TWI258478B

TWI258478B - Tetrazole derivatives and methods of treatment of metabolic-related disorders thereof

Info

Publication number: TWI258478B
Application number: TW093132486A
Authority: TW
Inventors: Graeme Semple; Thomas Schrader; Philip J Skinner; Steven L Colletti; Tawfik Gharbaoui
Original assignee: Arena Pharm Inc; Merck & Co Inc
Priority date: 2003-10-31
Filing date: 2004-10-27
Publication date: 2006-07-21
Also published as: IS2372B; TNSN06150A1; US8637555B2; CA2539985C; US20070072924A1; RS20060290A; AU2004287861A1; TW200530221A; MA28171A1; CA2539985A1; ZA200603419B; EP1599469B1; MXPA06004556A; CN1867562B; ATE328880T1; US20060217562A1; CO5690551A2; HK1076468A1; CR8270A; JP2010163448A

Description

1258478 九、發明說明：【發明所屬之技術領域】本發明有關於特定四錢生物及其f藥上可接受鹽類，其展現有益的藥理特性，例如針對於驗酸受體⑽P25)的顯藥劑。本發明亦提供包括_種或多種本發明化合物之醫藥組合物，，以及使用本發明之化合物及組合物治療代謝相關病症之方法’其包括血脂異常、動脈粥樣硬化、冠心病、胰島素抗性、第二型糖尿病、乂症候群等。另外，本發明亦提供本發明的化合物組合其他活性劑之用途，例如屬於α-葡萄糖苷酶抑制劑、醛醣還原酶抑制劑、雙胍 (blgUanides)、HMG-CoA還原酶抑制劑、角鯊烯合成抑制劑、苯氧芳酸（fibrates)、LDL分解代謝加強劑、血管緊張素轉化6^抑制劑、騰島素分泌力。強劑、。塞嗤咬二酮及其相似物之類別。【先前技術】本發明的化合物做為抗脂質分解劑在美國，動脈粥樣硬化及中風是人們死因的第一名及第二名。第二型糖尿病為一眾所周知的健康問題，其有曰益嚴重、普及及增加的趨勢。高低密度脂蛋白（LDL)膽固醇含量或低高密度脂蛋白（HDL)膽固醇含量各為動脈粥樣硬化以及相關心血管病理的風險因素。另外，高血漿自由脂肪酸含量則與胰島素抗性及第二型糖尿病相關。一種降低 LDL-膽固醇、增加HDL膽固醇以及降低血漿自由脂肪酸之策略為抑制脂肪組織中脂解。此方法需要調整荷爾蒙敏感 103486-94 ll〇2.d〇. 1258478 f生月曰酶，其為脂解的速率限制酶。脂解劑可增加e AMP的細胞含量，其導致脂肪細胞内之荷爾蒙敏感性脂酶活化。相反地，降低細胞内cAMP含量之試劑為抗脂解性。同樣值得注意的是經由增加cAMp的細胞含量而降低來自脂肪細胞之脂素分泌[Delp〇rte，ML等人价/ (2002) 7月]。減低血漿脂素含量與代謝相關的病症有關，其包括動脈粥樣硬化、冠心病、胰島素抗性及第二型糖尿病 [MatSuda，M等人J Bi〇l Chem (2002) 7月及其中之回顧]。菸鹼酸（菸酸，吡啶_3_羧酸）為人體健康、生長及繁殖所需的一種水溶性維生素；維生素B群之一部份。菸鹼酸亦為冶療血脂異常的最古老用藥。菸鹼酸因其有利影響實際上所有上述脂質參數而為一有價值的藥品[(3〇〇—抓及

Gilmans冶療學的藥理基礎，Harmori jg及Limbird LE主筆弟一十，、早，Mahley RW及 Bersot TP (2001)第 971- 〇2頁]於驗k對於動脈粥樣硬化心血管疾病的治療或預防之益處已記載於六個主要臨床試驗中[Guyt〇n jr (1998)Am J Cardiol 82 : 18U_23U]。近來已討論於驗酸及相關衍生物，例如阿西莫司（acipim〇x) [L〇renzen，A等人 (2001)分子藥理學μ : 349_357]。菸鹼酸的額外同系物或衍生物的結構及合成係在默克索引[化學、藥品以及生物的百科全書，第九版（1983)]中探討，其在此全部併入做為參考。菸鹼酸可抑制脂肪組織中自由脂肪酸的製造及釋放，其可能係經由腺苷環酶的抑制、細胞内cAMp含量的減低、 103486-941102.doc 1258478 以及力貝爾冡敏感性脂酶活性之伴隨降低。降低賀爾蒙敏感 ^ι酶m而導致Α漿中自由脂肪酸含量降低之顯藥劑报可肊具有治療上的價值。降低血漿自由脂肪酸的結果為兩方面°首先’其最終將可降低LDL_膽固醇及提高肋^膽固醇含量，其為獨立風險因t，因而減少由於粥樣化形成後之〜血官發病所導致死亡風險。再者，其肖具有胰島素抗性或第二型糖尿病的個人提供胰島素敏感性。不幸的疋，將菸鹼酸用於治療部份地受限於若干附帶的負面副作用。這些副作用包括臉紅、自由脂肪酸再結合以及肝臟毒性。具有較少副作用之新型菸鹼酸受體顯藥劑之合理發展有饧值，但現今因無法在分子程度分辨該菸鹼酸受體而受阻。再者，同類的其他受體可能存在於脂肪細胞的表面，而且類似地經由降低細胞内cAMP含量而降低賀爾蒙敏感文性脂酶活性，但是不會誘導副作用，例如臉紅，因而代表可期望的治療目標。近來之作業提議菸鹼酸可能透過特疋的GPCR而作用[Lorenzen A等人（2001)分子藥理學 (Molecular Pharmacology) 59 ·· 349-357及其回顧]。進一步之作業提議菸鹼酸對巨噬細胞、脾臟、而且可能及脂肪細胞的效果係藉由此特定GPCR傳達[Lorenzeil a等人（2002) 生物化學藥理學（Biochemical Pharmacology) 64:645-648及其中之回顧]。【發明内容】本务明的一個態樣態樣包含如式⑴所示之四唾衍生物： 103486-941102.doc 1258478

其中： x為nh或0 ;

Ri從下列該群中選出，包括Η、鹵素、羥基、硫氧基、氰基、硝基、Cw鹵烷基、胺基、C1-4烷基胺基、C2-8二烷基胺基、Cw烷基、Ci-4烷氧基、C2-4烯基、C2-4炔基、c3_5 環烧基、C1-4 4燒氧基、Cl·4烧硫基、Ci-4烧基亞確酸基、 C!-4烷基磺臨基、Cw鹵烷硫基、Cw鹵烷基亞磺醯基及Ci_ 4鹵化烧基石黃酿基； R2從下列該群中選出，包括Η、_素、羥基、硫氧基、氰基、硝基、Ch鹵烷基、胺基、Ci·4烷基胺基、Cw二烷

-4邓丞、匕2-4识：基、C3_ 、C1-4烧基亞續酿基、 I·4鹵烧亞石黃酿基及^ 基胺基、Ci-4烷基

鹵烧石黃醯基；或R2不存在；

鍵，从从

基、C2-8二烧基胺基、C k，或一 5、6或7-員雜環，其視之取代基取代’包括自素、和

Λ Cl-4鹵烷基、胺基、C

烷基、Cw烷氧基、C Μ烷基胺 2-4烯基、 103486-941102.doc 1258478 C2-4炔基、C3-5環烧基、Ci-4鹵烷氧基、Cw烷琉基、c"烷基亞磺醯基、Cw烷基磺醯基、c^ii烷硫基、Cl 4i燒亞磺醯基&Ci_4鹵烧績醯基；或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。本發明的一個態樣態樣包括含至少一種在此所述之式Q) 化合物之醫藥組合物。在某些具體實施例中，該醫藥組合物進一步包括一種或多種從下列該群中選取之試劑：α-型醣苷酶抑制劑、駿醣還原酶抑制劑、雙胍、hmg-c〇a還原酶抑制劑、鯊烯合成抑制劑、苯氧芳酸、LDL企解代謝加強劑、血管緊張素轉化酶抑制劑、胰島素分泌加強劑及售嗤σ定二g同。本發明的一個態樣態樣有關治療代謝相關病症的方法，其包括對需要此治療之個體施以治療有效量之在此所之 ΚΌ化合物或其醫藥組合物。本發明的一個態樣有關調節RUP25受體的方法，其包括使該受體與在此所述之式m化合物接觸。本發明的一個態樣有關調節RUP25受體以對需要此調節之個體治療代謝相關病症的方法，其包括使該受體與在此化合物接觸。本發明的一個態樣有關提高個人中HDL的方法，其包括對個人施以治療有效量之在此所述之式（I)化合物。本發明的一個態樣有關在此所述之式（I)化合物在治療人體或動物的治療方法之用途。本發明的一個態樣有關在此所述之式（1)化合物在治療人 103486-941102.doc -10 - 1258478 體或動物體之代謝相關病症的治療方法之用途。本發明的一個態樣有關查匕所歡I)化合μ t & 於治療代謝相關病症之藥物之用途。、。在本發明之某些具體實施例中，代謝相關病症的實例包括血脂異常、動脈粥樣硬化、冠心病、胰島素抗性、：胖、葡萄糖耐受性受損、動脈粥樣化疾病、高血壓、中風、X症候群、心臟病及第二型糖尿病。在某些具體實施例中，該代謝相關病症為血脂異常、動脈粥樣硬化、冠2 病、胰島素抗性及第二型糖尿病。在某些具體實施例中= 該代謝相關病症為血脂異常。在某些具體實施例中，該代谢相關病症為動脈粥樣硬化。在某些具體實施例中，該代謝相關病症為冠心病。在某些具體實施例中，該代謝相關病症為胰島素抗性。在某些具體實施例中，該代謝相關病症為弟二型糖尿病。本發明的一個態樣包括製造一種製造醫藥組合物的方法，其包含混合至少一種在此所述之式⑴化合物及一醫藥上可接受載劑或賦形劑。在此揭示的這些及其他本發明態樣將於下文中隨專利揭示之進行而更詳細地提出步驟。【實施方式】科學文獻中已採納數種專有名詞，為了更清晰以及連貫性的瞭解，以下的定義用於此專利文件說明中。顯藥劑（AGONISTS)意指與受體交互作用及活化，例如 RUP25受體’以及引發該受體之生理上或藥理上之回應特 103486-941102.doc -11 - 1258478 徵之部分。例如，當此部分結合該受體而活化該細胞内回應或增強GTP與細胞膜的結合時。

表1 丙胺酸（ALANINE) ALA A 精胺酸（ARGININE) ARG R 天冬醯胺（ASPARAGINE) ASN N 天冬胺酸（ASPARTIC ACID) ASP D 半胱胺酸（CYSTEINE) CYS C 麩胺酸（GLUTAMIC ACID) GLU E 麩醯胺酸（GLUTAMINE) GLN Q 甘胺酸（GLYCINE) GLY G 組胺酸（HISTIDINE) HIS H 異白胺酸（ISOLEUCINE) ILE I 白胺酸（LEUCINE) LEU L 離胺酸（LYSINE) LYS K 甲硫胺酸（METHIONINE) MET M 苯丙胺酸（PHENYLALANINE) PHE F 脯胺酸（PROLINE) PRO P 絲胺酸（SERINE) SER S 蘇胺酸（THREONINE) THR T 色胺酸（TRYPTOPHAN) TRP W 酪胺酸（TYROSINE) TYR Y 纈胺酸（VALINE) VAL V 名詞拮抗劑（ANTAGONISTS)意圖表示如同顯藥劑在該相同位置例如競爭性地結合該受體之部份（例如，内生配位子），但其不活化受體活性形式所引發之之細胞内回應，因而可以抑制顯藥劑或部分顯藥劑之細胞内回應。在缺少一顯藥劑或部分顯藥劑的情況下，拮抗劑不會減少基線細胞内回應。動脈粥樣硬化（ATHEROSCLEROSIS)意圖包括因脂質在 103486-941102.doc -12- 1258478 平滑肌細胞的内膜中逐漸累積所造成之大型及中型動脈病症0 化學基、部分或基團：名詞”CK4醯基”表示一Cw烷基連結一羰基，其中該烷基的定義與描述於此的定義相同；某些實例包括但不限於乙醯基、丙醯基、正-丁醯基、異-丁醯基、第二-丁醯基、t_ 丁醯基（例如三甲基乙醯基）、戊醯基及該相似物。名㈣nCw醯氧基’’表示一醯基連結一氧原子，其中該醯基的定義與描述於此的定義相同；某些實例包括但不限於乙醯氧基、丙醯氧基、丁醯氧基、異丁醯氧基、第二丁醯氧基、t- 丁醯基及該相似物。名詞f’C2·4稀基’’表示一基包括2到4個碳，其中存在至少一個碳-碳雙鍵，某些具體實施例為2到3個碳，某些具體實施例為2個碳。E及Z異構物均由名詞”烯基”所包含。再者，名詞”烯基"包括二烯基。因此，如果存在超過一個雙鍵，則該鍵結可能全部為E或Z或E及Z的混合物。一稀基的實例包括乙烯基、丙烯基、烯丙基、異丙烯基、2_甲基_ 丙烯基、1-甲基-丙烯基、丁-1_烯基、丁 _2-烯基、丁-3_烯基、丁-1,3-二烯基及該相似物。，如此所定義，直接地連乙氧基、正丙氧基、異丙名詞’’Cm烷氧基”表示一烷基結一氧原子。實例包括甲氧基、第二丁氧基及該氧基、正丁氧基、t-丁氧基、異丁氧基、相似物。名詞” Ci_4烧基”表示包括所不石厌數之直鏈或支鏈碳基 103486-941102.doc -13 - 1258478 例如，在某些具體實施例中，烷基為”Cw烷基’，且該此基包括1到4個碳。在某些具體實施例中烷基包括1到π個碳，某些具體實施例為1到2個碳，某些具體實施例包含1 個碳。烷基的實例包括但不限於甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、t-丁基、第二-丁基及其相似物。名詞’’Cy烷基亞磺醯基”表示一（^-4烷基連結式-S(0)-的亞颯基，其中該烷基與描述於此的定義相同。實例包括但不限於甲基亞石買酿基、乙基亞石黃酿基、正丙基亞石黃酸基、異丙基亞磺醯基、正丁基亞磺醯基、第二丁基亞磺醯基、異丁基亞績醯基、t- 丁基及其相似物。名詞"Cw烷基磺醯基”表示一 C"烷基連結式-S(0)2-的砜基’其中該烧基與描述於此的定義相同。實例包括但不限於曱基石頁酿基、乙基石黃酿基、正丙基石黃酿基、異丙基石黃隨基、正丁基磺醯基、第二丁基磺醯基、異丁基磺醯基、t-丁基續醯基及其相似物。名詞烷硫基”表示一 c1-4烷基連結式-S-的硫化物，其中該烷基與描述於此的定義相同。實例包括但不限於甲基磺醯基（例如CHsS-)、乙基磺醯基、正丙基磺醯基、異丙基磺醯基、正丁基磺醯基、第二丁基磺醯基、異丁基石黃酉&基、t - 丁基及其相似物。名詞’’C2_4炔基”表示一基包括2-4個碳及至少一個碳-碳二鍵’某些具體實施例為2到3個碳，某些具體實施例為2 個碳。炔基的實例包括但不限於乙炔基、丙炔基、3丙_ 2-炔基、丁-1-炔基、1-甲基丙炔基、丁β1，3-二炔基及其 103486-941102.doc -14 - 1258478 相似物。名詞”快基”包括二炔。名巧”胺基’’表示_nh2基。名同’’Cw烧基胺基”表示一烷基連結一胺基，其中該烷基與描述於此的定義相同。某些實例包括，但不限制甲基月女基、乙基胺基、正丙基胺基、異丙基胺基、正丁基胺基、第二丁基胺基、異丁基胺基、t-丁基胺基及其相似物。某些具體實施例為，，Cw烷基胺基，，。名㈣’’芳基π表示一包括6到10個環碳之芳環。實例包括苯基及萘基。名巧碳-Cy燒氧基”表示一魏酸的ci 4烧基酯，其中該烧基與定義於此處相同。實例包括但不限於碳甲氧基、碳乙氧基、碳丙氧基、碳異丙氧基、碳異丁氧基、碳丁氧基、奴酸第二丁氧基、碳異丁氧基、碳+ 丁氧基及其相似物。名詞π叛酿胺π表示-conh2基。名詞”羧基（carboxy)” 或"羧基（carb〇xyl)” 表示-C〇2H_ 基；亦稱為魏酸基。名詞基’’表示-CN基。名调’’CM環烷基”表示包括3到6個碳之飽和環基；某些具體實施例包括3到5個碳；某些具體實施例包括3到4個碳。實例包括環丙基、環丁基、環戊基、環己基。名詞’’Cw二烷胺基”表示經兩個相同或不同的烷基取代之胺基，#中該烷基與此處描述的定義相同。Cw二烷胺基可以由以下之基表示： 103486-941102.doc -15- 1258478 卜N: xCi-4 alkyl

Cq alkyl W二烷胺基的實例包括但不限於二甲胺基、甲乙胺基、 -乙胺基、甲丙胺基、甲異丙胺基及其相似物。名詞’’Cw齒烷氧基”表示一 _烷基，如定義於此，其直接地與一氧原子連結。實例包括但不限於二氟甲氧基、三氟甲氧基、2,2,2-二氟甲氧基、五氟乙氧基及其相似物。名詞”Cw自烷基”表示一烷基，其中該烷基以一鹵素取代’其範圍自一個取代至完全取代，且其中完全取代的鹵烷基可以由式ChL2h+1表示，其中L為一齒素而”h"表示碳原子的數量；當在超過一個_素時，該_素原子可以為相同或不同，且可以從下列該群中選出，包括F、a、Br&i; 應瞭解名詞”烧基，，及”鹵素”具有在此發現之相同定義。在某二具體貝％例中，鹵烷基為” Ci·4鹵烷基"且該基包括1到 4個妷，某些具體實施例包括丨到3個碳，某些具體實施例 $括1到2個碳，某些具體實施例包括丨個碳。當該函烷基疋全由鹵素原子取代時，此基在此稱為"全鹵烷基π，一個實例為完全由氟原子取代之烧基，其在此稱為”全氣烧基 ”。在某些具體實施例中，鹵烷基的實例包括但不限於二氟甲基、氟甲基、2,2,2-三I乙基、2,2·:氟·乙基、2备乙基、1，2,2-三氣_乙基、1)2•二氟·乙基、二氟_乙基、 1，1，2-三氟-乙基、3,3,3-三氟_丙基、2，二氟_丙基、二氟-丙基、3-氟-丙基、2,3,3_三氟_丙基、2,3二氟-丙基、 2,2,3,3,3-戊氟-丙基、2,2,3,3-四氟，基、2,2,3_三氟-丙 103486-941102.doc -16- 1258478 基' 1，2,3,3-四氟-丙基、1，2,3_三氟_丙基、ι，2,3,3-四氟-丙基、1，2,3·二氟-丙基、3,3 -二氟-丙基、ι，2,2,3-四氟_丙基、4,4-^一氟-丁基、3,3 - 一鼠_丁基、4,4,4 -三氟^丁基、 3，3-二氟-丁基及其相似物。在某些具體實施例中，全氟烷基的實例包括但不限於三氟甲基、五氟乙基、七氟丙基、 1，2,2,2 -四1·1-三氟甲基-乙基及其相似物。名岡’’C^4齒烧基亞確醢基”表示一 _烧基與式_s(〇)_的亞石風連結，其中該鹵烧基與此處的定義相同。名詞’’Cw i烷基磺醯基”表示一鹵烷基與式_s(〇)2_的砜基連結，其中該鹵烧基與此處的定義相同。名詞’’Cl-4鹵烷硫基’’表示一鹵烷基直接地與硫原子連結’其中該鹵烧與此處的定義相同。名詞’’齒素’’或’’齒’’表示氟、氣、漠或峨基。名列’’經基’’表示-0H基。名詞’’硝酸基，，表示-N02基。名詞’’硫代基氧”表示-SH基。該字母縮寫略字”DMF”表示二甲基甲醯胺。該字母縮寫略字”DMSO”表示二甲基亞颯。該字母縮寫略字”THF”表示四氫吱喃。該字母縮寫略字”DCM，，表示二氣甲烧。該字母縮寫略字”Hex，，表示己燒。该字母縮寫略字该字母縮寫略字该字母縮寫略字 TBDMS”表示第三丁基二甲基矽烷基。 PTSA”表示對甲苯石黃醯酸。 LDA”表示二異丙基醯胺鋰。 103486-941l〇2.d〇c -17^ 1258478 該字母縮寫略字’’LHMDS"表示伸己二矽氮烷鋰。該字母縮寫略字’’丁罗入”表示三氟醋酸。該字母縮寫略字”EDCn表示1-乙基-3-(3-二甲胺基丙基）羰二醯亞胺鹽酸鹽。該字母縮寫略字”dppf”表示1，1’-雙（二苯基膦基）二茂鐵。名詞’’密碼單位（CODON)’’表示一組三個核苷酸（或核苷酸等致物），其通常包括一偶合至磷酸基之核苷（腺苷（A)、鳥苷（G)、胞苷（C)、尿苷（U)以及胸苷（T))，且其轉譯時編碼胺基酸。名詞'组合物（COMPOSITION)"意指一材料包括至少兩種化合物或兩種成分；例如（但不限制），一醫藥組合物為一包括本發明的化合物及一醫藥上可接受載劑之組合物。名詞’化合物效用（COMPOUND EFFICACY) ’表示一化合物抑制或刺激受體功能性之能力的測度，其與受體親和力相反。名詞’組成上活化受體（CONSTITUTIVELY ACTIVATED RECEPTOR)”意指接受組成受體活化之受體。名詞’組成受體活化（CONSTITUTIVE RECEPTOR ACTIVATION)’’意指以受體與其内生配位子或其化學等致物以外將在活化狀態下受體穩定化。名詞’’接觸（CONTACT或CONTACTING)”意指使指定的部分在一起，不論在試管内或在活體内。因此，使RUP25 受體與本發明的化合物”接觸（contacting)’’包括對具有 103486-941102.doc -18- 1258478 RUP25受體之個體（例如，人類）施以本發明的化合物，，及例如將本發明的化合物引入一包含細胞的樣本或含RUP25受體之較純化製品。名詞’冠心病（CORONARY HEART DISEASE)’’在此表示包括提供血液及氧氣至心臟之小血管變小的疾病。冠心病通常由脂肪物質及斑的堆積。當該冠狀動脈狹窄時，血液流向心臟的速度變慢或停止。冠心病可能引起胸痛（持續絞痛）、呼吸急促、心臟病發作或其他症狀。 ’’減少（DECREASE)’’用以表示一可量測量的減少，且與用語’’減縮（reduce)’’、’’縮小（diminish)”、” 降低（lower)’丨、” 變少（lessen)”同義。 π糖尿病（DIABETES)’’用以在此表示包括糖尿病的一般診斷，其係由包括但不限於以下之任何方法完成··糖尿病的症狀（例如多尿、劇渴、多食），加上偶發血糖值上升超過（或等於）200 mg/dl，其中偶發血糖值係定義為一天當中的任何時間，不論是否為用餐或飲食時間；8小時禁食血糖值小於（或等於）126 mg/dl;以及口服溶解於水中之75 g 無水葡萄糖兩小時後，血糖值超過（或等於）200 mg/dl。名詞’’脂質代謝病症（DISORDERS OF LIPID METABOLISM)’’在此意指包括（但不限於）血脂異常。名詞’’血脂異常（DYSLIPIDEMIA)’’在此意指包含任何一種血漿自由脂肪酸的含量升高、血漿膽固醇的含量升高、 LDL-膽固醇的含量升高、HDL-膽固醇的含量減少、以及血漿三甘油脂的含量升高之疾病。 103486-941102.doc -19- 1258478 使用於此之名詞

需要治療（IN NEED OF TREATMENT)，，表*由照顧者（例如在人類之情形為醫師、護士、護理從事者等等;在動物（包括非人類的哺乳動物）之情形絲醫）認定此個體或動才勿需要或將從治療得到好處的判斷。此輯乃根據在照顧者的專門技術範圍中之各種因素而完成，其包括個體或動物生病或將生病，可以本發明化合物治療疾病、健康狀況或病症的結果之知識此外，名岡，需要治療’’亦表示個體之”預防,，，其係由該照顧者對將生病的個體所作的騎。在此本文中，本發明的化合物係以保護性或預防性方式使用。因而，，需要治療表示由…、顧者對已生病或將生病的個體所作的判斷，因此本發明的化合物可用、士击。初』用於減輕、抑制、改善或防止疾病、健康狀況或病症。在此使用之用語"個體（individual)”表示任何動物，包括哺乳動物，例如鼠類、|鼠、其他齧齒動物、兔子、狗骗豬牛、羊、馬或靈長類動物，及在其中一個具體貫施例為人類。 ”名3回應有關的用語"抑制或抑制（INHIBIT 〇r INHIBITING)，，意指#化合物存在時㈣無該化合物時降低或防止回應。在此使用之，，狹島素抗性（INSULIN RESISTANCE)，，包括島素抗丨生的舨矽斷’其係由包括但不限於以下之任何 :法凡成·骄脈葡萄糖耐受性測試或空腹胰島素含量測里眾所周知在空腹胰島素含量的高度及膜島素抗性的程 103486-941102.doc -20- 1258478 度之間具有一個極佳的關連。因此，為了證驗正常葡萄糖耐受性（NGT)之個體所具有之胰島素抗性之目的，可以使用高空腹胰島素含量作為胰島素抗性之視為代理指標，。亦可運用血糖正常之葡萄糖鉗術測試進行胰島素抗性的診斷。名詞π反向顯藥劑（INVERSE AGONISTS)’’意指與内生形式受體或該組成上活性形式受體結合之部份，而且其將該活性形式受體引發之基線細胞内回應抑制至低於在無顯藥劑或部份顯藥劑觀察到之正常活性基準，或降低GTP與該細胞膜結合。在某些具體實施例中，相較於無該反向顯藥劑的基線回應，在該反向顯藥劑存在時將該基線細胞内回應抑制至少30%，在其他具體實施例中，至少50%且在其他具體實施例中，至少75%。名詞”配位子（LIGAND)”將意指針對一内生天然產生受體之指定内生、天然產生分子。用語”代謝相關病症（METABOLIC-RELATED DISORDERS)’’此處意指包括（但不限於）血脂異常、動脈粥樣硬化、冠心病、胰島素抗性、肥胖、葡萄糖耐受性受損、粥樣化症狀、高血壓、中風、X症候群、心臟病及第二型糖尿病。使用在此之名詞調節或調節（MODULATE or MODULATING)意指有關一特定活性、功能或分子關於數量、品質或效果之增加或減少。

名詞’醫藥組合物（PHARMACEUTICAL 103486-941102.doc -21 - 1258478 COMPOSITION)”意指一用以預防、治療或控制一疾病的狀態或情況之組合物，其包括至少一種活性化合物，例如，本發明的化合物，包括其醫藥上可接受的鹽類、醫藥上可接受溶劑合物以及/或水合物，以及至少一種醫藥上可接受的載體。名詞”醫藥上可接受載體或賦形劑 (PHARMACEUTICALLY ACCEPTABLE CARRIER or EXCIPIENT)’’意指作為本發明化合物的稀釋劑或媒介之任何實質上惰性物質。在此使用之用語”治療上有效量（THERAPEUTIVALLY EFFECTIVE AMOUNT)”表示由研究員、獸醫、醫生或其他臨床醫生為包括下列一種或多種情況所求得誘發組織、系統、動物、個體或人類之回應之活性化合物或醫藥劑之量其= (1) 疾病的預防：例如，對易於患得該疾病、狀況或病症，但尚未經歷或出現該疾病的病理或症狀的個體，預防一疾病、狀況或病症，。 (2) 疾病的抑制：例如，對經歷或出現該疾病、狀況或病症的病理或症狀的個體，抑制該疾病、狀況或病症（換句話說，阻止病理及/或症狀的進一步發展），以及 (3) 疾病的改善：例如，對經歷或出現該疾病、狀況或病症的病理或症狀的個體，改善該疾病、狀況或病症（換句話說，逆轉該病理及/或症狀）。本發明的化合物 103486-941102.doc -22- 1258478 本發明的一個態樣包括如式（i)所示之四唑衍生物：

其中： X為NH或0 ;

Rl從下列該群中選出，包括Η、鹵素、羥基、硫氧基、氛基、石肖基、Cw鹵烷基、胺基、Cl-4烷基胺基、c28二烷基胺基、Ci-4烷基、（^_4烷氧基、C：2_4烯基、C2_4炔基、c3-5 ϊ衣烧基、（:“齒烷氧基、Cl_4烷硫基、Cl-4烷基亞磺醯基、

Cl_4烷基磺醯基、烷硫基、Cw鹵烷基亞磺醯基及Cl_ 4鹵烷基磺醯基； R2從下列該群中選出，包括Η 氰基、硝基、C1·4 _烷基、胺基基胺基、Cw烷基、Ci 4烷氧基、壞烷基、Ci^i烷氧基、Ci 4烷都 ^出’包括Η、鹵素、羥基、硫氧基、烧基、胺基、CN4烷基胺基、c2_8二烷 ci-4烷氧基、C2.4烯基、c2.4炔基、c3_5

Ci·4烷硫基、Cw烷基亞磺醯基、

鍵；以及 i烧硫基、Cw函烷亞磺醯基及〇1 或當R2不存在時，…為一雙環A為一 5、 6或7-員碳環，或一 5、要地以1到4個下列該群之取代基取代硫氧基、氰基、確基、

Ci_4鹵烧基、胺基、 6或7·»員雜環，視需 ’包括鹵素、經基、基、Cle4烧基胺基、 103486-941102.doc -23 - 1258478 c2-8二烷基胺基、Ci 4烷基、C14烷氧基、c2.4烯基、c24块基、C3-5%烷基、Cw鹵烷氧基、Ci·4烷硫基、烷基亞、-"土 C丨-4炫基石只醯基、（:丨_4鹵炫硫基、（^丨4鹵燒亞石黃醯基及C 1 -4鹵燒石黃酿基；或一醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或其水合物。本發明的化合物可以各種互變異構形式存在。例如，熟悉此領域者已知，四唑可以存在至少兩種互而且雖然式⑴表示其中一種形式，但可以瞭解所=變異構形式皆包含於本發明中，藉由圖例的說明，在下圖中顯示式（I)中四唑的兩種可互變異構物··

另一貫例包括其中乂為顧之具體實施例。熟悉此領域者已知，姆雜環可存有至少兩種互變異構形式，而且雖然式⑴表示其中—種形式，但可以瞭解所有的互變里構妒式皆包：:本發”，藉由圖例的說明，在下圖中顯示‘ 式⑴中其中X是NH之該心（）的兩種可能互變異構物：

再者應瞭解，當該X為NH時，則互變異構體可以同時呈現 103486-941102.doc -24- 1258478 環B結合四唑環。應瞭解，所有物中之互變異構體包含在本發明所有可存在於在此揭示的化合體包含在本發明的範圍之内本發明亦包含非鏡像異構物和非鏡像異構物和光學異構物，例如鏡像異包括4 %性混合物，和個別鏡像異構物及其產生原因是由於特定之本發明化合物中在某些具體實施例中，本發明的化合物氳構物的混合物，包括消旋性混合物非鏡像異構物，其產生原因是由於之結構不對稱。在某些具體實施例在某些具體實施例中本發明的化合物為體實施例中，本發明的應瞭解’為了明禮而豐實施例中，本發明的化合物為s。在某些具本發明的化合物為為消旋性混合物。 …瞭解，為了明確而描述於個別具體實施例中之本發明的特定特徵亦可在-單獨具體實施例中組合提供。反過來况，為了簡化而描述於單一具體實施例中之本發明的各式特徵亦可個別地或以任何適當次組合提供。如使用在此，”取代”表示該化學基的至少一個氫原子由非氫取代基或基取代。當此處化學基被”取代”時，其可呈有至多全取代價數；例如，一甲基可以由1、2或3個取代基取代，次甲基可以由1或2個取代基取代，一苯基可以由 1、2、3、4或5個取代基取代及其相似物。本發明的一個具體實施例有關其中X為NH之式（I)化合物。此具體實施例可以由下圖式（la)呈現：

k2 R1 (la) 103486-941102.doc -25- 1258478 其中式（la)的變數與上下文中所描述之定義相同。本發明的其中一個具體實施例有關其中又為題，心為Η 或經基，· RAH或無，·當時二為一單鍵，或當無化時二為一雙鍵；及環A為一弘員碳環或為一視需要由工到4 個取代基取代的5.員雜環，纟中該取代基包括h、^烧基、c“4烧氧基以及c3 5環烧基之式⑴化合物；或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。本發明的-個具體實施例有關其中之式⑴的化合物。此具體實施例可以由下圖式(Ic)的圖式呈現：

R2 R! (Ic) 其中在式(Ic)中的各變數與上下文中所描述之定義相同。本發明的盆i # ” 個具體實施例有關其中&從下列該群中選出’包括Η、鹵夸〜甘 ^ 口素、搜基、c^ii烷基、Cl_4烷基、Cl.4烷氧基、c2-4烯基、Γ 、匕2^炔基、Ci_4烷硫基及c1-4鹵烷氧基之式（I)化合物。a货呆些具體實施例中，Ri從下列該群中選出，包括Η、鹵| ^ , q I、Ci_4鹵烷基及Cl-4烷基。在某些具體實施例中，Ri為F。A甘L 、在某些具體實施例中，Ri為Η。本發明的一個月 U吳體實施例有關其中Ri從下列該群中選出，包括II、— I ^ ^ 口系、羥基、Cl 4鹵烷基、Cl_4烷基、Cl-4烷氧基、c2_4稀基、Γ 2·4快基、Ci_4^硫基及Ci-4鹵烧氧基之 103486-941102.doc -26- 1258478 式（I)化合物。在某些具體實施例中，R2從下列該群中選出，包括Η、鹵素、Cl·4鹵烷基及。“烷基。在某些具體實施例中，R2為]P。在某些具體實施例中，R2為Η。本發明的其中一個具體實施例有關其中1與r2皆為Η之式（I)化合物。本發明的一個具體實施例有關其中環八為一5、6或7員碳環之式（I)化合物。名詞”5、6或7_員碳環，，表示一環包括5 個、6個或7個環碳原子，其中兩個環碳原子共用環a及環 B環A可以為飽和狀態（即沒有環雙鍵）、未飽和狀態（即包含環雙鍵）或其組合。在某些具體實施例中，二二為單鍵並且R2存在。此具體實施例可以由下圖所示之式（Ie)表

其中在式（Ie)中的各變數與上下文中所描述之定義相同。本發明的一個具體實施例有關具有式（If)之化合物：

其中：

Ri為Η或經基，且環a可視需要地由1或2個取代基取 103486-941102.doc -27- 1258478 代 ’該取代基包括c“烷基其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合;^基、C3-5環燒基；或某二 ^例中，環Α為—5胃施例中，環a為—5員碳環由m —個具體實示·· 了 j以由下圖所示之式（Ig)表

其中在式（Ig)中的各變數與上所「又甲所描这之定義相同。在某些具體實施例中，R Λ 1馬li·4烧乳基。在某些具體實施例中，：^丨為Ci-4烷基。扃S此θ Μ虫、在某二具體實施例中，R〗盘R2皆為Η。 /、本毛明的其中一個具體實施例有關具有式（ih)之化合物：

其中：環A可視需要地經1或2個下列選取之取代基取代，其中包括鹵素、Cw烷基、Cw烷氧基及c3-5環烷基；或其醫藥上可接受的鹽類、〉谷劑合物或水合物。本發明的其中一個具體實施例有關具有式（Ih)之化合 103486-941102.doc -28- 1258478 物：

其中：環A可視需要地經1或2個下列選取之取代基取代，其中包括鹵素、正丙基、正丁基、Cl-4烷氧基及C：3·5環烷基；或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。本發明的其中一個具體實施例有關具有式（Ih)之化合物··

一其醫*上可接受的飽和（即單體為一5員環碳且更進-步為式⑼表示"雙鍵）。此具體實施例可以由下圖所示 103486-941 l〇2.d〇c -29- 1258478

/

N

N、 H (H) 文中所描述之定義相同。關其中環A為6員碳環之式由下圖所示之式（Ik)表示：其中在式（Ii)中的各變數與上下本發明的一個具體實施例有 (I)化合物。此具體實施例可以 n’N々n

(Ik) 其中在式di)中的各變數與上下文中所描述之定義相同。本發明的一個具體實施例有關其中環八為七員碳環之式 (I)化合物。此具體實施例可以由下圖所示之式（Im)表示：

(Im) 其中在式（Im)中的各變數與上下文中所描述之定義相同。本發明的一個具體實施例有關其中環A為一 5、6或7員石炭環，如上文所述之式（I)化合物。在某些具體實施例中，二為一雙鍵且哏2不存在。此具體實施例可以由下圖所示之式 (1〇)表示： 103486-941102.doc -30- 1258478 一個環碳以環氧原子取代’這些具體實施例可以由下圖所示之式（Is)及（It)呈現：

其中在式（Is)及式（It)中的各變數與上下文中所描述之定義相同。在某些具體實施例中，本發明的化合物為其中又為 NH之式（IS)。在某些具體實施例中，本發明的化合物為其中X為0(—氧原子）之式（Is)。在某些具體實施例中，本發明的化合物為其中X為NH之式（It)。在某些具體實施^ 中，本發明的化合物為其中X為0(一氧原子）之式（it)。在某些具體實施例中’本發明的化合物為其中〜為。丨烷基同時h為Η之式⑽。在某些具體實施例中，本發明的化合物為其中1及112皆為Η之式⑽。在某些具體實施例中，本發明的化合物為其中尺1為（：1·4烷基同時心為11之式（Η)。在某些具體實施例中’本發明的化合物為其中〜及^皆為Η 之式（it)纟某些具體實施例中，該5員雜環的其中一環碳由-環硫原子取代，·這些具體實施例可以由下圖所示之式 (In)及式（Iv)呈現：

(Iu) (Iv) 103486-941102.doc -32 1258478 其中在式（Iu)及式（Iv)中的各變數與上下文中所描述之定義相同。在某些具體實施例中，式（Iu)及式中的環硫進步氧化成亞砜基（即-S(0)-)。在某些具體實施例中，式（Iu)及式（IV)中之環硫進一步氧化成砜（即_s(〇)2_)。在某些具體實施例中，本發明的化合物為其中又為nh之式 (Iu)。在某些具體實施例中，本發明的化合物為其中X為〇( 一氧原子）之式（Iu)。在某些具體實施例中，本發明的化合物為式（IV)，其中X為NH。在某些具體實施例中，本發 2的化合物為其中X為0( 一氧原子）之式（Iv)。在某些具體 κ轭例中，裱A為一 6員雜環。在某些具體實施例中，該6 員雜環的-個環原子由-環氧原子取代；這些具體實施例可以由下圖所示之式（Ix)、式（Iy)及式（Iz)呈現：

其中在式（IX)、式（Iy)及式（Iz)中的各變數與上下文中所描述之定義相同。在某些具體實施例中，環A為一7員雜環。田本發明的其中一個具體實施例有關其中環A為:員二員 =7員雜環之式⑴化合物。在某些具體實施例中，=為二，鍵且化不存在。在某些具體實施例中，環A為-了員雜環。此具體實施例可以由下圖所示之式（na)呈現：、 103486-941102.doc -33 - 1258478 某些具體實施例中，環A視需要地以1到3個取代基取代。在某些具體實施例+，環A視需要地以！到2個取代基取代在某些具體實施例中，環A視需要地以1個取代基取代。在某4b呈#香A m ~ 體貫施例中，J哀A沒有取代基。本發明的化學性質式（I)化合物之合成入本發明的一個具體實施例為用於製備新穎之式（I)四唑之、'本發明的化合物可以利用各種市售原料，根據此新穎方法輕易地製備，或輕易地藉由熟悉此技藝者已知之合成體系製備。在下述合成圖巾，除非另有所述，該標記的取代基具有如以上式⑴化合物所述之化合物定義之相同身分。種用乂製備其中乂為NH(即，環B為…比峻）之本發明化合物的方法係利用衍生自式㈧環酮之中間產物，如下述反應略圖I所述：

Scheme I Η 〇

103486-941102.doc -35- 1258478 式（i&)化δ物可以藉由在驗及極性溶劑（例如但不限於。18 烷基醇、甲醇、乙醇、丁醇、戊醇、己醇、2_甲氧基乙醇、異丙醇、THF、DMF及其相似物）存在下，將式（幻裱酮與式（C(〇)〇r1g)2的草酸二烷酯反應得到式（B)酮酯而製備，其中RlG為一 Cw烷基。合適的鹼類包括金屬烷氧化物，例如，甲氧鈉、乙氧鈉、乙醇鉀、第三丁醇鉀及其相似物；鹼金屬醯胺（即，鹼金屬—NRn，其中R"為Cw烷基或甲矽烷基-Ci-8_烷基），例如，二異丙醯胺鋰、六甲基二 '六甲基二氮;、六甲基二氮石夕烧卸及相似鹼類。在適當的情況下將酮酯（B)與聯胺反應，其可為經保護（或未保護）聯胺，得到式（c)的吡唑酯。可視需要地保α名比唑，例如，使用苄基及其相似物。該酯類係利用此領域中已知的方法轉換成式（D)醯胺，例如，在極性溶劑中在由室溫到該溶劑的沸點之溫度以氨水處理。將醯胺 (D)與脫水試劑反應，例如氧氯化磷、五氧化二磷、氯化亞硫酿及其相似物，不論是純的或在非質子溶劑中，例如乙腈、DMF及其相似物，得到腈（11加士，幻。將腈 (Nitriie，E)與疊氮化合物（即Ns)或疊氮化合物的等致物反應，例如疊氮化鈉、疊氮化鉀、疊氮三甲基矽烷（即， (CHOSiN3)及其相似物，得到至式（1幻的四唑。在某些實例中，在一合適的溶劑中，例如DMF及其相似物，包含路易斯酸（Lewis acid)的存在為有益的，例如we丨3、〜价2及其相似物。 -種可以用來製備其中义為一環氧(換句話說，環Β為一 103486-941102.doc -36- 1258478 異噁唑）之式（i)化合物之方法運用式（j)炔醇所衍生之中間產物，如以下的反應略圖II所述：

Scheme II

藉由以一適當的保護基，例如：THP、TBDMS及其相似物，保護式（J)炔醇而得到炔基（K)可製備式（Ic)化合物例如。經由強鹼的處理，之後與氣甲酸CN8烷酯反應，炔基 (K)轉換成式（L，其中R15為Cw烷基）的炔酯。一種合適的強鹼為烷基鋰，例如但不限於正·丁基鋰、ί- 丁基鋰及其相似物。其後利用此領域中的已知方法將中間產物（L)去保護，例如，一般藉由酸（例如PTSA)處理而移除該ΤΗΡ基，同時典型地藉由氟化四烷銨處理而移除該TBDMS基。利用各種方法將該所得醇類氧化成酸（Μ)，例如，Dess-Martin periodinane(即， 1，1，1-三乙醯氧基-1，1-二氫-1， 2-碘苯噁唑-3-(1Η)-酮）、Swern氧化作用、使用NCS的Corey 氧化作用或任何其他合適的方法，如由Hudlicky，Μ在芬滅 103486-941102.doc -37- 1258478 化學中的氧化作用畫今所遂，ACS Monograph \U[\99Q)。醛（Μ)在鹼存在下與羥胺反應，接著為NCS及鹼而得到異噁唑烷酯（N)。異噁唑（N)可以一實質上相似上述的反應略圖I之方法轉換成式（Ic)化合物（即，-CCVCw烷基—CONH2 -> -C ξ N— _ 四口坐）〇一種可以用來製備特定式（I)化合物之方法運用中間產物 (AJ)，如以下反應略圖III及IV所述：

Scheme ΙΠ

(AF) (AG，）（AG") 結構（AJ)化合物（其中R為C!_4烷基、C2-4烯基及C2_4炔基）可以藉由在作為鹼之氫氧化鈉存在下，在如THF之適當溶劑中以溴化苄基處理不飽和吡唑（AA)，得到該N-苯基吡唑 (AB)而製備。利用此領域中已知的方法可以皂化該。比嗤 (AB)，例如，在溶劑混合物中（例如THF/MeOH)以氫氧化鈉水溶液處理。利用偶合劑（例如EDC)將該酸（AC)與N-羥基丁二醯亞胺偶合。在一溶劑中（例如1，4-二噁烷）以濃氨 103486-941102.doc •38- 1258478 水溶液將該酯類（AD)轉化成醯胺（AE)。該醯胺（AE)可在非質子溶劑（例如DMF)存在下以脫水試劑反應，例如三聚氯化氰、三氟醋酸酐、亞硫醯氯及其相似物，得到至該腈 (AF)。該腈（AF)在低溫下於一溶劑（如THF)中與過量的氫化硼-THF反應，之後在氫氧化鈉中以雙氧水氧化，得到示為（AG’）及（AGM)的醇類之1:1混合物。

Scheme IV

NaN3, ZnBr2 iPA/H2〇, 90 °C

運用任一醇類（AG’）或（AG”）可製備各式的酯類。運用醇類（AG’）之代表性合成示於反應略圖IV中。應了解，以醇類（AG")開始可運用相似的合成。結構（AH)化合物可藉由在在驗（例如氫化納）存在下，在非質子溶劑中，如DMF，將醇類中間產物（AG〇以過量的鹵化烴處理而製備。該腈（AH)可在路易斯酸（例如溴化辞）存在下，以與疊氮化合物反應，例如疊氮化鈉，而得到結構（AI)四唑。最終產物可藉由在氧化條件下，在如DMSO 的溶劑中運用如第三丁醇鉀之鹼移除苄基保護基而製備。一種可以用來製備特定式（I)化合物的方法係運用中間產物（AS)，如以下之反應略圖V所示： 103486-941102.doc -39- 1258478 Ο

LDA, THF, -78 °C (AL) x〇Vx o

Scheme V

BnNHNH2.HCI -^ EtOH/HOAc, reflux

Eta O

50%TFA/DCM Bn _ CN

OH /v-hydroxysuccimide EDC, DCM NH4〇H -^ Dioxane

nh2 Cyanuric chloride -^ DMF 0·

(AQ)

LDA, THF, -78 °C TfO

結構式（AV)化合物可以由3 -乙氧基-環戊烯酮藉由在非親核鹼（例如：LDA或LHMDS)存在下，在溶劑（例如THF)中以草酸二烷酯（例如：草酸二第三丁酯或草酸二乙酯）反應製備，得到酮酯（AM)而製備。將該酮酯（AM)在回流下於極性溶劑（如含冰醋酸的乙醇或甲醇）中以苄基聯胺反應，得到吡唑（AN)。或者，可將該酮酯（AK)以聯胺反應，之後利用碳酸鉋做為鹼，在非質子溶劑（例如DMF)中以溴化苄基將該吡唑烷化烷化。該吡唑酯（AN)可以利用（AGf) 所描述之相似順序轉化成該腈（AR)。在LDA存在下，在溶劑（例如THF)中利用康明斯試劑（Commins* reagent)將該酮 103486-941102.doc -40- 1258478 (AR)轉化成三氟甲磺酸乙烯酯（AS)。利用化合物（AS)，可將各式取代基在C-5處引入，如反應略圖VI所示。

Scheme VI

(AS)

Bu3SnR，，LiCI， (Ph3)4Pd，THF -^ or R'B(OH)2i K3PO4, (Ph3)4Pd，p-dioxane

ΝβΝβ, ZnBr2 -^ iPA/H2〇, 90 °C

Pd black, MeOH HCOOH or c.HCI (AU)

(AT) xNn N

該三氟甲磺酸（AS)可以在鹼（例如氯化鋰）及催化劑（例如四（三苯基膦）鈀（〇))存在下，在適當溶劑中，例如THF或甲苯，與適當的錫烷試劑反應。或者，該三氟甲磺酸（AS)可在驗（例如填酸氫鉀）及催化劑（如四（三苯基膦）Ιε (0))存在下，在適當溶劑中，例如1，4-二噁烷，與合適的烯基硼酸反應。該腈（AT)係在路易士酸（例如溴化辞）存在下與疊氮化合物（例如疊氮化鈉）反應，得到結構（AU)的四唑。最終化合物可藉由移除苄基保護基而製備，其可在極性溶劑 (例如甲醇或乙醇以及酸，如蟻酸或濃鹽酸）中利用鈀黑之還原條件下實行。或者，醇類（AG’）可以運用此領域中已知的方法氟化，例如DAST[三氟化（二乙基胺基）硫]來提供可以轉化成其四 103486-941102.doc -41 - 1258478 唑衍生物之氟化物，及運用描述於此的方法去保護。以下之反應略圖VC描述一種用以製備特定之式（I)化合物之方法：

(AM)

Scheme VII

TsCI pyridine CH2CI2 Η (AW)

(AY)

A/-hydroxysuccimide EDC, DCM

Cyanuric chloride DMF

LDA, THF.-78 °C Cl N N(Tf)2

Me4Sn, Pd(PPh3)4 -)► LiCI, toluene, 120 °C

(BD)

結構（BF)的化合物可以由酮酯（AM)藉由在極性溶劑中如包含冰醋酸的乙醇與聯胺反應，得到吡唑（AW)而製備。該^比嗤（AW)可以在驗（如°比淀）存在下，在溶劑（例如 CH2C12)中與磺醯基氯（例如p-甲苯磺醯基氯）反應，得到N- -42- 103486-941102.doc 1258478 磺醯化衍生物（ΑΧ)。該吡唑酯（ΑΧ)可以在酸性條件下利用酸，例如在CH2C12中的TFA，形成（ΑΥ)而去保護。該吡唑酸（AY)可以利用關於（AGJK描述相似的連續步驟轉換成該腈（BB)。在鹼（例如LDA)存在下，在溶劑（例如THF)中利用康明斯試劑（Comminsf reagent)可將該酮（BB)轉換成三氟甲磺酸乙烯酯（BC)。該三氟甲磺酸酯（BC)可以在鹼（例如氯化鋰）及催化劑（例如四（三苯基膦）鈀（0))存在下，在適當溶劑（例如THF或甲苯）中與四甲基錫偶合。藉由與It化四丁銨溶液在溶劑（例如THF)中反應可移除該p_甲苯磺醯基，得到吡唑（BE)。將該°比嗤（BE)在路易斯酸（例如漠化辞）存在下與一疊氮化合物（例如疊氮化鈉）反應可製備最終化合物，得到該四唑 (BF)。藉由許多上述以外步驟之步驟可執行將各種有機基變換成在此使用之保護基。可用於製備中間產物或揭示於此之化合物的其他合成步驟的參考文獻可發現於，例如·· Smith，M.B 及 March，J·所著 π 進階有機化學 Organic 第五版 WILEY-Interscience(200 1);

Larock，R.C.所著”有機變換概述，基礎基群製備的指導手 # {Comprehensive Organic Transformation, A Guide to Functional Grow/? 第二版，VCH 出版社 (1999)，或 Wuts，P.G.M及 Greene，T.W.; n在有機合成中的保護基（Protective Groups in Organic Synthesis)’’第三版，了〇1111\\^10；/及8〇113(1999)，其均於此全部併入作為參考。 103486-941102.doc -43 ·= 1258478 :⑴化合物可以具有-個或多個對掌中心、，因此存在如鏡像異構物或非鏡像異構物。應了解，本發明可延伸至所有此類之鏡像異構物、非鏡像異構物及其混合物，包括消旋混合物。式（I)及描述於此上文之式思圖呈現全部之個別異構物及其混合物，除非另有所述。藉由已知的方法可將外消旋混合物解析成光學純鏡像異才物’例如’猎由以光學活性酸分離其非鏡像異構物鹽類，及藉由驗處理釋放光學活性胺化合物。另一種將消旋物解析成該光學純鏡像異構物的方法是基於在—光學活性基質或對掌異構物撐體上之層析術。本發明的特定消旋化合物可以因此解析成其光學對掌體，例如藉由將d-或卜（酒石酸、，乙醇酸或樟腦石黃酸）鹽分鶴結晶。本發明的化合物亦可藉由將本發明化合物與光學活性之活化羧酸反應，如街生自（+)或㈠苯基丙胺酸、（+)或（―）苯基甘胺酸、 (+)或㈠樟腦酸之叛酸，形成非鏡像醯胺或酉旨，或藉由將本發明的化合物與-繼而水解之光學活性氯甲酸鹽或相似物反應，形成非鏡像胺甲酸鹽而解析。可以運用此領域中已知之其他光學異構物解析方法，而且其對熟悉此領域者為顯而易知的。此方法包括 J.JaqueS，A.Collet及S.Wilen所著之”鏡像異構物、消旋性混合物及分析（Enanti〇mers，Racemates，_ Res〇luti〇ns)，，

JohnWiley and Sons於紐約出版（1981)所述者。應瞭解，在此描述的化學為代表之實例，並非意圖以任何方式加以侷限。式（I)化合物的代表實例呈現於下頁的表A中。 103486-941102.doc -44- 1258478 表A 化合物結構式化學名稱 1 /~\ N-N Wv N—N、 & Η 3-(1Η-四氮唑-5-基)-2,4,5介四氫-環戊σ比唑 2 戸一\ Ν—Ν Vvv Ν—Ν Λ Η Η 3-(1Η-四氮唑·5-基)-2,6-二氫-4H-硫二稀伍圜並[3,4»c] σ比吐 3 /°~\ Ν-Ν Λνν Ν—Ν Λ 、Η Η 6-甲基-3<1H-四氮峻-5|)-2,6-二氫4H-呋[3,4-φ匕唑 4 ft \ Ν—Ν VvV Ν~Ν ^ Η 3-(1Η-四氮唑-5·基>2,4-二氫- 環戊σ比嗤 5 Ν—Ν Ν—Ν Λ 、Η Η 3-(1Η-四氣 °圭-5-基)-2,6-二氫_ 環戊°比吐 6 Ρ —\ Ν—Ν VvVN Ν_Ν Λ Η Η 3-(1Η-四氮唑-5-基)-2,6-二氫-4H-咬[3，4«C] σ 比 σ圭 7 / ~\ Ν-Ν \V；n Ν-Ν ^ Η 5-乙基-3·(1Η-四氮唑·5|)·2,4,5,6· 四氫·環戊°比吐 103486-941102.doc -45- 1258478 化合物結構式化學名稱 8 / \ N-N VvVn N 一Ν Λ Η Η 5-丁基-3<1Η-四氮唑-5 羞>-2,4,5,6- 四Α-環戊σ比峻 9 Ν—Ν Vvv Ν—Ν Λ Η Η 5-乙基-3-(111-四氮唑-5羞)-2,6- 二氫-環戊。比°坐 10 //\ Ν—Ν Ν—Ν Λ Η Η 5-乙基-3-(1Η-四氮唑-5基-2,4- 二氫-環戊吡唑 11 ]\ Ν—Ν VvV Ν—Ν ^ Η 5-丙基-3-(1Η-四氮唑-5去卜 2,4,5,6-四氫-環戊啦唑 12 Υ~\ Ν-Ν VvVN Ν-Ν Λ Η Η 5-丙氧基-3-(1Η-四氮唑-5| 2,4,5,6-四氫-環戊啦〇坐 13 1 \ Ν—Ν Ν — Ν μ Η Η 5-環戊基-3-(1Η-四氮唑-5| 2,4,5,6-四氫-環戊吡唑 103486-941102.doc -46- 1258478 化合物結構式丨化學名稱 14 / \ N-N N-N 山 Η 5-氟-3-(1Η-四氮唑-5-基)-2,4,5,6-四氫-環戊吼唑 15 / \ N—N Ν_Ν Λ 、Η Η 5-異丁氧-3-(1Η-四氮唑-5-基J 2,4,5,6-四氫-環戊σ比口坐 16 Ν—Ν Λ Η Η 5-丁氧-3<1Η-四氮唑-5-基） 2,4,5,6-四氫-環戊订比口坐 17 /r_"\ Ν-Ν h〇Wvn Ν—Ν Λ 、Η Η 3-(1Η-四氮唑-5-基)-2,4,5,6- 四氫-環戊°比0坐各醇 18 MeO / ~\ Ν-Ν νν,- Ν_Ν (ί, Η 5-乙氧基·3-(1Η-四氮唑-5-基） 2,4,5,6-四氫-環戊口比口坐 19 F F / \ Ν-Ν Ν—Ν' ^ Η 5,5-二氟-3-(1Η-四氮唑-5-基） 2,4,5,6-四氫-環戊口比口坐 103486-941102.doc -47- 1258478

本發明的化合物有益於自由脂肪酸製造本發明的化人物古〃 x "之抑制。再者，㈣化口物有s於自由脂肪酸製上降低或在某此愔报$ ^ ^ 抑制而造成實質你呆二h形為不可測量之臉紅常與菸鹼醢的你益士 F用’此作用通 /、於r双s文的施樂有關。利用此領域如顯示於實例7之古1 知的方法量測，丁於貫例7之方法，本發明的化合 mpk的劑量下’不會引起血管緊張。 4'··'300 在某些具體實施例中，相較於實際“ 劑量，太蘇日日《ywt·人專有效之於驗酸片J里本考又明的化合物在一個許尤2丨土初在個體不引起可測量之臉红。在其他具體實施例中、在旦“中自較於實際上相等有效之於鹼酸劑里本考，明的化合物在個體造成小於約80%'㈣' 观、抓、鄉、55%'5G%、45%、卿。、35%30%、 25/。、2〇%、15%、1〇%、5%或1%的可量測臉紅現象。一本發明的化合物可以調節該Rup25受體的活性。名詞” 受體”表示關於增加或減少哕為 X戟^ 4叉體活性的能力。在某些具體實施例中，本發明的仆人私 + 4义月旳化σ物可以藉由與此處描述之一種或多種化合物接觸，而用^ ^ ^啲用於凋即一RUP25受體的方法。在另-具體實施例中，本發明的化合物可以用於調節一 HUP25 X體的方法’以治療需要此調節之個體之代謝相關 103486-941102.doc -48- 1258478 病症’其包括將該受體與治療上有效劑量之式⑴化合物接觸。在某些具體實施例中，本發明的化合物可增加該 RUP25文體的活性。在進一步的具體實施例中，本發明的化合物為該RUP25受體的顯藥劑。在此使用之名詞，，顯藥劑”表示能夠刺激該受體活性（亦即活化）之試劑，例如該 RUP25 ^:體。在某些具體實施例中，本發明的化合物為該 RUP25受體的部分顯藥劑。本發明的另一態樣有關治療代謝相關病症的方法，包括對需要此治療之個體施以治療有效量之式（1)化合物。本發明的另一態樣有關提升個體中HDL的方法，包括對該個體施以治療有效量之式（I)化合物。本發明的另一態樣有關上述式⑴化合物在治療動物體或人體之方法之用途。本發明的另一態樣有關上述式⑴化合物在治療動物體或人體之代謝相關病症之方法之用途。本發明的另一態樣有關上述式⑴化合物在治療動物體或人體之代謝相關病症之方法之用豸，其中該代謝相關病症包括下列血脂異常、動脈粥樣硬化、冠心病、胰島素抗性、肥胖、葡萄糖耐受性受損、粥樣化疾病、高血壓、中風、X症候群、心臟病及第二型糖尿病。本發明的另一態樣有關上述式⑴化合物在治療動物體或人體之代謝相關病症之方法之㈣，其中該代謝相關病症包括血脂異常、動脈粥樣硬化、冠心病、月夷島素抗性及第二型糖尿病。 103486-941102.doc -49- 1258478 本發明的另—態樣有關上述式⑴化合物在治療之動脈粥樣硬之方法之用途。本發明的另一態樣有關上述式（I)化合物在提升動物體或人體中HDL之方法之用途。本發明的另_態樣有關上述式⑴化合物用於製造治療代謝相關病症之藥劑之用途。、 ;本發明的另—態樣有關上述式⑴化合物用於製造治療代。射相關病症之藥劑之用途，該病症包含企脂異常、動脈粥樣硬化、冠心病、胰島素抗性、肥胖、葡萄糖耐受性受損、粥樣化疾病、高血麼、十風、又症候群、心臟病及第二型糖尿病。本發明的另一態樣有關該上述式⑴化合物用於製造治療動脈粥樣硬化之藥劑之用途。本發明的另-態樣有關上述式⑴化合物用於製造對個體提升HDL的藥劑之用途。、本發明的某些具體實施例有關治療代謝相關病症的方法。在某些具體實施例中，該代謝相關病症包括血脂里系、動脈粥樣硬化、冠心病、胰島素抗性、肥胖、葡萄糖耐受性受損、粥樣化疾病、高血壓、中風、,症候= 弟二型糖尿病。在某些具體實施例中，該相關代謝病症為血脂異常、動脈粥樣硬化、冠心病、騰島素抗性及 2㈣尿病。在某些具體實施例中，該相關代謝病症為粥在某些具體實施例中’該相關代謝病症為動脈粥樣硬化。在某些具體實施例中，該相關代謝病症為冠心 103486-941102.d〇i -50- 1258478 ::在Γ::體實施例中’該相關代謝病症為姨島素抗病。體實施财，該相闕代謝病症為第二型糖尿動物，本《明方法之某些具體實施例中，該個體為哺乳。在進—步的具时施例中，該錢動物為人類。二：明的另'態樣有關製造-醫藥組合物的方法，包括合物’……接軸介。 :::::::::::含一― 诸樂上可接受的媒介。本發明的羊此且雜_ 法，該、二/、例包含製造一醫藥組合物的方 ^ /匕括混合至少一種根據任何一合物具體實施例之化合物及一匕不；此之化調配物可以藉由任何二:=接_介。 ^ ^ ,, ，L ^的方法製備，一般來說藉由將性化合物與液體或細微分| g A · 例均勾地遇合，之後，如I Γ 或兩者以所需比的形狀。所m ’將所得混合物形成所需片、T11⑽接合劑、填充物、可接受濕潤劑、键 ΓΓ:分解劑…使用於口服給藥之心油性‘服給藥的液體製品可以為溶液、乳劑、水性： /由14懸子液以及糖漿之 ^ 燥粉末的形式，其可在使::°亥口服製叩可以為乾重組。附加的添加物，“苹：^或其他合適的液體媒介 (包括食用油腐心及:：:乳化#,、非水性媒介日科與染色劑，可以添加入該 103486-941102.doc 1258478 液體製品。非經腸胃形式可藉由將本發明之化合物溶解在一適當的液體媒介及在填充與密封一適當的玻璃瓶或安瓿剞過渡消毒該液體而製備。在此領域中已知許多用於製備藥劑形式之適當方法的實例。利用此領域中已知的技術，可以將本發明的化合物調配成醫藥組合物。於此領域中已知上述以外之合適的醫藥可接受媒介；例如，詳見Remington ·· ”製藥的科學及實行 (The Science and Practice of Pharmacy)” 第 20版，西元 2000 年由LiPPincottWilliams&wilkins出版（編輯：以⑽㈣’八上等人）。雖然用於本發明之治療之化合物或可以原或純化學製品施藥，然而，較佳為該化合物或”活性成份"係如進一步包括一醫藥上可接受載劑之醫藥調配物或組合物而出現。因

的八他成刀相谷且且不過度損害賦形劑如：口服、直腸、鼻以藥物的降解最小

之最有效方式提供吸收藥物而以一控制醫藥調配物包括下述合適的方式，如部、局部（包括口腔射、皮下注射或靜或以穿透皮膚藥貼 103486-941102.d〇i -52- 1258478 ^刀配樂物…般來說，穿透皮膚藥貼包括—不透性的月層、一單獨壓力敏感膝布以及附有釋放塾的可移除保護層。熟悉此技藝者基於其需求應可瞭解及體認適合用來製造所需有效穿透皮膚藥貼之技術。、 :發明的化合物與一常見的賦形劑、媒介或稀釋劑因此二置：醫藥調配物及其單位藥劑的形式中，且可以利用各種形式如固體，例如鍵劑或填充勝囊，或液體，例如溶液、懸洋液、乳液、醜劑、膠體或填充該相似物的膠囊， =部針對口服使用，直腸施藥用栓劑；或非經腸胃(包 :注射)用之無菌注射溶液形式。此醫藥組合物及其之:劑形式可以按習知比例包含習知成份，有或無額外用^化合物或要素’同時此單位藥劑形式可以按意圖使母曰劑量範圍包含任-適當之有效量活性成份。料口服施藥，該醫藥組合物可為下列形式，例如錠二旦=、、懸洋液或液體。該醫藥組合物較佳為製成含特囊、錠劑、粉末 ,„ ^ …，予，夜，其具有習知添加劑，二纖唯:露醇、玉米殺粉或馬鈴薯澱粉；接合劑，例如二=、纖維素衍生物、阿拉伯膠、玉米殿粉或明鈉.” <列如玉未澱粉、馬鈐薯澱粉或羧甲基纖維辛 :::滑劑，例如滑石粉或硬脂酸鎮。該活性成份亦 ;猎；：:合物而注射施藥，例如，其中可使用生理食鹽葡㈣或水作為適當之醫藥上可接受媒介。，可以的化合物或其溶劑合物或生理機能衍生物 103486-941102.doc -53- 1258478 在劑醫藥組合物中作為活性成份。名詞’’活性成份，，定義在，，醫藥組合物尤其作為RUP25受體顯藥中且意指醫藥組合物之提供主要藥理作用之成分’與”非活性成份”相反其通常被認定無法提供醫藥上的效益。當運用本發明的化合物時，該劑量可以在一寬廣的限制中變化’ $時如習用並由為醫生所熟知，在各自單獨情形中其可配合個別的情況。例如，其依照疾病的特性及嚴重性’病人的m用之化合物’或治療急性或慢性病症或者是否施以本發明化合物以外的活性化合物而定。本發明的代表性劑量包括但不限於約0 001毫克到約5_毫克、約〇.〇(Π毫克到約2500毫克、約0 001毫克到約1〇〇〇毫克、約〇_〇〇1毫克到約500毫克、約0 001毫克到約25〇毫克、約0.001毫克到約100毫克、約0 001毫克到約5〇毫克、約〇·〇曰01毫克到約25毫克。—天當中可以施以多次劑量，尤其是在認定需要相對大量的藥物時，例如2、3或4份的劑量。依照個體及來自病患之醫生或提供照護者所認定，可能需要向上或向下調整此處所述的藥物劑量。用於治療所需的活性成份或其活性鹽類或衍生物的數 Ϊ ’將不僅隨選擇的特定鹽類’而且亦隨施藥途徑、治療 f月况的特性與病患的年齡條件而不同，以及最後由表與/之醫生或臨床醫生判斷。—般來說’熟悉此領域者瞭解如何將在一模擬系統所得取的活體内訊息推導至其他者，如’動物模型到人類。一般來說，動物模型包括（但不^ 於）下文實例1描述之齧齒動物糖尿病模型；下文實例2扩 103486-941102.doc -54 - 1258478 述的老鼠動脈粥樣硬化模型；或下文實例5描述的動物動脈粥樣硬化模型。在某些情況下，這些推導僅可以根據該動物杈型的體重彼此比較，例如哺乳動物，最佳地為人類，然而，這些推導不僅單單根據體重上的差異，且結合了各種因素。典型的因素包括病人的類型、年齡、體重、 f*生別、飲食及醫藥情況、疾病的嚴重程度、施藥途徑、藥理考量，如該使用特定化合物之活性、功效、藥物動力干、及毋藥特性，不論利用何種藥物傳送系統，不論治療急性或慢性疾病症狀態，或者不論是否施以式（1)化合物以外的活丨生化合物及作為藥物组合之一部分。以本發明的化合物及/或組合物治療之疾病情況之劑量體系可以根據各種因素而變化，例如上述者。於是，制之劑量體系可廣泛地改蜒’因而可得自一較佳劑量體系，而且熟悉此領域者應了解’可測試這些典型範圍外之劑量及劑量體系，及在適當處可用於本發明的方法。 “所而剤里可便利地以單一劑量或以適當間隔施藥之分離 :量供應，例如，如一天兩份、三份或四份或更多的次劑里口亥-人劑里本身彳進一纟分割例如成為許多λ範圍地分開施藥。尤其是在需要施以相當大量時，#日劑量可以分割成數份，例如2份、3份或4份施藥。如過合適，則依照個人行為可能需要增加或減少該指示之每日劑量。一本^月的化合物可以各式口服及非口服藥劑的形式施 ^ ^’“此領域者為顯而易知，該下述劑量形式可以包 ^月的化口物或本發明化合物在醫藥上可接受鹽類作 103486-94il02.doc -55- 1258478 為该活性成份。為了由本發明的化合物製備醫藥組合物，醫藥上可接受的媒介可以為固體或者液體。固體形式的製品包括粉末、錠劑、藥丸、膠囊、栓劑以及分散性粒劑。固體媒介可以為一種或多種物質，其亦可作為稀釋劑、增味劑、溶解劑、潤滑劑、懸浮劑、結合劑、防腐劑、錠狀分解劑或封包材料。

在粉末中，該媒介為一細微分割粉末，其與該細微分活性成分混合在一起。在藥錠中，該活性成分與具有所需黏合能力之媒介以當的比例混合且壓緊成所需形狀及大小。

該粉末及藥錠可以包括各式比例的活性化合物。粉末藥旋中之代表量可以包含約G. 5 %到約9 Q %的活性化合物 :而，在需要此範圍以外之量時技術人員可瞭解。粉末— 樂片的適合媒介為碳酸鎮、硬8旨酸鎮、滑石、糖、乳糖果膠、糊精、澱粉、明膠、黃耆膠、甲基纖維素、羧甲; 纖維素納、低溶解壞、可可脂及其相似物。該用語"製品表示包括該活性化合物與作為提供膠囊的媒介之封包^ 的調配物，其中將活槌士、八舌丨生成分，（有或不含媒介）以媒介彳圍’如此與之結合。同樣地，可包含藥包或菱劑。藥錠粉末、膠囊、藥丸、藥包及菱劑可如適合口服施藥之⑴ 形式使用。為了製備栓劑，首先、、交& 疋，合解低溶解蠟（例如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物）且鞋山错由撹拌將該活性成分均勻地分散 103486-941102.doc -56 - 1258478 其間。接著將該熔解均質混合物倒進一般尺寸的模具中，使其冷卻，藉以凝固。合適的陰道施藥調配物除了活性成份可方便地含有陰道藥栓、止血棉、乳膏、凝膠、糊狀物、泡沫乳膠或噴霧藥之適當載體，如此領域中所已知。攸篮形式的製品包括溶液、懸浮液及乳液，例如，水或水-丙二醇溶液。例如，非口服注射液體製品可調配成在丙二醇水溶液中溶液。可注射製品，例如，無菌可注射水性或油性懸浮液，可以根據已知的技術運用合適的分散劑或濕潤劑及懸浮劑調配。該無菌可注射製品亦可以為在非 f性非口服可接受稀釋劑或溶劑中之無菌可注射溶液或懸 /于液’例如’ 1，3·丁二醇之溶液。使用之可接受媒液及溶劑為水、林格氏液及等滲透的氯化納溶液。另外可以將無菌、安定的油類作為溶劑或懸浮媒體。針對這個目的，; 以運用任何無刺激安定的油類，包括合成單或二甘油卜逶有，脂肪酸，如油酸’可用於製備注射劑。曰 :據二：明之化合物可因此調用於非口服(例如庄入’例如’藥丸注人或連續浸猎由安瓿、事先填充針饩|獅接认冰加防腐劑的現。該組合物可以採取如在油性或水=的形式呈液、溶液或乳液的形式，同時可以包^物中之懸浮劑、穩定劑及/或分散劑。或者，該活性成：：例如懸浮的形式，其係藉由將無菌固體殺菌分離：：Μ為粉末得’在使用前與適當媒介物 5 〉容液凍乾而例如無菌、無熱源水。 103486-941102.doc -57- 1258478 適合作為Π服使料水溶液可以藉由將該活性成份溶於水中並且如所需添加適合的染色劑、香味、穩定劑及增稠劑而製備。適合料口服使用的水性懸浮液可以將細微分割活性成分分散在具輯材料之水中，如天然或纖、樹脂、曱基纖維素、羧甲基纖維素鈉或其他已知的懸浮劑。亦包括為固體形式製品’其意圖恰在使用前轉換成口服施藥用液體形式配品。此液體形式包括溶液、懸浮液及乳液。除了該活性成份之外，這些製品可以包括染色劑、香料、穩定劑、緩衝劑、人H然甘味料、分散劑、增祠劑、溶解劑及其相似物。古至於表皮的局部用藥，本發明的化合物可以調配成軟賞、乳劑或乳液，或作為穿透皮膚的藥貼。叙月及礼d可以’例如，以水性或油性料及添加合適的增稠劑及/或膠凝_配而成。洗液可以水性或油性料調配而且通#亦包含一種或多種乳化劑、穩定劑、分散劑、懸浮劑、增稠劑或著色劑。適合用於口腔局部用藥的調配物包括菱劑，其含有在調未基料中的活f生劑’通常為嚴糖及阿拉伯膠或黃耆膠；糖錠，其包括在惰性基料中的活性成份，例如明膠及甘油或

蔗糖及阿拉伯膠；镙古、私 M p ^ , A 避有漱口樂水，其包含在適當液體媒介中的活性成份。在鼻腔，例如，單一或多重劑量溶液或懸浮液係以習知方式直接地施用以滴瓶、吸量管或噴霧器。該調配物可以 103486-941102.doc -58- 1258478 的开/式提供。在後者滴瓶或吸量管之情形，复患：成施以適當的、預定體積的溶液或懸浮液。在= 的饧形，其可以由定量噴霧喷灑泵實行。、施藥於呼吸道亦可以藉由氣溶膠調配物完成，性成份提供於具適當推進劑之加壓包裝中。如 ^ =其之醫藥組合物如氣溶膠，例如，如鼻腔;溶膠： ==劑!？藥，則其可藉由’例如，利用噴霧劑、哭進> 務裔、吸入劑儀器、計量吸入器或乾粉吸入 -仃。“亥式（I)化合物如氣溶膠而施藥之醫藥形式可以由此領域中已知的方法製備。關於這些製備，例如化合物在水中之溶液或分散液，可使用水/醇混合物或合 k 液’其利用f用添加劑’例如节醇或其他合適的防腐劑、吸收生物利用率之吸收增強劑、劑及其他’及若適當，習用推進劑包括，例如，二；:: 奴、CFC、，例如二氯二氟甲烷、一氟三氯甲烷或四氟二乳乙烷及其相似物。該氣溶膠亦可便利地包含一表面活化劑’例如㈣脂。藥物㈣量可以提供計量閥來控制。在意圖對啤吸道施藥的調配物中，包括鼻腔調配物，該化合物通常具有小粒度，例如，1〇微米的等級或更小。此 :度可以错由此領域中已知的方法獲得，例如藉由微粒製 l方去纟而要時，可以採用適合持續釋放活性成份之調配物。或者，該活性成份可以乾燥粉末的形式呈現，例如，化 ;適田的知末基料之粉末混合物，例如乳糖、殿粉、 103486-941102.doc -59* 1258478 殿粉柄；i从 / (PVP、」例如經丙基甲基纖維素及聚乙稀基靖酮成粕末媒將便利地在鼻腔形成-凝膠。該粉末昆了单-藥劑的形式呈現，例如，明膠之膠囊或藥 —或：以藉由吸入器的方式施藥之發泡藥。脾兮w藥上的製備最好為單—藥劑的形式。在此形式中， ^製品再細分成包含適當數量活性成分的單一藥劑。該 :-樂劑的形式可以為包褒製品，該包裝含有不同數量的 :品，例如包裝藥片、膠囊及裝在藥水瓶或玻璃瓶中之粉。该早-藥劑形式亦可為’膠囊、藥片、藥包或其菱 Μ，或可以為其適當數量的任何包裝形式。作為口服用藥的藥片或膠囊及作為靜脈注射用藥的液體為較佳的成份。 ,,二本發明的化合物可被轉換成"前驅藥物（pr〇_drugs)”。該 ’’前驅藥物”表示經由此領域中已知的特定化學基修改，且在施藥至個體時，這些基進行生物轉換得到該原化合物 (parent compound)之化合物。前驅藥物可以因此被視為本發明的化合物包含-種或多種以暫時方式使用以改變或排除該化合物特性之特殊非毒性保護基。—般利用該前驅藥物方式促進口服吸收。完整之討論提供於A C S.論文系列中T.Higuchi及V.Stella提出的"視為最新傳送系、统的前驅藥物（Pro-drug as Novel Delivery Systems)"，以及由Edward B. Roche編輯，”Bioreversible Carriers in Drug Design(在藥物设計中生體可迚之媒介）”，美國製藥協會及Pergam〇n 出版（1987)，將其全體合併於此作為參考。 103486-941102.doc -60 - 1258478 結合療法：雖然本發明的化合4勿可作為該單一活性醫藥劑而施藥 (即，單療法），亦可以結合其他醫藥劑（即，結合療法），例如用於此處所述之疾病/病情/病症的治療。因此，本發明的另-態樣包括治療代謝相關病症的方法，纟包括對需要此治療之個體施以治療有效量之本發明化合物組合一種或多種此處所述之附加醫藥劑。可〃本么明的化合物組合之合適的醫藥劑包括抗肥胖剤，如載脂蛋白-B分泌/微粒三甘油酯轉移蛋白質 B/MTP)抑制劑、MCR-4顯藥劑、eholescystokinin-A(CCK- A)顯藥劑、血清素及甲基腎上腺素再攝取抑制劑（例如，諾美婷（sibutramine))、類交感神經劑、β3腎上腺素受體顯藥劑、巴多胺顯藥劑（例如，布克丁（br〇m〇criptine))、黑素細胞刺激激素受體類似物、大麻鹼丨受體拮抗劑[例如， SR141716 ·· N_(哌啶-1-基氣苯基卜卜^‘二氣苯基 4_曱基-1//-吡唑羧醯胺]、黑色素聚集激素拮抗劑、絲細胞（0B蛋白質）、痩蛋白相似物、瘦蛋白受體顯藥劑、甘丙肽拮抗劑、脂麵抑制劑（例如tetrahydr〇Hpstatin，即 Orlistat)、厭食劑（例如鈴蟾肽顯藥劑）、神經狀_γ拮抗劑、擬甲狀腺素藥、脫氫表雄g旨酮或其類似物、糖皮質激素受器顯藥劑或拮抗劑、促食受體拮抗劑、尾加壓素結合蛋白拮抗劑、似胰高血糖素縮胺酸_丨受器顯藥劑、纖毛神經營養因子（例如Ax〇kineTM ，由Regener〇n

Pharmaceuticals，Inc.，Tarrytown，NY及 Procter & Gamble 103486-941102.doc -61 - I2s8478

Company，Cincinnati，OH購得）、人類毛髮相關蛋白併 (AGRP)、生長素受體拮抗劑、組胺3受體拮抗劑或反轉顯藥劑、神經介素U受體顯藥劑、降腎上腺厭食劑（例如，_ 他命、嗎（咪唑）及其相似物）、食慾抑制物（例如，安非他酮（bupropion))。其他抗肥胖劑，包括在下文中提及之試劑，為已知的或在本揭示中對熟悉此技藝者為顯而易知。在某些具體實施例中，該抗肥胖劑可從下列各項挑選，包括讓你酷（orlistat)、諾美婷（sibutramine)、布克丁 (Bromocriptine)、麻黃鹼（ephedHne)、痩蛋白（ι^⑷及偽麻黃素（Pseudoephedrine)。在進一步具體實施例中，本發明的化合物以及組合療法係結合運動及/或合理的節食管理。應了解，本發明化合物與其他抗肥胖劑、減低食慾劑、食慾抑制劑及相關試劑之組合療法不限於上述列出各項，但原則上包括任何有益於治療過重及個體肥胖之任何醫藥劑或醫藥組合物的結合。 /' 除了抗肥胖劑之外，可傲士义义口口 Γ 了與本發明化合物結合的其他合適醫藥劑試劑包含有益於户、底糾* ^ ^ 、，口療附朮疾病之試劑。治療此病症包括使用此領域已知之—絲斗、夕#财^ 種或夕種醫樂劑，其屬於（但不限於）下述各項之相關单口、，荆杀σσ的分類·磺醯尿素、美格替耐類、雙脈、α葡萄糖苦醢女去丨 ’抑制刎、過氧體增生活化受體- γ(即，PPAR-γ)顯藥劑、騰島

^ 句系勝島素類似劑、HMG-CoA 运原酶抑制劑、降膽固醇鏟咚条物（例如，笨氧芳酸，其包括·· 103486-941102.doc -62- 1258478 非諾貝特、苯紮貝特、士劑，其包括消膦胺、考=降固醇酸等等；膽酸隔離冉㈣考來替泊等等，板劑(例如，阿斯匹靈及腺# + 於鹼酉文）、抗血小 ^ ^ ^ 腺苷二磷酸酯受體拮抗劑，包括克羅匹夕、噻氯匹定等等）、其 ^ 、巨緊張素轉化酶抑制劑、血管 Μ素㈣體拮抗劑及脂„。根據本發發明的化合物可與—醫華個也樣’本藥物分類的藥劑合併使用者—種或多種屬於於此引用之 =解，本發明化合物與其他製藥劑的結合療法領域不曰限於描述於上下文者，而是原則上包括有益於治療或預防關於代謝相關病症的疾病 ’、醫藥組合物的結合。况或病症之任何醫藥劑或广=發明的某些具體實施例包含治療描述於此之疾病、病兄的方法’其包含對需要此治療之個體施以治療上 ::或劑量之本發明化合物組合至少一種下列醫藥劑， =括1酿尿素、美格替耐類、雙胍、α葡萄糖苦酶抑 ”過乳體增生活化受體_γ(即，PPAR_”顯藥劑、胰島 =、胰島素類似劑、職_coA還原酶抑制劑、降膽固醇樂物(例如，苯氧芳酸，包括：非諾貝特、苯紮貝特、士非羅齊、降固醇酸等等；膽酸隔離劑，包括消膽胺、考I 替泊等等’以及終驗酸)、抗血小板劑(例如，阿斯匹*及腺普二磷酸醋受體拮抗劑，包括克羅匹多、噻氣匹定等等）、企管緊張素轉化酶抑制劑、血管緊張素π受體抬抗劑及脂聯素。在某些具體實施例中，該醫藥組合物進一步包括一種或多種從下列該群中選取之試劑：α葡萄糖㈣抑 103486-941102.doc -63- 1258478 制劑，還原酶抑制劑、雙胍、hmg_c〇a還原酶抑制劑、深海較！烯合成抑制劑、苯氧芳酸、祖分解代謝加強劑、血管緊張素轉化酶抑制劑、胰島素分泌增強劑以及噻唑啶二酮。本發明的一個態樣包括醫藥組合物，其包含至少一種在此所述之式⑴化合物。在某些具體實施例中，該醫藥組合物進-步包含—種或多種由下列該群選取之試劑，例如， α葡萄糖苷酶抑制劑、醛醣還原酶抑制劑、雙胍、HMG- C〇A還原酶抑制劑、深海鮫諸合成抑制劑、苯氧芳酸、既分解代謝加強劑、血管緊張素轉化酶抑制劑、胰島素分泌增強劑以及噻唑啶二酮。 a可以與本發明化合物連結的合適醫藥劑包括。葡萄糖苷酶抑制d。α葡萄糖皆酶抑制劑屬於在胰臟或小腸中競爭性地抑制消化_ (例如α，粉酶、麥芽酶、心酶聚葡萄糖酶、轉化酶等等）之藥類。α葡萄糖苷酶抑制劑之可逆的抑制仙因延遲澱粉及糖類的消化而減緩、減少或降低血糖值。α㈣糖㈣抑㈣的某些代表性實例包括阿拉伯糖、Ν-(1，3_二經基_2_丙基）滅〇 —(正式品名：伏格列波糖)、' 米格列醇及此領域中已知之α葡萄糖芽酶抑制劑。 α 、/、本么明化合物連結的合適醫藥劑包括續醯尿素。忒& &尿素（SU)為促進胰臟Ρ細胞分泌胰島素的藥物，其係藉著細胞膜中的su受體，傳送胰島素分泌的訊息。磺醯尿素的實例包括格列本脲、格十比嗪、格列美腺及此領域中已知的其他磺醯尿素。 103486-941102.doc -64- 1258478 可Μ與本發明化合物結合使用的合適醫藥劑包括美格替耐（meghUmdes)。該美㈣耐為苯甲酸衍生物，代表騰島素分泌促進劑的新類型。這些藥劑目標為飯後高血糖，並 :於降低HbAle顯示與磺醯尿素相似的功效。美格替耐的實例包括瑞格列奈、那格列那以及此領域中已格替耐。，、夷可以與本發明化合物結合使用的合適醫藥劑包括雙脈 (biguamdes)。该雙胍表示刺激無氧㈣，在周邊組織增加對胰島素的敏感性，抑制從腸道吸收葡萄糖，抑制肝臟糖 f生’以及抑制脂肪酸氧化之藥物類型。雙胍的實例包括刀法敏、—f雙脈（metfGmin)、丁福明（Buformin)及此領域已知的雙脈。了：本毛明化合物結合使用的合適醫藥劑包括以葡萄 1苦酶抑制d。》α葡萄糖芽酶抑制劑在姨臟或小腸中競 f〖生地抑制消化酶’例如α·澱粉酶、麥芽酶、心糊精酶、轉化每專等。α葡萄播· 'ft irJU , /+音_抑制劑之可逆抑制藉著延遲澱粉及糖類的消化來竑淫 ^ , 、、、、減 >、或降低血糖值。α葡萄糖苷酶抑制劑的實例包括阿卡波糖、Ν_(ι，3_二經基_2_丙基） —(正式品名：伏格列波糖）、米格列醇及此領域已知的α葡萄糖苷酶抑制劑。可以與本發明化合物姓物、、、口 5使用的合適醫藥劑包括過氧體增生活化受體-γ(即，ρρ R-γ)顯藥劑。該過氧體增生活化受體-γ顯藥劑象徵一活/ 匕核叉體PPAR-γ，因而調整涉及葡萄糖製造、運送及利用的&制之胰島素回應基因的轉譯之 103486-941102.doc -65- 1258478 化合物類型。此類試劑亦促進脂肪酸代謝的調節。PPAR-γ 顯藥劑的實例包括羅格列顚I、°比格列酸1、tesaglitazar、 netoglitazone、GW-409544、Gw_501516及此領域已知的 PPAR-γ拮抗劑。可以與本發明化合物結合使用的合適製藥劑包括HMG-CoA還原酶抑制劑。該HMG-CoA還原酶抑制劑為亦可稱為斯達汀（statin)化合物之試劑，屬於藉由抑制羥甲基戊醯基 CoA(HMG-CoA)還原酶而降低血中膽固醇含量的藥劑類型。HMG-CoA還原酶在膽固醇生物合成作用中為速度控制酶。該斯達汀藉由上調LDL受體的活性而降低LDL的濃度，及負責對血液清除LDL。斯達汀化合物的某些代表性實例包括羅蘇伐他汀（rosuvastatin)、普伐他丁 (pravastatin)、及其納鹽、辛伐他汀（simvastatin )、羅伐史達丁（lovastatin)、阿托利特（atorvastatin)、氟伐他汀 (fluvastatin)、西立伐他汀（cerivastatin )、匹伐他汀 (pitavastatin)、BMS’sn 超級他汀（superstatin)” 及此領域中已知的HMG-CoA還原酶抑制劑。可以與本發明化合物結合使用的合適醫藥劑包括血管緊張素轉化酶（ACE)抑制劑（angiotensin converting enzyme(ACE) inhibitor)。該血管緊張素轉化酶抑制劑屬於藉由抑制血管緊張素轉化酶而部分地降低血中葡萄糖含量及降低血壓的藥物類型。血管緊張素轉化酶抑制劑的實例包括卡托普利（captopril)、依那普利（enalapril)、阿拉普利 (alacepril)、地拉普利（delapril)、雷米普利（ramipril)、賴 103486-941102.doc -66- 1258478 諾普利（lisinopril)、口米噠普利（imidapril)、苯那普利 (benazepril)、喜仍那普利（ceronapril)、西拉普利 (cilazapril)、依好普利拉（enalaprilat)、福辛普利 (fosinopril)、moveltopril、培哚普利（卩61411(1〇卩1^1)、啥那普利（quinapril)、螺普利（spirapril)、替莫普利（temocapril)、群多普利（trandolapril)，及此領域中已知的血管緊張素轉化酶抑制劑。可以與本發明化合物結合使用的合適醫藥劑包括灰管緊張素II受器拮抗劑。血管緊張素II受器拮抗劑目標為金管緊張素II受體亞型1(即AT1)，及對高血壓展現效益。血管緊張素II受體拮抗劑的實例包括洛沙坦（l〇sartan)(及其钟鹽）以及此領域中已知的血管緊張素II受體拮抗劑。引證於此之一種或多種疾病的其他治療包括使用一種或多種此領域已知醫藥劑，該醫藥劑屬於相關藥物之分類，但不限於下述各項·騰版不〉谷素（amyHn)顯藥劑（例如，普蘭林肽（Pramlintide))、胰島素分泌促進劑（例如，GLpel顯藥劑、腸促胰島素類似物（exendin-4)、胰島素促生声 (insulinotropin，NN22 11)、一肽酸基狀酶抑制劑（例如， NVP-DPP-728))、酿基CoA膽固醇乙醯轉移酶抑制劑（例如，依替米貝（ezetimibe)、抗動脈粥樣硬化藥（eflucimibe) 及相似化合物）、膽固醇吸收抑制劑（例如，依替米貝、 pamaqueside及相似化合物）、膽固醇酯轉移蛋白抑制劑（例如，CP-529414、JTT-705、CETi]、把切普（t〇rcetrapib)及相似化合物）、微粒體三甘油脂轉移蛋白抑制劑（例如， 103486-941102.doc •67- 1258478 implitapide及相似化合物）、膽固醇調節劑（例如，nq - 1 886 及相似化合物）、膽汁酸调郎劑（例如，Gti-279及相似化合物）及Ϊ烯合酶（squalene synthase)抑制劑。鯊烯合酶抑制劑屬於藉由抑制鯊烯的合成而降低血中膽固醇含量之藥物類型，。該鯊烯合酶抑制劑的實例包括 (S)-cc[二（2,2-二甲基-1-氧丙氧基）甲氧基]亞膦醯基]苯氧基苯丁磺酸、單鉀鹽（BMS-188494)及此領域中已知的黑埽合抑制劑。根據本發明，該組合可以藉由將該代表性活性成份與上述之醫藥可接受媒介、賦形劑、接合劑、稀釋劑等等一起或獨立地混合，及將混合物作為醫藥組合物口服地或非口服地施藥而使用。當將式(1)化合物之一化合物或混合物與 /、他活f生化a物知藥作為結合療法時，該治療劑可同時或在，同時間調配為一獨立的醫藥組合物，或該治療劑可以如單一組合物而給予。依^本發明，本發明化合物與別心組合可藉由將各活性成分與上述醫藥可接受載劑、賦形劑、黏合劑、稀釋劑等一起或獨立地混合’及將混合物作為醫藥組合物口服地或非口服地施藥而使用。當將式⑴化合物之化合物或混合物與其他活性化合物施藥作為組合療法時，治療劑可同時或在不同時間調配為分離醫藥組合物，或治療劑可以如單一組合物而給予。記化合物與分析方式本發明的另—目的有關式⑴的放射性記化合物，其不僅 103486-941102.doc -68- 1258478 可用於放射線成像，亦可用於在組織樣本中（包含人類）將 RUP25局限及定量，及用於藉由抑制放射性記化合物的結合而分辨RUP25配位子之試管内外的分析。本發明的進一步目的包括其中含此放射性標記化合物之新穎Rup25分析。本發明包括式（I)之同位素標記化合物及此處任何亞屬，舉例但不限於式（la)到式（Iz);以及（IIa)到（nd)。一，，同位素"或”放射線標記”化合物與此描述的化合物相同，但事貝上，個或夕個原子由具有不同於一般在自然界所發現 (即，自然產生）的原子質量或質量數之原子代替或取代。可併入本發明的化合物中之適當放射核包括但不限於 2H(亦寫成D，氘）、3叫亦寫成丁，氚）、、13匸、14。、 13

N 15

N 15 0 o o 1〇F、、36C1、82βΓ、75汾、 13 1 ϊ及 1。併入即時放射性標記化合物中之&射核視放射標記化合物之指定應用而定。例如，對於試管内標記咖25及競爭性分析，通常併入3H、 I或S的化合物具有最大的效益。針對放射 1251、1231、1241、1311、75Br、 Br或Br通常最為有用。應了解’ ’’放射標兮p ”十，丨播。己或；^ §己化合物”為併入至少一個放射核的式（I)化合物。太宜此i辦每在某二具體只苑例中，該放射核可以從下列選取，包括、“c、125ι、3、或82汾。本發明的特定同位专素‘ a己化合物可用於化合物及/或基質組織分佈分析。在箪仕系t具體戶、施例中，該放射核七及/ 76Br、77Br、i23I、U4T、125 14C、5ZBr、125 成像應用而言，UC、Up 76^ a 77 103486-941102.doc -69- 1258478 或14c同位素可用於此種研究。再者，以較重同{ 代，例如氛(即，，能夠提供由較大代謝穩定性二：取特定治療優勢(例如，增加活體内半生期或：：而在某些情況之下較佳。本發明的同位;::: “勿-般可以由已揭示於上文略圖或下述實例的類似+ 驟，以同位素標記試劑取代非同位素標記試劑來製備。其他有用的合成方法將於下文中討t此外應瞭解，、本發明中出現的所有原子可為此原子之最常發生同位素，或^較稀有的放射性同位素或非放射活性同位素。將放射同位素併人有機化合物的合成方法適用於本發明的化合物，且在此領域中為已知的。這些合成方法例如，將活性程度之氚併入目標分子，如下所示： A·利用氚氣的催化還原作用-此步驟一般產生高特定活性產物’並且需要_化或不飽和前驅體。 B·利用氫硼化鈉[3h]的還原作用-此步驟極便宜，而且需要含可還原官能基（如醛、酮類、内酯、酯及其相似物）的前驅體。 c·利用氫化銘鋰[3H]的還原作用-此步驟提供幾為理論特定活性之產物。其亦需要含可還原官能基（如醛、酮類、内酯、酯類及其相似物）的前驅體。旅*氣曝路彳示3己_此步驟涉及在一適當催化劑存在下，使含可交換質子之前體曝露於氚氣中。 E.利用硬化曱基[3H]的N-甲基化-此步驟通常用來製備0-甲基或N甲基（3H)產物，其係以高特定活性碘甲烷[3H]處 103486-941102.doc -70- 1258478 理適§的前驅體。此方法通常允許更高的特定活性，例如，70-90 Ci/mmol。將活性程度之1251併入目標分子的合成方法包括： A·桑德邁爾（Sandmeyer)法及相似反應此步驟將芳基或雜务基私轉換成重氮鹽類，例如一四氟侧酸鹽，繼而使用 Na I成為I125標記化合物。一代表性步驟報告sZhu，D._G. 及同事之1〇7.〇/2靖.2002,67,943-948。 Β·酚的鄰125碘化作用-此步驟可將1251併入該酚之鄰位，如由Collier，T.L及同事報告於j·標記化合物放射性藥物.1999,42，S264-S266。 C·以1251交換溴化芳基及雜芳基-此步驟通常為兩個步驟。第一個步驟是將溴化芳基或雜芳基轉換成該對應的三烷基錫中間物，例如利用一鈀催化反應[即，pd(p}^p)d，或在二烷基錫_化物或六烷基二錫[例如 (CH^SnSrHCH3)3]存在下透過芳基或雜芳基鋰。代表性步驟由Bas’M.-D及同事報告於j·標記化合物放射性藥物 (2001)44，S280-S282。式（I)的放射性標記RUP25化合物可以使用於篩檢分析中以分辨/評估化合物。一般而言，可評估新合成或證驗化合物（即，測試化合物）降低，，式⑴的放射標記化合物，，結合 RUP25受體的能力。因此，測試化合物與，，式⑴的放射標記化合物”競爭結合該RUP25受體的能力直接地與其結合親和力有關。本1¾明的仏δ己化合物結合該rup 2 5受體。在一個具體實 103486-941102.doc 71 - 1258478 知例中’該標記化合物具有小於約5〇〇μ]ν[的IC5〇，在另一具體κ加例中’該標記化合物具有小於約100μΜ的1C50，而在另一具體實施例中，該標記化合物具有小於約1〇μΜ 的ICm，仍在另一具體實施例中，該標記化合物具有小於約1 μΜ的ICa，以及在另一具體實施例中，該標記化合物具有小於約Ο.ΙμΜ的IC5〇。特別是在回顧此揭示之後，該揭示受體及方法的其他用法對4悉此領域者為顯而易知。如經過證實，本發明方法的步驟不需要實行任何特定次數或以按任何特定的順序。本發明的其他目的、優勢及新穎的特徵’在檢驗下述實例後對熟悉此領域者為顯而易的，其意圖為描述性且不意圖為限制性。實例下述實例係提供作為實例之用途，但不加以限定。熟悉此領域者將可基於此處之揭示設計同等的分析及方法，其全體形成本發明的一部分。實例1 齧齒動物糖尿病實例已發展帶有肥胖及胰島素抗性之第二型糖尿病的齧齒動物模型。為了瞭解疾病的病理生理學，並為了測試候選的治療化合物，已發展如db/db及ob/ob[詳見糖尿病 (Dlabetes)(1982) 3 1:1_6]之鼠類及fa/fa zucker 鼠遺傳模型 [糖尿病（1983) 32:830-838 ; Ann Rep Sankyo Res Lab (1994) 46:1-57]。由傑克森實驗室（Jacks〇n Lab〇rat〇ry)發 103486-941102.doc -72- 1258478 展之同型動物C57 BL/KsJ-db/db鼠為肥胖、高血糖、高胰島素、以及胰島素抗性[J Clin Invest (1990) 85:962-967]，但異型則為瘦且血糖量正常。在該db/db模型中，鼠類隨年A逐漸產生胰島素缺乏，其為在人類第二型糖尿病的晚期中’當不足地控制糖份含量時常發現之特徵。由於此模型模擬人類第二型糖尿病，測試之本發明化合物之活性包括（但不限於）降低血漿葡萄糖及三甘油脂。Zucker(fa/fa) 鼠為過胖、高胰島素以及胰島素抗性{ c〇leman，糖尿病 (1982) 31:1 ; E Shafrir in Diabetes Mellitus, H Rifkin and 〇 Porte, jr? Eds [Elsevier Science Publishing Co5 New

York，ed· 4(1990)，p.299-340]}，且該 fa/fa 鼠的突變可能與該鼠 db的突變相同[Friedman等人，Cell (1992) 69:217、 220 ; Truett 等人，Proc Natl Acad ^ usa (i99i) 88:7806]。Tnbby(tub/tUb)鼠類的特徵為肥胖、中度胰島素抗性及高胰島素，但沒有顯著的高血糖症[c〇leman等人，

Heredity (1990) 81:424]。本毛明包含本發明化合物在任何或所有上述齧齒動物糖尿病模型中、在具有第二型糖尿病或上述其他較佳代謝相關病症或者脂質代謝疾病的人類中、或者在其他哺乳動物之模型中，減低該胰島素抗性及高血糖症之用途。以下將測試血糖及胰島素含量及其他„，包括（但不限於）血聚自由脂肪酸以及三甘油脂。本發明化合物之抗高血糖活性之活體内分析將在遺傳上改變之肥胖糖尿病鼠（db/db)(雄性，7_9週大） 103486-941102.doc -73 - 1258478 在22°C及50%相對濕度的標準實驗室條件關在籠中（7_9鼠/ 籠）’及維持Purina齧齒動物的飲食並且隨時給水。在、、△療如’從每一動物的尾巴靜脈採集血液，並利用〇此丁⑽& Basic GlUC0se Monitor SyStem(Lifescan)測定血糖濃度。使用血糖值介於250到500 mg/dl之間之鼠類。各治療組包括七隻鼠類，其係分配使得在研究開始的時候各組的平均血糖值都相等。利用微滲透泵對db/db鼠施藥，其係利用異氟烷麻醉插入，而由皮下（s.c·)對老鼠提供本發明的化合物、生理食鹽水或無關的化合物。其後每隔一段時間從尾巴靜脈對血液取樣，並分析血液葡萄糖濃度。利用史圖等特t_檢定（Student t-test)評估組間（將本發明的化合物比較經生理食鹽水處理者）的顯著差異。實例2 鼠動脈粥樣硬化模型透過去除脂聯素基因而產生之脂聯素不《鼠類已顯示易患動脈粥樣硬化及胰島素抗性。該鼠亦適合作為缺血性心臟病的模型[Matsuda, Μ等人生物化學（2〇〇2)七月，及其中引用之參考資料，其全體併入作為參考]。 ^ 將去除脂聯f鼠類在22t及5〇%相對濕度的標準實驗室料下關在蘢中（7·9隻/籠）。㈣微滲透泵對該氣類施樂’其係利用異敦炫麻醉插人，而由皮下（s e )對老鼠提供本1月的化5⑯、生理食鹽水或無關的化合物。測定在不同時間間隔宰殺之不同組鼠類之新生内膜及缺血性心臟病。利用史圖等特t-檢定(Student卜㈣評估組間(將本發 103486-941102.doc -74- 1258478 明的化合物比較經在裡人_ $ 早乂、、、工生理食鹽水處理者）的顯著差異。實例3 試管内生物活性依…、下述的協定，利用一改良Flash Plate TMAdenylyl Cyclase套件（新英格蘭核能公司；編號第直接證月侯k化5物作為hRUP25的顯藥劑。該名詞，，hRUp25，，包括核普酸為GenBank Accession No· NM一 17755 1以及多肽為

GenBank Accession Ν〇· Np—8〇8219的人類序列，及自然產生的等位變體、哺乳動物正常同系物與其重組變體。在可 hRUP25受體細胞表面表現之經非酵素方法從燒瓶採集穩定地以一表現載體編碼 hRUP25轉染，並且在可編碼hRup25受體細胞表面表現之條件下培養之CHO細胞。在PBS中清洗該細胞且再懸浮在該製造者的分析緩衝液中。利用血細胞計及Trypan藍排除法計算活細胞，並將該細胞濃度調整為2x1 〇6個細胞/毫升。製備cAMP標準品及偵測緩衝液（包括對^毫升的债測緩衝液為2 pCi的追蹤劑[125I]_cAMP(l〇〇 μ1))，同時依照該製造者的指示保存。將如上所述證驗之候選化合物（假如為冷/東狀態，則在室溫下解象）以增加之濃度（3微升/孔； 12 μΜ最終分析濃度）加入各分析孔中（最佳地為96孔的分析盤）。針對這些分析孔，加入在5 0 μΐ的分析緩衝液中為 1〇〇,〇00個細胞，接著將該混合物在室溫下培養3〇分鐘，伴隨溫和搖動。在培養後’將1 0 0 μΐ的偵測緩衝液加入各孔中，之後培養2_24小時。利用”協定# 31”（依照製造者的 103486-94ll02.doc -75 - 1258478 指示）將分析盤在Wallac MicroBeta™分析盤計數器中計數。特定之本發明化合物在cAMP全細胞性方法中具有25 μΜ 或更小的EC5〇。實例4 :試管内生物活性 35S-GTPyS-結合分析：在Wallac Scintistrip板中，將由穩定地表現於鹼酸受體或載體對照（7 pg/分析物）之中國田鼠卵巢細胞（CHO)-Kl細胞製備的細胞膜在分析緩衝液（100 Mm HEPES，100 mM NaCl及100 Mm MgCl2，PH7.4)中稀釋，並且以在加入0·3 ηΜ的35S-GTPyS之前，將測試化合物稀釋在包含40 μΜ GDP(最終[GDP]達100 μΜ)的分析緩衝液將近10分鐘而預先培養。為了避免可能之化合物沈澱，首先在100% DMSO中製備所有化合物，接著在分析中以分析緩衝液稀釋而得3% DMSO的最終濃度。在室溫下以4000 i*pm將板離心1 5分鐘前，使結合進行一小時，之後在Top Count閃爍計數裝置中計數。在GraphPad Prism中執行該結合曲線的非線性迴歸分析。細胞膜製備材料： CHO-K1細胞培養基：F_12Kaighn’s改良的細胞培養基，其具有10% FBS、2 mM的L-麩醯胺酸、1 mM的丙酮酸鈉以及 400 pgml 的 G418。

細胞膜去除緩衝液：20 mM HEPES 103486-941102.doc -76- 1258478 10 mM EDTA，PH 7.4

細胞膜清洗緩衝液：20 mM HEPES 0.1 mM EDTA，PH 7·4 蛋白酶抑制劑雞尾酒：P_8340，（Simga，st.Louis，MO) 步驟：〇從1 5平方公分的培養基抽出細胞培養液，以5毫升的冷卻P B S清洗並抽出。〇添加5毫升的細胞膜去除緩衝液並去除細胞。將刮除液轉移至50毫升的離心管中。添加50 μΐ的蛋白酶抑制劑雞尾酒。〇在4°C下以20,000旋轉17分鐘。〇將上清液抽出及將小球再懸浮於細胞膜清洗緩衝液中。添加5 0 μΐ的蛋白酶抑制劑雞尾酒。〇在4它下以20,000旋轉17分鐘。〇將上清液從該細胞膜小球抽出。將該小球冷凍在-80 °C下以在以後使用或可立即使用。分析材料_· 鳥苷 5’-二磷酸鈉鹽（GDP，sigma-Aldrich Catalog#87127) 鳥苷5'[y35S]硫代三磷酸三乙銨鹽（[35S]GTPyS， Amersham Biosciences Catalog#SJ1320，〜1000 Ci/mmol) 96孔 Scintiplates(Perkin-Elmer# 1450-501) 結合緩衝液：20 mM HEPES，PH 7·4 10 mM NaCl 103486-941102.doc -77- 1258478 1 0 mM MgCl2 GDP緩衝液：結合緩衝液加GDP，範圍從0.4到40 μΜ，在分析前製造新鮮的劑量。步驟： (總分析體積=100 μ/孔） 25 μΐ GDP緩衝液，有（或無）化合物（最終GDP 10 μΜ-所以使用40 μΜ原料）結合緩衝液中之50μ1細胞膜（0.4毫克蛋白質/毫升）結合緩衝液中之25 pl[35S]GTPYS。其可藉由在10毫升結合緩衝液（此緩衝液不含GDP)中添加5 μΐ的[35S]GTPYS原料而製成。〇欲篩檢之解凍化合物培養基（在100%的DMSO中含有5 μΐ的化合物@ 2 mM之子培養基）〇以245 pL的GDP緩衝液將該2 mM的化合物以1:50稀釋成在2% DMSO中為4 μΜ。將解凍的冷凍細胞膜小球放在冰上。〇利用一POLYRON ΡΤ3100(探針 PT-DA 3007/2，設定為 7000 rpm轉速）使細胞膜短暫地均化直到成為懸浮液。藉由Bradford分析測定該細胞膜蛋白質濃度。將細胞膜稀釋成在結合緩衝液中為0.40 mg/ml的蛋白質濃度。（注意：該最終分析濃度為20 pg/孔）。〇對Scintiplate的每個孔中添加25μ1在GDP緩衝液中的化合物。〇對Scintiplate每孔添加5 0 μΐ的細胞膜。 103486-941102.doc -78- 1258478 〇在室溫下預先培養5-10分鐘。〇添加25 μί的稀釋[35S]GTPyS。在室溫下在搖動器 (Lab-Line型號#1314攪拌設定為4)上培養6〇分鐘。〇藉由在22C下將以板蓋密封之培養板以25〇〇 rpm旋轉 20分鐘而中止分析。〇由丁 opCountNXT閃爍計數器讀取數值-35S協定。特定之本發明化合物在功能性試管内GTPyS結合分析中具有約10-100 μΜ範圍内之£(：5()值。更有利的本發明化合物在此分析中具有約1-10 μΜ的範圍内之ECw數值。仍更有利的化合物在此分析中具有小於1 之EC5〇值。實例5 活體内動物模型本發明化合物作為預防及治療高總膽固醇/HDb膽固醇比例及相關病情的醫藥劑的用途，係藉由該化合物在活體内豬模型中降低總膽固醇對HDL-膽固醇的比例、升高 HDL-膽固醇、或防止動脈粥樣硬化而證實。使用豬作為動物的實例，因為豬較其他動物模型更接近地反映人類的生理機此’尤其是脂質代謝。在此提出不意圖侷限之描述性活體内豬模型之說明。將約克白化症豬（Yorkshire albino pigs)(體重25.5±4公斤）在50天期間餵食富飽和脂肪酸及富膽固醇（SFA-CH〇)之飲食（3 5公斤豬隻體重傲食1公斤的份量），其係由供給2%的膽固醇及20%的牛脂之標準食物組成巧叮❽τ等人，臨床研究的歐洲期刊（2〇〇〇)30 : 843-52 ;其全體揭示在此併入作 103486-941102.doc -79- 1258478 為參考]。將飽和對不飽和脂肪酸的比例由正常豬隻食物之0·6調整為該SFA-CHO飲食之1.12。將動物分成兩組，一組（η=8)以該SFA-CHO之飲食餵食並經安慰藥治療，而另組以該SFA-CHO飲食假食並經該化合物治療（每公斤3 ·0 宅克）。將對照動物以標準食物餵食50天期間。採集基線 (接收該動物後兩天）以及開始該飲食物5〇天後之血液樣本。分析血脂。宰殺該動物並且檢驗屍體。或者，該先前分析包括多組各經不同劑量的化合物處理之組。較佳的該劑量係從下列該群中選取：每公斤〇 · i毫克、母公斤0.3毫克、每公斤1.0毫克、每公斤3·〇毫克、每公斤1〇毫克、每公斤30毫克以及每公斤100毫克。或者，該先前分析係在多個時間點實行。該較佳時間點係從下列各選項選取：10週、20週、30週、40週及50週。 HDL-膽固醇將血液收集至檸檬酸三鈉鹽中（3 ·8% ; 1 : 1〇)集。經過離心作用（1200 g，15分鐘）之後取得血漿並立即處理。利用自動为析儀Kodak Ektachem DT System(伊士曼柯達公司，羅契斯特，紐約，美國）量測總膽固醇、HDL-膽固醇以及 LDL-膽固醇。將具有高於此範圍之參數值之樣本藉由供庚該製造商所提供之溶液而稀釋，之後再進行分析。測定該總膽固醇/HDL-膽固醇比例。比較各組之間的HDL•膽固醇含里。比較各組之間的總膽固醇/HDL-膽固醇比例。取施以該化合物後之HDL-膽固醇上升或該總膽固醇 /HDL-膽固醇比例降低作為具有該前述效用之化合物之指 103486-941102.doc -80- 1258478 標。動脈粥樣硬化沿著該腹部表面縱向地切開而完整移除胸及腹主動脈，並在為了組織檢查與脂質組成物以及合成研究而從該胸腹主動脈之標準位置處將樣本切除之後，將其固定於中性缓衝福馬林中。固定後，將全部動脈以蘇丹4號染色並平放失出’同時以連結一電腦化影像分析系統（Image Pr〇

Plus，Media Cybernetics，Sliver Spring，MD)之 TV攝影機取得數位影像，來測定涉及動脈粥樣硬化損害的主動脈表面 _ 百刀比[Gerrity RG等人，糖尿病（仏⑻以以）一書（2〇〇1)5〇 : 1654-65 ; Cornhill JF等人，動脈粥樣硬化、栓塞以及血管 ί 物學 iArteriosclerosis，Thr〇mb〇sis，and Vasculw (1985)5 : 415-26 ;其全體於此併入作為參考]。比較各組：之間涉及動脈粥樣硬化損害的主動脈表面百分比。取施以該化合物之涉及動脈粥樣硬化損害的主動脈表面百分比降低作為具有該前述效用之化合物之指標。實例6 受體結合分析除了此處描述的方法外，另一評估須 ΰ平估測试化合物之方法為

RUP25受體的親和力之分析。 103486-941102.doc -81 - 1258478 可在一中使用式（I)之放射性標記RUP25化合物可在篩檢分析用於證驗/評估化合物。總括來說，可評估新合成或經證驗化合物（即測試化合物）降低’’式（I)的放射性標記化合物π結合RUP25受體的能力。因此，與”式（I)的放射性標記化合物π或放射性標記RUP25配位子競爭結合RUP25受體的能力直接地與測試化合物結合RUP25受體之結合親和力有關。用來測定受體結合RUP25的分析協定： A.RUP25受體製備（RUP25 RECEPTOR PREPARATION) 短暫地以10 pg人類RUP25受體及60 μΐ脂質體 (Lipofectamine)(每個15公分盤子）轉染之293個細胞在該盤中隨著培養基的變化而培養24小時（75%匯合），及以每盤 10毫升的 Hepes-EDTA 緩衝液（20 mM Hepes+10 Mm EDTA, 酸驗值7·4)移除。將此細胞在Beckman Coulter離心機以 17,000 rpm離心20分鐘（JA-25.5軸輪）。接著將該小球再懸浮在20 mM Hepes+1 Mm EDTA中（酸驗值7.4)，及以50-毫升均化機使其均化並再次離心。在移除該上清液之後，將該小球儲存在-80°C，直到用於該結合分析。當使用於該分析時，將細胞膜於冰上解凍20分鐘，之後添加1〇毫升的培養緩衝液（20 mM Hepes，1 m MgCl〗，1〇〇 NaCl ’ 酸鹼值7.4)。將該細胞膜振動以再懸浮該粗細胞膜小球，並以 Brinkmann PT-3 1 00 Polytron 均化機（設定為 6)均化 1 5 秒。利用該BRL Bradford蛋白質分析測定細胞膜蛋白質的濃度。 103486-941102.doc -82- 1258478 Β·結合分析（BINDING ASSAY) 關於總結合，將總體積為50 μΐ的適當地稀釋之細胞膜 (稀釋於包含50 mM Tris HC1 (酸鹼值7·4)，10mM MgCl2及 ImM EDTA ; 5-50 pg蛋白質的分析緩衝液中）加入96孔的聚丙烯微量滴定盤，之後加入100 μΐ分析緩衝液及50 μΐ的放射性標記RUP25配位子。關於非特定結合，添加50 μΐ的分析緩衝液而非1 〇〇 μΐ，及在添加50 μΐ的放射性標記 RUP25配位子前，加入另外50 μΐ的10 μΜ冷卻RUP25。接著將滴定盤在室溫培養60-120分鐘。藉由透過具Brandell 96孔分析盤收集器之 Microplate Devices CF/CUnifiter過濾盤過濾分析盤，之後以包含0.9% NaCl之50 mM冷卻Tris HC1(酸鹼值7.4)清洗，而終止該結合反應。之後密封該過渡盤的底部，將50 μΐ的Optiphase supermix加入各個孔中，將該盤的頂端密封5並將盤以Trilux MicroBeta閃爍計數器計數。有關化合物競爭研究，將100 μΐ的經適當稀釋測試化合物代替添加100 μΐ的分析緩衝液加入合適的孔中，之後添加50 μΐ的放射性標記RUP25配位子。 C·計算（CALCULATIONS) 測試化合物起初以1及0.1 μΜ，然後在選取以致於中間劑量造成50%之放射性RUP25配位子結合抑制（即·，IC5G)之選取濃度範圍内分析。不含測試化合物（B。）的特定結合與刪除非特定結合（NSB)的總結合（Βτ)不同，且相似地特定結合（B)(在測試化合物存在下）與刪除非特定結合（NSB)的置換結合（BD)不同。IC5〇係由抑制回應曲線來測定，其為 103486-941102.doc -83 - 1258478 % b/bq相對測試化合物濃度之對數-對數圖。由 Cheng and Prustoff變換計算 Ki ·· K{ = IC5Q/(1 + [^V^d) 其中[L]表示在用於該分析之放射性-RUP25配位子濃度，及KD為在該相同結合條件下單獨測定之放射性-RUP25配位子的解離常數。 D·替代性結合分析步驟（ALTERNATIVE BINDING ASSAY PROCEDURE) 3H-終驗酸結合競爭分析。使用穩定地表現該菸鹼酸受體之CHO-KI細胞來製造用於結合分析之細胞膜。細胞在成長培養基（F-12Kaighn’s改質培養基[ATCC，#30-2004]包括10%?68[013(：0，#10438-026]，1 mg/ml G41 8[GIBCO, #1013 1-027]以及 IX Pen-Strep (Sigma P-0871))中生長至〜80%匯合，由刮取採收，並在4 °C下以12000Xg離心10分鐘。將細胞小球再懸浮在採收緩衝液中（20 mM HEPES，10 mM EDTA，酸鹼值 7.4)，並以 12 mm Polytron均化機（設定為5)突發4X10秒而均化。將溶胞產物在4°C下以12000 Xg離心10分鐘來移除未溶細胞及細胞核，接著將所得上清液在4°C以39000 Xg離心15分鐘而得到小球細胞膜。該所得小球再懸浮在清洗緩衝液中 (20 mM HEPES，0.1 mM EDTA，ΡΗ 7·4)，並以 12 mm Polytron均化機（設定為4)突發3 χ 10秒而均化，之後於4 C 下以39000 Xg再離心45分鐘。將該所得小球再懸浮在清洗缓衝液中且在使用之前儲存在液態氮中。以BSA作為標準 103486-941102.doc -84 - 1258478 品，運用Pierce BCA蛋白質分析測定此處製品之細胞膜蛋白質濃度。在96孔聚丙烯盤中實行3H-菸鹼酸平衡結合。反應包括 140 μΐ稀釋在分析緩衝液中（20 mM HEPES，PH 7.4，1 mM MgCl2及0·01% CHAPS ; 15-3 0 pg細胞膜蛋白質/分析）之細胞膜，20 μΐ稀釋在分析緩衝液中（將化合物儲存在100%的 DMSO中；該分析之最終DMSO濃度為0.25%)的測試化合物，以及40 μΐ的25 Nm氚化菸鹼酸（[5,6-3Η]-菸鹼酸：美國放射性物質示蹤化學製品公司，在乙醇中20 μΜ ;在各分析中之最終乙醇濃度為1.5%)。在250 μΜ之未標記菸鹼酸存在下測定非特定結合。在室溫混合3-4小時後，使用 Packard採集器透過Packard Unifilter CF/C盤將反應過濾，且以8X200 μΐ冰冷結合緩衝液清洗。將分析盤乾燥過夜且使用針設計用於CF/C盤之PerkinElmer膠帶將其背部密封。將40 μΐ的PerkinElmer Microscint-20液態閃燦液加入各個孔中，將該頂部密封，並在Packard TopCount閃爍計數器中分析各盤。計算係如上述C之步驟執行。本發明的特定化合物在該3H-菸鹼酸結合競爭分析中具有約10到100 μΜ的範圍内之EC5〇值。本發明之更有利化合物在此分析中具有約1到10 μΜ的範圍内之EC5〇值。本發明之更有利化合物在此分析中具有小於約1 μΜ之EC5G值。實例7 :藉由雷射都普勒效應沖洗步驟-使用10毫克/毫升/公斤戊巴比妥鈉鹽（Nembutal 103486-941102.doc -85 - 1258478 sodium)麻醉雄性C57B16老鼠（〜25公克）。當施以拮抗劑時’便同％將戊巴比妥鈉鹽(Nembutal)麻醉劑一同注射。、’二過10刀鐘之後將動物放置在雷射之下，並將該耳朵折疊以露出該前側。將雷射置於該耳朵的中間同時將強度集中在8.4 9.0 v(其一般在該耳朵的上方〜4·5公分)。以15父15影像格式、自動間隔、60個影像與2〇秒時間延遲及中解析度開始取得"貝料。在第丨〇個影像後經由注射至腹膜空間而施以該測試化合物。將影像^10視為該動物的基線並將資料對基線平均強度的均值標準化。材料及方法-雷射都普勒Pirimed pimII，·菸鹼酸 (Sigma);戊巴比妥鈉鹽（亞培商標）。實例8 ·在插入導管的雄性SpragUe_Daly鼠類活體内抑制自由脂肪酸製造對得自活體可隨意地移動鼠類的血液中完成非酯化自由脂肪酸（NEFA)之分析。將頸靜脈導管以外科手術植入頸靜脈中’並使該動物在手術後恢復至少48小時。在該分析前 16小時左右，將該動物的食物移除。從該導管抽出〜2〇〇 μ1 的血液並做為該基線NEFA血液樣本。將各種濃度的藥物由腹膜内供給至個別鼠隻，之後在指定的時間點由該導管抽出〜200 μΐ的血液作為進一步的NEFA分析。NEFA分析係根據製造者的說明書（Wako Chemical，USA ; NEFA C)進行’並藉由已知標準曲線（已知自由脂肪酸的範圍）的迴歸分析測定自由脂肪酸的濃度。利用Excel及PrismGraph分析資料。 103486-941102.doc -86- 1258478 實例9 : 除非另有所述’本發明將藉由下列非限制實例說明：〇斤有的操作均在室溫或周圍溫度下實行，亦即在仏 25C的溫度範圍内； ⑼溶劑蒸發係在低壓（（WO mmHg)及至高5〇。〇的浴溫下之旋轉蒸發器執行； (111)此反應期間後為薄層層析法（TLC)A/或高效能液相層析法（HPLC)，之後為質譜儀（MS)，此處指LCMS，及任何反應時間僅用於描述； (iv) 所有最終化合物之結構係藉由至少一種下列技術確認：MS或質子核磁共振（iH NMR)光譜，及純度係藉由至少一種下列技術確認淨：TLC或HPLC ; (v) 如有產量則僅用於描述； (vi) 4 NMR光譜係運用該指示的溶劑以Bruke：r Avance_ 400 或 Varian Unity 或 Varian Inova instrument 在 400 Hz、 5 00 Hz或600 Hz的頻率下記錄；當列出譜線時，nmR資料為主要診斷質子之δ值的形式，其為相對殘餘溶劑峰之百萬份點（ppm)(多重性及氫數）；作為訊號形狀之傳統縮寫為·· s•單線（singlet) ; d.雙線（doublet)(顯而易見）；t·三線（triplet)(顯而易見）；m.多線（multiplet) ; br.寬 (broad)； (vii) MS資料係由 Waters Micromass 或 API 150EX記錄，其與惠普（Hewlett-Packard， AgilentllOO)或島津 (Shimadzu ，LC-10AD FP)HPLC 裝置連線，並以 103486-941102.doc -87- 1258478

MassLynx/OpenLynx 或 Analystl ·2 軟體操作；正離子（ES + ) 或負離子（ES-)偵測係利用電喷灑游離法；LCMS ES+方法為1-2毫升/分鐘，10-95%的Β線性梯度經5.5分鐘（Β = 0·05% TFA-乙腈，A=0.05%TFA-水），以及 LCMS ES-方法為 1-2 毫升/分鐘，10-95%的B線性梯度經5.5分鐘（Β = 0·1%甲酸-乙腈，Α=0.1°/〇甲酸-水），Waters XTerra C18-3.5um-50x3.0 mmID及二極管陣列偵測； (viii) 化合物純化係藉由製備性逆相HPLC (RPHPLC)在 Waters Symmetry Prep C18-5 μιη-30χ100 mmID 或 Waters Atlantis Prep dC18-5 um-20xl00 mmID 上進行；20 毫升/分鐘，10-100%B線性梯度經15分鐘（B = 0.05%TFA-乙腈， A=0.05%TFA-水）及二極管陣列偵測； (ix) 化合物自動化純化係藉由製備性逆相HPLC運用 YMC-Pack Pro C18 管柱（150x12 mm i.d·)在 Gils on系統中以 20毫升/分鐘與0-50%乙腈在水中（0.1% TFA)溶離而進行； (X)化合物純化係藉由製備性薄層層析法（PTLC)，在塗有石夕膠之20x20公分玻璃製備板上，或在Chromatotron上運用塗有矽膠之玻璃轉子之離心層析術進行，兩者皆可由 Analtech購得； (xi) 管柱層析術係運用 Kieselgel60，0·063_0·200 mm(Merck，默克公司）在石夕膠管柱上執行。 (xii) 微波照射係運用Smith合成器（Personal Chemistry，個人化學公司）執行。

(xiii) 化學符號具有其常用的意義；亦使用下列縮寫：V 103486-941102.doc -88- 1258478 (體積）、W (體重）、b.p·(彿點）、mp·(溶點）、L (公升）、 mL (毫升）、g (公克）、mg (毫克）、m〇i (莫耳）、mm〇1 (毫莫耳）、eq或equiv (當量）、IC5Q(造成最大可能抑制之5〇% 之莫耳濃度）、EC5〇(產生最大可能效能或回應之5〇%之莫耳濃度）、uM (微莫耳濃度）、nM (奈莫耳濃度）。提供該下述實例，如此本發明將可更完整地明白。其絕不應視為本發明的任何限制。實例9.1 : 3-(2H_四唑_5-基）-i，4,5,6-四氫-環戊吡唑（化合物 1) N^Nn

方法A:化合物1的製備將1，4,5,6-四氫-環戊吡唑甲腈（〇·〇22公克，0.165毫莫耳）及疊氮化鈉（0.086公克，1.30毫莫耳）溶解在DMF中（3立方公分），在微波下加熱至1 75 °C經20分鐘。將溶液冷卻至室溫，並過濾及將該過濾固體以醋酸乙酯清洗。將該混合溶液體加入飽和碳酸氫鈉水溶液（20立方公分）並以醋酸乙酯清洗。將該水層添加1 Μ鹽酸水溶液使其變酸至pH 1，同時在醋酸乙酯中萃取。結合該醋酸乙酯洗液且在低壓下移除溶劑，將所得固體以製備性HPLC純化，得到3-(2H-四。坐-5-基）-1，4,5,6-四氫-環戊。比嗤，為一白色固體（0.012公克，0.068 毫莫耳，41%)。4 NMR δ (CD3〇D) : 2.88(似-t 103486-941102.doc -89- 1258478 線 ’ 2H, >7.0)、2.82(似-t修，2H，J=7.3)、2 64(似_五線， 2H，J = 7.1) ; m/z (ES + ) : 177 [M+H]+。利用該下列步驟製備該中間物1，4,5,6_四氫_環戊。比峻_3 甲腈。步驟A: 1，4,5,6-四氫-環戊吡唑-3-羧酸乙酉旨 0

將環戊酮（10.0公克，118·9毫莫耳）溶解在無水乙醇中（3〇立方公分），同時加入乙氧基鈉（53立方公分，在乙醇中為 21%，143毫莫耳）。在氬氣下攪拌所得溶液1〇分鐘，接著加入乙二酸二乙酯（19.1公克，131毫莫耳）。再者加入1〇立方公分的乙醇並將該溶液在75 °C加熱3小時之後冷卻至室溫。將溶解在水中（20立方公分）之聯胺鹽酸鹽（815公克， 119宅莫耳）加入且將該溶液加熱至7 5 過夜。在低壓下移除溶劑並將所得溶解在醋酸乙酯（2〇〇立方公分）中並以2〇〇立方公分的水清洗’以NaJO4乾燥，過濾同時在低壓下移除溶劑’得到1，4,5,6-四氫-環戊吡唑-3-羧酸醋酸乙酯如一雜白色固體（16.16公克，90.0毫莫耳，76%)。511(。0300): 4·34 (q，2H，J=7_l，OCEiCH3)、2.78(似-t線，2H5 J=7.0)、 2.72 (寬線，2H)、2·49 (寬線，2H)、l.36(t，3H，J=7.1，。m/z (ES+) : 181 [M+H]+ 〇步驟B: 1，4,5,6-四氫-環戊吡唑_3_羧酸醯胺 103486-941102.doc -90- 1258478 NH2 n-n

H 將1，4,5,6-四氫-環戊吡唑_3·羧酸乙酸乙酯⑺·8〇8公克，4.48毫莫耳）溶解在甲醇氨（約7 M，12立方公分）並在％。(：攪拌過夜。將所得溶液急冷並藉由真空過濾、收集沈澱的 1，4,5,6-四氫-環戊吡唑-3-羧酸銨，為一白色結晶固體 (0.438公克，2.90毫莫耳，65%)。δΗ (CD3〇d) : 2.79 (似-t線， 2H，J=6.9)、2.73 (似-t線，2H, J=7.3)、2.55 (寬線，2H); m/z (ES + ) : 152 [M+H]、步驟C: 1，4,5,6 -四氫-環戊吨嗤_3 -甲猜

Qycn n-n Η 將1，4,5,6-四氫-環戊吡唑-3-羧酸醯胺（〇.210公克，1.39毫莫耳）加入12立方公分的無水乙腈，加熱至8〇°c並加入氯化鈉（2.0公克，34毫莫耳）。15分鐘後添加氧氯化磷（〇·ι28公克，0 · 8 3宅莫耳）並將溶液在8 0 °C加熱過夜，冷卻、過濾並將該收集的固體以乙腈清洗。在低壓下自該混合的溶液移除該溶劑並藉由藉製備性HPLC純化所得固體，得到 1，4,5,6-四氫-環戊吡唑-3-曱腈，為一深紫色的固體（0.031 公克，0.23 毫莫耳，17%)。δΗ (CD3OD) : 2.79 (似-t線，2H，卜7.3)、2.73 (似-t線，2H，J=7.1)、2.65-2.55 (m，2H) ; m/z (ES + ) : 134 [M+H]+。 103486-941102.doc -91 - 1258478 方法B:化合物1的製備

使空氣通過1-苄基- 3-(2H-四。坐-5-基）_1，4,5,6 -四氫-環戊吡唑（1.92公克，7.21毫莫耳）以及〖0?411(在丁1^的11^溶液 65毫升）在50毫升DMSO中的攪拌溶液經2小時。藉由添加 HC1(3 Μ»溶液使該反應變酸至pH=2。過濾該混合物並在真空中濃縮該濾液以移除揮發性物質。該物質藉由逆相 HPLC 純化：Phenomenex⑧LunaC18 管柱（10μ，250 X 50 mm)，5體積百分比的CHsCN(包括1%體積/體積TFA)在水 (包括1%體積/體積TFA)中梯度至50%水，每分鐘60毫升’ λ=214 nm。該產物進一步由在Varian BondElut⑧60毫升，10公克SCX匣中之填充材料純化。將MeOH(150毫升）通過該管柱以移除未連結的雜質。接著使MeOH( 150毫升）中2ΛΓ NH3的溶液通過該管柱而將產物溶離。將溶離液濃縮產生化合物1的銨鹽（947毫克，5.38毫莫耳，75 %產率），為一白色固體。1H NMR (銨鹽，400 MHz，CD3OD) : δ 2.88 (2Η，t，J = 6.8 Hz)、2·74 (2Η， t，J=6.8 Hz)、2·52 (2H，五重線，J=6.8 Hz)。HPLC/MS : Discovery⑧ C18 管柱，（5 μ，5 0x2.1 mm)，5體積百分比的CH3CN(包括1%體積/ 體積TFA)在水（包括1〇/0體積/體積TFA)中梯度至99〇/〇 ch3CN 在水中，每分鐘〇·75毫升，tr=1.22分鐘，ESI+ : 177.3 (M+H)。關於C^HsN6(中性化合物）的分析計算值·· c， 103486-941102.doc -92- 1258478 47·72 ; H，4„58。實測 C，47· 27 ; Η，4·16。關於c7HuN7 (氨鹽）的分析計算值·· C，43.51 ; H，574。實測C，42.94 ; Η，5β30。利用該下列步驟製備該中間產物1 _节基_3 _(2Η-四吐-5-基）-1，4,5,6-四氮-環戊°比吐。步驟A: 1-苄基-1，4,5,6-四氮·環戊η比唾_3_叛酸酿胺以及 2_苄基-2,4,5,6-四氫·環戊11比嗅_3_缓酸醯胺的製備

0、 \^ΝΗ2

J benzyl bromide \ T；N K2C03, DMF H 對在25°〇的〇]\4?(34毫升）中1，4,5,6-四氫-環戊口比嗤-3-魏酸驢胺（2·57公克，17.0毫莫耳）的攪拌溶液加入k2c〇3(5.87 公克，42.5毫莫耳）繼而溴化苄基（4.36公克，25.5毫莫耳）。在周圍溫度下攪拌該反應16小時，此時將該混合物以EtOAc(75毫升）稀釋並過濾。將該濾液以水（1〇〇毫升）清洗且將該水相以EtOAc(75毫升）及CH2C12(75毫升）反萃取。將組合有機萃取液以MgS〇4乾燥，過濾，並在真空中濃縮。藉由矽膠層析法純化（在己烷中5〇% EtOAc梯度至己烷中95 /〇 EtOAc)得到2_苄基-2,4,5,6-四氫環戊ϋ比峻-3-羧酸酿胺（73 9¾克，3 ·〇7毫莫耳’ 18°/〇產量）分離為一白色固體，接著為1-节基-1，4,5,6-四氫-環戊吡唑-3 -羧酸醯胺（3.24公克’ 13.4¾莫耳，79〇/0產量）分離為一白色固體。 1-节基-I，4,5,6-四氫_環戊吡唑_3_羧酸醯胺 H NMR (400 MHz，CDC13) : δ 7·37-7·30 (3H，m)、7.19 103486-941102.doc -93 - 1258478 (2H，m)、6.67 (1H，寬）、5.34(1H，寬）5· 19 (2H，s)、2.82 (2H，m)、2.51 (4H，m)。13C APT NMR (100 MHz， CDC13) : δ上：164.8，155.2，139·0，136.0，129.5，55·3, 31.2，24·1 ;下：129.0，128.3，127。8。HPLC/MS : AIItech®PrevailC18 管柱（5 μ，50x4.6 mm)，5%體積百分比的CH3CN(包括1%體積/體積TFA)在水（包括1%體積/體積 TFA)中梯度至99%體積百分比的CH3CN在水中，每分鐘3.5 毫升，tr=2.13 分鐘，ESI+ ·· 242·2(Μ+Η)。苄基_2,4,5,6_四氫-環戊吡唑_3_羧酸醯胺 NMR (400 MHz，CDC13) ·· δ 7·34-7·21 (5Η，m)、5.76 (2Η，s)、5.70-5.38 (2Η，寬）、2·78 (4Η，m)、2·49 (2Η， m)。13C APT NMR (100 ΜΗζ，CDC13) : δ上：161.9、 160.1、138.3、128.3、127.1、55·1、29·9、24·8、24·7 ; 下：128.6，128.0，127.6。HPLC/MS : Alltech⑧PrevailC18 管柱（5 0，5(^4.6 111111)，5%體積百分比的(：113〇^(包括1%體積/體積TFA)在水（包括1%體積/體積TFA)中梯度至99%體積百分比的CH/N在水中，每分鐘3.5毫升，tr= 1.98分鐘， ESI+ : 242·1(Μ+Η)。步驟Β · 基_3_(2Η-四嗤-5-基）_1，4,5,6_四氫-環戊π比啥

1) SOCI2, DMF -^ 2) NaN3, ZnBr2

120 °C

在至溫下將氣化硫基（1 · 9 4公克，16 · 3毫莫耳）加入 103486-941102.doc -94- 1258478 DMF(25毫升）中之1-苄基-1，4,5,6 -四氫-環戊。比嗤·3_叛酸酸胺（3.02公克，12.53毫莫耳）的授拌溶液。攪拌該反應18小時’此時將NaHC〇3(鹽類水溶液，6毫升）加入以將過量氯化硫酸基消除。將該混合物以EtOAc( 150毫升）稀釋並以 NaHCOd鹽類水溶液，100毫升）及鹽水（1〇〇毫升）清洗。將該水洗液以EtOAc(2xlOO毫升）反萃取並將該結合的有機物以MgSCU乾燥、過濾及在真空中濃縮，產生一粗黃色油。將該濃縮液溶解在DMF (20毫升）中，同時放入一厚璧的密封反應容器中’此時連續地加入ZnBr2(4.70公克，1 8.0 毫莫耳）及NaN3(2.73公克，42.0毫莫耳）。將該容器密封並加熱至120°C經1 8小時。將該混合物冷卻至室溫並且添加3 Μ水溶液的鹽酸2毫升，同時持續攪拌5分鐘。以 Et〇Ac(150毫升）稀釋該混合物並以鹽酸μ水溶液，1〇〇毫升）清洗。將該有機物以硫酸鎂乾燥、過濾及濃縮。藉由石夕膠層析法（50:50:0.2，己烧：EtOAc ·· AcOH梯度至 100:0.2，EtOAc : AcOH)純化得到 1·苄基 _3-(2H-四唑-5-基）_1，4,5,6_四氫-環戊吡唑（2.06公克，7·74毫莫耳，62%產量）為一白色固體。1HNMR(400 MHz，CD3OD):δ7.36 7.25 (5H9 m) ^ 5.30 (2H? s) ^ 2.84 (2H, t5 J=6.4 Hz) > 2.62- 2.56(4H，m)〇13CAPTNMR(100MHz，CD3OD):57.36- 7.25 (5H? m) > 5.30 (2H? s) ^ 2.84 (2H? t, J=6A Hz) 2.62- 2.56 (4H，m)。13C APT NMR (100 MHz，CD3OD) : δ上： 153.8、151·9、137·6、131.5，128.9，55·8，31.9，24.8, 24.6 ;下：129.9， 129.1， 129.0 。 HPLC/MS : 103486-941102.doc -95- 1258478

Discovery ⑧ C18 管柱（5 μ，50χ2·1 mm)，5%體積百分比的 CH/N(包括1%體積/體積TFA)在水中（包括1%體積/體積 TFA)梯度至99%體積百分比的CHgCN在水中，每分鐘〇//5 毫升，tr=2.18分鐘，ESI+=267.1(M+H)。

方法C:化合物1的製備在10%蟻酸/MeOH(體積/體積，900毫升）中i-节基_3· (2!1_四嗤-5-基）-1，4,5,6-四氫-環戊吼吐_(59.4公克，223毫莫耳）的溶液加入鈀黑（39·8公克，374毫莫耳）。將該混合物在A大氣下機械地攪拌24小時。過濾並濃縮該反應。之後藉由將材料（在MeoH中視為溶液）裝填至一包含B〇ndesil S C X S P E樹月曰（7 5 0公克）的管柱而將產物進一步純化及轉化為胺鹽。以MeOH(2_0公升）清洗該管柱來移除未鍵結雜質。利用2 N的NHs/MeOH(將近1.5公升）溶離該產物。濃縮四唑的銨鹽（39·3公克，203毫莫耳，91%產率）得到一白色固運用該下述步驟製備該中間物1-苄基-3-(2Η-四唑-5-基）-1，4,5,6-四氫-環戊σ比唑。步驟Α: 1，4,5,6_四氫-環戊吡唑_3_羧酸乙酯的製備 cr0十曰々

1)KOi-Bu, EtOH 2) H2NNH2 HCI h2o

103486-941102.doc -96- 1258478 至’里在氮氣下藉加成漏斗經〇·5小時對Et〇H(2 5公升）中的環戊酮（42.0公克，〇·5〇莫耳）及草酸二乙醋（73」公克，〇·5〇莫耳）溶液添加在THF(5〇()毫升的1 Μ溶液，〇5莫耳）中之KOt-Bu浴液。攪拌該反應3·5小時，此時將該燒瓶冷卻至0。〇。藉由加成漏斗經〇·5小時將肼氯化氫鹽（37·6公克，〇·55莫耳）加入水中（25〇毫升）。將該反應加溫至室溫並攪拌16小時。在真空中移除該揮發性物質並以NaHC03(鹽類水溶液，500毫升）及水（5〇〇毫升）清洗所得固體。進一步在真中》辰細付到純1，4，5，6 -四氫-環戊^比。坐_ 3 _羧酸乙g旨（6 3 · 6 公克，0·35莫耳，71%產量）為一黃色固體。步驟B: l，4,5,6-四氫-環戊吡唑羧酸醯胺的製備

將1，4,5,6-四氫-環戊吡唑-3-羧酸乙酯（63.5公克，〇·35毫莫耳）溶解在7 N NHVMeOHU.O公升）的溶液中。將該溶液分成四個相等的部分，分別將其轉移到350毫升的厚壁密封反應容器。加熱該容器至95 °C並攪拌20小時。將該反應冷卻至室溫，此時會有固體沈澱。過濾該溶液並將該固體以氫氧化鈉（1 N水溶液，200毫升）清洗，得到純1，4,5,6-四氫-環戊吡唑-3_羧酸醯胺（42.0公克，〇·20莫耳，80%產量）為一白色固體。步驟C : 1-苄基-i，4,5,6_四氫-環戊吡唑-3_羧酸醯胺及2一 103486-941102.doc • 97- 1258478 苄基-1，4,5,6-四氫-環戊吡唑_3_羧酸醯胺的製備

在室溫下對在460毫升THF中之M，5,6_w氫-環戊吡唑_3_ 鲮酸醯胺（4K5公克，275毫莫耳）溶液加入氫氧化鈉（5 1^水溶液，110毫升，054莫耳）溶液。攪拌5分鐘後，加入溴化苄基（49.2公克，0.29莫耳）’及將反應攪拌16小時。在真空中移除該揮發性物質且將所得固體以水清洗（3><25〇毫升）。進一步濃縮得到1-苄基-1，4,5,6-四氫-環戊吡唑_3_羧酸醯胺及2-节基-1，4,5,6-四氫-環戊吡唾_3_羧酸醯胺（653 公克，270毫莫耳，98%產量）為一 2〇:1混合物之區域異構物’且不分離而使用。

1) SOCI2, DMF -^ 2) NaN3, ZnBr2 120 °C

步驟d: :^基冬即·四嗤冬基^^认四氣-環戊啦嗤在乂下將裝備有一乾燥管之燒瓶填裝無水dmf(25〇毫升）。將該燒槪冷卻至0°C，藉由注射器經5分鐘的時間添加氣化磺醯基（36.7公克，309毫莫耳）。經過另外1〇分鐘的攪拌後，利用加成漏斗經5分鐘加入丨_苄基_丨4 5卜四氕環戊吡唑-3-羧酸醯胺（67.7公克，281毫莫耳）於1)1^?中（31( 103486-941102.doc -98- 1258478 毫升）的溶液。將該混合物慢慢地加溫至室溫狀態及攪拌 16小時。將NaHCO〆鹽類水溶液，1〇〇毫升）加入並攪拌該混合物ίο分鐘。在真空中移除該揮發物質且以Et〇Ac(7〇〇耄升）及NaHC〇3(鹽類水溶液，700毫升）稀釋該殘餘物。將該層分離並將該水相以400毫升的Et〇Ac反萃取。利用 NaHCOd鹽類水溶液，600毫升）及鹽水（6〇〇毫升）清洗該結合有機物’以MgSCU乾燥，過濾，以及濃縮，得到63.丨公克棕色固體的腈類。對DMF(560毫升）中的腈（得自以下）溶液加入211汾2(95.6 公克，425毫莫耳）繼而NaNs。將該混合物加熱至i2(rc並授拌14小時。將該反應冷卻至室溫並在真空中移除該 DMF。加入HC1 (2 N水溶液，800毫升）且在過渡之後授拌該混合物15分鐘。將該固體加入EtOAc(500毫升）及HCl(5iV 水溶液，300毫升）的雙相混合物並且攪拌〇·5小時。過渡該溶液並分離該層。將該剩餘固體再次以Et0Ac及鹽酸（5#水溶液）處理，如上所述，並且重複此程序（攪拌、過濾、分離）直到固體物質溶解。濃縮該混合的有機渡液，得到1 _节基-3-(2H-四唑-5-基）-1，4,5,6-四氫-環戊吡唑（61〇公克， 229毫莫耳，81%得自該醯胺的產率），為一淡棕色固體。實例 9·2 : 3_(1H-四嗤 _5_ 基）_2,6-二氫·4Η_ 嗟吩[3,4_c]° 比唆 (化合物2)

103486-941102.doc -99- 1258478 化合物2係以與上述實例9· 1相似的方法製備，並以NMR 及 MS特徵化：士 NMR (400 MHz，Me〇£>) : (400 MHz， CD3OD) δ 4·11 (dd，/=4.0, 2·2 Hz，2H)、4·03 (dd，J=3.6、 2·2 Hz，2H)。HPLC/MS : Wate产YMC ODS-A C18 管柱（5μ， 50x4.6 mm)，5%體積/體積的CH3CN(包括1%體積/體積 TFA)在水中（包括1%體積/體積TFA)梯度至99%體積百分比的CHAN在水中，每分鐘3·5毫升，tr=1.27分鐘， ESI+=194(M+H)。實例 9.3 : 6-甲基-3-(1Η-四唑-5-基）_2,6·二氫 _4H-呋[3,4· c] 口比唑（化合物3)

如相似上述實例9.1的方式製備化合物3，形成該吡唑後藉由區域異構物的管柱層析法分離。將化合物3以NMR及MS特徵化：4 NMR (400 MHz, DMSO) ·· δ 5·20 (m，lH)、4·94 (dd，J=34.7、10.3 Hz，2H)、 1.39 (d，J=4.4 Hz，3H)。HPLC/MS : Alltech’revail C18 管柱（5 μ，50χ4·6 mm)，5%體積/體積的CH3CN(包括1%體積/ 體積TFA)在水中（包括1%體積/體積TFA)梯度至99%體積百分比的CH/N在水中，每分鐘3·5毫升，tr=l.〇3分鐘， ESI+=192 (M+H) 〇實例9·4 : 3-(1Η_四唑-5_基）-1，4_二氫-環戊吡唑（化合物4) 以及3_(1H_四唑-5-基）_1，6_二氫-環戊吡唑（化合物5) 103486-941102.doc -100- 1258478

%，NH

VNH VNH 將如異構混合物之化合物9·4Α (50毫克，〇38毫莫耳）、疊氮化鈉（86.5公克，1.33毫莫耳）及溴化鋅（3〇〇毫克，133毫莫耳）在2毫升的DMF中的溶液在微波下照射至2〇〇^經6小 ^。冷卻至室溫後，以2 Ν的HC1溶液處理該反應混合物、以EtOAc萃取、以水清洗並在真空中濃縮。hPLc分離 (C18管柱，5至99%之CH3CNKH20中）提供40·3毫克 (6 1 %)的所需產物，為一浠烴異構物的2比1混合物。1^-MS m/zl75 (M+l) ： !H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.94 (m，0.5H)、6.87 (m，1H)、6·76 (m，1H)、6.40 (m，0.5H)、 3.35 (m，3H)。

It由逆相HPLC分離該異構物：phenomenex⑧Luna C 1 8 管柱（l〇 μ5 25 0x21.2 mm)，5%體積/體積的 CH3CN(包括 1% 體積/體積TFA)在水中（包括1%體積/體積TFA)梯度至70% 的水中，每分鐘20毫升，λ=280 nm 〇或者由正相HPLC分離該異構物：Dynamax Micorsorb

Si(prep)管柱μ，25〇>< 1〇 mm)，80% (體積 /體積）的 EtOAc(包括2%體積/體積AcOH)在己烷中（包括2%體積/體積AcOH)梯度至99%的EtOAc，每分鐘7.5毫升，λ=280 正相及逆相管柱之異構物溶離順序相同。 103486-941102.doc -101 - 1258478 異構物1(高RF異構物） 4 NMR (400 MHz，MeOD) δ 6·79 (2H，m)、3·42 (2H， m)。HPLC/MS : Discovery⑧C18 管柱（5 μ，20χ2·1 mm)，5% 體積/體積的CH3CN(包括1%體積/體積TFA)在水中（包括1% 體積/體積TFA)梯度至99%CH3CN在水中，每分鐘0.75毫升，tr=1.10分鐘，ESr=174.9(M+H)。異構物2(低rf異構物） ill NMR (400 MHz，MeOD) δ 6·98 (1H，m)、6.44 (1H， m)、3.33 (2Η，m)。HPLC/MS : Discovery⑧C18 管柱（5 μ，50 x2.1mm)，5°/。體積/體積的CH3CN(包括1%體積/體積TFA) 在水中（包括1%體積/體積TFA)梯度至99% CH3CN在水中’每分鐘〇·75 毫升，tr=l.ll 分鐘，ESI+=175.1 (M+H)。該中間物化合物9·4A如異構物混合物係利用下述步驟製備：步称A : 2,6-二氫-環戊β比唑-3-羧酸乙酯及2,4-二氫-環戊吡唑-3-羧酸乙酯（混合物）的製備〇

Compound 9.4C 化合物9.4B係由對應的酮類利用如在此所述製備吡唑酯 (詳見實例14.2)之方法製備。在氮氣下將苯基醚中的化合物9·4Β(2·0公克，8· 19宅莫耳）溶液在回流（25〇〜26〇。〇)加熱2 103486-941102.doc -102- 1258478 小時。將該溶液冷卻回室溫後，將其裝載在一二氧化石夕管柱中，以DCM沖洗驅除該苯基醚，並且以Et〇Ac/Hex(l/3)沖洗，得到1·05公克（72%)的化合物9.4C，為一烯烴異構物的混合物。LC-MS m/z 179 (Μ+1)。步驟B : 2,6-二氫-環戊吡唑-3-羧酸醯胺以及2,4_環戊吡唑羧酸醯胺（混合物）的製備〇

〇

Compound 9 AC 將如異構混合物之化合物9.4C (1·〇公克，5·6ι毫莫耳）溶解於最少量的二噁烷（小於5毫升）中且在一緊密封閉容器中與28%的氫氧化銨水溶液（1〇〇毫升）混合。將該溶液在室温下攪拌24小時並且在真空中濃縮得到化合物9 4]〇如異構混合物’為一定量產率之固體。LC-MS m/z 150 (M+1)。步驟C : 2,6-二氫-環戊吡唑_3_甲腈及2，扣二氫_環戊吡 - 3 -甲猜（混合物）的製備

nh2 y/^_/CN —-crtn

N

Compound 9.4D Compound 9.4A 在至溫對化合物9.4D如異構混合物（〇·8〇公克，5·36毫莫耳）與碳酸鉀（0.455公克，3.22毫莫耳）於30毫升乙腈中的懸 /予液加入P〇C13(0.785毫升，8·58毫莫耳）。將該反應混合 103486-941102.doc -103 - 1258478 物在回流加熱2小時。在真空中濃縮後，以Et〇Ac( 150毫升）稀釋該殘餘物，以水及鹽水清洗殘餘物並以Na2S〇4乾燥’濃縮得到141毫克的化合物9.4A如異構混合物。乙〇 MS m/z 132(M+1)。實例 9·5 : 3_(1H-四唑·5_基）-2,6_ 二氫-4H-呋喃[3,4-c】-吡嗤（化合物6)

如相似上述實例9· 1的方式製備化合物6，並以NMR及 MS特徵化；LC-MS m/z 179 (M+l) ; 4 NMR (400 MHz， CD3OD) δ 5.07(t，/=2.2 Hz，2H)、4.92 (t，/=2.2 Hz，2H)。實例9·6 : 5_乙基_3-(1Η·四唑-5-基）-2,4,5,6-四氫-環戊吡唑（化合物7)

gNS 如相似上述實例9.1的方式製備化合物7，並以NMR及 MS特徵化；LC-MS m/z 179 (M+1) ; 4 NMR (CD3OD， 400M Hz) δ 3·07 (1H，dd，《7=14.8, 7·6 Hz)、2·94-2·82 (2H， m)、2·51 (1Η，dd，J=15.2，6.8 Hz)、2·41 (1Η，dd，J=13.6, 5.6 Hz)、1·6 (2H，m)、1.02(3H，t，J=7.2 Hz)。HPLC/MS : Disco very® C 18 管柱（5 μ，50x2.1 mm)，5% 體積/體積的 103486-941102.doc -104- 1258478 CH3CN(包括1%體積/體積TFA)在水中（包括1%體積/體積 TFA)梯度至99%體積/體積CH3CN在水中，每分鐘0.75毫升，tr=1.42分鐘，ESr=205.2(M+H)〇實例9·7 :中間物1-苄基·5_羥基_1，4,5,6_四氫環-戊[c]吡唑-3-甲腈

步驟A : 1-苄基-1，6-二氫-環戊吡唑-3-羧酸乙酯及1-苄基-1,4-二氫-環戊吡唑-3-羧酸乙酯（混合物）的製備

對吡唑（化合物9.4C，詳見實例9.4步驟Α，2·0公克，11.22 毫莫耳）於無水THF( 100毫升）中之溶液添加溴化苄基（5.3 6 公克，44.88毫莫耳）及氫氧化鈉（1.79公克，44.88毫莫耳）。在室溫下攪拌1小時之後，將反應以1 NHC1(100毫升）急冷。將所得混合物以乙酸乙酯萃取，以1 N鹽酸、飽和 NaHC〇3溶液及鹽水清洗，及利用無水NaS04乾燥。將該溶液過濾及在真空中濃縮。將此材料在Biotage Flash 40M管柱上利用30%之乙酸乙酯-己烷純化。獲得一無色油。LC- MS : 3.22分鐘：（M+Na)=291.1。步驟B : 1-苄基-:^“二氫-環戊吡唑_3_羧酸及i苄基 103486-941102.doc -105 - 1258478 二虱-環戊吡唑羧酸（混合物）的製備

對得自步驟A之中間物（3·55公克，13.23毫莫耳）在1 ·· ι 的THF/MeOH(40毫升）中的溶液加入氫氧化鈉溶液（5 N， 3·9毫升，20毫莫耳）。在室溫下經過三個小時後，藉由添加1Ν鹽酸（22毫升）將該反應急冷。運用乙酸乙酯（3χ)萃取水層’以無水NaS〇4乾燥，過濾及在真空之下濃縮。獲得一育色固體，其無任何進一步的純化而用於下一個步驟。 LC-MS : 2·62分鐘：（μ+Η)=241·1。步驟C : 1_苄基-1,6-二氫-環戊吡唑_3羧酸2,5·二噁-吡洛-1-S日及基_ι，4 -二氫-環戊η比吐_3_叛酸2,5 -二嗯_咐*嘻_ 1 -酯（混合物）的製備

對得自步驟Β之中間物（3· 17公克，13·23毫莫耳）於200毫升CHAU中的溶液加入羥基丁二醯亞胺（3.〇4公克， 26.46毫莫耳）繼而為EDC(5 〇7公克，26.46毫莫耳）。在室溫下攪拌該反應混合物1 8小時之後，在真空中濃縮該混合物。利用2 0 0毫升的乙酸乙酯稀釋該殘餘物，以飽和的 103486-941102.doc -106- 1258478

NaHC〇3溶液及鹽水清洗。以無水NaS〇4乾燥該有機層，過濾並且在真空中濃縮。獲得一黃色固體。Lc_ms: 299分鐘；（Μ+Η)=338·1。步驟D : 1-苄基-l，6-二氫-環戊吡唑_3_羧酸醯胺及^苄基-1，4-二氩-環戊吡唑_3_羧酸醯胺（混合物）的製備

將得自步驟C之中間物（4.45公克，13.22毫莫耳）在15〇毫升1，4-二噁烷中的溶液加入ΝΗ4〇Η(14·8 Ν，ΐ〇·〇當量，9 i 毫升）。立即產生一沈澱物。在室溫下攪拌15分鐘之後，透過燒結漏斗過濾該反應混合物並以1，4 _二喔烧清洗今、、户肩又物。在真空中》辰細该渡液得到一黃色固體。LC-MS · 2.55 分鐘；（Μ+Η)=240·1。步驟Ε · 1-苄基-1,6-二氫-環戊η比嗅_3_甲腈及l苄基4_ 一風-環戊0比嗤-3-甲猜（混合物）的製備

對得自步驟D之中間物在50毫升的無水DMF中的溶液加入二Ικ氯化氰（2.33公克，13.2毫莫耳）。在室溫下搜掉I; 分鐘之後，藉由倒入100毫升的水中而將反應急冷。運用乙酸乙酯萃取所得混合物，並由飽和NaHC〇3、鹽水清洗，以無水NajO4乾燥，過濾以及在真空中濃縮。將殘餘 103486-941102.doc -107- 1258478 物在Biotage Flash 40M管柱（Si02)上利用20%之乙酸乙酯-己烷純化。獲得一白色固體。LC-MS : 3.22分鐘； (Μ+Η)=222·2 〇步驟F : 1-苄基-5-經基- ΐ，4,5,6-四氫·環戊°比峻-3 -曱腈的製備

在氮氣下對冷卻至0°C之得自步驟Ε之中間物（0.95克， 4.29毫莫耳）在40毫升無水THF中的溶液加入氫化硼-THF(23毫莫耳，5.36當量，1·〇 Μ溶液）。使該反應回溫至室温及攪拌1小時。接著將該反應冷卻至〇°C。加入水（3 毫升）繼而氫氧化鈉（4.29毫莫耳，1.43毫升，3 N)及雙氧水（12.88¾莫耳，在水中30%溶液）。將該反應在50 °C加熱30 分鐘之後，將其冷卻至室溫及藉由添加水而將反應急冷。利用乙酸乙酯（3X)萃取所得混合物，以無水Na2S04乾燥該有機層並且過濾以及在真空中濃縮。利用30%乙酸乙酯-己烷藉由急驟層析法純化該殘餘物。得到1:1的C-5及C-6醇類混合物。較不極性異構物（C-6醇類，化合物17) 4 NMR (500 MHz， CDC13) δ 7.2 (m，5H)、5.35 (d，/=14.9 Hz，1H)、 5.31(d，J=14.6Hz，1H)、4.99(dd，/=3.4,6·9 Hz，1H)、2.9 (m，2H)、2.6(m，1H)、2.35(m，1H)。LC/MS : 2.76分鐘； 103486-941102.doc -108 1258478 (Μ+Η) = 240·1。較極性異構物（C-5醇類）4 NMR (500 MHz, CDC13) δ 7·4·7·2 (m，5H)、5.28 (d，J=14.8 Hz，1H)、5·25 (d，J=14.9 Hz，1H)、5.01 (m，1H)、3·13 (dd，J=6.4、15·8 Hz，1H)、 2.89 (dd，J=6.6、16.2 Hz，1H)、2.68 (dd，>3.7、16.0 Hz， 1H)、2·52 (dd，/=3.4、16.2 Hz，1H)。LC/MS : 2.60分鐘； (M+H)=240.1 〇實例9.8 :中間物三氟_甲磺酸l苄基_3_氰基4，“二氫_ 環戊吡唑-5-酯及三氟-甲烷磺酸l苄基氰基4，^二氫_ 環戊吡唑-5-酯如區域異構物混合物的製備

TfO

步驟A : (1-乙氧基-2·噁-環戊-3-烯基）_噁_醋酸第三丁酯之製備

在氮氣下對冷卻至-78°C之3-乙氧環戊烯酮（212公克， 16·82毫莫耳）於40毫升無水THF的溶液加入二異丙基醯胺鋰（12毫升，24毫莫耳，在THF中2.0Μ)。經過15分鐘後，加入草酸一-第三丁酯（3.73公克，18.5毫莫耳）在THF(15毫升）中之溶液。將該反應混合物在-78 °C下攪拌丨5分鐘接著回 103486-941102.doc -109- 1258478 溫達-20°C並另外攪拌15分鐘。利用1 N的鹽酸（40毫升）將該反應急冷及利用乙酸乙酯（3X)萃取。以鹽水清洗該有機層’以無水Na2S〇4乾燥並過濾以及在真空中濃縮。利用 35%乙酸乙酯·己烷藉由急驟層析法（Si〇2)純化該殘餘物，得到所需產物（2.53公克），為一灰白色固體。步驟B : 1-苄基_5-噁_1，4,5,6_四氫_環戊吡唑-3-羧酸第三丁酯之製備

對付自步驟A之中間物（2· 15公克，8.45毫莫耳）在1〇〇毫升乙醇中的溶液加入苄基聯胺鹽酸鹽（1·8公克，9.22毫莫耳）及HOAe(l()毫升）。在室温下挽拌該反應混合物達^小時，之後在70 C回流30分鐘。將該反應冷卻至室溫狀態並且在真工中/辰細。將该殘餘物溶解在乙酸乙酯中，及利用水、飽和NaHC03及鹽水清洗。卩無水乾燥該有機層，過濾並且在真空中灑縮。u m 辰細利用30%乙酸乙酯-己烷藉由急驟層析法純化該殘餘物，# r t 物传到所需產物（1.64公克），為一棕色油體。 , 苄基惡_1，4,5,6·四氫環戊。比嗤_3_缓酸之製備 103486-941102.doc -110- 1258478

對得自步驟B之中間物（ι·64公克，5·25毫莫耳）在2〇毫升的二氯甲烷中的溶液加入三氟醋酸（20毫升）並在室溫下攪拌所得溶液4小時。在真空中濃縮該反應混合物及以與甲本（3X)共彿。此材料無任何進一步的純化而繼續下一步驟，。步驟D ·· 1-苄基-5_噁_1，4,5,6·四氫_環戊吡唑_3_羧酸-2,5_ 二噁·吡咯烷-1-酯之製備

對得自步驟C之中間物（L34公克，5·25毫莫耳）在50毫升 CH2C12中的溶液加入EDC(2.01公克，0·5毫莫耳）接著加入 N-每基丁二醢亞胺（ι·2ΐ公克，ι〇·5毫莫耳）。在室溫下搜拌1 8小時後，在真空中濃縮該反應混合物。利用2〇〇毫升的乙酸乙酯稀釋該殘餘物，以飽和NaHC〇3溶液及鹽水清洗。以無水NaSCU乾燥該有機層，過濾並且在真空中濃縮。獲得一黃色固體。步驟E : 1苄基-5-噁-1，4,5,6-四氫-環戊吡唑-3_羧酸醯胺之製備 103486-941102.doc -111 - 1258478

N NH2 對付自步驟D之中間物（2·0公克，5·25毫莫耳）在毫升 1，4_二噁烧中的溶液加入NH4OH( 14.8 N，1〇.〇當量，353 毫升）。立即產生一沈澱物。在室溫下攪拌15分鐘之後，透過燒結漏斗過遽该反應混合物並以1，4 *二°惡烧清洗3亥沈澱物。在真空中濃縮該濾液得到一固體。步驟F : 1_苄基-5·。惡-1，4,5,6_四氫-環戊β比唆甲腈之製 _

對得自步驟Ε之中間物（5·25毫莫耳）在60毫升的DMF中的浴液分二次加入三聚氣化氰（3·ΐ2公克，17毫莫耳）。在室溫下擾拌30分鐘之後，以水將反應急冷並利用乙酸乙酯 (2Χ)萃取。運用水、鹽水清洗該有機層並以無水Na2S04乾燥，過濾及在真空中濃縮。利用3〇%乙酸乙酯-己烷藉由急驟層析法（Si〇2)純化該殘餘物，獲得所需產物（〇 95公克），為一黃色固體。步驟G :三氟-甲磺酸i苄基_3_氰基_M_二氫-環戊吡唑_ 5-酯及二氟-甲磺酸l苄基_3_氰基二氫_環戊吡唑_5_酯 (混合物）的製備 103486-941102.doc -112- 1258478

TfO

在-78°c對得來自步驟F之中間物（447毫克，1·87毫莫耳）在14毫升無水THF中的溶液加入在6毫升THF中的二異丙基醯胺鋰（1.89毫莫耳）之新鮮製備溶液。在-78°C攪拌該反應 30分鐘後，加入2[N，N-二（三氟甲基-磺醯基）胺]_5_氯吡唆 (1·4公克，3.6毫莫耳）。將該反應回溫至_2〇。(：並攪拌3小時。以飽和ΝΗβΙ溶液將該反應急冷並以乙酸乙酯萃取所得混合物，以1 N鹽酸溶液及飽和NaHC〇3清洗，及利用無水Na2S〇4乾燥。過濾及在真空中濃縮該溶液。利用2〇〇〇_ 微米轉子（Si〇2)及5%乙酸乙酯·己烷作為溶離劑，在該 chromatotron上純化該殘餘物。得到393毫克的所需產物，為雙鍵區域異構物之2:1混合物。1H NMR (5〇〇 MHz， CDC13):(主要異構物）δ 7·45-7·3 (m，5H)、6 〇6 (bt，1H)、 5.41 (s，2H)、3.56 (bd，2H)。NMR (500 MHz，CDC13): (少數異構物）δ 7.45-7.3 (m，5H)、6·63 (bt，1H)、5.39 (s，2H)、3.18(bd，2H)。LC/MS : (M+H)=370.25。實例9·9 ·· 5-丙氧基_3_(1H-四唑_5_基）_2,4,5,6-四氫·環戊吡唑（化合物12)

103486-941102.doc 1258478 步驟A · 1_苄基-5-丙氧基4,4，s，6_四氫·環戊σ比唑_3_甲腈之製備

CN 對1_苄基-5-羥基-1，4,5,6-四氫環·戊[C]吡唑_3_甲腈（詳見實例9.7，30毫克，0.125毫莫耳）在2毫升無水DMF中的溶液加入氫化鈉（6毫克，0.15毫莫，在油中之6〇%分散液）。攪拌三分鐘之後加入溴丙烷（14 hL，〇·15毫莫耳）並攪拌所得混合物1小時。在此時間結束時加入氫化鈉（6毫克，〇15 *莫耳，在油中之60%分散液）及溴丙烷。經過30分鐘後藉由添加飽和NH4C1(3毫升）而將反應急冷。利用乙酸乙g旨萃取所得混合物，以鹽水清洗，並以無水Na2S〇4乾燥，過濾及在真空中濃縮。利用15%乙酸乙酯-己烷藉由PTLC(Si02；> 純化該殘餘物，得到所需產物。步驟B : 1-苄基·5_丙氧基四唑_5_基）_1，4,5,6_四氫-環戊吨唑的製備

對得自步驟A之中間物（25毫克，〇·〇89毫莫耳）在1毫升2 103486-941102.doc -114- 1258478 丙醇中的溶液加入2毫升的水、疊氮化鈉（14毫克，〇·222毫莫耳）及漠化鋅（10毫克，〇·〇4毫莫耳）。將反應混合物在9〇 °C加熱1 8小時之後，將其冷卻至室溫並添加hC1(3毫升，3 N)。利用乙酸乙酯萃取該該反應混合物，以鹽水清洗、利用無水NaSCU乾燥，過濾及在真空之下濃縮。利用1〇〇%乙酸乙S旨藉由PTLC(Si〇2)純化該殘餘物，得到所需產物。步驟C : 5_丙氧基四唑_5_基）_2,4,5,6_四氫_環戊吡唑（化合物12) 對得自步驟B之中間物（26毫克，0·〇8毫莫耳）在〇·6毫升的 DMSO中的溶液加入第三丁醇鉀（〇·6毫升，〇·6毫莫耳，在 THF中1·0 Μ)。使氧氣通過由該反應混合物起泡15分鐘。利用HC1(3宅升’ 3 Ν)將反應急冷。利用乙酸乙酯（5又）萃取所得混合物，利用無水NaSCU乾燥，過濾及在真空之下濃縮。藉由逆相HPLC純化該殘餘物，得到該標題化合物。1H NMR (CDC13) δ 4.80 (m，1H)、3 51 (m 2H)、2 ^ (dd，/=6.8、15·5 Hz，1H)、3·18 (dd，J=6 9、16 〇 Hz， 1H)、2.85 (dd，XI、15.6 Hz，iH)、2 79 ⑽，J=4 4、 16·1Ηζ，1H) ' 1.62 (m，2 H)、0.96(t，>7·6 Hz，3H)。Lc、 ]\48:2.15分鐘；（]^+11)=235。實例9·Κ) : 5-異丁氧基四唑_5_基）-2,4,5,6_四氣、環戊σ比嗤（化合物15) 103486-941102.doc -115- 1258478

Γ VH 運用實例9.8之合成所描述的相似步驟，由^苄基·5_羥基-1，4,5,6_四氫環-戊[c]吡唑d -甲腈（參見實例9·7)製備該標題化合物。4 NMR (CDC13) δ 4.77 (m，1Η)、3.33 (m 2H)、3.23 (dd，J=6.9, 15.5 Hz，1H)、3.17 (dd，9、16 〇 Hz，1H)、2·85 (dd，J=4.1、15.6 Hz，1H) > 2.79 (dd /=4.2、15.9 Hz，1H)、1.85 (m，1H)、0.94 (d，7 Hz 3H)。LC-MS * 2.42分鐘；（M+H)=249。實例9.11 ·· 5_ 丁氧·3_(1Η_四唑_5_基）-2,4,5,6_四氫_環戊吡唑（化合物16)

Ν\\ Ν 運用貝例9 · 8之合成所描述的相似步驟，由1 ·苄基* ^ _ 基-1，4,5,6-四氫環-戊[c]吡唑甲腈（參見實例9力製備該標題化合物。4 NMR (CDC13) δ 4·78(ιη，1Η)、3·56 ㈤， 2Η)、3.24 (dd，J=6.8，15.6 Ηζ，1Η)、3.17(dd，j=6.9，15.9 Hz，1H)、2.84 (dd，>4·1、15.6 hz，1H)、2 77 ㈣， J=4.6、16.0 Hz，1H)，1.58 (m，2H)，；L42(m，2H)、〇 % (t， 103486-941102.doc -116- 1258478 J-7·3 Ηζ，3Η)。LC-MS · 2.5〇分鐘；（Μ+Η卜249。實例9·12 : 5-H-3-(lH_四唑_5_基）_2,4,5,6_四氫環戊口比嗤（化合物14)

步驟A · 1-苄基-5-氟-l，4,5,6-四氫-環戊口比唑」-曱腈之製

在氮大氣下對0。9笔升無水二氯甲烧中的卜节基^-經基_ 1，4,5,6-四氫％ -戊[小比唾·3_甲腈（詳見實例9·7,3〇毫克， 0.125毫莫耳）溶液加入_丁(33 ‘ 〇·25毫莫耳）。在室溫下攪拌15分鐘後，利用乙酸乙g旨稀釋該反應混合物，以飽和NaHC〇3^液及鹽水清洗。利用無水乾燥該有機層’過濾以及在真空中濃縮。利用30%乙酸乙酯-己烷藉由 PTLC^SiC^)純化4殘餘物，得到所需化合物（16毫克步驟B · 节基_5_^3-(1Η-四唾_5-基）-1，4,5,6-四氫-環戊吡唑之製備 103486-941102.doc -117- 1258478

利用實例9.8步驟B所描述的相似步驟，自步驟A的氰基中間物製備該化合物。步驟<：:5-氟-3-(111_四唑-5_基）-2,4,5,6-四氫-環戊吡唑 (化合物14) 對得自步驟B之中間物（13毫克，〇〇4毫莫耳）在 MeOH(l毫升）中的溶液加入〇1毫升的甲酸繼而鈀黑（1〇毫克）°將該反應混合物在氮大氣下攪拌96小時後，將其過濾及真空中濃縮。藉由逆相HPLC(Gilson)純化該殘餘物，得到該標題化合物（4.9毫克）。4 NMR (CD3OD，5 00 MHz) δ 5.8 (d，J=51.9Hz，1H)、3·31-3·17 (m，2H)、3.14-2.92 (m， 2H)。LC-MS : 0.99分鐘；（m+H)=195.17。實例9·13 : 5_丙基四唑基>2,4,5,卜四氫-環戊吡唑（化合物11)

步驟A· 5稀丙基苄基二氫-環戊吼吐-、曱腈及 5-烯丙基-1-苄基-1，4-二氫-環戊吡唑_3_甲腈（混合物）的製備 103486-941102.doc -118 - 1258478

對實例9.8所描述之三氟甲磺酸酯中間物（114毫克，〇·307毫莫耳）在2毫升無水THF中之溶液加入三正丁基稀丙基錫（112毫克，0.338毫莫耳）、氣化鋰（39毫克，0·923毫莫耳）及四（三苯基膦）鈀（0)(7.1毫克，〇〇〇6毫莫耳）。在將該反應混合物攪拌6小時後’使其冷卻至室溫並過濾。在真空中濃縮該殘餘物並利用2000-微米轉子（Si〇2)及2〇%乙酸乙酯-己烷作為溶離劑在chromatotron上純化，得到所需產物（33毫克）。步驟B:5_稀丙基_ι_苄基四唾_5_基）二氫·環戊σ比嗅及5-稀丙基_1_苄基-3-(1Η-四唾基）-i，4_二氫_環戊"比嗤（混合物）的製備

利用實例9.8步驟B所描述的相似步驟，自步驟a獲得的中間物製備該化合物。步称C : S_丙基四唑-5-基）_2,4,5,6_四氫-環戊口比唾對得自步驟B之中間物（18毫克，0.059毫莫耳）在甲醇 103486-941102.doc -119- 1258478 中的溶液加入幾滴濃鹽酸5直到該反應均質為止。加入 Pd/C(1.8耄克）並且在氫大氣下（氣球）攪拌所得混合物24小 %。過；慮及在真空中滚細该反應混合物，並藉由逆相 HPLC純化，得到該標題化合物。1η NMR (CD3OD，500 MHz) δ 3.06 (m，2H)、2.97 (dd，J=7.5，15.1 Hz，1H)、2.5 (m，2H)、1.6 (m，2H)、1.4 (m，2H)、〇.98(t，J=7.3HZ， 3H)。LC-MS ·· 2.60分鐘；（M+H)=219.36。實例9.14:5-環戊基-3-(111-四唑_5-基）-2,4,5,6_四氫_環戊吡唑（化合物13)

步驟A : L苄基_5_環戊-1-烯基_1，6_二氫-環戊0比唑-3•甲腈及I苄基環戊-1·烯基-1，4-二氫·環戊吡唑-3-甲腈（混合物）的製備

對實例9·8所描述之三氟甲石黃酸酷中間物（185毫克，〇’5〇J毫莫耳)在丨，4-二噁烷中的溶液加入環戊烯-1-基硼酸克’〇.551笔莫耳）、破酸二氳鉀（160毫克，751毫莫耳） 103486-941102.doc -120- 1258478 及四（三苯基膦）鈀（〇)。將反應加熱至85〇c ◦該反應完成後’利用乙酸乙酯稀釋，以1 N氫氧化鈉及鹽水清洗，並以無水NaS〇4乾燥。過濾及在真空中濃縮該溶液。利用 2000-微米轉子（Si〇2)及20%乙酸乙酯-己烷作為溶離劑在 chromatotron上純化該殘餘物。步驟Β· 1-苄基_5_環戊_1-浠基-3_(1H_四唾_5_基二氫-環戊吡唑及1-苄基-5-環戊-1-烯基-3·(1Η_四唑_5_基）-I，4-二氫·環戊η比嗤（混合物）的製備

利用實例9 · 8步驟Β所描述的相似步驟，由步驟a所獲得的中間物製備該化合物。步驟C : 5-環戊烯基_3_(1H_四唑_5_基）-2,4,5,6-四氫_環戊吡唑（化合物13) 對得自步驟B之中間物（16毫克，〇·〇48毫莫耳）在甲醇（2毫升）中的〉谷液加入曱酸（2〇〇 μ[)。加入|巴黑（8·2毫克，0.078 宅莫耳）’並以氮氣沖洗所得混合物並攪拌24小時。加入另一部份的鈀黑（8.2毫克，0.078毫莫耳）。攪拌48小時後’過璩以及在真空中濃縮該反應，並藉由逆相HPLc純化’得到該標題化合物。iH NMR (CD3〇D，500 ΜΗζ) δ 3·!-2.9 (m? 2Η) > 2.6 (m5 2Η) ' 2.03 (m? 2H) ^ 1.87 (m5 2H)、1.63 (m，2H)、1.59 (m，2H)、1.28 (m，2H)°LC- 103486-941102.doc -121 - 1258478 MS : 2.99分鐘；（Μ+Η) = 245·46。實例9·15 : 5_ 丁基_3-(1Η_四唑_5-基）-2,4,5,6_四氫-環戊 ϋ比唑（化合物8)

步驟A · 基-5-丁基_1，6_二氫-環戊η比嗤_3_甲腈及1 苄基-5-丁基-ΐ，4-二氫-環戊吡唑_3_甲腈（混合物）的製備

CN 對貫例9.8所描述之三氟曱續酸酯中間物（18〇毫克， 0.486毫莫耳）在3毫升的甲苯中的溶液加入正_丁基硼酸（99 毫克，0·973毫莫耳）、K2CO3(201毫克，146毫莫耳）、 PdCl2(dPPf)2(12 毫克，0.0146 毫莫耳）及 Ag2〇(225 毫克， 0.973毫莫耳)。在將該反應混合物回流6小時後，將直冷卻至室溫並㈣。在真空中濃縮該殘餘物並利用讓:米轉子（Si〇2)及5%乙酸乙酯-20%乙酸7此 < G酯-己烷作為溶離劑在chromatotron上純化該殘餘物，锃于所需產物（52毫克）。步驟B: 1-节基-5-丁基- 3_(1H -四峰c 基）-1，6-二氫-環戊口比吐·及1 -午基-5_ 丁基-3_(1Η_四^^ _$ f _ _基）-1，4-二氫·環戊吡 103486-941102.doc -122- 1258478 唑（混合物）的製備

利用實例9.8步驟B所描诚&上，Α &族〜卢细遮的相似步驟，由步驟Α所獲付的中間物製備該化合物。步驟C : 5-丁基-3_(1H-四唑_5_基）-2,4,5，一四氫_環戊吡嗅（化合物8) 利用實例5步驟C所描述的相似步驟，由步驟B所獲得的中間物製備該化合物。1H NMR (CD3OD，500 ΜΗζ) δ 3.1 (m，2Η)、2.9(m，1Η)、2·5 (m，2Η)、1.6(m，2Η)、1.4 (m， 4H)、0.9 (t，/=7·0 H，3H)。LC-MS : 2.86 分鐘； (Μ+Η)=233·34。實例9·16 : 5-甲基四唑基）_2,6·二氫-環戊吡唑 (化合物9)及5-甲基-3-(1Η-四唑-5-基）-2,4-二氩-環戊吡唑 (化合物10)

步驟A : 5-乙氧基-1，4-二氫-環戊吡唑羧酸第三丁醋之製備 103486-941102.doc - 123 - 1258478

對如上述實例9.8的步驟八由3_乙氧基環戊烯酮製備之酮酯（ketoester)之乙醇溶液（5毫升）添加聯胺水合物（34微升， 1.1毫莫耳），繼而醋酸（0.5毫升）。將該反應混合物回流15 小時後，將其冷卻至室溫及在真空中濃縮。將殘餘物懸浮在水中並以乙酸乙酯萃取。利用無水NaSCu乾燥該有機層，過濾及在真空中/辰縮。利用2 5 %乙酸乙酯_己燒藉由糸驟層析法（Si〇2)純化該殘餘物，得到所需產物，為一白色固體。步驟b : 5-乙氧-ι-(曱苯冰績醢羧酸三丁酯的製備

對得自上述步驟A之吡唑中間物（275毫克，L1毫莫耳）在 CH2Ci2(5毫升）中之溶液加入π比咬（178此，22毫:耳）及對甲輸氯(230毫克，i.21毫莫耳）。在室溫將所得反應混合物授拌3小日寺後，以CH2Cl2稀釋，矛…n犯及飽和 _叫清洗’利用無水NaS〇4乾燥’過攄及在真空中濃縮。利侧乙酸乙㈣炫藉由急驟層析法(⑽)純化該 103486-941102.doc -124- 1258478 殘餘物。步驟C · 5“惡小（甲苯績醯基）q，4，s，6-四氫環戍〇比唾_ 3-羧酸的製備

對得自上述步驟B之中間物（414毫克，ι 〇2毫莫耳）在 CH2C12(2毫升）中的溶液加入三氟醋酸（2毫升”在室溫將鲁反應攪拌1 _ 5小時後，在真空中濃縮並與甲苯(2χ)共沸。此原料無任何進一步的純化而用於下_步驟。步驟D · 5“惡-(1-甲苯_4_確醢基四氫_環戊吡嗤一 3_羧酸2,5_二噁-吡咯啶-1-酯的製備

對知自上述步驟C之中間物（320毫克，ι·〇毫莫耳）在 CH2Cl2(20毫升）中的溶液加入Ν-羥基-丁二醯亞胺（230毫克，1.21¾莫耳）繼而EDC(384毫克，2〇毫莫耳在室溫授摔18小時後’在真空中濃縮該反應混合物。以2〇毫升的乙酸乙醋稀釋該殘餘物，利用飽和NaHC03溶液及鹽水清洗。利用無水NaS〇4乾燥該有機層，過濾及在真空中濃縮。獲得一黃色固體。 103486-941102.doc •125· Ϊ258478 步驟E : 5-噁_l_(甲苯-4-磺醯基）-l，4,5,6-四氫-環戊吡唑· 3_鲮酸醯胺的製備

對得自上述步驟D之中間物（380毫克，〇·9ΐ毫莫耳）在 1，4_二噁烷（1〇毫升）中的溶液加入νη4〇η(14·8 Ν，10.0當 ΐ，0·61毫升）。立即產生沈澱。在室溫攪拌15分鐘後，透過一燒結漏斗過濾該反應混合物，同時利用1，4_二嗔烧清洗該沈澱物。在真空中濃縮該濾液，得到一黃色油。步驟F ’ 惡-ΐ_(甲苯確醯基）_i，4,5，t四氫-環戊β比嗤_ 甲腈的製備

對得自上述步驟Ε之中間物（〇·91毫莫耳）在無水DMF(5毫升）中的溶液將三聚氯化氰（344毫克，2·〇毫莫耳）分成兩個部分加入。在室溫下攪拌15分鐘後，倒入1〇毫升的水將反應急冷。利用乙酸乙酯萃取所得混合物，以飽和NaHC〇3 /谷液及鹽水清洗’利用無水Nas〇4乾燥，過渡及在真空中濃縮。利用25%乙酸乙酯-己烷藉由急驟層析法（si〇2)純化該殘餘物。獲得一白色固體。 103486-941102.doc -126- 1258478 步驟G:三氟曱磺酸3-氰基-1-(甲苯-4_磺醢基V1，6-二氫-環戊哺唑-5-酯以及三氟甲磺酸氰基_1-(甲苯磺醯基）· 1，4-二氫-環戊吡唑-5-酯（混合物）的製備

對-78°C之得自步驟F之中間物（1〇〇毫克，0.33毫莫耳）在無水THF(5毫升）中的溶液加入二異丙基醯胺鋰（在THF中 0·33毫莫耳，166 pL，2.0 M)在6毫升的THF中的溶液。將反應在-78°C攪拌30分鐘之後，加入2[N，N-二（三氟甲基確醯基）胺]氯吨啶（195毫克，0.496毫莫耳）。使該反應回溫至0°C並攪拌45分鐘。利用1 n HC1將反應急冷，同時利用乙酸乙醋萃取所得混合物，以飽和NaHC03溶液清洗，並以無水NaSCU乾燥。過濾及在真空中濃縮該溶液。利用5〇/〇乙酸乙酯-己烷作為溶離劑，藉由急驟層析法（si〇2)純化該殘餘物。獲得79毫克的所需產物，如雙鍵區域異構物的 4 : 1混合物。步驟H · 甲基(甲笨-4-續醢基）-1,6-二氫-環戊啦唾· 3-甲腈及5_甲基 ^ ^ ^ ，本-4-磺醯基）-1，4-二虱·環戊吡唑_3_ 甲腈（混合物）的製倚

103486-94ll02.doc '127- 1258478 將得自上述步驟G之中間物（79毫克，0.182毫莫耳）在甲苯（1.5毫升）中的溶液加入氯化鐘（39毫克，〇·9ΐ2毫莫仆四甲基錫⑽‘ 0.912毫莫耳)及四(三苯基膦轉。將反應回流45分鐘後，將其冷卻至室溫，利用乙酸乙醋稀釋以水/月洗。利用無水NaS〇4乾燥該有機層，並且過減及在真空中濃縮。利用娜乙酸乙§旨_己烧藉由急驟層析： (Sl〇2)純化該殘餘物。獲得28毫克的所需產物。

步驟I . 5-甲基二氫_環戊吨唾_3_甲猜及^甲基.Μ-二氫-環戊吡唑_3_甲腈（混合物）的製備

Ί导自上述v驟Η之中間物（28毫克，〇 ο"毫莫耳）在無-水Τ，毫升)中的溶液加入氯化四丁基銨(在τη”” ：， 0.093¾莫耳，1.0 M)。將反應回流3()分鐘後，將其冷卻至至孤並在/、工中礙縮Q將該殘餘物溶解在乙酸乙酯中，以飽和NaHC〇3及鹽水清洗，並以無水聽〇4乾燥，過滤及# 在真工中/辰鈿。利用3〇%乙酸乙酯-己烷藉由急驟層析法 (Si〇2)純化該殘餘物。得到一白色固體。步称J: 5-甲基_3侦.四吐_5_基）_2,6_二氮_環戍Μ(化合物9)及5·甲基_3_(1η_四嗅_5•基）_2,4_二氫環戊β比唾（化合物10)的製備對知自上述步驟！之中間物（9 G毫克，G G62毫莫耳）在2' 丙醇（1毫升）中的溶液加入水（0·5毫升）、疊氮化鈉（12毫 103486-941102.doc -128- 1258478 克’ 〇·186毫莫耳）以及溴化鋅（6.5毫克，〇·〇3ΐ毫莫耳）。將反應混合物在90°C加熱1 8小時後，將其冷卻達室溫並加入 HC1( 1.5毫升，3 N)。利用乙酸乙酯萃取該反應混合物，以鹽水清洗，並以無水NaSCU乾燥，過濾及在真空中濃縮，得到所需混合物，如比例為2:1之雙鍵區域異構物。異構物（a) : iH NMR (CD3OD，500 ΜΗζ) δ 6.43 (bs，1H)、3.3(s， 2H) ' 2.2 (s，3H)。異構物（b) ·· 4 NMR (CD3〇D，5 00 MHz) δ 6.58 (bs，1H)，3.24 (s，2H)、2.15 (s，3H)。LC-MS : 1.86 分鐘；（Μ+Η)=189·1。在全部本申請案中，引用各式公告、專利以及公開專利申請案。這些公告、專利及公開專利申請案之揭示在此全部併入本揭示中作為參考。包含在熟悉此技藝者範圍内之所揭示發明的修改及延伸包括於上述的揭示及下列的申請專利範圍。雖然在此領域中適用各式的表現載體，但為了利用内生及非内生人類GPCRs的目的，最佳為使用之載體為 pCMV。此載體依據國際微專利步驟目的用生物存放辨認之布達佩斯條約之條款’存放在美國菌種中心（American

Type Culture Collection(ATCC)，西元 1998 年 10 月 13 日 (10801大學大道，麥納薩斯，VA20110-2209，美國）。 DNA係由ATCC測試並測定其實用性。ATCC已對pCMV指定以下之存放編號：ATCC#20355 1。 103486-941102.doc -129-

Claims

利申請案申請專利範圍替換本(95年4月） Γ—^一..—______ 十、申請專利範圍：年95及』3日修(更)正本 1· 一種式（I)化合物： —一~*---

其中： X 為 NH ; R1選自於由下列所組成之群：Η、鹵素、經基、硫氧基、氣基、硝基、Ci·4鹵烧基、胺基、Ci·4烧基胺基、C2-8二院基月女基、Ci_4烧基、Ci_4烧氧基、C2-4婦基、C2-4快基、C3-5環烧基、Cw鹵烷氧基、Cl_4烷硫基、Cl_4烷基亞磺醯基、Cl_4 院基磺醯基、Cj-4鹵烷硫基、Cl·4鹵烷基亞磺醯基及Ci-4_^ 基續酿基；反2選自於由下列所組成之群：η、鹵素、羥基、硫氧基、氰基、硝基、Cm鹵烷基、胺基、Cl_4烷基胺基、Cw二燒基胺基、Cw烧基、Cl.4烷氧基、c2.4烯基、C2.4炔基、c3-5環炫基、Cwii烧氧基、Cl_4烷硫基、c1-4烷基亞磺醯基、Cw 烷基磺醯基、（^_4_烷硫基、c! 4_烷亞磺醯基及(^^齒烷磺醢基；或R2不存在；當R2存在時，二二為一單鍵，或當R2不存在時，二二為一雙鍵；以及環A為一 5員碳環，或一 5員雜環，其中「5員碳環」表示 103486-950413.doc 1258478 玉衣包括5個J衣碳原子，JL Φ 2徊塔r山店7、》丁，、甲2個％石反原子破環A及環β共用；及、2或3個未被環 -s(0)-或 _s(0)2- 其中「5員雜環」表示一 5員碳環，其中^ 八及共用之環碳原子各自地被s_、取代；及其中環A視需要地以i到4個冑自由下列所組成之群之取代基取代：南素、羥基、硫氧基、氰基、硝基、C1_d烷基、胺基、Cw烷基胺基、C2.8二烷基胺基、Ci·4烷基、Cm烷氧基、c2.4婦烴基、C2.4炔基、〇3 5環烧基、cm齒烧氧基、 4烧硫基、基亞料基、基❹基、烧硫基、Cw鹵烷基亞磺醯基及Ci“鹵烷基磺醯基；或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。 2·如請求項1的化合物，其中環八為一 5員碳環。 3·如請求項1的化合物，其中環八為一 5員雜環。 4·如請求項1的化合物，其中環A為一 5員雜環，其中「5員雜環」表示一5員碳環，其中丨個未被環八及環B共用之環碳原子被-0-、-S-、-s(0)-或-S(0)2-取代。 5 · 如明求項1的化合物，其中： X 為 N Η ; R1為Η或經基； R2為Η或無；當I為Η時，=為一單鍵，或當I不存在時，=為一雙鍵；以及 Α為一 5貝碳環或5員雜環列所組成之群之取代基取代：，視需要地由1到4個選自由下鹵素、Ch烷基、cK4烷氧基 103486-950413.doc 1258478 以及C3-5環烧基；或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。 6.如請求項1的化合物，具有式（If):

其中： R1為Η或經基；且環Α可視需要地由丨或2個選自由下列所組成之群之取代基取代：鹵素、Cw烷基、Cw烷氧基以及C3-5環烷基；或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。 7.如請求項1的化合物，具有式（Ih):

其中：環A可視需要地由1或2個選自由下列所組成之群之取代基取代：鹵素、CN4烷基、Cw烷氧基以及C3-5環烷基；或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。 8.如請求項1的化合物，具有式（ih): 103486-950413.doc 1258478

H 其中：環A可視需要地以乙基取代；或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。 9.如請求項1的化合物，具有式（Ih):

其中：

環A可由1或2個選自由下列所組成之群之取代基取代：鹵素、正-丙基、正-丁基、Cw烷氧基及C3_5環烷基；或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。 10. 如請求項1的化合物，其為3-(1Η-四唑-5-基）-2,4,5,6-四氫-環戊ϋ比唾或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。 11. 如請求項1的化合物，其為3-(1Η-四唑-5-基）-2,6-二氫-4Η-噻吩[3，4-c]吼吐或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。 12.如請求項1的化合物，其為6-曱基-3-(1Η-四唑-5-基）-2,6-二氫-4H·呋喃[3,4-c]吡唑或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物 103486-950413.doc -4- 1258478 或水合物。 13. 如請求項1的化合物，其為3-(1Η-四唑-5-基）-2,4-二氫-環戊吡唑或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。 14. 如請求項1的化合物，其為3-(1Η-四唑-5-基）-2,6-二氫-環戊吼唑或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。 15. 如請求項1的化合物，其為3·(1Η-四唑-5-基）-2,6-二氫·4Η·呋喃[3,4-c]吡唑或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。 ® 16.如請求項1的化合物，其為5-乙基-3-(1Η-四唑-5-基）-2,4,5,6- 四氫-環戊吡唑或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。 17. 如請求項1的化合物，其為5-丁基-3-(1Η-四唑-5-基）-2,4,5,6-四氫-環戊吼唑或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。 18. 如請求項1的化合物，其為5-甲基-3-(1Η-四唑-5-基）-2,6-二氫-環戊吡唑或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合

物。 19. 如請求項1的化合物，其為5-曱基-3-(1Η-四唑-5-基）-2,4-二氫-環戊°比σ坐或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。 20. 如請求項1的化合物，其為5-丙基-3-(1Η-四唑_5_基）-2,4,5,6- 四氫-環戊°比σ坐或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。 2 1.如請求項1的化合物’其為5-丙氧基-3-(1Η-四0坐-5-基）_ 103486-950413.doc 1258478 22. 23. ⑩24. 25. 26.

27. 28. 29. 2.4.5.6- 四氫-環戊吡唑或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。如請求項1的化合物，其為5-環戊基-3-(1Η-四唑-5-基）- 2.4.5.6- 四氫-環戊吡唑或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。如請求項1的化合物，其為5-氟-3-(1Η-四唑-5-基）-2,4,5,6-四氫-環戊吡唑或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。如請求項1的化合物，其為5-異丁氧基·3-(1Η-四唑-5-基）-2，4,5,6-四氫-環戊°比唾或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。如請求項1的化合物，其為5-丁氧基-3-(1Η-四唑-5-基）- 2.4.5.6- 四氫-環戊°比峻或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。如請求項1的化合物，其為3-(1Η-四唑-5-基）-2,4,5,6-四氫-環戊吡唑-6-醇或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。如請求項1的化合物，其為5-甲氧基-3-(1Η-四唑-5-基）- 2.4.5.6- 四氫-環戊吡唑或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。如請求項1的化合物，其為5,5-二氟-3-(1Η-四唑-5-基）-2，4，5，6 -四氫-環戊吼σ坐或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。如請求項1的化合物，其為5-乙氧基-3-(1Η-四唑-5-基）- 103486-950413.doc Ϊ258478 、’ ’6四氫-¾戊吡唑或其醫藥上可接受的鹽類、溶劑合物或水合物。 30. 31. 32· -種用於治療代謝相關病症的醫藥組合物，其包含治療有政里之請求項1至第29項中任一項之化合物。如明求項30的醫藥組合物，纟中該代謝相關病症係選自由下列所組成之群：血脂異常、動脈粥樣硬化、冠心病、胰島素抗性及第二型糖尿病。

月求項30的醫藥組合物，》中該代謝相關病症為動脈粥樣硬化。 33. 一種提高個體之HDL的醫藥組合物，其包括治療有效量之月求項1至第2 9項中任一項之化合物。 3 4 . .如印求項1至29中任一項之化合物，其係用於治療人體或動物體的治療方法。 5 ·如明求項1至第29中任一項之化合物，其係用於治療人體或動物體之代謝相關病症的治療方法。 _ 3 6.如凊求項i至第29中任一項之化合物，其係用於治療人體或動物體之代謝相關病症的治療方法，其中該代謝相關病症係選自由下列所組成之群：血脂異常、動脈粥樣硬化、冠心病、胰島素抗性及第二型糖尿病。 37·如明求項i至29中任一項之化合物，其係用於治療人體或動物體之動脈粥樣硬化的治療方法。 38·如明求項i至29中任一項之化合物，其係用於以治療提高人體或動物體HDL的方法。 39. —種如請求項i至第29中任一項之化合物之用途，其係用於 103486-950413.doc 1258478 製造治療代謝相關病症之藥劑。一種如請求項1至29中任一項之化合物之用途，其係用於製 41. 42.

造治療選自下列所組成之群之代謝相關病症之藥劑：血脂異常病 ° 動脈粥樣硬化对〜病、姨島素抗性及第二型糖尿一種如請求項1至2 9中任一項之化人物造治療動脈粥樣硬化之藥劑。一種如請求項1至29中任一項之儿a 貝 < 化合物造提高個體之HDL之藥劑。之用途，其係用於製之用途，其係用於製 43. 一種製造醫藥組合物的方法，其勺任-項之化合物與醫藥上可接受㈣⑽合如請求項1至29中

103486-950413.doc