BR112019011120B1

BR112019011120B1 - Compostos dinucleotídeos cíclicos, composição e uso relacionados

Info

Publication number: BR112019011120B1
Application number: BR112019011120-4A
Authority: BR
Inventors: Masato Yoshikawa; Morihisa Saitoh; Taisuke Kato; Tomohiro Seki; Yasuo Nakagawa; Yusuke Tominari; Masaki Seto; Yusuke Sasaki; Masanori Okaniwa; Tsuneo Oda; Akito Shibuya; Kosuke Hidaka; Zenyu Shiokawa; Shumpei Murata; Atsutoshi Okabe; Michiyo Mochizuki; Yoshihisa Nakada; Taisuke Tawaraishi; Brian Scott Freeze; Paul D. Greenspan
Original assignee: Takeda Pharmaceutical Company Limited
Priority date: 2016-12-01
Filing date: 2017-12-01
Publication date: 2024-12-31

Abstract

A presente divulgação fornece um composto que apresenta uma atividade do agonista de STING (estimulador de genes do interferon), que se pode esperar que seja útil como agente para a profilaxia ou tratamento de doenças relacionadas a STING. A presente divulgação se refere a um composto representado pela fórmula (I), em que cada símbolo é como definido na descrição ou um seu sal.

Description

CAMPO TÉCNICO

[0001] A presente divulgação fornece um dinucleotídeo cíclico tendo uma atividade agonista de STING (estimulador de genes de interferon), que pode ser útil como um agente para a profilaxia ou tratamento de câncer e outras doenças.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

[0002] STING é um receptor que reconhece ácido nucleico diferente do TLR (receptor do tipo toll). Os exemplos do ligante natural a ser reconhecido incluem dinucloetídeos cíclicos (CDNs) derivados de bactérias/protozoários, 2',3'-cGAMP sintetizados pelo cGAS a montante (sintase GMP-AMP cíclica) e semelhantes (Trends in Immunology 35:88-93 (2014)). É relatado que 2',3'-cGAMP, que é um dos ligantes naturais, é decomposto por ENPP1 (ecto-nucleotídeo- pirofosfatase/fosfodiesterase), que é uma das pirofosfatases/fosfodiesterases, e que os outros CDNs são decompostos pela fosfodiesterase (Nat Chem Biol 10: 1043-1048 (2014); Cell Res 25: 539-550 (2015); Biochemistry 55:837-849 (2016)). O STING é ativado por esses ligantes naturais e induz a fosforilação de TBK1 (quinase de ligação a TANK 1) a jusante, e ativa o sinal IRF3 (fator 3 regulador de interferon) e o sinal NFkB no outro jusante, e assim a resposta de interferon do tipo I (IFN) é induzida (Trends in Immunology 35: 88-93 (2014)). A importância do sinal de STING no câncer é indicada por um teste usando um camundongo de inativação. É relatado que em camundongos com aloenxertos de tumor usando camundongos de inativação para STING e seu sinal a jusante, IRF3, as células cancerosas crescem pela supressão do sistema imunológico do câncer, em comparação com camundongos do tipo selvagem (Immunity 41: 830-842 (2014)). Além disso, também é relatado que o crescimento de células cancerígenas em camundongos com aloenxertos de tumor é suprimido por radioterapia, mas em camundongos de inativação para STING e IFNAR1 (receptor de interferon 1 (alfa e beta), receptor de IFN do tipo I produzido pelo sinal a jusante), o efeito pela terapia de radiação é reduzido (Immunity 41: 843-852 (2014)). Por essas razões,considera-se que o STING desempenha um papel importante na supressão do crescimento de células cancerosas, e a ativação do sinal imune, que é induzido pela ativação de STING, leva à atividade anticancerígena. Portanto, o agonista de STING pode ser usado como um agente anticancerígeno visando a imunidade ao câncer. Além disso, considera-se que a ativação de STING desempenha um papel importante no efeito imunológico da vacina, uma vez que a ativação ativa a imunidade natural (Ther Adv Vaccines 1: 131-143 (2013)). Portanto, o agonista de STING pode ser usado como um adjuvante para várias vacinas.

[0003] Os seguintes dinucleotídeos cíclicos são conhecidos.

[0004] O Documento de Patente 1 (WO 2014/093936) divulga um composto representado pela seguinte fórmula:em que cada símbolo é conforme definido no Documento de Patente 1, que de acordo com o Documento de Patente 1 um ativador de TBK1 dependente de STING e é útil para o tratamento de câncer (particularmente câncer sólido) e semelhantes, e também útil como um adjuvante.

[0005] O Documento de Patente 2 (WO 2014/189805) divulga um composto representado pela seguinte fórmula:em que cada símbolo conforme definido no Documento de Patente 2, que, de acordo com o Documento de Patente 2, um estimulador imune via STING e é útil para o tratamento de câncer e semelhantes.

[0006] O Documento de Patente 3 (WO 2015/077354) e o Documento Não Patenteado 8 (Cell reports 11, 1018-1030 (2015)) divulgam um compostorepresentado pela seguinte fórmula:em que cada símbolo conforme definido no Documento de Patente 3, que, de acordo com o Documento de Patente 3, é um agonista de STING e é útil para o tratamento de câncer e semelhantes.

[0007] Documento de Patente 4 (WO 2013/185052) e Documento Não- Patenteado 9 (Sci. Transl. Med. 283, 283ra52 (2015)) descrevem c-di-AMP, c-di- GMP, c-di-IMP, c-AMP-GMP, c-AMP-IMP e c-GMP-IMP, que, de acordo com o Documento de Patente 4, são ativadores de TBK1 dependentes de STING.

[0008] O Documento de Patente 5 (WO 2014/189806) divulga um composto representado pela seguinte fórmula:em que cada símbolo é definido no Documento de Patente 5,o qual, de acordo com o Documento de Patente 5, inibe a transdução de sinal dependente de STING e é útil para o tratamento de doença autoimune e semelhantes.

[0009] O Documento de Patente 6 (WO 2015/185565) divulga um composto representado pela seguinte fórmula:em que cada símbolo é conforme definido no Documento de Patente 6, que, de acordo com o Documento de Patente 6 é um modulador de STING e é útil para o tratamento de inflamação, doença autoimune alérgica, câncer e semelhantes, e também útil como um adjuvante de vacina.

[0010] O Documento de Patente 7 (WO 2014/179760) divulga um composto representado pela seguinte fórmula:em que cada símbolo é tal como definido no Documento de Patente 7, que, de acordo com o Documento de Patente 7 pode aumentar a produção de interferon do tipo I e é útil para o tratamento de câncer, doença autoimune, reação alérgica e semelhantes, e também útil como adjuvante.

[0011] Documento de Patente 8 (WO 2014/179335) e Documento Não Patenteado 10 (Mol. Cell 154, 748-762 (2013)) descrevem um compostorepresentado pela seguinte fórmula:em que cada símbolo é tal como definido no Documento de Patente 8, que de acordo com o Documento de Patente 8 pode aumentar a produção de interferon Tipo I e é útil para o tratamento de doenças caracterizadas por inflamação, doença autoimune, síndrome de Sjogren e semelhantes.

[0012] O Documento de Patente 9 (WO 2015/017652) divulga um composto representado pela seguinte fórmula:que, de acordo com o Documento de Patente 9, é um modulador de STING, e é útil para o tratamento de câncer, doença autoimune e semelhantes, e também é útil como vacina.

[0013] O Documento de Patente 10 (WO 2016/096577) divulga um composto representado pela seguinte fórmula:que, de acordo com o Documento de Patente 10, é um agonista de STING e é útil para o tratamento de câncer (particularmente câncer pancreático sólido) e semelhantes.

[0014] O Documento de Patente 11 composto representado pela seguinte fórmula:Que, de acordo com o Documento de Patente 11, é um agonista de STING.

[0015] O Documento de Patente 12 composto representado pela seguinte fórmula:que, de acordo com o Documento de Patente 12, é um agonista de STING.

[0016] O Documento de Patente 13 (WO 2016/120305) divulga um composto representado pela seguinte fórmula:que, de acordo com o Documento de Patente 13, é um agonista de STING.

[0017] O Documento de Patente 14 (WO composto representado pela seguinte fórmula:em que cada símbolo é conforme definido no Documento de Patente 14, o qual, de acordo com o Documento de Patente 14, é um agonista de STING.

[0018] O Documento de Patente 15 (WO 2017/027646) divulga um composto representado pela seguinte fórmula:em que cada símbolo é conforme definido no Documento de Patente 15 que, de acordo com o Documento de Patente 15, é um agonista de STING.

[0019] Documento de Patente 16 WO 2017/075477) divulga um composto representado pela seguinte fórmula:em que cada símbolo é conforme definido no Documento de Patente 16, que, de acordo com o Documento de Patente 16 é um agonista de STING.

[0020] O Documento de Patente 17 (WO 2017/027645) divulga um composto representado pela seguinte fórmula:em que cada símbolo é conforme definido no Documento de Patente 17, que, de acordo com o Documento de Patente 17 é um agonista de STING.

BREVE SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0021] Em um aspecto, a divulgação fornece um composto representado pela fórmula (I):em que:

[0022] a estrutura parcial representada pela fórmula (A-1):

[0023] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIA):

[0024] uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIB):

[0025] R1 e R2 são, cada um, independentemente um grupo hidroxi ou um átomo de halogênio;

[0026] B1 é um grupo representado por

[0027] R13, R14, R15, R16 e R17 são cada um independentemente um átomo de hidrogênio ou um substituinte;

[0028] ’11, ’12, ’13, ’14, ’15 e ’16 são, cada um, independentemente N ou CR1a;

[0029] Z11, Z12, Z13, Z14, Z15 e Z16 são, cada um, independentemente N ou C;

[0030] R1a é um átomo de hidrogênio ou um substituinte;

[0031] B2 é um grupo representado porJ cada um, independentemente selecionados dentre um átomo de hidrogênio ou um substituinte;

[0032] R23, R24, R25, R26 e R27 são, cada um, independentemente selecionados dentre um átomo de hidrogênio ou um substituinte;

[0033] Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 são, cada um, independentemente N ou CR2a;

[0034] Z21, Z22, Z23, Z24, Z25 e Z26 são, cada um, independentemente N ou C;

[0035] R2a é um átomo de hidrogênio ou um substituinte;desde quei) pelo menos um de Y11, Y12, Y13, Y14, Y15 e Y16 é CR1a,ii) pelo menos um de Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 é CR2a, ouiii) pelo menos um de Z13, Z16, Z23 e Z26 é C;X1 e X2 são, cada um, independentemente, um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre; e

[0036] Q1, Q2, Q3 e Q4 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre, ou um sal do mesmo (daqui em diante por vezes referido como composto (I)).

[0037] Em outro aspecto, a divulgação fornece um composto representado pela fórmula (I), em que pelo menos um de B1 e B2 é

[0038] R18 é hidrogênio ou C1-6 alquil; e

[0039] R19 é um átomo de halogênio ou um sal do mesmo.

[0040] Em outro aspecto, X1 e X2 são O.

[0041] Em outro aspecto, a divulgação fornece um composto representado pela fórmula (I), em que

[0042] B1 é

[0043] B2 éou um sal do mesmo. Em outro aspecto, X1 e X2 são O.

[0044] Em um outro aspecto, a divulgação fornece 7- ((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-15-fluoro- 2,10,16-trihidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona, ou um sal do mesmo.

[0045] Em outro aspecto, a divulgação fornece 7-((2R, 5R, 7R, 8R, 12aR, 14R, 15R, 15aR, 16R)-14-(6-amino-9H-purina-9-il)-15-fluoro- 10,16-di-hidroxi-2,10- dióxido-2-sulfanilocta-hidro-12H-5,8-metanofuro[3,2-l] [1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona, ou um sal do mesmo.

[0046] Em outro aspecto, a divulgação fornece 2-amino-9 - ((5R, 7R, 8R, 12aR, 14S, 15S, 15aS, 16R)-14-(4-aminopirazolo[1,5-a][1,3, 5]triazin-8-il) -2,10,15,16-tetra-hidroxi-2,10-dióxido-octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-7-il)-1,9-dihidro-6H-purin-6-ona, ou um sal do mesmo.

[0047] Em um outro aspecto, a divulgação fornece 7- ((2R,5R,7R,8R,10R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-15- fluoro-16-hidroxi-2,10-dióxido-2,10-dissulfaniloctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona, ou um sal do mesmo.

[0048] Em outro aspecto, a divulgação fornece um composto tendo a Fórmula (XIV):(CD-L)nA (XIV)ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, em que:

[0049] CD é um grupo representado por qualquer uma das Fórmula (XX) - (XXIX), vide abaixo;

[0050] L é um ligante peptídico;

[0051] A é um anticorpo, fragmento de anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno;

[0052] n é 1-10.

[0053] Em outro aspecto, a divulgação fornece um composto tendo a Fórmula (XIV), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que A é um anticorpo.

[0054] Em outro aspecto, a divulgação fornece um composto tendo Fórmula (XIV), ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que A é um fragmento de ligação ao antígeno.

[0055] Em outro aspecto, a divulgação fornece um medicamento compreendendo o composto ou sal de fórmula (I). Em outra modalidade, o medicamento é um agonista de STING. Em outra modalidade, o medicamento é um agente para a profilaxia ou tratamento de câncer.

[0056] Em outro aspecto, a divulgação fornece um método de ativar um STING em um mamífero, que compreende administrar uma quantidade eficaz de um composto tendo a fórmula (I), ou um sal do mesmo, ao mamífero.

[0057] Em outro aspecto, a divulgação fornece um método para profilaxia ou tratamento de câncer em um mamífero, que compreende administrar uma quantidade eficaz do composto tendo a fórmula (I), ou um sal do mesmo, a um mamífero.

[0058] Em outro aspecto, a divulgação fornece um composto tendo a fórmula (I), ou um sal do mesmo, para uso na prevenção ou tratamento de câncer.

[0059] Em outro aspecto, a divulgação fornece o uso do composto tendo a fórmula (I), ou um sal do mesmo, para a produção de um agente para a profilaxia ou tratamento de câncer.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[0060] A Fig. 1 é um gráfico de linhas que mostra a liberação de Carga Útil 1 a partir de ADC1.

[0061] A Fig. 2 é um gráfico de linhas que mostra a liberação de Carga Útil 1 a partir de ADC2.

[0062] A Fig. 3 é um gráfico de linhas que mostra a liberação de Carga Útil 2 a partir de ADC3.

[0063] A Fig. 4 é um gráfico de barras que mostra que as células HEK293 que expressam os avos de receptor de superfície para ADC1 exibem o aumento esperado fosfo-IRF3 (pIRF3) de marcador de via de STING quando tratadas com o ADC1.

[0064] A Fig. 5 é um gráfico de barras que mostra que as células HEK293 que expressam os alvos de receptor de superfície para ADC2 exibem o aumento esperado no fosfo-IRF3 (pIRF3) de marcador de via de STING quando tratadas com o ADC2.

[0065] A Fig. 6 é um gráfico de barras que mostra que as células HEK293 que expressam os alvos de receptor de superfície para ADC3 exibem o aumento esperado no fosfo-IRF3 (pIRF3) de marcador de via de STING quando tratadas com o ADC3.

[0066] A Fig. 7 é um gráfico de barras que mostra a análise de Western blot de ativação de via a jusante (TBK1 eIRF3) para o composto Ex. 14.

[0067] A Fig. 8 é um gráfico de linhas que mostra a atividade antitumoral do composto Ex. 3a no modelo de camundongos singênicos CT-26 de carcinoma do cólon.

[0068] A Fig. 9 é um gráfico de linhas que mostra a atividade antitumoral do composto Ex. 14 no modelo de camundongos singênicos CT-26 de carcinoma do cólon.

[0069] A Fig. 10 é um gráfico de linhas que mostra a atividade antitumoral do composto Ex. 3a no modelo de camundongos singênicos B16F10 de carcinoma do cólon.

[0070] A Fig. 11 é um gráfico de linhas que mostra a atividade antitumoral do composto Ex. 14 no modelo de camundongos singênicos B16F10 de carcinoma do cólon.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0071] A presente divulgação é explicada em detalhe abaixo.

[0072] A definição de cada substituinte usado no presente relatório descritivo é descrita em detalhe a seguir. Salvo indicação em contrário, cada substituinte tem a seguinte definição.

[0073] No presente relatório descritivo, os exemplos do "átomo de halogênio" incluem flúor, cloro, bromo e iodo.

[0074] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C1-6 alquil" incluem metil, etil, propil, isopropil, butil, isobutil, sec-butil, terc-butil, pentil, isopentil, neopentil, 1-etilpropil, hexil, isohexil, 1,1-dimetilbutil, 2,2-dimetilbutil, 3,3-dimetilbutil e 2-etilbutil.

[0075] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C1-6 alquil opcionalmente halogenado" incluem um grupo C1-6 alquil opcionalmente tendo 1 a 7, preferencialmente 1 a 5, átomos de halogênio. Os exemplos específicos do mesmo incluem metil, clorometil, difluorometil, triclorometil, trifluorometil, etil, 2- bromoetil, 2,2,2-trifluoroetil, tetrafluoroetil, pentafluoroetil, propiil, 2,2-difluoropropil, 3,3,3-trifluoropropil, isopropil, butil, 4,4,4-trifluorobuti, isobutil, sec-butil, terc-butil, pentil, isopentil, neopentil, 5,5,5-trifluoropentil, hexil e 6,6,6-trifluorohexil.

[0076] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C2-6 alquenil" incluem etenil, 1-propenil, 2-propenil, 2-metil-1-propenil, 1-butenil, 2-butenil, 3- butenil, 3-metil-2-butenil, 1-pentenil, 2-pentenil, 3-pentenil, 4-pentenil, 4-metil-3- pentenil, 1-hexenil, 3-hexenil e 5-hexenil.

[0077] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C2-6 alquenil" incluem etinil, 1-propinil, 2-propinil, 1-butinil, 2-butinil, 3-butinil, 1-pentinil, 2-pentinil, 3-pentinil, 4-pentinil, 1-hexinil, 2-hexinil, 3-hexinil, 4-hexinil, 5-hexinil e 4-metil-2- pentinil.

[0078] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C3-10 cicloalquil" incluem ciclopropil, ciclobutil, ciclopentil, ciclohexil, cicloheptil, ciclo-octil, biciclo[2.2.1]heptil, biciclo[2.2.2]octil, biciclo[3.2.1]octil adamantil.

[0079] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C3-10 cicloalquil opcionalmente halogenado" incluem um grupo C3-10 cicloalquil opcionalmente tendo 1 a 7, preferencialmente 1 a 5, átomos de halogênio. Os exemplos específicos do mesmo incluem ciclopropil, 2,2-difluorociclopropil, 2,3- difluorociclopropil, ciclobutil, difluorociclobutil, ciclopentil, ciclohexil, cicloheptil e ciclooctil.

[0080] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C3-10 cicloalquenil" incluem ciclopropenil, ciclobutenil, ciclopentenil, ciclohexenil, cicloheptanil e ciclooctil.

[0081] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C6-14 aril" incluem fenil, 1-naftil, 2-naftil, 1-antril, 2-antril e 9-antril.

[0082] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C7-16 aralquil" incluem benzil, fenetil, naftilmetil e fenilpropil.

[0083] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C1-6 alcoxi" incluem metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, isobutoxi, sec-butoxi, terc-butoxi, pentiloxi e hexiloxi.

[0084] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C1-6 alcoxi opcionalmente halogenado" incluem um grupo C1-6 alcoxi opcionalmente tendo 1 a 7, preferencialmente 1 a 5, átomos de halogênio. Os exemplos específicos do mesmo incluem metoxi, difluorometoxi, trifluorometoxi, etoxi, 2,2,2-trifluoroetoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, 4,4,4-trifluorobutoxi, isobutoxi, sec-butoxi, pentiloxi e hexiloxi.

[0085] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C3-10 cicloalquiloxi" incluem ciclopropiloxi, ciclobutiloxi, ciclopentiloxi, ciclohexiloxi, cicloheptiloxi e ciclooctiloxi.

[0086] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C1-6 alquiltio" incluem metiltio, etiltio, propiltio, isopropiltio, butiltio, sec-butiltio, terc-butiltio, pentiltio e hexiltio.

[0087] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C1-6 alquiltio opcionalmente halogenado" incluem um grupo C1-6 alquiltio opcionalmente tendo 1 a 7, preferencialmente 1 a 5, átomos de halogênio. Os exemplos específicos do mesmo incluem metiltio, difluorometiltio, trifluorometiltio, etiltio, propiltio, isopropiltio, butiltio, 4,4,4-trifluorobutiltio, pentiltio e hexiltio.

[0088] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C1-6 alquil- carbonil" incluem acetil, propanoil, butanoil, 2-metilpropanoil, pentanoil, 3- metilbutanoil, 2-metilbutanoil, 2,2-dimetilpropanoil, hexanoil e heptanoil.

[0089] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C1-6 alquil- carbonil opcionalmente halogenado" incluem um grupo C1-6 alquil-carbonil opcionalmente tendo 1 a 7, preferencialmente 1 a 5, átomos de halogênio. Os exemplos específicos do mesmo incluem acetil, cloroacetil, trifluoroacetil, tricloroacetil, propanoil, butanoil, pentanoil e hexanoil.

[0090] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C1-6 alcoxi- carbonil" incluem metoxicarbonil, etoxicarbonil, propoxicarbonil, isopropoxicarbonil, butoxicarbonil, isobutoxicarbonil, sec-butoxicarbonil, terc-butoxicarbonil, pentiloxicarbonil e hexiloxicarbonil.

[0091] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C6-14 aril- carbonil" incluem benzoil, 1-naftoil e 2-naftoil.

[0092] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C7-16 aralquil- carbonil" incluem fenilacetil e fenilpropionil.

[0093] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupoheterociclocarbonil aromático de 5 a 14 membros" incluem isonicotinoil, tenoil efuroil.

[0094] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupoheterociclilcarbonil aromático de 3 a 14 membros" incluem morfolinilcarbonil,piperidinilcarbonil e pirrolidinilcarbonil.

[0095] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo mono ou di- C1-6 alquil-carbamoil" incluem metilcarbamoil, etilcarbamoil, dimetilcarbamoil, dietilcarbamoil e N-etil-N-metilcarbamoil.

[0096] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo mono ou di- C7-16 aralquil-carbamoil" incluem benzilcarbamoil e fenetilcarbamoil.

[0097] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C1-6 alquilsulfonil" incluem metilsulfonil, etilsulfonil, propilsulfonil, isopropilsulfonil, butilsulfonil, sec-butilsulfonil e terc-butilsulfonil.

[0098] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C1-6 alquilsulfonil" incluem um grupo C1-6 alquilsulfonil opcionalmente tendo 1 a 7, preferencialmente 1 a 5, átomos de halogênio. Os exemplos específicos do mesmo incluem metilsulfonil, difluorometilsulfonil, trifluorometilsulfonil, etilsulfonil, propilsulfonil, isopropilsulfonil, butilsulfonil, 4,4,4-trifluorobutilsulfonil, pentilsulfonil e hexilsulfonil.

[0099] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo C6-14arilsulfonil" incluem fenilsulfonil, 1-naftilsulfonil e 2-naftilsulfonil.

[0100] No presente relatório descritivo, os exemplos do "substituinte"incluem um átomo de halogênio, um grupo ciano, um grupo nitro, um grupo hidrocarboneto opcionalmente substituído, um grupo acil, um grupo amino opcionalmente substituído, um grupo carbamoil opcionalmente substituído, um grupo tiocarbamoil opcionalmente substituído, um grupo sulfamoil opcionalmente substituído, um grupo hidroxi opcionalmente substituído, um grupo sulfanil opcionalmente substituído (SH) e um grupo silil opcionalmente substituído.

[0101] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo hidrocarboneto" (incluindo "grupo hidrocarboneto" do "grupo hidrocarboneto opcionalmente substituído") inclui um grupo C1-6 alquil, um grupo C2-6 alquenil, um grupo C2-6 alquinil, um grupo C3-10 cicloalquil, um grupo C3-10 cicloalquenil, um grupo C6-14 aril e um grupo C7-16 aralquil.

[0102] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo hidrocarboneto opcionalmente substituído" incluem um grupo hidrocarboneto opcionalmente tendo os substituintes selecionados dentre o seguinte grupo de substituintes A."Grupo de substituintes A:"(1) um átomo de halogênio,(2) um grupo nitro,(3) um grupo ciano,(4) um grupo oxo,(5) um grupo hidroxi,(6) um grupo C1-6 alcoxi opcionalmente halogenado, (7) um grupo C6-14 ariloxi (por exemplo, fenoxi, naftoxi),(8) um grupo C7-16 aralquiloxi (por exemplo, benziloxi),(9) um grupo heterocicliloxi aromático de 5 a 14 membros (por exemplo, piridiloxi),(10) um grupo heterocicliloxi não aromático de 3 a 14 membros (por exemplo, morfoliniloxi, piperidiniloxi),(11) um grupo C1-6 alquil-carboniloxi (por exemplo, acetoxi, propanoiloxi),(12) um grupo C6-14 aril-carboniloxi (por exemplo, benzoiloxi, 1-naftoloxi, 2- naftoiloxi),(13) um grupo C1-6 alcoxi-carboniloxi (por exemplo, metoxicarboniloxi, etoxicarboniloxi, propoxicarboniloxi, butoxicarboniloxi),(14) um grupo mono- ou di-C1-6 alquil-carbamoiloxi (por exemplo, metilcarbamoiloxi, etilcarbamoiloxi, dimetilcarbamoiloxi, dietilcarbamoiloxi),(15) um grupo C6-14 aril-carbamoiloxi (por exemplo, fenilcarbamoiloxi, naftilcarbamoiloxi),(16) um grupo heterociclilcarboniloxi aromático de 5 a 14 membros (por exemplo, nicotinoiloxi),(17) um grupo heterociclilcarboniloxi não aromático de 3 a 14 membros (por exemplo, morfolinilcarboniloxi, piperidinilcarboniloxi),(18) um grupo C1-6 alquilsulfoniloxi opcionalmente halogenado (por exemplo, metlsulfoniloxi, trifluorometilsulfoniloxi),(19) um grupo C6-14 arilsulfoniloxi opcionalmente substituído por um grupo C1-6 alquil (por exemplo, fenilsulfoniloxi, toluenossulfoniloxi),(20) um grupo C1-6 alquiltio opcionalmente halogenado,(21) um grupo heterocíclico aromático de 5 a 14 membros,(22) um grupo heterocíclico não aromático de 3 a 14 membros,(23) um grupo formil,(24) um grupo carboxi,(25) um grupo C1-6 alquil-carbonil opcionalmente halogenado,(26) um grupo C6-14 aril-carbonil,(27) um grupo heterociclilcarbonil aromático de 5 a 14 membros,(28) um grupo heterociclilcarbonil não aromático de 3 a 14 membros, (29) um grupo C1-6 alcoxi-carbonil,(30) um grupo C6-14 ariloxi-carbonil (por exemplo, feniloxicarbonil, 1- naftiloxicarbonil, 2-naftiloxicarbonil),(31) um grupo C7-16 aralquiloxi-carbonil (por exemplo, benziloxicarbonil, fenetiloxicarbonil),(32) um grupo carbamoil,(33) um grupo tiocarbamoil,(34) um grupo mono- ou di-C1-6 alquil-carbamoil,(35) um grupo C6-14 aril-carbamoil (por exemplo, fenilcarbamoil),(36) um grupo heterociclilcarbamoil aromático de 5 a 14 membros (por exemplo, piridilcarbamoil, tienilcarbamoil),(37) um grupo heterociclilcarbamoil não aromático de 3 a 14 membros (por exemplo, morfolinilcarbamoil, piperidinilcarbamoil),(38) um grupo C1-6 alquilsulfnil opcionalmente halogenado,(39) um grupo C6-14 arilsulfonil,(40) um grupo heterociclilsulfonil aromático de 5 a 14 membros (por exemplo, piridilsulfonil, tienilsulfonil),(41) um grupo C1-6 alquilsulfinil opcionalmente halogenado,(42) um grupo C6-14 arilsulfinil (por exemplo, fenilsulfinil, 1-naftilsulfinil, 2- naftilsulfinil),(43) um grupo heterociclilsulfinil aromático de 5 a 14 membros (por exemplo, piridilsulfinil, tienilsulfinil),(44) um grupo amino,(45) um grupo mono ou di-C1-6 alquilamino (por exemplo, metilamino, etilamino, propilamino, isopropilamino, butilamino, dimetlamino, dietilamino, dipropilamino, dbutilamino, N-etil-N-metilamino),(46) um grupo mono ou di-C6-14 arilamino (por exemplo, fenilamino),(47) um grupo heterociclilamino aromático de 5 a 14 membros (por exemplo, piridilamino),(48) um grupo C7-16 aralquilamino (por exemplo, benzilamino),(49) um grupo formilamino,(50) um grupo C1-6 alquil-carbonilamino (por exemplo, acetilamino, propanoilamino, butanoilamino),(51) um grupo (C1-6 alquil)(C1-6 alquil-carbonil) amino (por exemplo, N-acetil- N-metilamino),(52) um grupo C6-14 aril-carbonilamino (por exemplo, fenilcarbonilamino, naftilcarbonilamino),(53) um grupo C1-6 alcoxi-carbonilamino (por exemplo, metoxicarbonilamino, etoxicarbonilamino, propoxicarbonilamino, butoxicarbonilamino, terc-butoxicarbonilamino),(54) um grupo C7-16 aralquiloxi-carbonilamino (por exemplo, benziloxicarbonilamino),(55) um grupo C1-6 alquilsulfonilamino (por exemplo, metilsulfonilamino, etilsulfonilamino),(56) um grupo C6-14 arilsulfonilamino opcionalmente substituído por um grupo C1-6 alquil (por exemplo, fenilsulfonilamino, toluenossulfonilamino),(57) um grupo C1-6 alquil-carbonil opcionalmente halogenado,(58) um grupo C3-6 alquenil,(59) um grupo C2-6 alquinil,(60) um grupo C3-10 cicloalquil,(61) um grupo C3-10 cicloalquenil, e(62) um grupo C6-14 aril.

[0103] O número dos substituintes mencionados acima no "grupo hidrocarboneto opcionalmente substituído" é, por exemplo, 1 a 5, preferencialmente 1 a 3. Quando o número de substituintes for dois ou mais, os respectivos substituintes podem ser iguais ou diferentes.

[0104] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo heterocíclico" (incluindo "grupo heterocíclico" do "grupo heterocíclico opcionalmente substituído") incluindo (i) um grupo heterocíclico aromático, (ii) um grupo heterocíclico não aromático e (iii) um grupo heterocíclico com ligação em pontede 7 a 10 membros, cada um contendo, como um átomo que compõe um anel além do átomo de carbono, 1 a 4 heteroátomos selecionados dentre um átomo de nitrogênio, um átomo de enxofre e um átomo de oxigênio.

[0105] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo heterocíclico aromático" (incluindo "grupo heterocíclico aromático de 5 a 14 membros") incluem um grupo heterocíclico aromático de 5 a 14 membros (preferencialmente 5 a 10 membros) contendo, como um átomo que compõe um anel além do átomo de carbono, 1 a 4 heteroátomos selecionados dentre um átomo de nitrogênio, um átomo de enxofre e um átomo de oxigênio.

[0106] Os exemplos preferenciais do "grupo heterocíclico aromático" incluem grupos heterocíclicos aromáticos monocíclicos de 5 ou 6 membros tais como tienil, furil, pirrolil, imidazolil, pirazolil, tiazolil, isotiazolil, oxazolil, isoxazolil, piridil, pirazinil, pirimidinil, piridazinil, 1,2,4-oxadiazolil, 1,3,4-oxadiazolil, 1,2,4- tiadiazoli, 1,3,4-tiadiazolil, triazolil, tetrazolil, triazinil e semelhantes; e

[0107] grupos heterocíclicos aromáticos policíclicos (preferencialmente bi ou tricíclico) fundidos de 8 a 14 membros, tal como benzotiofenil, benzofuranil, benzimidazolil, benzoxazolil, benisoxazolil, benzotiazolil, benzisotiazolil, benzotriazolil, imidazopiridinil, tienopiridinil, furopiridinil, piirrolopiridinil, pirazolopiridinil, oxazolopiridinil, tiazolopiridinil, imidazopirazinil, imidazopirimidinil, tienopirimidinil, furopirimidinil, pirrolopirimidinil, pirazolopirimidinil,oxazolopirimidinil, tiazolopirimidinil, pirazolotriazinil, nafto[2,3-b]tienil, fenoxatiinil, indolil, isoindolil, 1H-indazolil, purinil, isoquinolil, quinolil, ftalazinil, naftiridinil, qinoxalinil, quinazolinil, cinolinil, carbazolil, β-carbolinil, fenantridinil, acridinil, fenazinil, fenotiazinil, fenoxazinil e semelhantes.

[0108] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo heterocíclico não aromático" (incluindo "grupo heterocíclico não aromático de 3 a 14 membros") incluem um grupo heterocíclico não aromático de 3 a 14 membros (preferencialmente de 4 a 10 membros) contendo, como um átomo que compõe um anel além do átomo de carbono, 1 a 4 heteroátomos selecionados dentre um átomo de nitrogênio, um átomo de enxofre e um átomo de oxigênio.

[0109] Os exemplos preferenciais do "grupo heterocíclico não aromático" incluem grupos heterocíclicos não aromáticos monocíclicos de 3 a 8 membros, tais como aziridinil, oxiranil, tiiranil, azetidinil, oxetanil, titânia, tetrahidrotienil, tetrahidrofuranil, pirrolinil, pirrolidinnil, imidazolinil, imidazolidinil, oxazolinil, oxazolidinil, pirazolinil, pirazolidinil, tiazolinil, tiazolidinil, tetrahidroisotiazolil, tetrahidrooxazolil, tetrahidroisooxazolil, piperidinil, piperazinil, tetrahidropiridinil, dihidropiridinil, dihidrotiopiranil, tetrahidropirimidinil, tetrahidropiridazinil, dihidropiranil, tetrahidropiranil, tetrahidrotiopiranil, morfolinil, tiomorfolinil, azepanil, diazepanil, azepinil, oxepanil, azocanil, diazoanil e semelhantes; e

[0110] Os grupos heterocíclicos não aromáticos policíclicos fundidos (preferencialmente bi ou tricíclicos) de 9 a 14 membros tais como di- hidrobenzofuranil, di-hidrobenzimidazolil, dihidrobenzoxazolil, dihidrobenzotiazolil, dihidrobenzisotiazolil, dihidronafto [2,3-b] tienil, tetrahidroisoquinolil, tetrahidroquinolil, 4H-quinolizinil, indolinil, isoindolinil, tetra-hidrotieno[2,3-c]piridinil, tetrahidrobenzazepinil, tetra-hidroquinoxalinil, tetrahidrofenantridinil,hexahidrofenotiazinil, hexahidrofenoxazinil, tetrahidroftalazinil, tetrahidronaftiridinil, tetra-hidroquinazolinil, tetrahidrocinolinil, tetrahidrocarbazolil, tetrahidro-β-carbolinil, tetrahidroacridinil, tetrahidrofenazinil, tetrahidrotioxantenil, octahidroisoquinolil e semelhantes.

[0111] No presente relatório descritivo, os exemplos preferenciais do "grupo heterocíclico com ligação em ponte com 7 a 10 membros" incluem quinuclidinil e 7- azabiciclo[2.2.1]heptanil.

[0112] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo heterocíclico contendo nitrogênio" incluem um "grupo heterocíclico" contendo pelo menos um átomo de nitrogênio como um átomo que compõe um anel.

[0113] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo heterocíclico opcionalmente substituído" incluem um grupo heterocíclico tendo opcionalmente substituintes selecionados dentre o "Grupo Substituinte A" mencionado acima.

[0114] O número de substituintes no "grupo heterocíclico opcionalmente substituído" é, por exemplo, 1 a 3. Quando o número de substituintes for dois ou mais, os respectivos substituintes podem ser iguais ou diferentes.

[0115] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo acil" incluem um grupo formil, um grupo carboxi, um grupo carbamoil, um grupo tiocarbamoil, um grupo sulfino, um grupo sulfo, um grupo sulfamoil e um grupo fosfono, cada um opcionalmente tendo "1 ou 2 substituintes selecionados dentre um grupo C1-6 alquil, um grupo C2-6 alquenil, um grupo C3-10 cicloalquil, um grupo C3-10 cicloalquenil, um grupo C6-14 aril, um grupo C7-16 aralquil, um grupo heterocíclico aromático de 5 a 14 membros e um grupo heterocíclico não aromático de 3 a 14 membros, cada um dos quais opcionalmente tem 1 a 3 substituintes selecionados dentre um átomo de halogênio, um grupo C1-6 alcoxi opcionalmente halogenado, um grupo hidroxi, um grupo nitro, um grupo ciano, um grupo amino e um grupo carbamoil".

[0116] Os exemplos do "grupo acil" também incluem um grupo hidrocarboneto-sulfonil, um grupo heterociclilsulfonil, um grupo hidrocarboneto- sulfinil e um grupo heterciclilsulfinil.

[0117] Neste documento, o grupo hidrocarboneto-sulfonil significa um grupo sulfonil ligado ao grupo hidrocarboneto, o grupo heterociclilslfonil significa um grupo sulfonil ligado ao grupo heterocíclico, o grupo hidrocarboneto-sulfinil significa um grupo sulfinil ligado ao grupo hidrocarboneto e o grupo heterociclilsulfinil significa um grupo sulfinil ligado ao grupo heterocíclico.

[0118] Os exemplos preferenciais do "grupo acil" incluem um grupo formil, um grupo carboxi, um grupo C1-6 alquil-carbonil, um grupo C2-6 alquenil-carbonil (por exemplo, crotonoil), a grupo C3-10 cicloalquil-carbonil (por exemplo, ciclobutanocarbonil, ciclopentanocarbonil, ciclohexanocarbonil,cicloheptanocarbonil), um grupo cicloalquenil-carbonil C3-10 (por exemplo, 2- ciclohexenocarbonil), um grupo C6-14 aril-carbonil, um grupo C7-16 aralquil-carbonil, um grupo heterociclilcarbonil aromático de 5 a 14 membros, um grupo heterociclilcarbonil não aromático de 3 a 14 membros, um grupo C1-6 alcoxi- carbonil, um grupo C6-14 ariloxi carbonil (por exemplo, feniloxicarbonil, naftiloxicarbonil), um grupo C7-16 aralquiloxi-carbonill (por exemplo,benziloxicarbonil, fenetiloxicarbonil), um grupo carbamoil, um grupo mono ou di-C1- 6 alquil-carbamoil, um grupo mono ou di-C2-6 alquenil-carbamoil (por exemplo, dialilcarbamoil), um grupo mono ou di-C3-10 cicloalquil-carbamoil (por exemplo, ciclopropilcarbamoil), um grupo mono ou di-C6-14 aril-carbamoil (por exemplo, fenilcarbamoil), um grupo mono ou di-C7-16 aralquil-carbamoil, um grupo heterociclilcarbamoil aromático de 5 a 14 membros (por exemplo, piridilcarbamoil), um grupo tiocarbamoil, um mono ou di-C1-6 alquil-tiocarbamoil (por exemplo, metiltiocarbamoil, N-etil-N-metiltiocarbamoil), um grupo mono or di-C2-6 alquenil- tiocarbamoil (por exemplo, dialiltiocarbamoil), um grupo mono ou di-C3-10 cicloalquil- tiocarbamoil (por exemplo, ciclopropiltiocarbamoil, ciclohexiltiocarbamoil), um mono ou di-C6-14 aril-tiocarbamoil (por exemplo, feniltiocarbamoil), um mono ou di-C7-16 aralquil-tiocarbamoil (por exemplo, benziltiocarbamoil, fenetiltiocarbamoil), um grupo heterocicliltiocarbamoil aromático de 5 a 14 membros (por exemplo, piridiltiocarbamoil), um grupo sulfino, um grupo C1-6 alquilsulfinil (por exemplo, metilsulfinil, etilsulfinil), grupo sulfo, um grupo C1-6 alquilsulfonil, um grupo C6-14 arilsulfonil, um grupo fosfono e um grupo mono ou di-C1-6 alquilfosfono (por exemplo, dimetilfosfono, dietilfosfono, diisopropilfosfono, dibutilfosfono).

[0119] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo amino opcionalmente substituído" incluem um grupo amino opcionalmente tendo "1 ou 2 substituintes selecionados dentre um grupo C1-6 alquil, um grupo C2-6 alquenil, um grupo C3-10 cicloalquil, um grupo C6-14 aril, um grupo C7-16 aralquil, um grupo C1-6 alquil-carbonil, um grupo C6-14 aril-carbonil, um grupo C7-16 aralquil-carbonil, um grupo heterociclilcarbonil aromático de 5 a 14 membros, um grupo heterociclilcarbonil não aromático de 3 a 14 membros não aromáticos, um grupo alcoxi-carbonil C1-6, um grupo heterocíclico aromático de 5 a 14 membros, um grupo carbamoil, um grupo mono ou di-C1-6 alquil carbamoil, um grupo mono ou di-C7-16 aralquil-carbamoil, um grupo C1-6 alquilsulfonil e um grupo C6-14 arilsulfonil, cada um dos quais opcionalmente tem 1 a 3 substituintes selecioandos dentre o "Grupo de Substituintes A".

[0120] Os exemplos preferenciais do grupo amino opcionalmente substituído incluem um grupo amino, um grupo mono ou di(C1-6 alquil opcionalmente halogenado) amino (por exemplo, metilamino, trifluorometilamino, dimetilamino, etilamino, dietilamino, propilamino, dibutilamino), um grupo mono ou di-C2-6 alquenilamino (por exemplo, dialilamino), um grupo mono ou di-C3-10 cicloalquilamino (por exemplo, ciclopropilamino, ciclohexilamino), um grupo mono ou di-C6-14 arilamino (por exemplo, fenilamino), um grupo mono ou di-C7-16 (por exemplo, benzilamino, dibenzilamino), um grupo mono ou di-(C1-6 alquil opcionalmente halogenado)-carbonilamino (por exemplo, acetilamino, propionilamino), um grupo mono ou di-C6-14 aril-carbonilamino (por exemplo, benzoilamino), um grupo mono ou di-C7-16 aralquil-carbonilamino (por exemplo, benzilcarbonilamino), um grupo mono ou di-heterociclilcarbonilamino aromático de 5 a 14 membros (por exemplo, nicotinoilamino, isonicotinoilamino), um grupo mono ou di-heterociclilcarbonilamino não aromático de 3 a 14 membros (por exemplo, piperidinilcarbonilamino), um grupo mono ou di-C1-6 alcoxi-carbonilamino (por exemplo, terc-butoxicarbonilamino), um grupo heterociclilamino aromático de 5 a 14 membros (por exemplo, piridilamino), um grupo carbamoilamino, um grupo (mono ou di-C1-6 alquil-carbamoil) amino (por exemplo, metilcarbamoilamino), um grupo (mono ou di-C7-16 aralquil-carbamoil) amino (por exemplo,benzilcarbamoilamino), um grupo C1-6 alquilsulfonilamino (por exemplo, metilsulfonilamino, etilsulfonilamino), um grupo C6-14 arilsulfonilamino (por exemplo, fenilsulfonilamino), um grupo (C1-6 alquil)(C1-6 alquil-carbonil) amino (por exemplo, N-acetil-N-metilamino) e um grupo (C1-6 alquil)(C6-14 aril-carbonil) amino (por exemplo, N-benzoil-N-metilamino).

[0121] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo carbamoil opcionalmente substituído" incluem um grupo carbamoil opcionalmente tendo "1 ou 2 substituintes selecionados dentre um grupo C1-6 alquil, um grupo C2-6 alquenil, um grupo C3-10 cicloalquil, um grupo C6-14 aril, um grupo C7-16 aralquil, um grupo C1-6 alquil-carbonil, um grupo C6-14 aril-carbonil, um grupo C7-16 aralquil-carbonil, um grupo heterociclilcarbonil aromático de 5 a 14 membros, um grupo heterociclilcarbonil não aromático de 3 a 14 membros, um grupo C1-6 alcoxi- carbonil, um grupo heterocíclico aromático de 5 a 14 membros, um grupo carbamoil, um grupo mono ou di-C1-6 alquil-carbamoil e um grupo mono ou di-C7-16 aralquil- carbamoil, cada um dos quais opcionalmente tem 1 a 3 substituintes selecioandos dentre o "Grupo de Substituintes A".

[0122] Os exemplos preferenciais do grupo carbamoil opcionalmente substituído incluem um grupo carbamoil, um grupo mono ou di-C1-6 alquil-carbamoil, um grupo mono- ou di-C2-6 alquenil-carbamoil (por exemplo, dialilcarbamoil), um grupo mono ou di-C3-10 cicloalquil-carbamoil (por exemplo, ciclopropilcarbamoil, ciclohexilcarbamoil), um grupo mono ou di-C6-14 aril-carbamoil (por exemplo, fenilcarbamoil), um grupo mono ou di-C7-16 aralquil-carbamoil, um grupo mono ou di-C1-6 alquil-carbonil-carbamoil (por exemplo, acetilcarbamoil, propionilcarbamoil), um grupo mono ou di-C6-14 aril-carbonil-carbamoil (por exemplo, benzoilcarbamoil) e um grupo heterociclilcarbamoil aromático de 5 a 14 membros (por exemplo, piridilcarbamoil).

[0123] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo tiocarbamoil opcionalmente substituído" incluem um grupo tiocarbamoil opcionalmente tendo "1 ou 2 substituintes selecionados dentre um grupo C1-6 alquil, um grupo C2-6 alquenil, um grupo C3-10 cicloalquil, um grupo C6-14 aril, um grupo C7-16 aralquil, um grupo C16 alquil-carbonil, um grupo C6-14 aril-carbonil, um grupo C7-16 aralquil-carbonil, um grupo heterociclilcarbonil aromático de 5 a 14 membros, um grupo heterociclilcarbonil não aromático de 3 a 14 membros, um grupo C1-6 alcoxi- carbonil, um grupo heterocíclico aromático de 5 a 14 membros, um grupo carbamoil, um grupo mono ou di-C1-6 alquil-carbamoil e um grupo mono ou di-C7-16 aralquil- carbamoil, cada um dos quais opcionalmente tem 1 a 3 substituintes selecioandos dentre o "Grupo de Substituintes A".

[0124] Os exemplos preferenciais do grupo tiocarbamoil opcionalmente substituído incluem um grupo tiocarbamoil, um grupo mono ou di-C1-6 alquil- tiocarbamoil (por exemplo, metiltiocarbamoil, etiltiocarbamoil, dimetiltiocarbamoil, dietiltiocarbamoil, N-etil-N-metiltiocarbamoil), um grupo mono ou di-C2-6 alquenil- tiocarbamoil (por exemplo, dialiltiocarbamoil), um grupo mono ou di-C3-10 cicloalquil- tiocarbamoil (por exemplo, ciclopropiltiocarbamoil, ciclohexiltiocarbamoil), um grupo mono ou di-C6-14 aril-tiocarbamoil (por exemplo, feniltiocarbamoil), um grupo mono ou di-C7-16 aralquil-tiocarbamoil (por exemplo, benziltiocarbamoil,fenetiltiocarbamoil), um grupo mono ou di-C1-6 alquil-carbonil-tiocarbamoil (por exemplo, acetiltiocarbamoil, propioniltiocarbamoil), um grupo mono ou di-C6-14 aril- carbonil-tiocarbamoil (por exemplo, benzoiltiocarbamoil) e um grupo heterocicliltiocarbamoil aromático de 5 a 14 membros (por exemplo, piridiltiocarbamoil).

[0125] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo sulfamoil opcionalmente substituído" incluem um grupo sulfamoil opcionalmente tendo "1 ou 2 substituintes selecionados dentre um grupo C1-6 alquil, um grupo C2-6 alquenil, um grupo C3-10 cicloalquil, um grupo C6-14 aril, um grupo C7-16 aralquil, um grupo C1-6 alquil-carbonil, um grupo C6-14 aril-carbonil, um grupo C7-16 aralquil-carbonil, um grupo heterociclilcarbonil aromático de 5 a 14 membros, um grupo heterociclilcarbonil não aromático de 3 a 14 membros, um grupo C1-6 alcoxi- carbonil, um grupo heterocíclico aromático de 5 a 14 membros, um grupo carbamoil, um grupo mono ou di-C1-6 alquil-carbamoil e um grupo mono ou di-C7-16 aralquil- carbamoil, cada um dos quais opcionalmente tem 1 a 3 substituintes selecioandos dentre o "Grupo de Substituintes A".

[0126] Os exemplos preferenciais do grupo sulfamoil opcionalmente substituído incluem um grupo sulfamoil, um grupo mono ou di-C1-6 alquil-sulfamoil (por exemplo, metilsulfamoil, etilsulfamoil, dimetilsulfamoil, dietilsulfamoil, N-etil-N- metiilsulfamoil), um grupo mono or di-C2-6 alquenil-sulfamoil (por exemplo, dialilsulfamoil), um grupo mono ou di-C3-10 cicloalquil-sulfamoil (por exemplo, ciclopropilsulfamoil, ciclohexilsulfamoil), um grupo mono ou di-C6-14 aril-sulfamoil (por exemplo, fenilsulfamoil), um grupo mono ou di-C7-16 aralquil-sulfamoil (por exemplo, benzilsulfamoil, fenetilsulfamoil), um grupo mono ou di-C1-6 alquil- carbonil-sulfamoil (por exemplo, acetilsulfamoil, propionilsulfamoil), um grupo mono ou di-C6-14 aril-carbonil-sulfamoil (por exemplo, benzoilsulfamoil) e um grupo heterociclilsulfamoil aromático de 5 a 14 membros (por exemplo, piridilsulfamoil).

[0127] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo hidroxi opcionalmente substituído" incluem um grupo hidroxi opcionalmente tendo "um substituinte selecionado dentre um grupo C1-6 alquil, um grupo C2-6 alquenil, um grupo C3-10 cicloalquil, um grupo C6-14 aril, um grupo C7-16 aralquil, um grupo C1-6 alquil-carbonil, um grupo C6-14 aril-carbonil, um grupo C7-16 aralquil-carbonil, um grupo heterociclilcarbonil aromático de 5 a 14 membros, um grupo heterociclilcarbonil não aromático de 3 a 14 membros não aromáticos, um grupo alcoxi-carbonil C1-6, um grupo heterocíclico aromático de 5 a 14 membros, um grupo carbamoil, um grupo mono ou di-C1-6 alquil carbamoil, um grupo mono ou di-C7-16 aralquil-carbamoil, um grupo C1-6 alquilsulfonil e um grupo C6-14 arilsulfonil, cada um dos quais tem opcionalmente 1 a 3 substituintes selecionados dentre o "Grupo de Substituintes A".

[0128] Os exemplos preferenciais do grupo hidroxi opcionalmente substituído incluem um grupo hidroxi, um grupo C1-6 alcoxi, um grupo C2-6 alqueniloxi (por exemplo, aliloxi, 2-buteniloxi, 2-penteniloxi, 3-hexeniloxi), um grupo C3-10 cicloalquiloxi (por exemplo, ciclohexiloxi), um grupo C6-14 ariloxi (por exemplo, fenoxi, naftiloxi), um grupo C7-16 aralquiloxi (por exemplo, benziloxi, fenetiloxi), um grupo C1-6 alquil-carboniloxi (por exemplo, acetiloxi, propieoniloxi, butiriloxi, isobutiriloxi, pivaloiloxi), um grupo C6-14 aril-carboniloxi (por exemplo, benzoiloxi), um grupo C7-16 aralquil-carboniloxi (por exemplo, benzilcarboniloxi), um grupo heterociclilcarboniloxi aromático de 5 a 14 membros (por exemplo, nicotinoiloxi), um heterociclilcarboniloxi não aromático de 3 a 14 membros (por exemplo, piperidinilcarboniloxi), um grupo C1-6 alcoxi-carboniloxi (por exemplo, terc- butoxicarboniloxi), um grupo heterocicliloxi aromático de 5 a 14 membros (por exemplo, piridiloxi), um grupo carbamoiloxi, um grupo C1-6 alquil-carbamoiloxi (por exemplo, metilcarbamoiloxi), um grupo C7-16 aralquil-carbamoiloxi (por exemplo, benzilcarbamoiloxi), um grupo C1-6 alquilsulfoniloxi (por exemplo, metilsulfoniloxi, etilsulfoniloxi) e um grupo C6-14 arilsulfoniloxi (por exemplo, fenilsulfoniloxi).

[0129] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo sulfanil opcionalmente substituído" incluem um grupo sulfanil opcionalmente tendo "um substituinte selecionado dentre um grupo C1-6 alquil, um grupo C2-6 alquenil, um grupo C3-10 cicloalquil, um grupo C6-14 alquil-carbonil, um grupo C7-16 aralquil, um grupo C1-6 alquil-carbonil, um grupo C6-14 aril-carbonil e um grupo heterocíclico aromático de 5 a 14 membros, cada um dos quais tem opcionalmente 1 a 3 substituintes selecionados dentre o "Grupo de Substituintes A" e um grupo sulfanil halogenado.

[0130] Os exemplos preferenciais do grupo sulfanil opcionalmente substituído incluem um grupo sulfanil (-SH), um grupo C1-6 alquiltio, um grupo C2-6 alqueniltio (por exemplo, aliltio, 2-buteniltio, 2-penteniltio, 3-hexeniltio), um grupo C3-10 cicloalquiltio (por exemplo, ciclohexiltio), um grupo C6-14 ariltio (por exemplo, feniltio, naftiltio), um grupo C7-16 aralquiltio (por exemplo, benziltio, fenetiltio), um grupo C1-6 alquil-carboniltio (por exemplo, acetiltio, propioniltio, butiriltio, isobutiriltio, pivaloiltio), um grupo C6-14 aril-carboniltio (por exemplo, benzoiltio), um grupo heterocicliltio aromático de 5 a 14 membros (por exemplo, piridiltio) e um grupo tio halogenado (por exemplo, pentafluorotio).

[0131] No presente relatório descritivo, os exemplos do "grupo opcionalmente substituído" incluem um grupo silil opcionalmente tendo "1 a 3 substituintes selecionados dentre um grupo C1-6 alquil, um grupo C2-6 alquenil, um grupo C3-10 cicloalquil, um grupo C6-14 aril e um grupo C7-16 aralquil, cada um dos quais opcionalmente tem 1 a 3 substituintes selecionados dentre o "Grupo de Substituintes A". Os exemplos do grupo silil opcionalmente substituído incluem um grupo tri-C1-6 alquilsilil (por exemplo, trimetilsilil, terc-butil(dimetil)silil).

[0132] O termo "conjugado anticorpo-fármaco "ou "ADC", conforme usado neste documento, refere-se a um composto que é ligado a um anticorpo e é definido pela fórmula (CD-L)n-A, em que CD é um grupo representado por qualquer uma das Fórmulas (XX) - (XXIX), vide abaixo, L é um ligante peptídico, A é uma proteína, por exemplo, um anticorpo e n é 1-10. Em uma modalidade, o ligante peptídico por -X3-T-Z-Q-, em que X3 é um radical divalente que conecta o CD ao resto do ligante peptídico, ou está ausente, T é um peptídeo, ou está ausente, Z é um espaçador e Q é um grupo heterobifuncional ou um grupo heterotrifuncional. Para fins ilustrativos, a seguinte fórmula genérica mostra um ADC da divulgação tendo um conector de base para-aminobenzil, um dipeptídeo de base alanila-alanina, um espaçador de base de propanona e um grupo heterobifuncional de base de tioéter de succinimida:

[0133] No presente relatório descritivo, o termo "ligante peptídico" refere-se a qualquer porção química capaz de ligar uma proteína, por exemplo, anticorpo, fragmento de anticorpo (por exemplo, fragmentos de ligação ao antígeno) ou equivalente funcional a um dinucleotídeo cíclico. Os ligantes peptídicos podem ser suscetíveis a clivagem (um "ligante peptídico clivável"), facilitando desse modo a liberação do dinucleotídeo cíclico. Por exemplo, tais ligantes peptídicos cliváveis podem ser suscetíveis a clivagem induzida por ácido, clivagem fotoinduzida, clivagem induzida por peptidase, clivagem induzidas por esterase e clivagem de ligação de dissulfeto, em condições sob as quais o dinucleotídeo cíclico e/ou o anticorpo permanece ativo. Alternativamente, os ligantes peptídicos podem ser substancialmente resistentes à clivagem (um "ligante peptídico não clivável").

[0134] Na presente divulgação, os ligantes peptídicos não cliváveis são qualquer fração química capaz de ligar um dinucleotídeo cíclico a um anticorpo de um modo estável, covalente e não se encontra nas categorias listadas acima para os ligantes peptídicos cliváveis. Portanto, os ligantes peptídicos não cliváveis são substancialmente resistentes à clivagem induzida por ácido, clivagem fotoinduzida, clivagem induzida por peptidase, clivagem induzida por esterase e clivagem por ligação de dissulfureto. Adicionalmente, não clivável se refere à capacidade da ligação química no ligante peptídico ou adjacente ao ligante peptídico de resistir à clivagem induzida por um ácido, agente de clivagem fotolábil, uma peptidase, uma esterase ou um composto químico ou fisiológico que cliva uma ligação de dissulfeto, em condições sob as quais um dinucleotídeo cíclico e/ou o anticorpo não perde sua atividade.

[0135] Alguns ligantes peptídicos são clivados por peptidases ("ligantes peptídicos cliváveis por peptidase"). Apenas certos peptídeos são facilmente clivados dentro ou fora das células, vide, por exemplo, Trout et al., 79 Proc. Natl. Acad. Sci. EUA, 626-629 (1982) e Umemoto et al. 43 int. J. Cancer, 677-684 (1989). Adicionalmente, os peptídeos são compostos por unidades de a-aminoácidos e ligações peptídicas, que quimicamente são ligações de amida entre o carboxilato de um aminoácido e o grupo amino de um segundo aminoácido. Outras ligações amida, tais como a ligação entre um carboxilato e o grupo aminoácido a da lisina, são entendidas como ligações não peptídicas e são consideradas não cliváveis.

[0136] Alguns ligantes peptídicos são clivados por esterases ("ligantes peptídicos cliváveis por esterase"). Apenas certos ésteres podem ser clivados por esterases presentes dentro ou fora das células. Os ésteres são formados pela condensação de um ácido carboxílico e um álcool. Os ésteres simples são ésteres produzidos com álcoois simples, como álcoois alifáticos, e pequenos álcoois cíclicos e pequenos aromáticos.

[0137] Em algumas modalidades, o componente de ligante peptídico clivável compreende um peptídeo compreendendo um a dez resíduos de aminoácidos. Nestas modalidades, o peptídeo permite a clivagem do ligante peptídico por uma protease, facilitando desse modo a liberação do dinucleotídeo cíclico após exposição a proteases intracelulares, tais como enzimas lisossomais (Doronina et al. (2003) Nat. Biotechnol. 21:778-784). Os peptídeos exemplificativos incluem, mas não estão limitados a, dipeptídeos, tripeptídeos, tetrapeptídeos e pentapeptídeos. Os dipeptídeos exemplificativos incluem, mas não estão limitados a, alanina-alanina (ala-ala), valina-citrulina (vc ou val-cit), alanina-fenilalanina (af ou ala-phe); fenilalanina-lisina (fk ou phe-lys); fenilalanina-homolisina (phe-homolys); e N-metil-valina-citrulina (Me-val-cit). Os tripeptídeos exemplificativos incluem, mas não estão limitados a, glicina-valina-citrulina (gly-val-cit) e glicina-glicina-glicina (gly-gly-gly).

[0138] Um peptídeo pode compreender resíduos de aminoácidos que ocorrem naturalmente e/ou não naturais. O termo "aminoácido que ocorre naturalmente" refere-se a Ala, Asp, Cys, Glu, Phe, Gly, His, He, Lis, Leu, Met, Asn, Pro, Gin, Arg, Ser, Thr, Val, Trp e Tyr. Os "aminoácidos não naturais" (ou seja, os aminoácidos não ocorrem naturalmente) incluem, a título de exemplo não limitativo, homosserina, homoarginina, citrulina, fenilglicina, taurina, iodotirosina, selenocisteína, norleucina ("Nle"), norvalina ("Nva"), beta-alanina, L ou D- naftalanina, ornitina ("Orn") e semelhantes. Os peptídeos podem ser projetados e otimizados para clivagem enzimática por uma enzima específica, por exemplo, uma protease associada ao tumor, catepsina B, C e D ou uma plasmina protease.

[0139] Os aminoácidos também incluem as formas D dos aminoácidos naturais e não naturais. "D-" designa um aminoácido tendo a configuração "D" (dextrorrotatória), em oposição à configuração nos aminoácidos de ocorrência natural ("L-"). Os aminoácidos naturais e não naturais podem ser adquiridos comercialmente (Sigma Chemical Co., Advanced Chemtech) ou sintetizados usando métodos conhecidos na técnica.

[0140] Na presente divulgação, o termo "grupo heterobifuncional" ou o termo "grupo heterotrifuncional" refere-se a uma porção química que conecta um ligante peptídico e outra molécula terapeuticamente ativa, por exemplo, proteína, por exemplo, um anticorpo. Vide, por exemplo, o documento WO 2017/191579. Os grupos heterobi e tri-funcionais são caracterizados como tendo diferentes grupos reativos em cada extremidade da porção química. Os grupos heterobifuncionais exemplificativos não limitativos incluem:em que o "*" indica o ponto de ligação a qualquer átomo de carbono, átomo de nitrogênio, átomo de oxigênio ou átomo de enxofre disponível ligado ao anticorpo. Na modalidade, o grupo heterobifuncional é e está ligado a um átomo de enxofre ligado ao anticorpo.

[0141] Um grupo heterotrifuncional exemplificativo não limitativo é:

[0142] Na presente divulgação, o termo "espaçador" refere-se à porção química que conecta um grupo heterobi e trifuncional ao resto do ligante peptídico, por exemplo, um peptídeo, ou, se um grupo heterobi ou tri-funcional está ausente, conecta o resto do ligante peptídico ou o dinucleotídeo cíclico a qualquer átomo de carbono, átomo de nitrogênio, átomo de oxigênio ou átomo de enxofre disponível ligado ao anticorpo. Os espaçadores exemplificativos não limitativos incluem -NH-, -S-, -O-, -NHC(=O)CH2CH2-, -S(=O)2-CH2CH2-, - C(=O)NHNH-, -C(=O)O-, - C(=O)NH-, -CH2-, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2-, -CH2=CH2-, -C=C-, -CH=N-O-, polietilenoglicol (PEG),

[0143] O termo "razão de anticorpo de fármaco" ou "DAR" refere-se ao número de CDs ligados a A (isto é, uma proteína, por exemplo, um anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo). Portanto, no ADC com a fórmula genérica (CD-L)n-A, o DAR é definido pela variável "n".

[0144] Quando se refere a um composto tendo a fórmula (CD-L)n-Arepresentando um ADC individual, o DAR refere-se ao número de CDs ligados aoindivíduo A, por exemplo, n é um número inteiro de 1 a 10.

[0145] Quando se refere a um composto tendo a fórmula (CD-L)n-Arepresentando uma pluralidade de ADCs, o DAR refere-se ao número médio de dinucleotídeos cíclicos ligados aos As, por exemplo, n é um número inteiro ou fração de 1 a 10). Portanto, a título de exemplo, um composto tendo fórmula (CD- L)n-A compreendendo um primeiro ADC com 3 dinucleotídeos cíclicos por A e um segundo ADC com 4 dinucleotídeos cíclicos por A teria um DAR, isto é, um "n" de 3,5.

[0146] Os termos "polipeptídeo", "peptídeo" e "proteína" são usados intercambiavelmente neste documento para se referir aos polímeros de aminoácidos de qualquer comprimento. Os polímeros podem ser lineares ou ramificados, podem compreender aminoácidos modificados, e podem ser interrompidos por não aminoácidos. Os termos também englobam um polímero de aminoácido que tenha sido modificado naturalmente ou por intervenção; por exemplo, pela formação da ligação de dissulfeto, glicosilação, lipidação, acetilação, fosforilação ou qualquer outra manipulação ou modificação, como conjugação com um componente de marcação. Também incluídos na definição estão, por exemplo, polipeptídeos contendo um ou mais análogos de um aminoácido (incluindo, por exemplo, aminoácidos não naturais, etc.), bem como outras modificações conhecidas na técnica. Entende-se que, visto que os polipeptídeos desta divulgação se baseiam em anticorpos, em determinadas modalidades, os polipeptídeos podem ocorrer como cadeias únicas ou cadeias associadas.

[0147] Um anticorpo "monoclonal" ou um fragmento de ligação a antígeno do mesmo refere-se a um anticorpo homogêneo ou população de fragmento de ligação a antígeno envolvido no reconhecimento e ligação de um único determinante antigênico ou epítopo. Isto contrasta com os anticorpos policlonais que normalmente incluem anticorpos diferentes direcionados contra diferentes determinantes antigênicos. O termo anticorpo "monoclonal" ou fragmento de ligação a antígeno do mesmo engloba tanto os anticorpos monoclonais intactos e completos, como os fragmentos de anticorpos (tais como Fab, Fab', F(ab')2, Fv), mutantes de cadeia única (scFv), proteínas de fusão que compreende uma porção de anticorpo e qualquer outra molécula de imunoglobulina modificada compreendendo um sítio de reconhecimento do antígeno. Adicionalmente, o anticorpo "monoclonal" ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo refere-se a tais anticorpos e fragmentos de ligação ao antígeno do mesmo em qualquer número de maneiras, incluindo, mas não limitado a, por hibridoma, seleção fágica, expressão recombinante e animais transgênicos.

[0148] O termo anticorpo "humanizado" ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo se refere às formas de anticorpos não humanos (por exemplo, murinos) ou fragmento de ligação ao antígeno que são cadeias de imunoglobulinas específicas, imunoglobulinas quiméricas, ou fragmentos dos mesmos que contêm sequências não humanas mínimas (por exemplo, murinas). Tipicamente, os anticorpos humanizados ou fragmentos de ligação ao antígeno dos mesmos são imunoglobulinas humanas nas quais os resíduos a partir da região determinante de complementaridade (CDR) são substituídos por resíduos a partir da CDR de uma espécie não humana (por exemplo, camundongo, rato, coelho, hâmster) que têm a especificidade desejada, afinidade e capacidade ("CDR enxertado") (Jones et al., Nature 321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature 332:323-327 (1988);Verhoeyen et al., Science 239:1534-1536 (1988)). Em alguns casos, os resíduos da região de framework (FR) de Fv de uma imunoglobulina humana são substituídos pelos resíduos correspondentes em um anticorpo ou fragmento a partir de uma espécie não humana que tenha a especificidade, afinidade e capacidade desejadas. O anticorpo humanizado ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo pode ser modificado adicionalmente pela substituição de resíduos adicionais na região de framework de Fv e/ou dentro dos resíduos não humanos substituídos para refinar e otimizar a especificidade, afinidade e/ou capacidade do anticorpo ou do fragmento de ligação ao antígeno. Geralmente, o anticorpo humanizado ou fragmento de ligação ao anticorpo compreenderá substancialmente todos dentre pelo menos um, e normalmente dois ou três, domínios variáveis contendo todas ou substancialmente todas as regiões CDR que correspondem à imunoglobulina não humana, considerando que todas ou substancialmente todas as regiões FR são aquelas de uma sequência consenso da imunoglobulina humana. O anticorpo humanizado ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo também pode compreender pelo menos uma porção de uma região ou domínio constante de imunoglobulina (Fc), normalmente o de uma imunoglobulina humana. Os exemplos de métodos usados para gerar anticorpos humanizados estão descritos na Patente U.S. 5.225.539; Roguska et al., Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 91(3):969-973 (1994) e Roguska et al., Protein Eng. 9 (10): 895-904 (1996). Em algumas modalidades, um "anticorpo humanizado" é um anticorpo de superfície modificada.

[0149] Uma "região variável" de um anticorpo se refere à região variável da cadeia leve do anticorpo ou à região variável da cadeia pesada do anticorpo, tanto sozinha quanto em combinação. As regiões variáveis da cadeia pesada e leve consistem em quatro regiões de framework (FR) conectadas por três regiões determinantes de complementariedade (CDRs), também conhecidas como as regiões hipervariáveis. As CDRs em cada cadeia são mantidas juntas em grande proximidade pelas FRs e, com as CDRs da outra cadeia, contribuem para a formação do sítio de ligação a antígeno dos anticorpos. Há pelo menos duas técnicas para a determinação das CDRs: (1) uma abordagem com base na variabilidade de sequência de espécies cruzadas (isto é, Kabat et al. Sequences of Proteins of Immunological Interest, (5a ed., 1991, National Institutes of Health, Bethesda Md.)); e (2) uma abordagem baseada em estudos cristalográficos de complexos antígeno-anticorpo (Al-lazikani et al (1997) J. Molec. Biol. 273:927-948)). Além disso, as combinações dessas duas abordagens são, às vezes, usadas na técnica para determinar as CDRs.

[0150] O sistema de numeração de Kabat é geralmente usado ao se referir a um resíduo no domínio variável (aproximadamente resíduos 1-107 da cadeia leve e resíduos 1-113 da cadeia pesada) (por exemplo, Kabat et al., Sequences of Immunological Interest. 5a Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)). A menos que explicitamente indicado em contrário, o sistema de numeração usado neste documento é o sistema de numeração Kabat.

[0151] A numeração da posição de aminoácidos, como em Kabat, refere-se ao sistema de numeração usado para os domínios variáveis da cadeia pesada ou aos domínios variáveis da cadeia leve da compilação de anticorpos em Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5a Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991). Usando este sistema de numeração, a sequência de aminoácidos linear real pode conter menos ou mais aminoácidos correspondentes a um encurtamento de, ou inserção em, uma FR ou CDR do domínio variável. Por exemplo, um domínio variável de cadeia pesada pode incluir uma inserção de um único aminoácido (resíduo 52a de acordo com Kabat) após o resíduo 52 de H2 e resíduos inseridos (por exemplo, resíduos 82a, 82b e 82c, etc. de acordo com Kabat) após o resíduo 82 da FR de cadeia pesada. A numeração de Kabat de resíduos pode ser determinada para um determinado anticorpo pelo alinhamento em regiões de homologia da sequência do anticorpo com uma sequência numerada por Kabat "padrão". Em vez disso, Chothia se refere à localização de alças (loops) estruturais (Chothia e Lesk J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)). A extremidade da alça de CDR-H1 de Chothia, quando numerada usando a convenção de numeração de Kabat, varia entre H32 e H34, dependendo do comprimento da alça (isto porque o esquema da numeração de Kabat coloca as inserções em H35A e H35B; se nem 35A nem 35B estiverem presentes, a alça termina em 32; se apenas 35A estiver presente, a alça termina em 33; se ambas 35A e 35B estiverem presentes, a alça termina em 34). As regiões hipervariáveis AbM representam um comprometimento entre as CDRs de Kabat e alças estruturais de Chothia, e são usadas pelo software de modelagem de anticorpo AbM da Oxford Molecular.

[0152] Em certos aspectos, as CDRs de um anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo podem ser determinadas de acordo com o esquema de numeração de Chothia, que se refere à localização das alças estruturais da imunoglobulina (vide, por exemplo, Chothia C & Lesk AM, (1987), J Mol Biol 196: 901-917; Al-Lazikani B et al., (1997) J Mol Biol 273: 927-948; Chothia C et al., (1992) J Mol Biol 227: 799-817; Tramontano A et al., (1990) J Mol Biol 215(1): 175-82; e Patente U.S. n° 7.709.226). Tipicamente, quando se usa a convenção de numeração de Kabat, a alça de Chothia CDR-H1 está presente nos aminoácidos de cadeia pesada 26 a 32, 33 ou 34, a alça de Chothia CDR-H2 está presente nos aminoácidos de cadeia pesada 52 a 56, e a alça A de Chothia CDR-H3 está presente nos aminoácidos de cadeia pesada 95 a 102, enquanto a alça de Chothia CDR-L1 está presente nos aminoácidos de cadeia leve 24 a 34, a alça de Chothia CDR-L2 está presente nos aminoácidos de cadeia leve 50 a 56 e a alça de Chothia CDR-L3 está presente nos aminoácidos de cadeia leve 89 a 97. A extremidade da alça de CDR-H1 de Chothia, quando numerada usando a convenção de numeração de Kabat, varia entre H32 e H34, dependendo do comprimento da alça (isto porque o esquema da numeração de Kabat coloca as inserções em H35A e H35B; se nem 35A nem 35B estiverem presentes, a alça termina em 32; se apenas 35A estiver presente, a alça termina em 33; se ambas 35A e 35B estiverem presentes, a alça termina em 34).

[0153] Em certos aspectos, as CDRs de um anticorpo ou seu fragmento de ligação ao antígeno podem ser determinadas de acordo com o sistema de numeração IMGT, conforme descrito em Lefranc MP, (1999) The Immunologist 7: 132-136 e Lefranc MP et al., (1999) Nucleic Acids Res 27: 209-212. De acordo com o esquema de numeração IMGT, VH-CDR1 está nas posições 26 a 35, VH-CDR2 está nas posições 51 a 57, VH-CDR3 está nas posições 93 a 102, VL-CDR1 está nas posições 27 a 32, VL-CDR2 está nas posições 50 a 52 e VL-CDR3 está nas posições 89 a 97.

[0154] Em certos aspectos, as CDRs de um anticorpo ou seu fragmento de ligação ao antígeno podem ser determinadas de acordo com MacCallum RM et al., (1996) J Mol Biol 262: 732-745. Vide também, por exemplo, Martin A. "Protein Sequence and Structure Analysis of Antibody Variable Domains," em Antibody Engineering, Kontermann e Dübel, eds., Capítulo 31, pp. 422-439, Springer-Verlag, Berlim (2001).

[0155] Em certos aspectos, as CDRs de um anticorpo ou fragmento do mesmo podem ser determinadas de acordo com o esquema de numeração AbM, que se refere às regiões hipervariáveis de AbM, que representam um compromisso entre as alças estruturais de CDR e Chothia de Kabat, e são usadas pelo software de modelagem de anticorpos AbM da Oxford Molecular (Oxford Molecular Group, Inc.).

[0156] O termo anticorpo "humano" significa um anticorpo produzido por um humano ou um anticorpo com uma sequência de aminoácidos correspondente a um anticorpo produzido por um humano usando qualquer técnica conhecida na técnica. Esta definição de um anticorpo humano inclui anticorpos intactos ou de comprimento total, seus fragmentos, e/ou anticorpos que compreendem pelo menos um polipeptídeo de cadeia pesada e/ou leve humana, tal como, por exemplo, um anticorpo compreendendo polipeptídeos de cadeia leve murina e de cadeia pesada humana.

[0157] O termo anticorpos "quiméricos" refere-se a anticorpos, em que a sequência de aminoácidos da molécula de imunoglobulina é derivada de duas ou mais espécies. Normalmente, a região variável das cadeias leve e pesada corresponde à região variável de anticorpos derivada de uma espécie de mamífero (por exemplo, camundongo, rato, coelho, etc.) com a especificidade, afinidade e capacidade desejadas, enquanto as regiões constantes são homólogas às sequências nos anticorpos derivadas de outra (geralmente humanas) para evitar a estimulação de uma resposta imune nessa espécie.

[0158] Os termos "epítopo" ou "determinante antigênico" são usados permutavelmente neste documento e se referem àquela porção do antígeno capaz de ser reconhecida e especificamente ligada por um anticorpo específico. Quando o antígeno é um polipeptídeo, os epítopos podem ser formados tanto por aminoácidos contíguos quanto por aminoácidos não contíguos justapostos por um dobramento terciário de uma proteína. Os epítopos formados a partir de aminoácidos contíguos são normalmente mantidos após a desnaturação proteica, enquanto que os epítopos formados pelo dobramento terciário são normalmente perdidos após a desnaturação proteica. Um epítopo tipicamente inclui pelo menos 3, e mais geralmente, pelo menos 5 ou 8-10 aminoácidos em uma única conformação espacial.

[0159] O termo "afinidade de ligação" refere-se geralmente à força da soma total de interações não covalentes entre um sítio de ligação único de uma molécula (por exemplo, um anticorpo) e seu parceiro de ligação (por exemplo, um antígeno). Salvo indicação em contrário, conforme usado neste documento, "afinidade de ligação" se refere à afinidade de ligação intrínseca que reflete uma interação de 1:1 entre membros de um par de ligação (por exemplo, anticorpo e antígeno). A afinidade de uma molécula X por seu parceiro Y pode ser geralmente representada pela constante de dissociação (Kd). A afinidade pode ser medida por métodos comuns conhecidos na técnica, incluindo aqueles descritos neste documento. Os anticorpos de baixa afinidade geralmente se ligam ao antígeno lentamente e tendem a se dissociar facilmente, enquanto que os anticorpos de alta afinidade geralmente se ligam ao antígeno mais rapidamente e tendem a permanecer ligado por mais tempo. Uma variedade de métodos para medir a afinidade de ligação são conhecidos na técnica, qualquer um dos quais pode ser usado para as finalidades da presente divulgação. As modalidades ilustrativas específicas são descritas a seguir.

[0160] "Ou melhor", quando usado neste documento para se referir à afinidade de ligação, irá se referir a uma ligação mais forte entre uma molécula e seu parceiro de ligação. "Ou melhor", quando usado neste documento, irá se referir a uma ligação mais forte, representada por um valor numérico de Kd menor. Por exemplo, um anticorpo tem uma afinidade por um antígeno de "0,6 nM ou melhor", a afinidade do anticorpo pelo antígeno é <0,6 nM, isto é, 0,59 nM, 0,58 nM, 0,57 nM etc. ou qualquer valor menor que 0,6 nM.

[0161] Por "se liga especificamente", entende-se geralmente que um anticorpo se liga a um epítopo através de seu domínio de ligação, e que a ligação impõe alguma complementariedade entre o domínio de ligação a antígeno e o epítopo. De acordo com esta definição, um anticorpo é dito "se ligar especificamente" a um epítopo quando este se liga a esse epítopo, através de seu domínio de ligação a antígeno mais facilmente do que se ligaria a um epítopo aleatório, não relacionado. O termo "especificidade" é usado neste documento para qualificar a afinidade relativa pela qual um determinado anticorpo se liga a um determinado epítopo. Por exemplo, um anticorpo "A" pode ser considerado ter uma maior especificidade para um determinado epítopo do que um anticorpo "B", ou o anticorpo "A" pode ser dito se ligar ao epítopo "C", com uma maior especificidade do que o mesmo tem para o epítopo relacionado "D".

[0162] Por "se liga preferencialmente", entende-se que o anticorpo se liga especificamente a um epítopo mais facilmente do que se ligaria a um epítopo relacionado, semelhante, homólogo ou análogo. Portanto, um anticorpo que "se liga preferencialmente" a um determinado epítopo mais provavelmente se ligaria a esse epítopo do que a um epítopo relacionado, mesmo que tal anticorpo pudesse reagir de forma cruzada com o epítopo relacionado.

[0163] Diz-se que um anticorpo "inibe competitivamente" a ligação de um anticorpo de referência a um dado epítopo se o anticorpo se liga preferencialmente a esse epítopo ou a um epítopo sobreposto, na medida em que bloqueia, em alguma medida, a ligação do anticorpo de referência ao epítopo. A inibição competitiva pode ser determinada por qualquer método conhecido na técnica, por exemplo, ensaios de ELISA de competição. Pode-se dizer que um anticorpo inibe competitivamente a ligação do anticorpo de referência a um determinado epítopo em pelo menos 90%, pelo menos 80%, pelo menos 70%, pelo menos 60% ou pelo menos 50%.

[0164] A frase "substancialmente similar", ou "substancialmente o mesmo", conforme usado neste documento, denota um grau suficientemente elevado de semelhança entre dois valores numéricos (geralmente um associado a um anticorpo da divulgação e o outro associado com um anticorpo de referência/comparação) de forma que aquele versado na técnica consideraria a diferença entre os dois valores com pouca ou nenhuma significância biológica e/ou estatística dentro do contexto da característica biológica medida por estes valores referidos (por exemplo, valores de Kd). A diferença entre os dois valores referidos pode ser menos de cerca de 50%, menos de cerca de 40%, menos de cerca de 30%, menos do que cerca de 20%, ou menos de cerca de 10% em função do valor para o anticorpo de referência/comparação.

[0165] Um polipeptídeo, anticorpo, polinucleotídio, vetor, célula ou composição que é "isolada" é um polipeptídeo, anticorpo, polinucleotídio, vetor, célula ou composição, que é uma forma não encontrada na natureza. Polipeptídeos, anticorpos, polinucleotídios, vetores, célula ou composições isoladas incluem aqueles que foram purificados a um grau no qual eles já não estão em uma forma na qual eles são encontrados na natureza. Em algumas modalidades, um anticorpo, polinucleotídios, vetor, célula ou composição que é isolada é substancialmente pura.

[0166] Conforme usado neste documento, "substancialmente pura" refere- se ao material que é pelo menos 50% puro (ou seja, livre de contaminantes), pelo menos 90% puro, pelo menos, 95% puro, pelo menos 98% puro, ou pelo menos 99% puro.

[0167] O termo "anticorpo" se refere a uma molécula de imunoglobulina que reconhece e se liga especificamente a um alvo, tal como uma proteína, polipeptídeo, peptídeo, carboidrato, polinucleotídeo, lipídio, ou combinações dos anteriores através de pelo menos um sítio de reconhecimento de antígeno dentro da região variável da molécula de imunoglobulina. Conforme usado neste documento, o termo "anticorpo" engloba anticorpos policlonais intactos, anticorpos monoclonais intactos, anticorpos quiméricos, anticorpos humanizados, anticorpos humanos, proteínas de fusão compreendendo um anticorpo e qualquer outra molécula de imunoglobulina modificada contanto que os anticorpos exibam a atividade biológica desejada. Um anticorpo pode ser de qualquer uma das cinco maiores classes de imunoglobulinas: IgA, IgD, IgE, IgG e IgM, ou suas subclasses (isótipos) (por exemplo, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 e IgA2), com base na identidade de seus domínios constantes de cadeia pesada referidos como alfa, delta, épsilon, gama e mu, respectivamente. As diferentes classes de imunoglobulinas têm estruturas de subunidade diferentes e conhecidas e configurações tridimensionais. Os anticorpos podem ser puros ou conjugados a outras moléculas, tais como toxinas, radioisótopos, etc. Conforme usado neste documento, o termo "anticorpo" engloba anticorpos biespecíficos e multiespecíficos.

[0168] O termo "fragmento de anticorpo" refere-se a uma porção de um anticorpo intacto. Um "fragmento de ligação ao antígeno" refere-se a uma porção de um anticorpo intacto que se liga a um antígeno. Um fragmento de ligação ao antígeno pode conter as regiões variáveis determinantes antigênicas de um anticorpo intacto. Os exemplos de fragmentos de anticorpo incluem, mas não estão limitados a, fragmentos de Fab, Fab', F(ab')2 e Fv, anticorpos lineares e anticorpos de cadeia simples. Um "fragmento de ligação ao antígeno" pode ser um fragmento de ligação ao antígeno biespecífico ou multiespecífico.

[0169] O termo "agente de administração de fármaco", tal como é usado neste documento, refere-se a uma porção química que altera a distribuição, direcionamento ou tempo de vida da molécula na qual é incorporada. Em algumas modalidades, um agente de distribuição de fármacos fornece uma afinidade aumentada para um alvo selecionado, por exemplo, molécula, célula ou tipo de célula, compartimento, receptor, por exemplo, um compartimento celular ou orgânico, tecido, órgão ou região do corpo, em comparação com uma espécie ausente, tal como agente de distribuição de fármaco. Os agentes de distribuição de fármacos que fornecem a afinidade potencializada para um alvo selecionado são denominados agentes de distribuição de fármacos de direcionamento. Vide, por exemplo, WO 2013/075035 A1. Todas as patentes, pedidos de patentes e publicações mencionados neste documento são totalmente incorporados por referência em sua totalidade.

[0170] O termo "conjugado de distribuição de fármacos", tal conforme usado neste documento, refere-se a um composto que compreende qualquer uma das Fórmulas (XX) - (XXIX), um agente de distribuição de fármacos e, opcionalmente, um ligante peptídico covalente.

[0171] Alguns agentes de distribuição de fármacos têm propriedades endossomolíticas. Os agentes de distribuição de fármacos endossomolíticos promovem a lise do endossoma e/ou transporte de qualquer uma das Fórmulas (XX) - (XXIX), do endossoma ao citoplasma da célula. O agente de distribuição de fármacos endossomolíticos pode ser um peptídeo polianiônico ou peptidomimético que mostra atividade de membrana dependente de pH e fusogenicidade. Em uma modalidade, o agente de distribuição de fármacos endossomolítico assume sua conformação ativa em pH endossômico. A conformação "ativa" é aquela conformação na qual o agente de distribuição de fármacos endossomolítico promove a lise do endossoma e/ou transporte de Fórmula (XX) - (XXIX) a partir do endossoma para o citoplasma da célula. Os agentes de distribuição de fármacos endossomolítico exemplificativos incluem o peptídeo GALA (Subbarao et al., Biochemistry, 1987, 26: 2964-2972), o peptídeo EALA (Vogel et al., J. Am. Chem. Soc, 1996, 118: 1581-1586), e seus derivados (Turk et al., Biochem. Biophys. Acta, 2002, 1559: 56-68). Em uma modalidade, o componente endossomolítico pode conter um grupo químico, por exemplo, um aminoácido, que sofrerá uma mudança na carga ou protonação em resposta a uma mudança no pH. O componente endossomolítico pode ser linear ou ramificado.

[0172] Os agentes de distribuição de fármacos podem melhorar as propriedades de transporte, hibridização e especificidade do conjugado de distribuição de fármacos resultante.

[0173] Os agentes de administração de fármacos podem incluir modificadores terapêuticos, por exemplo, para melhorar a absorção; compostos de diagnóstico ou grupos repórter, por exemplo, para monitorizar a distribuição; e agentes de reticulação. Exemplos gerais incluem lípidos, esteroides, vitaminas, hidratos de carbono, proteínas, peptídeos, poliaminas, polímeros ou oligômeros sintéticos (tais como PEG), peptidomiméticos ou quaisquer combinações dos mesmos.

[0174] Os agentes de distribuição de fármacos podem incluir uma substância natural, tal como uma proteína, por exemplo, albumina sérica humana (HSA), lipoproteína de baixa densidade (LDL), lipoproteína de alta densidade (HDL) ou globulina; um hidrato de carbono, por exemplo, um dextrano, pululano, quitina, quitosano, inulina, ciclodextrina ou ácido hialurônico; ou um lipídio. O agente de distribuição de fármacos também pode ser uma molécula recombinante ou sintética, tal como um polímero ou oligômero sintético, por exemplo, um poliaminoácido sintético, um oligonucleotídeo, por exemplo, um aptâmero. Os exemplos de poliaminoácidos incluem uma polilisina (PLL), ácido poli-L-aspártico, ácido poli-L-glutâmico. Outros exemplos de polímeros ou oligômeros sintéticos incluem copolímero de anidreto de ácido maleico estireno, copolímero de poli (L- láctido-co-glicolizado), copolímero de anidreto maleico de éter divinílico, copolímero de N- (2-hidroxipropil) metacrilamida (HMPA), polietilenoglicol (PEG), álcool polivinílico (PVA), poliuretano, ácido poli (2-etilacrílico), polímeros de N- isopropilacrilamida ou polifosfazina. Os exemplos de poliaminas incluem: polietilenoimina, polilisina (PLL), espermina, espermidina, poliamina, pseudopeptídica-poliamina, poliamina peptidomimética, dendrímero poliamina, arginina, amidina, protamina, lipídio catiônico, porfirina catiônico, sal quaternário de uma poliamina, ou um helicoidal alfa peptídeo.

[0175] Agentes de distribuição de fármacos também podem incluir grupos de segmentação, por exemplo, uma célula ou tecido agente de direcionamento, por exemplo, uma lectina, glicoproteína, lipídeo ou proteína, por exemplo, um anticorpo, que se liga a um tipo de células específico. Um grupo de segmentação pode ser um tirotropina, melanotropina, lectina, glicoproteína, proteína tensioativa A, mucina de carboidratos, lactose multivalente, galactose multivalente, N-acetil- galactosamina, N-acetil-gulucosamina manose múltipla, fucose multivalente, poliaminoácidos glicosiladas, galactose multivalente, transferrina, bisfosfonato, poliglutamato, poliaspartato, um lipídeo, colesterol, um esteróide, ácido biliar, ácido fólico, vitamina B12, biotina, um peptídeo RGD, um mimético de peptídeo RGD ou um aptâmero.

[0176] Outros exemplos de agentes de distribuição de fármacos incluem corantes, agentes intercalantes (por exemplo, acridinas), reticuladores (por exemplo, psoraleno, mitomicina C), porfirinas (TPPC4, texafirina, safirina), hidrocarbonetos aromáticos policíclicos (por exemplo, fenazina, diidrofenazina), endonucleases artificiais ou um quelante (por exemplo, EDTA), moléculas lipofílicas, por exemplo, colesterol, ácido cólico, ácido adamantano acético, ácido 1-pireno butírico, dihidrotestosterona, l, 3-Bis-0 (hexadecil) glicerol, grupo geraniloxihexilo, hexadecilglicerol, borneol, mentol, 1,3-propanodiol, grupo heptadecil, ácido palmítico, ácido mirístico, ácido 03- (oleoil) litocólico, ácido 03- (oleoil) colênico, dimetoxitritil ou fenoxazina) e conjugados de peptídeos (por exemplo, peptídeo antennapedia, peptídeo Tat), agentes alquilantes, fosfato, amino, mercapto, PEG (por exemplo, PEG-40K), MPEG, [MPEG] 2, poliamino, alquil, alquil substituído, marcadores radiomarcados, enzimas, haptenos (por exemplo, biotina), facilitadores de transporte/absorção (por exemplo, aspirina, vitamina E, ácido fólico), ribonucleases sintéticas (por exemplo, imidaz ole, bisimidazol, histamina, agregados de imidazol, conjugados acridina-imidazol, complexos Eu3 + de tetraazamacrociclos), dinitrofenil, HRP ou AP.

[0177] Os agentes de distribuição de fármacos também podem incluir hormônios e receptores hormonais. Eles também podem incluir as espécies não peptídicas, tais como lipídeos, lectinas, carboidratos, vitaminas, cofatores, lactose multivalente, galactose multivalente, N-acetil-galactosamina, N-acetil-gulucosamina multivalente manose, fucose multivalente ou aptâmeros. O agente de distribuição de fármacos pode ser, por exemplo, um lipopolissacarídeo, um ativador de p38 MAP quinase ou um ativador de NK-KB.

[0178] O agente de administração de fármaco pode ser uma substância, que pode aumentar a absorção de qualquer uma das Fórmulas (XX) - (XXIX) na célula, por exemplo, rompendo o citoesqueleto da célula, por exemplo, interrompendo os microtúbulos da célula, microfilamentos e/ou filamentos intermediários.

[0179] O agente de distribuição de fármacos pode aumentar a absorção de qualquer uma das Fórmulas (XX)-(XXIX) na célula por, por exemplo, ativação de uma resposta inflamatória. Os agentes de distribuição de fármacos exemplificativos que teriam esse efeito incluem o fator alfa de necrose tumoral (TNFalfa), interleucina-1 beta ou interferon gama.

[0180] Em uma modalidade, o agente de distribuição de fármacos é um lipídio ou uma molécula à base de lipídio. Tal lipídio ou molécula baseada em lípidos pode se ligar a uma proteína sérica, por exemplo, albumina sérica humana (HSA). Um agente de distribuição de fármacos de ligação a HSA permite a distribuição do conjugado de distribuição de fármacos a um tecido alvo, por exemplo, um tecido alvo não renal do corpo. Outras moléculas que podem se ligar a HSA também podem ser usadas como agentes de distribuição de fármaco. Por exemplo, naproxeno ou aspirina podem ser usados. Um lipídio ou agente de distribuição de fármacos à base de lipídios pode (a) aumentar a resistência à degradação do conjugado de distribuição de fármacos, (b) aumentar o direcionamento ou transporte para uma célula alvo ou membrana celular e/ou (c) pode ser usado para ajustar a ligação a uma proteína sérica, por exemplo, HSA. Um lipídio ou agente de distribuição de fármacos à base de lipídios pode também permitir a formação de nanopartículas, tais como micelas, que podem influenciar a biodistribuição de qualquer uma das Fórmulas (XX) - (XXIX).

[0181] Um agente de distribuição de fármacos à base de lípidos pode ser usado para modular, por exemplo, o controle da ligação do conjugado de distribuição de fármacos a um tecido alvo. Por exemplo, um lipídio ou agente de distribuição de fármacos à base de lipídios que se liga mais fortemente a HSA será menos provável de ser direcionado para o rim e, portanto, menos provável de ser eliminado do corpo. Um lipidio ou agente de distribuição de fármacos à base de lipídios que se liga a HSA menos fortemente pode ser usado para direcionar o conjugado ao rim.

[0182] Em uma modalidade, o agente de distribuição de fármacos à base de lipídios se liga a HSA com uma afinidade suficiente, de tal modo que o conjugado de distribuição de fármacos é distribuído a um tecido não renal. Em uma modalidade, a afinidade não é tão forte que a ligação do agente de distribuição de fármacos de HSA não possa ser revertida.

[0183] Em outra modalidade, o agente de distribuição de fármacos à base de lipídios se liga a HSA de forma fraca, ou não se liga, de tal modo que o conjugado de distribuição de fármacos é distribuído ao rim. Outras frações que direcionam as células do rim podem também ser usada no lugar de, ou em adição a, o agente de distribuição de fármacos à base de lipídios.

[0184] Em outra modalidade, o agente de distribuição de fármacos é uma porção, por exemplo, uma vitamina, que é absorvida por uma célula alvo, por exemplo, uma célula em proliferação. Estes são particularmente úteis para o tratamento de distúrbios caracterizados por proliferação celular indesejada, por exemplo, do tipo maligno ou não maligno, por exemplo, células cancerígenas. As vitaminas exemplificativas incluem vitamina A, E e K. Outras vitaminas exemplificativas incluem vitaminas do complexo B, por exemplo, ácido fólico, B12, riboflavina, biotina, piridoxal ou outras vitaminas ou nutrientes absorvidos pelas células cancerígenas. Também estão incluídas HAS, lipoproteína de baixa densidade (LDL) e lipoproteína de alta densidade (HDL).

[0185] Em outra modalidade, o agente de distribuição de fármacos é um agente de permeação celular, por exemplo, um agente de permeação celular helicoidal. Em uma modalidade, o agente é anfipático. Os agentes anfipáticos exemplificativos incluem um peptídeo, tal como tat ou antennapedia, e um conjugado lipídio-PEG. Se o agente for um peptídeo, pode ser modificado, incluindo uma ligação peptidilmimética, invertômeros, ligações não peptídicas ou pseudo- peptídicas e uso de D-aminoácidos. Em uma modalidade, o agente helicoidal é um agente alfa-helicoidal tendo uma fase lipofílica e uma fase lipofóbica.

[0186] O agente de distribuição de fármacos pode ser um peptídeo ou peptidomimético. Um peptidomimético (também referido neste documento como um oligopeptidomimético) é uma molécula capaz de se dobrar em uma estrutura tridimensional definida semelhante a um peptídeo natural. O peptídeo ou fração peptidomimética pode ser de cerca de 5 a 50 aminoácidos de comprimento, por exemplo, cerca de 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 ou 50 aminoácidos decomprimento. Um peptídeo ou peptidomimético pode ser, por exemplo, um peptídeo de permeação celular, peptídeo catiônico, peptídeo anfipático ou peptídeo hidrofóbico (por exemplo, consistindo principalmente em Tyr, Trp ou Phe). A porção peptídica pode ser um peptídeo dendrimérico, um peptídeo restrito ou peptídeo reticulado. Em outra modalidade, a fração peptídica pode incluir sequência de translocação de membrana hidrofóbica (MTS). Um peptídeo contendo MTS hidrofóbico exemplificativo é RFGF. Um análogo de RFGF contendo um MTS hidrofóbico pode também ser uma fração de direcionamento. A porção peptídica pode ser um peptídeo de "distribuição", que pode transportar moléculas polares grandes, incluindo peptídeos, oligonucleotídeos e proteínas através das membranas celulares. Por exemplo, certas sequências a partir da proteína Tat do HIV e da Drosophila Antennapedia foram descobertas ser capazes de funcionar como peptídeos de distribuição. Um peptídeo ou peptidomimético pode ser codificado por uma sequência de DNA randômica, tal como um peptídeo identificado dentre uma bibloteca phage display ou uma biblioteca combinatória de uma esfera e um composto (OBOC) (Lam et ah, Nature, 354:82-84, 1991). Em uma modalidade, o peptídeo ou peptidomimético é um peptídeo de direcionamento celular, tal como um peptídeo de ácido de arginina-glicina-aspártico (RGD) ou imitador de RGD. Uma porção peptídica pode variar em comprimento de cerca de 5 aminoácidos a cerca de 40 aminoácidos. As porções peptídicas podem ter uma modificação estrutural, tal como para aumentar a estabilidade ou propriedades conformacionais diretas. Qualquer uma das modificações estruturais descritas abaixo pode ser utilizada. Uma porção peptídica de RGD pode ser usada para direcionar uma célula tumoral, tal como uma célula tumoral endotelial ou uma célula tumoral com câncer da mama (Zitzmann et al., Cancer Res., 62: 5139-43, 2002). Um peptídeo de RGD pode facilitar o direcionamento de qualquer uma das Fórmulas (XX)-(XXIX) aos tumores de uma variedade de outros tecidos, incluindo dos pulmões, dos rins, do baço ou do fígado (Aoki et ah, Cancer Gene Therapy 8:783-787, 2001).

[0187] Em algumas modalidades, o peptídeo RGD irá facilitar o direcionamento de um conjugado de distribuição de fármacos para o rim. O peptídeo de RGD pode ser linear ou cíclico e pode ser modififcado, por exemplo, glicosilado ou metilado para facilitar o direcionamento a tecidos específicos. Por exemplo, um peptídeo de RGD glicosilado pode distribuir um conjugado de distribuição de fármacos a uma célula tumoral que expressa civB3 (Haubner et ah, Jour. Nucl. Med. 42: 326-336, 2001). Os peptídeos que têm como alvo marcadores enriquecidos em células em proliferação podem ser usados. Por exemplo, os peptídeos contendo RGD e peptidomiméticas podem ter como alvo células cancerígenas, particularmente, células que exibem uma integrina. Portanto, pode- se usar peptídeos de RGD, peptídeos cíclicos contendo RGD, peptídeos de RGD que incluem D-aminoácidos, bem como imitadores sintéticos de RGD. Além do RGD, podem-se usar outras frações que visam o agente de distribuição de fármacos de integrina. Em geral, estes agentes de distribuição de fármacos podem ser usados para controlar células em proliferação e angiogene. Os conjugados preferidos deste tipo de agente de distribuição de fármacos visam PECAM-1, VEGF, ou outro gene cancerígeno, por exemplo, um gene cancerígeno descrito neste documento.

[0188] Um "peptídeo de permeação celular" é capaz de permear uma célula, por exemplo, uma célula de mamífero, tal como uma célula humana. Um peptídeo de permeação celular pode incluir um peptídeo RALA. (Molecular Therapy: Nucleic Acids, 2017, 6, 249-258; J Control Release. 2014, 189:141-9; e Nanomedicine (Lond). 2015, 10 (19): 2989-3001). Um peptídeo de permeação celular podetambém incluir um sinal de localização nuclear (NLS). Por exemplo, um peptídeo de permeação celular pode ser um peptídeo anfipático bipartido, tal como MPG, que é derivado a partir do domínio de peptídeo de fusão do HIV-1 gp41 e o NLS do antígeno T grande SV40 (Simeoni et al, Nucl. Acids Res. 31: 2717-2724, 2003). Um peptídeo de permeação celular pode formar uma nanopartícula.

[0189] Em uma modalidade, um peptídeo de direcionamento pode ser um peptídeo a-helicoidal anfipático. Os peptídeos anfipáticos a-helicoidais exemplificativos incluem, mas não se limitam a, cecropinas, licotoxinas, paradaxinas, buforina, CPF, peptídeo semelhante a bombina (BLP), catelicidinas, ceratotoxinas, peptídeos de S. clava, peptídeos antimicrobianos intestinais de hagfish (HFIAPs), magaininas, brevininas-2, dermaseptinas, melitinas, pleurocidina, peptídeos de H2A, peptídeos de Xenopus, esculentinis-1 e caerinas. Vários fatores serão preferencialmente considerados para manter a integridade da estabilidade da hélice. Por exemplo, será utilizado um número máximo de resíduos de estabilização de hélice (por exemplo, leu, ala ou lys) e será utilizado um número mínimo de resíduos de desestabilização de hélice (por exemplo, prolina ou unidades monoméricas cíclicas. O resíduo de capping será considerado (por exemplo, Gly é um resíduo N-capping exemplificativo e/ou amidação C-terminal pode ser usado para fornecer uma ligação H extra para estabilizar a hélice. A formação de pontes salinas entre resíduos com cargas opostas, separadas por posições i + 3 ou i + 4, pode fornecer estabilidade. Por exemplo, os resíduos catiônicos, tais como lisina, arginina, homo-arginina, ornitina, ou histidina podem formar pontes salinas com o glutamato ou aspartato de resíduos aniônicos.

[0190] O peptídeo ou agentes de distribuição de fármacos peptidomiméticos incluem aqueles que têm peptídeos de ocorrência natural ou modificados, por exemplo, peptídeos D ou L; peptídeos α, β ou Y; peptídeos de N-metil; azapeptídeos; peptídeos tendo uma ou mais amidas, isto é, peptídeo, ligações substituídas por uma ou mais ligações de ureia, tioureia, carbamato, ou sulfonilureia; ou peptídeos cíclicos.

[0191] O agente de distribuição de fármacos de direcionamento pode ser qualquer agente de distribuição de fármacos que é capaz de direcionar um receptor específico. Os exemplos são: folato, GalNAc, galactose, manose, manose-6P, aglomerados de açúcares como o aglomerado GalNAc, aglomerado de manose, aglomerado de galactose ou um apatâmero. Um agrupamento é uma combinação de duas ou mais unidades de açúcar. Os agentes de distribuição de fármacos de direcionamento também incluem agentes de distribuição de fármacos de receptor de integrina, agentes de distribuição de fármacos de receptor de quimiocina, transferrina, biotina, agentes de distribuição de fármacos de receptor de serotonina, PSMA, endotelina, GCPII, somatostatina, agentes de distribuição de fármacos de LDL e HDL. Os agentes de distribuição de fármacos também podem ser baseados em ácido nucleico, por exemplo, um aptâmero. O aptâmero pode ser não modificado ou ter qualquer combinação de modificações divulgadas neste documento.

[0192] Os agentes de liberação endossômica incluem imidazoles, poli ou oligoimidazoles, PEIs, peptídeos, peptídeos fusogênicos, policarboxilatos, poliações, oligo ou poli cátions ou ânions ocultos, acetais, poliacetais, cetais/policetiais, ortoésteres, polímeros com cargas catiônicas ou aniônicas ocultas ou não ocultas, dendrímeros com cargas catiônicas ou aniônicas ocultas ou não ocultas.

[0193] O agente de distribuição de fármacos pode ser um modulador PK (modulador farmacocinético). Os moduladores PK incluem lipofilas, ácidos biliares, esteróides, análogos de fosfolipídios, peptídeos, agentes de ligação proteica, PEG, vitaminas, etc. Os moduladores PK incluem, mas não estão limitados a, colesterol, ácidos graxos, ácido cólico, ácido litocólico, dialquilglicerídeos, diacilglicerídeo, fosfolipídios, esfingolipídios, naproxeno, ibuprofeno, vitamina E, biotina, etc.

[0194] Os oligonucleotídeos que compreendem um número de ligações de fosforotioato são também conheciddos por se ligarem a proteínas séricas, portanto, oligonucleotídeos curtos, por exemplo, oligonucleotídeos de cerca de 5 bases, 10 bases, 15 bases ou 20 bases, compreendendo várias ligações de fosforotioato na espinha dorsal são também suscetíveis à presente invenção como agentes de distribuição de fármacos (por exemplo, como agentes de distribuição de fármacos moduladores Pk).

[0195] Adicionalmente, os aptâmeros que se ligam a componentes séricos (por exemplo, proteínas séricas) são também suscetíveis à presente divulgação como agentes de distribuição de fármacos moduladores PK.

[0196] Quando o agente de distribuição de fármacos compreende uma combinação de duas ou mais frações, por exemplo, um lípido e um hidrato de carbono, por exemplo, um lípido e um peptídeo, as duas ou mais frações podem ter todas as mesmas propriedades, todas têm propriedades diferentes ou algumas tem as mesmas propriedades, enquanto outras têm propriedades diferentes. Por exemplo, um agente de distribuição de fármacos pode ter propriedades de direcionamento, atividade endossomolítica e/ou propriedades de moduladores PK. Por exemplo, uma fração de um agente de distribuição de fármacos pode ser hidrofílica e outra pode ser hidrofóbica. Em algumas modalidades, as frações têm propriedades diferentes.

[0197] Os agentes de distribuição de fármacos e ligantes peptídicos são descritos em US 7.745.608; US 7.626.014; US 8.034.921; US 2005/0164235; e WO 2013/075035. Todas as patentes, pedidos de patentes e publicações mencionados neste documento são totalmente incorporados por referência em sua totalidade.

[0198] A definição de cada símbolo na fórmula (I) é explicadda em detalhes nas seguintes modalidades.

[0199] Em uma modalidade, a estrutura parcial:é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIA): uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIB):

[0200] Em outra modalidade, a estrutura parcial:é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIA):

[0201] Em outra modalidade, a estrutura parcial representada pela fórmula(IIA):é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIAa):

[0202] Em outra modalidade, a estrutura parcial representada pela fórmula(IIA):é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIAb):

[0203] Em outra modalidade, a estrutura parcial representada pela fórmula(IIB):é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIBa):

[0204] Em outra modalidade, a estrutura parcial representada pela fórmula(IIB):é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIBb):

[0205] Em outra modalidade, a estrutura parcial:

[0206] Em outra modalidade, a estrutura parcial:

[0207] Em outra modalidade, R1 e R2 sao, cada um, independentemente um grupo hidroxi ou um átomo de halogênio.

[0208] Em outra modalidade, R1 e R2 são, cada um, independentemente um grupo hidroxi ou um átomo de fluorina.

[0209] Em outra modalidade, R1 é um grupo hidroxi.

[0210] Em outra modalidade, R2 é um grupo hidroxi ou um átomo de fluorina.

[0211] Em outra modalidade, B1 é u, grupo representado por

[0212] Em uma modalidade, R13, R14, R15, R16 e R17 são cada um independentemente um átomo de hidrogênio ou um substituinte.

[0213] Em outra modalidade, Y11, Y12, Y13, Y14, Y15 e Y16 são, cada um, independentemente N ou CR1a.

[0214] Em outra modalidade, Z11, Z12, Z13, Z14, Z15 e Z16 são, cada um, independentemente N ou C.

[0215] Em outra modalidade, R1a é um átomo de hidrogênio ou uma preferência.

[0216] Em outra modalidade, R13 é um átomo de hidrogênio.

[0217] Em outra modalidade, R14 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino opcionalmente dsitribuído.

[0218] Em outra modalidade, R14 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino.

[0219] Em outra modalidade, R14 é um átomo de hidrogênio.

[0220] Em outra modalidade, R15 é preferencialmente um átomo de hidrogênio.

[0221] Em outra modalidade, R13 e R15 são ambos átomos de hidrogênio e R14 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino opcionalmente substituído (particularmente um átomo de hidrogênio ou grupo amino).

[0222] Em outra modalidade, R13, R14 e R15 são todos átomos de hidrogênio.

[0223] Em outra modalidade, R16 é um átomo de hidrogênio.

[0224] Em outra modalidade, R17 é um átomo de hidrogênio.

[0225] Em outra modalidade, Y11 é N.

[0226] Em outra modalidade, Y12 é N ou CH,

[0227] Em outra modalidade, Y12 é N.

[0228] Em outra modalidade, Y13 é N ou CR1a, em que R1a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina).

[0229] Em outra modalidade, Y13 é N ou CF.

[0230] Em outra modalidade, Y13 é CF.

[0231] Em outra modalidade, Y11 é N, Y12 é N ou CH, e Y13 é N ou CR1a, em que R1a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina).

[0232] Em outra modalidade, Y11 é N, Y12 é N ou CH e Y13 é N ou CF.

[0233] Em outra modalidade, Y11 é N, Y12 é N, e Y13 é CF, Y11 é N, Y12 é N, e Y13 é N, ou Y11 é N, Y12 é CH e Y13 é N.

[0234] Em outra modalidade, Y11 é N, Y12 é N e Y13 é CF.

[0235] Em outra modalidade, Y14 é N.

[0236] Em outra modalidade, Y15 é N.

[0237] Em outra modalidade, Y16 é N ou CR1a, em que R1a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina).

[0238] Em outra modalidade, Y16 é N ou CF.

[0239] Em outra modalidade, Y16 é N.

[0240] Em outra modalidade, Y14 é N, Y15 é N, e Y16 é N ou CR1a, em que R1a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina).

[0241] Em outra modalidade, Y14 é N, Y15 é N e Y16 é N ou CF.

[0242] Em outra modalidade, Y14 é N, Y15 é N, e Y16 é N, ou Y14 é N, Y15 é N, e Y16 é CF.

[0243] Em outra modalidade, Y14 é N, Y15 é N e Y16 é N.

[0244] Em outra modalidade, Z11 é C.

[0245] Em outra modalidade, Z12 é C.

[0246] Em outra modalidade, Z13 é N.

[0247] Em outra modalidade, Z11 é C, Z12 é C e Z13 é N.

[0248] Em outra modalidade, Z14 é preferencialmente C.

[0249] Em outra modalidade, Z15 é preferencialmente C.

[0250] Em outra modalidade, Z16 é preferencialmente N.

[0251] Em outra modalidade, Z14 é C, Z15 é C e Z16 é N.

[0252] Em outra modalidade, B2 é um grupo representado por

[0253] Em outra modalidade, R23, R24, R25, R26 e R27 são, cada um, independentemente selecionados dentre um átomo de hidrogênio ou um substituinte.

[0254] Em outra modalidade, Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 são, cada um, independentemente N ou CR2a.

[0255] Em outra modalidade, Z21, Z22, Z23, Z24, Z25 e Z26 são, cada um, independemente N ou C.

[0256] Em outra modalidade, R2a é um átomo de hidrogênio ou um substituinte.

[0257] Em outra modalidade, R23 é um átomo de hidrogênio.

[0258] Em outra modalidade, R24 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino opcionalmente distribuído.

[0259] Em outra modalidade, R24 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino.

[0260] Em outra modalidade, R24 é um átomo de hidrogênio.

[0261] Em outra modalidade, R25 é um átomo de hidrogênio.

[0262] Em outra modalidade, R26 é um átomo de hidrogênio.

[0263] Em outra modalidade, R27 é um átomo de hidrogênio.

[0264] Em outra modalidade, Y21 é N.

[0265] Em outra modalidade, Y22 é N.

[0266] Em outra modalidade, Y23 é N ou CR2a, em que R2a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina).

[0267] Em outra modalidade, Y23 é N ou CF.

[0268] Em outra modalidade, Y23 é CF.

[0269] Em outra modalidade, Y21 é N, Y22 é N, e Y23 é N ou CR2a, em que R2a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina).

[0270] Em outra modalidade, Y21 é N, Y22 é N e Y23 é N ou CF.

[0271] Em outra modalidade, Y21 é N, Y22 é N, e Y23 é CF, ou Y21 é N, Y22 éN e Y23 é N.

[0272] Em outra modalidade, Y21 é N, Y22 é N e Y23 é CF.

[0273] Em outra modalidade, Y24 é N.

[0274] Em outra modalidade, Y25 é N ou CH.

[0275] Em outra modalidade, Y25 é N.

[0276] Em outra modalidade, Y26 é N ou CR2a, em que R2a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina).

[0277] Em outra modalidade, Y26 é N ou CF.

[0278] Em outra modalidade, Y26 é N.

[0279] Em outra modalidade, Y24 é N, Y25 é N ou CH, e Y26 é N ou CR2a, em que R2a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina).

[0280] Em outra modalidade, Y24 é N, Y25 é N ou CH e Y26 é N ou CF.

[0281] Em outra modalidade, Y24 é N, Y25 é N, e Y26 é N; Y24 é N, Y25 é N, eY26 é CF; ou Y24 é N, Y25 é CH e Y26 é N.

[0282] Em outra modalidade, Y24 é N, Y25 é N e Y26 é N.

[0283] Em outra modalidade, Z21 é N ou C.

[0284] Em outra modalidade, Z21 é C.

[0285] Em outra modalidade, Z22 é C.

[0286] Em outra modalidade, Z23 é N ou C.

[0287] Em outra modalidade, Z23 é N.

[0288] Em outra modalidade, Z21 é N ou C, Z22 é C e Z23 é N ou C.

[0289] Em outra modalidade, Z21 é C, Z22 é C e Z23 é N, ou Z21 é N, Z22 é C e Z23 é C.

[0290] Em outra modalidade, Z21 é C, Z22 é C e Z23 é N.

[0291] Em outra modalidade, Z24 é N ou C.

[0292] Em outra modalidade, Z24 é C.

[0293] Em outra modalidade, Z25 é C.

[0294] Em outra modalidade, Z26 é N ou C.

[0295] Em outra modalidade, Z26 é N.

[0296] Em outra modalidade, Z24 é N ou C, Z25 é C e Z26 é N ou C.

[0297] Em outra modalidade, Z24 é C, Z25 é C e Z26 é N, ou Z24 é N, Z25 é C e Z26 é C.

[0298] Em outra modalidade, Z24 é C, Z25 é C e Z26 é N.

[0299] Em outra modalidade, B1 e B2 são, cada um, independentemente

[0300] Em outra modalidade, pelo menos um dos B1 e B2 ée neste caso, o outro é

[0301] Em outra modalidade, B1 é

[0302] B2 é

[0303] Em outra modalidade,i) pelo menos um de Y11, Y12, Y13, Y14, Y15 e Y16 é CR1a,ii) pelo menos um de Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 é CR2a, ouiii) pelo menos um de Z13, Z16, Z23 e Z26 é C.

[0304] Em outra modalidade, X1 e X2 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.

[0305] Em outra modalidade, X1 e X2 são ambos átomos de oxigênio.

[0306] Em outra modalidade, Q1, Q2, Q3 e Q4 são, cada um,independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.

[0307] Em outra modalidade, Q1 é um átomo de oxigênio.

[0308] Em outra modalidade, Q3 é um átomo de oxigênio.

[0309] Em outra modalidade, Q1 e Q3 são ambos átomos de oxigênio e Q2e Q4 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo deenxofre.

[0310] Em outra modalidade, Q1 é um átomo de oxigênio, Q2 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre, Q3 é um átomo de oxigênio e Q4 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.

[0311] Em outra modalidade, Q1 é um átomo de oxigênio, Q2 é um átomo de enxofre, Q3 é um átomo de oxigênio e Q4 é um átomo de enxofre.

[0312] Em outra modalidade, o Composto (I) é um composto representado pela fórmula (Ia):em que a estrutura parcial: é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIAa): uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIBa): ou um sal do mesmo (daqui em diante por vezes referido como composto (Ia)).

[0313] Em outra modalidade, o Composto (I) é um composto representado pela fórmula (Ib):em que a estrutura parcial: é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIAb): uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIBb): ou um sal do mesmo (daqui em diante por vezes referido como composto (Ib)).

[0314] Os exemplos do composto (I) incluem os seguintes compostos.Composto A1

[0315] O Composto A1 é um composto tendo a fórmula (I), em que a estrutura parcial:

[0316] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIA):

[0317] R1 é um grupo hidroxi;

[0318] R2 é um grupo hidroxi ou um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0319] B1 é um grupo representado por

[0320] R13 é um átomo de hidrogênio;

[0321] R14 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino opcionalmente substituído;

[0322] R15 é um átomo de hidrogênio;

[0323] R16 é um átomo de hidrogênio;

[0324] R17 é um átomo de hidrogênio;

[0325] ’11 é N;

[0326] ’12 é N ou CH;

[0327] ’13 é N ou CR1a, em que R1a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0328] ’14 é N;

[0329] ’15 é N;

[0330] ’16 é N ou CR1a, em que R1a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0331] Z11 é C;

[0332] Z12 é C;

[0333] Z13 é N;

[0334] Z14 é C;

[0335] Z15 é C;

[0336] Z16 é N;

[0337] B2 é um grupo representado por

[0338] R23 é um átomo de hidrogênio;

[0339] R24 é um átomo de hidrogênio;

[0340] R25 é um átomo de hidrogênio;

[0341] R26 é um átomo de hidrogênio;

[0342] R27 é um átomo de hidrogênio;

[0343] Y21 é N;

[0344] Y22 é N;

[0345] Y23 é N ou CR2a, em que R2a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0346] Y24 é N;

[0347] Y25 é N ou CH;

[0348] Y26 é N ou CR2a, em que R2a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0349] Z21 é N ou C;

[0350] Z22 é C;

[0351] Z23 é N ou C;

[0352] Z24 é N ou C;

[0353] Z25 é C;

[0354] Z26 é N ou C;desde quei) pelo menos um de Y11, Y12, Y13, Y14, Y15 e Y16 é CR1a,ii) pelo menos um de Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 é CR2a, ouiii) pelo menos um de Z13, Z16, Z23 e Z26 é C;

[0355] X1 e X2 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre; e

[0356] Q1, Q2, Q3 e Q4 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.Composto B1

[0357] O Composto B1 é um composto tendo fórmula (I), em que a estrutura parcial:

[0358] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIA):

[0359] R1 é um grupo hidroxi;

[0360] R2 é um grupo hidroxi ou um átomo de fluorina;

[0361] B1 é um grupo representado por

[0362] R13 é um átomo de hidrogênio;

[0363] R14 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino;

[0364] R15 é um átomo de hidrogênio;

[0365] R16 é um átomo de hidrogênio;

[0366] R17 é um átomo de hidrogênio;

[0367] '11 é N;

[0368] '12 é N ou CH;

[0369] Y13 é N ou CF;

[0370] (por exemplo, Y11 é N, Y12 é N e Y13 é CF; Y11 é N, Y12 é N e Y13 é N; ou Y11 é N, Y12 é CH e Y13 é N);

[0371] Y14 é N;

[0372] Y15 é N;

[0373] Y16 é N ou CF;

[0374] (por exemplo, Y14 é N, Y15 é N e Y16 é N; ou Y14 é N, Y15 é N e Y16 é CF);

[0375] Z11 é C;

[0376] Z12 é C;

[0377] Z13 é N;

[0378] Z14 é C;

[0379] Z15 é C;

[0380] Z16 é N;

[0381] B2 é um grupo representado por

[0382] R23 é um átomo de hidrogênio;

[0383] R24 é um átomo de hidrogênio;

[0384] R25 é um átomo de hidrogênio;

[0385] R26 é um átomo de hidrogênio;

[0386] R27 é um átomo de hidrogênio;

[0387] Y21 é N;

[0388] Y22 é N;

[0389] Y23 é N ou CF;

[0390] (por exemplo, Y21 é N, Y22 é N e Y23 é CF; ou Y21 é N, Y22 é N e Y23 é N);

[0391] Y24 é N;

[0392] Y25 é N ou CH;

[0393] Y26 é N ou CF;

[0394] (por exemplo, Y24 é N, Y25 é N e Y26 é N; Y24 é N, Y25 é N e Y26 é CF; ou Y24 é N, Y25 é CH e Y26 é N);

[0395] Z21 é N ou C;

[0396] Z22 é C;

[0397] Z23 é N ou C;

[0398] (por exemplo, Z21 é C, Z22 é C e Z23 é N; ou Z21 é N, Z22 é C e Z23 é C);

[0399] Z24 é N ou C;

[0400] Z25 é C;

[0401] Z26 é N ou C;

[0402] (por exemplo, Z24 é C, Z25 é C e Z26 é N; ou Z24 é N, Z25 é C e Z26 é C)desde quei) pelo menos um de Y11, Y12, Y13, Y14, Y15 e Y16 é CR1a,ii) pelo menos um de Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 é CR2a, ouiii) pelo menos um de Z13, Z16, Z23 e Z26 é C;

[0403] X1 e X2 são ambos átomos de oxigênio;

[0404] Q1 é um átomo de oxigênio;

[0405] Q2 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre;

[0406] Q3 é um átomo de oxigênio; e

[0407] Q4 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.Composto A1-a

[0408] O Composto A1-a é um composto tendo fórmula (Ia), em quea estrutura parcial:

[0409] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIAa):

[0410] R1 é um grupo hidroxi;

[0411] R2 é um grupo hidroxi ou um átomo de halogênio (preferencialmente, um átomo de fluorina);

[0412] B1 é um grupo representado por

[0413] R13 é um átomo de hidrogênio;

[0414] R14 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino opcionalmente substituído;

[0415] R15 é um átomo de hidrogênio;

[0416] R16 é um átomo de hidrogênio;

[0417] R17 é um átomo de hidrogênio;

[0418] Y11 é N;

[0419] Y12 é N ou CH;

[0420] Y13 é N ou CR1a, em que R1a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0421] Y14 é N;

[0422] Y15 é N;

[0423] Y16 é N ou CR1a, em que R1a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0424] Z11 é C;

[0425] Z12 é C;

[0426] Z13 é N;

[0427] Z14 é C;

[0428] Z15 é C;

[0429] Z16 é N;

[0430] B2 é um grupo representado por

[0431] R23 é um átomo de hidrogênio;

[0432] R24 é um átomo de hidrogênio;

[0433] R25 é um átomo de hidrogênio;

[0434] R26 é um átomo de hidrogênio;

[0435] R27 é um átomo de hidrogênio;

[0436] Y21 é N;

[0437] Y22 é N;

[0438] Y23 é N ou CR2a, em que R2a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0439] Y24 é N;

[0440] Y25 é N ou CH;

[0441] Y26 é N ou CR2a, em que R2a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0442] Z21 é N ou C;

[0443] Z22 é C;

[0444] Z23 é N ou C;

[0445] Z24 é N ou C;

[0446] Z25 é C;

[0447] Z26 é N ou C;desde quei) pelo menos um de Y11, Y12, Y13, Y14, Y15 e Y16 é CR1a, ii) pelo menos um de Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 é CR2a, ouiii) pelo menos um de Z13, Z16, Z23 e Z26 é C;

[0448] X1 e X2 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre; e

[0449] Q1, Q2, Q3 e Q4 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.Composto B1-a

[0450] O Composto B1-a é um composto tendo fórmula (Ia), em que a estrutura parcial:

[0451] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIAa):

[0452] R1 é um grupo hidroxi;

[0453] R2 é um grupo hidroxi ou um átomo de fluorina;

[0454] B1 é um grupo representado por

[0455] R13 é um átomo de hidrogênio;

[0456] R14 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino;

[0457] R15 é um átomo de hidrogênio;

[0458] R16 é um átomo de hidrogênio;

[0459] R17 é um átomo de hidrogênio;

[0460] Y11 é N;

[0461] Y12 é N ou CH;

[0462] Y13 é N ou CF;

[0463] (por exemplo, Y11 é N, Y12 é N e Y13 é CF; Y11 é N, Y12 é N e Y13 é N; ou Y11 é N, Y12 é CH e Y13 é N);

[0464] Y14 é N;

[0465] Y15 é N;

[0466] Y16 é N ou CF;

[0467] (por exemplo, Y14 é N, Y15 é N e Y16 é N; ou Y14 é N, Y15 é N e Y16 é CF);

[0468] Z11 é C;

[0469] Z12 é C;

[0470] Z13 é N;

[0471] Z14 é C;

[0472] Z15 é C;

[0473] Z16 é N;

[0474] B2 é um grupo representado por

[0475] R23 é um átomo de hidrogênio;

[0476] R24 é um átomo de hidrogênio;

[0477] R25 é um átomo de hidrogênio;

[0478] R26 é um átomo de hidrogênio;

[0479] R27 é um átomo de hidrogênio;

[0480] Y21 é N;

[0481] Y22 é N;

[0482] Y23 é N ou CF;

[0483] (por exemplo, Y21 é N, Y22 é N e Y23 é CF; ou Y21 é N, Y22 é N e Y23 é N)

[0484] Y24 é N;

[0485] Y25 é N ou CH;

[0486] Y26 é N ou CF;

[0487] (por exemplo, Y24 é N, Y25 é N e Y26 é N; Y24 é N, Y25 é N e Y26 é CF;ou Y24 é N, Y25 é CH e Y26 é N);

[0488] Z21 é N ou C;

[0489] Z22 é C;

[0490] Z23 é N ou C;

[0491] (por exemplo, Z21 é C, Z22 é C e Z23 é N; ou Z21 é N, Z22 é C e Z23 é C);

[0492] Z24 é N ou C;

[0493] Z25 é C;

[0494] Z26 é N ou C;

[0495] (por exemplo, Z24 é C, Z25 é C e Z26 é N, ou Z24 é N, Z25 é C e Z26 é C);desde quei) pelo menos um de Y11, Y12, Y13, Y14, Y15 e Y16 é CR1a,ii) pelo menos um de Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 é CR2a, ouiii) pelo menos um de Z13, Z16, Z23 e Z26 é C;

[0496] X1 e X2 são ambos átomos de oxigênio;

[0497] Q1 é um átomo de oxigênio;

[0498] Q2 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre;

[0499] Q3 é um átomo de oxigênio; e

[0500] Q4 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.Composto A1-b

[0501] O Composto A1-b é um composto tendo fórmula (Ib), em que a estrutura parcial:

[0502] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIAb):

[0503] R1 é um grupo hidroxi;

[0504] R2 é um grupo hidroxi ou um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0505] B1 é um grupo representado por

[0506] R13 é um átomo de hidrogênio;

[0507] R14 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino opcionalmente substituído;

[0508] R15 é um átomo de hidrogênio;

[0509] R16 é um átomo de hidrogênio;

[0510] R17 é um átomo de hidrogênio;

[0511] T11 é N;

[0512] T12 é N ou CH;

[0513] T13 é N ou CR1a, em que R1a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0514] T14 é N;

[0515] Y15 é N;

[0516] Y16 é N ou CR1a, em que R1a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0517] Z11 é C;

[0518] Z12 é C;

[0519] Z13 é N;

[0520] Z14 é C;

[0521] Z15 é C;

[0522] Z16 é N;

[0523] B2 é um grupo representado por

[0524] R23 é um átomo de hidrogênio;

[0525] R24 é um átomo de hidrogênio;

[0526] R25 é um átomo de hidrogênio;

[0527] R26 é um átomo de hidrogênio;

[0528] R27 é um átomo de hidrogênio;

[0529] Y21 é N;

[0530] Y22 é N;

[0531] Y23 é N ou CR2a, em que R2a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0532] Y24 é N;

[0533] Y25 é N ou CH;

[0534] Y26 é N ou CR2a, em que R2a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0535] Z21 é N ou C;

[0536] Z22 é C;

[0537] Z23 é N ou C;

[0538] Z24 é N ou C;

[0539] Z25 é C;

[0540] Z26 é N ou C;desde quei) pelo menos um de Y11, Y12, Y13, Y14, Y15 e Y16 é CR1a,ii) pelo menos um de Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 é CR2a, ouiii) pelo menos um de Z13, Z16, Z23 e Z26 é C;

[0541] X1 e X2 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre; e

[0542] Q1, Q2, Q3 e Q4 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.Composto B1-b

[0543] O Composto B1-b é um composto tendo fórmula (Ib), emque a estrutura parcial:

[0544] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIAb):

[0545] R1 é um grupo hidroxi;

[0546] R2 é um grupo hidroxi ou um átomo de fluorina;

[0547] B1 é um grupo representado por

[0548] R13 é um átomo de hidrogênio;

[0549] R14 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino;

[0550] R15 é um átomo de hidrogênio;

[0551] R16 é um átomo de hidrogênio;

[0552] R17 é um átomo de hidrogênio;

[0553] Y11 é N;

[0554] Y12 é N ou CH;

[0555] Y13 é N ou CF;

[0556] (por exemplo, Y11 é N, Y12 é N e Y13 é CF; Y11 é N, Y12 é N e Y13 é N; ou Y11 é N, Y12 é CH e Y13 é N);

[0557] Y14 é N;

[0558] Y15 é N;

[0559] Y16 é N ou CF;

[0560] (por exemplo, Y14 é N, Y15 é N e Y16 é N; ou Y14 é N, Y15 é N e Y16 é CF);

[0561] Z11 é C;

[0562] Z12 é C;

[0563] Z13 é N;

[0564] Z14 é C;

[0565] Z15 é C;

[0566] Z16 é N;

[0567] B2 é um grupo representado por

[0568] R23 é um átomo de hidrogênio;

[0569] R24 é um átomo de hidrogênio;

[0570] R25 é um átomo de hidrogênio;

[0571] R26 é um átomo de hidrogênio;

[0572] R27 é um átomo de hidrogênio;

[0573] Y21 é N;

[0574] Y22 é N;

[0575] Y23 é N ou CF;

[0576] (por exemplo, Y21 é N, Y22 é N e Y23 é CF; ou Y21 é N, Y22 é N e Y23 é N);

[0577] Y24 é N;

[0578] Y25 é N ou CH;

[0579] Y26 é N ou CF;

[0580] (por exemplo, Y24 é N, Y25 é N e Y26 é N; Y24 é N, Y25 é N e Y26 é CF ou Y24 é N, Y25 é CH e Y26 é N);

[0581] Z21 é N ou C;

[0582] Z22 é C;

[0583] Z23 é N ou C;

[0584] (por exemplo, Z21 é C, Z22 é C e Z23 é N; ou Z21 é N, Z22 é C e Z23 é C);

[0585] Z24 é N ou C;

[0586] Z25 é C;

[0587] Z26 é N ou C;

[0588] (por exemplo, Z24 é C, Z25 é C e Z26 é N; ou Z24 é N, Z25 é C e Z26 é C);desde que iv) pelo menos um de Y11, Y12, Y13, Y14, Y15 e Y16 é CR1a,v) ) pelo menos um de Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 é CR2a, ouvi) ) pelo menos um de Z13, Z16, Z23 e Z26 é C;

[0589] X1 e X2 são ambos átomos de oxigênio;

[0590] Q1 é um átomo de oxigênio;

[0591] Q2 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre;

[0592] Q3 é um átomo de oxigênio; e

[0593] Q4 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.Composto A2

[0594] O Composto A2 é um composto tendo a fórmula (I), em que a estrutura parcial:

[0595] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIA):

[0596] uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIB):

[0597] R1 é um grupo hidroxi;

[0598] R2 é um grupo hidroxi ou um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0599] B1 é um grupo representado por

[0600] R13 é um átomo de hidrogênio;

[0601] R14 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino opcionalmente substituído;

[0602] R15 é um átomo de hidrogênio;

[0603] R16 é um átomo de hidrogênio;

[0604] R17 é um átomo de hidrogênio;

[0605] Y11 é N;

[0606] Y12 é N ou CH;

[0607] Y13 é N ou CR1a, em que R1a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0608] Y14 é N;

[0609] Y15 é N;

[0610] Y16 é N ou CR1a, em que R1a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0611] Z11 é C;

[0612] Z12 é C;

[0613] Z13 é N;

[0614] Z14 é C;

[0615] Z15 é C;

[0616] Z16 é N;

[0617] B2 é um grupo representado por

[0618] R23 é um átomo de hidrogênio;

[0619] R24 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino opcionalmente substituído;

[0620] R25 é um átomo de hidrogênio;

[0621] R26 é um átomo de hidrogênio;

[0622] R27 é um átomo de hidrogênio;

[0623] Y21 é N;

[0624] Y22 é N;

[0625] Y23 é N ou CR2a, em que R2a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0626] Y24 é N;

[0627] Y25 é N ou CH;

[0628] Y26 é N ou CR2a, em que R2a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0629] Z21 é N ou C;

[0630] Z22 é C;

[0631] Z23 é N ou C;

[0632] Z24 é N ou C;

[0633] Z25 é C;

[0634] Z26 é N ou C;desde quevii) pelo menos um de Y11, Y12, Y13, Y14, Y15 e Y16 é CR1a,viii) pelo menos um de Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 é CR2a, ouix) ) pelo menos um de Z13, Z16, Z23 e Z26 é C;

[0635] X1 e X2 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre; e

[0636] Q1, Q2, Q3 e Q4 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.Composto B2

[0637] O Composto B2 é um composto tendo a fórmula (I), em que a estrutura parcial:

[0638] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIA):

[0639] uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIB):

[0640] R1 é um grupo hidroxi;

[0641] R2 é um grupo hidroxi ou um átomo de fluorina;

[0642] B1 é um grupo representado por

[0643] R13 é um átomo de hidrogênio;

[0644] R14 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino;

[0645] R15 é um átomo de hidrogênio;

[0646] R16 é um átomo de hidrogênio;

[0647] R17 é um átomo de hidrogênio;

[0648] Y11 é N;

[0649] Y12 é N ou CH;

[0650] Y13 é N ou CF;

[0651] (por exemplo, Y11 é N, Y12 é N e Y13 é CF; Y11 é N, Y12 é N e Y13 é N; ou Y11 é N, Y12 é CH e Y13 é N);

[0652] Y14 é N;

[0653] Y15 é N;

[0654] Y16 é N ou CF;

[0655] (por exemplo, Y14 é N, Y15 é N e Y16 é N; ou Y14 é N, Y15 é N e Y16 é CF);

[0656] Z11 é C;

[0657] Z12 é C;Z13 é N;

[0658] Z14 é C;

[0659] Z15 é C;

[0660] Z16 é N;

[0661] B2 é um grupo representado por

[0662] R23 é um átomo de hidrogênio;

[0663] R24 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino;

[0664] R25 é um átomo de hidrogênio;

[0665] R26 é um átomo de hidrogênio;

[0666] R27 é um átomo de hidrogênio;

[0667] Y21 é N;

[0668] Y22 é N;

[0669] Y23 é N ou CF;

[0670] (por exemplo, Y21 é N, Y22 é N e Y23 é CF; ou Y21 é N, Y22 é N e Y23 é N);

[0671] Y24 é N;

[0672] Y25 é N ou CH;

[0673] Y26 é N ou CF;

[0674] (por exemplo, Y24 é N, Y25 é N e Y26 é N; Y24 é N, Y25 é N e Y26 é CF, ou Y24 é N, Y25 é CH e Y26 é N);

[0675] Z21 é N ou C;

[0676] Z22 é C;

[0677] Z23 é N ou C;

[0678] (por exemplo, Z21 é C, Z22 é C e Z23 é N; ou Z21 é N, Z22 é C e Z23 é C);

[0679] Z24 é N ou C;

[0680] Z25 é C;

[0681] Z26 é N ou C;

[0682] (por exemplo, Z24 é C, Z25 é C e Z26 é N; ou Z24 é N, Z25 é C e Z26 é C)desde quex) pelo menos um de Y11, Y12, Y13, Y14, Y15 e Y16 é CR1a,xi) pelo menos um de Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 é CR2a, ouxii) pelo menos um de Z13, Z16, Z23 e Z26 é C;

[0683] X1 e X2 são ambos átomos de oxigênio;

[0684] Q1 é um átomo de oxigênio;

[0685] Q2 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre;

[0686] Q3 é um átomo de oxigênio; e

[0687] Q4 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.Composto A2-a

[0688] O Composto A2-a é um composto tendo fórmula (Ia), em que a estrutura parcial:

[0689] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIAa):

[0690] uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIBa):

[0691] R1 é um grupo hidroxi;

[0692] R2 é um grupo hidroxi ou um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0693] B1 é um grupo representado por

[0694] R13 é um átomo de hidrogênio;

[0695] R14 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino opcionalmente substituído;

[0696] R15 é um átomo de hidrogênio;

[0697] R16 é um átomo de hidrogênio;

[0698] R17 é um átomo de hidrogênio;

[0699] Y11 é N;

[0700] Y12 é N ou CH;

[0701] Y13 é N ou CR1a, em que R1a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0702] Y14 é N;

[0703] Y15 é N;

[0704] Y16 é N ou CR1a, em que R1a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0705] Z11 é C;

[0706] Z12 é C;

[0707] Z13 é N;

[0708] Z14 é C;

[0709] Z15 é C;

[0710] Z16 é N;

[0711] B2 é um grupo representado por

[0712] R23 é um átomo de hidrogênio;

[0713] R24 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino opcionalmente substituído;

[0714] R25 é um átomo de hidrogênio;

[0715] R26 é um átomo de hidrogênio;

[0716] R27 é um átomo de hidrogênio;

[0717] Y21 é N;

[0718] Y22 é N;

[0719] Y23 é N ou CR2a, em que R2a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0720] Y24 é N;

[0721] Y25 é N ou CH;

[0722] Y26 é N ou CR2a, em que R2a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0723] Z21 é N ou C;

[0724] Z22 é C;

[0725] Z23 é N ou C;

[0726] Z24 é N ou C;

[0727] Z25 é C;

[0728] Z26 é N ou C;desde quexiii) pelo menos um de Y11, Y12, Y13, Y14, Y15 e Y16 é CR1a,xiv) pelo menos um de Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 é CR2a, ouxv) ) pelo menos um de Z13, Z16, Z23 e Z26 é C;

[0729] X1 e X2 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre; e

[0730] Q1, Q2, Q3 e Q4 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.Composto B2-a

[0731] O Composto B2-a é um composto tendo a fórmula (I), em que a estrutura parcial:

[0732] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIAa):

[0733] uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIBa):

[0734] R1 é um grupo hidroxi;

[0735] R2 é um grupo hidroxi ou um átomo de fluorina;

[0736] B1 é um grupo representado por

[0737] R13 é um átomo de hidrogênio;

[0738] R14 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino;

[0739] R15 é um átomo de hidrogênio;

[0740] R16 é um átomo de hidrogênio;

[0741] R17 é um átomo de hidrogênio;

[0742] Y11 é N;

[0743] Y12 é N ou CH;

[0744] Y13 é N ou CF;

[0745] (por exemplo, Y11 é N, Y12 é N e Y13 é CF; Y11 é N, Y12 é N e Y13 é N; ou Y11 é N, Y12 é CH e Y13 é N);

[0746] Y14 é N;

[0747] Y15 é N;

[0748] Y16 é N ou CF;

[0749] (por exemplo, Y14 é N, Y15 é N e Y16 é N; ou Y14 é N, Y15 é N e Y16 é CF);

[0750] Z11 é C;

[0751] Z12 é C;

[0752] Z13 é N;

[0753] Z14 é C;

[0754] Z15 é C;

[0755] Z16 é N;

[0756] B2 é um grupo representado por

[0757] R23 é um átomo de hidrogênio;

[0758] R24 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino;

[0759] R25 é um átomo de hidrogênio;

[0760] R26 é um átomo de hidrogênio;

[0761] R27 é um átomo de hidrogênio;

[0762] Y21 é N;

[0763] Y22 é N;

[0764] Y23 é N ou CF;

[0765] (por exemplo, Y21 é N, Y22 é N e Y23 é CF; ou Y21 é N, Y22 é N e Y23 é N);

[0766] Y24 é N;

[0767] Y25 é N ou CH;

[0768] Y26 é N ou CF;

[0769] (por exemplo, Y24 é N, Y25 é N e Y26 é N; Y24 é N, Y25 é N e Y26 é CF;ou Y24 é N, Y25 é CH e Y26 é N);

[0770] Z21 é N ou C;

[0771] Z22 é C;

[0772] Z23 é N ou C;

[0773] (por exemplo, Z21 é C, Z22 é C e Z23 é N; ou Z21 é N, Z22 é C e Z23 é C);

[0774] Z24 é N ou C;

[0775] Z25 é C;

[0776] Z26 é N ou C;

[0777] (por exemplo, Z24 é C, Z25 é C e Z26 é N; ou Z24 é N, Z25 é C e Z26 é C);desde quexvi) pelo menos um de Y11, Y12, Y13, Y14, Y15 e Y16 é CR1a,xvii) pelo menos um de Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 é CR2a, ouxviii) pelo menos um de Z13, Z16, Z23 e Z26 é C;

[0778] X1 e X2 são ambos átomos de oxigênio;

[0779] Q1 é um átomo de oxigênio;

[0780] Q2 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre;

[0781] Q3 é um átomo de oxigênio; e

[0782] Q4 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.Composto A2-b

[0783] O Composto A2-b é um composto tendo fórmula (Ib), em que a estrutura parcial:

[0784] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIAb):

[0785] uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIBb):

[0786] R1 é um grupo hidroxi;

[0787] R2 é um grupo hidroxi ou um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0788] B1 é um grupo representado por

[0789] R13 é um átomo de hidrogênio;

[0790] R14 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino opcionalmente substituído;

[0791] R15 é um átomo de hidrogênio;

[0792] R16 é um átomo de hidrogênio;

[0793] R17 é um átomo de hidrogênio;

[0794] Y11 é N;

[0795] Y12 é N ou CH;

[0796] Y13 é N ou CR1a, em que R1a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0797] Y14 é N;

[0798] Y15 é N;

[0799] Y16 é N ou CR1a, em que R1a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0800] Z11 é C;

[0801] Z12 é C;

[0802] Z13 é N;

[0803] Z14 é C;

[0804] Z15 é C;

[0805] Z16 é N;

[0806] B2 é um grupo representado por

[0807] R23 é um átomo de hidrogênio;

[0808] R24 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino opcionalmente substituído;

[0809] R25 é um átomo de hidrogênio;

[0810] R26 é um átomo de hidrogênio;

[0811] R27 é um átomo de hidrogênio;

[0812] Y21 é N;

[0813] Y22 é N;

[0814] Y23 é N ou CR2a, em que R2a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0815] Y24 é N;

[0816] Y25 é N ou CH;

[0817] Y26 é N ou CR2a, em que R2a é um átomo de halogênio (por exemplo, um átomo de fluorina);

[0818] Z21 é N ou C;

[0819] Z22 é C;

[0820] Z23 é N ou C;

[0821] Z24 é N ou C;

[0822] Z25 é C;

[0823] Z26 é N ou C;desde quei) pelo menos um de Y11, Y12, Y13, Y14, Y15 e Y16 é CR1a,ii) pelo menos um de Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 é CR2a, ouiii) pelo menos um de Z13, Z16, Z23 e Z26 é C;

[0824] X1 e X2 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre; e

[0825] Q1, Q2, Q3 e Q4 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.Composto B2-b

[0826] O Composto B2-b é um composto tendo fórmula (Ib), em que a estrutura parcial:

[0827] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIAb):

[0828] uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIBb):

[0829] R1 é um grupo hidroxi;

[0830] R2 é um grupo hidroxi ou um átomo de fluorina;

[0831] B1 é um grupo representado por

[0832] R13 é um átomo de hidrogênio;

[0833] R14 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino;

[0834] R15 é um átomo de hidrogênio;

[0835] R16 é um átomo de hidrogênio;

[0836] R17 é um átomo de hidrogênio;

[0837] Y11 é N;

[0838] Y12 é N ou CH;

[0839] Y13 é N ou CF;

[0840] (por exemplo, Y11 é N, Y12 é N e Y13 é CF; Y11 é N, Y12 é N e Y13 é N;ou Y11 é N, Y12 é CH e Y13 é N);

[0841] Y14 é N;

[0842] Y15 é N;

[0843] Y16 é N ou CF;

[0844] (por exemplo, Y14 é N, Y15 é N e Y16 é N; ou Y14 é N, Y15 é N e Y16 é CF);

[0845] Z11 é C;

[0846] Z12 é C;

[0847] Z13 é N;

[0848] Z14 é C;

[0849] Z15 é C;

[0850] Z16 é N;

[0851] B2 é um grupo representado por

[0852] R23 é um átomo de hidrogênio;

[0853] R24 é um átomo de hidrogênio ou um grupo amino;

[0854] R25 é um átomo de hidrogênio;

[0855] R26 é um átomo de hidrogênio;

[0856] R27 é um átomo de hidrogênio;

[0857] Y21 é N;

[0858] Y22 é N;

[0859] Y23 é N ou CF;

[0860] (por exemplo, Y21 é N, Y22 é N e Y23 é CF; ou Y21 é N, Y22 é N e Y23 é N);

[0861] Y24 é N;

[0862] Y25 é N ou CH;

[0863] Y26 é N ou CF;

[0864] (por exemplo, Y24 é N, Y25 é N e Y26 é N; Y24 é N, Y25 é N e Y26 é CF, ou Y24 é N, Y25 é CH e Y26 é N);

[0865] Z21 é N ou C;

[0866] Z22 é C;

[0867] Z23 é N ou C;

[0868] (por exemplo, Z21 é C, Z22 é C e Z23 é N; ou Z21 é N, Z22 é C e Z23 é C)

[0869] Z24 é N ou C;

[0870] Z25 é C;

[0871] Z26 é N ou C;

[0872] (por exemplo, Z24 é C, Z25 é C e Z26 é N; ou Z24 é N, Z25 é C e Z26 é C)desde queiv) pelo menos um de Y11, Y12, Y13, Y14, Y15 e Y16 é CR1a,v) ) pelo menos um de Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 é CR2a, ouvi) ) pelo menos um de Z13, Z16, Z23 e Z26 é C;

[0873] X1 e X2 são ambos átomos de oxigênio;

[0874] Q1 é um átomo de oxigênio;

[0875] Q2 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre;

[0876] Q3 é um átomo de oxigênio; e

[0877] Q4 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.Composto C2

[0878] O Composto C2 é um composto tendo a fórmula (I), em que a estrutura parcial:

[0879] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIA):

[0880] uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIB):

[0881] R1 é um grupo hidroxi;

[0882] R2 é um grupo hidroxi ou um átomo de fluorina;

[0883] B1 e B2 são, cada um, independentemente

[0884] pelo menos um de B1 e B2 é

[0885] e, por exemplo, o outro é

[0886] X1 e X2 são ambos átomos de oxigênio;

[0887] Q1 é um átomo de oxigênio;

[0888] Q2 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre;

[0889] Q3 é um átomo de oxigênio; e

[0890] Q4 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.Composto C2-a

[0891] O Composto C2-a é um composto tendo fórmula (Ia), em que a estrutura parcial:

[0892] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIAa):

[0893] uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIBa):

[0894] R1 é um grupo hidroxi;

[0895] R2 é um grupo hidroxi ou um átomo de fluorina;

[0896] B1 e B2 são, cada um, independentemente

[0897] pelo menos um de B1 e B2 é

[0898] e, por exemplo, o outro é

[0899] X1 e X2 são ambos átomos de oxigênio;

[0900] Q1 é um átomo de oxigênio;

[0901] Q2 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre;

[0902] Q3 é um átomo de oxigênio; e

[0903] Q4 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.Composto C2-b

[0904] O Composto C2-b é um composto tendo fórmula (Ib), em que a estrutura parcial:

[0905] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIAb):

[0906] uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIBb):

[0907] R1 é um grupo hidroxi;

[0908] R2 é um grupo hidroxi ou um átomo de fluorina;

[0909] B1 e B2 são, cada um, independentemente

[0910] pelo menos um de B1 e B2 é

[0911] e, por exemplo, o outro é

[0912] X1 e X2 são ambos átomos de oxigênio;

[0913] Q1 é um átomo de oxigênio;

[0914] Q2 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre;

[0915] Q3 é um átomo de oxigênio; e

[0916] Q4 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.Composto D2

[0917] O Composto D2 é um composto tendo a fórmula (I), em que a estrutura parcial:

[0918] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIA):

[0919] uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIB):

[0920] R1 é um grupo hidroxi;

[0921] R2 é um grupo hidroxi ou um átomo de fluorina;

[0922] B1 é um grupo representado por

[0923] B2 é um grupo representado por

[0924] X1 e X2 são ambos átomos de oxigênio;

[0925] Q1 é um átomo de oxigênio;

[0926] Q2 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre;

[0927] Q3 é um átomo de oxigênio; e

[0928] Q4 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.Composto D2-a

[0929] O Composto D2-a é um composto tendo fórmula (Ia), em que a estrutura parcial:

[0930] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIAa):

[0931] uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIBa):

[0932] R1 é um grupo hidroxi;

[0933] R2 é um grupo hidroxi ou um átomo de fluorina;

[0934] B1 é um grupo representado por

[0935] B2 é um grupo representado por

[0936] X1 e X2 são ambos átomos de oxigênio;

[0937] Q1 é um átomo de oxigênio;

[0938] Q2 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre;

[0939] Q3 é um átomo de oxigênio; e

[0940] Q4 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.Composto D2-b

[0941] O Composto D2-b é um composto tendo fórmula (Ib), em que a estrutura parcial:

[0942] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIAb):

[0943] uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIBb):

[0944] R1 é um grupo hidroxi;

[0945] R2 é um grupo hidroxi ou um átomo de fluorina;

[0946] B1 é um grupo representado por

[0947] B2 é um grupo representado por

[0948] X1 e X2 são ambos átomos de oxigênio;

[0949] Q1 é um átomo de oxigênio;

[0950] Q2 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre;

[0951] Q3 é um átomo de oxigênio; e

[0952] Q4 é um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.

[0953] Os exemplos específicos do composto (I) incluem os compostos dos Exemplos 1 a 20 e 3a.

[0954] Quando o composto (I) está na forma de um sal, o sal é preferencialmente um sal farmaceuticamente aceitável. Os exemplos incluem sais com base inorgânica, sais com base orgânica, sais com ácido inorgânico, sais com ácido orgânico, e sais com aminoácido básico ou ácido.

[0955] Os exemplos preferenciais do sal com base inorgânica incluem sais de metal alcalino, tais como sal de sódio, sal de potássio e semelhantes; sais de metal alcalino-terroso, tais como sal de cálcio, sal de magnésio e semelhantes; sal de alumínio e sal de amônio.

[0956] Os exemplos preferenciais do sal com base orgânica incluem sais com trimetilamina, trietilamina, piridina, picolina, etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, trometamina [tris(hidroximetil)metilamina], tert-butilamina, ciclohexilamina, benzilamina, diciclohexilamina e N,N-dibenzil etileno diamina.

[0957] Os exemplos preferenciais do sal com ácido inorgânico incluem sais com ácido hidroclórico, ácido hidrbrômico, ácido nítrico, ácido sulfúrico e ácido fosfórico.

[0958] Os exemplos preferenciais do sal com ácido orgânico incluem sais com ácido fórmico, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido ftálico, ácido fumárico, ácido oxálico, ácido tartárico, ácido maleico, ácido cítrico, ácido succínico, ácido málico, ácido metanossulfônico, ácido benzenossulfônico e ácido- toluenossulfônico.

[0959] Os exemplos preferenciais do sal com aminoácido básico incluem sais com arginina, lisina e ornitina.

[0960] Os exemplos preferenciais do sal com aminoácido incluemsais com ácido aspártico e ácido glutâmico.

[0961] Quando o composto (I) está na forma de um sal, o sal é preferencialmente um sal com trietilamina ou sódio, mais preferencialmente um sal com trietilamina.

[0962] O método de produção do composto da presente invenção é explicado a seguir.

[0963] O composto de matéria-prima e o reagente usado e o composto obtido em cada etapa no seguinte método de produção podem estar, cada um, na forma de um sal, eexemplos desse sal incluem aqueles semelhantes aos sais do composto da presente divulgação.

[0964] Quando o composto obtido em cada etapa está em uma forma livre, o mesmo pode ser convertido no sal respectivo de acordo com um método conhecido na técnica. Quando o composto obtido em cada etapa é um sal, o mesmo pode ser convertido na respectiva forma livre ou no outro sal de acordo com um método conhecido na técnica.

[0965] Ocomposto obtido em cada etapa pode ser usado diretamente como a mistura de reação ou como um produto bruto para a seguinte reação. Alternativamente, o composto obtido em cada etapa pode ser isolado e purificado a partir de uma mistura de reação de acordo com um método conhecido na técnica, por exemplo, um meio de separação, tais como concentração, cristalização, recristalização, destilação, extração por solvente, destilação fracionada, cromatografia em coluna e semelhantes.

[0966] Quando o composto de matéria-prima e o reagente usado em cada etapa estão comercialmente disponíveis, o produto comercialmente disponível também pode ser usado diretamente.

[0967] Na reação em cada etapa, enquanto o tempo de reação varia dependendo do tipo de reagente e solvente a ser usado, é geralmente 1 min - 48 horas, preferencialmente 10 min - 8 horas, a menos que especificado em contrário.

[0968] Na reação em cada etapa, enquanto a temperatura da reação varia dependendo do tipo do reagente e solvente a ser usado, é geralmente -78°C - 300°C, preferencialmente -78°C - 150°C, a menos que especificado em contrário.

[0969] Na reação em cada etapa, enquanto a pressão varia dependendo do tipo do reagente e solvente a ser usado, é geralmente 1 atm - 20 atm, preferencialmente 1 atm - 3 atm, a menos que especificado em contrário.

[0970] O sintetizador de micro-ondas, tal como um iniciador fabricado por Biotage e semelhantes pode ser usado para a reação em cada etapa. Enquanto a temperatura de reação varia dependendo do tipo do reagente e solvente a ser usado, é geralmente temperatura ambiente - 300°C, preferencialmente 50°C - 250°C, a menos que especificado em contrário. Enquanto o tempo de reação varia dependendo do tipo do reagente e do solvente a ser usado, é geralmente 1 min - 48 horas, preferencialmente 1 min - 8 horas, a menos que especificado em contrário.

[0971] Na reação em cada etapa, o reagente é usado em uma quantidade de 0,5 equivalentes - 20 equivalentes, preferencialmente 0,8 equivalentes - 5 equivalentes, em relação ao substrato, a menos que especificado em contrário. Quando o reagente é usado como um catalizador, o reagente é usado em uma quantidade de 0,001 equivalente -1 equivalente, preferencialmente 0,01 equivalente - 0,2 equivalente, em relação ao substrato. Quando o reagente é usado como solvente da reação, o reagente é usado em uma quantidade de solvente.

[0972] Salvo indicação em contrário, a reação em cada etapa é realizada sem o solvente, ou ao dissolver ou suspendeer o composto de material bruto em um solvente adequado. Os exemplos do solvente incluem os descritos nos Exemplos e os seguintes solventes.álcoois: metanol, etanol, álcool terc-butílico, 2-metoxietanol e semelhantes;ésteres: éter dietílico, éter difenílico, tetrahidrofurano, 1,2-dimetoxietano e semelhantes;hidrocarbonetos aromáticos: clorobenzeno, tolueno, xileno e semelhantes;hidrocarbonetos saturados: ciclohexano, hexano e semelhantes;amidas: N, N-dimetilformamida, N-metilpirrolidona e semelhantes;hidrocarbonetos halogenados: diclorometano, tetracloreto de carbono e semelhantes;nitrilas: acetonitrila e semelhantes;sulfóxidos: sulfóxido de dimetil e semelhantes;bases orgânicas aromáticas: piridina e semelhantes;anidridos: anidrido acético e semelhantes;ácidos orgânicos: ácido fórmico, ácido acético, ácido trifluoroacético e semelhantes;ácidos inorgânicos: ácido clorídrico, ácido sulfúrico e semelhantes;ésteres: acetato de etil e semelhantes;cetonas: acetona, metiletilcetona e semelhantes;água.

[0973] O solvente mencionado acima pode ser usado em uma mistura de dois ou mais tipos deste em uma razão apropriada.

[0974] Quando uma base é usada para a reação em cada etapa, exemplos incluem os descritos nos Exemplose nas bases seguintes.bases inorgânicas: hidróxido de sódio, hidróxido de magnésio, carbonato de sódio, carbonato de cálcio, hidrogenocarbonato de sódio e semelhantes;bases orgânicas: trietilamina, dietilamina, piridina, 4-dimetilaminopiridina, N,N-dimetilanilina, 1,4-diazabiciclo [2.2.2] octano, 1,8-diazabiciclo[5.4.0]-7- undeceno, imidazol, piperidina e semelhantes;alcóxidos de metais: etóxido de sódio, terc-butóxido de potássio e semelhantes;hidretos de metal alcalino: hidreto de sódio e semelhantes;amidas metálicas: amida de sódio, diisopropilamida de lítio,hexametildisilazida de lítio e semelhantes;lítios orgânicos: n-butilítio e semelhantes.

[0975] Quando um ácido ou um catalisador ácido é usado para a reação em cada etapa, os exemplos do mesmo incluem aqueles descritos nos Exemplos e os seguintes ácidos e catalisadores ácidos.Ácidos Inorgânicos: ácido clorídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido bromídrico, ácido fosfórico e semelhantes;ácidos orgânicos: ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido cítrico, ácido p- toluenossulfônico, ácido 10-canforsulfônico e semelhantes;ácido de Lewis: complexo de éter dietílico trifloreto de boro, ideto de zinco, cloreto de alumínio anidro, cloreto de zinco anidro, cloreto de ferro anidro e semelhantes.

[0976] Salvo indicação em contrário, a reação em cada etapa é realizada de acordo com um método conhecido na técnica, por exemplo, o método descrito em Jikken Kagaku Kouza, 5th Edition, vol.13-19 (the Chemical Society of Japan ed.); Shin Jikken Kagaku Kouza, vol.14-15 (the Chemical Society of Japan ed.); Fine Organic Chemistry, 2a Edição Revisada (L. F. Tietze, Th. Eicher, Nankodo); Organic Name Reactions, the Reaction Mechanism and Essence, Edição Revisada (Hideo Togo, Kodansha); ORGANIC SYNTHESES Collective Volume I-VII (John Wiley & Sons Inc); Modern Organic Synthesis in the Laboratory A Collection of Standard Experimental Procedures (Jie Jack Li, OXFORD UNIVERSITY); Comprehensive Heterocyclic Chemistry III, Vol.1 - Vol.14 (Elsevier Japan); Strategic Applications of Named Reactions in Organic Synthesis (traduzido por Kiyoshi Tomioka, Kagakudojin); Comprehensive Organic Transformations (VCH Publishers Inc.), 1989, ou semelhantes, ou o método descrito nos Exemplos.

[0977] Em cada etapa, a reação de proteção e desproteção de um grupo funcional é realizada de acordo com um método conhecido na técnica, por exemplo, o método descrito em "Protective Groups in Organic Synthesis, 4a Ed", Wiley- Interscience, Inc., 2007 (Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts); "Protecting Groups 3a Ed." Thieme, 2004 (P.J.Kocienski), ou semelhantes, ou o método descrito nos Exemplos.

[0978] Os exemplos do grupo de proteçãopara um grupo hidroxi (por exemplo, um grupo hidroxi de um álcool e semelhantes, um grupo hidroxi fenólico) inclui grupos de proteção do tipo éter, tais como éter metoximetílico, éter benzílico, éter de terc-butildimetilsilil, éter de tetrahidropiraanil e semelhantes; grupos de proteção do tipo éster de carboxilato, tais como éster de acetato e semelhantes; grupos de proteção do tipo éster, tais como éster de metanossulfonato e semelhantes; e grupos de proteção do tipo éster, tais como terc-butilcarbonato e semelhantes.

[0979] Os exemplos do grupo protetor para um grupo carbonil de um aldeído incluem grupos protetores do tipo acetal, tais como dimetilacetal e semelhantes; e grupos protetores do tipo acetal cíclicostais como 1,3-dioxano e semelhantes.

[0980] Os exemplos do grupo protetor para um grupo carbonil de uma cetona incluem grupos protetores do tipo cetal, tais como dimetilcetal e semelhantes; grupos protetores do tipo cetal cíclico, tais como 1,3-dioxano e semelhantes; grupos protetores do tipo oxima, tal como O-metiloxima e semelhantes; e grupos protetores do tipo hidrazonatais como N, N-dimetil- hidrazona e semelhantes.

[0981] Os exemplos do grupo protetor para um grupo carboxil incluem grupos protetores do tipo éster, tais como éster metil e semelhantes; e grupos protetores do tipo amida, tais como N, N-dimetilamida e semelhantes.

[0982] Os exemplos do grupo protetor para um tiol incluem grupos protetores do tipo éter, tais como tioéter de benzil e semelhantes; e gruposprotetores do tipo éster, tal como éster de tioacetato, tiocarbonato, tiocarbamato e semelhantes.

[0983] Os exemplos do grupo protector para um grupo amino e um heterociclo aromático, tais como imidazol, pirrole, indol e semelhantes, incluem grupos protetores do tipo carbamato, tais como carbamato de benzil e semelhantes; grupos protetores do tipo amida, tais como acetamida, benzamida, isobutilamida e semelhantes; grupos protetores do tipo alquilamina,tais como N-trifenilmetilamina e semelhantes; e grupos protetores do tipo sulfonamida, tais como metanossulfonamida e semelhantes.

[0984] Os grupos protetores podem ser removidos de acordo com um método conhecido na técnica (por exemplo, um método usando ácido, base, raios ultravioleta, hidrazina, fenil-hidrazina, N-metilditiocarbamato de sódio, fluoreto de tetrabutilamônio, acetato de paládio ou haleto de trialquilsilil (por exemplo, iodeto de trimetilsilil, brometo de trimetil silil), um método de redução).

[0985] Quando a reação de redução é realizada em cada etapa, os exemplos do agente redutor sendo usado incluem hidretos de metal tais como hidreto de alumínio e lítio, triacetoxiboro-hidreto de sódio, cianoboro-hidreto de sódio, hidreto de diisobutilalumínio (DIBAL-H), boro-hidreto de sódio, triacetoxiboro- hidreto de tetrametilamônio e semelhantes; boranos, tais como complexo de tetrahidrofurano borano e semelhantes; níquel Raney; cobalto Raney; hidrogênio; ácido fórmico; trietilsilano e semelhantes. Quando a ligação dupla de carbono- carbono ou a ligação tripla é reduzida, pode ser usado um método que usa um catalisador, tal como paládio-carbono, catalisador de Lindlar e semelhantes podem ser empregados.

[0986] Quando a reação de oxidação é realizada em cada etapa, os exemplos do agente de oxidação sendo usado incluem peróxidos, tal como ácido m-cloroperbenzoico (mCPBA), peróxido de hidrogênio, hidroperóxido de terc-butil e semelhantes; percloratos, tais como perclorato de tetrabutilamônio e semelhantes; cloratos, tais como clorato de sódio e semelhantes; cloretos, tais como cloreto de sódio e semelhantes; ácidos periódicos, tais como periodato de sódio e semelhantes; reagentes de iodina hipervalentes, tais como iodosilbenzeno e semelhantes; reagentes contendo manganês, tais como dióxido de manganês, permanganato de potássio e semelhantes; chumbo, tal como tetracetato de chumbo e semelhantes; reagentes contendo cromo , tais como clorocromato de piridínio (PCC), dicromato de piridínio (PDC), reagente de Jones e semelhantes; compostos de halogênio, tais como N-bromosuccinimida (NBS) e semelhantes; oxigênio; ozona; complexo de trióxido-piridina de enxofre; tetróxido de ósmio; dióxido de selênio; 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona (DDQ) e semelhantes.

[0987] Quando a reação de ciclização radical é realizada em cada etapa, os exemplos do iniciador radical sendo usado incluem compostos azo, tais como azobisisobutironitril (AIBN) e semelhantes; iniciadores radicais solúveis em água, tais como ácido 4,4'-azobis-4-cianopentanoico (ACPA) e semelhantes; trietilboro na presença de ar ou oxigênio; peróxido de benzoil e semelhantes. Os exemplos do reagente radical sendo usado incluem tributilstanano, tristrimetilsililsilano, 1,1,2,2- tetrafenildisilano, difenilsilano, iodeto de samário e semelhantes.

[0988] Quando a reação de Wtting é realizada em cada etapa, os exemplos do reagente de Witting sendo usado incluem fosforanos de alquilideno e semelhantes. Os fosforanos de alquilideno podem ser preparados de acordo com um método conhecido na técnica, por exemplo, ao reagir um sal de fosfônio com uma base forte.

[0989] Quando a reação de Horner-Emmons é realizada em cada etapa, os exemplos do reagente sendo usado incluem fosfonoacetatos, tais como metil dimetilfosfonoacetato, dietilfosfonoacetato de etil e semelhantes; e bases, tais como hidretos de metal alcalino, lítios orgânicos e semelhantes.

[0990] Quando a reação de Friedel-Crafts é realizada em cada etapa, os exemplos do reagente sendo usado incluem uma combinação de um ácido de Lewis e um cloreto de ácido ou uma combinação de um ácido de Lewis e um agente de alquilação (por exemplo, um haleto de alquil, um álcool, uma olefina). Alternativamente, pode também ser usado um ácido orgânico ou um ácido inorgânico ao invés de um ácido de Lewis, e um anidrido, tal comoanidrido acético e semelhantes pode ser usado ao invés de um cloreto de ácido.

[0991] Quando a reação de substituição nucleofílica aromática é realizada em cada etapa, um nucleófilo (por exemplo, uma amina, imidazol) e uma base (por exemplo, uma base orgânica) são usados como reagente.

[0992] Quando a reação de adição nucleofílica por um ânion carbo, a reação nucleofílica de adição-1,4 ( reação de adição de Michael ) por um ânion carbo ou reação de substituição nucleofílica por um ânion carbo é realizada em cada etapa, os exemplos da base a ser usada para geração do ânion carbo incluem lítio orgânico, alcóxido de metal, bases inorgânicas, bases orgânicas e semelhantes.

[0993] Quando o reagente de Grignard é realizado em cada etapa, os exemplos do reagente de Grignard sendo usado incluem halogenetos de arilmagnésio, tais como brometo de fenilmagnésio e semelhantes; haletos de alquilmagnésio, tais como brometo de metilmagnésioe semelhantes, e semelhantes. Oreagente de Grignard pode ser preparado de acordo com um método conhecido na técnica, por exemplo, ao reagir um haleto de alquil ou um haleto de aril com magnésio metálico em um éter ou tetrahidrofurano como um solvente.

[0994] Quando a reação de condensação de Knoevenagel é realizada em cada etapa, um composto tendo um grupo metileno ativado com dois grupos de remoção de elétrons (por exemplo, ácido molônico, malonato de dietil, malonitril, etc.) e uma base (por exemplo, uma base orgânica, um alcóxido metálico, uma base inorgânica) são usados como um reagente.

[0995] Quando a reação de Vilsmeier-Haack é realizada em cada etapa, o cloreto de fosforil e um derivado de amida (por exemplo, N, N-dimetilformamida etc.) são usados como reagentes.

[0996] Quando areação de um álcool, um haleto de alquil ou um sulfonato é realizada em cada etapa, os exemplos do agente de azidação sendo usado inclui difenilfosforilazida (DPPA), trimetilsililazida, azida de sódio e semelhantes. Por exemplo, para o agente de azidação de um álcool, um método usando difenilfosforilazida e 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU), um método usando trimetilsililazida e um ácido de Lewis, e semelhantes são empregados.

[0997] Quando a reação de aminação redutiva é realizada em cada etapa, os exemplos do agente de redução sendo usado incluem triacetoxiboroidreto de sódio, cianoboroidreto de sódio, hidrogênio e ácido fórmico. Quando o substrato é um composto de amina, os exemplos do composto de carbonil sendo usado incluem paraformaldeído, aldeídos, tais como acetaldeído e semelhantes, e cetonas, tais como ciclohexanona e semelhantes. Quando o substrato é um composto de carbonil, exemplos da amina sendo usada incluem amônia, aminas primárias, tais como metilamina e semelhantes; aminas secundárias, tais como dimetilamina e semelhantes, e semelhantes.

[0998] Quando a reação de Mitsunobu é realizada em cada etapa, um azodicarboxilato (por exemplo, azodicarboxilato de dietil (DEAD), azodicarboxilato de diisopropil (DIAD) etc.) e trifenilfosfina são usados como um reagente.

[0999] Quando a reação de esterificação, a reação de amidação ou ureação é realizada em cada etapa, os exemplos do reagente sendo usado incluemhaletos de acil, tais como um cloreto de ácido, brometos de ácido e semelhantes; ácidos carboxílicos ativados, tais como anidridos, ésteres ativados, sulfatos e semelhantes. Os exemplos do agente de ativação do ácido carboxílico incluem agentes de condensação de carbodiimida, tais como cloridrato de 1-etil-3-(3- dimetilaminorpopil)carbodiimida (WSCD) e semelhantes; agentes de condensação de tirazina, tais como n-hidrato de cloreto de 4-(4,6-dimetoxi-1,3,5-triazin-2-il)-4- metilmorfolínio (DMT-MM) e semelhantes; agentes de condensação de carbonato, tais como 1,1-carbonildiimidazol (CDI) e semelhantes; difenilfosforil azida (DPPA);sal de benzotriazol-1-iloxi-trisdimetilaminofosfônio (reagente BOP); iodeto de 2-cloro-1-metil-piridínio (reagente de Mukaiyama); cloreto de tionil; haloformatos de alquil inferiores, tais como cloroformato de etil e semelhantes; hexafluorofosforato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametilurônio(HATU); ácido sulfúrico; combinações dos mesmos e semelhantes. Quando um agente de condensação de carbodiimida é usado, um aditivo, tal como 1- hidroxibenzotriazol (HOBt), N-hidroxisuccinimida (HOSu), dimetilaminopiridina (DMAP) e semelhantes podem ser adicionados ao sistema de reação.

[1000] Quando a reação de acoplamento é realizada em cada etapa, os exemplos do catalisador metálico sendo usado incluem compostos de paládio, tal como acetato de paládio(II), tetracis(trifenilfosfina)paládio(0), diclorobis(trifenilfosfina)paládio(II), diclorobis(trietilfosfina)paládio(II), tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0), cloreto de 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno paládio(II) e semelhantes; compostos de níquel, tal como tetracis(trifenilfosfina)níquel(0) e semelhantes; compostos de ródio, tais como cloreto de tris(trifenilfosfina)ródio(III) e semelhantes; compostos de cobalto; compostos de cobre, tal como óxido de cobre, iodeto de cobre(I) e semelhantes; compostos de platina e semelhantes. Além disso, uma base pode ser adicionada ao sistema de reação, e os exemplos da mesma incluem bases inorgânicas e semelhantes.

[1001] Quando a reação de tiocarbonilação é realizada em cada etapa, o pentassulfureto de fósforo é tipicamenteusado como o agente de tiocarbonilação. Alternativamente, um reagente tendo uma estrutura de 1,3,2,4-ditiadifosfetano-2,4- dissulfeto (por exemplo, 2,4-bis(4-metoxifenil)-1,3,2,4-ditiadifosfetano-2,4- dissulfeto (reagente de Lawesson) etc.) pode ser usada ao invés de pentassulfeto de fósforo.

[1002] Quando a reação de Wohl-Ziegler é realizada em cada etapa, os exemplos do agente de halogenação sendo usado inclui N-iodossuccinimida, N- bromossuccinimida (NBS), N-clorossuccinimida (NCS), bromina, cloreto de sulfuril e semelhantes. Além disso, a reação pode ser acelerada ao submeter um iniciador radical, tal como calor, luz, peróxido de benzoil, azobisisobutironitril e semelhantes ao sistema de reação.

[1003] Quando a reação de halogenação de um grupo hidroxi é realizada em cada etapa, os exemplos do agente de halogenação sendo usado incluem ácidos hidrohálicos e haletos de ácido de ácidos inorgânicos, especificamente, ácido hidroclórico, cloreto de tionil, oxicloreto de fósforo e semelhantes para clorinação, 48% de ácido hidrobrômico e semelhantes para brominação. Adicionalmente, pode ser empregado um método para produzir um haleto de alquil ao reagir um álcool com trifenilfosfina e tetracloreto de carbono ou tetrabrometo de carbono ou semelhantes. Alternativamente, pode ser também empregado um método de produzir um haleto de alquil através de duas etapas compreendendo converter um álcool ao sulfonato correspondente, e então ao reagir o sulfonato com brometo de lítio, cloreto de lítio ou iodeto de sódio.

[1004] Quando a reação de Arbuzov realizada em cada etapa, os exemplos do reagente sendo usados incluem haletos de alquil, tais como bromoacetato de etil e semelhantes; fosfitos, tais como trietilfosfito , tri(isopropil) fosfito e semelhantes, e semelhantes.

[1005] Quando areação de esterificação com sulfonato é realizada em cada etapa, os exemplos doagente de sulfonação a ser usado incluem cloreto de metanossulfonil, cloreto de p-toluenossulfonil, anidrido metanossulfônico, anidrido p-toluenossulfônico e semelhantes.

[1006] Quando a reação de hidrólise é realizada em cada etapa, um ácido ou uma base é usado(a) como reagente. Os exemplos do ácido incluem 2,2,2- trifluoroacetato de piridina. Para a reação de hidrólise de ácido deéster t-butil, ácido fórmico, trietilsilano e semelhantes podem ser adicionados para reter de modo redutivo o cátion det-butil que é produzido parcialmente.

[1007] Quando a reação de desidratação é realizada em cada etapa, os exemplos do agente de desidratação sendo usado incluem ácido sulfúrico, pentóxido de difósforo, oxicloreto de fósforo, N, N'-diciclohexilcarbodiimida, alumina, ácido polifosfórico e semelhantes.

[1008] Os exemplos do grupo protetor para um grupo hidroxi sendo usado em cada etapa incluem grupos protetores do tipo éter tais como éter de bis(4- metoxifenil)(fenil)metil e semelhantes, além daqueles exemplificados acima.

[1009] Os exemplos do grupo de proteção para um grupo amino sendo usado em cada etapa incluem um grupo de proteção do tipo imida ida, tal como N,N-dimetilformimidamida e semelhantes, além daqueles exemplificados acima.

[1010] A reação de desproteção em cada etapa pode ser também realizada usando ácido acético 1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol, trihidrofluoreto de trietilamina, metilamina, 2-metilpropan-2-amina ou hidrogênio fluoreto-piridina, ácido trifluoroacético, ao invés daqueles exemplificados acima.

[1011] Quando a reação de rearranjo é realizada em cada etapa, os exemplos do reagente a ser usado incluem bases tais como trietilamina e semelhantes.

[1012] Quando a reação de fosforamidita é realizada em cada etapa, um agente de fosforamidização (por exemplo, fosforodiamidatos, tais como 3- ((bis(diisopropilamino)fosfino)oxi)propanonitril e semelhantes, clorofosforamidatos, tais como 2-cianoetil diisopropilclorofosforamidato e semelhantes) e uma base (por exemplo, bases orgânicas) são usadas como reagente.

[1013] Quando a reação de tiofosforamidato é realizada em cada etapa, um agente tiofosforamidificante (por exemplo, 2-cianoetil dipropan-2- ilfosforamidocloridotioito) e uma base (por exemplo, bases orgânicas) são usados como reagente.

[1014] Quando a reação de H-fosfonação é realizada em cada etapa, os exemplos do agente de H-fosfonação sendo usado incluem difenil fosfito e semelhantes.

[1015] Quando a reação de H-tiofosfonação é realizada em cada etapa, os exemplos do agente H-tiofosfonante sendo usado incluem uma combinação de um ativador tal como difenil fosfito e semelhantes e uma fonte de átomos de enxofre tal como sulfureto de lítio e semelhantes, e semelhantes.

[1016] Quando a reação de condensação realizada em cada etapa, os exemplos do ativador sendo usado incluem 2,2,2-trifluoroacetato de piridina, 1H- tetrazol, 5-(etilsulfanil) -1H-tetrazol (daqui em diante por vezes a ser referido como 5- (etilsulfanil) -2H-tetrazol) e semelhantes.

[1017] Quando a reação de oxidação realizada em cada etapa, os exemplos do agente de oxidação sendo usado incluem halogênios, tais como iodina e semelhantes, geralmente usados para síntese de ácido nucleico, e semelhantes, além daqueles exemplificados acima.

[1018] Quando a reação de sulfurização é realizada em cada etapa, os exemplos do agente de sulfurização sendo usado incluem 3H-benzo[c][1,2]ditiol-3- ona, 1,1-dióxido de 3H-benzo[c][1,2]ditiol-3-ona, ((dimetilamino-metilideno)amino)- 3H-1,2,4-ditiazolina-3-tiona e semelhantes. Além disso, por exemplo, supensão de enxofre-2,6- lutidina, solução de dissulfeto de enxofre-carbono, dissulfeto de tetrametiltiuram (TED) (H. Vu et al., Tetrahedron Lett., 32, 3005-3008 (1991)), Beauge's reagent (R.P. Lyer et al., J. Am. Chem. Soc., 112, 1253-1254 (1990)) e o reagente de Lawesson pode também ser usado para reação de sulfurização. Alémdisso, uma vez que um método de formação da estrutura de fosforoditioato, o documento de Marshall et al. (Science 259: 1564-1570, 1993) e o documento de Caruthers e Nielsen et al (WO 1989/011486) podem ser usados como referência.

[1019] Quando a reação de ciclização é realizada em cada etapa, os exemplos do ativador sendo usado incluem 2-óxido de 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2- dioxafosfinano, cloreto de pivaloil, hexfluorato de 2-(benzoiltriazol-1-iloxi)-1,3- dimetil-2-pirrolidin-1-il-1,3,2-diazafosfolidinío (BOMP), cloreto de N,N-bis(2- oxazolidinil)fosfônico (BopCl), ácido pirofosfórico e semelhantes. Quando um ativador não é usado, a reação pode ser realizada sob aquecimento. Além disso, uma base pode ser adicionada ao sistema de reação. Os exemplos da base incluem bases orgânicas e semelhantes.

[1020] Quando a reação de formação de ligação entre nucleobase e ribose é realizada em cada etapa, os exemplos do ativador sendo usado incluem trimetilsilil N-(trimetilsilil)acetimidato, trifluorometanossulfonato de trimetilsilil e semelhantes.

[1021] Quando a estrutura parcial:

[1022] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIA): o composto (IA) pode ser produzido a partir do composto (1a) ou (1b) e composto (2a) ou (2b) de acordo com o método abaixo. em que PGa é um grupo protetor de hidroxi, e os outros símbolos são conforme definidos acima.

[1023] Alternativamente, quando a estrutura parcial: é a estrutura parcial representada pela fórmula (IIA), o composto (IA) também pode ser produzido a partir do composto (8a) ou (8b) e composto (9a) ou (9b) de acordo com o método abaixo. em que PGb é um grupo protetor de hidroxi, e os outros símbolos são conforme definidos acima.

[1024] Quando a estrutura parcial:

[1025] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIB): o composto (IB) pode ser produzido a partir do composto (15a) ou (15b) e composto (2a) ou (2b) de acordo com o método abaixo. em que cada símbolo é conforme definido acima.

[1026] Alternativamente, quando a estrutura parcial: é a estrutura parcial representada pela fórmula (IIB), o composto (IB) pode também ser produzido a partir do composto (8a) ou (8b) e o composto (21a) ou (21b), de acordo com o método abaixo. em que PGc é um grupo de proteção de hidroxi, e os outros símbolos são conforme definidos acima.

[1027] Os exemplos preferidos do grupo protetor de hidroxi para PGa, PGb ou PGc incluem grupos de proteção do tipo éter, tais como éter de bis(4- metoxifenil)(fenil)metil, éter de 3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxanil e semelhantes.

[1028] Quando R1 e R2 são, cada um, um grupo hidroxi, o grupo hidroxi pode ser protegido. Os exemplos preferenciais do grupo protetor de hidroxi incluem grupos protetores do tipo éter, tais como o éter terc-butildimetilsilílico, o éter 3- hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxanílico e semelhantes.

[1029] Quando R1 é um grupo hidroxil, o grupo hidroxil e o grupo hidroxil representado por PGa podem ser protegidos por um grupo 1,1,3,3- tetraisopropildisiloxanil:

[1030] Neste caso, um componente em que o grupo hidroxil R1 é protegido por um grupo 3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxanil: é produzido na reação de desproteção para remoção de PGa.

[1031] Quando B1 tem um grupo funcional, o grupo funcional pode ser protegido. Por exemplo, quando B1 é um grupo representado por

[1032] R14 é um grupo -NH2, o grupo -NH2 pode ser protegido. Além disso, por exemplo, quando B1 é um grupo representado por o grupo -NH2 pode ser protegido.

[1033] Quando B2 tem um grupo funcional, o grupo funcional pode ser protegido. Por exemplo, quando B2 é um grupo representado por

[1034] R24 é um grupo -NH2, o grupo -NH2 pode ser protegido. Além disso, por exemplo, quando B2 é um grupo representado por o grupo -NH2 pode ser protegido.

[1035] Os exemplos preferidos do grupo protetor para o grupo -NH2 incluem grupos protetores do tipo amida, tais como benzamida, isobutilamida e semelhantes, e grupos protetores do tipo imidamida, tais como N, N- dimetilformimidamida e semelhantes.

[1036] Os compostos (1a), (1b), (9a) e (9b) podem ser produzidos a partir do composto (27), de acordo com o metodo abaixo. em que cada símbolo é conforme definido acima.

[1037] Os compostos (2a), (2b), (8a) e (8b) mencionados acima podem ser produzidos a partir do composto (29) de acordo com o método abaixo. em que cada símbolo é conforme definido acima.

[1038] Os compostos (15a), (15b), (21a) e (21b) mencionados acima podem ser produzidos a partir do composto (31), de acordo com o método abaixo. em que cada símbolo é conforme definido acima.

[1039] O substituinte do composto (I) então obtido pode ser submetido a modificação (isto é, introdução de substituinte, transformação de grupo funcional) de acordo com um método conhecido na técnica para dar o outro composto ou um sal do mesmo englobado no Composto (I). Os métodos gerais podem ser empregados para introdução de substituintes e transformação de grupo funcional, e exemplos dos mesmos incluem conversão de um átomo de halogênio (por exemplo, fluorina, clorina, bromina, iodina) ou um grupo C1-6 alquilsulfoniloxi halogenado [por exemplo, metanossulfoniloxi, etanossulfoniloxi, triclorometanossulfoniloxi, trifluorometanossulfoniloxi (triflato)] a um grupo metil, um grupo ciclopropil, um grupo vinil, um grupo ciano, um grupo formil, um grupo carbonil, um grupo carboxil, um grupo hidroxi, um grupo amino, um grupo boril e semelhantes; conversão de um grupo formil para um grupo etinil por reação de homologação de Seyferth-Gilbert; conversão de um éster a um grupo carboxi por hidrólise; conversão de um grupo carboxi para um carbamoil por amidação; conversão de um grupo carboxi para um grupo hidroximetil por redução; conversão de um grupo carbonil para um álcool por redução ou alquilação; aminação redutiva de um grupo carbonil; oximação de um grupo carbonil; acilação de um grupo amino; ureação de um grupo amino; sulfonilação de um grupo amino; alquilação de um grupo amino; substituição ou aminação de um halogênio ativado por uma amina; alquilação de um grupo hidroxi; e substituição ou aminação de um grupo hidroxi.

[1040] Caso de introdução do substituinte e transformação de grupo funcional, quando o composto tem uma fração reativa na qual uma reação indesejável pode ocorrer, um grupo de proteção pode ser introduzido na fração da fração reativa antecipadamente de acordo com um método conhecido na técnica conforme necessário. Ao remover o grupo protetor de acordo com um método conhecido na técnica após a reação objetiva , o composto abrangido na presente divulgação pode ser produzido.

[1041] Por exemplo, quando o composto de matéria-prima ou intermediário tem um grupo amino, um grupo carboxil ou um grupo hidroxil, estes grupos podem ser protegidos por um grupo de proteção geralmente usado em química de peptídeos e semelhantes. Ao remover o grupo protetor conforme necessário após a reação, o composto objetivo pode ser obtido.

[1042] Quando o composto (I) contém um isômero, tal como um isômero ótico, um estereoisômero, um regioisômero, um rotâmero e semelhantes, qualquer isômero e uma mistura dos mesmos são também abrangidos no composto (I) neste documento. Por exemplo, quando o composto (I) contém um isômero ótico, um isômero ótico dissipado a partir do composto de racemato é também abrangido no composto (I) neste documento. Estes isômeros podem ser obtidos como um único produto de acordo com um método sintético conhecido na técnica e um método de separação conhecido na técnica (por exemplo, concentração, extração com solvente, cromatografia em coluna e recristalização).

[1043] O composto (I) pode ser um cristal, e uma única forma de cristal e uma mistura de formas cristalinas são ambas abrangidas no composto(I) neste documento. O cristal pode ser produzido por cristalização de acordo com um método de cristalização conhecido na técnica.

[1044] O composto (I) pode ser um cocristal farmaceuticamente aceitável ou um sal do mesmo. O cocristal ou um sal do mesmo significa uma substância cristalina constituída por dois ou mais sólidos especiais à temperatura ambiente, tendo, cada um, propriedades físicas diferentes (por exemplo, estrutura, ponto de fusão, calor de fusão, higroscopicidade e estabilidade). O cocristal ou um sal do mesmo pode ser produzido de acordo com um método de cocristalização conhecido na técnica.

[1045] O composto (I) pode ser um hidrato, um não hidrato, um solvato ou um não solvato, e todos são abrangidos no composto (I).

[1046] O composto (I) também abrange um composto marcado ou substituído por um isótopo (por exemplo, 2H, 3H, 11C, 14C, 18F, 35S, 125I) e semelhantes. O composto marcado ou substituído por um isótopo pode ser usado, por exemplo, como um marcador (marcador PET) usado em tomografia por emissão de pósitron (PET)e é útil no campo de diagnósticos médicos e semelhantes.

[1047] O composto (I) pode ser um pró-fármaco.

[1048] O pró-fármaco do composto (I) significa um composto que é convertido para o composto (I) com uma reação devido a uma enzima, ácido gástrico e semelhantes sob a condição fisiológica no corpo vivo, ou seja, um composto no qual é convertido para um composto (I) em oxidação enzimática, redução, hidrólise e semelhantes; um composto que é convertido para composto (I) por hidrólise e semelhantes devido ao ácido gástrico e semelhantes.

[1049] Os exemplos do pró-fármaco para o composto (I) incluem [1] um composto obtido ao submeter o amino no composto (I) a acilação, alquilação ou fosforilação (por exemplo, um composto obtido ao submeter o amino no composto (I) a eicosanoilação, alanilação, pentilaminocarbonilação, (5-metil-2- oxo-1,3-dioxolen-4-il)metoxicarbonilação, tetrahidrofuranilação, pirrolidilmetilação, pivaloiloximetilação, terc-butilação, etoxicarbonilação, carbonilaçãodeterc-butoxi, acetilação ou carbonilação de ciclopropil); [2] um composto obtido ao submeter a hidroxi no composto (I) a acilação, alquilação, fosforilação ou boração (por exemplo, um composto obtido ao submeter a hidroxi ao composto (I) para acetilação, palmitoilação, propanoilação, pivaloilação, succinilação, fumarilação, alanilação ou dimetilaminometilcarbonilação); [3] um composto obtido ao submeter o carboxi no composto (I) a esterificação ou amidação (por exemplo, um composto obtido ao submeter o carboxi no composto (I) a esterificação com etil, esterificação com fenil, esterificação com carboximetil, esterificação de dimetilaminometil, esterificação de pivaloiloximetil, esterificação de etoxicarboniloxietil, esterificação de ftalidil, esterificação de (5-metil-2-oxo-1,3-dioxolen-4-il)metil, esterificação de ciclohexiloxicarboniletil ou metilamidação). Estes compostos podem ser produzidos a partir do composto (I) de acordo com um método conhecido na técnica.

[1050] O pró-fármaco do composto (I) pode também ser um que é convertido no composto (I) sob condições fisiológicas conforme descrito em "IYAKUHIN no KAIHATSU (Development of Pharmaceuticals)", Vol. 7, Design of Molecules, p. 163-198, Publicado por HIROKAWA SHOTEN (1990).

[1051] No presente relatório descritivo, o pró-fármaco pode estar na forma de um sal, e exemplos de tal sal inclui aqueles semelhantes aos sais do composto representado pela fórmula (I).

[1052] O composto (I) pode também ser usado como uma carga útil em um conjugado de anticorpo (ou sequência de reconhecimento de antígeno peptídico)- fármaco (a carga é a fração correspondente ao fármaco mencionado acima). Quando o composto (I) é usado como carga útil, o composto (I) pode ser ligado a um anticorpo (ou a uma sequência peptídica de reconhecimento do antígeno) através de um ligante peptídico.

[1053] Os exemplos da carga útil mencionada acima incluem [1] composto (I), em que B1 é um grupo representado por [2] composto (I), em que B2 é um grupo representado por

[1054] Quando o composto (I) é usado como carga útil, o composto (I) pode ser convertido em um conjugado de anticorpo (ou sequência de reconhecimento de antígeno peptídico), como se segue. (1) B1 na fórmula (I) é convertido em um grupo representado por

[1055] B2 na fórmula (I) é convertido em um grupo representado por em que

[1056] Ra e Rb são, cada um, independentemente (i) um grupo C1-6 alquil, (ii) um grupo acil ou (iii) um grupo representado pela fórmula: em que

[1057] R é uma ligação de ligante peptídico a um anticorpo ou uma sequência de reconhecimento de antígeno peptídico (a ligação é uma ligação covalente entre o ligante peptídico e o grupo funcional na cadeia lateral do anticorpo da sequência de reconhecimento de antígeno peptídico), e

[1058] cada R' é um átomo de hidrogênio ou um substituinte.

[1059] (2) R1 e R2 na fórmula (I) são, cada um, independentemente convertidos em um grupo representado pela fórmula: -OR3 em que R3 [é

[1060] (i) um grupo C1-6 alquil,

[1061] (ii) um grupo acil (preferencialmente um grupo C1-6 alcoxi-carbonil),

[1062] (iii) um grupo representado pela fórmula:

[1063] (iv) um grupo representado pela fórmula:

[1064] (v) um grupo representado pela fórmula:

[1065] (vi) um grupo representado pela fórmula:

[1066] (vii) um grupo representado pela fórmula:

[1067] (viii) um grupo representado pela fórmula:

[1068] (ix) um grupo representado pela fórmula:

[1069] em que cada R e cada R' nas fórmulas são, cada um, conforme definido acima.

[1070] (3) Q2H e Q4H na fórmula (I) são, cada um, independentemente convertidos em

[1071] (i) um grupo representado pela fórmula: -SR4 em que R4 é

[1072] (a) um grupo C1-6 alquil,

[1073] b) um grupo acil,

[1074] (c) um grupo representado pela fórmula: -SR,

[1075] (d) um grupo representado pela fórmula:

[1076] (e) um grupo representado pela fórmula:

[1077] (f) um grupo representado pela fórmula:

[1078] (g) um grupo representado pela fórmula:

[1079] (h) um grupo representado pela fórmula:

[1080] (i) um grupo representado pela fórmula:

[1081] (ii) um grupo representado pela fórmula: -OR5 em que R5 é

[1082] (a) um grupo C1-6 alquil,

[1083] b) um grupo acil,

[1084] (c) um grupo representado pela fórmula:

[1085] (d) um grupo representado pela fórmula:

[1086] (e) um grupo representado pela fórmula:

[1087] (f) um grupo representado pela fórmula:

[1088] (iii) um grupo representado pela fórmula: -NHR6 em que R6 é

[1089] (a) um grupo C1-6 alquil,

[1090] b) um grupo acil,

[1091] (c) um grupo representado pela fórmula:

[1092] (d) um grupo representado pela fórmula:

[1093] (e) um grupo representado pela fórmula: em que cada R e cada R' nas fórmulas são, cada um, conforme definido acima.

[1094] Além disso, quando o composto (I) é usado como carga útil, o agente de ligação descrito em Chem. Rev., 114, 9154-9218 (2014), Pharma. Res. 32, 3526-3540 (2015), Bioconjugate Chem. 21, 5-13 (2010), The AAPS journal, 17, 339 351 (2015), WO 2011/005761 e semelhantes podem ser usados.

[1095] A divulgação também fornece as seguintes modalidades em particular.

[1096] Modalidade 1. Composto tendo a Fórmula (I): ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, em que:

[1097] a estrutura parcial representada pela fórmula (A-1):

[1098] é uma estrutura parcial representada pela fórmula (IIA) ou fórmula (IIB):

[1099] R1 e R2 são, cada um, independentemente um grupo hidroxi ou um átomo de halogênio;

[1100] B1 é um grupo representado pela fórmula (B1-A) ou fórmula (B1-B):

[1101] R13, R14, R15, R16 e R17 são cada um independentemente um átomo de hidrogênio ou um substituinte;

[1102] Y11, Y12, Y13, Y14, Y15 e Y16 são, cada um, independentemente N ou CR1a;

[1103] Z11, Z12, Z13, Z14, Z15 e Z16 são, cada um, independentemente N ou C;

[1104] R1a é um átomo de hidrogênio ou um substituinte;

[1105] B2 é um grupo representado pela fórmula (B2-A) ou fórmula (B2-B):

[1106] R23, R24, R25, R26 e R27 são, cada um, independentemente selecionados dentre um átomo de hidrogênio ou um substituinte;

[1107] Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 são, cada um, independentemente N ou CR2a;

[1108] Z21, Z22, Z23, Z24, Z25 e Z26 são, cada um, independentemente N ou C;

[1109] R2a é um átomo de hidrogênio ou um substituinte;

[1110] X1 e X2 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre; e

[1111] Q1, Q2, Q3 e Q4 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre. desde que:

[1112] pelo menos, um de B1 e B2 é: em que:

[1113] R18 é hidrogênio ou C1-6 alquil; e

[1114] R19 é um átomo de halogênio.

[1115] Modalidade 2. Composto de acordo com a Modalidade 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R19 é flúor ou cloro.

[1116] Modalidade 3. Composto de acordo com as Modalidades 1 ou 2 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, tendo a fórmula (X):

[1117] Modalidade 4. Composto de acordo com as Modalidades 1 ou 2 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, tendo a fórmula (XI).

[1118] Modalidade 5. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1-4, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R1 é um grupo hidroxi.

[1119] Modalidade 6. Composto de qualquer uma das Modalidades 1-4, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que R1 é átomo de flúor.

[1120] Modalidade 7. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1-3, 5 ou 6, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R2 é um grupo hidroxil.

[1121] Modalidade 8. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1-3, 5 ou 6, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R2 é um átomo de flúor.

[1122] Modalidade 9. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1-8, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que Q4 é um átomo de enxofre.

[1123] Modalidade 10. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1-9, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que Q2 é um átomo de oxigênio.

[1124] Modalidade 11. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1-9, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que Q2 é um átomo de enxofre.

[1125] Modalidade 12. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1-3 ou 5-11, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, tendo a fórmula (XII):

[1126] Modalidade 13. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1, 2, 4-6, ou 9-11, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, tendo a fórmula (XIII):

[1127] Modalidade 14. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1-13 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B1 é:

[1128] Modalidade 15. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1-13, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B2 é:

[1129] Modalidade 16. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 2-15, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R19 é um átomo de flúor.

[1130] Modalidade 17. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1-16, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R18 é hidrogênio.

[1131] Modalidade 18. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1-16, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R18 é metil.

[1132] Modalidade 19. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 14 ou 16-18, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B2 é selecionado dentre o grupo que consiste em:

[1133] cada um dos quais é opcionalmente e independentemente substituído em:

[1134] (i) qualquer átomo de carbono disponível por um grupo halo, alquil C1-6 , alcoxi C1-6 , alquiltio C1-6 ou amino; e/ou

[1135] (ii) qualquer átomo de nitrogênio disponível por um grupo alquil C1-6

[1136] Modalidade 20. Composto de acordo com a Modalidade 19, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B2 é selecionado dentre o grupo que consiste em:

[1137] Modalidade 21. Composto da Modalidade 20, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B2 é selecionado dentre o grupo que consiste em:

[1138] Modalidade 22. Composto de acordo com a Modalidade 21, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B2 é selecionado dentre o grupo que consiste em:

[1139] Modalidade 23. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 15-18, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B1 é selecionado dentre o grupo que consiste em: cada um dos quais é opcionalmente e independentemente substituído em: (i) qualquer átomo de carbono disponível por um grupo halo, alquil C1-6, alcoxi C1-6, alquiltio C1-6 ou amino; e/ou (ii) qualquer átomo de nitrogênio disponível por um grupo alquil C1-6.

[1140] Modalidade 24. Composto de acordo com a Modalidade 23, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B1 é selecionado dentre o grupo que consiste em:

[1141] Modalidade 25. Composto de acordo com a Modalidade 24, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B1 é selecionado dentre o grupo que consiste em:

[1142] Modalidade 26. Composto de acordo com a Modalidade 25, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B1 é selecionado dentre o grupo que consiste em:

[1143] Modalidade 27. Composto de acordo com a Modalidade 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado dentre o grupo que consiste em:

[1144] Modalidade 28. Composto de acordo com a Modalidade 27, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado dentre o grupo que consiste em:

[1145] Modalidade 29. Composto de acordo com a Modalidade 27, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado dentre o grupo que consiste em:

[1146] Modalidade 30. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1-29, em que o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo é o sal de trietilamina ou um sal de sódio, por exemplo, o sal de ditrietilamina ou sal dissódico.

[1147] Modalidade 31. Composição farmacêutica compreendendo o composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1-30, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[1148] Modalidade 32. Um composto tendo a Fórmula (XIV): (CD-L)nA (XIV) ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, em que:

[1149] CD é um grupo representado por qualquer uma das Fórmula (XX) - (XXIX):

[1150] R1 e R2 são, cada um, independentemente um grupo hidroxi, hidrogênio, grupo amino ou um átomo de halogênio;

[1151] B3 e B4 são independentemente um grupo heterocíclico aromático de 5 a 14 membros opcionalmente substituído;

[1152] X1 e X2 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio, CH2, ou um átomo de enxofre;

[1153] Q1, Q2, Q3 e Q4 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre;

[1154] L é um ligante peptídico;

[1155] A é um anticorpo, fragmento de anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno; e

[1156] n é 1-10.

[1157] Modalidade 33. Composto de acordo com a Modalidade 32, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R1 e R2 são cada um independentemente um grupo hidroxi ou um átomo de halogênio.

[1158] Modalidade 34. Composto de acordo com a Modalidade 32 ou 33, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, em que X1 e X2 são cada um independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.

[1159] Modalidade 35. O composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 31-34, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que Q1 e Q3 são um átomo de oxigênio.

[1160] Modalidade 36. Composto de acordo com a Modalidade 32, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XX-A):

[1161] Modalidade 37. Composto de acordo com Modalidade 32, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXI-A):

[1162] Modalidade 38. Composto de acordo com a Modalidade 32, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXII-A):

[1163] Modalidade 39. Composto de acordo com a Modalidade 32, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXIII-A):

[1164] Modalidade 40. Composto de acordo com a Modalidade 32, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXIV-A):

[1165] Modalidade 41. Composto de acordo com a Modalidade 32, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXV-A):

[1166] Modalidade 42. Composto de acordo com a Modalidade 32, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXVI-A):

[1167] Modalidade 43. Composto de acordo com a Modalidade 32, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXVII-A):

[1168] Modalidade 44. Composto de acordo com a Modalidade 32, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXVIII-A):

[1169] Modalidade 45. Composto de acordo com a Modalidade 32, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXIX-A):

[1170] Modalidade 46. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 32-45, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:

[1171] L é -X3-T-Z-Q-;

[1172] X3 é -(CH2)o-,

[1173] o é 1, 2 ou 3; ou

[1174] X3 está ausente;

[1175] T é um peptídeo ou está ausente;

[1176] Z é um espaçador;

[1177] O Q é um grupo heterobifuncional ou grupo heterotrifuncional, ou está ausente.

[1178] Modalidade 47. Composto de acordo com a Modalidade 46, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, tendo a fórmula (XXX):

[1179] Modalidade 48. Composto de acordo com a Modalidade 46, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, tendo a fórmula (XXXI):

[1180] Modalidade 49. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 46-48, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:

[1181] X3 é

[1182]

[1183] T é e

[1184] R10a e R10b são independentemente selecionados dentre o grupo que consiste em hidrogênio e C1-6 alquil opcionalmente substituído.

[1185] Modalidade 50. Composto de acordo com a Modalidade 49, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:

[1186] X3 é

[1187] Modalidade 51. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 46-50, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: o

[1188] Z é ou -(CH2CH2O)s-;

[1189] m é 1, 2, 3, 4, 5, ou 6; e

[1190] n é 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10.

[1191] Modalidade 52. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 46-48, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:

[1192] X3 é -CH2-;

[1193]

[1194] Z é ; e

[1195] p é 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10.

[1196] Modalidade 53. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 46-48, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:

[1197] X3 é -CH2CH2-;

[1198] Z é

[1199] q é 1, 2, 3, 4, 5 ou 6; e

[1200] r é 1, 2, 3, 4, 5 ou 6.

[1201] Modalidade 54. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 46-53, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:

[1202] Q é um grupo heterobifuncional selecionado dentre o grupo que consiste em:

[1203] R29 é hidrogênio ou C1-6 alquil;

[1204] R30a e R30b são independentemente selecionados dentre o grupo que consiste em hidrogênio, alquil C1-6 , halo, -C(=O)OR29, -NH2, C1-6 alcoxi, -CN, -NO2, e -OH;

[1205] R31a e R31b são independentemente selecionados dentre o grupo que consiste em hidrogênio, alquil C1-6 , halo, -C(=O)OR29, -NH2, -N(CH3)2, C1-6 alcoxi, -CN, -NO2, e -OH; e

[1206] * indica o ponto de ligação a qualquer átomo de carbono disponível, átomo de nitrogênio, átomo de oxigênio, ou átomo de enxofre ligado ao anticorpo, fragmento de anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno.

[1207] Modalidade 55. Composto de acordo com a Modalidade 51, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, tendo a fórmula (XXXII):

[1208] em que:

[1209] R10a e R10b são independentemente C1-3 alquil; e

[1210] m é 2, 3, 4 ou 5.

[1211] Modalidade 56. Composto de acordo com a Modalidade 55, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, tendo a fórmula (XXXIII):

[1212] em que p é 4, 5 ou 6.

[1213] Modalidade 57. Composto de acordo com a Modalidade 56, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, tendo a fórmula (XXXIV):

[1214] em que:

[1215] q é 1, 2 ou 3; e

[1216] r é 1, 2 ou 3.

[1217] Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 32-57, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que n é 2-8.

[1218] Modalidade 59. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 32-58, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B3 e B4 são independentemente um heterocíclico aromático bicíclico fundido de 8 a 14 membros opcionalmente substituído.

[1219] Modalidade 60. Composto de acordo com a Modalidade 59, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:

[1220] B3 é um grupo representado pela fórmula (B3-A) ou fórmula (B3-B):

[1221] R13, R14, R15, R16 e R17 são cada um independentemente um átomo de hidrogênio ou um substituinte;

[1222] Y11, Y12, Y13, Y14, Y15 e Y16 são, cada um, independentemente N ou CR1a;

[1223] Z11, Z12, Z13, Z14, Z15 e Z16 são, cada um, independentemente N ou C;

[1224] R1a é um átomo de hidrogênio ou um substituinte;

[1225] B4 é um grupo representado pela fórmula (B4-A) ou fórmula (B4-B):

[1226] R23, R24, R25, R26 e R27 são, cada um, independentemente selecionados dentre um átomo de hidrogênio ou um substituinte;

[1227] Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 são, cada um, independentemente N ou CR2a;

[1228] Z21, Z22, Z23, Z24, Z25 e Z26 são, cada um, independentemente N ou C;

[1229] R2a é um átomo de hidrogênio ou um substituinte.

[1230] Modalidade 61. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 32-60, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que pelo menos um de B3 ou B4 é:

[1231] R18 é hidrogênio ou C1-6 alquil; e

[1232] R19 é um átomo de halogênio.

[1233] Modalidade 62. Composto de acordo com a Modalidade 61, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B3 é:

[1234] Modalidade 63. Composto de acordo com a Modalidade 61, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B4 é:

[1235] Modalidade 64. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 61-63, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R19 é um átomo de flúor.

[1236] Modalidade 65. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 61-64, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R18 é hidrogênio.

[1237] Modalidade 66. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 61-64, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R18 é metil.

[1238] Modalidade 67. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 62 ou 64-66, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B4 é selecionado dentre o grupo que consiste em:

[1239] cada um dos quais é opcionalmente e independentemente substituído em:

[1240] (i) qualquer átomo de carbono disponível por um grupo halo, alquil C1-6 , alcoxi C1-6 , alquiltio C1-6 ou amino; e/ou

[1241] (ii) qualquer átomo de nitrogênio disponível por um grupo alquil C1-6

[1242] Modalidade 68. Composto de acordo com a Modalidade 67, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B4 é selecionado dentre o grupo que consiste em:

[1243] Modalidade 69. Composto de acordo com a Modalidade 68, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B4é selecionado dentre o grupo que consiste em:

[1244] Modalidade 70. Composto de acordo com a Modalidade 69, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B4 é selecionado dentre o grupo que consiste em:

[1245] Modalidade 71. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 63-66, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B3 é selecionado dentre o grupo que consiste em:

[1246] cada um dos quais é opcionalmente e independentemente substituído em:

[1247] (i) qualquer átomo de carbono disponível por um grupo halo, alquil C1-6 , alcoxi C1-6 , alquiltio C1-6 ou amino; e/ou

[1248] (ii) qualquer átomo de nitrogênio disponível por um grupo alquil C1-6

[1249] Modalidade 72. Composto de acordo com a Modalidade 71, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B3 é selecionado dentre o grupo que consiste em:

[1250] Modalidade 73. Composto de acordo com a Modalidade 72, ou um mesmo, em que B3 é selecionado dentre o grupo que consiste em:

[1251] Modalidade 74. Composto de acordo com a Modalidade 73, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B3 é selecionado dentre o grupo que consiste em:

[1252] Modalidade 75. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 32-39, 44 ou 46-74, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que Q2 é um átomo de oxigênio.

[1253] Modalidade 76. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 32-39, 44, ou 46-74, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que Q2 é um átomo de enxofre.

[1254] Modalidade 77. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 32-35, 40-43, 45, 46, 49-54 ou 58-74, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que Q4 é um átomo de oxigênio.

[1255] Modalidade 78. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 32-35, 40-43, 45, 46, 49-54 ou 58-74, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que Q4 é um átomo de enxofre.

[1256] Modalidade 79. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 32-78, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 e X2 são um átomo de oxigênio e R1 e R2 são independentemente um grupo hidroxi, um átomo de flúor ou um átomo de cloro.

[1257] Modalidade 80. Composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 32-79, ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que o anticorpo é um anticorpo anti-GCC. Os anticorpos que se ligam a guanilil ciclase humana C (GCC) são divulgados, por exemplo, em US 20130315923 e WO 2011050242.

[1258] Modalidade 81. Composto de acordo com a Modalidade 80, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que o anticorpo anti-GCC compreendendo uma região de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos SEQ. ID. NO: 1.

[1259] Modalidade 82. Composto de acordo com a Modalidade 80 ou 81, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que o anticorpo anti-GCC compreendendo uma região de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos SEQ. ID. N° 2.

[1260] Modalidade 83. Composição farmacêutica compreendendo o composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 32-82, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[1261] Modalidade 84. Método de tratar um paciente compreendendo administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1-30 ou 32-82, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que o paciente tem câncer.

[1262] Modalidade 85. Método de acordo com a Modalidade 84, em que o câncer é qualquer um ou mais dos cânceres da Tabela 7.

[1263] Modalidade 86. Método de acordo com a Modalidade 85, em que o câncer é selecionado dentre o grupo que consiste em tumor sólido e linfoma.

[1264] Modalidade 87. O método de qualquer uma das Modalidades 84-86 compreende ainda a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um segundo agente terapêutico útil no tratamento de câncer.

[1265] Modalidade 88. A composição farmacêutica das Modalidades 31 ou 83 para utilização no tratamento do câncer.

[1266] Modalidade 89. A composição farmacêutica da Modalidade 88, em que o câncer é um ou mais dos cânceres da Tabela 7.

[1267] Modalidade 90. A composição farmacêutica da Modalidade 88, em que o câncer é selecionado do grupo que consiste em tumor sólido e linfoma.

[1268] Modalidade 91. Um composto de qualquer uma das Modalidades 1-30 ou 32-82, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para utilização no tratamento de câncer.

[1269] Modalidade 92. A composição farmacêutica da Modalidade 91, em que o câncer é um ou mais dos cânceres da Tabela 7.

[1270] Modalidade 93. A composição farmacêutica da Modalidade 91, em que o câncer é selecionado do grupo que consiste em tumor sólido e linfoma.

[1271] Modalidade 94. Utilização de um composto de qualquer uma das modalidades 1-30 ou 32-82, ou um sal farmaceuticamente aceitável, para a fabricação de um medicamento para o tratamento do câncer.

[1272] Modalidade 95. Utilização da Modalidade 94, em que o câncer é um ou mais dos cânceres da Tabela 7.

[1273] Modalidade 96. Utilização da Modalidade 94, em que o câncer é selecionado do grupo que consiste em tumor sólido e linfoma.

[1274] Modalidade 97. Um kit que compreende o composto de qualquer uma das modalidades 1-30 ou 32-82, ou um sal farmaceuticamente aceitável, e instruções para administrar o composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a um paciente com câncer.

[1275] Modalidade 98. Kit da Modalidade 97, em que o câncer é um ou mais dos cânceres da Tabela 7.

[1276] Modalidade 99. Kit da Modalidade 97, em que o câncer é selecionado do grupo que consiste em tumor sólido e linfoma.

[1277] Modalidade 100. Kit de qualquer uma das modalidades 97-99, compreendendo ainda um ou mais agentes terapêuticos adicionais.

[1278] Modalidade 101. Um composto com a fórmula (XL): CD-L1-R28 (XL) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:

[1279] CD é um grupo representado por qualquer uma das Fórmula (XX) - (XXIX):

[1280] R1 e R2 cada um independentemente um grupo hidroxi, hidrogênio, grupo amino ou um átomo de halogênio;

[1281] B3 e B4 independentemente um grupo heterocíclico aromático de 5 a 14 membros opcionalmente substituído;

[1282] X1 e X2 cada um independentemente um átomo de oxigênio, CH2, ou um átomo de enxofre;

[1283] Q1, Q2, Q3 e Q4 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre;

[1284] L1 é um ligante;

[1285] R28 é selecionado do grupo que consiste em -N3, -ONH2, -OH, -CN, - NO2, -CHO, -NR29C(=O)CH=CH2, -SH, -S(=O)2(CH=CH2), -NR29C(=O)CH2Br, - NR29C(=O)CH2I, -C(=O)NHNH2, -CO2H, -NH2, -C=CH,

[1286] R29 é hidrogênio ou C1-6 alquil;

[1287] R30a e R30b são independentemente selecionados do grupo consistindo de hidrogênio, alquil C1-6 , halo, -C(=O)OR29, -NH2, C1-6 alcoxi, -CN, - NO2, e -OH;

[1288] R31a e R31b são independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio, alquil C1-6 , halo, -C(=O)OR29, -NH2, -N(CH3)2, C1-6 alcoxi, -CN, -NO2, e -OH; e

[1289] o ligante é ligado a dinucleotídeo cíclico através de qualquer átomo de carbono, nitrogênio, oxigênio ou enxofre disponível.

[1290] Modalidade 102. Composto da Modalidade 101, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R1 e R2 são cada um independentemente um grupo hidroxi ou um átomo de halogênio.

[1291] Modalidade 103. Composto da Modalidade 101 ou 102, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que X1 e X2 são cada um independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre

[1292] Modalidade 104. O composto de qualquer uma das Modalidades 101-103, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que Q1 e Q3 um átomo de oxigênio.

[1293] Modalidade 105. Composto da Modalidade 101, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XX-A):

[1294] Modalidade 106. Composto da Modalidade 101, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXI-A):

[1295] Modalidade 107. Composto da Modalidade 101, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXII-A):

[1296] Modalidade 108. Composto da Modalidade 101, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXIII-A):

[1297] Modalidade 109. Composto da Modalidade 101, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXIV-A):

[1298] Modalidade 110. Composto da Modalidade 101, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXV-A):

[1299] Modalidade 111. Composto da Modalidade 101, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXVI-A):

[1300] Modalidade 112. Composto da Modalidade 101, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXVII-A):

[1301] Modalidade 113. Composto da Modalidade 101, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXVIII-A):

[1302] Modalidade 114. Composto da Modalidade 101, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXIX-A):

[1303] Modalidade 115. Composto de qualquer uma das Modalidades 101 114, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que: L1 é -X3-T-Z-;

[1304] X3 é -(CH2)o-,

[1305] o é 1, 2, ou 3; ou

[1306] X3 está ausente;

[1307] T é um peptídeo ou está ausente; e

[1308] Z é um espaçador.

[1309] Modalidade 116. Composto da Modalidade 115 ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que: X3 é T é ; e

[1310] R10a e R10b são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio e alquil C1-6 opcionalmente substituído.

[1311] Modalidade 117. O composto da modalidade 116, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que: X3 é

[1312] Modalidade 118. Composto de qualquer uma das Modalidades 115 117, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que: o

[1313] Z é ou -(CH2CH2O)s-;

[1314] m é 1,2, 3, 4, 5, ou 6; e

[1315] n é 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10.

[1316] Modalidade 119. Composto da Modalidade 115 ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que: X3 é -CH2-; Z é e p é 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10.

[1317] Modalidade 120. Composto da Modalidade 115 ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que:

[1318] X3 é -CH2CH2-;

[1319] Z é

[1320] q é 1, 2, 3, 4, 5 ou 6; e

[1321] r é 1, 2, 3, 4, 5 ou 6.

[1322] Modalidade 121. O composto de qualquer uma das Modalidades 101-120, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que B3 e B4 são independentemente um heterocíclico aromático bicíclico fundido de 8 a 14 membros opcionalmente substituído.

[1323] Modalidade 122. O composto da Modalidade 121, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que: B3 é um grupo representado pela fórmula (B3-A) ou fórmula (B3-B):

[1324] R13, R14, R15, R16 e R17 são cada um independentemente um átomo de hidrogênio ou um substituinte;

[1325] Y11, Y12, Y13, Y14, Y15 e Y16 são, cada um, independentemente N ou CR1a;

[1326] Z11, Z12, Z13, Z14, Z15 e Z16 são, cada um, independentemente N ou C;

[1327] R1a é um átomo de hidrogênio ou um substituinte;

[1328] B4 é um grupo representado pela fórmula (B4-A) ou fórmula (B4-B):

[1329] R23, R24, R25, R26 e R27 são, cada um, independentemente selecionados dentre um átomo de hidrogênio ou um substituinte;

[1330] Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 são, cada um, independentemente N ou CR2a;

[1331] Z21, Z22, Z23, Z24, Z25 e Z26 são, cada um, independentemente N ou C;

[1332] R2a é um átomo de hidrogênio ou um substituinte.

[1333] Modalidade 123. Composto de qualquer uma das Modalidades 101122, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que pelo menos um deB3 ou B4 é:

[1334] R18 é hidrogênio ou C1-6 alquil; e

[1335] R19 é um átomo de halogênio.

[1336] Modalidade 124. Composto da Modalidade 123, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que B3 é:

[1337] Modalidade 125. Composto da Modalidade 123, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que B4 é:

[1338] Modalidade 126. Composto de qualquer uma das Modalidades 123125, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que R19 é um átomo de flúor.

[1339] Modalidade 127. O composto de qualquer uma das Modalidades 123-126, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que R18 é hidrogênio.

[1340] Modalidade 128. O composto de qualquer uma das Modalidades 123-126, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que R18 é metil.

[1341] Modalidade 129. Composto de qualquer uma das Modalidades 124 ou 126-128, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que B4 selecionado do grupo que consiste em: cada um dos quais é opcionalmente e independentemente substituído em: (i) qualquer átomo de carbono disponível com um grupo halo , alquil C1-6, alcoxi C1-6 , alquiltio C1-6 ou amino; e/ou (ii) qualquer átomo de nitrogênio disponível com um grupo alquil C1-6 .

[1342] Modalidade 130. Composto da Modalidade 129, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que B4 selecionado do grupo que consiste em:

[1343] Modalidade 131. O composto da Modalidade 130, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que B4é selecionado do grupo que consiste em:

[1344] Modalidade 132. Composto da Modalidade 131, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que B4 selecionado do grupo que consiste em:

[1345] Modalidade 133. Composto de qualquer uma das Modalidades 125- 128, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que B3 selecionado do grupo que consiste em: cada um dos quais é opcionalmente e independentemente substituído em: (i) qualquer átomo de carbono disponível com um grupo halo, alquil C1-6, alcoxi C1-6, alquiltio C1-6 ou amino; e/ou (ii) qualquer átomo de nitrogênio disponível com um grupo alquil C1-6.

[1346] Modalidade 134. Composto da Modalidade 133, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que B3 selecionado do grupo que consiste em:

[1347] Modalidade 135. Composto da Modalidade 134, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que B3 selecionado do grupo que consiste em:

[1348] Modalidade 136. Composto da Modalidade 135, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que B3 selecionado do grupo que consiste em:

[1349] Modalidade 137. O composto de qualquer uma das Modalidades 101-108, 113 ou 115-136, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que Q2 é um átomo de oxigênio.

[1350] Modalidade 138. Composto de qualquer uma das Modalidades 101108, 113 ou 115-136, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que Q2 é um átomo de enxofre.

[1351] Modalidade 139. O composto de qualquer uma das Modalidades 101-104, 109-112, 114, ou 115-136, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que Q4 é um átomo de oxigênio.

[1352] Modalidade 140. Composto de qualquer uma das Modalidades 10104, 109-112, 114, ou 115-136, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que Q4 é um átomo de enxofre.

[1353] Modalidade 141. O composto de qualquer uma das Modalidades 101-142, ou um sal farmaceuticamente aceitável, em que X1 e X2 um átomo de oxigênio e R1 e R2 independentemente um grupo hidroxil ou um átomo de halogênio.

[1354] Modalidade 142. O composto de qualquer uma das Modalidades 101-141, em que R28 é

[1355] Modalidade 143. O composto da Modalidade 142, é selecionado do grupo que consiste em:

[1356] Modalidade 144. Um composto com a Fórmula (XLI): (CD-L2)u-DA (XLI)

[1357] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:

[1358] CD é um grupo representado por qualquer uma das Fórmula (XX) - (XXIX):

[1359] R1 e R2 cada um independentemente um grupo hidroxi, hidrogênio, grupo amino ou um átomo de halogênio;

[1360] B3 e B4 independentemente um grupo heterocíclico aromático de 5 a 14 membros opcionalmente substituído;

[1361] X1 e X2 cada um independentemente um átomo de oxigênio, CH2, ou um átomo de enxofre;

[1362] Q1, Q2, Q3, e Q4 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre;

[1363] L2 é um ligante; ou

[1364] L2 está ausente;

[1365] DA é um agente de distribuição de drogas; e

[1366] u é 1-1000.

[1367] Modalidade 145. Composto da Modalidade 144, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que R1 e R2 são cada um independentemente um grupo hidroxi ou um átomo de halogênio.

[1368] Modalidade 146. Composto da Modalidade 144 ou 145, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que X1 e X2 são cada um independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.

[1369] Modalidade 147. O composto de qualquer uma das Modalidades 144-146, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que Q1 e Q3 são um átomo de oxigênio.

[1370] Modalidade 148. Composto da Modalidade 144, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XX-A):

[1371] Modalidade 149. Composto da Modalidade 144, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXI-A):

[1372] Modalidade 150. Composto da Modalidade 144, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXII-A):

[1373] Modalidade 151. Composto da Modalidade 144, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXIII-A):

[1374] Modalidade 152. Composto da Modalidade 144, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXIV-A):

[1375] Modalidade 152. Composto da Modalidade 144, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXV-A):

[1376] Modalidade 153. Composto da Modalidade 144, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXVI-A):

[1377] Modalidade 154. Composto da Modalidade 144, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXVII-A):

[1378] Modalidade 155. Composto da Modalidade 144, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXVIII-A):

[1379] Modalidade 156. Composto da Modalidade 144, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que CD é grupo representado pela Fórmula (XXIX-A):

[1380] Modalidade 157. O composto de qualquer uma das Modalidades 144-156, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que B3 e B4 são independentemente um heterocíclico aromático bicíclico fundido de 8 a 14 membros opcionalmente substituído.

[1381] Modalidade 158. O composto da Modalidade 157, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que:

[1382] B3 é um grupo representado pela fórmula (B3-A) ou fórmula (B3-B):

[1383] R13, R14, R15, R16 e R17 são cada um independentemente um átomo de hidrogênio ou um substituinte;

[1384] Y11, Y12, Y13, Y14, Y15 e Y16 são, cada um, independentemente N ou CR1a;

[1385] Z11, Z12, Z13, Z14, Z15 e Z16 são, cada um, independentemente N ou C;

[1386] R1a é um átomo de hidrogênio ou um substituinte;

[1387] B4 é um grupo representado pela fórmula (B4-A) ou fórmula (B4-B):

[1388] R23, R24, R25, R26 e R27 são, cada um, independentemente selecionados dentre um átomo de hidrogênio ou um substituinte;

[1389] Y21, Y22, Y23, Y24, Y25 e Y26 são, cada um, independentemente N ou CR2a;

[1390] Z21, Z22, Z23, Z24, Z25 e Z26 são, cada um, independentemente N ou C;

[1391] R2a é um átomo de hidrogênio ou um substituinte.

[1392] Modalidade 159. Composto de qualquer uma das Modalidades 144158, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que pelo menos um de B3 ou B4 é:

[1393] R18 é hidrogênio ou C1-6 alquil; e

[1394] R19 é um átomo de halogênio.

[1395] Modalidade 160. O composto da Modalidade 159, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que B3 é:

[1396] Modalidades 161. O composto da Modalidade 159, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que B4 é:

[1397] Modalidade 162. Composto de qualquer uma das Modalidades 159161, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que R19 é um átomo de flúor.

[1398] Modalidade 163. O composto de qualquer uma das Modalidades 159-162, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que R18 é hidrogênio.

[1399] Modalidade 164. O composto de qualquer uma das Modalidades 159-162, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que R18 é metil.

[1400] Modalidade 165. Composto de qualquer uma das Modalidades 159 ou 162-164, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que B4 é selecionado do grupo que consiste em:

[1401] cada um dos quais é opcionalmente e independentemente substituído em:

[1402] (i) qualquer átomo de carbono disponível com um grupo halo , alquil C1-6, alcoxi C1-6 , alquiltio C1-6 ou amino; e/ou

[1403] (ii) qualquer átomo de nitrogênio disponível com um grupo alquil C1- 6 .

[1404] Modalidade 166. Composto da Modalidade 165, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que B4 é selecionado do grupo que consiste em:

[1405] Modalidade 167. Composto da Modalidade 166, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que B4é selecionado do grupo que consiste em:

[1406] Modalidade 168. Composto da Modalidade 167, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que B4 é selecionado do grupo que consiste em:

[1407] Modalidade 169. Composto de qualquer uma das Modalidades 161164, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que B3 selecionado do grupo que consiste em:

[1408] cada um dos quais é opcionalmente e independentemente substituído em:

[1409] (i) qualquer átomo de carbono disponível com um grupo halo , alquil C1-6 , alcoxi C1-6 , alquiltio C1-6 ou amino; e/ou

[1410] (ii) qualquer átomo de nitrogênio disponível com um grupo alquil C1- 6.

[1411] Modalidade 170. Composto da Modalidade 169, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que B3 é selecionado do grupo que consiste em:

[1412] Modalidade 171. Composto da Modalidade 170, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que B3 é selecionado do grupo que consiste em:

[1413] Modalidade 172. Composto da Modalidade 171, ou um sal mesma, em que B3 é selecionado do grupo que consiste em:

[1414] Modalidade 173. O composto de qualquer uma das Modalidades 144-151, 155 ou 157-172, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que Q2 é um átomo de oxigênio.

[1415] Modalidade 174. Composto de qualquer uma das Modalidades 144151, 155 ou 157-172, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que Q2 é um átomo de enxofre.

[1416] Modalidade 175. O composto de qualquer uma das Modalidades 144-147, 152-154, 156, 157-172, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que Q4 é um átomo de oxigênio.

[1417] Modalidade 176. Composto de qualquer uma das Modalidades 144147, 152-154, 156, ou 157-172, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que Q4 é um átomo de enxofre.

[1418] Modalidade 177. O composto de qualquer uma das Modalidades 144-176, ou um sal farmaceuticamente aceitável, em que X1 e X2 são um átomo de oxigênio e R1 e R2 independentemente um grupo hidroxi ou um átomo de halogênio.

[1419] Modalidade 178. O composto de qualquer uma das Modalidades 144-177, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que u é 1-100.

[1420] Modalidade 179. O composto da Modalidade 178, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que u é 1-10.

[1421] Modalidade 180. O composto da Modalidade 179, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que u é 1-5.

[1422] Modalidade 181. O composto da Modalidade 180, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que u é 1.

[1423] Modalidade 182. Composto de qualquer uma das Modalidades 144181, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que:

[1424] L2 é -X4-T1-Z1-QA-;

[1425] X4 é -(CH2)v-,

[1426] v é 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10; ou

[1427] X4 está ausente;

[1428] T1 é um peptídeo ou está ausente; e

[1429] Z1 é um espaçador;

[1430] O QA é um grupo heterobifuncional ou grupo heterotrifuncional, ou está ausente.

[1431] Modalidade 183. O composto da Modalidade 182, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que:

[1432] X4 é

[1433] T1 é; e

[1434] R10c e R10d são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio e alquil C1-6 opcionalmente substituído.

[1435] Modalidade 184. O composto da Modalidade 183, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que:

[1436] X4 é

[1437] Modalidade 185. Composto de qualquer uma das Modalidades 182 184, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que:

[1438] Z1 é ou -(CH2CH2O)si-;

[1439] m1 é 1, 2, 3, 4, 5, ou 6; e

[1440] s1 é 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, ou 10.

[1441] Modalidade 186. O composto da Modalidade 182, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que:

[1442] X4 é -CH2-;

[1443] Z1 é; e

[1444] p1 é 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10.

[1445] Modalidade 187. O composto da Modalidade 182, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que: X4 é -CH2CH2-; Z1 é q1 é 1, 2, 3, 4, 5, ou 6; e r1 é 1, 2, 3, 4, 5, ou 6.

[1446] Modalidade 188. Composto de qualquer uma das Modalidades 182, 186 ou 187, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que T1 está ausente.

[1447] Modalidade 189. Composto de qualquer uma das Modalidades 182188, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que QA um grupo heterobifuncional selecionado do grupo consistindo em:

[1448] R29 é hidrogênio ou C1-6 alquil;

[1449] R30a e R30b são independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio, C1-6 alquil, halo, -C(=O)OR29, -NH2, C1-6 alcoxi, -CN, - NO2, e -OH;

[1450] R31a e R31b são independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio, alquil C1-6 , halo, -C(=O)OR29, -NH2, -N(CH3)2, alcoxi C16 , -CN, -NO2, e -OH; e

[1451] * indica o ponto de ligação a qualquer átomo de carbono, átomo de nitrogênio, átomo de oxigênio ou átomo de enxofre disponível ligado ao agente de distribuição de drogas.

[1452] Modalidade 190. O composto da Modalidade 182, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que X4, T1, e QA estão ausentes.

[1453] Modalidade 191. O composto de qualquer uma das Modalidades 144-190, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, em que o agente de distribuição de drogas compreende lipídios, esteroides, vitaminas, carboidratos, protínas, peptídeos, poliaminas, polietilenoglicois ou peptidomiméticos ou quaisqur combinações dos mesmos.

[1454] Modalidade 192. Composto da Modalidade 191, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que o agente de distribuição de droga comprnde lipídios.

[1455] Modalidade 193. Composto da Modalidade 191, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que o agente de distribuição de droga comprnde esteroides.

[1456] Modalidade 194. Composto da Modalidade 191, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que o agente de distribuição de droga comprnde vitaminas.

[1457] Modalidade 195. Composto da Modalidade 191, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que o agente de distribuição de droga compreende carboidratos.

[1458] Modalidade 196. Composto da Modalidade 191, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que o agente de distribuição de droga compreende proteínas.

[1459] Modalidade 197. Composto da Modalidade 191, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que o agente de distribuição de droga compreende peptídeos.

[1460] Modalidade 198. Composto da Modalidade 191, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que o agente de distribuição de droga compreende poliaminas.

[1461] Modalidade 199. Composto da Modalidade 191, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que o agente de distribuição de droga compreende polietileno glicois.

[1462] Modalidade 200. Composto da Modalidade 191, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, em que o agente de distribuição de droga compreende peptidomiméticos

[1463] Uma vez que o composto (I) ou uma pró-droga da mesma (no presente relatório descritivo, por vezes a ser coletivamente abreviado como "o composto da presente divulgação") tem uma atividade agonista de STING, pode ser útil como um agente para a profilaxia ou tratamento de câncer, um inibidor do crescimento do câncer ou um inibidor da metástase do câncer.

[1464] Uma vez que o composto da presente divulgação mostra uma atividade agonista de STINGe é superior em termos de expressão de eficácia, farmacocinética (por exemplo, absorção, distribuição, metabolismo, excreção), solubilidade (por exemplo, solubilidade em água), interação com outros medicamentos (por exemplo, ação inibitória da enzima que metaboliza drogas), segurança (por exemplo, toxicidade aguda, toxicidade crônica, toxicidade genética, toxicidade reprodutiva, cardiotoxicidade, carcinogenicidade, toxicidade central) e estabilidade (por exemplo, estabilidade química , estabilidade a uma enzima), pode ser útil como um medicamento.

[1465] Por conseguinte, o composto da presente divulgação pode ser utilizado para aumentar a atividade de STING num mamífero (por exemplo, camundongo, rato, hamster, coelho, gato, cão, vaca, ovelha, macaco, humano).

[1466] O composto da presente divulgação pode ser utilizado como um medicamento, tal como um agente para a profilaxia ou tratamento de doenças possivelmente influenciadas por STING (no presente relatório descritivo, por vezes a ser abreviado como "doenças relacionadas com STING"), por exemplo, cânceres [por exemplo, cânceres colorretais (por exemplo, câncer colorretal, câncer retal, câncer de ânus, câncer colorretal familiar, câncer colorretal hereditário sem polipose, tumor estromal gastrointestinal), cânceres de pulmão (por exemplo, câncer de pulmão de células não-pequenas-, câncer de pulmão de células- pequenas, mesotelioma maligno), mesotelioma, cânceres pancreáticos (por exemplo, carcinoma ductal pancreático, tumor endócrino pancreático), câncer de faringe, câncer de laringe, câncer de esôfago, cânceres de estômago (por exemplo, adenocarcinoma papilar, adenocarcinoma mucinoso, carcinoma adenoescamoso), câncer duodenal, câncer do intestino delgado, cânceres de mama (por exemplo, carcinoma ductal invasivo, carcinoma ductal não invasivo, câncer de mama inflamatório), cânceres ovarianos (por exemplo, câncer epitelial de ovário, tumor de célula germinativa extragonadal, tumor de células germinativas ovarianas, tumor ovariano de baixo potencial maligno), tumor testicular, cânceres de próstata (por exemplo, câncer de próstata hormônio-dependente, câncer de próstata não dependente de hormônio, câncer de próstata resistente à castração), cânceres de fígado (por exemplo, câncer hepatocelular, câncer primário de fígado, câncer extra- hepático do ducto biliar), cânceres de tireoide (por exemplo, carcinoma medular de tireoide), cânceres renais (por exemplo, cânceres de células renais (por exemplo, câncer de células renais de células claras), câncer de células transicionais da pelve renal e ureter) cânceres uterinos (por exemplo, câncer cervical, câncer do corpo uterino, sarcoma uterino), coriocarcinoma gestacional, tumores cerebrais (por exemplo, meduloblastoma, glioma, tumores astrocíticos pineais, astrocitoma pilocítico, astrocitoma difuso, astrocitoma anaplásico, adenoma hipofisário), retinoblastoma, cânceres de pele (por exemplo, basalioma, melanoma maligno), sarcomas (por exemplo, rabdomiossarcoma, leiomiossarcoma, sarcoma de partes moles, sarcoma de células fusiformes), tumor ósseo maligno, câncer de bexiga, cânceres do sangue (por exemplo, mieloma múltiplo, leucemias (por exemplo, leucemia mielogênica aguda), linfoma maligno, doença de Hodgkin, doença mieloproliferativa crônica), câncer de primário desconhecido], um inibidor do crescimento de câncer, um inibidor de metástase de câncer, um promotor de apoptose, um agente para o tratamento de lesões pré-cancerosas (por exemplo, síndromes mielodisplásicos), e semelhantes.

[1467] Noutra modalidade, o câncer é selecionado de qualquer um ou mais dos cânceres da Tabela 7. Tabela 7

[1468] Noutra modalidade, o câncer é um tumor sólido ou linfoma.

[1469] Particularmente, o composto da presente divulgação pode ser utilizado como um medicamento para câncer colorretal, câncer da mama, câncer de pele, linfoma maligno ou câncer do pulmão.

[1470] O composto da presente divulgação pode ser administrado oralmente ou parentericamente, tal como este ou numa mistura com um carreador farmacologicamente aceitável, como um medicamento, a um mamífero (preferivelmente humanos).

[1471] O medicamento contendo o composto da presente divulgação (daqui em diante por vezes a ser abreviado como "o medicamento da presente divulgação") é explicado em detalhe abaixo. Exemplos da forma de dosagem do medicamento da presente divulgação incluem preparações orais tais como comprimido (por exemplo, comprimido revestido de açúcar, comprimido revestido por película, comprimido sublingual, comprimido bucal, desintegrador oral), pílula, grânulo, pó, cápsula (por exemplo, cápsula mole, microcápsula), xarope, emulsão, suspensão, películas (por exemplo, filmes de desintegração oral, película adesiva de mucosa oral) e semelhantes. Adicionalmente, exemplos da forma de dosagem do medicamento da presente divulgação incluem preparações parentéricas tais como injeção, infusão gota a gota, preparação do tipo de absorção transdérmica (por exemplo, preparação do tipo de absorção transdérmica por iontoforese), supositório, pomada, preparação nasal, preparação pulmonar soltar e semelhantes. Além disso, o medicamento da presente divulgação pode ser uma preparação de controle de liberação, tal como uma preparação de liberação imediata, uma preparação de liberação prolongada (por exemplo, uma microcápsula de liberação sustentada) e semelhantes.

[1472] Como a forma de dosagem do medicamento da presente divulgação, uma preparação de nanopartícula e uma preparação usando uma membrana derivada de bactérias também pode ser usada.

[1473] O medicamento da presente divulgação pode ser preparado de acordo com um método conhecido per se (por exemplo, o método descrito na Farmacopeia Japonesa etc. ) geralmente utilizado no campo da preparação. Além disso, o medicamento da presente divulgação pode conter uma quantidade adequada de um aditivo, tal como um excipiente, um ligante, um desintegrante, um lubrificante, um agente edulcorante, um surfactante, um agente de suspensão, um emulsionante, um corante, um conservante, um aromático, um corretivo, um estabilizante, um agente espessante e semelhantes geralmente utilizados no campo de preparação conforme necessário. Exemplos do carreador farmacologicamente aceitável incluem estes aditivos.

[1474] Por exemplo, o comprimido pode ser preparado utilizando um excipiente, um ligante, um desintegrante, um lubrificante e semelhantes, e comprimido ou grânulo pode ser preparado utilizando um excipiente, um ligante e um desintegrante. Pó ou cápsula pode ser preparada utilizando um excipiente e semelhantes, o xarope pode ser preparado utilizando um agente edulcorante e semelhantes, e a emulsão ou suspensão pode ser preparada utilizando um agente de suspensão, um surfactante, um emulsionante e semelhantes.

[1475] Exemplos do excipiente incluem lactose, sacarose, glucose, amido, sacarose, celulose cristalina, glicirrizina em pó, manitol, hidrogenocarbonato de sódio, fosfato de cálcio e sulfato de cálcio.

[1476] Exemplos do ligante incluem 5 a 10% em peso de pasta líquida de amido, 10 a 20% em peso de solução de goma arábica ou solução de gelatina, 1 a 5% em peso de solução de tragacanta, solução de carboximetilcelulose, solução de alginato de sódio e glicerina.

[1477] Exemplos do desintegrante incluem amido e carbonato de cálcio.

[1478] Exemplos do lubrificante incluem estearato de magnésio, ácido esteárico, estearato de cálcio e talco purificado.

[1479] Exemplos do adoçante incluem glucose, frutose, açúcar invertido, sorbitol, xilitol, glicerina e xarope simples.

[1480] Exemplos do agente surfactante incluem o lauril sulfato de sódio, o polisorbato 80, o éster do ácido monofatílico de sorbitano e o estearato de polioxil 40.

[1481] Exemplos do agente de suspensão incluem goma arábica, alginato de sódio, carboximetilcelulose de sódio, metilcelulose e bentonita.

[1482] Exemplos do emulsionante incluem goma arábica, tragacanto, gelatina e polissorbato 80.

[1483] Por exemplo, quando o medicamento da presente divulgação é um comprimido, por exemplo, um excipiente (por exemplo, lactose, sacarose, amido), um desintegrante (por exemplo, amido, carbonato de cálcio), um ligante (por exemplo, amido, goma arábica, carboximetil celulose, polivinilpirrolidona, hidroxipropilcelulose) ou um lubrificante (por exemplo, talco, estearato de magnésio, polietilenoglicol 6000) é adicionado ao composto da presente divulgação, e a mistura é moldada por compressão, de acordo com um método conhecido per se, e então, quando necessário, o produto moldado é revestido de acordo com um método conhecido per se com a finalidade de mascarar o sabor, a propriedade entérica ou a durabilidade, para obter um comprimido. Como agente de revestimento para o revestimento, por exemplo, hidroxipropilmetil celulose, etil celulose, hidroximetil celulose, hidroxipropil celulose, polioxietilenoglicol, Tween 80, Pluronic F68, acetato de ftalato de celulose, ftalato de hidroxipropilmetil celulose, sucinato de acetato de hidroximetil celulose, Eudragit (ácido metacrílico-copolímero de ácido acrílico, fabricado por Rohm, DE) e pigmento (por exemplo, óxido de ferro vermelho, dióxido de titânio) pode ser usado.

[1484] Exemplos da injeção incluem injeção intravenosa, bem como injeção subcutânea, injeção intracutânea, injeção intramuscular, injeção intraperitoneal, injeção por gotejamento e semelhantes.

[1485] Tais injeções são preparadas de acordo com um método conhecido per se, ou dissolvendo, suspendendo ou emulsionando o composto da presente divulgação num líquido aquoso ou oleoso esterilizado. Exemplos do líquido aquoso incluem solução salina fisiológica, soluções isotônicas contendo glucose ou outras drogas auxiliares (por exemplo, D-sorbitol, D-manitol, cloreto de sódio) e semelhantes. O líquido aquoso pode conter um agente solubilizante adequado, tal como um álcool (por exemplo, etanol), um poli álcool (por exemplo, propilenoglicol, polietilenoglicol), um agente surfactante não iônico (por exemplo, polissorbato 80, HCO-50) e semelhantes. Exemplos do líquido oleoso incluem óleo de gergelim, óleo de soja e semelhantes. O líquido oleoso pode conter um agente solubilizante. Exemplos do agente de solubilização incluem benzoato de benzil, álcool benzílico e semelhantes. Além disso, a injeção pode ser misturada com um tampão (por exemplo, tampão fosfato, tampão acetato de sódio), um agente calmante (por exemplo, cloreto de benzalcônio, cloridrato de procaína), um estabilizador (por exemplo, albumina sérica humana, polietilenoglicol) um conservante (por exemplo, álcool benzílico, fenol) e semelhantes. Uma injeção preparada pode ser geralmente preenchida em uma ampola.

[1486] Embora o teor do composto da presente divulgação no medicamento da presente divulgação varie dependendo da forma da preparação farmacêutica, geralmente, cerca de 0,01 a cerca de 100% em peso, de preferência cerca de 2 a cerca de 85% em peso, mais preferencialmente cerca de 5 a cerca de 70% em peso, em relação a toda a preparação.

[1487] Embora o teor do aditivo no medicamento da presente divulgação varie dependendo da forma da preparação farmacêutica, é geralmente de cerca de 1 a cerca de 99,9% em peso, preferivelmente cerca de 10 a cerca de 90% em peso, relativamente à preparação completa.

[1488] O composto da presente divulgação é estável e pouco tóxico e pode ser usado com segurança. Enquanto a dose diária do composto da presente divulgação varia dependendo da condição e peso corporal dos pacientes, o tipo de composto, via de administração e semelhantes, no caso de, por exemplo, administração oral a pacientes para o tratamento de câncer, a dose diária para um adulto (peso corporal de cerca de 60 kg) é de cerca de 1 a cerca de 1000 mg, preferivelmente cerca de 3 a cerca de 300 mg, mais preferencialmente cerca de 10 a cerca de 200 mg, como o composto da presente divulgação, que pode ser administrado em uma única administração ou administrado em 2 ou 3 porções por dia.

[1489] Quando o composto da presente divulgação é administrado parentericamente, é geralmente administrado na forma de um líquido (por exemplo, injeção). Embora a dose do composto da presente divulgação varie dependendo do sujeito de administração, órgão alvo, sintoma, método de administração e semelhantes, é, por exemplo, cerca de 0,01 mg a cerca de 100 mg, preferivelmente cerca de 0,01 a cerca de 50 mg, mais preferencialmente, cerca de 0,01 a cerca de 20 mg, relativamente a 1 kg de peso corporal, que é de preferência administrado por injeção intravenosa.

[1490] O composto da presente divulgação pode ser utilizado concomitantemente com outras drogas. Para ser específico, o composto da presente divulgação pode ser utilizado em conjunto com medicamentos, tais como agentes terapêuticos hormonais, agentes quimioterapêuticos, agentes imunoterapêuticos, medicamentos que inibem a ação de fatores de crescimento celular ou receptores do fator de crescimento celular e semelhantes. A seguir, as drogas que podem ser utilizados em combinação com o composto da presente divulgação são abreviadas como drogas concomitantes.

[1491] Os "agentes terapêuticos hormonais" exemplos de fosfestrol, dietilestilbestrol, clorotrianisene, acetato de medroxiprogesterona, acetato de megestrol, acetato de clormadinona, acetato de ciproterona, danazol, alilestrenol, gestrinona, mepartricina, raloxifeno, ormeloxifeno, levormeloxifeno, antiestrogênios (por exemplo, citrato de tamoxifeno, citrato toremifeno), pílula preparações, mepitiostano, testrolactona, aminoglutetimida, agonistas de LH-RH (por exemplo, acetato de goserelina, buserelina, leuprorelina, acetato de leuprorelina), droloxifeno, epitiostanol, etinilestradiol sulfonato, inibidores de aromatase (por exemplo, cloridrato de fadrozol, anastrozol, retrozol, exemestano, vorozol, formestano), anti-andrógenos (por exemplo, flutamida, bicartamida, nilutamida, enzalutamida), inibidores da 5α-redutase (por exemplo, Finasterida, epristerida, dutasterida) drogas de hormônio de córtex aderenal (por exemplo, dexametasona, prednisolona, betametasona, Triancinolona), inibidores da síntese de andrógenos (por exemplo, abiraterona), retinoide e drogas que retardam o metabolismo retinoide (por exemplo, liarozol), hormônio da tireoide, e preparações de DDS (Sistema de Distribuição de Droga) dos mesmos.

[1492] Exemplos dos "agentes quimioterapêuticos" incluem agentes alquilantes, antimetabólitos, antibióticos anticancerígenos e agentes anticancerígenos derivados de plantas.

[1493] Exemplos dos "agentes alquilantes" incluem mostarda nitrogenada, cloridrato de N-óxido de mostarda nitrogenada, clorambutil, ciclofosfamida, ifosfamida, tiotepa, carboquona, tosilato de improssulfan, busulfan, cloridrato de nimustina, mitobronitol, melfalan, dacarbazina, ranimustina, fosfato de estramustina de sódio, trietilenomelamina, carmustina, lomustina, estreptozocina, pipobromano, etoglucida, carboplatina, cisplatina, miboplatina, nedaplatina, oxaliplatina, altretamina, ambamustina, cloridrato de dibrospídio, fotemustina, prednimustina, pumitepa, ribomustina, temozolomida, treosulfano, troposfamida, zimostatina stimalamer, adozelesina, cistemustina, bizelesina, e preparações de DDS dos mesmos.

[1494] Exemplos dos "antimetabólitos" incluem mercaptopurina, ribosídeo 6-mercaptopurina, tioinosina, metotrexato, pemetrexed, enocitabina, citarabina, ocfosfato de citarabina, cloridrato de ancitabina, drogas 5-FU (por exemplo, fluorouracil, tegafur, UFT, doxifluridina, carmofur, galocitabina, emitefur, capecitabina), aminopterina, nelzarabina, leucovorina de cálcio, tabloide, butocina, folinato de cálcio, levofolinato de cálcio, cladribina, emitefur, fludarabina, gemcitabina, hidroxicarbamida, pentostatina, piritrexim, idoxuridina, mitoguazona, tiazofrina, ambamustina, bendamustina e preparações de DDS dos mesmos.

[1495] Exemplos de antibióticos anticancerígenos incluem actinomicina-D, actinomicina-C, mitomicina-C, cromomicina-A3, cloridrato de bleomicina, sulfato de bleomicina, sulfato de peplomicina, cloridrato de daunorrubicina, cloridrato de doxorrubicina, cloridrato de aclarubicina, cloridrato de pirarubicina, cloridrato de epirrubicina, neocarzinostatina, mitramicina, sarcomicina, carzinofilina, mitotano, cloridrato de zorubicina, cloridrato de mitoxantrona, cloridrato de idarubicina e preparações de DDS dos mesmos (por exemplo, lipossoma PEG incluindo doxorrubicina).

[1496] Exemplos dos "agentes anticancerígenos derivados de plantas" incluem etoposídeo, fosfato de etoposídeo, sulfato de vinblastina, sulfato de vincristina, sulfato de vindesina, teniposídeo, paclitaxel, docetaxel cabazitaxel, vinorelbina e preparações DDS dos mesmos.

[1497] Exemplos de "agentes imunoterapêuticos (BRM)" incluem picibanil, krestina, sizofiran, lentinan, ubenimex, interferons, interleucinas, fator estimulante de colônias de macrófagos, fator estimulante de colônias de granulócitos, eritropoietina, linfotoxina, vacina BCG, Corynebacterium parvum, levamisol, polissacarídeo K, procodazol, anticorpos anti-CTLA4 (por exemplo, ipilimumabe, tremelimumabe), anticorpos anti-PD-1 (por exemplo, nivolumab, pembrolizumab), e anticorpo anti-PD-L1 .

[1498] Exemplo, os "fatores de crescimento celular" nos "medicamentos que inibem a ação de fatores de crescimento celular ou receptores de fator de crescimento celular" incluem quaisquer substâncias que promovem a proliferação celular, que são normalmente peptídeos com não mais de 20. 000 de peso molecular que são capazes de expor a sua atividade em baixas concentrações por ligação a um receptor, incluindo (1) EGF (fator de crescimento epidérmico) ou substâncias possuindo substancialmente a mesma atividade como EGF [por exemplo, TGFα], (2) insulina ou substâncias possuindo substancialmente a mesma atividade como insulina [por exemplo, a insulina, IGF (fator de crescimento semelhante à insulina) -1, IGF-2], (3) FGF (fator de crescimento fibroblástico) ou substâncias possuindo substancialmente a mesma atividade como FGF [por exemplo, ácido FGF, FGF básico, KGF (fator de crescimento de queratinócitos), FGF-10] e (4) outros fatores de crescimento celular [por exemplo, CSF (fator de estimulação de colônia), EPO (eritropoietina), IL-2 (interleucina-2), NGF (fator de crescimento do nervo), PDGF (fator de crescimento derivado de plaquetas), TGFβ (fator de crescimento transformador β), HGF (fator de crescimento de hepatócito), VEGF (fator de crescimento endotelial vascular), heregulina, angiopoietina].

[1499] Exemplos dos "receptores do fator de crescimento celular" incluem quaisquer receptores capazes de se ligarem aos fatores de crescimento celular acima mencionados, incluindo o receptor EGF, receptor heregulina (por exemplo, HER3), receptor de insulina, receptor 1 de IGF, receptor de IGF-2 e receptor de FGF. 1 ou receptor de FGF-2, receptor de VEGF, receptor de angiopoietina (por exemplo, Tie2), receptor de PDGF e semelhantes.

[1500] Os exemplos dos "medicamentos que inibem a ação de fatores de crescimento celular ou receptores de fator de crescimento celular" exemplos de inibidor de EGF, inibidor deα TGF, inibidor de heregulina, inibidor de insulina, inibidor de IGF, inibidor de FGF, inibidor de KGF, inibidor de CSF, inibidor de EPO, inibidor de Il-2, inibidor de NGF, inibidor de PDGF, inibidor deβ TGF, inibidor de HGF, inibidor de VEGF, inibidor de angiopoietina, inibidor do receptor de EGF, inibidor de HER2, inibidor de HER4, receptor de insulina, inibidor do receptor de IGF-1, inibidor do receptor de IGF-2, inibidor do receptor 1 de FGF, inibidor do receptor 2 de FGF, inibidor do receptor 3 de FGF, inibidor do receptor 4 de FGF, inibidor de receptores VEGF, inibidor de Tie-2, inibidor do receptor de PDGF, inibidor de Abl, inibidor de Raf, inibidor de FLT3, inibidor de c-Kit, inibidor de Src, inibidor de PKC, inibidor de Smo, inibidor de ALK, inibidor de ROR1, inibidor de Trk, inibidor de Ret, inibidor de mTOR, inibidor de Aurora, inibidor de PLK, inibidor de MEK (MEK1/2), inibidor MET, inibidor de CDK, inibidor de Akt, inibidor de ERK, inibidor de PI3K e semelhantes. Mais especificamente, anticorpo anti-VEGF (por exemplo, Bevacizumab, Ramucurumab), anticorpo anti-HER2 (por exemplo, Trastuzumab, Pertuzumab), anticorpo anti-EGFR (por exemplo, Cetuximab, Panitumumab, Matuzumab, Nimotuzumab), anticorpo anti-HGF, Imatinib, Erlotinib, Gefitinib, Sorafenib, Sunitinib, Dasatinib, Lapatinib, Vatalanib, Ibrutinib, Bosutinib, Cabozantinib, Crizotinib, Alectinib, Vismodegib, Axitinib, Motesanib, Nilotinib, 6-[4- (4-etilpiperazin-1-ilmetil)fenil]-N-[1(R)-feniletil]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (AEE-788), Vandetanib, Temsirolimus, Everolimus, Enzastaurin, Tozasertib, 2-[N- [3-[4-[5-[N-(3-fluorofenil)carbamoilmetil]-1H-pirazol-3-ilamino]quinazolin-7- iloxi]propil]-N-etilamino]etil fosfato (AZD-1152), 4-[9-cloro-7-(2,6-difluorofenil)-5H- pirimido[5,4-d][2]benzazepin-2-ilamino]ácido benzoico, N-[2-metoxi-5-[(E)-2-(2,4,6- trimetoxifenil)vinilsulfonilmetil]fenil]sal de sódio de glicina (ON-1910Na), Volasertib, Selumetinib, Trametinib, N-[2(R),3-dihidroxipropoxi]-3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4- iodofenilamino)benzamida (PD-0325901), Bosutinib, Regorafenib, Afatinib, Idelalisib, Ceritinib, Dabrafenib e semelhantes podem ser usados.

[1501] Além das drogas acima mencionadas, L-asparaginase, L-arginase deiminase da arginina, aceglatone, cloridrato de procarbazina, sal complexo protoporfirina-cobalto, mercúrio Hematoporfirina-sódio, inibidores I de topoisomerase (por exemplo, irinotecano, Topotecano, indotecan, Indimitecan), inibidores de topoisomerase II (por exemplo, sobuzoxano), indutores de diferenciação (por exemplo, retinoide, vitamina D), outros inibidores de angiogênese (por exemplo, humagilina, extrato de tubarão, inibidor da COX-2), a- bloqueadores (por exemplo, cloridrato de tansulosina), ácidos bisfosfônicos (por exemplo, pamidronato, zoledronato), talidomida, lenalidomida, pomalidomida, azacitidina, decitabina, inibidores de proteassoma (por exemplo, bortezomibe, carfilzomibe, ixazomibe), inibidores de NEDD8 (por exemploPevonedistat), inibidores de UAE, inibidores de PARP (por exemplo, Olaparib, Niraparib, Veliparib), anticorpos antitumor tais como anticorpos anti-CD20 (por exemplo, Rituximab, Obinutuzumab), anti-CCR4 anticorpos (por exemplo, Mogamulizumab) e semelhantes, anticorpos-droga conjugados (por exemplo, trastuzumab emtansina, Brentuximabe vedotina) e semelhantes podem também ser usados como uma droga concomitante.

[1502] Combinando o composto da presente divulgação e uma droga concomitante, um efeito superior tal como (1) a dose pode ser reduzido em comparação com a administração única do composto da presente divulgação ou de uma droga concomitante, (2) a droga a ser combinada com o composto da presente divulgação pode ser selecionada de acordo com a condição dos pacientes (caso leve, caso grave e semelhantes), (3) o período de tratamento pode ser prolongado, (4) pode ser concebido um efeito de tratamento prolongado, (5) um efeito sinérgico pode ser obtido por uma utilização combinada do composto da presente divulgação e uma droga concomitante, e semelhantes, podem ser alcançados.

[1503] No presente relatório descritivo, o composto da presente divulgação e uma droga concomitante utilizado em combinação são referidos como o "agente de combinação da presente divulgação".

[1504] Para utilização do agente de combinação da presente divulgação, o tempo de administração do composto da presente divulgação e da droga concomitante não está restrito, e o composto da presente divulgação e a droga concomitante podem ser administrados a um sujeito de administração simultaneamente, ou pode ser administrado em momentos diferentes. Quando administrado num intervalo de tempo, o intervalo difere dependendo do ingrediente eficaz a ser administrado, forma de dosagem e método de administração e, por exemplo, quando a droga concomitante é administrada em primeiro lugar, o composto da presente divulgação pode ser administrado dentro do intervalo de tempo de 1 min a 3 dias, preferencialmente de 10 min a 1 dia, mais preferivelmente de 15 min a 1 h após a administração da droga concomitante. Quando o composto da presente divulgação é administrado em primeiro lugar, a droga concomitante é administrada dentro do intervalo de tempo de 1 min a 1 dia, preferencialmente de 10 min a 6 h, mais preferivelmente de 15 min a 1 h após a administração do composto da presente divulgação. A dosagem da droga concomitante pode ser determinada de acordo com a dose estabelecida clinicamente e pode ser adequadamente selecionada dependendo do sujeito da administração, via de administração, doença, combinação e semelhantes.

[1505] Exemplos do modo de administração da utilização combinada do composto da presente divulgação e a droga concomitante incluem os seguintes métodos: (1) O composto da presente divulgação e a droga concomitante são produzidos simultaneamente para obter uma preparação única, que é então administrado. (2) O composto da presente divulgação e a droga concomitante são produzidos separadamente para obter dois tipos de preparações que são administradas simultaneamente pela mesma via de administração. (3) O composto da presente divulgação e a droga concomitante são produzidos separadamente para obter dois tipos de preparações que são administradas pela mesma via de administração em momentos diferentes. (4) O composto da presente divulgação e a droga concomitante são produzidos separadamente para obter dois tipos de preparações que são administradas simultaneamente por diferentes vias de administração. (5) O composto da presente divulgação e a droga concomitante são produzidos separadamente para obter dois tipos de preparações que são administradas por diferentes vias de administração em momentos diferentes (por exemplo, o composto da presente divulgação e a droga concomitante são administrados nesta ordem, ou na ordem inversa).

[1506] A dose da droga concomitante pode ser apropriadamente determinada de acordo com a sua dose clínica, e a razão do composto da presente invenção e da droga concomitante pode ser determinada apropriadamente dependendo do sujeito da administração, via de administração, doença alvo, sintoma, combinação e semelhantes. Por exemplo, quando o sujeito da administração é humano, a droga concomitante é utilizada em 0,01 a 100 (partes em peso), em relação a 1 parte em peso do composto da presente divulgação.

[1507] Além disso, o composto da presente divulgação ou o agente de combinação da presente divulgação pode ser usado concomitantemente com uma terapia sem drogas. Para ser preciso, o composto da presente divulgação ou o agente de combinação da presente divulgação pode ser combinado com uma terapêutica sem drogas tal como (1) cirurgia, (2) quimioterapia hipertensiva utilizando angiotensina II etc. , (3) terapia genética, (4) termoterapia, (5) crioterapia, (6) cauterização a laser e (7) radioterapia.

[1508] Por exemplo, utilizando o composto da presente divulgação ou o agente de combinação da presente divulgação antes ou após a cirurgia acima mencionada e semelhantes, ou antes ou depois de um tratamento combinado de dois ou três tipos, efeitos tais como a prevenção de surgimento de resistência, prolongamento de Sobrevida Livre de Doença, supressão de metástase de câncer ou recorrência, prolongamento de vida e semelhantes podem ser obtidos.

[1509] Além disso, é possível combinar um tratamento com o composto de divulgação a presente ou o agente de combinação da divulgação presente com uma terapia de suporte [(i) administração de antibióticos (por exemplo, βtipo de - lactâmicos como pansporina e semelhantes, tipo de macrolídeos como claritromicina e afins) para a complicação com várias doenças infecciosas, (ii) administração de transfusão de alto teor calórico, preparação de aminoácido ou preparação geral vitamina para a melhoria da desnutrição, (iii) administração de morfina para mitigação da dor, administração (iv) de um agente farmacêutico para atenuar os efeitos colaterais como náuseas, vômitos, anorexia, diarreia, leucopenia, trombocitopenia, diminuição da concentração de hemoglobina, perda de cabelo, hepatopatia, renopatia, DIC, febre e semelhantes e (v) administração de um agente farmacêutico para suprimir a resistência a drogas múltiplas de câncer e semelhantes].

EXEMPLOS

[1510] A presente divulgação é explicada em detalhe por referência aos seguintes Exemplos, Exemplos Experimentais e Exemplos de Formulação, que não devem ser interpretados como limitativos, e a divulgação pode ser alterada dentro do escopo da presente divulgação.

[1511] Nos Exemplos seguintes, a "temperatura ambiente" geralmente significa cerca de 10°C a cerca de 35°C. As proporções indicadas para solventes mistos são proporções de mistura de volume, a menos que especificado de outro modo. % significa % em peso, salvo indicação em contrário.

[1512] Em cromatografia em coluna de sílica em gel, "Diol" significa a utilização de sílica gel ligada a 3-(2,3-di-hidroxipropoxi)propilsilano. Em cromatografia em coluna de sílica gel e HPLC (cromatografia fluida de alta eficiência), "C18" significa a utilização de sílica gel ligada a-octadecil. As proporções de solventes de eluição são proporções de mistura de volume, a menos que especificado de outro modo.

[1513] A medida por LC/MS foi realizada sob as seguintes condições [coluna: L-column2 ODS, 3. 0 mml. D. *50 mm, fase móvel: acetonitrila/5 mM solução tampão de acetato de amônio = 900/100)].

[1514] Nos Exemplos, as seguintes abreviaturas são usadas. mp: ponto de fusão MS: espectro de massa [M+H]+, [MH]-: pico iônico molecular M: concentração molar N: normal CDCl3: clorofórmio deuterado DMSO-d6: dimetil sulfóxido deuterado D2O: água deuterada 1H NMR: ressonância magnética nuclear protônica 31P NMR: ressonância magnética nuclear de fósforo LC/MS: espectrômetro de massa com cromatógrafo líquido ESI: ionização por eletro pulverização APCI: Ionização Química de Pressão Atomosférica THF: tetrahidrofurano DMF: N,N-dimetilformamida DCM: diclorometano

[1515] 1H NMR e 31P NMR foi medido pela NMR transformada tipo Fourier para a análise, foram utilizados ACD/SpecManager (nome comercial) e semelhantes. Os picos com prótons muito suaves, tais como um grupo hidroxi, um grupo amino e semelhantes, não são descritos.

[1516] MS foi medido por LC/MS. Como método de ionização, foi utilizado o método ESI ou o método APCI. Os dados indicam o valor medido real (encontrado). Geralmente, um pico iônico molecular é observado. No caso de um composto com um grupo terc-butoxicarbonil, pode ser observado um pico após a eliminação de um grupo terc-butoxicarbonil ou um grupo terc-butil pode ser observado como um fragmento de íon. No caso de um composto com um grupo hidroxi, um pico após a eliminação de H2O pode ser observado como um fragmento de íon. No caso de um sal, é geralmente observado um pico de íon molecular ou um pico iônico de fragmento de forma livre. EXEMPLO 1 Síntese de sal 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H- purin-9-il)-15-fluoro-2,10,16-trihidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7- dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina A) 7-((2R,3R,4S,5R)-5-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-3,4- dihidroxitetrahidrofuran-2-il)-5-fluoro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona

[1517] A uma solução de 7-((2R,3R,4S,5R)-3,4-di-hidroxi-5- (hidroximetil)tetra-hidrofuran-2-il)-5-fluoro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-4(7H)-ona (6,26 g) em piridina (100 mL) foi adicionado cloreto de 4,4'-dimetoxitritil (8,92 g) à temperatura ambiente, e a mistura foi agitada durante a noite sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente. Mistura reacional foi adicionada solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e a mistura foi extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, e seca sobre sulfato de sódio anidro, e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (8,65 g). MS: [M-H]- 586,0. B) 7-(5-O-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-3-O-(terc-butil(dimetil)silil)-beta-D- ribofuranosil)-5-fluoro-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona

[1518] A uma solução de 7-((2R,3R,4S,5R)-5-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-3,4-dihidroxitetrahidrofuran-2-il)-5-fluoro-3H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (2,65 g) em DMF (20 mL) foi adicionado imidazol (0,614 g) e terc-butildimetilclorosilano (0,816 g) e a mistura foi agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente. A mistura de reação foi diluída com água e extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com solução salina saturada e seco sobre sulfato de sódio anidro e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (acetato de etila/hexano) para obter o composto do título (1,1 g). MS: [M-H]- 700,2. C) 7-(5-O-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-3-O-(terc-butil(dimetil)silil)-2-O-((2- cianoetoxi)(diisopropilamino)fosfino)-beta-D-ribofuranosil)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona

[1519] 7-(5-O-(Bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-3-O-(terc-butil(dimetil)silil)- beta-D-ribofuranosil)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (5,43 g) foi sujeito a desidratação azeotrópica três vezes com tolueno anidro e dissolvido em DMF anidro (15 mL). À solução foram adicionados 3- ((bis(diisopropilamino)fosfino)oxi)propanonitril (3,19 mL), 1H-tetrazol (0,542 g) e 1- metil-1H-imidazol (0,306 mL), e a mistura foi agitada durante a noite sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente, vertida em solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, e seca sobre sulfato de sódio anidro, e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (DIOL, acetato de etila/hexano). O produto em bruto obtido foi purificado de novo por cromatografia em coluna sobre sílica gel (acetato de etila/hexano, contendo 0,5% de trietilamina) para obter o composto em título (4,22 g) como uma mistura de dois diastereômeros. MS: [M-H]- 901,2. D) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-2- ((((((2R,3R,4R,5R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7(4H)-il)-5-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2- cianoetoxi)fosforil)oxi)metil)-4-fluorotetrahidrofuran-3-il

[1520] N -Benzoil-2'-desoxi-2'-fluoro-3'-O- (hidroxi(oxido)fosforanil)adenosina (1,2 g) e 7-(5-O-([bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)]- 3-O-([terc-butil(dimetil)silil)]-2-O-({(2-cianoetoxi)([diisopropilamino)]fosfino)}-beta- D-ribofuranosil)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (3,4 g) foram submetidas a desidratação azeotrópica com acetonitrila anidra e acetonitrila anidra (15 mL) e THF anidro (5 mL) foram adicionados a isso. À mistura foi adicionada uma mistura de 5-(etilsulfanil)-2H-tetrazol (1,07 g) (que foi submetido a desidratação azeotrópica com acetonitrila anidra) e acetonitrila anidra (10 mL), e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio a 55°C por 2 horas. Foi adicionada solução aquosa de hidroperóxido de terc-butil a 70% (1,12 mL) e a mistura foi agitada temperatura ambiente durante 20 min. Mistura reacional foi adicionada uma mistura de tiossulfato de sódio (5920 mg) e água (3 mL) e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado ácido acético a 80% (30 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 20 min. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (1,1 g). MS: [M+H]+ 952,2 E) N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-16-((terc- butil(dimetil)silil)oxi)-15-fluoro-7-(5-fluoro-4-oxo-3,4-dihidro-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il)-2,10-dihidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-9H-purin-6-il)benzamida

[1521] Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-(6-Benzamido-9H-purin-9- il)-2-((((((2R,3R,4R,5R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-(5-fluoro-4-oxo-3H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)-il)-5-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2- cianoetoxi)fosforil)oxi)metil)-4-fluorotetrahidrofuran-3-il (350 mg) foi sujeito a desidratação azeotrópica com acetonitrila anidra e piridina anidra, e foi adicionada piridina anidra (15 mL). Mistura foi adicionado 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2- dioxafosfinano 2-óxido (238 mg), e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio temperatura ambiente durante 1 h. Foi adicionada água (232 mL) e iodo (121 mg) e a mistura foi agitada temperatura ambiente durante mais 20 min. À mistura reacional foi adicionada uma mistura de penta-hidrato de tiossulfato de sódio (91 mg) e água (1 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 5 min. Foi adicionado tolueno e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foram adicionadas acetonitrila anidra (15 mL) e 2-metilpropan-2-amina (5,26 mL) e a mistura foi agitada temperatura ambiente durante 2 h e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (332 mg). MS: [M+H]+ 897,1 F) 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-16- ((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-15-fluoro-2,10-dihidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7- dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona

[1522] À N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-16-((terc- butil(dimetil)silil)oxi)-15-fluoro-7-(5-fluoro-4-oxo-3,4-dihidro-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il)-2,10-dihidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-9H-purin-6-il)benzamida (332 mg) foi adicionada solução de etanolamina a 40% (7,6 mL) e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio temperatura ambiente durante 1 h e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (metanol/acetato de etila), e o resíduo obtido foi purificado por HPLC (L- column2 ODS, 50 x 150 mm, fase móvel: solução aquosa de acetato de amônio 5 mM/acetonitrila) para obter o composto do título (106,4 mg). MS: [M+H]+ 793,1 G) 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-15- fluoro-2,10,16-trihidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina

[1523] À 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9- il)-16-((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-15-fluoro-2,10-dihidroxi-2,10-dioxidooctahidro- 12H-5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5- fluoro-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (106,4) foi adicionado tri- hidrofluoreto de trietilamina (1094 μL). A mistura de reação foi agitada a 50°C durante 1 h, e resfriada à temperatura ambiente, etoxi(trimetil)silano (6266 μL) foi adicionada a isso, e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 1 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida, e ao resíduo foram adicionados etoxi(trimetil)silano (6266 μL) e metanol (1 mL), e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 1 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna C18 (acetonitrila/10 mM de solução tampão de acetato de trietilamônio) para obter o composto do título (82 mg). 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 1,18 (18H, t, J = 7,3 Hz), 3,11 (12H, q, J = 7,4 Hz), 4,01-4,14 (2H, m), 4,17-4,26 (1H, m), 4,34 (2H, d, J = 3,4 Hz), 4,42-4,50 (1H, m), 4,54 (1H, d, J = 4,2 Hz), 4,86-4,99 (2H, m), 5,38-5,60 (1H, m), 6,30-6,45 (2H, m), 7,24 (1H, d, J = 2,0 Hz), 7,91 (1H, s), 8,05 (1H, s), 8,17 (1H, s). 31P NMR (162 MHz, D2O) δ -2,16, -1,66. EXEMPLO 1a Síntese de sal 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H- purin-9-il)-15-fluoro-2,10,16-trihidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7- dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona dissódico

[1524] Água desionizada (480 mL) foi passada através de uma coluna preparada por uma embalagem de resina permutadora de cátions AG (nome comercial) 50W-X8 (malha 100-200, 30 g) numa coluna vazia. Em seguida, uma solução aquosa de hidróxido de sódio 1 M (288 mL) e água desionizada (540 mL) foram passadas através da resina. Água desionizada (54 mL) contendo sal de 7- ((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-15-fluoro- 2,10,16-trihidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (1,53 g) foi passado através da resina após o pré-tratamento mencionado acima, e água desionizada (72 ml) foi passada através da resina, e a solução aquosa obtida foi liofilizada para obter o composto do título (1,28 g). 1H NMR (300 MHz, D2O) δ 4,05-4,17 (2H, m), 4,20-4,28 (1H, m), 4,33-4,40 (2H, m), 4,44-4,51 (1H, m), 4,55 (1H, d, J = 4,2 Hz), 4,84-5,01 (2H, m), 5,39-5,61 (1H, m), 6,31-6,40 (2H, m), 7,25 (1H, d, J = 2,0 Hz), 7,91 (1H, s), 8,07 (1H, s), 8,18 (1H, s). 31P NMR (121 MHz, D2O) δ -2,2, -1,6. EXEMPLO 2 Síntese de sal 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H- purin-9-il)-15-fluoro-10,16,2-trihidroxi-10,2-dioxidooctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7- dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico) A) 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-16- ((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-15-fluoro-10-hidroxi-2,10-dioxido-2-sulfaniloctahidro- 12H-5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5- fluoro-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico)

[1525] Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-(6-Benzamido-9H-purin-9- il)-2-((((((2R,3R,4R,5R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-(5-fluoro-4-oxo-3H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)-il)-5-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2- cianoetoxi)fosforil)oxi)metil)-4-fluorotetrahidrofuran-3-il (700 mg) foi sujeito a desidratação azeotrópica com acetonitrila anidra e piridina anidra, e foi adicionada piridina anidra a isso (50 mL). À mistura foi adicionado 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2- dioxafosfinano 2-óxido (475 mg) temperatura ambiente e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio temperatura ambiente durante 1 h. Foi adicionada água (464 μL) e 3H-benzo[c][1,2]ditiol-3-ona (186 mg) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante mais 30 min. Mistura reacional foi adicionada uma mistura de tiossulfato de sódio (913 mg) e água (3 mL) e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foram adicionadas acetonitrila anidra (30 mL) e 2-metilpropan- 2-amina (10 mL) e a mistura foi agitada temperatura ambiente durante 1 h e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (metanol/acetato de etila) e ao resíduo obtido foi adicionada solução de etanolamina a 40% (7,3 mL). A mistura foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 30 min e a mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (metanol/acetato de etila). O resíduo obtido foi resolvido em dois diastereômeros (tR1 e tR2, cujos tempos de retenção por LC/MS são de mais curto a mais longo nesta ordem) por HPLC (L-column2 ODS, 50 x 150 mm, fase móvel: 5 mM de solução aquosa de acetato de amônio/acetonitrila) para obter o composto em título (70 mg, tR1) e o composto em título (150 mg, tR2). MS (tR1): [M+H]+ 809,1. MS (tR2): [M+H]+ 809,1 B) Sal 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)- 15-fluoro-10,16-dihidroxi-2,10-dioxido-2-sulfaniloctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico)

[1526] À 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9- il)-16-((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-15-fluoro-10-hidroxi-2,10-dioxido-2- sulfaniloctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico) (70 mg, derivado de tR1) foram adicionados metanol (3,0 mL) e trihidrofluoreto de trietilamina (1,41 mL). A mistura reacional foi concentrada para remover o metanol e o resíduo foi agitado a 55 °C durante 1 h. O resíduo foi arrefecido até à temperatura ambiente, foi adicionado etoxi (trimetil) silano (7,8 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna C18 (acetonitrila/solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM) para obter o composto do título (56 mg). 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 1,23 (18H, t, J = 7,3 Hz), 3,15 (12H, q, J = 7,3 Hz), 4,154,23 (3H, m), 4,37-4,50 (2H, m), 4,54 (1H, d, J = 10,3 Hz), 4,61 (1H, d, J = 3,9 Hz), 4,96 (2H, dt, J = 7,9, 3,9 Hz), 5,77-5,95 (1H, m), 6,36 (1H, d, J = 8,1 Hz), 6,40 (1H, d, J = 15,4 Hz), 7,51 (1H, d, J = 1,7 Hz), 7,99 (2H, d, J = 13,7 Hz), 8,23 (1H, s). 31P NMR (162 MHz, D2O) δ-2,43, 54,03. EXEMPLO 3 Síntese de sal 7-((2R,5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H- purin-9-il)-15-fluoro-10,16-dihidroxi-2,10-dioxido-2-sulfaniloctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7- dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona 1,7 trietilamina

[1527] À 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9- il)-16-((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-15-fluoro-10-hidroxi-2,10-dioxido-2- sulfaniloctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico) (150 mg, derivado de tR2) foram adicionados metanol (3,0 mL) e trihidrofluoreto de trietilamina (3,02 mL). A mistura reacional foi concentrada para remover o metanol e o resíduo foi agitado a 55 °C durante 1 h. O resíduo foi arrefecido até à temperatura ambiente, foi adicionado etóxi(trimetil)silano (16,4 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna C18 (acetonitrila/solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM) para obter o composto do título (155 mg). 1H NMR (400 MHz, D2O) δ 1,23 (15H, t, J = 7,3 Hz), 3,15 (10H, q, J = 7,3 Hz), 4,06 (1H, dd, J = 11,7, 4,9 Hz), 4,18 (1H, dd, J = 11,6, 2,8 Hz), 4,29-4,47 (3H, m), 4,51 (1H, d, J = 8,8 Hz), 4,58 (1H, d, J = 3,9 Hz), 4,93-5,14 (2H, m), 5,44-5,64 (1H, m), 6,33-6,45 (2H, m), 7,32 (1H, d, J = 1,5 Hz), 7,95 (1H, s), 8,06 (1H, s), 8,24 (1H, s). 31P NMR (162 MHz, D2O) δ-2,41,55,33. EXEMPLO 3a Síntese de sal dissódio 7-((2R,5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6- amino-9H-purin-9-il)-15-fluoro-10,16-dihidroxi-2,10-dioxido-2-sulfaniloctahidro- 12H-5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5- fluoro-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona

[1528] Água desionizada (400 mL) foi preparada por uma embalagem de resina permutadora de cátions AG (nome comercial) 50W-X8 (malha 100-200, 25,3 g) numa coluna vazia. Em seguida, uma solução aquosa de hidróxido de sódio 1 M (240 mL) e água desionizada (450 mL) foram passadas através da resina. Água desionizada (45 mL) contendo sal 7- ((2R,5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purina-9-il)-15-fluoro- 10,16-di-hidroxi-2,10-dioxido-2-sulfanilocta-hidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-di-hidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (1,30 g) foi passado através da resina após o pré-tratamento acima mencionado, e água desionizada (60 mL) foi passada através da resina para obter uma solução aquosa contendo o composto do título.

[1529] Água desionizada (400 mL) foi passada através de uma coluna preparada por uma embalagem de resina permutadora de cátions AG (nome comercial) 50W-X8 (malha 100-200, 26,3 g) numa coluna vazia. Em seguida, uma solução aquosa de hidróxido de sódio 1 M (270 mL) e água desionizada (540 mL) foram passadas através da resina. Água desionizada (54 mL) contendo sal 7- ((2R,5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purina-9-il)-15-fluoro- 10,16-di-hidroxi-2,10-dioxido-2-sulfanilocta-hidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-di-hidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (1,18 g) foi passado através da resina após o pré-tratamento acima mencionado, e água desionizada (63 mL) foi passada através da resina para obter uma solução aquosa contendo o composto do título. As duas soluções aquosas contendo o composto do título foram combinadas e liofilizadas para obter o composto do título (2,0 g). 1H NMR (300 MHz, D2O) δ 3,974,07 (1H, m), 4,11-4,20 (1H, m), 4,27-4,42 (3H, m), 4,43-4,51 (1H, m), 4,55 (1H, d, J = 3,8 Hz), 4,88-5,12 (2H, m), 5,34-5,59 (1H, m), 6,30-6,40 (2H, m), 7,28 (1H, d, J = 1,9 Hz), 7,91 (1H, s), 8,01 (1H, s), 8,18 (1H, s). 31P NMR (121 MHz, D2O) δ -2,38, 55,3. EXEMPLO 4 Síntese de sal 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,16R)-14-(6-amino-9H- purin-9-il)-2,10,15,16-tetrahidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina A) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-4- ((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-((((((2R,3R,4R,5R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-(5- fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)-il)-5-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3- il)oxi)(2-cianoetoxi)fosforil)oxi)metil)tetrahidrofuran-3-il

[1530] N-Benzoil-2'-O-(terc-butil(dimetil)silil)-3'-O- (hidroxi(oxido)fosforanil)adenosina (369 mg) e 7-(5-O-(bis(4- metoxifenil)(fenil)metil)-3-O-(terc-butil(dimetil)silil)-2-O-((2- cianoetoxi)(diisopropilamino)fosfino)-beta-D-ribofuranosil)-5-fluoro-3,7-di-hidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (817 mg) foram submetidas a desidratação azeotrópica com acetonitrila anidra (três vezes) e suspensa em acetonitrila anidra (3,6 mL) e THF anidro (1,2 mL). À suspensão foi adicionada uma mistura de 5-(etilsulfanil)-2H- tetrazol (262 mg) (que foi submetido a desidratação azeotrópica com acetonitrila anidra) e acetonitrila anidra (2,4 mL), e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio a temperatura ambiente durante 1,5 h. À solução reacional foi adicionada solução aquosa de hidroperóxido de terc-butil a 70% (0,276 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante mais 40 min. A mistura reacional foi extinta com tiossulfato de sódio (636 mg) e água (2 mL) e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em ácido acético a 80% (5 mL) e a solução foi agitada à temperatura ambiente durante 2,5 horas. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi submetido a desidratação azeotrópica com acetonitrila anidra e tolueno. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (538 mg). MS: [M+H]+ 1064,3. B) N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15,16-bis((tert- butil(dimetil)silil)oxi)-10-(2-cianoetoxi)-7-(5-fluoro-4-oxo-3,4-dihidro-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il)-2-hidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-9H-purin-6-il)benzamida

[1531] Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-(6-Benzamido-9H-purin-9- il)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-((((((2R,3R,4R,5R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-(5- fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)-il)-5-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3- il)oxi)(2-cianoetoxi)fosforil)oxi)metil)tetrahidrofuran-3-il (538 mg) foi submetido à desidratação azeotrópica com acetonitrila anidra e piridina anidra e suspensa em piridina anidra (12 mL). Foi adicionado 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosfinano 2- óxido (327 mg) e a mistura foi agitada temperatura ambiente durante 1 h. Foi adicionada água (0,319 mL) e iodo (167 mg) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante mais 30 min. A mistura reacional foi extinta com tiossulfato de sódio (208 mg) e água (2 mL) e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (509 mg). MS: [M+H]+ 1062,3. C) 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)- 15,16-bis((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-2,10-dihidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7- dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona

[1532] N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15,16-Bis((terc- butil(dimetil)silil)oxi)-10-(2-cianoetoxi)-7-(5-fluoro-4-oxo-3,4-dihidro-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il)-2-hidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-9H-purin-6-il)benzamida (509 mg) foi dissolvido em 33% de metilamina etanol solução (10 mL), a solução foi agitada sob atmosfera de argônio a temperatura ambiente durante 1 h e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (metanol/acetato de etila). O resíduo obtido foi purificado por HPLC (L-column2 ODS, 50 x 150 mm, fase móvel: solução aquosa de acetato de amônio 5 mM/acetonitrila) para se obter o composto do título (227 mg). MS: [M+H]+ 905,2. D) Sal 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)- 2,10,15,16-tetrahidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina

[1533] À 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9- il)-15,16-bis((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-2,10-dihidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H- 5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro- 3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (227 mg) foi adicionado tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,818 mL) e a mistura foi agitada a 50°C durante 5 horas. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida, o resíduo foi neutralizado com solução aquosa de bicarbonato de trietilamônio 1 M e o solvente foi novamente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel C18 (solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM/acetonitrila) e o sólido obtido foi liofilizado para obter o composto do título (103 mg). 1H NMR (300 MHz, D2O) δ1,26 (18H, t, J = 7,4 Hz), 3,18 (12H, q, J = 7,4 Hz), 4,06-4,29 (3H, m), 4,344,52 (3H, m), 4,62 (1H, d, J = 3,8 Hz), 4,69-4,83 (1H, m), 4,84-4,95 (1H, m), 4,985,09 (1H, m), 6,14 (1H, d, J = 1,5 Hz), 6,41 (1H, dd, J = 8,3, 1,5 Hz), 7,33 (1H, d, J = 1,9 Hz), 7,99 (1H, s), 8,16 (1H, s), 8,25 (1H, s). 31P NMR (121 MHz, D2O) δ-1,96,- 1,21. EXEMPLO 5 Sal 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)- 15,16-dihidroxi-2,10-dioxido-2,10-disulfaniloctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico) A) 7-(5-O-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-3-O-(terc-butil(dimetil)silil)-2-O- (hidroxi(oxido)fosfanil)-beta-D-ribofuranosil)-5-fluoro-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-4-ona

[1534] 7-(5-O-(Bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-3-O-(terc-butil(dimetil)silil)- beta-D-ribofuranosil)-5-fluoro-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (835 mg) foi dissolvido em piridina (4 mL) e foi adicionado difenil-fosfito a isso (0,456 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Água (1 mL) e hidróxido de amônio (2 mL) foram adicionados a isso. A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 30 min e a mistura reacional foi diluída com água e extraída com acetato de etila. O extrato foi seco sobre sulfato de magnésio anidro e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (611 mg). MS: [M-H]- 764,1. B) 7-(3-O-(terc-butil(dimetil)silil)-2-O-(hidroxi(oxido)fosforanil)-beta-D- ribofuranosil)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona

[1535] Uma mistura de 7-(5-O-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-3-O-(terc- butil(dimetil)silil)-2-O-(hidroxi(oxido)fosforanil)-beta-D-ribofuranosil)-5-fluoro-3,7- dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (611 mg) e 80% ácido acético (4 mL) foi agitada temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura reacional foi diluída com metanol e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (358 mg). MS: [M+H]+ 464,1. C) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-((((((2R,3R,4R,5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2- (hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi)fosforotioil)oxi)metil)-4-((terc- butildimetilsilil)oxi)-2-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)- il)tetrahidrofuran-3-il

[1536] Uma mistura de 7-(3-O-(terc-butil(dimetil)silil)-2-O- (hidroxi(oxido)fosforanil)-beta-D-ribofuranosil)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-4-ona (358 mg) e N-benzoil-5'-O-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-2'-O- (terc-butil(dimetil)silil)-3'-O-((2-cianoetoxi)(diisopropilamino)fosfino)adenosina (1,02 g) foi submetida a desidratação azeotrópica com acetonitrila anidra, e suspensa em acetonitrila anidra (10 mL). Foi adicionado 2,2,2-trifluoroacetato de piridina (386 mg) e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio a temperatura ambiente durante 1 h. Foi adicionado ((dimetilamino-metilideno)amino)-3H-1,2,4- ditiazolina-3-tiona (199 mg) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante mais 30 min. A mistura reacional foi extinta com uma solução aquosa (2,5 mL) de tiossulfato de sódio (250 mg) e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em 1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol (10 mL), a solução foi agitada temperatura ambiente durante 30 min e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (328 mg). MS: [M+H]+ 1080,3. D) N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15,16-bis((terc- butil(dimetil)silil)oxi)-2-(2-cianoetoxi)-7-(5-fluoro-4-oxo-3,4-dihidro-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il)-10-oxido-10-sulfanil-2-sulfidooctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-9H-purin-6-il)benzamida (isômero óptico)

[1537] A uma mistura de hidrogenofosfonato (2R,3R,4R,5R)-5- ((((((2R,3R,4R,5R)-5-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2- (hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi)fosforotioil)oxi)metil)-4-((terc- butildimetilsilil)oxi)-2-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)- il)tetrahidrofuran-3-il (328 mg) e piridina anidra (10 mL) foi adicionado 2-cloro-5,5- dimetil-1,3,2-dioxafosfinano 2-óxido (196 mg). A mistura foi agitada sob atmosfera de argônio a temperatura ambiente durante 30 min, foi adicionada água (0,5 mL) e 3H-benzo[c][1,2]ditiol-3-ona (61 mg), e a mistura foi agitada a temperatura ambiente por 1 hora. A mistura reacional foi diluída com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio e extraída com acetato de etila. O extrato foi seco sobre sulfato de sódio anidro e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (metanol/acetato de etila) e depois purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel C18 (tampão acetato de trietilamônio 10 mM/acetonitrila) para obter o composto do título (isômero óptico) (92 mg, tR4). MS: [M+H]+ 1094,3. E) 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)- 15,16-bis((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-2,10-dioxido-2,10-disulfaniloctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-I][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7- dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico)

[1538] N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15,16-Bis((terc- butil(dimetil)sill)oxi)-2-(2-cianoetoxi)-7-(5-fluoro-4-oxo-3,4-dihidro-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il)-10-oxido-10-sulfanil-2-sulfidooctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-9H-purin-6-il)benzamida (isômero óptico) (90 mg) foi dissolvido em 40% de solução de metilamina-metanol (3,0 mL), a solução foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 1 h e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (32 mg). MS: [M+H]+ 937,1. F) Sal 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)- 15,16-dihidroxi-2,10-dioxido-2,10-disulfaniloctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico)

[1539] Uma mistura de 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6- amino-9H-purin-9-il)-15,16-bis((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-2,10-dioxido-2,10- disulfaniloctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico) (32 mg) e tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,12 mL) foi agitada a 50°C por 3 horas. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e neutralizada com solução aquosa de bicarbonato de trietilamônio a 1 M e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel C18 (solução de tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM/acetonitrila). O sólido obtido foi liofilizado para obter o composto em título (21 mg). 1H NMR (300 MHz, D2O) δ1. 23 (18H, t, J = 7. 3 Hz), 3. 15 (12H, q, J = 7. 4 Hz), 3. 99-4. 09 (1H, m), 4. 23-4. 30 (2H, m), 4. 30-4. 41 (2H, m), 4. 41-4. 45 (1H, m), 4. 47-4. 54 (1H, m), 4. 83-4. 88 (2H, m), 4. 96-5. 13 (3H, m), 6. 11 (1H, d, J = 1. 1 Hz), 6. 36 (1H, d, J = 7. 4 Hz), 7. 31 (1H, d, J = 1. 9 Hz), 7. 95 (1H, s), 8. 11 (1H, s), 8. 22 (1H, s). 31P NMR (121 MHz, D2O) δ52. 25, 54. 88. EXEMPLO 6 Síntese de sal 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-7-(6-amino-9H- purin-9-il)-15,16-dihidroxi-2,10-dioxido-2,10-disulfaniloctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-5-fluoro-3,7- dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico) A) 7-(5-O-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-2-O-(terc-butil(dimetil)silil)-beta-D- ribofuranosil)-5-fluoro-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona

[1540] A uma solução de 7-((2R,3R,4S,5R)-5-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-3,4-dihidroxitetrahidrofuran-2-il)-5-fluoro-3H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (2,65 g) em DMF (20 mL) foi adicionado imidazol (0,614 g) e terc-butildimetilclorosilano (0,816 g) e a mistura foi agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente. A mistura de reação foi diluída com água e extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com solução salina saturada e seco sobre sulfato de sódio anidro e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (acetato de etila/hexano) para obter o composto do título (1,2 g). MS: [M-H]- 700,3. B) 7-(5-O-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-2-O-(terc-butil(dimetil)silil)-3-O-((2- cianoetoxi)(diisopropilamino)fosfino)-beta-D-ribofuranosil)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona

[1541] 7-(5-O-(Bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-2-O-(terc-butil(dimetil)silil)- beta-D-ribofuranosil)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (2,37 g) foi dissolvido em DMF (6,75 mL), e à solução foram adicionados 3- ((bis(diisopropilamino)fosfino)oxi)propanenitril (2,15 mL), 1H-tetrazol (0,237 g) e 1- metil-1H-imidazol (0,134 mL), e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 20,5 horas. À solução reacional foi adicionada solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio e a mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com solução aquosa saturada e seco sobre sulfato de magnésio anidro e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (acetato de etila/hexano, contendo 0,5% de trietilamina) para obter o composto do título (2,67 g). MS: [M-H]- 900,2. C) 7-(2-O-(terc-butil(dimetil)silil)-3-O-(hidroxi(oxido)fosforanil)-beta-D- ribofuranosil)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona

[1542] 7-(5-O-(Bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-2-O-(terc-butil(dimetil)silil)-3- O-((2-cianoetoxi)(diisopropilamino)fosfino)-beta-D-ribofuranosil)-5-fluoro-3,7- dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (1,54 g) foi dissolvido em acetonitrila (15 mL), piridina 2,2,2-trifluoroacetato (0,396 g) e água (0,062 mL) foram adicionados a isso à temperatura ambiente e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 50 min. À solução reacional foi adicionada 2-metilpropan-2-amina (8,07 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida, ao resíduo foi adicionado ácido acético a 80% (8,54 mL) e a mistura foi agitada temperatura ambiente durante 1 h.

[1543] De forma semelhante, 7-(5-O-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-2-O- (terc-butil(dimetil)silil)-3-O-((2-cianoetoxi)(diisopropilamino)fosfino)-beta-D- ribofuranosil)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (1,13 g) foi dissolvido em acetonitrila (10 mL), e piridina 2,2,2-trifluoroacetato (0,290 g) e água (0,045 mL) foram adicionados a isso a temperatura ambiente, e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 50 min. À solução reacional foi adicionada 2- metilpropan-2-amina (5,92 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida, ao resíduo foi adicionado ácido acético a 80% (6,27 mL) e a mistura foi agitada temperatura ambiente durante 1 h.

[1544] As misturas reacionais foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (961 mg). MS: [M+H]+ 464,0. D) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-2-((((((2R,3R,4R,5R)-2-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-5- (hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi)fosforotioil)oxi)metil)-4-((terc- butildimetilsilil)oxi)-5-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)- il)tetrahidrofuran-3-il

[1545] 7-(2-O-(terc-Butil(dimetil)silil)-3-O-(hidroxi(oxido)fosforanil)-beta-D- ribofuranosil)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (400 mg) e N- benzoil-5'-O-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-3'-O-(terc-butil(dimetil)silil)-2'-O-((2- cianoetoxi)(diisopropilamino)fosfino)adenosina (1,02 g) foram submetidos a desidratação azeotrópica com acetonitrila anidra (três vezes), e foi suspensa em acetonitrila anidra (6 mL). Foi adicionado a isso 2,2,2-trifluoroacetato de piridina (333 mg), e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio a temperatura ambiente durante 1 h. Foi adicionado a isso (dimetilamino-metilideno)amino)-3H-1,2,4- ditiazolina-3-tiona (195 mg) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente por mais 30 min. A mistura reacional foi extinta com tiossulfato de sódio (316 mg) e água (0,5 mL) e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em 1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol (5 mL) e a solução foi agitada a temperatura ambiente durante 1 h. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi submetido a desidratação azeotrópica com acetonitrila anidra e tolueno. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (556 mg). MS: [M+H]+ 1080,3. E) N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15,16-bis((terc- butil(dimetil)silil)oxi)-10-(2-cianoetoxi)-14-(5-fluoro-4-oxo-3,4-dihidro-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-hidroxi-2,10-disulfidooctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-9H-purin-6- il)benzamida (isômero óptico)

[1546] Hidrogenofosfonato de ((2R,3R,4R,5R)-2-((((((2R,3R,4R,5R)-2-(6- Benzamido-9H-purin-9-il)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-5- (hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi)fosforotioil)oxi)metil)-4-((terc- butildimetilsilil)oxi)-5-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)- il)tetrahidrofuran-3-il (556 mg) foi submetido a desidratação azeotrópica com acetonitrila anidra e piridina anidra e dissolvida em piridina anidra (15 mL). À solução foi adicionado 2-cloro-5,5-dimetil-1, 3, 2-dioxafosfinano 2-óxido (332 mg) a temperatura ambiente, e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio a temperatura ambiente durante 30 min. Foi adicionada a isso água (1 mL) e 3H-1,2- benzoditiol-3-ona (108 mg) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante mais 1 h. À mistura reacional foi adicionada solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio e a mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com solução aquosa saturada de cloreto de sódio e seco sobre sulfato de sódio anidro e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (acetato de etila/metanol). O resíduo obtido foi resolvido em quatro diastereômeros (tR1, tR2, tR3 e tR4, cujos tempos de retenção por LC/MS foram desde mais curtos a mais longos nesta ordem) por HPLC (L-column2 ODS, 50 x 150 mm, fase móvel: Solução aquosa de acetato de amônio 5 mM/acetonitrila) para obter o composto do título (120 mg, tR2) e o composto do título (183 mg, tR4). tR2 MS: [M+H]+ 1094,3. tR4 MS: [M+H]+ 1094,3. F) 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-7-(6-amino-9H-purin-9-il)-15,16- bis((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-2,10-dioxido-2,10-disulfaniloctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-I][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-5-fluoro- 3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico)

[1547] N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15,16-Bis((terc- butil(dimetil)silil)oxi)-10-(2-cianoetoxi)-14-(5-fluoro-4-oxo-3,4-dihidro-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-oxido-2-sulfanil-10-sulfidooctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-9H-purin-6- il)benzamida (isômero óptico, derivado de tR2) (120 mg) foi dissolvido em 33% de solução de metilamina-etanol (5,0 mL), a solução foi agitada sob atmosfera de argônio a temperatura ambiente durante 1,5 h e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (84,4 mg). MS: [M + H]+ 937,2. G) Sal 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-7-(6-amino-9H-purin-9-il)- 15,16-dihidroxi-2,10-dioxido-2,10-disulfaniloctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico)

[1548] À 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-7-(6-amino-9H-purin-9- il)-15,16-bis((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-2,10-dioxido-2,10-disulfaniloctahidro-12H- 5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-5-fluoro- 3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico, derivado de tR2) (84,4 mg) foi adicionado tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,294 mL) foi agitada a 50°C durante 2 horas. A mistura foi arrefecida até a temperatura ambiente e neutralizada com solução aquosa de bicarbonato de trietilamônio a 1 M e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel C18 (solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM/acetonitrila) e o sólido obtido foi liofilizado para fornecer o composto do título (58,4 mg). 1H NMR (300 MHz, D2O) δ 1,26 (18H, t, J = 7,4 Hz), 3,18 (12H, q, J = 7,3 Hz), 3,94-4,05 (1H, m), 4,10-4,20 (1H, m), 4,28-4,45 (2H, m), 4,50 (2H, brs), 4,59 (1H, d, J = 4,2 Hz), 4,71-4,81 (1H, m), 5,32 (2H, d, J = 10,6 Hz), 6,23-6,32 (2H, m), 7,17 (1H, d, J = 2,3 Hz), 8,05 (1H, s), 8,20 (1H, s), 8,66 (1H, s), 31P NMR (121 MHz, D2O) δ55,8,59,2. EXEMPLO 7 Síntese de sal 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,16R)-7-(6-amino-9H- purin-9-il)-15,16-dihidroxi-2,10-dioxido-2,10-disulfaniloctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-5-fluoro-3,7- dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico) A) 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-7-(6-amino-9H-purin-9-il)- 15,16-bis((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-2,10-dioxido-2,10-disulfaniloctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-I][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-5-fluoro- 3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico)

[1549] N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15,16-Bis((terc- butil(dimetil)silil)oxi)-10-(2-cianoetoxi)-14-(5-fluoro-4-oxo-3,4-dihidro-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-oxido-2-sulfanil-10-sulfidooctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-9H-purin-6- il)benzamida (isômero óptico, derivado de tR4) (183 mg) foi dissolvido em 33% de solução de metilamina-etanol (5,0 mL), a solução foi agitada sob atmosfera de argônio a temperatura ambiente durante 1 h e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (107 mg). MS: [M+H]+ 937,1. B) Sal 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,16R)-7-(6-amino-9H-purin-9-il)- 15,16-dihidroxi-2,10-dioxido-2,10-disulfaniloctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico)

[1550] À 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-7-(6-amino-9H-purin-9- il)-15,16-bis((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-2,10-dioxido-2,10-disulfaniloctahidro-12H- 5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-5-fluoro- 3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico, derivado de tR4) (107 mg) foi adicionado trihidrofluoreto de trietilamina (0,372 mL), e a mistura foi agitada a 50°C durante 2,5 h. A solução reacional foi arrefecida a temperatura ambiente e neutralizada com 1 M de solução aquosa de bicarbonato de trietilamônio e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel C18 (solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM/acetonitrila) e o sólido obtido foi liofilizado para obter o composto do título (78 mg). 1H NMR (300 MHz, D2O) δ 1,26 (18H, t, J = 7,4 Hz), 3,18 (12H, q, J = 7,2 Hz), 4,09-4,18 (1H, m), 4,21-4,29 (2H, m), 4,33-4,43 (1H, m), 4,51 (2H, brs), 4,65-4,71 (1H, m), 4,89 (1H, d, J = 4,2 Hz), 4,99-5,11 (1H, m), 5,295,42 (1H, m), 6,23-6,31 (2H, m), 7,00 (1H, d, J = 1,9 Hz), 8,03 (1H, s), 8,17 (1H, s), 8,56 (1H, s), 31P NMR (121 MHz, D2O) δ52,8,55,1. EXEMPLO 8 Síntese de sal 2-amino-9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,16R)-14-(4- amino-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-7-il)-2,10,15,16-tetra-hidroxi-2,10- dioxido-octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-7-il)-1,9-di-hidro-6H-purin-6-ona di-trietilamina A) N-(7-((2R,3R,4S,5R)-5-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-3,4- dihidroxitetrahidrofuran-2-il)-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)benzamida

[1551] Di-benzoato de (2R, 3R, 4R, 5R)-2-((Benzoiloxi)metil)-5-(4-cloro-5- fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)tetrahidrofurano-3,4-diil (14,09 g) foi carregada em 17 recipientes de tubos de vedação em 17 partes, e foi adicionada uma solução de 2 M de amônia em isopropanol (20 mL), respectivamente. Cada mistura foi agitada com irradiação de micro-ondas a 130°C durante 5 h. As misturas obtidas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi submetido a evaporação azeotrópica duas vezes com tolueno para remover o solvente, foi adicionada piridina (100 mL) e a mistura foi arrefecida a 0°C. Cloreto de benzoil (26,6 mL) foi adicionado a 0°C e a mistura foi agitada durante a noite a temperatura ambiente. À mistura reacional foi adicionada água e a mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (acetato de etila/hexano). Ao composto obtido foi adicionada piridina (350 mL) e etanol (100 mL) e a mistura foi arrefecida a 0°C. Foi adicionada a isso solução aquosa de hidróxido de sódio 1 M (103 mL) e a mistura foi agitada a 0°C durante 1 h. Foi adicionado novamente a isso 1 M de solução aquosa de hidróxido de sódio (45,7 mL) e a mistura foi agitada a 0°C durante 1 h. À mistura reacional foi adicionada resina de permuta catiônica fortemente ácida DOWEXTM 50Wx4 100-200 (95 g) à temperatura ambiente, o sólido foi removido por filtração e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (metanol/acetato de etila). Ao produto obtido (5,71 g) foram adicionados piridina (60 mL) e cloreto de 4,4'-dimetoxitritil (5,98 g) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 4 h. Foi adicionado novamente cloreto de 4,4'- dimetoxitritil (5,98 g) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 1 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, foi adicionada água e a mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com água e solução salina e seco sobre sulfato de sódio anidro e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (acetato de etila/hexano) para obter o composto do título (8,50 g). MS: [M+H]+ 691,2. B) N-(7-((2R,3R,4R,5R)-5-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-3-((terc- butildimetilsilil)oxi)-4-hidroxitetrahidrofuran-2-il)-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)benzamida

[1552] À uma mistura de N-(7-((2R,3R,4S,5R)-5-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-3,4-di-hidroxitetra-hidrofuran-2-il)-5-fluoro-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)benzamida (7,51 g) e DMF (30 mL) foram adicionados imidazol (1,924 g) e terc-butildimetilclorosilano (2,13 g), e a mistura foi agitada durante a noite a temperatura ambiente. À mistura reacional foi adicionada água e a mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com água e solução salina e seco sobre sulfato de sódio anidro e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (acetato de etila/hexano) para obter o composto do título (2,94 g). MS, encontrado: 501,2. C) N-benzoil-7-(5-O-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-2-O-(terc- butil(dimetil)silil)-3-O-((2-cianoetoxi)(diisopropilamino)fosfino)-beta-D- ribofuranosil)-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina

[1553] N-(7-((2R,3R,4R,5R)-5-((Bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-3- ((terc-butildimetilsilil)oxi)-4-hidroxitetrahidrofuran-2-il)-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-4-il)benzamida (1,03 g) foi submetido a desidratação azeotrópica com tolueno anidro e DMF anidra (5 mL) sob atmosfera de argônio foi adicionado. 3 - ((Bis(diisopropilamino)fosfino)oxi)propanonitril (0,771 g), 1H-tetrazol (0,090 g) e 1- metil-1H-imidazol (0,051 mL) foram adicionados e a mistura foi agitada durante 6 h. À mistura reacional foi adicionada solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e a mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução salina e seco sobre sulfato de sódio anidro, e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (acetato de etila/hexano, contendo 0,5% de trietilamina) para obter o composto do título (1,12 g). 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ -0,17 (3H, d, J = 2,6 Hz), -0,04-0,00 (3H, m), 0,78 (9H, s), 1,04 (3H, d, J = 6,8 Hz), 1,13-1,23 (9H, m), 2,32 (1H, t, J = 6,6 Hz), 2,68 (1H, td, J = 6,4, 1,9 Hz), 3,21-3,36 (1H, m), 3,42-3,71 (4H, m), 3,79 (6H, d, J = 1,1 Hz), 3,85-4,05 (1H, m), 4,25-4,45 (2H, m), 4,64-4,82 (1H, m), 6,39 (1H, dd, J = 14,2, 5,9 Hz), 6,74-6,89 (4H, m), 7,19-7,41 (8H, m), 7,43-7,67 (5H, m), 7,98 (2H, d, J = 7,6 Hz), 8,50 (1H, s), 8,64 (1H, d, J = 5,3 Hz). D) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-(4-benzamido-5-fluoro-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-(hidroximetil)tetra- hidrofuran-3-il

[1554] À N-benzoil-7-(5-O-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-2-O-(terc- butil(dimetil)silil)-3-O-((2-cianoetoxi)(diisopropilamino)fosfino)-beta-D- ribofuranosil)-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (1,12 g) foram adicionados acetonitrila (5 mL), água (40 μL) e piridina 2,2,2-trifluoroacetato (258 mg). A mistura foi agitada temperatura ambiente durante 10 min, foi adicionado terc- butilamina (5,43 mL) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 1 h. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida, foi adicionado a isso ácido acético a 80% (5,5 mL) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante mais 1 h. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (527 mg). MS: [M+H]+ 567,2. E) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-(4-benzamido-5-fluoro-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-((((((2R,3R,4R,5R)-4- ((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-(hidroximetil)-2-(2-isobutilamido-6-oxo-1H-purin-9(6H)- il)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi)fosforil)oxi)metil)tetrahidrofuran-3-il

[1555] Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-(4-Benzamido-5-fluoro-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2- (hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il (527 mg) e 3'-O-(terc-butil(dimetil)silil)-2'-O-((2- cianoetoxi)(diisopropilamino)fosfino)-N-isobutirilguanosina (1,083 g) foram submetidos a desidratação azeotrópica três vezes com acetonitrila anidra e acetonitrila anidra (10 mL) foi adicionada a isso. Foi adicionado 2,2,2- trifluoroacetato de piridina (359 mg) a isso, e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 30 min. Foi adicionada solução aquosa de hidroperóxido de terc- butil a 70% (382 μL) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante mais 20 min. À mistura reacional foram adicionados tiossulfato de sódio (693 mg) e água (1 mL) e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado ácido acético a 80% (5 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi submetido a desidratação azeotrópica três vezes com tolueno. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (175 mg). MS: [M+H]+ 1149,4. F) N-(7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15,16-bis((terc- butil(dimetil)silil)oxi)-10-(2-cianoetoxi)-2-hidroxi-7-(2-((2-metilpropanoil)amino)-6- oxo-1,6-dihidro-9H-purin-9-il)-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-4-il)benzamida

[1556] Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-(4-Benzamido-5-fluoro-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-((((((2R,3R,4R,5R)-4- ((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-(hidroximetil)-2-(2-isobutilamido-6-oxo-1H-purin-9(6H)- il)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi)fosforil)oxi)metil)tetrahidrofuran-3-il (175 mg) foi submetida a desidratação azeotrópica três vezes com acetonitrila anidra e piridina anidra ( 3 mL) e 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosfinano 2-óxido (98 mg) foram adicionados a isso. A mistura foi agitada sob atmosfera de argônio a temperatura ambiente durante 10 min, água (96 mL) e iodo (50 mg) foram adicionados a isso e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante mais 20 min. A mistura reacional foi adicionada uma mistura de tiossulfato de sódio (98 mg) e água (0,4 mL) e a mistura foi agitada durante 5 min e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado duas vezes por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (48 mg). MS: [M+H]+ 1147,6. G) 2-amino-9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(4-amino-5-fluoro- 7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-15,16-bis((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-2,10-dihidroxi- 2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-1,9-dihidro-6H-purin-6-ona

[1557] N-(7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15,16-Bis((terc- butil(dimetil)silil)oxi)-10-(2-cianoetoxi)-2-hidroxi-7-(2-((2-metilpropanoil)amino)-6- oxo-1,6-dihidro-9H-purin-9-il)-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-4-il)benzamida (48 mg) foi submetida a desidratação azeotrópica duas vezes com acetonitrila anidra, foi adicionada a isso solução de etanolamina a 33% em etanol (2 mL) e a mistura foi agitada durante a noite sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente. A mistura obtida foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (acetato de etila/hexano). O resíduo obtido foi purificado por HPLC (L-column2 ODS, 50 x 150 mm, fase móvel: solução aquosa de acetato de amônio 5 mM/acetonitrila), a fração obtida foi concentrada sob pressão reduzida e o produto obtido foi liofilizado para obter o composto do título (5 mg). MS: [M+H]+ 920,3. H) Sal 2-amino-9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,16R)-14-(4-amino-5- fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,10,15,16-tetrahidroxi-2,10-dioxidooctahidro- 12H-5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-1,9- dihidro-6H-purin-6-ona di-trietilamina

[1558] Uma mistura de 2-amino-9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)- 14-(4-amino-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-15,16-bis((terc- butil(dimetil)silil)oxi)-2,10-dihidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-1,9-dihidro-6H-purin-6-ona (5 mg) e trihidrofluoreto de tiretilamina (200 μL) foi agitada a 50°C durante 1 hora. A mistura reacional foi arrefecida até a temperatura ambiente e neutralizada com solução aquosa de hidrogenocarbonato de trietilamônio a 1 M. A mistura reacional foi purificada por cromatografia em coluna C18 (acetonitrila/solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM), a fração objetiva foi concentrada sob pressão reduzida e o produto obtido foi liofilizado para obter o composto do título (3,2 mg). 1H NMR (600 MHz, D2O) δ 1,23 (18H, t, J = 7,3 Hz), 3,15 (12H, q, J = 7,3 Hz), 4,064,11 (1H, m), 4,14-4,19 (1H, m), 4,21-4,26 (1H, m), 4,31-4,37 (2H, m),4,40 (1H, d, J = 1,5 Hz), 4,56 (1H, dd, J = 15,2, 4,3 Hz), 4,61-4,68 (1H, m), 5,00 (1H, ddd, J = 8,5, 6,6, 4,5 Hz), 5,60 (1H, td, J = 7,9, 4,1 Hz), 5,93 (1H, d, J = 8,5 Hz), 6,26 (1H, s), 7,14 (1H, d, J = 1,6 Hz), 7,87 (1H, s), 8,10 (1H, s). EXEMPLO 10 Síntese de 1-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,16R)-14-(6-amino-9H-purin- 9-il)-2,10,15,16-tetrahidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-1,5-dihidro-4H-imidazo[4,5- c]piridin-4-ona A) Di-benzoato(2R,3R,4R,5R)-2-((benzoiloxi)metil)-5-(4-oxo-4,5- dihidro-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)tetrahidrofuran-3,4-diil

[1559] À 4-cloro-1H-imidazo[4,5-c]piridina (20 g) foram adicionados ácido fórmico (123 mL) e água (30 mL) a temperatura ambiente e a mistura foi agitada a 100°C durante 2 horas. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado ácido clorídrico concentrado (100 mL), e a mistura foi agitada a 100°C durante 1 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, o resíduo foi suspenso em MeOH (100 mL) e éter diisopropil (100 mL) e foi adicionada a isso trietilamina (50 mL). O sólido resultante foi coletado por filtração e dissolvido em acetonitrila (600 mL). Foi adicionado trimetilsilil N-(trimetilsilil)acetimidato (38,2 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada durante 10 min. À mistura reacional foi adicionado dibenzoato de (2S,3R,4R,5R)-2-acetoxi-5-((benzoiloxi)metil)tetra-hidrofurano-3,4- diil (79,0 g) a temperatura ambiente, e a mistura foi aquecida até 80°C. À solução reacional foi adicionado trifluorometanossulfonato de trimetilsilil (28,2 mL) e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio durante a noite a 80°C. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, foi adicionada água (500 mL) e o sólido resultante foi coletado por filtração. O sólido foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (25,9 g). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4,65-4,96 (3H, m), 5,91 (2H, brs), 6,23-6,42 (1H, m), 6,64 (1H, brs), 7,15 (1H, brs), 7,32-7,56 (9H, m), 7,92-8,15 (7H, m), 12,11- 12,50 (1H, m). MS: [M+H]+ 580,1 B) 1-((2R,3R,4S,5R)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximetil)tetrahidrofuran-2-il)-1H- imidazo[4,5-c]piridin-4(5H)-ona

[1560] Ao Dibenzoato (2R,3R,4R,5R)-2-((benzoiloxi)metil)-5-(4-oxo-4,5- dihidro-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)tetrahidrofuran-3,4-diil (30,0 g) foi adicionada uma solução de metanol e metilamina a 40% (200 mL) e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio a temperatura ambiente durante 1 h e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de hexano-acetato de etila para obter o composto do título (11,2 g). MS: [M+H]+ 268,1 C) 1-((2R,3R,4S,5R)-5-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-3,4- dihidroxitetrahidrofuran-2-il)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4(5H)-ona

[1561] A uma solução de 1-((2R,3R,4S,5R)-3,4-dihidroxi-5- (hidroximetil)tetrahidrofuran-2-il)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4(5H)-ona (18,0 g) em piridina (140 mL) foi adicionado cloreto de 4,4'-dimetoxitritil (18,46 g) a temperatura ambiente e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida, ao resíduo foi adicionada água e a mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato obtido foi lavado com solução salina saturada e seco sobre sulfato de sódio anidro e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (18,2 g). MS: [M+H]+ 570,2 D) 1-((2R,3R,4S,5R)-5-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-((terc- butildimetilsilil)oxi)-3-hidroxitetrahidrofuran-2-il)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4(5H)-ona

[1562] A uma solução de 1-((2R,3R,4S,5R)-5-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-3,4-dihidroxitetrahidrofuran-2-il)-1H-imidazo[4,5- c]piridin-4(5H)-ona (18,02 g) em DMF (158 mL) foram adicionados imidazol (4,30 g) e terc-butildimetilclorosilano (5,72 g), e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 3 h. Terc-butildimetilclorossilano (2,38 g) foi adicionado novamente a isso e a mistura foi agitada durante 3 h. A mistura reacional foi diluída com água e extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com solução salina saturada e seco sobre sulfato de sódio anidro e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (acetato de etila/hexano). O regioisômero isolado do composto do título foi dissolvido em MeOH e trietilamina e a solução foi agitada durante a noite a temperatura ambiente. A solução reacional foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (acetato de etila/hexano) para obter o composto do título (11,5 g). MS: [M+H]+ 684,2 E) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-(4-oxo-4,5-dihidro-1H- imidazo[4,5-c]piridin-1-il)tetrahidrofuran-3-il

[1563] A uma mistura de 1-((2R,3R,4S,5R)-5-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-3-hidroxitetrahidrofuran- 2-il)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4(5H)-ona (8,0 g) e piridina (117 mL) foi adicionado difenil fosfito (4,5 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. Foi adicionada água (20 mL) à mistura reacional. A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 30 min e a mistura reacional foi diluída com água e extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com solução salina saturada e seco sobre sulfato de magnésio anidro e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (8,5 g). MS: [M+H]+ 748,3 F) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-5- (hidroximetil)-2-(4-oxo-4,5-dihidro-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)tetrahidrofuran-3-il

[1564] Uma mistura de hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-(4-oxo-4,5-dihidro-1H- imidazo[4,5-c]piridin-1-il)tetrahidrofuran-3-il (8,2 g) e 1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan- 2-ol (30 mL) foi agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. Foi adicionado metanol (10 mL), a mistura foi agitada a 60°C durante 1 h e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de acetato de etila e éter diisopropílico para obter o composto do título (4,3 g). MS: [M+H]+ 446,1 G) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-((((((2R,3R,4R,5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2- (hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi)fosforil)oxi)metil)-4-((terc- butildimetilsilil)oxi)-2-(4-oxo-4,5-dihidro-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1- il)tetrahidrofuran-3-il

[1565] Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-4-((terc-Butildimetilsilil)oxi)-5- (hidroximetil)-2-(4-oxo-4,5-dihidro-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)tetrahidrofuran-3-il (250 mg) e N-benzoil-5'-O-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-2'-O-(terc- butil(dimetil)silil)-3'-O-((2-cianoetoxi)(diisopropilamino)fosfino)adenosina (776 mg) foram submetidos a desidratação azeotrópica com acetonitrila anidra, e foi adicionada acetonitrila anidra a isso (5,61 mL). À mistura foi adicionado 2,2,2- trifluoroacetato de piridina (271 mg) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 40 min. Foi adicionada solução aquosa de hidroperóxido de terc-butil a 70% (231 mL) e a mistura foi agitada temperatura ambiente durante 20 min. À mistura reacional foi adicionada uma mistura de tiossulfato de sódio (1,3 g) e água (3 mL) e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado 1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol (15 mL) e a mistura foi agitada temperatura ambiente durante 1 h. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (acetato de etila/hexano e metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (170 mg). MS: [M+H]+ 1046,3 H) N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15,16-bis((terc- butil(dimetil)silil)oxi)-2-(2-cianoetoxi)-10-hidroxi-2,10-dioxido-7-(4-oxo-4,5-dihidro- 1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-9H-purin-6-il)benzamida

[1566] Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-((((((2R,3R,4R,5R)-5-(6- Benzamido-9H-purin-9-il)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2- (hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi)fosforil)oxi)metil)-4-((terc- butildimetilsilil)oxi)-2-(4-oxo-4,5-dihidro-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1- il)tetrahidrofuran-3-il (160 mg) foi submetido a desidratação azeotrópica com piridina anidra e foi adicionada piridina anidra a isso (3,0 mL). À mistura foi adicionado 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosfinano 2-óxido (99 mg) temperatura ambiente e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 1 h. Foi adicionada água (96 mL) e iodo (50,5 mg) e a mistura foi agitada temperatura ambiente durante mais 20 min. À mistura reacional foi adicionada uma mistura de tiossulfato de sódio (190 mg) e água (0,4 mL) e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (10,6 mg). MS: [M+H]+ 1044,3 I) 1-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)- 15,16-bis((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-2,10-dihidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-1,5-dihidro- 4H-imidazo[4,5-c]piridin-4-ona

[1567] À N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15,16-bis((terc- butil(dimetil)silil)oxi)-2-(2-cianoetoxi)-10-hidroxi-2,10-dioxido-7-(4-oxo-4,5-dihidro- 1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-9H-purin-6-il)benzamida (10,6 mg) foi adicionada uma solução de etanolamina a 40% (5,0 mL) e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio temperatura ambiente durante 1 h e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (9,0 mg). MS: [M+H]+ 887,2 J) 1-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)- 2,10,15,16-tetrahidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8-methnofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-1,5-dihidro-4H-imidazo[4,5- c]piridin-4-ona

[1568] À 1-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9- il)-15,16-bis((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-2,10-dihidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H- 5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-1,5- dihidro-4H-imidazo[4,5-c]piridin-4-ona (9,0 mg) foram adicionados metanol (1,0 mL) e trihidrofluoreto de trietilamina (165 μL). A mistura reacional foi concentrada para remover o metanol e o resíduo foi agitado a 55°C durante 1 h. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, foi adicionada etóxi(trimetil)silano (0,90 mL) a isso e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna C18 (acetonitrila/solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM) para obter o composto do título (0,3 mg). 1H NMR (400 MHz, D2O) a 4. 15 (2H, d, J = 11. 5 Hz), 4. 46 (4H, brs), 4. 56-4. 62 (1H, m), 4. 98-4. 99 (2H, m), 6. 05-6. 20 (2H, m), 6. 79-6. 87 (1H, m), 7. 06-7. 12 (1H, m), 8. 00 (1H, s), 7. 96-8. 10 (1H, m), 8. 23 (2H, s). 31P NMR (162 MHz, D2O) δ -2. 36,-1. 94. EXEMPLO 11 Síntese de sal 2-amino-9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,16R)-14-(4- amino-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)-2,10,15,16-tetrahidroxi-2,10-dioxidooctahidro- 12H-5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-1,9- dihidro-6H-purin-6-ona di-trietilamina A) N-benzoil-1-(2-O-(terc-butil(dimetil)silil)-3,5-O-(di-terc-butilsilileno)-beta- D-ribofuranosil)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4-amina

[1569] N-Benzoil-1-(beta-D-ribofuranosil)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4-amina (2,41 g) foi dissolvido em DMF (25 mL), di-terc-butilsilonediil bis(trifluorometanosulfonato) (2,32 mL) foi adicionado a 0°C e a mistura foi agitada a 0°C durante 75 min. Di-terc-butilsilanediil bis(trifluorometanosulfonato) (0,63 mL) foi adicionada a isso a 0°C, e a mistura foi agitada a 0°C por mais 30 min. Di-terc- butilsilanodiil bis (trifluorometanossulfonato) (0,63 mL) foi adicionado a isso a 0°C e a mistura foi agitada a 0°C durante mais 35 min. À mistura reacional foi adicionado 1H-imidazol (2,22 g) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 10 min. Terc-butildimetilclorossilano (1,18 g) foi adicionado a isso e a mistura foi agitada a 60°C durante 1,5 h. Terc-butildimetilclorossilano (0,294 g) foi adicionada a isso e a mistura foi agitada a 60°C durante 14,5 horas. A mistura reacional foi diluída com água e extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com solução aquosa saturada de cloreto de sódio e seco sobre sulfato de sódio anidro e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (acetato de etila/hexano) para dar o composto do título (3,28 g). MS: [M+H]+ 625,2. B) N-benzoil-1-(2-O-(terc-butil(dimetil)silil)-beta-D-ribofuranosil)-1H- imidazo[4,5-c]piridin-4-amina

[1570] Dissolveu-se poli(fluoreto de hidrogênio) de piridínio (1,86 mL) em piridina (10 mL) a 0°C, adicionou-se a solução a uma solução de N-benzoil-1-(2-O- (terc-butil(dimetil)silil)-3,5-O-(di-terc-butilsilileno)-beta-D-ribofuranosil)-1H- imidazo[4,5-c]piridin-4-amina (1,64 g) em THF (13 mL) a 0°C, e a mistura foi agitada a 0°C durante 8 min. Esta reação foi repetida duas vezes. As soluções reacionais foram combinadas, diluídas com água e extraídas com acetato de etila. O extrato foi lavado com solução aquosa saturada de cloreto de sódio e seco sobre sulfato de sódio anidro e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (acetato de etila/hexano e metanol/acetato de etila) para dar o composto do título (2,24 g). MS: [M+H]+ 485,1. C) N-benzoil-1-(5-O-(bis (4-metoxifenil)(fenil)metil)-2-O-(terc- butil(dimetil)silil)-beta-D-ribofuranosil)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4-amina

[1571] N-benzoil-1-(2-O-(terc-butil(dimetil)silil)-beta-D-ribofuranosil)-1H- imidazo[4,5-c]piridin-4-amina (2,24 g) foi dissolvida em piridina (25 mL), cloreto de 4,4'-dimetoxitritil (2,04 g) foi adicionado à temperatura ambiente e agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 4,5 horas. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida, ao resíduo foi adicionada água e a mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com solução aquosa saturada de cloreto de sódio e seco sobre sulfato de sódio anidro e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (acetato de etila/hexano) para dar o composto do título (3,29 g). MS: [M+H]+ 787,3. D) N-benzoil-1-(5-O-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-2-O-(terc- butil(dimetil)silil)-3-O-((2- cianoetoxi)(di-isopropilamino)fosfino)-beta-D- ribofuranosil)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4-amina

[1572] N-Benzoil-1-(5-O-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-2-O-(terc- butil(dimetil)silil)-beta-D-ribofuranosil)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4-amina (3,29 g) foi dissolvida em DMF anidro (9,5 mL), à solução foram adicionados 3- ((bis(diisopropilamino)fosfino)oxi)propanonitril (2,98 mL), 1H-tetrazol (0,328 g) e 1- metil-1H-imidazol (0,185 mL) e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 2,5 horas. À solução reacional foi adicionada solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada, e a mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com solução aquosa saturada de cloreto de sódio e seco sobre sulfato de sódio anidro e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (acetato de etila/hexano, contendo 0,5% de trietilamina) para dar o composto do título (3,85 g). MS: [M+H]+ 987,4. E) N-benzoil-1-(2-O-(terc-butil(dimetil)silil)-3-O-(hidroxi(oxido)fosforanil)- beta-D-ribofuranosil)-1H-imidazo[4,5- c]piridina-4-amina

[1573] N-Benzoil-1-(5-O-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-2-O-(terc- butil(dimetil)silil)-3-O-((2-cianoetoxi)(diisopropilamino))fosfino)-beta-D- ribofuranosil)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4-amina (3,85 g) foi dissolvido em acetonitril (30 mL), 2,2,2-trifluoroacetato de piridina (0,904 g) e água (0,141 mL) foram adicionados a esta temperatura ambiente e a mistura foi agitada temperatura ambiente durante 30 min. À solução reacional foi adicionada 2-metilpropan-2-amina (9 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 40 min. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e ao resíduo foi adicionado 1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol (25 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3,5 h. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida, foi-lhe adicionado ácido acético (20 mL) e água (5 mL) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 1 h. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (metanol/acetato de etila) para dar o composto do título (1,85 g). MS: [M+H]+ 549,1. F) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-(4-benzamido-1H-imidazo[4,5- c]piridin-1-il)-4-((tert-butildimetilsilil) oxi)-2-((((((2R,3R,4R,5R)-4 -((tert- butildimetilsilil)oxi)-5-(hidroximetil)-2-(2-isobutilamido-6-oxo-1H-purin-9(6H)- il)tetrahidrofurano-3-il)oxi)(2-cianoetoxi)fosforil)oxi)metil)tetra-hidrofurano-3-il

[1574] N-Benzoil-1-(2-O-(terc-butil(dimetil)silil)-3-O- (hidroxi(oxido)fosforanil)-beta-D-ribofuranosil)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4-amina (300 mg) e 5'-O-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-3'-O-(terc-butil(dimetil)silil)-2'-O-((2- cianoetoxi)(di-isopropilamino)fosfino)-N-isobutirilguanosina (637 mg) foram submetidos a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro (três vezes), e suspensos em acetonitril anidro (6 mL). Adicionou-se 2,2,2-trifluoroacetato de piridina (264 mg) e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 1 h. Adicionou-se solução aquosa a 70% de hidroperóxido de terc-butil (0,225 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante mais 1 h. A mistura reacional foi extinta com tiossulfato de sódio (400 mg) e água (1,5 mL) e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em ácido acético a 80% (5 mL) e a solução foi agitada à temperatura ambiente durante 45 min. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi submetido a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro e tolueno. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (469 mg). MS: [M+H]+ 1131,4. G) N-(1-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15,16-bis((terc- butil(dimetil)silil)oxi)-10-(2-cianoetoxi)-2-hidroxi-7-(2-(isobutirilamino)-6-oxo-1,6-di- hidro-9H-purin-9-il)-2,10-dioxido-octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatriciclotetradecin-14-il)-1H-imidazo[4,5-c]piridin- 4-il)benzamida

[1575] Hidrogenofosfonato de 2R,3R,4R,5R)-5-(4-Benzamido-1H- imidazo[4,5-c]piridin-1-il)-4-((tert-butildimetilsilil)oxi)-2-((((((2R,3R,4R,5R)-4-((tert- butildimetilsilil)oxi)-5-(hidroximetil)-2-(2-isobutilamido-6-oxo-1H-purin-9(6H)-il)tetra- hidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi)fosforil)oxi)metil)tetra-hidrofuran-3-il (469 mg) foi sujeito a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro e piridina anidra, e suspenso em piridina anidra (10 mL). Foi adicionado 2-óxido de 2-cloro-5,5-dimetil- 1,3,2-dioxafosfinano (268 mg) e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 15 min. Adicionou-se água (1 mL) e iodo (158 mg) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante mais 13 min. A mistura reacional foi extinta com tiossulfato de sódio (170 mg) e água (0,5 mL), o solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi submetido a desidratação azeotrópica com tolueno. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (419 mg). MS: [M+H]+ 1129,3. H) 2-amino-9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(4-amino-1H- imidazo[4,5-c]piridin-1-il)-15,16-bis((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-2,10-di-hidroxi-2,10- dioxido-octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-7-il)-1,9-di-hidro-6H-purin-6-ona

[1576] N-(1-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15,16-Bis((terc- butil(dimetil)silil)oxi)-10-(2-cianoetoxi)-2-hidroxi-7-(2-(isobutirilamino)-6-oxo-1,6-di- hidro-9H-purin-9-il)-2,10-dioxido-octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-14-il)-1H-imidazo[4,5-c]piridin- 4-il)benzamida (419 mg) foi dissolvido em 33% solução de etanolamina metilada (10,0 mL), e a solução foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 18,5 horas. Adicionou-se solução de etanolamina a 33% em metanol (5 mL), a mistura foi agitada durante mais 3 horas e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em solução de etanolamina a 33% (10,0 mL), a solução foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (173 mg). MS: [M+H]+ 902,3. I) Sal de 2-amino-9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,16R)-14-(4-amino-1H- imidazo[4,5-c]piridin-1-il)-2,10,15,16-tetra-hidroxi-2,10-dioxido-octahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-7-il)-1,9-di- hidro-6H-purin-6-ona di-trietilamina

[1577] A 2-amino-9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(4-amino- 1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)-15,16-bis((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-2,10-di-hidroxi- 2,10-dioxido-octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-7-il)-1,9-di-hidro-6H-purin-6-ona (173 mg) foi adicionado tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,625 mL) e a mistura foi agitada a 50°C durante 3 horas A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e neutralizada com solução aquosa de bicarbonato de trietilamônio a 1 M e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel C18 (solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM/acetonitril) e o sólido obtido foi liofilizado para fornecer o composto do título (123 mg). 1H RMN (300 MHz, D2O) δ 1,25 (18H, t, J = 7,4 Hz), 3,17 (12H, q, J = 7,2 Hz), 3,87-4,10 (1H, m), 4,11-4,30 (3H, m), 4,32-4,45 (2H, m), 4,52 (1H, d, J = 3,8 Hz), 4,65 (1H, d, J = 4,2 Hz), 4,97-5,10 (1H, m), 5,79 (1H, brs), 5,94 (2H, d, J = 8,3 Hz), 7,10 (1H, d, J = 6,8 Hz), 7,68-7,78 (1H, m), 7,83 (1H, s), 7,94-8,26 (1H, m). 31P RMN (121 MHz, D2O) δ-1,36. EXEMPLO 12 Síntese de Sal de 8-((5R,7R,8R,12aR,14S,15S,15aS,16R)-7-(6-amino-9H- purin-9-il)-15,16-di-hidroxi-2,10-dioxido-2,10-dissulfanilocta-hidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)pirazolo[1,5- a][1,3,5]triazin-4(3H)-ona di-trietilamina (isômero óptico) A) 8-((2S,3S,4R,5R)-3,4-bis(benziloxi)-5-((benziloxi)metil)tetra-hidrofuran-2- il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-4(3H)-ona

[1578] A uma solução de 4-((2S,3S,4R,5R)-3,4-bis(benziloxi)-5- ((benziloxi)metil)tetra-hidrofuran-2-il)-1H-pirazol-5-amina (17,3 g) e carbonato de potássio (24,6 g) em DMF (200 mL) foi adicionado cloridrato de formimidato de etil (19,5 g) à temperatura ambiente. A mistura reacional foi então agitada à temperatura ambiente durante a noite. Mistura reacional foi adicionado carbonato de dietil (126 g) à temperatura ambiente e a mistura reacional foi agitada a 100°C durante 1 h. À mistura reacional foi adicionada solução de etóxido de sódio a 20% (60,6 g) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 100°C durante 30 min. A mistura reacional foi neutralizada com ácido acético à temperatura ambiente e extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com água e solução salina saturada e seco sobre sulfato de sódio anidro e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (acetato de etila/hexano) para obter o composto do título (5,79 g). MS: [M+H]+ 539,1. B) 8-((2S,3R,4S,5R)-3,4-di-hidroxi-5-(hidroximetil)tetra-hidrofuran-2- il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-4(3H)-ona

[1579] Uma solução de 8-((2S,3S,4R,5R)-3,4-bis(benziloxi)-5- ((benziloxi)metil)tetra-hidrofurano-2-il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4(3H)-ona (3,49 g) e hidróxido de paládio (1,37 g, Pd a 10%) em metanol (30 mL) foram agitados sob atmosfera de hidrogênio durante a noite à temperatura ambiente. O catalisador foi removido por filtração e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para dar o composto do título (1,72 g). MS: [M+H]+ 269,0. C) 8-((2S,3R,4S,5R)-5-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-3,4-di- hidroxitetrabidrofuran-2-il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-4(3H)-ona

[1580] A uma solução de 8-((2S,3R,4S,5R)-3,4-di-hidroxi-5- (hidroximetil)tetra-hidrofuran-2-il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-4(3H)-ona (1,72 g) em piridina desidratada (30 mL) adicionou-se cloreto de 4,4'-dimetoxitritil (2,39 g) sob arrefecimento com gelo. A mistura reacional foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 2 h. À mistura reacional foi adicionado cloreto de 4,4'-Dimetoxitritil (0,217 g) sob arrefecimento com gelo. A mistura reacional foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 3 h. À mistura reacional adicionou-se cloreto de 4,4'-Dimetoxitritil (0,217 g) à temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 30 min. À mistura reacional foi adicionada solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à temperatura ambiente e a mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com água e solução salina saturada e seco sobre sulfato de sódio anidro e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (1,62 g). MS: [M-H]- 569,1. D) 8-((2S,3R,4R,5R)-5-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-3-((terc- butildimetilsilil)oxi)-4-hidroxitetrahidrofurano-2-il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4(3H)- ona

[1581] Adicionou-se terc-butildimetilclorossilano (536 mg) e nitrato de prata (I) (604 mg) a uma solução de 8-((2S,3R,4S,5R)-5-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-3,4-di-hidroxitetra-hidrofuran-2-il)pirazolo[1,5- a][1,3,5]triazin-4(3H)-ona (1,69 g) e piridina desidratada (1,20 mL) em THF (20 mL) à temperatura ambiente sob atmosfera de argônio. A mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente durante 8 h e à mistura reacional foram adicionados terc- butildimetilclorossilano (89 mg) e nitrato de prata (I) (101 mg) à temperatura ambiente. A mistura reacional foi então agitada à temperatura ambiente durante a noite. A substância insolúvel foi removida por filtração e lavada com acetato de etila. Ao filtrado foi adicionada solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e a mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com solução salina saturada e seco sobre sulfato de sódio anidro e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (740 mg). MS: [M-H]- 683,1. E) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4S,5S)-2-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-(4-oxo-3,4-di- hidropirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-8-il)tetra-hidrofurano-3-il

[1582] Foi adicionado fosfito de difenil (0,41 mL) a uma solução de 8- ((2S,3R,4R,5R)-5-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-3-((terc- butildimetilsilil))oxi)-4-hidroxitetra-hidrofuran-2-il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4(3H)- ona (740 mg) em piridina (10 mL) à temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 1 h. Mistura reacional foi adicionada água (20 mL) e a mistura foi agitada durante 1 h. A mistura reacional foi vertida em água à temperatura ambiente e extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com água e solução salina saturada e seco sobre sulfato de sódio anidro e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (300 mg). MS: [M-H]- 747,1. F) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4S,5S)-4-((tert-butildimetilsilil)oxi)-2- (hidroximetil)-5-(4-oxo-3,4-di-hidropirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-8-il)tetra-hidrofuran- 3-il

[1583] A hidrogenofosfonato de (2R,3R,4S,5S)-2-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-(4-oxo-3,4-di- hidropirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-8-il)tetra-hidrofuran-3-il (300 mg) foi adicionada solução aquosa de ácido acético a 80% (10 mL), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (metanol/acetato de etila) para dar o composto do título (170 mg). MS: [M+H]+ 447,0. G) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4S,5S)-2-((((((2R,3R,4R,5R)-2-(6- benzamido-9H-purina-9-il)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-(hidroximetil)tetra- hidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi)fosforotioil)oxi)metil)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-5- (4-oxo-3,4-di-hidropirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-8-il)tetra-hidrofuran-3-il

[1584] Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4S,5S)-4-((tert-Butildimetilsilil)oxi)-2- (hidroximetil)-5-(4-oxo-3,4-di-hidropirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-8-il)tetra-hidrofuran- 3-il (190mg) e N-benzoil-5'-O-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-3'-O-(terc- butil(dimetil)silil)-2'-O-((2-cianoetil)(diisopropilamino)fosfino)adenosina (505 mg) foram submetidos a processo azeotrópico três vezes com acetonitril desidratado. Ao resíduo foram adicionados acetonitril desidratado (5 mL) e 2,2,2-trifluoroacetato de piridina (164 mg). A mistura reacional foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 10 min, ((dimetilamino-metilideno)amino)-3H-1,2,4- ditiazolino-3-tiona (96 mg) foi adicionada à mistura reacional, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 20 min. À mistura reacional foi adicionada uma solução aquosa (0,2 mL) de tiossulfato de sódio (0,2 g) e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionada solução aquosa de ácido acético a 80% (5 mL), a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h e a mistura reacional foi submetida a um processo azeotrópico duas vezes com acetonitril. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (260 mg). MS: [M+H]+ 1063,2. H) 8-((5R,7R,8R,12aR,14S,15S,15aR,16R)-7-(6-amino-9H-purina-9-il)- 15,16-bis((terc-butil)(dimetil)silil)oxi)-2,10-dioxido-2,10-disulfanilocta-hidro-12H- 5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina14- il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4(3H)-ona (isômero óptico)

[1585] Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4S,5S)-2-((((((2R,3R,4R,5R)-2-(6- Benzamido-9H-purin-9-il)-4-((terc-butildimetilsilil))oxi)-5-(hidroximetil)tetra- hidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi)fosforotioil)oxi)metil)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-5- (4-oxo-3,4di-hidropirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-8-il)tetrahidrofuran-3-il (260 mg) foi submetido a um processo azeotrópico duas vezes com acetonitril desidratado. O resíduo foi submetido a processo azeotrópico uma vez com piridina desidratada. A uma solução do resíduo em piridina desidratada (5 mL) adicionou-se 2-óxido de 2- cloro-5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosfinano (158 mg) e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente por 20 min. À mistura reacional adicionou-se água (0,15 mL) e 3H-benzo[c][1,2]ditiol-3-ona (49,4 mg) à temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. À mistura reacional foi adicionada solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à temperatura ambiente e a mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com solução aquosa saturada de tiossulfato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seco sobre sulfato de sódio anidro e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (metanol/acetato de etila) e depois purificado por HPLC (L- Column2 ODS, 50 x 150 mm, fase móvel: solução aquosa de acetato de amônio 5 mM/acetonitril) para dar frações e a fracção com o maior tempo de retenção foi concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionada solução de etanolamina a 33% (5 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (25 mg). MS: [M+H]+ 920,2. I) Sal de 8-((5R,7R,8R,12aR,14S,15S,15aS,16R)-7-(6-amino-9H-purin-9-il)- 15,16-di-hidroxi-2,10-dioxido-2,10-dissulfanilocta-hidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin- 4(3H)-ona di-trietilamina (isômero ótico)

[1586] A uma solução de 8-((5R,7R,8R,12aR,14S,15S,15aR,16R)-7-(6- amino-9H-purin-9-il)-15,16-bis((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-2,10-dioxido-2,10- dissulfanilocta-hidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-14-il)pirazolo[1,5- a][1,3,5]triazin-4(3H)-ona (isômero óptico) (25 mg) em metanol (2 mL) foi adicionado tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,177 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada a 50°C durante 2 horas. À mistura reacional foi adicionado etoxitrimetilsilano (5 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada durante 10 min. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel C18 (solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM/acetonitril) e o produto obtido foi liofilizado para proporcionar o composto do título (13 mg). 1H RMN (300 MHz, D2O) δ 4,02-4,19 (3H, m), 4,32-4,42 (2H, m), 4,44-4,49 (1H, m), 4,59-4,64 (1H, m), 4,76-4,80 (1H, m), 4,95-5,04 (1H, m), 5,16 (1H, d, J = 4,9 Hz), 5,31 (1H, ddd, J = 9,8, 8,7, 4,2 Hz), 6,22 (1H, d, J = 8,3 Hz), 7,99 (1H, s), 8,00 (1H, s), 8,14 (1H, s), 8,49 (1H, s). EXEMPLO 13 Síntese de sal de 2-amino-9 - ((5R, 7R, 8R, 12aR, 14S, 15S, 15aS, 16R)-14- (4-aminopirazolo[1,5-a][1,3, 5]triazin-8-il) -2,10,15,16-tetra-hidroxi-2,10- dioxido- octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11, pentaoxadifosfatociclotetradecin-7-il) -1,9-dihidro-6H-purin-6-ona di-trietilamina A) dibenzoato de (2S,3S,4R,5R)-2-(4-(N-benzoilbenzamido)pirazolo[1,5- a][1,3,5]triazin-8-il)-5-((benzoiloxi)metil)3,4-di-hidro-tetra-hidrofurano

[1587] A uma solução de (2S,3R,4S,5R)-2-(4-aminopirazolo[1,5- a][1,3,5]triazin-8-il)-5-(hidroximetil)tetra-hidrofurano-3,4-diol (2,98 g) e N,N-dimetil- 4-aminopiridina (1,36 g) em piridina desidratada (50 mL) foi adicionado cloreto de benzoil (12,5 g) sob arrefecimento com gelo. A mistura reacional foi agitada sob atmosfera de argônio durante 1 h. À mistura reacional foi adicionado cloreto de benzoil (3,13 g) sob arrefecimento com gelo. A mistura reacional foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 2 h. À mistura reacional foi adicionada água e a mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com água e solução salina saturada e seco sobre sulfato de sódio anidro e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (acetato de etila/hexano) para obter o composto do título (6,51 g). MS: [M+H]+ 788,2. B) N-(8-((2S,3R,4S,5R)-3,4-di-hidroxi-5-(hidroximetil)tetra-hidrofuran-2- il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)benzamida

[1588] A uma solução de dibenzoato de (2S,3S,4R,5R)-2-(4-(N- benzoilbenzamido)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-8-il)-5- ((benzoiloxi)metil)tetrahidrofurano-3,4-diil (6,51 g) num solvente misto de piridina (50 mL) e etanol (25 mL) foi adicionada solução aquosa de hidróxido de sódio a 1 M (49,6 mL) sob arrefecimento com gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. À mistura reacional adicionou-se resina DOWEX TM 50Wx4 100-200 (40 g) de troca catiônica acídica forte à temperatura ambiente, e agitou-se a mistura temperatura à ambiente durante 15 min. O sólido foi removido por filtração e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado metanol e o sólido obtido foi recolhido por filtração, para dar o composto do título (1,82 g). MS: [M+H]+ 372,1. C) N-(8-((2S,3R,4S,5R)-5-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-3,4-di- hidroxitetra-hidrofuran-2-il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)benzamida

[1589] A uma solução de N-(8-((2S,3R,4S,5R)-3,4-di-hidroxi-5- (hidroximetil)tetra-hidrofuran-2-il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)benzamida (1,89 g) em piridina desidratada (30 mL) adicionou-se cloreto de 4,4'-dimetoxitritil (517 mg) sob arrefecimento com gelo. A mistura reacional foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 3 h. À mistura reacional adicionou-se cloreto de 4,4'-dimetoxitritil (517 mg) à temperatura ambiente e agitou-se a mistura durante a noite sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente. À mistura reacional foi adicionado cloreto de 4,4'-dimetoxitritil (1035 mg) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 1 h. À mistura reacional foi adicionada solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à temperatura ambiente e a mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com solução salina saturada e seco sobre sulfato de sódio anidro e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (2160 mg). MS: [M-H]- 672,1. D) N-(8-((2S,3R,4R,5R)-5-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-3-((terc- butildimetilsilil)oxi)-4-hidroxitetrahidrofurano-2-il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4- il)benzamida

[1590] A uma solução de N-(8-((2S,3R,4S,5R)-5-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-3,4-di-hidroxitetra-hidrofuran-2-il)pirazolo[1,5- a][1,3,5]triazin-4-il)benzamida (2,16 g) em THF desidratado (30 mL) adicionou-se nitrato de prata (I) (708 mg) e piridina desidratada (1,22 g). A mistura reacional foi agitada sob atmosfera de argônio durante 15 min e foi adicionado terc- butildimetilclorossilano (628 mg). A mistura reacional foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 2 h. À mistura reacional adicionou-se nitrato de prata (I) (163 mg), terc-butildimetilclorossilano (145 mg) e piridina desidratada (507 mg) à temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada durante a noite sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente. À mistura reacional adicionou-se nitrato de prata (I) (436 mg), terc-butildimetilclorossilano (387 mg) e piridina desidratada (761 mg) à temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 2 h. À mistura reacional foi adicionada solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à temperatura ambiente e a mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com solução salina saturada e seco sobre sulfato de sódio anidro e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (acetato de etila/hexano) para obter o composto do título (980 mg). MS: [M-H]- 786,2. E) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4S,5S)-5-(4-benzamidopirazolo[1,5- a][1,3,5]triazin-8-il)-4-((tert-butildimetilsilil)oxi)-2-(hidroximetil)tetra-hidrofuran-3-il

[1591] N-(8-((2S,3R,4R,5R)-5-((Bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-3- ((terc-butildimetilsilil)oxi)-4-hidroxitetrahidrofurano-2-il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin- 4-il)benzamida (980 mg) foi submetida a um processo azeotrópico com tolueno desidratado duas vezes e dissolveu-se em DMF desidratado (10 mL). À mistura reacional adicionou-se 3-((bis(diisopropilamino)fosfino)oxi)propanonitril (487mg), 1H-tetrazol (87 mg) e 1-metil-1H-imidazol (51 mg). A mistura reacional foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 5 h. À mistura reacional foi adicionada solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à temperatura ambiente e a mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com solução salina saturada e seco sobre sulfato de sódio anidro e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (acetato de etila contendo trietilamina/hexano a 0,5%). A uma solução da mistura obtida em acetonitril (10 mL) foram adicionados água (0,04 mL) e 2,2,2-trifluoroacetato de piridina (256 mg) à temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min, adicionou-se terc- butilamina (5,38 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 45 min. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionada solução aquosa de ácido acético a 80% (5,4 mL), a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (530 mg). MS: [M+H]+ 550,2. F) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4S,5S)-5-(4-benzamidopirazolo[1,5- a][1,3,5]triazin-8-il)-4-((tert-butildimetilsilil)oxi)-2-(((((((2R,3R,4R,5R)-4-((tert- butildimetilsilil)oxi)-5-(hidroximetil)-2-(2-isobutilamido-6-oxo-1H-purina-9(6H)- il)tetra-hidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi)fosforil)oxi)metil)tetra-hidrofuran-3-il

[1592] Uma mistura de (2R,3R,4S,5S)-5-(4-benzamidopirazolo[1,5- a][1,3,5]triazin-8-il)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)Hidrogenofosfonatode2- (hidroximetil)tetra-hidrofuran-3-il (240mg) e 5'-O-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-3'- O-(terc-butil(dimetil)silil)-2'-O-((2-cianoetil)(diisopropilamino)fosfino)-N- isobutirilguanosina (635 mg) foi submetida a um processo azeotrópico três vezes com acetonitril desidratado. Ao resíduo foi adicionada uma solução de acetonitril desidratado (5 mL), THF desidratado (2,5 mL) e 5-(etiltio)-2H-tetrazol (171 mg) (que foi previamente sujeito a processo azeotrópico com acetonitril desidratado) em acetonitril desidratado (2,5 mL). A mistura reacional foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 2 h. Adicionou-se solução aquosa de hidroperóxido de terc-butil a 70% (0,179 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 20 min. À mistura reacional foi adicionada uma solução aquosa (0,12 mL) de penta-hidrato de tiossulfato de sódio (0,12 g) e a mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionada solução aquosa de ácido acético a 80% (3 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. O resíduo foi submetido a processo azeotrópico duas vezes com acetonitril. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (metanol/acetato de etila) para dar um produto bruto (420 mg) contendo o composto do título. MS: [M+H]+ 1132,3. G) N-(8-((5R,7R,8R,12aR,14S,15S,15aR,16R)-15,16-bis((terc- butil(dimetil)silil)oxi)-10-(2-cianoetoxi)-2-hidroxi-7-(2-((2-metilpropanoil)amino)-6- oxo-1,6-di-hidro-9H-purin-9-il)-2,10-dioxido-octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin- 4-ilo)benzamida

[1593] O produto bruto (430 mg) contendo hidrogenofosfonato de (2R,3R,4S,5S)-5-(4-benzamidopirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-8-il)-4-((tert- butildimetilsilil)oxi)-2-((((((2R,3R,4R,5R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-5- (hidroximetil)-2-(2-isobutilamido-6-oxo-1H-purina-9(6H)-il)tetra-hidrofurano-3- il)oxi)(2-cianoetoxi)fosforil)oxi)metil)tetrahidrofurano-3-il foi sujeito a um processo azeotrópico duas vezes com acetonitril desidratado. O resíduo obtido foi submetido a processo azeotrópico uma vez com piridina desidratada. A uma solução do resíduo obtido em piridina desidratada (3 mL) adicionou-se 2-óxido de 2-cloro-5,5- dimetil-1,3,2-dioxafosfinano (245 mg) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente sob atmosfera de argônio por 10 min. À mistura reacional adicionou-se água (0,239 mL) e iodo (125 mg) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 20 min. À mistura reacional foi adicionada uma solução aquosa (0,4 mL) de penta-hidrato de tiossulfato de sódio (245 mg) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 5 min. Foi adicionado tolueno e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (metanol/acetato de etila) para dar um produto bruto (553 mg) contendo o composto do título. MS: [M+H]+ 1130,4. H) Sal de 2-amino-9 - ((5R, 7R, 8R, 12aR, 14S, 15S, 15aS, 16R)-14-(4- aminopirazolo[1,5-a][1,3, 5]triazin-8-il) -2,10,15,16-tetra-hidroxi-2,10- dioxido- octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11, 2,10] pentaoxadifosfatociclotetradecin-7-il) -1,9-dihidro-6H-purin-6-ona di-trietilamina

[1594] Uma mistura de N-(8-((5R,7R,8R,12aR,14S,15S,15aR,16R)-15,16- bis((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-10-(2-cianoetoxi)-2-hidroxi-7-(2-((2- metilpropanoil)amino)-6-oxo-1,6-di-hidro-9H-purin-9-il)-2,10-dioxido-octahidro- 12H-5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfa-ciclotetradecin-14- il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)benzamida (553 mg) e solução de etanol metilamina a 33% (20 mL) foram agitados durante a noite à temperatura ambiente. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (metanol/acetato de etila) e depois purificado por HPLC (ODS, fase móvel: água/acetonitril (contendo 5 mM de acetato de amônio)) para dar uma fração e a fração obtida foi concentrada sob pressão reduzida. A uma solução do resíduo obtido em metanol (3 mL) adicionou-se tri- hidrofluoreto de trietilamina (0,072 mL) à temperatura ambiente e agitou-se a mistura a 50°C durante 4 horas. À mistura reacional foi adicionado tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,181 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada durante a noite a 50°C. À mistura reacional foi adicionado tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,181 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada a 50°C durante 5 h. À mistura reacional foi adicionado etoxitrimetilsilano (1,034 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada durante 5 min. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel C18 (solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM/acetonitril) e o produto obtido foi liofilizado para proporcionar o composto do título (10 mg).). 1H RMN (300 MHz, D2O) δ 3,99-4,08 (1H, m), 4,11-4,31 (4H, m), 4,34-4,42 (1H, m), 4,52-4,60 (2H, m), 4,94-5,05 (1H, m), 5,27-5,35 (1H, m), 5,51-5,62 (1H, m), 5,94 (1H, d, J = 8,3 Hz), 7,89 (1H, s), 8,07 (1H, s), 8,08 (1H, s). EXEMPLO 14 Sal dissódio de 7-((2R,5R,7R,8R,10R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6- amino-9H-purin-9-il)-15-fluoro-16-hidroxi-2,10-dioxido-2,10-dissulfaniloctahidro- 12H-5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5- fluoro-3,7-dihidro-4H-pirrol[2,3-d]pirimidin-4-ona A) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-((((((2R,3R,4R,5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetra-hidrofuran-3-il)oxi)(2- cianoetoxi)fosforotioil)oxi)metil)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-(5-fluoro-4-oxo-3H- pirrolo[2,3-d]pirimidina-7(4H)-il)tetra-hidrofurano-3-il

[1595] 7-(3-O-(terc-Butil(dimetil)silil)-2-O-(hidroxi(oxido)fosforanil)-beta-D- ribofuranosil)-5-fluoro-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (8,89g) e N- benzoil-5'-O-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metil)-3'-O-((2- cianoetoxi)(diisopropilamino]fosfino)-2'-desoxi-2'-fluoroadenosina (18,5 g) foram sujeitos a um processo azeotrópico três vezes com acetonitril desidratado. Ao resíduo foram adicionados acetonitril anidro (40 mL), THF anidro (20 mL) e uma solução de acetonitril anidro (40 mL) de 5-(etilsulfanil)-2H-tetrazol (7,49 g). A mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min sob atmosfera de argônio, adicionou-se ((dimetilaminometilideno)amino)-3H-1,2,4-ditiazolino-3- tiona (4,33 g) à mistura reacional, e a mistura foi agitou-se à temperatura ambiente durante 30 min. À mistura reacional foi adicionada uma solução aquosa (5 mL) contendo tiossulfato de sódio (5,24 g) e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionada solução aquosa de ácido acético a 80% (100 mL), a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h e a mistura reacional foi submetida a um processo azeotrópico com tolueno. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (14,3 g). MS: [M+H]+ 968,3. B) N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-16-((terc- butil(dimetil)silil)oxi)-2-(2-cianoetoxi)-15-fluoro-7-(5-fluoro-4-oxo-3,4-dihidro-7H- pirrol[2,3-d]pirimidin-7-il)-10-oxido-10-sulfanil-2-sulfidooctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-9H-purin-6- il)benzamida (isômero óptico)

[1596] Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-((((((2R,3R,4R,5R)-5-(6- Benzamido-9H-purina-9-il)-4-fluoro-2-((hidroximetil)tetra-hidrofuran-3-il)oxi)(2- cianoetoxi)fosforotioil)oxi)metil)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-(5-fluoro-4-oxo-3H- pirrolo[2,3-d]pirimidina-7(4H)-il)tetrahidrofurano-3-il (1,07 g) foi sujeito a um processo azeotrópico três vezes com piridina de desidratação. A uma solução do resíduo em piridina anidra (150 mL) adicionou-se 2-óxido de 2-cloro-5,5-dimetil- 1,3,2-dioxafosfinano (4,66 g) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos sob atmosfera de argônio. À mistura reacional adicionou-se 3H- benzo[c][1,2]ditiol-3-ona (1,46 g) e água (4,55 mL) à temperatura ambiente e a mistura reacional foi agitada durante 30 min. A análise por LCMS da mistura reacional mostrou quatro picos com a mesma massa ([M+H]+971,1), indicando a formação de quatro diastereômeros. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (metanol/acetato de etila) e depois purificado por HPLC (L-Column2 ODS, 50 x 150 mm, fase móvel: 5 mM de solução de acetato de amônio aquoso/acetonitril). A fracção com o maior tempo de retenção foi concentrada sob pressão reduzida para dar o composto do título (379 mg). MS: [M+H]+ 982,1. C) 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-16- ((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-15-fluoro-2,10-dioxido-2,10-dissulfaniloctahidro-12H- 5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro- 3,7-dihidro-4H-pirrol[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico)

[1597] 40% de solução de metilamina metanol (10 mL) de N-(9- ((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-16-((terc-butil(dimetil)silil)oxi)-2-(2- cianoetoxi)-15-fluoro-7-(5-fluoro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)- 10-oxido-10-sulfanil-2-sulfido-octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-14-il)-9H-purin-6-ilo)benzamida (isômero óptico) (379 mg) foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas sob atmosfera de argônio. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (319 g). MS: [M+H]+ 825,1. D) Sal de 7-((2R,5R,7R,8R,10R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H- purin-9-il)-15-fluoro-16-hidroxi-2,10-dioxido-2,10-dissulfaniloctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7- dihidro-4H-pirrol[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina

[1598] A uma solução de 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6- amino-9H-purina-9-il)-16-((terc-butilo(dimetil))silil)oxi)-15-fluoro-2,10-dioxido-2,10- dissulfanilocta-hidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-di-hidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico) (319 mg) em metanol (1 mL) adicionou-se trietilamina tri-hidrofluoreto (2,52 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada a 50°C durante 3 h e diluída com metanol (10 mL). À mistura reacional foi adicionado etoxitrimetilsilano (12 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada durante 10 min. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida, o resíduo foi diluído com metanol e a mistura foi concentrada de novo sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionada solução tampão de acetato de trietilamônio e o sólido foi recolhido por filtração e lavado com acetonitril para dar um sólido branco. O sólido branco obtido foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (ODS, solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM/acetonitril). Por outro lado, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (metanol/acetato de etila) e cromatografia em coluna de sílica gel (ODS, solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM/acetonitril). A fração contendo o composto do título obtida por cromatografia em coluna sobre sílica gel (ODS, solução tampão acetato de trietilamônio a 10 mM/acetonitril) concentrou-se sob pressão reduzida, e secou-se o resíduo por congelação para dar o composto do título (195 mg). MS: [M + H]+ 711,0. E) Sal de 7-((2R,5R,7R,8R,10R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H- purin-9-il)-15-fluoro-16-hidroxi-2,10-dioxido-2,10-dissulfaniloctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7- dihidro-4H-pirrol[2,3-d]pirimidin-4-ona dissódio

[1599] Água deionizada (60 mL) foi passada através de uma coluna preparada por uma embalagem de resina permutadora de cátions AG (nome comercial) 50W-X8 (malha 100-200, 3,9 g) numa coluna vazia. Em seguida, uma solução aquosa de hidróxido de sódio 1 M (36 mL) e água deionizada (68 mL) foram passadas através da resina. Água deionizada (15 mL) contendo sal de 7- ((2R,5R,7R,8R,10R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-15- fluoro-16-hidroxi-2,10-dioxido-2,10-dissulfaniloctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrol[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (195 mg) foi passado através da resina após o pré-tratamento mencionado acima, e água deionizada (19 ml) foi passada através da resina, e a solução aquosa obtida foi liofilizada para obter o composto do título (165 mg). 1H RMN (300 MHz, D2O) δ 4,00-4,08 (1H, m), 4,22-4,45 (4H, m), 4,50-4,57 (1H, m), 4,81-4,84 (1H, m), 4,98-5,14 (2H, m), 5,40-5,61 (1H, m), 6,336,43 (2H, m), 7,28 (1H, d, J = 1,9 Hz), 7,94 (1H, s), 8,05 (1H, s), 8,21 (1H, s). 31P RMN (121 MHz, D2O) δ 52,1, 55,3. EXEMPLO 15 Síntese de sal 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H- purin-9-il)-15-fluoro-2,16-dihidroxi-2,10-dioxido-10-sulfaniloctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7- dihidro-4H-pirrol[2,3-d]pirimidin-4-ona de di-trietilamina (isômero óptico) A) 5-fluoro-7-((6aR,8R,9R,9aS)-9-hidroxi-2,2,4,4-tetraisopropiltetrahidro-6H- furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-8-il)-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona

[1600] A uma solução de 7-((2R,3R,4S,5R)-3,4-di-hidroxi-5- (hidroximetil)tetra-hidrofuran-2-il)-5-fluoro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-4(7H)-ona (37,9 g) em piridina (760 mL) foi adicionado 1,3-dicloro-1,1,3,3- tetraisopropildisiloxano (44,4 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h sob atmosfera de argônio. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e ao resíduo foram adicionados acetato de etila e água. A camada orgânica foi lavada com água e solução salina e seca sobre sulfato de sódio anidro e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com éter isopropílico (IPE) e a mistura foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. O sólido foi recolhido por filtração para dar o composto do título (32,3 g). O licor-mãe foi concentrado sob pressão reduzida, e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (hexano/acetato de etila) para produzir o composto do título (13,3 g). MS: [M+H]+ 528,2. B) 2-cianoetil(6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 7(4H)-il)-2,2,4,4-tetraisopropiltetrahidro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-9-il- diisopropilfosforamidito

[1601] 5-Fluoro-7-((6aR,8R,9R,9aS)-9-hidroxi-2,2,4,4- tetraisopropiltetrahidro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-8-il)-3,7-di-hidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (20 g) foi submetida a desidratação azeotrópica três vezes com acetonitril anidro e dissolvida em DMF anidro (100 mL). A esta solução foram adicionados 1H-tetrazol (2,79 g), 1-metil-1H-imidazol (1,65 mL) e 3- ((bis(diisopropilamino)fosfino)oxi)propanonitril (24,1 mL), e a mistura foi agitada durante a noite à temperatura ambiente sob atmosfera de argônio, vertida em solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, e seca sobre sulfato de sódio anidro, e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (acetato de etila/hexano, contendo 0,5% de trietilamina) para dar o composto do título (20,8 g) como uma mistura de dois diastereômeros. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.911.19 (40H, m), 2.69-2.82 (2H, m), 3.46-3.73 (2H, m), 3.78-4.12 (5H, m), 4.47-4.61 (2H, m), 6.02-6.12 (1H, m), 7.14-7.23 (1H, m), 7.84-7.91 (1H, m), 12.00-12.40 (1H, br). C) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-2- ((((2-cianoetoxi)(((6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 7(4H)-il)-2,2,4,4-tetraisopropiltetrahidro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-9- il)oxi)fosforotioil)oxi)metil)-4-fluorotetra-hidrofuran-3-il

[1602] Uma mistura de hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il (3,48g) e 2- cianoetil(6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)-il)- 2,2,4,4-tetraisopropiltetra-hidro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-9- ildiisopropilfosforamidito (7,82 g) foi sujeita a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro e suspensa em acetonitril anidro (25 mL) e THF anidro (15 mL). 5- (Etilsulfanil)-2H-tetrazol (3,11 g), que foi submetido antecipadamente a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro, foi dissolvido em acetonitril anidro (6 mL), a solução foi adicionada à suspensão acima mencionada e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora sob atmosfera de argônio. Adicionou-se ((dimetilaminometilideno)amino)-3H-1,2,4-ditiazolino-3-tiona (3,27 g) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante mais 30 min. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida, e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (metanol/acetato de etila) para dar o composto do título (6,73 g). MS: [M+H]+ 1096,2. D) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-2- ((((2-cianoetoxi)(((2R,3R,4R,5R)-2-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)- il)-4-((3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropil-dissilsulfanil)oxi)-5-(hidroximetil)tetra- hidrofuran-3-il)oxi)fosforotioil)oxi)metil)-4-fluorotetra-hidrofuran-3-il

[1603] Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-(6-Benzamido-9H-purin-9- il)-2-((((2-cianoetoxi)(((6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7(4H)-il)-2,2,4,4-tetraisopropiltetrahidro-6H-furo[3,2- f][1,3,5,2,4]trioxadisilocina-9-il)oxi)fosforotioil)oxi)metil)-4-fluorotetra-hidrofurano-3- il (6,73 g) foi dissolvido num solvente misto de THF (74,8 mL) e água (16,6 mL) e a solução foi arrefecida em gelo. Foi adicionado ácido trifluoroacético (16,6 mL) e a mistura foi agitada a 0°C durante 2 h. A mistura reacional foi extinta com uma solução aquosa de bicarbonato de sódio (25,8 g) e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com solução salina e seca sobre sulfato de magnésio anidro e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (6,43 g). MS: [M+H]+ 1114,2. E) N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-10-(2-cianoetoxi)-15-fluoro- 7-(5-fluoro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-hidroxi-16-((3- hidroxi-1,1,3,3-tetra(propan-2-il)disiloxanil)oxi)-2-oxido-10-sulfido-octahidro-12H- 5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-14-il)-9H- purin-6-il)benzamida

[1604] (2R,3R,4R,5R)-5-(6-Benzamido-9H-purin-9-il)-2-((((2- cianoetoxi)(((2R,3R,4R,5R)-2-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)-il)-4- ((3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropil-dissiloxanil)oxi)-Hidrogenofosfonatode5- (hidroximetil)tetra-hidrofuran-3-il)oxi)fosforotioil)oxi)metil)-4-fluorotetra-hidrofuran- 3-il (6,43 g) foi submetido desidratação azeotrópica com acetonitril anidro e piridina anidra e suspenso em piridina anidra (130 mL). Adicionou-se 2-óxido de 2-cloro- 5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosfinano (3,73 g) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h sob atmosfera de argônio. Adicionou-se água (5,17 mL) e iodo (1,90 g) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante mais 1 h. A mistura reacional foi extinta com tiossulfato de sódio (7,16 g) e água (3,6 mL) e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com água e solução salina e seca sobre sulfato de magnésio anidro e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (4,60 g). MS: [M+H]+ 1112,2. F) 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-15- fluoro-2-hidroxi-16-((3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxanil)oxi-2,10-dioxido-10- sulfaniloctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrol[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico)

[1605] Para N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-10-(2-cianoetoxi)- 15-fluoro-7-(5-fluoro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-hidroxi-16- ((3-hidroxi-1,1,3,3-tetra(propan-2-il)dissiloxanil)oxi)-2-oxido-10-sulfido-octahidro- 12H-5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-14-il)- 9H-purin-6-il)benzamida (6,42 g) foi adicionada uma solução a 40% de metilamina metanol (30 mL) e a mistura foi agitada temperatura ambiente durante 1 h sob atmosfera de argônio. A mistura obtida foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (acetato de etila/hexano). O resíduo obtido foi purificado por HPLC (L-Column2 ODS, 50 x 150 mm, fase móvel: solução aquosa de acetato de amônio 5 mM/acetonitril), a fração obtida foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi liofilizado para dar o composto do título (420 mg). MS: [M+H]+ 955,2. G) Sal de 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9- il)-15-fluoro-2,16-dihidroxi-2,10-dioxido-10-sulfaniloctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7- dihidro-4H-pirrol[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico)

[1606] A 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9- il)-15-fluoro-2-hidroxi-16-((3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropil-dissiloxanil)oxi)-2,10- dioxido-10-sulfanilocta-hidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-di-hidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico, derivado de tR2) (420 mg) foi adicionado tri-hidrofluoreto de trietilamina (9,68 mL) e a mistura foi agitada a 50°C durante 7,5 h. À mistura reacional foi adicionado etoxitrimetilsilano (36,3 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada durante 30 min. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel C18 (solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM/acetonitril) e foi liofilizado para proporcionar o composto do título (298 mg). 1H RMN (300 MHz, D2O) δ1,13-1,29 (16H, m), 3,12 (11H, q, J = 7,2 Hz), 3,99-4,29 (4H, m), 4,31-4,43 (2H, m), 4,50 (1H, d, J = 9,1 Hz), 4,81-5,08 (3H, m), 5,39-5,61 (1H, m), 6,30-6,42 (2H, m), 7,24 (1H, d, J = 1,9 Hz), 7,92 (1H, s), 8,09 (1H, s), 8,19 (1H, s). 31P RMN (121 MHz, D2O) δ52,2,1,63. EXEMPLO 16 Síntese de sal de 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-14-(6-amino-9H- purin-9-il)-2,10,18-tri-hidroxi-2,10-dioxidohexa-hidro-14H-15,12a-(epoximetano)- 5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-7(12H)-il)- 5-fluoro-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico) A) Hidrogenofosfonato de (1R,3R,4R,7S)-3-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-1- ((((2-cianoetoxi)(((6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 7(4H)-il)-2,2,4,4-tetraisopropiltetrahidro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-9- il)oxi)-fosforil)oxi)metil)-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptan-7-il

[1607] Hidrogenofosfonato de (1S,3R,4R,7S)-3-(6-benzamido-9H-purin-9- il)-1-(hidroximetil)-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptan-7-il (2,00g) e 2- cianoetil(6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)-il)- 2,2,4,4-tetraisopropiltetra-hidro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-9-il diisopropilfosforamidito (4,23 g) foi sujeito a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro (cerca de 50 mL, três vezes), e suspenso em THF anidro (16 mL). 5-(Etilsulfanil)-2H-tetrazol (1,75 g), que foi submetido antecipadamente a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro (cerca de 30 mL, três vezes), foi dissolvido em acetonitril anidro (16 mL), a solução foi adicionada à suspensão acima mencionada, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 15 h sob corrente de argônio. Foi adicionada solução aquosa de hidroperóxido de terc- butil a 70% (1,86 mL) e a mistura foi agitada temperatura ambiente durante 30 min adicionais. A mistura reacional foi extinta com solução aquosa a 10% de tiossulfato de sódio (13 mL) e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi submetido sucessivamente a desidratação azeotrópica com acetonitril (cerca de 80 mL) e tolueno (cerca de 80 mL), o resíduo foi submetido a cromatografia em coluna de sílica gel (metanol/acetato de etila) e a fracção objetiva foi concentrada sob pressão reduzida para dar o composto do título (5,36 g) na forma de um sólido branco amorfo (uma mistura de dois diastereômeros). MS: [M+H]+ 1090,2. B) Hidrogenofosfonato de (1R,3R,4R,7S)-3-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-1- ((((2-cianoetoxi)(((2R,3R,4R,5R)-2-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)- il)-4-((3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropil-dissilsulfanil)oxi)-5-(hidroximetil)tetra- hidrofuran-3-il)oxi)fosforil)oxi)metil)-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptan-7-il

[1608] Hidrogenofosfonato de (1R,3R,4R,7S)-3-(6-benzamido-9H-purin-9- il)-1-((((2-cianoetoxi)(((6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7(4H)-il)-2,2,4,4-tetraisopropiltetrahidro-6H-furo[3,2- f][1,3,5,2,4]trioxadisilocina-9-il)oxi)-fosforil)oxi)metil)-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptan- 7-il (5,36 g) foi dissolvido num solvente misto de THF (60 mL) e água (13 mL) e a solução foi arrefecida com gelo. Foi adicionado ácido trifluoroacético (13,18 mL) e a mistura foi agitada a 0°C durante 4 h. A mistura reacional foi extinta com uma solução de bicarbonato de sódio (20,65 g) em água (250 mL) pouco a pouco, saturada com NaCl e extraída com acetato de etila-THF (3:1). A camada orgânica foi lavada com solução salina e seca sobre sulfato de magnésio anidro e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi submetido a cromatografia em coluna sobre sílica gel (metanol/acetato de etila) e a fração objetiva foi concentrada sob pressão reduzida para dar o composto do título (3,06 g) como um sólido branco amorfo (uma mistura de dois diastereômeros). MS: [M+H]+ 1108,3. C) N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-10-(2-cianoetoxi)-7-(5- fluoro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-hidroxi-18-((3-hidroxi- 1,1,3,3-tetra(propan-2-il)dissiloxanil)oxi)-2,10-dioxido-hexa-hidro-14H-15,12a- (epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecina-14(12H)-il)-9H-purina-6- il)benzamida

[1609] Hidrogenofosfonato de (1R,3R,4R,7S)-3-(6-benzamido-9H-purina-9- il)-1-((((2-cianoetoxi)(((2R,3R,4R,5R)-2-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 7(4H)-il)-4-((3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropil-dissiloxanil)oxi)-5-(hidroximetil)tetra- hidrofuran-3-il)oxi)fosforil)oxi)metil)-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptan-7-il (3,06 g) foi submetido sucessivamente a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro (cerca de 100 mL) e piridina anidra (cerca de 100 mL) e dissolvido em piridina anidra (75 mL). Adicionou-se 2-óxido de 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosfinano (1,78 g) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h sob corrente de argônio. Adicionou-se água (1,74 mL) e iodo (911 mg) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante mais 15 min. A mistura reacional foi extinta com solução aquosa a 10% de tiossulfato de sódio (7,5 mL) e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi diluo com água (100 mL) e a mistura foi extraída com acetato de etila- THF (3:1). A camada orgânica foi lavada com solução salina e seca sobre sulfato de magnésio anidro e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. Adicionou-se tolueno (cerca de 100 mL) e a mistura foi novamente concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi submetido a cromatografia em coluna sobre sílica gel (metanol/acetato de etila) e a fração objetiva foi concentrada sob pressão reduzida para dar o composto do título (2,38 g) como um sólido branco amorfo (uma mistura de dois diastereômeros). MS: [M+H]+ 1106,3. D) 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)- 2,10-di-hidroxi-18-((3-hidroxi-1,1,3,3-tetra(propan-2-il)dissiloxanil)oxi)-2,10- dioxido-hexa-hidro-14H-15,12a-(epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-7(12H)-il)-5-fluoro-3,7-di-hidro- 4H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-4-1

[1610] N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-10-(2-Cianoetoxi)-7-(5- fluoro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-hidroxi-18-((3-hidroxi- 1,1,3,3-tetra(propan-2-il)dissiloxanil)oxi)-2,10-dioxido-hexa-hidro-14H-15,12a- (epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecina-14(12H)-il)-9H-purina-6-il)- benzamida (2,38 g) foi dissolvida em 40% de solução de metilamina metanol (40 mL), a solução foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h e a mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida. Adicionou-se tolueno (cerca de 80 mL) e a mistura foi novamente concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi submetido a cromatografia em coluna sobre sílica gel (metanol/acetato de etila) e a fração objetiva foi concentrada sob pressão reduzida para dar o composto do título (756 g) como um sólido branco. MS: [M+H]+ 949,2. E) Sal de 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-14-(6-amino-9H-purin-9- il)-2,10,18-tri-hidroxi-2,10-dioxidohexa-hidro-14H-15,12a-(epoximetano)-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-7(12H)-il)-5- fluoro-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico)

[1611] 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-14-(6-Amino-9H-purina-9- il)-2,10-di-hidroxi-18-((3-hidroxi-1,1,3,3-tetra(propan-2-il)disiloxanil)oxi)-2,10- dioxido-hexa-hidro-14H-15,12a-(epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-7(12H)-il)-5-fluoro-3,7-di-hidro- 4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (756 mg) foi dissolvido em metanol (2 mL) e foi-lhe adicionada trietilamina (0,8 mL), tri-hidrofluoreto de trietilamina (3,90 mL) e a mistura foi agitada a 50°C durante 2 h. A mistura reacional foi deixada a arrefecer até a temperatura ambiente, neutralizada com solução aquosa de hidrogenocarbonato de trietilamônio a 1 M (110 mL) e agitada à temperatura ambiente durante 15 min. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi submetido a cromatografia em coluna ODS (acetonitril/solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM). A fração objetiva foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi liofilizado para dar o composto do título (504 mg) como um sólido branco. 1H RMN (300 MHz, D2O) δ 1,20 (18H, t, J = 7,4 Hz), 3,12 (12H, q, J = 7,2 Hz), 4,02-4,16 (4H, m), 4,23-4,37 (3H, m), 4,55 (1H, d, J = 4,5 Hz), 4,82-4,93 (3H, m), 6,12 (1H, s), 6,39 (1H, dd, J = 8,3, 1,5 Hz), 7,19 (1H, d, J = 1,9 Hz), 7,96 (1H, s), 8,11 (1H, s), 8,17 (1H, s). 31P RMN (121 MHz, D2O) δ -1,91, -1,80. EXEMPLO 17 Síntese de sal de 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-14-(6-amino-9H- purin-9-il)-10,18-dihidroxi-2,10-dioxido-2-sulfanilhexa-hidro-14H-15,12a- (epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-7(12H)-il)-5-fluoro-3,7-di-hidro- 4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trimetilamina (isômero óptico) A) N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-10-(2-cianoetoxi)-7-(5-fluoro- 4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-18-((3-hidroxi-1,1,3,3- tetraisopropilidisiloxanil)oxi)-2,10-dioxido-2-sulfanil-hexa-hidro-14H-15,12a- (epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-14(12H)-il)-9H-purina-6- il)benzamida

[1612] Hidrogenofosfonato de (1R,3R,4R,7S)-3-(6-benzamido-9H-purina-9- il)-1-((((2-cianoetoxi)(((2R,3R,4R,5R)-2-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 7(4H)-il)-4-((3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropil-dissiloxanil)oxi)-5- (hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il)oxi)fosforil)oxi)metil)-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptan- 7-il (3,71 g) foi submetido a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro e piridina anidra e suspendido em piridina anidra (70 mL). Adicionou-se 2-óxido de 2- cloro-5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosfinano (2,15 g) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h sob atmosfera de argônio. Adicionou-se 3H- benzo[c][1,2]ditiol-3-ona (674 mg) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante mais 1 h. À mistura reacional foi adicionada solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e a mistura foi extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com solução salina e seca sobre sulfato de sódio e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (2,78 g). MS: [M+H]+ 1122,2 B) 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-14-(6-amino-9H-purina-9-il)-10- hidroxi-18-((3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxanil)oxi)-2,10-dioxido-2-sulfanil- hexa-hidro-14H-15,12a-(epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-7(12H)-il)-5-fluoro-3,7-di-hidro- 4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico)

[1613] N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-10-(2-Cianoetoxi)-7-(5- fluoro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-18-((3-hidroxi-1,1,3,3- tetraisopropil-dissilanil)oxi)-2,10-dioxido-2-sulfanil-hexa-hidro-14H-15,12a- (epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecina-14(12H)-il)-9H-purina-6- il)benzamida (2,78 g) foi dissolvida em solução de metilamina metanol a 40% (50 ml), a solução foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h sob atmosfera de argônio e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (metanol/acetato de etila). O resíduo obtido foi purificado por HPLC (L-column2 ODS, 50 x 150 mm, fase móvel: solução aquosa de acetato de amônio 5 mM/acetonitril) para se obter o composto do título (30 mg). MS: [M+H]+ 965,3. C) Sal de 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-14-(6-amino-9H-purin-9- il)-10,18-dihidroxi-2,10-dioxido-2-sulfanilhexa-hidro-14H-15,12a-(epoximetano)- 5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-7(12H)-il)- 5-fluoro-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico)

[1614] A 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-14-(6-amino-9H-purina- 9-il)-10-hidroxi-18-((3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxanil)oxi)-2,10-dioxido-2- sulfanil-hexa-hidro-14H-15,12a-(epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-7(12H)-il)-5-fluoro-3,7-di-hidro- 4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico) (30 mg) adicionou-se tri- hidrofluoreto de trietilamina (0,70 mL) e metanol (1 mL) e agitou-se a mistura a 50°C durante 3 h. À solução reacional foi adicionado etoxi(trimetil)silano (2,5 mL), a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel C18 (solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM/acetonitril) e o sólido obtido foi liofilizado para obter o composto do título (25 mg). 1H RMN (300 MHz, D2O) δ1,19 (18H, t, J = 7,4 Hz), 3,11 (12H, q, J = 7,2 Hz), 3,99-4,09 (3H, m), 4,09-4,17 (2H, m), 4,22-4,29 (1H, m), 4,34-4,38 (1H, m), 4,504,54 (2H, m), 4,90-4,96 (1H, m), 5,06 (1H, s), 6,11 (1H, s), 6,35 (1H, dd, J = 8,3, 1,1 Hz), 7,19 (1H, d, J = 2,3 Hz), 7,94 (1H, s), 8,08 (1H, s), 8,16 (1H, s). 31P RMN (121 MHz, D2O) δ 55,76, -1,56. EXEMPLO 18 Síntese de sal de 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-14-(6-amino-9H- purin-9-il)-2,18-dihidroxi-2,10-dioxido-10-sulfanilhexa-hidro-14H-15,12a- (epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-7(12H)-il)-5-fluoro-3,7-di-hidro- 4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico) A) Hidrogenofosfonato de (1R,3R,4R,7S)-3-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-1- ((((2-cianoetoxi)(((6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 7(4H)-il)-2,2,4,4-tetraisopropiltetrahidro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-9- il)oxi)-fosforotioil)oxi)metil)-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptan-7-il

[1615] Uma mistura de hidrogenofosfonato de (1S,3R,4R,7S)-3-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-1-(hidroximetil)-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptan-7-il (3,0 g) e 2-cianoetil(6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)-il)- 2,2,4,4-tetraisopropiltetra-hidro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-9-il diisopropilfosforamidito (5,86 g) foi sujeita a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro e suspensa em THF anidro (25 mL). 5-(Etilsulfanil)-2H-tetrazol (2,62 g), que foi submetido antecipadamente a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro, foi dissolvido em acetonitril anidro (25 mL), a solução foi adicionada à suspensão acima mencionada e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite sob atmosfera de argônio. Adicionou-se ((dimetilaminometilideno)amino)-3H-1,2,4-ditiazolino-3-tiona (2,75 g) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante mais 30 min. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida, e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (metanol/acetato de etila) para dar o composto do título (4,96 g). MS: [M+H]+ 1106,3. B) Hidrogenofosfonato de (1R,3R,4R,7S)-3-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-1- ((((2-cianoetoxi)(((2R,3R,4R,5R)-2-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)- il)-4-((3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropil-dissilsulfanil)oxi)-5-(hidroximetil)tetra- hidrofuran-3-il)oxi)fosforotioil)oxi)metil)-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptan-7-il

[1616] Hidrogenofosfonato de (1R,3R,4R,7S)-3-(6-benzamido-9H-purin-9- il)-1-((((2-cianoetoxi)(((6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7(4H)-il)-2,2,4,4-tetraisopropiltetrahidro-6H-furo[3,2- f][1,3,5,2,4]trioxadisilocina-9-il)oxi)-fosforotioil)oxi)metil)-2,5- dioxabiciclo[2.2.1]heptan-7-il (4,96 g) foi dissolvido num solvente misto de THF (60 mL) e água (12 mL) e a solução foi arrefecida com gelo. Foi adicionado ácido trifluoroacético (12,1 mL) e a mistura foi agitada a 0°C durante 3 h. A mistura reacional foi extinta com uma solução de bicarbonato de sódio (18,8 g) em água (100 mL) e extraída com acetato de etila-THF (3:1). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (3,77 g). MS: [M+H]+ 1124,2. C) N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-10-(2-cianoetoxi)-7-(5- fluoro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-hidroxi-18-((3-hidroxi- 1,1,3,3-tetraisopropilidisiloxanil)oxi)-2-oxido-10-sulfido-hexa-hidro-14H-15,12a- (epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-14(12H)-il)-9H-purina-6- il)benzamida

[1617] Hidrogenofosfonato de (1R,3R,4R,7S)-3-(6-benzamido-9H-purina-9- il)-1-((((2-cianoetoxi)(((2R,3R,4R,5R)-2-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 7(4H)-il)-4-((3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropil-dissiloxanil)oxi)-5- (hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il)oxi)fosforotioil)oxi)metil)-2,5- dioxabiciclo[2.2.1]heptan-7-il (3,77 g) foi submetido a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro e piridina anidra e suspendido em piridina anidra (70 mL). Adicionou-se 2-óxido de 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosfinano (2,17 g) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h sob atmosfera de argônio. Adicionou-se água (2,12 mL) e iodo (1,11 g) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante mais 1 h. A mistura reacional foi extinta com solução aquosa a 10% de tiossulfato de sódio (15 mL) e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi diluo com água (100 mL) e a mistura foi extraída com acetato de etila-THF (3:1). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (2,21 g). MS: [M+H]+ 1122,2. D) 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-di- hidroxi-18-((3-hidroxi-1,1,3,3-tetra(propan-2-il)dissiloxanil)oxi)-2,10-dioxido-10- sulfanil-hexa-hidro-14H-15,12a-(epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-7(12H)-il)-5-fluoro-3,7-di-hidro- 4H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-4-1 (isômero óptico)

[1618] A N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-10-(2-cianoetoxi)-7- (5-fluoro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-hidroxi-18-((3-hidroxi- 1,1,3,3-tetraisopropil-dissilsiloxanil)oxi)-2-oxido-10-sulfido-hexa-hidro-14H-15,12a- (epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-14(12H)-il)-9H-purina-6- il)benzamida (2,38 g) foi adicionada solução a 40% de metilamina metanol (40 mL), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h sob atmosfera de argônio. A mistura obtida foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (acetato de etila/hexano). O resíduo obtido foi purificado por HPLC (L-Column2 ODS, 50 x 150 mm, fase móvel: solução aquosa de acetato de amônio 5 mM/acetonitril), a fração obtida foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi liofilizado para dar o composto do título (710 mg). MS: [M+H]+ 965,2. E) Sal de 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-14-(6-amino-9H-purin-9- il)-2,18-dihidroxi-2,10-dioxido-10-sulfanilhexa-hidro-14H-15,12a-(epoximetano)- 5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-7(12H)-il)- 5-fluoro-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico)

[1619] A uma solução de 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-14-(6- amino-9H-purina-9-il)-2-hidroxi-18-((3-hidroxi-1,1,3,3-tetra(propan-2- il)disiloxanil)oxi)-2,10-dioxido-10-sulfanil-hexa-hidro-14H-15,12a-(epoximetano)- 5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-7(12H)-il)- 5-fluoro-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico, derivado de tR2) (710 mg) em metanol (20 mL) foi adicionado tri-hidrofluoreto de trietilamina (4,80 mL) e a mistura foi agitada a 50°C durante 3 h. À mistura reacional foi adicionado etoxitrimetilsilano (2,29 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada durante 30 min. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel C18 (solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM/acetonitril) e foi liofilizado para proporcionar o composto do título (530 mg). 1H RMN (300 MHz, D2O) δ1,22 (18H, t, J = 7,2 Hz), 3,14 (12H, q, J = 7,6 Hz), 4,03-4,19 (4H, m), 4,25-4,41 (3H, m), 4,65 (1H, d, J = 4,5 Hz), 4,84 (1H, d, J= 4,5 Hz), 4,91 (1H, s), 4,99 (1H, ddd, J = 10,1, 8,2, 4,3 Hz), 6,14 (1H, s), 6,39 (1H, d, J = 7,9 Hz), 7,17 (1H, d, J = 2,3 Hz), 7,97 (1H, s), 8,11 (1H, s), 8,19 (1H, s). 31P RMN (121 MHz, D2O) δ52,5,1,74. EXEMPLO 19 Síntese de sal de 2-amino-9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15- fluoro-7-(5-fluoro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,10,16-tri- hidroxi-2,10-dioxido-octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-1,9-dihidro-6H-purin-6-ona A) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-2-((((2- cianoetoxi)(((6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)-il)- 2,2,4,4-tetraisopropiltetrahidro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocina-9- il)oxi)fosforil)oxi)metil)-4-fluoro-5-(2-isobutilamido-6-oxo-1H-purin-9(6H)-il)tetra- hidrofurano-3-il

[1620] 2'-Desoxi-2'-fluoro-3'-O-(hidroxi(óxido)fosforanil)-N- isobutirilguanosina (680 mg) e diisopropilfosforamidito de 2- cianoetil(6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)-il)- 2,2,4,4-tetraisopropiltetrahidro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]detrioxadisilocina-9-il (1535 mg) foram sujeitos a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro (três vezes), e suspensos em THF anidro (10,00 ml). À suspensão foi adicionada uma mistura de 5-(etilsulfanil)-2H-tetrazol (633 mg) (que foi sujeita a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro) e acetonitril anidro (10 ml) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 7h sob atmosfera de argônio. À mistura foram adicionados uma mistura de diisopropilfosforamidito de 2-cianoetil(6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-4- oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)-il)-2,2,4,4-tetraisopropiltetrahidro-6H-furo[3,2- f][1,3,5,2,4]trioxadisilocina-9-il (1181 mg, 1,62 mmol) (que foi sujeito a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro) e acetonitril anidro (3 ml), e uma mistura de 5- (etilsulfanil)-2H-tetrazol (633 mg) (que foi sujeita a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro) e acetonitril anidro (3 ml) e a mistura foi agitada durante a noite à temperatura ambiente sob atmosfera de argônio. À mistura reacional foi adicionada solução aquosa de hidroperóxido de terc-butil a 70% (0,674 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante mais 30 min. À mistura reacional foi adicionada uma mistura de tiossulfato de sódio penta-hidratado (2817 mg) e água (4 mL) e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (1260 mg). MS: [M+H]+ 1062,3. B) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-2-((((2- cianoetoxi)(((2R,3R,4R,5R)-2-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)-il)-4- ((3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropil)-isiloxanil)oxi)-5-(hidroximetil)tetra-hidrofuran-3- il)oxi)fosforil)(oxi)metil)-4-fluoro-5-(2-isobutilamido-6-oxo-1H-purin-9(6H)-il)tetra- hidrofurano-3-il

[1621] A uma mistura de hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-2-((((2- cianoetoxi)(((6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)-il)- 2,2,4,4-tetraisopropiltetra-hidro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocina-9- il)oxi)fosforil)oxi)metil)-4-fluoro-5-(2-isobutilamido-6-oxo-1H-purin-9(6H)-il)tetra- hidrofuran-3-il (1,26 g), THF (16 ml) e água (4 ml) adicionou-se ácido trifluoroacético (3,18 ml) a 0°C e agitou-se a mistura durante 4 horas. À mistura foi adicionada uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio (4,98 g) e a mistura foi saturada com cloreto de sódio. A mistura foi extraída com acetato de etila/THF e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (1000 mg). MS: [M+H]+ 1080,3. C) N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-10-(2-cianoetoxi)-15-fluoro- 7-(5-fluoro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-hidroxi-16-((3- hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropil-di-siloxanil)oxi)-2,10-dioxidoocta-hidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifos-faciclotetradecin-14-il)-6-oxo-6,9- di-hidro-1H-purin-2-il)-2-metilpropanamida

[1622] (2R,3R,4R,5R)-2-((((2-Cianoetoxi)(((2R,3R,4R,5R)-2-(5-fluoro-4- oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-7(4H)-il)-4-((3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropil)- isiloxanil)oxi)-5-(hidroximetil)tetra-hidrofurano-3- il)oxi)fosforil)oxi)hidrogenofosfonatode(metil)-4-fluoro-5-(2-isobutilamido-6-oxo-1H- purin-9(6H)-il)tetrahidrofuran-3-il (1 g) foi sujeito a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro e piridina anidra e suspenso em piridina anidra (24 mL). Adicionou- se 2-óxido de 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosfinano (598 g) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 15 min sob atmosfera de argônio. Adicionou-se água (0,584 mL) e iodo (305 mg) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante mais 25 min. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (800 g). MS: [M+H]+ 1078,2 D) 2-amino-9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15-fluoro-7-(5-fluoro-4- oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,10-di-hidroxi-16-((3-hidroxi- 1,1,3,3-tetraisopropil-dissilsiloxanil)oxi)-2,10-dioxido-octahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-1,9-di-hidro- 6H-purin-6-ona (isômero óptico)

[1623] Para N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-10-(2-cianoetoxi)- 15-fluoro-7-(5-fluoro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-hidroxi-16- ((3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropil-di-siloxanil)oxi)-2,10-di-oxido-octa-hidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-6-oxo-6,9- di-hidro-1H-purin-2-il)-2-metilpropanamida (800 mg, 0,74 mmol) foi adicionada solução de etanolamina a 33% (30 mL), a mistura foi agitada durante a noite à temperatura ambiente sob atmosfera de argônio e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (metanol/acetato de etila). O resíduo obtido foi purificado por HPLC (L-column2 ODS, 50 x 150 mm, fase móvel: solução aquosa de acetato de amônio 5 mM/acetonitril) para se obter o composto do título (163,4 mg). MS: [M+H]+ 955,3. E) Sal de 2-amino-9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15-fluoro-7-(5- fluoro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,10,16-tri-hidroxi-2,10- dioxido-octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)-1,9-dihidro-6H-purin-6-ona trietilamina (isômero óptico)

[1624] Uma mistura de 2-amino-9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)- 15-fluoro-7-(5-fluoro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,10-di- hidroxi-16-((3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropil-dissiloxanil)oxi)-2,10-dioxido-octahidro- 12H-5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il)- 1,9-di-hidro-6H-purin-6-ona (isômero óptico) (21,4 mg), trihidrofluoreto de trietilamina (0,183 mL) e metanol (0,07 mL) foi agitada a 50°C durante 1 hora sob atmosfera de argônio. À mistura reacional foi adicionado etoxi(trimetil)silano (1,046 mL), a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante mais 1 h e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel C18 (solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM/acetonitril) e foi liofilizado para fornecer o composto do título (4,6 mg). 1H RMN (300 MHz, D2O) δ 1,20 (18H, t, J = 7,3 Hz), 3,13 (12H, q, J = 7,3 Hz), 4,07 (2H, d, J = 11,1 Hz), 4,25 (2H, d, J = 7,6 Hz), 4,33-4,99 (4H, m), 5,04-5,25 (1H, m), 5,415,70 (1H, m), 6,17 (1H, d, J = 19,0 Hz), 6,38 (1H, d, J = 9,2 Hz), 7,32 (1H, s), 7,79 (1H, brs), 7,95 (1H, s). 31P RMN (121 MHz, D2O) δ -1.61, -1.52. EXEMPLO 20 Síntese de sal de 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,16R)-14-(6-amino-9H- purin-9-il)-2,10,15,16-tetrahidroxi-2-oxido-10-sulfaniloctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7- dihidro-4H-pirrol[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico) A) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-4- ((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-((((2-cianoetoxi)(((6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-4-oxo- 3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)-il)-2,2,4,4-tetraisopropiltetra-hidro-6H-furo[3,2- f][1,3,5,2,4]trioxadisilocina-9-il)oxi)fosforotioil)oxi)metil)tetra-hidrofurano-3-il

[1625] Uma mistura de fosfonato (2R,3R,4R,5R)-5-(6-benzamido-9H-purin- 9-il)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il (3,0g) e 2- cianoetil(6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-4-oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)-il)- 2,2,4,4-tetraisopropiltetra-hidro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-9- ildiisopropilfosforamidito de hidrogênio (5,36 g) foi sujeita a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro e suspensa em acetonitril anidro (25 mL) e THF anidro (15 mL). 5-(Etilsulfanil)-2H-tetrazol (2,13 g), que foi submetido antecipadamente a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro, foi dissolvido em acetonitril anidro (15 mL), a solução foi adicionada à suspensão acima mencionada e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite sob atmosfera de argônio. Adicionou-se ((dimetilaminometilideno)amino)-3H-1, 2,4- ditiazolino-3-tiona (2,24 g) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante mais 1 h. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (metanol/acetato de etila) para dar o composto do título (5,15 g). MS: [M+H]+ 1208,3. B) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-4- ((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-((((2-cianoetoxi)(((2R,3R,4R,5R)-2-(5-fluoro-4-oxo-3H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)-il)-4-((3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxanil)oxi)-5- (hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il)oxi)fosforotioil)oxi)metil)tetrahidrofuran-3-il

[1626] Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-(6-Benzamido-9H-purin-9- il)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-((((2-cianoetoxi)(((6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-4- oxo-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)-il)-2,2,4,4-tetraisopropiltetra-hidro-6H-furo[3,2- f][1,3,5,2,4]trioxadisilocina-9-il)oxi)fosforotioil)oxi)metil)tetra-hidrofurano-3-il (5,15 g) foi dissolvido num solvente misto de THF (48 mL) e água (10 mL) e a solução foi arrefecida com gelo. Foi adicionado ácido trifluoroacético (11,5 mL) e a mistura foi agitada a 0°C durante 3 h. A mistura reacional foi extinta com uma solução de bicarbonato de sódio (12,5 g) em água (100 mL) e extraída com acetato de etila- THF. A camada orgânica foi lavada com solução salina e seca sobre sulfato de sódio e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (5,13 g). MS: [M+H]+ 1226,4. C) N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15-((tert- butil(dimetil)silil)oxi)-10-(2-cianoetoxi)-7-(5-fluoro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il)-2-hidroxi-16-((3-hidroxi-1,1,3,3-tetra(propan-2-il)disiloxanil)oxi)-2- oxido-10-sulfido-octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-14-il)-9H-purin-6-il)benzamida

[1627] Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-(6-Benzamido-9H-purin-9- il)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-((((2-cianoetoxi)(((2R,3R,4R,5R)-2-(5-fluoro-4-oxo- 3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7(4H)-il)-4-((3-hidroxi-1,1,3,3- tetraisopropildisiloxanil)oxi)-5-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3- il)oxi)fosforotioil)oxi)metil)tetra-hidrofuran-3-il (5,13 g) foi sujeito a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro e piridina anidra e suspenso em piridina anidra (100 mL). Adicionou-se 2-óxido de 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosfinano (2,70 g) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h sob atmosfera de argônio. Adicionou-se água (2,64 g) e iodo (1,38 g) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante mais 1 h. A mistura reacional foi extinta com tiossulfato de sódio (5,19 g) e água (2,64 g) e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com água e solução salina e seca sobre sulfato de magnésio anidro e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (3,53 g). MS: [M+H]+ 1224,4. D) 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purina-9-il)-15- (((1,1-dimetiletilo)dimetilsililoxi)octa-hidro-2,10-di-hidroxi-16-((3-hidroxi-1,1,3,3- tetraquis(1-metiletil)disiloxanil)oxi)-2-oxido-10-sulfanil-5,8-metano-12H-furo[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfa-ciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-di-hidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico)

[1628] A N-(9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15-((terc- butil(dimetil)silil)oxi)-10-(2-cianoetoxi)-7-(5-fluoro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il)-2-hidroxi-16-((3-hidroxi-1,1,3,3-tetra(propan-2-il)disiloxanil)oxi)-2- oxido-10-sulfido-octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-14-il)-9H-purina-6- il)benzamida (3,5 g) foi adicionada solução de metilamina metanol a 40% (50 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h sob atmosfera de argônio. A mistura obtida foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (acetato de etila/hexano). O resíduo obtido foi purificado por HPLC (L-Column2 ODS, 50 x 150 mm, fase móvel: solução aquosa de acetato de amônio 5 mM/acetonitril), a fração obtida foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi liofilizado para dar o composto do título (210 mg). MS: [M+H]+ 1067,4. E) Sal de 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9- il)-2,10,15,16-tetrahidroxi-2-oxido-10-sulfaniloctahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-dihidro-4H- pirrol[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico)

[1629] A uma solução de 7-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6- amino-9H-purina-9-il)-15-(((1,1-dimetilsilil)oxi)octahidro-2,10-di-hidroxi-16-((3- hidroxi-1,1,3,3-tetraquis(1-metiletil)disiloxanil)oxi)-2-oxido-10-sulfanil-5,8-metano- 12H-furo[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfa-ciclotetradecin-7-il)-5-fluoro-3,7-di- hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico, derivado de tR2) (210 mg) em metanol (1,0 mL)-trietilamina (0,4 mL) foi adicionado tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,962 mL) e a mistura foi agitada a 50°C durante 2,5 h. À mistura reacional foi adicionado etoxitrimetilsilano (4,59 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada durante 30 min. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel C18 (solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM/acetonitril) e foi liofilizado para proporcionar o composto do título (125 mg).

[1630] 1H RMN (300 MHz, D2O) δ1,13-1,28 (18H, m), 3,12 (12H, q, J = 7,2 Hz), 4,02-4,11 (1H, m), 4,13-4,25 (2H, m), 4,27-4,40 (2H, m), 4,46 (1H, d, J = 6,4 Hz), 4,73-4,79 (2H, m), 4,80-4,91 (1H, m), 5,02 (1H, td, J = 8,8, 4,2 Hz), 6,08 (1H, d, J = 1,7 Hz), 6,35 (1H, d, J = 8,1 Hz), 7,27 (1H, d, J = 1,7 Hz), 7,93 (1H, s), 8,14 (1H, s), 8,18 (1H, s). 31P RMN (121 MHz, D2O) δ52.4,1,21. EXEMPLO 23 Síntese de sal de 7-[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,16R)-14-(6-amino-9H- purina-9-il)-10,15,16-tri-hidroxi-2,10-dioxido-2-sulfanilocta-hidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il]-5-fluoro-3- metil-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômeros ópticos 1 e 2) A) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-[6-(benzoilamino)-9H-purin-9-il]- 4-{[terc-butil(dimetil)silil]oxi}-2-({[(2-cianoetoxi){[(6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-3- metil-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-7-il)-2,2,4,4- tetraisopropiltetrahidro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocina-9- il]oxi}fosforil]oxi}metil)tetra-hidrofurano-3-il

[1631] Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-[6-(benzoilamino)-9H- purin-9-il]-4-{[terc-butil(dimetil)silil]oxi}-2-(hidroximetil)tetra-hidrofurano-3-il (250mg) e 2-cianoetil(6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-3-metil-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il)-2,2,4,4-tetraisopropiltetra-hidro-6H-furo[3,2- f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-9-il-diisopropilfosforamidoito (359 mg) (Exemplo 24, passo C) foram submetidos a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro e adicionou-se acetonitril anidro (1,1 mL) e tetra-hidrofurano anidro (0,7 mL). À mistura foi adicionada uma solução de 5-(etilsulfanil)-2H-tetrazol (175 mg) (que foi submetido a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro) em acetonitril anidro (0,75 mL), e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 2 horas. Foi adicionado hidroperóxido de terc-butil (5,5 mol/L) em nonano (0,25 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 40 min. Arrefeceu- se a mistura reacional em banho de gelo e adicionou-se uma solução de tiossulfato de sódio (345 mg) em água (0,275 mL). A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 15 min e foi concentrada sob pressão reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (metanol/diclorometano) para dar o composto do título (318 mg) como uma mistura de diastereômeros. MS: [M+H]+ 1206,3 B) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-[6-(benzoilamino)-9H-purin-9-il]- 4-{[terc-butil(dimetil)silil]oxi}-2-({[(2-cianoetoxi)({(2R,3R,4R,5R)-2-(5-fluoro-3-metil- 4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-7-il)-5-(hidroximetil)-4-[(3-hidroxi- 1,1,3,3-tetraisopropil-disiloxanil)oxi]tetra-hidrofuran-3-il}oxi)-fosforil]oxi}metil)tetra- hidrofuran-3-il

[1632] Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-[6-(benzoilamino)-9H- purina-9-il]-4-{[terc-butil(dimetil)silil]oxi}-2-({[(2-cianoetoxi){[(6aR,8R,9R,9aR)-8-(5- fluoro-3-metil-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-7-il)-2,2,4,4- tetraisopropiltetra-hidro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocina-9- il]oxi}fosforil]oxi}metil)tetra-hidrofurano-3-il (315 mg) foi dissolvido numa mistura de tetra-hidrofurano (2,8 mL) e água (0,71 mL) e deixou-se a solução a agitar e arrefeceu-se em banho de gelo. Foi adicionado, gota a gota, ácido trifluoroacético (0,71 mL) e a mistura foi deixada a agitar a 0-5°C durante 2 h 15 min. Adicionou-se gradualmente bicarbonato de sódio (1,14 g) à mistura reacional enquanto se mantinha uma boa agitação seguindo-se a adição de água (3 mL) e acetato de etila (10 mL). A camada aquosa separada foi extraída com acetato de etila (10 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com solução salina (3 mL), secos sobre sulfato de sódio anidro, filtrados e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (metanol/cloreto de metileno) para dar o composto do título (145 mg). MS: [M+H]+ 1224,3 C) N-(9-{(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15-{[tert- butil(dimetil)silil]oxi}-10-(2-cianoetoxi)-7-(5-fluoro-3-metil-4-oxo-3,4-di-hidro-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-16-[(3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxanil)oxi]-2,10- dioxido-2-sulfanilocta-hidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-14-il}-9H-purina-6- il)benzamida

[1633] Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-[6-(benzoilamino)-9H- purina-9-il]-4-{[terc-butil(dimetil)silil]oxi}-2-({[(2-cianoetoxi)({(2R,3R,4R,5R)-2-(5- fluoro-3-metil-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-7-il)-5-(hidroximetil)-4- [(3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxanil)oxi]tetra-hidrofuran-3- il}oxi)fosforil]oxi}metil)tetra-hidrofuran-3-il (143 mg) foi sujeito a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro e adicionou-se piridina anidra (2,3 mL). À mistura foi adicionado 2-óxido de 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosfinano (75 mg) e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 45 min. Adicionou-se água (75 μL) e 1,1-dióxido de 3H-1,2-benzoditiol-3-ona (29 mg), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante mais 40 min. À mistura reacional foi adicionada uma solução de penta-hidrato de tiossulfato de sódio (150 mg) e água (0,35 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 5 min. A mistura foi concentrada, foi adicionado tolueno e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida (repetição 4X). O produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (metanol/diclorometano) para dar o composto do título (84 mg) como uma mistura de diastereômeros. MS: [M+H]+ 1238,3 D) 7-{(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-15- {[terc-butil(dimetil)sililo]oxi}-10-hidroxi-16-[(3-hidroxi-1,1,3,3- tetraisopropildisiloxanil)oxi]--2,10-dioxido-2-sulfanilocta-hidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-7-il}-5-fluoro-3- metil-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-4-ona

[1634] A N-(9-{(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-15-{[tert- butil(dimetil)silil]oxi}-10-(2-cianoetoxi)-7-(5-fluoro-3-metil-4-oxo-3,4-di-hidro-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-16-[(3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxanil)oxi]-2,10- dioxido-2-sulfanilocta-hidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-14-il}-9H-purina-6- il)benzamida (83 mg) foi adicionada solução de etanolamina a 33% (2,0 mL) e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 1 h e concentrada sob pressão reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografia de fase reversa (coluna ISCO RediSepRf Gold HP C18 15,5 g) eluída com 0 a 70% de ACN em 10 mM de NH4OAc aq. para dar dois isômeros isolados dos compostos do título: pico 1 (fração inicial, 11 mg) e pico 2 (fração tardia, 44,5 mg). MS: [M+H]+ 1081,3 E) Sal de 7-[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,16R)-14-(6-amino-9H-purina- 9-il)-10,15,16-tri-hidroxi-2,10-dioxido-2-sulfanilocta-hidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il]-5-fluoro-3-metil-3,7-di-hidro- 4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico 1)

[1635] A 7-{(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9- il)-15-{[terc-butil(dimetil)sililo]oxi}-10-hidroxi-16-[(3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropil- iloxanil)oxi]-2,10-dioxido-2-sulfanilocta-hidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-7-il}-5-fluoro-3-metil-3,7-di- hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-4-ona (324 mg, pico 2/fração tardia da etapa D) adicionou-se piridina (6,0 mL) e tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,303 mL). A mistura reacional foi agitada a 55°C durante 16 h. A análise por LCMS mostrou alguns dos intermediários monoprotegidos. Foi adicionado metanol (2,0 mL) e a mistura reacional foi agitada a 55°C durante 3 h. O LCMS mostrou então uma reação completa. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e foram adicionados água (6,7 mL) e cloreto de cálcio (700 mg). A suspensão resultante foi agitada durante 1 hora e foi filtrada numa almofada de Celite®. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia de fase reversa (coluna ISCO RediSepRf Gold HP C18Aq), eluído com 0 a 15% ACN em acetato de trietilamônio aq. a 10 mM para dar o composto do título (195 mg). MS: [M+H]+ 707,1 1H RMN (400 MHz, D2O) δ 1,27 (18H, t, J = 7,3 Hz), 3,19 (12H, q, J = 7,3 Hz), 3,35 (3H, s), 4,06-4,10 (1H, m), 4,18-4,26 (1H, m), 4,32-4,37 (1H, m), 4,39-4,54 (3H, m), 4,63 (1H, d, J = 4,0 Hz), 4,80-4,82 (1H, m), 5,03-5,12 (2H, m), 6,15-6,17 (1H, m), 6,35-6,39 (1H, m), 7,33-7,37 (1H, m), 8,13 (1H, s), 8,15 (1H, s), 8,27 (1H, s). 31P RMN (162 MHz, D2O) δ -2,22, 54,80. 19F RMN (376 MHz, D2O) δ -164,6. F) Sal de 7-[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,16R)-14-(6-amino-9H-purina-9- il)-10,15,16-tri-hidroxi-2,10-dioxido-2-sulfanilocta-hidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il]-5-fluoro-3-metil-3,7-di-hidro- 4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico 2)

[1636] O isômero óptico 2 foi preparado usando o mesmo procedimento que para o isômero óptico 1. 7-{(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H- purin-9-il)-15-{[terc-butil(dimetil)silil]oxi}-10-hidroxi-16-[(3-hidroxi-1,1,3,3- tetraisopropildisiloxanil)oxi]--2,10-dioxido-2-sulfanilocta-hidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-7-il}-5-fluoro-3- metil-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (24,5 mg, pico 1/fracção inicial do passo D) fornece o composto do título (11,8 mg). MS: [M+H]+ 707,1, 1H RMN (400 MHz, D2O) δ ppm 1,25 (18 H, t, J=7,22 Hz), 3,17 (q, J=7,24 Hz, 12 H), 3,35 (3H, s), 4,12 - 4,22 (3H, m), 4,40 - 4,53 (3H, m), 4,62 (1H, m), 4,83 - 4,90 (1H, m), 4,93 - 4,98 (1H, m), 5,09 - 5,15 (1H, m), 6,16 (1H, s), 6,28 - 6,36 (1H, m), 7,50 (1H, s), 8,12 (1H, s), 8,15 (1H, s), 8,31 (1H, s). 31P RMN (162 MHz, D2O) δ -2,42, 54,11. 19F RMN (376 MHz, D2O) δ -165,54. EXEMPLO 24 Síntese de sal de 7-[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H- purina-9-il)-15-fluoro-10,16-dihidroxi-2,10-dioxido-2-sulfanilocta-hidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il]-5-fluoro-3- metil-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômeros ópticos 1 e 2) A) 7-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-di-hidroxi-5-(hidroximetil)tetra-hidrofuran-2-il]-5- fluoro-3-metil-pirrolo[2,3-d]pirimidina-4-ona.

[1637] 7-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-di-hidroxi-5-(hidroximetil)tetra-hidrofuran-2-il]- 5-fluoro-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (300 mg) foi dissolvida em N,N-dimetilformamida (3,30 mL) e foi adicionado carbonato de potássio (192 mg). A suspensão foi arrefecida em banho de gelo. Adicionou-se iodometano (0,080 mL). A mistura foi agitada com arrefecimento durante 5 min e depois agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada e foi adicionada água, neutralizada com 1M de HCl para pH ~ 6. O sólido resultante foi recolhido por filtração e seco sob vácuo durante a noite para dar o composto do título (266 mg). MS: [M+H]+ 300,1. B) 5-fluoro-7-[(6aR,8R,9R,9aS)-9-hidroxi-2,2,4,4-tetraisopropiltetrahidro-6H- furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-8-il]-3-metil-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-4-ona.

[1638] 7-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-di-hidroxi-5-(hidroximetil)tetra-hidrofuran-2-il]- 5-fluoro-3-metil-pirrolo[2,3-d]pirimidina-4-ona (985 mg) (pré-azeotropada com acetonitril 3 vezes e seca sob vácuo durante 5 horas) foi dissolvida em piridina (9,75 mL) e N,N-dimetilformamida (4,80 mL). Após agitação durante 15 min, 1,3-dicloro- 1,1,3,3-tetraisopropildisiloxano (1,02 mL) foi adicionado gota a gota. A mistura foi então agitada à temperatura ambiente durante uma noite. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e azeotropada com tolueno. O resíduo foi particionado entre EtOAc (120 ml) e água (50 mL). A camada orgânica separada foi lavada com água (2 x 50 mL) e solução salina (50 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia utilizando EtOAc/hexano para dar o composto do título (1,41 g). MS: [M+H]+ 542,3. C) 2-cianoetil(6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-3-metil-4-oxo-3,4-di-hidro-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2,4,4-tetraisopropiltetrahidro-6H-furo[3,2- f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-9-il-diisopropilfosforamidoito

[1639] Num balão de fundo redondo de 15 mL, 5-fluoro-7- [(6aR,8R,9R,9aS)-9-hidroxi-2,2,4,4-tetraisopropiltetrahidro-6H-furo[3,2- f][1,3,5,2,4]trioxadisilocina-8-il]-3-metil-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-4- ona (1,41 g) foi azeotropada com acetonitril seco (3 x 5 mL), dissolvida em N,N- dimetilformamida seca (6,17 mL) sob argônio. Adicionou-se 1H-tetrazol 0,45 M em acetonitril (7,05 mL), 1-metil-1H-imidazol (123 μL) e N,N,N',N'- tetraisopropilfosforodiamidito (1,86 mL) de 2-cianoetil. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura foi diluída com 70 ml de EtOAc, lavada com NaHCO3(X 2) saturado e solução salina, seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo em bruto foi purificado por cromatografia em sílica gel utilizando EtOAc/hexano (0,5% de Et3N) para dar o composto do título (1,87 g). MS: [M+H]+ 742,4. D) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-[6-(benzoilamino)-9H-purin-9-il]- 2-({[(2-cianoetoxi){[(6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-3-metil-4-oxo-3,4-di-hidro-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2,4,4-tetraisopropiltetra-hidro-6H-furo[3,2- f][1,3,5,2,4]trioxadisilocina-9-il]oxi}-fosforil]oxi}metil)-4-fluorotetra-hidrofurano-3-il

[1640] Num balão de fundo redondo de 100 mL, 2-cianoetil (6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-3-metil-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 7-il)-2,2,4,4-tetraisopropiltetra-hidro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-9-il- diisopropilfosforamidoito (937 mg) e hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-[6- (benzoilamino)-9H-purin-9-il]-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetra-hidrofuran-3-il (425 mg) foram azeotropados com CH3CN seco (3 x 5 mL), suspensos em tetra-hidrofurano seco (1,80 mL) e acetonitril (2,95 mL) sob argônio. Adicionou-se uma solução de 5- (etiltio)-1H-tetrazol (380 mg) (pré- azeotropada com acetonitril 3 x 5 mL) em acetonitril seco (1,80 mL). A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 1 hora. Hidroperóxido de terc-butil (5,5 mol/L) em nonano (425 μL) foi adicionado. A mistura foi agitada durante 40 min à temperatura ambiente e depois arrefecida num banho de gelo. Uma solução de tiossulfato de sódio (500,0 mg) em água (700 μL) foi adicionada e a mistura foi agitada durante 10 min. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (metanol/DCM). O composto do título (1,10 g) como uma mistura de dois isômeros ópticos foi proporcionado. MS: [M+H]+ 1094,3. E) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-[6-(benzoilamino)-9H-purin-9-il]- 2-({[(2-cianoetoxi)({(2R,3R,4R,5R)-2-(5-fluoro-3-metil-4-oxo-3,4-di-hidro-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-(hidroximetil)-4-[(3-hidroxi-1,1,3,3- tetraisopropildisiloxanil)oxi]tetra-hidrofuran-3-il}oxi)-fosforil]oxi}metil)-4-fluorotetra- hidrofuran-3-il.

[1641] A uma solução de (2R,3R,4R,5R)-5-[6-(benzoilamino)-9H-purin-9-il]- 2-({[(2-cianoetoxi){[(6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-fluoro-3-metil-4-oxo-3,4-di-hidro-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2,4,4-fosfonatodetetraisopropiltetra-hidro-6H-furo[3,2- f][1,3,5,2,4]trioxadisilocina-9-il]oxi}-fosforil]oxi}metil)-4-fluorotetra-hidrofurano-3-il (1,10 g) em tetra-hidrofurano (11,0 mL) e água (2,50 mL) arrefecida com um banho de gelo foi lentamente adicionado ácido trifluoroacético (2,50 mL). A mistura foi agitada com arrefecimento durante 4 horas. Adicionou-se bicarbonato de sódio (3800 mg), seguido de 8 ml de água. A mistura foi agitada durante 5 min, levada à temperatura ambiente e extraída com EtOAc duas vezes. A camada orgânica combinada foi lavada com solução salina, seca sobre Na2SO4, filtrada e o filtrado foi evaporado sob pressão reduzida para dar um produto em bruto. A cromatografia utilizando coluna de sílica gel (metanol/DCM) proporcionou o composto do título (1,14 g). MS: [M+H]+ 1112,3. F) N-(9-{(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-10-(2-cianoetoxi)-15-fluoro- 7-(5-fluoro-3-metil-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-16-[(3-hidroxi- 1,1,3,3-tetraisopropil-dissiloxanil)oxi]-2,10-dioxido-2-sulfanilocta-hidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il}-9H-purin-6- il)benzamida.

[1642] Num balão de fundo redondo de 100 mL, hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-[6-(benzoilamino)-9H-purina-9-il]-2-({[(2- cianoetoxi)({(2R,3R,4R,5R)-2-(5-fluoro-3-metil-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il)-5-(hidroximetil)-4-[(3-hidroxi-1,1,3,3- tetraisopropildisiloxanil)oxi]tetra-hidrofuran-3-il}oxi)fosforil]oxi}metil)-4-fluorotetra- hidrofurano-3-il (149 mg) foi azeotropado com acetonitril (3 x 4 mL) e seco sob vácuo, dissolvido em piridina seca (2,35 mL) e arrefecido num banho de gelo. Adicionou-se 2-óxido de 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosforinano (180 mg) em piridina (0,120 mL). A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 1,5 hora. Água (70,3 mL) foi adicionada, seguido de 3H-1,2-benzoditiol-3-ona (56,2 mg). A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 40 min. Tiossulfato de sódio (135 mg) em 1 mL de água foi adicionado. A mistura foi agitada durante 10 min, concentrada sob pressão reduzida, azeotropada com tolueno para remover a piridina. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (metanol/DCM) para dar o composto do título como uma mistura de dois isômeros ópticos (63,6 mg). MS: [M+H]+ 1126,3. G) 7-{(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-15- fluoro-10-hidroxi-16-[(3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxanil)oxi]-2,10-dioxido-2- sulfanilocta-hidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-7-il}-5-fluoro-3-metil-3,7-di- hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona

[1643] A mistura de dois isômeros, N-(9- {(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-10-(2-cianoetoxi)-15-fluoro-7-(5-fluoro-3- metil-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-16-[(3-hidroxi-1,1,3,3- tetraisopropil-dissiloxanil)oxi]-2,10-dioxido-2-sulfanilocta-hidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il}-9H-purina- 6-il)benzamida (60,7 mg) foi agitada em metilamina (33% em peso) em etanol (3,00 mL) à temperatura ambiente durante 1 hora. A substância volátil foi evaporada sob pressão reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografia de fase reversa (coluna ISCO RediSepRf Gold HP C18) eluída com 0 a 50% de ACN em 10 mM de NH4OAc aq. para dar dois isômeros isolados dos compostos do título: pico 1 (fração inicial, 12 mg) e pico 2 (fração tardia, 35,6 mg). MS: [M+H]+ 969,3. H) Sal de 7-[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purina- 9-il)-15-fluoro-10,16-dihidroxi-2,10-dioxido-2-sulfanilocta-hidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il]-5-fluoro-3- metil-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico 1)

[1644] O tubo cônico de polipropileno de 15 mL foi carregado com 7- {(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-15-fluoro-10- hidroxi-16-[(3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxanil)oxi]--2,10-dioxido-2- sulfanilocta-hidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il}-5-fluoro-3-metil-3,7-di-hidro- 4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona ( 35,6 mg, pico2/fração tardia da etapa G). Piridina (273 μL) foi adicionada, seguido por trihidrofluoreto de trietilamina (27,3 μL) e trietilamina (414 μL). A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante a noite e a 50°C durante 2 horas. A mistura reacional foi arrefecida em banho de gelo e diluída com água (1,3 mL). Adicionou-se lentamente uma solução de cloreto de cálcio (146,0 mg) em água (1,0 mL). A mistura foi agitada durante 30 min e depois filtrada através de um tampão de Celite®. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia de fase reversa (coluna ISCO RediSepRf Gold HP C18Aq), eluído com 0 a 10% de ACN em acetato de trietilamônio aq. a 10 mM para dar o composto do título (23,9 mg). MS: [M+H]+ 709,2. 1NRM H (400 MHz, METANOL-d4) δ 8,29 - 8,24 (m, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,08 - 8,04 (m, 1H), 7,46 - 7,40 (m, 1H), 6,48 (d, 1H, J=12 Hz), 6,37 (d, 1H, J=16 Hz), 5,80 - 5,57 (m, 1H), 5,33 - 5,12 (m, 1H), 5,05 - 4,95 (m, 1H), 4,50 - 4,42 (m, 2H), 4,41 - 4,34 (m, 1H), 4,34 - 4,24 (m, 2H), 4,08 - 3,96 (m, 1H), 3,57 (s, 3H), 3,52 - 3,48 (m, 1H), 3,25 - 3,11 (m, 12H), 1,39 - 1,24 (m, 18H). 31RMN P (162 MHz, D2O) δ-2,45, 55,32. 19RMN F (376,5 MHz, D2O) δ-164,60, -200,71. I) Sal de 7-[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purina-9- il)-15-fluoro-10,16-dihidroxi-2,10-dioxido-2-sulfanilocta-hidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il]-5-fluoro-3- metil-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico 2)

[1645] O tubo cônico de polipropileno de 15 mL foi carregado com 7- {(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-15-fluoro-10- hidroxi-16-[(3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxanil)oxi]--2,10-dioxido-2- sulfanilocta-hidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il}-5-fluoro-3-metil-3,7-di-hidro- 4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (12,0 mg, pico 1/fração inicial da etapa G). Piridina (92 mL) foi adicionada, seguido por tri-hidrofluoreto de trietilamina (9,2 mL) e trietilamina (140 mL). A mistura foi deixada a agitar a 50°C durante 2 horas. A mistura reacional foi arrefecida com banho de gelo e diluída com água (1,0 mL). Adicionou-se lentamente uma solução de cloreto de cálcio (6,98 mg) em água (1,0 mL). A mistura foi agitada durante 30 min e depois filtrada através de um tampão de Celite®. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia de fase reversa (coluna ISCO RediSepRf Gold HP C18Aq), eluído com 0 a 10% de ACN em acetato de trietilamônio aq. a 10 mM para dar o composto do título (1,94 mg). MS: [M+H]+ 709,3. 1H RMN (400 MHz, ÓXIDO DE DEUTÉRIO) δ 8,20 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,46 - 7,40 (m, 1H), 6,37 (d, 1H, J=16 Hz), 6,27 (d, 1H, J=8 Hz), 5,83 (dd, 1H, J1=52 Hz, J2=4 Hz), 4,98 - 4,84 (m, 2H), 4,57 (br d, J = 3,9 Hz, 2H), 4,54 - 4,48 (m, 2H), 4,46 - 4,36 (m, 3H), 4,20 - 4,11 (m, 3H), 3,55 - 3,47 (m, 3H), 3,20 - 3,06 (dd, 12H), 1,28 - 1,12 (t, 18H). 31P RMN (162 MHz, D2O) δ-2,52, 53,94. 19F RMN (376,5 MHz, D2O) δ-165,55, -202,45. EXEMPLO 25 Síntese de sal de 7-[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H- purin-9-il)-15-fluoro-2,10,16-trihidroxi-2,10-dioxidooctahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il]-5-fluoro-3- metil-3,7-dihidro-4H-pirrol[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina A) N-(9-{(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-10-(2-cianoetoxi)-15-fluoro- 7-(5-fluoro-3-metil-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-hidroxi-16- [(3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropil-di-siloxanil)oxi]-2,10-dioxido-octahidro-12H-5,8- metano-furo[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il}-9H-purin-6- il)benzamida

[1646] Num balão de fundo redondo de 100 mL, hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-[6-(benzoilamino)-9H-purina-9-il]-2-({[(2- cianoetoxi)({(2R,3R,4R,5R)-2-(5-fluoro-3-metil-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il)-5-(hidroximetil)-4-[(3-hidroxi-1,1,3,3- tetraisopropildisiloxanil)oxi]tetra-hidrofuran-3-il}oxi)fosforil]oxi}metil)-4-fluorotetra- hidrofurano-3-il (1,14 mg) foi azeotropado com acetonitril (3 x 4 mL) e seco sob vácuo, dissolvido em piridina (18,0 mL) e arrefecido num banho de gelo. Foi adicionado 2-óxido de 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosforinano (586 mg) em 2 porções. A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 40 min. Foi adicionada água (0,554 mL), seguida por 1,1-dióxido de 3H-1,2-benzoditiol-3-ona (251 mg). A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 40 min. Adicionou-se uma solução de tiossulfato de sódio (810 mg) em 2 mL de água. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e azeotropada com tolueno para remover a piridina. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (metanol/DCM) para dar o composto do título (650 mg). MS: [M+H]+ 1111,3

[1647] B) 7-{(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purina- 9-il)-15-fluoro-2,10-di-hidroxi-16-[(3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxanil)oxi]- 2,10-dioxido-octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-7-il}-5-fluoro-3-metil-3,7-di- hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona

[1648] A um balão de fundo redondo de 25 mL foi adicionada N-(9- {(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-10-(2-cianoetoxi)-15-fluoro-7-(5-fluoro-3- metil-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-hidroxi-16-[(3-hidroxi- 1,1,3,3-tetraisopropil-dissiloxanil)oxi]-2,10-dioxido-octahidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfato-ciclotetradecina-14-il}-9H- purina-6-il)benzamida (650 mg) e metilamina (33% em massa) em etanol absoluto (22,7 mL). A mistura foi então agitada à temperatura ambiente por 3 horas. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia de fase reversa (coluna ISCO RediSepRf Gold HP C18) eluída com 0 a 60% de ACN em NH4OAc a 10 mM para dar o composto do título (32,0 mg). MS: [M+H]+ 953,3. C) Sal de 7-[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purina- 9-il)-15-fluoro-2,10,16-tri-hidroxilo-2,10-dioxido-octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il]-5-fluoro-3-metil-3,7-di-hidro- 4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina.

[1649] O tubo cônico de polipropileno de 15 mL foi carregado com 7- {(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-15-fluoro-2,10- di-hidroxi-16-[(3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropil--dissiloxanil)oxi]-2,10-dioxido- octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,36,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il}-5-fluoro-3-metil-3,7-di-hidro- 4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (32,0 mg) e piridina (246 μL) foi adicionada. À suspensão foi adicionado trihidrofluoreto de trietilamina (24,6 μL), seguido por trietilamina (372 μL). A mistura foi deixada agitar durante a noite em temperatura ambiente. A mistura reacional foi arrefecida em banho de gelo e diluída com água (1 mL). Adicionou-se lentamente uma solução de cloreto de cálcio (18,6 mg) em água (1 mL). A mistura foi agitada durante 30 min e depois filtrada através de um tampão de Celite®. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia de fase reversa (coluna ISCO RediSepRf Gold HP C18Aq), eluído com 0 a 5% de ACN em acetato de trietilamônio aq. a 10 mM para dar o composto do título (8,3 mg). MS: [M+H]+ 693,2. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 8,36 (br, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,38 (d, 1H, j=2), 6,48 (d, 1H, j=8), 6,37 (d, 1H, J=16 Hz), 5,70 (dd, 1H, J1=52 Hz, J2=4 Hz), 5,20 - 5,07 (m, 1H), 4,98 - 4,92 (m, 1H), 4,53 (d, 1H, J=4 Hz), 4,45 - 4,33 (m, 2H), 4,33 - 4,19 (m, 3H), 4,09 - 4,03 (m, 1H), 3,45 (s, 3H), 3,17 (qt, 12H), 1,28(t, 18H). 31P RMN (162 MHz, D2O) δ-1,66, -2,26. 19F RMN (376,5 MHz, D2O) δ-164,5, -201,7. EXEMPLO 26 Síntese de sal de 7-[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin- 9-il)-15-fluoro-16-hidroxi-2,10-dioxido-2,10-disulfanilocta-hidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il]-5- cloro-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico 1 e isômero óptico 2): A) (6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-cloro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il)-2,2,4,4-tetraisopropiltetra-hidro-6H-furo[3,2- f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-9-il2-cianoetil-diisopropilfosforamidoito

[1650] Num balão de fundo redondo de 100 mL, 5-cloro-7- [(6aR,8R,9R,9aS)-9-hidroxi-2,2,4,4-tetraisopropiltetrahidro-6H-furo[3,2- f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-8-il]-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (1,469 g) (sintetizada da mesma forma que no método do Exemplo 15 A)) foi azeotropado com tolueno (3 x) e seco sob vácuo. O balão de fundo redondo foi evacuado e recheado com argônio (3 x). N,N-dimetilformamida anidra (5,00 mL) foi adicionada para dissolver o material de partida com sonicação durante um minuto, seguido por 2-cianoetil N,N,N',N'-tetraisopropilfosforodiamidito (2,50 mL), 1-metilimidazol (0,13 mL) e depois 1H-tetrazol (0,45 M em acetonitril, 6,70 mL). A mistura foi agitada sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente durante 3 horas. A mistura foi diluída com EtOAc (200 mL). Adicionou-se solução saturada de NaHCO3. A camada aquosa foi extraída duas vezes com EtOAc. A camada de EtOAc combinada foi lavada com água, depois com solução salina, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para dar um produto oleoso em bruto. O material em bruto foi purificado por cromatografia em coluna (coluna ISCO RediSepRf DIOL HP Gold 100 g) eluída com EtOAc:hexanos (1:9 a 1:1) para dar o composto do título (1,77 g). MS: [M+H]+ 661,3 para o fragmento hidrolisado do produto. B) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-[6-(benzoilamino)-9H-purin-9-il]- 4-fluoro-2-(hidroximetil)tetra-hidrofuran-3-il.

[1651] N-{9-[(2R,3R,4R,5R)-5-{[bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi]metil}-3- fluoro-4-hidroxitetra-hidrofuran-2-il]-9H-purina-6-il}benzamida (2,64 g) foi dissolvida em piridina anidra (18,0 mL) sob argônio, arrefecida com um banho de gelo. Adicionou-se fosfito de difenil (1,60 mL) lentamente ao longo de 1 min. A solução de reação foi aquecida à temperatura ambiente e agitada por 1 hora. A segunda porção de fosfito de difenil (0,35 mL) foi adicionada lentamente e a mistura foi mantida em agitação durante mais 30 min. A mistura foi arrefecida com um banho de gelo. Adicionou-se água (2,0 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e azeotropada com tolueno para remover ainda mais piridina e água. O resíduo foi seco em bomba de vácuo. Ao resíduo foi adicionado ácido acético (10,0 mL) e água (2,0 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 min. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e submetida a evaporação azeotrópica com tolueno, depois seca com bomba de vácuo para dar um óleo em bruto, que foi cromatografado numa coluna de sílica utilizando MeOH/DCM (0/100 a 50/50) para proporcionar 1,33 g do produto do título como um sólido branco. MS: [M+H]+ 438,1. C) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-[6-(benzoilamino)-9H-purin-9-il]- 2-({[{[(6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-cloro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7- il)-2,2,4,4-tetraisopropiltetrahidro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-9-il]oxi}(2- cianoetoxi)fosforotioil]oxi}metil)-4-fluorotetra-hidrofuran-3-il.

[1652] Num balão de fundo redondo de 250 mL, uma mistura de 2-cianoetil diisopropilfosforamidoito de (6aR,8R,9R,9aR)-8-(5-cloro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidina-7-il)-2,2,4,4-tetraisopropiltetrahidro-6H-furo[3,2- f][1,3,5,2,4]trioxadisilocina-9-il (2,23 g) e hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5- [6-(benzoilamino)-9H-purin-9-il]-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetra-hidrofuran-3-il (1,17 g) foi azeotropado com acetonitril seco (25 mL x 3), seco em bomba de vácuo durante 1 hora. À mistura foi adicionado acetonitril anidro (20,0 mL) sob argônio, seguido de uma solução de 5-(etiltio)-1H-tetrazol (1,00 g) (pré-azeotropada com acetonitril seco, 10 mL x 3 e seca com bomba de vácuo) em acetonitril anidro (10,0 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora e 20 min. Adicionou-se ((dimetilamino-metilideno)amino)-3H-1,2,4-ditiazolino-3-tiona (655 mg) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 40 min. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida. A cromatografia em coluna de sílica utilizando MeOH/DCM (0/100 a 40/60) originou o composto do título (1,78 g) como uma mistura de 2 isômeros ópticos. MS: [M+H]+ 1112,4. E) Hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-[6-(benzoilamino)-9H-purina-9- il]-2-({[({(2R,3R,4R,5R)-2-(5-cloro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7- il)-5-(hidroximetil)-4-[(3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxanil)oxi]tetra-hidrofuran- 3-il}oxi)(2-cianoetoxi)fosforotioil]oxi}metil)-4-fluorotetra-hidrofuran-3-il.

[1653] Em um balão de fundo redondo, hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)-5-[6-(benzoilamino)-9H-purin-9-il]-2-({[{[(6aR,8R,9R,9aR)-8-(5- cloro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2,4,4- tetraisopropiltetrahidro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-9-il]oxi}(2- cianoetoxi)fosforotioil]oxi}metil)-4-fluorotetra-hidrofuran-3-il (1,73 g) foi dissolvido em tetrahidrofurano (16 mL) e água (4,0 mL). A solução foi arrefecida com um banho de gelo. Adicionou-se ácido trifluoroacético (4,0 mL) gota a gota. A mistura foi agitada com arrefecimento durante 4 horas. A 0oC adicionou-se bicarbonato de sódio (7,00 g), em porções, seguido de água e EtOAc. A mistura foi agitada durante 3 min e depois trazida para a temperatura ambiente. As camadas foram separadas. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (3 x). A solução de EtOAc combinada foi lavada com solução salina, seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e seco em bomba de vácuo para dar o produto em bruto. O material em bruto foi purificado numa coluna de sílica utilizando MeOH/DCM (0/100 a 40/60) para proporcionar o produto do título (1,43 g) como uma mistura de 2 isômeros ópticos. MS: [M+H]+ 1130,3. F) N-(9-{(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-7-(5-cloro-4-oxo-3,4-di- hidro-7H-pirrolo[2,3-dpirimidin-7-il)-10-(2-cianoetoxi)-15-fluoro-16-[(3-hidroxi- 1,1,3,3-tetraisopropil-dissilsiloxanil)oxi]-2-oxido-2-sulfanil-10-sulfido-octa-hidro- 12H-5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il}- 9H-purin-6-il)benzamida (mistura de dois isômeros ópticos principais).

[1654] Num balão de fundo redondo, hidrogenofosfonato de (2R,3R,4R,5R)- 5-[6-(benzoilamino)-9H-purina-9-il]-2-({[({(2R,3R,4R,5R)-2-(5-cloro-4-oxo-3,4-di- hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-(hidroximetil)-4-[(3-hidroxi-1,1,3,3- tetraisopropildisiloxanil)oxi]tetrahidrofuran-3-il}oxi)(2- cianoetoxi)fosforotioil]oxi}metil)-4-fluorotetra-hidrofurano-3-il (1,20 g) foi azeotropado com piridina seca (garrafa fresca)/acetonitril (x 2) e depois acetonitril seco. O sólido branco resultante foi seco sob vácuo. Sob uma atmosfera de argônio, piridina anidra (20,0 mL) (garrafa fresca) foi adicionada, seguido de 2-óxido de 2- cloro-5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosfinano (0,700 g). A solução límpida foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 1 hora e 10 minutos. Foi adicionada água (0,70 mL), seguida por 1,1-dióxido de 3H-1,2-benzoditiol-3-ona (0,300 g). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 20 min. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, azeotropada com tolueno (x 2), seca com bomba de vácuo para dar um resíduo bruto. O resíduo em bruto foi cromatografado numa coluna de sílica utilizando MeOH/DCM (0/100 a 20/80). Os produtos do título (590 mg) da fracção inicial foram obtidos e identificados como a mistura dos principais isômeros dos picos 2 e 4 da LCMS; enquanto a segunda safra de produtos (389 mg) da fração tardia foi uma mistura de todos os 4 isômeros. MS: [M+H]+ 1144,2. G) 7-{(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-15- fluoro-16-[(3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxanil)oxi]-2,10-dioxido-2,10- dissulfanilocta-hidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-7-il}-5-cloro-3,7-di-hidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômeros ópticos 1 e 2)

[1655] Sob atmosfera de N2 N-(9-{(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-7- (5-cloro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-10-(2-cianoetoxi)-15- fluoro-16-[(3-hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropil-dissilsiloxanil)oxi]-2-oxido-2-sulfanil-10- sulfido-octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-14-il}-9H-purin-6-ilo)benzamida (0,584 g, mistura de 2 isômeros principais, fração inicial da cromatografia em coluna) foi agitada em metilamina (33% em massa) em etanol absoluto (15,0 mL) à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e seca com bomba de vácuo para dar um sólido em bruto. Duas purificações subsequentes em colunas de sílica gel, utilizando MeOH/EtOAc (0/100 a 40/60) proporcionaram 2 isômeros ópticos únicos dos compostos do título: isômero 1 (fração inicial/pico 1, 73 mg) e isômero 2 (fração tardia/pico 2, 304 mg) e uma fração de mistura do pico 1 e 2 (0,30 g). MS (isômero óptico 1): [M+H]+ 987,2. MS (isômero óptico 2): [M+H]+ 987,2. H) Sal de 7-[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9- il)-15-fluoro-16-hidroxi-2,10-dioxido-2,10-disulfanilocta-hidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il]-5-cloro-3,7- di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico 1).

[1656] A um tubo de polipropileno foi adicionado 7- {(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-15-fluoro-16-[(3- hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxanil)oxi]-2,10-dioxido-2,10-dissulfanilocta-hidro- 12H-5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecin-7-il}-5- cloro-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico 1, 69,2 mg, fração inicial da cromatografia em coluna), piridina (0,40 mL), seguida de tri- hidrofluoreto de trietilamina (0,060 mL), depois trietilamina (0,90 mL). A mistura reacional no tubo de propileno selado foi agitada a 50oC durante a noite. A mistura reacional foi arrefecida à temperatura ambiente, diluída com água (1,30 mL). Adicionou-se uma solução de cloreto de cálcio (92,5 mg) em água (1,30 mL). A mistura branca turva foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora e depois filtrada através de Celite® utilizando um funil de filtro de plástico, lavada com água (1 mL x 4). O filtrado aquoso límpido foi concentrado sob pressão reduzida, submetido a evaporação azeotrópica com tolueno por várias vezes, seco sob vácuo durante 10 min para dar um resíduo bruto. Purificou-se o resíduo bruto por cromatografia em coluna C18 (água-acetonitril/solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM). A fração do produto foi concentrada sob pressão reduzida, azeotropada com tolueno (x 4), depois com água livre de endotoxina (x 5). O resíduo final foi dissolvido em água livre de endotoxina e liofilizado para dar o produto do título (isômero óptico 1, 29,0 mg). MS [M+H]+ 727,0, 1H RMN (400 MHz, óxido de deutério) δ = 8,19 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,63 (s, 1H), 6,39 (br d, J = 15,7 Hz, 1H), 6,34 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,60 - 5,41 (m, 1H), 5,22 - 5,14 (m, 1H), 5,14 - 5,02 (m, 1H), 4,55 (br d, J = 3,8 Hz, 1H), 4,51 (br d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,42 (br s, 1H), 4,40 (br s, 1H), 4,35 - 4,28 (m, 1H), 4,16 - 4,10 (m, 1H), 4,06 (br dd, J = 4,3, 11,5 Hz, 1H), 3,13 (q, J = 7,3 Hz, 12H), 1,21 (t, J = 7,3 Hz, 18H). 31P RMN (162 MHz, óxido de deutério) δ 55,29, 54,54. 19RNM F (376 MHz, óxido de deutério) δ - 200,90. I) Sal de 7-[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9- il)-15-fluoro-16-hidroxi-2,10-dioxido-2,10-disulfanilocta-hidro-12H-5,8- metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-7-il]-5-cloro-3,7- di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona di-trietilamina (isômero óptico 2).

[1657] A um tubo de polipropileno foi adicionada 7- {(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-15-fluoro-16-[(3- hidroxi-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxanil)oxi]-2,10-dioxido-2,10-dissulfanilocta-hidro- 12H-5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatriciclotetradecin-7-il}-5- cloro-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (isômero óptico 2, 186 mg, fração tardia do cromatógrafo). Adicionou-se piridina (1,1 mL), seguida de tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,161 mL) e depois trietilamina (2,4 mL). A mistura reacional no tubo de propileno selado foi agitada a 50oC durante a noite. A mistura reacional foi arrefecida à temperatura ambiente, diluída com água (3,50 mL). Adicionou-se uma solução de cloreto de cálcio (250 mg) em água (3,50 mL). A mistura branca turva foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura foi filtrada através de Celite® usando um funil de filtro de plástico, lavada com água (3 mL x 4). O filtrado aquoso límpido foi concentrado sob pressão reduzida, submetido a evaporação azeotrópica com tolueno por várias vezes, seco sob vácuo durante 10 min para dar um resíduo bruto. Purificou-se o resíduo bruto por cromatografia em coluna C18 (água-acetonitril/solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM). A fração do produto foi concentrada sob pressão reduzida, azeotropada com tolueno (x 4), depois com água livre de endotoxina (x 5). O resíduo final foi dissolvido em água livre de endotoxina e liofilizado para dar o produto do título (isômero óptico 2, 109 mg). MS [M+H]+ 727,0.

[1658] 1H RMN (400 MHz, óxido de deutério) δ 8,10 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 6,30 (d, J = 15,9 Hz, 1H), 6,24 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,49 - 5,27 (m, 1H), 5,07 - 4,86 (m, 2H), 4,85 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 4,44 (br d, J = 9,0 Hz, 1H), 4,33 (br d, J = 14,7 Hz, 2H), 4,28 - 4,16 (m, 2H), 3,98 (br dd, J = 5,0, 11,8 Hz, 1H), 3,04 (q, J = 7,4 Hz, 12H), 1,12 (t, J = 7,3 Hz, 18H). 31P RMN (162 MHz, óxido de deutério) δ 55,12, 52,04. 19F RMN (376 MHz, óxido de deutério) δ -200,43. EXEMPLO 27 Carga útil do ligante 1

[1659] A uma mistura de 6-(2,5-dioxopirrol-1-il)-N-[(1S)-1-[[(1S)-2-[4- (hidroximetil)anilino]-1-metil-2-oxo-etil]carbamoil]-2-metil-propil]hexanamida (mc- Val-Ala-PAB-OH, Synchem, Elk Grove Village, IL, 0,0822 mmol, 40,0 mg) em acetonitril anidro (19,1 mmol, 1,00 mL, 783 mg) foi adicionado iodeto de césio (0,0986 mmol, 25,6 mg) e dietil eterato de trifluoreto de boro (0,0986 mmol, 0,0125 mL, 14,0 mg). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante uma noite. Após 18 h de agitação, a mistura foi diluída com ~10 mL de DCM e filtrada sobre uma almofada de Celite®. O sólido foi lavado com DCM. O filtrado foi concentrado para proporcionar um sólido laranja. O produto bruto (mc-Val-Ala-PAB-I) foi utilizado sem purificação adicional.

[1660] Um frasco carregado com uma solução de dissódio 2,10-dióxido de (5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-15-fluoro-7-(5- fluoro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-16-hidroxi-2-sulfido- octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecina-10-olato (Carga 1, também "composto Ex. 3a", 0,0106 mmol, 7,80 mg) e 6-(2,5-dioxopirrol-1-yl)-N-[(1S)-1- [[(1S)-2-[4-(iodometil)anilino]-1-metil-2-oxo-etil]carbamoil]-2-metil- propil]hexanamida (mc-Val-Ala-PAB-eu, 0,0208 mmol, 12,4 mg, bruto) em N,N- dimetilformamida(5,17 mmol 0,400 mL, 378 mg) foi vedado e aquecido a 60 ° C. Em 2h a reação foi arrefecida à temperatura ambiente e purificada por cromatografia em coluna C18 (gradiente contínuo de 20-60% CH3CN/água com 0,1% de ácido fórmico) para fornecer N-[(2S)-1-{[(2S)-1-{[4- ({[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-15-fluoro-7-(5- fluoro-4-oxo-3,4-dihidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-10,16-dihidroxi-2,10- dioxidooctahidro-12H-5,8-methanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-2-il]sulfanil}metil)fenil]amino}-1- oxopropan-2-il]amino}-3-Metil-1-oxobutan-2-il]-6-(2,5-dioxo-2,5-dihidro-1h-pirrol-1- iL)hexanamida e (5,5 mg, 45% de rendimento) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 8,23-8,35 (m, 2H), 8,10 (s, 1H), 7,89-8,02 (m, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,52-7,64 (m, 2H), 7,41 (br d, J=8,53 Hz, 2H), 7,22-7,38 (m, 2H), 6,75-6,83 (m, 2H), 6,32-6,43 (m, 2H), 5,71-5,90 (m, 2H), 4,54-4,59 (m, 2H), 4,42-4,51 (m, 2H), 4,07-4,35 (m, 8H), 3,46 (br t, J=7,03 Hz, 2H), 2,27 (br t, J=7,34 Hz, 2H), 2,03-2,15 (m, 2H), 1,53-1,70 (m, 4H), 1,39-1,47 (m, 3H), 1,23-1,37 (m, 2H), 0,92-1,02 (m, 6H). LCMS: m/z 1163, 1164 [M+H]. EXEMPLO 28 Carga útil do ligante 2

[1661] A carga útil do ligante 2 foi gerada de acordo com o procedimento no Exemplo 27, utilizando sal de 2-amino-9-[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-14- (6-amino-9H-purina-9-il)-10,18-di-hidroxi-2,10-dioxido-2-sulfanil-hexa-hidro-14H- 15,12a-(epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-7(12H)-il]-1,9-di-hidro-6H- purin-6-ona sesqui-trietilamina (Carga Útil 2) em vez de Carga Útil 1.

[1662] A carga útil 2 foi preparada de acordo com o método abaixo.

[1663] Sal de 2-amino-9-((5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-14-(6- amino-9H-purina-9-il)-10,18-di-hidroxi-2,10-oxido-2-sulfanil-hexa-hidro-14H- 15,12a-(epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecina-7(12H)-il)-1,9-di-hidro-6H-purin- 6-ona sesqui-trietilamina (isômero óptico) A) Hidrogenofosfonato de (1R,3R,4R,7S)-3-(6-benzamido-9H-purina-9-il)-1- ((((((2R,3R,4R,5R)-4-((tert-butildimetilsililoxi)-5-(hidroximetil)-2-(2-isobutilamido-6- oxo-1H-purin-9(6H)-il)tetra-hidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi)fosforil)oxi)metil)-2,5- dioxabiciclo[2.2.1]heptan-7-il

[1664] Hidrogenofosfonato de (1S,3R,4R,7S)-3-(6-benzamido-9H-purin-9- il)-1-(hidroximetil)-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptan-7-il (700mg) e 5'-O-[bis(4- metoxifenil)(fenil)metil]-3'-O-[terc-butil(dimetil)silil]-2'-O-{(2- cianoetoxi)[diisopropilamino]fosfanil}-N-(2-metilpropanoil)guanosina (2280 mg) foram submetidos a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro e foram adicionados acetonitril anidro (15 mL) e tetra-hidrofurano anidro (5 mL). À mistura foi adicionada uma mistura de 5-(etilsulfanil)-2H-tetrazol (611 mg) (que foi submetido a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro) e acetonitril anidro (10 mL), e a mistura foi agitada durante a noite sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente. Foi adicionado hidroperóxido de terc-butil a 70% (643 μL) e a mistura foi agitada temperatura ambiente durante 20 min. Mistura reacional foi adicionada uma mistura de tiossulfato de sódio (5920 mg) e água (3 mL) e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado ácido acético a 80% (30 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 20 min. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica em gel (metanol/acetato de etila) para obter o composto do título (980 g). MS: [M+H]+ 1030,2 B) 2-amino-9-[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-14-(6-amino-9H-purin- 9-il)-18-{[terc-butilo(dimetil)silil]oxi}-2,10-di-hidroxi-10-oxido-2-sulfido-hexa-hidro- 14H-15,12a-(epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-7(12H)-il]-1,9-di-hidro-6H- purina-6-ona (isômero óptico)

[1665] Hidrogenofosfonato de (1R,3R,4R,7S)-3-(6-benzamido-9H-purina-9- il)-1-((((((2R,3R,4R,5R)-4-((terc-butildimetilsilil))oxi)-5-(hidroximetil)-2-(2- isobutilamido-6-oxo-1H-purin-9(6H)-il)tetra-hidrofuran-3-il)oxi)(2- cianoetoxi)fosforil)oxi)metil)-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptan-7-il (980 mg) foi submetido a desidratação azeotrópica com acetonitril anidro e piridina anidra, e adicionou-se piridina anidra (50 mL). À mistura foi adicionado 2-cloro-5,5-dimetil- 1,3,2-dioxafosfinano 2-óxido (615 mg) temperatura ambiente e a mistura foi agitada sob atmosfera de argônio temperatura ambiente durante 1 h. Foi adicionada água (600 μL) e 3H-benzo[c][1,2]ditiol-3-ona (240 mg) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante mais 30 min. Mistura reacional foi adicionada uma mistura de tiossulfato de sódio (1180 mg) e água (3 mL) e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foram adicionados acetonitril anidro (15 mL) e 2- metilpropan-2-amina (5,0 mL) e a mistura foi agitada temperatura ambiente durante 1,5 h e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (metanol/acetato de etila) e ao resíduo obtido foi adicionada solução de etanolamina a 40% (30 mL). A mistura foi agitada durante a noite sob atmosfera de argônio à temperatura ambiente e a mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica em gel (metanol/acetato de etila). O resíduo obtido foi resolvido em dois diastereômeros (tR1 e tR2, cujos tempos de retenção por LC/MS são de mais curto a mais longo nesta ordem) por HPLC (L-column2 ODS, 50 x 150 mm, fase móvel: 5 mM de solução aquosa de acetato de amônio/acetonitril) para obter o composto em título (38 mg, tR1) e o composto em título (322 mg, tR2). MS (tR1): [M+H]+ 817,1. MS (tR2): [M+H]+ 817,1 C) Sal de 2-amino-9-[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-14-(6-amino- 9H-purina-9-il)-2,10,18-tri-hidroxi-10-oxido-2-sulfido-hexa-hidro-14H-15,12a- (epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentanadadifosfaciclotetradecina-7(12H)-il]-1,9-di-hidro-6H- purin-6-onasesqui-trieltilamina (isômero óptico)

[1666] A 2-amino-9-[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-14-(6-amino- 9H-purin-9-il)-18-{[terc-butilo(dimetil)silil]oxi}-2,10-di-hidroxi-10-oxido-2-sulfido- hexa-hidro-14H-15,12a-(epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-7(12H)-il]-1,9-di-hidro-6H- purina-6-ona (isômero óptico) (38 mg, tR1) foram adicionados metanol (3,0 mL) e tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,76 mL). A mistura reacional foi concentrada para remover o metanol e o resíduo foi agitado a 55°C durante 1 h. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, foi adicionada etóxi(trimetil)silano (4,2 mL) a isso e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna C18 (acetonitril/solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM) para obter o composto do título (27 mg). 1H RMN (400 MHz, D2O) δ 1,23 (13H, t, J = 7,3 Hz), 3,15 (9H, q, J = 7,3 Hz), 4,04 (1H, d, J = 8,3 Hz), 4,08-4,19 (3H, m), 4,28 (1H, d, J = 12,2 Hz), 4,37-4,52 (2H, m), 4,65 (1H, d, J = 4,2 Hz), 4,90 (1H, d, J = 4,6 Hz), 5,36 (1H, s), 5,55 (1H, td, J = 8,5, 4,0 Hz), 5,98 (1H, d, J = 8,3 Hz), 6,16 (1H, s), 7,94 (1H, s), 8,21 (1H, s), 8,25 (1H, s). 31P RMN (162 MHz, D2O) δ-1,45, 53,78.

[1667] Síntese de sal de 2-amino-9-[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)- 14-(6-amino-9H-purin-9-il)-10,18-di-hidroxi-2,10-dioxido-2-sulfanil-hexa-hidro-14H- 15,12a-(epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-7(12H)-il]-1,9-di-hidro-6H- purin-6-ona sesqui-trietilamina (isômero óptico; Carga útil 2)

[1668] A 2-amino-9-[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-14-(6-amino- 9H-purin-9-il)-18-{[terc-butilo(dimetil)silil]oxi}-2,10-di-hidroxi-10-oxido-2-sulfido- hexa-hidro-14H-15,12a-(epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfatociclotetradecina-7(12H)-il]-1,9-di-hidro-6H- purina-6-ona (isômero óptico) (322 mg, tR2) foram adicionados metanol (3,0 mL) e tri-hidrofluoreto de trietilamina (3,2 mL). A mistura reacional foi concentrada para remover o metanol e o resíduo foi agitado a 55°C durante 1 h. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, foi adicionada etóxi(trimetil)silano (14 mL) a isso e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna C18 (acetonitril/solução tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM) para obter o composto do título (266 mg). 1H RMN (400 MHz, D2O) δ 1,23 (14H, t, J = 7,3 Hz), 3,15 (10H, q, J = 7,3 Hz), 4,02 (1H, d, J = 8,1 Hz), 4,13-4,24 (2H, m), 4,27-4,42 (4H, m), 4,59 (1H, d, J = 4,4 Hz), 5,01 (1H, s), 5,11 (1H, d, J = 4,2 Hz), 5,61-5,73 (1H, m), 5,95 (1H, d, J = 8,3 Hz), 6,15 (1H, s), 7,87 (1H, s), 8,00 (1H, s), 8,25 (1H, s).31P RMN (162 MHz, D2O) δ-1,93, 55,44. EXEMPLO 29 Procedimento Geral de Conjugação ADC

[1669] Diluiu-se uma solução de anticorpo para a concentração reacional desejada com um tampão apropriado. O pH foi ajustado a 7 por adição de tris 0,5 M, solução EDTA a 25 mM em água (pH 8,0). Adicionou-se TCEP (2,2 equiv, 5 mM em água) com agitação. Após 1 hora de incubação à temperatura ambiente, adicionaram-se 5 equiv. de carga útil de ligante (5 mM em DMA). Após 2 horas adicionais de agitação suave à temperatura ambiente, a mistura foi purificada duas vezes sobre 3 mL de colunas de dessalinização spinOUT (G-Bioscience, pré- equilibrada com um tampão contendo histidina a 10 mM, sacarose a 7,5% (p/v) e polissorbato 20 a 0,08%/v) a pH 5,2) e depois trocou-se o tampão para PBS de Dulbecco e concentrou-se a 1 ~ 3 mg/mL (conforme determinado por absorção de UV utilizando um coeficiente de extinção IgG1 padrão) utilizando uma coluna Vivaspin6 (GE Healthcare). A amostra foi então caracterizada por razão droga- anticorpo (DAR) por espectrometria de massa QTOF. A composição monomérica do ADC foi determinada por cromatografia de exclusão de tamanho (SEC). Protocolo de Cromatografia de Exclusão de Tamanho (SEC) Preparação de amostras

[1670] Preparar uma água em bruto adicionando água HPLC a um frasco de HPLC. Controles de anticorpos nus e amostras de ADC são obtidos dos químicos. Os controles e as amostras são diluídos com 1XPBS se a concentração estiver acima de 5mg/ml, ou injetados puros se a concentração for 5mg/ml ou inferior. Configuração do sistema HPLC

[1671] Um sistema de HPLC Agilent 1100 é usado para análise. O sistema é configurado com sistema de lavagem (5% de acetonitril em água HPLC) em um canal de bomba, e a fase móvel (como descrito acima) em um canal de bomba diferente. A coluna utilizada é Tosoh Biosep TSK Gel, G3000SWxl; P/N 8541; 250A; 5um; 7,8 mm x 300 mm. A taxa de fluxo é ajustada para 1mL/min, e cada execução é isocrática com 100% de fase móvel [fosfato de sódio a 100 mM, cloreto de sódio a 300 mM, pH 6,8, acetonitril a 10% (v/v)] durante 20 minutos. O DAD está configurado para 280nm. O volume de injeção para cada controle, amostra e espaço em branco é tipicamente 10uL, mas pode ser ajustado dependendo da absorbância UV. Análise de Dados: Todos os picos a 280nm dentro da janela de tempo apropriada (tipicamente 2-10 minutos) são integrados. EXEMPLO 30 Preparação de ADC1

[1672] A síntese foi realizada de acordo com o Procedimento de Conjugação Geral de ADC.

[1673] Anticorpo: Anticorpo 1, um anticorpo anti-GCC (5F9), 100 uL de uma solução de 60 mg/mL em um tampão de 50 mM de histidina e 100 mM de arginina a pH 6,0, receptor alvo guanilil ciclase C (GCC) Cadeia pesada do anticorpo 1:

[1674] QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVFGGSFSGYYWSWIRQPPGK GLEWIGEINHRGNTNDNPSLKSRVTISVDTSKNQFALKLSSVTAADTAVYYCARE RGYTYGNFDHWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDY FPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNH KPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV TCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQD WLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTC LVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQG NVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ. ID No. 1) Cadeia leve do anticorpo 1:

[1675] EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSRNLAWYQQKPGQAP RLLIYGASTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTIGSLQSEDFAVYYCQQYKTWPRTFG QGTNVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNAL QSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKS FNRGEC (SEQ. ID No. 2)

[1676] Tampão: histidina a 50 mM e arginina a 100 mM a pH 6,0, 200 uL, concentração final a 20 mg/mL

[1677] Carga útil do ligante: N-[(2S)-1-{[(2S)-1-{[4- ({[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purina-9-il)-15-fluoro-7- (5-fluoro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-7-il)-10,16-di-hidroxi-2,10- dioxido-octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-2-il]sulfanil}metil)fenil]amino}-1- oxopropan-2-il]amino}-3-metil-1-oxobutan-2-il]-6-(2,5-dioxo-2,5-di-hidro-1H-pirrol- 1-il)hexanamida (carga útil do ligante 1)

[1678] Produto de ADC: ADC1, rendimento = 1,9 ml a 2,5 mg/mL (79%), DAR 3,5, 99% de monômero (isto é, não agregado) EXEMPLO 31 Preparação de ADC2

[1679] A síntese foi realizada de acordo com o Procedimento de Conjugação Geral de ADC.

[1680] Anticorpo: Anticorpo 2, um anticorpo não direcionado a GCC direcionado para uma proteína ancorada à membrana superexpressada em certos tumores sólidos incluindo pulmão e mama, 100 uL a 11,8 mg/ml em acetato de sódio a 25 mM, pH 5,5.

[1681] Tampão: PBS de Dulbecco, pH 7,4, 200 uL, concentração final 4 mg/mL

[1682] Carga útil do ligante: N-[(2S)-1-{[(2S)-1-{[4- ({[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aR,16R)-14-(6-amino-9H-purina-9-il)-15-fluoro-7- (5-fluoro-4-oxo-3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-7-il)-10,16-di-hidroxi-2,10- dioxido-octahidro-12H-5,8-metanofuro[3,2- l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfaciclotetradecin-2-il]sulfanil}metil)fenil]amino}-1- oxopropan-2-il]amino}-3-metil-1-oxobutan-2-il]-6-(2,5-dioxo-2,5-di-hidro-1H-pirrol- 1-il)hexanamida (carga útil do ligante 1)

[1683] Produto de ADC: ADC2, rendimento = 0,6 ml a 1,4 mg/ml (70%), DAR 2,6, 99% de monômero EXEMPLO 32 Preparação de ADC3

[1684] A síntese foi realizada de acordo com o Procedimento de Conjugação Geral de ADC.

[1685] Anticorpo: Anticorpo 1, 33 uL a 60 mg/mL num tampão de histidina a 50 mM e arginina a 100 mM a pH 6,0

[1686] Tampão: histidina a 50 mM e arginina a 100 mM a pH 6,0, 66 uL, concentração final a 20 mg/mL

[1687] Carga útil do agente de ligação: N-[(2S)-1-{[(2S)-1-{[4- ({[(5R,7R,8R,12aR,14R,15R,15aS,18R)-7-(2-amino-6-oxo-1,6-di-hidro-9H-purin-9- il)-14-(6-amino-9H-purin-9-il)-10,18-di-hidroxi-2,10-dioxido-hexa-hidro-14H- 15,12a-(epoximetano)-5,8-metanofuro[3,2-l][1,3,6,9,11,2,10]pentaoxadifosfa- ciclotetradecina-2(12H)-il]sulfanil}metil)fenil]amino}-1-oxopropan-2-il]amino}-3- metil-1-oxobutan-2-il]-6-(2,5-dioxo-2,5-di-hidro-1H-pirrol-1-il)hexanamida (Carga útil do ligante 2)

[1688] Produto de ADC: ADC3, rendimento = 1,9 ml a 1,0 mg/ml (95%), DAR 4,3, 98% de monômero EXEMPLO 33 Ensaio de liberação de carga útil de tritossoma - medição da liberação de carga útil de sistemas de carga útil do ligante ou ADCs em um modelo de lisossoma in vitro Materiais:

[1689] Tampão: 47,9 mg/ml de Monobásico de Fosfato de Potássio (Número do Produto Sigma-Aldrich P5379); 6,8 mg/mL de fosfato de sódio dibásico (Número do Produto S0876 da Sigma-Aldrich), 1,7 mg/mL de ácido etilenodiaminotetracético (número de produto ED4SS da Sigma-Aldrich) em água purificada. O pH foi ajustado para 6,0 usando HCl a 1N ou KOH a 1N.

[1690] Tritossomas de Fígado de Rato comprados da XenoTech

[1691] Carga útil do ligante (DMSO a 10 mM)

[1692] ADC (1-40 uM no tampão de armazenamento usado para produção). Procedimento:

[1693] Para avaliação da liberação de carga útil de compostos de carga útil do ligante, uma solução de trabalho de 120,95 dM DMSO foi preparada a partir de solução estoque de 10 mM de compostos de carga útil do ligante. Depois, a solução de trabalho de DMSO a 120,95 uM foi diluída para 1 M em 225 de solução tampão de tritossoma contendo 22,4% de tritossomas de fígado de rato.

[1694] Para avaliação das moléculas de ADC, 1,86 μL de solução de ADC foi diluído com 223,1 μL de mistura de tritossomas de fígado de rato em tampão de tritossoma.

[1695] As soluções assim preparadas foram incubadas durante 24 horas a 37°C. Alíquotas de 40 uL foram removidas a 0,5, 1, 3, 5 e 24 horas e diluídas com 160 μl de ácido fórmico a 0,1% em solução de metanol em uma placa de 96 poços, que foi armazenada em freezer a -80°C até a conclusão do experimento. Após a coleta do último ponto de tempo, adicionou-se às amostras 200 uL de ácido fórmico a 0,1% em solução de metanol e adicionou-se carbutamida a 150 nM, que é uma solução padrão interna. As amostras foram bem misturadas e centrifugadas a 4000 g por 10 minutos, e a placa de 96 poços foi submetida à análise de concentração de carga útil por LC/MS/MS. Sistema LC/MS/MS:

[1696] Foram injetados 5 uL de amostras no LC/MS/MS com uma coluna Waters Xselect C18 CSH 3,5u 2,1 mmID x 30 mm de comprimento. O solvente aquoso da fase móvel continha 0,1% de ácido fórmico em água, e o solvente orgânico em fase móvel continha 0,1% de ácido fórmico em 5% de água e 95% de acetonitril. As amostras foram executadas em gradiente de 3 minutos a uma taxa de fluxo de 1,5 mL/min. Inicialmente, o instrumento estava executando solvente de fase mel 100% aquoso durante 0,5 minutos e depois aumentou para 100% de solvente orgânico nos próximos 1,5 minutos. O sistema manterá a 100% de solvente orgânico por mais 0,5 minutos, e então mudará para 100% de solvente de fase aquosa nos próximos 0,5 minutos. Análise:

[1697] Para monitorar e calcular a liberação da carga útil do ligante e da carga útil do ADC, uma curva de área de pico ou concentração versus tempo foi plotada. Os dados seriam analisados usando o programa Excel-Fit para calcular a taxa de variação linear e t1/2 da carga útil de formação das moléculas testadas. Dados de liberação de carga útil tritossomal:

[1698] Como mostrado na Fig. 1, Fig. 2 e Fig. 3, quando submetidos ao protocolo acima, ADC1, ADC2 e ADC3 liberam as cargas úteis esperadas. Protocolo de ensaio de fosfo-IRF3

[1699] Células HEK293 manipuladas para expressar os alvos da superfície celular associados a tumores para os mAbs Anticorpo 1 (ADC1 e ADC3) e Anticorpo 2 (ADC2), bem como células HEK293 alvo não expressantes (HEK293-Vect), foram semeadas em 1,5 x 10E5 células/poço (500 uL/poço) em placas de 24 poços revestidas com poli-D-lisina (Corning) e foram cultivadas durante a noite. Após privação sérica durante a noite, as células foram tratadas com várias concentrações de ADCs durante 6 horas e depois lisadas em tampão RIPA (ThermoFisher Scientific) com inibidores de protease e fosfatase (ThermoFisher Scientific). Os lisados celulares foram submetidos a análise Western blotting para fosfo-IRF3 (CST) e IRF3 (BD Biosciences). O nível de fosfo-IRF3 foi normalizado para o seu IRF3 total. Resultados do ensaio de Fosfo-IRF3

[1700] Como mostrado na Fig. 4, Fig. 5 e Fig. 6, as células HEK293 que expressam os alvos receptores de superfície para ADC1, ADC2 e ADC3 exibem o aumento esperado no marcador de via STING fosfo-IRF3 (pIRF3) quando tratadas com os ADC1, ADC2 e ADC3, respectivamente. Por outro lado, a resposta de pIRF3 não é regulada positivamente após o tratamento de ADC em células vetoriais HEK293 que não expressam os correspondentes alvos receptores de superfície. EXEMPLO 34 Perfis farmacológicos de dinucleotídeos cíclicos selecionados

[1701] Os perfis farmacológicos dos dinucleotídeos cíclicos selecionados são mostrados na Tabela 6. Protocolo do Ensaio do Gene Repórter Lucia de THP-1 Dual

[1702] As células THP1-Dual™ (InvivoGen # thpd-nfis) foram derivadas da linhagem celular de monócitos THP-1 humana por integração estável do gene de luciferase Lucia, um gene repórter de luciferase secretado, sob o controle de um promotor mínimo de ISG54 (gene estimulado por interferon) em conjunto com cinco elementos de resposta estimulada por interferon (IFN). No dia da experiência, as células foram plaqueadas numa placa preta de 384 poços (Corning 356697) a 7500 células/25 μL por densidade de poço em meio de crescimento (RPMI 1640, L- glutamina a 2 mM, HEPES a 25 mM, 10% de soro bovino fetal inativado pelo calor, 100 μg/mL de Normocin™, 100 μg/mL-100 μg/mL de Pen-Strep, 10 μg/mL de blasticidina e 100 μg/mL de Zeocina). As placas de células foram doseadas com 62,5 nL dos compostos de teste e depois incubadas a 37°C durante 20 horas. No final da incubação, foram adicionados 15 μL/poço do QUANTI-Luc™ (InvivoGen # rep-qlc1) e a luminescência foi medida imediatamente utilizando o LeadSeeker. Protocolo de análise de western blot da ativação da via de sinalização a jusante (TBK1 e IRF3)

[1703] Foram tratadas 1,5x106 células THP-1-Dual (catálogo Invivogen # thpd-nfis) com DMSO ou com as concentrações indicadas de Ex14 durante 3 horas. Após estimulação, as células foram coletadas em gelo, centrifugadas a 800 RCF durante 5 minutos e lavadas uma vez em PBS gelado.

[1704] Os sedimentos celulares foram lisados em 1% de tampão de lise de células inteiras Triton X-100 (10% de glicerol, 20 mM de Tris-HCl a pH 7,5, 150 mM de NaCl, 1 μM de EDTA e 1 μM de DTT) contendo coquetéis inibidores de protease e fosfatase (Sigma # P8340 e CalBiochem # 524629, respectivamente). Os lisados celulares foram limpos de detritos insolúveis por centrifugação a 16.000 RCF durante 10 minutos. As concentrações proteicas dos lisados foram determinadas por ensaio de Bradford utilizando padrões de BSA.

[1705] Os lisados foram desnaturados em tampão de amostra NuPAGE ™ LDS (4X, catálogo # NP0008) contendo DTT como agente redutor. Os lisados desnaturados foram resolvidos em géis Bis-Tris NuPAGE™ a 4-12% em tampão MES/SDS e transferidos para membranas de PVDF utilizando um modo de transferência semisseco. As membranas foram sondadas durante a noite a 4°C para fosfo-TBK1 S172, fosfo-IRF3S396 e GAPDH utilizando anticorpos da Cell Signaling Technology (# 5483, # 4947 e # 5174, respectivamente).

[1706] Após uma sonda primária durante a noite, as membranas foram lavadas extensivamente, depois testadas com anticorpo secundário (IgG de cabra anti-coelho Alexa Fluor 680®, Life Technologies # A21109) em Tampão de Bloqueio Odyssey® (número de catálogo 927-400000) à temperatura ambiente. Após extensa lavagem, as membranas foram desenvolvidas usando um LI-COR ODYSSEY CLx.

[1707] As intensidades relativas das bandas fosfo-TBK1 e fosfo-IRF3 foram quantificadas e normalizadas para os níveis de GAPDH. Os valores de fosfo-TBK1 e fosfo-IRF3 normalizados por GAPDH foram representados graficamente como intensidade multiplicada ao longo do controle não estimulado (DMSO). Ver Fig. 7. Protocolo de ensaio de estabilidade do plasma humano

[1708] O composto foi incubado em plasma humano heparinizado a 37oC por 0, 1, 2, 4, 8 e 24 horas, e a mudança na concentração do composto foi medida pelo método LC/MS/MS. A constante de taxa de eliminação (=k(/h)) foi calculada com base na curva ajustada, assumindo a diminuição exponencial da concentração como se segue; concentração no tempo x = concentração inicial*exp (-k*x). Teste do modelo tumoral singênico

[1709] Ex14 e Ex3a foram testados em modelos de tumor singênico em camundongos. Quando Ex14 e Ex3a foram administrados por via intravenosa (a cada 3 dias, 3 vezes), foram observados efeitos antitumorais. Ver Fig. 8 e Fig. 9 para o modelo de camundongo singênico CT-26 de carcinoma do cólon com efeito antitumoral, e Fig. 10 e Fig. 11 para o efeito antitumoral no modelo de camundongo singênico do carcinoma do cólon B16F10. O protocolo para avaliação do efeito antitumoral

[1710] 8x104 células de tumor de camundongo B16F10 e 2x105 CT-26 foram implantadas subcutaneamente no flanco de camundongos C57BL/6 (B16F10) e Balb/C (CT-26) fêmeas (n = 7 por grupo). Veículo (1xPBS), composto de Ex3a (30 mg/kg) ou Ex14 (1,0 mg/kg) foram administrados por via intravenosa (volume final de 100 μL) de camundongos com tumor, uma vez que o volume do tumor alcançou 100 mm3 (Dia 0). Veículo, Ex3a ou Ex14 foram dados a cada 3 dias por um total de 3 doses (q3dx3). As medições do peso do tumor e do corpo foram realizadas três vezes por semana, utilizando-se compassos de calibre vernier e escala mettler, respectivamente. Os volumes tumorais foram determinados pela multiplicação do quadrado da largura ('W'), medido ao longo do eixo curto do tumor, por metade do comprimento ('L') medido ao longo do eixo curto do tumor (V = W2 x 0,5L)

[1711] Os compostos dos Exemplos são mostrados nas tabelas seguintes. MS nas tabelas significa valor medido real. O composto do exemplo 9 foi sintetizado da mesma maneira que no método do Exemplo 5. Tabela 1-1 Tabela 1-2 Tabela 1-3 Tabela 1-4 Tabela 1-5 EXEMPLO 35 Teste de ligação de STING

[1712] Composto de Teste (2 μL), Estreptavidina-Térbio (4 μL, Cisbio), marcado com Fluoresceína 2',3'-cGAMP (c[G(2',5')p-2'-Fluo-AHC-A(3',5')p]) (Biolog, Germany) e proteína biotinilada STING (2 μL, tipo selvagem, WT) foram misturados usando tampão de ensaio (Solução Salina Tamponada com Fosfato da Dulbecco (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) contendo 0,01% de albumina de soro bovino livre de ácido graxo (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.)), e a mistura foi deixada à temperatura ambiente por 3h (A concentração final: Estreptavidina- Térbio; diluída por 1/1000, FITC-cGAMP; 1 μM, proteína biotinilada STING; 100 nM). A transferência de energia de ressonância de fluorescência resolvida no tempo (TR-FRET) foi medida no comprimento de onda de 520 nm e 486 nm por EnVision (Perkin Elmer, Waltham, MA, EUA). A taxa de inibição da ligação da proteína STING de tipo selvagem e 2',3'-cGAMP do composto de teste foi calculada utilizando a razão da contagem a 520 nm dividida pela contagem a 486 nm. Os resultados são mostrados nas Tabelas 2 e 2A.

[1713] A proteína STING biotinilada acima mencionada (tipo selvagem (WT)) foi preparada pelo método seguinte. Método de preparação da proteína STING biotinilada de tipo selvagem

[1714] ECOS (nome comercial) E. coli BL21 (DE3) competente foi adquirido da Nippon Gene Co. Ltd. Ampilicina, canamicina, NaCl, glicerol, isopropiltiogalactosido, (+)-biotina, imidazol, nuclease recombinante SEM e kit de ensaio de proteína BCA foram comprados das Wako Pure Chemical Industries, Ltd. Triptona, Bacto, e Extrato de Levedura, Bacto foram comprados da Difco Laboratories, solução salina tamponada tris (TBS) em comprimidos, pH7,6 foi comprada da Takara Bio Inc., Lisozima (Clara de Ovo), 6x Cryst foi comprada da Seikagaku Corporation, e cOmplet (nome de marca) e coquetel de inibidor de protease livre de EDTA foram comprados da Roche. Cartucho Ni-NTA Superflow produzido pela QIAGEN foi usado, e HiLoad 26/60 Superdex 200 pg produzido pela GE Healthcare foi usado.

[1715] Em pRSF1b (Novagen) com múltiplos sítios de clonagem foi inserida Escherichia coli BirA, e transfectada para ECOS JM109, de forma que pRH8/FLAG- BirA foi construído. pET21HH/His-Avi-SUMO-FLAG-hTMEM173(139-379)(H232R) (que foi construído pelo método mencionado no EXEMPLO 36) e pRH8/FLAG-BirA para biotinilação de tag Avi foram simultaneamente transformados em ECO (nome de marca) E.coli BL21(DE3) competente para preparar a linhagem celular expressante de His-Avi-SUMO-FLAG-hSTING (139-379, H232R)-. A linhagem celular de expressão foi adicionada ao LB meio (10 g/L de Triptona, 5 g/L de Extrato de Levedura, 5 g/L NaCl) contendo ampicilina (100 μg/L) e canamicina (50 μg/L), e a mistura foi pré-cultivada a 30°C, e expandida ao TB meio (12 g/L de Triptona, 24 g/L de Extrato de Levedura, 4 mL/L de Glicerol, 2,3 g/L de KH2PO4, 12,5 g/L K2HPO4) contendo os mesmos antibióticos, e a mistura foi cultivada a 37°C. Quando a turbidez da solução de cultura atingiu 500 KU, a temperatura de cultura foi reduzida a 16°C, 0,1 mM de isopropiltiogalactosido e 50 μM de (+)-biotina foram ali adicionados, e a mistura foi cultivada por 16h adicionais.

[1716] A solução de cultura foi centrifugada, os corpos de fungo obtidos foram suspensos em Tampão de Lise (50 mM de TrisHCl, 150 mM de NaCl, 20 mM de Imidazol, 1 mg/mL de Lisozima, 5 U/mL de Nuclease SEM, recombinante, Complete livre de EDTA, pH7,6), e a proteína foi extraída por fragmentação ultrassônica. O reagente foi adicionado ali para que a concentração de sal do extrato fosse ajustada para NaCl a 300 mM e o sobrenadante coletado por centrifugação. O sobrenadante obtido foi passado através de Cartucho NiNTA Superflow equilibrado com Tampão de Lavagem (TrisHCl a 50 mM, NaCl a 300 mM, Imidazol a 20 mM, pH 7,6), e o Cartucho foi lavado com Tampão de Lavagem e eluído com Tampão de Eluição (TrisHCl a 50 mM, NaCl a 300 mM, Imidazol a 250 mM, pH 7,6). O eluato foi passado através da coluna HiLoad 26/60 Superdex 200 pg equilibrada com tampão de armazenamento (TrisHCl a 50 mM, NaCl a 150 mM, pH 7,6), e a fração eluída foi coletada como His-Avi-SUMO-FLAG-hSTING biotinilado (139 -379, H232R). A concentração de proteína foi medida usando kit de ensaio de proteína BCA, e a fração foi criopreservada a -80°C até usada. Tabela 2: Teste de ligação de STING Tabela 2A: Teste de ligação de STING

[1717] Como é claro a partir dos resultados acima mencionados, o composto da presente invenção inibe a ligação da proteína STING de tipo selvagem e o ligante natural 2',3'-cGAMP, isto é, o composto da presente divulgação liga-se a proteína STING de tipo selvagem. EXEMPLO 36 Ensaio do gene repórter Preparação de vários plasmídeos (i) Construção de expressão de plasmídeo de TMEM173 humana e similares

[1718] Expressão de plasmídeo de STING humana (na presente especificação, às vezes referida como TMEM173 humana) em E. coli foi obtida por PCR de extensão de sobreposição para introdução de mutação usando Clone de cDNA de TMEM173 (GeneCopoeia) como um modelo. Primeiro, as PCRs foram realizadas utilizando dois tipos de primers (5'-CCTGGCCCCAGCTGAGATCTCTG- 3' (C-hTMEM(139aa)-F) (SEQ. ID No. 3) e 5'- GTAAACCCGATCCTTGATGCCAGCACGGTCACCGGTC-3' (hTMEM173(H232R)-R)) (SEQ. ID No. 4) e dois tipos de Primer (5'- CTGCCCCAGCAGACCGGTGACCGTGCTGGCATCAAG-3' (hTMEM173(H232R)- F) (SEQ. ID No. 5) e 5'- ATAATAGCGGCCGCTCAAGAGAAATCCGTGCGGAGAGG-3' (hTMEM173-st- Not-R) (SEQ. ID No. 6). A PCR foi realizada cada vez utilizando Polimerase de DNA PrimeStar MAX (Takara Bio Inc.) sucessivamente (1) a 98°C durante 1 min, (2) repetições de 25 vezes a 98°C durante 10 segundos e a 72°C durante 10 segundos e (3) a 72° C por 1 min. Em seguida, a PCR foi realizada utilizando o segmento obtido como modelo, e utilizando dois tipos de Primer (C- hTMEM(139aa)-F e hTMEM173-st-Not-R). A PCR foi realizada usando Polimerase de DNA PrimeStar GXL (Takara Bio Inc.) sucessivamente (1) a 98°C por 1 min, (2) 35 vezes repetições a 98°C por 10 seg e a 72°C por 1,5 min, e (3) a 72°C por 1 min. O segmento obtido foi cortado com Not I (Takara Bio Inc.), inserido no sítio Stu I/Not I do vetor, em que His-Avi-SUMO Tag foi ligado a pET21a (Novagen), usando Ligation High (Toyobo Co., Ltd), e transfectado a ECOS JM109 (Nippon Gene Co., Ltd.), de forma que pET21HH/His-Avi-SUMO-hTMEM173(139-379)(H232R) foi construído.

[1719] Segundo, a PCR foi realizada utilizando este plasmídeo como modelo e utilizando dois tipos de primer (5'- CGACTACAAGGACGACGATGACAAGGGATCCCTGGCCCCAGCTGAGATCTC TG-3' (C-FLAG-Bam-hTMEM173(139aa)-F) (SEQ. ID No. 7) e hTMEM173-st-Not- R). A PCR foi realizada utilizando DNA de Polimerase PrimeStar MAX sucessivamente (1) a 98°C durante 1 min, (2) 25 vezes repetições a 98°C durante 10 seg e a 72°C durante 10 seg, e (3) a 72°C durante 1 min. O segmento obtido foi cortado com Not I, inserido no sítio Stu I/Not I de pET21a ao qual foi ligado o His- Avi-SUMO Tag, utilizando Ligation High, como mencionado acima, e transfectado a ECOS JM109, de forma que pET21HH/His- Avi-SUMO-FLAG-hTMEM173 (139- 379) (H232R) foi construído.

[1720] O plasmídeo de expressão para Ensaio de Repórter foi obtido por PCR de sobreposição de extensão para introdução de mutação usando clone de cDNA TMEM173 humano como um modelo, como mencionado acima. Primeiro, as PCR foram realizadas utilizando dois tipos de primer (5'- GTACCCATACGATGTTCCAGATTACGCTGGATCCGCCACCATGCCCCACTCC AGCCTGCATC-3' (HA-Bam-ko-hTMEM173-F) (SEQ. ID No. 8) e hTMEM173 H232R)-R) e dois tipos de Primer (hTMEM173(H232R)-F e hTMEM173-st-Not-R). As PCRs foram cada uma realizadas utilizando DNA de Polimerase PrimeStar MAX sucessivamente (1) a 98°C durante 1 min, (2) 25 vezes repetições a 98°C durante 10 seg e a 72°C durante 10 seg, e (3) a 72°C durante 1 min. Em seguida, a PCR foi realizada utilizando o segmento obtido como modelo e utilizando dois tipos de primer (5'- ATAATATCTAGAATTCGCCACCATGTACCCATACGATGTTCCAGATTACGC-3' (Xba-Eco-ko-HA-F) (SEQ. ID No. 9) e hTMEM173-st-Not-R). A PCR foi realizada usando Polimerase de DNA PrimeStar GXL sucessivamente (1) a 98°C por 1 min, (2) 35 vezes repetições a 98°C por 10 seg, a 65°C por 5 seg e a 72°C por 1,5 min, e (3) a 72 C por 1 min. O segmento obtido foi cortado com Xba I (Takara Bio Inc.) e Not I, inserido no sítio Nhe I/Not I de vetor de resistência a Zeocina em que múltiplos sítios de clonagem foram inseridos em pcDNA3.3 (Invitrogen), usando Ligation High, e transfectados a ECOS JM109, de forma que pcDNA3.3zeo/HA- hTMEM173(H232R) foi construído.

[1721] O plasmídeo expressando TMEM173 humana de tipo mutado (R232H) foi construído por PCR usando Clone de cDNA de TMEM173 humano (GeneCopoeia) como um modelo, e usando dois tipos de Primer (5'- TTCCAGATTACGCTGGATCCGCCACCATGCCCCACTCCAGCCTGCATC-3' (Bam-ko-hTEME173v1-F) (SEQ. ID No. 10) e 5'- CCTCTAGACTCGAGCGGCCGCTCAAGAGAAATCCGTGCGGAGAGG-3' (hTMEM173-st-Not-R2) (SEQ. ID No. 11). A PCR foi realizada usando Polimerase de DNA PrimeStar MAX (Takara Bio Inc.) sucessivamente (1) a 98°C por 1 min, (2) repetições de 30 vezes a 98°C por 10 seg e a 68°C por 10 seg, e (3) a 72°C por 1 min. O segmento obtido foi inserido no sítio Bam HI/Not I de vetor em que HA-Tag foi ligado a pcDNA3.1(+) (ThermoFischer), usando Gibson Assembly (NEB), e transfectado a ECOS JM109 (Nippon Gene Co., Ltd.), de forma que pcDNA3.1HA/HA-hTMEM173v1 foi construído.

[1722] O plasmídeo que expressa TMEM173 de tipo selvagem humano (H232R) foi construído por PCR utilizando o plasmídeo pcDNA3.3zeo/HA- hTMEM173 (H232R) como um modelo e utilizando dois tipos de primer (5'- GGAGACCCAAGCTGGCTAGCGCCACCATGTACCCATACGATG-3' (Nhe-ko-HA- F) (SEQ. ID No. 12) e 5'- CCTCTAGACTCGAGCGGCCGCTCAAGAGAAATCCGTGCGGAGAGG-3' (hTMEM173-st-Not-R2) (SEQ. ID No. 11). A PCR foi realizada usando Polimerase de DNA PrimeStar MAX sucessivamente (1) a 98°C por 1 min, (2) repetições de 30 vezes a 98°C por 10 seg e a 72°C por 35 seg, e (3) a 72°C por 1 min. O segmento obtido foi inserido no sítio Nhe I/Not I de pcDNA3.1zeo (ThermoFischer) usando Gibson Assembly, e transfectado a ECOS JM109, de forma que pcDNA3.1zeo/HA- hTMEM173(H232R) foi construído. (11) Construção de plasmídeo de expressão de luciferase de vagalume

[1723] Plasmídeo de expressão de luciferase de vagalume foi construído por inserção de Promotor CMV em vetor de Repórter. A PCR foi realizada utilizando o vector pcDNA3.1(+) (Invitrogen) como modelo, e utilizando dois tipos de Primer (5'-ATAATAAGATCTGTTGACATTGATTATTGACTAGTTATTAATAG-3' (CMVPro- BglII-F) (SEQ. ID No. 13) e 5'- ATAATAAAGCTTGAGCTCTGCTTATATAGACCTCCC-3' (CMVPro-HindIII-R) (SEQ. ID No. 14). A PCR foi realizada usando Polimerase de DNA PrimeStar MAX sucessivamente (1) a 98°C por 1 min, (2) repetições de 25 vezes a 98°C por 10 seg e a 68°C por 3 seg, e (3) a 72°C por 1 min. O segmento obtido foi cortado com Bgl II e Hind III (Takara Bio Inc.), inserido no sítio BglII/HindIII de pGL4.17 (Promega Corporation) utilizando Ligation High (Toyobo Co., Ltd) e transfectado para ECOS JM109, de forma que pGL4.17/CMV Pro foi construído. Ensaio do gene repórter (1)

[1724] Uma linhagem de células 293T estável de expressão transfectada com o vector pNL[NLucP/ISRE/Hygro] (Promega, Fitchburg, WI, EUA) foi construída. pcDNA3.3zeo/HA-hTMEM173(H232R) foi transfectado para as células utilizando FugeneHD (Promega, Fitchburg, WI, EUA) e as células foram cultivadas durante um dia utilizando Meio Modified Eagle da Dulbecco (DMEM) (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) contendo 10% de soro bovino fetal. As células foram coletadas e criopreservadas por CELLBANKER 1 (Nippon Zenyaku Kogyo Co., Ltd.).

[1725] No dia do ensaio, o composto de teste diluído com tampão de ensaio (DMEM contendo 0,1% de albumina de soro bovino livre de ácido graxo) foi adicionado a uma placa de 384 poços branca (Corning, NY, EUA) por 10 μL/poço. As células criopreservadas foram descongeladas e as células suspensas em tampão de ensaio foram semeadas até 10 μL/poço (10000 células/poço). As células foram cultivadas a 37°C sob condição de 5% de CO2 por 20h, e solução reagente NanoGlo (Promega, Fitchburg, WI, US) (20 μL) foi ali adicionada. Após incubação por 5 min, o nível de luminescência foi medido usando EnVision (PerkinElmer, Waltham, MA, EUA). O nível de atividade de cada composto de teste foi calculado quando a contagem nas células tratadas com 2',3'-cGAMP (30 μM) foi considerada como 100%, e a contagem nas células tratadas com o solvente foi considerada como 0%. Os resultados são mostrados na Tabela 3. Tabela 3: Teste de atividade agonística de STING

[1726] Como é claro a partir dos resultados acima mencionados, o composto da presente divulgação tem uma atividade agonista contra STING do tipo selvagem. Ensaio do gene repórter (2)

[1727] Uma linhagem de células 293T de expressão estável transfectada com o vetor pNL[NLucP/ISRE/Hygro (Promega, Fitchburg, WI, EUA) foi construída. Uma suspensão, que foi preparada por meio da transfecção de pcDNA3.1zeo/HA- hTMEM173 (H232R) ou pcDNA3.1HA/HA-hTMEM173v1 juntamente com o plasmídeo de expressão da luciferase de vagalume nas células utilizando FugeneHD (Promega, Fitchburg, WI, EUA), foi adicionada a uma placa de 384 poços (Corning, NY, EUA), e as células foram cultivadas durante dois dias. A solução de cultura foi removida, e o composto de teste diluído com tampão de ensaio (50 mM de HEPES a pH 7,0, 100 mM de KCl, 3 mM de MgCl2, 85 mM de Sucrose, 0,1 mM de DTT, 0,2% de BSA, 1 mM de ATP, 0,1 mM de GTP, 10 μg/ml de Digitonina) foi adicionado ali por 15 μL/poço. As células foram cultivadas a 37°C sob condição de 5% de CO2 por 30 min, e o tampão de ensaio foi removido. Meio Eagle modificado da Dulbecco (DMEM) (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) contendo 10% de soro fetal bovino foi adicionado a 20 μL/poço, e as células foram cultivadas a 37°C sob condição de 5% de CO2 por 4h. Sinais de luminescência derivados de luciferase de vagalume e Luciferase NanoLuc foram, cada um, medidos usando EnVision (PerkinElmer, Waltham, MA, US) de acordo com o protocolo Nano-Glo Dual-Luciferase Reporter Assay System (Promega, Fitchburg, WI, US). A razão entre a contagem de Luciferase NanoLuc dividida pela contagem de luciferase de vagalume foi usada para calculação. O nível de atividade de cada composto de teste foi calculado quando a razão nas células tratadas com 2',3'- cGAMP (30 mM) foi considerada como 100%, e a razão nas células tratadas com o solvente foi considerada como 0%. Os resultados são mostrados na Tabela 4. Tabela 4: Teste de atividade agonística de STING

[1728] Como é claro a partir dos resultados acima mencionados, o composto da presente divulgação tem uma atividade agonista contra STING de tipo selvagem e STING de tipo mutado (R232H). EXEMPLO 37 Detecção de proteína IRF3 em célula FaDu

[1729] Semearam-se linhagens celulares de células de câncer da laringe FaDu (ATCC), substituindo o meio por meio isento de soro, um dia após a semeadura. Após a substituição, a célula foi cultivada por um dia, e foram adicionados à célula o ligante natural 2',3'-cGAMP (a concentração final; 30 μM) e composto de teste (a concentração final; 15 μM ou 30 μM). 6h após a adição, a célula foi lavada com PBS, o extrato celular foi preparado, e a proteína IRF3 fosforilada foi detectada por método ELISA ou método Western blotting. A atividade de fosforilação da proteína IRF3 do composto de teste foi calculada quando o valor na amostra com a adição do ligante natural 2',3'-cGAMP na concentração final de 30 mM foi considerado como 100%. Os resultados são mostrados na Tabela 5. Tabela 5: Teste de fosforilação da proteína IRF3

[1730] Como é claro a partir dos resultados acima mencionados, o composto da presente divulgação promove a fosforilação de IRF3, que é o sinal a jusante de STING, como no ligante natural 2',3'-cGAMP. Quer dizer, o composto da presente invenção ativa o sinal a jusante de STING, como um agonista de STING. EXEMPLO 38 Exemplo de Formulação

[1731] Um medicamento contendo o composto da presente divulgação como ingrediente ativo pode ser produzido, por exemplo, com base na composição seguinte. 1. cápsula

[1732] (1), (2), (3) e 5 mg de (4) são misturados e granulados. A estes são adicionados os restantes 5 mg de (4), e a quantidade total é preenchida numa cápsula de gelatina. 2. comprimido (1) o composto obtido no Exemplo 1 10 mg

[1733] (1), (2), (3), 20 mg de (4) e 2,5 mg de (5) são misturados e granulados. A estes são adicionados os restantes 10 mg de (4) e os restantes 2,5 mg de (5), e a mistura é formada por compressão para dar um comprimido.

Aplicabilidade Industrial

[1734] O composto da presente divulgação pode ter uma atividade agonista de STING. Por conseguinte, o composto da presente divulgação pode ser utilizado como um agonista de STING e pode ser útil como um agente para a profilaxia ou tratamento de doenças relacionadas com STING incluindo câncer e semelhantes.

[1735] Deve ser entendido que as modalidades e exemplificações descritas acima não se destinam a ser limitantes em qualquer aspecto ao âmbito da divulgação e que as reivindicações apresentadas neste documento se destinam a englobar todas as modalidades e exemplificações, sejam ou não explicitamente apresentadas neste documento.

[1736] Todas as patentes, pedidos de patentes e publicações mencionados neste documento são totalmente incorporados por referência em sua totalidade.

Claims

1. Composto caracterizado pelo fato de ser da Fórmula (X):R1 e R2 são, cada um, independentemente um grupo hidróxi ou um átomo de halogênio;B1 é: R18 é hidrogênio ou C1-6 alquil;R19 é um átomo de halogênio;B2 é: Q2 e Q4 são, cada um, independentemente um átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável dele, caracterizado pelo fato de que R19 é flúor ou cloro.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável dele, caracterizado pelo fato de que R1 é um grupo hidróxi.

4. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um sal farmaceuticamente aceitável dele, caracterizado pelo fato de que R2 é um grupo hidroxila ou um átomo de flúor.

5. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, ou um sal farmaceuticamente aceitável dele, caracterizado pelo fato de que Q4 é um átomo de enxofre.

6. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, ou um sal farmaceuticamente aceitável dele, caracterizado pelo fato de que Q2 é um átomo de oxigênio.

7. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, ou um sal farmaceuticamente aceitável dele, caracterizado pelo fato de que Q2 é um átomo de enxofre.

8. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, ou um sal farmaceuticamente aceitável dele, caracterizado pelo fato de que possui a fórmula (XII):

9. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável dele, caracterizado pelo fato de que R18 é hidrogênio ou metil.

10. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R18 é hidrogênio e R19 é um átomo de flúor.

11. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é selecionado a partir do grupo que consiste em: ou um sal farmaceuticamente aceitável dele.

12. Composto, de acordo com a reivindicação 11,caracterizado pelo fato de serou um sal farmaceuticamente aceitável dele.

13. Composto, de acordo com a reivindicação 11,caracterizado pelo fato de serou um sal farmaceuticamente aceitável dele.

14. Composto, de acordo com a reivindicação 11,caracterizado pelo fato de serou um sal farmaceuticamente aceitável dele.

15. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizado pelo fato de que o sal farmaceuticamente aceitável é o sal de trietilamina.

16. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizado pelo fato de que o sal farmaceuticamente aceitável é o sal de sódio.

17. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de que compreende o composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 16, ou um sal farmaceuticamente aceitável dele, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

18. Uso de um composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 16, ou um sal farmaceuticamente aceitável dele, caracterizado pelo fato de que é para a fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer.