TWI481590B - 作為ｍｅｋ抑制劑之ｎ－（芳胺基）磺醯胺（包括多晶型）衍生物及組合物，使用方法及其製備方法 - Google Patents

Description

作為MEK抑制劑之N-(芳胺基)磺醯胺(包括多晶型)衍生物及組合物，使用方法及其製備方法

本申請案主張於2008年4月14日申請之美國專利臨時申請案第61/044,886號，2008年3月6日申請之美國專利臨時申請案第61/034,466號，及2008年3月6日申請之美國專利臨時申請案第61/034,464號的優先權，該等專利臨時申請案之全文以引用的方式併入本文中。

致癌基因為特定正常細胞基因的突變形(「原致癌基因」)。在特定情況下，致癌基因碼編信號轉導路徑組份的不正常形式，諸如受體酪胺酸激酶、絲胺酸-蘇胺酸激酶或下游信號轉導分子。

本文揭露之特定實施例為一種包含選自：及的化合物之組合物。在某些實施例中，該組合物進一步包含選自下列組成之群的賦形劑：微晶纖維素、交聯羧甲纖維素鈉、月桂基硫酸鈉、硬脂酸鎂或其組合。在某些實施例中，該組合物包含約0.1wt%至約15wt%之結構的化合物，結構的化合物或其組合。在某些實施例中，該組合物進一步包含約85%至約99.9wt%之微晶纖維素。在某些實施例中，該組合物包含約1mg之結構的化合物，結構的化合物或其組合；約222.2mg之微晶纖維素；約12.0mg之交聯羧甲纖維素鈉；約2.4mg之月桂基硫酸鈉；及約2.4mg之硬脂酸鎂。在某些實施例中，該組合物包含：約10mg之結構的化合物，結構的化合物或其組合；約213.2mg之微晶纖維素；約12.0mg之交聯羧甲纖維素鈉；約2.4mg之月桂基硫酸鈉；及約2.4mg之硬些實施例中，該組合物包含：約20mg之：結構的化合物，結構的化合物或其組合；約203.2mg之微晶纖維素；約12.0mg之交聯羧甲纖維素鈉；約2.4mg之月桂基硫酸鈉；及約2.4mg之硬脂酸鎂。在某些實施例中，該組合物包含：約40mg之：結構的化合物，結構的化合物或其組合；約183.2mg之微晶纖維素；約12.0mg之交聯羧甲纖維素鈉；約2.4mg之月桂基硫酸鈉；及約2.4mg之硬脂酸鎂。在某些實施例中，當投與個體時，該化合物在第1天達到介於約0.01μg/ml至約1.0μg/ml間的C_max 。在某些實施例中，該化合物由0至12小時具有介於約0.1μg小時/mL至約5.0μg小時/mL間的AUC。在某些實施例中，該化合物在單一劑量約5小時後具有大於約0.01mg/mL的血漿濃度。

在特定實施例中，本發明揭露一種N-(-)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺之結晶多晶型A，其呈現的粉末x光繞射譜圖包含約50%至約90%之顯示於圖5中的粉末x光繞射譜圖中辨識之峰。在某些實施例中，此粉末x光繞射譜圖實質上與顯示於圖5中的粉末x光繞射譜圖相同。

在特定實施例中，本發明揭露一種N-(-)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺的結晶多晶型A，其呈現之示差掃描熱量測定譜圖實質上與圖6中顯示的示差掃描熱量測定譜圖相同。

在特定實施例中，本發明揭露一種N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺之多晶型，其係藉由包含自乙酸乙酯與庚烷的混合物結晶非晶形N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺之步驟的方法製備。在某些實施例中，乙酸乙酯與庚烷的混合物為約1至約4份乙酸乙酯對約2至約10份庚烷之比例。

在特定實施例中，本發明揭露一種包含有效量的本文揭露之結晶多晶型之醫藥組合物。

在特定實施例中，本發明揭露一種抑制MEK酶的方法，其包含使MEK酶與包含選自：及之化合物的化合物組合物接觸。在某些實施例中，該MEK酶為MEK激酶。

在特定實施例中，本發明揭露一種治療MEK介導之病症的方法，其包含投與有需要之個體包包含選自：之化合物的組合物。在某些實施例中，MEK介導之病症為一細胞激素-介導之病症。在某些實施例中，此MEK介導之病症為係選自免疫性病症、發炎性病症、感染性病症、增生性病症或其組合。在某些實施例中，MEK介導之病症為癌症。在某些實施例中，該MEK介導之病症為纖維化病症。在某些實施例中，該化合物的T_max 在該組合物投與禁食個體後於0.5小時與5小時間達到。在某些實施例中，當投與個體後，該化合物在第1天達到介於約0.01μg/ml至約1.0μg/ml間的C_max 。在某些實施例中，該化合物由0至12小時具有介於約0.1μg小時/mL至約5.0μg小時/mL間的AUC。在某些實施例中，該化合物在單一劑量約5小時後具有大於約0.01mg/mL的血漿濃度。

在特定實施例中，本發明揭露一種抑制多種靶細胞生長的方法，其包含投與有需要之個體包含選自：及之化合物的組合物。在某些實施例中，該等靶細胞為癌細胞。在某些實施例中，該化合物的T_max 在該組合物投與禁食個體後於0.5小時與5小時間達到。在某些實施例中，當投與個體後，該化合物在第1天達到介於約0.01μg/ml至約1.0μg/ml間的C_max 。在某些實施例中，該化合物由0至12小時具有介於約0.1μg小時/mL至約5.0μg小時/mL間的AUC。在某些實施例中，該化合物在單一劑量約5小時後具有大於約0.01mg/mL的血漿濃度。

本發明的新穎特徵特別以後附之申請專利範圍述明。對於本發明之特徵及優點的較佳瞭解可經由參考下列說明例示性實施例的實施方式及其伴隨圖式而獲得，該等實施例利用本發明的技術思想。

在本文使用之此部份標題僅為組織目的之用而非用於解釋為限制本發明所描述的標的物。在本申請案中引用之所有的文件或文件的部份，包括(但不限於)專利、專利申請案、論文、書籍、手冊及協定標準皆明顯的以引用的方式併入本文中。

I.特定術語

除非特別定義，否則本文所有使用的技術及科技名詞如熟悉本發明主張之標的物所屬的技術領域之一般技術人士通常瞭解的相同意義。

應瞭解前述的發明內容及後文的實施方式僅為例示及解釋之用，且非用於限制本發明所主張之任何標的物。在本發明申請案中，除非特別指明，否則單數詞的使用包括複數詞。必須注意，如在本發明說明書及後附申請專利範圍中使用者，除非前後文清楚指明，單數型式「一(a)」、「一(an)」及「此(the)」包括複數者。亦應瞭解，除非特別指明，否則使用「或」意指「及/或」。此外，「包括(including)」以及其他形如「包括(include)」、「包括(includes)」及「包括(included)」的使用並未受到限制。

標準化學名詞的定義可見於參考工具書中，包括Carey與Sundberg著之「ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY4^TH ED.」Vols. A(2000)及B(2001)，Plenum Press，New York。除非提供特別的定義，否則與本文描述之分析化學、合成有機化學及藥學與醫藥化學有關所使用的命名法及分析化學、合成有機化學及藥學與醫藥化學實驗程序及技術為熟習此項技術者所熟知的。

除非特別指明，否則一般化學名詞的使用，如(但不限於)「烷基」、「胺」、「芳基」等同於其視情況經取代之形式。例如，本文使用的「烷基」包括視情況經取代之烷基。

如本文所使用「基團(moiety)」、「化學基團」、「基團(group)」及「化學基團(chemical group)」係意指分子之特定片段或官能基。化學基團通常認知為內嵌於或附於分子的化學實體。

術語「鍵」或「單鍵」為意指介於兩個原子或兩個基團間的化學鍵，此時鍵所結合之原子視為較大次結構的部份。

術語「視情況選用的之(optional)」或「視情況地(optionally)」等詞為意指後續的事件或情況為可發生或不可發生，且描述係包括該事件或情況發生的例子或及不發生的例子。例如「視情況經取代之烷基」意指如下列定義的「烷基」或「經取代之烷基」。此外，一視情況的經取代之基團包括未經取代之(例如，-CH₂ CH₃ )、完全取代的之(例如，-CF₂ CF₃ )、單取代之(例如，-CH₂ CH₂ F)或在完全取代及單取代間的任意處之程度的取代(例如-CH₂ CHF₂ 、-CH₂ CF₃ 、-CF₂ CH₃ 、-CFHCHF₂ 等)。熟習此項技術者應瞭解有關含有一或多個取代基的任何基團，此等取代基並未傾向引入任何取代作用或取代型式(例如，經取代之烷基包括視情況經取代之環烷基，其又定義為包括視情況經取代之烷基，潛在的無限大)，其為立體不實際及/或不易於合成。因此，任何描述的取代基應大致瞭解為具有約1,000道耳吞之最大分子量，且更典型為至多約500道耳吞(除了在巨分子取代基為清楚傾向的情況下，例如多胜肽、聚醣、聚乙二醇、DNA、RNA及其類似物)。

除非特別註明，否則通用的化學術語，如雖然不限於「烷基」、「胺」「芳基」未經取代。

如本文所使用，C₁ -C_x 包括C₁ -C₂ 、C₁ -C₃ ...C₁ -C_x 。僅舉例而言，指定為「C₁ -C₄ 」的基團表明在基團中有1至4個碳原子，亦即含有1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子或4個碳原子的基團，以及C₁ -C₂ 及C₁ -C₃ 範圍。因此，僅舉例而言，「C₁ -C₄ 烷基」表明在烷基中有1至4個碳原子，亦即選自甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基及第三丁基的烷基。當無論何時在本文中出現時，數值範圍如「1至10」係指在特定範圍中的每一整數；例如「1至10個碳原子」意指該基團具有1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子、4個碳原子、5個碳原子、6個碳原子、7個碳原子、8個碳原子、9個碳原子或10個碳原子。

本文使用之術語「A及A'與其所連接之碳原子共同形成3-至6-員飽和環」係指用於本文揭露之化合物的下列結構：

本文使用之術語「雜原子」或「雜」單獨或組合為意指不為碳或氫的原子。雜原子獨立選自氧、氮、硫、磷、矽、硒及錫，(但不限於)此些原子。在其中存有兩個或兩個以上雜原子的實施例中，兩個或兩個以上雜原子彼此相同。在其中存有兩個或兩個以上雜原子的實施例中，兩個或兩個以上雜原子彼此不相同。

本文使用之術語「烷基」單獨或組合為意指具有1至約10個碳原子或1至6個碳原子之直鏈或支鏈飽和烴單基。實例包括(但不限於)甲基、乙基、正丙基、異丙基、2-甲基-1-丙基、2-甲基-2-丙基、2-甲基-1-丁基、3-甲基-1-丁基、2-甲基-3-丁基、2,2-二甲基-1-丙基、2-甲基-1-戊基、3-甲基-1-戊基、4-甲基-1-戊基、2-甲基-2-戊基、3-甲基-2-戊基、4-甲基-2-戊基、2,2-二甲基-1-丁基、3,3-二甲基-1-丁基、2-乙基-1-丁基、正丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基、正戊基、異戊基、新戊基、第三戊基及己基、與較長烷基如庚基、辛基及其類似物。當無論何時在本文中出現時，數值範圍如「C₁ -C₆ 烷基」或「C_1-6 烷基」意指由1個碳原子，2個碳原子，3個碳原子，4個碳原子，5個碳原子或6個碳原子組成的烷基。在一實施例中，「烷基」係經取代。除非特別指明，否則「烷基」係未經取代。

本文使用術語之「烯基」單獨或組合為意指具有一或多個碳-碳雙鍵且具有2至約10個碳原子或2至約6個碳原子之直鏈或支鏈烴單基。在某些實施例中，此基團在雙鍵附近為順式構形。在某些實施例中，此基團在雙鍵附近為反式構形。實例包括(但不限於)乙烯基(-CH=CH₂ )、1-丙烯基(-CH₂ CH=CH₂ )、異丙烯基[-C(CH₃ )=CH₂ ]、丁烯基、1,3-丁二烯基及其類似物。當無論何時在本文中出現時，數值範圍如「C₂ -C₆ 烯基」或「C_2-6 烯基」意指烯基可由2個碳原子、3個碳原子、4個碳原子、5個碳原子或6個碳原子組成。在一實施例中，「烯基」係經取代。除非特別指明，否則「烯基」係未經取代。

本文使用之術語「炔基」單獨或組合為意指具有一或多個碳-碳參鍵且具有2至約10個碳原子或2至約6個碳原子之直鏈或支鏈烴單基。實例包括(但不限於)炔基、2-丙炔基、2-丁炔基、1,3-丁二炔基及其類似物。當無論何時在本文中出現時，數值範圍如「C₂ -C₆ 炔基」或「C_2-6 炔基」意指炔基可由2個碳原子、3個碳原子、4個碳原子、5個碳原子或6個碳原子組成。在一實施例中，「炔基」係經取代。除非特別指明，否則「炔基」係未經取代。

本文使用之術語「雜烷基」、「雜烯基」及「雜炔基」單獨或組合為分別意指如前述的烷基、烯基及炔基結構，其中一或多個骨架鏈碳原子(及若適當之任何連帶的氫原子)為各自獨立地以雜原子(亦即不為碳的原子，諸如(但不限於)氧、氮、硫、矽、磷、錫或其組合)、或雜原子基替代，諸如(但不限於)-O-O-、-S-S-、-O-S-、-S-O-、=N-N=、-N=N-、-N=N-NH-、-P(O)₂ -、-O-P(O)₂ -、-P(O)₂ -O-、-S(O)-、-S(O)₂ -、-SnH₂ -及其類似物。

本文使用的術語「鹵代烷基」，「鹵代烯基」及「鹵代炔基」單獨或組合使用分別意指如前述定義的烷基，烯基及炔基，其中一或多個氫原子以氟、氯、溴或碘原子或其組合取代。在某些實施例中，兩個或兩個以上的氫原子以彼此相同的鹵素原子取代(如二氟甲基)；在其他實施例中，兩個或兩個以上的氫原子以彼此不同的鹵素原子取代(例如1-氯-1-氟-1-碘乙基)。鹵代烷基的非限制性實例為氟甲基、氯甲基及溴乙基。鹵代烯基的非限制性實例為溴乙烯基。鹵代炔基的非限制性實例為氯乙炔基。

本文使用的術語「碳鏈」單獨或組合使用意指任何烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基或雜炔基，其等為線性、環狀或其任何組合。若鏈為連接基團的部份，且該連接基團包含一或多個為部份核心骨架之環，為了計算鏈的長度，此「鏈」僅包括由構成特定環之底部或頂部且非兩者同時的碳原子，且在環的頂部及底部不等長時，應將較短的距離用於決定鏈長。若鏈含有雜原子為骨架的部份，此些原子並不計算為碳鏈長度的部份。

本文使用之術語「環(cycle)」，「環狀(cyclic)」，「環(ring)」及「數員環」單獨或組合使用意指任何共價封閉結構，包括如本文所描述之脂環族、雜環、芳族、雜芳族及多員環稠合或非稠合環系統。環視情況經取代。環可形成稠合環系統的部份。術語「員」意指表示構成環之骨架原子的數目。因此，僅舉例而言，環己烷、吡啶、哌喃及嘧啶為6員環而環戊烷、吡咯、四氫呋喃及噻吩為5員環。

本文使用之術語「稠合」單獨或組合使用意指兩個或兩個以上環分享一或多個鍵結的環結構。

本文使用之術語「環烷基」單獨或組合使用意指飽和烴單基環，其含有由3至約15個環碳原子或由3至約10個環碳原子，雖然可包括額外、非環碳原子作為取代基(例如甲基環丙基)。當無論何時在本文中出現時，數值範圍如「C₃ -C₆ 環烷基」或「C_3-6 環烷基」意指環烷基可由3個碳原子、4個碳原子、5個碳原子或6個碳原子組成，亦即為環丙基、環丁基、環戊基或環庚基，雖然本文的定義亦涵蓋沒有指定數值範圍的術語「環烷基」的出現。此術語包括稠合、非稠合、橋接及螺基。在某些實施例中，稠合環烷基含有兩個至四個稠合環，其中附接的環為環烷基環，且其他獨立環為脂環族、雜環基、芳族、雜芳族或其之任何組合。實例包括(但不限於)環丙基、環戊基、環己基、十氫萘基、及雙環[2.2.1]庚基與金剛烷基環系統。說明之例示性實例包括(但不限於)下列基團：

及其類似物。

在一實施例中，「環烷基」係經取代。除非特別指明，否則此「環烷基」係未經取代。

本文使用之術語「非芳族雜環基」及「雜脂環基」單獨或組合使用意指飽和、部份不飽和或完全不飽和的含有3至約20個環原子之非芳族環單基，其中一或多個環原子為不為碳的原子，其係獨立選自氧、氮、硫、磷、矽、硒及錫，但不限於此些原子。在某些實施例中，其中此環中存在兩個或兩個以上雜原子，此兩個或兩個以上雜原子彼此相同。在某些實施例中，在兩個或兩個以上之雜原子存在於環中，兩個或兩個以上雜原子的部份或全部彼此不同。此術語包括稠合、非稠合、橋接及螺基。在某些實施例中，稠合非芳族雜環基團含有兩個至四個稠環，其中附接的環為非芳族雜環，且其他獨立環為脂環族、雜環、芳族、雜芳族或其任何組合。在某些實施例中，稠環系統為跨接單鍵或雙鍵稠合，以及為碳-碳、碳-雜原子或雜原子-雜原子的跨接鍵結。此術語亦包括具有3至約12骨架環原子的基團，以及具有3至約10骨架環原子的基團。在某些實施例中，非芳族雜環次單元經由雜原子或碳原子連接至其母分子。同樣，在某些實施例中，額外的取代作用係經雜原子或碳原子。作為一非限制性實例，咪唑啶非芳族雜環經由其N原子(咪唑啶-1-基或咪唑啶-3-基)或其碳原子之任一者(咪唑啶-2-基、咪唑啶-4-基或咪唑啶-5-基)連接至母分子。在特定實施例中，非芳族雜環含有一或多個羰基或硫代羰基如含側氧基-及含硫基之基團。實例包括(但不限於)吡咯啶基、四氫呋喃、二氫呋喃、四氫噻吩基、四氫哌喃基、二氫哌喃基、四氫硫代哌喃基、六氫吡啶基、嗎啉基、硫代嗎啉基、硫氧雜環己烷基、哌嗪基、氮雜環丁烷基(azetidinyl)、氧雜環丁烷基(oxetanyl)、硫雜環丁烷基(thietanyl)、高六氫吡啶基、氧雜環庚烷基(oxepanyl)、硫雜環庚烷基(thiepanyl)、噁氮呯基(oxazepinyl)、二氮呯基(diazepinyl)、噻氮呯基(thiazepinyl)、1,2,3,6-四氫吡啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吲哚啉基、2H-哌喃基、4H-哌喃基、二氧雜環己烷基、1,3-二氧戊環基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫戊環基、二氫哌喃基、二氫噻吩基、二氫呋喃基、吡唑啶基、咪唑啉基、咪唑啶基、3-氮雜雙環[3.1.0]己烷基、3-氮雜雙環[4.1.0]庚烷基、3H-吲哚基及喹嗪基。雜環烷基的例示性實例亦稱為非芳族雜環，其包括：

及其類似物。

此些術語亦包括所有碳氫化合物的環形式，包括(但不限於)單醣、雙醣及寡醣。在一實施例中，「非芳族雜環基」或「雜脂環基」係經取代。除非特別指明，否則此「非芳族雜環基」或「雜脂環基」係未經取代。

本文使用之術語「芳基」單獨或組合使用意指含6至約20個環碳原子的芳烴，且包括稠合及非稠合芳環。在某些實施例中，稠合芳環基含有兩個至四個稠環，其中連接的環為芳環。在某些實施例中，其他獨立環為脂族環、雜環、芳族環、雜芳族環或其任何組合。此外，術語芳基包括含有6至約12個環碳原子的稠環及非稠環，以及含有6至約10個環碳原子者。單環芳基之非限制性實例包括苯基；稠環芳基包萘基、菲基、蒽基、薁基；且非稠合雙芳基包括聯苯基。在一實施例中，「芳基」係經取代。除非特別指明，否則此「芳基」係未經取代。

本文使用之術語「雜芳基」單獨或組合使用意指含有約5至約20個骨架環原子之芳族單基，其中一或多個環原子為雜原子，該雜原子獨立選自氧、氮、硫、磷、矽、硒及錫，但並不限於此些原子，且條件為該基的環不含有兩個相鄰O或S原子。在環中存在兩個或兩個以上雜原子的之實施例中，兩個或兩個以上雜原子彼此相同，或兩個或兩個以上雜原子之部份或全部彼此不同。術語雜芳基包括具有至少一個雜原子的稠合及非稠合雜芳基。術語雜芳基亦包括具有5至約12個骨架環原子之稠合及非稠合雜芳基，以及具有5至約10個骨架環原子者。在某些實施例中，經由碳原子或雜原子鍵結至雜芳基。作為非限制性實例，咪唑基為經由其任一碳原子(咪唑-2-基、咪唑-4-基或咪唑-5-基)或其氮原子(咪唑-1-基或咪唑-3-基)鍵結至母分子。同樣，在某些實施例中，雜芳基更進一步經由其任何或全部碳原子或其任何或全部雜原子取代。在某些實施例中，稠合雜芳基含有兩個至四個稠環，其中連接的環為雜芳環且其他獨立環為雜環、芳族環、雜芳族環或其任何組合。單環雜芳基之非限制性實例包括吡啶基；稠環雜芳基包括苯并咪唑基、喹啉基、吖啶基；且非稠合雙雜芳基包括聯吡啶基。雜芳基的其他實例包括(但不限於)呋喃基、噻吩基、噁唑基、吖啶基、啡嗪基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并噻吩基、苯并噁二唑基、苯并三唑基、咪唑基、吲哚基、異噁唑基、異喹啉基、吲哚嗪基(indolizinyl)、異噻唑基、異吲哚基噁二唑基、吲唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡咯基、吡嗪基、吡唑基、嘌呤基、呔嗪基、喋啶基、喹啉基、喹唑啉基、喹諾啉基、三唑基、四唑基、噻唑基、三嗪基、噻二唑基及其類似物，及其氧化物，例如吡啶基-N-氧化物。雜芳基的例示性實例包括下列基團：

及其類似物。

在一實施例中，「雜芳基」係經取代。除非特別指明，否則「雜芳基」係未經取代。

本文使用之術語「雜環基」單獨或組合使用係統稱雜脂環基及雜芳基。在本文中，不論何時指明雜環中的碳原子數(例如，C₁ -C₆ 雜環)，在環中必需存在至少一個非碳原子(雜原子)。指稱如「C₁ -C₆ 雜環」為僅意指在環中的碳原子數而非指稱在環中的總原子數。指稱如「4-6員雜環」為意指在環中所包含的原子總數(亦即四、五、或六員環，其中至少一個原子為碳原子，至少一個原子為雜原子且其餘的2至4個原子為碳原子或雜原子)。對於具有兩個或兩個以上雜原子的雜環，此些兩個或兩個以上雜原子彼此相同或不同。非芳族雜環基包括在環中僅有三個原子的基團，而芳族雜環基在環中必需具有至少5個原子。在某些實施例中，鍵結(亦即連接至母分子或進一步的取代)至雜環係經由雜原子。在某些實施例中，鍵結至雜環係經由碳原子。在一實施例中，此「雜環基」係經取代。除非特別指明，否則此「雜環基」係未經取代。

本文使用之術語「鹵素」，「鹵代」或「鹵化物」單獨或組合使用意指氟、氯、溴及/或碘。

本文使用之術語「胺基」單獨或組合使用意指單基-NH₂ 。

本文使用之術語「烷基胺基」單獨或組合使用意指單基-NH(烷基)，其中烷基如本文定義。

本文使用之「二烷基胺基」術語單獨或組合使用意指單基-N(烷基)(烷基)，其中每一烷基相同或不相同且如本文定義。

本文使用之術語「二胺基烷基」單獨或組合使用意指含有兩個胺基之烷基，其中該等胺基為在烷基上之取代基，其為胺基、烷基胺基或二烷基胺基，或其中該等胺基中之一或兩者可形成烷基鏈之部份以形成-伸烷基-N(H或烷基)-伸烷基-N(H或烷基或伸烷基-)(H或烷基或伸烷基-)。

本文使用之術語「羥基」單獨或組合使用意指單基-OH。

本文使用之術語「氰基」單獨或組合使用意指單基-CN。

本文使用之術語「氰基甲基」單獨或組合使用意指單基-CH₂ CN。

本文使用之術語「硝基」單獨或組合使用意指單基-NO₂ 。

本文使用之術語「氧基」單獨或組合使用意指雙基-O-。

本文使用之術語「側氧基」單獨或組合使用意指雙基=O。

本文使用之術語「羰基」單獨或組合使用意指雙基-C(=O)-，其亦可寫為-C(O)-。

本文使用之術語「羧基(carboxy)」或「羧基(carboxyl)」單獨或組合使用意指基團-C(O)OH，其亦可寫為-COOH。

本文使用之術語「烷氧基」單獨或組合使用意指烷基醚基，即-O-烷基，其包括基團-O-脂族基及-O-碳環基，其中該烷基、脂族基及碳環基係視情況經取代，且其中該等術語烷基、脂族基及碳環基為如本文定義。烷氧基的非限制性實例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、第二丁氧基、第三丁氧基及其類似物。

本文使用之術語「亞磺醯基」單獨或組合使用意指雙基-S(=O)-。

本文使用之術語「磺醯基」單獨或組合使用意指雙基-S(=O)₂ -。

本文使用之術語「磺醯胺」，「磺醯胺基(sulfamido)」及「磺醯胺基(sulfamidyl)」單獨或組合使用意指雙基-S(=O)₂ -NH-及-NH-S(=O)₂ -。

本文使用之術語「磺醯胺」，「磺醯胺基(sulfamido)」及「磺醯胺基(sulfamidyl)」單獨或組合使用意指雙基-NH-S(=O)₂ -NH-。

本文使用之術語「反應物」為指用於產生共價鍵的親核劑或親電子劑。

應瞭解在兩個或兩個以上基團為連續使用以定義連接至一結構的取代基的情況下，第一個命名的基團視為端基且最後一個命名的基團被視為連接至所述結構上。因此，例如基團芳基烷基為經由烷基連接至所述結構上。

本文使用之術語「MEK抑制劑」為意係指對MEK活性呈現如本文大致描述之Mek1激酶檢定所量測不大於約100μM或不大於約50μM之IC₅₀ 的化合物。「IC₅₀ 」為抑制劑減少酶活性(例如，MEK)至半最大水準的濃度。本文揭露之化合物亦發現可呈現對於MEK的抑制作用。本發明之化合物對於MEK較佳呈現以本文所述之Mek1激酶檢定所量測不大於約10μM，更佳不大於約5μM，更佳不大於約1μM，且最佳不大於約200nM的IC₅₀ 。

本文使用之術語「個體」涵蓋哺乳動物及非哺乳動物。此些術語無一解釋為要求醫療專業人員(例如，醫師、護士、護理員、收容所工作者)的監督。哺乳動物的實例包括(但不限於)哺乳動物綱的任何成員：人類、非人類靈長類如黑猩猩及其他猿與猴品種；農場動物如牛、馬、羊、山羊、豬；家畜動物如兔、狗及貓；實驗動物包括囓齒動物，如大鼠、小鼠及天竺鼠，及其類似物。非哺乳動物的實例包括(但不限於)鳥、魚及其類似物。在一本文提供之方法與組合物之實施例中，哺乳動物為人類。

本文使用之術語「治療(treat)」、「治療(treating)」或「治療(treatment)」及其他文法上的等價物意謂使病症的進展慢化或停止，造成病症的退化、緩和病症的症狀、預防額外症狀的進展或呈現額外症狀、緩和及/或預防症狀的基本病因或其組合。此術語進一步包括達到預防的優點。對於預防優點，本文揭露之化合物或組合物可投與有發展特定病症風險、傾向於發展特定病症的個體，或投與報告病症之一或多個生理症狀的個體。

本文使用之術語「有效量」，「治療有效量」或「醫藥學上有效量」意指足以治療病症之藥劑或化合物的量。在某些實施例中，此結果為病症之病徵、症狀或原因的減緩及/或減輕，或生物系統的任何其他預期之改變。例如，用於治療的「有效量」為醫療上顯著減輕病症所需之包含本文揭露之化合物的組合物量。任何獨立情況下的適當「有效」量可使用諸如劑量累增研究之技術加以測定。

本文使用之術語「實質上無水」及「實質上無溶劑」意指包含分別少於0.01、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1或2wt%之水或溶劑的結晶多晶型。

本文使用之術語「實質上相同」意指不同於本文所說明者，但當由熟習此項技術者考量時則可屬於實驗誤差範圍內之粉末x光繞射譜圖或示差掃描熱量測定譜圖。

本文使用之術語「醫藥學上可接受之」意指一材料，如載劑或稀釋劑，其不會破壞本文描述之化合物的生物活性或性質，且為相對無毒性(亦即，此材料投與個體不會造成不當生物效用或以不利的方法與該組合物所包含之任何組份交互作用)。

本文使用之術語「調節」意指不論直接或間接與標靶交互作用，從而改變標靶活性，包括(僅舉例而言)促進標靶活性、抑制標靶活性、限制標靶活性或擴展標靶活性。

II.MEK

在特定情況下，Ras為信號轉導蛋白。在特定情況下，Ras藉由鳥苷核苷酸，即GTP(鳥苷三磷酸)或GDP(鳥苷二磷酸)的結合而活化。

在特定情況下，Ras的活化作用導致絲胺酸/蘇胺酸激酶的級聯之活化。在特定情況下，活化之Ras活化Raf蛋白質。在特定情況下，活化之Raf蛋白質活化「MEK1」及「MEK2」。

MEK1及MEK2為雙功能絲胺酸/蘇胺酸與酪胺酸蛋白質激酶，其在特定情況下為活化MAPK。在特定情況下，藉有絲分裂原致裂物質活化之MAP激酶的活化作用呈現似乎會誘設發細胞增生。在特定情況下，MAPK的構成活化作用誘發細胞轉形。在特定情況下，下游Ras信號轉導的阻斷，如藉由使用顯性負性Raf-1蛋白質來阻斷，抑制致有絲分裂，其不論係由細胞表面受體抑或由致癌基因Ras突變株所誘發抑制致裂物質作用。

III.化合物

將標準技用於化學合成、化學分析、醫藥製備、調配物及個體的傳遞與治療。反應及純化技術的進行例如，使用製造商說明書的套組或此項技術中一般可得者或本文所描述者。

在整個說明書中，其基團及取代基可由熟習此項技術者加以選擇以提供安定的基團及化合物。

本文所呈現之化合物可具有一或多個的立體中心且每一立體中心以R或S組態或以其組合存在。相似地同樣，本文所呈現之化合物可具有一或多個的雙鍵且每一者可以E(反式)或Z(順式)組態或以其組合存在。呈現一種特定立體異構物、區位向異構物、非鏡像異構物、鏡像異構物或表異構物的呈現應瞭理解為包括所有可能的立體異構物、區位向異構物、非鏡像異構物、鏡像異構物或表異構物及其之混合物。因此，本文呈現的化合物包括所有分離組態立體異構、區位向異構、非鏡像異構、鏡像異構或表異構形式以及其對應之混合物。呈現含有一或多個的掌性中心的化合物之一種特定化學結構或化學名的呈現，但其並未指定特別的立體化學，則應瞭解為包括所有的立體異構物，其包括所有可能之立體異構物、一特定立體異構物的純形式或實質上純形式及另一立體異構物之純形式或實質上純形式的混合物。倒置或留下未改變之特定立體中心的技術及用於拆分立體異構物之混合物的技術為此技術領域已知的，且熟習此項技術者完全有能力依特定狀況選用適當方法。參閱，例如Furniss等人(編)之VOGEL'S ENCYCLOPEDIA OF PRACTICAL ORGANIC CHEMISTRY 5. sup.TH ED.，Longman Scientific and Technical Ltd.，Essex，1991 ，809-816；及Heller，Acc. Chem. Res .1990 ，23，128。

取代基由其傳統習知化學式指定，其由左至右書寫，其同等地包含由右至左書寫產生之化學性質相同之取代基。作為一非限制性實例，-CH₂ O-等同於-OCH₂ -。

本文揭露之特定實施例為式I的化合物：

其中Z為H或F；X為F、Cl、CH₃ 、CH₂ OH、CH₂ F、CHF₂ 或CF₃ ；Y為I、Br、Cl、CF₃ 、C₁ -C₃ 烷基、C₂ -C₃ 烯基、C₂ -C₃ 炔基、環丙基、OMe、OEt、SMe、苯基或Het，其中Het為5-至10-員單環或雙環之雜環基，該基團為飽和、烯烴或芳族基團，含有1-5個獨立選自N、O及S的環雜原子；其中所有該等苯基或Het基視情況經F、Cl、Br、I、乙醯基、甲基、CN、NO₂ 、CO₂ H、C₁ -C₃ 烷基、C₁ -C₃ 烷氧基、C₁ -C₃ 烷基-C(=O)-、C₁ -C₃ 烷基-C(=S)-、C₁ -C₃ 烷氧基-C(=S)-、C₁ -C₃ 烷基-C(=O)O-、C₁ -C₃ 烷基-O-(C=O)-、C₁ -C₃ 烷基-C(=O)NH-、C₁ -C₃ 烷基-C(=NH)NH-、C₁ -C₃ 烷基-NH-(C=O)-、二-C₁ -C₃ 烷基-N-(C=O)-、C₁ -C₃ 烷基-C(=O)N(C₁ -C₃ 烷基)-、C₁ -C₃ 烷基-S(=O)₂ NH-或三氟甲基取代；所有該等甲基、乙基、C₁ -C₃ 烷基及環丙基可視情況經OH取代；所有該等甲基可視情況經一個、兩個或三個F原子取代；R⁰ 為H、F、Cl、Br、I、CH₃ NH-、(CH₃ )₂ N-、C₁ -C₆ 烷基、C₁ -C₄ 烷氧基、C₃ -C₆ 環烷基、C₂ -C₆ 烯基、C₂ -C₆ 炔基、苯基、單取代苯基、O(C₁ -C₄ 烷基)、O-C(=O)(C₁ -C₄ 烷基)或C(=O)O(C₁ -C₄ 烷基)；其中該等烷基、烷氧基、環烷基、烯基、炔基及苯基可視情況經1-3個獨立選自F、Cl、Br、I、OH、CN、氰甲基、硝基、苯基及三氟甲基的取代基取代；該等C₁ -C₆ 烷基及C₁ -C₄ 烷氧基亦可視情況經OCH₃ 或OCH₂ CH₃ 取代；G為G₁ 、G₂ 、R_1a 、R_1b 、R_1c 、R_1d 、R_1e 、Ar₁ 、Ar₂ 或Ar₃ ；其中G₁ 為可視情況經一個胺基、C₁ -C₃ 烷基胺基或二烷基胺基取代之C₁ -C₆ 烷基，該二烷基胺基包含兩個相同或不同的C₁ -C₄ 烷基；或G₁ 為C₃ -C₈ 二胺基烷基；G₂ 為5-或6-員環，其為飽和、不飽和或芳族環，含有1-3個獨立選自N、O及S的環雜原子，可視情況經1-3個獨立選自F、Cl、OH、O(C₁ -C₃ 烷基)、OCH₂ 、OCH₂ CH₃ 、CH₃ C(=O)NH、CH₃ C(=O)O、CN、CF₃ 及含有1-4個獨立選自N、O及S的環雜原子的5員芳族雜環基的取代基取代；R_1a 為甲基，其可視情況經1-3個氟原子或1-3個氯原子，或經OH、環丙氧基或C₁ -C₃ 烷氧基取代，其中該環丙氧基或該等C₁ -C₃ 烷氧基之C₁ -C₃ 烷基可視情況經一個羥基或甲氧基取代，且其中該C₁ -C₄ 烷氧基中之所有C₃ 烷基可視情況以第二OH基進一步取代；R_1b 為CH(CH₃ )-C₁ .₃ 烷基或C₃ -C₆ 環烷基，該等烷基及環烷基可視情況以1-3個獨立選自F、Cl、Br、I、OH、OCH₃ 及CN的取代基取代；R_1c 為(CH₂ )_n O_m R'；其中m為0或1；且其中當m為0時，n為1或2；當m為1時，n為2或3；R'為C₁ -C₆ 烷基，其可視情況經1-3個獨立選自F、Cl、OH、OCH₃ 、OCH₂ CH₃ 及C₃ -C₆ 環烷基之取代基取代；R_1d 為C(A)(A')(B)-；其中B為H或C_1-4 烷基，其可視情況經一或兩個OH基取代；A及A'獨立為H或C_1-4 烷基，其可視情況經一或兩個OH基取代；或A及A'與其連接的碳原子共同形成3-至6-員飽和環；R_1e 為

其中q為1或2；R₂ 及R₃ 各自獨立為H、F、Cl、Br、CH₃ 、CH₂ F、CHF₂ 、CF₃ OCH₃ 、OCH₂ F、OCHF₂ 、OCF₃ 、乙基、正丙基、異丙基、環丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基或甲磺醯基；R₄ 為H、F、Cl、Br、CH₃ 、CH₂ F、CHF₂ 、CF₃ OCH₃ 、OCH₂ F、OCHF₂ 、OCF₃ 、乙基、正丙基、異丙基、環丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基、甲磺醯基、硝基、乙醯胺基、脒基、氰基、胺甲醯基、甲基胺甲醯基、二甲基胺甲醯基、1,3,4-噁二唑-2-基、5-甲基-1,3,4-噁二唑、1,3,4-噻二唑、5-甲基-1,3,4-噻二唑1H-四唑基、N-嗎啉基羰基胺基、N-嗎啉基磺醯基及N-吡咯啶基羰基胺基；R₅ 為H、F、Cl或甲基；R₆ 為H、F、Cl或甲基；Ar₁ 為

其中U及V獨立為N、CR₂ 或CR₃ ；R₂ 、R₃ 及R₄ 獨立為H、F、Cl、Br、CH₃ 、CH₂ F、CHF₂ 、CF₃ 、OCH₃ 、OCH₂ F、OCHF₂ 、OCF₃ 、乙基、正丙基、異丙基、環丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基、乙醯胺基、脒基、氰基、胺甲醯基、甲基胺甲醯基、二甲基胺甲醯基、1,3,4-噁二唑-2-基、5-甲基-1,3,4-噁二唑、1,3,4-噻二唑、5-甲基-1,3,4-噻二唑基、1H-四唑基、N-嗎啉基羰基胺基、N-嗎啉基磺醯基、N-吡咯啶基羰基胺基及甲磺醯基；R₅ 及R₆ 獨立為H、F、Cl或甲基；Ar₂ 為

其中虛線為表示第二環中雙鍵的選擇性正式位置；U為-S-、-O-或-N=，且其中當U為-O-或-S-時，V為-CH=、-CCl=或-N=；當U為-N=時，V為-CH=、-CCl=、或-N=；R₇ 為H或甲基；R₃ 為H、乙醯胺基、甲基、F或Cl；Ar₃ 為

其中U為-NH-、-NCH₃ -或-O-；R₇ 及R₃ 獨立為H、F、Cl或甲基。

除了在本文中賦予基團G、R⁰ 、X、Y及Z之定義外，亦包括熟習化學及醫藥技術者可預期的額外取代作用。

在某些實施例中，本發明提供式I的化合物，其中G為G₁ 或G₂ 。在另些實施例中，G為G₁ 。在某些實施例中，G為G₂ 。

在某些實施例中，本發明提供式I的化合物，其中G為R_1a 、R_1b 、R_1c 、R_1d 、R_1e 、Ar₁ 、Ar₂ 或Ar₃ 。在某些實施例中，G為R_1a 、R_1b 、R_1c 、R_1d 或R_1e 。在某些實施例中，G為R_1a 。在某些實施例中，G為R_1b 。在某些實施例中，G為R_1c 。在某些實施例中，G為R_1d 。在某些實施例中，G為R_1e 。在某些實施例中，G為Ar₁ ，Ar₂ 或Ar₃ 。在某些實施例中，G為Ar₁ 。在某些實施例中，G為Ar₂ 。在某些實施例中，G為Ar₃

在某些實施例中，本文揭露之化合物以醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、多晶型、酯、醯胺、互變異構物、前藥或其組合形式提供。

在某些實施例中，Z為H。在某些實施例中，Z為F。在某些實施例中，X為F。在某些實施例中，X為Cl。在某些實施例中，X為CH₃ 。在某些實施例中，X為CH₂ OH。在某些實施例中，X為CH₂ F。在某些實施例中，X為CHF₂ 。在某些實施例中，X為CF₃ 。在某些實施例中，X為F、Cl或CH₃ 。

在某些實施例中，G為G₁ 或G₂ ，X為F、Cl或CH₃ ；Y為I、Br、Cl、CF₃ 、C₁ -C₃ 烷基、苯基、吡啶基、吡咯基、吡唑基、該等苯基、吡啶基、吡咯基及吡唑基可視情況經F、Cl、Br、I、乙醯基、甲基、CN、NO₂ 、CO₂ H、C₁ -C₃ 烷基、C₁ -C₃ 烷氧基、C₁ -C₃ 烷基-C(=O)-、C₁ -C₃ 烷基-C(=S)-、C₁ -C₃ 烷氧基-C(=S)-、C₁ -C₃ 烷基-C(=O)O-、C₁ -C₃ 烷基-O-(C=O)-、C₁ -C₃ 烷基-C(=O)NH-、C₁ -C₃ 烷基-C(=NH)NH-、C₁ -C₃ 烷基-NH-(C=O)-、二-C₁ -C₃ 烷基-N-(C=O)-、C₁ -C₃ 烷基-C(=O)N(C₁ -C₃ 烷基)-、C₁ -C₃ 烷基-S(=O)₂ NH-或三氟甲基取代；且Z為H或F。在某些實施例中，G為G₁ 或G₂ ，且R⁰ 為F、Cl、C₁ -C₄ 烷基或C₁ -C₄ 烷氧基，該C₁ -C₄ 烷基及該C₁ -C₄ 烷氧基之C₁ -C₄ 烷基可視情況經F、Cl、OCH₃ 或OCH₂ CH₃ 取代。在某些實施例中，G為G₁ 或G₂ ，且R⁰ 為H、F、Cl、C₁ -C₄ 烷基、甲氧基、乙氧基、或2-甲氧基-乙氧基。

在某些實施例中，G₁ 為N-甲基-2-胺基乙基。在某些實施例中，G₁ 為(CH₃ )₂ N-CH₂ CH₂ -NH-(CH₂ )n-，其中n為1、2或3。在某些實施例中，G₁ 為(CH₃ )₂ N-CH₂ CH₂ -NH-(CH₂ )n-，其中n為1、2或3，且X為F。在某些實施例中，G₁ 為(CH₃ )₂ N-CH₂ CH₂ -NH-(CH₂ )_n -，其中n為1、2或3，X為F且Z為F。

在某些實施例中，G₂ 為1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、或4-哌啶基。在某些實施例中，G₂ 為嗎啉基、1-哌嗪基或2-哌嗪基。

在某些實施例中，G為R_1a 、R_1b 、R_1c 、R_1d 、R_1e 、Ar₁ 、Ar₂ 或Ar₃ 且X為F、Cl、或CH₃ 。在某些實施例中，G為R_1a 、R_1b 、R_1c 、R_1d 、R_1e 、Ar₁ 、Ar₂ 或Ar₃ ，X為F、Cl或CH₃ 且Y為I、Br、Cl、CF₃ 或C₁ -C₃ 烷基。在某些實施例中，G為R_1a 、R_1b 、R_1c 、R_1d 、R_1e 、Ar₁ 、Ar₂ 或Ar₃ ，X為F、Cl或CH₃ ，Y為I、Br、Cl、CF₃ 、或C₁ -C₃ 烷基且Z為H或F。

在某些實施例中，G為R_1a 、R_1b 、R_1c 、R_1d 、R_1e 、Ar₁ 、A_r2 或Ar₃ 且R⁰ 為F、Cl、C₁ -C₄ 烷基或C₁ -C₄ 烷氧基，該C₁ -C₄ 烷基及該C₁ -C₄ 烷氧基之C₁ -C₄ 烷基可視情況經F、Cl、oCH₃ 或OCH₂ CH₃ 取代。在某些實施例中，G為R_1a 、R_1b 、R_1c 、R_1d 、R_1e 、Ar₁ 、Ar₂ 或Ar₃ 且R⁰ 為H、F、Cl、C₁ -C₄ 烷基、甲氧基、乙氧基或2-甲氧基-乙氧基。

在某些實施例中，G為R_1a ；且Z為F。在某些實施例中，G為R_1a ，其中R_1a 為CH₃ ，R⁰ 為H；且Y為Br、I、CF₃ 或CH₃ 。在某些實施例中，G為R_1b 且Z為F。在某些實施例中，G為R_1b ，Z為F，且R⁰ 為H、F或OCH₃ 。在某些實施例中，G為R_1b ，Z為F，R⁰ 為H，F或OCH₃ ，且X為F或CH₃ 。在某些實施例中，G為R_1b ，Z為F，R⁰ 為H、F或OCH₃ ，X為F或CH₃ 且Y為Br、I或CH₃ 。在某些實施例中，G為R_1b ，其中R_1b 為C₃ -C₆ 環烷基。在某些實施例中，G為R_1b ，其中R_1b 為經取代之C₃ -C₆ 環烷基。在某些實施例中，G為R_1b ，其中R_1b 為未經取代之C₃ -C₆ 環烷基。在某些實施例中，G為R_1b ，其中R_1b 為未經取代之C₃ -C₆ 環烷基且R⁰ 為H。在某些實施例中，G為R_1b ，其中R_1b 為異丙基或環丙基。

在某些實施例中，G為R_1c ，且Y為I、Br、CH₃ 或CF₃ 。在某些實施例中，G為R_1c ，Y為I、Br、CH₃ 或CF₃ ，且Z為F。在某些實施例中，G為R_1c ，Y為I、Br、CH₃ 或CF₃ ，Z為F且m為0。

在某些實施例中，G為R_1d 且R⁰ 為氟、氯、甲基、乙基、丙基、異丙基、第二丁基、異丁基、第三丁基、環丙基、環丁基、氟甲基、甲氧基、氟甲氧基、甲基胺基或二甲基胺基。在某些實施例中，G為R_1d ，R⁰ 為氟、氯、甲基、乙基、丙基、異丙基、第二丁基、異丁基、第三丁基、環丙基、環丁基、氟甲基、甲氧基、氟甲氧基、甲基胺基或二甲基胺基且X為F、Cl、CH₃ 、或單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基。在某些實施例中，G為R_1d ，R⁰ 為氟、氯、甲基、乙基、丙基、異丙基、第二丁基、異丁基、第三丁基、環丙基、環丁基、氟甲基、甲氧基、氟甲氧基、甲基胺基或二甲基胺基，X為F、Cl、CH₃ 、或單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基，且Y為I、Br、Cl、或單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基。在某些實施例中，G為R_1d ，R⁰ 為氟、氯、甲基、乙基、丙基、異丙基、第二丁基、異丁基、第三丁基、環丙基、環丁基、氟甲基、甲氧基、氟甲氧基、甲基胺基或二甲基胺基，X為F、Cl、CH₃ 、或單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基，Y為I、Br、Cl、或單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基且Z為H或F。在某些實施例中，G為R_1d 且R⁰ 為F、Cl、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基或2-甲氧基-乙氧基。

在某些實施例中，G為R_1d ，R⁰ 為F、Cl、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基或2-甲氧基-乙氧基且X為F、Cl或CH₃ 。在某些實施例中，G為R_1d ，R⁰ 為F、Cl、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、或2-甲氧基-乙氧基，X為F、Cl或CH₃ 且Y為I、Br、Cl、或單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基。在某些實施例中，G為R_1d ，R⁰ 為F、Cl、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基或2-甲氧基-乙氧基，X為F、Cl或CH₃ ，Y為I、Br、Cl、或單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基且Z為H或F。在某些實施例中，G為R_1d 且R⁰ 為H；X為F、Cl、CH₃ 、或單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基。在某些實施例中，G為R_1d ，R⁰ 為H；X為F、Cl、CH₃ 、或單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基且Y為I、Br、Cl、或單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基。在某些實施例中，G為R_1d ，R⁰ 為H；X為F、Cl、CH₃ 、或單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基且Y為I、Br、Cl、或單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基且Z為H或F。

在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為C₁ -C₆ 環烷基。在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為C₁ -C₆ 環烷基且B為H。在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為C₁ -C₆ 環烷基且B為甲基、乙基、2-羥基乙基、正丙基、3-羥基丙基、2,3-二羥基丙基、3,4-二羥基丁基、異丙基、1-甲基-2-羥基乙基、正丁基、第二丁基、異丁基、或2-羥基甲基-3-羥基丙基。

在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為C₁ -C₆ 環烷基且B為2,3-二羥基丙基或3,4-二羥基丁基。在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為C₁ -C₆ 環烷基且B為2,3-二羥基丙基或3,4-二羥基丁基，其中B中的掌性碳為R組態。在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為C₁ -C₆ 環烷基且B為2,3-二羥基丙基或3,4-二羥基丁基，其中B的掌性碳為S組態。在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為C₁ -C₆ 環烷基且B為甲基，其可視情況經OH基取代，或C₂ -C₄ 烷基，其可視情況經一或兩個OH基取代。在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為C₁ -C₆ 環烷基且R⁰ 為氟、氯、甲基、乙基、丙基、異丙基、第二丁基、異丁基、第三丁基、環丙基、環丁基、氟甲基、甲氧基、氟甲氧基、甲基胺基或二甲基胺基。在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為C₁ -C₆ 環烷基及R⁰ 為F、Cl、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、或2-甲氧基-乙氧基。在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為C₁ -C₆ 環烷基且R⁰ 為H；X為F、Cl、CH₃ 、或單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基。

在某些實施例中，本發明提供一種包含式I之化合物的組合物，其中G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為C₁ -C₆ 環烷基且B為2,3-二羥基丙基或3,4-二羥基丁基，其中B的掌性碳為R組態，其實質上無S異構物。在某些實施例中，本發明提供一種包含式I之化合物的組合物，其中G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為C₁ -C₆ 環烷基且B為2,3-二羥基丙基，其中B的掌性碳為R組態，其實質上無S異構物。在某些實施例中，本發明提供一種包含式I之化合物的組合物，其中G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為C₁ -C₆ 環烷基且B為3,4-二羥基丁基，其中B的掌性碳為R組態，其實質上無S異構物。在某些實施例中，本發明提供一種包含式I之化合物的組合物，其中G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為C₁ -C₆ 環烷基且B為2,3-二羥基丙基或3,4-二羥基丁基，其中B的掌性碳為S組態，其實質上無R異構物。在某些實施例中，本發明提供一種包含式I之化合物的組合物，其中G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為C₁ -C₆ 環烷基且B為2,3-二羥基丙基，其中B的掌性碳為S組態，其實質上無R異構物。在某些實施例中，本發明提供一種包含式I之化合物的組合物，其中G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為C₁ -C₆ 環烷基且B為3,4-二羥基丁基，其中B的掌性碳為S組態，其實質上無R異構物。

在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為環丙基。在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為環丙基且B為H。在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為環丙基且B為甲基、乙基、2-羥基乙基、正丙基、3-羥基丙基、2,3-二羥基丙基、3,4-二羥基丁基、異丙基、1-甲基-2-羥基乙基、正丁基、第二丁基、異丁基或2-羥基甲基-3-羥基丙基。在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為環丙基且B為2,3-二羥基丙基或3,4-二羥基丁基。在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為環丙基且B為2,3-二羥基丙基或3,4-二羥基丁基，其中B中的掌性碳為R組態。在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為環丙基且B為2,3-二羥基丙基或3,4-二羥基丁基，其中B中的掌性碳為S組態。在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為環丙基且B為甲基，其視情況經一個OH基取代，或C₂ -C₄ 烷基，其視情況經一或兩個OH基取代。在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為環丙基且R⁰ 為氟、氯、甲基、乙基、丙基、異丙基、第二丁基、異丁基、第三丁基、環丙基、環丁基、氟甲基、甲氧基、氟甲氧基、甲基胺基或二甲基胺基。在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為環丙基及R⁰ 為F、Cl、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、或2-甲氧基-乙氧基。在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為環丙基且R⁰ 為H；X為F、Cl、CH₃ 、或單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基。

在某些實施例中，本發明提供一種包含式I之化合物的組合物，其中G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為環丙基且B為2,3-二羥基丙基或3,4-二羥基丁基，其中B中的掌性碳為R組態，其實質上無S異構物。在某些實施例中，本發明提供一種包含式I之化合物的組合物，其中G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為環丙基且B為2,3-二羥基丙基，其中B中的掌性碳為R組態，其實質上無S異構物。在某些實施例中，本發明提供一種包含式I之化合物的組合物，其中G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為環丙基且B為3,4-二羥基丁基，其中B中的掌性碳為R組態，其實質上無S異構物。在某些實施例中，本發明提供一種包含式I之化合物的組合物，其中G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為環丙基且B為2,3-二羥基丙基或3,4-二羥基丁基，其中B中的掌性碳為S組態，其實質上無R異構物。在某些實施例中，本發明提供一種包含式1之化合物的組合物，其中G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為環丙基且B為2,3-二羥基丙基，其中B的掌性碳為S組態，其實質上無R異構物。在某些實施例中，本發明提供一種包含式I之化合物的組合物，其中G為R_1d ，其中R_1d 為C(A)(A')且C(A)(A')為環丙基且B為3,4-二羥基丁基，其中B中的掌性碳為S組態，其實質上無R異構物。

在某些實施例中，G為R_1e 且n為1。在某些實施例中，G為R_1e ，R⁰ 為H，R_4-6 為H，R₂ 及R₃ 獨立為H、F、Cl、Br、CH₃ 、CH₂ F、CHF₂ 、CF₃ 、OCH₃ 、OCH₂ F、OCHF₂ 、OCF₃ 、乙基、正丙基、異丙基、環丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基、及甲磺醯基，X為F且Y為I。

在某些實施例中，G為Ar₁ ，其中Ar₁ 為視情況經一個選自乙醯胺基、脒基、氰基、胺甲醯基、甲基胺甲醯基、二甲基胺甲醯基、1,3,4-噁二唑-2-基、5-甲基-1,3,4-噁唑基、1,3,4-噻二唑基、5-甲基-1,3,4-噻二唑基、1H-四唑基、N-嗎啉基羰基胺基、N-嗎啉基磺醯基、N-吡咯啶基羰基胺基及甲磺醯基的基團取代的苯基，視情況經1-3個選自F、Cl及CH₃ 的取代基取代。在某些實施例中，G為Ar₁ ，其中Ar₁ 為視情況經一個選自乙醯胺基、脒基、氰基、胺甲醯基、甲基胺甲醯基、二甲基胺甲醯基、1,3,4-噁二唑-2-基、5-甲基-1,3,4-噁二唑基、1,3,4-噻二唑基、5-甲基-1,3,4-噻二唑基、1H-四唑基、N-嗎啉基羰基胺基、N-嗎啉基磺醯基、N-吡咯啶基羰基胺基及甲磺醯基的基團取代的苯基，視情況經1-3個選自F、Cl及CH₃ 的取代基取代，R⁰ 為H、X為F、Cl或甲基且Y為Br、I、CF₃ 、C₁ -C₃ 烷基、C₂ -C₃ 烯基、C₂ -C₃ 炔基、環丙基、OCH₃ 、OCH₂ CH₃ 或SCH₃ 。在某些實施例中，G為Ar₁ ，其中Ar₁ 為且其中R₂ 及R₃ 獨立為H、F、Cl、CH₃ 、CF₃ 、OCH₃ 。在某些實施例中，G為Ar₁ ，其中Ar₁ 為且其中R₂ 及R₃ 獨立為H、F、Cl、CH₃ 、CF₃ 、OCH₃ ，X為F或CH₃ ，Y為I、Br或Cl；且Z為F。在某些實施例中，G為Ar₁ ，其中Ar₁ 為苯基或單取代之苯基。在某些實施例中，G為Ar₁ ，其中Ar₁ 為苯基或單取代之苯基，X為F或CH₃ ，Y為I、Br或Cl，Z為F；且R⁰ 為F、甲基、乙基、甲氧基或2-甲氧基-乙氧基。在某些實施例中，G為Ar₁ ，其中U為N或CR₂ 且V為N。在某些實施例中，G為Ar₁ ，其中U為N或CR₂ 且V為CR。在某些實施例中，G為Ar₁ ，其中U為N或CR₂ ，V為CR，R⁰ 為H，X為F、Cl或甲基且Y為Br、I、CF₃ 、C₁ -C₃ 烷基、C₂ -C₃ 烯基、C₂ -C₃ 炔基、環丙基、OCH₃ 、OCH₂ CH₃ 或SCH₂ 。

在某些實施例中，G為Ar₂ ，其中Ar₂ 為，其中R₇ 為H或甲基且R₈ 為H、乙醯胺基、甲基、F或Cl。在某些實施例中，G為Ar₂ ，其中Ar₂ 為，其中R₇ 為H或甲基，R₈ 為H、乙醯胺基、甲基、F或Cl，R⁰ 為H，X為F、Cl或甲基，Y為Br、I、CF₃ 、C₁ -C₃ 烷基、C₂ -C3烯基、C₂ -C₃ 炔基、環丙基、OCH₃ 、OCH₂ CH₃ 或SCH₃ ，且Z為F。在某些實施例中，G為Ar₂ ，其中Ar₂ 為，其中U為S或O，V為CH=，且R₈ 為H或CH₃ ，R₇ 為H或甲基，R₈ 為H、乙醯胺基、甲基、F或Cl，R⁰ 為H，X為F、Cl或甲基，Y為Br、I、CF₃ 、C₁ -C₃ 烷基、C₂ -C₃ 烯基、C₂ -C₃ 炔基、環丙基、OCH₃ 、OCH₂ CH₃ 或SCH₃ 且Z為F。在某些實施例中，R⁰ 為H。在某些實施例中，R⁰ 為H，X為F或Cl且Y為Br、I、CH₂ CH₃ 或SCH₃

在某些實施例中，G為Ar₃ ，其中U為-O-。

在某些實施例中，G為R_1a ，其中R_1a 如前文定義。在某些實施例中，G為R_1a ，且R⁰ 為H，其中R_1a 如前文定義。在某些實施例中，G為R_1a 且R⁰ 如前文定義，不為H，且R_1a 如前文定義。在某些實施例中，G為R_1a ，其中R_1a 為甲基、單鹵代甲基、C₁ -C₃ 烷氧基甲基、或環丙氧基甲基。在某些實施例中，G為R_1a ，其中R_1a 為甲基、單鹵代甲基、C₁ -C₃ 烷氧基甲基或環丙氧基甲基且其中R⁰ 為F、Cl、C₁ -C₃ 烷基、單氯代C₁ -C₃ 烷基、C₁ -C₃ 烷氧基、三氟甲氧基、或2-甲氧基-乙氧基。

在某些實施例中，G為R_1b ，其中R_1b 如前文定義。在某些實施例中，G為 R_1b ，且R⁰ 為H，其中R_1b 如前文定義。在某些實施例中，G為R_1b ，R⁰ 為H且Z為F，其中R_1b 如前文定義。在某些實施例中，G為R_1b 且R⁰ 如前文定義，不為H，且R_1b 如前文定義。在某些實施例中，G為R_1b ，其中R_1b 為異丙基、2-丁基、2-戊基、環丙基、環丁基、環戊基或環己基，其等全部可視情況以1或2個獨立選自F、Cl、OH及OCH₃ 的取代基取代；Y為Br、I、甲基或三氟甲基。在某些實施例中，G為R_1b ，其中R_1b 為異丙基、2-丁基、2-戊基、環丙基、環丁基、環戊基或環己基，其等可視情況以1或2個獨立選自F、Cl、OH及OCH₃ 的取代基取代；Y為Br、I、甲基或三氟甲基；且R⁰ 為F、Cl、C₁ -C₃ 烷基、單氯代C₁ -C₃ 烷基、C₁ -C₃ 烷氧基、三氟甲氧基或2-甲氧基-乙氧基。在某些實施例中，G為R_1b ，其中R_1b 為異丙基、2-丁基、2-戊基、環丙基、環丁基、環戊基或環己基，其等全部可視情況以1個Cl或以1或2個OH基取代；且Y為Br、I、甲基或三氟甲基。在某些實施例中，G為R_1b ，其中R_1b 為異丙基、2-丁基、2-戊基、環丙基、環丁基、環戊基或環己基，其等全部可視情況以1個Cl或以1或2個OH基取代；Y為Br、I、甲基或三氟甲基；且R⁰ 為F、Cl、C₁ -C₃ 烷基、單氯代C₁ -C₃ 烷基、C₁ -C₃ 烷氧基、三氟甲氧基或2-甲氧基-乙氧基。

在某些實施例中，G為R_1c ，其中R_1c 如前文定義。在某些實施例中，G為R_1c ，且R⁰ 為H，其中R_1c 如前文定義。在某些實施例中，G為R_1c 且R⁰ 如前文定義，不為H，且R_1c 如前文定義。在某些實施例中，G為R_1c ，且R⁰ 為H，其中R_1c 為(CH₂ )_n O_m R'，其中m為0或1，當m為1時n為2或3，且當m為0時n為1或2，且R'為C₁ -C₆ 烷基，其視情況經1-3個獨立選自F、Cl、OH、OCH₃ 、OCH₂ CH₃ 及C₃ -C₆ 環烷基的取代基取代。在另一更特定之次實施例中，m為0，n為1或2，且R'為C₁ -C₄ 烷基，其視情況如前文定義取代。在另一更特定之次實施例中，m為1，n為2或3，且R'為C₁ -C₄ 烷基，其視情況如前文定義取代。在另一更特定之次實施例中，m為0、n為1或2，且R'為C₁ -C₄ 烷基，其視情況經1-3個獨立選自OH、OCH₃ 、Cl及環丙基的基團取代。

在某些實施例中，G為R_1d ，其中R_1d 如前文定義。在某些實施例中，G為R_1d ，且R⁰ 為H，其中R_1d 如前文定義。在某些實施例中，G為R_1d 且R⁰ 如前文定義，不為H，且R_1d 如前文定義。在某些實施例中，G為R_1d ，且R⁰ 為H，其中R_1d 為C(A)(A')(B)-，其中B、A及A'獨立為H或C_1-4 烷基，其視情況經一或兩個OH基或鹵素原子取代，或A及A¹ 與其連接的碳原子共同形成3至6員飽和環，該環可視情況含有一或兩個獨立選自O、N及S的雜原子且視情況經一或兩個獨立選自甲基、乙基、氟、氯、溴及碘的基團取代。

在某些實施例中，G為R_1e ，其中R_1e 如前文定義。在某些實施例中，G為R_1e ，且R⁰ 為H，其中R_1e 如前文定義。在某些實施例中，G為R_1e 且R⁰ 如前文定義，不為H，且R_1e 如前文定義。

在某些實施例中，G為Ar₁ ，其中Ar₁ 如前文定義。在某些實施例中，G為Ar₁ ，且R⁰ 為H，其中Ar₁ 如前文定義。在某些實施例中，G為Ar₁ 且R⁰ 如前文定義，不為H，且Ar₁ 如前文定義。

在某些實施例中，G為Ar₂ ，其中Ar₂ 如前文定義。在某些實施例中，G為Ar₂ ，且R⁰ 為H，其中Ar₂ 如前文定義。在某些實施例中，G為Ar₂ 且R⁰ 如前文定義，不為H，且Ar₂ 如前文定義。

在某些實施例中，X為F、Cl或CH₃ ；Y為I、Br、Cl、CF₃ 或C₁ -C₃ 烷基、且Z為H或F。在某些實施例中，X為F、Cl或CH₃ ，Y為I、Br、Cl、CF₃ 或C₁ -C₃ 烷基，Z為H或F，且R⁰ 為鹵素、C₁ -C₆ 烷基、單鹵代C₁ -C₆ 烷基、C₃ -C₆ 環烷基、C₂ -C₆ 烯基、C₂ -C₆ 炔基、苯基、單取代之苯基、OR₃ 、O-C(=O)R₄ 或C(=O)OR₅ 。在某些實施例中，X為F、Cl或CH₃ ：Y為I、Br、Cl、CF₃ 或C₁ -C₃ 烷基，Z為H或F，且R⁰ 為呋喃基、噻吩基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、吡咯基或吡唑基。在某些實施例中，X為F、Cl或CH₃ ，Y為I、Br、Cl、CF₃ 或C₁ -C₃ 烷基，Z為H或F，且R⁰ 為F、Cl、C₁ -C₄ 烷基、C₁ -C₃ 烷氧基、三氟甲氧基或2-甲氧基-乙氧基。

在另一更特定之次實施例中，R_1d 為環烷基或1-烷基-環烷基，其中該1-烷基視情況經一或兩個OH基或經一或兩個鹵素原子取代。

在另一更特定之次實施例中，R⁰ 為鹵素、C₁ -C₆ 烷基、單鹵代C₁ -C₆ 烷基、C₃ -C₆ 環烷基、C₂ -C₆ 烯基、C₂ -C₆ 炔基、苯基、單取代之苯基、OR₃ 、O-C(=O)R₄ 或C(=O)OR₅ ；且R_1d 為環烷基或1-烷基-環烷基，其中該1-烷基視情況經一或兩個OH基或經一或兩個鹵素原子取代。

在另一更特定之次實施例中，R⁰ 為呋喃基、噻吩基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、吡咯基或吡唑基；且R_1d 為環烷基或1-烷基-環烷基，其中該1-烷基視情況經一或兩個OH基或經一或兩個鹵素原子取代。

在另一更特定之次實施例中，R_1d 為環烷基或1-烷基-環烷基，其中該1-烷基視情況經一或兩個OH基取代，且其中Y為Br、I、甲基或三氟甲基。在另一更特定之次實施例中，R_1d 為環烷基或1-烷基-環烷基，其中該1-烷基視情況經一或兩個氟或氯原子取代，且其中Y為Br、I、甲基或三氟甲基。在另一更特定之次實施例中，R_1d 為環烷基或(1-烷基)-環烷基，其中該1-烷基視情況經一或兩個OH基取代、且其中R⁰ '為F、Cl、C₁ -C₃ 烷基、單氯C₁ -C₃ 烷基、C₁ -C₃ 烷氧基、三氟甲氧基、或2-甲氧基-乙氧基。在另一更特定之次實施例中，R_1d 為四氫呋喃基、四氫噻吩基、吡咯啶基、哌啶基、哌嗪基、或嗎啉基，每一者視情況如前述經取代，且其中Y為Br、I、甲基或三氟甲基。在另一更特定之次實施例中，R_1d 為噁唑啶基、噻唑啶基、異噁唑啶基、異噻唑啶基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、吡咯啶基、哌啶基、哌嗪基、或嗎啉基，每一者視情況如前述經取代，且其中Y為Br、I、甲基或三氟甲基。在另一更特定之次實施例中，R_1d 為環丙基或1-烷基-環丙基，其中該1-烷基視情況經一或兩個OH基取代，且其中R⁰ '為F、Cl、甲基、乙基、氯甲基、C₁ -C₂ 烷氧基、三氟甲氧基或2-甲氧基-乙氧基。在一更特定的實施例中，R_1d 為1-(單羥基烷基)環烷基。在另一更特定的實施例中，R_1d 為1-(單羥基烷基)環烷基，且其中R⁰ '為F、Cl、甲基、乙基、氯甲基、C₁ -C₂ 烷氧基、三氟甲氧基或2-甲氧基-乙氧基。在一更特定的實施例中，R_1d 為1-(二羥基烷基)環烷基。在另一更特定的實施例中，R_1d 為1-(二羥基烷基)環烷基，其中R⁰ '為F、Cl、甲基、乙基、氯甲基、C₁ -C₂ 烷氧基、三氟甲氧基或2-甲氧基-乙氧基。

在另一更特定之次實施例中，U為CR₂ 且V為N。在另一更特定之次實施例中，U及V皆為N。在另一更特定之次實施例中，U為CR₂ 且V為CR₃ 。

在又一更特定之次實施例中，本發明提供一種式I之化合物，其中G為Ar₁ 且 Ar₁ 為苯基或單取代之苯基，R⁰ 為F、甲基、乙基、C₁ -C₃ 烷氧基、三氟甲氧基或2-甲氧基-乙氧基；X為F、Cl或CH₃ ；Y為I；且Z為F。在另一次實施例中，本發明提供一種式I之化合物，其中G為Ar₁ ，其中Ar₁ 為苯基或單取代之苯基，R⁰ 為鹵素、C₁ -C₆ 烷基、C₃ -C₆ 環烷基、C₂ -C₆ 烯基、C₂ -C₆ 炔基，所有此些烷基、環烷基、烯基及炔基視情況經1-3個選自鹵素、OH、CN、氰基甲基、硝基、苯基及三氟甲基的取代基取代；或R⁰ 為苯基、OR₃ 、呋喃基、噻吩基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、吡咯基或吡唑基。在一更特定之次實施例中，本發明提供一種式I之化合物，其中A為Ar₁ ，其中Ar₁ 為苯基或單取代之苯基，R⁰ 為F、Cl、C₁ -C₃ 烷基、C₁ -C₃ 烷氧基、2-甲氧基乙氧基、C₂ -C₃ 烯基、C₂ -C₃ 炔基、三氟甲基、苯基、呋喃基或噻吩基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、吡咯基或吡唑基；X為F、Cl或甲基；Y為I、Br、Cl、CF₃ 或C₁ -C₃ 烷基；且Z為F。

在另一更特定之次實施例中，本發明提供一種式I之化合物，其中G為Ar₁ ，其中Ar₁ 為苯基或單取代之苯基，R⁰ 為H；X為F、Cl或CH₃ ；Y為Br或I；且Z為F。

在另一次實施例中，本發明提供一種式I之化合物，其中G為Ar₂ ，其中Ar₂ 為2-噻吩基、2-呋喃基、3-噻吩基、3-呋喃基、2-吡咯基或3-吡咯基，所有視情況經甲氧基羰基、甲基胺甲醯基、乙醯胺基、乙醯基、甲基、乙基、三氟甲基或鹵素取代。在另一更特定次實施例中，本發明提供一種式I之化合物，其中G為Ar₂ ，其中Ar₂ 為2-噻吩基、2-呋喃基、3-噻吩基、3-呋喃基、2-吡咯基或3-吡咯基，所有視情況經甲氧基羰基、甲基胺甲醯基、乙醯胺基、乙醯基、甲基、乙基、三氟甲基或鹵素取代；R⁰ 不為H；X為F、Cl或CH₃ ：Y為I、Br、Cl、CF₃ 或C₁ -C₃ 烷基，且Z為H或F。在另一次實施例中，本發明提供一種式I之化合物，其中G為Ar₂ ，其中Ar₂ 為2-噻吩基、2-呋喃基、3-噻吩基、3-呋喃基、2-吡咯基或3-吡咯基，所有視情況經甲氧基羰基、甲基胺甲醯基、乙醯胺基、乙醯基、甲基、乙基、三氟甲基或鹵素取代；R⁰ 為F、Cl、C₁ -C₃ 烷基、單氯C₁ -C₃ 烷基、C₁ -C₃ 烷氧基、三氟甲氧基、甲氧基-甲氧基或2-甲氧基-乙氧基；X為F、Cl或CH₃ ；Y為I、Br、Cl、CF₃ 或C₁ -C₃ 烷基；且Z為H或F。在另一次實施例中，本發明提供一種式I之化合物，其中G為Ar₂ ，其中Ar₂ 為2-噻吩基、2-呋喃基、3-噻吩基、3-呋喃基、2-吡咯基或3-吡咯基，所有視情況經甲氧基羰基、甲基胺甲醯基、乙醯胺基、乙醯基、甲基、乙基、三氟甲基或鹵素取代；R⁰ 為H；X為F、Cl或CH₃ ，Y為I、Br、Cl、CF₃ 或C₁ -C₃ 烷基，且Z為H或F。在另一次實施例中，本發明提供一種式I之化合物，其中G為Ar₂ ，其中Ar₂ 為噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、吡咯基或吡唑基，所有視情況經甲氧基羰基、甲基胺甲醯基、乙醯胺基、乙醯基、甲基、乙基、三氟甲基或鹵素取代；R⁰ 為H或甲氧基；X為F、Cl或CH₃ ，Y為I、Br、Cl、CF₃ 或C₁ -C₃ 烷基，且Z為H或F。

本文揭露之特定實施例為化合物A之化合物：

在某些實施例中，該化合物A之化合物為醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、多晶型、酯、醯胺、互變異構物或前藥。

本文揭露之特定實施例為化合物B之化合物：

在某些實施例中，該化合物B之化合物為醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、多晶型、酯、醯胺、互變異構物或前藥。

本文揭露之特定實施例為化合物A之化合物：

其中2-OH碳處於R組態。在某些實施例中，該化合物A之化合物為醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、多晶型、酯、醯胺、互變異構物或前藥。在某些實施例中，組合物實質上無該化合物的S-異構物。在某些實施例中，該化合物含有少於10%之該化合物的S-異構物。在某些實施例中，該化合物含有少於5%之該化合物的S-異構物。在某些實施例中，該化合物含有少於1%之該化合物的S-異構物。

本文揭露之特定實施例為化合物B之化合物：

其中2-OH碳處於R組態。在某些實施例中，該化合物B之化合物為醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、多晶型、酯、醯胺、互變異構物或前藥。在某些實施例中，組合物實質上無該化合物的S-異構物。在某些實施例中，該化合物含有少於10%之該化合物的S-異構物。在某些實施例中，該化合物含有少於5%之該化合物的S-異構物。在某些實施例中，該化合物含有少於1%之該化合物的S-異構物。

本文揭露之特定實施例為化合物A之化合物：

其中2-OH碳處於S組態。在某些實施例中，該化合物A之化合物為醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、多晶型、酯、醯胺、互變異構物或前藥。在某些實施例中，組合物實質上無該化合物的R-異構物。在某些實施例中，該化合物含有少於10%之該化合物的R-異構物。在某些實施例中，該化合物含有少於5%之該化合物的R-異構物。在某些實施例中，該化合物含有少於1%之該化合物的R-異構物。

本文揭露之特定實施例為化合物B之化合物：

其中2-OH碳處於S組態。在某些實施例中，該化合物B之化合物為醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、多晶型、酯、醯胺、互變異構物或前藥。在某些實施例中，組合物實質上無該化合物的R-異構物。在某些實施例中，該化合物含有少於10%之該化合物的R-異構物。在某些實施例中，該化合物含有少於5%之該化合物的R-異構物。在某些實施例中，該化合物含有少於1%之該化合物的R-異構物。

在某些實施例中，本文揭露之化合物在第1天達到介於約0.01μg/ml至約1.0μg/ml間的Cmax。在某些實施例中，本文揭露之化合物在第1天達到介於約0.01μg/ml至約0.8μg/ml間的Cmax。在某些實施例中，本文揭露之化合物在第1天達到介於約0.03μg/ml至約0.5μg/ml間的Cmax。

在某些實施例中，本文揭露之化合物自0至12小時具有介於約0.1μg小時/mL至約5.0μg小時/mL的AUC。在某些實施例中，本文揭露之化合物具有介於約0.1μg小時/mL至約4.0μg小時/mL的AUC。在某些實施例中，本文揭露之化合物具有介於約0.5μg小時/mL至約3.0μg小時/mL的AUC。

在某些實施例中，本文揭露之化合物具有介於約0.1μg小時/mL至約5.0μg小時/mL間的平均AUC。在某些實施例中，本文揭露之化合物具有介於約0.1μg小時/mL至約4.0μg小時/mL間的AUC。在某些實施例中，本文揭露之化合物具有介於約0.5μg小時/mL至約3.0μg小時/mL間的平均AUC。

在某些實施例中，本文揭露之化合物的T_max 在投與組合物至禁食個體後於1小時至3小時間達到。在某些實施例中，本文揭露之化合物具有介於0.5小時至5小時間的T_max 。在某些實施例中，本文揭露之化合物具有介於1.0小時至3.0小時間的T_max 。在某些實施例中，本文揭露之化合物具有介於1.0小時至2.5小時間的T_max 。

在某些實施例中，本文揭露之化合物具有介於0.5小時至5小時間的平均T_max 。在某些實施例中，本文揭露之化合物具有介於1.0小時至3.0小時間的平均T_max 。The在某些實施例中，本文揭露之化合物具有介於1.0小時至2.5小時間的平均T_max 。

在某些實施例中，本文揭露之化合物在單一劑量5小時後具有大於約0.01mg/mL的血漿濃度。在某些實施例中，本文揭露之化合物在單一劑量10小時後具有大於約0.01mg/mL的血漿濃度。在某些實施例中，本文揭露之化合物在單一劑量15小時後具有大於約0.01mg/mL的血漿濃度。

合成程序

本文進一步揭露合成本文揭露之化合物的方法。在某些實施例中，本文揭露之化合物由下述方法製成。下列的程序及實例意欲用於說明此些方法。程序或實例皆不應以任何方式被解釋為限制本發明。本文揭露之化合物亦可使用熟習此項技術者已知的標準合成技術或使用此項技術中已知的方法與本文描述的方法合成。此外，本文所呈現的溶劑、溫度及其他反應條件可依熟習此項技術者的實務及常識變化。

在某些實施例中，用於合成本文所述之化合物的起始材料可由商業來源獲得，如Aldrich Chemical公司(美國威斯康辛州)、Sigma Chemical公司(美國密蘇里州聖路易斯市)。在某些實施例中，用於合成本文所述之化合物的起始材料為合成材料。在某些實施例中，本文所述之化合物及其他具有不同取代基的相關化合物係使用如述於March著之ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY 4^th Ed.，(Wiley 1992)；Carey及Sundberg著之ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY4^th Ed.，Vols. A與B(Plenum 2000，2001)，及Green與Wuts著之PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS 3^rd Ed.，(Wiley1 999)(其等皆以引用的方式以引用的方式併入本文中文中)中的技術及材料合成。用於製備本文揭露之化合物的一般方法由在本領域中已知的反應得到，且在某些實施例中，反應係藉由使用適當的試劑及條件而改良以引入可見於本文中提供之化學式中的不同基團。

藉由親電子劑與親核劑的反應而形成共價鍵

本文揭露之化合物使用不同的親電子劑或親核劑改質以形成官能基或取代基。下表名為「共價鍵及其前驅物的實例」，列出所選之共價鍵及其前驅物官能基的實例。前驅物官能基為以親電子基及親核基顯示。

共價鍵的實例4其前驅物 保護基的使用

在某些實施例中，必需要保護在終產物中為所需之反應官能基，例如羥基、胺基、亞胺基、硫基或羧基以避免其不希望的參予反應。保護基為用於阻斷某些或全部反應基團並防止此些基團參予化學反應直至保護基被去除。在某些實施例中，每一保護基可藉由不同方式移除。在完全不同反應條件下分裂的保護基滿足不同移除的需求。在某些實施例中，保護基以酸、鹼及氫解作用移除。在某些實施例中，基團如三苯甲基、二甲氧基三苯甲基、縮醛及第三丁基二甲基矽烷基為酸不穩定的且在以Cbz基保護之胺基的存在下用於保護羧基及羥基反應基團，該等基團可由氫解作用及鹼不穩定的Fmoc基去除。在某些實施例中，羧基及羥基反應基團在以諸如胺基甲酸第三丁酯或以胺基甲酸酯之酸不穩定阻斷的胺存在下以例如(但不限於)甲基、乙基及乙醯基之鹼不穩定基阻斷，其為酸與鹼皆安定但可水解去除。

在某些實施例中，羧酸及羥基反應基團亦以諸如苯甲基之水解可去除的保護基阻斷，同時能與酸氫鍵鍵結的胺基以諸如Fmoc之鹼不穩定基阻斷。在某些實施例中，羧酸反應基團藉由轉化成為如本文例示之單酯化合物受到保護，或其可以諸如2,4-二甲氧基苯甲基之氧化可去除保護基阻斷，同時共存在的胺基以氟化物不穩定矽烷基胺基甲酸酯阻斷。

在某些實施例中，烯丙基阻斷基在酸保護基及鹼保護基存在下為可用的。例如，烯丙基-阻斷的羧酸在酸不穩定胺基甲酸第三丁酯或鹼不穩定乙酸酯胺保護基存在下以Pd-催化反應去保護。保護基的另一形式為化合物或中間物可連接的樹脂。只要殘餘基連接至該樹脂，則此官能基被阻斷且不能反應。一旦由此樹脂釋出，則此官能基可用於反應。

保護基或阻斷基選自：

其他保護基，與可用於產生保護基與其移除的技術之詳細描述可見於Greene及Wuts著之Protective Groups in Organic Synthesis，第3版，美國紐約州紐約市John Wiley ＆ Sons公司於1999年出版，及Kocienski著之Protective Groups，美國紐約州紐約市Thieme Verlag公司於1994年出版，其等著作皆以引用的方式併入本中。

製造本文揭露之化合物

本文揭露之化合物可藉由多種方法製成。下列程序意欲用以說明此些方法，且所提出的實例意欲說明本發明的範疇。此些方法或此些實例不應以任何方式被解釋為限制本發明。

I. 結構VI 之化合物的製備說明如下

上述流程圖I 說明一種用於製造結構VI 之磺醯胺衍生物的方法。在某些實施例中，1,2-二胺衍生物(結構IV )由預期的硝基衍生物(結構I )以兩步驟製備。在某些實施例中，結構IV 之化合物與磺醯氯衍生物(結構V ，參考下一流程圖)反應以形成預期的磺醯胺。在某些實施例中，1,2-二胺衍生物IV在與對應的磺醯氯反應前受到保護用於產生咪唑酮(結構VII )。在某些實施例中，在鹼性條件下使1,2-二胺VIII去保護提供預期的材料VI。

II. 合成通式結構V 的化合物之一般路徑概述於下：

上述流程圖II顯示一種製備複合磺醯氯之實例。在某些實施例中，結構XX 由IX 合成，烷基化及轉化為鉀鹽XII 。在某些實施例中，以SOCl₂ 或POCl₃ 處理鹽以提供預期的化合物。其他用於製備獨特磺醯氯衍生物之更特定程序報導於實驗段落中。

III. 合成通式結構XIII 的化合物之一般路徑概述於流程圖3中：

上述流程圖III說明通式結構XIII 的磺醯胺衍生物之製備。在某些實施例中，此些化合物藉由在鈴木(Suzuki)條件下使用鈀催化劑使結構VI 與酸反應而獲得。

IV. 合成通式結構XIII 的化合物之一般路徑概述於流程圖4中：

上述流程圖IV說明通式結構XV 的磺醯胺衍生物之製備。在某些實施例中，乙烯磺醯胺(XIV)與胺反應形成通式結構XV 的衍生物。

本文揭露之化合物的其他形式 本文揭露之化合物的異構物

在某些實施例中，本文揭露之化合物以幾何異構物形式存在。在某些實施例中，本文揭露之化合物具有一或多個雙鍵。本文提供之化合物包括所有的順式、反式、同向、反向、E(entgegen)及Z(zusammen)異構物以及其對應混合物。在某些實施例中，本文揭露之化合物以互變異構物形式存在。本文揭露之化合物包括所有在本文描述之化學式中可能的互變異構物。在某些實施例中，本文揭露之化合物具有一或多個掌性中心且每一中心可以R或S組態存在。本文揭露之化合物包括所有的非鏡像異構、鏡像異構及表異構形式以及其對應混合物。在本文提供之化合物與方法之額外實施例中，源自單一製備步驟、組合或互變現象的鏡像異構物及/或非鏡像異構物之混合物亦可用於本文所述之應用。在某些實施例中，本文揭露之化合物可藉由將該化合物的外消旋混合物與光學活性拆分劑反應形成一對非鏡像異構物、分離此等非鏡像異構物及回收光學純鏡像異構物而製備為其個別立體異構物。在某些實施例中，鏡像異構物的拆分使用本文所述之化合物的共價非鏡像異構衍生物進行，或使用可解離之複合物(例如，結晶非鏡像異構鹽)。在某些實施例中，非鏡像異構物可藉由掌性層析或依溶解度不同的分離/拆分技術而分離。在某些實施例中，接著與拆分劑一起藉由任何實際不會造成外消旋作用的手段回收光學純鏡像異構物。可用於將化合物之立體異構物由其外消旋混合物拆分出的技術之更詳盡描述可見於Jean Jacques，Andre Collet，Samuel H. Wilen，「Enantiomers，Racemates and Resolutions」，John Wiley And Sons，Inc.，1981，此等揭露內容以引用的方式併入本文中。

本文揭露之標記化合物

本文亦描述標記化合物。此外，本文揭露藉由投與已經被標記之本文揭露之化合物治療病症的方法，

在某些實施例中，本文揭露之化合物為同位素標記(亦即，包含放射活性同位素)。在某些實施例中，本文揭露之化合物藉由使用發色團或螢光基團、生物發光標記或化學發光標記而標記。

經同位素標記之本文揭露的化合物亦等同於在本文中述及者，但其中一或多個原子經原子質量或質量數與通常可見於自然界中的原子質量或質量數不同原子替代。在某些實施例中，併入本文揭露之化合物中的同位素係選自² H、³ H、¹³ C，¹⁴ C、¹⁵ N、¹⁸ 0、¹⁷ O、³¹ P、³² P、³⁵ S、¹⁸ F及³⁶ Cl。在某些實施例中，將同位素標記之本文揭露的化合物用於藥物及/或基質組織分布檢定中。在某些實施例中，同位素標記之本文揭露的化合物具有較大的代謝安定性(例如，活體內半衰期增加或劑量需求減少)。

在某些實施例中，文揭露之化合物可藉由任何合宜的方式標記。

本文揭露之化合物的醫藥學上可接受之鹽

本文亦描述醫藥學上可接受之鹽。本文另揭露藉由投與本文揭露之化合物的醫藥學上可接受之鹽治療病症之方法。

在某些實施例中，當在母化合物中存在的酸質子由金屬離子替代，例如鹼金屬離子、鹼土金屬離子或鋁離子；或與有機鹼配位時本文揭露之化合物製備為醫藥學上可接受之鹽。

在某些實施例中，鹼加成鹽係藉由使本文揭露之化合物之自由酸形式與醫藥學上可接受之無機鹼或有機鹼反應而製得，該鹼包括(但不限於)有機鹼如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、緩血酸胺、N-甲基還原葡萄糖胺及其類似物與無機鹼如氫氧化鋁、氫氧化鈣、氫氧化鉀、碳酸鈉、氫氧化鈉及其類似物。

在某些實施例中，本文揭露之化合物係藉由使該化合物的自由鹼形式與醫藥學上可接受之無機酸或有機酸反應而製備成為醫藥學上可接受之鹽，該酸包括(但不限於)無機酸如氫氯酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、偏磷酸及其類似物；及有機酸如乙酸、丙酸、己酸、環戊烷丙酸、乙醇酸、焦葡萄酸、乳酸、丙二酸、丁二酸、羥基丁二酸、順丁烯二酸、反丁烯二酸、Q-甲苯磺酸、酒石酸、三氟乙酸、檸檬酸、苯甲酸、3-(4-羥基苯甲醯基)苯甲酸、肉桂酸、苦杏仁酸、芳基磺酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、1,2-乙烷二磺酸、2-羥基乙烷磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲基雙環-[2.2.2]辛-2-烯-1-甲酸、葡萄庚酸、4,4'-亞甲基雙-(3-羥基-2-烯-1-甲酸)、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、第三丁基乙酸、月桂基硫酸、葡萄糖酸、麩胺酸、羥基萘甲酸、柳酸、硬脂酸及己二烯二酸。

本文揭露之化合物的溶劑合物

本文亦揭露溶劑合物。本文另揭露藉由投與本文揭露之化合物的溶劑合物治療病症的方法。

溶劑合物含有化學計量或非化學計量之量的溶劑。在某些實施例中，本文揭露之化合物的溶劑合物在以醫藥學上可接受之溶劑如水、乙醇及其類似物進行結晶之製程中形成。在某些實施例中，當溶劑為水時形成本文揭露之化合物的水合物。在某些實施例中，當溶劑為醇時形成醇化物。

在某些實施例中，本文揭露之化合物的溶劑合物係在本文所描述的製程中製備或形成。在某些實施例中，本文揭露之化合物的水合物係藉由自水性/有機溶劑混合物中使用有機溶劑再結晶而製備，該等有機溶劑包括(但不限於)二噁烷、四氫呋喃或甲醇。在某些實施例中，本文揭露之化合物未經溶劑化。通常，溶劑化形式視為等同於非溶劑化形式以用於本文提供之化合物與方法。

本文揭露之化合物的多晶型

本文亦揭露多晶型。本文另揭露藉由投與本文揭露之化合物的多晶型之治療病症的方法。

如本文使用之「多晶型」包括化合物的相同元素組成的不同結晶堆疊排列。在特定情況下，化合物之每一多晶型具有不同的x光繞射譜圖、紅外光譜、熔點、密度、硬度、晶形、光學及電學性質，安定性及溶解度。多種因素如再結晶溶劑，結晶速度及儲存溫度可能會造成單晶形占優勢。

在特定實施例中，本文揭露N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺之結晶多晶型A：。

在某些實施例中，N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺之結晶多晶型A呈現特定的粉末x光繞射譜圖。在某些實施例中，此粉末x光繞射譜圖含有顯示於圖5中之至少約50%的峰。在某些實施例中，此粉末x光繞射譜圖含有顯示於圖5中之至少約70%的峰。在某些實施例中，此粉末x光繞射譜圖含有顯示於圖5中之至少約90%的峰。在某些實施例中，此粉末x光繞射譜圖實質上與顯示於圖5中之粉末x光繞射譜圖相同。

在某些實施例中，N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺之結晶多晶型A呈現特定的示差掃描熱量測定譜圖。在某些實施例中，此特定的示差掃描熱量測定譜圖實質上與顯示於圖6中之示差掃描熱量測定譜圖相同。在某些實施例中，結晶多晶型A具有由示差掃描熱量測定法測出之約143℃的熔點初始值。

在某些實施例中，此N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺的結晶多晶型A係藉由自溶劑中結晶非晶形之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺而製成。

在某些實施例中，此N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺的結晶多晶型A係藉由自己烷與乙酸乙酯的混合物製成。

本文揭露之化合物的前藥

本文亦揭露前藥。本文另揭露藉由投與本文揭露之化合物的前藥治療病症的方法。

如本文使用，「前藥」為化合物的一種形式，其在投與個體並接著吸收後轉化為活性或更具活性之物質(亦即母體)。在某些實施例中，前藥藉由代謝作用轉化為母體。

在某些實施例中，本文揭露之化合物的前藥具有之化學基可使得該化合物較不具有活性及/或調節該化合物的溶解性。在某些實施例中，切斷此化學基會造成此前藥轉化為母體。在某些實施例中，本文揭露之化合物的前藥比母體易於投與。在某些實施例中，本文揭露之化合物的前藥可藉由口服投藥而為生物可利用，但母體不行。在某些實施例中，本文揭露之化合物的前藥在溶解性上優於母體。

前藥之非限制性實例可為本文描述之化合物以酯(「前藥」)投與以促進通過細胞膜的傳送，其中水溶解性不利於遷移但其接著可水解代謝為羧酸，此活性實體一旦在細胞內則水溶解性為有利的。前藥的又一實例可為鍵結至酸基的短胜肽(聚胺基酸)，其中代謝該胜肽以顯露該活性基團。

設計前藥的方法參閱例如，Fedorak等人之Am.J.Physiοl. ，269：G210-218(1995)；McLoed等人之Gastroenterol ，106：405-413(1994)；Hochhaus等人之Biomed. Chrom.， 6：283-286(1992)；J. Larsen 及H. Bundgaard，Int.J. Pharmaceutics， 37，87(1987)；J. Larsen等人之Int.J. Pharmaceutics ，47，103(1988)；Sinkula等人之J. Pharm. Sci. ，64：181-210(1975)；T. Higuchi及V. Stella，Pro-Drugs as Novel Delivery Systems ，A.C.S. Symposium Series之第14卷；及Edward B. Roche，Bioreversible Carriers in Drug Design ，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press，1987；及Saulnier等人著之(1994)，Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters，第4卷，第1985頁，此等文獻皆以引用的方式併入本文中。

在某些實施例中，本文揭露之化合物的前藥係藉由非衍生的本文揭露之化合物與合宜的胺基甲醯劑，如(但不限於)1,1-醯氧基烷基氯甲酸酯、對硝基苯基碳酸酯或其類似物反應而製備。

在某些實施例中，本文揭露之化合物的前藥包含經由醯胺或酯鍵共價連接至本文揭露之化合物的自由胺基、羥基或羧酸基的一個胺基酸殘基，或兩個或兩個以上(亦即兩個、三個或四個)胺基酸殘基之多胜肽鏈。在某些實施例中，胺基酸殘基包括天然發生之胺基酸、4-羥基脯胺酸、羥基離胺酸、戴胺酸(demosine)、異戴胺酸(isodemosine)、3-甲基組胺酸、正纈胺酸、β-丙胺酸、γ-胺基丁酸、瓜胺酸、高半胱胺酸、高絲胺酸、鳥胺酸及甲硫胺酸碸。

在某些實施例中，本文揭露之具有自由胺基、醯胺基、羥基或羧基之化合物係轉換為前藥。在某些實施例中，本文揭露之具有自由羧基的化合物藉由使自由羧基衍生為醯胺或烷基酯而轉換為前藥。在某些實施例中，本文揭露之具有自由羥基的化合物藉由使用包括(但不限於)半琥珀酸酯、磷酸酯、二甲基胺基乙酸酯及磷醯氧基甲氧基羰基之基團衍生自由羥基而轉換為前藥，如在Advanced Drug Delivery Reviews 1996 ,l9 ，115中概述。亦包括羥基及胺基的胺基甲酸酯前藥，以及羥基的碳酸酯前藥、磺酸酯及硫酸酯。

某些實施例中，本文揭露之化合物的前藥藉由使羥基衍生為(醯氧基)甲基及(醯氧基)乙基醚而產生，其中醯基為烷基酯，視情況經包括(但不限於)醚、胺及羧酸官能基之基團取代，或其中醯基為如前述的胺基酸酯。此型式的前藥描述於J. Med. Chem. 1996 ，39 ，10，其以引用的方式併入本文中。在某些實施例中，自由胺衍生為醯胺、磺醯胺或磷醯胺。全部此些前藥基團可併入包含(但不限於)醚、胺及羧酸官能基之基團。

在特定情況下，本文揭露之化合物之芳族環部份上的位點易於發生多種代謝反應；因此，在某些實施例中，本文揭露之化合物包含在芳族環結構上併入適當的取代基。

IV.使用方法

在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以抑制MEK酶。在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以治療病症。在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以治療MEK介導之病症。在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以治療增生性病症。在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以治療發炎性病症。

在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以抑制MEK酶。在某些實施例中，MEK酶為MEK激酶。在某些實施例中，MEK酶為MEK1。在某些實施例中，MEK酶為MEK2。

在某些實施例中，MEK酶至少被抑制約1%。在某些實施例中，MEK酶至少被抑制約2%。在某些實施例中，MEK酶至少被抑制約3%。在某些實施例中，MEK酶至少被抑制約4%。在某些實施例中，MEK酶至少被抑制約5%。在某些實施例中，MEK酶至少被抑制約10%。在某些實施例中，MEK酶至少被抑制約20%。在某些實施例中，MEK酶至少被抑制約25%。在某些實施例中，MEK酶至少被抑制約30%。在某些實施例中，MEK酶至少被抑制約40%。在某些實施例中，MEK酶至少被抑制約50%。在某些實施例中，MEK酶至少被抑制約60%。在某些實施例中，MEK酶至少被抑制約70%。在某些實施例中，MEK酶至少被抑制約75%。在某些實施例中，MEK酶至少被抑制約80%。在某些實施例中，MEK酶至少被抑制約90%。在某些實施例中，MEK酶基本上完全得到抑制。

在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以治療MEK介導之病症。在某些實施例中，MEK介導之病症選自下列病症組成之群：發炎性病症、增生性病症、感染、免疫性病症(例如，自體免疫病症、牛皮癬、類風濕性關節炎、骨關節炎、乾眼症及青光眼)、心臟病症(例如中風、再灌注損傷、局部缺血、動脈粥狀硬化、心衰竭)、神經病症、纖維化病症、代謝疾病、慢性疼痛及/或神經疼痛。

在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以治療免疫性病症。在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以治療細胞激素介導之病症(亦即由前發炎細胞激素過量產生或未調節產生所引起的病症，前發炎細胞激素包括例如TNF、IL-1、IL-6及IL-8)。在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以治療自體免疫病症、發炎性病症、感染性病症、前列腺素過氧化酶合成酶-2(COX-2)伴隨之症狀、類風濕性關節炎、發炎性腸道病症、發炎性疼痛、潰瘍性結腸炎、克羅恩氏(Crohn's disorder)病、牙周病症、顳下顎關節病症、多發性硬化、糖尿病、腎絲球性腎炎、全身性紅斑狼瘡、硬皮病、慢性甲狀腺炎、葛瑞夫氏病症、溶血性貧血、自體免疫胃炎、自體免疫嗜中性白血球減少症、血小板減少症、慢性活動性肝炎、重症肌無力、異位性皮膚炎、移植物抗宿主病症，及牛皮癬、氣喘、過敏、呼吸窘迫症候群或急性或慢性胰炎及多發性硬化。

在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以治療發炎性病症。在某些實施例中，發炎性病症為增生性腎絲球性腎炎、慢性發炎性病症、滑液囊炎、急性風濕性關節炎、過敏、滑液囊炎、肺纖維化、化膿性關節炎、關節黏連性脊椎炎、關節炎、氣喘、動脈粥狀硬化、慢性發炎性病症、慢性阻塞性肺病、糖尿病(包括糖尿病視網膜病變)、腹瀉、濕疹、腸道性關節炎、胃炎、痛風、痛風性關節炎、炎性腸道發病症、大腸急躁症、潰瘍性結腸炎、幼年型關節炎、神經性關節炎、器官移植排斥反應、骨關節炎、骨質疏鬆、胰炎、增生性腎絲球性腎炎、搔癢性皮炎、牛皮癬、牛皮癬癬性關節炎、肺纖維化、肺部發炎、化膿性關節炎、回流性食道炎、呼吸窘迫症候群、急性或慢性胰炎、類風濕性關節炎、硬皮病、囊腫性纖維化、全身性紅斑狼瘡、肌腱炎、潰瘍性結腸炎、白斑(vitaligo)、脊椎關節病變或克羅恩氏病症。

在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以治療增生性病症。在某些實施例中，增生性病症為不正常細胞的生長。在某些實施例中，增生性病症為血管瘤。在某些實施例中，增生性病症為癌症。在某些實施例中，癌症為血液學或非血液血癌症。在某些實施例中，癌症選自由多發性骨髓瘤、白血病及淋巴瘤組成之群。在某些實施例中，癌症選自由急性及慢性白血病組成之群。在某些實施例中，癌症選自由急性淋巴球性白血病(ALL)及急性非淋巴球性白血病(ANLL)組成之群。在某些實施例中，癌症選自由慢性淋巴球性白血病(CLL)及慢性骨髓性白血病(CML)組成之群。在某些實施例中，癌症選自由霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)及非霍奇金氏淋巴瘤組成之群。在某些實施例中，癌症為多發性骨髓瘤。在某些實施例中，癌症為低、中、及高級。在某些實施例中，癌症選自由下列組成之群：腦癌、頭頸癌、肺癌、乳癌、生殖系統癌、消化系統癌、胰腺癌及泌尿系統癌。在某些實施例中，癌症為上消化道癌或結腸直腸癌。在某些實施例中，癌症為膀胱癌或腎細胞癌。在某些實施例中，癌症為前列腺癌。在某些實施例中，癌症為乳癌如在乳腺管組織中的乳腺管癌、髓質癌、膠樣癌、管狀癌及發炎性乳癌；卵巢癌，包括上皮卵巢腫瘤如在卵巢中的腺癌及由卵巢遷移至腹腔中的腺癌；子宮癌；子宮頸癌，諸如在子宮頸上皮中的腺癌，包括鱗狀細胞癌及腺癌；前列腺癌，諸如選自下列者的前列腺癌：腺癌或遷移至骨的腺癌；胰腺癌，諸如在胰管組織中的上皮樣癌及在胰管中的腺癌；膀胱癌，諸如在膀胱中的移行細胞癌，尿道上皮癌(移行細胞癌)，位於膀胱內層的尿道上皮細胞中的腫瘤、鱗狀細胞癌、腺癌及小細胞癌；白血病，諸如急性骨髓性白血病(AML)、急性淋巴球性白血病、慢性淋巴球性白血病、慢性骨髓性白血病、毛細胞白血病、脊髓發育不良及骨髓增生性病症；骨癌；肺癌，諸如非小細胞肺癌(NSCLC)，其分化為鱗狀細胞癌、腺癌及大細胞未分化癌及小細胞肺癌；皮膚癌，諸如基底細胞癌、黑素瘤、鱗狀細胞癌及光化性角化症，其為有時發展為鱗狀細胞癌之皮膚症狀；眼睛視網膜母細胞瘤；皮膚或眼內(眼)黑素瘤；原發性肝癌(在肝中開始為癌)；腎癌；甲狀腺癌，諸如乳突狀、濾泡狀、髓質及未分化性；AIDS有關淋巴瘤，諸如擴散大B細胞淋巴瘤、B-細胞免疫母細胞淋巴瘤及小型無裂隙細胞淋巴瘤；卡波西氏瘤(Kaposi's Sarcoma)；病毒誘導癌，包括B型肝炎病毒(HBV)、C型肝炎病毒(HCV)及肝癌；第1型人類淋巴細胞病毒(HTLV-1)及成人T-細胞白血病/淋巴瘤；及人類乳頭狀瘤病毒(HPV)與子宮頸癌；中樞神經系統癌(CNS)，諸如原發性腦腫瘤，其包括膠質瘤(星形細胞瘤、退化星形細胞瘤或多形性膠質母細胞瘤)、寡樹突神經膠細胞瘤、室管膜瘤、腦脊髓膜瘤、淋巴瘤、神經鞘瘤、及神經管胚細胞瘤；周邊神經系統(PNS)癌，諸如聽神經瘤與惡性周邊神經鞘腫瘤(MPNST)，包括神經纖維瘤及神經鞘瘤、惡性纖維細胞瘤、惡性纖維組織細胞瘤、惡性腦脊髓膜瘤、惡性間皮瘤及惡性混合苗勒氏腫瘤(malignant mixedtumor)；口腔及口咽癌，諸如下嚥癌、喉癌、鼻咽癌及口咽癌；胃癌，諸如淋巴瘤、胃基質腫瘤及類癌腫瘤；睪丸癌，諸如胚細胞腫瘤(GCTs)，其包括精原細胞瘤及非精原細胞瘤與性腺基質腫瘤，其包括萊迪希氏細胞腫瘤(Leydig cell tumor)及賽特利氏細胞腫瘤(Sertoli cell tumor)；胸腺癌，諸如胸腺瘤、胸腺癌、霍奇金氏症、非霍奇金氏淋巴類癌或類癌腫瘤；直腸癌；結腸癌、腎癌、腎上腺皮質癌、濾泡性淋巴瘤、陰性前細胞(Pre-B)急性白血病、慢性淋巴球B-白血病、腺癌、血管肉瘤、星形細胞瘤、聽神經瘤、退化星形細胞瘤、基底細胞癌、胚神經膠質瘤(blastoglioma)、軟骨肉瘤、絨毛膜癌、脊索瘤、顱咽管瘤、皮膚黑素瘤、囊腺癌、內皮肉瘤、胚胎癌，室管膜瘤、伊汶氏腫瘤(Ewing's tumor)、上皮癌、纖維肉瘤、胃癌、泌尿生殖道癌、多形性膠質母細胞瘤、血管母細胞瘤、肝細胞癌、肝癌、卡波西氏肉瘤、大細胞癌、平滑肌肉瘤、脂肪肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管內皮肉瘤、髓質性甲狀腺癌、神經管胚細胞瘤、腦脊髓膜瘤、間皮瘤、骨髓瘤、黏液肉瘤、神經母細胞瘤、神經纖維肉瘤、寡樹突神經膠細胞瘤、骨原性肉瘤、上皮卵巢癌、乳突狀癌、乳突狀腺癌、副甲狀腺腫瘤、嗜鉻細胞瘤、松果體瘤、漿細胞瘤、視網膜母細胞瘤、橫紋肌肉瘤、皮脂腺癌、精原細胞癌、皮膚癌、黑素瘤、小細胞肺癌、鱗狀細胞癌、汗腺癌、滑膜瘤、甲狀腺癌、葡萄膜黑素瘤及威姆氏腫瘤(Wilm's tumor)、口腔及喉癌、呼吸系統癌、骨頭及關節癌、軟組織癌、皮膚癌、生殖系統癌、眼睛及眼眶癌、神經系統癌、淋巴系統癌及內分泌系統癌。在特定實施例中，此些癌選自下列組成之群：舌、嘴、咽或其他口腔癌；食道癌、胃癌或小腸癌；結腸癌或直腸、肛門或肛門直腸癌；肝、肝內膽管、膽囊、胰腺或其他膽汁或消化器官癌；喉部、支氣管及其他呼吸器官癌；心臟癌，黑素瘤，基底細胞癌，鱗狀細胞癌，其他非上皮皮膚癌；子宮或子宮頸癌；子宮體癌；卵巢、陰門、陰道，或其他雌性生殖器癌；前列腺、睪丸、陰莖或其他雄性生殖器癌；膀胱癌；腎癌；腎、骨盆或尿道癌或其他泌尿生殖器官癌；甲狀腺癌或其他內分泌癌；慢性淋巴球性白血病；及皮膚T-細胞淋巴瘤，顆粒狀及單核狀兩者。

在某些實施例中，本文揭露之化合物及/或組合物投與有需要之個體以治療增生性病症。在某些實施例中，增生性病症為纖維化病症。在某些實施例中，增生性病症選自血管生成有關症狀或症狀、血管成形術、動脈粥狀硬化、心肥大、增生、免疫性病症、發炎、間質性腎炎或肺纖維化、瘢痕瘤形成、肝硬化、偏頭痛、疼痛、多發性肌炎、在醫療程序後引起的增生、再狹窄、類風濕性關節炎、硬皮病、全身性狼瘡或血管生成。

在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以治療增生性病症。在某些實施例中，增生性病症為良性皮膚增生(例如牛皮癬)或前列腺(例如良性前列腺肥大(BPH))。

在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以治療血液性病症。在某些實施例中，血液性病症選自由鐮狀細胞貧血、骨髓發育不良病症(MDS)及骨髓增生性病症組成之群。在某些實施例中，增生性病症選自由真性紅血球增多症、骨髓纖維變性及原發性血小板增多症組成之群。

在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以治療眼科病症。在某些實施例中，眼科病症為乾眼症(包括修格連氏症候群(Sjogren's syndrome))、黃斑部退化、閉角及開角型青光眼、視網膜神經節細胞退化、眼局部缺血、視網膜炎、視神經病變(例如，青光眼視神經病變或糖尿病視神經病變)、葡萄膜炎、眼畏光、眼部組織外傷伴隨的發炎及疼痛(例如，眼部手術之手術後發炎或疼痛，諸如白內障手術及屈光手術)。

在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以治療皮膚病。在某些實施例中，皮膚病為黑素瘤、基底細胞癌、鱗狀細胞癌、牛皮癬及持續性搔癢。

在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以治療代謝性病症。在某些實施例中，代謝性病症為代謝症候群、抗胰島素症及第I型與第II型糖尿病。

在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以治療與組織損傷相關的病症。在某些實施例中，與組織損傷相關的病症選自血管病症、偏頭痛、結節性動脈周圍炎、甲狀腺炎、再生不全性貧血、霍奇金氏症、硬皮病(sclerodoma)、風濕熱、第I型糖尿病、神經肌肉接合病症包括重症肌無力、白質病症包括多發性硬化、肉狀瘤病、腎炎、腎病症候群、貝塞特氏症候群(Behcet's syndrome)、多發性肌炎、牙齦炎、牙周病、過敏、創傷後膨脹、局部缺血包括心肌局部缺血、心血管局部缺血、繼發於心臟停止之局部缺血、過敏性鼻炎、呼吸窘迫症候群、內毒素休克症候群及動脈粥狀硬化。

在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以治療心血管病症。在某些實施例中，心血管病症為動脈粥狀硬化、心肥大、自發性心肌症、心臟衰竭、血管生成有關症狀或病症，及醫療手術後誘發的增生，此包括(但不限於)由手術及血管成形術造成的再狹窄。

本文揭露之化合物或組合物投與有需要之個體以治療與組織損傷相關的神經性病症。在某些實施例中，神經性病症為帕金森氏症；阿茲海默氏症；阿茲海默氏癡呆；由中風、局部缺血及創傷造成的中樞神經系統損傷；癲癇；神經性疼痛，憂鬱症；或躁鬱症。

在某些實施例中，可投與本文揭露之化合物及/或組合物以預防胚細胞植入。

在某些實施例中，可投與本文揭露之化合物及/或組合物以使細胞降解、抑制細胞生長或殺死細胞。在某些實施例中，細胞為癌細胞。在某些實施例中，細胞為腦、乳房、肺、卵巢、胰臟、前列腺、腎或結腸直腸癌細胞。

在某些實施例中，可投與本文揭露之化合物及/或組合物以抑制複數個靶細胞的生長。在某些實施例中，靶細胞生長可被抑制約1%。在某些實施例中，靶細胞生長可被抑制約2%。在某些實施例中，靶細胞生長可被抑制約3%。在某些實施例中，靶細胞生長可被抑制約4%。在某些實施例中，靶細胞生長可被抑制約5%。在某些實施例中，靶細胞生長可被抑制約10%。在某些實施例中，靶細胞生長可被抑制約20%。在某些實施例中，靶細胞生長可被抑制約25%。在某些實施例中，靶細胞生長可被抑制約30%。在某些實施例中，靶細胞生長可被抑制約40%。在某些實施例中，靶細胞生長可被抑制約50%。在某些實施例中，靶細胞生長可被抑制約60%。在某些實施例中，靶細胞生長可被抑制約70%。在某些實施例中，靶細胞生長可被抑制約75%。在某些實施例中，靶細胞生長可被抑制約80%。在某些實施例中，靶細胞生長可被抑制約90%。在某些實施例中，靶細胞生長可被抑制約100%。在某些實施例中，靶細胞為癌細胞。

在某些實施例中，可投與本文揭露之化合物及/或組合物以使複數個靶細胞降解。在某些實施例中，1%的靶細胞被降解。在某些實施例中，2%的靶細胞被降解。在某些實施例中，3%的靶細胞被降解。在某些實施例中，4%的靶細胞被降解。在某些實施例中，5%的靶細胞被降解。在某些實施例中，10%的靶細胞被降解。在某些實施例中，20%的靶細胞被降解。在某些實施例中，25%的靶細胞被降解。在某些實施例中，30%的靶細胞被降解。在某些實施例中，40%的靶細胞被降解。在某些實施例中，50%的靶細胞被降解。在某些實施例中，60%的靶細胞被降解。在某些實施例中，70%的靶細胞被降解。在某些實施例中，75%的靶細胞被降解。在某些實施例中，80%的靶細胞被降解。在某些實施例中，90%的靶細胞被降解。在某些實施例中，100%的靶細胞被降解。在某些實施例中，基本上全部的靶細胞被降解。在某些實施例中，靶細胞為癌細胞。

在某些實施例中，可投與本文揭露之化合物及/或組合物以殺死複數個靶細胞。在某些實施例中，1%的靶細胞被殺死。在某些實施例中，2%的靶細胞被殺死。在某些實施例中，3%的靶細胞被殺死。在某些實施例中，4%的靶細胞被殺死。在某些實施例中，5%的靶細胞被殺死。在某些實施例中，10%的靶細胞被殺死。在某些實施例中，20%的靶細胞被殺死。在某些實施例中，25%的靶細胞被殺死。在某些實施例中，30%的靶細胞被殺死。在某些實施例中，40%的靶細胞被殺死。在某些實施例中，50%的靶細胞被殺死。在某些實施例中，60%的靶細胞被殺死。在某些實施例中，70%的靶細胞被殺死。在某些實施例中，75%的靶細胞被殺死。在某些實施例中，80%的靶細胞被殺死。在某些實施例中，90%的靶細胞被殺死。在某些實施例中，100%的靶細胞被殺死。在某些實施例中，靶細胞為癌細胞。

在某些實施例中，將本文揭露之化合物及/或組合物投與有需要之個體以減少腫瘤大小、抑制腫瘤生長、減少轉移或預防轉移。

在某些實施例中，減少腫瘤大小。在某些實施例中，腫瘤大小減少至少1%。在某些實施例中，腫瘤大小減少至少2%。在某些實施例中，腫瘤大小減少至少3%。在某些實施例中，腫瘤大小減少至少4%。在某些實施例中，腫瘤大小減少至少5%。在某些實施例中，腫瘤大小減少至少10%。在某些實施例中腫瘤大小減少至少20%。在某些實施例中，腫瘤大小減少至少25%。在某些實施例中，腫瘤大小減少至少30%。在某些實施例中，腫瘤大小減少至少40%。在某些實施例中，腫瘤大小減少至少50%。在某些實施例中，腫瘤大小減少至少60%。在某些實施例中，腫瘤大小減少至少70%。在某些實施例中，腫瘤大小減少至少75%。在某些實施例中，腫瘤大小減少至少80%。在某些實施例中，腫瘤大小減少至少85%。在某些實施例中，腫瘤大小減少至少90%。在某些實施例中，腫瘤大小減少至少95%。

在某些實施例中，抑制腫瘤生長。在某些實施例中，腫瘤生長可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少1%。在某些實施例中，腫瘤生長可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少2%。在某些實施例中，腫瘤生長可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少3%。在某些實施例中，腫瘤生長可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少4%。在某些實施例中，腫瘤生長可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少5%。在某些實施例中，腫瘤生長可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少6%。在某些實施例中，腫瘤生長可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少10%。在某些實施例中，腫瘤生長可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少20%。在某些實施例中，腫瘤生長可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少30%。在某些實施例中，腫瘤生長可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少40%。在某些實施例中，腫瘤生長可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少50%。在某些實施例中，腫瘤生長可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少60%。在某些實施例中，腫瘤生長可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少70%。在某些實施例中，腫瘤生長可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少75%。在某些實施例中，腫瘤生長可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少80%。在某些實施例中，腫瘤生長可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少90%。在某些實施例中，腫瘤生長可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少95%。在某些實施例中，腫瘤生長可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少99%。

在某些實施例中，抑制轉移。在某些實施例中，轉移可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少1%。在某些實施例中，轉移可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少2%。在某些實施例中，轉移可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少3%。在某些實施例中，轉移可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少4%。在某些實施例中，轉移可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少5%。在某些實施例中，轉移可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少6%。在某些實施例中，轉移可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少10%。在某些實施例中，轉移可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少20%。在某些實施例中，轉移可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少30%。在某些實施例中，轉移可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少40%。在某些實施例中，轉移可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少50%。在某些實施例中，轉移可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少60%。在某些實施例中，轉移可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少70%。在某些實施例中，轉移可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少75%。在某些實施例中，轉移可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少80%。在某些實施例中，轉移可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少90%。在某些實施例中，轉移可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少95%。在某些實施例中，轉移可相對於投與本文揭露之化合物及/或組合物之前的生長速率抑制至少99%。在某些實施例中，預防轉移。

在某些實施例中，本文揭露之化合物或組合物係用於診斷目的及/或用作研究試劑。在某些實施例中，本文揭露之化合物及/或組合物係用於差異及/或組合分析以說明表現於細胞及組織內的基因之表現模式。

V.醫藥組合物

本文揭露之特定實施例為一種包含化合物A之醫藥組合物或其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、多晶型、酯、醯胺、互變異構物、前藥、水合物或衍生物。

在某些實施例中，組合物包含化合物A：

其中2-OH碳處於R組態，實質上無S-異構物。在某些實施例中，化合物上之2-OH碳處於R組態。在某些實施例中，組合物實質上無該化合物之S-異構物。在某些實施例中，化合物含有少於10%之該化合物之S-異構物。在某些實施例中，化合物含有少於5%之該化合物之S-異構物。在某些實施例中，化合物含有少於1%之該化合物之S-異構物。在某些實施例中，化合物處於R組態。

在某些實施例中，組合物包含化合物A：

其中2-OH碳處於S組態，實質上無R-異構物。在某些實施例中，化合物上之2-OH碳處於S組態。在某些實施例中，組合物實質上無該化合物之R-異構物。在某些實施例中，化合物含有少於10%之該化合物之R-異構物。在某些實施例中，化合物含有少於5%之該化合物之R-異構物。在某些實施例中，化合物含有少於1%之該化合物之R-異構物。在某些實施例中，化合物處於S組態。

本文揭露之特定實施例為一種包含化合物B之醫藥組合物或其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、多晶型、酯、醯胺、互變異構物、前藥、水合物或衍生物。

在某些實施例中，組合物包含化合物B：

其中2-OH碳處於R組態，實質上無S-異構物。在某些實施例中，化合物上之2-OH碳處於R組態。在某些實施例中，組合物實質上無該化合物之S-異構物。在某些實施例中，化合物含有少於10%之該化合物之S-異構物。在某些實施例中，化合物含有少於5%之該化合物之S-異構物。在某些實施例中，化合物含有少於1%之該化合物之S-異構物。在某些實施例中，化合物處於R組態。

在某些實施例中，組合物包含化合物B：

其中2-OH碳處於S組態，實質上無R-異構物。在某些實施例中，化合物上之2-OH碳處於S組態。在某些實施例中，組合物實質上無該化合物之R-異構物。在某些實施例中，化合物含有少於10%之該化合物之R-異構物。在某些實施例中，化合物含有少於5%之該化合物之R-異構物。在某些實施例中，化合物含有少於1%之該化合物之R-異構物。在某些實施例中，化合物處於S組態。

本文揭露之特定實施例為一種包含本文揭露之化合物的醫藥組合物。在某些實施例中，該化合物的存在量為約1-50mg。在某些實施例中，該化合物的存在量為約1-10mg。在某些實施例中，該化合物的存在量為約10-20mg。在某些實施例中，該化合物的存在量為約20-40mg。在某些實施例中，該化合物的存在量為約40-50mg。

本文揭露之特定實施例為一種包含至少約50%之化合物的醫藥組合物，其呈現之粉末x光繞射譜圖包含至少50%顯示於圖5中之粉末x光繞射譜圖辨識的峰。在某些實施例中，粉末x光繞射譜圖包含至少70%顯示於圖5中之粉末x光繞射譜圖辨識的峰。在某些實施例中，粉末x光繞射譜圖包含至少90%顯示於圖5中之粉末x光繞射譜圖辨識的峰。在某些實施例中，粉末x光繞射譜圖實質上與顯示於圖5中之粉末x光繞射譜圖相同。

在某些實施例中，組合物包含至少約75%之化合物，其呈現之粉末x光繞射譜圖包含至少50%顯示於圖5中之粉末x光繞射譜圖辨識的峰。在某些實施例中，粉末x光繞射譜圖包含至少70%顯示於圖5中之粉末x光繞射譜圖辨識的峰。在某些實施例中，粉末x光繞射譜圖包含至少90%顯示於圖5中之粉末x光繞射譜圖辨識的峰。在某些實施例中，粉末x光繞射譜圖實質上與顯示於圖5中之粉末x光繞射譜圖相同。

在某些實施例中，組合物包含至少約90%之化合物，其呈現之粉末x光繞射譜圖包含至少50%顯示於圖5中之粉末x光繞射譜圖辨識的峰。在某些實施例中，粉末x光繞射譜圖包含至少70%顯示於圖5中之粉末x光繞射譜圖辨識的峰。在某些實施例中，粉末x光繞射譜圖包含至少90%顯示於圖5中之粉末x光繞射譜圖辨識的峰。在某些實施例中，粉末x光繞射譜圖實質上與顯示於圖5中之粉末x光繞射譜圖相同。

在某些實施例中，組合物中之實質上所有化合物呈現之粉末x光繞射譜圖包含至少50%顯示於圖5中之粉末x光繞射譜圖辨識的峰。在某些實施例中，粉末x光繞射譜圖包含至少70%顯示於圖5中之粉末x光繞射譜圖辨識的峰。在某些實施例中，粉末x光繞射譜圖包含至少90%顯示於圖5中之粉末x光繞射譜圖辨識的峰。在某些實施例中，粉末x光繞射譜圖實質上與顯示於圖5中之粉末x光繞射譜圖相同。

在某些實施例中，該組合物中存在的結晶多晶型具有如由示差掃描熱量測定法測出之約143℃的熔點初始值。在某些實施例中，結晶多晶型實質上無水。在某些實施例中，結晶多晶型實質上無溶劑。

在某些實施例中，組合物含有至少約50%之化合物，其呈現之示差掃描熱量測定譜圖實質上與顯示於圖6中的示差掃描熱量測定譜圖相同。在某些實施例中，結晶多晶型具有如由示差掃描熱量測定法測出之約143℃的熔點初始值。在某些實施例中，結晶多晶型實質上無水。在某些實施例中，結晶多晶型實質上無溶劑。

在某些實施例中，組合物包含至少約75%之化合物，其呈現之示差掃描熱量測定譜圖實質上與顯示於圖6中的示差掃描熱量測定譜圖相同。在某些實施例中，結晶多晶型具有如由示差掃描熱量測定法測出之約143℃的熔點初始值。在某些實施例中，結晶多晶型實質上無水。在某些實施例中，結晶多晶型實質上無溶劑。

在某些實施例中，組合物含有至少約90%之化合物，其呈現之示差掃描熱量測定譜圖實質上與顯示於圖6中的示差掃描熱量測定譜圖相同。在某些實施例中，結晶多晶型具有如由示差掃描熱量測定法測出之約143℃的熔點初始值。在某些實施例中，結晶多晶型實質上無水。在某些實施例中，結晶多晶型實質上無溶劑。

在某些實施例中，組合物中的實質上所有化合物呈現之示差掃描熱量測定譜圖實質上與顯示於圖6中的示差掃描熱量測定譜圖相同。在某些實施例中，此結晶多晶型具有如由示差掃描熱量測定法測出之約143℃的熔點初始值。在某些實施例中，結晶多晶型實質上無水。在某些實施例中，結晶多晶型實質上無溶劑。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：多晶型之N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺，其係由包含結晶非晶形之N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺的步驟之方法製成。在某些實施例中，結晶步驟包含由乙酸乙酯與庚烷的混合物結晶，例如乙基乙酸酯與庚烷的混合物為約1-4份乙酸乙酯對約2-10份庚烷之比例，或更尤其為由約2份乙酸乙酯對約5份庚烷之比例。

在某些實施例中，醫藥組合物進一步包含至少一種醫藥學上可接受之載劑。在某些實施例中，醫藥組合物進一步包含佐劑、賦形劑及防腐劑、用於延遲吸收之劑、填充劑、黏合劑、吸附劑、緩衝劑、崩解劑、溶解劑、其他載劑、及其他惰性成份。

在某些實施例中，醫藥組合物進一步包含至少一種醫藥學上可接受之載劑。合宜的醫藥載劑包括惰性稀釋劑或填充劑、水及不同有機溶劑。

在某些實施例中，組合物包括填充劑或稀釋劑。在不同的實施例中，填充劑或稀釋劑選自微晶纖維素、矽化微晶纖維素、乳糖、甘露糖醇、可壓縮糖、磷酸鈣、硫酸鈣、碳酸鈣、矽酸鈣及澱粉。在其他實施例中，填充劑或稀釋劑為微晶纖維素。

在某些實施例中，組合物包括崩解劑。在不同的實施例中，崩解劑選自交聯羧甲纖維素鈉、乙醇酸澱粉鈉、交聯聚維酮、甲基纖維素、海藻酸、海藻酸鈉、澱粉衍生物、皂白石及矽酸鎂鋁(veegum)。在某些實施例中，崩解劑為交聯羧甲纖維素鈉。

在某些實施例中，組合物包括潤滑劑。在不同的實施例中，潤滑劑選自硬脂酸鎂、硬脂酸金屬鹽、滑石、硬脂醯反丁烯二酸鈉及硬脂酸。在某些實施例中，潤滑劑為硬脂酸鎂。

在某些實施例中，組合物包括濕潤劑或界面活性劑。在不同實施例中，濕潤劑或界面活性劑選自月桂基硫酸鈉、甘油、脫水山梨糖醇油酸酯、脫水山梨糖醇硬脂酸酯、聚氧基乙烯化脫水山梨糖醇月桂酸酯、棕櫚酸酯、硬脂酸酯、油酸酯或己酸酯(hexaolate)、聚氧乙烯硬脂醇及脫水山梨糖醇單月桂酸酯。在某些實施例中，濕潤劑或界面活性劑為月桂基硫酸鈉。

亦可加入其他賦形劑，諸如助滑劑、香料及著色劑。其他賦形劑可參閱：The Handbook of PharmaceuticalExcipients，5^th Edition，2005 and the FDA Inactive Ingedient Database。

在某些實施例中，組合物包含微晶纖維素。在某些實施例中，組合物包含交聯羧甲纖維素鈉。在某些實施例中，組合物包含月桂基硫酸鈉。在某些實施例中，組合物包含硬脂酸鎂。

在某些實施例中，組合物進一步包含至少一種選自微晶纖維素、矽化微晶纖維素、乳糖、可壓縮糖、木糖醇、山梨糖醇、甘露糖醇、預膠凝化澱粉、麥芽糊精、磷酸鈣、碳酸鈣、澱粉及矽酸鈣之填充劑。在某些實施例中，組合物進一步包含至少一種選自交聯羧甲纖維素鈉、乙醇酸澱粉鈉、交聯聚維酮、甲基纖維素、海藻酸、海藻酸鈉、澱粉衍生物、皂白石及矽酸鎂鋁之崩解劑。在某些實施例中，組合物進一步包含至少一種選自硬脂酸鎂、硬脂酸金屬鹽、滑石、硬脂醯反丁烯二酸鈉及硬脂酸之潤滑劑。在某些實施例中，組合物進一步包含至少一種選自月桂基硫酸鈉、甘油、脫水山梨糖醇油酸酯、脫水山梨糖醇硬脂酸酯、聚氧基乙烯化脫水山梨糖醇月桂酸酯、棕櫚酸酯、硬脂酸酯、油酸酯或己酸酯、聚氧乙烯硬脂醇及脫水山梨糖醇單月桂酸酯的濕潤劑或界面活性劑。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：約1mg下列結構之化合物：約222.2mg之微晶纖維素；約12.0mg之交聯羧甲纖維素鈉；約2.4mg之月桂基硫酸鈉；及約2.4mg之硬脂酸鎂。在某些實施例中，醫藥組合物包含：約10mg下列結構之化合物：約213.2mg之微晶纖維素；約12.0mg之交聯羧甲纖維素鈉；約2.4mg之月桂基硫酸鈉；及約2.4mg之硬脂酸鎂。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：約20mg下列結構之化合物：約203.2mg之微晶纖維素；約12.0mg之交聯羧甲纖維素鈉；約2.4mg之月桂基硫酸鈉；及約2.4mg之硬脂酸鎂。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：約40mg下列結構之化合物：約183.2mg之微晶纖維素；約12.0mg之交聯羧甲纖維素鈉；約2.4mg之月桂基硫酸鈉；及約2.4mg之硬脂酸鎂。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：約0.4wt%下列結構之化合物：；及約99.6wt%之醫藥學上可接受之載劑或媒劑。在某些實施例中，醫藥學上可接受之載劑或媒劑包含微晶纖維素。在某些實施例中，微晶纖維素為組合物重量的約92.6wt%。在某些實施例中，組合物進一步包含：約5wt%交聯羧甲纖維素鈉；約1wt%月桂基硫酸鈉；及約1wt%硬脂酸鎂。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：約4.2wt%下列結構之化合物：；及約95.8wt%之醫藥學上可接受之載劑或媒劑。在某些實施例中，醫藥學上可接受之載劑或媒劑包含微晶纖維素。在某些實施例中，微晶纖維素為組合物之約88.8wt%。在某些實施例中，組合物進一步包含：約5wt%交聯羧甲纖維素鈉；約1wt%之月桂基硫酸鈉；及約1wt%之硬脂酸鎂。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：約2wt%至約10wt%下列結構之化合物：；及約98wt%至約90wt%之醫藥學上可接受之載劑或媒劑。在某些實施例中，醫藥學上可接受之載劑或媒劑包含微晶維素。在某些實施例中，微晶纖維素為該組合物之約85wt%至約95wt%。在某些實施例中，組合物進一步包含：約1%至約6wt%之交聯羧甲纖維素鈉；約0.1%至約2wt%之月桂基硫酸鈉；及約0.25wt%至約1.5wt%之硬脂酸鎂。在某些實施例中，醫藥學上可接受之載劑或媒劑包含微晶纖維素。在某些實施例中，微晶纖維素為該組合物之約85wt%至約95wt%。在某些實施例中，組合物進一步包含：約1wt%至約6wt%之交聯羧甲纖維素鈉；及約0.25wt%至約1.5wt%之硬脂酸鎂。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：約1mg之下列結構之化合物：約222.2mg之微晶纖維素；約12.0mg之交聯羧甲纖維素鈉；約2.4mg之月桂基硫酸鈉；及約2.4mg之硬脂酸鎂。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：約10mg之下列結構之化合物：；約213.2mg之微晶纖維素；約12.0mg之交聯羧甲纖維素鈉；約2.4mg之月桂基硫酸鈉；及約2.4mg之硬脂酸鎂。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：約20mg之下列結構之化合物：黏；約203.2mg之微晶纖維素；約12.0mg之交聯羧甲纖維素鈉；約2.4mg之月桂基硫酸鈉；及約2.4mg之硬脂酸鎂。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：約40mg之下列結構之化合物：；約183.2mg之微晶纖維素；約12.0mg之交聯羧甲纖維素鈉；約2.4mg之月桂基硫酸鈉；及約2.4mg之硬脂酸鎂。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：約0.4wt%之下列結構之化合物：；及99.6wt%之醫藥學上可接受之載劑或媒劑。在某些實施例中，醫藥學上可接受之載劑或媒劑包含微晶纖維素。在某些實施例中，微晶纖維素為組合物之約92.6wt%。在某些實施例中，組合物進一步包含：約5wt%之交聯羧甲纖維素鈉；約1wt%之月桂基硫酸鈉；及約1wt%之硬脂酸鎂。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：約4.2wt%之下列結構之化合物：；及約95.8wt%之醫藥學上可接受之載劑或媒劑。在某些實施例中，醫藥學上可接受之載劑或媒劑包含微晶纖維素。在某些實施例中，微晶纖維素為組合物之約88.8wt%。在某些實施例中，組合物進一步包含：約5wt%之交聯羧甲纖維素鈉；約1wt%之月桂基硫酸鈉；及約1wt%之硬脂酸鎂。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：約2%至約10wt%之下列結構之化合物：；及約98wt%至約90wt%之醫藥學上可接受之載劑或媒劑。在某些實施例中，醫藥學上可接受之載劑或媒劑包含微晶纖維素。在某些實施例中，微晶纖維素為組合物之約85wt%至約95wt%。在某些實施例中，組合物進一步包含：約1wt%至約6wt%交聯羧甲纖維素鈉；約0.1wt%至約2wt%之月桂基硫酸鈉；及約0.25wt%至約1.5wt%之硬脂酸鎂。在某些實施例中，醫藥學上可接受之載劑或媒劑包含微晶纖維素。在某些實施例中，微晶纖維素為組合物之約85wt%至約95wt%。在某些實施例中，組合物進一步包含：約1wt%至約6wt%之交聯羧甲纖維素鈉；及約0.25wt%至約1.5wt%之硬脂酸鎂。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：約1mg之下列結構之化合物：約222.2mg之微晶纖維素；約12.0mg之交聯羧甲纖維素鈉；約2.4mg之月桂基硫酸鈉；及約2.4mg之硬脂酸鎂。

本發明亦係關於包含下列之組合物：約10mg之下列結構之化合物：約213.2mg之微晶纖維素；約12.0mg之交聯羧甲纖維素鈉；約2.4mg之月桂基硫酸鈉；及約2.4mg之硬脂酸鎂。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：約20mg之下列結構之化合物：約203.2mg之微晶纖維素；約12.0mg之交聯羧甲纖維素鈉；約2.4mg之月桂基硫酸鈉；及約2.4mg之硬脂酸鎂。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：約40mg之下列結構之化合物：約183.2mg之微晶纖維素；約12.0mg之交聯羧甲纖維素鈉；約2.4mg之月桂基硫酸鈉；及約2.4mg之硬脂酸鎂。

某些實施例中，醫藥組合物包含：約0.4wt%之下列結構之化合物：；及約99.6wt%之醫藥學上可接受之載劑或媒劑。在某些實施例中，醫藥學上可接受之載劑或媒劑包含微晶纖維素。在某些實施例中，微晶纖維素為組合物之約92.6wt%。在某些實施例中，組合物進一步包含：約5wt%之交聯羧甲纖維素鈉；約1wt%之月桂基硫酸鈉；及約1wt%之硬脂酸鎂。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：約4.2wt%之下列結構之化合物：；及約95.8wt%之醫藥學上可接受之載劑或媒劑。在某些實施例中，醫藥學上可接受之載劑或媒劑包含微晶纖維素。在某些實施例中，微晶纖維素為組合物之約88.8wt%。在某些實施例中，組合物進一步包含：約5wt%之交聯羧甲纖維素鈉；約1wt%之月桂基硫酸鈉；及約1wt%之硬脂酸鎂。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：約2wt%至約10wt%之下列結構之化合物：；及約98wt%至約90wt%之醫藥學上可接受之載劑或媒劑。在某些實施例中，醫藥學上可接受之載劑或媒劑包含微晶纖維素。在某些實施例中，微晶纖維素為組合物之約85wt%至約95wt%。在某些實施例中，組合物進一步包含：約1wt%至約6wt%之交聯羧甲纖維素鈉；約0.1wt%至約2wt%之月桂基硫酸鈉；及約0.25wt%約1.5wt%之硬脂酸鎂。在某些實施例中，醫藥學上可接受之載劑或媒劑包含微晶纖維素。在某些實施例中，微晶纖維素為組合物之約85wt%至約95wt%。在某些實施例中，組合物進一步包含：約1wt%至約6wt%之交聯羧甲纖維素鈉；及約0.25wt%約1.5wt%之硬脂酸鎂。

在某些實施例中，醫藥組合物包含：N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺之結晶多晶型A。在某些實施例中，醫藥組合物包含：N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺之結晶多晶型A，及至少一種醫藥學上可接受之載劑。

劑型

在某些實施例中，本發明揭露之組合物係調配用於口服。在某些實施例中，本發明揭露之組合物以錠劑、膠囊、丸劑、散劑、溶液、懸浮液、膠蓋、藥錠、小丸劑或珠粒形式投與。

在某些實施例中，本發明揭露之組合物係經由錠劑投與。在某些實施例中，錠劑包含惰性稀釋劑(例如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉)；粒化及崩解劑(例如交聯羧甲纖維素鈉、交聯聚維酮或乙醇酸澱粉鈉)；填充劑(例如微晶纖維素、矽化微晶纖維素、預膠凝化澱粉、乳糖、磷酸二鈣或可壓縮糖)；黏合劑(例如羥丙甲纖維素、聚維酮、澱粉、明膠、聚乙烯基吡咯烷酮或阿拉伯膠)；界面活性劑(例如月桂基硫酸鈉)及/或潤滑劑及加工助劑(例如，滑石、交聯羧甲纖維素鈉、玉米澱粉或海藻酸、硬脂酸鎂、硬脂酸、膠體二氧化矽及月桂基硫酸鈉)。在某些實施例中，錠劑進一步包含甜味劑、調味劑、著色劑及防腐劑。

在某些實施例中，錠劑包含檸檬酸、崩解劑(例如澱粉、海藻酸及特定複合矽酸鹽)及黏合劑(例如，蔗糖、明膠及阿拉伯膠)。

在某些實施例中，錠劑為未經塗覆或經塗覆的。在特定情況下，塗層會遮蔽組合物之味道。在特定情況下，塗層可改良在腸胃道中的崩解性及吸收作用。

在某些實施例中，本發明揭露之錠劑以任何合宜的方法製備。在某些實施例中，本發明揭露之錠劑以乾摻合方式製備。在某些實施例中，本發明揭露之化合物藉由與賦形劑乾摻合併接著壓製成錠劑形式而併入劑型中。在某些實施例中，壓製錠劑係藉由在任何合宜的機器中壓製諸如粉末或粒子的自由流動形式之活性成份而製備，其視情況與黏合劑、惰性稀釋劑或潤滑劑、界面活性或分散劑混合。

在某些實施例中，本發明揭露之錠劑以任何合宜的方法製備。在某些實施例中，本發明揭露之錠劑係以濕粒化作用製備。在某些實施例中，將本發明揭露之化合物加至乾賦形劑中並混合，然後加入黏合劑溶液，或將藥物溶解並以溶液形式添加作為粒化作用之一部份。在濕粒化技術中，若使用界面活性劑，則此界面活性劑加至乾賦形劑或加至黏合劑溶液中並併入溶液形式。

在某些實施例中，本文揭露之組合物係經由膠囊投與。在某些實施例中，膠囊為硬膠囊。在某些實施例中，活性成份與惰性固體稀釋劑混合，例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土。在某些實施例中，膠囊為軟膠囊。在某些實施例中，活性成份與水可溶載劑如聚乙二醇或油介質如花生油、液態石蠟或橄欖油混合。

在某些實施例中，本發明揭露之膠囊以任何合宜的方法製備。在某些實施例中，本文揭露之化合物係溶解於一材料中(例如高分子量聚乙二醇的熔融形式)，將其填充入硬明膠膠囊殼中，接著結合及密封。在某些實施例中，本文揭露之化合物係溶解於高分子量聚乙二醇中。在某些實施例中，冷卻此混合物並接著填充入明膠膠囊中。

在某些實施例中，組合物為膠囊或錠劑形式且具有約50mg至約1000mg之總重量。在某些實施例中，組合物為膠囊或錠劑形式且具有選自由50mg、75mg、100mg、150mg、200mg、250mg、300mg、350mg、400mg、450mg及500mg組成之群的總重量。在某些實施例中，組合物為膠囊或錠劑形式且具有之總重量為約240mg。

在某些實施例中，組合物為膠囊或錠劑形式且劑型包含約1至約50mg的本文揭露之化合物，其具有小於約15的含量均一性之USP可接受值。

在某些實施例中，本發明揭露之化合物以水性懸浮液形式投與。在某些實施例中，水性懸浮液包含甜味劑或調味劑、著色物質或染料且若需要包含乳化劑或懸浮劑，與稀釋劑，諸如水、乙醇、丙二醇、甘油或其組合。在某些實施例中，水性懸浮液包含懸浮劑。在某些實施例中，水性懸浮液包含羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯基吡咯烷酮、黃蓍膠及阿拉伯膠。在某些實施例中，水性懸浮液包含分散或濕潤劑。在某些實施例中，水性懸浮液包含天然產生之磷脂，例如卵磷脂，或環氧烷與脂肪酸之縮合產物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或環氧乙烷與長鏈脂族醇之縮合產物，例如十七伸乙基氧基鯨蠟醇，或環氧乙烷與由脂肪酸與己糖醇衍生之偏酯的縮合產物，例如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯，或環氧乙烷與由脂肪酸與己糖醇酐衍生之偏酯的縮合產物，例如聚乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。在某些實施例中，水性懸浮液包含防腐劑。在某些實施例中，水性懸浮液包含對羥基苯甲酸乙酯，或對羥基苯甲酸正丙酯。在某些實施例中，水性懸浮液包含甜化劑。在某些實施例中，水性懸浮液包含蔗糖、糖精或阿斯巴甜。

在某些實施例中，本發明揭露之化合物以油性懸浮液形式投與。在某些實施例中，藉由使活性成份懸浮於植物油(例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)，或懸浮於礦物油(例如，液態石蠟)中而調配油性懸浮液。在某些實施例中，油性懸浮液包含增稠劑(例如，蜂臘、硬石臘或十六醇)。在某些實施例中，油性懸浮液包含如前文說明的甜味劑。在某些實施例中，油性懸浮液包含抗氧化劑(例如，丁基化羥基苯甲醚或α-生育酚)。

在某些實施例中，本文揭露之組合物經調配用於非經腸注射(例如，經由注射或灌注，包括動脈內、心內、皮內、十二指腸內、髓內、肌肉內、骨內、腹膜內、鞘內、血管內、靜脈內、玻璃體內、硬膜外及皮下)。在某些實施例中，本文揭露之組合物以滅菌溶液、懸浮液或乳液形式投與。

在某些實施例中，用於非經腸投與之調配物包括活性化合物之水性及非水性(油性)滅菌注射溶液，其可包含抗氧化劑、緩衝劑、抑菌劑及使調配物與欲接受者之血液等張的溶質；及可包括懸浮劑及增稠劑的水性與非水性滅菌懸浮液。在某些實施例中，用於非經腸投與之調配物包括合宜的安定劑或可增加化合物之溶解度以使得可製備高濃溶液之藥劑。

在某些實施例中，本發明揭露之化合物以水性懸浮液形式投與。在某些實施例中，水性懸浮液包含水、林格氏溶液(Ringer's solution)或等張氯化鈉溶液。

在某些實施例中，本文揭露之化合物以水中油微乳液形式投與，其中該活性成份溶解於油相中。在某些實施例中，本文揭露之化合物溶解於諸如芝麻油之脂肪油中，或諸如油酸乙酯或三酸甘油酯之合成脂肪酸酯，或脂質體中。在某些實施例中，本文揭露之化合物溶解於大豆油與卵磷脂的混合物中。在某些實施例中，此油溶液係引入水與甘油之混合物中並加工形成微乳液。

在某些實施例中，經調配用於非經腸投與的組合物以單次快速注射形式投與。在某些實施例中，經調配用於非經腸投與的組合物以連續靜脈內遞送裝置投與(例如，Deltec CADD-PLUS^TM 型5400靜脈內泵)。

在某些實施例中，用於注射之調配物以單位劑型與添加的防腐劑一起例如存在於安瓿或多劑量容器中。在某些實施例中，用於注射之調配物以粉末形式或以使用前僅需立即加入滅菌液態載劑例如鹽水或滅菌無熱原水的凍乾(冷凍乾燥)狀態儲存。

在某些實施例中，本文揭露之調配物以儲槽製劑投與。在某些實施例中，儲槽製劑經由植入(例如皮下或肌肉內)或經肌肉注射而投與。

在某些實施例中，本文揭露之組合物經調配用於局部投與。如本文所述，局部投與意指組合物的施用可使該化合物不會顯著進入血流中。在某些實施例中，本文揭露之組合物可施用於表皮、頰腔、耳、眼及/或鼻。

在某些實施例中，經調配用於局部投與之組合物以凝膠、擦劑、洗劑、乳霜、軟膏或糊劑、溶液、懸浮液、乳液或粉末形式調配。在某些實施例中，本文揭露之組合物以軟膏或乳霜形式投與。在某些實施例中，本文揭露之組合物以漱口劑形式投與。在某些實施例中，本文揭露之組合物經由吸入投與。

在某些實施例中，經調配用於經由吸入投與之組合物由吹入器、噴霧器、加壓包裝或其他宜遞送霧劑噴霧之裝置遞送。加壓包裝可包含合宜的推進劑，諸如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合宜的氣體。在加壓氣霧劑的狀況下，劑量單位係藉由提供一閥以遞送計量用量來確定。或者，對於吸人或吹入式投與，醫藥製劑可採取乾粉末組合物之形式，例如化合物與合宜之粉末基質(如乳糖或澱粉)的粉末混合物。粉末組合物以單位劑型存在於例如膠囊、濾筒、明膠或發泡包裝中，以藉助於吸入器或吹入器由其中投與粉末。對於面頰或舌下投與，組合物可採取以習知方式調配的錠劑、口含錠、片劑或凝膠形式。該等組合物可包含在調味基質中的活性成份，調味基質如蔗糖與阿拉伯膠或黃蓍膠。

在某些實施例中，本文揭露之組合物經調配用於直腸投與。在某些實施例中，本文揭露之組合物以栓劑形式投與。在某些實施例中，合宜用於直腸投與的組合物係藉由將本文揭露之化合物與合宜非刺激性賦形劑混合而製得，該賦形劑在常溫下為固體但在直腸溫度下為液體，且因此可在直腸中溶解以釋出藥物。在某些實施例中，合宜用於直腸投與的組合物係藉由將本文揭露之化合物與可可脂、甘油化明膠、氫化植物油、不同分子量之聚乙二醇混合物或聚乙二醇之脂肪酸酯混合而製備。

製備多種醫藥組合物之方法參閱Remington's Pharmaceutical Sciences，Mack Publishing Company，Ester，Pa.，第18版(1990)。

在某些實施例中，使用U.S. Pharmacopeia(USP)Apparatus II在50rpm下，以水中之1%月桂基硫酸鈉為溶解介質，劑型在30分鐘內釋出至少60百分比的藥物。在某些實施例中，使用U.S. Pharmacopeia(USP)Apparatus II在50rpm下，以水中之1%月桂基硫酸鈉為溶解介質，劑型在30分鐘內釋出至少60-100百分比的藥。在某些實施例中，使用U.S. Pharmacopeia(USP)Apparatus II在50rpm下，以水中之1%月桂基硫酸鈉為溶解介質，劑型在30分鐘內釋出至少60-90百分比的藥。在某些實施例中，使用U.S. Pharmacopeia(USP)Apparatus II在50rpm下，以水中之1%月桂基硫酸鈉為溶解介質，劑型在30分鐘內釋出至少60-80百分比的藥。

劑量

醫藥組合物之投與量首先依被治療的哺乳動物而定。在醫藥組合物投與人類個體的情況下，日劑量通常由處方醫師判定，其中劑量一般依個體之年齡、性別、飲食、重量、一般健康狀況及反應、個體症狀之嚴重性、處理之明確適應症或狀況、處理之適應症或狀況的嚴重性、投與時間、投與途徑、組合物之素因、排泄率、藥組合及處方醫師之判斷而變化。

在某些實施例中，劑量介於約0.001至約1000毫克/公斤體重/天間。在某些實施例中，本文揭露之化合物的量在約0.5至約50毫克/公斤/天範圍內。在某些實施例中，本文揭露之化合物的量為約0.001至約7g/天。在某些實施例中，本文揭露之化合物的量為約0.01至約7g/天。在某些實施例中，本文揭露之化合物的量為約0.02至約5g/天。在某些實施例中，本文揭露之化合物的量為約0.05至約2.5g/天。在某些實施例中，本文揭露之化合物的量為約0.1至約1g/天。

在某些實施例中，本文揭露之化合物的量以單一劑量每天投與一次。在某些實施例中，本文揭露之化合物的量以多個劑量每天投與一次以上。在某些實施例中，本文揭露之化合物的量以每天兩次投與。在某些實施例中，本文揭露之化合物的量以每天三次投與。在某些實施例中，本文揭露之化合物的量以每天四次投與。在某些實施例中，本文揭露之化合物的量以每天多於四次投與。

雖然在其他情況下仍使用較大劑量而未引起任何有害的副作用，但在某些情況下低於前文述及範圍之下限的劑量為更適當，其藉由將此較大劑量分為數個小劑量以在一天中投與來進行。投與量可視所用化合物之特定IC₅₀ 值而改變。在化合物不是單一治療的組合應用中，可投與較少量之化合物而仍具有治療或預防效果。

IX.組合治療

在某些實施例中，本文揭露之化合物與第二治療劑組合投與。在某些實施例中，本文揭露之化合物與手術及/或放射療法組合投與。

在某些實施例中，第二治療劑選自細胞抑制劑抑制劑、抗血管生成劑及抗腫瘤劑。在某些實施例中，第二治療劑選自烷化劑、抗代謝物、差向鬼臼毒素(epidophyllotoxins)；抗腫瘤酶、拓撲異構酶抑制劑(topoisomerase inhibitor)、丙卡巴肼(procarbazines)、米托蒽醌(mitoxantrones)、鉑配位複合物、生物反應修飾劑及生長抑制劑、荷爾蒙/抗荷爾蒙治療劑、造血生長因子、芳香酶抑制劑、抗雌性激素、抗雄性激素、皮質類固醇、性腺釋素促效劑、微管活化劑，亞硝基脲、脂質或蛋白質激酶標靶劑、IMiDs、蛋白質或脂質磷酸酶標靶劑、抗血管生成劑、Akt抑制劑、IGF-I抑制劑、FGF3調節子、mTOR抑制劑、Smac模擬肽(Smac mimetics)、HDAC抑制劑、誘發細胞分化的試劑、緩激肽(bradykinin)1受體拮抗劑、血管緊縮素II拮抗劑、環加氧酶抑制劑、乙醯肝素酶(heparanase)抑制劑、淋巴介質抑制劑、細胞激素抑制劑、IKK抑制劑、P38MAPK抑制劑、HSP90抑制劑、多激酶抑制劑、雙膦酸鹽、雷帕黴素(rapamycin)衍生物、抗凋亡途徑抑制劑、凋亡途徑促效劑、PPAR促效劑、RAR促效劑、Ras同功異構脢抑制劑、端粒脢抑制劑、蛋白酶抑制劑、金屬蛋白脢抑制劑、胺基肽酶抑制劑、SHIP活化子-AQX-MN100、Humax-CD20(ofatumumab)、CD20拮抗劑、IL2-白喉毒素融合物或其組合。

在某些實施例中，第二治療劑選自ARRY-797、達卡巴嗪(dacarbazine)(DTIC)、放線菌素C₂ 、C₃ 、D、及F₁ 、環磷醯胺、美法侖(melphalan)、雌莫司汀(estramustine)、馬坦辛諾(maytansinol)、利福黴素(rifamycin)、曲張鏈絲菌素(streptovaricin)、小紅莓(doxorubicin)、道諾黴素(daunorubicin)、表柔比星(epirubicin)、黃膽素(idarubicin)、地托比星(detorubicin)、洋紅黴素(carminomycin)、黃膽素(idarubicin)、表柔比星(epirubicin)、依索比星(esorubicin)、米托蒽醌(mitoxantrone)、博來黴素(bleomycins)A、A₂ 、及B、喜樹鹼、伊力替康(Irinotecan)、拓撲替康(Topotecan)、9-胺基喜樹鹼、10,11-亞甲基二氧基喜樹鹼、9-硝基喜樹鹼、波替單抗(bortezomib)、替莫唑胺(temozolomide)、TAS103、NPI0052、康比利史坦丁(combretastatin)、康比利史坦丁A-2、康比利史坦丁A-4、卡奇黴素(calicheamicins)、新製癌菌素(neocarcinostatins)、埃博黴素A、B、C(epothilones A、B、C)及半合成變異體、賀賽汀(Herceptin)、美羅華(Rituxan)、CD40抗體、天門冬醯胺酶(asparaginase)、介白素(interleukins)、干擾素、柳培林(leuprolide)、及培門冬酶(pegaspargase)、5-氟尿嘧啶、氟去氧尿苷、普脫拉弗(ptorafur)、5'-去氧氟脲啶、UFT、MITC、S-1卡培他濱(capecitabine)、二乙基己烯雌酚、他莫西芬(Tamoxifen)、多侖美凡(toremefine)、多莫迪斯(tolmudex)、噻米克(thymitaq)、福特醯胺(flutamide)、氟羥甲基睪酮、比卡魯胺(bicalutamide)、非那雄安(finasteride)、雌二醇、曲沃昔芬(trioxifene)、地塞米松(dexamethasone)、醋酸亮丙瑞林(leuproelinacetate)、雌莫司汀(estramustine)、屈洛昔芬(droloxifene)、甲羥黃體酮(medroxyprogesterone)、甲地孕酮乙酸酯(megesterol acetate)、胺基格洛亞胺(aminoglutethimide)、睪內酯(testolactone)、睪固酮、己烯雌酚(diethylstilbestrol)、羥基助孕酮、絲裂黴素(mitomycins)A、B及C、甲基絲裂黴素(porfiromycin)、順鉑(cisplatin)、卡鉑(carboplatin)、奧沙利鉑(oxaliplatin)、四氯環己鉑(tetraplatin)、鉑-DACH、奧馬鉑(ormaplatin)、沙立度胺(thalidomide)、來那度胺(lenalidomide)、CI-973、特羅美沙丁(telomestatin)、CHIR258、Rad001、SAHA、土巴辛(Tubacin)、17-AAG、索拉非尼(sorafenib)、JM-216、鬼臼毒素(podophyllotoxin)、差向鬼臼毒素(epipodophyllotoxin)、依託泊苷(etoposide)、替尼泊苷(teniposide)、得舒緩(Tarceva)、依拉沙(Iressa)、伊馬替尼(Imatinib)、米特弗辛(Miltefosine)、沛利弗辛(Perifosine)、胺基蝶呤(aminopterin)、甲胺蝶呤(methotrexate)、胺甲蝶呤(methopterin)、二氯甲胺蝶呤(methotrexate)、6-巰嘌呤、硫鳥嘌呤、阿沙土歐林(zattuoprine)、別嘌呤醇、克拉屈濱(cladribine)、氟達拉濱(fludarabine)、噴司他丁(pentostatin)、2-氯甲胺喋呤、去氧胞苷、阿糖胞苷(cytosine arabinoside)、阿拉伯胞嘧啶糖苷(cytarabine)、阿紮胞苷(azacitidine)、5-氮雜胞嘧啶(azacytosine)、真西他平(gencitabine)、5-氮雜胞嘧啶(azacytosine)-阿糖胞苷(arabinoside)、長春新鹼(vincristine)、長春花鹼(vinblastine)、長春瑞濱(vinorelbine)、環氧長春鹼(leurosine)、異長春鹼(leurosidine)及長春地辛(vindesine)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)、紫杉德(taxotere)及多西紫杉醇(docetaxel)。

在某些實施例中，第二治療劑為選自皮質類固醇、非類固醇抗發炎劑、肌肉鬆弛劑及其與其他藥劑的組合、麻醉藥及其與其他藥劑的組合、祛痰藥及其與其他藥劑的組合、抗憂鬱劑、抗抽搐藥及其組合；抗高血壓藥、類鴉片、局部類大麻酚、辣椒素(capsaicin)、二丙酸倍他米松(betamethasone dipropionate)(增強及未增強)、戊酸倍他米松(betamethasone valerate)、丙酸氯倍他索(clobetasol propionate)、強體松(prednisone)、甲基潑尼龍(prednisolone)、二乙酸二氟拉松(diflorasone diacetate)、丙酸鹵代貝他松(halobetasol propionate)、安西奈德(amcinonide)、地塞米松(dexamethasone)、得辛美沙酮(dexosimethasone)、丙酮化氟新龍(fluocinolone acetononide)、氟新諾龍酯(fluocinonide)、氯氟松(halocinonide)、特戊酸可卡他酮(clocortalone pivalate)、得辛美他酮(dexosimetasone)、氟氫縮松(flurandrenalide)、水楊酸、異布洛芬(ibuprofen)、酮基布洛芬(ketoprofen)、依託度酸(etodolac)、雙氯芬酸(diclofenac)、美洛芬鈉(meclofenamate sodium)、萘普生(naproxen)、吡羅昔康(piroxicam)、塞來昔布(celecoxib)、環苯紮平(cyclobenzaprine)、氯苯胺丁酸(baclofen)、環苯紮平/利多卡因(lidocaine)、氯苯胺丁酸/環苯紮平、環苯紮平/利多卡因/酮基布洛芬、利多卡因、利多卡因/去氧-D-葡萄糖、丙胺卡因(prilocaine)、EMLA乳霜(局部麻醉藥(利多卡因2.5%及丙胺卡因2.5%)之共熔混合物)、哌芬那辛(guaifenesin)、哌芬那辛/酮基布洛芬/環苯紮平、阿米替林(amitryptiline)、多慮平(doxepin)、地昔帕明(desipramine)、丙咪嗪(imipramine)、阿莫沙平(amoxapine)、氯米帕明(clomipramine)、去甲替林(nortriptyline)、普羅替林(protriptyline)、杜洛西汀(duloxetine)、米塔卓平(mirtazepine)、尼索西汀(nisoxetine)、馬普替林(maprotiline)、瑞波西汀(reboxetine)、氟希定(fluoxetine)、氟伏沙明(fluvoxamine)、卡巴氮平(carbamazepine)、非爾氨酯(felbamate)、拉莫三嗪(lamotrigine)、托吡酯(topiramate)、噻加賓(tiagabine)、奧卡西平(oxcarbazepine)、卡馬西平(carbamezipine)、唑尼沙胺(zonisamide)、美西律(mexiletine)、加巴噴丁(gabapentin)/可樂定(clonidine)、加巴噴丁/卡巴氮平(carbamazepine)、卡巴氮平/環苯紮平、抗高血壓藥包括可樂定、可待因(codeine)、洛哌丁胺(loperamide)、曲馬多(tramadol)、嗎啡、芬太尼(fentanyl)、羥可酮(oxycodone)、氫可酮(hydrocodone)、左啡諾(levorphanol)、布托啡諾(butorphanol)、薄荷腦、冬青油、樟腦、桉樹油、松節油；CB1/CB2配位子、乙醯胺苯酚、英利昔單抗(infliximab)、一氧化氮合成酶抑制劑，特別是可誘發一氧化氮合成酶的抑制劑、PDE4抑制劑-相似於異丁司特(Ibudilast)(AV-411)之機制、CDC-801、JNK抑制劑-CC-401、組合TNF/PDE4抑制劑-CDC-998、IL1拮抗劑，例如安那卡拉-金瑞特(Anakinra-Kineret)、AMG108、標靶IL-1之(mAb)、SHIP活化子-AQX-MN100、C5拮抗劑、C5a抑制劑、比西林卓默(Pexelizumab)、嘧啶合成抑制劑、淋巴介質抑制劑、細胞激素抑制劑、IKK抑制劑、P38MAPK抑制劑、ARRY-797、HSP90抑制劑、多激酶抑制劑、雙膦酸鹽、PPAR促效劑、Cox1及cox2抑制劑、抗CD4療法、B-細胞抑制劑、COX/LOX雙重抑制劑、免疫抑止劑、iNOS抑制劑、非類固醇抗炎藥(NSAIDs)、sPLA2抑制劑、秋水仙素、別嘌呤醇、奧昔嘌醇(oxypurinol)、金(Gold)、瑞度拉(Ridaura)-金諾芬(Auranofin)、菲巴斯塔(febuxostat)、普林卡斯(Puricase)、PEG-優林卡斯(PEG-uricase)調配物、苯溴馬隆(Benzbromarone)、長效β-2促效劑(LABAs)、沙美特羅(salmeterol)(Serevent Diskus)及福莫特羅(formoterol)(Foradil)、白三烯改質劑包括孟魯司特(montelukast)(Singulair)及紮魯司特(zafirlukast)(Accolate)。吸入色甘酸(cromolyn)(Intal)或奈多羅米(nedocromil)(Tilade)、茶鹼。短效β-2促效劑、異丙托銨(Ipratropium)(Atrovent)、免疫療法-(過敏-減敏注射)、抗IgE單株抗體-賽洛耳(Xolair)、一般DMARD包括羥基氯喹林(Plaquenil)、金化合物-金諾芬(Auranofin)(瑞度拉)、柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine)(Azulfidine)、二甲胺四環素(minocycline)(Dynacin、Minocin)及甲胺喋呤(Rheumatrex)、來氟米特(leflunomide)(Arava)、硫唑嘌呤(azathioprine)(Imuran)、環孢黴素(Neoral、Sandimmune)及環磷醯胺(Cytoxan)、抗生素、CD80拮抗劑、共刺激因子拮抗劑、Humax-CD20(ofatumumab)；CD20拮抗劑、MEK抑制劑、NFκB抑制劑、抗B細胞抗體、單諾默(denosumab)、特異性標靶核因子κB配位子之受體活化子(RANKL)的mAb。IL17去活抗體、IL-17受體拮抗劑/抑制劑、CTLA抑制劑、CD20抑制劑、可溶性VEGFR-1受體、抗VEGFR-1受體抗體、抗VEGF抗體、整合素受體拮抗劑、選擇素抑制劑、P-選擇素及E-選擇素抑制劑、磷脂酶A2抑制劑、脂肪加氧脢抑制劑、RANKL及RANK拮抗劑/抗體、骨保護素拮抗劑、淋巴毒素抑制劑、B-淋巴細胞刺激子、MCP-1抑制劑、MIF抑制劑、CD2、CD3、CD4、CD25、CD40及CD40配位子CD152(CTLA4)之抑制劑、大環內酯(Macrolide)免疫抑制劑、核苷酸代謝的選擇性抑制劑、趨化性抑制劑、CXC受體及CXC配位子抑制劑、趨化因子(Chemokine)拮抗劑、白血球趨化性抑制劑、黏合分子阻斷劑、選擇素淋巴細胞功能抗原-1(LFA-1、CD11a)拮抗劑、極遲抗原-4(VLA-4)拮抗劑、基質金屬蛋白酶抑制劑、彈性蛋白酶抑制劑、組織蛋白酶抑制劑。

在某些實施例中，第二治療劑選自β-阻斷劑、碳酸酐酶抑制劑、α-及β-腎上腺素拮抗劑包括α1-腎上腺素拮抗劑、α2促效劑、縮瞳藥、前列腺類似物、皮質類固醇及免疫抑止劑。在某些實施例中，第二治療劑選自堤莫洛(timolol)、倍他洛爾(betaxolol)、左倍他洛爾(levobetaxolol)、卡替洛爾(carteolol)、左布諾洛爾(levobunolol)、普萘洛爾(propranolol)、布林佐胺(brinzolamide)、杜塞醯胺(dorzolamide)、尼普洛爾(nipradilol)、艾歐比啶(iopidine)、溴莫尼定(brimonidine)、毛果芸香鹼(pilocarpine)、腎上腺素、拉坦前列素(latanoprost)、曲伏前列素(travoprost)、比馬前列素(bimatoprost)、烏諾前列酮(unoprostone)、地塞米松、強體松、甲基潑尼龍、硫唑嘌呤、環孢黴素及免疫球蛋白。

在某些實施例中，第二治療劑選自皮質類固醇、免疫抑止劑、前列腺類似物及抗代謝物。在某些實施例中，第二治療劑選自地塞米松、強體松、甲基潑尼龍、硫唑嘌呤、環孢黴素、免疫球蛋白、拉坦前列素(latanoprost)、曲伏前列素(travoprost)、比馬前列素(bimatoprost)、烏諾前列酮(unoprostone)、英利昔單抗、利妥昔單抗(rutuximab)、甲胺喋呤(methotrexate)、非類固醇抗發炎劑、肌肉鬆弛劑及其與其他藥劑的組合、麻醉藥及其與其他藥劑的組合、祛痰藥及其與其他藥劑的組合、抗憂鬱劑、抗抽搐藥及其組合；抗高血壓藥、類鴉片、局部類大麻酚、及其他藥劑，諸如辣椒素、二丙酸倍他米松(增強及未增強)、戊酸倍他米松、丙酸氯倍他索、強體松、甲基潑尼龍、二乙酸二氟拉松、丙酸鹵代貝他松、安西奈德、地塞米松、得辛美沙酮、丙酮化氟新龍、氟新諾龍酯、氯氟松、特戊酸可卡他酮、得辛美他酮、氟氫縮松、水楊酸、異布洛芬、酮基布洛芬、依託度酸、雙氯芬酸、美洛芬鈉、萘普生、吡羅昔康、塞來昔布、環苯紮平、巴克樂芬、環苯紮平/利多卡因、巴克樂芬/環苯紮平、環苯紮平/利多卡因/酮基布洛芬、利多卡因、利多卡因/去氧-D-葡萄糖、丙胺卡因、EMLA乳霜(局部麻醉藥(利多卡因2.5%及丙胺卡因(prilocaine)2.5%)之共熔混合物)、哌芬那辛、哌芬那辛/酮基布洛芬/環苯紮平、阿米替林、多慮平、地昔帕明、丙咪嗪、阿莫沙平、氯米帕明、去甲替林、普羅替林、杜洛西汀、米塔卓平、尼索西汀、馬普替林、瑞波西汀、氟希定、氟伏沙明、卡巴氮平、非爾氨酯、拉莫三嗪、托吡酯、噻加賓、奧卡西平、卡馬西平、唑尼沙胺、美西律、加巴噴丁/可樂定、加巴噴丁/卡巴氮平、卡巴氮平/環苯紮平、抗高血壓藥包括可樂定、可待因、洛哌丁胺、曲馬多、嗎啡、芬太尼、羥可酮、氫可酮、左啡諾、布托啡諾、薄荷腦、冬青油、樟腦、桉樹油、松節油；CB1/CB2配位子、乙醯胺苯酚、英利昔單抗、一氧化氮合成酶抑制劑，特別是可誘發一氧化氮合成酶的抑制劑；及其他藥劑，諸如辣椒素。PDE4抑制劑-相似於異丁司特(Ibudilast)(AV-411)之機制、CDC-801、JNK抑制劑-CC-401、組合TNF/PDE4抑制劑-CDC-998、IL1拮抗劑例如安那卡拉-金瑞特(Anakinra-Kineret)、AMG108、標靶IL-1之(mAb)、SHIP活化子-AQX-MN100、C5拮抗劑、C5a抑制劑、比西林卓默(Pexelizumab)、嘧啶合成抑制劑、淋巴介質抑制劑、細胞激素抑制劑、IKK抑制劑、P38MAPK抑制劑、ARRY-797、HSP90抑制劑、多激酶抑制劑、雙膦酸鹽、PPAR促效劑、Cox1及cox2抑制劑、抗CD4療法、B-細胞抑制劑、COX/LOX雙重抑制劑、免疫抑止劑、iNOS抑制劑、NSAID、sPLA2抑制劑、秋水仙素、別嘌呤醇、奧昔嘌醇(oxypurinol)、金、瑞度拉-金諾芬、菲巴斯塔(febuxostat)、普林卡斯(Puricase)、PE G-優林卡斯(PEG-uricase)調配物、苯溴馬隆、長效β-2促效劑(LABAs)、沙美特羅(Serevent Diskus)及福莫特羅(Foradil)、白三烯改質劑包括孟魯司特(Singulair)及紮魯司特(Accolate)。吸入色甘酸(Intal)或奈多羅米(Tilade)、茶鹼。短效β-2促效劑、異丙托銨(Atrovent)、免疫療法-(過敏-減敏注射)、抗IgE單株抗體-賽洛耳、一般DMARD包括羥基氯喹林(Plaquenil)、金化合物-金諾芬(瑞度拉)、柳氮磺胺吡啶(Azulfidine)、二甲胺四環素(Dynacin、Minocin)及甲胺喋呤(Rheumatrex)、來氟米特(Arava)、硫唑嘌呤(Imuran)、環孢黴素(Neoral、Sandimmune)及環磷醯胺(Cytoxan)、抗生素、CD80拮抗劑、共刺激因子拮抗劑、Humax-CD20(ofatumumab)；CD20拮抗劑、MEK抑制劑、NFκB抑制劑、抗B細胞抗體、單諾默、特異性標靶核因子κB配位子之受體活化子(RANKL)的mAb，IL17去活抗體、IL-17受體拮抗劑/抑制劑、CTLA抑制劑、CD20抑制劑、可溶性VEGFR-1受體、抗VEGFR-1受體抗體、抗VEGF抗體、整合素受體拮抗劑、選擇素抑制劑、P-選擇素及E-選擇素抑制劑、磷脂酶A2抑制劑、脂肪加氧脢抑制劑、RANKL及RANK拮抗劑/抗體、骨保護素拮抗劑、淋巴毒素抑制劑、B-淋巴細胞刺激子、MCP-1抑制劑、MIF抑制劑、CD2、CD3、CD4、CD25、CD40及CD40配位子CD152(CTLA4)之抑制劑、大環內酯(Macrolide)免疫抑制劑、核苷酸代謝的選擇性抑制劑、趨化性抑制劑、CXC受體及CXC配位子抑制劑、趨化因子拮抗劑、白血球趨化性抑制劑、黏合分子阻斷劑、選擇素淋巴細胞功能抗原-1(LFA-1、CD11a)拮抗劑、極遲抗原-4(VLA-4)拮抗劑、基質金屬蛋白酶抑制劑、彈性蛋白酶抑制劑、組織蛋白酶抑制劑。

在某些實施例中，第二治療劑選自胰島素、胰島素衍生物及模擬肽、胰島素促泌素、胰島素增敏劑、雙胍劑、α-葡萄糖苷酶抑制劑、促胰島素磺醯基脲受體配位子、蛋白質酪胺酸磷酸酶-1B(PTP-1B)抑制劑、GSK3(肝醣合成酶激酶-3)抑制劑、GLP-1(似升糖素胜肽-1)、GLP-1類似物、DPPIV(二肽基肽酶IV)抑制劑、RXR配位子鈉依賴性葡萄糖共轉運體抑制劑、肝醣磷酸化酶A抑制劑、AGE斷裂子、PPAR調節子、LXR及FXR調節子、非噻唑二酮型(non-glitazone type)PPARS促效劑、選擇性糖皮質素拮抗劑、二甲雙胍(metformin)、格列甲嗪(Glipizide)、甘布若(glyburide)、瑪爾胰(Amaryl)、美格替耐(meglitinides)、那格列奈(nateglinide)、瑞格列奈(repaglinide)、PT-112、SB_- 517955、SB4195052、SB-216763、NN-57-05441、NN-57-05445、GW-0791、AGN-.sup.194.sup.204、T-1095、BAY R3401、醣祿(acarbose)Exendin-4、DPP728、LAF237、維達列汀(vildagliptin)、MK-0431、沙格列汀(saxagliptin)、GSK23A、吡格列酮(pioglitazone)、羅格列酮(rosiglitazone)、述於專利申請案WO03/043985如實例4之化合物l9的(R)-1-{4-[5-甲基-2-(4-三氟甲基-苯基)-噁唑-4-基甲氧基]-苯磺醯基}2,3-二氫-1H-吲哚-2-羧酸與GI-262570。

套組

本文所述之化合物、組合物及方法提供用於治療病症之套組，如在本文中所述之病症。此些套組包含於容器中之本文所描述之化合物、多種化合物或組合物，且視情況包含教示依本文所述之不同方法及方式使用該套組的說明書。該等套組亦可包含資訊，如科學文獻參考資料、包裝插頁材料、臨床實驗結果及/或此些咨訊的概述及其類似物，其指示或建立該組合物之活性及/或優點，及/或描述其給藥、投與、副作用、藥物交互作用或健康照護提供者可用的其他資訊。此資訊為基於多種研究的結果，例如使用有關實驗動物之活體內模型的研究及基於人類臨床實驗的研究。本文描述之套組係提供、行銷及/或推展至健康照護提供者，包括醫師、護士、藥師、調劑師(formulary official)及其類似者。且，在某些實施例中，套組可直接銷售給消費者。

實例 合成磺醯胺之通用例示性程序

程序A： 向胺(1eq)於無水二氯甲烷(3mL/mmol)中之溶液中添加無水三乙胺(5eq)。向此溶液中添加磺醯氯(1eq)且在室溫下攪拌此溶液16小時。蒸發溶劑且以急驟管柱層析法在二氧化矽上純化殘餘物。

程序B： 向胺(1eq)於無水吡啶(5ml/mmol)中之經攪拌溶液中添加磺醯氯(1-5eq)。在40℃下攪拌此反應混合物48小時。使此反應混合物在水與EtOAc之間分溶。將有機層以鹽水洗滌，乾燥(MgSO₄ )並在減壓下濃縮。以急驟管柱層析法在二氧化矽上純化殘餘物。

程序C(碘原子之取代)：在微波反應器中於115℃下加熱含有1eq.芳基碘、1.5當量酸或酸酯、0.25eq. PdCl₂ (dppf)‧DCM與10eq.無水K₂ CO₃ 粉末於二噁烷與水之經去氧混合物(3 1)中的懸浮液60分鐘。使用含水NH₄ Cl/THF對其進行萃取，且使用Na₂ SO₄ 乾燥有機部分。使用急驟管柱層析法(Si，EtOAc/己烷或CHCl₃ /MeOH)純化粗反應產物。產率20-40%。

程序D (N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)苯基)-2-(烷基胺基)乙烷磺醯胺之合成)：將2-氯-乙烷磺醯氯(0.1ml，1mmol)加至5,6-二氟-N ¹ -(2-氟-4-碘苯基)苯-1,2-二胺(0.364g，1mmol)與三乙胺(0.28ml，2mmol)於CH₂ Cl₂ (5ml)中之溶液中且在室溫下攪拌此反應混合物16小時。接著，將其以呈溶液或純淨液體形式之過量胺(10eq)處理。在室溫下再攪拌此反應混合物6小時。以CH₂ Cl₂ (10ml)及水(10ml)稀釋此反應混合物。相繼以稀HCl(2×20ml，2N)及飽和NaHCO₃ (2×10ml)溶液洗滌有機層。接著，乾燥(MgSO₄ )此CH₂ Cl₂ 層並蒸發以獲得粗產物。在製備型HPLC條件下純化此不純產物以獲得純產物(產率50-60%)。

實例1：N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺

步驟A：環丙烷磺酸丁酯

將環丙烷磺醯氯(5g，35mmol，1eq)溶解於過量BuOH(20ml)中，在-10℃下使此反應混合物冷卻並緩慢逐滴添加吡啶(5.8mL，70mmol，2eq)。在室溫下緩慢溫熱此混合物並攪拌過夜。在減壓下移除溶劑且將所得白色固體溶解於CHCl₃ 中。以水、鹽水洗滌此有機相並乾燥(MgSO₄ )且濃縮，得到一油狀物(4.8g，24.9mmol，71%)。¹ H NMR(300MHz，CDCl₃ )δ4.25(t，2H)，2.46(m，1H)，1.74(m，2H)，1.45(m，2H)，1.25(dd，2H)，1.09(dd，2H)，0.93(t，3H)。

步驟B：1-烯丙基環丙烷-1-磺酸丁酯

於氮氣氛圍下在-78℃下向環丙烷磺酸1-丁酯(4.8g，24.9mmol)於THF中之溶液中同時添加丁基鋰溶液(15.6m1，24.9mmol，1.6M，THF)及烯丙基碘(24.9mmol)。在-78℃下攪拌此反應混合物2小時並在室溫攪拌3小時。在減壓下蒸發掉揮發物且以CH₂ Cl₂ (100ml)萃取殘餘物。以水洗滌萃取物，乾燥(MgSO₄ )並蒸發。經由二氧化矽凝膠層析術(溶離劑：己烷/CH₂ Cl₂ )純化殘餘物以獲得呈無色油之標題產物(3.75g，69.0%)。¹ H NMR(300MHz，CDCl₃ )δ5.6(m，1H)，5.13-5.08(t，2H)，4.21(t，2H)，2.65(d，2H)，1.7(m，2H)，1.4(m，4H)，0.93(m，5H)。

步驟C：1-烯丙基環丙烷-1-磺酸鉀

使1-甲基-環丙烷磺酸1-丁酯(3.75g，17.2mmol)及硫氰酸鉀(1.7g，17.2mmol)在DME(20ml)與水(20ml)中之混合物回流16小時。蒸發掉揮發物以獲得粗磺酸鹽(3.44g，定量)，使其在50℃真空下乾燥16小時。此粗產物未經進一步純化即用於下一反應中。¹ H NMR(CDCl₃ )δ5.6(m，1H)，4.91-4.85(dd，2H)，2.471-2.397(d，2H)，0.756(m，2H)，0.322(m，2H)。

步驟D：1-烯丙基環丙烷-1-磺醯氯

使1-烯丙基環丙烷-1-磺酸鉀(3.44g，172mmol)、亞硫醯氯(10ml)及DMF(5滴)之溶液在60℃下回流16小時。在減壓下蒸發掉揮發物並以CH₂ Cl₂ (50ml)萃取殘餘物。以水洗滌萃取物，乾燥(MgSO₄ )並蒸發以獲得呈黃色膠質油之粗產物，以己烷洗滌此粗產物且未經進一步純化即用於下一反應中(2.7g，15mmol，87%)。¹ HNMR(300MHz，CDCl₃ )δ5.728(m，1H)，5.91(t，2H)，2.9(d，2H)，0.756(m，2H)，0.322(m，2H)。

步驟E：1-烯丙基-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)苯基)環丙烷-1-磺醯胺

依據通用程序B，使5,6-二氟-N1-(2-氟-4-碘苯基)苯-1,2-二胺與1-烯丙基環丙烷-1-磺醯氯反應以獲得所要產物。m /z =507[M-1]^- 。

步驟F：N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺

使1-烯丙基-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)苯基)環丙烷-1-磺醯胺(0.77g，1.52mmol)及4-甲基嗎啉N-氧化物(0.18g，1.52mmol)溶解於THF(50mL)中。在室溫下添加四氧化鋨(0.152mmol，0.965mL，4%於H₂ O中)且在室溫下攪拌此反應混合物16小時。添加EtOAc，以水洗滌有機相，乾燥(MgSO₄ )並在減壓下濃縮。經由二氧化矽凝膠層析術(溶離劑：EtOAc/MeOH)純化殘餘物以獲得標題產物(0.65g，79%)。¹ H NMR(300MHz，CDCl₃ +D₂ O)δ7.38(dd，J=1.8 & 10.5Hz，1H)，7.36(ddd，J=2.4，5.1 & 9.3Hz，1H)，7.25(d，J=8.7Hz，1H)，7.02(dd，J=9.0 & 17.7Hz，1H)，6.27(dt，J=3.0，8.7 & 17.4Hz，1H)，3.92(m，1H)，3.54(dd，J=3.9 & 11.1Hz，1H)，3.39(dd，J=6.6 & 11.1Hz，1H)，2.16(dd，J=9.6 & 15.9Hz，1H)，1.59(d，J=14.1Hz，1H)，1.41(m，1H)，1.26(m，1H)，0.83(m，2H)；m /z =542[M-1]^- 。

實例2：(S)-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺

藉由對外消旋混合物(實例13)進行對掌性HPLC分離來獲得純S異構物。¹ H NMR(300MHz，CDCl₃ +D₂ O)δ7.38(dd，J=1.8 & 10.5Hz，1H)，7.36(ddd，J=2.4，5.1 & 9.3Hz，1H)，7.25(d，J=8.7Hz，1H)，7.02(dd，J=9.0 & 17.7Hz，1H)，6.27(dt，J=3.0，8.7 & 17.4Hz，1H)，3.92(m，1H)，3.54(dd，J=3.9 & 11.1Hz，1H)，3.39(dd，J=6.6 & 11.1Hz，1H)，2.16(dd，J=9.6 & 15.9Hz，1H)，1.59(d，J=14.1Hz，1H)，1.41(m，1H)，1.26(m，1H)，0.83(m，2H)；m /z =542[M-1]^- 。

實例3：(R)-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺

藉由對外消旋混合物(實例13)進行對掌性HPLC分離來獲得純R異構物。¹ H NMR(300MHz，CDCl₃ +D₂ O)：δ7.38(dd，J=1.8 ＆ 10.5Hz，1H)，7.36(ddd，J=2.4，5.1 ＆ 9.3Hz，1H)，7.25(d，J=8.7Hz，1H)，7.02(dd，J=9.0 ＆ 17.7Hz，1H)，6.27(dt，J=3.0，8.7 ＆ 17.4Hz，1H)，3.92(m，1H)，3.54(dd，J=3.9 ＆ 11.1Hz，1H)，3.39(dd，J=6.6 ＆ 11.1Hz，1H)，2.16(dd，J=9.6 ＆ 15.9Hz，1H)，1.59(d，J =14.1Hz，1H)，1.41(m，1H)，1.26(m，1H)，0.83(m，2H)；m/z =542[M-1]^- 。

實例4：1-(2,3-二羥基-丙基)-環丙烷磺酸[3,4,6-三氟-2-(4-氟-2碘-苯基胺基)-苯基]-醯胺

步驟A 1-烯丙基-環丙烷磺酸[3,4,6-三氟-2-(2-氟-4-碘-苯基胺基)苯基]-醯胺

依據通用程序B，使1-烯丙基-環丙烷磺醯氯與3,5,6-三氟-N¹ -(2-氟-4-碘苯基)苯-1,2-二胺反應以獲得標題產物。¹ H NMR(CDCl₃ ，300MHz)δ7.41(dd，1H)，7.38(dd，1H)，7.09(s，1H)，6.78(m，1H)，6.49(m，1H)，5.96(s，1H)，5.86(m，1H)，5.18(d，2H)，2.76(d，2H)，1.23(m，2H)，0.872(m，2H)。

步驟B 1-(2，3-二羥基丙基)-N-(3,4,6-三氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)苯基)環丙烷-1-磺醯胺

將1-烯丙基-環丙烷磺酸[3,4,6-三氟-2-(2-氟-4-碘-苯基胺基)-苯基]-醯胺(110mg，0.21mmol)及4-甲基嗎啉N-氧化物(24.6mg，0.21mmol)溶解於THF(8mL)中。在室溫下添加四氧化鋨(0.021mmol，0.153mL，4%於H₂ O中)且在室溫下攪拌此反應混合物16小時。添加EtOAc，以水洗滌有機相，乾燥(MgSO₄ )並在減壓下濃縮。經由二氧化矽凝膠層析術(溶離劑：EtOAc/MeOH)純化殘餘物以獲得標題產物(0.89g，75%)。¹ H NMR(CDCl₃ ，300MHz)δ7.39(dd，J=1.5 & 10.6Hz，1H)，7.29(d，J=8.8Hz，IH)，7.28(s，1H)，6.97(s，1H)，6.76(m，1H)，6.49(m，1H)，4.13(m，1H)，3.66(dd，J=3.7 & 11.4Hz，1H)，3.53(dd.J=6.7 & 11.2Hz，1H)，2.50(dd，J=10.0 & 16.1Hz，1H)，1.6(m，1H)，1.46(m，1H)，1.28(m，1H)，1.20(m，2H)，0.92(m，2H)；m/z =559[M-1]^- 。

實例5：(S)-1-(2,3-二羥基丙基)-N-(3,4,6-三氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)苯基)環丙烷-1-磺醯胺

藉由對外消旋混合物(實例52)進行對掌性HPLC分離來獲得純S異構物。¹ H NMR(CDCl₃ ，300MHz)δ7.39(dd，J=1.5 & 10.6Hz₅ 1H)，7.29(d，J=8.8Hz，1H)，7.28(s，1H)，6.97(s，1H)，6.76(m，1H)，6.49(m，1H)，4.13(m，1H)，3.66(dd，J=3.7 & 11.4Hz₅ 1H)，3.53(dd，J=6.7 & 11.2Hz，1H)，2.50(dd，J=10.0 & 16.1Hz，1H)，1.6(m，1H)，1.46(m，1H)，1.28(m，1H)，1.20(m，2H)，0.92(m，2H)；m /z =559[M-1]^- 。

實例6：(R)-1-(2,3-二羥基丙基)-N-(3,4,6-三氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)苯基)環丙烷-1-磺醯胺

藉由對外消旋混合物(實例52)進行對掌性HPLC分離來獲得純R異構物。¹ H NMR(CDCl₃ ，300MHz)δ7.39(dd，J=1.5 & 10.6Hz，1H)，7.29(d，J=8.8Hz，1H)，7.28(s，1H)，6.97(s，1H)，6.76(m，1H)，6.49(m，1H)，4.13(m，1H)，3.66(dd，J=3.7 & 11.4Hz，1H)，3.53(dd，J=6.7 & 11.2Hz，1H)，2.50(dd，J=10.0 & 16.1Hz，1H)，1.6(m，1H)，1.46(m，1H)，1.28(m，1H)，1.20(m，2H)，0.92(m，2H)；m /z =559[M-1]^- 。

實例7：N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺

步驟A 1-烯丙基-N-3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)環丙烷-1-磺醯胺

依據通用程序B，使1-烯丙基-環丙烷磺醯氯與5,6-二氟-N1-(2-氟-4-碘苯基)-3-甲氧基苯-1,2-二胺反應以獲得標題產物。¹ H NMR(CDCl₃ ，300MHz)δ7.417(dd，1H)，7.309(s，1H)，7.25(m，1H)，6.89(m，1H)，6.52(m，1H)，6.427(m，1H)，6.03(s，1H)，5.668(m，1H)，5.11(t，1H)，3.9(s，3H)，2.75(d，2H)，1.21(m，2H)，0.767(m，2H)。

步驟BN-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺

將1-烯丙基-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)環丙烷-1-磺醯胺(97mg，0.18mmol)及4-甲基嗎啉N-氧化物(21mg，0.18mmol)溶解於THF(8mL)中。在室溫下添加四氧化鋨(0.018mmol，0.13mL，4%於H₂ O中)且在室溫下攪拌此反應混合物16小時。添加EtOAc，以水洗滌有機相，乾燥(MgSO₄ )並在減壓下濃縮。經由二氧化矽凝膠層析術(溶離劑：EtOAc/MeOH)純化殘餘物以獲得標題產物(0.80g，78%)。¹ H NMR(CDCl₃ ，300MHz)δ7.38(dd，J=1.7 & 10.3Hz，1H)，7.26(m，1H)，7.14(s，1H)，6.87(s，1H)，6.53(dd，J=6.8 ＆ 11.4Hz，1H)，6.43(m，1H)，4.06(m，1H)，3.89(s，3H)，3.63(dd，J=3.7 ＆ 11.1Hz，1H)，3.49(dd，J=6.4 ＆ 11.1Hz，1H)，2.3(dd，J=9.7 ＆ 16.1Hz，1H)，1.77(dd，J=1.9 ＆ 16.0Hz，1H)，1.37(m，1H)，1.25(m，1H)，1.21(m，2H)，0.86(m，2H)；m/z =571[M-1]^- 。

實例8：(S)-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺

藉由對外消旋混合物(實例55)進行對掌性HPLC分離來獲得純S異構物。¹ H NMR(CDCl₃ ，300MHz)δ7.38(dd，J=1.7 ＆ 10.3Hz，1H)，7.26(m，1H)，7.14(s，1H)，6.87(s，1H)，6.53(dd，J=6.8 ＆ 11.4Hz，1H)，6.43(m，1H)，4.06(m，1H)，3.89(s，3H)，3.63(dd，J=3.7 ＆ 11.1Hz，1H)，3.49(dd，J=6.4 ＆ 11.1Hz，1H)，2.3(dd，J=9.7 ＆ 16.1Hz，1H)，1.77(dd，J=1.9 ＆ 16.0Hz，1H)，1.37(m，1H)，1.25(m，1H)，1.21(m，2H)，0.86(m，2H)；m/z =571[M-1]^- 。

實例9：(R)-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺

藉由對外消旋混合物(實例55)進行對掌性HPLC分離來獲得純R異構物。¹ H NMR(CDCl₃ ，300MHz)δ7.38(dd，J=1.7 & 10.3Hz，1H)，7.26(m，1H)，7.14(s，1H)，6.87(s，1H)，6.53(dd，J=6.8 & 11.4Hz，1H)，6.43(m，1H)，4.06(m，1H)，3.89(s，3H)，3.63(dd，J=3.7&11.1Hz，1H)，3.49(dd，J=6.4 & 11.1Hz，1H)，2.3(dd，J=9.7 & 16.1Hz，1H)，1.77(dd，J=1.9 & 16.0Hz，1H)，1.37(m，1H)，1.25(m，1H)，1.21(m，2H)，0.86(m，2H)；m/z =571[M-1]。

實例10：N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺 ：

步驟A：(3,4,5-三氟苯基)甲醇 ：

經30分鐘向經冷卻(-5℃)之3,4,5-三氟苯甲醛(7.0g，43.75mmol)於THF與水之混合物(50ml，9：1)中的溶液中緩慢地逐份添加NaBH₄ (1.662g，43.75mmol)。經2小時使此反應混合物達至室溫並小心地倒入冰冷之稀HCl(200ml，1N)中。使油性層萃取至CH₂ Cl₂ (250ml)中且以水(200ml)洗滌有機層，乾燥(MgSO₄ )並蒸發。獲得的粗產物(7.08g，定量)無需進一步純化即進入下一步驟。

步 驟B：5-(溴甲基)-1,2,3-三氟苯：

向(3,4,5-三氟苯基)甲醇(40mmol)於CH₂ Cl₂ (150ml)中之溶液中緩慢添加亞硫醯溴(6.16ml，80mmol)於CH₂ Cl₂ (50ml)中之溶液。在室溫下攪拌此反應混合物16小時並倒入冰水(200ml)中。分離有機層並以飽和NaHCO₃ (2×200ml)、水(200ml)洗滌，乾燥(MgSO₄ )並蒸發以獲得呈淡黃色油之相應溴基化合物(定量產率)。此粗產物未經進一步純化即進入下一反應。

步驟C：1,2,3-三氟-5-甲基苯：

將前述溴基化合物(40mmol)與三乙基矽烷(48mmol)混合且以小份的固體PdCl₂ (4mmol)處理此反應混合物。在數分鐘後，發生猛烈的放熱反應，小心地藉由置放一回流冷凝器使燒瓶之內容物回流。再在室溫下攪拌此反應混合物6小時並經16小時使內容物靜置。接著，小心地傾析出粗液體產物並在未經進一步純化之情況下直接進入下一反應。假定反應係以定量產率進行。

步驟D：1,2,3-三氟-5-甲基-4-硝基苯：

在0-5℃下將1,2,3-三氟-5-甲基苯(40mmol)添加至濃H₂ SO₄ (50ml)中。接著，緩慢地以濃HNO₃ (3.39ml，48.44mmol，90%)處理此反應混合物，同時維持內部溫度低於20℃。在室溫下攪拌此反應混合物16小時並倒在冰(300g)上，以CH₂ Cl₂ (2×125ml)萃取油性層。以水(2×200ml)、鹽水(200ml)洗滌有機層並乾燥(MgSO₄ )且蒸發以獲得粗產物，經由急驟二氧化矽凝膠層析術純化該粗產物以獲得標題產物(6.5g，85%)。1H-NMR(300MHz，CDCl₃ )：56.96(七重峰，1H)，2.39(s，3H)。¹⁹ FNMR(CDCl₃ )：δ-128.18，-141.50，-159.05。

步驟E：2,3-二氟-N-(2-氟-4-碘苯基)-5-甲基-6-硝基苯胺：

使用實例1(步驟A)中所描述之條件使2-氟-4-碘苯胺及1,2,3-三氟-5-甲基-4-硝基苯反應以形成標題化合物。M-H⁺ ：407.9。

步 驟F：5,6-二氟-N1-(2-氟-4-碘苯基)-3-甲基苯-1,2-二胺：

使用實例1(步驟B)中所描述之條件使2,3-二氟-N-(2-氟-4-碘苯基)-5-甲基-6-硝基苯胺反應以形成標題化合物。M-H⁺ ：377.4。

步驟G：1-烯丙基-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲基苯基)環丙烷-1-磺醯胺：

依據通用程序B，使1-烯丙基-環丙烷磺醯氯(142mg，142mg)與5,6-二氟-N1-(2-氟-4-碘苯基)-3-甲基苯-1,2-二胺(150mg，0.4mmol)反應以獲得標題產物(100mg，47%)；m/z =521[M-1]。

步驟H：N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺：

將1-烯丙基-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲基苯基)環丙烷-1-磺醯胺(150mg，0.29mmol)及4-甲基嗎啉N-氧化物(33mg，0.29mmol)溶解於THF(50mL)中。在室溫下添加四氧化鋨(0.029mmol，0.18mL，4%於H₂ O中)且在室溫下攪拌此反應混合物16小時。添加EtOAc，將有機相以水洗滌，乾燥(MgSO₄ )並在減壓下濃縮。經由二氧化矽凝膠層析術(溶離劑：EtOAc/MeOH)純化殘餘物以獲得標題產物(0.110g，68%)。¹ H-NMR(300MHz，CDCl₃ )：δ7.07(m，1H)，6.97(br m，2H)，6.84(m，2H)，6.60(br m，2H)，3.98(br m，1H)，3.58(m，1H)，3.43(m，1H)，3.20(d，J=3.9Hz，1H)，2.42(s，3H)，2.31(dd，J=9.9 ＆ 15.6Hz，1H)，2.01(br t，1H)，2.31(dd，J=9.9 ＆ 15.6Hz，1H)，1.66(dd，J=2.1 ＆ 15.9Hz，1H)，1.52(m，1H)，1.40(m，1H)，0.91(m，2H)。

活體外 生物活性

實例11：IC ₅₀ 數據之產生

材料及試劑之製備：將人類GST-MEK1及組成性活性對偶基因GST-MEK1^CA (具有突變Ser218Asp及Ser222Asp)自野生型人類MEK1 cDNA次選殖於酵母表現載體pGEM4Z(Promega,Madison,WI)中。使GST-MEK1^CA 表現於大腸桿菌(Escherichia coli )中且使用麩胱甘肽Sepharose 4B親和樹脂(Amersham Pharmacia Biotech,Piscataway,NJ)部份純化。將ERK2對偶基因自在pUSEamp中之MAPK2/Erk2 cDNA(野生型)(Upstate Biotechnology,Inc.,Waltham,MA)次選殖於載體pET21a(Novagen,Madison,WI)中，產生N-末端組胺酸標記之小鼠ERK2對偶基因。使ERK2表現並加以純化至均質[Zhang，1993 #33]。髓鞘鹼性蛋白質(MBP)購自Gibco BRL公司(Rockville，MD)。EasyTides腺苷5'-三磷酸(ATP)([γ-³³ P])(NEN Perkin Elmer,Wellesley,MA)為所有激酶反應之放射性標記源。活化之Raf-1(截短者)及活化之MAP激酶2/ERK2購自Upstate公司(Lake Placid,NY)。4-20% Criterion Precast凝膠購自Bio-Rad公司(Hercules,CA)。

酶活性之測定：使化合物自二甲亞碸(DMSO)儲備液稀釋至1×HMNDE(20mM HEPES pH 7.2，1mM MgCl₂ ，100mM NaCl，1.25mM DTT，0.2mM EDTA)中。一典型25ml檢定含有0.002奈莫耳MEK1^CA 、0.02奈莫耳ERK2、0.25奈莫耳MBP、0.25奈莫耳之未標記ATP及0.1μCi[γ³³ P]ATP。篩選檢定基本上包含四次添加。將5μl經稀釋之化合物分配於96孔檢定板中。然後向每一孔中添加10μl之2.5×酶混合液(僅MEK1^CA 及ERK2)，接著在環境溫度下預培養30分鐘。然後添加10μl之2.5×受質混合液(標記及未標記之ATP加上MBP)，接著在環境溫度下培養60分鐘。最後，添加100μl之10%三氯乙酸(TCA)並在室溫下培養30分鐘以停止反應且使放射性標記蛋白質產物沈澱。在以水及1%焦磷酸鹽預濕之玻璃纖維96孔濾板上收集反應產物。接著以水洗滌此濾板5次。以無水乙醇置換水且使此板在室溫下風乾30分鐘。人工地施加背部密封且分配40μl之閃爍混合液至每一孔中。施加頂部密封且在TopCount中對板進行計數(2秒/孔)。

對於某些實驗，使用需要由Raf激酶活化之MEK的截短型式。

實 例12：EC50數據之產生

化合物在細胞中之作用係藉由對磷酸化ERK進行西方墨點分析(Western blotting)而測定。將MDA-MB-231乳癌細胞塗於48孔板中，每孔為20,000個細胞且在37°濕化之CO₂ 培養器中生長。第二天，移除生長培養基(DMEM+10%胎牛血清)並以饑餓培養基(DMEM+0.1%胎牛血清)替換。使細胞在饑餓培養基中培養16小時且接著以一系列濃度之化合物處理30分鐘。在與化合物一起培養後，以100ng/ml EGF刺激細胞5分鐘。接著溶解細胞並以西方墨點法使用針對磷酸化ERK產生之單株抗體來分析。使用與近紅外染料結合之二次抗體放大信號並在Licor Odyssey掃描器上偵測。定量信號強度且利用此數據來產生劑量反應曲線且進行EC50計算。

活體m生物活性

實例13

本文所述之化合物及組合物可用於治療或預防一或多種病症，該等病症包括(但不限於)癌症、發炎性腸道病症(IBD)、牛皮癬及類風濕性關節炎(RA)。本文所述之化合物及組合物亦可用於每天一次或二次口服治療或預防一或多種包括(但不限於)癌症、IBD、牛皮癬及RA之病症。

在此實例中說明下列結構之化合物(化合物A，如本文所描述製備)的活體d測試：

將人類腫瘤植入nu/nu小鼠中。一旦腫瘤大小為約100mm³ 時，以口服方式投與化合物A歷時14天。在治療14天後測定腫瘤生長抑制率(TGI)，其係以治療組相對於媒劑對照組之腫瘤大小的減小率來表示。終點時間(TTE)係根據腫瘤達到指定的終點體積之時間或研究之最後一天(以先出現者為準)計算。治療結果係根據腫瘤生長延遲百分比(%TGD)來確定，後者係以被治療小鼠相較於媒劑治療之對照小鼠之中值TTE的增加百分比來定義。亦監控動物之消退反應。腫瘤及腦中之pERK含量係以西方墨點法測定且與化合物A之血漿含量相聯繫以供藥力學/藥動學研究用。以不同劑量及劑量方案評估數種腫瘤模型。在A375黑素瘤腫瘤、Colo205結腸癌腫瘤及A431表皮樣腫瘤中以每天一次(QD)之25或50mg/kg治療顯示統計上顯著的%TGD。對於在此等腫瘤模型中以及在HT29結腸癌腫瘤中以25mg/kg QD口服給藥，可觀測到統計上顯著的TGI。在A375異體移植中評估不同給藥方案之效果。雖然每二天一次口服給予之100mg/kg化合物A顯示統計上顯著的%TGD(91%)，但其不如25mg/kg(143% TGD)或50mg/kg(233% TGD)之QD治療般有效。如以%TGI衡量得知，每天二次(BID)給藥亦比QD給藥更為有效。相比於化合物A之25mg/kg QD的51.7%，12.5mg/kg BID之給藥產生79.5%TGI。相比於50 mg/kg QD之69.9%，25mg/kg BID之給藥產生110.1% TGI。一項在Colo205異體移植中進行之藥力學/藥動學研究顯示腫瘤中之pERK形成受到抑制，而在腦中觀察到最小抑制，此表明有效的抗腫瘤活性，而CNS穿透性有限。

化合物A為一種有效的MEK1/2抑制子，其在活體外 及活體內 抑止腫瘤細胞生長。在固著依賴性生長但非固著獨立性生長中或在異體移植中BRAF狀態決定著對由該化合物所致之生長抑制的敏感性。在給藥間隔中維持足夠的MEK抑制似乎比峰值含量更重要，此係因為在較頻繁之給藥下有較大的功效。化合物A在人類中具有有利的藥動學曲線，且基於異體移植結果在人類中之預計治療性劑量為20-40mg/天。

實例13A：癌細胞生長之抑制(GI ₅₀ )

固著依賴性生長抑制係使用CellTiterGlo試劑在以化合物A處理生長在384孔板中之細胞48小時後量測。固著獨立性生長檢定在對生長在含有0.15%瓊脂糖之培養基中或生長於非結合板上(A431)之細胞作7天處理後使用MTS(甲烷硫代磺酸鹽)試劑。生長抑制值(GI₅₀ )示於下表中。

實例13B：抗腫瘤異體移植活性

向雌性nu/nu小鼠移植A375黑素瘤、Colo205結腸腫瘤、A431表皮樣腫瘤或HT-29結腸腫瘤細胞，使該等細胞生長至100-200mm³ 。每天一次口服投與化合物A或媒劑(25mg/kg、50mg/kg或100mg/kg)歷時14天。對媒劑及治療組之平均腫瘤體積作圖並顯示於圖1中。

實例13C：腫瘤生長抑制率(TGI)25mg/kg QD

針對指定之腫瘤異體移植計算以25mg/kg化合物A治療的組之腫瘤生長抑制率。腫瘤生長抑制率係在14天之每天一次給藥結束時量測並如下計算：

%TGI=(100)[1-[(經治療之腫瘤體積_最終 -腫瘤體積_最初 )/(經媒劑治療之腫瘤體積_最終 -腫瘤體積_最初 )]]

A375及Colo₂₀₅ 之範圍表示來自2個獨立研究之值。

實例13D：Colo205異體移植中之ED ₅₀

向雄性nu/nu小鼠移植Colo205腫瘤細胞。在10天後，根據腫瘤大小(範圍在126-256mm³ 內)將動物隨機分組並以太平洋紫衫醇(paclitaxel，IV，QOD×5)、媒劑或化合物A(PO，QD×14)處理。

藥動學參數係藉由向Balb/c小鼠投與25mg/kg化合物A且對較低劑量組之值進行外推而獲得且示於下表中。

實例13E：A375異體移植之腫瘤生長抑制率

向A375異體移植小鼠投與化合物A 50mg/kg QD、25mg/kg BID、50mg/kg QD及12.5mg/kg BID。計算TGI%且作圖並顯示於圖2中。

實例13F：小鼠體內之血漿濃度

向雌性nu/nu小鼠移植A375腫瘤細胞，使該等細胞生長至100-200mm³ 。每天一次(QD)或每天二次(BID)口服投與化合物A或媒劑(50mg/kg QD、25mg/kg BID、50mg/kg QD及12.5mg/kg BID)。腫瘤生長抑制率係在14天之每天一次給藥結束時量測並如下計算：

%TGI=(100)[1-[(經治療之腫瘤體積_最終 -腫瘤體積_最初 )/(經媒劑治療之腫瘤體積_最終 -腫瘤體積_最初 )]]

統計顯著性=對數等級測試

實例13G：小鼠異體移植腫瘤及腦MEK活性之抑制

向移植有Colo205腫瘤細胞之雌性nu/nu小鼠給予2.5、5、10或25mg/kg單一劑量之媒劑或化合物A。測定血漿試樣中之化合物含量且測定腫瘤與腦部試樣中之pERK含量，其中該等樣本係在給藥後2、6、12及24小時時收集。由西方墨點法得到之pERK含量係使用LI-COR Odyssey定量，針對總ERK含量進行校正且與經媒劑處理之含量比較以求出MEK抑制%。將各小鼠之腫瘤或腦部的MEK抑制率對動物體內化合物A之相應血漿濃度作圖。非線性回歸分析得出在腫瘤中MEK抑制之EC₅₀ 為73nM。腦部EC₅₀ 大於5000nM。

血漿濃度(log nM)對pERK%抑制之圖顯示於圖3中。

膠囊之製備

實例14A

製備藍色1號硬明膠膠囊，其含有1mg及10mg濃度之如下化合物A的乾粉末摻合物組合物(參閱前文實例93中所示之表)：。

如本文所述製備化合物A，且接著使用流體能量研磨機(Spiral Jet Mill，電動研磨，具有直徑為50mm之研磨室；50°.4×0.8mm噴嘴環；0.8mm之噴射器噴嘴直徑及3mm之噴射器噴嘴距離)微米化。混合化合物A與一部分微晶纖維素並經由#20篩目篩網過篩且加至一擴散-滾轉式摻合器(V-摻合器)中。使其餘微晶纖維素經由#20篩目篩網過篩，加至摻合器中之物質中並摻合之。使交聯羧甲纖維素鈉及月桂基硫酸鈉經由#20篩目篩網過篩，加至摻合器中之物質中並摻合之。使粉末摻合物通過一旋轉葉輪研磨機(Quadro CoMil)並加回至摻合器中並繼續摻合。使硬脂酸鎂經由#20篩目篩網過篩並與經研磨之粉末摻合物摻合。將此粉末摻合物充填至1號膠囊中。對10mg膠囊作條帶標記以供辨識。

膠囊之組成顯示於下表中：

1mg膠囊之10,000#批料的典型批料配方如下：

10mg膠囊之10,000#批料的典型批料配方如下：

實例14B

製備藍色1號硬明膠膠囊，其含有1mg及10mg濃度之如下化合物A的乾粉末摻合物組合物(參閱前文實例93中所示之表)：

如本文所述製備化合物A，且使用流體能量研磨機(Spiral Jet Mill，電動研磨，具有直徑為50mm之研磨室；50°.4×0.8mm噴嘴環；0.8mm之噴射器噴嘴直徑及3mm之噴射器噴嘴距離)微米化。混合化合物A與一部分微晶纖維素並經由#20篩目篩網過篩且加至一擴散-滾轉式摻合器(V-摻合器)中。使其餘微晶纖維素經由#20篩目篩網過篩，加至摻合器中之物質中並摻合之。使交聯羧甲纖維素鈉及月桂基硫酸鈉經由#20篩目篩網過篩，加至摻合器中之物質中並摻合之。使粉末摻合物通過一旋轉葉輪研磨機(Quadro CoMil)並加回至摻合器中並繼續摻合。使硬脂酸鎂經由#20篩目篩網過篩並與經研磨之粉末摻合物摻合。將此粉末摻合物充填至1號膠囊中。對10mg膠囊作條帶標記以供辨識。

膠囊之組成顯示於下表中：

人類之 活體內 活性

實例15：於人類癌症個體中投與實例95A中所述之膠囊

向人類癌症個體投與單一劑量之前文實例95A中所述之1mg或10mg膠囊組合物。對於2mg劑量，向個體給予2×1mg膠囊；對於4mg劑量，向個體給予4×1mg膠囊；對於6mg劑量，向個體給予6×1mg膠囊；對於10mg劑量，向個體給予1×10mg膠囊；對於20mg劑量，向個體給予2×10mg膠囊。

監測濃度-時間曲線圖並顯示於圖4及下表中：

結晶多晶型形式

實例16：N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺之製備

N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺係依據前述程序製備(參見已公開之國際專利申請案WO 2007/014011)且概述於下。

步驟A ：2-氟-N-(2,3,5-三氟-6-硝基苯基)-4-碘苯胺

將1.0M雙(三甲基矽烷)胺基鋰(LiN(SiMe₃ )₂ )"LHMDS"(15.37mL，15.37mmol)溶液在氮氣下於-78℃下緩慢加至經攪拌之2-氟-4-碘苯胺(3.64g，15.37mmol)於無水THF(100mL)中之溶液中並再在-78℃下持續攪拌一小時。添加2,3,4,6-四氟硝基苯，且使反應混合物溫熱至室溫並再持續攪拌16小時。添加乙酸乙酯(200mL)且以水洗滌有機相，經由硫酸鈉乾燥並經由管柱層析術進一步純化以提供呈黃色固體之產物(3.75g，59.24%)。M-H⁺ ：410.9。¹ H NMR(DMSO，300MHz)：6.85(t，1H)；7.38(d，1H)；7.62(m，2H)；8.78(s，1H)。

步驟B ：2-氟-N-(2,3-二氟-5-甲氧基-6-硝基苯基)-4-碘苯胺

使經攪拌之(2-氟-4-碘-苯基)-(2,3,5-三氟-6-硝基-苯基)-胺(1.23g，3mmol)於無水THF(25ml)中之溶液在氮氣下冷卻至-78℃且緩慢添加25%之甲醇鈉(0.68ml，0.3mmol)溶液。使此反應混合物溫熱至室溫並再持續攪拌16小時。TLC顯示反應不完全。添加乙酸乙酯(100mL)至反應混合物中並以水洗滌有機層，經由硫酸鈉乾燥並經由管柱層析術進一步純化，得到呈黃色固體之所要化合物(0.6g，47.6%)。m/z =424[M+H]⁺ 。

步驟C ：5,6-二氟-N ¹ - (2-氟-4-碘苯基)-3-甲氧基苯-1,2-二胺

將氯化銨(1.18g，20.16mmol)及鐵粉(1.15g，21.44mmol)添加至經攪拌之(2,3-二氟-5-甲氧基-6-硝基-苯基)-(2-氟-4-碘-苯基)-胺(0.57g，1.34mmol)於乙醇(20mL)中的溶液中。將此混合物在回流下攪拌16小時，冷卻至室溫，經由矽藻土過濾且將濾液濃縮至乾燥。使所得殘餘物溶解於乙酸乙酯中，以水洗滌，經由硫酸鈉乾燥並藉由自乙醇中結晶來進一步純化，得到呈灰白色固體之產物(0.47g，90.3%)。M-H⁺ ：393.2。¹ H NMR(DMSO，300MHz)：3.76(s，3H)；6.1(t，1H)；6.8-7.0(m，1H)；7.2(d，1H)；7.35(s，1H)；7.42(d，1H)。

步驟D ：1-烯丙基-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)環丙烷-1-磺醯胺

向經攪拌之5,6-二氟-N¹ -(2-氟-4-碘苯基)-3-甲氧基苯-1,2-二胺(1eq)於無水吡啶(5ml/mmol)中之溶液中添加1-烯丙基-環丙烷磺醯氯(1-5eq)。將此反應混合物在40℃下攪拌48小時。使此反應混合物在水與乙酸乙酯之間分溶。將有機層以鹽水洗滌，乾燥(MgSO₄ )且在減壓下濃縮。經由急驟管柱層析法在二氧化矽上純化殘餘物以獲得標題產物。¹ H NMR(CDCl₃ ，300MHz)：δ7.417(dd，1H)，7.309(s，1H)，7.25(m，1H)，6.89(m，1H)，6.52(m，1H)，6.427(m，1H)，6.03(s，1H)，5.668(m，1H)，5.11(t，1H)，3.9(s，3H)，2.75(d，2H)，1.21(m，2H)，0.767(m，2H)。

步驟E ：N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-l-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺

將1-烯丙基-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)環丙烷-1-磺醯胺(97mg，0.18mmol)及4-甲基嗎啉N-氧化物(21mg，0.18mmol)溶解於THF(8mL)中。在室溫下添加四氧化鋨(0.018mmol，0.13mL，4%於H₂ O中)且在室溫下攪拌此反應混合物16小時。添加乙酸乙酯，並以水洗滌有機相，乾燥(MgSO₄ )並在減壓下濃縮。經由二氧化矽凝膠層析術(溶離劑：EtOAc/MeOH)純化殘餘物以獲得標題產物(0.80g，78%)。¹ H NMR(CDCl₃ ，300MHz)：δ7.38(dd，J=1.7 ＆ 10.3Hz，1H)，7.26(m，1H)，7.14(s，1H)，6.87(s，1H)，6.53(dd，J=6.8 ＆ 11.4Hz，1H)，6.43(m，1H)，4.06(m，1H)，3.89(s，3H)，3.63(dd，J=3.7 ＆ 11.1Hz，1H)，3.49(dd，J=6.4 ＆ 11.1Hz，1H)，2.3(dd，J=9.7 ＆ 16.1 Hz，1H)，1.77(dd，J=1.9 ＆ 16.0Hz，1H)，1.37(m，1H)，1.25(m，1H)，1.21(m，2H)，0.86(m，2H)；m/z =571[M-1]^- 。

實例17：N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺之製備

藉由對外消旋混合物進行對掌性HPLC分離來獲得純S異構物。¹ H NMR(CDCl₃ ，300MHz)：δ7.38(dd，J=1.7 ＆ 10.3Hz，1H)，7.26(m，1H)，7.14(s，1H)，6.87(s，1H)，6.53(dd，J=6.8 ＆ 11.4Hz，1H)，6.43(m，1H)，4.06(m，1H)，3.89(s，3H)，3.63(dd，J=3.7 ＆ 11.1Hz，1H)，3.49(dd，J=6.4 ＆ 11.1Hz，1H)，2.3(dd，J=9.7 ＆ 16.1Hz，1H)，1.77(dd，J=1.9 ＆ 16.0Hz，1H)，1.37(m，1H)，1.25(m，1H)，1.21(m，2H)，0.86(m，2H)；m/z =571[M-1]^- 。

實例18：N-(R)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺之製備

藉由對外消旋混合物進行對掌性HPLC分離來獲得純R異構物。¹ H NMR(CDCl₃ ，300MHz)：δ7.38(dd，J=1.7 ＆ 10.3Hz，1H)，7.26(m，1H)，7.14(s，1H)，6.87(s，1H)，6.53(dd，J=6.8 ＆ 11.4Hz，1H)，6.43(m，1H)，4.06(m，1H)，3.89(s，3H)，3.63(dd，J=3.7 ＆ 11.1Hz，1H)，3.49(dd，J=6.4 ＆ 11.1Hz，1H)，2.3(dd，J=9.7 ＆ 16.1Hz，1H)，1.77(dd，J=1.9 ＆ 16.0Hz，1H)，1.37(m，1H)，1.25(m，1H)，1.21(m，2H)，0.86(m，2H)；m/z =571[M-1]^- 。

實例19：N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺之結晶多晶型形式A的製備

步驟A

將N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺(216.10g)饋入裝備有大磁性攪拌棒及磁性攪拌器/熱板之4L錐形燒瓶中。添加乙酸乙酯(約600mL，購自Fisher公司)。開始加熱及攪拌以形成棕色懸浮液。使此混合物低速回流並添加額外的乙酸乙酯(約200mL)以達成完全溶解，得到一深棕色溶液。緩慢地逐份添加庚烷(購自Acros公司)至回流的溶液中，該添加速率使得每一次添加後所形成之所有沈澱物可迅速溶解並維持回流。在添加2L庚烷至此溶液中後，所形成之固體在回流下之溶解非常緩慢。停止加熱並在經16小時攪拌之同時使結晶混合物平衡至室溫。在放置期間於玻璃表面周圍逐漸形成較厚的一層結晶物質。在冰/水浴中在攪拌下使所得懸浮液平衡。在置有惠特曼(Whatman)#1過濾介質之25cm布氏漏斗(Buchner funnel)上過濾此懸浮液。以庚烷(1L)洗滌所收集之晶體並使其在真空下風乾。經20小時使此等晶體進一步在40℃/<1托下乾燥以產生呈粉紅色結晶固體之產物(160.99g，77.2%)。

步驟B

將N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺(13.2g)及乙酸乙酯(30mL)饋入裝備有大磁性攪拌棒及磁性攪拌器/熱板之錐形燒瓶中。開始攪拌及加熱至低速回流以達成完全溶解，得到一深棕色溶液。緩慢地逐份添加庚烷至回流的溶液中，該添加速率使得每一次添加後所形成之所有沈澱物可迅速溶解並維持回流，直至溶液中庚烷之添加使得所形成之固體在回流下之溶解非常緩慢(約90mL庚烷)為止。停止加熱並在經16小時攪拌之同時使結晶混合物平衡至室溫。在放置期間於玻璃表面周圍逐漸形成較厚的一層結晶物質。在冰/水浴中在攪拌下使所得懸浮液平衡。在置有惠特曼#1過濾介質之布氏漏斗上過濾此懸浮液。以庚烷洗滌所收集之晶體並使其在真空下風乾。經20小時使此等晶體進一步在40℃/<1托下乾燥以產生呈粉紅色結晶固體之產物。

步驟C

將N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺(44.8g)及乙酸乙酯(750mL)饋入裝備有大磁性攪拌棒及磁性攪拌器/熱板之錐形燒瓶中。開始攪拌及加熱至低速回流以達成完全溶解，得到一深棕色溶液。緩慢地逐份添加己烷至回流的溶液中，該添加速率使得每一次添加後所形成之所有沈澱物可迅速溶解並維持回流,直至溶液中己烷之添加使得所形成之固體在回流下之溶解非常緩慢(約2L己烷)為止。停止加熱並在經16小時攪拌之同時使結晶混合物平衡至室溫。在放置期間於玻璃表面周圍逐漸形成較厚的一層結晶物質。在冰/水浴中在攪拌下使所得懸浮液平衡。在置有惠特曼#1過濾介質之布氏漏斗上過濾此懸浮液。洗滌所收集之晶體，並使其在真空下風乾。經20小時使此等晶體進一步在40℃/<1托下乾燥以產生呈粉紅色結晶固體之產物。

實例20：N-(R)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺之結晶多晶型之製備

將N-(R)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺(216.10g)饋入裝備有大磁性攪拌棒及磁性攪拌器/熱板之4L錐形燒瓶中。添加乙酸乙酯(約600mL)。開始加熱及攪拌以形成一棕色懸浮液。使此混合物低速回流並添加額外的乙酸乙酯(約200mL)以達成完全溶解，得到一深棕色溶液。緩慢地逐份饋入庚烷至回流的溶液中，該添加速率使得每一次添加後所形成之所有沈澱物可迅速溶解並維持回流。在添加2L庚烷至此溶液中後，所形成之固體在回流下之溶解非常緩慢。停止加熱並在經16小時攪拌之同時使結晶混合物平衡至室溫。在放置期間於玻璃表面周圍逐漸形成較厚的一層結晶物質。在冰/水浴中在攪拌下使所得懸浮液平衡。在置有惠特曼#1過濾介質之25cm布氏漏斗上過濾此懸浮液。以庚烷(1L)洗滌所收集之晶體並使其在真空下風乾。經20小時使此等晶體進一步在40℃/<1托下乾燥。

實例21：IC ₅₀ 數據之產生

材料及試劑之製備：將人類GST-MEK1及組成性活性對偶基因GST-MEK1^CA (具有突變Ser218Asp及Ser222Asp)自野生型人類MEK1 cDNA次選殖於酵母表現載體pGEM4Z(Promega,Madison,WI)中。使GST-MEK1^CA 表現於大腸桿菌中且使用麩胱甘肽Sepharose 4B親和樹脂(Amersham Pharmacia Biotech,Piscataway,NJ)部份純化。將ERK2對偶基因自在pUSEamp中之MAPK2/Erk2 cDNA(野生型)(Upstate Biotechnology,Inc.,Waltham,MA)次選殖於載體pET21a(Novagen,Madison,WI)中，產生N-末端組胺酸標記之小鼠ERK2對偶基因。使ERK2表現並加以純化至均質[Zhang，1993 #33]。髓鞘鹼性蛋白質(MBP)購自Gibco BRL公司(Rockville，MD)。EasyTides腺苷5'-三磷酸(ATP)([γ-³³ P])(NEN Perkin Elmer,Wellesley,MA)為所有激酶反應之放射性標記源。活化之Raf-1(截短者)及活化之MAP激酶2/ERK2購自Upstate公司(Lake Placid,NY)。4-20% Criterion Precast凝膠購自Bio-Rad公司(Hercules,CA)。

酶活性之測定：使化合物自二甲亞碸(DMSO)儲備液稀釋至1×HMNDE(20mM HEPES pH 7.2，1mM MgCl₂ ，100mM NaCl，1.25mM DTT，0.2mM EDTA)中。一典型25ml檢定含有0.002奈莫耳MEK1^CA 、0.02奈莫耳ERK2、0.25奈莫耳MBP、0.25奈莫耳之未標記ATP及0.1μCi[γ³³ P]ATP。篩選檢定基本上包含四次添加。將5μl經稀釋之化合物分配於96孔檢定板中。然後向每一孔中添加10μl之2.5×酶混合液(僅MEK1^CA 及ERK2)，接著在環境溫度下預培養30分鐘。然後添加10μl之2.5×受質混合液(標記及未標記之ATP加上MBP)，接著在環境溫度下培養60分鐘。最後，添加100μl之10%三氯乙酸(TCA)並在室溫下培養30分鐘以停止反應且使放射性標記蛋白質產物沈澱。在以水及1%焦磷酸鹽預濕之玻璃纖維96孔濾板上收集反應產物。接著以水洗滌此濾板5次。以無水乙醇置換水且使此板在室溫下風乾30分鐘。人工地施加背部密封且分配40μl之閃爍混合液至每一孔中。施加頂部密封且在TopCount中對板進行計數(2秒/孔)。對於某些實驗，使用需要由Raf激酶活化之MEK的截短型式。

實例22：EC50數據之產生

化合物在細胞中之作用係藉由對磷酸化ERK進行西方墨點分析而測定。將MDA-MB-231乳癌細胞塗於48孔板中，每孔為20,000個細胞且在37°濕化之CO₂ 培養器中生長。第二天，移除生長培養基(DMEM+10%胎牛血清)並以饑餓培養基(DMEM+0.1%胎牛血清)替換。使細胞在饑餓培養基中培養16小時且接著以一系列濃度之化合物處理30分鐘。在與化合物一起培養後，以100ng/ml EGF刺激細胞5分鐘。接著溶解細胞並以西方墨點法使用針對磷酸化ERK產生之單株抗體來分析。使用與近紅外染料結合之二次抗體放大信號並在Licor Odyssey掃描器上偵測。定量信號強度且利用此數據來產生劑量反應曲線且進行EC50計算。

實例23：化合物之活性數據

在上述檢定中測試描述於實例1、2及3中之化合物。結果概述於下表中：

實例24：XRPD數據

XPRD係在裝備有具有120°之2θ範圍之曲線位置靈敏偵測器的Inel XRG-3000繞射儀上進行。即時數據係使用Cu Kα輻射在0.03° 2θ解析度下收集。管電壓及電流分別被設定至40kV及30mA。展現2.5至40° 2θ之譜圖以有助於直接的譜圖比較。藉由將(S)-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺(如本文所述所合成)裝入薄壁玻璃毛細管中來準備試樣以供分析。使每一毛細管移至一機動型測角計頭上以允許毛細管在數據獲取期間旋轉。對此等試樣分析5分鐘。每天使用矽參考標準物進行儀器校正。圖5為N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺形式A之粉末x光繞射(PXRD)譜圖。圖7為N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺形式A(上部)及非晶形(底部)之粉末x光繞射(PXRD)譜圖。

實例25：示差掃描熱量測定(DSC)

在TA Instruments示差掃描熱量測定儀Q1000上進行分析。此儀器係使用銦作為參考材料來校正。將試樣置於具有非卷邊蓋構造之標準鋁DSC盤中，且精確記錄其重量。為了測定非晶形材料之玻璃轉化溫度(T _g )，使試樣管在-40℃至140℃之間循環數次。使最終溫度升至150℃。根據最後循環的轉化之拐點，記錄T _g 。圖6為N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺(形式A)之調製DSC熱譜圖。此圖係以經校正之熱流量(瓦特/公克，W/g))對所量測之試樣溫度(℃)作圖。

實例26：動態蒸氣吸附/解吸附(DVS)

在VTI SGA-100蒸氣吸附分析儀上收集水份吸附/解吸附數據。吸附及解吸附數據係在氮氮氣吹掃(nitrogen purge)下以10%相對濕度(RH)間隔於5%至95% RH範圍內收集。在分析前試樣未經乾燥。用於分析之平衡準則為在5分鐘內重量變化不到0.0100%，若未滿足此重量準則，則最大平衡時間為3小時。未對對試樣之最初水份含量對數據作校正。使用氯化鈉及聚乙烯吡咯啶作為校正標準物。圖8顯示N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺(形式A)之DVS等溫線。此物質在實驗期間展現可忽略不計的重量變化。

實例27：熱重分析(TG)

在TA Instrument 2950熱重分析儀上進行分析。校正標準物為鎳及Alumel^TM 。將每一試樣置於鋁試樣盤中並插入至TG爐中。使試樣在25℃下平衡，且接著在氮氣流下以10℃/min之加熱速率加熱直至最後溫度為350℃。圖9顯示N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺(形式A)之TG熱譜圖，其展示直至140℃之重量損失可忽略不計，此指示：呈多晶型，形式A為非溶劑化物。

實例28：活體外癌症篩選

使人類腫瘤細胞株在含有5%胎牛血清與2mM L-麩醯胺酸之RPMI 1640培養基中生長。將細胞以100μL按視個別細胞株之倍增時間而定範圍介於5,000至40,000個細胞/孔之間的植板密度(plating density)接種至96孔微量滴定板中。在細胞接種後，將此等微量滴定板在添加N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺前於37℃、5% CO₂ 、95%空氣與100%相對濕度下培養24小時。

在24小時後，將每一細胞株之兩個板以TCA原位固定，以表現在添加N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺時每一細胞株之細胞群體的量測值(Tz)。使N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺以400倍於所要最終的最大測試濃度之量溶解於二甲亞碸中並在使用前冷凍保存。在添加時，將冷凍濃縮物之一個等分試樣解凍並以含有50μg/ml慶大黴素(gentamicin)之完全培養基稀釋至二倍於所要最終的最大測試濃度之濃度。製備另外4個10倍或對數系列的稀釋液以提供總數為5個的濃度加上對照組。將此等不同稀釋液之100μl的等分試樣加至已含有100μl培養基之適當微量滴定孔中，從而得到所需的最終濃度。

在添加N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺之後，再將此等板於37℃、5% CO₂ 、95%空氣及100%相對濕度下培養48小時。對於附著細胞，此檢定係藉由添加冷TCA來終止。藉由緩慢添加50μl冷50% (w/v)TCA(最終濃度，10% TCA)而將細胞原位固定，並在4℃下培養60分鐘。丟棄上清液，且以自來水洗滌此等板5次並風乾。向每一孔中添加在1%乙酸中之0.4%(w/v)磺醯羅丹明(Sulforhodamine B，SRB)溶液(100μl)，且將板在室溫下培養10分鐘。在染色後，藉由以1%乙酸洗滌5次來去除未結合之染料且使此等板風乾。隨後以10mM Trizma鹼溶解所結合之染料，且在自動板讀取器上於515nm波長下讀取吸光度。對於懸浮液細胞，方法為相同的，例外之處在於檢定係藉由緩慢添加50μl之80% TCA(最終濃度，16% TCA)使沈降細胞固定於孔之底部來終止。使用7次吸光度量測[時間0(Tz)、對照生長(C)及在5個濃度值之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺存在下的測試生長(Ti)]，在每一藥物濃度值下計算生長百分比。生長抑制百分比係如下計算：

計算三個劑量反應參數。50%之生長抑制(GI50)係根據[(Ti-Tz)/(C-Tz)]×100=50計算，其為使得在藥物培養期間於對照組細胞中之淨蛋白質增加(以SRB染色量測)有50%之降低的濃度。導致總生長抑制(TGI)之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺濃度係根據Ti=Tz計算。指示在處理後細胞之淨損失的LC50(在藥物處理結束時與開始時相比使得所量測之蛋白質減少50%的藥物濃度)係根據[(Ti-Tz)/Tz]×100=-50計算。若達到了活性值，則計算此三個參數各自之值；然而，若未達到或超出此效果，則將彼參參數之值表示為大於或小於所測試之最大或最小濃度。

針對所指細胞株，檢驗對應於白血病、非小細胞肺癌、結腸癌、CNS癌、黑素瘤、卵巢癌、腎癌、前列腺癌及乳癌之討論組，且結果顯示於下表中。

實例29： 活體外 抗增殖活性

在本實例中，檢驗N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺之下列效應：(1)針對數種具有不同突變之腫瘤細胞株之生長的活性(GI₅₀ )；(2)針對數種B-Raf突變細胞株之生長的活性(GI₅₀ )；(3)對固著獨立性細胞生長之影響；(4)對細胞週期之影響；及(5)對原代肝及腎細胞之毒性效應。

實例29A：細胞培養/生長抑制檢定

人類黑素瘤A375細胞及人類結腸癌Colo205細胞係獲自ATCC(Manassas，VA)。使A375細胞維持於補充有10%胎牛血清、麩醯胺酸(2mM)、青黴素(penicillin)(100U/ml)及鏈黴素(100μg/ml)之DMEM中。將細胞維持於37℃、5%CO₂ 及100%濕度下。使 Colo205細胞維持於補充有10%胎牛血清、麩醯胺酸(2mM)、青黴素(100U/ml)及鏈黴素(100μg/ml)之RPMI中。對於生長抑制實驗，將細胞以1000個細胞/20μl/孔塗於白色384孔微量板中。在24小時後，添加5μl之5X藥物儲備溶液。所有之藥物最初係以在DMSO中之200×儲備液製備，故最終DMSO濃度為0.5%。將細胞在37℃下培育48小時且使用CellTiterGlo(Promega,Madison,WI)測定ATP含量。腺苷酸激酶(AK)釋放係使用Toxilight(Cambrex，Walkersville，MD)來測定。使用GraphPadPrism 4(GraphPad Software,San Diego,CA)進行非線性曲線擬合。4-胺基-8-((2R,3R,4S,5R)-3,4-二羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-基)-吡啶幷[2,3-d]嘧啶-5(8H)-酮(VRX-14686)為用作參考化合物之細胞毒性劑。

生長抑制(%)=(僅媒劑對照值(RLU)-N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺RLU)/(僅媒劑對照RLU-1μM N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺RLU)；在量測ATP含量時係以由N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺引起之生長停滯為基礎。

細胞存活(%)=(N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺RLU-10μM VRX-14686 RLU)/(僅媒劑對照RLU-10μM他莫昔芬(Tamoxifen)RLU)；在量測ATP含量時係以由VRX-14686引起之細胞殺死為基礎。

細胞殺死(%)=(N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺RLU-僅媒劑對照RLU)/(10μM他莫昔芬RLU-僅媒劑對照RLU)；在量測ATP含量時係以由他莫昔芬引起之細胞殺死為基礎。

RLU=相對發光單位

實例29B：細胞週期停滯之評估

將A375細胞以10,000個細胞/200μ1/孔塗於96孔微量板中。在24小時後，細胞接近50%匯合，並添加50μ1之5X藥物儲備溶液。又在24小時後，使細胞胰蛋白酶化，固定在200μ1 Prefer(Anatech,Battle Creek,MI)中，並保存於4℃下過夜。接著在PBS中沖洗細胞，經透性化且在0.1%Triton X-100、200μg/ml無DNase之RNase及25μg/ml碘化丙錠(Molecular Probes,Sunnyvale,CA)中染色，且在Guava PCA-96(Guava Technologies,Foster City,CA)上進行分析。使用ModFit LT(版本3.0，Verity，Topsham，ME)分析數據。

固著獨獨立性細胞生長抑制之評估

向「超低結合性」板(Corning,Acton MA)之孔中填充60μl之於完全RPMI中的0.15%瓊脂糖溶液。接著，每孔添加60μl於0.15%瓊脂糖中之含有9000個Colo205細胞的完全RPMI。在24小時後，添加60μl在無瓊脂糖之完全RPMI中的3X藥物溶液。在7天後，每孔添加36μl 6X MTS試劑(CellTiter 96 Aqueous,Promega,Madison,WI)。在37℃下2小時後，在M5板讀取器(Molecular Devices,Sunnyvale,CA)上測定490nm下之吸光度。使用GraphPad Prism 4進行非線性曲線擬合。

針對MEK依賴性癌細胞生長之生長抑制(GI ₅₀ )

使對數期分裂之B-Raf突變細胞A375(人類黑素瘤)、A431(黑素瘤)、Colo205(結腸癌)、HT29(結腸直腸腺癌)、MDA-MB231(乳腺癌)及BxPC3(胰腺癌)暴露於N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺歷時48小時並分析ATP含量。使用1μMN-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺測定100%生長停滯。

下表顯示來自每一細胞株之至少三個實驗之平均GI₅₀ 值，且顯示N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺在三個B-Raf突變細胞株(A375、Colo205及HT29)以及一個ras/raf/MEK/MAPK路徑野生型細胞株(A431)中導致生長抑制，其平均效能為79nM(±9nM)。

在一項獨立研究中，使對數期分裂之B-Raf突變細胞A375(人類黑素瘤)、SK Mel 28(人類黑素瘤)及Colo205(人類結腸癌)暴露於N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺歷時48小時並分析ATP含量。下表顯示每一細胞株之GI₅₀ ，其指示N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺導致效能接近其MEK抑制之EC₅₀ 值的生長抑制。

圖10A 及圖10B 顯示暴露於漸增濃度之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺的對數期分裂之A375細胞的生長停滯。分析細胞之ATP含量。使用1μM N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺測定100%生長停滯。

藉由量測腺苷酸激酶(AK)釋放來分析細胞上清液之細胞毒性溶解。使對數期分裂之A375細胞暴露於N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺及PD-325901歷時48小時。(使用20μM他莫昔芬測定100%細胞殺死)。結果顯示於圖11 。此數據指示在數個敏感性人類癌症細胞株中N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺導致非毒性生長停滯，此係由(i)生長停滯量測(ATP定量)；及(ii)缺乏細胞毒性細胞溶解(AK釋放)所證明。對於所測試之所有細胞株均證實缺乏AK釋放。

實例29C：固著獨立性生長抑制

以96孔微量板格式定量評估暴露於N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺7天之Colo205、A375及MDA-MB231細胞的固著獨立性生長。以MTS檢定測定存活力。GI₅₀ 值顯示如下：

圖12A-12C 顯示N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺對(A)人類結腸直腸癌Colo205細胞(GI₅₀ =11nM)、(B)A375細胞(GI₅₀ =22nM)之生長抑制及對(C)MDA-MB231細胞之抑制，其並未顯示在二維固著依賴性檢定中N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺引起生長停滯。

使對數期分裂之A375細胞暴露於N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺(1μM)歷時48小時且分析細胞上清液之生長抑制(ATP含量)及細胞毒性溶解(AK釋放)。在僅有媒劑之對照孔中測定100%存活(ATP檢定)。下表顯示之結果指示N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺在B-Raf突變人類黑素瘤A375細胞中導致非毒性生長停滯。

實例29D： 固著獨立性生長抑制

以96孔微量板格式定量評估固著獨立性生長。圖13A 顯示人類結腸直腸癌Colo205細胞之生長的抑制以及分別在6nM及11nM下之GI₅₀ 值。圖13B 顯示A375細胞之生長的抑制以及在5nM及22nM下之GI₅₀ 值。

實例29E：N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺引起之生長停滯的細胞週期分析

已顯示MEK抑制在A375細胞中引起G1/S期細胞週期停滯。

使對數期分裂之A375細胞暴露於N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺歷時24小時且使用流式細胞術測定對於階段依賴性量之細胞內DNA而言經染色的細胞之百分比。

下表顯示經N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺及對照物(僅媒劑處理之細胞的各自生長期時之細胞分布百分比。

圖14A及圖14B 顯示N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺對細胞週期進展之影響，其展示A375細胞暴露於N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺引起細胞週期之G1期的停滯，此係由G2及S期時的細胞消耗所指示。

實例29F：原代肝細胞及腎細胞毒性之評估

冷藏之大鼠肝細胞係獲自CellzDirect(Austin,TX)並依據製造商說明書塗於經膠原蛋白塗覆之96孔板上。在塗於板上後4小時添加藥物(最終DMSO濃度0.5%)。所塗之人類肝細胞係獲自Cellz Direct並依據製造商說明書處理。

冷藏之人類腎近端小管上皮細胞(RPTEC)係獲自Cambrex並依據製造商說明書處理。使細胞擴增4天並接著以50,000個細胞/孔塗於96孔板上以供藥物暴露。

在48小時後，使用Toxilight測定上清液AK含量，且使用CellTiterGlo測定細胞ATP含量。使用15μM VRX-14686測定完全的致死值。

結果顯示如下。觀察到非常少的細胞溶解。在經新近植板之原代人類肝細胞中於30μM N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺下觀察到最小毒性(81%存活)。RPTEC細胞顯示劑量依賴性ATP消耗及明顯的細胞溶解(30μM)。

上述數據說明，(1)N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺在固著依賴性增生檢定中抑制特定人類癌細胞之細胞生長及分裂(GI₅₀ 值在70-89nM範圍內)，但並未導致如以細胞溶解檢定所測定之毒性；(2)N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺在固著依賴性與獨立性增生檢定中抑制特定人類癌細胞之細胞生長及分裂，GI₅₀ 值分別為51nM與22nM；(3)N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺在A375細胞中引起G1停滯且抑制固著獨立性生長，此提供證據表明在生理學相關的活體外 模型中具抗癌活性；及(4)N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺顯示針對原代正常人類肝細胞、人類腎近端小管上皮細胞及大鼠肝細胞幾乎無細胞毒性。

實例30：N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺在癌症個體中在多次給藥後的藥動學概況

在以2、4或6mg/個體多次投與N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺後，N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺易於以範圍介於1.33至1.50小時之間的平均T_max 被吸收。平均C_max 、C_τ 及AUC值以與劑量成正比之方式隨劑量而增加。分別而言，累積指數範圍對於C_max 為介於1.49至1.76間且對於AUC為介於1.90至2.07間，此指示適度的累積。雖然在多次給藥後由於取樣時間有限而不能準確地量測半衰期，但是預期在多次給藥後基於累積指數半衰期可長於22小時。此等半衰期值明顯長於在小鼠效率模型中所觀測到之半衰期，據觀測，後者在2-3小時之典型範圍內。此外，在所有劑量中可見理想的峰谷比。

實例31：N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺在健康自願者中在多次給藥後的藥動學概況

在以10或20mg/個體多次投與N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺後，N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺易於以範圍介於2.00至2.25小時之間的平均T_max 被吸收。平均C_max 、C_τ 及AUC值隨劑量而增加。分別而言，累積指數範圍對於C_max 為介於1.14至1.23間且對於AUC為介於1.24至1.29間，此指示微小的累積。對於兩個劑量方案，半衰期類似，範圍在13至15小時間。此等半衰期值比在癌症個體中所觀測到的要短。

實例32： 活體外 抗增殖活性

在細胞增殖檢定中於源自人類胃癌之細胞株中檢驗N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺對細胞增殖抑制之影響。

實例32A：細胞培養/生長抑制檢定：

人類胃癌Hs746t細胞係獲自ATCC(Manassas，VA)。使Hs746t細胞維持於補充有10%胎牛血清、青黴素(100U/ml)及鏈黴素(100μg/ml)之DMEM中。使細胞維持於37℃、5% CO₂ 及100%濕度下。為了進行細胞增殖實驗，將細胞以3000個細胞/100μl/孔塗於具有透明基底之白色96孔板中。在24小時後，移除細胞培養基並以含有不同劑量之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺的培養基替換。在37℃下培育48小時後，使用CellTiterGlo(Promega,Madison,WI)測定ATP含量並使用LJL Biosystems Analyst HT(Sunnyvale,CA)讀取發光值。每一劑量之ATP含量係使用獨立的孔以一式三份測定。

相對細胞數目 =(平均RLU(N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺治療者))/(僅媒劑之對照組的平均RLU)。

圖19 顯示細胞數目(相對於媒劑)對N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺濃度之曲線圖且展示N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺在48小時治療後抑制人類胃癌Hs746t細胞之增殖。

實例33： 活體外 抗增殖活性

在細胞增殖檢定中於源自人類胃癌之細胞株中檢驗N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺對細胞增殖抑制之影響。

實例33A：細胞培養/生長抑制檢定

人類胃癌AGS細胞係獲自ATCC(Manassas，VA)。使AGS細胞維持於補充有10%胎牛血清、青黴素(100U/ml)及鏈黴素(100μg/ml)之DMEM/F12中。使細胞維持於37℃、5%CO₂ 及100%濕度下。為了進行細胞增殖實驗，將細胞以3000個細胞/100μl/孔塗於具有透明基底之白色96孔板中。在24小時後，移除細胞培養基並以含有不同劑量之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺的培養基替換。在37℃下培育3天後，使用Cell Titer Glo(Promega,Madison,WI)測定ATP含量並使用LJL Biosystems Analyst HT(Sunnyvale,CA)讀取發光值。每一劑量之ATP含量係使用獨立的孔以一式三份測定。在另一實驗中，以1000個細胞/100μl/孔植板且將細胞處理6天並如前述進行檢定。

相對細胞數目=(平均RLU(N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺治療者))/(僅媒劑之對照組的平均RLU)。

圖15A 及圖15B 顯示在暴露於N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺(A)3天及(B)6天後N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺濃度對細胞數目(相對於媒劑)之曲線圖，其展示N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺抑制人類胃癌AGS細胞株之增殖。

實例34：以不同量之N-(S) -(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺處理之裸小鼠體內的原位人類Hep3B腫瘤之生長反應

在BALB/cnu /nu 小鼠中與最佳劑量之5-氟尿嘧啶(75mg/kg)相比較，評估N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺(「化合物A」)在抑制原位Hep3B2.1-7人類肝癌發展方面之劑量反應功效。

動物 ：

在此項研究中使用雌性BALB/cnu /nu 小鼠(University of Adelaide,Waite Campus,SA,Australia)，10-14週大，體重範圍如下：19.1-29.94g(平均22.95g)。如下將小鼠分成6個研究組(4個治療組及2個對照組)：每組之小鼠數目：在第1組至第5組中為10隻；在'接受率(Take-Rate)'對照組中為為15隻(第6組)在屏蔽(隔離)條件下以12小時光/12小時黑暗週期使小鼠保持於一受控環境(目標範圍：溫度21±3℃，濕度30-70%，每小時空氣交換10-15次)下。持續地監控溫度及相對濕度。使動物任意食用市售囓齒動物飲食(Rat and Mouse Cubes，Speciality Feeds Pty Ltd,Glen Forrest,Western Australia)及自來水。所有食物與供水皆利用高壓釜處理來滅菌。

腫瘤接種 ：

在補充有10% FBS與青黴素-鏈黴素(50IU/mL最終濃度)之RPMI1640細胞培養基中培養Hep3B人類肝癌細胞(來自工作儲備物VP-Stock 353之第2繼代)。經由胰蛋白酶化來收集細胞，於HBSS中洗滌二次並加以計數。接著使細胞再懸浮於HBSS：Matrigel(1：1，v/v)中並調整至含有1×10⁸ 個細胞/mL之最終體積。在接種前，以酒精充分地擦洗切口位置且經由腹壁切開以暴露出肝臟。使針經由肝表面引入而釋出10μL細胞(1×10⁶ 個細胞)。將針固持在此位置約30秒以允許聚合以便避免腫瘤細胞洩漏至腹腔中。

在接種後14天開始進行治療。在研究之第7天(在接種後21天)，將'接受率'對照組之所有小鼠處死且目視評估肝臟中腫瘤之存在。

材料 ：

下列材料係獲自各自的供應商。

無菌鹽水溶液(0.9% NaCl(aq))係獲自Baxter Healthcare Australia,Old Toongabbie,NSW,Australia。十六醇聚氧乙烯醚EL係獲自Sigma-Aldrich Pty Ltd,Castle Hill,NSW,Australia。5-氟尿嘧啶(臨床調配物，清澈、無色液體)係獲自Mayne Pharma Pty Ltd.。RPMI1640細胞培養基、FBS及HBSS係獲自Invitrogen Australia Pty Ltd,Mt Waverley,VIC,Australia。青黴素-鏈黴素及錐蟲藍(Trypan Blue)係獲自Sigma-Aldrich,Castle Hill,NSW,Australia。Hep3B2.1-7人類肝癌細胞係源自美國菌種保藏中心((American Type Culture Collection，ATCC)，Rockville,MD,USA。Matrigel係獲自BD Biosciences,North Ryde,NSW,Australia。

在接種懸浮液中使用可改良腫瘤之接受率且降低腫瘤大小之變化性，且當在此細胞外基質存在下接種時Hep3B2.1-7人類肝癌之生長較穩定。

化合物之製備及投與 ：

十六醇聚氧乙烯醚EL：鹽水(1：9，v/v；媒劑對照物)、N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺(「化合物A」)或5-氟尿嘧啶(化合物對照物)係依據下列時程投與：

媒劑對照物十六醇聚氧乙烯醚EL：鹽水(1：9，v/v)係以10mL/kg之劑量體積每天一次經口投與持續21天(第0至20天)。

將N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺調配於十六醇聚氧乙烯醚EL：鹽水(1：9，v/v)中。每週一次製備儲備溶液並保存在4℃下。給藥溶液係在各自投藥之日製備。N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺係以10mL/kg之劑量體積每天一次經口投與持續21天(第0至20天)。該化合物係以2、10及50mg/kg之劑量投與。

將5-氟尿嘧啶臨床調配物在無菌鹽水中稀釋並經靜脈內經由尾部靜脈以75mg/kg濃度以10mL/kg之劑量體積每星期一次投與持續3個星期(在第0、7及14天)。

在第6組(「接受率」對照組)中未向小鼠施加治療。在研究之第7天(接種後21天),將小鼠處死並暴露出肝以測定肝壁內之腫瘤的「接受率」與大小。

在給藥前立即量測各動物之體重。計算投與每一小鼠之體積並基於體重進行調整。

腫瘤量測：

當在研究結束之當天在小鼠死後切取肝臟及腫瘤時，量測肝臟及腫瘤濕重。在研究終止時，自每一研究組之所有小鼠切取肝臟並稱重。若存在有可見腫瘤，則對可見腫瘤之數目進行計數。自肝臟移取此等腫瘤並稱重。

數據量測及試樣收集時程

數據獲取及計算：

在就要獲取數據前使用條碼讀取器(LabMax I,DataMars,Switzerland)掃描各動物之感應器(Bar Code Data Systems Pty Ltd,Botany Bay,NSW)。所有的量測值係以相同的手持卡尺(Absolute Digimatic Model CD-6」CS,Mitutoyo Corporation,Japan)獲取。使用Pendragon Forms 4.0(Software Corporation,Libertyville,IL,U.S.A.)作為傳輸軟體使數據與vivoPharm之安全相關性資料庫同步化。使用AIDAM v2.4來作數據報告及數據計算。

統計與計算：

所有統計及計算使用SigmaStat3.0(SPSS Australasia Pty Ltd,North Sydney,NSW,Australia)進行。

使用雙試樣t測試來測定一治療組內於此研究第0天至結束之日間體重變化的顯著性。在數據未通過正常性測試或等差異測試時，進行一項Mann-Whitney等級和測試。

進行克-瓦二氏單因子等級變異數分析(Kruskal-Wallis One-Way Analysis of Variance(AN進行克-瓦二氏單因子等級變異數分析(Kruskal-Wallis One-Way Analysis of Variance(ANoVA)on ranks)。對研究中具有腫瘤之小鼠的數據進行相同的統計分析。

小於0.05之p值被視為顯著。

具有腫瘤之小鼠之肝臟重量及腫瘤重量數據與具有腫瘤之小鼠的每一組中每一小鼠之肝臟及腫瘤的平均重量

未收集第5組(75mg/kg 5-氟尿嘧啶)之小鼠的試樣，該組在研究期間已被殺死。因為在部分小鼠體內存在有大腫瘤，此如由膨脹的腹部外觀所指示，此研究係在最初治療後18天終止。

在N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺處理組中肝臟與腫瘤重量之劑量依賴性減輕趨勢係明顯的。當僅考量具有腫瘤之小鼠時，發現以最高劑量之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺(第4組，50mg/kg)與5-氟尿嘧啶(第5組，50mg/kg)處理之組的肝臟平均重量明顯不同於媒劑對照組(第1組；p<0.05)。且，發現以N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺(第3組及第4組，分別為10mg/kg與50mg/kg)與5-氟尿嘧啶(第5組，75mg/kg)處理之組的腫瘤平均重量明顯不同於媒劑對照組。

此等結果係以圖形形式呈現於圖16 (平均肝臟重量-僅具有腫瘤之小鼠)及圖17 (肝臟腫瘤重量-僅具有腫瘤之小鼠)。

實例35：以不同量之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺處理之裸小鼠體內的原位人類HT-29結腸腫瘤之生長反應

在BALB/cnu/nu 小鼠中與最佳劑量之5-氟尿嘧啶(75mg/kg)相比較，評估N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺(「化合物A」)在抑制原位HT-29人類結腸直腸腺癌發展方面之劑量反應功效。

動物 ：

在此項研究中使用雌性BALB/cnu /nu 小鼠(University of Adelaide,Waite Campus,SA,Australia)，7-12週大，體重範圍如下：16.58-25.39g(平均21.52g)。如下將小鼠分成6個研究組(4個治療組及2個對照組)：每組之小鼠數目：在第1組至第5組中為10隻；在'接受率'對照組中為9隻(第6組)在屏障(隔離)條件下以12小時光/12小時黑暗週期使小鼠保持於一受控環境(目標範圍：溫度21±3℃，濕度30-70%，每小時空氣交換10-15次)下。持續地監控溫度及相對濕度。使動物任意食用市售囓齒動物飲食(Rat and Mouse Cubes，Speciality Feeds Pty Ltd，Glen Forrest，Western澳洲)及自來水。所有食物與供水皆利用高壓釜處理來滅菌。

腫瘤接種 ：

在補充有10% FBS及青黴素-鏈黴素(50IU/mL最終濃度)之RPMI1640細胞培養基中培養HT-29人類結腸直腸腺癌細胞(來自工作儲備物VP-Stock 325之第4繼代)。經由胰蛋白酶化來收集細胞，於HBSS中洗滌二次並加以計數。接著使細胞再懸浮於HBSS中並調整至含有2×10⁸ 個細胞/mL之最終體積。在接種前，以酒精充分地擦洗切口位置且經由腹壁切開以暴露出盲腸壁。使針經由盲腸壁表面引入而釋出5μL細胞(1×10⁶ 細胞)。

材料 ：

下列材料係獲自各自的供應商。

無菌鹽水溶液(0.9% NaCl(aq))係獲自Baxter Healthcare Australia,Old Toongabbie,NSW,Australia。十六醇聚氧乙烯醚EL係獲自Sigma-Aldrich Pty Ltd,Castle Hill,NSW,Australia。5-氟尿嘧啶(臨床調配物，清澈、無色液體)係獲自Mayne Pharma Pty公司。RPMI1640細胞培養基、FBS及HBSS係獲自Invitrogen Australia Pty Ltd,Mt Waverley,VIC,Australia。青黴素-鏈黴素及錐蟲藍係獲自Sigma-Aldrich,Castle Hill,NSW,Australia。HT-29人類結腸直腸腺癌細胞係源自美國菌種保藏中心(ATCC),Rockville,MD,USA。

化合物之製備及投與 ：

十六醇聚氧乙烯醚EL：鹽水(1：9,v/v；媒劑對照組)、N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺或5-氟尿嘧啶(化合物對照組)係依據下列時程投與：

媒劑對照物十六醇聚氧乙烯醚EL：鹽水(1：9，v/v)係以10mL/kg之劑量體積每天一次經口投與持續21天(第0至20天)。

將N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺調配於十六醇聚氧乙烯醚EL：鹽水(1：9，v/v)中。每週一次製備儲備溶液並保存在4℃下。給藥溶液係在各自投藥之日製備。N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺係以10mL/kg之劑量體積以2、10及50mg/kg之劑量每天一次經口投與持續21天(第0至20天)。

將5-氟尿嘧啶臨床調配物在無菌鹽水中稀釋並經靜脈內經由尾部靜脈以75mg/kg濃度以10mL/kg之劑量體積每星期一次投與持續3個星期(在第0、7及14天)。

在第6組(「接受率」對照組)中未向小鼠施加治療。在研究之第7天(接種後21天)，殺死小鼠並暴露出結腸以測定盲腸壁內之腫瘤的「接受率」與大小。

在給藥前立即量測各動物之體重。計算投與每一小鼠之體積並基於體重進行調整。

腫瘤量測：

當在研究結束之當天在小鼠死後切取盲腸及腫瘤時，量測盲腸及腫瘤濕重。在研究終止時，自每一研究組之所有小鼠切取盲腸並在腫瘤保持完整之情況下稱重。接著自盲腸切取腫瘤並稱重。

在研究終止時，亦自各組之所有小鼠切取肝臟，並固定於10%緩衝福馬林中。使來自媒劑對照組之5個肝試樣嵌埋於石臘中，切片並以蘇木紫-曙紅染色(H＆E)染色以進行形態學變化之組織學評估。

數據量測及試樣收集時程

數據獲取及計算：

在就要獲取數據前使用條碼讀取器(LabMax I,DataMars,Switzerland)掃描各動物之感應器(Bar Code Data Systems Pty Ltd,Botany Bay,NSW)。所有的量測值係以相同的手持卡尺(Absolute Digimatic Model CD-6」CS,Mitutoyo Corporation,Japan)獲取。使用Pendragon Forms 4.0(PendragonSoftware Corporation,Libertyville,IL,U.S.A.)作為傳輸軟體使數據與vivoPharm之安全相關性資料庫同步化。使用AIDAM v2.4來作數據報告及數據計算。

統計與計算：

所有的統計計算係使用SigmaStat 3.0(SPSS Australasia Pty Ltd,North Sydney,NSW,Australia)來進行。

使用雙試樣t測試來測定一處理組內於此研究第0天至結束之日間體重變化的顯著性。在以2與50mg/kg之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺處理的組中，早期因為過多的體重損失而中斷處理。在此等組中，使用雙試樣t測試來測定一處理組內於此研究第0天至結束之日間與在研究之最後處理日至終止日間體重變化的顯著性。在數據未通過正常性測試或等差異測試時，進行一項Mann-Whitney等級和測試。

在研究結束時對盲腸重量與腫瘤重量數據進行單因子變異數分析(ANOVA)(所有成對多重比較程序與多重比較對對照組)。在數據未通過正常性測試時，在進行程序前使值轉換為自然對數。

小於0.05之p值被視為顯著。

觀測結果：

在所有研究組(包括媒劑對照組)中量測到平均體重損失。在所有研究組(包括媒劑對照組)中觀察到腹瀉及脫水癥狀(皮膚彈性受損)。在研究期間早期嚴重的體重損失導致接受最低劑量(2mg/kg)與最高劑量(50mg/kg)之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺的組之處理分別在研究之第9天及第7天時停止。因為接受10mg/kg之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺之組的體重損失較不嚴重，故此組之所有治療係如時程安排般來投藥。在此組及5-氟尿嘧啶治療組之研究結束時的平均體重損失為顯著的。

雖然在接種後21天HT-29腫瘤在'接受率'組中之接受率為100%，但此等腫瘤之大小遠不及預期者。此可能係因為在N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺處理組與媒劑對照組間於平均盲腸與腫瘤重量上無顯著差異。5-氟尿嘧啶對盲腸與HT-29腫瘤重量亦無影響。

體 重量測(±SEM)(治療最後一天及研究終止日)

未收集第6組(「接受率」對照組)之體重數據。在研究之第7天(在接種後21天)，將此組處死以目視評估腫瘤生長是否適宜用於本研究之目的。

第2組(2mg/kg之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺)之處理在研究第9天中斷且第4組(50mg/kg之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺)之處理在研究第7天中斷，此係因為小鼠體重損失過多的緣故。其餘組在研究期間皆接受所有預定的處理。

每一組之平均腫瘤重量顯示於圖18 。每一組之平均腫瘤重量僅包括直至研究的最後一天仍存活者。在研究期間死亡的小鼠之值並不包括於計算的平均值中。

盲腸重量及腫瘤重量數據

帶陰影之框指示由在研究期間死亡之小鼠收集到的試樣。由盲腸重量及腫瘤重量計算平均值時排除此等值。趨勢顯示在以10mg/kg之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺處理後HT-29腫瘤及盲腸重量數據有所降低。

實例36：在帶有人類A375黑素瘤異體移植的裸小鼠中腫瘤生長的延遲

使用6組(n=9)已腫瘤化的小鼠。對照組包括以口服胃管灌食(po)接受10%十六醇聚氧乙烯醚EL/鹽水媒劑，每天一次共14天(qd×14)，與30mg/kg之尾部靜脈注射(iv)的第二特定太平洋紫杉醇為參考劑，每隔一天五次給藥(qod×5)的一個組。四個實驗組接受25mg/kg或50mg/kg、qd×14，或12.5或25mg/kg、bid×14之口服N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺(「化合物A」)。處理結果以TGD評估，TGD定義為治療組與對照組在終點時間中間值之腫瘤體積上的差異。毒性藉由體重量測及臨床觀察評估。

動物：

雌性無胸腺裸小鼠(nu /nu ，Harlan)為10至11週大且在研究第1天具有19.3至25.5公克的體重(BW)範圍。動物自由獲取水(逆滲透，1ppm Cl)及NIH31改質及照射Lab，其由18.0%粗蛋白質、5.0%粗脂肪及5.0%粗纖維組成。此小鼠收容於靜態微分離室內之照射 實驗室動物襯墊上，處於12小時光週期與21-22℃(70-72℉)及40-60%濕度下。遵守實驗動物飼養管理及使用規範有關限制、放牧、手術程序、餵養及液體規定與獸醫照護之建議。

腫瘤移植：

異體移植由A375人類黑素瘤藉由在無胸腺裸小鼠中連續移植而起始。A375腫瘤片段(~1mm³ )皮下移植入每一測試小鼠的右側腹，且監測腫瘤生長之平均大小達100-150mm³ 。13天後，指定當天為研究的第1天，動物分為6組且每一組由9隻小鼠(由10減少而來)組成，其具有63至221mm³ 範圍內之個別腫瘤體積且各組的平均腫瘤體積為125.3至125.9mm³ 。使用下列方程式計算腫瘤體積：腫瘤體積(mm³ )=(w ² ×ｌ) /2 ，其中w =A375腫瘤的寬度(mm)且ｌ =A375腫瘤的長度(mm)。

材料：

N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺以5mg/ml溶解於10%十六醇聚氧乙烯醚EL之鹽水溶液中，其間進行超音波處理、振盪及加熱至35℃以幫助溶解。以5mg/mL溶液作為用於50mg/kg的處理給藥溶液，且25mg/kg與12.5mg/kg的處理給藥溶液以連續稀釋法製備。給藥溶液保存在室溫免於光照下達一星期。

太平洋紫杉醇(NPI)給藥溶液由30mg/mL儲備液藉由於5%乙醇、於5%葡萄糖水溶液(D5W)中之5%十六醇聚氧乙烯醚EL中稀釋至3mg/mL而製備用於每天的使用。太平洋紫杉醇劑量為30mg/kg。

治療 ：

下表顯示治療方案。

第1組的小鼠接受由10%十六醇聚氧乙烯醚EL之鹽水溶液組成的媒劑，以口服胃管灌食(po)，每天14次給藥(qd×14)，且作為腫瘤進展之對照組。第2組動物以靜脈內(iv)投與30mg/kg之太平洋紫杉醇作為參考劑，每隔一天一次共五次給藥(qod×5)。第3-6組的小鼠分別以下列時程口服接受N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺：50mg/kg，qd×14；25mg/kg，每天二次共14天，在第一及最後一天給予單一劑量(bid×14)；25mg/kg，qd×14；及12.5mg/kg，bid×14。所有劑量以每20g體重為0.2mL體積給予，規模符合動物的體重。

終點：

在所有組中的腫瘤使用卡尺每星期量測二次。每一動物當腫瘤達到2000mm³ 終點大小或在研究的最後一天(第60天)之任一者先到達時，將動物安樂死。每一小鼠的終點時間(TTE)由下列等式計算：TTE(天)=(log₁₀ (終點體積，mm³ )-b)/m，其中b為截距且m為對數轉換腫瘤生長數據組之線性回歸所得到的直線之斜率。

此數據組包含超過研究終點體積之第一觀察與達到終點體積之前即時的三個連續觀察。未達到終點的動物指定一等於研究最後一天之TTE值。分類為因意外NTR(非治療相關性)(NTRa)或因未知原因(NTRu)死亡的動物為排除於TTE計算(及所有進一步的分析)。分類為TR(治療有關)死亡或NTRm(因轉移導致的非治療相關性)之動物指定一等於研究死亡當天之TTE值。

處理結果以腫瘤生長延遲(TGD)測定，其定義為治療組與對照組相比在終點時間中間值(TTE)上之增加：TGD=T-C，以天表示，或以對照組的TTE中間值之百分比表示：，其中：T=治療組的TTE中間值，C=對照組(第1組)的TTE中間值。

治療可能造成動物腫瘤的部份消退(PR)或完全消退(CR)。在PR反應中，於研究過程期間，腫瘤體積在三個連續量測中為第1天體積之50%或更少，且在此三個量測之一或多個中等於或大於13.5mm³ 。在CR反應中，於研究過程期間，腫瘤體積在三個連續量測中小於13.5mm³ 。在研究終止時，具有CR反應之動物額外分類為無腫瘤存活者(TFS)。監測腫瘤消退並記錄。

副作用：

動物在研究的前五天每天稱重，並接著每星期二次稱重。頻繁觀察此小鼠之任何不良、治療有關的副作用的明顯癥候，並記錄觀察時臨床現象。可接受耐受度定義為測試期間一組平均體重損失少於20%且動物組中不多於一的治療有關死亡。任何不能滿足此等準則之給藥方案視為大於最大耐受劑量(MTD)。死亡若以醫療症狀及/或解剖證實為治療副作用的關係則分類為TR，或若因在給藥期間或在最後10天給藥期間因未知原因死亡則分類為TR。若無證據證實死亡與治療副作用有關則死亡分類為NTR。

統計及圖形分析：

使用對數等級檢驗來分析處理組與對照組之TTE值的差異顯著性。在顯著量P =0.05下進行雙尾統計分析。

腫瘤生長曲線之中間值顯示各組之中間值腫瘤體積為時間的函數。當動物因腫瘤大小或TR死亡退出研究時，以用於後續時間點中計算組之中間腫瘤體積之數據包括對動物記錄的最終腫瘤體積。因腫瘤發展於組中的50%動物退出研究後截斷此曲線。建構Kaplan-Meier圖形以顯示保留在研究中的動物百分比為時間的函數，且使用相同的數據組作為對數等級檢驗。使用視窗3.03(Windows3.03)之Prism(GraphPad)進行所有圖形表現及統計分析。

治療反應概述

A375腫瘤在對照組小鼠(第1組)中的生長：

第1組動物接受10%十六醇聚氧乙烯醚EL/鹽水媒劑，po，qd×14。在對照組中的腫瘤以中間值TTE為22.8天生長發展至2000mm³ 終點體積，在37.1天的研究建立最可能的T-C或163% TGD。

太平洋紫杉醇治療的效果(第2組)：

第2組動物投與太平洋紫杉醇作為參考劑，30mg/kg，iv，qod×5。9隻動物皆達到腫瘤體積終點。腫瘤生長平行且與對照組比較稍微右移。中間TTE值為28.8天，對應於26% TGD，以對數等級分析為顯著結果(表2，P =0.0088 G1 vs. G2)。腫瘤消退與太平洋紫杉醇治療無關。

N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺治療的效果(第3-6組)：

第3-6組接受N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺的口服給藥作為單一治療。第3組動物以qd×14時程投與50mg/kg。在該組中9個腫瘤達到體積終點。該組之腫瘤體積中間值在開始約10天經歷少量淨變動，接著在研究期間增加。單一動物經歷腫瘤PR。中間TTE值為27.5天，或21% TGD，其為顯著結果(P=0.0054 G1 vs. G)。

第4組動物以bid×14時程接受25mg/kg之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺。該組9隻動物中有四隻在第60天仍然保留，全部為TFS。額外的2/9動物在研究終止前一天具有達到體積終點之腫瘤。該組具有4/9 PR、5/9 CR及4/9 TFS。中間值腫瘤體積在研究開始數天下降且持續約30天。在5/9動物中之腫瘤再生長說明在約第32天開始腫瘤生長中間值的再現且持續至研究終止。此組之中間TTE值為59.9天，表示最大可能性為163% TGD(P<0.0001，表A1)。

第5組小鼠接受25mg/kgN-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺，但遵循較低強度之qd×14時程。第5組中的9隻動物皆達到腫瘤體積終點，無腫瘤消退。密切追蹤該組及對照組之腫瘤生長。中間TTE值為25.6天，或12% TGD，其為非顯著結果(P =0.0662 G1 vs. G5)。

第6組動物以bid×14時程投與12.5mg/kg N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺。此組中之所有腫瘤達到體積終點。如同第4組，第6組的中間值腫瘤體積在研究早期下降，但此降低僅持續約9天且伴有單一的PR反應。腫瘤體積由第10天增加至研究終止。此組的中間TTE值為27.5天，對應於顯著21% TGD(P =0.0424 G1 vs. G6)。

概略言之，N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺在每天一次與每天二次口服給藥時對人類A375黑素瘤異體移植呈現劑量有關的抗腫瘤活性。每天二次給藥在所產生的TGD大小及在目標反應數方面優於每天一次給藥。因此，N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺抗腫瘤活性依劑量及時程二者變化。

實例37：針對皮下COLO205人類結腸癌異體移植之活性動物：

雌性無胸腺裸小鼠(nu /nu ，Harlan)為12至13週大且在研究第1天具有18.3至27.3公克的體重(BW)範圍。動物自由獲取水(逆滲透，1ppm Cl)及NIH31改質及照射Lab，其由18.0%粗蛋白質、5.0%粗脂肪及5.0%粗纖維組成。此小鼠收容於靜態微分離室內之照射 實驗室動物襯墊上，處於12小時光週期與21-22℃(70-72℉)及40-60%濕度下。遵守實驗動物飼養管理及使用規範有關限制、放牧、手術程序、餵養及液體規定與獸醫照護之建議。

腫瘤移植：

異體移植由COLO205人類結腸癌細胞起始。腫瘤細胞在10%熱滅活胎牛血清、100單位/毫升青黴素G鈉、100μg/mL鏈黴素硫酸鹽、0.25μg/mL兩性黴素B、25μg/mL健他黴素、2mM麩醯胺酸、1mM丙酮酸鈉、10mMHEPES與0.075%碳酸氫鈉中培養。細胞培養維持於37℃、5% CO₂ 與95%空氣氛圍之濕化培養槽中的組織培養瓶中。在腫瘤細胞植入當天，在對數生長期間回收Colo205細胞並以5×10⁶ 個細胞/mL濃度再懸浮於在PBS中的50% Matrigel基質(BD Biosciences)。每一測 試小鼠在右側腹接受1×10⁶ 個Colo205細胞皮下植入，且監控腫瘤生長達到平均大小為80-120mm³ 。14天後，指定當天為研究第1天，動物分為8組(n=9)，其具有63至196mm³ 範圍內之個別腫瘤體積且各組的平均腫瘤體積為118-119mm³ 。使用下列方程式計算腫瘤體積：腫瘤體積(mm³ )=(w ² ×l) /2 ，其中w =COLO205腫瘤的寬度(mm)且l =COLO205腫瘤的長度(mm)。腫瘤重量依1mg等於1mm³ 腫瘤體積之推論估計。

材料：

化合物A的給藥溶液藉由溶解需要量的化合物於100%十六醇聚氧乙烯醚EL中並接著以生理鹽水稀釋至10倍而每天新鮮配製。最終給藥溶液濃度為2.5、5、10或20mg/mL，以提供在10mL/kg給藥體積中的25、50、100或200mg/kg各別劑量。太平洋紫杉醇(Natural Pharmaceuticals公司)在由5%乙醇與5%十六醇聚氧乙烯醚EL於90% D5W(5% EC媒劑)組成的媒劑中在每天給藥時新鮮配製。

治療 ：

下表顯示治療方案。

第1組接受配方媒劑(10%十六醇聚氧乙烯醚EL於鹽水中)，且作為腫瘤生長對照組。第2組接受以裸小鼠之最適時程投與的參考藥物太平洋紫杉醇(30mg/kg i.v. qod×5)。第3-6組分別接受25、50、100及200mg/kg劑量之化合物A，p.o. qd×14投與，其中第6組(200mg/kg)因毒性在6天後中斷。所有劑量符合動物重量(0.2mL/20g體重)。

終點：

腫瘤使用卡尺每星期量測二次。每一動物當腫瘤達到2000mm³ 預定終點大小為或在研究的最後一天(第74天)之任一者先到達時，將動物安樂死。然而，對照組腫瘤達到大小約800mm³ 後並未呈現對數生長特性。因此，800mm³ 終點腫瘤大小為用於腫瘤生長延遲之分析(TGD)。每一鼠的終點時間(TTE)由下列等式計算：TTE(天)=(log₁₀ (終點體積，mm³ )-b)/m，其中b為截距且m為對數轉換腫瘤生長數據組之線性回歸所得到的直線之斜率。此數據組包含超過研究終點體積之第一觀察與達到終點體積之前即時的三個連續觀察。未達到終點的動物指定一等於研究最後一天之TTE值。分類為因意外NTR(非治療相關性)(NTRa)或因未知原因(NTRu)死亡的動物為排除於TTE計算(及所有進一步的分析)。分類為TR(治療有關)死亡或NTRm(因轉移導致的非治療相關性)之動物指定一等於研究死亡當天之TTE值。

處理結果以腫瘤生長延遲(TGD)評估，其定義為治療組與對照組相比在終點時間中間值(TTE)上之增加：TGD=T-C，以天表示，或以對照組的TTE中間值之百分比表示：，其中：T=治療組的TTE中間值，C=對照組(第1組)的TTE中間值。

對照組指定為第1組小鼠。

治療可能造成動物腫瘤的部份消退(PR)或完全消退(CR)。在PR反應中，於研究過程期間，腫瘤體積在三個連續量測中為第1天體積的50%或更少，且在此三個量測之一或多個中等於或大於13.5mm³ 。在CR反應中，於研究過程期間，腫瘤體積在三個連續量測中小於13.5mm³ 。監測消退反應並記錄。

副作用

動物在研究的前五天每天稱重，並接著每星期二次稱重。頻繁觀察此小鼠之任何不良、治療有關的副作用的明顯癥候，並記錄觀察時毒性的臨床現象。可接受耐受度定義為測試期間一組平均體重損失少於20%且動物組中不多於一的治療有關死亡，且任何導致較大毒性的給藥方案視為大於最大耐受劑量(MTD)。死亡若以醫療症狀及/或解剖證實為治療副作用的關係則分類為TR，或若因在給藥期間或在最後10天給藥期間因未知原因死亡則評估為TR。若無證據證實死亡與治療副作用有關則死亡分類為NTR。動物藉由時常觀察及BW量測監控。BW改變為不明顯的，且所有的治療為可接受的耐受性，除了第6組。化合物A每天一次p.o. 200mg/kg之劑量六次導致TR死亡評估在第7天及在第8天又二TR死亡。在第6組的所有鼠呈現毒性的醫療症狀，其包括駝背、活動減少及糞便軟條狀。

統計及圖形分析：

使用對數等級檢驗來分析處理組與對照組之TTE值的差異顯著性。在顯著量P =0.05進行雙尾統計分析。

腫瘤生長曲線之中間值顯示各組之中間值腫瘤體積在對數規模為時間的函數。當動物因腫瘤大小或TR死亡時退出研究時，以用於後續時間點中計算組之中間腫瘤體積之數據包括對動物記錄的最終腫瘤體積。因腫瘤發展或在組中第二TR死亡後於組中的50%動物退出研究後截斷此曲線。建構Kaplan-Meier圖形以顯示保留在研究中的動物百分比為時間的函數，且使用相同的數據組作為對數等級檢驗。使用視窗3.03(Windows3.03)之Prism(GraphPad)進行所有圖形表現及統計分析。

治療反應概述

COLO205腫瘤在對照組小鼠(第1組)中之生長

第1組腫瘤呈現緩慢、異質生長。7/9以媒劑處理之第1組對照小鼠的腫瘤達到800mm³ 腫瘤體積終點且兩隻小鼠維持至研究終止。第1組的中間值TTE為41.0天，且因此在此74天研究之最大TGD可能值為33.0天(80%)。

以太平洋紫杉醇(第2組)治療的效果

第2組中8隻接受太平洋紫杉醇治療之小鼠(n=9)在第74天保留於研究中，其具有143mm³ 之MTV。此對應最大可能TGD(33.0天或80%)及統計上顯著活性(P =0.002)。記錄五個PR反應。平均腫瘤生長曲線顯示當腫瘤生長恢復時，在第19天時MTV降低，接著微弱變化直至第47天。

以化合物A(第3-6組)治療的效果

第3、4、5組分別產生47.9、59.1及74.0天之TTE中間值。第3及4組具有非顯著對數等級結果，且第5組對數等級檢驗達到邊界顯著性(P =0.058)。此等治療產生數量隨劑量變化的消退，然而，此類型的消退反應(PR相對CR)及在每一組中的74天存活者數目與劑量無關。腫瘤生長曲線中間值顯示在研究早期的三個劑量有相似的活性(至第29天)，接著在腫瘤再生長中出現劑量依賴性延遲。第6組產生3個TR死亡，且給藥在6天後停止。因此，200mg/kg的治療視為高於MTD且無法用於TGD評價。

化合物A說明對COLO205結腸癌異體移植的劑量依賴性活性。當以25mg/kg投與時，化合物A呈現3%之TGD。在50mg/kg下，化合物A產生46%之TGD。100mg/kg治療之耐受性可接受，且如太平洋紫杉醇治療一樣，導致在具有相似消退反應數的實驗中的最大TGD可能值。200mg/kg治療產生3/9 TR死亡且高於MTD。可觀察到化合物A相比於太平洋紫杉醇在腫瘤負荷有更顯著的最初降低；然而，此效果的持續時間較短。在25及50mg/kg組中的腫瘤再生長以比對照組更快的步調起始展開，且在研究結束前，MTV接近對照組。100mg/kg治療並未顯示此快速的再生長，但顯示比太平洋紫杉醇更快的腫瘤生長。

實例38：人類臨床試驗

在首次接受化學治療之末期或轉移胰腺癌的個體中以化合物A及安慰劑進行隨機、雙盲、開放標記、組織學控制、單組分派、安全性/有效性人類第I期臨床試驗。

此研究的主要目的在於評估化合物A之安全性與耐受性。次要結果為評估以化合物A治療後的反應速率、臨床獲益及腫瘤縮小。再者，此研究將設計為評估具胰腺癌的個體之病症進展的時間及整體存活率。此外，可以DCE-MRI來評估腫瘤血管參數(包括例如血液流量、血容量、峰值時間ROC-接受者操作者特徵曲線)之藥力學變化。

再者，使用諸如MEK1及MEK2遺傳多態現象及血清蛋白質組學之生物標記來關聯結果。此亦允許決定在處理後腫瘤的切除率，以及評估化合物A之MTD。

在研究期間，化合物A將以約1mg、約1.5mg、約2mg、約2.5mg、約3mg、約3.5mg、約4.0mg、約4.5mg、約5mg、約5.5mg、約6mg、約6.5mg、約7mg、約7.5mg、約8mg、約8.5mg、約9mg、約9.5mg、約10mg、約10.5mg、約11mg、約11.5mg、約12mg、約12.5mg、約13mg、約13.5mg、約14mg、約14.5或約15mg之不同劑量投與。

此研究的選用準則基於下列因素：

組織學/病理學確定局部末期無法切除或邊界無法切除(borderline unresectable)胰腺癌，且無轉移性病症證據。

局部末期無法切除胰腺癌的診斷基於雙相電腦斷層掃描及/或內視鏡超音波(EUS)(描述於附件F之EUS)的評估。

依RECIST的可量測病症且在登記療程建議表前14天內由雙相電腦斷層掃描獲得。

腫瘤大小在雙相電腦斷層掃描中大於或等於2cm。

適當的器官功能在登記的14天內記錄，實證為：絕對嗜中性細胞數>1500/mm³ ；血小板數；100,000/mm³ ；血紅素9gm/dL，在前4星期無輸血需求；總膽紅素常規上限的1.5倍(ULN)；轉胺酶(AST及/或ALT)；PT(或INR)且aPTT在正常範圍內(接受以諸如殺鼠靈或肝素之試劑進行抗凝血治療之個體被允許參加)；對於接受殺鼠靈之個體進行至少每星期的緊密監測直至INR在預劑量下量測為安定的，如依當地照護標準定義；使用Cockcroft-Gault方程式計算肌內醯胺淨度為>60ml/min。

排除準則包括：在登記前在6個月內以化合物A先前治療；臨床證實腫瘤侵入十二指腸黏膜(以內視鏡或內視鏡超音波記錄)；在研究登記的14天內經歷小型外科手術(例如細針抽取或細針活體檢查)；在研究登記的21天內經歷大型外科手術、明顯的創傷或嚴重的非癒合傷口、潰瘍或骨折；在研究藥物投與之前6個月內經歷下列任一者：嚴重/不穩定心絞痛(在休息時的心絞痛症狀)、新開始的心絞痛(在最後3個月內開始)或心肌梗塞、充血性心臟衰竭、需要抗心律不整治療的心律不整；在過去6個月內的栓塞或栓塞形成事件病史，諸如腦血管意外或暫時性腦缺血；動脈瘤或動靜脈畸形病史；已知的人類免疫不全病毒(HIV)感染或慢性B或C型肝炎；活躍期臨床嚴重感染大於CTCAE第2級；在研究登記的4星期內接受任何試驗藥；儘管進行最佳的醫藥控制，高血壓仍未得到控制，其定義為收縮壓大於150mmHg或舒張壓大於90mmHg；在研究登記的4星期內肺泡出血/流血事件大於CTCAE第2級；在研究登記的4星期內任何其他出血/流血事件大於CTCAE第3級；出血素質或凝血病的事實或病史；以阿斯匹靈或其他非類固醇抗發炎製劑長期、每日治療；使用金絲桃(St. John's Wort)、立汎黴素(rifampin，rifampicin)、酮伴那坐(ketoconazole)、適樸諾(itraconazole)、林多那凡(ritonavir)或葡萄柚汁；已知或懷疑對化合物A過敏；任何損傷個體吞嚥整顆藥丸之能力的狀況；任何吸收不良問題；其他嚴重、急性或慢性醫療或精神狀況，或可能增加附隨研究參予或研究藥投與的風險，或可能干擾研究結果的解釋，研究者判斷該個體不適於參予此研究之實驗室檢查異常；膠原蛋白血管病症病史；對進行核磁共振影像之任何禁忌。

實例39：人類臨床試驗

以與實例117中所指定相同的方式，在首次接受化學治療之末期或轉移胃癌的個體中以化合物A進行隨機、雙盲、開放標記、組織學控制、單組分派、安全性/有效性人類第I期臨床試驗，例外之處在於所參與之個體經診斷患有胃淋巴瘤、胃基質腫瘤或胃類癌瘤。

實例40：大鼠之鹿角菜膠誘發之爪子水腫(CPE)

在注入1%鹿角菜膠懸浮液至雄性Sprague-Dawley大鼠(每治療組N=6)的右後足墊之前2小時，口服投與化合物A(6、20及60mg/kg)或吲哚美辛(indomethacin)(3mg/kg)。在3小時後以體積描記法評估爪子體積來量測後爪水腫。後爪水腫減輕30%或更多表示顯著的急性抗發炎活性。吲哚美辛(Indo)用作陽性對照藥。圖22顯示每一治療組中爪子體積的增加，說明口服投與化合物A造成在所有劑量組的大鼠鹿角菜膠爪子水腫模型中顯著的抗發炎活性。

實例41：大鼠佐劑性關節炎發炎檢定

在大鼠佐劑誘發性關節炎模型中，將完全弗氏佐劑(Complete Freund's adjuvant，CFA)注射入大鼠的右後爪中以誘發類似於人類之類風濕性關節炎的病變。以2、6及20mg/kg口服投與化合物A持續5天。亦以5mg/kg口服投與地塞米松持續5天。在第1天及第4天經皮下注射投與10mg/kg之依那西普(Enbrel)。將CFA在第1天之第1劑量之後1小時注射入至右後爪中。對於急性期，測定第1天及第5天的右後爪腫脹相對於媒劑處理對照組之抑制百分比，同時對於延遲期而言，測定第14天及第18天的左後爪腫脹相對於媒劑處理對照組之抑制百分比。多發性關節炎係依據前爪、尾部、鼻或耳之腫脹的存在評分。

圖23A及圖23B 顯示不同治療組相對於對照組的腫脹之抑制百分比。20mg/kg之化合物A在急性期及延遲期皆顯示在腫脹上有顯著的減輕。對於多發性關節炎評分，媒劑治療組之6隻動物皆在前爪及尾部上具有腫脹。對於20mg/kg化合物A組，6隻中的2隻在前爪上不具有腫脹且6隻中的4隻在尾部上不具有腫脹。對於依那西普組，無任一動物免於前爪上不具有腫脹且6隻中的3隻在尾部上不具有腫脹。

實例42：小鼠中之膠原蛋白-抗體誘發性關節炎(CAIA)的抑制

在第0天向雄性Balb/c小鼠(每一治療組N=8)經靜脈內(尾部靜脈)注射2mg之膠原蛋白抗體混合液(Chondrex)。自第0天至第4天口服投與RDEA119(1、3 ＆ 10mg/kg QD)或地塞米松(1mg/kg QD)，同時在第1天及第3天皮下注射依那西普。除了未試驗過之動物以外，於第3天向所有小鼠經腹膜內注射LPS(50μg)。判定所有四肢之關節炎分數且顯示於圖24中(最大分數為16)。對於所有測試物品及參考藥物注意到顯著的抗發炎活性。使用依那西普及地塞米松作為陽性對照。

實例43：活體內細胞增殖檢定

測定以MEK蛋白質激酶抑制劑處理之癌細胞的細胞增殖計數之方法在此項技術領域內已為人所瞭解且描述於Kenny，L.M.等人著之Positron Emission Tomography(PET)Imaging of Cell Proliferation in Oncology，Clinical Oncology，16：176-185(2004)，其係以全文引用之方式併入本文中。在活體內檢驗MEK蛋白質激酶抑制劑(例如化合物A)以測定其對癌細胞增殖之影響。50位個體自願地參與此項研究，其皆遭受著處於類似癌症發展階段之胰腺癌之苦。向25位個體投與化合物A之組合。向最後25位個體投與安慰劑。向每一個體投與日劑量之放射性標記示蹤劑(例如經標記之氟-2-去氧-DF-葡萄糖(FDG))持續14天。

在處理14天後，受過訓練之醫師使用非侵入性正子放射斷層攝影(PET)成像裝置偵測腫瘤細胞增殖。再者，此受過訓練之醫師將測定以化合物A及安慰劑處理之個體的腫瘤與正常細胞組織二者之細胞增殖計數。結果指示在MEK蛋白質激酶抑制劑(例如化合物A)與安慰劑之間細胞增殖計數有所減少。此使用經標記示蹤劑及PET成像來測定細胞增殖計數之檢定在本文中稱為「活體內細胞增殖方法」。其他活體內 細胞增殖方法在此項技術領域內係已知的。

使用類似分析來測定腫瘤大小之減小。

實例44：活體內細胞調亡檢定

在活體內檢驗MEK抑制劑(例如化合物A)以測定其對癌細胞之細胞調亡的影響。40位個體自願地參與此項研究，其皆遭受著處於類似癌症發展階段之胰腺癌之苦。向20位個體投與化合物A且向20位個體投與安慰劑。向每一個體投與日劑量持續14天。

在14天後，每一個體將消耗與一標記偶合之可偵測脂多醣結合蛋白質(LBP)試劑。依據WO/2006/054068(其係以全文引用之方式併入本文中)，接著使每一個體處於掃描裝置之掃描範圍內，藉此掃描裝置偵測與死細胞結合之消耗試劑。死細胞數目與每一個體之細胞調亡程度有關聯。將投與組合之個體的細胞調亡程度與投與單一實體藥劑之個體的細胞調亡程度進行比較，並與投與安慰劑之組群進行比較。此使用脂多醣結合蛋白質與掃描裝置來偵測細胞調亡程度的方法在本文中稱為「活體內細胞調亡方法」。

實例45：溶解研究

如上述實例製備含有化合物A之膠囊。使用USP<711>溶解方法獲得下列溶解數據。

圖1 顯示在植入A375黑素瘤、Colo205結腸腫瘤、A431表皮樣腫瘤或HT-29結腸腫瘤細胞之小鼠中平均腫瘤體積與時間(天)關係的圖式。小鼠以每天一次口服給藥(25mg/kg、50mg/kg或100mg/kg)共14天；

圖2 顯示給予50mg/kg QD、25mg/kg BID、50mg/kg QD及12.5mg/kg BID劑量之A375異體移植小鼠中的腫瘤生長抑制%(%TGI)的圖式；

圖3 顯示移植Colo205腫瘤細胞之雌性nu/nu小鼠中血漿濃度(log nM)與pERK抑制%關係的圖式。小鼠給予2.5、5、10或25mg/kg的單一劑量；

圖4 顯示在人類中給予單一劑量2mg(2×1mg膠囊)、4mg(4×1mg膠囊)或6mg(6×1mg膠囊)後血漿濃度(ng/mL)與時間(小時)關係的圖式；

圖5 為N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺形式A之粉末x光繞射(PXRD)譜圖之圖式，其係使用Inel XRG-3000繞射儀產生。此圖係以由每秒計數所定義的峰強度相對於繞射角2θ(°)作圖；

圖6 為使用TA Instruments示差掃描熱量測定儀Q1000產生之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺形式A之示差掃描熱量測定(DSC)調製熱譜圖。此圖係以經校正之熱流量(單位為瓦特/公克，W/g)對量測之試樣溫度(℃)作圖；

圖7 為N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺形式A(上部)及N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺非晶形(底部)的PXRD譜圖之圖，其使用Inel XRG-3000繞射儀產生。此圖係以由每秒計數所定義的峰強度對繞射角2θ(°)作圖；

圖8 顯示使用VTI SGA-100蒸氣吸附分析儀產生的N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺形式A之動態蒸氣吸附/脫附(DVS)等溫線；

圖9 顯示使用TA Instrument 2950熱重分析儀產生的N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺形式A之熱動分析(TG)熱譜圖；

圖10(a)及圖10(b) 顯示暴露於增加濃度之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺的對數相分裂之A375細胞的生長停滯。分析細胞之ATP含量。使用1μM N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺測定100%生長停滯；

圖11 顯示在A375細胞中48小時的AK檢定。對數相分裂之A375細胞暴露於N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺及PD-325901歷時48小時並分析AK釋放；

圖12A-12C 顯示N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺對(A)人類結腸直腸癌Colo205細胞(GI₅₀ =11nM)之生長抑制；(B)A375細胞(GI₅₀ =22nM)之生長抑制及(C)MDA-MB231細胞之抑制，其並未顯示在二維固著依賴性檢定中N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺-引起生長停滯；

圖13A 顯示人類結腸直腸癌Colo205細胞之生長的抑制，以及分別在6nM及11nM下之GI₅₀ 值；

圖13B 顯示A375細胞之生長的抑制以及在5nM及22nM下的GI₅₀ 值；

圖14A及圖14B 顯示N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺對細胞週期進展之影響，其展示A375細胞暴露於N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺引起細胞週期之G1期的停滯，此係由G2及S期時的細胞消耗所指示；

圖15A及圖15B 顯示在暴露於N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺3天(圖15A)及6天(圖15B)後N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺對胃癌(胃腺癌)細胞株AGS的影響。y軸為相對於媒劑之細胞數目且x軸為N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺的μM；

圖16 顯示在帶有腫瘤之小鼠中以N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺(每天一次2mg/kg，口服(po)；每天一次10mg/kg，口服及每天一次50mg/kg，口服)治療後的平均肝重量；

圖17 顯示在帶有腫瘤之小鼠中以N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺(每天一次2mg/kg，口服；每天一次10mg/kg，口服及每天一次50mg/kg，口服)治療後的肝腫瘤重量；

圖18 顯示以N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺(2mg/kg；10mg/kg；及50mg/kg)治療後的平均腫瘤重量；

圖19 顯示在細胞數目(相對於媒劑)對N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺之濃度的曲線圖中Hs746t細胞增殖之抑制；

圖20A 繪示比較在以增加濃度之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺於處理非小細胞肺癌(NSCLC)MV522細胞之第5天的各別細胞凋亡程度；

圖20B 繪示在以增加濃度之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺處理非小細胞肺癌(NSCLC)H358細胞之第5天的各別細胞凋亡程度；

圖20C 繪示在以增加濃度之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺於處理非小細胞肺癌(NSCLC)A549細胞之第6天的各別細胞凋亡程度；

圖20D 繪示在以增加濃度之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺於處理非小細胞肺癌(NSCLC)H727細胞之第5天的各別細胞凋亡程度；

圖20E 繪示在以增加濃度之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺於處理結腸HT29細胞之第5天的各別細胞凋亡程度；

圖20F 繪示在以增加濃度之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺於處理結腸HCT116細胞之第6天的各別細胞凋亡程度；

圖20G 繪示在以增加濃度之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺於處理結腸HUH7肝癌細胞之第5天的各別細胞凋亡程度；

圖20H 繪示在以增加濃度之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺於處理肉瘤U2-OS細胞之第5天的各別細胞凋亡程度；

圖20I 繪示在以增加濃度之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺於處理神經膠質瘤D37細胞之第5天的各別細胞凋亡程度；

圖21 顯示化合物A對MEK1及MEK2相對於一組205酶(10μM)之選擇性。細胞株為Colo205、A375、A431及HT-29；

圖22 為顯示在大鼠鹿角菜膠爪子水腫模型中向大鼠投與6、20、60及200mg/kg之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺後在各治療組中爪子體積有所增加且相對於媒劑對照組水腫有所減輕的圖；

圖23A 顯示在佐劑誘發性關節炎模型中在急性期時以2、6及20mg/kg之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺治療之大鼠的腫脹受到抑制；

圖23B 顯示在佐劑誘發性關節炎模型中在延遲期時以2、6及20mg/kg之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺治療之大鼠的腫脹受到抑制；及

圖24 顯示以1、3及10mg/kg QD之N-(S)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺治療之膠原蛋白-抗體誘發性關節炎(CAIA)小鼠的平均關節炎分數。

(無元件符號說明)

Claims (27)

1. 一種N-(-)-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺之結晶多晶型A，其具有與顯示於圖5中的粉末x光繞射譜圖實質上相同之粉末x光繞射譜圖，或與顯示於圖6中的示差掃描熱量測定譜圖實質上相同之示差掃描熱量測定譜圖。
2. 如請求項1之結晶多晶型，其具有由示差掃描熱量測定法測出之約143℃的熔點初始值。
3. 如請求項1之結晶多晶型，其係實質上無水。
4. 如請求項2之結晶多晶型，其係實質上無水。
5. 如請求項1或3之結晶多晶型，其係實質上無溶劑。
6. 如請求項2之結晶多晶型，其係實質上無溶劑。
7. 如請求項4之結晶多晶型，其係實質上無溶劑。
8. 如請求項1之結晶多晶型，其係藉由包含結晶非晶形N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺之步驟的方法製備。
9. 一種醫藥組合物，其包含有效量之如請求項1至8中任一項之之結晶多晶型及至少一種賦形劑或載劑。
10. 一種將請求項1至8中任一項之多晶型用於製備藥劑之用途，其中該藥劑係用於治療為MEK介導之病症所苦之個體之該病症。
11. 如請求項10之用途，其中該MEK介導之病症係選自由發炎性病症、感染性病症、自體免疫病症、中風、局部缺血、心臟病症、神經病症、纖維化病症、增生性病症、 過度增生性病症、腫瘤(tumor)、白血病、新生瘤(neoplasms)、癌症(cancer)、上皮癌(carcinomas)、代謝疾病及惡性疾病所組成之群。
12. 如請求項11之用途，其中該MEK介導之病症係增生性病症。
13. 如請求項12之用途，其中該增生性病症係癌症、牛皮癬、再狹窄、自體免疫疾病、或動脈粥狀硬化。
14. 如請求項13之用途，其中該癌症係腦癌、乳癌、肺癌、卵巢癌、胰臟癌、肝細胞癌、前列腺癌、腎癌、結腸直腸癌、白血病、骨髓性白血病、膠質母細胞瘤、濾泡性淋巴瘤、陰性前細胞(Pre-B)急性白血病、慢性淋巴球B-白血病、胃癌、間皮瘤或小細胞肺癌。
15. 如請求項11至14中任一項之用途，其中該藥劑係用於與至少一種治療劑或至少一種額外的癌症療法併用，其係選自放射療法、非MEK激酶抑制劑療法、化學治療、外科手術、糖皮質素、甲胺蝶呤(methotrexate)、生物反應修飾劑，或其組合。
16. 如請求項15之用途，其中該治療劑係索拉非尼(sorafenib)或吉西他濱(gemcitabine)。
17. 如請求項16之用途，其中該藥劑係用於與索拉非尼併用以治療肝細胞癌。
18. 如請求項16之用途，其中該藥劑係用於與吉西他濱併用以治療胰臟癌。
19. 一種將請求項9中之組合物用於製備藥劑之用途，其中 該藥劑係用於治療為MEK介導之病症所苦之個體之該病症。
20. 如請求項19之方法，其中該MEK介導之病症係選自由發炎性病症、感染性病症、自體免疫病症、中風、局部缺血、心臟病症、神經病症、纖維化病症、增生性病症、過度增生性病症、腫瘤(tumor)、白血病、新生瘤(neoplasms)、癌症(cancer)、上皮癌(carcinomas)、代謝疾病及惡性疾病所組成之群。
21. 如請求項20之用途，其中該MEK介導之病症係增生性病症。
22. 如請求項21之用途，其中該增生性病症係癌症、牛皮癬、再狹窄、自體免疫疾病、或動脈粥狀硬化。
23. 如請求項22之用途，其中該癌症係腦癌、乳癌、肺癌、卵巢癌、胰臟癌、肝細胞癌、前列腺癌、腎癌、結腸直腸癌、白血病、骨髓性白血病、膠質母細胞瘤、濾泡性淋巴瘤、陰性前細胞(Pre-B)急性白血病、慢性淋巴球B-白血病、胃癌、間皮瘤或小細胞肺癌。
24. 如請求項19至23中任一項之用途，其中該藥劑係用於與至少一種治療劑或至少一種額外的癌症療法併用，其係選自放射療法、非MEK激酶抑制劑療法、化學治療、外科手術、糖皮質素、甲胺蝶呤(methotrexate)、生物反應修飾劑，或其組合。
25. 如請求項24之用途，其中該治療劑係索拉非尼(sorafenib)或吉西他濱(gemcitabine)。
26. 如請求項25之用途，其中該藥劑係用於與索拉非尼併用以治療肝細胞癌。
27. 如請求項25之用途，其中該藥劑係用於與吉西他濱併用以治療胰臟癌。