Manual de Practicas de Laboratorio Biologia Contemporanea
Manual de Practicas de Laboratorio Biologia Contemporanea
ELABORADO:
ACADEMIA DE BIOLOGIA
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Secretaría de Educación Pública
Subsecretaría de Educación Media
Superior
Unidad de Educación Media Superior Tecnológica Industrial y de Servicios
Oficinas Auxiliares en el Estado de Tamaulipas
CENTRO DE ESTUDIOS TECNOLÓGICOS industrial y de servicios No. 22 “FRANCISCO VILLA”
PRESENTACION
OBJETIVO
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INDICE
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PRESENTACION------------------------------------------------------------------------------------------------- pág. 2
OBJETIVO -----------------------------------------------------------------------------------------------------------pág. 3
PRACTICA No. 1
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PROPOSITO:
Que el alumno conozca las normas generales del uso de laboratorio de biología, para
que se familiarice con las normas de seguridad, material y equipo de uso y evitar
accidentes.
INTRODUCCION:
MATERIAL A UTILIZAR:
DESARROLLO:
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1. Antes de realizar una práctica, debe leerse detenidamente para adquirir una idea clara de
su objetivo, fundamento y técnica. Los resultados deben ser siempre anotados
cuidadosamente apenas se conozcan.
2. El orden y la limpieza deben presidir todas las experiencias de laboratorio. En
consecuencia, al terminar cada práctica se procederá a limpiar cuidadosamente el
material que se ha utilizado.
3. Cada grupo de prácticas se responsabilizará de su zona de trabajo y de su
material.
4. Antes de utilizar un compuesto hay que fijarse en la etiqueta para asegurarse de que
es el que se necesita y de los posibles riesgos de su manipulación.
5. No devolver nunca a los frascos de origen los sobrantes de los productos
utilizados sin consultar con el profesor.
6. No tacar con las manos y menos con la boca los productos químicos.
7. Todo el material, especialmente los aparatos delicados, como lupas y microscopios,
deben manejarse con cuidado evitando los golpes o el forzar sus mecanismos.
8. Los productos inflamables (gases, alcohol, éter, etc.) deben mantenerse alejados de
las llamas de los mecheros. Si hay que calentar tubos de ensayo con estos
productos, se hará al baño María, nunca directamente a la llama. Si se manejan
mecheros de gas se debe tener mucho cuidado de cerrar las llaves de paso al apagar
la llama.
9. Cuando se manejan productos corrosivos (ácidos, álcalis, etc.) deberá hacerse con
cuidado para evitar que salpiquen el cuerpo o los vestidos. Nunca se verterán
bruscamente en los tubos de ensayo, sino que se dejarán resbalar suavemente por
su pared.
10. Cuando se quiera diluir un ácido, nunca se debe echar agua sobre ellos; siempre, al
contrario: ácido sobre agua.
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11. Cuando se vierta un producto líquido, el frasco que lo contiene se inclinará de forma
que la etiqueta quede en la parte superior para evitar que si escurre líquido se
deteriore dicha etiqueta y no se pueda identificar el contenido del frasco.
12. No pipetear nunca con la boca. Se debe utilizar la bomba manual, una jeringuilla o
artilugio que se disponga en el Centro.
13. Las pipetas se cogerán de forma que sea el dedo índice el que tape su extremo
superior para regular la caída de líquido.
14. Al enrasar un líquido con una determinada división de escala graduada debe evitarse
el error de paralaje levantando el recipiente graduado a la altura de los ojos para que
la visual al enrase sea horizontal.
15. Cuando se calientan a la llama tubos de ensayo que contienen líquidos debe evitarse
la ebullición violenta por el peligro que existe de producir salpicaduras. El tubo de
ensayo se acercará a la llama inclinado y procurando que ésta actúe sobre la mitad
superior del contenido y, cuando se observe que se inicia la ebullición rápida, se
retirará, acercándolo nuevamente a los pocos segundos y retirándolo otra vez al
producirse una nueva ebullición, realizando así un calentamiento intermitente. En
cualquier caso, se evitará dirigir la boca del tubo hacia la cara o hacia otra persona.
16. Cualquier material de vidrio no debe enfriarse bruscamente justo después de haberlos
calentado con el fin de evitar roturas.
17. Los cubreobjetos y portaobjetos deben cogerse por los bordes para evitar que se
engrasen.
1. Por que crees que sea importante que exista en el laboratorio medias o normas de
seguridad para el manejo de material y equipo.
FECHA
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PRACTICA No. 2
PROPOSITO
Que el alumno se conozca el microscopio compuesto, así como sus partes, uso y
manejo de cada una de ellas.
INTRODUCCION
La ciencia que investiga los objetos pequeños utilizando este instrumento se llama
Microscopía.
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DESARROLLO
Sistema óptico
o OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del
objetivo.
o OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta.
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6. de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparación y por ello es fácil que ocurran
dos tipos de percances: incrustarlo en la preparación si se descuidan las
precauciones anteriores y mancharlo con aceite de inmersión si se observa una
preparación que ya se enfocó con el objetivo de inmersión.
7. Empleo del objetivo de inmersión:
. Bajar totalmente la platina.
a. Subir totalmente el condensador para ver claramente el círculo de luz que nos
indica la zona que se va a visualizar y donde habrá que echar el aceite.
b. Girar el revólver hacia el objetivo de inmersión dejándolo a medio camino entre
éste y el de x40.
c. Colocar una gota mínima de aceite de inmersión sobre el círculo de luz.
d. Terminar de girar suavemente el revólver hasta la posición del objetivo de
inmersión.
e. Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente
toca la gota de aceite. En ese momento se nota como si la gota ascendiera y
se adosara a la lente.
f. Enfocar cuidadosamente con el micrométrico. La distancia de trabajo entre el
objetivo de inmersión y la preparación es mínima, aun menor que con el de 40x
por lo que el riesgo de accidente es muy grande.
g. Una vez se haya puesto aceite de inmersión sobre la preparación, ya no se
puede volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se
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h. mancharía de aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo, hay que bajar la
platina y repetir la operación desde el paso 3.
i. Una vez finalizada la observación de la preparación se baja la platina y se
coloca el objetivo de menor aumento girando el revólver. En este
j. momento ya se puede retirar la preparación de la platina. Nunca se debe retirar
con el objetivo de inmersión en posición de observación.
k. Limpiar el objetivo de inmersión con cuidado empleando un papel especial para
óptica. Comprobar también que el objetivo 40x está perfectamente limpio.
MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONES
1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posición
de observación, asegurarse de que la parte mecánica de la platina no sobresale del
borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda.
2. Cuando no se está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su
funda para evitar que se ensucien y dañen las lentes. Si no se va a usar de forma
prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del
polvo.
3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy
suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de óptica.
4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el
microscopio.
5. Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite que queda en el
objetivo con pañuelos especiales para óptica o con papel de filtro (menos
recomendable). En cualquier caso, se pasará el papel por la lente en un solo sentido
y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que
limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este
tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes en exceso se pueden dañar
las lentes y su sujeción.
6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico, micrométrico,
platina, revólver y condensador).
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ALUMNO PUNTOS.
FECHA
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PRACTICA No. 3
INTRODUCCION
Desde que Robert Hooke observó las celdas de corcho, otros científicos se dieron a la tarea
de investigar cómo estaban formados los seres vivos. Fueron tres de ellos quienes
conformaron lo que conocemos ahora como la Teoría Celular: el botánico Matthew
Schleiden quien propuso a la célula como la unidad estructural de las plantas, el zoólogo
Theodor Schawn que hizo lo mismo con los animales, y el médico y fisiólogo Rudolph
Virchow que conjuntó las propuestas anteriores y propuso que la célula se origina de otra
célula.
Existen dos tipos de células en la naturaleza: las procarióticas como las bacterias, que están
conformadas por una membrana celular, citoplasma, material genético y ribosomas. Y las Y
las eucarióticas como las de los protistas, hongos, plantas y animales, que además de las
estructuras de las bacterias, tiene organelos membranosos, con material genético
encapsulado en un núcleo. Todo esto se conoce gracias a la microscopía electrónica.
MATERIAL A UTILIZAR:
Microscopio Preparaciones de
Porta y cubreobjetos protozoarios
Gotero Azul de metileno
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DESARROLLO:
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CONCLUSIONES:
ALUMNO PUNTOS.
FECHA
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PRACTICA No. 4
BIOMOLÉCULAS “CARBOHIDRATOS”
PROPOSITO
Diferenciar las sustancias que contienen carbohidratos simples por medio de sus
reacciones químicas.
INTRODUCCION
Los carbohidratos son compuestos orgánicos formados por carbono, hidrógeno y oxígeno.
Estos forman parte e intervienen en una gran cantidad de procesos de los
seres vivientes. Los más importantes son de tres tipos: energéticos, de reserva y
estructurales.
Desde el punto de vista energético uno de los carbohidratos más sencillos, la glucosa
constituye el material de más rápido aprovechamiento en el organismo y su
oxidación satisface las necesidades energéticas y calóricas del mismo.
Como materiales de reserva, los carbohidratos existen en reino vegetal en forma de
almidones y en el reino animal en forma de glucógenos; tanto uno como el otro son
susceptibles de convertirse en glucosa para poder ser utilizados.
Y en el aspecto estructural, los carbohidratos llevan a cabo una importante función en los
vegetales debido a que la célula, que es su estructura leñosa o esqueleto, está constituida
por cadenas de azúcares simples. En los animales también
sucede lo anterior, así tenemos que el exoesqueleto de muchos artrópodos está constituido
también por cadenas de carbohidratos simples.
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MATERIAL
PROCEDIMIENTO
1.- En el primer tubo de ensayo agrega 5 ml de agua simple; este será nuestro tubo
testigo.
2.- En el segundo coloca 5 ml. De agua con sal.
3.- En el tercero agrega la misma cantidad de clara de huevo.
4.- En el cuarto coloca también 5 ml. De jugo de manzana.
5.- Después agrega 8 gotas de reactivo de Benedict y observa los resultados.
6.- El reactivo reacciona con la glucosa produciendo un color que va de rojo
a
anaranjado, dependiendo de la concentración a la que ésta se encuentre en el medio.
CUADRO DE RESULTADOS:
(UTILIZA 3 CRUCES PARA EL TUBO CON MAYOR CONCENTRACIÓN DE GLUCOSA, Y
LUEGO 2, 1 Y 0 PARA LOS DEMÁS TUBOS)
Tubo Concentración
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PRACTICA No. 5
BIOMOLÉCULAS “PROTEINAS”
PROPOSITO
Determinar la presencia de proteínas en distintos alimentos mediante la Reacción de
Biuret
INTRODUCCION
Las proteínas son elementos vitales para los organismos, encontrándose en plantas y
animales en una proporción elevada. Hay una gran variedad de proteínas y cada una
desempeña una función biológica específica que puede ser de reserva, de sostén,
transporte, estructural, etc.
Químicamente las proteínas están constituidas por combinaciones complejas de carbono,
hidrógeno, oxígeno, nitrógeno t otros elementos en menor proporción como son
azufre, cobre, fósforo y fierro.
Cuando la estructura de la proteína se desorganiza, se dice que se encuentra
desnaturalizada y esto trae como consecuencia la pérdida de la actividad biológica.
La desnaturalización puede lograrse por medios físicos como el calor o químicos como una
variación de pH, observándose una disminución en la solubilidad y la formación de un
coagulo. Este método es utilizado para demostrar la presencia de proteínas.
También se pueden identificar proteínas mediante el uso de sustancias que, al ponerse en
contacto con ellas, producen una coloración específica; tal es el caso de la Reacción de
Biuret. En esta técnica, se agrega hidróxido sódico y sulfato cúprico a la proteína; el cobre
se combina con ella y toma una coloración púrpura.
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MATERIAL
PROCEDIMIENTO
1.- Coloca en cada tubo 5 ml. de uno de los siguientes productos solución de clara de
huevo al 60 %, leche, consomé de pollo, jugo de naranja y solución de macerado de
papa.
2.- Añade a cada tubo 5 ml. hidróxido sódico al 10 % y una gota de sulfato cúprico al 1 %.
3.- Observa cada uno de los tubos y describe tus observaciones.
CUADRO DE RESULTADOS:
alimento observaciones
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PRACTICA No. 6
“BIOMOLÉCULAS”
“EXTRACCION Y SEPARACION DE LIPIDOS”
PROPOSITO
Extraer lípidos de tejidos animales y vegetales e identificarlos como tales.
INTRODUCCION
Además del agua, los carbohidratos y las proteínas, los seres vivos están constituidos por otras
moléculas que, aunque en menor cantidad, desempeñan funciones muy importantes.
Los lípidos son biomoléculas insolubles en agua que se encuentran en los seres vivos y desempeñan
funciones diversas como: ser componentes estructurales de membranas,
almacenan energía, separan, por sus condiciones de insolubilidad en agua regiones donde tiene lugar
reacciones diferentes. Funcionan también como cubierta protectora en el caso de algunos animales
mamíferos.
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PROCEDIMIENTO
1.- Toma una muestra del tejido que hayas elegido y homogenízalo, es decir muélelo con el
mortero, si el tejido es muy duro lícualo en seco.
2.- Coloca tu muestra en el vaso de precipitados.
3.- Agrégale un poco de mezcla Folch (suficiente para cubrir en exceso la muestra).
4.- La mezcla de Folch se prepara con cloroformo y metanol en proporción de 2:1, es decir,
dos partes de cloroformo y una de metanol.
5.- Cuando hayas agregado la mezcla Folch a tu muestra, agítala durante algunos minutos, dejando
tiempo suficiente para que la grasa se disuelva en la mezcla.
6.- Coloca el papel filtro sobre el embudo y éste sobre matraz y filtra la mezcla.
7.- Observa la figura 1. En el papel filtro se quedarán las proteínas y otras sustancias insolubles en la
mezcla y en el filtrado estarán las grasas, pero disueltas en la mezcla de cloroformo metanol, por ello
es necesario evaporar para obtener un extracto puro.
8.- Deberás hacer la evaporación con mucha precaución, ya que los solventes que
estás utilizando son muy inflamables y requieren precauciones extremas.
9.- Por lo que es necesario que utilices un baño maría ya que no pueden ponerse a fuego directo.
Monta el baño maría como se te indica en la figura 2, colocando dentro de la muestra piedrecillas de
roca volcánica o pedacitos de vidrio pequeños para favorecer
la ebullición y evitar que haya movimientos muy fuertes.
10.- Evapora a sequedad y deja enfriar; añádele unas gotas de Sudán IV que es un reactivo que indica
presencia de grasas y observa el cambio del color.
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Fig. 1 fig. 2
CUADRO DE RESULTADOS:
alimento observaciones
ALUMNO PUNTOS.
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PRACTICA No. 7
“EXTRACCION DE ADN”
PROPOSITO
Aprender un método de extracción de material genético.
INTRODUCCION
La extracción de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los iones salinos
son atraídos hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su disolución y posterior
extracción de la célula.
Se empieza por lisar (romper) las células mediante un detergente, vaciándose su
contenido molecular en una disolución tampón en la que se disuelve el ADN. En ese
momento, el tampón contiene ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN,
carbohidratos, proteínas y otras sustancias en menor proporción. Las proteínas asociadas al
ADN, de gran longitud, se habrán racionado en cadenas más pequeñas. y separado de él
por acción del detergente. Sólo queda, por tanto, extraer el ADN y esa mezcla de tampón y
detergente, para lo cual se utiliza alcohol isoamílico, probablemente el único reactivo de esta
práctica que no suele haber en una cocina.
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PROCEDIMIENTO
1.-Preparar el tampón con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o en un baño
de hielo triturado:
2.- 120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del grifo.
3.- 1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura.
4.- 5 g de bicarbonato sódico.
5.- 5ml de detergente líquido o shampoo
6.-Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que pueda haber en la
cocina (cebolla, ajo, tomates, etc.) y cortarla en cuadraditos.
7.- Triturar la muestra con un poco de agua en la batidora accionando las cuchillas a
impulsos de 10 segundos. Así se romperán muchas células y otras quedarán expuestas a la
acción del detergente.
4. Mezclar en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampón frío y agitar
vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar después los restos vegetales más
grandes del caldo molecular haciéndolo pasar por un colador lo más fino posible. Lo ideal es
centrifugar a baja velocidad 5 minutos y después pipetear el sobrenadante.
5. Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y añadir con pipeta 10 ml de alcohol
isoamílico enfriado a 0º C Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del
recipiente, teniendo éste inclinado. El alcohol quedará flotando sobre el tampón.
6. Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación entre el
alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán
enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla
atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedará adherido a su extremo con el
aspecto de un copo de algodón mojado.
RESULTADOS.
El producto filamentoso obtenido de la extracción no es ADN puro ya que, entremezclado
con él, hay fragmentos de ARN. Una extracción "profesional" se realiza añadiendo enzimas
que fragmentan las moléculas de ARN e impiden que se unan al ADN.
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PRACTICA No.
8
“VARIACION GENETICA”
PROPOSITO
Diferenciar el concepto de genotipo y fenotipo, a través de la observación e investigación de
algunos caracteres hereditarios.
• Apreciar la variabilidad en las características de un ser humano y comprender que ésta es
resultado de las múltiples combinaciones de genes que se han dado en generaciones
anteriores
INTRODUCCION
La variedad de las características en los seres vivos con reproducción sexual es una ventaja, pues les
permite tener e intercambiar información para poder soportar las variaciones o cambios en su
ambiente. Estas variaciones se pueden observar fácilmente al comparar una característica específica.
Sabemos que el genotipo nos indica las posibilidades (alelos) que tiene un gen de expresarse, pues los
genes pueden ser dominantes o recesivos. El fenotipo sería la característica o gen que se expresa y que
podemos ver o detectar.
MATERIAL
Hoja de papel milimétrico
PROCEDIMIENTO
1. Las siguientes características del ser humano no están determinadas por genes, y siempre tienen
dos posibilidades:
a. Capacidad de enrollar la lengua en forma de U
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Lóbulo de la oreja
separado
Hoyuelos en las
mejillas
Pico de viuda
Diestro
Miopía
Analiza el círculo de caracteres tal y como te lo indica tu maestro (a) (Ver anexo3).
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Anexo 3
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3. ¿Es cierto que todos los genes recesivos son dañinos o malos para los organismos?
ALUMNO PUNTOS. _
FECHA
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