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WO2012073375A1 - 新規化合物、並びに、キネシンスピンドルタンパク質阻害剤及びその応用 - Google Patents

新規化合物、並びに、キネシンスピンドルタンパク質阻害剤及びその応用 Download PDF

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Publication number
WO2012073375A1
WO2012073375A1 PCT/JP2010/071656 JP2010071656W WO2012073375A1 WO 2012073375 A1 WO2012073375 A1 WO 2012073375A1 JP 2010071656 W JP2010071656 W JP 2010071656W WO 2012073375 A1 WO2012073375 A1 WO 2012073375A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
cancer
spindle protein
general formula
kinesin spindle
compound represented
Prior art date
Application number
PCT/JP2010/071656
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
希 紙谷
惇 朝永
肇 杉山
Original Assignee
富士通株式会社
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 富士通株式会社 filed Critical 富士通株式会社
Priority to EP10860393.7A priority Critical patent/EP2647622B1/en
Priority to PCT/JP2010/071656 priority patent/WO2012073375A1/ja
Priority to JP2012546641A priority patent/JP5641054B2/ja
Publication of WO2012073375A1 publication Critical patent/WO2012073375A1/ja
Priority to US13/901,282 priority patent/US9242928B2/en

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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/20—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/165—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/04—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C237/06—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having the nitrogen atoms of the carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
    • C07C2602/02—Systems containing two condensed rings the rings having only two atoms in common
    • C07C2602/04—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring
    • C07C2602/08—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring the other ring being five-membered, e.g. indane

Definitions

  • the present invention provides a compound, a kinesin spindle protein inhibitor containing the compound, a pharmaceutical composition containing the kinesin spindle protein inhibitor, a method for inhibiting kinesin spindle protein using the kinesin spindle protein inhibitor, and the The present invention relates to a preventive or therapeutic method using a pharmaceutical composition.
  • Kinesin is a motor protein that slides on microtubules using adenosine triphosphate and transports organelles and vesicles, and has a variety of intracellular substances such as cell division and transport of nerve axons. It plays an important role in cell biological processes. Currently, about 100 kinesin-like proteins have been identified. These are thought to play an extremely important role in the mitotic phase of the cell cycle by directly interacting with the microtubules or chromosomes of the mitotic spindle.
  • Cell division is an indispensable phenomenon for living organisms to maintain homeostasis of the internal environment.
  • proliferation proliferation
  • apoptosis occurs in vivo. That is, the homeostasis of the internal environment of the organism is maintained by performing a good balance between cell division (proliferation) and apoptosis.
  • cell proliferative diseases such as cancer are caused.
  • chemotherapeutic agents used to treat cancer include taxanes and vinca alkaloids. Taxanes and vinca alkaloids act on microtubules present in various cell structures. It is estimated that destruction of mitotic spindles by these agents inhibits cancer cell division and induces cell death of cancer cells.
  • microtubules play important functions not only in cancer cells but also in normal cells such as nerve cells. Therefore, these conventional chemotherapeutic agents do not specifically target the mitotic spindle, and neuropathy such as numbness of the limbs is a problem as a side effect.
  • a kinesin spindle protein (sometimes referred to as KSP, Eg5, KNSL1, TRIP5, KIF11, etc.) is localized in the mitotic spindle and is a bipolar mitotic spindle. It is known that it is necessary for the formation and function of the body (see Non-Patent Document 1). Although Eg5 is known to be involved in mouse neuronal development, it disappears from neurons immediately after birth, suggesting that inhibition of Eg5 does not cause peripheral neuropathy associated with conventional chemotherapeutic agents. (See Non-Patent Document 2).
  • a novel low molecular weight compound capable of inhibiting kinesin spindle protein with high efficiency a kinesin spindle protein inhibitor containing the low molecular weight compound, containing the kinesin spindle protein, and at least partially mediated by the kinesin spindle protein
  • the present situation is that it is desired to provide a pharmaceutical composition that can prevent or treat such a disorder and that has no side effects and is highly safe.
  • the present invention relates to a novel low molecular compound capable of inhibiting kinesin spindle protein with high efficiency, a kinesin spindle protein inhibitor containing the novel low molecular compound, a method for inhibiting kinesin spindle protein, and the kinesin spindle protein.
  • a pharmaceutical composition containing an inhibitor and capable of preventing or treating a disorder mediated by kinesin spindle protein at least in part and having no side effects and high safety, and a treatment or prevention method using the pharmaceutical composition The purpose is to provide.
  • the novel compound is represented by the following general formula (I).
  • the kinesin spindle protein inhibitor contains the compound and inhibits the activity of kinesin spindle protein.
  • the pharmaceutical composition contains the kinesin spindle protein inhibitor, and prevents or treats a disorder mediated by kinesin spindle protein at least in part.
  • the kinesin spindle protein inhibitor is brought into contact with a cell to inhibit the activity of kinesin spindle protein in the cell.
  • the prevention or treatment method uses the above-mentioned pharmaceutical composition to prevent or treat a disorder mediated by kinesin spindle protein at least in part.
  • the present invention it is possible to solve the above-mentioned problems in the prior art, achieve the above-mentioned object, and include a low-molecular novel compound capable of inhibiting kinesin spindle protein with high efficiency, and the low-molecular novel compound Kinesin spindle protein inhibitor and method for inhibiting kinesin spindle protein, including the kinesin spindle protein inhibitor, capable of preventing or treating a disorder mediated by kinesin spindle protein at least partially, and having no side effects and safety And a therapeutic or prophylactic method using the pharmaceutical composition.
  • FIG. 1 is a proton nuclear magnetic resonance spectrum of the compound represented by Structural Formula (1), which is a preferred example of the compound represented by General Formula (I).
  • FIG. 2A shows LC (liquid chromatography) (upper) and MS (in high performance liquid chromatography mass spectrometry of the compound represented by the structural formula (1), which is a preferred example of the compound represented by the general formula (I). It is a chromatogram image of (mass spectrometry) (lower stage).
  • FIG. 2B shows the result of mass spectrometry of the peak component having a retention time of 3.142 in high performance liquid chromatography mass spectrometry of the compound represented by the structural formula (1), which is a preferred example of the compound represented by the general formula (I).
  • FIG. 3 shows a proton nucleus of N- (4-chloro-2-fluorophenyl) acetamide, which is an intermediate of the compound represented by the structural formula (2), which is a preferred example of the compound represented by the general formula (V). It is a magnetic resonance spectrum.
  • FIG. 4 shows (E) -3- (3-acetamido-6-chloro-2, which is an intermediate of the compound represented by the structural formula (2), which is a preferred example of the compound represented by the general formula (V). It is a proton nuclear magnetic resonance spectrum of (fluorophenyl) acrylic acid.
  • FIG. 4 shows (E) -3- (3-acetamido-6-chloro-2, which is an intermediate of the compound represented by the structural formula (2), which is a preferred example of the compound represented by the general formula (V). It is a proton nuclear magnetic resonance spectrum of (fluorophenyl) acrylic acid.
  • FIG. 5 shows protons of 3- (3-acetamido-2-fluorophenyl) propanoic acid that is an intermediate of the compound represented by the structural formula (2), which is a preferred example of the compound represented by the general formula (V). It is a nuclear magnetic resonance spectrum.
  • FIG. 6 shows N- (4-fluoro-1-oxo-2,3-dihydro which is an intermediate of the compound represented by the structural formula (2) which is a preferred example of the compound represented by the general formula (V).
  • 1 is a proton nuclear magnetic resonance spectrum of (-1H-inden-5-yl) acetamide.
  • FIG. 7 shows 5-amino-4-fluoro-2,3-dihydro-1H— which is an intermediate of the compound represented by the structural formula (2), which is a preferred example of the compound represented by the general formula (V). It is a proton nuclear magnetic resonance spectrum of inden-1-one.
  • FIG. 8 shows 5- (benzylamino) -4-fluoro-2,3-dihydro which is an intermediate of the compound represented by the structural formula (2) which is a preferred example of the compound represented by the general formula (V).
  • 1 is a proton nuclear magnetic resonance spectrum of -1H-inden-1-one.
  • FIG. 9 is a proton nuclear magnetic resonance spectrum of the compound represented by Structural Formula (2), which is a preferred example of the compound represented by General Formula (V).
  • FIG. 10 shows a preferred example of a compound represented by the general formula (VI), which is an intermediate of a compound represented by the structural formula (2) [benzyl- (3-hydroxy-1-H-indan-5 Yl) -amino] acetic acid proton nuclear magnetic resonance spectrum.
  • FIG. 11 is a proton nuclear magnetic resonance spectrum of the compound represented by Structural Formula (3), which is a preferred example of the compound represented by General Formula (VI).
  • FIG. 12 is a proton nuclear magnetic resonance spectrum of the compound represented by Structural Formula (4), which is a preferred example of the compound represented by General Formula (VI).
  • the novel compound is represented by the following general formula (I).
  • R 1 and R 2 represent an alkyl group which may have a substituent
  • R 3 represents any one of the following general formula (II) and the following general formula (III)
  • R 1 and R 2 may be the same as or different from each other.
  • X represents one of a hydrogen atom and a halogen atom
  • R 4 represents any of a methyl group, a dimethyl group, and an oxygen atom
  • the compound represented by the general formula (1) may be a pharmacologically acceptable salt or ester, or a tautomer.
  • carboxylate an inorganic acid salt, an amino acid salt, a sulfonate, etc.
  • carboxylate examples include trifluoroacetate, acetate, trichloroacetate, hydroxyacetate, lactate, citrate, tartrate, oxalate, benzoate, butyrate, maleate, Examples include propionate, formate and malate.
  • the inorganic acid salt examples include hydrohalide, sulfate, nitrate, phosphate, carbonate, and the like.
  • the amino acid salt include arginate, aspartate, glutamate and the like.
  • the sulfonate examples include methanesulfonate and p-toluenesulfonate.
  • the compound represented by the general formula (I) is a compound represented by any one of the following general formula (IV), the following general formula (V), and the following general formula (VI). preferable.
  • R 1 and R 2 represent an alkyl group which may have a substituent
  • X represents one of a hydrogen atom and a halogen atom
  • R 1 and R 2 may be the same as or different from each other.
  • R 1 and R 2 are preferably either an ethyl group or a methyl group, and R 1 and R 2 are the same group It is more preferable that In the general formulas (I) to (VI), X is preferably any one of a hydrogen atom, a fluorine atom, and a chlorine atom.
  • the physicochemical properties of the compound represented by the structural formula (1) are as follows. (1) The molecular formula is represented by C 24 H 29 FN 2 O. The molecular weight is 380.23. (2) Proton nuclear magnetic resonance (NMR) was measured at 25 ° C. in deuterated chloroform (CDCl 3 ) at 400 MHz. The proton nuclear magnetic resonance spectrum is as shown in FIG. (3) The experimental value by a high performance liquid chromatograph mass spectrometer (LC-MS: positive ion mode) is m / z 381.2 (M + H) + , and the calculated value of M is m / z 381.23 (C a 24 H 30 FN 2 O). The analysis result is shown in FIG. 2A.
  • LC-MS high performance liquid chromatograph mass spectrometer
  • FIG. 2A the upper row is an LC (liquid chromatography) chromatographic image (vertical axis: signal intensity (mAU), horizontal axis: measurement time (minutes), and the lower row is a chromatographic image of MS (mass spectrometry). (Vertical axis: signal intensity, horizontal axis: measurement time (minutes))
  • Fig. 2B shows the results of mass spectrometry of the peak component with a retention time of 3.142.
  • the method for obtaining the compound represented by the structural formula (1) by chemical synthesis is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose.
  • the starting material is 2-fluorobenzoic acid (shown below) Examples thereof include a method of synthesizing via an intermediate using compound 1).
  • a method for producing the compound represented by the structural formula (1) using the starting material 2-fluorobenzoic acid is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose.
  • the method of passing 10 pieces is mentioned.
  • Examples of the intermediate include, first, the following compound 2 (hereinafter sometimes referred to as “intermediate 1-1”), and secondly, the following compound 3 (hereinafter referred to as “intermediate 1-2”).
  • the method for obtaining the intermediates 1-1 to 1-10 is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. Examples thereof include a chemical synthesis method. Moreover, a commercial item can also be used irrespective of chemical synthesis.
  • the reaction temperature, reaction time, synthesis method, and amount of the compound used are not particularly limited. And can be appropriately selected according to the purpose.
  • the state of the compound used for the chemical synthesis is not particularly limited and can be appropriately selected depending on the purpose. For example, the liquid state, the solid state, the dried state, the oily state, the recrystallized state The state etc. are mentioned.
  • the method for confirming the intermediate is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. For example, proton nuclear magnetic resonance spectroscopy, mass spectrometry, carbon-13 nuclear magnetic resonance spectroscopy, infrared spectroscopy And a method of analyzing by a high-performance liquid chromatography method and the like.
  • the product obtained by the chemical synthesis can be purified as necessary.
  • the purification method is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose.
  • a column using a normal layer or reverse layer filler, prep-TLC (preparative TLC), prep- A method such as HPLC (preparative HPLC) can be used.
  • the physicochemical properties of the compound represented by the structural formula (2) are as follows. (1) The molecular formula is represented by C 22 H 25 FN 2 O 2 . The molecular weight is 368.44. (2) Proton nuclear magnetic resonance (NMR) was measured at 25 ° C. in deuterated chloroform (CDCl 3 ) at 400 MHz. The proton nuclear magnetic resonance spectrum is as shown in FIG.
  • a method for obtaining the compound represented by the structural formula (2) by chemical synthesis is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose.
  • 4-chloro-2-fluoroaniline as a starting material And a method of producing via an intermediate.
  • a method for producing the compound represented by the structural formula (2) using the 4-chloro-2-fluoroaniline is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. As shown in Fig. 4, there are a method of passing through 8 intermediates.
  • intermediate 2-1 N- (4-chloro-2-fluorophenyl) acetamide
  • intermediate 2-2 N- (4- Chloro-2-fluoro-3-formylphenyl) acetamide
  • intermediate 2-3 N-(E) -ethyl-3- (3-acetamido-6-chloro- 2-fluorophenyl) acrylate
  • intermediate 2-3 fourthly, (E) -3- (3-acetamido-6-chloro-2-fluorophenyl) acrylic acid (
  • intermediate 2-4 N- (4-chloro-2-fluorophenyl) acetamide
  • intermediate 2-2 N- (4- Chloro-2-fluoro-3-formylphenyl) acetamide
  • intermediate 2-5 3- (3-acetamido-2-fluorophenyl) propanoic acid (hereinafter referred to as “intermediate 2-5”). 6) N- (4-fluoro-1-o) So-2,3-dihydro-1H-inden-5-yl) acetamide (hereinafter sometimes referred to as “intermediate 2-6”), and seventhly, 5-amino-4-fluoro-2,3- Dihydro-1H-inden-1-one (hereinafter sometimes referred to as “intermediate 2-7”), and 8- (benzylamino) -4-fluoro-2,3-dihydro-1H-indene -1-one (hereinafter sometimes referred to as “intermediate 2-8”).
  • the method for obtaining the intermediates 2-1 to 2-8 is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. Examples thereof include a chemical synthesis method. Moreover, you may use a commercial item.
  • reaction temperature, reaction time, synthesis method, and amount of the compound used are not particularly limited. And can be appropriately selected according to the purpose.
  • the state of each compound used in the chemical synthesis is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. For example, the liquid state, solid state, dry state, oily state, recrystallization State.
  • the method for confirming the intermediate is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose.
  • the product obtained by the chemical synthesis can be purified as necessary.
  • the purification method is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. For example, a column using a normal layer or reverse layer filler, prep-TLC, prep-HPLC and the like may be used. Can be used.
  • the physicochemical properties of the compound represented by the structural formula (3) are as follows. (1) The molecular formula is represented by C 23 H 28 N 2 O. The molecular weight is 348.48. (2) Proton nuclear magnetic resonance (NMR) was measured at 25 ° C. in deuterated chloroform (CDCl 3 ) at 400 MHz. The proton nuclear magnetic resonance spectrum is as shown in FIG.
  • the physicochemical properties of the compound represented by the structural formula (4) are as follows. (1) The molecular formula is represented by C 21 H 24 N 2 O. The molecular weight is 320.43. (2) Proton nuclear magnetic resonance (NMR) was measured at 25 ° C. in deuterated chloroform (CDCl 3 ) at 400 MHz. The proton nuclear magnetic resonance spectrum is as shown in FIG.
  • the method for obtaining the compounds represented by the structural formula (3) and the structural formula (4) by chemical synthesis is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. Examples include a method of producing via benzene and using an intermediate. There is no restriction
  • intermediate 3-1 phenyllithium
  • intermediate 3-2 3-phenylbutanoic acid
  • intermediate 3-3 3-methyl-2,3-dihydro-1H-inden-1-one
  • intermediate 3-4 Methyl-6-nitro-2,3-dihydro-1-H-inden-1-one
  • intermediate 3-5 fifthly 6-amino-3-methyl- 2,3-dihydro-1-H-inden-1-one
  • intermediate 3-5 sixth, N- (1-methyl-3-oxo-indan-5) -Yl) benzamide
  • seventh [benzyl- (1-mes L-3-oxo-indan-5-yl) -amin
  • reaction temperature, reaction time, synthesis method, and amount of the compound used are not particularly limited. And can be appropriately selected according to the purpose.
  • the state of each compound used in the chemical synthesis is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. For example, the liquid state, solid state, dry state, oily state, recrystallization State.
  • the method for confirming the intermediate is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose.
  • the product obtained by the chemical synthesis can be purified as necessary.
  • the purification method is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. For example, a column using a normal layer or reverse layer filler, prep-TLC, prep-HPLC and the like may be used. Can be used.
  • the kinesin spindle protein inhibitor contains the compound represented by the general formula (I), and further contains other components as necessary.
  • the compound represented by the general formula (I) in the kinesin spindle protein inhibitor may be used alone or in combination of two or more.
  • the content of the compound represented by the general formula (I) in the kinesin spindle protein inhibitor is not particularly limited as long as it can inhibit the activity of the kinesin spindle protein, and may be appropriately selected according to the purpose. it can.
  • the kinesin spindle protein inhibitor may be the compound represented by the general formula (I).
  • ⁇ Dosage form> There is no restriction
  • the solid agent is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose.
  • a content agent for example, tablet, chewable tablet, effervescent tablet, orally disintegrating tablet, troche, drop agent , Hard capsules, soft capsules, granules, powders, pills, dry syrups, soaking agents and the like.
  • the solid agent is used as an external preparation, for example, suppositories, poultices, plasters and the like can be mentioned.
  • liquid agent a syrup agent, a drink agent, a suspension agent, an alcoholic agent etc. are mentioned, for example.
  • a liquid agent, eye drops, an aerosol agent, a spray agent etc. are mentioned, for example.
  • the activity of the kinesin spindle protein can be inhibited by contacting the kinesin spindle protein inhibitor with a cell.
  • the amount of the kinesin spindle protein inhibitor used is not particularly limited as long as it can inhibit the activity of kinesin spindle protein in the cells, and can be appropriately selected according to the purpose.
  • the kinesin spindle protein inhibitor may be used alone or in combination with other kinesin spindle protein inhibitors.
  • ⁇ Cell> There is no restriction
  • the method for bringing the kinesin spindle protein inhibitor into contact with the cells in the living body is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose.
  • the kinesin spindle protein inhibitor is administered to animals or the like.
  • the method etc. which are administered to a subject are mentioned.
  • the animal species to be administered is not particularly limited and can be appropriately selected according to the purpose. For example, human, monkey, pig, cow, sheep, goat, dog, cat, mouse, rat, bird, etc. Is mentioned.
  • the administration method is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the site where the activity of kinesin spindle protein is to be inhibited. Examples thereof include a local administration method, a gut administration method, and a parenteral administration method. .
  • the topical administration method is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. For example, dermal administration method, inhalation administration method, injection administration method, instillation on the conjunctiva, nasal administration method, vagina An internal administration method etc. are mentioned. There is no restriction
  • the parenteral administration method is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose.
  • the dosage of the kinesin spindle protein inhibitor is not particularly limited and takes into consideration various factors such as the age, weight, constitution, symptom of the subject to be administered, and the presence / absence of administration of a drug containing other ingredients as active ingredients. And can be selected as appropriate.
  • the cultured cells may be known cultured cell lines, primary cultured cells collected from animals, or cells obtained by subculturing the primary cultured cells. There is no restriction
  • the method for bringing the kinesin spindle protein inhibitor into contact with the cultured cells is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the purpose.
  • the kinesin spindle protein inhibitor is cultured in the cultured cells.
  • a method of adding to the medium is not particularly limited and can be appropriately selected depending on the number of cultured cells.
  • the pharmaceutical composition contains the kinesin spindle protein inhibitor and, if necessary, further contains other components.
  • a disorder mediated by kinesin spindle protein at least in part can be prevented or treated.
  • the kinesin spindle protein inhibitor may be contained alone or in combination of two or more.
  • the pharmaceutical composition may be the kinesin spindle protein inhibitor itself.
  • the other components are not particularly limited and may be appropriately selected depending on the purpose within a range not impairing the effects of the present invention.
  • a pharmacologically acceptable carrier and other components are effective.
  • examples include drugs as components.
  • the pharmacologically acceptable carrier is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose.
  • a refreshing agent a bactericidal agent, a preservative, a binder, a thickener, a fixing agent
  • examples include binders, colorants, stabilizers, pH adjusters, buffers, toning agents, solvents, antioxidants, UV inhibitors, crystal precipitation inhibitors, antifoaming agents, physical property improvers, preservatives, etc. It is done.
  • the binder, thickener and fixing agent are not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose.
  • the binder is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose.
  • examples include propyl starch, methyl cellulose, ethyl cellulose, shellac, calcium phosphate, and polyvinyl pyrrolidone.
  • the colorant is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. Examples thereof include titanium oxide and iron oxide.
  • the stabilizer is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. Examples thereof include tragacanth, gum arabic, gelatin, sodium pyrosulfite, EDTA, thioglycolic acid, and thiolactic acid.
  • the pH adjusting agent and the buffering agent are not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. Examples thereof include sodium citrate, sodium acetate, and sodium phosphate.
  • the tonicity agent is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. Examples thereof include sodium chloride and glucose.
  • BCG Bacille Calmette-Guerin
  • actinomycin D actinomycin D
  • aclarubicin azacitidine
  • asparaginase acegraton
  • Anastrozole aminoglutethimide, amsacrine, alemtuzumab, allopurinol, anthracycline, androgen, androgen bicalutamide, antiandrogen, ibritumomab, ifosfamide, imatinib, irinotecan, interferon, interferon alfa, interleukin-2, ubenimest eexex Ramustine, Estrogen, Etoposide, Enocitabine, Epirubicin, Oxaliplatin, Octreotide Carbocon, carboplatin, carmustine, carmofur, cladribine, clarithromycin, krestin (PSK), chlorambucil, ketoconazole, gefitinib, gemcitabine, gem
  • the said pharmaceutical composition may be used individually by 1 type, and may use 2 or more types together.
  • the pharmaceutical composition may be used in combination with a medicine having another component as an active ingredient, or may be used in a state of being blended with a medicine having another component as an active ingredient.
  • the cancer disease is not particularly limited and can be appropriately selected depending on the purpose.
  • Examples include cancer, multiple myeloma, brain tumor, non-Hodgkin lymphoma, melanoma, ciliated colon adenoma, acute myeloid leukemia, chronic myelogenous leukemia, lymphoid leukemia, myeloid leukemia.
  • the method for preventing or treating a disorder mediated by kinesin spindle protein at least in part is not particularly limited as long as the pharmaceutical composition is used, and can be appropriately selected according to the purpose.
  • failure or after onset, etc. are mentioned.
  • the objective it can select suitably.
  • the animal species to be administered include humans, monkeys, pigs, cows, sheep, goats, dogs, cats, mice, rats, birds and the like.
  • the administration method According to the objective, it can select suitably, For example, the method similar to the administration method of the said kinesin spindle protein inhibitor, etc. are mentioned.
  • the dosage is not particularly limited and may be appropriately selected in consideration of various factors such as the age, weight, constitution, symptom, and presence / absence of administration of a drug containing other ingredients as active ingredients. it can.
  • the filtrate was concentrated and purified with a 100 g silica gel column using n-hexane and ethyl acetate to obtain the target compound 3 (2.5 g, yield: 23%).
  • the proton nuclear magnetic resonance (NMR) of the compound represented by the structural formula (1) was measured at 25 ° C. in deuterated chloroform (CDCl 3 ) at 400 MHz.
  • a proton nuclear magnetic resonance spectrum is shown in FIG.
  • the experimental value of the compound represented by the structural formula (1) by a high performance liquid chromatograph mass spectrometer (LC-MS: positive ion mode) is m / z 381.2 (M + H) + , The calculated value was m / z 381.23 (C 24 H 30 FN 2 O).
  • the analysis result is shown in FIG. 2A.
  • FIG. 2A In FIG.
  • Fig. 2A shows the upper row is an LC (liquid chromatography) chromatographic image (vertical axis: signal intensity (mAU), horizontal axis: measurement time (minutes), and the lower row is a chromatographic image of MS (mass spectrometry). (Vertical axis: signal intensity, horizontal axis: measurement time (minutes))
  • Fig. 2B shows the results of mass spectrometry of the peak component with a retention time of 3.142.
  • NMR nuclear magnetic resonance
  • FIG. 11 shows a proton nuclear magnetic resonance spectrum of the compound represented by the structural formula (3)
  • FIG. 12 shows a proton nuclear magnetic resonance spectrum of the compound represented by the structural formula (4).
  • Example 1 The kinesin spindle protein inhibitory activity of each of the compounds represented by the structural formulas (1) to (4) was measured according to Elizabeth B. et al. Cogan et al. , Analytical Biochemistry, 1999, 271, p. 29-35 and Keith W. Rickert et al. , Archives of Biochemistry and Biophysics, 2008, 469, p. The measurement was carried out by the following method with reference to the method described in 220-231.
  • kinesin spindle protein- BL21 Star (DE3) (manufactured by Invitrogen Corporation) was cultured overnight at 37 ° C. and 200 rpm using an LB (Luria-Bertani) medium. This culture was added to 2 L of LB medium so that the OD at 600 nm was 0.01. Subsequently, it culture
  • kinesin spindle protein is induced by adding 1 mM IPTG (Isopropyl- ⁇ -D-thiogalactopyranoside), and 3 hours after the start of induction by IPTG, centrifugation is performed at 4 ° C. and 7,000 g for 15 minutes. Cells were harvested. Cells expressing this recombinant kinesin spindle protein were stored as 1 g / pack at ⁇ 80 ° C. until use.
  • IPTG Isopropyl- ⁇ -D-thiogalactopyranoside
  • This crude kinesin spindle protein fraction (4 mL) was put in a dialysis tube (Ting Ke Hong Da (made in China)) and dialyzed at 4 ° C. with 500 mL of IEX Buffer A (the composition is shown below). This dialysis was performed twice.
  • IEX ion exchange
  • the kinesin spindle protein fraction was loaded onto a 1 mL HisTrap TM SPXL column (GE Healthcare). The column was flushed with IEX Buffer A until A280 reached baseline, followed by pH 6.8 IEX Buffer A and IEX Buffer B (composition shown below) for sodium chloride concentrations from 0M to 1M. A linear gradient was used. Kinesin spindle protein was eluted when the concentration of sodium chloride was about 400 mM, and this fraction was transferred to a storage buffer (composition shown below) by dialysis. Dialysis was performed in the same manner as the first purification.
  • the final purified kinesin spindle protein concentration was measured by the ultraviolet absorption method.
  • the concentration of purified kinesin spindle protein was 1.5 ⁇ M. This was divided into 100 ⁇ L / tube (total amount 1.45 mL) and stored at ⁇ 80 ° C. until use.
  • composition of protein extraction buffer 50 mM HEPES (4- (2-hydroxyethyl) -1-piperazine ethanesulfonic acid) (pH 8.0) 2 mM magnesium chloride 250 mM sodium chloride 10% by mass Glycerol 0.1% by mass NP-40 (polyoxyethylene (9) octylphenyl ether) 1 mM dithiothreitol (DTT) 1 mM phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF) 0.5 mM ATP-Mg 10 mM imidazole 2 mM Benzimidine [Composition of His-Buffer A] 50 mM HEPES (pH 8.0) 2 mM Magnesium chloride 250 mM Sodium chloride 10% by mass Glycerol [Composition of His-Buffer B] 50 mM HEPES (pH 8.0) 2 mM magnesium chloride 250 mM sodium chloride 10% by mass Glycerol 1M Imidazo
  • reaction solution was prepared by mixing and incubated at 37 ° C. for 10 minutes, and then 10 ⁇ ATP solution (10 mM) The reaction was started by adding 5 ⁇ L of ATP, 10 mM PIPES (pH 7.0), and immediately incubated at 37 ° C. for 20 minutes.
  • the final concentration in 50 ⁇ L of the reaction solution is 19 mM PIPES, 1 mM EGTA, 1.2 mM magnesium chloride, 2 ⁇ M taxol, 66 ⁇ g / mL microtubule, 30 nM kinesin spindle protein, 1 mM ATP.
  • a high control was prepared in the same manner as in the reaction solution except that only 100% by mass DMSO was used instead of the 100 ⁇ compound in the reaction solution, and reacted in the same manner.
  • the low control was prepared in the same manner as the reaction solution except that 1 ⁇ L of water was added instead of 1 ⁇ L of kinesin spindle protein in the reaction solution, and reacted in the same manner.
  • Quench C buffer (the composition is shown below) was added to stop the reaction, followed by incubation at room temperature for 5 minutes. Absorbance at 525 nm was measured with a microplate reader (SpectraMax, manufactured by Molecular Devices).
  • the Quench C buffer was prepared before use before the test.
  • Kinesin spindle protein degrades ATP into ADP and Pi (phosphate). Pi produced by decomposition is combined with quinaldine red (QR) and ammonium heptamolybdate to form a complex. For this reason, the production amount of Pi can be measured by measuring the absorbance at 525 nm. Therefore, when the value of absorbance at 525 nm of the high control (Pi production amount) is 100, by comparing the absorbance value of the high control with the absorbance value of the test group to which the compound was added, It can be determined whether the activity of the kinesin spindle protein is inhibited. That is, the activity inhibition rate of kinesin spindle protein can be calculated from the following formula.
  • Inhibition rate (%) (S ⁇ L) / (H ⁇ L) ⁇ 100
  • S represents a compound represented by the structural formula (1), a compound represented by the structural formula (2), a compound represented by the structural formula (3), or the structural formula.
  • the absorbance value tested in the reaction solution to which the compound represented by (4) was added “L” represents the absorbance value of the low control, and “H” represents the absorbance value of the high control.

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Abstract

　下記一般式（Ｉ）で表されることを特徴とする化合物の提供。ただし、前記一般式（Ｉ）において、Ｒ１及びＲ２は、置換基を有していてもよいアルキル基を表し、Ｒ３は、下記一般式（ＩＩ）及び下記一般式（ＩＩＩ）いずれかを表し、前記Ｒ１及び前記Ｒ２は、互いに同一であってもよいし、異なっていてもよい。 ただし、前記一般式（ＩＩ）及び前記一般式（ＩＩＩ）において、Ｘは、水素原子及びハロゲン原子のいずれかを表し、Ｒ４は、メチル基、ジメチル基、及び酸素原子のいずれかを表し、＊は、結合手を表す。

Description

新規化合物、並びに、キネシンスピンドルタンパク質阻害剤及びその応用
　本発明は、化合物、前記化合物を含有するキネシンスピンドルタンパク質阻害剤、前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤を含有する医薬組成物、並びに、前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤を用いたキネシンスピンドルタンパク質の阻害方法、及び前記医薬組成物を用いた予防乃至治療方法に関する。
　キネシンは、アデノシン三リン酸を使用して微小管上を滑走し、細胞小器官及び小胞などを輸送する運動タンパク質であり、細胞分裂や神経軸索輸送等の細胞内物質輸送など、多様な細胞生物学的プロセスにおいて重要な役割を果たしている。
　現在、約１００種類のキネシン様タンパク質が同定されている。これらは有糸分裂紡錘体の微小管又は染色体と直接相互作用して細胞周期の有糸分裂時期に極めて重要な役割を果たすと考えられている。
　細胞分裂は、生物が生存し内部環境の恒常性を維持していく上で欠かすことのできない現象である。一方で、この恒常性を維持するために、生体内においてアポトーシスが起こることも重要である。即ち、細胞分裂（増殖）とアポトーシスとがバランスよく行われることで生物の内部環境の恒常性が維持される。
　しかし、この細胞分裂とアポトーシスとのバランスが崩れ、細胞分裂が亢進すると、ガン等の細胞増殖性疾患が引き起こされる。
　そこで、ガン等の細胞増殖性疾患の治療方法として前記キネシンを阻害することが検討されている。ガンの治療に用いられる常套の化学療法剤には、タキサン類及びビンカアルカロイド類がある。タキサン類及びビンカアルカロイド類は、各種の細胞構造に存在する微小管に作用する。これらの薬剤による有糸分裂紡錘体の破壊によってガン細胞の分裂が阻害され、ガン細胞の細胞死が誘発されると推定されている。
　しかし、微小管は、ガン細胞だけでなく神経細胞等の正常細胞でも重要な機能を担っている。そのため、これらの常套の化学療法剤は、有糸分裂紡錘体を特異的に標的とするものではなく、手足のしびれ等の神経障害が副作用として問題となっている。
　前記同定されたキネシン様タンパク質の１つとして、キネシンスピンドルタンパク質（ＫＳＰ、Ｅｇ５、ＫＮＳＬ１、ＴＲＩＰ５、ＫＩＦ１１などと称することもある。）が、有糸分裂紡錘体に局在し、双極有糸分裂紡錘体の形成及び機能に必要であること知られている（非特許文献１参照）。
　前記Ｅｇ５は、マウスのニューロン発達に関与していることが知られているが、出生直後ニューロンから消失するので、Ｅｇ５の阻害は常套の化学療法剤にともなう末梢神経障害を起こさないことが示唆されている（非特許文献２参照）。
　したがって、キネシンスピンドルタンパク質を高効率で阻害することができる低分子の新規化合物、該低分子化合物を含有するキネシンスピンドルタンパク質阻害剤、該キネシンスピンドルタンパク質を含有し、少なくとも一部にキネシンスピンドルタンパク質が介在する障害を予防乃至治療することができ、かつ副作用がなく安全性の高い医薬組成物の提供が望まれているのが現状である。
Ａｎｎｅ　Ｂｌａｎｇｙ　ｅｔ　ａｌ．，　１９９５，　Ｃｅｌｌ，　Ｖｏｌ．８３，　ｐ．１１５９－１１６９ Ｌｏｔｆｉ　Ｆｅｒｈａｔ　ｅｔ　ａｌ．，　１９９８，　Ｔｈｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，　１８（１９），　ｐ．７８２２－７８３５
　本発明は、従来における前記諸問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、キネシンスピンドルタンパク質を高効率で阻害することができる低分子の新規化合物、該低分子の新規化合物を含有するキネシンスピンドルタンパク質阻害剤及びキネシンスピンドルタンパク質の阻害方法、該キネシンスピンドルタンパク質阻害剤を含有し、少なくとも一部にキネシンスピンドルタンパク質が介在する障害を予防乃至治療することができ、かつ副作用がなく安全性の高い医薬組成物、該医薬組成物を用いた治療乃至予防方法を提供することを目的とする。
　新規化合物は、下記一般式（Ｉ）で表される。
　キネシンスピンドルタンパク質阻害剤は、前記化合物を含有し、キネシンスピンドルタンパク質の活性を阻害する。
　医薬組成物は、前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤を含有し、少なくとも一部にキネシンスピンドルタンパク質が介在する障害を予防乃至治療する。
　キネシンスピンドルタンパク質の阻害方法は、前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤と細胞とを接触させて、該細胞におけるキネシンスピンドルタンパク質の活性を阻害する。
　予防乃至治療方法は、前記医薬組成物を用いて、少なくとも一部にキネシンスピンドルタンパク質が介在する障害を予防乃至治療する。
　本発明によれば、従来における前記諸問題を解決し、前記目的を達成することができ、キネシンスピンドルタンパク質を高効率で阻害することができる低分子の新規化合物、該低分子の新規化合物を含有するキネシンスピンドルタンパク質阻害剤及びキネシンスピンドルタンパク質の阻害方法、該キネシンスピンドルタンパク質阻害剤を含有し、少なくとも一部にキネシンスピンドルタンパク質が介在する障害を予防乃至治療することができ、かつ副作用がなく安全性の高い医薬組成物、該医薬組成物を用いた治療乃至予防方法を提供することができる。
図１は、一般式（Ｉ）で表される化合物の好ましい一例である構造式（１）で表される化合物のプロトン核磁気共鳴スペクトルである。 図２Ａは、一般式（Ｉ）で表される化合物の好ましい一例である構造式（１）で表される化合物の高速液体クロマトグラフ質量分析における、ＬＣ（液体クロマトグラフィー）（上段）及びＭＳ（質量分析）（下段）のクロマトグラム像である。 図２Ｂは、一般式（Ｉ）で表される化合物の好ましい一例である構造式（１）で表される化合物の高速液体クロマトグラフ質量分析におけるリテンションタイム３．１４２のピーク成分の質量分析の結果を示した図である。 図３は、一般式（Ｖ）で表される化合物の好ましい一例である構造式（２）で表される化合物の中間体であるＮ－（４－クロロ－２－フルオロフェニル）アセトアミドのプロトン核磁気共鳴スペクトルである。 図４は、一般式（Ｖ）で表される化合物の好ましい一例である構造式（２）で表される化合物の中間体である（Ｅ）－３－（３－アセトアミド－６－クロロ－２－フルオロフェニル）アクリル酸のプロトン核磁気共鳴スペクトルである。 図５は、一般式（Ｖ）で表される化合物の好ましい一例である構造式（２）で表される化合物の中間体である３－（３－アセトアミド－２－フルオロフェニル）プロパン酸のプロトン核磁気共鳴スペクトルである。 図６は、一般式（Ｖ）で表される化合物の好ましい一例である構造式（２）で表される化合物の中間体であるＮ－（４－フルオロ－１－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－５－イル）アセトアミドのプロトン核磁気共鳴スペクトルである。 図７は、一般式（Ｖ）で表される化合物の好ましい一例である構造式（２）で表される化合物の中間体である５－アミノ－４－フルオロ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－１－オンのプロトン核磁気共鳴スペクトルである。 図８は、一般式（Ｖ）で表される化合物の好ましい一例である構造式（２）で表される化合物の中間体である５－（ベンジルアミノ）－４－フルオロ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－１－オンのプロトン核磁気共鳴スペクトルである。 図９は、一般式（Ｖ）で表される化合物の好ましい一例である構造式（２）で表される化合物のプロトン核磁気共鳴スペクトルである。 図１０は、一般式（ＶＩ）で表される化合物の好ましい一例である構造式（２）で表される化合物の中間体である［ベンジル－（３－ヒドロキシ－１－Ｈ－インダン－５－イル）－アミノ］酢酸のプロトン核磁気共鳴スペクトルである。 図１１は、一般式（ＶＩ）で表される化合物の好ましい一例である構造式（３）で表される化合物のプロトン核磁気共鳴スペクトルである。 図１２は、一般式（ＶＩ）で表される化合物の好ましい一例である構造式（４）で表される化合物のプロトン核磁気共鳴スペクトルである。
（新規化合物）
　新規化合物は、下記一般式（Ｉ）で表される。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000010
 　ただし、前記一般式（Ｉ）において、
　Ｒ１及びＲ２は、置換基を有していてもよいアルキル基を表し、
　Ｒ３は、下記一般式（ＩＩ）及び下記一般式（ＩＩＩ）いずれかを表し、
　前記Ｒ１及び前記Ｒ２は、互いに同一であってもよいし、異なっていてもよい。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000011
 　ただし、前記一般式（ＩＩ）及び前記一般式（ＩＩＩ）において、
　Ｘは、水素原子及びハロゲン原子のいずれかを表し、
　Ｒ４は、メチル基、ジメチル基、及び酸素原子のいずれかを表し、
　＊は、結合手を表す。
　前記一般式（１）で表される化合物は、薬理学的に許容される塩やエステルであってもよく、互変異性体であってもよい。
　前記塩としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、カルボン酸塩、無機酸塩、アミノ酸塩、スルホン酸塩などが挙げられる。
　前記カルボン酸塩としては、例えば、トリフルオロ酢酸塩、酢酸塩、トリクロロ酢酸塩、ヒドロキシ酢酸塩、乳酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、シュウ酸塩、安息香酸塩、酪酸塩、マレイン酸塩、プロピオン酸塩、蟻酸塩、リンゴ酸塩などが挙げられる。
　前記無機酸塩としては、例えば、ハロゲン化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、炭酸塩などが挙げられる。
　前記アミノ酸塩としては、例えば、アルギニン酸塩、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩などが挙げられる。
　前記スルホン酸塩としては、例えば、メタンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩などが挙げられる。
　これらの中でも、前記一般式（Ｉ）で表される化合物は、下記一般式（ＩＶ）、下記一般式（Ｖ）、及び下記一般式（ＶＩ）のいずれかで表される化合物であることが好ましい。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000012
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000013
  
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000014
 　ただし、前記一般式（ＩＶ）、前記一般式（Ｖ）、及び前記一般式（ＶＩ）において、
　Ｒ１及びＲ２は、置換基を有していてもよいアルキル基を表し、
　Ｘは、水素原子及びハロゲン原子のいずれかを表し、
　前記Ｒ１及び前記Ｒ２は、互いに同一であってもよいし、異なっていてもよい。
　これらの中でも、前記一般式（Ｉ）～（ＶＩ）において、Ｒ１及びＲ２の少なくともいずれかが、エチル基及びメチル基のいずれかであることが好ましく、Ｒ１及びＲ２が同一の基であることがより好ましい。
　また、前記一般式（Ｉ）～（ＶＩ）において、Ｘは、水素原子、フッ素原子、及び塩素原子のいずれかであることが好ましい。
＜一般式（ＩＶ）で表される化合物＞
　前記一般式（ＩＶ）で表される化合物としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、下記構造式（１）で表される化合物が好ましい。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000015
－物理化学的性状－
　前記構造式（１）で表される化合物の物理化学的性状としては、以下のとおりである。
（１）分子式は、Ｃ２４Ｈ２９ＦＮ２Ｏで表される。分子量は、３８０．２３である。
（２）プロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）は、４００ＭＨｚにおいて重クロロホルム（ＣＤＣｌ３）中で２５℃にて測定した。プロトン核磁気共鳴スペクトルとしては、図１に示す通りである。
（３）高速液体クロマトグラフ質量分析計（ＬＣ－ＭＳ：正イオンモード）による、実験値は、ｍ／ｚ３８１．２（Ｍ＋Ｈ）＋であり、Ｍの計算値は、ｍ／ｚ３８１．２３（Ｃ２４Ｈ３０ＦＮ２Ｏ）である。分析結果を図２Ａに示す。図２Ａにおいて、上段は、ＬＣ（液体クロマトグラフィー）のクロマトグラフ像（縦軸：シグナル強度（ｍＡＵ）、横軸：測定時間（分間）であり、下段は、ＭＳ（質量分析）のクロマトグラフ像（縦軸：シグナル強度、横軸：測定時間（分間））である。また、図２Ｂにリテンションタイム３．１４２のピーク成分の質量分析の結果を示す。
＜＜製造方法＞＞
　前記一般式（ＩＶ）で表される化合物の製造方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、化学合成による方法などが挙げられる。
　以下に、前記構造式（１）で表される化合物を例に挙げ、前記一般式（ＩＶ）で表される化合物の製造方法の一例を説明する。
　前記構造式（１）で表される化合物を化学合成により得る方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、出発物質を下記に示す２－フルオロ安息香酸（化合物１）を用い、中間体を経て合成する方法などが挙げられる。
　前記出発物質２－フルオロ安息香酸を用いて、前記構造式（１）で表される化合物を製造する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、中間体を１０個経る方法などが挙げられる。
　前記中間体としては、例えば、第１に下記化合物２（以下、「中間体１－１」と称することがある。）、第２に下記化合物３（以下、「中間体１－２」と称することがある。）、第３に下記化合物４（以下、「中間体１－３」と称することがある。）、第４に下記化合物５（以下、「中間体１－４」と称することがある。）、第５に下記化合物６（以下、「中間体１－５」と称することがある。）、第６に下記化合物７（以下、「中間体１－６」と称することがある。）、第７に下記化合物８（以下、「中間体１－７」と称することがある。）、第８に下記化合物９（以下、「中間体１－８」と称することがある。）、第９に下記化合物１０（以下、「中間体１－９」と称することがある。）、第１０に下記化合物１１（以下、「中間体１－１０」と称することがある。）などが挙げられる。
　前記中間体１－１～１－１０を得る方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、化学合成による方法などが挙げられる。また、化学合成によらず、市販品を用いることもできる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000016
　前記一般式（ＩＶ）で表される化合物、及び前記中間体１－１～１－１０を化学合成する際の、反応温度、反応時間、合成方法、及び化合物の使用量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
　前記化学合成に用いる化合物の状態としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、液体の状態、固体の状態、乾燥した状態、油状物の状態、再結晶化した状態などが挙げられる。
　前記中間体を確認する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、プロトン核磁気共鳴分光法、質量分析法、炭素１３核磁気共鳴分光法、赤外分光法、高速液体クロマトグラフィー法等で分析する方法などが挙げられる。
　また、前記化学合成により得た生成物は、必要に応じて精製することができる。
　前記精製の方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、順層系又は逆層系充填剤を使用したカラム、ｐｒｅｐ－ＴＬＣ（分取ＴＬＣ）、ｐｒｅｐ－ＨＰＬＣ（分取ＨＰＬＣ）などの方法を用いることができる。
＜一般式（Ｖ）で表される化合物＞
　前記一般式（Ｖ）で表される化合物としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、下記構造式（２）で表される化合物が好ましい。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000017
－物理化学的性状－
　前記構造式（２）で表される化合物の物理化学的性状としては、以下のとおりである。
（１）分子式は、Ｃ２２Ｈ２５ＦＮ２Ｏ２で表される。分子量は、３６８．４４である。
（２）プロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）は、４００ＭＨｚにおいて重クロロホルム（ＣＤＣｌ３）中で２５℃にて測定した。プロトン核磁気共鳴スペクトルとしては、図９に示す通りである。
＜＜製造方法＞＞
　前記一般式（Ｖ）で表される化合物の製造方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、化学合成による方法などが挙げられる。
　以下に、前記構造式（２）で表される化合物を例に挙げ、前記一般式（Ｖ）で表される化合物の製造方法の一例を説明する。
　前記構造式（２）で表される化合物を化学合成による得る方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、出発物質として下記４－クロロ－２－フルオロアニリンを用い、中間体を経て製造する方法などが挙げられる。
　前記４－クロロ－２－フルオロアニリンを用いて、前記構造式（２）で表される化合物を製造する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、下記に示すように、中間体を８つ経る方法などが挙げられる。
　前記中間体としては、例えば、第１にＮ－（４－クロロ－２－フルオロフェニル）アセトアミド（以下、「中間体２－１」と称することがある。）、第２にＮ－（４－クロロ－２－フルオロ－３－ホルミルフェニル）アセトアミド（以下、「中間体２－２」と称することがある。）、第３に（Ｅ）－エチル－３－（３－アセトアミド－６－クロロ－２－フルオロフェニル）アクリレート（以下、「中間体２－３」と称することがある。）、第４に（Ｅ）－３－（３－アセトアミド－６－クロロ－２－フルオロフェニル）アクリル酸（以下、「中間体２－４」と称することがある。）、第５に３－（３－アセトアミド－２－フルオロフェニル）プロパン酸（以下、「中間体２－５」と称することがある。）、第６にＮ－（４－フルオロ－１－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－５－イル）アセトアミド（以下、「中間体２－６」と称することがある。）、第７に５－アミノ－４－フルオロ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－１－オン（以下、「中間体２－７」と称することがある。）、第８に５－（ベンジルアミノ）－４－フルオロ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－１－オン（以下、「中間体２－８」と称することがある。）などが挙げられる。
　前記中間体２－１～２－８を得る方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、化学合成による方法などが挙げられる。また、市販品を用いてもよい。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000018
　前記一般式（Ｖ）で表される化合物、及び前記中間体２－１～２－８を化学合成する際の、反応温度、反応時間、合成方法、及び化合物の使用量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
　前記化学合成に用いる各化合物の状態としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、液体の状態、固体の状態、乾燥した状態、油状物の状態、再結晶化した状態などが挙げられる。
　前記中間体を確認する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、プロトン核磁気共鳴分光法、質量分析法、炭素１３核磁気共鳴分光法、赤外分光法、高速液体クロマトグラフィー法等で分析する方法などが挙げられる。
　また、前記化学合成により得た生成物は、必要に応じて精製することができる。
　前記精製の方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、順層系又は逆層系充填剤を使用したカラム、ｐｒｅｐ－ＴＬＣ、ｐｒｅｐ－ＨＰＬＣなどの方法を用いることができる。
＜一般式（ＶＩ）で表される化合物＞
　前記一般式（ＶＩ）で表される化合物としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、下記構造式（３）及び下記構造式（４）のいずれかで表される化合物が好ましい。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000019
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000020
－物理化学的性状－
　前記構造式（３）で表される化合物の物理化学的性状としては、以下のとおりである。
（１）分子式は、Ｃ２３Ｈ２８Ｎ２Ｏで表される。分子量は、３４８．４８である。
（２）プロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）は、４００ＭＨｚにおいて重クロロホルム（ＣＤＣｌ３）中で２５℃にて測定した。プロトン核磁気共鳴スペクトルとしては、図１１に示す通りである。
　前記構造式（４）で表される化合物の物理化学的性状としては、以下のとおりである。
（１）分子式は、Ｃ２１Ｈ２４Ｎ２Ｏで表される。分子量は、３２０．４３である。
（２）プロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）は、４００ＭＨｚにおいて重クロロホルム（ＣＤＣｌ３）中で２５℃にて測定した。プロトン核磁気共鳴スペクトルとしては、図１２に示す通りである。
＜＜製造方法＞＞
　前記一般式（ＶＩ）で表される化合物の製造方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、化学合成による方法などが挙げられる。
　以下に、前記構造式（３）及び前記構造式（４）で表される化合物を例に挙げ、前記一般式（ＶＩ）で表される化合物の製造方法の一例を説明する。
　前記構造式（３）及び前記構造式（４）で表される化合物を化学合成による得る方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、出発物質として下記ブロモベンゼンを用い、中間体を経て製造する方法などが挙げられる。
　前記ブロモベンゼンを用いて、前記構造式（３）及び前記構造式（４）で表される化合物を製造する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、下記に示すように、中間体を１０個経る方法などが挙げられる。
　前記中間体としては、例えば、第１にフェニルリチウム（以下、「中間体３－１」と称することがある。）、第２に３－フェニルブタン酸（以下、「中間体３－２」と称することがある。）、第３に３－メチル－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－１－オン（以下、「中間体３－３」と称することがある。）、第４に３－メチル－６－ニトロ－２，３－ジヒドロ－１－Ｈ－インデン－１－オン（以下、「中間体３－４」と称することがある。）、第５に６－アミノ－３－メチル－２，３－ジヒドロ－１－Ｈ－インデン－１－オン（以下、「中間体３－５」と称することがある。）、第６にＮ－（１－メチル－３－オキソ－インダン－５－イル）ベンズアミド（以下、「中間体３－６」と称することがある。）、第７に［ベンジル－（１－メチル－３－オキソ－インダン－５－イル）－アミノ]酢酸エチルエステル（以下、「中間体３－７」と称することがある。）、第８に［ベンジル－（３－ヒドロキシ－１－メチル－インダン－５－イル）－アミノ］酢酸エチルエステル（以下、「中間体３－８」と称することがある。）、第９に［ベンジル－（３－ヒドロキシ－１－Ｈ－インダン－５－イル）－アミノ］酢酸エチルエステル（以下、「中間体３－９」と称することがある。）、第１０に［ベンジル－（３－ヒドロキシ－１－Ｈ－インダン－５－イル）－アミノ］酢酸エチルエステル（以下、「中間体３－１０」と称することがある。）などが挙げられる。
　前記中間体３－１～３－１０を得る方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、化学合成による方法などが挙げられる。また、市販品を用いてもよい。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000021
　前記一般式（ＶＩ）で表される化合物、及び前記中間体３－１～３－１０を化学合成する際の、反応温度、反応時間、合成方法、及び化合物の使用量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
　前記化学合成に用いる各化合物の状態としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、液体の状態、固体の状態、乾燥した状態、油状物の状態、再結晶化した状態などが挙げられる。
　前記中間体を確認する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、プロトン核磁気共鳴分光法、質量分析法、炭素１３核磁気共鳴分光法、赤外分光法、高速液体クロマトグラフィー法等で分析する方法などが挙げられる。
　また、前記化学合成により得た生成物は、必要に応じて精製することができる。
　前記精製の方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、順層系又は逆層系充填剤を使用したカラム、ｐｒｅｐ－ＴＬＣ、ｐｒｅｐ－ＨＰＬＣなどの方法を用いることができる。
（キネシンスピンドルタンパク質阻害剤）
　キネシンスピンドルタンパク質阻害剤は、前記一般式（Ｉ）で表される化合物を含有し、必要に応じて、更にその他の成分を含有する。
＜一般式（Ｉ）で表される化合物＞
　前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤中の前記一般式（Ｉ）で表される化合物は、１種単独で使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
　前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤における前記一般式（Ｉ）で表される化合物の含有量としては、キネシンスピンドルタンパク質の活性を阻害することができれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。また、前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤は、前記一般式（Ｉ）で表される化合物そのものであってもよい。
＜その他の成分＞
　前記その他の成分としては、特に制限はなく、薬理学的に許容される担体の中から目的に応じて適宜選択することができ、例えば、薬理学的に許容される担体などが挙げられる。
＜剤型＞
　前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤の剤型としては、特に制限はなく、例えば、固形剤、半固形剤、液剤などが挙げられる。
－固形剤－
　前記固形剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、内容剤として用いられる場合、例えば、錠剤、チュアブル錠、発泡錠、口腔内崩壊錠、トローチ剤、ドロップ剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、顆粒剤、散剤、丸剤、ドライシロップ剤、浸剤などが挙げられる。
　前記固形剤が、外用剤として用いられる場合、例えば、坐剤、パップ剤、プラスター剤などが挙げられる。
－半固形剤－
　前記半固形剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、内用剤として用いられる場合、例えば、舐剤、チューインガム剤、ホイップ剤、ゼリー剤などが挙げられる。
　前記半固形剤が、外用剤として用いられる場合、例えば、軟膏剤、クリーム剤、ムース剤、インヘラー剤、ナザールジェル剤などが挙げられる。
－液剤－
　前記液剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、内用剤として用いられる場合、例えば、シロップ剤、ドリンク剤、懸濁剤、酒精剤などが挙げられる。
　前記液剤が、外用剤として用いられる場合、例えば、液剤、点眼剤、エアゾール剤、噴霧剤などが挙げられる。
（キネシンスピンドルタンパク質の阻害方法）
　キネシンスピンドルタンパク質の活性は、前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤と細胞とを接触させることにより阻害することができる。
＜キネシンスピンドルタンパク質阻害剤＞
　前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤の使用量としては、前記細胞におけるキネシンスピンドルタンパク質の活性を阻害することができれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
　前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤は、１種単独で使用してもよく、他のキネシンスピンドルタンパク質阻害剤と併用してもよい。
＜細胞＞
　前記細胞としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、生体内の細胞、培養細胞などが挙げられる。
－生体内の細胞－
　前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤と、前記生体内の細胞とを接触させる方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤を動物等の投与対象に投与する方法などが挙げられる。
　前記投与対象となる動物種としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ヒト、サル、ブタ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコ、マウス、ラット、トリなどが挙げられる。
　前記投与方法としては、特に制限はなく、キネシンスピンドルタンパク質の活性を阻害したい部位などに応じて適宜選択することができ、例えば、局所投与法、径腸投与法、非経口投与法などが挙げられる。
　前記局所投与法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、皮膚上投与法、吸入投与法、注投与法、結膜上への点眼、経鼻投与法、膣内投与法などが挙げられる。
　前記径腸投与法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、経口投与法、径管栄養法、注腸投与法などが挙げられる。
　前記非経口投与法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、径静脈投与法、径動脈投与法、筋肉内投与法、心臓内投与法、皮下投与法、骨内投与法、皮内投与法、くも膜下投与法、腹腔内投与法、膀胱内投与法、径皮投与法、径粘膜投与法、吸入投与法、硬膜外投与法、硝子体内投与法などが挙げられる。
　前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤の投与量としては、特に制限はなく投与対象となる個体の年齢、体重、体質、症状、他の成分を有効成分とする医薬の投与の有無など、様々な要因を考慮して適宜選択することができる。
－培養細胞－
　前記培養細胞としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
　前記培養細胞は、公知の培養細胞株であってもよく、動物から採取した初代培養細胞、又は前記初代培養細胞を継代培養した細胞であってもよい。
　前記培養細胞の細胞数としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
　前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤と、前記培養細胞とを接触させる方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤を、前記培養細胞を培養中の培地に添加する方法などが挙げられる。
　前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤の添加量としては、特に制限はなく、培養細胞の細胞数などに応じて適宜選択することができる。
（医薬組成物、予防乃至治療方法）
　医薬組成物は、前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤を含有し、必要に応じて、更にその他の成分を含有する。
　前記医薬組成物を用いることにより、少なくとも一部にキネシンスピンドルタンパク質が介在する障害を予防乃至治療することができる。
＜医薬組成物＞
＜＜キネシンスピンドルタンパク質阻害剤＞＞
　前記医薬組成物における、前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤の含有量としては、前記障害を予防乃至治療することができれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤は、１種単独で含有されていてもよく、２種以上が含有されていてもよい。また、前記医薬組成物は、前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤そのものであってもよい。
＜＜その他の成分＞＞
　前記その他の成分としては、特に制限はなく、本発明の効果を損なわない範囲内で、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、薬理学的に許容される担体、他の成分を有効成分とする薬剤などが挙げられる。
　前記医薬組成物中の、その他の成分の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
－薬理学的に許容される担体－
　前記薬理学的に許容される担体としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、清涼剤、殺菌剤、保存剤、粘結剤、増粘剤、固着剤、結合剤、着色剤、安定化剤、ｐＨ調節剤、緩衝剤、等調化剤、溶剤、酸化防止剤、紫外線防止剤、結晶析出防止剤、消泡剤、物性向上剤、防腐剤などが挙げられる。
　前記粘結剤、増粘剤、固着剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、澱粉、デキストリン、セルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルデンプン、プルラン、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸アンモニウム、アルギン酸プロピレングリコールエステル、グアーガム、ローカストビーンガム、アラビアゴム、キサンタンガム、ゼラチン、カゼイン、ポリビニルアルコール、ポリエチレンオキサイド、ポリエチレングリコール、エチレン・プロピレンブロックポリマー、ポリアクリル酸ナトリウム、ポリビニルピロリドンなどが挙げられる。これらは、１種単独で使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
　前記結合剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドンなどが挙げられる。
　前記着色剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、酸化チタン、酸化鉄などが挙げられる。
　前記安定化剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、トラガント、アラビアゴム、ゼラチン、ピロ亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、チオグリコール酸、チオ乳酸などが挙げられる。
　前記ｐＨ調節剤及び前記緩衝剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウムなどが挙げられる。
　前記等張化剤としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、塩化ナトリウム、ブドウ糖などが挙げられる。
－他の成分を有効成分とする薬剤－
　前記他の成分を有効成分とする薬剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、ガンの治療乃至予防に用いられる薬剤が好ましい。
　前記ガンの治療乃至予防に用いられる薬剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ＢＣＧ（ｂａｃｉｌｌｅ　Ｃａｌｍｅｔｔｅ－Ｇｕｅｒｉｎ）、アクチノマイシンＤ、アクラルビシン、アザシチジン、アスパラギナーゼ、アセグラトン、アナストロゾール、アミノグルテチミド、アムサクリン、アレムツズマブ、アロプリノール、アントラサイクリン、アンドロゲン、アンドロゲン　ビカルタミド、抗アンドロゲン、イブリツモマブ、イホスファミド、イマチニブ、イリノテカン、インターフェロン、インターフェロンアルファ、インターロイキン－２、ウベニメクス、エキセメスタン、エストラムスチン、エストロゲン、エトポシド、エノシタビン、エピルビシン、オキサリプラチン、オクトレオチド、カルボコン、カルボプラチン、カルムスチン、カルモフール、クラドリビン、クラリスロマイシン、クレスチン（ＰＳＫ）、クロラムブシル、ケトコナゾール、ゲフィチニブ、ゲムシタビン、ゲムツズマブ、ゴセレリン、サリドマイド、シクロホスファミド、シスプラチン、シゾフィラン、シタラビン、シプロヘプタジン、ジノスタチンスチマラマー、ストレプトゾシン、スラミン、ソブゾキサン、タモキシフェン、タルグレチン、ダウノルビシン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、チオグアニン、チオテパ、テガフール、テガフール・ウラシル、テガフール・ギメラシル・オテラシルカリウム、テニポシド、デキサメタゾン、デニロイキンジフチトクス、トポテカン、トラスツズマブ、トリプトレリン、トレチノイン、トレミフェン、ドキシフルリジン、ドキソルビシン、ドセタキセル、ニムスチン、ネオカルチノスタチン、ネダプラチン、バルルビシン、パクリタキセル、ヒドロキシウレア、ヒドロキシカルバミド、ビカルタミド、ビノレルビン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビンブラスチン、ピシバニール、ピラルビシン、ファドロゾール、フルオロウラシル、フルタミド、フルダラビン、フルベストラント、フロクスウリジン、ブスルファン、ブレオマイシン、プリカマイシン、プレドニゾン、プロカルバジン、プロカルバジン、ペプロマイシン、ペメトレキセド、ペントスタチン、ポルフィマーナトリウム、マイトマイシン、ミトキサントロン、ミトタン、メクロレタミン、メスナ、メチセルジド、メトトレキサート、メドロキシプロゲステロン、メラシン、メルカプトプリン、メルファラン、ラニムスチン、リツキシマブ、リュープロライド、レトロゾール、レバミゾール、レンチナン、ロイコボリン、ロムスチン、三酸化ヒ酸、酢酸メゲストロール、放射性ヨウ素－１３１、放射性リン等を有効成分とする薬剤などが挙げられる。これらは、１種単独で使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
＜＜使用＞＞
　前記医薬組成物は、１種単独で使用してもよく、２種以上を併用してもよい。また、医薬組成物は、他の成分を有効性分とする医薬と併せて使用されてもよく、他の成分を有効成分とする医薬に配合された状態で使用されてもよい。
＜＜キネシンスピンドルタンパク質が介在する障害＞＞
　前記障害としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、細胞増殖性疾患であることが好ましく、ガン疾患であることがより好ましい。
　前記ガン疾患としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、肺ガン、気管支ガン、前立腺ガン、乳ガン、膵臓ガン、結腸ガン、直腸ガン、小腸ガン、甲状腺ガン、食道ガン、口腔ガン、咽頭ガン、喉頭ガン、胃ガン、肝臓ガン、肝内胆管ガン、腎臓ガン、腎盂ガン、膀胱ガン、子宮体ガン、子宮頸ガン、卵巣ガン、結膜ガン、涙腺ガン、眼瞼ガン、多発性骨髄腫、脳腫瘍、非ホジキンリンパ腫、黒色腫、繊毛性結腸腺腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、リンパ性白血病、骨髄性白血病などが挙げられる。
＜予防乃至治療方法＞
　前記少なくとも一部にキネシンスピンドルタンパク質が介在する障害を予防乃至治療する方法としては、前記医薬組成物を用いる限り、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
　例えば、前記障害の発症前又は発症後の投与対象に前記医薬組成物を投与する方法などが挙げられる。
　前記投与量、投与対象、投与時期としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
　前記投与対象となる動物種としては、例えば、ヒト、サル、ブタ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコ、マウス、ラット、トリなどが挙げられる。
　前記投与方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記キネシンスピンドルタンパク質阻害剤の投与方法と同様の方法などが挙げられる。
　前記投与量としては、特に制限はなく、投与対象個体の年齢、体重、体質、症状、他の成分を有効成分とする医薬の投与の有無など、様々な要因を考慮して適宜選択することができる。
　以下、本発明の実施例を説明するが、本発明は、これらの実施例に何ら制限されるものではない。
（製造例１：構造式（１）で表される化合物の合成）
＜化合物２の合成＞
　下記反応式で示すとおり、２－フルオロ安息香酸（１０ｇ、７１ｍｍｏｌ）と塩化チオニル（ＳＯＣｌ２；９ｍＬ）混合液を４０度で３０分反応し溶媒を留去し精製することなく次行程に使用した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000022
＜化合物３の合成＞
　下記反応式で示すとおり、化合物２の粗生成物を塩化メチレン５０ｍｌに溶かし氷冷下塩化アルミニウム（ＡｌＣｌ３；１３ｇ、９．７ｍｍｏｌ）及び塩化ナトリウム（ＮａＣｌ；６ｇ、１０ｍｍｏｌ）を加え、攪拌下エチレンガスを２時間導入した。反応液に１００ｇの氷を加え濾過を３０ｍｌのエーテルで３回抽出し１００ｍｌの飽和食塩水で洗った。無水硫酸ナトリウムで乾燥し濾液を濃縮しｎーヘキサンと酢酸エチルを用いて１００ｇのシリカゲルカラムで精製すると目的化合物３を得た（２．５ｇ、収率：２３％）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000023
＜化合物４の合成＞
　下記反応式で示すとおり、化合物３（１９ｇ、１２７ｍｍｏｌ）、及びトリエチルアミン（Ｅｔ３Ｎ；１４ｇ、１３８ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（ＣＨ３ＣＮ；１００ｍＬ）混合液に、氷冷下ｔｅｒｔ－ブチルジメチルクロロシラン（ＴＢＳＣｌ）（２１ｇ、１４０ｍｍｏｌ）を加えた。次に、混合液を１時間還流下で攪拌した。反応液を濃縮し残渣を得た後、該残渣をエーテル（１５０ｍＬ）に溶解させた。得られた濾液を、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮することにより化合物４の粗生成物を得た。該粗生成物は、精製は行わずに次工程に使用した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000024
 ＜化合物５の合成＞
　下記反応式で示すとおり、化合物４の粗生成物（３２ｇをアセトニトリル（２５０ｍＬ）に溶かし、ヨウ化メチル（ＭｅＩ；４４ｇ、３１０ｍｍｏｌ）及びリチウムヘキサメチルジシラジド（ＬｉＨＭＤＳ；ｇ、３１０ｍｍｏｌ）の２９％のテトラハイドロフラン溶液（２００ｍＬ）を加え、２時間還流した。この反応液に氷水２００ｍｌを加え１００ｍＬの酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機相を、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮することにより化合物５の粗生成物を得た。該粗生成物は、精製は行わずに次工程に使用した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000025
＜化合物６の合成＞
　下記反応式で示すとおり、化合物５の粗生成物（２０．４ｇ、７７ｍｍｏｌ）のテトラハイドロフラン（２５０ｍＬ）混合液に、セシウムフロライド（１０ｇ、６６ｍｍｏｌ）を加え、室温で３時間攪拌した。テトラハイドロフランを減圧で１００ｍｌまで濃縮し１００ｍＬの酢酸エチルと氷水１００ｍｌを加えて酢酸１００ｍｌで３回抽出した。合わせた有機相を、飽和食塩水１００ｍｌで洗い無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮することにより化合物６を得た（１２ｇ、収率：５３％）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000026
＜化合物７の合成＞
　下記反応式で示すとおり、化合物６（１２ｇ、６７ｍｍｏｌ）に、硝酸カリウム（ＫＮＯ３；８ｇ、８１ｍｍｏｌ）の硫酸（２０ｍＬ）混合液を添加し、氷冷下１時間、更に室温２時間攪拌した。この反応液に２００ｍＬの氷水を加え酢酸エチル１００ｍｌで３回抽出した。合わせた有機相を、飽和食塩水で洗い無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮することにより化合物７ａ（５ｇ、収率：３３％）及び７ｂ（４ｇ、収率：２７％）を得た。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000027
＜化合物８の合成＞
　下記反応式で示すとおり、化合物７ａ（５ｇ、２２ｍｍｏｌ）及び水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＢＨ４；１ｇ、２６ｍｍｏｌ）のエタノール（５０ｍＬ）混合液を、室温１時間攪拌した。この混合液に水１００ｍｌを加え１００ｍＬの酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機相を、飽和食塩水１００ｍｌで洗い無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮することにより化合物８の粗生成物を得た。該粗生成物は、精製は行わずに次工程に使用した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000028
＜化合物９の合成＞
　下記反応式で示すとおり、化合物８（３ｇ、１３ｍｍｏｌ）及びｐ－トリスルホン酸触媒（ＴｓＯＨ（ｃａｔ）；２００ｍｇ）をトルエン３０ｍｌに溶かし３時間還流した。この反応液のトルエンを濃縮後水３０ｍｌを加えて３０ｍＬの酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機相を、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮することにより化合物９を得た（２．５ｇ、収率：９０％）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000029
＜化合物１０の合成＞
　下記反応式で示すとおり、化合物９（２．５ｇ、１２ｍｍｏｌ）と塩化スズ（ＳｎＣｌ２；５．７ｇ、３０ｍｍｏｌ）に、塩酸（ＨＣｌ；１５．５ｍＬ）及びを室温にて添加し、その後６０度で２時間攪拌した。この反応液に氷水５０ｍＬを加え酢酸エチル３０ｍｌで３回抽出した。合わせた有機相を、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮することにより化合物１０を得た（１．５ｇ、収率：７１％）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000030
＜化合物１１の合成＞
　下記反応式で示すとおり、化合物１０（５００ｍｇ、２．８ｍｍｏｌ）のジメチルフォルムアミド（７ｍＬ）混合液にトリエチルアミン３００ｍｇ（３０ｍＭ）とヨウ素酢酸ジエチルアミド（６４０ｍｇ、３０ｍｍｏｌ）を加え４０度で２時間攪拌した。この反応液に２０ｍｌの氷水を加え３０ｍＬの酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機相を、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮することにより化合物１１を得た（１４０ｍｇ、収率：１７％）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000031
＜構造式（１）で表される化合物の合成＞
　下記反応式で示すとおり、化合物１１（１４０ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（５ｍＬ）混合液にトリエチルアミン５０ｍｇ（０．５ｍＭ）とベンジルブロマイド８０ｍｇ（０．５ｍＭ）を加え６０度で２時間加熱した。この反応液に２０ｍｌの水を加え５ｍＬの酢酸エチルで３回抽出し溶媒を蒸去後、ｐｒｅｐ－ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ社製）で精製して生成物を得た（１５ｍｇ、収率：８．２％）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000032
　前記構造式（１）で表される化合物のプロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）は、４００ＭＨｚにおいて重クロロホルム（ＣＤＣｌ３）中で２５℃にて測定した。プロトン核磁気共鳴スペクトルを図１に示す。
　また、前記構造式（１）で表される化合物の高速液体クロマトグラフ質量分析計（ＬＣ－ＭＳ：正イオンモード）による、実験値は、ｍ／ｚ３８１．２（Ｍ＋Ｈ）＋であり、Ｍの計算値は、ｍ／ｚ３８１．２３（Ｃ２４Ｈ３０ＦＮ２Ｏ）であった。分析結果を図２Ａに示す。図２Ａにおいて、上段は、ＬＣ（液体クロマトグラフィー）のクロマトグラフ像（縦軸：シグナル強度（ｍＡＵ）、横軸：測定時間（分間）であり、下段は、ＭＳ（質量分析）のクロマトグラフ像（縦軸：シグナル強度、横軸：測定時間（分間））である。また、図２Ｂにリテンションタイム３．１４２のピーク成分の質量分析の結果を示す。
（製造例２：構造式（２）で表される化合物の合成）
＜Ｎ－（４－クロロ－２－フルオロフェニル）アセトアミドの調製＞
　下記反応式で示すとおり、４－クロロ－２－フルオロアニリン（２ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）の酢酸（２ｍＬ）混合液に、無水酢酸（Ａｃ２Ｏ；１．７ｍＬ）を数回に分けて室温（約２５℃）にて添加した。得られた反応混合液を２時間攪拌した。反応終了後、混合液をろ過し粗生成物を得た。次に、前記粗生成物をヘキサンで洗浄することにより、Ｎ－（４－クロロ－２－フルオロフェニル）アセトアミドを得た（２．４ｇ、収率：９４％）。
　このＮ－（４－クロロ－２－フルオロフェニル）アセトアミドのプロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）は、４００ＭＨｚにおいて重クロロホルム（ＣＤＣｌ３）中で２５℃にて測定した。プロトン核磁気共鳴スペクトルを図３に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000033
＜Ｎ－（４－クロロ－２－フルオロ－３－ホルミルフェニル）アセトアミドの調製＞
　下記反応式で示すとおり、Ｎ－（４－クロロ－２－フルオロフェニル）アセトアミド（３０ｇ、０．１６ｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（ＴＨＦ；３００ｍＬ）溶液に、－７８℃でｎ－ブチルリチウム（ｎ－ＢｕＬｉ）のヘキサン溶液（１６６ｍＬ、０．３５ｍｏｌ）を数回に分けて添加した。得られた反応混合液を１時間攪拌した。次に、無水Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ；１０．５ｍＬ、０．１８ｍｏｌ）を－７８℃で混合液に添加し、更に０．５時間攪拌した。飽和塩化アンモニウムで反応を停止させた。有機相を分離し、乾燥させ、濃縮することにより粗生成物を得た後、該粗生成物を精製せずに次工程に使用した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000034
＜（Ｅ）－エチル－３－（３－アセトアミド－６－クロロ－２－フルオロフェニル）アクリレートの調製＞
　Ｎ－（４－クロロ－２－フルオロ－３－ホルミルフェニル）アセトアミドとエチル－２－（ジエトキシホスホリル）アセテート（３７．６ｇ、０．１７ｍｏｌ）とを含有するトルエン（５００ｍＬ）溶液に、水酸化ナトリウム（５．３ｇ、０．２２ｍｏｌ）を０℃で添加した。得られた溶液を室温（２５℃）にて２時間攪拌した。飽和塩化アンモニウムで反応を停止させ、３００ｍＬの酢酸エチルで３回抽出した。有機相を分離し、乾燥させ、濃縮することにより粗生成物を得た後、該粗生成物を精製せずに次工程に使用した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000035
＜（Ｅ）－３－（３－アセトアミド－６－クロロ－２－フルオロフェニル）アクリル酸の調製＞
　（Ｅ）－エチル－３－（３－アセトアミド－６－クロロ－２－フルオロフェニル）アクリレートと、メタノール（１５０ｍＬ）／テトラヒドロフラン（ＴＨＦ；１５０ｍＬ）混合溶液との混合液に、水酸化リチウム水溶液（１１．３ｇ、１５０ｍＬ、０．２７ｍｏｌ）を室温（２５℃）にて添加し、次に得られた溶液を２時間攪拌した。混合液を３０ｍＬの酢酸エチルで３回抽出した。水相のｐＨを塩化水素（１Ｍ）で１～２に調整し、３０ｍＬの酢酸エチルで３回抽出した。
　有機相を乾燥させ濃縮することにより、純粋な生成物である（Ｅ）－３－（３－アセトアミド－６－クロロ－２－フルオロフェニル）アクリル酸を得た（１５ｇ、収率：３７％）。なお、前記収率は、前記３ステップを経た収率である。
　この（Ｅ）－３－（３－アセトアミド－６－クロロ－２－フルオロフェニル）アクリル酸のプロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）は、４００ＭＨｚにおいて重クロロホルム（ＣＤＣｌ３）中で２５℃にて測定した。プロトン核磁気共鳴スペクトルを図４に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000036
＜３－（３－アセトアミド－２－フルオロフェニル）プロパン酸の調製＞
　下記反応式で示すとおり、（Ｅ）－３－（３－アセトアミド－６－クロロ－２－フルオロフェニル）アクリル酸（１５ｇ、０．０５８ｍｏｌ）、パラジウム炭素（Ｐｄ／Ｃ；１．５ｇ、５．８ｍｍｏｌ）、メタノール（１００ｍＬ）、及びトリエチルアミン（６．４ｇ、０．０６ｍｏｌ）の混合液を５０℃、１気圧（Ｈ２）の条件下で一晩攪拌した。混合液をろ過し濃縮することにより３－（３－アセトアミド－２－フルオロフェニル）プロパン酸を黄色固体として得た（１０ｇ、収率：７３％）。
　この３－（３－アセトアミド－２－フルオロフェニル）プロパン酸のプロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）は、４００ＭＨｚにおいて重メタノール（ＭｅＯＤ）中で２５℃にて測定した。プロトン核磁気共鳴スペクトルを図５に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000037
＜Ｎ－（４－フルオロ－１－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－５－イル）アセトアミドの調製＞
　下記反応式で示すとおり、３－（３－アセトアミド－２－フルオロフェニル）プロパン酸（１０ｇ、０．０４ｍｍｏｌ）のポリリン酸溶液（ＰＰＡ；２０ｍＬ）溶液を１２０℃で２時間攪拌した。得られた混合液を４Ｎ水酸化ナトリウムで処理してｐＨを１０～１２に調整し、１００ｍＬの酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮することによりＮ－（４－フルオロ－１－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－５－イル）アセトアミドを黄色固体として得た（３．０ｇ、収率：３８％）。
　このＮ－（４－フルオロ－１－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－５－イル）アセトアミドのプロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）は、４００ＭＨｚにおいて重クロロホルム（ＣＤＣｌ３）中で２５℃にて測定した。プロトン核磁気共鳴スペクトルを図６に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000038
＜５－アミノ－４－フルオロ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－１－オンの調製＞
　下記反応式で示すとおり、Ｎ－（４－フルオロ－１－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－５－イル）アセトアミド（３ｇ、０．０１ｍｍｏｌ）の濃硫酸（２０ｍＬ）溶液を８０℃で０．５時間攪拌した。得られた混合液を４Ｎ水酸化ナトリウムで処理してｐＨを１０～１２に調整し、１００ｍＬの酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮することにより５－アミノ－４－フルオロ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－１－オンを得た（２．３ｇ、収率：９６％）。
　この５－アミノ－４－フルオロ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－１－オンのプロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）は、４００ＭＨｚにおいて重クロロホルム（ＣＤＣｌ３）中で２５℃にて測定した。プロトン核磁気共鳴スペクトルを図７に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000039
＜５－（ベンジルアミノ）－４－フルオロ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－１－オンの調製＞
　下記反応式で示すとおり、５－アミノ－４－フルオロ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－１－オン（２．３ｇ、１４ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（Ｃｓ２ＣＯ３；１２ｇ、２８ｍｍｏｌ）、及び臭化ベンジル（０．１７ｇ、７２ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（ＣＨ３ＣＮ；２０ｍＬ）混合液を４８時間還流下で攪拌した。混合液を濃縮し残渣を得た後、該残渣を水（２０ｍＬ）に溶解させた。得られた溶液を２０ｍＬの酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮することにより粗生成物を得た後、該粗生成物をｐｒｅ－ＴＬＣ（Ｍｅｒｃｋ社製）で精製することにより、５－（ベンジルアミノ）－４－フルオロ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－１－オンを黄色固体として得た（３７０ｍｇ、収率：１０％）。
　この５－（ベンジルアミノ）－４－フルオロ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－１－オンのプロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）は、４００ＭＨｚにおいて重クロロホルム（ＣＤＣｌ３）中で２５℃にて測定した。プロトン核磁気共鳴スペクトルを図８に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000040
＜構造式（２）で表される化合物の調製＞
　下記反応式で示すとおり、５－（ベンジルアミノ）－４－フルオロ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－１－オン（３７０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（Ｃｓ２ＣＯ３；９４０ｍｇ、３ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（ＣＨ３ＣＮ；２０ｍＬ）混合液に、Ｎ，Ｎ－ジエチル－２－ヨードアセトアミド（７２３ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を室温にて滴下した。次に、混合液を４８時間還流した。続いて混合液をろ過し、ろ液を濃縮することにより粗生成物を得た後、該粗生成物をｐｒｅ－ＴＬＣ（Ｍｅｒｃｋ社製）で精製することにより、構造式（２）で表される２－（ベンジル（４－フルオロ－１－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－５－イル）アミノ）－Ｎ，Ｎ－ジエチルアセトアミドを黄色固体として得た（５ｍｇ、収率：１％）。
　この２－（ベンジル（４－フルオロ－１－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－５－イル）アミノ）－Ｎ，Ｎ－ジエチルアセトアミドのプロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）は、４００ＭＨｚにおいて重クロロホルム（ＣＤＣｌ３）中で２５℃にて測定した。プロトン核磁気共鳴スペクトルを図９に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000041
（製造例３：構造式（３）及び構造式（４）で表される化合物の合成）
＜３－フェニルブタン酸の調製＞
　下記反応式で示すとおり、ブロモベンゼン（１６６ｇ、１．０７ｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（ＴＨＦ；５００ｍＬ）混合液に、ｎ－ブチルリチウム（ｎ－ＢｕＬｉ；４２８ｍＬ、１．０７ｍｏｌ）を－７８℃～－６５℃で滴下し、次いで、－７８℃で０．５時間攪拌した。次に、（Ｅ）－２－ブテン酸（４６ｇ、０．５３ｍｏｌ）を前記混合液に滴下した。反応終了後、混合液を塩酸で処理してｐＨを１．０に調整し、続いて５００ｍＬのジクロロメタン（ＤＣＭ）で２回抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ濃縮することにより粗生成物を得た後、該粗生成物をカラムクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ社製のシリカゲル３００ｇ）で精製し、３－フェニルブタン酸を黄色液体として得た（５２ｇ、収率：６０％）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000042
＜３－メチル－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－１－オンの調製＞
　下記反応式で示すとおり、３－フェニルブタン酸（３０ｇ、０．１８ｍｏｌ）の塩化チオニル（ＳＯＣｌ２；１００ｍＬ）混合液を２時間加熱還流した後、該塩化チオニルを除去した。トルエン（２００ｍＬ）と塩化アルミニウム（ＡｌＣｌ３；２４ｇ、０．１８ｍｏｌ）を混合液に０℃で添加し、反応混合液を０℃で０．５時間攪拌し、次いで加熱還流した。反応終了後、混合液を氷水で処理し、続いて２００ｍＬのジクロロメタン（ＤＣＭ）で２回抽出した。合わせた有機相を水（１００ｍＬ）と飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ濃縮することにより粗生成物を得た後、該粗生成物をゲルカラムクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ社のシリカゲル１００ｇ）にてペンタン（ＰＥ）：酢酸エチル（２０：１（体積比））で溶出させて精製することにより、３－メチル－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－１－オンを褐色油状物として得た（１６ｇ、収率：６０％）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000043
＜３－メチル－６－ニトロ－２，３－ジヒドロ－１－Ｈ－インデン－１－オンの調製＞
　下記反応式で示すとおり、３－メチル－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－１－オン（９．０ｇ、０．０６ｍｏｌ）の硫酸（Ｈ２ＳＯ４；４０ｍＬ）混合液に、硝酸カリウム（ＫＮＯ２；６．２ｇ、０．０６ｍｏｌ）の硫酸（３０ｍＬ）溶液を０℃で滴下した。次に、該混合液を反応が終了するまで０℃で攪拌した。この反応により得られた混合液を氷水に添加し、ろ過した。ケーキを水で洗浄し１００ｇのシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ社製）にてペンタン（ＰＥ）：酢酸エチル（１０：１（体積比））で溶出させて精製することにより、３－メチル－６－ニトロ－２，３－ジヒドロ－１－Ｈ－インデン－１－オンを黄色固体として得た（８ｇ、収率：６９％）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000044
＜６－アミノ－３－メチル－２，３－ジヒドロ－１－Ｈ－インデン－１－オンの調製＞
　下記反応式で示すとおり、３－メチル－６－ニトロ－２，３－ジヒドロ－１－Ｈ－インデン－１－オン（５．０ｇ、０．０２６ｍｏｌ）、塩酸（ＨＣｌ；９０ｍＬ）及び水（Ｈ２Ｏ；３０ｍＬ）の混合液に、塩化スズ（ＳｎＣｌ２；２６．５ｇ、０．１１７ｍｏｌ）を室温にて添加し、反応混合液を４０℃で０．５時間攪拌した。反応終了後、混合液を飽和、無水炭酸カリウム（Ｋ２ＣＯ３；３００ｍＬ）で処理し、続いて１００ｍＬのジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機相を濃縮することにより、６－アミノ－３－メチル－２，３－ジヒドロ－１－Ｈ－インデン－１－オンを得た（３．８ｇ、収率：９２％）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000045
＜Ｎ－（１－メチル－３－オキソ－インダン－５－イル）ベンズアミドの調製＞
　下記反応式で示すとおり、３－メチル－６－ニトロ－２，３－ジヒドロ－１－Ｈ－インデン－１－オン（７ｇ、０．０４３ｍｏｌ）及びトリエチルアミン（９．６ｇ、０．０９５ｍｏｌ）のジクロロメタン（ＤＣＭ；１００ｍＬ）混合液に、塩化ベンゾイル（ＰｈＣＯＣｌ；６．７ｇ、０．０４３ｍｏｌ）のジクロロメタン（ＤＣＭ；２０ｍＬ）溶液を０℃で添加し、反応混合液を２時間攪拌した。反応終了後、混合液を水（５０ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム（５０ｍＬ）、及び飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、濃縮することにより粗生成物を得た後、該粗生成物を５０ｇのシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ社製）にてペンタン（ＰＥ）：酢酸エチル（１０：１（体積比））で溶出させて精製し、所望の生成物であるＮ－（１－メチル－３－オキソ－インダン－５－イル）ベンズアミドを黄色固体として得た（１０ｇ、収率：８７％）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000046
＜［ベンジル－（１－メチル－３－オキソ－インダン－５－イル）－アミノ]酢酸エチルエステルの調製＞
　下記反応式で示すとおり、Ｎ－（１－メチル－３－オキソ－インダン－５－イル）ベンズアミド（１０ｇ、０．０３７ｍｏｌ）及び無水炭酸カリウム（１０．４ｇ、０．０７５ｍｏｌ）のアセトニトリル（１５０ｍＬ）混合液に、ブロモ酢酸エチル（ＢｒＣＨ２ＣＯＯＥｔ；７．５ｇ、０．０４５ｍｏｌ）のアセトニトリル（２０ｍＬ）溶液を添加し、反応混合液を５時間還流した。反応終了後、混合液をろ過し、ろ液を濃縮することにより粗生成物として［ベンジル－（１－メチル－３－オキソ－インダン－５－イル）－アミノ］酢酸エチルエステルを黄色固体として得た（８ｇ、収率：６３％）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000047
＜［ベンジル－（３－ヒドロキシ－１－メチル－インダン－５－イル）－アミノ］酢酸エチルエステルの調製＞
　下記反応式で示すとおり、［ベンジル－（１－メチル－３－オキソ－インダン－５－イル）－アミノ］酢酸エチルエステル（４ｇ、０．０１１ｍｏｌ）とテトラヒドロフラン（ＴＨＦ；５０ｍＬ）との溶液に、ボラン（ＢＨ３）のメチルスルフィド（Ｍｅ２Ｓ；１．４ｍＬ、０．０１４ｍｏｌ）混合液を添加し、反応混合液を２時間還流した。ＢＨ３のＭｅ２Ｓ（１．４ｍＬ、０．０１４ｍｏｌ）混合液は、残留反応物が消失するまで数回に分けて添加した。メタノール（１０ｍＬ）にて０℃で反応を停止させた。得られた混合液を室温まで加温し０．５時間攪拌した。混合液を濃縮して粗生成物を得た後、該粗生成物を３０ｇのシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ社製）にてペンタン（ＰＥ）：酢酸エチル（５：１（体積比））で溶出させて精製し、所望の生成物である［ベンジル－（３－ヒドロキシ－１－メチル－インダン－５－イル）－アミノ］酢酸エチルエステルを得た（１．４ｇ、収率：３２％）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000048
＜［ベンジル－（３－ヒドロキシ－１－Ｈ－インダン－５－イル）－アミノ］酢酸エチルエステルの調製＞
　下記反応式で示すとおり、［ベンジル－（３－ヒドロキシ－１－メチル－インダン－５－イル）－アミノ］酢酸エチルエステル（２ｇ、５．９ｍｍｏｌ）及びｐ－トルエンスルホン酸－水和物（Ｐ－ＴｓＯＨ．２Ｈ２Ｏ；０．１２ｇ、０．６ｍｍｏｌ）のトルエン（５０ｍＬ）混合液を２時間還流した。反応終了後、混合液を炭酸水素ナトリウムで処理し、続いて２０ｍＬの酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機相を、水（２０ｍＬ）と飽和食塩水（２０ｍＬ）とで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮することにより粗生成物として［ベンジル－（３－ヒドロキシ－１－Ｈ－インダン－５－イル）－アミノ］酢酸エチルエステルを得た（１．５ｇ、収率：７７％）。該粗生成物をｐｒｅｐ－ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ社製）で精製し純粋な生成物を得た。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000049
＜［ベンジル－（３－ヒドロキシ－１－Ｈ－インダン－５－イル）－アミノ］酢酸の調製＞
　下記反応式で示すとおり、［ベンジル－（３－ヒドロキシ－１－Ｈ－インダン－５－イル）－アミノ］酢酸エチルエステル（０．５ｇ、０．００１６ｍｏｌ）、水酸化リチウム（ＬｉＯＨ；０．１３ｇ、０．００３ｍｏｌ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ；７ｍＬ）、水（３ｍＬ）、及びメタノール（３ｍＬ）の混合液を、反応が終了するまで室温にて攪拌した。得られた混合液を塩酸で処理してｐＨを６．０に調整し、続いて３０ｍＬのジクロロメタンで抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（２５ｍＬ）で洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥させ濃縮することにより粗生成物として［ベンジル－（３－ヒドロキシ－１－Ｈ－インダン－５－イル）－アミノ］酢酸を得た（０．３２ｇ、７０％）。該粗生成物は、更なる精製は行わずに次工程に使用した。
　この［ベンジル－（３－ヒドロキシ－１－Ｈ－インダン－５－イル）－アミノ］酢酸のプロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）は、４００ＭＨｚにおいて重クロロホルム（ＣＤＣｌ３）中で２５℃にて測定した。プロトン核磁気共鳴スペクトルを図１０に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000050
＜構造式（３）で表される化合物及び構造式（４）で表される化合物の調製＞
　下記反応式で示すとおり、［ベンジル－（３－ヒドロキシ－１－Ｈ－インダン－５－イル）－アミノ］酢酸（０．２ｇ、０．７ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（０．３８ｇ、１ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ社製）、トリエチルアミン（ＮＥｔ３；０．５ｇ、５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１０ｍＬ）の混合液に、アミン（３．５ｍｍｏｌ）を２０℃で１時間添加した。次に、混合液を２０ｍＬの水で３回洗浄し、ｐｒｅｐ－ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ社製）で精製して生成物として、構造式（３）で表される化合物（４２ｍｇ、収率：１９％）及び構造式（４）で表される化合物（３５ｍｇ、収率：１４％）を得た。
　なお、同様に、下記構造式（５）で表される化合物（５５ｍｇ、収率：２４％）及び下記構造式（６）で表される化合物（３９ｍｇ、収率：１７％）も得られたが、後述する実施例１では、構造式（３）で表される化合物及び構造式（４）で表される化合物を用いて試験を行った。
　この構造式（３）で表される化合物及び構造式（４）で表される化合物のプロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）は、４００ＭＨｚにおいて重クロロホルム（ＣＤＣｌ３）中で２５℃にて測定した。構造式（３）で表される化合物のプロトン核磁気共鳴スペクトルを図１１に、構造式（４）で表される化合物のプロトン核磁気共鳴スペクトルを図１２に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000051
（実施例１）
　前記構造式（１）～（４）で表される化合物のそれぞれのキネシンスピンドルタンパク質阻害活性を、Ｅｌｉｚａｂｅｔｈ　Ｂ．　Ｃｏｇａｎ　ｅｔ　ａｌ．，　Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，　１９９９，　２７１，　ｐ．２９－３５及びＫｅｉｔｈ　Ｗ．　Ｒｉｃｋｅｒｔ　ｅｔ　ａｌ．，　Ａｒｃｈｉｖｅｓ　ｏｆ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃｓ，　２００８，　４６９，　ｐ．２２０－２３１に記載の方法を参照し、以下の方法で測定した。
＜キネシンスピンドルタンパク質の調製＞
－キネシンスピンドルタンパク質の発現－
　ＢＬ２１　Ｓｔａｒ（ＤＥ３）（インビトロジェン株式会社製）をＬＢ（Ｌｕｒｉａ－Ｂｅｒｔａｎｉ）培地を用いて３７℃、２００ｒｐｍの条件で、１晩培養した。この培養物を２ＬのＬＢ培地に添加し６００ｎｍにおけるＯＤを０．０１とした。次いで、３７℃、２００ｒｐｍの条件で、６００ｎｍにおけるＯＤが０．４となる細胞密度になるまで培養した。
　キネシンスピンドルタンパク質の発現は、１ｍＭ　ＩＰＴＧ（Ｉｓｏｐｒｏｐｙｌ－β－Ｄ－ｔｈｉｏｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ）を添加することにより誘導し、ＩＰＴＧによる誘導開始から３時間後に、４℃、７，０００ｇで１５分間遠心分離を行うことにより細胞を回収した。このリコンビナントキネシンスピンドルタンパク質を発現する細胞は、１ｇ／パックとして、使用時まで－８０℃で保存した。
－キネシンスピンドルタンパク質の精製－
　リコンビナントキネシンスピンドルタンパク質を発現するウェット細胞２ｇを氷冷したタンパク質抽出バッファー（下記に組成を示す。）５０ｍＬに懸濁した。マイクロフルイダイザー（ＭＩＣＲＯＦＬＵＩＤＩＺＥＲ、Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ社製）を用いて、４℃にて１５，０００ｐｓｉの圧力で細胞を３回処理し溶解させた。次いで、高機能高速冷却遠心機（Ｂｅｃｋｍａｎ　Ａｖａｎｔｉ　Ｊ－２６ＸＰ、ベックマンコールター社製）を用いて、４℃にて２０，０００×ｇで３０分間遠心分離を行った後、上清を回収し、続いて該上清を０．４５μＭフィルターでろ過した。
　ろ液を１ｍＬ　ＨｉｓＴｒａｐ（商標）ＨＰカラム（ＧＥヘルスケア社製）に充填した。Ａ２８０がベースラインに達するまで、このカラムに、Ｈｉｓ－Ｂｕｆｆｅｒ　Ａ（下記に組成を示す。）とＨｉｓ－Ｂｕｆｆｅｒ　Ｂ（下記に組成を示す。）（Ｈｉｓ－Ｂｕｆｆｅｒ　Ａ：Ｈｉｓ－Ｂｕｆｆｅｒ　Ｂ＝９５：５（体積比））を流した。Ｈｉｓ－Ｂｕｆｆｅｒ　Ｂを、Ｈｉｓ－Ｂｕｆｆｅｒ　Ａに対して０体積％～５０体積％のリニアグラジエントで流してリコンビナントキネシンスピンドルタンパク質を溶出させた。
　キネシンスピンドルタンパク質のピークは、２５体積％のＢｕｆｆｅｒ　Ｂ（２５０ｍＭイミダゾール）で観測された。この粗キネシンスピンドルタンパク質画分（４ｍＬ）を透析チューブ（Ｔｉｎｇ　Ｋｅ　Ｈｏｎｇ　Ｄａ（中国製））に入れ、４℃で、５００ｍＬのＩＥＸ　Ｂｕｆｆｅｒ　Ａ（下記に組成を示す。）で透析した。この透析は２回行った。
　次いで、更なる精製をイオン交換（ＩＥＸ）クロマトグラフィーにて行った。キネシンスピンドルタンパク質の画分を１ｍＬ　ＨｉｓＴｒａｐ（商標）ＳＰＸＬカラム（ＧＥヘルスケア社製）に充填した。Ａ２８０がベースラインに達するまで、このカラムにＩＥＸ　Ｂｕｆｆｅｒ　Ａを流し、続いてｐＨ６．８のＩＥＸ　Ｂｕｆｆｅｒ　Ａ及びＩＥＸ　Ｂｕｆｆｅｒ　Ｂ（下記に組成を示す。）を用いて塩化ナトリウムの濃度について０Ｍ～１Ｍのリニアグラジエントで流した。
　キネシンスピンドルタンパク質は、塩化ナトリウムの濃度が約４００ｍＭのときに溶出され、この画分を透析により保存用バッファー（下記に組成を示す。）に移した。透析の方法は、１回目の精製と同様の方法で行った。
　最終的に精製したキネシンスピンドルタンパク質の濃度を、紫外吸収法により測定した。精製したキネシンスピンドルタンパク質の濃度は１．５μＭであった。これを１００μＬ／チューブ（総量１．４５ｍＬ）に分けて使用時まで－８０℃で保存した。
［タンパク質抽出バッファーの組成］
　５０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ（４－（２－ハイドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルフォン酸）（ｐＨ８．０）
　２ｍＭ　塩化マグネシウム
　２５０ｍＭ　塩化ナトリウム
　１０質量％　グリセロール
　０．１質量％　ＮＰ－４０（ポリオキシエチレン（９）オクチルフェニルエーテル）
　１ｍＭ　ジチオトレイトール（ＤＴＴ）
　１ｍＭ　フェニルメチルスルフォニルフルオライド（ＰＭＳＦ）
　０．５ｍＭ　ＡＴＰ－Ｍｇ
　１０ｍＭ　イミダゾール
　２ｍＭ　Ｂｅｎｚｉｍｉｄｉｎｅ
［Ｈｉｓ－Ｂｕｆｆｅｒ　Ａの組成］
　５０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ（ｐＨ８．０）
　２ｍＭ　塩化マグネシウム
　２５０ｍＭ　塩化ナトリウム
　１０質量％　グリセロール
［Ｈｉｓ－Ｂｕｆｆｅｒ　Ｂの組成］
　５０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ（ｐＨ８．０）
　２ｍＭ　塩化マグネシウム
　２５０ｍＭ　塩化ナトリウム
　１０質量％　グリセロール
　１Ｍ　イミダゾール
［ＩＥＸ　Ｂｕｆｆｅｒ　Ａの組成］
　５０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ（ｐＨ６．８）
　１ｍＭ　塩化マグネシウム
　１ｍＭ　ジチオトレイトール（ＤＴＴ）
　１０質量％　グリセロール
［ＩＥＸ　Ｂｕｆｆｅｒ　Ｂの組成］
　５０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ（ｐＨ６．８）
　１ｍＭ　塩化マグネシウム
　１ｍＭ　ジチオトレイトール（ＤＴＴ）
　１０質量％　グリセロール
　１Ｍ　塩化ナトリウム
［保存用バッファー］
　５０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ（ｐＨ６．８）
　１ｍＭ　塩化マグネシウム
　１ｍＭ　ジチオトレイトール（ＤＴＴ）
　１０質量％　グリセロール
＜キネシンスピンドルタンパク質阻害活性の測定＞
－構造式（１）～（４）で表される化合物の調製－
　前記構造式（１）～（４）で表される化合物は、それぞれ１００質量％ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）中に１００倍濃度（１００×）で調製した。次いで、１００質量％ＤＭＳＯで０．００１ｍＭ、０．００３．ｍＭ、０．０１ｍＭ、０．０３ｍＭ、０．１ｍＭ、０．３ｍＭ、１ｍＭ、３ｍＭ、１０ｍＭ、３０ｍＭとなるように希釈した。
－キネシンスピンドルタンパク質阻害活性の測定方法－
　下記表１に示す反応液を調製した。即ち、水２８．５μＬと、前記精製したキネシンスピンドルタンパク質（１．５μＭ）１μＬと、１０×反応バッファー（１５０ｍＭ　ＰＩＰＥＳ（１，４－ピペラジンジエタンスルフォン酸）（ｐＨ７．０）、１０ｍＭ　塩化マグネシウム、１０ｍＭ　ＥＧＴＡ（グリコールエーテルジアミン四酢酸））５μＬと、５×微小管溶液（３３０μｇ／ｍＬ微小管、１５ｍＭ　ＰＩＰＥＳ（ｐＨ７．０）、１ｍＭ塩化マグネシウム、１０μＭタキソール）１０μＬと、前記調製した１００×化合物（構造式（１）で表される化合物、構造式（２）で表される化合物、構造式（３）で表される化合物、又は構造式（４）で表される化合物）０．５μＬとを混合して４５μＬの反応液を調製し、３７℃で１０分間インキュベートした後、１０×ＡＴＰ溶液（１０ｍＭ　ＡＴＰ、１０ｍＭ　ＰＩＰＥＳ（ｐＨ７．０））５μＬを添加して反応を開始させ、直ちに３７℃で２０分間インキュベートした。なお、前記反応液５０μＬ中の終濃度は、１９ｍＭ　ＰＩＰＥＳ、１ｍＭ　ＥＧＴＡ、１．２ｍＭ塩化マグネシウム、２μＭタキソール、６６μｇ／ｍＬ微小管、３０ｎＭキネシンスピンドルタンパク質、１ｍＭ　ＡＴＰとなる。
　また、ハイコントロールは、前記反応液において、１００×化合物に代えて１００質量％ＤＭＳＯのみを用いたこと以外は、前記反応液と同様の方法で調製し、同様の方法で反応させた。
　また、ローコントロールは、前記反応液において、キネシンスピンドルタンパク質１μＬに代えて水１μＬを添加したこと以外は、前記反応液と同様の方法で調製し、同様の方法で反応させた。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000052
　反応後、１５０μＬのＱｕｅｎｃｈ　Ｃバッファー（下記に組成を示す。）を添加して反応を停止させて、続いて室温で５分間インキュベートした。５２５ｎｍにおける吸光度をマイクロプレートリーダ（ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｄｅｖｉｃｅｓ社製）で測定した。
［Ｑｕｅｎｃｈ　Ｃの組成］
　１００μＬのＱｕｅｎｃｈ　Ａ（１ｍｇ／ｍＬキナルジンレッド（ＱＲ）、０．１４質量％ＰＶＡ）と５０μＬのＱｕｅｎｃｈ　Ｂ（１．１５Ｍ硫酸、１２．３ｍＭ七モリブデン酸アンモニウム）とを混合した。なお、Ｑｕｅｎｃｈ　Ｃバッファーは、試験前に用時調製したものを用いた。
　キネシンスピンドルタンパク質は、ＡＴＰをＡＤＰとＰｉ（リン酸）に分解する。分解して生成されたＰｉは、キナルジンレッド（ＱＲ）及び七モリブデン酸アンモニウムと結合して複合体を形成する。このため、５２５ｎｍにおける吸光度を測定することによりＰｉの生成量を測定することができる。したがって、前記ハイコントロールの５２５ｎｍにおける吸光度の値（Ｐｉの生成量）を１００としたとき、該ハイコントロールの吸光度の値と、前記化合物を添加した試験区の吸光度の値とを比較することで、キネシンスピンドルタンパク質の活性が阻害されているか否かを判断することができる。
　即ち、キネシンスピンドルタンパク質の活性阻害率は、以下の計算式より算出することができる。前記各化合物の濃度と、キネシンスピンドルタンパク質活性の阻害率との関係を下記表２に示す。
　阻害率（％）＝（Ｓ－Ｌ）／（Ｈ－Ｌ）×１００
　上記計算式において、「Ｓ」は、前記構造式（１）で表される化合物、前記構造式（２）で表される化合物、前記構造式（３）で表される化合物、又は前記構造式（４）で表される化合物を添加した反応液で試験した吸光度の値、「Ｌ」は、ローコントロールの吸光度の値、「Ｈ」は、ハイコントロールの吸光度の値を表わす。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000053
　表２の結果より、前記構造式（１）で表される化合物、前記構造式（２）で表される化合物、前記構造式（３）で表される化合物、及び前記構造式（４）で表される化合物は、それぞれ好適にキネシンスピンドルタンパク質の活性を阻害できることがわかった。

Claims (20)

  1. 　下記一般式（Ｉ）で表されることを特徴とする化合物。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
     　ただし、前記一般式（Ｉ）において、
    　Ｒ１及びＲ２は、置換基を有していてもよいアルキル基を表し、
    　Ｒ３は、下記一般式（ＩＩ）及び下記一般式（ＩＩＩ）いずれかを表し、
    　前記Ｒ１及び前記Ｒ２は、互いに同一であってもよいし、異なっていてもよい。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
     　ただし、前記一般式（ＩＩ）及び前記一般式（ＩＩＩ）において、
    　Ｘは、水素原子及びハロゲン原子のいずれかを表し、
    　Ｒ４は、メチル基、ジメチル基、及び酸素原子のいずれかを表し、
    　＊は、結合手を表す。
  2. 　一般式（Ｉ）で表される化合物が、下記一般式（ＩＶ）、下記一般式（Ｖ）、及び下記一般式（ＶＩ）のいずれかで表される化合物である請求項１に記載の化合物。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000004
      
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000005
     　ただし、前記一般式（ＩＶ）、前記一般式（Ｖ）、及び前記一般式（ＶＩ）において、
    　Ｒ１及びＲ２は、置換基を有していてもよいアルキル基を表し、
    　Ｘは、水素原子及びハロゲン原子のいずれかを表し、
    　前記Ｒ１及び前記Ｒ２は、互いに同一であってもよいし、異なっていてもよい。
  3. 　一般式（Ｉ）で表される化合物において、Ｒ１及びＲ２の少なくともいずれかが、エチル基及びメチル基のいずれかであり、Ｘが、水素原子、フッ素原子、及び塩素原子のいずれかである請求項１から２のいずれかに記載の化合物。
  4. 　一般式（Ｉ）で表される化合物が、下記構造式（１）、下記構造式（２）、下記構造式（３）、及び下記構造式（４）のいずれかで表される化合物である請求項１から３のいずれかに記載の化合物。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000006
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000007
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000008
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000009
  5. 　請求項１から４のいずれかに記載の化合物を含有し、キネシンスピンドルタンパク質の活性を阻害することを特徴とするキネシンスピンドルタンパク質阻害剤。
  6. 　請求項５に記載のキネシンスピンドルタンパク質阻害剤を含有し、少なくとも一部にキネシンスピンドルタンパク質が介在する障害を予防乃至治療することを特徴とする医薬組成物。
  7. 　少なくとも一部にキネシンスピンドルタンパク質が介在する障害が、細胞増殖性疾患である請求項６に記載の医薬組成物。
  8. 　細胞増殖性疾患が、ガン疾患である請求項７に記載の医薬組成物。
  9. 　ガン疾患が、肺ガン、気管支ガン、前立腺ガン、乳ガン、膵臓ガン、結腸ガン、直腸ガン、小腸ガン、甲状腺ガン、食道ガン、口腔ガン、咽頭ガン、喉頭ガン、胃ガン、肝臓ガン、肝内胆管ガン、腎臓ガン、腎盂ガン、膀胱ガン、子宮体ガン、子宮頸ガン、卵巣ガン、結膜ガン、涙腺ガン、眼瞼ガン、多発性骨髄腫、脳腫瘍、非ホジキンリンパ腫、黒色腫、繊毛性結腸腺腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、リンパ性白血病、及び骨髄性白血病から選択される少なくとも１種である請求項８に記載の医薬組成物。
  10. 　更に薬理学的に許容される担体を含む請求項６から９のいずれかに記載の医薬組成物。
  11. 　更にガンの予防乃至治療に用いられる少なくとも１種の薬剤を含む、請求項６から１０のいずれかに記載の医薬組成物。
  12. 　請求項５に記載のキネシンスピンドルタンパク質阻害剤と細胞とを接触させて、該細胞におけるキネシンスピンドルタンパク質の活性を阻害することを特徴とするキネシンスピンドルタンパク質の阻害方法。
  13. 　細胞が、生体内の細胞及び培養細胞のいずれかである請求項１２に記載のキネシンスピンドルタンパク質の阻害方法。
  14. 　キネシンスピンドルタンパク質阻害剤を動物に投与することにより、前記キネシンスピンドルタンパク質と生体内の細胞とを接触させる請求項１３に記載のキネシンスピンドルタンパク質の阻害方法。
  15. 　動物が、非ヒト動物である請求項１４に記載のキネシンスピンドルタンパク質の阻害方法。
  16. 　請求項６から１１のいずれかに記載の医薬組成物を用いて、少なくとも一部にキネシンスピンドルタンパク質が介在する障害を予防乃至治療することを特徴とする予防乃至治療方法。
  17. 　少なくとも一部にキネシンスピンドルタンパク質が介在する障害が、細胞増殖性疾患である請求項１６に記載の予防乃至治療方法。
  18. 　細胞増殖性疾患が、ガン疾患である請求項１７に記載の予防乃至治療方法。
  19. 　ガン疾患が、肺ガン、気管支ガン、前立腺ガン、乳ガン、膵臓ガン、結腸ガン、直腸ガン、小腸ガン、甲状腺ガン、食道ガン、口腔ガン、咽頭ガン、喉頭ガン、胃ガン、肝臓ガン、肝内胆管ガン、腎臓ガン、腎盂ガン、膀胱ガン、子宮体ガン、子宮頸ガン、卵巣ガン、結膜ガン、涙腺ガン、眼瞼ガン、多発性骨髄腫、脳腫瘍、非ホジキンリンパ腫、黒色腫、繊毛性結腸腺腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、リンパ性白血病、及び骨髄性白血病から選択される少なくとも１種である請求項１８に記載の予防乃至治療方法。
  20. 　少なくとも一部にキネシンスピンドルタンパク質が介在する障害の予防乃至治療が、医薬組成物を動物に投与することにより行われる請求項１６から１９のいずれかに記載の予防乃至治療方法。
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