[go: up one dir, main page]

TWI577674B - 二氫－苯并－及二氫－吡啶并－衍生物 - Google Patents

二氫－苯并－及二氫－吡啶并－衍生物 Download PDF

Info

Publication number
TWI577674B
TWI577674B TW101149109A TW101149109A TWI577674B TW I577674 B TWI577674 B TW I577674B TW 101149109 A TW101149109 A TW 101149109A TW 101149109 A TW101149109 A TW 101149109A TW I577674 B TWI577674 B TW I577674B
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
dihydro
yloxy
pyrrolidin
benzo
methoxy
Prior art date
Application number
TW101149109A
Other languages
English (en)
Other versions
TW201333000A (zh
Inventor
喬治歐 卡羅維堤
席爾維 嘉蒙
派斯可 佛瑞特
克萊門斯 豪格納爾
康斯坦茲 赫斯
克里斯多福 卡里斯
凱倫 卡莫爾藤斯
艾安 路易斯
亨利克 摩必茲
亞歷山德勒 巴克斯特 史密斯
尼可拉斯 索德曼
羅曼 渥夫
佛瑞德利克 查克利
Original Assignee
諾華公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 諾華公司 filed Critical 諾華公司
Publication of TW201333000A publication Critical patent/TW201333000A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI577674B publication Critical patent/TWI577674B/zh

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5383—1,4-Oxazines, e.g. morpholine ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/538—1,4-Oxazines, e.g. morpholine ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/10—Anti-acne agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/06—Antimalarials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/12—Transferases (2.) transferring phosphorus containing groups, e.g. kinases (2.7)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/25—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving enzymes not classifiable in groups C12Q1/26 - C12Q1/66
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
    • C12Q1/686—Polymerase chain reaction [PCR]
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)

Description

二氫-苯并- 及二氫-吡啶并- 衍生物
本發明係關於新穎的二氫-苯并-及二氫-吡啶并-衍生物以游離形式或以醫藥學上可接受之鹽形式用作候選藥物的製備及用途，其具有有價值的類藥性質(諸如代謝穩定性及適合的藥物動力學)、適於調節之形式、特別是抑制磷酸肌醇3' OH激酶家族(下文中稱為PI3K)之活性或功能的形式。
磷酸肌醇-3激酶(PI3K)家族成員牽涉於細胞生長、分化、存活、細胞骨架重塑及胞內細胞器在多種不同類型細胞中的運輸中(Okkenhaug及Wymann,Nature Rev.Immunol.3：317(2003))。
迄今為止，已鑑別出8種哺乳動物PI3K，根據其基因序列、結構、適配體分子、表現、活化方式及較佳受質，主要分成三類(I、II及III)。
PI3Kδ為屬於I類PI3K家族(PI3K α、β、γ及δ)的脂質激酶，其在酪胺酸激酶連接受體下游產生第二信使信號。PI3Kδ為雜二聚體，其由適配體蛋白及p110δ催化亞單位構成，p110δ催化亞單位使磷脂醯肌醇-4,5-雙磷酸酯(PtdInsP2)轉化為磷脂醯肌醇-3,4,5-三磷酸酯(PtdInsP3)。效應蛋白與PtdInsP3相互作用並觸發牽涉於細胞活化、分化、遷移及細胞存活中的特定信號傳導路徑。
p110δ及p110γ催化亞單位優先表現於白血球中。在平滑 肌細胞、肌細胞及內皮細胞中亦觀察到表現。相比之下，所有類型細胞均表現p110α及p110β(Marone等人，Biochimica et Biophysica Acta 1784：159(2008))。
PI3Kδ與B細胞發育及功能有關(Okkenhaug等人，Science 297：1031(2002))。B細胞亦在多種自體免疫及過敏性疾病之發病機理以及移植排斥之過程中起關鍵作用(Martin及Chan,Annu.Rev.Immunol.24：467(2006))。
趨化性牽涉於許多自體免疫或發炎疾病、血管生成、侵入/轉移、神經退化或傷口癒合中(Gerard等人，Nat.Immunol.2：108(2001))。回應細胞激素之白血球遷移中的暫時性獨特事件完全取決於PI3Kδ及PI3Kγ(Liu等人，Blood 110：1191(2007))。
PI3Kα及PI3Kβ起著維持內穩定的重要作用且已發現此等分子目標之藥理學抑制與癌症療法有關(Maira等人，Expert Opin.Ther.Targets 12：223(2008))。PI3Kα牽涉於胰島素信號傳導及細胞生長路徑中(Foukas等人，Nature 441：366(2006))。PI3Kδ同功異型物選擇性抑制預期可避免潛在副作用，諸如高血糖症、及代謝或生長失調。
寄生性感染仍為全世界罹病率及死亡率的最重要病因之一。在導致人類及動物病理的寄生蟲中，頂復門(phylum apicomplexa)包含一組病媒寄生蟲，其導致多種嚴重疾病，包括(但不限於)瘧疾、利什曼病(leishmaniasis)及錐蟲病(trypanosomiasis)。僅瘧疾便感染5-10%之人類且每年致使約兩百萬人死亡。[Schofield等人，「Immunological processes in malaria pathogenesis」,Nat Rev Imm 2005],[Schofiled L,「Intravascular infiltrates and organ-specific inflammation in malaria pathogenesis],[Mishra等人，「TLRs in CNS Parasitic infections」,Curr Top Micro Imm 2009],[Bottieau等人，「Therapy of vector-borne protozoan infections in nonendemic settings」,Expert Rev.Anti infect.Ther.,2011]。
Toll樣受體(TLR)為生殖系編碼的系譜分類學古分子，其識別微生物病原體內的進化保守性結構相關分子(稱為病原體相關分子模式(PAMP))。包括免疫系統細胞在內的各種不同類型細胞表現TLR且從而能夠偵測PAMP之存在。迄今為止，已描述人類中之10種功能性TLR家族成員(TLR1-10)，其皆識別特異性PAMP分子。在識別此等特異性PAMP之後，TLR誘導並協調宿主對細菌、病毒、真菌及寄生蟲感染的免疫反應。[Hedayat等人，「Targeting of TLRs：a decade of progress in combating infectious disease」,review,Lancet Infectious disease 2011],[Kwai等人，「TLRs and their crosstalk with other innate receptorsin infection and immunity」,review,Immunity May-2011]。所感染宿主之免疫系統對感染作出反應，其中TLR誘導促炎性細胞激素(主要為T輔助1型(Th1))產生。雖然足量的此等細胞激素有益於清除感染且為清除感染所必需，但此等介體之過度產生對宿主有害且與免疫介導之病理(包括神經病理)及組織損傷有關，導致嚴重且常常致命的後果。 此免疫介導病理之一個高度相關的突出實例為急性腦型瘧疾(CM)，其引起嚴重臨床症狀且常為致命的。[Schofield 等人，「Immunological processes in malaria pathogenesis」,Nat Rev Imm 2005],[Schofiled L,「Intravascular infiltrates and organ-specific inflammation in malaria pathogenesis],[Mishra等人，「TLRs in CNS Parasitic infections」,Curr Top Micro Imm 2009],[Bottieau等人，「Therapy of vector-borne protozoan infections in nonendemic settings」,Expert Rev.Anti infect.Ther.,2011][Hedayat等人，「Targeting of TLRs：a decade of progress in combating infectious disease」,review,Lancet Infectious disease 2011]。儘管在瘧疾治療及根除方面已有進展，但與嚴重瘧疾(包括CM)有關的死亡率仍呈現不可接受地高水準。因此僅僅針對根除宿主中之寄生蟲的策略可能不足以預防神經病併發症及在所有CM情況下的死亡。因而，開發可有效降低部分由宿主介導免疫病理引起之CM相關死亡率及罹病率的新穎創新性輔助治療策略仍為醫學之急迫需求。[Higgins等人，「Immunopathogenesis of falciparum malaria：implications for adjunctive therapy in the management of severe and cerebral malaria」,Expert Rev.Anti Infect.Ther.2011。]
最近已進一步證明，TLR9在對寄生蟲(包括(但不限於)瘧原蟲屬(Plasmodium)、利什曼蟲屬(Leishmania)、錐蟲屬(Trypanosoma)及弓形蟲屬(Toxoplasma))的識別及反應方面 起關鍵作用[Gowda等人，「The Nucleosome is the TLR9-specific Immunostimulatory component of plasmodium falciparum that activates DCs」,PLoS ONE,June 2011],[Peixoto-Rangel等人，」Candidate gene analysis of ocular toxoplasmosis in Brazil：evidence for a role for TLR9」,Mem Inst Oswaldo Cruz 2009],[Pellegrini等人，「The role of TLRs and adoptive immunity in the development of protective or pathological immune response triggered by the Trypanosoma cruzi protozoan」,Future Microbiol 2011]且干擾TLR(包括TLR9)活化表示一種在嚴重及腦型瘧疾中預防有害發炎反應的有前景的策略[Franklin等人，「Therapeutical targeting of nucleic acid-sensing TLRs prevents experimental cerebral malaria」,PNAS 2011]。
瘧疾為由四種原生動物寄生蟲：惡性瘧原蟲(Plasmodium falciparum)；間日瘧原蟲(Plasmodium vivax)；卵形瘧原蟲(Plasmodium ovale)；及三日瘧原蟲(Plasmodium malaria)引起的傳染性疾病。該四種寄生蟲通常藉由所感染之雌性瘧蚊叮咬來傳播。瘧疾為世界多個地區之問題且在最近幾十年間，瘧疾負擔不斷增加。死於瘧疾的人據估計每年有1至3百萬，主要為不到5歲的兒童。瘧疾死亡率之此增加部分係因為惡性瘧原蟲(最致命的瘧疾寄生蟲)已獲得針對幾乎所有可獲得之抗瘧藥物(青蒿素衍生物除外)的抗性。
利什曼病係由屬於利什曼蟲屬之超過20種寄生性原生動 物中之一種引起，且藉由雌性白蛉叮咬來傳播。利什曼病在約88個國家(包括許多熱帶及亞熱帶地區)中為地方病。利什曼病存在四種主要形式。內臟利什曼病(亦稱為黑熱病)為最嚴重的形式且由寄生蟲杜氏利什曼蟲(Leishmania donovani)引起。患有內臟利什曼病的患者若不接受治療，則會在數月內死亡。內臟利什曼病之兩種主要療法為銻衍生物葡萄糖酸銻鈉(Pentostam®)及葡甲胺銻酸鹽(Glucantim®)。葡萄糖酸銻鈉已使用約70年且對此藥物的抗性為日益嚴重的問題。另外，治療時間相對較長且治療很痛苦，且會引起不良副作用。
非洲人類錐蟲病(亦稱為昏睡病)為病媒寄生蟲病。相關寄生蟲為屬於錐蟲屬的原生動物。其藉由已自具有人類病原性寄生蟲之人類或動物獲得其感染之采采蠅(tsetse fly)(舌蠅屬(Glossina Genus))叮咬而傳播至人類。
查加斯氏病(Chagas disease)(亦稱為美洲錐蟲病)為另一種人類寄生蟲病，其為美洲大陸之貧困人群中的地方病。此疾病由原生動物寄生蟲克氏錐蟲(Trypanosoma cruzi)經吸血昆蟲傳播至人類所引起。人類疾病分兩期發生：感染後不久即發生的急性期，及可患病多年的慢性期。慢性感染導致各種神經病症，包括癡呆、心肌損傷及時有發生的消化道擴張，以及體重減輕。未經治療的慢性疾病常具有致命性。目前可供治療查加斯氏病的藥物為硝呋替莫(Nifurtimox)及苄硝唑(benznidazole)。然而，此等現行療法的問題包括其副作用多種多樣、治療時間長及治療期間 需要醫務監督。此外，僅在疾病之急性期期間給予治療時，治療才實際有效。對兩種第一線藥物的抗性已存在。已提出用抗真菌劑兩性黴素b(Amphotericin b)作為第二線藥物，但此藥物成本高且相對有毒。
弓形蟲病為世界大部分地區的地方病，其可感染大部分成人群體1,2。然而，其盛行率在不同國家不同3。在北方溫帶國家中，據估計其感染至少10%之成人，且在地中海及熱帶國家中，據估計其感染超過一半的成人4。弓蟲(Toxoplasma gondii)為普遍存在的專性胞內原生動物且被認為是人類感染性視網膜炎之最常見病因，其視多種因素而定，包括氣候、衛生及飲食習慣5-7。具有免疫能力的成人之疾病過程一般無症狀且具自限性。一旦感染已發生，則寄生蟲在視網膜中及身體之其他器官中形成潛在包囊，其會在最初感染多年後再活化，引起急性視網膜脈絡膜炎且形成新的視網膜脈絡膜病變。[Arevalo等人，「Ocular Toxoplasmosis in the developing world」,Internat.Ophthal.Clin 2010]。
神經囊尾蚴病(Neurocysticercosis)為由有鉤絛蟲之幼蟲引起之最常見的寄生蟲性CNS疾病(全世界發病率約兩百五十萬)。此疾病在人類中具有長期無症狀期，其特徵為不存在圍繞寄生蟲之可偵測的發炎反應。無症狀期期間的總體免疫反應具有Th2表型。然而，藉由治療性處理或藉由正常寄生蟲耗損來摧毀幼蟲可引起強發炎反應，常由慢性肉芽腫反應及該疾病之典型症狀表現組成。有症狀患者之 CNS免疫反應係由明顯的Th1表型或Th1、Th2及Th3混合反應組成，視肉芽腫之不存在或存在而定。在CNS之有症狀期期間盛行的過度發炎反應導致嚴重神經病理病狀及與神經囊尾蚴病有關的死亡率。[Mishra等人，「TLRs in CNS Parasitic infections」,Curr Top Micro Imm 2009]。
需要提供新穎的PI3K抑制劑作為良好候選藥物。特定而言，本發明化合物應有效結合至PI3K，同時對其他受體幾乎不顯示親和力且顯示作為抑制劑的功能活性。其應被胃腸道充分吸收，具有代謝穩定性且具有有利的藥物動力學性質。當靶向中樞神經系統中之受體時，其應自由穿過血腦障壁，且當選擇性地靶向周邊神經系統中之受體時，其不應穿過血腦障壁。其應為無毒的，且幾乎不顯示副作用。此外，理想的候選藥物將以穩定、無吸濕性及容易調配的實體形式存在。
本發明化合物針對不同旁系同源物PI3Kα、β、γ及δ顯示一定程度的選擇性。特定而言，針對同功異型物PI3Kδ顯示一定程度的選擇性。
本發明化合物因此潛在地適用於治療多種病症，尤其是包括(但不限於)以下的病症：自體免疫病症、發炎疾病、過敏性疾病、疾病或感染相關之免疫病理病狀、氣管疾病(諸如哮喘及COPD)、移植排斥反應、癌症(例如造血源癌症)或實體腫瘤。
本發明亦關於單獨或與一或多種其他藥理學活性化合物組合之治療，包括治療其中B細胞之一或多種功能(諸如抗 體產生、抗原呈遞、細胞激素產生或淋巴器官形成)為異常或為非所要之病狀、疾病或病症的方法，包括類風濕性關節炎、尋常天疱瘡及相關疾病、特發性血小板減少性紫癜、全身性紅斑狼瘡、多發性硬化症、重症肌無力、休格連氏症候群(Sjögren's syndrome)、自體免疫性溶血性貧血、ANCA相關血管炎、冷凝球蛋白血病、血栓性血小板減少性紫癜、慢性自體免疫蕁麻疹、過敏症(異位性皮炎、接觸性皮炎、過敏性鼻炎)、古德帕斯徹氏症候群(goodpasture's syndrome)、AMR(抗體介導之移植排斥反應)、B細胞介導之超急性、急性及慢性移植排斥反應及造血源癌症，包括(但不限於)多發性骨髓瘤；急性髓性白血病；慢性髓性白血病；淋巴細胞性白血病；骨髓性白血病；非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin lymphoma)；淋巴瘤；真性紅血球增多症(polycythemia vera)；原發性血小板增多症；骨髓纖維化併發髓樣化生；及瓦爾登氏疾病(Walden stroem disease)，以及疾病或感染相關之免疫病理病狀。
本發明係關於式(I)之二氫-苯并-及二氫-吡啶并-化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，
其中Y係選自O或NH；V係選自CR5或N；W係選自CH2或O；U係選自N或CH；Q係選自N或CR6；其中U及Q不均為N；R1係選自苯基、吡啶基、嘧啶基、吡基、噠基、1,2,3-三基、1,2,4-三基、1,3,5-三基，或-X-R4其中X係選自C(O)、S(O)2或CH2及R4係選自C1-C8烷基、鹵基-C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、氰基-C1-C8烷基、N,N-二-C1-C4烷基-胺基-C1-C8烷基、C1-C4烷基-磺醯基-C1-C8烷基、苯基、雜環基、雜環基氧基、雜環基-C1-C8烷基、C3-C12環烷基、C3-C12環烷基氧基、C3-C12環烷基-C1-C8烷 基、雜芳基、雜芳基氧基、雜芳基-C1-C8烷基、羥基、C1-C8烷氧基、胺基、N-C1-C8烷基胺基或N,N-二-C1-C8烷基胺基，其中N-C1-C8烷基-胺基及N,N-二-C1-C8烷基-胺基中之C1-C8烷基可未經取代或經鹵素、羥基或C1-C4烷氧基取代，其中C3-C12環烷基及C3-C12環烷基-C1-C8烷基中之C3-C12環烷基可未經取代或經1至5個選自鹵素、羥基或C1-C4烷氧基的取代基取代；其中『雜環基』為含有1至3個選自N、O或S之雜原子的3至7員飽和或部分不飽和單環系統，其各自未經取代或經1至5個選自以下之取代基取代：側氧基、鹵素、C1-C8烷基、鹵基-C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、羥基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基、N,N-二-C1-C8烷基-胺基、C1-C8烷基-羰基、鹵基-C1-C8烷基-羰基、羥基-C1-C8烷基-羰基或C1-C8烷氧基-C1-C8烷基-羰基；其中『雜環基』可連接於雜原子或碳原子處且其中N及/或S雜原子視情況亦可氧化為各種氧化態，其中『雜芳基』為含有1至3個選自N、O或S之雜原子的3至7員完全不飽和單環系統，或吡唑并[1,5-a]嘧啶或咪唑并[2,1-b]噻唑，其各自未經取代或經1至5個選自以下之取代基取代：鹵素、C1-C8烷基、鹵基-C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、羥基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基、N,N-二-C1-C8烷基-胺基、C1-C8烷基-羰基、鹵基-C1-C8烷基-羰基、羥基-C1-C8烷基-羰基 或C1-C8烷氧基-C1-C8烷基-羰基；其中『雜芳基』可連接於雜原子或碳原子處且其中N及/或S雜原子視情況亦可氧化為各種氧化態，R6係選自氫、鹵素、C1-C4烷基、鹵基-C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基-磺醯基、C1-C4烷基-亞磺醯基、C1-C4烷基-硫基、鹵基-C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基-C1-C4烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基、N,N-二-C1-C8烷基-胺基；R7係選自氫、鹵素、氰基、硝基、C1-C4烷基、鹵基-C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、N(R8)2-磺醯基、C1-C4烷基-磺醯基、C1-C4烷基-磺醯基-胺基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基或N,N-二-C1-C8烷基-胺基；或R6與R7連在一起為CH=CH-CH=CH，其中R8獨立地選自氫、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基，或兩個R8與其所連接之氮一起形成含有1至2個選自N、O、S之雜原子的4至7員雜環，該雜環未經取代或經1至3個選自C1-C4烷基之取代基取代；R5獨立地選自H、D、F或C1-C2烷基；R30獨立地選自H、D或F。
除非另有說明，否則術語「本發明化合物」係指式(I)及其子式之化合物、該等化合物之鹽、該等化合物及/或鹽之水合物或溶劑合物，以及所有立體異構體(包括非對映異構體及對映異構體)、互變異構體及同位素標記化合物(包括氘取代)。本發明化合物進一步包含式(I)(或其子式) 之化合物及其鹽之多晶型物。在提及式(I)化合物的情況下，此意欲亦包括式(I)化合物之互變異構體及N-氧化物。
藉由參考以下描述(包括以下術語彙編及總結性實例)可更充分地瞭解本發明。如本文所用，術語「包括」、「含有」及「包含」在本文中以其開放而非限制性含義使用。
互變異構體(諸如介於酮形式與烯醇形式之間、內醯胺形式與內醯亞胺形式之間、醯胺形式與亞胺酸形式之間或烯胺形式與亞胺形式之間的互變異構體)可存在於例如式(I)化合物之R1部分中。含氮雜環基及雜芳基殘基可形成N-氧化物。
在對化合物、鹽及其類似物使用複數形式的情況下，此亦意謂單一化合物、鹽或其類似物。
除非另外指明，否則上文中及下文中使用的通用術語在本發明之上下文中較佳具有以下含義：如本文所用，術語「烷基」係指具有至多20個碳原子的完全飽和分支鏈(包括單或多分支鏈)或未分支的烴部分。除非另有規定，否則烷基係指具有1至16個碳原子、1至10個碳原子、1至7個碳原子或1至4個碳原子之烴部分。烷基之代表性實例包括(但不限於)甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第二丁基、異丁基、第三丁基、正戊基、異戊基、新戊基、正己基、3-甲基己基、2,2-二甲基戊基、2,3-二甲基戊基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基及類似基團。通常，烷基具有1至7個碳，更佳1至4個碳。
如本文所用，術語「鹵基-烷基」係指如本文定義之烷 基經如本文定義之一或多個鹵基取代。鹵基-烷基可為單鹵基-烷基、二鹵基-烷基或多鹵基-烷基，包括全鹵基-烷基。單鹵基-烷基在烷基內可具有1個碘、溴、氯或氟。二-鹵基-烷基及多鹵基-烷基在烷基內可具有兩個或兩個以上相同鹵原子或不同鹵基之組合。通常，多鹵基-烷基含有至多12個或10個或8個或6個或4個或3個或2個鹵基。鹵基-烷基之非限制性實例包括氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、五氟乙基、七氟丙基、二氟氯甲基、二氯氟甲基、二氟乙基、二氟丙基、二氯乙基及二氯丙基。全鹵基-烷基係指所有氫原子皆經鹵原子置換的烷基。
如本文所用，術語「雜環基」或「雜環」係指3至7員單環或7至10員飽和或部分飽和環或環系統，其含有至少一個選自N、O及S的雜原子，其中該N及S視情況亦可氧化為各種氧化態。『雜環基』可連接於雜原子或碳原子處。『雜環基』可包括稠合或橋連的環以及螺環。
在R4之情形下，雜環之實例包括環氧乙烷基、氮雜環丙烯基、氧雜環丁烷基、硫雜環丁烷基、氮雜環丁烷基、吡咯啶基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、2,3-二氫呋喃基、2,5-二氫呋喃基、2,3-二氫噻吩基、1-吡咯啉基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、四氫哌喃基、哌啶基、四氫硫哌喃基、嗎啉基、硫嗎啉基、氧硫雜環己烷基、二烷基、哌基、二氫哌喃基、四氫吡啶基、二氫硫哌喃基、氮雜環庚烷基、硫雜環庚烷基及氧雜環庚烷基。
在R8之情形下，雜環之實例包括吡咯啉基、哌啶基、嗎啉基、硫嗎啉基、哌基、四氫吡啶基及氮雜環庚烷基。
如本文所用，術語「雜芳基」或「雜芳族」係指4員、5員、6員或7員單環、7員、8員、9員、10員、11員或12員二環或10員、11員、12員、13員、14員或15員三環不飽和環或環系統，其在環中攜有可能的最多數目的共軛雙鍵，其含有至少一個選自N、O及S之雜原子，其中N及S視情況亦可氧化為各種氧化態。『雜芳基』可連接於雜原子或碳原子處。『雜芳基』可包括稠合或橋連的環以及螺環。雜芳基之實例包括呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、異噻唑基、唑基、異唑基、1,2,5-二唑基、1,2,4-二唑基、1,2,3-二唑基、1,3,4-二唑基、1,2,5-噻二唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,3-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,5-三唑基、吡啶基、嘧啶基、吡基、噠基、1,2,3-三基、1,2,4-三基及1,3,5-三基。
如本文所用，術語「環烷基」係指具有3至12個碳原子的飽和或部分不飽和單環、二環或三環烴基團。除非另有規定，否則環烷基係指具有3個至10個環碳原子或3個至7個環碳原子的環烴基團。例示性二環烴基團包括八氫吲哚基、十氫萘基。例示性三環烴包括二環[2.1.1]己基、二環[2.2.1]庚基、二環[2.2.1]庚烯基、6,6-二甲基二環[3.1.1]庚基、2,6,6-三甲基二環[3.1.1]庚基、二環[2.2.2]辛基。例示性四環烴基團包括金剛烷基。
如本文所用，術語「氧基」係指-O-連接基團。
如本文所用，術語「羧基(carboxy或carboxyl)」為-COOH。
如本文所用，所有取代基係以顯示組成其之官能基(基團)之順序的方式書寫。官能基如上文中所定義。
本發明之所列各個實施例在本文中描述。應認識到，各實施例中指定之特徵可與其他指定特徵組合以提供本發明之其他實施例。
在一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(I')化合物 其中R1、R5、R7、R30、Y、V、W、U及Q如上文所定義。
在一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(Ia)化合物 其中R1、R5、R7、R30、Y、V、U及Q如上文所定義。
在一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(Ia')化合物 其中R1、R5、R7、R30、Y、V、U及Q如上文所定義。
在另一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(Ib)化合物 其中R1、R5、R7、R30、V、W、U及Q如上文所定義。
在另一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(Ib')化合物 其中R1、R5、R7、R30、V、W、U及Q如上文所定義。
在另一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(Ic)化合物 其中R1、R5、R7、U及Q如上文所定義。
在另一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(Ic')化合物 其中R1、R5、R7、U及Q如上文所定義。
在另一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(Id)化合物 其中R1、R5、R7、U及Q如上文所定義。
在另一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(Id')化合物 其中R1、R5、R7、U及Q如上文所定義。
在另一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(Ie)化合物 其中R1、R5、R6及R7如上文所定義。
在另一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(Ie')化合物 其中R1、R5、R6及R7如上文所定義。
在另一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(If)化合物 其中R1、R5、R6及R7如上文所定義。
在另一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(If')化合物 其中R1、R5、R6及R7如上文所定義。
在另一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(Ig)化合物 其中X、R4、R5、R6及R7如上文所定義。
在另一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(Ig')化合物 其中X、R4、R5、R6及R7如上文所定義。
在另一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(Ih)化合物 其中X、R4、R5、R6及R7如上文所定義。
在另一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(Ih')化合物 其中X、R4、R5、R6及R7如上文所定義。
在另一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(Ii)化合物 其中R4、R5、R6及R7如上文所定義。
在另一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(Ii')化合物 其中R4、R5、R6及R7如上文所定義。
在另一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(Ij)化合物 其中R4、R5、R6及R7如上文所定義。
在另一個實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其選自式(Ij')化合物 其中R4、R5、R6及R7如上文所定義。
在另一個實施例中，本發明提供式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')、(Ib)、(Ib')(Ic)、(Ic')、(Id)、(Id')、(Ie)、(Ie')、(If)、(If')、(Ig)、(Ig')、(Ih)、(Ih')、(Ii)、(Ii')、(Ij)或(Ij')之化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其中R4係選自C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、氰基-C1-C8烷基、N,N-二-C1-C4烷基-胺基-C1-C8烷基、C1-C4烷基-磺醯基-C1-C8烷基、苯基、雜環基、雜 環基-C1-C8烷基、C3-C12環烷基、雜芳基、雜芳基-C1-C8烷基、C1-C8烷氧基，其中N-C1-C8烷基-胺基及N,N-二-C1-C8烷基-胺基中之C1-C8烷基可未經取代或經鹵素、羥基或C1-C4烷氧基取代，其中C3-C12環烷基及C3-C12環烷基-C1-C8烷基中之C3-C12環烷基可未經取代或經鹵素、羥基或C1-C4烷氧基取代；其中『雜環基』為含有1至3個選自N、O或S之雜原子的3至7員飽和或部分不飽和單環系統，其未經取代或經1至5個選自以下之取代基取代：側氧基、鹵素、C1-C8烷基、鹵基-C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、羥基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基、N,N-二-C1-C8烷基-胺基、C1-C8烷基-羰基、鹵基-C1-C8烷基-羰基、羥基-C1-C8烷基-羰基或C1-C8烷氧基-C1-C8烷基-羰基；其中『雜環基』可連接於雜原子或碳原子處且其中N及/或S雜原子視情況亦可氧化為各種氧化態，其中『雜芳基』為含有1至3個選自N、O或S之雜原子的3至7員完全不飽和單環系統，或吡唑并[1,5-a]嘧啶或咪唑并[2,1-b]噻唑，其各自未經取代或經1至5個選自以下之取代基取代：鹵素、C1-C8烷基、鹵基-C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、羥基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基、N,N-二-C1-C8烷基-胺基、C1-C8烷基-羰基、鹵基-C1-C8烷基-羰基、羥基-C1-C8烷基-羰基或C1-C8烷氧基-C1-C8烷基-羰基；其中『雜芳基』可連接於雜原子或碳原子處且其中N及/或S雜原子視情況亦可氧 化為各種氧化態。
在另一個實施例中，本發明提供式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')、(Ib)、(Ib')(Ic)、(Ic')、(Id)、(Id')、(Ie)、(Ie')、(If)、(If')、(Ig)、(Ig')、(Ih)、(Ih')、(Ii)、(Ii')、(Ij)或(Ij')之化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其中R4係選自C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、氰基-C1-C8烷基、N,N-二-C1-C4烷基-胺基-C1-C8烷基、C1-C4烷基-磺醯基-C1-C8烷基、苯基、雜環基、雜環基-C1-C8烷基、C3-C12環烷基、雜芳基、雜芳基-C1-C8烷基、C1-C8烷氧基，其中N-C1-C8烷基-胺基及N,N-二-C1-C8烷基-胺基中之C1-C8烷基可未經取代或經鹵素、羥基或C1-C4烷氧基取代，其中C3-C12環烷基及C3-C12環烷基-C1-C8烷基中之C3-C12環烷基可未經取代或經鹵素、羥基或C1-C4烷氧基取代；其中『雜環基』係選自吡咯啶基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫哌喃基、哌啶基、四氫硫哌喃基、嗎啉基、二烷基或二氫哌喃基，其各自未經取代或經1至3個選自側氧基、C1-C8烷基或C1-C8烷基-羰基之取代基取代；其中『雜環基』可連接於雜原子或碳原子處且其中N及/或S雜原子視情況亦可氧化為各種氧化態，其中『雜芳基』係選自咪唑基、吡唑基、噻唑基、唑基、1,2,5-二唑基、1,3,4-二唑基、吡啶基、嘧啶基、吡基、吡唑并[1,5-a]嘧啶或咪唑并[2,1-b]噻唑，其各自未經取代或經1至3個選自C1-C8烷基、羥基或胺基之取代 基取代；其中『雜芳基』可連接於雜原子或碳原子處且其中N及/或S雜原子視情況亦可氧化為各種氧化態。
在另一個實施例中，本發明提供式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')、(Ib)、(Ib')(Ic)、(Ic')、(Id)、(Id')、(Ie)、(Ie')、(If)、(If')、(Ig)、(Ig')、(Ih)、(Ih')、(Ii)、(Ii')、(Ij)或(Ij')之化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其中R6係選自鹵素、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基-磺醯基或鹵基-C1-C4烷氧基。
在另一個實施例中，本發明提供式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')、(Ib)、(Ib')(Ic)、(Ic')、(Id)、(Id')、(Ie)、(Ie')、(If)、(If')、(Ig)、(Ig')、(Ih)、(Ih')、(Ii)、(Ii')、(Ij)或(Ij')之化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其中R7係選自氫、鹵素、氰基、C1-C4烷基、鹵基-C1-C4烷基或C1-C4烷氧基。
在另一個實施例中，本發明提供式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')、(Ib)、(Ib')(Ic)、(Ic')、(Id)、(Id')、(Ie)、(Ie')、(If)、(If')、(Ig)、(Ig')、(Ih)、(Ih')、(Ii)、(Ii')、(Ij)或(Ij')之化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其中R4係選自C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、氰基-C1-C8烷基、N,N-二-C1-C4烷基-胺基-C1-C8烷基、C1-C4烷基-磺醯基-C1-C8烷基、苯基、雜環基、雜環基-C1-C8烷基、C3-C12環烷基、雜芳基、雜芳基-C1-C8烷基、C1-C8烷氧基，其中N-C1-C8烷基-胺基及N,N-二-C1-C8烷基-胺基中之C1-C8烷基可未經取代或經鹵素、羥基或C1- C4烷氧基取代，其中C3-C12環烷基及C3-C12環烷基-C1-C8烷基中之C3-C12環烷基可未經取代或經鹵素、羥基或C1-C4烷氧基取代；其中『雜環基』為含有1至3個選自N、O或S之雜原子的3至7員飽和或部分不飽和單環系統，其未經取代或經1至5個選自以下之取代基取代：側氧基、鹵素、C1-C8烷基、鹵基-C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、羥基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基、N,N-二-C1-C8烷基-胺基、C1-C8烷基-羰基、鹵基-C1-C8烷基-羰基、羥基-C1-C8烷基-羰基或C1-C8烷氧基-C1-C8烷基-羰基；其中『雜環基』可連接於雜原子或碳原子處且其中N及/或S雜原子視情況亦可氧化為各種氧化態，其中『雜芳基』為含有1至3個選自N、O或S之雜原子的3至7員完全不飽和單環系統，或吡唑并[1,5-a]嘧啶或咪唑并[2,1-b]噻唑，其各自未經取代或經1至5個選自以下之取代基取代：鹵素、C1-C8烷基、鹵基-C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、羥基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基、N,N-二-C1-C8烷基-胺基、C1-C8烷基-羰基、鹵基-C1-C8烷基-羰基、羥基-C1-C8烷基-羰基或C1-C8烷氧基-C1-C8烷基-羰基；其中『雜芳基』可連接於雜原子或碳原子處且其中N及/或S雜原子視情況亦可氧化為各種氧化態，且R6係選自鹵素、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基-磺醯基或鹵基-C1-C4烷氧基。
在另一個實施例中，本發明提供式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')、(Ib)、(Ib')(Ic)、(Ic')、(Id)、(Id')、(Ie)、(Ie')、(If)、(If')、(Ig)、(Ig')、(Ih)、(Ih')、(Ii)、(Ii')、(Ij)或(Ij')之化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其中R4係選自C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、氰基-C1-C8烷基、N,N-二-C1-C4烷基-胺基-C1-C8烷基、C1-C4烷基-磺醯基-C1-C8烷基、苯基、雜環基、雜環基-C1-C8烷基、C3-C12環烷基、雜芳基、雜芳基-C1-C8烷基、C1-C8烷氧基，其中N-C1-C8烷基-胺基及N,N-二-C1-C8烷基-胺基中之C1-C8烷基可未經取代或經鹵素、羥基或C1-C4烷氧基取代，其中C3-C12環烷基及C3-C12環烷基-C1-C8烷基中之C3-C12環烷基可未經取代或經鹵素、羥基或C1-C4烷氧基取代；其中『雜環基』為含有1至3個選自N、O或S之雜原子的3至7員飽和或部分不飽和單環系統，其未經取代或經1至5個選自以下之取代基取代：側氧基、鹵素、C1-C8烷基、鹵基-C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、羥基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基、N,N-二-C1-C8烷基-胺基、C1-C8烷基-羰基、鹵基-C1-C8烷基-羰基、羥基-C1-C8烷基-羰基或C1-C8烷氧基-C1-C8烷基-羰基；其中『雜環基』可連接於雜原子或碳原子處且其中N及/或S雜原子視情況亦可氧化為各種氧化態，其中『雜芳基』為含有1至3個選自N、O或S之雜原子的3至7員完全不飽和單環系統，或吡唑并[1,5-a]嘧啶或咪唑 并[2,1-b]噻唑，其各自未經取代或經1至5個選自以下之取代基取代：鹵素、C1-C8烷基、鹵基-C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、羥基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基、N,N-二-C1-C8烷基-胺基、C1-C8烷基-羰基、鹵基-C1-C8烷基-羰基、羥基-C1-C8烷基-羰基或C1-C8烷氧基-C1-C8烷基-羰基；其中『雜芳基』可連接於雜原子或碳原子處且其中N及/或S雜原子視情況亦可氧化為各種氧化態，且R7係選自氫、鹵素、氰基、C1-C4烷基、鹵基-C1-C4烷基或C1-C4烷氧基。
在另一個實施例中，本發明提供式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')、(Ib)、(Ib')(Ic)、(Ic')、(Id)、(Id')、(Ie)、(Ie')、(If)、(If')、(Ig)、(Ig')、(Ih)、(Ih')、(Ii)、(Ii')、(Ij)或(Ij')之化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽及/或溶劑合物，其中R4係選自C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、氰基-C1-C8烷基、N,N-二-C1-C4烷基-胺基-C1-C8烷基、C1-C4烷基-磺醯基-C1-C8烷基、苯基、雜環基、雜環基-C1-C8烷基、C3-C12環烷基、雜芳基、雜芳基-C1-C8烷基、C1-C8烷氧基，其中N-C1-C8烷基-胺基及N,N-二-C1-C8烷基-胺基中之C1-C8烷基可未經取代或經鹵素、羥基或C1-C4烷氧基取代，其中C3-C12環烷基及C3-C12環烷基-C1-C8烷基中之C3-C12環烷基可未經取代或經鹵素、羥基或C1-C4烷氧基取代；其中『雜環基』為含有1至3個選自N、O或S之雜原子的 3至7員飽和或部分不飽和單環系統，其未經取代或經1至5個選自以下之取代基取代：側氧基、鹵素、C1-C8烷基、鹵基-C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、羥基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基、N,N-二-C1-C8烷基-胺基、C1-C8烷基-羰基、鹵基-C1-C8烷基-羰基、羥基-C1-C8烷基-羰基或C1-C8烷氧基-C1-C8烷基-羰基；其中『雜環基』可連接於雜原子或碳原子處且其中N及/或S雜原子視情況亦可氧化為各種氧化態，其中『雜芳基』為含有1至3個選自N、O或S之雜原子的3至7員完全不飽和單環系統，或吡唑并[1,5-a]嘧啶或咪唑并[2,1-b]噻唑，其各自未經取代或經1至5個選自以下之取代基取代：鹵素、C1-C8烷基、鹵基-C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、羥基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基、N,N-二-C1-C8烷基-胺基、C1-C8烷基-羰基、鹵基-C1-C8烷基-羰基、羥基-C1-C8烷基-羰基或C1-C8烷氧基-C1-C8烷基-羰基；其中『雜芳基』可連接於雜原子或碳原子處且其中N及/或S雜原子視情況亦可氧化為各種氧化態，R6係選自鹵素、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基-磺醯基或鹵基-C1-C4烷氧基且R7係選自氫、鹵素、氰基、C1-C4烷基、鹵基-C1-C4烷基或C1-C4烷氧基。
在另一個實施例中，本發明之個別化合物為下文實例部分中列舉之化合物。
如本文所用，術語「光學異構體」或「立體異構體」係指本發明之給定化合物可存在之各種立體異構組態中之任一者，且包括幾何異構體。應理解，取代基可連接於碳原子之對掌性中心處。術語「對掌性」係指具有其鏡像搭配物不可重疊之性質的分子，而術語「非對掌性」係指其鏡像搭配物可重疊之分子。因此，本發明包括化合物之對映異構體、非對映異構體或外消旋體。「對映異構體」為彼此呈不可重疊之鏡像的一對立體異構體。一對對映異構體之1：1混合物為「外消旋」混合物。適當時，該術語用於指示外消旋混合物。「非對映異構體」為具有至少兩個不對稱原子，但彼此不互為鏡像之立體異構體。根據Cahn-lngold-Prelog R-S系統指定絕對立體化學。當化合物為純對映異構體時，各對掌性碳之立體化學可由R或S指定。絕對組態未知之解析化合物可視其在鈉D線之波長下使平面偏振光旋轉之方向(右旋或左旋)，以(+)或(-)表示。本文所述之某些化合物含有一或多個不對稱中心或不對稱軸，且因此可產生對映異構體、非對映異構體及其他立體異構形式，其可根據絕對立體化學，以(R)-或(S)-定義。
視起始物質及程序之選擇而定，化合物可以可能的異構體中之一種或其混合物形式存在，例如純光學異構體，或異構體混合物，諸如外消旋體及非對映異構體混合物，視不對稱碳原子數目而定。本發明意欲包括所有該等可能的異構體，包括外消旋混合物、非對映異構體混合物及光學純形式。可使用對掌性合成組元或對掌性試劑製備或使用 習知技術解析光學活性(R)-及(S)-異構體。若化合物含有雙鍵，則取代基可為E或Z組態。若化合物含有經二取代之環烷基，則環烷基取代基可具有順式或反式組態。亦意欲包括所有互變異構形式。
如本文所用，術語「鹽」係指本發明化合物之酸加成鹽或鹼加成鹽。「鹽」特定言之包括「醫藥學上可接受之鹽」。術語「醫藥學上可接受之鹽」係指保留本發明化合物之生物有效性及性質且通常在生物學上或其他方面合乎需要之鹽。在許多情況下，本發明化合物由於存在胺基及/或羧基或其類似基團而能夠形成酸式鹽及/或鹼式鹽。
醫藥學上可接受之酸加成鹽可用無機酸及有機酸形成，例如乙酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、溴化物/氫溴酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、樟腦磺酸鹽、氯化物/鹽酸鹽、氯茶鹼鹽、檸檬酸鹽、乙烷二磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、馬尿酸鹽、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙基磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、杏仁酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、萘甲酸鹽、萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、十八酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、聚半乳糖醛酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、丁二酸鹽、磺基水楊酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽及三氟乙酸鹽。
可衍生得到鹽之無機酸包括例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、 硝酸、磷酸及其類似酸。
可衍生得到鹽之有機酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、順丁烯二酸、丙二酸、丁二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、杏仁酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、甲苯磺酸、磺基水楊酸及其類似酸。可用無機鹼及有機鹼形成醫藥學上可接受之鹼加成鹽。
可衍生得到鹽之無機鹼包括例如銨鹽及週期表第I行至第XII行之金屬之鹽。在某些實施例中，鹽係衍生自鈉、鉀、銨、鈣、鎂、鐵、銀、鋅及銅；尤其適合的鹽包括銨鹽、鉀鹽、鈉鹽、鈣鹽及鎂鹽。
可衍生得到鹽之有機鹼包括例如一級、二級及三級胺；經取代之胺，包括天然產生之經取代胺；環胺；鹼離子交換樹脂及其類似物。某些有機胺包括異丙胺、苄星(benzathine)、膽茶鹼(cholinate)、二乙醇胺、二乙胺、離胺酸、葡甲胺(meglumine)、哌及緩血酸胺(tromethamine)。
可藉由習知化學方法自鹼性或酸性部分合成本發明之醫藥學上可接受之鹽。一般而言，此等鹽可藉由使游離酸形式之此等化合物與化學計量之量的適當鹼(諸如Na、Ca、Mg或K之氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽或其類似物)反應或藉由使游離鹼形式之此等化合物與化學計量之量的適當酸反應來製備。該等反應通常在水中或在有機溶劑中或在二者之混合物中進行。一般而言，在可行時，希望使用非水性介質，如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈。其 他適合鹽之清單可見於例如以下文獻中：「Remington's Pharmaceutical Sciences」，第20版，Mack Publishing Company,Easton,Pa.,(1985)；及「Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties,Selection,and Use」,Stahl及Wermuth(Wiley-VCH,Weinheim,Germany,2002)。
本文中給出之任何式亦意欲表示化合物之未標記形式以及經同位素標記之形式。經同位素標記之化合物具有由本文中給出之式描繪的結構，例外之處為一或多個原子經具有所選原子質量或質量數之原子置換。可併入本發明化合物中之同位素之實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟及氯之同位素，分別諸如2H、3H、11C、13C、14C、15N、18F、31P、32P、35S、36Cl、125I。本發明包括如本文定義之各種經同位素標記之化合物，例如存在諸如3H及14C之放射性同位素的彼等物或存在諸如2H及13C之非放射性同位素的彼等物。該等經同位素標記之化合物適用於代謝研究(使用14C)；反應動力學研究(使用例如2H或3H)；偵測或成像技術，諸如正電子發射斷層攝影法(PET)或單光子發射電腦斷層攝影法(SPECT)，包括藥物或受質組織分佈分析；或患者之放射性治療。特定言之，18F或標記化合物可能特別合乎PET或SPECT研究之需要。式(I)之同位素標記化合物通常可藉由熟習該項技術者已知之習知技術製備，或使用適當的同位素標記試劑而非先前所用之非標記試劑、藉由與附隨實例及製備中所述彼等方法類似的方法製備。
此外，尤其是氘(亦即2H或D)之較重同位素的取代可得 到由較大代謝穩定性產生之某些治療優勢，例如活體內半衰期延長或劑量需求減小或治療指數改良。應瞭解，在此情形下，氘被視為式(I)化合物之取代基。該種較重同位素(詳言之氘)之濃度可由同位素增濃因數定義。如本文所用，術語「同位素增濃因數」意謂指定同位素之同位素豐度與天然豐度之間的比率。若本發明化合物中之取代基表示為氘，則該化合物中各指定氘原子的同位素增濃因數為至少3500(各指定氘原子上52.5%氘併入)、至少4000(60%氘併入)、至少4500(67.5%氘併入)、至少5000(75%氘併入)、至少5500(82.5%氘併入)、至少6000(90%氘併入)、至少6333.3(95%氘併入)、至少6466.7(97%氘併入)、至少6600(99%氘併入)或至少6633.3(99.5%氘併入)。
本發明之醫藥學上可接受之溶劑合物包括其中結晶化溶劑可經同位素取代的彼等物，例如D2O、d6-丙酮、DMSO-d6。
本發明化合物(亦即含有能夠充當氫鍵之供體及/或受體之基團的式(I)化合物)可能夠用適合的共晶形成劑來形成共晶體。此等共晶體可藉由已知共晶形成程序由式(I)化合物製備。此等程序包括在溶液中將式(I)化合物與共晶形成劑一起在結晶條件下研磨、加熱、共昇華、共熔融或接觸並分離由此形成之共晶體。適合的共晶形成劑包括WO 2004/078163中所述之共晶形成劑。因此，本發明進一步提供包含式(I)化合物之共晶體。
如本文所用，術語「醫藥學上可接受之載劑」包括如為 熟習此項技術者所知之任何及所有溶劑、分散介質、塗料、界面活性劑、抗氧化劑、防腐劑(例如抗細菌劑、抗真菌劑)、等張劑、吸收延遲劑、鹽、防腐劑、藥物穩定劑、黏合劑、賦形劑、崩解劑、潤滑劑、甜味劑、調味劑、染料及其類似物及其組合(參見例如Remington's Pharmaceutical Sciences，第18版Mack Printing Company,1990，第1289頁至第1329頁)。除了在任何習知載劑與活性成分不相容之情況之外，涵蓋其在治療或醫藥組合物中之用途。
術語本發明化合物之「治療有效量」係指本發明化合物引起個體之生物學或醫學反應(例如酶或蛋白質活性降低或抑制)或改善症狀、緩解病狀、減緩或延遲疾病進展或預防疾病等的量。在一個非限制性實施例中，術語「治療有效量」係指本發明化合物投與個體時有效達成以下的量：(1)至少部分地緩解、抑制、預防及/或改善(i)由PI3K介導或(ii)與PI3K活性有關或(iii)以PI3K活性(正常或異常)為特徵的病狀或病症或疾病，或(2)降低或抑制PI3K之活性，或(3)降低或抑制PI3K表現。在另一個非限制性實施例中，術語「治療有效量」係指當投與細胞或組織或非細胞生物材料或介質時有效達成以下之本發明化合物之量：至少部分地降低或抑制PI3K活性；或至少部分地降低或抑制PI3K表現。如上述實施例中針對PI3K所說明之術語「治療有效量」之含義亦以相同含義應用於任何其他相關蛋白質/肽/酶。
如本文所用，術語「個體」係指動物。動物通常為哺乳動物。個體亦指例如靈長類動物(例如人類，男性或女性)、奶牛、綿羊、山羊、馬、犬、貓、兔、大鼠、小鼠、魚、鳥及其類似物。在某些實施例中，個體為靈長類動物。在其他實施例中，個體為人類。
如本文所用，術語「抑制(inhibit)」、「抑制(inhibition)」或「抑制(inhibiting)」係指減輕或遏止指定病狀、症狀或病症或疾病，或顯著減小生物活性或過程之基線活性。
如本文所用，在一個實施例中，術語「治療」任何疾病或病症係指緩解疾病或病症(亦即減緩或阻止或減慢疾病之發展或其至少一種臨床症狀)。在另一實施例中，「治療」係指緩解或改善至少一種物理參數，包括患者無法辨識之參數。在另一實施例中，「治療」係指在身體上(例如穩定可辨別之症狀)、生理上(例如穩定物理參數)或兩方面調節疾病或病症。在另一實施例中，「治療」係指預防或延遲疾病或病症的發作或發展或進展。
如本文所用，若個體在生物學、醫學或生活品質上將受益於治療，則該個體「需要」該治療。
除非本文另有說明或與上下文明顯抵觸，否則如本文所用，本發明之上下文中(尤其在申請專利範圍之上下文中)所用之術語「一」、「該」及類似術語應解釋為包括單數及複數。
除非本文另有說明或與上下文明顯抵觸，否則本文所述 之所有方法可以任何適合順序進行。使用本文所提供之任何及所有實例或例示性語言(例如「諸如」)僅欲更好地說明本發明，且對另外所主張之本發明之範疇不構成限制。
本發明化合物之任何不對稱原子(例如碳或其類似物)可呈外消旋或對映異構體增濃形式，例如(R)-、(S)-或(R,S)-組態存在。在某些實施例中，各不對稱原子的(R)-或(S)-組態具有至少50%對映異構過量、至少60%對映異構過量、至少70%對映異構過量、至少80%對映異構過量、至少90%對映異構過量、至少95%對映異構過量或至少99%對映異構過量。若可能，則具有不飽和雙鍵之原子處的取代基可以順式(Z)或反式(E)形式存在。
因此，如本文所用，本發明化合物可呈可能的異構體、旋轉異構體、滯轉異構體、互變異構體或其混合物中之一種形式，例如呈實質上純幾何異構(順式或反式)異構體、非對映異構體、光學異構體(對映體)、外消旋體或其混合物。
基於該等成分之物理化學差異，例如藉由層析法及/或分步結晶，可將任何所得之異構體混合物分離為純的或實質上純的幾何異構體或光學異構體、非對映異構體、外消旋體。
任何所得之最終產物或中間體之外消旋體均可藉由已知方法，例如藉由分離其非對映異構體鹽(用光學活性酸或鹼獲得)及釋放光學活性酸性或鹼性化合物而解析為光學對映體。詳言之，鹼性部分可因此用於解析本發明化合物 成其光學對映體，例如藉由對由光學活性酸(例如酒石酸、二苯甲醯基酒石酸、二乙醯基酒石酸、二-O,O'-對甲苯甲醯基酒石酸、杏仁酸、蘋果酸或樟腦-10-磺酸)形成之鹽進行分步結晶。亦可藉由對掌性層析法，例如使用對掌性吸附劑之高壓液相層析法(HPLC)解析外消旋產物。
此外，本發明化合物(包括其鹽)亦可以其水合物形式獲得或包括其結晶所用之其他溶劑。本發明化合物可固有地或故意地與醫藥學上可接受之溶劑(包括水)形成溶劑合物；因此，本發明意欲涵蓋溶劑化形式及非溶劑化形式。術語「溶劑合物」係指本發明化合物(包括其醫藥學上可接受之鹽)與一或多個溶劑分子之分子複合物。此等溶劑分子為醫藥技術中常用之溶劑分子，例如水、乙醇及其類似物，已知其對接受者無害。術語「水合物」係指溶劑分子為水之複合物。
本發明化合物(包括其鹽、水合物及溶劑合物)可固有地或故意地形成多晶型物。
通常，式(I)化合物可根據下文提供的方法製備。
在一個實施例中，本發明係關於一種製備式(I)化合物之方法(方法A)，其包含步驟a、b、c、d。
式(I)化合物經由以下步驟獲得：脫除式(F)化合物之保護基PG1之步驟c，其中PG1表示適合保護基，諸如Boc基團，且其他取代基如上文所定義；
隨後為與以下發生之偶合反應步驟d R1-Act1，步驟c1：其中R1為-C(O)-R4或-S(O)2-R4，其中R4如上文所定義，且Act1表示活化基團或羥基：偶合反應為醯胺、脲、胺基甲酸酯或磺醯胺形成。存在許多已知的製備醯胺、脲、胺基甲酸酯或磺醯胺之方法。偶合反應步驟可在以下條件下進行：Act1表示活化基團，較佳以一步程序進行；或Act1表示羥基，以一步或兩步程序進行。關於醯胺鍵形成之實例，參見Mantalbetti,C.A.G.N及Falque,V.,Amide bond formation and peptide coupling,Tetrahedron,2005,61(46)，第10827-10852頁及其中引用之參考文獻。關於脲合成之實例，參見Sartori,G.；Maggi,R.Acyclic and cyclic ureas,Science of Synthesis(2005),18,665-758；Gallou,Isabelle.Unsymmetrical ureas Synthetic methodologies and application in drug design,Organic Preparations and Procedures International(2007),39(4),355-383。關於胺基甲酸酯合成之實例，參見Adams,Philip；Baron,Frank A.Esters of carbamic acid,Chemical Reviews(1965),65(5),567-602。本文提供之實例因此不意欲具有窮盡性，而僅具說明性；步驟c2：其中R1係選自苯基、吡啶基、嘧啶基、吡基、噠基、1,2,3-三基、1,2,4-三基或1,3,5-三基且Act1表示鹵素，尤其是碘或溴：偶合反應係在胺鹼(諸如N,N-二異丙基乙胺)存在下進行。反應係在有機溶劑存在下或不使用溶劑，在微波加熱下進行。或者，反應係在慣用的布查沃德-哈特維條件(Buchwald-Hartwig condition)諸如上述條件下進行。反應較佳在諸如氮氣或氬氣之惰性氣體下進行。
式(F)化合物經由式(C)化合物(其中PG1表示適合保護基，諸如Bob基團，且其他取代基如上文所定義)
與式(D)化合物(其中X'表示鹵素，諸如碘或溴，且其他取代基如上文所定義)
在慣用的布查沃德-哈特維條件下，使用適合的Pd催化劑/配位體組合(諸如Pd2(dba)3/2-(二環己基膦基)聯苯或Pd2(dba)3/2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯、Pd2(dba)3/X-Phos、Pd2(dba)3/(rac)-BINAP、Pd(OAc)2/(rac)-BINAP或雙(三-第三丁基膦)鈀)與適合鹼(諸如NaOtBu、Cs2CO3或K3PO4)及有機溶劑(諸如甲苯、二噁烷或THF)進行偶合之步驟b而獲得。在約60至140℃之溫度下，例如在100℃至110℃之溫度下攪拌反應物且視情況在微波反應器中進行。反應較佳在諸如氮氣或氬氣之惰性氣體下進行。
式(C)化合物經由式(A)化合物(其中取代基如上文所定義)與式(B)化合物(其中PG1表示適合保護基，諸如Boc基團且Act2為活化基團或H，且其他取代基如上文所定義)偶合之步驟a而獲得，
步驟a1：其中Y為O且Act2表示活化基團，諸如甲磺酸酯基：反應在諸如氫氧化鈉(NaH)、K2CO3或第三丁醇鉀(tBuOK)之適合鹼存在下、在適合的極性有機溶劑(諸如DMF、THF、2-甲基四氫呋喃或二噁烷)中，在諸如室溫至100℃之適合溫度下進行。
步驟a2：其中Y為O且Act2表示H：反應係使用慣用的光延反應條件(Mitsunobu condition)，例如使用Ph3P及DEAD，在諸如THF之有機溶劑中，在諸如70℃之高溫下，在惰性氣體條件下進行。
步驟a3：其中Y為NH且Act2表示H：使用鹼促進之鏻偶合反應，其中使於諸如乙腈之適合溶劑中的式(A)化合物與諸如六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基參(二甲基胺基)鏻(BOP)在諸如1,8-二氮雜-7-二環[5.4.0]十一碳烯(DBU)之鹼存在下反應，隨後添加式(B)化合物。在20℃至100℃之溫度下攪拌反應混合物。
在另一個實施例中，本發明係關於一種使用式(B)化合物(其中PG1表示R1)製備式(I)化合物的方法(方法A-a)，其包含如上文針對方法A所定義之步驟a及b。
在另一個實施例中，本發明係關於一種製備式(I)化合物之方法(方法B)，其包含步驟e、b、f、a、c及d。
式(I)化合物由式(F)化合物經如上文針對方法A所述之步 驟c及d獲得。
式(F)化合物經由脫除式(E)化合物(其中PG2為適合的保護基，諸如甲矽烷基保護基，且其他取代基如上文所定義)之保護基PG2之步驟f 隨後與式(B)化合物進行如上文針對方法A所述之偶合反應步驟a來獲得。
式(E)化合物經由用適合保護基PG2保護式(A)化合物之步驟e而獲得，隨後，由式(E)化合物(其中PG2為適合保護基，諸如甲矽烷基保護基)與式(D)化合物進行如上文針對方法A所述之偶合反應步驟b。
在另一個實施例中，本發明係關於一種使用式(B)化合物(其中PG1表示R1)製備式(I)化合物的方法(方法B-a)，其包含如上文針對方法B所定義之步驟e、b及f。
在另一個實施例中，本發明係關於一種使用式(A')化合物(其中X"表示鹵素且其他取代基如上文所定義)，使用式(B)化合物製備式(I)化合物的方法(方法C)
包含如上文針對方法B所定義之步驟b、c及d，及經修改之步驟a4：步驟a4：其中Y為NH且Act2為H：反應在諸如100℃至140℃之高溫下，在諸如碳酸鉀之適合鹼或諸如三乙胺或N,N-二異丙基乙胺之適合胺鹼存在下進行。或者，反應在諸如上述條件之慣用的布查沃德-哈特維條件下進行。反應較佳在諸如氮氣或氬氣之惰性氣體下進行。
在另一個實施例中，本發明係關於一種使用式(B)化合物(其中PG1表示R1)製備式(I)化合物的方法(方法C-a)，其包含如上文針對方法B1所定義之步驟b、a4、c及d。
如本文所用，術語「活化基團」係指可活化羧酸、碳酸或胺基甲酸衍生物以便與胺部分偶合而分別形成醯胺、脲或胺基甲酸酯部分(Act1)的基團，或係指可活化羥基以便與另一個羥基部分偶合形成醚(Act2)的基團。
可活化羧酸、碳酸或胺基甲酸衍生物以便與胺部分偶合形成醯胺、脲或胺基甲酸酯部分的基團為氯化物，或為由酸衍生物與活化劑反應而產生的基團。適合的活化劑已為熟習此項技術者所知，此等活化試劑之實例為碳化二亞胺衍生物、五氟苯基酯衍生物、三唑衍生物、咪唑衍生物。
可活化羥基以便與另一羥基部分偶合形成醚的基團為熟 習此項技術者已知的基團，此等活化基團之實例為甲磺酸酯及甲苯磺酸酯。
如本文所用，術語「保護基」係指保護存在於起始物質中之官能基且不欲參加反應的基團。在視需要進行的其他方法步驟中，不應參加反應的起始化合物之官能基可以未保護之形式存在或可藉由例如一或多個保護基而受保護。接著根據已知方法中之一者來完全地或部分地移除保護基。保護基及引入及移除其之方式描述於例如「Protective Groups in Organic Chemistry」,Plenum Press,London,New York 1973，及「Methoden der organischen Chemie」,Houben-Weyl，第4版，第15/1卷，Georg-Thieme-Verlag,Stuttgart 1974，及Theodora W.Greene,「Protective Groups in Organic Synthesis」,John Wiley & Sons,New York 1981中。保護基之特徵在於其可輕易移除，亦即不發生非所要的二次反應，例如溶劑分解、還原、光分解或在生理條件下。
本發明進一步包括本發明方法之任何變型，其中將可於其任何階段獲得之中間產物用作起始物質且執行剩餘步驟，或其中起始物質在反應條件下當場形成，或其中反應組分以其鹽或光學純物質形式使用。本發明化合物及中間物亦可根據熟習此項技術者一般已知的方法彼此轉化。
中間物及最終產物可根據標準方法，例如使用層析法、分佈法、(再)結晶法及其類似方法處理及/或純化。
以下一般適用於本文之上文及下文所述的所有方法。所 有上述方法步驟均可在熟習此項技術者已知之反應條件下進行，包括特別提及之反應條件，在溶劑或稀釋劑(包括例如對所用試劑呈惰性且溶解所用試劑之溶劑或稀釋劑)不存在或慣常存在下，在催化劑、縮合劑或中和劑(例如離子交換劑，諸如陽離子交換劑，例如呈H+形式，視反應及/或反應物之性質而定)不存在或存在下，在低溫、常溫或高溫下(例如在約-100℃至約190℃之溫度範圍內，包括例如約-80℃至約150℃，例如在-80℃至-60℃下，在室溫下，在-20℃至40℃下或在回流溫度下)，在大氣壓下或在封閉容器中(適當時處於壓力下)，及/或在惰性氛圍中(例如在氬氣或氮氣氛圍下)。
在反應之所有階段，所形成的異構體混合物可類似於例如上文所述之方法分離成個別異構體，例如非對映異構體或對映異構體，或分離成任何所要的異構體混合物，例如外消旋物或非對映異構體混合物。除非在方法之描述中另外說明，否則適於任何特定反應之彼等溶劑可選擇的溶劑包括特定提及之彼等溶劑，或例如水；酯，諸如低碳烷基-低碳烷酸酯，例如乙酸乙酯；醚類，諸如脂族醚，例如乙醚，或環醚，例如四氫呋喃或二烷；液態芳族烴，諸如苯或甲苯；醇類，諸如甲醇、乙醇或1-丙醇或2-丙醇；腈類，諸如乙腈；鹵代烴，例如二氯甲烷或氯仿；醯胺類，諸如二甲基甲醯胺或二甲基乙醯胺；鹼類，諸如雜環氮鹼，例如吡啶或N-甲基吡咯啶-2-酮；羧酸酐，諸如低碳烷酸酐，例如乙酸酐；環烴、直鏈烴或支鏈烴，諸如 環己烷、己烷或異戊烷、甲基環己烷；或彼等溶劑之混合物，例如水溶液。該等溶劑混合物亦可用於處理(例如層析或分溶)中。化合物(包括其鹽)亦可以水合物形式獲得，或其結晶體可包括例如用於結晶之溶劑。可存在不同結晶形式。本發明亦關於以下彼等形式之方法：使用可在方法之任何階段以中間體形式獲得之化合物作為起始物質且進行剩餘方法步驟，或其中起始物質在反應條件下形成或以衍生物形式使用，例如以經保護形式或以鹽形式使用，或在製程條件下產生可藉由本發明方法獲得之化合物且當場進一步處理其。
在另一態樣中，本發明提供一種包含本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之載劑的醫藥組合物。醫藥組合物可針對特定投與途徑調配，諸如經口投與、非經腸投與及直腸投與等。此外，本發明之醫藥組合物可製備為固體形式(包括(但不限於)膠囊、錠劑、藥丸、顆粒劑、散劑或栓劑)或液體形式(包括(但不限於)溶液、懸浮液或乳液)。醫藥組合物可經受習知醫藥操作(諸如滅菌)及/或可含有習知惰性稀釋劑、潤滑劑或緩衝劑，以及佐劑，諸如防腐劑、穩定劑、濕潤劑、乳化劑及緩衝劑等。通常，醫藥組合物為錠劑或明膠膠囊，其包含活性成分以及a)稀釋劑，例如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇、纖維素及/或甘胺酸；b)潤滑劑，例如矽石、滑石、硬脂酸、硬脂酸鎂鹽或硬 脂酸鈣鹽及/或聚乙二醇；對於錠劑而言亦包含c)黏合劑，例如矽酸鎂鋁、澱粉糊、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉及/或聚乙烯吡咯啶酮；若需要，則包含d)崩解劑，例如澱粉、瓊脂、海藻酸或其鈉鹽，或起泡混合物；及/或e)吸附劑、著色劑、香料及甜味劑。
錠劑可根據此項技術中已知之方法包覆膜衣或腸衣。
適於口服之組合物包括有效量之呈以下形式的本發明化合物：錠劑、口含劑、水性或油性懸浮液、分散性散劑或顆粒、乳液、硬或軟膠囊，或糖漿或酏劑。欲口服使用之組合物係根據醫藥組合物製備技術中已知之任何方法來製備，且該等組合物可含有一或多種選自由以下組成之群的試劑：甜味劑、調味劑、著色劑及防腐劑，以便提供醫藥學上精緻且適口之製劑。錠劑可含有活性成分與適於製備錠劑之醫藥學上可接受之無毒賦形劑的混合物。此等賦形劑為例如惰性稀釋劑，諸如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；粒化及崩解劑，例如玉米澱粉或海藻酸；黏合劑，例如澱粉、明膠或阿拉伯膠；及潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。錠劑可未包覆包衣或藉由已知技術包覆包衣以延遲在胃腸道中之崩解及吸收，且藉此提供較長時間之持續作用。舉例而言，可使用時間延遲材料，諸如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。口服使用之調配物可以其中活性成分與惰性固體稀釋劑(例如碳酸鈣、磷酸 鈣或高嶺土)混合之硬明膠膠囊形式或以其中活性成分與水或油介質(例如花生油、液體石蠟或橄欖油)混合之軟明膠膠囊形式呈現。
某些可注射組合物為等張水溶液或懸浮液，且栓劑宜自脂肪乳液或懸浮液製備。該等組合物可經滅菌且/或含有佐劑，諸如防腐劑、穩定劑、濕潤劑或乳化劑、溶解促進劑、調節滲透壓之鹽及/或緩衝劑。另外，其亦可含有其他治療上有價值之物質。該等組合物分別根據習知混合、粒化或包衣方法製備，且含有約0.1-75%活性成分或含有約1-50%活性成分。
適用於經皮施用之組合物包括有效量之本發明化合物及適合載劑。適於經皮傳遞之載劑包括可吸收之藥理學上可接受之溶劑以有助於穿過宿主之皮膚。舉例而言，經皮裝置呈繃帶形式，其包含背襯部件、含有化合物之儲集層(視情況具有載劑)、視情況存在之速率控制障壁以在較長時期以受控及預定速率向宿主皮膚遞送化合物、及使裝置緊固於皮膚之構件。
適用於局部施用(例如施用於皮膚及眼)之組合物包括水溶液、懸浮液、軟膏、乳膏、凝膠或可噴霧調配物，例如以便藉由氣溶膠或其類似物遞送。該等局部遞送系統尤其適用於真皮施藥，例如用於治療皮膚癌，例如以日霜、洗劑、噴霧劑及其類似物形式用於預防性用途。因此，其尤其適用於此項技術中熟知之局部(包括化妝)調配物。該等物質可含有增溶劑、穩定劑、張力增強劑、緩衝劑及防腐 劑。
如本文所用，局部施藥亦可關於吸入或鼻內施藥。其宜以來自乾粉吸入器之乾粉形式(單獨、作為混合物(例如與乳糖之乾式摻合物)或混合組分粒子(例如與磷脂))，或在使用或不使用適合推進劑下來自壓力容器、泵、噴灑器、霧化器或噴霧器的氣溶膠噴霧呈遞形式傳遞。
本發明進一步提供包含本發明化合物作為活性成分之無水醫藥組合物及劑型，這是因為水可促進某些化合物降解。
本發明之無水醫藥組合物及劑型可使用無水或水分含量低之成分及低水分或低濕度條件來製備。無水醫藥組合物可經製備並儲存以維持其無水性質。因此，無水組合物使用已知可防止暴露於水之材料包裝，使得其可包括在適合配方之套組中。適合封裝之實例包括(但不限於)密封之箔、塑膠、單位劑量容器(例如小瓶)、泡殼包裝及條狀包裝。
本發明進一步提供醫藥組合物及劑型，其包含使作為活性成分之本發明化合物分解之速率降低的一或多種試劑。本文中稱為「穩定劑」之該等試劑包括(但不限於)諸如抗壞血酸之抗氧化劑、pH值緩衝劑或鹽緩衝劑等。
呈游離形式或鹽形式之式I化合物展現有價值的藥理學性質，例如PI3K調節性質，如下一個部分中所提供之活體外及活體內測試所指示，且因此表明其可用於治療或用作研究化學品，例如用作工具化合物。
本發明化合物可適用於治療其中B細胞之一或多種功能(諸如抗體產生、抗原呈遞、細胞激素產生或淋巴器官形成)為異常或為非所要之病狀、疾病或病症，包括疾病或感染相關之免疫病理病狀，包括類風濕性關節炎、尋常天疱瘡及相關疾病、特發性血小板減少性紫癜、全身性紅斑狼瘡、多發性硬化症、重症肌無力、休格連氏症候群、自體免疫性溶血性貧血、ANCA相關血管炎、冷凝球蛋白血病、血栓性血小板減少性紫癜、慢性自體免疫蕁麻疹、過敏症(異位性皮炎、接觸性皮炎、過敏性鼻炎)、古德帕斯徹氏症候群、AMR(抗體介導之移植排斥反應)、B細胞介導之超急性、急性及慢性移植排斥反應及造血源癌症，包括(但不限於)多發性骨髓瘤；急性髓性白血病；慢性髓性白血病；淋巴細胞性白血病；骨髓性白血病；非霍奇金淋巴瘤；淋巴瘤；真性紅血球增多症；原發性血小板增多症；骨髓纖維化併發髓樣化生；及瓦爾登氏疾病。
本發明包括治療其中嗜中性白血球之一或多種功能(諸如超氧化物釋放、刺激的胞外分泌或趨化性遷移)為異常或為非所要的病狀、疾病或病症的方法，包括類風濕性關節炎、敗血症、肺或呼吸道病症(諸如哮喘)、發炎性皮膚病(諸如牛皮癬)、以及疾病或感染相關之免疫病理病狀等。
本發明包括治療其中嗜鹼性細胞及肥大細胞之一或多種功能(諸如趨化性遷移或過敏原-IgE介導之去顆粒作用)為異常或為非所要的病狀、疾病或病症的方法，包括過敏性 疾病(異位性皮炎、接觸性皮炎、過敏性鼻炎)以及其他病症，諸如COPD、哮喘或肺氣腫。
本發明包括治療其中T細胞之一或多種功能(諸如細胞激素產生或細胞介導之細胞毒性)為異常或為非所要的病狀、疾病或病症的方法，包括類風濕性關節炎、多發性硬化症、細胞組織或器官移植物之急性或慢性排斥反應、或造血源癌症、以及疾病或感染相關之免疫病理病狀。
此外，本發明包括治療神經退化性疾病、心血管疾病及血小板凝集之方法。此外，本發明包括治療皮膚病(諸如遲發性皮膚紫質病、多形性光線疹、皮膚肌炎、日光性蕁麻疹、口腔扁平苔癬、脂膜炎、硬皮症、蕁麻疹性血管炎)之方法。
此外，本發明包括治療慢性發炎疾病(諸如類肉瘤病、環狀肉芽腫)之方法。
在其他實施例中，病狀或病症(例如PI3K介導)係選自由以下組成之群：真性紅血球增多症、原發性血小板增多症、骨髓纖維化併發髓樣化生、哮喘、COPD、ARDS、呂弗勒氏症候群(Loffler's syndrome)、嗜伊紅血球性肺炎、寄生性(尤其是後生動物)感染(包括熱帶性嗜伊紅血球過多症)、支氣管與肺麴菌病、結節性多動脈炎(包括徹奇-斯全司症候群(Churg-Strauss syndrome))、嗜伊紅血球性肉芽腫、由藥物反應引起的累及氣管之嗜伊紅血球相關病症、牛皮癬、接觸性皮炎、異位性皮炎、斑形脫髮、多形性紅斑、疱疹樣皮炎、硬皮病、白斑病、超敏性脈管炎、蕁麻 疹、大皰性類天疱瘡、紅斑狼瘡、天疱瘡、後天性大皰性表皮鬆解、自體免疫血液病症(例如溶血性貧血、再生障礙性貧血、純紅血球貧血及特發性血小板減少症)、全身性紅斑狼瘡、多軟骨炎、硬皮病、韋格納肉芽腫(Wegener granulomatosis)、皮肌炎、慢性活動型肝炎、重症肌無力、斯-約二氏症候群(Steven-Johnson syndrome)、特發性口炎性腹瀉、自體免疫發炎性腸病(例如潰瘍性結腸炎及克羅恩氏病(Crohn's disease))、內分泌眼病變、格雷夫氏病(Grave's disease)、類肉瘤病、肺泡炎、慢性過敏性肺炎、多發性硬化、原發性膽汁肝硬化、葡萄膜炎(前部及後部)、肺間質纖維化、牛皮癬性關節炎、絲球體腎炎、心血管疾病、動脈粥樣硬化、高血壓、深靜脈血栓形成、中風、心肌梗塞、不穩定絞痛、血栓栓塞、肺栓塞、血栓溶解疾病、急性動脈缺血、周邊血栓性閉塞及冠狀動脈病、再灌注損傷、視網膜病變(諸如糖尿病性視網膜病變或高壓氧誘發之視網膜病變)及以眼內壓升高或眼房液分泌為特徵之病狀，諸如青光眼。
在另一個實施例中，本發明化合物適用於治療、預防或改善自體免疫性疾病及發炎病狀，尤其是病因包括自體免疫組分的發炎病狀，諸如關節炎(例如類風濕性關節炎、慢性進行性關節炎及變形關節炎)及風濕性疾病，包括發炎病狀及風濕性疾病，包括骨損失、發炎性疼痛、脊柱關節病(包括僵直性脊椎炎)、萊特氏症候群(Reiter syndrome)、反應性關節炎、牛皮癬關節炎及腸病性關節 炎、超敏反應(包括氣管超敏反應及皮膚超敏反應)及過敏症。可使用本發明抗體治療之特定自體免疫疾病，包括自體免疫血液病症(包括例如溶血性貧血、再生障礙性貧血、純紅血球貧血及特發性血小板減少症)、後天性A型血友病、冷凝集素疾病、冷凝球蛋白血症、血栓性血小板減少性紫癜、休格連氏症候群、全身性紅斑狼瘡、發炎性肌肉病症、多軟骨炎、硬皮病、抗嗜中性白血球細胞質抗體相關之血管炎、IgM介導之神經病變、眼陣攣肌陣攣症候群、韋格納肉芽腫病、皮膚肌炎、慢性活動型肝炎、重症肌無力、牛皮癬、斯-約二氏症候群、尋常天疱瘡、落葉狀天疱瘡、特發性口炎性腹瀉、自體免疫發炎性腸病(包括例如潰瘍性結腸炎、克羅恩氏病及大腸急躁症)、內分泌性眼病、格雷夫氏病、類肉瘤病、多發性硬化症、視神經脊髓炎、原發性膽汁性肝硬化、青少年糖尿病(I型糖尿病)、葡萄膜炎(前部、中間及後部，以及全葡萄膜炎)、乾燥性角膜結膜炎及春季角膜結膜炎、肺間質纖維化、牛皮癬關節炎及腎絲球性腎炎(併發及不併發腎病症候群，例如包括特發性腎病症候群或最小變化腎病變)、腫瘤、皮膚及角膜之發炎疾病、肌炎、骨植入物鬆散、代謝失調(諸如動脈粥樣硬化症、糖尿病及血脂異常)。
在另一個實施例中，本發明化合物適用於治療選自由以下組成之群的病狀或病症：原發性皮膚B細胞淋巴瘤、免疫性水泡疾病、尋常天疱瘡、落葉狀天疱瘡、巴西天疱瘡之地方病形式(Fogo selvagem)、副腫瘤性天疱瘡、大皰性 類天疱瘡、黏膜類天疱瘡、後天性大皰性表皮鬆解、慢性移植物抗宿主疾病、皮膚肌炎、全身性紅斑狼瘡、血管炎、小血管血管炎、低補體性蕁麻疹性血管炎、抗嗜中性球細胞質抗體血管炎、冷凝球蛋白血症、薛尼茲氏症候群(Schnitzler syndrome)、瓦爾登氏巨球蛋白血症、血管性水腫、白斑病、全身性紅斑狼瘡、特發性血小板減少性紫癜、多發性硬化症、冷凝集素疾病、自體免疫性溶血性貧血、抗嗜中性球細胞質抗體相關之血管炎、移植物抗宿主疾病、冷凝球蛋白血症及血栓形成性血小板減少症。
因此，在另一個實施例中，本發明提供式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')、(Ib)、(Ib')(Ic)、(Ic')、(Id)、(Id')、(Ie)、(Ie')、(If)、(If')、(Ig)、(Ig')、(Ih)、(Ih')、(Ii)、(Ii')、(Ij)或(Ij')之化合物用於療法中的用途。在另一個實施例中，療法係選自藉由抑制PI3K可治療的疾病。在另一個實施例中，疾病係選自上述清單，宜選自自體免疫病症、發炎疾病、過敏性疾病、氣管疾病(諸如哮喘及COPD)、移植排斥反應；其中抗體產生、抗原呈遞、細胞激素產生或淋巴器官形成為異常或為非所要的的疾病，包括類風濕性關節炎、尋常天疱瘡、特發性血小板減少性紫癜、全身性紅斑狼瘡、多發性硬化症、重症肌無力、休格連氏症候群、自體免疫性溶血性貧血、ANCA相關血管炎、冷凝球蛋白血症、血栓性血小板減少性紫癜、慢性自體免疫蕁麻疹、過敏症(異位性皮炎、接觸性皮炎、過敏性鼻炎)、古德帕斯徹氏症候群、AMR(抗體介導之移植排斥反應)、B 細胞介導之超急性、急性及慢性移植排斥反應及造血源癌症，包括(但不限於)多發性骨髓瘤；白血病；急性髓性白血病；慢性髓性白血病；淋巴細胞性白血病；骨髓性白血病；非霍奇金淋巴瘤；淋巴瘤；真性紅血球增多症；原發性血小板增多症；骨髓纖維化併發髓樣化生；及瓦爾登氏疾病；更宜選自類風濕性關節炎(RA)、尋常天疱瘡(PV)、特發性血小板減少性紫癜(ITP)、血栓性血小板減少性紫癜(TTP)、自體免疫性溶血性貧血(AIHA)、後天性A型血友病(AHA)、全身性紅斑狼瘡(SLE)、多發性硬化症(MS)、重症肌無力(MG)、休格連氏症候群(SS)、ANCA相關血管炎、冷凝球蛋白血症、慢性自體免疫蕁麻疹(CAU)、過敏症(異位性皮炎、接觸性皮炎、過敏性鼻炎)、古德帕斯徹氏症候群、移植排斥反應及造血源癌症、以及疾病或感染相關之免疫病理病狀(例如嚴重及腦型瘧疾、錐蟲病、利什曼病、弓形蟲病及神經囊尾蚴病)。
在另一個實施例中，本發明提供一種治療可藉由抑制PI3K加以治療之疾病的方法，其包含投與治療上可接受之量的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')、(Ib)、(Ib')(Ic)、(Ic')、(Id)、(Id')、(Ie)、(Ie')、(If)、(If')、(Ig)、(Ig')、(Ih)、(Ih')、(Ii)、(Ii')、(Ij)或(Ij')之化合物。在另一個實施例中，該疾病係選自上述清單，宜選自自體免疫病症、發炎疾病、過敏性疾病、氣管疾病(諸如哮喘及COPD)、移植排斥反應；其中抗體產生、抗原呈遞、細胞激素產生或淋巴器官形成為異常或為非所要的疾病，包括類風濕性關節 炎、尋常天疱瘡、特發性血小板減少性紫癜、全身性紅斑狼瘡、多發性硬化症、重症肌無力、休格連氏症候群、自體免疫性溶血性貧血、ANCA相關血管炎、冷凝球蛋白血症、血栓性血小板減少性紫癜、慢性自體免疫蕁麻疹、過敏症(異位性皮炎、接觸性皮炎、過敏性鼻炎)、古德帕斯徹氏症候群、AMR(抗體介導之移植排斥反應)、B細胞介導之超急性、急性及慢性移植排斥反應及造血源癌症，包括(但不限於)多發性骨髓瘤；白血病；急性髓性白血病；慢性髓性白血病；淋巴細胞性白血病；骨髓性白血病；非霍奇金淋巴瘤；淋巴瘤；真性紅血球增多症；原發性血小板增多症；骨髓纖維化併發髓樣化生；及瓦爾登氏疾病；更宜選自類風濕性關節炎(RA)、尋常天疱瘡(PV)、特發性血小板減少性紫癜(ITP)、血栓性血小板減少性紫癜(TTP)、自體免疫性溶血性貧血(AIHA)、後天性A型血友病(AHA)、全身性紅斑狼瘡(SLE)、多發性硬化症(MS)、重症肌無力(MG)、休格連氏症候群(SS)、ANCA相關血管炎、冷凝球蛋白血症、慢性自體免疫蕁麻疹(CAU)、過敏症(異位性皮炎、接觸性皮炎、過敏性鼻炎)、古德帕斯徹氏症候群、移植排斥反應及造血源癌症、以及疾病或感染相關之免疫病理病狀(例如嚴重及腦型瘧疾、錐蟲病、利什曼病、弓形蟲病及神經囊尾蚴病)。
因此，在另一個實施例中，本發明提供式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')、(Ib)、(Ib')、(Ic)、(Ic')、(Id)、(Id')、(Ie)、(Ie')、(If)、(If')、(Ig)、(Ig')、(Ih)、(Ih')、(Ii)、(Ii')、 (Ij)或(Ij')之化合物用於製備藥劑的用途。在另一個實施例中，藥劑係用於治療可藉由抑制PI3K加以治療的疾病。在另一個實施例中，疾病係選自上述清單，宜選自自體免疫病症、發炎疾病、過敏性疾病、氣管疾病(諸如哮喘及COPD)、移植排斥反應；其中抗體產生、抗原呈遞、細胞激素產生或淋巴器官形成為異常或為非所要的的疾病，包括類風濕性關節炎、尋常天疱瘡、特發性血小板減少性紫癜、全身性紅斑狼瘡、多發性硬化症、重症肌無力、休格連氏症候群、自體免疫性溶血性貧血、ANCA相關血管炎、冷凝球蛋白血症、血栓性血小板減少性紫癜、慢性自體免疫蕁麻疹、過敏症(異位性皮炎、接觸性皮炎、過敏性鼻炎)、古德帕斯徹氏症候群、AMR(抗體介導之移植排斥反應)、B細胞介導之超急性、急性及慢性移植排斥反應及造血源癌症，包括(但不限於)多發性骨髓瘤；白血病；急性髓性白血病；慢性髓性白血病；淋巴細胞性白血病；骨髓性白血病；非霍奇金淋巴瘤；淋巴瘤；真性紅血球增多症；原發性血小板增多症；骨髓纖維化併發髓樣化生；及瓦爾登氏疾病；更宜選自類風濕性關節炎(RA)、尋常天疱瘡(PV)、特發性血小板減少性紫癜(ITP)、血栓性血小板減少性紫癜(TTP)、自體免疫性溶血性貧血(AIHA)、後天性A型血友病(AHA)、全身性紅斑狼瘡(SLE)、多發性硬化症(MS)、重症肌無力(MG)、休格連氏症候群(SS)、ANCA相關血管炎、冷凝球蛋白血症、慢性自體免疫蕁麻疹(CAU)、過敏症(異位性皮炎、接觸性皮炎、過敏性鼻 炎)、古德帕斯徹氏症候群、移植排斥反應及造血源癌症、以及疾病或感染相關之免疫病理病狀(例如嚴重及腦型瘧疾、錐蟲病、利什曼病、弓形蟲病及神經囊尾蚴病)。
對於約50-70 kg之個體，本發明之醫藥組合物或組合的單位劑量可具有約1-1000 mg活性成分、或約1-500 mg或約1-250 mg或約1-150 mg或約0.5-100 mg、或約1-50 mg活性成分。化合物、醫藥組合物或其組合之治療有效劑量取決於個體之物種、體重、年齡及個體狀況、所治療之病症或疾病或其嚴重程度。一般熟練之醫師、臨床醫生或獸醫容易確定每一活性成分用於預防、治療或抑制病症或疾病進展所需的有效量。
宜使用哺乳動物(例如小鼠、大鼠、狗、猴)或分離的器官、組織及其標本活體外及活體內測試證明上述劑量性質。本發明化合物可以溶液(例如水溶液)形式在活體外施用，及例如以懸浮液或水溶液形式經腸、非經腸、宜靜脈內在活體內施用。活體外劑量可介於約10-3莫耳濃度與10-9莫耳濃度之間。視投藥途徑而定，活體內治療有效量範圍可在約0.1-500 mg/kg之間，較佳在約1-100 mg/kg之間。
本發明化合物可與一或多種其他治療劑同時、在其之前或之後投與。本發明化合物可藉由相同或不同投藥途徑單獨投與或與其他藥劑在同一醫藥組合物中一起投與。
在一個實施例中，本發明提供一種產品，其包含式(I)化合物及至少一種其他治療劑作為組合製劑以在療法中同 時、分別或依序使用。在一個實施例中，療法為治療由PI3K酶活性介導的疾病或病狀。以組合製劑形式提供之產品包括組合物，其包含共同存在於同一醫藥組合物中之式(I)化合物及其他治療劑，或呈各別形式(例如呈套組形式)之式(I)化合物及其他治療劑。
在一個實施例中，本發明提供一種醫藥組合物，其包含式(I)化合物及其他治療劑。醫藥組合物視情況可包含如上文所述的醫藥學上可接受之載劑。
在一個實施例中，本發明提供一種套組，其包含兩種或兩種以上各別醫藥組合物，其中至少一種含有式(I)化合物。在一個實施例中，套組包含用於分別容納該等組合物之構件，諸如容器、分隔瓶或分隔箔包。該套組之一個實例為在錠劑、膠囊及其類似物之封裝中常用之泡殼包裝。
本發明之套組可用於例如經口及非經腸投與不同劑型，以不同給藥間隔時間投與各別組合物，或相對於彼此滴定各別組合物。為有助於順應性，本發明套組通常包含投藥說明書。
在本發明之組合療法中，本發明化合物及其他治療劑可由相同或不同製造商製造及/或調配。此外，本發明化合物及其他治療劑可一起用於組合療法中：(i)在對醫師發行組合產品之前(例如在套組包含本發明化合物及其他治療劑的情況下)；(ii)在投藥之前不久由醫師親自進行(或在醫師指導下進行)；(iii)由患者本人進行，例如在依序投與本發明化合物及其他治療劑期間。
因此，本發明提供式(I)化合物用於治療由PI3K酶活性介導之疾病或病狀的用途，其中該藥劑準備聯合另一種治療劑投與。本發明亦提供另一種治療劑用於治療由PI3K酶活性介導之疾病或病狀的用途，其中該藥劑聯合式(I)化合物投與。
本發明亦提供式(I)化合物，其用於治療由PI3K酶活性介導之疾病或病狀的方法中，其中式(I)化合物準備聯合另一種治療劑投與。本發明亦提供另一種治療劑，其用於治療由PI3K酶活性介導之疾病或病狀的方法中，其中另一種治療劑準備聯合式(I)化合物投與。本發明亦提供式(I)化合物，其用於治療由PI3K酶活性介導之疾病或病狀的方法中，其中式(I)化合物聯合另一種治療劑投與。本發明亦提供另一種治療劑，其用於治療由PI3K酶活性介導之疾病或病狀的方法中，其中另一種治療劑聯合式(I)化合物投與。
本發明亦提供式(I)化合物用於治療由PI3K酶活性介導之疾病或病狀的用途，其中患者先前(例如在24小時內)已經另一種治療劑治療。本發明亦提供另一種治療劑用於治療由PI3K酶活性介導之疾病或病狀的用途，其中患者先前(例如在24小時內)已經式(I)化合物治療。
式I化合物可作為唯一活性成分或聯合其他藥物(例如作為佐劑)投與，例如用於治療或預防同種異體移植物或異種移植物急性或慢性排斥反應或發炎性或自體免疫病症之免疫抑制劑或免疫調節劑或其他消炎劑，或化學治療劑，例如惡性細胞抗增殖劑。舉例而言，式I化合物可與以下 物質組合使用：鈣調神經磷酸酶抑制劑，例如環孢素A或FK 506；mTOR抑制劑，例如雷帕黴素(rapamycin)、40-O-(2-羥乙基)-雷帕黴素、CCI779、ABT578、AP23573、TAFA-93、拜奧莫司-7(biolimus-7)或拜奧莫司-9；具有免疫抑制性質之子囊黴素(ascomycin)，例如ABT-281、ASM981等；皮質類固醇；環磷醯胺；硫唑普林(azathioprene)；甲胺喋呤；來氟米特(leflunomide)；咪唑立賓(mizoribine)；黴酚酸或黴酚酸鹽；黴酚酸嗎啉乙酯；15-去氧史帕胍淋(15-deoxyspergualine)或其免疫抑制性同系物、類似物或衍生物；PKC抑制劑，例如WO 02/38561或WO 03/82859中所揭示者，例如實例56或70之化合物；JAK3激酶抑制劑，例如N-苄基-3,4-二羥基-亞苄基-氰基乙醯胺α-氰基-(3,4-二羥基)-]N-苄基肉桂醯胺(Tyrphostin AG 490)、靈菌紅素25-C(prodigiosin 25-C)(PNU156804)、[4-(4'-羥基苯基)-胺基-6,7-二甲氧基喹唑啉](WHI-P131)、[4-(3'-溴-4'-羥基苯基)-胺基-6,7-二甲氧基喹唑啉](WHI-P154)、[4-(3',5'-二溴-4'-羥基苯基)-胺基-6,7-二甲氧基喹唑啉]WHI-P97、KRX-211、3-{(3R,4R)-4-甲基-3-[甲基-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-胺基]-哌啶-1-基}-3-側氧基-丙腈，呈游離形式或醫藥學上可接受之鹽形式，例如單檸檬酸鹽(亦稱為CP-690,550)，或如WO 04/052359或WO 05/066156中所揭示之化合物；免疫抑制性單株抗體，例如針對白血球受體(例如MHC、CD2、CD3、CD4、CD7、CD8、CD25、CD28、CD40、CD45、CD52、CD58、 CD80、CD86或其配位體)之單株抗體；其他免疫調節化合物，例如CTLA4之細胞外域之至少一部分或其突變體(例如CTLA4之至少細胞外部分或其突變體)與非CTLA4蛋白質序列連接的重組結合分子，例如CTLA4Ig(例如命名為ATCC 68629)或其突變體，例如LEA29Y；黏著分子抑制劑，例如LFA-1拮抗劑、ICAM-1拮抗劑或ICAM-3拮抗劑、VCAM-4拮抗劑或VLA-4拮抗劑；或抗組織胺；或抗氣喘劑；或支氣管擴張劑；或血管緊張素受體阻斷劑；或抗感染劑。
在式I化合物聯合其他免疫抑制/免疫調節療法、消炎療法、化學療法或抗感染療法投與的情況下，共投與之免疫抑制性、免疫調節性、消炎性、化療或抗感染化合物的劑量當然視所用輔助藥物之類型(例如其是否為類固醇或鈣調神經磷酸酶抑制劑)、所用特定藥物、所治療之病狀等而變。
式(I)化合物亦可有利地彼此組合或與其他治療劑組合、尤其與其他抗增殖藥劑組合使用。該等抗增殖劑包括(但不限於)芳香酶抑制劑；抗雌激素；拓撲異構酶I抑制劑；拓撲異構酶II抑制劑；微管活性劑；烷基化劑；組蛋白脫乙醯基酶抑制劑；誘導細胞分化過程之化合物；環加氧酶抑制劑；MMP抑制劑；mTOR抑制劑；抗贅生性抗代謝物；鉑化合物；靶向/降低蛋白質或脂質激酶活性之化合物及其他抗血管生成化合物；靶向、降低或抑制蛋白質或脂質磷酸酶活性之化合物；戈那瑞林(gonadorelin)激動 劑；抗雄激素；甲硫胺酸胺肽酶抑制劑；雙膦酸鹽；生物反應調節劑；抗增生性抗體；肝素酶抑制劑；Ras致癌同功異型物之抑制劑；端粒酶抑制劑；蛋白酶體抑制劑；用於治療血液惡性病之藥劑；靶向、降低或抑制Flt-3活性之化合物；Hsp90抑制劑；替莫唑胺(temozolomide)(TEMODAL®)；及甲醯四氫葉酸。
如本文所用，術語「芳香酶抑制劑」係指抑制雌激素產生(亦即受質雄烯二酮及睪固酮分別轉化為雌酮及雖二醇)之化合物。該術語包括(但不限於)類固醇，尤其是阿他美坦(atamestane)、依西美坦(exemestane)及福美司坦(formestane)；且特定而言為非類固醇，尤其是胺魯米特(aminoglutethimide)、羅穀亞胺(roglethimide)、吡魯米特(pyridoglutethimide)、曲洛司坦(trilostane)、睪內酯(testolactone)、酮康唑(ketokonazole)、伏羅唑(vorozole)、法屈唑(fadrozole)、阿那曲唑(anastrozole)及來曲唑(letrozole)。依西美坦可以例如市售之形式(例如商標AROMASIN)投與。福美司坦可以例如市售之形式(例如商標LENTARON)投與。法屈唑可以例如市售之形式(例如商標AFEMA)投與。阿那曲唑可以例如市售之形式(例如商標ARIMIDEX)投與。來曲唑可以例如市售之形式(例如商標FEMARA或FEMAR)投與。胺魯米特可以例如市售之形式(例如商標ORIMETEN)投與。包含作為芳香酶抑制劑之化學治療劑之本發明組合尤其適用於治療激素受體陽性腫瘤，例如乳房腫瘤。
如本文所用，術語「抗雌激素」係指在雌激素受體層面上拮抗雌激素之作用的化合物。該術語包括(但不限於)他莫昔芬(tamoxifen)、氟維司群(fulvestrant)、雷洛昔芬(raloxifene)及雷洛昔芬鹽酸鹽。他莫昔芬可以例如市售之形式(例如商標NOLVADEX)投與。雷洛昔芬鹽酸鹽可以例如市售之形式(例如商標EVISTA)投與。氟維司群可如美國專利第4,659,516號中所揭示來調配或其可以例如市售之形式(例如商標FASLODEX)投與。包含作為抗雌激素之化學治療劑之本發明組合尤其適用於治療雌激素受體陽性腫瘤，例如乳房腫瘤。
如本文所用，術語「抗雄激素」係指能夠抑制雄激素之生物學作用的任何物質，其包括但不限於比卡魯胺(bicalutamide)(CASODEX)，其可如例如美國專利第4,636,505號中所揭示來調配。
如本文所用，術語「性腺釋素激動劑」包括但不限於阿巴瑞克(abarelix)、戈舍瑞林(goserelin)及戈舍瑞林乙酸鹽。戈舍瑞林揭示於美國專利第4,100,274號中且可以例如市售之形式(例如商標ZOLADEX)投與。阿巴瑞克可如例如美國專利第5,843,901號中所揭示來調配。
如本文所用，術語「拓撲異構酶I抑制劑」包括但不限於拓朴替康、吉瑪替康、伊立替康、喜樹鹼及其類似物、9-硝基喜樹鹼及高分子喜樹鹼結合物PNU-166148(WO 99/17804中之化合物A1)。伊立替康可以例如市售之形式(例如商標CAMPTOSAR)投與。拓朴替康可以例如市售之 形式(例如商標HYCAMTIN)投與。
如本文所用，術語「拓撲異構酶II抑制劑」包括但不限於蒽環黴素(anthracyclines)，諸如阿黴素(doxorubicin)，包括脂質體調配物，例如CAELYX；道諾黴素(daunorubicin)；表柔比星(epirubicin)；艾達黴素(idarubicin)；奈莫柔比星(nemorubicin)；蒽醌、米托蒽醌(mitoxantrone)及洛索蒽醌(losoxantrone)；及鬼臼毒素(podophillotoxines)、依託泊苷(etoposide)及替尼泊苷(teniposide)。依託泊苷可以例如市售之形式(例如商標ETOPOPHOS)投與。替尼泊苷可以例如市售之形式(例如商標VM 26-BRISTOL)投與。阿黴素可以例如市售之形式(例如商標ADRIBLASTIN或ADRIAMYCIN)投與。表柔比星可以例如市售之形式(例如商標FARMORUBICIN)投與。艾達黴素可以例如市售之形式(例如商標ZAVEDOS)投與。米托蒽醌可以例如市售之形式(例如商標NOVANTRON)投與。
術語「微管活性劑」係指微管穩定劑、微管去穩定劑及微管蛋白聚合抑制劑，包括(但不限於)紫杉烷，例如太平洋紫杉醇(paclitaxel)及多西他賽(docetaxel)；長春花生物鹼(vinca alkaloids)，例如長春花鹼(vinblastine)，尤其是硫酸長春花鹼；長春新鹼(vincristine)，尤其是硫酸長春新鹼及長春瑞濱(vinorelbine)；迪斯德莫來(discodermolides)；秋水仙鹼(cochicine)；及埃博黴素(epothilones)及其衍生物，例如埃博黴素B或D或其衍生物。太平洋紫杉醇可以例如市售的形式(例如TAXOL)投 與。多西他賽可以例如市售之形式(例如商標TAXOTERE)投與。硫酸長春花鹼可以例如市售之形式(例如商標VINBLASTIN R.P)投與。硫酸長春新鹼可以例如市售之形式(例如商標FARMISTIN)投與。迪斯德莫來可如例如美國專利第5,010,099號中所揭示獲得。亦包括埃博黴素衍生物，其揭示於WO 98/10121、美國專利第6,194,181號、WO 98/25929、WO 98/08849、WO 99/43653、WO 98/22461及WO 00/31247中。尤其較佳為埃博黴素A及/或埃博黴素B。
如本文所用，術語「烷基化劑」包括但不限於環磷醯胺(cyclophosphamide)、異環磷醯胺(ifosfamide)、美法侖(melphalan)或亞硝基脲(BCNU或Gliadel)。環磷醯胺可以例如市售之形式(例如商標CYCLOSTIN)投與。異環磷醯胺可以例如市售之形式(例如商標HOLOXAN)投與。
術語「組蛋白脫乙醯基酶抑制劑」或「HDAC抑制劑」係指抑制組蛋白脫乙醯基酶且具有抗增生活性之化合物。其包括WO 02/22577中揭示之化合物，特定而言，N-羥基-3-[4-[[(2-羥乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-胺基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯醯胺、N-羥基-3-[4-[[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙基]-胺基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯醯胺及其醫藥學上可接受之鹽。其另外尤其包括辛二醯苯胺異羥肟酸(Suberoylanilide hydroxamic acid；SAHA)。
術語「抗贅生性抗代謝物」包括但不限於5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)或5-FU；卡培他濱(capecitabine)；吉西他濱 (gemcitabine)；DNA脫甲基劑，諸如5-氮胞苷及丁西他濱(decitabine)；甲胺喋呤及依達曲沙(edatrexate)；及葉酸拮抗劑，諸如培美曲塞(pemetrexed)。卡培他濱可以例如市售之形式(例如商標XELODA)投與。吉西他濱可以例如市售之形式(例如商標GEMZAR)投與。亦包括單株抗體曲妥珠單抗(trastuzumab)，其可以例如市售之形式(例如商標HERCEPTIN)投與。
如本文所用，術語「鉑化合物」包括(但不限於)卡鉑(carboplatin)、順鉑(cis-platin)、順鉑(cisplatinum)及奧賽力鉑(oxaliplatin)。卡鉑可以例如市售之形式(例如商標CARBOPLAT)投與。奧賽力鉑可以例如市售之形式(例如商標ELOXATIN)投與。
如本文所用，術語「靶向/降低蛋白質或脂質激酶活性之化合物；或靶向/降低蛋白質或脂質磷酸酶活性之化合物；或其他抗血管生成化合物」包括(但不限於)蛋白質酪胺酸激酶及/或絲胺酸及/或蘇胺酸激酶抑制劑或脂質激酶抑制劑，例如：a)靶向、降低或抑制血小板源生長因子受體(PDGFR)活性之化合物，諸如靶向、降低或抑制PDGFR活性之化合物，尤其是抑制PDGF受體之化合物，例如N-苯基-2-嘧啶-胺衍生物，例如伊馬替尼(imatinib)、SU101、SU6668及GFB-111；b)靶向、降低或抑制纖維母細胞生長因子受體(FGFR)活性之化合物； c)靶向、降低或抑制胰島素樣生長因子受體I(IGF-IR)之活性的化合物，諸如靶向、降低或抑制IGF-IR之活性的化合物，尤其是抑制IGF-IR受體的化合物，諸如WO 02/092599中所揭示的彼等化合物；d)靶向、降低或抑制Trk受體酪胺酸激酶家族之活性的化合物；e)靶向、降低或抑制Axl受體酪胺酸激酶家族之活性的化合物；f)靶向、降低或抑制c-Met受體活性之化合物；g)靶向、降低或抑制Kit/SCFR受體酪胺酸激酶活性之化合物；h)靶向、降低或抑制C-kit受體酪胺酸激酶(PDGFR家族之一部分)活性之化合物，諸如靶向、降低或抑制c-Kit受體酪胺酸激酶家族活性之化合物，尤其是抑制c-Kit受體之化合物，例如伊馬替尼；i)靶向、降低或抑制c-Abl家族成員及其基因融合產物(例如BCR-Abl激酶)之活性的化合物，諸如靶向、降低或抑制c-Abl家族成員及其基因融合產物之活性的化合物，例如N-苯基-2-嘧啶-胺衍生物，例如伊馬替尼、PD180970、AG957、NSC 680410或PD173955(得自ParkeDavis)；j)靶向、降低或抑制蛋白激酶C(PKC)及絲胺酸/蘇胺酸激酶Raf家族之成員、MEK、SRC、JAK、FAK、PDK及Ras/MAPK家族成員或PI(3)激酶家族或PI(3)激酶相關激酶 家族成員及/或週期素依賴性激酶家族(CDK)成員之活性的化合物，且尤其為美國專利第5,093,330號中所揭示之彼等星形孢菌素(staurosporine)衍生物，例如米哚妥林(midostaurin)；其他化合物之實例包括例如UCN-01；沙芬戈(safingol)；BAY 43-9006；蘚苔抑制素1(Bryostatin 1)；哌立福新(Perifosine)；伊莫福新(Ilmofosine)；RO 318220及RO 320432；GO 6976；Isis 3521；LY333531/LY379196；異喹啉化合物，諸如WO 00/09495中所揭示之彼等物；FTIs；PD184352；或QAN697(P13K抑制劑)；k)靶向、降低或抑制蛋白質酪胺酸激酶抑制劑活性之化合物，諸如靶向、降低或抑制蛋白質酪胺酸激酶抑制劑活性之化合物，包括伊馬替尼甲磺酸鹽(GLEEVEC)或替伏汀(tyrphostin)。替伏汀較佳為低分子量(Mr<1500)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，尤其為選自亞苄基丙二腈類或S-芳基苯丙二腈類或雙受質喹啉類化合物之化合物，更尤其為選自由以下組成之群之任何化合物：替伏汀A23/RG-50810；AG 99；替伏汀AG 213；替伏汀AG 1748；替伏汀AG 490；替伏汀B44；替伏汀B44(+)對映異構體；替伏汀AG 555；AG 494；替伏汀AG 556、AG957及阿達福汀(adaphostin)(4-{[(2,5-二羥基苯基)甲基]胺基}-苯甲酸金剛烷基酯，NSC 680410，阿達福汀)；及l)靶向、降低或抑制表皮生長因子家族之受體酪胺酸激酶(EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4，作為同二聚體或雜二 聚體)之活性的化合物，諸如靶向、降低或抑制表皮生長因子受體家族之活性的化合物，尤其為抑制EGF受體酪胺酸激酶家族成員(例如EGF受體、ErbB2、ErbB3及ErbB4)或結合至EGF或EGF相關配位體的化合物、蛋白質或抗體，且尤其為以下文獻中一般及具體揭示之彼等化合物、蛋白質或單株抗體：WO 97/02266(例如實例39之化合物)，或EP 0 564 409、WO 99/03854、EP 0520722、EP 0 566 226、EP 0 787 722、EP 0 837 063、美國專利第5,747,498號、WO 98/10767、WO 97/30034、WO 97/49688、WO 97/38983及尤其是WO 96/30347(例如稱為CP 358774之化合物)、WO 96/33980(例如化合物ZD 1839)及WO 95/03283，例如化合物ZM105180，例如曲妥珠單抗(HERCEPTIN)、西妥昔單抗(cetuximab)、艾瑞莎(Iressa)、得舒緩(Tarceva)、OSI-774、CI-1033、EKB-569、GW-2016、E1.1、E2.4、E2.5、E6.2、E6.4、E2.11、E6.3或E7.6.3，及7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶衍生物，其揭示於WO 03/013541中。
其他抗血管生成化合物包括具有另一活性機制(例如與蛋白質或脂質激酶抑制作用無關)之化合物，例如沙立度胺(thalidomide)(THALOMID)及TNP-470。
靶向、降低或抑制蛋白質或脂質磷酸酶活性的化合物為例如磷酸酶1、磷酸酶2A、PTEN或CDC25之抑制劑，例如岡田井酸(okadaic acid)或其衍生物。
誘導細胞分化過程的化合物為例如視黃酸、α-、γ-或δ- 生育酚或α-、γ-或δ-生育三烯酚。
如本文所用，術語環加氧酶抑制劑包括(但不限於)例如Cox-2抑制劑、5-烷基取代之2-芳基胺基苯基乙酸及衍生物，諸如塞內昔布(celecoxib)(CELEBREX)、羅非昔布(rofecoxib)(VIOXX)、依託昔布(etoricoxib)、伐地昔布(valdecoxib)或5-烷基-2-芳基胺基苯基乙酸，例如5-甲基-2-(2'-氯-6'-氟苯胺基)苯乙酸，或羅美昔布(lumiracoxib)。
如本文所用，術語「雙膦酸鹽」包括(但不限於)依替酮酸(etridonic acid)、氯膦酸(clodronic acid)、替魯羅酸(tiludronic acid)、帕米膦酸(pamidronic acid)、阿侖膦酸(alendronic acid)、伊班膦酸(ibandronic acid)、利塞膦酸(risedronic acid)及唑來膦酸(zoledronic acid)。「依替酮酸」可以例如市售之形式(例如商標DIDRONEL)投與。「氯膦酸」可以例如市售之形式(例如商標BONEFOS)投與。 「替魯羅酸」可以例如市售之形式(例如商標SKELID)投與。「帕米膦酸」可以例如市售之形式(例如商標AREDIATM)投與。「阿侖膦酸」可以例如市售之形式(例如商標FOSAMAX)投與。「伊班膦酸」可以例如市售之形式(例如商標BONDRANAT)投與。「利塞膦酸」可以例如市售之形式(例如商標ACTONEL)投與。「唑來磷酸」可以例如市售之形式(例如商標ZOMETA)投與。
術語「mTOR抑制劑」係指抑制雷帕黴素之哺乳動物目標(mTOR)且具有抗增生活性的化合物，諸如西羅莫司(sirolimus)(Rapamune®)、依維莫司(everolimus) (CerticanTM)、CCI-779及ABT578。
如本文中所用，術語「肝素酶抑制劑」係指靶向、降低或抑制肝素硫酸鹽降解之化合物。該術語包括(但不限於)PI-88。
如本文所用，術語「生物反應調節劑」係指淋巴激素或干擾素，例如干擾素γ。
如本文所用，術語「Ras致癌性同功異型物(例如H-Ras、K-Ras或N-Ras)之抑制劑」係指靶向、降低或抑制Ras之致癌活性的化合物，例如「法呢基轉移酶抑制劑」，例如L-744832、DK8G557或R115777(Zarnestra)。
如本文所用，術語「端粒酶抑制劑」係指靶向、降低或抑制端粒酶活性之化合物。靶向、降低或抑制端粒酶活性之化合物尤其為抑制端粒酶受體之化合物，例如端粒酶抑素(telomestatin)。
如本文所用，術語「甲硫胺酸胺肽酶抑制劑」係指靶向、降低或抑制甲硫胺酸胺肽酶活性之化合物。靶向、降低或抑制甲硫胺酸胺肽酶活性之化合物為例如苯加胺(bengamide)或其衍生物。
如本文所用，術語「蛋白酶體抑制劑」係指靶向、降低或抑制蛋白酶體活性之化合物。靶向、降低或抑制蛋白酶體活性之化合物包括例如PS-341及MLN 341。
如本文所用，術語「基質金屬蛋白酶抑制劑」或(「MMP」抑制劑)包括(但不限於)膠原蛋白肽模擬及非肽模擬抑制劑、四環素衍生物，例如，氫草醯胺酸酯 (hydroxamate)肽模擬抑制劑巴馬司他(batimastat)及具有口服生物可用性之其類似物馬立馬司他(marimastat)(BB-2516)、普利司他(prinomastat)(AG3340)、美他司他(metastat)(NSC 683551)、BMS-279251、BAY 12-9566、TAA211、MMI270B或AAJ996。
如本文所用，術語「用於治療血液惡性病之藥劑」包括但不限於FMS樣酪胺酸激酶抑制劑，例如靶向、降低或抑制FMS樣酪胺酸激酶受體(Flt-3R)活性之化合物；干擾素、1-b-D-阿糖呋喃胞嘧啶(ara-c)及白消安(bisulfan)；及ALK抑制劑，例如靶向、降低或抑制間變型淋巴瘤激酶的化合物。靶向、降低或抑制FMS樣酪胺酸激酶受體(Flt-3R)活性之化合物尤其為抑制Flt-3R受體激酶家族成員之化合物、蛋白質或抗體，例如PKC412、米哚妥林、星形孢菌素衍生物、SU11248及MLN518。
如本文所用，術語「HSP90抑制劑」包括(但不限於)靶向、降低或抑制HSP90之固有ATP酶(ATPase)活性之化合物；經由泛素蛋白酶體路徑降解、靶向、降低或抑制HSP90客戶蛋白之化合物。靶向、降低或抑制HSP90之固有ATP酶活性之化合物尤其為抑制HSP90之ATP酶活性之化合物、蛋白質或抗體，例如17-烯丙胺基、17-去甲氧基格爾德黴素(17AAG)(一種格爾德黴素衍生物)；其他格爾德黴素相關化合物；根赤殼菌素(radicicol)；及HDAC抑制劑。
如本文所用，術語「抗增生性抗體」包括但不限於曲妥 珠單抗(HerceptinTM)、曲妥珠單抗-DM1、埃羅替尼(erlotinib)(TarcevaTM)、貝伐單抗(bevacizumab)(AvastinTM)、利妥昔單抗(rituximab)(Rituxan®)、PRO64553(抗CD40)及2C4抗體。抗體意謂例如完整單株抗體、多株抗體、由至少兩種完整抗體形成之多特異性抗體，及抗體片段(只要其展現所要生物活性即可)。
為治療急性骨髓性白血病(AML)，可將式(I)化合物與標準白血病療法組合使用，尤其與用於治療AML之療法組合使用。詳言之，式(I)化合物可與例如法呢基轉移酶抑制劑及/或適用於治療AML之其他藥物(諸如道諾黴素、阿黴素、Ara-C、VP-16、替尼泊苷、米托蒽醌、伊達比星、卡鉑(Carboplatinum)及PKC412)組合使用。
式(I)化合物亦可有利地彼此組合或與其他治療劑組合、尤其與其他抗瘧疾劑組合使用。此等抗瘧疾劑包括(但不限於)氯胍(proguanil)、氯丙胍(chlorproguanil)、甲氧苄啶(trimethoprim)、氯喹(chloroquine)、甲氟喹(mefloquine)、苯芴醇(lumefantrine)、阿托伐醌(atovaquone)、乙胺嘧啶-磺胺多辛(pyrimethamine-sulfadoxine)、乙胺嘧啶-達普松(pyrimethamine-dapsone)、鹵甲丙二苯(halofantrine)、奎寧(quinine)、奎尼丁(quinidine)、阿莫地喹(amodiaquine)、阿莫吡喹(amopyroquine)、磺醯胺、青蒿素(artemisinin)、阿替夫林(arteflene)、蒿甲醚(artemether)、青蒿琥酯(artesunate)、伯胺喹啉(primaquine)、吸入性NO、L-精胺酸、二丙二醇三胺氮氧 化加合物(NO供體)、羅格列酮(Rosiglitzone)(PPARγ激動劑)、活性炭、紅血球生成素、左旋咪唑(Levamisole)及咯萘啶(pyronaridine)。
式(I)化合物亦可有利地彼此組合使用或與其他治療劑(諸如用於治療利什曼病、錐蟲病、弓形蟲病及神經囊尾蚴病之治療劑)組合使用。此等藥劑包括(但不限於)氯喹硫酸鹽、阿托伐醌-氯胍、蒿甲醚-苯芴醇、奎寧硫酸鹽、青蒿琥酯、奎寧、多西環素(doxycycline)、克林達黴素(clindamycin)、葡甲胺銻酸鹽(meglumine antimoniate)、葡萄糖酸銻鈉(sodium stibogluconate)、米替福新(miltefosine)、酮康唑(ketoconazole)、戊烷脒(pentamidine)、兩性黴素B(amphotericin B)(AmB)、脂質體-AmB、巴龍黴素(paromomycine)、依氟鳥胺酸(eflornithine)、硝呋替莫(nifurtimox)、蘇拉明(suramin)、米拉索普(melarsoprol)、潑尼龍(prednisolone)、苄硝唑(benznidazole)、磺胺嘧啶(sulfadiazine)、乙胺嘧啶、克林達黴素、甲氧苄啶、新諾明(sulfamethoxazole)、阿奇黴素(azitromycin)、阿托伐醌、地塞米松(dexamethasone)、吡喹酮(praziquantel)、阿苯達唑(albendazole)、β-內醯胺、氟喹諾酮(fluoroquinolones)、大環內酯(macrolides)、胺基糖苷、磺胺嘧啶及乙胺嘧啶。
藉編碼號、通用名稱或商品名稱鑑別之活性劑之結構可自標準概要「The Merck Index」之現行版本或自資料庫(例如Patents International，例如IMS World Publications) 獲得。
可與式(I)化合物組合使用之上述化合物可如此項技術中(諸如上文引用之文獻中)所述製備及投與。
式(I)化合物亦可有利地與已知治療方法(例如投與激素或尤其輻射)組合使用。
式(I)化合物尤其可用作輻射敏化劑，尤其用於治療對輻射療法展現不良敏感性之腫瘤。
「組合」意謂呈一種單位劑型之固定組合，或組合投與之分裝部分之套組，其中式(I)化合物與組合搭配物可同時獨立地投與或在特別允許組合搭配物顯示協同(例如增效)作用或其任何組合的時間間隔內分別投與。如本文所用，術語「共投與」或「組合投與」或其類似術語意欲包括向有需要之單一個體(例如患者)投與所選組合搭配物，且意欲包括不一定藉由相同投藥途徑或同時投藥的治療方式。如本文所用，術語「醫藥組合」意謂由混合或合併一種以上活性成分所產生之產物且包括活性成分之固定及非固定組合。術語「固定組合」意謂活性成分(例如式I化合物及組合搭配物)均以單一實體或劑型同時投與患者。術語「非固定組合」意謂活性成分(例如式(I)化合物及組合搭配物)均以各別實體同時、並行或無特定時間限制地依序投與患者，其中此投藥將治療有效量之兩種化合物供應至患者體內。後者亦適用於混合療法(cocktail therapy)，例如投與三種或三種以上活性成分。
實例 實驗細節：
下列實例意欲說明本發明且不應解釋為對其進行限制。溫度以攝氏度表示。若未另外提及，則所有蒸發均在減壓下進行，通常為約15 mm Hg至100 mm Hg(=20-133毫巴)。最終產物、中間物及起始物質之結構係藉由標準分析方法確認，例如微量分析及光譜學特徵(例如MS、IR、NMR)。所用縮寫為此項技術中習知之縮寫。
合成本發明化合物所用的所有起始物質、建構組塊、試劑、酸、鹼、脫水劑、溶劑及催化劑均可購得或可藉由一般技術者已知之有機合成方法(Houben-Weyl，第4版.1952,Methods of Organic Synthesis,Thieme，第21卷)製得。此外，本發明化合物可藉由一般技術者已知之有機合成方法，如以下實例中所示製得。
所用微波設備為Biotage Initiator®。
所有化合物皆使用AutoNom來命名。
製備實例-一般程序
a)使(R)-吡咯啶-3-醇與式R4C(O)Cl之酸氯化物或式R4C(O)OH之羧酸反應以製備通式II之醯胺。熟習此項技術者將瞭解，存在許多已知的製備醯胺之方法。舉例而言，參見Mantalbetti,C.A.G.N及Falque,V.,Amide bond formation and peptide coupling,Tetrahedron,2005,61(46),第10827至10852頁及其中引用之參考文獻。使用以下一般方法i至ii。
i.羧酸及DMF(1 eq.)於DCM中之溶液在3℃下用乙二醯氯(1.5 eq.)處理1小時。反應混合物在減壓下濃縮，溶於DCM中且在3℃下添加至(R)-吡咯啶-3-醇鹽酸鹽(1.0 eq.)及Et3N(2.5 eq.)於DCM中之溶液中。所得混合物在3℃下劇烈攪拌1小時，接著在減壓下濃縮。殘餘物用EtOAc處理且過濾。殘餘物用EtOAc洗滌，且合併之濾液在減壓下濃縮且藉由急驟層析加以純化。
ii.將市售酸氯化物(1.0 eq.)於DCM中之溶液在3℃下添加至(R)-吡咯啶-3-醇鹽酸鹽(1.0 eq.)及Et3N(2.5 eq.)於DCM中之溶液中。所得混合物在3℃下劇烈攪拌1小時，接著在減壓下濃縮。殘餘物用EtOAc處理且過濾。殘餘物用EtOAc洗滌，且合併之濾液在減壓下濃縮且藉由急驟層析加以純化。
用於醯胺鍵形成反應的典型條件舉例說明於下文部分B)醯胺鍵形成條件中。
b)通式II化合物之甲磺酸酯藉由慣用條件製備，較佳由II與甲磺醯氯(2 eq.)及Et3N(2 eq.)於DCM中在0℃下反應來製備。
c)通式V化合物係由3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-醇IV與通式III化合物在50℃下、在適合鹼(諸如氫化鈉(NaH))及極性有機溶劑(諸如DMF)存在下、在惰性氣體條件下反應來製備。用於此種反應的典型條件舉例說明於下文部分C)側鏈引入條件中。
d)V與通式R2-X'之芳基鹵化物(其中X'=溴或碘)之間的布查沃德-哈特維交叉偶合反應係在慣用的布查沃德-哈特維條件下、使用Pd催化劑/配位體組合(較佳諸如Pd2(dba)3/2-(二環己基膦基)聯苯或Pd2(dba)3/2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-聯苯或雙(三-第三丁基膦)鈀)及鹼(較佳諸如NaOtBu)及有機溶劑(較佳諸如甲苯)進行。反應物較佳在約80-120℃之溫度下、較佳在110℃下攪拌且較佳在微波反應器中進行。反應較佳在諸如氮氣或氬氣之惰性 氣體下進行。最終化合物藉由正相或逆相層析加以純化。用於布查沃德-哈特維交叉偶合反應的典型條件舉例說明於下文部分A)布查沃德胺化或羥基化反應中。
a)(S)-3-((3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]-6-基)氧基)吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(化合物VIII)係藉由以下方法之一，由3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-醇IV與通式VII化合物反應來製備：i)若X=甲磺酸酯，則化合物IV與VII在適合鹼(諸如氫化鈉(NaH))及極性有機溶劑DMF存在下、在惰性氣體條件下、在室溫下反應；ii)若X=H，則通式IV與VII之化合物在較佳70℃之溫度下、在諸如THF之有機溶劑中、在惰性氣體條件下使用慣用的光延條件、較佳使用Ph3P(1.4 eq.)及DEAD(1.4 eq.)進行反應。用於此種反應的典型條件舉例說明於下文部分C)側鏈引入條件中。
b)VIII與通式R2-X'(其中X'=溴或碘)之芳基鹵化物之間的布查沃德-哈特維交叉偶合反應係在慣用的布查沃德-哈特維條件下、使用Pd催化劑/配位體組合(較佳諸如Pd2(dba)3/X-Phos、Pd2(dba)3/(rac)-BINAP、Pd(OAc)2/(rac)-BINAP或雙(三-第三丁基膦)鈀)及鹼(較佳諸如NaOtBu、Cs2CO3或K3PO4)及有機溶劑(較佳諸如甲苯、二烷或THF)進行。反應物較佳在約60-120℃之溫度下攪拌且較佳在微波反應器中進行。反應較佳在諸如氮氣或氬氣之惰性氣體下進行。用於布查沃德-哈特維交叉偶合反應的典型條件舉例說明於下文部分A)布查沃德胺化或羥基化反應中。
c)脫除通式IX化合物之N-BOC保護基的反應係在慣用的BOC保護基脫除條件下，使用可能的酸(較佳為三氟乙酸)及有機溶劑(較佳為DCM)來進行。反應較佳在室溫下進行。
d)通式X化合物與式R4C(O)Cl之酸氯化物或式R4C(O)OH之羧酸係使用慣用的醯胺偶合條件反應以製備通式VI之醯胺：除流程1步驟a)中所述之方法之外，較佳偶合試劑為HBTU、HOBt/EDC、COMU/DIPEA。偶合反應係在有機溶劑(較佳諸如DMF或DCM)中進行且最終化合物藉由正相或逆相層析加以純化。用於醯胺鍵形成反應的典型條件舉例說明於下文部分B)醯胺鍵形成條件中。
a)使用標準矽烷化程序，使用矽烷化試劑(較佳為TBDMSCl)及鹼(較佳為NaH)，在有機溶劑(較佳為THF)中在室溫下對3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-醇IV之O添加保護基。
b)XI與通式R2-X'(其中X'=溴或碘)之芳基鹵化物之間的布查沃德-哈特維交叉偶合反應係在慣用的布查沃德-哈特維條件下，使用Pd催化劑/配位體組合(較佳諸如Pd2(dba)3/X-Phos、Pd2(dba)3/二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯或雙(三-第三丁基膦)鈀)及鹼(較佳諸如NaOtBu)及有機溶劑(較佳諸如甲苯)進行。反應物較佳在約110-140℃ 之溫度下攪拌且較佳在微波反應器中進行。反應較佳在諸如氮氣或氬氣之惰性氣體下進行。用於布查沃德-哈特維交叉偶合反應的典型條件舉例說明於下文部分A)布查沃德胺化或羥基化反應中。
c)通式XII化合物之O-TBDMS保護基脫除反應係在慣用的保護基脫除條件下、較佳使用TBAF及有機溶劑(較佳為THF)來進行。反應較佳在室溫下進行。
d)使用適合鹼(較佳諸如氫化鈉(NaH)或K2CO3)及極性有機溶劑(諸如DMF)，在惰性氣體條件下，在室溫或高達100℃之高溫下，使通式XIII化合物與通式III之甲磺酸酯偶合。最終化合物藉由正相或逆相層析加以純化。用於此種反應的典型條件舉例說明於下文部分C)側鏈引入條件中。
a)通式XIII化合物(如流程3中所述製備)與通式VII化合物藉由以下方法之一進行反應：i)若X=甲磺酸酯，則化合物XIII與VII在適合鹼(諸如氫化鈉(NaH))及極性有機溶劑DMF存在下，在惰性氣體條件下，在室溫下反應；ii)若X=H，則通式XIII化合物與通式VII化合物在較佳70℃之溫度下，在惰性氣體條件下，在諸如THF之有機溶劑中使用慣用的光延條件(較佳使用Ph3P(1.4 eq.)及DEAD(1.4 eq.))反應。用於此種反應的典型條件舉例說明於下文部分C)側鏈引入條件中。
b)脫除N-BOC保護基的反應係在慣用的BOC保護基脫除條件下使用可能的酸(較佳為三氟乙酸)及有機溶劑(較佳為CH2Cl2)來進行。反應較佳在室溫下進行。
c)醯胺鍵形成係使用通式XV化合物及式R4C(O)Cl之酸氯化物或式R4C(O)OH之羧酸進行以製備通式VI之醯胺；如流程1步驟a)中所述使用慣用的醯胺鍵偶合條件。除流程1步驟a)中所述之方法之外，使用HOBt/EDC進行羧酸偶合或使用氯甲酸酯或胺甲醯氯進行偶合。偶合反應係在有機溶劑(較佳諸如DMF或DCM)中進行且最終化合物藉由正相或逆相層析加以純化。用於醯胺鍵形成反應的典型條件舉例說明於下文部分B)醯胺鍵形成條件中。
a)7-氯-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4] XVII係由7-氯-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-2-酮XVI，藉由慣用的還原法、較佳使用BH3*THF作為還原劑且較佳使用THF作為溶劑來製備。XVI係由2-氯-5-(2-甲氧基-2-側氧基乙氧基)吡啶-1-氧化物經流式硝化，隨後還原及環化而獲得。
b)XVII與通式R2-X'(其中X'=溴或碘)之芳基鹵化物之間 的交叉偶合反應係在慣用的布查沃德-哈特維條件下，使用Pd催化劑/配位體組合(較佳諸如Pd2(dba)3/X-Phos)及鹼(較佳諸如Cs2CO3)及有機溶劑(較佳諸如二烷)進行。反應物較佳在約100℃之溫度下攪拌且可在微波反應器中進行。反應較佳在諸如氮氣或氬氣之惰性氣體下進行。用於布查沃德-哈特維交叉偶合反應的典型條件舉例說明於下文部分A)布查沃德胺化或羥基化反應中。
c)XVIII之羥基化反應係使用KOH水溶液及Pd催化劑/配位體組合(較佳諸如Pd2(dba)3/四甲基-第三丁基-Xphos)及有機溶劑(較佳諸如二烷)進行。反應物較佳在約100℃之溫度下加以攪拌。反應較佳在諸如氮氣或氬氣之惰性氣體下進行。
d)通式XIX化合物與通式VII化合物之偶合反應係使用適合鹼(諸如氫化鈉(NaH)、Cs2CO3、K2CO3)及極性有機溶劑(諸如DMF)，在惰性氣體條件下，在較佳60-80℃之溫度下進行。用於此種反應的典型條件舉例說明於下文部分C)側鏈引入條件中。
e)脫除N-BOC保護基係在慣用的BOC保護基脫除條件下，使用可能的酸(較佳為三氟乙酸)及有機溶劑(較佳為CH2Cl2)來進行。反應較佳在室溫下進行。
f)醯胺鍵形成係使用通式XXI化合物與式R4C(O)Cl之酸氯化物或式R4C(O)OH之羧酸進行以製備通式XXII之醯胺；使用如流程1步驟a)中所述的慣用的醯胺鍵偶合條件，此外使用HOBt/EDC進行羧酸之偶合。偶合反應係在 有機溶劑(較佳諸如DMF或DCM)中進行且最終化合物藉由正相或逆相層析加以純化。用於醯胺鍵形成反應的典型條件舉例說明於下文部分B)醯胺鍵形成條件中。
a)7-氯-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4] XVII經羥基化而得到2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-醇XXIII的反應係使用KOH水溶液及Pd催化劑/配位體組合(較佳諸如Pd2(dba)3/四甲基-第三丁基-Xphos)及有機溶劑(較佳諸如二烷)來進行。反應物較佳在約100℃之溫度下攪拌。反應較佳在諸如氮氣或氬氣之惰性氣體下進行。
b)化合物XXIII與甲磺酸酯VII之偶合係使用適合鹼(諸 如氫化鈉(NaH))及極性有機溶劑(諸如DMF)，在惰性氣體條件下，在較佳80℃之溫度下實現。用於此種反應的典型條件舉例說明於下文部分C)側鏈引入條件中。
c)XXIV與通式R2-X'(其中X'=溴或碘)之芳基鹵化物的交叉偶合反應在慣用的布查沃德-哈特維條件下，使用Pd催化劑/配位體組合(較佳諸如Pd2(dba)3/X-Phos或Pd2(dba)3/(rac)-BINAP)及鹼(較佳諸如Cs2CO3或NaOtBu)及有機溶劑(較佳諸如二烷或甲苯)進行。反應物較佳在約100℃之溫度下攪拌且可在微波反應器中進行。反應較佳在諸如氮氣或氬氣之惰性氣體下進行。用於布查沃德-哈特維交叉偶合反應的典型條件舉例說明於下文部分A)布查沃德胺化或羥基化反應中。
d)脫除N-BOC保護基係在慣用的BOC保護基脫除條件下，使用可能的酸(較佳為三氟乙酸)及有機溶劑(較佳為CH2Cl2)進行。反應較佳在室溫下進行。
e)醯胺鍵形成係使用通式XXI化合物與式R4C(O)Cl之酸氯化物或式R4C(O)OH之羧酸進行以製備通式XXII之醯胺；使用如流程1步驟a)中所述的慣用的醯胺鍵偶合條件，或使用HOBt、HOBt/EDC或HATU進行羧酸之偶合。偶合反應係在有機溶劑(較佳諸如DMF或DCM)中進行且最終化合物藉由正相或逆相層析加以純化。用於醯胺鍵形成反應的典型條件舉例說明於下文部分B)醯胺鍵形成條件中。
一般層析資訊 LCMS方法M1(Rt M1 )
HPLC管柱尺寸：2.1×50 mm
HPLC管柱類型：Acquity UPLC HSS T3,1.8 μm
HPLC溶離劑：A)水+0.05 Vol.-%甲酸+3.75 mM乙酸銨，B)ACN+0.04 Vol.-%甲酸
HPLC梯度：2-98% B在1.4 min內，98% B 0.45 min，流量=1.2 ml/min
HPLC管柱溫度：50℃
LCMS方法M2(Rt M2 )
HPLC管柱尺寸：2.1×30 mm
HPLC管柱類型：Ascentis Express C18,2.7 μm
HPLC溶離劑：A)水+0.05 Vol.-%甲酸+3.75 mM乙酸銨，B)ACN+0.04 Vol.-%甲酸
HPLC梯度：2-98% B在1.4 min內，0.75 min 98% B，流量=1.2 ml/min
HPLC管柱溫度：50℃
LCMS方法M3(Rt M3 )
HPLC管柱尺寸：2.1×30 mm
HPLC管柱類型：Ascentis Express C18,2.7 μm
HPLC溶離劑：A)水+0.05 Vol.-%甲酸+3.75 mM乙酸銨，B)ACN+0.04 Vol.-%甲酸
HPLC梯度：2-98% B在8.5 min內，1 min 98% B，流量=1.2 ml/min
HPLC管柱溫度：50℃
LCMS方法M4(Rt M4 )
HPLC管柱尺寸：4.6×50 mm
HPLC管柱類型：SunFire C18,5 μm
HPLC溶離劑：A)水+0.1 Vol.-% TFA，B)ACN+0.1 Vol.-% TFA
HPLC梯度：5-100% B在8.0 min B內，流量=2 ml/min
HPLC管柱溫度：40℃
LCMS方法M5(Rt M5 )
HPLC管柱尺寸：0.46×25 cm
HPLC管柱類型：Chiralcel OJ-H(1189)
HPLC溶離劑：EtOH/MeOH 60：40
HPLC梯度：等度，流量=0.5 ml/min
偵測器：UV 220 nm
LCMS方法M6(Rt M6 )
HPLC管柱尺寸：2.1×30 mm
HPLC管柱類型：Ascentis Express C18,2.7 μm
HPLC溶離劑：A)水+0.05% TFA，B)ACN+0.04% TFA
HPLC梯度：2-98% B在1.4 min內，0.75 min 98% B，流量=1.2 ml/min
HPLC管柱溫度：50℃
LCMS方法M7(Rt M7 )
HPLC管柱尺寸：2.1×30 mm
HPLC管柱類型：Ascentis Express C18,2.7 μm
HPLC溶離劑：A)水+0.05% TFA，B)ACN+0.04% TFA
HPLC梯度：10-95% B在3.0 min內，1 min 95% B，流量=1.2 ml/min
HPLC管柱溫度：50℃
LCMS方法M8(Rt M8 )
HPLC管柱尺寸：2.1×30 mm
HPLC管柱類型：Ascentis Express C18 2.7 μm
HPLC溶離劑：A)水+0.05%甲酸+3.75 mM乙酸銨，B)乙腈+0.04%甲酸
HPLC梯度：10-95% B在3.0 min內，流量=1.2 ml/min
LCMS方法M9(Rt M9 )
HPLC管柱尺寸：2.1×30 mm
HPLC管柱類型：Ascentis Express C18 2.7 μm
HPLC溶離劑：A)水+0.05%甲酸+3.75 mM乙酸銨，B)乙腈+0.04%甲酸
HPLC梯度：10% B自0.0至0.5 min，接著梯度10-95% B自0.5 min至3.0 min，流量=1.2 ml/min
LCMS方法M10(Rt M10 )
HPLC管柱尺寸：2.1×50 mm
HPLC管柱類型：Acquity UPLC BEH C18 1.7 μm
HPLC溶離劑：A)水+0.1 Vol.-%甲酸，B)乙腈
HPLC梯度：20-25% B在1.00 min內，接著25-95% B在3.20 min內，接著95-100% B在0.10 min內，接著100%維持0.20 min，流量=0.7 ml/min
LCMS方法M11(Rt M11 )
HPLC管柱尺寸：2.1×50 mm
HPLC管柱類型：Acquity UPLC BEH C18 1.7 μm
HPLC溶離劑：A)水+0.1 Vol.-%甲酸，B)乙腈
HPLC梯度：5-10% B在1.00 min內，接著10-90% B在3.00 min內，接著90-100% B在0.10 min內，接著100%維持0.40 min，流量=0.7 ml/min
LCMS方法M12(Rt M12 )
HPLC管柱尺寸：2.1×30 mm
HPLC管柱類型：Ascentis Express C18 2.7 μm
HPLC溶離劑：A)水+0.1 Vol.-% TFA，B)乙腈
HPLC梯度：10-95% B在1.7 min內且以1.2 mL/min作為溶劑流量，且接著95 5 B經0.7 min，流量=1.4 mL/min.
LCMS方法M13(Rt M13 )
HPLC管柱尺寸：2.1×30 mm
HPLC管柱類型：Ascentis Express C18 2.7 μm
HPLC溶離劑：A)水+0.05%甲酸+3.75 mM乙酸銨， B)乙腈+0.04%甲酸
HPLC梯度：10-95% B在3.7 min內，流量=1.2 ml/min
LCMS方法M14(Rt M14 )
HPLC管柱尺寸：2.1×30 mm
HPLC管柱類型：Ascentis Express C18,2.7 μ m
HPLC溶離劑：A)水+0.05%甲酸+3.75 mM乙酸銨，B)乙腈+0.04%甲酸
HPLC梯度：10-95% B在1.5 min內，1 min 95% B，流量=1.2 ml/min
LCMS方法M15(Rt M15 )
HPLC管柱尺寸：0.46×25 cm
HPLC管柱類型：Chiralcel OD-H(1194)
HPLC溶離劑：己烷/EtOH 50：50+0.05% DEA
HPLC梯度：等度，流量=0.5 ml/min
偵測器：UV 220 nm
LCMS方法M16(Rt M16 )
HPLC管柱尺寸：2.1×50 mm
HPLC管柱類型：Acquity UPLC HSS T3,1.8 μm
HPLC溶離劑：A)水+0.05 Vol.-%甲酸+3.75 mM乙酸銨，B)ACN+0.04 Vol.-%甲酸
HPLC梯度：5-98% B在1.4 min內，98% B0.4 min，流量=1.0 ml/min
HPLC管柱溫度：60℃
X光粉末繞射 儀器： 方法X1
儀器：Bruker D8 GADDS Discover
照射 CuKα(40 kV,40 mA)
偵測器 HI-STAR Area偵測器
掃描範圍 6°-39°(2θ值)
熔點測定：
藉由差示掃描熱量測定法(DSC)測定熔點。使用10℃/min之加熱速率在TA Instruments DSC Q2000上記錄DSC。稱取0.6 mg樣品置於標準鋁鍋(鍋+蓋，TA 900786.901，900779.901)中。使用Thermal Advantage Q系列軟體V.2.6.0.367及Thermal Advantage軟體V4.6.9操作儀器。使用Universal Analysis V4.3A 4.3.0.6版表徵熱事件。相對於無小孔的樣品鍋量測樣品。根據以下方案處理樣品：
步驟1：在0℃平衡
步驟2：以10℃/min勻變至300℃
製備實例
在說明化合物係以針對先前實例所述之方式製備的情況下，熟習此項技術者應瞭解，可針對各特定反應修改反應時間、試劑之當量值及反應溫度，且使用不同處理或純化條件仍為必需或合乎需要的。
實例A1：(S)-(3-((4-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4] -6-基)氧基)吡咯啶-1-基)(四氫-2H-哌喃-4-基)甲酮(根據流程1) a1)(R)-(3-羥基吡咯啶-1-基)(四氫-2H-哌喃-4-基)甲酮
四氫-2H-哌喃-4-甲酸(CAS登記號5337-03-1)(0.200 g，1.537 mmol)及DMF(0.012 ml，0.154 mmol)於DCM(3 ml)中之經攪拌溶液在3℃下用乙二醯氯(0.202 ml，2.305 mmol)處理。在3℃下1小時之後，在減壓下濃縮反應混合物。殘餘物接著溶於DCM(2 ml)中，且在3℃下添加至(R)-吡咯啶-3-醇鹽酸鹽(CAS登記號104706-47-0)(0.190 g，1.537 mmol)、Et3N(0.535 ml，3.84 mmol mmol)於DCM(3 ml)中之經攪拌溶液中。在3℃下1小時之後，在減壓下濃縮反應混合物。殘餘物用EtOAc(10 ml)處理且過濾。殘餘物用EtOAc洗滌，且合併之濾液在減壓下濃縮。粗產物藉由矽膠急驟層析(DCM/甲醇梯度)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物。
ESIMS：200[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 4.61-4.50(m,1H),4.10-4.02 (m,2H),3.77-3.40(m,6H),2.70-2.53(m,1H),2.20-1.85(m,4H),1.75-1.69(m,3H)。
替代方法a2：使用市購酸氯化物，如丙醯氯(CAS登記號79-03-8)，而非當場製備酸氯化物。
b1)(R)-1-(四氫-2H-哌喃-4-羰基)吡咯啶-3-基甲烷磺酸酯
(R)-(3-羥基吡咯啶-1-基)(四氫-2H-哌喃-4-基)甲酮(0.245 g，1.230 mmol)於DCM(10 ml)中之經攪拌溶液在0℃下用Et3N(0.343 ml，2.459 mmol)及甲烷磺醯氯(0.192 ml，2.459 mmol)處理。在0℃下1小時之後，添加水(20 ml)。有機層用飽和NaCl溶液(20 ml)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。粗產物藉由乙醚濕磨來純化，得到呈白色固體狀之標題化合物。
ESIMS：278[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 5.40-.5.29(m,1H),4.10-4.02(m,2H),3.94-3.87(m,1H),3.82-3.56(m.3H),3.52-3.41(m,2H),3.11-3.04(m,3H),2.70-2.10(m,3H),2.02-2.87(m,2H),1.72-1.57(m,2H)。
c1)(S)-(3-((3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4] -6-基)氧基)吡咯啶-1-基)(四氫-2H-哌喃-4-基)甲酮
3,4-二氫-2H-苯并-6-醇(CAS登記號26021-57-8)(0.140 g，0.926 mmol)於DMF(3 ml)中之經攪拌溶液在室溫下用氫化鈉(60%，於礦物油中，0.445 g，1.111 mmol)處理。在室溫下10分鐘之後，添加(R)-1-(四氫-2H-哌喃-4-羰基)吡咯啶-3-基甲烷磺酸酯(0.283 g，1.019 mmol)。將 小瓶封蓋且加熱至50℃維持3小時。隨後，在減壓下濃縮反應混合物。將殘餘物溶於EtOAc(50 ml)中，且添加水(50 ml)。有機層用飽和NaCl溶液(20 ml)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。粗產物藉由矽膠急驟層析(DCM/甲醇梯度)純化，得到呈灰色非晶形固體狀之標題化合物。
HPLC RtM10=2.07 min；ESIMS：333[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 6.55-6.50(m,1H),6.15-6.11(m,1H),6.07-6.00(m,1H),5.77(br s,1H),4.88-4.74(m,1H),4.06-4.01(m,2H),3.90-3.22(m,10H),2.75-2.58(m,1H),2.15-1.95(m,2H),1.65-1.45(m,4H)。
d1)(S)-(3-((4-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4] -6-基)氧基)吡咯啶-1-基)(四氫-2H-哌喃-4-基)甲酮
(S)-(3-((3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]-6-基)氧基)吡咯啶-1-基)(四氫-2H-哌喃-4-基)甲酮(0.050 g，0.150 mmol)於甲苯(1 ml)中之經攪拌溶液在室溫下、在氬氣下用5-溴-2-甲氧基-3-甲基吡啶(CAS登記號760207-87-2)(0.030 g，0.150 mmol)、NaOtBu(0.022 g，0.226 mmol)、2-(二環己基膦基)聯苯(CAS登記號247940-06-3)及Pd2(dba)3(0.004 g，0.005 mmol)處理。將反應小瓶封蓋且在微波反應器中加熱至110℃維持3小時。隨後，在減壓下濃縮反應混合物。粗產物藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc梯度)純化，得到呈灰白色固體狀之標題化合物。
HPLC RtM10=2.85 min；ESIMS：454[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CD3OD)：δ 7.90-7.85(m,1H),7.49-7.44(m,1H),6.76-6.69(m,1H),6.32-6.24(m,1H),6.07-6.02(m,1H),4.86-4.73(m,1H),4.29-4.23(m,2H),4.02-3.92(m,5H),3.80-3.40(m,8H),2.85-2.60(m,1H),2.25-1.91(m,5H),1.85-1.50(m,4H)。
替代方法d2：2-(二環己基膦基)聯苯(CAS登記號247940-06-3)用2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯(CAS登記號564483-18-7)置換。
替代方法d3：2-(二環己基膦基)聯苯(CAS登記號247940-06-3)及Pd2(dba)3用雙(三-第三丁基膦)鈀(CAS登記號53199-31-8)置換。
實例A2至A43：表1中所列之化合物藉由類似於實例A1所用的程序製備。
實例B1：{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮(根據流程2)
a)(S)-3-(3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基)-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯
3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-醇(CAS登記號26021-57-8)(4.0 g，26.5 mmol)於DMF(150 ml)中之溶液在20℃下用NaH(2.117 g，52.9 mmol)處理20分鐘。添加(R)-3-甲烷磺醯基氧基-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(CAS登記號127423-61-4)(9.13 g，34.4 mmol)。在室溫下攪拌22小時之後，將反應混合物濃縮至乾燥，接著用EtOAc溶解，經hyflo過濾且濾液用飽和Na2CO3水溶液洗滌。合併之有機層用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且蒸發。粗產物藉由矽膠急驟層析(環己烷/異丙醇100：0至85：15，在40分鐘內)純化，得到 呈黃色油狀之標題化合物。
HPLC RtM8=1.84 min；ESIMS：321[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO)：6.52(d,1H),6.12(d,1H),6.02(m,1H),5.76(m,1H),4.75(br s,1H),4.01-40.5(m,2H),3.27-3.50(m,4H),3.22-3.26(m,2H),1.95-2.08(m,2H),1.39(m,9H)。
b)(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯
對(S)-3-(3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基)-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(2.12 g，6.62 mmol)、5-溴-2-甲烷磺醯基-3-甲基-吡啶(中間物IA1)(2.091 g，7.94 mmol)、NaOtBu(1.272 g，13.23 mmol)、XPhos配位體(0.158 g，0.331 mmol)及Pd2(dba)3(0.303 g，0.331 mmol)於二烷(3.5 ml)中之混合物進行除氣且在110℃下攪拌12小時。添加飽和NaHCO3水溶液且反應混合物用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且蒸發。粗產物藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 100：0至50：50純化，得到標題化合物。
HPLC RtM14=1.25 min；ESIMS：490[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.33(d,1H),7.43(d,1H),6.86(d,1H),6.59(d,1H),6.47(m,1H),4.69-4.73(m,12H),4.23-4.28(m,2H),3.73-3.78(m,2H),3.41-3.58(m,4H),3.34(s,3H),2.69(s,3H),1.96-2.17(m,2H),1.46(s,9H)。
c)4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-6-((S)-吡咯啶-3-基氧基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]
(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(1.5 g，3.06 mmol)及TFA(0.236 ml，3.06 mmol)於DCM(15 ml)中之溶液在室溫下攪拌1小時。反應混合物冷卻至0℃，添加飽和Na2CO3溶液且反應混合物用DCM萃取。合併之有機層經Na2SO4乾燥，過濾且蒸發，得到標題化合物。
HPLC RtM2=0.66 min；ESIMS：390[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.33(d,1H),7.43(d,1H),6.86(d,1H),6.58(d,1H),6.47(m,1H),4.68(m,1H),4.22-4.27(m,2H),3.73-3.78(m,2H),3.33(s,3H),3.12-3.22(m,2H),2.86-3.04(m,2H),2.68(s,3H),1.88-2.08(m,2H)。
d){(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮
4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-6-((S)-吡咯啶-3-基氧基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4](0.085 g，0.218 mmol)、四氫-2H-哌喃-4-甲醯氯(CAS登記號40191-32-0)(0.049 mg，0.327 mmol)及Et3N(0.046 ml，0.327 mmol)於DCM(4 ml)中之混合物在室溫下攪拌15分鐘。將反應混合物濃縮至乾燥。粗產物藉由製備型RP-HPLC(SunFire C18管柱，H2O+0.1% TFA/ACN+0.1% TFA 90：10至30：70，在12分鐘 內)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物。
HPLC RtM7=1.62 min；ESIMS：502[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO)：δ 8.38-8.42(m,1H),7.72(m,1H),6.84(d,1H),6.67(m,1H),6.50-6.57(m,1H),4.82-4.94(m,1H),4.20(m,2H),3.31(s,3H),3.28-3.88(m,10H),2.59-2.73(m,1H),2.56(s,3H),1.95-2.13(m,2H),1.44-1.62(m,4H)。
實例B2至B122：表2中所列之化合物藉由類似於實例B1所用的程序製備。
實例C1：2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4] -4-基}-菸腈(根據流程3)
a)6-(第三丁基-二甲基-矽烷基氧基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]
在氬氣下，向3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-醇(CAS登記號26021-57-8)(5.60 g，37.0 mmol)於THF(200 ml)中之溶液中逐份添加NaH(2.96 g，74.1 mmol)。在室溫下攪拌20分鐘之後，緩慢添加TBDMSCl(CAS登記號18162-48-6)(7.26 g，48.2 mmol)且繼續攪拌1小時。反應混合物用Et2O稀釋，用飽和NaHCO3水溶液及鹽水洗滌。有機相經MgSO4乾燥，濃縮且在矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 100：0至60：40，歷時15分鐘)之後獲得呈黃色油狀之標題化合物 (9.20 g，94%產率)。
HPLC RtM10=3.65 min；ESIMS：266[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 6.46(d,1H),6.08(d,1H),5.91(m,1H),5.71(br s,1H),3.91-4.12(m,2H),3.12-3.28(m,2H),0.87-1.01(s,9H),0.03-0.21(s,3H)。
b)5-[6-(第三丁基-二甲基-矽烷基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4] -4-基]-2-甲氧基菸腈
在氬氣下，將XPhos(CAS登記號564483-18-7)(0.79 g，1.7 mmol)及Pd2(dba)3(CAS登記號51364-51-3)(1.52 g，1.7 mmol)添加至6-(第三丁基-二甲基-矽烷基氧基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4](9.00 g，33.2 mmol)、5-溴-2-甲氧基-菸腈(CAS登記號941294-54-8)(7.79 g，36.6 mmol)、NaOtBu(4.79 g，49.8 mmol)於甲苯(270 ml)中之懸浮液中。反應混合物在110℃下攪拌1小時且濃縮，得到褐色固體，用DCM/MeOH(8：2)之混合物洗滌且濾出。濃縮濾液，所得殘餘物溶於DCM/MeOH(8：2)中，經hyflo過濾，濃縮濾液且於MeOH中濕磨，得到呈黃色固體狀之標題化合物(10.14 g，77%產率)。
HPLC RtM11=3.89 min；ESIMS：398[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.35-8.51(m,1H),8.16-8.31(m,1H),6.60-6.79(m,1H),6.15-6.32(m,1H),5.92-6.09(m,1H),4.00(s,3H),3.51-3.74(m,2H),0.87(s,9H),0.07(s,6H)。
c)5-(6-羥基-2,3-二氫-苯并[1,4] -4-基)-2-甲氧基-菸腈
將TBAF(1 M，於THF中)(37.7 ml，37.7 mmol)添加至5-[6-(第三丁基-二甲基-矽烷基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基]-2-甲氧基-菸腈(10 g，25.2 mmol)溶於THF(200 ml)中之溶液中。在室溫下攪拌溶液30分鐘，用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO3水溶液及鹽水洗滌。水層用EtOAc反萃取，濃縮有機相，經MgSO4乾燥之後，得到褐色殘餘物，將其溶於DCM/MeOH(1：1)中且經hyflo過濾。濃縮且用Et2O濕磨濾液，得到呈褐色固體狀之標題化合物(6.63 g，93%產率)。
HPLC RtM10=2.56 min；ESIMS：284[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.70(br.s,1H),8.44(d,1H),8.28(d,1H),6.62(d,1H),6.12(m,1H),6.01(d,1H),4.11-4.32(m,2H),4.01(s,3H),3.54-3.68(m,2H)。
d)2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4] -4-基}-菸腈
在氬氣下，將NaH(31 mg，0.78 mmol)添加至5-(6-羥基-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基)-2-甲氧基-菸腈(100 mg，0.35 mmol)於DMF(2 ml)中之溶液中且在室溫下攪拌5分鐘。添加甲烷磺酸(R)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基酯(中間物IC1)(98.0 mg，0.35 mmol)且在50℃下攪拌反應混合物4小時。冷卻之後，添加NaH(0.5 eq.，8.47 mg，0.21 mmol)，在室溫下攪拌反應混合物5分鐘且添加甲烷磺酸(R)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基酯(中間物IC1)(49.0 mg，0.18 mmol)。在50℃下攪拌反應混合物1小時。 濃縮且藉由製備型RP-HPLC(Sunfire PrepC18 OBD 30×100 mm,5 μm；溶劑A：H2O+0.1 Vol.% TFA；溶劑B：CH3CN+0.1 Vol.% TFA)純化，將合併之溶離份鹼化且用EtOAc萃取之後，得到呈黃色固體狀之標題化合物(72 mg，43%產率)。
HPLC RtM10=2.72 min；ESIMS：465[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CD3OD)：δ 8.36(d,1H),8.06(t,1H),6.78(m,1H),6.37(m,1H),6.17(m,1H),4.81(br s,1H),4.17-4.37(m,2H),4.08(s,3H),3.90-4.03(m,2H),3.56-3.81(m,5H),3.39-3.54(m,3H),2.59-2.89(m,1H),1.87-2.29(m,2H),1.48-1.87(m,4H)。
實例C2至C26：表3中所列之化合物藉由類似於實例C1所用的程序製備。
實例D1：(S)-2-甲氧基-5-(6-((1-(1-甲基-1H-咪唑-4-羰基)吡咯啶-3-基)氧基)-2H-苯并[b][1,4] -4(3H)-基)菸腈(根據流程4) a1)6-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]
3,4-二氫-2H-1,4-苯并-6-醇(CAS登記號226021-57-8)(6.00 g，39.70 mmol)於THF(200 ml)中之經攪拌溶液在室溫下用氫化鈉(60%，於礦物油中，3.18 g，79.00 mmol)處理。在室溫下20分鐘之後，添加TBDMSCl(7.78 g，51.6 mmol)，且反應混合物在室溫下攪拌1.5小時。隨後，添加乙醚(500 ml)及飽和NaHCO3水溶液(100 ml)。水層用乙醚萃取，且合併之有機萃取物經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。粗產物藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc梯度)純化，得到呈黃色油狀之標題化合物。
HPLC RtM11=3.37 min；ESIMS：266[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 6.48-6.44(m,1H),6.09-6.05(m,1H),5.94-5.89(m,1H),5.76-5.70(m,1H),4.06-4.00(m,2H),3.25-3.19(m,2H),0.92(s,9H),0.12(s,6H)。
b1)5-(6-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)-2H-苯并[b][1,4] -4(3H)-基)-2-甲氧基菸腈
6-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4](8.88 g，32.80 mmol)於甲苯(270 ml)中之經攪拌溶液在室溫下在氬氣下用5-溴-2-甲氧基菸腈(CAS登記 號941294-54-8)(7.68 g，36.10 mmol)、NaOtBu(4.87 g，49.2 mmol)、2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯(CAS登記號564483-18-7)(0.806 g，1.64 mmol)及Pd2dba3(1.501 g，1.64 mmol)處理。反應混合物加熱至110℃並維持1.5小時。隨後，在減壓下濃縮反應混合物。殘餘物溶於DCM(200 ml)中，經矽藻土墊過濾，且在減壓下濃縮。殘餘物溶於MeOH中，且超音波處理若干次，得到黃色/橙色沈澱物。過濾殘餘物，用甲醇洗滌，且在真空下乾燥，得到呈黃色固體狀之標題化合物。
HPLC RtM11=3.90 min；ESIMS：398[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.45-8.42(m,1H),8.28-8.24(m,1H),6.72-6.68(m,1H),6.24-6.19(m,1H),6.06-6.03(m,1H),4.24-4.18(m,2H),4.00(s,3H),3.66-3.61(m,2H),0.87(s,9H),0.07(s,6H)。
替代方法b2：二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯(CAS登記號564483-18-7)及Pd2(dba)3用雙(三-第三丁基膦)鈀(CAS登記號53199-31-8)置換。
c1)5-(6-羥基-2H-苯并[b][1,4] -4(3H)-基)-2-甲氧基菸腈
5-(6-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)-2H-苯并[b][1,4]-4(3H)-基)-2-甲氧基菸腈(10.85 g，27.30 mmol)於四氫呋喃(220 ml)中之經攪拌溶液在室溫下用TBAF(1.0 M，於THF中，40.9 ml，40.90 mmol)處理。在室溫下40分鐘之後，添加EtOAc(300 ml)及飽和NaHCO3水溶液(200 ml)。有機萃取物經MgSO4乾燥，過濾且在減壓 下濃縮。粗產物藉由乙醚濕磨來純化，得到呈淺褐色固體狀之標題化合物。
HPLC RtM11=2.00 min；ESIMS：284[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.71(s,1H),8.44(d,1H),8.29(d,1H),6.61(d,1H),6.12(dd,1H),6.01(d,1H),4.21-4.16(m,2H),4.01(s,3H),3.64-3.59(m,2H)。
d1)(S)-3-((4-(5-氰基-6-甲氧基吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4] -6-基)氧基)吡咯啶-1-甲酸第三丁酯
5-(6-羥基-2H-苯并[b][1,4]-4(3H)-基)-2-甲氧基菸腈(3.70 g，13.06 mmol)於DMF(60 ml)中之經攪拌溶液在室溫下用氫化鈉(60%，於礦物油中，1.31 g，32.70 mmol)處理。反應混合物在室溫下攪拌15分鐘。隨後，添加(R)-1-Boc-3-甲烷磺醯氧基吡咯啶(CAS登記號141699-57-2)(5.36 g，19.59 mmol)，且在50℃下攪拌反應混合物3小時。隨後，在減壓下濃縮反應混合物。粗產物藉由矽膠急驟層析(環己烷/丙酮梯度)純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物。
HPLC RtM11=3.13 min；ESIMS：453[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.31(d,1H),7.81(d,1H),6.82(d,1H),6.32(dd,1H),6.14(d,1H),4.74-4.68(m,1H),4.32-4.28(m,2H),4.09(s,3H),3.67-3.62(m,2H),3.59-3.39(m,4H),2.17-1.92(m,2H),1.47(s,9H)。
替代方法d2：使用方法CC4中所述之光延條件，將甲磺酸化醇、氫化鈉及DMF用相應的羥基異唑啶、DEAD及 THF置換。
e1)(S)-2-甲氧基-5-(6-(吡咯啶-3-基氧基)-2H-苯并[b][1,4] -4(3H)-基)菸腈
(S)-3-((4-(5-氰基-6-甲氧基吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]-6-基)氧基)吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(4.35 g，9.32 mmol)於DCM(160 ml)中之經攪拌溶液在室溫下用TFA(35.9 ml，466 mmol)處理。反應混合物在室溫下攪拌2小時。隨後，在減壓下濃縮反應混合物。殘餘物溶於DCM(500 ml)中，且添加飽和NaHCO3水溶液(500 ml)。有機萃取物用飽和NaCl水溶液(50 ml)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。粗產物(標題化合物，黃色固體)不經進一步純化即可用於下一步驟。
HPLC RtM10=2.06 min；ESIMS：353[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.31(d,1H),7.82(d,1H),6.82(d,1H),6.32(dd,1H),6.12(d,1H),4.71-4.65(m,1H),4.32-4.27(m,2H),4.09(s,3H),3.67-3.62(m,2H),3.22-2.90(m,4H),2.08-1.88(m,2H)。
f1)(S)-2-甲氧基-5-(6-((1-(1-甲基-1H-咪唑-4-羰基)吡咯啶-3-基)氧基)-2H-苯并[b][1,4] -4(3H)-基)菸腈
1-甲基-1H-咪唑-4-甲酸(CAS登記號41716-18-1)(0.578 g，4.45 mmol)於DMF(40 ml)中之經攪拌溶液在室溫下用HOBT(0.695 g，4.45 mmol)、EDC(0.870 g，4.45 mmol)及Et3N(1.24 ml，8.90 mmol)處理。反應混合物在室溫下攪拌15分鐘。隨後，添加(S)-2-甲氧基-5-(6-(吡咯啶-3-基 氧基)-2H-苯并[b][1,4]-4(3H)-基)菸腈(1.10 g，2.97 mmol)，且反應混合物在室溫下攪拌3小時15分鐘。隨後，在減壓下濃縮反應混合物。殘餘物溶於DCM(200 ml)中，且添加飽和NaHCO3水溶液(200 ml)。有機萃取物經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。粗產物藉由矽膠急驟層析(DCM/甲醇梯度)及製備型HPLC(SunFire C18管柱，CH3CN/1% TFA/H2O梯度，純溶離份用DCM及飽和NaHCO3水溶液處理；合併之有機萃取物經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮)純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物。
HPLC RtM10=2.27 min；ESIMS：461[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.46-8.41(m,1H),8.30-8.26(m,1H),7.66-7.59(m,2H),6.77-6.72(m,1H),6.37-6.29(m,1H),6.14-6.07(m,1H),4.90-4.79(m,1H),4.25-4.11(m,3H),3.99(s,3H),3.98-3.78(m,1H),3.70-3.41(m,7H),2.10-1.93(m,2H)。
替代方法f2：羧酸、HOBT、EDC及DMF用羧酸氯化物及DCM置換。
替代方法f3：羧酸、HOBT、EDC及DMF用氯甲酸酯及DCM置換。
替代方法f4：羧酸、HOBT及EDC用胺甲醯氯置換。
實例D2至D40：表4中所列之化合物藉由類似於實例D1所用的程序製備。
實例E1：{(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4] -7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮(根據流程5)
a)7-氯-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]
7-氯-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-2-酮(CAS登記號928118-43-8)(630 mg，3.41 mmol)及BH3*THF(1 M，於THF中)(10.2 ml，10.2 mmol)於THF(20 ml)中之混合物在80℃下攪拌2小時。反應混合物用MeOH淬滅，添加1 M NaOH水溶液且用EtOAc萃取混合物。合併之有機層用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且蒸發。粗產物藉由矽膠急驟層析(庚烷/EtOAc 100：0至50：50，在12分鐘內)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(432 mg，74%產率)。
HPLC RtM1=0.47 min；ESIMS：171[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 7.74(s,1H),6.46(s,1H),4.43(br s,1H)4.21-4.25(m,2H),3.48-3.51(m,2H)。
b)7-氯-1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-
用氬氣對7-氯-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4](127 mg，0.74 mmol)、5-溴-2-甲氧基-3-甲基吡啶(CAS登記號760207-87-2)(0.196 g，0.986 mmol)、Cs2CO3(534 mg，1.64 mmol)及XPhos(28 mg，0.06 mmol)於二烷(3.5 ml)中之混合物除氣且添加Pd2(dba)3(27 mg，0.03 mmol)。在100℃下攪拌3.5小時之後，反應混合物經hyflo過濾，添加飽和NaHCO3水溶液且混合物用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且蒸發。粗產物藉由矽膠急驟層析(庚烷/EtOAc 95：5至40：60，在14分鐘內)純化，得到呈淺色固體狀之標題化合物(190 mg，87%產率)。
HPLC RtM1=1.04 min；ESIMS：292[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 7.94(d,1H),7.80(s,1H),7.31(d,1H),6.31(s,1H),4.34-4.37(m,2H),4.01(s,3H),3.68-3.72(m,2H),2.24(s,3H)。
c)1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4] -7-醇
用氬氣對7-氯-1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4](190 mg，0.65 mmol)、四甲基-第三丁基-XPhos(13 mg，0.03 mmol)於二烷(3 ml)及5 M KOH水溶液(0.04 ml，1.95 mmol)中之混合物進行除氣且添加Pd2(dba)3(6 mg，0.01 mmol)。在100℃下攪拌17.5小時之後，反應混合物經hyflo過濾，濾液經Na2SO4乾燥，過濾且蒸發。粗產物藉由矽膠急驟層析(EtOAc/MeOH 100：0至85：15，在17分鐘內)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(111 mg，62%產率)。
HPLC RtM1=0.67 min；ESIMS：274[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 10.32(br s,1H),8.02(d,1H),7.62(m,1H),6.89(s,1H),4.84(s,1H),4.17-4.21(m,2H),3.91(s,3H),3.61-3.66(m,2H),2.17(s,3H)。
d)(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4] -7-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯
1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-醇(111 mg，0.41 mmol)於DMF(3 ml)中之溶液在20℃下用NaH(33 mg，0.81 mmol)處理10分鐘。添加(R)-3-甲烷磺醯基氧基-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(CAS 登記號127423-61-4)(162 mg，0.61 mmol)。在60℃下攪拌19小時且在80℃下攪拌18小時之後，添加飽和NaHCO3水溶液且反應混合物用TBME萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且蒸發。粗產物藉由矽膠急驟層析(庚烷/EtOAc 93：7至40：60，在13.5分鐘內)純化，得到呈淺黃色油狀之標題化合物(107 mg，59%產率)。
HPLC RtM1=1.21 min；ESIMS：443[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 7.93(d,1H),7.61(br s,1H),7.32(br s 1H),5.71(s,1H),5.41(br s,1H),4.32(br s,2H),3.99(s,3H),3.65-3.70(m,2H),3.37-3.61(m,4H),2.23(s,3H),1.58(s,9H),0.82-0.97(m,2H)。
e)1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-7-((S)-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]
(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]--7-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(103 mg，0.23 mmol)及TFA(0.179 ml，2.33 mmol)於DCM(1.8 ml)中之溶液在室溫下攪拌18小時。添加飽和Na2CO3水溶液且反應混合物用DCM萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且蒸發，得到呈淺黃色泡沫狀之標題化合物(72 mg，90%產率)。
HPLC RtM1=0.64 min；ESIMS：343[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 7.93(d,1H),7.62(s,1H),7.32(m,1H),5.70(s,1H),5.29-5.35(m,1H),4.29-4.33(m,2H),3.99(s,3H),3.65-3.69(m,2H),2.82-3.14(m, 4H),2.22(s,3H),1.80-2.10(m,2H)。
f){(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4] -7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮
1-甲基-1H-咪唑-4-甲酸(CAS登記號41716-18-1)(15 mg，0.12 mmol)、HBTU(53 mg，0.14 mmol)及DIPEA(0.025 ml，0.14 mmol)於DMF(0.6 ml)中之混合物在室溫下攪拌5分鐘。添加1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-7-((S)-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4](0.037 g，0.11 mmol)於DMF(0.6 ml)中之溶液。在室溫下攪拌20小時之後，添加水且反應混合物用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且蒸發。粗產物藉由製備型RP-HPLC(SunFire C18管柱，H2O+0.1% TFA/ACN+0.1% TFA 90：10至60：40，在16分鐘內)純化，得到呈淺黃色泡沫狀之標題化合物(24 mg，49%產率)。
HPLC RtM1=0.74 min；ESIMS：451[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO)：δ 8.00(m,1H),7.58-7.63(m,3H),7.53(d,1H),5.51(d,1H),5.29-5.40(m,1H),4.23-4,29(m,2H),3.99(s,3H),3.77-4.19(m,2H),3.66(m,5H),3.39-3.63(m,2H),2.15(s,3H),1.89-2.11(m,2H)。
實例E2至11：表5中所列之化合物藉由類似於實例E1所用的程序製備。
參考實例E12至E13：表5a中所列之化合物藉由類似於實例E1中所用的程序，應用適當的保護基策略製備。
實例F1：(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4- b][1,4] -7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮(根據流程6)
a)7-氯-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]
7-氯-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-2-酮(CAS登記號928118-43-8)(3.70 g，20 mmol)於THF(63 ml)中之溶液用BH3*THF(1 M，於THF中，47 ml，47 mmol)處理。反應 混合物在75℃下攪拌1小時，接著冷卻至室溫且用甲醇(24 ml，600 mmol)淬滅。在減壓下濃縮反應混合物且殘餘物用EtOAc溶解且用飽和NaHCO3水溶液洗滌。有機層經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到呈淺黃色固體狀之標題產物(3.3 g，96%產率)。
UPLC RtM1=0.47 min；ESIMS：171[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 7.53(s,1H),7.11(br s,1H),6.47(s,1H),4.09(t,2H),3.17-3.38(m,2H)。
b)2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4] -7-醇
用氮氣對7-氯-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4](1.08 g，6.33 mmol)、KOH水溶液(1.07 g，19 mmol KOH，於5.4 ml水中)、98% 2-二-第三丁基膦基-3,4,5,6-四甲基-2',4',6-三異丙基聯苯(0.30 g，0.63 mmol)及Pd2(dba)3(0.29 g，0.32 mmol)於二烷(32.5 ml)中之混合物除氣三次，將管密封且反應混合物在100℃下攪拌5小時。冷卻至室溫之後，反應混合物經hyflo過濾，用EtOAc及甲醇沖洗。濃縮濾液且在矽膠急驟層析(DCM/MeOH，98：2至75：25)之後，獲得呈橙色殘餘物形式之標題化合物(660 mg，69%產率)。
UPLC RtM1=0.34 min；ESIMS：153[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 10.33(br s,1H),7.03(br s,1H),6.71(s,1H),5.15(s,1H),3.95(t,2H),3.25(m,2H)。
c)(S)-3-(2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4] -7-基氧基)- 吡咯啶-1-甲酸第三丁酯
2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-醇(0.66 g，4.34 mmol)及(R)-3-甲烷磺醯基氧基-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(CAS登記號127423-61-4)(1.73 g，6.51 mmol)於DMF(40 ml)中之無水溶液用氫化鈉(60%，於礦物油中，0.21 g，8.68 mmol)處理且反應混合物在80℃下攪拌18小時。冷卻至室溫之後，反應混合物用TBME稀釋且用飽和NaHCO3水溶液洗滌。有機層經MgSO4乾燥，過濾，濃縮且在矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc，95：5至30：70)之後，獲得呈黃色油狀之標題化合物(1.035 g，75%純度，56%產率)。
UPLC RtM1=0.65 min；ESIMS：322[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 7.54(s,1H),5.86(s,1H),5.42(br s,1H),4.25-4.41(m,1H),4.19(t,2H),3.38-3.66(m,6H),2.00-2.18(m,2H),1.46(d,9H)。
d)(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4] -7-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯
(S)-3-(2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基)-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(254 mg，0.79 mmol)、5-溴-2-甲氧基-3-甲基吡啶(CAS登記號760207-87-2)(208 mg，1.03 mmol)、XPhos(30 mg，0.06 mmol)及NaOtBu(167 mg，1.74 mmol)於二烷(6 ml)中之混合物用氬氣除氣5分鐘，接著添加Pd2(dba)3(29 mg，0.03 mmol)。管用氬氣填充，密封且反應混合物在100℃下攪拌2小時。冷卻至室溫之後，反應混合物經hyflo過濾，用EtOAc沖洗且濾液用飽和 NaHCO3水溶液洗滌。水層用EtOAc反萃取兩次，合併之有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且在矽膠急驟層析(庚烷/EtOAc，100：0至50：50)之後，獲得呈透明膠狀之標題化合物(274 mg，78%產率)。UPLC RtM1=1.20 min；ESIMS：443[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 7.93(d,1H),7.61(br s,1H),7.30-7.35(m,1H),5.71(s,1H),5.34-5.46(m,1H),4.31(br s,2H),3.99(s,3H),3.68(t,2H),3.34-3.62(m,4H),2.23(s,3H),2.01-2.09(m,2H),1.44(s,9H)。
e)1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-7-((S)-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]
(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(364 mg，0.82 mmol)於DCM(6 ml)中之溶液用TFA(0.63 ml，8.23 mmol)處理且反應混合物在室溫下攪拌18小時，接著用飽和NaHCO3水溶液淬滅且用DCM萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到呈紅色油狀之標題產物(313 mg，90%純度，定量產量)，其不經進一步純化即用於下一步。
UPLC RtM1=0.65 min；ESIMS：343[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 7.93(d,1H),7.62(s,1H),7.32(d,1H),5.70(s,1H),5.26-5.36(m,1H),4.31(t,2H),3.99(s,3H),3.67(t,2H),2.95-3.15(m,3H),2.81-2.92(m,1H),2.22(s,3H),1.98-2.10(m,1H),1.79-1.90(m,1H)。
f)(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4] -7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮
1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-甲酸(CAS登記號64096-87-3)(106 mg，0.59 mmol)於DMF(4 ml)中之溶液用HBTU(225 mg，0.59 mmol)及DIPEA(0.24 ml，1.37 mmol)處理。所得橙色溶液在室溫下攪拌5分鐘，接著添加1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-7-((S)-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4](156 mg，0.46 mmol)於DMF(2 ml)中之溶液。反應混合物在室溫下攪拌1小時，接著在減壓下濃縮且殘餘物用DCM溶解且用飽和NaHCO3水溶液洗滌。有機層藉由使其通過相分離筒柱來乾燥，濃縮且在SFC層析(管柱DEAP(250 mm×30 mm，60A，5 μm)Princeton，梯度11-16%甲醇/超臨界CO2，在6分鐘內)之後獲得呈稍微有色固體狀之標題化合物(112 mg，49%產率)。
UPLC RtM1=0.81 min；ESIMS：503[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.01(s,1H),7.61(m,1H),7.52(d,1H),5.52(d,1H),5.24-5.43(m,1H),4.26(br s,2H),3.89(s,3H),3.59-3.79(m,3H),3.41-3.56(m,2H),3.21-3.39(m,1H),2.98-3.21(m,4H),2.67-2.83(m,1H),1.84-2.20(m,9H)。
1H NMR(600 MHz,DMSO-d6)：δ 8.01(s,1H),7.63-7.59(m,1H),7.55-7.51(m,1H),5.55-5.51(m,1H),5.43-5.24(m,1H),4.29-4.22(m,2H),3.90(s,3H),3.80-3.60(m,2H), 3.56-3.37(m,3H),3.28-2.99(m,5H),2.89-2.66(m,1H),2.19-2.09(m,4H),2.08-1.98(m,2H),1.98-1.86(m,3H)。
在異丙醇/乙醚中藉由加熱及冷卻使實例F1結晶
將474 mg非晶形實例F1懸浮於1.4 mL異丙醇中。將混合物加熱至70℃且在70℃下攪拌，使得實例F1完全溶解。將溶液冷卻至室溫，形成膠狀殘餘物。添加2 mL乙醚且將漿液攪拌48小時。形成白色懸浮液。過濾懸浮液且在40℃下、15毫巴下乾燥固體。獲得白色精細粉末。該物質僅含有少量的殘餘溶劑(<0.5%)。獲得起始熔點為148.77℃的實例F1之無水結晶形式。
實例F1無水形式(方法M1)之X射線粉末繞射圖案之最顯著2θ峰清單(容許限度±0.5)(資訊包括低/弱峰)。
注意：此峰清單不具詳盡性，而僅為「個別的」。
實例F2至F15：表6中所列之化合物藉由類似於實例F1所用的程序製備。
實例G1：咪唑并[2,1-b]噻唑-6-基-{(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4] -7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮
a)7-溴-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]
7-溴-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-2-酮(CAS登記號943995-72-0)(2.93 g，12.79 mmol)於THF(40 ml)中之溶液用BH3*THF(1 M，於THF中，30 ml，30 mmol)處理。反應混合物在80℃下攪拌1.5小時，接著冷卻至室溫且用甲醇淬滅。在減壓下濃縮反應混合物且殘餘物用EtOAc溶解且用1 M NaOH水溶液洗滌。有機層經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到呈白色固體狀之標題產物(2.48 g， 90%產率)。
UPLC RtM1=0.49 min；ESIMS：217[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 7.72(s,1H),6.60(s,1H),4.42(br s,1H),4.20-4.24(m,2H),3.49(m,2H)。
b)7-溴-2,3-二氫-吡啶并[3,4-b][1,4] -1-甲酸苯甲酯
7-溴-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4](1.85 g，8.60 mmol)於THF(50 ml)中之無水溶液在0℃下用在礦物油中之60% NaH(0.52 g，12.90 mmol)逐份處理且反應混合物在0℃下攪拌1小時。逐滴添加氯甲酸苯甲酯(CAS登記號501-53-1)(1.40 ml，9.85 mmol)且反應混合物溫熱至室溫並攪拌20小時，最後用甲醇淬滅且接著用飽和NaHCO3水溶液稀釋並用EtOAc萃取。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且在矽膠急驟層析(庚烷/EtOAc，100：0至60：40)之後獲得呈白色固體狀之標題化合物(2.06 g，68%產率)。
UPLC RtM1=1.14 min；ESIMS：349[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.28(br s,1H),7.98(s,1H),7.35-7.46(m,5H),5.30(s,2H),4.20-4.27(m,2H),3.92-4.01(m,2H)。
c)2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4] -7-醇
7-溴-2,3-二氫-吡啶并[3,4-b][1,4]-1-甲酸苯甲酯(1.27 g，3.63 mmol)、KOH水溶液(0.90 g，16 mmol KOH，於3.2 ml水中)、98% 2-二-第三丁基膦基-3,4,5,6-四甲基-2',4',6'-三異丙基聯苯(0.26 g，0.54 mmol)於二烷(16 ml)中之混合物用氬氣除氣5分鐘，接著添加Pd2(dba)3 (0.25 g，0.27 mmol)。用氬氣填充管，接著密封且反應混合物在100℃下攪拌19小時。冷卻至室溫之後，反應混合物經hyflo過濾，用EtOAc及甲醇沖洗。濾液經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且在矽膠急驟層析(DCM/MeOH，95：5至60：40)之後獲得呈橙色殘餘物形式之標題化合物(262 mg，47%產率)。
UPLC RtM1=0.32 min；ESIMS：153[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 10.33(br.s,1H),7.03(br.s,1H),6.71(s,1H),5.15(s,1H),3.95(t,2H),3.25(td,2H)。
d)(S)-3-(2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4] 7-基氧基)-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯
2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]7-醇(200 mg，0.66 mmol)及(R)-3-甲烷磺醯基氧基-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(CAS登記號127423-61-4)(262 mg，0.99 mmol)於DMF(6 ml)中之無水溶液用在礦物油中之60%氫化鈉(53 mg，1.33 mmol)處理且反應混合物在80℃下攪拌17小時。冷卻至室溫之後，反應混合物用TBME稀釋且用飽和NaHCO3水溶液洗滌。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且在矽膠急驟層析(庚烷/EtOAc，88：12至0：100)之後獲得呈油狀之標題化合物(140 mg，66%產率)。
UPLC RtM1=0.66 min；ESIMS：322[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 7.54(s,1H),5.86(s,1H),5.42(br.s,1H),4.25-4.41(m,1H),4.19(t,2H),3.38-3.66 (m,6H),2.00-2.18(m,2H),1.46(d,9H)。
e)(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4] -7-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯
(S)-3-(2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基)-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(115 mg，0.36 mmol)、5-溴-2-甲氧基-3-三氟甲基吡啶(CAS登記號1214377-42-0)(119 mg，0.47 mmol)、XPhos(14 mg，0.03 mmol)及NaOtBu(76 mg，0.79 mmol)於二烷(2.5 ml)中之混合物用氬氣除氣5分鐘，接著添加Pd2(dba)3(13 mg，0.01 mmol)。用氬氣填充管，接著密封且反應混合物在100℃下攪拌2小時。冷卻至室溫之後，反應混合物經hyflo過濾，用EtOAc沖洗且濾液用飽和NaHCO3水溶液洗滌。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且在矽膠急驟層析(庚烷/EtOAc，93：7至40：60)之後，獲得呈透明膠狀之標題化合物(91 mg，51%產率)。
UPLC RtM1=1.27 min；ESIMS：497[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.29(d,1H),7.79(d,1H),7.64(d,1H),5.70(s,1H),5.36-5.46(m,1H),4.34(br s,2H),4.09(s,3H),3.70(t,2H),3.34-3.62(m,4H),2.02-2.11(m,2H),1.44(s,9H)。
f)1-(6-甲氧基-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-7-((S)-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]
(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯 (88 mg，0.18 mmol)於DCM(1.3 ml)中之溶液用TFA(0.14 ml，1.77 mmol)處理且反應混合物在室溫下攪拌17小時，接著用飽和Na2CO3水溶液淬滅且用DCM萃取。有機層經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到標題化合物(66 mg，94%產率)。
UPLC RtM1=0.72 min；ESIMS：397[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.28(d,1H),7.79(d,1H),7.65(s,1H),5.68(s,1H),5.31-5.39(m,1H),4.31-4.37(m,2H),4.08(s,3H),3.67-3.72(m,2H),3.01-3.18(m,3H),2.85-2.97(m,1H),2.01-2.13(m,1H),1.82-1.95(m,1H)。
g)咪唑并[2,1-b]噻唑-6-基-{(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4] -7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮
咪唑并[2,1-b]噻唑-6-甲酸、氫溴化物(1：1)(CAS登記號725234-39-9)(25 mg，0.10 mmol)於DMF(0.45 ml)中之溶液用HBTU(41 mg，0.11 mmol)及DIPEA(0.04 ml，0.21 mmol)處理。所得橙色溶液在室溫下攪拌5分鐘，接著添加1-(6-甲氧基-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-7-((S)-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4](32 mg，0.08 mmol)於DMF(0.45 ml)中之溶液。反應混合物在室溫下攪拌17小時，接著在減壓下濃縮且殘餘物用EtOAc溶解且用鹽水洗滌。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且在RP製備型HPLC(Sunfire PrepC18 30×100 mm，5 μm；溶劑A：H2O+0.1 Vol.% TFA；溶劑B：CH3CN+0.1 Vol.% TFA，梯 度15-45% B，在16分鐘內)之後，獲得標題化合物。經Agilent PL-HCO3 MP SPE筒柱過濾之後，獲得呈固體狀之標題化合物(23 mg，52%產率)。
UPLC RtM1=1.00 min；ESIMS：547[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.49(dd,1H),8.16-8.20(m,2H),7.92(dd,1H),7.57(d,1H),7.37(dd,1H),5.63(d,1H),5.33-5.45(m,1H),4.25-4.31(m,2H),3.52-4.14(m,9H),1.88-2.12(m,2H)。
實例G2至G3：表7中所列之化合物藉由類似於實例G1所用的程序製備。
實例H1至H16：表8中所列之化合物藉由層析型非對映異構體分離加以製備。
實例I1：(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[5-氟4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮
a)5-氟-6-甲氧基-4H-苯并[1,4] -3-酮
6-溴-5-氟-4H-苯并[1,4]-3-酮(CAS登記號1029421-36-0)(5.0 g，20 mmol)於MeOH(10 ml)中之溶液用甲醇鈉溶液(30%，於MeOH中，11.3 ml，61 mmol)及CuI(0.4 g，2 mmol)處理。在80℃下攪拌20小時之後，反應物用飽和NaHCO3水溶液淬滅且用EtOAc萃取。有機層經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，獲得淺黃色固體(2.2 g，92%產率)。
UPLC RtM1=0.64 min。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 6.74(m,2H),4.53(s,2H),3.79(s,3H)。
b)5-氟-6-羥基-4H-苯并[1,4] -3-酮
5-氟-6-甲氧基-4H-苯并[1,4]-3-酮(2.0 g，10 mmol)於DCM(50 ml)中之溶液在0℃下用三溴化硼(9.6 ml，101 mmol)處理。反應混合物在室溫下攪拌17小時，接著冷卻至0℃且用甲醇淬滅。在減壓下濃縮混合物且殘餘物用EtOAc溶解且用飽和NaHCO3水溶液洗滌。有機層用10% Na2S2O4水溶液洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。矽膠急驟層析(己烷/EtOAc 100：0至60：40)之後，獲得呈褐色固體狀之標題化合物(780 mg，42%產率)。
UPLC RtM1=0.49 min；ESIMS：228[(M+HCOO)-]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 11.00(s,1H),6.65(d,1H),6.45(t,1H),4.50(s,2H)。
c)5-氟-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-醇
5-氟-6-羥基-4H-苯并[1,4]-3-酮(780 mg，4.2 mmol)於THF(10 ml)中之溶液用BH3*THF(1 M，於THF中，12.8 ml，12.8 mmol)處理。反應混合物在室溫下攪拌17小時，接著冷卻至0℃且用甲醇(30 ml)淬滅。反應混合物在減壓下濃縮，獲得褐色油狀物(720 mg，定量產量)。
UPLC RtM1=0.54 min；ESIMS：170[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.95(s,1H),6.45(d,1H),6.00(t,1H),4.09(m,2H),3.45(m,2H)。
d)(S)-3-(5-氟-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基)-吡咯 啶-1-甲酸第三丁酯
三苯膦(1.5 g，5.7 mmol)於THF(20 ml)中之溶液在0℃下用DEAD(0.900 ml，5.69)處理。橙色溶液在室溫下攪拌10分鐘，接著添加5-氟-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-醇(740 mg，4.37 mmol)及(R)-3-羥基吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(1065 mg，5.69 mmol)。反應混合物在60℃下攪拌19小時且接著在減壓下濃縮。矽膠急驟層析(己烷/EtOAc，100：0至70：30)之後，獲得呈無色油狀之標題化合物(1.1 g，74%產率)。
UPLC RtM1=1.07 min；ESIMS：339[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 6.45(d,1H),6.00(t,1H),5.42(br.s,1H),4.25-4.41(m,1H),4.19(t,2H),3.38-3.66(m,6H),2.00-2.18(m,2H),1.46(d,9H)。
e)(S)-3-[5-氟-4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯
(S)-3-(5-氟-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基)-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(100 mg，0.296 mmol)、5-溴-2-甲氧基-3-甲基吡啶(CAS登記號760207-87-2，179 mg，0.887 mmol)、RuPhos(6.90 mg，0.015 mmol)、NaOtBu(85 mg，0.887 mmol)及(2-二環己基膦基-2'6'-二異丙基-1,1'-聯苯)(2-(2-胺基乙基)苯基)鈀(II)(12.07 mg，0.015 mmol)於二烷(2 ml)中之混合物用氬氣除氣，接著密封且反應混合物在100℃下攪拌23小時。冷卻至室溫之後，反應混合物經hyflo過濾，用EtOAc沖洗且濾液用飽和NaHCO3水溶 液洗滌。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且在矽膠急驟層析(己烷/EtOAc，100：0至70：30)之後獲得呈黃色油狀之標題化合物(123 mg，63%產率)。
UPLC RtM1=1.29 min；ESIMS：460[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 7.75(d,1H),7.45(d,1H),6.55(t,1H),6.35(d,1H),4.75(m,1H),4.15(t,2H),3.84(s,3H),3.60(t,2H),3.38-3.66(m,4H),2.12(s,3H),2.00-2.18(m,2H),1.46(d,9H).
f)5-氟-4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-6-((S)-吡咯啶-3-基氧基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]
(S)-3-[5-氟-4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(123 mg，0.185 mmol)於DCM(2 ml)中之溶液用4 N HCl/二烷(0.046 ml，0.185 mmol)處理。反應混合物在室溫下攪拌3天，接著在減壓下濃縮，獲得黑色油狀物(100 mg，79%產率)。
UPLC RtM1=0.73 min；ESIMS：360[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 7.75(d,1H),7.45(d,1H),6.80(m,1H),6.75(m,1H),5.20(m,1H),4.15(t,2H),3.84(s,3H),3.60(t,2H),3.38-3.66(m,4H),2.12(s,3H),2.00-2.18(m,2H)。
g)(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[5-氟-4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮
1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-甲酸(CAS登記號64096-87-3)(33.9 mg，0.15 mmol)於DCM(2 ml)中之溶液在室溫下用Et3N(0.061 ml，0.440 mmol)及HATU(55.7 mg，0.147 mmol)處理。所得橙色溶液在室溫下攪拌20分鐘，接著添加5-氟-4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-6-((S)-吡咯啶-3-基氧基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4](100 mg，0.147 mmol)於DCM(2 ml)中之溶液。反應混合物在室溫下攪拌1.5小時，接著用EtOAc稀釋且用飽和NaHCO3水溶液洗滌。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且在製備型RP-HPLC(SunFire C18管柱OBD 5 mm 30×100 mm，梯度25%至45% ACN，在16分鐘內)之後，獲得標題化合物。凍乾溶離份且經PL-HCO3 MP SPE筒柱過濾，得到褐色固體(54 mg，71%產率)。
UPLC RtM1=0.94 min；ESIMS：520[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 7.75(d,1H),7.45(d,1H),6.55(t,1H),6.35(d,1H),4.75(m,1H),4.15(t,2H),3.84(s,3H),3.59-3.79(m,3H),3.41-3.56(m,2H),3.21-3.39(m,1H),2.98-3.21(m,4H),2.67-2.83(m,1H),1.84-2.20(m,9H)。
實例I2至I3：表9中所列之化合物藉由類似於實例I1所用的程序製備。
實例J：5-{6-[(S)-1-((S)-1-乙醯基-吡咯啶-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]- -4-基}-2-甲氧基-菸腈
2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-((S)-吡咯啶-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈(實例D39；23 mg，0.051 mmol)於DCM(1 ml)中之溶液用Et3N(0.014 ml，10.4 mg，0.102 mmol)處理。溶液在室溫下攪拌10分鐘，接著添加乙醯氯(0.0044 ml，4.87 mg，0.061 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌1.5小時。另外添加2 eq.之Et3N(0.014 ml，10.4 mg，0.102 mmol)及1 eq.之乙醯氯(0.0037 ml，4.06 mg，0.051 mmol)，在室溫下繼續攪拌1.5小時。反應混合物用DCM及飽和NaHCO3水溶液稀釋，接著通過相分離器，水層用DCM萃取兩次，將合併之有機層濃縮，得到呈黃色油狀之標題化合物，藉由製備型RP-HPLC(管柱SunFire C18，10-85% ACN，在20分鐘內)純化。溶離份用DCM/NaHCO3萃取，經MgSO4乾燥，濃縮且凍乾，得到呈黃色泡沫狀之標題化合物(14 mg，53%產率)。
HPLC RtM10=2.55 min；ESIMS：492[(M+H)+]。
實例K：5-{6-[(S)-1-((R)-1-乙醯基-吡咯啶-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-2-甲氧基-菸腈
類似於實例J，以2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-((R)-吡咯啶-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈(實例D40)為起始物來製備此實例。。
HPLC RtM10=2.55 min；ESIMS：492[(M+H)+]。
實例L：2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-((R)-1-甲基-吡咯啶-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4] -4-基}-菸腈
2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-((R)-吡咯啶-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈(實例D40；26 mg，0.058 mmol)於MeOH(1 ml)中之溶液用37%甲醛水溶液(0.043 ml，46.9 mg，0.578 mmol)及乙酸(0.004 ml，4.17 mg，0.0069 mmol)處理。溶液在氬氣下在室溫下攪拌45分鐘，接著添加NaBH3CN(5.65 mg 90%固體，0.081 mmol)。所得混合物在室溫下攪拌45分鐘，用DCM及飽和 NaHCO3水溶液稀釋。水層用DCM反萃取兩次，合併之有機層經MgSO4乾燥且濃縮，得到粗標題化合物，藉由製備型RP-HPLC(管柱SunFire C18，梯度5-75% ACN，在20分鐘內)純化其。溶離份用DCM/飽和NaHCO3水溶液萃取，經MgSO4乾燥，濃縮且凍乾，得到呈黃色泡沫狀之標題化合物(20 mg，72%產率)。
HPLC RtM11=2.24 min；ESIMS：464[(M+H)+]。
實例M：4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-6-((S)-1-吡啶-2-基-吡咯啶-3-基氧基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]
4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-6-((S)-1-吡啶-2-基-吡咯啶-3-基氧基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4](如實例B1中所述製備；60 mg，0.154 mmol)、2-氯吡啶(CAS 109-09-1，0.017 ml，21.0 mg，0.185 mmol)、Xphos(8.81 mg，0.018 mmol)及Cs2CO3(125 mg，0.385 mmol)於二烷(1 ml)中之溶液用氬氣除氣，接著添加Pd2(dba)3(7.05 mg，0.0077 mmol)。反應混合物在80℃下加熱6小時，添加XPhos(8.81 mg，0.018 mmol)，混合物用氬氣再次除氣且添加Pd2(dba)3(7.05 mg，0.0077 mmol)。在80℃下繼續攪拌隔夜。混合物經矽藻土過濾且濃縮，得到標題化合物， 藉由NP-HPLC(管柱Grace Grom Saphir 65 Si，梯度庚烷：EtOAc：MeOH 68：30：2至0：65：35，在12 min內)純化其，產量32 mg(45%)。
HPLC RtM1=0.72 min；ESIMS：467[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.32(d,1H),8.14-8.12(m,1H),7.49-7.39(m,2H),6.86(d,1H),6.61(d,1H),6.57-6.46(m,2H),6.37(d,1H),4.92-4.85(m,1H),4.26-4.24(m,2H),3.76-3.74(m,2H),3.71(d,2H),3.63-3.55(m,2H),3.32(s,3H),2.67(s,3H),2.35-2.27(m,1H),2.26-2.15(m,1H)。
實例N：4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-6-((S)-1-嘧啶-2-基-吡咯啶-3-基氧基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]
4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-6-((S)-1-吡啶-2-基-吡咯啶-3-基氧基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4](如實例B1中所述製備；60 mg，0.154 mmol)、2-氯嘧啶(CAS 1722-12-9，24.7 mg，0.216 mmol)及DIPEA(0.054 ml，39.8 mg，0.308 mmol)於ACN(1 ml)中之溶液在微波反應器中在140℃下加熱30分鐘。產物用飽和NaHCO3水溶液及EtOAc萃取，過濾且濃縮，產生標題化合物，藉由製備型NP- HPLC(管柱Grace Grom Saphir 65 Si，梯度庚烷：EtOAc：MeOH 68：30：2至0：65：35，在12分鐘內)純化其，產量45 mg(63%)。
HPLC RtM1=0.97 min；ESIMS：468[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.37-8.26(m,3H),7.44(d,1H),6.87(d,1H),6.62(d,1H),6.56-6.46(m,2H),4.92-4.84(m,1H),4.27-4.25(m,2H),3.90-3.63(m,6H),3.33(s,3H),2.69(s,3H),2.37-2.13(m,2H)。
實例O1：2-甲氧基-5-{2-甲基-6-[(S)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4] -4-基}-菸腈
a)N-(5-苄氧基-2-羥基-苯基)-2-氯-丙醯胺
2-氯-丙酸(CAS登記號598-78-7)(0.914 ml，7.53 mmol)於DMF(20 ml)中之溶液用Et3N(1.259 ml，9.03 mmol)及HATU(3.05 g，8.03 mmol)處理。所得溶液在室溫下攪拌30分鐘，接著添加2-胺基-4-苄氧基-苯酚(CAS登記號102580-07-4)(1.08 g，5.02 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌5分鐘，用EtOAc稀釋且濃縮。在矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc，100：0至50：50)之後，獲得呈橙色固體狀之標題化合物(617 mg，40%產率)。
UPLC RtM14=1.32 min；ESIMS：306[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 9.50(d,1H),7.70(br,s 1H),7.45(m,5H),6.80(d,1H),6.65(dd,1H),5.00(s,2H),2.65(s,3H)。
b)6-苄氧基-2-甲基-4H-苯并[1,4] -3-酮
N-(5-苄氧基-2-羥基-苯基)-2-氯-丙醯胺(617 mg，2.0 mmol)於DMF(15 ml)中之無水溶液在在0℃下用氫化鈉95%(58.1 mg，2.4 mmol)處理。在室溫下攪拌1小時之後，反應混合物用DCM稀釋且用水洗滌。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且在矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc，100：0至80：20)之後獲得呈白色固體狀之標題化合物(146 mg，27%產率)。
UPLC RtM14=1.30 min；ESIMS：270[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 10.80(s,1H),7.45(m,5H),6.85(d,1H),6.65(m,2H),5.00(s,2H),4.55(q,1H),1.45(d,3H)。
c)6-苄氧基-2-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]
6-苄氧基-2-甲基-4H-苯并[1,4]-3-酮(146 mg，0.54 mmol)於THF(4 ml)中之溶液在0℃下用BH3*THF(1 M，於THF中，0.813 ml，0.813 mmol)處理。在35℃下攪拌1小時之後，將反應混合物冷卻至0℃，用水(0.5 ml)及4 N NaOH水溶液(0.5 ml)淬滅且接著用EtOAc稀釋。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且獲得呈白色固體狀之標題化合物(125 mg，90%產率)。
UPLC RtM14=1.40 min；ESIMS：256[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 7.45(m,5H),6.50(d,1H),6.20(d,1H),6.10(dd,1H),5.35(s,1H),4.90(s,2H),4.00(m,1H),3.25(m,1H),2.90(m,1H),1.35(d,3H)。
d)2-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-醇
6-苄氧基-2-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4](124 mg，0.486 mmol)於MeOH(10 ml)中之溶液在室溫下用甲酸銨(276 mg，4.37 mmol)及Pd(OH)2(68.2 mg，0.486 mmol)處理。反應混合物在60℃下攪拌15分鐘。冷卻至室溫之後，反應混合物經hyflo過濾，用DCM及MeOH沖洗且接著濃縮濾液。矽膠急驟層析(DCM/MeOH，100：0至90：10)之後，獲得呈褐色固體狀之標題化合物(69.4 mg，87%產率)。
UPLC RtM14=0.56 min；ESIMS：166[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.50(s,1H),6.45(d,1H),6.00(d,1H),5.85(dd,1H),5.25(s,1H),4.00(m,1H),3.25(m,1H),2.90(m,1H),1.35(d,3H)。
e)[(S)-3-(2-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基)-吡咯啶-1-基]-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮
2-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-醇(69 mg，0.42 mmol)及(R)-1-(四氫-2H-哌喃-4-羰基)吡咯啶-3-基甲烷磺酸酯(中間物C1，209 mg，0.75 mmol)於DMF(1.4 ml)中之無水溶液用存於礦物油中之60%氫化鈉(15.8 mg，0.63 mmol)處理且反應混合物在50℃下攪拌18小時。反應混合物用EtOAc稀釋且用飽和NaHCO3水溶液洗滌。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且在矽膠急驟層析 (DCM/MeOH，100：0至95：5)之後，獲得呈橙紅色黏性固體狀之標題化合物(128 mg，88%產率)。
UPLC RtM14=1.01 min；ESIMS：347[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 6.50(d,1H),6.25(d,1H),6.00(d,1H),6.05(m,1H),5.65(m,2H),5.35(d,2H),4.45(d,2H),3.00-4.00(m,6H),2.00-2.40(m,4H),1.5(m,4H)。
f)2-甲氧基-5-{2-甲基-6-[(S)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4] -4-基}-菸腈
用氬氣對(S)-(3-(2-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]-6-基氧基)吡咯啶-1-基)(四氫-2H-哌喃-4-基)甲酮(128 mg，0.369 mmol)、5-溴-2-甲氧基菸腈(CAS登記號941294-54-8，IA12)(94 mg，0.443 mmol)、XPhos(8.81 mg，0.018 mmol)、NaOtBu(53.3 mg，0.554 mmol)及Pd2(dba)3(16.92 mg，0.018 mmol)於甲苯(2.5 ml)中之混合物進行除氣。反應混合物在80℃下攪拌20分鐘。冷卻至室溫之後，反應混合物經hyflo過濾，用EtOAc沖洗且濾液用飽和NaHCO3水溶液洗滌。有機層經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。在製備型RP-HPLC(SunFire C18管柱OBD 5 mm 30×100 mm，梯度32%至67% ACN，在15分鐘內)之後，獲得標題化合物。凍乾溶離份且經PL-HCO3 MP SPE筒柱過濾，得到褐色固體(39.1 mg，22%產率)。
UPLC RtM14=1.10 min；ESIMS：479[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6,394 K)：δ 8.40-8.30(m,1H), 8.10-8.00(m,1H),6.75(d,1H),6.35(m,1H),6.15(m,1H),4.75(m,1H),4.00(s,3H),3.85(m,1H),3.75-3.00(m,5H),2.65(m,1H),2.00(m,1H),1.65(m,2H),1.44(d,3H)。
實例O2至O3：表10中所列之化合物藉由層析型非對映異構體分離加以製備。
實例P：2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(1-甲基-哌啶-4-基甲基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4] -4-基}-菸腈
a)(S)-4-((3-(4-(5-氰基-6-甲氧基吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4] -6-基氧基)吡咯啶-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸第三丁酯
2-甲氧基-5-[6-((S)-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基]-菸腈(參見類似物B1，c)，95 mg，0.270 mmol)於DCE(4.5 ml)中之溶液用4-甲醯哌啶-1-甲酸第三丁酯(60 mg，0.281 mmol)處理。在室溫下攪拌2天之後， 反應混合物用DCM及飽和NaHCO3水溶液稀釋。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且在矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc，100：0至0：100)之後，獲得標題化合物，產量66 mg(40%)。
UPLC RtM1=1.66 min；ESIMS：550[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.35(d,1H),7.75(d,1H),7.35(s,1H),7.85(d,1H),6.35(dd,1H),6.10(d,1H),4.65(m,1H),4.45(m,2H),3.60(m,2H),2.75-2.15(m,4H),1.50(s,9H)。
b)(S)-2-甲氧基-5-(6-(1-(哌啶-4-基甲基)吡咯啶-3-基氧基)-2H-苯并[b][1,4] -4(3H)-基)菸腈
(S)-4-((3-(4-(5-氰基-6-甲氧基吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]-6-基氧基)吡咯啶-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(66 mg，0.120 mmol)於DCM(2 ml)中之溶液用三氟乙酸(0.093 ml，1.20 mmol)處理。反應混合物在室溫下攪拌17小時，接著用飽和Na2CO3水溶液淬滅且用DCM萃取。有機層經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到標題產物(36 mg，67%產率)。
UPLC RtM1=1.03 min；ESIMS：450[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.35(d,1H),7.80(d,1H),7.25(s,1H),6.80(d,1H),6.25(m,1H),6.15(d,1H),4.65(m,1H),4.45(m,2H),3.60(m,2H),2.75-2.15(m,4H)。
c)(S)-2-甲氧基-5-(6-(1-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)吡咯啶-3- 基氧基)-2H-苯并[b][1,4] -4(3H)-基)菸腈
(S)-2-甲氧基-5-(6-(1-(哌啶-4-基甲基)吡咯啶-3-基氧基)-2H-苯并[b][1,4]-4(3H)-基)菸腈(36 mg，0.080 mmol)於DCE(2 ml)中之溶液用37%甲醛水溶液(8.94 μl，0.120 mmol)處理。溶液在氬氣下在室溫下攪拌15分鐘，接著添加NaBH3CN(50.9 mg，0.240 mmol)。所得混合物在室溫下攪拌30分鐘，用DCM及飽和NaHCO3水溶液稀釋。有機層經Na2SO4乾燥且濃縮。在藉由製備型RP-HPLC(管柱SunFire C18，梯度15-50% ACN，在15分鐘內)純化之後，獲得標題化合物。溶離份用DCM/飽和NaHCO3水溶液萃取，經Na2SO4乾燥，濃縮且凍乾，得到標題化合物(18 mg，48%產率)。
UPLC RtM1=1.04 min；ESIMS：464[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.35(d,1H),7.85(d,1H),7.45(s,1H),6.75(d,1H),6.35(dd,1H),6.15(d,1H),4.65(m,1H),4.45(m,2H),3.25(m,2H),2.75-2.15(m,4H),2.65(s,3H),1.95(m,2H),1.65(m,2H)。
實例Q：{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4- 基)-甲酮
a)6-(第三丁基-二甲基-矽烷基氧基)-4H-苯并[1,4] -3-酮
6-羥基-2H-苯并[b][1,4]-3(4H)-酮(CAS登記號53412-38-7)(1076 mg，6.52 mmol)於DMF(8 ml)中之溶液在室溫下用TBDMSCl(1080 mg，7.17 mmol)及咪唑(532 mg，7.82 mmol)處理。在室溫下攪拌18小時之後，反應混合物用DCM稀釋且用水洗滌。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且在矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc，100：0至50：50)之後 獲得呈白色固體狀之標題化合物(1.18 g，65%產率)。
UPLC RtM2=1.91 min；ESIMS：280[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 7.85(br,s 1H),7.35(s,1H),6.85(d,1H),6.45(m,1H),6.30(d,1H),4.50(s,2H),1.00(s,9H),0.25(s,6H)。
b)3,3-二氘-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-醇
6-(第三丁基-二甲基-矽烷基氧基)-4H-苯并[1,4]-3-酮(8.34 g，29.8 mmol)於THF(100 ml)中之溶液在0℃下用氘化鋰鋁(2.26 g，59.7 mmol)處理。在室溫下攪拌18小時之後，將反應混合物添加至1 M冷的羅謝爾鹽水溶液(Rochelle's salt soln.)中且用EtOAc萃取。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且在矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc，100：0至0：100)之後，獲得呈白色固體狀之標題化合物(1.40 g，31%產率)。
UPLC RtM9=0.69 min；ESIMS：154[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.50(s 1H),6.45(d,1H),6.00(d,1H),5.85(m,1H),5.15(s,1H),4.00(s,2H)。
c)(S)-3-(3,3-二氘-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基)-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯
3,3-二氘-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-醇(1.44 g，9.40 mmol)及(R)-3-甲烷磺醯基氧基-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(CAS登記號127423-61-4)(5.49 g，20.68 mmol)於DMF(10 ml)中之無水溶液用存於礦物油中之60%氫化鈉(0.752 g，18.80 mmol)處理且反應混合物在室溫下攪拌2天。反應混 合物用EtOAc稀釋且用飽和NaHCO3水溶液洗滌。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc，100：0至0：100)純化，產生4.12 g(定量產量)之標題化合物。
UPLC RtM1=1.07 min；ESIMS：323[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 6.65(m,1H),6.15(m,2H),5.35(m,1H),4.85(m,2H),3.50(m,4H),2.15(m,2H),1.50(s,9H)。
d)(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,3-二氘-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯
此實例類似於實例G1、e)製備。
UPLC RtM1=2.00 min；ESIMS：444[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 7.95(br.s,1H),7.45(br.s,1H),6.80(m,1H),6.25(m,1H),4.75(m,1H),4.35(s,2H),4.00(s,3H),3.50(m,4H),2.25(m,2H),1.50(s,9H)。
e)4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,3-二氘-6-((S)-吡咯啶-3-基氧基)-3,4-二氫-2H-苯并-[1,4]
此實例類似於實例G1、f)製備。
UPLC RtM1=1.26 min；ESIMS：342[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 7.95(br.s,1H),7.45(br.s,1H),6.80(m,1H),6.25(m,1H),4.75(m,1H),4.35(s,2H),4.00(s,3H),3.15(m,2H),2.75(m,2H),2.25(m,2H)。
f){(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮
此實例類似於實例B1、d)製備。UPLC RtM1=1.65 min；ESIMS：456[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3,298 K)：δ 8.45(m,1H),8.29(s,1H),7.21(t,1H),6.20(t,1H),6.10(s,1H),5.00(d,1H),4.37(t,2H),4.00(m,3H),3.39-3.74(m,4H),2.50(m,2H),2.35(s,3H),1.09-2.10(m,5H)。
實例R：5-{6-[(S)-1-(4-羥基-環己烷羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4] -4-基}-2-甲氧基-菸腈
類似於實例J，以2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-((S)-吡咯啶-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈為起始物來製備此實例。
UPLC RtM14=0.91 min；ESIMS：478[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.43(d,1H),8.28(d,1H),6.73(m,1H),6.34(m,1H),6.08(dd,1H),4.76(d,1H),4.51(m,1H),4.22(s,2H),4.00(s,3H),3.20-3.71(m,9H),1.09-2.10(m,10H)。
實例S：2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(2-吡啶-4-基-乙醯基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4] -4-基}-菸腈
類似於實例J，以2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-((S)-吡咯啶-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈為起始物來製備此實例。
UPLC RtM14=0.82 min；ESIMS：471[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.45(m,3H),8.29(s,1H),7.21(m,2H),6.74(m,1H),6.33(m,1H),6.10(m,1H),4.87(d,1H),4.22(s,2H),4.00(s,3H),3.39-3.74(m,8H),1.09-2.10(m,2H)。
實例T：{(S)-3-[4-(5-胺基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮
a)5-[6-((S)-1-第三丁氧基羰基-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4] -4-基]-2-甲氧基-菸酸甲酯
在氬氣下，將K3PO4(815 mg，2.00 mmol)及雙-(第三丁基膦)鈀(29.4 mg，0.06 mmol)添加至(S)-3-(3,4-二氫-2H-苯 并[1,4]-6-基氧基)-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(如實例B步驟a)中所述製備)(615 mg，1.92 mmol)及5-溴-2-甲氧基-菸酸甲酯(IA22，CAS登記號122433-41-4)(614 mg，1.30 mmol)於甲苯(6 ml)中之溶液中。反應混合物用氬氣除氣15分鐘，接著在110℃下攪拌18小時，用EtOAc稀釋且用飽和NaHCO3水溶液洗滌。有機層經MgSO4乾燥且濃縮，得到粗標題化合物，藉由矽膠急驟層析(庚烷/EtOAc 90：10至0：100)純化，得到黃色膠狀物(474 mg，51%產率)。
UPLC RtM2=1.36 min；ESIMS：486[(M+H)+]。
b)5-[6-((S)-1-第三丁氧基羰基-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4] -4-基]-2-甲氧基-菸酸
5-[6-((S)-1-第三丁氧基羰基-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基]-2-甲氧基-菸酸甲酯(483 mg，0.99 mmol)於二烷(5 ml)中之溶液用氫氧化鈉片粒(119mg，2.98 mmol)於水(2 ml)中之溶液處理。溶液在80℃下攪拌1小時。反應混合物用1 N HCl水溶液酸化至pH3且用EtOAc萃取。合併之有機相經MgSO4乾燥且濃縮，矽膠急驟層析(庚烷/EtOAc 100：0至0：100，接著EtOAc/MeOH 90：10至80：20)之後，得到呈固體狀之標題化合物(370 mg，79%產 率)。
UPLC RtM6=1.79 min；ESIMS：372[(M+H-100)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.22-8.48(m,2H),6.82(d,1H),6.33(m,1H),6.21(d,1H),4.60-4.76(m,1H),4.27-4.41(m,2H),4.15-4.27(m,3H),3.62-3.77(m,2H),3.31-3.58(m,5H),1.85-2.19(m,2H),1.34-1.56(m,9H)。
c)(S)-3-[4-(5-第三丁氧基羰基胺基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯
5-[6-((S)-1-第三丁氧基羰基-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基]-2-甲氧基-菸酸(370 mg，0.78 mmol)及Et3N(0.28 ml，1.96 mmol)於tBuOH(5 ml)中之溶液用DPPA(CAS登記號26386-88-9)(0.17 ml，0.78 mmol)處理且在100℃下攪拌6小時。添加DCM及飽和NaHCO3水溶液，藉由經分離相筒柱溶離來分離有機層且濃縮，矽膠急驟層析(庚烷/EtOAc 100：0至50：50)之後，得到呈粉紅色膠狀之標題化合物(114 mg，24%)。
UPLC RtM2=1.36 min；ESIMS：486[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.42(br s,1H),7.75(d,1H), 7.02(s,1H),6.78(d,1H),6.15-6.41(m,1H),4.71(br s,1H),4.23-4.39(m,2H),4.09-4.22(m,3H),3.62-3.75(m,2H),3.31-3.58(m,4H),1.86-2.26(m,2H),1.40-1.60(m,18H)。
d)2-甲氧基-5-[6-((S)-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4] -4-基]-吡啶-3-基胺
(S)-3-[4-(5-第三丁氧基羰基胺基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(130 mg，0.24 mmol)於DCM(2 ml)中之溶液用TFA(CAS登記號76-05-1)處理且在室溫下攪拌1小時。濃縮反應混合物，經2 g Isolute SCX-2筒柱(溶離劑MeOH，接著2 M NH3/MeOH)溶離之後，得到呈黃色膠狀之標題化合物(88 mg，定量，粗物質)。
UPLC RtM2=1.25 min；ESIMS：343[(M+H)+]。
e){(S)-3-[4-(5-胺基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮
1-甲基-1H-咪唑-4-甲酸(CAS登記號41716-18-1)(36.0 mg，0.26 mmol)及Et3N(0.11 ml，0.78 mmol)於DMF(1 ml)中之溶液用HBTU(CAS登記號94790-37)(107 mg，0.28 mmol)處理。在室溫下攪拌20分鐘之後，將反應混合物冷卻至5℃且添加2-甲氧基-5-[6-((S)-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4]4-基]-吡啶-3-基胺(88 mg，0.26 mmol)於DMF(3 ml)中之溶液。反應混合物在室溫下攪拌1小時，濃縮且殘餘物用DCM(10 ml)溶解，用飽和NaHCO3水溶液(5 ml)洗滌，藉由經分離相筒柱溶離來分離有機層且濃縮。殘餘物藉由矽膠急驟層析(庚烷/EtOAc 100：0至0：100)加以純化，將合併之溶離份濃縮，溶於tBuOH/H2O中且凍乾，得到呈無色固體狀之標題化合物(21 mg，37%產率)。
UPLC RtM2=0.85 min；ESIMS：451[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CD3OD)：δ 7.64(s,1H),7.62(s,1H),7.65 m,1H),6.93(m,1H),6.70(m,1H),6.20-6.34(m,1H),6.15(m,1H),4.81(m,1H),4.19-4.31(m,2H),3.90-4.05(m,4H),3.55-3.83(m,8H),2.04-2.28(m,2H)。
實例U：N-(2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(1-甲基-1H-咪唑-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4] 4-基}-吡啶- 3-基)-甲烷磺醯胺
{(S)-3-[4-(5-胺基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮(22.9 mg，0.05 mmol)於吡啶(1 ml)中之溶液用甲烷磺醯氯(CAS登記號124-63-0)(0.08 ml，0.97 mmol)處理且在50℃下攪拌18小時。反應混合物用DCM及H2O稀釋，藉由經分離相筒柱溶離來分離有機層且濃縮。殘餘物藉由矽膠急驟層析(庚烷/EtOAc 100：0至0：100，接著EtOAc/MeOH 90：10至80：20)加以純化，將合併之溶離份濃縮，溶於tBuOH/H2O中且凍乾，得到呈無色固體狀之標題化合物(14 mg，49%)。
UPLC RtM2=1.39 min；ESIMS：529[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CD3OD)：δ 7.87(d,1H),7.41-7.76(m,3H),6.73(m,1H),6.02-6.44(m,2H),4.14-4.39(m,2H),3.87-4.12(m,5H),3.55-3.84(m,8H),2.85-3.08(m,3H),1.75-2.40(m,2H)。
實例V：(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮
a)6-甲氧基-5-甲基-4H-苯并[1,4] -3-酮
6-溴-5-甲基-4H-苯并[1,4]-3-酮(CAS登記號1154740-47-2)(1000 mg，4.13 mmol)及CuI(79 mg，0.41 mmol)於含有30% NaOMe之MeOH(8.1 ml)中之溶液在130℃下攪拌5小時。將橙色/褐色混合物冷卻至室溫，用EtOAc稀釋且用飽和NaHCO3水溶液洗滌。合併之有機層經MgSO4乾燥，且濃縮，得到橙色固體。經環己烷濕磨，得到呈粉紅色固體狀之標題化合物(647 mg，70%產率)。
HPLC RtM1=0.73 min。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 10.21(s,1H),6.76(d,1H),6.53(d,1H),4.42(s,2H),3.71(s,3H),2.05(s,3H)。
b)6-羥基-5-甲基-4H-苯并[1,4] -3-酮
6-甲氧基-5-甲基-4H-苯并[1,4]-3-酮(647 mg，3.35 mmol)於DCM(30 ml)中之懸浮液在氬氣下在室溫下用BBr3(3.16 ml，33.5 mmol)處理且在室溫下攪拌18小時。藉由在0℃下逐滴添加MeOH直至獲得透明溶液來淬滅反應混合物。移除溶劑之後，將殘餘物傾倒於冰/飽和NaHCO3水溶液上且用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥且濃縮，得到呈褐色固體狀之標題化合物(647 mg，粗物質)，其不經進一步純化即用於下一步。
HPLC RtM1=0.49 min。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 10.11(s,1H),6.43(d,1H),5.98(d,1H),4.57(s,2H),1.89(s,3H)。
c)5-甲基-3,4-二氫-5H-苯并[1,4] -6-醇
6-羥基-5-甲基-4H-苯并[1,4]-3-酮(647 mg，3.61 mmol)於THF(20 ml)中之溶液在氬氣下在0℃下用BH3*THF(1 M，於THF中，10.83 ml，10.83 mmol)處理且在室溫下攪拌18小時。添加MeOH且溶液在室溫下攪拌1小時，濃縮，得到殘餘物，溶於THF(20 ml)中，用BH3*THF(1 M，於THF中，10.83 ml，10.83 mmol)處理且在室溫下攪拌18小時。添加MeOH，溶液在室溫下攪拌4小時，濃縮至乾燥，得到呈褐色固體狀之標題化合物(600 mg，粗物質)，其不經進一步純化即用於下一步。
HPLC RtM1=0.49 min；ESIMS：166[(M+H)+]。
d)(S)-3-(5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基)-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯
三苯膦(1.33 g，5.09 mmol)於THF(10 ml)中之溶液用 DEAD(0.8 ml，5.09 mmol)處理，隨後用(R)-3-羥基-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(CAS登記號127423-61-4)(1 g，5.45 mmol)及5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-醇(600 mg，3.63 mmol)處理。所得紅色/褐色溶液在70℃下攪拌18小時。將褐色混合物冷卻，用EtOAc稀釋且用飽和NaHCO3水溶液洗滌。合併之有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮，得到褐色油狀物。粗產物藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 90：10至40：60)純化三次，得到呈無色油狀之標題化合物(130 mg，11%產率)。
HPLC RtM1=1.09 min；ESIMS：335[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 6.44(d,1H),6.22-6.04(m,1H),5.24(br s,1H),4.75(br s,1H),4.07-3.93(m,2H),3.45-3.33(m,3H),3.28(d,7H),2.00(d,2H),1.83(d,3H),1.46-1.32(m,9H)。
e)(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯
(S)-3-(5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基)-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(120 mg，0.36 mmol)、5-溴-2-甲氧基-3-甲基吡啶(CAS登記號760207-87-2)(145 mg，0.72 mmol)、NaOtBu(103 mg，1.08 mmol)、RuPhos(CAS登記號787618-22-8)(8 mg，0.02 mmol)及[RuPhos]鈀環(CAS登記號787618-22-8)(15 mg，0.02 mmol)於二烷(2 ml)中之溶液在100℃下攪拌18小時。將橙色/褐色混合物冷卻，用EtOAc稀釋且用水洗滌。合併之有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮，得到褐色油狀物。粗產物藉由矽膠急驟層析 (環己烷/EtOAc 95：05至60：40)純化三次，得到呈黃色油狀之標題化合物(97 mg，60%產率)。
HPLC RtM1=1.37 min；ESIMS：456[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 7.40(d,1H),7.28-7.07(m,1H),6.74(s,2H),4.84(br s,1H),3.96(br s,2H),3.80(s,2H),3.57(br s,2H),3.44-3.19(m,10H),2.08(s,3H),2.05-1.92(m,2H),1.60(d,3H),1.34(d,9H)。
f)(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮
(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(97 mg，0.21 mmol)於DCM(3 ml)中之溶液在室溫下在氬氣下用TFA(0.16 ml，2.13 mmol)處理且攪拌6小時。反應混合物用飽和NaHCO3水溶液淬滅且經由相分離筒柱分離有機溶液，得到黃色溶液。向此黃色溶液中添加1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-甲酸(CAS登記號64096-87-3)(49 mg，0.28 mmol)、Et3N(0.09 ml，0.64 mmol)、EDC(62 mg，0.32 mmol)、HOBT(49 mg，0.32 mmol)且在室溫下攪拌18小時。反應混合物用飽和NaHCO3水溶液淬滅且有機層藉由通過相分離筒柱加以分離，接著濃縮且藉由製備型RP-HPLC(管柱SunFire C18 OBD 5 mm 30×100 mm，溶劑A：H2O(0.1% TFA)，溶劑B：CH3CN(0.1% TFA))純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(76 mg，70%產率)。
HPLC RtM1=0.98 min；ESIMS：516[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6,375K)：δ 7.44(br s,1H),7.18(br s,1H),6.75(s,2H),4.88(br s,1H),4.02(t,2H),3.86(s,3H),3.81-3.33(m,6H),3.24-3.06(m,4H),2.83(br s,1H),1.66(s,3H)。旋轉異構體。
實例W：{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮
Le
a)6-溴-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]
6-溴-5-甲基-4H-苯并[1,4]-3-酮(CAS登記號1154740-47-2)(425 mg，1.56 mmol)於THF(9 ml)中之溶液在氬氣下在0℃下用BH3*THF(1 M，於THF中，4.7 ml，4.69 mmol)處理且在室溫下攪拌18小時。添加1 M BH3.THF(2 ml)且再繼續攪拌24小時。濃縮反應混合物且藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 100：0至80：20)純化，得到呈橙色固體狀之標題化合物(324 mg，86%產率)。
HPLC RtM1=1.04 min；ESIMS：228,230[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 6.68(d,1H),6.48(d,1H),5.54(br s,1H),4.04(t,2H),3.36-3.26(m,2H),2.11(s,3H)。
b)6-溴-4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]
6-溴-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4](324 mg，1.42 mmol)、中間物IA1(391 mg，1.56 mmol)、Cs2CO3(1018 mg，3.13 mmol)、BINAP(CAS登記號98327-87-8)(44 mg，0.07 mmol)、Pd(OAc)2(CAS登記號3375-31-3)(32 mg，0.14 mmol)於甲苯(13 ml)中之溶液在100℃下攪拌18小時。再裝載催化劑及配位體且在100℃下再繼續攪拌24小時。將反應混合物冷卻至室溫，用EtOAc稀釋且用水洗滌。濃縮有機層且藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 97：03至40：60)純化，得到呈橙色固體狀之標題化合物(345 mg，58%產率)。
HPLC RtM1=1.13 min；ESIMS：397,399[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 7.99(br.s,1H),7.37(d,1H),7.24(br.s,1H),6.83(d,1H),4.13(t,2H),3.97-3.86(m,2H),3.30(s,3H),2.52(s,3H),1.93(s,3H)。
c)苯甲基-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基]-胺
6-溴-4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4](324 mg，0.82 mmol)、苄胺(350 mg，3.26 mmol)、NaOtBu(157 mg，1.63 mmol)、RuPhos(CAS登記號787618-22-8)(30 mg，0.06mmol)及[BrettPhos]鈀環(CAS登記號1148148-01-9)(52 mg，0.06 mmol)於二烷(16 ml)中之溶液在80℃下攪拌0.5小時。過濾，濃縮濾液且藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 88：12至35：65)純化，得到呈黃色油狀之標題化合物(228 mg，66%產率)。
HPLC RtM1=1.13 min；ESIMS：424[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 7.94(br s,1H),7.40-7.33(m,2H),7.30(t,2H),7.19(t,2H),6.58(d,1H),6.30(d,1H),5.25(t,1H),4.30(d,2H),4.04-3.97(m,2H),3.90(d,2H),3.29(s,3H),2.51(br s,3H),1.76(s,3H)。
d)4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基胺
苯甲基-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基]-胺(228 mg，0.53 mmol)、乙酸(0.21 ml，3.70 mmol)、Pd/C於MeOH/THF (2.5/2.5 ml)中之溶液在室溫下用H2氫化65小時。過濾及濃縮濾液，得到呈綠色油狀之標題化合物(200 mg，粗物質，包括剩餘AcOH)。
HPLC RtM1=0.64 min；ESIMS：334[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 7.96(br s,1H),7.17(br s,1H),6.62-6.54(d,1H),6.54-6.45(d,1H),4.48(br s,2H),4.01(t,2H),3.88(br s,2H),3.28(s,3H),1.88(d,3H),1.63(s,3H)。
e)4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-醇
在0℃下將4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基胺(200 mg，0.60 mmol)於水(3.5 ml)及H2SO4(0.32 ml)中之溶液逐滴添加亞硝酸鈉(49.7 mg，0.72 mmol)於水(10 ml)中之溶液中。在室溫下攪拌混合物3天。過濾反應混合物且濾液用飽和NaHCO3水溶液淬滅且用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮，得到褐色油狀物。藉由矽膠急驟層析(DCM/MeOH 88：12至80：20)純化，得到呈褐色油狀之標題化合物(50 mg，25%產率)。
HPLC RtM1=0.78 min；ESIMS：335[(M+H)+]。
f)(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮
三苯膦(55 mg，0.21 mmol)於THF(2.5 ml)中之溶液用 DEAD(0.03 ml，0.21 mmol)處理，隨後用(R)-3-羥基-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(CAS登記號127423-61-4)(33 mg，0.18 mmol)及4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-醇(50 mg，0.15 mmol)處理。所得紅色/褐色溶液在70℃下攪拌18小時。將反應混合物冷卻至室溫，用EtOAc稀釋且用飽和NaHCO3水溶液洗滌。有機層經MgSO4乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 90：10至40：60)純化，得到呈橙色固體狀之標題化合物(44 mg，58%產率)。
HPLC RtM1=1.16 min；ESIMS：504[(M+H)+]。
g){(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮
(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮(44 mg，0.09 mmol)於DCM(4 ml)中之溶液在室溫下在氬氣下用TFA(0.07 ml，0.17 mmol)處理且攪拌18小時。反應混合物用飽和NaHCO3水溶液淬滅且有機溶液經由相分離筒柱分離，濃縮且藉由矽膠急驟層析(DCM/MeOH 100：0至90：10)純化。將所得產物溶於DCM(4 ml)中且添加Et3N。在0℃下向反應混合物中添加四氫-哌喃-4-甲醯氯(CAS登記號40191-32-0)(15 mg，0.10 mmol)且所得橙色溶液在室溫下攪拌4小時。反應混合物用飽和NaHCO3水溶液淬滅且有機 層藉由經相分離筒柱溶離來分離，濃縮且藉由SFC(管柱NH2(250×30 mm(l x w)，60A，5 μm，Princeton，甲醇於超臨界CO2中之梯度)純化，得到呈黃色油狀之標題化合物(15 mg，32%產率)。
HPLC RtM1=0.88 min；ESIMS：516[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6,375K)：δ 7.98(br s,1 H),7.19(br s,1 H),6.92-6.85(m,1 H),6.85-6.77(m,1 H),4.95(br s,1 H),4.12(t,2 H),3.92(t,2 H),3.88(br s,2 H),3.61(br s,3 H),3.38(td,2 H),3.27(s,3 H),2.68(d,1 H),2.56(s,3 H),2.17(br s,2 H),1.73(s,3 H),1.58(br s,4 H)。旋轉異構體。
實例X：{(S)-3-[4-(5-二氟甲基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-甲酮
a)6-溴-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]
6-溴-5-甲基-4H-苯并[1,4]-3-酮(CAS登記號1154740-47-2)(2.8 mg，11.56 mmol)於THF(50 ml)中之溶液在氬氣下用BH3*THF(1 M，於THF中，34.7 ml，34.70 mmol)處理且在回流下加熱2小時。添加MeOH且溶液在室溫下攪拌1小時，濃縮且藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 100：0至80：20)純化，得到呈橙色固體狀之標題化合物(1.8 g，68%產率)。
HPLC RtM1=1.04 min；ESIMS：228,230[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 6.68(d,1H),6.48(d,1H),5.54(br s,1H),4.04(t,2H),3.36-3.26(m,2H),2.11(s,3H)。
b)6-溴-4-(5-二氟甲基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]
6-溴-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4](500 mg，2.19 mmol)、中間物IA6(574 mg，2.41 mmol)、NaOtBu(421 mg，4.38 mmol)、BrettPhos(CAS登記號1070663-78-3)(59 mg，0.11 mmol)及[Brettphos]鈀環(CAS登記號1148148-01-9)(88 mg，0.11 mmol)於二烷(11 ml)中之溶液在100℃下攪拌18小時。再裝載催化劑及配位體且在100℃下繼續攪拌48小時。將反應混合物冷卻至室溫，用EtOAc稀釋且用飽和NaHCO3水溶液洗滌。有機層經MgSO4乾燥且濃縮，得到褐色油狀物。藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 100：0至80：20)純化，得到呈褐色油狀之標題化 合物(150 mg，18%產率)。
HPLC RtM1=1.34 min；ESIMS：385,387[(M+H)+]。
c)4-(5-二氟甲基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-醇
6-溴-4-(5-二氟甲基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4](150 mg，0.39 mmol)、含有KOH(65 mg，1.17 mmol)之水(0.33 ml)、四甲基-第三丁基-XPhos(CAS登記號857356-94-6)(18.72 mg，0.04 mmol)及Pd2(dba)3(17.83 mg，0.02 mmol)於二烷(2 ml)中之混合物用氮氣除氣且在100℃下加熱18小時。過濾，濃縮且藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 100：0至70：30)純化，得到呈橙色油狀之標題化合物(65 mg，52%產率)。
HPLC RtM1=1.01 min；ESIMS：323[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.83(s,1H),7.89(d,1H),7.36(d,1H),7.00(t,1H),6.61(d,1H),6.55(d,1H),3.93(t,2H),3.88(s,3H),3.65(t,2H),1.60(s,3H)。
d)(S)-3-[4-(5-二氟甲基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯
三苯膦(74 mg，0.28 mmol)於THF(2 ml)中之溶液用DEAD(0.04 ml，0.28 mmol)處理，隨後用(R)-3-羥基-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(CAS登記號127423-61-4)(45 mg，0.24 mmol)及4-(5-二氟甲基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-醇(65 mg，0.20 mmol)處理。所得紅色/褐色溶液在70℃下攪拌18小時，冷卻至室溫，用 EtOAc稀釋且用飽和NaHCO3水溶液洗滌。有機層經MgSO4乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 100：0至70：30)純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物(51 mg，42%產率)。
HPLC RtM1=1.36 min；ESIMS：492[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 7.92-7.75(m,1H),7.46-7.33(m,1H),7.19-6.84(t,1H),6.77(s,2H),4.86(br s,1H),3.98(br s,2H),3.88(s,3H),3.73-3.55(m,2H),3.46-3.33(m,2H),2.12-1.95(m,2H),1.65-1.55(m,3H),1.34(br s,9H)。旋轉異構體。
e){(S)-3-[4-(5-二氟甲基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4] -6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-甲酮
(S)-3-[4-(5-二氟甲基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(51 mg，0.10 mmol)於DCM(3 ml)中之溶液在室溫下在氬氣下用TFA(0.08 ml，1.10 mmol)處理且攪拌18小時。反應混合物用飽和NaHCO3水溶液淬滅且經由相分離來分離有機溶液，得到黃色溶液。添加1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-甲酸(CAS登記號64096-87-3)(25 mg，0.14 mmol)、Et3N(0.05 ml，0.33 mmol)、EDC(31 mg，0.16 mmol)及HOBT(25 mg，0.16 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物3小時。反應混合物用飽和NaHCO3水溶液淬滅。有機層藉由經相分離筒柱溶離來分離，粗產物經SFC(管 柱Reprosil NH2(250×30 mm(l x w)，60A，5 μm，Princeton，甲醇於超臨界CO2中之梯度)純化，得到呈黃色油狀之標題化合物(19 mg，30%產率)。
HPLC RtM1=1.00 min；ESIMS：552[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6,375K)：δ 7.85(br s,1 H),7.43(br s,1H),6.96(t,1H),6.80(s,2H),5.11-4.71(m,1H),4.04(t,2H),3.94(s,3H),3.70(d,2 H),3.63(br s,2 H),3.52(br s,2 H),3.23-3.04(m,4H),2.92-2.73(m,1H),2.16(br s,2 H),2.06(br s,4H),1.67(s,3 H)，旋轉異構體。
實例Y：2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基胺基]-2,3-二氫-苯并[1,4] -4-基}-菸腈
a)5-碘-2-甲氧基-菸腈
2-甲氧基-菸腈(CAS登記號7254-34-4)(10 g，74.6 mmol)及N-碘基丁二醯亞胺(CAS登記號516-12-1)(25.2 g，112 mmol)用三氟乙酸(CAS登記號76-05-1)(68.9 ml，895 mmol)及三氟乙酸酐(CAS登記號407-25-0)(31.6 ml，224 mmol)處理且反應混合物在90℃下加熱18小時，接著冷卻至室溫且傾倒於冰上。混合物使用30% NaOH水溶液緩慢鹼化，用水稀釋且用EtOAc萃取。有機層用20%硫代硫酸鈉水溶液及飽和NaHCO3水溶液依次洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 100：0至20：80)之後，獲得呈固體狀之標題化合物(12.2 g，63%產率)。
UPLC RtM14=1.30 min；ESIMS：261[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.54(d,1H),8.11(d,1H),4.06(s,3H)。
b)5-(6-溴-2,3-二氫-苯并[1,4] -4-基)-2-甲氧基-菸腈
6-溴-3,4-二氫-2H-苯并[1,4](CAS登記號105655-01-4)(5.0 g，23.36 mmol)、5-碘-2-甲氧基-菸腈(12.2 g，46.7 mmol)及NaOtBu(2.69 g，28.0 mmol)於甲苯(50 ml)中之混合物用氬氣除氣10分鐘，接著添加雙(三-第三丁基膦)鈀(0)(0.36 g，0.70 mmol)。反應混合物在110℃下在氬氣下攪拌18小時。冷卻至室溫之後，反應混合物經矽藻土過濾，用EtOAc沖洗且濾液用飽和NaHCO3水溶液洗滌。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且藉由矽膠急驟層析(環己 烷/EtOAc，100：0至50：50)純化，產生標題化合物(4.2 g，52%產率)。
UPLC RtM14=1.55 min；ESIMS：348[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.31(d,1H),7.80(d,1H),6.89(dd,1H),6.78(d,1H),6.67(d,1H),4.30-4.35(m,2H),4.10(s,3H),3.61-3.66(m,2H)。
c)(S)-3-[4-(5-氰基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-基胺基] -6-基胺基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯
5-(6-溴-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基)-2-甲氧基-菸腈(300 mg，0.87 mmol)、(S)-3-胺基-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(CAS登記號147081-44-5)(0.26 ml，1.47 mmol)、2-(二環己基膦基)聯苯(CAS登記號247940-06-3)(18.2 mg，0.05 mmol)及NaOtBu(100 mg，1.04 mmol)於甲苯(10 ml)中之混合物用氬氣除氣10分鐘，接著添加Pd2(dba)3(23.8 mg，0.03 mmol)。反應混合物在110℃下在氬氣下攪拌1小時。冷卻至室溫之後，反應混合物經矽藻土過濾，用EtOAc沖洗且濃縮濾液。矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc，100：0至70：30)之後，獲得呈黃色泡沫狀之標題化合物(150 mg，37%產率)。
UPLC RtM11=2.73 min；ESIMS：452[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CD3OD)：δ 8.36(d,1H),8.04(d,1H),6.68(s,1H),6.19(dd,1H),6.03(s,1H),4.19-4.24(m,2H),4.06(s,3H),3.81-3.89(m,1H),3.62-3.68(m,2H),3.48-3.56(m,1H),3.35-3.48(m,2H),3.08-3.18(m,1H),2.05- 2.18(m,1H),1.75-1.87(m,1H),1.46(s,9H)。
d)2-甲氧基-5-[6-((S)-吡咯啶-3-基胺基)-2,3-二氫-苯并[1,4] -4-基]-菸腈
(S)-3-[4-(5-氰基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基胺基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(144 mg，0.32 mmol)於CH2Cl2(4 ml)中之溶液用TFA(0.49 ml，6.38 mmol)處理。反應混合物在室溫下攪拌2小時，接著用飽和NaHCO3水溶液淬滅且用DCM萃取。有機層經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到呈黃色泡沫狀之標題產物(120 mg，100%產率)。
UPLC RtM11=2.06 min；ESIMS：352[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CD3OD)：δ 8.36(d,1H),8.04(d,1H),6.69(d,1H),6.17(dd,1H),6.00(d,1H),4.19-4.26(m,2H),4.06(s,3H),3.80-3.90(m,1H),3.62-3.69(m,2H),3.10-3.20(m,2H),2.98-3.09(m,1H),2.82-2.90(m,1H),2.06-2.18(m,1H),1.70-1.81(m,1H)。
e)2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基胺基]-2,3-二氫-苯并[1,4] -4-基}-菸腈
在0℃下，2-甲氧基-5-[6-((S)-吡咯啶-3-基胺基)-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基]-菸腈(27 mg，0.08 mmol)於CH2Cl2(1 ml)中之溶液用Et3N(0.02 ml，0.12 mmol)及四氫-哌喃-4-甲醯氯(CAS登記號40191-32-0)(11 μl，0.09 mmol)處理。反應混合物在0℃下攪拌1小時，接著用飽和NaHCO3水溶液淬滅且用DCM萃取。有機層經Na2SO4乾燥，過濾且 濃縮，且在製備型RP-HPLC(管柱Sunfire PrepC18 OBD 30×100 mm，5 μm；溶劑A：H2O+0.1 Vol.% TFA；溶劑B：CH3CN+0.1 Vol.% TFA，梯度5-60% B，在20分鐘內)且經Agilent PL-HCO3 MP SPE筒柱過濾之後，獲得呈黃色固體狀之標題化合物(9 mg，25%產率)。
UPLC RtM2=1.19 min；ESIMS：464[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CD3OD)：δ 8.36(d,1H),8.05(m,1H),6.69(dd,1H),6.15-6.23(m,1H),5.97-6.07(m,1H),4.15-4.29(m,2H),4.06(s,3H),3.82-4.03(m,3H),3.35-3.80(m,8H),2.65-2.84(m,1H),2.03-2.28(m,1H),1.49-2.03(m,5H)。
偶合條件 A)布查沃德胺化或羥基化
B)醯胺鍵形成條件
C)側鏈引入條件 CC1)使用甲磺酸酯
在室溫下，吡啶-2-醇中間物(1 eq.)及甲磺酸酯中間物(1.1-2 eq.)於DMF(0.17 M)中之無水溶液用存於礦物油中之NaH(2-3 eq.)處理且反應混合物在20-80℃下攪拌4至72小時。
CC2)使用甲磺酸酯
在室溫下，芳基-6-醇中間物(1 eq.)及甲磺酸酯中間物(1.1-2 eq.)於DMF(0.17 M)中之無水溶液用存於礦物油中之NaH(2-3 eq.)處理且反應混合物在50-80℃下攪拌4至72小時。
CC3)使用甲磺酸酯
在室溫下，芳基-6-醇中間物(1 eq.)及甲磺酸酯中間物(2.5 eq.)於DMF(0.06 M)中之無水溶液用K2CO3(4 eq.)處理且反應混合物在85℃至100℃下攪拌4至50小時。
CC4)使用光延反應
在室溫下，向三苯膦(1.4 eq.)於THF(0.30 M)中之溶液中添加DEAD(1.4 eq.)、(R)-3-羥基-吡咯啶-1-甲酸第三丁 酯(1.5 eq.)及芳基-6-醇中間物(1 eq.)。紅色/褐色溶液在70℃下攪拌18小時。
D)用於對掌性分離層析之條件
製備中間物 IA)芳族溴化物
中間物IA1：5-溴-2-甲烷磺醯基-3-甲基-吡啶
5-溴-2-甲基硫基-3-甲基-吡啶(9.04 g，41.4 mmol)於DCM(83 ml)中之溶液在0℃下用mCPBA(21.46 g，124 mmol)處理。在室溫下攪拌18小時之後，將反應混合物添加至2 N NaOH水溶液中且用DCM萃取。有機層經Na2SO4乾燥，濃縮且用環己烷濕磨之後，獲得呈白色固體狀之標題化合物(9.25 g，89%產率)。
UPLC RtM1=0.81 min；MS(ESI,m/z)：250.1[(M+H+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.68(d,1H),8.30(d,1H),3.37(s,3H),2.58(s,3H)。
中間物IA2：5-溴-3-氟-2-甲烷磺醯基-吡啶
5-溴-3-氟-2-甲基硫基-吡啶(222 mg，1.0 mmol)於DCM(5 ml)中之溶液在0℃下用mCPBA(518 mg，3.0 mmol)處理。在室溫下攪拌1.5小時之後，將反應混合物添加至2 N NaOH水溶液中且用DCM萃取。有機層經Na2SO4乾燥，濃縮且獲得呈白色固體狀之標題化合物(241 mg，95%產率)，其不經進一步純化即可使用。
UPLC RtM1=0.63 min；1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.75(d,1H),8.60(d,1H),3.40(s,3H)。
中間物IA3：5-溴-2-甲烷磺醯基-3-三氟甲基-吡啶
5-溴-2-甲基硫基-3-三氟甲基-吡啶(1.40 g，1.16 mmol)於DCM(30 ml)中之溶液在0℃下用mCPBA(2.67 g，15.48 mmol)處理。在室溫下攪拌18小時之後，將反應混合物添加至4 N NaOH水溶液中且用DCM萃取。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且在矽膠急驟層析(己烷/EtOAc，100：0至70：30)之後，獲得呈白色固體狀之標題化合物(940 mg，60%產率)。
UPLC RtM1=0.87 min；MS(ESI,m/z)：323.0[(M+NH4)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 9.45(d,1H),8.76(d,1H),3.57(s,3H)。
中間物IA4：5-溴-3-二氟甲基-2-甲烷磺醯基-吡啶 a)2,5-二溴-3-二氟甲基-吡啶
三氟化Et3N(1.80 ml，11.3 mmol)於DCM(40 ml)中之溶液在0℃下用Xtalfluor-E(2.67 g，15.5 mmol)及2,5-二溴-吡啶-3-甲醛(1.0 g，3.77 mmol)處理。在室溫下攪拌19小時之後，反應混合物用TBME稀釋且用飽和NaHCO3水溶液洗滌。有機層經Na2SO4乾燥，濃縮，得到黃色油狀物(950 mg，88%產率)，其不經進一步純化即可使用。
UPLC RtM1=1.05 min；1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.57(d,1H),8.48(d,1H),7.14(t,1H),3.35(s,3H)。
b)5-溴-3-二氟甲基-2-甲烷磺醯基-吡啶
2,5-二溴-3-二氟甲基-吡啶(1400 mg，1.16 mmol)於DMF(10 ml)中之溶液在0℃下用甲硫醇鈉(348 mg，4.97 mmol)處理。在室溫下攪拌1.5小時之後，在0℃下冷卻反應物且向反應混合物中添加mCPBA(2857 mg，16.56 mmol)。在 室溫下攪拌1小時之後，將反應混合物添加至4 N NaOH水溶液中且用TBME萃取。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且在矽膠急驟層析(己烷/EtOAc，100/0至80/20)之後，獲得呈白色固體狀之標題化合物(498 mg，53%產率)。
UPLC RtM1=0.86 min；1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.67(d,1H),8.45(d,1H),7.37(t,1H),3.37(s,3H)。
中間物IA5：5-溴-3-氟甲基-2-甲烷磺醯基-吡啶 a)5-溴-2-氯-3-氟甲基-吡啶
三氟化Et3N(1.76 ml，10.79 mmol)於DCM(20 ml)中之溶液在0℃下用Xtalfluor-E(1.65 g，7.19 mmol)及(5-溴-2-氯-吡啶-3-基)-甲醇(0.80 g，3.60 mmol)處理。在室溫下攪拌18小時之後，反應混合物用TBME稀釋且用飽和NaHCO3水溶液洗滌。有機層經Na2SO4乾燥，濃縮且在矽膠急驟層析(己烷/EtOAc，100/0至90/10)之後，獲得呈無色油狀之標題化合物(286 mg，35%產率)。
UPLC RtM1=0.98 min；1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.53(d,1H),8.45(d,1H),5.52(d,1H)。
b)5-溴-3-氟甲基-2-甲烷磺醯基-吡啶
2,5-二溴-3-二氟甲基-吡啶(1.4 g，1.16 mmol)於DMF(10 ml)中之溶液在0℃下用甲硫醇鈉(348 mg，4.97 mmol)處理。在室溫下攪拌1.5小時之後，將反應物冷卻至0℃且向反應混合物引入mCPBA(2857 mg，16.56 mmol)。在室溫 下攪拌1小時之後，將反應混合物添加至4 N NaOH水溶液中且用TBME萃取。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且在矽膠急驟層析(己烷/EtOAc，100/0至80/20)之後，獲得呈白色固體狀之標題化合物(498 mg，53%產率)。
UPLC RtM1=0.86 min；1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.67(d,1H),8.45(d,1H),7.37(t,1H),3.37(s,3H)。
中間物IA7：5-溴-3-氟甲基-2-甲氧基-吡啶
(5-溴-2-甲氧基-吡啶-3-基)-甲醇(343 mg，1.57 mmol)於DCM(7 ml)中之溶液在0℃下用deoxofluor(1.5 ml，3.46 mmol)及EtOH(27.6 μl，0.47 mmol)處理。反應混合物在室溫下攪拌，接著用飽和NaHCO3水溶液淬滅且用DCM萃取。有機層經Na2SO4乾燥，濃縮，矽膠急驟層析(己烷/EtOAc 80：20)之後，得到呈黃色油狀之標題化合物(80 mg，23%產率)。
UPLC RtM1=1.07 min；1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.32(t,1H),8.00(t,1H),5.37(d,2H),3.89(s,3H)。
中間物IA24：1-(5-溴-2-甲氧基-吡啶-3-磺醯基)-4-甲基-哌嗪 a)(5-溴-2-甲烷磺醯基-吡啶-3-基)-甲基-胺
5-溴-2-氯-吡啶-3-磺醯氯(CAS登記號1146290-19-8)(580 mg，1.99 mmol)及Et3N(0.55 ml，3.99 mmol)於DCM(20 ml)中之溶液在0℃下用1-甲基-哌嗪(0.33 ml，2.99 mmol)處理，所得混合物在0℃下攪拌20分鐘且在室溫下攪拌18小時。混合物用DCM(30 ml)稀釋且用飽和NaHCO3水溶液洗滌。有機層經MgSO4乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析(DCM/MeOH 100：0至90：10)純化，得到呈橙色固體狀之標題化合物(420 mg，59%產率)。
HPLC RtM2=1.49 min；ESIMS：356[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.62(d,1H),8.50(d,1H),3.57-3.29(t,4H),2.50(t,4H),2.33(s,3H)。
b)1-(5-溴-2-甲氧基-吡啶-3-磺醯基)-4-甲基-哌嗪
1-(5-溴-2-氯-吡啶-3-磺醯基)-4-甲基-哌嗪(420 mg，1.18 mmol)於THF(10 ml)中之溶液用甲醇鈉(192 mg，3.55 mmol)逐份處理。所得混合物在室溫下攪拌18小時。混合物藉由添加水淬滅且用EtOAc萃取。合併之有機層用飽和NaHCO3水溶液洗滌且經MgSO4乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析(DCM/MeOH 100：0至90：10)純化，得到標題化合物(358 mg，85%產率)。
HPLC RtM2=1.47 min；ESIMS：350,352[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.36(d,1H),8.28(d,1H),4.05(s,3H),3.35(br s,4 H),2.49(br s,4 H),2.33(s,3H)。
中間物IA30：3-溴-5-(丙烷-2-磺醯基)-吡啶
3,5-二溴-吡啶(CAS登記號625-92-3)(495 mg，2.09 mmol)於NMP(5 ml)中之溶液用丙烷-2-硫醇鈉(CAS登記號20607-43-6)(205 mg，2.09 mmol)處理，所得混合物在80℃下攪拌2小時。將混合物冷卻且用EtOAc稀釋，用水洗滌(2次)，接著用鹽水洗滌。有機層經MgSO4乾燥且濃縮。所得殘餘物溶於DCM(10 ml)中，用mCPBA(1083 mg，6.27 mmol)處理且在室溫下攪拌18小時。添加10%亞硫酸鈉水溶液且在室溫下攪拌混合物1小時。分離各相且有機層用飽和NaHCO3水溶液洗滌，經MgSO4乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 100：0至00：100)純化，得到標題化合物(364 mg，59%產率)。
HPLC RtM2=0.77 min；ESIMS：264,266[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.98(dd,2H),8.33(t,1H),3.34-3.17(m,1H),1.37(d,6H)。
中間物IA44：5-溴-2-乙烷亞磺醯基-吡啶 a)5-溴-2-乙基硫基-吡啶
2,5-二溴-吡啶(CAS登記號588729-99-1)(1.15 g，4.85 mmol)及乙硫醇鈉(CAS登記號811-51-8)(2.04 g，24.27 mmol)於DMSO(15 ml)中之混合物在室溫下攪拌18小時。添加水且混合物用DCM萃取。有機層藉由通過相分離筒柱而加以乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 100：0至70：30)純化，得到呈橙色油狀之標題化合物(1.09 g，92%產率)。
HPLC RtM2=1.25 min；ESIMS：218,220[(M+H)+]。
b)5-溴-2-乙烷亞磺醯基-吡啶
5-溴-2-乙基硫基-吡啶(1.09 g，4.49 mmol)於DCM(15 ml)中之溶液用mCPBA(1.55 g，8.98 mmol)處理。所得溶液在室溫下攪拌15分鐘。混合物藉由添加2 M NaOH水溶液來淬滅且用DCM萃取。合併之有機層經MgSO4乾燥且濃縮。化合物藉由製備型RP-HPLC(管柱SunFire C18 OBD，梯度5-60% ACN，在15分鐘內)純化，得到呈無色油狀之標題化合物(490 mg，45%產率)
HPLC RtM2=0.65 min；ESIMS：234,236[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.85(d,1H),8.37(dd,1H),7.80(d,1H),3.33(s,2H),3.27-3.10(m,1H),2.94-2.72(m,1 H),1.01(t,3 H)。
中間物IA45：5-溴-2-甲烷磺醯基-3-甲氧基吡啶 a)5-溴-3-甲氧基-2-甲基硫基-吡啶
2,5-二溴-3-甲氧基-吡啶(CAS登記號1142191-57-8)(550 mg，2.06 mmol)及甲硫醇鈉(CAS登記號5188-07-8)(722 mg，10.30 mmol)於DMSO(1.5 ml)中之混合物在室溫下攪拌0.5小時。添加水且混合物用DCM萃取。有機層藉由通過相分離筒柱而加以乾燥且濃縮，得到呈無色油狀之標題化合物(1.50 g，93%產率，粗物質)。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.19(d,1H),7.53(d,1H),3.89(s,3H),3.32(s,3H)。
b)5-溴-2-甲烷磺醯基-3-甲氧基吡啶
5-溴-3-甲氧基-2-甲基硫基-吡啶(1.50 g，2.24 mmol)於DCM(10 ml)中之溶液用mCPBA(1.55 g，8.97 mmol)處 理。所得混合物在室溫下攪拌18小時。混合物藉由添加2 M NaOH水溶液來淬滅且用DCM萃取。有機層藉由通過相分離筒柱而加以乾燥且濃縮，得到標題化合物(400 mg，33%產率，粗物質)。
HPLC RtM2=0.75 min；ESIMS：268[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.41(d,1H),8.17(s,1H),4.01(s,3H),3.30(s,3H)。
中間物IA51：(5-溴-2-甲烷磺醯基-吡啶-3-基)-甲基-胺 a)(5-溴-2-氯-吡啶-3-基)-甲基-胺
5-溴-2-氯-吡啶-3-基胺(CAS登記號588729-99-1)(565 mg，2.72 mmol)於THF(4 ml)中之溶液在0℃下用含有1.6 M BuLi之己烷(0.17 ml，0.17 mmol)處理，所得混合物在0℃下攪拌0.5小時，接著緩慢添加碘甲烷(0.17 ml，2.72 mmol)。反應混合物溫熱至室溫且攪拌18小時。將橙色/褐色混合物傾注於飽和NaHCO3水溶液中，且用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 95：5至60：40)純化，得到呈橙色固體狀之標題化合物(354 mg，59%產率)。
HPLC RtM1=0.94 min；ESIMS：221,223,225[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 7.65(d,1H),7.14(d,1H),6.11(d,1H),2.74(d,3H)。
b)(5-溴-2-甲烷磺醯基-吡啶-3-基)-甲基-胺
(5-溴-2-氯-吡啶-3-基)-甲基-胺(354 mg，1.60 mmol)於DMF(2.6 ml)中之溶液在0℃下用甲硫醇鈉(168 mg，2.40 mmol)處理。所得溶液在室溫下攪拌2天且在60℃下加熱4天。混合物在0℃下藉由添加2 M NaOH水溶液來淬滅且用DCM萃取。合併之有機層經MgSO4乾燥且濃縮，得到橙色油狀物，將其溶於DCM(5 ml)中且在0℃下用mCPBA(CAS登記號937-14-4)(827 mg，4.79 mmol)處理且在室溫下攪拌18小時。混合物在0℃下藉由添加2 M NaOH水溶液來淬滅且用DCM萃取。合併之有機物經MgSO4乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 92：8至32：68)純化，得到呈橙色固體狀之標題化合物(174 mg，41%產率)。
HPLC RtM1=0.78 min；ESIMS：265,267[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 7.95(d,1H),7.50(d,1H),6.70-6.59(m,1H),3.26(s,3H),2.82(d,3H)。
中間物IA52：(5-溴-2-甲烷磺醯基-吡啶-3-基)-二甲基-胺 a)(5-溴-2-氯-吡啶-3-基)-甲基-胺
5-溴-2-氯-吡啶-3-基胺(CAS登記號588729-99-1)(1 g，4.82 mmol)於THF(7 ml)中之溶液在0℃下用含有1.6 M BuLi之己烷(6 ml，9.64 mmol)處理，所得混合物在0℃下攪拌0.5小時，接著緩慢添加碘甲烷(0.60 ml，9.64 mmol)。反應混合物在室溫下溫熱且攪拌18小時。將橙色/褐色混合物傾倒於飽和NaHCO3水溶液上且用EtOAc萃取，有機層經MgSO4乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 95：05至70：30)純化，得到呈橙色固體狀之標題化合物(182 mg，17%產率)。
HPLC RtM1=0.94 min；ESIMS：221,223[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 7.65(d,1H),7.14(d,1H),6.11(d,1H),2.74(d,3H)。
b)(5-溴-2-氯-吡啶-3-基)-二甲基-胺
(5-溴-2-氯-吡啶-3-基)-甲基-胺(182 mg，0.82 mmol)於DMF(4 ml)中之溶液在室溫下用NaH(23 mg，0.99 mmol)處理，且混合物在室溫下攪拌0.5小時，添加碘甲烷(0.06 ml，0.99 mmol)且所得混合物在室溫下攪拌1小時。混合物用TBME稀釋且用飽和NaHCO3水溶液洗滌，有機層經MgSO4乾燥且濃縮，得到呈橙色油狀之標題化合物(174 mg，90%產率)。其不經進一步純化即可使用。
HPLC RtM1=1.03 min；ESIMS：235,237[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.10(d,1H),7.70(d,1H),2.78(s,6H)。
c)(5-溴-2-甲烷磺醯基-吡啶-3-基)-甲基-胺
(5-溴-2-氯-吡啶-3-基)-二甲基-胺(174 mg，0.74 mmol)於DMF(5 ml)中之溶液在室溫下用甲硫醇鈉(104 mg，1.48 mmol)處理，所得溶液在80℃下攪拌18小時。在0℃下，混合物藉由添加2 M NaOH水溶液淬滅，接著用TBME萃取。合併之有機層經MgSO4乾燥且濃縮，得到橙色油狀物，將其溶於DCM(5 ml)中且在0℃下用mCPBA(CAS登記號937-14-4)(382 mg，2.21 mmol)處理且在室溫下攪拌18小時。在0℃下，混合物藉由添加2 M NaOH水溶液淬滅，接著用DCM萃取。合併之有機層經MgSO4乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 88：12至00：100)純化，得到呈橙色固體狀之標題化合物(50 mg，24%產率)。
HPLC RtM1=0.83 min；ESIMS：279,281[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 8.25(d,1H),7.90(d,1H),3.29(s,3H),2.91(s,6H)。
中間物IA65：5-溴-2,N-二甲氧基-苯磺醯胺
5-溴-2-甲氧基-苯磺醯氯(CAS登記號23095-05-8)(218 mg，0.76 mmol)及Et3N(0.55 ml，3.99 mmol)於DCM(20 ml)中之溶液在0℃下攪拌15分鐘且用O-甲基羥胺(36 mg，0.76 mmol)處理，所得混合物在室溫下攪拌18小時。混合物分配於EtOAc與水之間。有機層用飽和NaHCO3水溶液洗滌，經MgSO4乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 100：0至0：100)純化，得到標題化合物(189 mg，84%產率)。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 8.10(d,1 H),7.78(s,1 H),7.72(dd,1 H),6.97(d,1 H),4.01(s,3 H),3.81(s,3 H)。
IB)羧酸或酸氯化物
實例IB1/IB2：(S)-四氫-呋喃-3-甲酸/(R)-四氫-呋喃-3-甲酸 a)四氫-呋喃-3-甲酸苯甲酯
四氫-呋喃-3-甲酸(CAS登記號89364-31-8)(4.00 g，34.40 mmol)於DMF(20 ml)中之溶液在100℃下用K2CO3(9.52 g，68.9 mmol)及溴化苄(CAS登記號100-39-0)(8.18 ml，68.9 mmol)處理18小時。將混合物冷卻至室溫，用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌。合併之有機層經MgSO4乾燥，濃縮且藉由矽膠急驟層析(環己烷/EtOAc 92：8至34：66)純化，得到呈無色油狀之標題化合物(6.93 g，98%產率)。
HPLC RtM2=0.94 min；ESIMS：207[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 7.50-7.26(m,5H),5.17(m,2H),4.05-3.75(m,4H),3.29-3.05(m,1H),2.36-2.09(m,2H)。
b)四氫-呋喃-3-甲酸苯甲酯之對映異構體分離
方法資訊：
管柱：Chiralpak AD-PREP
溶劑：HEPTANE/ETOH/MEOH 95/2.5/2.5
流量：1.0 ml/min
長模式：210 nm
引擎(Engine)：Agilent 1200 DAD Magellan
溶液：EtOH
將6.347 g外消旋物分離之後，獲得2個峰：位於9.086 min之峰1(2.43 g，ee>99%)及位於10.584 min之峰2(2.19 g，ee>99%)。
HPLC(峰1或2)RtM2=0.92 min；ESIMS：207[(M+H)+]。
1H NMR(峰1)(400 MHz,CDCl3)：δ 7.48-7.29(m,5H),5.23-5.07(m,2H),4.05-3.77(m,4H),3.23-3.10(m,1H),2.35-2.06(m,2H)。
1H NMR(峰2)(400 MHz,CDCl3)：δ 7.51-7.31(m,5H),5.23-5.09(m,2H),4.07-3.77(m,4H),3.24-3.07(m,1H),2.35-2.06(m,2H)。
c)(S)-四氫-呋喃-3-甲酸/(R)-四氫-呋喃-3-甲酸
對映異構性純的四氫-呋喃-3-甲酸苯甲酯(峰1或峰2，200 mg，0.97 mmol)、Pd/C(103 mg，0.97 mmol)於EtOH(2 ml)中的溶液在室溫下用H2氫化18小時。過濾反應混合物且濃縮濾液，得到呈無色油狀之標題化合物(125 mg(峰1)，111 mg(峰2)，粗物質)。
1H NMR(均為對映異構體)(400 MHz,DMSO-d6)：δ 12.40(br s,1H),3.84-3.59(m,4H),3.00(m,1H),2.08-1.92(m,1H)。
實例IB3)：5-第三丁氧基羰基胺基-1-甲基-1H-咪唑-4-甲酸 a)5-二(第三丁氧基羰基)胺基-1-甲基-1H-咪唑-4-甲酸乙酯
5-胺基-1-甲基-1H-咪唑-4-甲酸乙酯(CAS登記號54147-04-5)(82 mg，0.49 mmol)於THF(4 ml)中之溶液在-50℃下用1 M LiHMDS之THF溶液(0.97 ml，0.97 mmol)處理且反應混合物在-50℃下攪拌10分鐘，接著添加Boc2O(237 mg，1.07 mmol)於THF(1.5 ml)中之溶液。反應混合物緩慢溫熱至室溫，接著溫熱至50℃且在50℃下攪拌15小時。將反應混合物冷卻至室溫，用EtOAc稀釋且用H2O淬滅。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且在矽膠急驟層析(庚烷/EtOAc，85：15至0：100)之後，獲得呈白色固體狀之標題化合物(140 mg，78%產率)。
UPLC RtM1=0.96 min；ESIMS：370[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3,298 K)：δ 4.33(q,2H),3.50(s,3H),1.41(s,18H),1.35(t,3H)。
b)5-第三丁氧基羰基胺基-1-甲基-1H-咪唑-4-甲酸
5-二(第三丁氧基羰基)胺基-1-甲基-1H-咪唑-4-甲酸乙酯(167 mg，0.452 mmol)於THF(2.2 ml)及H2O(2.2 ml)中之溶液用LiOH(54.1 mg，2.26 mmol)處理且反應混合物在室溫下攪拌18小時，接著用1 M HCl水溶液淬滅，達成pH 2且用EtOAc萃取。有機層經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮，得到標題化合物。(70 mg，65%產率)。
UPLC RtM1=0.47 min；ESIMS：242[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 12.42(br.s.,1H),8.98(br.s.,1H),7.82(s,1H),3.45(s,3H),1.41(s,9H)。
IC)吡咯啶醇衍生物或類似物
中間物IC1：甲烷磺酸(R)-1-(四氫-2H-哌喃-4-羰基)吡咯啶-3-基酯 a)((R)-3-羥基-吡咯啶-1-基)-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮
將乙二醯氯(0.20 ml，3.84 mmol)添加至四氫-哌喃-4-甲酸(CAS登記號5337-03-1)及DMF(0.012 ml，0.15 mmol)之溶液中。反應混合物在3℃下攪拌1小時。反應混合物在減壓(170毫巴)下在40℃下(水浴)濃縮，得到呈無色油狀之醯基中間物。將中間物溶於DCM(2 ml)中且添加至(R)-吡咯啶-3-醇鹽酸鹽(CAS登記號104706-47-0)(190 mg，1.54 mmol)於DCM(3 ml)中之溶液中，冷卻至3℃，所形成之白色懸浮液在3℃下攪拌1小時。濃縮反應混合物；向殘餘物中添加EtOAc，濾出且用EtOAc洗滌。濃縮且濾液藉由矽膠急驟層析(DCM/DCM：MeOH(9：1)，100：0至60：40，經11分鐘)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(250 mg，82%產率)。
ESIMS：200[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 4.43-4.65(m,1H),3.95-4.16(m,2H),3.30-3.82(m,6H),2.45-2.75(m,1H),1.83-2.30(m,4H),1.54-1.78(m,3H)。
b)甲烷磺酸(R)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)吡咯啶-3-基酯
在氬氣下，在-10℃下將甲烷磺醯氯(CAS登記號124-63-0)(3.52 ml，45.2 mmol)添加至((R)-3-羥基-吡咯啶-1-基)-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮(6 g，22.6 mmol)及Et3N(6.30 ml，45.2 mmol)於DCM(100 ml)中之溶液中。溶液在0℃下攪拌1小時，用H2O及DCM稀釋，有機層用H2O及鹽水洗滌兩次且經MgSO4乾燥。濃縮且所得油狀物用乙醚濕磨，得到呈灰白色固體狀之標題化合物(5.3 g，84%)。
ESIMS：278[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 5.22-5.44(m,1H),3.96-4.13(m,2H),3.85-3.96(m,1H),3.56-3.83(m,3H),3.36-3.53(m,2H),3.08(d,3H),2.07-2.75(m,3H),1.93(m,2H),1.51-1.75(m,3H)。
中間物IC2：甲烷磺酸(S)-(四氫-哌喃-4-羰基)吡咯啶-3-基酯 a)((S)-3-羥基-吡咯啶-1-基)-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮
將四氫-哌喃-4-甲醯氯(CAS登記號40191-32-0)(316 mg，2.02 mmol)於DCM(2 ml)中之溶液逐滴添加 (0℃<T<10℃)至(S)-吡咯啶-3-醇(CAS登記號100243-39-8)(250 mg，2.02 mmol)及Et3N(0.62 ml，4.45 mmol)於DCM(5 ml)中之溶液中。反應混合物在3℃下攪拌1小時。濃縮揮發物且向殘餘物中添加EtOAc，濾出剩餘固體且用EtOAc洗滌，濃縮濾液，得到呈白色固體狀之標題化合物(390 mg，97%產率)。
ESIMS：200[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 4.55(d,1H),3.96-4.11(m,2H),3.36-3.80(m,6H),2.48-2.74(m,1H),1.52-2.20(m,7H)。
b)甲烷磺酸(S)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基酯
在氬氣下，在-10℃下將甲烷磺醯氯(CAS登記號124-63-0)(0.23 ml，2.94 mmol)添加至((S)-3-羥基-吡咯啶-1-基)-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮(0.39 g，1.96 mmol)及Et3N(0.55 ml，3.91 mmol)於DCM(10 ml)中之溶液中。溶液在3℃下攪拌1小時，用H2O及DCM稀釋，有機層用H2O及鹽水洗滌兩次，接著經MgSO4乾燥。濃縮且所得油狀物用乙醚濕磨，得到呈白色固體狀之標題化合物(0.45 g，83%產率)。
ESIMS：278[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 5.25-5.44(m,1H),3.99-4.16(m,2H),3.85-3.95(m,1H),3.56-3.83(m,3H),3.37-3.54(m,2H),3.08(d,3H),2.09-2.78(m,3H),1.93(m,2H),1.51-1.76(m,2H)。
中間物IC3：甲烷磺酸(S)-1-丙醯基-吡咯啶-3-基酯 a)1-((S)-3-羥基-吡咯啶-1-基)-丙-1-酮
在5℃下經15分鐘將丙醯氯(CAS登記號79-03-8)(4.78 ml，54.8 mmol)逐滴添加至(S)-吡咯啶-3-醇(CAS登記號100243-39-8)(4.8 g，55.9 mmol)及Et3N(8.74 ml，63.1 mmol)之溶液中，溶液溫熱至室溫且攪拌1小時。向溶液中添加H2O(10 ml)及飽和NaHCO3水溶液(10 ml)，有機相用鹽水(10 ml)及0.25 M HCl水溶液(20 ml)洗滌。將合併之水層濃縮且用EtOAc(2×100 ml)萃取，合併之有機相經MgSO4乾燥且濃縮，得到呈淺黃色油狀之標題化合物(4.80 g，54%產率)。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 4.54(d,1H),3.31-3.73(m,3H),3.12(m,1H),1.82-2.46(m,5H),1.17(t,3H)。
b)甲烷磺酸(S)-1-丙醯基-吡咯啶-3-基酯
在氬氣下，在5℃下經10分鐘將甲烷磺醯氯(CAS登記號124-63-0)(1.36 ml，17.46 mmol)添加至1-((S)-3-羥基-吡咯啶-1-基)-丙-1-酮(2.5 g，17.4 mmol)及Et3N(2.43 ml，17.4 mmol)於DCM(50 ml)中之溶液中。溶液溫熱至室溫且攪拌18小時，接著向反應混合物中添加甲烷磺醯氯(CAS登記號124-63-0)(1.36 ml，17.46 mmol)及Et3N(2.43 ml，17.4 mmol)，在室溫下攪拌48小時。向溶液中添加DCM及H2O且有機相經由相分離筒柱分離，濃縮且在矽膠急驟層析(EtOAc/MeOH 100：0至95：5，經40分鐘)之後，獲得呈無色油狀之標題化合物(2.7 g，66%產率)。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 5.19-5.42(m,1H),3.48-3.99(m,4H),3.06(d,3H).2.04-2.54(m,4H),1.16(t,3H)。
中間物IC4：甲烷磺酸(R)-1-丙醯基-吡咯啶-3-基酯 a)1-((R)-3-羥基-吡咯啶-1-基)-丙-1-酮
經15分鐘向(R)-吡咯啶-3-醇(CAS登記號2799-21-5)(10 g，81 mmol)及Et3N(23.6 ml，170 mmol)於DCM(150 ml)中之懸浮液(已在-10℃下預冷卻)中添加(0℃<T<10℃)丙醯氯(CAS登記號79-03-8)(7.06 ml，81 mmol)。灰白色懸浮液在0℃下攪拌2小時，添加MeOH(9.82 ml，243 mmol)且混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮且用Et2O(200 ml)稀釋 殘餘物，過濾且濃縮濾液之後，得到呈黃色油狀之標題化合物(11.2 g，95%)。
ESIMS：144[(M+H)+]。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 4.81-5.04(m,1H),4.15-4.38(m,1H),3.35-3.59(m,2H),3.16-3.29(m,2H),2.11-2.33(m,2H),1.65-2.00(m,2H),0.98(td,3H)。
b)甲烷磺酸(R)-1-丙醯基-吡咯啶-3-基酯
在氬氣下，在5℃下經5分鐘向1-((R)-3-羥基-吡咯啶-1-基)-丙-1-酮(300 mg，2.09 mmol)及Et3N(0.29 ml，2.09 mmol)於DCM(10 ml)中之溶液中逐滴添加甲烷磺醯氯(CAS登記號124-63-0)(0.16 ml，2.09 mmol)，反應混合物在室溫下攪拌18小時。接著向反應混合物中添加甲烷磺醯氯(CAS登記號124-63-0)(0.16 ml，2.09 mmol)及Et3N(0.29 ml，2.09 mmol)，在室溫下攪拌48小時。向溶液中添加DCM及H2O，且有機相經由相分離筒柱分離且濃縮。矽膠急驟層析(EtOAc/MeOH 100：0至95：5，經25分鐘)之後，獲得呈無色油狀之標題化合物(420 mg，86%)。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 5.21-5.44(m,1H).3.49-4.03(m,4H),2.98-3.12(m,3H),1.97-2.54(m,4H),1.18(t,3H)。
ID)DBO衍生物或類似物
生物學評估
本發明化合物之活性可藉由以下活體外及活體內方法來評估。
生物學分析 1測定酶PI3Kα及PI3Kδ同功異型物抑制 1.1測試脂質激酶活性
實例1至117之化合物作為PI3激酶抑制劑的功效可如下證明：激酶反應係在COSTAR 96孔半區板中以每孔50 μl之最終體積進行。在該分析中，ATP及磷脂醯肌醇之最終濃度分別為5 μM及6 μg/mL。藉由添加PI3激酶(例如PI3激酶δ)來起始反應。
p110δ。如下每孔添加分析中之各組分：
˙第2-1行每孔添加10 μl含有測試化合物之5% DMSO。
˙藉由第1行開頭4個孔中及第12行最後4孔中添加10 μl 5%(vol/vol)DMSO來測定總活性。
˙藉由在第1行最後4個孔及第12行開頭4個孔中添加10 μM對照化合物來測定背景值。
˙每個板製備2 mL『分析混合物』：1.912 mL HEPES分析緩衝液
8.33 μl之3 mM ATP儲備液，得到每孔5 μM的最終濃度
在活性日(activity date)，添加1 μl[33P]ATP，得到每孔0.05 μCi
30 μl之1 mg/mL PI儲備液，得到每孔6 μg/ml的最終濃度
5 μl之1 M MgCl2儲備液，得到每孔1 mM的最終濃度
˙每孔添加20 μl分析混合物。
˙每個板製備2 mL『酶混合物』(x* μl PI3激酶p110β存在於2mL激酶緩衝液中)。『酶混合物』在添加至分析板期間，保持在冰上。
˙每孔添加20 μl『酶混合物』以起始反應。
˙接著在室溫下培育板90分鐘。
˙藉由每孔添加50 μl WGA-SPA珠粒(經小麥胚凝集素塗佈之閃爍近接分析珠粒)懸浮液來終止反應。
˙使用TopSeal-S(用於聚苯乙烯微定量板的熱封，PerkinElmer LAS[Deutschland]GmbH,Rodgau,Germany)將分析板密封且在室溫下培育至少60分鐘。
˙分析板接著使用Jouan bench top離心機(Jouan Inc.,Nantes,France)以1500 rpm離心2分鐘。
˙使用Packard TopCount對分析板進行計數，每孔計數20秒。
*酶之體積與所用批次之酶活性有關。
在一個更佳分析中，激酶反應係在低容量非結合型 CORNING 384孔黑色板(產品目錄號3676)中以每孔10 μl之最終體積進行。在該分析中，ATP及磷脂醯肌醇(PI)之最終濃度分別為1 μM及10 μg/ml。藉由添加ATP來起始反應。
如下每孔添加分析中之各組分：第1至20行每孔添加50 nl含有測試化合物的90% DMSO，一次8種濃度(1/3及1/3.33連續稀釋步驟)。
‧低對照物：第23至24行之一半孔中為50 nl 90% DMSO(最終為0.45%)。
‧高對照物：第23至24行之另一半孔中為50 nl參考化合物(例如WO 2006/122806中之實例7之化合物)(最終為2.5 μM)。
‧標準物：第21至22行中為50 nl如剛剛提及之參考化合物，作為測試化合物加以稀釋。
‧每次分析製備20 mL『緩衝液』：200 μl之1 M TRIS HCl pH7.5(最終10 mM)
60 μl之1 M MgCl2(最終3 mM)
500 μl之2 M NaCl(最終50 mM)
100 μl之10% CHAPS(最終0.05%)
200 μl之100 mM DTT(最終1 mM)
18.94 mL超純水
‧每次分析製備10 mL『PI』：200 μl於3%辛基葡糖苷中製備之1 mg/mL 1-α-磷脂醯肌醇(Liver Bovine,Avanti Polar Lipids，產品目錄號 840042C，MW=909.12)(最終為10 μg/mL)
9.8 mL『緩衝液』
‧每次分析製備10 mL『ATP』：6.7 μl之3 mM ATP儲備液，得到每孔1 μM的最終濃度10 mL『緩衝液』
‧每次分析在『PI』中製備2.5 mL各PI3K構築體，最終濃度如下：
10 nM PI3K α EMV B1075
25 nM β EMV BV949
10 nM δ EMV BV1060
150 nM γ EMV BV950
‧每孔添加5 μl『PI/PI3K』。
‧每孔添加5 μl『ATP』以起始反應。
‧接著在室溫下培育板60分鐘(α、β、δ)或120分鐘(γ)。
‧藉由添加10 μl激酶-Glo(Promega產品目錄號6714)來終止反應。
‧10分鐘之後，用Synergy 2讀取器(BioTek,Vermont USA)、以100毫秒之積分時間及設定為191的靈敏度讀取分析板。
‧輸出：高對照物計數為約60'000個且低對照物計數為30'000或低於30'000個
‧此發光分析得到0.4與0.7之間的有用Z'比率
Z'值為分析之可靠性之通用量度。Z'在0.5與1.0之間被視為極好分析。
對於此分析而言，如下製備所提及之PI3K構築體：
1.2產生基因構築體
使用兩種不同構築體BV 1052及BV 1075產生PI3激酶α蛋白質用於化合物篩選。
PI3Kα BV-1052 p85(iSH2)-Gly連接子-p110a(D20aa)-C端His標籤
針對p85亞單元之SH2內結構域(iSH2)及p110-a亞單元(缺失開頭20個胺基酸)產生PCR產物且藉由重疊PCR進行融合。
首先使用引子gwG130-p01(5'-CGAGAATATGATAGATTATATGAAGAAT-3')(SEQ ID NO：1)及gwG130-p02(5'-TGGTTT-AATGCTGTTCATACGTTTGTCAAT-3')(SEQ ID NO：2)，自第一股cDNA產生iSH2 PCR產物。隨後在第二PCR反應中，使用引子gwG130-p03(5'-GGGACAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCTACGAAGGAGATATACATAT-GCGAGAATATGATAGATTATATGAAGAAT-3')(SEQ ID NO：3)及gwG152-p04(5'-TACCATAATTCCACCACCACCACCGGAAATTCCCCCTGGTTT-AATGCTGTTCATACGTTTGTCAAT-3')(SEQ ID NO：4)分別在p85 iSH2片段之5'端及3'端添加Gateway(Invitrogen AG,Basel,Switzerland)重組AttB1位點及連接子序列。
亦首先使用引子gwG152-p01(5'- CTAGTGGAATGTTTACTACCAAATGG-3')(SEQ ID NO：5)及gwG152-p02(5'-GTTCAATG-CATGCTGTTTAATTGTGT-3')(SEQ ID NO：6)，自第一股cDNA產生p110-a片段。在隨後的PCR反應中，使用引子gw152-p03(5'-GGGGGAATTTCCGGTGGTGGTGGTGGAATTATGGTAC-TAGTGGAATGTTTACTACC-AAATGGA-3')(SEQ ID NO：7)及gwG152-p06(5'-AGCTCCGTGATGGTGATGGTGATGTGCTCCGTTCAATG-CATGCTGTTTAATTGTGT-3')(SEQ ID NO：8)，分別在p110-a片段之5'端及3'端添加連接子序列及組胺酸標籤。
使用上述gwG130-p03引子及含有重疊組胺酸標籤及AttB2重組序列(5'-GGGACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGTTTAAGCTCCGTGATGGTGATGGTGAT-GTGCTCC-3')(SEQ ID NO：9)的引子，藉由位於iSH2片段之3'端及p110-a片段之5'端的重疊連接子，以第三次PCR反應組裝p85-iSH2/p110-a融合蛋白。
此最終產物以OR反應(Invitrogen)重組於供者載體pDONR201中以產生ORF318進入純系。藉由定序來證實此純系且將其用於Gateway LR反應中以將插入序列轉移至Gateway改適之pBlueBac4.5(Invitrogen)載體中用於產生桿狀病毒表現載體LR410。
PI3Kα BV-1075 p85(iSH2)-12 XGly連接子-p110a(D20aa)-C端His標籤
藉由包含選殖於載體pBlueBac4.5中之p85片段及p110-a片段之三部分接合來產生用於桿狀病毒BV-1075之構築體。p85片段來源於利用Nhe/Spe消化之質體p1661-2。p110-a片段來源於作為SpeI/HindIII片段的LR410(參見上文)。選殖載體pBlueBac4.5(Invitrogen)係利用Nhe/HindIII消化。由此產生構築體PED 153.8。
使用ORF 318(上文所述)作為模板及一個正向引子KAC1028(5'-GCTAGCATGCGAGAATATGATAGATTATATGAAGAATATACC)(SEQ ID NO：10)及兩個反向引子KAC1029(5'-GCCTCCACCACCTCCGCCTGGTTTAATGCTGTTCATACGTTTGTC)(SEQ ID NO：11)及KAC1039(5'-TACTAGTCCGCCTCCACCACCTCCGCCTCCACCACCTCCGCC)(SEQ ID NO：12)，藉由PCR產生p85組分(iSH2)。
該兩個反向引子使12x Gly連接子與p110a基因之N端序列重疊且併入SpeI位點。12x Gly連接子置換BV1052構築體中之連接子。PCR片段選殖於pCR2.1 TOPO(Invitrogen)中。在所得純系中，p1661-2經測定為正確的。此質體用Nhe及SpeI消化且所得片段經凝膠分離且純化用於次選殖。
p110-a選殖片段係藉由Spe I及HindIII酶促消化純系LR410(參見上文)來產生。SpeI位點位於p110a基因之編碼區中。所得片段經凝膠分離且純化用於次選殖。
藉由Nhe及HindIII酶促消化來製備選殖載體pBlueBac4.5 (Invitrogen)。酶切載體經Qiagen(Quiagen N.V,Venlo,Netherlands)管柱純化且接著用小牛腸鹼性磷酸酶(CIP)(New England BioLabs,Ipswich,MA)去磷酸化。CIP反應完成之後，酶切載體再次用管柱純化以產生最終載體。使用Roche快速接合酶且根據供應商說明書進行3部分接合。
PI3Kβ BV-949 p85(iSH2)-Gly連接子-p110b(全長)-C端His標籤
針對p85亞單元之SH2內結構域(iSH2)及全長p110-b亞單元產生PCR產物且藉由重疊PCR進行融合。
首先使用引子gwG130-p01(5'-CGAGAATATGATAGATTATATGAAGAAT-3')(SEQ ID NO：1)及gwG130-p02(5'-TGGTTT-AATGCTGTTCATACGTTTGTCAAT-3')(SEQ ID NO：2)，自第一股cDNA產生iSH2 PCR產物。隨後，在第二PCR反應中，使用引子gwG130-p03(5'-GGGACAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCTACGAAGGAGATA-TACATATGCGAGAATATGATAGATTATATGAAGAAT-3')(SEQ ID NO：3)及gwG130-p05(5'-ACTGAAGCATCCTCCTCCTCCTCCTCCTGGTTTAAT-GCTGTTCATACGTTTGTC-3')(SEQ ID NO：13)，分別在p85 iSH2片段之5'端及3'端添加Gateway(Invitrogen)重組AttB1位點及連接子序列。
亦首先使用含有連接子序列及p110-b之5'端的引子gwG130-p04(5'- ATTAAACCAGGAGGAGGAGGAGGAGGATGCTTCAGTTTCATAATGCC-TCCTGCT-3')(SEQ ID NO：4)及含有p110-b之3'端與組胺酸標籤融合之序列的引子gwG130-p06(5'-AGCTCCGTGATGGTGATGGTGATGTGCTCCAGATCTGTAGTCTTT-CCGAACTGTGTG-3')(SEQ ID NO：14)，自第一股cDNA產生p110-b片段。
使用上述gwG130-p03引子及含有重疊組胺酸標籤及AttB2重組序列(5'-GGGACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGTTT-AAGCTCCGTGATGGTGATGGTGATGTGCTCC-3')(SEQ ID NO：15)的引子，藉由位於iSH2片段之3'端及p110-b片段之5'端的連接子，以重疊PCR反應組裝p85-iSH2/p110-b融合蛋白。
此最終產物以Gateway(Invitrogen)OR反應重組於供者載體pDONR201中以產生ORF253進入純系。藉由定序來證實此純系且用於Gateway LR反應中以將插入序列轉移至Gateway改適之pBlueBac4.5(Invitrogen)載體中用於產生桿狀病毒表現載體LR280。
PI3Kδ BV-1060 p85(iSH2)-Gly連接子-p110d(全長)-C端His標籤
針對p85亞單元之SH2內結構域(iSH2)及全長p110-d亞單元產生PCR產物且藉由重疊PCR進行融合。
首先使用引子gwG130-p01(5'-CGAGAATATGATAGATTATATGAAGAAT-3')(SEQ ID NO： 1)及gwG130-p02(5'-TGGTTT-AATGCTGTTCATACGTTTGTCAAT-3')(SEQ ID NO：2)，自第一股cDNA產生iSH2 PCR產物。隨後，在第二PCR反應中，使用引子gwG130-p03(5'-GGGACAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCTACGAAGGAGATATACAT-ATGCGAGAATATGATAGATTATATGAAGAAT-3')(SEQ ID NO：3)及gwG154-p04(5'-TCCTCCTCCTCCTCCTCCTGGTTTAATGCTGTTCATACGTTTGTC-3')(SEQ ID NO：16)，分別在p85 iSH2片段之5'端及3'端添加Gateway(Invitrogen)重組AttB1位點及連接子序列。
亦首先使用引子gwG154-p01(5'-ATGCCCCCTGGGGTGGACTGCCCCAT-3')(SEQ ID NO：17)及gwG154-p02(5'-CTACTG-CCTGTTGTCTTTGGACACGT-3')(SEQ ID NO：18)，自第一股cDNA產生p110-a片段。
在隨後的PCR反應中，使用引子gw154-p03(5'-ATTAAACCAGGAGGAGGAGGAGGAGGACCCCCTGGGGTGGAC-TGCCCCATGGA-3')(SEQ ID NO：19)及gwG154-p06(5'-AGCTCCGTGATGGTGAT-GGTGATGTGCT-CCCTGCCTGTTGTCTTTGGACACGTTGT-3')(SEQ ID NO：20)，分別在p110-d片段之5'端及3'端添加連接子序列及組胺酸標籤。
使用上述gwG130-p03引子及含有重疊組胺酸標籤及 Gateway(Invitrogen)AttB2重組序列(5'-GGGACCACTTTGTA-CAAGAAAGCTGGGTTT-AAGCTCCGTGATGGTGATGGTGATGTGCTCCC-3')(SEQ ID NO：21)的引子，藉由位於iSH2片段之3'端及p110-d片段之5'端的重疊連接子，以第三次PCR反應組裝p85-iSH2/p110-d融合蛋白。
此最終產物以Gateway(Invitrogen)OR反應重組於供者載體pDONR201中以產生ORF319進入純系。藉由定序來證實此純系且將其用於Gateway LR反應中以將插入序列轉移至Gateway改適之pBlueBac4.5(Invitrogen)載體中用於產生桿狀病毒表現載體LR415。
PI3Kγ BV-950 p110g(D144aa)-C端His標籤
此構築體獲自Roger Williams lab,MRC Laboratory of Molecular Biology,Cambridge,UK(2003年11月)。構築體描述於Pacold M.E.等人，(2000)Cell 103,931-943中。
1.3蛋白質表現及純化
針對PI3K同功異型物產生重組桿狀病毒及蛋白質的方法：使用供應商推薦的方法，用BaculoGold WT基因組DNA(BD Biosciences,Franklin Lakes,NJ,USA)共轉染含有不同PI3激酶基因的pBlue-Bac4.5(針對a、b及d同功異型物)或pVL1393(針對g)質體。隨後，獲自轉染的重組桿狀病毒用Sf9昆蟲細胞進行斑點純化，產生表現重組蛋白的若干分離株。藉由抗HIS或抗同功異型物抗體，以西方墨點 法選擇陽性純系。對於PI3Kα及δ同功異型物，用PI3K之第一純系病毒儲備液進行二次斑點純化。以低感染倍率(moi)擴增所有桿狀病毒分離株，產生高效價低傳代儲備液用於產生蛋白質。桿狀病毒以BV1052(α)及BV1075(α)、BV949(β)、BV1060(δ)及BV950(γ)命名。
蛋白質產生包括在2 l Erlenmyer玻璃燒瓶(110 rpm)中或搖擺式生物反應器(22-25 rpm)中，在無蛋白質的培養基中，以2至10之moi感染(傳代3次或低於3次)所懸浮之Tn5(粉紋夜蛾(Trichoplusia ni))或TiniPro(Expression Systems,LLC,Woodland,CA,USA)細胞。首先，以3e5個細胞/毫升之密度，以半容量(5 L)接種10 l工作容積的搖擺式生物反應器。在細胞生長期期間，反應器以15 rpm振動72小時，補充5%氧氣與空氣之混合物(每分鐘0.2公升)。即將感染之前，分析搖擺式反應器培養物的密度、成活力且稀釋至約1.5e6個細胞/毫升。另培養2至4小時之後，添加100 mL至500 mL高效價低傳代病毒。氧氣在39至48小時感染期增至35%且振動平台rpm增至25。感染期間，藉由Vicell成活力分析儀(Beckman Coulter,Inc,Fullerton,CA,USA)生物方法監測細胞的成活力、直徑及密度。收集之前每12至18小時用Nova Bioanalyzer(NOVA Biomedical Corp.,Waltham,MA,USA)採集各種參數及代謝物(pH值、O2飽和度、葡萄糖等)。感染後40小時內收集搖擺式生物反應器中的細胞。藉由離心(4℃，1500 rpm)收集細胞，且隨後在集結粒彙集期間，維持在冰上以用於溶胞及純化。使用少 量的無補充物之冷的Grace培養基(w/o蛋白酶抑制劑)促使集結粒彙集。
針對HTS(BV1052)之PI3Kα純化方案
以三個層析步驟純化PI3Kα：在Ni瓊脂糖樹脂(GE Healthcare，屬於General Electric Company,Fairfield,CT,USA)上進行固定化金屬親和層析；利用Superdex 200 26/60管柱(GE Healthcare)進行凝膠過濾；及最後在SP-XL管柱(GE Healthcare)上進行陽離子交換步驟。所有緩衝液皆冷卻至4℃且溶胞在冰上冷卻進行。管柱分離係在室溫下快速進行。
通常，將冷凍的昆蟲細胞溶解於高張性溶胞緩衝液中且施加於製備型IMAC管柱上。樹脂用3至5個管柱體積之溶胞緩衝液洗滌，隨後用3至5個管柱體積之含有45 mM咪唑的洗滌緩衝液洗滌，且接著用含有250 mM咪唑的緩衝液溶離目標蛋白質。藉由庫馬斯染色之SDS-PAGE凝膠(Coomassie stained SDS-PAGE gel)分析溶離份，且彙集含有目標蛋白質的溶離份且施加於製備型GFC管柱上。藉由庫馬斯染色之SDS-PAGE凝膠對來自GFC管柱的溶離份進行分析，且彙集含有目標蛋白質的溶離份。來自GFC管柱的彙集物於低鹽緩衝液中稀釋且施加於製備型SP-XL管柱上。管柱用低鹽緩衝液洗滌直至達成穩定的A280基線吸光度，且使用20個管柱體積，0 mM NaCl至500 mM NaCl之梯度溶離。又，藉由庫馬斯染色之SDS-PAGE凝膠對來自SP-XL管柱的溶離份進行分析，且彙集含有目標蛋白質的 溶離份。最終彙集物於含有50%甘油的儲存緩衝液中透析且在-20℃下儲存。在磷酸肌醇激酶分析中，分析最終彙集物的活性。
針對HTS(BV949)之PI3Kβ純化方案
PI3Kβ以兩個層析步驟進行純化：在Ni瓊脂糖樹脂(GE Healthcare)上進行固定化金屬親和層析(IMAC)，及使用Superdex 200 26/60管柱(GE Healthcare)進行凝膠過濾(GFC)。所有緩衝液皆冷卻至4℃且溶胞在冰上冷卻進行。管柱分離係在室溫下快速進行。
通常，將冷凍的昆蟲細胞溶解於高張性溶胞緩衝液中且施加於製備型IMAC管柱上。樹脂用3至5個管柱體積之溶胞緩衝液洗滌，隨後用3至5個管柱體積之含有45 mM咪唑的洗滌緩衝液洗滌，且接著用含有250 mM咪唑的緩衝液溶離目標蛋白質。藉由庫馬斯染色之SDS-PAGE凝膠分析溶離份，且彙集含有目標蛋白質的溶離份並施加於製備型GFC管柱上。藉由庫馬斯染色之SDS-PAGE凝膠對來自GFC管柱的溶離份進行分析，且彙集含有目標蛋白質的溶離份。最終彙集物於含有50%甘油的儲存緩衝液中透析且在-20℃下儲存。在磷酸肌醇激酶分析中，分析最終彙集物的活性。
針對HTS(BV950)之PI3Kγ純化方案
PI3Kγ以兩個層析步驟進行純化：在Ni瓊脂糖樹脂(GE Healthcare)上進行固定化金屬親和層析(IMAC)，及使用Superdex 200 26/60管柱(GE Healthcare)進行凝膠過濾 (GFC)。所有緩衝液皆冷卻至4℃且溶胞在冰上冷卻進行。管柱分離係在室溫下快速進行。通常，將冷凍的昆蟲細胞溶解於高張性溶胞緩衝液中且施加於製備型IMAC管柱上。樹脂用3至5個管柱體積之溶胞緩衝液洗滌，隨後用3至5個管柱體積之含有45 mM咪唑的洗滌緩衝液洗滌，且接著用含有250 mM咪唑的緩衝液溶離目標蛋白質。藉由庫馬斯染色之SDS-PAGE凝膠分析溶離份，且彙集含有目標蛋白質的溶離份並施加於製備型GFC管柱上。藉由庫馬斯染色之SDS-PAGE凝膠對來自GFC管柱的溶離份進行分析，且彙集含有目標蛋白質的溶離份。最終彙集物於含有50%甘油的儲存緩衝液中透析且在-20℃下儲存。在磷酸肌醇激酶分析中，分析最終彙集物的活性。
針對HTS(BV1060)之PI3Kδ純化方案
PI3Kδ以三個層析步驟進行純化：在Ni瓊脂糖樹脂(GE Healthcare)上進行固定化金屬親和層析，使用Superdex 200 26/60管柱(GE Healthcare)進行凝膠過濾，及最後在Q-HP管柱(GE Healthcare)上進行陰離子交換步驟。所有緩衝液皆冷卻至4℃且溶胞在冰上冷卻進行。管柱分離係在室溫下快速進行。通常，將冷凍的昆蟲細胞溶解於高張性溶胞緩衝液中並施加於製備型IMAC管柱上。樹脂用3至5個管柱體積之溶胞緩衝液洗滌，隨後用3至5個管柱體積之含有45 mM咪唑的洗滌緩衝液洗滌，且接著用含有250 mM咪唑的緩衝液溶離目標蛋白質。藉由庫馬斯染色之SDS-PAGE凝膠分析溶離份，且彙集含有目標蛋白質的溶離份 並施加於製備型GFC管柱上。藉由庫馬斯染色之SDS-PAGE凝膠對來自GFC管柱的溶離份進行分析，且彙集含有目標蛋白質的溶離份。來自GFC管柱的彙集物於低鹽緩衝液中稀釋且施加於製備型Q-HP管柱上。管柱用低鹽緩衝液洗滌直至達成穩定的A280基線吸光度，且使用20個管柱體積，0 mM NaCl至500 mM NaCl之梯度溶離。又，藉由庫馬斯染色之SDS-PAGE凝膠對來自Q-HP管柱的溶離份進行分析，且彙集含有目標蛋白質的溶離份。最終彙集物於含有50%甘油的儲存緩衝液中透析且在-20℃下儲存。在磷酸肌醇激酶分析中，分析最終彙集物的活性。
藉由與「excel擬合」一起的四參數曲線擬合常式測定IC50。使用四參數邏輯方程式計算各化合物在8種濃度(一般為10 μM、3.0 μM、1.0 μM、0.3 μM、0.1 μM、0.030 μM、0.010 μM及0.003 μM)下的抑制百分比之IC50值(IDBS XLfit)。或者，使用idbsXLfit模型204(其為4參數邏輯模型)計算IC50值。
又或者，對於ATP消耗分析而言，將待測試之式I化合物溶於DMSO中且以每孔0.5 μl直接分佈於白色384孔板中。為起始反應，將10 μl 10 nM PI3激酶及5 μg/mL 1-α-磷脂醯肌醇(PI)添加至每孔中，隨後添加10 μl 2 μM ATP。反應進行直至約50% ATP消耗，且接著藉由添加20 μl激酶-Glo溶液(Promega Corp.,Madison,WI,USA)來中止。將中止之反應物培養5分鐘且隨後經由發光來偵測殘餘ATP。接著測定IC50值。
在本發明之一個實施例中，PI3K抑制劑，其中該抑制劑對PI3K同功異型物δ具有抑制作用，其中在酶PI3Kδ分析中，以IC50表示的活性之範圍為1 nM至500 nM。
在本發明之另一個實施例中，PI3K抑制劑，其中該抑制劑對PI3K同功異型物δ具有抑制作用，其中在酶PI3Kδ分析中，以IC50表示的活性之範圍為1 nM至100 nM。
在本發明之另一個實施例中，PI3K抑制劑，其中該抑制劑對PI3K同功異型物δ具有抑制作用，其中在酶PI3Kδ分析中，以IC50表示的活性之範圍為0.5 nM至10 nM。
在本發明之一個實施例中，PI3K抑制劑，其中該抑制劑對PI3K同功異型物δ具有抑制作用，其中在細胞PI3Kδ分析中，以IC50表示的活性之範圍為1 nM至1000 nM。
在本發明之另一個實施例中，PI3K抑制劑，其中該抑制劑對PI3K同功異型物δ具有抑制作用，其中在細胞PI3Kδ分析中，以IC50表示的活性之範圍為1 nM至500 nM。
在本發明之另一個實施例中，PI3K抑制劑，其中該抑制劑對PI3K同功異型物δ具有抑制作用，其中該抑制劑對PI3K同功異型物δ顯示的選擇性大於一或多種其他同功異型物，其中此選擇性為至少10倍。
在本發明之另一個實施例中，PI3K抑制劑，其中該抑制劑對PI3K同功異型物δ具有抑制作用，其中該抑制劑對PI3K同功異型物δ顯示的選擇性大於一或多種其他同功異型物，其中此選擇性為至少20倍。
在本發明之另一個實施例中，PI3K抑制劑，其中該抑制 劑對PI3K同功異型物δ具有抑制作用，其中該抑制劑對PI3K同功異型物δ顯示的選擇性大於不同旁系同源物PI3Kα及β，其中此選擇性為至少10倍。
在本發明之另一個實施例中，PI3K抑制劑，其中該抑制劑對PI3K同功異型物δ具有抑制作用，其中該抑制劑對PI3K同功異型物δ顯示的選擇性大於不同旁系同源物PI3Kα及β，其中此選擇性為至少20倍。
在本發明之另一個實施例中，PI3K抑制劑，其中該抑制劑對PI3K同功異型物δ具有抑制作用，其中在細胞PI3Kδ分析中，以IC50表示的活性之範圍為1 nM至500 nM，且其中該抑制劑對PI3K同功異型物δ具有抑制作用，其中該抑制劑對PI3K同功異型物δ顯示的選擇性大於不同旁系同源物PI3Kα及β，其中此選擇性為至少10倍。
在本發明之另一個實施例中，PI3K抑制劑，其中該抑制劑對PI3K同功異型物δ具有抑制作用，其中在細胞PI3Kδ分析中，以IC50表示的活性之範圍為1 nM至500 nM，且其中該抑制劑對PI3K同功異型物δ具有抑制作用，其中該抑制劑對PI3K同功異型物δ顯示的選擇性大於不同旁系同源物PI3Kα及β，其中此選擇性為至少20倍。
2.細胞分析 2.1磷酸肌醇-3激酶(PI3K)在Rat-1細胞中介導之Akt 1/2(S473)磷酸化
穩定地過度表現豆蔻醯化形式的人類磷酸肌醇-3激酶(PI3K)α、β或δ之催化亞單位之Rat-1細胞於30 μl完全生長 培養基(杜貝科氏改良之伊格爾氏培養基(Dulbecco' smodified Eagle's medium)(高葡萄糖DMEM)，補充有10%(v/v)胎牛血清、1%(v/v)MEM非必需胺基酸、10 mM HEPES、2 mM L-麩醯胺酸、10 μg/ml嘌呤黴素及1%(v/v)青黴素/鏈黴素)中以7500(PI3Kα)、6200(PI3Kβ)或4000(PI3Kδ)個細胞之密度塗鋪於384孔板中且在37℃/5%CO2/95%濕度下培育24小時。化合物以及4種參考化合物與16種高對照物及16種低(抑制)對照物於384孔複合板中稀釋以獲得40種測試化合物於90% DMSO中的8點連續稀釋液。藉由使用Hummingwell奈升分配器將250 nl化合物溶液分配式吸移至384孔聚丙烯板中來製備預稀釋板。藉由添加49.75 μl完全生長培養基來預稀釋化合物。使用384孔移液器將10 μl預稀釋化合物溶液轉移至細胞板中，使得最終DMSO濃度為0.11%。在37℃/5%CO2/95%濕度下培育細胞1小時。移除上清液，將細胞溶解於20 μl溶胞緩衝液中以供AlphaScreen® SureFire®偵測。
使用SureFire® p-Akt 1/2(Ser473)分析套組(PerkinElmer,U.S.A)偵測p-AKT(Ser473)。使用384孔移液器將5 μl細胞溶胞物轉移至384孔低容量Proxiplate中以便偵測。根據製造商方案添加AlphaScreen® SureFire®試劑。首先，添加5 μl含有AlphaScreen®受體珠粒的反應緩衝液與活化緩衝液，將板密封，且在室溫下，在板振盪器上，培育2小時。其次，添加2 μl含有AlphaScreen®供體珠粒的稀釋緩衝液，且如上在板振盪器上再培育板2小時。 使用標準AlphaScreen®配置，用AlphaScreen®相容性讀板器讀取板。
2.2測定鼠科B細胞活化
已認識到當B細胞經B細胞受體(BCR)刺激時，PI3Kδ可調節B細胞功能(Okkenhaug等人，Science 297：1031(2002))。為了評估化合物對B細胞活化的抑制性質，用抗IgM刺激之後，量測來源於小鼠脾抗體的鼠科B細胞上活化標記物CD86及CD69之上調。CD69為熟知之B細胞及T細胞活化標記物(Sancho等人，Trends Immunol.26：136(2005))。CD86(亦稱為B7-2)主要表現於包括B細胞的抗原呈遞細胞上。休眠B細胞低量表現CD86，但在例如BCR或IL-4受體刺激之後，使CD86上調。B細胞上之CD86與T細胞上之CD28相互作用。此相互作用為最佳T細胞活化及產生最佳IgG1反應所必需的(Carreno等人，Annu Rev Immunol.20：29(2002))。
收集Balb/c小鼠之脾，分離脾細胞且用含有10%胎牛血清(FBS)、10 mM HEPES、100個單位/毫升青黴素/鏈黴素的RPMI洗滌兩次。以此方式補充的RPMI則被稱為培養基。細胞於培養基中調節至2.5×106個細胞/毫升且將200 μl細胞懸浮液(5×106個細胞)添加至96孔板之適當孔中。
接著藉由添加50 μl含有抗IgM mAb的培養基(最終濃度：30 μg/ml)來刺激細胞。在37℃下培育24小時之後，細胞用以下抗體混合物染色：抗小鼠CD86-FITC、抗小鼠CD69-PerCP-Cy5.5、抗小鼠CD19-PerCP(用於評估B細胞) 及抗小鼠CD3-FITC、抗小鼠CD69-PE(用於評估T細胞)(每孔2 μl各抗體)。在室溫(rt)下，在黑暗中一小時之後，將細胞轉移至96深孔板中。細胞用1 mL含有2% FBS之PBS洗滌一次且再懸浮於200 μl中之後，用FACS Calibur流式細胞儀分析樣品。根據尺寸及粒度，利用FSC/SSC點狀圖閘選淋巴細胞且進一步分析CD19、CD3及活化標記物(CD86、CD69)之表現。使用BD CellQest軟體，利用墨點數計算針對CD19+或CD3+群內之活化標記物呈陽性染色之細胞的百分比數據。
為了評估化合物之抑制性質，首先將化合物溶解並稀釋於DMSO中，隨後1：50稀釋於培養基中。分離Balb/c小鼠之脾細胞，再懸浮且轉移至如上文所述之96孔板(200微升/孔)。向板中添加所稀釋之化合物或溶劑(25 μl)且在37℃下培育1小時。接著，培養物在37℃下用25 μl抗IgM mAb/孔(最終濃度30 μg/ml)刺激24小時且用抗小鼠CD86-FITC及抗小鼠CD19-PerCP(每孔2 μl各抗體)染色。藉由如上文所述之流式細胞術對CD19陽性B細胞上之CD86表現進行定量。
2.3測定大鼠B細胞活化
已認識到當B細胞經B細胞受體(BCR)刺激時，PI3Kδ可調節B細胞功能(Okkenhaug等人，Science 297：1031(2002))。為了評估化合物對B細胞活化的抑制性質，用抗IgM及重組IL-4刺激之後，量測來源於全血之大鼠B細胞上活化標記物CD86之上調。CD86分子(亦稱為B7-2)主要表 現於包括B細胞的抗原呈遞細胞上。休眠B細胞低量表現CD86，但在例如BCR或IL-4受體刺激之後，使CD86上調。B細胞上之CD86與T細胞上之CD28相互作用。此相互作用為最佳T細胞活化及產生最佳IgG1反應所必需的(Carreno等人，Annu Rev Immunol.20：29(2002))。
收集大鼠血液
藉由使用10 ml注射器自成年雄性路易斯大鼠(LEW/HanHsd)腹主動脈收集全血，該注射器具有經肝素鈉預塗佈之皮下注射針頭。將血液轉移至50 ml Falcon管中且將抗凝劑濃度調節至100 U/ml。
刺激大鼠B細胞且用特定抑制劑處理
為了評估免疫抑制藥物之活體外作用，用培養基將肝素化血液預稀釋至50%。補充有100 U/ml青黴素、100 mg/mL鏈黴素、2 mM L-麩醯胺酸、50 mg/mL聚葡萄糖40及5%胎牛血清(FCS,Fetaclone I,Gibco #10270-106)的高葡萄糖DMEM(Animed產品目錄號1-26F01-I)用作培養基。接著，在96孔U型底微量滴定板(Nunc)中，在190 μl預稀釋血液中外加10 μl預稀釋之測試化合物，產生濃度範圍為20 μM至0.0003 μM的3倍連續稀釋液。對照孔經DMSO預處理而獲得0.5% DMSO之最終濃度。一式兩份配置培養物，藉由在板振盪器(Heidolph Titramax 101；30秒，速度900)上振盪來充分混合，上下吸移且再次在板振盪器上振盪。培養物在37℃、5% CO2下培育1小時。接著添加20 μl多株山羊抗大鼠IgM Ab(Serotec，目錄號302001)及10 μl經稀釋 之重組rIL-4(Immunotools #340085)而分別獲得30 μg/ml及5 ng/ml之最終濃度。藉由如上在板振盪器上振盪使板混合且在37℃、5% CO2下培育24小時。
藉由流式細胞術測定B細胞活化
培育之後，每孔添加15 μl 25 mM EDTA溶液且振盪15分鐘以分離黏附細胞。為了分析表面活化標記物，樣品接著用PE-Cy5標記之抗大鼠CD45RA(BD目錄號557015)染色，以便在FACS分析中閘選B細胞。另外，樣品用PE標記之抗大鼠CD86(BD目錄號551396)染色。所有染色程序皆在室溫下在黑暗中進行30分鐘。培育之後，將樣品轉移至含有2毫升/孔之BD溶胞溶液(BD #349202)的96深孔V形底微量滴定板(Corning #396096)中。紅血球溶解之後，樣品用2 ml CellWASH(BD #349524)洗滌。使用Cellquest Plus或DIVA(6.1.1版)軟體，在LSRII或FACScalibur流式細胞儀(BD Biosciences)上獲得資料。根據尺寸及粒度，利用FSC/SSC墨點閘選淋巴細胞且進一步分析CD45RA及活化標記物之表現。利用墨點或直方圖計算針對CD45RA+群內之活化標記物呈陽性染色之細胞的百分比數據。
統計學評估
暴露於藥物之後的B細胞活化抑制百分比係依據下式計算：
使用ORIGIN 7軟體(OriginLab Corporation,Northampton, MA)進行非線性回歸曲線擬合。藉由將Hill方程式與抑制數據擬合來獲得引起50%抑制的藥物濃度(IC50)。
2.4測定TLR9誘導小鼠脾細胞產生之IL-6 由小鼠脾製備單細胞懸浮液
在對C57BL/6小鼠施行安樂死之後立即切下其脾。自脾去除過量脂肪，隨後使用5 ml注射器之針筒經由0.4 μM細胞過濾器搗碎脾。製備單細胞懸浮液且使用冷的PBS，於50 ml Falcon管中將體積調節至15 ml。細胞在4℃下以1500 rpm離心5分鐘，隨後移除上清液且再懸浮於每個脾5 ml紅血球溶胞緩衝液中且在室溫下培育5分鐘。向細胞中添加冰冷的PBS(30 ml)，隨後在4℃下以1500 rpm離心5分鐘。移除上清液且細胞用40 ml鼠科脾細胞培養基(MSCM)洗滌兩次。MSCM由補充有100個單位/毫升青黴素及100 μg/ml鏈黴素、1x非必需胺基酸、1 mM丙酮酸鈉、0.05 mM β-巰基乙醇及10%熱不活化胎牛血清(FBS)的RPMI組成。將細胞再懸浮於10 ml至20 ml MSCM中且使用Countess細胞計數器計數。自單一C57BL/6小鼠脾獲得約60×106個脾細胞。
刺激鼠科脾細胞及用特定抑制劑處理
脾細胞以2×105個細胞/孔之最終密度，以100 μl之體積塗鋪於96孔平底板中且在37℃含濕氣培育箱中培育2至4小時。隨後，使用自動化液體處理機，使用先前製備之化合物儲備板分配待測試之化合物。儲備板由使用2倍或3倍稀釋以8至10個點排列之化合物(於90%/10% DMSO/ddH2O中) 組成。液體處理機將1 μl來自先前製備之化合物來源板的各稀釋液分配至96孔板之適當目的孔中。化合物在細胞培養液中的最終起始濃度為10 μM。DMSO在細胞培養液中的最終濃度為0.5%。細胞用化合物培育1小時，隨後添加TLR配位體。接著，10x EC80濃度之CpG1826以20 μl之體積添加(最終培養體積為200 μl)，隨後培養物在37℃含濕氣培育箱中培育隔夜。
藉由ELISA測定白介素-6
培養隔夜之後，在室溫下以2000 rpm離心板5分鐘。隨後將150 μl各培養物轉移至V形底96孔板中且使用市購小鼠IL-6夾心ELISA套組量測IL-6含量。簡言之，板用捕捉抗體塗佈隔夜，隨後用PBS/0.1% BSA阻斷1小時。樣品及標準物係以50 μl之體積添加且在室溫下培育板2小時。移除標準物/樣品之後，使用PBS/0.05% Tween洗滌板，隨後添加50 μl生物素標記之偵測抗體，隨後將板在室溫下伴隨振盪培育2小時。再次洗滌板，隨後每孔添加50 μl抗生蛋白鏈菌素-辣根過氧化酶維持20分鐘。再洗滌板之後，向各孔中添加50 μl TMB受質且將板培育20分鐘，隨後添加25微升/孔中止溶液。使用SpectraMax 190讀板器(450 nm)量測IL-6含量且使用SoftMax Pro及GraphPad Prism軟體分析。
2.5測定TLR9誘導人類外周血液單核細胞(PBMC)產生之IFNα 自新鮮人類血液製備PBMC
在含有肝素的10 S-Monovette管(S-Monovette，7.5 mL NH肝素16 IU/mL血液；Starstedt)中收集人類血液(約75 ml)。藉由每管添加15 ml淋巴細胞分離介質LSM1077TM(#J15-004；PAA Laboratories)來製備LeucosepTM管(30 mL #227290；Greiner Bio-one)且以1000 g離心30秒。用等份PBS(不含Ca2+/Mg2+；#14190-094)稀釋之後，將一些25 ml血液轉移至LeucosepTM管中。在22℃下，使用無制動的Eppendorf 5810R離心機，以800 g離心樣品20分鐘。自血漿：分離培養基界面小心地移出PBMC層且轉移至清潔的50 ml管中。藉由添加PBS(至多45 ml)將細胞洗滌一次且使用Eppendorf 5810R在無制動的情況下離心(1400 rpm，10分鐘，22℃)。將集結的細胞小心地再懸浮於培養基(RPMI 1640+GlutaMAX-I，0.05 mM 2-巰基乙醇、10 mM HEPES及5% v/v FCS)中且彙集樣品。自Gibco獲得培養基組分2-巰基乙醇(#31350-010；50 mM)、Hepes(#15630-056，1 M)及RPMI 1640(1x)+GlutaMAX-I(#61870-010)。自Amimed獲得FCS(#2-01F36-1)。使用Countess®自動化細胞計數器對PBMC計數(樣品在培養基中1：10預稀釋，隨後添加等體積(10 μl)之錐蟲藍)。細胞稀釋至4×106個細胞/毫升且接種於384孔板(#353962；Becton Dickinson AG)中，得到25 μl之最終體積(亦即1×105個細胞/孔)。
刺激PBMC且用特定抑制劑處理
化合物在100% v/v DMSO(#41640-100 mL；Sigma-Aldrich)中預稀釋，隨後轉移至培養基中(達成0.25%之最 終DMSO濃度)。細胞用適當化合物稀釋液(5 μl)或媒劑對照物(5 μl)處理且在含濕氣培育箱中在37℃及具有5%(v/v)CO2之空氣中培育30分鐘。細胞用CpG2216(0.3 μM；#tlrl-hodna；Invivogen)或媒劑對照物(10微升/孔)刺激且培育20小時。短暫離心板(在22℃下以200×g離心2分鐘)且移出上清液樣品(30 μl)用於定量IFNα含量。
使用AlphaLisa技術定量IFNα
使用來自PerkinElmer之人類干擾素AlphaLISA Kit(#AL264F)定量IFNα。新鮮製備含有抗IFNα受體珠粒(最終5 μg/ml)及生物素標記之抗體抗IFNα(最終0.5 nM)的抗體混合物且分配(5 μl)至384孔OptiplatesTM(#6007299；PerkinElmer)中。製備已知IFNα標準物(人類IFNα B(2b))之稀釋液且連同細胞上清液(5 μl)一起添加至上述板中。短暫離心板(200 g脈衝)，用黏著性密封薄膜覆蓋，渦旋且在室溫下在黑暗中培育1小時。製備經抗生蛋白鏈菌素塗佈之供體珠粒(最終20 μg/ml)且在暗光區域(光敏混合物)中添加至各孔(5 μl)中。在室溫下培育板30分鐘(板不可離心或覆蓋)。培育之後，使用配備有ALPHA選項的EnVisionTM多板讀取器，利用儀器自身的「AlphaScreen標準配置」(例如總量測時間：550 ms，雷射680 nm，激發時間：180 ms，反光鏡：D640 as，發射過濾器：M570w，中心波長570 nm，帶寬100 nm，透光率75%)讀板。收集資料用於分析及定量IFNα含量。
資料評估及分析
使用Excel XL fit 4.0(Microsoft)聯合內插附件XLfit(IDBS；4.3.2版)分析資料。利用人類IFNα B(2b)，依據標準曲線外推法測定特定IFNα濃度。將曲線與實驗資料擬合之後，藉由非線性回歸測定化合物之個別IC50值。
3測定針對綿羊紅血球(SRBC)產生之抗體
簡言之，在d0日將綿羊紅血球靜脈內注射至OFA大鼠且連續四日(d0至d3)以所研究之化合物經口處理。在d4日製備脾細胞懸浮液且在指示細胞(SRBC)及補體存在下將淋巴細胞塗鋪於軟瓊脂上。指示細胞因分泌SRBC特異性抗體(以IgM子類為主)及存在補體而溶解，產生斑點。對每板之斑點數目計數且以每個脾之斑點數表示。
免疫：一組5隻雌性OFA大鼠在第0日用2×108/ml SRBC(獲自Laboratory Animal Services LAS,Novartis Pharma AG)，以每隻大鼠0.5 ml之體積，藉由靜脈內注射來免疫。
化合物處理：自免疫當天開始，連續4天(第0日、第1日、第2日及第3日)用懸浮於0.5% CMC、0.5% Tween80中的化合物處理動物。化合物以每公斤體重5 ml之施用體積，以12小時給藥間隔時間每日經口投與兩次。
製備脾細胞懸浮液：
第4日，用CO2對動物施行安樂死。移除脾，稱重且在每個大鼠脾含有10 ml冷(4℃)亨克氏平衡鹽溶液(Hank's balanced salt solution，HBSS；Gibco，pH 7.3，含有1 mg酚紅/100 ml)的塑膠管中沈積。脾用玻璃陶瓷體均質化， 在冰上擱置5分鐘且將1 ml上清液轉移至新管中。細胞用4 ml HBSS洗滌一次，接著丟棄上清液且將集結粒再懸浮於1 ml HBSS中。藉由自動化細胞計數器測定每個脾的淋巴細胞數且將脾細胞懸浮液調節至30×106/ml之細胞濃度。
斑點形成分析：
用含有0.7%瓊脂糖(SERVA)的HBSS製備軟瓊脂皮式培養皿。
另外，在塑膠管中製備1 ml 0.7%瓊脂糖且在水浴中維持在48℃下。添加一些50 μl之30×106/ml脾細胞懸浮液及50 μl之SRBC(40×108/ml)，快速混合(渦旋)且傾倒於所製備之瓊脂糖培養皿上。將皮式培養皿稍微傾斜以達成細胞混合物在瓊脂糖層上的均勻分佈。培養皿在室溫下擱置15分鐘且接著在37℃下培育60分鐘。接著添加1.4 ml天竺鼠補體(Harlan；10%)且在37℃下繼續培育另外60分鐘。所塗B細胞釋放的SRBC特異性抗體結合至其鄰近處之抗原(SRBC)。此等抗原抗體複合物活化補體且引起SRBC溶解，在紅血球層中留下亮點(斑點)。使用顯微鏡對斑點計數。
使用下式測定斑點形成抑制：抑制%=C*100/V-100
其中：V=斑點平均數/媒劑組之脾；C=斑點平均數/化合物處理組之脾
參考文獻：
N.K. Jerne & A.A. Nordin (1963) Plaque formation in agar by single antibody-producing cells. Science 140:405。
N.K. Jerne, A.A. Nordin & C. Henry (1963) The agar plaque technique for recognizing antibody-producing cells. In: 「Cell Bound Antibodies」, B. Amos & H. Koprowski, Eds., Wistar Inst. Press, Philadelphia pp.109-125。
生物數據 酶分析
細胞分析
圖1為實例F1無水結晶型之X射線粉末繞射圖案。
圖2為實例F1無水結晶型之差示掃描熱量測定曲線圖。

Claims (19)

  1. 一種式(I)化合物， 或其鹽，其中Y係選自O或NH；V係選自CR5或N；W係選自CH2或O；U係選自N或CH；Q係選自N或CR6；其中U及Q不均為N；R1係選自苯基、吡啶基、嘧啶基、吡基、噠基、1,2,3-三基、1,2,4-三基、1,3,5-三基，或-X-R4其中X係選自C(O)、S(O)2或CH2及R4係選自C1-C8烷基、鹵基-C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、氰基-C1-C8烷基、N,N-二-C1-C4烷基-胺基-C1-C8烷基、C1-C4烷基-磺醯基-C1-C8烷基、苯基、雜環基、雜環基氧基、 雜環基-C1-C8烷基、C3-C12環烷基、C3-C12環烷基氧基、C3-C12環烷基-C1-C8烷基、雜芳基、雜芳基氧基、雜芳基-C1-C8烷基、羥基、C1-C8烷氧基、胺基、N-C1-C8烷基胺基或N,N-二-C1-C8烷基胺基，其中N-C1-C8烷基-胺基及N,N-二-C1-C8烷基-胺基中之C1-C8烷基可未經取代或經鹵素、羥基或C1-C4烷氧基取代，其中C3-C12環烷基及C3-C12環烷基-C1-C8烷基中之C3-C12環烷基可未經取代或經1至5個選自鹵素、羥基或C1-C4烷氧基的取代基取代；其中『雜環基』為含有1至3個選自N、O或S之雜原子的3至7員飽和或部分不飽和單環系統，其各自未經取代或經1至5個選自以下之取代基取代：側氧基、鹵素、C1-C8烷基、鹵基-C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、羥基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基、N,N-二-C1-C8烷基-胺基、C1-C8烷基-羰基、鹵基-C1-C8烷基-羰基、羥基-C1-C8烷基-羰基或C1-C8烷氧基-C1-C8烷基-羰基；其中『雜環基』可連接於雜原子或碳原子處且其中該N及/或S雜原子視情況亦可氧化為各種氧化態，其中『雜芳基』為含有1至3個選自N、O或S之雜原子的3至7員完全不飽和單環系統，或吡唑并[1,5-a]嘧啶或咪唑并[2,1-b]噻唑，其各自未經取代或經1 至5個選自以下之取代基取代：鹵素、C1-C8烷基、鹵基-C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、羥基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基、N,N-二-C1-C8烷基-胺基、C1-C8烷基-羰基、鹵基-C1-C8烷基-羰基、羥基-C1-C8烷基-羰基或C1-C8烷氧基-C1-C8烷基-羰基；其中『雜芳基』可連接於雜原子或碳原子處且其中該N及/或S雜原子視情況亦可氧化為各種氧化態，R6係選自氫、鹵素、C1-C4烷基、鹵基-C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基-磺醯基、C1-C4烷基-亞磺醯基、C1-C4烷基-硫基、鹵基-C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基-C1-C4烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基、N,N-二-C1-C8烷基-胺基；R7係選自氫、鹵素、氰基、硝基、C1-C4烷基、鹵基-C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、N(R8)2-磺醯基、C1-C4烷基-磺醯基、C1-C4烷基-磺醯基-胺基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基或N,N-二-C1-C8烷基-胺基；或R6與R7連在一起為CH=CH-CH=CH，其中R8獨立地選自氫、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基，或兩個R8與其所連接之氮一起形成含有1至2個選自N、O、S之雜原子的4至7員雜環，該雜環未經取代或經1至3個選自C1-C4烷基之取代基取代；R5獨立地選自H、D、F或C1-C2烷基； R30獨立地選自H、D或F。
  2. 如請求項1之化合物或其鹽，其具有式(Ic')
  3. 如請求項1之化合物或其鹽，其具有式(Id')
  4. 如請求項1之化合物或其鹽，其具有式(Ie')
  5. 如請求項1之化合物或其鹽，其具有式(If')
  6. 如請求項1至5中任一項之化合物或其鹽，其中R1係選自苯基、吡啶基、嘧啶基、吡基、噠基、1,2,3-三基、1,2,4-三基、1,3,5-三基，或-X-R4，其中R4係選自C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、氰基-C1-C8烷基、N,N-二-C1-C4烷基-胺基-C1-C8烷基、C1-C4烷基-磺醯基-C1-C8烷基、苯基、雜環基、雜環基-C1-C8烷基、C3-C12環烷基、雜芳基、雜芳基-C1-C8烷基、C1-C8烷氧基，其中N-C1-C8烷基-胺基及N,N-二-C1-C8烷基-胺基中之C1-C8烷基可未經取代或經鹵素、羥基或C1-C4烷氧基取代，其中C3-C12環烷基及C3-C12環烷基-C1-C8烷基中之C3-C12環烷基可未經取代或經鹵素、羥基或C1-C4烷氧基取代；其中『雜環基』為含有1至3個選自N、O或S之雜原子的3至7員飽和或部分不飽和單環系統，其未經取代或經1至5個選自以下之取代基取代：側氧基、鹵素、C1-C8烷基、鹵基-C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、羥 基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基、N,N-二-C1-C8烷基-胺基、C1-C8烷基-羰基、鹵基-C1-C8烷基-羰基、羥基-C1-C8烷基-羰基或C1-C8烷氧基-C1-C8烷基-羰基；其中『雜環基』可連接於雜原子或碳原子處且其中該N及/或S雜原子視情況亦可氧化為各種氧化態，其中『雜芳基』為含有1至3個選自N、O或S之雜原子的3至7員完全不飽和單環系統，或吡唑并[1,5-a]嘧啶或咪唑并[2,1-b]噻唑，其各自未經取代或經1至5個選自以下之取代基取代：鹵素、C1-C8烷基、鹵基-C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、羥基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基、N,N-二-C1-C8烷基-胺基、C1-C8烷基-羰基、鹵基-C1-C8烷基-羰基、羥基-C1-C8烷基-羰基或C1-C8烷氧基-C1-C8烷基-羰基；其中『雜芳基』可連接於雜原子或碳原子處且其中該N及/或S雜原子視情況亦可氧化為各種氧化態。
  7. 如請求項1至5中任一項之化合物或其鹽，其中R1係選自-X-R4，其中R4係選自C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、氰基-C1-C8烷基、N,N-二-C1-C4烷基-胺基-C1-C8烷基、C1-C4烷基-磺醯基-C1-C8烷基、苯基、雜環基、雜環基-C1-C8烷基、C3-C12環烷基、雜芳基、雜芳基 -C1-C8烷基、C1-C8烷氧基，其中N-C1-C8烷基-胺基及N,N-二-C1-C8烷基-胺基中之C1-C8烷基可未經取代或經鹵素、羥基或C1-C4烷氧基取代，其中C3-C12環烷基及C3-C12環烷基-C1-C8烷基中之C3-C12環烷基可未經取代或經鹵素、羥基或C1-C4烷氧基取代；其中『雜環基』為含有1至3個選自N、O或S之雜原子的3至7員飽和或部分不飽和單環系統，其未經取代或經1至5個選自以下之取代基取代：側氧基、鹵素、C1-C8烷基、鹵基-C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、羥基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基、N,N-二-C1-C8烷基-胺基、C1-C8烷基-羰基、鹵基-C1-C8烷基-羰基、羥基-C1-C8烷基-羰基或C1-C8烷氧基-C1-C8烷基-羰基；其中『雜環基』可連接於雜原子或碳原子處且其中該N及/或S雜原子視情況亦可氧化為各種氧化態，其中『雜芳基』為含有1至3個選自N、O或S之雜原子的3至7員完全不飽和單環系統，或吡唑并[1,5-a]嘧啶或咪唑并[2,1-b]噻唑，其各自未經取代或經1至5個選自以下之取代基取代：鹵素、C1-C8烷基、鹵基-C1-C8烷基、羥基-C1-C8烷基、羥基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷氧基-C1-C8烷基、胺基、N-C1-C8烷基-胺基、N,N-二-C1-C8烷基-胺基、C1-C8烷基-羰基、鹵基-C1-C8烷基-羰基、羥基-C1-C8烷基-羰基或C1-C8烷氧基-C1-C8 烷基-羰基；其中『雜芳基』可連接於雜原子或碳原子處且其中該N及/或S雜原子視情況亦可氧化為各種氧化態，R6係選自鹵素、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基-磺醯基或鹵基-C1-C4烷氧基且R7係選自氫、鹵素、氰基、C1-C4烷基、鹵基-C1-C4烷基或C1-C4烷氧基。
  8. 如請求項1之化合物，其係選自由下列組成之群：(S)-(3-((4-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]-6-基)氧基)吡咯啶-1-基)(四氫-2H-哌喃-4-基)甲酮；5-{6-[(S)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-吡啶-3-磺酸二甲基醯胺；((S)-3-{4-[5-(嗎啉-4-磺醯基)-吡啶-3-基]-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基}-吡咯啶-1-基)-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲基-5-硝基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；(四氫-哌喃-4-基)-{(S)-3-[4-(5-三氟甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲 酮；5-{6-[(S)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；1-{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；2-甲氧基-5-[6-((S)-1-丙醯基-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基]-菸腈；1-{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；1-{(S)-3-[4-(5-氟-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；1-{(S)-3-[4-(5-氯-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；1-{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；1-{(S)-3-[4-(6-胺基-5-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；2-甲氧基-N,N-二甲基-5-[6-((S)-1-丙醯基-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基]-苯磺醯胺；1-{(S)-3-[4-(3-甲烷磺醯基-4-甲氧基-苯基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；1-{(S)-3-[4-(6-胺基-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；1-((S)-3-{4-[6-甲氧基-5-(4-甲基-哌-1-磺醯基)-吡啶- 3-基]-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基}-吡咯啶-1-基)-丙-1-酮；{(S)-3-[4-(2-甲基-吡啶-4-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲氧基甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；(四氫-哌喃-4-基)-{(S)-3-[4-(2-三氟甲基-吡啶-4-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；{(S)-3-[4-(2-甲氧基-吡啶-4-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(6-胺基-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；1-((S)-3-{4-[4-甲基-3-(哌啶-1-磺醯基)-苯基]-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基}-吡咯啶-1-基)-丙-1-酮；1-((S)-3-{4-[4-甲氧基-3-(嗎啉-4-磺醯基)-苯基]-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基}-吡咯啶-1-基)-丙-1-酮；1-((S)-3-{4-[5-(嗎啉-4-磺醯基)-吡啶-3-基]-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基}-吡咯啶-1-基)-丙-1-酮；1-((S)-3-{4-[4-甲氧基-3-(4-甲基-哌-1-磺醯基)-苯 基]-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基}-吡咯啶-1-基)-丙-1-酮；1-((S)-3-{4-[5-(4-甲基-哌-1-磺醯基)-吡啶-3-基]-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基}-吡咯啶-1-基)-丙-1-酮；2,N-二甲氧基-N-甲基-5-[6-((S)-1-丙醯基-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基]-苯磺醯胺；5-[6-((S)-1-丙醯基-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基]-吡啶-3-磺酸甲氧基-甲基-醯胺；2,N-二甲氧基-5-[6-((S)-1-丙醯基-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基]-苯磺醯胺；5-[6-((S)-1-丙醯基-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基]-菸腈；{(S)-3-[4-(5-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(5-氯-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；1-{(S)-3-[4-(3,4-二甲氧基-苯基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；1-[(S)-3-(4-喹啉-3-基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基)-吡咯啶-1-基]-丙-1-酮；1-{(S)-3-[4-(5-甲烷磺醯基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯 并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；1-{(S)-3-[4-(5-三氟甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；5-[6-((S)-1-丙醯基-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基]-吡啶-3-磺酸二甲基醯胺；2-甲基-5-[6-((S)-1-丙醯基-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基]-苯甲腈；1-{(S)-3-[4-(4-甲氧基-3-三氟甲基-苯基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；(四氫-哌喃-4-基)-{(S)-3-[4-(6-三氟甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(6-乙氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；4-[6-((S)-1-丙醯基-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基]-吡啶-2-甲腈；1-{(S)-3-[4-(5,6-二甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯 并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；1-((S)-3-{4-[5-(丙烷-2-磺醯基)-吡啶-3-基]-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基}-吡咯啶-1-基)-丙-1-酮；((S)-3-{4-[5-(丙烷-2-磺醯基)-吡啶-3-基]-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基}-吡咯啶-1-基；{(S)-3-[4-(6-乙烷亞磺醯基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；(4,4-二氟-環己基)-{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[4-(5-氟-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；{(S)-3-[4-(5-氯-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-甲酮；1,1-二側氧基-四氫-1λ*6*-噻吩-3-基)-{(S)-3-[4-(6-甲 氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[4-(6-乙氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；({(S)-3-[4-(5-氟-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[4-(5-乙基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-吡啶-4-基-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫- 2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-嘧啶-5-基-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-唑-4-基-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-唑-5-基-甲酮；(2,2-二甲基-四氫-哌喃-4-基)-{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-((S)-3-{4-[5-(丙烷-2-磺醯基)-吡啶-3-基]-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基}-吡咯啶-1-基)-甲酮；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(1-甲基-1H-咪唑-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-3,3-二氘-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-呋喃-3-基)-甲酮；1-{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-2-甲氧基-乙酮；1-{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二 氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-2-甲基-丙-1-酮；{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-苯基-甲酮；(1,1-二側氧基-四氫-1λ*6*-噻吩-3-基)-{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；[1,4]二烷-2-基-{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；1-{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-丙-1-酮；{(S)-3-[4-(5,6-二甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(5,6-二甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-[1,4]二烷-2-基-甲酮；{(S)-3-[4-(5,6-二甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-呋喃-3-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(5,6-二甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1,1-二側氧基-四氫- 1λ*6*-噻吩-3-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-3-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(5,6-二甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-3-基)-甲酮；1-{(S)-3-[4-(5,6-二甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-2-甲氧基-乙酮；1-{(S)-3-[4-(5,6-二甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-3-甲烷磺醯基-丙-1-酮；1-{(S)-3-[4-(5,6-二甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-丙-1-酮；{(S)-3-[4-(5,6-二甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*硫哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(5,6-二甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮；環己基-{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；(4-羥基-環己基)-{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶 -3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-呋喃-3-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(6-氯-5-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；1-{(S)-3-[4-(6-氯-5-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；{(S)-3-[4-(6-氯-5-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-甲酮；1-{(S)-3-[4-(6-氯-5-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-3-羥基-丙-1-酮；{(S)-3-[4-(6-氯-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；1-{(S)-3-[4-(6-氯-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；{(S)-3-[4-(6-氯-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-甲酮；1-{(S)-3-[4-(6-氯-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯 并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-3-羥基-丙-1-酮；{(S)-3-[4-(6-氯-5-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮；5-{(S)-3-[4-(6-氯-5-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-羰基}-1H-吡啶-2-酮；{(S)-3-[4-(6-氯-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮；5-{(S)-3-[4-(6-氯-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-羰基}-1H-吡啶-2-酮；{(S)-3-[4-(5,6-二甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(4-羥基-環己基)-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(3-甲基-吡啶-4-基)-甲酮；1-{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-2-吡啶-4-基-乙酮；{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮； {(S)-3-[4-(5-二氟甲基-6-甲烷磺醯基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(5-氟甲基-6-甲烷磺醯基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(6-二氟甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(6-二氟甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1,1-二側氧基-六氫-6-硫哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(5-二氟甲基-6-甲烷磺醯基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(R)-四氫-呋喃-3-基-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基胺基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(5-二甲基胺基-6-甲烷磺醯基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮； {(S)-3-[4-(5-氯-6-甲烷磺醯基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；環丙基-{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-6-[(S)-1-(四氫-哌喃-4-磺醯基)-吡咯啶-3-基氧基]-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]；4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-6-[(S)-1-(丙烷-2-磺醯基)-吡咯啶-3-基氧基]-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]；6-((S)-1-環丙烷磺醯基-吡咯啶-3-基氧基)-4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]；6-((S)-1-乙烷磺醯基-吡咯啶-3-基氧基)-4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]；(S)-3-[4-(5-氟-6-甲烷磺醯基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯；{(S)-3-[4-(5-氟-6-甲烷磺醯基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(6-乙烷磺醯基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H- 苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(3-甲基-3H-咪唑-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮；1-(4-{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-羰基}-哌啶-1-基)-乙酮；4-{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-羰基}-1H-吡啶-2-酮；5-{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-羰基}-1H-吡啶-2-酮；(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-呋喃-3-基)-甲酮；5-{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-羰基}-1-甲基-1H-吡啶-2-酮；1-{(S)-3-[4-(6-乙烷磺醯基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯 并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；1-{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；{(S)-3-[4-(5-氟-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-呋喃-3-基)-甲酮；1-{(S)-3-[4-(5-氟-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-2-甲氧基-乙酮；{(S)-3-[4-(5-氟-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-唑-4-基-甲酮；(1,1-二側氧基-四氫-1λ*6*-噻吩-3-基)-{(S)-3-[4-(5-氟-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；{(S)-3-[4-(5-氟-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(5-氟-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-唑-5-基-甲酮；{(S)-3-[4-(5-氟-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-嘧啶-5-基-甲酮；{(S)-3-[4-(5-氯-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1,1-二側氧基-四氫-1λ*6*-噻吩-3-基)-甲酮；1-{(S)-3-[4-(5-氯-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H- 苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-3-甲烷磺醯基-丙-1-酮；1-{(S)-3-[4-(5-氯-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-3-羥基-丙-1-酮；{(S)-3-[4-(5-氯-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-唑-5-基-甲酮；3-{(S)-3-[4-(5-氯-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-3-側氧基-丙腈；1-{(S)-3-[4-(5-氯-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-2-甲烷磺醯基-乙酮；1-{(S)-3-[4-(5-氟-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-2-甲烷磺醯基-乙酮；1-{(S)-3-[4-(5-氟-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-3-甲烷磺醯基-丙-1-酮；1-{(S)-3-[4-(5-氟-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-3-羥基-丙-1-酮；1-{(S)-3-[4-(5-氟-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-丙-1-酮；[1,4]二烷-2-基-{(S)-3-[4-(5-氟-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}- 甲酮；3-{(S)-3-[4-(5-氟-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-3-側氧基-丙腈；{(S)-3-[4-(5-氟-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(4-羥基-環己基)-甲酮；{(S)-3-[4-(5-二氟甲基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1,1-二側氧基-六氫-6-硫哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(5-二氟甲基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；1-{(S)-3-[4-(6-乙烷亞磺醯基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；1-((R)-3-{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-羰基}-吡咯啶-1-基)-乙酮；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(R)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；1-{(R)-3-[4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；1-{(S)-3-[4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并 [1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-丙-1-酮；2-甲氧基-5-{3-甲基-6-[(S)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；5-{6-[(S)-1-(呋呫-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-2-甲氧基-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(2-甲基-2H-吡唑-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；5-{6-[(S)-1-(異唑-5-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-2-甲氧基-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(1H-吡唑-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；5-{6-[(S)-1-(2-甲烷磺醯基-乙醯基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-2-甲氧基-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(5-甲基-[1,3,4]氧雜二唑-2-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(嘧啶-5-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(噻唑-5-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(吡-2-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(吡啶-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈； 2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(吡啶-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；5-{6-[(S)-1-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-2-甲氧基-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(5-側氧基-吡咯啶-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；5-{6-[(S)-1-(2,4-二甲基-唑-5-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-2-甲氧基-菸腈；5-{6-[(S)-1-(6,6-二甲基-4-側氧基-5,6-二氫-4H-哌喃-2-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-2-甲氧基-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(5-側氧基-吡咯啶-2-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；5-{6-[(S)-1-([1,4]二烷-2-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-2-甲氧基-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(四氫-哌喃-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；(S)-2-甲氧基-5-(6-((1-(1-甲基-1H-咪唑-4-羰基)吡咯啶-3-基)氧基)-2H-苯并[b][1,4]-4(3H)-基)菸腈；1-{(S)-3-[4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-2-嗎啉-4-基-乙酮；2-二甲基胺基-1-{(S)-3-[4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4- 二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-乙酮；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；5-{6-[(S)-1-(1-乙醯基-哌啶-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-2-甲氧基-菸腈；5-{6-[(S)-1-(2-二甲基胺基-乙醯基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-2-甲氧基-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(2-嗎啉-4-基-乙醯基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；5-[6-((S)-1-異丁炔基-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基]-2-甲氧基-菸腈；5-{6-[(S)-1-(3,3-二甲基-丁炔基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-2-甲氧基-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(3-甲基-丁炔基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；(S)-3-[4-(5-氰基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸甲酯；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(2-甲氧基-乙醯基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；5-[6-((S)-1-環己烷羰基-吡咯啶-3-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基]-2-甲氧基-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(1-甲基-哌啶-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；5-{6-[(S)-1-(2-羥基-2-甲基-丙醯基)-吡咯啶-3-基氧 基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-2-甲氧基-菸腈；5-{6-[(S)-1-(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-2-甲氧基-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-吡啶-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(唑-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(6-側氧基-1,6-二氫-吡啶-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(R)-2-(四氫-哌喃-4-羰基)-異唑啶-4-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-[6-((R)-2-丙醯基-異唑啶-4-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基]-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-2-(四氫-哌喃-4-羰基)-異唑啶-4-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸； 2-甲氧基-5-[6-((S)-2-丙醯基-異唑啶-4-基氧基)-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基]-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(R)-2-(1-甲基-1H-咪唑-4-羰基)-異唑啶-4-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(1-甲基-1H-吡唑-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(四氫-呋喃-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；{(S)-3-[4-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(3-甲基-3H-咪唑-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(唑-5-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(4-甲基-唑-5-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(嗎啉-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(4-甲氧基-環己烷羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-(6-{(S)-1-[2-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-乙醯基]-吡咯啶-3-基氧基}-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基)-菸腈； 2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(哌啶-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-((S)-吡咯啶-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-((R)-吡咯啶-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；{(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮；(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯；{(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[1-(6-二氟甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[1-(5-氯-6-甲氧基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-甲酮；(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮； {(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮；{(S)-3-[1-(5-氯-6-甲氧基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮；{(S)-3-[1-(6-二氟甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[1-(6-二氟甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮；環丙基-{(S)-3-[1-(6-二氟甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[1-(6-羥基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[1-(5-羥基甲基-6-甲氧基-吡啶-3-基}2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}甲酮；(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮； (1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[1-(5-氟-6-甲氧基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；{(S)-3-[1-(5-氟-6-甲氧基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮；2-甲氧基-5-{7-[(S)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-吡啶并[3,4-b][1,4]-1-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{7-[(S)-1-(1-甲基-1H-咪唑-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-吡啶并[3,4-b][1,4]-1-基}-菸腈；{(S)-3-[1-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[1-(5-二氟甲基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[1-(5-二氟甲基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；1-{(S)-3-[1-(5-二氟甲基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-2-甲氧基-乙酮；{(S)-3-[1-(5-二氟甲基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-2,3-二氫- 1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮；1-{(S)-3-[1-(5-二氟甲基-6-甲烷磺醯基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-2-甲氧基-乙酮；(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{3-[1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；5-{7-[(S)-1-(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-吡啶并[3,4-b][1,4]-1-基}-2-甲氧基-菸腈；(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(R)-3-氟-4-[1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；咪唑并[2,1-b]噻唑-6-基-{(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(R)-3-[1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；(5-胺基-1-甲基-1H-咪唑-4-基)-{(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；(1,1-二側氧基-四氫-1λ*6*-噻吩-3-基)-{(S)-3-[1-(6-甲 烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；{(S)-3-[4-(5,6-二甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-呋喃-2-基)-甲酮；(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[5-氟4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；{(S)-3-[4-(5-二氟甲基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-5-氟-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[5-氟-4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；5-{6-[(S)-1-((S)-1-乙醯基-吡咯啶-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]--4-基}-2-甲氧基-菸腈；5-{6-[(S)-1-((R)-1-乙醯基-吡咯啶-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-2-甲氧基-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-((R)-1-甲基-吡咯啶-3-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-6-((S)-1-吡啶-2-基-吡咯啶-3-基氧基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]；4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-6-((S)-1-嘧啶-2-基-吡咯啶-3-基氧基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]； 2-甲氧基-5-{2-甲基-6-[(S)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{(S)-2-甲基-6-[(S)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(1-甲基-哌啶-4-基甲基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮；5-{6-[(S)-1-(4-羥基-環己烷羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-2-甲氧基-菸腈；2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(2-吡啶-4-基-乙醯基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；{(S)-3-[4-(5-胺基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮；N-(2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(1-甲基-1H-咪唑-4-羰基)-吡咯啶-3-基氧基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-吡啶-3-基)-甲烷磺醯胺；(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[4-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮；{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四 氫-哌喃-4-基)-甲酮；{(S)-3-[4-(5-二氟甲基-6-甲氧基-吡啶-3-基)-5-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-甲酮；或2-甲氧基-5-{6-[(S)-1-(四氫-哌喃-4-羰基)-吡咯啶-3-基胺基]-2,3-二氫-苯并[1,4]-4-基}-菸腈；或其鹽。
  9. 如請求項1之化合物，其呈結晶形式。
  10. 如請求項8之化合物，其係(S)-(3-((4-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]-6-基)氧基)吡咯啶-1-基)(四氫-2H-哌喃-4-基)甲酮或其鹽。
  11. 如請求項8之化合物，其係{(S)-3-[4-(6-甲烷磺醯基-5-甲基-吡啶-3-基)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]-6-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(四氫-哌喃-4-基)-甲酮或其鹽。
  12. 如請求項8之化合物，其係{(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-甲酮或其鹽。
  13. 如請求項1之化合物，其係(1,1-二側氧基-六氫-1λ*6*-硫哌喃-4-基)-{(S)-3-[1-(6-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]-7-基氧基]-吡咯啶-1-基}-甲酮或其鹽。
  14. 如請求項1至5及8至13中任一項之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其係用作藥劑。
  15. 一種組合，其包含治療有效量之如請求項1至13中任一 項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種治療活性助劑。
  16. 如請求項1至5及8至13中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其係用於治療選自以下之病症或疾病：類風濕性關節炎(RA)、尋常天疱瘡(PV)、巴西天疱瘡(Brazilian pemphigus/Fogo selvagem)之地方病形式、特發性血小板減少性紫癜(ITP)、血栓性血小板減少性紫癜(TTP)、自體免疫性溶血性貧血(AIHA)、後天性血友病A型(AHA)、全身性紅斑狼瘡(SLE)、多發性硬化症(MS)、重症肌無力(MG)、休格連氏症候群(Sjögren's syndrome；SS)、ANCA相關血管炎、冷凝球蛋白血病、慢性自體免疫蕁麻疹(CAU)、過敏症、古德帕斯徹氏症候群(goodpasture's syndrome)、移植排斥反應、造血源癌症、嚴重及腦型瘧疾、錐蟲病、利什曼病(leishmaniasis)、弓形蟲病及神經囊尾蚴病。
  17. 一種醫藥組合物，其包含治療有效量之如請求項1至13中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種醫藥學上可接受之載劑。
  18. 一種如請求項1至13中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其係用於製備供調節個體中之PI3K酶之活性用的藥劑。
  19. 一種如請求項1至13中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其係用於製備供治療選自以下之病症或疾病用的藥劑：類風濕性關節炎(RA)、尋常天疱瘡 (PV)、巴西天疱瘡之地方病形式、特發性血小板減少性紫癜(ITP)、血栓性血小板減少性紫癜(TTP)、自體免疫性溶血性貧血(AIHA)、後天性血友病A型(AHA)、全身性紅斑狼瘡(SLE)、多發性硬化症(MS)、重症肌無力(MG)、休格連氏症候群(SS)、ANCA相關血管炎、冷凝球蛋白血病、慢性自體免疫蕁麻疹(CAU)、過敏症、古德帕斯徹氏症候群、移植排斥反應、造血源癌症、嚴重及腦型瘧疾、錐蟲病、利什曼病、弓形蟲病及神經囊尾蚴病。
TW101149109A 2011-12-22 2012-12-21 二氫－苯并－及二氫－吡啶并－衍生物 TWI577674B (zh)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161579231P 2011-12-22 2011-12-22

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW201333000A TW201333000A (zh) 2013-08-16
TWI577674B true TWI577674B (zh) 2017-04-11

Family

ID=47678928

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW101149109A TWI577674B (zh) 2011-12-22 2012-12-21 二氫－苯并－及二氫－吡啶并－衍生物

Country Status (42)

Country Link
US (2) US9539260B2 (zh)
EP (1) EP2794600B1 (zh)
JP (1) JP5903499B2 (zh)
KR (1) KR101656592B1 (zh)
CN (1) CN104011045B (zh)
AP (1) AP4055A (zh)
AR (1) AR089424A1 (zh)
AU (1) AU2012356083B2 (zh)
BR (1) BR112014015103B1 (zh)
CA (1) CA2859764C (zh)
CL (1) CL2014001452A1 (zh)
CO (1) CO6990717A2 (zh)
CR (2) CR20200286A (zh)
CU (1) CU20140072A7 (zh)
CY (1) CY1119939T1 (zh)
DK (1) DK2794600T3 (zh)
EA (1) EA025322B1 (zh)
EC (1) ECSP14009999A (zh)
ES (1) ES2661864T3 (zh)
GT (1) GT201400131A (zh)
HR (1) HRP20180384T1 (zh)
HU (1) HUE036953T2 (zh)
IL (1) IL233117A (zh)
IN (1) IN2014CN04174A (zh)
JO (1) JO3398B1 (zh)
LT (1) LT2794600T (zh)
MA (1) MA37142B1 (zh)
MX (1) MX353342B (zh)
MY (1) MY170922A (zh)
NO (1) NO2809782T3 (zh)
PE (1) PE20141598A1 (zh)
PH (1) PH12014501417B1 (zh)
PL (1) PL2794600T3 (zh)
PT (1) PT2794600T (zh)
RS (1) RS56891B1 (zh)
SG (1) SG11201402237WA (zh)
SI (1) SI2794600T1 (zh)
TN (1) TN2014000210A1 (zh)
TW (1) TWI577674B (zh)
UA (1) UA112558C2 (zh)
UY (1) UY34541A (zh)
WO (1) WO2013093849A1 (zh)

Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT2794600T (pt) 2011-12-22 2018-03-13 Novartis Ag Derivados de 2,3-di-hidro-benzo[1,4]oxazina e compostos relacionados como inibidores de fosfoinositídeo-3-cinase (pi3k) para o tratamento de, por exemplo, artrite reumatoide
AR089284A1 (es) 2011-12-22 2014-08-13 Galapagos Nv Dihidropirimidinoisoquinolinonas y composiciones farmaceuticas de las mismas para el tratamiento de trastornos inflamatorios
LT2794627T (lt) 2011-12-22 2019-01-10 Alios Biopharma, Inc. Pakeistieji nukleozidai, nukleotidai ir jų analogai
US9441007B2 (en) 2012-03-21 2016-09-13 Alios Biopharma, Inc. Substituted nucleosides, nucleotides and analogs thereof
USRE48171E1 (en) 2012-03-21 2020-08-25 Janssen Biopharma, Inc. Substituted nucleosides, nucleotides and analogs thereof
TW201422625A (zh) * 2012-11-26 2014-06-16 Novartis Ag 二氫－吡啶并－□衍生物之固體形式
LT2928896T (lt) * 2012-11-26 2017-09-25 Novartis Ag Dihidro-pirido-oksazino darinio kieta forma
CN105541698B (zh) * 2015-12-23 2018-07-10 滨海康杰化学有限公司 一种5-溴-2-三氟甲基吡啶的制备方法
GB2550437B (en) * 2016-05-20 2021-06-23 Bugworks Res Inc Heterocyclic compounds useful as anti-bacterial agents and method for production
AU2018392816B2 (en) * 2017-12-22 2023-04-20 HiberCell Inc. Chromenopyridine derivatives as phosphatidylinositol phosphate kinase inhibitors
PL3837263T3 (pl) 2018-08-13 2024-10-14 F. Hoffmann-La Roche Ag Nowe związki heterocykliczne jako inhibitory lipazy monoacyloglicerolowej
BR112021007421A2 (pt) 2018-12-06 2021-08-03 Daiichi Sankyo Company, Limited derivado de cicloalcano-1,3-diamina
TW202112784A (zh) 2019-06-17 2021-04-01 美商佩特拉製藥公司 作為磷脂酸肌醇磷酸激酶抑制劑之𠳭唏并嘧啶衍生物
CN114269755A (zh) 2019-09-12 2022-04-01 豪夫迈·罗氏有限公司 作为magl抑制剂的4,4a,5,7,8,8a-六吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-3-酮化合物
EP4061821A1 (en) * 2019-11-20 2022-09-28 F. Hoffmann-La Roche AG Spiro(isobenzofuranazetidine) compounds for the treatment of autoimmune disease
ES2982017T3 (es) 2020-07-15 2024-10-14 Chiesi Farm Spa Derivados de pirido-oxazina como inhibidores de ALK5
IL315475A (en) 2022-03-08 2024-11-01 Equashield Medical Ltd A position for transferring liquids in a robotic system for preparing medicines
CN116535436B (zh) * 2023-05-06 2024-04-30 遵义医科大学 一种氟离子荧光探针及其合成方法和应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040121996A1 (en) * 2002-12-06 2004-06-24 Nicole Barvian Benzoxazin-3-ones and derivatives thereof as therapeutic agents
US20060161001A1 (en) * 2004-12-20 2006-07-20 Amgen Inc. Substituted heterocyclic compounds and methods of use
WO2008044022A1 (en) * 2006-10-10 2008-04-17 Ucb Pharma S.A. Fused thiazole derivatives as kinase inhibitors
US20090042773A1 (en) * 2004-10-12 2009-02-12 Reinhard Wetzker P13 kinase gamma inhibitors for the treatment of anaemia
US20110172217A1 (en) * 2008-09-05 2011-07-14 Shionogi & Co., Ltd. Ring-fused morpholine derivative having pi3k-inhibiting activity

Family Cites Families (74)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1524747A (en) 1976-05-11 1978-09-13 Ici Ltd Polypeptide
DE3372965D1 (en) 1982-07-23 1987-09-17 Ici Plc Amide derivatives
GB8327256D0 (en) 1983-10-12 1983-11-16 Ici Plc Steroid derivatives
US5093330A (en) 1987-06-15 1992-03-03 Ciba-Geigy Corporation Staurosporine derivatives substituted at methylamino nitrogen
US5010099A (en) 1989-08-11 1991-04-23 Harbor Branch Oceanographic Institution, Inc. Discodermolide compounds, compositions containing same and method of preparation and use
TW224941B (zh) 1989-11-08 1994-06-11 Yamanouchi Pharma Co Ltd
NZ243082A (en) 1991-06-28 1995-02-24 Ici Plc 4-anilino-quinazoline derivatives; pharmaceutical compositions, preparatory processes, and use thereof
GB9300059D0 (en) 1992-01-20 1993-03-03 Zeneca Ltd Quinazoline derivatives
TW225528B (zh) 1992-04-03 1994-06-21 Ciba Geigy Ag
GB9309716D0 (en) 1993-05-12 1993-06-23 Zeneca Ltd Heterocyclic derivatives
GB9314893D0 (en) 1993-07-19 1993-09-01 Zeneca Ltd Quinazoline derivatives
EP1110953B1 (en) 1995-03-30 2009-10-28 Pfizer Products Inc. Quinazoline derivatives
GB9508538D0 (en) 1995-04-27 1995-06-14 Zeneca Ltd Quinazoline derivatives
US5747498A (en) 1996-05-28 1998-05-05 Pfizer Inc. Alkynyl and azido-substituted 4-anilinoquinazolines
US5843901A (en) 1995-06-07 1998-12-01 Advanced Research & Technology Institute LHRH antagonist peptides
DK0836605T3 (da) 1995-07-06 2002-05-13 Novartis Ag Pyrrolopyrimidiner og fremgangsmåder til deres fremstilling
US5760041A (en) 1996-02-05 1998-06-02 American Cyanamid Company 4-aminoquinazoline EGFR Inhibitors
GB9603095D0 (en) 1996-02-14 1996-04-10 Zeneca Ltd Quinazoline derivatives
DE69710712T3 (de) 1996-04-12 2010-12-23 Warner-Lambert Co. Llc Umkehrbare inhibitoren von tyrosin kinasen
DE69734513T2 (de) 1996-06-24 2006-07-27 Pfizer Inc. Phenylamino-substituierte tricyclische derivate zur behandlung hyperproliferativer krankheiten
AU716610B2 (en) 1996-08-30 2000-03-02 Novartis Ag Method for producing epothilones, and intermediate products obtained during the production process
ATE247724T1 (de) 1996-09-06 2003-09-15 Obducat Ab Verfahren für das anisotrope ätzen von strukturen in leitende materialien
CA2265630A1 (en) 1996-09-13 1998-03-19 Gerald Mcmahon Use of quinazoline derivatives for the manufacture of a medicament in the treatment of hyperproliferative skin disorders
EP0837063A1 (en) 1996-10-17 1998-04-22 Pfizer Inc. 4-Aminoquinazoline derivatives
IL129558A (en) 1996-11-18 2001-10-31 Biotechnolog Forschung Gmbh History of apothilone and pharmaceuticals and herbal preparations containing them
US6441186B1 (en) 1996-12-13 2002-08-27 The Scripps Research Institute Epothilone analogs
CO4940418A1 (es) 1997-07-18 2000-07-24 Novartis Ag Modificacion de cristal de un derivado de n-fenil-2- pirimidinamina, procesos para su fabricacion y su uso
GB9721069D0 (en) 1997-10-03 1997-12-03 Pharmacia & Upjohn Spa Polymeric derivatives of camptothecin
US6194181B1 (en) 1998-02-19 2001-02-27 Novartis Ag Fermentative preparation process for and crystal forms of cytostatics
MXPA00008365A (es) 1998-02-25 2002-11-07 Sloan Kettering Inst Cancer Sintesis de epotilonas, intermediarios y analogos de las mismas.
BR9912938B1 (pt) 1998-08-11 2011-06-28 derivados de isoquinolina, composição que os compreende, processo para preparação e uso dos mesmos.
EP1135470A2 (en) 1998-11-20 2001-09-26 Kosan Biosciences, Inc. Recombinant methods and materials for producing epothilone and epothilone derivatives
HUP0200481A3 (en) 1998-12-23 2002-12-28 Aventis Pharma Ltd West Mallin Dihydro-benzo(1,4)oxazines and tetrahydroquinoxalines, process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
CZ20021086A3 (cs) 1999-09-30 2002-10-16 Neurogen Corporation Alkylendiaminem substituované heterocykly
AU2001236606A1 (en) 2000-02-01 2001-08-14 Cor Therapeutics, Inc. 3,4-dihydro-2h-benzo(1,4)oxazine inhibitors of factor xa
PE20020354A1 (es) 2000-09-01 2002-06-12 Novartis Ag Compuestos de hidroxamato como inhibidores de histona-desacetilasa (hda)
EP1337527B1 (en) 2000-11-07 2009-10-14 Novartis AG Indolylmaleimide derivatives as protein kinase c inhibitors
JPWO2002072049A1 (ja) 2001-02-27 2004-07-02 山之内製薬株式会社 育毛用医薬組成物
AR035885A1 (es) 2001-05-14 2004-07-21 Novartis Ag Derivados de 4-amino-5-fenil-7-ciclobutilpirrolo (2,3-d)pirimidina, un proceso para su preparacion, una composicion farmaceutica y el uso de dichos derivados para la preparacion de una composicion farmaceutica
GB0119249D0 (en) 2001-08-07 2001-10-03 Novartis Ag Organic compounds
WO2004078163A2 (en) 2003-02-28 2004-09-16 Transform Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical co-crystal compositions of drugs such as carbamazepine, celecoxib, olanzapine, itraconazole, topiramate, modafinil, 5-fluorouracil, hydrochlorothiazide, acetaminophen, aspirin, flurbiprofen, phenytoin and ibuprofen
PE20040079A1 (es) 2002-04-03 2004-04-19 Novartis Ag Derivados de indolilmaleimida
CA2506432A1 (en) 2002-12-09 2004-06-24 Robert A. Kirken Methods for selectively inhibiting janus tyrosine kinase 3 (jak3)
AU2003303231A1 (en) * 2002-12-20 2004-07-14 Warner-Lambert Company Llc Benzoxazines and derivatives thereof as inhibitors of pi3ks
PL377633A1 (pl) 2003-04-03 2006-02-06 Merck Patent Gmbh Związki karbonylowe
AU2004283313A1 (en) 2003-10-24 2005-05-06 Exelixis, Inc. TAO kinase modulators and methods of use
NZ546058A (en) 2004-01-12 2010-09-30 Ym Biosciences Australia Pty Benzimidazole and other fused ring derivatives as selective janus kinase inhibitors
CN1984906A (zh) 2004-07-15 2007-06-20 日本烟草产业株式会社 稠合苯甲酰胺化合物和香草素受体1(vr1)活性抑制剂
DE102004045796A1 (de) 2004-09-22 2006-03-23 Merck Patent Gmbh Arzneimittel enthaltend Carbonylverbindungen sowie deren Verwendung
DE102004047254A1 (de) 2004-09-29 2006-04-13 Merck Patent Gmbh Carbonylverbindungen
US20080269204A1 (en) 2004-11-01 2008-10-30 Tatyana Dyakonov Compounds and Methods of Use Thereof
GB0510390D0 (en) 2005-05-20 2005-06-29 Novartis Ag Organic compounds
UA96736C2 (ru) * 2005-09-07 2011-12-12 Мерк Сероно Са Ингибиторы pi3k для лечения эндометриоза
TWI385161B (zh) 2006-02-02 2013-02-11 Mitsubishi Tanabe Pharma Corp 含氮雜雙環化合物
US8242116B2 (en) 2006-06-26 2012-08-14 Ucb Pharma S.A. Fused thiazole derivatives as kinase inhibitors
JP5513118B2 (ja) 2006-10-19 2014-06-04 シグナル ファーマシューティカルズ，エルエルシー ヘテロアリール化合物、その組成物、及びプロテインキナーゼ阻害剤としてのそれらの使用
KR20090108124A (ko) * 2007-02-06 2009-10-14 노파르티스 아게 Ｐｉ 3-키나제 억제제 및 그의 사용 방법
US7691851B2 (en) 2007-03-07 2010-04-06 Alantos Pharmaceuticals Holding, Inc. Metalloprotease inhibitors containing a heterocyclic moiety
US9603848B2 (en) 2007-06-08 2017-03-28 Senomyx, Inc. Modulation of chemosensory receptors and ligands associated therewith
WO2009026444A1 (en) 2007-08-22 2009-02-26 President And Fellows Of Harvard College Ryanodine channel binders and uses thereof
WO2009071895A1 (en) 2007-12-04 2009-06-11 Ucb Pharma S.A. Fused thiazole and thiophene derivatives as kinase inhibitors
WO2009157196A1 (ja) 2008-06-25 2009-12-30 武田薬品工業株式会社 アミド化合物
US20100152160A1 (en) 2008-12-12 2010-06-17 Khamrai Uttam Novel benzodioxane and benzoxazine derivatives useful as cc chemokine receptor ligands
WO2010111626A2 (en) 2009-03-27 2010-09-30 Takeda Pharmaceutical Company Limited Poly (adp-ribose) polymerase (parp) inhibitors
WO2010117425A1 (en) 2009-03-31 2010-10-14 Biogen Idec Ma Inc. Certain substituted pyrimidines, pharmaceutical compositions thereof, and methods for their use
WO2010151737A2 (en) 2009-06-25 2010-12-29 Amgen Inc. Heterocyclic compounds and their uses
WO2011143495A1 (en) 2010-05-13 2011-11-17 Amgen Inc. Heteroaryloxyheterocyclyl compounds as pde10 inhibitors
UA112517C2 (uk) 2010-07-06 2016-09-26 Новартіс Аг Тетрагідропіридопіримідинові похідні
KR20120018236A (ko) 2010-07-23 2012-03-02 현대약품 주식회사 치환된 피리미디닐 유도체 및 이의 제조방법
WO2012068106A2 (en) 2010-11-15 2012-05-24 Exelixis, Inc. Benzoxazepines as inhibitors of pi3k/mtor and methods of their use and manufacture
WO2012068096A2 (en) 2010-11-15 2012-05-24 Exelixis, Inc. Benzoxazepines as inhibitors of pi3k/mtor and methods of their use and manufacture
CN102731525A (zh) 2011-04-08 2012-10-17 上海艾力斯医药科技有限公司 苯并吗啉衍生物
PT2794600T (pt) 2011-12-22 2018-03-13 Novartis Ag Derivados de 2,3-di-hidro-benzo[1,4]oxazina e compostos relacionados como inibidores de fosfoinositídeo-3-cinase (pi3k) para o tratamento de, por exemplo, artrite reumatoide
TW201422625A (zh) 2012-11-26 2014-06-16 Novartis Ag 二氫－吡啶并－□衍生物之固體形式

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040121996A1 (en) * 2002-12-06 2004-06-24 Nicole Barvian Benzoxazin-3-ones and derivatives thereof as therapeutic agents
US20090042773A1 (en) * 2004-10-12 2009-02-12 Reinhard Wetzker P13 kinase gamma inhibitors for the treatment of anaemia
US20060161001A1 (en) * 2004-12-20 2006-07-20 Amgen Inc. Substituted heterocyclic compounds and methods of use
WO2008044022A1 (en) * 2006-10-10 2008-04-17 Ucb Pharma S.A. Fused thiazole derivatives as kinase inhibitors
US20110172217A1 (en) * 2008-09-05 2011-07-14 Shionogi & Co., Ltd. Ring-fused morpholine derivative having pi3k-inhibiting activity

Also Published As

Publication number Publication date
EP2794600A1 (en) 2014-10-29
AU2012356083B2 (en) 2015-01-22
BR112014015103A2 (pt) 2020-10-27
CA2859764C (en) 2019-12-31
JP5903499B2 (ja) 2016-04-13
PT2794600T (pt) 2018-03-13
TW201333000A (zh) 2013-08-16
CL2014001452A1 (es) 2014-10-24
MA37142B1 (fr) 2019-07-31
AU2012356083A1 (en) 2014-06-26
US9763952B2 (en) 2017-09-19
MY170922A (en) 2019-09-18
ES2661864T3 (es) 2018-04-04
TN2014000210A1 (en) 2015-09-30
CN104011045B (zh) 2016-08-24
IL233117A0 (en) 2014-07-31
PH12014501417A1 (en) 2014-09-22
JP2015506344A (ja) 2015-03-02
AP2014007658A0 (en) 2014-05-31
JO3398B1 (ar) 2019-10-20
NZ624872A (en) 2015-07-31
CA2859764A1 (en) 2013-06-27
CY1119939T1 (el) 2018-12-12
US20130165436A1 (en) 2013-06-27
SG11201402237WA (en) 2014-09-26
EA201491247A1 (ru) 2014-09-30
US20160106753A1 (en) 2016-04-21
CN104011045A (zh) 2014-08-27
CR20200286A (es) 2020-09-23
EP2794600B1 (en) 2017-12-06
MX353342B (es) 2018-01-08
HUE036953T2 (hu) 2018-08-28
RS56891B1 (sr) 2018-04-30
PE20141598A1 (es) 2014-11-14
HRP20180384T1 (hr) 2018-04-06
BR112014015103B1 (pt) 2022-06-28
DK2794600T3 (en) 2018-03-12
AP4055A (en) 2017-03-07
KR101656592B1 (ko) 2016-09-23
SI2794600T1 (en) 2018-03-30
WO2013093849A1 (en) 2013-06-27
ECSP14009999A (es) 2018-10-31
PH12014501417B1 (en) 2014-09-22
UY34541A (es) 2013-09-02
CO6990717A2 (es) 2014-07-10
IN2014CN04174A (zh) 2015-09-04
NO2809782T3 (zh) 2018-01-20
US9539260B2 (en) 2017-01-10
CR20140294A (es) 2014-08-13
MA37142A2 (fr) 2016-07-29
CU20140072A7 (es) 2014-10-02
UA112558C2 (uk) 2016-09-26
LT2794600T (lt) 2018-02-26
AR089424A1 (es) 2014-08-20
MX2014007687A (es) 2014-07-30
EA025322B1 (ru) 2016-12-30
GT201400131A (es) 2015-06-02
IL233117A (en) 2017-02-28
PL2794600T3 (pl) 2018-06-29
MA37142A3 (fr) 2018-05-31
KR20140107500A (ko) 2014-09-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI577674B (zh) 二氫－苯并－及二氫－吡啶并－衍生物
US20220267318A1 (en) Tetrahydro-Pyrido-Pyrimidine Derivatives
JP6437544B2 (ja) 置換キナゾリン−４−オン誘導体
KR20150091047A (ko) 디히드로-피리도-옥사진 유도체의 고체 형태
US20250059181A1 (en) Tetrahydro-Pyrido-Pyrimidine Derivatives
WO2013093850A1 (en) Quinoline derivatives
NZ624872B2 (en) Dihydro-benzo-oxazine and dihydro-pyrido-oxazine derivatives

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Annulment or lapse of patent due to non-payment of fees