CH636962A5

CH636962A5 - METHOD AND DEVICE FOR THE QUICK DETECTION OF PHOTOMETRIC MEASURED VALUES.

Info

Publication number: CH636962A5
Application number: CH993278A
Authority: CH
Inventors: Robert Klaus; Herbert Dr Halpaap; Heinz-Emil Dr Hauck
Original assignee: Merck Patent Gmbh
Priority date: 1977-09-23
Filing date: 1978-09-22
Publication date: 1983-06-30
Also published as: CA1110465A; BE870642A; FR2404209B1; IT1106582B; IT7851191A0; SE7809981L; NL7809672A; GB2005827A; JPS5458076A; FR2404209A1; GB2005827B; DE2742864A1

Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren und eine Vorrichtung zur schnellen Erfassung von photometrischen Messwerten, die durch optisch integrierbare Flecken von Dünnschichtchromatogrammen gegeben werden. The invention relates to a method and a device for the rapid detection of photometric measured values, which are given by optically integrable spots of thin-layer chromatograms.

Neben der rein visuellen Auswertung von Dünnschichtchro- 55 matogrammen ist es auch üblich, dafür spezielle Auswertegeräte einzusetzen. So sind für diesen Zweck Spektralphotometer bekannt, die im Messtisch eine Aufnahme für eine Dünnschichtplatte oder Folie besitzen. Durch eine langsame Bewegung der Dünnschichtplatte, relativ zu der im Messkopf des Photometers 60 installierten Messzelle, ist es möglich, nacheinander die gesamte Oberfläche des Chromatogramms zu erfassen. In addition to the purely visual evaluation of thin-layer chromatograms, it is also common to use special evaluation devices for this. Spectrophotometers are known for this purpose, which have a holder for a thin-layer plate or film in the measuring table. By slowly moving the thin-layer plate, relative to the measuring cell installed in the measuring head of the photometer 60, it is possible to record the entire surface of the chromatogram in succession.

Die Erfassung erfolgt dabei so, dass die Dünnschichtplatte durch einen in der Grösse veränderbaren Spalt mit Licht einer bestimmten, bei den meisten Geräten veränderbaren Wellen- 65 länge bestrahlt wird und mit einer Messzelle die von der meist mit einem Fluoreszenzindikator versehenen Sorptionsschicht der Dünnschichtplatte reflektierte oder emittierte Strahlung gemessen wird. Die Intensität der reflektierten oder emittierten Strahlung ist dabei abhängig von Art und Menge der auf der Platte befindlichen Substanzen. Durch Verbinden der Messzelle mit einem Verstärker und Linearschreiber, wobei die in der Messzelle erzeugte veränderliche Spannung zur Auslenkung des Schreibers in der X-Richtung dient, erhält man durch den konstanten Papiervorschub des Schreibers in der Y-Richtung eine Kurve, die die Abhängigkeit der Messzellenspannung von der jeweils beobachteten Chromatogrammfläche zeigt. Durch Auswertung der Kurvenintegrale - diese können sowohl graphisch als auch über einen Integrator ermittelt werden — kann die quantitative Zusammensetzung eines auf der Dünnschichtplatte getrennten Stoffgemisches bestimmt werden. The detection is carried out in such a way that the thin-layer plate is irradiated through a size-variable gap with light of a certain wavelength, which can be changed in most devices, and with a measuring cell which reflects or emits the sorption layer of the thin-layer plate, which is usually provided with a fluorescence indicator Radiation is measured. The intensity of the reflected or emitted radiation depends on the type and amount of the substances on the plate. By connecting the measuring cell to an amplifier and linear recorder, whereby the variable voltage generated in the measuring cell serves to deflect the recorder in the X direction, the constant paper feed of the recorder in the Y direction gives a curve that shows the dependence of the measuring cell voltage of the observed chromatogram area. By evaluating the curve integrals - these can be determined both graphically and via an integrator - the quantitative composition of a mixture of substances separated on the thin-film plate can be determined.

In prinzipiell der gleichen Weise arbeitet eine im deutschen Gebrauchsmuster Nr. 7 619 310 beschriebene Vorrichtung zur Auswertung von Zirkularchromatogrammen. In Anpassung an die besonderen geometrischen Voraussetzungen eines Zirkular-chromatogrammes wird dort ein motorgetriebener Drehtisch vorgeschlagen, der es ermöglicht, das Zirkularchromatogramm mit gleichmässiger Geschwindigkeit am Messkopf eines Spektralphotometers vorbeizuführen. Auch hier muss die Registrierung der gemessenen Werte z.B. mit einem Linearschreiber und/oder Integrator erfolgen, um eine quantitative Auswertung machen zu können. A device for evaluating circular chromatograms described in German Utility Model No. 7 619 310 works in basically the same way. In adaptation to the special geometric requirements of a circular chromatogram, a motor-driven turntable is proposed there, which makes it possible to move the circular chromatogram past the measuring head of a spectrophotometer at a uniform speed. Here too the registration of the measured values e.g. with a linear recorder and / or integrator in order to be able to make a quantitative evaluation.

Nachteilig bei allen diesen Vorrichtungen ist, dass das Vorbeiführen des Chromatogramms an der Messzelle nur relativ langsam erfolgen kann und somit die Registrierung eines Chromatogrammes relativ lange (einige Minuten) dauert. Dies hat seinen Grund darin, dass zwar die Messzelle des Photometers fast verzögerungsfrei arbeitet, dass die Auswertung der gemessenen Werte jedoch aufgrund der Trägheit bzw. Eigenschaften der zur Registrierung verwendeten Schreiber und Integratoren nur bei relativ langsamem Durchlauf korrekt erfolgt. Die Zahl der pro Zeiteinheit auszuwertenden Chromatogramme ist dadurch erheblich eingeschränkt. A disadvantage of all these devices is that the chromatogram can only be guided past the measuring cell relatively slowly, and the registration of a chromatogram therefore takes a relatively long time (a few minutes). The reason for this is that although the measuring cell of the photometer works almost without delay, the evaluation of the measured values is only carried out correctly due to the sluggishness or properties of the recorders and integrators used for registration only when the flow is relatively slow. The number of chromatograms to be evaluated per unit of time is thereby considerably restricted.

Das Problem, dass photometrische Messwerte zwar ohne grössere Schwierigkeiten sehr schnell gewonnen werden können, dass die Geschwindigkeit der Messwerterfassung aber durch die Trägheit der Registrier- und Auswertungsgeräte begrenzt ist, stellt sich in im Prinzip ähnlicher Weise auch auf anderen Anwendungsgebieten, bei denen photometrische Messzellen Verwendung finden. The problem that photometric measured values can be obtained very quickly without major difficulties, but that the speed of the measured value acquisition is limited by the sluggishness of the registration and evaluation devices, arises in a similar way in principle in other areas of application in which photometric measuring cells are used Find.

Es bestand also die Aufgabe, ein Verfahren zu finden, das es gestattet, photometrische Messwerte direkt zu erfassen und der Auswertung zugänglich zu machen. The task was therefore to find a method which would allow photometric measurements to be recorded directly and made available for evaluation.

Diese Aufgabe wurde durch die vorliegende Erfindung gelöst, so wie sie im kennzeichnenden Teil von Anspruch 1 umschrieben ist. This object has been achieved by the present invention, as described in the characterizing part of claim 1.

Die erfindungsgemässe Vorrichtung zur Durchführung dieses Verfahrens ist im Anspruch 2 umschrieben. The inventive device for performing this method is described in claim 2.

Die Vorteile der erfindungsgemässen Vorrichtung liegen vor allem darin, dass es damit möglich ist, die Auswertung von Chromatogrammen innerhalb von wenigen Sekunden vornehmen zu können. The advantages of the device according to the invention lie above all in that it is possible to carry out the evaluation of chromatograms within a few seconds.

In den Zeichnungen sind bevorzugte Ausgestaltungsformen der erfindungsgemässen Vorrichtung dargestellt. Preferred embodiments of the device according to the invention are shown in the drawings.

Figur 1 zeigt die schematische Anordnung einer Vorrichtung zur Auswertung von Linearchromatogrammen. Figur 2 zeigt die schematische Anordnung einer Vorrichtung zur Auswertung von Zirkularchromatogrammen. Figure 1 shows the schematic arrangement of a device for evaluating linear chromatograms. FIG. 2 shows the schematic arrangement of a device for evaluating circular chromatograms.

Mit 1 ist dabei der Strahlengang der Messstrahlung angedeutet, der von der Lichtquelle 2 über einen Umlenkspiegel 3 durch den die Messfläche begrenzenden Spalt 4 auf die Chro-matogrammfolie oder -platte 5 und von dort reflektiert zur Messzelle 6 führt. 7 soll den Oszillographen symbolisieren und 8 die Verbindung von Messzelle und Oszillograph. 9 ist jeweils eine Rotationsachse, um die die Walze 10 oder der Drehtisch 11 rotiert. Mit 12 schliesslich sind die Substanzflecken auf dem The beam path of the measurement radiation is indicated by 1, which leads from the light source 2 via a deflection mirror 3 through the gap 4 delimiting the measurement area to the chromatogram film or plate 5 and reflected from there to the measurement cell 6. 7 should symbolize the oscillograph and 8 the connection of measuring cell and oscillograph. 9 is in each case an axis of rotation about which the roller 10 or the rotary table 11 rotates. At 12, the substance stains are on the

3 636 962 3,636,962

entwickelten Chromatogramm bezeichnet.Die erfindungsge- deutung erlangen, vorzugsweise ist jedoch die Kippfrequenz mässe Vorrichtung kann im Prinzip mit jedem für die Auswer- gleich der Drehfrequenz. developed chromatogram. Achieve the meaning of the invention, but preferably the tilting frequency device can in principle be used for evaluating the rotational frequency.

tung von Chromatogrammen üblichen Spektralphotometer be- Die prinzipiell gleiche Messwerterfassung ist auch bei Line nutzt werden. Die in den Zeichnungen nur schematisch ange- archromatogrammen möglich. Aufgrund der anderen geometri-deutete Messstrahlen-, Spalt- und Messzellenanordnung wird 5 sehen Anordnung der Substanzflecken eines Linearchromato-dabei unverändert übernommen. Verändert wird gegenüber be- grammes, die nicht kreisförmig sondern linear angeordnet sind, kannten Geräten nur der Messtisch und die Messwerterfassung. kann hierbei nicht mit einem Drehteller gearbeitet werden, son- Chromatograms conventional spectrophotometers The principle of the same measured value acquisition can also be used with Line. The only possible chromatographs in the drawings are possible. On the basis of the other geometrically-interpreted measuring beam, slit and measuring cell arrangement, the arrangement of the substance spots of a linear chromato is adopted unchanged. The only change compared to programs that are not arranged in a circle, but linearly, was known only to the measuring table and the measurement value acquisition. cannot be used with a turntable, but

Wesentlich bei der erfindungsgemässen Vorrichtung ist, dem es wird dazu eine zylinderförmige Walze 10 verwendet. It is essential in the device according to the invention that a cylindrical roller 10 is used for this purpose.

dass der Messtisch so eingerichtet ist, dass die auszuwertenden Durch Aufspannen der entwickelten Chromatogrammfolien Chromatogrammflecken 12 sehr schnell und mit konstanter Ge- 10 (Platten sind hierbei nicht zu verwenden) auf diese Walze 10 schwindigkeit den Spalt 4 des Auswertegerätes passieren kön- und Rotieren der Walze 10 um die Drehachse 9 (Figur 1) wird nen, und dass, nachdem alle gleichzeitig zu vermessenden Sub- auch hier erreicht, dass die in gleicher Entfernung vom Folien-stanzflecken 12 den Spalt 4 passiert haben, wieder der Aus- rand liegenden Substanzflecken 12 nacheinander den Spalt 4 that the measuring table is set up in such a way that the chromatographic spots 12 to be evaluated can be passed through the gap 4 of the evaluation device and rotated on the roller 10 very quickly and at a constant speed 10 (plates are not to be used here) by clamping the developed chromatographic foils 10 about the axis of rotation 9 (FIG. 1), and that, after all the sub-areas to be measured at the same time have also reached here, have passed through the gap 4 at the same distance from the die-cut spots 12, the outermost substance spots 12 again one after the other the gap 4

gangspunkt der Bewegung erreicht ist, so dass das gleichförmige passieren. Bezüglich der Drehgeschwindigkeit, der Kippfre-Durchfahren aller Messpositionen beliebig schnell und beliebig 15 quenz und der Messwertanzeige liegen also analoge Verhältnis-oft wiederholt werden kann. se vor, wie vorstehend für Zirkularchromatogramme ausführlich starting point of movement is reached so that the uniform pass. Regarding the speed of rotation, the tilting through of all measuring positions as fast and as desired, and the measured value display, analogue ratios are often repeated. se as detailed above for circular chromatograms

Bei Zirkularchromatogrammen sind die Substanzflecken 12 beschrieben. In the case of circular chromatograms, the substance spots 12 are described.

gleicher Rf-Werte auf konzentrischen Kreisen um den Mittel- Im Gegensatz zur Auswertung von Zirkularchromatogram- same Rf values on concentric circles around the middle - in contrast to the evaluation of circular chromatogram -

punkt der Chromatogrammplatte oder -folie angeordnet. Ein men, bei der nur Substanzflecken gleichen Rf-Wertes gleichzei-gleichmässiges Vorbeibewegen der Substanzflecken gleicher Rf- 20 tig erfasst und ausgewertet werden können, ist es bei der Aus-Werte am Messspalt 4 ist also dann gegeben, wenn, wie in Figur Wertung von Linearchromatogrammen möglich, wahlweise ent-2 angedeutet, die Chromatogrammplatte oder -folie so auf ei- weder Substanzflecken gleichen Rf-Wertes oder aber die auf nem Drehteller 11 plaziert wird, dass der Mittelpunkt des Zir- einer chromatographischen Bahn liegenden Substanzflecken kularchromatogramms genau auf der Drehachse 9 liegt und der (die vom Auftragsort des Substanzgemisches aus in Steigrich-Messspalt 4 sich über der Kreislinie befindet, auf der die auszu- 25 tung des Eluens entwickelten, aufgetrennten Substanzflecken) wertenden Chromatogrammflecken eines Rf-Wertes liegen. auszuwerten. Dies wird einfach dadurch erreicht, dass zur Erfas- point of the chromatogram plate or foil. There is a situation in which only substance spots of the same Rf value can be detected and evaluated at the same time as the substance spots of the same Rf-20 can be moved past and evaluated, so there is an off value at the measuring gap 4 if, as in the figure, the evaluation of Linear chromatograms possible, optionally indicated in accordance with FIG. 2, the chromatogram plate or foil placed on either substance spots of the same Rf value or placed on a turntable 11 in such a way that the center point of the substance spots lying on a chromatographic path is precisely on the axis of rotation of the chromatographic chromatograph 9 lies and (which is located in Steigrich measuring gap 4 from the place of application of the substance mixture above the circular line on which the separated substance stains developed the eluent is developed) there are chromatographic stains of an Rf value. evaluate. This is simply achieved by

Durch Drehen des Drehtellers 11 um die Drehachse 9 passieren sung der Substanzflecken gleicher Rf-Werte die entwickelte Fo-so nacheinander alle Substanzflecken 12 eines Rf-Wertes den lie so auf die Walze gespannt wird, dass die bei der Entwicklung Messspalt 4. gewählte Steigrichtung des Eluens parallel zur Drehachse 9 By rotating the turntable 11 about the axis of rotation 9 solution of the substance spots of the same Rf values pass through the developed Fo-so one after the other all substance spots 12 of an Rf value which is stretched on the roller in such a way that the measuring direction 4. selected during the development of the gap Eluens parallel to the axis of rotation 9

Bei den nach dem Stand der Technik üblichen Vorrichtun- 30 liegt, und dass zur Erfassung einer chromatographischen Bahn gen ist eine solche Drehbewegung aufgrund der Trägheit bzw. die entwickelte Folie so auf die Walze gespannt wird, dass die Eigenschaften der zur Registrierung der gemessenen Werte ver- bei der Entwicklung gewählte Steigrichtung des Eluens senkwendeten Linearschreiber und Integratoren nur sehr langsam, recht zur Drehachse 9 liegt. In the devices customary according to the prior art, and in order to detect a chromatographic path, such a rotary movement is tensioned on the roller due to the inertia or the developed film in such a way that the properties of the values registered for registering the measured values - When developing the selected direction of rise of the eluent, the linear recorder and integrators used are very slow, right to the axis of rotation 9.

z.B. mit einer Geschwindigkeit von etwa 5- 30 mm/Min., mög- Die Drehgeschwindigkeit des Drehtellers 11 oder der Walze lieh, wodurch sich eine Registrierzeit für die Erfassung der 35 10 kann an sich in relativ weiten Grenzen variiert werden (wo-Messwerte der Substanzflecken eines Rf-Wertes (1 Umdrehung bei natürlich die gegenseitige Abhängigkeit zu beachten ist), des Drehtisches) von mehreren Minuten ergibt. Nach unten ist die Drehgeschwindigkeit an sich nur begrenzt e.g. at a speed of about 5-30 mm / min., The rotational speed of the turntable 11 or the roller was borrowed, which means that a registration time for the detection of the 35 10 itself can be varied within relatively wide limits (where-measured values of the substance stains of an Rf value (1 turn, of course, the interdependency has to be taken into account) of the rotary table) of several minutes. The speed of rotation is only limited downwards

Bei der erfindungsgemässen Vorrichtung wird dagegen die durch das Ziel, eine möglichst schnelle Auswertung zu errei-Platte oder Folie mit einer sehr grossen Geschwindigkeit von chen. Nach oben, das heisst zu grossen Drehgeschwindigkeiten, z.B. 1000 Umdrehungen/Min. oder sogar mehreren Tausend 40 ist eine Grenze durch die Ansprechzeit der Messzelle gegeben, Umdrehungen/Min. gedreht. Auf diese Weise werden alle die bei zu schnellem Drehen nicht mehr erreicht wird, so dass In the device according to the invention, on the other hand, the aim is to achieve the fastest possible evaluation of the plate or film at a very high speed. Upwards, that means at high rotational speeds, e.g. 1000 revolutions / min. or even several thousand 40, there is a limit to the response time of the measuring cell, revolutions / min. turned. In this way, all those who can no longer be reached if they turn too quickly, so that

Messpositionen in Bruchteilen einer Sekunde durchlaufen. Eine die einzelnen Messwerte nicht mehr aufgelöst werden. Auch Registrierung der so gewonnenen Messwerte auf herkömmliche durch die Materialbeanspruchung bei sehr grossen Drehzahlen Weise ist dabei natürlich nicht möglich. ist nach oben eine Grenze gesetzt. In der Regel wird man des- Run through measurement positions in fractions of a second. The individual measured values can no longer be resolved. It is of course also not possible to register the measurement values obtained in this way in a conventional manner due to the material stress at very high speeds. there is an upper limit. As a rule, one will

Mit Hilfe der erfindungsgemässen Vorrichtung ist es jedoch 45 halb Drehzahlen von etwa 1000 bis etwa 5000 Umdrehungen/ überraschenderweise möglich, auch diese in sehr kurzer Zeit Min. bevorzugen. With the aid of the device according to the invention, however, 45 half speeds of approximately 1000 to approximately 5000 revolutions / surprisingly possible, these also prefer min in a very short time.

gewonnen Messwerte zu registrieren. Erfmdungsgemäss wird Um diese Drehzahlen zu erreichen, werden Drehteller 11 recorded measured values. According to the invention, in order to achieve these speeds, turntables 11

nämlich die Messzelle 6 des Auswertegerätes mit einem Oszillo- und Walze 10 zweckmässig durch einen regelbaren Elektromo-graphen so verbunden, dass die in der Messzelle erzeugte Span- tor angetrieben. Die Art der Installation des Antriebs und der nung nach entsprechender Verstärkung zur Auslenkung des Os- 50 Anbringung von Walze 10 oder Drehteller 11 im Messtisch sind zillographen benutzt wird. Wenn nun die Drehfrequenz des dem Fachmann an sich bekannt und sind nicht Gegenstand der namely the measuring cell 6 of the evaluation device is expediently connected to an oscilloscope and roller 10 by a controllable electromagraph so that the tensioner generated in the measuring cell is driven. The type of installation of the drive and the opening after appropriate reinforcement to deflect the Os 50 attachment of roller 10 or turntable 11 in the measuring table are used zillographen. If now the rotational frequency of the person skilled in the art and are not the subject of

Drehtellers mit der Kippfrequenz des Oszillographen überein- vorliegenden Erfindung. Bei der Anbringung von Walze 10 und stimmt, dann erscheinen die Messwerte sämtlicher durchlaufen- Drehteller 11 im Messtisch des Auswertegerätes muss lediglich der Messpunkte in Form von «Peaks», analog denen von einem dafür gesorgt werden, dass Walze bzw. Drehteller relativ zum Linearschreiber registrierten, als stehendes Bild auf dem Bild- 55 Spalt 4 positionierbar sind, so dass die gesamte Chromato-schirm des Oszillographen. grammfläche einer Auswertung zugänglich ist. Turntable with the tilt frequency of the oscillograph in accordance with the present invention. When roller 10 and 10 is attached, the measured values of all the rotary plates 11 that have passed through appear in the measuring table of the evaluation device, only the measuring points in the form of “peaks”, analogous to those of one, ensure that the roller or rotary plate registered relative to the linear recorder , can be positioned as a still image on the image gap 4, so that the entire chromatograph screen of the oscillograph. gram area of an evaluation is accessible.

Die Auswertung kann dann entweder unmittelbar durch Wie bereits erwähnt, kann zusammen mit der erfindungsge- The evaluation can then either be carried out directly as already mentioned, together with the

Ausmessen der Peaks auf dem Oszillographenschirm erfolgen, mässen Vorrichtung jedes, auch bisher für diesen Zweck ver-es kann jedoch z.B. auch das Schirmbild photographisch erfasst wendete Auswertegerät verwendet werden, wobei lediglich im und auf dem so gewonnenen Bild ausgewertet werden, wobei 60 Messtisch die notwendigen Modifikationen vorgenommen wer-die erfassten Messwerte gleichzeitig konserviert werden. den müssen. Die gleiche Analogie gilt auch für die Art der The peaks are measured on the oscillograph screen, each device measures up to now also for this purpose. However, e.g. the evaluation device photographically recorded is also used, only the evaluation being carried out in and on the image obtained in this way, the measurement being carried out at 60 measuring tables and the recorded measured values being preserved at the same time. have to. The same analogy applies to the type of

Die Kippfrequenz des Oszillographen kann jedoch auch Auswertung der erhaltenen Messwerte. Da mit Hilfe der erfin- However, the tilt frequency of the oscillograph can also evaluate the measured values obtained. Because with the help of the invented

grösser oder kleiner sein als die Drehfrequenz des Drehtellers. dungsgemässen Vorrichtung nicht die Messmethode selbst, son-Ist die Drehfrequenz grösser als die Kippfrequenz, so erschei- dem nur die Art und Geschwindigkeit der Messwerterfassung nen die Messwertpeaks des Chromatogrammes mehr als einmal 65 geändert wird, gelten auch hier die bekannten Voraussetzungen, auf dem Oszillographenbildschirm. Ist die Drehfrequenz kleiner die bezüglich einer quantitativen Auswertung der Messwerte an als die Kippfrequenz, so wird nur ein Teil der Messwertpeaks die Abmessungen des Spaltes 4 in Bezug auf die Grössen der beobachtet. Beide Möglichkeiten können für Spezialfälle Be- Substanzflecken 12 zu stellen sind. Die Abmessungen des Spai- be greater or less than the rotational frequency of the turntable. According to the device according to the invention, not the measurement method itself, but if the rotational frequency is greater than the tilting frequency, only the type and speed of the measurement value acquisition differ if the measurement value peaks of the chromatogram are changed more than once, the known requirements also apply here on the oscillograph screen . If the rotational frequency is lower than the tilting frequency with regard to a quantitative evaluation of the measured values, then only a part of the measured value peaks the dimensions of the gap 4 are observed in relation to the sizes of the. For special cases, both options can be provided for substance stains 12. The dimensions of the spa

636 962 4 636 962 4

tes 4 sollten dabei vorzugsweise auf die Abmessungen der aus- Auf einer HP-TLC (High Performance Thin Layer Chroma- tes 4 should preferably be based on the dimensions of the on an HP-TLC (High Performance Thin Layer Chroma

zuwertenden Substanzflecken 12 abgestimmt sein. tography) Glasplatte mit Kieselgel 60 für die Nano-DC ohne substance stains 12 to be matched. tography) Glass plate with silica gel 60 for nano DC without

Die Abmessungen des Drehtisches 11 und der Walze 10 Fluoreszenzindikator, (Artikel Nr. 5631 der Firma E. Merck, sind vor allem durch die Grösse der Chromatogrammplatten Darmstadt) in der Grösse 10 X 10 cm wurden konzentrisch um oder -folien bestimmt. Vorzugsweise werden zusammen mit der 5 den Mittelpunkt der Platte folgende Mengen Chinin aufge-erfindungsgemässen Vorrichtung quadratische Platten oder Fo- tragen : The dimensions of the turntable 11 and the roller 10 fluorescence indicator (article no. 5631 from E. Merck, are mainly due to the size of the chromatogram plates Darmstadt) in the size 10 X 10 cm were determined concentrically around or foils. Preferably, together with FIG. 5, the following amounts of quinine on the device according to the invention are square plates or photos:

lien verwendet, wobei für Zirkularchromatogramme sowohl beschichtete Glasplatten als auch beschichtete Kunststoff- oder 1. 6,25 ng Aluminiumfolien verwendet werden können, für Linearchroma- 2. 12,5 ng togramme jedoch nur die biegsamen Folien. 10 3. 25 ng lien used, whereby both coated glass plates and coated plastic or 1. 6.25 ng aluminum foils can be used for circular chromatograms, but only the flexible foils for linear chromatograms 2. 12.5 ng togrammes. 10 3. 25 ng

Handelsüblich sind Platten und Folien in den Grössen 10 X 4. 50 ng 10 cm und 20 X 20 cm. Für einen Drehteller 11, der sowohl für die Grösse 10 X 10 cm als auch für die Grösse 20 X 20 cm Nach der Entwicklung des Chromatogramms mit Chloro- Sheets and foils in the sizes 10 X 4. 50 ng 10 cm and 20 X 20 cm are commercially available. For a turntable 11, which is suitable for both the size 10 X 10 cm and for the size 20 X 20 cm after the development of the chromatogram with chloro-

geeignet ist, ergibt sich damit also ein Mindestdurchmesser von form/Methanol/Eisessig (80/20/3 Volumenteile) wurde die etwa 30 cm. Beschränkt man sich auf die Auswertung von Chro-15 Platte in einen am Photometer befindlichen Drehteller eingelegt matogrammen der Grösse 10 X 10 cm, so benötigt der Drehtel- und mit 1200 U/min gedreht. Dabei passierten die Substanzler 11 natürlich nur einen Durchmesser von etwa 15 cm. Bei der flecken nacheinander den Messspalt des Photometers. Die Walze 10 ergeben sich für die beiden Chromatogrammformate Messzelle des Photometers war mit einem Oszillographen verDurchmesser von etwa 4 bis 7 cm. Für Linearchromatogramme bunden, dessen Kippfrequenz 20 Hz betrug. is suitable, this results in a minimum diameter of form / methanol / glacial acetic acid (80/20/3 parts by volume) which was around 30 cm. If you restrict yourself to evaluating the Chro-15 plate in a 10 X 10 cm turntable placed on the turntable on the photometer, the turntable needs to be turned at 1200 rpm. The substance 11 passed naturally only a diameter of about 15 cm. The stain the measuring gap of the photometer one after the other. The roller 10 results for the two chromatogram formats measuring cell of the photometer with an oscillograph diameter of about 4 to 7 cm. Bound for linear chromatograms whose sweep frequency was 20 Hz.

in Verbindung mit der Walze 10 können selbstverständlich auch 20 Aus der Anzeige auf dem Oszillographenbildschirm konnrechteckige Formate, z.B. in den Grössen 5 X 10 cm, 5 X 20 ten die folgenden Peakhöhen ermittelt werden: in connection with the roller 10 can of course also 20 rectangular formats from the display on the oscillograph screen, e.g. in the sizes 5 X 10 cm, 5 X 20 th the following peak heights are determined:

cm oder 10 X 20 cm, verwendet werden. Auch die Anpassung der erfindungsgemässen Vorrichtung an andere Formate ist je- 1. 4,5 mm derzeit möglich. 2. 9 mm cm or 10 X 20 cm. It is also currently possible to adapt the device according to the invention to other formats. 2.9 mm

Beidererfindungsgemässen Vorrichtung ist vorgesehen, die 25 3. 15 mm Messzelle 6 so mit einem Oszillographen zu verbinden, dass die 4. 28 mm in der Messzelle 6 erzeugte Spannung zur Auslenkung des Oszillographen dient. Die dazu notwendige Schaltungsanordnung Zur Überprüfung dieser in wenigen Sekunden ermittelten mit einem ggf. zwischengeschalteten Verstärkerteil ist dadurch Messwerte wurde das Chromatogramm ein zweites Mal mit dem gekennzeichnet, dass die bei Wechselstromverstärkern erfor- 30 gleichen Spektralphotometer ausgewertet, diesmal jedoch auf derliche Modulation des Messlichtes nicht elektronisch oder konventionelle Weise, d.h. durch sehr langsames Rotieren der mechanisch erfolgt, sondern durch die rotierende Platte oder Platte und Registrierung der Messwerte mit einem Linearschrei-Walze selbst. Man erreicht dies durch einfaches Stillegen des ber. Dabei ergaben sich die folgenden Peakhöhen: entsprechenden Verstärkerteiles. The device according to the invention provides for the 25.3.15mm measuring cell 6 to be connected to an oscillograph in such a way that the 4.28mm voltage generated in the measuring cell 6 serves to deflect the oscillograph. The circuit arrangement required for this purpose. In order to check the measured values determined in a few seconds with an possibly interposed amplifier part, the chromatogram was characterized a second time with the fact that the spectrophotometers required for AC amplifiers were evaluated, but this time not electronically on the modulation of the measuring light or conventional way, ie by rotating the mechanically very slowly, but by rotating the plate or plate and registering the measured values with a linear screeching roller itself. This is achieved by simply shutting down the ber. This results in the following peak heights: corresponding amplifier part.

Als Oszillograph kann dabei jeder übliche Kathodenstrahl- 35 1. 6,5 mm oszillograph benutzt werden. Es ist jedoch auch möglich, dabei 2. 13 mm einen registrierenden Schleifenoszillographen zu verwenden. 3. 26 mm Mit der erfindungsgemässen Vorrichtung steht somit eine 4. 49,5 mm Möglichkeit zur Verfügung, die Auswertung von Zirkular- und Any conventional cathode ray oscilloscope can be used as the oscillograph. However, it is also possible to use a 2. 13 mm recording loop oscillograph. 3. 26 mm With the device according to the invention, a 4. 49.5 mm possibility is thus available for evaluating circular and

Linearchromatogrammen mit Hilfe von üblichen Auswertegera- 40 Der Vergleich zeigt, dass die nach den beiden Methoden ten so zu verbessern, dass die durch das Auswertegerät gewon- ermittelten relativen Peakhöhen sehr gut übereinstimmen, wo-nenen Messwerte innerhalb von wenigen Sekunden zugänglich mit demonstriert ist, dass nach dem erfindungsgemässen Versind und so die Zeit zur Auswertung von Chromatogrammen fahren in wenigen Sekunden genauso zuverlässige Ergebnisse wesentlich verkürzt wird. erzielt werden können wie nach konventionellen in mehreren Linear chromatograms with the help of standard evaluation devices. The comparison shows that the two methods can be improved in such a way that the relative peak heights obtained by the evaluation device match very well, where the measured values are accessible and demonstrated within a few seconds. that, according to the invention and thus the time for evaluating chromatograms, results which are just as reliable are significantly reduced in a few seconds. can be achieved as in conventional in several

Das der Vorrichtung und dem Verfahren zugrunde liegende 45 Minuten. The 45 minutes on which the device and the method are based.

Prinzip der Messwerterfassung kann auch auf andere Anwendungsgebiete übertragen werden. Voraussetzung ist dafür ledig- Beispiel 2 lieh, dass die auf dem jeweiligen Anwendungsgebiet anfallenden Auswertung eines Linearchromatogramms. The principle of data acquisition can also be applied to other areas of application. The prerequisite for this is single - Example 2 loaned that the evaluation of a linear chromatogram occurring in the respective area of application.

photometrischen Messwerte ausreichend schnell gewonnen wer- Chinin in den Mengen 6,25,12,5,25 und 50 wurde linear den können, so wie es in dem speziellen Fall der DC-Auswer- so auf eine HP-TLC Alufolie mit Kieselgel 60 für die Nano-DC tung durch schnelle Rotation der Chromatogramme möglich ist. ohne Fluoreszenzindikator (Artikel Nr. 5547 der Firma E. Quinine in the quantities 6.25, 12.5, 25 and 50 could be obtained linearly, as was the case in the special case of the DC evaluation on an HP-TLC aluminum foil with silica gel 60 for the nano-DC movement is possible through the rapid rotation of the chromatograms. without fluorescent indicator (Article No. 5547 from E.

In den nachfolgenden Beispielen wird die Anwendung des Merck, Darmstadt) aufgetragen. Nach der Entwicklung des erfindungsgemässen Verfahrens auf die Auswertung von Zirku- Chromatogramms wurde die Folie so auf eine am Photometer lar- und Linear-Chromatogrammen demonstriert. Es wurde angebrachte Walze aufgespannt, dass die bei der Entwicklung dabei die erfindungsgemässe Vorrichtung in Verbindung mit ei- 55 gewählte Steigrichtung des Eluens parallel zur Walzenachse lag. nem Chromatogramm-Spektral-Photometer der Firma Carl Die Walze rotierte mit einer Geschwindigkeit von 3600 U/min, Zeiss verwendet. Die Spaltbreite im Messkopf des Photometers wobei die einzelnen Substanzflecken sehr schnell nacheinander betrug 2 mm. den Messspalt des Photometers passierten. Die Kippfrequenz des Oszillographen betrug 60 Hz. Die aus der Anzeige auf dem Beispiel 1 60 Oszillographenbildschirm ermittelten Peakhöhen entsprachen The application of Merck, Darmstadt) is shown in the following examples. After the development of the method according to the invention for the evaluation of circu-chromatograms, the film was demonstrated on a lar and linear chromatogram on a photometer. The attached roller was clamped so that the device according to the invention during development, in connection with a selected rising direction of the eluent, was parallel to the roller axis. a chromatogram spectral photometer from Carl The roller rotated at a speed of 3600 rpm, Zeiss used. The gap width in the measuring head of the photometer, with the individual substance spots very quickly in succession, was 2 mm. passed the measuring gap of the photometer. The oscillating frequency of the oscillograph was 60 Hz. The peak heights determined from the display on the example 1 60 oscillograph screen corresponded

Auswertung eines Zirkularchromatogramms. denen im Beispiel 1. Evaluation of a circular chromatogram. those in example 1.

C C.

1 Blatt Zeichnungen 1 sheet of drawings

Claims

636 962

PATENT CLAIMS

1. A method for the rapid acquisition of photometric measured values which are given by optically integrable spots of thin-layer chromatograms, characterized in that 5

a) the measurements are carried out in remission,

b) a plurality of measurement positions, which are located on a carrier, are successively passed through,

that after the last measuring position, the first measuring position is reached again and this running through the measuring positions is repeated continuously and at high speed during the entire measuring time,

c) the voltage generated in a photometric measuring cell is used to deflect an oscillograph, and d) the throughput frequency of the measuring positions is coordinated with the frequency of the oscilloscope.

2. Device for carrying out the method according to claim 1 for detecting optically integrable spots of thin-layer chromatograms in a chromatogram evaluation device, which device comprises a light source, a recording for the chromatogram to be evaluated, a measuring cell and a registration unit, characterized in that

a) in the measuring table of the chromatogram evaluation device there is a rotatable receptacle 25 which can be positioned relative to the measuring head and by means of which the chromatogram is presented at a constant high rotational speed on the measuring head of the evaluation device in such a way that the starting position is reached again after a certain constant time,

b) the measuring cell is connected to an oscillograph in such a way that the voltage generated in the measuring cell is used to deflect an oscillograph, and c) the rotational frequency of the chromatogram is coordinated with the sweep frequency of the oscillograph.

3. Apparatus according to claim 2 in an evaluation device 35 for evaluating circular chromatograms, characterized in that the measuring table is provided with a turntable which can be positioned relative to the measuring head of the evaluation device and which is equipped for receiving the chromatogram plate to be evaluated and which allows the chromatogram spots 40 of the same Rf - Guide the values past the measuring head one after the other.

4. The device according to claim 2 in an evaluation device for evaluating linear chromatograms, characterized in that the measuring table is provided with a rotatable roller which can be positioned relative to the measuring head of the evaluation device, 45 which in turn is provided with holders for fastening the chromatogram foils on the roller surface.

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