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WO2012025533A1 - Verfahren zum schutz von pflanzen mit insektenpathogenen viren und cellulosesulfat - Google Patents

Verfahren zum schutz von pflanzen mit insektenpathogenen viren und cellulosesulfat Download PDF

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Publication number
WO2012025533A1
WO2012025533A1 PCT/EP2011/064482 EP2011064482W WO2012025533A1 WO 2012025533 A1 WO2012025533 A1 WO 2012025533A1 EP 2011064482 W EP2011064482 W EP 2011064482W WO 2012025533 A1 WO2012025533 A1 WO 2012025533A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
cellulose sulfate
plants
pesticide
insect
viruses
Prior art date
Application number
PCT/EP2011/064482
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Eric Geppert
Original Assignee
Euroferm Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Euroferm Gmbh filed Critical Euroferm Gmbh
Priority to AU2011295110A priority Critical patent/AU2011295110B2/en
Priority to MX2013002019A priority patent/MX2013002019A/es
Priority to NZ608383A priority patent/NZ608383A/en
Priority to EP11761018.8A priority patent/EP2608663A1/de
Priority to CA2808686A priority patent/CA2808686A1/en
Priority to CN2011800450864A priority patent/CN103179854A/zh
Priority to EA201300270A priority patent/EA201300270A1/ru
Priority to US13/818,211 priority patent/US20130189229A1/en
Publication of WO2012025533A1 publication Critical patent/WO2012025533A1/de
Priority to ZA2013/02156A priority patent/ZA201302156B/en

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Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/40—Viruses, e.g. bacteriophages
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
    • A01N43/02—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • A01N43/04—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom
    • A01N43/14—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom six-membered rings
    • A01N43/16—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom six-membered rings with oxygen as the ring hetero atom

Definitions

  • the present invention relates to a method of protecting plants in which crop protection agents containing insect pathogenic viruses and cellulose sulfate are applied to the plants.
  • Baculoviruses are insect pathogenic viruses that preferentially infect larvae.
  • the advantages of baculoviruses include strict host specificity and their residue-free degradation, which makes it possible to treat 25 fruits shortly before harvesting.
  • baculoviruses form occlusion bodies (OBs) which allow the viruses to maintain biological activity for long periods of time outside the host.
  • OBs occlusion bodies
  • Cellulose sulfate is based on cellulose, which is a polysaccharide of beta-D glucose molecules or cellulosic monomers. Cellulose, mostly obtained from cotton or wood, is sulfated by means of a sulphating agent (usually concentrated sulfuric acid).
  • a sulphating agent usually concentrated sulfuric acid
  • Cellulose sulfate is a biopolymer of polyelectrolyte character which is capable of forming complexes with oppositely charged ions. These complexes are called coacervates. Complexes of cellulose sulphate with polycations can form hollow microspheres for the encapsulation of mammalian, insect cells and enzymes. These are also used for the cultivation of baculoviruses, e.g. in EP 1982758 A1. According to a WHO study, an anti-HIV activity was detected on a preparation containing cellulose sulfate.
  • the object of the present invention is to provide a process for increasing the effectiveness of pesticides, so that the known pesticides show the same effect in significantly smaller concentrations. This should significantly reduce the consumption of chemical insecticides.
  • This object is achieved by a method in which pesticides containing insect pathogenic viruses and cellulose sulfate are applied to the plants.
  • pesticides containing insect pathogenic viruses and cellulose sulfate are applied to the plants.
  • crop protection agents containing insect pathogenic viruses and cellulose sulfate are applied together, simultaneously and / or in a mixture.
  • plant protection agents containing insect pathogenic viruses and cellulose sulfate are applied separately, individually and / or sequentially.
  • cellulose sulfate is applied after the application of a crop protection agent containing insect pathogenic viruses.
  • cellulose sulfate is applied prior to application of a crop protection agent containing insect pathogenic viruses.
  • Both the cellulose sulfate and the crop protection agent containing insect pathogenic viruses show high stability and retain their respective activity over weeks, preferably months.
  • cellulose sulfate and the crop protection agent containing insect pathogenic viruses irrespective of the order, within a period of two months, preferably six weeks, five weeks, four weeks, more preferably three weeks, two weeks, one week, especially six days, five days, four days, three days, one day, applied
  • the pesticides containing insect pathogenic viruses can be applied alone or together with cellulose sulfate or as a mixture of pesticides and cellulose sulfate.
  • An increase in effectiveness is always determined according to the invention in comparison to a control in which the plant protection product is applied under identical conditions and in identical concentrations, but without coming into contact with cellulose sulfate.
  • the increase in the efficacy of the plant protection product is determined in comparison to a control.
  • the control includes the application of the Plant protection product under identical conditions as in the process according to the invention.
  • cellulose sulfate is not applied to plants either before or after application of the control plant protection product or simultaneously with it.
  • the effectiveness can be determined by the damage, eg. B. the damaged plants, leaves, seeds or fruits are determined, or in another embodiment by means of the yield of the agricultural product, such as. B. seeds or fruits.
  • Increasing the effectiveness means according to the invention that a lower concentration of pesticides can be used to achieve the same effect as the control.
  • concentration of the plant protection agent in the process according to the invention can be set to 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, preferably 10%, 5%, 1%, 0.5%, 0.25%, 0.1%, 0.005%, more preferably 0.001% over the control.
  • the increase according to the invention of the efficacy of the plant protection agent containing insect-pathogenic viruses by cellulose sulfate is characterized in that the active component of the insect-pathogenic viruses can be reduced by one or several orders of magnitude, while maintaining a high degree of effectiveness.
  • the concentration of insect-pathogenic viruses may thus be reduced to 10%, 1%, preferably 0.5%, 0.1%, particularly preferably 0.05%, 0.01%, in particular 0.005%, 0.001%. reduced compared to the control virus used.
  • the term cellulose losesulfate also always includes derivatives of cellulose sulfate.
  • Cellulose sulfate having at least one alkoxy group per cellulase monomer
  • application of the plant protection product to plants means that the plant protection agent and cellulose sulfate or a mixture thereof are applied directly to the plants to be protected, or to parts of plants, such as plants. Leaves, seeds or fruits, or on the location of the plant to be protected as well as directly on the insect pests, which are on, at the plant or at their location.
  • An alternative of the present invention in addition to the use of the virus-containing crop protection agent, relates to the use and the use of at least one further crop protection agent, preferably selected from the group of insecticides, fungicides and herbicides, in particular insecticides.
  • at least one further crop protection agent preferably selected from the group of insecticides, fungicides and herbicides, in particular insecticides.
  • cellulose sulfate or a mixture of virus-containing plant protection products applied with cellulose sulfate in addition to the o.g. Plant protection agent cellulose sulfate or a mixture of virus-containing plant protection products applied with cellulose sulfate.
  • a further embodiment of the present invention relates to the use of cellulose sulfate in a concentration of 0.1 ppm to 10,000 ppm, preferably 1 ppm to 5,000 ppm, more preferably 1 ppm to 1000 ppm, 500 ppm, most preferably 1 ppm to 500 ppm.
  • An embodiment of the present invention relates to the use of Cellulose sulfate in water-soluble form or as a co-serve to a bound polycation.
  • the cellulose sulfate may be present as a component of the crop protection agent.
  • the cellulose sulfate is added to the spray mixture when the crop protection agent is applied.
  • the insect pathogenic viruses of the plant protection product are baculoviruses.
  • viruses preferably baculoviruses, in which the insecticidal potential has been optimized by means of genetic engineering methods.
  • the insecticidal potential has been optimized by means of genetic engineering methods.
  • the genetic engineering methods include e.g. the integration of neurotoxin genes into the viral genome or the deletion of the viral egf gene. As a result, a significant acceleration of the effective speed can be achieved.
  • Insect-specific neurotoxins may, for. B. from scorpions or mites are isolated and expressed in recombinant viruses.
  • Enhancin is applied with cellulose sulfate and / or insect-pathogenic viruses.
  • Enhancin is a protein which is produced by the Trichoplusia ni granulovirus and amplifies infections, preferably by viruses in different Lepidoptera genera.
  • the increase in efficiency may also be achieved by the separate addition of Enhancin in purified form or by the integration of the Enhancin encoding gene into the insect-pathogenic virus or by adding Trichoplusia ni (Hübner) granulovirus.
  • Enhancin affects the integrity of the intestinal membrane in the midgut of the larvae and leads to an efficacy enhancement in different viral species such as T. ni, Helicoverpa zea (Boddie), Heliothis virescens (Fabricius), Spodoptera exigua (Hübner), Pseudoplusia includens (Walker), and Anticarsia gemmatalis (Hübner), (Granados et al., Biological Control 20, 153-159 (2001).
  • the crop protection agent contains granuloviruses and / or nuclear polyhetraviruses.
  • the viruses and the cellulose sulfate are present together in lyophilized form. This ensures a good dispersibility and thus easy production of the fuel mixture. In addition, this gives a long shelf life and stability of both the virus and the cellulose sulfate.
  • such a mixture of insect pathogenic viruses and cellulose sulfate is applied at a concentration of 0.01 g, 10 g / acre.
  • 1 acre corresponds to an area of 4,046,856 m 2 or 0.4 ha approximately.
  • 0.1 to 10 g, in particular 0.2 to 5 g, particularly preferably 0.4 g / acre are applied.
  • the mixture of crop protection agent and cellulose sulfate contains 0.01 to 10 inclusion bodies (OB) / g, preferably 0.05 to 1 OB / g, particularly preferably 0.01 to 0.03 OB / g.
  • 0.1 to 10 ⁇ 10 12 inclusion bodies / acre preferably 0.5 to 5 ⁇ 10 12 inclusion bodies, particularly preferably 1 to 2 ⁇ 10 12 inclusion bodies, in particular 1, 2x10 12 inclusion bodies / acre applied.
  • the application of said amounts of crop protection agent with cellulose sulfate is carried out in three individual Applications.
  • the applications are preferably carried out at intervals of one to three weeks, in particular at intervals of two weeks each.
  • the inventive method is used in an embodiment for the protection of fruit and vegetable crops, in particular fruit trees, particularly preferably apple trees or the corresponding fruits.
  • the plant protection agents according to the invention may e.g. used in fruit growing, in particular to protect apples, pears, quinces, apricots, peaches, plums, cherries, hawthorn, chestnuts and walnut from pests, especially from insects, especially from their larvae.
  • one or more viruses are selected from the group comprising Cydia pomonella granoloviruses (CpGV), Cydia pomonella GV mexican strain, Autographa californica AcMNPV, Helicoverpa armigera MNPV, Choristoneura furniferana NPV, Spodoptera litoralis, MNPV, Lobesia botrana GV, Thaumetopoea processionea NPV, Helicoverpa zea (Heliothis zea), (HzSNPV), Tuta absolutea NPV, Plutella xylostella (PxMNPV), Spodoptera exigua (SeMNPV), Spodoptera frugiperda (SfMNPV), and Lymantria dispar LdNPV.
  • CpGV Cydia pomonella granoloviruses
  • CaMV Cydia pomonella granoloviruses
  • Helicoverpa zea corncillers Corn, cotton, soy (Heliothis zea) (cooton bollworm, tomato
  • the crop protection agents according to the invention exhibit synergistic effects through the use of cellulose sulfate. Synergetic effects according to the invention means a better pest control than would be expected individually when using the pesticides or cellulose sulfate.
  • the pesticide-containing crop protection agent and cellulose sulfate are taken up by ingestion by the insect pest and are incorporated in the pest insect in vivo simultaneously, so as to exert its effect.
  • Insect patho means: 45 0 94.3 100 159.5 gene viruses:
  • Table 1 Biological effectiveness of the plant protection agent 5 according to the invention containing insect-pathogenic viruses: CpGV with sodium cellulose sulfate against Cydia pomoneiia L. in early apple varieties
  • Insect pathogen mean: 109.5 20 94.3 100 ene Viruses:
  • Table 2 Biological effectiveness of the plant protection agent according to the invention containing insect-pathogenic viruses: CpGV with sodium cellulose sulfate against Cydia pomonella L. in late-apple varieties
  • Viruses CpGV with cellulose sulfate

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Abstract

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zum Schutz von Pflanzen in welchem insektenpathogene Viren enthaltende Pflanzenschutzmittel und Zellulosesulfat auf die Pflanzen ausgebracht werden.

Description

VERFAHREN UM SCHUTZ VON PFLANZEN MIT INSEKTENPATHOGENEN VIREN UND CELLULOSESULFAT
5 D ie vorl iegende E rfindung betrifft ein Verfahren zum Schutz von Pflanzen in welchem insektenpathogene Viren enthaltende Pflanzenschutzmittel und Zellulosesulfat auf die Pflanzen ausgebracht werden.
Insekten verursachen jährlich einen volkswirtschaftlichen Schaden, der 20 bis 30% 10 der Welternte betragen kann. Insbesondere bei der Kultivierung von Monokulturen wird ein massenhaftes Auftreten von schädlichen Insekten beobachtet. Werden Pestizide großflächig eingesetzt, so ist davon die Gesamtheit der Insekten eines Biotops betroffen, und das ökologische Gleichgewicht ist gefährdet. Deshalb werden in zunehmenden Maßen Viren zur Schädlingsbekämpfung eingesetzt. Diese zeigen 15 eine hohe Selektivität bezüglich ihrer Wirte, während gleichzeitig die nützlichen Populationen geschont werden.
Es wurde geschätzt, dass weltweit ca. 30% der Hauptschädlinge landwirtschaftlicher Nutzpflanzen mittels Baculoviren bekämpft werden können.
In der US 6,042,843 wurde die Verwendung von Bakkoloviren des Stammes Plutella 20 Xylostella zur Bekämpfung von schädlichen Insekten beschrieben.
Insbesondere im Apfelanbau werden seit Jahren Baculoviren als insektenpathogene Viren eingesetzt. Baculoviren sind insektenpathogene Viren, die bevorzugt Larven infizieren. Zu den Vorteilen der Baculoviren gehören strikte Wirtsspezifität sowie ihr rückstandsfreier Abbau, wodurch auch kurz vor der Ernte eine Behandlung von 25 Früchten noch möglich ist.
Ferner bilden Baculoviren Einschlusskörper (Occlusion Body, OB), welche den Viren erlauben, auch außerhalb des Wirtes die biologische Aktivität über lange Zeiten aufrecht zu erhalten. Durch diese aktiven Viruspartikel in einem schützenden Einschlusskörper wird sichergestellt, dass auch bei sich stark verändernden 30 Populationsdichten von Insekten die Infektionskette über die perorale Infektion der Insektenlarven geschlossen bleibt.
Im Apfelanbau werden die Baculoviren gegen die Larven des Apfelwicklers eingesetzt. In den letzten Jahren wurden jedoch virusresistente Apfelwickler nachgewiesen (Asser-Kaiser, Science, 2007).
Deshalb sind Pflanzenschutzmittel mit verstärkter Wirkung erforderlich bzw. muss die Wirkung vorhandener Pflanzenschutzmittel verstärkt werden.
Zellulosesulfat basiert auf Zellulose, die ein Polysacharid aus beta-D- Glukosemolekülen bzw. Zellubiose-Monomeren ist. Zellulose, meistens aus Baumwolle oder Holz gewonnen, wird mittels eines Sulfatierungsmittels (üblicherweise konzentrierte Schwefelsäure) sulfatiert.
Zellulosesulfat ist ein Biopolymer mit Polyelektrolyt-Charakter, welches zur Bildung von Komplexen mit entgegensetzt geladenen Ionen befähigt ist. Diese Komplexe werden Koazervate genannt. Komplexe von Zellulosesulfat mit Polykationen können Mikrohohlkugeln bilden, die zur Verkapselung von Säuger-, Insektenzellen und Enzymen dienen. Diese werden auch zur Kultivierung von Baculoviren eingesetzt, wie z.B. in der EP 1982758 A1 beschrieben. Gemäß einer WHO-Studie wurde einem Zellulosesulfat enthaltenden Präparat eine Aktivität gegen HIV nachgewiesen.
Die Verwendung von Zellulosesulfat in Pflanzenschutzmitteln als Verdickungsmittel wurde in der DE 1 130589 B, in der WO 01/60159 A1 sowie in der US 2007/0179058 A1 beschrieben. Dabei handelt es sich jedoch nicht um Pflanzenschutzmittel die insektenpathogene Viren enthalten.
Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, ein Verfahren zur Erhöhung der Wirksamkeit von Pflanzenschutzmittel zur Verfügung zu stellen, so dass die bekannten Pflanzenschutzmittel in deutlich kleineren Konzentrationen dieselbe Wirkung zeigen. Dadurch soll der Verbrauch chem ischer Insektizide deutlich reduziert werden.
Ferner ist es Aufgabe der vorliegenden Erfindung insbesondere, die Kosten für den Pflanzenschutz und für die Bekämpfung von Schadinsekten zu senken. Diese Aufgabe wird durch ein Verfahren gelöst bei welchem insektenpathogene Viren enthaltende Pflanzenschutzmitteln und Zellulosesulfat auf die Pflanzen ausgebracht werden. In einer Variante der vorliegenden Erfindung werden insektenpathogene Viren enthaltende Pflanzenschutzm itteln und Zellulosesulfat zusammen, gleichzeitig und/oder im Gemisch ausgebracht.
In einer anderen Variante der vorliegenden Erfindung werden insektenpathogene Viren enthaltende Pflanzenschutzm itteln und Zellulosesulfat getrennt, einzeln und/oder nacheinander ausgebracht.
In einer weiteren Ausführung der vorliegenden Erfindung wird Zellulosesulfat nach dem Ausbringen eines Pflanzenschutzmittels, enthaltend insektenpathogene Viren, ausgebracht.
In einer weiteren Ausführung der vorliegenden Erfindung wird Zellulosesulfat vor dem Ausbringen eines Pflanzenschutzmittels, enthaltend insektenpathogene Viren, ausgebracht.
Sowohl das Zellulosesulfat als auch das Pflanzenschutzmittels enthaltend insektenpathogene Viren zeigen eine hohe Stabilität und bewahren ihre jeweilige Aktivität über Wochen, bevorzugt Monate.
Demgemäß werden Zellulosesulfat und das Pflanzenschutzmittel enthaltend insektenpathogene Viren -unabhängig von der Reihenfolge - innerhalb einer Zeitspanne von zwei Monaten, bevorzugt sechs Wochen, fünf Wochen, vier Wochen, besonders bevorzugt drei Wochen, zwei Wochen, eine Woche, insbesondere sechs Tage, fünf Tage, vier Tage, drei Tage, einem Tag, ausgebracht
Auch in dieser Ausführung kann das insektenpathogene Viren enthaltende Pflanzenschutzmittel allein oder zusammen mit Zellulosesulfat oder als Gemisch von Pflanzenschutzmittel und Zellulosesulfat ausgebracht werden.
Eine Erhöhung der Wirksamkeit wird erfindungsgemäß immer im Vergleich zu einer Kontrolle bestimmt, bei der das Pflanzenschutzmittel unter identischen Bedingungen und in identischen Konzentrationen appliziert wird, jedoch ohne in Kontakt mit Zellulosesulfat zu treten.
Erfindungsgemäß wird die Erhöhung der Wirksamkeit des Pflanzenschutzmittels im Vergleich zu einer Kontrolle bestimmt. Die Kontrolle umfasst das Aufbringen des Pflanzenschutzmittels unter identischen Bedingungen wie im erfindungsgemäßen Verfahren. Allerdings wird weder vor, noch nach dem Aufbringen des Kontroll- Pflanzenschutzmittels, noch gleichzeitig damit, Zellulosesulfat auf Pflanzen ausgebracht. Die Wirksamkeit kann anhand der Beschädigung, z. B. der beschädigten Pflanzen, Blätter, Samen oder Früchte bestimmt werden, oder in einer anderen Ausführung mittels der Ausbeute des landwirtschaftlichen Produkts, wie z. B. Samen oder Früchte.
Eine Erhöhung der Wirksamkeit bedeutet erfindungsgemäß, dass eine geringere Konzentration an Pflanzenschutzmittel eingesetzt werden kann, um die gleiche Wirkung wie die Kontrolle zu erzielen. Die Konzentration des Pflanzenschutzmittels kann im erfindungsgemäßen Verfahren auf 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, bevorzugt 10%, 5%, 1 %, 0,5%, 0,25%, 0, 1 %, 0,005%, besonders bevorzugt 0,001 % gegenüber der Kontrolle reduziert werden. D ie erfindungsgem äße Erhöhung der Wirksam keit des Pflanzenschutzm ittels enthaltend insektanpathogene Viren durch Zellulosesulfat ist dadurch gekennzeichnet, dass der Wirkanteil der insektenpathogenen Viren um eine oder mehrere Größenordnungen reduziert werden kann, bei gleich bleibender hoher Effektivität.
In einer Alternative der vorliegenden Erfindung kann som it die Konzentration an insektenpathogenen Viren auf 10%, 1 %, bevorzugt 0,5%, 0, 1 %, besonders bevorzugt 0,05 %, 0,01 %, insbesondere 0,005%, 0,001 % der im Vergleich zur Kontrolle eingesetzten Viren reduziert werden. Erfindungsgemäß umfasst der Begriff Zel lu losesulfat auch im mer Derivate von Zellulosesulfat.
Als Derivat wird eine Verbindung ausgesucht aus der Gruppe bestehend aus:
- Salze einwertiger, z. B. Na+, K+; , NH4+ zweiwertiger, z. B. Mg2+, Ca2+, Sr2+, Ba2+, Fe2+, ; und dreiwertiger, z. B. AI3+, Fe3+, Kationen;
- Zellulosesulfat mit mindestens einer Alkoxy-Gruppe pro Zellubiose-Monomer;
- Zellulosesulfat substituiert mit Methyl-, Ethyl-, Acetyl- an einem oder mehreren Monomeren des Zellulosesulfat Moleküls substituiert mit Methyl-, Ethyl-, Acetyl- - Sulfatierungs-bzw Substitutionsgrad von 0,01 bis 3,0 insbesondere von 0,4 bis 0,7 bevorzugt 0,5 bis 0,6, insbesondere 0,6;
- insbesondere wasserlösliche Zellulosesulfate
bezeichnet.
In einer Alternative des erfindungsgemäßen Verfahrens wird ein Pflanzenschutzmittel enthaltend Baculoviren in einer Konzentration von 1 x 105 bis 1 x 1015/g und Zellulosesulfat in einem Gehalt von 0,01% bis 70% insbesondere von 0,1 bis 10% oder in einer Konzentration von 0,1 ppm bis 700 ppm als Ausgangsstoff eingesetzt, z.B. zur Vorbereitung einer Spritzbrühe.
Unter Aufbringen des Pflanzenschutzmittels auf Pflanzen ist im Sinne der vorliegenden Erfindung zu verstehen, dass das Pflanzenschutzmittel und Zellulosesulfat oder ein Gemisch davon unmittelbar auf die zu schützenden Pflanzen aufgebracht wird, oder auf Teile von Pflanzen wie z.B. Blätter, Samen oder Früchte, oder auf den Standort der zu schützenden Pflanze sowie auch unmittelbar auf die Schadinsekten, welche sich auf, an der Pflanze oder an deren Standort befinden.
Eine Alternative der vorliegenden Erfindung betrifft neben der Verwendung des Viren enthaltenden Pflanzenschutzmittels die Verwendung und den Einsatz mindestens eines weiteren Pflanzenschutzmittels, bevorzugt ausgewählt aus der Gruppe von Insektiziden, Fungiziden und Herbiziden, insbesondere Insektizide. In einer Ausführung wird zusätzlich zu den o.g. Pflanzenschutzmittel Zellulosesulfat oder ein Gemisch der Viren enthaltenden Pflanzenschutzmittel mit Zellulosesulfat ausgebracht.
Eine weitere Ausführung der vorliegenden Erfindung betrifft den Einsatz von Zellulosesulfat in einer Konzentration von 0,1 ppm bis 10.000 ppm, bevorzugt 1 ppm bis 5.000 ppm insbesondere besonders bevorzugt 1 ppm bis 1000 ppm, 500 ppm, insbesondere bevorzugt 1 ppm bis 500 ppm,.
Eine Ausführung der vorliegenden Erfindung betrifft die Verwendung von Zellulosesulfat in wasserlöslicher Form oder als Coadservat an ein Polykation in gebundener Form.
Das Zellulosesulfat kann als Komponente des Pflanzenschutzmittels vorliegen.
In einer Alternative des erfindungsgemäßen Verfahrens wird das Zellulosesulfat beim Ausbringen des Pflanzenschutzmittels der Spritzbrühe zugesetzt.
In einer Variante der vorliegenden Erfindung sind die insektenpathogene Viren des Pflanzenschutzmittels Baculoviren.
In einer weiteren Ausführung des erfindungsgemäßen Verfahrens handelt es sich um Viren, bevorzugt Baculoviren, bei denen das Insektizide Potenzial mittels gentechnischer Methoden optimiert wurde. So wurde z.B. durch gentechnische Methoden der Wirtsbereich spezifisch erweitert, oder die Virulenz der Baculoviren gegenüber älteren Larvenstadien verstärkt, oder ihre Wirkgeschwindigkeit erhöht. Zu den gentechnischen Methoden gehört z.B. die Integration von Neurotoxin-Genen in das Virusgenom oder die Delletion des viralen egf-Gens. Dadurch kann eine signifikante Beschleunigung der Wirkgeschwindigkeit erreicht werden. Insektenspezifische Neurotoxine können z. B. aus Skorpionen oder Milben isoliert werden und in rekombinanten Viren exprimiert werden. Eine Liste in gentechnischen Viren, die erfindungsgemäß verwendet werden kann (welche hiermit durch Verweis einbezogen ist), ist in Chen, X.W. et al. (Journal of Invertebrate Pathology, 76, 140 - 146) offenbart.
In einer weiteren Ausführung des erfindungsgemäßen Verfahrens wird Enhancin mit Zellulosesulfat und/oder den insektenpathogenen Viren ausgebracht.
Enhancin ist ein Protein welches von dem Trichoplusia ni Granulovirus gebildet wird und Infektionen, bevorzugt durch Viren in verschiedenen Lepidoptera Gattungen verstärkt.
Die Effizienzsteigerung kann auch durch die separate Zugabe von Enhancin in aufgereinigter Form oder durch die Integration des für Enhancin kodierenden Gens in den insektenpathogenen Virus bzw. durch Zugabe von Trichoplusia ni (Hübner) Granulovirus erfolgen.
Enhancin beeinflusst die Integrität der Darmmembran im Mitteldarm der Larven und führt zu einer Wirksamkeitverstärkung bei verschieden Virenspezies beispielweise T. ni, Helicoverpa zea (Boddie), Heliothis virescens (Fabricius), Spodoptera exigua (Hübner), Pseudoplusia includens (Walker), and Anticarsia gemmatalis (Hübner), (Granados et. all.; Biological Control 20, 153-159 (2001).
In einer weiteren Ausführung der vorliegenden Erfindung enthält das Pflanzenschutzmittel Granuloviren und/oder Kernpolyhetraviren.
In einer Variante der vorliegenden Erfindung liegen die Viren und das Zellulosesulfat gemeinsam in lyophilisierter Form vor. Dadurch wird eine gute Dispergierbarkeit und somit leichte Herstellung der Spritbrühe gewährleistet. Zusätzlich ist dadurch eine lange Haltbarkeit und Stabilität sowohl der Viren als auch des Zellulosesulfats gegeben.
In einer Alternative der vorliegenden Erfindung wird ein solches Gemisch von insektenpathogenen Viren und Zellulosesulfat in einer Konzentration von 0,01 g, 10 g/acre ausgebracht. Dabei entspricht 1 acre einer Fläche von 4.046,856 m2bzw.0,4 ha in etwa. Bevorzugt werden 0,1 bis 10 g, insbesondere 0,2 bis 5 g, besonders bevorzugt 0,4 g/acre ausgebracht. Das Gemisch von Pflanzenschutzmittel und Zellulosesulfat enthält 0,01 bis 10 Einschlusskörper (OB)/g, bevorzugt 0,05 bis 1 OB/g, besonders bevorzugt 0,01 bis 0,03 OB/g.
Zum vollständigen Schutz der Pflanzen für eine Saison werden erfindungsgemäß 0,1 bis 100 g/acre, bevorzugt 0,5 bis 10 g/acre, besonders bevorzugt 1 bis 2 g/acre, insbesondere 1 ,2 g/acre des oben beschriebenen Gemisches ausgebracht.
In einer Alternative der vorliegenden Erfindung werden zum vollständigen Schutz der Pflanzen pro Saison 0,1 bis 10 x 1012 Einschlusskörper/acre, bevorzugt 0,5 bis 5 x 1012 Einschlusskörper, besonders bevorzugt 1 bis 2 x 1012 Einschlusskörper, insbesondere 1,2x1012 Einschlusskörper/acre ausgebracht.
In einer weiteren Alternative der vorliegenden Erfindung erfolgt das Ausbringen der genannten Mengen an Pflanzenschutzmittel mit Zellulosesulfat in drei einzelnen Applikationen. Bevorzugt werden die Applikationen in Abstand von einer bis drei Wochen, insbesondere im Abstand von jeweils zwei Wochen ausgeführt.
Das erfindungsgemäße Verfahren wird in einer Ausführung zum Schutze von Obst und Gem üsepflanzen eingesetzt, insbesondere von Obstbäumen, besonders bevorzugt Apfelbäume bzw. der entsprechenden Früchte.
Die erfindungsgemäßen Pflanzenschutzmittel können z.B. im Obstanbau eingesetzt werden, insbesondere um Äpfel, Birnen, Quitten, Aprikosen, Pfirsiche, Pflaumen, Kirschen, Weißdorn, Esskastanien und Walnuss vor Schädlingen, besonders vor Insekten, insbesondere vor deren Larven zu schützen.
In einer Variante der vorliegenden Erfindung werden ein oder meherere Viren ausgewählt aus der Gruppe enthaltend Cydia pomonella Granoloviren (CpGV), Cydia pomonella GV mexican strain, Autographa californica AcMNPV, Helicoverpa armigera MNPV, Choristoneura furniferana NPV, Spodoptera litoralis, MNPV, Lobesia botrana GV, Thaumetopoea processionea NPV, Helicoverpa zea (Heliothis zea), (HzSNPV), Tuta absoluta NPV, Plutella xylostella (PxMNPV), Spodoptera exigua (SeMNPV), Spodoptera frugiperda (SfMNPV) und Lymantria dispar LdNPV eingesetzt.
Einzelheiten zu den Viren sind folgender Tabelle A zu entnehmen:
Tab.: A
Figure imgf000009_0001
Helicoverpa zea Maiszünzler Mais, Baumwolle, Soja (Heliothis zea) (cooton bollworm, tomato
(HzSNPV) friutworm, sorghum
headworm)
Tuta absoluta NPV Tomatenminiermotte Tomate
Plutella xylostella Diamond back moth Gemüse
(PxMNPV) Kohl
Spodoptera exigua Beet Armyworm Gemüse
(SeMNPV Kohl
Spodoptera frugiperda Fall armyworm Baumwolle, Soja
(SfMNPV)
Lymantria dispar Schwammspinner Gypsy Laubwald
LdNPV moth
Die erfindungsgemäßen Pflanzenschutzmittel zeigen durch die Verwendung von Zellulosesulfat synergetische Effekte. Synergetische Effekte bedeutet erfindungsgemäß eine bessere Schädlingsbekämpfung als bei Einsatz der Pflanzenschutzmittel oder Zellulosesulfat einzeln zu erwarten wäre.
In einer Ausführung der vorliegenden Erfindung wird das insektenpathogene Viren enthaltende Pflanzenschutzmittel und Zellulosesulfat durch Fraßaufnahme durch das Schadinsekt aufgenommen und liegt im Schadinsekt in vivo gleichzeitig inkorporiert vor, um so seine Wirkung zu entfalten.
Beispiele: Aus den Beispielen geht eine erhöhte Wirksam keit des erfindungsgemäßen Pflanzenschutzmittels mit 94-100% Wirksamkeit (Tab 1 und 2) hervor. Dieses Ergebnis konnte mit einer erheblich niedrigeren Wirkstoffkonzentration im Vergleich zu anderen verfügbaren Produkten erzielt werden (Tab 3). Variante AnwendungsM ittlere Anzahl A b s e n ku n g d e r Biologische norm der Beschädigungen Ernte der beschädigten i n Bezug auf die Früchte,
(1x10*12Glanula Früchte Kontrolle (%) kg/Baum
/g)
Fallob GeFallobst Gest pflückte pflückte
Früchte Früchte
Pflanzen1 ,0g 1 46 0 94,2 100 162 schutzmittel
2 44 0 94,4 100 157 enthaltend
insektenpatho Mittel: 45 0 94,3 100 159,5 gene Viren:
CpGV mit
Natrium- Zellulosesulfat
Kontrolle 1 760 210 72
2 830 226 88
Mittel: 795 218 80
Tabelle 1 : Biologische Effektivität des erfindungsgemäßen Pflanzenschutzmittel 5 enthaltend insektenpathogene Viren: CpGV mit Natrium-Zellulosesulfat gegen Cydia pomoneiia L. bei frühen Apfensorten
Figure imgf000011_0001
Pflanzen1 ,0 1 105 21 94,2 100 schutzmittel 2 1 14 19 94,4 100 enthaltend
insektenpathog Mittel: 109,5 20 94,3 100 ene Viren:
CpGV mit
Natrium-
Zellulosesulfat
Kontrolle 1 1.010 184
2 940 159
Mittel: 975 171 ,5
Tabelle 2: Biologische Effektivität des erfindungsgemäßen Pflanzenschutzmittel enthaltend insektenpathogene Viren: CpGV mit Natrium-Zellulosesulfat gegen Cydia pomonella L. bei späten Apfensorten
5 Glanula = OB Occiusion Body (Einschlusskörper)
Figure imgf000012_0001
Pflanzenschutzmittel enthaltend
Produkt Produkt 1 Produkt 2 Produkt 3 insektenpathogene
Viren: CpGV mit Zellulosesulfat
Gesamte
Applikation (3x) 15,9 1 1 ,8 12,0 1 ,2
OB/acre (x 1012)
$307 - $393/L 20-30€/g
Preis (durchschnittli $130/L $350/L (Großhandel)
ch $350/L)
Tab 3: Vergleich der Dosierungsempfehlungen für am Markt vergleichbare Produkte (USA)

Claims

Ansprüche:
1 . Verfahren zum Schutz von Pflanzen bei welchem insektenpathogene Viren enthaltende Pflanzenschutzmittel und Zellulosesulfat auf die Pflanzen ausgebracht werden.
2. Verfahren nach Anspruch 1 dadurch gekennzeichnet, dass Pflanzenschutzmittel und Zellulosesulfat gleichzeitig oder getrennt auf die Pflanzen ausgebracht werden.
3. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche dadurch gekennzeichnet, dass Zellulosesulfat in wasserlöslicher Form oder als Koazervat an ein Polykation in gebundener Form vorliegt.
4. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche dadurch gekennzeichnet, dass Zellulosesulfat als Komponente des Pflanzenschutzmittel vorliegt.
5. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüchedadurch gekennzeichnet, dass Zellulosesulfat beim Ausbringen des Pflanzenschutzmittels der Spritzbrühe zugesetzt wird.
6. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche dadurch gekennzeichnet, dass Zellulosesulfat vor oder nach dem Ausbringen eines Pflanzenschutzmittels auf die zu schützenden Pflanzen appliziert wird.
7. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche dadurch gekennzeichnet, dass die Pflanzenschutzmittel Baculoviren enthalten.
8. Verfahren nach Anspruch 7 dadurch gekennzeichnet, dass
die Pflanzenschutzmittel Granuloviren und/oder Kernpolyhedraviren enthalten.
9. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche dadurch gekennzeichnet, dass die Erhöhung der Wirksamkeit des Pflanzenschutzmittels im Vergleich zu einer Kontrolle bestimmt wird, welche in dem Ausbringen des Pflanzenschutzmittels unter identischen Bedingungen ohne Zellulosesulfat oder dessen Derivate besteht.
10. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche dadurch gekennzeichnet, dass mindestens ein weiteres Pestizid auf die Pflanze aufgebracht wird.
1 1 . Verfahren nach einem der vorangehenden Ansprüche dadurch
gekennzeichnet, dass das Pflanzenschutzmittel 0,01 bis 10 Einschlusskörper (OB) / Gramm enthält.
12. Verfahren nach einem der vorangehenden Ansprüche dadurch
gekennzeichnet, dass zum vollständigen Schutz der Pflanzen für eine Saison 0, 1 bis 10 x 1012 Einschlusskörper /acre ausgebracht werden.
13. Verfahren nach einem der vorangehenden Ansprüche dadurch
gekennzeichnet, dass Zellulosesulfat in einer Konzentration von 0, 1 ppm bis 10000 ppm eingesetzt wird.
14. Verwendung von Zellulosesulfat zur Verbesserung der Wirksamkeit von Pflanzenschutzmittel im Vergleich zu einer Kontrolle.
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