CN101264058A

CN101264058A - 石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒、和它的制造方法

Info

Publication number: CN101264058A
Application number: CNA2007100380072A
Authority: CN
Inventors: 李亚平; 顾王文; 陈伶俐
Original assignee: Shanghai Institute of Materia Medica of CAS
Current assignee: Shanghai Institute of Materia Medica of CAS
Priority date: 2007-03-13
Filing date: 2007-03-13
Publication date: 2008-09-17
Anticipated expiration: 2027-03-13
Also published as: CN101264058B

Abstract

本发明提供了一种石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒，它包括石杉碱甲及其衍生物或其盐和载体，载体包括了聚乳酸、乙交酯丙交酯共聚物、明胶、壳聚糖、聚乙二醇与聚乳酸共聚物、聚乙二醇与乙交酯丙交酯共聚物、大豆磷脂、大豆卵磷脂、卵磷脂、硬脂酸甘油酯等中的一种或几种的混合物。石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒用于治疗阿尔茨海默病，血管性痴呆等老年性疾病。该缓释纳米粒能够延长药物作用时间、减少用药次数、提高石杉碱甲及其衍生物或其盐的生物利用度，降低该药的毒副作用，提高病人服药的依从性。

Description

石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒、和它的制造方法

技术领域

本发明涉及治疗阿尔茨海默病，血管性痴呆等老年性痴呆的石杉碱甲及其衍生物或其盐，尤其涉及石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒、和它的制造方法。

背景技术

石杉碱甲(Huperzine A)，化学名为：(5R，9R，11E)-5-氨基-11-亚乙基-5，6，9，10-四氢-7-甲基-5，9-亚甲环芳辛并-2(1H)-吡啶酮，是从中草药千层塔[Huperzia serrata(Thunb)Thev]中提取得到的酚性部分中获得的生物碱，是一种高效、低毒和可逆性的乙酰胆碱酯酶抑制剂(AChEI)。1993年，美国FDA批准其为类胆碱能剂。药理试验证明，石杉碱甲和它的一些衍生物对治疗阿尔茨海默病，血管性痴呆等其他老年性痴呆有效。本发明涉及到的石杉碱甲及其衍生物分别为如下结构：

随着当今生活水平的改善以及医疗水平的日益提高，人的寿命不断延长，社会老龄化问题逐渐显现。在我国65岁以上的城镇居民的阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)的患病率为6.9％，接近欧洲(6.4％)和日本(7.0％)。AD已成为老年人群中继心血管病、恶性肿瘤、中风之后的第四大“杀手”。心血管疾病的发病率在老年人群中居高不下，由此引起的血管性痴呆等疾病不仅给患者及其家属带来极大的痛苦，而且给社会和医疗保健系统带来沉重负担。在治疗这些疾病的药物中，石杉碱甲及其衍生物或其盐具有极高的选择性抑制脑内乙酰胆碱酯酶和增强脑内胆碱能神经元的功能，此外还具有作用时间长、易透过血-脑脊液屏障、口服生物利用度高以及不良反应少等多种优点。石杉碱甲还具有多靶点作用，除抑制乙酰胆碱酯酶活性外，还可通过抗氧化应激和抗细胞凋亡途径对神经元产生保护作用，对多种实验性记忆损害均有改善作用。因此，石杉碱甲及其衍生物要优于加兰他敏、多奈哌齐和他克林等其他治疗AD的药物。

目前，有关石杉碱甲制剂的研究和专利有：注射缓释微球制剂(CN1194688.C)；注射用长效微球混悬剂(CN 1723895.A)；鼻腔给药制剂(CN 1383824.A)；经鼻腔脑靶向制剂(CN1621039.A)；滴丸(CN1493287)；口腔崩解片(CN 1568985)；缓释骨架片(CN1751683.A)；肠溶包衣缓释片(CN 1682719.A)。由于适用此药物制剂的疾病属于慢性神经退行性疾病，需要长期进行药物治疗；而且患者多为老年患者，减少给药次数，提高病人用药的依从性是我们选择剂型应该着重考虑的问题之一。

基于上述问题的考虑，本发明提供了一种石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒，由于纳米粒粒径小，容易通过血脑屏障进入大脑，直接作用于脑内，因此其生物利用度大大提高；此外，药物通过载体材料或依靠载体材料的不断分解、融蚀，药物能缓缓地被释放进入体内，血药浓度平稳且长久，能减少药物的副作用和给药次数，提高了病人用药的依从性。

发明内容

本发明的目的是提供了一种石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒。它的粒径在20～500nm，药物在体内可以缓慢释放，血药浓度平稳且长久，能提高生物利用度并减少给药次数。

另外，上述石杉碱甲及其衍生物或其盐，优选为，

或它与盐酸、醋酸、磷酸、硫酸、乳酸、枸橼酸或马来酸结合成的盐。

本发明的另一目的是提供石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒的制备方法，本发明所述的缓释纳米粒配方及重量百分比为：

石杉碱甲及其衍生物或其盐：0.05～45％

载体材料：4～99％

乳化剂：0.1～65％

这里所说的载体材料包括PLA、PLGA、聚乙二醇与聚乳酸共聚物、聚乙二醇与乙交酯丙交酯共聚物、大豆磷脂、大豆卵磷脂、卵磷脂、硬脂酸甘油酯中的一种或几种的混合物。乳化剂包括PVA、聚乙二醇PEG、十二烷基硫酸钠、单甘油脂肪酸酯、三甘油脂肪酸酯、聚甘油硬脂酸酯、脂肪酸山梨醇、聚山梨酯、卖泽、苄泽、泊洛沙姆、阿拉伯胶、西黄蓍胶、明胶、卵黄、海藻酸钠、胆酸钠、甲基纤维素中的一种或几种的混合物。

本发明的石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒，可用以下方法制备：

(1)取载体材料溶解在有机相中，与溶有乳化剂和石杉碱甲的水相制成O/W型乳状液，在加入大量水后，油相中的有机相先被水萃取，后被蒸发除去，原来的油滴逐渐变成聚合物和药物的纳米粒；

(2)将载体材料溶解在非水溶液中，注入到搅拌的含石杉碱甲水相，使聚合物的溶解度降低形成纳米粒；

(3)取DL-丙交酯/乙交酯共聚物混悬于水中，加入丙酮和二氯甲烷，倒入搅拌的含石杉碱甲的PVA水溶液中，丙酮迅速扩散进入水相使有机相滴粒径减小而成纳米粒；

(4)先取PLA与聚乙二醇单甲醚合成两亲性嵌段共聚物，将它与石杉碱甲分散于丙酮，蒸发得石杉碱甲固体基材，干燥，搅拌加水，除去大粒子即得石杉碱甲缓释纳米粒；

(5)将PLA、溶于丙酮中，缓慢搅拌下加入含石杉碱甲的PVA和高浓度盐的水相，由于水相含浓盐溶液使两相不混容，开始形成W/O型乳状液，继续搅拌下加入水相，发生相转换，形成O/W型乳状液。再加水，油滴中的丙酮向水相扩散，形成纳米粒；

(6)将类脂等溶于适宜的有机溶剂中，减压除去有机溶剂，形成一层脂质薄膜，加入一定量的乳化剂水溶液和石杉碱甲，超声分散即可制得粒径小而分布均匀的纳米粒；

(7)将脂质载体溶解有机溶液，然后加入含有乳化剂的水相中，石杉碱甲溶解在水相中，在高速剪切力的搅拌下形成初分散体。将初分散体于200～500个大气压下经高压乳匀机处理2～3次，即可得到所需的纳米粒；

(8)将类脂溶于与水不互溶的有机溶剂中，加入到含有石杉碱甲和乳化剂的水相中乳化，挥发有机溶剂后，类脂在水相中沉淀形成纳米粒。

为延长石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒的存放时间，可将本发明的纳米粒通过真空干燥或冷冻干燥制成粉末状纳米粒，提高纳米粒的稳定性，为防止干燥工艺中纳米粒的聚集和粘连，可以加入支架剂，这里支架剂选自蔗糖、乳糖、甘露醇、葡萄糖、海藻糖、右旋糖苷、木糖醇、山梨醇、果糖中的一种或几种的混合物。

本发明的石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒也可进一步制成注射制剂。

本发明的石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒粒径在20～500nm之间，能显著延长药效，提供持续的治疗效果。实验证明，该纳米粒能在较长时间内维持有效血药浓度。

附图说明

图1为实施例1的石杉碱甲缓释纳米粒的粒径大小分布图。

图2为实施例19的石杉碱甲的缓释纳米粒体内药时的曲线图。

具体实施方式

下面将通过具体实施例进一步说明本发明，但以下描述为非限制性的，并不限制本发明的权利要求范围。

实施例1

取5g聚乳酸溶解于50m乙酸乙酯中制成有机相，取0.5g石杉碱甲和4g聚乙烯醇溶于100ml水中制成水相，8000r/min高速搅拌乳化10min中，制成O/W型乳状液，在加入400ml水后萃取乙酸乙酯，减压蒸馏除去，形成石杉碱甲的纳米颗粒，加入20g甘露醇，冷冻干燥即得。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加15ml水溶解，在NICOMP 380ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其结果如图1，粒径在20～500nm的范围，平均粒径为120nm。

实施例2

10g的聚乳酸溶解在二氯甲烷20ml中，取0.1g石杉碱甲溶解在含0.1g泊洛沙姆的60ml水中制成水相，5000r/min高速搅拌乳化15min中，制成O/W型乳状液，在加入200ml水后萃取二氯甲烷，减压蒸馏除去，形成石杉碱甲的纳米粒，加入60g葡萄糖，冷冻干燥即得。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加10ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在50～450nm的范围，平均粒径为200nm。

实施例3

20g的PLGA溶解在40ml二氯甲烷中，取300mg石杉碱甲和2.51g海藻酸钠溶于80ml水中制成水相，5000r/min高速搅拌乳化10min中，制成O/W型乳状液，在加入200ml水后萃取二氯甲烷，减压蒸馏除去，形成石杉碱甲的纳米粒，加入10g甘露醇和15g木糖醇，冷冻干燥即得。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加50ml水溶解，在NICOMP 380ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在60～300nm的范围，平均粒径为100nm。

实施例4

100g的聚乳酸溶解在100ml丙酮中，注入到含0.5g卖泽和500mg石杉碱甲的搅拌的水溶液100ml中，使聚乳酸的溶解度降低形成纳米粒，继续搅拌，减压使丙酮挥发，加入10g蔗糖和15g乳糖，冷冻干燥即得。取制成的石杉碱甲纳米颗粒0.5g，加10ml水溶解，在NICOMP380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在100～300nm的范围，平均粒径为150nm。

实施例5

10g的PLGA溶解于50ml丙酮中，注入到含1.0g胆酸钠和1.0g石杉碱甲的水溶液80ml中，搅拌，减压丙酮挥发，加入10g甘露醇和2g右旋糖苷，冷冻干燥即得。取制成的石杉碱甲纳米颗粒0.5g，加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在100～400nm的范围，平均粒径为200nm。

实施例6

取2gPLGA溶解在20ml丙酮中，注入到含0.5g石杉碱甲和25mg十二烷基硫酸钠的水溶液80ml，搅拌，减压使丙酮挥发，加入10g甘露醇和2g山梨醇，冷冻干燥即得。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在60～200nm的范围，平均粒径为80nm。

实施例7

20ml丙酮和5ml二氯甲烷，加入含1.0g DL-PLGA，倒入含10gPVA和120mg石杉碱甲的水溶液100ml中，搅拌，丙酮迅速扩散进入水相使有机相滴粒径减小而成纳米粒，将二氯甲烷减压去除，加入10g甘露醇和2g果糖，冷冻干燥即得。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在100～300nm的范围，平均粒径为220nm。

实施例8

20ml丙酮和10ml二氯甲烷加入含5gDL-PLGA10ml，倒入含0.1gPVA和100mg石杉碱甲的水溶液150ml中，搅拌，丙酮迅速扩散进入水相使有机相滴粒径减小而成纳米粒，将二氯甲烷减压去除，加入10g甘露醇和2g海藻糖，冷冻干燥即得。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加10ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在40～400nm的范围，平均粒径为200nm。

实施例9

35ml丙酮和0.5ml二氯甲烷，加入4.5gDL-PLGA，倒入含200mg石杉碱甲和2gPVA的水溶液100ml中，搅拌，丙酮迅速扩散进入水相使有机相滴粒径减小而成纳米粒，将二氯甲烷减压去除，加入10g甘露醇，冷冻干燥即得。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在100～300nm的范围，平均粒径为150nm。

实施例10

先取PLA与聚乙二醇单甲醚合成两亲性聚乙二醇与聚乳酸共聚物，取此共聚物6g溶于丙酮10ml，加300mg石杉碱甲分散在其中，吹氮气蒸发得石杉碱甲固体基材，干燥，加卖泽1g和水50ml，搅拌，离心除去大粒子，加甘露醇3.5g，冷冻干燥即得石杉碱甲缓释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在150～400nm的范围，平均粒径为250nm。

实施例11

先取PLGA与聚乙二醇单甲醚合成两亲性聚乙二醇与乙交酯丙交酯共聚物，取此共聚物10g溶于丙酮50ml，取石杉碱甲120mg分散在其中，吹氮气蒸发得石杉碱甲固体基材，干燥，搅拌加苄泽1g和PBS150ml，离心除去大粒子，加葡萄糖10g，冷冻干燥即得石杉碱甲缓释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加20ml水溶解，在NICOMP380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在150～350nm的范围，平均粒径为100nm。

实施例12

将7g PLA溶于丙酮20ml中，缓慢搅拌下加入含200mg石杉碱甲、2gPVA和6g氯化镁的水溶液10ml，由于水相含浓盐溶液使两相不混容，开始形成W/O型乳状液，继续搅拌下加入水相50ml，发生相转换，形成O/W型乳状液。再加水100ml，油滴中的丙酮向水相扩散，形成纳米粒。加葡萄糖15g，冷冻干燥即得石杉碱甲缓释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在80～400nm的范围，平均粒径为120nm。

实施例13

15g PLA溶于20ml丙酮中，缓慢搅拌下加入含400mg石杉碱甲、4g阿拉伯胶、4g西黄蓍胶和8g氯化镁的水溶液15ml，由于水相含浓盐溶液使两相不混容，开始形成W/O型乳状液，继续搅拌下加入水相80ml，发生相转换，形成O/W型乳状液。再加水160ml，油滴中的丙酮向水相扩散，形成纳米粒。加甘露醇25g，冷冻干燥即得石杉碱甲缓释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加15ml水溶解，在NICOMP380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在90～350nm的范围，平均粒径为200nm。

实施例14

10g PLA溶于丙酮20ml中，缓慢搅拌下加入含0.5g石杉碱甲、5g聚山梨酯和6g氯化镁的水溶液10ml，由于水相含浓盐溶液使两相不混容，开始形成W/O型乳状液，继续搅拌下加入水相40ml，发生相转换，形成O/W型乳状液。再加水150ml，油滴中的丙酮向水相扩散，形成纳米粒。加右旋糖苷15g，冷冻干燥即得石杉碱甲缓释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加10ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在80～250nm的范围，平均粒径为110nm。

实施例15

大豆磷脂8g和3gPLGA溶于25ml丙酮中，减压除去有机溶剂，形成一层脂质薄膜，加入含0.6g苄泽为乳化剂和100mg石杉碱甲的水溶液50ml，超声分散，加甘露醇5g，冷冻干燥即得石杉碱甲缓释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加20ml水溶解，在NICOMP 380ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在100～300nm的范围，平均粒径为150nm。

实施例16

8g大豆磷脂、1g卵磷脂和5gPLGA溶于35ml乙酸乙酯中，减压除去有机溶剂，形成一层脂质薄膜，加入含100mg石杉碱甲和1g明胶的水溶液100ml，超声分散，加甘露醇7g，冷冻干燥即得石杉碱甲缓释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加20ml水溶解，在NICOMP380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在100～300nm的范围，平均粒径为150nm。

实施例17

将卵磷脂10g和10gPLGA溶于55ml二氯甲烷中，减压除去有机溶剂，形成一层脂质薄膜，加入含200mg石杉碱甲和5g脂肪酸山梨醇的水溶液100ml，超声分散，加甘露醇15g，冷冻干燥即得石杉碱甲缓释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加15ml水溶解，在NICOMP380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在100～350nm的范围，平均粒径为250nm。

实施例18

卵磷脂15g和7gPLGA溶于25ml丙酮中，减压除去有机溶剂，形成一层脂质薄膜，加入含300mg石杉碱甲和2g卵黄和3g胆酸钠的水溶液100ml，超声分散，加甘露醇15g，冷冻干燥即得石杉碱甲缓释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加25ml水溶解，在NICOMP 380ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在80～400nm的范围，平均粒径为250nm。

实施例19

6g卵磷脂和5gPLGA溶于15ml乙醇溶液中，然后加入含有1g泊洛沙姆和110mg石杉碱甲的水100ml中，高速剪切力搅拌下分散形成初分散体。减压去乙醇，再将初分散体于200～500个大气压下经高压乳匀机处理2～3次，即可得到所需的纳米粒。加甘露醇15g，冷冻干燥即得石杉碱甲缓释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加10ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在50～200nm的范围，平均粒径为90nm。

实施例20

5g硬脂酸甘油酯溶解于25ml乙醇溶液中，然后加入含有0.6g甲基纤维素和500mg石杉碱甲的水100ml，高速剪切力搅拌，分散形成初分散体。减压除乙醇，将初分散体于200～500个大气压下经高压乳匀机处理2～3次，即可得到所需的纳米粒。加葡萄糖15g，冷冻干燥即得石杉碱甲缓释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在50～400nm的范围，平均粒径为110nm。

实施例21

5g大豆磷脂和5gPLGA溶于15ml丙酮溶液中，然后加入含有100mg石杉碱甲和0.5g聚乙烯醇的水80ml中，在高速剪切力的搅拌下分散形成初分散体。减压除去丙酮，将初分散体于200～500个大气压下经高压乳匀机处理4～5次，即可得到所需的纳米粒。加甘露醇8g，冷冻干燥即得石杉碱甲缓释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在50～250nm的范围，平均粒径为120nm。

实施例22

6g大豆卵磷脂和3gPLGA溶解于15ml的乙酸乙酯溶液中，然后加入含有400mg石杉碱甲和0.5g聚乙烯醇的水80ml中，在高速剪切力的搅拌下分散，形成初分散体。减压除去乙酸乙酯，将初分散体于200～500个大气压下经高压乳匀机处理4～5次，即可得到所需的纳米粒。加甘露醇8g，冷冻干燥即得石杉碱甲缓释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在60～400nm的范围，平均粒径为250nm。

实施例23

5g硬脂酸甘油酯溶解于25ml丙酮溶液中，然后加入含170mg石杉碱甲和1g胆酸钠的水100ml，在高速剪切力的搅拌下分散，形成初分散体。减压除去丙酮，将初分散体于200～500个大气压下经高压乳匀机处理4～5次，即可得到所需的纳米粒。加甘露醇8g，冷冻干燥即得石杉碱甲缓释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加10ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在60～400nm的范围，平均粒径为160nm。

实施例24

0.6g单甘油脂肪酸酯和5g卵磷脂溶解于25ml丙酮溶液中，然后加入含有200mg石杉碱甲和2g卖泽的水100ml，在高速剪切力的搅拌下分散，形成初分散体。减压除去丙酮，将初分散体于200～500个大气压下经高压乳匀机处理4～5次，即可得到所需的纳米粒。加甘露醇8g，冷冻干燥即得石杉碱甲缓释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在50～300nm的范围，平均粒径为250nm。

实施例25

1.5g三甘油脂肪酸酯和6g大豆卵磷脂溶解于35ml丙酮溶液中，然后加入含150mg石杉碱甲的水溶液100ml，在高速剪切力的搅拌下分散，形成初分散体。减压除去丙酮，将初分散体于200～500个大气压下经高压乳匀机处理4～5次，即可得到所需的纳米粒。加甘露醇8g，冷冻干燥即得石杉碱甲缓释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在40～200nm的范围，平均粒径为80nm。

实施例26

2g聚甘油硬脂酸酯和5g硬脂酸甘油酯溶解于25ml丙酮溶液中，然后加入含500mg石杉碱甲的水溶液100ml，在高速剪切力的搅拌下分散，形成初分散体。减压除去丙酮，将初分散体于200～500个大气压下经高压乳匀机处理4～5次，即可得到所需的纳米粒。加甘露醇8g，冷冻干燥即得石杉碱甲缓释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在150～400nm的范围，平均粒径为250nm。

实施例27

将6g大豆磷脂和5gPLA溶于丙酮15ml中，加入到含有100mg石杉碱甲和4g阿拉伯胶的水溶液50ml中，超声乳化15分钟，减压挥发有机溶剂后，类脂在水相中沉淀形成纳米粒。加8g甘露醇，冷冻干燥即得石杉碱甲缓释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加10ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在60～200nm的范围，平均粒径为100nm。

实施例28

将9g大豆卵磷脂和5gPLGA溶于25ml二氯甲烷中，加入到含有200mg石杉碱甲和0.8g泊洛沙姆的水溶液100ml中，搅拌乳化10分钟，减压挥发有机溶剂后，类脂在水相中沉淀形成纳米粒。加甘露醇10g，冷冻干燥即得石杉碱甲缓释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒1g，加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在100～300nm的范围，平均粒径为150nm。

实施例29

以实施例19的方法制备石杉碱甲的缓释纳米粒，以狗为动物模型，200μg/kg的剂量给药，1天内按规定时间采集血样，冷冻保存，用HPLC进行检测。检测的色谱条件为：检测波长307nm，色谱柱Kromasil C18柱(4.6mm×250mm，5mm)，流动相甲醇-水-三乙胺(60∶40∶0.02，冰乙酸调至pH 6.0)，柱温室温，流速1ml/min，进样量20ml。结果如图2，从图可见，血药浓度平稳，24小时内缓缓释药。

Claims

1. 一种石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒，其特征在于，粒径在20～500nm的范围。

2. 如权利要求1所述的石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒，其特征在于，所述石杉碱甲及其衍生物或其盐包括，

或上述化合物与盐酸、醋酸、磷酸、硫酸、乳酸、枸橼酸或马来酸结合成的盐。

3. 如权利要求1所述的石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒，其特征在于，其配方以重量百分比计为：

石杉碱甲及其衍生物或其盐：0.05～45％

载体材料：4～99％

乳化剂：0.1～65％。

4. 如权利要求3所述的石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒，其特征在于，载体材料选自聚乳酸(PLA)、乙交酯丙交酯共聚物(PLGA)、聚乙二醇与聚乳酸共聚物、聚乙二醇与乙交酯丙交酯共聚物、大豆磷脂、大豆卵磷脂、卵磷脂、硬脂酸甘油酯中的一种或几种的混合物。

5. 如权利要求3所述的石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒，其特征在于，乳化剂选自聚乙烯醇(PVA)、聚乙二醇(PEG)、十二烷基硫酸钠、单甘油脂肪酸酯、三甘油脂肪酸酯、聚甘油硬脂酸酯、脂肪酸山梨醇、聚山梨酯、卖泽、苄泽、泊洛沙姆、阿拉伯胶、西黄蓍胶、明胶、卵黄、海藻酸钠、胆酸钠、甲基纤维素中的一种或几种的混合物。

6. 如权利要求1～5任意一项所述的石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒，其特征在于可进一步制成注射制剂。

7. 一种制备权利要求3～5所述的石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒的制备方法，是以如下步骤制备：取载体材料溶解在有机相中，同溶有乳化剂和石杉碱甲的水相制成O/W型乳状液，在加入大量水后，油相中的有机相先被水萃取，后被蒸发除去，原来的油滴逐渐变成聚合物和药物的纳米粒。

8. 一种制备根据权利要求3～5所述的石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒的制备方法，是以如下步骤制备：将载体材料溶解到非水溶液中，注入到搅拌的含石杉碱甲的水相中，使聚合物的溶解度降低形成纳米粒。

9. 一种制备根据权利要求3～5所述的石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒的制备方法，是以如下步骤制备：取DL-丙交酯/乙交酯共聚物混悬于水中，加入丙酮和二氯甲烷，倒入搅拌的含石杉碱甲的PVA水溶液中，丙酮迅速扩散进入水相使有机相滴粒径减小而成纳米粒。

10. 一种制备根据权利要求3～5所述的石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒的制备方法，是以如下步骤制备：先取PLA与聚乙二醇单甲醚合成两亲性嵌段共聚物，将它与石杉碱甲分散于丙酮，蒸发得石杉碱甲固体基材，干燥，搅拌加水，除去大粒子即得石杉碱甲缓释纳米粒。

11. 一种制备根据权利要求3～5所述的石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒的制备方法，是以如下步骤制备：将PLA、溶于丙酮中，缓慢搅拌下加入含石杉碱甲的PVA和高浓度盐的水相，由于水相含浓盐溶液使两相不混容，开始形成W/O型乳状液，继续搅拌下加入水相，发生相转换，形成O/W型乳状液。再加水，油滴中的丙酮向水相扩散，形成纳米粒。

12. 一种制备根据权利要求3～5所述的石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒的制备方法，是以如下步骤制备：将类脂等溶于适宜的有机溶剂中，减压除去有机溶剂，形成一层脂质薄膜，加入一定量的乳化剂水溶液和石杉碱甲，超声分散即可制得粒径小而分布均匀的纳米粒。

13. 一种制备根据权利要求3～5所述的石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒的制备方法，是以如下步骤制备：将脂质载体溶解有机溶液，然后加入含有乳化剂的水相中，石杉碱甲溶解在水相中，在高速剪切力的搅拌下形成初分散体。将初分散体于200～500个大气压下经高压乳匀机处理2～3次，即可得到所需的纳米粒。

14. 一种制备根据权利要求3～5所述的石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒的制备方法，是以如下步骤制备：将类脂溶于与水不互溶的有机溶剂中，加入到含有石杉碱甲和乳化剂的水相中乳化，挥发有机溶剂后，类脂在水相中沉淀形成纳米粒。

15. 如权利要求7～14任意一项所述的石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒的制备方法，其特征在于，通过冷冻干燥或真空干燥得到粉末状纳米粒。

16. 如权利要求7～14任意一项所述的石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒的制备方法，其特征在于，加入支架剂进行冷冻干燥，支架剂选自蔗糖、乳糖、甘露醇、葡萄糖、海藻糖、右旋糖苷、木糖醇、山梨醇、果糖中的一种或几种的混合物。