KAJIAN PERTUMBUHAN MIKROALGA Spirulina sp.

, Nannochloropsis
sp. DAN Chlorella sp. PADA MEDIA LIMBAH CAIR INDUSTRI KARET
REMAH SEBAGAI SUMBER PROTEIN

(Skripsi)

Oleh

RIMADINA ARUMAYANTI

FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS LAMPUNG
BANDAR LAMPUNG
2018
 ABSTRACT

MICROALGA GROWTH STUDY Spirulina sp., Nannochloropsis sp. AND

Chlorella sp. ON LIQUID WASTE MEDIA OF CRUMB RUBBER
INDUSTRY AS A SOURCE OF PROTEIN

By

Rimadina Arumayanti

Microalgae has a very high protein content, therefore microalgae is known as a

single cell protein. Crumb rubber wastewater which contains of high organic

matter and nutrients can be used as a media for the growth of microalgae without

the addition of nutrients. The purpose of this study was to get one of three types

of microalgae that is Spirulina sp., Nannochloropsis sp. and Chlorella sp. which

were cultivated on the crumb rubber wastewater media with the highest potential

to produce high protein content biomass. This research was conducted by

preparing the seed of microalgae Spirulina sp., Nannochloropsis sp. and Chlorella

sp. as much 25% v/v cultivated in 5 L of volume open pond bioreactor for 7 days,

and then flocculated by NaOH. The daily observations conducted was: cell

density, whereas at the beginning and end of cultivation that is: biomass, protein

content, salinity, N-total, P-PO4, Chemical Oxygen Demand, Dissolved Oxygen

and pH. This results indicated that High protein microalgae types that are able to

adapt to crumb rubber industrial waste media are Spirulina sp. with cell density

6.835 x 104 sel/mL, to produce the highest biomass of 0,6866 g/L, protein content
of 16,80%, then fat content of 2,13%, moisture content of 15,65% and ash content

of 39,27%.

Key words : Spirulina sp., Dunaliella sp., Tetraselmis sp., Wastewater, Protein
 ABSTRAK

KAJIAN PERTUMBUHAN MIKROALGA Spirulina sp. Nannochloropsis

sp. DAN Chlorella sp. PADA MEDIA LIMBAH CAIR INDUSTRI KARET
REMAH SEBAGAI SUMBER PROTEIN

Oleh

Rimadina Arumayanti

Mikroalga memiliki kandungan protein yang sangat tinggi, sehingga mikroalga

juga dikenal sebagai single cell protein. Limbah cair karet yang mengandung

bahan organik dan nutrien yang tinggi dapat digunakan sebagai media

pertumbuhan mikroalga tanpa penambahan nutrisi. Tujuan dari penelitian ini

untuk mendapatkan satu dari ketiga jenis mikroalga yaitu Spirulina sp.,

Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp. yang dikultivasikan pada media limbah

cair karet yang paling berpotensi dalam menghasilkan biomassa dan kadar protein

tinggi. Penelitian ini dilakukan dengan menyiapkan bibit mikroalga Spirulina sp.,

Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp. sebanyak 25% v/v dikultivasikan pada

bioreaktor sistem open pond dengan volume kerja 5 L selama 7 hari, kemudian

dipanen dengan metode flokulasi menggunakan NaOH. Pengamatan yang

dilakukan setiap hari yaitu kepadatan sel, sedangkan pada awal dan akhir kultivasi

yaitu biomassa, kadar proksimat, sainitas, N-total, P-PO4, Chemical Oxygen

Demand, Dissolved Oxygen dan pH. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa

Jenis mikroalga berprotein tinggi yang mampu beradaptasi pada media limbah
cair industri karet remah adalah Spirulina sp. dengan kepadatan sel 6.835 x 104

sel/mL, menghasilkan biomassa tertinggi yaitu 0,6866 g/L dan kadar protein

sebesar 16,80%, kemudian kadar lemak sebesar 2,13%, kadar air 15,65% dan

kadar abu 39,27%.

Kata Kunci : Spirulina sp., Dunaliella sp., Tetraselmis sp., Limbah Cair, Protein
 KAJIAN PERTUMBUHAN MIKROALGA Spirulina sp. Nannochloropsis
sp. DAN Chlorella sp. PADA MEDIA LIMBAH CAIR INDUSTRI KARET
REMAH SEBAGAI SUMBER PROTEIN

Oleh

RIMADINA ARUMAYANTI

Skripsi

Sebagai Salah Satu Syarat untuk Mencapai Gelar

SARJANA TEKNOLOGI PERTANIAN

Pada

Jurusan Teknologi Hasil Pertanian

Fakultas Pertanian Universitas Lampung

FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS LAMPUNG
BANDAR LAMPUNG
2018
 RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan di Bandar Lampung pada tanggal 09 Februari 1996, sebagai

anak kedua dari tiga bersaudara pasangan Bapak Bejo Sutrisno dan Ibu

Sumarsinah. Penulis memulai pendidikan di Taman Kanak-Kanak PTPN VII

pada tahun 2000-2002, Sekolah Dasar Negeri (SDN) 02 Sabah Balau pada tahun

2002-2008, Sekolah Menengah Pertama (SMP) 24 Bandar Lampung pada tahun

2008-2011, Sekolah Menengah Atas (SMA) 12 Bandar Lampung pada tahun

2011-2014. Pada tahun 2014, penulis diterima sebagai mahasiswa Jurusan

Teknologi Hasil Pertanian Fakultas Pertanian Universitas Lampung melalui

Seleksi Bersama Mahasiswa Perguruan Tinggi Negeri (SBMPTN).

Penulis melaksanakan kegiatan Kuliah Kerja Nyata (KKN) di Desa Tanjung

Kurung, Kecamatan Wonosobo, Kabupaten Tanggamus pada bulan Januari

sampai Maret 2018 dan melaksanakan kegiatan Praktik Umum (PU) pada bulan

Juli sampai Agustus 2017 di PT Umas Jaya Agrotama, Terbanggi Besar,

Lampung Tengah dengan judul “Mempelajari Proses Pengolahan dan

Pengendalian Mutu Produksi Tapioka di PT Umas Jaya Agrotama, Terbanggi

Besar, Lampung Tengah. Penulis pernah menjadi asisten dosen pada mata kuliah

Pengolahan Hasil Perkebunan periode 2018-2019.

 SANWACANA

Bismillaahhirrahmaanirrahiim, Segala puji dan syukur penulis panjatkan ke

hadirat Allah SWT atas rahmat dan hidayah-Nya serta kelancaran yang telah

diberikan sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi

ini yang berjudul “Kajian Pertumbuhan Mikroalga Spirulina sp., Nannochloropsis

sp. dan Chlorella sp. Pada Media Limbah Cair Industri Karet Remah Sebagai

Sumber Protein”. Penyusunan skripsi ini tidak terlepas dari keterlibatan berbagai

pihak, sehingga pada kesempatan ini penulis ingin mengucapkan terima kasih

kepada :

1. Prof. Dr. Ir. Irwan Sukri Banuwa, M.Si. selaku Dekan Fakultas Pertanian

Universitas Lampung.

2. Ibu Ir. Susilawati, M.Si. selaku Ketua Jurusan Teknologi Hasil Pertanian

Fakultas Pertanian Universitas Lampung.

3. Ibu Ir. Otik Nawansih, M.P. selaku Pembimbing Pertama skripsi, terimakasih

atas pengarahan, nasihat, saran, bantuan, motivasi, serta kesabaran selama

proses penelitian hingga penyelesaian skripsi ini.

4. Bapak Dr. Ir. Tanto Pratondo Utomo, M.Si. selaku Pembimbing Kedua

skripsi, terimakasih atas segala bantuan, pengarahan, nasihat, dan saran

selama penyusunan skripsi ini.

5. Ibu Dr. Sri Hidayati, S.T.P., M.P. selaku Pembahas terimakasih atas segala

masukan dan saran selama penyusunan skripsi ini.

6. Balai Besar Perikanan Budidaya Laut (BBPBL) Lampung yang telah

memberikan tempat penelitian dan bibit mikroalga.

7. Bapak Safei, Ibu Valen dan Ibu Anis yang telah memberikan bimbingan,

arahan, dan motivasi selama penelitian di BBPBL.

8. Kedua orang tuaku Bapak Bejo Sutrisno dan Ibu Sumarsinah, kakakku Nur

Aris Henda Yanto dan adikku Titin Na’afiah, terima kasih atas doa, motivasi,

kasih dan sayang yang tak pernah putus yang telah diberikan, semangat,

dukungan, pengertian dan bantuan baik materi maupun non materi yang tak

mungkin dapat terbalaskan.

9. Terimakasih sahabat seperjuangan penelitian (Ruri Mayang Nirwana dan Riki

Satria Rainaudi) yang telah membantu dan memberi saran selama proses

penyelesaian skripsi ini.

10. Keluarga angkatan 2014 yang telah memberikan pengalaman yang luar biasa

dalam dunia kampus.

Penulis berharap semoga Allah SWT membalas kebaikan mereka dan semoga

skripsi ini dapat bermanfaat bagi kita semua.

Bandar Lampung, 12 Oktober 2018

Penulis

Rimadina Arumayanti
 DAFTAR ISI

Halaman

DAFTAR ISI.......................................................................................................... i

DAFTAR TABEL ................................................................................................ iii

DAFTAR GAMBAR............................................................................................ iv

I. PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang ........................................................................................... 1

1.2. Tujuan Penelitian........................................................................................ 5

II. TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Mikroalga ................................................................................................. 6

2.2. Faktor-Faktor Pertumbuhan Mikroalga ..................................................10
2.3. Potensi Mikroalga. ..................................................................................16
2.3.1. Produk Pangan dan Organik .........................................................16
2.3.2. Mikroalga Sebagai Sumber Pakan Alami .....................................18
2.4. Jenis-Jenis Mikroalga..............................................................................19
2.4.1. Spirulina sp. ..................................................................................19
2.4.2. Nannochloropsis sp. ........................................................................... 23
2.4.3. Chlorella sp. .................................................................................26
2.6. Teknik Kultivasi Mikroalga. ...................................................................29
2.1. Limbah Cair Industri Karet Remah.........................................................31

III. METODELOGI PENELITIAN

3.1. Waktu dan Tempat Penelitian .................................................................35

3.2. Alat dan Bahan .......................................................................................35
3.3. Metode Penelitian ...................................................................................36
3.4. Pelaksanaan Penelitian............................................................................37
3.4.1. Pembiakan Kultur Murni ..............................................................38
 3.4.2. Persiapan Media............................................................................38
3.4.3. Kultivasi Mikroalga ......................................................................38
3.4.5. Pemanenan Mikroalga ..................................................................39
3.5. Pengamatan .............................................................................................40
3.5.1. Kepadatan Sel Mikroalga..............................................................40
3.5.2. Analisis COD ................................................................................41
3.5.3. Analisis DO...................................................................................42
3.5.4. Derajat Keasaman (pH).................................................................42
3.5.5. Ortophospat (P-PO4) .....................................................................42
3.5.6. Analisis Nitrogen total (N-total) ...................................................43
3.5.7. Salinitas.........................................................................................44
3.5.8. Biomassa ...................................................................................... 44
3.5.8. Kadar Air ......................................................................................45
3.5.10. Kadar Abu...................................................................................46
3.5.11. Kadar Protein ..............................................................................46
3.5.12. Kadar Lemak...............................................................................47

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1. Potensi mikroalga dalam Menghasilkan Biomassa dan Kadar Protein...49

4.1.1. Kepadatan Sel Mikroalga..............................................................49
4.1.2. Biomassa .......................................................................................58
4.1.3. Kadar Protein, Kadar Lemak, Kadar Air dan Kada Abu ..............60
4.1.4. Salinitas.........................................................................................65

4.2. Potensi Mikroalga dalam Menurunkan Beban Cemaran Limbah Cair .. 68

4.2.1. Nitrogen total (N-total) .................................................................68
4.2.2. Ortofosfat (P-PO4) ........................................................................70
4.2.3. Chemical Oxygen Demand (COD) ...............................................72
4.2.4. Dissolved Oxygen (DO) ................................................................75
4.2.5. Derajat Keasaman (pH).................................................................78

V. KESIMPULAN DAN SARAN

5.1. Kesimpulan ......................................................................................81

5.2. Saran ................................................................................................81

DAFTAR PUSTAKA

LAMPIRAN
 DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

1. Jenis mikroalga yang berpotensi untuk pangan.............................................. 7

2. Mikroalga yang menghasilkan senyawa karotenoid. ..................................... 18

3. Manfaat Spirulina untuk beberapa jenis hewan peliharaan............................ 19

4. Kepadatan sel mikroalga selama 7 hari kultivasi........................................... 95

5. Biomassa mikroalga Spirulina sp., Nannochloropsis sp. dan

Chlorella sp. . ................................................................................................. 95
6. Salinitas limbah cair karet.............................................................................. 96

7. DO limbah cair karet...................................................................................... 96

8. pH limbah cair karet....................................................................................... 97

9. COD limbah cair karet. .................................................................................. 97

10. Kandungan N-total limbah cair karet............................................................ 98

11. Kandungan P-PO4 limbah cair karet............................................................. 98

12. Kadar protein Spirulina sp., Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp. .......... 99

13. Kadar lemak Spirulina sp., Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp. . .......... 99

14. Kadar air dan kadar abu Spirulina sp. Nannochloropsis sp. dan
Chlorella sp. ................................................................................................100
 DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

1. Fase pertumbuhan mikroalga. ........................................................................ 10

2. Mikroalga Spirulina sp................................................................................... 21

3. Mikroalga Nannochloropsis sp ...................................................................... 23

4. Morfologi sel Nannochloropsis sp ................................................................. 24

5. Mikroalga Chlorella sp .................................................................................. 26

6. Teknik budidaya mikroalga open raceway ponds.......................................... 30

7. Teknik budidaya mikroalga photobioreactor ................................................ 31

8. Diagram alir perolehan biomassa mikroalga.................................................. 37

9. Fase pertumbuhan mikroalga. ........................................................................ 50

10. Kepadatan sel mikroalga Spirulina sp. Nannochloropsis sp. dan

Chlorella sp. selama 7 hari kultivasi............................................................ 51

11. Sel mikroalga pada mikroskop perbesaran lensa objective 10x................... 51

12. Warna media Spirulina sp............................................................................ 52

13. Warna media Nannocloropsis sp.. ............................................................... 55

14. Warna media Chlorella sp ........................................................................... 56

15. Colpoda........................................................................................................ 58

16. Biomassa pada berbagai jenis perlakuan. .................................................... 59

17. Kadar proksimat mikroalga.......................................................................... 61

18. Grafik peningkatan salinitas kultur mikroalga pada media limbah cair
karet remah................................................................................................... 66

19. Grafik penurunan kadar N-total pada limbah cair karet remah
sebelum dan setelah kultivasi....................................................................... 69

20. Grafik penurunan kadar P-PO4 pada limbah cair karet remah
sebelum dan setelah kultivasi....................................................................... 71

21. Nilai COD pada media limbah cair karet remah.......................................... 73

22. Peningkatan kadar Dissolved Oxygen pada media limbah cair karet
remah sebelum dan setelah kultivasi............................................................ 76

23. Peningkatan pH pada limbah cair karet remah sebelum dan

setelah kultivasi............................................................................................ 79

24. Pupuk Conwy................................................................................................ 100

25. Bibit mikroalga Chlorella sp........................................................................ 100

26. Hand counter................................................................................................ 101

27. Penggunaan Hand counter ........................................................................... 101

28. Pembiakan Kultur Murni Spirulina sp. Nannochloropsis sp. dan

Chlorella sp.................................................................................................. 101

29. Pengadaptasian kultur pada media LCKR 25%. .......................................... 101

30. Pengadaptasian kultur pada media LCKR 50%. .......................................... 102

31. Kultivasi Pada Media limbah cair karet selama 7 hari................................. 102

32. Pemanenan mikroalga. ................................................................................. 102

33. Yield basah mikroalga.................................................................................. 103

34. Pengamatan kepadatan sel mikroalga .......................................................... 103

35. Analisis kadar protein. ................................................................................. 103

36. Persiapan Analisis COD............................................................................... 103

37. Pengamatan salinitas media limbah cair karet ............................................. 104

 I. PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang

Karet merupakan salah satu komoditas yang mampu menyumbangkan kontribusi

yang besar dalam upaya peningkatan devisa negara. Produksi karet Indonesia

mempunyai laju pertambahan sebesar 3,5%/th dan diproyeksikan hingga tahun

2019 terdapat 3.810.000 ton karet yang dihasilkan (Direktorat Jendral

Perkebunan, 2015). Diperkirakan produksi komoditas karet sebagai hasil

perkebunan akan meningkat seiring dengan pertumbuhan kebutuhan masyarakat

kedepannya. Menurut Utomo dan Suroso (2008), Industri pengolahan karet alam

didominasi oleh jenis karet remah yakni 90% dari total produksi karet di

Indonesia. Usaha industri karet remah adalah suatu usaha industri pengolahan

karet yang melakukan kegiatan mengubah bahan baku karet menjadi karet remah.

Salah satu industri karet remah di Lampung yang dikelola oleh PT. Perkebunan

Nusantara VII (Persero) adalah Unit Pabrik Karet Way Berulu. Pabrik

Pengolahan Karet Remah Unit Usaha Way Berulu merupakan pabrik yang

mengolah lateks segar menjadi karet remah dengan jenis mutu SIR (Standard

Indonesian Rubber) 3L dan SIR 3 WF. Aktivitas industri pengolahan karet

menimbulkan limbah cair. Pabrik pengolahan karet remah unit usaha Way Berulu

memiliki kapasitas produksi sebanyak 30 ton kk/hari dan limbah cair yang
 2

dikeluarkan antara 240-312 m3/hari. Oleh karena itu diperlukan penanganan dan

pengolahan limbah yang baik (Kartika, 2010).

Limbah cair pengolahan karet ini berasal dari proses pengenceran lateks,

koagulasi, penggilingan, dan pencucian. Adapun kandungan limbah cair karet

antara lain, komponen karet (protein, lipid, karotenoid, dan garam anorganik),

lateks yang tidak terkoagulasi dan bahan kimia yang ditambahkan selama

pengolahan. Limbah cair industri karet remah mengandung senyawa nitrogen

sebesar 100-300 mg/L N-NH3 dan senyawa fosfor sebesar 20-40 mg/L P-PO4

(Utomo et al., 2012). Senyawa-senyawa organik berupa nitrogen dan fosfor dalam

limbah cair industri karet remah dapat digunakan mikroalga sebagai sumber hara.

Beberapa penelitian membuktikan bahwa limbah cair industri karet dapat

dijadikan sebagai media tumbuh mikroalga tanpa penambahan nutrisi. Hasil

penelitian Dedi et al., 2010 menyatakan bahwa mikroalga Chlorella sp. yang

dibudidaya pada media limbah cair karet dengan konsentrasi 15% mampu

menghasilkan biomassa dan kepadatan sel tertinggi sebesar 3,7256 x 106 (sel/mL).

Mikroalga adalah kelompok tumbuhan berukuran renik yang termasuk dalam

kelas alga, diameternya antara 3-30 μm, baik sel tunggal maupun koloni yang

hidup di seluruh wilayah perairan tawar maupun laut, yang lazim disebut

fitoplankton. Menurut Loehr (1974), alga dapat menyimpan kelebihan nutrien

dalam masa selnya, oleh karena itu dapat digunakan sebagai alat untuk mengambil

nutrien N dan P yang terdapat pada hasil buangan atau limbah cair. Mikroalga

yang tumbuh pada limbah cair karet memiliki peran penting dalam proses

dekomposisi limbah cair karet. Mikroalga tidak mendegradasi bahan organik

 3

namun adanya simbiosis mutualisme antara mikroalga dan bakteri aerob dapat

menurunkan kandungan nitrogen, Phospat, BOD dan COD pada limbah.

Mikroalga menggunakan cahaya matahari, karbon dioksida (CO2), dan bahan

organik seperti nitrogen dan Phospat untuk fotosintesis. Oksigen yang dihasilkan

dari proses fotosintesis mikroalga dimanfaatkan oleh bakteri aerob untuk

mengoksidasi senyawa organik pada limbah cair karet (Wulan, 2015).

Mikroalga memiliki kandungan protein yang sangat tinggi, sehingga mikroalga

juga dikenal sebagai single cell protein.. Biomassa mikroalga kaya nutrien antara

lain asam lemak omega 3 dan 6, asam amino esensial (leusin, isoleusin, valin, dan

lain-lain), dan karoten. Budidaya mikroalga merupakan bagian yang sangat

penting dalam perkembangan teknologi budidaya moluska, krustacea dan ikan

karena dijadikan sebagai sumber pakan alami untuk pertumbuhan organisme

budidaya (Freire et al., 2016). Mikroalga terbukti dapat meningkatkan

pertumbuhan berat badan pada ikan, dan babi, selain itu mikroalga yang dijadikan

pakan ayam dapat menurunkan kandungan kolesterol dalam telur yang dihasilkan

serta warna dari telur menjadi lebih gelap akibat pertambahan kandungan pigmen

karoten (Chen, et al., 2011). Beberapa jenis mikroalga juga memiliki kandungan

protein yang tinggi diantaranya Scenedesmus obliqus, Chlorella vulgaris,

Chlorella pyrenoidosa, Spirulina plantesis, Spirulina maxima, Dunaliella salina

dan Tetraselmis sp. (Hasanah, 2011).

Spirulina sp. merupakan organisme autotroph berwarna hijau kebiruan terdiri dari

sel-sel silindris yang membentuk koloni dimana selnya berkolom membentuk

filament terpilin menyerupai spiral (helix) sehingga disebut juga alga biru hijau
 4

berfilamen (Ariyati, 1998; Hariyati, 2008). Spirulina sp memiliki ukuran sel yang

besar yaitu berdiameter 1-12 µm, panjang 200-300 μm dan lebar 5-70 μm.

Keunggulan dari Spirulina sp adalah kandungan nutrisi yang baik antara lain 60–

70% protein, 13,5% karbohidrat, 4-7% lemak dan asam lemak (linolenic acid dan

γ-linolenic acid), asam amino esensial (leusin, isoleusin, valine), pigmen (klorofil,

fikosianin dan karotenoid) dan juga mengandung vitamin seperti provitamin A,

vitamin B12 serta β-caroten, serta mineral dan mudah dicerna oleh ternak (Koru,

2012). Berdasarkan penelitian Amanantin (2013) Spirulina sp. yang ditumbuhkan

pada media ekstrak tauge (MET) 4% dan Urea 100 ppm menunjukkan kadar

protein yang tertinggi sebesar 20,99%, dengan menggunakan suhu 200C-260C,

salinitas 20-27 ppt, dan pH 7-8.

Nannochloropsis sp. merupakan mikroalga berwarna hijau kuning, berbentuk

bola, berukuran kecil dengan diamater 2-4 μm. Ciri khas dari mikroalga ini

adalah memiliki dinding sel yang terbuat dari komponen selulosa (Sleigh, 1989;

Brown et al., 1997). Berdasarkan penelitian Komalasari (2015) Perlakuan

dengan menggunakan media limbah cair dari outlet kolam Fakultatif II dapat

meningkatkan kepadatan sel Nannochloropsis sp. mencapai 3,3 x 107 sel/mL dan

dapat menurunkan kandungan bahan organik limbah cair karet remah berupa N-

NH3 mencapai 98%, P-PO4 89%, N-total 92%, serta perolehan yield kering

sebesar 0,87 g/L. Nannochloropsis sp. mempunyai peranan penting dalam suatu

kegiatan pembenihan karena kandungan nutrisinya yang tinggi. Komposisi

kandungan Nannochloropsis sp. adalah Nannochloropsis sp. memiliki sejumlah

kandungan gizi dan pigmen seperti protein (52,11 %), karbohidrat (16 %), lemak

(27,64 %), vitamin C (0,85 %) dan klorofil A (0,89 %) (Anon et al., 2009).
 5

Chlorella sp. merupakan kelompok organisme protista autrotof, yakni protista

yang mampu membuat makanannya sendiri. Karakeristik ini dimiliki Chlorella

sp. karena organisme ini mempunyai pigmen klorofil, sehingga dapat melakukan

fotosintesis. Bentuk sel Chlorella sp. bulat atau bulat telur dan di dalamnya

terdapat protoplasma yang berbentuk cawan, tidak mempunyai flagella sehingga

tidak dapat bergerak aktif, diameter selnya berkisar antara 2-8 μm, dinding selnya

keras terdiri atas selulosa dan pektin. Berdasarkan penelitian Zulfarina et al.,

(2013) dan Sriharti (2004) menunjukkan bahwa Chlorella pyrenoidosa dan

Chlorella sp. dapat menurunkan kadar pencemar (COD) 52,6-96,7 % pada limbah

cair karet setelah dikultivasi selama 15 hari. Chlorella sp. memiliki kandungan

minyak sebesar 28-32%, karbohidrat 12-17%, lemak 14-22%, asam nukleat 4-5%

dan protein 51–58% (Rachmaniah et al., 2010). Berdasarkan uraian diatas,

kemampuan ketiga jenis mikroalga dalam beradaptasi di limbah cair karet perlu

dikaji potensinya dalam hal menghasilkan biomassa yang kaya protein dan dapat

digunakan sebagai pakan ternak

1.2. Tujuan Penelitian

Tujuan dari penelitian ini adalah mendapatkan satu dari ketiga jenis mikroalga

yaitu Spirulina sp., Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp. yang dikultivasikan

pada media limbah cair karet yang paling berpotensi dalam menghasilkan

biomassa dan kadar protein tinggi.

 II. TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Mikroalga

Mikroalga adalah kelompok tumbuhan berukuran renik yang termasuk dalam

kelas alga, diameternya antara 3-30 μm, baik sel tunggal maupun koloni yang

hidup di seluruh wilayah perairan tawar maupun laut, yang lazim disebut

fitoplankton. Morfologi mikroalga berbentuk uniseluler atau multiseluler tetapi

belum ada pembagian tugas yang jelas pada sel-sel komponennya. Hal itulah yang

membedakan mikroalga dari tumbuhan tingkat tinggi (Romimohtarto, 2004).

Budidaya mikroalga sangat menarik karena tingkat pertumbuhannya yang tinggi,

mampu menyesuaikan pada kondisi lingkungan yang bervariasi. Mikroalga

merupakan tumbuhan thalus yang berklorofil dan mempunyai pigmen tumbuhan

yang dapat menyerap cahaya matahari melalui proses fotosintesis. Kandungan

alami mikroalga terdiri dari zat gizi dan beberapa senyawa aktif seperti β-karoten,

provitamin, mineral, pigmen dan asam lemak. Mikroalga memiliki kandungan

protein yang sangat tinggi, sehingga mikroalga juga dikenal sebagai single cell

protein. Jenis mikroalga yang berpotensi untuk pangan terdapat pada tabel

dibawah ini yaitu sebagai berikut :

 7

Tabel 1. Jenis mikroalga yang berpotensi untuk pangan.

Mikroalga Protein karbohidrat Lipid

Anabaena cylindria 43-56 25-30 4-7
Aphanizomenon 62 23 3
flos-aquae
Chlamydomonas 48 17 21
rheinhardii
Chlorella 57 26 2
pyrenoidosa
Chlorella vulgaris 51-58 12-17 14-22
Dunaliella salina 57 32 6
Euglena gracilis 39- 61 14-18 14-20
Spirulina platensis 46-63 8- 14 4-9
Spirulina maxima 60-71 13-16 6-7
Nannochloropsis sp. 52 27 31-68
Synechococcus sp. 63 15 11
Sumber (Becker, 2007).

Mikroalga bisa termasuk mikroorganisme prokariot atau eukariot. Mikroalga

prokariot terdiri dari sianobakter atau alga biru-hijau dan mirip dengan bakteri.

Sel prokariot mikroalga tidak mempunyai organel terikat membran seperti plastid,

nukleus atau mitokondria jadi melakukan fotosintesa di dalam sitoplasma bukan

dalam organel-organel. Sel eukariot memiliki organel-organel untuk proses

fotosintesa. Sebagian besar mikroalga memiliki inti yang membantu fungsi sel

untuk melakukan metabolisme, bertahan dan reproduksi (Adetola, 2011).

Mikroalga dapat bersifat autotrof, heterotrof atau miksotrof. Mikroalga autotrof

menggunakan cahaya dalam proses fotosintesa sebagai sumber energi. Mikroalga

heterotrof menggunakan karbon organik dari luar sebagai sumber energi seperti

glukosa, asetat dan tidak memerlukan cahaya matahari untukBeberapa spesies

 8

mikroalga merupakan miksotrof yang mampu berfotosintesa dan menggunakan

nutrisi dari luar untuk energi. Autotrof atau heterotrof tergantung

pada sumber apa yang tersedia.

Menurut Kawaroe et al., (2010) pada pertumbuhan mikroalga pada sistem

kultivasi terbagi menjadi lima tahapan yaitu, fase adaptasi (lag phase), fase

eksponensial (log phase), fase penurunan pertumbuhan (declining growth), fase

stasioner, fase kematian (death phase). Lima tahapan fase tersebut dijabarkan

sebagai berikut:

a). Fase Adaptasi (Lag Phase) lag phase merupakan suatu tahap setelah

pemberian inokolum ke dalam media kultur dimana terjadi penundaan

pertumbuhan yang dikarenakan memerlukan pembelahan. Dalam hal ini tidak

terjadi pertambahan sel. Fase ini adalah fase penyesuaian yaitu suatu masa

ketika sel–sel kekurangan metabolisme dan enzim akibat dari keadaan tidak

menguntungkan dalam pembiakan terdahulu, menyesuaikan diri dengan

lingkungan yang baru. Enzim–enzim dan zat antara terbentuk dan terkumpul

sampai konsentrasi yang cukup untuk kelanjutan pertumbuahan.

b). Fase eksponensial (Log Phase), pada fase ini sel–sel membelah dengan cepat

dan terjadi pertambahan dalam jumlah sel. Selama fase ini, sel–sel berada

dalam keadaan yang stabil. Bahan sel baru terbentuk dengan konstan tetapi

bahan-bahan ini bersifat katalitik dan massa bertambah secara eksponensial.

Hal ini bergantung pada satu atau dua hal yang terjadi, yaitu apabila tidak atau

lebih zat makan dalam pembenihan maka hasil metabolisme yang beracun akan

tertimbun dan menghambat pertumbuhan. Kultur ini bertambah dengan

 9

kecepatan yang konstan. Dalam penggunaan mikroorganisme pada dunia

perindustrian dibutuhkan bibit atau starter untuk proses fermentasi suatu bahan

makanan, biasanya digunakan mikroorganisme yang sedang berada dalam fase

eksponensial.

c). Fase penurunan laju pertumbuhan (Deklinasi), pada fase ini terjadi

pertambahan sel namun namun laju pertumbuhannya menurun. Hal ini

dikarenakan terjadinya kompetisi yang sangat tinggi di dalam media hidup

karena zat makan yang tersedia tidak sebanding dengan populasi akibat dari

pertumbuhan yang sangat cepat pada fase eksponensial sehingga sebagian dari

populasi yang mendapatkan makan yang cukup dan dapat tumbuh serta

membelah.

d). Fase stasioner, pada fase ini laju pertumbuhan berbanding lurus dengan laju

kematian sehingga penambahan maupun pengurangan mikroalga relatif sama,

oleh karena itu kepadatan kultur menjadi tetap.

e). Fase kematian, pada fase ini laju kematian lebih cepat dibandingkan dengan

laju pertumbuhan sehingga terjadi penurunan jumlah sel pada bak kulturisasi.

Penurunan kepadatan mikroalga ditandai dengan perubahan kondisi optimum

yang dipengaruhi oleh suhu, intensitas cahaya, jumlah hara yang ada dan

beberapa kondisi lingkungan yang lain.

 10

Gambar 1. Fase Pertumbuhan Mikroalga

Dalam siklus makanan diperairan, mikroalga berperan sebagai produsen utama.

Diperkirakan bahwa 40% fotosintesis secara global dilakukan oleh mikroalga

(Aung et al., 2013). Mikroalga dapat menjadi alternatif sumber produk alami

yang kontinyu dan terpercaya, karena mikroalga dapat dikultivasi dalam

bioreaktor dalam skala besar. Selain itu kondisi sel mikroalga dapat dikontrol,

dengan menggunakan media yang bersih dalam pertumbuhannya, sehingga

mereka tidak terkontaminasi herbisida, pestisida dan substansi toksik lainnya.

Mikroalga telah dikenal sebagai sumber berbagai pigmen berharga yaitu

chlorophyl a, zeaxanthin, canthaxanthin and astaxanthin (Rocha et al., 2003).

2.2. Faktor-Faktor Pertumbuhan Mikroalga

Secara umum pertumbuhan fitoplankton dipengaruhi oleh kondisi perairan yang

meliputi:

a). Salinitas

Kisaran salinitas yang berubah-ubah dapat mempengaruhi pertumbuhan

 11

mikroalga. Beberapa mikroalga dapat tumbuh dalam kisaran salinitas yang

tinggi tetapi ada juga yang dapat tumbuh dalam kisaran salinitas yang rendah.

Namun, hampir semua jenis mikroalga dapat tumbuh optimal pada salinitas

sedikit dibawah habitat asal. Pengaturan salinitas pada media yang diperkaya

dapat dilakukan dengan pengenceran menggunakan air tawar. Kisaran salinitas

yang paling optimum untuk pertumbuhan mikroalga adalah 25-35 ppt

(Sylvester et al., 2002).

b). Suhu

Suhu merupakan salah satu faktor penting yang mempengaruhi pertumbuhan

mikroalga. Perubahan suhu berpengaruh terhadap proses kimia, biologi dan

fisika, peningkatan suhu dapat menurunkan kelarutan bahan dan dapat

menyebabkan peningkatan kecepatan metabolisme dan respirasi mikroalga di

perairan. Secara umum suhu optimal dalam kultur mikroalga berkisar antara

20-24 C. Suhu dalam kultur diatur sedemikian rupa bergantung pada media

yang digunakan. Suhu di bawah 16 oC dapat menyebabkan kecepatan

pertumbuhan turun, sedangkan suhu diatas 36 oC dapat menyebabkan

kematian. Beberapa fitoplankton tidak tahan terhadap suhu yang tinggi.

Pengaturan suhu dalam kultur fitoplankton dapat dilakukan dengan

mengalirkan air dingin ke botol kultur atau dengan menggunakan alat pengatur

suhu udara (Taw, 1990).

c). Derajat Keasaman (pH)

Variasi pH dalam media kultur dapat mempengaruhi metabolisme dan

pertumbuhan kultur mikroalga antara lain mengubah keseimbangan karbon

 12

anorganik, mengubah ketersediaan nutrien dan mempengaruhi fisiologi sel.

Kisaran pH untuk kultur alga antara 7-9, kisaran optimum untuk alga laut

berkisar antara 7,8-8,5. Semakin tinggi kerapatan sel pada medium kultur

menyebabkan kondisi medium kultur meningkat tingkat kebasaannya (pH

semakin tinggi) dan hal itu menyebabkan peningkatan CO2 terlarut dalam

medium kultur (Wijanarko et al., 2007). Aktifitas fotosintesis akan turun

maksimum 33% ketika ph turun pada 5,0 (Colman dan Gehl, 1983).

d). Karbondioksida

Karbondioksida (CO2) merupakan faktor penting yang mempengaruhi

pertumbuhan dan metabolisme mikroalga (Hoshida et al., 2005).

Karbondioksida diperlukan oleh mikroalga untuk membantu proses

fotosintesis. Karbondioksida dengan kadar 1-2% biasanya sudah cukup

digunakan dalam kultur mikroalga dengan intensitas cahaya yang rendah.

Kadar karbondioksida yang berlebih dapat menyebabkan pH kurang dari batas

optimum sehingga akan berpengaruh terhadap pertumbuhan mikroalga (Taw,

1990).

Mikroalga dapat menyerap CO2 pada kisaran pH dan konsentrasi gas CO2 yang

berbeda. Efisiensi dari penyerapan CO2 oleh mikroalga tergantung dari pH

kultivasi dan dipengaruhi oleh perbedaan konsentrasi gas CO2. Semakin tinggi

konsentrasi gas CO2 maka semakin besar pula pembentukan biomassa yang

terjadi. Gas CO2 diserap oleh mikroalga dan digunakan untuk proses biofiksasi

menghasilkan biomassa (Olaizola et al., 2004). Penggunaan karbondioksida

pada kultivasi mikroalga memiliki beberapa keuntungan, seperti mikroalga

 13

tumbuh di air, lebih mudah diamati pertumbuhannya daripada tumbuhan

tingkat tinggi, mikroalga dapat tumbuh sangat cepat dan mikroalga tidak

membutuhkan tempat atau lahan yang sangat luas untuk tumbuh (Benemann,

1997).

e). Nutrien

Mikroalga memperoleh nutrien dari air laut yang sudah mengandung nutrien

yang cukup lengkap. Namun pertumbuhan mikroalga dalam kultur dapat

mencapai optimum dengan menambahkan nutrien yang tidak terkandung dalam

air laut tersebut. Nutrisi yang mempengaruhi pertumbuhan mikroalga terdiri

dari makro dan mikro nutrient. Untuk makro nutrient terdiri dari C, H, N, P, K,

S, Mg dan Ca, sedangkan untuk mikro nutrient antara lain Fe, Cu, Mn, Zn, Co,

Mo, Bo, Vn dan Si. Faktor pembatas untuk mikroalga adalah N dan P (Dallaire

et al., 2007).

Nutrien di dalam media kultur merupakan faktor yang tidak kalah penting

dalam mempengaruhi pertumbuhan dan kandungan nutrisi mikroalga.

Beberapa komponen yang memiliki peranan penting diantaranya: Mangan

(Mn) sebagai komponen struktural membran kloroplas dan merupakan

aktivator enzim pada reaksi terang fotosintesis (Prihatini, 2007). Magnesium

(Mg) berperan sebagai kofaktor dalam pembentukan asam amino dan klorofil,

Besi (Fe) berperan dalam sintesis klorofil dan sintesis protein-protein penyusun

kloroplas, Seng (Zn) diperlukan dalam proses pembentukan klorofil dan

mencegah kerusakan molekul klorofil (Bidwell, 1979). Secara umum

defisiensi nutrien pada mikroalga mengakibatkan penurunan protein, pigmen

 14

fotosintesis, serta kandungan produk kar karbohidrat dan lemak (Healey,

1973).

f). Aerasi

Aerasi dalam kultivasi mikroalga digunakan dalam proses pengadukan media

kultur. Pengadukan sangat penting dilakukan bertujuan untuk mencegah

terjadinya pengendapan sel, nutrien tersebar dengan baik sehingga mikroalga

dalam kultur mendapatkan nutrien yang sama, mencegah sratifikasi suhu, dan

meningkatkan pertukaran gas dari udara ke media (Taw, 1990). Komposisi

udara normal terdiri atas gas nitrogen 78,09 %, oksigen 20,95 %, dan

karbondioksida 0,93%, sementara selebihnya berupa gas argon, neon, kripton,

xenon dan helium sekitar 0,03% .

g). Cahaya

Cahaya merupakan sumber energi dalam proses fotosintesis yang berguna

untuk pembentukan senyawa karbon organik. Intensitas cahaya sangat

menentukan pertumbuhan mikroalga yaitu dilihat dari lama penyinaran dan

panjang gelombang yang digunakan untuk fotosintesis. Cahaya berperan

penting dalam pertumbuhan mikroalga, tetapi kebutuhannya bervariasi yang

disesuaikan dengan kedalaman kultur dan kepadatannya. Kedalaman dan

kepadatan kultur yang lebih tinggi menyebabkan intensitas cahaya yang

dibutuhkan tinggi. Intensitas cahaya yang terlalu tinggi dapat menyebabkan

fotoinhibisi dan pemanasan. Penggunaan lampu dalam kultur mikroalga

minimal dinyalakan 18 jam per hari, hal tersebut dilakukan sampai mikroalga

dapat tumbuh dengan konstan dan normal (Coutteau, 1996).

 15

Pada kondisi gelap, mikroalga tidak melakukan proses sintesa biomassa

melainkan mempertahankan hidupnya dengan cara melakukan respirasi

sehingga medium kultur menjadi jenuh oleh senyawa karbonat yang tidak

dimanfaatkan mikroalga. Hal ini menyebabkan pengurangan proses transfer

gas CO2 ke dalam medium kultur (Wijanarko et al., 2007). Namun pada

akhirnya antara kondisi terang maupun gelap menghasilkan produksi biomassa

yang konstan karena CTR (Carbon Transfer Rate) pada umumnya memiliki

nilai yang tinggi pada awal masa pertumbuhan dimana konsentrasi gas CO 2 di

dalam medium kultur masih di bawah ambang kejenuhan, sehingga gas CO2

lebih mudah larut dalam medium kultur. Selain itu, kenaikan jumlah sel yang

sangat besar mempertinggi penyerapan gas yang terlarut dalam bentuk HCO3-

oleh mikroalga. CTR kemudian akan cenderung menurun seiring dengan waktu

karena terjadinya ketidaksetimbangan antara peningkatan jumlah sel dengan

besarnya biofiksasi CO2 yang mengakibatkan produksi biomassa menjadi

konstan kemudian menurun.

Adanya pertumbuhan dalam kultur mikroalga ditandai dengan bertambahnya

jumlah sel mikroalga dan bertambah besarnya ukuran sel (Isnansetyo dan

Kurniastuty, 1995). Faktor pertumbuhan mikroalga mempengaruhi hasil

biomassa, maupun jenis produk yang diinginkan. Terkadang biomassa yang

sedikit menghasilkan produk yang diinginkan dalam jumlah banyak, untuk itu

diperukan optimasi komposisi yang seimbang antara banyaknya biomassa dan

banyaknya produk dalam biomassa mikroalga. Beberapa faktor penting bagi

produksi mikroalga skala massal di antaranya intensitas cahaya, suhu, media

pertumbuhan pH, dan salinitasi (Hadiyanto dan Azim, 2012). Kandungan

 16

nutrien dalam setiap jenis mikrolaga berbeda-beda. Biomassa mikroalga kaya

nutrien antara lain asam lemak omega 3 dan 6, asam amino esensial (leusin,

isoleusin, valin, dan lain-lain), dan karoten. Beberapa jenis mikroalga juga

memiliki kandungan protein yang tinggi. Asam amino pada mikroalga lebih

baik jika dibandingkan dengan sumber protein makanan yang lain (Hasanah,

2011). Selain itu jika dibandingkan dengan sumber lain seperti yeast maupun

fungi, mikroalga memiliki keunggulan di aspek keamanannya. Jika di

bandingkan dengan protein bersel tunggal yang bersumber dari mamalia,

mikroalga lebih unggul di bidang efisiensi dan kemudahan dalam produksinya

(Nur, 2014).

2.3. Potensi Mikroalga

Harun et al., (2010) memaparkan beberapa produk yang dapat dihasilkan dari

mikroalga, diantaranya :

2.3.1. Produk Pangan dan Organik

Mikroalga dapat digunakan dalam aplikasi yang lebih luas. Selain sebagai produk

pangan, mikroalga juga dapat dimanfaatkan sebagai bahan pangan, biopolimer

penghasil plastik, sebagai suplement, obat-obatan, dan keperluan medis lainnya.

a). Omega 3

Mikroalga secara alami memiliki kandungan asam lemak omega-3 sehingga

dapat dimanfaatkan untuk suplement bernilai tinggi (Handayani, 2011).

Sumber omega-3 dapat ditemui dalam bentuk eicosapentanoic acid (EPA) dan

decosahexaenoic acid (DHA). EPA secara umum digunakan untuk farmasi

 17

seperti obat migrain, jantung, asma, dan beberapa penyakit berbahaya lainnya.

Jenis mikroalga penghasil EPA sebagai contoh adalah pavlova vidiris

Nannochloropsis sp.

Sama halnya dengan EPA, DHA juga berperan penting dalam bidang medis.

Berdasarkan laporan paramedis, DHA dapat digunakan untuk melawan kanker,

AIDS, serangan jantung, menurunkan kolesterol, meningkatkan sistim imun,

dan detoksifikasi (mengeluarkan racun) dari tubuh. Mikroalga yang tumbuh di

air laut lebih dominan menghasilkan DHA. Schizochytrium mangrove,

mikroalga air laut, dapat menghasilkan DHA 33-39% dari total asam lemak.

b). Klorofil

Klorofil secara medis berfungsi sebagai penawar pada organ hati, memperbaiki

sel, dan meningkatkan haemoglobin dalam darah. Klorofil juga dapat

digunakan sebagai sumber pigmen pada kosmetik dan pangan. Salah satu

mikroalga penghasil chlorofil tertinggi adalah Chlorella sp. Mirkoalga jenis

Spirulina platensis dikenal luas sebagai suplement yang mengandung kadar

protein tinggi hingga mencapai 68% dan kandungan vitamin lain. Kandungan

protein ini lebih tinggi dari daging, kedelai, ikan, dan telur. Beberapa

mikroalga lain yang mengandung protein tinggi seperti Chlorella sp. juga dapat

digunakan sebagai pakan alami untuk beberapa jenis udang tertentu. Selain itu

mikroalga penghasil protein dapat digunakan untuk suplement pakan ternak

yang berfungsi menurunkan lemak dan menambah kadar protein pada daging.
 18

c). Karotenoid

Tabel 2. Mikroalga yang menghasilkan senyawa karotenoid.

Karotenoid Fungsi Species

mikroalga
Beta a. Nutrisi esensial yang diubah tubuh Dunaliella salina,
karotein menjadi vitamin A Scenedesmus
b. Antioksidan lemah, tapi efektif dalam almeriensis,
menghambat oksigen tunggal. Soelastrella
c. Menstimulasi enzim-enzim untuk striolata.
memperbaiki DNA yang rusak
d. Meningkatkan aktivitas sel-sel imun
e. Melindungi kornea mata dari sinar UV
Lutein a. Pigmentasi warna kuning dan hijau pada Hematococcus
berbagai jenis makanan pluvialis,
b. Bersama dengan zeaxantin merupakan Chlorella
penyusun setengah karotenoid dalam sorokiniana
retina mata
c. Melindungi mata dari degenerasi dan
katarak
d. Dapat berperan melawan kanker kolon
Zeaxanthin a. Bersama lutein merupakan karotenoid Scenedesmus
satu-satunya dalam makula mata almerientis
b. Menyerap sinar biru yang membahayakan
tubuh
c. Melindungi mata dari degenerasi dan
katarak
Sumber : Guedes et al., (2011)

2.3.2. Mikroalga sebagai Sumber Pakan Alami

Mikroalga merupakan sumber pakan alami yang populer bagi peternak unggas,
 19

pem budidaya ikan, dan sapi. Beberapa jenis mikroalga dapat dimanfaatkan

sebagai suplemen yang dicampurkan pada pelet atau makanan ternak lainnya.

Kulpys et al., (2009) melakukan penelitian tentang pengaruh penambahan

Spirulina platensis terhadap produktivitas dan kandungan susu sapi. Selama 90

hari dilakukan uji coba penambahan Spirulina dengan dosis 200 gram diperoleh

hasil sapi menjadi lebih gemuk 8.5-11%, dengan produktivitas susu 29

kg/ hari tanpa penambahan alga, menjadi 36 lt/hari. Selain itu Mikroalga juga

dapat digunakan sebagai suplemen bagi hewan peliharaan. Seperti yang

diinformasikan dalam situs Spirulinasource.com, Spirulina platensis dapat

digunakan untuk beberapa hewan peliharaan seperti pada Tabel 3.

Tabel 3. Manfaat Spirulina untuk beberapa jenis hewan peliharaan.

Hewan Peliharaan Manfaat

Burung Meningkatkan kualitas bulu, warna bulu,fertilitas,
meningkatkan sistem imunitas
Kucing Menyehatkan kulit, mencegah penyakit
kanker dan infeksi viral
Anjing Menyehatkan kulit, mencegah penyakit
dermatitis, meningkatkan daya tubuh
Unggas Menurunkan resiko kematian

2.4. Jenis-jenis Mikroalga

2.4.1. Spirulina sp.

Salah satu jenis mikroalga yang memiliki rentang hidup yang luas di media

tumbuhnya adalah Spirulina platensis (Khoirunisa et al., 2012). Spirulina sp.

merupakan mikroalga bersifat multiseluler yang termasuk dalam golongan

 20

cyanobacterium mikroskopik berfilamen, Spirulina platensis di bawah mikroskop

tampak seperti benang tipis (filamen) yang berbentuk spiral. Filamen ini

merupakan koloni sel yang dapat bersifat motil. Filamen bersel banyak memiliki

ukuran panjang 200-300 dan lebar 5-70 mikron. Suatu filament dengan 7 spiral

akan mencapai ukuran 1000 mikron dan berisi 250-400 sel (Phang, 2002).

Spirulina sp. adalah makhluk hidup autotroph berwarna kehijauan, kebiruan,

dengan sel berkolom membentuk filament terpilin menyerupai spiral (helix)

sehingga disebut juga dengan alga biru hijau berfilamen (cyanobacteria)

(Hariyati, 2008).

Spirulina sp. memiliki dinding sel yang tipis dengan garis tengah sel berkisar 1-12

mikron. Spirulina sp. bergerak dengan cara menggelinding sepanjang garis tengah

selnya. Spirulina sp. merupakan mikroorganisme yang berkembang biak dengan

cara membelah diri. Spirulina sp. merupakan salah satu jenis mikroalga yang

sangat berpotensi sebagai sumber pangan karena 1 are (0,4646 hektar) Spirulina

sp. dapat menghasilkan protein 20 kali lebih baik dari 1 are kedelai atau jagung

dan 200 kali lebih baik daripada daging sapi (Spolaore et al., 2006). Spirulina sp.

dapat tumbuh dengan baik di danau, air tawar, air laut, dan media tanah.

Mikroalga jenis ini termasuk mikroalga yang mudah untuk dibudidayakan, karena

budidayanya dapat dilakukan di dalam maupun di luar ruangan.

Klasifikasi Spirulina sp menurut Bold dan Wynne (1985) adalah sebagai berikut:

Divisi : Cyanophyta
Kelas : Cyanophyceae
Famili : Oscillatoriaceae
Genus : Spirulina
Spesies : Spirulina sp.
 21

Gambar 2. Spirulina sp. (Sciento, 2008).

Keunggulan dari Spirulina sp. adalah kandungan nutrisi yang baik antara lain 60–

70% protein, 13,5% karbohidrat, 4-7% lemak dan asam lemak (linolenic acid dan

γ-linolenic acid), asam amino esensial (leusin, isoleusin, valine), pigmen (klorofil,

fikosianin dan karotenoid) dan juga mengandung vitamin seperti provitamin A,

vitamin B12 serta β-caroten (Koru, 2012). Menurut Riyono (2008) menyatakan

bahwa Spirulina sp. memiliki banyak manfaat dan juga keistimewaan. Keistimewaan

yang dimiliki Spirulina diantaranya adalah sebagai sumber protein nabati 100%

bersifat alkali, dengan dinding sel yang lunak sehingga sangat mudah dicerna dan

diserap oleh tubuh. Protein Spirulina sp. 90% dapat dicerna karena mengandung

enzim yang membantu dalam proses pencernaan.

Selain kandungan protein yang cukup tinggi, Spirulina sp. memiliki beberapa

keunggulan dibanding mikroalga jenis lain yaitu relatif cepat berproduksi serta

biomassa yang dihasilkan mudah dalam pemanenan. Hal ini disebabkan karena

ukuran biomassa Spirulina sp. lebih besar sehingga dapat dipisahkan dari media

melalui filtrasi menggunakan filter berukuran 20 μm. Spirulina sp. mudah dicerna

karena lapisannya berupa membran tipis bukan seperti selulosa yang sulit dicerna.

Membran tersebut merupakan gugus gula yang mudah dicerna dan diserap
 22

(Desmorieux dan Decaen, 2006).

Secara umum, Spirulina sp. dapat tumbuh dengan baik pada kisaran pH 8-11,

dengan intensitas cahaya 2000-3500 lux. Periode penyinaran yang umum

digunakan adalah 12 jam, walaupun beberapa peneliti menyatakan bahwa

pertumbuhan terbaik diperoleh pada periode penyinaran 16 jam dengan waktu

gelap 8 jam pada intensitas cahaya 2000 ± 200 lux, temperatur 30 ± 1°C dan pH

9.1 (Santosa dan Limantara, 2007). Suhu terendah untuk Spirulina platensis

untuk hidup adalah 15°C pertumbuhan yang optimal adalah 35- 40°C

(Chritwardana et al., 2013). Salinitas yang optimal untuk pertumbuhan Spirulina

sp. berkisar antara 20 - 30 ppt (Wicaksono et al., 2014). Salinitas akan

mempengaruhi tekanan osmosis antara sel dan medium serta laju disosiasi

senyawa organik nutrien alga. Bila salinitas terlalu tinggi akan mengakibatkan

media pemeliharaan bersifat hipertonis terhadap sel dan mengakibatkan kurang

baiknya penyerapan nutrien oleh sel. Ketersediaan nutrisi yang memadai dan

sinar matahari yang cukup juga merupakan faktor penting yang mendukung

pertumbuhan mikroalga ini.

Berdasarkan penelitian Amanantin (2013) Spirulina sp. yang ditumbuhkan pada

media ekstrak tauge (MET) 4% dan Urea 100 ppm menunjukkan kadar protein

yang tertinggi sebesar 20,99%, dengan menggunakan suhu 200C-260C, salinitas

20-27 ppt, dan pH 7-8. Berdasarkan penelitian Nawansih et al., (2015) dari 3

jenis mikroalga yang dicoba Spirulina sp., Dunaliella sp., Tetraselmis sp. yang

paling berpotensi dalam menghasilkan biomassa sebagai sumber protein pada

media limbah cair karet remah serta dapat menurunkan cemaran adalah Spirulina
 23

sp. Kepadatan sel setelah 7 hari kultivasi mencapai 3878 x 104 sel/mL,

menghasilkan biomassa sebesar 1,7282 g/L bk dengan kadar protein 12,13 %,

serta mampu menurunkan beban cemaran N-NH3 sebesar 94% dan P-PO4 sebesar

71%.

2.4.2. Nannochloropsis sp.

Klasifikasi Nannochloropsis sp. menurut Adehoog dan Simon (2001) sebagai

berikut:

Regnum : Protista
Divisio : Chromophyta
Classis : Eustigmatophyceae
Ordo : Eustigmatales
Familia : Monodopsidaceae
Genus : Nannochloropsis
Spesies : Nannochloropsis

Gambar 3. Nannochloropsis sp. (CSIRO, 2009).

Nannochloropsis sp. merupakan salah satu pakan alami (livefood) untuk larva ikan

atau udang dan juga berperan sebagai pakan dari zooplankton, rotifer dan artemia

(Sasmita, 2004). Nannchloropsis sp. memiliki kandungan lemak yang cukup tinggi

(31-68%), sedangkan Isochrysis (17,07%) dan Dunaliella hanya (6%) (Erlania,

2010). Kandungan lemak mikroalga tergantung dari jenis mikroalga, rata-rata

 24

pertumbuhan dan kondisi kultur mikroalga. Nannochloropsis sp. merupakan

mikroalga berwarna kehijauan, selnya berbentuk bola, berukuran kecil dengan

diamater 2-4 μm, memiliki 2 flagel dengan salah satu flagelnya berambut tipis.

Ciri khas dari Nannochloropsis sp. adalah memiliki dinding sel yang terbuat dari

komponen selulosa (Fachrullah, 2011). Nannochloropsis sp. memiliki dinding sel,

mitokondria, kloroplas dan nukleus yang dilapisi membran. Kloroplas berbentuk

seperti lonceng yang terletak di tepi sel dan memiliki stigma (bintik mata) yang

bersifat sensitif terhadap cahaya. Nannochloropsis sp. dapat berfotosintesis karena

memiliki klorofil a dan c.

Gambar 4. Morfologi sel Nannochloropsis sp.

(Adehoog dan Simon, 2001).

Nannochloropsis sp. bersifat kosmopolit, dapat ditemukan hampir di semua jenis

perairan baik laut maupun tawar. Nannochloropsis sp. dapat tumbuh pada salinitas 0-

35 ppt. Salinitas optimum untuk pertumbuhannya adalah 25-35 ppt, suhu 25-30oC

dan tumbuh baik pada kisaran pH 8-9,5 (Fachrullah, 2011). Perubahan salinitas dan

CO2 pada tahap kedua dapat meningkatkan kepadatan dan mengubah kandungan

lipid. Menurut Wahyuni et al., (2001), bahwa sel Nannochloropsis sp. tumbuh
 25

dengan baik dengan pH 7-9 dengan kekuatan cahaya 5000-200.000 lux sesuai dengan

volume budidaya suhu 23-36oC. Nannochloropsis sp. membutuhkan cahaya untuk

berfotosintesis. Kurangnya cahaya yang dibutuhkan untuk aktifitas fotosintesis akan

menyebabkan proses fotosintesis tidak berlangsung normal sehingga mengganggu

metabolisme selanjutnya. Nannochloropsis sp. bereproduksi secara aseksual dengan

cara membelah diri dan membentuk autospora. Setiap sel yang sudah masak akan

membelah diri dan menghasilkan dua dan empat autospora. Autospora adalah spora

non flagela yang bentuknya menyerupai sel induknya, tetapi mempunyai ukuran

tubuh lebih kecil. Autospora yang telah dihasilkan dibebaskan dari sel induk melalui

penghancuran dinding sel dewasa dan berkembang hingga mencapai ukuran sel

induknya (Barsanti dan Gualtieri, 2006).

Nannochloropsis sp. mempunyai peranan penting dalam suatu kegiatan

pembenihan karena kandungan nutrisinya yang tinggi. Komposisi kandungan

Nannochloropsis sp. adalah Nannochloropsis sp. memiliki sejumlah kandungan

gizi dan pigmen seperti protein (52,11 %), karbohidrat (16 %), lemak (27,64 %),

vitamin C (0,85 %) dan klorofil A (0,89 %) (Anon et al., 2009). Nannochloropsis

sp. memiliki kandungan minyak mentah yang cukup tinggi yaitu maksimal

mencapai 68 % (Susilaningsih et al., 2009). Nannochloropsis sp. mengandung

vitamin B12 dan Eicosapentaenoic acid (EPA) masing – masing 30,5 % dan total

kandungan omega 3 Higly unsaturated Fatty acids (HUFA) sebesar 42,7 %.

Komposisi asam lemak pada Nannochloropsis sp. lebih tinggi dibandingkan jenis

mikroalga yang lain (Fulks dan Main 1991). Nannochloropsis sp. juga

mengandung komponen antioksidan yang tinggi seperti karotenoid, astaxanthin,

kantaxanthin, flavoxanthin, loraxanthin, neoxanthin dan sebagian fenolik.

 26

Berdasarkan penelitian Hadi et al ., (2015) diketahui bahwa media limbah cair

karet 40% merupakan media yang efektif untuk meningkatkan biomassa protein

Nannochloropsis oculata dengan keadaan pH media kisaran 6-8, salinitas media

antara 17-20 ppt dan suhu ruang kultur antara 19-24 oC merupakan keadaan

lingkungan yang efektif bagi N. oculata untuk menghasilkan biomassa protein sel

secara lebih optimal yaitu sebesar 30,17%. Sedangkan Konsentrasi media limbah

cair karet 20% merupakan konsentrasi yang tepat untuk meningkatkan kepadatan

sel N. oculata secara lebih optimal 112, 97 x 108 sel/mL.

2.4.3. Chlorella sp.

Klasifikasi Chlorella sp. menurut Bold dan Wynne (1985) dan Vashista (1999)

dalam Prabowo (2009) adalah sebagai berikut :

Divisi : Chlorophyta
Kelas : Chlorophyceae
Ordo : Chlorococcales
Family : Oocystaceae
Genus : Chlorella
Spesies : Chlorella sp.

Gambar 5. Chlorella sp. (Dewi, 2015)

 27

Chlorella berasal dari bahasa latin yaitu “Chloros” yang berarti hijau dan “ella”

yang berarti kecil. Chlorella sp. merupakan pakan dasar biota yang ada diperairan

termasuk ikan. Chlorella sp. merupakan produsen dalam rantai makanan makhluk

hidup yang kaya akan gizi (Merizawati, 2008). Chlorella sp. merupakan

kelompok organisme protista autrotof, yakni protista yang mampu membuat

makanannya sendiri. Karakeristik ini dimiliki Chlorella sp. karena organisme ini

mempunyai pigmen klorofil, sehingga dapat melakukan fotosintesis. Warna hijau

pada alga ini disebabkan selnya mengandung klorofil a dan klorofil b dalam

jumlah yang besar selain itu juga mengandung karoten dan xantofil (Volesky,

1970 dalam Rostini 2007). Chlorella sp. memiliki kelebihan untuk tumbuh atau

berkembang biak dengan cepat. Hal ini juga yang menjadi penyebab mengapa

Chlorella sp. menjadi mikroalga hijau yang saat ini banyak diteliti. Chlorella sp.

yang paling sering dikembangkan dan digunakan dalam penelitian adalah

Chlorella vulgaris dan Chlorella pyrenoidosa.

Chlorella sp. termasuk salah satu kelompok alga hijau yang paling banyak

jumlahnya diantara alga hijau lainnya, 90 % Chlorella sp. hidup diair tawar dan

10 % Chlorella sp. hidup di air laut. Chlorella sp. termasuk dalam divisi

chlorophyta. Perkembangan Chlorella sp. terjadi secara vegetatif. Masing-

masing sel induk membelah menghasilkan 4,8 atau 16 sel yang dibebaskan

bersama dengan pecahnya sel induk. Perkembangbiakan sel ini diawali dengan

pertumbuhan sel yang besar. Periode selanjutnya terjadinya peningkatan

aktivitas sintesa sebagai bagian dari persiapan pembentukan autospora yang

merupakan tingkat pemasakan akhir yang akan disusul oleh pelepasan autospora.

Kebanyakan spesies Chlorella mampu tumbuh menggunakan fotosintetik atau

 28

pada kondisi dimana tidak terdapat cahaya dengan mengambil bahan organik

secara langsung dari mediumnya (Yani dan Yosar, 2009).

Isnansetyo dan Kurniastuty (1995) mengungkapkan bahwa Chlorella sp.

merupakan alga bersel tunggal (unicelluler). Bentuk sel Chlorella sp. bulat atau

bulat telur dan di dalamnya terdapat protoplasma yang berbentuk cawan, tidak

mempunyai flagella sehingga tidak dapat bergerak aktif, diameter selnya berkisar

antara 2-8 mikron, dinding selnya keras terdiri atas selulosa dan pektin. Menurut

Isnansetyo dan Kurniastututy (1995) Chlorella sp. tumbuh optimal pada salinitas

25-34 ppt sementara pada salinitas 15 ppt tumbuh lambat dan tidak tumbuh pada

salinitas 0 ppt dan 60 ppt. Suhu optimum untuk pertumbuhannya adalah 25-300C.

pH yang sesuai untuk perkembangbiakan Chlorella berkisar antara 4,5-9,3 dan

kisaran optimum untuk Chlorella laut berkisar antara 7,8-8,5. Chlorella sp.

memiliki kandungan minyak sebesar 28-32%, karbohidrat 12-17%, lemak 14-

22%, asam nukleat 4-5% dan protein 51–58% (Rachmaniah et al., 2010).

Berdasarkan penelitian Dedi et al., (2010) menyatakan bahwa mikroalga

Chlorella sp. yang dibudidaya pada media limbah cair karet dengan konsentrasi

15% mampu menghasilkan biomassa dan kepadatan sel tertinggi sebesar 3,7256 x

106 (sel/mL). Chrismadha et al., (2006) dalam Ernest (2012) menyatakan bahwa

kandungan protein dan klorofil mikroalga yang dikultur dapat dipengaruhi oleh

persentasi nitrogen dalam media. Berdasarkan hasil penelitian Tetelepta (2011)

menyatakan bahwa Chlorella sp. yang dikultur pada media walne pada kepadatan

inokulum 105 sel/mL, 106 sel/mL dan 107 sel/mL memberikan hasil yang berbeda

dan kepadatan inokulum 105 sel/mL yang merupakan kepadatan inokulum untuk
 29

kultur Chlorella sp. dengan kepadatan 9,21 x 107 sel/mL dengan suhu 260C, pH

8,5, dan salinitas 30 ppt.

2.5. Teknik Kultivasi Mikroalga

Kultivasi merupakan suatu teknik untuk menumbuhkan mikroalga dalam

lingkungan tertentu yang terkontrol. Kultivasi bertujuan untuk menyediakan

spesies tunggal pada kultur masal mikroalga untuk tahap pemanenan. Mikroalga

dapat tumbuh dengan sangat cepat pada kondisi iklim yang tepat. Sebagian besar

mikroalga menggunakan cahaya dan karbondioksida (CO2) sebagai sumber energi

dan sumber karbon (organisme photoautotrophic). Pertumbuhan optimum

mikroalga membutuhkan temperatur air berkisar 15 - 30˚C. Media pertumbuhan

juga harus mengandung elemen inorganik yang berfungsi dalam pembentukan sel,

seperti nitrogen, phospor, dan besi. Faktor-faktor yang mempengaruhi

pertumbuhan mikroalga, diantaranya faktor abiotik (cahaya matahari, temperatur,

nutrisi, O2, CO2, pH, salinitas), faktor biotik (bakteri, jamur, virus, dan kompetisi

dengan mikroalga lain), serta faktor teknik (cara pemanenan, dan lain - lain)

(Harun et al., 2010).

Terdapat dua proses yang paling menentukan dalam proses bioteknologi

mikroalga yaitu kultivasi serta pemanenan mikroalga. Mikroalga biasanya

dikultivasi di sistem terbuka (open ponds system) dan tertutup (closed

photobioreactors) dengan diiluminasi baik dengan cahaya buatan ataupun cahaya

matahari dengan tempartur 27- 30oC dan pH 6,5 - 8. Open ponds merupakan

sistem kultivasi mikroalga yang paling lama digunakan. Open ponds dapat

dikategorikan kedalam kolam yang menggunakan air alam seperti air danau, air
 30

tambak atau air kolam. Keuntungan dari open pond ini adalah mudah untuk

dibuat, dan lebih murah dikarenakan hanya menggunakan sinar matahari untuk

sistem fotosintesisnya dan tidak memerlukan banyak alat. Sebaliknya, kelemahan

dari sistem Open ponds ini merupakan sistem kolam terbuka dimana mediadapat

mengalami evaporasi akut, penggunaan karbondioksida (CO2) menjadi tidak

efisien, mudah terkena kontaminan dan untuk sistem Open ponds dengan volume

kultur yang besar, sinar matahari tidak dapat sepenuhnya diserap oleh mikroalga

di dasar kolam (Ugwu et al., 2007).

Sistem Open ponds ini sering dioperasikan secara kontinyu dimana umpan segar

(mengandung nutrisi termasuk nitrogen, phosphor, dan garam inorganic)

ditambahkan di depan paddlew heel dan setelah beredar melalui loop-loop

mikroalga tersebut dapat dipanen di bagian belakang dari paddlewheel.

Paddlewheel digunakan untuk proses sirkulasi dan proses pencampuran

mikroalgadengan nutrisi.

Gambar 6. Teknik budidaya mikroalga open raceway ponds (Chisti, 2007).

Sistem photobioreactor dikembangkan untuk mengatasi permasalahan

kontaminasi dan evaporasi yang sering terjadi dalam sistem open pond.
 31

Photobioreactor memiliki rasio luas permukaan dan volume yang besar.

Produktivitas mikroalga menggunakan photobioreactor dapat mencapai 13 kali

lipat total produksi dengan menggunakan sistem open raceway pond (Molina et

al., 1999). Dalam sistem photobioreactor kontaminan dan parameter

pertumbuhan seperti pH, temperatur dan karbondioksida dapat dikontrol dengan

baik. Walaupun demikian, sistem photobioreactor memerlukan biaya tinggi

sehingga pengetahuan dalam pemilihan sistem kultivasi mikroalga sangat

diperlukan.

Gambar 7. Teknik budidaya mikroalga photobioreactor (Chisti, 2007).

2.6. Limbah Cair Industri Karet Remah

Perkembangan industri karet memberikan dampak yang positif sebagai salah satu

agroindustri potensial sebagai penghasil devisa negara. Namun dalam proses

pengolahan karet olahan seperti karet remah menghasilkan limbah cair yang

bersumber dari tahap koagulasi, penggilingan dan pencucian. Limbah tersebut

mengandung bahan organik yang berasal dari serum dan partikel karet yang

belum terkoagulasi ( Utomo et al., 2012 ). Limbah cair yang dihasilkan dari

industri karet alam berkisar 5,2 – 13,4 m3/ton produk kering dengan kapasitas
 32

produksi 450 – 2.600 kg/hari sehingga effluent limbah yang dihasilkan oleh suatu

pabrik bisa lebih dari 35 m3/hari sehingga membutuhkan air dalam jumlah yang

sangat besar (Tekasakul dan Tekasakul, 2006).

Agroindustri karet remah (crumb rubber) menggunakan air dalam jumlah yang

cukup banyak yaitu 25-40 m3/ton karet kering (Maspanger dan Honggokusumo,

2004) sehingga volume limbah cair yang dihasilkan cukup tinggi yaitu 25 m3/ton

karct kering, dengan kandungan bahan organik yang cukup tinggi terutama

karbon, nitrogen, dan fosfor. Limbah cair industri karet remah berwarna putih

keruh, mengandung padatan tersuspensi, terlarut maupun mengendap. Limbah

cair ini bersifat asam dengan nilai pH berkisar 4,2-6,3 dikarenakan penggunaan

asam formiat pada proses koagulasi lateks (Wulan, 2015). Air limbah pabrik

karet remah berbahan baku lateks kebun memiliki nilai COD berkisar antara

3.000 - 5.000 mg/L dan BOD 2.300- 2.700 mg/L dengan rasio COD:BOD sekitar

1,5 sehingga tergolong limbah yang mudah terurai secara biologis. Selain itu, air

limbah pabrik karet berbahan baku lateks kebun mengandung senyawa nitrogen

sebesar 100-300 mg/L N-NH3 dan fosfor sebesar 20 mg/L P-PO4 (Utomo, 2012).

Karakteristik effluent limbah pengolahan karet alam memiliki nilai COD 120 –

15069 mg/L; BOD 40 – 9433 mg/L; TSS 30 – 525 mg/L; N-Amoniak 30,3 - 110

mg/L; dan pH 6,6- 9,4 (Hien dan Thao, 2012). Limbah cair tersebut jika dibuang

ke lingkungan akan mencemari lingkungan karena kandungan zat pencemar

limbah cair karet berada diatas baku mutu. Menurut Peraturan Menteri

Lingkungan Hidup No 5 tahun 2014, batas maksimum zat pencemar industri karet

adalah BOD5 100 mg/L, COD 250 mg/L, TSS 100 mg/l dan pH 6-9. Dengan
 33

tingginya kandungan organik dalam limbah cair karet, maka diperlukan

penanganan maupun pengolahan yang tepat agar tidak menimbulkan dampak

negatif bagi lingkungan. Metode pengolahan limbah cair yang umum diterapkan

oleh industri karet adalah sistem kolam. Cara tersebut cukup efektif menurunkan

bahan organik, namun karena limbah cair industri karet kaya akan N dan P maka

ada peluang effluent masih mengandung N dan P yang melebihi baku mutu

sehingga berpotensi menyebabkan eutrofikasi. Selain menurunkan cemaran

organik, sistem tersebut tidak menghasilkan manfaat lain. Koagulasi dan flokulasi

merupakan metode yang paling memungkinkan untuk diterapkan pada pengolahan

limbah cair karet karena sederhana, ekonomis dan efektif (Tzoupanos, 2008).

Limbah cair karet dengan kandungan nitrogen lebih dari 4.000 ppm dan unsur

lainnya merupakan modal dasar yang dapat dijadikan sebagai media kultur dan

budidaya mikroalga (Dedi et al., 2010). Berdasarkan penelitian Pratama (2016)

media limbah cair industri karet remah dari outlet kolam Fakultatif II + NaCl

sampai salinitasnya mencapai 30 ppt paling efektif dalam meningkatkan produksi

biomassa Tetraselmis sp. yaitu sebesar 105% dengan perolehan biomassa kering

Tetraselmis sp. sebesar 0.6250 g/L dan tingkat kepadatan sel Tetraselmis sp.

paling tinggi yaitu mencapai 120 x 104 sel/mL serta mampu menurunkan

kandungan N-total sebesar 72,2% dan P-PO4 sebesar 87,6%. Berdasarkan hasil

penelitian Nawansih et al., (2016) juga membuktikan tanpa penambahan

nitrogen, limbah cair dari kolam fakultatif 2 sudah sesuai untuk pertumbuhan

mikroalga. Limbah cair industri karet mempunyai salinitas yang rendah (nol),

peningkatan salinitasnya sampai 30 ppt efektif meningkatkan pertumbuhan

mikroalga.
 34

Beberapa jenis mikroalga yang sudah berhasil dikultivasi pada limbah cair

industri karet remah adalah Chlorella (Sriharti, 2014 ), Chlorella pyrenoidosa

(Zulfarina et al., 2013), Botryococcus braunii, Spirulina sp., Tetraselmis sp. dan

Nannochloropsis sp. ( Nawansih et al., 2015 ). Menurut hasil penelitian Zulfarina

et al., (2013) dan Sriharti (2004) menunjukkan bahwa jenis mikroalga Chlorella

pyrenoidosa dan Chlorella sp. dapat menurunkan kadar pencemar (COD) 52,6

dan 96,7 % pada limbah cair karet setelah dikultivasi selama 15 hari. Chlorella

vulgaris yang dikultivasi pada media limbah cair karet selama 7 hari pada

bioreaktor closed pond dengan penambahan pupuk NPK dapat menurunkan beban

N-NH3 99,3%, COD 40%, Fe 75,5%, Ca 93,4% dan Mg 36,6%, (Yulita, 2014).

Berdasarkan penelitian Nawansih et al., 2015 jenis mikroalga Spirulina sp.

Dunaliella sp. Tetraselmis sp. yang paling berpotensi dalam menghasilkan

biomassa sebagai sumber protein pada media limbah cair karet remah serta dapat

menurunkan cemaran adalah Spirulina sp. Kepadatan sel setelah 7 hari kultivasi

mencapai 3878 x 104 sel/mL, menghasilkan biomassa sebesar 1,7282 g/L bk

dengan kadar protein 12,13 %, serta mampu menurunkan beban cemaran N-NH3

sebesar 94% dan P-PO4 sebesar 71%.

 III. BAHAN DAN METODE

3.1. Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan April - Juli 2018 di Green House, Rumput

Laut & Laboratorium Fitoplankton, Laboratorium Kualitas Air Balai Besar

Perikanan Budidaya Laut Lampung, Laboratorium Teknologi Hasil Pertanian

Program Studi Teknologi Pangan Jurusan Teknologi Pertanian Politeknik Negeri

Lampung, dan Laboratorium Pengelolaan Limbah Agroindustri Jurusan Teknologi

Hasil Pertanian Fakultas Pertanian Universitas Lampung.

3.2. Alat dan Bahan

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini yaitu reaktor terbuka yang terbuat

dari fiberglass ukuran (35x14x19) cm dengan volume kerja 5 L yang dilengkapi

dengan selang aerasi dan lampu TL 40 Watt, dan seperangkat alat untuk analisis

meliputi pH meter, DO meter, refraktometer, haemacytometer, hand counter,

sedgwick rafter colony counter, mikroskop, HACH spektrofotometer, DRB 200,

vial HACH, derigen, gelas ukur, erlenmeyer, labu Kjeldahl, labu takar, buret

pyrex, statif, klem, rubber bulb, cuvet, cawan porselin, pipet mikro, pipet tetes,

pengaduk, spatula, oven, desikator, neraca analitik, alumunium foil, dan kain

plankton net.

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah limbah cair karet yang diambil
 36

dari IPAL PTPN VII Unit Usaha Way Berulu berupa air limbah dari outlet kolam

Fakultatif II, kultur alga murni Spirulina sp., Nannochloropsis sp. yang diperoleh

dari koleksi Balai Besar Perikanan Budidaya Laut (BBPBL) Lampung dan

Chlorella sp. yang diperoleh dari koleksi Balai Besar Perikanan Budidaya Laut

(BBPBL) Jepara, aquades, sodium arsenit,brucine, larutan oksidator, larutan fenol,

larutan H3PO4, larutan asam sulfat (H2SO4), NH4Cl, NaOH, SnCl2, ammonium

molibdat, K2Cr2O7, HgSO4, pupuk conwy, dan natrium klorida (NaCl) merk

rafina.

3.3 Metode Penelitian

Penelitian ini dilakukan dengan 3 perlakuan jenis mikroalga yaitu Spirulina sp.,

Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp. yang dikultivasikan kedalam media limbah

cair karet dari outlet kolam Fakultatif II yang telah di atur salinitasnya 30 ppt

selama 7 hari dalam reaktor terbuka volume 5 liter. Tahap kultivasi dilakukan

dengan mempersiapkan bibit mikroalga sebanyak 25% v/v kerja pada media

limbah cair karet (Kawaroe et al., 2012). Setiap perlakuan diulang sebanyak tiga

kali sehingga menghasilkan 3x3= 9 satuan percobaan. Pemanenan dilakukan

dengan cara flokulasi (Pengendapan) menggunakan flokulan NaOH. Pengamatan

yang dilakukan setiap hari yaitu pengamatan kepadatan sel mikroalga, sedangkan

pengamatan COD, DO, pH, P-PO4, N-total, salinitas, dilakukan diawal dan

diakhir kultivasi serta pengamatan biomassa kering dan kadar proksimat (kadar

protein, kadar abu, kadar air, dan kadar lemak) dilakukan diakhir kultivasi. Data

yang diperoleh disajikan dalam bentuk tabel dan grafik serta dianalisis secara

deskriptif.
 37

3.4. Pelaksanaan Penelitian

Prosedur pada penelitian ini sebagai berikut :

Bibit Spirulina sp., Nannochloropsis sp.

dan Chlorella sp.

Pupuk Conwy Kultivasi 1/3 bibit mikroalga di media air

1 mL/L laut volume 1000 mL Analisis:
COD
Kultivasi 1/3 bibit mikroalga di media air laut dan DO
pH
LCKR 25% volume 2000 mL P-PO4
N-total
Kultivasi 1/3 bibit mikroalga di media air laut dan LCKR 50% Salinitas
volume 6000 mL

Persiapan media limbah cair karet remah dari oulet kolam

Fakultatif II sebanyak 5 L dengan penambahan NaCL dan
pengaturan salinitas 30 ppt

Pengamatan :
Kultivasi pada limbah cair karet fakultatif II 3750 mL dengan
Kepadatan sel
penambahan 1250 mL (25%) alga v/v selama 7 hari

Pemanenan mikroalga dengan NaOH ( 1 L mikroalga : 0,2 g NaOH )

Pengadukan cepat selama 1 menit dilanjutkan pengadukan lambat

selama 15 menit

Pengendapan selama 1 jam

Analisis:
COD Penyaringan dengan kain plankton net
DO
pH
Pengamatan:
P-PO4
N-total Berat Kering
Filtrat Biomassa
Salinitas Kadar Proksimat

Gambar 8. Diagram alir perolehan biomassa (Wulan, 2015) dimodifikasi

 38

3.4.1. Pembiakan Kultur Murni

Pembiakan kultur dilakukan secara bertahap dari volume kecil ke volume yang

lebih besar (Amini dan Susilowati, 2010). Kultur awal dikultivasikan secara

indoor pada media kultur dengan penambahan pupuk Conwy sebanyak 1 mL/1 L

air laut steril. Pembiakan indoor dilakukan dengan memasukkan 1/3 bagian bibit

mikroalga kedalam erlenmeyer dengan volume media kultur 100 – 300 mL.

Selanjutnya apabila kepadatan mikroalga telah mencapai maksimal , kultur dapat

dipindahkan dalam media dengan volume lebih besar (500–1000 mL). Setelah

satu minggu kultur dapat dipindahkan ke volume yang lebih besar lagi (6000 mL).

3.4.2. Persiapan Media

Media yang digunakan untuk kultivasi mikroalga adalah limbah cair industri karet

remah berbahan baku lateks kebun dari outlet kolam Fakultatif II PTPN VII

(Persero) UnitWay Berulu yang dimasukan kedalam reaktor terbuka volume kerja

5 liter yang dilengkapi aerator. Aerator berfungsi untuk menjamin pasokan CO2

dalam media, mencegah pengendapan sel supaya mikroalga tetap tersuspensi dan

menstabilkan pH dalam media. Sebelum digunakan sebagai media kultivasi

mikroalga limbah cair karet dianalisis untuk mengetahui nilai awal dari, N-total,

P-PO4, pH, kandungan Chemical Oxygen Demand (COD), dan Dissolved Oxygen

(DO) dan salinitas.

3.4.3. Kultivasi Mikroalga

Pelaksanaan kultivasi mikroalga dalam media limbah cair karet menggunakann

metode Karawoe et al.,(2012) dengan sistem kolam terbuka atau Open pond
 39

system (reaktor volume 5 L). Kultivasi dilakukan dengan memasukkan inokulum

mikroalga hasil dari perbanyakan dengan konsentrasi mikroalga 25% % v/v (1250

mL) dimasukan dalam media limbah cair karet sebanyak 3750 mL. Kultivasi

dilakukan selama 7 hari dengan dilakukan sirkulasi menggunakan selang aerasi

sebagai sumber O2/CO2 dan sekaligus berfungsi sebagai pengaduk (sirkulasi) air

media pertumbuhan. Sebagai sumber cahaya dalam pemeliharaan mikroalga

dilakukan penyinaran dengan bantuan lampu TL 40 Watt. Pengukuran kepadatan

sel dilakukan setiap hari. Setelah 7 hari kultivasi, mikroalga dipanen untuk

menghasilkan biomassa basah maupun kering.

3.4.4. Pemanenan Mikroalga

Pemanenan dilakukan dengan cara flokulasi menggunakan NaOH (1 L mikroalga:

0,2 g NaOH (Hidayati et al., 2015). Setelah ditambahkan flokulan NaOH,

dilakukan pengadukan cepat selama 1 menit, dilanjutkan pengadukan lambat

selama 15 menit secara manual menggunakan pengaduk kaca. Proses

pengendapan dilakukan selama 1 jam setelah pengadukan selesai agar biomassa

mikroalga terendapkan secara optimal. Pemanenan dilakukan dengan cara

flokulasi menggunakan NaOH (1 L mikroalga: 0,2 g NaOH). Setelah

ditambahkan flokulan NaOH, dilakukan pengadukan cepat selama 1 menit,

dilanjutkan pengadukan lambat selama 15 menit secara manual menggunakan

pengaduk kaca. Proses pengendapan dilakukan selama 1 jam setelah pengadukan

selesai agar biomassa mikroalga terendapkan secara optimal. Setelah itu,

dilakukan penyaringan dengan menggunakan plankton net. Setelah semua yeild

tertampung pada plankton net, yeild dikeringkan menggunakan oven pada suhu
 40

105oC hingga berat konstan, selanjutnya akan dianalisis lebih lanjut meliputi

penimbangan biomassa kering (Kawaroe et al, 2012).

3.5. Pengamatan

Pengamatan yang dilakukan terbagi menjadi beberapa waktu. Pengamatan yang

dilakukan setiap hari yaitu pengamatan kepadatan sel mikroalga, sedangkan

pengamatan COD (Chemical Oxygen Demand), DO (Dissolved Oxygen), pH, P-

PO4, N-total, dan salinitas dilakukan diawal dan diakhir kultivasi serta

pengamatan biomassa kering dan kadar proksimat (kadar protein, kadar lemak,

kadar air dan kadar abu) dilakukan diakhir kultivasi.

3.5.1. Kepadatan Sel Mikroalga (Amini dan Susilowati, 2010)

Pengamatan kepadatan sel mikroalga dilakukan setiap hari pada saat kultivasi

dengan metode numerik untuk menghitung jumlah sel mikroalga. Alat yang

digunakan untuk menghitung kepadatan sel adalah Mikroskop, haemacytometer

tipe Neubauer Improved, sedgwick rafter dan hand counter. Kepadatan sel

Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp. dihitung menggunakan haemacytometer.

Hemacytometer dipasang pada cover glass kemudian sampel diteteskan pada

bagian parit yang melintang hingga penuh. Selanjutnya hemacytometer diamati di

bawah mikroskop dan dilakukan perhitungan jumlah sel pada setiap bidang kotak

dengan bantuan hand counter. Pada setiap penghitungan dilakukan dua kali

penghitungan dan jumlah tertinggi yang dijadikan data jumlah sel terhitung.

Kepadatan sel Spirulina sp. dihitung menggunakan sedgwick rafter dengan cara

mengambil 1 mL sampel, kemudian ditutup dengan gelas penutup. Penghitungan

dilakukan dengan menghitung jumlah unit yang terdapat dalam sedgwick rafter
 41

dibawah mikroskop dengan bantuan hand counter. Pada setiap penghitungan

dilakukan dua kali penghitungan dan jumlah tertinggi yang dijadikan data jumlah

sel terhitung.

3.5.2. Analisis COD (Chemical Oxygen Demand) (APHA 5220 D1989)

Larutan 10,216 g K2Cr2O7 dikeringkan pada suhu 150oC selama 2 jam, dilarutkan

dengan 500 mL aquades ditambahkan 169 ml asam sulfat pekat dan 33,3 HgSO4,

didinginkan pada suhu kamar dan ditambahkan aquades sampai 1000 mL, dibuat

larutan Kalium dikromat dengan konsentrasi rendah, dibuat menggunakan 1,022 g

K2Cr2O7. Kemudian dibuat reagen asam sulfamat dan dibuat reagen PHP

(Potassium Hydrogen Phthalate). Dimasukkan 2,5 ml bila menggunakan ampul

10 mL dan ditambahkan kalium dikromat 0,01667 M sebanyak 1,5 mL, lalu

ditambahkan reagen asam sulfat pekat kemudian ditutup, dan dikocok beberapa

kali sampai tercampur rata.

Dimasukkan ampul ke dalam digester block suhu 150oC dan reflux selama 2 jam,

dinginkan pada suhu ruang dan jika setelah dipanaskan warna kuning berubah

menjadi hijau, maka peru dilakukan pengenceran.demikian juga dengan blanko

dilakukan hal serupa dengan sampel. Didinginkan sampel setelah direflux dan

biarkan partikel tersuspensi mengendap, lalu diukur absorbansi dengan panjang

gelombang 420 nm atau 600 nm. Dalam pembuatan kurva standar yaitu dengan

menyiapkan minimal 5 macam larutan standar potassium hydrogen

phthalate (KHP). Nilai COD dihitung dengan rumus sebagai berikut:

mg O mg O dalam volume akhir X 1000

COD ( )=
L ml sampel
 42

3.5.3. Analisis DO (Dissolved Oxygen) (SNI 06-6989.14-2004)

Alat yang digunakan untuk analisis Dissolved Oxygen adalah DO meter.

Pengukuran oksigen terlarut dilakukan secara elektrokimia. Prinsip kerja DO

meter menggunakan probe oksigen yang terdiri dari katoda dan anoda yang

direndam dalam larutan elektrolit. Pengukuran DO dilakukan dengan

mencelupkan alat DO meter tersebut ke dalam sampel air yang diukur dan catat

hasil pengukuran.

3.5.4. Derajat Keasaman (pH) (SNI 06-6989.11-2004)

Analisis pH dilakukan di tahap awal sebelum kultivasi dan di tahap akhir setelah

kultivasi. Alat yang digunakan adalah pH meter. pH meter dikalibrasi terlebih

dahulu sebelum digunakan dengan menggunakan larutan buffer pH 7,0 atau pH

4,0. Dikeringkan dengan tisu selanjutnya bilas elektroda dengan air suling.

Setelah itu dilakukan pengukuran terhadap larutan sampel dengan mencelupkan

bagian elektrodanya kedalam larutan sampel dan biarkan beberapa saat sampai pH

meter menunjukkan pembacaan yang tetap.

3.5.5. Ortophospat (P-PO4) (SNI 06-6989. 31-2005)

Analisis P-PO4 dilakukan di tahap awal sebelum kultivasi dan di tahap akhir

setelah kultivasi menggunakan metode pereaksi P pekat (larutan ammonium

molibdat). Sampel limbah cair karet sebanyak 25 mL yang telah disaring dengan

kertas Whatman no 42 dimasukkan ke dalam beakerglass 50 mL. Kemudian

ditambahkan 1 mL larutan ammonium molibdat dan 5 tetes larutan SnCl2.

Dikocok dan didiamkan selama 10 menit. Kemudian diukur dengan alat

 43

spektrophotometer pada panjang gelombang 690 nm.

3.5.6. Analisis Nitrogen total (N-total)

Analisis Nitrogen total (N-total) dilakukan dengan menggunakan metode

Gunning. Metode Gunning adalah suatu metode penentuan kadar protein

berdasarkan nitrogen yang menunjukkan jumlah protein yang juga mengikat

senyawa N bukan protein misalnya urea, asam nukleat, amino, nitrat, nitrit, asam

amino, amida, purin, dan pirimidin. Hasil analisis yang didapat tersebut dikalikan

dengan angka konversi (Susilowati dan Hapsari, 2013).

Analisis N-total limbah cair industri karet remah dilakukan dengan cara

memasukan 0,5 – 1 g sampel ke dalam labu Kjeldahl kemudian ditambahkan

Na2SO4 dan K2S dengan perbandingan (7:1) sebanyak 1 g. Setelah itu

ditambahkan H2SO4 pekat sebanyak 10 mL dan didestruksi pada suhu

100oCsampai larutan berwarna bening kemudian didinginkan pada suhu ruang.

Selanjutnya ditambahkan aquades sebanyak 100 mL dan NaOH 40% sebanyak

30-40 mL. Destilat ditampung dengan HCl 0,1 N sebanyak 25 mL, proses destilasi

dihentikan apabila volume destilat sudah mencapai 150 mL. Setelah itu

ditambahkan indikator phenolphthalein sebanyak 3 tetes dan dititrasi dengan

larutan NaOH 0,1 N sampai berwarna merah muda. Selanjutnya dibuat larutan

blanko dengan mengganti sampel dengan aquades. Kandungan N-total dihitung

dalam % N (Sudarmadji et al., 1984) kemudian % N dikonversi dalam satuan

ppm. Perhitungan % N menggunakan rumus berikut

(mL NaOH − mL NaOH contoh)

%N= × N NaOH × 14,008
g contoh × 10
 44

3.5.7. Salinitas

Salinitas merupakan konsentrasi total dari semua ion yang larut dalam air, dan

dinyatakan dalam bagian perseribu (ppt) yang setara dengan gram per liter (Boyd,

1990). Pengukuran salinitas dilakukan dengan menggunakan alat hand

refractometer. Sebelum digunakan hand refractometer dikalibrasi terlebih dahulu

pada salinitas 0 ppt menggunakan aquades. Selanjutnya dilakukan pengukuran

salinitas sampel meneteskan sampel pada bagian kaca prisma hand refractometer

kemudian dilihat ditempat yang bercahaya. Nilai salinitas sampel dapat dilihat

pada garis batas antara bidang berwarna biru dan putih.

3.5.8. Biomassa

Biomassa diukur dengan menghitung berat basah dan berat kering mikroalga.

Berat basah mikroalga diukur dengan menimbang biomassa basah yang diperoleh

dari penyaringan dengan kain satin dan kertas saring. Untuk memperoleh berat

kering mikroalga, maka dilakukan pengukuran kadar air pada biomassa basah

mikroalga. Penentuan kadar air dilakukan dengan mengeringkan bahan dalam

oven pada suhu 105-110ºC selama 4 jam atau sampai didapat berat yang konstan.

Selisih berat sebelum dan sesudah pengeringan adalah banyaknya air yang

diuapkan (Winarno,1992). Kadar air dalam mikroalga dihitung menggunakan

persamaan (AOAC, 1985) :

b−c
% Kadar air = × 100 %
b−a

Keterangan:
a = berat konstan cawan kosong
b = berat cawan + sampel sebelum dikeringkan
 45

c = berat konstan cawan + sampel setelah dikeringkan

Perhitungan perolehan biomassa kering sampel dapat dilakukan dengan rumus:

Biomassa kering = (100 – Kadar Air) % x berat sampel basah (g/L).

3.5.9. Kadar Air (AOC,2005)

Kadar air ditentukan dengan metode cawan kering (AOAC, 2005), yaitu analisis

dengan menggunakan oven langsung pada suhu 105°C. Prinsipnya adalah

menguapkan molekul air (H2O) bebas yang ada dalam sampel. Kemudian sampel

ditimbang sampai didapat bobot konstan yang diasumsikan semua air yang

terkandung dalam sampel sudah diuapkan. Selisih bobot sebelum dan sesudah

pengeringan merupakan banyaknya air yang diuapkan. Cawan dikeringkan

menggunakan oven pada suhu 100-105°C selama 30 menit, kemudian didinginkan

dalam desikator selama 15 menit untuk menghilangkan uap air dan ditimbang (A).

Ditimbang sampel sebanyak 5 gram dalam cawan yang sudah dikeringkan (B),

kemudian dioven pada suhu 100-105ºC dinginkan dalam desikator selama 30

menit dan dilakukan penimbangan (C). Tahap ini diulangi hingga dicapai bobot

yang konstan. Kadar air dihitung dengan rumus:

Kadar air (%) = x 100 %

Keterangan :
A : berat cawan kosong dinyatakan dalam gram
B : berat cawan + sampel awal dinyatakan dalam gram
C : berat cawan + sampel kering dinyatakan dalam gram
 46

3.5.10. Kadar Abu (AOC, 2005)

Analisis kadar abu dilakukan menggunakan metode oven, yaitu pembakaran atau

pengabuan bahan-bahan organik yang diuraikan menjadi air (H2O) dan

karbondioksida (CO2) tetapi zat anorganik tidak terbakar. Zat anorganik ini

disebut abu. Prosedur analisis kadar abu sebagai berikut: cawan yang akan

digunakan dioven terlebih dahulu selama 30 menit pada suhu 100 sampai 105ºC,

kemudian didinginkan dalam desikator untuk menghilangkan uap air dan

ditimbang (A). Sampel ditimbang sebanyak 5g dalam cawan yang sudah

dikeringkan (B) kemudian dibakar di atas nyala pembakar sampai tidak berasap

dan dilanjutkan dengan pengabuan di dalam tanur bersuhu 550-600ºC sampai

pengabuan sempurna. Sampel yang sudah diabukan didinginkan dalam desikator

dan ditimbang (C). Tahap pembakaran dalam tanur diulangi sampai didapat bobot

yang konstan. Kadar abu dihitung dengan rumus:

C−A
% Kadar abu = × 100 %
B−A

Keterangan :
A: berat cawan kosong dinyatakan dalam gram
B: berat cawan + sampel awal dinyatakan dalam gram
C: berat cawan + sampel kering dinyatakan dalam gram

3.5.11. Kadar Protein (AOAC 960.52-1995)

Sampel ditimbang 1 g, dimasukkan dalam labu kjeldahl. Kemudian ditambahkan

7,5 g kalium sulfat dan 0,35 g raksa (II) oksida dan 15 mL asam sulfat pekat.

Dipanaskan semua bahan dalam labu Kjeldahl dalam lemari asam sampai berhenti

berasap dan pemanasan dilanjutkan sampai mendidih dan cairan sudah menjadi
 47

jernih. Dilakukan pemanasan kurang lebih 30 menit, pemanas dimatikan dan

dibiarkan sampai dingin. Selanjutnya ditambahkan 100 mL aquadest dalam labu

Kjeldahl yang didinginkan dalam air es dan beberapa lempeng Zn, ditambahkan

15 mL larutan kalium sulfat 4% (dalam air) dan ditambahkan perlahan-lahan

larutan natrium hidroksida 50% sebanyak 50 mL yang telah didinginkan dalam

lemari es. Labu kjeldahl dipasang dengan segera pada alat destilasi. Labu

kjeldahl dipanaskan perlahan-lahan sampai dua lapis cairan tercampur, kemudian

dipanaskan dengan cepat sampai mendidih. Destilat ditampung dalam erlenmeyer

yang telah diisi dengan larutan baku asam klorida 0,1N sebanyak 50 mL dan

indikator merah metil 0,1% b/v (dalam etanol 95%) sebanyak 5 tetes, ujung pipa

kaca destilator dipastikan masuk ke dalam larutan asam klorida 0,1N. Proses

destilasi selesai jika destilat yang ditampung lebih kurang 75 mL. Sisa larutan

asam klorida 0,1N yang tidak bereaksi dengan destilat dititrasi dengan larutan

baku natrium hidroksida 0,1N. Titik akhir titrasi tercapai jika terjadi perubahan

warna larutan dari merah menjadi kuning, kemudian dilakukan titrasi blanko.

Kadar protein dihitung dengan persamaan berikut :

–
Kadar = ( )
× N NaOH × 14,008 × 100% × Fk

Keterangan :
Fk : faktor koreksi
Fk N : 16

3.5.12. Kadar Lemak (AOC, 2005)

Analisis kadar lemak dilakukan dengan metode Soxhlet, yaitu lemak yang

terdapat dalam sampel diekstrak dengan menggunakan pelarut lemak non polar.
 48

Prosedur analisis kadar lemak sebagai berikut: labu lemak yang akan digunakan

dioven selama 15 menit pada suhu 105ºC, kemudian didinginkan dalam desikator

untuk menghilangkan uap air selama 15 menit dan ditimbang (A). Sampel

ditimbang sebanyak 5 gram (B) lalu dibungkus dengan kertas timbel, ditutup

dengan kapas bebas lemak dan dimasukkan ke dalam alat ekstraksi Soxhlet yang

telah dihubungkan dengan labu lemak yang telah dioven dan diketahui bobotnya.

Pelarut heksan dituangkan sampai sampel terendam dan dilakukan refluks atau

ektraksi lemak selama 5-6 jam atau sampai palarut lemak yang turun ke labu

lemak berwarna jernih. Pelarut lemak yang telah digunakan, disuling dan

ditampung setelah itu ekstrak lemak yang ada dalam labu lemak dikeringkan

dalam oven bersuhu 100-105ºC selama 10 menit, lalu labu lemak didinginkan

dalam desikator selama 15 menit dan ditimbang (C). Tahap pengeringan labu

lemak diulangi sampai diperoleh bobot yang konstan. Kadar lemak dihitung

dengan rumus:

C−A
% Lemak total = x 100 %
B

Keterangan :
A: berat labu alas bulat kosong dinyatakan dalam gram
B: berat sampel dinyatakan dalam gram
C: berat labu alas bulat dan lemak hasil ekstraksi dalam gram
 V. KESIMPULAN

5.1. Kesimpulan

Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan, sebagai berikut:

Jenis mikroalga berprotein tinggi yang mampu beradaptasi pada media limbah

cair industri karet remah adalah Spirulina sp. dengan kepadatan 6.835 x 104

sel/mL, menghasilkan biomassa tertinggi yaitu 0,6866 g/L dan kadar protein

sebesar 16,80%, kemudian kadar lemak sebesar 2,13%, kadar air 15,65% dan

kadar abu 39,27%.

5.2. Saran

Berdasarkan hasil penelitian ini, perlu dilakukan teknik pemanenan yang tepat

yaitu dengan menggunakan sentrifugasi atau filtrasi untuk mengurangi kehilangan

biomassa ketiga jenis mikroalga dan pemilihan bibit yang terbaik dengan indikasi

tidak terdapat protozoa sehingga dapat memperoleh kepadatan sel yang maksimal.
 DAFTAR PUSTAKA

Abdurrachman, O., Mutiara, M., dan Buchori, L. 2013. Peningkatan

Karbondioksida dengan Mikroalga (Chlorella Vulgaris, Chalamydomonas
sp. Spirulina sp.) dalam Upaya untuk Meningkatkan Kemurnian Biogas.
Jurnal Teknologi Kimia Industri. Universitas Diponegoro. Semarang.
2(4):5.

Adehoog and Simon, K.F. 2001. Marine Ecological Proceses. Great Britain.
London.

Adenan, N.S., Yusoff, F., Md. and Shariff, M. 2013. Effect of Salinity and
Temperature on the Growth of Diatoms and Green Algae. J. Fish. Aqua.
Sci. 8(2):397-404.

Adetola, T.G. 2011. Effect of Nitrogen, Iron and Temperature on Yield and
Composition of Microalgae (thesis). Stillwater:Oklahoma state University.

Amanatin, D.R., Rofidah, E., dan Rosady, S.D.N. 2013. Produksi Protein Sel
Tunggal (PST) Spirulina sp. Sebagai Super Food Dalam Upaya
Penanggulangan Gizi Buruk dan Kerawanan Pangan Di Indonesia. Jurusan
Biologi. Institut Teknologi Sepuluh Nopember.

Amini, S., dan Susilowati, R. 2010. Produksi biodiesel dari mikroalga

Botryococcus braunii. Squalen. 5 (1): 23-30.

Anon, Sen., M.A.T., Kocer, M.T., and Erbas, H. 2009. Studies on Growth Marine
Microalgae in Batch Cultures: Nannochloropsis oculata (Eustigmatophyta).
Asian J. of Plant Sciences. 4(6): 642-644.

AOAC ( Association of Official Analytical Chemist). 1995. Official Methods Of

Analysis. Arlington, Inc. New York.

APHA (American Public Health Association). 1989. Standard methods for the
examination of water and waste water. American Public Health Association
(APHA). American Water Works Association (AWWA) and Water
Pollution Control Federation (WPCF). 20th ed. Washington. 1193 hal.
Ariyati, S. 1998. Pengaruh Salinitas dan Dosis Pupuk Urea terhadap Pertumbuhan
 83

Populasi Spirulina sp. Skripsi. Jurusan Biologi. Fakultas Matematikan dan

Ilmu Pengetahuan Alam. Semarang: Universitas Diponegoro.
Arnata,W. I., Gunam, W .I.B., Anggreni, D. AAM., Aryanta, R.W., Loberto, PM.,
2013. Produksi Biomassa dan Potensi Nutrisi Mikroalga Nannochloropsis
sp. K4. Teknologi Industri Pertanian, Universitas Udayana.
Association of Official Analytical Chemist (AOAC). 2005. Official Methods of
Analysis (18 Edn). Association of Official Analytical Chemist Inc.
Mayland. USA.
Aung,W.L., Kyaw, N., dan Nway, N.H. 2013. Biosorption of Lead (Pb2+) by
using Chlorella vulgaris. International Journal of Chemical, Environmental
& BiologicalSciences, 1(2), 2320–4087.
Badan Standardisasi Nasional. 2004. Cara Uji Derajat Keasaman Menggunakan
Alat pH Meter SNI 06-6989.11-2004. Badan Standardisasi Nasional.
Jakarta.
Badan Standardisasi Nasional. 2004. Cara Uji Oksigen Terlarut secara Yodometri
SNI 06-6989.14-2004. Badan Standardisasi Nasional. Jakarta.
Badan Standarisasi Nasional. 2005. Cara Uji Kadar Amonia dengan
Spektrofototmeter secara fenat SNI 06-6989.30-2005. Badan Standardisasi
Nasional. Jakarta.
BadanStandardisasi Nasional. 2005. Cara Uji Kadar Fosfat Dengan
Spektrofotometer Secara Asam Askorbat SNI 06-6989.31-2005. Badan
Standardisasi Nasional. Jakarta.
Balai Besar Pengembangan Budidaya Laut. 2007. Budidaya Fitoplankton dan
Zooplankton. Balai Besar Pengembangan Budidaya Laut. Departemen
Kelautan dan Perikanan. Lampung. 83 hlm.
Barsanti, L., and Gualtieri, P. 2006. Algae: Anatomy, Biochemistry, and
Biotechnology, CRC Press Boca Raton, (1).
Becker, E.W., 2007. Micro-algae as source of protein. Biotechnology Advances.
Vol. 25:207-210.
Becker, W. 2004. Microalgae in Human and Animal Nutrition. Handbook of
Microalgae Culture. Oxford: Blackwell. Hlm 312-351.

Benemann, G. 1997. Characterization of Marine Microalga for Biofuel

Production. Journal of Biotechnology. 31, pp. 1367-1372.
Benemann, J. R., Weissman, J. C., dan Oswald, W. J. 1979. Algal Biomass. Di
dalam: Rose, A. H. (ed.). 1979. Economic Microbiology Vol. IV: Microbial
Biomass, hal. 177. Academic Press, San Fransisco.
Bidwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology 2nd Ed. Macmillan Publishing Co., Inc.
New York. pp. 255-263.
 84

Bold, H.C., and Wynne, M.J. 1985. Introduction to the Algae, Second Edition,
Prentice-Hall Mc. Engelwood Cliffs New York.
Borowitzka, A.M., and Borowitzka, L.J. 1988. Microalgae Biotechnology.
Cambridge University Press. Australia. 488 pp.
Borowitzka, M.A., and L. J. Borowtzka. 1998. Microalgal Biotechnology.
Cambridge University press. Cambridge. New York USA.
Boyd, C.E. 1988. Water Quality in Warmwater Fish Ponds. Fourth Printing.
Auburn University Agricultural Experiment Station, Alabama, USA.
Boyd, C.E. 1990. Water Quality in Ponds for Aquaculture. Birmingham
Publishing Company. Alabama. 482 pp.
Brown, M.R., Jeffrey, S.W., Volkman, J.K., and Dunstan, G.A. 1997. Nutritional
Poperties of Microalgae for Marinculture. Aquaculture. 151: 315-331.
Chen, C.Y., Yeh, K.L., Aisyah, R., Lee, D.J, and Chang, J.S. 2011. Cultivation,
photobio-reactor design and harvesting of microalgae forbiodiesel
production: A critical review Biore-source Technology,102, hal 71–81.

Chisti, Y. 2007. Biodiesel from Microalgaee. Biotechnology Andances.25, hal

294-306.

Chrismadha, T., Lily, P., dan Yayah, M. 2006. Pengaruh Konsentrasi Nitrogen
dan Fosfor terhdap Pertumbuhan, Kandungan Protein, Karbohidrat dan
Fikosianin pada Kultur Spirulina fusiformis. Berita Biologi. 8 (3).

Christwardana, M., Nur, M.M.A., dan Hadiyanto. 2013. Spirulina platensis :

Potensinya Sebagai Bahan Pangan Fungsional. Review. Jurnal Teknologi
Pangan. Vol.2 (1) : 10-17.

Cole, G.A. 1994. Textbook of Limnology. Waveland Press Inc., Illinois.

Colman, B., and Gehl, K.A. 1983. Effect of External pH on The Internal pH of
Chlorella saccharophila. J Plant Phsiol. 77 (4) : 917 – 921.

Coutteau P. 1996. Micro Algae. Dalam Manual on the Production and Use of Live
Food for Aquaculture, Laboratory of quaculture and Artemia Reference
Center University of Gent, Belgium, FAO, p : 7-30.

CSIRO. 2009. Nannochloropsis sp. (online). (http://www.scienceimage.csiro.

au/image/10697 diakses 07 Juli 2016).

Dallaire, B., Bernet, N., and Bernard, O. 2007. Anaerobic Digestion of

Microalgae as a Necessary Step to Make Microalgae Biodiesel Sustainable.
Journal of Biotechnology Advances, 27, pp. 409-416.
 85

Darley, W.M. 1982. Algal Biology: A Physiological Approach. Department of

Botany. The University of Georgia.

Dedi, F., Hendra, H., Maliana, Y., Ningsih, R.L., dan Hadi, R.P. 2010.
Pemanfaatan Limbah Cair Karet sebagai Media Alternatif Budidaya
Chlorella sp., Ilmiah Mahasiswa Universitas Tanjungpura. 1(1) : 81-90.

Desmorieux, H., and Decaen, N. 2006. Convective drying of Spirulina in thin

layer. J Food Eng. 77, pp. 64-70.

Dewi, E.R.S. 2015. Respon Penurunan Konsentrasi Logam Berat Kromium (Cr)
dan Pertumbuhan Mikroalga Chlorella Vulgaris Pada Media Kultur.
Seminar Konservasi dan Pemanfaatan Sumber Daya Alam.

Direktorat Jendral Perkebunan. 2015. Rencana Strategis Direktorat Jendral

Perkebunan Tahun 2015-2019. Jakarta.

Djariah, A.S.1995. Pakan Alami Ikan. Percetakan Kanisius. Yogyakarta.

Djunaedi, A., Sunaryo, Suryono, C.A., dan Santosa, A. 2017. Kandungan Pigmen
Fikobiliprotein dan Biomassa Mikroalga Chlorella Vulgaris pada media
dengan Salinitas Berbeda. Jurnal Kelautan Tropis. 20(2):112–116. ISSN
0853-7291.
Effendi, H. 2003. Telaah Kualitas Air Bagi Pengelolaan Sumberdaya dan
Lingkungan Perairan. Kanisius. Yogyakarta. 249 hal.
Erlania. 2010. Penyimpanan Rotifera Instan (Branchionus rotundiformis) pada
Suhu yang Berbeda Dengan Pemberian Pakan Mikroalga Konsentrat. J. Ris.
Akuakultur. 5: 287-297.

Ernest, P. 2012. Pengaruh Kandungan Ion Nitrat terhadap Pertumbuhan

Nannochloropsis sp. Skripsi. Universitas Indonesia. Depok.
Evasari, J. 2012. Pemanfaatan Lahan Basah Buatan Dengan Menggunakan
Tanaman Typha angustifolia Untuk Mengelola Limbah Cair Domestik.
Universitas Indonesia, Jakarta.
Fachrullah, M. R. 2011. Laju Pertumbuhan Mikroalga Penghasil Biofuel Jenis
Chlorella sp. dan Nannochloropsis sp. yang Dikultivasi Menggunakan Air
Limbah Hasil Penambangan Timah di Pulau Bangka. Skripsi. Fakultas
Perikanan dan Ilmu Kelautan. Institut Pertanian Bogor. Bogor. 103 hal.
Fitri, K. 2011. Peran Chlorella vulgaris dalam Pengelolaan Lingkungan
(Kajian Penggunaan untuk Menurunkan Nitrogen Amonia Air Limbah
Domestik dan Potensinya sebagai Bahan Minyak Biodiesel).(Tesis).
Departemen Teknik Kimia Universitas Indonesia. Depok.
Foissner, W. 1980. Colpodide Ciliaten (Protozoa: CUiophora) aus alpinen Böden.
Zoologisches Jahrbuch Systematik. 107:391-432.
 86

Freire, I., Cortina-Burgueño, A., Grillea, P., Arizcu, M.A. n, E. Abellán, M.

Segura, Sousa, F.W., and Otero, A. 2016. Nannochloropsis limnetica: A
freshwater microalga for marine aquaculture. Aquaculture. 459:124-130.

Fulks, W., dan Main, K.L. 1991. Rotifer and microalgae culture system.
Proceeding of a U.S – Asia Workshop. Argent Laboratories.

Gardner, F.P., Pearce, R.B., dan Mitchell, R.L. 1991. Fisiologi Tanaman
Budidaya. Diterjemahkan oleh: SUSILO, H. dan SUBIYANTO. Penerbit
Universitas Indonesia, Jakarta. 428 hlm.

Guedes, A.C., Amaro, H.M., dan Malcata, F.X. 2011. Microalgaee as Sources of
Carotenoids.Mar Drugs. (9), 625-644 Best, Ben. Phytochemicals as
Nutraceuticals.
http://www.benbest.com/nutrceut/phytochemicals.html#carotenoids
Hadi, R.P., Setyawati, T.R., dan Mukarlina. 2015. Kandungan Protein dan
Kepadatan Sel Nannochloropsis Oculata pada Media Kultur Limbah Cair
Karet. Jurnal Protobiont. 4 (1) : 120-127.
Handayani, 2011. Mikroalga Sumber Pangan dan Energi Masa Depan. UPT
UNDIP Press. Semarang. ISBN: 978-602-097-298-3.
Hariyadi, S. 2001. Teknik Sampling Kualitas Air, Makalah Pendidikan dan
Latihan Teknis Sampling Kelautan Angkatan I. Badan Pengendalian
Dampak Lingkungan Daerah Pemerintah Propinsi DKI Jakarta. Jakarta.
Hariyati, R. 2008. Pertumbuhan dan Biomasa Spirulina sp dalam Skala
Laboratoris. BIOMA. 10 : 19-22.
Harun, R., Singh, M., Forde, G.M., and Danquah, M.K. 2010. Bioprocess
engineering of microalgae to produce a variety of consumer products,
Renewable and Sustainable Energy Reviews, 14, hal 1037–1047.

Hasanah, U. 2011. Mikrobiologi Makanan. FMIPA UNIMED. Medan.

Healey, F.P. 1973, Inorganic nutrient uptake and deficiency in algae. CRC Critical
Review in Microbiology, 69-113.
Hermanto, M. B., Sumardi, L. C. Hawa dan Fiqtinovri, S. M. 2011. Perancangan
bioreaktor untuk pembudidayaan mikroalga. Jurnal Teknologi Pertanian.
Vol 12 (3): 153-162.
Hidayati, S., Nawansih, O., dan Febiana, V. 2015. Teknik Pemanenan Mikroalga
Nannochloropsis sp. yang Dikultivasi Dalam Media Limbah Cair Karet
Remah Dengan Flokulan Alumunium Sulfat. Jurnal Teknologi Industri dan
Hasil Pertanian. 20 (2).
Hien, N. dan Thao, T. 2012. Situation of wastewater treatment of natural rubber
latex processing in the Southeastern region, Vietnam. J. Vietnamese
Environ. 2, 58–64.
 87

Hoshida, H., Ohira, T., Minematsu, A., Akada, R., and Nishizawa, Y. 2005.
Accumulation of Eicosapentaenoic Acid in Nannochloropsis sp. In
Response to Elevated CO2 Concentrations. Applied Phycology, 17, pp.29-
34.
Hu Q. 2004. Environmental effects on cell composition. Di dalam: Richmond A
(Ed). Handbook of Microalgal Culture: Biotechnology and Applied Science.
Oxford: Blackwell Science Publishing. Hal 83-93.
Hu, Q. 2004. Environmental Effect on Cell Composition. Di dalam Richmond,
A.E. (editor). Handbook of Microalgal Culture, Biotechtology and Applied
Phycology. Blackwell Publ Ltd., Iowa, USA. hlm: 84.
Indarmawan, T., Mubarak, A.S., dan Mahasri, G.2012. Pengaruh Konsentrasi
Pupuk Azolla pinnata Terhadap Populasi Chaetoceros sp. Journal Of
Marine and Coastal Science. 1(1):61-70.
Isnansetyo, A dan Kurniastuti. 1995. Teknik Kultur Fitoplankton dan
Zooplankton. Pakan Alami Untuk Pembenihan Organisme Laut. Kanisius.
Yogyakarta.
Istiyanie, D. 2011. Pemanfaatan emisi CO2 dari PLTU batubara dalam pengolahan
limbah cair domestik berbasis mikroalga. (Tesis). Universitas Indonesia.
Jakarta. 192 hlm.
Jati, F., Hutabarat, J., dan Herawati, E.V. 2012. Pengaruh Penggunaan Dua Jenis
Media Kultur Teknis yang Berbeda Terhadap Pola Petumbuhan, Kandungan
Protein dan Asam Lemak Omega 3 EPA (Chaetoceros gracilis). Journal of
Aqualculture Management and Technology. vol.1, hal. 221-235.
Kabinawa, I., dan Nyoman, K. 2006. Spirulina : Ganggang Penggempur Aneka
Penyakit. PT. Agro Media Pustaka. Depok.

Kartika, I. 2010. Penanganan dan pengolahan limbah di perusahaan perseroan

(persero) PT. Perkebunan Nusantara VII Unit Usaha Way Berulu,
Lampung.(Laporan Praktek Lapangan). Institut Pertanian Bogor. Bogor. 52
hlm.
Kaswinarni, F. 2007. Kajian Teknis Pengolahan Limbah Padat dan Cair Industri
Tahu. Tesis Universitas Diponegoro. Semarang.
Kawaroe, M., Prartono, T., Sunuddin, A., Wulan Sari, D., dan Augustine, D.
2010. Mikroalga Potensi dan Pemanfaatannya untuk Produksi Bio Bahan
Bakar. IPB Press. Bogor.
Keputusan Menteri Negara Lingkungan Hidup Nomor 51 Tahun 2004 tentang Baku
Mutu Air Laut. Jakarta.
Khoirunisa, E., Mutiah, E.,dan Abdullah. 2012. Proses Kultivasi Spirulina
Platensis MenggunakanPOME (Palm Oil Mill Effluent) Sebagai Media
Kultur dalam Raceway Open Pond Bioreactor. Jurnal Teknologi Kimia dan
Indsutri 1(1): 264-269.
 88

Komala, P.S., Helard, D., dan Delimas, D. 2012. Identifikasi Mikroba Anaerob
Dominan padaPengolahan Limbah Cair Pabrik Karet dengan Sistem Multi
Soil Layering (MSL). Jurnal Teknik Lingkungan UNAND. 9 (1) : 74-88.
Komalasari, A. 2015. Studi Kemampuan Pertumbuhan Mikroalga Pada Media
Limbah Cair Karet Remah dengan Open Ponds System. (Skripsi). Jurusan
Teknologi Hasil Pertanian,Universitas Lampung. Lampung.
Koru, E. 2012. Food Additive in Earth Food Spirulina (Arthrospira): Production
and Quality Standarts, 191-202. INTECH.
Kulpys, J., Paulauskas, E., Pilipaviclus, V., dan Stankevicius, R. 2009. Influence
ofcyanobacteria Arthospira (Spirulina Platensis) biomass additives towards
the body condition of lactation cows and biochemial milk indexes.
Agronomy Research .7 (2),823-835.
Kusuma W. 2014. Kandungan Nitrogen (N), Fospor (P), Kalium (K) Limbah
Jamur Tiram (Rleurotusostreatus) dan Jamur Kuping (Auricularia
auricular) Guna Pemanfaatannya sebagai Pupuk. Skripsi, Fakultas
Peternakan, Universitas Hasanuddin.
Lapu, P. 1994. Analisis Beberapa Kualitas Sumber Air di Maranak, Kabupaten
Maros, Sulawesi Selatan. Universitas Hasanudin. Sulawesi. 46 p.
Loehr, R.C. 1974. Agriculture Waste Management: Proplem, Process and
Approach. Academic Press. New York. 576p.
Lubis, D.F. 2014. The Identification of Potential Microalga as Degradable Agent
in the Rubber Waste PT. Ricry, Pekanbaru. Jurnal. Universita Riau.
Pekanbaru.
Mahreni dan Suhenry, S. 2011. Kinetika Pertumbuhan Sel Sacharomyces
Cerevisiae Dalam Media Tepung Kulit Pisang. Prodi Teknik Kimia.
Fakultas Teknologi Industri, Universitas Pembangunan Nasional “Veteran”
Yogyakarta. Seminar Rekayasa Kimia dan Proses. ISSN: 1411-4216.

Mara, D.D., Mills, S.W., Pearson, H.W., and Alabaster, G.P. 1992. Waste
Stabilization Pond: Viable Alternative for Small Communty Treatment
Systems. J. Inst. Environt. Manag.6(1):72-78.

Mara, D., Mills, S. W., Pearson, H. W,. dan Alabaster, G.P. 2007. Waste
Stabilization Ponds : a Viable Alternative for Small Community Treatment
Systems. Water and Environment Journal, 74.

Maspanger, D., dan Honggokusumo S. 2004. Dampak Penerapan Produksi Bersih

Industri Crumb Rubber pada peningkatan Pasar Global. Disajikan pada
Seminar atau temu Usah Sosialisasi Produksi Bersih Industri Crumb
Rubber. Pekanbaru: Direktorat Industri Kimia Hasil Pertanian dan
Perkebunan, Direktorat Jendral Industri Kimia, Agro, dan hasil Hutan. 56
hlm.
 89

Mata, T. M., Martins,A.A., and Caetano, N.S. 2010. Microalgae for biodiesel
production and other application. A review, Renewable and Sustainable
Energy Reviews. 14: 217-232.

Merizawati. 2008. Analisis Sinar Merah, Hijau, dan Biru (RGB) untuk Mengukur
Kelimpahan Fitiplanktonn (Chlorella sp.). Skripsi Prodram Studi Ilmu dan
Teknologi Kelautan. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Institut
Pertanian Bogor. 87 hal.

Moertinah, S. 2010. Kajian Proses Anaerobik sebagai Alternatif Teknologi

Pengolahan Air Limbah Industri Organik Tinggi. J.Riset Teknologi
Pencegahan dan Pencemaran Industri. 1(2):104-114.
Molina, G.E., Acién, F.F.G., García C.F., and Chisti, Y. 1999. Photobioreactors:
light regime, mass transfer, and scaleup. Journal of Biotechnology.(70) :
231–47.
Nawansih, O., Utomo, T.P., dan Pratama, A.I., 2016. “Kajian Produksi Biomassa
Tetraselmis sp. pada Media Limbah Cair Industri Karet Remah yang
Diperkaya sebagai Bahan Baku Potensial Biodiesel”. Jurnal Kelitbangan
Inovasi dan Pembangunan. Vol.04 No.01, April 2016. Badan Penelitian dan
Pengembangan Inovasi Daerah Provinsi Lampung. ISSN :2354-5704.
Nawansih, O., Utomo, T.P., dan Wulan R.R., 2015. “Kemampuan Mikroalga yang
Dikultivasi pada Limbah Cair Industri Karet Remah dalam Menghasilkan
Biomssa dan Menurunkan Cemaran”. Proseeding Semnas Sain dan
Teknologi VI LPPM Universitas Lampung 03-11-201.
Nur, M.M.A. 2014. Potensi Mikroalga sebagai Sumber Pangan Fungsional di
Indonesia. Eksergi. 11(2) : 01-06.

Nurdiana, S., Sarwono, dan Nikhlani, A., 2017. Kepadatan Sel Chlorella sp.
Yang Dikultur Dengan Periodisitas Cahaya Berbeda. J. Aquawarman. Vol.
3 (2) : 35-41. ISSN : 2460-9226.
Nurlita, H., dan Utomo, S. 2011. Potensi Nitrikasi Oleh Bakteri yang Terdapat di
Laut Aliran Kali Plumbon, Laut Aliran Kali Banjir Kanal Barat dan Laut
Aliran Kali Banjir Kanal Timur. Jurnal Presipitasi. VIII (1):187-198.
Olaizola, M., Bridges, T., Flores, S., Griswold, L., Morency, J., dan Nakamura, T.
2004. Microalga Removal of CO2 from Flue Gases : CO2 Capture from a
Coal Combuster, Biotech. Bioproc. Eng., 8, pp. 360- 367.

Peraturan Menteri Lingkungan Hidup No. 5 Tahun 2014 tentang Baku Mutu Air
Limbah.
Phang, 2002. Spirulina Culture in Digested Sago Strech Factory Waste Water. J
Appl. Phycol.
Prabowo, D.A. 2009. Optimasi Pengembangan Media untuk Pertumbuhan
Chlorella sp. pada Skala Laboratorium. Skripsi. Program Studi Ilmu dan
 90

Teknologi Kelautan. Fakultas Perikanan dan Kelautan. Institut Pertanian

Bogor. 95 hlm.
Pratama, A.I. 2016. Kajian Produksi Biomassa Tetraselmis sp. Pada Media
Limbah Cair Industri Karet Remah yang Diperkaya Nitrogen Dan Diatur
Salinitasnya. Skripsi. Universitas Lampung. 69 hlm.
Prihantini, N.B. 2007. Pengaruh Konsentrasi Medium Ekstrak Tauge
(MET) Terhadap Pertumbuhan Scenedesmus Isolat Subang. Makara
Sains. 11 (1) : 1.
Rachmaniah , O., Setyarini, R.D., dan Maulida, L. 2010. Pemilihan Metode
Ekstraksi Minyak Alga dari Chlorella sp. dan Prediksinya sebagai
Biodiesel. Seminar Teknik Kimia Soehadi Reksowardojo 2010. Fakultas
Teknologi Industri. Institut Teknologi Sepuluh Nopember. Surabaya. 10 hal.
Reynolds, C.S. 2006. Ecology of Phytoplankton. Cambridge University Press.
New York. Hal. 535.
Richmond, A. 1988. Spirulina In: Borowitzka, M A. and Borowitzka, L J.( Eds),
Micro-agal Biotechnology, Cambridge:Cambridge University Press.
Richmond, A.E. 1986. Microagriculture. CRC. Critical Rev. Biotechnol, 4 (4):
369-438.
Riyono, S.H. 2008. Ekstrak klorofil. Jurnal Oseanografi. 2(24): 8-12.
Rizky, N.M. 2010. Optimasi Kultivasi Mikroalga Laut Nannochloropsis Oculata
dengan Perlakuan Pupuk Urea untuk Produksi Lemak Nabati. Fakultas
Perikanan. Universitas Brawijaya. Malang.
Rocha, G.J.M.S., Garcia, J.E.C., and Henriques, M.H.F. 2003. Growth aspects of
the marine microalga Nannochloropsis. Biomolecular Engineering. 20,
237–242.
Romimohtarto, K. 2004. Meroplankton Laut : Larva Hewan Laut yang Menjadi
Plankton. Djambatan. Jakarta.
Rostini, I. 2007. Karya Ilmiah: Kultur Fitoplankton (Chlorella sp. dan Tetraselmis
sp.) pada Skala Laboratorium di Instalasi Penelitian dan Pengkajian
Teknologi Pertanian Bojonegara, Fakultas Perikanan dan Ilmu
Kelautan.Universitas Padjajaran, Bandung.

Salvado, H., Meritxell, M.A.S., Sergi, M., and Ma, P.G. 2001, Effect of Shock
Loads of Salt on Protozoan Communities on Activated Sludge, Acta
Protozool, (40) : 177-185.
Santosa, V., dan Limantara, L. 2007. Kultivasi Spirulina. BioS. 1(2) : 18.
Santosa, V., dan Leenawaty, L. 2007. Majalah Biologi Populer. Pascasarjana
Magister Biologi Universitas Kristen Satya Wacana. 1(2).
Sasmita, P.G., Wenten, I.G., dan Suantika, G. 2004. Pengembangan Teknologi
 91

Ultrafiltrasi Untuk Pemekatan Mikroalga. Didalam Prosiding Seminar

Nasional Rekayasa Kimia. ITB. Bandung. Hal 1-5.
Setyaningsih, I., Saputra, T.A., dan Uju. 2011. Komposisi Kimia dan Kandungan
Pigmen Spirulina fusiformis Pada Umur Panen Yang Berbeda Dalam Media
Pupuk. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia. Volume XIV. (1):
63-69.

Sleigh, M.A. 1989. Protista and Other Protist. Edward Arnold. London.
Spolaore, P., Cassan, C.J., Duran, C., and Isamabert, A. 2006. Commercial
application of microalgae. Journal of Bioscience and Bioengineering,
101(2), pp. 87-96.
Sriharti. 2004. Pengaruh species Clorella dalam menetralisir limbah cair karet.
Prosiding Seminar Nasional Rekayasa Kimia dan Proses 2004. ISSN : 1411
– 4216.
Sudarmadji, S., Haryono, B. dan Suhardi. 2007. Analisis Bahan Makanan dan
Pertanian. Liberty. Yogyakarta.
Sugiharto, 1987. Dasar-dasar Pengelolaan Air Limbah. UI Press. Jakarta.
Suharyanto, Tri-Panji, Shinta, P., dan Khaswar, S. 2014. Produksi Spirulina
Plantesis dalam Fotobioreaktor Kontinyu Menggunakan Media Limbah Cair
Pabrik Kelapa Sawit. Menara Perkebunan. 82(1):1-9.
Sumardianto, 1995. Struktur Komunitas Fitoplankton di Perairan Teluk Pelabuhan
Ratu, Jawa Barat. Program Studi Manajemen Sumberdaya Perairan.
Fakultas Perikanan Institut Pertanian Bogor, Bogor. 57p.
Susilaningsih, D., Djohan, A.C., Widyaningrum, D.N., dan Anam, K. 2009.
Biodiesel from Indigenous Indonesian Marine Microalgae Nannochloropsis
sp. Journal of biotechnology. 2(2) Oct. 2009 ISSN: 1979-9756.
Sylvester, B., Nelvy, D.D., dan Sudjiharno. 2002. Persyaratan Budidaya
Fitoplankton. Budidaya Fitoplankton dan Zooplankton. Prosiding Proyek
Pengembangan Perekayasaan Teknologi Balai Budidaya Laut Lampung.
hal. 24-36.
Takagi, M., Watanabe, K., Yamaberi, K., and Yoshida, T. 2000. Limited feeding
of Potassium Nitrate for IntracellularLlipid and Triglyceride Accumulation
of Nannochlorpopsis sp. UTEX LB1999. Appl Microbiol Biotechnol.
54:112–117.
Taw Nyan, D.R. 1990. Petunjuk Pemeliharaan Kultur Murni dan Massal
Mikromikroalga. Proyek Pengembangan Budidaya Udang : United Nations
Development Programme Food dan Agriculture Organization Of The
United Nations. US. 34 hal (diterjemahkan oleh : Budiono M dan Indah W).

Tekasakul, P. dan Tekasakul, S. 2006. Environmental problems related to natural

rubber production inThailand. J. Aerosol Res.21 : 122–129.
 92

Tetelepta, L.D., dan Zouboulis, A.I. 2008. Coagulation-Flocculation Processes in

Water/Wastewater Treatment: The Application Of New Generation Of
Chemical Reagents. Paper Presented at the 6th IASME/WSEAS
International Conference Greece.
Tzoupanos, N. D., dan Zouboulis, A. I. 2008. Coagulation-Flocculation
Processes In Water/Wastewater Treatment: The Application Of New
Generation Of Chemical Reagents. Paper presented at the 6th
IASME/WSEAS International Conference Greece.
Ugwu, C.U., Aoyagi, H., and Uchiyama, H. 2007. Photobioreactors for Mass
cultivation of Algae, Bioresource Technology , in press.
Utomo, N.B.P., Winarti, A., dan Erlina. 2005. Pertumbuhan Spirulina plantensis
yang dikultur dengan pupuk inorganik (Urea TSP dan ZA) dan kotoran
Ayam. Akuakultur Indonesia. 4(1) : 41-48.
Utomo, T.P., Hasanudin,U., dan Suroso, E. 2012. Agroindustri Karet Indonesia:
Petani Karet dan Kelembagaan, Proses Pengolahan dan Kinerjanya,
Selayang Pandang Karet Sintetis. PT Sarana Tutorial Nurani Sejahtera.
Bandung. 228 hlm.
Utomo, T.P., dan Suroso. 2008. Rancang bangun proses produksi karet remah
berbasis produksi bersih.(Disertasi). Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian
Bogor. Bogor.
Vashista, B.R. 1999. Botany for Degree Students:Algae, S.Chand dan Company
Ltd., New Delhi.
Volesky, G. 1970. Algal Product. NewDelhi: In Properties of Algal (Ed)Penum
Press.

Vonshak, A.S., Boussiba, A., Abeliovich and Richmond, A. 2004. Production of

Sprirulina Platensis biomass: Maintenance of monoalgal culture outdoors.
Biotech. and Bioengineering. 25(2):341-349.
Wahyuni, K.A., Anindiastuti, L.M., Sapta dan Agus, H. 2001. Teknik
Penyimpanan dan Kegunaan Nata de Nanno. Direktorat Jendral Perikanan
Budidaya laut., Lampung.
Wahyuni, S., Krisantini,S., and Johnston, M.E. 2010. Plant Growth Regulators
And Flowering Of Brunonia and Calandrinia sp. Elsivier Scientia
Holticulturae. 128 (2) : 141 – 145.
Wakatsuki, T., Esumi, H., and Omura, S. 1993. High performance and N dan
Premovableon-site domesticwastewater treatment system by MultiSoil
Layering Method, Wat. Sci. Tech., 27 (1) : 31-40.
Wibisono, T. 2005. Pengantar Ilmu Kelautan. Penerbit PT. Grasindo. Jakarta.
Wicaksono, G., Masithah E.D., dan Alamsjah, A. 2014. Pengaruh Pemberian
Spektrum Cahaya Berbeda Terhadap Kandungan Klorofil Spirulina sp.
 93

Fakultas Perikanan Dan Kelautan Universitas Airlangga. Surabaya. Skripsi:

15 hlm.
Widianingsih, Hartati, R., Endrawati, Yudiati, E., dan Iriani,V. R. 2011. Pengaruh
Pengurangan Konsentrasi Nutrien Fosfat dan Nitrat Terhadap Kandungan
Lipid Total Nannochloropsis Oculata. Semarang. Universitas Diponegoro.
Jurnal Ilmu Kelautan Maret 2011. Vol. 16 (1) 24-29. Hal 24-25.
Widyartini, D.S. 2007. Pertumbuhan Mikroalga Spirulina Hasil Kultur skala Semi
Massal. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan. Purwokerto: Universitas
Soedirman.
Wijanarko,A., Sudaryono, dan Sutarno. 2007. Karakteristik Sifat Kimia dan
Fisika Alfisol di Jawa Timur dan Jawa Tengah. Iptek Tanaman Pangan.
2(2): 214-266.
Wulan, R.R. 2015. Kemampuan mikroalga yang dikultivasi pada limbah cair
industri karet remah dalam menghasilkan biomassa dan menurunkan
cemaran. (Skripsi). Universitas Lampung. Lampung. 60 hlm.
Yani dan Yosar. 2009. Pemanfaatan Algae Chlorella sp. dan Eceng Gondok
Untuk Menurunkan Tembaga CU pada Industri Pelapisan Logam. J.
Jurusan Teknik Kimia. Fakultas Teknik. Universitas Diponegoro. Semarang.
Yulita, E. 2014. Pemanfaatan Limbah Cair Industri Karet Remah Sebagai Media
Pertumbuhan Chlorella Vulgaris Untuk Pakan Alami Ikan. Balai Riset dan
Standardisasi Industri Palembang. Jurnal Dinamika Penelitian Industri. 25
(1).
Zulfarina, Sayuti, I., and Putri, H.T. 2013. Potential utilization of algae Chlorella
pyrenoidosa for rubber waste management. Prosiding Semirata FMIPA.
Universitas Riau. Riau. 511-520.