CN100446779C

CN100446779C - 一种制备刺五加提取液/物的方法

Info

Publication number: CN100446779C
Application number: CNB2007101176400A
Authority: CN
Inventors: 方同华
Original assignee: Helongjiang Zhenbaodao Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Haerbin Zhenbao Pharmaceutical Co., Ltd.
Priority date: 2007-06-20
Filing date: 2007-06-20
Publication date: 2008-12-31
Anticipated expiration: 2027-06-20
Also published as: CN101084953A

Abstract

本发明提供了一种制备刺五加提取液/物的方法，该方法包括步骤：1)采用水提醇沉法制备刺五加药物浸膏；2)将浸膏加水稀释，用石灰乳调节pH至10.00～12.00，搅拌均匀后用硫酸调节pH至4.5～6.5，静置，抽取上清液过滤，浓缩，醇沉；3)冷藏静置除杂，得刺五加提取液；或浓缩减压干燥得刺五加提取物。本发明方法制备工艺简单，除杂效果好，纯度高。

Description

一种制备刺五加提取液/物的方法

技术领域

本发明涉及医药领域，具体地说涉及刺五加提取液/物的制备方法。

背景技术

刺五加(Radix Acanthopanacis Senticosi)为五加科落叶灌木，高1-6m。枝上常密生针状向下的细刺。掌状复叶，小叶5，椭圆状倒卵形或长圆形，边缘有重锯齿。伞形花序单个顶生或2-6个聚生，花瓣黄白色或紫色。果球形，成熟时黑色。分布于东北地区和河北、山西，生于海拔800m以下(东北)至1500-2000m(华北)处的针阔混交林内。朝鲜半岛、前苏联、日本也有分布。药用价值近似人参。国家三级保护渐危种。

刺五加注射液是刺五加经过提取制得的灭菌注射液，被收载于中国药典一部，具有平补肝肾，益精壮骨的功能。用于肝肾不足所致的短暂性脑缺血发作，脑动脉硬化，脑血栓形成，脑栓塞等。

刺五加制剂的常规制备方法为水提醇沉，但一般仅提取2次，醇沉1次。并不能完全将其有效成分提出，大幅度地去除杂质。专利文献94107718.7采用的是水提醇沉提取法提取后经大孔树脂柱脱色，用乙酸乙酯萃取，得到刺五加提取物。但萃取过程会减少有效成分的回收，且乙酸乙酯毒性大，又属易燃物，会对人体造成极大的伤害。

发明内容

本发明的目的在于针对上述不足提供刺五加提取液/物的制备方法。

本发明制备方法包括如下步骤：采用水提醇沉法制备刺五加药物浸膏；将浸膏加水稀释，用石灰乳调节pH至10.00～12.00，搅拌均匀后用硫酸调节pH至4.5～6.5，静置，抽取上清液过滤，浓缩，醇沉，冷藏静置除杂，得刺五加提取液；或浓缩减压干燥得刺五加提取物。

本发明利用石灰乳调碱，使总黄酮类与之形成鳌合物，再加硫酸调酸，使总黄酮类成分溶于溶液中，而杂质成分沉淀，此法增加了总黄酮的溶出，且能更有效地去除杂质。

更具体地，将浸膏用水稀释至15倍体积以上，搅拌均匀，待温度降至50℃以下，加10-30％新鲜石灰乳，调pH值至10.00～12.00，搅拌均匀后，再用10-30％硫酸调pH值至4.5～6.5，继续搅拌5～10分钟后，冷却至室温，静置4～6小时，抽取上清液过滤，再经醇沉进一步提高除杂的效果。这里醇沉的方法是，将滤液减压浓缩至相对密度1.08～1.17(80℃测)，待温度降至40℃以下时，缓慢加入乙醇使含醇量达82～85％，沉淀12～36小时。

上述水提醇沉法制备药物浸膏的方法是：将刺五加杆切成碎片，加水至少提取2次，每次加入2～10倍量水，煎煮30～60分钟，合并滤液浓缩，2次醇沉，静置，过滤，回收乙醇至无醇味，即得药物浸膏。

更具体地，可以通过下述方法制备浸膏：取刺五加杆，切制成1～3cm的碎片，煎煮2～4次，每次加4～8倍量水，煎煮30～60分钟，合并煎液，浓缩至相对密度1.08～1.17(80℃测)，待温度降至40℃以下时，加入乙醇使含醇量达到65～75％，搅拌均匀后静置6-18小时，过滤，残渣加乙醇使含醇量达到75～85％，静置4～12小时，过滤，残渣离心过滤，收集滤液，回收乙醇至无醇味，得浓浸膏。

本发明进行冷藏静置的目的在于进一步除杂，冷藏静置的方法是：取醇沉上清液过滤，残渣离心过滤，回收乙醇至无醇味并浓缩至相对密度1.05～1.20(80℃测)，加入注射用水稀释至5g(生药)/ml，灭菌，冷冻，缓化，冷藏，过滤。

更具体地，可以通过下述方法冷藏静置除杂：取上清液过滤，残渣离心过滤，回收乙醇至无醇味并浓缩至相对密度1.08～1.17(80℃测)，加入注射用水稀释至5g(生药)/ml，115℃灭菌40分钟，于-20℃～-10℃下冷冻12小时以上，缓化，冷藏七天以上，药液经0.45μm滤膜过滤。

本发明制备工艺优点：总黄酮和紫丁香苷的含量高，杂质少，工艺简单，合理，成本低，污染少。

1)多次反复醇沉，能有效去除大分子蛋白质等杂质。

2)先加石灰乳调碱，使总黄酮类成分与之形成鳌合物，再加硫酸调酸，使总黄酮类成分溶于溶液中，而杂质成分沉淀，增加了总黄酮的溶出，且能更有效的去除杂质。

可以进一步地将上述方法制备得到的刺五加提取液/物与药用辅料制备成各种剂型，包括注射液、冻干粉针剂、输液剂、口服液、胶囊剂、颗粒剂以及片剂等。所述的药用辅料包括葡萄糖、乙醇(95％)，甘露醇，右旋糖酐，乳糖，氯化钠，聚山梨酯80等。当该制剂为注射液时，每1ml该注射液含有总黄酮为1.8-5.5mg；含有紫丁香苷应为0.20-2.0mg。

具体实施方式

下面结合具体的实施例来进一步阐述本发明。应当理解，这些实施例仅用于说明本发明，而不能限制本发明的保护范围。

实施例1刺五加提取液的制备

取刺五加杆，切制成1～3cm的碎片。煎煮三次，第一次加5倍量水煎煮30分钟；第二次加6倍量水煎煮40分钟；第三次加10倍量水煎煮30分钟。合并煎液，浓缩至相对密度1.10(80℃测)，待温度降至40℃以下时，加入乙醇使含醇量达到70％，搅拌均匀后静置10小时，过滤，残渣加乙醇使含醇量达到80％，静置8小时，过滤，残渣离心过滤，收集滤液，回收乙醇至无醇味，得浓浸膏。补加纯化水至浓浸膏15倍体积，搅拌均匀，待温度降至50℃以下，加20％新鲜石灰乳，调pH值至11.00，搅拌均匀后，再用20％硫酸调pH值至5.5，继续搅拌8分钟后，冷却至室温，静置5小时，抽取上清液过滤，减压浓缩至相对密度1.15(80℃测)，待温度降至40℃以下时，缓慢加入乙醇使含醇量达85％，沉淀24小时，取上清液过滤，残渣离心过滤，回收乙醇至无醇味并浓缩至相对密度1.05(80℃测)。加入注射用水稀释至5g(生药)/ml，115℃灭菌40分钟。于-10℃下冷冻12小时，缓化，冷藏七天。药液经0.45μm滤膜过滤，即得刺五加提取液。

实施例2刺五加提取物的制备

取刺五加杆，切制成1～3cm的碎片。煎煮2次，第一次加4倍量水煎煮40分钟；第二次加8倍量水煎煮60分钟。合并煎液，浓缩至相对密度1.08(80℃测)，待温度降至40℃以下时，加入乙醇使含醇量达到75％，搅拌均匀后静置18小时，过滤，残渣加乙醇使含醇量达到85％，静置12小时，过滤，残渣离心过滤，收集滤液，回收乙醇至无醇味，得浓浸膏。补加纯化水至浓浸膏18倍体积，搅拌均匀，待温度降至50℃以下，加10％新鲜石灰乳，调pH值至12.00，搅拌均匀后，再用10％硫酸调pH值至6.5，继续搅拌10分钟后，冷却至室温，静置6小时，抽取上清液过滤，减压浓缩至相对密度1.17(80℃测)，待温度降至40℃以下时，缓慢加入乙醇使含醇量达82％，沉淀36小时，取上清液过滤，残渣离心过滤，回收乙醇至无醇味并浓缩至相对密度1.08(80℃测)。加入注射用水稀释至5g(生药)/ml，115℃灭菌40分钟。于-15℃下冷冻16小时，缓化，冷藏十天。药液经0.45μm滤膜过滤，浓缩减压干燥即得刺五加提取物。

实施例3刺五加提取液的制备

取刺五加杆，切制成1～3cm的碎片。煎煮3次，第一次加5倍量水煎煮30分钟；第二次加6倍量水煎煮40分钟；第三次加4倍量水煎煮50分钟。合并煎液，浓缩至相对密度1.17(80℃测)，待温度降至40℃以下时，加入乙醇使含醇量达到65％，搅拌均匀后静置6小时，过滤，残渣加乙醇使含醇量达到75％，静置4小时，过滤，残渣离心过滤，收集滤液，回收乙醇至无醇味，得浓浸膏。补加纯化水至浓浸膏15倍体积，搅拌均匀，待温度降至50℃以下，加30％新鲜石灰乳，调pH值至10.00，搅拌均匀后，再用30％硫酸调pH值至4.5，继续搅拌5分钟后，冷却至室温，静置4小时，抽取上清液过滤，减压浓缩至相对密度1.17(80℃测)，待温度降至40℃以下时，缓慢加入乙醇使含醇量达84％，沉淀12小时，取上清液过滤，残渣离心过滤，回收乙醇至无醇味并浓缩至相对密度1.17(80℃测)。加入注射用水稀释至5g(生药)/ml，115℃灭菌40分钟。于-20℃下冷冻20小时，缓化，冷藏十五天。药液经0.45μm滤膜过滤，即得刺五加提取液。

实施例4注射液的制备

取实施例1的提取液，用40％的NaOH溶液调pH值至5.5，搅拌均匀后加热，加入0.2％的活性炭，煮沸吸附15分钟，冷却至50℃以下用40％的NaOH溶液调pH值至5.5，补加新鲜注射用水至原体积。经0.45μm滤膜过滤至澄清，灌装，115℃高压灭菌40分钟。冷冻，缓化后冷藏15天，常温放置3个月。0.65μm滤芯过滤，加注射用水至原体积，调pH值至5.5，加入活性炭脱色，过滤，调pH值至5.5，补加注射用水至原体积，经0.45μm、0.22μm滤芯精滤，灌封，115℃30分钟灭菌，即得。

经检验，本注射液每1ml含总黄酮，以无水芦丁(C₂₇H₃₀O₁₆)计为2.0mg，含紫丁香苷0.20mg。

实施例5注射液的制备

取实施例2的提取物，加注射用水使溶解，用40％的NaOH溶液调pH值至5.5，搅拌均匀后加热，加入0.2％的活性炭，煮沸吸附15分钟，冷却至50℃以下用40％的NaOH溶液调pH值至5.7，补加新鲜注射用水至含生药5g/ml。经0.45μm滤膜过滤至澄清，灌装，115℃高压灭菌40分钟。冷冻，缓化后冷藏20天，常温放置3.5个月。0.65μm滤芯过滤，加注射用水至含生药5g/ml，调pH值至5.0，加入活性炭脱色，过滤，调pH值至5.0，补加注射用水至含生药5g/ml，分别经0.45μm、0.22μm滤芯精滤，灌封，115℃30分钟灭菌，即得。

经检验，本注射液每1ml含总黄酮，以无水芦丁(C₂₇H₃₀O₁₆)计为5.1mg，含紫丁香苷2.0mg。

实施例6注射液的制备

取实施例3的提取液，用40％的NaOH溶液调pH值至5.5，搅拌均匀后加热，加入0.2％的活性炭，煮沸吸附15分钟，冷却至50℃以下用40％的NaOH溶液调pH值至5.3，补加新鲜注射用水至原体积。经0.45μm滤膜过滤至澄清，灌装，115℃高压灭菌40分钟。冷冻，缓化后冷藏25天，常温放置4个月。0.65μm滤芯过滤，加注射用水至原体积，调pH值至6.0，加入活性炭脱色，过滤，调pH值至6.0，补加注射用水至原体积，分别经0.45μm、0.22μm滤芯精滤，灌封，115℃30分钟灭菌，即得。

经检验，本注射液每1ml含总黄酮，以无水芦丁(C₂₇H₃₀O₁₆)计为3.3mg，含紫丁香苷0.85mg。

Claims

1、一种制备刺五加提取液/物的方法，其特征在于，其包括步骤：1)将刺五加杆切成碎片，加水提取2～4次，每次加2～10倍量水，煎煮30～60分钟，合并滤液浓缩，2次醇沉，静置，过滤，回收乙醇至无醇味，得药物浸膏；2)将浸膏加水稀释，用重量百分比为10～30％的新鲜石灰乳调节pH至10.00～12.00，搅拌均匀后用重量百分比为10～30％的硫酸调节pH至4.5～6.5，静置，抽取上清液过滤，浓缩，醇沉；3)取上清液过滤，残渣离心过滤，回收乙醇至无醇味并按检测温度80℃浓缩至相对密度1.05～1.20，加入注射用水稀释至5g生药/ml，灭菌，于-20℃～-10℃下冷冻12小时以上，缓化，冷藏七天以上，过滤得刺五加提取液；或将提取液浓缩减压干燥得刺五加提取物。

2、如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)为：取刺五加杆，切制成1～3cm的碎片，煎煮2～4次，每次加4～8倍量水，煎煮30～60分钟，合并煎液，按检测温度80℃浓缩至相对密度1.08～1.17，待温度降至40℃以下时，加入乙醇使含醇量达到65～75％，搅拌均匀后静置6～18小时，过滤，残渣加乙醇使含醇量达到75～85％，静置4～12小时，过滤，残渣离心过滤，收集滤液，回收乙醇至无醇味，得药物浸膏。

3、如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中醇沉的方法是将滤液减压按检测温度80℃浓缩至相对密度1.08～1.17，待温度降至40℃以下时，缓慢加入乙醇使含醇量达82～85％，沉淀12～36小时。

4、一种刺五加提取液/物制剂，其特征在于，由权利要求1～3任一项制备方法制得的刺五加提取液/物制成。

5、一种刺五加提取液/物制剂，其特征在于，由权利要求1～3任一项制备方法制得的刺五加提取液/物和药用辅料制成。

6、如权利要求4或5所述的制剂，其特征在于，该制剂为注射液、冻干粉针剂、输液剂、口服液、胶囊剂、颗粒剂或片剂。

7、如权利要求4或5所述的制剂，其特征在于，该制剂为注射液，每1ml该注射液含有总黄酮为1.8～5.5mg；含有紫丁香苷为0.20～2.0mg。