[go: up one dir, main page]

TWI434855B - 結合物及其在免疫分析中作為參考標準之用途 - Google Patents

結合物及其在免疫分析中作為參考標準之用途 Download PDF

Info

Publication number
TWI434855B
TWI434855B TW96143238A TW96143238A TWI434855B TW I434855 B TWI434855 B TW I434855B TW 96143238 A TW96143238 A TW 96143238A TW 96143238 A TW96143238 A TW 96143238A TW I434855 B TWI434855 B TW I434855B
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
antibody
immunoglobulin
genetic
parent
human
Prior art date
Application number
TW96143238A
Other languages
English (en)
Other versions
TW200829601A (en
Inventor
Kay-Gunnar Stubenrauch
Rudolf Vogel
Uwe Wessels
Original Assignee
Hoffmann La Roche
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoffmann La Roche filed Critical Hoffmann La Roche
Publication of TW200829601A publication Critical patent/TW200829601A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI434855B publication Critical patent/TWI434855B/zh

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/42—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins
    • C07K16/4283—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an allotypic or isotypic determinant on Ig
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/42—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/42—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins
    • C07K16/4208—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an idiotypic determinant on Ig
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/42—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins
    • C07K16/4208—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an idiotypic determinant on Ig
    • C07K16/4241—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an idiotypic determinant on Ig against anti-human or anti-animal Ig
    • C07K16/4258—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an idiotypic determinant on Ig against anti-human or anti-animal Ig against anti-receptor Ig
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/42—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins
    • C07K16/4283—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an allotypic or isotypic determinant on Ig
    • C07K16/4291—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an allotypic or isotypic determinant on Ig against IgE
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
    • C07K16/461—Igs containing Ig-regions, -domains or -residues form different species
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/531—Production of immunochemical test materials
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
    • G01N33/537—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with separation of immune complex from unbound antigen or antibody
    • G01N33/539—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with separation of immune complex from unbound antigen or antibody involving precipitating reagent, e.g. ammonium sulfate
    • G01N33/541—Double or second antibody, i.e. precipitating antibody
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/551—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being inorganic
    • G01N33/553—Metal or metal coated
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6854—Immunoglobulins
    • G01N33/6857—Antibody fragments
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6854—Immunoglobulins
    • G01N33/686—Anti-idiotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/54—F(ab')2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
    • G01N21/59—Transmissivity
    • G01N2021/5903—Transmissivity using surface plasmon resonance [SPR], e.g. extraordinary optical transmission [EOT]
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/24—Immunology or allergic disorders
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/52—Predicting or monitoring the response to treatment, e.g. for selection of therapy based on assay results in personalised medicine; Prognosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Description

結合物及其在免疫分析中作為參考標準之用途
本發明包含結合物及其在用於測定抗藥物抗體之免疫分析中作為參考標準或陽性對照之用途。
以單株抗體進行之標準固相免疫分析包括在固體支撐物上所吸附之抗體(捕捉抗體)、抗原及與可偵測標記結合之抗原的另一抗原決定基之抗體(示蹤抗體(tracer antibody))之間形成複合物。因此，形成夾層結構：固體支撐物-捕捉抗體-抗原-示蹤抗體。在該夾層結構中，與抗體結合之可偵測標記的強度與培育介質中之抗原濃度成比例。標準夾層法亦稱為雙抗原橋接免疫分析，此係因為捕捉抗體及示蹤抗體與抗原之不同抗原決定基結合。Hoesel,W.，等人於J.Immunol.Methods 294(2004)101-110中報導藉以使用與胺基及碳水化合物基團偶合之固定化rhEPO混合物的抗EPO雙抗原橋接分析。
諸如雙抗原橋接ELISA之免疫分析為研究患者對抗體藥物(治療抗體或診斷抗體)之免疫原性應答中常見的分析類型。Mire-Sluis,A.R.，等人於J.Immunol.Methods 289(2004)1-16中概述使用偵測對抗生物技術產品之宿主抗體來設計及最優化免疫分析的推薦方法。根據Mire-Sluis等人，熟知之抗藥物抗體分析格式展示顯著缺點。舉例而言，在WO 2005/045058及WO 90/006515中提及抗藥物抗體分析。舉例而言，在US 5,219,730、WO 87/002778、EP 0 139 389及EP 0 170 302中提及抗遺傳型抗體分析。Wadhwa,M等人於J.Immunol.Methods 278(2003)1-17中報導偵測、量測及表徵由治療性生物製劑誘導之不良抗體的策略。
人類抗人類抗體之血清學分析係描述於Ritter,G.,Cancer Res.61(2001)6851-6859及WO 2003/016909中。IgG類人類抗人類抗體之識別在分析之前需要額外之蛋白G沈澱步驟。
本發明包含一種結合物，其包含與親本抗體之CDR區特異性結合之抗遺傳型抗體及單一免疫球蛋白類之參考免疫球蛋白。
較佳地，該參考免疫球蛋白未與該抗遺傳型抗體及該親本抗體特異性結合。
本發明進一步包含本發明結合物在用於測定人類樣本中之抗親本抗體之抗體的免疫分析中作為參考標準之用途。
較佳地，該結合物在使用包含捕捉抗體及示蹤抗體之夾層免疫分析對樣本中之抗親本抗體之抗體的免疫學測定中用作參考標準或陽性對照。
較佳地，該捕捉抗體或該示蹤抗體為該親本抗體。
較佳地，該抗親本抗體之抗體為對抗該親本抗體之抗遺傳型抗體。
較佳地，該親本抗體為治療抗體或診斷抗體。
較佳地，該捕捉抗體係選自包含以下各物之群：該親本 抗體之輕鏈、重鏈可變區、Fab、Fab'、F(ab)2 或F(ab')2 片段。
較佳地，捕捉抗體與固體支撐物之結合係藉由被動吸附來進行。
較佳地，捕捉抗體係經由特異性結合對而固定。
較佳地，捕捉抗體係與生物素結合且經由固定化抗生物素蛋白(Avidin)或抗生蛋白鏈菌素(Streptavidin)進行固定。
較佳地，示蹤抗體係經由特異性結合對與可偵測標記結合。
較佳地，示蹤抗體係與地高辛精(digoxigenin)結合且與可偵測標記之連接係經由對抗地高辛精之抗體來進行。
較佳地，免疫學測定係藉由表面電漿共振來進行。
較佳地，捕捉抗體及/或示蹤抗體與其結合搭配物之結合係藉由以下步驟來進行：使其經由N-末端及/或ε-胺基(離胺酸)、不同離胺酸之ε-胺基、抗體胺基酸骨架之羧基-、硫氫基-、羥基-及/或酚系官能基，及/或抗體碳水化合物結構之糖醇基而化學結合。
較佳地，捕捉抗體係藉由被動吸附與固體支撐物結合且因此與固體支撐物結合之捕捉抗體包含至少兩種經由不同抗體位點與固體支撐物結合之捕捉抗體的混合物。被動吸附係(例如)由Butler,J.E.,Solid Phases in Immunoassay於Immunoassays,Diamandis,E.P.及Christopoulos,T.K.(編)，Academic Press San Diego(1996)，第205-225頁中描 述。
在本發明之一較佳實施例中，捕捉抗體係經由特異性結合對而固定。該結合對(第一組份/第二組份)為(例如)抗生蛋白鏈菌素或抗生物素蛋白/生物素、抗體/抗原(例如參見Hermanson,G.T等人，Bioconjugate Techniques,Academic Press,1996)、凝聚素/多醣、類固醇/類固醇結合蛋白、激素/激素受體、酶/底物、IgG/蛋白A及/或G等。較佳地，捕捉親本抗體係與生物素結合且經由固定化抗生物素蛋白或抗生蛋白鏈菌素來進行固定。
在本發明之一較佳實施例中，示蹤抗體係與可偵測標記結合，較佳經由特異性結合對而結合。該結合對(第一組份/第二組份)為(例如)抗生蛋白鏈菌素或抗生物素蛋白/生物素、抗體/抗原(例如參見Hermanson,G.T等人，Bioconjugate Techniques,Academic Press,1996)、凝聚素/多醣、類固醇/類固醇結合蛋白、激素/激素受體、酶/底物、IgG/蛋白A及/或G等。較佳地，示蹤親本抗體係經由地高辛精及對抗地高辛精之抗體而與可偵測標記結合。或者，示蹤親本抗體係與電致化學發光標記(如雙吡啶釕錯合物)結合。
本發明包含一種結合物，其包含與親本抗體之CDR區特異性結合之抗遺傳型抗體及單一免疫球蛋白類之參考免疫球蛋白。較佳地，該親本抗體為治療抗體。較佳地，該親本抗體為診斷抗體。
本發明之術語"與親本抗體之CDR區特異性結合之抗遺傳型抗體"表示源於非人類動物體內之親本抗體的抗體，亦即非人類抗體。較佳地，該源於親本抗體之抗體係源於齧齒動物或獼猴，尤其較佳源於小鼠、家兔或食蟹猴，或藉由呈現技術而獲得，較佳藉由噬菌體或核糖體呈現技術獲得。較佳地，該抗遺傳型抗體為多株抗體。亦較佳地，該抗遺傳型抗體為單株抗體。較佳以親本抗體或其片段進行動物之免疫。在另一步驟中，該動物之免疫球蛋白係使用親和吸附至親本抗體之CDR區而分離及純化。術語"親本抗體之CDR區"表示親本抗體輕鏈及重鏈之CDR區，亦即包含親本抗體輕鏈CDR1、CDR2、CDR3、親本抗體重鏈CDR1、CDR2、CDR3。
本發明之術語"親本抗體"表示可作為藥物(藥物抗體或治療抗體)或作為診斷方式(診斷抗體)投與個體之抗體，使得該個體之樣本在投藥之後可能包含該親本抗體。在根據本發明進行之一種分析中，親本抗體、捕捉(親本)抗體及/或示蹤(親本)抗體包含"相同"抗體分子，例如由相同表現載體重組產生且包含相同胺基酸序列。藥物抗體(治療單株抗體)廣泛用於治療各種疾病，諸如致癌疾病(例如，包括非霍奇金氏淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma)、乳癌及結腸直腸癌之血液科及實體惡性疾病)。該等抗體(例如)由Levene,A.P.，等人，Journal of the Royal Society of Medicine 98(2005)146-152所描述。該等抗體為(例如)對抗以下各物之抗體：CCR4、CD19、CD20、CD22、 CD28、HLA-DR、CD33、CD40、CD52、CD80、CSF-1R、CTLA-4、纖維母細胞活化蛋白(FAP)、EGFR、G250、GD3、HER2/neu、HER3、HER4、前列腺特異性膜抗原(PSMA)、CD56、VEGF、VEGF2、TLSP-R、TIE-1、TIE-2、TNF-α、TNF樣細胞凋亡微弱誘導劑(TWEAK)、CEA、Ep-CAM、TRAIL、TRAIL-受體1、TRAIL-受體2、淋巴毒素-β受體、Levis Y抗原、hepsin、與黑素瘤相關聯之硫酸軟骨素蛋白聚糖(MCSP)、IL-1受體、IL-6受體、VEGF-受體1、VEGF-受體2或IGF-1受體。治療抗體亦由Groner,B.，等人，Curr.Mol.Med.4(2004)539-547及Harris,M.,Lancet Oncol.5(2004)292-302描述。
如本文所用之術語"參考免疫球蛋白"表示完整免疫球蛋白，亦即包含Fab區及Fc區以及完全免疫球蛋白片段(諸如Fc區、CH 2域或CH 3域)之免疫球蛋白。參考免疫球蛋白較佳為人類免疫球蛋白。較佳地，"參考免疫球蛋白"為人類免疫球蛋白或人類免疫球蛋白之Fc區。"參考免疫球蛋白"不與抗遺傳型抗體特異性結合且不與本發明結合物之親本抗體特異性結合。免疫球蛋白之Fc區係藉由使完整免疫球蛋白經胃蛋白酶或木瓜蛋白酶裂解而獲得。參考免疫球蛋白為"單一免疫球蛋白類"之免疫球蛋白。術語"單一免疫球蛋白類"表示參考免疫球蛋白包含選自A、E、M及G類免疫球蛋白之免疫球蛋白類特異性恆定區胺基酸序列。免疫球蛋白類特異性恆定區胺基酸序列參見例如Pink,J.R等人，Biochem.J.117(1970)33-47。
"抗親本抗體之抗體"為與親本抗體特異性結合之抗體，亦即對抗親本抗體之抗體。同樣地，抗-抗IL-6R抗體之抗體為與抗-IL-6R抗體特異性結合之抗體。"抗親本抗體之抗體"為針對親本抗體任何區(如親本抗體之可變區、恆定區或甘油結構)之抗體。該等抗親本抗體之抗體可在抗體療法期間隨患者之免疫原性反應而出現(參見Pan,Y.，等人，FASEB J.9(1995)43-49)。"抗遺傳型抗體"為與親本抗體之CDR區特異性結合之抗體。抗遺傳型抗體與親本抗體之輕鏈CDR1區、重鏈CDR2區、輕鏈CDR3區、重鏈CDR1區、重鏈CDR2區或重鏈CDR3區特異性結合。
實例(較佳為單株)親本抗體為對抗IL-6受體之抗體(抗-IL-6R抗體)。該抗體(例如)由Mihara,M.等人，Clin.Immunol.98(2001)319-326，Nishimoto,N等人，Blood 106(2005)2627-2632於臨床試驗NCT00046774中或於WO 2004/096274中描述。
實例(較佳為單株)親本抗體為對抗IGF-1受體之抗體(抗-IGF-1R抗體)。該抗體(例如)描述於WO 2004/087756或WO 2005/005635中。
本發明之術語"結合"或"特異性結合"係指在BIAcore分析中以小於10-6 M(M=mol/l)(例如10-12 M)之KD 值、更佳以10-9 M至10-15 M範圍內之KD 值與抗原、免疫球蛋白之恆定區、親本抗體或親本抗體之CDR區結合。若KD 值大於10-5 M(例如10-4 M)，則發現"非特異性結合"。
不同免疫分析之原理(例如)由Hage,D.S.於Anal.Chem. 71(1999)294R-304R描述。Lu,B等人於Analyst 121(1996)29R-32R中報導用於免疫分析中之抗體的定向固定。抗生物素蛋白-生物素-介導之免疫分析(例如)由Wilchek,M及Bayer,E.A.於Methods Enzymol.184(1990)467-469中報導。
抗體(尤其為其恆定域)含有用以與結合搭配物(如表面、蛋白、聚合物(諸如PEG、纖維素或聚苯乙烯(Polystyrol))、酶或結合對之成員)偶合之胺基酸側鏈官能基(亦即化學反應基團)。抗體之化學反應基團為(例如)胺基(離胺酸之ε胺基、α-胺基)、硫醇基(胱胺酸、半胱胺酸及甲硫胺酸)、羧基(天冬胺酸、麩胺酸)及糖-醇基。該等方法(例如)由Aslam,M.及Dent,A.,Bioconjugation,MacMillan Ref.Ltd.(1999)50-100描述。
對於多肽與(例如)固體支撐物之結合而言，需要合適之化學保護劑。該等化學保護劑(例如)在未經保護之側鏈胺處形成鍵結且與N末端處之彼等鍵結相比較不穩定且與其不同。許多該等化學保護劑為已知的(例如參見EP 0 651 761)。較佳化學保護劑包括環狀二羧酸酐，如順丁烯二酸酐或檸康酸酐。
術語"樣本"包括(但不限於)來自人類之任何量的物質。該等物質包括(但不限於)為臨床常規中最廣泛使用之樣本源的個體之全血、血清或血漿。
用於本發明之免疫分析的固體支撐物廣泛描述於此項技術中(參見，例如Butler,J.E.,Methods 22(2000)4-23)。
術語"固體支撐物"表示非流體物質，且包括由諸如聚合物、金屬(順磁性、鐵磁性顆粒)、玻璃及陶瓷之材料製成之晶片、容器及顆粒(包括微粒及珠粒)；凝膠物質，諸如二氧化矽、氧化鋁及聚合物凝膠；可由聚合物、金屬、玻璃及/或陶瓷製成之毛細管；沸石及其他多孔物質；電極；微量滴定盤；固體條帶；及光析管、試管或其他分光計樣本容器。分析之固體支撐物組件與分析可接觸之惰性固體表面之區別在於"固體支撐物"在其表面上含有至少一個欲與捕捉抗體直接或間接相互作用的部分。固體支撐物可為靜止組件，諸如試管、條帶、光析管或微量滴定盤，或可為非靜止組件，諸如珠粒及微粒。微粒亦可用作均勻分析格式之固體支撐物。可使用允許非共價或共價連接蛋白及其他物質之各種微粒。該等顆粒包括聚合物顆粒，諸如聚苯乙烯及聚(甲基丙烯酸甲酯)；金顆粒，諸如金奈米顆粒及金膠體；以及陶瓷顆粒，諸如二氧化矽、玻璃及金屬氧化物顆粒。例如，參見Martin,C.R.等人，Analytical Chemistry-News & Features 70(1998)322A-327A，其以引用的方式併入本文中。
"晶片"為固體、非多孔材料，諸如金屬、玻璃或塑料。該材料可視情況全部或在某些區域經塗佈。在材料表面上存在任何可見的或位於座標中之點陣列。在各點上可固定與材料表面具有或不具有連接劑或間隔劑之所定義多肽。
本文(上文及下文)提及之所有文獻均係以引用的方式併入本文中。
色素原(螢光或發光基團及染料)、酶、NMR活性基團或金屬顆粒、半抗原(例如，地高辛精)為可偵測標記之實例。可偵測標記亦可為光可活化之交聯基團，例如疊氮基或氮丙啶(azirine)基。可由電致化學發光偵測之金屬螯合物亦為較佳之用作可偵測標記的信號發生基團，特定較佳為釕螯合物，諸如釕(雙吡啶基)3 2+ 螯合物。合適釕標記基團(例如)描述於EP 0 580 949、WO 90/05301、WO 90/11511及WO 92/14138中。
本發明包含一種結合物，其包含與親本抗體之CDR區特異性結合之抗遺傳型抗體及單一免疫球蛋白類之參考免疫球蛋白。
本發明包含一種結合物，其包含與親本抗體之CDR區特異性結合之抗遺傳型抗體及單一免疫球蛋白類之參考免疫球蛋白，該單一免疫球蛋白類係選自包含人類免疫球蛋白E、人類免疫球蛋白G、人類免疫球蛋白M或人類免疫球蛋白A之群，亦即參考免疫球蛋白為人類IgE類，或人類IgG類，或人類IgM類，或人類IgA類之免疫球蛋白。
較佳地，本發明包含一種結合物，其包含與親本抗體之CDR區特異性結合之抗遺傳型抗體及不與該抗遺傳型抗體特異性結合且不與該親本抗體特異性結合之單一免疫球蛋白類之參考免疫球蛋白。
較佳地，該親本抗體為治療抗體或診斷抗體。較佳地，該參考免疫球蛋白為單一免疫球蛋白類之不可起作用的免疫球蛋白或單一免疫球蛋白類之免疫球蛋白Fc區。
術語"診斷抗體"表示為天然抗體或重組產生抗體的抗體且其係用於偵測及觀測其標靶抗原。診斷抗體係用於(例如)分析系統(例如ELISA)中或用於活體外成像。診斷抗體可為(例如)經標記之治療抗體。
較佳地，該參考免疫球蛋白為人類免疫球蛋白或人類免疫球蛋白Fc區。
參考免疫球蛋白提供一免疫球蛋白類特異性恆定區，該恆定區可被抗免疫球蛋白類抗體(諸如抗人類免疫球蛋白G抗體)特異性結合。因此，參考免疫球蛋白提供具有可由標籤特異性抗體特異性識別之免疫球蛋白類特異性標籤的本發明結合物。舉例而言，若標籤為免疫球蛋白G恆定區，則標籤特異性抗體為抗免疫球蛋白G抗體。
較佳地，該抗遺傳型抗體為多株抗體，且該參考免疫球蛋白為多株免疫球蛋白。亦較佳地，該抗遺傳型抗體為多株抗體且該參考免疫球蛋白為單株免疫球蛋白。仍較佳地，該抗遺傳型抗體為單株抗體且該參考免疫球蛋白為單株免疫球蛋白。
本發明結合物係藉由使抗遺傳型抗體與參考免疫球蛋白化學結合而獲得。
在本發明結合物中，抗遺傳型抗體為可起作用之免疫球蛋白，而參考免疫球蛋白係為不會起作用之免疫球蛋白。此表示抗遺傳型抗體可與其標靶抗體特異性結合，而參考抗體則不會與任何人類抗原特異性結合。提供參考抗體以呈現與天然存在之免疫球蛋白儘可能類似且不與抗原結合 之Fc區。以下發現亦在本發明之範疇內：抗遺傳型抗體及參考抗體不為相同抗體，亦即其差別至少20%之胺基酸殘基，亦即其具有80%或80%以下之胺基酸序列一致性。參考抗體可為多株抗體或單株抗體。本申請案中所用之術語"單株抗體"表示係由單一細胞及/或其後代所產生之抗體群體。該術語表示抗體具有相同之胺基酸序列，亦即抗體具有一致胺基酸序列，儘管在產生其之細胞的繁殖期間出現無意突變。
本申請案中所用之術語"不會起作用之免疫球蛋白"表示以10-5 mol/l或10-5 mol/l以上(例如，10-3 mol/l)之KD 值(結合親和力)，較佳以10-6 mol/l或10-6 mol/l以上之KD 值與人類抗原結合之免疫球蛋白。結合親和力係以標準結合分析，諸如表面電漿共振技術(BIAcore®)所測定。此結合親和力值並非必須作為確切值來處理；其僅為參考點。其係用於測定及/或選擇對人類抗原不展示免疫球蛋白典型特異性結合且因此在人體內不具有治療活性之免疫球蛋白。此並不排除對非人類抗原展示特異性結合之免疫球蛋白。非人類抗原之此特異性結合與10-7 mol/l或10-7 mol/l以下(例如，10-10 mol/l)之KD 值，較佳與10-8 mol/l或10-8 mol/l以下之KD 值相關聯。
基於轉染瘤細胞(亦即含有自免疫小鼠獲得之經轉染免疫球蛋白基因的淋巴細胞)，可藉由在核酸層面上結合而獲得本發明結合物。
發源於接受生物體外部向哺乳動物投與藥物(例如投與 外源治療性多肽)導致接受哺乳動物之免疫反應。此免疫反應因出現抗藥物抗體而變得顯而易見。為評估該免疫反應，需要一種用於偵測對抗該藥物之抗體的方法。
本發明結合物可在免疫分析中用作參考標準。因此，本發明包含結合物在用於測定人類樣本中之抗親本抗體之抗體的免疫分析中作為參考標準之用途，該結合物包含與親本抗體之CDR區特異性結合之抗遺傳型抗體及單一免疫球蛋白類之參考免疫球蛋白。
本發明結合物亦可在免疫分析中用作陽性對照。此使得能夠(例如)建立偵測界限。因此，本發明包含結合物在用於測定人類樣本中之抗親本抗體之抗體的免疫分析中作為陽性對照之用途，該結合物包含與親本抗體之CDR區特異性結合之抗遺傳型抗體及單一免疫球蛋白類之參考免疫球蛋白。較佳地，在該實施例中，在免疫分析之前將該結合物添加至人類樣本中。
該親本抗體較佳為治療抗體。亦較佳地，親本抗體為鼠科抗體、嵌合抗體、人源化抗體或人類抗體。較佳地，親本抗體為嵌合抗體、人源化抗體或人類抗體。尤其較佳地，該親本抗體為治療嵌合抗體、人源化抗體或人類抗體。可採用不同方法來偵測抵抗親本抗體之抗體，諸如放射免疫分析(RIA)、酶聯結免疫吸附分析(ELISA)、免疫放射測定分析(IRMA)或表面電漿共振(SPR)。
本申請案中所用之術語"治療抗體"及其語法等效物表示意欲經投與至哺乳動物，較佳投與至人類以供用於處理、 治療或診斷疾病的(較佳為單株)抗體。一般藉由重組方式產生治療抗體，例如藉由培育經編碼該治療抗體之核酸轉染的真核細胞而產生。較佳地，治療抗體為鼠科抗體，或人源化抗體，或人類抗體。投與治療抗體以達成所要效應，諸如消耗標靶細胞，或調節ADCC(抗體依賴性細胞介導之細胞毒性)，或調節CDC(補體依賴性細胞毒性)。標靶細胞可為(例如)癌細胞或病毒感染之細胞。為調節ADCC或CDC，必須使治療抗體與標靶細胞結合且其因此對(例如)腫瘤抗原具有特異性，亦即與腫瘤抗原特異性結合。
如本文所用之術語"腫瘤抗原"包括此項技術中已知之含義，包括表現於腫瘤細胞上(或與其發展相關聯)之已知或認為造成腫瘤細胞之致瘤特徵的任何分子。此項技術中已知多種腫瘤抗原。亦可根據彼等熟習此項技術者熟知之技術及分析來判定分子是否為腫瘤抗原，諸如細胞群落分析、轉型分析、活體外或活體內腫瘤形成分析、凝膠遷移分析、基因剔除分析等。較佳地，本文所用之術語"腫瘤抗原"係指人類跨膜蛋白，亦即錨定於細胞之脂質雙層中的細胞膜蛋白。人類跨膜蛋白一般將包含如本文所用之"胞外域"，其可與配位基、親脂性跨膜域、保守胞內域(例如酪胺酸激酶域)及具有若乾酪胺酸殘基(可經磷酸化)之羧基末端信號轉導域結合。腫瘤抗原包括諸如以下之分子：EGFR、HER2/neu、HER3、HER4、EpCAM、CEA、TRAIL、TRAIL-受體1、TRAIL-受體2、淋巴毒素β受體、CCR4、CD19、CD20、CD22、CD28、CD33、CD40、 CD80、CSF-1R、CTLA-4、纖維母細胞活化蛋白(FAP)、hepsin、與黑素瘤相關聯之硫酸軟骨素蛋白聚糖(MCSP)、前列腺特異性膜抗原(PSMA)、VEGF受體1、VEGF受體2、IGF1-R、TSLP-R、TIE-1、TIE-2、TNF-α、TNF樣細胞凋亡微弱誘導劑(TWEAK)或IL-1R。
較佳地，本發明結合物在使用包含捕捉抗體及示蹤抗體之夾層免疫分析的樣本之抗親本抗體之抗體的免疫學測定中用作參考標準。尤其較佳地，該捕捉抗體或該示蹤抗體為該親本抗體。
舉例而言，抗藥物抗體分析在WO 2005/045058及WO 90/006515中提及，抗遺傳型抗體分析在US 5,219,730、WO 87/002778、EP 0 139 389及EP 0 170 302中提及。
較佳地，該抗遺傳型抗體為單株抗體且該參考免疫球蛋白為多株人類免疫球蛋白。亦較佳地，該抗遺傳型抗體為單株抗體且該參考免疫球蛋白為單株人類免疫球蛋白。
本發明結合物較佳在對抗樣本中之親本抗體的抗遺傳型抗體之免疫學測定中用作參考標準。對於免疫學測定而言，採用捕捉抗體及示蹤抗體。在一實施例中，捕捉抗體為親本抗體。較佳地，用作捕捉抗體之親本抗體為完整抗體，亦即其包含輕鏈及重鏈(其中輕鏈包含可變域及恆定域，且其中重鏈包含可變域、CH 1、CH 2、CH 3及可選之CH 4域)及鉸鏈區。較佳地，捕捉抗體係選自包含以下之群：該親本抗體之輕鏈、重鏈可變區、Fab、Fab'、F(ab)2 或F(ab')2 片段，亦即其為該親本抗體之輕鏈、重鏈可變 區、Fab，或Fab'，或F(ab)2 ，或F(ab')2 片段。在另一實施例中，示蹤抗體為親本抗體。在該實施例中，(例如)本發明結合物係經由與結合物之參考免疫球蛋白特異性結合之免疫球蛋白與固體支撐物結合。
示蹤抗體及/或捕捉抗體與其結合搭配物之結合可藉由不同方法來進行，諸如被動吸附、化學結合或經由特異性結合對結合。如本文所用之術語"結合搭配物"表示(例如)固體支撐物、多肽、可偵測標記、特異性結合對之成員。 在一實施例中，捕捉抗體及/或示蹤抗體與其結合搭配物之結合係藉由以下步驟來進行：經由N-末端及/或ε-胺基(離胺酸)、不同離胺酸之ε-胺基、抗體胺基酸骨架之羧基-、硫氫基-、羥基-及/或酚系官能基，及/或抗體碳水化合物結構之糖醇基化學結合。在一實施例中，捕捉抗體及/或示蹤抗體係經由特異性結合對與其結合搭配物結合。較佳地，捕捉抗體係與生物素結合且經由固體支撐物固定化之抗生物素蛋白或抗生蛋白鏈菌素進行與固體支撐物的固定。較佳地，示蹤抗體係與地高辛精結合且經由對抗地高辛精之抗體來進行與可偵測標記之連接。在另一實施例中，捕捉抗體藉由被動吸附與固體支撐物結合。藉由被動吸附與固體支撐物結合之抗體包含經由不同抗體位點與固體支撐物結合之抗體的混合物。因此，藉由被動吸附與固體支撐物結合之捕捉抗體為兩種或兩種以上不同結合物之混合物，其中結合物之區別在於實現與固體支撐物之結合的抗體位點(亦即抗體殘基)。被動吸附(例如)係由Butler, J.E.於"Solid Phases in Immunoassay"，第205-225頁；Diamandis,E.P.及Christopoulos,T.K.(編)：Immunoassays(1996),Academic Press,San Diego中描述。
在本發明之較佳實施例中，捕捉抗體係經由特異性結合對而固定。該結合對(第一組份/第二組份)為(例如)抗生蛋白鏈菌素或抗生物素蛋白/生物素、抗體/抗原(例如參見Hermanson,G.T等人，Bioconjugate Techniques,Academic Press,1996)、凝聚素/多醣、類固醇/類固醇結合蛋白、激素/激素受體、酶/底物、IgG/蛋白A及/或G及/或L等。較佳地，捕捉親本抗體係與生物素結合且經由固定化抗生物素蛋白或抗生蛋白鏈菌素來進行固定。在本發明之另一較佳實施例中，示蹤抗體與可偵測標記結合，較佳經由特異性結合對結合。該結合對(第一組份/第二組份)為(例如)抗生蛋白鏈菌素或抗生物素蛋白/生物素、抗體/抗原、凝聚素/多醣、類固醇/類固醇結合蛋白、激素/激素受體、酶/底物、IgG/蛋白A及/或G及/或L等。較佳地，示蹤親本抗體係經由地高辛精及對抗地高辛精之抗體與可偵測標記結合。或者，示蹤親本抗體係與電致化學發光標記(如雙吡啶釕錯合物)結合。
若將本發明結合物在用於測定人類樣本中對抗親本抗體之抗遺傳型抗體的免疫分析中用作參考標準，則較佳以兩種或兩種以上不同之濃度使用。以對參考標準之不同濃度所測得之反應可計算出校正曲線。
若將本發明結合物在用於測定人類樣本中對抗親本抗體 之抗遺傳型抗體的免疫分析中用作參考標準，則可採用與該結合物之該參考免疫球蛋白特異性結合之(可選)其他抗體。本發明結合物可單獨或與其他可選抗人類免疫球蛋白抗體組合用作參考標準(圖3及4)。
在本申請案中可互換使用之術語"參考標準"或"參考標準物質"表示分析方法之參考點，且係用於設定一值以供與相同分析方法之其他結果相比較。如本文所用之術語"陽性對照"表示若在分析方法中採用則將達成高於界定截取值或臨限值之反應的參考標準物質。一般而言，截取值為對不含有抗藥物抗體之樣本的分析中所獲得之平均值加上所獲得值之兩倍(較佳三倍)的標準差。
本發明進一步包含一種將本發明結合物在免疫分析中用作參考標準的方法，其包含以下步驟：a)使本發明結合物與捕捉抗體接觸，b)偵測該結合物與該捕捉抗體之結合。對於步驟a)中結合之偵測可直接(例如，經由SPR角之變化)或間接(例如，經由示蹤抗體及/或可偵測標記)進行。
本發明進一步包含一種判定抗藥物抗體是否與親本抗體之Fc區或Fab區結合且該抗藥物抗體具有何類免疫球蛋白的方法(例如，參見圖7)。在該方法中，樣本之結合係由經固定親本抗體、該親本抗體之經固定Fc區及/或該親本抗體之經固定Fab區來判定。此可在(例如)BIAcore晶片上進行，其中四個通道中之一者含有經固定親本抗體，一者含有親本抗體之經固定Fc區，一者含有親本抗體之經固定Fab區，且一者含有未經固定之親本抗體。視哪些通道且 因此哪些親本抗體部分展示與樣本之抗藥物抗體結合而定，可判定抗藥物抗體之結合區。藉由抗人類免疫球蛋白E抗體、抗人類免疫球蛋白M抗體、抗人類免疫球蛋白G抗體或抗人類免疫球蛋白A抗體之結合來判定免疫球蛋白之類別。抗人類免疫球蛋白抗體可相繼或相伴使用，較佳相繼使用。本發明結合物可在此方法中用作參考標準。
本發明進一步包含一種判定與樣本中之親本抗體之CDR區特異性結合之抗遺傳型抗體的免疫球蛋白類別之方法，該方法使用包含捕捉抗體、示蹤抗體及本發明結合物的夾層免疫分析，其包含以下步驟：a)使該樣本與捕捉抗體在適於形成捕捉抗體/抗遺傳型抗體複合物之條件下接觸，b)分別將：i)抗人類免疫球蛋白A抗體，ii)抗人類免疫球蛋白E抗體，iii)抗人類免疫球蛋白M抗體，及iv)抗人類免疫球蛋白G抗體，作為示蹤抗體與該捕捉抗體/抗遺傳型抗體複合物接觸，c)測定該等示蹤抗體各自與該複合物之結合且藉此判定該抗遺傳型抗體之免疫球蛋白類別，其中本發明結合物係用作陽性對照。
圖1及圖2中給出該方法之流程及例示性反應曲線圖。
較佳地，該示蹤抗體以如下次序：i)抗人類免疫球蛋白 A抗體，ii)抗人類免疫球蛋白E抗體，iii)抗人類免疫球蛋白M抗體，及iv)抗人類免疫球蛋白G抗體與該捕捉抗體/抗遺傳型抗體複合物接觸，亦即示蹤抗體經相繼接觸。
較佳地，該捕捉抗體係選自包含以下之群：該親本抗體之輕鏈、重鏈可變區、Fab、Fab'、F(ab)2 或F(ab')2 片段。
本發明進一步包含與抗IL-6R抗體之CDR區特異性結合之多株抗體。實例1a)中描述製備本發明多株抗體的方法。
較佳地，判定本發明抗遺傳型抗體之免疫球蛋白類別的方法包含以下步驟：a)使該樣本與捕捉抗體在適於形成捕捉抗體/抗遺傳型抗體複合物之條件下接觸，b)使選自包含抗人類免疫球蛋白G抗體、抗人類免疫球蛋白E抗體、抗人類免疫球蛋白M抗體、抗人類免疫球蛋白A抗體之示蹤抗體群的示蹤抗體與該捕捉抗體/抗遺傳型抗體複合物接觸，c)測定該示蹤抗體與該複合物之結合，d)使該捕捉抗體/抗遺傳型抗體複合物分解，e)以先前未選擇之示蹤抗體重複步驟a)至d)，f)判定該抗遺傳型抗體之免疫球蛋白類別為與該捕捉抗體/抗遺傳型抗體複合物特異性結合之該示蹤抗體的免疫球蛋白。
示蹤抗體較佳係選自抗人類免疫球蛋白G抗體，或抗人類免疫球蛋白E抗體，或抗人類免疫球蛋白M抗體，或抗 人類免疫球蛋白A抗體。
如在本申請案中所用之術語"在適於形成[...]複合物之條件下"及其語法等效物表示所關注抗體/免疫球蛋白(例如，抗遺傳型抗體)在與第二抗體接觸時與其結合之條件。此未必表示100%之所關注抗體與第二抗體結合，但基本上為100%之所關注抗體與第二抗體結合，亦即至少85%之所關注抗體與第二抗體結合，較佳至少90%之所關注抗體與第二抗體結合，較佳至少95%之所關注抗體與第二抗體結合，更佳95%以上之所關注抗體與第二抗體結合。
提供以下實例及圖式以有助於理解本發明，其真實範疇闡述於隨附申請專利範圍中。應瞭解，在不偏離本發明之精神下可對所述程序進行修正。
在以下實例中使用對抗IL-6受體之抗體僅為例示本發明，且非意謂限制本發明之範疇。
實例1
製備與親本抗體之CDR區特異性結合之多株抗遺傳型抗體及E、G、A及M類多株人類血清免疫球蛋白之組合物。
多株抗-抗-IL-6R抗體之抗體(抗-抗-IL-6R-mAb pAb) i)製備對抗單株抗IL-6R抗體之多株抗體 來自家兔血清之多株抗體的純化
根據標準方法以單株抗IL-6R抗體使家兔免疫。在5隻經免疫家兔之生血清中，藉由以Aerosil(1.5%(重量/體積))脫脂移除脂質組份且以硫酸銨(1.7M)使免疫球蛋白沈澱。在酸處理(30分鐘，pH 5.5)且經以50mM NaCl補充之15mM 磷酸鉀緩衝液(pH 7.0)透析後，將混合物藉由DEAE離子交換層析法於pH 7.0下分離。免疫球蛋白G溶離份係處於流動(flow through)中(=家兔抗-抗-IL-6R-mAb pAb)且經濃縮至約25mg/ml。
製備與對抗IL-6R之親本抗體之CDR區特異性結合之家兔抗-抗-IL-6R-mAb抗體
將先前步驟之經濃縮IgG溶離份轉移至具有以150mM NaCl補充之50mM磷酸鉀的緩衝液系統(pH 7.5，PBS)中。將藉由先前技術使抗IL-6R抗體與NHS-瓊脂糖結合製備的具有經固定抗IL-6R抗體(親本抗體)之免疫吸收劑封裝於管柱中，且以補充有150mM NaCl之50mM磷酸鉀緩衝液(pH 7.5)來平衡。
將10mg經濃縮之免疫球蛋白G溶離份/ml免疫吸收劑施用於經PBS平衡之管柱中。將管柱經以PBS、補充有0.05%(重量/體積)Tween® 20之0.5M NaCl及30mM NaCl連續洗滌。將與免疫吸收劑特異性結合之IgG以3mM HCl及1M丙酸溶離。將溶離液經PBS透析。
為消除與人類免疫球蛋白G(IgG)恆定區具有交叉反應性之抗體，將具有經固定人類IgG之親和力純化抗體施用至親和管柱，該等親和力純化抗體係藉由先前技術使非特異性人類IgG與NHS瓊脂糖結合而製備。該管柱係經PBS平衡。將約6mg IgG/ml免疫吸收劑施用至管柱。所要之特異性多株IgG溶離份係處於流動中。隨後，以補充有0.05%(重量/體積)Tween® 20之0.5M NaCl、30mM NaCl、1M丙酸及PBS使管柱再生。將與人類IgG恆定區非特異性結合之抗體的免疫吸附重複兩次以完全消除與人類IgG具有交叉反應性之抗體。
將所得與人類IgG恆定區不具有交叉反應性之經純化多株抗-抗-IL-6R-抗體之抗體濃縮至約4mg/ml且儲存於-80℃下。
ii)多株抗-抗-IL-6R-抗體之抗體與多株人類免疫球蛋白E、人類免疫球蛋白G、人類免疫球蛋白A及人類免疫球蛋白M之結合 製備多株家兔抗-抗-IL-6R抗體之抗體(aa-IL-6R pAb)與人類免疫球蛋白G之結合物 步驟1：製備家兔aa-IL-6R pAb-SATP
將aa-IL-6R pAb經含有150mM NaCl之100mM磷酸鉀緩衝液(pH 7.8)透析且將蛋白溶液調整至約15mg/ml之蛋白濃度。將N-琥珀醯亞胺基-3-乙醯基硫代丙酸酯(SATP)溶解於DMSO中且以1：5(aa-IL-6R pAb：SATP)之莫耳比添加至抗體溶液中。將pH值調整至pH 7.1且將混合物在25℃下培育60分鐘。藉由以最終濃度10mM添加L-離胺酸使反應停止且藉由經含有200mM NaCl、1mM EDTA之10mM磷酸鉀緩衝液(pH 6.1)透析來移除多餘之SATP。
步驟2：製備人類多株人類免疫球蛋白G-MH
將多株人類抗體經30mM磷酸鉀緩衝液(pH 7.4)透析，且此後將蛋白溶液調整至約25mg/ml之蛋白濃度。將馬來醯亞胺己醯基-N-羥基琥珀醯亞胺酯(MHS)溶解於DMSO中 且以1：6(IgG：MHS)之莫耳比添加至抗體溶液中。將pH值調整至pH 7.1且將混合物在25℃下培育60分鐘。藉由以最終濃度10mM添加L-離胺酸使反應停止，將pH值調整至pH 6.2且藉由經含有200mM NaCl、1mM EDTA之10mM磷酸鉀緩衝液(pH 6.1)透析來移除多餘之MHS。
步驟3：aa-IL-6R pAb-SATP與多株人類免疫球蛋白G-MH之結合
藉由以2%(體積/體積)之1M羥基胺(pH 7.5)培育使aa-IL-6R pAb-SATP去乙醯化為aa-IL-6R pAb-SH且在25℃下培育45分鐘。將經去乙醯化之抗體與多株人類免疫球蛋白G-MH(IgG-SH：IgG-MH莫耳比=1：3)混合且以含有200mM NaCl、1mM EDTA之10mM磷酸鉀緩衝液(pH 6.1)稀釋至最終濃度為1.5mg/ml之aa-IL-6R pAb-SH及4.5mg/ml之多株人類免疫球蛋白G-MH。將pH值調整至pH 7.1且將混合物在25℃下培育。以分析型凝膠過濾管柱(例如，TSK 3000)分析結合過程。一般在45分鐘後藉由添加半胱胺酸至1mM之最終濃度而使結合停止。再經歷30分鐘培育時間後，將N-甲基馬來醯亞胺(NMM)添加至5mM之最終濃度且將pH值調整至pH 7.5。在25℃下培育60分鐘後，將結合物藉由S300凝膠過濾層析純化以消除未結合之抗體。
製備家兔aa-IL-6R pAb與人類免疫球蛋白M之結合物 步驟1：製備家兔aa-IL-6R pAb-SATP
將aa-IL-6R pAb經含有150mM NaCl之100mM磷酸鉀緩衝液(pH 7.8)透析且將蛋白溶液調整至約15mg/ml之蛋白 濃度。將N-琥珀醯亞胺基-3-乙醯基硫代丙酸酯(SATP)溶解於DMSO中且以1：5(aa-IL-6R pAb：SATP)之莫耳比添加至抗體溶液中。將pH值調整至pH 7.1且將混合物在25℃下培育60分鐘。藉由以最終濃度10mM添加L-離胺酸使反應停止且藉由經含有200mM NaCl、1mM EDTA之10mM磷酸鉀緩衝液(pH 6.1)透析來移除多餘之SATP。
步驟2：製備多株人類免疫球蛋白M-MH
將多株人類抗體經30mM磷酸鉀緩衝液(pH 7.4)透析，且此後將所獲得之蛋白溶液調整至約20mg/ml之蛋白濃度。將馬來醯亞胺己醯基-N-羥基琥珀醯亞胺酯(MHS)溶解於DMSO中且以1：50(IgM：MHS)之莫耳比添加至抗體溶液中。將pH值調整至pH 7.1且將混合物在25℃下培育60分鐘。藉由添加L-離胺酸至10mM之最終濃度使反應停止。將pH值調整至pH 6.2且藉由經含有200mM NaCl、1mM EDTA之10mM磷酸鉀緩衝液(pH 6.1)透析來移除多餘之MHS。
步驟3：aa-IL-6R pAb-SATP與多株人類免疫球蛋白M-MH之結合
藉由以2%(體積/體積)之1M羥基胺(pH 7.5)培育使aa-IL-6R pAb-SATP去乙醯化為aa-IL-6R pAb-SH且在25℃下培育45分鐘。將經去乙醯化之抗體與多株人類免疫球蛋白M-MH(aa-IL-6R pAb-SH：IgM-MH莫耳比=1：2)混合且以含有200mM NaCl、1mM EDTA之10mM磷酸鉀緩衝液(pH 6.1)稀釋至最終濃度為約0.9mg/ml之aa-IL-6R pAb-SH及9.1 mg/ml之多株人類免疫球蛋白M-MH。將pH值調整至pH 7.1且將混合物在25℃下培育。以分析型凝膠過濾管柱(例如，TSK 5000)監控結合過程。一般在60分鐘之後藉由添加半胱胺酸至1mM之最終濃度而使結合反應停止。再經歷30分鐘培育時間後，將N-甲基馬來醯亞胺(NMM)添加至5mM之最終濃度且將pH值調整至pH 7.5。在25℃下培育60分鐘後，將結合物藉由S400凝膠過濾層析純化以消除未結合之抗體。
製備家兔aa-IL-6R pAb與多株人類免疫球蛋白E之結合物 步驟1：製備家兔aa-IL-6R pAb-SATP
將aa-IL-6R pAb經含有150mM NaCl之100mM磷酸鉀緩衝液(pH 7.8)透析且將蛋白溶液調整至約15mg/ml之蛋白濃度。將N-琥珀醯亞胺基-3-乙醯基硫代丙酸酯(SATP)溶解於DMSO中且以1：5(aa-IL-6R pAb：SATP)之莫耳比添加至抗體溶液中。將pH值調整至pH 7.1且將混合物在25℃下培育60分鐘。藉由以最終濃度10mM添加L-離胺酸使反應停止且藉由經含有200mM NaCl、1mM EDTA之10mM磷酸鉀緩衝液(pH 6.1)透析來移除多餘之SATP。
步驟2：製備多株人類免疫球蛋白E-MH
將多株人類抗體經30mM磷酸鉀緩衝液(pH 7.4)透析，且將所獲得之蛋白溶液調整至約13mg/ml之最終蛋白濃度。將馬來醯亞胺己醯基-N-羥基琥珀醯亞胺酯(MHS)溶解於DMSO中且以1：6(IgE：MHS)之莫耳比添加至抗體溶液中。將pH值調整至pH 7.1且將混合物在25℃下培育60分 鐘。藉由以最終濃度10mM添加L-離胺酸使反應停止，將pH值調整至pH 6.2，且藉由經含有200mM NaCl、1mM EDTA之10mM磷酸鉀緩衝液(pH 6.1)透析來移除多餘之MHS。
步驟3：家兔aa-IL-6R pAb-SATP與多株人類免疫球蛋白E-MH之結合
藉由以2%(體積/體積)之1M羥基胺(pH 7.5)培育使aa-IL-6R pAb-SATP去乙醯化為aa-IL-6R pAb-SH且在25℃下培育45分鐘。將經去乙醯化之抗體與多株人類免疫球蛋白E-MH(aa-IL-6R pAb-SH：IgE-MH莫耳比=1：1.7)混合且以含有200mM NaCl、1mM EDTA之10mM磷酸鉀緩衝液(pH 6.1)稀釋至濃度為2.9mg/ml之aa-IL-6R pAb-SH及6.3mg/ml之多株人類免疫球蛋白E-MH。將pH值調整至7.1且將混合物在25℃下培育。以分析型凝膠過濾管柱(例如，TSK 4000)監控結合過程。一般在90分鐘後藉由添加半胱胺酸至1mM之最終濃度而使結合過程停止。再經歷30分鐘培育時間後，將N-甲基馬來醯亞胺(NMM)添加至5mM之最終濃度且將pH值調整至pH 7.5。在25℃下培育60分鐘後，將結合物藉由S300凝膠過濾層析純化以消除未結合之抗體。
製備家兔aa-IL-6R pAb與多株人類免疫球蛋白A之結合物 步驟1：製備家兔aa-IL-6R pAb-SATP
將aa-IL-6R pAb經含有150mM NaCl之100mM磷酸鉀緩衝液(pH 7.8)透析且將蛋白溶液調整至約15mg/ml之蛋白濃度。將N-琥珀醯亞胺基-3-乙醯基硫代丙酸酯(SATP)溶 解於DMSO中且以1：5(aa-IL-6R pAb：SATP)之莫耳比添加至抗體溶液中。將pH值調整至pH 7.1且將混合物在25℃下培育60分鐘。藉由以最終濃度10mM添加L-離胺酸使反應停止且藉由經含有200mM NaCl、1mM EDTA之10mM磷酸鉀緩衝液(pH 6.1)透析來移除多餘之SATP。
步驟2：製備多株人類免疫球蛋白A-MH
將多株人類抗體經30mM磷酸鉀緩衝液(pH 7.4)透析，且將所獲得之蛋白溶液調整至約13mg/ml之最終蛋白濃度。將馬來醯亞胺己醯基-N-羥基琥珀醯亞胺酯(MHS)溶解於DMSO中且以1：6(IgA：MHS)之莫耳比添加至抗體溶液中。將pH值調整至pH 7.1且將混合物在25℃下培育60分鐘。藉由以最終濃度10mM添加L-離胺酸使反應停止，將pH值調整至pH 6.2，且藉由經含有200mM NaCl、1mM EDTA之10mM磷酸鉀緩衝液(pH 6.1)透析來移除多餘之MHS。
步驟3：家兔aa-IL-6R pAb-SATP與多株人類免疫球蛋白A-MH之結合
藉由以2%(體積/體積)之1M羥基胺(pH 7.5)培育使aa-IL-6R pAb-SATP去乙醯化為aa-IL-6R pAb-SH且在25℃下培育45分鐘。將經去乙醯化之抗體與多株人類免疫球蛋白A-MH(aa-IL-6R pAb-SH：IgA-MH莫耳比=1：2)混合且以含有200mM NaCl、1mM EDTA之10mM磷酸鉀緩衝液(pH 6.1)稀釋至濃度為2.9mg/ml之aa-IL-6R pAb-SH及6.3mg/ml之多株人類免疫球蛋白A-MH。將pH值調整至7.1且將混合物 在25℃下培育。以分析型凝膠過濾管柱(例如，TSK 4000)監控結合過程。一般在90分鐘後藉由添加半胱胺酸至1mM之最終濃度而使結合過程停止。再經歷30分鐘培育時間後，將N-甲基馬來醯亞胺(NMM)添加至5mM之最終濃度且將pH值調整至pH 7.5。在25℃下培育60分鐘後，將結合物藉由S300凝膠過濾層析純化以消除未結合之抗體。
實例2 經結合生物素之抗-IL-6R抗體與經抗生蛋白鏈菌素塗佈之晶片的偶合
抗IL-6R抗體已由緩衝液(100mM磷酸鉀緩衝液，pH 8.5)透析。隨後，將溶液調整至10mg/ml之蛋白濃度。將D-生物素基(biotinoyl)-胺基己酸-N-羥基琥珀醯亞胺酯溶解於DMSO中且以1：5之莫耳比添加至抗體溶液中。60分鐘後，藉由添加L-離胺酸使反應停止。藉由經補充有150mM氯化鈉之25mM磷酸鉀緩衝液(pH 7.5)透析來移除多餘之標記試劑。
在第一步驟中，以NHS-EDC混合物活化CM5晶片之流槽表面。表面活化後，注射100μg/ml之中性鏈親和素(Neutravidin)溶液(於緩衝液(pH 4.5)中稀釋；Pierce)以使得可與經活化表面酯形成共價鍵。隨後，藉由注射1M乙醇胺達成殘餘未偶合酯之失活。經單一流槽以20μl/min之流動速率及20μg/ml之濃度注射經結合生物素之抗體歷時5分鐘。此舉導致抗體固定至流槽。
實例3 偵測人類血清中之IgG類抗-抗-IL-6R-抗體之抗體
將樣本以1：10至1：100倍稀釋，且以20μl體積以20μl/min之流動速率注射至如實例2所製備之晶片上。樣本注射後，將抗IgG類抗體mAb抗人類免疫球蛋白G抗體以20μl/min之流動速率及20μg/ml之濃度注射。最後，進行一次再生溶液(100mM H3 PO4 )之注射。在各次量測開始時對標準樣本進行量測。將作為陽性參考標準之20μl多株家兔抗-抗-IL-6R-抗體之抗體(aa-IL-6R pAb)與人類IgG之結合物連同抗-IL-6R抗體之固定化完整抗體、F(ab')2 片段及/或Fc片段一起以20μl/min之流動速率注射至免疫原性晶片上。在標準注射後，視情況以相同流動速率注射抗Ig類抗體mAb抗人類免疫球蛋白G抗體。
實例4 偵測人類血清中之IgE類抗-抗-IL-6R-抗體之抗體
將樣本以1：10至1：100倍稀釋，且以20μl體積以20μl/min之流動速率注射至如實例2所製備之晶片上。樣本注射後，將抗IgE類抗體mAb抗人類免疫球蛋白E抗體以20μl/min之流動速率及20μg/ml之濃度注射。最後，進行一次再生溶液(100mM H3 PO4 )之注射。在各次量測開始時對標準樣本進行量測。將作為陽性參考標準之20μl家兔aa-IL-6R pAb與人類IgE之結合物連同抗-IL-6R抗體之固定化完整抗體、F(ab')2 片段及/或Fc片段一起以20μl/min之流動速率注射至免疫原性晶片上。在標準注射後，視情況以相同流動速率注射抗IgE類抗體mAb抗人類免疫球蛋白E抗 體。
實例5 偵測人類血清中之IgM類抗-抗-IL-6R-抗體之抗體
將樣本以1：10至1：100倍稀釋，且以20μl體積以20μl/min之流動速率注射至如實例2所製備之晶片上。樣本注射後，將抗IgM類抗體mAb抗人類免疫球蛋白M以20μl/min之流動速率及20μg/ml之濃度注射。最後，進行一次再生溶液(100mM H3 PO4 )之注射。在各次量測開始時對標準樣本進行量測。將作為陽性參考標準之20μl家兔aa-IL-6R pAb與人類IgM之結合物連同抗-IL-6R抗體之固定化完整抗體、F(ab')2 片段及/或Fc片段一起以20μl/min之流動速率注射至免疫原性晶片上。在標準注射後，視情況以相同流動速率注射抗IgM類抗體mAb抗人類免疫球蛋白M抗體。
實例6 偵測人類血清中之IgE、IgG及IgM類抗-抗-IL-6R-抗體之抗體
將樣本以1：10至1：100倍稀釋，且以20μl體積以20μl/min之流動速率注射至如實例2所製備之晶片上。樣本注射後，將抗IgE類抗體mAb抗人類免疫球蛋白E以20μl/min之流動速率及20μg/ml之濃度注射。注射後，記錄反應。隨後，將抗IgM類抗體mAb抗人類免疫球蛋白M以20μl/min之流動速率及20μg/ml之濃度注射。注射後，記錄反應。隨後，將抗IgG類抗體mAb抗人類免疫球蛋白G以 20μl/min之流動速率及20μg/ml之濃度注射。注射後，記錄反應。最後，進行一次再生溶液(100mM H3 PO4 )之注射。在各次量測開始時，對三種所述標準樣本(結合物)進行量測。參考標準1：將作為陽性參考標準之20μl家兔aa-IL-6R pAb與人類IgM之結合物注射至免疫原性晶片上；參考標準2：將作為陽性參考標準之20μl家兔aa-IL-6R pAb與人類IgE之結合物注射至免疫原性晶片上；參考標準3：將作為陽性參考標準之20μl家兔aa-IL-6R pAb與人類IgG之結合物注射至免疫原性晶片上。
實例7 使用標準結合物經ELISA測定IgE類抗親本抗體
在第一步驟中，使對抗IL-6受體之經結合生物素抗體(親本抗體)結合至經抗生蛋白鏈菌素塗佈之微量滴定盤(SA-MTP)之孔表面上。藉由以通用緩衝液洗滌來移除未經結合之抗體。隨後，將樣本及參考標準(對抗與多株人類IgE結合之抗-IL-6受體抗體的家兔抗體)添加至不同孔中且培育。使來自樣本之抗親本抗體及參考標準分別與經固定之親本抗體結合。在洗滌步驟後，將經結合之抗親本抗體及參考標準分別以對抗人類IgE之經地高辛精標記之抗體偵測，隨後以辣根過氧化物酶標記之抗地高辛精抗體培育。抗體酶結合物催化ABTS®基板之顯色反應。藉由ELISA讀取器在405nm波長(參考波長：490nm)下量測信號。將各血清樣本之吸光度值重複測定三次。在抗親本抗體為IgE子類抗親本抗體(圖5及6)之狀況下，參考標準及樣本均獲 得陽性信號。
圖1 以可選後續子類判定偵測樣本中之抗親本抗體之抗體的流程。
圖2 本發明之抗遺傳型抗體之子類判定的BIAcore SPR曲線圖。(1)注射樣本，(2)+(3)注射抗人類免疫球蛋白E抗體，(4)注射抗人類免疫球蛋白G抗體。
圖3 將具有可選類別特異性抗體之本發明結合物用作參考標準之流程。
圖4 使用本發明之化合物作為參考標準(第一反應)與可選後續抗參考標準免疫球蛋白子類抗體(第二反應)之BIAcore SPR曲線圖。
圖5 ELISA測定抗遺傳型抗體之流程。
圖6 測定抗遺傳型抗體之ELISA的標準曲線。
圖7 多通道偵測抗親本抗體之抗體結合區與隨後免疫球蛋白類別判定之流程。

Claims (7)

  1. 一種化學結合物，其包含可與單株治療抗體之CDR區特異性結合之抗遺傳型抗體及單一免疫球蛋白類之參考免疫球蛋白，其中抗遺傳型抗體為完整抗體，且其中該參考免疫球蛋白為人類免疫球蛋白或人類免疫球蛋白Fc區。
  2. 如請求項1之化學結合物，其特徵在於該參考免疫球蛋白不會與該抗遺傳型抗體特異性結合，且不會與該治療抗體特異性結合。
  3. 一種如請求項1之化學結合物之用途，其係在用以測定樣本中之抗親本抗體之抗體的免疫分析中作為參考標準或陽性對照。
  4. 如請求項3之用途，其特徵在於該免疫分析為包含捕捉抗體及示蹤抗體之夾層免疫分析，其中該捕捉抗體或該示蹤抗體為該親本抗體。
  5. 如請求項3或4中任一項之用途，其特徵在於該抗親本抗體之抗體為對抗該親本抗體之抗遺傳型抗體。
  6. 如請求項4之用途，其特徵在於該捕捉抗體係選自包含以下之群：該親本抗體之輕鏈、重鏈可變區、Fab、Fab'、F(ab)2 或F(ab')2 片段。
  7. 一種判定與樣本中之親本抗體之CDR區特異性結合之抗遺傳型抗體的免疫球蛋白類別之方法，該方法使用包含捕捉抗體及示蹤抗體及如請求項1或2之化學結合物的夾層免疫分析，其包含以下步驟： a)使該樣本與該捕捉抗體在適於形成捕捉抗體/抗遺傳型抗體複合物之條件下接觸，b)分別將：i)抗人類免疫球蛋白A抗體，ii)抗人類免疫球蛋白E抗體，iii)抗人類免疫球蛋白M抗體，及iv)抗人類免疫球蛋白G抗體，作為示蹤抗體與該捕捉抗體/抗遺傳型抗體複合物接觸，c)測定該等示蹤抗體與該複合物之結合，且藉此判定該抗遺傳型抗體之免疫球蛋白類別，其中如請求項1之化學結合物係作為陽性對照。
TW96143238A 2006-11-21 2007-11-15 結合物及其在免疫分析中作為參考標準之用途 TWI434855B (zh)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP06024133 2006-11-21

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW200829601A TW200829601A (en) 2008-07-16
TWI434855B true TWI434855B (zh) 2014-04-21

Family

ID=37913626

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW96143238A TWI434855B (zh) 2006-11-21 2007-11-15 結合物及其在免疫分析中作為參考標準之用途

Country Status (13)

Country Link
US (1) US8809005B2 (zh)
EP (1) EP2089434B1 (zh)
JP (1) JP5235892B2 (zh)
KR (1) KR101182945B1 (zh)
CN (1) CN101541835B (zh)
AU (1) AU2007323364B2 (zh)
BR (1) BRPI0719118A2 (zh)
CA (1) CA2669602C (zh)
ES (1) ES2561486T3 (zh)
IL (1) IL197702A (zh)
MX (1) MX2009005103A (zh)
TW (1) TWI434855B (zh)
WO (1) WO2008061684A1 (zh)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8614297B2 (en) 2008-12-22 2013-12-24 Hoffmann-La Roche Inc. Anti-idiotype antibody against an antibody against the amyloid β peptide
MX337290B (es) * 2009-10-19 2016-02-24 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti igg reactivos no cruzados.
US10214593B2 (en) 2013-04-02 2019-02-26 Samsung Electronics Co., Ltd. Anti-idiotype antibody against anti-c-MET antibody
CN105378480B (zh) 2013-07-04 2018-06-12 豪夫迈·罗氏有限公司 检测血清样品中抗药物抗体的干扰抑制性免疫测定
CN105683755B (zh) * 2013-11-05 2019-08-13 豪夫迈·罗氏有限公司 陷阱分子和检测分子的用途及其相关试剂盒和组合物
WO2015193786A1 (en) * 2014-06-16 2015-12-23 Dr. Reddy's Laboratories Limited Method of purifying anti-idiotypic antibodies
EP3176580A1 (en) 2015-12-01 2017-06-07 Roche Diagnostics GmbH Method for reduction of interferences in immunoassays
CN107478831B (zh) * 2017-07-18 2019-08-23 深圳市疾病预防控制中心 抗独特型抗体检测方法
CN109946464A (zh) * 2019-04-26 2019-06-28 江苏硕世生物科技股份有限公司 检测甲型肝炎病毒IgM抗体的酶标板、试剂盒以及制备方法
CN112114151B (zh) * 2020-08-20 2022-03-01 深圳爱信生物技术有限公司 一种2019-nCoV的IgG、IgM和IgA抗体联合检测试剂盒及其检测方法
WO2023021055A1 (en) 2021-08-19 2023-02-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Multivalent anti-variant fc-region antibodies and methods of use

Family Cites Families (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4692416A (en) 1982-12-03 1987-09-08 Yeshiva University Monoclonal antibodies reactive with shared idiotypes on human antibodies to native DNA from patients with systemic lupus erythematosus
US4513088A (en) * 1983-03-30 1985-04-23 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Assay for monoclonal antibody against surface Ig of a human B cell tumor
US4828981A (en) 1983-08-24 1989-05-09 Synbiotics Corporation Immunoassays for determining Dirofilaria immitis infection using antiidiotype monoclonal antibody reagents
US4661444A (en) 1984-03-29 1987-04-28 Ortho Diagnostic Systems Inc. Homogeneous immunoassays employing double antibody conjugates comprising anti-idiotype antibody
JP2565303B2 (ja) 1984-05-25 1996-12-18 三井東圧化学株式会社 緑膿菌感染症の予防治療剤
EP0170302A1 (fr) 1984-06-27 1986-02-05 l'Association internationale à but scientifique, dite: Institut international de pathologie cellulaire et moléculaire Procédé de dosage immunologique d'une substance dans un échantillon liquide au moyen d'anticorps anti-idiotypiques
WO1987002778A1 (en) 1985-10-22 1987-05-07 Cooper-Lipotech Solid-phase liposome immunoassay system
GB8824869D0 (en) 1988-10-24 1988-11-30 Stevenson G T Synthetic antibody
US5780029A (en) 1989-11-14 1998-07-14 New York Medical College Antidiotypic monoclonal antibodies for treatment of melanoma
DE69024758T2 (de) * 1989-11-14 1996-08-29 New York Medical College Neuartige antiidiotypische monoklonale Antikörper
JPH04207199A (ja) 1990-11-30 1992-07-29 Sumitomo Electric Ind Ltd ハムスター免疫グロブリンと反応する抗体
JPH04304897A (ja) 1991-04-01 1992-10-28 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 抗イディオタイプモノクローナル抗体
US6063379A (en) * 1993-12-09 2000-05-16 Centro De Inmunologia Molecular Anti-idiotypic monoclonal antibodies and compositions including the anti-idiotypic monoclonal antibodies
JPH11500607A (ja) * 1994-12-28 1999-01-19 ユニバーシティ オブ ケンタッキー マウスモノクローナル抗イディオタイプ抗体３ｈ１
CA2240834C (en) 1995-12-22 2013-12-03 Immunomedics, Inc. Use of immunoconjugates to enhance the efficacy of multi-stage cascade boosting vaccines
CA2295375A1 (en) 1997-07-08 1999-01-21 Novopharm Biotech Inc. Antigen binding fragments, designated 4b5, that specifically detect cancer cells, nucleotides encoding the fragments, and use thereof for the prophylaxis and detection of cancers
US20020122807A1 (en) 1998-07-07 2002-09-05 Dan Michael D. Antigen binding fragments, designated 4B5, that specifically detect cancer cells, nucleotides encoding the fragments, and use thereof for the prophylaxis and detection of cancers
CU23007A1 (es) 2001-04-06 2004-12-17 Ct De Inmunologia Molecular Ct De Inmunologia Mole Combinaciones inmunoterapéuticas para el tratamiencombinaciones inmunoterapéuticas para el tratamiento de tumores que sobre-expresan gangliósidos to de tumores que sobre-expresan gangliósidos
CN1142183C (zh) * 2001-08-23 2004-03-17 北京大学人民医院 抗独特型微抗体及其制备方法和应用
MXPA04009771A (es) 2002-04-09 2004-12-13 Merck Patent Gmbh Moleculas de anticuerpo contra cea antiidiotipicas y su uso como vacuna contra el cancer.
CA2535804A1 (en) 2003-08-14 2005-03-03 Wyeth Anti-lewis y anti-idiotypic antibodies and uses thereof
EP1680666A4 (en) 2003-10-27 2008-03-26 Monogram Biosciences Inc DETECTION OF HUMAN ANTITHERAPEUTIC ANTIBODIES
WO2005077981A2 (en) 2003-12-22 2005-08-25 Xencor, Inc. Fc POLYPEPTIDES WITH NOVEL Fc LIGAND BINDING SITES

Also Published As

Publication number Publication date
AU2007323364B2 (en) 2013-03-07
US20080118939A1 (en) 2008-05-22
TW200829601A (en) 2008-07-16
WO2008061684A1 (en) 2008-05-29
CN101541835A (zh) 2009-09-23
US8809005B2 (en) 2014-08-19
IL197702A0 (en) 2011-08-01
JP2010510504A (ja) 2010-04-02
ES2561486T3 (es) 2016-02-26
EP2089434B1 (en) 2015-12-30
CA2669602C (en) 2015-10-27
KR101182945B1 (ko) 2012-09-13
CN101541835B (zh) 2013-04-10
CA2669602A1 (en) 2008-05-29
AU2007323364A1 (en) 2008-05-29
EP2089434A1 (en) 2009-08-19
MX2009005103A (es) 2009-05-27
JP5235892B2 (ja) 2013-07-10
BRPI0719118A2 (pt) 2013-12-10
KR20090078361A (ko) 2009-07-17
IL197702A (en) 2013-04-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI434855B (zh) 結合物及其在免疫分析中作為參考標準之用途
CA2709127C (en) Distinguishing assay
JP4964957B2 (ja) 抗薬物抗体アッセイ
KR20160029034A (ko) 혈청 샘플 중 항-약물 항체를 검출하기 위한 간섭-억제된 면역분석
RU2636822C2 (ru) Способ обнаружения мультиспецифического связывающего агента
MX2014008762A (es) Metodo para la deteccion de una molecula de union de un enlazador multiespecifico.
JP7553647B2 (ja) 干渉抑制薬物動態イムノアッセイ
AU2013202747B2 (en) Distinguishing assay

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Annulment or lapse of patent due to non-payment of fees