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Conservación Microbiana en Papel Filtro

La conservación de cepas microbiológicas en papel filtro se basa en paralizar el crecimiento celular mediante la eliminación del agua disponible para las células. El procedimiento implica esterilizar círculos de papel filtro, empaparlos con una suspensión microbiana, y secarlos en un desecador a baja temperatura para paralizar el crecimiento al remover el agua, logrando conservar las cepas hasta por 2 años a temperatura ambiente.

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Amayrani Figueroa Diaz
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Conservación Microbiana en Papel Filtro

La conservación de cepas microbiológicas en papel filtro se basa en paralizar el crecimiento celular mediante la eliminación del agua disponible para las células. El procedimiento implica esterilizar círculos de papel filtro, empaparlos con una suspensión microbiana, y secarlos en un desecador a baja temperatura para paralizar el crecimiento al remover el agua, logrando conservar las cepas hasta por 2 años a temperatura ambiente.

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 CONSERVACIÓN DE CEPAS MICROBIOLÓGICAS EN PAPEL FILTRO

La conservación en papel filtro se basa en la paralización del crecimiento celular por la


eliminación del agua disponible para las células.

 Objetivo

- El empleo de esta técnica pretende el mantenimiento de la estabilidad y pureza del


microorganismo por medio del uso de un papel filtro absorbente que paralice el crecimiento
celular por la remoción de agua disponible.

 Fundamento

El empleo de un soporte de papel para el mantenimiento de células en condiciones de ausencia de


agua es un procedimiento adecuado y sencillo, para conservar cepas. La conservación en discos de
papel de filtro se basa en la en la paralización del crecimiento celular por la eliminación del agua
disponible para las células.

La técnica consiste en embeber tiras de papel de filtro con una suspensión densa de organismos en
suero, glutamato de sodio u otro agente, las mismas son posteriormente colocadas en tubos para
su posterior secado bajo vacío. De esta forma se han logrado conservar por períodos de hasta 2 años
a temperatura ambiente. Para ello es necesario utilizar papel de filtro absorbente y estéril que se
impregne en una suspensión bacteriana de células, para posteriormente dejar secar al aire en
condiciones estériles y una vez secos los discos colocarlos en tubos Eppendorf estériles a 4°C.

 Procedimiento
1.Tomar el papel filtro Watman No ° 4 en forma de círculos

2. Esterilizar los círculos de papel filtro en la autoclave.

3. Preparar la suspensión del microorganismo ( hongo o bacteria) con agua destilada estéri.

4.Colocar los círculos de papel filtro esterilizados en tubos Eppendorf (5 a 7 círculos,


aproximadamente)

5.Existen dos formas de agregar la suspensión:

a. Agregar directamente la suspensión al tubo Eppendorf el cual mojará a los círculos de papel, pero
se correr el riesgo de agregar un exceso de suspensión, provocando que se retarde el secado de los
círculos en el desecador, o bien

b. agregar la suspensión a los círculos, uno por uno tratando de no crear un exceso de suspensión
para no retrasar al secado (cuando se le agrega la suspensión uno por uno el secado en el desecador
en más rápido ya que la cantidad de agua a eliminar será menor).

6.Una vez húmedos los círculos se llevan al desecador con la tapa abierta para que pierdan humedad
todo esto en esterilidad por 2 a 3 semanas a 4 °C.

7.Transcurrido el tiempo necesario para el secado de los círculos se aplican pruebas de viabilidad.

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