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TW202448938A - 配體-極性藥物複合物 - Google Patents

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TW202448938A
TW202448938A TW112136880A TW112136880A TW202448938A TW 202448938 A TW202448938 A TW 202448938A TW 112136880 A TW112136880 A TW 112136880A TW 112136880 A TW112136880 A TW 112136880A TW 202448938 A TW202448938 A TW 202448938A
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boc
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bond
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TW112136880A
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林陽生
黃爾毅
呂學毅
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瀚陽生物科技股份有限公司
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Abstract

本發明揭示式I之化合物：

Description

配體-極性藥物複合物
本發明係有關於配體-極性藥物複合物。
發明背景
抗體-藥物複合物(ADC)提供利用抗體特異性及小分子腫瘤細胞毒性的以抗體為主的有前景之治療劑。其將高效治療劑特異性遞送至目標細胞且因此最大限度地減少癌症治療中常見之副作用。
典型治療劑係疏水性細胞毒性藥物，諸如類美登素(maytansinoid)、奧瑞他汀(auristatins)、卡奇黴素(calicheamicins)、倍癌黴素(duocarmycins)及吡咯并苯并二氮呯(PBD)。在ADC中，治療劑經由化學或酶可裂解連接子或不可裂解連接子連接至抗體(參見Su等人, 2021)。ADC開發中的一個主要難題係適合連接子之應用，該連接子將治療劑(亦即，有效負載)連接至配體，使ADC在循環中穩定以及將有效負載釋放至癌細胞之特定部位。
ADC可包括酶可裂解連接子(「可裂解連接子」)或不可裂解連接子。
可裂解連接子具有一或多個切割部位，其用於在溶酶體酶，諸如組織蛋白酶B、醣苷酶、磷酸酶及硫酸酯酶作用下釋放該有效負載(參見Jiang等人, 2015)。除溶酶體外，許多溶酶體酶看來亦存在於其他位置中，例如存在於循環中(Zhloba及Dunaevskiĭ, 1996)、細胞外空間中及細胞表面上(Wu等人, 2010)，以及內體隔室中(Guha等人, 2008)。顯然，具有可裂解連接子之ADC在前進至溶酶體之前，經歷其有效負載之過早釋放。實際上，有效負載之過早釋放已在關於具有可裂解連接子之ADC的臨床前及臨床研究中得到確認(Diamantis及Banerji, 2016；Bargh等人, 2019；Su等人, 2021；及Sheyi等人, 2022)。
另一方面，不可裂解連接子不含切割部位。含有不可裂解連接子之ADC依賴於抗體配體在溶酶體中緩慢降解而釋放離子活性代謝物，亦即，由有效負載、連接子及抗體衍生之胺基酸殘基構成的共價連接之三聯實體(參見Oroudjev等人, 2010)。此外，自殺滅之腫瘤細胞釋放的離子性且因此不大可能跨過細胞膜的活性代謝物與其疏水性對應物相比對腫瘤及別處中之正常細胞群體具有較低毒性。
具有不可裂解連接子之ADC係藉由使有效負載經由連接子與抗體形成複合物來製備。因此，可用複合部位侷限於抗體暴露之半胱胺酸、離胺酸或麩醯胺酸殘基之側鏈(Schneider等人, 2020)。另外，歸因於用於複合的抗體配體及/或轉麩醯胺酸酶引起之空間位阻，連接子之選擇受到進一步限制(Leal等人, 2015)。習知的具有不可裂解連接子之ADC的其他缺點有：(a)其活性代謝物限於半胱胺酸、離胺酸或麩醯胺酸加合物且只能在抗體於溶酶體中完整降解之後釋放(Mckertish及Kayser, 2021)，此係在該等活性代謝物或多或少會受損的極其不利環境中進行之相當慢的過程；(b)DAR(藥物/抗體比)值較低(約2-4)(Rathi等人, 2021)；及(c)半衰期較短(Lu等人, 2014)。
顯然，為了更好地利用具有不可裂解連接子之ADC用於癌症治療的能力，有極大的改良空間。
腫瘤血管結構不成熟且易於滲漏，引起腫瘤微環境特有的高滲透長滯留效應(enhanced permeability and retention，EPR)(McDonald及Baluk. 2002；Nagy等人, 2009)及腫瘤間質液壓(tumor interstitial fluid pressure，TIFP)(Libutti等人, 2018)。許多腫瘤因TIFP而抵抗抗癌劑之間質穿透。此種抗性可幫助闡明在實驗室環境中根除腫瘤細胞之藥物常常無法消除體內惡性病的原因。
癌症化學療法中之另一問題係多重藥物抗性(MDR)，即，同時對多種結構不相關之細胞毒性藥物產生抗性(Catalano等人, 2022)。MDR主要由膜ABC轉運蛋白之表現增加引起，該等轉運蛋白介導化學治療劑之單向能量依賴性流出。因此，ABC轉運蛋白干擾化學治療劑之生體可用率、藥物動力學及藥效學。在ABC轉運蛋白中，MDR1蛋白質(又稱為P-醣蛋白或ABCB1)之過度表現主要引起在許多癌細胞中觀察到的MDR。經顯示，MDR1可轉運幾乎無結構類似性之多種化合物。實際上，由於化學治療劑流出中所涉及之MDR1的空腔為疏水性的且因此偏好容納疏水性化合物，故已知作為MDR1受質之許多癌症藥物為疏水性的，諸如絲裂黴素C (mitomycin C)、長春花鹼(vinblastine)、長春新鹼(vincristine)、長春瑞濱(vinorebline)、長春地辛(vindesine)、依託泊苷(etoposide)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)、小紅莓(doxorubicin)、道諾黴素(daunorubicin)、表柔比星(epirubicin)、艾達黴素(idarubicin)、多西他賽(docetaxel)、伊立替康(irinotecan)、SN-38、拓樸替康(topotecan)及甲胺喋呤(methotrexate)(Zhou等人, 2008；Waghray及Zhang, 2018；Gala等人, 2020)。
需要開發一種將治療劑高效遞送至癌細胞內所需部位並將其迅速釋放以殺滅該細胞的複合物。
發明概要
本發明提供治療癌症之配體-極性藥物複合物(LPDC)，其具有極佳的藥物動力學、生體可用率及藥效學。
在一個態樣中，本發明係關於式I之化合物： I
如式I中所示，該化合物包含配體連接子L1、M n1連接子複合體、藥物連接子L2、由 表示之第一極性藥物(PD)部分PD1、任擇地一至五個親水性聚合物部分HP以及任擇地一至五個二級靶向部分ST。
在上式I中，n1係自1至15之整數；n2係自0至5之整數；n3係自0至5之整數；n4係1或2；n5係0或1；n6係0或1；一個----係共價鍵且另一個----缺失，或當n2及n3係0時，二者皆缺失；L1、L2及HP各自當存在時經由連接子鍵鍵結至M n1連接子複合體；ST當存在時係經由連接子鍵鍵結至HP或M n1連接子複合體；L2係經由醯胺鍵或醣苷鍵鍵結至PD；L3當存在時係經由穩定鍵鍵結至D；Pc當存在時係經由穩定鍵鍵結至L3或D；M n1連接子複合體內之單體M各自經由穩定鍵鍵結至其相鄰單體M；D係藥物部分；M在每次出現時獨立地為多官能部分；L1係含有偶合部分的雙官能交聯劑，該偶合部分能夠經由配體中所包含之硫氫基、胺基、麩醯胺酸或甲醯基與配體反應；L2係雙官能交聯劑；L3當存在時係雙官能交聯劑；當存在時，HP在每次出現時獨立地為親水性聚合物部分；Pc當存在時含有極性基團；當存在時，ST在每次出現時獨立地為二級靶向部分；連接子鍵係醯胺鍵、醣苷鍵、酯鍵、雙硫鍵、C-S鍵、C-O鍵、C-N鍵、碳酸酯部分(-O-C(O)-O-)、胺基甲酸酯部分(-O-C(O)-NH-)、脲部分(-NH-C(O)-NH-)或三唑部分( )；且穩定鍵係穩定醯胺鍵、穩定醣苷鍵、穩定酯鍵、穩定雙硫鍵、C-S鍵、C-O鍵、C-N鍵、脲部分(-NH-C(O)-NH-)或三唑部分( )。
較佳地，L1含有胺基(NH 2)、碘(I)、溴(Br)、順丁烯二醯亞胺部分、N-羥基琥珀醯亞胺(NHS)部分或胺氧基部分；M在每次出現時為衍生自以下之部分：天然胺基酸、非天然胺基酸、單醣、雙官能交聯劑、具有至少一個二級或三級胺基團之聚胺、3,6-雙(4-胺基丁基)哌𠯤-2,5-二酮、環肽或二胺基二羧酸；Pc係衍生自以下之部分：單醣、聚胺、羥基羧酸、線性或環狀二肽、二胺基二羧酸、天然胺基酸或非天然胺基酸；且ST係衍生自以下之部分：葡萄糖、葉酸、iRGD肽、癌症特異性肽配體(AGM-330)、人類纖維結合蛋白胞外域B(EDB)特異性高親和力肽(human fibronectin extra-domain B (EDB)-specific aptide，「APT EDB」)、生替林(centyrin)、F3肽、DVN肽、帕瑞肽(pasireotide)、阿法諾肽(afamelanotide)、依特卡肽(etelcalcetide)、生長抑素、PD-1/PD-L1相互作用抑制劑(「BMS-1166」)、環肽、單鏈抗體或適體。
以上描述之任何化合物任擇地含有由 表示之第二極性藥物部分PD2，其經由醯胺鍵或醣苷鍵鍵結至M n1連接子複合體；n5'係0或1；n6'係0或1；D'係藥物部分；L3'當存在時係雙官能交聯劑；且Pc'當存在時含有極性基團。
M n1連接子複合體含有一或多個(亦即，n1)M，其各自為單體單元。M在每次出現時獨立地為衍生自以下之部分：二胺基二羧酸、單醣、3,6-雙(4-胺基丁基)哌𠯤-2,5-二酮、環肽、胺基酸、二羧酸、巰基羧酸或胺基硫醇。
較佳地，M n1連接子複合體含有衍生自以下之單體單元：二胺基二羧酸、3,6-雙(4-胺基丁基)哌𠯤-2,5-二酮或環肽。在此等較佳實施例中，該化合物任擇地在L2與PD之間含有可釋放部分，其具有自分解型間隔子、酶可裂解胺基酸、具有2-8個胺基酸之酶可裂解肽、自分解型間隔子與酶可裂解胺基酸之組合、或自分解型間隔子與酶可裂解肽之組合。
典型地，M n1連接子複合體含有選自由以下組成之群的部分： 、 、 、 、 , 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 及 。
較佳地，M n1連接子複合體含有選自由以下組成之群的部分： 、 、 、 及 。
更佳地，M n1連接子複合體含有： 、 或 。
式I之化合物的亞群可以具有以下特徵中之一者或任何組合： (i)  L1為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ，其中nL1係自0至10之整數； (ii) L2係 、 、 、 或 ， 其中nL2係自0至10之整數； (iii) Pc係衍生自以下之部分：胺基酸、線性或環狀二肽、單醣、雙官能聚乙二醇或胺基苯酚，諸如： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 及 ； (iv) L3係 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ；且nL3係0至10； (v) HP係 或 ，其中np係自5至50之整數；Cap係(i)能夠與ST分子反應以將該ST部分鍵結至該HP部分的反應性基團或(ii)選自由以下組成之群的端基：C 1-C 10烷基、C 2-C 10烷基-CO 2H、C 2-C 10烷基-OH、C 2-C 10烷基-NH 2、C 2-C 10烷基-NH(C 1-C 3烷基)及C 2-C 10烷基-N(C 1-C 3烷基) 2；且Lp係連接子部分。例示性HP部分包括 、 、 、 、 , 、 、 、 、 或 ； (vi) D係衍生自以下之藥物部分：美登素(mertansine)(DM1)、拉夫坦辛(ravtansine)(DM4)、N-甲基-L-Ala-美登醇、單甲基奧瑞他汀E (monomethyl auristatin E)、7-乙基-10-羥基喜樹鹼(SN38)或TLR7/8促效劑Ag；且 (vii)該二級靶向部分係衍生自葉酸、葡萄糖或乙醯基-RHGAMVYLK。
以下顯示36種本發明之例示性化合物，亦即化合物1-36的結構。 化合物1 (C-PD2-LK1) 化合物2 (C-PD5-LK2) 化合物3 (C-PD18-LK3) 化合物4 (C-PD18-LK4) 化合物5 (C-PD2-LK5) 化合物6 (C-PD5-LK6) 化合物7 (C-PD1-LK7) 化合物8 (C-PD1-LK8) 化合物9 (C-PD1-LK9) 化合物10 (C-PD1-LK10) 化合物11 (C-PD1-LK11) 化合物12 (C-PD1-LK12) 化合物13 (C-PD1-LK13) 化合物14 (C-PD1-LK14) 化合物15 (C-PD2-LK15) 化合物16 (C-PD2-LK16) 化合物17 (C-PD1-LK17) 化合物18 (C-PD1-LK18) 化合物19 (C-PD1-LK19) 化合物20 (C-PD1-LK20) 化合物21 (C-PD1-LK21) 化合物22 (C-PD1-LK22) 化合物23 (C-PD1-LK23) 化合物24 (C-PD1-LK24) 化合物25 (C-PD6-LK25) 化合物26 (C-PD4-LK26) 化合物27 (I-PD1-LK1) 化合物28 (I-PD2-LK2) 化合物29 (I-PD2-LK3) 化合物30 (I-PD2-LK4) 化合物31 (I-PD-LK5) 化合物32 (I-PD-LK6) 化合物33 (I-PD1-LK7) 化合物34 (I-PD2-LK8) 化合物35 (I-PD2-LK9) 化合物36 (I-PD2-LK10) 。
本發明之另一個態樣係關於配體-PD複合物，其各自含有配體部分及衍生自上述化合物中之任一者的部分。該配體經由在配體中之官能基與式I中之L1之間形成的共價鍵鍵結至該化合物且該官能基係硫氫基、胺基、麩醯胺酸或甲醯基。
例示性配體包括曲妥珠單抗(trastuzumab)、白蛋白及帕妥株單抗(pertuzumab)。共價鍵係在配體之硫氫基與L1之順丁烯二醯亞胺、碘或溴部分之間形成。
典型地，該配體與該化合物之莫耳比在1:1與1:20之間，較佳地在1:2與1:8之間。
例示性本發明之複合物，亦即複合物1-28顯示於下。 複合物1 (C-APDC1) 複合物2 (C-APDC2) 複合物3 (C-APDC3) 複合物4 (C-APDC4) 複合物5 (C-APDC5) 複合物6 (C-APDC6) 複合物7 (C-APDC7) 複合物8 (C-APDC8) 複合物9 (C-APDC9) 複合物10 (C-APDC10) 複合物11 (C-APDC11) 複合物12 (C-APDC12) 複合物13 (C-APDC13) 複合物14 (C-APDC14) 複合物15 (C-APDC15) 複合物16 (C-APDC16) 複合物17 (C-APDC17) 複合物18 (C-APDC18) 複合物19 (C-AlbPDC1) 複合物20 (I-APDC2) 複合物21 (I-APDC3) 複合物22 (I-APDC4) 複合物23 (I-APDC5) 複合物24 (I-APDC6) 複合物25 (I-APDC7) 複合物26 (I-APDC8) 複合物27 (I-APDC9) 複合物28 (I-APDC10)
治療癌症之方法亦在本發明之範圍內，該方法包括向有需要之患者投予有效量的上述複合物中之任一者的步驟。
該方法可用於治療任何癌症。非限制性實例包括造血系統癌症，諸如淋巴瘤(霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin Lymphoma)及非霍奇金氏淋巴瘤)及白血病；以及實體腫瘤。造血系統癌症之實例包括濾泡性淋巴瘤、多形性大細胞淋巴瘤、套細胞淋巴瘤、急性骨髓母細胞性白血病、慢性骨髓細胞性白血病、慢性淋巴球性白血病、瀰漫性大B細胞淋巴瘤及多發性骨髓瘤。實體腫瘤之實例包括纖維肉瘤、黏液肉瘤、脂肪肉瘤、軟骨肉瘤、骨原性肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、內皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴內皮肉瘤、滑膜瘤、間皮瘤、尤文氏腫瘤(Ewing's tumor)、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、結腸癌、結腸直腸癌、腎癌、胰臟癌、骨癌、乳癌、卵巢癌、前列腺癌、食道癌、胃癌、口腔癌、鼻癌、喉癌、鱗狀細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭狀癌、乳頭狀腺癌、囊腺癌、髓質癌、支氣管癌、腎細胞癌、肝細胞瘤、膽管癌瘤、絨毛膜癌、精原細胞瘤、胚胎性癌、威爾姆斯氏腫瘤(Wilms'tumor)、子宮頸癌、子宮癌、睪丸癌、小細胞肺癌、膀胱癌、肺癌、上皮癌瘤、神經膠質瘤、多形性膠質母細胞瘤、星形細胞瘤、神經管母細胞瘤、顱咽管瘤、室管膜瘤、松果體瘤、血管母細胞瘤、聽神經瘤、少突神經膠質瘤、腦膜瘤、皮膚癌、黑色素瘤、神經母細胞瘤及視網膜母細胞瘤。
醫藥組成物亦在本發明之範圍內，該醫藥組成物含有本發明之複合物中之任一者及醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑。
亦提供用於製造供治療癌症用之藥劑的本發明之複合物中之任一者。
亦設想製備上述複合物中之任一者的方法。該方法涉及使配體與任何上述化合物反應，其中該配體含有一或多個官能基，該一或多個官能基獨立地為硫氫基、胺基、麩醯胺酸或甲醯基。
術語「烷基」係指含有1-20個碳原子(例如C 1 - 6)及藉由自母烷烴之碳原子移除一個氫原子得到之單價基團中心的直鏈或支鏈烴基。例示性烷基係甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、三級丁基、正戊基及正己基。術語「烷基羰基」或「羰基」係指烷基-C(O)-。術語「鹵烷基」係指經一或多個鹵原子取代之烷基。實例包括氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氟乙基(例如1-氟乙基及2-氟乙基)、二氟乙基(例如1,1-二氟乙基、1,2-二氟乙基及2,2-二氟乙基)及三氟乙基(例如2,2,2-三氟乙基)。術語「雜烷基」係指具有一或多個雜原子(例如O、N、P及S)之烷基，該一或多個雜原子各自置換烷基中之碳原子。術語「伸烷基」係指含有藉由自母烷烴之同一碳原子或二個不同碳原子移除二個氫原子而得到的具有二個單價基團中心之二價烷基。術語「伸雜烷基」係指含有二個單價基團中心之二價雜烷基。
術語「鹵素」在本文中係指氟基、氯基、溴基或碘基。實例包括氟基(F)及溴基(Br)。
術語「羧醯胺」係指-C(O)NH 2。
術語「胺基」係指衍生自胺之基團，其未經取代或者經烷基、芳基、環烷基、雜環烷基或雜芳基取代。術語「胺基烷基」係指NH 2-烷基，亦即，經至少一個胺基取代之烷基。術語「烷基胺基」係指烷基-NH-。胺基烷基之實例包括胺基甲基及2-胺基乙基。術語「醯基胺基」係指-C(O)-NH-。
術語「芳基」係指含有一或多個稠合或非稠合苯基環之單價碳環基團。應理解，當採用多個環時，該術語包括部分不飽和環系統。典型芳基包括苯基、聯苯、1-萘基或2-萘基、1,2-二氫萘基、1,2,3,4-四氫萘基、茚基、二氫茚基及其類似基團。術語「伸芳基」係指含有二個單價基團中心之二價芳基。
術語「雜芳基」係指具有一或多個雜原子(例如O、N、P及S)的芳族5至8員單環、8至12員雙環或11至14員三環環系統。實例包括吡啶基、嘧啶基、喹啉基、異喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并㗁唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吡唑基、三唑基、㗁唑基、噻二唑基、四唑基、㗁唑基、異㗁唑基、咔唑基、呋喃基、咪唑基、噻吩基、噻唑基及苯并噻唑基。
術語「環烷基」係指含有3至12個碳(例如C3-6及C3-10)的非芳族、飽和或不飽和單環、雙環、三環或四環烴基。應理解，當採用多個環時，該術語包括稠合、橋接及螺環系統。典型環烷基包括單環、雙環及螺環，諸如環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環庚基、環辛基、雙環[1.1.1]戊基、雙環[2.1.1]己基、十氫萘及其類似基團。術語「碳環」係指含有二個單價基團中心之二價環烷基。
術語「雜環烷基」係指具有一或多個雜原子(例如O、N、P及S)的非芳族、飽和或不飽和3-8員單環、8-12員雙環或11-14員三環環系統。實例包括氮雜環丙烷基、氮呾基、吡咯啶基、二氫呋喃基、四氫呋喃基、四氫哌喃基、四氫噻吩基、四氫-2-H-硫代哌喃-1,1-二氧離子基、哌𠯤基、哌啶基、𠰌啉基、咪唑啶基、氮雜環庚烷基、二氫噻二唑基、二㗁烷基、奎寧環基、2-氮雜螺[3.3]庚基及8-氮雜雙環[3.2.1]辛基。術語「雜環」係指含有二個單價基團中心之二價雜環烷基。
術語「甲醯基」係指-C(O)H基團。術語「羧基」係指-C(O)-OH基團。術語「羧酸酯基」係指-O-C(O)-烷基。術語「乙醯氧基」係指-OC(O)CH 3基團。術語「側氧基」係指=O基團。
術語「胺基酸」係指可併入肽、多肽或蛋白質中之任何單體單元。胺基酸包括天然胺基酸及其立體異構物，以及非天然胺基酸及其立體異構物。給定胺基酸之「立體異構物」係指具有相同分子式及分子內鍵但鍵及原子之三維排列不同的異構物(例如L-胺基酸及相應D-胺基酸)。
天然之胺基酸係由遺傳密碼編碼的天然存在之α-胺基酸，以及隨後經修飾之胺基酸，例如羥基脯胺酸、α-羧基麩胺酸及O-磷酸絲胺酸。天然存在之α-胺基酸包括但不限於丙胺酸(Ala)、半胱胺酸(Cys)、天冬胺酸(Asp)、麩胺酸(Glu)、苯丙胺酸(Phe)、甘胺酸(Gly)、組胺酸(His)、異白胺酸(Ile)、精胺酸(Arg)、離胺酸(Lys)、白胺酸(Leu)、甲硫胺酸(Met)、天冬醯胺(Asn)、脯胺酸(Pro)、麩醯胺酸(Gln)、絲胺酸(Ser)、蘇胺酸(Thr)、纈胺酸(Val)、色胺酸(Trp)、酪胺酸(Tyr)及其組合。天然胺基酸之立體異構物包括但不限於D-丙胺酸(D-Ala)、D-半胱胺酸(D-Cys)、D-天冬胺酸(D-Asp)、D-麩胺酸(D-Glu)、D-苯丙胺酸(D-Phe)、D-組胺酸(D-His)、D-異白胺酸(D-Ile)、D-精胺酸(D-Arg)、D-離胺酸(D-Lys)、D-白胺酸(D-Leu)、D-甲硫胺酸(D-Met)、D-天冬醯胺(D-Asn)、D-脯胺酸(D-Pro)、D-麩醯胺酸(D-Gln)、D-絲胺酸(D-Ser)、D-蘇胺酸(D-Thr)、D-纈胺酸(D-Val)、D-色胺酸(D-Trp)、D-酪胺酸(D-Tyr)及其組合。
非天然(非天然存在的)胺基酸包括但不限於呈L-組態或D-組態的胺基酸類似物、胺基酸模擬物、合成胺基酸、N取代之甘胺酸及N-甲基胺基酸，其以類似於天然胺基酸之方式起作用。舉例而言，「胺基酸類似物」可為具有與天然胺基酸相同之基礎化學結構(亦即，碳鍵結至氫、羧基、胺基)，但具有經修飾之側鏈基團或經修飾之肽主鏈的非天然胺基酸，例如高絲胺酸、正白胺酸、甲硫胺酸亞碸、甲硫胺酸甲基鋶。「胺基酸模擬物」係指具有與胺基酸之一般化學結構不同之結構，但以與天然胺基酸類似之方式起作用的化合物。胺基酸在本文中可由通常已知之三字母符號或由IUPAC-IUB生物化學命名法委員會(Biochemical Nomenclature Commission)所推薦之單字母符號來提及。
術語「二胺基二羧酸」係指具有二個或更多個(例如二、三及四個)胺基、二個或更多個(例如二、三及四個)羧基及至少六個雜原子(例如O、N、P及S)的芳族或非芳族、飽和或不飽和環狀或非環狀烴。實例包括2,5-二胺基苯-1,4-二甲酸、3,6-二胺基吡𠯤-2,5-二甲酸、2,2'-二胺基-[1,1'-聯苯]-4,4'-二甲酸、1,4-二胺基-環己烷-1,4-二甲酸、4,4'-亞甲基雙鄰胺基苯甲酸、2,5-雙(甲基胺基)對苯二甲酸、3,6-二胺基-鄰苯二甲酸、2,5-二胺基環己-1,4-二烯-1,4-二甲酸、2,3-二胺基對苯二甲酸、2,5-二胺基環己烷-1,4-二甲酸、2,5-二胺基對苯二甲酸、2,5-二胺基苯-1,3-二甲酸、2,5-二羥基環己-1,4-二烯-1,4-二甲酸、2,5-二羥基環己-1,3-二烯-1,4-二甲酸、4,6-二胺基苯-1,3-二甲酸、3,6-二胺基吡𠯤-2,5-二甲酸、3,3'-二胺基-[1,1'-聯苯]-4,4'-二甲酸、2,2'-二胺基-4,4'-聯苯二甲酸、2,2'-二胺基-4,4'-芪二甲酸、2,3-二胺基琥珀酸、2,4-二胺基-戊二酸、2,5-二胺基己二酸、2,6-二胺基庚二酸、2,7-二胺基辛二酸、2,8-二胺基壬二酸、2,9-二胺基癸二酸、2,10-二胺基十一烷二酸、二-O-甲基化瑞斯托黴素酸(ristomycinic acid)、胱硫醚(cystathionine)、羊毛硫胺酸(lanthionine)及黎豆胺酸(djenkolic acid)。
穩定(或酶抗性)醯胺鍵係指(1)在二個天然或非天然胺基酸之間形成的肽鍵，其中該肽鍵係在來自一個胺基酸之二級胺基及/或來自另一胺基酸之羧酸基團之間形成，該另一個胺基酸係獨立地選自環狀α-胺基酸、環狀β-胺基酸或環狀二級胺基酸(參見下文)；(2)環肽中所見之肽鍵；(3)極少酶能夠水解之異肽鍵(參見KW-1017，UniProtKB條目)或(4)在胺基酸與非胺基酸化合物(諸如雙官能交聯劑、聚胺、單醣或二胺基二羧酸)之間形成的醯胺鍵。實際上，自具有不可裂解連接子之習知ADC釋放的活性代謝物中所發現的醯胺鍵係穩定醯胺鍵(Erickson等人, 2006；Phillips等人, 2008；Leal等人, 2015)。
簡單醯胺鍵係指在除脯胺酸外的二個天然胺基酸之間形成之肽鍵。
醯胺鍵係指簡單醯胺鍵或穩定醯胺鍵。
穩定醣苷鍵係指在半縮醛與羥基之間形成的醣苷鍵，其中該半縮醛及羥基中之至少一者係二級半縮醛、三級半縮醛、二級羥基或三級羥基。
簡單醣苷鍵係指在一級半縮醛與一級羥基之間形成的醣苷鍵。
醣苷鍵係指簡單醣苷鍵或穩定醣苷鍵。
穩定酯鍵係指在羥基與羧酸基團之間形成的酯鍵，其中該羥基及羧酸基團中之至少一者係二級羥基、三級羥基、二級羧酸基團或三級羧酸基團。且衍生自環丙烷羧酸之穩定酯鍵係最著名的(Bender等人, 2008)。
簡單酯鍵係指衍生自一級羥基及一級羧酸基團之酯鍵。
酯鍵係指簡單酯鍵或穩定酯鍵。
穩定雙硫鍵係指在二個硫醇基之間形成的雙硫鍵，該等硫醇基中之至少一者係二級硫醇基或三級硫醇基。
簡單雙硫鍵係指在二個一級硫醇基之間形成的雙硫鍵。
雙硫鍵係指簡單雙硫鍵或穩定雙硫鍵。
與簡單對應物相比較，穩定醯胺鍵、穩定醣苷鍵、穩定酯鍵及穩定雙硫鍵對化學或酶水解具有較高抗性。
術語「酶可裂解肽(或胺基酸)」係指經由可裂解鍵連接藥物連接子及極性藥物部分以在例如酶處理時釋放極性藥物的肽鏈(或胺基酸)。可裂解鍵之實例包括雙硫鍵、在酸性pH下可裂解的酸不穩定性鍵及可藉由水解酶(例如肽酶、酯酶及葡糖醛酸酶)裂解之鍵。
術語「自分解型間隔子」係指具有連接至酶可裂解肽之第一鍵及連接至極性藥物部分之第二鍵的化學部分，其中第一鍵及第二鍵能夠回應於特定刺激而自發降解。
抗原係配體或二級靶向部分特異性結合的實體。
本文所使用之術語「配體」涵蓋單株抗體、聚乙二醇化單株抗體(Chapman 2002)、Fc-融合蛋白(Czajkowsky等人, 2012；Jafari等人, 2017)、白蛋白、聚乙二醇化白蛋白(Akbarzadehlaleh等人, 2016)及白蛋白-融合蛋白(Rogers等人, 2015；Wang等人, 2020b)。
二級靶向部分之非限制性實例包括葡萄糖(Calvaresi及Hergenrother, 2013)、AGM-330(Kim等人, 2020)、iRGD肽(Sugahara等人, 2009)、APTEDB(Saw等人, 2021)、生替林(Goldberg等人, 2016)、F3肽(Lam等人, 2016)、DVN肽(Zhu等人, 2018)、帕瑞肽(Wang等人, 2022)、阿法諾肽(Wang等人, 2022)、依特卡肽(Wang等人, 2022)、生長抑素、葉酸(Dharmatti等人, 2019)、BMS-1166(Pan等人, 2021)、適體(Jiang等人, 2015；Kuai等人, 2017)。
如本文所使用，術語單醣涵蓋單醣及其衍生物。單醣具有化學式：(CH 2O) x，其中x≥3。已知大量單醣衍生物。非限制性實例包括葡糖胺、唾液酸、半乳糖胺、抗壞血酸、甘露糖醇、葡糖醛酸、胞壁酸及神經胺酸。
親水性聚合物(HP)常常被用於增加半衰期，減小免疫原性以及改善小分子及巨分子之溶解度及穩定性(Greenwald等人, 2003；Fishburn 2008；Schlapschy等人, 2013；Lin等人, 2015；Lyon等人, 2015；Podust等人, 2016；Chan等人, 2017；Hu等人, 2018；Gupta等人, 2019；Hou等人, 2019；Viricel等人, 2019；Tian等人, 2021)。HP之非限制性實例包括PEG(-C 0-C 10伸烷基-(CH 2-CH 2-O) p-C 0-C 10伸烷基-，其中下標p係選自2-50之整數；參見上文關於伸烷基之定義)；聚肌胺酸(C 0-C 10伸烷基-[N(CH 3)-CH 2-(C=O)] s-C 0-C 10伸烷基-，其中下標s係選自2-500之整數；PAS(聚Pro-Ala-Ser)[C 0-C 10烷基-(Pro-Ala-Ser) a-C 0-C 10烷基，其中下標a係選自2-50之整數]；聚類肽聚合物；兩性離子性聚合物及羥基脯胺酸聚合物。
官能基係指惰性基團或反應性基團。
惰性基團係指任何化學非反應性基團。惰性基團之非限制性實例包括：C 1-C 10烷基、C 1-C 10伸烷基、芳基、伸芳基、C 3-C 8雜環、C 3-C 8雜環、C 3-C 8碳環、C 3-C 8碳環、C 1-C 10雜烷基及C 1-C 10伸雜烷基。該惰性基團亦可選自反應性基團之清單。
反應性基團係指具有共價結合可結合基團之反應性的任何化學部分。反應性基團之非限制性實例包括羧酸；胺；胺氧基；羥基；鹵素；活化酯，諸如N-羥基琥珀醯亞胺酯；炔基；烯基；疊氮基；異氰酸酯；醛；酮；順丁烯二醯亞胺；吡啶基二硫化物；及硫醇基。
雙官能或多官能交聯劑係在末端具有二個或更多個反應性基團的含PEG或不含PEG之化學試劑。可使用此等試劑，使用適合反應將二個或更多個分子交聯在一起。雙官能或多官能交聯劑包括同型雙官能交聯劑、異型雙官能交聯劑及光反應性交聯劑。同型雙官能(諸如戊二醛)交聯劑係在結構各端具有相同官能性化學的交聯劑。異型雙官能交聯劑(諸如SMCC (N-琥珀醯亞胺基4-(順丁烯二醯亞胺基甲基)環己烷-1-甲酸酯)及磺基-SMCC)係在結構各端具有不同反應性基團的交聯劑。光反應性交聯劑(諸如ABH (對疊氮基苯甲醯基醯肼))具有僅在暴露於UV或可見光時才變得有反應性的光可活化反應性基團。交聯劑中發現之反應性基團的實例分別包括但不限於用於與目標分子之羧酸酯基團複合的胺；用於目標分子之胺基的NHS-酯；用於目標分子之硫醇基的順丁烯二醯亞胺；用於目標分子之羥基的異氰酸酯；用於目標分子之疊氮基(-N 3)的炔烴(-C≡CH)；用於目標分子之醛或酮基團的肼或胺氧基。
術語「化合物」當涉及本發明化合物時亦包括其鹽、溶劑合物及前藥。醫藥學上可接受之鹽包括Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, 第2修訂版, P. H. Stahl及C. G. Wermuth (編), Wiley-VCH, New York, (2011)中所列者。除醫藥學上可接受之鹽以外，本發明中亦涵蓋其他鹽。其可充當化合物之純化中或其他醫藥學上可接受之鹽之製備中的中間物，或者可用於鑑別、表徵或純化本發明之化合物。溶劑合物係指在活性化合物與醫藥學上可接受之溶劑之間形成的複合體。醫藥學上可接受之溶劑的實例包括水、乙醇、異丙醇、乙酸乙酯、乙酸及乙醇胺。前藥係指在投予之後代謝成醫藥活性藥物的化合物。前藥之實例包括酯及其他醫藥學上可接受之衍生物。
本發明之化合物可以含有一或多個非芳族雙鍵或不對稱中心。其各自以外消旋體或外消旋混合物、單一R鏡像異構物、單一S鏡像異構物、個別非鏡像異構物、非鏡像異構物混合物、順式異構物或反式異構物形式存在。此類異構形式之化合物係在本發明之範圍內。其可呈混合物形式存在或可使用對掌性合成或對掌性分離技術分離。
應理解，本發明之化合物可以立體異構物形式存在。還應理解，本發明之化合物包括所有形式之立體異構物，包括鏡像異構物、非鏡像異構物及其混合物。較佳的立體異構物主要為一種非鏡像異構物。更佳的立體異構物主要為一種鏡像異構物。
如本文所使用，化學式中描繪之星號(*)表示基團與相應母式之連接點。
應認識到，熟習此項技術者可藉由向目前展現出症狀之患者投予有效量的本發明之複合物來治療癌症。因此，術語「治療(treatment)」及「治療(treating)」係指治療性治療及預防復發之預防措施，其中目的係抑制或減慢(減少)非所需生理變化或病症，諸如癌症之發展或擴散。出於本發明之目的，有益或所需臨床結果包括但不限於症狀減輕、疾病程度減輕、疾病病況穩定(亦即，不惡化)、疾病進展延緩或減慢、疾病病況改善或緩和，以及緩解(部分或完全緩解)，無論該等結果為可偵測還是不可偵測的。「治療」亦可意謂存活期相較於不接受治療之預期存活期延長。需要治療之患者包括已患有病況或病症之患者以及易患病況或病症之患者。在癌症之情形中，術語「治療」包括以下中之任一者或全部：抑制腫瘤細胞、癌細胞或腫瘤之生長；抑制腫瘤細胞或癌細胞之複製；減小總體腫瘤負荷或減少癌細胞數目；及改善與疾病相關之一或多種症狀。
此外，應認識到，熟習此項技術者可藉由向有未來症狀風險之患者投予有效量的本發明之複合物來治療癌症，且意欲包括對此之預防性治療。
如本文所使用，術語式I之化合物的「有效量」係指有效治療病症，諸如本文所述之疾病的量，亦即，劑量。作為熟習此項技術者之主治診斷醫師可易於藉由使用習知技術且藉由觀察在類似情況下得到之結果來確定有效量。在確定本發明之複合物的有效量或劑量時，要考慮多個因素，包括但不限於待投予之複合物；其他藥劑(若使用)之共同投予；哺乳動物物種；其體格、年齡及一般健康狀況；諸如癌症之類病症的累及程度或嚴重性；個別患者之反應；投予模式；投予之製劑的生體可用率特徵；所選擇之劑量方案；其他伴隨藥物之使用；以及其他相關情況。本發明之組合可以治療有效之單次或分次日劑量投予。該組合之活性組分可以在單藥療法中治療有效之該等劑量或以低於單藥療法中所用劑量的該等劑量投予，但當組合時產生所需(聯合)治療有效量。
本發明之複合物可單獨投予或以與醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑的醫藥組成物形式投予。此類醫藥組成物及其製備方法係此項技術中已知的(參見例如Remington: The Science and Practice of Pharmacy, A. Adejare編輯, 第23版, Academic Press, 2020)。
在本發明內，應理解，根據本發明使用之組合、組成物、套組、方法、用途或化合物可設想同時、並行、依序、連續、交替或分開投予活性成分或組分。
本發明之複合物及至少一種其他藥理學活性物質之投予可藉由共同投予活性組分或成分來進行，諸如藉由將其以一種單一調配物或劑型或者以二種或更多種單獨調配物或劑型同時、並行、依序、連續、交替或分別投予。
舉例而言，同時投予包括在實質上同一時間投予。此形式之投予亦可稱為「伴隨」投予。並行投予包括在同一大致時段內，例如在同一天但不一定在同一時間投予活性劑。交替投予包括在一時段期間，例如在幾天或一週之過程內投予一種藥劑，隨後在後續時段期間，例如在幾天或一週之過程內投予另一藥劑，且接著將該模式重複一或多個週期。依序或連續投予包括在第一時段期間(例如在幾天或一週之過程內)使用一或多次劑量投予一種藥劑，隨後在第二及/或另外時段期間(例如在幾天或一週之過程內)使用一或多次劑量投予另一藥劑。亦可採用重疊時程，其包括在治療期內的不同日投予活性劑，不必根據常規順序。亦可採用此等普通準則之變化形式，例如根據所使用之藥劑及個體之病況。
本發明組合之各成分可藉由技術人員慣用之方法投予(無論依賴性地抑或獨立地)，例如藉由經口、經腸、非經腸(例如肌肉內、腹膜內、靜脈內、經皮或皮下注射，或植入)、經鼻、經陰道、經直腸或表面投予途徑且可以含有適合於各投予途徑之習知無毒醫藥學上可接受之載劑、賦形劑及/或媒劑的適合劑量單位調配物單獨或一起調配。
無需進一步詳細描述，咸信熟習此項技術者可基於以上描述最大程度地利用本發明。以下實例應解釋為僅為例示性的且無論如何不以任何方式限制本揭露內容之其餘部分。
本文中所引用之所有公開案以全文引用的方式併入本文中。
較佳實施例之詳細說明
由於PD連接子不含組織蛋白酶切割部位，本發明之複合物在循環中以及在內體中穩定以延長其藥物動力學。該等複合物可經由內體再循環遞送至腫瘤間質中以有效地殺滅間質腫瘤細胞。此外，該等複合物典型地具有約7-8的高DLR(藥物/配體比)值且在併入多種極性藥物作為有效負載方面為多樣化的。且與具有不可裂解連接子之習知ADC相比，該等複合物之PD有效負載經由溶酶體中醯胺鍵或醣苷鍵之裂解而迅速釋放，由此實現改善的生體可用率及藥效學。在該等複合物之PD連接子中可包括一或多個任擇的二級靶向部分以改善PD連接子針對缺乏該配體所識別之抗原之癌細胞的活性。另外，在該等複合物之PD連接子中可包括一或多個任擇的親水性聚合物部分以改善PD連接子之溶解度及藥物動力學。
本發明之複合物中的連接子複合體在循環中穩定以限制在將該複合物遞送至腫瘤細胞之前由該藥劑引起的對健康組織之損害。在該複合物進入腫瘤細胞之後，連接子複合體防止重要有效負載在內體中的浪費性釋放，由此確保該複合物經由內體再循環遞送至腫瘤間質中。另外，其有助於有效負載在溶酶體中之最佳釋放。
大多數IgG及以IgG為主之複合物均可經由固有的內體再循環機制遞送至腫瘤間質中。
不受任何理論束縛，本發明之複合物係經由高滲透長滯留效應(EPR)被動地遞送至腫瘤組織中，隨後抗體配體與感興趣之腫瘤抗原之間發生特異性相互作用。在內化及轉運至內體之後，該複合物利用固有的內體再循環機制繞過TIFP造成之障壁並幫助藥物遞送至腫瘤間質中。因此，該複合物在內體中係穩定的且有效殺滅間質腫瘤細胞。
本發明之複合物各自含有配體部分及衍生自上述式I之化合物的部分。該配體經由在該配體中之官能基與式I之化合物中之L1之間形成的共價鍵鍵結至該化合物。該官能基係硫氫基、胺基、麩醯胺酸或甲醯基。例示性鍵係硫醚鍵(C-S，例如經由配體之半胱胺酸殘基中的SH與式I之化合物中L1之順丁烯二醯亞胺部分)及醯胺鍵(CONH，例如經由該配體之離胺酸或麩醯胺酸殘基)。配體中之硫醇基可由還原鏈間二硫化物殘基及/或含硫醇殘基獲得。
例示性配體包括單株抗體、聚乙二醇化單株抗體、Fc-融合蛋白白蛋白、聚乙二醇化白蛋白及白蛋白-融合蛋白。
該等抗體可為自體或同種異體抗體。術語「同種異體抗體」或「異體抗體」係指並非來自所討論之個體(例如癌症患者)，而是來自相同或不同物種且已工程改造成減少、降低或避免被識別為異種抗體(例如非自身抗體)的抗體。舉例而言，「同種異體抗體」可為包括免疫球蛋白G(IgG)或免疫球蛋白A(IgA)之人源化抗體。
在較佳實施例中，抗體係指定子類(例如IgG 1、IgG 2、IgG 3、IgG 4、IgA 1或IgA 2)之單株抗體。若使用抗體組合，則抗體可來自相同子類或來自不同子類。舉例而言，抗體可為IgG 1抗體。熟習此項技術者可獲得不同相對比例的不同子類之各種組合。在一些情況下，特定子類或不同子類之特定組合可在癌症治療或腫瘤大小減小方面特別有效。
正如所說明的，抗體結合至癌細胞之抗原。舉例而言，抗體可結合癌細胞表面上以至少10個；100個；1,000個；10,000個；100,000個；1,000,000個；2.5×10 6個；5×10 6個；或1×10 7個拷貝或更多拷貝之量存在的目標抗原。另外，該抗體可以比結合非癌細胞上之相應抗原高的親和力結合癌細胞或免疫細胞上之抗原。舉例而言，相較於識別非癌症或非免疫細胞上之相應野生型抗原，該抗體可優先識別在癌細胞或免疫細胞上發現的含有多形現象之抗原。在一些情況下，該抗體以比結合非癌症或非免疫細胞高的親合力結合癌細胞或免疫細胞。舉例而言，癌細胞或免疫細胞可表現較高密度之抗原，由此提供多價抗體與癌細胞或免疫細胞之較高親和力結合。
適合配體包括阿巴伏單抗(abagovomab)、阿巴西普(abatacept)(又稱為ORENCIA™)、阿昔單抗(abciximab)(又稱為REOPRO™、c7E3 Fab)、阿達木單抗(adalimumab)(又稱為HUMIRA™)、阿德木單抗(adecatumumab)、阿侖單抗(alemtuzumab)(又稱為CAMPATH™、MabCampath或Campath-1H)、阿妥莫單抗(altumomab)、阿非莫單抗(afelimomab)、馬安莫單抗(anatumomab mafenatox)、阿尼莫單抗(anetumumab)、安如珠單抗(anrukizumab)、阿泊珠單抗(apolizumab)、阿西莫單抗(arcitumomab)、阿塞珠單抗(aselizumab)、阿利珠單抗(atlizumab)、阿托木單抗(atorolimumab)、阿維魯單抗(Avelumab)、巴匹組單抗(bapineuzumab)、巴利昔單抗(basiliximab) (又稱為SIMULECT™)、巴維妥昔單抗(bavituximab)、貝妥莫單抗(bectumomab) (又稱為LYMPHOSCAN™)、貝利單抗(belimumab (又稱為LYMPHO-STAT-B™)、柏替木單抗(bertilimumab)、貝索單抗(besilesomab)、貝伐單抗(bevacizumab) (又稱為AVASTIN™)、比西單抗溴烯巴比妥(biciromab brallobarbital)、比伐單抗美登素(bivatuzumab mertansine)、坎帕斯(campath)、卡那單抗(canakinumab) (又稱為ACZ885)、坎妥珠單抗美登素(cantuzumab mertansine)、卡羅單抗(capromab) (又稱為PROSTASCINT™)、卡妥索單抗(catumaxomab) (又稱為REMOVAB™)、西利珠單抗(cedelizumab) (又稱為CIMZIA™)、聚乙二醇化賽妥珠單抗(certolizumab pegol)、西妥昔單抗(cetuximab) (又稱為ERBITUX™)、克立昔單抗(clenoliximab)、達西組單抗(dacetuzumab)、達昔單抗(dacliximab)、達利珠單抗(daclizumab) (又稱為ZENAPAX™)、德諾單抗(denosumab) (又稱為AMG 162)、地莫單抗(detumomab)、阿托度單抗(dorlimomab aritox)、得利西珠單抗(dorlixizumab)、頓圖木單抗(duntumumab)、度里姆單抗(durimulumab)、德木魯單抗(durmulumab)、依美昔單抗(ecromeximab)、依庫珠單抗(eculizumab) (又稱為SOLIRIS™)、埃巴單抗(edobacomab)、依決洛單抗(edrecolomab) (又稱為Mab17-1A、PANOREX™)、艾法珠單抗(efalizumab) (又稱為RAPTIVA™)、依夫單抗(efungumab) (又稱為MYCOGRAB™)、艾西莫單抗(elsilimomab)、聚乙二醇化恩莫單抗(enlimomab pegol)、西艾匹莫單抗(epitumomab cituxetan)、艾法珠單抗(efalizumab)、依匹莫單抗(epitumomab)、依帕珠單抗(epratuzumab)、厄利珠單抗(erlizumab)、厄妥索單抗(ertumaxomab) (又稱為REXOMUN™)、依那西普(etanercept) (又稱為ENBREL™)、埃達珠單抗(etaracizumab) (又稱為埃達組單抗(etaratuzumab)、VITAXIN™ ABEGRIN™)、艾韋單抗(exbivirumab)、法索單抗(fanolesomab) (又稱為NEUTROSPEC™)、法拉莫單抗(faralimomab)、非維珠單抗(felvizumab)、芳妥珠單抗(fontolizumab) (又稱為HUZAF™)、加利昔單抗(galiximab)、更汀蘆單抗(gantenerumab)、加維莫單抗(gavilimomab)(又稱為ABXCBL™)、吉妥單抗奧佐米星(gemtuzumab ozogamicin) (又稱為MYLOTARG™)、戈利木單抗(golimumab) (又稱為CNTO 148)、戈米西單抗(gomiliximab)、伊巴珠單抗(ibalizumab) (又稱為TNX-355)、替伊莫單抗(ibritumomab tiuxetan) (又稱為ZEVALIN™)、伊戈伏單抗(igovomab)、英西單抗(imciromab)、英利昔單抗(infliximab) (又稱為REMICADE™)、伊諾莫單抗(inolimomab)、奧英妥珠單抗(inotuzumab ozogamicin)、伊匹單抗(ipilimumab) (又稱為MDX-010、MDX-101)、伊妥木單抗(iratumumab)、凱利昔單抗(keliximab)、拉貝珠單抗(labetuzumab)、來馬索單抗(lemalesomab)、萊布利珠單抗(lebrilizumab)、樂德木單抗(lerdelimumab)、來沙木單抗(lexatumumab) (又稱為HGS-ETR2, ETR2-STO 1)、萊西珠單抗(lexitumumab)、利韋單抗(libivirumab)、林妥珠單抗(lintuzumab)、盧卡木單抗(lucatumumab)、魯昔單抗(lumiliximab)、馬帕木單抗(mapatumumab) (又稱為HGSETR1、TRM-1)、馬司莫單抗(maslimomab)、馬妥珠單抗(matuzumab) (又稱為EMD72000)、美泊珠單抗(mepolizumab) (又稱為BOSATRIA™)、美替木單抗(metelimumab)、米拉組單抗(milatuzumab)、明瑞莫單抗(minretumomab)、米妥莫單抗(mitumomab)、莫羅木單抗(morolimumab)、莫維組單抗(motavizumab) (又稱為NUMAX™)、莫羅單抗(muromonab) (又稱為OKT3)、他那可單抗(nacolomab tafenatox)、他那莫單抗(naptumomab estafenatox)、那他珠單抗(natalizumab) (又稱為TYSABRI™、ANTEGREN™)、奈巴庫單抗(nebacumab)、奈瑞莫單抗(nerelimomab)、尼妥組單抗(nimotuzumab) (又稱為THERACIM hR3™、THERA-CIM-hR3™、THERALOC™)、諾非妥莫單抗美噴坦(nofetumomab merpentan) (又稱為VERLUMA™)、奧瑞組單抗(ocrelizumab)、奧度莫單抗(odulimomab)、奧法木單抗(ofatumumab)、奧馬珠單抗(omalizumab) (又稱為XOLAIR™)、奧戈伏單抗(oregovomab) (又稱為OVAREX™)、奧昔組單抗(otelixizumab)、帕昔單抗(pagibaximab)、帕利珠單抗(palivizumab) (又稱為SYNAGIS™)、帕尼單抗(panitumumab) (又稱為ABX-EGF、VECTIBIX™)、帕考珠單抗(pascolizumab)、潘妥莫單抗(pemtumomab) (又稱為THERAGYN™)、帕妥株單抗(pertuzumab) (又稱為2C4、OMNITARG™)、培克珠單抗(pexelizumab)、平妥莫單抗(pintumomab)、普立昔單抗(priliximab)、普托木單抗(pritumumab)、蘭尼單抗(ranibizumab) (又稱為LUCENTIS™)、雷昔庫單抗(raxibacumab)、瑞加韋單抗(regavirumab)、瑞利珠單抗(reslizumab)、利妥昔單抗(rituximab) (又稱為RITUXAN™、MabTHERA™)、羅維珠單抗(rovelizumab)、盧利珠單抗(ruplizumab)、沙妥莫單抗(satumomab)、司韋單抗(sevirumab)、西羅珠單抗(sibrotuzumab)、西利珠單抗(siplizumab) (又稱為MEDI-507)、松妥珠單抗(sontuzumab)、司他蘆單抗(stamulumab) (又稱為MYO-029)、硫索單抗(sulesomab) (又稱為LEUKOSCAN™)、替珠單抗(tacatuzumab tetraxetan)、他度珠單抗(tadocizumab)、他利珠單抗(talizumab)、帕他莫單抗(taplitumomab paptox)、替非珠單抗(tefibazumab) (又稱為AUREXIS™)、阿替莫單抗(telimomab aritox)、替奈昔單抗(teneliximab)、替利組單抗(teplizumab)、曲美木單抗(ticilimumab)、托珠單抗(tocilizumab) (又稱為ACTEMRA™)、托珠單抗(toralizumab)、托西莫單抗(tositumomab)、曲妥珠單抗(trastuzumab) (又稱為HERCEPTIN™)、曲美木單抗(tremelimumab) (又稱為CP-675,206)、西莫白介素單抗(tucotuzumab celmoleukin)、妥韋單抗(tuvirumab)、烏珠單抗(urtoxazumab)、烏司奴單抗(ustekinumab) (又稱為CNTO 1275)、伐利昔單抗(vapaliximab)、維妥組單抗(veltuzumab)、維帕莫單抗(vepalimomab)、維西珠單抗(visilizumab) (又稱為NUVION™)、伏洛昔單抗(volociximab) (又稱為M200)、伏妥莫單抗(votumumab) (又稱為HUMASPECT™)、紮魯姆單抗(zalutumumab)、紮木單抗(zanolimumab) (又稱為HuMAX-CD4)、齊拉木單抗(ziralimumab)、阿佐莫單抗(zolimomab aritox)、達雷木單抗(daratumumab)、埃羅妥珠單抗(elotuxumab)、奧妥珠單抗(obintunzumab)、奧拉單抗(olaratumab)、本妥昔單抗維多汀(brentuximab vedotin)、阿柏西普(afibercept)、阿巴西普(abatacept)、貝拉西普(belatacept)、阿柏西普(afibercept)、依那西普(etanercept)、羅米司亭(romiplostim)、SBT-040 (US 2017/0158772中所列之序列。較佳地，該配體係賀癌平、白蛋白、賀疾妥(Perjeta)或其任何組合。
在較佳實施例中，複合物中配體與式I之化合物的莫耳比在1:1與1:20之間(例如1:1至1:16之間、1:1至1 :12之間、1:2至1 :12之間、1:2至1:10之間、1:4至1:10之間、1:2至1:8之間、1:6至1:8之間及1:5至1:12之間)。
式I之化合物亦在本發明之範圍內： I。
該化合物具有四種組分：配體連接子L1、M n1連接子複合體、藥物連接子L2及第一極性藥物部分PD1。任擇地，該化合物具有一至五個親水性聚合物部分HP、一至五個二級靶向部分ST或其任何組合。
該配體連接子含有能夠與配體反應之官能基。在本發明之複合物中，該配體連接子連接配體與M n1連接子複合體。
M n1連接子複合體含有1至15個由M表示之單體單元。M n1連接子複合體中之各單體單元M可彼此相同或不同。各M經由穩定醯胺鍵、穩定醣苷鍵、穩定酯鍵、穩定雙硫鍵、C-S鍵、C-O鍵、C-N鍵、脲部分(-NH-C(O)-NH-)或三唑部分共價鍵結至其相鄰M，由此使M n1複合體穩定，即，對酶裂解具有抗性。M n1可為線性寡聚物、具有四個或多於四個單體單元之分支寡聚物、環狀寡聚物或馬賽克寡聚物(mosaic oligomer)，該馬賽克寡聚物係具有一或多個環成員之環狀寡聚物，該一或多個環成員具有一或多個取代基，諸如單體單元M或者含有二至十個單體單元M之線性、分支、環狀或馬賽克寡聚物。M n1複合體之各單體以殘基形式存在。
M在每次出現時可獨立地選自： (1) 天然或非天然胺基酸，較佳為具有二級胺基之胺基酸(諸如N-甲基-L-丙胺酸；N-甲基-L-絲胺酸；N2-甲基-L-天冬醯胺、N-(4-羥基苯基)甘胺酸、亞胺基二乙酸、N-(2-胺基乙基)甘胺酸、肌胺酸)或來自以下胺基酸組之胺基酸：(a)環狀α-胺基酸(例如1-胺基環丙烷-1-甲酸、環白胺酸、3-胺基四氫呋喃-3-甲酸、4-胺基四氫-呋喃-3-甲酸、4-胺基-四氫-哌喃-4-甲酸)；(b)環狀β-胺基酸(亦即，2-胺基-環丙烷甲酸及4-胺基四氫-3-噻吩甲酸)；及(c)環狀二級胺基酸，諸如氮呾-2-甲酸、六氫菸鹼酸(pipecolic acid)、脯胺酸、4-胺基脯胺酸、4-羥基脯胺酸、4-㗁唑啶甲酸、4-疊氮基脯胺酸、L-反-吡咯啶-2,4-二甲酸、吡咯啶-2,5-二甲酸、哌啶-2,6-二甲酸、2,4-順-哌啶-2,4-二甲酸、哌啶-2,3-二甲酸、咪唑啶-2-甲酸、3-𠰌啉甲酸、哌啶甲酸、3-(甲基胺基)四氫呋喃-3-甲酸、3-((甲基胺基)甲基)氮呾-1-甲酸、3-((甲基胺基)甲基)哌啶-1-甲酸、2-((甲基胺基)甲基)吡咯啶-1-甲酸、3-((甲基胺基)甲基)吡咯啶-1-甲酸； (2) 3,6-雙(4-胺基-丁基)-哌𠯤-2,5-二酮(CDK)及其衍生物。應注意，3,6-雙(4-胺基-丁基)-哌𠯤-2,5-二酮可被視為環狀二肽(亦即，環狀二-離胺酸)； (3) 單醣； (4) 雙官能交聯劑或多官能交聯劑 (5) 聚胺，其中至少一個胺基為二級胺基或三級胺基；或 (6) 二胺基-二羧酸。
在一個較佳實施例中，M n1連接子複合體含有至少一個衍生自以下之單體單元：3,6-雙(4-胺基-丁基)-哌𠯤-2,5-二酮、環肽或二胺基二羧酸(例如2,5-二胺基苯-1,4-二甲酸)。
藥物連接子L2將連接M n1連接子複合體與第一極性藥物部分PD1。L2與PD1之間的鍵係醯胺鍵或醣苷鍵。不受任何理論束縛，L2與PD1之間的鍵在患者之循環及內體中足夠穩定，但被溶酶體酶迅速裂解而釋放PD1，由此消除習知具有不可裂解連接子之習知ADC引起抗體降解而釋放活性代謝物之緩慢過程。
L2可為含有-C1-C10伸烷基-或-C0-C10伸烷基-(CH2-CH2-O)g-C0-C10伸烷基-之雙官能交聯劑，其中g係1-10之整數。
極性藥物PD1係藥劑中之生物活性成分，其在25℃下以至少1比10000、1比1000、1比100、1比30、1比10或1比1之極性藥物與水(重量比重量)的比率溶解於水中。疏水性藥物可藉由引入一或多個極性、親水性或離子部分，例如-NH 2、-OH及COOH進行修飾而成為極性藥物。疏水性藥物之非限制性實例包括類美登素、奧瑞他汀、卡奇黴素、倍癌黴素、吡咯并苯并二氮呯、拉帕替尼(lapatinib)及免疫佐劑(例如TLR7/8促效劑1，CAS編號：1620278-72-9)；T785(Ackerman等人, 2021)及diABZI-C2-NH2(STING促效劑，CAS編號：2137975-93-8)。
本發明之化合物可含有第二極性藥物部分(PD2)，其經由L2或與如上文所描述之L2類似的藥物連接子連接至連接子複合體M n1。
如上所指出，該化合物亦任擇地含有一或多個二級靶向部分及一或多個親水性聚合物部分。
本發明之一或多個實施例詳細闡述於以下說明中。本發明之其他特徵、目標及優勢將自本說明書及申請專利範圍顯而易見。
無需進一步詳細描述，咸信熟習此項技術者可基於以上描述最大程度地利用本發明。以下實例應解釋為僅為例示性的且無論如何不以任何方式限制本揭露內容之其餘部分。 實例
使用以下試劑、細胞株及動物(1)製備本發明之式(I)之化合物及複合物以及(2)基於細胞之分析及動物研究。其供應商以及其CAS登記號或目錄號(Cat No)提供於下。
TLR7/8促效劑1二鹽酸鹽(Ag)，MedChemExpress，CAS編號1620278-72-9；Nα-Fmoc-Nβ-Boc-L-2,3-二胺基丙酸(Fmoc-Dap(Boc)-OH)，Tokyo Chemical Industry有限公司，CAS編號162558-25-0；HATU，Combi-Blocks，CAS編號148893-10-1；N-乙基二異丙胺(DIPEA或DIEA)，Alfa Aesar，CAS編號7087-68-5；DMSO，Sigma-Aldrich；乙腈(ACN)，J.T.Baker；(2R,4S)-1-Fmoc-4-Boc-胺基吡咯啶-2-甲酸(Fmoc-4AP(Boc)-OH)，Combi-Blocks，CAS編號1820570-42-0；雙PEG6-NHS酯，Broadpharm，CAS編號1526718-98-8；HEPES，Sigma-Aldrich，CAS編號7365-45-9；氫氧化鈉(NaOH)，Sigma-Aldrich；(2R,4S)-1-Boc-4-胺基吡咯啶-2-甲酸(NH2-4AP(Boc)-OH)，AK Scientific，CAS編號132622-78-7；三氟乙酸，Sigma-Aldrich，CAS編號76-05-1；m-PEG12-NHS酯，Broadpharm，CAS編號174569-25-6；(2R,4S)-1-Fmoc-4-Boc-胺基吡咯啶-2-甲酸(Boc-4AP(Fmoc)-OH)，AK Scientific，CAS編號1253791-18-2；1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺(EDC)鹽酸鹽，Sigma-Aldrich，CAS編號25952-53-8；N-羥基琥珀醯亞胺，Sigma-Aldrich，CAS編號6066-82-6；3,6-雙(4-胺基丁基)-2,5-哌𠯤二酮(CDK)，Broadpharm，CAS編號23409-32-7；𠰌啉，Alfa Aesar；Mal-PEG2-酸，Broadpharm，CAS編號1374666-32-6；賀癌平(曲妥珠單抗)，Roche，目錄號000961-1-CTN-05；賀疾妥，Roche，Cas編號H0536B33；DL-二硫蘇糖醇(DTT)，VWR LIFE SCIENCE，CAS編號3483-12-3；SephadexTM G25 Fine Cytiva；SephadexTM G-100，Cytiva；D-脯胺酸，AK Scientific，CAS編號344-25-2；m-PEG24-NHS酯，Broadpharm，CAS編號2395839-96-8；2,5-二胺基對苯二甲酸(H2DATA)，Ambeed，CAS編號945-30-2；Boc-Sar-Osu，Combi-Blocks，CAS編號80621-90-5；HOBT，Sigma-Aldrich，CAS編號123333-53-9；mPEG12-胺，Broadpharm，CAS編號1977493-48-3；三乙胺，Sigma-Aldrich，CAS編號121-44-8；酸-PEG5-NHS，Broadpharm，CAS編號1343476-41-4；N,N-二甲基甲醯胺(DMF)，Sigma-Aldrich，CAS編號68-12-2；二(N-琥珀醯亞胺基)己二酸酯(DSA)，Broadpharm，CAS編號59156-70-6；蔗糖，VWR LIFE SCIENCE，CAS編號57-50-1；六水合琥珀酸二鈉，Sigma-Aldrich，CAS編號6106-21-4；Tween-20，VWR LIFE SCIENCE，CAS編號9005-64-5；m-PEG24-胺，Broadpharm，CAS編號32130-27-1；凝膠過濾標準品，Bio-Rad，目錄號151-1901；美登素(DM1)，Cyaman，CAS: 139504-50-0；N-Me-L-Ala-美登醇，Boc Sciences，CAS: 77668-69-0；單甲基奧瑞他汀E (MMAE)，Long Tail Intl. (Taiwan)，CAS: 474645-27-7；DM4，MedChemExpress，CAS: 796073-69-3；SN38，MedChemExpress，CAS: 86639-52-3；拉帕替尼，MedChemExpress，CAS: 231277-92-2；Kadcyla，Roche，NDC 50242-088-01；Enhertu，Daiichi-Sankyo AstraZeneca，NDC 65597-406-01；(2S)-2-胺基-3-{[(三級丁氧基)羰基]胺基}丙酸[NH2-Dap(Boc)-OH]，Combi-Block，CAS: 74536-29-1；(2R,4S)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)吡咯啶-2-甲酸(Boc-4AP(NH2)-OH)，Ambeed，CAS: 1279030-48-6；L-天冬醯胺，Combi-Block，CAS: 70-47-3；L-半胱胺酸鹽酸鹽單水合物，Sigma，CAS: 7048-04-6；(S)-3-胺基-2-(三級丁氧基羰基胺基)丙酸(Boc-Dap-OH)，Tokyo Chemical Industry有限公司，CAS: 73259-81-1；N α-(三級丁氧基羰基)-L-離胺酸(Boc-Lys-OH)，Tokyo Chemical Industry有限公司，CAS: 13734-28-6；絲胺酸，Tokyo Chemical Industry有限公司，CAS: 56-45-1；3-巰基乳酸，Toronto Research Chemicals，CAS: 2614-83-7；H-Lys(Boc)-OH，Combi-Block，CAS: 2418-95-3；L-(+)-青黴胺(Penicillamine)，Santa Cruz，CAS: 1113-41-3；L-5-胺基-2-N-Boc-胺基-戊酸，Santa Cruz，CAS: 21887-64-9；1-[(三級丁氧基羰基)-胺基]環丙烷甲酸，Combi-Block，CAS: 88950-64-5；順丁烯二醯亞胺基己酸，Combi-Block，55750-53-3；N-琥珀醯亞胺基順丁烯二醯亞胺基乙酸酯(AMAS)，Tokyo Chemical Industry有限公司，CAS: 55750-61-3；N-琥珀醯亞胺基3-順丁烯二醯亞胺丙酸酯(BMPS)，Tokyo Chemical Industry有限公司，CAS: 55750-62-4；1,2-雙(順丁烯二醯亞胺基)乙烷，Tokyo Chemical Industry有限公司，CAS: 5132-30-9；二(N-琥珀醯亞胺基)己二酸酯(DSA)；Broadpharm；CAS: 59156-70-6；N-琥珀醯亞胺基4-(N-順丁烯二醯亞胺基甲基)環己烷甲酸酯(SMCC)，Tokyo Chemical Industry有限公司，CAS: 64987-85-5；N-琥珀醯亞胺基3-(2-吡啶基二硫基)丙酸酯(SPDP)，Tokyo Chemical Industry有限公司，CAS: 68181-17-9；碘-PEG3-甲酸，Lumiprobe，Cat.2063-1g；N-Fmoc-3-碘-L-丙胺酸甲基[Fmoc-Ala(碘)-Ome]，Ambeed，CAS: 156017-42-4；1,2-雙(2-碘乙氧基)乙烷，Combi-Blocks，36839-55-1；4-(2-Boc-胺基乙基)哌啶，AK Scientific公司，CAS:165528-81-4)；t-Boc-N-醯胺基-PEG6-酸，Broadpharm，CAS: 882847-13-4；胺基-PEG8-醇，Broadpharm，CAS: 352439-37-3；m-peg8-胺，Broadpharm，CAS: 869718-81-0；胺基-PEG8-酸，Broadpharm，CAS: 756526-04-2；胺基-peg24-酸，Broadpharm，CAS: 196936-04-6；葡萄糖-PEG-NH2，RuixiBiotech有限公司，目錄號R-CP-060；2-(4-(2,5-二側氧基-2H-吡咯-1(5H)-基)苯基)乙酸(4-順丁烯二醯亞胺基苯基乙酸)，Broadpharm，CAS: 91574-45-7；參(2-羧基乙基)膦(TCEP)，GoldBio，CAS: 51805-45-9；無水二氯甲烷(DCM)，Sigma，CAS: 75-09-2；無水吡啶，Sigma，CAS: 110-86-1；N,N'-二環己基-碳化二亞胺(DCC)，Tokyo Chemical Industry有限公司，CAS: 538-75-0；4-二甲基-胺基吡啶(DMAP)，Tokyo Chemical Industry有限公司，CAS: 1122-58-3；人類白蛋白20%，CSL Behring，ATC編碼：B05A A01；1-(4-胺基丁基)-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(T785)，Amadis Chemical，CAS編號313350-31-1；胞壁酸，Toronto Research Chemicals，CAS: 1114-41-6；96孔盤，Nunc，Thermo Fisher，目錄號167008；氯化鈉，Sigma，目錄號S3014；氯化鉀，Amresco；目錄號395；無水磷酸氫二鈉，Amresco，目錄號404；磷酸二氫鉀，Sigma，目錄號795488；碳酸鈉，Sigma，目錄號497198；碳酸氫鈉，Sigma，目錄號144568；牛血清白蛋白，Gibco，目錄號30063721；脫水乙二胺四乙酸二鈉鹽，Sigma，目錄號E4884；檸檬酸，Merck，目錄號77929；DM1單株抗體(A4G2)，Invitrogen，目錄號MA5-42527；Her2/ERBB2蛋白質，人類重組(ECD)，SinoBiological，目錄號10004-HCCH；生物素化Her2/ERBB2蛋白質，人類重組(ECD)，SinoBiological，目錄號10004-HCCH-B；山羊F(ab')2抗人類IgG Fc (HRP)，Abcam，目錄號ab98530；過氧化酶複合之鏈黴抗生物素蛋白，Jackson Immunoresearch，目錄號16030084；3,3,5,5-四甲基聯苯胺，Sigma，目錄號860336-5G；嘌呤黴素，Sigma，目錄號P8833；DMEM (GIBCO，目錄號12100-061；熱滅活胎牛血清(FBS)，GIBCO，目錄號10437-028；RPMI-1640，GIBCO，目錄號31800-022；McCoy's 5A，Sigma，目錄號M4892；IMDM，GIBCO，目錄號12200-036；M199，GIBCO，目錄號31100-035；肝素，Sigma，目錄號H3149；ECGS，Sigma，目錄號02-102；及CellTiter-Glo®發光細胞生存力分析，Promega，目錄號G7571。
乳癌細胞株MDA-MB-231及SK-BR-3、胃癌細胞株NCI-N87、卵巢癌細胞株SK-OV-3及胰臟癌細胞株Capan-1係購自ATCC。乳癌細胞株JIMT-1係購自德國微生物菌種保藏中心(Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen，DSMZ；德國)。胃癌細胞株MKN45係購自RIKEN。人類臍靜脈內皮細胞株(HUVAC)係購自BCRC(臺灣新竹市生物資源保存及研究中心(Bioresource Collection and Research Center, Hsinchu City, Taiwan))。
藉由慢病毒載體介導之基因轉導產生過度表現人類MDR1之NCI-N87 (NCI-N87-hMDR1)細胞株。簡言之，慢病毒轉移載體含有hEF1α啟動子驅動之hMDR1編碼序列(CDS)及hPGK啟動子驅動之EGFP-IRES-Puro雙順反子卡匣。使用第二代慢病毒系統將慢病毒包裝於293T細胞株中。轉染之後，選擇穩定NCI-N87-hMDR1並將其維持在含有嘌呤黴素(0.55 µg/mL)之RPMI-1640培養基中。JIMT-1及MDA-MB-231係維持在補充有10%熱滅活胎牛血清(FBS)之DMEM中。NCI-N87、NCI-N87-hMDR1、SK-OV-3及MKN45係維持在補充有10%熱滅活FBS之RPMI-1640中。SK-BR-3係維持在補充有10%熱滅活FBS之McCoy's 5A中。Capan-1係維持在補充有20%熱滅活FBS之IMDM中。HUVAC係維持在補充有25 U/mL肝素、30 µg/mL ECGS及10%熱滅活FBS之M199中。所有細胞株均在37℃及5% CO2氛圍下培養。
BALB/c小鼠、BALB/c裸小鼠及史泊格-多利(Sprague-Dawley，SD)大鼠係自BioLASCO有限公司(臺灣)獲得。作為比較樣品之T-DM1(曲妥珠單抗美坦新(Trastuzumab emtansine))係購自Shanghai Union Dispensary公司(臺灣臺北)。所有動物研究均根據動物照護與使用委員會(Animal Care and Use Committee)在由實驗動物照護評估及評審協會(Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care)認可之設施中進行。
使用以下管柱進行分離及分析：ACE® 5 C18-300，250 × 4.6 mm，Advanced Chromatography Technologies有限公司(ACE)，目錄號ACE-221-2546；ACE® 5 phenyl-300 250 × 4.6 mm，ACE，目錄號ACE-225-2546；Zorbax® RRHD Eclipse Plus C18，95Å，2.1 × 50 mm，1.8 µm，Agilent，目錄號959757-902；ENrich™ SEC 650 10 × 300管柱，Biorad，目錄號7801650，系列號100601。
使用以下儀器進行製備或分析：高效液相層析(HPLC)，Agilent，型號：1260 Infinity®II；6545 Q-TOF LC/MS，Agilent，型號：G6545B；ThermoCell Mixing Block，Bioer，型號：MB-101；岐管式凍乾儀，Uniss，型號：FDM-5； ImageXpress ® Micro成像系統，Molecular Devices。
以下製備之化合物係使用質譜儀(裝備有EclipsePlusC18 RRHD 1.8μm 2.1 × 50 mm之Agilent 6545 Q-TOF LC/MS)表徵及確認。
遵循若干程序製備本發明之例示性化合物及複合物。其將在以下簡要描述。 用於移除Boc 保護基之方案 (Boc 方案 )
藉由將化合物與70%三氟乙酸(TFA)一起在室溫下溫育1小時來移除該化合物之三級丁氧基羰基(Boc)保護基(產率為約90-99%)。將所需產物藉由HPLC (利用ACE C18-300管柱之Agilent® 1260 Infinity® II)純化，隨後用歧管式凍乾儀(-80℃，10毫托)凍乾。 用於移除TRT 保護基之方案 (TRT 方案 )
藉由將化合物與80-90%三氟乙酸(TFA)一起在室溫下溫育1小時來移除該化合物之三苯甲基(TRT)保護基(產率為約90-99%)。將所需產物藉由HPLC (利用ACE C18-300管柱之Agilent® 1260 Infinity® II)純化，隨後用歧管式凍乾儀(-80℃，10毫托)凍乾。 用於移除Fmoc 保護基之方案 (Fmoc 方案 )
藉由將化合物與12.5%𠰌啉一起在室溫下溫育20分鐘來移除該化合物之茀基甲氧基羰基(Fmoc)保護基(產率為約90-99%)。將所需產物藉由HPLC (利用ACE® C18-300管柱之Agilent® 1260 Infinity® II)純化，隨後用歧管式凍乾儀(-80℃，10毫托)凍乾。 使用NHS 試劑形成醯胺鍵之方案 (NHS 方案 ) ：
在室溫下，在攪拌下將N-羥基琥珀醯亞胺(NHS，65 mM)與含有胺(130 mM)、80%二甲亞碸(DMSO)及pH8-9的20%之50 mM HEPES緩衝液(50 mM HEPES、100 mM NaCl及1 mM乙二胺四乙酸，亦即EDTA)之溶液混合2小時(產率為約60-95%)。將所需產物藉由HPLC (利用ACE® C18-300管柱之Agilent® 1260 Infinity® II)純化，隨後用歧管式凍乾儀(-80℃，10毫托)凍乾。 使用HATU 試劑形成醯胺鍵之方案 (HATU 方案 )
在室溫下，將胺(51.8 mM)與羧酸(104 mM)、HATU (207 mM)及DIEA (518 mM)一起於DMF中攪拌1小時(產率為約40-90%)。將所需產物藉由HPLC (利用ACE® C18-300管柱之Agilent® 1260 Infinity® II)純化，隨後用歧管式凍乾儀(-80℃，10毫托)凍乾。 使用碳酸銫試劑形成C -S 鍵之方案 (C -S 鍵方案 )
在室溫下，將硫醇(6.82 mM)與碘化合物(20.5 mM)、參(2-羧基乙基)-膦(TCEP，3.41 mM)及碳酸銫(54.6 mM)一起於含有60% DMSO及40%之50 mM磷酸鉀緩衝液(30.8 mM K 2HPO 4、19.2 mM KH2PO4、100 mM NaCl及1 mM EDTA；pH7)之溶液中攪拌2小時(產率為約50-90%)。將所需產物藉由HPLC (利用ACE C18-300管柱之Agilent® 1260 Infinity II)純化，隨後用歧管式凍乾儀(-80℃，10毫托)凍乾。 關於順丁烯二醯亞胺- 硫醇反應之方案( 順丁烯二醯亞胺- 硫醇方案)
在室溫下，將順丁烯二醯亞胺(35.4 mM)與硫醇(29.5 mM)一起於含有80% DMSO及20%之50 mM HEPES緩衝液(pH 6.5)之溶液中一起攪拌1小時(產率為約90-99%)。將所需產物藉由HPLC (利用ACE® C18-300管柱之Agilent® 1260 Infinity® II)純化，隨後用歧管式凍乾儀(-80℃，10毫托)凍乾。 有關NHS 酯合成之方案 (NHS 酯方案 )
在室溫下，將羧酸(65.4 mM)與NHS(654 mM)及EDC(654 mM)一起於DMSO中攪拌1小時(產率為約65-95%)。將所需產物藉由HPLC (利用ACE® C18-300管柱之Agilent® 1260 Infinity® II)純化，隨後用歧管式凍乾儀(-80℃，10毫托)凍乾。 有關SPDP - 硫醇反應之方案 (SPDP - 硫醇方案 )
在室溫下，將SPDP(11.4 mM)與硫醇(5.69 mM)一起於含有80% DMSO及20%之50 mM HEPES緩衝液(50 mM HEPES、100 mM NaCl及1 mM EDTA，具有8之pH值)之溶液中攪拌1小時(產率為約90-99%)。將所需產物藉由HPLC (利用ACE® C18-300管柱之Agilent® 1260 Infinity® II)純化，隨後用歧管式凍乾儀(-80℃，10毫托)凍乾。 有關Boc - 羥基反應之方案 (Boc - 羥基方案 )
在室溫下，將含羥基(OH)之化合物(11.9 mM)與Boc 2O(15.6 mM)及吡啶(35.7 mM)一起於含有50% DMSO及50% DCM之溶液中攪拌隔夜(產率為約95-99%)。將所需產物藉由HPLC (利用ACE® C18-300管柱之Agilent® 1260 Infinity® II)純化，隨後用歧管式凍乾儀(-80℃，10毫托)凍乾。 使用DCC /DMAP 試劑形成酯鍵之方案 (DCC /DMAP 方案 )
在室溫下，將含OH化合物(9.22 mM)與羧酸(18.4 mM)以及DCC(36.9 mM)及DMAP(44.4 mM)一起於含有50% DMSO及50% DCM之溶液中攪拌隔夜(產率為約55-75%)。將所需產物藉由HPLC (利用ACE® C18-300管柱之Agilent® 1260 Infinity® II)純化，隨後用歧管式凍乾儀(-80℃，10毫托)凍乾。 用於聚肌胺酸合成之方案 (SPPS 方案)
將Fmoc-Sar-OH(1.5 eq.)添加至膨脹的2-氯三苯甲基氯(CTC)樹脂中並在室溫下攪拌隔夜。將CTC樹脂用DMF洗滌三次且再用DCM洗滌三次。隨後，藉由封端溶液(DCM:MeOH:DIEA=17:2:1)對CTC樹脂封端。在室溫下，利用Fmoc脫保護溶液(DCM:DMF:𠰌啉=1:1:2)移除Fmoc，持續1小時。對於肽偶合，使用1 eq.HATU活化1 eq Fmoc-Sar-OH，隨後添加4 eq.的DIEA。將偶合反應在室溫下溫育4小時。重複偶合步驟，直至製備出所需多肽，在用含有20%六氟異丙醇於DCM中之溶液裂解之後，將該多肽自樹脂溶離。 抗體 - 極性藥物複合物 (APDC ) 之製備 及表徵
在0.5 mL含有二水合α,α-海藻糖(9.09 mg)、L-組胺酸鹽酸鹽(0.225mg)、L-組胺酸(0.145mg)、聚山梨醇酯20(0.04mg)及DTT(0.83mg)之緩衝液中還原IgG1抗體(Ab)分子(10 mg)。在將抗體所有可接近之雙硫鍵還原之後，使用G-25凝膠過濾管柱將緩衝液更換為50 mM HEPES緩衝液(50 mM HEPES，pH 8，含有100 mM NaCl及1 mM EDTA)以移除過量DTT(產率為約80-90%)。將連接子-PD(相對於該抗體之莫耳量為5-10莫耳當量)溶解於DMSO中並添加至上文所製備之抗體溶液中，由此獲得含有2 mg/mL Ab、70%之50 mM HEPES緩衝液(50 mM HEPES pH 7.4、100 mM NaCl及1 mM EDTA)及30% DMSO之溶液。在室溫下執行複合反應，持續1-2小時。隨後，經由 G-100 凝膠過濾管柱將緩衝液更換為pH 5的含有6%蔗糖、10 mM六水合琥珀酸二鈉及0.02% Tween 20之溶液。藉由BCA蛋白質分析，使用賀癌平作為標準品，測定所得複合物溶液中之蛋白質濃度(產率為約80-90%)。利用HPLC測定藥物/抗體比率(DAR)。簡言之，藉由螢光偵測器(FLD；在274 nm激發且在310 nm發射)測定抗體之重量，而藉由特定UV吸光度波長，例如對於DM1為254 nm，測定藥物之重量。對照(抗體溶液)之FLD及UV吸光度用作參照。全抗體質譜提供用於評估APDC之藥物負載均勻性及DAR的另一種方法。使用尺寸排阻管柱(SEC)分析抗體聚集物。將由此純化之APDC凍乾並在-20℃下儲存待用。如所描述(Ackerman等人, 2021)製備Bolt之免疫刺激ADC，即Her-T785，作為比較樣品。 AlbPDC 之製備及表徵
以與上文所描述類似的方式，將白蛋白(0.74 mM)與TCEP (0.74 mM)一起在37℃下溫育10分鐘，並藉由G-25凝膠過濾管柱將緩衝液更換為50 mM HEPES緩衝液(50 mM HEPES pH 8，含有100 mM NaCl及1 mM EDTA)以移除過量DTT(產率為約80-90%)。將本發明之連接子-PD(相對於白蛋白為2莫耳當量)溶解於DMSO中並添加至白蛋白緩衝液中，由此獲得含有2 mg/mL白蛋白、70% HEPES緩衝液(50 mM HEPES pH 7.4、100 mM NaCl及1 mM EDTA)及30% DMSO之溶液。在室溫下執行複合反應，持續1-2小時。經由G-100凝膠過濾管柱將緩衝液更換為含有6%蔗糖、10 mM六水合琥珀酸二鈉及0.02% Tween 20(pH5)之另一種緩衝液。藉由BCA蛋白質分析，使用人類血清白蛋白作為標準品，測定由此製備之複合物溶液中之蛋白質濃度(產率為約80-90%)。藉由HPLC測定藥物/白蛋白比率。簡言之，藉由FLD(在274 nm激發且在310 nm發射)測定白蛋白之量且使用UV光譜儀在254下測定藥物之重量。使用人類血清白蛋白作為FLD及UV分析中之標準品。 極性藥物或極性藥物中間物之製備方案I
極性藥物C-PD1，亦即DM1-AMAS-Dap(NH2)-OH係如以上方案I中所描繪來製備，具有三個步驟：(i)遵循以上描述之NHS方案，在(2S)-2-胺基-3-{[(三級丁氧基)羰基]胺基}丙酸[NH2-Dap(Boc)-OH]與N-琥珀醯亞胺基順丁烯二醯亞胺基乙酸酯(AMAS)之間形成醯胺鍵；(ii)遵循亦於上文描述之Boc方案，移除AMAS-Dap(Boc)-OH之Boc保護基；及(iii)遵循亦如以上描述之順丁烯二醯亞胺-硫醇方案，在AMAS-Dap(Boc)-OH與DM1之間形成順丁烯二醯亞胺-S鍵。 方案II
類似地，極性藥物C-PD2，亦即DM1-AMAS-Ser-OH係如以上方案II中所描繪來製備：(i)使用NHS方案，在絲胺酸與N-琥珀醯亞胺基順丁烯二醯亞胺基乙酸酯(AMAS)之間形成醯胺鍵；及(ii)使用順丁烯二醯亞胺-硫醇方案在AMAS-Ser-OH與DM1之間形成順丁烯二醯亞胺-S鍵。 方案III
極性藥物C-PD3，亦即DM1-AMAS-Lys(NH2)-OH係如以上方案III中所描繪來製備：(i)使用NHS方案，在H-Lys(Boc)-OH與N-琥珀醯亞胺基順丁烯二醯亞胺基乙酸酯(AMAS)之間形成醯胺鍵；(ii)使用Boc方案，移除AMAS-Lys(Boc)-OH之Boc保護基；及(iii)使用順丁烯二醯亞胺-硫醇方案在AMAS-Lys(NH2)-OH與DM1之間形成順丁烯二醯亞胺-S鍵。 方案IV
極性藥物C-PD4，亦即DM1-AMAS-Asn-OH係如以上方案IV中所描繪來製備：(i)使用NHS方案，L-天冬醯胺與N-琥珀醯亞胺基順丁烯二醯亞胺基乙酸酯(AMAS)；及(ii)使用順丁烯二醯亞胺-硫醇方案在AMAS-Asn-OH與DM1之間形成順丁烯二醯亞胺-S鍵。 方案V
極性藥物C-PD5，亦即DM1-PEG3-絲胺酸係如以上方案V中所描繪來製備：(i)使用碳酸銫方案，在DM1與碘-PEG3-羧酸之間形成C-S鍵；(ii)使用NHS酯方案製備DM1-PEG3-羧酸之NHS酯；及(iii)遵循NHS方案，在DM1-PEG3-NHS與絲胺酸之間形成醯胺鍵。 方案VI
極性藥物C-PD6，亦即Ala(DM1)-Ome係如以上方案VI中所描繪來製備：(i)使用碳酸銫方案，在DM1與N-Fmoc-3-碘-L-丙胺酸甲基(Fmoc-Ala(碘)-Ome)之間形成C-S鍵；及(ii)遵循Fmoc方案移除Fmoc-Ala(DM1)-Ome之Fmoc保護基。 方案VII
極性藥物C-PD7，亦即半胱胺酸-PEG2-DM1係如以上方案VII中所描繪來製備：(i)使用碳酸銫方案，在DM1與1,2-雙(2-碘代乙氧基)乙烷之間形成C-S鍵；及(ii)使用碳酸銫方案，在DM1-[1,2-雙(2-碘代乙氧基)乙烷]與半胱胺酸之間形成C-S鍵。 方案VIII
極性藥物C-PD8，亦即3-巰基乳酸-PEG2-DM1係如以上方案VIII中所描繪來製備：(i)使用碳酸銫方案，在DM1與1,2-雙(2-碘代乙氧基)乙烷之間形成C-S鍵；及(ii)使用碳酸銫方案，在DM1-[1,2-雙(2-碘代乙氧基)乙烷]與3-巰基乳酸之間形成C-S鍵。 方案IX
極性藥物C-PD9，亦即N-Me-L-Ala-美登醇-PEG3-3-巰基乳酸係如以上方案IX中所描繪來製備：(i)遵循HATU方案，在N-Me-L-Ala-美登醇與碘-PEG3-酸之間形成醯胺鍵；及(ii)使用碳酸銫方案，在N-Me-L-Ala-美登醇-PEG3-碘基與3-巰基乳酸之間形成C-S鍵。 方案X
極性藥物C-PD10，亦即MMAE-PEG4-NHS係如以上方案X中所描繪，遵循HATU方案製備以在單甲基奧瑞他汀E (MMAE)與酸-PEG4-NHS酯之間形成醯胺鍵。 方案XI
極性藥物C-PD11，亦即MMAE-PEG3-半胱胺酸係如以上方案XI中所描繪來製備：(i)遵循HATU方案，在單甲基奧瑞他汀E (MMAE)與碘-PEG3-酸之間形成醯胺鍵；及(ii)使用碳酸銫方案在MMAE-PEG3-碘基與半胱胺酸之間形成C-S鍵。 方案XII
極性藥物C-PD12，亦即MMAE-PEG3-3-巰基乳酸係如以上方案XII中所描繪來製備：(i)遵循HATU方案，在單甲基奧瑞他汀E (MMAE)與碘-PEG3-酸之間形成醯胺鍵；及(ii)使用碳酸銫方案，在MMAE-PEG3-碘基與3-巰基乳酸之間形成C-S鍵。 方案XIII
極性藥物C-PD13，亦即CPCA-SN38係如以上方案XIII中所描繪，分三個步驟製備：(i)遵循Boc保護方案，用Boc對SN-38之10-羥基進行保護；(ii)遵循碳酸酯方案，在Boc-10-羥基-SN38與1-[(三級丁氧基羰基)-胺基]環丙烷甲酸之間形成酯鍵(Boc-CPCA-OH)；及(iii)使用Boc方案移除Boc-CPCA-Boc-10-羥基-SN38之Boc保護基。 方案XIV
極性藥物C-PD14，亦即DM1-AMAS-胞壁酸係如以上方案XIV中所描繪來製備：(i)遵循NHS方案，在胞壁酸與N-琥珀醯亞胺基順丁烯二醯亞胺基乙酸酯(AMAS)之間形成醯胺鍵；及(ii)遵循順丁烯二醯亞胺-硫醇方案在AMAS-胞壁酸與DM1之間形成順丁烯二醯亞胺-S鍵。 方案XV
極性藥物C-PD15，亦即DM1-SMCC-Lys(NH2)-OH係如以上方案XV中所描繪來製備：(i)遵循NHS方案，在H-Lys(Boc)-OH與N-琥珀醯亞胺基4-(N-順丁烯二醯亞胺基甲基)環己烷甲酸酯(SMCC)之間形成醯胺鍵；(ii)遵循Boc方案，移除SMCC-Lys(Boc)-OH之Boc保護基；及(iii)遵循順丁烯二醯亞胺-硫醇方案在SMCC-Lys(NH2)-OH與DM1之間形成順丁烯二醯亞胺-S鍵。 方案XVI 。
極性藥物C-PD16，亦即Lys(DM1-SMCC)-OH係如以上方案XVI中所描繪來製備：(i)遵循NHS方案，在Boc-Lys-OH與n-琥珀醯亞胺基4-(N-順丁烯二醯亞胺基甲基)環己烷甲酸酯(SMCC)之間形成醯胺鍵；(ii)遵循Boc方案，移除Boc-Lys(SMCC)-OH之Boc保護基；及(iii)遵循順丁烯二醯亞胺-硫醇方案在Lys(SMCC)-OH與DM1之間形成順丁烯二醯亞胺-S鍵。 方案XVII
極性藥物C-PD17，亦即Lys(DM1-BMPS)-OH係如以上方案XVII中所描繪來製備：(i)遵循NHS方案，在Boc-Lys-OH與N-琥珀醯亞胺基3-順丁烯二醯亞胺丙酸酯(BMPS)之間形成醯胺鍵；(ii)遵循Boc方案，移除Boc-Lys(BMPS)-OH之Boc保護基；及(iii)遵循順丁烯二醯亞胺-硫醇方案在Lys(BMPS)-OH與DM1之間形成順丁烯二醯亞胺-S鍵。 方案XVIII
極性藥物C-PD18，亦即DM4-SPDP係如以上方案XVIII中所描繪，遵循SPDP方案製備，以形成雙硫鍵DM4及SPDP。 方案XIX
極性藥物C-PD19，亦即Dap(SMCC-DM1)-OH係如以上方案XIX中所描繪來製備：(i)遵循NHS方案，在Boc-Dap-OH與n-琥珀醯亞胺基4-(N-順丁烯二醯亞胺基甲基)環己烷甲酸酯(SMCC)之間形成醯胺鍵；(ii)遵循Boc方案，移除Boc-Dap(SMCC)-OH之Boc保護基；及(iii)遵循順丁烯二醯亞胺-硫醇方案在Dap(SMCC)-OH與DM1之間形成順丁烯二醯亞胺-S鍵。 方案XX
極性藥物C-PD20，亦即Dap(BMPS-DM1)-OH係如以上方案XX中所描繪來製備：(i)遵循NHS方案，在Boc-Dap-OH與N-琥珀醯亞胺基3-順丁烯二醯亞胺丙酸酯(BMPS)之間形成醯胺鍵；(ii)遵循Boc方案，移除Boc-Dap(BMPS)-OH之Boc保護基；及(iii)遵循順丁烯二醯亞胺-硫醇方案在Dap(BMPS)-OH與DM1之間形成順丁烯二醯亞胺-S鍵。 方案XXI
極性藥物C-PD21，亦即Dap(AMAS-DM1)-OH係如以上方案XXI中所描繪來製備：(i)遵循NHS方案，在Boc-Dap-OH與N-琥珀醯亞胺基順丁烯二醯亞胺基乙酸酯(AMAS)之間形成醯胺鍵；(ii)遵循Boc方案，移除Boc-Dap(AMAS)-OH之Boc保護基；及(iii)遵循順丁烯二醯亞胺-硫醇方案在Dap(AMAS)-OH與DM1之間形成順丁烯二醯亞胺-S鍵。 方案XXII
極性藥物C-PD22，亦即Orn(BMPS-DM1)-OH係如以上方案XXII中所描繪來製備：(i)遵循NHS方案，在Boc-Orn-OH與N-琥珀醯亞胺基3-順丁烯二醯亞胺丙酸酯(BMPS)之間形成醯胺鍵；(ii)遵循Boc方案，移除Boc-Orn(BMPS)-OH之Boc保護基；及(iii)遵循順丁烯二醯亞胺-硫醇方案在Orn(BMPS)-OH與DM1之間形成順丁烯二醯亞胺-S鍵。 方案XXIII
極性藥物C-PD23，亦即Cys-1,2-雙(順丁烯二醯亞胺基)乙烷-DM1係如以上方案XXIII中所描繪來製備：(i)遵循順丁烯二醯亞胺-硫醇方案，在半胱胺酸與1,2-雙(順丁烯二醯亞胺基)乙烷之間形成順丁烯二醯亞胺-S鍵；及(ii)遵循順丁烯二醯亞胺-硫醇方案，在半胱胺酸-1,2-雙(順丁烯二醯亞胺基)乙烷與DM1之間形成順丁烯二醯亞胺-S鍵。 方案XXIV
極性藥物C-PD24，亦即L-(+)-青黴胺-1,2-雙(順丁烯二醯亞胺基)乙烷-DM1係如以上方案XXIV中所描繪來製備：(i)遵循順丁烯二醯亞胺-硫醇方案，在L-(+)-青黴胺與1,2-雙(順丁烯二醯亞胺基)乙烷之間形成順丁烯二醯亞胺-S鍵；及(ii)遵循順丁烯二醯亞胺-硫醇方案，在L-(+)-青黴胺-1,2-雙(順丁烯二醯亞胺基)乙烷與DM1之間形成順丁烯二醯亞胺-S鍵。 方案XXV
極性藥物I-PD1，亦即Dap(Boc)-Ag係如以上方案XXV中所描繪來製備：(i)遵循HATU方案，在TLR7/8促效劑Ag與Nα-Fmoc-Nβ-Boc-L-2,3-二胺基丙酸之間形成醯胺鍵(Fmoc-Dap(Boc)-OH)；及(ii)遵循Fmoc方案，移除Fmoc-Dap(Boc)-Ag之Fmoc保護基。 方案XXVI
極性藥物I-PD2，亦即4AP(Boc)-Ag係如以上方案XXVI中所描繪來製備：(i)遵循HATU方案，在TLR7/8促效劑Ag與(2S,4R)Fmoc-4-胺基-1-Boc-吡咯啶-2-甲酸之間形成醯胺鍵(Fmoc-4AP(Boc)-OH)；及(ii)遵循Fmoc方案移除Fmoc-4AP(Boc)-Ag之Fmoc保護基。 實例1 ：化合物1，亦即C-PD2-LK1 (PD= Ser-AMAS-DM1；HP= 2X PEG12m) 方案1-A：A部分 方案1-B：B部分 方案1-C：C部分 方案1-D：D部分 。
本發明之化合物1，亦即Mal-PEG2-4AP(PEG12m)-H2DATA-4AP(PEG12m)-PEG6-Ser-AMAS-DM1係如以上方案1-A至1-D中所示來製備。各步驟中所使用之方案如下所示。 A部分. (i)         (2R,4S)-1-Fmoc-4-Boc-胺基吡咯啶-2-甲酸(Fmoc-4AP(Boc)-OH)之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (ii)       Fmoc-4AP(NH2)-OH與m-PEG12-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)         (2R,4S)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)-吡咯啶-2-甲酸(Boc-4AP(NH2)-OH)與m-PEG12-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 C部分. (i)         Boc-4AP(PEG12m)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案之方案。 (ii)       Boc-4AP(PEG12m)-NHS與2,5-二胺基對苯二甲酸(H2DATA)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)     Fmoc-4AP(PEG12m)-OH與H2DATA-4AP(PEG12m)-Boc之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (iv)     Fmoc-4AP(PEG12m)-H2DATA-4AP(PEG12m)-Boc之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (v)       Fmoc-4AP(PEG12m)-H2DATA-4AP(PEG12m)-NH2與t-Boc-N-醯胺基-PEG6-酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (vi)     Fmoc-4AP(PEG12m)-H2DATA-4AP(PEG12m)-PEG6-N-醯胺基-Boc-t之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 D部分. (i)         Fmoc-4AP(PEG12m)-H2DATA-4AP(PEG12m)-PEG6-NH2與DM1-AMAS-絲胺酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (ii)       Fmoc-4AP(PEG12m)-H2DATA-4AP(PEG12m)-PEG6-Ser-AMAS-DM1之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (iii)     NH2-4AP(PEG12m)-H2DATA-4AP(PEG12m)-PEG6-Ser-AMAS-DM1與Mal-PEG2-酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 實例2 ：化合物2，亦即C-PD5-LK2 (PD= Ser-PEG3-DM1；HP= 2X PEG12m) 方案2-A，A部分 方案2-B，B部分 方案2-C，C部分 方案2-D，D部分
本發明之化合物2，亦即Mal-PEG2-4AP(PEG12m)-H2DATA-4AP(PEG12m)-PEG6-Ser-PEG3-DM1係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分. (i)         (2R,4S)-1-Fmoc-4-Boc-胺基吡咯啶-2-甲酸(Fmoc-4AP(Boc)-OH)之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (ii)       Fmoc-4AP(NH2)-OH與m-PEG12-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)         在(2R,4S)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)吡咯啶-2-甲酸(Boc-4AP(NH2)-OH)與m-PEG12-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 C部分. (i)         Boc-4AP(PEG12m)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (ii)       Boc-4AP(PEG12m)-NHS與2,5-二胺基對苯二甲酸(H2DATA)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)     Fmoc-4AP(PEG12m)-OH與H2DATA-4AP(PEG12m)-Boc之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (iv)     Fmoc-4AP(PEG12m)-H2DATA-4AP(PEG12m)-Boc之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (v)       Fmoc-4AP(PEG12m)-H2DATA-4AP(PEG12m)-NH2與t-Boc-N-醯胺基-PEG6-酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (vi)     Fmoc-4AP(PEG12m)-H2DATA-4AP(PEG12m)-PEG6-N-醯胺基-Boc-t之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 D部分. (i)     Fmoc-4AP(PEG12m)-H2DATA-4AP(PEG12m)-PEG6-NH2與DM1-PEG3-絲胺酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (ii)       Fmoc-4AP(PEG12m)-H2DATA-4AP(PEG12m)-PEG6-Ser-PEG3-DM1之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (iii)     NH2-4AP(PEG12m)-H2DATA-4AP(PEG12m)-PEG6-Ser-PEG3-DM1與Mal-PEG2-酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 實例3 ：化合物3，亦即C-PD18-LK3 (PD= SPDP-DM4；HP= 2X PEG24m) A部分 B部分. C部分 D部分
本發明之化合物3，亦即4-順丁烯二醯亞胺基苯基乙酸-4AP(PEG24m)-H2DATA-4AP(PEG24m)-SPDP-DM4係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分. (i)         (2R,4S)-1-Fmoc-4-Boc-胺基吡咯啶-2-甲酸(Fmoc-4AP(Boc)-OH)之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (ii)       Fmoc-4AP(NH2)-OH與m-PEG24-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)         (2R,4S)-4-((三級丁氧基羰基)-胺基)吡咯啶-2-甲酸(Boc-4AP(NH2)-OH)與m-PEG24-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 C部分. (i)         Boc-4AP(PEG24m)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (ii)       Boc-4AP(PEG24m)-NHS與2,5-二胺基對苯二甲酸(H2DATA)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)     Fmoc-4AP(PEG24m)-OH與H2DATA-4AP(PEG24m)-Boc之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (iv)     Fmoc-4AP(PEG24m)-H2DATA-4AP(PEG24m)-Boc之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 D部分. (i)         DM4與SPDP之間雙硫鍵的形成遵循SPDP方案。 (ii)       Fmoc-4AP(PEG24m)-H2DATA-4AP(PEG24m)-NH2與DM4-SPDP之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)     Fmoc-4AP(PEG24m)-H2DATA-4AP(PEG24m)-SPDP-DM4之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (iv)     NH2-4AP(PEG24m)-H2DATA-4AP(PEG24m)-SPDP-DM4與4-順丁烯二醯亞胺基苯基乙酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 實例4 ：化合物4，亦即C-PD18-LK4 (PD= SPDP-DM4；HP=PEG24) A部分 B部分
本發明之化合物4，亦即4-順丁烯二醯亞胺基苯基乙酸-Pro-H2DATA-4AP(PEG24m)-SPDP-DM4係遵循如以下所指示之方案合成。 A部分. (i)         (2R,4S)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)-吡咯啶-2-甲酸(Boc-4AP(NH2)-OH)與m-PEG24-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (ii)       Boc-4AP(PEG24m)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (iii)     Boc-4AP(PEG24m)-NHS與2,5-二胺基對苯二甲酸(H2DATA)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iv)     Fmoc-Pro-OH與H2DATA-4AP(PEG24m)-Boc之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (v)  Fmoc-Pro-H2DATA-4AP(PEG24m)-Boc之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 B部分 (i)         DM4與SPDP之間雙硫鍵的形成遵循SPDP方案。 (ii)       Fmoc-Pro-H2DATA-4AP(PEG24m)-NH2與DM4-SPDP之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)     Fmoc-Pro-H2DATA-4AP(PEG24m)-SPDP-DM4之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (iv)     NH2-Pro-H2DATA-4AP(PEG24m)-SPDP-DM4與4-順丁烯二醯亞胺基苯基乙酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 實例5 ：化合物5，亦即C-PD2-LK5 (PD= Ser-AMAS-DM1；HP= 2X PEG12) A部分 B部分 C部分 D部分
本發明之化合物5，亦即Mal-PEG2-4AP(PEG12m)-CDK-4AP(PEG12m)-PEG6-Ser-AMAS-DM1係遵循如以下所指示之方案合成。 A部分. (i)         (2R,4S)-1-Fmoc-4-Boc-胺基吡咯啶-2-甲酸(Fmoc-4AP(Boc)-OH)之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (ii)       Fmoc-4AP(NH2)-OH與m-PEG12-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)         (2R,4S)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)-吡咯啶-2-甲酸(Boc-4AP(NH2)-OH)與m-PEG12-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 C部分. (i)         Boc-4AP(PEG12m)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (ii)       Boc-4AP(PEG12m)-NHS與3,6-雙(4-胺基丁基)-2,5-哌𠯤二酮(CDK)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)     Fmoc-4AP(PEG12m)-OH與CDK-4AP(PEG12m)-Boc之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (iv)     Fmoc-4AP(PEG12m)-CDK-4AP(PEG12m)-Boc之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (v)       Fmoc-4AP(PEG12m)-CDK-4AP(PEG12m)-NH2與t-Boc-N-醯胺基-PEG6-酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (vi)     Fmoc-4AP(PEG12m)-CDK-4AP(PEG12m)-PEG6-N-醯胺基-Boc-t之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 D部分. (i)         Fmoc-4AP(PEG12m)-CDK-4AP(PEG12m)-PEG6-NH2與DM1-AMAS-絲胺酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (ii)       Fmoc-4AP(PEG12m)-CDK-4AP(PEG12m)-PEG6-Ser-AMAS-DM1之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (iii)     NH2-4AP(PEG12m)-CDK-4AP(PEG12m)-PEG6-Ser-AMAS-DM1與Mal-PEG2-酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 實例6 ：化合物6，亦即C-PD5-LK6 (PD= Ser-PEG3-DM1；HP= 2X PEG12) A部分 B部分 C部分 D部分
本發明之化合物6，亦即Mal-PEG2-4AP(PEG12m)-CDK-4AP(PEG12m)-PEG6-Ser-PEG3-DM1係遵循如以下所指示之方案合成。 A部分. (i)         (2R,4S)-1-Fmoc-4-Boc-胺基吡咯啶-2-甲酸(Fmoc-4AP(Boc)-OH)之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (ii)       Fmoc-4AP(NH2)-OH與m-PEG12-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)         (2R,4S)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)-吡咯啶-2-甲酸(Boc-4AP(NH2)-OH)與m-PEG12-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 C部分. (i)         Boc-4AP(PEG12m)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (ii)       Boc-4AP(PEG12m)-NHS與3,6-雙(4-胺基丁基)-2,5-哌𠯤二酮(CDK)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)     Fmoc-4AP(PEG12m)-OH與CDK-4AP(PEG12m)-Boc之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (iv)     Fmoc-4AP(PEG12m)-CDK-4AP(PEG12m)-Boc之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (v)       Fmoc-4AP(PEG12m)-CDK-4AP(PEG12m)-NH2與t-Boc-N-醯胺基-PEG6-酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (vi)     Fmoc-4AP(PEG12m)-CDK-4AP(PEG12m)-PEG6-N-醯胺基-Boc-t之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 D部分. (i)         Fmoc-4AP(PEG12m)-CDK-4AP(PEG12m)-PEG6-NH2與DM1-PEG3-絲胺酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (ii)       Fmoc-4AP(PEG12m)-CDK-4AP(PEG12m)-PEG6-Ser-PEG3-DM1之Fmoc保護基的移除Fmoc方案。 (iii)     NH2-4AP(PEG12m)-CDK-4AP(PEG12m)-PEG6-Ser-PEG3-DM1與Mal-PEG2-酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 實例7 ：化合物7，亦即C-PD1-LK7 (PD= 2X Dap-AMAS-DM1；HP=PEG48m) A部分 B部分
本發明之化合物7，亦即MC-4AP(PEG6-Dap-AMAS-DM1)-4AP(PEG6-Dap-AMAS-DM1)-PEG48-m係遵循如以下所指示之方案合成。 A部分. (i)         DM1-AMAS-Dap(NH2)-OH與雙PEG6-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)         Fmoc-4AP(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (ii)       Fmoc-4AP(Boc)-NHS與Fmoc-4AP(Boc)-OH之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)     Fmoc-4AP(Boc)-4AP(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (iv)     Fmoc-4AP(Boc)-4AP(Boc)-NHS m-PEG48-胺之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (v)       Fmoc-4AP(Boc)-4AP(Boc)-PEG48-m之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (vi)     NH2-4AP(Boc)-4AP(Boc)-PEG48-m與6-順丁烯二醯亞胺基己酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(MC-NHS)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (vii)   MC-4AP(Boc)-4AP(Boc)-PEG48-m之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (viii) Mc-4AP(NH2)-4AP(NH2)-PEG48-m與DM1-AMAS-Dap(PEG6-NHS)-OH之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 實例8 ：化合物8，亦即C-PD1-LK8 (PD=Dap-AMAS-DM1；HP+2 ndD= PEG24-拉帕替尼) A部分 B部分 C部分 D部分
本發明之化合物8，亦即DM1-AMAS-Dap(MC)-(CH2)2-S-S-PEG24-拉帕替尼係遵循如以下所指示之方案合成。 A部分. (i)         拉帕替尼與SPDP-PEG-24-NHS酯之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)         Fmoc-Dap(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (ii)       Fmoc-Dap(Boc)-NHS與半胱胺之間醯胺鍵之形成遵循NHS方案。 C部分. (i)         Fmoc-Dap(Boc)-半胱胺與SPDP-PEG24-拉帕替尼之間雙硫鍵之形成遵循SPDP方案。 D部分. (i)         Fmoc-Dap(Boc)-(CH2)2-S-S-PEG24-拉帕替尼之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (ii)       NH2-Dap(Boc)-(CH2)2-S-S-PEG24-拉帕替尼與AMAS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)     AMAS-Dap(Boc)-(CH2)2-S-S-PEG24-拉帕替尼之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (iv)     AMAS-Dap(NH2)-(CH2)2-S-S-PEG24-拉帕替尼與DM1之間順丁烯二醯亞胺-硫醇鍵的形成遵循順丁烯二醯亞胺-硫醇方案。 (v)       DM1-AMAS-Dap(NH2)-(CH2)2-S-S-PEG24-拉帕替尼與6-順丁烯二醯亞胺基己酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(MC-NHS)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 實例9 ：化合物9，亦即C-PD1-LK9 (PD= Dap-AMAS-DM1: HP+ST= PEG24-(乙醯基-RHGAMVYLK)) A部分 B部分
本發明之化合物9，亦即MC-Dap(Dap-AMAS-DM1)-PEG24-(乙醯基-RHGAMVYLK)係遵循如以下所指示之方案合成。 A部分. (i)             DM1-AMAS-Dap(NH2)-OH與雙PEG6-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)             Fmoc-Dap(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (ii)          Fmoc-Dap(Boc)-NHS與胺基-PEG24-酸之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)        Fmoc-Dap(Boc)-PEG24-酸之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (iv)         Fmoc-Dap(Boc)-PEG24-NHS與乙醯基-RHGAMVYLK之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (v)           Fmoc-Dap(Boc)-PEG24-(乙醯基-RHGAMVYLK)之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (vi)         NH2-Dap(Boc)-PEG24-(乙醯基-RHGAMVYLK)與6-順丁烯二醯亞胺基己酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(MC-NHS)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (vii)       MC-Dap(Boc)-PEG24-(乙醯基-RHGAMVYLK)之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (viii)    MC-Dap(NH2)-PEG24-(乙醯基-RHGAMVYLK)與DM1-AMAS-Dap(PEG6-NHS)-OH之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 實例10 ：化合物10：C-PD1-LK10 (PD= Dap-AMAS-DM1；HP+ST= PEG1K-葉酸) A部分 B部分
本發明之化合物10，亦即MC-Dap(PEG6-Dap-AMAS-DM1)-PEG1K-葉酸係遵循如以下所指示之方案合成。 A部分. (i)             DM1-AMAS-Dap(NH2)-OH與雙PEG6-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)             Fmoc-Dap(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (ii)          Fmoc-Dap(Boc)-NHS與胺基-PEG1K-葉酸之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)        Fmoc-Dap(Boc)-PEG1K-葉酸之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (iv)         NH2-Dap(Boc)-PEG1K-葉酸與6-順丁烯二醯亞胺基己酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(MC-NHS)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (v)           MC-Dap(Boc)-PEG1K-葉酸之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (vi)         MC-Dap(NH2)-PEG1K-葉酸與DM1-AMAS-Dap(PEG6-NHS)-OH之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 實例11 ：化合物11，亦即C-PD1-LK11 (PD= Dap-AMAS-DM1；HP+ST= PEG1K-葡萄糖) A部分 B部分
本發明之化合物11，亦即Mal-PEG2-4AP(PEG6-Dap-AMAS-DM1)-PEG1K-葡萄糖係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分. (i)             DM1-AMAS-Dap(NH2)-OH與雙PEG6-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)             Fmoc-4AP(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (ii)          Fmoc-4AP(Boc)-NHS與NH2-PEG1K-葡萄糖之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)        Fmoc-4Dap(Boc)-PEG1K-葡萄糖之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (iv)         NH2-4AP(Boc)-PEG1K-葡萄糖與Mal-PEG2-酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (v)           Mal-PEG2-4AP(Boc)-PEG1K-葡萄糖之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (vi)         Mal-PEG2-4AP(NH2)-PEG1K-PEG1K-葡萄糖與DM1-AMAS-Dap(PEG6-NHS)-OH之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 實例12 ：化合物12，亦即C-PD1-LK12 (PD= Dap-AMAS-DM1；HP= PEG8OH) A部分 B部分
本發明之化合物12，亦即MC-4AP(PEG6-Dap-AMAS-DM1)-PEG8OH係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分. (i)         DM1-AMAS-Dap(NH2)-OH與雙PEG6-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)         Fmoc-4AP(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (ii)       Fmoc-4AP(Boc)-NHS與胺基-PEG8-醇之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)     Fmoc-4AP(Boc)-PEG8-OH之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (iv)     NH2-4AP(Boc)-PEG8-OH與6-順丁烯二醯亞胺基己酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(MC-NHS)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (v)       MC-4AP(Boc)-PEG8-OH之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (vi)     MC-4AP(NH2)-PEG8-OH與DM1-AMAS-Dap(PEG6-NHS)-OH之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 實例13 ：化合物13，亦即C-PD1-LK13 (PD= Dap-AMAS-DM1；HP= PEG24-m) A部分 B部分
本發明之化合物13，亦即MC-4AP(PEG6-Dap-AMAS-DM1)-PEG24-m係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分. (i)                 DM1-AMAS-Dap(NH2)-OH與雙PEG6-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)                 Fmoc-4AP(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (ii)               Fmoc-4AP(Boc)-NHS與胺基-PEG24-m之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)             Fmoc-4AP(Boc)-PEG24-m之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (iv)             NH2-4AP(Boc)-PEG24-m與6-順丁烯二醯亞胺基己酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(MC-NHS)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (v)                MC-4AP(Boc)-PEG24-m之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (vi)             MC-4AP(NH2)-PEG24-m與DM1-AMAS-Dap(PEG6-NHS)-OH之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 實例14 ：化合物14，亦即C-PD1-LK14 (PD= Dap-AMAS-DM1；HP= PEG24-m) A部分 B部分
本發明之化合物14，亦即MC-4AP(DSA-Dap-AMAS-DM1)-PEG24-m係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分. (i)                 DM1-AMAS-Dap(NH2)-OH與DSA之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)                 Fmoc-4AP(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (ii)               Fmoc-4AP(Boc)-NHS與胺基-PEG24-m之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)             Fmoc-4AP(Boc)-PEG24-m之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (iv)             NH2-4AP(Boc)-PEG24-m與6-順丁烯二醯亞胺基己酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(MC-NHS)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (v)                MC-4AP(Boc)-PEG24-m之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (vi)             MC-4AP(NH2)-PEG24-m與DM1-AMAS-Dap(DSA)-OH之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 實例15 ：化合物15，亦即C-PD2-LK15 (PD= Ser-AMAS-DM1；HP= PEG24-m)
本發明之化合物15，亦即MC-4AP(PEG6-Ser-AMAS-DM1)-PEG24-m係遵循如以下所指示之方案製備。 (i)                 Fmoc-4AP(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (ii)              Fmoc-4AP(Boc)-NHS與胺基-PEG24-m之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)            Fmoc-4AP(Boc)-PEG24-m之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (iv)             Fmoc-4AP(NH2)-PEG24-m與t-Boc-N-醯胺基-PEG6-酸之間的醯胺鍵形成遵循HATU方案。 (v)               Fmoc-4AP(t-Boc-N-醯胺基-PEG6)-PEG24-m之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (vi)             Fmoc-4AP(N-醯胺基-PEG6)-PEG24-m與DM1-AMAS-Ser之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (vii)           Fmoc-4AP(PEG6-Ser-AMAS-DM1)-PEG24-m之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (viii)        NH2-4AP(PEG6-Ser-AMAS-DM1)-PEG24-m與6-順丁烯二醯亞胺基己酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 實例16 ：化合物16，亦即C-PD2-LK16 (PD= Ser-AMAS-DM1；HP=PEG24-m) A部分 B部分
本發明之化合物16，亦即MC-4AP(5-胺基戊酸-Ser-AMAS-DM1)-PEG24-m係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分. (i)             Boc-5-胺基戊酸之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 B部分. (i)             Fmoc-4AP(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (ii)          Fmoc-4AP(Boc)-NHS與胺基-PEG24-m之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)        Fmoc-4AP(Boc)-PEG24-m之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (iv)         NH2-4AP(Boc)-PEG24-m與6-順丁烯二醯亞胺基己酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(MC-NHS)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (v)           MC-4AP(Boc)-PEG24-m之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (vi)         MC-4AP(NH2)-PEG24-m與Boc-5-胺基戊酸之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (vii)       MC-4AP(Boc-5-胺基戊酸)-PEG24-m之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (viii)    MC-4AP(NH2-5-胺基戊酸)-PEG24-m與DM1-AMAS-Ser-OH之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 實例17 ：化合物17，亦即C-PD1-LK17 (PD= Dap-AMAS-DM1；HP=PEG8-m) A部分 B部分
本發明之化合物17，亦即MC-Dap(PEG6-Dap-AMAS-DM1)-PEG8-m係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分. (i)             DM1-AMAS-Dap(NH2)-OH與雙PEG6-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)             Fmoc-Dap(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯合成方案。 (ii)          Fmoc-Dap(Boc)-NHS與胺基-PEG8-m之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)        Fmoc-Dap(Boc)-PEG8-m之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (iv)         NH2-Dap(Boc)-PEG8-m與6-順丁烯二醯亞胺基己酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(MC-NHS)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (v)           MC-Dap(Boc)-PEG8-m之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (vi)         MC-Dap(NH2)-PEG8-m與DM1-AMAS-Dap(PEG6-NHS)-OH之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 C-L-PD之式= C90H139ClN10O35S，C-L-PD之式量= 1988.63 實例18 ：化合物18，亦即C-PD1-LK18 (PD= Dap-AMAS-DM1；HP=PEG8-OH) A部分 B部分
本發明之化合物18，亦即MC-Dap(PEG6-Dap-AMAS-DM1)-PEG8-OH係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分. (i)             DM1-AMAS-Dap(NH2)-OH與雙PEG6-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)             Fmoc-Dap(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯合成方案。 (ii)          Fmoc-Dap(Boc)-NHS與胺基-PEG8-OH之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)        Fmoc-Dap(Boc)-PEG8-OH之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (iv)         NH2-Dap(Boc)-PEG8-OH與6-順丁烯二醯亞胺基己酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(MC-NHS)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (v)           MC-Dap(Boc)-PEG8-OH之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (vi)         MC-Dap(NH2)-PEG8-OH與DM1-AMAS-Dap(PEG6-NHS)-OH之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 C-L-PD之式= C91H141ClN10O36S，C-L-PD之式量= 2018.66 實例19 ：化合物19，亦即C-PD1-LK19 (PD= Dap-AMAS-DM1；HP=PEG8-酸) A部分 B部分
本發明之化合物19，亦即MC-Dap(PEG6-Dap-AMAS-DM1)-PEG8-酸係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分. (i)                 DM1-AMAS-Dap(NH2)-OH與雙PEG6-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)                 Fmoc-Dap(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯合成方案。 (ii)               Fmoc-Dap(Boc)-NHS與胺基-PEG8-酸之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)             Fmoc-Dap(Boc)-PEG8-酸之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (iv)             NH2-Dap(Boc)-PEG8-酸與6-順丁烯二醯亞胺基己酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(MC-NHS)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (v)                MC-Dap(Boc)-PEG8-酸之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (vi)             MC-Dap(NH2)-PEG8-酸與DM1-AMAS-Dap(PEG6-NHS)-酸之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 C-L-PD之式= C92H141ClN10O37S，C-L-PD之式量= 2046.67 實例20 ：化合物20，亦即C-PD1-LK20 (PD= Dap-AMAS-DM1；HP=PEG24-m) A部分 B部分
本發明之化合物20，亦即MC-Dap(PEG6-Dap-AMAS-DM1)-PEG24-m係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分. (i)             DM1-AMAS-Dap(NH2)-OH與雙PEG6-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)             Fmoc-Dap(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯合成方案。 (ii)          Fmoc-Dap(Boc)-NHS與胺基-PEG24-m之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)        Fmoc-Dap(Boc)-PEG24-m之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (iv)         NH2-Dap(Boc)-PEG24-m與6-順丁烯二醯亞胺基己酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(MC-NHS)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (v)           MC-Dap(Boc)-PEG24-m之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (vi)         MC-Dap(NH2)-PEG24-m與DM1-AMAS-Dap(PEG6-NHS)-OH之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 實例21 ：化合物21，亦即C-PD1-LK21 (PD= Dap-AMAS-DM1；HP=PEG24-OH) A部分 B部分
本發明之化合物21，亦即MC-Dap(PEG6-Dap-AMAS-DM1)-PEG24-OH係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分. (i)             DM1-AMAS-Dap(NH2)-OH與雙PEG6-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)             Fmoc-Dap(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯合成方案。 (ii)          Fmoc-Dap(Boc)-NHS與胺基-PEG24-OH之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)        Fmoc-Dap(Boc)-PEG24-OH之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (iv)         NH2-Dap(Boc)-PEG24-OH與6-順丁烯二醯亞胺基己酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(MC-NHS)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (v)           MC-Dap(Boc)-PEG24-OH之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (vi)         MC-Dap(NH2)-PEG24-OH與DM1-AMAS-Dap(PEG6-NHS)-酸之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 實例22 ：化合物22，亦即C-PD1-LK22 (PD= Dap-AMAS-DM1；HP=PEG24-酸) A部分 B部分
本發明之化合物22，亦即MC-Dap(PEG6-Dap-AMAS-DM1)-PEG24-酸係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分. (i)             DM1-AMAS-Dap(NH2)-OH與雙PEG6-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)             Fmoc-Dap(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯合成方案。 (ii)          Fmoc-Dap(Boc)-NHS與胺基-PEG24-酸之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)        Fmoc-Dap(Boc)-PEG24-酸之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (iv)         NH2-Dap(Boc)-PEG24-酸與6-順丁烯二醯亞胺基己酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(MC-NHS)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (v)           MC-Dap(Boc)-PEG24-酸之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (vi)         MC-Dap(NH2)-PEG24-酸與DM1-AMAS-Dap(PEG6-NHS)-酸之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 實例23 ：化合物23，亦即C-PD1-LK23 (PD= 胞壁酸-AMAS-DM1；HP= PEG24-m)
本發明之化合物23，亦即Mal-PEG2-Pro(PEG6-胞壁酸-AMAS-DM1)-PEG24-m係遵循如以下所指示之方案製備。 (i)             Fmoc-4AP(Boc)-OH與胺基-PEG24-m之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (ii)          Fmoc-4AP(Boc)-PEG24-m之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (iii)        Fmoc-4AP(NH2)-PEG24-m與t-Boc-N-醯胺基-PEG6-酸之間的醯胺鍵形成遵循HATU方案。 (iv)         Fmoc-4AP(t-Boc-N-醯胺基-PEG6)-PEG24-m之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (v)           Fmoc-4AP(N-醯胺基-PEG6)-PEG24-m與胞壁酸-AMAS-DM1之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (vi)         Fmoc-4AP(PEG6-胞壁酸-AMAS-DM1)-PEG24-m之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (vii)       NH2-4AP(PEG6-胞壁酸-AMAS-DM1)-PEG24-m與4-順丁烯二醯亞胺基苯基乙酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 實例24 ：化合物24，亦即C-PD1-LK24 (PD= Dap-AMAS-DM1: HP= PEG8OH) A部分 B部分
本發明之化合物24，亦即MC-4AP(PEG6-Dap-AMAS-DM1)-Ser-PEG8OH係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分. (i)             DM1-AMAS-Dap(NH2)-OH與雙PEG6-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)             Fmoc-4AP(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (ii)          Fmoc-4AP(Boc)-NHS與絲胺酸之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)        Fmoc-4AP(Boc)-Ser之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (iv)         Fmoc-4AP(Boc)-Ser-NHS與胺基-PEG8-醇之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (v)           Fmoc-4AP(Boc)-Ser-PEG8-OH之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (vi)         NH2-4AP(Boc)-Ser-PEG8-OH與6-順丁烯二醯亞胺基己酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(MC-NHS)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (vii)       MC-4AP(Boc)-Ser-PEG8-OH之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (viii)    MC-4AP(NH2)-Ser-PEG8-OH與DM1-AMAS-Dap(PEG6-NHS)-OH之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 實例25 ：化合物25，亦即C-PD6-LK25 (PD= Ala(DM1)-Ome；HP= PEG24-m) A部分 B部分
本發明之化合物25，亦即Mc-4AP(DSA-Ala(DM1)-Ome)-PEG24-m係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分. (i)                 NH2-Ala(DM1)-Ome與二(N-琥珀醯亞胺基)己二酸酯(DSA)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)                 Fmoc-4AP(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 (ii)               Fmoc-4AP(Boc)-NHS與胺基-PEG24-m之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (iii)             Fmoc-4AP(Boc)-PEG24-m之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (iv)             NH2-4AP(Boc)-PEG24-m與6-順丁烯二醯亞胺基己酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(MC-NHS)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 (v)                MC-4AP(Boc)-PEG24-m之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (vi)             MC-4AP(NH2)-PEG24-m與DSA-Ala(DM1)-Ome之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 實例26 ：化合物26，亦即C-PD4-LK26 (PD = DM1-AMAS-Asn-OH； HP= PEG24-m) A部分 B部分
本發明之化合物26，亦即MC-4AP(PEG6-ASN-AMAS-DM1)-PEG24-m係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分. (i)                 ASN(TRT)-OH與N-琥珀醯亞胺基順丁烯二醯亞胺基乙酸酯(AMAS)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分. (i)                 Fmoc-4AP(Boc)-OH與胺基-PEG24-m之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (ii)               Fmoc-4AP(Boc)-PEG24-m之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (iii)             Fmoc-4AP(NH2)-PEG24-m與t-Boc-N-醯胺基-PEG6-酸之間的醯胺鍵形成遵循HATU方案。 (iv)             Fmoc-4AP(t-Boc-N-醯胺基-PEG6)-PEG24-m之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (v)                Fmoc-4AP(N-醯胺基-PEG6)-PEG24-m與AMAS-ASN(TRT)-OH之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 (vi)             Fmoc-4AP[PEG6-ASN(TRT)-AMAS]-PEG24-m之TRT保護基的移除遵循TRT方案。 (vii)           Fmoc-4AP[PEG6-ASN-AMAS]-PEG24-m與DM1之間順丁烯二醯亞胺-硫醇鍵的形成遵循順丁烯二醯亞胺-硫醇方案。 (viii)         Fmoc-4AP[PEG6-ASN-AMAS-DM1]-PEG24-m之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 (ix)             NH2-4AP[PEG6-ASN-AMAS-DM1]-PEG24-m與6-順丁烯二醯亞胺基己酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 實例27 ：化合物27，亦即I-PD1-LK1：(PD=Dap-TLR7/8促效劑1；HP=PEG12-m) A部分 B部分 C部分
本發明之化合物27係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分-(i)：I-PD1與雙PEG6-NHS酯之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分-(i)：(2R,4S)-1-Boc-4-胺基吡咯啶-2-甲酸(NH2-4AP(Boc)-OH)之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 B部分-(ii)：NH2-4AP(NH2)-OH與m-PEG12-NHS酯之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 C部分-(i)：(2R,4S)-1-Fmoc-4-Boc-胺基吡咯啶-2-甲酸(Boc-4AP(Fmoc)-OH)之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 C部分-(ii)：Boc-4AP(Fmoc)-osu與3,6-雙(4-胺基丁基)-2,5-哌𠯤二酮(CDK)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 C部分-(iii)：P12-4AP(P12)-OH與Boc-4AP(Fmoc)-CDK之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 C部分-(iv)：Boc-4AP(Fmoc)-CDK-(P12-4AP(P12))之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 C部分-(v)：I-PD1-PEG6-NHS與NH2-4AP(Fmoc)-CDK-(P12-4AP(P12))之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 C部分-(vi)：(I-PD1-PEG6)-4AP(Fmoc)-CDK-(P12-4AP(P12))之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 C部分-(vii)：(I-PD1-PEG6)-4AP(NH2)-CDK-(P12-4AP(P12))與Mal-PEG2-酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 C部分-(viii)：(I-PD1-PEG6)-4AP(MP2A)-CDK-(P12-4AP(P12))之Boc保護基的移除遵循Boc方案。藉由ESI-MS m/z測定的C126H211N16O44[M+H]+之質量計算值係2652.5，與2652.5之理論值一致。 實例28 ：化合物28，亦即I-PD2-LK2 (PD= 4AP-TLR7/8促效劑1；HP=PEG24-m) A部分 B部分
本發明之化合物28係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分-(i)：D-脯胺酸與m-PEG24-NHS酯之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 A部分-(ii)：Pro-P24之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 A部分-(iii)：Boc-4AP(Fmoc)-CDK與Pro-P24-osu之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 A部分-(iv)：Boc-4AP(Fmoc)-CDK-Pro-P24之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 B部分-(i)：I-PD2與雙PEG6-NHS酯之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分-(ii)：NH2-4AP(Fmoc)-CDK-Pro-P24與I-PD2-PEG6-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分-(iii)：I-PD2-PEG6-4AP(Fmoc)-CDK-Pro-P24之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 B部分-(iv)：I-PD2-PEG6-4AP(NH2)-CDK-Pro-P24與Mal-PEG2-酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 B部分-(v)：I-PD2-PEG6-4AP(MP2A)-CDK-Pro-P24 (8.5mg)之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 C126H210N15O43 [M+H]+之ESI-MS m/z計算值：2621.5；實驗值2621.5. 實例29 ：化合物29，亦即I-PD2-LK3 (PD= 4AP-TLR7/8促效劑1； HP= 2X PEG12-m) A部分 B部分
本發明之化合物29係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分-(i)：(2R,4S)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)吡咯啶-2-甲酸(Boc-4AP(NH2)-OH)與m-PEG12-NHS酯之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 A部分-(ii)：Boc-4AP(P12)-OH之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 A部分-(iii)：NH2-4AP(P12)-OH與I-PD2-PEG6-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分-(i)：(2R,4S)-1-Fmoc-4-Boc-胺基吡咯啶-2-甲酸(Boc-4AP(Fmoc)-OH)之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 B部分-(ii)：NH2-4AP(Fmoc)-OH與m-PEG12-NHS酯之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分-(iii)：P12-4AP(Fmoc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 B部分-(iv)：P12-4AP(Fmoc)-osu與3,6-雙(4-胺基丁基)-2,5-哌𠯤二酮(CDK)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分-(v)：P12-4AP(Fmoc)-CDK與I-PD2-4AP(P12)-OH之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 B部分-(vi)：P12-4AP(Fmoc)-CDK-(I-PD2-4AP(P12))之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 B部分-(vii)：P12-4AP(NH2)-CDK-(I-PD2-4AP(P12))與Mal-PEG2-酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 B部分-(viii)：P12-4AP(MP2A)-CDK-(I-PD2-4AP(P12))之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 C128H213N16O44 [M+H]+之ESI-MS m/z計算值：2678.5；實驗值2678.5。 實例30 ：化合物30，亦即I-PD2-LK4 (PD= 4AP-TLR7/8促效劑1； HP= 2X PEG24-m) A部分 B部分
本發明之化合物30係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分-(i)：(2R,4S)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)吡咯啶-2-甲酸(Boc-4AP(NH2)-OH)與m-PEG24-NHS酯之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 A部分-(ii)：Boc-4AP(P24)-OH之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 A部分-(iii)：NH2-4AP(P24)-OH與I-PD2-PEG6-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分-(i)：(2R,4S)-1-Fmoc-4-Boc-胺基吡咯啶-2-甲酸(Boc-4AP(Fmoc)-OH)之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 B部分-(ii)：NH2-4AP(Fmoc)-OH與m-PEG24-NHS酯之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分-(iii)：P24-4AP(Fmoc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 B部分-(iv)：P24-4AP(Fmoc)-osu與3,6-雙(4-胺基丁基)-2,5-哌𠯤二酮(CDK)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分-(v)：P24-4AP(Fmoc)-CDK與I-PD2-4AP(P24)-OH之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 B部分-(vi)：P24-4AP(Fmoc)-CDK-(I-PD2-4AP(P24))之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 B部分-(vii)：P24-4AP(NH2)-CDK-(I-PD2-4AP(P24))與Mal-PEG2-酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 B部分-(viii)：P24-4AP(MP2A)-CDK-(I-PD2-4AP(P24))之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 C176H309N16O68 [M+H]+之ESI-MS m/z計算值：3735.1；實驗值3735.1。 實例31 ：化合物31，I-PD-LK5(PD= PEG5-TLR7/8促效劑1；HP= 2X PEG12-m) A部分 B部分 C部分
本發明之化合物31係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分-(i)：Ag與酸-PEG5-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 A部分-(ii)：Ag-P5-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 B部分-(i)：(2R,4S)-1-Boc-4-胺基吡咯啶-2-甲酸(NH2-4AP(Boc)-OH)與mPEG12-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 B部分-(ii)：P12-4AP(Boc)-OH之NHS酯的合成遵循NHS酯方案。 B部分-(iii)：2,5-二胺基對苯二甲酸(H2DATA)與P12-4AP(Boc)-osu之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 C部分-(i)：(2S,4R)-Fmoc-4-胺基-1-Boc-吡咯啶-2-甲酸(Fmoc-4AP(Boc)-OH)之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 C部分-(ii)：Fmoc-4AP(NH2)-OH與m-PEG12-NHS酯之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 C部分-(iii)：Fmoc-4AP-(P12)-OH與P12-4AP(Boc)-H2DATA之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 C部分-(iv)：P12-4AP(Boc)-H2DATA-Fmoc-4AP(P12)之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 C部分-(v)：P12-4AP(Boc)-H2DATA-NH2-4AP(P12)與Ag-P5-osu之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 C部分-(vi)：P12-4AP(Boc)-H2DATA-(Ag-P5)-4AP(P12)之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 C部分-(vii)：Mal-PEG2-酸(0.8mg)與P12-4AP(NH2)-H2DATA-(Ag-P5)-4AP(P12)之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 C117H185N12O44 [M+H]+之ESI-MS m/z計算值：2462.2；實驗值2462.2。 實例32 ：化合物32，亦即I-PD-LK6 (PD= PEG5-TLR7/8促效劑1； HP= 2X PEG12-m) A部分
本發明之化合物32係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分-(i)：2,5-二胺基對苯二甲酸(H2DATA)與Boc-Sar-osu之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 A部分-(ii)：(B-Sar)-H2DATA-(Sar-B)與mPEG12-胺之間醯胺鍵的形成遵循NHS酯方案。 A部分-(iii)：(B-Sar)-P12-H2DATA-P12-(Sar-B)之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 A部分-(iv)：(NH2-Sar)-P12-H2DATA-P12-(Sar-NH2)與Ag-P5-OH之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 A部分-(v)：(Ag-P5-Sar)-P12-H2DATA-P12-(Sar-NH2)與Mal-PEG2-酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 C111H181N12O40 [M+H]+之ESI-MS m/z計算值：2322.2；實驗值2322.2。 實例33 ：化合物33，亦即I-PD1-LK7 (PD= Dap-TLR7/8促效劑1；HP= PEG24-m) A部分
本發明之化合物33係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分-(i)：I-PD1與二(N-琥珀醯亞胺基)己二酸酯(DSA)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 A部分-(ii)：NH2-4AP(Fmoc)-CDK-Pro-P24與I-PD1-6c-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 A部分-(iii)：(I-PD1-6c)-4AP(Fmoc)-CDK-Pro-P24之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 A部分-(iv)：(I-PD1-6c)-4AP(NH2)-CDK-Pro-P24與Mal-PEG2-酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 A部分-(v)：(I-PD1-6c)-4AP(MP2A)-CDK-Pro-P24之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 C114H188N15O37 [M+H]+之ESI-MS m/z計算值：2359.3；實驗值2359.3。 實例34 ：化合物34，I-PD2-LK8 (PD= 4AP-TLR7/8促效劑1；HP= PEG24-m) A部分
本發明之化合物34係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分-(i)：I-PD2 (4.8mg)與二(N-琥珀醯亞胺基)己二酸酯(DSA)之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 A部分-(ii)：NH2-4AP(Fmoc)-CDK-Pro-P24與I-PD2-6I-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 A部分-(iii)：(I-PD2-6c)-4AP(Fmoc)-CDK-Pro-P24之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 A部分-(iv)：(I-PD2-6c)-4AP(NH2)-CDK-Pro-P24與Mal-PEG2-酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 A部分-(v)：(I-PD2-6c)-4AP(MP2A)-CDK-Pro-P24之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 C121H198N15O39 [M+H]+之ESI-MS m/z計算值：2485.4；實驗值2485.4。 實例35 ：化合物35，I-PD2-LK9 (PD= 4AP-TLR7/8促效劑1；HP= PEG24-m) A部分
本發明之化合物35係遵循如以下所指示之方案製備。 A部分-(i)：Boc-4AP(Fmoc)-OH與mPEG24-胺之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 A部分-(ii)：Boc-4AP(Fmoc)-P24之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 A部分-(iii)：NH2-4AP(Fmoc)-P24與I-PD2-6c-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 A部分-(iv)：(I-PD2-6c)-4AP(Fmoc)-P24之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 A部分-(v)：(I-PD2-6c)-4AP(NH2)-P24與Mal-PEG2-酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 A部分-(vi)：(I-PD2-6c)-4AP(MP2A)-P24之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 C98H162N11O33 [M+H]+之ESI-MS m/z計算值：2021.1；實驗值2021.1。 實例36 ：化合物36，亦即I-PD2-LK10 (PD= 4AP-TLR7/8促效劑1；HP= 聚肌胺酸8)
本發明之化合物36係遵循如以下所指示之方案製備。 (i)：boc-4AP(Fmoc)-Sar8-OH之合成遵循SPPS方案。 (ii)：boc-4AP(Fmoc)-Sar8-OH之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 (iii)：NH2-4AP(Fmoc)-Sar8-OH與I-PD2-6c-NHS之間醯胺鍵的形成遵循NHS方案。 A部分-(iv)：(I-PD2-6c)-4AP(Fmoc)-Sar8-OH之Fmoc保護基的移除遵循Fmoc方案。 A部分-(v)：(I-PD2-6c)-4AP(NH2)-Sar8-OH與Mal-PEG2-酸之間醯胺鍵的形成遵循HATU方案。 A部分-(vi)：(I-PD2-6c)-4AP(MP2A)-Sar8-OH之Boc保護基的移除遵循Boc方案。 實例37-64
使用以上描述之方案中之一者，由配體及極性藥物連接子(PDL)製備本發明之例示性配體-極性藥物複合物，亦即LPDC 1至LPDC 28。參見以下關於實例37至64之表1。
遵循APDC方案，使用賀癌平作為配體製備LPDC 1-18、LPDC 20-26及LPDC 28。遵循APDC方案，使用賀疾妥作為配體製備LPDC 27。遵循AlbPDC方案，使用白蛋白作為配體製備LPDC 19。 表1
實例編號 LPDC PDL 產品
37 1 化合物1 (C-PD2-LK1) C-APDC1：賀癌平-C-PD2-LK1
38 2 化合物2 (C-PD5-LK2) C-APDC2：賀癌平-C-PD5-LK2
39 3 化合物5 (C-PD2-LK5) C-APDC3：賀癌平-C-PD2-LK5
40 4 化合物6 (C-PD5-LK6) C-APDC4：賀癌平-C-PD5-LK6
41 5 化合物12 (C-PD1-LK12) C-APDC5：賀癌平-C-PD1-LK12
42 6 化合物14 (C-PD1-LK14) C-APDC6：賀癌平-C-PD1-LK14
43 7 化合物25 (C-PD6-LK25) C-APDC7：賀癌平-C-PD6-LK25
44 8 化合物20 (C-PD1-LK20) C-APDC8：賀癌平-C-PD1-LK20
45 9 化合物7 (C-PD1-LK7) C-APDC9：賀癌平-C-PD1-LK7
46 10 化合物9 (C-PD1-LK9) C-APDC10：賀癌平-C-PD1-LK9
47 11 化合物17 (C-PD1-LK17) C-APDC11：賀癌平-C-PD1-LK17
48 12 化合物18 (C-PD1-LK18) C-APDC12：賀癌平-C-PD1-LK18
49 13 化合物19 (C-PD1-LK19) C-APDC13：賀癌平-C-PD1-LK19
50 14 化合物21 (C-PD1-LK21) C-APDC14：賀癌平-C-PD1-LK21
51 15 化合物22 (C-PD1-LK22) C-APDC15：賀癌平-C-PD1-LK22
52 16 化合物24 (C-PD1-LK24) C-APDC16：賀癌平-C-PD1-LK24
53 17 化合物15 (C-PD2-LK15) C-APDC17：賀癌平-C-PD2-LK15
54 18 化合物26 (C-PD4-LK26) C-APDC18：賀癌平-C-PD4-LK26
55 19 化合物15 (C-PD2-LK15) C-AlbPDC1：人類血清白蛋白-C-PD2-LK15
56 20 化合物28 (I-PD2-LK2) I-APDC2：賀癌平-I-PD2-LK2
57 21 化合物29 (I-PD2-LK3) I-APDC3：賀癌平-I-PD2-LK3
58 22 化合物30 (I-PD2-LK4) I-APDC4：賀癌平-I-PD2-LK4
59 23 化合物31 (I-PD-LK5) I-APDC5：賀癌平-I-PD-LK5
60 24 化合物32 (I-PD-LK6) I-APDC6：賀癌平-I-PD-LK6
61 25 化合物33 (I-PD1-LK7) I-APDC7：賀癌平-I-PD1-LK7
62 26 化合物34 (I-PD2-LK8) I-APDC8：賀癌平-I-PD2-LK8
63 27 化合物34 (I-PD2-LK8) I-APDC9：賀疾妥-I-PD2-LK8
64 28 化合物35 (I-PD2-LK9) I-APDC10：賀癌平-I-PD2-LK9
使用如下文所描述的五種分析(SEC分析、活體外細胞毒性分析、毒性研究、藥物動力學研究及異種移植腫瘤模型實驗)評價本發明之複合物1-28。 C-APDC 之SEC 分析
將C-APDC在pH 5的含有6%蔗糖、10 mM六水合琥珀酸二鈉及0.02% Tween 20之緩衝液中稀釋至2.5 mg/mL。使用具有分析型SEC管柱(Agilent AdvanceBio® SEC 300Å 2.7μm)之Agilent HPLC系統分析樣品(24 µL)，用磷酸鹽緩衝鹽水溶液(PBS)以0.5 mL/min之流動速率等度溶離。 I-APDC 之SEC 分析
將I-APDC在PBS中稀釋至0.2 mg/mL。將樣品(500 µL)注射至在AKTA PURE FPLC系統上之分析型SEC管柱(Biorad® SEC 650)上，用PBS以1 mL/min之流動速率等度溶離。 APDC 之活體外細胞毒性分析
如先前所描述(Boyd及Paull, 1995；Phillips等人, 2008)執行活體外細胞毒性分析。GI50係以[(Ti-Tz)/(C-Tz)] × 100 =50計算，其中「Tz」表示在D0時之細胞群；「Ti」表示在D3時不同ADC濃度組之細胞群；及「C」表示在D3時媒劑組之細胞群。自劑量-反應曲線計算半數最大抑制濃度IC50，該等劑量-反應曲線係藉由四參數曲線擬合產生。 T-DM1 及LPDC 之毒性研究
利用單獨媒劑，或T-DM1/LPDC(60 mg/kg、70 mg/kg、80 mg/kg及90 mg/kg，n=3隻動物/組)，藉由在第0天將T-DM1或LPDC單次劑量靜脈內注射至小鼠體內來評價T-DM1及LPDC之毒性。在第0天、第1天、第2天、第3天、第6天及第7天記錄體重。 T -DM1及 APDC 之 藥物動力學研究
如先前所描述(Dere等人, 2013)，使用分別針對曲妥珠單抗及美登素之抗體執行藥物動力學研究。 有關細胞毒性APDC 之 異種移植腫瘤模型實驗
如先前所描述(Jumbe等人, 2010)，利用細胞毒性APDC執行異種移植腫瘤模型實驗。 有關免疫刺激性APDC 之 異種移植腫瘤模型實驗
如先前所描述(Ackerman等人, 2021)，利用免疫刺激性APDC執行異種移植腫瘤模型實驗。 以上五種分析之結果顯示，出乎意料地：
1. DAR值為約7-9的本發明之LPDC皆幾乎不展現聚集。對以下九種本發明之複合物執行尺寸排阻層析(SEC)：C-APDC17、I-APDC2、I-APDC3、I-APDC4、I-APDC6、I-APDC7、I-APDC8、I-APDC9及I-APDC10。DAR值為約7-9的各複合物係以具有約150KD分子量之單峰溶離，表明幾乎沒有複合物聚集。
2. 基於細胞之分析展示，相較於Kadcyla及Enhertu。APDC17之細胞毒性在抑制具有低位準至高位準HER2表現之癌症細胞株方面更有效且對MDR1介導之流出具有更高抗性。參見以下四個表。
3. 表2
   IC 50(nM)
Kadcyla Enhertu C-APDC17
HER2+++ SK-BR-3 0.060 0.23 0.017
NCI-N87 0.15 0.97 0.082
HER2++ JIMT-1 14 ＞1000 0.93
Capan-1 86 ＞1000 55
HER2+ MKN45 52 371 32
MDA-MB-231 62 ＞1000 35
表3
   GI 50(nM)
Kadcyla Enhertu C-APDC17
HER2+++ SK-BR-3 0.052 0.3 0.014
NCI-N87 0.24 12 0.16
HER2++ JIMT-1 15 ＞1000 1.4
Capan-1 64 56 42
HER2+ MKN45 107 1041 76
MDA-MB-231 156 ＞1000 72
表4
   IC 50(nM)
Kadcyla Enhertu C-APDC17
NCI-N87 0.38 3.1 0.47
NCI-N87-hMDR1 2.5 36 1.9
NCI-N87 / NCI-N87-hMDR1 (倍數) 6.7 12 4.1
表5
   GI 50(nM)
Kadcyla Enhertu C-APDC17
NCI-N87 0.53 49 0.51
NCI-N87-hMDR1 6.7 ＞1000 4.6
NCI-N87 / NCI-N87-hMDR1 (倍數) 13 ＞20 9
在上表2中，本發明之複合物C-APDC17在全部六種細胞株，亦即SK-BR-3、NCI-N87、JIMT-1、Capan-1、MKN45、MDA-MB-231中具有比Kadcyla及Enhertu低得多的IC 50，表明其在抑制此等細胞方面更有效。表3還證實，相較於Kadcyla及Enhertu，在該六種細胞株中，複合物C-APDC17在抑制此等癌細胞之生長方面更有效，因為其具有較低的GI50。
表4及表5顯示，複合物C-APDC17不僅在抑制正常NCI-N87細胞株方面比Kadcyla及Enhertu更有效，而且對MDR1蛋白質具有更高抗性，此係藉由利用過度表現MDR1之細胞株NCI-N87-hMDR1進行的研究證實。
4. 在JIMT-1異種移植模型中，複合物APDC17在抑制腫瘤生長方面比諸如Kadcyla及Enhertu之類市售ADC更有效(參見圖1)。在JIMT-1異種移植模型中進行APDC17、Kadcyla或Enhertu之單次靜脈內注射(在第零天10 mg/kg)。以長度×寬度 2/2計算的腫瘤體積隨時間之變化標繪於圖3中。意外地是，APDC17治療組中腫瘤體積減小，而Kadcyla及Enhertu治療組顯示明顯腫瘤生長。
5. 藥物動力學研究亦展示，在SD大鼠中靜脈內投予全部三種測試劑量，亦即1 mg/kg、3 mg/kg及10 mg/kg之C-APDC17或Kadcyla之後，C-APDC17之表現要優於Kadcyla。
6.在靜脈內注射之後，BALB/c小鼠中C-APDC17之最大耐受劑量(MTD)為約90 mg/kg，表明本發明之複合物具有良好耐受性。有關本發明之C-APDC5、C-APDC8、C-APDC9及C-APDC16之耐受性研究表明，其耐受性與Kadcyla之耐受性類似。
7.在JIMT-1異種移植模型中，單次劑量的本發明之細胞毒性複合物(C-APDC5、C-APDC8、C-APDC9及C-APDC16)勝過二次劑量的市售ADC Kadcyla及Enhertu(參見圖2)。
8.本發明之雙重(HER2及核仁素)靶向複合物，即C-APDC10在殺滅癌細胞方面比作為單一靶向ADC之Kadcyla或作為單一靶向APDC之C-APDC15有效得多(參見圖3)。
9.本發明之免疫刺激性LPDC(亦即，I-APDC2、I-APDC3、I-APDC4、I-APDC6、I-APDC7、I-APDC-8、I-APDC9及I-APDC10)的表現明顯優於作為Bolt's免疫刺激性ADC的Her-T785(參見圖4至圖6)。 其他實施例
本說明書中所揭示之所有特徵可以任何組合形式組合。本文所揭示之各特徵可經用於相同、等效或類似目的之替代性特徵置換。因此，除非另外明確說明，否則所揭示之各特徵僅為一系列普通等效或類似特徵之一個實例。
根據以上描述，熟習此項技術者可易於確定本發明之基本特徵，且在不脫離本發明之精神及範圍的情況下可對本發明作出各種改變及修改以使其適應各種用途及條件。舉例而言，亦可製備結構類似於本發明之複合物的化合物，針對其治療癌症之功效進行篩選。 參考文獻
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無
圖1顯示在JIMT-1異種移植模型中腫瘤體積(mm 3)隨時間(天)的變化，比較了本發明之複合物C-APDC17與Kadcyla及Enhertu (二者皆為市售ADC)引起的腫瘤生長抑制作用。
圖2顯示單次靜脈內劑量(在第零天10 mg/kg)的四種本發明之複合物(亦即，C-APDC5、C-APDC-8、C-APDC9及C-APDC16)中之一者各自比二種劑量(在第零天及第7天分別為10 mg/kg)的Kadcyla及Enhertu更有效。腫瘤體積隨時間之變化係使用式(L×W2)/2確定。
圖3展示，在基於細胞之分析中，本發明之雙重靶向APDC複合物C-APDC10在殺滅癌細胞方面比作為單一靶向ADC之Kadcyla或作為單一靶向APDC之C-APDC15更有效。
圖4示出本發明之複合物I-APDC2、I-APDC3、I-APDC4及I-APDC6在N87異種移植模型中之抗腫瘤活性，表現明顯優於Her-T785 (Bolt之免疫刺激性ADC)。
圖5顯示在N87異種移植模型中，本發明之複合物I-APDC2、I-APDC3、I-APDC4及I-APDC6之耐受性，與Her-T785之耐受性類似。
圖6展示在JIMT-1異種移植模型中，本發明之複合物I-APDC7、I-APDC8、I-APDC9及I-APDC10各自有效地消除在無B細胞、T細胞或NK細胞活性存在下Kadcyla抗性腫瘤異種移植模型中的腫瘤細胞，表現明顯優於Her-T785。

Claims (25)

  1. 一種式I之化合物： I， 其中 該化合物包含一配體連接子L1、一M n1連接子複合體、一藥物連接子L2、一由 表示之第一極性藥物部分PD1，任擇地一至五個親水性聚合物部分HP以及任擇地一至五個二級靶向部分ST； n1係一自1至15之整數； n2係一自0至5之整數； n3係一自0至5之整數； n4係1或2； n5係0或1； n6係0或1； 一個----係一共價鍵且另一個----缺失； L1、L2及HP各自經由一連接子鍵鍵結至該M n1連接子複合體； ST當存在時經由一連接子鍵鍵結至HP或該M n1連接子複合體， L2係經由一醯胺鍵或一醣苷鍵鍵結至PD； L3當存在時經由一穩定鍵鍵結至D； Pc當存在時經由一穩定鍵鍵結至L3或D； 該M n1連接子複合體內之單體M各自經由一穩定鍵鍵結至其相鄰單體M； D係一藥物部分； M在每次出現時獨立地為一多官能部分； L1係含有一偶合部分的一雙官能交聯劑，該偶合部分能夠經由一配體中所包含的硫氫基、胺基、麩醯胺酸或甲醯基與該配體反應； L2係一雙官能交聯劑； L3係一雙官能交聯劑； HP在每次出現時獨立地為一親水性聚合物部分； Pc含有一極性基團； ST在每次出現時獨立地為一二級靶向部分； 一連接子鍵係一醯胺鍵、一醣苷鍵、一酯鍵、一雙硫鍵、一C-S鍵、一C-O鍵、一C-N鍵、一碳酸酯部分(-O-C(O)-O-)、一胺基甲酸酯部分(-O-C(O)-NH-)、一脲部分(-NH-C(O)-NH-)或一三唑部分( )；且 一穩定鍵係一穩定醯胺鍵、一穩定醣苷鍵、一穩定酯鍵、一穩定雙硫鍵、一C-S鍵、一C-O鍵、一C-N鍵、一脲部分(-NH-C(O)-NH-)或一三唑部分( )。
  2. 如請求項1之化合物，其中 L1含有胺基(NH 2)、碘(I)、溴(Br)、一順丁烯二醯亞胺部分、一N-羥基琥珀醯亞胺(NHS)部分或一胺氧基部分； M在每次出現時係一衍生自以下之單體單元：一天然胺基酸、一非天然胺基酸、一單醣、一雙官能交聯劑、一具有至少一個二級或三級胺基之聚胺、3,6-雙(4-胺基-丁基)-哌𠯤-2,5-二酮、一環肽或一二胺基二羧酸； Pc係一衍生自以下之部分：一單醣、一聚胺、一羥基羧酸、一線性或環狀二肽、一二胺基二羧酸、一天然胺基酸或一非天然胺基酸；且 ST在每次出現時獨立地為一衍生自以下之部分：葡萄糖、葉酸、iRGD肽、一癌症特異性肽配體(AGM-330)、一人類纖維結合蛋白胞外域B(EDB)特異性高親和力肽(human fibronectin extra-domain B (EDB)-specific aptide)(「APT EDB」)、一生替林(centyrin)、一F3肽、一DVN肽、帕瑞肽(pasireotide)、阿法諾肽(afamelanotide)、依特卡肽(etelcalcetide)、生長抑素、一PD-1/PD-L1相互作用抑制劑(「BMS-1166」)、一環肽、一單鏈抗體或一適體。
  3. 如請求項1之化合物，其中該化合物包含一由 表示之第二極性藥物部分PD2，其經由一醯胺鍵或一醣苷鍵鍵結至該M n1連接子複合體；n5'係0或1；n6'係0或1；D'係一藥物部分；L3'當存在時係一雙官能交聯劑；且Pc'當存在時含有一極性基團。
  4. 如請求項1之化合物，其中M在每次出現時獨立地為一衍生自以下之部分：一二胺基二羧酸、一單醣、3,6-雙(4-胺基-丁基)-哌𠯤-2,5-二酮、一環肽、一胺基酸、一二羧酸、一巰基羧酸或一胺基硫醇。
  5. 如請求項1之化合物，其中該M n1連接子複合體含有一衍生自以下之單體單元：一二胺基二羧酸、3,6-雙(4-胺基-丁基)-哌𠯤-2,5-二酮或一環肽，且該化合物任擇地在L2與PD之間含有一可釋放部分，其具有一自分解型間隔子、一酶可裂解胺基酸、一具有2-8個胺基酸之酶可裂解肽、該自分解型間隔子與該酶可裂解胺基酸之一組合或該自分解型間隔子與該酶可裂解肽之一組合。
  6. 如請求項1之化合物，其中該M n1連接子複合體含有一選自由以下組成之群的部分： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 及 。
  7. 如請求項6之化合物，其中該M n1連接子複合體含有一選自由以下組成之群的部分： 、 、 、 及 。
  8. 如請求項7之化合物，其中該M n1連接子複合體含有： 、 或 。
  9. 如請求項1之化合物，其中L1係 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ， 其中nL1係一自0至10之整數。
  10. 如請求項1之化合物，其中L2係 、 、 、 或 ， 其中nL2係一自0至10之整數。
  11. 如請求項1之化合物，其中Pc係一衍生自以下之部分：一胺基酸、一線性或環狀二肽、一單醣、一雙官能聚乙二醇或一胺基苯酚。
  12. 如請求項11之化合物，其中Pc係 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ； L3係 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ；且 nL3係0至10。
  13. 如請求項1之化合物，其中HP在每次出現時獨立地為 或 ，其中np係一自5至50之整數；Cap係(i)能夠與一ST分子反應以將該ST部分鍵結至該HP部分的一反應性基團或(ii)一選自由以下組成之群的端基：C 1-C 10烷基、C 2-C 10烷基-CO 2H、C 2-C 10烷基-OH、C 2-C 10烷基-NH 2、C 2-C 10烷基-NH(C 1-C 3烷基)及C 2-C 10烷基-N(C 1-C 3烷基) 2；且Lp係一連接子部分。
  14. 如請求項13之化合物，其中HP在每次出現時獨立地為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
  15. 如請求項1之化合物，其中D係一衍生自以下之藥物部分：美登素(mertansine)(DM1)、拉夫坦辛(ravtansine)(DM4)、N-甲基-L-Ala-美登醇、單甲基奧瑞他汀E (monomethyl auristatin E)、7-乙基-10-羥基喜樹鹼(SN38)或TLR7/8促效劑Ag。
  16. 如請求項1之化合物，其中該二級靶向部分係衍生自葉酸、葡萄糖或乙醯基-RHGAMVYLK。
  17. 如請求項1之化合物，其中該化合物係化合物1-36中之一者。
  18. 一種配體-PD複合物，其包含一配體部分及一衍生自一如請求項1之化合物之部分，其中該配體係經由在該配體中之一官能基與式I中之L1之間形成的一共價鍵鍵結至該化合物，且該官能基係硫氫基、胺基、麩醯胺酸或甲醯基。
  19. 如請求項17之配體-PD複合物，其中該配體係曲妥珠單抗(trastuzumab)、白蛋白或帕妥株單抗(pertuzumab)，且該共價鍵係在該配體之硫氫基與L1之順丁烯二醯亞胺、碘或溴部分之間形成。
  20. 如請求項18之配體-PD複合物，其中該配體與該化合物之莫耳比在1:1與1:20之間，較佳地在1:2與1:8之間。
  21. 如請求項18之配體-PD複合物，其中該配體-PD複合物係複合物1-28中之一者。
  22. 一種治療癌症之方法，其包含向一有需要之患者投予一有效量的一如請求項18之複合物。
  23. 一種醫藥組成物，其包含一如請求項18之複合物及一醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑。
  24. 如請求項18之複合物，其係用於製造一供治療癌症用之藥劑。
  25. 一種製備一如請求項18之複合物的方法，其包含使一配體與一如請求項1之化合物反應，其中該配體含有一或多個官能基，該一或多個官能基獨立地為硫氫基、胺基、麩醯胺酸或甲醯基。
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