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WO2011126099A1 - 糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤 - Google Patents

糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤 Download PDF

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WO2011126099A1
WO2011126099A1 PCT/JP2011/058855 JP2011058855W WO2011126099A1 WO 2011126099 A1 WO2011126099 A1 WO 2011126099A1 JP 2011058855 W JP2011058855 W JP 2011058855W WO 2011126099 A1 WO2011126099 A1 WO 2011126099A1
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WO
WIPO (PCT)
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group
substituent
hydrogen atom
acid
compound
Prior art date
Application number
PCT/JP2011/058855
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English (en)
French (fr)
Inventor
礼子 安田
譲 江藤
Original Assignee
味の素株式会社
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 味の素株式会社 filed Critical 味の素株式会社
Priority to JP2012509709A priority Critical patent/JPWO2011126099A1/ja
Priority to EP11765999.5A priority patent/EP2554165A4/en
Publication of WO2011126099A1 publication Critical patent/WO2011126099A1/ja
Priority to US13/630,562 priority patent/US8877739B2/en

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    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/28—Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
    • C07F9/38—Phosphonic acids [RP(=O)(OH)2]; Thiophosphonic acids ; [RP(=X1)(X2H)2(X1, X2 are each independently O, S or Se)]
    • C07F9/3804—Phosphonic acids [RP(=O)(OH)2]; Thiophosphonic acids ; [RP(=X1)(X2H)2(X1, X2 are each independently O, S or Se)] not used, see subgroups
    • C07F9/3834—Aromatic acids (P-C aromatic linkage)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/28—Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
    • C07F9/38—Phosphonic acids [RP(=O)(OH)2]; Thiophosphonic acids ; [RP(=X1)(X2H)2(X1, X2 are each independently O, S or Se)]
    • C07F9/40—Esters thereof
    • C07F9/4003—Esters thereof the acid moiety containing a substituent or a structure which is considered as characteristic
    • C07F9/4021—Esters of aromatic acids (P-C aromatic linkage)

Definitions

  • the present invention relates to a glutamic acid derivative having CaSR agonist activity or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and a preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity containing the derivative or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • pancreatic ⁇ cells The body's energy metabolism is controlled by insulin produced by pancreatic ⁇ cells.
  • Insulin acts on peripheral tissues and cells and plays an important role in controlling blood sugar levels by promoting the uptake of sugar from the blood.
  • pancreatic ⁇ cells become exhausted and dysfunctional, resulting in diabetes and obesity.
  • Insulin secretion is regulated by various hormones. In particular, glucagon-like peptide-1 (GLP-1) produced and secreted in the digestive tract is considered to be important.
  • GLP-1 glucagon-like peptide-1
  • GLP-1 is a peptide hormone having a molecular weight of about 4000, and is produced mainly by L cells in the small intestine. GLP-1 has an effect of promoting insulin secretion of ⁇ cells, an effect of suppressing gastric peristalsis and digestion and absorption, an appetite, an effect of suppressing anorexia, etc., and is clearly effective for the treatment and prevention of diabetes and obesity
  • GLP-1 has been It is known that the ability to produce GLP-1 is reduced in diabetes and obesity, and if GLP-1 production can be promoted in these pathological conditions, it is expected to lead to the treatment and prevention of diabetes and obesity.
  • CCK Cholecystokinin
  • a calcium sensing receptor (Calcium Sensing Receptor (CaSR)) is also called a calcium receptor, but the receptor signal regulates various in vivo functions, and a substance having CaSR agonist activity is used to treat various diseases or There is a possibility of being useful for prevention and a possibility of being useful as a body taste imparting agent.
  • CaSR Calcium Sensing Receptor
  • Patent Document 1 discloses a screening method for a body taste imparting substance, and a body taste imparting agent containing the body taste imparting substance obtained by the method. And it was found that various low molecular weight peptides have CaSR agonist activity, and as a result, not only the five basic tastes expressed by sweet taste, salty taste, sour taste, bitter taste, and umami taste, but thickness, spread, sustainability, It is described that a richness-imparting agent capable of imparting a richness, which is a taste that enhances the taste around the basic taste, such as lumps, can be provided.
  • Non-patent Documents 5 and 2 “calcium sensing receptor (CaSR) or G protein-coupled receptor”, “diabetes or obesity”, “promoting GLP-1 secretion”, “promoting CCK secretion”, “suppressing gastric emptying”, etc. There is no literature that describes the relationship.
  • CaSR calcium sensing receptor
  • G protein-coupled receptor “diabetes or obesity”, “promoting GLP-1 secretion”, “promoting CCK secretion”, “suppressing gastric emptying”, etc.
  • compounds that activate CaSR ⁇ -glutamyl peptide derivatives including glutathione are known in addition to Cinacalcet and related synthetic low molecular weight compounds (Patent Document 4, Non-Patent Documents 8 and 9).
  • Non-Patent Document 5 some of these compounds are known to be used as therapeutic agents for diabetes or obesity (Patent Document 5), but are structurally different from the glutamic acid derivative of the present invention.
  • the present invention even in some known compounds among the particularly preferred 3-sulfonic acid, 3-carboxylic acid and 3-nitro derivatives, most of their uses are as substrates in the enzyme activity measurement of ⁇ -glutamyltransferase.
  • the use as an antibacterial agent or antiallergic agent (Non-Patent Document 6, Patent Document 3) and the use as an analytical reagent for mass spectrometry (Non-Patent Document 7) are slightly known as other applications. Only. Therefore, it is required to search for more variation compounds having CaSR agonist activity and to provide more excellent preventive or therapeutic agents for diabetes or obesity.
  • An object of the present invention is to search many variation compounds having CaSR agonist activity and to provide a preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity containing the compound.
  • glutamic acid derivatives As a result of searching for a compound having CaSR agonist activity, the present inventors have surprisingly found that various ⁇ -glutamic acid derivatives and analogs thereof (hereinafter referred to as “glutamic acid derivatives”) have excellent CaSR agonist activity. I found. Furthermore, the present inventors have found that the found glutamic acid derivative having CaSR agonist activity or a pharmaceutically acceptable salt thereof can be a useful preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity, and has completed the present invention.
  • the present invention provides a preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity containing the following glutamic acid derivative or a pharmaceutically acceptable salt thereof;
  • R 1 , R 2 , or R 3 is a nitro group, a sulfo group, or a group
  • R 6 is a hydrogen atom, a hydroxyl group, or a C 1-6 alkyl group which may have a substituent
  • R 7 is a hydrogen atom or an optionally substituted C 1-6 alkyl group
  • X is a methylene group or an oxygen atom
  • E is a hydroxyl group, a C 1-6 alkoxy group which may have a substituent, a mercapto group which may have a substituent, or the following group:
  • Z represents a C 1-6 hydrocarbon divalent group which may have a substituent
  • E 1 represents a C 1-6 acyloxy group or substituent which may have a substitu
  • E 2 represents a hydrogen atom or C 1-6 Represents an alkyl group, and Z and E 1 may form a ring together)
  • a prophylactic or therapeutic agent for diabetes or obesity comprising the glutamic acid derivative represented by the formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof: [1-2]
  • R 1 , R 2 , R 3 , R 4 , and R 5 are each independently a hydrogen atom, a halogeno group, a hydroxyl group, a nitro group, an amino group, or a C 1-6 which may have a substituent.
  • R 1 , R 2 , or R 3 is a nitro group, a sulfo group, or a group Or
  • R 6 is a hydrogen atom, a hydroxyl group, or a C 1-6 alkyl group which may have a substituent
  • R 7 is a hydrogen atom or an optionally substituted C 1-6 alkyl group
  • X is a methylene group or an oxygen atom
  • E is a hydroxyl group, a C 1-6 alkoxy group which may have a substituent, a mercapto group which may have a substituent, or the following group: (Wherein Z represents an optionally substituted divalent group of C 1-6 hydrocarbon, and E 2 represents a hydrogen atom or a C 1-6 alkyl group).
  • R 1 , R 3 , R 4 , and R 5 are each independently a hydrogen atom, a halogeno group, a hydroxyl group, a nitro group, an amino group, a C 1-6 alkyl group that may have a substituent, A group selected from a C 1-6 alkoxy group which may have a substituent or a C 1-6 mono or dialkylamino group which may have a substituent, R 2 represents a nitro group, a sulfo group, or a group Or R 6 and R 7 are each independently a hydrogen atom or a C 1-6 alkyl group which may have a substituent,
  • the agent for preventing or treating diabetes or obesity according to [1] or [1-2], wherein X is a methylene group or an oxygen atom.
  • R 1 , R 3 , R 4 , and R 5 are each independently a hydrogen atom, a halogeno group, a hydroxyl group, a nitro group, an amino group, a C 1-3 alkyl group that may have a substituent, A group selected from a C 1-3 alkoxy group which may have a substituent or a C 1-3 mono- or dialkylamino group which may have a substituent; R 2 is a nitro group, a sulfo group, or a group Or The prevention or treatment of diabetes or obesity according to any one of [1] to [2], wherein R 6 and R 7 are each independently a hydrogen atom or a methyl group. Agent.
  • R 1 , R 3 , R 4 , and R 5 are each independently a group selected from a hydrogen atom, a chloro group or a bromo group, a hydroxyl group, a nitro group, an amino group, a methyl group, or a methoxy group;
  • R 2 is a nitro group, a sulfo group or a group Or
  • a group selected from R 6 is a hydrogen atom or a methyl group, R 7 is a hydrogen atom, and X is a methylene group, The preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity according to any one of [1] to [3].
  • E is a C 1-6 alkoxy group, or the following group: (In formula (IIa), Z represents a C 1-6 hydrocarbon divalent group which may have a substituent, and E 1 represents a C 1-6 acyloxy group which may have a substituent.
  • a halogen atom, an aryl group, a heteroaryl group, a C 1-6 alkoxy group which may have a substituent, or a carbamoyl group which may have a substituent, and Z and E 1 are The agent for preventing or treating diabetes or obesity according to any one of the above [1] to [6], which may form a ring integrally.
  • various compounds having excellent CaSR agonist activity can be provided, and a preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity containing these compounds can be provided.
  • the “C 1-6 alkyl group” is a monovalent derivative derived by removing one arbitrary hydrogen atom from a linear or branched aliphatic hydrocarbon having 1 to 6 carbon atoms. Is the basis of Specific examples include groups such as methyl, ethyl, isopropyl, butyl, n-butyl, isobutyl, sec-butyl, t-butyl, pentyl, isopentyl, 2,3-dimethylpropyl, hexyl and the like. Preferably it is a C1-3 alkyl group.
  • the “C 1-6 alkoxy group” means C 1-6 alkyl-O—.
  • it is a C 1-3 alkoxy group.
  • halogeno group examples include a fluorine atom, a chlorine atom, a bromine atom, and an iodine atom.
  • the “mono or di C 1-6 alkylamino group” refers to an amino group in which one or two hydrogen atoms have been substituted with the aforementioned C 1-6 alkyl group, specifically, for example, methylamino, dimethylamino , Ethylamino, diethylamino and the like. Preferably, it is a mono or di C1-3 alkylamino group.
  • the “C 1-6 acyloxy group” means C 1-6 alkyl-C (O) —O—, C 3-6 cycloalkyl-C (O) —O—, or phenyl-C (O) —O—.
  • the C 1-6 acyloxy group acetyloxy, propionyloxy, cyclohexylcarbonyloxy, groups of benzoyloxy.
  • the “C 1-6 alkoxycarbonyl group” means a group represented by C 1-6 alkyl-O—C (O) —, and examples thereof include groups such as methoxycarbonyl and ethoxycarbonyl.
  • it is a C 1-3 alkoxycarbonyl group.
  • the “C 1-6 alkoxycarbonyloxy group” means a group represented by C 1-6 alkyl-O—C (O) —O—, and examples thereof include groups such as methoxycarbonyloxy and ethoxycarbonyloxy.
  • the “aryl group” means an aromatic hydrocarbon ring group such as phenyl or naphthyl. This is preferably a phenyl group.
  • the “heteroaryl group” is a 5- to 10-membered aromatic heterocyclic group containing 1, 2 or 3 heteroatoms selected from N, S, and O, and the aromatic heterocyclic group includes Specific examples include groups such as pyridine, pyridazine, pyrazine, pyrimidine, thiazole, isothiazole, oxazole, isoxazole, oxadiazole, pyrazole, imidazole, furan, thiophene, and pyrrole.
  • C 1-6 hydrocarbon divalent group means a straight chain or branched chain group having 1 to 6 carbon atoms and may contain 1 to several double bonds or triple bonds. It means a divalent group derived by removing two arbitrary hydrogen atoms from a hydrocarbon. Specific examples include groups such as methylene, ethane-1,1-diyl, vinylene, ethynylene, propargyl and the like.
  • the “ring” formed by Z and E 1 together includes Z—E 1 as a part of the ring, It means a saturated or unsaturated 5- or 6-membered ring which may have 1 to 3 heteroatoms selected from a nitrogen atom, an oxygen atom and a sulfur atom, and may further be condensed with a benzene ring. Preferably, it is a saturated or unsaturated 5- or 6-membered ring which may have 1 to 3 oxygen atoms as ring constituent atoms.
  • Specific examples of E in the case where Z and E 1 are combined to form a ring include the following groups.
  • the group represented by CO-E is exemplified by Prog. Med.
  • R 1 , R 2 , R 3 , R 4 and R 5 are preferably Are each independently a hydrogen atom, a halogeno group, a hydroxyl group, a nitro group, an amino group, an optionally substituted alkyl group having 1 to 3 carbon atoms, or an optionally substituted carbon atom. It is a group selected from an alkoxy group having 1 to 3 carbon atoms or a mono- or dialkylamino group having 1 to 3 carbon atoms which may have a substituent.
  • R 1 , R 3 , R 4 , and R 5 may preferably each independently have a hydrogen atom, a halogeno group, a hydroxyl group, a nitro group, an amino group, or a substituent. It is a group selected from a good C 1-3 alkyl group, an optionally substituted C 1-3 alkoxy group, or an optionally substituted mono- or di-C 1-3 alkylamino group. .
  • R 1 , R 3 , R 4 and R 5 are each independently selected from a hydrogen atom, chloro group or bromo group, hydroxyl group, nitro group, amino group, methyl group or methoxy group. It is a group.
  • R 2 is preferably a sulfo group, a carboxylic acid group or a phosphonic acid group.
  • any one of R 1 and R 3 may be a sulfo group, and R 4 is preferably a halogeno group.
  • R 6 and R 7 are preferably each independently a hydrogen atom or a methyl group. More preferably, R 6 is a hydrogen atom or a methyl group, and R 7 is a hydrogen atom. Further, for R 6 is a hydroxyl group is also preferred.
  • X is preferably a methylene group or an oxygen atom.
  • E is preferably a C 1-6 alkoxy group which may have a hydroxyl group or a substituent.
  • a hydroxyl group or a C 1-6 alkoxy group particularly preferably a hydroxyl group or a C 1-3 alkoxy group.
  • the glutamic acid derivative represented by the above general formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof contained in the preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity according to the present invention include R 1 , R 2 , and R 3 . Any of them is preferably a sulfo group, a carboxylic acid group or a phosphonic acid group.
  • R 2 is preferably a sulfo group, a carboxylic acid group or a phosphonic acid group, and particularly preferably a sulfo group.
  • R 2 when R 2 is a sulfo group, R 1 is a hydrogen atom or a hydroxyl group, and R 3 is a hydrogen atom, a chloro group, a hydroxyl group, a methyl group or a methoxy group.
  • R 4 is a hydrogen atom, chloro group or nitro group
  • R 5 is a hydrogen atom, hydroxyl group, methyl group or methoxy group
  • R 6 is a hydrogen atom or methyl group
  • X is a methylene group or oxygen Those that are atoms are preferred.
  • R 2 when R 2 is a sulfo group, R 1 is a hydrogen atom or a hydroxyl group, R 3 is a hydrogen atom, a chloro group or a methyl group, and R 4 is a hydrogen atom or Most preferred is a chloro group, R 5 is a hydrogen atom, a hydroxyl group or a methyl group, R 6 is a hydrogen atom, and X is a methylene group or an oxygen atom.
  • R 2 is a carboxylic acid group
  • R 1 is a hydrogen atom or a hydroxyl group
  • R 3 is a hydrogen atom
  • R 4 is a hydrogen atom or a bromo group
  • R 5 is a hydrogen atom
  • R 6 is a hydrogen atom
  • X is a methylene group.
  • R 2 is —PO (OCH 3 ) OH group or —PO (OH) 2 group
  • R 1 is a hydrogen atom
  • R 3 is a hydrogen atom
  • R 4 is a hydrogen atom
  • 5 is a hydrogen atom
  • R 6 is hydrogen atom
  • X is a methylene group or an oxygen atom is most preferred.
  • the glutamic acid derivative represented by the above general formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof contained in the preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity of the present invention in particular, in the above general formula (I),
  • R 2 is a nitro group
  • R 1 is a hydrogen atom
  • R 3 is a hydrogen atom
  • R 4 is a hydrogen atom
  • R 5 is a hydrogen atom
  • R 6 is a hydrogen atom
  • X is a methylene group.
  • the compounds described in Examples are particularly preferable, and among them, compounds 1, 7, 10, 21, 22, 24, 32, 33, 34, 35 and 37 are preferred.
  • the alkyl group, alkoxy group, and mono- or dialkylamino group present in the general formula (I) may each have a substituent, and examples of the substituent include a halogen, a hydroxyl group, an alkoxy group, an amino group, Examples include, but are not limited to, mono or dialkylamino groups, carboxyl groups, and sulfo groups.
  • the alkoxy group, mono- or dialkylamino group as the substituent is preferably a lower alkoxy group, a lower mono- or dialkylamino group, respectively.
  • lower means that the total number of carbon atoms of the substituent is 1 to 3.
  • the glutamic acid derivative represented by the general formula (I) contained in the preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity of the present invention may be in the form of a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • the pharmaceutically acceptable salt of the glutamic acid derivative represented by the above general formula (I) of the present invention includes edible salts.
  • an acidic group such as a carboxyl group or a sulfo group in the formula
  • ammonium salts salts with alkali metals such as sodium and potassium, salts with alkaline earth metals such as calcium and magnesium, aluminum salts, zinc salts, triethylamine, ethanolamine, morpholine, pyrrolidine, piperidine, piperazine and Mention may be made of salts with organic amines such as dicyclohexylamine and salts with basic amino acids such as arginine and lysine.
  • a salt with an inorganic acid such as hydrochloric acid, sulfuric acid, phosphoric acid, nitric acid and hydrobromic acid, acetic acid, citric acid, benzoic acid
  • organic carboxylic acids such as maleic acid, fumaric acid, tartaric acid, succinic acid, tannic acid, butyric acid, hybenzic acid, pamoic acid, enanthic acid, decanoic acid, teocric acid, salicylic acid, lactic acid, oxalic acid, mandelic acid and malic acid
  • salts with organic sulfonic acids such as salts, methanesulfonic acid, benzenesulfonic acid and p-toluenesulfonic acid.
  • CaSR means a calcium sensing receptor, which belongs to the class C of the 7-transmembrane receptor, and is also called a calcium receptor.
  • CaSR agonist refers to an agent that binds to and activates CaSR
  • CaSR agonist agent refers to an agent or substance that binds to and activates CaSR.
  • activate CaSR means that a ligand binds to CaSR and activates a guanine nucleotide-binding protein to transmit a signal. The property of binding to CaSR and activating CaSR is referred to as “CaSR agonist activity”.
  • a preferred example is human CaSR encoded by the human CaSR gene registered in NM_000388.
  • CaSR is not limited to the protein encoded by the gene of the above sequence, and as long as it encodes a protein having a CaSR function, it is 60% or more, preferably 80% or more, more preferably 90% or more. It may be a protein encoded by a homologous gene.
  • the CaSR function can be examined by expressing these genes in cells and measuring changes in current and intracellular calcium ion concentration when calcium is added.
  • the origin of the CaSR is not particularly limited, and examples include CaSR derived from any animal including mice, rats, dogs and the like as well as the human CaSR.
  • the CaSR activity can be confirmed using a living cell expressing CaSR or a fragment thereof, a cell membrane expressing CaSR or a fragment thereof, an in vitro system containing a protein of CaSR or a fragment thereof, or the like.
  • An example using living cells is shown below, but is not limited thereto.
  • CaSR is expressed in cultured cells such as Xenopus oocytes, hamster ovary cells, and human fetal kidney cells. This can be achieved by introducing a plasmid carrying a foreign gene into which a CaSR gene has been cleaned and introducing the plasmid state or cRNA using it as a template.
  • an electrophysiological technique or a fluorescent indicator reagent for increasing intracellular calcium can be used.
  • CaSR expression is first confirmed by a response with calcium or a specific activator.
  • An oocyte in which an intracellular current is observed or a cultured cell in which fluorescence of a fluorescent indicator reagent is observed is used with respect to calcium having a concentration of about 5 mM. The concentration dependence is measured by changing the calcium concentration.
  • the test substance is prepared to about 1 ⁇ M to 1 mM, added to the oocyte or cultured cell, and the CaSR agonist activity of the test substance is measured by measuring the CaSR activity in the presence of the test substance. taking measurement.
  • CaSR is expressed in various tissues and has various physiological actions.
  • CaSR has been shown that peptides and low-molecular compounds having calcium receptor activation promote secretion of GLP-1 and CCK in intestinal STC-1 cells and GLUTag cells (WO2009 / 11221). .
  • compounds having a CaSR agonist activity are diabetics (The Journal of Biological Chemistry, 1999, Vol. 274, p. 20561-20568 and The Journal of Biological Chemistry, 2000, Vol. 277-84, p. ), Useful as an agent for preventing or treating obesity.
  • the compound of the present invention has a GLP-1 and CCK secretion-promoting action (see Test Examples described later), and can be used as a preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity.
  • the compound of this invention can also be used as a secretion promoter of GLP-1 or CCK.
  • the compound of the present invention can also be used as a gastric emptying inhibitor, and can also be used as an antifeedant based on its gastric emptying inhibitory action.
  • the preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity of the present invention is any glutamic acid derivative included in the glutamic acid derivative represented by the above general formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof alone or in any two kinds Or it may contain 3 or more types in combination, and may contain any solid or liquid carrier, additive, etc. that are pharmaceutically, physiologically, experimentally, or food-acceptable.
  • the method of applying the preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity of the present invention is not particularly limited, and any invasive or non-invasive administration using oral administration or injection can be used. Administration may be employed.
  • the active ingredient can be administered in the form of a conventional pharmaceutical preparation together with a solid or liquid pharmaceutical carrier suitable for administration methods such as oral and injection.
  • a solid or liquid pharmaceutical carrier suitable for administration methods such as oral and injection.
  • Such preparations include forms of solid preparations such as tablets, granules, powders and capsules, forms of solutions such as solutions, suspensions and emulsions, and forms such as lyophilization agents. These preparations can be prepared by conventional means on the preparation.
  • any pharmaceutically and physiologically acceptable solid or liquid carrier, additive and the like may be optionally added to the preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity of the present invention.
  • the carrier examples include glucose, lactose, sucrose, starch, mannitol, dextrin, fatty acid glyceride, polyethylene glycol, hydroxyethyl starch, ethylene glycol, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, gelatin, albumin, amino acid, water, and physiological saline. Water etc. are mentioned. Further, if necessary, conventional additives such as stabilizers, wetting agents, emulsifiers, binders, tonicity agents and the like can be appropriately added to the preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity of the present invention. .
  • the additive is not particularly limited as long as it is usually used for the purpose according to the purpose.
  • flavoring, sugar, sweetener, dietary fiber, vitamins, sodium glutamate examples include amino acids such as (MSG), nucleic acids such as inosine monophosphate (IMP), inorganic salts such as sodium chloride, and water.
  • the preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity of the present invention can be used in any form without limitation on physical properties such as dry powder, paste, and solution.
  • the preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity of the present invention can be used for drugs, quasi drugs, foods, and the like.
  • the amount of the preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity of the present invention is appropriately adjusted according to each purpose. For example, when administered to a subject by oral administration, it is represented by the formula (I).
  • the total amount of the glutamic acid derivative or pharmaceutically acceptable salt thereof is preferably 0.01 mg to 10 g per kg body weight and more preferably 0.1 mg to 1 g per kg body weight in a single administration.
  • the frequency of administration is not particularly limited, and can be administered once to several times per day. Further, when the preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity of the present invention is used in foods or reagents, 0.000001 g to 10 g per prescription is preferable, and 0.00001 g to 1 g per prescription is more preferable.
  • the content of the glutamic acid derivative represented by the formula (I) or the pharmaceutically acceptable salt thereof in the preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity of the present invention is particularly limited as long as it is suitable for the above-mentioned use amount.
  • the preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity of the present invention may further contain one or more known substances having CaSR agonist activity.
  • known substances having the above CaSR agonist activity include cations such as calcium and gadolinium, basic peptides such as polyarginine and polylysine, polyamines such as putrescine, spermine and spermidine, proteins such as protamine, amino acids such as phenylalanine, and glutathione. And the like, and cinacalcet related compounds, and the like, but are not limited thereto.
  • the preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity of the present invention may contain any known substance in addition to the known substance having CaSR agonist activity depending on the purpose.
  • the preventive or therapeutic agent for diabetes or obesity of the present invention can also be used as a food or drink or supplement that has an effect on the treatment or prevention of diseases, diabetes or obesity involving the secretion of GLP-1 or CCK.
  • it can be set as the food-drinks which displayed that the container and the packaging had the therapeutic effect and the preventive effect with respect to diabetes or obesity. It does not restrict
  • Examples of the food include seasonings; beverages such as juice and milk; confectionery; jelly; health foods; processed agricultural products; processed livestock products such as milk and cheese; and food supplements.
  • a dry powder There are no restrictions on the physical properties of the paste, solution and the like.
  • a suitable protecting group at the raw material or intermediate stage, that is, a group that can be easily converted into the functional group. It may be effective. Thereafter, the protecting group is removed as necessary to obtain the desired compound.
  • a suitable protecting group include an amino group, a hydroxyl group, a carboxyl group, and the like.
  • Examples of the protective group include t-butoxycarbonyl (Boc) and benzyloxycarbonyl (Z or Cbz), 9-fluorenylmethoxycarbonyl (Fmoc), Protective Groups in Organic Synthesis 3rd edition (TW Green) such as t-butyl (tBu) and benzyl (Bn or Bzl) as protecting groups for carboxyl groups.
  • TW Green Protective Groups in Organic Synthesis 3rd edition
  • TW Green such as t-butyl (tBu) and benzyl (Bn or Bzl) as protecting groups for carboxyl groups.
  • P. GM Wuts published by JOHN WILLY & SONS, INC.
  • the method described in the reference can be applied in a timely manner.
  • Production method 1 is a reaction in which compound (I ′) is obtained by condensation reaction of carboxylic acid and amine using compound (II ′) and compound (III ′). This reaction may be carried out according to a conventional method in the presence of a condensing agent using an equivalent amount of compound (II ′) and amine derivative (III ′) or an excess amount of one.
  • condensing agent examples include N, N-dicyclohexylcarbodiimide (DCC), 1-ethyl-3- [3- (N, N-dimethylamino) propyl] carbodiimide (EDCI or WSC), O-benzotriazol-1-yl.
  • DCC N-dicyclohexylcarbodiimide
  • EDCI or WSC 1-ethyl-3- [3- (N, N-dimethylamino) propyl] carbodiimide
  • O-benzotriazol-1-yl examples include N, N-dicyclohexylcarbodiimide (DCC), 1-ethyl-3- [3- (N, N-dimethylamino) propyl] carbodiimide (EDCI or WSC), O-benzotriazol-1-yl.
  • HBTU HBTU
  • carbonyldiimidazole CDI
  • 4- (4,6-dimethoxy-1,3,5-triazin-2-yl) 4-methylmorpholinium chloride DTMM
  • 2- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N, N, N ′, N′-tetramethyluronium hexafluorophosphate HATU or the like is preferably used. be able to.
  • These condensing agents are used in an equivalent amount or an excess amount relative to the carboxylic acid.
  • solvents not involved in the reaction such as N, N-dimethylformamide (DMF), dioxane, water, methanol, ethanol, tetrahydrofuran (THF), dichloromethane, dichloroethane, diethyl ether, chloroform, dimethoxyethane (DME), acetic acid.
  • solvents not involved in the reaction such as N, N-dimethylformamide (DMF), dioxane, water, methanol, ethanol, tetrahydrofuran (THF), dichloromethane, dichloroethane, diethyl ether, chloroform, dimethoxyethane (DME), acetic acid.
  • Ethyl, toluene, acetonitrile, dimethyl sulfoxide (DMSO), a mixed solvent thereof or the like can be used, but it is preferable to select appropriately depending on the raw materials and the type of condensing agent.
  • the reaction may proceed smoothly in the presence of a base such as triethylamine, diisopropylethylamine (DIEA), N-methylmorpholine, pyridine, 4-dimethylaminopyridine, or by reacting these bases as a solvent.
  • a base such as triethylamine, diisopropylethylamine (DIEA), N-methylmorpholine, pyridine, 4-dimethylaminopyridine, or by reacting these bases as a solvent.
  • the reaction is usually carried out from cooling to room temperature, but depending on the conditions of the condensation reaction, it may be preferable to carry out the reaction under heating.
  • Compound (I ′) can also be produced by a method in which a carboxylic acid is led to an active derivative and then condensed with an amine. In this case, the reaction is carried out using an equivalent amount of compound (II ′) and amine derivative (III ′) or an excess amount of one.
  • Examples of the active derivative of carboxylic acid include phenolic compounds such as p-nitrophenol, 1-hydroxysuccinimide (HOSu), 1-hydroxybenzotriazole (HOBt), 7-aza-1-hydroxybenzotriazole (HOAt), and the like.
  • Active ester obtained by reacting with an N-hydroxyamine compound, monoalkyl ester carbonate, mixed acid anhydride obtained by reacting with an organic acid, diphenylphosphoryl chloride and phosphorus obtained by reacting N-methylmorpholine
  • Examples thereof include acid mixed acid anhydrides, acid azides obtained by sequentially reacting esters with hydrazine and alkyl nitrites, acid halides such as acid chlorides or acid fluorides, and target acid anhydrides.
  • the activating reagent used in the synthesis of the active derivative of carboxylic acid is carried out using an equivalent amount or an excess amount relative to compound (II ′).
  • any reaction can be used as long as it is a reaction that forms an amide bond.
  • E represents other than a hydroxyl group
  • a reaction that selectively removes Prot 1 in the protected compound (I ′) is used. Can be manufactured.
  • Prot 1 and Prot 2 after deprotecting Prot 1 and Prot 2 , for example, a method of performing esterification in an alcohol solvent such as methanol in the presence of an acid catalyst such as hydrogen chloride gas, or after selectively removing only Prot 2
  • a method of performing esterification in an alcohol solvent such as methanol in the presence of an acid catalyst such as hydrogen chloride gas or after selectively removing only Prot 2
  • an alcohol is allowed to act in the presence of a condensing agent to form an ester bond and then remove Prot 1 as necessary.
  • Reduction method 2 In this reaction, an intermediate is obtained from compound (II ′′), and compound (III ′) is allowed to act on the obtained intermediate to obtain compound (I ′′).
  • an intermediate can be obtained by reacting compound (II ′ ′) with, for example, an equivalent or small excess of N, N-carbonyldiimidazole, phosgene, triphosgene, benzyl chloroformate, methyl carbonate or the like.
  • Solvents not involved in the reaction such as N, N-dimethylformamide (DMF), dioxane, tetrahydrofuran (THF), dichloromethane, dichloroethane, diethyl ether, chloroform, dimethoxyethane (DME), ethyl acetate, toluene, acetonitrile, dimethyl sulfoxide (DMSO) or a mixed solvent thereof is preferably used.
  • This reaction is usually carried out under cooling to room temperature, but it may be desirable to heat depending on the type of reagent and compound.
  • the obtained intermediate is subjected to a reaction so that the equivalent amount or either the intermediate or the compound (III ′) becomes a small excess while undergoing a step of substituting with a preferred solvent as necessary.
  • a reaction for example, an organic base such as triethylamine and an inorganic base such as potassium carbonate can coexist.
  • This reaction is usually carried out under heating and under heating conditions of about 100 ° C., but depending on the type of compound, additional heating conditions may be required.
  • any reaction can be used as long as it is a reaction for forming a carbamate.
  • the compound of the present invention thus produced is isolated as it is or as a salt thereof by a conventional chemical operation in the art, for example, extraction, precipitation, fractional chromatography, fractional crystallization, recrystallization, etc. Can be purified.
  • the salt of the said compound can be manufactured by attaching
  • an optical isomer exists. These optical isomers can be converted into diastereomeric salts with optically active acids or bases and then fractionally crystallized, optically resolved by conventional methods such as column chromatography, or optically active starting compounds. Can be produced by a method of synthesis.
  • the carbon atom to which E-CO- and the amino group are bonded preferably has an S configuration.
  • the ordinary method refers to a method generally used as a chemical operation represented by separation operation, drying, filtration, and concentration.
  • the purification step A refers to a crude product obtained by a conventional method, subjected to reverse phase high performance liquid chromatography using octadodecyl group chemically bonded silica gel (ODS) as a filler, and trifluoroacetic acid. Is eluted with a mixed solution of water and acetonitrile containing 0.1% (v / v), and the target fraction is concentrated and freeze-dried.
  • ODS octadodecyl group chemically bonded silica gel
  • Example I (Synthesis Example 1) N 5 Synthesis of-(3-sulfophenyl) -L-glutamine (Compound No. 1) Boc-Glu-OtBu (75 mg, 0.247 mmol), HATU (112 mg, 0.296 mmol) and HOAt (41 mg, 0.296 mmol) were dissolved in 1 ml of DMF, triethylamine (52 ⁇ l) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 10 minutes. .
  • Boc-Glu-OtBu 100 mg, 0.33 mmol
  • HOBt monohydrate 65.6 mg, 0.43 mmol
  • triethylamine 0.137 ml
  • diisopropylcarbodiimide 66.4 ⁇ l, 0.43 mmol
  • 2-amino-4-chlorophenol-6-sulfonic acid 73.7 mg, 0.33 mmol
  • Boc-Glu-OtBu 100 mg, 0.33 mmol was dissolved in methylene chloride (1 ml) and THF (1 ml), CDI (65 mg, 1.1 mmol) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 30 minutes. Thereto was added sodium 5-amino-2-hydroxybenzenesulfonate (77 mg, 0.33 mmol), and the mixture was stirred overnight at room temperature. After the solvent was distilled off, purification was performed using purification step A. The obtained intermediate was dissolved in 2 ml of TFA and stirred at room temperature for 3 hours, and then the solvent was distilled off and the product was purified using purification step A to obtain the title compound.
  • Boc-Ser-OtBu 200 mg, 0.77 mmol was dissolved in 3 ml of methylene chloride and cooled to 0 ° C. N, N′-carbonyldiimidazole (124 mg, 0.77 mmol) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 2 hours. The solvent was distilled off, 3-aminobenzenesulfonic acid (132.6 mg, 0.77 mmol), DMF 2 ml and diisopropylethylamine 0.4 ml were added, and the mixture was stirred at 70 ° C. overnight. After the solvent was distilled off, purification was performed using purification step A to obtain an intermediate.
  • 3 ml of TFA was added and stirred at room temperature for 5 hours. After the solvent was distilled off, purification was performed using purification step A to obtain the title compound.
  • the obtained monomethyl phosphonate was dissolved in 10 ml of methanol, a catalytic amount of Pd / C was added, and the mixture was stirred overnight under a hydrogen atmosphere. After the catalyst was filtered off, the solvent was distilled off to obtain a mixture of (3-aminophenyl) phosphonic acid monomethyl ester and dimethyl ester.
  • Boc-Glu-OtBu (303 mg, 1 mmol), HOAt (136 mg, 1 mmol) and HATU (380 mg, 1 mmol) were dissolved in 1 ml of DMF, and triethylamine (0.278 ml) was added.
  • Purification was performed using purification step A to obtain a protected product of the target product.
  • the obtained protected product was dissolved in 5 ml of trifluoroacetic acid and stirred for 2 hours. After the solvent was distilled off, purification was performed using purification step A to obtain the title compound.
  • the reaction solution was diluted with water-acetonitrile and purified using the purification step A to obtain a protected product of the target product.
  • the obtained protected product was dissolved in 5 ml of trifluoroacetic acid and stirred for 2 hours. After the solvent was distilled off, purification was performed using purification step A to obtain the title compound.
  • Zinc powder 270 mg (4.3 mmol) and ammonium chloride 106 mg (2 mmol) were suspended in 2 ml of a mixed solvent of methanol: water (1: 1), and 450 mg (2 mmol) of 2-nitrobenzenesulfonic acid sodium salt was slowly added. After heating to 65 ° C. and stirring for 1 hour, insoluble matter was filtered off, and the resulting filtrate was distilled off to obtain a crude product of hydroxylamine derivative.
  • BMF-Glu-OtBu hydrochloride 450 mg (1.5 mmol), HOAt 230 mg (1.7 mmol) and HATU 646 mg (1.7 mmol) were added with DMF 5 ml and DIEA 0.35 ml and stirred for 10 minutes.
  • Example II Preparation of CaSR gene The CaSR gene was prepared using the method described in Example 1 of WO07 / 55393. Using the resulting recombinant plasmid, a human CaSR expression plasmid hCaSR / pcDNA3.1 was prepared.
  • Example III Evaluation of CaSR Agonist Activity (CaSR agonist evaluation method) 293E cells (EBNA1-expressing HEK293 cells, ATCC No. CRL-10852) in the presence of 250 ⁇ g / ml G418, DMEM (1.0 g / ml Glucose-containing Dulbecco's modified Eagle medium, Nacalai Tesque containing 10% fetal calf serum). ).
  • the 384 well plate was transferred to FLIPR (Molecular Devices), a compound dissolved in 0.1% BSA-containing assay buffer was added at 12.5 ⁇ l / well, and the fluorescence intensity change was measured for 3 minutes.
  • Compound No. 20 was purchased from Bachem. (EC 50 Calculation method)
  • the difference (RFU (Max-Min)) between the maximum value and the minimum value of fluorescence intensity before and after the addition of the compound was determined by automatic calculation of FLIPR. Calculate the activity rate by defining RFU (Max-Min) at the time of adding the maximum concentration of compound as 100% and RFU (Max-Min) at the time of adding DMSO of the same concentration instead of the compound as 0%.
  • NCI-H716 cells were seeded at 100000 cells / well in a poly-D-lysine-coated 96-well plate and cultured for 2 days. Prior to sample addition, the wells were washed with Hepes buffer (20 mM Hepes, 146 mM NaCl, 5 mM KCl, 1.5 mM CaCl2, 1 mM MgSO4, 5.5 mM D-glucose, 0.2% BSA, pH 7.4). 50 ⁇ l of the sample solution dissolved in the buffer was added and incubated at 37 ° C. for 60 minutes. Compound Nos. Listed in Table 1 as samples. 1 (20 mM), No. 1 7 (20 mM), No. 7 21 (20 mM), no.
  • Human GLP-1 receptor The gene (SEQ ID NO: 1) was incorporated into pcDNA3.1 to prepare a human GLP-1 receptor gene expression plasmid hGLP-1R / pcDNA3.1.
  • a chimeric protein (SEQ ID NO: 2) of human G ⁇ 15 gene and human gustducin gene was incorporated into pcDNA3.1 to prepare G protein expression plasmid G ⁇ 15-gust / pcDNA3.1.
  • HGLP-1R / pcDNA3.1 and G ⁇ 15-gust44 / pcDNA3.1 were cotransfected into HEK293E cells (ATCC No. CRL-10852) using the transfection reagent FuGene6 (Roche Japan).
  • Hepes buffer (20 mM Hepes, 146 mM NaCl, 5 mM KCl, 1.5 mM CaCl 2 , 1 mM MgSO 4 , 5.5 mM D-glucose, 0.02% BSA, pH 7.4)
  • the wells were washed, 300 ⁇ l of a sample solution dissolved in the same buffer was added, and the mixture was incubated at 37 ° C. for 30 minutes.
  • Example VII Suppression of gastric emptying Normal mice (C57BL / 6J, 7 weeks old) fasted for 24 hours are forcibly orally administered the administration medium (distilled water) or the compound of the present invention using a mouse sonde.
  • the administration medium distilled water
  • the compound of the present invention using a mouse sonde.
  • exendin-4 Sigma
  • the Exendin-4 group of mice is also orally administered a 10 ml / kg administration vehicle.
  • a phenol red solution (0.5 mg / ml phenol red + 1.5% methylcellulose + distilled water) was forcibly orally administered at a volume of 5 ml / kg, and 20 minutes later, the stomach was excised from each mouse.
  • the phenol red remaining in is extracted in 0.1N NaOH solution.
  • the amount of phenol red remaining (S) is quantified by measuring the absorbance of the extracted solution at 560 nm.
  • the amount of phenol red extracted by extracting the stomach (C) is defined as 100%, and the ratio of the amount of residual phenol red 20 minutes after drug administration to C is calculated based on the following formula.
  • the amount of gastric emptying The amount of gastric emptying.
  • tail vein blood is collected at 15, 30, 60, 120, and 180 minutes, and the glucose concentration in plasma is measured using a commercially available kit (Roche).
  • a commercially available kit (Roche).
  • the compound of the present invention or a salt thereof, and a medicament thereof exhibit excellent CaSR agonist activity, and further exhibit GLP-1 secretion promoting action and CCK secretion promoting action. It is useful as a preventive or therapeutic agent for diabetes, obesity and the like.

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Abstract

［課題］優れたＣａＳＲアゴニスト作用を有する糖尿病又は肥満病の予防又は治療を可能にする医薬を提供すること。 ［解決手段］上記課題は、明細書記載の一般式（Ｉ）で示される化合物又はその塩を含む組成物により解決される。

Description

糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤
　本発明は、ＣａＳＲアゴニスト活性を有するグルタミン酸誘導体又はその医薬的に許容しうる塩、並びに当該誘導体又はその医薬的に許容しうる塩を有効成分として含有する糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤に関する。
　体内のエネルギー代謝は、膵臓β細胞で作られるインシュリンによってコントロールされている。インシュリンは末梢組織や細胞に作用し、血中から糖分の取込を促進することで血糖値のコントロールに重要な役割を果たしている。しかし、継続的に高カロリー食を摂取し、細胞のインシュリン感受性が低下すると、血糖値の上昇とインシュリンの過剰分泌が同時に進む。その結果、膵臓のβ細胞が疲弊して機能不全となり、糖尿病、肥満症が発症する。
　インシュリンの分泌は種々のホルモンにより調節されており、特に、消化管で産生、分泌されるグルカゴン様ペプチド−１（Ｇｌｕｃａｇｏｎ−ｌｉｋｅ　ｐｅｐｔｉｄｅ−１、ＧＬＰ−１）が重要と考えられている。ＧＬＰ−１は分子量約４０００のペプチドホルモンであり、主に小腸のＬ細胞で産生される。ＧＬＰ−１は、β細胞のインシュリン分泌促進作用、胃嬬動運動と消化吸収の抑制作用、食欲、過食抑制作用、等を有し、糖尿病や肥満症の治療や予防に有効であることが明らかにされてきた。糖尿病や肥満症ではＧＬＰ−１産生能が低下していることが知られており、これら病態においてＧＬＰ−１産生を促進することができれば、糖尿病や肥満症の治療と予防につながるものと期待される。Ｌ細胞におけるＧＬＰ−１の産生は、糖質、脂質、蛋白質など様々な栄養分の摂取により促進されるが、特定の成分のペプチド等の化合物をＧＬＰ−１分泌促進剤として活用した例は稀である。
　コレシストキニン（ＣＣＫ）は、分子量約４０００のペプチドホルモンであり、主に十二指腸と小腸のＬ細胞で産生され、胆汁の分泌と膵臓消化液の分泌を促進する。ＣＣＫの生理作用で特に注目されるのは、食品の胃排出を抑制する作用、膵酵素分泌を促進する作用、満腹感により摂食を抑制する作用、である（非特許文献１、２）。更に、血糖調節ホルモンであるインスリンの分泌を促進する作用も知られている（非特許文献３、４）。ＣＣＫは、このような作用を有することから、糖尿病や肥満症や膵炎等の生活習慣病の治療又は予防に有望と考えられている。
　ＧＬＰ−１およびＣＣＫはペプチドであることから、治療に応用するには、ＧＬＰ−１およびＣＣＫを注射等で血中投与することになるが、毎日の投与の煩雑さと多額の費用から現実的とはいえない。一方で、食品成分のタンパク質、ペプチド、アミノ酸、脂肪酸等によって、小腸粘膜にあるＧＬＰ−１およびＣＣＫ産生細胞から内因性のＧＬＰ−１およびＣＣＫが分泌される機構を利用することが考えられる。すなわち、ＧＬＰ−１およびＣＣＫ分泌促進作用を持った化合物や食品素材の開発が望まれていた。
　一方で、カルシウムセンシング受容体（Ｃａｌｃｉｕｍ　Ｓｅｎｓｉｎｇ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒ：ＣａＳＲ）は、カルシウム受容体とも呼ばれるが、当該受容体シグナルは種々の生体内機能を調節し、ＣａＳＲアゴニスト活性を有する物質は種々の疾患の治療若しくは予防に有用である可能性、及びコク味付与剤として有用である可能性が存在する。特許文献１には、コク味付与物質のスクリーニング方法、及び当該方法により得られたコク味付与物質を含有するコク味付与剤が開示されている。そして、種々の低分子ペプチドにＣａＳＲアゴニスト活性があることが見出され、これにより、甘味、塩味、酸味、苦味、うま味で表される５基本味だけでは表せず、厚み・ひろがり・持続性・まとまりなど上記基本味の周辺の味をも増強した味覚である「コク味」を付与することのできるコク味付与剤が提供できたことが記載されている。
　また、γ−グルタミルアニリド誘導体は、γ−グルタミルトランスフェラーゼの基質となることから、酵素活性測定に用いることができることが古くから知られている（非特許文献５、特許文献２）。しかしながら、本発明の特徴である「カルシウムセンシング受容体（ＣａＳＲ）若しくはＧ蛋白共役受容体」、「糖尿病又は肥満症」、「ＧＬＰ−１分泌促進」、「ＣＣＫ分泌促進」「胃排出抑制」などとの関係について記載する文献はない。
　一方、ＣａＳＲを活性化する化合物としては、Ｃｉｎａｃａｌｃｅｔや類縁の合成低分子化合物の他、グルタチオンをはじめとするγ−グルタミルペプチド誘導体が知られており（特許文献４、非特許文献８、９）、また、これらのうち一部の化合物について、糖尿病又は肥満症の治療剤の用途も知られているが（特許文献５）、本発明のグルタミン酸誘導体とは構造的に異なる化合物である。
　本発明において、特に好ましい３−スルホン酸、３−カルボン酸、３−ニトロ誘導体の内の一部の公知化合物においても、それらの用途の大部分は、γ−グルタミルトランスフェラーゼの酵素活性測定における基質としての用途であり、抗菌剤や抗アレルギー剤としての用途（非特許文献６、特許文献３）や、質量分析用の分析試薬としての用途（非特許文献７）が、他の用途として僅かに知られるのみである。
　従って、ＣａＳＲアゴニスト活性を有するより多くのバリエーション化合物を探索してより優れた糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤を提供することが求められている。
ＷＯ２００７／０５５３９３Ａ１公報 ＷＯ２００７／０５５３９３Ａ１公報 特開平０６−１７２２８７号公報 ＷＯ２００７／０５５３８８Ａ２公報 ＷＯ２００９／１０７６６０号公報
Ｓｃｉｅｎｃｅ，ｖｏｌ．２４７，ｐ．１５８９−１５９１，１９９０ Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．２７６，Ｒ１７０１−Ｒ１７０９，１９９９ Ｄｉａｂｅｔｅｓ，ｖｏｌ．３６，ｐ．１２１２−１２１５，１９８７ Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，ｖｏｌ．６５，ｐ．３９５−４０１，１９８７ Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２２，２０５１（１９７６） Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９６５），８（３），３９８−４００ Ａｎａｌｙｔｉｃａ　Ｃｈｉｍｉｃａ　Ａｃｔａ（２００４），５１９（２），１８１−１８７ Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（２００６），２８１（１３），８８６４−７０ Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，（２０１０），２８５（２），１０１６−２２
　本発明は、ＣａＳＲアゴニスト活性を有する多くのバリエーション化合物を探索し、当該化合物を含有する、糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤を提供することを課題とする。
　本発明者は、ＣａＳＲアゴニスト活性を有する化合物を探索した結果、驚くべきことに、種々のγ−グルタミン酸誘導体ならびにその類縁体（以下、「グルタミン酸誘導体」という。）が優れたＣａＳＲアゴニスト活性を有することを見出した。さらに、見出されたＣａＳＲアゴニスト活性を有するグルタミン酸誘導体又はその医薬的に許容しうる塩が、有用な糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤となりうることを見出し、本発明を完成させた。
　すなわち、本発明は、以下のグルタミン酸誘導体又はその医薬的に許容しうる塩を含有する糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤を提供する；
　〔１〕下記一般式（Ｉ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000014
　（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲノ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していても良いＣ１−６アルキル基、置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシ基又は置換基を有していても良いＣ１−６モノ若しくはジアルキルアミノ基、スルホ基、又は基
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000015
若しくは
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000016
　から選択される基であり、ただし、Ｒ１、Ｒ２、又は、Ｒ３のいずれかは、ニトロ基、スルホ基、又は基
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000017
若しくは
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000018
　から選択される基であり、かつ
　Ｒ６は、水素原子、ヒドロキシル基又は置換基を有していても良いＣ１−６アルキル基であり、
　Ｒ７は、水素原子、又は置換基を有していても良いＣ１−６アルキル基であり、
　Ｘは、メチレン基又は酸素原子であり、
　Ｅは、ヒドロキシル基、置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシ基、置換基を有していても良いメルカプト基、又は、下記基：
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000019
　（式中、Ｚは置換基を有していても良いＣ１−６炭化水素の２価基を示し、Ｅ１は、置換基を有していても良いＣ１−６アシルオキシ基、置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシカルボニルオキシ基、置換基を有していても良いアミノ基、カルボキシル基、置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシカルボニル基、ハロゲン原子、アリール基、ヘテロアリール基、置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシ基、又は、置換基を有していても良いカルバモイル基を示し、Ｅ２は水素原子又はＣ１−６アルキル基を示す。また、ＺとＥ１は一体となって環を形成しても良い））
　で表されるグルタミン酸誘導体又はその医薬的に許容しうる塩を含有する糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤を提供する。
〔１−２〕一般式（Ｉ）において、
　Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲノ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していても良いＣ１−６アルキル基、置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシ基又は置換基を有していても良いＣ１−６モノ若しくはジアルキルアミノ基、スルホ基、又は基
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000020
　若しくは
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000021
　から選択される基であり、ただし、Ｒ１、Ｒ２、又はＲ３のいずれかは、ニトロ基、スルホ基、又は基
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000022
　若しくは
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000023
　から選択される基であり、かつ
　Ｒ６は、水素原子、ヒドロキシル基又は置換基を有していても良いＣ１−６アルキル基であり、
　Ｒ７は、水素原子、又は置換基を有していても良いＣ１−６アルキル基であり、
　Ｘは、メチレン基又は酸素原子であり、
　Ｅは、ヒドロキシル基、置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシ基、置換基を有していても良いメルカプト基、又は、下記基：
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000024
　（式中、Ｚは置換基を有していても良いＣ１−６炭化水素の２価基を示し、Ｅ２は水素原子又はＣ１−６アルキル基を示す。）から選択される、
　〔１〕に記載の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤。
〔２〕一般式（Ｉ）において、
　Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５が、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲノ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していても良いＣ１−６アルキル基、置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシ基又は置換基を有していても良いＣ１−６モノ若しくはジアルキルアミノ基から選択される基であり、
　Ｒ２は、ニトロ基、スルホ基、又は基
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000025
　若しくは
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000026
　から選択される基であり、かつ
　Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素原子又は置換基を有していても良いＣ１−６アルキル基であり、
　Ｘはメチレン基又は酸素原子である、前記〔１〕又は〔１−２〕に記載の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤。
〔３〕一般式（Ｉ）において、
　Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５が、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲノ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していても良いＣ１−３アルキル基、置換基を有していても良いＣ１−３アルコキシ基又は置換基を有していても良いＣ１−３モノ若しくはジアルキルアミノ基から選択される基であり、
　Ｒ２が、ニトロ基、スルホ基、又は基
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000027
　若しくは
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000028
　から選択される基であり、かつ
　Ｒ６及びＲ７が、それぞれ独立して、水素原子又はメチル基である、〔１〕~〔２〕のいずれかに記載の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤。
〔４〕一般式（Ｉ）において、
　Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５が、それぞれ独立して、水素原子、クロロ基若しくはブロモ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、アミノ基、メチル基又はメトキシ基から選択される基であり、
　Ｒ２が、ニトロ基、スルホ基又は基
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000029
　若しくは
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000030
　から選択される基であり、
　Ｒ６が、水素原子又はメチル基であり、
　Ｒ７が水素原子であり、かつ、
　Ｘがメチレン基である、
　前記〔１〕~〔３〕のいずれかに記載の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤。
〔５〕一般式（Ｉ）において、
　Ｒ２がスルホ基、カルボン酸基又はホスホン酸基である、前記〔１〕~〔４〕のいずれかに記載の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤。
〔６〕一般式（Ｉ）において、
　Ｅが、ヒドロキシル基又は置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシ基である、前記〔１〕~〔５〕いずれかに記載の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤を提供する。
〔７〕一般式（Ｉ）において、
　Ｅが、Ｃ１−６のアルコキシ基、又は、下記基：
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000031
（式（ＩＩａ）中、Ｚは置換基を有していても良いＣ１−６炭化水素の２価基を示し、Ｅ１は、置換基を有していても良いＣ１−６アシルオキシ基、置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシカルボニルオキシ基、置換基を有していても良いアミノ基、カルボキシル基、置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシカルボニル基、ハロゲン原子、アリール基、ヘテロアリール基、置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシ基、又は、置換基を有していても良いカルバモイル基を示し、また、ＺとＥ１は一体となって環を形成しても良い）である、前記〔１〕~〔６〕いずれかに記載の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤。
　本発明によれば、優れたＣａＳＲアゴニスト活性を有する種々の化合物を提供すると共に、それらの化合物を含有する糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤を提供することができる。
　以下、本発明について詳述する。
　本明細書において、「Ｃ１−６アルキル基」とは、炭素数１~６の直鎖状および分枝鎖状の脂肪族炭化水素から任意の水素原子を１個除いて誘導される１価の基である。具体的にはメチル、エチル、イソプロピル、ブチル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、２，３−ジメチルプロピル、ヘキシルなどの基が挙げられる。好ましくはＣ１−３アルキル基である。
　「Ｃ１−６アルコキシ基」とはＣ１−６アルキル−Ｏ−を意味する。具体的には、メトキシ、エトキシ、１−プロポキシ、２−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｉ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、１−ペンチルオキシ、２−ペンチルオキシ、３−ペンチルオキシ、２−メチル−１−ブチルオキシ、３−メチル−１−ブチルオキシ、２−メチル−２−ブチルオキシ、３−メチル−２−ブチルオキシ、２，２−ジメチル−１−プロピルオキシ、１−ヘキシルオキシ、２−ヘキシルオキシ及び３−ヘキシルオキシなどの基があげられる。好ましくはＣ１−３アルコキシ基である。
　「ハロゲノ基」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子があげられる。
　「モノ若しくはジＣ１−６アルキルアミノ基」とは、前述のＣ１−６アルキル基により１若しくは２個の水素原子が置換されたアミノ基を示し、具体的に例えば、メチルアミノ、ジメチルアミノ、エチルアミノ、ジエチルアミノなどの基が挙げられる。好ましくは、モノ若しくはジＣ１−３アルキルアミノ基である。
　「Ｃ１−６アシルオキシ基」とは、Ｃ１−６アルキル−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、又はフェニル−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−で示される基を意味する。ここで、Ｃ３−６シクロアルキル基は、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどの基が挙げられる。Ｃ１−６アシルオキシ基としては、アセチルオキシ、プロピオニルオキシ、シクロヘキシルカルボニルオキシ、ベンゾイルオキシ等の基が挙げられる。好ましくは、Ｃ１−６アルキル−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−であり、更に好ましくはＣ１−３アルキル−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−である。
　「Ｃ１−６アルコキシカルボニル基」とは、Ｃ１−６アルキル−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−で示される基を意味し、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル等の基が挙げられる。好ましくは、Ｃ１−３アルコキシカルボニル基である。
　「Ｃ１−６アルコキシカルボニルオキシ基」とは、Ｃ１−６アルキル−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−で示される基を意味し、メトキシカルボニルオキシ、エトキシカルボニルオキシ等の基が挙げられる。好ましくは、Ｃ１−３アルコキシカルボニルオキシ基である。
　「アリール基」とは、フェニル、ナフチルなどの芳香族炭化水素環基を意味する。このましくはフェニル基である。
　「ヘテロアリール基」とは、Ｎ、Ｓ、Ｏから選択されるヘテロ原子を１、２又は３個含有する５員~１０員の芳香族ヘテロ環基であって、該芳香族ヘテロ環としては具体的には、ピリジン、ピリダジン、ピラジン、ピリミジン、チアゾール、イソチアゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、オキサジアゾール、ピラゾール、イミダゾール、フラン、チオフェン、ピロール等の基が挙げられる。好ましくは、ピリジン、イミダゾール、チオフェン、オキサジアゾール、インドール等の基である。好ましくは、５員~６員の芳香族ヘテロ環であって、具体的には、ピリジン、ピリミジン等の基である。
　「Ｃ１−６炭化水素の２価基」とは、炭素数１~６の直鎖状および分枝鎖状であり、二重結合もしくは三重結合を１~数個含んでいてもよい脂肪族炭化水素から任意の水素原子を２個除いて誘導される２価の基を意味する。具体的には、メチレン、エタン−１，１−ジイル、ビニレン、エチニレン、プロパルギル等の基が挙げられる。
　Ｅにおいて、Ｅが式（ＩＩａ）で示されるときに、ＺとＥ１が一体となって形成する「環」とは、Ｚ−Ｅ１を環の一部として含み、環の構成原子としてさらに窒素原子、酸素原子および硫黄原子から選択されるヘテロ原子を１~３個有していてもよい飽和もしくは不飽和の５又は６員環を意味し、さらにベンゼン環と縮合してもよい。好ましくは、環の構成原子として酸素原子を１~３個有していてもよい飽和もしくは不飽和の５又は６員環である。ＺとＥ１が一体となって環を形成する場合のＥとしては、具体的には、例えば以下の基が挙げられる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000032
　なお、前記ＣＯ−Ｅで表される基は、例えば、Ｐｒｏｇ．Ｍｅｄ．５：２１５７−２１６１（１９８５），医薬品の開発（広川書店１９９０年刊）７巻　分子設計ｐ．１６３−１９８、あるいは最新　創薬化学（テクノミック１９９９年刊）下巻　ｐ．２７１−２９８に記載されているように、生体内でカルボキシル基に変換される、プロドラッグ化修飾をうけたカルボキシル基として機能することもできる。
　本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤に含まれる、上記一般式（Ｉ）において、本発明のグルタミン酸誘導体としては、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、好ましくは、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲノ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していても良い炭素数１~３のアルキル基、置換基を有していても良い炭素数１~３のアルコキシ基又は置換基を有していても良い炭素数１~３のモノ若しくはジアルキルアミノ基から選択される基である。また、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５において、Ｒ１、Ｒ２、又はＲ３のいずれか１つはスルホ基、又は基
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000033
若しくは
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000034
　から選択される基であることが好ましい。また、一方で、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、好ましくは、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲノ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していても良いＣ１−３アルキル基、置換基を有していても良いＣ１−３アルコキシ基又は置換基を有していても良いモノ若しくはジＣ１−３アルキルアミノ基から選択される基である。より好ましくは、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して、水素原子、クロロ基若しくはブロモ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、アミノ基、メチル基又はメトキシ基から選択される基である。
　本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤に含まれる、上記一般式（Ｉ）中、Ｒ２は、好ましくは、スルホ基、カルボン酸基又はホスホン酸基である。
　あるいは、Ｒ１又はＲ３のうち、いずれか１つの基は、スルホ基であってもよく、その際、Ｒ４はハロゲノ基であることも好ましい。
　本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤に含まれる、上記一般式（Ｉ）中、Ｒ６及びＲ７は、好ましくは、それぞれ独立して、水素原子又はメチル基である。より好ましくは、Ｒ６は、水素原子又はメチル基であり、Ｒ７は、水素原子である。また、Ｒ６については、ヒドロキシル基も好ましい。
　本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤に含まれる、上記一般式（Ｉ）中、Ｘは、好ましくは、メチレン基又は酸素原子である。
　本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤に含まれる、上記一般式（Ｉ）中、Ｅは、ヒドロキシル基又は置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシ基であることが好ましく、より好ましくは、ヒドロキシル基又はＣ１−６アルコキシ基であり、特に好ましくは、ヒドロキシル基又はＣ１−３アルコキシ基である。
　本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤に含まれる、上記一般式（Ｉ）で表されるグルタミン酸誘導体又はその医薬的に許容しうる塩としては、Ｒ１、Ｒ２、又はＲ３のいずれかは、スルホ基、カルボン酸基又はホスホン酸基であることが好ましい。中でも、Ｒ２は、スルホ基、カルボン酸基又はホスホン酸基であることが好ましく、特にスルホ基が好ましい。
　特に、上記一般式（Ｉ）中、Ｒ２がスルホ基である場合には、Ｒ１が水素原子又はヒドロキシル基であり、Ｒ３が水素原子、クロロ基、ヒドロキシル基、メチル基又はメトキシ基であり、Ｒ４が水素原子、クロロ基又はニトロ基であり、Ｒ５が水素原子、ヒドロキシル基、メチル基又はメトキシ基であり、Ｒ６が水素原子又はメチル基であり、Ｘがメチレン基又は酸素原子であるものが好ましい。上記一般式（Ｉ）中、Ｒ２がスルホ基である場合には、Ｒ１が水素原子又はヒドロキシル基であり、Ｒ３が水素原子、クロロ基又はメチル基であり、Ｒ４が水素原子又はクロロ基であり、Ｒ５が水素原子、ヒドロキシル基又はメチル基であり、Ｒ６が水素原子であり、Ｘがメチレン基又は酸素原子であるものが最も好ましい。
　本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤に含まれる、上記一般式（Ｉ）で表されるグルタミン酸誘導体又はその医薬的に許容しうる塩としては、特に、上記一般式（Ｉ）中、Ｒ２がカルボン酸基である場合には、Ｒ１が水素原子又はヒドロキシル基であり、Ｒ３が水素原子であり、Ｒ４が水素原子又はブロモ基であり、Ｒ５が水素原子であり、Ｒ６が水素原子であり、Ｘがメチレン基であるものが最も好ましい。
　本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤に含まれる、上記一般式（Ｉ）で表されるグルタミン酸誘導体又はその医薬的に許容しうる塩としては、特に、上記一般式（Ｉ）中、Ｒ２が−ＰＯ（ＯＣＨ３）ＯＨ基又は−ＰＯ（ＯＨ）２基で有る場合には、Ｒ１が水素原子であり、Ｒ３が水素原子であり、Ｒ４が水素原子であり、Ｒ５が水素原子であり、Ｒ６が水素原子であり、Ｘがメチレン基又は酸素原子であるものが最も好ましい。
　本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤に含まれる、上記一般式（Ｉ）で表されるグルタミン酸誘導体又はその医薬的に許容しうる塩としては、特に、上記一般式（Ｉ）中、Ｒ２がニトロ基ある場合には、Ｒ１が水素原子であり、Ｒ３が水素原子であり、Ｒ４が水素原子であり、Ｒ５が水素原子であり、Ｒ６が水素原子であり、Ｘがメチレン基であるものが最も好ましい。
　また、本発明の上記一般式（Ｉ）で表されるグルタミン酸誘導体としては、特に、実施例に記載の化合物が好ましく、中でも、化合物１、７、１０、２１、２２、２４、３２、３３、３４、３５及び３７が好ましい。特に、化合物７、１０、２１、２２、２４、３２、３３、３４、３５及び３７が好ましい。
　上記一般式（Ｉ）中に存在するアルキル基、アルコキシ基及びモノ若しくはジアルキルアミノ基は、各々置換基を有していてもよいが、置換基としては、ハロゲン、水酸基、アルコキシ基、アミノ基、モノ若しくはジアルキルアミノ基、カルボキシル基及びスルホ基が挙げられるが、これらに限定されない。また、当該置換基としてのアルコキシ基、モノ若しくはジアルキルアミノ基は、各々、低級アルコキシ基、低級モノ若しくはジアルキルアミノ基であることが好ましい。ここで、低級とは、置換基全体の炭素数が１~３のものを意味する。
　本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤に含まれる、上記一般式（Ｉ）で表されるグルタミン酸誘導体は、その医薬的に許容しうる塩の形態であってもよい。本発明の上記一般式（Ｉ）で表されるグルタミン酸誘導体の医薬的に許容しうる塩としては、可食性の塩が含まれ、例えば、該式中のカルボキシル基、スルホ基等の酸性基に対しては、アンモニウム塩、ナトリウム及びカリウム等のアルカリ金属との塩、カルシウム及びマグネシウム等のアルカリ土類金属との塩、アルミニウム塩、亜鉛塩、トリエチルアミン、エタノールアミン、モルホリン、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン及びジシクロヘキシルアミン等の有機アミンとの塩、アルギニン及びリジン等の塩基性アミノ酸との塩を挙げることができる。該式中に塩基性基が存在する場合の該塩基性基に対しては、塩酸、硫酸、リン酸、硝酸及び臭化水素酸等の無機酸との塩、酢酸、クエン酸、安息香酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、コハク酸、タンニン酸、酪酸、ヒベンズ酸、パモ酸、エナント酸、デカン酸、テオクル酸、サリチル酸、乳酸、シュウ酸、マンデル酸及びリンゴ酸等の有機カルボン酸との塩、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸及びｐ−トルエンスルホン酸等の有機スルホン酸との塩を挙げることができる。
　本明細書において、「ＣａＳＲ」とは、カルシウムセンシング受容体（Ｃａｌｃｉｕｍ　Ｓｅｎｓｉｎｇ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒ）を意味し、７回膜貫通型受容体のクラスＣに属するものであり、カルシウム受容体とも呼ばれる。本明細書において「ＣａＳＲアゴニスト」とは、上記ＣａＳＲに結合し、ＣａＳＲを活性化するものをいい、「ＣａＳＲアゴニスト剤」とは上記ＣａＳＲに結合し、ＣａＳＲを活性化する剤もしくは物質を意味する。また、本明細書において、「ＣａＳＲを活性化する」とは、ＣａＳＲにリガンドが結合し、グアニンヌクレオチド結合タンパク質を活性化して、シグナルを伝達することを意味する。また、ＣａＳＲに結合し、ＣａＳＲを活性化する性質を「ＣａＳＲアゴニスト活性」という。
　上記ＣａＳＲとしては、ＧｅｎＢａｎｋ　Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ　Ｎｏ．ＮＭ＿０００３８８で登録されているヒトＣａＳＲ遺伝子によってコードされるヒトＣａＳＲが好ましく例示できる。尚、ＣａＳＲは、上記配列の遺伝子によってコードされるタンパク質に制限されず、ＣａＳＲ機能を有するタンパク質をコードする限りにおいて、上記配列と６０％以上、好ましくは８０％以上、より好ましくは９０％以上の相同性を有する遺伝子によってコードされるタンパク質であってもよい。なお、ＣａＳＲ機能はこれらの遺伝子を細胞に発現させ、カルシウム添加時の電流の変化や細胞内カルシウムイオン濃度の変化を測定することによって調べることができる。
　上記ＣａＳＲは、その由来は特に制限されず、上記ヒトのＣａＳＲのみならず、マウス、ラット、イヌなどを含むあらゆる動物由来のＣａＳＲが挙げられる。
　上述の如く、ＣａＳＲ活性は、ＣａＳＲ又はその断片を発現した生きた細胞、ＣａＳＲ又はその断片を発現した細胞膜、ＣａＳＲ又はその断片のタンパク質を含むインビトロの系などを利用して確認することができる。
　以下に生きた細胞を用いた一例を示すが、これに限定されるものではない。
　ＣａＳＲは、アフリカツメガエル卵母細胞やハムスター卵巣細胞やヒト胎児腎臓細胞等の培養細胞に発現させる。これは外来遺伝子を保持するプラスミドにＣａＳＲ遺伝子をクリーニングしたものを、プラスミドの状態もしくはそれを鋳型にしたｃＲＮＡを導入することで可能となる。反応の検出には電気生理学的手法や細胞内カルシウム上昇の蛍光指示試薬を用いることができる。
　ＣａＳＲの発現は、初めにカルシウムもしくは特異的活性化剤による応答で確認する。
　５ｍＭ程度の濃度のカルシウムに対して、細胞内電流が観察された卵母細胞もしくは蛍光指示試薬の蛍光が観察された培養細胞を使用する。カルシウムの濃度を変えて濃度依存性を測定する。次に、被検物質を１μＭ~１ｍＭ程度に調製し、卵母細胞もしくは培養細胞に添加し、上記被検物質存在下でのＣａＳＲ活性を測定することで、上記被検物質のＣａＳＲアゴニスト活性を測定する。
　ＣａＳＲは様々な組織で発現しており、様々な生理作用を担っている。例えば、ＣａＳＲは、カルシウム受容体活性化を有するペプチドや低分子化合物が腸管由来のＳＴＣ−１細胞およびＧＬＵＴａｇ細胞のＧＬＰ−１およびＣＣＫの分泌を促進することが示されている（ＷＯ２００９／１１２２１）。このため、ＣａＳＲアゴニスト作用を有する化合物は、糖尿病（Ｔｈｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１９９９年、第２７４巻、ｐ．２０５６１−２０５６８及びＴｈｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２０００年、第２７５巻、ｐ．１８７７７−１８７８４）、肥満症の予防又は治療剤としての有用性が示されている。実際に、本発明の化合物は、ＧＬＰ−１およびＣＣＫの分泌促進作用を有することが確認されており（後述の試験例参照）、糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤として用いることができる。また、本発明の化合物は、ＧＬＰ−１又はＣＣＫの分泌促進剤として用いることもできる。さらに、本発明の化合物は、胃排出抑制剤として用いることもでき、胃排出抑制作用に基づき、摂食抑制剤として用いることもできる。
　本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤は、上記一般式（Ｉ）で表されるグルタミン酸誘導体に包含されるあらゆるグルタミン酸誘導体又はその医薬的に許容しうる塩を単独で又は任意の２種又は３種以上を組み合わせて含有してもよく、さらに、医薬的、生理学的、実験的、食品的に許容しうるあらゆる固体又は液体の担体、添加物等を含有させてもよい。
　本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤の適用方法としては、特に制限されず、経口投与あるいは注射等を利用したあらゆる侵襲的又は非侵襲的投与が利用可能であり、坐薬投与あるいは経皮投与を採用してもよい。有効成分を経口、注射などの投与方法に適した固体又は液体の医薬用担体と共に、慣用の医薬製剤の形態で投与することが出来る。このような製剤としては、例えば、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等の固形剤の形態、溶液剤、懸濁剤、乳剤等の液剤の形態、凍結乾燥剤等の形態が挙げられる。これらの製剤は製剤上の常套手段により調製することができる。さらに、本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤には、医薬的、生理学的に許容しうるあらゆる固体又は液体の担体、添加物等を任意に添加してもよい。
　上記担体としては、例えば、グルコース、乳糖、ショ糖、澱粉、マンニトール、デキストリン、脂肪酸グリセリド、ポリエチレングリコール、ヒドロキシエチルデンプン、エチレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ゼラチン、アルブミン、アミノ酸、水、生理食塩水等が挙げられる。また、必要に応じて、本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤に、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、結合剤、等張化剤等の慣用の添加剤を適宜添加することもできる。
　上記添加物としては、目的に応じて当該目的に対して通常用いられるものであれば特に制限されないが、具体的には、例えば、香料、糖類、甘味料、食物繊維類、ビタミン類、グルタミン酸ナトリウム（ＭＳＧ）などのアミノ酸類、イノシン一リン酸（ＩＭＰ）などの核酸類、塩化ナトリウムなどの無機塩類、水などが挙げられる。
　本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤は、乾燥粉末、ペースト、溶液などの物性に制限なしにあらゆる形態で用いることができる。また、本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤は、医薬、医薬部外品、食品等に用いることができる。
　本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤の使用量は、それぞれの目的に応じて適宜調節されるが、例えば、経口投与で対象に投与される場合には、式（Ｉ）で表されるグルタミン酸誘導体又はその医薬的に許容しうる塩の合計量として、１回の投与において体重１ｋｇあたり、０．０１ｍｇ~１０ｇが好ましく、体重１ｋｇあたり、０．１ｍｇ~１ｇがより好ましい。
　投与回数は特に制限されず、１日あたり１回~数回投与することができる。
　また、本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤を、食品又は試薬に用いる場合には、１処方あたり０．０００００１ｇ~１０ｇが好ましく、１処方あたり０．００００１ｇ~１ｇがより好ましい。
　本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤中の式（Ｉ）で表されるグルタミン酸誘導体又はその医薬的に許容しうる塩の含有量は、上記使用量に適したものであれば特に制限されず、好ましくは、乾燥重量あたり０．０００００１質量％~９９．９９９９質量％、より好ましくは、０．００００１質量％~９９．９９９質量％、特に好ましくは、０．０００１質量％~９９．９９質量％である。
　本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤は、さらに、ＣａＳＲアゴニスト活性を有する既知の物質を１種又は２種以上含むものであってもよい。
　上記のＣａＳＲアゴニスト活性を有する既知の物質としては、カルシウム及びガドリニウム等のカチオン、ポリアルギニン、ポリリジン等の塩基性ペプチド、プトレッシン、スペルミン、スペルミジン等のポリアミン、プロタミン等のタンパク質、フェニルアラニン等のアミノ酸、グルタチオン等のペプチド、シナカルセットの類縁化合物等が挙げられるが、これらに限定されない。
　また、本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤は、ＣａＳＲアゴニスト活性を有する既知の物質以外にも、その目的に応じて、あらゆる既知の物質を含むものであってもよい。
　本発明の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤は、また、ＧＬＰ−１又はＣＣＫの分泌が関与する疾患、糖尿病や肥満症の治療や予防に効果を有する飲食品あるいはサプリメントとして用いることもできる。例えば、容器や包装に糖尿病もしくは肥満症に対する治療効果や予防効果がある旨を表示した飲食品とすることができる。飲食品の形態としては特に制限されず、本発明の化合物を配合すること以外は、通常の食品と同様の材料を用いて、同様の製法で製造することができる。食品としては、例えば、調味料；ジュース、牛乳等の飲料；菓子；ゼリー；健康食品；農産物加工品；牛乳、チーズ等の畜産物加工品；食品補助剤等が挙げられる。
　本発明の上記式（Ｉ）で表されるグルタミン酸誘導体若しくはその医薬的に許容しうる塩を含有する糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤を、飲食品に添加する際の形態としては、乾燥粉末、ペースト、溶液などの物性に制限はない。
　（一般式（Ｉ）で表されるグルタミン酸誘導体の代表的な合成法）
　以下に本発明化合物の代表的な製造法を説明する。
　なお、以下の製造法において、官能基の種類によっては、当該官能基を原料ないし中間体の段階で適当な保護基、すなわち容易に当該官能基に転化可能な基に置き換えておくことが製造技術上効果的な場合がある。しかるのち、必要に応じて保護基を除去し、所望の化合物を得ることができる。このような官能基としては例えばアミノ基、水酸基、カルボキシル基等を挙げることができ、それらの保護基としては例えば、アミノ基の保護基としてｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）やベンジルオキシカルボニル（Ｚ又はＣｂｚ）、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）など、カルボキシル基の保護基としてｔ−ブチル（ｔＢｕ）やベンジル（Ｂｎ又はＢｚｌ）など、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　第３版（Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎ、Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ著、ＪＯＨＮ　ＷＩＬＬＹ　＆　ＳＯＮＳ，ＩＮＣ．発行）に記載の保護基等を挙げることができ、これらを反応条件に応じて適宜用いればよい。保護基の導入および脱保護は当該参考書記載の方法を適時適応できる。例えば下記製造法１，２中に記したＰｒｏｔ１，Ｐｒｏｔ２の様に記した官能基が保護基として用いられている事を示すが、これに限定されるものではない。
（製造法１）
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000035
　製造法１は、化合物（ＩＩ’）と化合物（ＩＩＩ’）を用いて、カルボン酸とアミンの縮合反応により化合物（Ｉ’）を得る反応である。
　本反応は化合物（ＩＩ’）とアミン誘導体（ＩＩＩ’）とを当量或いは一方を過剰量用いて、縮合剤の存在下、常法に従って行えばよい。縮合剤としては、例えばＮ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ），１−エチル−３−［３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）プロピル］カルボジイミド（ＥＤＣＩ又はＷＳＣ）、Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム　ヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ），カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）４−メチルモルホリニウム　クロリド（ＤＭＴＭＭ）、２−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム　ヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）等を好適に用いることができる。これら縮合剤は、カルボン酸に対して当量、或いは過剰量用いて行われる。溶媒としては、反応に関与しない溶媒、例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジオキサン、水、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジクロロメタン、ジクロロエタン、ジエチルエーテル、クロロホルム、ジメトキシエタン（ＤＭＥ）、酢酸エチル、トルエン、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）やこれらの混合溶媒などが用いることができるが、原料や縮合剤の種類などにより適宜選択するのが好ましい。トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）、Ｎ−メチルモルホリン、ピリジン、４−ジメチルアミノピリジンなどの塩基存在下で、あるいはこれら塩基を溶媒として反応させることで反応が円滑に進行する場合がある。前記反応は通常、冷却~室温にて行うが、縮合反応の条件によっては加熱下で実施する方が好ましい場合がある。
　また、化合物（Ｉ’）は、カルボン酸を活性誘導体に導いた後にアミンと縮合させる方法によっても製造できる。この場合、化合物（ＩＩ’）とアミン誘導体（ＩＩＩ’）とを当量或いは一方を過剰量用いて反応を行う。カルボン酸の活性誘導体としては、ｐ−ニトロフェノール等のフェノール系化合物、又は１−ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）もしくは７−アザ−１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）等のＮ−ヒドロシキアミン系の化合物と反応させて得られる活性エステル、炭酸モノアルキルエステル、有機酸と反応させて得られる混合酸無水物、塩化ジフェニルホスホリルおよびＮ−メチルモルホリンを反応させて得られるリン酸系混合酸無水物、エステルをヒドラジン及び亜硝酸アルキルと逐次反応させて得られる酸アジド、酸塩化物もしくは酸フッ化物等の酸ハロゲン化物、並びに対象型酸無水物等が挙げられる。
　カルボン酸の活性誘導体を合成する際の活性化試薬は化合物（ＩＩ’）に対して当量又は、過剰量用いて実施される。この場合の反応条件以外でも、アミド結合を形成する反応であれば、いずれの反応も用いることができる。
　また、式（Ｉ）で表される本発明のグルタミン酸誘導体において、Ｅがヒドロキシル基以外を表す場合は、例えば、保護された化合物（Ｉ’）において、Ｐｒｏｔ１を選択的に除去する反応を用いること等で製造することが出来る。又はＰｒｏｔ１，Ｐｒｏｔ２を脱保護した後、例えば、メタノールのようなアルコール溶媒中、塩化水素ガスのような酸触媒存在下、エステル化を行う方法や、Ｐｒｏｔ２のみを選択的に除去した後、上記と同様に縮合剤の存在下において、アルコールを作用させることでエステル結合を生成し後にＰｒｏｔ１を必要に応じて除去する方法を用いることも出来る。
（製造法２）
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000036
　化合物（ＩＩ′′）から中間体を得て、得られた中間体に化合物（ＩＩＩ’）を作用させることで化合物（Ｉ′’）を得る反応である。
　本反応は化合物（ＩＩ′’）と例えば当量あるいは小過剰のＮ，Ｎ−カルボニルジイミダゾールやホスゲン、トリホスゲン、クロロ蟻酸ベンジル、炭酸メチルなど試薬を、作用させることで中間体を得ることができる。この際反応に関与しない溶媒、例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジオキサン、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジクロロメタン、ジクロロエタン、ジエチルエーテル、クロロホルム、ジメトキシエタン（ＤＭＥ）、酢酸エチル、トルエン、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）やこれらの混合溶媒などを用いて、実施することが好ましい。また本反応は、通常冷却下~室温にて行うが、試薬および化合物の種類により加熱する事が望ましい場合がある。得られた中間体は、必要に応じて好ましい溶媒へ置換する工程を経つつ、当量又は中間体か化合物（ＩＩＩ′）のどちらかを小過剰になるように、反応を行う。本反応は、例えばトリエチルアミンの様な有機塩基、炭酸カリウムなどの無機塩基を共存させることも可能である。本反応は、通常冷却下~１００℃程度の加熱条件下で反応を行うが、化合物の種類によっては、更なる加熱条件が必要な場合がある。上記の方法以外にも、カルバマートを形成する反応であれば、いずれの反応も用いることができる。
　式（Ｉ）で表される本発明のグルタミン酸誘導体において、Ｅがヒドロキシル基以外を示す場合は、例えば保護された化合物（Ｉ′’）において、Ｐｒｏｔ１を選択的に除去する反応を用いること等で製造することが出来る。又はＰｒｏｔ１，Ｐｒｏｔ２を脱保護した後、例えば、メタノールのようなアルコール溶媒中若しくはアルコール存在下、又は、塩化水素ガスのような酸触媒存在下でエステル化を行う方法や、Ｐｒｏｔ２のみを選択的に除去した後、上記と同様に縮合剤の存在下において、アルコールを作用させることでエステル結合を生成し後にＰｒｏｔ１を必要に応じて除去する方法を用いることも出来る。
　（製造法３）
　このようにして製造された本発明化合物は、遊離のまま或いはその塩として、当該分野における慣用の化学操作、例えば、抽出、沈殿、分画クロマトグラフィー、分別結晶化、再結晶等により単離、精製することができる。また、当該化合物の塩は、遊離の本発明化合物を通常の造塩反応に付すことにより製造できる。
　また、本発明化合物が不斉炭素を有する場合には光学異性体が存在する。これら光学異性体は、光学活性な酸もしくは塩基とのジアステレオマー塩に導いた後、分別結晶化する手法、カラムクロマトグラフィー等の常法により光学分割する手法、或いは光学活性な原料化合物を用いて合成する手法等により製造することができる。
　なお、式（Ｉ）において、Ｅ−ＣＯ−及びアミノ基の結合する炭素原子の立体は、Ｓ配置であることが好ましい。
　以下に、実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明するが、これらは本発明を限定するものではない。
本明細書において、常法とは、分液操作、乾燥、濾過、濃縮に代表される化学操作として一般的に用いられる手法を言う。
　本明細書において、精製工程Ａとは、常法を用いて得られた粗製物をオクタドデシル基化学結合型シリカゲル（ＯＤＳ）を充填剤とする逆相高速液体クロマトグラフィーに付し、トリフルオロ酢酸を０．１％含有する（ｖ／ｖ）、水とアセトニトリルの混合溶液で溶出し、目的のフラクションを濃縮、凍結乾燥する方法をいう。
　以下に、表１に示す代表的な本発明の化合物の合成について、実施例を挙げてさらに詳しく説明するが、本発明の化合物はこれらの実施例に限定されるものではない。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000037
 実施例Ｉ
（合成例１）　Ｎ５−（３−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成　（化合物Ｎｏ．１）
　Ｂｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（７５ｍｇ，０．２４７ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１１２ｍｇ，０．２９６ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（４１ｍｇ，０．２９６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ　１ｍｌに溶解し、トリエチルアミン（５２μｌ）を加え、室温で１０分撹拌した。そこへ、３−スルホアニリン（４３ｍｇ，０．２４７ｍｍｏｌ）を加え、室温で終夜撹拌した。溶媒を留去した後、精製工程Ａを用いて精製を行い、得られた中間体をトリフルオロ酢酸２ｍｌに溶解し、３時間室温で撹拌した後、溶媒を留去した。生成物を精製工程Ａを用いて精製し、表題化合物を得た。
　収量　３０．８ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）　収率４１％
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，３００ＭＨｚ）：δ　７．８９（ｓ，１Ｈ），７．６７−７．６２（ｍ，２Ｈ），７．５８−７．５３（ｍ，１Ｈ），３．９９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），２．７３−２．６６（ｍ，２Ｈ），２．３３−２．２５（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３０３［Ｍ＋Ｈ］＋，３０１［Ｍ−Ｈ］−
　（合成例２）　Ｎ５−（４−メトキシ−３−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成　（化合物Ｎｏ．２）
　合成例１の３−スルホアニリンの代わりに、ｐ−アニシジン−３−スルホン酸を用い、同様に実施することで表題化合物を得た。
　収量２４．７ｍｇ　収率２３％
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，３００ＭＨｚ）：δ　７．９６（ｓ，１Ｈ），７．５３（ｄ，１Ｈ），７．０４（ｄ，１Ｈ），３．９８（ｔ，１Ｈ），３．７８（ｓ，３Ｈ），２．６３−２．５２（ｍ，２Ｈ），２．３０−２．０５（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３３３［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例３）　Ｎ５−（２−メトキシ−５−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成　（化合物Ｎｏ．３）
　合成例１の３−スルホアニリンの代わりに、ｏ−アニシジン−５−スルホン酸を用い、同様に実施することで表題化合物を得た。
　収量７５．７ｍｇ　収率６９％
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，３００ＭＨｚ）：δ　７．６５（ｓ，１Ｈ），７．４５（ｄ，１Ｈ），７．０４（ｄ，１Ｈ），３．９６（ｔ，１Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），２．８０−２．５０（ｍ，２Ｈ），２．２５−２．１０（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３３３［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例４）　Ｎ５−（２，４−ジメチル−５−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成　（化合物Ｎｏ．４）
　合成例１の３−スルホアニリンの代わりに、２，４−ジメチルアニリン−５−スルホン酸ナトリウム塩を用い、同様に実施することで表題化合物を得た。
　収量７０．３ｍｇ　収率６４％
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，３００ＭＨｚ）：δ　７．５５（ｓ，１Ｈ），７．１７（ｓ，１Ｈ），３．９７（ｔ，１Ｈ），２．６７−２．５５（ｍ，２Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ），２．３０−２．１５（ｍ，２Ｈ），２．０８（ｓ，３Ｈ）
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３３１［Ｍ＋Ｈ］＋
　合成例５）　Ｎ５−（４−メチル−３−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成　（化合物Ｎｏ．５）
　合成例１の３−スルホアニリンの代わりに、５−アミノ−２−メチルベンゼン−１−スルホン酸を用い、同様に実施することで表題化合物を得た。
　収量７９．３ｍｇ　収率７６％
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，３００ＭＨｚ）：δ　７．７６（ｓ，１Ｈ），７．３４（ｄ，１Ｈ），７．２４（ｄ，１Ｈ），３．９３（ｔ，１Ｈ），２．６０−２．４５（ｍ，２Ｈ），２．４４（ｓ，３Ｈ），２．３０−２．００（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３１７［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例６）　Ｎ５−（２−ヒドロキシ−３−ニトロ−５−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成　（化合物Ｎｏ．６）
　合成例１の３−スルホアニリンの代わりに、３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−ニトロベンゼンスルホン酸を用い、同様に実施することで表題化合物を得た。
　収量７３．８ｍｇ　収率６２％
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，３００ＭＨｚ）：δ　８．３７（ｓ，１Ｈ），８．２４（ｓ，１Ｈ），３．９４（ｔ，１Ｈ），２．６４−２．７０（ｍ，２Ｈ），２．０９−２．２３（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３６４［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例７）　Ｎ５−（５−クロロ−２−ヒドロキシ−３−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成　（化合物Ｎｏ．７）
　Ｂｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（１００ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ　１水和物（６５．６ｍｇ，０．４３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ　２ｍｌに溶解し、トリエチルアミン（０．１３７ｍｌ）を加えた。０℃に冷却した後、ジイソプロピルカルボジイミド（６６．４μｌ，０．４３ｍｍｏｌ）、２−アミノ−４−クロロフェノール−６−スルホン酸（７３．７ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を加え、室温で終夜撹拌した。溶媒を留去した後、精製工程Ａを用いて精製し、得られた中間体をＴＦＡ　２ｍｌに溶解し、室温にて２時間撹拌した。塩化メチレン２ｍｌを加え、析出物を濾取することで、表題化合物を得た。
　収量　１６．８ｍｇ　収率　１４．４％
　１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，３００ＭＨｚ）：δ　１１．０７（ｓ，１Ｈ），９．３９（ｓ，１Ｈ），８．２０−８．４０（ｂｒ，２Ｈ），８．０２（ｓ，１Ｈ），７．１４（ｓ，１Ｈ），３．９５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），２．６４（ｍ，２Ｈ），２．０７（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３５３［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例８）　Ｎ５−（２−ヒドロキシ−５−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成　（化合物Ｎｏ．８）
　合成例７の２−アミノ−４−クロロフェノール−６−スルホン酸の代わりに、２−アミノフェノール４−スルホン酸を用い、同様に実施することで表題化合物を得た。
　収量　３１．５ｍｇ　収率　３０％
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，３００ＭＨｚ）：δ　７．７７（ｓ，１Ｈ），７．４４（ｄ，１Ｈ），６．９４（ｄ，１Ｈ），４．００−３．８５（ｍ，１Ｈ），２．６５−２．５７（ｍ，２Ｈ），２．１９−２．１０（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３１９［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例９）　Ｎ５−（４−クロロ−３−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成　（化合物Ｎｏ．９）
　合成例７の２−アミノ−４−クロロフェノール−６−スルホン酸の代わりに、４−クロロアニリン−３−スルホン酸（６８．４ｍｇ）を用い、同様に実施することで表題化合物を得た。
　収量　４７．８ｍｇ　収率　４３％
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，３００ＭＨｚ）：δ　７．９１（ｓ，１Ｈ），７．５０−７．４５（ｍ，２Ｈ），４．００−３．８５（ｍ，１Ｈ），２．６０−２．４０（ｍ，１Ｈ），２．２５−２．１５（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３３７［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例１０）　Ｎ５−（２−ヒドロキシ−３−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成　（化合物Ｎｏ．１０）
　Ｚ−Ｇｌｕ−ＯＢｎ（３７１ｍｇ，１ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（１ｍｌ）に溶解し、ＣＤＩ（１８０ｍｇ，１．１ｍｍｏｌ）を加えて３０分室温で撹拌した。そこへ２−アミノ−４−クロロフェノール−６−スルホン酸（２２３ｍｇ，１ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（１ｍｌ）を加え、終夜室温で撹拌した。溶媒を留去した後、精製工程Ａを用いて精製を行った。得られた中間体を、メタノール−水混合溶媒に溶解し、触媒量のＰｄ／Ｃを加え、水素雰囲気下、終夜室温で撹拌した。触媒を濾別した後、溶媒を留去し、精製工程Ａを用いて精製し、表題化合物を得た。
　収量１２０ｍｇ（０．４０ｍｍｏｌ）　収率４０％
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，３００ＭＨｚ）：δ　７．６７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），７．６２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．０７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，８．２Ｈｚ），３．９２−３．９７（ｍ，１Ｈ），２．５９−２．６４（ｍ，２Ｈ），２．２５−２．２０（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３０３［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例１１）　Ｎ５−（４−ヒドロキシ−３−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成　（化合物Ｎｏ．１１）
　Ｂｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（１００ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（１ｍｌ）およびＴＨＦ（１ｍｌ）に溶解し、ＣＤＩ（６５ｍｇ，１．１ｍｍｏｌ）を加えて３０分室温で撹拌した。そこへ５−アミノ−２−ヒドロキシベンゼンスルホン酸ナトリウム（７７ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）を加え、終夜室温で撹拌した。溶媒を留去した後、精製工程Ａを用いて精製を行った。得られた中間体を、ＴＦＡ　２ｍｌに溶解し，３時間室温で撹拌した後、溶媒を留去し、精製工程Ａを用いて精製し、表題化合物を得た。
　収量２ｍｇ
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３１９［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例１２）　Ｎ５−メチル−Ｎ５−（３−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成　（化合物Ｎｏ．１２）工程１　３−［（２−ニトロフェニル）スルホニル］アミノベンゼンスルホン酸の合成
　３−アミノベンゼンスルホン酸（３４６．３ｍｇ，２ｍｍｏｌ）を塩化メチレン２．５ｍｌに件濁させ、０℃に冷却した後、２−ニトロフェニルベンゼンスルホニルクロリド（４４３．２ｍｇ，２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎジイソプロピルエチルアミン（６９７μｌ，４ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１時間撹拌した後、溶媒を留去し、精製工程Ａを用いて精製し、表題化合物を得た。
　収量　４６０ｍｇ（１．２９ｍｍｏｌ）　収率　６４％
　１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，３００ＭＨｚ）：δ　７．０２−７．８３（ｍ，８Ｈ）
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３５９［Ｍ＋Ｈ］＋
　工程２　Ｎ５−メチル−Ｎ５−（３−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成
　工程１で得られた化合物（２３０ｍｇ，０．６５ｍｍｏｌ）に炭酸カリウム（１７７ｍｇ，１，２８ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（２ｍｌ）、ＭｅＩ（６０μｌ）を加え４０℃で６時間撹拌した。炭酸カリウム（４４．３ｍｇ）、ＭｅＩ（４０μＬ）を追加し、終夜撹拌した。溶媒を留去した後、精製工程Ａを用い、３−｛メチル［（２−ニトロフェニル）スルホニル］アミノ｝ベンゼンスルホン酸の粗生成物（１６０ｍｇ）を得た。この粗生成物（１４４ｍｇ，０．３９ｍｍｌ）をＤＭＦ（３ｍｌ）に溶解し、炭酸セシウム（１２６ｍｇ，０．３９ｍｍｏｌ）、チオフェノール（４０μｌ，０．３９ｍｍｏｌ）を加え、５０℃で終夜撹拌した。溶媒を留去した後、精製工程Ａを用いて３−（メチルアミノ）ベンゼンスルホン酸の粗生成物（８４．１ｍｇ）を得た。
　合成例１の３−スルホアニリンの代わりに、３−（メチルアミノ）ベンゼンスルホン酸の粗生成物を用い、同様に実施することで表題化合物を得た。
　収量　５．１４ｍｇ
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３１７［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例１３）　Ｏ−｛［（３−スルホフェニル）アミノ］カルボニル｝−Ｌ−セリンの合成　（化合物Ｎｏ．１３）
　Ｂｏｃ−Ｓｅｒ−ＯｔＢｕ（２００ｍｇ，０．７７ｍｍｏｌ）を塩化メチレン３ｍｌに溶解し、０℃に冷却した。Ｎ，Ｎ′−カルボニルジイミダゾール（１２４ｍｇ，０．７７ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。溶媒を留去し、３−アミノベンゼンスルホン酸（１３２．６ｍｇ，０．７７ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ　２ｍｌ，ジイソプロピルエチルアミン０．４ｍｌを加え７０℃で終夜撹拌した。溶媒を留去した後、精製工程Ａを用いて、精製し、中間体を得た。得られた中間体をＴＦＡ１ｍｌに溶解し、室温で２時間撹拌した。溶媒を留去した後、精製工程Ａを用いて精製し、表題化合物を得た。
　収量１．３９ｍｇ　収率０．６％
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３０４［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例１４）　３−（Ｌ−γ−グルタミルアミノ）安息香酸の合成　（化合物Ｎｏ．１４）
　Ｂｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（１００ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１５０．４ｍｇ，０．４０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ　２ｍｌに溶解し、トリエチルアミン（６８．５μｌ）を加え、１０分撹拌した。そこへ、３−アミノ安息香酸エチル（４９．２ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）を加え、終夜撹拌した。酢酸エチル、１Ｍ　水酸化ナトリウム水溶液を用いて分液操作をした後、有機層を１Ｍ　水酸化ナトリウム水溶液、１Ｍ塩酸、飽和食塩水で順次洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を留去した。得られた残渣をＴＨＦ　２ｍｌ、エタノール１ｍｌ、水１ｍｌに溶解し、水酸化リチウム１水和物（１３．５ｍｇ，０．３２ｍｍｏｌ）を加えた。５時間撹拌した後、水酸化リチウムを４．５ｍｇ加え、終夜撹拌した。反応終了を確認した後、１Ｍ塩酸で反応液をｐＨ＝２に調整し、溶媒を留去した。得られた残渣にＴＦＡ　３ｍｌを加え、室温で５時間撹拌した。溶媒を留去した後、精製工程Ａを用いて精製し、表題化合物を得た。
　収量５４．１７ｍｇ　収率６１％
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，３００ＭＨｚ）：δ　７．９２（ｓ，１Ｈ），７．７２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），７．５５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９Ｈｚ），７．４２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５，９．０Ｈｚ），４．００−３．８０（ｍ，１Ｈ），２．５８−２．５４（ｍ，２Ｈ），２．２０−２．１５（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：２６７［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例１５）　３−（Ｌ−γ−グルタミルアミノ）−２−ヒドロキシ安息香酸の合成　（化合物Ｎｏ．１５）
　合成例１４の３−アミノ安息香酸エチルの代わりに、３−アミノ−２−ヒドロキシ安息香酸エチルエステルを用い、同様に実施することで表題化合物を得た。
　収量３４．１ｍｇ　収率３７％
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，３００ＭＨｚ）：δ　７．７０−７．６０（ｍ，２Ｈ），６．８７（ｔ，１Ｈ），３．９１（ｔ，１Ｈ），２．６３−２．５５（ｍ，２Ｈ），２．２０−２．１０（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：２８３［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例１６）　３−ブロモ−５−（Ｌ−γ−グルタミルアミノ）安息香酸の合成　（化合物Ｎｏ．１６）
　合成例１４の３−アミノ安息香酸エチルの代わりに、３−アミノ−５−ブロモ安息香酸メチルを用い、同様に実施することで表題化合物を得た。
　収量　１６．８ｍｇ
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，３００ＭＨｚ）：δ　７．８０−７．８５（ｓ＊２，２Ｈ），３．７５−３．９０（ｍ，１Ｈ），２．４５−２．５５（ｍ，２Ｈ），２．１０−２．２０（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３４５，３４７［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例１７）　Ｎ５−｛３−［ヒドロキシ（メトキシ）ホスホリル］フェニル｝−Ｌ−グルタミンの合成　（化合物Ｎｏ．１７）
　１−ヨード−３−ニトロベンゼン（２４９ｍｇ，１ｍｍｏｌ）をアセトニトリル１０ｍｌに溶解し、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（５８ｍｇ，３ｍｏｌ％）、亜リン酸ジメチル（０．１３８ｍｌ，１．５ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．２８ｍｌ，２ｍｍｏｌ）を加え、７０℃で終夜撹拌した。溶媒を留去した後、精製工程Ａで精製し、（３−ニトロフェニル）ホスホン酸モノメチルエステル、およびジメチルエステルの混合物を（０．２２２ｇ）を得た。得られたホスホン酸モノメチルをメタノール１０ｍｌに溶解し、触媒量のＰｄ／Ｃを加え、水素雰囲気下終夜撹拌した。触媒を濾別した後、溶媒を留去し（３−アミノフェニル）ホスホン酸モノメチルエステルおよびジメチルエステルの混合物を得た。
　Ｂｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（３０３ｍｇ，１ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（１３６ｍｇ，１ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（３８０ｍｇ，１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ　１ｍｌに溶解し、トリエチルアミン（０．２７８ｍｌ）を加えた。１０分後、（３−アミノフェニル）ホスホン酸モノメチルエステルおよびジメチルエステルの混合物を加え、室温で終夜撹拌した。
　溶媒を留去したのち、精製工程Ａを用い精製し、表題化合物を得た。
　収量１１．５ｍｇ
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，３００ＭＨｚ）：δ　７．５０−７．９０（ｍ，４Ｈ），４．１４−４．１８（ｍ，１Ｈ），３．５６（ｓ，１．５Ｈ），３．５２（ｓ，１．５Ｈ），２．６８−２．７４（ｍ，２Ｈ），２．２８０−２．３７（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３１７［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例１８）　Ｎ５−（３−ホスホノフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成　（化合物Ｎｏ．１８）
　合成例１７で中間体として得られる（３−ニトロフェニル）ホスホン酸モノメチルエステルおよびジメチルエステルの混合物（１７０ｍｇ）に、ＤＭＦ４ｍｌ、トリメチルシリルブロミド（１ｍｌ）を加え、６０℃で２時間撹拌した。溶媒を留去した後、水、メタノール混合溶媒に溶解し、触媒量のＰｄ／Ｃを加え水素雰囲気下で終夜撹拌した。触媒を濾別、溶媒を留去して（３−アミノフェニル）ホスホン酸の粗生成物を得た。
　Ｂｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（２３６ｍｇ，０．７８ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（１２７ｍｇ，０．９３６ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（３５６ｍｇ，０．９３６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ　１ｍｌに溶解し、トリエチルアミン（０．２１ｍｌ）を加えた。１０分後、（３−アミノフェニル）ホスホン酸の粗生成物を加え、室温で終夜撹拌した。溶媒を留去したのち、精製工程Ａを用い精製し、表題化合物を得た。
　収量２．５ｍｇ
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３０３［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例１９）　Ｎ５−（３−ニトロフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成　（化合物Ｎｏ．１９）
　合成例１の３−スルホアニリンの代わりに、３−ニトロアニリンを用い、同様に実施することで表題化合物を得た。
　収量　６１．６ｍｇ　収率　９３％
　１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，３００ＭＨｚ）：δ　１０．５（ｓ，１Ｈ），８．６６（ｓ，１Ｈ），７．８６−７．９３（ｍ，２Ｈ），７．６１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），３．９９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），２．５０−２．７０（ｍ，２Ｈ），２．０６−２．１６（ｍ，２Ｈ）ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：２６８［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例２０）Ｎ−γ−グルタミル−アニリン（化合物Ｎｏ．２０）
　化合物Ｎｏ．２０はＢａｃｈｅｍ社より購入したものを用いた。
　以下に、表２に示す他の代表的な本発明の化合物の合成について、実施例を挙げてさらに詳しく説明するが、本発明の化合物はこれらの実施例に限定されるものではない。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000038
 　（合成例２１）
　Ｎ５−（３−クロロ−４−メチル−５−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成（化合物Ｎｏ．２１）
　Ｂｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ塩酸塩３０３ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、ＣＤＩ　１８０ｍｇ（１．１ｍｍｏｌ）に塩化メチレン１ｍｌ、ＴＨＦ　１ｍｌを加え、５−アミノ−３−クロロ−２−メチルベンゼンスルホン酸２２１ｍｇを加え、室温で終夜撹拌した。精製工程Ａを用いて精製し、目的物の保護体を得た。得られた保護体をトリフルオロ酢酸５ｍｌに溶解し、２時間撹拌した。溶媒を留去したのち、精製工程Ａを用いて精製し、表題化合物を得た。
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：７．７１（ｄ，１Ｈ），７．６０（ｄ，１Ｈ），３．９３（ｔ，１Ｈ），２．５０−２．５７（ｍ，２Ｈ），２．４７（ｓ，３Ｈ），２．１０−２．２０（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ−ＭＳ：３４９［Ｍ−Ｈ］−，３５１［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例２２）
　Ｎ５−（３−クロロ−２−メチル−５−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成（化合物Ｎｏ．２２）
　Ｂｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ塩酸塩３０３ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、３−アミノ−５−クロロ−４−メチルベンゼンスルホン酸２２１ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ　１６０ｍｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ　４１０ｍｇ（１．３ｍｍｏｌ）にＤＭＦ　２ｍｌ、ＤＩＥＡ　０．５２ｍｌ（３ｍｍｏｌ）を加え、室温で終夜撹拌した。反応液を水−アセトニトリルで希釈し、精製工程Ａを用いて精製し、目的物の保護体を得た。得られた保護体をトリフルオロ酢酸５ｍｌに溶解し、２時間撹拌した。溶媒を留去した後、精製工程Ａを用いて精製し、表題化合物を得た。
　収量：１５０ｍｇ
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：７．８１（ｄ，１Ｈ），７．６１（ｄ，１Ｈ），４．１０（ｔ，１Ｈ），２．７４−２．８１（ｍ，２Ｈ），２．２４−２．３７（ｍ，５Ｈ）
　ＥＳＩ−ＭＳ：３４９［Ｍ−Ｈ］−，３５１［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例２３）
　Ｎ５−（２−ヒドロキシ−５−ニトロ−３−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成（化合物Ｎｏ．２３）
　合成例２２の３−アミノ−５−クロロ−４−メチルベンゼンスルホン酸を３−アミノ−２−ヒドロキシ−５−ニトロベンゼンスルホン酸に置き換えて、同様の操作を行うことで表題化合物を得た。
　収量：１８５ｍｇ
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：８．５５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），８．２９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．７Ｈｚ），３．９５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），２．６６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），２．１０−２．３０（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ−ＭＳ：３６２［Ｍ−Ｈ］−，３６４［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例２４）
　２，５−ジクロロ−３−（Ｌ−γ−グルタミルアミノ）安息香酸の合成（化合物ＮＯ．２４）
　（工程１）
　２，５−ジクロロ−３−アミノ安息香酸２０６ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）をアセトン４ｍｌに溶解し、トリメチルシリルジアゾメタン２．０Ｍヘキサン溶液０．７ｍｌ（１．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で１．５時間攪拌した。溶媒を留去し、２，５−ジクロロ−３−アミノ安息香酸メチルを得た。
　収量：２２０ｍｇ
　（工程２）
　２，５−ジクロロ−３−アミノ安息香酸メチル１１０ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）にＨＡＴＵ　１９０ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ　７０ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ塩酸塩１５２ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン０．２１ｍｌ（１．５ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン２ｍｌを加え、室温で一晩攪拌した。
　溶媒を留去し酢酸エチル−水を用いて抽出を行ない、有機層を飽和食塩水で処理した後硫酸ナトリウムで乾燥させた。硫酸ナトリウムを濾去し、溶媒を留去した後、１Ｎ水酸化ナトリウム溶液５ｍｌを加え、室温で２時間攪拌した。続けてトリフルオロ酢酸５ｍｌを加え、室温で２時間攪拌した。溶媒を留去したのち、精製工程Ａで精製し、表題化合物を得た。
　収量：６．６ｍｇ
　１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：８．０８（ｓ，１Ｈ），７．５６（ｓ，１Ｈ），３．９５−４．０１（ｍ，１Ｈ），２．７６−２．８２（ｍ，２Ｈ），２．２０−２．３０（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ−ＭＳ：３３３［Ｍ−Ｈ］−，３３５［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例２５）
　２−クロロ−３−（Ｌ−γ−グルタミルアミノ）安息香酸の合成（化合物Ｎｏ．２５）
　合成例２４（化合物Ｎｏ．２４の合成）で使用した安息香酸誘導体を、２−クロロ−３−アミノ安息香酸に置き換え、同様に操作することで、表題化合物を得た。
　収量：４．０ｍｇ
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：７．４７−７．５６（ｍ，１Ｈ），７．３９−７．４６（ｍ，１Ｈ），７．２７−７．３２（ｓ，１Ｈ），３．８１−３８７（ｍ，１Ｈ），２．５９−２．６５（ｍ，２Ｈ），２．１２−２．２１（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ−ＭＳ：２９９［Ｍ−Ｈ］−，３０１［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例２６）
　４−クロロ−３−（Ｌ−γ−グルタミルアミノ）安息香酸の合成（化合物Ｎｏ．２６）
　合成例２４（化合物ＮＯ．２４の合成）で使用した安息香酸誘導体を、４−クロロ−３−アミノ安息香酸に置き換え、同様に操作することで、表題化合物を得た。
　収量：５．３ｍｇ
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：８．０３（ｓ，１Ｈ），７．７６−７．７９（ｍ，１Ｈ），７．５２−７．５５（ｍ，１Ｈ），３．７８−３．８４（ｍ，１Ｈ），２．５９−２．６５（ｍ，２Ｈ），２．１２−２．２２（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ−ＭＳ：２９９［Ｍ−Ｈ］−，３０１［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例２７）
　２−メトキシ−３−（Ｌ−γ−グルタミルアミノ）安息香酸の合成（化合物Ｎｏ．２７）
　２−メトキシ−３−アミノ安息香酸メチル３６ｍｇ（０．２ｍｍｏｌ）にＨＡＴＵ　８４ｍｇ（０．２ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ　３０ｍｇ（０．２ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ塩酸塩６１ｍｇ（０．２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン０．０８４ｍｌ（０．６ｍｏｌ）、ジクロロメタン１ｍｌを加え、室温で一晩攪拌した。
　溶媒を留去し酢酸エチル−水を用いて抽出を行ない、有機層を飽和食塩水で処理した後硫酸ナトリウムで乾燥させた。硫酸ナトリウムを濾去し、溶媒を留去した後、１Ｎ水酸化ナトリウム溶液５ｍｌを加え、室温で２時間攪拌した。続けてトリフルオロ酢酸５ｍｌを加え、室温で２時間攪拌した。溶媒を留去したのち、精製工程Ａで精製し、表題化合物を得た。
　収量：６．５ｍｇ
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：７．６９−７．７１（ｍ，１Ｈ），７．５６−７．５９（ｍ，１Ｈ），７．１３−７．１８（ｍ，１Ｈ），３．８７−３．９３（ｍ，１Ｈ），３．６８（ｓ，３Ｈ），２．６０−２．６６（ｍ，２Ｈ），２．１２−２．２２（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ−ＭＳ：２９５［Ｍ−Ｈ］−，２９７［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例２８）
　６−ヒドロキシ−３−（Ｌ−γ−グルタミルアミノ）安息香酸の合成（化合物Ｎｏ．２８）
　合成例２７（化合物Ｎｏ．２７の合成）で使用した安息香酸誘導体を、６−メトキシ−３−アミノ安息香酸に置き換え、同様に操作することで、６−メトキシ−３−（Ｌ−γ−グルタミルアミノ）安息香酸を合成した。これを精製工程Ａで精製し、合成過程で副生成物として得られた表題化合物を得た。
　収量：２．１ｍｇ
　ＥＳＩ−ＭＳ：２８０［Ｍ−Ｈ］−，２８２［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例２９）
　４−メチル−３−（Ｌ−γ−グルタミルアミノ）安息香酸の合成（化合物Ｎｏ．２９）
　４−メチル−３−ニトロ安息香酸５００ｍｇにメタノール５ｍｌ、４Ｎ塩化水素含有のジオキサン溶液１０ｍｌに溶解した。２日間室温で撹拌した後、溶媒を留去し、粗製物を得た。得られた粗製物をメタノール１０ｍｌに溶解し、水素雰囲気下触媒量のＰｄ／Ｃを室温で終夜、作用させた。触媒をろ別し、溶媒を留去し粗製物を得た。得られた粗製物１６５ｍｇ、Ｂｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ塩酸塩３０３ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ４００ｍｇ（約１．３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ　１ｍｌに溶解し、ＤＩＥＡ０．２６ｍｌを加え、終夜撹拌した。反応液を水−アセトニトリルで希釈し、精製工程Ａを用いて精製し、目的物の保護体０．３１ｇを得た。得られた保護体にＴＨＦ３ｍｌ、メタノール１．５ｍｌ、水１．５ｍｌを加え、水酸化リチウム１水和物２６ｍｇ（０．８２ｍｍｏｌ）を加えた。２時間撹拌した後、溶媒を留去し、再びＴＨＦ３ｍｌ、メタノール１．５ｍｌ、水１．５ｍｌを加え、水酸化リチウム１水和物２６ｍｇ（０．８２ｍｍｏｌ）を加え、２時間撹拌した。酢酸エチル２ｍｌを加えた後、溶媒を留去し、続けてトリフルオロ酢酸３ｍｌを加え、室温で２時間撹拌した。溶媒を留去した後、精製工程Ａで精製し、表題化合物を得た。
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：７．７４−７．７７（ｍ，１Ｈ），７．３０−７．３６（ｍ，１Ｈ），３．７５−３．８１（ｍ，１Ｈ），２．５５−２．６２（ｍ，２Ｈ），２．１０−２．２０（ｍ，５Ｈ）
　ＥＳＩ−ＭＳ：２７９［Ｍ−Ｈ］−，２８１［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例３０）
　５−ヒドロキシ−３−（Ｌ−γ−グルタミルアミノ）安息香酸の合成（化合物Ｎｏ．３０）
　合成例２７（化合物Ｎｏ．２７の合成）で使用した安息香酸誘導体を、５−メトキシ−３−アミノ安息香酸に置き換え、同様に操作することで、５−メトキシ−３−（Ｌ−γ−グルタミルアミノ）安息香酸を合成した。これを精製工程Ａで精製し、合成過程で副生成物として得られた表題化合物を得た。
　収量：７．５ｍｇ
　ＥＳＩ−ＭＳ：２８０［Ｍ−Ｈ］−，２８２［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例３１）
　３−（Ｌ−γ−グルタミルアミノ）−２−メチル安息香酸の合成（化合物Ｎｏ．３１）
　合成例２９（化合物Ｎｏ．２９の合成）で使用した安息香酸誘導体を、２−メチル−３−ニトロ安息香酸に置き換え、同様に操作することで、表題化合物を得た。
　収量：３７ｍｇ
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：７．５６（ｄｄ，１Ｈ），７．３０（ｄｄ，１Ｈ），７．２３（ｔ，１Ｈ），３．８２（ｔ，１Ｈ），２．５−２．６２（ｍ，２Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ），２．１０−２．２９（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ−ＭＳ：２７９［Ｍ−Ｈ］−，２８１［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例３２）
　５−クロロ−３−（Ｌ−γ−グルタミルアミノ）安息香酸の合成（化合物Ｎｏ．３２）
　（工程１）
　５−クロロ−１，３ジ安息香酸メチル２２８ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、水酸化カリウム５６ｍｇ（１ｍｍｏｌ）にメタノール８ｍｌ、ＴＨＦ　２ｍｌを加え、室温で一晩攪拌した。反応溶液を減圧濃縮し、トルエン４ｍｌ、トリエチルアミン０．１２ｍｌ（０．８５ｍｍｏｌ）、ジフェニルホスホリルアジド０．１９ｍｌ（０．８８ｍｍｏｌ）を加え、５０℃で１時間攪拌した。続けてｔ−ブチルアルコール０．１９ｍｌ（２ｍｍｏｌ）、トルエン２ｍｌを加え、８０℃で一晩攪拌した。室温に冷却した後、酢酸エチル−水を用いて抽出を行ない、有機層を飽和食塩水で処理した後硫酸ナトリウムで乾燥させた。硫酸ナトリウムを濾去し、溶媒を留去した後、精製工程Ａで精製し、５−クロロ−３−アミノ安息香酸メチル−トリフルオロ酢酸塩を得た。
　収量：３０ｍｇ
　（工程２）
　５−クロロ−３−アミノ安息香酸メチル３０ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）にＨＡＴＵ　３８ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ　１４ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ塩酸塩３０ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン０．０１４ｍｌ（０．１ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン１ｍｌを加え、室温で一晩攪拌した。
　溶媒を留去し酢酸エチル−水を用いて抽出を行ない、有機層を飽和食塩水で処理した後硫酸ナトリウムで乾燥させた。硫酸ナトリウムを濾去し、溶媒を留去した後、１Ｎ水酸化ナトリウム溶液５ｍｌを加え、室温で２時間攪拌した。続けてトリフルオロ酢酸５ｍｌを加え、室温で２時間攪拌した。溶媒を留去したのち、精製工程Ａで精製し、表題化合物を得た。
　収量：１．０ｍｇ
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：７．５４（ｓ，１Ｈ），７．４８（ｓ，１Ｈ），７．４５（ｓ，１Ｈ），３．９６−４．００（ｍ，１Ｈ），２．５０−２．５６（ｍ，２Ｈ），２．１２−２．２０（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ−ＭＳ：２９９［Ｍ−Ｈ］−，３０１［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例３３）
　Ｏ−｛［（３−クロロ−４−メチル−５−スルホフェニル）アミノ］カルボニル｝−Ｌ−セリンの合成（化合物Ｎｏ．３３）
　Ｂｏｃ−Ｓｅｒ−ＯｔＢｕ　１００ｍｇ（０．３８ｍｍｏｌ）、５−アミノ−３−クロロ−２−メチルベンゼンスルホン酸８６ｍｇ（０．３８ｍｍｏｌ）、トリホスゲン３７ｍｇ（０．０１２７ｍｍｏｌ）を塩化メチレン１ｍｌに懸濁させ、ＤＩＥＡ　６６μｌ（０．７６ｍｍｏｌ）を加えた。室温で終夜撹拌した後、溶媒を留去した。精製工程Ａを用いて精製し、表題化合物の保護体を得た。得られた保護体をトリフルオロ酢酸２ｍｌに溶解し、２時間撹拌した後溶媒を留去し、精製工程Ａで精製し、表題化合物を得た。
　収量：１５．５ｍｇ
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：７．６７（ｄ，１Ｈ），７．５７．（ｄ，１Ｈ），４．５１（ｔ，２Ｈ），４．１５（ｄｄ，１Ｈ）２．４７（ｓ，３Ｈ）
　ＥＳＩ−ＭＳ：３５１［Ｍ−Ｈ］−，３５３［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例３４）
　３−（｛［（２Ｓ）−２−アミノ−２−カルボキシエトキシカルボニル｝アミノ）−５−クロロ−２−ヒドロキシベンゼンスルホン酸ナトリウム塩の合成（化合物Ｎｏ．３４）
　合成例３３（化合物Ｎｏ．３３の合成）で使用したベンゼンスルホン酸誘導体を３−アミノ−５−クロロ−２−ヒドロキシベンゼンスルホン酸に置き換え、同様の操作を行い、ついで１当量の０．１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加え、凍結乾燥することで、表題化合物を得た。
　収量：１５．１ｍｇ
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：７．７０（ｓ，１Ｈ），７．３７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），４．３７−４．５５（ｍ，２Ｈ），３．９８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．０，５．３Ｈｚ），
　ＥＳＩ−ＭＳ：３５３［Ｍ−Ｈ］−，３５５［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例３５）
　Ｏ−｛［（３−クロロ−２−メチル−５−スルホフェニル）アミノ］カルボニル｝−Ｌ−セリンの合成（化合物Ｎｏ．３５）
　合成例３３（化合物Ｎｏ．３３の合成）で使用したベンゼンスルホン酸誘導体を３−アミノ−５−クロロ−４−メチルベンゼンスルホン酸に置き換え同様の操作を行うことで表題化合物を得た。
　収量：３．９ｍｇ
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：７．６０−７．６４（ｍ，２Ｈ），４．４２−４．５４（ｍ，２Ｈ），４．０３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．２，４．８Ｈｚ）
ＥＳＩ−ＭＳ：３５１［Ｍ−Ｈ］−，３５３［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例３６）
　Ｏ−｛［（５−クロロ−２−メトキシ−３−スルホフェニル）アミノ］カルボニル｝−Ｌ−セリンの合成（化合物Ｎｏ．３６）
　合成例１４（化合物Ｎｏ．１４の合成）中で得られる保護体３０ｍｇにアセトン２ｍｌを加え、２Ｍトリメチルシリルジアゾメタン含有のヘキサン溶液１ｍｌ、トリエチルアミン１００μｌ加えた。２０分撹拌した後、溶媒を留去し、精製工程Ａを用いて精製し、メチル化体を得た。得られたメチル化体をトリフルオロ酢酸２ｍｌに溶解し、室温で３時間撹拌した。溶媒を留去した後、水を加え凍結乾燥することで表題化合物を得た。
　収量：１．４８ｍｇ
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：７．６４（ｂｒｓ，１Ｈ），７．２７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），４．２５−４．２２（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．１，５．０Ｈｚ），３．５２（ｓ，３Ｈ）
　（合成例３７）
　Ｎ５−（２−クロロ−５−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成（化合物Ｎｏ．３７）
　４−クロロ−３−ニトロベンゼンスルホン酸ナトリウム塩（１ｍｍｏｌ）にメタノール２ｍｌ、水３ｍｌを加え、触媒量の２％Ｐｔ−Ｓ／Ｃを加え、水素雰囲気下室温で終夜撹拌した。触媒をろ別し、十分に乾燥した後、Ｂｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ塩酸塩３０３ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ　１６３ｍｇ（１．２ｍｍｏｌ），ＨＡＴＵ　４５６ｍｇ（１．２ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ　２ｍｌ、ＤＩＥＡ　０．３５ｍｌを加え、室温で終夜撹拌した。反応液を水−アセトニトリルで希釈し精製工程Ａを用いて精製し、表題化合物の保護体を得た。得られた保護体をトリフルオロ酢酸３ｍｌに溶解し、室温で２時間撹拌した後、溶媒を留去した。精製工程Ａを用いて精製し、表題化合物を得た。
　収量：６９．９ｍｇ
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：７．８５（ｂｒｓ，１Ｈ），７．５０−７．５５（ｍ，２Ｈ），４．０３（ｔ，１Ｈ），２．６６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），２．１０−２．３０（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ−ＭＳ：３３５［Ｍ−Ｈ］−，３３７［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例３８）
　Ｎ５−（３−クロロ−４−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成（化合物Ｎｏ．３８）
　工程１
　発煙硫酸４ｍｌに３−クロロアニリン０．４ｍｌをゆっくり加え、室温で終夜撹拌した。０度に冷却しながら水に反応液を入れ、析出した固体をろ別した。ろ別した固体を２規定水酸化ナトリウム水溶液にに溶解し、ついで濃塩酸を加え、液性を酸性にした。析出した固体をろ別し、４−アミノ−２−クロロベンゼンスルホン酸の粗製物を得た。
　収量：８０ｍｇ
　工程２
　合成例２１（化合物Ｎｏ．２１の合成）で使用したベンゼンスルホン酸誘導体を工程１で得られた４−アミノ−２−クロロベンゼンスルホン酸の粗製物に置き換え、同様の操作を行うことで表題化合物を得た。
　収量：４０ｍｇ
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：７．８０（ｄ，１Ｈ），７．６３（ｄ，１Ｈ），７．３３（ｄｄ，１Ｈ），３．９４（ｔ，１Ｈ），２．５０−２．６０（ｍ，２Ｈ），２．１０−２．２２（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ−ＭＳ：３３７［Ｍ＋Ｈ］＋，３３５［Ｍ−Ｈ］−
　（合成例３９）
　Ｎ５−（５−ブロモ−３−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成（化合物Ｎｏ．３９）
　合成例１８（化合物Ｎｏ．１８の合成）工程１で使用したアニリン誘導体を３−ブロモアニリンに置き換え、工程１、工程２を同様に行い、表題化合物を得た。
　収量：９．９ｍｇ
　ＥＳＩ−ＭＳ：４２９［Ｍ＋Ｈ］＋，４２７［Ｍ−Ｈ］−
　（合成例４０）
　Ｎ５−（３−ヨード−４−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成（化合物Ｎｏ．４０）
　合成例３８（化合物Ｎｏ．３８の合成）工程１で使用したアニリン誘導体を３−ヨードアニリンに置き換え、工程１、工程２を同様に行い、表題化合物を得た。
　収量：
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：８．１２（ｓ，１Ｈ），７．８４（ｄ，１Ｈ），７．４４（ｄｄ，１Ｈ），３．７５−３．９０（ｍ，１Ｈ），２．５０−２．６０（ｍ，２Ｈ），２．００−２．２０（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ−ＭＳ：４２９［Ｍ＋Ｈ］＋，４２７［Ｍ−Ｈ］−
　（合成例４１）
　Ｎ５−（５−ヨード−２−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成（化合物Ｎｏ．４１）
　合成例４０の合成において、位置異性体として得た。
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：８．１１（ｄ，１Ｈ），７．６３−７．６６（ｍ，１Ｈ），７．４８（ｄ，１Ｈ），３．８０−３．９０（ｍ，１Ｈ），２．５８−２．６６（ｍ，２Ｈ），２．１０−２．２４（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ−ＭＳ：４２９［Ｍ＋Ｈ］＋，４２７［Ｍ−Ｈ］−
　（合成例４２）
　Ｎ５−ヒドロキシ−Ｎ５−（３−スルホフェニル）−Ｌ−グルタミンの合成（化合物Ｎｏ．４２）
　亜鉛粉末２７０ｍｇ（４．３ｍｍｏｌ）、塩化アンモニウム１０６ｍｇ（２ｍｍｏｌ）をメタノール：水（１：１）混合溶媒２ｍｌ中に懸濁させ、２−ニトロベンゼンスルホン酸ナトリウム塩４５０ｍｇ（２ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。６５℃に加熱し１時間撹拌した後、不溶物をろ過、得られたろ液を留去し、ヒドロキシルアミン誘導体の粗生成物を得た。Ｂｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ塩酸塩４５０ｍｇ（１．５ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ　２３０ｍｇ（１．７ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ　６４６ｍｇ（１．７ｍｍｏｌ）にＤＭＦ　５ｍｌ、ＤＩＥＡ　０．３５ｍｌを加え、１０分撹拌した。その溶液を先ほど得られた粗生成物に加え、終夜撹拌した。精製工程Ａを用いて精製し、表題化合物の保護体を得た。得られた保護体にＴＦＡ４ｍｌを加え、２時間撹拌し、ＴＦＡを除去した後、精製工程Ａを用いて精製することで、表題化合物を得た。
　収量：１３５ｍｇ
　１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：１０．６５（ｓ，１Ｈ），１０．０４（ｓ，１Ｈ），７．２０−８．４０（ｍ，７Ｈ），３．９０−４．１０（ｍ，１Ｈ），２．６０−３．００（ｍ，２Ｈ），１．９０−２．２０（ｍ，２Ｈ）
　ＥＳＩ−ＭＳ：３１７［Ｍ−Ｈ］−，３１９［Ｍ＋Ｈ］＋
　（合成例４３）
　Ｏ−｛［ヒドロキシ（３−スルホフェニル）アミノ］カルボニル｝−Ｌ−セリンの合成（化合物Ｎｏ．４３）
　Ｂｏｃ−Ｓｅｒ−ＯｔＢｕ　１ｍｍｏｌ、合成例４２で得られたヒドロキシルアミンの粗製物、トリホスゲン１００ｍｇ（０．３３ｍｍｏｌ）に塩化メチレン２ｍｌ、ＤＩＥＡ　０．３５ｍｌを加え、室温で終夜撹拌した。溶媒を留去し、得られた残渣を精製工程Ａで精製し、表題化合物の保護体を得た。得られた保護体をＴＦＡ４ｍｌに溶解し、室温で３時間撹拌した後、ＴＦＡを留去、精製工程Ａで精製し表題化合物を得た。
　収量：６．６ｍｇ
　１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：７．７８−７．８０（ｍ，１Ｈ），７．４３−７．６０（ｍ，４Ｈ），４．５６−４．５８（ｍ，２Ｈ），４．１０−４．１５（ｍ，１Ｈ）
　ＥＳＩ−ＭＳ：３１９［Ｍ−Ｈ］−，３２１［Ｍ＋Ｈ］＋
　以下に、表３に示す他の代表的な本発明の化合物の合成について、実施例を挙げてさらに詳しく説明するが、本発明の化合物はこれらの実施例に限定されるものではない。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000039
 　（合成例４４）
　３−［（４Ｓ）−４−アミノ−５−メトキシ−５−オキソペンタンアミド］ベンゼン−１−スルホン酸の合成
　Ｂｏｃ−Ｇｌｕ−ＯＭｅ　１３０ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）、２−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム　ヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）　１９０ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）、７−アザ−１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）　７０ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）、３−アミノベンゼンスルホン酸　８７ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）を塩化メチレン　２．０ｍｌに懸濁させ、トリエチルアミン　０．５ｍｌを加え室温で終夜攪拌した。溶媒を留去した後、精製工程Ａを用い、中間体を得た。この粗生成物をトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）　４．０ｍｌに溶解し、室温で１時間撹拌した。溶媒を留去した後、精製工程Ａを用いて表題化合物　７．４ｍｇを得た。
　収量：７．４ｍｇ
　（合成例４５）
　３−［（４Ｓ）−４−アミノ−５−メトキシ−５−オキソペンタンアミド］−５−クロロ−２−ヒドロキシベンゼン−１−スルホン酸の合成
　合成例４４で使用した３−アミノベンゼンスルホン酸を、３−アミノ−５−クロロ−２−ヒドロキシベンゼンスルホン酸に置き換え、同様に操作することで、表題化合物を得た。
　収量：１７．４ｍｇ
　（合成例４６）
　３−［（４Ｓ）−４−アミノ−５−メトキシ−５−オキソペンタンアミド］−５−クロロ−４−メチルベンゼン−１−スルホン酸の合成
　合成例４４で使用した３−アミノベンゼンスルホン酸を、３−アミノ−５−クロロ−４−メチルベンゼンスルホン酸に置き換え、同様に操作することで、表題化合物を得た。
　収量：５．１ｍｇ
　（合成例４７）
　３−［（４Ｓ）−４−アミノ−５−（ベンジルオキシ）−５−オキソペンタンアミド］−５−クロロ−２−ヒドロキシベンゼン−１−スルホン酸の合成
　合成例４４で使用したＢｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕをＢｏｃ−Ｇｌｕ−ＯＢｚｌに、３−スルホアニリンを３−アミノ−５−クロロ−２−ヒドロキシベンゼンスルホン酸にそれぞれ置き換えて同様に実施することで表題化合物を得た。
　（合成例４８）
　３−（｛［（２Ｓ）−２−アミノ−３−メトキシ−３−オキソプロポキシ］カルボニル｝アミノ）ベンゼン−１−スルホン酸の合成
　Ｂｏｃ−Ｓｅｒ−ＯＭｅ　１１０ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）、３−アミノベンゼンスルホン酸　８７ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）をピリジン１ｍｌに溶解し、トリホスゲン５０ｍｇを加えた。室温で２時間撹拌した後、溶媒を留去し、得られた残渣を精製工程Ａを用いて精製することで表題化合物の保護体の粗精製物を得た。得られた粗精製物を塩化メチレン１ｍｌ、トリフルオロ酢酸１ｍｌに溶解し、３０分室温で撹拌した後、溶媒を留去、精製工程Ａを用いて精製することで、表題化合物を得た。
　収量：２０．１７ｍｇ
　（合成例４９）
　５−（｛［（２Ｓ）−２−アミノ−３−メトキシ−３−オキソプロポキシ］カルボニル｝アミノ）−３−クロロ−２−メチルベンゼン−１−スルホン酸の合成
　合成例４８において用いた３−アミノベンゼンスルホン酸を５−アミノ−３−クロロ−２−メチルベンゼンスルホン酸に置き換えて同様に実施することで、表題化合物を得た。
　収量８１．７６ｍｇ
　（合成例５０）
　３−［（４Ｓ）−４−アミノ−５−エトキシ−５−オキソペンタンアミド］−５−クロロ−２−ヒドロキシベンゼン−１−スルホン酸の合成
　（工程１）Ｂｏｃ−Ｇｌｕ−ＯＥｔの合成
　Ｂｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｎ）−ＯＨ　１．０１ｇ（３．０ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）　６２０ｍｇ（３．１ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール１水和物（ＨＯＢｔ・Ｈ２Ｏ）　４７５ｍｇ（３．１ｍｍｏｌ）を塩化メチレン　１２ｍｌに懸濁させ、０℃に冷却した後エチルアルコール　１７５μｌを加えた。室温に戻し終夜撹拌した後、酢酸エチル／水で抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄した後、硫酸ナトリウムを加え乾燥させた。有機層を減圧濃縮し、得られた残渣をメタノール　１２ｍｌに溶解させ、１０％　Ｐｄ／Ｃを１００ｍｇ加え、水素雰囲気下で終夜攪拌した。精製工程Ａを用いて表題化合物の粗生成物を得た。
　ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：２７６［Ｍ＋Ｈ］＋
　（工程２）
　３−［（４Ｓ）−４−アミノ−５−エトキシ−５−オキソペンタンアミド］−５−クロロ−２−ヒドロキシベンゼン−１−スルホン酸の合成
　工程１で得られた化合物　９２ｍｇ（０．３３ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ　１３０ｍｇ（０．３３ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ　４５ｍｇ（０．３３ｍｍｏｌ）、３−アミノ−５−クロロ２−ヒドロキシベンゼンスルホン酸　７７ｍｇ（０．３３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ　１．０ｍｌに懸濁させ、ピリジン　０．２５ｍｌを加え室温で終夜攪拌した。溶媒を留去した後、精製工程Ａを用い、中間体を得た。この粗生成物をＴＦＡ　４．０ｍｌに溶解し、室温で１時間撹拌した。溶媒を留去した後、精製工程Ａを用いて表題化合物　４７．２ｍｇを得た。
　収量：４７．２ｍｇ
　（合成例５１）
　３−［（４Ｓ）−４−アミノ−５−オキソ−５−（プロパン−２−イルオキシ）ペンタンアミド］−５−クロロ−２−ヒドロキシベンゼン−１−スルホン酸の合成
　合成例５０で使用したエチルアルコールを、２−プロパノールに置き換え、同様に操作することで、表題化合物を得た。
　収量：４２．６ｍｇ
　実施例ＩＩ　ＣａＳＲ遺伝子の調製
　ＣａＳＲの遺伝子の調製は、ＷＯ０７／５５３９３のＥｘａｍｐｌｅ　１に記載の方法を用いて調製した。得られた組換えプラスミドを用いて、ヒトＣａＳＲ発現プラスミドｈＣａＳＲ／ｐｃＤＮＡ３．１を作成した。
　実施例ＩＩＩ　ＣａＳＲアゴニスト活性の評価
　（ＣａＳＲアゴニスト評価法）
　２９３Ｅ細胞（ＥＢＮＡ１発現ＨＥＫ２９３細胞、ＡＴＣＣ　Ｎｏ．ＣＲＬ−１０８５２）は２５０μｇ／ｍｌのＧ４１８存在下、１０％のウシ胎児血清を含むＤＭＥＭ（１．０ｇ／ｍｌ　Ｇｌｕｃｏｓｅ含有Ｄｕｌｂｅｃｃｏ′ｓ　ｍｏｄｉｆｉｅｄ　Ｅａｇｌｅ　ｍｅｄｉｕｍ、ナカライテスク）にて培養した。１．８×１０６ｃｅｅｌｌｓ／１５ｍｌで直径１０ｃｍシャーレに撒き、ＣＯ２インキュベータ（５％ＣＯ２、３７℃）に２４時間静置した後、トランスフェクション試薬Ｍｉｒｕｓ　ＴｒａｎｓＩＴ　２９３（タカラバイオ）にてヒトＣａＳＲ発現プラスミドｈＣａＳＲ／ｐｃＤＮＡ３．１をトランスフェクションした。ＣＯ２インキュベータに２４時間置いた後、細胞を１０％ウシ胎児血清含有ＤＭＥＭにて回収し、１５，０００ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌでｐｏｌｙ−Ｄ−ｌｙｓｉｎｅ　ｃｏａｔ　３８４ｗｅｌｌ　ｐｌａｔｅ（Ｆａｌｃｏｎ）に播種した。ＣＯ２インキュベータにて２４時間静置した後、培地を除去し、Ａｓｓａｙ　Ｂｕｆｆｅｒ（１４６ｍＭ　ＮａＣｌ、５ｍＭ　ＫＣｌ、１ｍＭ　ＭｇＳＯ４、１ｍｇ／ｍｌ　Ｇｌｕｃｏｓｅ、２０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．２）、１．５ｍＭ　ＣａＣｌ２）に溶解したＣａ２＋蛍光指示薬Ｃａｌｃｉｕｍ　４　Ａｓｓａｙ　Ｋｉｔ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｄｅｖｉｃｅｓ）を５０μｌ／ｗｅｌｌ添加し、３７℃で１時間、次いで室温で３０分静置し指示薬を取り込ませた。前記３８４ｗｅｌｌ　ｐｌａｔｅをＦＬＩＰＲ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｄｅｖｉｃｅｓ）に移し、０．１％ＢＳＡ含有Ａｓｓａｙ　Ｂｕｆｆｅｒに溶解した化合物を１２．５μｌ／ｗｅｌｌ添加し、３分間蛍光強度変化を測定した。なお、化合物Ｎｏ．２０はＢａｃｈｅｍ社より購入した。
　（ＥＣ５０算出法）
　化合物添加前後の蛍光強度の最大値と最小値の差（ＲＦＵ（Ｍａｘ−Ｍｉｎ））をＦＬＩＰＲの自動計算にて求めた。化合物最大濃度添加時のＲＦＵ（Ｍａｘ−Ｍｉｎ）を１００％、化合物の代わりに同濃度のＤＭＳＯを添加時のＲＦＵ（Ｍａｘ−Ｍｉｎ）を０％と定義した活性率を計算し、表計算ソフトＸｆｉｔにてカーブフィッティングし、活性率５０％時の化合物濃度であるＥＣ５０値を求めた。表１及び表２に示した化合物についての結果を表４及び表５に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000040
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000041
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000042
　実施例ＩＶ　ＣａＳＲアゴニスト活性の評価
　実施例ＩＩＩと同様にして、化合物４４、４９、５０についてＥＣ５０値を測定した。結果を表６に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000043
 　実施例Ｖ　ＧＬＰ−１分泌促進作用
　化合物Ｎｏ．１、７、２１、２２、３３及び３４について以下の試験を行った。
　ヒト盲腸由来細胞株ＮＣＩ−Ｈ７１６（ＡＴＣＣ　Ｎｏ　ＣＣＬ−２５１）を、１０％　ＦＢＳを含むＤＭＥＭ／ＨａｍＦ−１２　ｍｅｄｉｕｍにて、３７℃、５％　ＣＯ２存在下で培養した。ＮＣＩ−Ｈ７１６細胞をｐｏｌｙ−Ｄ−ｌｙｓｉｎｅコート９６ウェルプレートに、１０００００ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌで播種し、２日間培養した。サンプル添加前に、Ｈｅｐｅｓバッファー（２０ｍＭ　Ｈｅｐｅｓ，１４６ｍＭ　ＮａＣｌ，５ｍＭ　ＫＣｌ，１．５ｍＭ　ＣａＣｌ２，１ｍＭ　ＭｇＳＯ４，５．５ｍＭ　Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ，０．２％　ＢＳＡ，ｐＨ７．４）にてウェルを洗浄し、同バッファーに溶解したサンプル溶液を５０μｌ添加し、３７℃にて６０分間インキュベーションした。サンプルとして表１に掲げた化合物Ｎｏ．１（２０ｍＭ）、Ｎｏ．７（２０ｍＭ）、Ｎｏ．２１（２０ｍＭ）、Ｎｏ．２２（２０ｍＭ）、Ｎｏ．３３（７．５ｍＭ）、およびＮｏ．３４（７．５ｍＭ）を用いた。また、対照として、Ｈｅｐｅｓバッファーを用いた。上清を回収後、遠心分離（５０００　ｘ　ｇ、１分）により細胞を沈殿させ、その上清を回収した。上清中のＧＬＰ−１濃度をＧＬＰ−１受容体遺伝子発現細胞を用いたＧＬＰ−１の定量法により、以下のように測定した。
　常法に従って（Ｌ▲ｏ▼ｐｅｚ　ｄｅ　Ｍａｔｕｒａｎａ　Ｒ，Ｗｉｌｌｓｈａｗ　Ａ，Ｋｕｎｔｚｓｃｈ　Ａ，Ｒｕｄｏｌｐｈ　Ｒ，Ｄｏｎｎｅｌｌｙ　Ｄ．Ｊ　Ｂｉｏｌ　Ｃｈｅｍ．２００３　Ｍａｒ　２１；２７８（１２）：１０１９５−２００．）、ヒトＧＬＰ−１受容体遺伝子（配列番号１）をｐｃＤＮＡ３．１に組み込んでヒトＧＬＰ−１受容体遺伝子発現プラスミドｈＧＬＰ−１Ｒ／ｐｃＤＮＡ３．１を作製した。また、ヒトＧα１５遺伝子とヒトガストデューシン遺伝子のキメラ遺伝子（配列番号２）をｐｃＤＮＡ３．１に組み込んでＧ蛋白質発現プラスミドＧα１５−ｇｕｓｔ／ｐｃＤＮＡ３．１を作製した。トランスフェクション試薬ＦｕＧｅｎｅ６（日本ロシュ社）を用いて、ｈＧＬＰ−１Ｒ／ｐｃＤＮＡ３．１とＧα１５−ｇｕｓｔ４４／ｐｃＤＮＡ３．１をＨＥＫ２９３Ｅ細胞（ＡＴＣＣ　Ｎｏ．ＣＲＬ−１０８５２）にコトランスフェクションした。ＣＯ２インキュベーターで４~６時間培養した後、細胞を５％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ／ＨａｍＦ１２に懸濁し、７００００ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌでｐｏｌｙ−Ｄ−ｌｙｓｉｎｅコート９６ウェルプレートに播種した。ＣＯ２インキュベーターで２４時間培養した後、Ｃａ２＋蛍光指示薬ＦＬＩＰＲ　Ｃａｌｃｉｕｍ　４　Ａｓｓａｙ　Ｋｉｔプロトコール（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｄｅｖｉｃｅｓ）に従い、ＦｌｅｘＳｔａｔｉｏｎ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｄｅｖｉｃｅｓ）を用いて、サンプル添加直後より蛍光強度変化を測定した。ヒトＧＬＰ−１（７−３６アミド；ペプチド研究所）の蛍光強度変化に対する濃度依存性を求め、標準曲線としてサンプルの定量に用いた。ここで用いた発現プラスミドは、例えば、Ｐｒｏｃ　Ｎａｔｌ　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ　Ｕ　Ｓ　Ａ．１９９２　Ｓｅｐ１５；８９（１８）：８６４１−５、ＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔｅｒｓ　Ｖｏｌｕｍｅ　３７３，Ｉｓｓｕｅ　２，９　Ｏｃｔｏｂｅｒ　１９９５，Ｐａｇｅｓ　１８２−１８６）、Ｔｈｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，Ａｕｇｕｓｔ　１３，２００３，２３（１９）：７３７６−７３８０）などに記載されている方法を用いて作製してもよい。
　結果を表７に示す。Ｂｕｆｆｅｒを用いたコントロールの測定値を１とした際のＧＬＰ−１分泌量として相対値で示した。いずれの化合物についてもＧＬＰ−１分泌促進作用が確認され、本発明の化合物がＧＬＰ−１分泌促進作用を有することが示された。したがって、本発明の化合物は、糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤として有効であることがわかった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000044
 　実施例ＶＩ　ＣＣＫ分泌促進作用
　化合物Ｎｏ．１、７、２１、２２、３３及び３４について、以下の試験を行った。
　ヒト盲腸由来細胞株ＮＣＩ−Ｈ７１６（ＡＴＣＣ　Ｎｏ　ＣＣＬ−２５１）を、１０％　ＦＢＳを含むＤＭＥＭ／ＨａｍＦ−１２　ｍｅｄｉｕｍにて、３７℃、５％　ＣＯ２存在下で培養した。ＮＣＩ−Ｈ７１６細胞をｐｏｌｙ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅコート２４ウェルプレートに、６０００００ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌで播種し、２日間培養した。サンプル添加前に、Ｈｅｐｅｓバッファー（２０ｍＭ　Ｈｅｐｅｓ，１４６ｍＭ　ＮａＣｌ，５ｍＭ　ＫＣｌ，１．５ｍＭ　ＣａＣｌ２，１ｍＭ　ＭｇＳＯ４，５．５ｍＭ　Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ，０．０２％　ＢＳＡ，ｐＨ７．４）にてウェルを洗浄し、同バッファーに溶解したサンプル溶液を３００μｌ添加し、３７℃にて３０分間インキュベーションした。サンプルとして表２に掲げた化合物Ｎｏ．１（２０ｍＭ）、Ｎｏ．７（２ｍＭ）、Ｎｏ．２１（２ｍＭ）、Ｎｏ．２２（２ｍＭ）、Ｎｏ．３３（０．１ｍＭ）、およびＮｏ．３４（１ｍＭ）を用いた。また、対照として、Ｈｅｐｅｓバッファーを用いた。上清を回収後、遠心分離（５０００　ｘ　ｇ、１分）により細胞を沈殿させ、その上清を回収し、ＳＡＶＡＮＴ社Ｓｐｅｅｄ　Ｖａｃ　Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｏｒにて凍結乾燥し、６０μｌの水を加えて溶解した。溶液中のＣＣＫ濃度をＥｎｚｙｍｅ　ｉｍｍｕｎｏ　ａｓｓａｙ　ｋｉｔ（ＥＫ−０６９−０４；ＰＨＯＥＮＩＸ　ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ）を用いて測定した。
　結果を表８に示す。Ｂｕｆｆｅｒを用いたコントロールを１とした際のＣＣＫ分泌量として相対値で示した。いずれの化合物についてもＣＣＫ分泌促進作用が確認され、本発明の化合物がＣＣＫ分泌促進作用を有することが示された。したがって、本発明の化合物は、ＣＣＫ分泌促進作用を有することからも、糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤として有効であることがわかった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000045
 　実施例ＶＩＩ　胃排出抑制
　２４時間絶食させた正常マウス（Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ、７週齢）にマウス用ゾンデを用いて投与媒体（蒸留水）又は本発明の化合物を強制経口投与する。陽性対照として、胃排出抑制作用が知られているエクセンジン−４（シグマ社）を２．４ｎｍｏｌ／ｋｇになるように皮下注射する群を設けてもよい。エクセンジン−４群のマウスには１０ｍｌ／ｋｇの投与媒体も経口投与する。薬物投与１５分後にフェノールレッド溶液（０．５ｍｇ／ｍｌフェノールレッド＋１．５％メチルセルロース＋蒸留水）を５ｍｌ／ｋｇの容量で強制経口投与し、さらに２０分後に各マウスより胃を摘出し、胃に残存しているフェノールレッドを０．１Ｎ　ＮａＯＨ溶液中で抽出する。抽出した溶液の５６０ｎｍの吸光度を測定することにより残存したフェノールレッドの量（Ｓ）を定量する。フェノールレッドを投与した直後に胃を摘出して抽出されるフェノールレッドの量（Ｃ）を１００％として、Ｃに対する薬物投与２０分後の残存フェノールレッド量の割合を下記の式に基づいて計算し胃排出量とする。
　胃排出量（％）＝（１−（Ｓ／Ｃ））×１００
　このような方法により、本発明の化合物が胃排出抑制作用を有することを確認することができる。従って、本発明の化合物が、摂食抑制作用、抗肥満作用を有することを確認することができる。
　実施例ＶＩＩＩ　血糖値上昇抑制
　雄マウス（Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ、７週齢）を予備飼育（７日）後に、一夜絶食し、経口グルコース負荷試験を以下のように行う。グルコース溶液のみ（２ｇ／ｋｇ体重）、及び、本発明の化合物を含むグルコース溶液（２ｇ／ｋｇ体重）を経口投与する。試料投与後、１５、３０、６０、１２０、１８０分の尾静脈血を採取し、血漿中のグルコース濃度を市販のキット（ロシュ社）を用いて測定する。
　このような方法により、本発明の化合物が血糖値上昇抑制作用を有することを確認することができる。
　本発明の化合物又はその塩、ならびにその医薬は、優れたＣａＳＲアゴニスト活性を示し、さらに、ＧＬＰ−１分泌促進作用、ＣＣＫ分泌促進作用を示すので、このような作用によって治療が可能な疾患、特に、糖尿病、又は肥満などの予防又は治療剤として有用である。

Claims (7)

  1. 下記一般式（Ｉ）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000001
    　（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及び、Ｒ５は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲノ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していても良いＣ１−６アルキル基、置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシ基又は置換基を有していても良いＣ１−６モノ若しくはジアルキルアミノ基、スルホ基、又は基
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000002
    　若しくは
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000003
    　から選択される基であり、ただし、Ｒ１、Ｒ２、又はＲ３のいずれかは、ニトロ基、スルホ基、又は基
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000004
    　若しくは
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000005
    　から選択される基であり、かつ
    　Ｒ６は、水素原子、ヒドロキシル基又は置換基を有していても良いＣ１−６アルキル基であり、
    　Ｒ７は、水素原子、又は置換基を有していても良いＣ１−６アルキル基であり、
    　Ｘは、メチレン基又は酸素原子であり、
    　Ｅは、ヒドロキシル基、置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシ基、置換基を有していても良いメルカプト基、又は、下記基：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000006
    　（式中、Ｚは置換基を有していても良いＣ１−６炭化水素の２価基を示し、Ｅ２は水素原子又はＣ１−６アルキル基を示す。）から選択される基である。）
    　で表されるグルタミン酸誘導体又はその医薬的に許容しうる塩を含有する、糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤。
  2. 一般式（Ｉ）において、
    　Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５が、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲノ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していても良いＣ１−６アルキル基、置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシ基又は置換基を有していても良いＣ１−６モノ若しくはジアルキルアミノ基から選択される基であり、
    　Ｒ２は、ニトロ基、スルホ基、又は基
    　若しくは
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000008
    　から選択される基であり、かつ
    　Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素原子又は置換基を有していても良いＣ１−６アルキル基であり、
    　Ｘはメチレン基又は酸素原子である、請求項１記載の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤。
  3. 一般式（Ｉ）において、
    　Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、及び、Ｒ５が、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲノ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していても良いＣ１−３アルキル基、置換基を有していても良いＣ１−３アルコキシ基又は置換基を有していても良いＣ１−３モノ若しくはジアルキルアミノ基から選択される基であり、
    　Ｒ２が、ニトロ基、スルホ基、又は基
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000009
    　若しくは
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000010
    　から選択される基であり、かつ
    　Ｒ６及びＲ７が、それぞれ独立して、水素原子又はメチル基である、請求項１又は２に記載の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤。
  4. 一般式（Ｉ）において、
    　Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５が、それぞれ独立して、水素原子、クロロ基若しくはブロモ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、アミノ基、メチル基又はメトキシ基から選択される基であり、
    　Ｒ２が、ニトロ基、スルホ基又は基
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000011
    　若しくは
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000012
    　から選択される基であり、
    　Ｒ６が、水素原子又はメチル基であり、
    　Ｒ７が水素原子であり、かつ、
    　Ｘがメチレン基である、
    　請求項１~３のいずれかに記載の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤。
  5. 一般式（Ｉ）において、
    　Ｒ２がスルホ基、カルボン酸基又はホスホン酸基である、請求項１~４のいずれか１項記載の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤。
  6. 一般式（Ｉ）において、
    　Ｅが、ヒドロキシル基又は置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシ基である、請求項１~５のいずれかに記載の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤。
  7. 一般式（Ｉ）において、
    　Ｅが、Ｃ１−６のアルコキシ基、又は、下記基：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-I000013
    （式（ＩＩａ）中、Ｚは置換基を有していても良いＣ１−６炭化水素の２価基を示し、Ｅ１は、置換基を有していても良いＣ１−６アシルオキシ基、置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシカルボニルオキシ基、置換基を有していても良いアミノ基、カルボキシル基、置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシカルボニル基、ハロゲン原子、アリール基、ヘテロアリール基、置換基を有していても良いＣ１−６アルコキシ基、又は、置換基を有していても良いカルバモイル基を示し、また、ＺとＥ１は一体となって環を形成しても良い）である、請求項１~６のいずれかに記載の糖尿病又は肥満症の予防又は治療剤。
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