WO2022025299A1

WO2022025299A1 - 疾患罹患性の評価方法

Info

Publication number: WO2022025299A1
Application number: PCT/JP2021/029242
Authority: WO
Inventors: 静衣大岡; 和隆池田; 大輔西澤
Original assignee: 公益財団法人東京都医学総合研究所
Priority date: 2020-07-31
Filing date: 2021-08-02
Publication date: 2022-02-03
Also published as: JP2023133648A

Abstract

疾患罹患性を評価する方法を提供する。本発明は、ＨＳ３ＳＴ４遺伝子、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子又はＩＧＦ２遺伝子の遺伝子多型と、個体の疾患罹患性とを関連づけることを特徴とする、疾患罹患性の評価方法に係るものである。

Description

疾患罹患性の評価方法

　本発明は、ＨＳ３ＳＴ４（Ｈｅｐａｒａｎ　ｓｕｌｆａｔｅ　ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ　３−Ｏ−ｓｕｌｆｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ　４）遺伝子などの解析により疾患罹患性を評価する方法等に関する。具体的には、ＨＳ３ＳＴ４遺伝子等における遺伝子多型と個体の疾患罹患性とを関連づける、疾患罹患性の評価方法に関する。

　水疱瘡の原因ウイルスである水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）が感染後、生涯潜伏感染し、免疫力が低下した際などに再活性化されると、強い痛みを伴う帯状疱疹（ＨＺ）が引き起こされる。５０歳以上でＨＺ罹患者が急増するが、５０歳以上では帯状疱疹罹患者の１８％程度、８０歳以上では帯状疱疹罹患者の３３％において、帯状疱疹後神経痛（ＰＨＮ）が発症し、長期間に渡り神経障害性疼痛を引き起こし、高齢になるほどＰＨＮを発症しやすいことが知られている（例えば、非特許文献１、２）。ＰＨＮで痛みが続く原因は、ＶＺＶ増殖に伴う神経損傷によるが、ＰＨＮの発症のしやすさが人により異なる理由や、疼痛が長期間続くメカニズムについては未解明である。

　また、上記の帯状疱疹罹患やＰＨＮによる痛み以外にも、一般に、神経障害性疼痛全般を含む慢性疼痛には、根本原因が不明なものが多く、疼痛持続の個人差の原因なども未解明である。

　先行技術文献
　非特許文献１：Ｙｕｋｉｋｏ　Ｔａｋａｏ，ｅｔ　ａｌ．，Ｉｎｃｉｄｅｎｃｅｓ　ｏｆ　Ｈｅｒｐｅｓ　Ｚｏｓｔｅｒ　ａｎｄ　Ｐｏｓｔｈｅｒｐｅｔｉｃ　Ｎｅｕｒａｌｇｉａ　ｉｎ　Ｊａｐａｎｅｓｅ　Ａｄｕｌｔｓ　Ａｇｅｄ　５０　Ｙｅａｒｓ　ａｎｄ　Ｏｌｄｅｒ　Ｆｒｏｍ　ａ　Ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ−ｂａｓｅｄ　Ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ　Ｃｏｈｏｒｔ　Ｓｔｕｄｙ：Ｔｈｅ　ＳＨＥＺ　Ｓｔｕｄｙ．，Ｊ．Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ，２０１５；２５（１０）：６１７−６２５．
　非特許文献２：Ｙａｗｎ　ＢＰ，Ｇｉｌｄｅｎ　Ｄ．，Ｔｈｅ　ｇｌｏｂａｌ　ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ｈｅｒｐｅｓ　ｚｏｓｔｅｒ．，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，２０１３；８１（１０）：９２８−９３０．
　非特許文献３：Ｔｉｗａｒｉ　Ｖ．ｅｔ　ａｌ．，２００５，ＢＢＲＣ，３３８：９３０−９３７．
　非特許文献４：Ｘｉａｏｌｉ　Ｙｕ　ｅｔ　ａｌ．，Ｖａｒｉｃｅｌｌａ　Ｚｏｓｔｅｒ　Ｖｉｒｕｓ　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｈｉｇｈｌｙ　Ｐｕｒｅ　Ｔｅｒｍｉｎａｌｌｙ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ　Ｈｕｍａｎ　Ｎｅｕｒｏｎｓ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｖｉｒｏｌ．，２０１３；１９（１）：７５−８１．

　このような状況下において、疾患（疼痛等）の罹患性を評価する方法等の開発が望まれていた。

　本発明は、上記状況を考慮してなされたもので、以下に示す、疾患罹患性の評価方法等を提供するものである。

（１）ＨＳ３ＳＴ４遺伝子、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子又はＩＧＦ２遺伝子の遺伝子多型と、個体の疾患罹患性とを関連づけることを特徴とする、疾患罹患性の評価方法。
（２）前記遺伝子多型の解析結果に基づいて、個体の疾患罹患性の高低の傾向を評価することを特徴とする、上記（１）に記載の方法。
（３）（ａ）被験者由来の試料を用いて遺伝子多型解析を行い、遺伝子多型を選択する工程、
　（ｂ）工程（ａ）において選択された遺伝子多型の遺伝子型と、疾患罹患性との間の関連を解析する工程、及び
　（ｃ）前記被験者における疾患罹患性と有意に関連した遺伝子多型を、疾患罹患性の評価に用いる工程
を含む、上記（１）又は（２）に記載の方法。

（４）前記疾患が疼痛である、上記（１）~（３）のいずれか１つに記載の方法。
（５）前記疼痛が、慢性疼痛、又は帯状疱疹に伴う疼痛である、上記（４）に記載の方法。
（６）慢性疼痛が、帯状疱疹後神経痛、脊柱管狭窄、椎間板ヘルニア、関節周囲炎、及び関節リウマチからなる群から選択される少なくとも１つである、上記（５）に記載の方法。

（７）遺伝子多型が、一塩基多型、挿入型多型、欠失型多型及び塩基繰り返し多型からなる群から選択される少なくとも１つである、上記（１）~（６）のいずれか１つに記載の方法。
（８）ＨＳ３ＳＴ４遺伝子の遺伝子多型が、ｒｓ９９８９４０８、ｒｓ４５１１５４０、ｒｓ４５７８６５１、ｒｓ４３８１６０８、ｒｓ７１９０１４３、ｒｓ７３５９３４１、ｒｓ６４９７８９８、ｒｓ４２３８９２５、ｒｓ１２７０８６８６、ｒｓ４７８７３３７、ｒｓ４５３３２８９、ｒｓ４３０３４９０、ｒｓ８０５０１１０、ｒｓ１２５９６３２４、ｒｓ７２０５８８０、ｒｓ４７８７７６６、ｒｓ９９２８７３５、ｒｓ４３３１３３９、ｒｓ７１９６１３８、ｒｓ７２００８１３、ｒｓ４３０５０２４、ｒｓ１１６４０９７０、ｒｓ４２３８９２６、ｒｓ４７８７３３８、ｒｓ２０５１６２、ｒｓ４７８７７７７、及びｒｓ１２９３３５１５からなる群から選択される少なくとも１つであり、
　ＩＧＦ２Ｒ遺伝子の遺伝子多型が、ｒｓ１８０５０７５、ｒｓ２２７４８４９、ｒｓ４７０９３９６、ｒｓ７７４６１０２、ｒｓ８１９１８２１、ｒｓ８１９１８２９、ｒｓ８１９１８９８、ｒｓ２２８２１３８、ｒｓ２２８２１３９、ｒｓ３７７７４１２、ｒｓ８１９１８１６、及びｒｓ８１９１８１８からなる群から選択される少なくとも１つであり、
　ＩＧＦ２遺伝子の遺伝子多型が、ｒｓ３２１３２１６である、
上記（１）~（７）のいずれか１つに記載の方法。

（９）ＨＳ３ＳＴ４遺伝子、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子又はＩＧＦ２遺伝子の遺伝子多型を含むＤＮＡ断片に特異的にハイブリダイズしうる、配列番号１~３８、４２及び４３の少なくとも１つに示される塩基配列のうち第５１番目の塩基を含む少なくとも１０塩基長の塩基配列又は該塩基配列に相補的な塩基配列からなるオリゴヌクレオチドを用いることを特徴とする、上記（１）~（８）のいずれか１つのいずれか１項に記載の方法。
（１０）ＨＳ３ＳＴ４遺伝子、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子又はＩＧＦ２遺伝の遺伝子多型を含むＤＮＡ断片に特異的にハイブリダイズしうる、配列番号１~３８、４２及び４３の少なくとも１つに示される塩基配列のうち第５１番目の塩基を含む少なくとも１０塩基長の塩基配列又は該塩基配列に相補的な塩基配列からなるオリゴヌクレオチドを含む、疾患罹患性の評価用キット。

（１１）ＨＳ３ＳＴ４遺伝子、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子又はＩＧＦ２遺伝子の遺伝子多型を含む、個体の疾患罹患性の高低の傾向を評価するための遺伝子多型マーカー。
（１２）ＨＳ３ＳＴ４遺伝子が発現可能なように導入されたトランスジェニック動物細胞に、候補物質を接触させて、該動物細胞の細胞融合及び／又は細胞伸展の状態を評価し、得られる評価結果を指標として、疼痛の治療薬又は予防薬をスクリーニングする方法。
（１３）前記疼痛が、慢性疼痛、又は帯状疱疹に伴う疼痛である、上記（１２）に記載の方法。

（１４）慢性疼痛が、帯状疱疹後神経痛、脊柱管狭窄、椎間板ヘルニア、関節周囲炎、及び関節リウマチからなる群から選択される少なくとも１つである、上記（１３）に記載の方法。
（１５）候補物質を接触させる前記動物細胞が、水痘帯状疱疹ウイルスを感染させたものである、上記（１２）に記載の方法。
（１６）前記動物細胞がヒト由来細胞である、上記（１２）に記載の動物細胞。

（１７）ＨＳ３ＳＴ４遺伝子が発現可能なように導入された、疼痛の治療薬又は予防薬をスクリーニングするために用いられるトランスジェニック動物細胞。
（１８）前記動物細胞が、水痘帯状疱疹ウイルスを感染させたものである、上記（１７）に記載の方法。
（１９）前記動物細胞がヒト由来細胞である、上記（１７）又は（１８）に記載の動物細胞。
　発明の効果

　本発明により、疼痛等の疾患の罹患性に関する個人差を評価することができる、ＨＳ３ＳＴ４遺伝子等の遺伝子多型を用いた疾患罹患性の評価方法等を提供することができる。当該評価方法等は、疼痛等の疾患に対する、テーラーメイド予防及び治療などに有用である。

ＨＳ３ＳＴ４，ＩＧＦ２Ｒ，ＩＧＦ２のＳＮＰｓは、帯状疱疹後神経痛（ＰＨＮ）や帯状疱疹罹患（ＨＺ）に有意に関連し、ＨＳ３ＳＴ４のＳＮＰｓはＰＨＮやＨＺ以外の末梢神経障害性疼痛、神経痛にも有意に関連していることを示す図である。図中の各数値は、相関の優位性を示す値（ｐ値）である。ＶＺＶ感染ＨＳ３ＳＴ４発現細胞の方が、プラーク辺縁が明瞭である（感染７日目）ことを示す図である。ＨＳ３ＳＴ４発現細胞では水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）感染により効率的に細胞融合する（感染２日目）ことを示す図である。ＨＳ３ＳＴ４発現細胞ではＶＺＶ感染により効率的に細胞融合する（フュージョンアッセイによる）ことを示す図である。ＨＳ３ＳＴ４発現細胞ではＶＺＶ糖タンパク質ｇＢ，ｇＨ，ｇＬの発現により細胞融合が促進される（フュージョンアッセイによる）ことを示す図である。単純ヘルペスウイルス２型（ＨＳＶ−２）感染でもＨＳ３ＳＴ４発現により融合が促進される（感染細胞の顕微鏡観察による）ことを示す図である。ＨＳ３ＳＴ４発現細胞ではＶＺＶ複製効率がほとんど低下しない又は少し低下する（定量ＰＣＲによる）ことを示す図である。ＨＳ３ＳＴ４発現細胞の方が、播種後細胞が伸展しにくい（播種２４時間後）ことを示す図である。ＳＮＰと各表現型との関連を示す図である。図中の各数値は、相関の優位性を示す値（ｐ値）である。図８−１、図８−２及び図９の全体を通して、Ｎｏ．２−５，１０−１６，１８，２１−２３，２５，及び２９−３９のＳＮＰは、＃印または＊印を付したＳＮＰ（Ｎｏ．１，６−９，１７，１９−２０，２４，及び２６−２８）の連鎖不平衡ＳＮＰである。ＳＮＰと各表現型との関連を示す図である（図８−１の続き）。ＳＮＰと各表現型との関連を示す図である（図８−２の続き）。

　以下、本発明を詳細に説明する。本発明の範囲はこれらの説明に拘束されることはなく、以下の例示以外についても、本発明の趣旨を損なわない範囲で適宜変更し実施することができる。なお、本明細書は、本願優先権主張の基礎となる、特願２０２０−１３０３７９号明細書（令和２年（２０２０年）７月３１日出願）の全体を包含する。本明細書において引用された全ての刊行物、例えば先行技術文献、及び公開公報、特許公報その他の特許文献は、参照として本明細書に組み込まれる。

１．本発明の概要
　一般に、神経障害性疼痛全般を含む慢性疼痛には、根本原因が不明なものが多く、疼痛持続の個人差の原因なども未解明である。本発明者は、ゲノムワイド関連解析（ＧＷＡＳ）等により、神経障害性疼痛全般、並びに帯状疱疹罹患、及び帯状疱疹後神経痛（ＰＨＮ）のいずれとも非常に関連の強い一塩基多型（ＳＮＰ）が存在する遺伝子として、ＨＳ３ＳＴ４（Ｈｅｐａｒａｎ　ｓｕｌｆａｔｅ　ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ　３−Ｏ−ｓｕｌｆｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ　４）遺伝子を発見した。この発見は、ＰＨＮ以外の神経障害性疼痛にも、帯状疱疹罹患やＰＨＮと同一の要因が関与する集団が存在する可能性を強く示唆する。さらに、本発明者は、統計上だけではなく実際に、帯状疱疹の原因ウイルスである水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）複製時に、ＨＳ３ＳＴ４タンパク質により細胞融合が促進されることを見出し、ＨＳ３ＳＴ４タンパク質により帯状疱疹発症時の神経障害が増悪する可能性を示した。また、本発明者は、ＨＳ３ＳＴ４タンパク質が細胞伸展時間の長期化に関わることも見出し、損傷神経再生時の軸索伸長時間の長期化が疼痛持続に寄与する可能性を示した。本発明において解明する、神経障害性疼痛全般を含む慢性疼痛の憎悪及び持続機構は、ＰＨＮ以外の疼痛にも直結し得るものである。

　また、本発明者は、ＶＺＶの受容体として報告のあるＩＧＦ２Ｒ（Ｉｎｓｕｌｉｎ−ｌｉｋｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　２　ｒｅｃｅｐｔｏｒ）の遺伝子や、ＩＧＦ２ＲのリガンドであるＩＧＦ２（Ｉｎｓｕｌｉｎ−ｌｉｋｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　２）の遺伝子のＳＮＰについても解析したところ、ＰＨＮ及び帯状疱疹罹患と有意に関連していた。このことから、これらＳＮＰは、ＶＺＶ感染に関連が予想される遺伝子のＳＮＰで有意となることが確認された。
　さらに、上述した遺伝子のＳＮＰが、ＰＨＮや帯状疱疹罹患以外の、末梢神経障害性疼痛・神経痛と関連するかを検討したところ、例えば、ＨＳ３ＳＴ４のＳＮＰｓでは、有意な関連あるいは有意な傾向が確認された。従って、ＨＳ３ＳＴ４　ＳＮＰｓは、ＶＺＶ感染に寄らない末梢神経疼痛全般にも関連することが示唆された。

　本発明によれば、ＨＳ３ＳＴ４遺伝子や、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子や、ＩＧＦ２遺伝子の遺伝子多型を解析することによって、例えば慢性疼痛や帯状疱疹に伴う疼痛といった疾患の罹患に関する表現型（すなわち疾患罹患性）についての個体差を評価することができる。疾患罹患性について評価した結果は、個体における慢性疼痛や帯状疱疹に伴う疼痛といった疾患の、発症のしやすさ、並びにその憎悪性（重症化の可能性及び重症化している状態を含む）及び持続性（長期化の可能性及び長期化している状態を含む）の予測や、当該疾患の治療薬や予防薬の投与回数、投与量及び種類などの決定において利用可能な重要な情報となる。よって、本発明は、ＨＳ３ＳＴ４遺伝子や、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子や、ＩＧＦ２遺伝子の遺伝子多型の解析結果に基づいて、疾患罹患性を評価する方法、具体的には、個体（個人）の疾患罹患性の有無（詳しくは、その遺伝的要因の有無）や疾患罹患性の高低の傾向を評価する（具体的には、予め知るまたは予測する）方法を提供するものである。

　また本発明では、ＨＳ３ＳＴ４遺伝子や、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子や、ＩＧＦ２遺伝子の遺伝子多型は、個体（個人）の疾患罹患性の有無（詳しくは、その遺伝的要因の有無）や疾患罹患性の高低の傾向を評価する（予め知る又は予測することを意味することがある。）ための、遺伝子多型マーカーとして利用することができる。
　本明細書において、「個体」とは、疾患罹患性を評価する対象者であり、被験者個人を意味する。

２．遺伝子多型
　本発明における、ＨＳ３ＳＴ４遺伝子、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子、及びＩＧＦ２遺伝子の遺伝子多型としては、主に一塩基多型（ｓｉｎｇｌｅ　ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ；ＳＮＰ）を含むが、限定はされず、挿入型多型、欠失型多型、および塩基繰り返し多型をも含み得る。
　一塩基多型（ＳＮＰ（ＳＮＰｓ））とは、遺伝子の特定の１塩基が他の塩基に置換することによる遺伝子多型を意味する。挿入／欠失型多型とは、１以上の塩基が欠失／挿入することによる遺伝子多型を意味する。

　また、塩基繰り返し多型とは塩基配列の繰り返し数の異なることにより生じる遺伝子多型を意味する。塩基繰り返し多型は繰り返す塩基数の違いにより、マイクロサテライト多型（塩基数：２塩基~４塩基程度）とＶＮＴＲ（ｖａｒｉａｂｌｅ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｔａｎｄｅｍ　ｒｅｐｅａｔ）多型（繰り返し塩基：数塩基~数十塩基）に分けられ、その繰り返し数が個々人によって異なる。

　本発明における疾患罹患性の評価に用い得る遺伝子多型（ＨＳ３ＳＴ４遺伝子、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子、及びＩＧＦ２遺伝子におけるＳＮＰ）の遺伝子多型名は、以下に列挙する通りである。これらの遺伝子多型は、後述する本願実施例で示す方法により統計学的に同定されたもの（Ｐ値＜０．０５）であるか、あるいは、それらと統計学的に連鎖性が高い（近傍ＳＮＰについてはｒ^２≧０．８、遠方ＳＮＰについてはＬＯＤ≧２、連鎖不平衡解析による）又は高いと予測されるものである。なお、遺伝子多型名は、ゲノム上の位置におけるＳＮＰの名称であり、ｄｂＳＮＰデータベース（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｐｒｏｊｅｃｔｓ／ＳＮＰ／からアクセス可能）に登録されたものである。基本的に、４桁以上の数字の前に「ｒｓ」のＩＤが付与され、どのＳＮＰであるかが識別されている。

・ＨＳ３ＳＴ４遺伝子におけるＳＮＰ：
　ｒｓ９９８９４０８、ｒｓ４５１１５４０、ｒｓ４５７８６５１、ｒｓ４３８１６０８、ｒｓ７１９０１４３、ｒｓ７３５９３４１、ｒｓ６４９７８９８、ｒｓ４２３８９２５、ｒｓ１２７０８６８６、ｒｓ４７８７３３７、ｒｓ４５３３２８９、ｒｓ４３０３４９０、ｒｓ８０５０１１０、ｒｓ１２５９６３２４、ｒｓ７２０５８８０、ｒｓ４７８７７６６、ｒｓ９９２８７３５、ｒｓ４３３１３３９、ｒｓ７１９６１３８、ｒｓ７２００８１３、ｒｓ４３０５０２４、ｒｓ１１６４０９７０、ｒｓ４２３８９２６、ｒｓ４７８７３３８、ｒｓ２０５１６２、ｒｓ４７８７７７７、ｒｓ１２９３３５１５

・ＩＧＦ２Ｒ遺伝子におけるＳＮＰ：
　ｒｓ１８０５０７５、ｒｓ２２７４８４９、ｒｓ４７０９３９６、ｒｓ７７４６１０２、ｒｓ８１９１８２１、ｒｓ８１９１８２９、ｒｓ８１９１８９８、ｒｓ２２８２１３８、ｒｓ２２８２１３９、ｒｓ３７７７４１２、ｒｓ８１９１８１６、ｒｓ８１９１８１８

・ＩＧＦ２遺伝子におけるＳＮＰ：
　ｒｓ３２１３２１６

　本発明は、ＨＳ３ＳＴ４遺伝子、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子、又はＩＧＦ２遺伝子の遺伝子多型を含むＤＮＡ断片に特異的にハイブリダイズし得るオリゴヌクレオチド、すなわち、具体的には、上述した各遺伝子多型名のＳＮＰのいずれか１つを含むオリゴヌクレオチドを提供する。当該遺伝子多型部位は、配列番号１~３８、４２及び４３のいずれか１つに示される塩基配列の第５１番目の塩基である。
　本発明のオリゴヌクレオチドの塩基は、少なくとも１０塩基、好ましくは１０~１５０塩基、より好ましくは１０~４５塩基、さらに好ましくは１４~２５塩基を有することが好ましい。本発明のオリゴヌクレオチドとしては、配列番号１~３８、４２及び４３のいずれか１つに示される塩基配列または当該塩基配列に相補的な塩基配列から選択されるオリゴヌクレオチド、あるいは当該オリゴヌクレオチドの一部（但し、前記遺伝子多型部位を含む）が挙げられる。

　本発明のオリゴヌクレオチドは、後述する遺伝子多型の検出において、ＨＳ３ＳＴ４遺伝子、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子、又はＩＧＦ２遺伝子の特異的なプローブおよびプライマーとして用いることができる。
　下記の表１−１及び表１−２には、１０１塩基長の塩基配列（配列番号１~３８、４２及び４３）が表示されており、それぞれの５１番目に、遺伝子多型部位が表示されている。例えば、［Ｇ／Ａ］と表示したものは「Ｇ」と「Ａ」の遺伝子多型であることを意味し、［Ｃ／Ｇ／Ｔ］と表示したものは「Ｃ」と「Ｇ」と「Ｔ」の遺伝子多型であることを意味し、［Ｔ／Ａ／Ｃ／Ｇ］と表示したものは「Ｔ」と「Ａ」と「Ｃ」と「Ｇ」の遺伝子多型であることを意味する。なお、遺伝子多型部位に関し、「メジャーアレル」および「マイナーアレル」は、それぞれ日本人健常者のゲノム上での多数派および少数派となるアレルを表す。表１−１及び表１−２中の遺伝子多型部位の表記において、左端のアレルがメジャーアレル、それ以外のアレルがマイナーアレルを意味する。例えば、遺伝子多型部位が［Ｃ／Ｇ／Ｔ］と表記されているものであれば、メジャーアレルが「Ｃ」であり、マイナーアレルが「Ｇ」と「Ｔ」である。

３．遺伝子多型と疾患罹患性との相関
　遺伝子に遺伝子多型が生じると、タンパク質の機能や発現量が変化する場合があると考えられる。従って、多型と、遺伝子によりコードされるタンパク質に関するさまざまな表現型とは相関関係にある場合がある。本発明に関しては、ＨＳ３ＳＴ４遺伝子、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子、及びＩＧＦ２遺伝子における遺伝子多型と、疾患罹患性（表現型）とは、相関関係にある場合がある。ここで、疾患罹患性としては、疼痛に対する罹患性が挙げられ、例えば、慢性疼痛や帯状疱疹に伴う疼痛に対する罹患性が挙げられる。慢性疼痛としては、例えば、帯状疱疹後神経痛（ＰＨＮ）、脊柱管狭窄、椎間板ヘルニア、関節周囲炎、及び関節リウマチからなる群から選択される少なくとも１つが挙げられる。

　各遺伝子多型と、表現型との相関は、一般的には、例えば、以下の（１）~（３）のように調べることができる。
（１）健常者における連鎖不平衡解析等の結果、推定された連鎖不平衡ブロック内の遺伝子多型を選択する。例えば、代表的な遺伝子多型であるＴａｇ　ＳＮＰを表現型との相関解析用の遺伝子多型として選択する。
（２）次に、被験者（疾患に罹患している患者）における当該遺伝子多型についての遺伝子多型頻度を解析する。遺伝子多型と疾患罹患性との相関を調べる場合、被験者と健常者の遺伝子多型頻度との比較を行う。比較においてはχ^２乗検定などの統計手法を用いることが有効である。ここで、さらに、表現型の違いにより被験者を分類し、分類毎に健常者と被験者の遺伝子多型頻度や遺伝子型を比較してもよい。
（３）被験者において疾患罹患性と有意に関連した遺伝子多型があれば、当該遺伝子多型を疾患罹患性の遺伝的素因の評価に用いることができる。また、健常者と被験者との間で遺伝子多型頻度に有意差のある遺伝子多型があれば、当該遺伝子多型を疾患脆弱性の遺伝的素因の評価に用いることができる。
　従って、上記遺伝子多型のリスクアレルを有する場合は、例えば５０％以上、６０％以上、７０％以上、８０％以上、９０％以上又は９５％以上の確率で、疼痛を有する、又は疼痛のリスクがあると判断又は推定することができる。

　ただし、遺伝子多型の傾向は、人種や出身地等に影響されることが示唆されているため、関連する遺伝子多型（例えばＳＮＰ）を見出すのに用いた母集団と同様な遺伝子多型を示す集団おいて、当該遺伝子多型を用いる上記評価を行うことが望ましい。

　上記のように調べられた、ＨＳ３ＳＴ４遺伝子、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子、及びＩＧＦ２遺伝子における遺伝子多型と疾患罹患性（表現型）との相関は、慢性疼痛や帯状疱疹に伴う疼痛といった疾患の発症のしやすさ、並びにその憎悪性（重症化の可能性及び重症化している状態を含む）及び持続性（長期化の可能性及び長期化している状態を含む）を評価する（予め知る、予測する）方法や、当該疾患の治療法又は予防法を選択する（治療薬や予防薬の適正投与量を決定等することも含む）方法などの指標として利用することができる。
　従って、上記遺伝子多型は、疾患罹患性の遺伝的素因の評価、疾患の診断、疾患の有無の判断等のための基礎情報又は補助資料となる。

　本発明により、疼痛である、又は疼痛のリスクがあると判定したときは、患者又は被験者に対して疼痛に対する予防薬又は治療薬を投与することができる。従って、本発明は、前記疼痛のリスクがあると判定された患者又は被検者に対して、疼痛に対する予防薬又は治療薬を投与する工程を含む、疼痛の予防方法又は治療方法を提供する。
　疼痛に対する予防薬又は治療薬としては、特に限定されるものではないが、例えば非オピオイド又はオピオイド鎮痛薬が挙げられる。また、抗うつ薬、抗てんかん薬、その他の中枢神経系作用薬も慢性疼痛や神経障害性疼痛等に使用することができる。

　上記予防薬又は治療薬の投与については、その用法は限定されるものではないが、通常、非経口又は経口用法が採用される。
　経口用固形製剤を調製する場合には、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤などを単独で又は適宜組み合わせた製剤、例えば錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、カプセル剤等とすることができる。
　注射剤等の非経口投与製剤を調製する場合には、必要によりｐＨ調整剤、緩衝剤、懸濁化剤、溶解補助剤、安定化剤、等張化剤、保存剤などを添加して、例えば、静脈、皮下、筋肉内注射剤製剤とし、単位投与量アンプル又は多投与量容器の状態等で提供される。必要により、凍結乾燥物とすることもできる。

　上記予防薬又は治療薬の投与量は、投与方法、投与時期、投与間隔などのほか、患者の症状の程度、年齢、性別、体重等によって異なり、特に限定されず、適宜選択される。その投与は、１日１~５回毎日投与してもよく、１日~１４日おきに又は２~６週間おきに間欠的に投与してもよい。

　また、本発明の遺伝子多型または評価方法を用いて、人種の違いによる疾患罹患性を評価することも可能である。対象者は特に限定されるものではなく、日本人、欧米人などが挙げられるが、本発明においては日本人又は日本人と同様の遺伝子多型傾向を有する者であることが好ましい。

　ところで、本発明の方法では、複数の被験者由来の試料を用いて遺伝子多型を解析している。従って、被験者個人の疾患罹患性を検出する場合、ゲノムＤＮＡにおける遺伝子変異の定量解析（例えばアレル特異的ＰＣＲ法等）による統計解析（例えばスピアマンの順位相関係数等）の結果、当該個人が全体のどの位置に存在又は属するかを調べることによって、各被験者個人の疾患罹患性（可能性又はリスク）を知ることができる。また、予め規定された数の被験者（１次母集団）において遺伝子多型と疾患罹患性との間の分析を行い、得られた測定値を基本データとして、この基本データと、検出の対象となる単数又は複数の被験者由来の遺伝子多型とを比較することにより、解析結果を、表現型である疾患罹患性と関連付けすることもできる。

　上記測定された被験者由来のデータを前記母集団の値に組み込んで遺伝子多型情報と疾患罹患性のリスクレベルを再度データ処理しておくと、対象となる被験者（母集団）の例数を増やすことにより、解析の精度を高めることができる。

４．遺伝子多型の検出
　被験者からのゲノムサンプルは、血液、唾液、皮膚等の生体試料から抽出することができるが、ゲノムサンプルを採取できるものであれば、これに限定されるものではない。ゲノムＤＮＡの抽出及び精製法は周知である。例えば、ヒトから採取した血液、唾液、皮膚等の検体から、フェノール法等を用いてゲノムＤＮＡを精製する。その際、ＧＦＸ　Ｇｅｎｏｍｉｃ　Ｂｌｏｏｄ　ＤＮＡ　Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　Ｋｉｔ等の市販のゲノムＤＮＡ抽出キットや装置を用いてもよい。調査するＳＮＰがオープンリーディングフレーム中にある場合は、ゲノムＤＮＡの代わりにｍＲＮＡやｔｏｔａｌ　ＲＮＡを抽出してもよい。以下、上記の被験サンプルの遺伝子多型検出法の一例を示す。

（１）ＰＣＲ法を用いた検出
　ＰＣＲにより被験サンプルを増幅するには、Ｆｉｄｅｌｉｔｙの高いＤＮＡポリメラーゼ、例えば、ＫＯＤ　Ｄａｓｈポリメラーゼ（ＴＯＹＯＢＯ社）を用いることが好ましい。用いるプライマーは、被験サンプル中の対象ＳＮＰを増幅できるようにプライマーの任意の位置に遺伝子多型が含まれるように設計し合成する。
　増幅反応終了後は、増幅産物の検出を行い、多型の有無を判定する。

　遺伝子多型情報を得る方法は、例えば、以下の通りである。
　（ｉ）ヒトから採取した検体（例えば血液）から、フェノール法等を用いてゲノムＤＮＡを精製する。その際、ＧＦＸ　Ｇｅｎｏｍｉｃ　Ｂｌｏｏｄ　ＤＮＡ　Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　Ｋｉｔ（ＧＥヘルスケア　バイオサイエンス株式会社製）等の市販のゲノムＤＮＡ抽出キットや装置を用いてもよい。
　（ｉｉ）次に、得られたゲノムＤＮＡを鋳型として、ＰＣＲ法によりゲノムＤＮＡをいくつかに分けて増幅し、シークエンス用の鋳型ＤＮＡとする。本発明は、遺伝子多型を対象とするため、ＰＣＲ法に用いる酵素はなるべくＦｉｄｅｌｉｔｙ（忠実度）の高いものを用いることが望ましい。

　（ｉｉｉ）各遺伝子多型周辺の領域を、ＧｅｎＢａｎｋに公開されている配列情報に基づいて設計したプライマーを用いて約５００~１０００ｂｐずつＰＣＲにより増幅を行う。
　（ｉｖ）これらのＰＣＲ断片の全領域の塩基配列を、ＧｅｎＢａｎｋに公開されている配列情報に基づいて設計したプライマーを用いて約５００~７００ｂｐずつシークエンス法により解読し、目的の遺伝子多型情報を得ることができる。

（２）塩基配列決定法による検出
　本発明においては、ジデオキシ法に基づく塩基配列決定法により本発明の多型を検出することもできる。塩基配列決定に用いるシークエンサーには、市販のＡＢＩシリーズ（アマシャムバイオサイエンス）を用いる。

（３）ＤＮＡマイクロアレイによる検出
　ＤＮＡマイクロアレイは、支持体上にヌクレオチドプローブが固定されたものであり、ＤＮＡチップ、Ｇｅｎｅチップ、マイクロチップ、ビーズアレイなどを含む。
　まず、被験サンプルのポリヌクレオチドを単離し、ＰＣＲにより増幅し、蛍光レポーター基により標識する。続いて、標識化ＤＮＡ／ｍＲＮＡ，ｔｏｔａｌ　ＲＮＡをアレイと共にインキュベートする。次にこのアレイをスキャナーに差し込み、ハイブリダイゼーションパターンを検出する。ハイブリダイゼーションのデータは、プローブアレイに結合した（すなわち標的配列に取り込まれた）蛍光レポーター基からの発光として採集する。標的配列と完全に一致したプローブは、標的配列と一致していない部分を有するものよりも強いシグナルを生じる。アレイ上の各プローブの配列及び位置は分かっているため、相補性によって、プローブアレイと反応させた標的ポリヌクレオチドの配列を決定することができる。

　遺伝子多型情報を得る方法は、以下の通りである。
　（ｉ）ヒトから採取した検体（例えば血液）から、フェノール法等を用いてゲノムＤＮＡを精製する。その際、ＧＦＸ　Ｇｅｎｏｍｉｃ　Ｂｌｏｏｄ　ＤＮＡ　Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　Ｋｉｔ（ＧＥヘルスケア　バイオサイエンス株式会社製）等の市販のゲノムＤＮＡ抽出キットや装置を用いてもよい。
　（ｉｉ）次に、得られたゲノムＤＮＡをＴＥ　ｂｕｆｆｅｒ（１０ｍＭ　ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，１ｍＭ　ＥＤＴＡ，ｐＨ８．０）に溶解し、１００ｎｇ／μｌに調整する。
　（ｉｉｉ）イルミナ社製、ｉＳｃａｎシステム（Ｉｌｌｕｍｉｎａ，Ｓａｎ　Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を利用したＩｎｆｉｎｉｕｍ　ａｓｓａｙ　ＩＩ法などにより、メーカー側のプロトコルに従い全ゲノムジェノタイピングを行う。

　（ｉｖ）ＢｅａｄＳｔｕｄｉｏ　Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ　ｍｏｄｕｌｅ　ｖ３．３．７（Ｉｌｌｕｍｉｎａ）などを用いて全ゲノムジェノタイピングデータ解析を行い、各サンプルの遺伝子多型データの品質評価（Ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ）を行う。
　（ｖ）これらの全ゲノムジェノタイピングデータより、目的の遺伝子名のアノテーション情報を手掛かりにしてその遺伝子領域及びフランキング領域に含まれる遺伝子多型を選定し、ＢｅａｄＳｔｕｄｉｏ　Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ　ｍｏｄｕｌｅ　ｖ３．３．７（Ｉｌｌｕｍｉｎａ）などの出力機能を用いてそれらの遺伝子多型情報を全て抽出する。

（４）ＴａｑＭａｎ　ＰＣＲ法による検出
　ＴａｑＭａｎ　ＰＣＲ法は、蛍光標識したアレル特異的オリゴとＴａｑ　ＤＮＡポリメラーゼによるＰＣＲ反応とを利用した方法である。ＴａｑＭａｎ　ＰＣＲ法で用いるアレル特異的オリゴ（ＴａｑＭａｎプローブという）は、前記遺伝子多型情報に基づいて設計することができる。

（５）インベーダー法による遺伝子多型の検出
　インベーダー法は、アレル特異的オリゴと鋳型とをハイブリダイゼーションすることにより遺伝子多型を検出する方法である。インベーダー法を行うためのキットは市販されており、この方法により容易に遺伝子多型を検出することが可能である。

５．キット
　本発明は、疾患罹患性を評価するためのキットを提供する。本発明の遺伝子多型検出用キットは、本発明を実施するために必要な１種以上の成分を含む。
　例えば、本発明のキットは、酵素を保存若しくは供給するためのもの、および／または遺伝子多型検出を実施するために必要な反応成分を含むことが好ましい。当該成分としては、限定されるものではないが、例えば、本発明のオリゴヌクレオチド、酵素緩衝液、ｄＮＴＰ、コントロール用試薬（例えば、組織サンプル、ポジティブおよびネガティブコントロール用標的オリゴヌクレオチドなど）、標識用および／または検出用試薬、固相支持体、説明書などが挙げられる。また本発明のキットは、必要な成分のうちの一部のみを含む部分的キットであってもよく、その場合には、ユーザーが他の成分を用意することができる。

　本発明のキットは、上記オリゴヌクレオチドを支持体に固定したマイクロアレイとして提供することもできる。マイクロアレイは、支持体上に本発明のオリゴヌクレオチドが固定されたものであり、ＤＮＡチップ、Ｇｅｎｅチップ、マイクロチップ、ビーズアレイなどを含む。
　本発明のキットは、本発明において見出された、ＨＳ３ＳＴ４遺伝子、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子、及び／又はＩＧＦ２遺伝子における遺伝子多型を含み、当該遺伝子多型を含むＤＮＡ断片に特異的にハイブリダイズしうるオリゴヌクレオチドを含むことが好ましい。

　本発明のキットにより遺伝子多型を判定する場合、例えば、疾患の罹患前又は罹患後に採血して、ＨＳ３ＳＴ４遺伝子、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子、及び／又はＩＧＦ２遺伝子を含むＤＮＡを単離し、当該遺伝子をキット中のオリゴヌクレオチドと反応させて遺伝子型を判定する。
　判定した遺伝子型および遺伝子多型から、慢性疼痛や帯状疱疹に伴う疼痛といった疾患の、発症のしやすさや、その憎悪性（重症化の可能性及び重症化している状態を含む）及び持続性（長期化の可能性及び長期化している状態を含む）を予測したり、当該疾患の治療薬や予防薬の種類または用量などの投与計画を作成することもできる。その結果、個体に合った予測・診断・治療・予防の効果を得ることができ、オーダーメイド医療に有用となる。

６．疼痛治療又は予防薬のスクリーニング
　後述する本願実施例においても示すとおり、本発明者は、ＨＳ３ＳＴ４タンパク質の発現上昇により、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）感染時の細胞融合能が亢進することや、細胞伸展に要する時間が長期化することも見出し、これらの現象が、疼痛（帯状疱疹に伴う疼痛や慢性疼痛など）の発症のしやすさや、その疼痛の憎悪性（重症化の可能性及び重症化している状態を含む）及び持続性（長期化の可能性及び長期化している状態を含む）の要因となり得ることを見出した。

　従って、本発明においては、疼痛の治療薬又は予防薬をスクリーニングする方法なども提供される。
　具体的には、ＨＳ３ＳＴ４遺伝子が発現可能なように導入されたトランスジェニック動物細胞に、候補物質を接触させて、該動物細胞の細胞融合及び／又は細胞伸展の状態を評価し、得られる評価結果を指標として、前記スクリーニングを行う方法などが提供される。
　ここで、前記疼痛としては、先に述べた本発明の評価方法での説明と同様に、例えば、慢性疼痛、又は帯状疱疹に伴う疼痛などが挙げられ、また、慢性疼痛としては、帯状疱疹後神経痛、脊柱管狭窄、椎間板ヘルニア、関節周囲炎、及び関節リウマチなどが挙げられる。

　また、ＨＳ３ＳＴ４遺伝子が発現可能なように導入される動物細胞としては、限定はされず、ヒト由来細胞や、各種非ヒト動物細胞（マウス、ラット及びモルモット等の齧歯類（ネズミ目）動物や、ウサギ、ブタ、イタチ、イヌ、ネコ、サル、ヒツジ、ウシ及びウマ等のヒトを除く哺乳類動物由来の細胞）が挙げられるが、ヒト由来細胞が好ましい。ヒト由来細胞としては、例えば、ヒト悪性メラノーマ細胞（ＭｅＷｏ細胞、ＣＯＬＯ６７９細胞、Ｇ−３６１細胞、ＤＥＯＣ−１細胞、ＨＭＶ−Ｉ細胞、ＨＭＶ−ＩＩ細胞、ＨＴＭＭ細胞）、ヒト多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）、ｉＰＳＣ由来分化細胞、子宮頸部類上皮がん（ＨｅＬａ細胞、ＨｅＬａ　Ｓ３細胞）、ヒト神経膠腫由来細胞（ＮＰ２細胞，ＮＰ３細胞，ＮＰ５細胞，ＮＰ８細胞、Ａ１７２細胞、ＯＮＤＡ１０細胞、ＯＮＤＡ１１細胞、ＫＧ−１−Ｃ細胞、ＴＭ−３１細胞）、ヒト神経芽細胞腫細胞（ＳＫ−Ｎ−ＮＨ細胞、ＳＫ−Ｎ−ＭＣ細胞、ＨＳＮＢ細胞、ＴＮ−２細胞、ＳＣＣＨ−２６細胞、ＮＢ−１細胞、ＴＮ−１細胞、ＮＨ−１２細胞、ＮＨ−６細胞、ＩＭＲ３２細胞）、未分化神経外胚葉性腫瘍細胞（ＦＵ−ＲＰＮＴ−１細胞、ＦＵ−ＲＰＮＴ−２細胞）、ヒト繊維芽細胞（Ｄｅｔｒｏｉｔ５５１細胞）、ヒト膠芽腫細胞株（Ｕ８７ＭＧ細胞、Ｕ３７３細胞、Ｕ１３８細胞）、ヒト胎児線維芽細胞株（ＨＥＦ細胞、ＫＭＳＴ−６細胞）、ヒト骨腫瘍細胞（Ｕ２ＯＳ細胞）、ヒト胎児肺細胞（ＭＲＣ−５細胞、ＨＥＬ細胞）、および、ヒト網膜芽細胞腫由来細胞株（ＷＥＲＩ−Ｒｂ−１細胞、ＮＣＣ−ＲｂＣ−３９細胞、ＮＣＣ−ＲｂＣ−５１、ＮＣＣ−ＲｂＣ−５４、ＮＣＣ−ＲｂＣ−５９細胞、ＮＣＣ−ＲｂＣ−６０細胞、ＮＣＣ−ＲｂＣ−６７細胞、ＮＣＣ−ＲｂＣ−８３細胞、ＮＣＣ−ＲｂＣ−９２細胞、ＮＣＣ−ＲｂＣ−Ｔ１細胞）などが挙げられる。

　ＨＳ３ＳＴ４遺伝子が発現可能なように導入されたトランスジェニック動物細胞は、公知の遺伝子組換え技術を用いて、適宜作製することができる。なお、本発明のスクリーニング方法に用いるトランスジェニック動物細胞は、例えば、予め、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）を感染させたものであることが好ましい。ＶＺＶ感染トランスジェニック動物細胞は、主に、当該動物細胞の細胞融合の状態を評価する場合に、好ましく用いられる。
　トランスジェニック動物細胞への候補物質の接触（添加等）は、限定はされず、公知の方法及び条件等を採用することができる。接触させる量についても、動物細胞の種類及び状態、並びに候補物質の種類等を考慮して、適宜設定可能である。

　候補物質についても、特に制限はされず、例えば、ＨＳ３ＳＴ４タンパク質の発現上昇を抑制する又は当該発現を阻害する物質などが挙げられる。具体的には、例えば、天然又は人為的に合成された各種ペプチド、タンパク質（酵素や抗体を含む）、核酸（ポリヌクレオチド（ＤＮＡ（アンチセンスＤＮＡなど），ＲＮＡ）、オリゴヌクレオチド（ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ及びマイクロＲＮＡ等）、ペプチド核酸（ＰＮＡ）など）、低分子、中分子又は高分子有機化合物等を例示することができる。

　トランスジェニック動物細胞の細胞融合の状態の評価は、候補物質の接触前に比べて、細胞融合の促進が、有意に抑制又は阻害されているかどうかを評価することが好ましい。また、トランスジェニック動物細胞の細胞伸展の状態の評価は、候補物質の接触前に比べて、細胞伸展の抑制が、有意に抑制又は阻害されているかどうかを評価することが好ましい。有意性が認められれば、その候補物質は、疼痛の治療薬又は予防薬としてスクリーニングし得るものであると評価できる。

　なお、本発明のスクリーニング方法は、必要に応じ、他の何らかの工程を含んでいてもよい。
　また本発明においては、上記スクリーニングをするために用いられるトランスジェニック動物細胞に係る発明も提供される。さらに本発明においては、上記スクリーニング方法により得られた治療又は予防薬を含む、疼痛（慢性疼痛、又は帯状疱疹に伴う疼痛など）の治療又は予防用医薬組成物に係る発明や、当該医薬組成物を、当該疼痛を患っている又は患っている可能性がある患者に投与することを含む、疼痛の治療又は予防方法に係る発明も提供される。
　この場合の治療薬又は予防薬の剤型、用法、用量等は前記と同様である。

　以下に、実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。

　本発明者は、ゲノムワイド関連解析等により、神経障害性疼痛および帯状疱疹罹患、並びに帯状疱疹後神経痛（ＰＨＮ）の全てと極めて有意な関連がある一塩基多型（ＳＮＰ）が存在する遺伝子ＨＳ３ＳＴ４を見出した。このＨＳ３ＳＴ４タンパク質は、細胞膜表面タンパク質等に結合しているヘパラン硫酸の修飾酵素をコードし、単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ−１）感染に関与するとの報告がある（前掲の非特許文献３参照）。ＨＳＶ−１は、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）と同じヘルペスウイルス科に属する近縁ウイルスであるため、ＶＺＶ感染にもＨＳ３ＳＴ４タンパク質が関与する可能性が考えられ、ひいてはＰＨＮのみならず神経障害性疼痛全般にも関連する可能性が考えられた。そこで、ＨＳ３ＳＴ４タンパク質がＶＺＶ感染に及ぼす影響を解明すると同時に、ＨＳ３ＳＴ４タンパク質が痛みに関わる機構を明らかにする。

１．方法
ゲノム解析
　ＪＲ総合東京病院、順天堂大学病院、日本大学医学部附属板橋病院に来院した１９４名の末梢神経障害性疼痛患者、および関東近辺在住の２８２名の健常人の全血サンプルからＤＮＡを抽出し、全ゲノムジェノタイピングをＩｎｆｉｎｉｕｍ　ａｓｓａｙ　ＩＩを用いｉＳｃａｎ　ｓｙｓｔｅｍ（Ｉｌｌｕｍｉｎａ，Ｓａｎ　Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）で解析した。１９４名の末梢神経障害性疼痛患者サンプルについてはＨｕｍａｎＯｍｎｉ１−Ｑｕａｄ　ｖ１．０（ｔｏｔａｌ　ｍａｒｋｅｒｓ：１，１３４，５１４）ａｎｄ　ＨｕｍａｎＯｍｎｉＥｘｐｒｅｓｓ−１２　ｖ１．１（ｔｏｔａｌ　ｍａｒｋｅｒｓ：７１９，６６５）のＢｅａｄＣｈｉｐｓを用いた。２８２名の健常人サンプルにはＨｕｍａｎＯｍｎｉＥｘｐｒｅｓｓＥｘｏｍｅ−８　ｖ１．２（ｔｏｔａｌ　ｍａｒｋｅｒｓ：９６４，１９３）ＢｅａｄＣｈｉｐを用いた。

　全ゲノムジェノタイピングデータの質をＧｅｎｏｍｅＳｔｕｄｉｏ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ　ｍｏｄｕｌｅ　ｖ３．３．７（Ｉｌｌｕｍｉｎａ）で評価した。Ｃａｌｌ　ｒａｔｅが０．９５未満のものを除外したところ、１９４名の末梢神経障害性疼痛患者サンプルのうち３名のサンプルが除外された。ゲノムワイド関連解析（ＧＷＡＳ）の結果、末梢神経障害性疼痛との関連が有意に強いＳＮＰの中に、単純ヘルペスウイルス１型との関連が報告されているＨＳ３ＳＴ４遺伝子のＳＮＰ　ｒｓ９９８９４０８があった。単純ヘルペスウイルス１型は、帯状疱疹を引き起こす水痘帯状疱疹ウイルスの近縁ウイルスであり、帯状疱疹は激痛を伴う疾患で、さらに帯状疱疹後神経痛に進行することから、ＨＳ３ＳＴ４遺伝子の当該ＳＮＰと帯状疱疹罹患、帯状疱疹後神経痛患者との関連の統計解析を行った。末梢神経障害性疼痛患者サンプルの中から、帯状疱疹罹患経験者９６名、帯状疱疹後神経痛患者９１名、神経痛患者（帯状疱疹後神経痛患者を除く）３９名を抽出し、それぞれ健常人との比較解析を当該ＳＮＰについてＳＳＰＳソフトウェア（ＩＢＭ）を用いて分割表解析を行った。また、当該ＳＮＰ近傍のＧＷＡＳ掲載ＳＮＰのうち、慢性疼痛、ＰＨＮ、帯状疱疹、慢性疼痛（ＰＨＮ除く）、慢性疼痛（帯状疱疹除く）のいずれかと有意な関連があるＨＳ３ＳＴ４　ＳＮＰは、ｒｓ４５１１５４０、ｒｓ４５７８６５１、ｒｓ４３８１６０８、ｒｓ６４９７８９８、ｒｓ１２７０８６８６、ｒｓ４７８７７７７、ｒｓ４５３３２８９、ｒｓ４３０３４９０、ｒｓ８０５０１１０、ｒｓ１２５９６３２４であった。これらのいずれかのＳＮＰまたはｒｓ９９８９４０８　ＳＮＰと連鎖不平衡にある、ｒｓ７２０５８８０、ｒｓ４７８７７６６、ｒｓ９９２８７３５、ｒｓ２０５１６２、ｒｓ６４９７８９８、ｒｓ４３０５０２４、ｒｓ７１９０１４３、ｒｓ７３５９３４１、ｒｓ４２３８９２５、ｒｓ１１６４０９７０、ｒｓ４２３８９２６、ｒｓ４７８７３３７、ｒｓ４７８７３３８、ｒｓ４３３１３３９、ｒｓ７１９６１３８、ｒｓ７２００８１３、ｒｓ１２９３３５１５の中でＧＷＡＳに掲載がない、ｒｓ４３０５０２４、ｒｓ７１９０１４３、ｒｓ７３５９３４１、ｒｓ４２３８９２５、ｒｓ１１６４０９７０、ｒｓ４２３８９２６、ｒｓ４７８７３３７、ｒｓ４７８７３３８、について、ＴａｑＭａｎ　ＳＮＰ遺伝子型決定アッセイ（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ）により各サンプルの遺伝子型を同定し、追加統計解析を行った。慢性痛と有意な関連があるＩＧＦ２Ｒ　ＳＮＰ　ｒｓ１８０５０７５と連鎖不平衡にある、ｒｓ２２７４８４９、ｒｓ４７０９３９６、ｒｓ７７４６１０２、ｒｓ８１９１８２１、ｒｓ８１９１８２９、ｒｓ８１９１８９８、ｒｓ２２８２１３８、ｒｓ２２８２１３９、ｒｓ３７７７４１２、ｒｓ８１９１８１６、ｒｓ８１９１８１８、の中でＧＷＡＳに掲載がない、ｒｓ２２８２１３８、ｒｓ２２８２１３９、ｒｓ３７７７４１２、ｒｓ８１９１８１６、ｒｓ８１９１８１８、について、ＴａｑＭａｎ　ＳＮＰ遺伝子型決定アッセイにより各サンプルの遺伝子型を同定し、追加統計解析を行った。

定常発現細胞作製
　ＨＳ３ＳＴ４　ｃＤＮＡをｐｃＤＮＡ３ベクターに導入したプラスミドを作製した。ｐｃＤＮＡ３−ＨＳ３ＳＴ４，ｐｃＤＮＡ３をヒト悪性メラノーマ細胞（ＭｅＷｏ細胞）に導入後Ｇ４１８で選択しモノクローナル細胞ＭｅＷｏ−ＨＳ３ＳＴ４，ＭｅＷｏ−ｖｅｃｔｏｒを得た。それらの細胞でのＨＳ３ＳＴ４の発現を確認し実験に使用した。

ウイルス感染実験
　ＶＺＶ野生株感染ＭｅＷｏ細胞をターゲット細胞に感染させた。ＭｅＷｏ−ＨＳ３ＳＴ４，ＭｅＷｏ−ｖｅｃｔｏｒ，ＭｅＷｏ細胞を２４穴または９６穴プレートに播種し、翌日１０００ｐｌａｑｕｅ　ｆｏｒｍｉｎｇ　ｕｎｉｔ（ＰＦＵ）相当の感染ＭｅＷｏ細胞を添加し（ｍｕｌｔｉｐｌｉｃｉｔｙ　ｏｆ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ＝０．０１）、３７℃、５％ＣＯ_２インキュベーター内で加温した。随時顕微鏡下観察を行った。

プラークアッセイ
　ＭｅＷｏ−ＨＳ３ＳＴ４，ＭｅＷｏ−ｖｅｃｔｏｒ，ＭｅＷｏ細胞を１２穴プレート等に播種翌日にＶＺＶ野生株感染ＭｅＷｏ細胞を段階希釈したものを添加し、３７℃、５％ＣＯ_２インキュベーター内で６日間程度加温した。その間に顕微鏡下観察を行った。最終的に培地をホルマリン入りクリスタルバイオレット固定染色液に交換し２時間室温に放置後、固定染色液を洗浄し乾燥させ、形態観察、計数を行った。

エレクトロポレーション
　Ａｍａｘａ　４Ｄ　Ｎｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒ　Ｋｉｔ　ＳＦ（Ｌｏｎｚａ）と添付の１６ｗｅｌｌキュベットを用い、Ａｍａｘａ　４Ｄ　Ｎｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒ　Ｘ　ｕｎｉｔ（Ｌｏｎｚａ）で細胞に遺伝子導入し９６穴プレートに播種後、４~６時間後に新鮮な培地１００μｌに交換した。

フュージョンアッセイ
　９６穴プレート中の感染細胞等またはエレクトロポレーション翌日の細胞の上清１００μｌの半量である５０μｌを新しい９６穴プレートに分取し、ＣｙｔｏＴｏｘ　９６　ｎｏｎ−ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ　ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ　ａｓｓａｙ（プロメガ）のプロトコルに従って行った。

定量ＰＣＲ
　２４穴プレートの感染細胞等から、ＱＩＡａｍｐ　ＤＮＡ　Ｍｉｎｉ　Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を用いてトータルＤＮＡを精製した。ＴａｑＭａｎリアルタイムＰＣＲマスターミックス（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ）を用い、７５００ＦａｓｔリアルタイムＰＣＲシステム（Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）で解析を行った。ＶＺＶプローブ、プライマーは下記の通りである。細胞数評価のために、細胞のＲＮａｓｅＰコピー数をＴａｑＭａｎ^ＴＭ　Ｃｏｐｙ　Ｎｕｍｂｅｒ　Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　Ａｓｓａｙ，ｈｕｍａｎ，ＲＮａｓｅ　Ｐ（ＶＩＣ−ＴＡＭＲＡ）で検出した。

ＶＺＶ　ｇｅｎｏｍｅ検出（前掲の非特許文献４参照）
　プローブ（ｆｉｎａｌ　０．２５μＭ）：

　プライマー（ｆｉｎａｌ　０．９μＭ）：

ＲＮａｓｅＰ　ｇｅｎｏｍｅ検出
　プローブ・プライマー：
　ＴａｑＭａｎ^ＴＭ　Ｃｏｐｙ　Ｎｕｍｂｅｒ　Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　Ａｓｓａｙ，ｈｕｍａｎ，ＲＮａｓｅ　Ｐ（ＶＩＣ−ＴＡＭＲＡ）を１×で使用

　ＰＣＲ反応：
　５０℃　　２分
　９５℃　　１０分　　以上１サイクル
　９５℃　　１５秒
　６０℃　　１分　　以上４０サイクル

細胞伸展観察
　ＭｅＷｏ−ＨＳ３ＳＴ４，ＭｅＷｏ−ｖｅｃｔｏｒ，ＭｅＷｏ細胞を播種後、経時的に顕微鏡下観察を行った。

２．結果
ゲノム解析
　末梢神経障害性疼痛との関連をＧＷＡＳで検討した結果、Ｔｒｅｎｄ　ｍｏｄｅｌの上位４位にＨＳＶ−１との関連が報告されているＨＳ３ＳＴ４遺伝子のｒｓ９９８９４０８　ＳＮＰが入っていた。ＨＳＶ−１は、帯状疱疹を引き起こすＶＺＶの近縁ウイルスであり、帯状疱疹は激痛を伴う疾患で、さらにＰＨＮに進行することから、ＨＳ３ＳＴ４遺伝子ｒｓ９９８９４０８　ＳＮＰと帯状疱疹罹患、ＰＨＮとの関連の統計解析を行った（図１）。ＨＳ３ＳＴ４遺伝子ｒｓ９９８９４０８　ＳＮＰはＰＨＮおよび帯状疱疹罹患と有意に関連していた。また、ＨＳ３ＳＴ４遺伝子のｒｓ１２７０８６８６　ＳＮＰでも同様の結果が得られた。さらに、ＶＺＶの受容体として報告のあるＩＧＦ２Ｒのｒｓ１８０５０７５　ＳＮＰと、ＶＺＶの関連は報告がないＩＧＦ２ＲのリガンドであるＩＧＦ２のｒｓ３２１３２１６　ＳＮＰについても解析したところ、ＰＨＮおよび帯状疱疹罹患と有意に関連していたことから、ＶＺＶ感染に関連が予想される遺伝子のＳＮＰで有意となることが確認された。

　次に、これらの遺伝子のＳＮＰが、ＰＨＮや帯状疱疹罹患以外の末梢神経障害性疼痛・神経痛と関連するかを検討したところ、ＩＧＦ２ＲおよびＩＧＦ２のＳＮＰでは有意な関連が見られなかったのに対し、ＨＳ３ＳＴ４　ＳＮＰｓでは有意な関連あるいは有意傾向が確認された。したがって、ＨＳ３ＳＴ４　ＳＮＰｓはＶＺＶ感染に寄らない末梢神経疼痛全般にも関連することが示唆された。

　さらに、末梢神経疼痛全般、ＰＨＮおよび帯状疱疹罹患と有意に関連していた上記ＨＳ３ＳＴ４　ＳＮＰｓについて（図８−１及び８−２中のＳＮＰｓ（＃印あり））、近傍のＧＷＡＳ掲載ＳＮＰｓの統計解析を行い、いずれかの疼痛表現型で有意な関連を示したものを選抜した（図８−１及び８−２中のＳＮＰｓ（＊印あり））。それら（図８−１及び８−２中のＳＮＰｓ（＃印あり及び＊印あり））の連鎖不平衡ＳＮＰ（図８−１及び８−２のＳＮＰｓ（＃印なしかつ＊印なし））についても統計解析を行ったところ、連鎖不平衡関係にあるＳＮＰｓはいずれも似通った傾向を示し、いずれかの疼痛表現型で有意な関連を示していた（図８−１及び８−２）。末梢神経疼痛全般、ＰＨＮおよび帯状疱疹罹患と有意に関連していた上記ＩＧＦ２Ｒ　ＳＮＰ（図９のＳＮＰ（＃印あり））についても同様に、連鎖不平衡ＳＮＰ（図９のＳＮＰｓ（＃印なしかつ＊印なし））について統計解析を行い、ＨＳ３ＳＴ４　ＳＮＰｓと同様の結果を得た（図９）。

ＨＳ３ＳＴ４発現によるＶＺＶ等感染への影響
　ＨＳ３ＳＴ４　ＳＮＰがＶＺＶ関連疼痛および非関連疼痛両方に関与することから、まず、ＨＳ３ＳＴ４発現によるＶＺＶ感染に対する影響を検討した。ＭｅＷｏ−ＨＳ３ＳＴ４細胞およびネガティブコントロール細胞であるＭｅＷｏ−ｖｅｃｔｏｒ細胞にＶＺＶ感染細胞を添加し感染させ、プラークアッセイを行った（図２）。プラーク辺縁部を比較すると、ＨＳ３ＳＴ４発現細胞ではプラーク境界が明瞭であり、プラーク辺縁がまとまって剥がれていると考えられる。
　次に、ＭｅＷｏ−ＨＳ３ＳＴ４細胞およびネガティブコントロール細胞にＶＺＶを感染させ、ＶＺＶ感染細胞を顕微鏡下観察した（図３−１）。感染２日後、ネガティブコントロール細胞よりもＨＳ３ＳＴ４発現細胞の方が、感染細胞である融合細胞の大きさが大きく、ＨＳ３ＳＴ４発現細胞ではＶＺＶ感染により効率的に細胞融合すると考えられた。プラーク辺縁がＨＳ３ＳＴ４発現細胞で明瞭だったのも、細胞融合した感染細胞がまとめて剥がれるためと考えられる。

　そこで、細胞融合の度合いを数値化するために、フュージョンアッセイを行ったところ（図３−２）、感染３日後にＨＳ３ＳＴ４発現細胞の方が、盛んに融合が起こっていることが明らかとなった。感染４日後には、ネガティブコントロール細胞でも細胞融合以外のウイルス感染による細胞死の影響が見られてくると考えらえる。以上の結果から、ＨＳ３ＳＴ４はＶＺＶ感染下、細胞融合が活性化されることが示唆された。

　ＶＺＶ感染時の細胞融合が、ＶＺＶのどの因子によって引き起こされるのかを検討した。ＶＺＶの糖タンパク質のうち、ｇＢ，ｇＨ，ｇＬが特によく細胞融合に関与する報告があることから、ＶＺＶを感染させずこれらの糖タンパク質のみをＨＳ３ＳＴ４発現細胞およびネガティブコントロール細胞に発現させ、細胞融合が惹起されるかをフュージョンアッセイで検討した（図４）。ＨＳ３ＳＴ４発現細胞では、ｇＢ，ｇＨ，ｇＬの発現により細胞融合が促進されていたことから、ｇＢ，ｇＨ，ｇＬ発現がＨＳ３ＳＴ４による細胞融合を引き起こすことが明らかになった。

ＨＳ３ＳＴ４発現のＶＺＶ近縁ウイルス感染による細胞融合に及ぼす影響
　ＶＺＶ近縁ウイルスによる細胞融合促進現象が見られるのかを検討した。ＶＺＶと同じαヘルペスウイルス亜科に属する単純ヘルペスウイルス２型（ＨＳＶ−２）は、帯状疱疹等と同様に疼痛を伴う病態を示すことが知られているので、ＨＳＶ−２の細胞融合現象に対するＨＳ３ＳＴ４発現の効果を検討した（図５）。ＨＳＶ−２も感染細胞が細胞融合を起こすことが知られているので、ＭｅＷｏ−ＨＳ３ＳＴ４細胞またはＭｅＷｏ−ｖｅｃｔｏｒ細胞にＨＳＶ−２を感染させ、顕微鏡下感染細胞の観察を行い、感染細胞集団のうち細胞融合を起こしているものの割合を調べたところ、ＭｅＷｏ−ＨＳ３ＳＴ４細胞ではネガティブコントロール細胞に比べ細胞融合を起こしている感染細胞集団の割合が高いことが判明した。したがって、ＶＺＶ感染同様、ＨＳＶ−２感染でもＨＳ３ＳＴ４発現により細胞融合が促進されることが示唆された。

ＨＳ３ＳＴ４発現のＶＺＶ感染・複製に及ぼす影響
　次に、ＨＳ３ＳＴ４発現がＶＺＶ感染・複製に及ぼす影響を検討した。ＭｅＷｏ−ＨＳ３ＳＴ４細胞またはＭｅＷｏ−ｖｅｃｔｏｒ細胞を播種翌日、ＶＺＶ感染細胞を添加し、経時的に細胞を採取し、細胞内に含まれるＶＺＶ　ｇｅｎｏｍｅ　ＤＮＡのコピー数と、それを細胞数あたりに換算するために、細胞数を反映するＲＮａｓｅＰ　ｇｅｎｏｍｅコピー数をリアルタイムＰＣＲ法で測定した（図６）。感染４８時間後からＶＺＶ　ｇｅｎｏｍｅコピー数がいずれの細胞でも上昇し始めたが、９６時間後まで常にＭｅＷｏ−ＨＳ３ＳＴ４細胞よりもネガティブコントロール細胞の方が２倍前後の高値を示した。以上の結果から、両細胞間でのウイルスコピー数の差は大きくはないものの、ＨＳ３ＳＴ４の発現により、ＶＺＶの感染または複製がわずかに阻害されることが示唆された。先にＨＳ３ＳＴ４発現細胞ではＶＺＶ感染により細胞融合が促進されることを示したが、ＶＺＶ感染構造体での複製が細胞融合により阻害されることにより、ウイルスの複製が阻害される可能性が考えられる。

ＨＳ３ＳＴ４発現による細胞伸展への影響
　ヒトゲノム解析の結果から、ＨＳ３ＳＴ４はＶＺＶに関連しない一般の末梢神経障害性疼痛や神経痛にも関連することが示唆されている。したがって、ＨＳ３ＳＴ４は、上記のウイルス感染複製関連への寄与以外に、ウイルスに関連しない表現型を誘導する可能性が考えられた。そこで、ＨＳ３ＳＴ４発現の有無による細胞の性質の違いを観察した。ＭｅＷｏ−ＨＳ３ＳＴ４細胞またはＭｅＷｏ−ｖｅｃｔｏｒ細胞を播種後、経時的に顕微鏡下観察を行ったところ、ＭｅＷｏ−ＨＳ３ＳＴ４細胞の方が播種後ネガティブコントロール細胞と同様に接着はするものの、伸展までに長い時間がかかることを見出した（図７）。この結果から、ＨＳ３ＳＴ４発現により細胞伸展に抑制効果が見られることが明らかとなった。

　本発明によれば、疼痛等の疾患の罹患性に関する個人差を評価することができる、ＨＳ３ＳＴ４遺伝子等の遺伝子多型を用いた疾患罹患性の評価方法等を提供することができ、当該評価方法等は、疼痛等の疾患に対する、テーラーメイド予防及び治療などに有用である。

　配列番号３９：合成ＤＮＡ
　配列番号４０：合成ＤＮＡ
　配列番号４１：合成ＤＮＡ

Claims

　ＨＳ３ＳＴ４遺伝子、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子又はＩＧＦ２遺伝子の遺伝子多型と、個体の疾患罹患性とを関連づけることを特徴とする、疾患罹患性の評価方法。
　前記遺伝子多型の解析結果に基づいて、個体の疾患罹患性の高低の傾向を評価することを特徴とする、請求項１に記載の方法。
　（ａ）被験者由来の試料を用いて遺伝子多型解析を行い、遺伝子多型を選択する工程、
　（ｂ）工程（ａ）において選択された遺伝子多型の遺伝子型と、疾患罹患性との間の関連を解析する工程、及び
　（ｃ）前記被験者における疾患罹患性と有意に関連した遺伝子多型を、疾患罹患性の評価に用いる工程
を含む、請求項１又は２に記載の方法。
　前記疾患が疼痛である、請求項１~３のいずれか１項に記載の方法。
　前記疼痛が、慢性疼痛、又は帯状疱疹に伴う疼痛である、請求項４に記載の方法。
　慢性疼痛が、帯状疱疹後神経痛、脊柱管狭窄、椎間板ヘルニア、関節周囲炎、及び関節リウマチからなる群から選択される少なくとも１つである、請求項５に記載の方法。
　遺伝子多型が、一塩基多型、挿入型多型、欠失型多型及び塩基繰り返し多型からなる群から選択される少なくとも１つである、請求項１~６のいずれか１項に記載の方法。
　ＨＳ３ＳＴ４遺伝子の遺伝子多型が、ｒｓ９９８９４０８、ｒｓ４５１１５４０、ｒｓ４５７８６５１、ｒｓ４３８１６０８、ｒｓ７１９０１４３、ｒｓ７３５９３４１、ｒｓ６４９７８９８、ｒｓ４２３８９２５、ｒｓ１２７０８６８６、ｒｓ４７８７３３７、ｒｓ４５３３２８９、ｒｓ４３０３４９０、ｒｓ８０５０１１０、ｒｓ１２５９６３２４、ｒｓ７２０５８８０、ｒｓ４７８７７６６、ｒｓ９９２８７３５、ｒｓ４３３１３３９、ｒｓ７１９６１３８、ｒｓ７２００８１３、ｒｓ４３０５０２４、ｒｓ１１６４０９７０、ｒｓ４２３８９２６、ｒｓ４７８７３３８、ｒｓ２０５１６２、ｒｓ４７８７７７７、及びｒｓ１２９３３５１５からなる群から選択される少なくとも１つであり、
　ＩＧＦ２Ｒ遺伝子の遺伝子多型が、ｒｓ１８０５０７５、ｒｓ２２７４８４９、ｒｓ４７０９３９６、ｒｓ７７４６１０２、ｒｓ８１９１８２１、ｒｓ８１９１８２９、ｒｓ８１９１８９８、ｒｓ２２８２１３８、ｒｓ２２８２１３９、ｒｓ３７７７４１２、ｒｓ８１９１８１６、及びｒｓ８１９１８１８からなる群から選択される少なくとも１つであり、
　ＩＧＦ２遺伝子の遺伝子多型が、ｒｓ３２１３２１６である、
請求項１~７のいずれか１項に記載の方法。
　ＨＳ３ＳＴ４遺伝子、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子又はＩＧＦ２遺伝子の遺伝子多型を含むＤＮＡ断片に特異的にハイブリダイズしうる、配列番号１~３８、４２及び４３の少なくとも１つに示される塩基配列のうち第５１番目の塩基を含む少なくとも１０塩基長の塩基配列又は該塩基配列に相補的な塩基配列からなるオリゴヌクレオチドを用いることを特徴とする、請求項１~８のいずれか１項に記載の方法。
　ＨＳ３ＳＴ４遺伝子、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子又はＩＧＦ２遺伝の遺伝子多型を含むＤＮＡ断片に特異的にハイブリダイズしうる、配列番号１~３８、４２及び４３の少なくとも１つに示される塩基配列のうち第５１番目の塩基を含む少なくとも１０塩基長の塩基配列又は該塩基配列に相補的な塩基配列からなるオリゴヌクレオチドを含む、疾患罹患性の評価用キット。
　ＨＳ３ＳＴ４遺伝子、ＩＧＦ２Ｒ遺伝子又はＩＧＦ２遺伝子の遺伝子多型を含む、個体の疾患罹患性の高低の傾向を評価するための遺伝子多型マーカー。
　ＨＳ３ＳＴ４遺伝子が発現可能なように導入されたトランスジェニック動物細胞に、候補物質を接触させて、該動物細胞の細胞融合及び／又は細胞伸展の状態を評価し、得られる評価結果を指標として、疼痛の治療薬又は予防薬をスクリーニングする方法。
　前記疼痛が、慢性疼痛、又は帯状疱疹に伴う疼痛である、請求項１２に記載の方法。
　慢性疼痛が、帯状疱疹後神経痛、脊柱管狭窄、椎間板ヘルニア、関節周囲炎、及び関節リウマチからなる群から選択される少なくとも１つである、請求項１３に記載の方法。
　候補物質を接触させる前記動物細胞が、水痘帯状疱疹ウイルスを感染させたものである、請求項１２に記載の方法。
　前記動物細胞がヒト由来細胞である、請求項１２に記載の動物細胞。
　ＨＳ３ＳＴ４遺伝子が発現可能なように導入された、疼痛の治療薬又は予防薬をスクリーニングするために用いられるトランスジェニック動物細胞。
　前記動物細胞が、水痘帯状疱疹ウイルスを感染させたものである、請求項１７に記載の方法。
　前記動物細胞がヒト由来細胞である、請求項１７又は１８に記載の動物細胞。