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WO2016194789A1 - 家禽用配合飼料 - Google Patents

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Publication number
WO2016194789A1
WO2016194789A1 PCT/JP2016/065661 JP2016065661W WO2016194789A1 WO 2016194789 A1 WO2016194789 A1 WO 2016194789A1 JP 2016065661 W JP2016065661 W JP 2016065661W WO 2016194789 A1 WO2016194789 A1 WO 2016194789A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
feed
astaxanthin
ppm
corn
poultry
Prior art date
Application number
PCT/JP2016/065661
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
渉 佐藤
秀忠 永井
祐貴 川嶋
道久 五十嵐
酒井　豊
Original Assignee
Ｊｘエネルギー株式会社
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ｊｘエネルギー株式会社 filed Critical Ｊｘエネルギー株式会社
Priority to JP2017521891A priority Critical patent/JPWO2016194789A1/ja
Priority to US15/575,965 priority patent/US20180146698A1/en
Publication of WO2016194789A1 publication Critical patent/WO2016194789A1/ja

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    • A—HUMAN NECESSITIES
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    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10—Organic substances
    • A23K20/179—Colouring agents, e.g. pigmenting or dyeing agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A23K10/18—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
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    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
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    • A23K10/30—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/70—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds
    • A23K50/75—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds for poultry
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/12—Ketones
    • A61K31/122—Ketones having the oxygen directly attached to a ring, e.g. quinones, vitamin K1, anthralin

Definitions

  • the present invention relates to a blended feed for poultry, and more specifically to a blended feed for poultry to which astaxanthin is added.
  • Eggs from poultry such as chickens are highly nutritious and are widely used as foods and as materials for various confectionery and foods.
  • feeds mainly composed of corn are used.
  • feeds mainly composed of corn are used.
  • One of the important factors that determine the commercial value of eggs is egg yolk. This is because pigments such as carotenoids contained in the feed, especially lutein and zeaxanthin, which are pigments contained in corn, are absorbed by laying hens. It is well known that it has become yellowish in order to migrate and accumulate.
  • JP-A-7-143864 Japanese Patent Laid-Open No. 7-115915 JP-A-8-242774
  • Corn is in high demand because it is used not only for poultry but also for various feeds, and it may be in short supply due to the effects of cropping due to abnormal weather such as drought. For this reason, price fluctuations are large, and as a result, prices may rise. In preparation for such cases, the use of feed with a low corn content is also being studied. However, in blended feed for laying hens, corn is an essential blend in order to provide eggs with egg yolk preferred by consumers. Has been an ingredient.
  • the paprika used for the color frying agent is a plant, its supply situation is known to vary depending on the season and the climate, and therefore its price can also vary depending on the season.
  • the group of the present inventors has established astaxanthin production technology by bacteria, and by using this technology, astaxanthin can be stably supplied throughout the year. Astaxanthin has been reported to have an antioxidant effect of about 500 times the singlet oxygen scavenging activity and about 1000 times the lipid peroxidation inhibitory activity compared to vitamin E. In addition to the effect as a coloring agent, It can be blended into feed in anticipation of an antioxidant effect.
  • the present inventors have made various studies on the possibility of using a feed with a corn concentration lower than the standard concentration of 50 to 60% as a mixed feed for poultry.
  • astaxanthin derived from bacterial dry powder is used as a color frying agent, it can be used in feeds with low corn content, compared to the conventional feed with high corn content. It has been found that the desired color tone can be obtained, and therefore the amount of the coloring agent added can be reduced.
  • the present invention includes the following [1] to [9].
  • [1] A mixed feed for poultry containing 50% or less of corn and 1 to 8 ppm of astaxanthin derived from bacterial dry powder.
  • [2] The formulated feed according to [1], wherein the bacterium is a genus Paracoccus.
  • Poultry is raised using a mixed feed containing corn of 50% or less and astaxanthin derived from bacterial dry powder in the range of 1 to 8 ppm, A method of obtaining eggs that have an egg yolk with a color fan value of 9-15.
  • [5] The method according to [4], comprising feeding the compounded feed for 2 weeks or more.
  • [6] The method according to [4] or [5], wherein the bacterium is a bacterium belonging to the genus Paracoccus.
  • Egg yellow with a color fan value of 9 to 15 obtained by raising poultry using a mixed feed containing corn 50% or less and astaxanthin derived from bacterial dry powder in the range of 1 to 8 ppm A poultry egg presenting.
  • [9] The poultry egg according to [7] or [8], wherein the concentration of astaxanthin in the egg yolk is 12 ppm or less.
  • the present invention it is possible to reduce the amount of corn in the blended feed for poultry and to suppress the addition amount of the color frying agent, to reduce the cost, and at the same time, to provide a blended feed that can be stably supplied without being influenced by the season and the climate. Provision is possible. As a result, it is possible to provide poultry eggs exhibiting an egg yolk that suits consumers' preferences at a lower price.
  • concentration in egg yolk at the time of adding t-capsanthin in feed and CF value is shown.
  • ⁇ Standard corn content feed
  • ⁇ Low corn content feed.
  • ⁇ Astaxanthin
  • ⁇ t-Capsanthin.
  • the graph shows the relationship between the astaxanthin or t-capsanthin concentration actually measured in each feed and the color fan value of egg yolk when astaxanthin or t-capsanthin is added to the feed with a corn content of 50%.
  • ⁇ Astaxanthin
  • ⁇ t-Capsanthin.
  • L * values obtained by measuring the egg yolk yellow color obtained by adding 1 to 16 ppm of astaxanthin or t-capsanthin into a feed with a corn content of 30 to 50% are shown with a color difference meter, respectively.
  • the a * values obtained by measuring the egg yolk yellow color obtained by adding 1 to 16 ppm of astaxanthin or t-capsanthin to a corn content of 30 to 50% are shown by a color difference meter.
  • the b * values obtained by measuring the egg yolk color obtained with 1 to 16 ppm of astaxanthin or t-capsanthin in a corn content of 30 to 50% with a color difference meter are shown. It shows the carotenoid concentration in egg yolk and the composition of eggs collected from chickens fed with a diet containing 1 to 16 ppm of astaxanthin or t-capsanthin in a corn content of 30 to 50%.
  • the relationship between the corn content (%) and the color fan value of egg yolk when astaxanthin or t-capsanthin is added at 2 ppm each to the corn content 0-30% feed is shown.
  • ⁇ Astaxanthin
  • ⁇ t-Capsanthin.
  • the relationship between the maize content (%) and the color fan value of egg yolk when astaxanthin or t-capsanthin is added at 2 ppm each in the feed with a maize content of 30-50% is shown.
  • ⁇ Astaxanthin, ⁇ : t-Capsanthin.
  • the relationship between the corn content (%) and the color fan value of egg yolk when astaxanthin or t-capsanthin is added to each feed at 4 ppm is shown.
  • ⁇ Astaxanthin, ⁇ : t-Capsanthin.
  • the carotenoid concentration in egg yolk and the composition of eggs collected from chickens fed with a diet containing 2 ppm or 4 ppm of astaxanthin or t-capsanthin in a corn content of 0 to 30% are shown.
  • L * values obtained by measuring the egg yolk yellow color with a color difference meter when astaxanthin or t-capsanthin was added at 2 ppm or 4 ppm in a feed having a corn content of 0 to 30% are shown.
  • the a * values obtained by measuring the egg yolk color obtained with 2 ppm or 4 ppm of astaxanthin or t-capsanthin in the feed having a corn content of 0 to 30% were measured with a color difference meter.
  • the b * values obtained by measuring the egg yolk color obtained with 2 ppm or 4 ppm of astaxanthin or t-capsanthin in a corn content of 0 to 30% with a color difference meter are shown.
  • CF value is in the range of 1-15.
  • the color fan value is also measured by automatic measurement using a device that electronically determines a color tone (for example, Egg Multi Tester EMT-7300 (JA Zenno Tamago)).
  • egg yolk may be measured by a color difference meter.
  • egg yolk with a CF value of 10 has an a * value of 8
  • egg yolk with a CF value of 12 has a CF value of 14
  • the CF value of 14 has a value of about 15. Since the value may vary depending on the breed of the chicken, the measurement method of the color difference meter, etc., the correspondence between the measurement value by the color difference meter and the CF value has not yet been made. Thus, for those skilled in the art, the CF value is the most commonly understood objective measurement.
  • “poultry” or “poultry” refers to, for example, chickens, pupae, turkeys, guinea fowls, pigeons, ducks, geese and the like, and “poultry eggs” refer to these eggs. Especially in many countries including Japan, the consumption of chicken eggs is the highest, so the present invention has been studied mainly using chickens and eggs, and the present invention can be suitably implemented in chickens. In addition, terms such as “laying hen” and “egg” are also applicable to the above-mentioned “poultry” in general.
  • the color fan value of the resulting egg is about 6-9.
  • the preference for egg yolk varies from person to person and from country to country, but in recent years, egg yolks with higher color fan values, such as 12 to 14 color fan values, and in some cases 15 color fan values, have been used.
  • Present eggs may be preferred. Therefore, when providing eggs that meet consumer preferences, it is essential to add pigments in order to obtain eggs that are darker (higher color fan value) than egg yolks obtained only with corn pigments.
  • the present invention provides a mixed feed for poultry characterized in that astaxanthin derived from bacterial dry powder is added in a range of 1 to 8 ppm to a feed having a corn content of 50% or less.
  • the corn content in the mixed feed of the present invention may be 50% or less, 40% or less, 30% or less, 20% or less, 10% or less, 8% or less, 5% or less, 3% or less, and is not blended at all. It may be the case (ie 0%). However, the corn content may be 1% or more, 2% or more, 3% or more, 10% or more, 20% or more, 30% or more, etc., depending on the target color fan value, and may be adjusted as appropriate. Astaxanthin's color frying improvement effect is observed in feeds having a corn content of 50% or less, but the color frying improvement effect of the present invention is recognized depending on the reduction in corn content.
  • the bacterium that can be used in the present invention is not particularly limited as long as it can produce astaxanthin.
  • a bacterium belonging to the genus Paracoccus a bacterium belonging to the genus Sphingomonas, a breven dimonas ( Brevundimonas genus bacteria, Erythrobacter genus bacteria, etc. can be used, and bacteria belonging to the genus Paracoccus are preferably used.
  • Paracoccus genus bacteria include, for example, Paracoccus carotinifaciens, Paracoccus marcusii, Paracoccus ⁇ ⁇ haeundaensis, Paracoccus ⁇ axanthinifaciens ⁇ ⁇ Paracoccus denitrificans, Paracoccus aminovorans, Paracoccus aminophilus, Paracoccus kourii, Paracoccus halodenitificans (Paracoccus paraphyllica) and Paracoccus halodenitrificans (Paracoccus alcaliphilus), and Paracoccus carotinifaciens can be used particularly preferably.
  • Paracoccus carotinifaciens strains include Paracoccus carotinifaciens strain E-396 (FERM BP-4283).
  • mutant strains with altered astaxanthin-producing ability can also be used.
  • mutant strain include, but are not limited to, a strain having a high astaxanthin-producing ability (Japanese Patent Laid-Open No. 2001-95500).
  • the method for culturing the astaxanthin-producing bacteria is not particularly limited.
  • a medium for example, a carbon source, a nitrogen source, an inorganic salt, and sometimes a special required nutrient (such as vitamins) necessary for the growth of the bacteria.
  • a special required nutrient such as vitamins
  • Amino acids, nucleic acids, etc. and the following methods are used.
  • carbon sources include glucose, sucrose, fructose, trehalose, mannose, mannitol, maltose and other sugars; acetic acid, fumaric acid, citric acid, propionic acid, malic acid, malonic acid and other organic acids; ethanol, propanol, butanol, Examples thereof include alcohols such as pentanol, hexanol, and isobutanol, and combinations thereof.
  • the addition ratio depends on the type of carbon source, but can generally be 1 to 100 g, for example 2 to 50 g, per liter of medium.
  • Nitrogen sources include potassium nitrate, ammonium nitrate, ammonium chloride, ammonium sulfate, ammonium phosphate, ammonia, urea, and combinations thereof.
  • the addition ratio depends on the type of nitrogen source, but can generally be 0.1 to 20 g, for example 1 to 10 g, with respect to 1 L of the medium.
  • Inorganic salts include potassium dihydrogen phosphate, dipotassium hydrogen phosphate, disodium hydrogen phosphate, magnesium sulfate, magnesium chloride, iron sulfate, iron chloride, manganese sulfate, manganese chloride, zinc sulfate, zinc chloride, copper sulfate, Examples include calcium chloride, calcium carbonate, sodium carbonate, and combinations thereof. The addition ratio depends on the type of inorganic salt, but can generally be 0.1 mg to 10 g per 1 L of medium.
  • Special requirements include vitamins, nucleic acids, yeast extract, peptone, meat extract, malt extract, corn steep liquor, dry yeast, soybean meal, soybean oil, olive oil, corn oil, linseed oil, and combinations thereof. Can be mentioned.
  • the addition ratio depends on the type of special requirement substance, but can generally be 0.01 mg to 100 g per 1 L of the medium.
  • the pH of the medium is adjusted to pH 2 to 12, for example, pH 6 to 9.
  • Cultivation can be performed, for example, at a temperature of 10 to 70 ° C., for example, 20 to 35 ° C., usually for 1 to 20 days, for example, 2 to 9 days, by shaking culture or aeration and agitation culture. Astaxanthin-producing bacteria are cultured under such conditions. When cultured, the bacteria produce significant amounts of astaxanthin inside and outside the cells.
  • the culture solution obtained by the above culture method can be concentrated as appropriate.
  • concentration method include membrane concentration and centrifugation.
  • the medium components are removed.
  • it is added to a concentrated solution to remove medium components.
  • diafiltration is performed to remove medium components.
  • the amount of water added depends on the state of the pigment content of the concentrate, but can be about 1 to 5 times, for example.
  • drying is performed to obtain a dry powder from the culture solution or the concentrated solution. That is, in the present invention, powders obtained by drying the cells of astaxanthin-containing bacteria obtained as a culture solution or a cell slurry can be used.
  • the drying method is not particularly limited, and a known drying method such as spray drying, spray granulation drying, drum drying, freeze drying fluidized bed drying or the like can be used. In this way, a dry powder containing astaxanthin can be produced.
  • the obtained dry powder can be further pulverized to have a finer particle size, for example, those having a particle size of 1 ⁇ m to 30 ⁇ m, 1 ⁇ m to 20 ⁇ m, 5 ⁇ m to 20 ⁇ m, 7 ⁇ m to 20 ⁇ m.
  • a dry powder suitable for use in the present invention comprises a step of bringing a bacterial cell capable of producing astaxanthin into contact with a heat transfer section having a temperature of more than 100 ° C. and then performing heat transfer heat receiving.
  • a heat transfer section having a temperature of more than 100 ° C. and then performing heat transfer heat receiving.
  • the volume particle diameter D50 is 7 to 12 ⁇ m
  • the temperature change ratio between the diffusion coefficient D of astaxanthin extracted by ethanol extraction between 25 ° C. and 35 ° C. (b 25 / b 35 ) Is 0.807 ⁇ 0.05.
  • Astaxanthin that can be used in the present invention can be obtained, for example, as Panaferd-P (Panaferd-P, JX Energy Corporation).
  • the above dry powder is added to a feed having a corn content of 50% or less.
  • corn in the description of “corn content” means mainly dried and crushed corn nuts, and processed products derived from corn such as corn gluten feed, corn gluten meal, DDGS (Dried Distiller's Grains with Solubles).
  • the carotenoid concentration in egg yolk is low compared to the carotenoid concentration in egg yolk obtained from poultry fed by adding the above astaxanthin dry powder to a feed with high corn content. Regardless, eggs with the desired color fan value can be obtained.
  • astaxanthin-containing poultry eggs are obtained by feeding the poultry feed containing the dry powder obtained above in a feed having a corn content of 50% or less, growing the poultry, and collecting eggs.
  • the dry powder containing astaxanthin may vary depending on the type of bacteria, the culture method, etc., but may contain 1-30 mg astaxanthin in 1 g of the powder.
  • about 1 mg to 2.5 mg (2,100 to 2,500 ppm) of astaxanthin can be contained in 1 g of a dry powder of a certain strain belonging to the genus Paracoccus.
  • astaxanthin in an amount of about 20 mg to 25 mg (20,000 to 25,000 ppm) can be contained in 1 g of dry powder of another strain belonging to the genus Paracoccus.
  • astaxanthin is 1 to 8 ppm (0.1 to 0.8 mg per 100 g of feed) in the final mixed feed, for example, 1 ppm, 2 ppm, 3 ppm, 4 ppm, 5 ppm, 6 ppm, 7 ppm, 8 ppm Therefore, the dried astaxanthin-containing bacterial powder obtained as described above is about 3 to 800 mg (30 to 8,000 ppm) per 100 g of feed. ), For example, in the range of 4 to 400 mg (40 to 4,000 ppm) or 4 to 40 mg (40 to 400 ppm).
  • the dried astaxanthin-containing bacterial powder can be premixed in the premix with vitamins and the like.
  • the feeding period of the mixed feed to which the astaxanthin-containing dry bacteria powder is added may be 2 weeks or more, 3 weeks or more, or 4 weeks or more before the start of egg laying.
  • the concentration of astaxanthin in the egg yolk obtained by feeding the mixed poultry feed of the present invention containing the astaxanthin-containing dry bacteria powder may be, for example, 12 ppm or less, 10 ppm or less, 9 ppm or less, 8 ppm or less, 7 ppm or less. 0.1 ppm or more, 0.3 ppm or more, 0.5 ppm or more, 0.8 ppm or more, or 1 ppm or more.
  • the method of the present invention makes it possible to obtain eggs having an egg yolk color of 9 to 15 when the amount of astaxanthin added to the feed is in the range of 1 to 8 ppm.
  • an egg exhibiting an egg yolk with a color fan value of up to 14 can be obtained by blending astaxanthin at a concentration of 4 ppm or less. Since the target color fan value varies depending on consumer preferences and egg usage, etc., the target color fan value, for example, an egg with a color fan value of 9, 10, 11, 12, 13, 14 or 15 is selected. In order to obtain, the amount (concentration) of astaxanthin to be added to the blended feed can be adjusted.
  • the poultry fed the feed composition of the present invention has a low carotenoid content that migrates into the yolk when using a feed with low corn content, and also has an astaxanthin concentration of 10 ppm or less (1 mg or less per 100 g). Regardless, it produces egg yolk poultry eggs with color fan values of 9-15.
  • the egg yolk obtained has a carotenoid content of about 10 to 30 ppm. Therefore, it is surprising that the target color fan value was obtained with the composition of the mixed feed of the present invention.
  • the unexpected effect of the present invention is not bound by any theory, but zeaxanthin and lutein, which are yellow carotenoids in corn, competitively inhibit astaxanthin absorption and accumulation in egg yolk. Therefore, it is considered that astaxanthin absorption and accumulation in egg yolk increase due to a decrease in the amount of these pigments.
  • the chemical structure of astaxanthin is very similar to that of zeaxanthin and lutein. This effect, thought to be due to a decrease in the amount of zeaxanthin and lutein absorbed and accumulated, was not seen with t-capsanthin, a pigment derived from paprika.
  • the bacterial dry powder that produces astaxanthin contains not only astaxanthin but also several other carotenoids.
  • a bacterial dry powder of a Paracoccus strain contains about 3% carotenoids, of which about 60%, that is, about 2% based on the total bacterial dry powder, is astaxanthin. Therefore, the above results may have a combined effect that includes all carotenoids including astaxanthin (including metabolites of astaxanthin and precursors of astaxanthin), and further components contained in the dry bacterial powder. It is thought to suggest sex.
  • Materials that can be used as an alternative to corn include rice, wheat, barley, soybean, milo, and / or raw materials derived from these, which have a low yellow carotenoid content as carbohydrate, such as 10% or more, 20% or more, 30% or more , 40% or more, or 50% or more.
  • rice for example, brown rice, white rice, rice bran or the like can be used.
  • the addition amount of an amino acid, a vitamin, a mineral, etc. can be suitably adjusted as needed.
  • a person skilled in the art can prepare a feed having an appropriate composition without affecting the number of eggs laid, even if it is a mixed feed with a reduced corn content.
  • Example 1 Egg color deep-fried test 1 As a coloring agent for evaluation, a paracoccus dry cell preparation (containing 2% astaxanthin) and a paprika dye preparation (containing 0.25% t-capsanthin) were used.
  • Paracoccus dry cell preparations used nitrosoguanidine mutants from Paracoccus carotinifaciens E-396 (FERM BP-4283) as paracoccus producing carotenoids. This was first cultured in a seed flask medium, and then in a main culture medium at 28 ° C. under aerobic conditions until the bacterial cell concentration was maximized. Subsequently, this was collected by a centrifuge and collected.
  • the recovered Paracoccus cells were dried with a double drum dryer under conditions of a drum rotation number of 3.5 rpm and a drum temperature of 140 ° C.
  • the average particle diameter (volume particle diameter D50) of the obtained powder was about 100 to 125 ⁇ m.
  • the paprika pigment preparation used was colored up (Kohkin Chemicals, total xanthophyll concentration of 5 g / kg).
  • HPLC high performance liquid chromatography
  • the column used was two Inertsil® SIL-100A, 5 ⁇ m ( ⁇ 4.6 ⁇ 250 mm) (made by GL Science) connected together. Elution was performed by flowing 1.0 mL / min of a mobile phase n-hexane / tetrahydrofuran / methanol mixture (40: 20: 1) at a constant temperature near room temperature. In the measurement, the sample was dissolved in tetrahydrofuran, and 20 ⁇ L of a solution appropriately diluted with a mobile phase was used as the injection amount, and the column eluent was detected at a wavelength of 470 nm.
  • 1 and 2 show the relationship between the concentrations of astaxanthin and t-capsanthin in both feeds and the color fan value of the egg yolk obtained.
  • Example 2 Comparison of carotenoid content and composition in egg yolk 1
  • the carotenoid concentration in the egg yolk of the egg obtained in Example 1 was measured for three egg yolks in each test section by the method described in Example 1.
  • FIG. 3 shows the composition of carotenoids in the yolk of eggs collected from chickens fed for 4 to 6 weeks with feed supplemented with 2 ppm or 4 ppm of pigment.
  • the total carotenoid concentration in the egg yolk is 20-30 ⁇ ppm in the standard corn content feed, whereas the total carotenoid concentration is 10 ⁇ ppm or less in the low corn content feed. It was confirmed that the amount of the derived pigment was reduced.
  • Table 4 shows the total carotenoid concentration and color fan value in egg yolk obtained when 4 ppm of pigment is added.
  • Example 3 Comparison of pigment concentration in egg yolk The pigment concentration in egg yolk when the same coloring agent as in Example 1 was added to the feed at an added concentration of 1 to 8 ppm was compared between the standard corn content feed and the low corn content feed did. The results are shown in FIGS.
  • Example 4 Correlation between pigment concentration in egg yolk and color fan value Astaxanthin and t-capsanthin concentration in egg yolk of egg obtained in Example 1 (the concentrations added to the feed were 1, 2, 4 respectively) 8 ppm) and the color fan value of egg yolk are shown in FIGS.
  • Example 5 Chicken egg color deep-fried test 2 The effect of the present invention was confirmed in the same manner as in Example 1 using a feed having a corn content of 30 to 50%.
  • a mixed feed was prepared by adding astaxanthin and t-capsanthin to the feed having the composition shown in Table 5 so that the final concentration was 1 to 16 ppm.
  • the composition other than the corn content and the content of brown rice added in accordance with the reduction was the same feed, and corn gluten meal derived from corn was not blended.
  • FIGS. 8a and 8b show the relationship between the concentrations of astaxanthin and t-capsanthin in the corn content of 30% and 50% and the egg yolk color fan value of the egg obtained, respectively.
  • Example 6 Measurement 1 of egg yolk using a color difference meter
  • the results of the measured L * value, a * value, and b * value are shown in FIGS. 9a to 9c, respectively.
  • Color fan values are known to correlate with a * values corresponding to redness.
  • the results shown in FIG. 9b show that the a * value (redness) increases according to the amount of astaxanthin and t-capsanthin added to the feed, and astaxanthin is added when the amount of the coloring agent is 8 ppm or less. This indicates that the a * value is higher.
  • Example 7 Comparison 2 of carotenoid content and composition in egg yolk
  • the carotenoid concentration in the yolks of the eggs obtained in Examples 5 and 6 was measured for 5 yolks in each test group by the same method as in Example 1.
  • FIG. 10 shows the composition of carotenoids in the yolk of eggs collected from chickens fed for 2 to 4 weeks with a mixed feed obtained by adding 1 to 16 ppm of pigment to a feed with a corn content of 30 to 50%.
  • the carotenoid concentration in the egg yolk increased depending on the added concentrations of astaxanthin and t-capsanthin.
  • Example 8 Fried egg color test 3 The effect of the present invention was confirmed in the same manner as in Example 1 using a feed having a corn content of 0 to 30%.
  • a mixed feed was prepared by adding the astaxanthin and t-capsanthin contents to the feed having the composition shown in Table 7 so that the final concentrations were 2 ppm or 4 ppm, respectively.
  • the composition other than the corn content and the content of brown rice added in accordance with the reduction was the same feed, and corn gluten meal derived from corn was not blended.
  • FIG. 11 shows the color fan value of egg yolk obtained when astaxanthin and t-capsanthin were added to a corn content of 0-30%.
  • Example 5 Based on the above results and the results obtained in Example 5 (FIGS. 8a and 8b), a corn content 0-30% feed and a 30-50% feed with a pigment added at 2 to 4 ppm or 4 to ppm were used.
  • the relationship with the color fan value in the egg yolk of the egg obtained is shown in FIGS. 12a to 12c. As is clear from the figure, it is possible to obtain an egg having a significantly higher color fan value than when the t-capsanthin is added to the mixed feed of the present invention using the mixed feed to which 2 to 4 ppm of the coloring agent is added. It was shown that it can be done.
  • Example 9 Comparison of carotenoid content and composition in egg yolk 3
  • the carotenoid concentration in the egg yolk of the egg obtained in Example 8 was measured for each egg yolk in each test section by the same method as in Example 1.
  • FIG. 13 shows the composition of carotenoids in the yolk of eggs collected from chickens fed for 2 to 4 weeks with a feed containing 2 to 4 ppm of pigment added to a feed with a corn content of 0 to 30%.
  • the carotenoid concentration increased depending on the corn content, and the carotenoid concentration in the yolk increased depending on the added concentrations of astaxanthin and t-capsanthin. It was shown that astaxanthin was transferred to egg yolk at a higher concentration than t-capsanthin.
  • Example 10 Measurement 2 of egg yolk using a color difference meter
  • the egg yolk of the egg obtained in Example 8 was measured using a color difference meter (CM-700d Konica Minolta).
  • CM-700d Konica Minolta The results of the measured L * value, a * value, and b * value are shown in FIGS. 14a to 14c, respectively.
  • FIG. 14b shows that the a * value (redness) increases according to the amounts of astaxanthin and t-capsanthin added to the feed (2 ppm or 4 ppm).
  • the a * value increased as the corn content increased.
  • the change in the a * value due to the change in the corn content was not observed.
  • there was no significant difference in the L * value corresponding to the brightness (FIG. 14a) but the b * value corresponding to the yellowness (FIG. 14c) increased according to the corn content, It was thought to be a variation due to the derived yellow pigment.
  • Egg prices have not fluctuated for decades and have remained low. For this reason, it is desirable for poultry farmers to provide eggs with high added value while maintaining a low price in a highly competitive environment. For that purpose, it is very significant if the feed cost can be reduced, and the cost reduction can be finally reflected in the price of eggs in the market.

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Abstract

飼料のコストの低減及び安定供給が可能であり、かつ消費者に好まれる卵黄色を呈する卵を得る方法を提供する。具体的には、本発明は、トウモロコシを50％以下、細菌乾燥粉末由来のアスタキサンチンを1～8 ppmの範囲で含有する家禽用配合飼料、及び前記配合飼料を用いて所望の卵黄色を呈する卵を取得する方法を提供する。本発明により、季節及び気候に左右されることなく低価格で安定供給が可能な配合飼料の提供が可能となると共に、消費者の嗜好に合った卵黄色を呈する家禽卵をより低価格で提供することができる。

Description

家禽用配合飼料
　本発明は、家禽類のための配合飼料に関し、より具体的には、アスタキサンチンを添加した家禽用配合飼料に関する。
　ニワトリ等の家禽類の卵は栄養価が高く、それ自体が食品として、また種々の菓子及び食品の材料として広く利用されている。
　家禽類の飼料として、種々の組成の配合飼料が知られているが、ほとんどの場合、トウモロコシを主体とする飼料が用いられている。卵の商品価値を決める重要な要素の一つは卵黄色であるが、これは飼料に含まれるカロテノイド等の色素、特にトウモロコシに含まれる色素であるルテイン及びゼアキサンチンが産卵鶏によって吸収され、卵へと移行・蓄積するために黄色味を帯びるようになったものであることは良く知られている。
　一方、近年では、卵黄色がより濃い、あるいはより赤みを増した卵が消費者に好まれるようになってきている。産卵鶏に給餌する配合飼料には一般的にトウモロコシが50～60％程度配合されているが、トウモロコシ等の穀類だけでは消費者の嗜好に合う色にならないため、現在、ほとんどの飼料にカロテノイドを主成分とする色揚げ剤が添加されている。色揚げ剤としては、例えばパプリカ由来の色素やアスタキサンチンが利用されている（例えば特許文献１～３）。
特開平７－１４３８６４号公報 特開平７－１１５９１５号公報 特開平８－２４２７７４号公報
　トウモロコシは家禽類だけでなく種々の飼料に利用されているために需要が多く、また、干ばつ等の異常気象による不作の影響等でも供給不足となることがある。このため価格変動が大きく、結果的には価格が高騰する可能性も考えられる。このような場合に備えてトウモロコシ含量の低い飼料の使用も検討されつつあるが、産卵鶏用の配合飼料においては、消費者に好まれる卵黄色を呈する卵を提供するためにトウモロコシが必須の配合成分とされてきた。
　また、色揚げ剤に使用されるパプリカは植物であるため、その供給状況も季節及び気候によって変動することが知られており、従ってその価格も季節によって変動し得る。
　従って、コストの低減と価格変動幅の縮小及び安定供給が可能な飼料の使用、かつ消費者に好まれる卵黄色を呈する卵の提供が望まれている。
　本発明者等のグループは、細菌によるアスタキサンチンの産生技術を確立しており、この技術を利用することで、アスタキサンチンを１年中安定的に供給することが可能である。アスタキサンチンはビタミンＥと比較して一重項酸素の消去活性で約500倍、脂質過酸化抑制活性で約1000倍の酸化防止効果を有することが報告されており、色揚げ剤としての効果に加えて、酸化防止効果を期待して飼料に配合することができる。
　上記課題に鑑み、本発明者等は、トウモロコシ濃度を標準的な濃度である50～60％よりも低減させた飼料を家禽用配合飼料として用い得る可能性について種々検討を重ねてきた。その結果、驚くべきことに、細菌乾燥粉末由来のアスタキサンチンを色揚げ剤として使用すると、トウモロコシ含量の低い飼料において、従来のトウモロコシ含量の高い飼料に添加する場合と比較して、より少ない添加量で目的とする色調が得られ、従って色揚げ剤の添加量を低減することができることを見出した。
　この効果はアスタキサンチンのみで見られ、パプリカ由来の色素であるトランスカプサンチン(t-cap)では見られないことが確認された。従って、飼料中のトウモロコシ含量を減らし、かつ色揚げ剤をアスタキサンチンとしてその添加量を減らすことにより、配合飼料のコストを低減させると共に、所望の卵黄色が得られることが判明した。
　すなわち本発明は、以下の［１］～［９］を包含する。
［１］トウモロコシを50％以下、細菌乾燥粉末由来のアスタキサンチンを1～8 ppmの範囲で含有する家禽用配合飼料。
［２］前記細菌がパラコッカス（Paracoccus）属細菌である、［１］記載の配合飼料。
［３］コメ、コムギ、オオムギ、ダイズ、マイロ、及び／又はこれらに由来する原料を10％以上含有する、［１］又は［２］記載の配合飼料。
［４］トウモロコシを50％以下、細菌乾燥粉末由来のアスタキサンチンを1～8 ppmの範囲で含有する配合飼料を用いて家禽類を飼育し、
　カラーファン値が9～15の卵黄色を呈する卵を取得する方法。
［５］上記配合飼料を2週間以上にわたって給餌することを含む、［４］記載の方法。
［６］前記細菌がパラコッカス（Paracoccus）属細菌である、［４］又は［５］記載の方法。
［７］トウモロコシを50％以下、細菌乾燥粉末由来のアスタキサンチンを1～8 ppmの範囲で含有する配合飼料を用いて家禽類を飼育して取得される、カラーファン値が9～15の卵黄色を呈する家禽卵。
［８］前記細菌がパラコッカス（Paracoccus）属細菌である、［７］記載の家禽卵。
［９］卵黄中のアスタキサンチン濃度が12 ppm以下である、［７］又は［８］記載の家禽卵。
　本明細書は本願の優先権の基礎となる日本国特許出願番号2015-110258号の開示内容を包含する。
　本発明により、家禽用配合飼料におけるトウモロコシの配合量を低減すると共に色揚げ剤の添加量も抑制し、コストが低減され、同時に季節及び気候に左右されることなく安定供給が可能な配合飼料の提供が可能となる。その結果、消費者の嗜好に合った卵黄色を呈する家禽卵をより低価格で提供することができる。
飼料中にアスタキサンチンを1～8 ppm添加した場合の、各飼料中の実測値のアスタキサンチン濃度と卵黄のカラーファン値（CF値）との関係を示す。◆：標準トウモロコシ含量飼料、■：低トウモロコシ含量飼料。 飼料中にt-カプサンチンを1～8 ppm添加した場合の、各飼料中の実測値のt-カプサンチン濃度と卵黄のCF値との関係を示す。◆：標準トウモロコシ含量飼料、■：低トウモロコシ含量飼料。 アスタキサンチンもしくはt-カプサンチンをそれぞれ2ppm又は4ppm添加した飼料を給餌した鶏より採卵した卵の卵黄中カロテノイド濃度及びその組成を示す。 アスタキサンチンを添加濃度1～8 ppmで飼料に添加した場合の卵黄中のアスタキサンチン濃度を標準トウモロコシ含量飼料及び低トウモロコシ含量飼料で比較した結果を示す。□：標準トウモロコシ含量飼料、■：低トウモロコシ含量飼料。 t-カプサンチンを添加濃度1～8 ppmで飼料に添加した場合の卵黄中のt-カプサンチン濃度を標準トウモロコシ含量飼料及び低トウモロコシ含量飼料で比較した結果を示す。□：標準トウモロコシ含量飼料、■：低トウモロコシ含量飼料。 飼料中にアスタキサンチンを添加した場合の卵黄中のアスタキサンチン濃度とCF値の関係を示す。◆：標準トウモロコシ含量飼料、■：低トウモロコシ含量飼料。 飼料中にt-カプサンチンを添加した場合の卵黄中のt-カプサンチン濃度とCF値の関係を示す。◆：標準トウモロコシ含量飼料、■：低トウモロコシ含量飼料。 トウモロコシ含量30％飼料中にアスタキサンチンもしくはt-カプサンチンをそれぞれ1～16ppm添加した場合の、各飼料中の実測値のアスタキサンチンもしくはt-カプサンチン濃度と卵黄のカラーファン値との関係を示す。近似式CF=b×(1-EXP(-1×a×飼料中色素濃度))+切片を用い、最小二乗法によりカーブフィッティングを実施した。◆：アスタキサンチン、■：t-カプサンチン。 トウモロコシ含量50％飼料中にアスタキサンチンもしくはt-カプサンチンをそれぞれ1～16ppm添加した場合の、各飼料中の実測値のアスタキサンチンもしくはt-カプサンチン濃度と卵黄のカラーファン値との関係を示す。近似式CF=b×(1-EXP(-1×a×飼料中色素濃度))+切片を用い、最小二乗法によりカーブフィッティングを実施した。◆：アスタキサンチン、■：t-カプサンチン。 トウモロコシ含量30～50％飼料中にアスタキサンチンもしくはt-カプサンチンを1～16ppm添加した場合に得られた卵の卵黄色を色差計で測定したL＊値をそれぞれ示す。 トウモロコシ含量30～50％飼料中にアスタキサンチンもしくはt-カプサンチンを1～16ppm添加した場合に得られた卵の卵黄色を色差計で測定したa＊値をそれぞれ示す。 トウモロコシ含量30～50％飼料中にアスタキサンチンもしくはt-カプサンチンを1～16ppm添加した場合に得られた卵の卵黄色を色差計で測定したb＊値をそれぞれ示す。 トウモロコシ含量30～50％飼料中にアスタキサンチンもしくはt-カプサンチンをそれぞれ1～16ppm添加した配合飼料を給餌した鶏より採卵した卵の卵黄中カロテノイド濃度及びその組成を示す。 トウモロコシ含量0～30％飼料中にアスタキサンチンもしくはt-カプサンチンをそれぞれ2ppm又は4ppm添加した配合飼料を給餌した鶏より採卵した卵の卵黄のカラーファン値をそれぞれ示す。 トウモロコシ含量0～30％飼料中にアスタキサンチンもしくはt-カプサンチンをそれぞれ2ppm添加した場合のトウモロコシ含量（％）と卵黄のカラーファン値との関係を示す。◆：アスタキサンチン、■：t-カプサンチン。 トウモロコシ含量30～50％飼料中にアスタキサンチンもしくはt-カプサンチンをそれぞれ2ppm添加した場合のトウモロコシ含量（％）と卵黄のカラーファン値との関係を示す。◆：アスタキサンチン、■：t-カプサンチン。 トウモロコシ含量0～30％飼料中にアスタキサンチンもしくはt-カプサンチンをそれぞれ4ppm添加した場合のトウモロコシ含量（％）と卵黄のカラーファン値との関係を示す。◆：アスタキサンチン、■：t-カプサンチン。 トウモロコシ含量0～30％飼料中にアスタキサンチンもしくはt-カプサンチンをそれぞれ2ppm又は4ppm添加した配合飼料を給餌した鶏より採卵した卵の卵黄中カロテノイド濃度及びその組成を示す。 トウモロコシ含量0～30％飼料中にアスタキサンチンもしくはt-カプサンチンを2ppm又は4ppm添加した場合に得られた卵の卵黄色を色差計で測定したL＊値をそれぞれ示す。 トウモロコシ含量0～30％飼料中にアスタキサンチンもしくはt-カプサンチンを2ppm又は4ppm添加した場合に得られた卵の卵黄色を色差計で測定したa＊値をそれぞれ示す。 トウモロコシ含量0～30％飼料中にアスタキサンチンもしくはt-カプサンチンを2ppm又は4ppm添加した場合に得られた卵の卵黄色を色差計で測定したb＊値をそれぞれ示す。
　現在、鶏卵等の卵黄色の測定は、JA全農たまご社の全農卵黄カラーチャート(Zen-Noh Yolk Colour Chart:CF)やロッシュ社のヨークカラーファン（Roche Yolk Color Fan: RYCF）を用いることが常法となっており、当分野において最も一般的な卵黄色の評価方法となっている。カラーファンの値（CF値）は、1～15の範囲である。現在では、電子的に色調を判定する機器（例えばエッグマルチテスターEMT-7300(JA全農たまご社)等）による自動的測定によってカラーファン値を測定することも行われている。
　また、卵黄色は色差計によって測定されることもあり、例えばCF値10の卵黄のa*値は8、CF値12の卵黄は12、CF値14は15程度であるが、これは飼料成分やニワトリの品種、色差計の測定方法等によって値が変わることがあるため、色差計による測定値とCF値との明確な対応付けは未だなされていない。従って、当業者にとって、CF値が最も共通に理解される客観的測定値である。
　本明細書において「家禽」又は「家禽類」とは、例えば鶏、鶉、七面鳥、ホロホロ鳥、鳩、アヒル、ガチョウ等をいい、「家禽卵」とはこれらの卵をいう。特に日本を始め多くの国では鶏卵の消費量が最も多いため、主として鶏及び鶏卵を使用して本発明の検討を行っており、また本発明は鶏において好適に実施できるが、本発明は鶏及び鶏卵に限定されるものではなく、「産卵鶏」及び「卵」等の用語も上記の「家禽類」全般に適用されるものとする。
　本明細書において、配合量及び添加量を表す「％」及び「ppm」の値は、重量比を意味するものとする。
　トウモロコシを50～60％含有する配合飼料を色揚げ剤を使用せずに用いた場合、得られる卵のカラーファン値は約6～9である。卵黄色に対する嗜好は個人によって異なり、また国によっても異なるものであるが、近年では、よりカラーファン値の高い、例えばカラーファン値が12～14、場合によってはカラーファン値が15の卵黄色を呈する卵が好まれる場合がある。従って、消費者の嗜好に沿った卵を提供する場合、トウモロコシの色素のみによって得られる卵黄色よりも濃い（カラーファン値の高い）卵を得るためには、色素の添加が必須である。
　例えば、配合飼料中のトウモロコシの含有量を10％以下に下げた場合には、黄色色素であるルテイン及びゼアキサンチンの量が低下するため、得られる卵のカラーファン値は約1～6の範囲である（6は近似曲線からの外挿値）。
　本発明は、トウモロコシ含量が50％以下の飼料に対して細菌乾燥粉末由来のアスタキサンチンを1～8 ppmの範囲で添加したことを特徴とする家禽用配合飼料を提供する。本発明の配合飼料中のトウモロコシ含量は、50％以下、40％以下、30％以下、20％以下、10％以下、8％以下、5％以下、3％以下であって良く、全く配合しない場合（すなわち0％）であっても良い。しかしながら、目的のカラーファン値等に応じて、トウモロコシ含量は1％以上、2％以上、3％以上、10％以上、20％以上、30％以上等としても良く、適宜調整すれば良い。アスタキサンチンの色揚げ向上効果はトウモロコシ含量が50％以下の飼料において認められるが、本発明の色揚げ向上効果はトウモロコシ含量の低減に依存して認められる。
　本発明に用いることができる細菌としては、アスタキサンチンを産生し得る細菌であれば良く、限定されるものではないが、例えばパラコッカス(Paracoccus)属細菌、スフィンゴモナス(Sphingomonas)属細菌、ブレブンディモナス(Brevundimonas)属細菌、エリスロバクター(Erythrobacter)属細菌等を用いることができ、好ましくはパラコッカス属に属する細菌が用いられる。パラコッカス属細菌としては、例えばパラコッカス・カロティニファシエンス(Paracoccus carotinifaciens)、パラコッカス・マークシイ(Paracoccus marcusii)、パラコッカス・ヘウンデンシス(Paracoccus haeundaensis)、パラコッカス・ゼアキサンチニファシエンス(Paracoccus zeaxanthinifaciens)、パラコッカス・デニトリフィカンス(Paracoccus denitrificans)、パラコッカス・アミノヴォランス(Paracoccus aminovorans)、パラコッカス・アミノフィルス(Paracoccus aminophilus)、パラコッカス・コウリイ(Paracoccus kourii)、パラコッカス・ハロデニトリフィカンス(Paracoccus halodenitrificans)およびパラコッカス・アルカリフィルス(Paracoccus alcaliphilus)が挙げられ、特に好適にはパラコッカス・カロティニファシエンスを用いることができる。パラコッカス・カロティニファシエンスの株としては例えばパラコッカス・カロティニファシエンス E-396株（FERM BP-4283）が挙げられる。
　また、本発明において、アスタキサンチン産生能の改変された変異株も使用可能である。変異株としては、アスタキサンチン産生能の高い菌株（特開2001-95500）が挙げられるがこれに限らない。
　アスタキサンチン産生細菌を培養する方法としては、特に限定するものではないが、例えば、培地として、例えば細菌の生育に必要な炭素源、窒素源、無機塩および場合により特殊な要求栄養物質(例えば、ビタミン、アミノ酸、核酸等)を含むものを使用する、下記のような方法が挙げられる。
　炭素源としては、グルコース、シュークロース、フルクトース、トレハロース、マンノース、マンニトール、マルトース等の糖類；酢酸、フマル酸、クエン酸、プロピオン酸、リンゴ酸、マロン酸等の有機酸；エタノール、プロパノール、ブタノール、ペンタノール、ヘキサノール、イソブタノール等のアルコール類、およびこれらの組合せが挙げられる。添加割合は、炭素源の種類によるが、一般に培地1L当たり1～100g、例えば2～50gとすることができる。
　窒素源としては、硝酸カリウム、硝酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、リン酸アンモニウム、アンモニア、尿素、およびこれらの組合せが挙げられる。添加割合は、窒素源の種類によるが、一般に、培地1Lに対し0.1～20g、例えば1～10gとすることができる。
　無機塩としては、リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸水素二ナトリウム、硫酸マグネシウム、塩化マグネシウム、硫酸鉄、塩化鉄、硫酸マンガン、塩化マンガン、硫酸亜鉛、塩化亜鉛、硫酸銅、塩化カルシウム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、およびこれらの組合せ等が挙げられる。添加割合は、無機塩の種類によるが、一般に、培地1Lに対し0.1mg～10gとすることができる。
　特殊な要求物質としては、ビタミン類、核酸類、酵母エキス、ペプトン、肉エキス、麦芽エキス、コーンスティープリカー、乾燥酵母、大豆粕、大豆油、オリーブ油、トウモロコシ油、アマニ油、およびこれらの組合せが挙げられる。添加割合は、特殊な要求物質の種類によるが、一般に、培地1Lに対し0.01mg～100gとすることができる。
　培地のpHは、例えばpH2～12、例えばpH6～9に調整する。
　培養は、例えば10～70℃、例えば20～35℃の温度にて、通常、1日～20日間、例えば2～9日間、振とう培養または通気撹拌培養により行うことができる。このような条件下でアスタキサンチン産生細菌を培養する。培養すると細菌は、菌体内外にアスタキサンチンを著量産生する。
　以上の培養方法により得られた培養液は適宜濃縮することができる。濃縮方法としては、膜濃縮、遠心分離法等が挙げられる。
　次に、培地成分を除去する。遠心分離の際には、濃縮を行ったのであれば濃縮液に加水し、培地成分を除去する。膜分離を用いる場合、ダイアフィルトレーションを行い、培地成分を除去する。加水量は、濃縮液の色素含有量等の状態によるが、例えば1～5倍程度とすることができる。
　さらに、培養液または濃縮液から乾燥粉末を得るために乾燥を行う。すなわち本発明では、培養液または菌体スラリーとして得られるアスタキサンチン含有細菌の菌体を乾燥させて粉末としたものを使用することができる。
　乾燥方法としては特に制限はなく、例えば噴霧乾燥、噴霧造粒乾燥、ドラム乾燥、凍結乾燥流動床乾燥等の公知の乾燥方法を用いることができる。このようにして、アスタキサンチンを含有する乾燥粉末を製造することができる。また、得られた乾燥粉末をさらに粉砕により粒径を細かくしたもの、例えば粒径が1μm～30μm、1μm～20μm、5μm～20μm、7μm～20μmのものを用いることができる。
　ある実施形態において、本発明における使用に適した乾燥粉末は、アスタキサンチンを産生し得る細菌の菌体を、100℃を超える温度の伝熱部と接触させて伝熱受熱乾燥する工程を含む製造方法によって得られる乾燥菌体であって、例えば体積粒子径D50が7～12μmのときにエタノール抽出により抽出されるアスタキサンチンの拡散係数Dの25℃と35℃との温度変化比（b25／b35）が0.807±0.05のものである。
　本発明において使用することができるアスタキサンチンは、例えばパナファード-P（PANAFERD-P、JXエネルギー株式会社）として販売されているものを入手することができる。
　本発明の家禽用配合飼料の調製のために、上記の乾燥粉末を、トウモロコシ含量50％以下の飼料に添加する。本明細書において、「トウモロコシ含量」との記載における「トウモロコシ」とは、主としてトウモロコシの実を乾燥及び破砕したもの、並びにトウモロコシ由来の加工品、例えばコーングルテンフィード、コーングルテンミール、DDGS（Dried Distiller's Grains with Solubles、トウモロコシ蒸留かす）等も含めることとする。
　本発明の家禽用配合飼料を用いれば、トウモロコシ含量が高い飼料に上記アスタキサンチン乾燥粉末を添加して給餌した家禽から得られる卵黄中のカロテノイド濃度と比較して、卵黄中のカロテノイド濃度が低いにもかかわらず、所望のカラーファン値を有する卵を得ることができる。
　本方法では、トウモロコシ含量が50％以下である飼料中に、上記で得られる乾燥粉末を添加した配合飼料を、家禽に給餌し、家禽を生育させ、採卵することでアスタキサンチン含有家禽卵を得る。
　アスタキサンチン含有細菌乾燥粉末は、細菌の種類、培養方法等の条件によって変動し得るが、粉末1g中に1～30mgのアスタキサンチンを含有し得る。例えば、パラコッカス属に属するある菌株の乾燥粉末1g中には、2.1mg～2.5mg（2,100～2,500ppm）程度のアスタキサンチンが含まれ得る。また、パラコッカス属に属する別の菌株の乾燥粉末1g中には、20mg～25mg（20,000～25,000ppm）程度のアスタキサンチンが含まれ得る。本発明では、最終の配合飼料中にアスタキサンチンが1～8 ppm（飼料100gあたり0.1～0.8mg）、例えば1 ppm、2 ppm、3 ppm、4 ppm、5 ppm、6 ppm、7 ppm、8 ppm、1～4 ppm、又は2～4 ppm含まれていれば良く、従って、上記のようにして得られたアスタキサンチン含有細菌乾燥粉末を、100gの飼料に対して約3～800mg（30～8,000 ppm）、例えば4～400 mg（40～4,000 ppm）、又は4～40 mg（40～400 ppm）の範囲で添加すれば良い。
　アスタキサンチン含有細菌乾燥粉末は、ビタミン類等と共にプレミックス中に事前に混合しておくこともできる。
　アスタキサンチン含有細菌乾燥粉末を添加した配合飼料による給餌期間は、産卵開始前2週間以上、3週間以上、又は4週間以上であれば良い。
　アスタキサンチン含有細菌乾燥粉末を含有する本発明の家禽用配合飼料を給餌して得られる卵における卵黄中アスタキサンチン濃度は、例えば12ppm以下、10ppm以下、9ppm以下、8ppm以下、7ppm以下であれば良く、また、0.1ppm以上、0.3ppm以上、0.5ppm以上、0.8ppm以上、1ppm以上であれば良い。
　本発明の方法により、飼料中へのアスタキサンチンの添加量が1 ppm～8 ppmの範囲において、カラーファン値が9～15の卵黄色を呈する卵を得ることができる。また、4 ppm以下の濃度のアスタキサンチンの配合によって、カラーファン値が14までの卵黄色を呈する卵を得ることができる。消費者の嗜好や卵の用途等に応じて目的とするカラーファン値は異なるため、目的とするカラーファン値、例えばカラーファン値が9、10、11、12、13、14又は15の卵を得るために、配合飼料中に添加すべきアスタキサンチンの量（濃度）を調整することができる。
　本発明の配合飼料を給餌した家禽は、トウモロコシ含量が低い飼料を用いた場合には、卵黄中に移行するカロテノイド含量も低く、またアスタキサンチン濃度が10 ppm以下（100g当たり1mg以下）であるにもかかわらず、カラーファン値が9～15の卵黄色の家禽卵を産卵する。通常、トウモロコシ含量の高い配合飼料を使用した場合には、得られる卵黄は10～30ppm程度のカロテノイド含量を有する。従って、本発明の配合飼料の組成で目的のカラーファン値が得られたことは驚くべきことである。
　本発明の予想外の効果については、いかなる理論にも拘束されるものではないが、トウモロコシ中の黄色系カロテノイドであるゼアキサンチン、ルテインがアスタキサンチンの吸収及び卵黄への蓄積を競合的に阻害しているため、これらの色素量の低下によって、アスタキサンチンの吸収・卵黄への蓄積が増加することが考えられる。アスタキサンチンの化学構造はゼアキサンチン及びルテインの化学構造と非常に類似している。吸収・蓄積されるゼアキサンチン、ルテインの量の低下によると考えられるこの効果は、パプリカ由来の色素であるt-カプサンチンでは見られないものであった。
　実際に、同量のアスタキサンチンをトウモロコシ含量の高い飼料（トウモロコシ含量50％超）及び含量の低い飼料（トウモロコシ含量10％以下）に添加して卵黄中のカロテノイド組成を比較した結果、トウモロコシ含量の低い飼料の場合で、総カロテノイド量は少ないにも関わらず、アスタキサンチン濃度が高く、カラーファン値も高くなっていることが判明した（図３、図４及び表４）。これに対してt-カプサンチンを添加した場合には、トウモロコシ含量の高い飼料を与えた場合の方がt-カプサンチン濃度が高くなっていた（図５）。また、カロテノイド中のt-カプサンチン濃度が相対的に上昇しているにもかかわらず、カラーファン値の上昇は見られなかった（表４）。
　アスタキサンチンを産生する細菌乾燥粉末には、アスタキサンチンのみではなく、他に数種のカロテノイドが含まれている。例えばあるパラコッカス菌株の細菌乾燥粉末中には約3％のカロテノイドが含まれており、そのうちの約60％、すなわち細菌乾燥粉末全量に基づいて約2％がアスタキサンチンである。従って、上記の結果は、アスタキサンチンをはじめとするカロテノイド全体（例えばアスタキサンチンの代謝産物やアスタキサンチンの前駆物質も含む）、更に細菌乾燥粉末に含まれる更なる成分も併せた複合的効果が生じている可能性も示唆するものと考えられる。
　飼料中のトウモロコシの配合量を低減する場合、トウモロコシから得られていた色素以外の栄養を他の材料により補う必要がある。トウモロコシの代替として使用可能な材料は、炭水化物として黄色系カロテノイド含有量が低いコメ、コムギ、オオムギ、ダイズ、マイロ、及び／又はこれらに由来する原料を例えば10％以上、20％以上、30％以上、40％以上、又は50％以上含有させることができる。コメとしては、例えば玄米、白米、米ぬか等を利用することができる。また、必要に応じて、アミノ酸、ビタミン、ミネラル等の添加量を適宜調整することができる。当業者であれば、トウモロコシ含量を下げた配合飼料であっても、産卵数等に影響させることなく、適切な組成のものを調製することができる。
　以下、実施例により本発明を更に具体的に説明する。但し、本発明はこれらに限定されるものではない。
［実施例１］　鶏卵色揚げ試験１
　評価用色素剤として、パラコッカス菌乾燥菌体製剤（アスタキサンチン2%含有）とパプリカ色素製剤（t-カプサンチン 0.25%含有）を用いた。
　パラコッカス菌乾燥菌体製剤は、カロテノイド類を産生するパラコッカス菌体として、パラコッカス・カロティニファシエンス(Paracoccus carotinifaciens) E-396株（FERM BP-4283）からのニトロソグアニジン変異株を使用した。これをシード用フラスコ培地でまず培養し、次いで本培養用培地で、菌体濃度が最大になるまで、28℃で好気条件で培養した。次いでこれを遠心分離機で集菌し、回収した。
　回収したパラコッカス菌体を、ドラム回転数3.5rpm、ドラム温度140℃の条件でダブルドラムドライヤーで乾燥した。得られた粉末の平均粒径（体積粒子径D50）はおよそ100～125μmであった。これをさらにジェットミル（株式会社セイシン企業社製）を用いて平均粒径(D50)が9μmとなるように微粉化（粉砕）し、パラコッカス菌乾燥菌体製剤として用いた。
　パプリカ色素製剤はカラーアップ（コーキン化学社、総キサントフィル濃度5 g/kg品）を用いた。
　表１に示す低トウモロコシ含量飼料および標準トウモロコシ含量飼料に、上記の製剤を、アスタキサンチン、t-カプサンチン含量がそれぞれ最終濃度で1、2、4、又は8 ppmとなるように添加した配合飼料を調製した。尚、実際に製造された配合飼料中のアスタキサンチン、t-カプサンチン含量の実測濃度を表２に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
　試験には、ジュリアライトを用い、各区に10羽ずつ供試した。2週間の馴致期間を設け、カラーファン値の安定する2週目以降の卵を評価に用いた。
　各試験区から採卵し、エッグマルチテスターEMT-7300(JA全農たまご社)を用いて各試験区ごとに鶏卵10個のカラーファン値を測定した。また、卵黄中のカロテノイド濃度は各試験区ごとに3個を測定した。
　卵黄中、飼料中のカロテノイド類の定量は高速液体クロマトグラフィー(HPLC)にて以下のように行った。
　カラムはInertsil SIL-100A, 5μm(φ4.6×250mm)(GLサイエンス製)を2本連結して使用した。溶出は、移動相であるn-ヘキサン/テトラヒドロフラン/メタノール混合液(40:20:1)を室温付近一定の温度にて毎分1.0mL流すことで行った。測定においては、サンプルをテトラヒドロフランで溶解し、移動相にて適当に希釈した液20μLを注入量とし、カラム溶離液の検出は波長470nmで行った。
　双方の飼料中のアスタキサンチン及びt-カプサンチンの濃度と得られた卵の卵黄色のカラーファン値の関係を図１及び２に示す。
　その結果、驚くべきことに、色素剤としてアスタキサンチンを用いた場合、低トウモロコシ含量飼料では、標準トウモロコシ含量飼料中のアスタキサンチン濃度に対して約50～70％のアスタキサンチン濃度で同等のカラーファン値を得ることができた（図１）。一方、t-カプサンチンを用いた場合、アスタキサンチンのような色素剤の必要量の低下は観察されなかった（図２）。また、標準トウモロコシ含量飼料で比較すると、アスタキサンチンとt-カプサンチンとで色揚げに必要な量は同等であった。
　図１及び２の結果から、目的とするカラーファン値10～15を得るために低トウモロコシ含量飼料中に添加すべきアスタキサンチン及びt-カプサンチンの濃度を算出した（表３）。例えば、カラーファン値13を達成するためには、低トウモロコシ含量飼料中にアスタキサンチンを最終濃度2.2 ppmとなるように添加すれば良いのに対して、t-カプサンチンでは最終濃度4.3 ppmとなるように添加する必要があり、アスタキサンチンはt-カプサンチンと比較して約51％の量で同様のカラーファン値が得られることが判明した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
　この結果より、アスタキサンチンと低トウモロコシ含量飼料の組み合わせを選択することにより、色揚げに必要な色素剤の量を低減させることができることが明らかになった。尚、本実施例において、産卵数に有意な差異は見られず、卵の生産性は落ちないことも確認された。
［実施例２］　卵黄中のカロテノイド含量及び組成の比較１
　実施例１で得られた卵の卵黄中のカロテノイド濃度を実施例１に記載の方法により各試験区の卵黄について3個ずつ測定した。図３に、色素を2 ppm又は4 ppm添加した飼料を4～6週間給餌した鶏より採卵した卵の卵黄中カロテノイド組成を示す。
　図から明らかなように、標準トウモロコシ含量飼料では、卵黄中の総カロテノイド濃度が20～30 ppmであるのに対して、低トウモロコシ含量飼料では、総カロテノイド濃度がいずれも10 ppm以下であり、トウモロコシ由来の色素量が低減していることが確認された。
　アスタキサンチンを給餌した区では、2 ppm又は4 ppmのいずれの場合も、標準トウモロコシ含量飼料に添加した場合よりも低トウモロコシ含量飼料を添加した場合に卵黄中アスタキサンチン濃度の増加が観察された。一方、t-カプサンチンを給餌した区ではアスタキサンチンのような濃度の増加は観察されなかった。
　上記の結果から、飼料中のトウモロコシ含量の低下と関連して、アスタキサンチンの吸収及び／又は卵黄中への蓄積量が上昇することが示唆された。
　表４に、色素を4ppm添加した場合に得られる卵黄中の総カロテノイド濃度及びカラーファン値を示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
　表４の結果から明らかな通り、アスタキサンチンを添加した飼料では、卵黄中の総カロテノイド濃度が10 ppm以下に大きく低下しているにもかかわらず、カラーファン値は上昇し、カラーファン値約14を得ることができた。これに対してt-カプサンチンを添加した場合にはカラーファン値の上昇は見られなかった。
［実施例３］　卵黄中色素濃度の比較
　実施例１と同じ色素剤を添加濃度1～8 ppmで飼料に添加した場合の卵黄中の色素濃度を、標準トウモロコシ含量飼料及び低トウモロコシ含量飼料で比較した。結果を図４及び５に示す。
　図４に示すように、アスタキサンチンを添加した場合、全ての添加濃度において、標準トウモロコシ含量飼料よりも低トウモロコシ含量飼料を給餌した鶏から得た卵の卵黄中アスタキサンチン濃度が高く、トウモロコシ含量の低い方が卵黄中により多くアスタキサンチンが蓄積されることが示された。これに対して、t-カプサンチンを添加した場合（図５）、トウモロコシ含量の高い方が蓄積されるt-カプサンチン濃度が高く、アスタキサンチンとは逆の結果を示すことが確認された。
［実施例４］　卵黄中の色素濃度とカラーファン値の相関性
　実施例１で得られた卵の卵黄中におけるアスタキサンチン及びt-カプサンチン濃度（飼料中への添加濃度はいずれも1、2、4、8 ppm）と卵黄のカラーファン値の関係を図６及び７に示す。
　図６及び７の結果から、標準トウモロコシ含量飼料及び低トウモロコシ含量飼料のいずれの場合も、卵黄中のアスタキサンチン濃度又はt-カプサンチン濃度が増加するにつれ、カラーファン値の上昇が確認された。
　また、図中に矢印で示すように、同じ添加濃度であっても、アスタキサンチンでは低トウモロコシ含量飼料とすることで、カラーファン値が高まるのに対し、t-カプサンチンでは逆にカラーファン値が低くなる傾向がみられた。
［実施例５］　鶏卵色揚げ試験２
　トウモロコシ含量30～50％の飼料を用い、実施例１と同様にして本発明の効果を確認した。
　表５に示す組成の飼料に、アスタキサンチン、t-カプサンチン含量がそれぞれ最終濃度で1～16 ppmとなるように添加した配合飼料を調製した。本実施例では、トウモロコシ含量と、その低減に伴って添加する玄米の含量以外の組成は同一の飼料とし、トウモロコシに由来するコーングルテンミールは配合しなかった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000005
　図８ａ及び８ｂに、トウモロコシ含量30％及び50％飼料中のアスタキサンチン及びt-カプサンチンの濃度と得られた卵の卵黄色のカラーファン値の関係をそれぞれ示す。
　その結果、いずれの飼料においても、色素剤として1～8ppmアスタキサンチンを用いた場合、t-カプサンチンを用いた場合よりも高いカラーファン値が得られた。色素剤を16 ppm添加した場合には有意な差は見られなかった。
　図８ａ及び８ｂの結果から、目的とするカラーファン値10～15を得るために飼料中に添加すべきアスタキサンチン及びt-カプサンチンの濃度を、トウモロコシ含量30％及び50％飼料について算出した（表６）。表６に示すように、アスタキサンチンはt-カプサンチンと比較して約60～80％の量で同様のカラーファン値が得られることが判明した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000006
　この結果より、トウモロコシ含量30～50％の飼料においても、色素剤としてアスタキサンチンを選択することにより、色揚げに必要な色素剤の量を低減させることができることが明らかになった。尚、本実施例において、飼料組成の相違による産卵数に有意な差異は見られず、卵の生産性も落ちないことが確認された。
［実施例６］　色差計を用いた卵黄色の測定１
　実施例５で得られた卵、並びに上記表５に示すトウモロコシ含量40％飼料にアスタキサンチンもしくはt-カプサンチンをそれぞれ最終濃度で2ppmとなるように添加した配合飼料を用いて得られた卵の卵黄色を、色差計（CM-700dコニカミノルタ社）を用いて測定した。測定されたL*値、a*値、b*値の結果を図９ａ～９ｃにそれぞれ示す。
　カラーファン値は、赤味に対応するa*値と相関することが知られている。図９ｂに示す結果は、飼料中へのアスタキサンチン及びt-カプサンチンの添加量に応じてa*値（赤味）が上昇しており、また色素剤の添加量が8 ppm以下において、アスタキサンチンを添加した場合の方がa*値が高いことを示す。一方、L*値（図９ａ）及びb*値（図９ｃ）では有意な差は見られなかった。
［実施例７］　卵黄中のカロテノイド含量及び組成の比較２
　実施例５及び６で得られた卵の卵黄中のカロテノイド濃度を、実施例１と同様の方法により各試験区の卵黄について5個ずつ測定した。図１０に、トウモロコシ含量30～50％飼料に色素を1～16 ppm添加した配合飼料を2～4週間給餌した鶏より採卵した卵の卵黄中カロテノイド組成を示す。
　図から明らかなように、アスタキサンチン及びt-カプサンチンの添加濃度に依存して卵黄中のカロテノイド濃度が上昇していた。
　また、トウモロコシ含量が低いほど卵黄中のアスタキサンチン蓄積量が増加する傾向が確認された。一方、t-カプサンチンについてはこのような傾向は確認されなかった。
［実施例８］　鶏卵色揚げ試験３
　トウモロコシ含量0～30％の飼料を用い、実施例１と同様にして本発明の効果を確認した。
　表７に示す組成の飼料に、アスタキサンチン、t-カプサンチン含量がそれぞれ最終濃度で2 ppm又は4 ppmとなるように添加した配合飼料を調製した。本実施例では、トウモロコシ含量と、その低減に伴って添加する玄米の含量以外の組成は同一の飼料とし、トウモロコシに由来するコーングルテンミールは配合しなかった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000007
　図１１に、トウモロコシ含量0～30％飼料にアスタキサンチン及びt-カプサンチンを添加した場合に得られた卵の卵黄色のカラーファン値を示す。
　その結果、いずれの飼料においても、色素剤としてアスタキサンチンを用いた場合にt-カプサンチンを用いた場合よりも高いカラーファン値が得られた。
　上記の結果、並びに実施例５で得られた結果（図８ａ及び８ｂ）から、トウモロコシ含量0～30％飼料及び30～50％飼料に色素剤を2 ppm又は4 ppm添加した配合飼料を用いて得られる卵の卵黄色におけるカラーファン値との関係を図１２ａ～１２ｃに示す。図から明らかな通り、色素剤を2 ppmもしくは4 ppm添加した配合飼料を用いて、本発明の配合飼料がt-カプサンチンを添加した場合よりも有意に高いカラーファン値を有する卵を得ることができることが示された。
［実施例９］　卵黄中のカロテノイド含量及び組成の比較３
　実施例８で得られた卵の卵黄中のカロテノイド濃度を、実施例１と同様の方法により各試験区の卵黄について5個ずつ測定した。図１３に、トウモロコシ含量0～30％飼料に色素を2 ppm又は4 ppm添加した配合飼料を2～4週間給餌した鶏より採卵した卵の卵黄中カロテノイド組成を示す。
　図から明らかなように、トウモロコシ含量に依存してカロテノイド濃度が上昇し、またアスタキサンチン及びt-カプサンチンの添加濃度に依存しても卵黄中のカロテノイド濃度が上昇していたが、いずれの条件においてもt-カプサンチンと比較してアスタキサンチンの方が高濃度に卵黄中に移行していることが示された。
［実施例１０］　色差計を用いた卵黄色の測定２
　実施例８で得られた卵の卵黄色を、色差計（CM-700dコニカミノルタ社）を用いて測定した。測定されたL*値、a*値、b*値の結果を図１４ａ～１４ｃにそれぞれ示す。
　図１４ｂに示す結果は、飼料中へのアスタキサンチン及びt-カプサンチンの添加量（2 ppm又は4 ppm）に応じてa*値（赤味）が上昇することを示す。また、t-カプサンチンではトウモロコシ含量が多い程a*値が高くなったが、アスタキサンチン添加の場合はトウモロコシ含量の変動によるa*値の変動はあまり観察されなかった。一方、明るさに対応するL*値（図１４ａ）では有意な差は見られなかったが、黄色味に対応するb*値（図１４ｃ）ではトウモロコシ含量に応じて上昇し、これはトウモロコシに由来する黄色系色素による変動と考えられた。
　卵の価格は数十年間大きな変動がなく、低価格で推移している。このため、養鶏業者にとっては競争が激しい中で低価格を維持しながら付加価値の高い卵を提供することが望まれている。そのためには、飼料コストの削減ができれば非常に意義があり、また、コストの削減は、最終的には市場における卵の価格にも反映させることができる。
　本明細書で引用した全ての刊行物、特許及び特許出願はそのまま引用により本明細書に組み入れられるものとする。

Claims (9)

  1. 　トウモロコシを50％以下、細菌乾燥粉末由来のアスタキサンチンを1～8 ppmの範囲で含有する家禽用配合飼料。
  2. 　前記細菌がパラコッカス（Paracoccus）属細菌である、請求項１記載の配合飼料。
  3. 　コメ、コムギ、オオムギ、ダイズ、マイロ、及び／又はこれらに由来する原料を10％以上含有する、請求項１又は２記載の配合飼料。
  4. 　トウモロコシを50％以下、細菌乾燥粉末由来のアスタキサンチンを1～8 ppmの範囲で含有する配合飼料を用いて家禽類を飼育し、
    　カラーファン値が9～15の卵黄色を呈する卵を取得する方法。
  5. 　上記配合飼料を2週間以上にわたって給餌することを含む、請求項４記載の方法。
  6. 　前記細菌がパラコッカス（Paracoccus）属細菌である、請求項４又は５記載の方法。
  7. 　トウモロコシを50％以下、細菌乾燥粉末由来のアスタキサンチンを1～8 ppmの範囲で含有する配合飼料を用いて家禽類を飼育して取得される、カラーファン値が9～15の卵黄色を呈する家禽卵。
  8. 　前記細菌がパラコッカス（Paracoccus）属細菌である、請求項７記載の家禽卵。
  9. 　卵黄中のアスタキサンチン濃度が12 ppm以下である、請求項７又は８記載の家禽卵。
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