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TWI499379B - 保存內源性轉型生長因子－β（ＴＧＦ－β）的方法 - Google Patents

保存內源性轉型生長因子－β（ＴＧＦ－β）的方法 Download PDF

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TWI499379B
TWI499379B TW098135793A TW98135793A TWI499379B TW I499379 B TWI499379 B TW I499379B TW 098135793 A TW098135793 A TW 098135793A TW 98135793 A TW98135793 A TW 98135793A TW I499379 B TWI499379 B TW I499379B
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whey protein
protein
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TW098135793A
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Juan M Gonzalez
Dattatreya Banavara
John D Alvey
Original Assignee
Mjn Us Holdings Llc
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Description

保存內源性轉型生長因子-β(TGF-β)的方法
本發明概括關於保存在液體營養產品中的轉型生長因子-β(TGF-β)生物活性的方法。
關於保存在液體營養產品中的TGF-β生物活性的方法，與此等方法有關的參考文獻包括Cerletti之美國專利第7,057,016號或第6,057,430號。
簡言之，本發明在具體實例中針對一種製備保留TGF-β生物活性之液體營養產品的方法。步驟包含選擇一或多種已接受包含中溫或較低溫加熱之熱負荷的蛋白質成分；將蛋白質成分與液體營養產品的所有其他組份組合，以形成漿液；使漿液在從約55℃到約65℃之溫度接受約5到約20秒從約2500磅每平方英吋(psi)到約3500psi之壓力經；使漿液接受約1.5到約15秒從約135℃到約150℃之溫度；及將漿液經約30分鐘或更短時間冷卻到低於約8℃之溫度。
現將詳細參考本發明的具體實例，一或多個以下提出之實例。每個實例係以解釋本發明而非限制本發明的方式提供。事實上，那些熟習所屬技藝者明白可在本發明進行各種修改及變異而違背本發明的範疇或精神。例如，作為 一個具體實例一部分所例證或說明之特性可用於另一具體實例，得到又另一具體實例。
因此，意欲以本發明涵蓋此等修改及變異如同落於所附之申請專利範圍及其同等物之範疇內。本發明的其他目的、特性及觀點被揭示於或顯而易見於下列的詳細說明中。一般熟習所屬技藝者應瞭解本發明的討論僅為示例性具體實例的說明而已，而無意限制本發明更寬闊的觀點。
如上所提出，本發明概括關於保存在液體營養產品中的TGF-β生物活性的方法。與此等方法有關的參考文獻包括Cerletti之美國專利第7,057,016號或第6,057,430號。
轉型生長因子-β(TGF-β)為多肽家族的通用名稱，其成員具有多功能調節活性。三種差示調節之哺乳類同型體(稱為TGF-β 1、TGF-β 2及TGF-β 3)在許多發育胚胎、嬰兒、兒童及成人的過程中扮演重要的角色。TGF-β為已知在免疫系統及全身二者內介導多效性功能之25-kDa同型二聚體細胞激素。TGF-β表現在腸黏膜內的許多類胞類型中，包括淋巴細胞、上皮細胞、巨噬細胞及基質細胞，而且以T-細胞、嗜中性細胞、巨噬細胞、上皮細胞、纖維母細胞、血小板、成骨細胞、破骨細胞及其他等表現。另外，TGF-β存在於人乳中且可影響嬰兒健康及發育的多重方面。
TGF-β係經合成為大的前驅蛋白質，其係由包含訊息序列及潛伏相關複合物的胺基末端前區域及成熟羧基末端次單元所組成。生物活性TGF-β為由兩種以二硫化物連結之相同的成熟次單元所組成之同型二聚體。從潛伏相關複合物釋放TGF-β同型二聚體為TGF-β致力生物活性於標的細胞上所必要的。潛伏相關複合物的本性及負責TGF-β釋放的機制為瞭解TGF-β在活體內的生物活性的關鍵。在人的內臟中，此可藉由蛋白解酶、pH極限、熱、鈣及/或機械撕裂的作用而完成。
基於由TGF-β所提供的許多利益，通常重要的是生長因子存在於或補充至各種液體營養產品中。例如，在營養產品中的某些蛋白質來源可提供TGF-β來源。或者，若營養產品本身不含有TGF-β，則生長因子可補充至產品中。然而，在任一情況中，經由液體營養產品的製造法難以保留TGF-β的生物活性。
貨架期穩定的非冷藏性液體營養產品典型地利用高熱處理加工，以破壞病原菌芽胞。常見的甑餾法可能加熱產物至130℃經2.5分鐘，其取決於營養產品的固體含量。或者，可能利用超高溫(UHT)。以UHT加熱產品至135-150℃之溫度範圍經1.5到15秒。TGF-β(不耐熱生物活性化合物)常常不可存活於製造貨架期穩定的液體營養產品所必要而常見的甑餾法。這些方法常使TGF-β的天然結構顯著變性，藉此使其成為生理惰性且不能在人的內臟中活化。
因此，由本發明解決的技術問題係提供製備液體營養產品的方法，使得TGF-β及其他的不耐熱組份保留其生物活性及利用率。在具體實例中，本發明指向一種加工方法及保留在以貨架期穩定的非冷藏性乳製品為主之液體營養產品中的TGF-β水平、生物活性及/或生物利用率之成份的選擇。
在到達任何加工廠之前，以乳製品為主之原料，諸如脫脂奶粉(亦已知為脫脂奶粉(skim milk powder))、乳清蛋白粉、煉乳、酪蛋白及其他原料的製造需要某種加熱程度以確保安全性。根據本發明，以乳製品為主之原料係以其接受的累積熱處理為基準分類，如表1及2中所示。因為難以決定熱處理類型，所以原料接受檢查，測量原料的未變性乳清蛋白氮(WPN)水平以傳達此資訊。表1顯示脫脂奶粉的一般公認之處理參數及WPN水平。
在脫脂奶粉中的WPN水平為存在於脫脂奶粉中以每公克脫脂奶粉計之毫克氮表示的未變性乳清蛋白量。在特殊的具體實例中，為了測定脫脂奶粉中的WPN，可將奶粉脫水，在氯化鈉飽和溶液中加熱及過濾。濾液接著含有未變性乳清蛋白及非蛋白氮部分。接著可將濾液在鹽飽和溶液中稀釋及酸化，並且溶液可以分光光度測量。所獲得的透光率接著可與從標準物的凱氏氮對那些標準物的透光率所繪製之標準曲線比較。此方法常被稱為Harland-Ashworth試驗。在其他的具體實例中，可使用所屬技藝中用於測定脫脂奶粉中的WPN水平之任何已知的方法。
因此，如本文所使用之〝低溫加熱〞脫脂奶粉被定義成一種來到加工時含有至少約6毫克/公克之WPN的奶粉。低溫加熱脫脂奶粉有可能經歷約30秒到5分鐘暴露於低於約70℃之溫度。
〝中溫加熱〞脫脂奶粉被定義成一種來到加工時含有介於約1.51毫克/公克與約5.99毫克/公克之間的WPN之奶粉。中溫加熱脫脂奶粉有可能經歷約15到25分鐘暴露於約70℃到78℃之範圍內的溫度。
如本文所使用之〝高溫加熱〞脫脂奶粉被定義成一種來到加工時含有約1.5毫克/公克或更少的WPN之奶粉。高溫加熱脫脂奶粉有可能經歷約30分鐘或更長暴露於至少88℃之溫度。
表2顯示乳清蛋白粉的處理參數及WPN水平，包括乳清蛋白濃縮物及乳清蛋白分離物。參閱Mahmoud等人之Factors Affecting Measurement of Undenatured Whey Protein Nitrogen in Dried Whey by a Modified Harland-Ashworth Test,J. Dairy Sci. 73:1694-1699(1990)。
在乳清蛋白粉中的WPN水平大於標準的脫脂奶粉之該水平，因為在乳清蛋白粉中的乳清蛋白組成物(諸如具有約50%蛋白質之乳清蛋白濃縮物)以無水為基準計比脫脂奶粉多至少6至7倍。當以方法偵測乳清蛋白中的變性時，則預期乳清蛋白粉的結果比以脫脂奶粉所獲得的結果更高。
因此，如本文所使用之〝低溫加熱〞乳清蛋白粉被定義成一種來到加工時含有至少約14.5毫克/公克之WPN的粉。低溫加熱乳清蛋白粉有可能經歷約30秒到30分鐘暴露於少於約63℃之溫度。
〝中溫加熱〞乳清蛋白粉被定義成一種來到加工時含有介於約5.99毫克/公克與約14.49毫克/公克之間的WPN之粉。中溫加熱乳清蛋白粉有可能經歷約15到25分鐘暴露於約70℃到78℃之範圍內的溫度。
如本文所使用之〝高溫加熱〞乳清蛋白粉被定義成一種來到加工時含有約6.0毫克/公克或更少的WPN之粉。高溫加熱乳清蛋白粉有可能經歷約30分鐘或更長暴露於至少91℃之溫度。
根據本發明的成份選擇具有重要性，因為熱處理程度衝擊蛋白質來源的物理化學性質與其在食品加工中的價值。以熱誘發之乳清蛋白變性引起乳清蛋白與酪蛋白微膠粒表面交互作用。此變性提供牛奶酪蛋白在液體配方製造期間更高的熱穩定性。然而，此方法亦使許多存在於牛奶中的生物活性組份變性，諸如生長因子，如TGF-β。
在本發明的具體實例中，方法包含根據在營養產品製造期間接收的熱負荷及在加工期間施予營養產品的熱過程而對蛋白質材料的特別選擇。
在具體實例中，營養產品之蛋白質材料的選擇包括脫脂奶粉的來源。在此具體實例中，脫脂奶粉來源可具有大於約1.5毫克/公克之WPN。在另一具體實例中，脫脂奶粉來源可具有大於約2.0毫克/公克之WPN。在又另一具體實例中，脫脂奶粉來源可具有大於約3.0毫克/公克之WPN。在進一步的具體實例中，脫脂奶粉來源可具有大於約4.0毫克/公克之WPN。在又進一步的具體實例中，脫脂奶粉來源可具有大於約5.0毫克/公克之WPN。在特殊的具體實例中，脫脂奶粉來源可具有大於約6.0毫克/公克之WPN。
在一些具體實例中，脫脂奶粉來源可具有從約3毫克/公克到約10毫克/公克之WPN。在一些具體實例中，脫脂奶粉含有約1.5毫克/公克到約8毫克/公克之WPN水平。在又其他的具體實例中，脫脂奶粉含有介於約5毫克/公克與約8毫克/公克之間的WPN水平。雖然WPN水平在此係根據低溫、中溫及高溫加熱分類，但是應瞭解具有比接近於約1.5毫克/公克而更接近於約5.99毫克/公克之WPN水平的中溫加熱脫脂奶粉可具有更多的內源性TGF-β量存在於其中。
在另一具體實例中，營養產品之蛋白質材料的選擇包括乳清蛋白粉的來源。在此具體實例中，乳清蛋白粉可選自甜乳清、去鹽乳清、乳清蛋白濃縮物、乳清蛋白分離物及其組合。在各具體實例中，乳清蛋白粉來源接受中溫、低溫或不加熱。因此，在具體實例中，乳清蛋白粉可具有大於約6.0毫克/公克之WPN。在另一具體實例中，乳清蛋白粉可具有大於約8.0毫克/公克之WPN。在又另一具體實例中，乳清蛋白粉可具有大於約10.0毫克/公克之WPN。在進一步的具體實例中，乳清蛋白粉可具有大於約12.0毫克/公克之WPN。在又進一步的具體實例中，乳清蛋白粉可具有大於約14.0毫克/公克之WPN。在特殊的具體實例中，乳清蛋白粉可具有大於約14.5毫克/公克之WPN。
在一些具體實例中，乳清蛋白粉可具有從約6毫克/公克到約15毫克/公克之WPN。在一些具體實例中，乳清蛋白粉含有約10毫克/公克到約20毫克/公克之WPN水平。在又其他的具體實例中，乳清蛋白粉含有介於約12毫克/公克與約15毫克/公克之間的WPN水平。雖然WPN水平在此係根據低溫、中溫及高溫加熱分類，但是應瞭解具有比接近於約6.0毫克/公克而更接近於約14.5毫克/公克之WPN水平的中溫加熱乳清蛋白粉可具有更多的內源性TGF-β量存在於其中。
在另一具體實例中，營養產品之蛋白質材料的選擇包括選自全脂奶粉、牛奶蛋白濃縮物、牛乳蛋白分離物及其組合之酪蛋白來源。在各具體實例中，酪蛋白源已以最少的熱處理發展史為基準選擇。TGF-β可藉由減至最少的加熱量施予蛋白質材料而有更好的保護且可在產品製造期間存活於UHT法。在乳清材料中的TGF-β對熱變性比存在於含酪蛋白成份中TGF-β更敏感。這通常歸因於酪蛋白致力於生物活性組份的保護效果。
在一些具體實例中，酪蛋白及乳清蛋白來源二者被用於營養產品中。
在本發明之前，一般熟習所屬技藝者可能不選擇具有本文主張之WPN水平之原料。一般熟習所屬技藝者咸信液體營養產品的熱加工可能破壞成份的任何TGF-β活性。據此，沒有選擇低溫或中溫加熱原料的動機。另外，在本發明之前，以選擇高溫加熱原料實際上較佳，由於經由高溫加熱製造技術的蛋白質變性提供比以未變性蛋白質更少起泡的最終產物之事實。本發明者驚訝地發現內源性TGF-β水平及活性可藉由選擇具有如本文所主張之WPN水平的成份且施予所主張之加工步驟而保留在最終產品中。
在本發明的具體實例中，蛋白質成份係以其製造加熱處理為基準予以選擇且與液體營養產品的所有其他組份組合，以形成漿液。在一些具體實例中，先將漿液進行加熱殺菌。加熱殺菌可在約70℃到約75℃之溫度進行約5到25秒。在其他的具體實例中，加熱殺菌可在約72℃之溫度進行約10-20秒。在又其他的具體實例中，加熱殺菌可在約72℃之溫度進行約15秒。
接著將此漿液均化。均化步驟可在介於約2500磅/平方英吋(psi)與3500psi之間的壓力下進行。在其他的具體實例中，壓力可為約3000psi。均化步驟的溫度範圍可從約55℃到約65℃。在具體實例中，均化步驟可發生約5到20秒。在特殊的具體實例中，均化步驟係在約3000psi之壓力及約55℃到約65℃之範圍內的溫度進行約5到20秒。
接著將均化乳液經UHT處理。在具體實例中，UHT處理係在約135℃到約150℃之範圍內的溫度進行。在其他的具體實例中，UHT處理係在約141℃到約145℃之範圍內的溫度進行。UHT處理可發生約1.5到15秒。在特殊的具體實例中，UHT處理係在約141℃到約145℃之範圍內的溫度進行約5秒。
此方法接著包含快速冷卻步驟。在此步驟中，可將產品冷卻到低於約8℃之溫度。冷卻步驟可發生在少於30分鐘之內。
在產物冷卻後，可將產物以無菌填充至所欲格式中，成為其中具有活性水平之TGF-β的貨架期穩定的非冷藏性乳製產品。
在此方法的替代具體實例中，可將漿液利用高壓加工技術在約400MPa到約600MPa之範圍內的壓力與約60℃到約80℃之範圍內的溫度組合下加工約1到3分鐘。若必要時，如上述所討論，接著可將此高壓加工之材料均化及甚至進一步經UHT處理。此高壓的替代具體實例允許營養產品保留其TGF-β生物活性。此高壓處理之材料亦可與上述方法中之一或全部組合，以獲得具有活性TGF-β及其他生物活性化合物的貨架期穩定產品。
在圖1中所示之特殊具體實例中，可將一或多個低或中溫加熱成份經由橫流過濾系統(諸如0.14微米陶磁濾器)泵取。這些成分可包含液體乳清成份或隨意在低pH下重組的乳清蛋白濃縮物。可將滯留物與營養產品必要的其他成份混合。將著可將滯留物混合物熱加工及轉移到無菌的散裝產物槽中。可將來自上述橫流過濾步驟的透過物再經由另一橫流過濾系統(諸如0.20微米螺捲式薄膜濾器)泵取。接著可將所得透過物以無菌定量配料至熱處理產物中且以無菌包裝成貨架期穩定產品。
在一些具體實例中，本發明的方法用於生產貨架期穩定的非冷藏性液體產品。然而，此方法亦可用於生產冷藏性產品。在具體實例中，此方法可經修改以補充在選擇之原料中的內源性TGF-β水平。
在一些具體實例中，營養產品可為嬰兒配方。如本文所使用之術語〝嬰兒〞意謂不超過12個月大的人。術語〝嬰兒配方〞適用於意欲使用之液體或粉末形式的組成物，在必要時，成為符合嬰兒正常營養需求之人乳取代品(母奶取代品)。在單獨的具體實例中，營養產品可為人乳補強劑，意謂其為添加到人乳中以增強人乳的營養價值之組成物。作為人乳補強劑之本發明組成物具有粉末或液體形式。在另一具體實例中，本發明的營養產品為較大嬰兒(follow-up)配方。如本文所使用之術語〝較大嬰兒配方〞係指意欲用作為從6個月起之嬰兒及幼小兒童的斷奶飲食之液體部分的食物。如本文所使用之術語〝幼小兒童〞(〝young child〞或〝young childred〞)意謂從大於12個月到最大3歲的人。在又另一具體實例中，本發明的營養產品可為兒童營養組成物。如本文所使用之術語〝兒童〞(〝child〞或〝childred〞)意謂大於3歲及青春期之前的人。在又另一具體實例中，本發明的營養產品可為成長牛奶。術語〝成長牛奶〞係指意欲用作為多樣化飲食一部分的以牛奶為基補強之飲品的廣義類別，以維持從1至6歲之兒童正常生長及發育。
在一些具體實例中，組成物為酸化產品。如本文所使用之術語〝酸化產品〞係指具有4.6或更低之最終平衡pH及大於0.85之水活性的營養組成物。在又另一具體實例中，營養產品可為醫學食品。術語〝醫學食品〞被定義成經調配在醫師監督下吃掉或經腸投予且為疾病或症狀之特殊的飲食管理而準備之食品，此係由醫學評估建立基於認可之科學原理的特殊營養需求。通常，被認為醫學食品的產品最少必須符合下列準則：產品必須是經口或管灌餵食之食品；產品必須被標識用於有特殊營養需求之特殊的醫學病症、疾病或症狀之飲食管理；及產品必須為醫學監督下使用而準備。
本發明的營養產品可提供最少、部分或全部的營養補給。組成物可為營養補充品或代餐。在一些具體實例中，組成物可連同食物或營養組成物一起施予。在此具體實例中，組成物可在受試者攝取之前與食物或其他營養組成物混合或可在攝取食物或營養組成物之前或之後施予受試者。組成物可施予接受嬰兒配方、人乳、人乳補強劑或其組合之不足月嬰兒。
組成物可為但非必要為全營養。熟習的技藝人員將理解〝全營養〞係取決於許多因素而變動，包括(但不限於此)年齡、臨床症狀及適用全營養期限的受試者之飲食攝取。通常，〝全營養〞意謂本發明的營養組成物提供正常生長所需之適量的所有碳水化合物、脂質、必需脂肪酸、蛋白質、必需胺基酸、條件性必需胺基酸、維生素、礦物質及能量。如適用於營養分的術語〝必需〞係指不可由身體合成足以正常生長且維持健康之量且因此必須由飲食供給的任何營養分。如適用於營養分的術語〝條件性必需〞意謂營養分在適量的前驅化合物無法由身體以內源性合成發生時之條件下必須由飲食供給。
用於不足月嬰兒之〝全營養〞組成物根據定義提供不足月嬰兒生長所需之定性及定量上適量的所有碳水化合物、脂質、必需脂肪酸、蛋白質、必需胺基酸、條件性必需胺基酸、維生素、礦物質及能量。用於足月嬰兒之〝全營養〞組成物根據定義提供足月嬰兒生長所需之定性及定量上適量的所有碳水化合物、脂質、必需脂肪酸、蛋白質、必需胺基酸、條件性必需胺基酸、維生素、礦物質及能量。用於兒童之〝全營養〞組成物根據定義提供兒童生長所需之定性及定量上適量的所有碳水化合物、脂質、必需脂肪酸、蛋白質、必需胺基酸、條件性必需胺基酸、維生素、礦物質及能量。
若營養產品為嬰兒配方或人乳補充品，則其可為用於足月嬰兒、不足月嬰兒、低出生體重兒、非常低出生體重兒或極低出生體重兒之產品。如本文所使用之術語〝足月〞係指在約37週懷孕期之後到整個42週懷孕期出生但小於1個月大之新生嬰兒。如本文所使用之術語〝足月嬰兒〞或〝嬰兒〞係指小於12個月大之嬰兒。如本文所使用之術語〝不足月〞或〝不足月嬰兒〞包括在約37週懷孕期之前出生之嬰兒。如本文所使用之術語〝低出生體重〞或〝低出生體重兒〞為那些在出生時秤重從約3.3到約5.5磅之嬰兒。〝非常低出生體重兒〞為那些在出生時秤重少於約3.3到約2.2磅之嬰兒。〝極低出生體重〞或〝極低出生體重兒〞為那些在出生時秤重少於約2.2磅之嬰兒。
在某些具體實例中，經由本發明方法所形成之營養配方可經腸或非經腸施予。如本文所使用之〝經腸〞意謂經過或在胃腸道或消化道內，且〝經腸施予〞包括經口餵食、經胃內餵食、經幽門施予或任何其他引入消化道的方式。術語〝非經腸〞意謂以除了經過消化道以外的方式進入體內或施予，諸如以靜脈內或肌肉內注射。
在具體實例中，在組成物中的脂質或脂肪量可從約4到約7公克/100千卡變動。在另一具體實例中，脂肪量可從約5到約6公克/100千卡變動。在進一步的具體實例中，脂肪量可從約5.3到約5.6公克/100千卡變動。在又另一具體實例中，脂肪量可從約5.4到約5.9公克/100千卡變動。在還另一具體實例中，脂肪量可從約5.5到約5.7公克/100千卡變動。適合於實行本發明的脂質來源可為所屬技藝中已知或使用的任何來源，包括(但不限於此)動物來源，例如乳脂、奶油、奶油脂、蛋黃脂質；水產來源，諸如魚油、水產油、單細胞油；蔬菜及植物油，諸如玉米油、菜籽油、葵花子油、大豆油、棕櫚油、椰子油、高油酸葵花子油、月見草油、油菜籽油、橄欖油、亞麻仁油(亞麻仁籽油)、棉籽油、高油酸紅花子油、棕櫚硬脂液油、棕櫚仁油、小麥胚芽油；中鏈三酸甘油酯與乳液及脂肪酸之酯；及其任何組合。
在本發明的具體實例中，在組成物中的蛋白質量可從約1到約5公克/100千卡變動。在另一具體實例中，蛋白質量可從約1.8到約2.5公克/100千卡。在另一具體實例中，蛋白質量可從約2.0到約2.2公克/100千卡。在一個具體實例中，蛋白質量可為約2.1公克/100千卡。在實行本發明時有用的牛奶蛋白質來源包括(但不限於此)牛奶蛋白粉、牛奶蛋白濃縮物、牛奶蛋白分離物、脫脂奶粉固體、脫脂牛奶、脫脂奶粉、乳清蛋白、乳清蛋白分離物、乳清蛋白濃縮物、甜乳清、酸乳清、酪蛋白、酸酪蛋白、酪蛋白酸鹽(例如，酪蛋白酸鈉、酪蛋白酸鈉鈣、酪蛋白酸鈣)及其任何組合。
在本發明的具體實例中，蛋白質係以完整蛋白質提供。在其他的具體實例中，蛋白質係以完整蛋白質與介於約4%與10%之間的水解程度之部分水解蛋白質二者之組合提供。在又另一具體實例中，蛋白質來源可以含麩醯胺酸肽補充。
在本發明特殊的具體實例中，乳清：酪蛋白之比類似於人乳中所發現。在具體實例中，蛋白質來源可包含從約40%到約70%之乳清蛋白。在另一具體實例中，蛋白質來源可包含從約30%到約60%之酪蛋白。在一個具體實例中，蛋白質來源可包含從約40%到約70%之乳清蛋白及從約30%到約60%之酪蛋白。
在具體實例中，在本發明組成物中的碳水化合物量可從約8到約12公克/100千卡變動。在另一具體實例中，碳水化合物量可從約10.5到11公克/100千卡變動。在特殊的具體實例中，碳水化合物量可為約10.6公克/100千卡。碳水化合物來源可為所屬技藝中已知或使用的任何來源，例如乳糖、果糖、葡萄糖、玉米糖漿、玉米糖漿固體、麥芽糊精、蔗糖、澱粉、米糖漿固體、米澱粉、改造玉米澱粉、改造樹薯澱粉、米粉、大豆粉及其組合。
在特殊的具體實例中，碳水化合物組份可由100%之乳糖所組成。在又另一具體實例中，碳水化合物組份包含介於約0%與60%之間的乳糖。在另一具體實例中，碳水化合物組份包含介於約15%與55%之間的乳糖。在又另一具體實例中，碳水化合物組份包含介於20%與30%之間的乳糖。在這些具體實例中，剩餘的碳水化合物來源可由所屬技藝中已知的那些來源中之一或多者提供，包括(但不限於此)那些先前所揭示適合於實行本發明的來源。
本發明的營養組成物可隨意地包括下列維生素或其衍生物中之一或多者，包括(但不限於此)生物素、生物素研製粉、維生素B1 (例如，噻胺、噻胺焦磷酸鹽、噻胺鹽酸鹽、噻胺三磷酸鹽、噻胺單硝酸鹽)、維生素B2 (例如，核黃素、黃素單核苷酸、黃素腺嘌呤二核苷酸、乳核黃素、卵核黃素、核黃素鈉、核黃素-5’-磷酸鹽)、維生素B2 (例如，菸鹼、菸鹼酸、菸鹼醯胺(nicotinamide)、菸鹼醯胺(niacinamide)、菸鹼醯胺腺嘌呤二核苷酸、菸鹼醯胺單核苷酸、菸鹼醯胺腺嘌呤二核苷酸磷酸鹽、吡啶-3-羧酸、維生素B3 前驅物色胺酸)、葉酸(例如，葉酸鹽、葉酸素、蝶醯麩胺酸、蝶醯單麩胺酸、蝶醯聚麩胺酸鹽)、泛酸(例如，泛酸鹽、泛醇、泛酸鈣)、維生素B6 (例如，吡哆醇鹽酸鹽、吡哆醇、吡哆醇-5’-磷酸鹽、吡哆醛、吡哆醛-5’-磷酸鹽、吡哆胺、吡哆胺-5’-磷酸鹽、吡哆醇葡萄糖苷)、維生素B12 (例如，鈷胺素、甲基鈷胺素、脫氧腺苷鈷胺素、氰基鈷胺素、羥基鈷胺素、腺苷鈷胺素、5’-脫氧腺苷鈷胺素)、維生素C(例如，抗壞血酸、去氫抗壞血酸、L-抗壞血酸、L-抗壞血酸鈉、L-抗壞血酸鈣、抗壞血酸棕櫚酸酯)、維生素A(例如，視網醇、視網醛、視網酸、維生素A棕櫚酸酯、乙酸視網酯、棕櫚酸視網酯(retinyl palmitate)、棕櫚酸視網酯(retinyl palmitate ester)、視網酯、視網醇酯)、β-胡蘿蔔素、α-胡蘿蔔素、維生素D(例如，維生素D3 、促鈣醇、膽促鈣醇、二羥基維生素D、1,25-二羥基膽促鈣醇、7-脫氫膽固醇、麥角促鈣醇)、膽鹼(例如，氯化膽鹼、膽鹼二酒石酸酯、溶血卵磷脂)、維生素E(例如，維生素E乙酸酯、維生素E生育酚乙酸酯、α-生育酚、α-生育酚乙酸酯、α-生育酚丁二酸酯、α-生育酚菸鹼酸酯、α-生育酚酯、RRR-α-生育酚、RRR-α-生育酚乙酸酯、RRR-α-生育酚丁二酸酯、dL-α-生育酚乙酸酯、dL-α-生育酚丁二酸酯、dL-α-生育酚、dL-α-生育酚乙酸酯、dL-α-生育酚丁二酸酯、γ-生育酚)、維生素K(例如，維生素K1 葉萘醌、維生素K2 、維生素K3 、甲萘醌、甲基萘醌、甲基萘醌-7、甲基萘醌-4、甲基萘醌-8、甲基萘醌-8H、甲基萘醌-9、甲基萘醌-9H、甲基萘醌-10、甲基萘醌-11、甲基萘醌-12、甲基萘醌-13、葉綠醌、萘酚醌、2’,3’-二氫葉綠醌)、肉鹼、L-肉鹼、肌醇、牛磺酸及其任何組合。
本發明的營養組成物可隨意地包括下列礦物質或其衍生物中之一或多者，包括(但不限於此)硼、鈣、乙酸鈣、天冬胺酸鈣、碳酸鈣、氯化鈣、檸檬酸鈣、檸檬酸蘋果酸鈣、D-蔗糖酸鈣、葡萄糖酸鈣、葡萄糖酸鈣單水合物、甘油磷酸鈣、乳酸鈣、磷酸鈣、丙酸鈣、硫酸鈣、氯化物、鉻、氯化鉻、吡啶甲酸鉻、三價鉻、銅、葡萄糖酸銅、硫酸銅、氟化物、碘化物、碘、碘酸鈣、碘化亞銅、碘酸鉀、碘化鉀、鐵、鐵研製粉、元素鐵、硫酸亞鐵七水合物、羰基鐵、三價鐵離子(ferric iron)、葡萄糖酸亞鐵、甘胺酸磺酸亞鐵、二價鐵離子、富馬酸亞鐵、正磷酸鐵、多糖鐵、鎂、碳酸鎂、氫氧化鎂、氧化鋅、磷酸鎂、硬脂酸鎂、硫酸鎂、錳、乙酸錳、氯化錳、硫酸錳單水合物、鉬、鉬酸鈉、無水鉬、磷、鉀、乙酸鉀、碳酸氫鉀、氯化鉀、檸檬酸鉀、氫氧化鉀、磷酸鉀、硒、硒酸鹽、亞硒酸鹽研製粉、多庫酸鈉(sodium docusate)、硫、鈉、氯化鈉、檸檬酸鈉、亞硒酸鈉、硫酸鈉、無機硫酸鹽、鋅、葡萄糖酸鋅、氧化鋅、硫酸鋅、硫酸鋅單水合物及其任何組合。礦物質化合物的非限制性示例衍生物包括任何礦物質化合物的鹽類、鹼鹽類、多糖類、酯類、元素礦物質及螯合物。
在本發明的一些具體實例中，在營養組成物中的補充鈣來源包含單獨或與選自乳酸鈣、硫酸鈣、氯化鈣、檸檬酸鈣、磷酸鈣、D-蔗糖酸鈣、天冬胺酸鈣、丙酸鈣及其組合之鈣來源組合的葡萄糖酸鈣。在本發明特殊的具體實例中，在營養組成物中單獨的補充鈣來源為葡萄糖酸鈣。
在單獨的具體實例中，本發明可包含以成長牛奶提供的兒童營養組成物。此發明可具有提供從約60到75千卡/100毫升之能量的200毫升標準食用份量，以每天食用2到3次的建議攝取量。在此一具體實例中，蛋白質、脂質及碳水化合物的量及類型可變動。蛋白質可包含從約2.5到3.75公克/100千卡，碳水化合物提供從約11到約16.5公克/100千卡及脂質包含從約2.2到約4.4公克/100千卡。碳水化合物來源可為所屬技藝中已知或適合於營養組成物使用的任何來源，包括(但不限於此)那些本文所揭示者。在具體實例中，用於成長牛奶中的碳水化合物來源可包括(但不限於此)麥芽糊精、果糖、乳糖、益菌生、抗性澱粉、澱粉及其任何組合。在具體實例中，每次食用的成長牛奶少於10%之能量係由選自：白糖(葡萄糖)、紅糖、玉米糖漿、玉米糖漿固體、高果糖玉米糖漿、麥芽糖漿、楓糖漿、液體果糖、糖蜜、蜂蜜、無水葡萄糖及其任何組合之糖貢獻。
當維生素A存在於成長牛奶中時，其可以約1到約150微克/食用之範圍存在。在另一具體實例中，維生素A可以從約57到約65微克/食用為範圍之量存在。在所屬技藝中具有營養用途的任何已知的維生素A來源可適用於本發明組成物中，包括(但不限於此)那些用於實行本發明的先前所揭示者。在具體實例中，用於成長牛奶中的維生素A來源可包括預形成之維生素A來源，諸如乙酸視網酯、棕櫚酸視網酯、視網醇及其任何組合。
當維生素C存在於成長牛奶中時，其可以約0.1到約10毫克/食用之範圍存在。在另一具體實例中，維生素C可以5毫克/食用之水平存在。在所屬技藝中具有營養用途的任何已知的維生素C來源可適用於本發明組成物中，包括(但不限於此)那些用於實行本發明的先前所揭示者。在具體實例中，用於成長牛奶中的維生素C來源包括L-抗壞血酸、L-抗壞血酸鈉、L-抗壞血酸鈣、抗壞血酸棕櫚酸酯及其任何組合。
當噻胺存在於成長牛奶中時，其可以約0.01到約0.5毫克/食用之範圍存在。在另一具體實例中，噻胺可以0.05到約0.15毫克/食用之範圍存在。在又另一具體實例中，噻胺可在0.08到0.10毫克/食用之範圍內。在所屬技藝中具有營養用途的任何已知的噻胺來源可適用於本發明組成物中，包括(但不限於此)那些用於實行本發明的先前所揭示者。在具體實例中，用於成長牛奶中的噻胺來源包括噻胺鹽酸鹽、噻胺單硝酸鹽及其任何組合。
當核黃素存在於成長牛奶中時，其可以約0.01到約0.5毫克/食用之範圍存在。在另一具體實例中，核黃素可以0.05到約0.15毫克/食用之範圍存在。在又另一具體實例中，核黃素可在0.08到0.10毫克/食用之範圍內。在所屬技藝中具有營養用途的任何已知的核黃素來源可適用於本發明組成物中，包括(但不限於此)那些用於實行本發明的先前所揭示者。在具體實例中，用於成長牛奶中的核黃素來源包括游離核黃素、核黃素鈉、核黃素-5’-磷酸鹽及其任何組合。
當維生素B6 存在於成長牛奶中時，其可以約0.01到約0.5毫克/食用之範圍存在。在另一具體實例中，維生素B6 可以0.05到約0.15毫克/食用之範圍存在。在又另一具體實例中，維生素B6 的水平可在0.08到0.10毫克/食用之範圍內。在所屬技藝中具有營養用途的任何已知的維生素B6 來源可適用於本發明組成物中，包括(但不限於此)那些用於實行本發明的先前所揭示者。在具體實例中，用於成長牛奶中的維生素B6 來源包括吡哆醇鹽酸鹽、吡哆醇-5’-磷酸鹽及其任何組合。
當葉酸鹽存在於成長牛奶中時，其可以5到50微克/食用之範圍存在。在另一具體實例中，葉酸鹽含量可為10到40微克/食用。在又另一具體實例中，葉酸鹽含量可在20到35微克/食用之範圍內。在所屬技藝中具有營養用途的任何已知的葉酸鹽來源可適用於本發明組成物中，包括(但不限於此)那些用於實行本發明的先前所揭示者。在具體實例中，用於成長牛奶中的葉酸鹽來源為葉酸。
當維生素D存在於成長牛奶中時，其可以0.1到約2微克/食用之範圍存在。在又另一具體實例中，成長牛奶中的維生素D含量可為0.5到1微克/食用。在所屬技藝中具有營養用途的任何已知的維生素D來源可適用於本發明組成物中，包括(但不限於此)那些用於實行本發明的先前所揭示者。在具體實例中，用於成長牛奶中的維生素D來源包括膽促鈣醇、麥角促鈣醇及其任何組合。
當鈣存在於成長牛奶中時，總鈣可以約165到約300毫克/食用之範圍存在。在另一具體實例中，可於成長牛奶中提供約180到250毫克/食用之範圍內的總鈣水平。在所屬技藝中具有營養用途的任何已知的鈣來源可適用於本發明組成物中，包括(但不限於此)那些用於實行本發明的先前所揭示者。
當鐵被提供於成長牛奶中時，其可以0.1到2.2毫克/食用之範圍存在。在另一具體實例中，鐵可以0.5到1.8毫克/食用之範圍存在。在又另一具體實例中，在成長牛奶中所提供的鐵水平可在1.0到1.4毫克/食用之範圍內。在所屬技藝中具有營養用途的任何已知的鐵來源可適用於本發明組成物中，包括(但不限於此)那些用於實行本發明的先前所揭示者。在具體實例中，用於成長牛奶中的鐵來源包括硫酸亞鐵、富馬酸亞鐵及其任何組合。
當鋅被提供於成長牛奶中時，其可以0.2到1.5毫克/食用之範圍存在。在另一具體實例中，鋅可以0.5到1.0毫克/食用之範圍存在。在所屬技藝中具有營養用途的任何已知的鋅來源可適用於本發明組成物中，包括(但不限於此)那些用於實行本發明的先前所揭示者。在具體實例中，鋅係以硫酸鋅提供。
當碘存在於成長牛奶中時，其可以0.2到41微克/食用之範圍存在。在另一具體實例中，碘可以5到15微克/食用之範圍存在。在所屬技藝中具有營養用途的任何已知的碘來源可適用於本發明組成物中，包括(但不限於此)那些用於實行本發明的先前所揭示者。在具體實例中，與成長牛奶使用的碘來源包括碘化鈉、碘化鉀及其任何組合。
在其中本發明組成物為介於1與6歲之間的兒童所調配之成長牛奶的另一具體實例中，可添加以每份食用為基準之變動量及範圍內的維生素及礦物質。在具體實例中，以介於1與6歲之間的兒童而言，一份食用之成長牛奶可含有從約15%到約50%之預估平均需求量(EAR)的下列營養分：維生素E、維生素K、菸鹼、泛酸、維生素B12 、生物素、膽鹼、鉀、鎂、磷、氯化物、銅、硒、氟化物及其任何組合。在具體實例中，以介於1與6歲之間的兒童而言，一份食用之成長牛奶可含有從約20%到約30%之EAR的下列營養分：維生素E、維生素K、菸鹼、泛酸、維生素B12 、生物素、膽鹼、鉀、鎂、磷、氯化物、銅、硒、氟化物及其任何組合。具有營養用途的任何已知的這些營養分來源可適用於組成物中，包括(但不限於此)那些本文所揭示者。
本發明組成物可隨意地含有可對宿主具有利效應的其他物質，諸如乳鐵素、核苷酸、核苷、免疫球蛋白、CMP同等物(胞苷5’-單磷酸鹽，游離酸)、UMP同等物(尿苷5’-單磷酸鹽，二鈉鹽)、AMP同等物(腺苷5’-單磷酸鹽，游離酸)、GMP同等物(鳥苷5’-單磷酸鹽，二鈉鹽)及其組合物。
在本發明的一個具體實例中，營養組成物可含有一或多種益生菌。術語〝益生菌〞意謂致力於宿主健康的有利效應之微生物。所屬技藝中已知的任何益生菌可為此具體實例中接受，其先決條件係達成意欲結果。在特殊的具體實例中，益生菌可選自乳酸桿菌(Lactobacillus)物種、鼠李醣乳酸桿菌(Lactobacillus rhamnosus)GG、雙歧桿菌(Bifidobacterium)物種、龍根雙歧桿菌(Bifidobacterium longum)及亞乳酸動物雙歧桿菌(Bifidobacterium animalis subsp. lactis)BB-12。
若益生菌包括在組成物中，則益生菌量可以每天每公斤體重計從約104 個到約1010 個群落形成單位(cfu)變動。在另一具體實例中，益生菌量可以每天每公斤體重計從約106 到約109 cfu變動。在又另一具體實例中，益生菌量可以每天每公斤體重計至少約106 cfu。
在具體實例中，益生菌可為活菌或非活菌。如本文所使用之術語〝活菌〞係指有生命的微生物。術語〝非活的〞或〝非活的益生菌〞意謂沒有生命的益生菌微生物、彼之細胞組份及其代謝物。此等非活的益生菌可能已經熱殺死或以另外方式失活，但是保留有利地影響宿主健康的能力。在本發明中有用的益生菌可為自然生成、合成或經由有機體的基因操控而發育，不論此新來源為目前已知或後來發展。
在本發明的另一具體實例中，營養組成物可含有一或多種益菌生。如本文所使用之術語〝益菌生〞係指致力於宿主健康利益的不能消化之食物成分。此等健康利益可包括(但不限於此)選擇性刺激一種或數量有限之有利的內臟細菌生長及/或活性、刺激攝取之益生菌微生物的生長及/或活性、選擇性減少內臟病原菌及對內臟短鏈脂肪酸分布的有利影響。所屬技藝中已知的任何益菌生可為此具體實例中接受，其先決條件係達成意欲結果。此等益菌生可為自然生成、合成或經由有機體及/或植物的基因操控而發育，不論此新來源為目前已知或後來發展。在本發明中有用的益菌生可包括寡醣、多醣及含有果糖、木糖、大豆、半乳糖、葡萄糖及甘露糖的其他益菌生。更特定言之，在本發明中有用的益菌生可包括乳酮糖、乳果糖、棉子糖、葡萄寡糖(gluco-oligosaccharide)、菊糖、聚葡萄糖、聚葡萄糖粉、半乳寡糖(galacto-oligosaccharide)、半乳寡糖漿、果寡糖(fructo-oligosaccharide)、異麥芽寡糖(isomalto-oligosaccharide)、大豆寡醣、乳果糖、木寡糖(xylo-oligosaccharide)、幾丁寡醣(chito-oligosaccharide)、甘露蜜寡糖(manno-oligosaccharide)、阿拉伯寡糖(aribino-oligosaccharide)、唾液酸寡糖(siallyl-oligosaccharide)、富可寡糖(fuco-oligosaccharide)及龍膽寡糖(gentio-oligosaccharide)。
在具體實例中，在營養組成物中存在的益菌生總量可從約1.0公克/公升到約10.0公克/公升之組成物。在另一具體實例中，在營養組成物中存在的益菌生總量可從約2.0公克/公升到約8.0公克/公升之組成物。在又另一具體實例中，在營養組成物中存在的益菌生總量可為約4.0公克/公升之組成物。
若半乳寡糖被用作為益菌生，則在營養組成物中的半乳寡糖量在具體實例中可在從約1.0公克/公升到約4.0公克/公升之範圍內。在另一具體實例中，在營養組成物中的半乳寡糖量可為約2.0公克/公升。在又另一具體實例中，在營養組成物中的半乳寡糖量可為約4.0公克/公升。若聚葡萄糖被用作為益菌生，則在營養組成物中的聚葡萄糖量在具體實例中可在從約1.0公克/公升到約4.0公克/公升之範圍內。在另一具體實例中，在營養組成物中的聚葡萄糖量可為約2.0公克/公升。在特殊的具體實例中，半乳寡糖與聚葡萄糖係以約4.0公克/公升之總量補充至營養組成物中。在此具體實例中，半乳寡糖的量可為約2.0公克/公升及聚葡萄糖的量可為約2.0公克/公升。
若半乳寡糖被用作為益菌生，則在營養組成物中的半乳寡糖量在具體實例中可從約0.1毫克/100千卡到約1.0毫克/100千卡。在另一具體實例中，在營養組成物中的半乳寡糖量可從約0.1毫克/100千卡到約0.5毫克/100千卡。在又另一具體實例中，在營養組成物中的半乳寡糖量可為約0.6毫克/100千卡。若聚葡萄糖被用作為益菌生，則在營養組成物中的聚葡萄糖量在具體實例中可在從約0.1毫克/100千卡到約0.5毫克/100千卡之範圍內。在另一具體實例中，聚葡萄糖量可為約0.3毫克/100千卡。在特殊的具體實例中，半乳寡糖與聚葡萄糖係以約0.6毫克/100千卡之總量補充至營養組成物中。在此具體實例中，半乳寡糖的量可為約0.3毫克/100千卡及聚葡萄糖的量可為約0.3毫克/100千卡。
在本發明的又另一具體實例中，配方可含有其他的活性劑，諸如長鏈聚不飽和脂肪酸(LCPUFA)。適合的LCPUFA包括(但不限於此)α-亞麻油酸、γ-亞麻油酸、亞麻油酸、亞麻仁油酸、二十碳五烯酸(EPA)、花生四烯酸(ARA)及/或二十二碳六烯酸(DHA)。在具體實例中，營養組成物以DHA補充。在另一具體實例中，營養組成物以ARA補充。在又另一具體實例中，營養組成物以DHA及ARA二者補充。
在一個具體實例中，營養組成物以DHA及ARA二者補充。在此具體實例中，ARA：DHA之重量比可從約1：3到約9：1。在本發明的一個具體實例中，重量比為從約1：2到約4：1。在又另一具體實例中，重量比為從約2：3到約2：1。在一個特殊的具體實例中，重量比為約2：1。在本發明另一特殊的具體實例中，重量比為約1：1.5。在其他的具體實例中，重量比為約1：1.3。在還有的其他具體實例中，重量比為約1：1.9。在特殊的具體實例中，重量比為約1.5：1。在進一步的具體實例中，重量比為約1.47：1。
在本發明的某些具體實例中，DHA水平係在以重量計約0.0%到1.00%之脂肪酸範圍內。DHA水平可以重量計約0.32%。在一些具體實例中，DHA水平可以重量計約0.33%。在另一具體實例中，DHA水平可以重量計約0.64%。在另一具體實例中，DHA水平可以重量計約0.67%。在又另一具體實例中，DHA水平可以重量計約0.96%。在進一步的具體實例中，DHA水平可以重量計約1.00%。
若包括DHA，則在本發明的具體實例中的DHA量典型地以每天每公斤體重計從約3毫克到以每天每公斤體重計約150毫克。在本發明的一個具體實例中，此量係以每天每公斤體重計從約6毫克到以每天每公斤體重計約100毫克。在另一具體實例中，此量係以每天每公斤體重計從約10毫克到以每天每公斤體重計約60毫克。在又另一具體實例中，此量係以每天每公斤體重計從約15毫克到以每天每公斤體重計約30毫克。
若包括DHA，則在營養組成物中的DHA量可從約5毫克/100千卡到約80毫克/100千卡變動。在本發明的一個具體實例中，DHA係從約10毫克/100千卡到約50毫克/100千卡變動；而在另一具體實例中從約15毫克/100千卡到約20毫克/100千卡。在本發明特殊的具體實例中，DHA量為約17毫克/100千卡。
在本發明的具體實例中，ARA水平係在以重量計0.0%到0.67%之脂肪酸範圍內。在另一具體實例中，ARA水平可以重量計約0.67%。在另一具體實例中，ARA水平可以重量計約0.5%。在又另一具體實例中，ARA水平可在以重量計約0.47%到0.48%之範圍內。
若包括ARA，則在本發明的具體實例中的ARA量典型地以每天每公斤體重計從約5毫克到以每天每公斤體重計約150毫克。在本發明的一個具體實例中，此量係以每天每公斤體重計從約10毫克到以每天每公斤體重計約120毫克變動。在另一具體實例中，此量係以每天每公斤體重計從約15毫克到以每天每公斤體重計約90毫克變動。在又另一具體實例中，此量係以每天每公斤體重計從約20毫克到以每天每公斤體重計約60毫克變動。
若包括ARA，則在營養組成物中的ARA量可從約10毫克/100千卡到約100毫克/100千卡變動。在本發明的一個具體實例中，ARA量係從約15毫克/100千卡到約70毫克/100千卡變動。在另一具體實例中，ARA量係從約20毫克/100千卡到約40毫克/100千卡變動。在本發明特殊的具體實例中，ARA量為約25毫克/100千卡。
若包括DHA及ARA，則營養組成物可利用所屬技藝中已知的標準技術以含有DHA及ARA之油補充。例如，DHA及ARA可藉由取代正常存在於配方中的等量油(諸如高油酸葵花子油)而添加到配方中。含有DHA及ARA之油可藉由取代正常存在於沒有DHA及ARA之配方中的等量其餘總脂肪調合物而添加到配方中，作為另一實例。
若使用DHA及ARA，則DHA及ARA來源可為所屬技藝中已知的任何來源，諸如水產油、魚油、單細胞油、蛋黃脂質及腦脂質。在一些具體實例中，DHA及ARA源自於單細胞Martek油、DHASCO或其變異體。DHA及ARA可具有自然形式，其先決條件係LCPUFA來源的剩餘部分不對嬰兒造成任何實質有害的效果。或者，DHA及ARA可以精製形式使用。
在本發明的具體實例中，DHA及ARA來源可為單細胞油，如在美國專利第5,374,567號、第5,550,156號及第5,397,591號中所指導，將其完整的揭示內容併入本文以供參考。然而，本發明不限於此等油而已。
在一個具體實例中，將含有EPA之LCPUFA來源用於營養組成物中。在另一具體實例中，將實質上不含EPA之LCPUFA來源用於營養組成物中。例如，在本發明的一個具體實例中，營養組成物含有少於約16毫克EPA/100千卡。在另一具體實例中，營養組成物含有少於約10毫克EPA/100千卡。在又另一具體實例中，營養組成物含有少於約5毫克EPA/100千卡。本發明的另一具體實例包括不含甚至微量EPA之營養組成物。
本發明的營養組成物亦可含有乳化劑。適合的乳化劑實例包括(但不限於此)卵磷脂(例如，來自蛋或大豆)及/或單-和二-甘油酯及其混合物。其他的乳化劑為熟習所屬技藝者輕易明白且適合的乳化劑選擇部分將取決於配方及最終產物。
本發明的營養組成物可隨意地含有一或多種穩定劑。適用於本發明的營養組成物中的穩定劑包括(但不限於此)阿拉伯膠、印度膠、卡拉牙樹膠、黃蓍膠、瓊脂、叉紅藻膠、瓜爾膠、結蘭膠、刺槐豆膠、黏膠質、低甲氧基黏膠質、明膠、微結晶纖維素、CMC(羧甲基纖維素鈉)、甲基纖維素羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、DATEM(單-和二-甘油酯之二乙醯基酒石酸酯)、聚葡萄醣、鹿角菜膠及其混合物。
本發明的營養組成物可隨意地包括一或多種亦經添加以延長產品貨架期壽命的保存劑。適合的保存劑包括(但不限於此)山梨酸鉀、山梨酸鈉、苯甲酸鉀、苯甲酸鈉、鈣二鈉EDTA及其混合物。
本發明的營養組成物可隨意地包括一或多種下列的調味劑，包括(但不限於此)調味萃取物、揮發油、可可或巧克力調味劑、香草或香草萃取劑、花生奶油調味劑、蜂蜜、餅屑或任何市場上可取得的調味。在本發明的營養組成物中有用的調味劑更多的非限制性實例包括(但不限於此)純茴香萃取物、仿香蕉萃取物、仿櫻桃萃取物、巧克力萃取物，純檸檬萃取物，純橘子萃取物、純薄荷萃取物、仿鳳梨萃取物、仿糖蜜(rum)萃取物、仿草莓萃取物；或揮發油，諸如香蜂葉油、月桂油、佛手柑油、雪松木油、櫻桃油、肉桂油、丁香油或薄荷油；奶油糖果、太妃糖；及其混合物。調味劑量可取決於所使用之調味劑而大幅變動。所使用的調味劑類型及量可如所屬技藝中已知的方式選擇。
在本發明特殊的具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β水平係從約0.0150(皮克/微克)ppm到約0.1000(皮克/微克)ppm。在另一具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β水平係從約0.0225(皮克/微克)ppm到約0.0750(皮克/微克)ppm。在又另一具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β水平係從約0.0300(皮克/微克)ppm到約0.0600(皮克/微克)ppm。在特殊的具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β水平為約0.0340(皮克/微克)。
在本發明特殊的具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β水平係從約2500皮克/毫升到約10,000皮克/毫升組成物。在另一具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β水平係從約3000皮克/毫升到約8000皮克/毫升。在又另一具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β水平係從約4000皮克/毫升到約6000皮克/毫升。在特殊的具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β水平為約5000皮克/毫升。
在具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β1水平係從約0.0001(皮克/微克)ppm到約0.0075(皮克/微克)ppm。在另一具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β1水平係從約0.0010(皮克/微克)ppm到約0.0050(皮克/微克)ppm。在又另一具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β1水平係從約0.0020(皮克/微克)ppm到約0.0035(皮克/微克)ppm。在還另一具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β1水平為約0.0030(皮克/微克)ppm。
在具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β2水平係從約0.0150(皮克/微克)ppm到約0.0750(皮克/微克)ppm。在另一具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β2水平係從約0.0250(皮克/微克)ppm到約0.0500(皮克/微克)ppm。在又另一具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β2水平係從約0.0300(皮克/微克)ppm到約0.0400(皮克/微克)ppm。在還另一具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β2水平為約0.0320(皮克/微克)ppm。
在具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β1：TGF-β2之比係在約1：1到約1：20之範圍內。在另一具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β1：TGF-β2之比係在約1：5到約1：15之範圍內。在又另一具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β1：TGF-β2之比係在約1：8到約1：13之範圍內。在特殊的具體實例中，在本發明組成物中的TGF-β1：TGF-β2之比為約1：11。
在具體實例中，在本發明組成物內的TGF-β生物活性係從約500毫微克Eq/100千卡到約5000毫微克Eq/100千卡。在另一具體實例中，在本發明組成物內的TGF-β生物活性係從約750毫微克Eq/100千卡到約3000毫微克Eq/100千卡。在又另一具體實例中，在本發明組成物內的TGF-β生物活性係從約800毫微克Eq/100千卡到約2500毫微克Eq/100千卡。在一個具體實例中，生物活性為約860毫微克Eq/100千卡。在另一具體實例中，生物活性為約1700毫微克Eq/100千卡。在另一具體實例中，生物活性為約1200毫微克Eq/100千卡。
或者，在本發明組成物中的TGF-β生物活性可以HT-2細胞生長抑制檢定法中的IC50 為觀點定義。在具體實例中，組成物的生物活性包含從約1.1毫克/毫升到約5.0毫克/毫升之IC50 。在另一具體實例中，組成物的生物活性包含從約1.2毫克/毫升到約3.0毫克/毫升之IC50 。在又另一具體實例中，組成物的生物活性包含從約1.3毫克/毫升到約3.0毫克/毫升之IC50 。在還另一具體實例中，組成物的生物活性包含從約1.3毫克/毫升到約2.0毫克/毫升之IC50 。在具體實例中，組成物的生物活性包含約1.5毫克/毫升之IC50 。
下列的實例說明本發明的各種具體實例。在本文申請專利範圍之範疇內的其他具體實例可由熟習所屬技藝者從思考本文所揭示之本發明的說明書或實例而明白。意欲與實例一起的說明書被視為示例而已，本發明的範疇及精神係由實例之後的申請專利範圍表明。在實例中，所有的百分比皆以重量為基準提供，除非有另外的表明。
 實例1
此實例例證本發明方法的具體實例。在此實例中，將表3中提出之成份混合。
接著使混合物在73℃接受直接蒸汽噴射15到30秒。隨後將混合物在55℃到65℃經5到15秒均化。最後，將混合物在141℃到145℃甑餾3到5秒。接著將混合物以無菌包裝且密封。
實例2
此實例例證本發明的粉狀嬰兒配方的具體實例。
為了製備在標準稀釋下(20千卡/液量盎司(fl.oz.))1公升產品，將136公克粉與895.2公克水混合。為了製備在標準稀釋下1夸脫產品，將128.7公克粉與847.2公克水混合。
在重組時，在此實例中所述之嬰兒配方含有約2公克/公升之半乳寡糖及2公克/公升之聚葡萄糖。嬰兒配方具有25毫克/100千卡之ARA水平。配方具有5.6公克脂肪/100千卡，以達成類似於人乳之脂肪含量。配方另外具有低緩衝強度。
關於此嬰兒配方的所有pH調整係以氫氧化鉀溶液執行。配方的比重為1.03117。
實例3
此實例例證本發明的粉狀嬰兒配方的另一具體實例。
為了製備在標準稀釋下(20千卡/液量盎司)1公升產品，將136公克粉與895.2公克水混合。為了製備在標準稀釋下1夸脫產品，將128.7公克粉與847.2公克水混合。
在重組時，在此實例中所述之嬰兒配方含有約4公克/公升之半乳寡糖及具有25毫克/100千卡之ARA水平。配方具有5.6公克脂肪/100千卡，以達成類似於人乳之脂肪含量。配方另外具有低緩衝強度。
關於此嬰兒配方的所有pH調整係以氫氧化鉀溶液執行。配方的比重為1.03117。
實例4
圖2例證標準加工與本發明方法的比較及其對TGF-β生物活性的影響。本發明方法以代表新方法的術語〝NP〞標示於圖中。標準方法以代表舊方法的術語〝OP〞標示於圖中。利用標準加工技術之樣品的相對生物活性為約7000。利用本發明方法之樣品的相對生物活性為約36,000。如本文所見，TGF-β生物活性增加約414%。另外，利用本發明方法之樣品的生物活性幾乎等於100皮克/毫升之重組人類TGF-β所誘出之生物活性。
在圖2中所例證之實驗的方法為鹼性磷酸酶之生物檢定法。已知TGF-β在細胞中誘發出可以分泌之鹼性磷酸酶測量的免疫傳訊途徑。利用抑制劑壓抑TGF-β活性因此減少鹼性磷酸酶的分泌及其活性。此顯示所觀察之活性對TGF-β具專一性。如圖2中所示，〝+〞符號代表抑制劑。在所有活性樣品中使用抑制劑顯示出活性具有TGF-β專一性。
於此說明書中所引述之所有參考資料，包括(非限制)所有論文、公報、專利、專利申請案、報告書、教科書、報導、手稿、小冊子、書籍、網路貼文、雜誌文章、期刊及類似物皆以其完整內容併入本說明書以供參考。本文的參考資料討論僅意欲總結由該等作者提出的主張，而不對任何參考資料構成先前技藝予以承認。申請者保留挑戰所引述之參考資料的準確性與切題性之權利。
雖然本發明較佳的具體實例已利用特殊的術語、裝置及方法予以說明，但是這些說明僅以例證為目的。本文所使用之言辭係說明而非限制性言辭。應瞭解改變及變異可由那些一般熟習所屬技藝者以不違背在下列申請專利範圍中提出之本發明精神及範疇來達成。另外，應瞭解各種具體實例的觀點可全部或部分地交換。例如，雖然已舉例說明用於生產根據那些方法所製成之市場上無菌的液體營養補充品之方法，但是亦涵蓋其他的方法。因外，所附之申請專利範圍的精神及範疇應不受限於本文所述較佳版本的說明。
完整且授權之本發明揭示內容(包括引導所屬技藝的一般熟習者的其最好模式)在說明書中提出，其論及所附之圖，其中：
圖1例證本發明方法的具體實例；及
圖2為例證根據新方法所製造之嬰兒配方相對於根據標準方法所製造之嬰兒配方的生物活性之長條圖。

Claims (8)

  1. 一種製備保留轉型生長因子-β(TGF-β)生物活性之液體營養產品的方法，其包含：a.選擇一或多種已接受包含中溫或較低溫加熱之熱負荷的蛋白質成分，其中該蛋白質成分包含乳清蛋白粉來源；b.將蛋白質成分與一或多種額外的液體營養產品組份組合，以形成漿液；c.使漿液在從約55℃到約65℃之溫度接受約5到約20秒從約2500磅每平方英吋(psi)到約3500psi之壓力；d.使漿液接受約1.5到約15秒從約135℃到約150℃之溫度；及e.將漿液在約30分鐘或更短之內冷卻到低於約8℃之溫度。
  2. 根據申請專利範圍第1項之方法，其中該熱負荷包含低溫加熱。
  3. 根據申請專利範圍第1項之方法，其中該乳清蛋白粉來源係選自甜乳清、去鹽乳清、乳清蛋白濃縮物、乳清蛋白分離物及其組合。
  4. 根據申請專利範圍第1項之方法，其中該乳清蛋白粉具有至少約6.0毫克/公克之未變性乳清蛋白氮水平。
  5. 根據申請專利範圍第1項之方法，其中該蛋白質成分包含酪蛋白來源及乳清蛋白來源。
  6. 根據申請專利範圍第1項之方法，其中該步驟(c) 係在約3000psi之壓力及在約55℃到約65℃之範圍內的溫度進行約5到20秒。
  7. 根據申請專利範圍第1項之方法，其中該步驟(d)係在約141℃到約145℃之範圍內的溫度進行約1.5到15秒。
  8. 根據申請專利範圍第1項之方法，其另外包含以無菌填充冷卻之漿液至所欲容器中。
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