Procédé de préparation de ptéroyiglutamate dibenzylique. La présente invention se rapporte à un procédé de préparation d'une ptéridine subs tituée, soit de ptéroylglutamate dibenzylique qui, sous une forme tautomère au moins, ré pond à la formule suivante:
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Suivant l'invention, on prépare ce ptéroyl- glutamate dibenzylique en faisant réagir de la 2,4,5-triamino-6-hydroxypyrimidine, du 2,3- dihydroxyacrylaldéhyde et du p-aminoben- zoylglutamate dibenzylique.
Le ptéroy1glutamate dibenzylique obtenu, qui constitue un produit nouveau, est un so lide jaune à orange, difficilement soluble dans l'eau, mais soluble .dans des solvants organi ques et n'ayant pas de point de fusion précis. Il est utile comme intermédiaire pour la pré paration d'acide ptéroylglutamique.
La 2,4,5-triamino-6-hydroxypyrimidine est un composé connu qui peut exister sous une ou plusieurs formes tautomères. Ces formes tautomères réagissant de manière analogue dans les mêmes réactions chimiques, elles peu vent être utilisées l'une pour l'autre. Le 2,3-dihydroxy acry laldéhyde, connu sous le nom de réductonc, répond à. la formule:
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et peut également exister sous plusieurs for mes tautomères.
Le troisième réactif, le p-aminobenzoylglu- ta.mate dibenzylique, peut se préparer par ac tion .de chlorure de p-nitrobenzoyle sur du glutamate dibenzylique et réduction du groupe nitro en groupe amino.
La réaction ayant lieu dans le procédé se lon la présente invention peut être représen tée par l'équation globale suivante
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On peut effectuer la réaction donnant lieu à la formation du ptéroylglutamate dibenzy- lique en mélangeant simultanément les trois réactifs ou en faisant premièrement réagir le second réactif avec,
l'un des deux autres avant d'ajouter le troisième réactif au mélange réac tionnel, en isolant ou non les intermédiaires.
La réaction peut être effectuée dans de l'eau ou dans un solvant organique, de préfé rence dans un liquide organique hydroxylé, tel .que l'alcool éthylique, le glycol éthylénique ou autres solvants semblables. On peut égale ment utiliser d'autres solvants tels que l'acé tone, ile benzène, le formamide, etc.
La tem pérature peut varier entre la température am biante et 160 C environ, les températures su périeures à 100 C étant préférées. Le temps nécessaire varie naturellement selon la tem pérature et les autres conditions.
On peut utiliser certains agents de conden sation alcalins, tels que l'acétate de sodium, le phosphate idisodique, le formiate de sodium, la pyridine ou la diméthylaniline, pour aug menter le rendement.
La réaction a également lieu dans de lar ges limites de px et il ne semble pas qu'il existe une .limite d'acidité ou d'alcalinité. Les meilleurs résultats sont toutefois obtenus à un pH compris entre 3 et 5. Une mise en oûuvre du procédé est décrite de manière détaillée dans l'exemple suivant.
Exemple: On dissout 2 g d'ester dibenzylique d'acide p-aminobenzoylglt-ttamique dans une solution de 60 cm3 d'éthanol et 40 cms d'eau, en chauf fant. On filtre la solution et on refroidit le filtrat à la température ambiante. On ajoute ensuite 60 em3 d'eau et 0,6 em3 d'acide chlor hydrique. On ajoute alors 0;7 g .de réduetone et on agite le mélange pendant une heure.
Après refroidissement du mélange le produit est recueilli, lavé à l'eau et séché. Rendement: 2,3 g. Après reerista-llisation dans de l'éthanol absolu, le produit présente un point de fu sion de<B>175-1770</B> C.
On mélange 1,5 g de ce composé, soit. l'ester @dibenzylique de l'acide p-(2,3-dihy droxy-2-propyIidène-amino)\-benzoylglutami- que, 1,0 g de 2,4,5-triamino-6-hydroxypyrinii- dine et 10 cm3 d'éthylèneglycol et on chauffe 11e mélange à 135 C pendant 30 minutes.
Le mélange est refroidi, dilué par 3 volumes en viron :d'eau et encore refroidi. Le produit est isolé .par filtrage, lavé à l'eau, au méthanol et à l'éther et séché. Rendement: 1,5 g d'ester dibenzylique .d'acide ptéroylglutamique. Pu reté déterminée par analyse chimique: 10 %.
On dissout un échantillon de ce produit dans un milieu non hydrolysant et on déter mine par essai biologique l'activité sur la. croissance de S. faecalis R. On obtient la va leur de 9,9 %.
Un autre échantillon de ce produit est hy drolysé au moyen d'hydroxyde de sodium 0,7. n à 50-60 C en l'espace de 30 minutes. L'essai biologique sur S. faecalis R. donne une valeur de 13,25 %. On peut en déduire que .le produit de condensation est l'ester di- benzylique qui, lors de l'hydrolyse, est trans formé en acide ptéroylglutamique libre.
Process for the preparation of dibenzyl pteroyiglutamate. The present invention relates to a process for preparing a substituted pteridine, either dibenzyl pteroylglutamate which, in at least one tautomeric form, corresponds to the following formula:
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According to the invention, this dibenzyl pteroylglutamate is prepared by reacting 2,4,5-triamino-6-hydroxypyrimidine, 2,3-dihydroxyacrylaldehyde and dibenzyl p-aminobenzoylglutamate.
The dibenzyl pteroylglutamate obtained, which constitutes a new product, is a yellow to orange solid, hardly soluble in water, but soluble in organic solvents and having no precise melting point. It is useful as an intermediate for the preparation of pteroylglutamic acid.
2,4,5-Triamino-6-hydroxypyrimidine is a known compound which can exist in one or more tautomeric forms. Since these tautomeric forms react in a similar way in the same chemical reactions, they can be used interchangeably. 2,3-Dihydroxy acrylaldehyde, known as the reductant, responds to. the formula:
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and can also exist in several tautomeric forms.
The third reagent, dibenzyl p-aminobenzoylglutamate, can be prepared by ac tion of p-nitrobenzoyl chloride on dibenzyl glutamate and reduction of the nitro group to an amino group.
The reaction taking place in the process according to the present invention can be represented by the following global equation
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The reaction resulting in the formation of dibenzyl pteroylglutamate can be carried out by simultaneously mixing the three reactants or by first reacting the second reactant with,
one of the other two before adding the third reagent to the reaction mixture, with or without isolating the intermediates.
The reaction can be carried out in water or in an organic solvent, preferably in a hydroxylated organic liquid, such as ethyl alcohol, ethylenic glycol or the like. It is also possible to use other solvents such as acetone, benzene, formamide, etc.
The temperature can vary between room temperature and approximately 160 ° C., temperatures above 100 ° C. being preferred. The time required will naturally vary depending on temperature and other conditions.
Certain alkaline condensing agents, such as sodium acetate, idisodium phosphate, sodium formate, pyridine or dimethylaniline, can be used to increase the yield.
The reaction also takes place within wide px limits and there does not appear to be a limit of acidity or alkalinity. The best results are however obtained at a pH between 3 and 5. An implementation of the process is described in detail in the following example.
Example: 2 g of dibenzyl ester of p-aminobenzoylglt-ttamic acid are dissolved in a solution of 60 cm3 of ethanol and 40 cms of water, by heating fant. The solution is filtered and the filtrate is cooled to room temperature. Then 60 em3 of water and 0.6 em3 of hydrochloric acid are added. 0.7 g of reduetone is then added and the mixture is stirred for one hour.
After cooling the mixture, the product is collected, washed with water and dried. Yield: 2.3 g. After reerista-llization in absolute ethanol, the product exhibits a melting point of <B> 175-1770 </B> C.
1.5 g of this compound are mixed, ie. p- (2,3-Dihy droxy-2-propylidene-amino) \ - benzoylglutamic acid @dibenzyl ester, 1.0 g of 2,4,5-triamino-6-hydroxypyriniidine and 10 cm3 of ethylene glycol and the 11th mixture is heated at 135 ° C. for 30 minutes.
The mixture is cooled, diluted with approximately 3 volumes: of water and further cooled. The product is isolated by filtering, washed with water, methanol and ether and dried. Yield: 1.5 g of dibenzyl ester of pteroylglutamic acid. Power determined by chemical analysis: 10%.
A sample of this product is dissolved in a non-hydrolyzing medium and the activity on Ia is bioassayed. growth of S. faecalis R. The value is 9.9%.
Another sample of this product is hydrolyzed with 0.7 sodium hydroxide. n at 50-60 C within 30 minutes. The biological test on S. faecalis R. gives a value of 13.25%. From this it can be deduced that the condensation product is the dibenzyl ester which, upon hydrolysis, is transformed into free pteroylglutamic acid.