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"Composition huileuse et son procédé de préparation" Domaine de l'invention
La présente invention est relative à une composition huileuse et à son procédé de préparation, et en particulier à une composition huileuse contenant, comme composants actifs des substances qui suppriment la production d'oxygène réactif et de peroxyde lipidique dans des corps humains. Ci-après, ces substances seront appelées des substances antioxydantes.
Etat de la technique
Récemment, l'attention a été attirée sur des substances antioxydantes qui montrent d'excellents effets lorsqu'elles sont utilisées pour empêcher et traiter différentes inflammations et maladies persistantes, telles que du rhumatisme articulaire chronique, la thrombophlébite, le sclérème systémique progressif, la maladie de Buerger, la maladie de Raynaud, un dermatoulcère intraitable et des maladies analogues, provoquées par la destruction d'une organisation cellulaire par de l'oxygène réactif et du peroxyde lipidique produits dans le corps humain.
Une étude des présents inventeurs a clarifié que les substances antioxydantes précitées comprennent des substances de faible poids moléculaire, telles des flavonoïdes, des polyphénols, des tanins, des tocophérols, de la vitamine B, et des substances analogues contenues dans un corps de plante et, lorsqu'on les prend oralement comme un médicament ou comme un aliment pour la santé, la production de l'oxygène réactif et du peroxyde lipidique précités dans le corps est supprimée (voir Journal of Japan Pharmacist Association, NO 39,
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Vol. 12, supplément,"Bioavailabilityof SOD (Superoxide Dismutasc) and crude drug", pp. 1097-1119, publié le 1 décembre 1987).
D'une manière conventionnelle, comme préparations contenant de telles substances antioxydantes, on connaît un agent nutritif végétal conforme au brevet japonais n01. 366.268 et une composition antioxydante décrite dans la demande de brevet japonaise nO 63-79834.
L'agent nutritif végétal selon le brevet japonais n 1.366. 268 est obtenu par mélange d'une poudre de thé vert avec de la poudre de riz non glacé cuit et de la poudre de soya, par addition d'une petite quantité de koji fungus au mélange, puis par immersion de ce mélange pulvérulent dans un mélange d'huile de sésame et d'huile de soya pendant environ 4 jours pour extraire les composants actifs, par élimination des précipités par centrifugation et par incorporation de la substance huileuse restante dans une capsule faite de gélatine ou d'une matière analogue.
La composition antioxydante de la demande de brevet japonaise 63-79834 est obtenue par un chauffage modéré de semences de plantes ou de leurs germes pour ne pas produire un roussissement, par un brassage ultérieur de ces matières végétales chauffées avec addition d'un micro-organisme et par addition à cela d'une huile végétale obtenue à partir d'une plante qui a également été doucement chauffée. Eventuellement, on ajoute à la composition de la vitamine C, des dérivés de vitamine C ou un corps végétal la contenant.
Comme semences végétales on utilise une semence qui contient des substances antioxydantes, telles que des flavonoïdes, polyphénols, tanins, tocophérols, vitamine B, et les matières analogues précitées, notamment du riz, du froment, de l'orge, du soya, des fèves d'adzuki, du maïs, de l'hatomugi (orge perlé), des pois. Comme huile végétale, on utilise de l'huile
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de sésame, de l'huile de soya, de l'huile de coton, de l'huile de maïs, de l'huile de carthame, de l'huile d'oenothère, de l'huile de son de riz, de l'huile de colza, de l'huile d'olive et analogue.
Cependant, l'agent nutritif végétal suivant le brevet japonais 1.366. 268 est faible dans son activité antioxydante étant donné son procédé de traitement de la matière végétale crue.
La composition antioxydante suivant la demande de brevet japonais 63-79834 surmonte ce problème par une augmentation remarquable de l'activité des substances antioxydantes par un chauffage modéré de la matière végétale crue pour ne pas produire un roussissement par un rayonnement dans l'infrarouge lointain, ce qui empêche donc une désactivation des substances antioxydantes à la suite d'une température élevée, libère et convertit la matière crue en les composants actifs de faible poids moléculaire, et par brassage de la matière ainsi traitée à chaud pour promouvoir une libération et une conversion supplémentaires en les substances actives de faible poids moléculaire.
Cependant, selon l'étude des présents inventeurs, il est apparu que, bien que les substances antioxydantes précitées suppriment de manière remarquable la production d'oxygène réactif et de peroxyde lipidique dans un tube à essai, les activités antioxydantes ne sont pas développées de manière suffisante dans le corps humain.
On a considéré que, en vue de permettre aux substances antioxydantes d'arriver à l'intérieur des cellules qui souffrent d'une maladie telle qu'une réaction inflammatoire ou analogue, à la suite d'oxygène réactif et de peroxyde lipidique, il est nécessaire de passer à travers des membranes cellulaires qui couvrent les surfaces des cellules. Cependant, la membrane cellulaire de l'être humain est abondante en composants
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huileux et gras et par conséquent elle a une propriété telle que seules des substances huileuses peuvent passer à travers, de sorte que la composition antioxydante précitée ayant une faible teneur en substances huileuses présente une faible aptitude au passage à travers la membrane cellulaire en vue de pénétrer à l'intérieur de la cellule.
Donc, les présents inventeurs ont repris des examens en vue d'améliorer la capacité de passage à travers la membrane cellulaire de la composition antioxydante, tout en réalisant en outre une amélioration dans la sélection des espèces végétales comme matières crues et dans son procédé de traitement. Par conséquent, on a obtenu une composition huileuse dans laquelle l'activité des substances antioxydantes, en tant que composants actifs, est élevée et l'aptitude à la pénétration à l'intérieur de la cellule souffrant d'une maladie est élevée, ce qui complète la présente invention.
Un objet de la présente invention consiste à prévoir une composition huileuse et son procédé de préparation dans lesquels l'activité des substances antioxydantes, comme composants actifs, est élevée et la capacité de pénétration à l'intérieur d'une cellule en un emplacement malade est élevée.
Le procédé de préparation de la composition huileuse suivant la présente invention comprend un chauffage de germes de riz et/ou de germes de froment et de soya à une température qui ne dépasse pas 100 C, une addition de koji dans la matière chauffée, un brassage du mélange, puis une conversion du mélange en poudre et une addition du mélange pulvérulent obtenu dans un mélange huileux comprenant une huile obtenue à partir de sésame chauffé à une température ne dépassant pas 100 C et une huile obtenue à partir de sésame cru, le rapport entre le mélange huileux et la quantité totale du
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mélange pulvérulent et du mélange huileux étant de 60 à 95 % en poids.
Comme matière crue contenant abondamment les substances antioxydantes, en plus des germes de riz, des germes de froment et du soya, on peut prévoir des espèces végétales décrites dans la demande de brevet japonaise nO 63-79834, c'est-à-dire de l'orge, des fèves d'adzuki, du maïs, de l'hatomugi (orge perlé), des pois et des matières analogues ; mais, conformément à l'étude des présents inventeurs, les germes de riz, les germes de froment et le soya sont les matières crues les plus préférables.
En plus des germes de riz, des germes de froment et du soya, on peut prévoir du son de riz, de l'hatomugi (orge perlé) et du froment. Par conséquent, comme matière crue, au moins une matière parmi du son de riz, de l'hatomugi (orge perlé) et du froment peut être incluse conjointement aux germes de riz et/ou aux germes de froment. En tout cas, le rapport des germes (germes de riz et/ou germes de froment) dans la matière crue de céréales est de préférence au moins supérieur à 1 % en poids ou égal à cela.
Les substances antioxydantes dans la matière crue de céréales décrite ci-dessus forment un polymère macromoléculaire compliqué conjointement à d'autres substances, et par conséquent elles n'ont pas d'activité en tant que telles, de sorte qu'il est nécessaire de couper les liens macromoléculaires au moyen d'un léger chauffage ou d'une manière analogue de façon à libérer les substances antioxydantes de faible poids moléculaire. Cependant, si la température de chauffage est trop élevée, les substances antioxydantes de faible poids moléculaire sont désactivées de sorte qu'il est nécessaire de choisir une condition de chauffage prenant en considération ce fait.
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En vue de satisfaire une telle condition, il est nécessaire de chauffer la matière crue de céréales à une température ne dépassant pas 100 C, lentement et dans un intervalle de temps suffisant. En détail, la matière crue de céréales est mise dans un récipient en matière céramique, tel qu'une poterie ou un récipient analogue, qui irradie des rayons dans l'infrarouge lointain, de préférence ayant des longueurs d'onde de 4 à 14 ; nm, et un chauffage est effectué pendant qu'on agite lentement et qu'on maintient la température à environ 90 jusqu'à 96 C.
La durée de chauffage varie en fonction des types d'espèces de céréales, de sorte qu'elle ne peut pas être définie de manière aveugle ; mais elle est de préférence comprise entre environ 30 minutes et 3 heures. D'une manière incidente, le procédé de chauffage n'est pas limité au procédé précité pour autant que les substances antioxydantes dans la matière crue de céréales soient suffisamment libérées comme substances de faible poids moléculaire alors qu'une désactivation de celles-ci est empêchée.
Après le traitement à chaud décrit ci-dessus, on ajoute du koji (Aspergillus orizae) à la matière crue pour le brassage. La condition de brassage est de préférence à 20 jusqu'à 360C pendant environ 2 à 6 jours. Lorsque le brassage est effectué en utilisant un ferment, environ 2 à 3 heures sont suffisantes. Ce brassage est effectué en vue de promouvoir davantage la libération et la conversion des substances antioxydantes en substances de faible poids moléculaire dans la matière crue de céréales et, par cette étape de brassage, l'activité des substances antioxydantes est remarquablement augmentée en comparaison d'une matière crue uniquement soumise au traitement thermique.
Ensuite, la matière brassée est broyée pour en faire une fine poudre. Le broyage peut être effectué en
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utilisant un broyeur commercialement disponible. Certains types de broyeurs cependant provoquent une température élevée pendant leur usage, en désactivant donc les substances antioxydantes. Par conséquent, il est préférable d'utiliser ceux qui n'engendrent pas une température élevée lorsqu'ils sont utilisés. Par exemple, un concasseur peut être utilisé.
Ensuite, l'huile est préparée par mélange d'une huile obtenue à partir de sésame chauffé (appelée ci-après huile de pâte de sésame) avec une huile obtenue à partir de sésame cru, dans un rapport approprié, et la poudre fine précitée est ajoutée au mélange huileux.
L'huile de pâte de sésame est une huile qui, après que du sésame cru a été chauffé lentement à une température ne dépassant pas 100 C pendant un intervalle de temps suffisant, a été obtenue par broyage et écrasement, la teneur en matières solides fines formées par broyage du sésame restant cependant telle quelle, de sorte qu'on obtient l'apparence d'un état pâteux. L'huile de pâte de sésame contient abondamment les substances antioxydantes de faible poids moléculaire et en l'utilisant il est possible d'obtenir la composition huileuse ayant une haute activité de substances antioxydantes.
Cependant, cette huile de pâte de sésame a une viscosité élevée et la dimension d'une goutte d'huile est également grande de sorte que la composition, dans laquelle on ajoute seulement l'huile de pâte de sésame à la fine poudre décrite ci-dessus, a une pauvre capacité de pénétration à l'intérieur des cellules dans une partie malade. Cependant, lorsque l'huile de sésame obtenue à partir de sésame cru est ajoutée à l'huile de pâte de sésame, la dimension de la goutte peut être petite et la capacité de pénétration à l'intérieur des cellules dans une partie malade est améliorée.
L'huile receuillie à partir du sésame cru est une huile qui, après que du sésame cru a été broyé en
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tant que tel et après son écrasement, est obtenue par élimination des matières solides et elle représente une huile commercialement disponible, comme de l'huile de sésame ordinaire. Comme le rapport de mélange entre l'huile de pâte de sésame et l'huile de sésame ordinaire est différent en fonction de la quantité de poudre fine à ajouter, il ne peut pas être défini de manière aveugle. Il est de préférence de 1 à 3 parties en poids d'huile de sésame ordinaire par rapport à 1 partie en poids d'huile de pâte de sésame.
Le rapport entre le mélange huileux et la fine poudre qui lui est ajoutée est tel que l'huile mélangée en arrive à former 60 à 95 % en poids de la quantité totale des deux. Si le mélange huileux est inférieur à 60 % en poids, la capacité de passer à travers la membrane cellulaire est faible. D'autre part, si le mélange huileux dépasse 95 % en poids, la concentration des substances antioxydantes comme composants actifs est faible, de sorte que l'effet de supprimer la production d'oxygène réactif et de peroxyde lipidique décroît également.
La composition huileuse suivant la présente invention, qui est prise oralement, peut être préparée par addition de la poudre fine au mélange huileux en l'incorporant dans une capsule de gélatine ou analogue, aussitôt que le mélange huileux est préparé. Cependant, le mélange de matières peut être soumis à une maturation de préférence à 20 jusqu'à 350C pendant environ 3 à 30 jours, très avantageusement à 28 jusqu'à 300C pendant environ 1 semaine, avant l'encapsulation.
Par application du traitement de maturation, la libération des substances antioxydantes et leur conversion en substances de faible poids moléculaire sont davantage développées par le koji restant dans la fine poudre et les substances antioxydantes s'attachent bien au mélange huileux de sorte que l'activité et la
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capacité osmotique de pénétrer à l'intérieur des cellules de la part des composants réactifs sont davantage améliorées.
La composition huileuse suivant la présente invention peut aussi contenir une matière crue de céréales comprenant des germes de riz ou des germes de froment et du soya, et éventuellement au moins une matière parmi du son de riz, de l'hatomugi (orge perlé) ou du froment, cela étant transformé en une fine poudre telle qu'elle est, sans chauffage ni brassage, poudre qui est ajoutée au mélange huileux conjointement à la fine poudre chauffée et brassée, décrite précédemment.
Dans la fine poudre de matière crue de céréales, qui n'est pas chauffée ni brassée, les substances antioxydantes en tant que composants actifs ne sont pas libérées et ne sont pas converties en substances de faible poids moléculaire. Cependant, lorsqu'on l'ajoute au mélange huileux simultanément à la fine poudre chauffée et brassée, la libération des substances antioxydantes et la conversion de celles-ci en substances de faible poids moléculaire se développent progressivement même après encapsulation, étant donné le koji restant dans la fine poudre brassée, ce qui permet un avantage tel que l'effet de suppression de la production de l'oxygène réactif et du peroxyde lipidique est maintenue pendant une longue période.
Au contraire, dans la composition huileuse dans laquelle on utilise seulement la fine poudre chauffée et brassée, étant donné les réactions enzymatiques et analogues qui ont continuellement lieu même après encapsulation, les substances antioxydantes en tant que composants actifs sont graduellement décomposées de sorte que la période efficace est courte en comparaison d'une composition dans laquelle la fine poudre non traitée est ajoutée.
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Cependant, dans le cas où l'addition d'une quantité de fine poudre non traitée est trop grande, l'activité du composant actif décroît. Par conséquent, il est préférable que la fine poudre non traitée soit d'environ 0,5 à 1 partie en poids par rapport à 1 partie en poids de la fine poudre chauffée et brassée. De manière incidente, également dans ce cas comprenant deux types de fines poudres, le mélange huileux représente 60 à 95 % en poids de la quantité totale.
Dans la composition huileuse ainsi obtenue suivant la présente invention, à la fois l'activité des substances antioxydantes et le pouvoir osmotique de pénétrer à l'intérieur des cellules sont élevés et, ainsi qu'il ressort des résultats des essais cliniques décrits ci-après, la composition montre des effets remarquables vis-à-vis d'inflammations et malades persistantes variées pour lesquelles les effets thérapeutiques des agents anti-inflammatoires conventionnels se sont avérés insuffisants.
La composition huileuse suivant la présente invention peut être encapsulée par de la gélatine ou une matière analogue, et elle peut être prise oralement comme un médicament. De plus, dans le cas d'une pigmentation anormale, telle qu'une dermatite, une tache pigmentaire, des taches de rousseur et des maladies analogues, ou des rides et analogues, la composition huileuse peut être appliquée directement sur une partie affectée. En plus d'une dermatite ou d'une maladie analogue, la présente composition huileuse peut être aussi appliquée à des maladies d'adulte et à des maladies persistantes telles que du rhumatisme articulaire chronique, une thrombophlébite, un sclérème systémique progressif, la maladie de Buerger, la maladie de Raynaud, un dermatoulcère intraitable et des maladies analogues.
La composition suivant l'invention a également des effets sur le traitement et la prévention
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d'autres maladies diverses causées par la pollution, de brûlures, de blessures externes, de la fatigue, de la gueule de bois, de la constipation et de troubles analogues.
De plus, la composition huileuse suivant la présente invention n'a pas d'effets secondaires étant donné l'utilisation uniquement de céréales, de koji et de sésame comme matières crues, de sorte qu'il est possible de la prendre oralement comme un aliment pour la santé en vue de maintenir et d'augmenter la santé. Il est sans utilité de dire que, lorsqu'on réalise une composition, il est possible d'ajouter des médicaments ou composants auxiliaires utiles pour la santé, tels que différentes vitamines, des agents minéraux et analogues, et des agents sapides, des agents d'ajustement du goût, des agents colorants et analogues.
Forme de réalisation
Chaque fois une partie de germes de riz, de soya, de son de riz, d'hatomugi (orge perlé) et de froment sont chargées dans un pot réalisé en poterie et émettant des rayons dans l'infrarouge lointain de 4 à 14 jum, et on chauffe à 90 jusqu'à 960C pendant 3 heures avec une faible agitation, ce qui ne provoque pas de roussissement. Ensuite, du koji est ajouté en une quantité de 3 % de la quantité totale pour le brassage à 36-400C pendant 72 heures et ensuite la matière brassée est transformée en une fine poudre par l'utilisation d'un concasseur. De plus, cinq types précités de matières crues de céréales, qui n'ont pas été chauffées et brassées, sont broyés par un concasseur en vue d'obtenir de fines poudres en la même quantité.
Par ailleurs, du sésame est chauffé de la même manière que les matières céréalières ci-dessus et, après qu'il a été broyé avec un concasseur, il est écrasé pour obtenir une huile de pâte de sésame.
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Ensuite, 28, 1 parties en poids d'huile de pâte de sésame sont mélangées à 48,9 parties en poids d'une huile de sésame commercialement disponible ; à ce mélange on ajoute 11,5 parties en poids de fine poudre chauffée et brassée et 11,5 parties en poids de poudre fine non traitée, et le mélange obtenu est mélangé de manière homogène. Le mélange obtenu est soumis à une maturation à 28 C pendant une semaine, puis il est encapsulé dans de la gélatine pour obtenir une composition huileuse.
Effet de l'invention [I] Essai in vitro.
(1) Pour un essai in vitro concernant l'examen de l'arrivée et de la pénétration dans des sites huileux, la composition huileuse de la forme de réalisation est ajoutée à un système de réaction TBA (acide thiobarbiturique) dans lequel un acide gras insaturé huileux (acide décosahexaénoïque) est mis à réagir avec de l'oxygène réactif engendré par des ultraviolets et produit du peroxyde lipidique, et le degré de suppression de la production de peroxyde lipidique est mesuré.
A 0,1 cm d'acide décosahexaénoïque dilué 100 fois, on ajoute 1,8 mg/ml de l'échantillon d'essai de la composition huileuse suivant la présente invention et le peroxyde lipidique produit est mesuré par la réaction au TBA. Dans la réaction au TBA, 0,2 ml de dodécylsulfate de sodium à 7 %, 2 ml de HCl 0,1 N et 0,3 ml d'acide phosphotungstique sont mélangés ; on ajoute 1,8 mg/ml de l'échantillon d'essai au mélange ; on ajoute 1 ml d'un réactif dans lequel 0,67 % de TBA est mélangé à de l'acide acétique dans un rapport de 1/1 ; ensuite, la mesure est effectuée par excitation à 515 nm et émission à 553 nm en utilisant un spectrophotomètre fluorescent.
Comme exemples comparatifs on a utilisé l'agent nutritif végétal du brevet japonais na 1.366. 268 (exemple comparatif 1) et la composition antioxydante
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décrite dans la demande de brevet japonais nO 63-79834 (exemple comparatif 2), les mesures ayant été effectuées de la même manière. Les résultats sont illustrés dans le Tableau 1.
Tableau 1
EMI13.1
<tb>
<tb> Echantillon <SEP> d'essai <SEP> Moyenne
<tb> (Valeur <SEP> 6 <SEP> minutes)
<tb> Témoin <SEP> (UV+) <SEP> 461 <SEP> 62
<tb> Composition <SEP> huileuse <SEP> suivant
<tb> la <SEP> présente <SEP> invention <SEP> (1,8 <SEP> mg/ml) <SEP> 121 <SEP> 13 <SEP> ***
<tb> Exemple <SEP> comparatif <SEP> 1 <SEP> (1,8 <SEP> mg/ml) <SEP> 271 <SEP> 34 <SEP> **
<tb> Exemple <SEP> comparatif <SEP> 2 <SEP> (1,8 <SEP> mg/ml) <SEP> 358 <SEP> : <SEP> 45 <SEP> *
<tb>
UV+ : irradiation aux ultraviolets
EMI13.2
*** : 0, 01 < P < 0, 05 (par rapport au témoin) ** : P < 0, 01 (par rapport au témoin) * :
P < 0, 0001 (par rapport au témoin)
Résultat d'essai
Bien que quelques-uns des échantillons d'essai suppriment de manière significative la formation de peroxyde lipidique (substances de réaction au TBA) à partir d'acide gras insaturé (acide décosahexaénoïque) par irradiation de rayons ultraviolets ('0), la composi- tion huileuse suivant la présente invention spécialement supprime de manière remarquable cette formation (P < 0,0001). Ce résultat supporte le fait que la composition huileuse suivant la présente invention a une activité de la substance antioxydante qui est plus élevée que les compositions conventionnelles (exemples comparatifs 1 et 2) et une capacité de pénétration plus élevée à l'intérieur des cellules dans lesquelles une maladie se produit.
(2) Une substance antioxydante [3, 4 -3Hz] est préparée dans laquelle la substance antioxydante de faible poids moléculaire, contenue dans la préparation huileuse suivant la présente invention, est marquée par un
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isotope (3H) ; on l'ajoute dans un tissu humain dans un tube à essai et le compte (cpm) des [3Hz] fixés à sa membrane cellulaire est mesuré par un compteur de scintillations ; la capacité d'arriver à la membrane cellulaire est ainsi examinée (de la thymidine tritiée marquée est de 2 Ci/mM).
Les mêmes essais sont également effectués pour les exemples comparatifs 1 et 2. Les résultats sont illustrés sur le Tableau 2. Ainsi qu'il ressort du Tableau 2, la composition huileuse suivant la présente invention a l'affinité la plus élevée vis-à-vis de la membrane cellulaire, en comparaison des exemples comparatifs 1 et 2.
Tableau 2
EMI14.1
<tb>
<tb> Echantillon <SEP> d'essai <SEP> Incorporation <SEP> cpm
<tb> Témoin <SEP> 15643 <SEP> cpm/103
<tb> cellules
<tb> Composition <SEP> huileuse <SEP> suivant
<tb> l'invention <SEP> (1,8 <SEP> mg/ml) <SEP> 56372 <SEP> cpm/103
<tb> cellules
<tb> Exemple <SEP> comparatif <SEP> 1 <SEP> (1,8 <SEP> mg/ml) <SEP> 33451 <SEP> cpm/103
<tb> cellules
<tb> Exemple <SEP> comparatif <SEP> 2 <SEP> (1,8 <SEP> mg/ml) <SEP> 30567 <SEP> cpm <SEP> / <SEP> 103
<tb> cellules
<tb>
(3) La composition huileuse suivant la présente invention est soumise à un traitement ultrasonique et elle est ajoutée à un système de formation d'oxygène réactif (oxydase xanthine-xanthine et neutrophile) de façon qu'une concentration dans le corps vivant convertie devienne 1,6 mg/ml, et les trois types d'oxygènes réactifs dz H2O2 et OH-)
sont mesurés pour les comparer avec le cas de non-addition (témoin). La concentration dans le corps vivant convertie est une quantité supposée exister dans le sang lorsqu'une quantité de prise ordinaire pour un jour (9 g dans le cas de la composi-
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tion huileuse suivant la présent invention) est absorbée dans un corps vivant.
Les procédés de mesure pour les trois types d'oxygènes réactifs sont les suivants.
Pour 02-, on utilise le procédé dans lequel la quantité de réduction du ferri-cytochrome C par zest mesurée à une longueur d'onde de 550 nm par spectrophotomètre de Beckman, et elle est convertie en la quantité de O2-.
Pour H202, en fonction du fait que H202 décroît la fluorescence engendrée par de la scopolétine en présence de peroxydase, on mesure, en utilisant de la scopolétine et de la peroxydase, le degré de diminution de la fluorescence de la scopolétine en utilisant un spectrophotomère de fluorescence réalisé par Hitachi Ltd., avec excitation à 370 nm et émission à 460 nm.
Pour OH-, en utilisant un principe selon lequel de l'acide a-céto-méthiol-butylique (KMB) réagit avec OHpour former du gaz éthylène, on utilise le procédé dans lequel le gaz éthylène est quantifié par une chromatographie en phase gazeuse réalisée par Hitachi Ltd., de façon à le convertir en OH-. Les mêmes essais sont aussi effectués pour les exemples comparatifs 1 et 2.
Les résultats sont illustrés sur le Tableau 3.
Tableau 3 Echantillon d'essai 02 H OH- Témoin 1,532 nmole 485 pmoles 854 pmoles Composition huileuse suivant l'invention (1,8 mg/ml) 0,589 nmole 161 pmoles 283 pmoles Exemple comparatif 1 (1,8 mg/ml) 1,285 nmole 403 pmoles 707 pmoles Exemple comparatif 2 (1,8 mg/ml) 0,231 nmole 538 pmoles 108 pmoles
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Résultat d'essai.
L'effet antioxydant de la composition huileuse suivant la présente invention est légèrement inférieur à celui de l'exemple comparatif 2, mais il est montré que l'effet antioxydant est plus fort que celui de l'exemple comparatif 1. Cependant, ainsi qu'il ressort des Tableaux 1 et 2 précités, l'exemple comparatif 2 a une teneur plus petite en substances huileuses de sorte qu'il a peu de possibilité d'arriver à la cellule dans laquelle un mal apparaît.
Par conséquent, lorsqu'on fait une appréciation globale, la composition huileuse suivant la présente invention, dans laquelle l'effet antioxydant est élevé et la capacité de pénétration à l'intérieur des cellules dans une partie malade est la plus élevée, est excellente comme agent antioxydant.
[II] Essai clinique.
L'essai thérapeutique a été investigué sur 96 patients de maladies auto-immunologiques, de troubles du collagène, comme du rhumatisme articulaire chronique, de l'hémasthénose, de la néphrite, de l'hépatocirrhose, une tache pigmentaire, des taches de rousseur et des maux analogues, qui ont jusqu'à présent résistés ou sont devenus pires par rapport à l'un quelconque des médicaments antiphlogistiques non stéroïdaux, des stéroïdes et de la composition antioxydante de l'exemple comparatif 2.
Les résultats sont montrés dans le Tableau 4.
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Tableau 4
EMI17.1
<tb>
<tb> Echantillon <SEP> d'essai
<tb> Maladie
<tb> Composition <SEP> huileuse <SEP> suivant <SEP> la <SEP> Exemple <SEP> Exemple
<tb> présente <SEP> comparatif <SEP> 1 <SEP> comparatif <SEP> 2
<tb> invention <SEP> (1,8 <SEP> mg/ml) <SEP> (1,8 <SEP> mg/ml)
<tb> (1,8 <SEP> mg/ml)
<tb> Rhumatisme <SEP> 13/18 <SEP> (72 <SEP> %) <SEP> 0,7 <SEP> (0 <SEP> %) <SEP> 4/14 <SEP> (28 <SEP> %)
<tb> articulaire
<tb> Angéite <SEP> 3/5 <SEP> (60 <SEP> %) <SEP> 0/3 <SEP> (0 <SEP> %) <SEP> 1/4 <SEP> (25 <SEP> %)
<tb> Sclérème <SEP> pro-9/12 <SEP> (75 <SEP> %) <SEP> 2/10 <SEP> (20 <SEP> %) <SEP> 6/12 <SEP> (50 <SEP> %)
<tb> gressif <SEP> systémique
<tb> Dermatomyosyte <SEP> 6/8 <SEP> (75 <SEP> %) <SEP> 2/12 <SEP> (16 <SEP> %) <SEP> 6/13 <SEP> (46 <SEP> %)
<tb> Thrombophlébite <SEP> 2/3 <SEP> (66 <SEP> %) <SEP> 0/4 <SEP> (0 <SEP> %) <SEP> 1/5 <SEP> (20 <SEP> %)
<tb> Maladie <SEP> de <SEP> 6/8 <SEP> (75 <SEP> %) <SEP> 0/3 <SEP> (0 <SEP> %) <SEP> 3/6 <SEP> (50 <SEP> %)
<tb> Buerger
<tb> Maladie <SEP> de <SEP> 10/12 <SEP> (83 <SEP> %) <SEP> 3/8 <SEP> (37 <SEP> %) <SEP> 7/12 <SEP> (58 <SEP> %)
<tb> Raynaud
<tb> Crus <SEP> varicosis <SEP> 8/11 <SEP> (72 <SEP> %) <SEP> 4/9 <SEP> (44 <SEP> %) <SEP> 11/15 <SEP> (73 <SEP> %)
<tb> Dermatoulcère <SEP> 3/5 <SEP> (60 <SEP> %) <SEP> 1/5 <SEP> (20 <SEP> %) <SEP> 2/6 <SEP> (33 <SEP> %)
<tb> intraitable
<tb> Taches <SEP> pigmentai-11/14 <SEP> (78 <SEP> %) <SEP> 4/12 <SEP> (33 <SEP> %) <SEP> 17/25 <SEP> (68 <SEP> %)
<tb> res,
<SEP> taches <SEP> de
<tb> rousseur
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Il doit être entendu que la présente invention n'est en aucune façon limitée aux formes de réalisation décrites ci-dessus et que bien des modifications peuvent y être apportées sans sortir de son cadre.