TWI685494B

TWI685494B - 稠環或三環芳基嘧啶化合物用作激酶抑制劑

Info

Publication number: TWI685494B
Application number: TW105112975A
Authority: TW
Inventors: 照中丁; 曙輝陳; 趙保平; 劉希樂; 肖琳霞; 丁超; 王非; 健黎
Original assignee: 大陸商廣東眾生藥業股份有限公司
Priority date: 2015-04-29
Filing date: 2016-04-26
Publication date: 2020-02-21
Also published as: TW201808953A; TW201643168A; TWI687420B

Abstract

本發明公佈了一種稠環或三環芳基嘧啶化合物作為突變選擇性的EGFR 抑制劑。具體地，本發明公開了作為EGFR抑制劑的式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽。

Description

稠環或三環芳基嘧啶化合物用作激酶抑制劑

本發明涉及一種稠環或三環芳基嘧啶化合物作為突變選擇性的EGFR抑制劑。具體地，本發明涉及作為EGFR抑制劑的式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽。

蛋白酪氨酸激酶是一類催化位於蛋白質底物上的磷酸基團從ATP或GTP轉移到酪氨酸殘基的酶。受體酪氨酸激酶通過從細胞外到細胞內傳遞信號引起磷酸化來啟動次級信號通路。多種細胞過程都是由這些信號調控，包括增殖，碳水化合物利用，蛋白質合成，血管生成，細胞生長和細胞存活。此外，許多疾病或病症是與一種或多種激酶的活性失常，異常或失調相關。

表皮生長因數受體屬於跨膜酪氨酸激酶受體ErbB家族，該家族包括EGFR(也稱為的ErbB或HER1)，ErbB2的(HER2或neu基因)，ErbB3的(HER3)和ErbB4(HER4)。除HER3以外，均具有酪氨酸激酶活性。所述EGFR/ErbB家族酪氨酸激酶受體在細胞增殖，分化和凋亡中具有不可或缺的作用，並因此成為用於防止腫瘤生長和轉移的有效靶標。第一代的表皮生長因數受體酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKI中)，包括吉非替尼(J Med 2004；350：2129-39)和厄洛替尼(Lancet Oncol 2011；12：735-42)，它們已被證明在具有體細胞活化突變的晚期NSCLC患者中是有效的。這些突變在編碼表皮生長因數受體的激酶結構域，如多核苷酸19號外顯子的框內缺失和21號外顯子上的858位的亮氨酸置換為精氨酸的點突變(L858R)(Nat Rev Cancer 2007；7：169-81)。然而，病人在接受第一代EGFR-TKIs後最終會由於耐藥而導致腫瘤產生繼發性生長。790號位的蘇氨酸置換為甲硫氨酸(T790M)的二次突變是最普遍認為的耐藥機制。這種突變在50%~60%疾病出現進展的病人的腫瘤細胞中被檢測出來(N Engl J Med 2005；353：207-8)。第二代EGFR-TKIs，如阿法替尼(Lancet Oncol 2014；15：213-22)和dacomitinib(Cancer 2014；120：1145-54)的開發用以克服一代TKIs產生的耐藥性。它們可以不可逆的共價結合EGFR上797位的半胱氨酸。共價機制被認為可以克服雙突變體所增加的ATP的親和力。然而半胱氨酸-797存在於所有形式的EGFR中。因此這些第二代的化合物，不僅對活性突變和二次突變的EGFR有活性，而且對野生型的EGFR也具有活性。對野生型EGFR的抑制不被認為有助於其臨床療效，而是會導致皮疹和腹瀉的副作用(Curr.Med.Chem.2006,13,3483-3492)。

因此第三代EGFR-TKIs，包括AZD9291(Cancer Discov 2014；4：1046-61),CO-1686(Cancer Res.2013；19：2240-2247)和HM61713(US 2013011213)，它們是口服的不可逆的具有突變選擇性的EGFR-TKIs，可以抑制T790M突變和傳統的EGFR突變，而對野生型EGFR沒有作用。它們在T790M陽性腫瘤中有高效，但他們仍然存在一定的毒性，像依然會產生腹瀉，皮疹，噁心甚至高血糖等臨床副作用((J Clin Oncol 2014；32：abstr 8009；J Clin Oncol 2014；32：abstr 8010)。很顯然，一個具有更高活性和低毒性的化合物會帶來更大好處。

本發明涉及一系列新型的稠合或三環芳基嘧啶化合物，該系列化合物對敏感突變和雙突變的EGFR(敏感和T790M耐藥)顯示出優良的活性，並對野生型EGFR具有較高選擇性。它們對由表皮生長因數受體的酶的異常引起的疾病有可能提供更有效的治療。

本發明的目的在於提供式(I)所示化合物或其藥學上可接受的鹽，

其中，W選自：

、

、

；n=0、1或2； m=1、2或3Y₁、Y₂、Y₃、和Y₄分別獨立地選自-O-、-S-、-C(R)₂-、-N(R)-、 -S(=O)₂-、-S(=O)-、-C(=O)-、-C(=S)-；X₁選自CR_X1、N；X₂選自CR_X2、N；X₃選自CR_X3、N；R_X1、R_X2、R_X3分別獨立地選自H、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH₂，或R_X1、R_X2、R_X3分別獨立地選自任選被1、2、3或4個R取代的：C_1-6烷基、C_1-6雜烷基；R₁選自H、F、Cl、Me、CN、CF₃；R₂選自R₀₂、OR₀₂、SR₀₂；R₀₂獨立地選自任選被1、2、3或4個R取代的：C_1-4烷基、C_1-4雜烷基、C_3-5環烷基-(CH₂)_0-3-；R₃選自任選被1、2、3或4個R取代的：C_1-6烷基、C_1-6雜烷基、C₂-₄炔基、3~7元環烷基、3~7元環烷基-L-、3~7元雜環烷基、3~7元雜環烷基-L-；L選自-O-、-S-、-C(=O)-、-S(=O)₂-、-S(=O)-，或L選自任選被1、2、3或4個R取代的：NH,C_1-4烷基、C_1-4雜烷基；“雜”代表雜原子或雜原子團，其選自：-C(=O)NH-、-NH-、-O-、-S-、N、=O、=S、-C(=O)O-、-C(=O)-、-C(=S)-、-S(=O)-、-S(=O)₂-；雜原子或雜原子團的數目分別獨立地選自0、1、2、3；R選自H、F、Cl、Br、I、OH、CN，或R選自任選被1、2、3或4個R’取代的：NH₂、C_1-4烷基、C_1-4雜烷基、3~7元環烷基、或3~7元雜環烷基；R’選自F、Cl、Br、I、CN、OH、NH₂、CF₃、NHCH₃、CH₂OCH₃、N(CH₃)₂。

本發明的一個方案中，上述R選自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、 CN、Me、Et、CF₃、N(CH₃)₂、N(CD₃)₂、NHCH₃、

、

。

本發明的一個方案中，上述Y₁、Y₂、Y₃和Y₄分別獨立地選自：-O-、-S-、-CH₂-、-CF₂-、-CHF-、-C(Me)₂-、-CH(Me)-、-CH(OH)-、-C(=O)-、-S(=O)₂-、-S(=O)-。

本發明的一個方案中，上述Y1和Y3選自：-CH2-、-C(Me)2-、-CH(Me)-、-C(=O)-、-CF2-、-CHF-、-CH(OH)-。

本發明的一個方案中，上述Y₂和Y₄分別獨立選自：單鍵、-O-、-S-、-S(=O)₂-、-CH₂-、-C(Me)₂-、-C(=O)-、-CF₂-、-CH(OH)-、-CH(Me)-、-CHF-。

本發明的一個方案中，上述結構單元

選自：

本發明的一個方案中，上述結構單元

選自：

、

本發明的一個方案中，上述結構單元

選自：

、

本發明的一個方案中，上述L選自-O-、-S-、-C(=O)-、-S(=O)₂-、-S(=O)-，或L選自任選被1、2或3個R取代的：NH、C_1-3烷基、-O-C_1-3烷基、-S-烷基、-NH-C_1-3烷基。

本發明的一個方案中，上述L選自：-O-、-S-、-C(=O)-、-S(=O)₂-、 -S(=O)-，或L選自任選被1、2或3個R取代的：-NH-、-CH₂-、

、

、

本發明的一個方案中，上述L選自：-O-、-S-、-C(=O)-、-NH-、 -N(CH₃)-、-CH₂-、

、

、

、

、

。

本發明的一個方案中，上述R₃選自任選被1、2、3或4個R取代的：-C_1-4烷基、-NH-C_1-4烷基、-NH-C(=O)-C_1-4烷基、-O-C_1-4烷基、-S-烷基、-S(=O)-C_1-4烷基、-S(=O)₂-C_1-4烷基、C₂-₃炔基、3~6元環烷基、3~6元環烷基-L-、3~6元雜環烷基、3~6元雜環烷基-L-，所述“雜”代表雜原子或雜原子團，其選自：-C(=O)NH-、-NH-、-O-、-S-、N、=O、=S、-C(=O)O-、-C(=O)-、-C(=S)-、-S(=O)-、-S(=O)₂-，雜原子或雜原子團的數目分別獨立地選自0、1、2、3。

本發明的一個方案中，上述R₃選自任選被1、2、3或4個R取代的：

本發明的一個方案中，上述R₃選自：

、

、

、

本發明的一個方案中，上述R₀₂選自Me、CHF₂、CH₂CH₃、CH(CH₃)₂。

本發明的一個方案中，上述化合物選自：

定義和說明。

除非另有說明，本文所用的下列術語和短語旨在具有下列含義。一個特定的術語或短語在沒有特別定義的情況下不應該被認為是不確定的或不清楚的，而應該按照普通的含義去理解。當本文中出現商品名時，意在指代其對應的商品或其活性成分。

C_1-6選自C₁、C₂、C₃、C₄、C₅和C₆；3~7元選自3元、4元、5元、6元和7元。

這裡所採用的術語“藥學上可接受的”，是針對那些化合物、材料、組合物和/或劑型而言，它們在可靠的醫學判斷的範圍之內，適用於與人類和動物的組織接觸使用，而沒有過多的毒性、刺激性、過敏性反應或其它問題或併發症，與合理的利益/風險比相稱。

術語“藥學上可接受的鹽”是指本發明化合物的鹽，由本發明發現的具有特定取代基的化合物與相對無毒的酸或鹼製備。當本發明的化合物中含有相對酸性的功能團時，可以通過在純的溶液或合適的惰性溶劑中用足夠量的鹼與這類化合物的中性形式接觸的方式獲得鹼加成鹽。藥學上可接受的鹼加成鹽包括鈉、鉀、鈣、銨、有機氨或鎂鹽或類似的鹽。當本發明的化合物中含有相對鹼性的官能團時，可以通過在純的溶液或合適的惰性溶劑中用足夠量的酸與這類化合物的中性形式接觸的方式獲得酸加成鹽。藥學上可接受的酸加成鹽的實例包括無機酸鹽，所述無機酸包括例如鹽酸、氫溴酸、硝酸、碳酸，碳酸氫根，磷酸、磷酸一氫根、磷酸二氫根、硫酸、硫酸氫根、氫碘酸、亞磷酸等；以及有機酸鹽，所述有機酸包括如乙酸、丙酸、異丁酸、馬來酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、反丁烯二酸、乳酸、扁桃酸、鄰苯二甲酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、檸檬酸、酒石酸和甲磺酸等類似的酸；還包括氨基酸(如精氨酸等)的鹽，以及如葡糖醛酸等有機酸的鹽(參見Berge et al.,"Pharmaceutical Salts",Journal of Pharmaceutical Science 66：1-19(1977))。本發明的某些特定的化合物含有鹼性和酸性的官能團，從而可以被轉換成任一鹼或酸加成鹽。

優選地，以常規方式使鹽與鹼或酸接觸，再分離母體化合物，由此再生化合物的中性形式。化合物的母體形式與其各種鹽的形式的不同之處在於某些物理性質，例如在極性溶劑中的溶解度不同。

本文所用的“藥學上可接受的鹽”屬於本發明化合物的衍生物，其中，通過與酸成鹽或與鹼成鹽的方式修飾所述母體化合物。藥學上可接受的鹽的實例包括但不限於：鹼基比如胺的無機酸或有機酸鹽、酸根比如羧酸的鹼金屬或有機鹽等等。藥學上可接受的鹽包括常規的無毒性的鹽或母體化合物的第四銨鹽，例如無毒的無機酸或有機酸所形成的鹽。常規的無毒性的鹽包括但不限於那些衍生自無機酸和有機酸的鹽，所述的無機酸或有機酸選自2-乙醯氧基苯甲酸、2-羥基乙磺酸、乙酸、抗壞血酸、苯磺酸、苯甲酸、碳酸氫根、碳酸、檸檬酸、依地酸、乙烷二磺酸、乙烷磺酸、富馬酸、葡庚糖、葡糖酸、谷氨酸、乙醇酸、氫溴酸、鹽酸、氫碘酸鹽、羥基、羥萘、羥乙磺酸、乳酸、乳糖、十二烷基磺酸、馬來酸、蘋果酸、扁桃酸、甲烷磺酸、硝酸、草酸、雙羥萘酸、泛酸、苯乙酸、磷酸、多聚半乳糖醛、丙酸、水楊酸、硬脂酸、亞乙酸、琥珀酸、氨基磺酸、對氨基苯磺酸、硫酸、單寧、酒石酸和對甲苯磺酸。

本發明的藥學上可接受的鹽可由含有酸根或鹼基的母體化合物通過常規化學方法合成。一般情況下，這樣的鹽的製備方法是：在水或有機溶劑或兩者的混合物中，經由游離酸或鹼形式的這些化合物與化學計量的適當的鹼或酸反應來製備。一般地，優選醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈等非水介質。

除了鹽的形式，本發明所提供的化合物還存在前藥形式。本文所描述的化合物的前藥容易地在生理條件下發生化學變化從而轉化成本發明的化合物。此外，前體藥物可以在體內環境中通過化學或生化方法被轉換到本發明的化合物。

本發明的某些化合物可以以非溶劑化形式或者溶劑化形式存在，包括水合物形式。一般而言，溶劑化形式與非溶劑化的形式相當，都包含在本發明的範圍之內。本發明的某些化合物可以以多晶或無定形形式存在。

本發明的某些化合物可以具有不對稱碳原子(光學中心)或雙鍵。外消旋體、非對映異構體、幾何異構體和單個的異構體都包括在本發明的範圍之內。

本文中消旋體、ambiscalemic and scalemic或者對映體純的化合物的圖示法來自Maehr,J.Chem.Ed.1985,62：114-120。1985年，62：114-120。除非另有說明，用楔形鍵和虛線鍵表示一個立體中心的絕對構型。當本文所述化合物含有烯屬雙鍵或其它幾何不對稱中心，除非另有規定，它們包括E、Z幾何異構體。同樣地，所有的互變異構形式均包括在本發明的範圍之內。

本發明的化合物可以存在特定的幾何或立體異構體形式。本發明設想所有的這類化合物，包括順式和反式異構體、(-)-和(+)-對對映體、(R)-和(S)-對映體、非對映異構體、(D)-異構體、(L)-異構體，及其外消旋混合物和其他混合物，例如對映異構體或非對映體富集的混合物，所有這些混合物都屬於本發明的範圍之內。烷基等取代基中可存在另外的不對稱碳原子。所有這些異構體以及它們的混合物，均包括在本發明的範圍之內。

可以通過的手性合成或手性試劑或者其他常規技術製備光學活性的(R)-和(S)-異構體以及D和L異構體。如果想得到本發明某化合物的一種對映體，可以通過不對稱合成或者具有手性助劑的衍生作用來製備，其中將所得非對映體混合物分離，並且輔助基團裂開以提供純的所需對映異構體。或者，當分子中含有鹼性官能團(如氨基)或酸性官能團(如羧基)時，與適當的光學活性的酸或鹼形成非對映異構體的鹽，然後通過本領域所公知的分步結晶法或色譜法進行非對映異構體拆分，然後回收得到純的對映體。此外，對映異構體和非對映異構體的分離通常是通過使用色譜法完成的，所述色譜法採用手性固定相，並任選地與化學衍生法相結合(例如由胺生成氨基甲酸鹽)。

本發明的化合物可以在一個或多個構成該化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素標記化合物，比如氚(³H)，碘-125(¹²⁵I)或C-14(¹⁴C)。本發明的化合物的所有同位素組成的變換，無論放射性與否，都包括在本發明的範圍之內。

術語“藥學上可接受的載體”是指能夠遞送本發明有效量活性物質、不干擾活性物質的生物活性並且對宿主或者患者無毒副作用的任何製劑或載體介質代表性的載體包括水、油、蔬菜和礦物質、膏基、洗劑基質、軟膏基質等。這些基質包括懸浮劑、增粘劑、透皮促進劑等。它們的製劑為化妝品領域或局部藥物領域的技術人員所周知。關於載體的其他資訊，可以參考Remington：The Science and Practice of Pharmacy,21st Ed.,Lippincott,Williams & Wilkins(2005)，該文獻的內容通過引用的方式併入本文。

術語“賦形劑”通常是指配製有效的藥物組合物所需要載體、稀釋劑和/或介質。

針對藥物或藥理學活性劑而言，術語“有效量”或“治療有效量”是指無毒的但能達到預期效果的藥物或藥劑的足夠用量。對於本發明中的口服劑型，組合物中一種活性物質的“有效量”是指與該組合物中另一種活性物質聯用時為了達到預期效果所需要的用量。有效量的確定因人而異，取決於受體的年齡和一般情況，也取決於具體的活性物質，個案中合適的有效量可以由本領域技術人員根據常規試驗確定。

術語“活性成分”、“治療劑”，“活性物質”或“活性劑”是指一種化學實體，它可以有效地治療目標紊亂、疾病或病症。

術語“被取代的”是指特定原子上的任意一個或多個氫原子被取代基取代，包括重氫和氫的變體，只要特定原子的價態是正常的並且取代後的化合物是穩定的。當取代基為酮基(即=O)時，意味著兩個氫原子被取代。酮取代不會發生在芳香基上。術語“任選被取代的”是指可以被取代，也可以不被取代，除非另有規定，取代基的種類和數目在化學上可以實現的基礎上可以是任意的。

當任何變數(例如R)在化合物的組成或結構中出現一次以上時，其在每一種情況下的定義都是獨立的。因此，例如，如果一個基團被0-2個R所取代，則所述基團可以任選地至多被兩個R所取代，並且每種情況下的R都有獨立的選項。此外，取代基和/或其變體的組合只有在這樣的組合會產生穩定的化合物的情況下才是被允許的。

當其中一個變數選自單鍵時，表示其連接的兩個基團直接相連，比如A-L-Z中L代表單鍵時表示該結構實際上是A-Z。

當一個取代基的鍵可以交叉連接到一個環上的兩個原子時，這種取代基可以與這個環上的任意原子相鍵合。當所列舉的取代基中沒有指明其通過哪一個原子連接到化學結構通式中包括但未具體提及的化合物時，這種取代基可以通過其任何原子相鍵合。取代基和/或其變體的組合只有在這樣的組合會產生穩定的化合物的情況下才是被允許的。例如，結構單元

或

表示其可在環己基或者環基二烯上的任意一個位置發生取代。

烷基和雜烷基原子團的取代基一般被稱為“烷基取代基”，它們可以選自但不限於下列基團中的一個或多個：-R’、-OR’、=O、=NR’、=N-OR’、-NR’R”、-SR’、鹵素、-SiR’R”R'''、OC(O)R’、-C(O)R’、-CO₂R’、-CONR’R”、-OC(O)NR’R”、-NR”C(O)R’、NR’C(O)NR”R'''、-NR”C(O)₂R’、-NR'''''-C(NR’R”R''')=NR''''、NR''''C(NR’R”)=NR'''、-S(O)R’、-S(O)₂R’、-S(O)₂NR’R”、NR”SO₂R’、-CN、-NO₂、-N₃、-CH(Ph)₂和氟代(C₁-C₄)烷基，取代基的數目為0~(2m’+1)，其中m’是這類原子團中碳原子的總數。R'、R”、R”'、R''''和R'''''各自獨立地優選氫、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基(例如被1~3個鹵素取代芳基)、被取代或未被取代的烷基、烷氧基、硫代烷氧基基團或芳烷基。當本發明的化合物包括一個以上的R基團時，例如，每一個R基團是獨立地加以選擇的，如同當存在一個以上的R'、R”、R”'、R''''和R'''''基團時的每個這些基團。當R'和R”附著於同一個氮原子時，它們可與該氮原子結合形成5-，6-或7-元環。例如，-NR'R“意在包括但不僅限於1-吡咯烷基和4-嗎啉基。根據上述關於取代基的討論中，本領域技術人員可以理解，術語“烷基”意在包括碳原子鍵合於非氫基團所構成的基團，如鹵代烷基(例如-CF₃、-CH₂CF₃)和醯基(例如-C(O)CH₃、-C(O)CF₃、-C(O)CH₂OCH₃等)。

與烷基原子團所述取代基相似，芳基和雜芳基取代基一般統稱為“芳基取代基”，選自例如-R’、-OR’、-NR’R”、-SR’、-鹵素，-SiR’R”R'''、OC(O)R’、-C(O)R’、-CO2R’、-CONR’R”、-OC(O)NR’R”、-NR”C(O)R’、NR’C(O)NR”R'''、-NR”C(O)2R’、-NR'''''-C(NR’R”R''')=NR''''、NR''''C(NR’R”)=NR'''、-S(O)R’、-S(O)₂R’、-S(O)₂NR’R”、NR”SO₂R’、-CN、-NO₂、-N₃、-CH(Ph)₂、氟(C₁-C₄)烷氧基和氟(C₁-C₄)烷基等，取代基的數量為0到芳香環上開放化合價的總數之間；其中R’、R”、R'''、R''''和R'''''獨立地優選自氫、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基和被取代或未被取代的雜芳基。當本發明的化合物包括一個以上的R基團時，例如，每個R基團是獨立地加以選擇的，如同當存在一個以上R’、R”、R'''、R''''和R'''''基團時的每個這些基團。

除非另有規定，芳基或雜芳基環的相鄰原子上的兩個取代基可以任選地被通式為-T-C(O)-(CRR’)q-U-的取代基所取代，其中T和U獨立地選自-NR-、-O-、CRR'-或單鍵，q是0到3的整數。作為替代選擇，芳基或雜芳基環的相鄰原子上的兩個取代基可以任選地被通式為-A(CH₂)rB-的取代基所取代，其中A和B獨立的選自-CRR’-、-O-、-NR-、-S-、-S(O)-、S(O)₂-、 -S(O)₂NR’-或單鍵，r是1~4的整數。任選地，由此形成的新環上的一個單鍵可以替換為雙鍵。作為替代選擇，芳基或雜芳基環的相鄰原子上的兩個取代基可以任選地被通式為-A(CH₂)r B-的取代基所取代，其中s和d分別獨立的選自0~3的整數，X是-O-、-NR’、-S-、-S(O)-、-S(O)₂-或-S(O)₂NR’-。取代基R、R’、R”和R'''分別獨立地優選自氫和被取代或未被取代的(C₁-C₆)烷基。

除非另有規定，術語“鹵代素”或“鹵素”本身或作為另一取代基的一部分表示氟、氯、溴或碘原子。此外，術語“鹵代烷基”意在包括單鹵代烷基和多鹵代烷基。例如，術語“鹵代(C₁-C₄)烷基”意在包括但不僅限於三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、4-氯丁基和3-溴丙基等等。

鹵代烷基的實例包括但不僅限於：三氟甲基、三氯甲基、五氟乙基，和五氯乙基。“烷氧基”代表通過氧橋連接的具有特定數目碳原子的上述烷基。C_1-6烷氧基包括C₁、C₂、C₃、C₄、C₅和C₆的烷氧基。烷氧基的例子包括但不限於：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、二級丁氧基、三級丁氧基、正戊氧基和S-戊氧基。“環烷基”包括飽和環基，如環丙基、環丁基或環戊基。3-7環烷基包括C₃、C₄、C₅、C₆和C₇環烷基。“鏈烯基”包括直鏈或支鏈構型的烴鏈，其中該鏈上任何的穩定位點上存在一個或多個碳-碳雙鍵，例如乙烯基和丙烯基。

術語“鹵”或“鹵素”是指氟、氯、溴和碘。

除非另有規定，術語“雜”表示雜原子或雜原子團(即含有雜原子的原子團)，包括碳(C)和氫(H)以外的原子以及含有這些雜原子的原子團，例如包括氧(O)、氮(N)、硫(S)、矽(Si)、鍺(Ge)、鋁(Al)、硼(B)、-O-、-S-、=O、=S、-C(=O)O-、-C(=O)-、-C(=S)-、-S(=O)、-S(=O)₂-，以及任選被被取代的-C(=O)N(H)-、-N(H)-、-C(=NH)-、-S(=O)₂N(H)-或-S(=O)N(H)-。

除非另有規定，“環”表示被取代或未被取代的環烷基、雜環烷基、環烯基、雜環烯基、環炔基、雜環炔基、芳基或雜芳基。所謂的環包括單環、聯環、螺環、並環或橋環。環上原子的數目通常被定義為環的元數，例如，“5~7元環”是指環繞排列5~7個原子。除非另有規定，該環任選地包含1~3個雜原子。因此，“5~7元環”包括例如苯基、吡啶和呱啶基；另一方面，術語“5~7元雜環烷基環”包括吡啶基和呱啶基，但不包括苯基。術語“環”還包括含有至少一個環的環系，其中的每一個“環”均獨立地符合上述定義。

除非另有規定，術語“雜環”或“雜環基”意指穩定的含雜原子或雜原子團的單環、雙環或三環，它們可以是飽和的、部分不飽和的或不飽和的(芳族的)，它們包含碳原子和1、2、3或4個獨立地選自N、O和S的環雜原子，其中上述任意雜環可以稠合到一個苯環上形成雙環。氮和硫雜原子可任選被氧化(即NO和S(O)p)。氮原子可以是被取代的或未取代的(即N或NR，其中R是H或本文已經定義過的其他取代基)。該雜環可以附著到任何雜原子或碳原子的側基上從而形成穩定的結構。如果產生的化合物是穩定的，本文所述的雜環可以發生碳位或氮位上的取代。雜環中的氮原子任選地被四級銨化。一個優選方案是，當雜環中S及O原子的總數超過1時，這些雜原子彼此不相鄰。另一個優選方案是，雜環中S及O原子的總數不超過1。如本文所用，術語“芳族雜環基團”或“雜芳基”意指穩定的5、6、7元單環或雙環或7、8、9或10元雙環雜環基的芳香環，它包含碳原子和1、2、3或4個獨立地選自N、O和S的環雜原子。氮原子可以是被取代的或未取代的(即N或NR，其中R是H或本文已經定義過的其他取代基)。氮和硫雜原子可任選被氧化(即NO和S(O)p)。值得注意的是，芳香雜環上S和O原子的總數不超過1。橋環也包含在雜環的定義中。當一個或多個原子(即C、O、N或S)連接兩個不相鄰的碳原子或氮原子時形成橋環。優選的橋環包括但不限於：一個碳原子、兩個碳原子、一個氮原子、兩個氮原子和一個碳-氮基。值得注意的是，一個橋總是將單環轉換成三環。橋環中，環上的取代基也可以出現在橋上。

雜環化合物的實例包括但不限於：吖啶基、吖辛因基、苯並咪唑基、苯並呋喃基、苯並巰基呋喃基、苯並巰基苯基、苯並惡唑基、苯並惡唑啉基、苯並噻唑基、苯並三唑基、苯並四唑基、苯並異惡唑基、苯並異噻唑基、苯並咪唑啉基、哢唑基、4aH-哢唑基、哢啉基、苯並二氫吡喃基、色烯、噌啉基十氫喹啉基、2H,6H-1,5,2-二噻嗪基、二氫呋喃並[2,3-b]四氫呋喃基、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、1H-吲唑基、吲哚烯基、二氫吲哚基、中氮茚基、吲哚基、3H-吲哚基、isatino基、異苯並呋喃基、吡喃、異吲哚基、異二氫吲哚基、異吲哚基、吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、異惡唑基、亞甲二氧基苯基、嗎啉基、萘啶基，八氫異喹啉基、惡二唑基、1,2,3-惡二唑基、1,2’4-惡二唑基、1,2,5-惡二唑基、1,3,4-惡二唑基、惡唑烷基、惡唑基、異惡唑基、羥吲哚基、嘧啶基、菲啶基、菲咯啉基、吩嗪、吩噻嗪、苯並黃嘌呤基、酚惡嗪基、酞嗪基、呱嗪基、呱啶基、呱啶酮基、4-呱啶酮基、胡椒基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑基、噠嗪基、吡啶並惡唑、吡啶並咪唑、吡啶並噻唑、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、2H-吡咯基、吡咯基、吡唑基、喹唑啉基、喹啉基、4H-喹嗪基、喹喔啉基、奎寧環基、四氫呋喃基、四氫異喹啉基、四氫喹啉基、四唑基，6H-1,2,5-噻二嗪基、1,2,3-噻二唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,5-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、異噻唑基噻吩基、噻吩基、噻吩並惡唑基、噻吩並噻唑基、噻吩並咪唑基、噻吩基、三嗪基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,5-三唑基、1,3,4-三唑基和呫噸基。還包括稠環和螺環化合物。

除非另有規定，術語“烴基”或者其下位概念(比如烷基、烯基、炔基、苯基等等)本身或者作為另一取代基的一部分表示直鏈的、支鏈的或環狀的烴原子團或其組合，可以是完全飽和的、單元或多元不飽和的，可以是單取代、二取代或多取代的，可以是一價(如甲基)、二價(如亞甲基)或者多價(如次甲基)，可以包括二價或多價原子團，具有指定數量的碳原子(如C₁-C₁₀表示1至10個碳)。“烴基”包括但不限於脂肪烴基和芳香烴基，所述脂肪烴基包括鏈狀和環狀，具體包括但不限於烷基、烯基、炔基，所述芳香烴基包括但不限於6-12元的芳香烴基，例如苯、萘等。在一些實施例中，術語“烴基”表示直鏈的或支鏈的原子團或它們的組合，可以是完全飽和的、單元或多元不飽和的，可以包括二價和多價原子團。飽和烴原子團的實例包括但不限於甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第三丁基、異丁基、第二丁基、異丁基、環己基、(環己基)甲基、環丙基甲基，以及正戊基、正己基、正庚基、正辛基等原子團的同系物或異構體。不飽和烷基具有一個或多個雙鍵或三鍵，其實例包括但不限於乙烯基、2-丙烯基、丁烯基、巴豆基、2-異戊烯基、2-(丁二烯基)、2，4-戊二烯基、3-(1，4-戊二烯基)、乙炔基、1-和3-丙炔基，3-丁炔基，以及更高級的同系物和異構體。

除非另有規定，術語“雜烴基”或者其下位概念(比如雜烷基、雜烯基、雜炔基、雜芳基等等)本身或者與另一術語聯合表示穩定的直鏈的、支鏈的或環狀的烴原子團或其組合，有一定數目的碳原子和至少一個雜原子組成。在一些實施例中，術語“雜烷基”本身或者與另一術語聯合表示穩定的直鏈的、支鏈的烴原子團或其組合物，有一定數目的碳原子和至少一個雜原子組成。在一個典型實施例中，雜原子選自B、O、N和S，其中氮和硫原子任選地被氧化，氮雜原子任選地被四級銨化。雜原子或雜原子團可以位於雜烴基的任何內部位置(包括該烴基附著於分子其餘部分的位置)。實例包括但不限於-CH₂-CH₂-O-CH₃、-CH₂-CH₂-NH-CH₃、-CH₂-CH₂-N(CH₃)-CH₃、-CH₂-S-CH₂-CH₃、-CH₂-CH₂、-S(O)-CH₃、-CH₂-CH₂-S(O)₂-CH₃、-CH=CH-O-CH₃、-CH₂-CH=N-OCH₃和-CH=CH-N(CH₃)-CH₃。至多兩個雜原子可以是連續的，例如-CH₂-NH-OCH₃。

除非另有規定，術語“烷氧基”、“烷氨基”和“烷硫基”(或硫代烷氧基)屬於慣用表達，是指分別通過一個氧原子、氨基或硫原子連接到分子的其餘部分的那些烷基基團。

除非另有規定，術語“環烴基”、“雜環烴基”或者其下位概念(比如芳基、雜芳基、環烷基、雜環烷基、環烯基、雜環烯基、環炔基、雜環炔基等等)本身或與其他術語聯合分別表示環化的“烴基”、“雜烴基”。此外，就雜烴基或雜環烴基(比如雜烷基、雜環烷基)而言，雜原子可以佔據該雜環附著於分子其餘部分的位置。環烷基的實例包括但不限於環戊基、環己基、1-環己烯基、3-環己烯基、環庚基等。雜環基的非限制性實例包括1-(1,2,5,6-四氫吡啶基)、1-呱啶基、2-呱啶基，3-呱啶基、4-嗎啉基、3-嗎啉基、四氫呋喃-2-基、四氫呋喃吲哚-3-基、四氫噻吩-2-基、四氫噻吩-3-基，1-呱嗪基和2-呱嗪基。

除非另有規定，術語“芳基”表示多不飽和的芳族烴取代基，可以是單取代、二取代或多取代的，可以是一價、二價或者多價，它可以是單環或多環(比如1至3個環；其中至少一個環是芳族的)，它們稠合在一起或共價連接。術語“雜芳基”是指含有一至四個雜原子的芳基(或環)。在一個示範性實例中，雜原子選自B、N、O和S，其中氮和硫原子任選地被氧化，氮原子任選地被四級銨化。雜芳基可通過雜原子連接到分子的其餘部分。芳基或雜芳基的非限制性實施例包括苯基、1-萘基、2-萘基、4-聯苯基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、吡嗪基、2-惡唑基、4-惡唑基、2-苯基-4-惡唑基、5-惡唑基、3-異惡唑基、4-異惡唑基、5-異惡唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-苯並噻唑基、嘌呤基、2-苯並咪唑基、5-吲哚基、1-異喹啉基、5-異喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔啉基、3-喹啉基和6-喹啉基。除非另有規定，芳基在與其他術語聯合使用時(例如芳氧基、芳硫基、芳烷基)包括如上定義的芳基和雜芳基環。因此，術語“芳烷基”意在包括芳基附著於烷基的那些原子團(例如苄基、苯乙基、吡啶基甲基等)，包括其中碳原子(如亞甲基)已經被例如氧原子代替的那些烷基，例如苯氧基甲基、2-吡啶氧甲基3-(1-萘氧基)丙基等。

術語“離去基團”是指可以被另一種官能團或原子通過取代反應(例如親和取代反應)所取代的官能團或原子。例如，代表性的離去基團包括三氟甲磺酸酯；氯、溴、碘；磺酸酯基，如甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、對溴苯磺酸酯、對甲苯磺酸酯等；醯氧基，如乙醯氧基、三氟乙醯氧基等等。

術語“保護基”包括但不限於“氨基保護基”、“羥基保護基”或“巰基保護基”。術語“氨基保護基”是指適合用於阻止氨基氮位上副反應的保護基團。代表性的氨基保護基包括但不限於：甲醯基；醯基，例如鏈烷醯基(如乙醯基、三氯乙醯基或三氟乙醯基)；烷氧基羰基，如第三丁氧基羰基(Boc)；芳基甲氧羰基，如苄氧羰基(Cbz)和9-芴甲氧羰基(Fmoc)；芳基甲基，如苄基(Bn)、三苯甲基(Tr)、1,1-二-(4'-甲氧基苯基)甲基；甲矽烷基，如三甲基甲矽烷基(TMS)和第三丁基二甲基甲矽烷基(TBS)等等。術語“羥基保護基”是指適合用於阻止羥基副反應的保護基。代表性羥基保護基包括但不限於：烷基，如甲基、乙基和第三丁基；醯基，例如鏈烷醯基(如乙醯基)；芳基甲基，如苄基(Bn)，對甲氧基苄基(PMB)、9-芴基甲基(Fm)和二苯基甲基(二苯甲基，DPM)；甲矽烷基，如三甲基甲矽烷基(TMS)和第三丁基二甲基甲矽烷基(TBS)等等。

本發明的化合物可以通過本領域技術人員所熟知的多種合成方法來製備，包括下面列舉的具體實施方式、其與其他化學合成方法的結合所形成的實施方式以及本領域技術上人員所熟知的等同替換方式，優選的實施方式包括但不限於本發明的實施例。

本發明所使用的溶劑可經市售獲得。本發明採用下述縮略詞：aq代表水；DCM代表二氯甲烷；PE代表石油醚；DMF代表N，N-二甲基甲醯胺；DMA代表N，N-二甲基乙醯胺；MeCN代表乙腈；NMP代表N-甲基-2-吡咯烷酮；DME代表1,2-二甲氧基乙烷；TsOH代表對甲苯磺酸；DMSO代表二甲亞碸；EtOH代表乙醇；MeOH代表甲醇；HOAc代表乙酸；NaCNBH3代表氰基硼氫化鈉；THF代表四氫呋喃；Boc2O代表二-第三丁基二碳酸酯；TFA代表三氟乙酸；DIEA代表二異丙基乙基胺；Pd(dppf)Cl2代表[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)；NaH代表氫化鈉；LAH代表氫化鋁鋰；Pd(OAc)₂代表鈀(II)乙酸鹽；Pd₂(dba)₃代表三(二亞苄基丙酮)二鈀；Xantphos代表4,5-雙(二苯基膦基)-9,9-二甲基；MeSO₃H代表甲磺酸；t-BuOK代表第三丁醇鉀；MsCl代表甲烷磺醯氯；HATU代表O-(7-氮雜苯並三唑-1-基)-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸鹽；Cs₂CO₃代表碳酸銫；K₂CO₃代表碳酸鉀；NaHCO₃代表碳酸氫鈉；Na₂SO₄代表硫酸鈉；KOAc代表醋酸鉀；t-BuOH代表第三丁醇；TFAA代表三氟乙酸酐；FA代表甲酸；DBU代表1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯；m-CPBA代表3-氯過氧苯甲酸；DAST代表二乙基氨基三氟化硫。

化合物經手工或者ChemDraw^®軟體命名，市售化合物採用供應商目錄名稱。

在一些實施例中，具有式(I)的化合物可以按照方案A中所述的合成方法製備。其中W選自以下結構：

方案A：

在上述方案A中，二氯嘧啶衍生物(A)在路易士酸如FeCl₃或AlCl₃的存在下與富電的三環或二環化合物(B)發生類富克反應，或者與硼酸酯(C)經由Suzuki偶合反應生成化合物(D)。化合物(D)與芳胺(E)在如TsOH或TfOH酸存在下經由SNAr取代，或在鈀催化下，在鹼如無水磷酸鉀，在配體如XPhos存在下發生偶合反應得到(F)，收率中等到優良。(F)與不同的親核試劑如N1，N1二甲基乙烷-1,2-二胺，在鹼如DIEA存在下得到化合物(G)，它可以在還原劑如Pd/C,NH4Cl/Fe條件下還原得到胺(H)。胺(H)可以與丙烯醯氯(I)在鹼如DIEA存在下，在低溫如((-40~0℃))直接醯化得式一化合物(K)，也可以由胺(H)與3-氯代丙醯氯(J)先經一步醯化，再在鹼如NaOH存下發生消除反應得到式一的化合物(K)。

方案B為合成

的一般方法，其中n等於0，Y₁、Y₂和Y₃ 是CH₂。

方案B：

醛(L)與磷酸酯經由wittig反應得到(M)，用還原劑如LAH還原(M)，接著用MsCl酯化得到(N)，(N)可在鹼如NaH存在下環化得到(O)，它可以與二氯嘧啶衍生物(A)按照方案A反應得到(D)。

方案C為合成

的一般方法，其中n等於1，Y₁和Y₃是 CH₂，Y₂是O。

取代2-羥甲基吲哚(P)與二苯基乙烯基鋶鹽(Q)在鹼如氫氧化鉀，溶劑如二氯甲烷的存在下經由加成和分子內關環反應得到(R)，它可以與二氯嘧啶衍生物(A)按照方案A反應得到(D)。

方案D為合成

的一般方法，其中Y₁、Y₂和Y₃是CH₂。

流程C：

取代的7-羥基吲哚與鹵代醇(T)經由Mitsunobu反應得吲哚衍生物(U)，化合物(U)在鹼如鈉氫的存在下關環得到化合物(V)，它可以與二氯嘧啶衍生物(A)按照方案A反應得到(D)。

下面的說明性實施例已使用本文公開的方法的方法進行製備，分離和表徵。為了更詳細地說明本發明，給出下列實例，但本發明的範圍並非限定於此。

流程1

中間體A和B的一般製備方法：

實施例A1。

4-氟-2-甲氧基苯胺。

將2-甲氧基-4-氟硝基苯(100.00克，584.35毫莫耳)溶於甲醇(400mL)中，氮氣置換後加入Pd/C(10%，10克)。混合物在H₂中(壓力為50Psi)加熱至40℃，攪拌12小時。TLC顯示反應完成，將反應混合物過濾，濾液濃縮至乾，得到標題化合物(紅色油狀，83.00克，產率93.28%)。LCMS(ESI)(10-80CD)：m/z：142.1[M+1]。

實施例A2。

4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺。

在0℃下，將實施例A1(83.00克，558.67毫莫耳)慢慢滴加至濃H₂SO₄(415mL)中，然後分批加入KNO₃(56.48克，558.67毫莫耳)。混合物在0-10℃下攪拌3小時。TLC顯示反應完成，向反應混合物中加入NH₃．H₂O至pH為8，溫度控制在10℃下。將得到的混合物過濾，濾餅用水(500mL)洗滌後，溶於DCM(1L)，並用無水硫酸鈉乾燥，濃縮後，用柱色譜(PE：DCM=5：1，1：10)分離純化，得到標題化合物(黃色固體，60.00克，產率54.81%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 7.40(d,J=7.2Hz,1 H),6.64(d,J=12.4Hz,1 H),3.86-3.97(m,5 H)。

實施例A3。

(E)-乙基3-(1H-吲哚-2-基)丙烯酸乙酯。

在0℃下，將2-膦酸二乙酯-乙酸乙酯(18.53克，82.67毫莫耳)溶於THF(100mL)，向該混合物中加入NaH(4.13克，60%w，103.33毫莫耳)，攪拌1小時。再滴加入1-氫-2-甲醛吲哚(10克，69.89毫莫耳)的THF(80mL)溶液，升溫至20℃，攪拌10小時。TLC顯示反應完成，向反應混合物中加入飽和NH₄Cl(100mL)溶液，濃縮除去THF後，用EA(100mL x 3)萃取，並用飽和食鹽水(100mL x 2)洗滌後，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到標題化合物(黃色固體，12.20克，產率74.05%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ,8.60(br.s.,1H),7.71(d,J=16.0Hz,1H),7.64(d,J=8.0Hz,1H),7.39(d,J=8.4Hz,1H),7.30-7.26(m,1H),7.15-7.14(m,1H),6.84(s,1H),6.28(d,J=16.0Hz,1H),4.33-4.28(m,2H),1.39-1.35(m,3H)。

實施例A4。

3-(1H-吲哚-2-基)丙-1-醇。

在0℃下，將LiAlH₄(4.58克，120.79毫莫耳)懸浮於THF(100mL)，向該混合物中加入實施例A3(13.00克，60.69毫莫耳)的THF(50mL)溶液，攪拌8小時。TLC顯示反應完成，向反應混合物中依次加入水(4.5mL)、15%的NaOH(4.5mL)溶液和水(13.5mL)，攪拌30分鐘，無水硫酸鎂乾燥。混合物過濾，濾液濃縮後，用柱色譜(PE：EA=6：1，1：1)分離純化，得到標題化合物(黃色油狀，9.00克，產率76.54%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.25(s,1H),7.56(d,J=7.6Hz,1H),7.34-7.27(m,1H),7.18-7.08(m,2H),6.27(s,1H),3.83-3.71(m,2H),2.94-2.81(m,2H),2.04-1.91(m,2H)。

實施例A5。

3-(1H-吲哚-2-基)丙基甲磺酸酯。

在0℃下，將實施例A4(9.23克，42.12毫莫耳)和TEA(8.52克，84.24毫莫耳)溶於DCM(100mL)，向該混合物中加入甲磺醯氯(7.24克，63.18毫莫耳)，攪拌10小時。TLC顯示反應完成，向混合物中加入水(30mL)，用DCM(30mL x3)萃取，有機層經無水硫酸鈉乾燥，濃縮後，用柱色譜(PE：EA=20：1，3：1)分離純化，得到標題化合物(棕色固體，4.50克，產率37.96%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.25(s,1H),7.56(d,J=7.6Hz,1H),7.34-7.27(m,1H),7.18-7.08(m,2H),6.28(s,1H),4.32-4.29(m,2H),3.02(s,3H),2.94-2.90(m,2H),2.20-2.13(m,2H)。

實施例A6。

2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-α]吲哚。

在25℃下，將實施例A5(4.50克，17.76毫莫耳)溶於THF(150mL)，向該混合物中加入NaH(852.48毫克，60%w，35.52毫莫耳)，攪拌12小時。TLC顯示反應完成，向混合物中加入飽和NH₄Cl溶液至呈中性，濃縮除去THF後，用EA(30mL x3)萃取，有機層經無水硫酸鈉乾燥，濃縮後，用柱色譜(PE：EA=200：1，100：1)分離純化，得到標題化合物(黃色固體，2.80克，產率95.27%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 7.57(d,J=8.8Hz,1H),7.28-7.24(m,1H),7.14-7.11(m,1H),7.10-7.04(m,1H),6.19(br.s.,1H),4.12-4.06(m,2H),3.09-3.00(m,2H),2.69-2.59(m,2H)。

實施例A。

9-(2-氯嘧啶-4-基)-2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-α]吲哚。

將實施例A6(3.50克，22.26毫莫耳)與2，4-二氯嘧啶(6.63克，44.53毫莫耳)溶於DME(40mL)，向該混合物中加入FeCl₃(3.61克，22.26毫莫耳)，並升溫至70℃攪拌12小時。TLC顯示反應液中有60%的標題化合物和40%的實施例1F，將混合物過濾，濃縮，向其中加入水(20mL)，用EA(20mL x3)萃取，有機層經無水硫酸鈉乾燥，濃縮後，用柱色譜(PE：EA=200：1，100：1)分離純化，得到標題化合物(白色固體，3.00克，產率47.47%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.41(d,J=5.2Hz,1H),8.36-8.31(m,1H),7.38(d,J=5.6Hz,1H),7.33-7.27(m,3H),4.20-4.15(m,2H),3.44-3.37(m,2H),2.79-2.73(m,2H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：269.9[M+1]。

實施例B。

4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)-N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)嘧啶-2-胺。

將實施例A(2.40克，8.90毫莫耳)與2-甲氧基-4-氟-5-硝基苯胺(1.66克，8.90毫莫耳)溶於1，4-二氧六環(40mL)，向該混合物中加入TsOH(1.53克，8.90毫莫耳)，並升溫至120℃攪拌10小時。LCMS顯示反應完成，向混合物中加入飽和NaHCO₃溶液(30mL)，濃縮除去1，4-二氧六環，再加入水(50mL)，用DCM(50mL x3)萃取，有機層經無水硫酸鈉乾燥，濃縮後，得到粗產品。該產品經PE/EA(5：1,20mL x 2)洗滌後，得到標題化合物(黃色固體，3.30克，產率83.99%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 9.46(d,J=8.0Hz,1H),8.41(d,J=5.2Hz,1H),8.33-8.23(m,1H),7.58(s,1H),7.35-7.30(m,1H),7.28-7.24(m,2H),7.15(d,J=5.2Hz,1H),6.78(d,J=12.4Hz,1H),4.22-4.16(m,2H),4.06(s,3H),3.47(t,J=7.2Hz,2H),2.78-2.73(m,2H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：420.0[M+1]。

流程2。

實施例1的一般製備方法：

實施例1。

N-(5-((4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)氨基)-2((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-4-甲氧苯基)丙烯醯胺。

實施例1A。

N1-(4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)-N4-(2-(二甲基氨基)乙基)-2-甲氧基-N 4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

將實施例B(2.80克，6.68毫莫耳)與N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺(1.02克，10.01毫莫耳)溶於DMA(50mL)，向該混合物中加入DIEA(1.29克，10.01毫莫耳)，並升溫至90℃攪拌2小時。LCMS顯示反應完成，混合物濃縮除去DMA，加入水(30mL)，用DCM(50mL x3)萃取，有機層經無水硫酸鈉乾燥，濃縮後，得到粗產品。該產品經PE/EA(5：1,20mL x 2)洗滌後，得到標題化合物(紅色固體，3.20克，產率90.73%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 9.03(s,1H),8.35-8.24(m,2H),7.36(d,J=7.2Hz,1H),7.24-7.12(m,3H),7.09(s,1H),4.21-4.14(m,2H),4.10(s,3H),3.53-3.48(m,2H),3.43-3.37(m,4H),2.99(s,6H),2.88(s,3H),2.76-2.69(m,2H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：502.2[M+1]。

實施例1B。

N4-(4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)-N 1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

在25℃下，將實施例1A(3.20克，6.38毫莫耳)溶於MeOH(100mL)，氮氣置換後加入Pd/C(10%，500毫克)。混合物在H₂中(壓力為15Psi)，攪拌2小時。LCMS顯示反應完成，將反應混合物過濾，濾液濃縮至乾，得到標題化合物(灰色固體，2.42克，產率76.41%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.53-8.48(m,1H),8.33(d,J=5.2Hz,1H),8.16(s,1H),7.56(s,1H),7.33-7.29(m,1H),7.28-7.23(m,2H),6.95(d,J=5.2Hz,1H),6.70(s,1H),4.17(t,J= 7.2Hz,2H),3.87(s,3H),3.39(t,J=7.6Hz,2H),3.22(t,J=6.4Hz,2H),2.83(t,J=6.0Hz,2H),2.78-2.71(m,5H),2.63(s,6H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：472.2[M+1]。

實施例1C。

在-40℃下，將實施例1B(2.40克，5.09毫莫耳)與DIEA(789.40毫克，6.11毫莫耳)溶於DCM(150mL)，向該混合物中加入乙醯氯(460.00毫克，5.09毫莫耳)，攪拌1小時。LCMS顯示有產物，向反應混合物中加入水(100mL)，用DCM(50mL x3)萃取，有機相分離，無水硫酸鈉乾燥並濃縮，得到粗產物，粗產品通過製備HPLC分離純化，得到標題化合物(鹽酸鹽，859.00毫克，產率29.87%)。¹H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 8.30(br.s.,1H),8.01(d,J=7.2Hz,1H),7.88(br.s.,1H),7‧.43-7.39(m,1H),7.31-7.17(m,3H),7.10(s,1H),6.75-6.70(m,1H),6.47(dd,J1=1.6Hz,J2=16.8Hz,1H),5.89-5.84(m,1H),4.22(t,J=7.2Hz,2H),3.98(s,3H),3.65-3.54(m,2H),3.41-3.39(m,4H),2.93(s,6H),2.83(s,3H),2.75(t,J=7.2Hz,2H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：526.2[M+1]。

實施例2。

N-(5-((4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-(3-(二甲基氨基)氮雜環丁烷-1-基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例2A。

4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)-N-(4-(3-(二甲基氨基)氮雜環丁烷-1-基)-2-甲氧基-5-硝基苯基)嘧啶-2-胺。

本實施例根據實施例1A的方法製備，將N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺替換為3-N,N-二甲基胺環丁胺鹽酸鹽。得到標題化合物(紅色固體，180.00毫克，產率90.67%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 9.01(br.s.,1H),8.30-8.12(m,2H),7.28-7.24(m,1H),7.19(d,J=2.4Hz,2H),7.04(d,J=5.6Hz,1H),6.09(s,1H),4.19-4.09(m,4H),3.98-3.96(m,5H),3.60(br.s.,1H),3.19-3.12(m,2H),2.69-2.67(m,2H),2.51(br.s.,6H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：500.2[M+1]。

實施例2B。

N1-(4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)-4-(3-(二甲基氨基)氮雜環丁烷-1-基)-6-甲基苯-1,3-二胺。

本實施例根據實施例1B的方法製備，將實施例1A替換為實施例2A。得到標題化合物(棕色固體，170.00毫克，產率94.50%)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：470.2[M+1]。

實施例2C。

本實施例根據實施例1C的方法製備，將實施例1B替換為實施例2B。得到標題化合物(TFA鹽，40.00毫克，產率26.11%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ 8.97(br.s.,1H),8.29-8.23(m,2H),7.90(s,1H),7.53(s,1H),7.39-7.34(m,1H),7.18-7.12(m,2H),6.97(d,J=5.6Hz,1H),6.53-6.39(m,1H),6.26(s,1H),6.19(dd,J1=2.0Hz,J2=17.2Hz,1H),5.65(d,J=10.4Hz,1H),4.15(t,J=7.2Hz,2H),3.97-3.94(m,2H),3.87(s,3H),3.64-3.62(m,2H),3.31(t,J=7.6Hz,2H),2.66-2.62(m,3H),2.14(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：524.2[M+1]。

實施例3。

N-(5-((4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-4-甲氧苯基)丙烯醯胺。

實施例3A。

4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)-N-(4-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-2-甲氧基-5-硝基苯基)嘧啶-2-胺。

在0-10℃下，將2-N,N-二甲基胺乙醇(47.82毫克，536.47微莫耳)溶於DMA(3mL)，向此混合物中加入實施例B(2.80克，6.68毫莫耳)與N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺，向該混合物中加入NaH(28.61毫克，715.29微莫耳)，並升溫至20-30℃攪拌30分鐘。降溫至0-10℃，再加入實施例B(150.00毫克，357.65微莫耳)的DMA(8mL)溶液，並升溫至40℃攪拌12小時。TLC顯示反應完成，混合物降溫至0-10℃，加入NH₄Cl飽和溶液(8mL)，用DCM(8mL x 3)萃取，有機層經無水硫酸鈉乾燥，濃縮後，用製備板分離純化，得到標題化合物(黃色固體，140.00毫克，產率72.11%)。LCMS(ESI)(10-80AB)：m/z：489.3[M+1]。

實施例3B。

N1-(4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)-4-(2-(二甲基氨基)甲氧基)-6-甲基苯-1,3-二胺。

本實施例根據實施例1B的方法製備，將實施例1A替換為實施例3A。得到標題化合物(黃色固體，70.00毫克，產率34.80%)。LCMS(ESI)(10-80AB)：m/z：459.2[M+1]。

實施例3C。

本實施例根據實施例1C的方法製備，將實施例1B替換為實施例3B。得到標題化合物(FA鹽，20.00毫克，產率24.79%)。¹H NMR(400MHz,MeOH-d4)：δ 8.59-8.63(m,1H),8.45-8.52(m,1H),8.25-8.31(m,1H),8.18-8.25(m,1H),7.27-7.34(m,1H),7.07-7.18(m,2H),7.00-7.05(m,1H),6.87-6.92(m,1H),6.50-6.60(m,1H),6.35-6.44(m,1H),5.79-5.86(m,1H), 4.42-4.50(m,2H),4.11(s,2H),3.99(s,3H),3.38-3.42(m,2H),3.37(s,2H),2.87(s,6H),2.60-2.70(m,2H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：513.2[M+1]。

實施例4。

2-(2-甲氧基-4-(N-甲基)呱嗪-5-丙烯醯胺基苯胺基)-4-(3-(1，2，3-二氫吡咯並[1，2-a]吲哚))嘧啶。

實施例4A。

4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)-N-(2-甲氧基-4-(4-甲基呱嗪-1-基)-5-硝基苯基)嘧啶-2-胺。

本實施例根據實施例1A的方法製備，將N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺替換為N-甲基呱嗪。得到標題化合物(黃色固體，80.00毫克，產率43.88%)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：500.1[M+1]。

實施例4B。

N1-(4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)-6-甲氧基-4-(4-甲基呱嗪-1-基)苯-1,3-二胺。

本實施例根據實施例1B的方法製備，將實施例1A替換為實施例4A。得到標題化合物(黃色固體，80.00毫克，產率43.88%)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：470.1[M+1]。

實施例4C。

N-(5-((4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(4-甲基呱嗪-1-基)苯基)丙烯醯胺。

本實施例根據實施例1C的方法製備，將實施例1B替換為實施例4B。得到標題化合物(FA鹽，17.60毫克，產率19.33%)。¹H NMR(400MHz,METHANOL-d6)：δ 8.85(s,1 H),8.34(br.s.,2H),8.18-8.28(m,2H),7.25-7.30(m,1H),7.09-7.18(m,2H),7.03(d,J=4Hz,1H),6.92(s,1H),6.57(dd,J=16,12Hz,1H),6.31(d,J=20Hz,1H),5.79(d,J=8Hz,1H),4.07(t,J=8Hz,2H),3.95(s,3H),3.32-3.35(m,2H),3.24-3.30(m,4H),3.17(m,4H),2.87(s,3H),2.56-2.66(m,2H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：524.2[M+1]。

實施例5。

N-(5-((4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(甲基(2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)苯基)丙烯醯胺。

實施例5A。

第三丁基(2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基甲酸酯。

在0℃下，將2-吡咯乙胺(2.50克，21.89毫莫耳)溶於THF(50mL)，向該混合物中滴加入(Boc)₂O(4.78克，21.89毫莫耳)，並升溫至15℃攪拌12小時。LCMS顯示反應完成，將混合物濃縮，得到標題化合物(黃色油狀，4.50克，產率95.26%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 5.09(br.s.,1H),3.22(m,2H),2.54(t,J=6.0Hz,2H),2.48(br.s.,4H),1.74(m,4H),1.43(s,9H)。LCMS(0-60CD)：m/z：215.2[M+1]。

實施例5B。

N-甲基-2-(吡咯烷-1-基)乙胺。

在0℃下，將實施例5A(2.00克，9.33毫莫耳)溶於THF(100mL)，向該混合物中分批加入LAH(1.06克，27.99毫莫耳)，並升溫至70℃攪拌12小時。TLC顯示反應完成，升溫至0℃，向反應混合物中依次加入NaOH (1N，2mL)溶液和水(2mL)，將混合物過濾，濾液用DCM(50mL)稀釋，經無水硫酸鈉乾燥後，濃縮，得到標題化合物(黃色油狀，1.00克，產率79.42%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 2.67-2.72(m,2H),2.57-2.61(m,2H),2.48-2.53(m,4H),2.44(s,3H),1.74-1.80(m,4H)。

實施例5C。

N1-(4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)-2-甲氧基-N 4-甲基-5硝基-N-4-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例1A的方法製備，將N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺替換為實施例5B。得到標題化合物(黃色固體，200.00毫克，產率79.49%)。LCMS(5-95AB)：m/z：528.2[M+1]。

實施例5D。

N4-(4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)-5-甲氧基-N 1-甲基-N1-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例1B的方法製備，將實施例1A替換為實施例5C。得到標題化合物(白色固體，160.00毫克，產率81.43%)。LCMS(5-95AB)：m/z：498.2[M+1]。

實施例5E。

本實施例根據實施例1C的方法製備，將實施例1B替換為實施例5D。得到標題化合物(FA鹽，16.20毫克，產率7.34%)。¹H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 8.47(s,1H),8.43(br.s.,1H),8.25-8.29(m,1H),8.23(d,J=4Hz,1H),7.27-7.32(m,1H),7.07-7.15(m,2H),7.03(d,J=8.0Hz,1H),6.95(s,1H),6.36-6.57(m,2H),5.87(dd,J=10,2.0Hz,1H),4.06-4.12(m,2H),4.00(s,3H),3.44-3.53(m,2H),3.32-3.38(m,4H),3.23-3.31(m,4H),2.73(s,3H),2.60-2.68(m,2H),2.09-2.22(m,4H)。LCMS(0-60AB)：m/z：552.3[M+1]。

實施例6。

N-(5-((4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例6A。

N，N-二甲基吡咯烷-3-胺。

在25℃下，將3-(N,N-二甲胺基)吡咯甲酸第三丁酯(300.00毫克，1.40毫莫耳)溶於DCM(20mL)，向該混合物中加入TFA(1.60克，14.00毫莫耳)，並攪拌30分鐘。TLC顯示反應完成，將反應混合物濃縮，得到標題化合物(1.50克，粗品)。

實施例6B。

4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)-N-(4-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)-2-甲氧基-5-硝基苯基)嘧啶-2-胺。

本實施例根據實施例1A的方法製備，將N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺替換為實施例6A。得到標題化合物(黃色固體，250.00毫克，產率75.95%)。LCMS(0-60AB)：m/z：514.2[M+1]。

實施例6C。

N1-(4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)-4-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)-6-甲基苯-1,3-二胺。

本實施例根據實施例1B的方法製備，將實施例1A替換為實施例6B。得到標題化合物(白色固體，200.00毫克，產率80.54%)。LCMS(5-95AB)：m/z：484.2[M+1]。

實施例6D。

本實施例根據實施例1C的方法製備，將實施例1B替換為實施例6C。得到標題化合物(FA鹽，17.75毫克，產率6.17%)。¹H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 8.46(s,1H),8.26-8.15(m,2H),7.28(dd,J=2.0,8.0Hz,1H),7.17-7.10(m,2H),7.00(d,J=6.0Hz,1H),6.71(s,1H),6.59-6.49(m,1H),6.31(dd,J=2.0,16.0Hz,1H),5.76(dd,J=2.0,12.0Hz,1H),4.08(t,J=8.0Hz,2H), 3.93(s,3H),3.37-3.32(m,2H),3.29-3.23(m,4H),3.16-3.06(m,1H),2.67-2.56(m,2H),2.45(s,6H),2.31-2.20(m,1H),2.00-1.90(m,1H)。LCMS(0-60AB)：m/z：538.3[M+1]。

實施例7。

N-(5-((4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((3-(二甲基氨基)丙基)(甲基)氨基)-4-甲氧苯基)丙烯醯胺。

實施例7A。

N1-(4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)-N4-(3-(二甲基氨基)丙基)-2-甲氧基-N--4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例1A的方法製備，將N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺替換為N,N’,N’-三甲基-1,2-丙二胺。得到標題化合物(200.00毫克，粗品)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：516.2[M+1]。

實施例7B。

N4-(4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)-N 1-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例1B的方法製備，將實施例1A替換為實施例7A。得到標題化合物(白色固體，200.00毫克，粗品)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：486.2[M+1]。

實施例7C。

本實施例根據實施例1C的方法製備，將實施例1B替換為實施例7B。得到標題化合物(FA鹽，40.00毫克，產率17.58%)。¹H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 8.78(s,1H),8.45(br.s.,1H),8.19-8.33(m,2H),7.30(d,J=5.09Hz,1H),6.99-7.19(m,3H),6.96(s,1H),6.49-6.71(m,1H),6.33(d,J=16.95Hz, 1H),5.80(d,J=10.55Hz,1H),4.12(t,J=6.88Hz,2H),3.96(s,3H),2.99-3.20(m,4H),2.54-2.93(m,11H),1.76-2.00(m,2H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：540.2[M+1]。

流程3。

實施例8。

N-(5-((4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-(3-(二甲氨基)丙-1-炔-1-基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例8A。

4-溴-2-甲氧基-5-硝基苯胺。

在0~5℃下，將2-甲氧基-4-溴苯胺(5.00克，24.75毫莫耳)加至濃H₂SO₄(50毫升)中，然後分批加入硝酸胍(3.02克，24.75毫莫耳)。混合物在0~5℃下攪拌30分鐘。TLC顯示反應完成，將反應混合物慢慢滴加入NaHCO₃(100克)的水(1L)溶液中，溫度控制在15℃下。將得到的混合物過濾，得到標題化合物(黃色固體，5.40克，產率83.90%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ,7.39(s,1H),7.01(s,1H),4.09(br.s.,2H),3.96(s,3H)。

實施例8B。

N-(4-溴-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-胺。

將實施例8A(1.51克，5.56毫莫耳)和實施例A(1.50克，5.56毫莫耳)加入到1，4-二氧六環(20mL)中，向此混合物中加入TsOH．H₂O(1.27克，6.67毫莫耳)，並升溫至75~85℃攪拌12小時。TLC顯示反應完成，將反應混合物濃縮，加入DCM(20mL)溶解，用飽和NaHCO₃(20mL)洗滌，有機相濃縮後，用柱色譜(DCM/MeOH=100：0 to 100：1)分離純化，得到標題化合物(黃色固體，2.40克，產率85.38%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ,9.08(s,1H),8.42(d,J=5.2Hz,1H),8.35(d,J=8Hz,1H),8.30(s,1H),7.53(s,1H),7.42(d,J=7.6Hz,1H),7.12-7.21(m,3H),4.18(t,J=7.2Hz,2H),4.05(s,3H),3.23-3.33(m,2H),2.64-2.67(m,2H)。

實施例8C。

4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)-N-(4-(3-(二甲基氨基)丙-1-炔-1-基)-2-甲氧基-5-硝基苯基)嘧啶-2-胺。

在10~20℃下，將實施例8B(1.00克，2.08毫莫耳)，CuI(39.65毫克，208.00微莫耳)和Pd(PPh₃)₂Cl₂(73.07毫克，104.00微莫耳)加入到DMF(20mL)中，並攪拌1小時，然後向此混合物中加入1-二甲基胺基-2-丙炔(345.82毫克，4.16毫莫耳)和DIEA(537.64毫克，4.16毫莫耳)，並升溫至65~75℃攪拌23小時。TLC顯示反應完成，將反應混合物過濾，濃縮，用柱色譜(DCM/MeOH=100：0 to 100：5)分離純化，得到標題化合物(黃色固體，500.00克，產率45.33%)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：483.1[M+1]。

實施例8D。

N1-(4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)-4-(3-(二甲基氨基)丙-1-炔-1-基)-6-甲基苯-1,3-二胺。

將實施例8C(200.00毫克，414.48微莫耳)和NH₄Cl(110.85毫克，2.07毫莫耳)加入到丙酮(9mL)和水(1mL)中，向此混合物中加入鋅粉(110.85毫克，2.07毫莫耳)，並升溫至60~70℃攪拌16小時。TLC顯示反應完成，將反應混合物過濾，加入飽和Na₂CO₃至pH為9。用DCM(10mL×2)萃取，濃縮後，用製備析(DCM/MeOH=20：1)分離純化，得到標題化合物(黃色固體，20.00毫克，產率10.12%)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：453.1[M+1]。

實施例8E。

本實施例根據實施例1C的方法製備，將實施例1B替換為實施例8D。得到標題化合物(FA鹽，7.00毫克，產率20.84%)。¹H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 8.88(s,1H),8.43(br.s.,1H),8.27-8.29(m,2H),7.30-7.32(m,1H),7.08-7.18(m,4H),6.50-6.54(m,1H),6.34-6.39(m,1H),5.81(dd,J=1.13,10Hz,1H),4.07-4.09(m,2H),3.99(s,3H),3.90(s,2H),3.29-3.30(m,2H),2.55-2.72(m,8H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：507.2[M+1]。

實施例9。

N-(5-((4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(嗎啉代甲基)苯基)丙烯醯胺。

實施例9A。

3-甲氧基-4-(2,2,2-三氟乙基)苯甲酸。

在0~5℃下，將4-胺基-3-甲氧基苯甲酸(10.00克，59.82毫莫耳)加入到TFA(60mL)中，向此混合物中滴加TFAA(31.41克，59.82毫莫耳)，並攪拌30分鐘。TLC顯示反應完成，將反應混合物倒入冰水(1L)中，攪拌30分鐘後過濾，濾餅經乾燥，得到標題化合物(14.50克，產率87.50%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.74(br.s.,1H),8.49(d,J=8.4Hz,1H),7.87(dd,J=1.2,7.2Hz,1H),7.68(d,J=1.2Hz,1H),4.05(s,3H)。

實施例9B。

5-甲氧基-2-硝基-4-(2,2,2-三氟乙基)苯甲酸。

在0℃下，將實施例9A(13.50克，51.30毫莫耳)分批加入到發煙硝酸(100mL)中，向此混合物中滴加TFAA(31.41克，59.82毫莫耳)，並攪拌30分鐘。TLC顯示反應完成，將反應混合物倒入冰水(1L)中，攪拌30分鐘後過濾，濾餅經乾燥，得到標題化合物(灰白色固體，13.50克，產率76.85%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 9.01(s,1H),8.65(br.s.,1H),7.36(s,1H),4.13(s,3H)。

實施例9C。

2,2,2-三氟-N-(2-甲氧基-4-(嗎啉-4-羰基)-5-硝基苯基)乙醯胺。

在10~20℃下，將實施例9B(5.00克，16.22毫莫耳)和嗎啡啉(1.70克，19.46毫莫耳)加入到DMF(50mL)中，向此混合物中加入HATU(7.40克，19.46毫莫耳)和DIEA(3.14克，24.33毫莫耳)，並攪拌3小時。TLC顯示反應完成，將反應混合物慢慢加入至水(200mL)中，過濾，濾餅經乾燥，得到標題化合物(黃色固體，13.50克，產率76.85%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 9.22(s,1H),8.60(br.s.,1H),6.90(s,1H),4.09(s,3H),3.60-3.94(m,6H),3.22(t,J=4.8Hz,2H)。

實施例9D。

(4-氨基-5-甲氧基-2-硝基苯基)(嗎啉代)甲酮。

將實施例9C(4.00克，10.60毫莫耳)加入到MeOH/H₂O(1：1，40mL)中，向此混合物中加入K₂CO₃(7.33克，53.00毫莫耳)，並升溫至65℃攪拌5小時。TLC顯示反應完成，將反應混合物濃縮除去MeOH，用EA(15mL×2)萃取，有機相經無水硫酸鈉乾燥，濃縮後，得到標題化合物(黃色固體，2.50克，粗品)。

實施例9E。

2-甲氧基-4-(嗎啉代)-5-硝基苯胺。

在5~15℃下，將實施例9D(1.00克，3.56毫莫耳)加入到THF(10mL)中，向此混合物中加入BH₃-Me₂S(10M，1.78mL)，並升溫至66℃攪拌2小時。TLC顯示反應完成，向反應混合物中慢慢滴加MeOH(5mL)，並在66℃下攪拌1小時。將反應混合物濃縮，得到標題化合物(黃色固體，700.00毫克，產率72.83%)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：268.0[M+1]。

實施例9F。

4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)-N-(2-甲氧基-4-(嗎啉代甲基)-5-硝基苯基)嘧啶-2-胺。

將實施例9E(435.13毫克，1.63毫莫耳)和實施例A(400.00毫克，1.48毫莫耳)加入到t-BuOH(10mL)中，向此混合物中加入甲磺酸(170.69毫克，1.78毫莫耳)，並升溫至75~85℃攪拌48小時。TLC顯示反應完成，將反應混合物濃縮，用DCM(10mL)溶解，分別用NaHCO₃(5mL)和食鹽水(5mL)洗滌，濃縮，用柱色譜(DCM/MeOH=100：0 to 100：1)分離純化，得到標題化合物(黃色油狀，400.00毫克，產率43.74%)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：501.2[M+1]。

實施例9G。

N1-(4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)-6-甲氧基-4-(嗎啉代甲基)苯-1,3-二胺。

本實施例根據實施例1B的方法製備，將實施例1A替換為實施例9F。得到標題化合物(紅色油狀，300.00毫克，粗品)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：471.2[M+1]。

實施例9H。

本實施例根據實施例1C的方法製備，將實施例1B替換為實施例9G。得到標題化合物(FA鹽，37.00毫克，產率11.02%)。¹H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 8.84(s,1H),8.18-8.37(m,4H),7.34(d,J=7.6Hz,1H),7.05-7.23(m,3H),6.34-6.52(m,2H),5.86(dd,J=2.38,9.16Hz,1H),4.13(t,J=7.1Hz,2H),4.00(s,3H),3.85(d,J=12.8Hz,6H),2.84(br.s.,4H),2.53-2.73(m,3H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：525.2[M+1]。

實施例10。

N-(5-((4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-(3-(二甲基氨基)丙基)-4-甲基苯基)丙烯醯胺。

實施例10A。

3-甲氧基-4-硝基苯甲醛。

將3-甲氧基-4-硝基苯甲醇(4.70克，25.66毫莫耳)加入到DCM(50mL)中，向此混合物中加入MnO₂(13.39克，153.96毫莫耳)，並升溫至40℃攪拌12小時。TLC顯示反應完成，將反應混合物過濾，濾液濃縮，得到標題化合物(黃色固體，3.90克，產率79.71%)¹H NMR(300MHz,CDCl3)：δ 10.0-10.20(m,1 H),7.87-8.05(m,1 H),7.47-7.72(m,2 H),3.96-4.14(m,3 H)。

實施例10B。

(Z)-乙基-3-(3-甲氧基-4-硝基苯基)丙烯酸酯。

在5℃下，將實施例10A(3.90克，21.53毫莫耳)加入到THF(20mL)中，向此混合物中分批加入NaH(60%，1.29克，32.30毫莫耳)，並攪拌30分鐘。再向此混合物中滴加入二乙氧基膦醯乙酸乙酯(7.24克，32.30毫莫耳)，並升溫至20℃攪拌2.5小時。TLC顯示反應完成，向反應混合物中加入飽和NH₄Cl水溶液(5mL)，濃縮除去THF。將得到的混合物加入DCM(20mL)溶解，用H₂O(30mL×3)洗滌，有機相無水硫酸鈉乾燥後，濃縮，用柱色譜(PE/EA=10：1-5：1)分離純化，得到標題化合物(黃色固體，2.95克，產率53.89%)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：252.1[M+1]。

實施例10C。(3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)丙酸酯。

在16℃下，將實施例10B(2.75克，10.95毫莫耳)溶於MeOH(25mL)，氮氣置換後加入Pd/C(10%，300毫克)。混合物在H₂(壓力為15Psi)中，攪拌5小時。LCMS顯示反應完成，將反應混合物過濾，濾液濃縮至乾，得到標題化合物(淡紅色固體，2.30克，產率96.40%)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：224.2[M+1]。

實施例10D。

3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)丙-1-醇。

在20℃下，將實施例10C(1.90克，8.51毫莫耳)加入到THF(10mL)中，向此混合物中加入LAH(322.95克，8.51毫莫耳)，並攪拌5小時。LCMS顯示反應完成，向反應混合物中依次加入水(0.3mL)和NaOH(1M，1mL)。將得到的混合物過濾，用DCM(20mL)洗滌濾餅，濾液濃縮，得到標題化合物(黃色油狀，1.4克，粗品)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：182.0[M+1]。

實施例10E。

第三丁基(4-(3-羥丙基)-2-甲基苯基)氨基甲酸酯。

將實施例10D(1.50克，8.28毫莫耳)加入到THF(10mL)中，向此混合物中分批加入Boc₂O(1.81克，8.28毫莫耳)，並升溫至60~70℃攪拌5小時。TLC顯示反應完成，將反應混合物濃縮除，用柱色譜(PE/EA=10：1-5：1)分離純化，得到標題化合物(黃色油狀，1.20克，粗品)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：282.0[M+1]。

實施例10F。

第三丁基(2-甲氧基-4-(3-氧代丙基)苯基)氨基甲酸酯。

在20℃下，將實施例10E(1.20克，粗品)加入到DCM(10mL)中，向此混合物中分批加入DMP(1.81克，4.27毫莫耳)，並攪拌3小時。TLC顯示反應完成，向反應混合物中加入飽和Na₂CO₃水溶液(5mL)，用DCM(10mL×6)萃取，有機相水(20mL)洗，用無水硫酸鈉乾燥後，濃縮，得到標題化合物(紅色油狀，1.23克，粗品)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：180.1[M+1-100]。

實施例10G。

第三丁基(4-(3-(二甲基氨基)丙基)-2-甲氧基苯基)氨基甲酸酯。

在20℃下，將實施例10F(1.2克，粗品)加入到MeOH(20mL)中，向此混合物中加入二甲胺鹽酸鹽(701.24毫克，8.60毫莫耳)和NaBH₃CN (810.64毫克，12.90毫莫耳)，並攪拌5小時。LCMS顯示反應完成，向反應混合物中加入飽和Na₂CO₃水溶液(5mL)。用DCM(20mL)萃取，有機層用無水硫酸鈉乾燥後，濃縮，得到標題化合物(黃色油狀，750.00毫克，粗品)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：309.2[M+1]。

實施例10H。

4-(3-(二甲基氨基)丙基)-2-甲氧基-5-硝基苯胺。

在0℃下，將實施例10G(720.00毫克，2.33毫莫耳)加入到H₂SO₄(3mL)中，向此混合物中加入硝酸胍(284.45毫克，2.33毫莫耳)，並攪拌2小時，再升溫至20℃攪拌1小時。TLC顯示反應完成，向反應混合物中加入飽和Na₂CO₃水溶液至pH為7~8，用DCM(10mL×2)萃取，有機層用無水硫酸鈉乾燥後，濃縮，用柱色譜(DCM/MeOH=10：1)分離純化，得到標題化合物(黃色固體，270.00毫克，產率40.08%)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：254.2[M+1]。

實施例10I。

4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)-N-(4-(3-(二甲基氨基)丙基)-2-甲氧基-5-硝基苯基)嘧啶-2-胺。

本實施例根據實施例1A的方法製備，將N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺替換為實施例10H。得到標題化合物(紅色固體，300.00毫克，粗品)。 LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：487.3[M+1]。

實施例10J。

N1-(4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)-4-(3-(二甲基氨基)丙基)-6-甲基苯-1,3-二胺。

本實施例根據實施例1B的方法製備，將實施例1A替換為實施例10I。得到標題化合物(黃色固體，200.00毫克，產率66.21%)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：457.2[M+1]。

實施例10K。

本實施例根據實施例1C的方法製備，將實施例1B替換為實施例10J。得到標題化合物(FA鹽，30.00毫克，產率11.80%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)ppm δ 9.22(br.s.,1 H),8.58-8.78(m,1 H),8.50(s,1 H),8.19-8.37(m,2 H),7.65-7.79(m,1 H),7.16-7.26(m,2 H),7.00(d,J=5.40Hz,1 H),6.63-6.72(m,1 H),6.35-6.52(m,2 H),5.63-5.78(m,1 H),4.10(t,J=7.15Hz,2 H),3.82-3.92(m,3 H),3.28-3.43(m,2 H),2.53-2.78(m,12 H),1.88-2.18(m,2 H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：511.3[M+1]。

實施例11。

N-(5-((4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例11A。

2-((4-氨基-5-甲氧基-2-硝基苯基)(甲基)氨基)-N，N-二甲基丙醯胺。

將N，N-二甲基-2-(甲基氨基)丙醯胺(4.80克，36.87毫莫耳)和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(6.86克，36.87毫莫耳)加入到MeCN(10mL)中，向此混合物中加入Cs₂CO₃(48.05克，147.48毫莫耳)，並升溫至100℃攪拌12小時。TLC顯示反應完成，向反應混合物中加入水(25mL)，用DCM(60mL×3)萃取。有機相用飽和食鹽水(15mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥後，濃縮，用柱色譜(PE/EA=5：1-1：2)分離純化，得到標題化合物(紅色油狀，1.00克，產率6.49%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 7.25(s,1H),6.71(s,1H),4.11-4.17(m,1H),3.92(s,3H),2.93(d,J=8.0Hz,6H),2.82(s,3H),1.42(d,J=6.8Hz,3H)。LCMS(ESI)(10-80_CD)：m/z：297.2[M+1]。

實施例11B。

N1-(1-(二甲基氨基)丙-2-基)-5-甲氧基N1甲基-2-硝基苯-1,4-二胺。

將實施例11A(1.00克，3.37毫莫耳)加入到THF(40mL)中，向此混合物中加入BH₃/Me₂S(10M，1.69mL)，並升溫至80℃攪拌3小時。冷卻至室溫，向反應混合物中加入MeOH(40mL)，並攪拌30分鐘，再升溫至80℃攪拌1小時。TLC顯示反應完成，將反應混合物濃縮，用製備板(DCM/MeOH=10：1)分離純化，得到標題化合物(紅色油狀，480.00毫克，產率37.09%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 7.20(s,1H),6.59(s,1H),3.84(s,3H),3.55-3.72(m,2H),3.38-3.42(m,1H),2.61(s,3H),2.45-2.48(m,1H),2.23-2.32(m,1H),2.15(s,6H),1.14(d,J=6.4Hz,3H)。LCMS(ESI)(10-80_CD)：m/z：283.2[M+1]。

實施例11C。

N1-(4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)-N4-(1-(二甲基氨基)丙-2-基)-2-甲氧基-N-4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

將實施例11B(165.00毫克，584.40微莫耳)和實施例A(173.39毫克，642.84微莫耳)加入到二氧六環(10mL)中，向此混合物中加入Pd(OAc)₂(13.12毫克，58.44微莫耳)，Xantphos(33.81毫克，58.44微莫耳)和K₃PO₄(248.10毫克，1.17毫莫耳)，氮氣置換後，升溫至100℃攪拌12小時。LCMS顯示反應完成，將反應混合物濃縮，加入飽和Na₂CO₃水溶液(10mL)，用DCM(30mL×3)萃取。有機相用飽和食鹽水(10mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥後，濃縮，用製備板(DCM/MeOH=10：1)分離純化，得到標題化合物(紅色油狀，220.00毫克，產率66.25%)。LCMS(ESI)(0-60_AB)：m/z：516.2[M+1]。

實施例11D。

N4-(4-(2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)-N 1-(1-(二甲基氨基)丙-2-基)-5-甲氧基-N 1-甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例1B的方法製備，將實施例1A替換為實施例11C。得到標題化合物(棕色油狀，200.00毫克，產率92.81%)。LCMS(ESI)(0-60_AB)：m/z：486.3[M+1]。

實施例11E。

本實施例根據實施例1C的方法製備，將實施例1B替換為實施例11D。得到標題化合物(FA鹽，75.92毫克，產率30.52%)。¹H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.51(s,1H),8.26-8.31(m,2H),7.32-7.35(m,1H),6.87-7.17(m,3H),6.88(s,1H),6.47-6.51(m,2H),5.85-5.88(m,1H),4.16(t,J=7.2Hz,2H),3.91-4.07(m,4H),3.35-3.42(m,2H),3.12-3.15(m,1H),2.83-2.97(m,7H),2.67-2.74(m,5H),1.40(d,J=6.4Hz,3H)。LCMS(ESI)(0-60_AB)：m/z：540.3[M+1]。

流程4。

實施例12。

N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1-氧代-2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯醯胺_。

實施例12A。

甲基-1-氧代-2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-2-甲酸酯。

將2-羧酸乙酯吲哚(4.00克，21.14毫莫耳)和丙烯酸甲酯(3.28克，38.05毫莫耳)加入到甲苯(200mL)中，向此混合物中加入NaH(60%，974.13毫克，40.59毫莫耳)，並升溫至100℃攪拌16小時。LCMS顯示反應完成，向反應混合物中加入飽和NH₄Cl(100mL)水溶液。用EA(300mL×3)萃取，有機相經無水硫酸鈉乾燥後，濃縮，得到標題化合物(黃色油狀，3.73克，產率76.97%)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：229.9[M+1]。

實施例12B。

2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-1-酮。

將實施例12A(3.73克，16.27毫莫耳)加入到二氧六環(150mL)中，向此混合物中加入鹽酸(2M，40mL)，並升溫至80℃攪拌16小時。LCMS顯示反應完成，向反應混合物中加入氫氧化鈉溶液(2M，100mL)。將得到的混合物用EA(100mL×3)萃取，有機相經濃縮，用柱色譜(PE/EA=100：1-5：1)分離純化，得到標題化合物(黃色固體，1.52克，產率51.84%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ,7.80-7.78(m,1H),7.47-7.39(m,2H),7.39-7.22(m,1H),7.04(d,J=0.8Hz,1 H),4.49-4.46(m,2 H),3.27-3.24(m,2 H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：171.9[M+1]。

實施例12C。

9-溴-2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-1-酮。

在20℃下，將實施例12B(6.00克，35.05毫莫耳)加入到DMF(100mL)中，向此混合物中加入NBS(6.24克，35.05毫莫耳)，並攪拌2 小時。將反應混合物過濾，濾液濃縮後，用柱色譜(PE/EA=20：1-3：1)分離純化，得到標題化合物(黃色固體，7.98克，產率591.04%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ,7.74(d,J=8.4Hz,1 H),7.47-7.42(m,2 H),7.31-7.27(m,1),4.46-4.43(m,2 H),3.26-3.29(m,2 H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：251.9[M+3]。

實施例12D。

9-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環-2-基)-2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-1-酮。

將實施例12C(7.80克，31.19毫莫耳)和B₂Pin₂(11.98克，93.57毫莫耳)加入到甲苯(150mL)中，向此混合物中加入Pd₂(dba)₃(571.23毫克，623.80微莫耳)，X-phos(1.19克，2.50毫莫耳)和TEA(9.47克，93.57毫莫耳)，氮氣置換後，升溫至80℃攪拌3小時。LCMS顯示反應完成，將反應混合物過濾，濾液濃縮，得到標題化合物(棕色油狀，10.00克，粗品)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：298.0[M+1]。

實施例12E。

9-(2-氯嘧啶-4-基)-2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-1-酮。

將實施例12D(11.00克，37.02毫莫耳)和2，4-二氯嘧啶(11.03克，74.03毫莫耳)加入到二氧六環/水(15：1，160mL)中，向此混合物中加入Pd(dppf)Cl₂(812.56毫克，1.11毫莫耳)，K₂CO₃(10.23克，74.03毫莫耳)，氮氣置換後，升溫至70℃攪拌10小時。LCMS顯示反應完成，將反應混合物過濾，濾液濃縮後，用柱色譜(PE/DCM/EA=10：1：0-0：1：3)分離純化，得到標題化合物(黃色固體，1.80克，產率12.00%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 9.00(d,J=8.8Hz,1H),8.73-8.80(m,1H),8.61(d,J=5.2Hz,1H),7.53-7.40(m,3H),4.55(t,J=6.4Hz,2H),3.43-3.36(m,2H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：283.9[M+1]。

實施例12F。

9-(2-((4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)氨基)嘧啶-4-基)-2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-1-酮。

本實施例根據實施例B的方法製備，將實施例A替換為實施例12E。得到標題化合物(黃色固體，280.00毫克，產率8.31%)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：434.0[M+1]。

實施例12G。

9-(2-((4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基)氨基)嘧啶-4-基)-2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-1-酮。

本實施例根據實施例1A的方法製備，將實施例B替換為實施例12F。得到標題化合物(棕色固體，140.00毫克，產率54.04%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ,9.03(s,1H),8.35-8.24(m,2H),7.36(d,J=7.2Hz,1H),7.24-7.12(m,3H),7.09(s,1H),4.21-4.14(m,2H),4.10(s,3H),3.53-3.48(m,2H),3.43-3.37(m,4H),2.99(s,6H),2.88(s,3H),2.76-2.69(m,2H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：516.2[M+1]。

實施例12H。

9-(2-((5-氨基-4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲基苯基)氨基)嘧啶-4-基)-2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-1-酮。

本實施例根據實施例1B的方法製備，將實施例1A替換為實施例12G。得到標題化合物(棕色固體，140.00毫克，粗品)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.98(d,J=8.4Hz,1H),8.51(d,J=5.2Hz,1H),8.20(s,1H),8.06-8.01(m,1H),7.68(s,1H),7.50-7.48(m.,2H),7.02-6.99(m,1H),6.74-6.69(m,1H),4.55(t,J=6.0Hz,2H),3.89(s,3H),3.38-3.37(m,2H),3.28-3.26(m, 2H),3.11(s,3H),2.95-2.94(m.,2H),2.75(s,6H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：486.1[M+1]。

實施例12I。

N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1-氧代-2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-9-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯醯胺。

本實施例根據實施例1C的方法製備，將實施例1B替換為實施例12H。得到標題化合物(FA鹽，50.00毫克，產率28.78%)。¹H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 8.75-8.64(m,2H),8.21(d,J=6.4Hz,1H),7.82-7.68(m,2H),7.52(t,J=8.0Hz,1H),7.38-7.35(m,1H),7.11(s,1H),6.71-6.60(m,1H),6.53-6.43(m,1H),5.87(dd,J1=1.6,J2=10.4Hz,1H),4.6-4.63(m,2H),3.97(s,3H),3.64-3.56(m,2H),3.46-3.36(m,4H),2.94(s,6H),2.84(s,3H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：540.2[M+1]。

流程5。

實施例13。

N-〔2-〔2-(二甲基氨基)乙基-甲基-氨基]-5-[[4-(6-氟-2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-4-基)嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基苯基]丙-2-烯醯胺。

實施例13A。

乙基-5-氟-1H-吲哚-2-羧酸酯。

在0℃下，將5-氟-2-羧酸吲哚(5.00克，27.91毫莫耳)加入到乙醇(50mL)中，向此混合物中加入SOCl₂(9.84克，82.71毫莫耳)，並升溫回流攪拌5小時。TLC顯示反應完成，將反應混合物濃縮，向其中加入飽和NaHCO₃(15mL)水溶液。用DCM(100mL×2)萃取，有機相經無水硫酸鈉乾燥後，濃縮，得到標題化合物(淡黃色固體，5.50克，產率85.60%)。¹H-NMR(400MHz,CDCl3)δ 9.00(br.s.,1 H),7.31-7.39(m,2 H),7.19(d,J=1.2Hz,1 H),7.10(td,J=9.0,2.4Hz,1 H),4.43(q,J=7.1Hz,2 H),1.43(t,J=7.1Hz,3 H)。

實施例13B。

甲基6-氟-3-氧代-1,2-二氫吡咯並[1,2-a]吲哚-2-甲酸酯。

本實施例根據實施例12A的方法製備，將2-羧酸乙酯吲哚替換為實施例13A。得到標題化合物(黃色油狀，8.20克，粗品)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：270.0[M+23]RT：0.658min/2min。

實施例13C。

6-氟-1,2-二氫吡咯並[1,2-a]吲哚-3-酮。

本實施例根據實施例12B的方法製備，將實施例12A替換為實施例13B。得到標題化合物(黃色固體，3.08克，產率48.43%)。¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.35-7.45(m,1 H),7.10-7.20(m,1 H),6.96(s,1 H),4.44(t,J=6.1Hz,2 H),3.23(t,J=6.0Hz,2 H)。

實施例13D。

6-氟-2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-α]吲哚。

將實施例13C(3.04克，16.07毫莫耳)加入到一縮二乙二醇(50mL)中，向此混合物中加入K₂CO₃(15.00克，108.53毫莫耳)和N₂H_4.H₂O(5.96克，119.07毫莫耳)，氮氣置換後，升溫至160℃攪拌2.5小時，再升溫至180℃攪拌2.5小時。TLC顯示反應完成，向反應混合物中加入EA(100mL)。用水(30mL×2)洗滌，有機相經濃縮後，用製備板(PE/EA=3：1)分離純化，得到標題化合物(白色固體，1.02克，產率32.81%)。¹H-NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.21(dd,J=10.0,2.5Hz,1 H),7.14(dd,J=8.7,4.5Hz,1 H),6.87(td,J=9.1,2.5Hz,1 H),6.15(s,1 H),4.07(t,J=7.0Hz,2 H),3.04(t,J=7.4Hz,2 H),2.56-2.70(m,2 H)。

實施例13E。

4-(2-氯嘧啶-4-基)-6-氟-2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-α]吲哚。

本實施例根據實施例A的方法製備，將實施例A6替換為實施例13D。得到標題化合物(黃色固體，716.00毫克，產率38.35%)。¹H-NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.41(d,J=5.5Hz,1 H),8.08(dd,J=10.3,2.4Hz,1 H),7.28(s,1 H),7.27(s,1 H),7.20(dd,J=8.7,4.5Hz,1 H),7.00(td,J=8.9,2.5Hz,1 H),4.17(t,J=7.2Hz,2 H),3.40(t,J=7.5Hz,2 H),2.77(quin,J=7.3Hz,2 H)。

實施例13F。

4-(6-氟-2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚基-4-基)-N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2-胺。

本實施例根據實施例B的方法製備，將實施例A替換為實施例13E。得到標題化合物(黃色固體，378.00毫克，粗品)。LCMS(ESI)(5-95 AB)：m/z：438.1[M+1]RT：0.672min/2min。

實施例13G。

N4-〔2-(二甲基氨基)乙基]-N 1-[4-(6-氟-2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-4-基)嘧啶-2-基]-2-甲氧基-N-4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例1A的方法製備，將實施例B替換為實施例13F。得到標題化合物(棕色固體，373.00毫克，產率69.78%)。¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ 9.09(s,1 H),8.36(d,J=4.0Hz,1 H),7.99(d,J=8.91Hz,1 H),7.44(s,1 H),7.20(dd,J=8.72,4.58Hz,1 H),6.92-7.01(m,2 H),6.72(s,1 H),4.15(t,J=7.15Hz,2 H),4.01(s,3 H),3.42(t,J=7.47Hz,2 H),3.32(t,J=7.03Hz,2 H),2.90(s,3 H),2.74(quin,J=7.31Hz,2 H),2.66(d,J=6.65Hz,2 H),2.34(s,6 H)。

實施例13H。

N1-[2-(二甲氨基)乙基]-N4-[4-(6-氟-2,3-二氫-1H-吡咯並[1,2-a]吲哚-4-基)嘧啶-2-基]-5-甲氧基-N 1-甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例1B的方法製備，將實施例1A替換為實施例12G。得到標題化合物(粉色固體，306.00毫克，產率64.46%)。¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ 8.21-8.29(m,2 H),8.05(s,1 H),7.52(s,1 H),7.15(dd,J=8.6,4.5Hz,1 H),6.89-6.99(m,1 H),6.78(d,J=5.4Hz,1 H),6.73(s,1 H),4.09(t,J=7.2Hz,2 H),3.83-3.90(m,3 H),3.30(t,J=7.4Hz,2 H),2.98(t,J=6.9Hz,2 H)2.65-2.73(m,4 H),2.38-2.48(m,2 H),2.23-2.30(m,6 H)。

實施例13I。

本實施例根據實施例1C的方法製備，將實施例1B替換為實施例13H。得到標題化合物(FA鹽，13.60毫克，產率7.53%)。LCMS(ESI)(0-60 AB)：m/z：544.2[M+1]RT：2.075min/4min；¹H-NMR(400MHz,DMSO)δ 10.08(s,1 H),8.61(s,1 H),8.27(br.s.,1 H),8.24(d,J=5.4Hz,1 H),8.17(s,1 H),8.01(d,J=10.9Hz,1 H),7.34(dd,J=8.7,4.7Hz,1 H),7.00(s,1 H),6.93(td,J=9.1,2.64Hz,1 H),6.89(d,J=5.5Hz,1 H),6.43(dd,J=17.0,10.1Hz,1 H),6.15(dd,J=17.0,1.88Hz,1 H),5.66-5.72(m,1 H),4.12(t,J=7.1Hz,2 H),3.78(s,3 H),3.27(t,J=7.4Hz,3 H),2.93(t,J=5.5Hz,2 H),2.69(s,3 H),2.59(quin,J=7.2Hz,2 H),2.44(t,J=5.6Hz,2 H)。

流程6。

實施例14。

N-〔5-〔〔4-(7,7-二氟-8,9-二氫-6H-吡啶並[1,2-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]氨基]-2-[2-(二甲基氨基)乙基-甲基-氨基]-4-甲氧基苯基]丙-2-烯醯胺。

實施例14A。

乙基(E)-3-(1H-吲哚-2-基)丙-2-烯酸酯。

在25℃下，將2-甲醛吲哚(5.00克，51.66毫莫耳)加入到THF(30mL)中，向此混合物中慢慢加入2-二乙氧基膦醯乙酸乙酯(11.58克，51.66毫莫耳)和NaH(2.76克，68.88毫莫耳)，氮氣置換後，攪拌3小時。TLC顯示反應完成，將反應混合物慢慢加入飽和NH₄Cl(15mL)水溶液，用DCM(20mL×3)萃取，有機相經飽和食鹽水(10mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥後，濃縮，用柱色譜(PE/EA=20：1-10：1)分離純化，得到標題化合物(淡黃色固體，5.20克，產率70.15%)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.33(br.s.,1H),7.69(d,J=16.0Hz,1H),7.62(d,J=8.0Hz,1H),7.34-7.39(m,1H),7.26-7.30(m,1H),7.09-7.15(m,1H),6.82(d,J=1.6Hz,1H),6.22(d,J=16.0Hz,1H),4.28(q,J=7.2Hz,2H),1.35(t,J=7.2Hz,3H),1.35(t,J=7.15Hz,3H)。

實施例14B。

乙基(E)-3-〔1-(2-第三丁氧基-2-氧代乙基)吲哚-2-基]丙-2-烯酸酯。

將實施例14A(7.00克，32.52毫莫耳)加入到DMF(100mL)中，向此混合物中加入2-溴乙酸第三丁酯(12.69克，65.04毫莫耳)和Cs₂CO₃(21.19克，65.04毫莫耳)，並升溫至50℃攪拌12小時。TLC顯示反應完成，將反應混合物過濾，濾餅用EA(150mL)洗滌，濾液濃縮後，用柱色譜(PE/EA=10：1)分離純化，得到標題化合物(淡黃色固體，8.50克，產率73.80%)。¹H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ 7.61-7.73(m,2 H),7.29-7.31(m,1 H),7.24-7.28(m,1 H),7.16(ddd,J=7.9,6.0,1.8Hz,1 H),7.03(s,1 H),6.49(d,J=15.8Hz,1 H),4.25-4.34(m,2 H),1.46(s,9 H),1.36(t,J=7.1Hz,3 H)。

實施例14C。

3-[1-(2-第三丁氧基-2-氧代乙基)吲哚-2-基]丙酸酯。

在20℃下，將實施例14B(8.50克，25.81毫莫耳)溶於MeOH(100mL)，氮氣置換後加入Pd/C(10%，800毫克)。混合物在H₂中(壓力為15Psi)，攪拌12小時。LCMS顯示反應完成，將反應混合物過濾，濾液濃縮至乾，得到標題化合物(黃色油狀，8.00克，粗品)。

實施例14D。

7-氧代-8,9-二氫-6H-吡啶並[1,2-a]吲哚-6-羧酸酯。

在0℃下，將實施例14C(8.00克，24.14毫莫耳)加入到THF(60mL)中，向此混合物中加入t-BuOK(5.42克，48.28毫莫耳)，並攪拌2小時。TLC顯示反應完成，向反應混合物加入稀鹽酸(0.5M)至pH為6~7。再加入EA(150mL)和水(30mL)，分液後，有機相濃縮，用柱色譜(PE/EA=60：1-20：1)分離純化，得到標題化合物(棕色固體，7.00克，產率98.59%)。¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.59(d,J=7.1Hz,1 H),7.13-7.26(m,3 H),6.39(s,1 H),5.42(s,1 H),3.25-3.41(m,2 H),2.95(dt,J=16.3,4.1Hz,1 H),2.62-2.75(m,1 H),1.41(s,9 H)。

實施例14E。

8,9-二氫-6H-吡啶並[1,2-a]吲哚-7-酮。

將實施例14D(7.00克，24.53毫莫耳)加入到甲苯(100mL)中，向此混合物中加入SiO₂(7.00克，116.52毫莫耳)，並氮氣置換，升溫至110℃攪拌12小時。TLC顯示反應完成，將反應混合物過濾，濾液濃縮後，用柱色譜(PE/EA=50：1)分離純化，得到標題化合物(黃色固體，1.75克，產率35.82%)。¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.60(d,J=7.6Hz,1 H),7.19-7.26(m,2 H),7.13-7.19(m,1 H),6.38(s,1 H),4.69(s,2 H),3.28(t,J=6.5Hz,2 H),2.74-2.86(m,2 H)。

實施例14F。

7,7-二氯-8,9-二氫-6H-吡啶並[1,2-α]吲哚。

在-40℃下，將實施例14E(1.70克，9.18毫莫耳)加入到DCM(20mL)中，向此混合物中加入DAST(5.92克，36.72毫莫耳)，並攪拌2小時。TLC顯示反應完成，向反應混合物加入飽和NaHCO₃水溶液(10mL)，再加入DCM(50mL)萃取，有機相用水(15mL)洗滌後，濃縮，用柱色譜(PE/EA=30：1-10：1)分離純化，得到標題化合物(黃色固體，1.17克，產率59.66%)。¹H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ 7.56(d,J=7.6Hz,1 H),7.12-7.26(m,3 H),6.31(s,1 H),4.35(t,J=12.7Hz,2 H),3.20(t,J=6.8Hz,2 H),2.38(tt,J=13.4,6.7Hz,2 H)。

實施例14G。

10-(2-氯嘧啶-4-基)-7,7-二氟-8,9-二氫-6H-吡啶並[1,2-α]吲哚。

本實施例根據實施例A的方法製備，將實施例A6替換為實施例14F。得到標題化合物(黃色固體，600.00毫克，產率49.25%)。¹H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.52-8.56(m,1 H),8.03-8.10(m,1 H),7.58(d,J=5.4Hz,1 H),7.30-7.37(m,3 H),4.43(t,J=12.3Hz,2 H),3.69(t,J=6.8Hz,2 H),2.47(tt,J=13.4,6.7Hz,2 H)。

實施例14H。

4-(7,7-二氯-8,9-二氫-6H-吡啶並[1,2-a]吲哚-10-基)-N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2-胺。

本實施例根據實施例B的方法製備，將實施例A替換為實施例14G。得到標題化合物(黃色固體，1.06克，產率78.01%)。¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ 8.96(m,1 H),8.26-8.60(m,2 H),8.08(m,1 H),7.54(m,1 H),7.12-7.44(m,4 H),4.65(m,2 H),4.02(m.,3 H)3.49(m,2 H)2.52(m,2 H)。

實施例14I。

N1-[4-(7,7-二氟-8,9-二氫-6H-吡啶並[1,2-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]-N4-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-甲氧基-N 4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例1A的方法製備，將實施例B替換為實施例14I。得到標題化合物(棕色固體，1.05克，產率75.98%)。LCMS(ESI)(5-95 AB)：m/z：552.2[M+1]。

實施例14J。

N4-〔4-(7,7-二氟-8,9-二氫-6H-吡啶並[1,2-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]-N 1-[2-(二甲基氨基)乙基]-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例1B的方法製備，將實施例1A替換為實施例14I。得到標題化合物(粉色固體，491.00毫克，粗品)。LCMS(ESI)(5-95 AB)：m/z：522.3[M+1]。

實施例14K。

本實施例根據實施例1C的方法製備，將實施例1B替換為實施例14J。得到標題化合物(FA鹽，141.90毫克，產率23.81%)。¹H-NMR(400MHz,MeOD)：δ 8.56(s,2 H),8.39(d,J=5.4Hz,1 H),8.07(d,J=7.15Hz,1 H),7.43(d,J=7.1Hz,1 H),7.15-7.28(m,3 H),6.96(s,1 H),6.38-6.54(m,2 H),5.85(dd,J=9.0,2.7Hz,1 H),4.50(t,J=12.6Hz,2 H),4.00(s,3 H),3.54(t,J=6.8Hz,2 H),3.43(t,J=5.5Hz,2 H),3.17(d,J=5.2Hz,2 H),2.79(s,6 H)2.71(s,3 H),2.42(tt,J=13.5,6.9Hz,2 H)。LCMS(ESI)(0-60 AB)：m/z：576.3[M+1]。

實施例15。

N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(6,7,8,9-四氫吡啶並[1,2-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯醯胺。

實施例15A。

6,7,8,9-四氫吡啶並[1,2-α]吲哚。

本實施例根據實施例13D的方法製備，將實施例13C替換為8,9-二氫吡啶並[1,2-a]吲哚-7(6H)酮。得到標題化合物(棕色固體，182.00毫克，產率26.24%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 7.57-7.60(m,1H),7.31-7.33(m,1H),7.13-7.19(m,2H),6.25(s,1H),4.06-4.11(m,2H),3.01-3.04(m,2H),2.11-2.15(m,2H),1.92-1.97(m,2H)。

實施例15B。

10-(2-氯嘧啶-4-基)-6,7,8,9-四氫吡啶並[1,2-α]吲哚。

本實施例根據實施例A的方法製備，將實施例A6替換為實施例15A。得到標題化合物(棕色油狀，100.00毫克，產率18.44%)。LCMS(ESI)(5-95_AB)：m/z：284.1[M+1]。

實施例15C。

N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(6,7,8,9-四氫吡啶並[1,2-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-胺。

本實施例根據實施例B的方法製備，將實施例A替換為實施例15B。得到標題化合物(黃色固體，(150.00毫克，產率37.43%)。LCMS(ESI)(5-95_AB)：m/z：434.0[M+1]。

實施例15D。

N1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基-N1-甲基-2-硝基N4-(4-(6,7,8,9-四氫吡啶並[1,2-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例1A的方法製備，將實施例B替換為實施例15C。得到標題化合物(棕色固體，300.00毫克，產率79.26%)。LCMS(ESI)(5-95_AB)：m/z：516.2[M+1]。

實施例15E。

N1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基N1甲基N4-(4-(6,7,8,9-四氫吡啶並[1,2-a]吲哚-10-基)嘧啶吡啶-2-基)苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例1B的方法製備，將實施例1A替換為實施例15D。得到標題化合物(粉色固體，250.00毫克，粗品)。

實施例15F。

本實施例根據實施例1C的方法製備，將實施例1B替換為實施例15E。得到標題化合物(FA鹽，46.00毫克，產率11.64%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 8.60(s,1H),8.48(s,1H),8.35(d,J=5.2Hz,1H),8.11(d,J=7.6Hz,1H),7.41(d,J=8.0Hz,1H),7.12-7.20(m,3H),6.97(s,1H),6.48-6.50(m,2H),5.88(t,J=5.8Hz,1H),4.16(t,J=5.8Hz,2H),4.03(s,3H),3.49(t,J=5.4Hz,2H),3.24-3.30(m,4H),2.86(s,6H),2.72(s,3H),2.08-2.19(m,2H),1.98-1.88(m,2H)。LCMS(ESI)(5-95_AB)：m/z：540.3[M+1]。

流程7。

中間體C和D的一般製備方法：

實施例C1。

2-溴乙基三氟甲磺酸酯。

在-20℃下，將三氟甲磺酸酐(20.06克，63.86毫莫耳)滴加入吡啶(20mL)與DCM(70mL)中，攪拌10分鐘後，向該混合物中滴加2-溴乙醇(7.60克，60.82毫莫耳)，攪拌10分鐘，並使溫度至10℃。將反應混合物過濾，濾液濃縮(20℃以下)，得到的粗產品溶於石油醚(60mL)中，劇烈攪拌後過濾，濾液濃縮，得到標題化合物(17.90克，粗品)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)：δ 3.61(t,J=6.0Hz,2 H)4.75(t,J=6.0Hz,2 H)。

實施例C2。

(2-溴乙基)二苯基鋶。

在25℃下，將實施例C1(17.90克，69.64毫莫耳)加入甲苯(40mL)中，向該混合物中加入二苯硫醚(13.81克，69.64毫莫耳)，並升溫至100℃，氮氣中攪拌5小時。將反應混合物冷卻至25℃，加入乙醚(80mL)後過濾，濾餅乾燥後，得到標題化合物(11.90克，產率34.69%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 3.64-3.74(t,J=6.0Hz 2 H)4.87(t,J=6.0Hz,2 H)7.69-7.82(m,6 H)8.09(d,J=8.0Hz,4 H)。

實施例C3。

二苯基(乙烯基)鋶。

在25℃下，將實施例C2(11.20克，25.27毫莫耳)加入THF/H₂O(2：1，36mL)中，向該混合物中加入KHCO₃(3.04克，30.32毫莫耳)，並攪拌20分鐘。立即將反應混合物濃縮(溫度不高於20℃)，加入DCM (40mL)，用無水硫酸鎂乾燥，濃縮後，用柱色譜(DCM：MeOH=20：1，10：1)分離純化，得到標題化合物(棕色油狀，6.20克，產率54.16%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 6.50(dd,J=16.0,4Hz,1 H)6.71(dd,J=8.0,4Hz,1 H)7.53(dd,J=16.0,8.0Hz,1 H)7.65-7.78(m,2 H)7.83-7.93(m,1 H)。

實施例C4。

3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪[4,3-a]吲哚。

在0℃下，將2-羥甲基-吲哚(2.50克，16.99毫莫耳)加入DCM(250mL)中，向該混合物中加入KOH(1.14克，20.39毫莫耳)，並攪拌30分鐘。再將實施例C3(6.16克，16.99毫莫耳)的DCM(50mL)溶液滴加入到該混合物中，並升溫至20℃攪拌11.5小時。反應混合物濃縮後，用柱色譜(PE/EA=20：1)分離純化，得到標題化合物(黃色固體，1.50克，產率48.42%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.59(d,J=8.0Hz,1H),7.34-7.29(m,1H),7.21(dt,J=1.2,7.6Hz,1H),7.17-7.12(m,1H),6.24(d,J=0.8Hz,1H),5.01(d,J=0.8Hz,2H),4.22-4.17(m,2H),4.13-4.08(m,2H)。

實施例C。

10-(2-氯嘧啶-4-基)-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚。

本實施例根據實施例A的方法製備，將實施例A6替換為實施例C4。得到標題化合物(棕色固體，1.30克，粗品)。LCMS(ESI)(10-80 AB)：m/z：286.1[M+1]。

實施例D。

4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)嘧啶-2-胺。

本實施例根據實施例B的方法製備，將實施例A替換為實施例C。得到標題化合物(黃色固體，311.00毫克，粗品)。LCMS(ESI)(5-95 AB)：m/z：436.0[M+1]。

流程8。

實施例16。

N-(2-((2-(二乙氨基)乙基)(甲基)氨基)-5-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例16A。

N1-(2-(二乙基氨基)乙基)-N4-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-甲氧基-N 1-甲基-2-硝基苯-1,4-二胺。

在氮氣保護下，將中間體D(150.00毫克，344.50微莫耳)與N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺(134.59毫克，1.03毫莫耳)溶於DMA(5mL)，向該混合物中加入DIEA(133.57毫克，1.03毫莫耳)，並升溫至90℃攪拌12小時。LCMS顯示反應完成，將反應液用水(5mL)稀釋，並用DCM(10mL*2)萃取，有機相合併後用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮乾得到標題化合物(黃色固體，300.00毫克，粗品)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：546.3[M+1]。

實施例16B。

N1-(2-(二乙基氨基)乙基)-N4-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

在25℃下，將實施例16A(300.00毫克，549.82微莫耳)溶於MeOH(5mL)中，氮氣置換後加入Pd/C(10%，0.20克)。混合物用H₂置換3次後在15Psi的壓力下攪拌2小時。TLC(DCM：MeOH=20：1)顯示反應完成，將反應混合物過濾，濾液濃縮至乾，得到標題化合物(黃色固體，200.00毫克，產率70.54%)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：516.3[M+1]。

實施例16C。

在0℃下，將實施例16B(200.00毫克，387.86微莫耳)溶於四氫呋喃(3mL)和水(1mL)的混合溶劑中，向該混合物中加入3-氯丙醯氯(73.87毫克，581.79微莫耳)，攪拌0.5小時，然後向該混合物中加入氫氧化鈉(62.06毫克，1.55毫莫耳)並升溫至70℃攪拌12小時。LCMS顯示反應完成，向混合物中加入水(2mL)，用DCM(10*2)萃取，有機相濃縮後，粗產品經製備HPLC分離純化得標題化合物(FA鹽，45.80毫克，產率 19.14%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 8.53(br.s.,1 H),8.28-8.30(m,2 H),8.01-8.03(m,1 H),7.39-7.40(m,1 H),7.21-7.23(m,2 H),7.09(d,J=5.20Hz,1 H),6.95(s,1 H),6.53-6.55(m,1 H),6.40-6.44(m,1 H),5.84-5.87(m,1 H),5.14(s,2 H),4.09(s,4 H),4.00(s,3 H),3.29-3.51(m,2 H),3.27(t,J=5.60Hz,2 H),3.20(q,J=7.20Hz,4 H),2.74(s,3 H),1.25(t,J=7.20Hz,6 H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：570.3[M+1]。

實施例17。

N-(5-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例17A。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺。得到標題化合物(黃色固體，230.00毫克，產率87.95%)。LCMS(0-60AB)：m/z：518.2[M+1]。

實施例17B。

N4-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)-N 1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例17A。得到標題化合物(黃色固體，170.00毫克，產率72.96%)。LCMS(0-60AB)：m/z：488.2[M+1]。

實施例17C。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例17B。得到標題化合物(FA鹽，20.00毫克，產率10.29%)。¹H NMR(400MHz, CD₃OD)：δ 8.49(br.s.,1H),8.33(d,J=4.0Hz,1H),8.29(s,1H),8.08-8.01(m,1H),7.46-7.40(m,1H),7.26-7.20(m,2H),7.17(d,J=4.0Hz,1H),6.95(s,1H),6.59-6.38(m,2H),5.84(dd,J=2.0,8.0Hz,1H),5.18(s,2H),4.17-4.11(m,4H),3.97(s,3H),3.45(t,J=6.0Hz,2H),3.20(t,J=6.0Hz,2H),2.81(s,6H),2.72(s,3H)。LCMS(0-60AB)：m/z：542.2[M+1]。

實施例18。

N-(5-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(乙基(甲基)氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例18A。

N1-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)-2-甲氧基-N 4-甲基-N 4-(2-(甲基氨基)乙基)-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N1，N2-二甲基乙烷-1,2-二胺。得到標題化合物(黃色固體，160.00毫克，收率85.24%)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：504.3[M+1]。

實施例18B。

N1-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)-N4-(2-(乙基(甲基)氨基)乙基)-2-甲氧基-N--4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

將實施例18A(100.00毫克，198.59微莫耳)、MeCHO(26.24毫克，595.77微莫耳)與醋酸(5.96毫克，99.30微莫耳)溶於DCE(5mL)中，得到的混合物升溫至40℃攪拌2小時。然後向該反應液中加入NaBH(OAc)₃(126.27毫克，595.77微莫耳)，加完後得到的混合液再在40℃攪拌2小時。LCMS顯示反應完成，反應混合物用水(5mL)稀釋，用DCM(10mL x3)萃取，有機層經無水硫酸鈉乾燥，濃縮後，得到標題化合物(黃色固體，140.00毫克，粗品)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：532.3[M+1]。

實施例18C。

N4-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)-N 1-(2-(乙基(甲基)氨基)乙基)-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例18B。得到標題化合物(黃色固體，100.00毫克，粗品)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：502[M+1]。

實施例18D。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例18C。得到標題化合物(FA鹽，38.3毫克，產率31.89%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 8.46(br.s.,1 H),8.34(s,1 H),8.23(br.s.,1 H),7.96(d,J=4.80Hz,1 H),7.33-7.34(m,1 H),7.17-7.19(m,2 H),7.01(d,J=5.20Hz,1 H),6.94(s,1 H),6.56-6.63(m,1 H),6.41-6.45(m,1 H),5.85(d,J=10.40Hz,1 H),5.06(br.s.,2 H),4.01(br.S.,4 H),3.98(s,3 H),3.48(br.s.,2 H),3.26(br.s.,2 H),3.12-3.21(m,2 H),2.82(s,3 H),2.72(s,3 H),1.25(t,J=7.20Hz,3 H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：556.4[M+1]。

實施例19。

實施例19A。

N1-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)-N4-(2-(二甲基氨基)乙基)-N 4-乙基-2-甲氧基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N1乙基-N2，N2-二甲基乙烷-1,2-二胺。得到標題化合物(黃色固體，80毫克，粗品)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：532.3[M+1]。

實施例19B。

N4-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)-N 1-(2-(二甲基氨基)乙基)-N1乙基-5-甲氧基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例19A。得到標題化合物(黃色固體，80毫克，粗品)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：502.3[M+1]。

實施例19C。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例19B。得到標題化合物(FA鹽，13.40毫克，產率13.79%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 8.49(br.s.,1 H),8.32(d,J=5.60Hz,1 H),8.28(s,1H),8.04(d,J=8.80Hz,1 H),7.41-7.44(m,1 H),7.23-7.25(m,2 H),7.14(d,J=5.60Hz,1 H),6.96(s,1 H),6.48-6.54(m,2 H),5.83-5.92(m,1 H),5.16(s,2 H),4.12(s,3 H),3.99(s,2 H),3.52(t,J=5.80Hz,1 H),3.25(t,J=5.60Hz,1 H),3.08(d,J=6.80Hz,1 H),2.85(s,2 H),1.06(t,J=7.20Hz,1 H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：556.3[M+1]。

實施例20。

N-(5-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例20A。

N1-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)-N4-(1-(二甲基氨基)丙-2-基)-2-甲氧基-N 4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N,N’,N’-三甲基1-甲基-1,2-乙二胺。得到標題化合物(紅色油狀，270.00毫克，產率48.90%)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：532.3[M+1]。

實施例20B。

N4-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)-N 1-(1-(二甲基氨基)丙-2-基)-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例20A。得到標題化合物(棕色油狀，227.00毫克，產率75.03%)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：502.3[M+1]。

實施例20C。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例20B。得到標題化合物(FA鹽，7.71毫克，產率2.83%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 8.29(s,2H),8.22(d,J=5.2Hz,1H),8.08(s,1H),7.94-7.97(m,1H),7.32-7.34(m,1H),7.12-7.16(m,2H),7.06(d,J=5.2Hz,1H),6.71-6.74(m,1H),6.36-6.43(m,2H),5.73-5.76(m,1H),5.06-5.08(m,2H),3.97-4.07(m,5H),3.85-3.87(m,3H),3.10-3.16(m,1H),2.91-2.95(m,1H),2.77(s,6H),2.55-2.58(m,3H),1.29-1.33(m,3H),1.12-1.16(m,1H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：556.4[M+1]。

流程9。

實施例21。

N-(5-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-(乙基(2-(甲基氨基)乙基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例21A。

N1-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)-N 4-乙基-N 4-(2-(甲基氨基)乙基)-2-甲氧基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N1，N2-二乙基乙烷-1,2-二胺。得到標題化合物(紅色油狀物，520毫克，粗品)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：532.2[M+1]。

實施例21B。

第三丁基(2-((4-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-2-硝基苯基)(乙基)氨基)甲基)(乙基)氨基甲酸第三丁酯。

將實施例21A(260.00毫克，489.09微莫耳)，(Boc)₂O(260.00毫克，489.09微莫耳)和碳酸鉀(101.40毫克，733.63微莫耳)溶於THF(5mL)和水(1mL)。該混合液在25℃攪拌12小時。LCMS顯示反應完成，反應混合物用水(10mL)稀釋，用EtOAc(30mL x2)萃取，有機層濃縮後得到的粗品用製備板(DCM/MeOH=20：1)分離純化，得到標題化合物(紅色有狀物，230毫克，產率71.98%)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：632.3[M+1]。

實施例21C。

第三丁基(2-((2-氨基-4-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲基苯基)(乙基)氨基)甲基)(乙基)氨基甲酸第三丁酯。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例21B。得到標題化合物(棕色油狀物，180毫克，粗品)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：602.3[M+1]。

實施例21D。

第三丁基(2-((2-丙烯醯氨基-4-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲基苯基)(乙基)氨基)甲基)(乙基)氨基甲酸第三丁酯。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例21C。得到標題化合物(棕色油狀物，180毫克，粗品)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：656.3[M+1]。

實施例21E。

在0℃下，將實施例21D(180毫克，273.64微莫耳)溶於DCM(5mL)中，向該混合物中緩慢加入TFA(1.54克，13.51毫莫耳)。加料完成後，反應液在25℃下攪拌12小時。LCMS顯示反應完成。反應液濃縮，粗品溶於DCM(20mL)並用飽和的NaHCO₃調pH到9~10。有機相分離出後進行濃縮得到粗產品，粗產品通過製備HPLC(FA)分離純化，得到標題化合物(黃色固體FA鹽，32.23毫克，產率19.51%)。¹H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 8.23(d,J=5.5Hz,1H),8.09(s,1H),7.95(d,J=8.2Hz,1H),7.31-7.37(m,1H),7.10-7.18(m,2H),7.07(d,J=5.5Hz,1H),6.82(s,1H),6.38-6.48(m,1H),6.26-6.34(m,1H),5.74(d,J=10.1Hz,1H),5.07(s,2 H),4.04(br.s.,4H),3.87(s,3H),3.38(br.s.,2H),3.04(d,J=5.0Hz,2H),2.87-3.01(m,4H),1.22-1.33(m,3H),0.94(t,J=7.0Hz,3H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：556.3[M+1]。

實施例22。

N-(5-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-(乙基(2-(乙基(甲基)氨基)。

實施例22A。

N1-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)-N4-乙基-N4-(2-(乙基(甲基)氨基)乙基)-2-甲氧基-5-硝基苯-1,4-二胺。

在25℃下，將N1-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)-N4-乙基-N4-(2-(甲基氨基)乙基)-2-甲氧基-5-硝基苯-1,4-二胺(260.00毫克，489.09微莫耳),HCHO(44.06毫克，1.47毫莫耳，40.42uL)和HOAc(2.94毫克，2.80uL)溶於(5mL)MeOH中並攪拌0.5小時。向反應液中加入NaBH(OAc)₃(310.97毫克，1.47毫莫耳)，得到的反應液在25℃繼續攪拌12小時。LCMS顯示反應完成。向反應液中加入NaHCO₃水溶液(10mL)，用DCM(30mL*2)萃取，有機相分離並濃縮。粗產品用柱色譜(DCM,DCM：MeOH=60：1；DCM：MeOH=30：1)分離純化，得到標題化合物(黃色油狀物，184.00毫克，產率61.71%)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：546.3[M+1]。

實施例22B。

N4-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)-N1乙基N1-(2-(乙基(甲基)氨基)乙基)-5-甲氧基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例22A。得到標題化合物(棕色油狀物，155毫克，粗品)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：516.3[M+1]。

實施例22C。

N-(5-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-(乙基(2-(乙基(甲基)氨基)乙基)氨基)-4-甲氧苯基)丙烯醯胺。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例22B。得到標題化合物(FA鹽，38.72毫克，產率19.93%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 8.50(br.s.,1H),8.21-8.29(m,2H),7.93-7.99(m,1H),7.31-7.36(m,1H),7.14-7.22(m,2H),7.02(d,J=5.4Hz,1 H),6.92(s,1H),6.48-6.59(m,1H),6.37-6.45(m,1H),5.84(dd,J=10.0,1.6Hz,1H),5.07(s,2H),4.02(s,4H),3.92-3.99(m,3H),3.51(t,J=5.33Hz,2H),3.23(br.s.,2H),2.99-3.18(m,4H), 2.79(s,3H),1.21(t,J=7.2Hz,3H),1.03(t,J=7.0Hz,3H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：570.4[M+1]。

實施例23。

N-(5-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(異丙基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例23A。

第三丁基(2-羥乙基)(異丙基)氨基甲酸第三丁酯。

在25℃下，將2-(異丙基氨基)乙醇(18.30克，177.39毫莫耳)和K₂CO₃(49.04克，354.78毫莫耳)溶於THF(100mL)和H₂O(20mL)中，向該混合液中加入(Boc)₂O(58.07克，266.09毫莫耳)並攪拌3小時。TLC(PE：EtOAc=2：1)顯示反應完成。向反應液中加入水(50mL)，用EtOAc(50mL*2)萃取。有機相合併後用無水Na₂SO₄乾燥，抽濾並濃縮。粗品用柱色譜(SiO₂,PE：EtOAc=50：1 to 2：1)分離純化，得到標題化合物(黃色油狀物，24.00克，產率59.90%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 4.28-4.06(m,1H),3.78-3.65(m,2H),3.31(br.s.,2H),1.50-1.48(s,9H),1.14(d,J=6.8Hz,6H)。

實施例23B。

第三丁基-N-異丙基-N-(2-氧代乙基)氨基甲酸。

在20℃下，將實施例23A(10.00克，49.19毫莫耳)溶於DCM(100mL)中。向該反應液中加入dess-martin試劑(31.30克，73.79毫莫耳)並攪拌2小時。TLC(PE：EtOAc=3：1)顯示反應完成。反應液過濾，濾液濃縮得到的殘留物溶於EtOAc(50mL)中，用飽和NaHCO₃水溶液(50mL x 2)洗滌，並用無水Na₂SO₄乾燥，抽濾並濃縮。粗品粗品用柱色譜(SiO₂：PE：EtOAc=100：1 to 10：1)分離純化，得到標題化合物(黃色油狀物，7.90克，產率71.82%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.53(br.s.,1H),4.63-4.21(m,1H),3.86-3.61(m,2H),1.50-1.39(m,9H),1.12(d,J=6.8Hz,6H)。

實施例23C。

第三丁基-N-異丙基-N-[2-(二甲氨基)乙基]氨基甲酸。

將實施例23B(1.80克，8.94毫莫耳)和甲胺鹽酸鹽(1.21克，17.89毫莫耳)溶於MeOH(200mL)，氬氣置換後加入Pd/C(10%，100.00毫克)並用H2置換3次。反應液在50Psi壓力下加熱到50℃，攪拌24小時。TLC(DCM：MeOH=20：1)顯示反應完成後，將反應混合物過濾，濾液濃縮至乾，得到粗品溶於DCM(20mL)中，再用6N的NaOH(10mL x 2)洗滌，有機相用無水Na₂SO₄乾燥，抽濾並濃縮得標題化合物(黃色油狀，600.00毫克，產率26.37%)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)：δ 4.24-4.07(m,1H),3.20-3.15(m,2H),2.77-2.66(m,2H),2.52-2.42(m,3H),1.48(s,9H),1.13(d,J=6.8Hz,6H)。

實施例23D。

第三丁基(2-((4-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-2-硝基苯基)(甲基)氨基)乙基)(異丙基)氨基甲酸第三丁酯。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為實施例23C。得到標題化合物(黃色固體，200毫克，產率88.4%)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：632.2[M+1]。

實施例23E。

第三丁基(2-((2-氨基-4-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯基)(甲基)氨基)乙基)(異丙基)氨基甲酸第三丁酯。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例23D。得到標題化合物(棕色固體，180毫克，粗品)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：602.4[M+1]。

實施例23F。

(2-((2-丙烯醯氨基-4-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯基)(甲基)氨基)乙基)(異丙基)氨基甲酸第三丁酯。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例23E。得到標題化合物(180毫克，粗品)，直接用於下一步。

實施例23G。

N-(5-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-(乙基(2-(異丙基氨基)乙基)氨基)-4-甲氧苯基)丙烯醯胺。

本實施例根據實施例21E的方法製備，將實施例21D替換為實施例23F。得到標題化合物(黃色固體FA鹽，24.30毫克，產率14.34%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 8.33(d,J=4.0Hz,1H),8.27(s,1H),8.08-8.03(m,1H),7.46-7.42(m,1H),7.28-7.20(m,2H),7.15(d,J=4.0Hz,1H),6.92(s,1H),6.58-6.49(m,1H),6.44-6.37(m,1H),5.84(dd,J=2.0,8.0Hz,1H),5.19(s,2H),4.14(s,4H),3.98(s,3H),3.44(t,J=6.0Hz,2H),3.39-3.33(m,1H),3.15(t,J= 6.0Hz,2H),2.72(s,3H),1.35(d,J=8.0Hz,6H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：556.4[M+1]。

實施例24。

N-(2-((2-(第三丁基氨基)乙基)(甲基)氨基)-5-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例24A。

第三丁基(2-(第三丁基氨基)乙基)(甲基)氨基甲酸。

在20℃下，將2-甲基丙-2-胺(844.04毫克，11.54毫莫耳)和第三丁基-N-甲基-N-(2-氧代乙基)氨基甲酸(1.00克，5.77毫莫耳)溶於MeOH(30mL)，氬氣置換後加入Pd/C(10%，200.00毫克)並用H₂置換。反應液在H₂中50Psi壓力下攪拌16小時。LCMS顯示反應物完全消耗，並檢測到要的MS。反應混合物過濾，濾液濃縮至乾，得到粗品溶於DCM(30mL)中，再用水(30mL x 2)洗滌，有機相濃縮得標題化合物(橙色油狀，1.00克，產率71.48%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 3.28(t,J=6.7Hz,2H),2.92-2.82(m,3H),2.75-2.65(m,2H),1.53-1.39(m,10H),1.08(s,9H)。

實施例24B。

N1-(第三丁基)-N2-二甲基乙烷-1,2-二胺。

在20℃下，將實施例24A(200.00毫克，868.24微莫耳)溶於EA(30mL)，向該混合液中加入HCl/EtOAc(4莫耳/升，2.17mL)，得到的反應液攪拌4小時。TLC(DCM/MeOH=10/1)顯示起始原料消耗。反應液濃縮得到得標題化合物(白色粉末鹽酸鹽，160毫克，產率86.18%)。¹H NMR(400MHz,D₂O)：δ 3.60-3.39(m,4H),3.00-2.79(m,3H),1.60-1.37(m,9H)。

實施例24C。

N4-[2-(第三丁基氨基)乙基]-N1-[4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]-2-甲氧基-N-4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為實施例24B。得到標題化合物(120.00毫克，粗品)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：546.3[M+1]。

實施例24D。

N1-[2-(第三丁基氨基)乙基]-N4-[4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例24C。得到標題化合物(橙色粉末，100毫克，粗品)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：516.3[M+1]。

實施例24E。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例24D。得到標題化合物(FA鹽，46.82毫克，產率39.41%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ 9.73(s,1H),8.50(s,1H),8.40(s,1H),8.36(d,J=5.3Hz,1H),8.13-8.00(m,2H),7.50(d,J=7.0Hz,1H),7.29-7.16(m,2H),7.10(d,J=5.5Hz,1H),6.94(s,1H),6.80(dd,J=10.3,16.8Hz,1H),6.22(d,J=16.8Hz,1H),5.72(d,J=11.0Hz,1H),5.13(s,2H),4.15(d,J=4.8Hz,2H),4.08(d,J=4.8Hz,2H),3.85(s,3H),3.22(br.s.,2H),2.93(br.s.,2H),2.60(s,3H),1.35-1.03(m,9H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：570.4[M+1]。

實施例25。

N-(5-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)-2-甲基丙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例25A。

1-氯-N，N，2-三甲基丙-2-胺。

將2-(二甲基氨基)-2-甲基丙-1-醇(10.00克，85.33毫莫耳)溶於甲苯(100mL)中，向該混合物中加入SOCl₂(20.30克，170.66毫莫耳)。加完後反應液升溫至100℃並攪拌3小時。TLC(DCM/MeOH=10/1)監測顯示起始原料消耗完全。反應液濃縮得到標題化合物(橙色粉末，鹽酸鹽，12.00g，粗品)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 3.65-3.56(m,2H),3.05(s,6H),1.77-1.68(m,6H)。

實施例25B。

N1，N2，N2,2-四甲基丙烷-1,2-二胺。

在20℃下，將1-氯-N，N，2-三甲基丙-2-胺(1.00克，5.81毫莫耳，鹽酸鹽)溶入H₂O(10mL)中，向該混合物中緩慢加入甲胺(1.80克，17.43毫莫耳)，並攪拌2小時。LCMS顯示反應完成，向反應混合物中緩慢加入NaOH固體(2克)，待反應液冷卻後用MTBE(20mL x2)萃取，分離的有機相濃縮至5mL後加入HCl/EA(5mL)並濃縮得到標題化合物(橙色粉末， 1.00克，粗品，鹽酸鹽)。¹H NMR(400MHz,D₂O)：δ 3.57-3.48(m,2H),3.01(s,6H),2.81-2.75(m,3H),1.53(s,6H)。

實施例25C。

N1-〔4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]-N4-[2-(二甲基氨基)-2-甲基丙基]-2-甲基-N--4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為實施例25B。得到標題化合物(紅色粉末，100.00毫克，粗品)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：546.4[M+1]。

實施例25D。

N4-〔4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]-N1-[2-(二甲基氨基)-2-甲基丙基]-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例25C。得到標題化合物(橙色膠狀，70毫克，粗品)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：516.4[M+1]。

實施例25E。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例25D。得到標題化合物(甲酸鹽，50.92毫克，產率58.97%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ 10.59(br.s.,1H),8.53(s,1H),8.36(d,J=5.3Hz,1H),8.28(s,2H),8.12-8.03(m,2H),7.54-7.45(m,1H),7.26-7.19(m,2H),7.15-7.06(m,2H),6.48(dd,J=10.0,16.8Hz,1H),6.23(dd,J=1.4,16.9Hz,1H),5.75(d,J=11.5Hz,1H),5.06(s,2H),4.24-4.14(m,2H),4.05(d,J=4.8Hz,2H),3.87-3.83(m,3H),3.12(br.s.,2H),2.69(s,3H),2.35(s,6H),1.07-0.89(m,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：570.4[M+1]。

實施例26。

N-(2-((2-(氮丙啶-1-基)乙基)(甲基)氨基)-5-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例26A。

N4-〔2-(氮丙啶-1-基)乙基]-N1-[4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]-2-甲氧基-N4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為2-(氮丙啶-1-基)-N-甲基甲胺。得到標題化合物(紅色粉末，150.00毫克，粗品)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：530.2[M+1]。

實施例26B。

N1-[2-(氮丙啶-1-基)乙基]-N4-[4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例26A。得到標題化合物(棕色粉末，130.00毫克，粗品)。

實施例26C。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例26B。得到標題化合物(FA鹽，57.26毫克，產率39.64%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ 9.28(s,1H),8.36-8.31(m,2H),8.30(s,1H),8.11-7.98(m,2H),7.55-7.44(m,1H),7.27-7.16(m,2H),7.11-7.05(m,1H),6.88(s,1H),6.68(dd,J=10.2,16.9Hz,1H),6.20(dd,J=1.3,17.1Hz,1H),5.72(d,J=10.8Hz,1H),5.11(s,2H),4.15(d,J=5.0Hz,2H),4.08(d,J=4.8Hz,2H),3.82(s,3H),3.23(br.s.,2H),3.10(t,J=5.3Hz,2H),3.00(br.s.,4H),2.55(s,3H),1.97(br.s.,2H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：554.2[M+1]。

實施例27。

N-(5-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(甲基(2-(甲基氨基)乙基氨基)苯基)丙烯醯胺。

本實施例合成流程同流程9。

實施例27A。

第三丁基(2-((4-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-2-硝基苯基)(甲基)氨基)乙基)(甲基)氨基甲酸。

本實施例根據實施例21B的方法製備，將實施例21A替換為N1-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)-2-甲氧基-N4-甲基-N4-(2-(甲基氨基)乙基)-5-硝基苯-1,4-二胺。得到標題化合物(黃色固體，150.00毫克，粗品)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：604.3[M+1]。

實施例27B。

第三丁基(2-((2-氨基-4-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯基)(甲基)氨基)乙基)(甲基)氨基甲酸。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例27A。得到標題化合物(黃色固體，100.00毫克，粗品)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：574.3[M+1]。

實施例27C。

第三丁基(2-((2-丙烯醯氨基-4-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯基)(甲基)氨基)乙基)(甲基)氨基甲酸。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例27B。得到標題化合物(黃色固體，150.00毫克，粗品)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：628.4[M+1]。

實施例27D。

本實施例根據實施例21E的方法製備，將實施例21D替換為實施例27C。得到標題化合物(甲酸鹽，9.26毫克，產率6.65%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 8.44(br.s.,1 H),8.31-8.35(m,2 H),8.03-8.06(m,1 H),7.42(s,1 H),7.21-7.28(m,2 H),7.16(d,J=5.60Hz,1 H),6.94(s,1 H),6.54-6.60(m,1 H),6.40-6.45(m,1 H),5.84-5.87(m,1 H),5.17(s,2 H),4.13(s,4 H),3.98(s,3 H),3.43(t,J=5.20Hz,2 H),3.17(t,J=5.20Hz,2 H),2.72(d,J=1.20Hz,6 H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：528.4[M+1]。

實施例28。

N-(5-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲氨基)-4-乙氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例28A。

4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-N-(2-甲氧基-4-氟-5-硝基苯基)嘧啶-2-胺。

本實施例根據實施例D的方法製備，將4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺替換為2-乙基-4-氟-5-硝基苯胺。得到標題化合物(黃色固體，300.00毫克，粗品)。

實施例28B。

N1-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)-N4-(2-(二甲基氨基)乙基)-2-甲氧基-N--4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將實施例D替換為實施例28A，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺。得到標題化合物(黃色固體，230.00毫克，粗品)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：532.2[M+1]。

實施例28C。

N4-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)-N1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例28B。得到標題化合物(棕色粉末，200.00毫克，粗品)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：502.3[M+1]。

實施例28D。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例28C。得到標題化合物(FA鹽，125.00毫克，產率50.65%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 8.46(br.s.,1H),8.35(d,J=4.0Hz,1H),8.32(s,1H),8.09-8.05(m,1H),7.49-7.42(m,1H),7.28-7.21(m,2H),7.19(d,J=4.0Hz,1H),6.95(s,1H),6.57-6.42(m,2H),5.86(dd,J=2.0,8.0Hz,1H),5.20(s,2H),4.22(q,J=8.0Hz,2H),4.16(br.s.,4H),3.46(t,J=6.0Hz,1H),3.25-3.20(m,1H),2.84(s,2H),2.73(s,1H),1.49(t,J=8.0Hz,1H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：556.4[M+1]。

實施例29。

N-(5-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲氨基)-4-異丙基苯基)丙烯醯胺。

實施例29A。

N1-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)-N4-(2-(二甲基氨基)乙基)-2-異丙氧基-N4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

在氮氣保護下向中間體C(200毫克，699.96微莫耳)與N4-〔2-(二甲基氨基)乙基]-2-異丙氧基-N4-甲基-5-硝基-苯-1,4-二胺(207.44毫克，699.96微莫耳)的10mL1,4-二氧六環溶液中加入Pd(OAc)₂(15.71毫克，70.00微莫耳),K₃PO₄(297.16毫克，1.40毫莫耳)和XPhos(33.37毫克，70.00微莫耳)，並升溫至90℃攪拌10小時。LCMS顯示反應完成，將混合物過濾，濃縮，粗品用製備板(SiO₂,DCM：MeOH=10：1)分離純化，得到標題化合物(黃色色固體，130.00毫克，產率26.45%)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：546.4[M+1]。

實施例29B。

N4-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基)-N1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-異丙基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例29A。得到標題化合物(淺黃色固體，120.00毫克，粗品)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：516.2[M+1]。

實施例29C。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例29B。得到標題化合物(FA鹽，20.00毫克，產率13.96%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.44(br.s.,1H),9.37(s,1H),8.42(d,J=4.0Hz,1H),8.07-7.99(m,1H),7.60(s,1H),7.38-7.33(m,1H),7.31-7.27(m,2H),7.19(d,J=4.0Hz,1H),6.80(dd,J=4.0,16.0Hz,1H),6.72(s,1H),6.41(dd,J=4.0,16.0Hz,1H), 5.74-5.65(m,1H),5.39(s,2H),4.50(spt,J=6.0Hz,1H),4.16(s,4H),3.18(t,J=6.0Hz,2H),2.95(t,J=6.0Hz,2H),2.67-2.64(m,9H),1.39(d,J=6.0Hz,6H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：570.3[M+1]。

流程10。

實施例30。

N-(5-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟吡啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例30A。

10-(2-氯-5-氟-吡啶-4-基)-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚。

在25℃下，將2,4-二氯-5-氟嘧啶(23.14克，138.56毫莫耳)溶於DME(400mL)，向該混合物中分批加入AlCl₃(30.79克，230.94毫莫耳)，接著分批加入3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚(20.00克，115.47毫莫耳)，並攪拌12小時。TLC顯示反應完成。將反應液倒入攪拌下的水(1200mL)中析出固體，固體過濾並用甲醇(100mL)打漿。得到的固體真空乾燥後得標題化合物(黃色固體，31.10克，產率84.61%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.41(d,J=2.80Hz,1 H),7.94-7.98(m,1 H),7.30-7.41(m,3 H),5.26(s,2 H),4.17-4.29(m,4 H)。

實施例30B。

4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟-N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)嘧啶-2-胺。

在氮氣保護下將實施例30A(28.00克，92.19毫莫耳)與4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(18.02克，96.80毫莫耳)溶入1,4-二氧六環(300mL)中，向該混合液中加入K₃PO₄(39.14克，184.38毫莫耳)，XPhos(4.39克，9.22毫莫耳)和Pd₂(dba)₃(8.44克，9.22毫莫耳)，並升溫至120℃攪拌10小時。LCMS顯示反應完成，將混合物過濾，濾餅用水(300mL)洗滌並真空乾燥得到標題化合物(黃色色固體，32.06克，產率75.73%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ 8.89(d,J=8.40Hz,1 H),8.59(d,J=3.20Hz,1 H),8.50(s,1 H), 7.78(dd,J=7.60,3.51Hz,1 H),7.55(d,J=8.00Hz,1 H),7.37(d,J=13.20Hz,1 H),7.25(d,J=7.20Hz,1 H),7.20(d,J=7.20Hz,1 H),5.11(s,2 H),4.20(d,J=8.00Hz,4 H),4.02(s,3 H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：454.3[M+1]。

實施例30C。

N1-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟吡啶-2-基)-N4-(2-(二甲基氨基)乙基)-2-甲氧基-N--4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將實施例D替換為實施例30B，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺。得到標題化合物(紅色固體，35.50克，產率87.43%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.06(s,1 H),8.35(d,J=2.80Hz,1 H),7.88-7.93(m,1 H),7.54(s,1 H),7.38(s,1 H),7.32(s,2 H),6.69(s,1 H),5.29(s,2 H),4.30(d,J=5.60Hz,2 H),4.23(d,J=5.60Hz,2 H),4.00(s,3 H),3.25-3.31(m,2 H),2.89(s,3 H),2.53-2.61(m,2 H),2.28(s,6 H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：536.4[M+1]。

實施例30D。

N4-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟吡啶-2-基)-N1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例30C。得到標題化合物(紅色固體，26.50克，產率79.32%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.31(d,J=2.80Hz,1 H),8.06-8.10(m,1 H),8.03(s,1 H),7.62(s,1 H),7.39(d,J=4.80Hz,1 H),7.29-7.34(m,2 H),6.72(s,1 H),5.20(s,2 H),4.24(dd,J=16.40,5.20Hz,4 H),3.86(s,3 H),2.98(s,2 H),2.69(s,3 H),2.39-2.46(m,2 H),2.29(s,6 H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：506.1[M+1]。

實施例30E。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例30D。得到標題化合物(23.20克，產率79.02%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 10.09-10.17(m,1 H),9.46(s,1 H),8.39(d,J=3.20Hz,1 H),7.89-7.94(m,1 H),7.55(s,1 H),7.34-7.38(m,1 H),7.29(s,1 H),7.24-7.28(m,1 H),6.81(s,1 H),6.26-6.43(m,2 H),5.65-5.71(m,1 H),5.31(s,2 H),4.22-4.27(m,2 H), 4.20(d,J=5.60Hz,2 H),3.90(s,3 H),2.86-2.94(m,2 H),2.73(s,3 H),2.23-2.33(m,8 H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：560.2[M+1]。

實施例31。

N-[5-[[4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟吡啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-2-[甲基[2-(二甲基氨基)乙基]胺基]苯基]丙-2-烯醯胺。

本實施例合成流程同流程9。

實施例31A。

N1-[4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟吡啶-2-基]-2-甲氧基-N4-甲基-N4-[2-(甲基氨基)乙基]-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將實施例D替換為將4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟-N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2-胺，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N1，N2-二甲基乙烷-1,2-二胺。得到標題化合物(黃色固體，1.50克，產率93.08%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.07(s,1 H),8.35(d,J=2.80Hz,1 H),7.90(m,1 H),7.56(s,1 H),7.36-7.42(m,1 H),7.29-7.35(m,2 H),6.67(s,1 H),5.29(s,2 H), 4.18-4.35(m,5 H),4.00(s,2 H),3.37(t,J=6.00Hz,2 H),2.78-2.87(m,4 H),2.46(s,3 H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：522.3[M+1]。

實施例31B。

第三丁基-N-[2-[4-[[4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟吡啶-2-基]氨基]-5-甲氧基-N-甲基-2-硝基苯胺]乙基]-N-甲基氨基甲酸第三丁酯。

本實施例根據實施例21B的方法製備，將實施例21A替換為實施例31A。得到標題化合物(黃色固體，1.45克，產率80.99%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.07(s,1 H),8.35(d,J=2.80Hz,1 H),7.90(m,1 H),7.56(s,1 H),7.36-7.42(m,1 H),7.29-7.35(m,2 H),6.67(s,1 H),5.29(s,2 H),4.18-4.35(m,5 H),4.00(s,2 H),3.37(t,J=6.00Hz,2 H),2.78-2.87(m,4 H),2.46(s,3 H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：522.3[M+1]。

實施例31C。

第三丁基-N-[2-[2-氨基-4-[[4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟-吡啶-2-基]氨基]-5-甲氧基-N-甲基苯胺基]乙基]-N-甲基氨基甲酸第三丁酯。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例31B。得到標題化合物(黃色固體，1.30克，產率94.30%)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：516.2[M+1]。

實施例31D。

第三丁基-N-[2-[4-[[4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟吡啶-2-基]氨基]-5-甲氧基-N-甲基-2-(丙-2-烯醯基氨基)-苯胺基]乙基]-N-甲基氨基甲酸第三丁酯。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例31C。得到標題化合物(黃色固體，1.2克，產率84.47%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.28-9.47(m,1 H),8.29(d,J=2.80Hz,1 H),7.82(d,J=5.20Hz,1 H),7.47(s,1 H),7.27-7.30(m,1 H),7.15-7.22(m,3 H),6.69(s,1 H),6.30(d,J=4.40Hz,2 H),5.60-5.67(m,1 H),5.22(d,J=2.80Hz,2 H),4.07-4.21(m,4 H),3.82(s,3 H),3.24-3.34(m,2 H),2.90(br.s.,2 H),2.77(s,3 H),2.61(s,3 H),1.39(s,8 H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：645.5[M+1]。

實施例31E。

本實施例根據實施例21E的方法製備，將實施例21D替換為實施例31D。得到標題化合物(體甲酸鹽，235.20毫克，產率20.76%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 8.51-8.55(m,1 H),8.42(s,1 H),8.36-8.40(m,1 H),7.84-7.92(m,1 H),7.47(d,J=7.60Hz,1 H),7.13-7.30(m,2 H),6.93(s,1 H),6.37-6.53(m,2 H),5.80-5.88(m,1 H),5.10(s,2 H),4.21(s,4 H),4.00(s,3 H),3.39-3.45(m,3 H),3.15(br.s.,2 H),2.71(s,3 H),2.70(s,3 H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：546.2[M+1]。

實施例32。

N-(5-((4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟吡啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)-2-甲基丙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例32A。

N1-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟吡啶-2-基)-N4-(2-(二甲基氨基)-2-甲基丙基)-2-甲基-N--4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將實施例D替換為4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟-N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)嘧啶-2-胺，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N1,N2,N2,2-四甲基丙烷-1,2-二胺。得到標題化合物(紅色固體，200.00毫克，產率80.44%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.02(s,1H),8.28(d,J=4.0Hz,1H),7.85-7.79(m,1H),7.61(s,1H),7.33-7.29(m,1H),7.29-7.26(m,1H),7.25-7.20(m,2H),5.23(s,2H),5.19(s,2H),4.24-4.18(m,2H),4.16-4.11(m,2H),4.09(s,3H),2.93(s,3H),2.68(s,6H),1.34(s,6H)。

實施例32B。

N4-(4-(3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟吡啶-2-基)-N1-(2-(二甲基氨基)-2-甲基丙基)-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例32A。得到標題化合物(220.00毫克，產率92.94%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.23(d,J=4.0Hz,1H),8.02-7.94(m,1H),7.91(s,1H),7.54(s,1H),7.32-7.27(m,1H),7.26-7.20(m,2H),6.57-6.54(m,1H),5.08(s,2H),4.22-4.15(m,2H),4.14-4.09(m,2H),3.77(s,3H),3.21(s,2H),2.72(s,3H),2.67(s,6H),1.33(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：534.3[M+1]。

實施例32C。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例32B。得到標題化合物(棕色固體，50.00毫克，產率20.38%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 8.39(s,1H),8.22(s,1H),8.16(s,1H),7.75(d,J=8.0Hz,1H),7.32(d,J=8.0Hz,1H),7.15-7.09(m,1H),7.09-7.03(m,1H),7.01(s,1H),6.43-6.33(m,2H),5.82-5.72(m,1H),4.92(s,2H),4.06(s,4H),3.89(s,3H),3.66-3.27(m,2H),2.67(s,3H),2.63(s,6H),1.22(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：588.3[M+1]。

實施例33。

N-[2-[2-(二甲基氨基)乙基-甲基-氨基]-5-[[5-氟-4-(7-氟-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-丙-2-烯醯胺。

本實施例合成流程同流程10。

實施例33A。

6-氟-1-(對甲苯磺醯基)吲哚。

在0℃下，將6-氟-1H-吲哚(18.00克，133.20毫莫耳)溶於N,N-二甲基甲醯胺(400mL)，向該混合物中分批加入NaH(6.39克，60%w，159.84毫莫耳)，攪拌1小時。然後向該混合物中緩慢加入4-甲基苯磺醯氯(30.47克，159.84毫莫耳)，升溫至15℃攪拌11小時。LCMS顯示反應完成，向混合物中加入飽和NH₄Cl溶液(500mL)，將析出的固體過濾，濃縮，得到標題化合物(黃色固體，39.80克，粗品)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.71-7.81(m,3 H),7.56(d,J=3.60Hz,1 H),7.46(dd,J=8.40,5.20Hz,1 H),7.26(d,J=8.00Hz,2 H),7.00(m,1 H),6.64(d,J=3.60Hz,1 H),2.37(s,3 H)。

實施例33B。

6-氟-1-(對甲苯磺醯基)吲哚-2-羧酸。

在-70℃下，將6-氟-1-(對甲苯磺醯基)吲哚(39.80克，132.06毫莫耳)溶於四氫呋喃(400mL)，向該混合物中滴加正丁基鋰(2.5莫耳，52.82mL)，攪拌1小時。然後向該混合物中緩慢加入乾冰(58.11克，1.32毫莫耳)，攪拌1.5小時。TLC顯示反應完成，向混合物中加入飽和NH₄Cl溶液(200mL)，用EA(200mL x2)萃取，水相用濃鹽酸調節至pH=1，再用DCM(200mL x3)萃取，濃縮，得到標題化合物(黃色固體，32.75克，產率74.40%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ 7.96(d,J=8.40Hz,1 H),7.80(d,J=10.40Hz,1 H),7.72(dd,J=8.80,6.00Hz,1 H),7.44(d,J=8.00Hz,2 H),7.34(s,1 H),7.23(br.s.,1 H),2.37(s,3 H)。

實施例33C。

(6-氟-1H-吲哚-2-基)甲醇。

在0℃下，將6-氟-1-(對甲苯磺醯基)吲哚-2-羧酸(32.75克，98.25毫莫耳)溶於四氫呋喃(400mL)，向該混合物中分批加入四氫鋁鋰(9.32克，245.63毫莫耳)，25℃攪拌16小時。TLC顯示反應完成，向反應混合物中依次加入水(9.5mL)、15%的NaOH(9.5mL)溶液和水(28mL)，混合物過濾，濾液濃縮後，得到粗產品，該產品經柱色譜(DCM：MeOH=20：1，3：1)得到標題化合物(白色固體，5.11克，產率31.49%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.37(br.s.,1 H),7.50(dd,J=8.40,5.20Hz,1 H),7.06(dd,J=9.60,1.60Hz,1 H),6.90(td,J=9.20,2.00Hz,1 H),6.41(s,1 H),4.84(s,2 H)。

實施例33D。

7-氟-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚。

在0℃下，將(6-氟-1H-吲哚-2-基)甲醇(5.11克，30.94毫莫耳)與氫氧化鉀(4.34克，77.35毫莫耳)溶於二氯甲烷(300mL)，向該混合物中滴加苯基乙烯基碸(14.02克，37.13毫莫耳)，20℃攪拌12小時。TLC顯示反應完成，用水洗(200mL x2)，有機相濃縮，得到粗產品，該產品經柱色譜(PE：EA=500：1，200：1)分離純化得到標題化合物(白色固體，3.65克，產率61.70%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.49(dd,J=8.40,5.20Hz,1 H),6.99(dd,J=9.20,2.00Hz,1 H),6.91(ddd,J=9.60,8.40,2.00Hz,1 H),6.22(s,1 H),4.98(s,2 H),4.16-4.24(m,2 H),4.01-4.09(m,2 H)。

實施例33E。

10-(2-氯-5-氟-吡啶-4-基)-7-氟-3,4,5a，9a中四氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚。

本實施例根據實施例30A的方法製備，將3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚替換為實施例33D。得到標題化合物(黃色固體，3.40克，產率64.79%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.44(d,J=2.80Hz,1 H),7.85-7.96(m,1 H),6.98-7.13(m,2 H),5.24(s,2 H),4.22-4.30(m,2 H),4.10-4.20(m,2 H)。

實施例33F。

5-氟-4-(7-氟-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2-胺。

本實施例根據實施例30B的方法製備，將實施例30A替換為實施例33E。得到標題化合物(黃色固體，5.10克，粗品)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.37(d,J=8.00Hz,1 H),8.40(d,J=2.40Hz,1 H),7.81-7.88(m,1 H),7.67(s,1 H),7.44(m,1 H),7.05-7.11(m,2 H),6.79(d,J=12.00Hz,1 H),5.25(s,2 H),4.27-4.33(m,2 H),4.15-4.20(m,3 H),4.06(s,3 H)。

實施例33G。

N4-[2-(二甲基氨基)乙基]-N1-[5-氟-4-(7-氟-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]-2-甲氧基-N4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將實施例D替換為實施例33F，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺。得到標題化合物(黃色固體，4.20克，粗品)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.01(s,1 H),8.33(d,J=2.80Hz,1 H),7.76-7.86(m,1 H),7.53(s,1 H),6.97-7.08(m,2 H),6.68(s,1 H),5.23(s,2 H),4.24-4.30(m,2 H),4.10-4.17(m,2 H),3.99(s,3 H),3.26(t,J=7.20Hz,2 H),2.88(s,3 H),2.55(t,J=7.20Hz,2 H),2.26(s,6 H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：554.2[M+1]。

實施例33H。

N1-[2-(二甲氨基)乙基]-N4-[5-氟-4-(7-氟-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例33G。得到標題化合物(黃色固體，1.23克，產率30.95%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ.8.32(d,J=2.40Hz,1 H),8.00(s,1 H),7.64(s,1 H),6.99-7.13(m,2 H),6.68(s,1 H),5.15(s,2 H),4.26(d,J=5.20Hz,2 H),4.15(d,J=5.20Hz,2 H),3.87(s,3 H),3.35(br.s.,2 H),3.08(br.s.,2 H),2.84(s,6 H),2.73(s,3 H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：524.1[M+1]。

實施例33I。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例33H。得到標題化合物(281.50克，產率24.41%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)： δ 8.54(br.s.,1 H),8.48(br.s.,1 H),8.38(br.s.,1 H),7.81-7.90(m,1 H),7.17-7.25(m,1 H),6.97(s,2 H),6.41-6.52(m,2 H),5.86(m,1 H),5.07(br.s.,3 H),4.17(d,J=14.00Hz,4 H),4.00(s,3 H),3.41(br.s.,3 H),3.12(br.s.,2 H),2.76(br.s.,6 H),2.72(s,3 H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：578.3[M+1]。

實施例34。

N-(5-((4-(7-氯-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟吡啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

本實施例合成流程同流程10。

實施例34A。

(6-氯-1H-吲哚-2-基)甲醇。

本實施例根據實施例33C的方法製備，將6-氟-1-(對甲苯磺醯基)吲哚-2-羧酸替換為6-氯-1-甲苯磺醯基-1H-吲哚-2-羧酸。得到標題化合物(棕色固體，3.50克，產率79.30%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.50(d,J=8.0Hz,1H),7.36(s,1H),7.09(dd,J=4.0,8.0Hz,1H),6.40(s,1H),4.85(s,2H)。

實施例34B。

7-氯-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚。

本實施例根據實施例33D的方法製備，將33C替換為34A。得到標題化合物(棕色固體，1.30克，產率29.17%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 7.49(d,J=8.0Hz,1H),7.30(s,1H),7.11(dd,J=0.8,8.0Hz,1H),6.22(d,J=4.0Hz,1H),4.99(s,2H),4.26-4.14(m,2H),4.10-4.04(m,2H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：210.0[M+2]。

實施例34C。

7-氯-10-(2-氯-5-氟吡啶-4-基)-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚。

本實施例根據實施例30A的方法製備，將3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚替換為34B。得到標題化合物(黃色固體，480.00毫克，產率26.01%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.44(d,J=4.0Hz,1H),7.88(dd,J=4.0,8.0Hz,1H),7.39(s,1H),7.31-7.29(m,1H),5.25(s,2H),4.31-4.14(m,4H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：338.1[M+1]。

實施例34D。

4-(7-氯-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟-N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)嘧啶-2-胺。

本實施例根據實施例30B的方法製備，將30A替換為34C。得到標題化合物(黃色固體，450.00毫克，產率66.11%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.25(d,J=8.0Hz,1H),8.30(d,J=4.0Hz,1H),7.71(dd,J=4.0,8.0Hz,1H),7.57(s,1H),7.30(d,J=4.0Hz,1H),7.17(dd,J=4.0,8.0Hz,1H),6.69(d,J=12.0Hz,1H),5.16(s,2H),4.23-4.17(m,2H),4.11-4.07(m,2H),3.96(s,3H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：488.0[M+1]。

實施例34E。

N1-(4-(7-氯-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟吡啶-2-基)-N4-(2-(二甲基氨基)乙基)-2-甲氧基-N--4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將實施例D替換為實施例34D，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺。得到標題化合物(紅色固體，300.00毫克，產率85.58%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.02(s,1H),8.35(d,J=4.0Hz,1H),7.84-7.75(m,1H),7.53(s,1H),7.38(d,J=4.0Hz,1H),7.25(dd,J=4.0,8.0Hz,1H),6.69(s,1H),5.26(s,2H),4.33-4.24(m,2H),4.20-4.14(m,2H),4.00(s,3H),3.28(t,J=8.0 Hz,2H),2.90(s,3H),2.57(t,J=8.0Hz,2H),2.28(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：570.1[M+1]。

實施例34F。

N4-(4-(7-氯-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟吡啶-2-基)-N1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例34E。得到標題化合物(棕色固體，200.00毫克，產率70.37%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.22(d,J=2.8Hz,1H),7.91-7.86(m,2H),7.52(s,1H),7.29(d,J=4.0Hz,1H),7.16(dd,J=4.0,8.0Hz,1H),6.63(s,1H),5.08(s,2H),4.19-4.15(m,2H),4.10-4.06(m,2H),3.77(s,3H),2.88(t,J=8.0Hz,2H),2.60(s,3H),2.33(t,J=8.0Hz,2H),2.19(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：540.2[M+1]。

實施例34G。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例34F。得到標題化合物(65.50毫克，產率29.27%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 8.98(s,1H),8.36(d,J=4.0Hz,1H),7.82(dd,J=4.0,8.0Hz,1H),7.50(d,J=0.8Hz,1H),7.16(dd,J=0.8,8.0Hz,1H),6.98(s,1H),6.52(dd,J=12.0,20.0Hz,1H),6.28(dd,J=0.8,20.0Hz,1H),5.77(dd,J=0.8,8.0Hz,1H),5.10(s,2H),4.17(s,4H),3.94(s,3H),3.06(t,J=4.0Hz,2H),2.71(s,3H),2.44(t,J=4.0Hz,2H),2.30(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：594.2[M+1]。

實施例35。

N-[2-[2-(二甲基氨基)乙基-甲基氨基]-5-[[5-氟-4-(6-甲氧基-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基苯基]丙-2-烯醯胺。

本實施例合成流程同流程10。

實施例35A。

(7-甲氧基-1H-吲哚-2-基)甲醇。

在0℃下，將乙基-7-甲氧基-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(11.00克，50.17毫莫耳)溶於THF(100mL)，向該混合物中分批加入四氫鋁鋰(2.86克，75.26毫莫耳)，升溫到25℃攪拌3小時。LCMS顯示反應完成，向反應混合物中加入H₂O(1mL)和NaOH(1mL)，然後加入H2O(3mL)，過濾，濃縮濾液得到標題化合物(棕色油狀，10.00克)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.57(br.s.,1 H),7.20(d,J=8.0Hz,1 H),7.03(t,J=8.0Hz,1 H),6.65(d,J=8.0Hz,1 H),6.40(d,J=4.0Hz,1 H),4.84(d,J=4.0Hz,2 H),3.97(s,3 H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：178.1[M+1]。

實施例35B。

6-甲氧基-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚。

在0℃下，將(7-甲氧基-1H-吲哚-2-基)甲醇(10.00克，56.43毫莫耳)和氫氧化鈉(7.92克，141.08毫莫耳)溶於二氯甲烷(300mL)，在N₂保護下，向該混合物中緩慢滴加苯基乙烯基碸(24.54克，67.72毫莫耳)的二氯甲烷(200mL)溶液，升溫到25℃攪拌3小時。TLC顯示反應完成，向反應混合物中加入H₂O(700mL)用二氯甲烷(500mLx2)萃取，有機層用飽和食鹽水(1000mL)沖洗，經無水硫酸鈉(10克)乾燥，濃縮後，用柱色譜(PE：EA=50：1，20：1)分離純化得到標題化合物(棕色固體，5.80克，50.58% yield)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.18(d,J=8.0Hz,1 H),7.02(t,J=8.0Hz,1 H),6.63(d,J=8.0Hz,1 H),6.20(s,1 H),4.99(s,2 H),4.50-4.57(m,2 H),4.10-4.17(m,2 H),3.94(s,3 H)。

實施例35C。

10-(2-氯-5-氟-吡啶-4-基)-6-甲氧基-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚。

本實施例根據實施例30A的方法製備，將3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚替換為35B。得到標題化合物(棕色固體，5.80克，50.58% yield)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.41(d,J=4.0Hz,1 H),7.48(dd,J=8.0,4.00Hz,1 H)7.17(t,J=8.00Hz,1 H)6.73(d,J=8.00Hz,1 H),5.22(s,2 H),4.65(t,J=4.00Hz,2 H),4.17(t,J=4.00Hz,2 H),3.96(s,3 H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：334.0[M+1]。

實施例35D。

5-氟-N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(6-甲氧基-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-胺。

本實施例根據實施例30B的方法製備，將30A替換為35C。得到標題化合物(黃色固體，3.2克)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.37(d,J=8.00Hz,1 H),8.36(d,J=2.00Hz,1 H),7.64(br.s.,1 H),7.40-7.46(m,1 H),7.14(t,J=8.00Hz,1 H),6.67-6.78(m,2 H),5.21(s,2 H),4.63(t,J=4.00Hz,2 H),4.20(t,J=4.00Hz,2 H),4.03(s,3 H),3.96(s,3 H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：484.0[M+1]。

實施例35E。

N4-〔2-(二甲基氨基)乙基]-N1-[5-氟-4-(6-甲氧基-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]-2-甲氧基-N--4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺基]。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將實施例D替換為實施例35D，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺。得到標題化合物(黃色固體，3.2克)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：566.1[M+1]。

實施例35F。

N1-[2-(二甲氨基)乙基]-N4-[5-氟-4-(6-甲氧基-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例35E。得到標題化合物(棕色油狀，500毫克)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.28(d,J=4.00Hz,1 H),8.03(s,1 H),7.58-7.63(m,2 H),7.14(t,J=8.00Hz,1 H),6.67-6.72(m,2 H),5.13(s,2 H),4.62(t,J=4.00Hz,2 H),4.16(t,J=8.00 Hz,2 H),3.95(s,3 H),3.84(s,3 H),2.95(t,J=8.00Hz,2 H),2.67(s,3 H),2.39(t,J=4.00Hz,2 H),2.26(s,6 H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：536.1[M+1]。

實施例35G。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例35F。得到標題化合物(210.00毫克，330.35微莫耳，58.98% yield)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 8.46-8.57(m,2 H),8.37(d,J=3.00Hz,1 H),7.40(dd,J=8.00,3.45Hz,1 H)7.06(t,J=8.00Hz,1 H)6.96(s,1 H)6.75(d,J=8.00bHz,1 H)6.39-6.54(m,2 H)5.82-5.90(m,1 H)5.05(s,2 H)4.58(t,J=5.00Hz,2 H)4.13(t,J=5.00Hz,2 H)4.00(s,3 H)3.96(s,3 H)3.39(d,J=8.00Hz,2 H)3.06-3.18(m,2 H)2.70-2.77(m,9 H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：590.3[M+1]。

實施例36。

N-(5-((4-(4,4-二甲基-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟吡啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺甲磺酸鹽。

本實施例合成流程同流程10。

實施例36A。

1-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯。

將吲哚-2-甲酸乙酯(32.00克，169.12毫莫耳)，溴乙酸乙酯(70.61克，422.80毫莫耳)和碳酸鉀(70.12克，507.36毫莫耳)混合於乙腈(400mL)中，80℃下攪拌20小時。LCMS顯示反應完成。將反應混合物用乙酸乙酯(500mL)和水(500mL)稀釋後分液。將有機相濃縮後用柱色譜(PE：EA=20：1)分離純化，得到標題化合物(無色油狀，46.00克，產率98.80%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.72(d,J=8.1Hz,1H),7.43-7.35(m,2H),7.34-7.29(m,1H),7.20(t,J=7.5Hz,1H),5.34(s,2H),4.38(q,J=7.2Hz,2H),4.24(q,2H),1.42(t,J=7.2Hz,3H),1.28(t,J=7.1Hz,3H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：276.2[M+1]。

實施例36B。

乙基-1-(1-甲氧基-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯。

在-70℃下，將二(三甲基矽)氨基鉀(1M，334.18mL)滴入溶有實施例36A(46.00克，167.09毫莫耳)的四氫呋喃(300mL)中。混合液在-70℃下攪拌0.5小時後滴入碘甲烷(47.43克，334.18毫莫耳)。混合物在5-15℃繼續攪拌12小時。TLC顯示未反應完。將混合物用水(500mL)和乙酸乙酯(500mL)稀釋後分液。將有機相濃縮後用色譜柱(PE：EA=40：1，20：1)分離純化。得到的產物(48克)用四氫呋喃(200mL)溶解後在-70℃下滴加二(三甲基矽)氨基鉀(1M，497.70mL)。混合物在-70℃下攪拌0.5小時後滴入碘甲烷(70.64克，497.70毫莫耳)。得到的混合物在0℃下攪拌3小時。LCMS顯示反應完全。將混合物用水(300mL)和乙酸乙酯(300mL)稀釋後分液。有機相濃縮後用色譜柱(PE：EA=30：1)分離純化，得到標題化合物(無色油狀，43.00克，產率85.44%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.67(dd,J=7.6,13.6Hz,2H),7.36(s,1H),7.26(s,1H),7.15(t,J=7.2Hz,1H),4.34(q,J=7.2Hz,2H),4.16(q,J=7.2Hz,2H),2.10(s,6H),1.41(t,J=7.2Hz,3H),1.18(t,J=7.2Hz,3H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：304.1[M+1]。

實施例36C。

2-(2-(羥基甲基)-1H-吲哚-1-基)-2-甲基丙-1-醇。

在0℃下，將四氫鋁鋰(3.75克，98.91毫莫耳)分批加入溶有實施例36B(10.00克，32.97毫莫耳)的四氫呋喃(100mL)中。混合物在40℃下攪拌1小時。TLC顯示反應完成。在0℃下，往混合物中滴加水(3.75mL)和15%氫氧化鈉水溶液(3.75mL)，然後過濾。濾液濃縮得到標題化合物 (白色固體，7.40克)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.52(d,J=7.2Hz,2H),7.13(t,J=6.8Hz,1H),7.07(t,J=7.2Hz,1H),6.22(s,1H),4.51(s,2H),3.55(s,2H),3.39(s,2H),1.64(s,6H)。

實施例36D。

4,4-二甲基-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚。

在0℃下，將甲烷磺醯氯(3.16克，27.59毫莫耳)滴入溶有實施例36C(5.50克，25.08毫莫耳)，,三乙胺(3.81克，37.62毫莫耳)和4-二甲氨基吡啶((306.40毫克，2.51毫莫耳)的DMF(100mL)中。混合物在15-25℃下攪拌2小時。TLC顯示反應完全。將混合物用DMF(200mL)稀釋後加入鈉氫(2.01克，50.16毫莫耳)。混合物在70℃下攪拌4小時。LCMS監測到標題化合物的MS。向混合物中加入水(2mL)然後濃縮乾。將濃縮殘留物溶於二氯甲烷(100mL)中然後用水(50mL x 2)洗滌。有機相濃縮後用柱色譜(PE：EA=40：1)分離純化，得到標題化合物(黃色固體，1.20克，產率23.77%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.56(t,J=8.6Hz,2H),7.20-7.05(m,2H),6.20(s,1H),4.97(s,2H),3.80(s,2H),1.68(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：202.0[M+1]。

實施例36E。

10-(2-氯-5-氟-吡啶-4-基)-4,4-二甲基-1,3-二氫-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚。

本實施例根據實施例30A的方法製備，將3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚替換為36D。得到標題化合物(黃色固體，1.30克，產率87.66%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.35(d,J=2.8Hz,1H),7.87-7.77(m,1H),7.61-7.51(m,1H),7.25-7.13(m,2H),5.10(s,2H),3.78(s,2H),1.67(s,6H)。

實施例36F。

4-(4,4-二甲基-1,3-二氫-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟-N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2-胺。

本實施例根據實施例30B的方法製備，將實施例30A替換為實施例36E。得到標題化合物(深黃色固體，1.30克，產率68.88%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.38(d,J=8.4Hz,1H),8.38(d,J=2.8Hz,1H),7.89-7.81(m,1H),7.70-7.59(m,2H),7.32-7.19(m,1H),6.76(d,J=12.0Hz,1H),5.21(s,2H),4.03(s,3H),3.90(s,2H),1.76(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：482.0[M+1]。

實施例36G。

N1-(4-(4,4-二甲基-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟吡啶-2-基)-N4-(2-(二甲基氨基)乙基)-2-甲氧基-N--4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將實施例D替換為實施例36F，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺。得到標題化合物(紅色固體，750.00毫克，80.16% yield)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.07(s,1H),8.34(d,J=2.5Hz,1H),7.91-7.79(m,1H),7.70-7.60(m,1H),7.56(s,1H),7.25(dd,J=3.2,5.6Hz,1H),6.68(s,1H),5.21(s,2H),3.98(s,3H),3.90(s,2H),3.27(t,J=6.8Hz,2H),2.88(s,3H),2.57(t,J=6.8Hz,2H),2.27(s,6H),1.75(s,6H)。

實施例36H。

N4-(4-(4,4-二甲基-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-5-氟吡啶-2-基)-N1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例36G。得到標題化合物(深黃色固體，600.00毫克，粗品)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.30(d,J=2.5Hz,1H),8.04(s,2H),7.67-7.58(m,2H),7.25(dd, J=3.2,6.4Hz,2H),6.71(s,1H),5.10(s,2H),3.93-3.76(m,5H),2.96(t,J=6.8Hz,2H),2.67(s,3H),2.40(t,J=6.8Hz,2H),2.26(s,6H),1.75(s,6H)。

實施例36I。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例36H。得到標題化合物(深黃固體，330.00毫克，59.93% yield)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.40(br.s.,1H),8.36(d,J=2.4Hz,1H),7.91-7.77(m,1H),7.65-7.52(m,2H),7.21(dd,J=2.8,6.0Hz,2H),6.69(s,1H),6.36(d,J=16.4Hz,1H),5.68(d,J=11.2Hz,1H),5.20(s,2H),3.88(s,3H),3.84(s,2H),3.17(br.s.,2H),2.76-2.43(m,9H),1.73(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：588.2[M+1]。

實施例36J。

在70℃下，將實施例36I(330.00毫克，561.52微莫耳)加入到EA(0.66mL)中，向該溶液中滴加溶於EA(0.66mL)的甲烷磺酸(53.97毫克，561.52微莫耳)溶液。加完後維持在該溫度下攪拌1小時。有紅色沉澱析出。混合物過濾，濾餅用EA(3mL*2)洗滌並真空乾燥得到標題化合物(283.00毫克，產率73.22%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 8.39(d,J=5.2Hz,1H),7.94-7.85(m,2H),7.82(d,J=8.0Hz,1H),7.38-7.21(m,2H),7.10(s,1H),6.70-6.58(m,1H),6.51-6.38(m,1H),5.87(d,J=10.8Hz,1H),5.00(s,2H),3.99(s,3H),3.85(s,2H),3.59(t,J=5.2Hz,2H),3.37(t,J=5.2Hz,2H),2.93(s,6H),2.83(s,3H),2.73(s,4H),1.74(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：588.3[M+1]。

流程11。

實施例37A。

(5-氟-1H-吲哚-2-基)甲醇。

在0℃下，將5-氟-1H-吲哚-2-羧酸(10.00克，55.82毫莫耳)溶於THF(100mL)中，向此混合物中加入LAH(3.18克，83.79毫莫耳)，並在0~25℃攪拌4小時。TLC(PE：EtOAc=1：1)顯示反應完成，向反應混合物中依次加入水(3mL),15%NaOH溶液(3mL)和水(9mL)，將得到的混合物過濾，濾液濃縮，得到標題化合物(黃色固體，9.00克，產率85.91%)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)：δ 8.44(br.S,,1H),7.20-7.27(m,2H),6.97-6.92(m,1H),6.38(s,1H),4.83(s,3H),2.09(br.s.,1H)。

實施例37B。

8-氟-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚。

本實施例根據實施例C4的方法製備，將2-羥甲基-吲哚替換為(5-氟-1H-吲哚-2-基)甲醇。得到標題化合物(淺黃色固體，1.30克，產率50.54%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.18-7.27(m,2H),6.95-6.93(m,1H),6.21(s,1H),5.00(s,2H),4.17-4.22(m,2H),4.06-4.11(m,2H)。

實施例37C。

10-溴-8-氟-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚。

在-70℃下，將實施例37B(5.00克，26.15毫莫耳)溶於THF(100mL)中，向該混合液中加入NBS(5.12克，28.77毫莫耳)，並在-70℃攪拌1小時。TLC(PE：EtOAc=10：1)顯示反應完成，反應液用飽和NaHCO₃溶液(20mL)淬滅，並用EtOAc(30mL*2)萃取，合併有機相用無水硫酸鈉乾燥，抽濾並濃縮，得到的殘留物用柱色譜(SiO2：PE：EtOAc=200：1 to 25：1)純化得到標題化合物(白色固體，5.50克，產率77.87%)。¹H NMR(400MHz, CDCl₃)：δ 7.27-7.17(m,1H),7.02-6.99(m,1H),4.93(s,2H),4.22-4.14(m,2H),4.12-4.03(m,2H)。

實施例37D。

8-氟-10-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊烷-2-基)-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚。

將實施例37C(5.50克，20.36毫莫耳)和4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊烷(5.21克，40.72毫莫耳，5.92mL)溶於甲苯(100mL)中，向該混合物中加入Pd₂(dba)₃(372.93毫克，407.20微莫耳)，Et₃N(6.18克，61.08毫莫耳，8.47mL)和X-PHOS(388.29毫克，814.40微莫耳)，並置換N₂後，升溫至110℃攪拌3小時。TLC(PE：DCM=10：1)顯示反應結束，將反應過濾並濃縮，殘留物用柱色譜(SiO2：PE：EtOAc=200：1 to 20：1)純化得到標題化合物(淺黃色固體，6.50克，產率90.59%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.67(dd,J1=2.4Hz,J2=10Hz,1H),7.19(dd,J1=4.4Hz,J2=8.8Hz,1H),6.97-6.94(m,1H),5.17(s,2H),4.21-4.15(m,2H),4.11-4.05(m,2H),1.36(s,12H)。

實施例37E。

10-(2-氯嘧啶-4-基)-8-氟-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚。

將實施例37D(1.50克，4.73毫莫耳)和2,4-二氯嘧啶(1.41克，9.46毫莫耳)溶於THF(20mL)和水(3mL)中，向該混合物中加入Na₂CO₃(1.00毫克，9.46毫莫耳)和Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(200.00毫克，244.91微莫耳)，在氮氣保護下升溫至50℃攪拌8小時。TLC(PE：EtOAc=5：1)顯示反應結束，向反應液中加入水(10mL)並濃縮除去THF，得到的固體抽濾並用PE：EtOAc(10：1)打漿，固體抽濾並濃縮得到標題化合物(白色固體，700.00克，38.98%)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)：δ 8.53(d,J=5.4Hz,1H),7.71(dd,J1=2.4Hz,J2=9.9Hz,1H),7.49(d,J=5.4Hz,1H),7.34-7.31(m,1H),7.10-7.08(m,1H),5.41(s,2H),4.30-4.14(m,4H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：304.0[M+1]。

實施例37F。

4-(8-氟-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2-胺。

本實施例根據實施例D的方法製備，將實施例C替換為實施例37E。得到標題化合物(灰色固體，700.00毫克，粗品)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)：δ 9.40(d,J=8.1Hz,1H),8.49(d,J=5.7Hz,1H),7.72(d,J=9.9Hz,1H),7.57(s,1H),7.15(d,J=5.4Hz,1H),7.08-7.06(m,1H),6.79(d,J=12.3Hz,1H),6.65(d,J=12.0Hz,1H),5.42(s,2H),4.27-4.25(m,2H),4.21-4.19(m,2H),4.06(s,3H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：454.2[M+1]。

實施例37G。

N4-〔2-(二甲基氨基)乙基]-N1-[4-(8-氟-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]-2-甲氧基-N4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將實施例D替換為實施例37F，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺。得到標題化合物(棕色固體，140.00毫克，產率88.89%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.96(s,1H),8.35(d,J=5.2Hz,1H),7.62(dd,J1=2.4Hz,J2=10.0Hz,1H),7.36(s,1H),7.22(dd,J1=4.4Hz,J2=9.0Hz,1H),7.00-6.91(m,2H),6.63(s,1H),6.64-6.60(m,1H),5.33(s,2H),4.21-4.15(m,2H),4.12-4.06(m,2H),3.92(s,3H),3.25-3.18(m,2H),2.82(s,3H),2.54(t,J=7.2Hz,2H),2.25(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：536.4[M+1]。

實施例37H。

N1-[2-(二甲氨基)乙基]-N4-[4-(8-氟-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例37G。得到標題化合物(棕色固體，160.00毫克，粗品)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.41(d,J=5.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.85-7.82(m,1H),7.80-7.71(m,1H),7.48(s,1H),7.07-7.02(m,1H),6.93(d,J=5.6Hz,1H),6.73(s,1H),5.38 (s,2H),4.27-4.22(m,2H),4.21-4.16(m,2H),3.86(s,3H),3.04-3.00(m,2H),2.70(s,3H),2.49-2.46(m,2H),2.32(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：506.1[M+1]。

實施例37I。

N-[2-[2-(二甲基氨基)乙基-甲基-氨基]-5-[4-(8-氟-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-丙-2-烯醯胺。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例37H。得到標題化合物(甲酸鹽，73.00毫克，產率37.33%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ 10.13(s,1H),8.60(s,1H),8.33(d,J=5.2Hz,1H),8.26(s,1H),8.17(s,1H),7.85(dd,J1=2.0Hz,J2=10.4Hz,1H),7.51(dd,J1=4.6Hz,J2=8.8Hz,1H),7.13-6.97(m,3H),6.44(dd,J1=10.0Hz,J2=16.8Hz,1H),6.19(dd,J1=2.0Hz,J2=16.8z,1H),5.78-5.67(m,1H),5.07(s,2H),4.18-4.11(m,2H),4.10-4.00(m,2H),3.80(s,3H),2.94(t,J=5.2Hz,2H),2.70(s,3H),2.44(t,J=5.6Hz,2H),2.29(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：560.1[M+1]。

實施例38。

N-[2-[2-(二甲基氨基)乙基-甲基-氨基]-5-[[4-(7-氟-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-丙-2-烯醯胺。

本實施例合成流程同流程11。

實施例38A。

甲基-6-氟-1H-吲哚-2-羧酸乙酯。

將2-溴-4-氟-苯甲醛(20.00克，98.52毫莫耳)和甲基-2-氨基乙酸(18.55克，147.78毫莫耳，鹽酸鹽)溶於NMP(500mL)中，向該混合物中加入Cs₂CO₃(64.20克，197.04毫莫耳)和Cu₂O(1.41克，9.85毫莫耳)，在氮氣保護下將反應液升溫至100℃攪拌16小時。TLC(PE：DCM=10：1)顯示反應結束，將反應過濾並濃縮，向殘留物中加入水(1000mL)，並用EtOAc(200mL*2)萃取，合併有機相用無水硫酸鈉乾燥，抽濾並濃縮，得到的殘留物用柱色譜(SiO₂,PE：EtOAc=500：1 to 20：1)純化得到標題化合物(黃色固體，5.00克，產率26.27%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.20(br.s.,1H),7.62(dd,J1=5.2Hz,J2=8.8Hz,1H),7.21(d,J=1.2Hz,1H),7.10(dd,J1=2.0Hz,J2=9.6Hz,1H),6.94(dt,J1=2.4Hz,J2=9.2Hz,1H),3.95(s,3H)。

實施例38B。

(6-氟-1H-吲哚-2-基)甲醇。

本實施例根據實施例37A的方法製備，將5-氟-1H-吲哚-2-羧酸替換為甲基-6-氟-1H-吲哚-2-羧酸乙酯。得到標題化合物(黃色油狀，4.50克，89.49%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.54(br.s.,1H),7.56-7.44(m,1H),7.07-7.00(m,1H),6.91-6.88(m,1H),6.39(s,1H),4.81(s,2H)。

實施例38C。

7-氟-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚。

本實施例根據實施例37B的方法製備，將(5-氟-1H-吲哚-2-基)甲醇替換為(6-氟-1H-吲哚-2-基)甲醇。得到標題化合物(棕色固體，1.20克，31.10%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.49(dd,J1=8.8Hz,J2=5.2Hz,1H),6.84-7.03(m,2H),6.22(s,1H),4.98(s,2H),4.17-4.22(m,2H),4.02-4.07(m,2H)。

實施例38D。

10-溴-7-氟-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚。

本實施例根據實施例37C的方法製備，將37B替換為38C。得到標題化合物(白色固體，2.20克，53.69%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.42-7.31(m,1H),6.95-6.81(m,2H),4.84-4.73(m,2H),4.11-4.03(m,2H),3.97-3.85(m,2H)。

實施例38E。

7-氟-10-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊烷-2-基)-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚。

本實施例根據實施例37D的方法製備，將37C替換為38D。得到標題化合物(淺黃色固體，2.50克，96.72%)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)：δ 7.93-7.83(m,1H),6.99-6.89(m,2H),5.15(s,2H),4.20-4.13(m,2H),4.07-4.00(m,2H),1.34(s,12H)。

實施例38F。

10-(2-氯嘧啶-4-基)-7-氟-3,4-二氫-1H-[1,41惡嗪並[4,3-a]吲哚。

本實施例根據實施例37E的方法製備，將37D替換為38E。得到標題化合物(淺黃色固體，1.10克，47.45%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.53(d,J=5.4Hz,1H),7.98(dd,J=5.2Hz,J2=9.2Hz,1H),7.53(d,J=5.2Hz,1H),7.14-7.05(m,2H),5.43-5.35(m,2H),4.26-4.21(m,2H),4.18-4.13(m,2H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：304.0[M+1]。

實施例38G。

4-(7-氟-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)-N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)嘧啶-2-胺。

本實施例根據實施例D的方法製備，將實施例C替換為實施例38F。得到標題化合物(棕色固體，2.00克，粗品)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.39(d,J=8.4Hz,1H),8.48(d,J=5.2Hz,1H),7.97(dd,J1=5.2Hz,J2=8.8Hz,1H),7.57(s,1H),7.19(d,J=5.2Hz,1H),7.11-7.03(m,2H),6.79(d,J=12.0Hz,1H),5.40(s,2H),4.30-4.24(m,2H),4.20-4.11(m,2H),4.06(s,3H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：454.0[M+1]。

實施例38H。

N4-〔2-(二甲基氨基)乙基]-N1-[4-(7-氟-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-a]吲哚-10-基)嘧啶-2-基]-2-甲氧基-N4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將實施例D替換為實施例38G，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺。得到標題化合物(棕色固體，1.60克，產率71.70%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.06(s,1H),8.44(d,J=5.2Hz,1H),8.02-7.92(m,1H),7.66-7.37(m,2H),7.15-7.01(m,3H),6.76(s,1H),5.43(s,2H),4.31-4.23(m,2H),4.19-4.10(m,2H),3.99(s,3H),3.36-3.28(m,2H),2.91(s,3H),2.64-2.61(m,2H),2.32(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：536.2[M+1]。

實施例38I。

N1-[2-(二甲氨基)乙基]-N4-[4-(7-氟-3,4-二氫-1H-[1,4]惡嗪並[4,3-[1吲哚-10-基)嘧啶-2-基]-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例38H。得到標題化合物(棕色固體，1.50克，產率89.30%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.41(d,J=5.2Hz,1H),8.09(dd,J1=5.2Hz,J2=9.6Hz,1H),7.97(s,1H),7.64-7.57(m,1H),7.49(s,1H),7.09-7.06(m,1H),6.97(d,J=5.2Hz,1H),6.73(s,1H),5.37(s,2H),4.27-4.20(m,2H),4.17-4.10(m,2H),3.86(s,3H),3.04-2.97(m,2H),2.70(s,3H),2.52-2.43(m,3H),2.32(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：506.2[M+1]。

實施例38J。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例38I。得到標題化合物(甲酸鹽，90.00毫克，產率39.84%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ 10.14(s,1H),8.61(s,1H),8.34(d,J=5.2Hz,1H),8.26(s,1H),8.16-8.03(m,2H),7.38(dd,J1=2.4Hz,J2=9.6Hz,1H),7.08-6.94(m,3H),6.44(dd,J1=10.0Hz,J2=16.8Hz,1H),6.19(dd,J1=2.0Hz,J2=16.8Hz,1H),5.76-5.65(m,1H),5.04(s,2H),4.14-4.00(m,4H),3.80(s,3H),2.94(t,J=5.6Hz,2H),2.70(s,3H),2.42(t,J=5.6Hz,2H),2.28(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：560.3[M+1]。

實施例39。

N-[5-[[4-(8,9-二氫-6H-吡啶並[2,3]吡咯並[4,5-α][1,4]惡嗪-5-基)-5-氟吡啶-2-基]氨基]-2-[2-(二甲基氨基)乙基-甲基-氨基]-4-甲氧苯基]丙-2-烯醯胺。

本實施例合成流程同流程11。

實施例39A。

1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-2-基甲醇。

在0℃下，將1-(對甲苯磺醯基)吡咯並[2,3-b]吡啶-2-羧酸(26.00克，82.19毫莫耳)溶於四氫呋喃(300mL)，向該混合物中分批加入四氫鋁鋰(12.48克，328.76毫莫耳)，20℃攪拌32小時。TLC顯示反應完成，向反應混合物中依次加入水(13mL)、15%的NaOH(13mL)溶液和水(39mL)，混合物過濾，濾液濃縮後，得到粗產品，該產品經柱色譜分離純化(DCM：MeOH=1：0，10：1)得到標題化合物(黃色固體，2.90克，產率23.81%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 8.14(dd,J=4.80,1.20Hz,1 H),7.94(d,J=7.60Hz,1 H),7.08(dd,J=8.00,4.80Hz,1 H),6.42(s,1 H),4.77(s,3 H)。

實施例39B。

8,9-二氫-6H-吡啶並[3,4]吡咯並[3,5-α][1,4]惡嗪。

在0℃下，將1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-2-基甲醇(2.50克，16.87毫莫耳)與氫氧化鉀(2.37克，42.18毫莫耳)溶於二氯甲烷(900mL)，向該混合物中滴加溶有苯基乙烯基碸(7.34克，20.24毫莫耳)的DCM(100mL)的溶液，20℃攪拌12小時。TLC顯示反應完成，用水洗(100mL x2)，有機相濃縮，得到粗產品，該產品經柱色譜(DCM：MeOH=1：0，10：1)得到標題化合物(白色固體，820.00毫克，產率27.90%)。

實施例39C。

5-溴-8,9-二氫-6H-吡啶並[2,3]吡咯並[4,5-α][1,4]惡嗪。

本實施例根據實施例37C的方法製備，將實施例37B替換為實施例39B。得到標題化合物(黃色固體，180.00毫克，產率45.99%)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：253.00[M+1]。

實施例39D。

5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊烷-2-基)-8,9-二氫-6H-吡啶並[3,4]吡咯並[3,5-α][1,4]惡嗪。

本實施例根據實施例37D的方法製備，將實施例37C替換為實施例39C。得到標題化合物(黃色固體，170.00毫克，產率73.97%)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：300.7[M+1]。

實施例39E。

5-(2-氯-5-氟-吡啶-4-基)-8,9-二氫-6H-吡啶並[2,3]吡咯並[4,5-α][1,4]惡嗪。

本實施例根據實施例37E的方法製備，將實施例37D替換為實施例39D。得到標題化合物(黃色固體，90.00毫克，產率60.29%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.12-8.58(m,4 H),5.35(br.s.,2 H),4.09-4.59(m,4 H)。 LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：305.0[M+1]。

實施例39F。

4-(8,9-二氫-6H-吡啶並[2,3]吡咯並[4,5-α][1,4]惡嗪-5-基)-5-氟-N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2-胺。

本實施例根據實施例30B的方法製備，將實施例30A替換為實施例39E。得到標題化合物(黃色固體，88.00毫克，產率65.71%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ.9.36(br.s.,1 H),8.08-8.58(m,2 H),7.66(br.s.,1 H),7.35-7.52(m,1 H),6.68-6.88(m,1 H),5.34(br.s.,2 H),4.21-4.55(m,4 H),4.08(br.s.,3 H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：455.0[M+1]。

實施例39G。

N1-[4-(8,9-二氫-6H-吡啶並[2,3]吡咯並[4,5-α][1,4]惡嗪-5-基)-5-氟吡啶-2-基]-N4-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-甲氧基-N4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將實施例D替換為實施例39F，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺。得到標題化合物(黃色固體，55.00毫克，產率43.19%)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：537.2[M+1]。

實施例39H。

N4-[4-(8,9-二氫-6H-吡啶並[2,3]吡咯並[4,5-α][1,4]惡嗪-5-基)-5-氟吡啶-2-基]-N1-[2-(二甲基氨基)乙基]-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例39G。得到標題化合物(黃色固體，420.00毫克，產率99.13%)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：507.2[M+1]。

實施例39I。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例39H。得到標題化合物(8.60毫克，產率17.44%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 8.54(br.s.,1 H),8.48(br.s.,1 H),8.38(br.s.,1 H),7.81-7.90(m,1 H),7.17-7.25(m,1 H),6.97(s,2 H),6.41-6.52(m,2 H),5.86(m,1 H),5.07(br.s.,3 H),4.17(d,J=14.00Hz,4 H),4.00(s,3 H),3.41(br.s.,3 H),3.12(br.s.,2 H),2.76(br.s.,6 H),2.72(s,3 H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：578.3[M+1]。

流程12。

實施例E1。

7-(3-溴丙基)-1氫-吲哚。

將7-羥基吲哚(2.60克，19.49毫莫耳)溶於THF(10.00mL)中，10℃下加入三苯基膦(10.22g,38.98毫莫耳)和3-溴丙醇(5.42g，38.98毫莫耳)，然後緩慢滴加DIAD(7.88g,38.98毫莫耳)，混合物在30℃下攪拌12小時，TLC顯示反應完成。濃縮後，用柱色譜(PE：EA=20：1，6：1)分離純化，得到標題化合物(無色油狀物，3.27克，產率66.02%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.29(br.s.,1 H),7.18(d,J=2.13Hz,1 H),7.11(t,J=2.70Hz,1 H),6.91-6.98(m,1 H),6.59(d,J=7.65Hz,1 H),6.47(dd,J=3.01,2.26Hz,1 H),4.16-4.28(m,2 H),3.52-3.63(m,2 H),2.27-2.41(m,2 H)。

實施例E2。

4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺。

在0℃下，將實施例E1(2.07克，8.15毫莫耳)溶於DMF(10mL)中，然後分批加入NaH(0.652克，16.30毫莫耳，60%純度)。混合物在30℃下攪拌2小時。TLC顯示反應完成，向反應混合物中加入H₂O(10mL)，混合物加入EA(200mL)萃取，有機相濃縮後，用柱色譜(PE：EA=30：1，20：1)分離純化，得到標題化合物(白色固體，1.13克，產率80.05%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.27-7.33(m,1 H),7.09(d,J=3.14Hz,1 H),7.00-7.06(m,1 H),6.81-6.87(m,1 H),6.58(d,J=3.01Hz,1 H),4.31-4.38(m,2 H),4.18-4.25(m,2 H),2.36-2.44(m,2 H)。

實施例E。

7-(2-氯嘧啶-4-基)-3,4-二氫-2H-[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚。

在10℃下，將AlCl₃(3.7克，27.72毫莫耳)溶於DME(20mL)，向該混合物中加入2,4-二氯嘧啶(2.75克，18.48毫莫耳)，攪拌0.5小時。再分批緩慢加入實施例E2(1.6克，9.24毫莫耳)，升溫至80℃，攪拌2小時。TLC顯示反應完成，向反應混合物中加入DCM(500mL)溶液，有機層用飽和食鹽水(200mL x 2)洗滌後，濃縮，粗品經過柱色譜(PE：EA=3：1，DCM)分離純化得到標題化合物(黃色固體，1.3克，產率49.24%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.45-8.52(m,1 H),7.90-8.01(m,2 H),7.52(d,J=5.40Hz,1 H),7.17-7.27(m,1 H),6.94(d,J=7.78Hz,1 H),4.26-4.46(m,4 H),2.35-2.50(m,2 H)。

實施例F。

4-(3,4-二氫-2H-[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚-7-基)-N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)嘧啶-2-胺。

在室溫下，將實施例E(2.4克，8.40毫莫耳)和4-氟-2-甲氧基-5-硝基-苯胺(1.64克，8.82毫莫耳)，對甲苯磺酸(1.76克，1.1毫莫耳)加入1,4-二氧六環(90mL)溶液中，升溫至110度，攪拌12小時。LCMS顯示反應完成，向反應混合物中加入氨水(50mL)調節溶液pH=8.混合物冷卻至20度，過濾。固體用甲醇(50mL)洗滌，乾燥得到標題化合物(黃色固體，3.00克，產率82.02%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.10(d,J=8.41Hz,1 H),8.28-8.48(m,3 H),8.07(d,J=7.78Hz,1 H),7.26-7.42(m,2 H),7.01(t,J=7.84Hz,1 H),6.78(d,J=7.53Hz,1 H),4.34(d,J=4.64Hz,4 H),4.02(s,3 H),2.34(br.s.,2 H)。

實施例40。

N-(5-((4-(3,4-二氫-2H-[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚-7-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例40A。

N1-(4-(3,4-二氫-2H-[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚-7-基)嘧啶-2-基)-N4-(2-(二甲基氨基)乙基)-2-甲氧基-N--4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例根據實施例16A的方法製備，將實施例D替換為實施例F，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺。得到標題化合物(黃色固體，1.00克，產率82.15%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.62(s,1 H),8.42(d,J=5.27Hz,1 H),8.32(s,1 H),7.80(d,J=7.91Hz,1 H),7.52-7.61(m,1 H),7.14-7.25(m,2 H),6.91(d,J=7.65Hz,1 H),6.70(s,1 H),4.35-4.51(m,4 H),4.01(s,3 H),3.33(t,J=7.09Hz,2 H),2.93(s,3 H),2.63(t,J=7.09Hz,2 H),2.45(dt,J=10.29,5.40Hz,2 H),2.32(s,6 H)。

實施例40B。

N4-(4-(3,4-二氫-2H-[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚-7-基)嘧啶-2-基)-N1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例根據實施例16B的方法製備，將實施例16A替換為實施例40A。得到標題化合物(黃色固體，0.8克，產率85.01%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.27(d,J=5.27Hz,1 H),8.08(t,J=3.95Hz,2 H),7.70(s,1 H),7.53(s,1 H),7.10(t,J=7.91Hz,1 H),6.94(d,J=5.27Hz,1 H),6.83(d,J=7.65Hz,1 H),6.61-6.66(m,1 H),4.20-4.34(m,4 H),3.75-3.80(m,3 H),2.94(t,J=6.78Hz,2 H),2.62(s,3 H),2.42(t,J=6.59Hz,2 H),2.30-2.38(m,2 H),2.26(s,6 H)。

實施例40C。

本實施例根據實施例16C的方法製備，將實施例16B替換為實施例40B。得標題化合物(120.00毫克，產率71.15%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 10.21(br.s.,1H),9.84(s,1H),9.07(br.s.,1H),8.40(d,J=2.0Hz,1H),7.81-7.68(m,2H),7.22(d,J=4.0Hz,1H),7.14(t,J=8.0Hz,1H),6.87(d,J=8.0Hz,1H),6.81(s,1H),6.48-6.31(m,2H),5.78-5.64(m,1H),4.64-4.52(m,2H),4.45-4.36(m,2H),3.90(s,3H),2.90(t,J=4.0Hz,2H),2.72(s,3H),2.48-2.36(m,2H),2.33-2.21(m,8H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：542.2[M+1]。

實施例41。

N-(5-((4-(3,3-二甲基-3,4-二氫-2H-[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚-7-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例41A。

7-(3-氯-2,2-二甲基丙基)-1H-吲哚。

在20℃下，將7-羥基吲哚(5.00克，37.55毫莫耳)，3-氯-2,2-二甲基-丙-1-醇(6.91克，56.33毫莫耳)，三苯基磷(1.57克，6.00毫莫耳)1溶於THF(150mL)中，氮氣置換後向混合液中滴加DIAD(15.19克，75.10毫莫耳)。混合物70℃下攪拌12小時。TLC顯示反應完成，將反應液濃縮乾，粗品用柱色譜(PE：EA=50：1，20：1)分離純化，得到標題化合物(白色固體，3.5克，產率39.21%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.29(s,1H),7.21(t,J=4.0Hz,1H),7.03(t,J=8.0Hz,1H),6.68(d,J=8.0Hz,1H),6.58-6.53(m,1H),3.96(s,2H),3.65(s,2H),1.20(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：238.1[M+1]。

實施例41B。

3,3-二甲基-3,4-二氫-2H-[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚。

在0℃下，將實施例41A(3.50克，14.72毫莫耳)溶於DMF(50mL)，向該混合物中加入NaH(1.18克，29.44毫莫耳)，70℃下攪拌2小時。TLC顯示反應完成，向混合物中加入水(50mL)，用EA(50mL x2)萃取，有機層經無水硫酸鈉乾燥，濃縮後，用柱色譜(PE：EA=20：1，10：1)分離純化，得到標題化合物(白色固體，2.80克，產率94.51%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.28(d,J=1.0Hz,1H),7.29-7.26(m,1H),7.03-6.97(m,2H),6.79(dd,J=0.8,7.7Hz,1H),6.52(d,J=3.1Hz,1H),4.05-3.98(m,2H),3.87(s,2H),1.17(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：202.2[M+1]。

實施例41C。

7-(2-氯嘧啶-4-基)-3,3-二甲基-3,4-二氫-2H-[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚。

本實施例依據實施例E的方法，將實施例E2替換為實施例41B。得到標題化合物(黃色固體，2.30克，產率64.13%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.47(d,J=4.0Hz,1H),7.92(d,J=8.0Hz,1H),7.87(s,1H),7.49(d,J=4.0Hz,1H),7.19(t,J=9.0Hz,1H),6.90(d,J=8.0Hz,1H),4.05(s,2H),4.00(s,2H),1.17(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：314.0[M+1]。

實施例41D。

4-(3,3-二甲基-3,4-二氫-2H-[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚-7-基)-N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)嘧啶-2-胺。

本實施例依據實施例F的方法，將實施例E替換為實施例41C。得到標題化合物(黃色固體，3.00克，產率88.31%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.85(d,J=8.0Hz,1H),8.45(d,J=4.0Hz,1H),8.20(s,1H),7.78(d,J=8.0Hz,1H),7.64(s,1H),7.26(br.s.,1H),7.18(t,J=8.0Hz,1H),6.89(d,J=8.0Hz,1H),6.77(d,J=12.0Hz,1H),4.11(s,2H),4.08(s,2H),4.05(s,3H),3.71(s,2H),1.21(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：464.0[M+1]。

實施例41E。

N1-(4-(3,3-二甲基-3,4-二氫-2H-[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚-7-基)嘧啶-2-基)-N4-(2-(二甲基氨基)乙基)-2-甲氧基-N--4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例依據實施例16A的方法，將實施例D替換為實施例41D，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺。得到標題化合物(黃色固體，1.70克，產率96.16%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.55(s,1H),8.41(d,J=4.0Hz,1H),8.20(s,1H),7.78(d,J=8.0Hz,1H),7.60-7.50(m,1H),7.23-7.13(m,2H),6.87(d,J=8.0Hz,1H),6.69(s,1H),4.11(s,2H),4.07(s,2H),4.00(s,3H),3.36-3.26(m,2H),2.92(s,3H), 2.61(t,J=8.0Hz,2H),2.35-2.24(m,6H),1.21(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：546.2[M+1]。

實施例41F。

N4-(4-(3,3-二甲基-3,4-二氫-2H-[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚-7-基)嘧啶-2-基)-N1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例依據實施例16B的方法，將實施例16A替換為實施例41E。得到標題化合物(黃色固體，1.50克，產率93.24%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.35(d,J=4.0Hz,1H),8.18-8.08(m,2H),7.76-7.69(m,1H),7.60(s,1H),7.17(t,J=8.0Hz,1H),7.02(d,J=4.0Hz,1H),6.88(d,J=8.0Hz,1H),6.72(s,1H),4.06(s,2H),4.00(s,2H),3.86(s,3H),2.99(t,J=6.0Hz,2H),2.69(s,3H),2.49-2.39(m,2H),2.28(s,6H),1.19(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：516.2[M+1]。

實施例41G。

本實施例依據實施例16C的方法，將實施例16B替換為實施例41F。得到標題化合物(棕色固體，1.30克，產率95.57%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 10.24(s,1H),9.85(s,1H),9.08(s,1H),8.40(d,J=4.0Hz,1H),7.74(s,1H),7.68(d,J=8.0Hz,1H),7.21(d,J=4.0Hz,1H),7.13(t,J=8.0Hz,1H),6.87-6.79(m,2H),6.50-6.32(m,2H),5.72(dd,J=2.0,8.0Hz,1H),4.26(s,2H),4.07(s,2H),3.89(s,3H),2.92-2.85(m,2H),2.71(s,3H),2.29(br.s.,2H),2.27(s,6H),1.18(s,6H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：570.2[M+1]。

實施例41H。

N-(5-((4-(3,3-二甲基-3,4-二氫-2H-[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚-7-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺甲磺酸鹽。

本實施例依據實施例36J的方法，將實施例36I替換為實施例41G。得到標題化合物(1.36克，產率89.43%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 8.68(s,1H),8.29(d,J=4.0Hz,1H),8.10(s,1H),7.99(d,J=8.0Hz,1H),7.21(d,J=4.0Hz,1H),7.03(t,J=8.0Hz,1H),6.97(s,1H),6.74(d,J=8.0Hz,1H),6.60- 6.42(m,2H),5.93-5.82(m,1H),4.06(s,2H),4.03(s,2H),4.02(s,3H),3.48(t,J=6.0Hz,2H),3.30-3.24(m,2H),2.88(s,6H),2.72(s,3H),2.70(s,3H),1.15(s,6H)。LCMS(ESI)(0-60AB)：m/z：570.2[M+1]。

實施例42。

N-(5-((4-(3H-螺[[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚-2,1'-環丙基]-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例42A。

1-(2-硝基苯氧基)環丙烷羧酸。

在0℃下，將1-氟-2-硝基苯(10.37克，73.47毫莫耳)和1-羥基環丙烷羧酸(5.00克，48.98毫莫耳)溶於DMF(100mL)中，分批加入NaH(4.90克，122.45毫莫耳)，混合物在80℃下攪拌12小時。TLC顯示反應基本完成。向其中加入水(20mL)，用EA(100mL x2)萃取，水相用6N HCl調節到PH=3，用EA(100mLx3)萃取，有機層合併後經無水硫酸鈉乾燥，濃縮至乾得標題化合物(黃色固體，6.00克，產率54.89%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.84(dd,J=2.0,8.0Hz,1H),7.56-7.48(m,1H),7.20(d,J=8.0Hz,1H),7.10(t,J=8.0Hz,1H),1.80-1.73(m,2H),1.55-1.49(m,2H)。

實施例42B。

4-螺[苯並[b][1,4]惡嗪-2,1'-環丙基]-3(4H)-酮。

將實施例42A(11.00克，49.29毫莫耳)，NH4Cl(10..55克，197.15毫莫耳)，鐵粉(11.01克，197.15毫莫耳)溶於乙醇(15mL)和水(2mL)中。反應液用氮氣置換後升溫至90℃攪拌12小時。TLC顯示反應完全。反應液冷卻後過濾，濾餅用乙醇洗滌，濾液濃縮至乾得標題化合物(黃色固體，7.5克，產率98.89%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.43(br.s.,1H),7.12-6.65(m,1H),1.62-1.02(m,4H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：176.0[M+1]。

實施例42C。

6-3,4-二氫螺[苯並[b][1,4]惡嗪-2,1'-環丙烷]。

將實施例42B(8.50克，48.52毫莫耳)溶於THF(100mL)中，在70℃下加入LiAlH4(4.60克，121.30毫莫耳)後攪拌2小時。LCMS監測反應完全。向反應混合物中依次加入水(4.6mL)、15%的NaOH(4.6mL)溶液和水(13.8mL)，攪拌30分鐘，混合物過濾，濾液濃縮至乾得標題化合物(黃色油狀物，7.5克，產率98.89%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 6.85-6.77(m,1H),6.77-6.72(m,1H),6.71-6.65(m,2H),3.86(br.s.,1H),3.33(d,J=2.0Hz,2H),1.11-1.03(m,2H),0.74-0.67(m,2H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：162.1[M+1]。

實施例42D。

8-4-(2,2-二甲氧基乙基)-3,4-二氫螺[苯並[b][1,4]惡嗪-2,1'-環丙烷]。

將實施例42C(7.50克，46.53毫莫耳)，K₂CO₃(9.65克，69.8毫莫耳)，KI(772.33毫克，4.65毫莫耳)和2-溴-1,1-二乙氧基乙烷(18.34克，93.06毫莫耳)溶於DMF(50mL)。氮氣置換後加熱到130℃並攪拌12小時。TLC顯示少量原料剩餘，向混合物中加入水(150mL)，用DCM(100mL x2)萃取，有機層經無水硫酸鈉乾燥，濃縮後，粗品用柱色譜(PE：EA=1000：1，100：1)分離純化，得到標題化合物(黃色油狀物，8.0克，產率61.99%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 6.90-6.82(m,1H),6.72(d,J=8.0Hz,2H),6.63-6.56(m,1H),4.79-4.66(m,1H),3.80-3.69(m,2H),3.64-3.53(m,2H),3.46-3.38(m,4H),1.28-1.17(m,6H),1.05-0.97(m,2H),0.73-0.61(m,2H)。

實施例42E。

10--3H-螺[[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚-2,1'-環丙烷]。

在0℃下，將AlCl₃(10.1克，75.72毫莫耳)加入到DCM(50mL)中，將實施例42D(7.00克，25.24毫莫耳)溶於DCM(130mL)後緩慢滴加到該混合物中。在0℃下攪拌10分鐘，TLC顯示少量原料剩餘。將混合物緩慢倒入冰水(300mL)中淬滅，用DCM(300mL x2)萃取，有機層經無水硫酸鈉乾燥，濃縮後，用柱色譜(PE：EA=1000：1，100：1)分離純化，得到標題化合物(黃色油狀物，3.2克，產率68.45%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 7.26-7.23(m,1H),7.08(d,J=2.0Hz,1H),6.99(t,J=8.0Hz,1H),6.62(d,J=8.0Hz,1H),6.51(d,J=2.0Hz,1H),4.19(s,2H),1.27-1.19(m,2H),0.88-0.81(m,2H)。

實施例42F。

6-(2-氯嘧啶-4-基)-3H-螺[[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚-2,1'-環丙烷]。

本實施例依據實施例E的方法，將實施例E2替換為實施例42E。得到標題化合物(黃色固體，1.30克，產率67.38%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.49(d,J=4.0Hz,1H),8.02(s,1H),7.72(d,J=8.0Hz,1H),7.54(d,J=4.0Hz,1H),7.19(t,J=8.0Hz,1H),6.76-6.71(m,1H),4.27(s,2H),1.28-1.23(m,2H),0.91-0.85(m,2H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：298.0[M+1]。

實施例42G。

N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(3H-螺[[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚-2,1'環丙基]-6-基)嘧啶-2-胺。

本實施例依據實施例F的方法，將實施例E替換為實施例42F。得到標題化合物(黃色固體，1.80克，產率92.06%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)： δ 9.90(d,J=8.0Hz,1H),8.48-8.42(m,1H),8.33(s,1H),7.71-7.58(m,2H),7.28(s,1H),7.17(t,J=8.0Hz,1H),6.82-6.67(m,2H),4.40-4.26(m,2H),4.08-3.99(m,3H),1.31-1.17(m,2H),1.02-0.82(m,2H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：448.1[M+1]。

實施例42H。

N1-(4-(3H-螺[[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚-2,1'-環丙基]-6-基)嘧啶-2-基)-N4-(2-(二甲基氨基)乙基)-2-甲氧基-N--4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例依據實施例16A的方法，將實施例D替換為實施例42G，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N,N’,N’-三甲基-1,2-乙二胺。得標題化合物(黃色固體，1.80克，產率84.55%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.63(s,1H),8.42(d,J=4.0Hz,1H),8.35(s,1H),7.63(d,J=8.0Hz,1H),7.58-7.53(m,1H),7.22(d,J=4.0Hz,1H),7.15(t,J=8.0Hz,1H),6.73-6.67(m,2H),4.42-4.31(m,2H),4.00(s,3H),3.36-3.26(m,2H),2.91(s,3H),2.61(t,J=8.0Hz,2H),2.33-2.26(m,6H),1.25-1.19(m,2H),0.92-0.84(m,2H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：530.2[M+1]。

實施例42I。

N4-(4-(3H-螺[[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚-2,1'-環丙基]-6-基)嘧啶-2-基)-N1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例依據實施例16B的方法，將實施例16A替換為實施例42H。得標題化合物(黃色固體，1.60克，產率94.12%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 8.41-8.32(m,1H),8.18-8.13(m,1H),7.91-7.82(m,2H),7.60(s,1H),7.18-7.12(m,1H),7.06(d,J=4.0Hz,1H),6.76-6.67(m,2H),4.27(s,2H),3.86-3.84(m,3H),3.00-2.93(m,2H),2.69(s,3H),2.42(t,J=8.0Hz,2H),2.29-2.25(m,6H),1.26-1.21(m,2H),0.92-0.83(m,2H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：500.2[M+1]。

實施例42J。

本實施例依據實施例16C的方法，將實施例16B替換為實施例42I。得標題化合物(1.25克，產率85.09%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 10.23(br.s.,1H),9.85(s,1H),9.21(br.s.,1H),8.40(d,J=4.0Hz,1H),7.75(s,1H),7.58(d,J=8.0Hz,1H),7.20(d,J=4.0Hz,1H),7.12(t,J=8.0Hz,1H),6.81(s,1H), 6.67(d,J=8.0Hz,1H),6.35(d,J=4.0Hz,2H),5.68(t,J=6.0Hz,1H),4.39(s,2H),3.90(s,3H),2.98-2.85(m,2H),2.71(s,3H),2.30-2.22(m,8H),1.25-1.19(m,2H),0.87(s,2H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：554.2[M+1]。

實施例43。

N-(5-((4-(3H-螺[[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚-2,1'-環丙基]-6-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)-2-甲基丙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯醯胺。

實施例43A。

N1-(4-(3H-螺[[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚-2,1'-環丙基]-6-基)嘧啶-2-基)-N4-(2-(二甲基氨基)-2-甲基丙基)-2-甲基-N--4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺。

本實施例依據實施例16A的方法，將實施例D替換為實施例42G，將N，N-二乙基-N-甲基乙烷-1,2-二胺替換為N1,N2,N2,2-四甲基丙烷-1,2-二胺。得標題化合物(黃色固體，500毫克，產率39.01%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 9.61(s,1H),8.43(d,J=4.0Hz,1H),8.27(s,1H),7.74-7.58(m,2H), 7.31(s,1H),7.23(d,J=4.0Hz,1H),7.16(t,J=8.0Hz,1H),6.71(d,J=8.0Hz,1H),4.34(s,2H),4.22-4.11(m,3H),3.86(br.s.,2H),3.03(s,3H),2.73(s,6H),1.43(s,6H),1.28-1.22(m,2H),0.91-0.86(m,2H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：558.2[M+1]。

實施例43B。

N4-(4-(3H-螺[[1,4]惡嗪[2,3,4-hi]吲哚-2,1'-環丙基]-6-基)嘧啶-2-基)-N1-(2-(二甲基氨基)-2-甲基丙基)-5-甲氧基N1甲基苯-1,2,4-三胺。

本實施例依據實施例16B的方法，將實施例16A替換為實施例43A。得標題化合物(黃色固體，300.00毫克，產率63.41%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 8.31(d,J=4.0Hz,1H),8.22(s,1H),8.11(s,1H),7.85(d,J=8.0Hz,1H),7.23(d,J=4.0Hz,1H),7.09(t,J=8.0Hz,1H),7.04(s,1H),6.65-6.62(m,1H),4.37(s,2H),3.92(s,3H),3.29(s,2H),2.83(s,3H),2.74(s,6H),1.24(s,6H),1.16-1.12(m,2H),0.95-0.92(m,2H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：528.3[M+1]。

實施例43C。

本實施例依據實施例16C的方法，將實施例16B替換為實施例43B。得標題化合物(230.00毫克，產率69.54%)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：δ 8.56(br.s.,1H),8.29(d,J=4.0Hz,1H),8.09(br.s.,1H),7.82(d,J=8.0Hz,1H),7.22(d,J=4.0Hz,1H),7.14(s,1H),7.02(t,J=8.0Hz,1H),6.60-6.49(m,3H),5.90(dd,J=4.0,7.9Hz,1H),4.34(s,2H),4.03(s,3H),3.69-3.41(m,2H),2.80(s,3H),2.75(s,6H),1.34(s,6H),1.16-1.11(m,2H),0.95-0.90(m,2H)。LCMS(ESI)(5-95AB)：m/z：582.4[M+1]。

生化實驗。

實驗材料。

酶：EGFR野生型，EGFR T790M/L858R，EGFR T790M和INSR均購自Life technology(Madison,WI)，EGFR d746-750/T790M購自Carna Biosciences(Japan)。

HTRF試劑盒：購自Cis-Bio International，內含Eu標記TK1抗體，XL665和biotin標記的TK1多肽底物。

檢測儀器：Envision(PerkinElmer)。

實驗方法：將測試化合物3倍梯度稀釋，獲得終濃度從300nM到0.015nM 10個劑量。

野生型EGFR酶反應混合物體系：0.05nM野生型EGFR,1uM biotin-TK1 peptide,25uM ATP的酶緩衝液共計10uL.反應板為white Proxiplate 384-Plus plate(PerkinElmer)，23℃反應60分鐘。

EGFR T790M/L858R酶反應混合物體系：0.04nM EGFR T790M/L858R,1uM biotin-TK1 peptide,20uM ATP的酶緩衝液共計10uL.反應板為white Proxiplate 384-Plus plate(PerkinElmer)，23℃反應60分鐘。

EGFR d746-750/T790M酶反應混合物體系：0.025nM EGFR d746-750/T790M,1uM biotin-TK1 peptide,40uM ATP的酶緩衝液共計10uL.反應板為white Proxiplate 384-Plus plate(PerkinElmer)，23℃反應60分鐘。

EGFR T790M酶反應混合物體系：0.03nM EGFR T790M,1uM biotin-TK1 peptide,10uM ATP的酶緩衝液共計10uL.反應板為white Proxiplate 384-Plus plate(PerkinElmer)，23℃反應60分鐘。

INSR酶反應混合物體系：0.5nM INSR,1uM biotin-TK1 peptide,35uM ATP的酶緩衝液共計10uL.反應板為white Proxiplate 384-Plus plate(PerkinElmer)，23℃反應60分鐘。

檢測反應：10ul檢測試劑包含Antibody 2nM並加入XL665 62.5nM。23℃孵育60分鐘。Envision讀板。

資料分析：通過下列公式將讀數轉化成抑制率(%)(Min-Ratio)/(Max-Min)*100%。4參數曲線擬合(Model 205 in XLFIT5,iDBS)測得IC50數據。

細胞實驗。

實驗材料：RPMI1640，胎牛血清，青黴素/鏈黴素溶液，均購自Life Technology(Madison,WI)。Cell Titer-Glo luminescent cell viability reagents購自Promega(Madison,WI)。A431 cell line和NCI-H1975 cell line均購自European Collection of Cell Cultures(ECACC)。讀板儀器：Envision(PerkinElmer)。

實驗方法：384孔板，每孔種300個A431 cells和NCI-H1975 cells細胞，45ul體積。在CO 2培養箱中37℃過夜培養。待測化合物做3倍梯度稀釋，獲得濃度從10uM到0.508nM 10個劑量濃度，兩複孔。中間板每孔加49ul培養基。從梯度稀釋化合物板轉移1ul化合物至中間板，混合充分。再從中間板取5ul液體轉至細胞板。細胞繼續在CO2培養箱中培養6天。6天后，加入25ul檢測試劑。室溫孵育10分鐘，Envision讀板。

資料分析：通過下列公式將讀數轉化成抑制率(%)(Max-Sample)/(Max-Min)*100%。4參數曲線擬合(Model 205 in XLFIT5,iDBS)測得IC 50數據。

本發明化合物的野生型EGFR酶抑制IC 50，EGFR L858R/T790M酶抑制IC 50，EGFR d746-750/T790M酶抑制IC 50，NCI-H1975細胞EGFR L858R/T790M的IC 50以及A431細胞EGFR WT的IC50資料在以下表1中展示。

本發明化合物的INSR酶抑制的IC50資料在以下表2中展示。

表2

體內藥效研究。

以下體內藥效資料表明，本發明的化合物在NCI-H1975非小細胞肺癌患者來源的異種移植(CDX)模型(BALB/c裸鼠)模型上展示了較強的抗腫瘤活性以及減小腫瘤體積。舉例來說，代表性化合物30，33，34，40,42和43在給藥21天后，腫瘤體積從最開始的約149mm³減小至3-39mm³。

在皮下植入NCI-H1975肺癌患者來源的異種移植(CDX)BALB/c裸小鼠上進行體內藥效實驗：BALB/c裸鼠，雌性，6-8周，體重約18-22克，將小鼠保持在一個特殊的無病原體的環境中，且在單個通風籠中(5只小鼠每籠)。所有的籠子，鋪墊和水在使用前進行消毒。所有的動物都可以自由獲取標準認證的商業實驗室飲食。共有100只購於北京維通利華的小鼠用於研究。每只小鼠在右脅腹皮下植入腫瘤組織(20-30立方毫米)，用於腫瘤的生長。當平均腫瘤體積達到約150-200立方毫米時開始實驗。將試驗化合物每日口服給藥(化合物30按10毫克/公斤給藥，化合物33，34，40，42和43按20毫克/公斤給藥，化合物AZD9291按5毫克/公斤，連續給藥21天，資料列於表3)。腫瘤體積一周兩次用二維卡尺測量，體積以立方毫米計量，通過以下公式計算：V=V=0.5 a x b2，其中a和b分別是腫瘤的長徑和短徑。抗腫瘤藥效是通過用化合物處理過的動物的平均腫瘤增加體積除以未處理過動物的平均腫瘤增加體積來確定。

體內選擇性研究。

以下體內選擇性實驗資料表明，本發明的化合物在A431人皮膚鱗狀細胞癌患者來源的異種移植(CDX)模型(BALB/c裸鼠)模型上展現了良好的體內選擇性。在此模型中，對腫瘤的抑制作用越弱，說明其體內選擇性越好。舉例來說，代表性化合物17，30，37及38(實驗一，結果見表4)在給藥(20毫克/公斤)21天后，腫瘤體積從最開始的約175mm³增長至1201~1434mm³，而Afatinib(7.5毫克/公斤)只增長到479mm³。代表性化合物33，34及40(實驗二，結果見表5)在給藥(20毫克/公斤)21天后，腫瘤體積從最開始的約144mm³增長至1135~1708mm³，而AZD9291(5毫克/公斤)只增長到321mm³。

在皮下植入人皮膚鱗狀細胞A431異種移植(CDX)BALB/c裸小鼠上進行體內選擇性實驗：BALB/c裸鼠，雌性，6-8周，體重約18-20克，將小鼠保持在一個特殊的無病原體的環境中，且在單個通風籠中(5只小鼠每籠)。所有的籠子，鋪墊和水在使用前進行消毒。所有的動物都可以自由獲取標準認證的商業實驗室飲食。所有實驗用小鼠均購於上海BK Laboratory Animal Co.,LTD的小鼠用於研究。每只小鼠在右脅腹皮下植入腫瘤組織(20-30立方毫米)，用於腫瘤的生長。當平均腫瘤體積達到約150-200立方毫米時開始實驗。將試驗化合物口服給藥(化合物17，30，37和38按20毫克/公斤每日一次給藥，化合物AZD9291按5毫克/公斤每日一次給藥，化合物CO-1686按50毫克/公斤每日兩次給藥，化合物Erlotinib按75毫克/公斤每日一次給藥，化合物Afatinib按7.5毫克/公斤每日一次給藥，連續給藥21天，資料列於表4；化合物33，34，40，42和43按20毫克/公斤每日一次給藥，化合物AZD9291按5毫克/公斤每日一次給藥，連續給藥21天，資料列於表5)。腫瘤體積一周兩次用二維卡尺測量，體積以立方毫米計量，通過以下公式計算：V=V=0.5 a x b2，其中a和b分別是腫瘤的長徑和短徑。抗腫瘤藥效是通過用化合物處理過的動物的平均腫瘤增加體積除以未處理過動物的平均腫瘤增加體積來確定。

EGFR TKIs的臨床資料顯示，非選擇性抑制野生型EGFR有副作用，包括皮疹和腹瀉；抑制胰島素受體(INSR)會導致高血糖和高胰島素。表1~表5表明，我們的許多化合物不僅對L858R/EGFR T790M和EGFR790M具有優異的體外活性和選擇性，而且在體內具有較好的藥效和體內選擇性，選擇性由對野生型EGFR(A431)和對胰島素受體(INSR)的低抑制活性可以體現出來。這些體外、體內選擇性資料顯示我們的化合物將有更好的安全性。

Claims

一種式(I)所示化合物或其藥學上可接受的鹽，
其中， W選自
、
、
；n=0、1或2；m=1、2或3；Y₁、Y₃、和Y₄分別獨立地選自-O-、-S-、-C(R)₂-、-N(R)-、-S(=O)₂-、-S(=O)-、-C(=O)-、-C(=S)-；Y₂選自-O-、-S-、-N(R)-、-S(=O)₂-、-S(=O)-、-C(=O)-、-C(=S)-；X₁選自CR_X1、N；X₂選自CR_X2、N；X₃選自CR_X3、N；R_X1、R_X2、R_X3分別獨立地選自H、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH₂，或R_X1、R_X2、R_X3分別獨立地選自任選被1、2、3或4個R取代的：C_1-6烷基、C_1-6雜烷基；R₁選自H、F、Cl、Me、CN、CF₃；R₂選自R₀₂、OR₀₂、SR₀₂； R₀₂獨立地選自任選被1、2、3或4個R取代的：C_1-4烷基、C_1-4雜烷基、C_3-5環烷基-(CH₂)_0-3-；R₃選自任選被1、2、3或4個R取代的：C_1-6烷基、C_1-6雜烷基、C₂-₄炔基、3~7元環烷基、3~7元環烷基-L-、3~7元雜環烷基、3~7元雜環烷基-L-；L選自-O-、-S-、-C(=O)-、-S(=O)₂-、-S(=O)-，或L選自任選被1、2、3或4個R取代的：NH,C_1-4烷基、C_1-4雜烷基；“雜”代表雜原子或雜原子團，其選自：-C(=O)NH-、-NH-、-O-、-S-、N、=O、=S、-C(=O)O-、-C(=O)-、-C(=S)-、-S(=O)-、-S(=O)₂-；雜原子或雜原子團的數目分別獨立地選自0、1、2、3；R選自H、F、Cl、Br、I、OH、CN，或R選自任選被1、2、3或4個R’取代的：NH₂、C_1-4烷基、C_1-4雜烷基、3~7元環烷基、或3~7元雜環烷基；以及R’選自F、Cl、Br、I、CN、OH、NH₂、CF₃、NHCH₃、CH₂OCH₃、N(CH₃)₂。
一種式(I)所示化合物或其藥學上可接受的鹽，
其中， W選自
、
、
；n=0或2；m=1、2或3； Y₁、Y₃、和Y₄分別獨立地選自-O-、-S-、-C(R)₂-、-N(R)-、-S(=O)₂-、-S(=O)-、-C(=O)-、-C(=S)-；Y₂選自-C(R)₂-；X₁選自CR_X1、N；X₂選自CR_X2、N；X₃選自CR_X3、N；R_X1、R_X2、R_X3分別獨立地選自H、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH₂，或R_X1、R_X2、R_X3分別獨立地選自任選被1、2、3或4個R取代的：C_1-6烷基、C_1-6雜烷基；R₁選自H、F、Cl、Me、CN、CF₃；R₂選自R₀₂、OR₀₂、SR₀₂；R₀₂獨立地選自任選被1、2、3或4個R取代的：C_1-4烷基、C_1-4雜烷基、C_3-5環烷基-(CH₂)_0-3-；R₃選自任選被1、2、3或4個R取代的：C_1-6烷基、C_1-6雜烷基、C₂-₄炔基、3~7元環烷基、3~7元環烷基-L-、3~7元雜環烷基、3~7元雜環烷基-L-；L選自-O-、-S-、-C(=O)-、-S(=O)₂-、-S(=O)-，或L選自任選被1、2、3或4個R取代的：NH,C_1-4烷基、C_1-4雜烷基；“雜”代表雜原子或雜原子團，其選自：-C(=O)NH-、-NH-、-O-、-S-、N、=O、=S、-C(=O)O-、-C(=O)-、-C(=S)-、-S(=O)-、-S(=O)₂-；雜原子或雜原子團的數目分別獨立地選自0、1、2、3；R選自H、F、Cl、Br、I、OH、CN，或R選自任選被1、2、3或4個R’取代的：NH₂、C_1-4烷基、C_1-4雜烷基、3~7元環烷基、或3~7元雜環烷基；以及R’選自F、Cl、Br、I、CN、OH、NH₂、CF₃、NHCH₃、CH₂OCH₃、N(CH₃)₂。
如請求項1或2所述化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R選自H、 F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN、Me、Et、CF₃、N(CH₃)₂、N(CD₃)₂、NHCH₃、
、
如請求項1所述化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，Y₁、Y₃和Y₄分別獨立地選自：-O-、-S-、-CH₂-、-CF₂-、-CHF-、-C(Me)₂-、-CH(Me)-、-CH(OH)-、-C(=O)-、-S(=O)₂-、-S(=O)-；Y₂選自-O-、-S-、-S(=O)₂-、-S(=O)-、-C(=O)-。
如請求項4所述化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，Y₁和Y₃選自：-CH₂-、-C(Me)₂-、-CH(Me)-、-C(=O)-、-CF₂-、-CHF-、-CH(OH)-；Y₂選自-O-、-S-、-S(=O)₂-、-C(=O)-；Y₄選自：-O-、-S-、-S(=O)₂-、-CH₂-、-C(Me)₂-、-C(=O)-、-CF₂-、-CH(OH)-、-CH(Me)-、-CHF-。
如請求項2所述化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，Y₁、Y₃和Y₄分別獨立地選自：-O-、-S-、-CH₂-、-CF₂-、-CHF-、-C(Me)₂-、-CH(Me)-、-CH(OH)-、-C(=O)-、-S(=O)₂-、-S(=O)-；Y₂選自-CH₂-、-CF₂-、-CHF-、-C(Me)₂-、-CH(Me)-、-CH(OH)-。
如請求項6所述化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，Y₁和Y₃選自：-CH₂-、-C(Me)₂-、-CH(Me)-、-C(=O)-、-CF₂-、-CHF-、-CH(OH)-；Y₂選自-CH₂-、-CF₂-、-CHF-、-C(Me)₂-、-CH(Me)-、-CH(OH)-；Y₄選自：-O-、-S-、-S(=O)₂-、-CH₂-、-C(Me)₂-、-C(=O)-、-CF₂-、-CH(OH)-、-CH(Me)-、-CHF-。
如請求項1所述化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，結構單元
選自：
如請求項2所述化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，結構單元
選自：
、
、
、
；或，結構單元
選自：
如請求項1或2中之任一項所述化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，結構單元
選自：
、
、
、
。
如請求項1或2中之任一項所述化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，L選自-O-、-S-、-C(=O)-、-S(=O)₂-、-S(=O)-，或L選自任選被1、2或3個R取代的：NH、C_1-3烷基、-O-C_1-3烷基、-S-C_1-3烷基、-NH-C_1-3烷基。
如請求項11所述化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，L選自：-O-、-S-、-C(=O)-、-S(=O)₂-、-S(=O)-，或L選自任選被1、2或3個R取代的：-NH-、-CH₂-、
、
、
、
、
。
如請求項12所述化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，L選自：-O-、-S-、-C(=O)-、-NH-、-N(CH₃)-、-CH₂-、
、
、
、
、
。
如請求項1或2中之任一項所述化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R₃選自任選被1、2、3或4個R取代的：-C_1-4烷基、-NH-C_1-4烷基、-NH-C(=O)-C_1-4烷基、-O-C_1-4烷基、-S-C_1-4烷基、-S(=O)-C_1-4烷基、-S(=O)₂-C_1-4烷基、C₂-₃炔基、3~6元環烷基、3~6元環烷基-L-、3~6元雜環烷基、3~6元雜環烷基-L-，所述“雜”代表雜原子或雜原子團，其選自：-C(=O)NH-、-NH-、-O-、-S-、N、=O、=S、-C(=O)O-、-C(=O)-、-C(=S)-、-S(=O)-、-S(=O)₂-，雜原子或雜原子團的數目分別獨立地選自0、1、2、3。
如請求項14所述化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R₃選自任選被1、2、3或4個R取代的：
如請求項14所述化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，R₃選自：
如請求項1或2中之任一項所述化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R₀₂選自Me、CHF₂、CH₂CH₃、CH(CH₃)₂。
如請求項1或2中之任一項所述化合物或其藥學上可接受的鹽，其選自：