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TW202430206A - 組合疫苗 - Google Patents

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TW202430206A
TW202430206A TW112139675A TW112139675A TW202430206A TW 202430206 A TW202430206 A TW 202430206A TW 112139675 A TW112139675 A TW 112139675A TW 112139675 A TW112139675 A TW 112139675A TW 202430206 A TW202430206 A TW 202430206A
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納丁 薩利甚
費德里歌 曼沙
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Abstract

本揭示案係關於用以預防或治療多種傳染原之RNA領域。特定而言，本揭示案係關於用於針對冠狀病毒感染、流行性感冒感染及/或RSV感染進行疫苗接種以及誘導有效冠狀病毒、流行性感冒病毒及/或RSV抗原特異性免疫反應、諸如抗體及/或T細胞反應之方法及劑。具體而言，在一個實施例中，本揭示案係關於包括向個體投與以下之方法：(i)二價RNA疫苗，其編碼包含SARS-CoV-2刺突蛋白(S蛋白)之抗原決定基之肽或蛋白質，及(ii)四價RNA疫苗，其編碼包含血球凝集素(HA)之抗原決定基之肽或蛋白質，以供在該個體中誘導針對冠狀病毒S蛋白、特定而言SARS-CoV-2之S蛋白以及流行性感冒蛋白、特定而言A型及B型流行性感冒病毒之HA蛋白的免疫反應。

Description

組合疫苗
病毒感染對人類健康及福祉造成重大威脅。舉例而言，冠狀病毒係一組可引起自輕度至致命之呼吸道感染之RNA病毒。在人類中之輕微疾病包括一些普通感冒病例(其亦由其他病毒引起，主要為鼻病毒)，而更致命之種類可引起SARS、MERS及COVID-19。
流行性感冒通常稱為「流感」，其係由負義RNA病毒家族的流行性感冒病毒引起之傳染性疾病。症狀自輕微至重度不等，且通常包括發熱、流鼻涕、喉嚨痛、肌肉疼痛、頭痛、咳嗽及疲勞。在典型年份中，5%-15%之群體感染流行性感冒，每年有3百萬至5百萬重度病例，且每年全球有多達650,000例呼吸相關死亡。
本揭示案係關於向個體(例如人類個體)同時遞送多種抗原性多肽以及用於預防及/或治療多種傳染原之相關技術(例如方法)。在一些實施例中，此等傳染原可包括(但不限於)細菌性傳染原及病毒性傳染原。
在一些實施例中，本揭示案提供達成多種抗原性多肽之此類同時遞送之醫藥組合物(例如免疫原性組合物，例如疫苗)。在一些實施例中，本揭示案提供尤其可用於有效疫苗接種中之某些組合組合物。在一些實施例中，此類組合組合物包含複數種RNA，該等RNA編碼至少兩種不同的傳染性疾病(例如在一些實施例中為傳染性呼吸疾病)之抗原性多肽(例如誘導或促進對至少兩種不同的傳染性疾病之免疫力)。
在一些實施例中，如本文所闡述之抗原性多肽為包含至少一個抗原決定基之多肽。在一些實施例中，抗原性多肽為全長抗原。在一些實施例中，抗原性多肽為全長抗原之免疫原性片段。在一些實施例中，例如如在相關傳染原中所發現，抗原性多肽相對於全長或免疫原性片段可包含一或多種修飾(例如，在一些實施例中為取代)。在一些實施例中，抗原決定基或抗原性多肽與傳染原(例如病毒，諸如呼吸病毒)中之相應抗原決定基或多肽交叉反應(例如誘導及/或促進免疫反應)。
本揭示案尤其提供一種認識，亦即針對某些傳染性疾病(例如流行性感冒、呼吸道融合病毒疾病及/或冠狀病毒疾病)之年度疫苗程式可在一年的相似時間進行，且現有疫苗載體及傳統技術可限制自選擇季節性毒株起之製造時間。舉例而言，流行性感冒及冠狀病毒疫苗目前係可獲得的，但本揭示案鑑別出當前疫苗接種程式之問題來源，且此外提供改良之疫苗接種技術，包括特定疫苗組合物及策略。
由於在初次接種一系列COVID-19疫苗後觀察到中和抗體效價隨時間下降，故建議加強投藥以恢復或維持強勁之免疫力及疾病保護。此外，新的SARS-CoV-2變異體之持續演化使得疫苗毒株變化。流行性感冒疫苗亦定期更新(通常每年)。現有的流行性感冒疫苗具有侷限性，包括例如自選擇季節性毒株起之製造時間、製造之複雜性及有限之有效性。本揭示案尤其提供一種認識，亦即針對某些傳染性疾病(例如傳染性呼吸疾病)之組合RNA疫苗可有益於解決針對某些傳染性疾病之現有個別疫苗之某些侷限性。舉例而言，在一態樣中，本揭示案提供一種認識，亦即組合RNA疫苗可提供某些益處，包括例如(但不限於)加速製造之可能性(例如無重配步驟)，及/或疫苗與季節性傳播毒株錯配之機率降低，及/或經由誘導強T細胞反應(例如CD4+及/或CD8+ T細胞反應)，功效相對於目前許可之疫苗改良。
在一態樣中，本揭示案係關於用於針對冠狀病毒及流行性感冒病毒感染或疾病進行疫苗接種以及誘導有效冠狀病毒及流行性感冒病毒抗原特異性免疫反應(諸如抗體及/或T細胞反應)之技術(例如組合物及方法)。在一些實施例中，基於RNA技術之此類技術尤其可用於預防或治療冠狀病毒及流行性感冒病毒感染及/或疾病。向個體投與本文所揭示之RNA可保護個體免受冠狀病毒感染及/或流行性感冒病毒感染(例如，降低暴露將導致確定之感染及/或疾病之機率)。
在一些實施例中，本揭示案藉由向個體投與編碼冠狀病毒抗原性多肽之RNA及編碼流行性感冒抗原性多肽之RNA而提供保護免受冠狀病毒及流行性感冒病毒感染之技術(例如組合物及/或方法)。具體而言，在一個實施例中，本揭示案係關於如下方法，該等方法包括向個體投與編碼冠狀病毒肽或蛋白質(包含SARS-CoV-2刺突蛋白(S蛋白)、特定而言SARS-CoV-2之S蛋白之抗原決定基)之RNA，及編碼包含血球凝集素(HA)蛋白之抗原決定基之肽或蛋白質之RNA，以用於誘導針對冠狀病毒S蛋白之免疫反應及針對血球凝集素之免疫反應，亦即編碼疫苗RNA之疫苗抗原。向個體投與編碼疫苗抗原之RNA可提供(在適當靶細胞表現該RNA後)疫苗抗原，用於在個體中誘導針對疫苗抗原(及疾病相關抗原)之免疫反應。
本揭示案尤其提供多種見解，用於達成將多種抗原性多肽(例如來自不同傳染原之抗原性多肽)有效遞送至個體及/或提供針對不同傳染性疾病之強勁免疫反應。在一些實施例中，本揭示案提供與RNA疫苗技術相關之見解，包括與以下相關之某些見解：抗原組合、用於編碼抗原性多肽之序列、非編碼元件、奈米顆粒調配物、醫藥組合物及投藥方案，其可提供多種抗原性多肽(例如來自不同傳染原之抗原性多肽)至個體之有效遞送及/或提供針對不同傳染性疾病之強勁免疫反應。
在一些實施例中，本文所提供之見解得到可產生針對多種傳染原之有效免疫反應之RNA組合物。在一些實施例中，本文所提供之見解得到可產生針對至少兩種傳染原之免疫反應之RNA組合物，該等免疫反應相當於(例如在70%、80%、90%、95%內或更高且最多100%)或優於(例如增加至少30%，包括例如至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、至少1.1倍、至少1.5倍、至少2倍、至少3倍或更高)其各別獨立型(例如單價) RNA疫苗或參考疫苗(諸如非RNA疫苗(例如不活化之病毒疫苗))之功效。在一些實施例中，與其各別獨立型(例如單價) RNA疫苗之功效相比，本文所提供之見解得到可產生優良(例如增加至少30%，包括例如至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、至少1.1倍、至少1.5倍、至少2倍、至少3倍或更高)的針對至少一種且在實施例中針對至少兩種傳染原中之每一者的免疫反應之RNA組合物，即使在投與與各別獨立型RNA疫苗相同劑量之RNA時亦如此。在一些實施例中，本文所提供之見解甚至可用於產生包含編碼至少兩種傳染原之至少兩種抗原性多肽之RNA的RNA組合物，每種抗原性多肽之劑量低於其各別獨立型(例如單價) RNA疫苗中所用之劑量，與具有更高劑量之獨立型(例如單價) RNA疫苗之免疫反應相比，該等組合物可產生優良(例如增加至少30%，包括例如至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、至少1.1倍、至少1.5倍、至少2倍、至少3倍或更高)的針對至少一種且在實施例中至少兩種傳染原中之每一者的免疫反應。
在一些實施例中，本揭示案提供以下見解，亦即使用相同的RNA主鏈構築體(例如具有相同的非編碼元件組合，例如在mRNA之背景下，相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列，編碼抗原性有效載荷之序列除外)及/或使用相同的囊封RNA之奈米顆粒調配物(例如相同的脂質調配物)以單一組合物遞送來自至少兩種不同傳染原(例如呼吸傳染原)之一或多種抗原性多肽可提供一或多種特定優點。舉例而言，在一些實施例中，此一方法可容許此類RNA在單一組合物中在非零溫度或更高溫度下儲存至少24小時或更長時間後(例如，在一些實施例中，暴露於30℃持續一段時間，之後在2℃-8℃下維持一段時間)保持穩定。在一些實施例中，本揭示案提供以下見解，亦即與具有不同的非編碼元件組合及/或不同的奈米顆粒調配物之RNA相比，使用相同的RNA主鏈構築體(例如具有相同的非編碼元件組合，例如在mRNA之背景下，相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列，編碼抗原性有效載荷之序列除外)及/或使用相同的囊封RNA之奈米顆粒調配物(例如相同的脂質調配物)以單一組合物遞送來自至少兩種不同傳染原(例如呼吸傳染原)之一或多種抗原性多肽可提供此類RNA之相當的藥物動力學及/或藥效學，及/或可降低或最小化所編碼抗原性多肽之免疫原性之間的干擾。
在一些實施例中，本揭示案提供以下見解，亦即對於包含兩種或更多種多核苷酸(各自包含編碼與不同的傳染原相關之抗原性多肽之核苷酸序列)之組合物，與具有不同的非編碼元件組合及/或不同的奈米顆粒調配物之RNA相比，當該兩種或更多種多核苷酸包含相同的非編碼元件組合(例如，在mRNA之背景下，相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列，編碼抗原性有效載荷之序列除外)及/或調配於相同的奈米顆粒調配物(例如相同的脂質調配物)中時，可誘導優良的針對每種靶傳染原之免疫反應。
在一些實施例中，本揭示案提供以下見解，亦即組合疫苗之多價性可具有佐劑效應。不希望受特定理論束縛，在一些實施例中，此一佐劑效應可能係由於囊封RNA之奈米顆粒(例如脂質奈米顆粒)之濃度增加所致，此可引起劑量節省效應。因此，在一些實施例中，在包含兩種或更多種多核苷酸之組合物中，每種多核苷酸包含編碼與不同的傳染原相關之抗原之核苷酸序列，且每種多核苷酸(一起或分開)調配於奈米顆粒調配物(例如脂質奈米顆粒調配物)中，可誘導免疫反應，該免疫反應優於由相應單價組合物誘導之免疫反應(例如在相同的奈米顆粒調配物中僅包含一種多核苷酸之組合物)。在一些實施例中，由此等組合物誘導之免疫反應可強於由相同量之單價組合物誘導之免疫反應。在一些實施例中，可能需要較低量之此等組合物以產生與單價產品相同強度之免疫反應。
不希望受任何特定理論束縛，本申請案提供以下見解，亦即在一些實施例中，例如與在相同的遞送媒劑中共囊封(例如編碼不同抗原性多肽之兩種或更多種個別mRNA)相比，單獨囊封編碼不同抗原性多肽(例如來自不同傳染原(例如SARS-CoV-2對流行性感冒)之抗原性多肽，或代表相同傳染原之不同變異體(例如SARS-CoV-2刺突蛋白之不同變異體等)之抗原性多肽)之個別mRNA (例如在遞送媒劑中，諸如LNP)可提供某些優點，包括例如某些免疫學益處。舉例而言，本揭示案提出，在一些實施例中，單獨囊封可達成一或多種所編碼抗原性多肽之改良表現，及/或改良的針對一或多種所編碼抗原性多肽之免疫反應。不希望受任何特定理論束縛，在一些實施例中，單獨囊封可促進個別mRNA單獨攝取至個體細胞(例如單獨APC)中。不希望受任何特定理論束縛，本申請案指出，兩種或更多種RNA (每種RNA編碼不同的抗原性多肽)之共囊封可導致由細胞(例如APC)共攝取，且該共攝取可導致一或多種所編碼抗原性多肽之轉譯競爭及表現減少及/或免疫反應減少。在一些實施例中，與包含編碼流行性感冒抗原之共囊封mRNA之組合物相比，單獨囊封編碼流行性感冒抗原之mRNA (例如，單獨囊封編碼流行性感冒抗原之每種mRNA；將編碼流行性感冒A型抗原之mRNA囊封在第一奈米顆粒群體(例如LNP)中且將編碼流行性感冒B型抗原之mRNA囊封在第二奈米顆粒群體(例如LNP)中；或將編碼流行性感冒A型抗原之mRNA囊封在第一奈米顆粒群體(例如LNP)中且將編碼流行性感冒B型抗原之每種mRNA囊封在單獨的奈米顆粒群體(例如LNP)中)可提供益處。在一些實施例中，將包含(i)兩種或更多種不同的RNA，其各自編碼流行性感冒A型病毒之抗原性多肽(例如HA蛋白)(例如，使得該兩種或更多種不同的RNA一起編碼兩種或更多種不同的流行性感冒A HA多肽)，及(ii)兩種或更多種不同的RNA，其各自編碼流行性感冒B型病毒之抗原性多肽(例如HA蛋白)(例如，使得該兩種或更多種不同的RNA一起編碼兩種或更多種不同的流行性感冒B HA多肽)之組合物調配於奈米顆粒(例如LNP)中，使得： • 將編碼流行性感冒A型病毒之抗原性多肽之每種RNA囊封於第一奈米顆粒群體中，且將編碼流行性感冒B型病毒之抗原性多肽之每種RNA囊封於第二奈米顆粒群體中； • 將每種RNA囊封於單獨的奈米顆粒中；或 • 將編碼流行性感冒A型抗原性多肽之每種RNA囊封於第一奈米顆粒群體中，且將編碼流行性感冒B型抗原性多肽之兩種RNA各自囊封於單獨的奈米顆粒群體中。
在一些實施例中，本揭示案亦提供以下見解，亦即產生廣泛中和不同的流行性感冒病毒毒株之免疫反應(例如產生針對流行性感冒A型及/或B型病毒之高中和效價及/或血清轉化率(例如，處於臨床相關水準之中和效價及/或血清轉化率(例如，(i)與先前顯示預防流行性感冒症狀之彼等中和效價相當或優良之中和效價，及/或(ii)與由相關比較物誘導之彼等中和效價及/或血清轉化率相當或優良之中和效價及/或血清轉化率(例如，不與SARS-CoV-2疫苗一起投與的商業上獲批之流行性感冒疫苗或流行性感冒RNA疫苗)))。本揭示案亦提供可產生針對兩種類型之流行性感冒病毒之強免疫反應之例示性RNA劑量(例如，處於臨床相關水準之中和效價及/或血清轉化率(例如，(i)與先前顯示預防流行性感冒症狀之彼等中和效價相當或優良之中和效價，及/或(ii)與由相關比較物誘導之彼等中和效價及/或血清轉化率相當或優良之中和效價及/或血清轉化率(例如，不與SARS-CoV-2疫苗一起投與的商業上獲批之流行性感冒疫苗或流行性感冒RNA疫苗)))。
冠狀病毒係正義單股RNA ((+)ssRNA)包膜之病毒，其編碼總計四種結構蛋白，亦即刺突蛋白(S)、包膜蛋白(E)、膜蛋白(M)及核衣殼蛋白(N)。刺突蛋白(S蛋白)負責受體識別、附著於細胞、經由內體路徑感染以及由病毒及內體膜之融合驅動之基因體釋放。雖然不同家族成員之間的序列不同，但S蛋白內存在保守區及模體，使得有可能將S蛋白分成兩個亞結構域：S1及S2。S2與其跨膜結構域一起負責膜融合，而S1結構域識別病毒特異性受體並與靶宿主細胞結合。在若干種冠狀病毒分離株內鑑別出受體結合結構域(RBD)，且定義了S蛋白之一般結構(圖1)。
2019年12月，中國武漢暴發了不明原因之肺炎，且明確發現一種新型冠狀病毒(嚴重急性呼吸症候群冠狀病毒2；SARS-CoV-2)係根本原因。WHO及公眾可獲得SARS-CoV-2之遺傳序列(MN908947.3)，且該病毒被歸類為貝塔冠狀病毒(betacoronavirus)亞家族。藉由序列分析，種系發生樹揭示與嚴重急性呼吸症候群(SARS)病毒分離株之關係較與感染人類之另一種冠狀病毒亦即中東呼吸症候群(MERS)病毒之關係更為密切。
SARS-CoV-2感染及由此引發之疾病COVID-19已在全球傳播，愈來愈多之國家受到影響。2020年3月11日，WHO將COVID-19暴發定性為大流行病。截至2020年12月1日，全球確診之COVID-19病例超過6300萬，且死亡人數超過140萬，191個國家/地區受到影響。正在發生之大流行病仍為對全世界公共衛生及經濟穩定之重大挑戰。
由於對SARS-CoV-2沒有預先存在之免疫力，因此每一個體均有被感染之風險。感染之後，一些但並非所有個體在中和抗體反應及細胞介導之免疫方面產生保護性免疫力。然而，目前尚不知曉此保護持續至什麼程度及持續多久。根據WHO，80%之受感染個體無需醫院照護即可康復，而15%發展為更嚴重之疾病，且5%需要重症監護。認為年齡增長及基礎醫療條件係發展成嚴重疾病之風險因素。
COVID-19之表現通常伴有咳嗽及發熱，胸部放射線攝影術顯示出磨玻璃不透明樣或斑片樣陰影。然而，許多患者呈現沒有發熱或放射線攝影改變，且感染可能為無症狀的，此與控制傳播有關。對於有症狀之個體，疾病之進展可導致需要通氣之急性呼吸窘迫症候群以及隨後的多器官衰竭及死亡。住院患者之常見症狀(按最高至最低頻率之順序)包括發熱、乾咳、呼吸短促、疲勞、肌痛、噁心/嘔吐或腹瀉、頭痛、虛弱及鼻溢。在大約3%的患有COVID-19之個體中，嗅覺缺失(嗅覺喪失)或味覺缺失(味覺喪失)可為唯一呈現之症狀。
所有年齡均可出現該疾病，但超過60歲之人的病死率(CFR)顯著升高。共病亦與CFR升高相關，包括心血管疾病、糖尿病、高血壓及慢性呼吸疾病。由於與受感染患者之職業性接觸，COVID-19患者中醫護人員所佔比例過高。
在大多數情況下，使用分子測試來偵測SARS-CoV-2並確認感染。靶向SARS-CoV-2病毒RNA之反轉錄聚合酶鏈式反應(RT-PCR)測試方法係用於診斷COVID-19疑似病例之黃金標準活體外方法。用拭子自鼻及/或喉嚨中採集待測樣品。
流行性感冒係全世界發病率及死亡率之主要原因，在每年的季節性流行病中發生且偶爾在全球大流行中發生(Cunha BA. Influenza: historical aspects of epidemics and pandemics. Infect Dis Clin North Am. 2004;18(1):141-55)。有症狀之流行性感冒病毒感染引起伴有呼吸及全身症狀之發熱性疾病(Monto AS, Gravenstein S, Elliott M等人，Clinical signs and symptoms predicting influenza infection. Arch Intern Med. 2000;160(21):3243-7)， 但流行性感冒病毒感染通常亦為無症狀的(Cowling BJ, Chan KH, Fang VJ等人，Comparative epidemiology of pandemic and seasonal influenza A in households. N Engl J Med. 2010;362(23):2175-84)。≥65歲之人、年幼兒童及患有某些基礎性醫學病況之人患流行性感冒併發症及住院的風險更高。在美國，每年平均有＞200,000例住院與流行性感冒有關，而據估計，全球年死亡人數範圍近300,000至600,000以上(Iuliano AD, Roguski KM, Chang HH等人，Estimates of global seasonal influenza-associated respiratory mortality: a modelling study. Lancet. 2018;391(10127):1285-300)。 徵象及症狀
季節性流行性感冒之特徵在於突然發熱、咳嗽(通常為乾咳)、頭痛、肌肉及關節疼痛、嚴重不適(感覺不適)、喉嚨痛及流鼻涕。咳嗽可為嚴重的，且可持續2週或更多週。大多數人在一週內自發熱及其他症狀中恢復，無需醫療關注，但流行性感冒可引起嚴重疾病或死亡，尤其是在高風險人群中。
在工業化國家，大多數與流行性感冒相關之死亡發生在65歲或以上之人群中。流行病可導致大量工人/學生缺勤及生產力損失。在疾病高峰期，門診及醫院可能會不堪重負。
在發展中國家，季節性流行性感冒流行病之效應尚不完全清楚，但研究估計，在5歲以下流行性感冒相關之下呼吸道感染之兒童中，99%之死亡發生在發展中國家。 流行病學
所有年齡群組均可受到流行性感冒感染影響，但一些群組較其他群組之風險更大。受到感染時發生嚴重疾病或併發症之風險更大之人群包括：孕婦、59個月以下之兒童、老年人、患有慢性醫學病況(諸如慢性心臟、肺、腎、代謝、神經發育、肝或血液疾病)之個體及患有免疫抑制性疾患(諸如HIV/AIDS，接受化學療法或類固醇，或惡性病)之個體。
由於患者暴露，衛生保健工作者亦處於獲得流行性感冒病毒感染之高風險下，且亦可進一步傳播疾病，尤其傳播給易患病個體。
季節性流行性感冒容易傳播，在擁擠區域(包括學校及療養院)中快速傳播。當受感染之人咳嗽或打噴嚏時，含有病毒之飛沫(傳染性飛沫)分散至空氣中，且可傳播至高達一米遠，並感染附近吸入該等飛沫之人。病毒亦可由受流行性感冒病毒污染之手傳播。為防止傳染，人們在咳嗽時應用紙巾覆蓋口鼻，並定期洗手。
在溫帶氣候中，季節性流行病主要發生在冬季，而在熱帶地區，流行性感冒可能全年發生，引起更不規律之暴發。自感染至發病之時間稱為潛伏期，為約2天，但範圍為一至四天。 診斷
大多數人類流行性感冒病例係臨床診斷的。通常推薦收集適當呼吸樣品且應用實驗室診斷測試，以確立明確之診斷。呼吸樣本之適當收集、儲存及轉運通常為實驗室偵測流行性感冒病毒感染之第一步。通常，使用來自咽喉、鼻及鼻咽分泌物或氣管抽吸物或洗液之樣品來證實流行性感冒感染，例如使用直接抗原偵測、病毒分離或藉由反轉錄酶-聚合酶鏈式反應(RT-PCR)偵測流行性感冒特異性RNA。關於實驗室技術之指導為此項技術中所已知，且可例如在世界衛生組織(World Health Organization, WHO)之網站上找到。快速流行性感冒診斷測試(RIDT)可用於臨床環境中，但與RT-PCR方法相比，其靈敏度較低，且其可靠性很大程度上取決於其使用條件。此外，本揭示案提供對由組合物引發的免疫反應之見解，該等組合物包含(i)兩種或更多種抗原性多肽，其各自與不同的傳染原相關，或(ii)兩種或更多種多核苷酸，其各自包含編碼與不同的傳染原相關之抗原性多肽之序列。該等見解使得能夠開發可誘導針對多種傳染原之強免疫反應之組合產品及/或治療(例如，誘導與由單價產品所誘導之免疫反應相似或甚至更優之免疫反應的組合產品)。特定而言，本揭示案提供對由組合物引發的免疫反應之見解，該等組合物包含(i)一或多種與冠狀病毒相關之抗原性多肽及一或多種與流行性感冒病毒相關之抗原性多肽，或(ii)一或多種多核苷酸，其各自包含編碼與流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列。
在一些實施例中，本揭示案提供組合物，其包含： (i) 包含第一核苷酸序列之RNA，該第一核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第一核苷酸序列與SEQ ID NO: 9至少85%一致； (ii) 包含第二核苷酸序列之RNA，該第二核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自該SARS-CoV-2毒株之變異體之第二SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第二核苷酸序列與SEQ ID NO: 70至少85%一致； (iii) 包含第三核苷酸序列之RNA，該第三核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第三核苷酸序列與SEQ ID NO: 92至少85%一致； (iv) 包含第四核苷酸序列之RNA，該第四核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第四核苷酸序列與SEQ ID NO: 97至少85%一致； (v) 包含第五核苷酸序列之RNA，該第五核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第五核苷酸序列與SEQ ID NO: 102至少85%一致；及 (vi) 包含第六核苷酸序列之RNA，該第六核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第六核苷酸序列與SEQ ID NO: 107至少85%一致。
在一些實施例中，本揭示案提供組合物，其包含： (i) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之核苷酸序列； (ii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自該SARS-CoV-2毒株之變異體之第二SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之核苷酸序列； (iii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之核苷酸序列； (iv) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 99至少85%一致之核苷酸 序列； (v) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 104至少85%一致之核苷酸序列；及 (vi) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，流行性感冒A H1N1毒株為流行性感冒A/Wisconsin/588/2019。在一些實施例中，流行性感冒A H3N2毒株為流行性感冒A/Cambodia/e0826360/2020。在一些實施例中，流行性感冒B Victoria毒株為流行性感冒B/Washington/02/2019。在一些實施例中，流行性感冒B Yamagata毒株為流行性感冒B/PHUKET/3073/2013。
在一些實施例中，本文揭示組合物，其包含： (i) 包含第一核苷酸序列之RNA，該第一核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第一核苷酸序列與SEQ ID NO: 9至少85%一致； (ii) 包含第二核苷酸序列之RNA，該第二核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自該SARS-CoV-2毒株之變異體之第二SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第二核苷酸序列與SEQ ID NO: 70至少85%一致； (iii) 包含第三核苷酸序列之RNA，該第三核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第三核苷酸序列與SEQ ID NO: 92至少85%一致； (iv) 包含第四核苷酸序列之RNA，該第四核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第四核苷酸序列與SEQ ID NO: 82至少85%一致； (v) 包含第五核苷酸序列之RNA，該第五核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第五核苷酸序列與SEQ ID NO: 87至少85%一致；及 (vi) 包含第六核苷酸序列之RNA，該第六核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第六核苷酸序列與SEQ ID NO: 107至少85%一致。
在一些實施例中，本揭示案提供組合物，其包含： (i) 包含第一核苷酸序列之RNA，該第一核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第一核苷酸序列與SEQ ID NO: 20至少85%一致； (ii) 包含第二核苷酸序列之RNA，該第二核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第二SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第二核苷酸序列與SEQ ID NO: 72至少85%一致； (iii) 包含第三核苷酸序列之RNA，該第三核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第三核苷酸序列與SEQ ID NO: 94至少85%一致； (iv) 包含第四核苷酸序列之RNA，該第四核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第四核苷酸序列與SEQ ID NO: 84至少85%一致； (v) 包含第五核苷酸序列之RNA，該第五核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第五核苷酸序列與SEQ ID NO: 89至少85%一致；及 (vi) 包含第六核苷酸序列之RNA，該第六核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第六核苷酸序列與SEQ ID NO: 109至少85%一致。
在一些實施例中，流行性感冒A H1N1毒株為流行性感冒A/Wisconsin/588/2019。在一些實施例中，流行性感冒A H3N2毒株為流行性感冒A/Darwin/6/2021。在一些實施例中，流行性感冒B Victoria毒株為流行性感冒B/Austria/1359417/2021。在一些實施例中，流行性感冒B Yamagata毒株為流行性感冒B/PHUKET/3073/2013。
在一些實施例中，SARS-CoV-2毒株為武漢毒株。在一些實施例中，SARS-CoV-2毒株之變異體為奧密克戎(Omicron) BA.4/5變異體。在一些實施例中，SARS-CoV-2毒株之變異體為奧密克戎XBB.1.5變異體。
在一些實施例中，組合物中之每一RNA包含相同的非編碼元件，該等非編碼元件包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列。
在一些實施例中，RNA (i)-(ii)與RNA (iii)-(vi)之質量比為1:5至5:1、1:4至4:1、1:3至3:1或1:2至2:1。在一些實施例中，RNA (iii)-(iv)與RNA (v)-(vi)之質量比為1:1至1:5。在一些實施例中，RNA (i)與RNA (ii)之質量比為1:1。在一些實施例中，RNA (iii)、(iv)、(v)及(vi)係以1:1:1:1或1:1:5:5之質量比存在。
在一些實施例中，組合物中RNA (i)-(vi)之合併質量為約30 ug至約100 ug。在一些實施例中，RNA (i)及RNA (ii)之合併質量為約3 μg至約60 μg (例如約3 μg、約10 μg、約30 μg或約60 μg)。在一些實施例中，RNA (iii)-(vi)之合併質量為約30 μg至約60 μg (例如約30 μg或約60 μg)。
在一些實施例中，RNA (i)及RNA (ii)各自係以約15 μg之量存在，且RNA (iii)-(vi)各自係以約7.5 μg之量存在。在一些實施例中，RNA (i)及(ii)各自係以約30 μg之量存在，且RNA (iii)-(vi)各自係以約7.5 μg之量存在。在一些實施例中，RNA (i)及(ii)各自係以約15 μg之量存在，且RNA (iii)-(vi)各自係以約11.25 μg之量存在。在一些實施例中，RNA (i)及(ii)各自係以約15 μg之量存在，RNA (iii)及(iv)各自係以約5 μg之量存在，且RNA (v)及(vi)各自係以約25 μg之量存在。在一些實施例中，RNA (i)及(ii)各自係以約15 μg之量存在，RNA (iii)及(iv)各自係以約2.5 μg之量存在，且RNA (v)及(vi)各自係以約12.5 μg之量存在。在一些實施例中，RNA (i)及(ii)各自係以約30 μg之量存在，RNA (iii)及(iv)各自係以約2.5 μg之量存在，且RNA (v)及(vi)各自係以約12.5 μg之量存在。在一些實施例中，RNA (i)-(vi)各自係以約15 μg之量存在。
在一些實施例中，組合物包含： (i) 包含第一核苷酸序列之RNA，該第一核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第一核苷酸序列與SEQ ID NO: 129至少85%一致； (ii) 包含第二核苷酸序列之RNA，該第二核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第二核苷酸序列與SEQ ID NO: 92至少85%一致； (iii) 包含第三核苷酸序列之RNA，該第三核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第三核苷酸序列與SEQ ID NO: 99至少85%一致； (iv) 包含第四核苷酸序列之RNA，該第四核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第四核苷酸序列與SEQ ID NO: 102至少85%一致；及 (v) 包含第五核苷酸序列之RNA，該第五核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第五核苷酸序列與SEQ ID NO: 107至少85%一致。
在一些實施例中，組合物包含： (i) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 132至少85%一致之核苷酸序列； (ii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之核苷酸序列； (iii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 99至少85%一致之核苷酸序列； (iv) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 104至少85%一致之核苷酸序列；及 (v) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，組合物包含編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之血球凝集素抗原之RNA，其中該流行性感冒A H1N1毒株為流行性感冒A/Wisconsin/588/2019。
在一些實施例中，組合物包含編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之血球凝集素抗原之RNA，其中該流行性感冒A H3N2毒株為流行性感冒A/Cambodia/e0826360/2020。
在一些實施例中，組合物包含編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之血球凝集素抗原之RNA，其中該流行性感冒B Victoria毒株為流行性感冒B/Washington/02/2019。
在一些實施例中，組合物包含編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之血球凝集素抗原之RNA，其中該流行性感冒B Yamagata毒株為流行性感冒B/PHUKET/3073/2013。
在一些實施例中，組合物包含： (i) 包含第一核苷酸序列之RNA，該第一核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第一核苷酸序列與SEQ ID NO: 130至少85%一致； (ii) 包含第二核苷酸序列之RNA，該第二核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第二核苷酸序列與SEQ ID NO: 92至少85%一致； (iii) 包含第三核苷酸序列之RNA，該第三核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第三核苷酸序列與SEQ ID NO: 82至少85%一致； (iv) 包含第四核苷酸序列之RNA，該第四核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第四核苷酸序列與SEQ ID NO: 87至少85%一致；及 (v) 包含第五核苷酸序列之RNA，該第五核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第五核苷酸序列與SEQ ID NO: 107至少85%一致。
在一些實施例中，組合物包含： (i) 包含第一核苷酸序列之RNA，該第一核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第一核苷酸序列與SEQ ID NO: 132至少85%一致； (iii) 包含第二核苷酸序列之RNA，該第二核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第二核苷酸序列與SEQ ID NO: 94至少85%一致； (iv) 包含第三核苷酸序列之RNA，該第三核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第三核苷酸序列與SEQ ID NO: 84至少85%一致； (v) 包含第四核苷酸序列之RNA，該第四核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第四核苷酸序列與SEQ ID NO: 89至少85%一致；及 (vi) 包含第五核苷酸序列之RNA，該第五核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第五核苷酸序列與SEQ ID NO: 109至少85%一致。
在一些實施例中，組合物包含編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之血球凝集素抗原之RNA，其中該流行性感冒A H3N2毒株為流行性感冒A/Darwin/6/2021。
在一些實施例中，組合物包含編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之血球凝集素抗原之RNA，其中該流行性感冒B Victoria毒株為流行性感冒B/Austria/1359417/2021。
在一些實施例中，組合物包含編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之血球凝集素抗原之RNA，其中該流行性感冒B Yamagata毒株為流行性感冒B/PHUKET/3073/2013。
在一些實施例中，組合物包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，組合物包含編碼來自奧密克戎BA.4/5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，組合物包含編碼來自XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，組合物中之每一RNA包含相同的非編碼元件(例如，包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列)。
在一些實施例中，組合物包含質量比為1:5至5:1、1:4至4:1、1:3至3:1或1:2至2:1之RNA (i)及RNA (ii)-(v)。
在一些實施例中，組合物包含質量比為1:1至1:5之RNA (i)及RNA (ii)-(v)。
在一些實施例中，組合物包含質量比為1:1:1:1或1:1:5:5之RNA (ii)、(iii)、(iv)及(v)。
在一些實施例中，組合物包含一或多種編碼SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，及一或多種編碼流行性感冒HA蛋白之RNA，其中(i)該一或多種編碼SARS-CoV-2 S蛋白之RNA與(ii)該一或多種編碼流行性感冒HA蛋白之RNA的質量比為1:5至5:1、1:4至4:1、1:3至3:1或1:2至2:1 (例如1:2或2:1)。
在一些實施例中，組合物包含一或多種編碼SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，其中該一或多種RNA之質量為約30 μg。在一些實施例中，組合物包含一或多種編碼SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，其中該一或多種RNA之質量為約60 μg。
在一些實施例中，組合物包含一或多種編碼流行性感冒HA蛋白之RNA，其中該一或多種編碼流行性感冒HA蛋白之RNA之質量為30 μg。在一些實施例中，組合物包含一或多種編碼流行性感冒HA蛋白之RNA，其中該一或多種編碼流行性感冒HA蛋白之RNA之質量為60 μg。
在一些實施例中，組合物包含： (a) 約30 μg之量的RNA (i)，及各自約7.5 μg之量的RNA (ii)-(v)； (b) 約60 μg之量的RNA (i)，及各自約7.5 μg之量的RNA (ii)-(v)； (c) 約30 μg之量的RNA (i)，及各自約11.25 μg之量的RNA (ii)-(v)； (d) 約30 μg之量的RNA (i)，各自約5 μg之量的RNA (ii)及(iii)，及各自約25 μg之量的RNA (iv)及(v)； (e) 約30 μg之量的RNA (i)，各自約2.5 μg之量的RNA (ii)及(iii)，及各自約12.5 μg之量的RNA (iv)及(v)； (f) 約30 μg之量的RNA (i)，各自約2.5 μg之量的RNA (ii)及(iii)，以及各自約12.5 μg之量的RNA (iv)及(v)；或 (g) 約30 μg之量的RNA (i)，及各自約15 μg之量的RNA (ii)-(v)。
在一些實施例中，本文所闡述之組合物包含： (i) 包含一或多種RNA之冠狀病毒RNA疫苗，每種RNA包含編碼SARS-CoV-2抗原之核苷酸序列；及 (ii) 包含一或多種RNA之流行性感冒RNA疫苗，每種RNA包含一或多種編碼流行性感冒抗原之核苷酸序列，其中該流行性感冒RNA疫苗編碼至少四種流行性感冒抗原，且其中每種流行性感冒抗原來自預測在特定半球之流感季期間傳播之不同的流行性感冒病毒毒株； 其中該組合物中之每一RNA包含相同的非編碼元件，該等非編碼元件包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列。
在一些實施例中，冠狀病毒RNA疫苗中之該一或多種RNA中之每一者及流行性感冒RNA疫苗中之該一或多種RNA中之每一者包括一或多個經修飾之尿苷。
在一些實施例中，本揭示案提供組合物，其包含： 至少二價之冠狀病毒RNA疫苗，其中該冠狀病毒RNA疫苗包含一或多種RNA，該一或多種RNA包含編碼至少兩種SARS-CoV-2抗原之核苷酸序列；及 至少四價之流行性感冒RNA疫苗，其中該流行性感冒RNA疫苗包含一或多種RNA，該一或多種RNA包含編碼至少四種流行性感冒抗原之核苷酸序列，每種流行性感冒抗原來自預測在特定半球之流感季期間傳播之不同的流行性感冒病毒毒株； 其中該冠狀病毒RNA疫苗中及該流行性感冒RNA疫苗中之每種RNA 包含相同的非編碼元件，該等非編碼元件包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列。
在一些實施例中，至少二價冠狀病毒RNA疫苗中之每種RNA及至少四價流行性感冒RNA疫苗中之每種RNA包括經修飾之尿苷代替尿苷。
在一些實施例中，至少二價SARS-CoV-2疫苗包含或編碼至少兩種SARS-CoV-2抗原，該至少兩種SARS-CoV-2抗原為或包含來自SARS-CoV-2毒株之SARS-CoV-2刺突(S)多肽及來自該SARS-CoV-2毒株之變異體之SARS-CoV-2 S多肽。
在一些實施例中，四價流行性感冒疫苗包含或編碼至少四種流行性感冒抗原，該至少四種流行性感冒抗原各自為或包含來自預測在流感季期間傳播之不同的流行性感冒病毒毒株之血球凝集素抗原。在一些實施例中，基於來自北半球或南半球之人類血清學資料，預測每種不同的流行性感冒病毒在流感季期間傳播。
在一些實施例中，冠狀病毒RNA疫苗編碼至少兩種SARS-CoV-2抗原，其各自來自不同的SARS-CoV-2毒株或變異體。
在一些實施例中，至少二價SARS-CoV-2疫苗包含編碼至少兩種SARS-CoV-2抗原之RNA，該至少兩種SARS-CoV-2抗原中之每一者各自由單獨的RNA編碼。
在一些實施例中，至少四價流行性感冒疫苗包含編碼至少四種流行性感冒抗原之RNA，該至少四種流行性感冒抗原中之每一者由單獨的RNA編碼。
在一些實施例中，至少二價冠狀病毒疫苗中之RNA及至少四價流行性感冒疫苗中之RNA係以1:5至5:1、1:4至4:1、1:3至3:1或1:2至2:1之質量比存在。
在一些實施例中，至少四價流行性感冒疫苗包含編碼至少四種流行性感冒抗原之RNA，包括至少兩種來自流行性感冒A病毒之血球凝集素抗原及至少兩種來自流行性感冒B病毒之血球凝集素抗原，其中每種流行性感冒抗原由單獨的RNA編碼。在一些實施例中，編碼來自流行性感冒A病毒之血球凝集素抗原之RNA及編碼來自流行性感冒B病毒之血球凝集素抗原之RNA係以1:1至1:5之質量比存在。在一些實施例中，至少四價流行性感冒疫苗包含至少四種以1:1:1:1之質量比存在之RNA。
在一些實施例中，至少二價冠狀病毒疫苗包含至少兩種RNA，每種RNA編碼不同的冠狀病毒抗原，其中該兩種RNA係以1:1之質量比存在。
在一些實施例中，組合物包含總量為約30 ug至約100 ug (例如約30 ug、約45 ug、約60 ug、約75 ug或約90 ug)之RNA。
在一些實施例中，包含至少二價冠狀病毒疫苗及至少四價流行性感冒疫苗之組合物包含總量為30 ug至100 ug之RNA。
在一些實施例中，本揭示案提供組合物，其包含： 一或多種第一RNA，其各自包含編碼與第一傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列； 一或多種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，其中該第二傳染原與該第一傳染原不同； 其中該組合物中之該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者包含相同的非編碼元件，該等非編碼元件包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列，且 其中該等相同的非編碼元件中之至少一者為或包含： (i) 5’-UTR序列，其為或包含經修飾之人類α-球蛋白5’-UTR； (ii) 3’-UTR序列，其為或包含來自分裂之胺基末端增強子(AES)信使RNA之第一序列及來自粒線體編碼之12S核糖體RNA之第二序列； (iii) 包含至少100個A核苷酸之聚A序列，其中該第一RNA及該第二RNA各自在該3’ UTR與該聚A序列之間不包含至少30個鄰接C核苷酸之區段； (iv) 包含A核苷酸之中斷序列之聚A序列，視情況其中該中斷序列包含30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)，之後為70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)，其中該30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)與該70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)由連接體序列隔開；或 (v) 包含帽1結構之5’帽以及包含RNA之+1、+2、+3、+4及+5位之帽近端序列；其中： (a) 該帽1結構包含m7(3’OMeG)(5')ppp(5')(2'OMeA 1)pG 2，其中A 1為RNA之+1位，且G 2為RNA之+2位；且 (b) 該帽近端序列包含該帽1結構之A 1及G 2，以及包含分別位於RNA之+3、+4及+5位之A 3N 4N 5之序列，其中N 4及N 5各自獨立地選自A、G、C及U。
在一些實施例中，本揭示案提供組合物，其包含： 一或多種第一RNA，其各自包含編碼與第一傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列； 一或多種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，該第二傳染原與該第一傳染原不同； 其中該組合物中之該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者包含相同的非編碼元件，該等非編碼元件包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列，且 其中該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者之特徵在於： (i) 由該組合物中之RNA誘導之免疫反應水準為由該相同RNA在單獨投與時誘導之免疫反應水準的至少80%；及/或 (ii) 由該組合物中之RNA誘導之免疫反應水準為由該相同RNA在個體身體之不同位置與其他RNA分開投與時誘導之免疫反應水準的至少80%；及/或 (iii) 由該組合物中之RNA誘導之免疫反應水準為由各別參考組合物誘導之免疫反應水準的至少80%。
在一些實施例中，各別參考組合物為不活化之病毒疫苗。
在一些實施例中，由一或多種第一RNA及一或多種第二RNA誘導之免疫反應各自為當該一或多種第一RNA及該一或多種第二RNA分開投與時由相同RNA誘導之免疫反應水準的至少100%。
在一些實施例中，由一或多種第一RNA及一或多種第二RNA誘導之免疫反應各自大於由分開投與之相同RNA誘導之免疫反應。
在一些實施例中，一或多種第一RNA及一或多種第二RNA各自以低於分開投與之相同RNA之劑量的劑量存在，其中由較低劑量之該一或多種第一RNA及該一或多種第二RNA誘導之免疫反應各自實質上相當於或大於由較大劑量之分開投與的相同RNA誘導之免疫反應。
在一些實施例中，本文揭示組合物，其包含： 一或多種第一RNA，其各自包含編碼與第一傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列； 一或多種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，該第二傳染原與該第一傳染原不同； 其中該組合物中之該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者包含相同的非編碼元件，該等非編碼元件包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列， 其中該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者分開或一起囊封於奈米顆粒中；且 其中該組合物之特徵在於： (i) 儲存24小時後，該組合物之RNA含量為初始RNA含量之至少95%； (ii) 儲存24小時後，RNA囊封保持為初始RNA囊封之至少95%； (iii) 儲存24小時後，囊封該等第一RNA及該等第二RNA之奈米顆粒維持實質上相同之大小； (iv) 囊封該等第一RNA及該等第二RNA之奈米顆粒在24小時後維持不超過0.3之多分散性；及/或 (v) 儲存24小時後，該第一RNA與該第二RNA之質量比保持實質上相同。
在一些實施例中，本文所揭示之組合物包含奈米顆粒，該等奈米顆粒包含脂質奈米顆粒、多聚複合物(PLX)、脂質化多聚複合物(LPLX)、脂質體或多糖奈米顆粒。在一些實施例中，本文所揭示之組合物包含奈米顆粒，該等奈米顆粒包含脂質奈米顆粒。在一些實施例中，脂質奈米顆粒各自包含：陽離子可電離脂質；及一或多種中性脂質，及聚合物結合之脂質。在一些實施例中，聚合物結合之脂質包含PEG結合脂質。在一些實施例中，奈米顆粒之平均直徑為約50-150 nm。
在一些實施例中，對於(i)-(v)中之每一者，儲存之最初12小時係在30℃下且儲存之剩餘12小時係在2℃-8℃下。
在一些實施例中，一或多種第一RNA包含至少兩種第一RNA，其各自包含編碼與第一傳染原之不同毒株或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
在一些實施例中，一或多種第二RNA包含至少兩種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原之不同毒株或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
在一些實施例中，一或多種第二RNA包含至少三種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原之不同毒株或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
在一些實施例中，一或多種第二RNA包含至少四種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原之不同變異體或毒株相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
在一些實施例中，本文揭示組合物，其包含： 複數種(例如至少兩種、至少三種、至少四種或至少五種或更多種)第一RNA，其各自包含編碼與第一傳染原或其不同毒株及/或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列； 一或多種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，該第二傳染原與該第一傳染原不同； 且其中該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者分開或一起調配於相同的奈米顆粒調配物中； 其中(i)該等第一RNA及該等第二RNA係以1:2至2:1之質量比存在，且/或(ii)該等第一RNA及該等第二RNA係以每劑約10 ug至約100 ug之總量存在；及 一或多種第一RNA，其各自包含編碼與第一傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列； 一或多種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，其中該第二傳染原與該第一傳染原不同； 其中該組合物中之該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者包含相同的非編碼元件，該等非編碼元件包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列，且 其中該等相同的非編碼元件中之至少一者為或包含： (i) 5’-UTR序列，其為或包含經修飾之人類α-球蛋白5’-UTR； (ii) 3’-UTR序列，其為或包含來自分裂之胺基末端增強子(AES)信使RNA之第一序列及來自粒線體編碼之12S核糖體RNA之第二序列； (iii) 包含至少100個A核苷酸之聚A序列，其中該第一RNA及該第二RNA各自在該3’ UTR與該聚A序列之間不包含至少30個鄰接C核苷酸之區段； (iv) 包含A核苷酸之中斷序列之聚A序列，視情況其中該中斷序列包含30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)，之後為70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)，其中該30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)與該70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)由連接體序列隔開；或 (v) 包含帽1結構之5’帽以及包含RNA之+1、+2、+3、+4及+5位之帽近端序列；其中： (a) 該帽1結構包含m7(3’OMeG)(5')ppp(5')(2'OMeA 1)pG 2，其中A 1為RNA之+1位，且G 2為RNA之+2位；且 (b) 該帽近端序列包含該帽1結構之A 1及G 2，以及包含分別位於RNA之+3、+4及+5位之A 3N 4N 5之序列，其中N 4及N 5各自獨立地選自A、G、C及U。
在一些實施例中，將組合物中之每種第一RNA共調配於相同的奈米顆粒調配物中。在一些實施例中，將組合物中之每種第二RNA共調配於相同的奈米顆粒調配物中。在一些實施例中，將組合物中之每種第一RNA及每種第二RNA調配於單獨的奈米顆粒群體中。在一些實施例中，將組合物中之每種第一RNA及每種第二RNA一起共調配於相同的奈米顆粒調配物中。
在一些實施例中，第一傳染原為或包含冠狀病毒。
在一些實施例中，組合物包含一或多種第一RNA，該一或多種第一RNA包含(i)包含編碼與第一冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列的RNA，及(ii)包含編碼與第二冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列的RNA。
在一些實施例中，組合物包含複數種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原或其不同毒株及/或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
在一些實施例中，組合物包含至少兩種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原或其不同毒株及/或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
在一些實施例中，組合物包含至少三種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原或其不同毒株及/或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
在一些實施例中，組合物包含至少四種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原或其不同毒株及/或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
在一些實施例中，第二傳染原為或包含細菌性傳染原。在一些實施例中，細菌性傳染原為肺炎鏈球菌( Streptococcus pneumoniae)。
在一些實施例中，第二傳染原為或包含病毒性傳染原。在一些實施例中，病毒性傳染原誘發傳染性呼吸疾病。在一些實施例中，病毒性傳染原為或包含流行性感冒病毒、肺病毒科病毒或副黏液病毒科(Paramyxoviridae)病毒。在一些實施例中，肺病毒科病毒為呼吸道融合病毒(RSV)。在一些實施例中，傳染性呼吸疾病為或包含流行性感冒A型、B型及/或C型病毒。在一些實施例中，傳染性呼吸疾病為或包含流行性感冒A型及/或B型病毒。
在一些實施例中，組合物包含(i)至少一種RNA，其包含編碼與流行性感冒A型病毒相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，及(ii)至少一種RNA，其包含編碼與流行性感冒B型病毒相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
在一些實施例中，組合物包含至少兩種RNA，其各自包含編碼與流行性感冒A型病毒之不同毒株相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，及至少兩種RNA，其各自包含編碼與流行性感冒B型病毒之不同毒株相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
在一些實施例中，與流行性感冒病毒相關之抗原性多肽為血球凝集素(HA)多肽、神經胺酸酶(NA)多肽或其組合，或其免疫原性片段。
在一些實施例中，例如基於人類血清學資料，流行性感冒A型及/或流行性感冒B型病毒之毒株已預測為或為即將到來的流感季之傳播毒株。
在一些實施例中，流行性感冒A病毒之毒株係選自H1N1、H1N2、H2N2、H3N1、H3N2、H3N8、H5N1、H5N2、H5N3、H5N8、H5N9、H7N1、H7N2、H7N3、H7N4、H7N7、H7N9、H9N2、H10N7及H10N8病毒。在一些實施例中，流行性感冒A型病毒之毒株係選自H1N1、H3N2、H5N1及H5N8病毒。
在一些實施例中，組合物包含一或多種第二RNA，該一或多種第二RNA包含含有編碼與H1N1病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列的RNA。在一些實施例中，H1N1病毒為A/Wisconsin/588/2019。在一些實施例中，與A/Wisconsin/588/2019相關之抗原性多肽為HA多肽，且包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之胺基酸序列。在一些實施例中，與A/Wisconsin/588/2019相關之抗原性多肽為HA多肽，且編碼該HA多肽之RNA包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，組合物包含一或多種第二RNA，該一或多種第二RNA包含含有編碼與H3N2病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列的RNA。在一些實施例中，H3N2病毒為A/Cambodia/e0826360/2020。在一些實施例中，與A/Cambodia/e0826360/2020相關之抗原性多肽為HA多肽，且包含與SEQ ID NO: 95至少85%一致之胺基酸序列。在一些實施例中，與A/Cambodia/e0826360/2020相關之抗原性多肽為HA多肽，且編碼該HA多肽之RNA包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之核苷酸序列。在一些實施例中，H3N2病毒為A/Darwin/6/2021。在一些實施例中，與A/Darwin/6/2021相關之抗原性多肽為HA多肽，且包含與SEQ ID NO: 80至少85%一致之胺基酸序列。在一些實施例中，與A/Darwin/6/2021相關之抗原性多肽為HA多肽，且編碼該HA多肽之RNA包含與SEQ ID NO: 82至少85%一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，組合物包含一或多種第二RNA，該一或多種第二RNA包含含有編碼與B/Yamagata或B/Victoria譜系病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列的RNA。在一些實施例中，B/Victoria譜系流行性感冒病毒為B/Washington/02/2019。在一些實施例中，與B/Washington/02/2019相關之抗原性多肽為HA多肽，且包含與SEQ ID NO: 100至少85%一致之胺基酸序列。在一些實施例中，與B/Washington/02/2019相關之抗原性多肽為HA多肽，且編碼該HA多肽之RNA包含與SEQ ID NO: 102至少85%一致之核苷酸序列。在一些實施例中，B/Victoria譜系流行性感冒病毒為B/Austria/1359417/2021。在一些實施例中，與B/Austria/1359417/2021相關之抗原性多肽為HA多肽，且包含與SEQ ID NO: 85至少85%一致之序列。在一些實施例中，與B/Austria/1359417/2021相關之抗原性多肽為HA多肽，且編碼該HA多肽之RNA包含與SEQ ID NO: 87至少85%一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，B/Yamagata譜系流行性感冒病毒為B/Phuket/3073/2013。在一些實施例中，與B/Phuket/3073/2013相關之抗原性多肽為HA多肽，且包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之胺基酸序列。在一些實施例中，與B/Phuket/3073/2013相關之抗原性多肽為HA多肽，且編碼HA多肽之RNA包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，第一傳染原為冠狀病毒。在一些實施例中，冠狀病毒為阿爾法冠狀病毒(alphacoronavirus)、貝塔冠狀病毒、伽馬冠狀病毒(gammacoronavirus)或德爾塔冠狀病毒(deltacoronavirus)。在一些實施例中，冠狀病毒為貝塔冠狀病毒。在一些實施例中，貝塔冠狀病毒為沙貝病毒(sarbecovirus)、瑪貝病毒(merbecovirus)、埃貝病毒(embecorvius)、諾貝病毒(nobecovirus)或希貝病毒(hibecorvirus)。在一些實施例中，沙貝病毒為SARS-CoV-1或SARS-CoV-2。在一些實施例中，沙貝病毒為SARS-CoV-2。在一些實施例中，瑪貝病毒為MERS-CoV。
在一些實施例中，組合物包含一或多種第一RNA，該一或多種第一RNA包含如下RNA，該RNA包含編碼與SARS-CoV-2變異體相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，在投與時該SARS-CoV-2變異體在相關群體中流行或已鑑別為所關注變異體。
在一些實施例中，組合物包含一或多種第一RNA，該一或多種第一RNA包含如下RNA，該RNA包含編碼與奧密克戎SARS-CoV-2變異體(例如BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5變異體)相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
在一些實施例中，本文所揭示之組合物包含(i)包含編碼與第一SARS-CoV-2毒株相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列的RNA，其中該第一SARS-CoV-2毒株為SARS-CoV-2原始毒株(武漢毒株)，及(ii)包含編碼與第二SARS-CoV-2變異體相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列的RNA，其中該第二SARS-CoV-2為該SARS-CoV-2原始毒株之變異體，且在投與時在相關群體中流行或已鑑別為所關注變異體。
在一些實施例中，組合物包含(i)包含編碼與第一SARS-CoV-2變異體相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列的RNA，及(ii)包含編碼與第二SARS-CoV-2變異體相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列的RNA，其中該第一SARS-CoV-2變異體及該第二SARS-CoV-2變異體各自在投與時在相關群體中流行或已鑑別為所關注變異體。在一些實施例中，第二SARS-CoV-2變異體為SARS-CoV-2之奧密克戎變異體。在一些實施例中，SARS-CoV-2之奧密克戎變異體為或包含奧密克戎BA.1、BA.2或BA.4/5。在一些實施例中，與冠狀病毒相關之抗原性多肽為刺突(S)多肽，或其免疫原性片段或變異體。在一些實施例中，S多肽為融合前穩定之S多肽。在一些實施例中，融合前穩定之S多肽包含至少兩個脯胺酸取代。在一些實施例中，該兩個脯胺酸取代包含在對應於SEQ ID NO: 1之殘基986及987之位置處的脯胺酸殘基。在一些實施例中，融合前穩定之S多肽包含至少六個脯胺酸取代。在一些實施例中，融合前穩定之S多肽包含在對應於SEQ ID NO: 1之殘基817、892、899及942之位置處的脯胺酸殘基。在一些實施例中，編碼與奧密克戎SARS-CoV-2變異體相關之一或多種抗原性多肽之RNA編碼與XBB.1.5毒株相關之S蛋白，且包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之胺基酸序列。
在一些實施例中，編碼與SARS-CoV-2原始毒株相關之一或多種抗原性多肽之RNA編碼與武漢毒株相關之S蛋白，且包含與SEQ ID NO: 1至少85%一致之胺基酸序列。在一些實施例中，編碼SEQ ID NO: 1之RNA包含與SEQ ID NO: 9至少85%一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，編碼與第二SARS-CoV-2變異體相關之一或多種抗原性多肽之RNA編碼與BA.4/5變異體相關之S蛋白，且包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之胺基酸序列。在一些實施例中，編碼SEQ ID NO: 69之RNA包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，本文所揭示之組合物包含： (i) (a)包含編碼來自SARS-CoV-2奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5變異體)之SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列的RNA，或(b)包含編碼來自SARS-CoV-2原始毒株(武漢毒株)之SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列的RNA，及包含編碼來自SARS-CoV-2奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5變異體)之SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列的RNA；及 (ii) 包含編碼來自流行性感冒A/H1N1病毒之HA多肽之核苷酸序列的RNA，包含編碼來自流行性感冒A/H3N2病毒之HA多肽之核苷酸序列的RNA，包含編碼來自流行性感冒B/Victoria譜系病毒之HA多肽之核苷酸序列的RNA，及包含編碼來自流行性感冒B/Yamagata病毒之HA多肽之核苷酸序列的RNA。
在一些實施例中，H1N1病毒為A/Wisconsin/588/2019。在一些實施例中，與A/Wisconsin/588/2019相關之HA多肽包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之序列。在一些實施例中，與A/Wisconsin/588/2019相關之HA多肽由包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之核苷酸序列的RNA編碼。
在一些實施例中，H3N2病毒為A/Cambodia/e0826360/2020。在一些實施例中， 與A/Cambodia/e0826360/2020相關之HA多肽包含與SEQ ID NO: 95至少85%一致之序列。在一些實施例中，與A/Cambodia/e0826360/2020相關之HA多肽由包含與SEQ ID NO: 97至少85%一致之序列的RNA編碼。
在一些實施例中，B/Victoria譜系流行性感冒病毒為B/Washington/02/2019。在一些實施例中，與B/Washington/02/2019相關之HA多肽包含與SEQ ID NO: 100至少85%一致之胺基酸序列。在一些實施例中，與B/Washington/02/2019相關之HA多肽由包含與SEQ ID NO: 102至少85%一致之核苷酸序列的RNA編碼。
在一些實施例中，B/Yamagata譜系流行性感冒病毒為B/Phuket/3073/2013。在一些實施例中，與B/Phuket/3073/2013相關之HA多肽包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之胺基酸序列。在一些實施例中，與B/Phuket/3073/2013相關之HA多肽由包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之序列的RNA編碼。
在一些實施例中，與武漢毒株相關之S多肽包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之序列。
在一些實施例中，與武漢毒株相關之S多肽包含與SEQ ID NO: 9至少85%一致之序列。
在一些實施例中，奧密克戎變異體為BA.4/5變異體。在一些實施例中，與BA.4/5奧密克戎變異體相關之S多肽包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列。在一些實施例中，與BA.4/5奧密克戎變異體相關之S多肽由包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之序列的RNA編碼。
在一些實施例中，奧密克戎變異體為XBB.1.5變異體。在一些實施例中，與XBB.1.5奧密克戎變異體相關之S多肽包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列。在一些實施例中，與XBB.1.5變異體相關之S多肽由包含與SEQ ID NO: 130至少85%一致之序列的RNA編碼。
在一些實施例中，本文所揭示組合物中之每一RNA包含相同的非編碼元件，其中該等非編碼元件中之至少一者為或包含： (i) 5’-UTR序列，其為或包含經修飾之人類α-球蛋白5’-UTR； (ii) 3’-UTR序列，其為或包含來自分裂之胺基末端增強子(AES)信使RNA之第一序列及來自粒線體編碼之12S核糖體RNA之第二序列； (iii) 包含至少100個A核苷酸之聚A序列，其中該第一RNA及該第二RNA各自在該3’ UTR與該聚A序列之間不包含至少30個鄰接C核苷酸之區段； (iv) 包含A核苷酸之中斷序列之聚A序列，視情況其中該中斷序列包含30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)，之後為70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)，其中該30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)與該70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)由連接體序列隔開；或 (v) 包含帽1結構之5’帽以及包含RNA之+1、+2、+3、+4及+5位之帽近端序列；其中： (a) 該帽1結構包含m7(3’OMeG)(5')ppp(5')(2'OMeA 1)pG 2，其中A 1為RNA之+1位，且G 2為RNA之+2位；且 (b) 該帽近端序列包含該帽1結構之A 1及G 2，以及包含分別位於RNA之+3、+4及+5位之A 3N 4N 5之序列，其中N 4及N 5各自獨立地選自A、G、C及U。
在一些實施例中，組合物中之每一RNA包含相同的非編碼元件，其中該等相同的非編碼元件中之至少一者為或包含： (i) 5’-UTR序列，其為或包含經修飾之人類α-球蛋白5’-UTR； (ii) 3’-UTR序列，其為或包含來自分裂之胺基末端增強子(AES)信使RNA之第一序列及來自粒線體編碼之12S核糖體RNA之第二序列； (iii) 包含至少100個A核苷酸之聚A序列，其中該第一RNA及該第二RNA各自在該3’ UTR與該聚A序列之間不包含至少30個鄰接C核苷酸之區段； (iv) 包含A核苷酸之中斷序列之聚A序列，視情況其中該中斷序列包含30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)，之後為70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)，其中該30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)與該70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)由連接體序列隔開；及 (v) 包含帽1結構之5’帽以及包含RNA之+1、+2、+3、+4及+5位之帽近端序列；其中： (a) 該帽1結構包含m7(3’OMeG)(5')ppp(5')(2'OMeA 1)pG 2，其中A 1為RNA之+1位，且G 2為RNA之+2位；且 (b) 該帽近端序列包含該帽1結構之A 1及G 2，以及包含分別位於RNA之+3、+4及+5位之A 3N 4N 5之序列，其中N 4及N 5各自獨立地選自A、G、C及U。
在一些實施例中，組合物中之每一RNA以5’至3’定向包含5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列。
在一些實施例中，組合物中之每一RNA包含5’-帽，該5’-帽為或包含m 2 7,3’-OGppp(m 1 2’-O)ApG。
在一些實施例中，組合物中之每一RNA包含5' UTR，該5' UTR包含人類α-球蛋白5’-UTR或由其組成。在一些實施例中，人類α-球蛋白5’-UTR包含SEQ ID NO: 12。
在一些實施例中，組合物中之每一RNA包含3’ UTR，該3’ UTR包含來自分裂之胺基末端增強子(AES)信使RNA之第一序列及來自粒線體編碼之12S核糖體RNA之第二序列，或由其組成。在一些實施例中，組合物中之每一RNA包含3’ UTR，該3’ UTR包含根據SEQ ID NO: 13之序列或由其組成。
在一些實施例中，組合物中之每一RNA包含聚A尾序列，該聚A尾序列為中斷之聚A尾序列。在一些實施例中，中斷之聚A尾序列包含30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)，之後為70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)，其中該30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)與該70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)由連接體序列隔開。在一些實施例中，中斷之聚A尾序列包含根據SEQ ID NO: 14之核糖核酸序列或由其組成。
在一些實施例中，組合物中之每一RNA包括經修飾之尿苷代替所有尿苷。在一些實施例中，經修飾之尿苷為N1-甲基-假尿苷。
在一些實施例中，組合物包含一或多種第一RNA及一或多種第二RNA，其質量比為1:5至5:1、1:4至4:1、1:3至3:1或1:2至2:1。
在一些實施例中，將組合物中之每一RNA調配於奈米顆粒中。
在一些實施例中，將組合物中之所有第一RNA一起共調配於相同的奈米顆粒群體中，且將組合物中之所有第二RNA一起共調配於相同的奈米顆粒群體中，其中該等第一RNA及該等第二RNA調配於單獨的奈米顆粒群體中。
在一些實施例中，將組合物中之所有第一RNA及所有第二RNA一起共調配於相同的奈米顆粒群體中。
在一些實施例中，奈米顆粒包含脂質奈米顆粒、多聚複合物(PLX)、脂質化多聚複合物(LPLX)、脂質體或多糖奈米顆粒。在一些實施例中，奈米顆粒包含脂質奈米顆粒。在一些實施例中，脂質奈米顆粒包含：陽離子可電離脂質；及一或多種中性脂質，及聚合物結合之脂質。在一些實施例中，聚合物結合之脂質包含PEG結合脂質。在一些實施例中，奈米顆粒之平均直徑為約50-150 nm。
在一些實施例中，本文所揭示之組合物進一步包含一或多種第三RNA，其各自包含編碼與第三傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，該第三傳染原不同於第一傳染原及第二傳染原。在一些實施例中，本文所揭示之組合物進一步包含與第三傳染原相關之一或多種抗原性多肽，該第三傳染原不同於第一傳染原及第二傳染原。在一些實施例中，第三傳染原為呼吸病毒(例如不為SARS-CoV-2病毒或流行性感冒病毒之呼吸病毒)。在一些實施例中，第三傳染原為呼吸道融合病毒(RSV)。
在一些實施例中，組合物包含一或多種RNA，其各自編碼RSV多肽。在一些實施例中，組合物包含一或多種RSV多肽。在一些實施例中，組合物包含一或多種RNA，其各自編碼RSV F蛋白、其變異體或者RSV F蛋白或其變異體之免疫原性片段。在一些實施例中，組合物包含一或多種RSV F蛋白、其免疫原性變異體或者RSV F蛋白或其變異體之免疫原性片段。
在一些實施例中，本文所闡述之組合物包含： (i) 一或多種RNA，其各自編碼RSV亞型A病毒之多肽(例如F蛋白、其變異體或者F蛋白或其變異體之免疫原性片段)，及一或多種RNA，其各自編碼RSV亞型B病毒之多肽(例如F蛋白、其變異體或者F蛋白或其變異體之免疫原性片段)；或 (ii) RSV亞型A病毒之一或多種多肽(例如F蛋白、其變異體或者F蛋白或其變異體之免疫原性片段)及RSV亞型B病毒之一或多種多肽(例如F蛋白、其變異體或者F蛋白或其變異體之免疫原性片段)。
在一些實施例中，RSV F蛋白、變異體或免疫原性片段以融合前構形穩定。在一些實施例中，組合物包含或描述RSVpreF (亦稱為Abrysvo TM)及Arexvy TM。
在一些實施例中，本揭示案提供醫藥組合物，其包含本文所揭示之組合物及至少一種醫藥學上可接受之賦形劑。在一些實施例中，醫藥組合物包含低溫保護劑，視情況其中該低溫保護劑為或包含蔗糖。在一些實施例中，醫藥組合物包含緩衝水溶液，視情況其中該緩衝水溶液包含Tris鹼、Tris HCl、NaCl、KCl、Na 2HPO 4及KH 2PO 4中之一或多者。
在一些實施例中，醫藥組合物經調配以提供100 μg或更少劑量之總RNA。在一些實施例中，醫藥組合物經調配以提供90 μg劑量之總RNA。在一些實施例中，醫藥組合物經調配以提供60 μg劑量之總RNA。在一些實施例中，醫藥組合物經調配以提供30 μg劑量之一或多種第一RNA及60 μg劑量之一或多種第二RNA。在一些實施例中，醫藥組合物經調配以提供60 μg劑量之一或多種第一RNA及30 μg劑量之一或多種第二RNA。在一些實施例中，醫藥組合物經調配以提供30 μg劑量之一或多種第一RNA及30 μg劑量之一或多種第二RNA。
在一些實施例中，醫藥組合物包含四種第二RNA，其各自包含編碼與不同的流行性感冒抗原相關之抗原性多肽之核苷酸序列，且其中該醫藥組合物經調配以提供15 μg劑量之每種第二RNA。
在一些實施例中，醫藥組合物包含四種第二RNA，其各自包含編碼與不同的流行性感冒抗原相關之抗原性多肽之核苷酸序列，且其中該醫藥組合物經調配以提供7.5 μg劑量之每種第二RNA。
在一些實施例中，醫藥組合物包含兩種第一RNA，其各自包含編碼與不同的冠狀病毒抗原相關之抗原性多肽之核苷酸序列，且其中該醫藥組合物經調配以提供15 μg劑量之每種第一RNA。
在一些實施例中，醫藥組合物包含兩種第一RNA，其各自包含編碼與不同的冠狀病毒抗原相關之抗原性多肽之核苷酸序列，且其中該醫藥組合物經調配以提供30 μg劑量之每種第一RNA。
在一些實施例中，本文揭示一種方法，其包括向個體投與本文所揭示之組合物或醫藥組合物。
在一些實施例中，本文揭示一種方法，其包括向個體投與一或多個劑量之本文所揭示之醫藥組合物。
在一些實施例中，本文所揭示之方法係用於治療冠狀病毒疾病及流行性感冒疾病之方法。在一些實施例中，本文所揭示之方法係用於治療冠狀病毒疾病及RSV疾病之方法。在一些實施例中，本文所揭示之方法係用於治療冠狀病毒疾病、流行性感冒疾病及RSV疾病之方法。
在一些實施例中，本文所揭示之方法係用於預防冠狀病毒疾病及流行性感冒疾病之方法。在一些實施例中，本文所揭示之方法係用於預防冠狀病毒疾病及RSV疾病之方法。在一些實施例中，本文所揭示之方法係用於預防冠狀病毒疾病、流行性感冒疾病及RSV疾病之方法。
在一些實施例中，本文所揭示之方法係用於誘導針對一或多種冠狀病毒及一或多種流行性感冒病毒之免疫反應之方法。在一些實施例中，本文所揭示之方法係用於誘導針對一或多種冠狀病毒及一或多種RSV之免疫反應之方法。在一些實施例中，本文所揭示之方法係用於誘導針對一或多種冠狀病毒、一或多種流行性感冒病毒及一或多種RSV之免疫反應之方法。
在一些實施例中，一或多個劑量之組合物或醫藥組合物與針對第三傳染原之疫苗共投與。在一些實施例中，第三傳染原為可引起呼吸疾病之病毒。在一些實施例中，第三傳染原為RSV。在一些實施例中，針對第三傳染原之疫苗為Arexvy TM或Abrysvo TM。
在一些實施例中，在即將投與給個體之前將針對第三傳染原之疫苗與一或多個劑量之組合物或一或多個劑量之本文所闡述醫藥組合物混合。在一些實施例中，將針對第三傳染原之疫苗與一或多個劑量之組合物或一或多個劑量之醫藥組合物分開投與(例如，其中針對該第三傳染原之該疫苗與該一或多個劑量之該組合物或該一或多個劑量之該醫藥組合物在分開的注射部位(例如在對側手臂上)投與給個體。
在一些實施例中，本文揭示組合物或醫藥組合物，其用於治療冠狀病毒疾病、流行性感冒疾病及/或RSV疾病(例如冠狀病毒疾病及流行性感冒疾病；冠狀病毒疾病及RSV疾病；或冠狀病毒疾病、流行性感冒疾病及RSV疾病)，其包括向個體投與一或多個劑量之該組合物或該醫藥組合物。
在一些實施例中，本文揭示組合物或醫藥組合物，其用於預防冠狀病毒疾病、RSV疾病及/或流行性感冒疾病(例如冠狀病毒疾病及流行性感冒疾病；冠狀病毒疾病及RSV疾病；或冠狀病毒疾病、流行性感冒疾病及RSV疾病)，其中該用途包括向個體投與一或多個劑量之該組合物或該醫藥組合物。在一些實施例中，用途包括投與兩個或更多個劑量之該組合物或該醫藥組合物。在一些實施例中，該兩個或更多個劑量相隔至少約21天投與。
在一些實施例中，本文所揭示之方法或用途包括向個體投與三個或更多個劑量之組合物或醫藥組合物。
在一些實施例中，方法或用途包括向先前已暴露於冠狀病毒及/或流行性感冒病毒(例如藉由疫苗接種或藉由感染)之個體投與。
在一些實施例中，方法或用途在個體中誘導針對一或多種冠狀病毒、一或多種RSV及/或一或多種流行性感冒病毒(例如一或多種冠狀病毒及一或多種流行性感冒病毒；一或多種冠狀病毒及一或多種RSV；或一或多種冠狀病毒、一或多種流行性感冒病毒及一或多種RSV)之免疫反應。在一些實施例中，免疫反應包含B細胞反應。在一些實施例中，B細胞反應包含產生針對一或多種抗原之抗體。在一些實施例中，免疫反應包含T細胞反應。在一些實施例中，T細胞反應為或包含CD4+ T細胞反應。在一些實施例中，T細胞反應為或包含CD8+ T細胞反應。
在一些實施例中，本文揭示本文所揭示之醫藥組合物治療冠狀病毒疾病、RSV疾病及/或流行性感冒疾病(例如冠狀病毒疾病及流行性感冒疾病；冠狀病毒疾病及RSV疾病；或冠狀病毒疾病、流行性感冒疾病及RSV疾病)之方法或用途。
在一些實施例中，本文揭示組合物(例如本文所闡述之組合物)或醫藥組合物(例如本文所闡述之醫藥組合物)，其用於預防冠狀病毒疾病、RSV疾病及/或流行性感冒疾病(例如冠狀病毒疾病及流行性感冒疾病；冠狀病毒疾病及RSV疾病；或冠狀病毒疾病、流行性感冒疾病及RSV疾病)。在一些實施例中，本文揭示組合物或醫藥組合物，其用於在個體中誘導針對一或多種冠狀病毒、及一或多種RSV、及一或多種流行性感冒病毒(例如一或多種冠狀病毒及一或多種流行性感冒病毒；一或多種冠狀病毒及一或多種RSV；或一或多種冠狀病毒、一或多種流行性感冒病毒及一或多種RSV)之免疫反應。
在一些實施例中，組合物包含： 一或多種RNA，其各自編碼第一傳染原之多肽；及 第二傳染原之一或多種多肽。
在一些實施例中，組合物包含一或多種RNA，其各自編碼冠狀病毒(例如SARS-CoV-2病毒)之多肽。在一些實施例中，組合物包含一或多種RNA，其各自編碼SARS-CoV-2 S蛋白、其變異體或者SARS-CoV-2 S蛋白或其變異體之免疫原性片段。在一些實施例中，組合物包含一或多種RNA，其各自編碼武漢毒株或SARS-CoV-2變異體(例如奧密克戎變異體(例如奧密克戎BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5變異體(例如本文所闡述之RNA)))之SARS-CoV-2 S蛋白、其變異體或者SARS-CoV-2 S蛋白或其變異體之免疫原性片段。在一些實施例中，組合物包含流行性感冒病毒之一或多種多肽。在一些實施例中，組合物包含一或多種流行性感冒病毒之一或多種多肽(例如兩種或更多種流行性感冒病毒毒株之一或多種多肽(例如在相關轄區流行或已預測在相關轄區流行之四種或更多種流行性感冒病毒毒株之一或多種多肽))。在一些實施例中，組合物包含市售流行性感冒病毒(例如重組市售流行性感冒病毒或本文所闡述之不活化之病毒疫苗)。在一些實施例中，市售流行性感冒病毒為Flublok或Fluzone。在一些實施例中，組合物包含RSV之一或多種多肽。在一些實施例中，組合物包含與第一RSV亞型相關之一或多種多肽及第二RSV亞型之一或多種多肽。在一些實施例中，組合物包含一或多種RSV F蛋白、其變異體或者RSV F蛋白或其變異體之免疫原性片段。在一些實施例中，組合物包含RSV F蛋白或其免疫原性片段，其包含一或多個穩定F蛋白之融合前構形之突變。在一些實施例中，組合物包含Arexvy TM或ABRYSVO TM。在一些實施例中，組合物包含第三傳染原之一或多種多肽。
在一些實施例中，組合物包含： 一或多種RNA，每種RNA編碼冠狀病毒之一或多種多肽(例如SARS-CoV-2 S蛋白、其變異體或前述中任一者之免疫原性片段)； 一或多種流行性感冒病毒之一或多種多肽；及 一或多種RSV之一或多種多肽。
在一些實施例中，組合物包含 編碼奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA (例如編碼本文所闡述之奧密克戎BA.1、BA.4/5或XBB.1.5變異體之S蛋白的RNA)； 重組流行性感冒疫苗(例如，如本文所闡述(例如FluBlok疫苗))或不活化之病毒疫苗(例如，如本文所闡述(例如Fluzone))；及 RSV疫苗，其包含融合前穩定之F蛋白或其免疫原性片段(例如本文所闡述之RSV疫苗(例如Arexvy TM或ABRYSVO TM))。
在一些實施例中，本文闡述一種組合，其包含SARS-CoV-2疫苗，該SARS-CoV-2疫苗包含編碼融合前穩定之SARS-CoV-2刺突蛋白或其變異體之一或多種mRNA；及 (a) 流行性感冒疫苗，其包含(i)編碼流行性感冒病毒之HA蛋白之一或多種mRNA，或(ii)一或多種HA多肽，及/或 (b) RSV疫苗，其包含一或多種融合前穩定之RSV F蛋白或其免疫原性片段。
在一些實施例中，組合包含編碼融合前穩定之SARS-CoV-2刺突蛋白或其變異體之一或多種mRNA，其中該一或多種mRNA調配為LNP。
在一些實施例中，組合物包含編碼流行性感冒病毒之HA蛋白之一或多種mRNA，其中該一或多種mRNA調配為LNP。
在一些實施例中，組合包含(1) SARS-CoV-2疫苗，其包含編碼融合前穩定之SARS-CoV-2刺突蛋白或其變異體之一或多種mRNA，及(2)流行性感冒疫苗或RSV疫苗，其中該(1) SARS-CoV-2疫苗及該(2)流行性感冒疫苗或RSV疫苗係在單獨的容器(例如小瓶或注射器)中提供。在一些實施例中，組合包含(1) SARS-CoV-2疫苗，其包含編碼融合前穩定之SARS-CoV-2刺突蛋白或其變異體之一或多種mRNA，及(2)流行性感冒疫苗或RSV疫苗，其中該(1) SARS-CoV-2疫苗及該(2)流行性感冒疫苗或RSV疫苗係在單一容器(例如小瓶或注射器)中提供。
在一些實施例中，組合包含SARS-CoV-2疫苗、流行性感冒疫苗及RSV疫苗。在一些實施例中，組合包含SARS-CoV-2疫苗、流行性感冒疫苗及RSV疫苗，其全部均在單一容器(例如小瓶或注射器)中提供。在一些實施例中，組合包含SARS-CoV-2疫苗、流行性感冒疫苗及RSV疫苗，其各自在單獨的容器(例如單獨的小瓶及/或注射器)中提供。
在一些實施例中，組合包含： (a) 在單一容器中提供之SARS-CoV-2疫苗及流行性感冒疫苗，及在單獨容器中提供之RSV疫苗；或 (b) 在單一容器中提供之SARS-CoV-2疫苗及RSV疫苗，及在單獨容器中提供之流行性感冒疫苗。
在一些實施例中，組合包含SARS-CoV-2疫苗，其為BNT162b2 (例如本文所闡述之單價或二價疫苗)。
在一些實施例中，組合包含流行性感冒疫苗，其為重組流行性感冒疫苗(例如，如本文所闡述(例如FluBlok疫苗))；或包含不活化之流行性感冒病毒(例如Fluzone)。在一些實施例中，組合包含RSV疫苗，其包含融合前穩定之F蛋白或其免疫原性片段(例如本文所闡述之RSV疫苗(例如RSVpreF或ABRYSVO TM))。
在一些實施例中，本文揭示誘導針對第一傳染原及第二傳染原之免疫反應之方法，其中該方法包括投與(i)第一奈米顆粒調配之RNA，其包含編碼與第一傳染原相關之抗原性多肽之核苷酸序列，及(ii)第二LNP調配之RNA，其包含編碼與第二傳染原相關之抗原性多肽之核苷酸序列， 其中所誘導之針對該第一傳染原及該第二傳染原中之每一者之免疫反應大於分開投與LNP時所誘導之免疫反應。
在一些實施例中，本文揭示用於減少產生針對第一傳染原之免疫反應所需的第一LNP調配之RNA之量的方法，其中該第一LNP之RNA之RNA包含編碼與第一傳染原相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列， 其中該方法包括共投與第二LNP調配之RNA，該RNA包含編碼與第二傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，且 其中該第一傳染原不同於該第二傳染原。
此外，本文尤其提供器皿，其包含最近摻合之組合，該組合包含：SARS-CoV-2疫苗及流行性感冒疫苗；SARS-CoV-2疫苗及RSV疫苗；或SARS-CoV-2疫苗、流行性感冒疫苗及RSV疫苗。
在一些實施例中，器皿包含最近摻合之組合，該組合包含： (a) SARS-CoV-2疫苗；及 (b) 流行性感冒疫苗； 其中該SARS-CoV-2疫苗包含一或多種編碼SARS-CoV-2刺突(S)蛋白之免疫原性部分之RNA，且該等RNA調配於奈米顆粒(例如脂質奈米顆粒(LNP))中；且 其中該流行性感冒疫苗：(i)為奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA疫苗，或(ii)包含一或多種流行性感冒病毒毒株之一或多種抗原性多肽(例如HA蛋白)。
在一些實施例中，器皿包含最近摻合之組合，該組合包含： (a) SARS-CoV-2疫苗；及 (b) RSV疫苗； 其中該SARS-CoV-2疫苗包含一或多種編碼SARS-CoV-2刺突(S)蛋白之免疫原性部分之RNA，且該等RNA調配於奈米顆粒(例如脂質奈米顆粒(LNP))中；且 其中該RSV疫苗包含與一或多種RSV毒株相關之一或多種抗原性多肽(例如F蛋白或其免疫原性片段)。
在一些實施例中，器皿包含最近摻合之組合，該組合包含： (a) SARS-CoV-2疫苗； (b) RSV疫苗； (c) 流行性感冒疫苗； 其中該SARS-CoV-2疫苗包含一或多種編碼SARS-CoV-2刺突(S)蛋白之免疫原性部分之RNA，且該等RNA調配於奈米顆粒(例如脂質奈米顆粒(LNP))中；且 其中該RSV疫苗包含與一或多種RSV毒株相關之一或多種抗原性多肽(例如F蛋白或其免疫原性片段)；且 其中該流行性感冒疫苗：(i)為奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA疫苗，或(ii)包含一或多種流行性感冒病毒毒株之一或多種抗原性多肽(例如HA蛋白)。
在一些實施例中，器皿包含SARS-CoV-2疫苗，其為單價或二價疫苗。
在一些實施例中，器皿包含流行性感冒疫苗，其中該流行性感冒疫苗為四價疫苗。
在一些實施例中，器皿包含流行性感冒疫苗，其為不活化之流行性感冒病毒、重組流行性感冒疫苗、活減毒流行性感冒疫苗、無佐劑流行性感冒疫苗、含佐劑流行性感冒疫苗或亞單位或裂解疫苗。
在一些實施例中，器皿包含RSV疫苗，其包含一或多種RSV毒株之融合前穩定之F蛋白或其免疫原性片段。
在一些實施例中，器皿為注射器或小瓶。
此外，本文尤其提供對人類個體同時進行針對SARS-CoV-2及流行性感冒中之每一者、SARS-CoV-2及RSV中之每一者或SARS-CoV-2、流行性感冒及RSV中之每一者的疫苗接種之方法。
在一些實施例中，對人類個體同時進行針對SARS-CoV-2及流行性感冒中之每一者的疫苗接種之方法包括： 向同一部位同時投與SARS-CoV-2疫苗組合物及流行性感冒疫苗組合物； 其中該SARS-CoV-2疫苗包含一或多種編碼SARS-CoV-2刺突(S)蛋白之免疫原性部分之RNA，且該等RNA調配於奈米顆粒(例如脂質奈米顆粒(LNP))中；且 其中該流行性感冒疫苗：(i)為奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA疫苗，或(ii)包含一或多種流行性感冒病毒毒株之一或多種抗原性多肽(例如HA蛋白)。
在一些實施例中，對人類個體同時進行針對SARS-CoV-2及RSV中之每一者的疫苗接種之方法包括： 向同一部位同時投與SARS-CoV-2疫苗組合物及RSV疫苗組合物； 其中該SARS-CoV-2疫苗包含一或多種編碼SARS-CoV-2刺突(S)蛋白之免疫原性部分之RNA，且該等RNA調配於奈米顆粒(例如脂質奈米顆粒(LNP))中；且 其中該RSV疫苗包含與一或多種RSV毒株相關之一或多種抗原性多肽(例如F蛋白或其免疫原性片段)。
在一些實施例中，對人類個體同時進行針對SARS-CoV-2、流行性感冒及RSV中之每一者的疫苗接種之方法包括： 向同一部位同時投與SARS-CoV-2疫苗組合物、流行性感冒疫苗組合物及RSV疫苗組合物； 其中該SARS-CoV-2疫苗包含一或多種編碼SARS-CoV-2刺突(S)蛋白之免疫原性部分之RNA，且該等RNA調配於奈米顆粒(例如脂質奈米顆粒(LNP))中； 其中該流行性感冒疫苗：(i)為奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA疫苗，或(ii)包含一或多種流行性感冒病毒毒株之一或多種抗原性多肽(例如HA蛋白)；且 其中該RSV疫苗包含與一或多種RSV毒株相關之一或多種抗原性多肽(例如F蛋白或其免疫原性片段)。
在一些實施例中，針對SARS-CoV-2及流行性感冒中之每一者同時進行疫苗接種之方法包括投與步驟，該步驟包括經由針或埠注射組合物；且 其中所注射之組合物包括該SARS-CoV-2疫苗組合物及該流行性感冒疫苗組合物兩者；且 其中該SARS-CoV-2疫苗組合物及該流行性感冒疫苗組合物視情況使用注射器(例如雙室注射器)投與。
在一些實施例中，針對SARS-CoV-2及RSV中之每一者同時進行疫苗接種之方法包括投與步驟，該步驟包括經由針或埠注射組合物； 其中所注射之組合物包括該SARS-CoV-2疫苗組合物及該RSV疫苗組合物兩者；且 其中該SARS-CoV-2疫苗組合物及該RSV疫苗組合物視情況使用注射器(例如雙室注射器)投與。
在一些實施例中，針對SARS-CoV-2及RSV中之每一者同時進行疫苗接種之方法包括投與步驟，該步驟包括經由針或埠注射組合物； 其中所注射之組合物包括該SARS-CoV-2疫苗組合物、該流行性感冒疫苗組合物及該RSV疫苗組合物中之每一者；且 其中該SARS-CoV-2疫苗組合物、該RSV疫苗組合物及該流行性感冒疫苗組合物視情況使用注射器(例如雙室注射器)投與。
在一些實施例中，針對SARS-CoV-2及流行性感冒中之每一者同時進行疫苗接種之方法在投與步驟之前進一步包括摻合SARS-CoV-2疫苗組合物與流行性感冒疫苗組合物之步驟。
在一些實施例中，針對SARS-CoV-2及RSV兩者同時進行疫苗接種之方法在投與步驟之前包括摻合SARS-CoV-2疫苗組合物與RSV疫苗組合物之步驟。
在一些實施例中，針對SARS-CoV-2、流行性感冒及RSV中之每一者同時進行疫苗接種之方法在投與之前包括摻合SARS-CoV-2疫苗組合物、流行性感冒疫苗組合物及RSV疫苗組合物之步驟。
在一些實施例中，摻合步驟係在投與前的一段時間內實施，該一段時間不超過2小時(例如不超過1小時、30分鐘、20分鐘、15分鐘、10分鐘或5分鐘)。
在一些實施例中，器皿包含SARS-CoV-2疫苗或同時進行疫苗接種之方法使用SARS-CoV-2疫苗，其中該SARS-CoV-2疫苗組合物包含兩種或更多種RNA，其各自編碼不同SARS-CoV-2毒株或變異體之S蛋白，且其中該兩種或更多種RNA囊封在單獨之LNP群體中。
在一些實施例中，器皿包含流行性感冒疫苗或同時進行疫苗接種之方法使用流行性感冒疫苗，該流行性感冒疫苗包含兩種或更多種RNA (例如四種RNA)，其各自編碼不同的流行性感冒毒株之抗原性多肽(例如HA蛋白)，且其中該兩種或更多種RNA囊封在單獨之LNP群體中。
在一些實施例中，器皿包含SARS-CoV-2疫苗或進行同時投與之方法使用SARS-CoV-2疫苗，其中該SARS-CoV-2疫苗包含： (a) (i) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列，其中該RNA編碼包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之胺基酸序列之多肽，且/或包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 9至少85%一致之核苷酸序列，及(ii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自奧密克戎BA.4/5 SARS-CoV-2變異體之S多肽之核苷酸序列，其中該RNA包含編碼多肽之核苷酸序列，該多肽包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列，且/或其中該RNA包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 70至少85%一致之核苷酸序列；或 (b) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列，其中該RNA包含編碼多肽之核苷酸序列，該多肽包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之序列，且/或其中該RNA包含與SEQ ID NO: 132至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 130至少85%一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，器皿包含SARS-CoV-2疫苗或進行同時投與之方法使用SARS-CoV-2疫苗，其中該SARS-CoV-2疫苗包含流行性感冒疫苗，其中該流行性感冒疫苗包含： (a) (i) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 92至少85%一致之核苷酸序列；(ii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸 序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 99至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 97至少85%一致之核苷酸序列；(iii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 104至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 102至少85%一致之核苷酸序列；及(iv) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 107至少85%一致之核苷酸序列；或 (b) (i) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該核苷酸序列與SEQ ID NO: 92至少85%一致且/或與SEQ ID NO: 94至少85%一致；(ii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該核苷酸序列與SEQ ID NO: 82至少85%一致且/或與SEQ ID NO: 84至少85%一致；(iii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該核苷酸序列與SEQ ID NO: 87至少85%一致且/或與SEQ ID NO: 89至少85%一致；及(iv) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該核苷酸序列與SEQ ID NO: 107至少85%一致且/或與SEQ ID NO: 109至少85%一致。
SARS-CoV-2係具有四種結構蛋白之RNA病毒。其中之一的刺突蛋白係結合宿主細胞上存在的血管收縮素轉化酶2 (ACE-2)之表面蛋白。因此，認為刺突蛋白係疫苗開發之相關抗原。
BNT162b2 (其包含含有SEQ ID NO: 20之RNA)係用於預防COVID-19之mRNA疫苗，且在預防COVID-19方面已展示出95%或更高之功效。該疫苗包含囊封在脂質奈米顆粒(LNP)中之編碼全長SARS-CoV-2刺突糖蛋白(S)之5’加帽mRNA。成品以含有BNT162b2作為活性物質之注射用分散體濃縮物之形式呈現。其他成分包括：ALC-0315 (4-羥基丁基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)、ALC-0159 (2-[(聚乙二醇)-2000]-N,N-雙十四基乙醯胺)、1,2-二硬脂醯基-sn-甘油-3-磷酸膽鹼(DSPC)、膽固醇，且在一些實施例中包括氯化鉀、磷酸二氫鉀、氯化鈉、磷酸二鈉二水合物、蔗糖及注射用水。
在一些實施例中，可使用不同的緩衝液代替PBS。在一些實施例中，將BNT162b2調配於視情況包含蔗糖之Tris緩衝溶液中。在一些實施例中，調配物包含ALC-0315 (4-羥基丁基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)、ALC-0159 (2-[(聚乙二醇)-2000]-N,N-雙十四基乙醯胺)、DSPC (1,2-二硬脂醯基-sn-甘油-3-磷酸膽鹼)、膽固醇、蔗糖、胺丁三醇(Tris)、鹽酸胺丁三醇及水。
在一些實施例中，醫藥RNA製劑中之RNA濃度為約0.1-0.2 mg/ml。在一些實施例中，醫藥RNA製劑中之RNA濃度為約0.1 mg/ml。在一些實施例中，醫藥RNA製劑中之RNA濃度為約0.12 mg/ml。在一些實施例中，醫藥RNA製劑中之RNA濃度為約0.14 mg/ml。在一些實施例中，醫藥RNA製劑中之RNA濃度為約0.16 mg/ml。在一些實施例中，醫藥RNA製劑中之RNA濃度為約0.18 mg/ml。在一些實施例中，藉由投與約200 uL之RNA製劑來投與約30 ug之RNA。在一些實施例中，在投與之前稀釋醫藥RNA製劑中之RNA (例如，稀釋至約0.05 mg/ml之濃度)。在一些實施例中，投與體積介於約200 μl與約300 μl之間。在一些實施例中，將醫藥RNA製劑中之RNA調配於約10 mM Tris緩衝液及約10%蔗糖中。
在一些實施例中，醫藥RNA製劑包含濃度為約0.1 mg/ml之RNA，且調配於約10 mM Tris緩衝液及約10%蔗糖中。在一些實施例中，醫藥RNA製劑包含 濃度為約0.12 mg/ml之RNA，且調配於約10 mM Tris緩衝液及約10%蔗糖中。在一些實施例中，醫藥RNA製劑包含 濃度為約0.14 mg/ml之RNA，且調配於約10 mM Tris緩衝液及約10%蔗糖中。在一些實施例中，醫藥RNA製劑包含 濃度為約0.16 mg/ml之RNA，且調配於約10 mM Tris緩衝液及約10%蔗糖中。在一些實施例中，醫藥RNA製劑包含 濃度為約0.18 mg/ml之RNA，且調配於約10 mM Tris緩衝液及約10%蔗糖中。
在一些實施例中，本文所提供之調配物(例如包含約10 mM Tris緩衝液及約10%蔗糖之調配物)可在投與前視需要經稀釋，以投與不同劑量之RNA，同時保持總注射體積相對恆定。舉例而言，可藉由以約1:1稀釋包含濃度為約0.1 mg/ml之RNA之醫藥製劑，且藉由投與約200 μl之所稀釋醫藥RNA製劑來投與約10 μg之RNA劑量。
在一些實施例中，將疫苗調配於小瓶(例如玻璃小瓶)中。在一些實施例中，將玻璃小瓶用溴化丁基彈性體塞及帶有翻開式(flip-off)塑膠帽之鋁密封件密封。
在一些實施例中，組合物包含RNA，該RNA包含編碼與冠狀病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列。在一些實施例中，冠狀病毒為貝塔冠狀病毒。在一些實施例中，貝塔冠狀病毒為SARS-CoV-2。在一些實施例中，與冠狀病毒相關之抗原性多肽為刺突(S)蛋白(例如SARS-CoV-2 S蛋白)。基於在「SARS-CoV-2分離株Wuhan-Hu -1」：GenBank: MN908947.3 (完整基因體)及GenBank: QHD43416.1 (刺突表面糖蛋白)公佈之序列，選擇BNT162b2編碼之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，包含編碼SARS-CoV-2 S蛋白之序列的RNA 為單股5'-加帽密碼子最佳化之mRNA，其轉譯成SARS-CoV-2之刺突抗原。在一些實施例中，所編碼之刺突抗原蛋白質序列含有兩個脯胺酸突變，此穩定抗原性改良之融合前構形(P2 S)。在一些實施例中，包含編碼SARS-CoV-2 S蛋白之核苷酸序列之RNA不含任何尿苷。在一些實施例中，在RNA合成中使用N1-甲基假尿苷代替尿苷。編碼SARS-CoV-2 S蛋白之RNA在宿主細胞中轉譯成SARS-CoV-2 S蛋白。接著S蛋白在細胞表面上表現，在此其誘導適應性免疫反應。S蛋白鑑別為用於中和針對病毒之抗體之靶標，且視為相關疫苗組分。
最近出現的SARS-CoV-2之新型傳播變異體已引起對疫苗干預之地理及時間功效之顯著關切。最早出現且迅速在全球佔據主導之變異體之一為D614G。
最初在英國偵測到阿爾法變異體(亦稱為B.1.1.7、VOC202012/01、501Y.V1或GRY)。阿爾法變異體具有大量突變，包括S基因中之若干突變。已顯示其固有更強之傳播性，在多個國家中增長率估計較其他SARS-CoV-2譜系高40%-70% (Volz等人，2021，Nature，https://doi.org/10.1038/s41586-021-03470-x；Washington等人，2021，Cell https://doi.org/10.1016/j.cell.2021.03.052)。
在南非首先偵測到貝塔變異體(亦稱為B.1.351或GH/501Y.V2)。貝塔變異體在S基因中攜帶若干突變。該等突變中之三者位於RBD中與免疫逃避相關之位點：N501Y (與阿爾法共有)以及E484K及K417N。
在巴西首次偵測到伽馬變異體(亦稱為P.1或GR/501Y.V3)。伽馬變異體攜帶影響刺突蛋白之若干突變，包括與貝塔共有之兩者(N501Y及E484K)以及在417位之不同突變(K417T)。
在印度首先記錄到德爾塔變異體(亦稱為B.1.617.2或G/478K.V1)。德爾塔變異體具有影響刺突蛋白之若干點突變，包括P681R (與阿爾法共有且鄰近弗林蛋白酶(furin)裂解位點之突變位置)及L452R，後者在RBD中，且與同ACE2之結合增加及中和抗體抗性有關。刺突蛋白中在156/157位亦存在缺失。
該四種VOC已在全球傳播，且在其首次鑑別之地理區域成為佔優變異體。
2021年11月24日，南非首先向WHO報告了奧密克戎(B.1.1.529)變異體。自最初在2021年11月出現以來，SARS-CoV-2奧密克戎及其亞系已對COVID-19大流行之流行病學格局產生了重大影響(WHO Technical Advisory Group on SARS-CoV-2 Virus Evolution (TAG-VE): Classification of Omicron (B.1.1.259): SARS-CoV-2 Variant of Concern (2021); WHO Headquarters (HQ), WHO Health Emergencies Programme, Enhancing Response to Omicron SARS-CoV-2 variant: Technical brief and priority actions for Member States (2022))。第一種奧密克戎變異體BA.1之刺突(S)糖蛋白中之顯著改變導致許多中和抗體抗原決定基之丟失(M. Hoffmann等人，「The Omicron variant is highly resistant against antibody mediated neutralization: Implications for control of the COVID-19 pandemic」, Cell 185, 447-456.e11 (2022))，此使得BA.1能夠部分地逃避先前建立的基於SARS-CoV-2野生型毒株(Wuhan-Hu-1)之免疫(V. Servellita等人，「Neutralizing immunity in vaccine breakthrough infections from the SARS-CoV-2 Omicron and Delta variants」, Cell 185, 1539-1548.e5 (2022)；Y. Cao等人，「Omicron escapes the majority of existing SARS-CoV-2 neutralizing antibodies」, Nature 602, 657-663 (2022))。因此，進行奧密克戎疫苗接種之個體之突破性感染較先前之所關注變異體(VOC)更常見。雖然奧密克戎BA.1在全球許多國家中由BA.2變異體取代，但其他變異體諸如BA.1.1及BA.3暫時及/或局部性地獲得了發展勢頭，但沒有成為全球主導(S. Xia等人，「Origin, virological features, immune evasion and intervention of SARS-CoV-2 Omicron sublineages」. Signal Transduct. Target. Ther. 7, 241 (2022)；H. Gruell等人，「SARS-CoV-2 Omicron sublineages exhibit distinct antibody escape patterns」, Cell Host Microbe 7, 241 (2022).)。奧密克戎BA.2.12.1隨後取代BA.2在美國成為主導，而BA.4及BA.5在歐洲、非洲部分地區及亞/太地區取代BA.2 (H. Gruell等人，「SARS-CoV-2 Omicron sublineages exhibit distinct antibody escape patterns」, Cell Host Microbe 7, 241 (2022)；European Centre for Disease Prevention and Control, Weekly COVID-19 country overview - Country overview report: Week 31 2022 (2022)；J. Hadfield等人，「Nextstrain: Real-time tracking of pathogen evolution」, Bioinformatics 34, 4121-4123 (2018))。目前，奧密克戎BA.5在全球佔主導，包括在美國(Centers for Disease Control and Prevention. COVID Data Tracker. Atlanta, GA: US Department of Health and Human Services, CDC; 2022年8月12日. https://covid.cdc.gov/coviddata-tracker (2022))。
奧密克戎已在S糖蛋白中獲得許多改變(胺基酸交換、插入或缺失)，其中一些係所有奧密克戎VOC之間共有的，而另一些係一或多個奧密克戎亞系所特有的。在抗原性上，BA.2.12.1展現出與BA.2具有高度相似性，但不與BA.1相似，而BA.4及BA.5與其原型BA.2差異相當大，甚至與BA.1差異更大，此與其種系係一致的(A. Z. Mykytyn等人，「Antigenic cartography of SARS-CoV-2 reveals that Omicron BA.1 and BA.2 are antigenically distinct」, Sci. Immunol. 7, eabq4450 (2022).)。BA.1與其餘奧密克戎VOC之主要差異包括S糖蛋白N末端結構域中之Δ143-145、L212I或ins214EPE以及受體結合結構域(RBD)中之G446S或G496S。RBD中之胺基酸變化T376A、D405N及R408S依次為BA.2及其子代常見的，但不見於BA.1中。另外，一些改變為個別BA.2子代VOC所特有的，包括對於BA.2.12.1之L452Q或對於BA.4及BA.5之L452R及F486V (BA.4及BA.5編碼相同的S序列)。已顯示大多數該等共有及VOC特有之改變在針對野生型S糖蛋白產生之單株抗體及多株血清之免疫逃逸中起重要作用。特定而言，BA.4/BA.5所特有之改變與該等VOC之免疫逃逸密切相關(P. Wang等人，「Antibody resistance of SARS-CoV-2 variants B.1.351 and B.1.1.7.」 Nature 593, 130-135 (2021)；Q. Wang等人，「Antibody evasion by SARS-CoV-2 Omicron subvariants BA.2.12.1, BA.4, & BA.5.」 Nature 608, 603-608 (2022))。截至本申請案之申請日，由BA.10.1及BA.2.75重組產生的XBB變異體群組係最流行之受關注SARS-CoV-2變異體，代表在2023年5月28日至2023年6月10日美國最流行的前三種毒株。
類似地，流行性感冒突變及逃避現有免疫反應之能力眾所周知。流行性感冒病毒係正黏液病毒科(Orthomyxoviridae family)之一部分，且基於核蛋白及基質蛋白之抗原性差異分為3個屬或類型(A、B及C)。流行性感冒A病毒基於膜糖蛋白、血球凝集素(HA)及神經胺酸酶(NA)進一步歸類為亞型(Cox NJ, Subbarao K. Influenza. Lancet. 1999;354(9186):1277-82)。流行性感冒A亞型H1N1 (亦寫為A(H1N1)pdm09)及H3N2目前在人類中傳播。H1N1係2009年大流行之罪魁禍首，且取代在2009年之前傳播之流行性感冒A (H1N1)病毒。迄今為止，所有流行性感冒大流行均係由流行性感冒A型病毒引起的。
流行性感冒之RNA基因體係分段的，此容許相同類型之病毒可進行基因重配。此遺傳不穩定性可導致稱為抗原轉變之現象，涉及HA及NA中之一者或兩者之重大變化，若高效傳播，則可導致大流行。更常見的係基因體中之多點突變，導致HA及NA更小之變化，稱為抗原漂移(Hall E. Influenza. 第12章，Centers for Disease Control and Prevention. Hall E, Wodi AP, Hamborsky J等人編輯，Epidemiology and prevention of vaccine-preventable diseases，第14版，Washington, DC: Public Health Foundation; 2021:179-92)。目前，基於HA中之差異，有兩種流行性感冒B之譜系在傳播，亦即Victoria (B/Victoria)及Yamagata (B/Yamagata)，(Rota PA, Hemphill ML, Whistler T, Regnery HL, Kendal APJJoGV. Antigenic and genetic characterization of the haemagglutinins of recent cocirculating strains of influenza B virus. J General Virology. 1992;73(10):2737-42)。流行性感冒A及B二者均經歷遺傳突變，該等遺傳突變經受人類免疫反應之選擇壓力，導致漂移。此遺傳不穩定性迫使當前疫苗每年針對流行或預測流行之流行性感冒進行調整。
仍需要針對SARS-CoV-2及流行性感冒之有效疫苗策略。
本揭示案揭示用於誘導針對多種傳染原之免疫反應之技術(例如組合物及方法)。特定而言，本揭示案提供用於誘導針對冠狀病毒及一或多種額外呼吸疾病(例如流行性感冒)之免疫反應之技術。在一些實施例中，本文所揭示之組合物包含RNA，該RNA包含編碼SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的胺基酸之核苷酸序列。在一些實施例中，本文所揭示之組合物包含RNA，該RNA包含編碼來自流行性感冒病毒之HA蛋白或其免疫原性變異體或者SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的核苷酸序列。投與編碼抗原多肽之RNA以提供(在適當的靶細胞表現多核苷酸之後)用於誘導(亦即刺激、引發及/或擴增)免疫反應之抗原，例如靶向靶抗原(例如冠狀病毒S蛋白，特定而言SARS-CoV-2 S蛋白及流行性感冒病毒HA蛋白)或其加工產物之抗體及/或免疫效應細胞。在一個實施例中，根據本揭示案欲誘導之免疫反應係B細胞介導之免疫反應，亦即抗體介導之免疫反應。另外或替代地，在一個實施例中，根據本揭示案欲誘導之免疫反應係T細胞介導之免疫反應。在一個實施例中，免疫反應係抗冠狀病毒、特定而言抗SARS-CoV-2免疫反應。在一個實施例中，免疫反應係抗流行性感冒病毒免疫反應、特定而言抗亞型A及/或亞型B免疫反應。
在一些實施例中，本文所闡述之疫苗包含作為活性成分之一或多種單股RNA，其在進入接受者之細胞時可轉譯成各別蛋白質。除編碼抗原序列之野生型或密碼子最佳化序列以外，RNA亦可含有就穩定性及轉譯效率而言針對RNA之最大功效最佳化之一或多個結構元件(例如，5'帽、5' UTR、3' UTR、聚(A)尾或其組合)。在一個實施例中，本文所闡述之RNA含有所有該等元件。在一個實施例中，帽1結構可用作在RNA原料藥之5’端之特異性加帽結構。在一個實施例中，β-S-ARCA(D1) (m 2 7,2'-OGppSpG)或m 2 7,3’-OGppp(m 1 2’-O)ApG可用作在RNA原料藥之5'端之特異性加帽結構。作為5'-UTR序列，可使用人類α-球蛋白mRNA之5'-UTR序列，視情況具有最佳化之『Kozak序列』以提高轉譯效率(例如，SEQ ID NO: 12)。作為3'-UTR序列，可使用來源於「分裂之胺基末端增強子」 (AES) mRNA (稱為F)及粒線體編碼之12S核糖體RNA (稱為I) (例如，SEQ ID NO: 13)之兩個序列元件(FI元件)之組合，其置於編碼序列與聚(A)尾之間以確保較高之最大蛋白質水準及mRNA之延長持久性。使用賦予RNA穩定性及增加總蛋白質表現之序列之離體選擇方法鑑別該等序列(參見WO 2017/060314，其係以引用的方式併入本文中)。或者，3’-UTR可為人類β-球蛋白mRNA之兩個重複之3'-UTR。另外或替代地，在一些實施例中，聚(A)尾可包含至少100個腺苷殘基(SEQ ID NO: 180)之長度(包括例如至少110個腺苷殘基、至少120個腺苷殘基、130個腺苷殘基或更長)。在一些實施例中，聚(A)尾可包含約100至約150個腺苷殘基之長度。在一些實施例中，聚(A)尾可包含中斷之聚(A)尾。舉例而言，在一些此等實施例中，可使用量測長度為110個核苷酸之聚(A)尾，其由一段30個腺苷殘基(SEQ ID NO: 174)、之後為10個核苷酸連接體序列(隨機核苷酸的)及另外70個腺苷殘基(SEQ ID NO: 175)組成(例如SEQ ID NO: 14)。此聚(A)尾序列經設計以增強RNA穩定性及轉譯效率。
在一些實施例中，分泌信號肽(sec)可融合至本文所闡述之抗原(例如作為N末端標籤)，或RNA可包含此一融合至sec之抗原。在一個實施例中，sec對應於S蛋白之分泌信號肽且融合至S蛋白之N末端。如融合蛋白所常用，編碼主要由胺基酸甘胺酸(G)及絲胺酸(S)組成的短連接體肽之序列可用作sec與抗原區之間的GS/連接體。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA可與蛋白質及/或脂質、較佳脂質複合，以產生用於投與之RNA顆粒。若使用不同RNA之組合，則RNA可複合在一起，或單獨與蛋白質及/或脂質複合，以產生用於投與之RNA顆粒。
在一態樣中，本揭示案係關於包含編碼胺基酸序列之RNA之組合物或醫藥製劑，該胺基酸序列構成SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段。
在一個實施例中，SARS-CoV-2 S蛋白之免疫原性片段構成SARS-CoV-2 S蛋白之S1亞單元，或SARS-CoV-2 S蛋白之S1亞單元之受體結合結構域(RBD)。
在一個實施例中，構成SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段之胺基酸序列能夠形成多聚體複合物、特定而言三聚體複合物。為此，構成SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段之胺基酸序列可包含容許形成構成SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段之胺基酸序列的多聚體複合物、特定而言三聚體複合物之結構域。在一個實施例中，容許形成多聚體複合物之結構域包含三聚化結構域，例如，如本文所闡述之三聚化結構域，例如SARS-CoV-2 S蛋白三聚化結構域。在一個實施例中，藉由添加三聚化結構域，例如T4-纖維蛋白(fibritin)源性「摺疊子」三聚化結構域(例如，SEQ ID NO: 10)來達成三聚化，特定而言若構成SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段之胺基酸序列對應於SARS-CoV-2 S蛋白中不包含SARS-CoV-2 S蛋白三聚化結構域之部分。
在一個實施例中，構成SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段之胺基酸序列由經密碼子最佳化及/或其G/C含量與野生型編碼序列相比增加之編碼序列編碼，其中密碼子最佳化及/或G/C含量之增加較佳不改變所編碼胺基酸序列之序列。熟習此項技術者將瞭解，密碼子最佳化涉及在編碼相同胺基酸殘基之替代密碼子之間或當中進行選擇。密碼子最佳化通常包括考慮對於序列欲在其中表現之特定宿主較佳之密碼子。根據本揭示案，在許多實施例中，較佳宿主為人類。在一些實施例中，較佳宿主可為家養動物。或者或另外，在一些實施例中，在編碼相同胺基酸之可能的密碼子之間或當中之選擇可考慮一或多種其他特徵，諸如總G/C含量(如以上所指出)及/或與特定參考之相似性。舉例而言，在本揭示案之一些實施例中，所提供之編碼SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之編碼序列在胺基酸序列上不同於由本文所闡述之BNT162b2構築體編碼之胺基酸序列，其在此差異之至少一個位置上利用密碼子，該密碼子相對於在此差異位置上編碼相同胺基酸之至少一個替代密碼子保留與BNT162b2構築體序列更大之相似性。
在一個實施例中，RNA係經修飾之RNA、特定而言經穩定之mRNA。在一個實施例中，RNA包含代替至少一個尿苷之經修飾之核苷。在一個實施例中，RNA包含代替每個尿苷之經修飾之核苷。在一個實施例中，經修飾之核苷獨立地選自假尿苷(ψ)、N1-甲基-假尿苷(m1ψ)及5-甲基-尿苷(m5U)。
在一個實施例中，RNA包含代替尿苷之經修飾之核苷。
在一個實施例中，經修飾之核苷係選自假尿苷(ψ)、N1-甲基-假尿苷(m1ψ)及5-甲基-尿苷(m5U)。
在一個實施例中，RNA包含5’帽。
在一個實施例中， (i) 編碼SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的RNA包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸979至1584之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸979至1584 之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸979至1584之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸979至1584之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；及/或 (ii) SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段包含SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。
在一個實施例中， (i) 編碼SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的RNA包含SEQ ID NO: 30之核苷酸111至986之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 30之核苷酸111至986之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 30之核苷酸111至986之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 30之核苷酸111至986之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；及/或 (ii) SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段包含SEQ ID NO: 29之胺基酸20至311之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 29之胺基酸20至311之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 29之胺基酸20至311之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 29之胺基酸20至311之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。
在一個實施例中， (i) 編碼SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的RNA包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至2055之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至2055之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至2055之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至2055之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；及/或 (ii) SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段包含SEQ ID NO: 1之胺基酸17至685之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸17至685之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸17至685之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸17至685之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。
在一個實施例中， (i) 編碼SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的RNA包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至3819之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至3819之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至3819之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至3819之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；及/或 (ii) SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段包含SEQ ID NO: 1或7之胺基酸17至1273之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1或7之胺基酸17至1273之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1或7之胺基酸17至1273之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1或7之胺基酸17至1273之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。
在一個實施例中，構成SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段之胺基酸序列包含分泌信號肽。
在一個實施例中，分泌信號肽與SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段融合、較佳N末端融合。
在一個實施例中， (i) 編碼分泌信號肽之RNA包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至48之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至48之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至48之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至48之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；及/或 (ii) 分泌信號肽包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的功能片段。
在一個實施例中， (i) 編碼SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的RNA包含SEQ ID NO: 6之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 6之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 6之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 6之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；及/或 (ii) SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 5之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 5之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 5之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。
在一個實施例中， (i) 編碼SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的RNA包含SEQ ID NO: 30之核苷酸54至986之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 30之核苷酸54至986之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 30之核苷酸54至986之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 30之核苷酸54至986之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；及/或 (ii) SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段包含SEQ ID NO: 29之胺基酸1至311之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 29之胺基酸1至311之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 29之胺基酸1至311之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 29之胺基酸1至311之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。
在一個實施例中，組合物中之每一RNA係經修飾之RNA、特定而言經穩定之mRNA。在一個實施例中，組合物中之每一RNA包含經修飾之核苷代替至少一個尿苷。在一個實施例中，組合物中之每一RNA包含經修飾之核苷代替每一尿苷。在一個實施例中，經修飾之核苷獨立地選自假尿苷(ψ)、N1-甲基-假尿苷(m1ψ)及5-甲基-尿苷(m5U)。
在一個實施例中，組合物中之每一RNA包含經修飾之核苷代替尿苷。
在一個實施例中，經修飾之核苷係選自假尿苷(ψ)、N1-甲基-假尿苷(m1ψ)及5-甲基-尿苷(m5U)。
在一個實施例中，組合物中之每一RNA包含5’帽。
在一個實施例中，組合物中之每一RNA包含5’ UTR，該5’ UTR包含SEQ ID NO: 12之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 12之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列。
在一個實施例中，組合物中之每一RNA包含3’ UTR，該3’ UTR包含SEQ ID NO: 13之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 13之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列。
在一個實施例中，組合物中之每一RNA包含聚A序列。
在一個實施例中，聚A序列包含至少100個核苷酸。
在一個實施例中，聚A序列包含SEQ ID NO: 14之核苷酸序列或由其組成。
在一個實施例中，組合物中之每一RNA經調配或欲調配為液體、固體或其組合。
在一個實施例中，組合物中之每一RNA經調配或欲調配為用於注射。
在一個實施例中，組合物中之每一RNA經調配或欲調配為用於肌內投與。
在一個實施例中，組合物中之每一RNA經調配或欲調配為顆粒。
在一個實施例中，顆粒為脂質奈米顆粒(LNP)或脂質複合物(lipoplex, LPX)顆粒。
在一個實施例中，LNP顆粒包含((4-羥基丁基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)、2-[(聚乙二醇)-2000]-N,N-雙十四基乙醯胺、1,2-二硬脂醯基-sn-甘油-3-磷酸膽鹼及膽固醇。
在一個實施例中，RNA脂質複合物顆粒可藉由將RNA與脂質體混合獲得。在一個實施例中，RNA脂質複合物顆粒可藉由將RNA與脂質混合獲得。
在一個實施例中，RNA經調配或欲調配為膠體。在一個實施例中，RNA經調配或欲調配為顆粒，形成膠體之分散相。在一個實施例中，50%或更多、75%或更多或85%或更多之RNA存在於分散相中。在一個實施例中，RNA經調配或欲調配為包含RNA及脂質之顆粒。在一個實施例中，藉由將溶解在水相中之RNA暴露於溶解在有機相中之脂質來形成顆粒。在一個實施例中，有機相包含乙醇。在一個實施例中，藉由將溶解在水相中之RNA暴露於分散在水相中之脂質來形成顆粒。在一個實施例中，分散在水相中之脂質形成脂質體。
在一個實施例中，組合物中之每一RNA為mRNA或saRNA。
在一個實施例中，組合物或醫藥製劑為醫藥組合物。
在一個實施例中，組合物或醫藥製劑為疫苗。
在一個實施例中，醫藥組合物進一步包含一或多種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑及/或賦形劑。
在一個實施例中，組合物或醫藥製劑為套組。
在一個實施例中，RNA及視情況形成顆粒之組分係在單獨的小瓶中。
在一個實施例中，套組進一步包含使用組合物或醫藥製劑在個體中誘導針對冠狀病毒之免疫反應之說明書。
在一態樣中，本揭示案係關於用於醫藥用途之本文所闡述之組合物或醫藥製劑。
在一個實施例中，醫藥用途包括在個體中誘導針對冠狀病毒之免疫反應。
在一個實施例中，醫藥用途包括冠狀病毒感染之治療性或預防性治療。
在一個實施例中，本文所闡述之組合物或醫藥製劑用於投與給人類。
在一個實施例中，冠狀病毒為貝塔冠狀病毒。
在一個實施例中，冠狀病毒為沙貝病毒。
在一個實施例中，冠狀病毒為SARS-CoV-2。
在一態樣中，本揭示案係關於在個體中誘導針對冠狀病毒及流行性感冒之免疫反應之方法，其包括向該個體投與一種組合物，該組合物包含編碼構成SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的胺基酸序列之RNA及編碼構成流行性感冒HA蛋白、其免疫原性變異體或者該流行性感冒HA蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的胺基酸序列之RNA。
在一個實施例中，SARS-CoV-2 S蛋白之免疫原性片段構成SARS-CoV-2 S蛋白之S1亞單元，或SARS-CoV-2 S蛋白之S1亞單元之受體結合結構域(RBD)。
已知冠狀病毒S蛋白之N末端結構域(NTD)及RBD二者均為中和病毒活性之抗體之結合位點。在SARS-CoV-2之情形下，RBD係宿主細胞表面上血管收縮素轉化酶2 (ACE2)之S蛋白部分。NTD在SARS-CoV-2 S蛋白中之功能尚不完全清楚，但該結構域似乎在結合糖部分及促進S蛋白自融合前至融合後構形之構形轉變中起作用。NTD及RBD二者均可誘導高結合抗體及中和抗體效價。
在一些實施例中，本揭示案提供方法，該等方法包括向人類個體投與治療性劑量之組合物，該組合物包含含有編碼融合蛋白之開放閱讀框(ORF)之RNA (例如mRNA))，該融合蛋白包含SARS-CoV-2刺突(S)蛋白之至少兩個結構域，且小於全長刺突蛋白，其中該RNA係在脂質奈米顆粒中。
在一個實施例中，構成SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段之胺基酸序列能夠形成多聚體複合物、特定而言三聚體複合物。為此，構成SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段之胺基酸序列可包含容許形成構成SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段之胺基酸序列的多聚體複合物、特定而言三聚體複合物之結構域。在一個實施例中，容許形成多聚體複合物之結構域包含三聚化結構域，例如，如本文所闡述之三聚化結構域。
在一個實施例中，構成SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段之胺基酸序列由經密碼子最佳化及/或其G/C含量與野生型編碼序列相比增加之編碼序列編碼，其中密碼子最佳化及/或G/C含量之增加較佳不改變所編碼胺基酸序列之序列。
在一個實施例中， (i) 編碼SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的RNA包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸979至1584之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸979至1584 之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸979至1584之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸979至1584之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；及/或 (ii) SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段包含SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。
在一個實施例中， (i) 編碼SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的RNA包含SEQ ID NO: 30之核苷酸111至986之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 30之核苷酸111至986之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 30之核苷酸111至986之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 30之核苷酸111至986之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；及/或 (ii) SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段包含SEQ ID NO: 29之胺基酸20至311之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 29之胺基酸20至311之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 29之胺基酸20至311之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 29之胺基酸20至311之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。
在一個實施例中， (i) 編碼SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的RNA包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至2055之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至2055之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至2055之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至2055之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；及/或 (ii) SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段包含SEQ ID NO: 1之胺基酸17至685之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸17至685之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸17至685之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸17至685之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。
在一個實施例中， (i) 編碼SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的RNA包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至3819之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至3819之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至3819之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至3819之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；及/或 (ii) SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段包含SEQ ID NO: 1或7之胺基酸17至1273之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1或7之胺基酸17至1273之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1或7之胺基酸17至1273之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1或7之胺基酸17至1273之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。
在一個實施例中，構成SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段之胺基酸序列包含分泌信號肽。
在一個實施例中，分泌信號肽與SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段融合、較佳N末端融合。
在一個實施例中， (i) 編碼分泌信號肽之RNA包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至48之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至48之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至48之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至48之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；及/或 (ii) 分泌信號肽包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的功能片段。
在一個實施例中， (i) 編碼SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的RNA包含SEQ ID NO: 6之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 6之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 6之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 6之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；及/或 (ii) SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 5之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 5之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 5之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。
在一個實施例中， (i) 編碼SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的RNA包含SEQ ID NO: 30之核苷酸54至986之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 30之核苷酸54至986之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 30之核苷酸54至986之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 30之核苷酸54至986之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；及/或 (ii) SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段包含SEQ ID NO: 29之胺基酸1至311之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 29之胺基酸1至311之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 29之胺基酸1至311之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 29之胺基酸1至311之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。
在一個實施例中，組合物中之每一RNA係經修飾之RNA、特定而言經穩定之mRNA。在一個實施例中，組合物中之每一RNA包含經修飾之核苷代替至少一個尿苷。在一個實施例中，組合物中之每一RNA包含經修飾之核苷代替每一尿苷。在一個實施例中，經修飾之核苷獨立地選自假尿苷(ψ)、N1-甲基-假尿苷(m1ψ)及5-甲基-尿苷(m5U)。
在一個實施例中，組合物中之每一RNA包含經修飾之核苷代替尿苷。
在一個實施例中，經修飾之核苷係選自假尿苷(ψ)、N1-甲基-假尿苷(m1ψ)及5-甲基-尿苷(m5U)。
在一個實施例中，組合物中之每一RNA包含帽。
在一個實施例中，編碼構成SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的胺基酸序列之RNA包含5’ UTR，該5’ UTR包含SEQ ID NO: 12之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 12之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列。
在一個實施例中，編碼構成SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的胺基酸序列之RNA包含3’ UTR，該3’ UTR包含SEQ ID NO: 13之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 13之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列。
在一個實施例中，組合物中之每一RNA包含聚A序列。
在一個實施例中，聚A序列包含至少100個核苷酸。
在一個實施例中，聚A序列包含SEQ ID NO: 14之核苷酸序列或由其組成。
在一個實施例中，組合物中之每一RNA調配為液體、固體或其組合。
在一個實施例中，藉由注射投與組合物中之每一RNA。
在一個實施例中，藉由肌內投與來投與組合物中之每一RNA。
在一個實施例中，組合物中之每一RNA調配為顆粒。
在一個實施例中，顆粒為脂質奈米顆粒(LNP)或脂質複合物(LPX)顆粒。
在一個實施例中，LNP顆粒包含((4-羥基丁基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)、2-[(聚乙二醇)-2000]-N,N-雙十四基乙醯胺、1,2-二硬脂醯基-sn-甘油-3-磷酸膽鹼及膽固醇。
在一個實施例中，RNA脂質複合物顆粒可藉由將RNA與脂質體混合獲得。在一個實施例中，RNA脂質複合物顆粒可藉由將RNA與脂質混合獲得。
在一個實施例中，RNA調配為膠體。在一個實施例中，RNA調配為顆粒，形成膠體之分散相。在一個實施例中，組合物中50%或更多、75%或更多或85%或更多之RNA存在於分散相中。在一個實施例中，RNA調配為包含RNA及脂質之顆粒。在一個實施例中，藉由將溶解在水相中之RNA暴露於溶解在有機相中之脂質來形成顆粒。在一個實施例中，有機相包含乙醇。在一個實施例中，藉由將溶解在水相中之RNA暴露於分散在水相中之脂質來形成顆粒。在一個實施例中，分散在水相中之脂質形成脂質體。
在一個實施例中，組合物中之每一RNA為mRNA或saRNA。
在一個實施例中，該方法係針對冠狀病毒進行疫苗接種之方法。
在一個實施例中，該方法係用於冠狀病毒感染之治療性或預防性治療之方法。
在一個實施例中，個體為人類。
在一個實施例中，冠狀病毒為貝塔冠狀病毒。
在一個實施例中，冠狀病毒為沙貝病毒。
在一個實施例中，冠狀病毒為SARS-CoV-2。
在本文所闡述方法之一個實施例中，組合物為本文所闡述之組合物。
在一態樣中，本揭示案係關於用於本文所闡述方法中之本文所闡述之組合物或醫藥製劑。
此外，本揭示案教示包含以下之組合物：(i)脂質奈米顆粒囊封之RNA，該RNA編碼SARS-CoV-2編碼多肽(例如SARS-CoV-2編碼S蛋白)之至少一部分(例如為或包含抗原決定基)，及(ii)脂質奈米顆粒囊封之RNA，該RNA編碼流行性感冒病毒編碼多肽(例如流行性感冒病毒編碼HA蛋白)之至少一部分(例如為或包含抗原決定基)，該組合物可在根據包括投與至少一個劑量疫苗組合物之方案向成人個體群體投與後7天內達成針對血清中每一抗原決定基之可偵測到之抗體效價。在此等組合物中，編碼SARS-CoV-2編碼多肽之至少一部分的mRNA及編碼流行性感冒病毒編碼多肽之至少一部分的mRNA可調配於同一或單獨的脂質奈米顆粒調配物中。此外，本揭示案教示此抗體效價之持久性。在一些實施例中，本揭示案教示當使用經修飾之mRNA時，與用相應未經修飾之mRNA所達成之效價相比，此抗體效價增加。
在一些實施例中，所提供之方案包括至少一個劑量。在一些實施例中，所提供之方案包括第一劑量及至少一個後續劑量。在一些實施例中，第一劑量與至少一個後續劑量之量相同。在一些實施例中，第一劑量與所有後續劑量之量相同。在一些實施例中，第一劑量之量不同於至少一個後續劑量。在一些實施例中，第一劑量之量不同於所有後續劑量。在一些實施例中，所提供之方案包含兩個劑量。在一些實施例中，所提供之方案由兩個劑量組成。
在特定實施例中，免疫原性組合物調配為在容器(例如小瓶)中之單劑量。在一些實施例中，免疫原性組合物調配為在小瓶中之多劑量調配物。在一些實施例中，多劑量調配物包括每個小瓶至少2個劑量。在一些實施例中，多劑量調配物包括每個小瓶總計2-20個劑量，諸如每個小瓶2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12個劑量。在一些實施例中，小瓶中之每個劑量體積相等。在一些實施例中，第一劑量與後續劑量體積不同。
「穩定的」多劑量調配物不展現不可接受之微生物生長水準，且實質上沒有或沒有活性生物分子組分之分解或降解。如本文所用，「穩定的」免疫原性組合物包括當投與給個體時仍能夠引發期望免疫學反應之調配物。
在一些實施例中，在多次或反覆接種/插入至多劑量容器中之情況下，多劑量調配物保持穩定達指定時間。舉例而言，在一些實施例中，當容納在多劑量容器內時，多劑量調配物在最多十次使用之情況下可穩定至少三天。在一些實施例中，在2-20次接種/插入之情況下，多劑量調配物保持穩定。
在一些實施例中，例如根據如本文所闡述之方案，投與包含脂質奈米顆粒囊封之mRNA之組合物，該mRNA編碼SARS-CoV-2編碼多肽(例如SARS-CoV-2編碼S蛋白)之至少一部分(例如為或包含抗原決定基)，可在一些個體中(例如在所有個體中，在大多數個體中，在約50%或更少、在約40%或更少、在約40%或更少、在約25%或更少、在約20%或更少、在約15%或更少、在約10%或更少、在約5%或更少之個體中等)導致淋巴球減少症。此外，本揭示案教示此淋巴球減少症可隨時間推移而消退。舉例而言，在一些實施例中，淋巴球減少症在約14天、約10天、約9天、約8天、約7天或更短之時間內消退。在一些實施例中，淋巴球減少症為3級、2級或更低級。
因此，此外，本揭示案提供包含以下之組合物：脂質奈米顆粒囊封之mRNA，該mRNA編碼SARS-CoV-2編碼多肽(例如SARS-CoV-2編碼S蛋白)之至少一部分(例如為或包含抗原決定基)；及脂質奈米顆粒囊封之mRNA，該mRNA編碼流行性感冒病毒編碼多肽(例如流行性感冒病毒編碼HA蛋白)之至少一部分(例如為或包含抗原決定基)，該等組合物之特徵在於當向相關成人群體投與時展示出如本文所闡述之某些特徵(例如，達成某些效應)。在此等組合物中，編碼SARS-CoV-2編碼多肽之至少一部分的mRNA及編碼流行性感冒病毒編碼多肽之至少一部分的mRNA可調配於同一或單獨的脂質奈米顆粒調配物中。在一些實施例中，所提供之組合物可在溫度不超過特定臨限值之條件下製備、儲存、轉運、表徵及/或使用。或者或另外，在一些實施例中，所提供之組合物可在其製備、儲存、轉運、表徵及/或使用之一些或所有過程期間受到避光(例如，某些波長)保護。在一些實施例中，所提供之組合物之一或多種特徵(例如mRNA穩定性，如可例如藉由大小、特定部分之存在或修飾等中之一或多者來評價；脂質奈米顆粒穩定性或聚集、pH等)可或已在投與之前的製備、儲存、轉運及/或使用期間在一或多個點進行評價。
此外，本揭示案記載某些所提供之組合物，其中mRNA內之核苷酸未經修飾(例如為天然A、U、C、G)，及/或所提供之與此等組合物有關之方法，其特徵(例如當向相關群體投與時，相關群體在一些實施例中可為或包含成人群體)在於固有的佐劑效應。在一些實施例中，此組合物及/或方法可誘導抗體及/或T細胞反應。在一些實施例中，與習用疫苗(例如非mRNA疫苗，諸如蛋白質疫苗)相比，此一組合物及/或方法可誘導更高之T細胞反應。
或者或另外，本揭示案記載所提供之組合物(例如，包含以下之組合物：(i)脂質奈米顆粒囊封之mRNA，該mRNA編碼SARS-CoV-2編碼多肽(例如SARS-CoV-2編碼S蛋白)之至少一部分(例如為或包含抗原決定基)，及(ii)脂質奈米顆粒囊封之mRNA，該mRNA編碼流行性感冒病毒編碼多肽(例如流行性感冒編碼HA蛋白)之至少一部分(例如為或包含抗原決定基))，其中mRNA內之核苷酸經修飾，及/或所提供之與此等組合物有關之方法，其特徵(例如當向相關群體投與時，相關群體在一些實施例中可為或包含成人群體)在於不存在固有的佐劑效應，或在於與結果未改變的另外相當組合物(或方法)相比，固有的佐劑效應降低。或者或另外，在一些實施例中，此等組合物(或方法)之特徵在於其(例如當向相關群體投與時，相關群體在一些實施例中可為或包含成人群體)誘導抗體反應及/或CD4+ T細胞反應。更進一步或者或另外，在一些實施例中，此等組合物(或方法)之特徵在於其(例如當向相關群體投與時，相關群體在一些實施例中可為或包含成人群體)誘導較用替代疫苗形式(例如肽疫苗)所觀察更高之CD4+ T細胞反應。在涉及經修飾之核苷酸之一些實施例中，此等經修飾之核苷酸可存在於例如3’ UTR序列、抗原編碼序列及/或5’UTR序列中。在一些實施例中，經修飾之核苷酸為或包括一或多個經修飾之尿嘧啶殘基及/或一或多個經修飾之胞嘧啶殘基。
此外，本揭示案記載所提供之組合物(例如包含以下之組合物：(i)脂質奈米顆粒囊封之mRNA，該mRNA編碼SARS-CoV-2編碼多肽(例如SARS-CoV-2編碼S蛋白)之至少一部分(例如為或包含抗原決定基)，及(ii)脂質奈米顆粒囊封之mRNA，該mRNA編碼流行性感冒病毒編碼多肽(例如流行性感冒編碼HA蛋白)之至少一部分(例如為或包含抗原決定基))及/或方法之特徵在於(例如當向相關群體投與時，相關群體在一些實施例中可為或包含成人群體)編碼之多肽(例如(i) SARS-CoV-2編碼蛋白質[諸如S蛋白]或其部分，該部分在一些實施例中可為或包含其抗原決定基，及(ii)流行性感冒編碼蛋白質[諸如HA蛋白]或其部分，該部分在一些實施例中可為或包含其抗原決定基)之持續表現。舉例而言，在一些實施例中，此等組合物及/或方法之特徵在於，當向人類投與時，其在來自此人類之生物樣品(例如血清)中達成可偵測到之多肽表現，且在一些實施例中，此表現持續至少36小時或更長之時間段，包括例如至少48小時、至少60小時、至少72小時、至少96小時、至少120小時、至少148小時或更長時間。
熟習此項技術者在閱讀本揭示案時將瞭解，其闡述各種組合物，該等組合物包含一或多種編碼SARS-CoV-2編碼多肽(例如SARS-CoV-2編碼S蛋白)之至少一部分(例如為或包含抗原決定基)之mRNA構築體及一或多種編碼流行性感冒病毒編碼多肽(例如流行性感冒病毒編碼HA蛋白)之至少一部分(例如為或包含抗原決定基)之mRNA構築體。熟習此項技術者在閱讀本揭示案時將尤其瞭解，其闡述包含各種mRNA構築體中之一或多者之組合物，該等mRNA構築體編碼SARS-CoV-2 S蛋白之至少一部分，例如SARS-CoV-2 S蛋白之至少RBD部分。此外，熟習此項技術者在閱讀本揭示案時將瞭解，其闡述包含以下之組合物之特定特徵及/或優點：一或多種編碼SARS-CoV-2編碼多肽(例如SARS-CoV-2編碼S蛋白)之至少一部分(例如為或包含抗原決定基)之mRNA構築體，及一或多種編碼流行性感冒病毒編碼多肽之至少一部分(例如為或包含抗原決定基)之mRNA構築體。在一些實施例中，組合物可包含一或多種mRNA構築體，該一或多種mRNA構築體編碼SARS-CoV-2編碼多肽之至少一個結構域(例如，如WO 2021/159040中所闡述之SARS-CoV-2編碼多肽之一或多個結構域，包括例如SARS-CoV-2刺突蛋白之N末端結構域(NTD)、SARS-CoV-2刺突蛋白之受體結合結構域(RBD)、SARS-CoV-2刺突蛋白之七肽重複序列1 (HR1)、SARS-CoV-2刺突蛋白之七肽重複序列2 (HR1)及/或其組合)。此外，本揭示案特別記載包含一或多種RNA之組合物的出人意料及有用之特徵及/或優點，該一或多種RNA包含編碼與流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列及編碼SARS-CoV-2 RBD部分且在一些實施例中不編碼全長SARS-CoV-2 S蛋白之某些mRNA構築體。不希望受任何特定理論束縛，本揭示案表明，編碼小於全長SARS-CoV-2 S蛋白、且特定而言編碼此SARS-CoV-2 S蛋白之至少RBD部分之RNA對於用作或用於免疫原性組合物(例如疫苗)及/或用於達成如本文所闡述之免疫學效應(例如產生SARS-CoV-2中和抗體及/或T細胞反應(例如CD4+及/或CD8+ T細胞反應))可能尤其有用及/或有效。
在一些實施例中，本揭示案提供包含RNA (例如mRNA)之組合物，該RNA (例如mRNA)包含編碼多肽之開放閱讀框，該多肽包含SARS-CoV-2 S蛋白之受體結合部分，該RNA適於該多肽之細胞內表現。在一些實施例中，此一編碼多肽不包含完整S蛋白。在一些實施例中，編碼多肽包含例如如SEQ ID NO: 5中所示之受體結合結構域(RBD)。在一些實施例中，編碼多肽包含根據SEQ ID NO: 29或31之肽。在一些實施例中，此一RNA (例如mRNA)可與(聚)陽離子聚合物、(多種)多聚複合物、(多種)蛋白質或(多種)肽複合。在一些實施例中，此一RNA可調配於脂質奈米顆粒(例如本文所闡述者)中。在一些實施例中，此一RNA (例如mRNA)對於用作或用於免疫原性組合物(例如疫苗)及/或用於達成如本文所闡述之免疫學效應(例如產生SARS-CoV-2中和抗體及/或T細胞反應(例如CD4+及/或CD8+ T細胞反應))可能尤其有用及/或有效。在一些實施例中，此一RNA (例如mRNA)可用於人類(包括例如已知已暴露於及/或感染SARS-CoV-2之人類，及/或未知已暴露於SARS-CoV-2之人類)之疫苗接種。
熟習此項技術者在閱讀本揭示案時將進一步瞭解，其闡述包含編碼全長SARS-CoV-2刺突蛋白之核酸序列之各種mRNA構築體(例如，包括其中此編碼之SARS-CoV-2刺突蛋白可包含至少一或多個胺基酸取代之實施例，例如，如本文所闡述之脯胺酸取代，及/或其中mRNA序列係密碼子最佳化之實施例，例如對於哺乳動物，例如人類個體)。在一些實施例中，此一全長SARS-CoV-2刺突蛋白可具有為SEQ ID NO: 7中所示胺基酸序列或包含SEQ ID NO: 7中所示胺基酸序列之胺基酸序列。更進一步地，熟習此項技術者在閱讀本揭示案時將瞭解，此外其闡述包含編碼全長SARS-CoV-2刺突蛋白之核酸序列之某些mRNA構築體之特定特徵及/或優點。
不希望受任何特定理論束縛，本揭示案表明，所提供之組合物(例如，包含一或多種編碼全長SARS-CoV-2 S蛋白之mRNA構築體及一或多種編碼HA蛋白之mRNA構築體的組合物)對於在特定個體群體(例如特定年齡群體)中用作或用於免疫原性組合物(例如疫苗)可能尤其有用及/或有效。舉例而言，在一些實施例中，此一mRNA組合物在年輕(例如不到25歲、20歲、18歲、15歲、10歲或更年輕)之個體中可能尤其有用；或者或另外，在一些實施例中，此一mRNA組合物在老年個體(例如超過55歲、60歲、65歲、70歲、75歲、80歲、85歲或以上)中可能尤其有用。在特定實施例中，包含本文所提供之此一mRNA構築體之免疫原性組合物至少在一些個體中(例如，在一些個體年齡組中)展現出劑量水準及/或劑量數依賴性全身反應原性(例如，發熱、疲勞、頭痛、寒戰、腹瀉、肌肉疼痛及/或關節疼痛等)及/或局部耐受性(例如，疼痛、發紅及/或腫脹等)之最小至適度增加(例如，不超過30%之增加、不超過20%之增加或不超過10%之增加，或更低)；在一些實施例中，尤其在年輕年齡組(例如不到25歲、20歲、18歲或更年輕)個體中及/或在年長(例如老年人)年齡組(例如65-85歲)中觀察到此反應原性及/或局部耐受性。在一些實施例中，所提供之組合物(包含一或多種編碼全長SARS-CoV-2 S蛋白之mRNA構築體及一或多種編碼HA蛋白之mRNA構築體)對於用作或用於在有患與SARS-CoV-2感染及/或流行性感冒病毒感染相關之嚴重疾病之高風險下的個體群體(例如老年人群體，例如65-85歲組)中誘導SARS-CoV-2中和抗體及流行性感冒病毒中和抗體反應水準之免疫原性組合物(例如疫苗)可能尤其有用及/或有效。
在一些實施例中，可將本文所闡述之方法、組合物或組合投與給由RSV感染引起之嚴重疾病風險增加(例如，具有本文所闡述之風險因素之一)之老年人個體(例如50歲或以上、55歲或以上、60歲及以上或65歲及以上之個體)。在一些實施例中，將本文所闡述之方法、組合物或組合投與給由RSV感染引起之嚴重疾病風險增加(例如，具有本文所闡述之風險因素之一)之老年人(例如60歲及以上或65歲及以上之個體)。
在一些實施例中，可將本文所闡述之方法、組合物或組合投與給由RSV感染引起之嚴重疾病風險增加(例如，具有本文所闡述之風險因素之一)之嬰兒或幼兒。在一些實施例中，將本文所闡述之方法、組合物或組合投與給患有可因RSV感染而惡化之疾患(例如，患有本文所闡述之疾患之一)之個體。
在一些實施例中，可將本文所闡述之方法、組合物或組合投與給懷孕個體(例如孕齡約32週至約36週之個體)，例如，以預防出生後不久之嬰兒(例如自出生至約6月齡之兒童)中由RSV引起的下呼吸道疾病(LRTD)及嚴重LRTD。
在一些實施例中，與年輕患者相比，可向老年個體(例如65歲或以上之個體)投與更高劑量。舉例而言，在一些實施例中，向老年患者(例如65歲或以上之患者)投與給予非老年患者(例如小於65歲之患者)兩倍之劑量。在一些實施例中，向老年患者投與60 ug編碼與傳染原(例如流行性感冒)相關的一或多種抗原之RNA。在一些實施例中，向老年患者投與60 ug四價流行性感冒疫苗(例如包含以下之疫苗：15 μg編碼與H1N1流行性感冒A病毒相關之HA多肽的RNA、15 μg編碼與H3N2流行性感冒A病毒相關之HA多肽的RNA、15 μg編碼與B/Yamagata譜系相關之HA多肽的RNA及15 μg編碼與B/Yamagata譜系相關之HA多肽的RNA)。
在一些實施例中，熟習此項技術者在閱讀本揭示案後將尤其瞭解，所提供之包含一或多種編碼全長SARS-CoV-2 S蛋白之mRNA構築體及一或多種編碼HA蛋白之RNA構築體的組合物在年輕及老年群體中展現出有利之反應原性型態(例如，如本文所闡述)，其可能尤其有用及/或有效用作或用於免疫原性組合物(例如疫苗)，以供達成如本文所闡述之免疫學效應(例如，生成SARS-CoV-2中和抗體、流行性感冒病毒中和抗體及/或T細胞反應(例如CD4+及/或CD8+ T細胞反應))。在一些實施例中，本揭示案亦表明，所提供之包含一或多種編碼全長SARS-CoV-2 S蛋白之mRNA構築體及一或多種編碼HA蛋白之mRNA構築體的組合物可尤其有效用以保護免受SARS-CoV-2感染及/或流行性感冒感染，其特徵在於在利用包含此等mRNA構築體之免疫原性組合物免疫且隨後受到SARS-CoV-2及/或流行性感冒病毒攻擊之非人類哺乳動物個體(例如恆河獼猴)中，SARS-CoV-2病毒及/或流行性感冒病毒RNA較早清除。在一些實施例中，可在利用包含此等mRNA構築體之免疫原性組合物免疫且隨後受到SARS-CoV-2及/或流行性感冒病毒攻擊之非人類哺乳動物個體(例如恆河獼猴)之鼻子中觀察到SARS-CoV-2病毒RNA及/或流行性感冒病毒RNA之此類較早清除。
在一些實施例中，本揭示案提供組合物，該組合物包含一或多種RNA (例如一或多種mRNA)，其各自包含編碼全長SARS-CoV-2 S蛋白(例如具有一或多個胺基酸取代之全長SARS-CoV-2 S蛋白)之開放閱讀框；及一或多種RNA (例如一或多種mRNA)，其各自包含編碼HA蛋白之開放閱讀框，該RNA適於細胞內表現多肽。在一些實施例中，所編碼之SARS-CoV-2蛋白包含SEQ ID NO:7、50或69之胺基酸序列。在一些實施例中，所編碼之HA蛋白包含SEQ ID NO: 80、85、90、95、100或105中之任一者之胺基酸序列。在一些實施例中，此一RNA (例如mRNA)可與(聚)陽離子聚合物、(多種)多聚複合物、(多種)蛋白質或(多種)肽複合。在一些實施例中，此一RNA可調配於脂質奈米顆粒(例如本文所闡述者)中。
在一些實施例中，本文所提供之免疫原性組合物可包含SARS-CoV-2多肽或其變異體之複數個(例如至少兩個或更多個，包括例如至少三個、至少四個、至少五個、至少六個、至少七個、至少八個、至少九個、至少十個等)免疫反應性抗原決定基。在一些此等實施例中，此複數個免疫反應性抗原決定基可由複數個RNA (例如mRNA)編碼。在一些此等實施例中，此複數個免疫反應性抗原決定基可由單個RNA (例如mRNA)編碼。在一些實施例中，編碼複數個免疫反應性抗原決定基之核酸序列可在單個RNA (例如mRNA)中由連接體(例如在一些實施例中肽連接體)彼此隔開。不希望受任何特定理論束縛，在一些實施例中，當考慮SARS-CoV-2變異體之遺傳多樣性時，所提供之多抗原決定基(polyepitope)免疫原性組合物(包括例如，編碼全長SARS-CoV-2刺突蛋白之彼等組合物)可尤其用於提供針對眾多病毒變異體之保護，及/或可提供更大之機會來開發多樣及/或在其他方面強勁(例如持久的，例如在投與一或多個劑量後約5天、10天、15天、20天、25天、30天、35天、40天、45天、50天、55天、60天或更多天可偵測到)之中和抗體及/或T細胞反應，且特定而言尤其強勁之T H1型T細胞(例如CD4+及/或CD8+ T細胞)反應。
在一些實施例中，本揭示案記載所提供組合物及/或方法之特徵在於(例如當向相關群體投與時，相關群體在一些實施例中可為或包含成人群體)，在單次投與之情況下，其達成一或多種特定治療結果(例如，如本文所闡述之有效免疫反應及/或所編碼SARS-CoV-2 S蛋白及所編碼流行性感冒HA蛋白或其免疫原性片段之可偵測表現)；在一些此等實施例中，可對結果進行評價，例如與不存在本文所闡述之mRNA疫苗情況下所觀察到的相比。在一些實施例中，可與在投與單價疫苗(例如僅包含本文所揭示之一種RNA之組合物)後所觀察到之結果相比來評價結果。在一些實施例中，可在低於一或多種替代策略所需之劑量下達成特定結果。
在一些實施例中，本揭示案提供免疫原性組合物，其包含(i)一或多種信使核糖核酸(mRNA)多核苷酸，其各自包含編碼包含SARs-CoV-2 S蛋白之受體結合部分之多肽的開放閱讀框，及(ii)一或多種信使核糖核酸(mRNA)多核苷酸，其各自包含編碼包含HA蛋白之多肽的開放閱讀框，其中該mRNA多核苷酸(i)及該mRNA多核苷酸(ii)各自調配(一起或分開)於至少一種脂質奈米顆粒中。舉例而言，在一些實施例中，此一脂質奈米顆粒可包含莫耳比為為20%-60%之可電離之陽離子脂質、5%-25%之非陽離子脂質(例如中性脂質)、25%-55%之固醇或類固醇及0.5%-15%之聚合物結合之脂質(例如PEG修飾之脂質)。在一些實施例中，脂質奈米顆粒中所包括之固醇或類固醇可為或包含膽固醇。在一些實施例中，中性脂質可為或包含1,2-二硬脂醯基-sn-甘油-3-磷酸膽鹼(DSPC)。在一些實施例中，聚合物結合之脂質可為或包含PEG2000 DMG。在一些實施例中，此一免疫原性組合物可包含約1 mg 至10 mg、或3 mg至8 mg、或4 mg至6 mg之總脂質含量。在一些實施例中，此一免疫原性組合物可包含約5 mg/mL -15 mg/mL或7.5 mg/mL- 12.5 mg/mL或9-11 mg/mL之總脂質含量。在一些實施例中，以在投與至少一個劑量之免疫原性組合物之個體中有效誘導免疫反應之量提供此一組合物。在一些實施例中，由mRNA多核苷酸(i)編碼之多肽不包含完整S蛋白。在一些實施例中，此一免疫原性組合物中之mRNA多核苷酸不為自我複製RNA。
在一些實施例中，本文所揭示之組合物可誘導針對第一傳染原及第二傳染原之免疫反應。在一些實施例中，組合物可誘導針對冠狀病毒及另一呼吸疾病之免疫反應。在一些實施例中，組合物可誘導針對SARS-CoV-2及流行性感冒病毒之免疫反應。
在一些實施例中，免疫反應可包含產生針對SARS-CoV-2蛋白(包括例如在一些實施例中，經穩定之融合前刺突三聚體)及/或流行性感冒病毒蛋白或其片段之結合抗體效價。在一些實施例中，免疫反應可包含產生針對SARS-CoV-2刺突蛋白之受體結合結構域(RBD)之結合抗體效價。在一些實施例中，已確定所提供之免疫原性組合物在投與第一劑量後達成可偵測之結合抗體效價，在接受此一所提供免疫原性組合物之個體群體中有至少70% (包括例如至少80%、至少90%、至少95%直至100%)例如在約2週內發生血清轉化。
在一些實施例中，免疫反應可包含產生針對SARS-CoV-2蛋白(包括例如在一些實施例中，經穩定之融合前刺突三聚體)及/或流行性感冒病毒蛋白或其片段之中和抗體效價。在一些實施例中，免疫反應可包含產生針對SARS-CoV-2刺突蛋白之受體結合結構域(RBD)之中和抗體效價。在一些實施例中，已確定所提供之免疫原性組合物在適當系統中(例如，在感染SARS-CoV-2、流行性感冒病毒之人類及/或其群體中及/或在針對該等病毒之模型系統中)達成中和抗體效價。舉例而言，在一些實施例中，此中和抗體效價可能已在人類群體、非人類靈長類動物模型(例如恆河獼猴)及/或小鼠模型中之一或多者中得到證明。
在一些實施例中，中和抗體效價係(例如已確定為)相對於對適當對照(例如未接種疫苗之對照個體，或接種活減毒病毒疫苗、不活化病毒疫苗或蛋白亞單元病毒疫苗或其組合之個體)觀察到的足以減少B細胞之病毒感染之效價。在一些此等實施例中，此減少為至少30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或更多。
在一些實施例中，中和抗體效價係(例如已確定為)相對於對適當對照(例如未接種疫苗之對照個體，或接種活減毒病毒疫苗、不活化病毒疫苗或蛋白亞單元病毒疫苗或其組合之個體)觀察到的足以降低無症狀病毒感染率之效價。在一些此等實施例中，此降低為至少30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或更多。在一些實施例中，此降低可藉由SARS-CoV-2 N蛋白及/或流行性感冒病毒血清學之評價來表徵。現實生活中之觀察亦可證實針對無症狀感染之顯著保護作用(例如，參見Dagan N.等人，N Engl J Med. 2021, doi: 10.1056/NEJMoa2101765. 先於印刷版之電子版. PMID: 33626250中所彙總之SARS-CoV-2相關結果)。
在一些實施例中，中和抗體效價係(例如已確定為)相對於對適當對照(例如未接種疫苗之對照個體，或接種活減毒病毒疫苗、不活化病毒疫苗或蛋白亞單元病毒疫苗或其組合之個體)觀察到的足以減少或阻斷病毒與接種疫苗之個體之上皮細胞及/或B細胞融合之效價。在一些此等實施例中，此減少為至少30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或更多。
在一些實施例中，中和抗體效價之誘導可藉由B細胞之數量增多來表徵，該等B細胞在一些實施例中可包括漿細胞、類別轉換之IgG1及IgG2陽性B細胞及/或生發中心B細胞。在一些實施例中，已確定所提供之免疫原性組合物在適當系統中(例如在感染SARS-CoV-2之人類及/或其群體中及/或在針對該病毒之模型系統中)達成此種B細胞數量之增多。舉例而言，在一些實施例中，此種B細胞數量之增多可能已在人類群體、非人類靈長類動物模型(例如恆河獼猴)及/或小鼠模型中之一或多者中得到證明。在一些實施例中，此種B細胞數量之增多可能已在用所提供之免疫原性組合物對此一小鼠模型進行免疫接種後(例如至少7天、至少8天、至少9天、至少10天、至少11天、至少12天、至少13天、至少14天後)之小鼠模型之引流淋巴結及/或脾中得到證明。
在一些實施例中，中和抗體效價之誘導可藉由血液中之循環B細胞之數量減少來表徵。在一些實施例中，已確定所提供之免疫原性組合物在適當系統(例如在感染SARS-CoV-2之人類及/或其群體中及/或在針對該病毒之模型系統中)之血液中達成循環B細胞數量之此種減少。舉例而言，在一些實施例中，血液中之循環B細胞數量之此種減少可能已在人類群體、非人類靈長類動物模型(例如恆河獼猴)及/或小鼠模型中之一或多者中得到證明。在一些實施例中，血液中之循環B細胞數量之此種減少可能已在用所提供之免疫原性組合物對此一小鼠模型進行免疫接種後(例如至少4天、至少5天、至少6天、至少7天、至少8天、至少9天、至少10天後)之小鼠模型中得到證明。不希望受理論束縛，血液中循環B細胞之減少可能係由於B細胞向淋巴樣區室之歸巢。
在一些實施例中，由所提供之免疫原性組合物誘導之免疫反應可包含T細胞數量之增多。在一些實施例中，此種T細胞數量之增多可包括T濾泡輔助(T FH)細胞數量之增多，其在一些實施例中可包含ICOS上調之一或多個子集。熟習此項技術者將理解，生發中心中T FH之增殖對於產生適應性B細胞反應係必要的，且在人類中，疫苗接種後在循環中出現之T FH通常與抗原特異性抗體之高頻率相關。在一些實施例中，已確定所提供之免疫原性組合物在適當系統中(例如在感染SARS-CoV-2之人類及/或其群體中及/或在針對該病毒之模型系統中)達成T細胞(例如T FH細胞)數量之此種增多。舉例而言，在一些實施例中，T細胞(例如T FH細胞)數量之此種增多可能已在人類群體、非人類靈長類動物模型(例如恆河獼猴)及/或小鼠模型中之一或多者中得到證明。在一些實施例中，T細胞(例如T FH細胞)數量之此種增多可能已在用所提供之免疫原性組合物對此一小鼠模型進行免疫接種後(例如至少4天、至少5天、至少6天、至少7天、至少8天、至少9天、至少10天、至少11天、至少12天、至少13天、至少14天後)在小鼠模型之引流淋巴結、脾及/或血液中得到證明。
在一些實施例中，已在針對SARS-CoV-2及/或流行性感冒之適當模型系統中建立由所提供之免疫原性組合物誘導的針對SARS-CoV-2及/或流行性感冒病毒之保護性反應。舉例而言，在一些實施例中，此一保護性反應可能已在動物模型中得到證明，例如非人類靈長類動物模型(例如恆河獼猴)及/或小鼠模型。在一些實施例中，例如經由鼻內及/或氣管內途徑用SARS-CoV-2及/或流行性感冒病毒攻擊已接受至少一次用所提供之免疫原性組合物進行免疫接種之非人類靈長類動物(例如恆河獼猴)或其群體。在一些實施例中，可在用所提供之免疫原性組合物進行至少一次免疫接種(包括例如至少兩次免疫接種)後數週(例如5-10週)進行此種攻擊。在一些實施例中，可當在已接受用所提供之免疫原性組合物進行至少一次免疫接種(包括例如至少兩次免疫接種)之非人類靈長類動物(例如恆河獼猴)中達成可偵測水準之SARS-CoV-2中和效價及/或流行性感冒中和效價(例如，對SARS-CoV-2刺突蛋白、流行性感冒病毒HA蛋白及/或其片段之抗體反應，包括例如但不限於經穩定之融合前刺突三聚體、S-2P、RBD及/或HA蛋白)時進行此種攻擊。在一些實施例中，保護性反應之特徵在於在受攻擊之非人類靈長類動物(例如恆河獼猴)之支氣管肺泡灌洗液(BAL)及/或鼻拭子中可偵測到之病毒RNA不存在或減少。在一些實施例中，本文所闡述之免疫原性組合物之特徵可在於，與未免疫之動物群體、例如非人類靈長類動物(例如恆河獼猴)相比，在已接受用所提供之免疫原性組合物進行至少一次免疫接種(包括例如至少兩次免疫接種)之群體(例如恆河獼猴)中更大百分比之受攻擊動物(例如非人類靈長類動物)在其BAL及/或鼻拭子中展示不存在可偵測到之RNA。在一些實施例中，本文所闡述之免疫原性組合物之特徵可在於，與未免疫之動物群體、例如非人類靈長類動物(例如恆河獼猴)相比，已接受用所提供之免疫原性組合物進行至少一次免疫接種(包括例如至少兩次免疫接種)之受攻擊動物、例如群體中之非人類者(例如恆河獼猴)可在不遲於10天顯示出鼻拭子中病毒RNA之清除，包括例如不遲於8天、不遲於6天、不遲於4天等。
在一些實施例中，本文所闡述之免疫原性組合物在投與給有需要之個體時實質上不增加疫苗相關之增強呼吸疾病之風險。在一些實施例中，此種疫苗相關之增強呼吸疾病可能與抗體依賴性複製增強及/或與誘導具有較差中和活性及Th2偏向反應之抗體之疫苗抗原相關。在一些實施例中，本文所闡述之免疫原性組合物在投與給有需要之個體時實質上不增加抗體依賴性複製增強之風險。
在一些實施例中，單劑量之mRNA組合物(例如調配於脂質奈米顆粒中)可在疫苗接種不到10天內誘導治療性抗體反應。在一些實施例中，此種治療性抗體反應之特徵可在於，當在動物模型中以0.1至10 ug或0.2- 5 ug之劑量進行疫苗接種後10天量測時，此一mRNA疫苗可誘導產生約10-100 ug/mL IgG。在一些實施例中，此種治療性抗體反應之特徵可在於，在動物模型中以0.1至10 ug或0.2- 5 ug之劑量進行疫苗接種之20天時量測，此一mRNA疫苗誘導約100-1000 ug/mL IgG。在一些實施例中，如在動物模型中所量測，單劑量可在疫苗接種後15天誘導10-200 pVN50效價之假病毒中和效價。在一些實施例中，如在動物模型中所量測，單劑量可在疫苗接種後15天誘導50-500 pVN50效價之假病毒中和效價。
在一些實施例中，與在不存在mRNA組合物之情形下所觀察到的相比，單劑量之此一mRNA組合物可將抗原特異性CD8及/或CD4 T細胞反應擴增至少50%或更多(包括例如至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%或更多)。在一些實施例中，與在不存在mRNA組合物之情形下所觀察到的相比，單劑量之此一mRNA組合物可將抗原特異性CD8及/或CD4 T細胞反應擴增至少1.5倍或更多(包括例如至少2倍、至少3倍、至少5倍、至少10倍、至少50倍、至少100倍、至少500倍、至少1000倍或更多)。
在一些實施例中，與在不存在方案(例如單劑量之mRNA組合物)之情形下所觀察到的相比，此一方案可將展現出Th1表型(例如，特徵在於IFN-γ、IL-2、IL-4及/或IL-5之表現)之T細胞擴增至少50%或更多(包括例如至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%或更多)。在一些實施例中，與在不存在方案(例如單劑量之mRNA組合物)之情形下所觀察到的相比，此一方案可將展現出Th1表型(例如，特徵在於IFN-γ、IL-2、IL-4及/或IL-5之表現)之T細胞擴增例如至少1.5倍或更多(包括例如至少2倍、至少3倍、至少5倍、至少10倍、至少50倍、至少100倍、至少500倍、至少1000倍或更多)。在一些實施例中，T細胞表型可為或包含Th1顯性細胞介素型態(例如，特徵在於INF-γ陽性及/或IL-2陽性)，及/或沒有IL-4分泌或IL-4分泌在生物學上不顯著。
在一些實施例中，如本文所闡述之方案(例如一或多個劑量之mRNA組合物)誘導及/或達成RBD 特異性CD4+ T細胞之產生。此外，本揭示案記載編碼SARS-CoV-2刺突蛋白(例如全長SARS-CoV-2刺突蛋白)及一或多種HA蛋白之含RBD之部分的mRNA組合物在RBD特異性CD4+ T細胞之此種誘導及/或產生中可能尤其有用及/或有效。在一些實施例中，由本文所闡述之mRNA組合物(例如由編碼SARS-CoV-2刺突蛋白及HA蛋白之含RBD部分之mRNA組合物)誘導的RBD特異性CD4+ T細胞展示出Th1顯性細胞介素型態(例如，特徵在於INF-γ陽性及/或IL-2陽性)，及/或沒有IL-4分泌或IL-4分泌在生物學上不顯著。
在一些實施例中，可使用自個體收集之PBMC採用離體分析對接受mRNA組合物(例如如本文所闡述)之個體的CD4+及/或CD8+ T細胞反應(例如本文所闡述)進行表徵。
在一些實施例中，可藉由以下血清學免疫原性分析中之一或多者來評價本文所闡述之mRNA組合物之免疫原性：偵測接受所提供mRNA組合物之個體之血液樣品中所存在的針對SARS-CoV-2 S蛋白及/或HA蛋白之IgG、IgM及/或IgA，及/或使用SARS-CoV-2假病毒、流行性感冒假病毒及/或野生型SARS-CoV-2病毒或野生型流行性感冒病毒之中和分析。
在一些實施例中，在以10 ug-100 ug或1 ug-50 ug之劑量進行疫苗接種後7天內，mRNA組合物(例如如本文所闡述)提供相對較低之不良效應(例如1級-2級疼痛、發紅及/或腫脹)。在一些實施例中，在以10 ug-100 ug之劑量進行疫苗接種後7天內，mRNA組合物(例如如本文所闡述)提供相對較低之全身性事件(例如1級-2級發熱、疲勞、頭痛、寒戰、嘔吐、腹瀉、肌肉疼痛、關節疼痛、用藥及其組合)之觀察結果。
在一些實施例中，mRNA組合物之特徵在於，當以10-100 ug劑量或1 ug-50 ug向個體投與時，針對SARS-CoV-2免疫原性蛋白、流行性感冒病毒免疫原性蛋白及/或其片段(例如刺突蛋白受體結合結構域及/或HA蛋白)之IgG可在疫苗接種後21天以100-100,000 U/mL或500-50,000 U/mL之水準產生。
在一些實施例中，mRNA編碼SARS-CoV-2之天然摺疊之三聚體受體結合蛋白。在一些實施例中，mRNA編碼此受體結合蛋白之變異體，使得所編碼之變異體以10 pM或更低之Kd與ACE2結合，包括例如以9 pM、8 pM、7 pM、6 pM、5 pM、4 pM或更低之Kd結合。在一些實施例中，mRNA編碼此受體結合蛋白之變異體，使得所編碼之變異體以5 pM之Kd與ACE2結合。在一些實施例中，mRNA編碼SARS-CoV-2中包含ACE2受體結合位點之三聚體受體結合部分。在一些實施例中，mRNA包含SARS-CoV-2之受體結合部分之編碼序列及三聚化結構域(例如T4纖維蛋白之天然三聚化結構域(摺疊子))，使得編碼序列指導具有ACE2受體結合位點並結合ACE2之三聚體蛋白之表現。在一些實施例中，mRNA編碼SARS-CoV-2或其變異體之三聚體受體結合部分，使得其Kd小於SARS-CoV-2之單體受體結合結構域(RBD)之Kd。舉例而言，在一些實施例中，mRNA編碼SARS-CoV-2或其變異體之三聚體受體結合部分，使得其Kd較SARS-CoV-2之RBD之Kd小至少10倍(包括例如至少50倍、至少100倍、至少500倍、至少1000倍等)。
在一些實施例中，如藉由電子低溫顯微鏡術(cryoEM)所表徵，當mRNA (例如如本文所闡述)編碼之SARS-CoV-2之三聚體受體結合部分以閉合構形與ACE2及B 0AT1中性胺基酸轉運蛋白複合時，可確定其大小為約3-4埃。在一些實施例中，藉由如本文所闡述之mRNA組合物或方法表徵及/或達成之幾何平均SARS-CoV-2中和效價可達到COVID-19恢復期人員組(例如，在症狀發作後20-40天及無症狀恢復期開始後至少14天獲得的來自COVID-19恢復期人員之一組血清)之至少1.5倍，包括至少2倍、至少2.5倍、至少3倍或更高。
在一些實施例中，如本文所提供之mRNA組合物之特徵可在於，已用此等組合物(例如，用至少一個劑量、至少兩個劑量等)治療之個體與適當對照(例如，未經如此治療且在合理相當暴露條件下暴露於病毒之相當個體或群體之確定預期水準)相比可顯示出病毒RNA在相關部位(例如鼻子及/或肺等，及/或易受感染之任何其他組織)之存在減少及/或更短暫
在一些實施例中，由mRNA構築體(例如如本文所闡述)表現之RBD抗原可藉由添加T4-纖維蛋白源性「摺疊子」三聚化結構域進行修飾，例如以增加其免疫原性。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於某些局部反應(例如疼痛、發紅及/或腫脹等)及/或全身性事件(例如發熱、疲勞、頭痛等)可能會在疫苗接種後第2天出現及/或達到高峰。在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物之特徵在於某些局部反應(例如疼痛、發紅及/或腫脹等)及/或全身性事件(例如發熱、疲勞、頭痛等)可能會到疫苗接種後第7天消退。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，在接受mRNA組合物(例如如本文所闡述)之個體中未觀察到常規臨床實驗室值之1級或更大之變化或實驗室異常。此等臨床實驗室分析之實例可包括淋巴球計數、血液學變化等。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，至第一次投藥(例如，10-100 ug (包括端值)或1 ug-50 ug (包括端值))後21天，針對SARS-CoV-2 S多肽、流行性感冒病毒HA蛋白或其免疫原性片段(例如RBD)之IgG之幾何平均濃度(GMC)可達到200-3000單位/mL或500-3000單位/mL或500-2000單位/mL，相比之下，COVID-19恢復期人類血清組為602單位/mL。在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物之特徵在於，至第二次投藥(例如，10-30 ug (包括端值)；或1 ug-50 ug (包括端值))後7天，針對SARS-CoV-2刺突多肽、HA多肽或其免疫原性片段(例如RBD)之IgG之幾何平均濃度(GMC)可增加至少8倍或更高，包括例如至少9倍、至少10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少30倍、至少35倍、至少40倍或更高。在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物之特徵在於，至第二次投藥(例如，10-30 ug (包括端值)；或1 ug-50 ug (包括端值))後7天，針對SARS-CoV-2 S多肽、流行性感冒HA多肽或其免疫原性片段(例如RBD)之IgG之幾何平均濃度(GMC)可增加至1500單位/mL至40,000單位/mL或4000單位/mL至40,000單位/mL。在一些實施例中，本文所闡述之抗體濃度可在第一次投藥後持續至少20天或更長時間，包括例如至少25天、至少30天、至少35天、至少40天、至少45天、至少50天，或在第二次投藥後持續至少10天或更長時間，包括例如至少15天、至少20天、至少25天或更長時間。在一些實施例中，抗體濃度可持續至第一次投藥後35天，或第二次投藥後至少14天。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物之特徵在於，當在第二次投藥(例如，1-50 ug (包括端值))後7天量測時，針對SARS-CoV-2 S多肽、流行性感冒病毒HA多肽或其免疫原性片段(例如RBD)之IgG之GMC與在COVID-19恢復期人類血清或流行性感冒恢復期人類血清組中觀察到的抗體濃度相比高至少30% (包括例如高至少40%、高至少50%、高至少60%、高至少70%、高至少80%、高至少90%、高至少95%)。在許多實施例中，本文所闡述之IgG之幾何平均濃度(GMC)為RBD結合IgG之GMC。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物之特徵在於，當在第二次投藥(例如，10-50 ug (包括端值))後7天量測時，針對SARS-CoV-2 S多肽、流行性感冒病毒HA多肽或其免疫原性片段(例如RBD)之IgG之GMC與在COVID-19恢復期人類血清組及/或流行性感冒恢復期人類血清組中觀察到的抗體濃度相比為至少1.1倍(包括例如至少1.5倍、至少2倍、至少3倍、至少4倍、至少5倍、至少6倍、至少7倍、至少8倍、至少9倍、至少10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少30倍)。在許多實施例中，本文所闡述之IgG之幾何平均濃度(GMC)為RBD結合IgG之GMC。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物之特徵在於，當在第二次投藥後21天量測時，針對SARS-CoV-2 S多肽、流行性感冒病毒HA多肽或其免疫原性片段(例如RBD)之IgG之GMC與在COVID-19恢復期或流行性感冒恢復期人類血清組中所觀察到的抗體濃度相比為至少5倍(包括例如為至少6倍、為至少7倍、為至少8倍、為至少9倍、為至少10倍、為至少15倍、為至少20倍、為至少25倍、為至少30倍)。在許多實施例中，本文所闡述之IgG之幾何平均濃度(GMC)為RBD結合IgG之GMC。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，在第一次投藥後21天觀察到SARS-CoV-2及/或流行性感冒中和幾何平均效價(GMT)之增加(例如至少30%、至少40%、至少50%或更多)。在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物之特徵在於，在個體接受第二次投藥(例如，10 μg-30 μg (包括端值))後7天達成實質上更大之血清中和GMT，達到150-300，相比之下COVID-19恢復期血清組為94。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，在投與第二劑量後7天，保護功效為至少60%，例如至少70%、至少80%、至少90%或至少95%。在一個實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，在投與第二劑量後7天，保護功效為至少70%。在一個實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，在投與第二劑量後7天，保護功效為至少80%。在一個實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，在投與第二劑量後7天，保護功效為至少90%。在一個實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，在投與第二劑量後7天，保護功效為至少95%。
在一些實施例中，本文所提供之RNA組合物之特徵在於，其在投藥後(例如，第二次投藥後)至少7天後誘導針對SARS-CoV-2及/或流行性感冒病毒之免疫反應。在一些實施例中，本文所提供之RNA組合物之特徵在於，其在投藥後(例如，第二次投藥後)不到14天內誘導針對SARS-CoV-2及/或流行性感冒病毒之免疫反應。在一些實施例中，本文所提供之RNA組合物之特徵在於，其在疫苗接種方案後至少7天後誘導針對SARS-CoV-2及/或流行性感冒病毒之免疫反應。在一些實施例中，疫苗接種方案包含第一劑量及第二劑量。在一些實施例中，第一劑量與第二劑量相隔至少21天投與。在一些此等實施例中，在第一次投藥後至少28天後誘導針對SARS-CoV-2及/或流行性感冒病毒之免疫反應。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，如在來自接受本揭示案之mRNA組合物(例如，劑量為10-30 ug (包括端值))之個體血清中所量測，針對SARS-CoV-2刺突多肽、流行性感冒病毒HA多肽或其免疫原性片段(例如RBD)之抗體的幾何平均濃度(GMC)顯著高於恢復期血清組(例如如本文所闡述)。在個體可接受第二劑量(例如，在1個第一劑量後21天)之一些實施例中，如個體血清中所量測，針對SARS-CoV-2刺突多肽、流行性感冒病毒HA多肽或其免疫原性片段(例如RBD)之抗體之幾何平均濃度(GMC)可為恢復期血清組GMC之8.0倍至50倍。在個體可接受第二劑量(例如，在1個第一劑量後21天)之一些實施例中，如個體血清中所量測，針對SARS-CoV-2刺突多肽、流行性感冒病毒HA多肽或其免疫原性片段(例如RBD)之抗體之幾何平均濃度(GMC)與恢復期血清組GMC相比可為至少8.0倍或更高，包括例如至少10倍、至少20倍、至少30倍、至少40倍、至少50倍、至少60倍或更高。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，與恢復期血清組之中和GMT相比，如在第一次投藥後28天或第二次投藥後7天所量測，SARS-CoV-2中和幾何平均效價及/或流行性感冒病毒中和幾何平均效價可為至少1.5倍或更高(包括例如至少2倍、至少2.5倍、至少3倍、至少3.5倍或更高)。
在一些實施例中，向個體投與之方案可為或包含單劑量。在一些實施例中，向個體投與之方案可包含複數個劑量(例如至少兩個劑量、至少三個劑量或更多)。在一些實施例中，向個體投與之方案可包含第一劑量及第二劑量，其相隔至少2週、相隔至少3週、相隔至少4週或更長時間給予。在一些實施例中，此等劑量可相隔至少1個月、至少2個月、至少3個月、至少4個月、至少5個月、至少6個月、至少7個月、至少8個月、至少9個月、至少10個月、至少11個月、至少12個月或更長時間。在一些實施例中，劑量可相隔數天投與，諸如相隔1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60天或更多天。在一些實施例中，劑量可相隔約1至約3週、或相隔約1至約4週、或相隔約1至約5週、或相隔約1至約6週、或相隔約1至超過6週投與。在一些實施例中，劑量可隔開約7至約60天之時間段，諸如約14至約48天等。在一些實施例中，劑量之間的最少天數可為約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21天或更多。在一些實施例中，劑量之間的最大天數可為約60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48、47、46、45、44、43、42、41、40、39、38、37、36、35、34、33、32、31、30、29、28、27、26、25、24、23、22、21天或更少。在一些實施例中，劑量可相隔約21至約28天。在一些實施例中，劑量可相隔約19至約42天。在一些實施例中，劑量可相隔約7至約28天。在一些實施例中，劑量可為約14至約24天。在一些實施例中，劑量可為約21至約42天。
在一些實施例中，特定而言對於經建立以在長於約3週之時間段內達成升高之抗體及/或T細胞效價之組合物，例如在一些實施例中，所提供之組合物經建立以在長於約3週之時間段內達成升高之抗體及/或T細胞效價(例如，對SARS-CoV-2刺突蛋白或流行性感冒病毒HA蛋白之相關部分具有特異性)；在一些此等實施例中，投藥方案可僅涉及單次劑量，或可涉及兩次或更多次劑量，在一些實施例中，該兩次或更多次劑量可彼此相隔長於約21天或三週之時間段。舉例而言，在一些此等實施例中，此時間段可為約4週、5週、6週、7週、8週、9週、10週、11週、12週、13週、14週、15週、16週、17週、18週、19週、20週或更長，或約1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月、12個月或更長，或在一些實施例中約一年或更長。
在一些實施例中，第一劑量及第二劑量(及/或其他後續劑量)可藉由肌內注射投與。在一些實施例中，第一劑量及第二劑量可在三角肌中投與。在一些實施例中，第一劑量及第二劑量可在同一臂中投與。在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物作為相隔21天之一系列兩次劑量(例如，每次0.3 mL)投與(例如藉由肌內注射)。在一些實施例中，每次劑量為約30 ug。在一些實施例中，每次劑量可高於30 ug，例如約40 ug、約50 ug、約60 ug。在一些實施例中，每次劑量可低於30 ug，例如約20 ug、約10 ug、約5 ug等。在一些實施例中，每次劑量為約3 ug或更低，例如約1 ug。在一些此等實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給16歲或更大(包括例如16-85歲)之個體。在一些此等實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給18-55歲之個體。在一些此等實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給56-85歲之個體。在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物作為單次劑量投與(例如藉由肌內注射)。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，與具有SARS-CoV-2 RBD結合親和力之參考人類單株抗體(例如，如在J. ter Meulen等人，PLOS Med. 3, e237 (2006).中所闡述之CR3022)相比，由此等mRNA組合物及/或方法誘導之RBD特異性IgG (例如多株反應)對RBD展現出更高之結合親和力。在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，與具有HA結合親和力之參考人類單株抗體相比，由此等mRNA組合物及/或方法誘導之HA特異性IgG (例如多株反應)對HA展現出更高之結合親和力。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清在一組(例如至少10種、至少15種或更多種) SARS-CoV-2刺突變異體及/或流行性感冒病毒HA變異體中展示出中和活性。在一些實施例中，此等SARs-CoV-2刺突變異體包括RBD突變(例如但不限於與SEQ ID NO: 1相比，Q321L、V341I、A348T、N354D、S359N、V367F、K378R、R408I、Q409E、A435S、N439K、K458R、I472V、G476S、S477N、V483A、Y508H、H519P等)及/或刺突蛋白突變(例如但不限於與SEQ ID NO: 1相比，D614G等)。熟習此項技術者知曉各種刺突變異體及/或記載其之資源(例如，由COVID-19病毒基因體分析管道維護並在https:// cov.lanl.gov/ components/ sequence/COV/int_sites_tbls.comp發現之刺突中之突變位點之表)(最後一次訪問係在2020年8月24日)，且閱讀本說明書，將瞭解，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法可表徵為其在接種疫苗之個體中誘導血清之能力，該等血清對任何或所有此類變異體及/或其組合展示出中和活性。
在特定實施例中，編碼SARS-CoV-2刺突蛋白之RBD之mRNA組合物之特徵在於，接種疫苗之個體之血清在一組(例如至少10種、至少15種或更多種) SARs-CoV-2刺突變異體中展示出中和活性，該等SARs-CoV-2刺突變異體包括RBD變異體(例如但不限於與SEQ ID NO: 1相比，Q321L、V341I、A348T、N354D、S359N、V367F、K378R、R408I、Q409E、A435S、N439K、K458R、I472V、G476S、S477N、V483A、Y508H、H519P等)及刺突蛋白變異體(例如但不限於與SEQ ID NO: 1相比，D614G)。
在特定實施例中，編碼在S2亞單元之中心螺旋之頂部，在胺基酸位置986及987包括兩個連續脯胺酸取代之SARS-CoV-2刺突蛋白變異體之mRNA組合物之特徵在於，接種疫苗之個體之血清在一組(例如至少10種、至少15種或更多種) SARs-CoV-2刺突變異體中展示出中和活性，該等SARs-CoV-2刺突變異體包括RBD變異體(例如但不限於與SEQ ID NO: 1相比，Q321L、V341I、A348T、N354D、S359N、V367F、K378R、R408I、Q409E、A435S、N439K、K458R、I472V、G476S、S477N、V483A、Y508H、H519P等)及刺突蛋白變異體(例如但不限於與SEQ ID NO: 1相比，D614G)。舉例而言，在一些實施例中，編碼SEQ ID NO 7 (S P2)之mRNA組合物引發針對任何一種SARs-CoV-2刺突變異體之免疫反應，該等SARs-CoV-2刺突變異體包括RBD變異體(例如但不限於與SEQ ID NO: 1相比，Q321L、V341I、A348T、N354D、S359N、V367F、K378R、R408I、Q409E、A435S、N439K、K458R、I472V、G476S、S477N、V483A、Y508H、H519P等)及刺突蛋白變異體(例如但不限於與SEQ ID NO: 1相比，D614G)。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對一或多種SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性，該等刺突變異體與SEQ ID NO: 1相比，包括在刺突蛋白501位之突變。在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對一或多種SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性，該等刺突變異體與SEQ ID NO: 1相比，包括刺突蛋白中之N501Y突變。
該一或多種包括與SEQ ID NO: 1相比刺突蛋白501位突變之SARs-CoV-2刺突變異體或該一或多種包括與SEQ ID NO: 1相比刺突蛋白中之N501Y突變之SARs-CoV-2刺突變異體可包括與SEQ ID NO: 1相比之一或多種其他突變(例如但不限於與SEQ ID NO: 1相比，H69/V70缺失、Y144缺失、A570D、D614G、P681H、T716I、S982A、D1118H、D80A、D215G、E484K、A701V、L18F、R246I、K417N、L242/A243/L244缺失等)。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對SARs-CoV-2刺突變異體「關注變異體202012/01」 (VOC-202012/01；亦稱為譜系B.1.1.7)展示出中和活性。該變異體先前在2020年12月由英國公共衛生部(Public Health England)命名為首個接受調查之變異體(Variant Under Investigation)(VUI - 202012/01)，但被重新分類為關注變異體(VOC-202012/01)。VOC-202012/01係SARS-CoV-2之一種變異體，於2020年10月在英國COVID-19大流行期間自前一個月採集之樣品中首次偵測到，並於12月中旬迅速開始傳播。其與英國COVID-19感染率之顯著增加相關；認為此增加至少部分地係由於刺突糖蛋白受體結合結構域內N501Y之改變，此係在人類細胞中結合ACE2所需的。VOC-202012/01變異體由23種突變定義：13種非同義突變、4種缺失及6種同義突變(亦即，存在17種改變蛋白質之突變及6種不改變蛋白質之突變)。VOC 202012/01中之刺突蛋白變化包括缺失69-70、缺失144、N501Y、A570D、D614G、P681H、T716I、S982A及D1118H。VOC-202012/01中最重要的變化之一似乎為N501Y，亦即在胺基酸位點501自天冬醯胺(N)變為酪胺酸(Y)。此突變單獨存在或與N末端結構域(NTD)中69/70位之缺失組合，可能會增強病毒之可傳播性。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比，缺失69-70、缺失144、N501Y、A570D、D614G、P681H、T716I、S982A及D1118H。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對SARs-CoV-2刺突變異體「501.V2」展示出中和活性。此變異體最早在2020年10月之樣品中觀察到，且此後在南非，藉由全基因體測序(WGS)已證實501.V2變異體之超過300個病例，在2020年12月，其係該病毒之佔優形式。初步結果指示，此變異體可能具有增加之可傳播性。501.V2變異體由多種刺突蛋白變化定義，包括：D80A、D215G、E484K、N501Y及A701V，且最近收集之病毒有其他變化：L18F、R246I、K417N及缺失242-244。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比之D80A、D215G、E484K、N501Y及A701V，以及視情況存在的：與SEQ ID NO: 1相比之L18F、R246I、K417N及缺失242-244。該SARs-CoV-2刺突變異體亦可包括與SEQ ID NO: 1相比之D614G突變。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對一或多種SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性，該一或多種刺突變異體與SEQ ID NO: 1相比，包括刺突蛋白中之H69/V70缺失。
在一些實施例中，一或多種與SEQ ID NO: 1相比包括刺突蛋白中之H69/V70缺失之SARs-CoV-2刺突變異體可包括與SEQ ID NO: 1相比之一或多種其他突變(例如但不限於與SEQ ID NO: 1相比，Y144缺失、N501Y、A570D、D614G、P681H、T716I、S982A、D1118H、D80A、D215G、E484K、A701V、L18F、R246I、K417N、L242/A243/L244缺失、Y453F、I692V、S1147L、M1229I等)。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對SARs-CoV-2刺突變異體「關注變異體202012/01」 (VOC-202012/01；亦稱為譜系B.1.1.7)展示出中和活性。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比，缺失69-70、缺失144、N501Y、A570D、D614G、P681H、T716I、S982A及D1118H。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對SARs-CoV-2刺突變異體「群集5」展示出中和活性，該變異體亦由丹麥國家血清研究所(Danish State Serum Institute，SSI)稱為ΔFVI刺突。其在丹麥北日德蘭半島(North Jutland, Denmark)發現，且據信係經由水貂養殖場自水貂傳播給人類的。在群集5中，已證實病毒之刺突蛋白中存在若干種不同的突變。特定突變包括69-70德爾塔HV (蛋白質69及70位之組胺酸及纈胺酸殘基缺失)、Y453F (453位自酪胺酸變為苯丙胺酸)、I692V (692位自異白胺酸變為纈胺酸)、M1229I (1229位自甲硫胺酸變為異白胺酸)及視情況存在之S1147L (1147位自絲胺酸變為白胺酸)。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比，缺失69-70、Y453F、I692V、M1229I及視情況存在之S1147L。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對一或多種SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性，該一或多種刺突變異體與SEQ ID NO: 1相比，包括在刺突蛋白614位之突變。在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對一或多種SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性，該一或多種刺突變異體與SEQ ID NO: 1相比，包括刺突蛋白中之D614G突變。
在一些實施例中，一或多種包括與SEQ ID NO: 1相比刺突蛋白614位突變之SARs-CoV-2刺突變異體或該一或多種包括與SEQ ID NO: 1相比刺突蛋白中之D614G突變之SARs-CoV-2刺突變異體可包括與SEQ ID NO: 1相比的一或多種其他突變(例如但不限於與SEQ ID NO: 1相比，H69/V70缺失、Y144缺失、N501Y、A570D、P681H、T716I、S982A、D1118H、D80A、D215G、E484K、A701V、L18F、R246I、K417N、L242/A243/L244缺失、Y453F、I692V、S1147L、M1229I等)。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對SARs-CoV-2刺突變異體「關注變異體202012/01」 (VOC-202012/01；亦稱為譜系B.1.1.7)展示出中和活性。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比，缺失69-70、缺失144、N501Y、A570D、D614G、P681H、T716I、S982A及D1118H。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比之D80A、D215G、E484K、N501Y、A701V及D614G，以及視情況存在的：與SEQ ID NO: 1相比之L18F、R246I、K417N及缺失242-244。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對一或多種SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性，該一或多種刺突變異體與SEQ ID NO: 1相比，包括在刺突蛋白501及614位之突變。在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對一或多種SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性，該一或多種刺突變異體與SEQ ID NO: 1相比，包括刺突蛋白中之N501Y突變及D614G突變。
在一些實施例中，一或多種包括與SEQ ID NO: 1相比刺突蛋白501及614位突變之SARs-CoV-2刺突變異體或該一或多種包括與SEQ ID NO: 1相比刺突蛋白中之N501Y突變及D614G突變之SARs-CoV-2刺突變異體可包括與SEQ ID NO: 1相比的一或多種其他突變(例如但不限於與SEQ ID NO: 1相比，H69/V70缺失、Y144缺失、A570D、P681H、T716I、S982A、D1118H、D80A、D215G、E484K、A701V、L18F、R246I、K417N、L242/A243/L244缺失、Y453F、I692V、S1147L、M1229I等)。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對SARs-CoV-2刺突變異體「關注變異體202012/01」 (VOC-202012/01；亦稱為譜系B.1.1.7)展示出中和活性。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比，缺失69-70、缺失144、N501Y、A570D、D614G、P681H、T716I、S982A及D1118H。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比之D80A、D215G、E484K、N501Y、A701V及D614G，以及視情況存在的：與SEQ ID NO: 1相比之L18F、R246I、K417N及缺失242-244。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對一或多種SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性，該一或多種刺突變異體與SEQ ID NO: 1相比，包括在刺突蛋白484位之突變。在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對一或多種SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性，該一或多種刺突變異體與SEQ ID NO: 1相比，包括刺突蛋白中之E484K突變。
在一些實施例中，一或多種包括與SEQ ID NO: 1相比刺突蛋白484位突變之SARs-CoV-2刺突變異體或該一或多種包括與SEQ ID NO: 1相比刺突蛋白中之E484K突變之SARs-CoV-2刺突變異體可包括與SEQ ID NO: 1相比的一或多種其他突變(例如但不限於與SEQ ID NO: 1相比，H69/V70缺失、Y144缺失、N501Y、A570D、D614G、P681H、T716I、S982A、D1118H、D80A、D215G、A701V、L18F、R246I、K417N、L242/A243/L244缺失、Y453F、I692V、S1147L、M1229I、T20N、P26S、D138Y、R190S、K417T、H655Y、T1027I、V1176F等)。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對SARs-CoV-2刺突變異體「501.V2」展示出中和活性。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比之D80A、D215G、E484K、N501Y及A701V，以及視情況存在的：與SEQ ID NO: 1相比之L18F、R246I、K417N及缺失242-244。該SARs-CoV-2刺突變異體亦可包括與SEQ ID NO: 1相比之D614G突變。
譜系B.1.1.248稱為巴西變異體，其係SARS-CoV-2之一種變異體，命名為P.1譜系，且具有17個獨特的胺基酸變化，其中10個在其刺突蛋白中，包括N501Y及E484K。B.1.1.248源自B.1.1.28。E484K存在於B.1.1.28及B.1.1.248二者中。B.1.1.248具有多種S蛋白多態性[L18F、T20N、P26S、D138Y、R190S、K417T、E484K、N501Y、H655Y、T1027I、V1176F]，且在某些關鍵之RBD位置(K417、E484、N501)與南非描述之變異體相似。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對SARs-CoV-2刺突變異體「B.1.1.28」展示出中和活性。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對SARs-CoV-2刺突變異體「B.1.1.248」展示出中和活性。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比，L18F、T20N、P26S、D138Y、R190S、K417T、E484K、N501Y、H655Y、T1027I及V1176F。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對一或多種SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性，該一或多種刺突變異體與SEQ ID NO: 1相比，包括在刺突蛋白501及484位之突變。在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對一或多種SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性，該一或多種刺突變異體與SEQ ID NO: 1相比，包括刺突蛋白中之N501Y突變及E484K突變。
在一些實施例中，一或多種包括與SEQ ID NO: 1相比刺突蛋白501及484位突變之SARs-CoV-2刺突變異體或該一或多種包括與SEQ ID NO: 1相比刺突蛋白中之N501Y突變及E484K突變之SARs-CoV-2刺突變異體可包括與SEQ ID NO: 1相比的一或多種其他突變(例如但不限於與SEQ ID NO: 1相比，H69/V70缺失、Y144缺失、A570D、D614G、P681H、T716I、S982A、D1118H、D80A、D215G、A701V、L18F、R246I、K417N、L242/A243/L244缺失、Y453F、I692V、S1147L、M1229I、T20N、P26S、D138Y、R190S、K417T、H655Y、T1027I、V1176F等)。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對SARs-CoV-2刺突變異體「501.V2」展示出中和活性。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比之D80A、D215G、E484K、N501Y及A701V，以及視情況存在的：與SEQ ID NO: 1相比之L18F、R246I、K417N及缺失242-244。該SARs-CoV-2刺突變異體亦可包括與SEQ ID NO: 1相比之D614G突變。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對SARs-CoV-2刺突變異體「B.1.1.248」展示出中和活性。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比，L18F、T20N、P26S、D138Y、R190S、K417T、E484K、N501Y、H655Y、T1027I及V1176F。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對一或多種SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性，該一或多種刺突變異體與SEQ ID NO: 1相比，包括在刺突蛋白501、484及614位之突變。在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對一或多種SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性，該一或多種刺突變異體與SEQ ID NO: 1相比，包括刺突蛋白中之N501Y突變、E484K突變及D614G突變。
在一些實施例中，一或多種包括與SEQ ID NO: 1相比刺突蛋白501、484及614位突變之SARs-CoV-2刺突變異體或該一或多種包括與SEQ ID NO: 1相比刺突蛋白中之N501Y突變、E484K突變及D614G突變之SARs-CoV-2刺突變異體可包括與SEQ ID NO: 1相比的一或多種其他突變(例如但不限於與SEQ ID NO: 1相比，H69/V70缺失、Y144缺失、A570D、P681H、T716I、S982A、D1118H、D80A、D215G、A701V、L18F、R246I、K417N、L242/A243/L244缺失、Y453F、I692V、S1147L、M1229I、T20N、P26S、D138Y、R190S、K417T、H655Y、T1027I、V1176F等)。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比之D80A、D215G、E484K、N501Y、A701V及D614G，以及視情況存在的：與SEQ ID NO: 1相比之L18F、R246I、K417N及缺失242-244。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對一或多種SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性，該一或多種刺突變異體與SEQ ID NO: 1相比，包括刺突蛋白中之L242/A243/L244缺失。
在一些實施例中，一或多種與SEQ ID NO: 1相比包括刺突蛋白中之L242/A243/L244缺失之SARs-CoV-2刺突變異體可包括與SEQ ID NO: 1相比的一或多種其他突變(例如但不限於與SEQ ID NO: 1相比，H69/V70缺失、Y144缺失、N501Y、A570D、D614G、P681H、T716I、S982A、D1118H、D80A、D215G、E484K、A701V、L18F、R246I、K417N、Y453F、I692V、S1147L、M1229I、T20N、P26S、D138Y、R190S、K417T、H655Y、T1027I、V1176F等)。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對SARs-CoV-2刺突變異體「501.V2」展示出中和活性。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比之D80A、D215G、E484K、N501Y、A701V及缺失242-244，以及視情況存在的：與SEQ ID NO: 1相比之L18F、R246I及K417N。該SARs-CoV-2刺突變異體亦可包括與SEQ ID NO: 1相比之D614G突變。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對一或多種SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性，該一或多種刺突變異體與SEQ ID NO: 1相比，包括在刺突蛋白417位之突變。在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對一或多種SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性，該一或多種刺突變異體與SEQ ID NO: 1相比，包括刺突蛋白中之K417N或K417T突變。
在一些實施例中，一或多種包括與SEQ ID NO: 1相比刺突蛋白417位突變之SARs-CoV-2刺突變異體或該一或多種包括與SEQ ID NO: 1相比刺突蛋白中之K417N或K417T突變之SARs-CoV-2刺突變異體可包括與SEQ ID NO: 1相比的一或多種其他突變(例如但不限於與SEQ ID NO: 1相比，H69/V70缺失、Y144缺失、N501Y、A570D、D614G、P681H、T716I、S982A、D1118H、D80A、D215G、E484K、A701V、L18F、R246I、L242/A243/L244缺失、Y453F、I692V、S1147L、M1229I、T20N、P26S、D138Y、R190S、H655Y、T1027I、V1176F等)。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對SARs-CoV-2刺突變異體「501.V2」展示出中和活性。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比之D80A、D215G、E484K、N501Y、A701V及K417N，以及視情況存在的：與SEQ ID NO: 1相比之L18F、R246I及缺失242-244。該SARs-CoV-2刺突變異體亦可包括與SEQ ID NO: 1相比之D614G突變。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對SARs-CoV-2刺突變異體「B.1.1.248」展示出中和活性。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比，L18F、T20N、P26S、D138Y、R190S、K417T、E484K、N501Y、H655Y、T1027I及V1176F。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對一或多種SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性，該一或多種刺突變異體與SEQ ID NO: 1相比，包括在刺突蛋白417及484及/或501位之突變。在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對一或多種SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性，該一或多種刺突變異體與SEQ ID NO: 1相比，包括刺突蛋白中之K417N或K417T突變以及E484K及/或N501Y突變。
在一些實施例中，一或多種包括與SEQ ID NO: 1相比刺突蛋白417及484及/或501位突變之SARs-CoV-2刺突變異體或該一或多種包括與SEQ ID NO: 1相比刺突蛋白中之K417N或K417T突變以及E484K及/或N501Y突變之SARs-CoV-2刺突變異體可包括與SEQ ID NO: 1相比的一或多種其他突變(例如但不限於與SEQ ID NO: 1相比，H69/V70缺失、Y144缺失、A570D、D614G、P681H、T716I、S982A、D1118H、D80A、D215G、A701V、L18F、R246I、L242/A243/L244缺失、Y453F、I692V、S1147L、M1229I、T20N、P26S、D138Y、R190S、H655Y、T1027I、V1176F等)。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對SARs-CoV-2刺突變異體「501.V2」展示出中和活性。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比之D80A、D215G、E484K、N501Y、A701V及K417N，以及視情況存在的：與SEQ ID NO: 1相比之L18F、R246I及缺失242-244。該SARs-CoV-2刺突變異體亦可包括與SEQ ID NO: 1相比之D614G突變。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對SARs-CoV-2刺突變異體「B.1.1.248」展示出中和活性。
在特定實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比，L18F、T20N、P26S、D138Y、R190S、K417T、E484K、N501Y、H655Y、T1027I及V1176F。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對奧密克戎(B.1.1.529)變異體之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性。奧密克戎(B.1.1.529)變異體係在南非偵測到之SARS-CoV-2變異體。已出現多種奧密克戎亞系，包括例如BA.1、BA.2、BA.2.12.1、BA.3、BA.4、BA.5及BA.2.75亞系。如本文所用，除非另有指定，否則「奧密克戎變異體」係指具有BA.1或此後出現之其任何變異體(包括(但不限於)例如如本文所闡述之BA.2、BA.2.12.1、BA.2.12.1、BA.4或BA.5、BA.2.75、BA.2.75.2、BJ.1、BA.4.6或BF.7、XBB、XBB.1、XBB.2、XBB.1.3、BA.2.3.20、BQ.1.1)之一或多個突變特徵之SARS-CoV-2變異體。在一些實施例中，奧密克戎(B.1.1.529) BA.1變異體中之刺突蛋白變化包括A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE (在胺基酸214後插入EPE)、G339D、S371L、S373P、S375F、K417N、N440K、G446S、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K及L981F。在一些實施例中，奧密克戎(B.1.1.529)變異體中之刺突蛋白變化包括A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE (在胺基酸214後插入EPE)、G339D、S371L、S373P、S375F、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K及L981F。在一些實施例中，奧密克戎BA.2變異體中之刺突變化包括T19I、Δ24-26、A27S、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、S477N、T478K、E484A、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K。在一些實施例中，BA.4及BA.5具有相同的刺突蛋白胺基酸序列，在該情況下，「BA.4/5」用於任一奧密克戎變異體。在一些實施例中，奧密克戎BA.4/5中之刺突變化包括：T19I、Δ24-26、A27S、Δ69/70、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、L452R、S477N、T478K、E484A、F486V、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K。在一些實施例中，奧密克戎BA.2.75中之刺突變化包括T19I、Δ24-26、A27S、G142D、K147E、W152R、F157L、I210V、V213G、G257S、G339H、N354D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、Q498R、N501Y,、Y505H D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變中之至少10者、至少15者、至少20者、至少21者、至少22者、至少23者、至少24者、至少25者、至少26者、至少27者、至少28者、至少29者、至少30者、至少31者、至少32者、至少33者、至少34者、至少35者、至少36者或至少37者之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比，T547K、H655Y、D614G、N679K、P681H、N969K、S373P、S371L、N440K、G339D、G446S、N856K、N764K、K417N、D796Y、Q954H、T95I、A67V、L981F、S477N、G496S、T478K、Q498R、Q493R、E484A、N501Y、S375F、Y505H、V143del、H69del、V70del、N211del、L212I、ins214EPE、G142D、Y144del、Y145del、L141del、Y144F、Y145D、G142del。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變中之至少10者、至少15者、至少20者、至少21者、至少22者、至少23者、至少24者或所有以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比，T547K、H655Y、D614G、N679K、P681H、N969K、S373P、S371L、N440K、G339D、G446S、N856K、N764K、K417N、D796Y、Q954H、T95I、A67V、L981F、S477N、G496S、T478K、Q498R、Q493R、E484A。該SARs-CoV-2刺突變異體可包括以下突變中之至少1者、至少2者、至少3者、至少4者、至少5者或所有以下突變：與SEQ ID NO: 1相比，N501Y、S375F、Y505H、V143del、H69del、V70del，及/或可包括以下突變中之至少1者、至少2者、至少3者、至少4者、至少5者或所有以下突變：與SEQ ID NO: 1相比，N211del、L212I、ins214EPE、G142D、Y144del、Y145del。在一些實施例中，該SARs-CoV-2刺突變異體可包括以下突變中之至少1者、至少2者、至少3者或所有以下突變：與SEQ ID NO: 1相比，L141del、Y144F、Y145D、G142del。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變中之至少10者、至少15者、至少20者、至少21者、至少22者、至少23者、至少24者、至少25者、至少26者、至少27者、至少28者、至少29者、至少30者、至少31者、至少32者、至少33者之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比，A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、K417N、N440K、G446S、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K及L981F。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變中之至少10者、至少15者、至少20者、至少21者、至少22者、至少23者、至少24者、至少25者、至少26者、至少27者、至少28者、至少29者、至少30者或至少31者之SARS-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比，T19I、Δ24-26、A27S、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、S477N、T478K、E484A、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變中之至少10者、至少15者、至少20者、至少21者、至少22者、至少23者、至少24者、至少25者、至少26者、至少27者、至少28者、至少29者、至少30者、至少31者、至少32者、至少33者或至少34者之SARS-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比，T19I、Δ24-26、A27S、Δ69/70、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、L452R、S477N、T478K、E484A、F486V、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比，A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、K417N、N440K、G446S、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K及L981F。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARS-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：T19I、Δ24-26、A27S、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、S477N、T478K、E484A、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K。在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARS-CoV2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比，T19I、Δ24-26、A27S、Δ69/70、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、L452R、S477N、T478K、E484A、F486V、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比，A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K及L981F。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法之特徵在於，接種疫苗之個體之血清針對包括以下突變之SARs-CoV-2刺突變異體展示出中和活性：與SEQ ID NO: 1相比，T19I、Δ24-26、A27S、G142D、K147E、W152R、F157L、I210V、V213G、G257S、G339H、N354D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、Q498R、N501Y、Y505H D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K。
與SEQ ID NO: 1相比，本文所闡述之SARs-CoV-2刺突變異體可包括或可不包括D614G突變。
在一些實施例中，本文所闡述之SARS-CoV-2刺突變異體包含弗林蛋白酶裂解位點中之突變(例如，在一些實施例中，SEQ ID NO: 1之殘基682-685)。在一些實施例中，SARS-CoV-2刺突變異體包含弗林蛋白酶裂解位點中之突變，該突變阻止弗林蛋白酶(例如人類弗林蛋白酶)之裂解作用。在一些實施例中，本文所闡述之SARS-CoV-2變異體包含WO2021163365或WO2021243122中所揭示之弗林蛋白酶突變(例如GSAS突變)，該兩案之內容係以全文引用的方式併入本文中。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物及/或方法可在至少50%之接受此等mRNA組合物及/或方法之個體中提供針對SARS-CoV-2及/或流行性感冒病毒(例如流行性感冒A型及/或B型病毒)之保護，及/或降低SARS-CoV-2感染及/或流行性感冒病毒感染(例如流行性感冒A型及/或B型病毒感染)之嚴重程度。在一些實施例中，本文所揭示之組合物可用於主動免疫接種，以預防個體(例如兒科患者、懷孕患者及18歲或18歲以上患者)中之SARS-CoV-2感染及流行性感冒亞型A及亞型B感染。
在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體包括18歲及18歲以上之個體。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體包括18-55歲之個體。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體包括56-85歲之個體。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體包括老年個體(例如超過60、65、70、75、80、85歲等之個體，例如年齡為65-85歲之個體)。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體包括18-85歲之個體。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體包括18歲或更年輕之個體。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體包括12歲或更年輕之個體。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體包括10歲或更年輕之個體。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體可包括青少年群體(例如，大約12歲至大約17歲之個體)。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體可包括兒科群體(例如，如本文所闡述)。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體包括嬰兒(例如，不到1歲)。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體不包括母親在妊娠期間已接受本文所闡述之此等mRNA組合物之嬰兒(例如，不到1歲)。不希望受任何特定理論束縛，一項大鼠研究表明，在妊娠期間給予此等mRNA組合物之雌性大鼠中誘導的SARS-CoV-2中和抗體反應可傳遞給胎兒。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體包括母親在妊娠期間未接受本文所闡述之此等mRNA組合物之嬰兒(例如，不到1歲)。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體可包括孕婦；在一些實施例中，母親在妊娠期間接種疫苗(例如接受至少一次劑量的，或替代地僅為接受兩次劑量的)之嬰兒在出生後最初的幾週、幾個月或甚至幾年(例如1、2、3、4、5、6、7、8週或更長，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24個月或更長，或1、2、3、4、5年或更長)內不接種疫苗。替代地或另外地，在一些實施例中，母親在妊娠期間接種疫苗(例如接受至少一次劑量的，或替代地僅為接受兩次劑量的)之嬰兒在出生後，例如在出生後最初之幾週、幾個月或甚至幾年(例如1、2、3、4、5、6、7、8週或更長，或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24個月或更長，或1、2、3、4、5年或更長)內接受減少之疫苗接種(例如更低之劑量及/或更少之投與次數，例如加強劑，及/或在給定之時間段內更低之總暴露量)，或者可能需要減少之疫苗接種(例如在給定時間段內更低之劑量及/或更少之投與次數，例如加強劑)。在一些實施例中，將如本文所提供之組合物投與給不包括孕婦之群體。
在一些特定實施例中，根據包括在妊娠約24週後(例如妊娠約22、23、24、25、26、27、28或更多週後)投與第一劑量之方案將本文所提供之組合物投與給孕婦；在一些實施例中，根據包括在妊娠約34週之前(例如妊娠約30、31、32、33、34、35、36、37、38週之前)投與第一劑量之方案將本文所提供之組合物投與給孕婦。在一些實施例中，根據包括在妊娠約24週後(例如妊娠約27週後，例如妊娠約24週至34週之間，或妊娠約27週至34週之間)投與第一劑量且約21天後投與第二劑量之方案將本文所提供之組合物投與給孕婦；在一些實施例中，兩次劑量均在分娩前投與。不希望受任何特定理論束縛，提出此一方案(例如，涉及在妊娠約24週或27週之後且視情況在妊娠約34週之前投與第一劑量且視情況在約21天內(理想地在分娩之前)投與第二劑量)在安全性(例如，減少早產或胎兒發病率或死亡率之風險)及/或功效(例如，給予嬰兒之殘轉疫苗接種)方面相對於替代投藥方案(例如，在妊娠期間之任何時間投藥，在妊娠期間避免投藥，及/或例如在妊娠後期投藥，使得在妊娠期間僅投與一次劑量)具有某些優勢。在一些實施例中，由例如根據本文所闡述之特定方案在妊娠期間接種疫苗之母親所生之嬰兒在出生後的一段時間(例如如本文所闡述)內可能不需要進一步接種疫苗，或可能需要減少之疫苗接種(例如更低之劑量及/或更少之投與次數，例如加強劑，及/或在給定之時間段內更低之總暴露量)。
在一些實施例中，將本文所提供之組合物投與給其中建議女性在接種疫苗後(例如在接受第一劑量之疫苗後、在接受最後劑量之疫苗後等)之一段時間內不妊娠之群體；在一些此等實施例中，該時間段可為至少1週、至少2週、至少3週、至少4週、至少5週、至少6週、至少7週、至少8週、至少9週、至少10週或更長，或可為至少1個月、至少2個月、至少3個月、至少4個月、至少5個月、至少6個月或更長。
在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體可包括具有一或多種例如如本文所註明之特別高風險疾患或病史之一或多個群體。舉例而言，在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體可包括其職業及/或環境暴露可顯著增加其感染SARS-CoV-2及/或感染流行性感冒病毒風險之個體(包括例如但不限於，公共交通運輸人員、囚犯、雜貨店工人、長期照護機構中之居民、屠夫或其他肉類加工工人、醫護人員及/或第一反應人員，例如應急反應人員)。在特定實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體可包括醫護人員及/或第一反應人員，例如應急反應人員。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體可包括有吸煙或吸電子煙史(例如在6個月、12個月或更長時間內，包括慢性吸煙或吸電子煙史)之群體。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體可包括已確定更易受SARS-CoV-2感染及/或流行性感冒病毒感染之某些族群。
在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體可包括具有可能已確定更易受SARS-CoV-2感染及/或流行性感冒病毒感染之血型之某些群體。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體可包括免疫受損個體(例如患有HIV/AIDS之彼等個體；癌症患者(例如接受抗腫瘤治療)；正在服用某些免疫抑制藥物之患者(例如移植患者、癌症患者等)；自體免疫性疾病或預期需要免疫抑制療法之其他生理疾患(例如3個月內、6個月內或更長時間內)；以及患有影響免疫系統之遺傳性疾病(例如先天性無γ球蛋白血症、先天性IgA缺乏)之患者)。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體可包括患有傳染性疾病之彼等群體。舉例而言，在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體可包括彼等感染人類免疫缺失病毒(HIV)及/或肝炎病毒(例如HBV、HCV)之群體。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體可包括彼等患有基礎性醫學病況之群體。此等基礎性醫學病況之實例可包括(但不限於)高血壓、心血管疾病、糖尿病、慢性呼吸疾病，例如慢性肺病、氣喘等，癌症及其他慢性疾病，諸如狼瘡、類風濕性關節炎、慢性肝病、慢性腎病(例如3期或更糟，諸如在一些實施例中以腎小球濾過率(GFR)小於60 mL/min/1.73 m 2為特徵)。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體可包括超重或肥胖個體，例如，具體而言包括身體質量指數(BMI)高於約30 kg/m 2之彼等個體。在一些實施例中，欲用本文所闡述之mRNA組合物治療之群體可包括有既往COVID-19診斷，或有當前或既往SARS-CoV-2感染證據(例如基於血清學或鼻拭子)之個體。在一些實施例中，欲治療之群體包括白人及/或非西班牙裔/非拉丁裔。
在一些實施例中，可選擇某些本文所闡述之mRNA組合物投與給亞洲人群體(例如中國人群體)，或在特定實施例中投與給較年長之亞洲人群體(例如60歲或以上，例如60-85歲或65-85歲)。
在一些實施例中，將本文所提供之mRNA組合物投與給已確定在投與前不顯示既往感染及/或當前感染證據之個體，及/或在該等個體中對該組合物進行評價；在一些實施例中，既往感染及/或當前感染之證據可為或包括個體中(例如其生物樣品中，諸如血液、細胞、黏液及/或組織)存在完整病毒或任何病毒核酸、蛋白質、脂質等之證據，及/或個體對該等物質之免疫反應之證據。在一些實施例中，將本文所提供之mRNA組合物投與給已確定在投與前顯示既往感染及/或當前感染證據之個體，及/或在該等個體中對該組合物進行評價；在一些實施例中，既往感染及/或當前感染之證據可為或包括個體中(例如其生物樣品中，諸如血液、細胞、黏液及/或組織)存在完整病毒或任何病毒核酸、蛋白質、脂質等之證據，及/或個體對該等物質之免疫反應之證據。在一些實施例中，基於在第1劑當日具有陽性N-結合抗體測試結果或陽性核酸擴增測試(NAAT)結果，認為個體有既往感染。
在一些實施例中，將本文所提供之RNA (例如mRNA)組合物投與給已告知有副作用風險之個體，該等副作用可包括例如以下中之一或多者：寒戰、發熱、頭痛、注射部位疼痛、肌肉疼痛、疲勞；在一些實施例中，將RNA (例如，mRNA)組合物投與給個體，若發生一或多種此等副作用，表現為超過輕度或中度，持續一天以上或數天時期，或若出現個體有合理理由認為可能與接受該組合物相關之任何嚴重或意外之事件，則要求個體告知健康照護提供者。在一些實施例中，將本文所提供之RNA (例如mRNA)組合物投與給個體，該個體已被要求將特定醫學病況告知健康照護提供者，該等醫學病況可包括例如過敏、出血性病症或服用血液稀釋劑藥劑、母乳餵養、發燒、免疫受損狀態或服用影響免疫系統之藥劑、妊娠或計劃妊娠等中之一或多者。在一些實施例中，將本文所提供之RNA (例如mRNA)組合物投與給個體，該個體已被要求將已接受另一COVID-19疫苗及/或另一流行性感冒疫苗(例如本文所闡述之COVID-19或流行性感冒疫苗)告知健康照護提供者。在一些實施例中，將本文所提供之RNA (例如mRNA)組合物投與給不具有以下醫學病況之一之個體：經歷發熱性疾病、接受免疫抑制劑療法(例如，過去60天內接受已知之免疫抑制藥劑或放射療法)、接受抗凝血療法、患有出血性病症(例如禁忌肌內注射者)、既往心臟病史、異常篩選肌鈣蛋白I實驗室值、大概或可能的心肌炎或心包炎(例如，個體之12導程ECG顯示平均QTcF間隔＞450 msec、完全性左束支傳導阻滯、急性或不確定年齡之心肌梗塞徵象、ST-T間隔變化提示心肌缺血、二度或三度AV阻滯及/或嚴重緩慢性心率不整或快速性心率不整)或妊娠及/或哺乳/授乳。在一些實施例中，將本文所提供之RNA (例如mRNA)組合物投與給未接受另一COVID-19疫苗及/或另一流行性感冒疫苗之個體。在一些實施例中，將本文所提供之RNA (例如mRNA)組合物投與給對該RNA (例如mRNA)組合物之任何組分沒有過敏反應之個體。此種過敏反應之實例包括(但不限於)呼吸困難、呼吸道及/或喉嚨腫脹、心跳加快、皮疹、頭暈及/或虛弱。在一些實施例中，將本文所提供之RNA (例如mRNA)組合物投與給已接受第一劑且對第一劑沒有過敏反應(例如如本文所闡述)之個體。在個體接受一劑本文所提供之RNA (例如mRNA)組合物後發生過敏反應之一些實施例中，可對此(等)個體採取一或多種干預措施，諸如治療以管控及/或減輕此等過敏反應之症狀，例如，使用退熱劑及/或抗炎劑。
在一些實施例中，告知已接受至少一劑本文所提供之RNA (例如mRNA)組合物之個體避免暴露於冠狀病毒(例如SARS-CoV-2)及/或流行性感冒病毒，除非且直至自投與第二劑以來已過去數天(例如至少7天、至少8天、9天、至少10天、至少11天、至少12天、至少13天、至少14天等)。舉例而言，告知已接受至少一劑本文所提供之RNA (例如mRNA)組合物之個體採取預防SARS-CoV-2感染及/或流行性感冒病毒感染之措施(例如保持社交距離、戴口罩、頻繁洗手等)，除非且直至自投與第二劑以來已過去數天(例如至少7天、至少8天、9天、至少10天、至少11天、至少12天、至少13天、至少14天等)。因此，在一些實施例中，投與本文所提供之RNA (例如mRNA)組合物之方法包括將第二劑本文所提供之此一RNA (例如mRNA)組合物投與給已接受第一劑並採取預防措施以避免暴露於冠狀病毒(例如SARS-CoV-2)及/或流行性感冒病毒之個體。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物可遞送至有需要個體之引流淋巴結，例如用於疫苗初免。在一些實施例中，此遞送可藉由肌內投與所提供之mRNA組合物來實施。
在一些實施例中，可將不同的特定mRNA組合物投與給不同的個體群體；或者或另外，在一些實施例中，可將不同的投藥方案投與給不同的個體群體。舉例而言，在一些實施例中，投與給特定個體群體之mRNA組合物之特徵可在於在彼等個體群體中之一或多種特定效應(例如發生率及/或影響度)。在一些實施例中，此(等)效應可為或包括例如中和抗體及/或T細胞(例如T H1型T細胞，諸如CD4 +及/或CD8 +T細胞)之效價及/或持久性，對抗攻擊之保護(例如經由注射及/或鼻暴露等)，副作用(例如反應原性)之發生率、嚴重程度及/或持久性等。
在一些實施例中，一或多種本文所闡述之mRNA組合物可根據建立的方案投與以降低每1000人-年COVID-19發病率及/或流行性感冒發病率，該方案係例如基於實驗室測試，諸如核酸擴增測試(NAAT)。在一些實施例中，一或多種本文所闡述之mRNA組合物可根據建立的方案投與以降低每1000人-年COVID-19及/或流行性感冒發病率，該方案係在接受至少一劑所提供之mRNA組合物且無既往SARS-CoV-2及/或流行性感冒病毒感染之血清學或病毒學證據(例如，在接受最後一劑之後最多7天)之個體中基於實驗室測試(諸如核酸擴增測試(NAAT))而建立的。在一些實施例中，一或多種本文所闡述之mRNA組合物可根據建立的方案投與以降低每1000人-年確診嚴重COVID-19及/或流行性感冒發病率。在一些實施例中，一或多種本文所闡述之mRNA組合物可根據建立的方案投與，以降低接受至少一劑所提供之mRNA組合物且無既往SARS-CoV-2及/或既往流行性感冒病毒感染之血清學或病毒學證據之個體中每1000人-年確診嚴重COVID-19及/或流行性感冒發病率。
在一些實施例中，一或多種本文所闡述之mRNA組合物可根據建立的方案投與，以在一段時間內產生針對SARS-CoV-2刺突多肽、流行性感冒病毒HA多肽及/或其免疫原性片段(例如RBD)之中和抗體，如在達到或超過參考水準(例如，基於人類SARS-CoV-2感染/COVID-19恢復期血清及/或人類流行性感冒恢復期血清確定之參考水準)之個體的血清中所量測，及/或在一段時間內誘導細胞介導之免疫反應(例如，針對SARS-CoV-2及/或流行性感冒病毒之T細胞反應)，包括例如在一些實施例中，誘導識別SARS-CoV-2刺突多肽、流行性感冒病毒HA多肽及/或其免疫原性片段(例如RBD)內之至少一或多個MHC限制性(例如MHC I類限制性)抗原決定基之T細胞。在一些此等實施例中，該一段時間可為至少2個月、3個月、至少4個月、至少5個月、至少6個月、至少7個月、至少8個月、至少9個月、至少10個月、至少11個月、至少12個月或更長時間。在一些實施例中，由疫苗誘導之T細胞(例如CD8+ T細胞)識別之一或多個抗原決定基可存在於MHC I類等位基因上，該等位基因存在於群體中至少50%之個體中，包括例如至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或更多；在一些此等實施例中，MHC I類等位基因可為HLA-B*0702、HLA-A*2402、HLA-B*3501、HLA-B*4401或HLA-A*0201。在一些實施例中，抗原決定基可包含HLA-A*0201 YLQPRTFLL (SEQ ID NO: 35)；HLA-A*0201 RLQSLQTYV (SEQ ID NO: 36)；HLA-A*2402 QYIKWPWYI (SEQ ID NO: 37)；HLA-A*2402 NYNYLYRLF (SEQ ID NO: 38)；HLA-A*2402 KWPWYIWLGF (SEQ ID NO: 39)；HLA-B*3501 QPTESIVRF (SEQ ID NO: 40)；HLA-B*3501 IPFAMQMAY (SEQ ID NO: 41)；或HLA-B*3501 LPFNDGVYF (SEQ ID NO: 42)。
在一些實施例中，將功效評價為在疫苗接種方案之前及期間無既往SARS-CoV-2感染及/或既往流行性感冒病毒感染之血清學或病毒學證據之個體中每1000人-年COVID-19及/或流行性感冒發病率；或者或另外，在一些實施例中，將功效評價為在疫苗接種方案之前及期間有及無既往SARS-CoV-2感染及/或流行性感冒病毒感染證據之個體中每1000人-年COVID-19及/或流行性感冒發病率。在一些此等實施例中，此發病率係在最後一劑疫苗(例如單劑方案中之第一劑；兩劑方案中之第二劑等)後之一段特定時間內COVID-19及/或流行性感冒確診病例之發病率；在一些實施例中，此時間段可為在特定天數(例如3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30天或更多)內(亦即，最多且包括7天)。在一些實施例中，此時間段可為在7天內或14天內或21天內或28天內。在一些實施例中，此時間段可為在7天內。在一些實施例中，此時間段可為在14天內。
在一些實施例中(例如，在評價功效之一些實施例中)，若以下中之一或多者成立，則確定個體經歷COVID-19感染或流行性感冒病毒感染：在來自個體之樣品中偵測到SARS-CoV-2核酸或流行性感冒病毒核酸，偵測到特異性識別SARS-CoV-2或流行性感冒病毒(例如SARS-Co-V-2刺突蛋白或HA多肽)之抗體，有COVID-19感染或流行性感冒病毒感染之一或多種症狀，及其組合。在一些此等實施例中，SARS-CoV-2或流行性感冒病毒核酸之偵測可涉及例如對中鼻甲拭子樣品之NAAT測試。在一些此等實施例中，相關抗體之偵測可涉及血液樣品或其部分之血清學測試。在一些此等實施例中，COVID-19感染之症狀可為或包括：發熱、新發或加重之咳嗽、新發或加重之呼吸短促、寒戰、新發或加重之肌肉疼痛、新發味覺或嗅覺喪失、喉嚨痛、腹瀉、嘔吐及其組合。在一些此等實施例中，COVID-19感染之症狀可為或包括：發熱、新發或加重之咳嗽、新發或加重之呼吸短促、寒戰、新發或加重之肌肉疼痛、新發味覺或嗅覺喪失、喉嚨痛、腹瀉、嘔吐、疲勞、頭痛、鼻塞或流鼻涕、噁心及其組合。在一些此等實施例中，若個體已經歷一種此症狀且SARS-CoV-2核酸測試陽性或抗體測試陽性，或二者同時為陽性，則確定此個體已經歷COVID-19感染。在一些此等實施例中，若個體已經歷一種此症狀且SARS-CoV-2核酸測試陽性，則確定此個體已經歷COVID-19感染。在一些此等實施例中，若個體已經曆一種此症狀且SARS-CoV-2抗體測試陽性，則確定此個體已經歷COVID-19感染。
在一些實施例中(例如，在評價功效之一些實施例中)，若個體已經歷以下一或多種情況，則確定此個體已經歷嚴重的COVID-19感染：靜息時臨床徵象指示嚴重全身性疾病(例如，下列中之一或多者：呼吸率大於或等於每分鐘30次，心率每分鐘125次或以上，海平面室內空氣條件下SpO 2低於或等於93%，或PaO 2/FiO 2低於300 m Hg)，呼吸衰竭(例如需要高流量吸氧、無創通氣、機械通氣、ECMO中之一或多者)，休克跡象(收縮壓低於90 mm Hg、舒張壓低於60 mm Hg，需要升壓藥)，明顯之急性腎、肝或神經功能障礙，入住重症監護室，死亡，及其組合。
在一些實施例中，一或多種本文所闡述之mRNA組合物可根據建立的方案投與，以降低報告至少一種以下情況之個體之百分比：(i)每次投藥後長達7天之一或多種局部反應(例如如本文所闡述)；(ii)每次投藥後長達7天之一或多次全身性事件；(iii)自第一劑至最後一劑後1個月之不良事件(例如如本文所闡述)；及/或(iv)自第一劑至最後一劑後6個月之嚴重不良事件(例如如本文所闡述)。
在一些實施例中，可監測已接受本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物之一或多名個體(例如至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10天或更長時間，包括例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12週或更長時間，包括例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24個月或更長時間，包括例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10年或更長時間)，以評價例如對所投與組合物之組分之免疫反應之存在、暴露於SARS-CoV-2或另一冠狀病毒及/或對其免疫反應之證據、任何不良事件之證據等。在一些實施例中，可經由遠程訪問進行監測。或者或另外，在一些實施例中，監測可為在場進行的。
在一些實施例中，一或多種本文所闡述之mRNA組合物所賦予之治療效應之特徵可在於：(i) SARS-CoV-2抗S1結合抗體水準高於預定臨限值；(ii) SARS-CoV-2抗RBD結合抗體水準高於預定臨限值；(iii) SARS-CoV-2血清中和效價高於臨限值水準；(iv)抗HA結合抗體水準高於預定臨限值，及/或(v)流行性感冒病毒血清中和效價高於臨限值，例如在基線、疫苗接種完成後1個月、3個月、6個月、9個月、12個月、18個月及/或24個月時。在一些實施例中，抗S1結合抗體及/或抗RBD結合抗體水準及/或抗HA結合抗體水準及/或血清中和效價可藉由幾何平均濃度(GMC)、幾何平均效價(GMT)或幾何平均升高倍數(GMFR)來表徵。
在一些實施例中，一或多種本文所闡述之mRNA組合物所賦予之治療效應之特徵可在於，顯示SARS-CoV-2血清中和效價及/或流行性感冒病毒中和效價高於預定臨限值(例如，在基線時、疫苗接種完成後1個月、3個月、6個月、9個月、12個月、18個月及/或24個月)之治療個體之百分比高於顯示SARS-CoV-2血清中和效價及/或流行性感冒病毒中和效價高於此一預定臨限值(例如如本文所闡述)之未治療個體之百分比。在一些實施例中，血清中和效價可藉由幾何平均濃度(GMC)、幾何平均效價(GMT)或幾何平均升高倍數(GMFR)來表徵。
在一些實施例中，一或多種本文所闡述之mRNA組合物所賦予之治療效應可藉由SARS-CoV-2 NVA特異性結合抗體之偵測來表徵。
在一些實施例中，一或多種本文所闡述之mRNA組合物所賦予之治療效應可藉由核酸擴增測試進行之SARS-CoV-2偵測及/或流行性感冒病毒偵測來表徵。
在一些實施例中，一或多種本文所闡述之mRNA組合物所賦予之治療效應可藉由以下來表徵：細胞介導之免疫反應(例如，針對SARS-CoV-2及/或流行性感冒病毒之T細胞反應)之誘導，包括例如在一些實施例中，識別SARS-CoV-2刺突多肽、HA多肽及/或其免疫原性片段(例如RBD)內之至少一或多個MHC限制性(例如MHC I類限制性)抗原決定基之T細胞之誘導。在一些實施例中，由疫苗誘導之T細胞(例如CD8+ T細胞)識別之一或多個抗原決定基可存在於MHC I類等位基因上，該等位基因存在於群體中至少50%之個體中，包括例如至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或更多；在一些此等實施例中，MHC I類等位基因可為HLA-B*0702、HLA-A*2402、HLA-B*3501、HLA-B*4401或HLA-A*0201。在一些實施例中，抗原決定基可包含HLA-A*0201 YLQPRTFLL (SEQ ID NO: 35)；HLA-A*0201 RLQSLQTYV (SEQ ID NO: 36)；HLA-A*2402 QYIKWPWYI (SEQ ID NO: 37)；HLA-A*2402 NYNYLYRLF (SEQ ID NO: 38)；HLA-A*2402 KWPWYIWLGF (SEQ ID NO: 39)；HLA-B*3501 QPTESIVRF (SEQ ID NO: 40)；HLA-B*3501 IPFAMQMAY (SEQ ID NO: 41)；或HLA-B*3501 LPFNDGVYF (SEQ ID NO: 42)。
在一些實施例中，當有足夠之證據(事後機率)表明主要VE1或者主要VE1及主要VE2兩者均＞30%或更高(包括例如大於40%、大於50%、大於60%、大於70%、大於80%、大於90%、大於95%、大於96%、大於97%、大於98%或更高)時，可建立一或多種本文所闡述之mRNA組合物之主要疫苗功效(VE)，其中主要VE定義為主要VE = 100 × (1 - IRR)；且IRR計算為疫苗組中COVID-19及/或流行性感冒患病率與安慰劑組中相應患病率之比率。主要VE1表示本文所闡述之預防性mRNA組合物針對疫苗接種前無感染證據之參與者中確診之COVID-19及/或流行性感冒的VE，且主要VE2表示本文所闡述之預防性mRNA組合物針對疫苗接種後所有參與者中確診之COVID-19及/或流行性感冒的VE。在一些實施例中，可依序評估主要VE1及VE2，以控制2.5%之總I型誤差(分級測試)。在一或多種本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物證明達成如上所論述之主要VE終點之一些實施例中，可例如藉由如上所論述之用於主要VE終點評估(分級測試)之相同方法來依序評估次要VE終點(例如，在疫苗接種前沒有感染證據之參與者中確診的嚴重COVID-19及/或確診的嚴重流行性感冒，以及在所有參與者中確診的嚴重COVID-19及/或嚴重流行性感冒)。在一些實施例中，主要及/或次要VE終點之評估可基於以與疫苗或安慰劑組1:1之比例隨機分配的至少20,000名或更多個體(例如至少25,000名或更多個體)，例如基於以下假設：(i)安慰劑組中每年1.0%之患病率，及(ii) 20%之參與者不可評估或有既往感染SARS-CoV-2及/或流行性感冒之血清學證據，此有可能使該等參與者對進一步感染具有免疫力。
在一些實施例中，一或多種本文所闡述之mRNA組合物可根據建立的方案投與，以達成免疫反應之維持及/或繼續加強。舉例而言，在一些實施例中，投與方案可包括第一劑，視情況隨後投與一或多個後續劑量；在一些實施例中，可選擇對任何此等後續劑量之需要、時間及/或量，以維持、增強及/或改進一或多種免疫反應或其特徵。在一些實施例中，劑量之數量、時間及/或量已確立以在投與給相關群體時有效。在一些實施例中，可針對個別個體調整劑量之數量、時間及/或量；例如，在一些實施例中，個別個體中之免疫反應之一或多個特徵可在接受第一劑後評價至少一次(且視情況一次以上，例如多次，一般間隔開，通常按預選之間隔期)。舉例而言，可評價抗體、B細胞及/或T細胞(例如CD4 +及/或CD8 +T細胞)之存在，及/或由其分泌之細胞介素之存在，及/或特定抗原及/或抗原決定基之屬性(identity)及/或對其反應之程度。在一些實施例中，可根據此類評價確定對後續劑量之需要、時間及/或量。
如上所述，在一些實施例中，可自接受任何特定劑量起，對已接受本文所闡述RNA (例如mRNA)組合物之一或多名個體進行監測(例如持續至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10天或更長時間，包括例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12週或更長時間，包括例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24個月或更長時間，包括例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10年或更長時間)，以評價例如對所投與組合物之組分之免疫反應的存在、暴露於SARS-CoV-2或另一冠狀病毒或流行性感冒病毒及/或對其免疫反應之證據、任何不良事件之證據等，包括評價以下中之一或多者：抗體、B細胞及/或T細胞(例如CD4 +及/或CD8 +T細胞)之存在，及/或由其分泌之細胞介素之存在，及/或特定抗原及/或抗原決定基之屬性及/或對其反應之程度。如本文所闡述之組合物可根據包括一或多個此等監測步驟之方案進行投與。
舉例而言，在一些實施例中，評價、確定及/或選擇對相對於第一劑之第二劑(及/或相對於前一劑之後續劑)之需要、時間及/或量，使得投與此第二(或後續)劑達成在第一(或其他前一)劑後觀察到的免疫反應(例如如本文所闡述)之放大或改進。在一些實施例中，與第一劑後觀察到的免疫反應水準相比，免疫反應(例如本文所闡述之免疫反應)之此放大可為至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%或更高。在一些實施例中，與第一劑後觀察到的免疫反應水準相比，免疫反應之此放大可為至少1.5倍、至少2倍、至少3倍、至少4倍、至少5倍、至少6倍、至少7倍、至少8倍、至少9倍、至少10倍、至少20倍、至少30倍或更高。
在一些實施例中，評價、確定及/或選擇對相對於第一(或其他前一)劑之第二(或後續)劑之需要、時間及/或量，使得較晚劑之投與延長在較早劑後觀察到的免疫反應(例如如本文所闡述)之持續時間；在一些此等實施例中，持續時間可延長至少1週、至少2週、至少3週、至少1個月、至少2個月、至少3個月、至少4個月、至少5個月、至少6個月、至少7個月、至少8個月、至少9個月或更長時間。在一些實施例中，第一劑後觀察到的免疫反應可由以下來表徵：針對SARS-CoV-2刺突多肽、流行性感冒病毒HA多肽及/或其免疫原性片段(例如RBD)之中和抗體之產生(在來自個體之血清中量測)，及/或細胞介導之免疫反應(例如，針對SARS-CoV-2及/或流行性感冒病毒之T細胞反應)之誘導，包括例如在一些實施例中，識別SARS-CoV-2刺突多肽、流行性感冒病毒HA多肽及/或其免疫原性片段(例如RBD)內之至少一或多個MHC限制性(例如MHC I類限制性)抗原決定基之T細胞的誘導。在一些實施例中，由疫苗誘導之T細胞(例如CD8+ T細胞)識別之一或多個抗原決定基可存在於MHC I類等位基因上，該等位基因存在於群體中至少50%之個體中，包括例如至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或更多；在一些此等實施例中，MHC I類等位基因可為HLA-B*0702、HLA-A*2402、HLA-B*3501、HLA-B*4401或HLA-A*0201。在一些實施例中，抗原決定基可包含HLA-A*0201 YLQPRTFLL (SEQ ID NO: 35)；HLA-A*0201 RLQSLQTYV (SEQ ID NO: 36)；HLA-A*2402 QYIKWPWYI (SEQ ID NO: 37)；HLA-A*2402 NYNYLYRLF (SEQ ID NO: 38)；HLA-A*2402 KWPWYIWLGF (SEQ ID NO: 39)；HLA-B*3501 QPTESIVRF (SEQ ID NO: 40)；HLA-B*3501 IPFAMQMAY (SEQ ID NO: 41)；或HLA-B*3501 LPFNDGVYF (SEQ ID NO: 42)。
在一些實施例中，評價、確定及/或選擇對相對於第一劑之第二劑(或相對於前一劑之其他後續劑)之需要、時間及/或量，使得投與該第二(或後續)劑維持或超過免疫反應之參考水準；在一些此等實施例中，參考水準係基於自個體抽取之人類SARS-CoV-2感染/COVID-19恢復期血清、流行性感冒恢復期血清及/或PBMC樣品確定的(例如，在PCR確診後至少一段時間，諸如至少14天或更長時間，包括例如15天、16天、17天、18天、19天、20天、25天、30天、35天、40天、45天、50天、55天、60天或更長時間，當個體無症狀時)。在一些實施例中，免疫反應可由以下表徵：針對SARS-CoV-2刺突多肽、流行性感冒病毒多肽及/或其免疫原性片段(例如RBD)之中和抗體之產生(在來自個體之血清中量測)，及/或細胞介導之免疫反應(例如，針對SARS-CoV-2及/或流行性感冒病毒之T細胞反應)之產生，包括例如在一些實施例中，識別SARS-CoV-2刺突多肽、流行性感冒病毒多肽及/或其免疫原性片段(例如RBD)內之至少一或多個MHC限制性(例如MHC I類限制性)抗原決定基之T細胞的誘導。在一些實施例中，由疫苗誘導之T細胞(例如CD8+ T細胞)識別之一或多個抗原決定基可存在於MHC I類等位基因上，該等位基因存在於群體中至少50%之個體中，包括例如至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或更多；在一些此等實施例中，MHC I類等位基因可為HLA-B*0702、HLA-A*2402、HLA-B*3501、HLA-B*4401或HLA-A*0201。在一些實施例中，抗原決定基可包含HLA-A*0201 YLQPRTFLL (SEQ ID NO: 35)；HLA-A*0201 RLQSLQTYV (SEQ ID NO: 36)；HLA-A*2402 QYIKWPWYI (SEQ ID NO: 37)；HLA-A*2402 NYNYLYRLF (SEQ ID NO: 38)；HLA-A*2402 KWPWYIWLGF (SEQ ID NO: 39)；HLA-B*3501 QPTESIVRF (SEQ ID NO: 40)；HLA-B*3501 IPFAMQMAY (SEQ ID NO: 41)；或HLA-B*3501 LPFNDGVYF (SEQ ID NO: 42)。
在一些實施例中，確定對第二(或後續)劑之需要、時間及/或量可包括在第一(或其他前一)劑之後(例如，7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21天或更長時間後)，對以下進行評價之一或多個步驟：針對SARS-CoV-2刺突多肽、流行性感冒HA多肽及/或其免疫原性片段(例如RBD)之中和抗體之存在及/或表現水準(在來自個體之血清中量測)，及/或細胞介導之免疫反應(例如，針對SARS-CoV-2及/或流行性感冒病毒之T細胞反應)之誘導，包括例如在一些實施例中，識別SARS-CoV-2刺突多肽、流行性感冒病毒HA多肽及/或其免疫原性片段(例如RBD)內之至少一或多個MHC限制性(例如，MHC I類限制性)抗原決定基之T細胞的誘導。在一些實施例中，由疫苗誘導之T細胞(例如CD8+ T細胞)識別之一或多個抗原決定基可存在於MHC I類等位基因上，該等位基因存在於群體中至少50%之個體中，包括例如至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或更多；在一些此等實施例中，MHC I類等位基因可為HLA-B*0702、HLA-A*2402、HLA-B*3501、HLA-B*4401或HLA-A*0201。在一些實施例中，抗原決定基可包含HLA-A*0201 YLQPRTFLL (SEQ ID NO: 35)；HLA-A*0201 RLQSLQTYV (SEQ ID NO: 36)；HLA-A*2402 QYIKWPWYI (SEQ ID NO: 37)；HLA-A*2402 NYNYLYRLF (SEQ ID NO: 38)；HLA-A*2402 KWPWYIWLGF (SEQ ID NO: 39)；HLA-B*3501 QPTESIVRF (SEQ ID NO: 40)；HLA-B*3501 IPFAMQMAY (SEQ ID NO: 41)；或HLA-B*3501 LPFNDGVYF (SEQ ID NO: 42)。
在一些實施例中，本文所提供之套組可包含實時監測日誌記錄裝置，例如在一些實施例中，該裝置能夠提供運送溫度、運送時間及/或定位。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物可在容器(諸如小瓶或注射器)，例如玻璃容器(諸如玻璃小瓶或注射器)中運送、儲存及/或使用，在一些實施例中，該容器可為單劑量容器或多劑量容器(例如，可經佈置及構築成容納、及/或在一些實施例中可容納單劑量或多個劑量之用於投與之產品)。在一些實施例中，多劑量容器(諸如多劑小瓶或注射器)可經佈置及構築成容納、及/或可容納2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多個劑量；在一些特定實施例中，其可經設計以容納及/或可容納5個劑量。在一些實施例中，單劑量或多劑量容器(諸如單劑量或多劑量小瓶或注射器)可經佈置及構築以容納及/或可容納大於所指示劑量數之體積或量，例如，以便允許在轉移及/或投與中出現一些損失。在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物可在不含防腐劑之玻璃容器(例如不含防腐劑之玻璃小瓶或注射器，例如單劑量或多劑量不含防腐劑之玻璃小瓶或注射器)中運送、儲存及/或使用。在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物可在不含防腐劑之玻璃容器(例如不含防腐劑之玻璃小瓶或注射器，例如單劑量或多劑量不含防腐劑之玻璃小瓶或注射器)中運送、儲存及/或使用，該玻璃容器含有冷凍液體，例如在一些實施例中含有0.45 ml冷凍液體(例如包括5個劑量)。在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物及/或放置其之容器(例如小瓶或注射器)可保持在低於室溫、4℃或以下、0℃或以下、-20℃或以下、-60℃或以下、-70℃或以下、-80℃或以下、-90℃或以下等之溫度下進行運送、儲存及/或使用。在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物及/或放置其之容器(例如小瓶或注射器)可保持在-80℃至-60℃之間的溫度下進行運送、儲存及/或使用，且在一些實施例中避光。在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物及/或放置其之容器(例如小瓶或注射器)可保持在低於約25℃之溫度下進行運送、儲存及/或使用，且在一些實施例中避光。在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物及/或放置其之容器(例如小瓶或注射器)可保持在低於約5℃(例如低於約4℃)之溫度下進行運送、儲存及/或使用，且在一些實施例中避光。在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物及/或放置其之容器(例如小瓶或注射器)可保持在低於約-20℃之溫度下進行運送、儲存及/或使用，且在一些實施例中避光。在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物及/或放置其之容器(例如小瓶或注射器)可保持在高於約-60℃之溫度下進行運送、儲存及/或使用(例如，在一些實施例中在約-20℃或高於約-20℃，且在一些實施例中在約4-5℃或高於約4-5℃，在任一情況下視情況在約25℃以下)，且在一些實施例中避光，或不採取積極措施(例如，冷卻措施)使儲存溫度實質上低於約-20℃。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物及/或放置其之容器(例如小瓶或注射器)與熱保護材料或容器及/或溫度調整材料一起及/或在熱保護材料或容器及/或溫度調整材料之背景下運送、儲存及/或使用。舉例而言，在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物及/或放置其之容器(例如小瓶或注射器)與冰及/或乾冰及/或與隔熱材料一起運送、儲存及/或使用。在一些特定實施例中，將放置有RNA (例如mRNA)組合物之容器(例如小瓶或注射器)放在托盤或其他保持裝置中，且進一步與溫度調整(例如冰及/或乾冰)材料及/或隔熱材料接觸(或在溫度調整(例如冰及/或乾冰)材料及/或隔熱材料之存在下)。在一些實施例中，放置有所提供之RNA (例如mRNA)組合物之多個容器(例如多個小瓶或注射器，諸如本文所闡述之單次使用或多次使用小瓶或注射器)係放置在一起的(例如在共同之托盤、架子、盒等中)，且與溫度調整(例如冰及/或乾冰)材料及/或隔熱材料一起包裝(或在溫度調整(例如冰及/或乾冰)材料及/或隔熱材料之存在下)。僅舉一個實例，在一些實施例中，放置有RNA (例如mRNA)組合物之多個容器(例如多個小瓶或注射器，諸如本文所闡述之單次使用或多次使用小瓶或注射器)放置在共同之托盤或架子中，且多個此等托盤或架子堆疊在紙箱中，紙箱在熱(例如隔熱)運送器中由溫度調整材料(例如乾冰)包圍。在一些實施例中，週期性地補充溫度調整材料(例如在到達地點之24小時內，及/或每2小時、4小時、6小時、8小時、10小時、12小時、14小時、16小時、18小時、20小時、22小時、1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天等)。較佳地，重新放入熱運送器應不頻繁，且期望地應一天不超過兩次。在一些實施例中，熱運送器在打開後5、4、3、2或1分鐘或更短時間內重新關閉。在一些實施例中，所提供之RNA (例如mRNA)組合物在熱運送器內儲存一段時間(視情況在特定溫度範圍內)仍係有用的。舉例而言，在一些實施例中，若如本文所闡述之含有所提供之RNA (例如mRNA)組合物之熱運送器保持或已保持(例如儲存)在約15℃至約25℃之溫度範圍內，則RNA (例如mRNA)組合物可使用長達10天；亦即，在一些實施例中，向個體投與已在熱運送器(熱運送器處於約15℃至約25℃範圍內之溫度下)內保持不超過10天的所提供之RNA (例如mRNA)組合物。或者或另外，在一些實施例中，若所提供之RNA (例如mRNA)組合物保持或已保持(例如儲存)在熱運送器內(熱運送器已保持(例如儲存)在約15℃至約25℃之溫度範圍內)，則其可使用長達10天；亦即，在一些實施例中，向個體投與保持在熱運送器(熱運送器已保持在約15℃至約25℃範圍內之溫度下不超過10天)中之所提供之RNA (例如mRNA)組合物。
在一些實施例中，所提供之RNA (例如mRNA)組合物係以冷凍狀態運送及/或儲存。在一些實施例中，所提供之RNA (例如mRNA組合物)係以冷凍懸浮液之形式運送及/或儲存，在一些實施例中其不含防腐劑。在一些實施例中，將冷凍的RNA (例如mRNA)組合物解凍。在一些實施例中，解凍之RNA (例如mRNA)組合物(例如懸浮液)可含有白色至灰白色不透明非晶形顆粒。在一些實施例中，若將解凍之RNA (例如mRNA)組合物保持(例如儲存)在室溫或低於室溫之溫度(例如低於約30℃、25℃、20℃、15℃、10℃、8℃、4℃等)，則組合物可在解凍後最多使用很短之天數(例如1、2、3、4、5或6天)。在一些實施例中，解凍之RNA (例如mRNA)組合物可在約2℃至約8℃之溫度下儲存(例如儲存如此短之天數)後使用；或者或另外，解凍之RNA (例如mRNA)組合物可在室溫解凍後很短之小時數(例如1、2、3、4、5、6小時)內使用。因此，在一些實施例中，向個體投與已解凍並在室溫或低於室溫之溫度下、且在一些實施例中在約2℃與約8℃之間保持不超過6、5、4、3、2或1天之所提供之RNA (例如mRNA)組合物。或者或另外，在一些實施例中，向個體投與已解凍並在室溫下保持不超過6、5、4、3、2或1小時之所提供之RNA (例如mRNA)組合物。在一些實施例中，所提供之RNA (例如mRNA)組合物係以濃縮狀態運送及/或儲存。在一些實施例中，此一濃縮組合物在投與前經稀釋。在一些實施例中，稀釋之組合物在稀釋後約10、9、8、7、6、5、4、3、2或1小時之時間段內投與；在一些實施例中，此投與係在稀釋後6小時內進行。因此，在一些實施例中，將所提供之RNA (例如mRNA)組合物之稀釋製劑在稀釋後6小時內投與給個體(例如，如本文所闡述在已保持在適當溫度下後，例如在低於室溫之溫度下、在4℃或以下、在0℃或以下、在-20℃或以下、在-60℃或以下、在-70℃或以下、在-80℃或以下等，且通常在約2℃或以上，例如在約2℃與約8℃之間或在約2℃與約25℃之間)。在一些實施例中，在稀釋後數小時(例如約10、約9、約8、約7、約6、約5小時或更少之小時數)內棄去未使用之組合物；在一些實施例中，在稀釋6小時內棄去未使用之組合物。
在一些實施例中，儲存、運送或使用之RNA (例如mRNA)組合物(例如冷凍組合物、液體濃縮組合物、稀釋液體組合物等)可能已在實質上高於-60℃之溫度下保持至少1、2、3、4、5、6、7天或更長時間，或至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10週或更長時間，或至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12個月或更長時間；在一些此等實施例中，此組合物可能已在約-20℃或以上之溫度下保持此時間段，及/或在最多或約4-5℃之溫度下保持此時間段，及/或可在高於約4-5℃之溫度下保持此時間段，及視情況在約25℃之溫度下保持一段時間，該段時間小於兩(2)個月及/或視情況最多約一(1)個月。在一些實施例中，此組合物可能沒有在實質上高於約4-5℃之溫度下儲存、運送或使用(或以其他方式暴露)，且特定而言沒有在約25℃之溫度或接近約25℃之溫度下儲存、運送或使用(或以其他方式暴露)長達約2週之時間段，或在一些實施例中1週之時間段。在一些實施例中，此組合物可能沒有在實質上高於約-20℃之溫度下儲存、運送或使用(或以其他方式暴露)，且特定而言沒有在約4-5℃之溫度下或接近約4-5℃之溫度下儲存、運送或使用(或以其他方式暴露)長達約12個月、11個月、10個月、9個月、8個月、7個月、6個月、5個月、4個月、3個月、2個月之時間段，或在一些實施例中，長達約8週或6週或實質上超過約2個月或在一些實施例中為3個月或在一些實施例中為4個月之時間段。
在一些實施例中，儲存、運送或使用之RNA (例如mRNA)組合物(例如冷凍組合物、液體濃縮組合物、稀釋液體組合物等)可避光。在一些實施例中，可採取一或多個步驟以減少或最小化此等組合物之光暴露(例如，可將組合物置於容器，諸如小瓶或注射器內)。在一些實施例中，避免暴露於陽光直射及/或紫外光。在一些實施例中，稀釋之溶液可在正常室內光條件下處置及/或使用(例如，不採取特定步驟來最小化或減少室內光暴露)。應理解，在處置(例如稀釋及/或投與)本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物期間，期望嚴格遵守無菌技術。在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物不經靜脈內投與(例如不靜脈注射)。在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物不經真皮內投與(例如不真皮內注射)。在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物不經皮下投與(例如不皮下注射)。在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物不以靜脈內、真皮內或皮下之任何方式投與(例如不以靜脈內、真皮內或皮下之任何方式注射)。在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物不投與給對其任何成分具有已知超敏反應之個體。在一些實施例中，監測已投與RNA (例如mRNA)組合物之個體是否出現一或多種過敏反應徵象。在一些實施例中，不將本文所闡述之RNA (例如mRNA組合物)投與給患有出血素質或與長時間出血相關之疾患之個體(特定而言不經由IM注射投與)。在一些實施例中，投與RNA (例如mRNA)組合物之個體先前已接受至少一劑不同的SARS-CoV-2及/或流行性感冒疫苗；在一些實施例中，投與RNA (例如mRNA)組合物之個體先前未接受不同的SARS-CoV-2及/或流行性感冒疫苗。在一些實施例中，在投與RNA (例如mRNA)組合物之前(例如在解凍、稀釋及/或投與此組合物之前或之後不久)，迅速量測個體之體溫；在一些實施例中，若確定此個體發熱，則延遲或取消投與。在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物不投與給正在接受抗凝血療法或正患有或易患將禁忌肌內注射之出血病症或疾患之個體。在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物由醫療專業人員投與，該醫療專業人員已將與副作用及風險相關之資訊告知接受該組合物之個體。在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如mRNA)組合物由醫療專業人員投與，該醫療專業人員已同意提交任何嚴重不良事件之不良事件報告，嚴重不良事件可包括例如以下中之一或多者：死亡、出現殘疾或先天性異常/出生缺陷(例如在個體之孩子中)、住院(包括現有住院延長)、危及生命之事件、防止死亡之藥物或手術干預、進行正常生活功能之能力之持續或顯著或實質性破壞；或可能危害個體且可能需要藥物或手術干預(治療)以防止其他結局之一的另一重要醫學事件。
在一些實施例中，將所提供之RNA組合物投與給18歲以下、或17歲以下、或16歲以下、或15歲以下、或14歲以下、或13歲以下之個體群體，例如根據所建立的對於下文一或多種局部反應事件具有不超過下文所指示發生率之發生率之方案投與： • 注射部位疼痛(第一劑及/或第二劑後75%，及/或第二劑後更低之發生率，例如第二劑後65%)； • 注射部位發紅(第一劑及/或第二劑後小於5%)；及/或 • 注射部位腫脹(第一劑及/或第二劑後小於5%)。
在一些實施例中，將所提供之RNA組合物投與給18歲以下、或17歲以下、或16歲以下、或15歲以下、或14歲以下、或13歲以下之個體群體，例如根據所建立的對於下文一或多種全身反應事件具有不超過下文所指示發生率之發生率之方案投與： • 疲勞(第一劑及/或第二劑後55%)； • 頭痛(第一劑及/或第二劑後50%)； • 肌肉疼痛(第一劑及/或第二劑後40%)； • 寒戰(第一劑及/或第二劑後40%)； • 關節疼痛(第一劑及/或第二劑後20%)； • 發熱(第一劑及/或第二劑後25%)； • 嘔吐(第一劑及/或第二劑後10%)；及/或 • 腹瀉(第一劑及/或第二劑後10%)。
在一些實施例中，將減輕一或多種局部反應及/或全身反應事件(例如本文所闡述)之一或多種症狀之藥劑投與給18歲以下、或17歲以下、或16歲以下、或15歲以下、或14歲以下、或13歲以下之個體，該等個體已投與所提供之RNA組合物且已經歷局部及/或全身反應事件(例如本文所闡述)中之一或多者。在一些實施例中，可將解熱藥劑及/或鎮痛藥劑投與給該等個體。
儘管下文詳細闡述本揭示案，但應理解，本揭示案並不限於本文闡述之特定方法、方案及試劑，此乃因該等方法、方案及試劑可變化。亦應理解，本文所用之術語僅出於描述特定實施例之目的，而不意欲限制本揭示案之範圍，本揭示案之範圍將僅受隨附申請專利範圍之限制。除非另有定義，否則本文所用之所有技術及科學術語均具有與熟習此項技術者通常所理解相同之含義。
較佳地，本文所用之術語如「A multilingual glossary of biotechnological terms: (IUPAC Recommendations)」，H. G. W. Leuenberger，B. Nagel及H. Kölbl編輯，Helvetica Chimica Acta, CH‑4010 Basel, Switzerland, (1995)中所闡述來定義。
除非另有指示，否則本揭示案之實踐將採用化學、生物化學、細胞生物學、免疫學及重組DNA技術之習用方法，其在領域文獻中予以解釋(例如，參見Molecular Cloning: A Laboratory Manual，第2版，J. Sambrook等人編輯，Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor 1989)。
在下文中，將闡述本揭示案之要素。該等要素用具體實施例列出，然而，應理解其可以任何方式及任何數量組合以產生其他實施例。各種所闡述之實例及實施例不應解釋為將本揭示案僅限於明確闡述之實施例。本說明書應理解為揭示且涵蓋將明確闡述之實施例與多種揭示要素組合之實施例。此外，除非上下文另有指示，否則所有闡述要素之任何排列及組合均應視為由本說明書揭示。
在本說明書之全文中引用若干文件。本文引用之每份文件(包括所有專利、專利申請案、科學出版物、製造商規範、說明書等)，無論是在上文還是在下文，均係以全文引用的方式併入本文中。本文中之任何內容均不得解釋為承認本揭示案無權先於此揭示內容。 定義
在下文中，將提供適用於本揭示案之所有態樣之定義。除非另有指示，否則下列術語具有以下含義。任何未定義之術語均具有其業內公認之含義。
術語「約」意指近似或接近，且在一個實施例中在本文示出之數值或範圍之上下文中意指所列舉或主張之數值或範圍的± 20%、± 10%、± 5%或± 3%。
除非本文中另有指示或與上下文明顯矛盾，否則在描述本揭示案之上下文中(尤其在申請專利範圍之上下文中)所用之術語「一個/種(a及an)」及「該(the)」以及類似之指示物應解釋為涵蓋單數及複數二者。本文對值範圍之列舉僅意欲用作個別提及屬於該範圍內之每個單獨值之速記方法。除非本文中另有指示，否則每一個別值如同其在本文中個別列舉一般併入本說明書中。除非本文另有指示或上下文另外明顯矛盾，否則本文所闡述之所有方法均可以任何適宜順序實施。使用本文所提供之任何及所有實例或例示性語言(例如「諸如」)僅意欲更佳地說明本揭示案，且不對申請專利範圍之範圍構成限制。本說明書中任何語言均不應解釋為指示任何非主張要素對於本揭示案之實踐係必不可少的。
除非另有明確指定，否則在本文件之上下文中使用術語「包含」與指示除由「包含」引入之列表成員以外，亦可視情況存在其他成員。然而，作為本揭示案之具體實施例，考慮術語「包含」涵蓋不存在其他成員之可能性，亦即，出於此實施例之目的，「包含」應理解為具有「由......組成」或「基本上由......組成」之含義。
如本文所用之諸如「降低」、「減少」、「抑制」或「損害」等術語係指總體降低或引起總體降低之能力，較佳在水準上降低至少5%、至少10%、至少20%、至少50%、至少75%或甚至更多。該等術語包括完全或基本上完全抑制，亦即降低至0或基本上至0。
諸如「增加」、「增強」或「超過」等術語較佳係指增加或增強至少10%、至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少80%、至少100%、至少200%、至少500%或甚至更多。
根據本揭示案，術語「肽」包含寡肽及多肽，且係指包含經由肽鍵彼此連接之約2個或更多個、約3個或更多個、約4個或更多個、約6個或更多個、約8個或更多個、約10個或更多個、約13個或更多個、約16個或更多個、約20個或更多個以及多達約50個、約100個或約150個連續胺基酸之物質。術語「蛋白質」或「多肽」係指大的肽，特定而言具有至少約150個胺基酸之肽，但術語「肽」、「蛋白質」及「多肽」在本文中通常用作同義詞。
當以治療有效量提供給個體時，「治療性蛋白質」對個體之疾患或疾病狀態具有積極或有利效應。在一個實施例中，治療性蛋白質具有治癒或姑息性質，且可投與以改善、減輕、緩解、逆轉、延遲疾病或病症之一或多種症狀之發作或減輕疾病或病症之一或多種症狀之嚴重程度。治療性蛋白質可具有預防性質，且可用於延遲疾病之發作或者減輕此類疾病或病理狀況之嚴重程度。術語「治療性蛋白質」包括完整蛋白或肽，且亦可指其治療活性片段。其亦可包括蛋白質之治療活性變異體。治療活性蛋白質之實例包括(但不限於)用於疫苗接種之抗原及免疫刺激劑，諸如細胞介素。
關於胺基酸序列(肽或蛋白質)，「片段」係指胺基酸序列之一部分，亦即，代表在N末端及/或C末端縮短的胺基酸序列之序列。在C末端縮短的片段(N末端片段)例如可藉由缺少開放閱讀框3'端之截短開放閱讀框之轉譯獲得。在N末端縮短的片段(C末端片段)例如可藉由缺少開放閱讀框5'端之截短開放閱讀框之轉譯獲得，只要截短之開放閱讀框包含用於起始轉譯之起始密碼子即可。胺基酸序列之片段包含例如至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%來自胺基酸序列之胺基酸殘基。胺基酸序列之片段較佳包含至少6個、特定而言至少8個、至少12個、至少15個、至少20個、至少30個、至少50個或至少100個來自胺基酸序列之連續胺基酸。
本文中之「變異體」意指由於至少一個胺基酸修飾而與親代胺基酸序列不同的胺基酸序列。親代胺基酸序列可為天然或野生型(WT)胺基酸序列，或可為野生型胺基酸序列之經修飾形式。較佳地，與親代胺基酸序列相比，變異體胺基酸序列具有至少一個胺基酸修飾，例如，與親代相比，具有1至約20個胺基酸修飾，且較佳1至約10個或1至約5個胺基酸修飾。
本文中之「野生型」或「WT」或「天然」意指在自然界中發現的胺基酸序列，包括等位基因變異。野生型胺基酸序列、肽或蛋白質具有未經有意修飾之胺基酸序列。如本文所用，野生型SARS-CoV-2 S蛋白係指具有首次偵測到之SARS-CoV-2武漢毒株之S蛋白序列(具有SEQ ID NO: 1)之蛋白質。
在一些實施例中，本揭示案係關於在相關轄區流行及/或迅速傳播之SARS-CoV-2變異體。在一些實施例中，此類變異體可基於可公開獲得之資料(例如在GISAID倡議資料庫：https://www.gisaid.org中所提供之資料，及/或世界衛生組織WHO所提供之資料(例如如提供於https://www.who.int/activities/tracking-SARS-CoV-2-variants處的資料)來鑑別。在一些實施例中，此一變異體係指本文所揭示之變異體。
出於本揭示案之目的，胺基酸序列(肽、蛋白質或多肽)之「變異體」包含胺基酸插入變異體、胺基酸添加變異體、胺基酸缺失變異體及/或胺基酸取代變異體。術語「變異體」包括所有突變體、剪接變異體、轉譯後修飾變異體、構形、同種型、等位基因變異體、物種變異體及物種同源物，特定而言彼等天然物質。特定而言，術語「變異體」包括胺基酸序列之片段。
胺基酸插入變異體包含在特定胺基酸序列中插入單個或兩個或更多個胺基酸。在具有插入之胺基酸序列變異體之情況下，一或多個胺基酸殘基插入至胺基酸序列中之特定位點，但適當篩選所得產物之隨機插入亦為可能的。胺基酸添加變異體包含一或多個胺基酸(諸如1、2、3、5、10、20、30、50或更多個胺基酸)之胺基末端及/或羧基末端融合。胺基酸缺失變異體之特徵在於自序列中去除一或多個胺基酸，諸如去除1、2、3、5、10、20、30、50或更多個胺基酸。缺失可在蛋白質之任何位置中。在蛋白質之N末端及/或C末端包含缺失之胺基酸缺失變異體亦稱為N末端及/或C末端截短變異體。胺基酸取代變異體之特徵在於去除序列中之至少一個殘基且在其位置插入另一殘基。較佳者為在同源蛋白質或肽之間不保守的胺基酸序列中之位置中進行修飾及/或將胺基酸用具有相似性質之其他胺基酸替代。較佳地，肽及蛋白質變異體中之胺基酸變化係保守之胺基酸變化，亦即，帶相似電荷或不帶電荷之胺基酸之取代。保守之胺基酸變化涉及取代在側鏈中相關之胺基酸家族中之一者。天然胺基酸通常分為四個家族：酸性(天冬胺酸鹽、麩胺酸鹽)，鹼性(離胺酸、精胺酸、組胺酸)，非極性(丙胺酸、纈胺酸、白胺酸、異白胺酸、脯胺酸、苯丙胺酸、甲硫胺酸、色胺酸)，及不帶電荷之極性(甘胺酸、天冬醯胺、麩醯胺酸、半胱胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、酪胺酸)胺基酸。苯丙胺酸、色胺酸及酪胺酸有時共同歸類為芳香族胺基酸。在一個實施例中，保守胺基酸取代包括在以下群組內之取代： 甘胺酸、丙胺酸； 纈胺酸、異白胺酸、白胺酸； 天冬胺酸、麩胺酸； 天冬醯胺、麩醯胺酸； 絲胺酸、蘇胺酸； 離胺酸、精胺酸；及 苯丙胺酸、酪胺酸。
較佳地，給定胺基酸序列與作為該給定胺基酸序列之變異體之胺基酸序列之間的相似性程度、較佳一致性程度將為至少約60%、70%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%。該相似性或一致性程度較佳針對佔參考胺基酸序列整個長度至少約10%、至少約20%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或約100%之胺基酸區域給出。舉例而言，若參考胺基酸序列由200個胺基酸組成，則較佳該相似性或一致性程度針對至少約20、至少約40、至少約60、至少約80、至少約100、至少約120、至少約140、至少約160、至少約180或約200個胺基酸給出，在一些實施例中針對連續胺基酸給出。在一些實施例中，該相似性或一致性程度針對參考胺基酸序列之整個長度給出。用於確定序列相似性、較佳序列一致性之比對可用此項技術中已知之工具，較佳使用最佳序列比對，例如使用Align，使用標准設置(較佳EMBOSS::needle、Matrix: Blosum62、Gap Open 10.0、Gap Extend 0.5)來完成。
「序列相似性」指示一致或代表保守胺基酸取代之胺基酸之百分比。兩個胺基酸序列之間的「序列一致性」指示該等序列之間一致的胺基酸之百分比。兩個核酸序列之間的「序列一致性」指示該等序列之間一致的核苷酸之百分比。
術語「一致%」、「一致性%」或相似術語意欲尤其指在待比較序列之間的最佳比對中一致核苷酸或胺基酸之百分比。該百分比純粹為統計上的，且兩個序列之間的差異可但不一定隨機分佈在待比較序列之整個長度上。通常藉由在對區段或「比較窗口」最佳比對之後比較序列來進行兩個序列之比較，以便鑑別相應序列之局部區域。可手動或借助於Smith and Waterman，1981, Ads App Math. 2, 482之局部同源性演算法，借助於Neddleman and Wunsch，1970, J. Mol. Biol. 48, 443之局部同源性演算法，借助於Pearson and Lipman，1988, Proc. Natl Acad. Sci. USA 88, 2444之相似性搜索演算法，或借助於使用該等演算法之電腦程式(Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group, 575 Science Drive, Madison, Wis.中之GAP、BESTFIT、FASTA、BLAST P、BLAST N及TFASTA)進行用於比較之最佳比對。在一些實施例中，使用如可在美國國家生物技術資訊中心(National Center for Biotechnology Information, NCBI)網站(例如在blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi?PAGE_TYPE=BlastSearch&BLAST_SPEC=blast2seq&LINK_LOC=align2seq處)獲得的BLASTN或BLASTP演算法確定兩個序列之一致性百分比。在一些實施例中，NCBI網站上之BLASTN演算法所用之演算法參數包括：(i)期望臨限值設置為10；(ii)字長設置為28；(iii)查詢範圍中之最大匹配設置為0；(iv)匹配/錯配評分設置為1，-2；(v)空位成本設置為線性；及(vi)使用低複雜度區域之篩選器。在一些實施例中，NCBI網站上之BLASTP演算法所用之演算法參數包括：(i)期望臨限值設置為10；(ii)字長設置為3；(iii)查詢範圍中之最大匹配設置為0；(iv)矩陣設置為BLOSUM62；(v)空位成本設置為存在：11，延伸：1；及(vi)條件成分評分矩陣調整。
藉由確定待比較序列對應之同一位置之數目，用此數目除以比較位置數目(例如參考序列中之位置數目)，且將此結果乘以100，獲得一致性百分比。
在一些實施例中，相似性或一致性程度針對佔參考序列整個長度至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或約100%之區域給出。舉例而言，若參考核酸序列由200個核苷酸組成，則一致性程度針對至少約100、至少約120、至少約140、至少約160、至少約180或約200個核苷酸給出，在一些實施例中針對連續核苷酸給出。在一些實施例中，相似性或一致性程度針對參考序列之整個長度給出。
根據本揭示案，同源胺基酸序列展現出胺基酸殘基之至少40%、特定而言至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%及較佳至少95%、至少98%或至少99%之一致性。
熟習此項技術者可例如藉由重組DNA操作容易地製備本文所闡述之胺基酸序列變異體。舉例而言，Sambrook等人(1989)詳細闡述對用於製備具有取代、添加、插入或缺失之肽或蛋白質之DNA序列的操作。此外，本文所闡述之肽及胺基酸變異體可借助已知之肽合成技術(諸如藉由固相合成及相似方法)容易地製備。
在一個實施例中，胺基酸序列(肽或蛋白質)之片段或變異體較佳為「功能片段」或「功能變異體」。術語胺基酸序列之「功能片段」或「功能變異體」係指如下任何片段或變異體：該片段或變異體展現出與該片段或變異體所源自胺基酸序列一致或相似之一或多種功能性質，亦即在功能上係等同的。關於抗原或抗原序列，一種特定功能係片段或變異體所源自胺基酸序列展示出之一或多種免疫原性活性。如本文所用之術語「功能片段」或「功能變異體」特定而言指如下變異體分子或序列：該變異體分子或序列包含與親代分子或序列之胺基酸序列相比有一或多個胺基酸發生改變但仍能夠完成親代分子或序列之一或多種功能(例如誘導免疫反應)之胺基酸序列。在一個實施例中，親代分子或序列之胺基酸序列中之修飾不顯著影響或改變分子或序列之特徵。在不同的實施例中，功能片段或功能變異體之功能可降低但仍顯著存在，例如，功能變異體之免疫原性可為親代分子或序列之至少50%、至少60%、至少70%、至少80%或至少90%。然而，在其他實施例中，功能片段或功能變異體之免疫原性與親代分子或序列相比可能增強。
「源自」指定胺基酸序列(肽、蛋白質或多肽)之胺基酸序列(肽、蛋白質或多肽)係指第一胺基酸序列之起源。較佳地，源自特定胺基酸序列之胺基酸序列具有與該特定胺基酸序列或其片段一致、基本上一致或同源之胺基酸序列。源自特定胺基酸序列之胺基酸序列可為該特定序列或其片段之變異體。舉例而言，熟習此項技術者將理解，適用於本文之抗原可經改變，使得該等抗原在序列上不同於其所源自之天然(naturally occurring或native)序列，同時保留天然序列之合意活性。
如本文所用，「指導材料」或「說明書」包括可用於傳達本揭示案之組合物及方法之可用性的出版物、記錄、圖表或任何其他表述媒介。本揭示案之套組之指導材料可例如黏貼至含有本揭示案組合物之容器，或與含有該等組合物之容器一起運輸。或者，指導材料可與容器分開運輸，目的係使接受者配合地使用指導材料及組合物。
「分離的」意指自天然狀態改變或去除。舉例而言，天然存在於活動物中之核酸或肽不為「分離的」，但自其天然狀態之共存材料部分或完全分離之相同核酸或肽則為「分離的」。分離的核酸或蛋白質可以實質上純之形式存在，或可存在於非天然環境中，諸如宿主細胞中。
在本揭示案之上下文中，術語「重組」意指「經由遺傳工程製備」。較佳地，在本揭示案之上下文中，「重組物體」(諸如重組核酸)不為天然存在的。
如本文所用之術語「天然」係指物體可在自然中發現之事實。舉例而言，存在於生物體(包括病毒)中且可自天然來源分離但尚未由人類在實驗室中有意修飾之肽或核酸係天然的。
如本文所用之「生理pH」係指約7.5之pH。
術語「遺傳修飾」或簡單地「修飾」包括用核酸轉染細胞。術語「轉染」係指將核酸、特定而言RNA引入至細胞中。出於本揭示案之目的，術語「轉染」亦包括將核酸引入至細胞中或使此細胞攝取核酸，其中該細胞可存在於個體體內，例如患者體內。因此，根據本揭示案，轉染本文所闡述核酸之細胞可存在於活體外或活體內，例如該細胞可形成患者器官、組織及/或生物體之一部分。根據本揭示案，轉染可為瞬時或穩定的。對於轉染之一些應用，若轉染之遺傳物質僅瞬時表現即足夠。可將RNA轉染至細胞中以瞬時表現其編碼之蛋白質。由於轉染過程中所引入之核酸通常不整合至核基因體中，故外源核酸將經由有絲分裂稀釋或降解。容許核酸之游離擴增之細胞極大地降低稀釋速率。若期望轉染之核酸實際上保留在細胞及其子細胞之基因體中，則必須進行穩定轉染。此種穩定轉染可藉由使用基於病毒之系統或基於轉座子之系統進行轉染來達成。通常，將編碼抗原之核酸瞬時轉染至細胞中。可將RNA轉染至細胞中以瞬時表現其編碼之蛋白質。
術語「血清轉化」包括自疫苗接種前至第2劑後1個月升高≥4倍。 冠狀病毒
冠狀病毒係有包膜的、正義的、單股RNA((+)ssRNA)病毒。其具有已知RNA病毒中最大之基因體(26-32 kb)，且在系統發生上分為四個屬(α、β、γ及δ)，而貝塔冠狀病毒進一步細分成四個譜系(A、B、C及D)。冠狀病毒感染廣泛的鳥類及哺乳動物物種，包括人類。一些人類冠狀病毒通常引起輕度呼吸疾病，但在嬰兒、老年人及免疫受損者中嚴重程度可能更高。分別屬於貝塔冠狀病毒譜系C及B之中東呼吸症候群冠狀病毒(MERS-CoV)及嚴重急性呼吸症候群冠狀病毒(SARS-CoV)具有高致病性。在過去15年內，該兩種病毒均自動物宿主進入人類群體中，且導致高病死率之暴發。自2019年12月中旬以來，引起非典型肺炎(2019年冠狀病毒疾病；COVID-19)之嚴重急性呼吸症候群冠狀病毒-2 (SARS-CoV-2)之暴發在中國持續，且已發展成為國際關注之突發公共衛生事件。SARS-CoV-2 (MN908947.3)屬於貝塔冠狀病毒譜系B。其與SARS-CoV具有至少70%之序列相似性。
一般而言，冠狀病毒具有四種結構蛋白，亦即包膜(E)、膜(M)、核衣殼(N)及刺突(S)。E及M蛋白在病毒裝配中具有重要功能，且N蛋白對於病毒RNA合成係必需的。關鍵糖蛋白S負責病毒結合及進入靶細胞。S蛋白合成為單鏈非活性前體，該單鏈非活性前體在產生細胞中由弗林蛋白酶樣宿主蛋白酶裂解成兩個非共價締合之亞單元S1及S2。S1亞單元含有受體結合結構域(RBD)，其識別宿主細胞受體。S2亞單元含有融合肽、兩個七肽重複序列及一個跨膜結構域，需要所有該等物質以藉由經歷大的構形重排來介導病毒及宿主細胞膜之融合。S1及S2亞單元三聚化形成大的融合前刺突。
SARS-CoV-2之S前體蛋白可以蛋白水解方式裂解成S1 (685 aa)及S2 (588 aa)亞單元。S1亞單元包含受體結合結構域(RBD)，該受體結合結構域介導病毒經由宿主血管收縮肽轉化酶2 (ACE2)受體進入敏感細胞中。 流行性感冒病毒
流行性感冒疾病係由流行性感冒病毒引起，其有四種類型：A、B、C及D。A型及B型係造成美國每年冬天發生季節性流行病(亦稱為流感季)之原因。A型病毒係迄今為止唯一導致大流行(亦即全球流行)之類型。C型病毒通常引起輕微疾病且認為不會引起人類流行病，而D型病毒主要影響牛，且不知曉感染或引起人類疾病。
基於兩種表面蛋白質亦即血球凝集素(HA)及神經胺酸酶(NA)將流行性感冒A病毒分成亞型。已知存在18種HA亞型及11種不同的NA亞型，且已觀察到130種以上之流行性感冒A亞型組合，但鑑於病毒之「重配」傾向(亦即流行性感冒病毒交換基因區段之過程，其可在兩種病毒同時感染宿主時發生)，更多之亞型組合係可能的。亞型H1N1及H3N2係目前在人類中常見之A型病毒。亞型可進一步分成「演化枝」及「亞演化枝」(亦分別稱為「群組」及「亞群組」)，其係基於HA基因序列組織的。
演化枝及亞演化枝可在遺傳學上彼此不同，而在抗原性上無差別。舉例而言，兩種病毒可能具有不同的HA基因序列，且因此在遺傳上係不同的，但仍由給定抗體結合並中和，且因此不具有抗原性差異。
目前傳播之流行性感冒A (H1N1)病毒與2009年春季出現的2009 H1N1病毒有關，且引起2009年之流感大流行。該等病毒亦稱為A(H1N1)pdm09病毒或「2009 H1N1」，自首次發現以來，一直在季節性傳播，且在遺傳及抗原上已經歷若干次變化。
近年來，流行性感冒A (H3N2)病毒亦包含許多單獨的、遺傳上不同之演化枝，該等演化枝繼續傳播。
流行性感冒B病毒係按譜系而非亞型歸類的。流行性感冒B病毒存在兩個譜系，亦即B/Yamagata及B/Victoria，其各自可進一步分為演化枝及亞演化枝。流行性感冒B病毒通常較流行性感冒A病毒變化更慢，在遺傳及抗原上均如此。近年來，B/Yamagata及B/Victoria二者處於共傳播中，但每一譜系之比例可端視於地點及季節而變化。
流行性感冒病毒名稱通常指示類型(A、B、C、D)、起源宿主(儘管對於人類而言，通常不指示起源宿主)、地理起源、毒株編號及採集年份。對於流行性感冒A病毒，HA及NA描述在括號中提供。
季節性流感疫苗通常經調配以提供針對已知引起流行病之多種流行性感冒病毒之保護。近年來，已將疫苗調配為四價疫苗，以提供針對H1N1、H3N2、B/Victoria及B/Yamagata病毒之抗原。在一些實施例中，流行性感冒疫苗可保護免受該疫苗所包含或遞送抗原之病毒以及抗原性類似病毒之影響。 RSV 病毒
呼吸道融合病毒(RSV)亦稱為人類呼吸道融合病毒(hRSV)及人類正肺病毒(orthopneumovirus)，其係一種常見的可引起呼吸道感染之傳染性病毒。
RSV係一種負義單股RNA病毒。RSV屬於單股反鏈病毒目(Mononegavirales)，肺病毒科，正肺病毒屬。其名稱來源於受感染細胞融合時所形成的稱為合胞體之大細胞。RSV之基因體係線性的，且長度為大約15,000個核苷酸。其係非分段的，此意味著，與流行性感冒不同，RSV無法參與導致較大的大流行之遺傳重配及抗原轉變類型。RSV具有10個基因，編碼11種蛋白質。基因順序為NS1-NS2-N-P-M-SH-G-F-M2-L，其中NS1及NS2基因作為非結構啟動子基因。
RSV係一種中等大小(約150 nm)之包膜病毒。雖然許多顆粒係球形的，但亦已鑑別出絲狀種類。基因體位於螺旋核衣殼內，且由基質蛋白及含有病毒糖蛋白之包膜包圍。
基於F及G表面蛋白質對單株抗體之反應性，RSV分為兩種抗原亞型，亦即A及B。該兩種亞型往往在當地流行病中同時傳播，但亞型A往往更為流行。通常，認為RSV亞型A (RSV A)較RSV亞型B (RSV B)更具毒力，病毒載量更高且傳播時間更快。迄今為止，已鑑別出16個RSVA及22個RSVB演化枝。在RSVA中，GA1、GA2、GA5及GA7演化枝佔優；GA7僅在美國發現。在RSVB中，BA演化枝在世界範圍內佔優。
RSV可在社區及醫院環境中引起暴發。在最初經由眼睛或鼻子感染後，該病毒影響上氣道及下氣道之上皮細胞，從而引起發炎、細胞損害及氣道阻塞。多種方法可用於RSV之病毒偵測及診斷，包括抗原測試、分子測試及病毒培養。
呼吸道融合病毒(RSV)係兒童疾病及嬰兒住院之常見原因。其在所有年齡組中均引起呼吸疾病之每年暴發。在美國大部分地區，RSV季始於秋季且在冬季達到頂峰，但在既定社區，RSV季之時間及嚴重程度每年可不同。
RSV可為患有呼吸疾病之患者的特別關注問題，尤其在RSV季期間。
RSV疫苗可用於保護老年人(例如60歲及以上之個體)免受嚴重RSV影響(例如本文所闡述之RSV疫苗)。單株抗體產品亦可用於保護嬰兒及幼兒免受嚴重RSV影響。
在一些實施例中，RSV疫苗係以單劑量投與。 臨床描述及診斷在嬰兒及幼兒中
RSV感染可引起嬰兒及幼兒之多種呼吸疾病及症狀。最常見地，其引起類似於感冒之疾病，但亦可引起下呼吸道感染，如細支氣管炎及肺炎。2%至3%之感染RSV之嬰兒可能需要住院。嚴重疾病最常見發生在極小的嬰兒中。另外，患有以下潛在疾患中之任一者之兒童視為處於增加之風險下： • 早產兒 • 嬰兒，尤其6個月及以下之嬰兒 • 患有慢性肺病或先天性心臟病之2歲以下兒童 • 免疫系統受到抑制或削弱之兒童 • 患有神經肌肉病症或先天異常之兒童，包括吞嚥困難或清除黏液分泌物有困難之兒童 • 患有嚴重囊性纖維化之兒童
感染RSV之嬰兒及幼兒可能在出現任何其他症狀之前出現鼻漏及食慾下降。咳嗽通常在1至3天後出現。咳嗽出現後不久，可發生打噴嚏、發熱及喘鳴。極小嬰兒之症狀可包括應激性、活動減少及/或呼吸暫停。
大多數感染RSV之其他方面健康之嬰兒及幼兒不需要住院。住院患者可能需要吸氧、補液及/或機械通氣。大多數患者在支持性照護下改善且在幾天後出院。 在老年人及患有慢性醫學病況之成人中
感染RSV之成人通常症狀輕微或無症狀。症狀通常與上呼吸道感染一致，且可包括鼻漏、咽炎、咳嗽、頭痛、疲勞及發熱。疾病通常持續不到5天。
然而，一些成人可經歷與下呼吸道感染一致之更嚴重的症狀，諸如肺炎。流行病學證據指示，處於患嚴重RSV疾病最高風險下之60歲及以上之人群包括患有以下慢性疾患中之任一者之人群： • 肺病(諸如慢性阻塞性肺病[COPD]及氣喘) • 慢性心血管疾病(諸如鬱血性心臟衰竭及冠狀動脈疾病) • 糖尿病 • 神經疾患 • 腎臟病症 • 肝臟病症 • 血液病症 • 免疫受損 •健康照護提供者認為可能增加嚴重呼吸疾病風險之其他潛在疾患
可增加嚴重RSV相關之呼吸疾病風險之其他潛在因素可包括以下： • 脆弱性 • 高齡 • 居住在療養院或其他長期照護機構 • 健康照護提供者認為可能增加嚴重呼吸疾病風險之其他潛在因素
RSV有時亦可導致嚴重疾患惡化，諸如： • 氣喘 • 慢性阻塞性肺病(COPD)；及 • 鬱血性心臟衰竭。 臨床實驗室測試
RSV之臨床症狀係非特異性的，且可與其他病毒性呼吸道感染以及一些細菌性感染重疊。若干種類型之實驗室測試可用於確認RSV感染。可對上呼吸道及下呼吸道樣本實施該等測試。
最常使用之RSV臨床實驗室測試類型包括： • 即時反轉錄-聚合酶鏈式反應(rRT-PCR)，其較培養及抗原測試更靈敏 • 抗原測試，其在兒童中靈敏，但在成人中較不靈敏
不常用之測試包括： • 病毒培養 • 血清學，其通常僅用於研究及監控研究
一些測試可區分RSV亞型(A及B)。 對於嬰兒及幼兒
rRT-PCR及抗原偵測測試二者均為診斷嬰兒及幼兒RSV感染之有效方法。在此年齡組中，RSV抗原偵測測試之靈敏度通常在80%至90%範圍內。 對於大齡兒童、青少年及成人
健康照護提供者在測試大齡兒童及成人之RSV時應使用高度靈敏之rRT-PCR分析。RSV之rRT-PCR分析現已商業可獲得。該等分析之靈敏度通常超過病毒分離及抗原偵測方法之靈敏度。對於大齡兒童及成人，抗原測試不靈敏，此乃因其呼吸道樣本中之病毒載量可能較低。 抗原
本揭示案尤其提供包含編碼構成SARS-CoV-2 S蛋白之胺基酸序列之RNA、編碼構成流行性感冒病毒HA蛋白、其免疫原性變異體或者SARS-CoV-2 S蛋白、流行性感冒HA蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段之胺基酸序列之RNA的組合物，及使用該等物質之方法。因此，在一些實施例中，RNA編碼包含SARS-CoV-2 S蛋白之至少抗原決定基、流行性感冒HA蛋白或其免疫原性變異體之至少抗原決定基之肽或蛋白質，以用於在個體中誘導針對冠狀病毒S蛋白、特定而言SARS-CoV-2 S蛋白或流行性感冒HA蛋白之免疫反應。構成SARS-CoV-2 S蛋白、流行性感冒HA蛋白、其免疫原性變異體，或者SARS-CoV-2 S蛋白、流行性感冒HA蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段(亦即抗原性肽或蛋白質)之胺基酸序列係「疫苗抗原」、「肽及蛋白質抗原」、「抗原分子」或簡稱為「抗原」之實例。SARS-CoV-2 S蛋白、流行性感冒HA蛋白、其免疫原性變異體，或者SARS-CoV-2 S蛋白、流行性感冒HA蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段亦為「抗原性肽或蛋白質」或「抗原序列」之實例。
如本文所用，武漢變異體之SARS-CoV-2冠狀病毒全長刺突(S)蛋白係指由1273個胺基酸組成且具有根據SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之多肽： MFVFLVLLPLVSSQCVNLTTRTQLPPAYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAIHVSGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLGVYYHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLVRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFGEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFSTFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGDEVRQIAPGQTGKIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNNLDSKVGGNYNYLYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGSTPCNGVEGFNCYFPLQSYGFQPTNGVGYQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQDVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEHVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTNSPRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLNRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKDFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLSSNFGAISSVLNDILSRLDKVEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT (SEQ ID NO: 1)
出於本揭示案之目的，上述序列視為野生型SARS-CoV-2 S蛋白胺基酸序列。本文給出之SARS-CoV-2 S蛋白中之位置編號與根據SEQ ID NO: 1之胺基酸序列及SARS-CoV-2 S蛋白變異體中之相應位置有關。
在具體實施例中，可以使原型融合前構形穩定化之方式修飾由本文所闡述之RNA編碼之全長刺突(S)蛋白。使融合前構形穩定化之某些突變為此項技術中所已知，例如如WO 2021243122 A2、WO 2023/001259 A1、US 2023/0021583 A1以及Hsieh、Ching-Lin等人(「Structure-based design of prefusion-stabilized SARS-CoV-2 spikes」, Science 369.6510 (2020): 1501-1505)所揭示的，每一者之內容均係以全文引用的方式併入本文中。在一些實施例中，SARS-CoV-2 S蛋白可藉由引入一或多個甘胺酸或脯胺酸突變來穩定化(例如，在S蛋白中之螺旋轉角區之冠中、在S2亞單元之七肽區1 (HR1)與中央螺旋(CH)或七肽區2 (HR2)區之間的12個胺基酸中引入一或多個甘胺酸或脯胺酸突變)。在一些實施例中，SARS-CoV-2 S蛋白可藉由在對應於L984、D985、K986及V987中之一或多者之一個位置處引入一或多個甘胺酸或脯胺酸突變來穩定化(位置相對於SEQ ID NO: 1))。在一些實施例中，刺突蛋白在對應於L984、D985、K986及V987中之每一者之位置處包含甘胺酸突變(位置相對於SEQ ID NO: 1)。
在一些實施例中，SARS-CoV-2 S蛋白可藉由引入一或多個脯胺酸突變來穩定化。此等脯胺酸突變之實例為此項技術中所已知，且包括例如在對應於以下位置處之突變：F817P、L865P、T866P、A892P、A899P、T912P、A893P、E895P、K921P、K922P、N978P、A942P、G946P、S975P、K986P及V987P (位置相對於SEQ ID NO:1)。在一些實施例中，SARS-CoV-2 S蛋白在對應於SEQ ID NO: 1之殘基986及/或987之位置處包含脯胺酸取代。在一些實施例中，SARS-CoV-2 S蛋白在對應於SEQ ID NO: 1之殘基817、892、899及942之一或多個位置處包含脯胺酸取代。在一些實施例中，SARS-CoV-2 S蛋白在對應於SEQ ID NO: 1之殘基817、892、899及942中之每一者之位置處包含脯胺酸取代。在一些實施例中，SARS-CoV-2 S蛋白在對應於SEQ ID NO: 1 之殘基817、892、899、942、986及987中之每一者之位置處包含脯胺酸取代。
在一些實施例中，刺突蛋白之修飾方式可阻斷融合前至融合後之構形變化(在本文中稱為「融合前後阻斷」)及/或減少脫落。在一些實施例中，可藉由引入一或多對半胱胺酸突變(例如，在刺突蛋白之融合前構形中彼此靠近之位置)來引入融合前後阻斷或減少脫落。此等半胱胺酸突變對位置之實例為此項技術中所已知，且包括在對應於例如以下位置處之對：S383C/D985C、G413C/P987C、A668C及V963C或P862C、I712C/T1077C、T547C/N978C；K558C/N282C、A570C/V963C、D571C/S967C、A653C/A694C、S659C/S698C、C662C/M697C、A668C/P862C、A672C/A694C；V705C/A983C；V705C/T883C、Y707C/T883C、I714C/Y1110C、P715C/P1069C、V722C/A930C；L727C/S1021C；P728C/V951C；V729C/A1022C；S735C/T859C；V736C/L858C；I770C/A1015C；T791C/A879C；G799C/A924C；P807C/S875C；E819C/Q1054C、E819C/S1055C；L822C/A1056C；I870C/S1055C；T874C/S1055C；S884C/A893C；G885C/Q901C；G889C/L1034C、A890C/V1040C；I896C/Q901C；A903C/Q913C；I909C/Y1047C；V911C/N1108C；N914C/S1123C；T961C/S758C；T961C/E762C；Q965C/S1003C；F970C/G999C；A972C/I980C；A972C/Q992C；A972C/R995C；S974C/D979C；A1078C/V1133C；A1080C/I1132C；I1081C/N1135C；H1088C/T1120C；F1103C/P1112C；T1116C/Y1138C；及T1117C/D1139C (位置相對於SEQ ID NO: 1)。關於例示性二硫鍵突變之其他揭示內容揭示於例如US 2023/0021583 A1、WO 2022/241229 A1、WO 2022/040220 A1及WO 2021/243122 A1中，其內容係以全文引用的方式併入本文中。
在一些實施例中，S蛋白之融合前構形可藉由引入一或多個「空腔填充」突變來穩定化。「空腔填充突變」係指填充摺疊蛋白質核心內空腔之胺基酸取代。空腔係摺疊蛋白質內之空隙，其中不存在胺基酸或胺基酸側鏈(如例如藉由檢查SARS-CoV-2 S蛋白之結構模型所確定)。在一些實施例中，可藉由引入填充SARS-CoV-2 S蛋白之融合前構形中所存在之空腔之突變來穩定SARS-CoV-2 S蛋白之融合前構形，在轉變成融合後構形後，該空腔塌陷(例如體積減小)。適宜空腔填充突變為此項技術中所已知，且包括例如在對應於以下位置處之突變：T724I、T724M、S730L、T778L、Q779M、V826L、S875F、T887W、A890V、L894F、A899F、Q901M、L923W、P937F、L938F、M939K、A944F、A944Y、V963L、S975M、V983l、R1000Y、R1000W、S1003V、I1013F、A1016、A1020、A1020W、L1033、R1039F、V1040F、V1040Y、V1041、H1058W、H1058F、H1058Y、P1069F、H1088W、H1088Y、D1118F、N1132Y及L1141F，以及其任何組合(位置相對於SEQ ID NO: 1)。關於空腔填充突變之其他揭示內容可例如參見WO 2023/015332 A1、WO 2023/001259 A1、WO 2022/241229 A1及WO 2021/243122 A1，其各自之內容係以全文引用的方式併入本文中。
在一些實施例中，刺突蛋白可經修飾以減少「脫落」(亦即，減少S1及S2亞單元之分離)。在一些實施例中，可藉由在弗林蛋白酶裂解位點處引入突變，使得弗林蛋白酶不能再結合及/或裂解S蛋白(例如，在對應於SEQ ID NO: 1之殘基682-685之位置處引入一或多個突變)而使刺突蛋白經修飾，以減少脫落。在一些實施例中，可藉由在對應於SEQ ID NO: 1之殘基682及685之位置處引入突變(例如，引入對應於SEQ ID NO: 1之R682S及R685G之突變)、在對應於SEQ ID NO: 1之殘基682、683及685中之每一者之位置處引入突變(例如，引入對應於SEQ ID NO: 1之(i) R682G、R683S及R685S，(ii) R682G、R683S及R685G，或(iii) R682Q、R683Q及R685Q之突變)，或藉由在對應於SEQ ID NO: 1之殘基682、683、684及685中之每一者之位置處引入突變(例如，引入對應於SEQ ID NO: 1之R682G、R683S、A684G及R685G之突變)，使S蛋白經修飾以減少脫落。
在一些實施例中，可將一或多種修飾引入至刺突蛋白中，以穩定「向上(up)」構形(在本文中稱為「RBD向上(RBD Up)」突變)。不希望受理論束縛，認為SARS-CoV-2刺突蛋白之向上構形增加中和敏感性殘基之暴露。因此，穩定向上構形之突變可產生更具有免疫原性之疫苗。
在一些實施例中，可藉由在全長刺突蛋白中對應於SEQ ID NO: 1之殘基986及987之位置的AS殘基處引入兩個連續的脯胺酸取代來獲得融合前構形之穩定化。具體而言，以將在對應於SEQ ID NO: 1之位置986之殘基處的胺基酸殘基交換為脯胺酸且將位於對應於SEQ ID NO: 1之位置987之位置處的胺基酸殘基亦交換為脯胺酸之方式獲得刺突(S)蛋白穩定化之蛋白質變異體。在一個實施例中，其中原型融合前構形得以穩定化之SARS-CoV-2 S蛋白變異體包含SEQ ID NO: 7中所示之胺基酸序列： MFVFLVLLPLVSSQCVNLTTRTQLPPAYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAIHVSGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLGVYYHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLVRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFGEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFSTFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGDEVRQIAPGQTGKIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNNLDSKVGGNYNYLYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGSTPCNGVEGFNCYFPLQSYGFQPTNGVGYQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQDVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEHVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTNSPRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLNRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKDFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLSSNFGAISSVLNDILSRLDPPEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT (SEQ ID NO: 7)
熟習此項技術者知曉各種刺突變異體及/或記錄其之資源。舉例而言，以下毒株、其SARS-CoV-2 S蛋白胺基酸序列，且特定而言其與野生型SARS-CoV-2 S蛋白胺基酸序列相比(例如與SEQ ID NO: 1相比)之修飾在本文中係有用的。 B.1.1.7 ( 「所關注變異體202012/01」(VOC-202012/01)
B.1.1.7 (「阿爾法變異體」)係SARS-CoV-2之一種變異體，該變異體於2020年10月在英國COVID-19大流行期間自上個月採集之樣品中首次偵測到，且於12月中旬迅速開始傳播。其與英國COVID-19感染率之顯著增加相關；認為此增加至少部分地係由於刺突糖蛋白受體結合結構域內N501Y之改變，此係在人類細胞中結合ACE2所需的。B.1.1.7變異體由以下23種突變定義：13種非同義突變、4種缺失及6種同義突變(亦即，存在17種改變蛋白質之突變及6種不改變蛋白質之突變)。B.1.1.7中之刺突蛋白變化包括缺失69-70、缺失144、N501Y、A570D、D614G、P681H、T716I、S982A及D1118H。 B.1.351 (501.V2)
B.1.351譜系(「貝塔變異體」)俗稱為南非COVID-19變異體，其係SARS-CoV-2之變異體。初步結果指示，此變異體可能具有增加之可傳播性。B.1.351變異體由多個刺突蛋白變化定義，包括：L18F、D80A、D215G、缺失242-244、R246I、K417N、E484K、N501Y、D614G及A701V。B.1.351基因體之刺突區域中有以下三個尤其受關注之突變：K417N、E484K、N501Y。 B.1.1.298 ( 群集5)
B.1.1.298在丹麥北日德蘭半島發現，且據信係經由水貂養殖場自水貂傳播給人類的。已證實病毒之刺突蛋白中存在若干種不同的突變。具體突變包括缺失69-70、Y453F、D614G、I692V、M1229I及視情況S1147L。 P.1 (B.1.1.248)
譜系B.1.1.248 (「伽馬變異體」)稱為巴西變異體，其係SARS-CoV-2之變異體之一，已命名為P.1譜系。P.1具有多種S蛋白修飾[L18F、T20N、P26S、D138Y、R190S、K417T、E484K、N501Y、D614G、H655Y、T1027I、V1176F]，且在某些關鍵RBD位置(K417、E484、N501)與來自南非之變異體B.1.351相似。 B.1.427/B.1.429 (CAL.20C)
譜系B.1.427/B.1.429 (「艾普斯龍變異體」)亦稱為CAL.20C，其由S蛋白中之以下修飾定義：S13I、W152C、L452R及D614G，其中之L452R修飾尤其受關注。CDC已將B.1.427/B.1.429列為「關注變異體」。 B.1.525
B.1.525(「埃塔變異體」)攜帶與如在P.1及B.1.351變異體中所發現相同之E484K修飾，且亦攜帶與如在B.1.1.7及B. 1.1.298中所發現相同之ΔH69/ΔV70缺失。其亦攜帶修飾D614G、Q677H及F888L。 B.1.526
B.1.526(「約塔變異體」)偵測為紐約地區新出現的病毒分離株譜系，與先前報導之變異體共享突變。該譜系中最常見之刺突突變集為L5F、T95I、D253G、E484K、D614G及A701V。
下表顯示作為或已作為VOI/VOC之例示性SARS-CoV-2毒株之概況。 表1：已作為或作為VOI/VOC之某些傳播性SARS-CoV-2毒株之概況
譜系 胺基酸取代
P.1 (BRA) L18F T20N P26S D138Y R190S K417T E484K N501Y D614G H655Y T1027I V1176F
B.1.1.7 (UK) ΔH69/V70 ΔY144 N501Y A570D D614G P681H T716I S982A D1118H
B.1.351 (SA) L18F D80A D215G Δ242/243/244 R246I K417N E484K N501Y D614G A701V
B.1.1.298 (DK) ΔH69/V70 Y453F D614G I692V M1229I
B.1.427/ B.1.429 (CAL) S13I W152C L452R D614G
B.1.525 ΔH69/V70 E484K D614G Q677H F888L
B.1.526 (NY) L5F T95I D253G E484K D614G A701V
B.1.1.529
B.1.529 (「奧密克戎變異體」)於2021年11月在南非首次偵測到。奧密克戎之繁殖速度較德爾塔變異體快約70倍，且迅速成為全球SARS-CoV-2之佔優毒株。自最初偵測到以來，已出現多種奧密克戎亞系。下文列示關注之奧密克戎變異體，以及與每個變異體之S蛋白相關之某些特徵性突變。BA.4及BA.5之S蛋白具有相同的特徵性突變集，此為下表中對於「BA.4或BA.5」僅有一列之原因，以及本揭示案在一些實施例中提及「BA.4/5」S蛋白之原因。類似地，BA.4.6及BF.7奧密克戎變異體之S蛋白具有相同的特徵性突變集，此為下表對於「BA.4.6或BF.7」僅有一列之原因。 表2：某些所關注之奧密克戎變異體之特徵性突變
亞變異體 特徵性突變
BA.1 A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、K417N、N440K、G446S、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K及L981F
BA.2 T19I、Δ24-26、A27S、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、S477N、T478K、E484A、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K
BA.2.12.1 T19I、Δ24-26、A27S、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、L452Q、S477N、T478K、E484A、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、S704L、N764K、D796Y、Q954H及N969K
BA.2.12.1 T19I、Δ24-26、A27S、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、L452Q、S477N、T478K、E484A、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、S704L、N764K、D796Y、Q954H、N969K
BA.4或BA.5 特徵性突變(1)：T19I、Δ24-26、A27S、Δ69/70、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、L452R、S477N、T478K、E484A、F486V、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K 特徵性突變(2)：T19I、Δ24-26、A27S、Δ69/70、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、K417N、N440K、L452R、S477N、T478K、E484A、F486V、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K
BA.2.75 T19I、Δ24-26、A27S、G142D、K147E、W152R、F157L、I210V、V213G、G257S、G339H、N354D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K
BA.2.75.2 T19I、Δ24-26、A27S、G142D、K147E、W152R、F157L、I210V、V213G、G257S、G339H、R346T、N354D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486S、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K及D1199N
BJ.1 T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、V213E、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、S477N、T478K、V483A、E484A、F490V、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、G798D、Q954H、N969K及S1003I
BA.4.6或BF.7 T19I、Δ24-26、A27S、Δ69/70、G142D、V213G、G339D、R346T、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、L452R、S477N、T478K、E484A、F486V、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N658S、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K
XBB 特徵性突變(1)：T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、V213E、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486S、F490S、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K 特徵性突變(2)：T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ145、H146Q、Q183E、V213E、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486S、F490S、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K
XBB.1 特徵性突變(1)：T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、V213E、G252V、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486S、F490S、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K 特徵性突變(2)：T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、V213E、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486S、F490S、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K
XBB.2 T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、V213E、D253G、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486S、F490S、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K
XBB.2.3 T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、V213E、D253G、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486P、F490S、Q498R、N501Y、P521S、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K
XBB.2.3.2 T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、G184V、V213E、D253G、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486P、F490S、Q498R、N501Y、P521S、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K
XBB.1.3 T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、V213E、G252V、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、A484T、F486S、F490S、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K
XBB.4 T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、V213E、G252V、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、K444R、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486S、F490S、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K
XBB.1.5 特徵性突變(1)：T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、V213E、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486P、F490S、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K 特徵性突變(2)：T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ145、H146Q、Q183E、V213E、G252V、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486P、F490S、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K
XBB.1.16 特徵性突變(1)：T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、E180V、Q183E、V213E、G252V、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478R、E484A、F486P、F490S、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K 特徵性突變(2)：T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ145、H146Q、E180V、Q183E、V213E、G252V、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478R、E484A、F486P、F490S、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K
BA.2.3.20 T19I、Δ24-26、A27S、G142D、M153T、N164K、V213G、H245N、G257D、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、K444R、E484R、N450D、L452M、N460K、S477N、T478K、E484A、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K
BQ.1 T19I、Δ24-26、A27S、Δ69/70、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、K444T、L452R、N460K、S477N、T478K、E484A、F486V、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K
BQ.1.1 T19I、Δ24-26、A27S、Δ69/70、G142D、V213G、G339D、R346T、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、K444T、L452R、N460K、S477N、T478K、E484A、F486V、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K
BN.1 T19I、Δ24-26、A27S、G142D、V213G、G339D、R346T、K356T、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、G446S、N460K、R493Q、S477N、T478K、E484A、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K
除上述奧密克戎變異體以外，亦已觀察到BA.5之其他變異體(此等變異體包括例如BF.7、BF.14、BQ.1及BQ.1.1)，該等其他變異體在S蛋白中包含以下突變中之一或多者(位置相對於SEQ ID NO: 1顯示)：E340X (例如E340K)、R346X (例如R346T、R346I或R346S)、K444X (例如K444N或K444T)、V445X、N450D及N460X (例如N460K)。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA包含編碼SARS-CoV-2 S蛋白之核苷酸序列，該SARS-CoV-2 S蛋白包含奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變(包括例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或更多個突變)(例如，與表2中之給定奧密克戎變異體相關之一或多個(例如所有)突變)。在一些實施例中，此一RNA進一步包含一或多個突變，該一或多個突變使融合前構形中之S蛋白穩定化(例如在一些實施例中，此RNA進一步包含在對應於SEQ ID NO: 1之殘基986及987之位置處的脯胺酸殘基)。在一些實施例中，RNA包含編碼SARS-CoV-2 S蛋白之核苷酸序列，該SARS-CoV-2 S蛋白包含表2中所列示之一或多個突變(包括例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或更多個突變)。在一些此等實施例中，RNA包含編碼SARS-CoV-2 S蛋白之核苷酸序列，該SARS-CoV-2 S蛋白包含來自表2中所列示之兩種或更多種變異體各自之一或多個突變。在一些實施例中，RNA包含編碼SARS-CoV-2 S蛋白之核苷酸序列，該SARS-CoV-2 S蛋白包含表2中所鑑別出的作為某一奧密克戎變異體之特徵的一或多個(例如所有)突變(例如，在一些實施例中，RNA包含編碼SARS-CoV-2 S蛋白之核苷酸序列，該SARS-CoV-2 S蛋白包含表2中所列示的作為奧密克戎BA.1、BA.2、BA.2.12.1、BA.4/5、BA.2.75、BA.2.75.1、BA.4.6、BQ.1.1、XBB、XBB.1、XBB.2、XBB.1.3、XBB.1.5、XBB.1.16、XBB.2.3、XBB.2.3.2變異體特徵之突變中之每一者)。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA包含編碼SARS-Cov-2 S蛋白之免疫原性片段(例如RBD)之核苷酸序列，該免疫原性片段包含SARS-CoV-2變異體(例如本文所闡述之奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變。舉例而言，在一些實施例中，RNA包含編碼SARS-CoV-2變異體之S蛋白之RBD (例如S蛋白中對應於SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之區域，且包含所關注變異體之一或多個位於S蛋白之該區域內之特徵性突變)的核苷酸序列。
在一些實施例中，RNA包含編碼XBB.1.5 SARS-CoV-2變異體之RBD之核苷酸序列，其中(i)該RBD包含SEQ ID NO: 129之胺基酸323至524或與SEQ ID NO: 129至少70% (例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%)一致之胺基酸序列，且/或(ii)該RNA包含SEQ ID NO: 131之核苷酸967至1572或與SEQ ID NO: 131之核苷酸967至1572至少70% (例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%)一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，RNA包含編碼XBB.1.16 SARS-CoV-2變異體之RBD之核苷酸序列，其中(i)該RBD包含SEQ ID NO: 134之胺基酸323至524或與SEQ ID NO: 134至少70% (例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%)一致之胺基酸序列，且/或(ii)該RNA包含SEQ ID NO: 136之核苷酸967至1572或與SEQ ID NO: 136之核苷酸967至1572至少70% (例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%)一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，RNA包含編碼XBB.2.3 SARS-CoV-2變異體之RBD之核苷酸序列，其中(i)該RBD包含SEQ ID NO: 139之胺基酸323至524或與SEQ ID NO: 139至少70% (例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%)一致之胺基酸序列，且/或(ii)該RNA包含SEQ ID NO: 141之核苷酸967至1572或與SEQ ID NO: 141之核苷酸967至1572至少70% (例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%)一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，RNA包含編碼XBB.2.3.2 SARS-CoV-2變異體之RBD之核苷酸序列，其中(i)該RBD包含SEQ ID NO: 144之胺基酸323至524或與SEQ ID NO: 144至少70% (例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%)一致之胺基酸序列，且/或(ii)該RNA包含SEQ ID NO: 146之核苷酸967至1572或與SEQ ID NO: 146之核苷酸967至1572至少70% (例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%)一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，RNA包含編碼XBB.1.16 SARS-CoV-2變異體之RBD之核苷酸序列，其中(i)該RBD之胺基酸序列包含SEQ ID NO: 134之胺基酸323至524，且/或(ii)該RNA包含與SEQ ID NO: 135之核苷酸967至1572至少70% (例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%)一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，RNA編碼包含表2中所列示突變之子集之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，RNA編碼包含表2中所列示的在某一變異體中最普遍之突變(例如，已在迄今為止針對已測序之給定變異體收集之序列中的至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%之序列中偵測到的突變)之SARS-CoV-2 S蛋白。可測定突變流行率，例如，基於已發佈之序列(例如，由GISAID收集並向公眾提供之序列)來測定。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含BA.4/5變異體之一或多個特徵性突變的SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，BA.4/5變異體之該一或多個特徵性突變包括T19I、Δ24-26、A27S、Δ69/70、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、K417N、N440K、L452R、S477N、T478K、E484A、F486V、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K，或其任何組合。在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含BA.4/5變異體之一或多個特徵性突變但不包括R408S之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含BA.4/5變異體之一或多個特徵性突變(包括例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或更多個(例如所有)突變)但不包括R408S之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含BA.2.75變異體之一或多個特徵性突變(包括例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或更多個(例如所有)突變)之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，BA.2.75變異體之該一或多個特徵性突變包括T19I、Δ24-26、A27S、G142D、K147E、W152R、F157L、I210V、V213G、G257S、G339H、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、Q954H及N969K，或其任何組合。在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含BA.2.75變異體之一或多個特徵性突變(包括例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或更多個突變)但不包括N354D之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含BA.2.75變異體之一或多個特徵性突變(包括例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或更多個突變)但不包括D796Y之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含BA.2.75變異體之一或多個特徵性突變(包括例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或更多個突變)但不包括D796Y及N354D之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含BA.2.75.2變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，BA.2.75.2變異體之該一或多個特徵性突變包括T19I、Δ24-26、A27S、G142D、K147E、W152R、F157L、I210V、V213G、G257S、G339H、R346T、N354D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486S、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K及D1199N，或其任何組合。在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含BA.2.75.2變異體之一或多個特徵性突變(包括例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或更多個突變)但不包括R346T之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含BA.4.6或BF.7變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，BA.4.6或BF.7變異體之該一或多個特徵性突變包括T19I、Δ24-26、A27S、Δ69/70、G142D、V213G、G339D、R346T、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、K417N、N440K、L452R、S477N、T478K、E484A、F486V、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K，或其任何組合。在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含BA.4.6或BF.7變異體之一或多個特徵性突變(包括例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或更多個突變)但不包括R408S之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含BA.4.6或BF.7變異體之一或多個特徵性突變(包括例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或更多個突變)但不包括N658S之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含BA.4.6或BF.7變異體之一或多個特徵性突變(包括例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或更多個突變)但不包括N658S及R408S之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含奧密克戎XBB變異體之一或多個特徵性突變的SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，奧密克戎XBB變異體之該一或多個特徵性突變包括T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、V213E、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486S、F490S、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K，或其任何組合。在一些實施例中，奧密克戎XBB變異體之該一或多個特徵性突變包括T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、V213E、 G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486S、F490S、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K，或其任何組合。在一些實施例中，奧密克戎XBB變異體之該一或多個特徵性突變包括T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、V213E、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486S、F490S、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K，或其任何組合。在一些實施例中，奧密克戎XBB變異體之該一或多個特徵性突變包括T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ145、H146Q、Q183E、V213E、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486S、F490S、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K，或其任何組合。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含奧密克戎XBB.1變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，奧密克戎XBB.1變異體之該一或多個特徵性突變包括G252V。在一些實施例中，奧密克戎XBB.1變異體之該一或多個特徵性突變包括T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、V213E、G252V、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486S、F490S、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K，或其任何組合。在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含奧密克戎XBB.1變異體之一或多個特徵性突變(包括例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或更多個突變)但不包括Q493R之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含奧密克戎XBB變異體之一或多個特徵性突變(包括例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或更多個突變)但不包括Q493R及G252V之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含奧密克戎XBB.2變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，奧密克戎XBB.2變異體之該一或多個特徵性突變包括D253G。在一些實施例中，奧密克戎-XBB.2變異體之該一或多個特徵性突變包括T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、V213E、D253G、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486S、F490S、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K，或其任何組合。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含奧密克戎XBB.2.3變異體之一或多個特徵性突變(例如，如上表2中所列示)之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，奧密克戎XBB.2.3變異體之該一或多個特徵性突變包括XBB變異體之一或多個特徵性突變以及D253G、F486P及P521S中之一或多者。在一些實施例中，奧密克戎XBB.2.3變異體之該一或多個特徵性突變包括T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、V213E、D253G、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486P、F490S、Q498R、N501Y、P521S、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K，或其任何組合。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含奧密克戎XBB.2.3.2變異體之一或多個特徵性突變(例如，如上表2中所列示)之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，奧密克戎XBB.2.3.2變異體之該一或多個特徵性突變包括XBB變異體之一或多個特徵性突變以及G184V、D253G、F486P及P521S中之一或多者。在一些實施例中，奧密克戎XBB.2.3變異體之該一或多個特徵性突變包括T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、G184V、V213E、D253G、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486P、F490S、Q498R、N501Y、P521S、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K，或其任何組合。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含奧密克戎XBB.1.3變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，奧密克戎XBB.1.3變異體之該一或多個特徵性突變包括G252V及A484T。在一些實施例中，奧密克戎XBB.1.3變異體之該一或多個特徵性突變包括T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、V213E、G252V、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、A484T、F486S、F490S、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K，或其任何組合。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含奧密克戎XBB.1.5變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，奧密克戎XBB.1.5變異體之該一或多個特徵性突變包括F486P。在一些實施例中，奧密克戎XBB.1.5變異體之該一或多個特徵性突變包括T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、V213E、G252V、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、S486P、F490S、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K，或其任何組合。在一些實施例中，奧密克戎XBB.1.5變異體之該一或多個特徵性突變包括T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、V213E、G252V、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、F486P、F490S、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K，或其任何組合。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含奧密克戎XBB.1.16變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，奧密克戎XBB.1.16變異體之該一或多個特徵性突變包括E180V及K478R。在一些實施例中，奧密克戎XBB.1.16變異體之該一或多個特徵性突變包括T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ144、H146Q、Q183E、V213E、G252V、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478K、E484A、S486P、F490S、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K，或其任何組合。在一些實施例中，奧密克戎XBB.1.16變異體之該一或多個特徵性突變包括T19I、Δ24-26、A27S、V83A、G142D、Δ145、H146Q、E180V、Q183E、V213E、G252V、G339H、R346T、L368I、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、V445P、G446S、N460K、S477N、T478R、E484A、F486P、F490S、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K，或其任何組合。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含BQ.1.1變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，BQ.1.1變異體之該一或多個特徵性突變包括T19I、Δ24-26、A27S、Δ69/70、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、K444T、L452R、N463K、S477N、T478K、E484A、F486V、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H及N969K，或其任何組合。在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼包含BQ.1.1變異體之一或多個特徵性突變(包括例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或更多個突變)之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一個實施例中，本文所闡述之疫苗抗原包含SARS-CoV-2之刺突蛋白(S)、其變異體或其片段，基本上由該等物質組成或由該等物質組成。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 1或7之胺基酸17至1273之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1或7之胺基酸17至1273之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1或7之胺基酸17至1273之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1或7之胺基酸17至1273之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 1或7之胺基酸17至1273之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至3819之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至3819之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至3819之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至3819之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 1或7之胺基酸17至1273之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1或7之胺基酸17至1273之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1或7之胺基酸17至1273之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1或7之胺基酸17至1273之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至3819之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 1或7之胺基酸17至1273之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SARS-CoV-2刺突S1片段(S1) (SARS-CoV-2之刺突蛋白(S)之S1亞單元)、其變異體或其片段，基本上由該等物質組成，或由該等物質組成。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 1之胺基酸17至683之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸17至683之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸17至683之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸17至683之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 1之胺基酸17至683之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至2049之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至2049之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至2049之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至2049之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 1之胺基酸17至683之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸17至683之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸17至683之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸17至683之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至2049之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 1之胺基酸17至683之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 1之胺基酸17至685之胺基酸序列與SEQ ID NO: 1之胺基酸17至685之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸17至685之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸17至685之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 1之胺基酸17至685之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至2055之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至2055之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至2055之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至2055之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 1之胺基酸17至685之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸17至685之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸17至685之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸17至685之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸49至2055之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 1之胺基酸17至685之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SARS-CoV-2之刺突蛋白(S)之S1亞單元之受體結合結構域(RBD)、其變異體或其片段，基本上由該等物質組成，或由該等物質組成。SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列、其變異體或其片段在本文中亦稱為「RBD」或「RBD結構域」。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列與SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸979至1584之核苷酸序列；與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸979至1584 之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸979至1584之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸979至1584之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸979至1584之核苷酸序列；的片段；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列之胺基酸序列。 信號肽
根據某些實施例，信號肽直接或經由連接體融合至SARS-CoV-2 S蛋白、其變異體或其片段，亦即抗原性肽或蛋白質。因此，在一個實施例中，信號肽融合至上述疫苗抗原所包含的源自SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段(抗原性肽或蛋白質)之上述胺基酸序列。
此等信號肽為如下序列：該序列通常展現出約15至30個胺基酸之長度，且較佳位於抗原性肽或蛋白質之N末端，但不限於此。如本文所定義之信號肽較佳容許將如由RNA編碼之抗原性肽或蛋白質轉運至限定之細胞區室，較佳細胞表面、內質網(ER)或內體-溶酶體區室。在一個實施例中，如本文所定義之信號肽序列包括(但不限於) SARS-CoV-2 S蛋白之信號肽序列、特定而言包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16或1至19之胺基酸序列或其功能變異體之序列。
在一個實施例中，信號序列包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的功能片段。在一個實施例中，信號序列包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼信號序列之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至48之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至48之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至48之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至48之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的功能片段。在一個實施例中，編碼信號序列之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至48之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，信號序列包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1至19之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至19之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸1至19之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至19之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的功能片段。在一個實施例中，信號序列包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1至19之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼信號序列之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至57之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至57之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至57之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至57之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 1之胺基酸1至19之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至19之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸1至19之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至19之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的功能片段。在一個實施例中，編碼信號序列之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至57之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1至19之胺基酸序列之胺基酸序列。
如本文所定義之信號肽序列進一步包括(但不限於)免疫球蛋白之信號肽序列，例如免疫球蛋白重鏈可變區之信號肽序列，其中該免疫球蛋白可為人類免疫球蛋白。特定而言，如本文所定義之信號肽序列包括如下序列，該序列包含SEQ ID NO: 31之胺基酸1至22之胺基酸序列或其功能變異體。
在一些實施例中，信號肽序列在哺乳動物細胞中具有功能。在一些實施例中，所利用之信號序列係「固有的」，此乃因其在本質上與所編碼之多肽相關(例如連接至所編碼之多肽)。在一些實施例中，所利用之信號序列與所編碼之多肽係異源的，例如所利用之信號序列不為序列包括在所編碼多肽中之多肽(例如蛋白質)之天然組成部分。在一些實施例中，信號肽為通常以約15至30個胺基酸之長度為特徵之序列。在許多實施例中，信號肽定位於如本文所闡述之編碼多肽之N末端，而不限於此。在一些實施例中，信號肽較佳容許將與其締合的由本揭示案之RNA編碼之多肽轉運至限定之細胞區室(較佳細胞表面、內質網(ER)或內體-溶酶體區室)中。在一些實施例中，信號序列係選自S1S2信號肽(aa 1-19)、免疫球蛋白分泌信號肽(aa 1-22)、HSV-1 gD信號肽(MGGAAARLGAVILFVVIVGLHGVRSKY (SEQ ID NO: 110))、HSV-2 gD信號肽(MGRLTSGVGTAALLVVAVGLRVVCA (SEQ ID NO: 111))；人類SPARC信號肽、人類胰島素同種型1信號肽、人類白蛋白信號肽等。熟習此項技術者應知曉其他分泌信號肽，諸如如WO2017/081082中所揭示之分泌信號肽(例如SEQ ID NO: 1-1115及1728，或其片段變異體)及WO2019008001中所揭示之分泌信號肽。在一些實施例中，RNA序列編碼如下抗原決定基，該抗原決定基可包含或以其他方式連接至信號序列(例如分泌序列)(諸如表A中所列示之彼等信號序列)或相對於該信號序列至少具有1個、2個、3個、4個或5個胺基酸差異之序列。在一些實施例中，使用諸如MFVFLVLLPLVSSQCVNLT (SEQ ID NO: 113)之信號序列或至少相對於其具有1個、2個、3個、4個或最多5個胺基酸差異之序列。在一些實施例中，使用諸如MFVFLVLLPLVSSQCVNLT (SEQ ID NO: 113)之序列，或相對於其具有1個、2個、3個、4個或最多5個胺基酸差異之序列。在一些實施例中，信號序列係選自下表A中所包括之彼等信號序列及/或由下表B中之序列編碼之彼等信號序列： 表A：例示性信號序列
SEQ ID NO: 信號 序列(胺基酸)
110 HSV-1 gD SP MGGAAARLGAVILFVVIVGLHGVRSKY
111 HSV-2 gD SP MGRLTSGVGTAALLVVAVGLRVVCA
112 HSV-2 MGRLTSGVGTAALLVVAVGLRVVCAKYA
113 SARS-CoV-2-S MFVFLVLLPLVSSQCVNLT
114 人類Ig重鏈信號肽(huSec) MDWIWRILFLVGAATGAHSQM
115 HuIgGk信號肽 METPAQLLFLLLLWLPDTTG
116 IgE重鏈艾普斯龍-1信號肽 MDWTWILFLVAAATRVHS
117 日本腦炎PRM信號序列 MLGSNSGQRVVFTILLLLVAPAYS
118 VSVg蛋白信號序列 MKCLLYLAFLFIGVNCA
119 MDWTWILFLVAAATRVHS
120 ETPAQLLFLLLLWLPDTTG
121 MLGSNSGQRVVFTILLLLVAPAYS
122 MKCLLYLAFLFIGVNCA
123 MWLVSLAIVTACAGA
124 MFVFLVLLPLVSSQC
表B：編碼信號序列之例示性核苷酸序列
SEQ ID NO: 信號 序列(核苷酸)
125 HSV-1 gD SP野生型 ATGGGGGGGGCTGCCGCCAGGTTGGGGGCCGTGATTTTGTTTGTCGTCATAGTGGGCCTCCATGGGGTCCGCAGCAAATAT
126 HSV-1 gD SP 最佳化之核苷酸序列 ATGggaggagccGCCGCCagactgggaGCCGTGatcctgttcgtggtgatcGTGggactgCATggagtgagaAGCaagtac
127 SARS-CoV-2-S ATGTTTGTGTTTCTTGTGCTGCTGCCTCTTGTGTCTTCTCAGTGTGTGAATTTGACA
128 人類Ig重鏈信號肽(huSec) ATGGATTGGATTTGGAGAATCCTGTTCCTCGTGGGAGCCGCTACAGGAGCCCACTCCCAGATG
多聚化結構域
在一些實施例中，如本文所闡述使用之RNA編碼多聚化元件(例如異源多聚化元件)。在一些實施例中，異源多聚化元件包含二聚化、三聚化或四聚化元件。在一些實施例中，多聚化元件係WO2017/081082中所闡述之元件(例如SEQ ID NO: 1116-1167，或其片段或變異體)。例示性三聚化及四聚化元件包括(但不限於)工程化白胺酸拉鍊、來自腸桿菌噬菌體T4之纖維蛋白摺疊子結構域、GCN4pll、GCN4-pll及p53。在一些實施例中，所提供之編碼多肽能夠形成三聚體複合物。舉例而言，所使用之編碼多肽可包含容許形成多聚體複合物之結構域，諸如包含如本文所闡述之編碼多肽之胺基酸序列之特定三聚體複合物。在一些實施例中，容許形成多聚體複合物之結構域包含三聚化結構域，例如如本文所闡述之三聚化結構域。在一些實施例中，可藉由添加T4-纖維蛋白源性「摺疊子」三聚化結構域對編碼多肽進行修飾，例如以增加其免疫原性。 跨膜結構域
在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼膜締合元件(例如異源膜締合元件)，諸如跨膜結構域。跨膜結構域可在編碼多肽之N末端、C末端或內部。跨膜元件之編碼序列通常置於與其連接之序列之編碼序列(例如編碼多肽之序列)之框內(亦即在同一閱讀框中)、5'、3'或內部。在一些實施例中，跨膜結構域包含或為流行性感冒病毒之血球凝集素(HA)、HIV-1之Env、馬傳染性貧血病毒(EIAV)、鼠白血病病毒(MLV)、小鼠乳房腫瘤病毒、水疱性口炎病毒(VSV)之G蛋白、狂犬病病毒之跨膜結構域，或七跨膜結構域受體。
在一個實施例中，信號序列包含SEQ ID NO: 31之胺基酸1至22之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 31之胺基酸1至22之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 31之胺基酸1至22之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 31之胺基酸1至22之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的功能片段。在一個實施例中，信號序列包含SEQ ID NO: 31之胺基酸1至22之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼信號序列之RNA (i)包含SEQ ID NO: 32之核苷酸54至119之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 32之核苷酸54至119之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 32之核苷酸54至119之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 32之核苷酸54至119之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 31之胺基酸1至22之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 31之胺基酸1至22之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 31之胺基酸1至22之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 31之胺基酸1至22之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的功能片段。在一個實施例中，編碼信號序列之RNA (i)包含SEQ ID NO: 32之核苷酸54至119之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 31之胺基酸1至22之胺基酸序列之胺基酸序列。
較佳使用此等信號肽以促進所編碼抗原性肽或蛋白質之分泌。更佳地，將如本文所定義之信號肽融合至如本文所定義之所編碼抗原性肽或蛋白質。
因此，在尤佳實施例中，本文所闡述之RNA包含至少一個編碼抗原性肽或蛋白質以及信號肽之編碼區，該信號肽較佳融合至抗原性肽或蛋白質，更佳融合至如本文所闡述之抗原性肽或蛋白質之N末端。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 1或7之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1或7之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1或7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1或7之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 1或7之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 1或7之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1或7之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1或7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1或7之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 1或7之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 7之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 7之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 15、16、19、20、24或25之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 15、16、19、20、24或25之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 15、16、19、20、24或25之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 15、16、19、20、24或25之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 7之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 7之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 7之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 15、16、19、20、24或25之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1至683之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至683之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸1至683之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至683之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1至683之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至2049之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至2049之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至2049之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至2049之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 1之胺基酸1至683之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至683之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸1至683之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至683之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至2049之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1至683之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1至685之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至685之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸1至685之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至685之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1至685之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至2055之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至2055之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至2055之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至2055之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 1之胺基酸1至685之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至685之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸1至685之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸1至685之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸1至2055之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1至685之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 3之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 3之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 3之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 3之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 3之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 4之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 4之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 4之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 4之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 3之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 3之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 3之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 3之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 4之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 29之胺基酸1至221之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 29之胺基酸1至221之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 29之胺基酸1至221之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 29之胺基酸1至221之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 29之胺基酸1至221之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 30之核苷酸54至716之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 30之核苷酸54至716之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 30之核苷酸54至716之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 30之核苷酸54至716之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 29之胺基酸1至221之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 29之胺基酸1至221之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 29之胺基酸1至221之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 29之胺基酸1至221之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 30之核苷酸54至716之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 29之胺基酸1至221之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 31之胺基酸1至224之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 31之胺基酸1至224之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 31之胺基酸1至224之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 31之胺基酸1至224之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 31之胺基酸1至224之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 32之核苷酸54至725之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 32之核苷酸54至725之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 32之核苷酸54至725之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 32之核苷酸54至725之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 31之胺基酸1至224之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 31之胺基酸1至224之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 31之胺基酸1至224之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 31之胺基酸1至224之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 32之核苷酸54至725之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 31之胺基酸1至224之胺基酸序列之胺基酸序列。
根據某些實施例，三聚化結構域直接或經由連接體(例如甘胺酸/絲胺酸連接體)融合至SARS-CoV-2 S蛋白、其變異體或其片段，亦即抗原性肽或蛋白質。因此，在一個實施例中，將三聚化結構域融合至上述疫苗抗原所包含的源自SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段(抗原性肽或蛋白質)之上述胺基酸序列(其可視情況融合至如上所述之信號肽)。
此等三聚化結構域較佳位於抗原性肽或蛋白質之C末端，但不限於此。如本文所定義之三聚化結構域較佳容許如由RNA編碼之抗原性肽或蛋白質之三聚化。如本文所定義之三聚化結構域之實例包括(但不限於)摺疊子，亦即T4纖維蛋白之天然三聚化結構域。T4纖維蛋白(摺疊子)之C末端結構域對於纖維蛋白三聚體結構之形成必不可少，且可用作人工三聚化結構域。在一個實施例中，如本文所定義之三聚化結構域包括(但不限於)包含SEQ ID NO: 10之胺基酸3至29之胺基酸序列或其功能變異體之序列。在一個實施例中，如本文所定義之三聚化結構域包括(但不限於)包含SEQ ID NO: 10之胺基酸序列或其功能變異體之序列。
在一個實施例中，三聚化結構域包含SEQ ID NO: 10之胺基酸3至29之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 10之胺基酸3至29之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 10之胺基酸3至29之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 10之胺基酸3至29之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的功能片段。在一個實施例中，三聚化結構域包含SEQ ID NO: 10之胺基酸3至29之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼三聚化結構域之RNA (i)包含SEQ ID NO: 11之核苷酸7至87之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 11之核苷酸7至87之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 11之核苷酸7至87之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 11之核苷酸7至87之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 10之胺基酸3至29之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 10之胺基酸3至29之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 10之胺基酸3至29之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 10之胺基酸3至29之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的功能片段。在一個實施例中，編碼三聚化結構域之RNA (i)包含SEQ ID NO: 11之核苷酸7至87之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 10之胺基酸3至29之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，三聚化結構域包含SEQ ID NO: 10之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 10之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 10之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 10之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的功能片段。在一個實施例中，三聚化結構域包含SEQ ID NO: 10之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼三聚化結構域之RNA (i)包含SEQ ID NO: 11之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 11之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 11之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 11之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 10之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 10之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 10之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 10之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的功能片段。在一個實施例中，編碼三聚化結構域之RNA (i)包含SEQ ID NO: 11之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 10之胺基酸序列之胺基酸序列。
較佳使用此等三聚化結構域以促進所編碼之抗原性肽或蛋白質之三聚化。更佳地，將如本文所定義之三聚化結構域融合至如本文所定義之抗原性肽或蛋白質。
因此，在尤佳實施例中，本文所闡述之RNA包含至少一個編碼抗原性肽或蛋白質以及如本文所定義之三聚化結構域之編碼區，該三聚化結構域較佳融合至抗原性肽或蛋白質，更佳融合至抗原性肽或蛋白質之C末端。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 5之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 5之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 5之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 6之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 6之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 6之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 6之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 5之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 5之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 5之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 5之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 6之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 17、21或26之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 17、21或26之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 17、21或26之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 17、21或26之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 5之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 5之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 5之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 5之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 17、21或26之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 18之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 18之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 18之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 18之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 18之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 29之胺基酸1至257之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 29之胺基酸1至257之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 29之胺基酸1至257之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 29之胺基酸1至257之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 29之胺基酸1至257之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 30之核苷酸54至824之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 30之核苷酸54至824之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 30之核苷酸54至824之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 30之核苷酸54至824之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 29之胺基酸1至257之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 29之胺基酸1至257之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 29之胺基酸1至257之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 29之胺基酸1至257之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 30之核苷酸54至824之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 29之胺基酸1至257之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 31之胺基酸1至260之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 31之胺基酸1至260之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 31之胺基酸1至260之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 31之胺基酸1至260之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 31之胺基酸1至260之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 32之核苷酸54至833之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 32之核苷酸54至833之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 32之核苷酸54至833之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 32之核苷酸54至833之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 31之胺基酸1至260之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 31之胺基酸1至260之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 31之胺基酸1至260之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 31之胺基酸1至260之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 32之核苷酸54至833之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 31之胺基酸1至260之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 29之胺基酸20至257之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 29之胺基酸20至257之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 29之胺基酸20至257之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 29之胺基酸20至257之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 29之胺基酸20至257之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 30之核苷酸111至824之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 30之核苷酸111至824之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 30之核苷酸111至824之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 30之核苷酸111至824之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 29之胺基酸20至257之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 29之胺基酸20至257之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 29之胺基酸20至257之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 29之胺基酸20至257之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 30之核苷酸111至824之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 29之胺基酸20至257之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 31之胺基酸23至260之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 31之胺基酸23至260之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 31之胺基酸23至260之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 31之胺基酸23至260之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 31之胺基酸23至260之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 32之核苷酸120至833之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 32之核苷酸120至833之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 32之核苷酸120至833之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 32之核苷酸120至833之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 31之胺基酸23至260之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 31之胺基酸23至260之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 31之胺基酸23至260之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 31之胺基酸23至260之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 32之核苷酸120至833之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 31之胺基酸23至260之胺基酸序列之胺基酸序列。
根據某些實施例，跨膜結構域直接或經由連接體(例如甘胺酸/絲胺酸連接體)融合至SARS-CoV-2 S蛋白、其變異體或其片段，亦即抗原性肽或蛋白質。因此，在一個實施例中，跨膜結構域融合至上述疫苗抗原所包含的源自SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段(抗原性肽或蛋白質)之上述胺基酸序列(其可視情況融合至如上所述之信號肽及/或三聚化結構域)。
此等跨膜結構域較佳位於抗原性肽或蛋白質之C末端，但不限於此。較佳地，此等跨膜結構域位於三聚化結構域(若存在)之C末端，但不限於此。在一個實施例中，三聚化結構域存在於SARS-CoV-2 S蛋白、其變異體或其片段(亦即抗原性肽或蛋白質)與跨膜結構域之間。
如本文所定義之跨膜結構域較佳容許如由RNA編碼之抗原性肽或蛋白質錨定至細胞膜中。
在一個實施例中，如本文所定義之跨膜結構域序列包括(但不限於) SARS-CoV-2 S蛋白之跨膜結構域序列，特定而言包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1207至1254之胺基酸序列或其功能變異體之序列。
在一個實施例中，跨膜結構域序列包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1207至1254之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸1207至1254之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸1207至1254之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸1207至1254之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的功能片段。在一個實施例中，跨膜結構域序列包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1207至1254之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼跨膜結構域序列之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸3619至3762之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸3619至3762之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸3619至3762之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸3619至3762之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 1之胺基酸1207至1254之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 1之胺基酸1207至1254之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 1之胺基酸1207至1254之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 1之胺基酸1207至1254之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的功能片段。在一個實施例中，編碼跨膜結構域序列之RNA (i)包含SEQ ID NO: 2、8或9之核苷酸3619至3762之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1207至1254之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 29之胺基酸1至311之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 29之胺基酸1至311之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 29之胺基酸1至311之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 29之胺基酸1至311之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 29之胺基酸1至311之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 30之核苷酸54至986之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 30之核苷酸54至986之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 30之核苷酸54至986之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 30之核苷酸54至986之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 29之胺基酸1至311之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 29之胺基酸1至311之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 29之胺基酸1至311之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 29之胺基酸1至311之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 30之核苷酸54至986之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 29之胺基酸1至311之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 31之胺基酸1至314之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 31之胺基酸1至314之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 31之胺基酸1至314之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 31之胺基酸1至314之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 31之胺基酸1至314之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 32之核苷酸54至995之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 32之核苷酸54至995之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 32之核苷酸54至995之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 32之核苷酸54至995之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 31之胺基酸1至314之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 31之胺基酸1至314之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 31之胺基酸1至314之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 31之胺基酸1至314之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 32之核苷酸54至995之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 31之胺基酸1至314之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 29之胺基酸20至311之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 29之胺基酸20至311之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 29之胺基酸20至311之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 29之胺基酸20至311之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 29之胺基酸20至311之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 30之核苷酸111至986之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 30之核苷酸111至986之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 30之核苷酸111至986之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 30之核苷酸111至986之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 29之胺基酸20至311之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 29之胺基酸20至311之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 29之胺基酸20至311之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 29之胺基酸20至311之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 30之核苷酸111至986之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 29之胺基酸20至311之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 31之胺基酸23至314之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 31之胺基酸23至314之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 31之胺基酸23至314之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 31之胺基酸23至314之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 31之胺基酸23至314之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 32之核苷酸120至995之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 32之核苷酸120至995之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 32之核苷酸120至995之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 32之核苷酸120至995之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 31之胺基酸23至314之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 31之胺基酸23至314之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 31之胺基酸23至314之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 31之胺基酸23至314之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 32之核苷酸120至995之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 31之胺基酸23至314之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 30之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 30之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 30之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 30之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 29之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 29之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 29之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 29之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 30之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 29之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 32之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 32之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 32之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 32之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 31之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 31之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 31之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 31之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 32之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 31之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 28之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 28之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 28之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 28之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 28之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 27之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 27之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 27之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 27之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 28之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 28之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 28之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 28之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 27之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 28之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 49之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 49之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 49之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列。SEQ ID NO: 49之胺基酸序列對應於來自奧密克戎BA.1之全長S蛋白之胺基酸序列，該胺基酸序列包括位於SEQ ID NO: 49之986位及987位之脯胺酸殘基。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 50之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 50之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 50之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 50之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 49之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 49之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 49之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 49之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97% 一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 50之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列之胺基酸序列。SEQ ID NO: 50之核苷酸序列係經設計以編碼來自奧密克戎BA.1之全長S蛋白之胺基酸序列之核苷酸序列，該胺基酸序列在SEQ ID NO: 49之986位及987位具有脯胺酸殘基。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 51之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 51之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 51之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 51之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 49之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 49之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 49之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 49之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97% 一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 51之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列之胺基酸序列。SEQ ID NO: 51之核苷酸序列對應於RNA構築體(例如包含5’ UTR、S蛋白編碼序列、3’ UTR及聚A尾)，該RNA構築體編碼來自奧密克戎BA.1之全長S蛋白之胺基酸序列，該胺基酸序列在SEQ ID NO: 49之986位及987位具有脯胺酸殘基。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 55之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 55之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 55之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 55之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 55之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 56之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 56之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 56之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 56之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 55之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 55之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 55之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 55之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97% 一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 56之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 55之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 57之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 57之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 57之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 57之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 55之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 55之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 55之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 55之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97% 一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 57之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 55之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 58之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 58之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 58之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 58之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 58之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 59之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 59之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 59之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 59之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 58之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 58之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 58之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 58之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97% 一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 59之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 58之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 60之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 60之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 60之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 60之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 58之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 58之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 58之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 58之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97% 一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 60之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 58之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 61之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 61之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 61之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 61之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 61之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 62之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 62之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 62之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 62之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 61之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 61之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 61之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 61之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97% 一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 62之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 61之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 63之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 63之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 63之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 63之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 61之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 61之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 61之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 61之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97% 一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 63之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 61之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 52之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 52之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 52之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 52之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，疫苗抗原包含SEQ ID NO: 52之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 53之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 53之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 53之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 53之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 52之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 52之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 52之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 52之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97% 一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 53之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 52之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 54之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 54之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列，或者SEQ ID NO: 54之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 54之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列的片段；且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 52之胺基酸序列，與SEQ ID NO: 52之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 52之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 52之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97% 一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA (i)包含SEQ ID NO: 54之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 52之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，上述疫苗抗原包含SARS-CoV-2冠狀病毒刺突(S)蛋白之鄰接序列，該鄰接序列由或基本上由上述疫苗抗原所包含的源自SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段(抗原性肽或蛋白質)之上述胺基酸序列組成。在一個實施例中，上述疫苗抗原包含不超過220個胺基酸、215個胺基酸、210個胺基酸或205個胺基酸之SARS-CoV-2冠狀病毒刺突(S)蛋白之鄰接序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，其在本文中描述為BNT162b1 (RBP020.3)、BNT162b2 (RBP020.1或RBP020.2)或BNT162b3 (例如BNT162b3c)。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，其在本文中描述為RBP020.2。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，其在本文中描述為BNT162b3 (例如BNT162b3c)。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 21之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 21之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 5之胺基酸序列，或與SEQ ID NO: 5之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 21之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 19或20之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 19或20之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 7之胺基酸序列，或與SEQ ID NO: 7之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 19或20之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 20之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 7之胺基酸序列，或與SEQ ID NO: 7之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 30之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 30之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 29之胺基酸序列，或與SEQ ID NO: 29之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 30之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 29之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 50之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 50之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列，且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 49之胺基酸序列，或與SEQ ID NO: 49之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 50之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 51之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 51之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列，且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 49之胺基酸序列，或與SEQ ID NO: 49之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 51之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 57之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 57之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列，且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 55之胺基酸序列，或與SEQ ID NO: 55之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 57之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 55之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 60之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 60之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列，且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 58之胺基酸序列，或與SEQ ID NO: 58之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 60之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 58之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 63之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 63之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列，且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 61之胺基酸序列，或與SEQ ID NO: 61之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 63之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 61之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 53之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 53之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列，且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 52之胺基酸序列，或與SEQ ID NO: 52之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 53之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 52之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 54之核苷酸序列，與SEQ ID NO: 54之核苷酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之核苷酸序列，且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 52之胺基酸序列，或與SEQ ID NO: 52之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%或97%一致性之胺基酸序列。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 54之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 52之胺基酸序列之胺基酸序列。
如本文所用，術語「疫苗」係指在接種至個體中後誘導免疫反應之組合物。在一些實施例中，所誘導之免疫反應提供保護性免疫。
在一個實施例中，使編碼抗原分子之RNA在個體細胞中表現以提供抗原分子。在一個實施例中，抗原分子之表現係在細胞表面或進入細胞外空間中。在一個實施例中，抗原分子係在MHC之背景下呈遞。在一個實施例中，編碼抗原分子之RNA在個體細胞中瞬時表現。在一個實施例中，在投與編碼抗原分子之RNA後、特定而言在肌內投與編碼抗原分子之RNA後，編碼抗原分子之RNA在肌肉中表現。在一個實施例中，在投與編碼抗原分子之RNA後，編碼抗原分子之RNA在脾中表現。在一個實施例中，在投與編碼抗原分子之RNA後，編碼抗原分子之RNA在抗原呈遞細胞(較佳專職抗原呈遞細胞)中表現。在一個實施例中，抗原呈遞細胞係選自由樹突細胞、巨噬細胞及B細胞組成之群。在一個實施例中，在投與編碼抗原分子之RNA後，編碼抗原分子之RNA在肺及/或肝中沒有表現或基本上沒有表現。在一個實施例中，在投與編碼抗原分子之RNA後，編碼抗原分子之RNA在脾中之表現為肺中表現量之至少5倍。
在一些實施例中，向個體投與後、特定而言肌內投與後，本文所闡述之方法及劑(例如mRNA組合物)導致將編碼疫苗抗原之RNA遞送至淋巴結及/或脾。在一些實施例中，在投與後6小時或更晚且較佳長達6天或更長時間，在淋巴結及/或脾中可偵測到編碼疫苗抗原之RNA。
在一些實施例中，向個體投與後、特定而言肌內投與後，本文所闡述之方法及劑(例如mRNA組合物)導致將編碼疫苗抗原之RNA遞送至B細胞濾泡、包膜下竇及/或T細胞區，特定而言淋巴結之B細胞濾泡及/或包膜下竇。
在一些實施例中，向個體投與後、特定而言肌內投與後，本文所闡述之方法及劑(例如mRNA組合物)導致將編碼疫苗抗原之RNA遞送至淋巴結之T細胞區及中間竇中之B細胞(CD19+)、包膜下竇巨噬細胞(CD169+)及/或樹突細胞(CD11c+)，特定而言淋巴結之B細胞(CD19+)及/或包膜下竇巨噬細胞(CD169+)。
在一些實施例中，向個體投與後、特定而言肌內投與後，本文所闡述之方法及劑(例如mRNA組合物)導致將編碼疫苗抗原之RNA遞送至脾之白髓。
在一些實施例中，向個體投與後、特定而言肌內投與後，本文所闡述之方法及劑(例如mRNA組合物)導致將編碼疫苗抗原之RNA遞送至B細胞、DC (CD11c+)、特定而言B細胞周圍之彼等細胞，及/或脾之巨噬細胞、特定而言B細胞及/或DC (CD11c+)。
在一個實施例中，疫苗抗原在淋巴結及/或脾中表現，特定而言在上述淋巴結及/或脾之細胞中表現。
適於根據本揭示案使用之肽及蛋白質抗原通常包括如下肽或蛋白質，該肽或蛋白質包含SARS-CoV-2 S蛋白或其功能變異體之抗原決定基，以用於誘導免疫反應。該肽或蛋白質或抗原決定基可源自靶抗原，亦即針對其引發免疫反應之抗原。舉例而言，肽或蛋白質抗原或者肽或蛋白質抗原內所含之抗原決定基可為靶抗原或靶抗原之片段或變異體。靶抗原可為冠狀病毒S蛋白、特定而言SARS-CoV-2 S蛋白。
抗原分子或其加工產物(例如其片段)可結合至免疫效應細胞攜帶之抗原受體(諸如BCR或TCR)，或結合至抗體。
根據本揭示案藉由投與編碼肽及蛋白質抗原之RNA而提供給個體之肽及蛋白質抗原(亦即疫苗抗原)較佳導致在提供該肽或蛋白質抗原之個體中誘導免疫反應，例如體液及/或細胞免疫反應。該免疫反應較佳針對靶抗原，特定而言冠狀病毒S蛋白，特定而言SARS-CoV-2 S蛋白及/或流行性感冒HA蛋白。因此，疫苗抗原可包含靶抗原、其變異體或其片段。在一個實施例中，此片段或變異體在免疫學上等同於靶抗原。在本揭示案之上下文中，術語「抗原片段」或「抗原變異體」意指導致誘導免疫反應之劑，該免疫反應靶向抗原，亦即靶抗原。因此，疫苗抗原可對應於或可包含靶抗原，可對應於或可包含靶抗原之片段，或可對應於或可包含與靶抗原或其片段同源之抗原。因此，根據本揭示案，疫苗抗原可包含靶抗原之免疫原性片段或與靶抗原之免疫原性片段同源之胺基酸序列。根據本揭示案之「抗原免疫原性片段」較佳係指能夠誘導針對靶抗原之免疫反應之抗原片段。疫苗抗原可為重組抗原。
術語「在免疫學上等同」意指在免疫學上等同之分子，諸如在免疫學上等同之胺基酸序列展現出相同或基本上相同的免疫學性質及/或發揮相同或基本上相同的免疫學效應(例如針對免疫學效應之類型而言)。在本揭示案之上下文中，術語「在免疫學上等同」較佳針對用於免疫之抗原或抗原變異體之免疫學效應或性質使用。舉例而言，若胺基酸序列在暴露於個體之免疫系統時誘導具有與參考胺基酸序列反應之特異性之免疫反應，則該胺基酸序列在免疫學上等同於參考胺基酸序列。
如本文所用之「活化」或「刺激」係指已經充分刺激以誘導可偵測到之細胞增殖的免疫效應細胞(諸如T細胞)之狀態。活化亦可與信號傳導路徑之起始、誘導之細胞介素產生及可偵測到之效應功能相關。術語「活化之免疫效應細胞」尤其指經歷細胞分裂之免疫效應細胞。
術語「初免」係指如下過程，其中免疫效應細胞(諸如T細胞)與其特異性抗原首次接觸並導致分化成效應細胞(諸如效應T細胞)。
術語「選殖擴增」或「擴增」係指其中特定實體增加之過程。在本揭示案之上下文中，該術語較佳用於免疫學反應之背景中，其中免疫效應細胞由抗原刺激，增殖，且識別該抗原之特定免疫效應細胞擴增。較佳地，選殖擴增導致免疫效應細胞之分化。
術語「抗原」係指包含抗原決定基之劑，針對該抗原決定基可產生免疫反應。特定而言，術語「抗原」包括蛋白質及肽。在一個實施例中，抗原由免疫系統細胞(諸如抗原呈遞細胞，如樹突細胞或巨噬細胞)呈遞。在一個實施例中，抗原或其加工產物(諸如T細胞抗原決定基)與T細胞受體或B細胞受體結合，或與免疫球蛋白分子(諸如抗體)結合。因此，抗原或其加工產物可與抗體或T淋巴球(T細胞)特異性地反應。在一個實施例中，抗原係病毒抗原，諸如冠狀病毒S蛋白，例如SARS-CoV-2 S蛋白，且抗原決定基源自此抗原。
術語「病毒抗原」係指具有抗原性質、亦即能夠在個體中引起免疫反應之任何病毒組分。病毒抗原可為冠狀病毒S蛋白，例如SARS-CoV-2 S蛋白。病毒抗原可為流行性感冒蛋白，例如HA蛋白。
術語「在細胞表面上表現」或「與細胞表面締合」意指分子(諸如抗原)與細胞質膜締合且位於細胞質膜上，其中該分子中之至少一部分面向該細胞之細胞外空間且可自該細胞之外部進入，例如藉由位於該細胞外部之抗體。在此背景中，一部分為較佳至少4個、較佳至少8個、較佳至少12個、更佳至少20個胺基酸。該締合可為直接或間接的。舉例而言，該締合可藉由一或多個跨膜結構域、一或多個脂質錨定物，或藉由與可在細胞質膜之外小葉上發現的任何其他蛋白質、脂質、糖或其他結構相互作用。舉例而言，與細胞表面締合之分子可為具有細胞外部分之跨膜蛋白，或可為藉由與另一種作為跨膜蛋白之蛋白質相互作用而與細胞表面締合之蛋白質。
「細胞表面」或「細胞之表面」係根據其在此項技術中之正常含義使用，且因此包括蛋白質及其他分子可接近而結合之細胞外部。若抗原位於細胞表面且可由例如添加至細胞之抗原特異性抗體接近而結合，則該抗原在該細胞表面上表現。
本揭示案之上下文中之術語「細胞外部分」或「胞外域(exodomain)」係指分子(諸如蛋白質)之一部分，該部分面向細胞之細胞外空間且較佳可例如由位於細胞外之結合分子(諸如抗體)自該細胞外部接近。較佳地，該術語係指一或多個細胞外環或結構域或其片段。
術語「抗原決定基」係指由免疫系統識別之分子(諸如抗原)之一部分或片段。舉例而言，抗原決定基可由T細胞、B細胞或抗體識別。抗原之抗原決定基可包括該抗原之連續或不連續部分，且長度可為約5至約100，諸如約5至約50，更佳約8至約30，最佳約8至約25個胺基酸，例如，抗原決定基之長度可較佳為9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25個胺基酸。在一個實施例中，抗原決定基之長度為約10至約25個胺基酸。術語「抗原決定基」包括T細胞抗原決定基。
術語「T細胞抗原決定基」係指當在MHC分子之背景下呈遞時，由T細胞識別之蛋白質之一部分或片段。術語「主要組織相容性複合物」及縮寫「MHC」包括MHC I類及MHC II類分子，且係指存在於所有脊椎動物中之基因複合物。MHC蛋白或分子對於免疫反應中淋巴球與抗原呈遞細胞或患病細胞之間的信號傳導係重要的，其中MHC蛋白或分子結合肽抗原決定基且呈遞其用於T細胞上之T細胞受體識別。MHC編碼之蛋白質在細胞表面上表現，且向T細胞展示自身抗原(來自細胞自身之肽片段)及非自身抗原(例如入侵微生物之片段)。在I類MHC/肽複合物之情況下，結合肽通常長約8至約10個胺基酸，但更長或更短之肽可能係有效的。在II類MHC/肽複合物之情況下，結合肽通常長約10至約25個胺基酸且特定而言長約13至約18個胺基酸，而更長或更短之肽可能係有效的。
肽及蛋白質抗原之長度可為2-100個胺基酸，包括例如5個胺基酸、10個胺基酸、15個胺基酸、20個胺基酸、25個胺基酸、30個胺基酸、35個胺基酸、40個胺基酸、45個胺基酸或50個胺基酸。在一些實施例中，肽可大於50個胺基酸。在一些實施例中，肽可大於100個胺基酸。
肽或蛋白質抗原可為任何肽及蛋白質，其可誘導或增加免疫系統產生針對該肽或蛋白質之抗體及T細胞反應之能力。
在一個實施例中，疫苗抗原由免疫效應細胞識別。較佳地，若疫苗抗原由免疫效應細胞識別，則其能夠在適當共刺激信號存在下誘導攜帶識別疫苗抗原之抗原受體之免疫效應細胞之刺激、引發(priming)及/或擴增。在本揭示案之實施例之上下文中，疫苗抗原較佳呈遞或存在於細胞(較佳抗原呈遞細胞)之表面上。在一個實施例中，抗原由患病細胞(諸如病毒感染之細胞)呈遞。在一個實施例中，抗原受體係TCR，其結合至在MHC之背景中呈遞之抗原決定基。在一個實施例中，當由T細胞表現及/或存在於T細胞上時，TCR結合至細胞(諸如抗原呈遞細胞)呈遞之抗原導致該等T細胞之刺激、引發及/或擴增。在一個實施例中，當由T細胞表現及/或存在於T細胞上時，TCR對患病細胞上呈遞之抗原之結合導致患病細胞之細胞溶解及/或凋亡，其中該等T細胞較佳釋放細胞毒性因子，例如穿孔蛋白及顆粒酶。
一個實施例中，抗原受體係結合至抗原中抗原決定基之抗體或B細胞受體。在一個實施例中，抗體或B細胞受體結合至抗原之天然抗原決定基。 核酸
如本文所用，術語「多核苷酸」或「核酸」意欲包括DNA及RNA，諸如基因體DNA、cDNA、mRNA、重組產生及化學合成之分子。核酸可為單股或雙股的。RNA包括活體外轉錄之RNA (IVT RNA)或合成RNA。根據本揭示案，多核苷酸較佳係分離的。
核酸可包含在載體中。如本文所用之術語「載體」包括熟習此項技術者所已知之任何載體，包括質體載體、黏粒載體、噬菌體載體(諸如λ噬菌體)、病毒載體(諸如反轉錄病毒載體、腺病毒載體或桿狀病毒載體)或人工染色體載體(諸如細菌人工染色體(BAC)、酵母人工染色體(YAC)或P1人工染色體(PAC))。該等載體包括表現載體以及選殖載體。表現載體包含質體以及病毒載體，且通常含有在特定宿主生物體(例如細菌、酵母、植物、昆蟲或哺乳動物)或活體外表現系統中表現可操作連接之編碼序列所必需的期望編碼序列及適當DNA序列。選殖載體通常用於工程改造及擴增某一期望DNA片段，且可缺少表現期望DNA片段所需之功能序列。
在本揭示案之所有態樣之一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA在經治療個體之細胞(諸如抗原呈遞細胞)中表現，以提供疫苗抗原。
本文所闡述之核酸可為重組及/或分離之分子。
在本揭示案中，術語「RNA」係指包括核糖核苷酸殘基之核酸分子。在較佳實施例中，RNA含有全部或大部分核糖核苷酸殘基。如本文所用，「核糖核苷酸」係指在β-D-呋喃核糖基之2'位具有羥基之核苷酸。RNA涵蓋(但不限於)雙股RNA、單股RNA、分離之RNA，諸如部分純化之RNA、基本上純之RNA、合成RNA、重組產生之RNA，以及與天然RNA之差異在於一或多個核苷酸之添加、缺失、取代及/或改變的經修飾之RNA。此等改變可指向內部RNA核苷酸或向RNA之一或多個末端添加非核苷酸物質。本文亦考慮RNA中之核苷酸可為非標準核苷酸，諸如化學合成核苷酸或去氧核苷酸。對於本揭示案，該等改變之RNA視為天然RNA之類似物。
在本揭示案之某些實施例中，RNA係與編碼肽或蛋白質之RNA轉錄本相關之信使RNA (mRNA)。如此項技術中所確定的，mRNA通常含有5'非轉譯區(5'-UTR)、肽編碼區及3'非轉譯區(3'-UTR)。在一些實施例中，RNA藉由活體外轉錄或化學合成產生。在一個實施例中，使用DNA模板藉由活體外轉錄產生mRNA，其中DNA係指含有去氧核糖核苷酸之核酸。
在一個實施例中，RNA係活體外轉錄之RNA (IVT-RNA)，且可藉由適當DNA模板之活體外轉錄獲得。控制轉錄之啟動子可為任何RNA聚合酶之任何啟動子。用於活體外轉錄之DNA模板可藉由選殖核酸、特定而言cDNA，且將其引入至用於活體外轉錄之適當載體中來獲得。cDNA可藉由RNA之反轉錄獲得。
在本揭示案之某些實施例中，RNA係「複製子RNA」或簡稱為「複製子」，特定而言「自我複製RNA」或「自我擴增RNA」。在一個尤佳實施例中，複製子或自我複製RNA源自ssRNA病毒(特定而言正股ssRNA病毒，諸如阿爾法病毒)或包含源自該ssRNA病毒之元件。阿爾法病毒係正股RNA病毒之典型代表。阿爾法病毒在受感染細胞之細胞質中複製(關於阿爾法病毒生命週期之綜述，參見José等人，Future Microbiol., 2009，第4卷，第837-856頁)。許多阿爾法病毒之總基因體長度通常在11,000至12,000個核苷酸範圍內，且基因體RNA通常具有5’-帽及3’聚(A)尾。阿爾法病毒之基因體編碼非結構蛋白(參與病毒RNA之轉錄、修飾及複製以及蛋白質修飾)及結構蛋白(形成病毒顆粒)。基因體中通常有兩個開放閱讀框(ORF)。四種非結構蛋白(nsP1-nsP4)通常由始於基因體5'末端附近之第一ORF一起編碼，而阿爾法病毒結構蛋白由存在於第一ORF下游並延伸至基因體3’末端附近之第二ORF一起編碼。通常，第一ORF大於第二ORF，比率大約為2:1。在由阿爾法病毒感染之細胞中，僅編碼非結構蛋白之核酸序列自基因體RNA轉譯，而編碼結構蛋白之遺傳資訊可自亞基因體轉錄本轉譯，該亞基因體轉錄本係類似於真核信使RNA之RNA分子(mRNA；Gould等人，2010, Antiviral Res.，第87卷，第111-124頁)。感染後，亦即在病毒生命週期之早期階段，(+)股基因體RNA直接像信使RNA一樣用於轉譯編碼非結構多蛋白(nsP1234)之開放閱讀框。已提出阿爾法病毒源性載體用於將外源遺傳資訊遞送至靶細胞或靶生物體中。在簡單方法中，編碼阿爾法病毒結構蛋白之開放閱讀框由編碼所關注蛋白質之開放閱讀框替代。基於阿爾法病毒之反式複製系統依賴於兩個單獨核酸分子上之阿爾法病毒核苷酸序列元件：一個核酸分子編碼病毒複製酶，且另一核酸分子能夠由該複製酶反式複製(因此命名為反式複製系統)。反式複製需要在給定宿主細胞中同時存在該兩種核酸分子。能夠由複製酶反式複製之核酸分子必須包含某些阿爾法病毒序列元件，以容許由阿爾法病毒複製酶識別並合成RNA。
在一個實施例中，本文所闡述之RNA可具有經修飾之核苷。在一些實施例中，RNA包含代替至少一個(例如每個)尿苷之經修飾核苷。
如本文所用，術語「尿嘧啶」描述可存在於RNA核酸中之核鹼基中之一者。尿嘧啶之結構為： 。
如本文所用，術語「尿苷」描述可存在於RNA中之核苷中之一者。尿苷之結構為： 。
UTP (尿苷5’-三磷酸)具有以下結構： 。
假-UTP (假尿苷5’-三磷酸)具有以下結構： 。
「假尿苷」係作為尿苷異構物之經修飾核苷之一個實例，其中尿嘧啶經由碳-碳鍵而非氮-碳糖苷鍵連接至戊糖環上。
另一例示性經修飾之核苷為N1-甲基-假尿苷(m1Ψ)，其具有以下結構： 。
N1-甲基-假-UTP具有以下結構： 。
另一例示性經修飾之核苷為5-甲基-尿苷(m5U)，其具有以下結構： 。
在一些實施例中，本文所闡述RNA中之一或多個尿苷由經修飾之核苷替代。在一些實施例中，經修飾之核苷為經修飾之尿苷。
在一些實施例中，RNA包含代替至少一個尿苷之經修飾之核苷。在一些實施例中，RNA包含代替每個尿苷之經修飾之核苷。
在一些實施例中，經修飾之核苷獨立地選自假尿苷(ψ)、N1-甲基-假尿苷(m1ψ)及5-甲基-尿苷(m5U)。在一些實施例中，經修飾之核苷包含假尿苷(ψ)。在一些實施例中，經修飾之核苷包含N1-甲基-假尿苷(m1ψ)。在一些實施例中，經修飾之核苷包含5-甲基-尿苷(m5U)。在一些實施例中，RNA可包含一種以上類型之經修飾之核苷，且經修飾之核苷獨立地選自假尿苷(ψ)、N1-甲基-假尿苷(m1ψ)及5-甲基-尿苷(m5U)。在一些實施例中，經修飾之核苷包含假尿苷(ψ)及N1-甲基-假尿苷(m1ψ)。在一些實施例中，經修飾之核苷包含假尿苷(ψ)及5-甲基-尿苷(m5U)。在一些實施例中，經修飾之核苷包含N1-甲基-假尿苷(m1ψ)及5-甲基-尿苷(m5U)。在一些實施例中，經修飾之核苷包含假尿苷(ψ)、N1-甲基-假尿苷(m1ψ)及5-甲基-尿苷(m5U)。
在一些實施例中，替代RNA中一或多個(例如全部)尿苷之經修飾之核苷可為以下中之任一或多者：3-甲基-尿苷(m 3U)、5-甲氧基-尿苷(mo 5U)、5-氮雜-尿苷、6-氮雜-尿苷、2-硫基-5-氮雜-尿苷、2-硫基-尿苷(s 2U)、4-硫基-尿苷(s 4U)、4-硫基-假尿苷、2-硫基-假尿苷、5-羥基-尿苷(ho 5U)、5-胺基烯丙基-尿苷、5-鹵基-尿苷(例如5-碘-尿苷或5-溴-尿苷)、尿苷5-氧基乙酸(cmo 5U)、尿苷5-氧基乙酸甲基酯(mcmo 5U)、5-羧基甲基-尿苷(cm 5U)、1-羧基甲基-假尿苷、5-羧基羥基甲基-尿苷(chm 5U)、5-羧基羥基甲基-尿苷甲基酯(mchm 5U)、5-甲氧基羰基甲基-尿苷(mcm 5U)、5-甲氧基羰基甲基-2-硫基-尿苷(mcm 5s 2U)、5-胺基甲基-2-硫基-尿苷(nm 5s 2U)、5-甲基胺基甲基-尿苷(mnm 5U)、1-乙基-假尿苷、5-甲基胺基甲基-2-硫基-尿苷(mnm 5s 2U)、5-甲基胺基甲基-2-硒基-尿苷(mnm 5se 2U)、5-胺甲醯基甲基-尿苷(ncm 5U)、5-羧基甲基胺基甲基-尿苷(cmnm 5U)、5-羧基甲基胺基甲基-2-硫基-尿苷(cmnm 5s 2U)、5-丙炔基-尿苷、1-丙炔基-假尿苷、5-牛磺酸甲基-尿苷(τm 5U)、1-牛磺酸甲基-假尿苷、5-牛磺酸甲基-2-硫基-尿苷(τm5s2U)、1-牛磺酸甲基-4-硫基-假尿苷)、5-甲基-2-硫基-尿苷(m 5s 2U)、1-甲基-4-硫基-假尿苷(m 1s 4ψ)、4-硫基-1-甲基-假尿苷、3-甲基-假尿苷(m 3ψ)、2-硫基-1-甲基-假尿苷、1-甲基-1-去氮-假尿苷、2-硫基-1-甲基-1-去氮-假尿苷、二氫尿苷(D)、二氫假尿苷、5,6-二氫尿苷、5-甲基-二氫尿苷(m 5D)、2-硫基-二氫尿苷、2-硫基-二氫假尿苷、2-甲氧基-尿苷、2-甲氧基-4-硫基-尿苷、4-甲氧基-假尿苷、4-甲氧基-2-硫基-假尿苷、N1-甲基-假尿苷、3-(3-胺基-3-羧基丙基)尿苷(acp 3U)、1-甲基-3-(3-胺基-3-羧基丙基)假尿苷(acp 3ψ)、5-(異戊烯基胺基甲基)尿苷(inm 5U)、5-(異戊烯基胺基甲基)-2-硫基-尿苷(inm 5s 2U)、α-硫基-尿苷、2'-O-甲基-尿苷(Um)、5,2'-O-二甲基-尿苷(m 5Um)、2'-O-甲基-假尿苷(ψm)、2-硫基-2'-O-甲基-尿苷(s 2Um)、5-甲氧基羰基甲基-2'-O-甲基-尿苷(mcm 5Um)、5-胺甲醯基甲基-2'-O-甲基-尿苷(ncm 5Um)、5-羧基甲基胺基甲基-2'-O-甲基-尿苷(cmnm 5Um)、3,2'-O-二甲基-尿苷(m 3Um)、5-(異戊烯基胺基甲基)-2'-O-甲基-尿苷(inm 5Um)、1-硫基-尿苷、去氧胸苷、2'-F-阿糖-尿苷、2'-F-尿苷、2'-OH-阿糖-尿苷、5-(2-碳甲氧基乙烯基)尿苷、5-[3-(1-E-丙烯基胺基)尿苷或此項技術中已知之任何其他經修飾之尿苷。
在一個實施例中，RNA包含其他經修飾之核苷或包含進一步修飾之核苷，例如經修飾之胞苷。舉例而言，在一個實施例中，在RNA中，5-甲基胞苷部分或完全、較佳完全取代胞苷。在一個實施例中，RNA包含5-甲基胞苷及選自假尿苷(ψ)、N1-甲基-假尿苷(m1ψ)及5-甲基-尿苷(m5U)中之一或多者。在一個實施例中，RNA包含5-甲基胞苷及N1-甲基-假尿苷(m1ψ)。在一些實施例中，RNA包含代替每個胞苷之5-甲基胞苷及代替每個尿苷之N1-甲基-假尿苷(m1ψ)。 5’ 帽
在一些實施例中，本文所闡述之RNA包含5’帽。天然真核mRNA包含經由5'至5'-三磷酸橋與mRNA連接之7-甲基鳥苷帽，從而產生帽0結構(m7GpppN)。在大多數真核mRNA及一些病毒mRNA中，進一步修飾可發生在第一及隨後核苷酸之2'-羥基(2’-OH) (例如，2'-羥基可經甲基化以形成2'-O-Me)處，從而分別產生「帽1」及「帽2」 5’端。Diamond等人(2014) Cytokine & growth Factor Reviews, 25:543-550報導，帽0-mRNA無法像帽1-mRNA那般有效地轉譯，其中在mRNA 5’端倒數第二個位置處之2'-O-Me之作用係決定性的。已顯示，缺少2'-O-met觸發先天性免疫且使IFN反應活化。Daffis等人(2010) Nature, 468:452-456；及Züst等人(2011) Nature Immunology, 12:137-143。
RNA加帽經充分研究，且例如闡述於Decroly E等人(2012) Nature Reviews 10: 51-65；及Ramanathan A.等人(2016) Nucleic Acids Res; 44(16): 7511-7526中，該等文獻各自之全部內容係以引用的方式併入本文中。舉例而言，在一些實施例中，可適用於本發明背景中之5’-帽結構為帽0 (第一核鹼基之甲基化，例如m7GpppN)、帽1 (m7GpppN之鄰近核苷酸之核糖的額外甲基化)、帽2 (m7GpppN下游第2個核苷酸之核糖的額外甲基化)、帽3 (m7GpppN下游第3個核苷酸之核糖的額外甲基化)、帽4 (m7GpppN下游第4個核苷酸之核糖的額外甲基化)、ARCA (「抗反向帽類似物」)、經修飾之ARCA (例如硫代磷酸酯修飾之ARCA)、肌苷、N1-甲基-鳥苷、2’-氟-鳥苷、7-去氮-鳥苷、8-側氧基-鳥苷、2-胺基-鳥苷、LNA-鳥苷及2-疊氮基-鳥苷。
在一個實施例中，本揭示案之RNA不具有未加帽之5'-三磷酸。在一個實施例中，RNA可經5'-帽類似物修飾。
術語「5'-帽」係指在RNA (例如mRNA)分子之5'端上發現的結構，且通常包括經由5'至5'-三磷酸鍵聯(亦稱為Gppp或G(5')ppp(5'))連結至RNA (例如mRNA)之鳥苷核苷酸。在一些實施例中，5’帽中所包括之鳥苷核苷可經修飾，例如藉由在鹼基(鳥嘌呤)上之一或多個位置(例如在7位)甲基化，及/或藉由在核糖之一或多個位置甲基化。在一些實施例中，5’帽中所包括之鳥苷核苷包含在核糖處之3’O甲基化(3’OMeG)。在一個實施例中，此鳥苷在7位經甲基化。在一些實施例中，提供具有5'-帽或5'-帽類似物之RNA可藉由活體外轉錄來達成，其中5'-帽共轉錄地表現至RNA股中，或可使用加帽酶在轉錄後連接至RNA上。在一些實施例中，與用適當參考比較物進行共轉錄加帽相比，用所揭示之帽進行共轉錄加帽提高RNA之加帽效率。在一些實施例中，提高加帽效率可增加RNA之轉譯效率及/或轉譯速率，且/或增加所編碼多肽之表現。在一些實施例中，對多核苷酸之改變產生不可水解之帽結構，該帽結構可例如防止脫帽且延長RNA半衰期。
在一些實施例中，T7 RNA聚合酶偏好G作為起始位點。因此，在一些此等實施例中，本揭示案提供帽(例如本文所闡述之三核苷酸及四核苷酸帽)，其中該三核苷酸(例如N 2)或四核苷酸帽(例如N 3)之3'端為G。
在一些實施例中，應瞭解，本文所提供之所有化合物或結構(例如5’帽)均涵蓋包含適宜相對離子(例如Na +)之游離鹼或鹽形式(例如Na +鹽)。繪示為鹽之化合物或結構(例如5’帽)亦涵蓋游離鹼且包括適宜相對離子(例如Na +)。
在一些實施例中，所用之5’帽為帽0、帽1或帽2結構。例如，參見Ramanathan A等人之圖1，及Decroly E等人之圖1，該等文獻各自係以全文引用的方式併入本文中。例如，參見Ramanathan A等人之圖1，及Decroly E等人之圖1，該等文獻各自係以全文引用的方式併入本文中。在一些實施例中，本文所闡述之RNA包含帽1結構。在一些實施例中，本文所闡述之RNA包含帽2結構。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA包含帽0結構。在一些實施例中，帽0結構包含在鳥嘌呤之7位甲基化之鳥苷核苷((m 7)G)。在一些實施例中，此一帽0結構經由5'-至5'-三磷酸鍵聯連結至RNA，且在本文中亦稱為(m 7)Gppp。在一些實施例中，帽0結構包含在鳥苷核糖之2’位甲基化之鳥苷核苷。在一些實施例中，帽0結構包含在鳥苷核糖之3’位甲基化之鳥苷核苷。在一些實施例中，5’帽中所包括之鳥苷核苷包含在鳥嘌呤7位及在核糖2’位之甲基化((m 2 7,2’-O)G)。在一些實施例中，5’帽中所包括之鳥苷核苷包含在鳥嘌呤7位及在核糖2’位之甲基化((m 2 7,3’-O)G)。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA包含帽1結構。在一些實施例中，帽1結構包含在鳥嘌呤之7位甲基化之鳥苷核苷((m 7)G)且視情況在核糖之2’或3’位甲基化之鳥苷核苷，以及RNA中2’O甲基化之第一核苷酸((m 2’-O)N 1)。在一些實施例中，帽1結構包含在鳥嘌呤之7位甲基化之鳥苷核苷((m 7)G)且在核糖之3’位甲基化之鳥苷核苷，以及RNA中2’O甲基化之第一核苷酸((m 2’-O)N 1)。在一些實施例中，帽1結構經由5'至5'-三磷酸鍵聯連結至RNA，且在本文中亦稱為例如((m 7)Gppp( 2'-O)N 1)或(m 2 7,3’-O)Gppp( 2'-O)N 1)，其中N 1係如本文所定義及闡述。在一些實施例中，帽1結構包含第二核苷酸N 2，其位於2位且係選自A、G、C或U，例如(m 7)Gppp( 2'-O)N 1pN 2或(m 2 7,3’-O)Gppp( 2'-O)N 1pN 2，其中N 1及N 2中之每一者係如本文所定義及闡述。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA包含帽2結構。在一些實施例中，帽2結構包含在鳥嘌呤之7位甲基化之鳥苷核苷((m 7)G)且視情況在核糖之2’或3’位甲基化之鳥苷核苷，以及RNA中2’O甲基化之第一及第二核苷酸((m 2’-O)N 1p(m 2’-O)N 2)。在一些實施例中，帽2結構包含在鳥嘌呤之7位甲基化之鳥苷核苷((m 7)G)且在核糖之3’位甲基化之鳥苷核苷，以及RNA中2’O甲基化之第一及第二核苷酸。在一些實施例中，帽2結構經由5'-至5'-三磷酸鍵聯連結至RNA，且在本文中亦稱為例如((m 7)Gppp( 2'-O)N 1p( 2'-O)N 2)或(m 2 7,3’-O)Gppp( 2'-O)N 1p( 2'-O)N 2)，其中N 1及N 2中之每一者係如本文所定義及闡述。
在一些實施例中，5’帽為二核苷酸帽結構。在一些實施例中，5’帽為包含N 1之二核苷酸帽結構，其中N 1係如本文所定義及闡述。在一些實施例中，5’帽為二核苷酸帽G*N 1，其中N 1係如上文及此處所定義，且： G*包含式(I)結構： (I) 或其鹽， 其中 每一R 2及R 3為-OH或-OCH 3；且 X為O或S。
在一些實施例中，R 2為-OH。在一些實施例中，R 2為-OCH 3。在一些實施例中，R 3為-OH。在一些實施例中，R 3為-OCH 3。在一些實施例中，R 2為-OH且R 3為-OH。在一些實施例中，R 2為-OH且R 3為-CH 3。在一些實施例中，R 2為-CH 3且R 3為-OH。在一些實施例中，R 2為-CH 3且R 3為-CH 3。
在一些實施例中，5’帽中所包括之鳥苷核苷包含在鳥嘌呤7位之甲基化及在核糖處之3’ O甲基化(m7(3’OMeG))。應理解，上一段中所用之符號(例如「(m 2 7,3’-O)G」或「m7(3’OMeG)」)適用於本文所闡述之其他結構。
在一些實施例中，5’帽為二核苷酸帽0結構(例如(m 7)GpppN 1、(m 2 7,2’-O)GpppN 1、(m 2 7,3’-O)GpppN 1、(m 7)GppSpN 1、(m 2 7,2’-O)GppSpN 1或(m 2 7,3’-O)GppSpN 1)，其中N 1係如本文所定義及闡述。在一些實施例中，5’帽為二核苷酸帽0結構(例如(m 7)GpppN 1、(m 2 7,2’-O)GpppN 1、(m 2 7,3’-O)GpppN 1、(m 7)GppSpN 1、(m 2 7,2’-O)GppSpN 1或(m 2 7,3’-O)GppSpN 1)，其中N 1為G。在一些實施例中，5’帽為二核苷酸帽0結構(例如(m 7)GpppN 1、(m 2 7,2’-O)GpppN 1、(m 2 7,3’-O)GpppN 1、(m 7)GppSpN 1、(m 2 7,2’-O)GppSpN 1或(m 2 7,3’-O)GppSpN 1)，其中N 1為A、U或C。在一些實施例中，5’帽為二核苷酸帽1結構(例如(m 7)Gppp(m 2’-O)N 1、(m 2 7,2’-O)Gppp(m 2’-O)N 1、(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2’-O)N 1、(m 7)GppSp(m 2’-O)N 1、(m 2 7,2’-O)GppSp(m 2’-O)N 1或(m 2 7,3’-O)GppSp(m 2’-O)N 1)，其中N 1係如本文所定義及闡述。在一些實施例中，5’帽係選自由以下組成之群：(m 7)GpppG (「Ecap0」)、(m 7)Gppp(m 2’-O)G (「Ecap1」)、(m 2 7,3’-O)GpppG (「ARCA」或「D1」)及(m 2 7,2’-O)GppSpG (「β-S-ARCA」)。在一些實施例中，5’帽為(m 7)GpppG (「Ecap0」)，其具有如下結構： 或其鹽。
在一些實施例中，5’帽為(m 7)Gppp(m 2’-O)G (「Ecap1」)，其具有如下結構： 或其鹽。
在一些實施例中，5’帽為(m 2 7,3’-O)GpppG (「ARCA」或「D1」)，其具有如下結構： 或其鹽。
在一些實施例中，5’帽為(m 2 7,2’-O)GppSpG (「β-S-ARCA」)，其具有如下結構： 或其鹽。
在一些實施例中，5’帽為三核苷酸帽結構。在一些實施例中，5’帽為包含N 1pN 2之三核苷酸帽結構，其中N 1及N 2係如本文所定義及闡述。在一些實施例中，5’帽為三核苷酸帽G*N 1pN 2，其中N 1及N 2係如上文及此處所定義，且： G*包含式(I)結構： (I) 或其鹽，其中R 2、R 3及X係如本文所定義及闡述。
在一些實施例中，5’帽為三核苷酸帽0結構(例如(m 7)GpppN 1pN 2、(m 2 7,2’-O)GpppN 1pN 2或(m 2 7,3’-O)GpppN 1pN 2)，其中N 1及N 2係如本文所定義及闡述)。在一些實施例中，5’帽為三核苷酸帽1結構(例如(m 7)Gppp(m 2’-O)N 1pN 2、(m 2 7,2’-O)Gppp(m 2’-O)N 1pN 2、(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2’-O)N 1pN 2)，其中N 1及N 2係如本文所定義及闡述。在一些實施例中，5’帽為三核苷酸帽2結構(例如(m 7)Gppp(m 2’-O)N 1p(m 2’-O)N 2、(m 2 7,2’-O)Gppp(m 2’-O)N 1p(m 2’-O)N 2、(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2’-O)N 1p(m 2’-O)N 2)，其中N 1及N 2係如本文所定義及闡述。在一些實施例中，5’帽係選自由以下組成之群：(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2’-O)ApG (「CleanCap AG 3’ OMe」、「CC413」)、(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2’-O)GpG (「CleanCap GG」)、(m 7)Gppp(m 2’-O)ApG、(m 7)Gppp(m 2’-O)GpG、(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2 6,2’-O)ApG及(m 7)Gppp(m 2’-O)ApU。在一些實施例中，5’帽係選自由以下組成之群：(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2’-O)ApG (「CleanCap AG」、「CC413」)、(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2’-O)GpG (「CleanCap GG」)、(m 7)Gppp(m 2’-O)ApG及(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2 6,2’-O)ApG、(m 7)Gppp(m 2’-O)ApU及(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2’-O)CpG。
在一些實施例中，5’帽為(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2’-O)ApG (「CleanCap AG 3’ OMe」、「CC413」)，其具有如下結構： 或其鹽。
在一些實施例中，5’帽為(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2’-O)GpG (「CleanCap GG」)，其具有如下結構： 或其鹽。
在一些實施例中，5’帽為(m 7)Gppp(m 2’-O)ApG，其具有如下結構： 或其鹽。
在一些實施例中，5’帽為(m 7)Gppp(m 2’-O)GpG，其具有如下結構： 或其鹽。
在一些實施例中，5’帽為(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2 6,2’-O)ApG，其具有如下結構： 或其鹽。
在一些實施例中，5’帽為(m 7)Gppp(m 2’-O)ApU，其具有如下結構： 或其鹽。
在一些實施例中，5’帽為(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2’-O)CpG，其具有如下結構： 或其鹽。
在一些實施例中，5’帽為四核苷酸帽結構。在一些實施例中，5’帽為包含N 1pN 2pN 3之四核苷酸帽結構，其中N 1、N 2及N 3係如本文所定義及闡述。在一些實施例中，5’帽為四核苷酸帽G*N 1pN 2pN 3，其中N 1、N 2及N 3係如上文及此處所定義，且： G*包含式(I)結構： (I) 或其鹽，其中R 2、R 3及X係如本文所定義及闡述。
在一些實施例中，5’帽為四核苷酸帽0結構(例如(m 7)GpppN 1pN 2pN 3、(m 2 7,2’-O)GpppN 1pN 2pN 3或(m 2 7,3’-O)GpppN 1N 2pN 3)，其中N 1、N 2及N 3係如本文所定義及闡述)。在一些實施例中，5’帽為四核苷酸帽1結構(例如(m 7)Gppp(m 2’-O)N 1pN 2pN 3、(m 2 7,2’-O)Gppp(m 2’-O)N 1pN 2pN 3、(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2’-O)N 1pN 2N 3)，其中N 1、N 2及N 3係如本文所定義及闡述。在一些實施例中，5’帽為四核苷酸帽2結構(例如(m 7)Gppp(m 2’-O)N 1p(m 2’-O)N 2pN 3、(m 2 7,2’-O)Gppp(m 2’-O)N 1p(m 2’-O)N 2pN 3、(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2’-O)N 1p(m 2’-O)N 2pN 3)，其中N 1、N 2及N 3係如本文所定義及闡述。在一些實施例中，5’帽係選自由以下組成之群：(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2’-O)Ap(m 2’-O)GpG、(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2’-O)Gp(m 2’-O)GpC、(m 7)Gppp(m 2’-O)Ap(m 2’-O)UpA及(m 7)Gppp(m 2’-O)Ap(m 2’-O)GpG。
在一些實施例中，5’帽為(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2’-O)Ap(m 2’-O)GpG，其具有如下結構： 或其鹽。
在一些實施例中，5’帽為(m 2 7,3’-O)Gppp(m 2’-O)Gp(m 2’-O)GpC，其具有如下結構： 或其鹽。
在一些實施例中，5’帽為(m 7)Gppp(m 2’-O)Ap(m 2’-O)UpA，其具有如下結構： 或其鹽。
在一些實施例中，5’帽為(m 7)Gppp(m 2’-O)Ap(m 2’-O)GpG，其具有如下結構： 或其鹽。
在一些實施例中，mRNA包含帽0、帽1或帽2，較佳包含帽1或帽2，更佳包含帽1。根據本揭示案，術語「帽0」包含結構「m 7GpppN」，其中N為在2'位帶有OH部分之任何核苷。根據本揭示案，術語「帽1」包含結構「m 7GpppNm」，其中Nm為在2'位帶有OCH 3部分之任何核苷。根據本揭示案，術語「帽2」包含結構「m 7GpppNmNm」，其中每個Nm獨立地為在2'位帶有OCH 3部分之任何核苷。
在一些實施例中，RNA之構建組元帽為m 2 7,3’-OGppp(m 1 2’-O)ApG (有時亦稱為m 2 7,3`OG(5’)ppp(5’)m 2’-OApG)，其具有以下結構： 。
以下為例示性帽1 RNA，其包含RNA及m 2 7,3`OG(5’)ppp(5’)m 2’-OApG： 。
以下為另一例示性帽1 RNA (無帽類似物)： 。
在一些實施例中，利用「帽0」結構，在一個實施例中，使用具有以下結構之帽類似物抗反向帽(ARCA帽(m 2 7,3`OG(5’)ppp(5’)G))修飾RNA： 。
以下為包含RNA及m 2 7,3`OG(5’)ppp(5’)G之例示性帽0 RNA： 。
在一些實施例中，使用具有以下結構之帽類似物β-S-ARCA (m 2 7,2`OG(5’)ppSp(5’)G)產生「帽0」結構： 。
以下為包含β-S-ARCA (m 2 7,2`OG(5’)ppSp(5’)G)及RNA之例示性帽0 RNA： 。
β-S-ARCA之「D1」非鏡像異構物或「β-S-ARCA(D1)」係β-S-ARCA之非鏡像異構物，其與β-S-ARCA之D2非鏡像異構物(β-S-ARCA(D2))相比首先在HPLC管柱上溶析，且因此展現出較短之滯留時間(參見WO 2011/015347，以引用方式併入本文中)。
尤佳帽為β-S-ARCA(D1) (m 2 7,2'-OGppSpG)或m 2 7,3’-OGppp(m 1 2’-O)ApG。
在一些實施例中，RNA包含WO2023/073190A1或WO2021/214204中所揭示之5’帽、帽近端序列(例如位於RNA 5’末端之序列)或其組合，該等案件之內容係以全文引用的方式併入本文中。舉例而言，在一些實施例中，RNA在其5’末端包含AGAAU。在一些實施例中，RNA在其5’末端包含AGCAC。 5’ UTR 及3’ UTR
在一些實施例中，根據本揭示案之RNA包含5'-UTR及/或3'-UTR。術語「非轉譯區」或「UTR」係指DNA分子中經轉錄但不轉譯成胺基酸序列之區域，或RNA分子(諸如mRNA分子)中之相應區域。非轉譯區(UTR)可存在於開放閱讀框之5' (上游)(5'-UTR)及/或開放閱讀框之3' (下游)(3'-UTR)。若存在，5'-UTR位於RNA之5'端，處於蛋白質編碼區之起始密碼子上游。5'-UTR位於5'-帽(若存在)之下游，例如與5'-帽直接相鄰。若存在，3'-UTR位於RNA之3'端，處於蛋白質編碼區之終止密碼子下游，但術語「3'-UTR」較佳不包括聚(A)序列。因此，3'-UTR位於聚(A)序列(若存在)之上游，例如與聚(A)序列直接相鄰。
例示性5’ UTR包括人類α球蛋白(hAg) 5’UTR或其片段、TEV 5’ UTR或其片段、HSP70 5’ UTR或其片段或者c-Jun 5’ UTR或其片段。
在一些實施例中，本文所揭示之RNA包含hAg 5’ UTR序列或其片段。
在一些實施例中，RNA包含5’-UTR，該5’-UTR包含SEQ ID NO: 12之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 12之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列。
在一些實施例中，本文所揭示之RNA包含3’ UTR，該3’ UTR包含來自分裂之胺基末端增強子(AES)信使RNA之第一序列(「F元件」)及/或來自粒線體編碼之12S核糖體RNA之第二序列(「I元件」)。
在一些實施例中，RNA包含3’-UTR，該3’-UTR包含SEQ ID NO: 13之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 13之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列。
尤佳5’-UTR包含SEQ ID NO: 12之核苷酸序列。尤佳3’-UTR包含SEQ ID NO: 13之核苷酸序列。
在一些實施例中，3’ UTR包含與SEQ ID NO: 13至少80%一致之序列，其緊鄰編碼抗原性多肽之序列且位於其下游。在一些實施例中，3’ UTR包含與SEQ ID NO: 13至少80%一致之序列，且包含位於編碼抗原性多肽之序列與同SEQ ID NO: 13至少80%一致之序列之間的間插序列。在一些實施例中，位於編碼抗原性多肽之序列與同SEQ ID NO: 13至少80%一致之序列之間的間插序列在5'至3’方向上包含序列CUCGAG。在一些實施例中，位於編碼抗原性多肽之序列與同SEQ ID NO: 13至少80%一致之序列之間的間插序列在5'至3’方向上包含序列GGAUCCGAU。
在一些實施例中，3’ UTR鄰近與SEQ ID NO: 14至少80%一致之聚A序列(例如緊鄰且位於其上游)。在一些實施例中，3’ UTR包含間插序列，該間插序列位於同SEQ ID NO: 13至少80%一致之序列與聚A尾(例如同SEQ ID NO: 14至少80%一致之序列)之間。在一些實施例中，位於同SEQ ID NO: 13至少80%一致之序列與聚A尾之間的間插序列在5'至3’方向上包含序列CUXGAGCUAGC (SEQ ID NO: 176)，其中X為G、C、A或U。在一些實施例中，位於同SEQ ID NO: 13至少80%一致之序列與聚A尾之間的間插序列在5'至3’方向上包含序列GAGACCUGGUCCAGAGUCGCUAGCCGCGUCGCU (SEQ ID NO: 177)。
在一些實施例中，RNA包含如WO2021/213924、WO2023/285560A1或WO2021/214204中所闡述之非編碼元件，該等案件各自之內容係以全文引用的方式併入本文中。 聚 (A) 序列
在一些實施例中，根據本揭示案之RNA包含3'-聚(A)序列。
如本文所用，術語「聚(A)序列」或「聚A尾」係指通常位於RNA分子3'端之不間斷或間斷之腺苷酸殘基序列。聚(A)序列為熟習此項技術者所已知，且可跟隨在本文所闡述RNA中之3’-UTR之後。不間斷之聚(A)序列之特徵在於連續腺苷酸殘基。在自然界中，不間斷之聚(A)序列係典型的。本文所揭示之RNA可具有在轉錄後藉由不依賴於模板之RNA聚合酶連接至RNA之游離3'端的聚(A)序列，或由DNA編碼且藉由模板依賴性RNA聚合酶轉錄之聚(A)序列。
已證明，約120個A核苷酸之聚(A)序列對經轉染真核細胞中之RNA水準以及自存在於聚(A)序列上游(5’)之開放讀碼框轉譯之蛋白質水準具有有益影響( Holtkamp等人，2006, Blood，第108卷，第4009-4017頁)。
聚(A)序列可具有任何長度。在一些實施例中，聚(A)序列包含至少20個、至少30個、至少40個、至少80個或至少100個且最多500個、最多400個、最多300個、最多200個或最多150個A核苷酸，且特定而言約120個A核苷酸，或基本由該等數量之A核苷酸組成，或由該等數量之A核苷酸組成。在本文中，「基本上由......組成」意指聚(A)序列中之大多數核苷酸，通常按數量計至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%之聚(A)序列中之核苷酸係A核苷酸，但允許剩餘的核苷酸係除A核苷酸外之核苷酸，諸如U核苷酸(尿苷酸)、G核苷酸(鳥苷酸)或C核苷酸(胞苷酸)。在本文中，「由......組成」意指聚(A)序列中之所有核苷酸，亦即按數量計100%之聚(A)序列中之核苷酸係A核苷酸。術語「A核苷酸」或「A」係指腺苷酸。
在一些實施例中，基於在與編碼股互補之股中包含重複dT核苷酸(去氧胸苷酸)之DNA模板，在RNA轉錄期間，例如在活體外轉錄之RNA之製備期間，連接聚(A)序列。編碼聚(A)序列(編碼股)之DNA序列稱為聚(A)盒。
在一些實施例中，存在於DNA編碼股中之聚(A)盒基本上由dA核苷酸組成，但由四種核苷酸(dA、dC、dG及dT)之隨機序列中斷。此隨機序列之長度可為5至50個、10至30個或10至20個核苷酸。WO 2016/005324 A1中揭示此盒，該案係以引用方式併入本文中。WO 2016/005324 A1中所揭示之任何聚(A)盒均可用於本揭示案。涵蓋如下聚(A)盒：其基本上由dA核苷酸組成，但由具有四種核苷酸(dA、dC、dG、dT)之等同分佈且具有例如5至50個核苷酸長度之隨機序列中斷，在DNA水準上顯示質體DNA在大腸桿菌( E. coli)中之恆定擴增，且在RNA水準上仍同與支持RNA穩定性及轉譯效率相關之有益性質相關。因此，在一些實施例中，本文所闡述RNA分子中所含之聚(A)序列基本上由A核苷酸組成，但由四種核苷酸(A、C、G、U)之隨機序列中斷。此隨機序列之長度可為5至50個、10至30個或10至20個核苷酸。
在一些實施例中，除A核苷酸之外，無核苷酸位於聚(A)序列之3'端側翼，亦即聚(A)序列在其3'端未由除A外之核苷酸遮蔽或後跟除A外之核苷酸。
在一些實施例中，聚(A)序列可包含至少20個、至少30個、至少40個、至少80個或至少100個且最多500個、最多400個、最多300個、最多200個或最多150個核苷酸。在一些實施例中，聚(A)序列可基本上由至少20個、至少30個、至少40個、至少80個或至少100個至最多500個、最多400個、最多300個、最多200個或最多150個核苷酸組成。在一些實施例中，聚(A)序列可由至少20個、至少30個、至少40個、至少80個或至少100個至最多500個、最多400個、最多300個、最多200個或最多150個核苷酸組成。在一些實施例中，聚(A)序列包含至少100個核苷酸。在一些實施例中，聚(A)序列包含約150個核苷酸。在一些實施例中，聚(A)序列包含約120個核苷酸。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA中所包括之聚(A)序列係中斷的聚(A)序列，例如如WO2016/005324中所闡述，其全部內容出於本文所闡述之目的係以引用方式併入本文中。在一些實施例中，聚(A)序列包含一段至少20個腺苷殘基(包括例如至少30、至少40、至少50、至少60、至少70或更多個腺苷殘基)，之後為連接體序列(例如在一些實施例中包含非A核苷酸)及另一段至少20個腺苷殘基(包括例如至少30、至少40、至少50、至少60、至少70或更多個腺苷殘基)。在一些實施例中，此一連接體序列可為3-50個核苷酸之長度，或5-25個核苷酸之長度，或10-15個核苷酸之長度。在一些實施例中，聚(A)序列包含一段約30個腺苷殘基，之後為長度為約5-15個核苷酸(例如在一些實施例中包含非A核苷酸)之連接體序列及另一段約70個腺苷殘基。
在一些實施例中，RNA包含聚(A)序列，該序列包含SEQ ID NO: 14之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 14之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列。
尤佳之聚(A)序列包含SEQ ID NO: 14之核苷酸序列。
根據本揭示案，疫苗抗原較佳以單股、5'-加帽mRNA之形式投與，該RNA在進入投與該mRNA之個體之細胞時轉譯成各別蛋白質。較佳地，RNA含有針對RNA在穩定性及轉譯效率方面之最大功效而最佳化之結構元件(5'-帽、5'-UTR、3'-UTR、聚(A)序列)。
在一個實施例中，β-S-ARCA(D1)用作RNA 5'端處之特異性加帽結構。在一個實施例中，m 2 7,3’-OGppp(m 1 2’-O)ApG用作RNA 5'端處之特異性加帽結構。在一個實施例中，5'-UTR序列源自人類α-球蛋白mRNA，且視情況具有最佳化之『Kozak序列』以提高轉譯效率。在一個實施例中，將源自「分裂之胺基末端增強子」(AES) mRNA (稱為F)及粒線體編碼之12S核糖體RNA (稱為I)之兩個序列元件(FI元件)的組合置於編碼序列與聚(A)序列之間，以確保更高的最大蛋白質水準及mRNA之延長持久性。在一個實施例中，源自人類β-球蛋白mRNA之兩個重複之3'-UTR置於編碼序列與聚(A)序列之間，以確保更高的最大蛋白質水準及mRNA之延長持久性。在一個實施例中，使用長度量測為110個核苷酸之聚(A)序列，其由一段30個腺苷殘基(SEQ ID NO: 174)、之後10個核苷酸之連接體序列及另一70個腺苷殘基(SEQ ID NO: 175)組成。此聚(A)序列經設計以增強RNA穩定性及轉譯效率。
在本揭示案之所有態樣之一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA在經治療個體之細胞中表現，以提供疫苗抗原。在本揭示案之所有態樣之一個實施例中，RNA在個體細胞中瞬時表現。在本揭示案之所有態樣之一個實施例中，RNA係活體外轉錄之RNA。在本揭示案之所有態樣之一個實施例中，由RNA編碼之疫苗抗原在細胞表面表現。在本揭示案之所有態樣之一個實施例中，疫苗抗原在MHC之背景下表現及呈遞。在本揭示案之所有態樣之一個實施例中，疫苗抗原之表現係在細胞外空間中，亦即分泌疫苗抗原。
在本揭示案之上下文中，術語「轉錄」係指一種過程，在該過程中DNA序列中之遺傳密碼轉錄成RNA。隨後，RNA可轉譯成肽或蛋白質。
根據本揭示案，術語「轉錄」包含「活體外轉錄」，其中術語「活體外轉錄」係指在無細胞系統中較佳使用適當細胞提取物活體外合成RNA、特定而言mRNA之過程。較佳地，選殖載體用於產生轉錄本。該等選殖載體通常稱為轉錄載體，且根據本揭示案由術語「載體」涵蓋。根據本揭示案，本揭示案中使用之RNA較佳為活體外轉錄之RNA (IVT-RNA)，且可藉由適當DNA模板之活體外轉錄獲得。控制轉錄之啟動子可為任何RNA聚合酶之任何啟動子。RNA聚合酶之具體實例為T7、T3及SP6 RNA聚合酶。較佳地，根據本揭示案之活體外轉錄由T7或SP6啟動子控制。用於活體外轉錄之DNA模板可藉由選殖核酸、特定而言cDNA，且將其引入至用於活體外轉錄之適當載體中來獲得。cDNA可藉由RNA之反轉錄獲得。
就RNA而言，術語「表現」或「轉譯」係指細胞核糖體中之過程，藉由該過程一股mRNA引導胺基酸序列之裝配以產生肽或蛋白質。
在一個實施例中，在投與本文所闡述之RNA (例如調配為RNA脂質顆粒)後，至少一部分RNA遞送至靶細胞。在一個實施例中，至少一部分RNA遞送至靶細胞之胞質液中。在一個實施例中，RNA由靶細胞轉譯以產生其編碼之肽或蛋白質。在一個實施例中，靶細胞為脾細胞。在一個實施例中，靶細胞為抗原呈遞細胞，諸如脾臟中之專職抗原呈遞細胞。在一個實施例中，靶細胞為樹突細胞或巨噬細胞。本文所闡述之RNA顆粒(諸如RNA脂質顆粒)可用於將RNA遞送至此靶細胞。因此，本揭示案亦係關於將RNA遞送至個體中之靶細胞之方法，該方法包括向該個體投與本文所闡述之RNA顆粒。在一個實施例中，將RNA遞送至靶細胞之胞質液中。在一個實施例中，RNA由靶細胞轉譯，以產生由該RNA編碼之肽或蛋白質。
「編碼」係指多核苷酸(諸如基因、cDNA或mRNA)中特定核苷酸序列之固有性質，以在生物過程中作為合成其他聚合物及大分子之模板，該等聚合物及大分子具有確定之核苷酸序列(亦即rRNA、tRNA及mRNA)或確定之胺基酸序列以及由此產生的生物學性質。因此，若對應於基因之mRNA之轉錄及轉譯在細胞或其他生物系統中產生蛋白質，則該基因編碼該蛋白質。其核苷酸序列與mRNA序列一致且通常在序列表中提供之編碼股及用作基因或cDNA之轉錄模板之非編碼股均可稱為編碼該基因或cDNA之蛋白質或其他產物。
在一個實施例中，根據本揭示案投與之編碼疫苗抗原之RNA係非免疫原性的。編碼免疫刺激劑之RNA可根據本揭示案投與以提供佐劑效應。編碼免疫刺激劑之RNA可為標準RNA或非免疫原性RNA。
如本文所用之術語「非免疫原性RNA」係指如下RNA：其在向例如哺乳動物投與時不誘導由免疫系統產生之反應，或所誘導之反應較差異僅在於其未曾受使得非免疫原性RNA變得具有非免疫原性之修飾及處理的相同RNA誘導之反應弱，亦即較標準RNA (stdRNA)誘導之反應弱。在一個較佳實施例中，藉由將抑制RNA介導之先天性免疫受體活化之經修飾核苷併入RNA中且去除雙股RNA (dsRNA)，使非免疫原性RNA (其在本文亦稱為經修飾之RNA (modRNA))變得具有非免疫原性。
為藉由併入經修飾之核苷使非免疫原性RNA變得具有非免疫原性，可使用任何經修飾之核苷，只要其降低或抑制RNA之免疫原性即可。尤佳者係抑制RNA介導之先天性免疫受體活化的經修飾之核苷。在一個實施例中，經修飾之核苷包含用包含經修飾之核鹼基之核苷替代一或多個尿苷。在一個實施例中，經修飾之核鹼基為經修飾之尿嘧啶。在一個實施例中，包含經修飾之核鹼基之核苷係選自由以下組成之群：3-甲基-尿苷(m 3U)、5-甲氧基-尿苷(mo 5U)、5-氮雜-尿苷、6-氮雜-尿苷、2-硫基-5-氮雜-尿苷、2-硫基-尿苷(s 2U)、4-硫基-尿苷(s 4U)、4-硫基-假尿苷、2-硫基-假尿苷、5-羥基-尿苷(ho 5U)、5-胺基烯丙基-尿苷、5-鹵基-尿苷(例如5-碘-尿苷或5-溴-尿苷)、尿苷5-氧基乙酸(cmo 5U)、尿苷5-氧基乙酸甲基酯(mcmo 5U)、5-羧基甲基-尿苷(cm 5U)、1-羧基甲基-假尿苷、5-羧基羥基甲基-尿苷(chm 5U)、5-羧基羥基甲基-尿苷甲基酯(mchm 5U)、5-甲氧基羰基甲基-尿苷(mcm 5U)、5-甲氧基羰基甲基-2-硫基-尿苷(mcm 5s 2U)、5-胺基甲基-2-硫基-尿苷(nm 5s 2U)、5-甲基胺基甲基-尿苷(mnm 5U)、1-乙基-假尿苷、5-甲基胺基甲基-2-硫基-尿苷(mnm 5s 2U)、5-甲基胺基甲基-2-硒基-尿苷(mnm 5se 2U)、5-胺甲醯基甲基-尿苷(ncm 5U)、5-羧基甲基胺基甲基-尿苷(cmnm 5U)、5-羧基甲基胺基甲基-2-硫基-尿苷(cmnm 5s 2U)、5-丙炔基-尿苷、1-丙炔基-假尿苷、5-牛磺酸甲基-尿苷(τm 5U)、1-牛磺酸甲基-假尿苷、5-牛磺酸甲基-2-硫基-尿苷(τm5s2U)、1-牛磺酸甲基-4-硫基-假尿苷)、5-甲基-2-硫基-尿苷(m 5s 2U)、1-甲基-4-硫基-假尿苷(m 1s 4ψ)、4-硫基-1-甲基-假尿苷、3-甲基-假尿苷(m 3ψ)、2-硫基-1-甲基-假尿苷、1-甲基-1-去氮-假尿苷、2-硫基-1-甲基-1-去氮-假尿苷、二氫尿苷(D)、二氫假尿苷、5,6-二氫尿苷、5-甲基-二氫尿苷(m 5D)、2-硫基-二氫尿苷、2-硫基-二氫假尿苷、2-甲氧基-尿苷、2-甲氧基-4-硫基-尿苷、4-甲氧基-假尿苷、4-甲氧基-2-硫基-假尿苷、N1-甲基-假尿苷、3-(3-胺基-3-羧基丙基)尿苷(acp 3U)、1-甲基-3-(3-胺基-3-羧基丙基)假尿苷(acp 3ψ)、5-(異戊烯基胺基甲基)尿苷(inm 5U)、5-(異戊烯基胺基甲基)-2-硫基-尿苷(inm 5s 2U)、α-硫基-尿苷、2'-O-甲基-尿苷(Um)、5,2'-O-二甲基-尿苷(m 5Um)、2'-O-甲基-假尿苷(ψm)、2-硫基-2'-O-甲基-尿苷(s 2Um)、5-甲氧基羰基甲基-2'-O-甲基-尿苷(mcm 5Um)、5-胺甲醯基甲基-2'-O-甲基-尿苷(ncm 5Um)、5-羧基甲基胺基甲基-2'-O-甲基-尿苷(cmnm 5Um)、3,2'-O-二甲基-尿苷(m 3Um)、5-(異戊烯基胺基甲基)-2'-O-甲基-尿苷(inm 5Um)、1-硫基-尿苷、去氧胸苷、2'-F-阿糖-尿苷、2'-F-尿苷、2'-OH-阿糖-尿苷、5-(2-碳甲氧基乙烯基)尿苷及5-[3-(1-E-丙烯基胺基)尿苷。在一個尤佳實施例中，包含經修飾之核鹼基之核苷為假尿苷(ψ)、N1-甲基-假尿苷(m1ψ)或5-甲基-尿苷(m5U)，特定而言N1-甲基-假尿苷。
在一個實施例中，用包含經修飾之核鹼基之核苷替代一或多個尿苷包含替代至少1%、至少2%、至少3%、至少4%、至少5%、至少10%、至少25%、至少50%、至少75%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%之尿苷。
在使用T7 RNA聚合酶藉由活體外轉錄(IVT)合成mRNA期間，由於該酶之非習用活性，產生大量異常產物，包括雙股RNA (dsRNA)。dsRNA誘導發炎性細胞介素且活化效應酶，導致蛋白質合成抑制。dsRNA誘導發炎性細胞介素且活化效應酶，從而導致蛋白質合成抑制。可例如藉由離子對反相HPLC，使用無孔或多孔C-18聚苯乙烯-二乙烯基苯(PS-DVB)基質將dsRNA自RNA (諸如IVT RNA)中去除。或者，可使用基於酶之方法，該方法使用特異性水解dsRNA但不水解ssRNA之大腸桿菌RNA酶III，藉此自IVT RNA製劑中消除dsRNA污染物。此外，可藉由使用纖維素材料自ssRNA中分離dsRNA。在一個實施例中，在容許dsRNA與纖維素材料結合而不容許ssRNA與纖維素材料結合之條件下，使RNA製劑與纖維素材料接觸，且自纖維素材料中分離ssRNA。
如本文所用之術語「去除(remove或removal)」係指第一物質(諸如非免疫原性RNA)之群體與第二物質(諸如dsRNA)之群體鄰近分離之特徵，其中第一物質之群體不一定缺乏第二物質，且第二物質之群體不一定缺乏第一物質。然而，與第一物質及第二物質之非分離混合物相比，特徵在於第二物質之群體之去除的第一物質之群體具有明顯更低含量之第二物質。
在一個實施例中，自非免疫原性RNA中去除dsRNA包含去除dsRNA，使得非免疫原性RNA組合物中少於10%、少於5%、少於4%、少於3%、少於2%、少於1%、少於0.5%、少於0.3%或少於0.1%之RNA為dsRNA。在一個實施例中，非免疫原性RNA不含或基本不含dsRNA。在一些實施例中，非免疫原性RNA組合物包含單股核苷修飾之RNA之純化製劑。舉例而言，在一些實施例中，單股核苷修飾之RNA之純化製劑實質上不含雙股RNA (dsRNA)。在一些實施例中，相對於所有其他核酸分子(DNA、dsRNA等)，純化製劑為至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、至少99.5%或至少99.9%之單股核苷修飾之RNA。
在一個實施例中，非免疫原性RNA在細胞中之轉譯較具有相同序列之標準RNA更高效。在一個實施例中，相對於未經修飾之對應物，轉譯增強2倍。在一個實施例中，轉譯增強3倍。在一個實施例中，轉譯增強4倍。在一個實施例中，轉譯增強5倍。在一個實施例中，轉譯增強6倍。在一個實施例中，轉譯增強7倍。在一個實施例中，轉譯增強8倍。在一個實施例中，轉譯增強9倍。在一個實施例中，轉譯增強10倍。在一個實施例中，轉譯增強15倍。在一個實施例中，轉譯增強20倍。在一個實施例中，轉譯增強50倍。在一個實施例中，轉譯增強100倍。在一個實施例中，轉譯增強200倍。在一個實施例中，轉譯增強500倍。在一個實施例中，轉譯增強1000倍。在一個實施例中，轉譯增強2000倍。在一個實施例中，倍數為10-1000倍。在一個實施例中，倍數為10-100倍。在一個實施例中，倍數為10-200倍。在一個實施例中，倍數為10-300倍。在一個實施例中，倍數為10-500倍。在一個實施例中，倍數為20-1000倍。在一個實施例中，倍數為30-1000倍。在一個實施例中，倍數為50-1000倍。在一個實施例中，倍數為100-1000倍。在一個實施例中，倍數為200-1000倍。在一個實施例中，轉譯增強任何其他顯著之量或量之範圍。
在一個實施例中，非免疫原性RNA較具有相同序列之標準RNA展現出顯著更低之先天性免疫原性。在一個實施例中，非免疫原性RNA展現出較其未經修飾之對應物低2倍之先天性免疫反應。在一個實施例中，先天性免疫原性降低3倍。在一個實施例中，先天性免疫原性降低4倍。在一個實施例中，先天性免疫原性降低5倍。在一個實施例中，先天性免疫原性降低6倍。在一個實施例中，先天性免疫原性降低7倍。在一個實施例中，先天性免疫原性降低8倍。在一個實施例中，先天性免疫原性降低9倍。在一個實施例中，先天性免疫原性降低10倍。在一個實施例中，先天性免疫原性降低15倍。在一個實施例中，先天性免疫原性降低20倍。在一個實施例中，先天性免疫原性降低50倍。在一個實施例中，先天性免疫原性降低100倍。在一個實施例中，先天性免疫原性降低200倍。在一個實施例中，先天性免疫原性降低500倍。在一個實施例中，先天性免疫原性降低1000倍。在一個實施例中，先天性免疫原性降低2000倍。
術語「展現出顯著更低之先天性免疫原性」係指先天性免疫原性可偵測到之降低。在一個實施例中，該術語係指減少，使得可投與有效量之非免疫原性RNA，而不觸發可偵測到之先天性免疫反應。在一個實施例中，該術語係指減少，使得非免疫原性RNA可重複投與，而不引發足以可偵測到地減少由非免疫原性RNA編碼之蛋白質產生之先天性免疫反應。在一個實施例中，該減少使得非免疫原性RNA可重複投與，而不會引發足以消除由非免疫原性RNA編碼之蛋白質可偵測到之產生的先天性免疫反應。
「免疫原性」係外來物質(諸如RNA)在人類或其他動物體內引發免疫反應之能力。先天性免疫系統係免疫系統之相對非特異性及直接之組成部分。其為脊椎動物免疫系統之兩個主要組成部分之一，以及適應性免疫系統。
如本文所用，「內源性」係指來自或產生於生物體、細胞、組織或系統內部之任何物質。
如本文所用，術語「外源性」係指自生物體、細胞、組織或系統外部引入或產生之任何物質。
如本文所用之術語「表現」定義為特定核苷酸序列之轉錄及/或轉譯。
如本文所用，術語「連接的」、「融合的」或「融合」可互換使用。該等術語係指兩個或更多個元件或組件或結構域接合在一起。 密碼子最佳化/ G/C含量之增加
在一些實施例中，與傳染原相關之抗原性多肽由經密碼子最佳化及/或其G/C含量與野生型編碼序列相比增加之編碼序列編碼。此亦包括其中編碼序列之一或多個序列區域與野生型編碼序列之相應序列區域相比經密碼子最佳化及/或G/C含量增加之實施例。在一個實施例中，密碼子最佳化及/或G/C含量之增加較佳不改變所編碼胺基酸序列之序列。
術語「密碼子最佳化」係指改變核酸分子編碼區中之密碼子以反映宿主生物體之典型密碼子使用(codon usage)，而不較佳改變由核酸分子編碼之胺基酸序列。在本揭示案之上下文中，較佳對編碼區進行密碼子最佳化，以便在使用本文所闡述之RNA分子治療之個體中獲得最佳表現。密碼子最佳化基於如下發現，亦即轉譯效率亦由細胞中tRNA出現之不同頻率決定。因此，可修飾RNA序列，使得插入可獲得頻繁出現tRNA之密碼子來代替「稀有密碼子」。
在本揭示案之一些實施例中，與野生型RNA之相應編碼序列之鳥苷/胞嘧啶(G/C)含量相比，本文所闡述RNA之編碼區之G/C含量增加，其中與由野生型RNA編碼之胺基酸序列相比，由RNA編碼之胺基酸序列較佳未經修飾。RNA序列之此修飾基於如下事實，亦即任何待轉譯之RNA區域之序列對於該mRNA之高效轉譯均係重要的。G (鳥苷)/C (胞嘧啶)含量增加之序列較A (腺苷)/U (尿嘧啶)含量增加之序列更穩定。關於幾個密碼子編碼同一個胺基酸之事實(所謂的遺傳密碼簡併)，可確定對穩定性最有利之密碼子(所謂的選擇性密碼子使用)。取決於由RNA編碼之胺基酸，與RNA序列之野生型序列相比，RNA序列有多種修飾之可能性。特定而言，含有A及/或U核苷酸之密碼子可藉由用編碼相同胺基酸但不含A及/或U或含有較低含量之A及/或U核苷酸之其他密碼子取代該等密碼子來修飾。
在各個實施例中，與野生型RNA之編碼區之G/C含量相比，本文所闡述RNA之編碼區之G/C含量增加至少10%、至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少55%或甚至更多。在一些實施例中，與野生型RNA之編碼區之G/C含量相比，編碼區之G/C含量增加約10%至約60% (例如約20%至約60%、約30%至約60%、約40%至約60%、約50%至約60%、或約51%、約52%、約53%、約54%、約55%、約56%、約57%、約58%、約59%或約60%)。
在一些實施例中，本文所揭示之RNA包含本文所揭示之序列(例如SEQ ID NO: 9)，該序列已經修飾以編碼SARS-CoV-2變異體(例如本文所闡述之變異體，包括但不限於BA.2或BA.4/5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變。在一些實施例中，藉由進行儘可能少之核苷酸改變，可修飾RNA以編碼SARS-CoV-2變異體之一或多個特徵性突變。在一些實施例中，藉由引入導致高密碼子最佳化及/或增加之G/C含量之突變，可修飾RNA以編碼SARS-CoV-2變異體之一或多個特徵性突變。
在一些實施例中，將SARS-CoV-2變異體之一或多個特徵性突變引入至全長S蛋白(例如，包含SEQ ID NO: 1之S蛋白)上。在一些實施例中，將SARS-CoV-2變異體之一或多個特徵性突變引入至具有一或多個脯胺酸突變之全長S蛋白上，該一或多個脯胺酸突變增加融合前構形之穩定性。舉例而言，在一些實施例中，在與SEQ ID NO: 1之986位及987位相對應之位置處進行脯胺酸取代。在一些實施例中，至少進行4個脯胺酸取代。在一些實施例中，至少4個此等脯胺酸突變包括在對應於SEQ ID NO: 1之殘基817、892、899及942之位置處的突變，例如如WO 2021243122 A2中所闡述，其全部內容係以引用方式併入本文中。在一些實施例中，此一SARS-CoV-2 S蛋白包含在對應於SEQ ID NO: 1之殘基817、892、899及942之位置處的脯胺酸取代，其可進一步包含在對應於SEQ ID NO: 1之殘基986及987之位置處的脯胺酸取代。在一些實施例中，將SARS-CoV-2變異體之一或多個特徵性突變引入至S蛋白之免疫原性片段(例如SEQ ID NO: 1之RBD)上。 所投與RNA之實施例
在一些實施例中，本揭示案提供包含以下之組合物：(i)一或多種第一RNA，其各自包含編碼與第一傳染原相關之抗原性多肽之核苷酸序列，及(ii)一或多種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原相關之抗原性多肽之核苷酸序列，其中該第一傳染原不同於該第二傳染原。在一些實施例中，第一傳染原及第二傳染原可各自獨立地為細菌性傳染原及/或病毒性傳染原。在一些實施例中，第一傳染原及第二傳染原可各自獨立地選自冠狀病毒(包括例如阿爾法冠狀病毒、貝塔冠狀病毒、伽馬冠狀病毒、德爾塔冠狀病毒)、流行性感冒病毒(例如A型、B型、C型或D型)、肺病毒科(例如呼吸道融合病毒)及其組合。
在一些實施例中，該組合物包含至少一種包含編碼冠狀病毒抗原之開放閱讀框的第一RNA及至少一種包含編碼非冠狀病毒傳染性疾病抗原之開放閱讀框的第二RNA。在一些實施例中，該組合物包含至少一種包含編碼冠狀病毒抗原之開放閱讀框的第一RNA及至少一種包含編碼流行性感冒抗原之開放閱讀框的第二RNA。例示性流行性感冒抗原包括血球凝集素(HA)及神經胺酸酶(NA)及其免疫原性片段。在一些實施例中，該組合物包含至少一種編碼多肽之第一RNA，該多肽包含SARS-CoV-2 S蛋白之至少一個免疫原性部分(例如SARS-CoV-2 S蛋白之RBD部分)。在一些實施例中，該組合物包含至少一種編碼全長S蛋白之第一RNA。在一些實施例中，該組合物包含至少一種編碼經穩定之融合前S蛋白之第一RNA。在一些實施例中，該組合物包含至少一種第二RNA，該第二RNA包含編碼多肽之開放閱讀框，該多肽包含流行性感冒HA蛋白之至少一部分。
在一些實施例中，該組合物包含至少一種第一RNA，該第一RNA包含編碼多肽之開放閱讀框，該多肽包含SARS-CoV-2 S蛋白之至少一部分。在一些實施例中，該組合物包含至少一種第二RNA，該第二RNA包含編碼多肽之開放閱讀框，該多肽包含流行性感冒HA蛋白之至少一部分。此等組合物中之每一RNA均適於所編碼多肽之細胞內表現。在一些實施例中，此一所編碼多肽包含對應於完整S蛋白之序列。在一些實施例中，此一所編碼多肽不包含對應於完整S蛋白之序列。在一些實施例中，所編碼多肽包含對應於受體結合結構域(RBD)之序列。在一些實施例中，所編碼多肽包含對應於RBD之序列，且進一步包含三聚化結構域(例如如本文所揭示之三聚化結構域，諸如纖維蛋白結構域)。在一些實施例中，RBD包含信號傳導結構域(例如如本文所揭示之信號傳導結構域)。在一些實施例中，RBD包含跨膜結構域(例如如本文所揭示之跨膜結構域)。在一些實施例中，RBD包含信號傳導結構域及三聚化結構域。在一些實施例中，RBD包含信號傳導結構域、三聚化結構域及跨膜結構域。在一些實施例中，此一所編碼多肽包含對應於完整HA蛋白之序列。
在一些實施例中，所編碼多肽包含對應於兩個受體結合結構域之序列。在一些實施例中，所編碼多肽包含對應於胺基酸鏈中串聯之兩個受體結合結構域之序列，例如，如Dai, Lianpan等人「A universal design of betacoronavirus vaccines against COVID-19, MERS, and SARS」, Cell 182.3 (2020): 722-733中所揭示，其內容係以全文引用的方式併入本文中。
在一些實施例中，SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段包含一或多個突變以改變或去除糖基化位點，例如如WO2022221835A2、US20220323574A1或WO2022195351A1中所闡述。
在一些實施例中，本文所闡述之組合物或醫藥製劑包含編碼胺基酸序列之RNA，該胺基酸序列構成SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段。同樣，本文所闡述之方法包括投與此一RNA。
本文所用之活性平臺基於編碼抗原之RNA疫苗，該RNA疫苗誘導強勁的中和抗體及伴隨/伴發之T細胞反應，從而以較佳最小之疫苗劑量達成保護性免疫。所投與之RNA較佳為活體外轉錄之RNA。
三種不同的RNA平臺尤佳，亦即未經修飾之含尿苷之mRNA (uRNA)、核苷修飾之mRNA (modRNA)及自我擴增RNA (saRNA)。在一個尤佳實施例中，RNA為活體外轉錄之RNA。在一些實施例中，uRNA為mRNA。在一些實施例中，modRNA為mRNA。
在下文中，闡述該三種不同RNA平臺之實施例，其中當闡述其元件時所用之某些術語具有以下含義： S1S2 蛋白 /S1S2 RBD ：編碼SARS-CoV-2之各別抗原之序列。 nsP1 、 nsP2 、 nsP3 及 nsP4 ：編碼委內瑞拉馬腦炎病毒(VEEV) RNA依賴性RNA聚合酶複製酶之野生型序列及亞基因體啟動子加支持複製及轉譯之保守序列元件。 virUTR ：編碼部分亞基因體啟動子以及複製及轉譯支持序列元件之病毒非轉譯區。 hAg-Kozak ：具有最佳化之『Kozak序列』以提高轉譯效率之人類α-球蛋白mRNA之5'-UTR序列。 Sec ：Sec對應於分泌信號肽(sec)，其引導新生多肽鏈易位至內質網中。在一些實施例中，此一分泌信號肽包括固有S1S2分泌信號肽。在一些實施例中，此一分泌信號肽係來自非S1S2蛋白之分泌信號肽。舉例而言，免疫球蛋白分泌信號肽(aa 1-22)、HSV-1 gD信號肽(MGGAAARLGAVILFVVIVGLHGVRSKY (SEQ ID NO: 110))、HSV-2 gD信號肽(MGRLTSGVGTAALLVVAVGLRVVCA (SEQ ID NO: 111))；人類SPARC信號肽、人類胰島素同種型1信號肽、人類白蛋白信號肽或本文所闡述之任何其他信號肽。 甘胺酸-絲胺酸連接體(GS)：編碼主要由胺基酸甘胺酸(G)及絲胺酸(S)組成之短連接體肽之序列，通常用於融合蛋白。 纖維蛋白：用作人工三聚化結構域之T4纖維蛋白(摺疊子)之部分序列。 TM ：TM序列對應於蛋白質之跨膜部分。跨膜結構域可在編碼多肽之N末端、C末端或內部。跨膜元件之編碼序列通常置於與其連接之序列之編碼序列(例如編碼多肽之序列)之框內(亦即在同一閱讀框中)、5'、3'或內部。在一些實施例中，跨膜結構域包含或為流行性感冒病毒之血球凝集素(HA)、HIV-1之Env、馬傳染性貧血病毒(EIAV)、鼠白血病病毒(MLV)、小鼠乳房腫瘤病毒、水疱性口炎病毒(VSV)之G蛋白、狂犬病病毒之跨膜結構域，或七跨膜結構域受體。在一些實施例中，蛋白質之跨膜部分來自S1S2蛋白。 FI 元件：3'-UTR係源自「分裂之胺基末端增強子」(AES) mRNA (稱為F)及粒線體編碼之12S核糖體RNA (稱為I)之兩個序列元件的組合。該等元件藉由賦予RNA穩定性及增加的總蛋白質表現之序列之離體選擇過程來鑑別。 A30L70 ：長度量測為110個核苷酸之聚(A)尾，由一段30個腺苷殘基(SEQ ID NO: 174)、之後10個核苷酸連接體序列及另一70個腺苷殘基(SEQ ID NO: 175)組成，其經設計以增強樹突細胞中之RNA穩定性及轉譯效率。
在一些實施例中，本文所闡述之疫苗RNA自5'至3'可包含下列結構之一： 帽-5'-UTR-疫苗抗原編碼序列-3'-UTR-聚(A) 或 帽-hAg-Kozak-疫苗抗原編碼序列-FI-A30L70。
在一些實施例中，本文所闡述之疫苗抗原可包含全長S蛋白或其免疫原性片段(例如RBD)。在疫苗抗原包含全長S蛋白之一些實施例中，其分泌信號肽及/或跨膜結構域可由異源分泌信號肽(例如如本文所闡述)及/或異源跨膜結構域(例如如本文所闡述)替代。
在一些實施例中，本文所闡述之疫苗抗原自N末端至C末端可包含下列結構之一： 信號序列-RBD-三聚化結構域 或 信號序列-RBD-三聚化結構域-跨膜結構域。
RBD及三聚化結構域可由連接體、特定而言GS連接體(諸如具有胺基酸序列GSPGSGSGS (SEQ ID NO: 33)之連接體)分開。三聚化結構域及跨膜結構域可由連接體、特定而言GS連接體(諸如具有胺基酸序列GSGSGS (SEQ ID NO: 34)之連接體)分開。
信號序列可為如本文所闡述之信號序列。如本文所闡述，RBD可為RBD結構域。三聚化結構域可為如本文所闡述之三聚化結構域。跨膜結構域可為如本文所闡述之跨膜結構域。
在一個實施例中， 信號序列包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16或1至19之胺基酸序列，或SEQ ID NO: 31之胺基酸1至22之胺基酸序列，或與該胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列， RBD包含SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列，或與該胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列， 三聚化結構域包含SEQ ID NO: 10之胺基酸3至29之胺基酸序列，或SEQ ID NO: 10之胺基酸序列，或與該胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列；且 跨膜結構域包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1207至1254之胺基酸序列，或與該胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列。
在一個實施例中， 信號序列包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1至16或1至19之胺基酸序列，或SEQ ID NO: 31之胺基酸1至22之胺基酸序列， RBD包含SEQ ID NO: 1之胺基酸327至528之胺基酸序列， 三聚化結構域包含SEQ ID NO: 10之胺基酸3至29之胺基酸序列，或SEQ ID NO: 10之胺基酸序列；且 跨膜結構域包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1207至1254之胺基酸序列。
在一些實施例中，包含編碼疫苗抗原(例如SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體、SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段或者HA蛋白或其免疫原性變異體)之序列或包含編碼疫苗抗原(例如SARS-CoV-2 S蛋白、HA蛋白、其免疫原性變異體或者SARS-CoV-2 S蛋白、HA蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段)之開放閱讀框(諸如SEQ ID NO: 50之核苷酸序列或SEQ ID NO: 53之核苷酸序列、其變異體或片段)之RNA多核苷酸進一步包含5’帽(例如包含帽1結構之5’帽)、5’UTR序列(例如包含SEQ ID NO: 12之核苷酸序列之5’UTR序列)、3’UTR序列(例如包含SEQ ID NO: 13之核苷酸序列之3’ UTR序列)及聚A序列(例如包含SEQ ID NO: 14之核苷酸序列之聚A序列)。在一些實施例中，RNA多核苷酸調配於包含((4-羥基丁基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)、膽固醇、二硬脂醯磷脂醯膽鹼及(2-[(聚乙二醇)-2000]-N,N-雙十四烷基乙醯胺)之組合物中。
本文所闡述之RNA或編碼本文所闡述疫苗抗原之RNA可為未經修飾之含尿苷之mRNA (uRNA)、核苷修飾之mRNA (modRNA)或自我擴增RNA (saRNA)。在一個實施例中，本文所闡述之RNA或編碼本文所闡述疫苗抗原之RNA為核苷修飾之mRNA (modRNA)。 編碼變異體特異性SARS-CoV-2抗原之例示性RNA
在一些實施例中，本文所揭示之RNA編碼包含SARS-CoV-2變異體之一或多個特徵性突變之S蛋白。在一些實施例中，RNA編碼包含阿爾法變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，RNA編碼包含貝塔變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，RNA編碼包含德爾塔變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，RNA編碼包含奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白(例如包含BA.1、BA.2或BA.4/5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之S蛋白)。在一些實施例中，RNA編碼包含奧密克戎XBB變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白(例如包含XBB.1.5、XBB.1.16、XBB.2.3或XBB.2.3.2變異體之一或多個特徵性突變之S蛋白)。在一些實施例中，RNA編碼包含BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，RNA編碼包含BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，RNA編碼包含BA.2.12.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，RNA編碼包含BA.3奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，RNA編碼包含BA.4奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，RNA編碼包含BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一些實施例中，本文所揭示之組合物包含二價SARS-CoV-2疫苗。在一些實施例中，SARS-CoV-2二價疫苗包含編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及編碼與預測在相關轄區流行之變異體相關之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一些實施例中，SARS-CoV-2二價疫苗包含兩種RNA，其各自編碼預測在相關轄區流行之SARS-CoV-2變異體之S蛋白。在一些實施例中，本文所揭示之組合物每年更新，以便編碼預測在相關轄區最流行之變異體之SARS-CoV-2 S蛋白。 編碼流行性感冒抗原之例示性RNA
在一些實施例中，本文所揭示之RNA包含編碼與流行性感冒相關之抗原性多肽之核苷酸序列。在一些實施例中，與流行性感冒相關之抗原性多肽為血球凝集素(HA)蛋白。在一些實施例中，與流行性感冒相關之抗原性多肽為神經胺酸酶(NA)蛋白。在一些實施例中，與流行性感冒相關之抗原性多肽包括至少一種保守抗原決定基(例如，如WO2021202734A2；Freyn, Alec W.等人，「A multi-targeting, nucleoside-modified mRNA influenza virus vaccine provides broad protection in mice」, Molecular Therapy 28.7 (2020): 1569-1584；及/或Ekiert, Damian C.等人，「Antibody recognition of a highly conserved influenza virus epitope」, Science 324.5924 (2009): 246-251中所闡述，該等文獻各自之內容係以全文引用的方式併入本文中)。
在一些實施例中，組合物包含編碼流行性感冒病毒之抗原(例如HA蛋白)之RNA，相關衛生管理機構推薦將該抗原包括在季節性適應之疫苗中(例如基於細胞之重組或活減毒病毒)。在一些實施例中，組合物包含複數種編碼每種流行性感冒病毒之抗原(例如HA蛋白)之RNA，相關衛生管理機構推薦將該等抗原包括在季節性適應之疫苗中(例如基於細胞之重組或活減毒病毒)。
在一些實施例中，流行性感冒病毒為流行性感冒A、流行性感冒B或流行性感冒C病毒。在一些實施例中，流行性感冒A病毒為H1N1、H1N2、H2N2、H3N1、H3N2、H3N8、H5N1、H5N2、H5N3、H5N8、H5N9、H7N1、H7N2、H7N3、H7N4、H7N7、H7N9、H9N2、H10N7或H10N8病毒。在一些實施例中，流行性感冒A病毒為H1N1、H3N2、H5N1或H5N8病毒。在一些實施例中，流行性感冒A病毒為H1N1病毒(例如A/Wisconsin/588/2019或A/Sydney/5/2021)。在一些實施例中，流行性感冒A病毒為H3N2病毒。在一些實施例中，H3N2病毒為A/Cambodia/e0826360/2020或A/Darwin/6/2021。在一些實施例中，流行性感冒B病毒為B/Yamagata或B/Victoria譜系之病毒。在一些實施例中，B/Victoria譜系流行性感冒病毒為B/Washington/02/2019。在一些實施例中，B/Victoria譜系病毒為B/Austria/1359417/2021。在一些實施例中，B/Yamagata譜系流行性感冒病毒為B/Phuket/3073/2013。
在一些實施例中，本文所闡述之組合物包含多價流行性感冒疫苗。在一些實施例中，多價流行性感冒疫苗包含2至50種不同的RNA分子(例如2至40、2至30或2至20種RNA分子)，在一些實施例中，該等RNA分子各自可編碼與流行性感冒相關之不同抗原性多肽(或特定抗原性多肽之不同形式)，例如，如Arevalo, Claudia P.等人，「A multivalent nucleoside-modified mRNA vaccine against all known influenza virus subtypes」. Science 378.6622 (2022): 899-904中所闡述。在一些實施例中，本文所闡述之組合物包含三價流行性感冒疫苗。在一些實施例中，三價流行性感冒疫苗包含編碼與預測在相關轄區流行之兩種A型病毒及一種B型病毒相關之抗原性多肽的RNA。在一些實施例中，本文所闡述之組合物包含四價流行性感冒疫苗。在一些實施例中，四價流行性感冒疫苗包含編碼與預測在相關轄區流行之兩種A型病毒及兩種B型病毒相關之抗原性多肽的RNA。在一些實施例中，本文所闡述之組合物包含八價流行性感冒疫苗。在一些實施例中，八價流行性感冒疫苗包含編碼兩種抗原性多肽之RNA，該兩種抗原性多肽與預測在相關轄區流行之兩種A型病毒及兩種B型病毒中之每一者相關(例如與每一病毒相關之HA蛋白及NA蛋白，或其免疫原性片段)。在一些實施例中，本文所揭示之組合物包含四價流行性感冒疫苗，該四價流行性感冒疫苗包含含有編碼與H1N1病毒(例如A/Wisconsin/588/2019)相關之HA蛋白之核苷酸序列的RNA、含有編碼與H3N2病毒(例如A/Cambodia/e0826360/2020)相關之HA蛋白之核苷酸序列的RNA、含有編碼與B/Victoria譜系流行性感冒病毒(例如B/Washington/02/2019)相關之HA蛋白及與B/Yamagata譜系流行性感冒病毒(例如B/Phuket/3073/2013)相關之HA蛋白之核苷酸序列的RNA。在一些實施例中，包含四價流行性感冒疫苗之此一組合物進一步包含冠狀病毒疫苗。在一些實施例中，此一冠狀病毒疫苗為SARS-CoV-2疫苗。在一些實施例中，SARS-CoV-2疫苗為二價SARS-CoV-2疫苗(例如，(i) SARS-CoV-2二價疫苗，其包含編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及編碼包含一或多個與投與前後在相關群體中流行之變異體相關之突變的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA。舉例而言，在一些實施例中，SARS-CoV-2疫苗為二價SARS-CoV-2疫苗(例如，(i) SARS-CoV-2二價疫苗，其包含編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及編碼包含一或多個與BA.4/5奧密克戎變異體相關之突變的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA。
在一些實施例中，組合物包含四價流行性感冒疫苗，該疫苗包含編碼與預測在相關轄區流行之兩種A型病毒及兩種B型病毒相關之抗原性多肽之RNA。在一些實施例中，四價流行性感冒疫苗包含編碼與H1N1流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之RNA、編碼與H3N2流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之RNA、編碼與Victoria譜系流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之RNA及編碼與Yamagata譜系流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之RNA。在一些實施例中，四價流行性感冒疫苗包含與預測在相關轄區流行之流行性感冒類型相關之RNA (例如與預測在相關轄區流行之H1N1、H3N2、B/Victoria及B/Yamagata流行性感冒病毒相關之HA多肽)。
在一些實施例中，組合物包含(i)四價流行性感冒疫苗，其包含編碼與預測在相關轄區最流行之流行性感冒病毒毒株相關之HA多肽的RNA，及(ii)二價SARS-CoV-2疫苗，其包含(a)編碼預測在相關轄區最流行之兩種變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或(b)編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及編碼預測在相關轄區流行之變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA。
在一些實施例中，本文所揭示組合物中之每一RNA編碼與預測在相關轄區流行之傳染原相關之抗原性多肽。此等組合物可減少所需之疫苗接種次數。 未經修飾之尿苷信使RNA (uRNA)
在一些實施例中，未經修飾之尿苷RNA為信使RNA。未經修飾之信使RNA (uRNA)原料藥之活性成分係進入細胞後可經轉譯之單股RNA (例如mRNA)。除編碼疫苗抗原之序列(亦即開放閱讀框)以外，每個uRNA較佳含有通用結構元件，針對RNA在穩定性及轉譯效率方面之最大功效對該等元件進行最佳化(5'-帽、5'-UTR、3'-UTR、聚(A)尾)。較佳之5’帽結構為β-S-ARCA(D1) (m 2 7,2'-OGppSpG)。較佳之5'-UTR及3'-UTR分別包含SEQ ID NO: 12之核苷酸序列及SEQ ID NO: 13之核苷酸序列。較佳之聚(A)尾包含SEQ ID NO: 14之序列。
該平臺之不同實施例如下： RBL063.1 (SEQ ID NO: 15; SEQ ID NO: 7)結構                 β-S-ARCA(D1)-hAg-Kozak-S1S2-PP-FI-A30L70 所編碼抗原      SARS-CoV-2之病毒刺突蛋白(S1S2蛋白)(S1S2全長蛋白，序列變異體) RBL063.2 (SEQ ID NO: 16; SEQ ID NO: 7)結構                 β-S-ARCA(D1)-hAg-Kozak-S1S2-PP-FI-A30L70 所編碼抗原      SARS-CoV-2之病毒刺突蛋白(S1S2蛋白)(S1S2全長蛋白，序列變異體) BNT162a1; RBL063.3 (SEQ ID NO: 17; SEQ ID NO: 5)結構                 β-S-ARCA(D1)-hAg-Kozak-RBD-GS-纖維蛋白-FI-A30L70 所編碼抗原      SARS-CoV-2之病毒刺突蛋白(S蛋白)(部分序列，S1S2蛋白之受體結合結構域(RBD))
圖3以圖表顯示抗原編碼RNA之一般結構。 核苷修飾之信使RNA (modRNA)
核苷修飾之RNA (modRNA)原料藥之活性成分係進入細胞後可經轉譯之單股RNA (例如mRNA)。除編碼疫苗抗原之序列(亦即開放閱讀框)以外，每個modRNA亦含有針對作為uRNA之RNA之最大功效而最佳化之通用結構元件(5'-帽、5'-UTR、3'-UTR、聚(A)尾)。與uRNA相比，modRNA含有1-甲基-假尿苷而非尿苷。較佳之5’帽結構為m 2 7,3’-OGppp(m 1 2’-O)ApG。較佳之5'-UTR及3'-UTR分別包含SEQ ID NO: 12之核苷酸序列及SEQ ID NO: 13之核苷酸序列。較佳之聚(A)尾包含SEQ ID NO: 14之序列。對modRNA進行額外純化步驟，以減少活體外轉錄反應期間產生之dsRNA污染物。
該平臺之不同實施例如下： BNT162b2; RBP020.1 (SEQ ID NO: 19; SEQ ID NO: 7)結構                 m 2 7,3’-OGppp(m 1 2’-O)ApG)-hAg-Kozak-S1S2-PP-FI-A30L70 所編碼抗原      SARS-CoV-2之病毒刺突蛋白(S1S2蛋白)(S1S2全長蛋白，序列變異體) BNT162b2; RBP020.2 (SEQ ID NO: 20; SEQ ID NO: 7)結構                 m 2 7,3’-OGppp(m 1 2’-O)ApG)-hAg-Kozak-S1S2-PP-FI-A30L70 所編碼抗原      SARS-CoV-2之病毒刺突蛋白(S1S2蛋白)(S1S2全長蛋白，序列變異體) BNT162b1; RBP020.3 (SEQ ID NO: 21; SEQ ID NO: 5)結構                 m 2 7,3’-OGppp(m 1 2’-O)ApG)-hAg-Kozak-RBD-GS-纖維蛋白-FI-A30L70 所編碼抗原      SARS-CoV-2之病毒刺突蛋白(S1S2蛋白)(部分序列，融合至纖維蛋白之S1S2蛋白之受體結合結構域(RBD))
圖4以圖表顯示抗原編碼RNA之一般結構。 BNT162b3c (SEQ ID NO: 29; SEQ ID NO: 30)結構                 m 2 7,3’-OGppp(m 1 2’-O)ApG-hAg-Kozak-RBD-GS-纖維蛋白-GS-TM-FI-A30L70 所編碼抗原      SARS-CoV-2之病毒刺突蛋白(S1S2蛋白)(部分序列，與同S1S2蛋白之跨膜結構域(TM)融合之纖維蛋白融合的S1S2蛋白之受體結合結構域(RBD))；抗原序列N末端處的固有S1S2蛋白分泌信號肽(aa 1-19) BNT162b3d (SEQ ID NO: 31; SEQ ID NO: 32)結構                 m 2 7,3’-OGppp(m 1 2’-O)ApG-hAg-Kozak-RBD-GS-纖維蛋白-GS-TM-FI-A30L70 所編碼抗原      SARS-CoV-2之病毒刺突蛋白(S1S2蛋白)(部分序列，與同S1S2蛋白之跨膜結構域(TM)融合之纖維蛋白融合的S1S2蛋白之受體結合結構域(RBD))；抗原序列N末端處的免疫球蛋白分泌信號肽(aa 1-22)。 BNT162b2 - 貝塔變異體 ；RBP020.11 (SEQ ID NO: 57; SEQ ID NO: 55)結構                 m 2 7,3’-OGppp(m 1 2’-O)ApG)-hAg-Kozak-S1S2-PP-FI-A30L70 所編碼抗原      SARS-CoV-2之病毒刺突蛋白(S1S2蛋白)(S1S2全長蛋白，序列變異體)，其包含SARS-CoV-2之貝塔變異體之特徵性突變 BNT162b2 - 阿爾法變異體 ；RBP020.14 (SEQ ID NO: 60; SEQ ID NO: 58)結構                 m 2 7,3’-OGppp(m 1 2’-O)ApG)-hAg-Kozak-S1S2-PP-FI-A30L70 所編碼抗原      SARS-CoV-2之病毒刺突蛋白(S1S2蛋白)(S1S2全長蛋白，序列變異體)，其包含SARS-CoV-2之阿爾法變異體之特徵性突變 BNT162b2 - 德爾塔變異體 ；RBP020.16 (SEQ ID NO: 63; SEQ ID NO: 61)結構                 m 2 7,3’-OGppp(m 1 2’-O)ApG)-hAg-Kozak-S1S2-PP-FI-A30L70 所編碼抗原      SARS-CoV-2之病毒刺突蛋白(S1S2蛋白)(S1S2全長蛋白，序列變異體)，其包含SARS-CoV-2之德爾塔變異體之特徵性突變 表 8 ：RBP020.22 (奧密克戎BA.4/BA.5特異性SARS-CoV-2 RNA疫苗)之序列
SEQ ID NO. 簡述 序列
69 來自奧密克戎BA.4/BA.5變異體之RNA編碼SARS-CoV-2 S蛋白之胺基酸序列(在對應於SEQ ID NO: 7之位置K986P及V987P之位置處具有PRO突變，亦即SEQ ID NO: 69之殘基981及982處) MFVFLVLLPLVSSQCVNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAISGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYYHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLGRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVRQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKVGGNYNYRYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDPPEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT**
70 編碼來自奧密克戎BA.4/BA.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA序列 AUGUUCGUGUUCCUGGUGCUGCUGCCUCUGGUGUCCAGCCAGUGUGUGAACCUGAUCACCAGAACACAGUCAUACACCAACAGCUUUACCAGAGGCGUGUACUACCCCGACAAGGUGUUCAGAUCCAGCGUGCUGCACUCUACCCAGGACCUGUUCCUGCCUUUCUUCAGCAACGUGACCUGGUUCCACGCCAUCUCCGGCACCAAUGGCACCAAGAGAUUCGACAACCCCGUGCUGCCCUUCAACGACGGGGUGUACUUUGCCAGCACCGAGAAGUCCAACAUCAUCAGAGGCUGGAUCUUCGGCACCACACUGGACAGCAAGACCCAGAGCCUGCUGAUCGUGAACAACGCCACCAACGUGGUCAUCAAAGUGUGCGAGUUCCAGUUCUGCAACGACCCCUUCCUGGACGUCUACUACCACAAGAACAACAAGAGCUGGAUGGAAAGCGAGUUCCGGGUGUACAGCAGCGCCAACAACUGCACCUUCGAGUACGUGUCCCAGCCUUUCCUGAUGGACCUGGAAGGCAAGCAGGGCAACUUCAAGAACCUGCGCGAGUUCGUGUUUAAGAACAUCGACGGCUACUUCAAGAUCUACAGCAAGCACACCCCUAUCAACCUCGGCCGGGAUCUGCCUCAGGGCUUCUCUGCUCUGGAACCCCUGGUGGAUCUGCCCAUCGGCAUCAACAUCACCCGGUUUCAGACACUGCUGGCCCUGCACAGAAGCUACCUGACACCUGGCGAUAGCAGCAGCGGAUGGACAGCUGGUGCCGCCGCUUACUAUGUGGGCUACCUGCAGCCUAGAACCUUCCUGCUGAAGUACAACGAGAACGGCACCAUCACCGACGCCGUGGAUUGUGCUCUGGAUCCUCUGAGCGAGACAAAGUGCACCCUGAAGUCCUUCACCGUGGAAAAGGGCAUCUACCAGACCAGCAACUUCCGGGUGCAGCCCACCGAAUCCAUCGUGCGGUUCCCCAAUAUCACCAAUCUGUGCCCCUUCGACGAGGUGUUCAAUGCCACCAGAUUCGCCUCUGUGUACGCCUGGAACCGGAAGCGGAUCAGCAAUUGCGUGGCCGACUACUCCGUGCUGUACAACUUCGCCCCCUUCUUCGCAUUCAAGUGCUACGGCGUGUCCCCUACCAAGCUGAACGACCUGUGCUUCACAAACGUGUACGCCGACAGCUUCGUGAUCCGGGGAAACGAAGUGCGGCAGAUUGCCCCUGGACAGACAGGCAACAUCGCCGACUACAACUACAAGCUGCCCGACGACUUCACCGGCUGUGUGAUUGCCUGGAACAGCAACAAGCUGGACUCCAAAGUCGGCGGCAACUACAAUUACAGGUACCGGCUGUUCCGGAAGUCCAAUCUGAAGCCCUUCGAGCGGGACAUCUCCACCGAGAUCUAUCAGGCCGGCAACAAGCCUUGUAACGGCGUGGCAGGCGUGAACUGCUACUUCCCACUGCAGUCCUACGGCUUUAGGCCCACAUACGGCGUGGGCCACCAGCCCUACAGAGUGGUGGUGCUGAGCUUCGAACUGCUGCAUGCCCCUGCCACAGUGUGCGGCCCUAAGAAAAGCACCAAUCUCGUGAAGAACAAAUGCGUGAACUUCAACUUCAACGGCCUGACCGGCACCGGCGUGCUGACAGAGAGCAACAAGAAGUUCCUGCCAUUCCAGCAGUUUGGCCGGGAUAUCGCCGAUACCACAGACGCCGUUAGAGAUCCCCAGACACUGGAAAUCCUGGACAUCACCCCUUGCAGCUUCGGCGGAGUGUCUGUGAUCACCCCUGGCACCAACACCAGCAAUCAGGUGGCAGUGCUGUACCAGGGCGUGAACUGUACCGAAGUGCCCGUGGCCAUUCACGCCGAUCAGCUGACACCUACAUGGCGGGUGUACUCCACCGGCAGCAAUGUGUUUCAGACCAGAGCCGGCUGUCUGAUCGGAGCCGAGUACGUGAACAAUAGCUACGAGUGCGACAUCCCCAUCGGCGCUGGAAUCUGCGCCAGCUACCAGACACAGACAAAGAGCCACCGGAGAGCCAGAAGCGUGGCCAGCCAGAGCAUCAUUGCCUACACAAUGUCUCUGGGCGCCGAGAACAGCGUGGCCUACUCCAACAACUCUAUCGCUAUCCCCACCAACUUCACCAUCAGCGUGACCACAGAGAUCCUGCCUGUGUCCAUGACCAAGACCAGCGUGGACUGCACCAUGUACAUCUGCGGCGAUUCCACCGAGUGCUCCAACCUGCUGCUGCAGUACGGCAGCUUCUGCACCCAGCUGAAAAGAGCCCUGACAGGGAUCGCCGUGGAACAGGACAAGAACACCCAAGAGGUGUUCGCCCAAGUGAAGCAGAUCUACAAGACCCCUCCUAUCAAGUACUUCGGCGGCUUCAAUUUCAGCCAGAUUCUGCCCGAUCCUAGCAAGCCCAGCAAGCGGAGCUUCAUCGAGGACCUGCUGUUCAACAAAGUGACACUGGCCGACGCCGGCUUCAUCAAGCAGUAUGGCGAUUGUCUGGGCGACAUUGCCGCCAGGGAUCUGAUUUGCGCCCAGAAGUUUAACGGACUGACAGUGCUGCCUCCUCUGCUGACCGAUGAGAUGAUCGCCCAGUACACAUCUGCCCUGCUGGCCGGCACAAUCACAAGCGGCUGGACAUUUGGAGCAGGCGCCGCUCUGCAGAUCCCCUUUGCUAUGCAGAUGGCCUACCGGUUCAACGGCAUCGGAGUGACCCAGAAUGUGCUGUACGAGAACCAGAAGCUGAUCGCCAACCAGUUCAACAGCGCCAUCGGCAAGAUCCAGGACAGCCUGAGCAGCACAGCAAGCGCCCUGGGAAAGCUGCAGGACGUGGUCAACCACAAUGCCCAGGCACUGAACACCCUGGUCAAGCAGCUGUCCUCCAAGUUCGGCGCCAUCAGCUCUGUGCUGAACGAUAUCCUGAGCAGACUGGACCCUCCUGAGGCCGAGGUGCAGAUCGACAGACUGAUCACAGGCAGACUGCAGAGCCUCCAGACAUACGUGACCCAGCAGCUGAUCAGAGCCGCCGAGAUUAGAGCCUCUGCCAAUCUGGCCGCCACCAAGAUGUCUGAGUGUGUGCUGGGCCAGAGCAAGAGAGUGGACUUUUGCGGCAAGGGCUACCACCUGAUGAGCUUCCCUCAGUCUGCCCCUCACGGCGUGGUGUUUCUGCACGUGACAUAUGUGCCCGCUCAAGAGAAGAAUUUCACCACCGCUCCAGCCAUCUGCCACGACGGCAAAGCCCACUUUCCUAGAGAAGGCGUGUUCGUGUCCAACGGCACCCAUUGGUUCGUGACACAGCGGAACUUCUACGAGCCCCAGAUCAUCACCACCGACAACACCUUCGUGUCUGGCAACUGCGACGUCGUGAUCGGCAUUGUGAACAAUACCGUGUACGACCCUCUGCAGCCCGAGCUGGACAGCUUCAAAGAGGAACUGGACAAGUACUUUAAGAACCACACAAGCCCCGACGUGGACCUGGGCGAUAUCAGCGGAAUCAAUGCCAGCGUCGUGAACAUCCAGAAAGAGAUCGACCGGCUGAACGAGGUGGCCAAGAAUCUGAACGAGAGCCUGAUCGACCUGCAAGAACUGGGGAAGUACGAGCAGUACAUCAAGUGGCCCUGGUACAUCUGGCUGGGCUUUAUCGCCGGACUGAUUGCCAUCGUGAUGGUCACAAUCAUGCUGUGUUGCAUGACCAGCUGCUGUAGCUGCCUGAAGGGCUGUUGUAGCUGUGGCAGCUGCUGCAAGUUCGACGAGGACGAUUCUGAGCCCGUGCUGAAGGGCGUGAAACUGCACUACACAUGAUGA
71 編碼來自奧密克戎BA.4/BA.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之DNA序列 ATGTTCGTGTTCCTGGTGCTGCTGCCTCTGGTGTCCAGCCAGTGTGTGAACCTGATCACCAGAACACAGTCATACACCAACAGCTTTACCAGAGGCGTGTACTACCCCGACAAGGTGTTCAGATCCAGCGTGCTGCACTCTACCCAGGACCTGTTCCTGCCTTTCTTCAGCAACGTGACCTGGTTCCACGCCATCTCCGGCACCAATGGCACCAAGAGATTCGACAACCCCGTGCTGCCCTTCAACGACGGGGTGTACTTTGCCAGCACCGAGAAGTCCAACATCATCAGAGGCTGGATCTTCGGCACCACACTGGACAGCAAGACCCAGAGCCTGCTGATCGTGAACAACGCCACCAACGTGGTCATCAAAGTGTGCGAGTTCCAGTTCTGCAACGACCCCTTCCTGGACGTCTACTACCACAAGAACAACAAGAGCTGGATGGAAAGCGAGTTCCGGGTGTACAGCAGCGCCAACAACTGCACCTTCGAGTACGTGTCCCAGCCTTTCCTGATGGACCTGGAAGGCAAGCAGGGCAACTTCAAGAACCTGCGCGAGTTCGTGTTTAAGAACATCGACGGCTACTTCAAGATCTACAGCAAGCACACCCCTATCAACCTCGGCCGGGATCTGCCTCAGGGCTTCTCTGCTCTGGAACCCCTGGTGGATCTGCCCATCGGCATCAACATCACCCGGTTTCAGACACTGCTGGCCCTGCACAGAAGCTACCTGACACCTGGCGATAGCAGCAGCGGATGGACAGCTGGTGCCGCCGCTTACTATGTGGGCTACCTGCAGCCTAGAACCTTCCTGCTGAAGTACAACGAGAACGGCACCATCACCGACGCCGTGGATTGTGCTCTGGATCCTCTGAGCGAGACAAAGTGCACCCTGAAGTCCTTCACCGTGGAAAAGGGCATCTACCAGACCAGCAACTTCCGGGTGCAGCCCACCGAATCCATCGTGCGGTTCCCCAATATCACCAATCTGTGCCCCTTCGACGAGGTGTTCAATGCCACCAGATTCGCCTCTGTGTACGCCTGGAACCGGAAGCGGATCAGCAATTGCGTGGCCGACTACTCCGTGCTGTACAACTTCGCCCCCTTCTTCGCATTCAAGTGCTACGGCGTGTCCCCTACCAAGCTGAACGACCTGTGCTTCACAAACGTGTACGCCGACAGCTTCGTGATCCGGGGAAACGAAGTGCGGCAGATTGCCCCTGGACAGACAGGCAACATCGCCGACTACAACTACAAGCTGCCCGACGACTTCACCGGCTGTGTGATTGCCTGGAACAGCAACAAGCTGGACTCCAAAGTCGGCGGCAACTACAATTACAGGTACCGGCTGTTCCGGAAGTCCAATCTGAAGCCCTTCGAGCGGGACATCTCCACCGAGATCTATCAGGCCGGCAACAAGCCTTGTAACGGCGTGGCAGGCGTGAACTGCTACTTCCCACTGCAGTCCTACGGCTTTAGGCCCACATACGGCGTGGGCCACCAGCCCTACAGAGTGGTGGTGCTGAGCTTCGAACTGCTGCATGCCCCTGCCACAGTGTGCGGCCCTAAGAAAAGCACCAATCTCGTGAAGAACAAATGCGTGAACTTCAACTTCAACGGCCTGACCGGCACCGGCGTGCTGACAGAGAGCAACAAGAAGTTCCTGCCATTCCAGCAGTTTGGCCGGGATATCGCCGATACCACAGACGCCGTTAGAGATCCCCAGACACTGGAAATCCTGGACATCACCCCTTGCAGCTTCGGCGGAGTGTCTGTGATCACCCCTGGCACCAACACCAGCAATCAGGTGGCAGTGCTGTACCAGGGCGTGAACTGTACCGAAGTGCCCGTGGCCATTCACGCCGATCAGCTGACACCTACATGGCGGGTGTACTCCACCGGCAGCAATGTGTTTCAGACCAGAGCCGGCTGTCTGATCGGAGCCGAGTACGTGAACAATAGCTACGAGTGCGACATCCCCATCGGCGCTGGAATCTGCGCCAGCTACCAGACACAGACAAAGAGCCACCGGAGAGCCAGAAGCGTGGCCAGCCAGAGCATCATTGCCTACACAATGTCTCTGGGCGCCGAGAACAGCGTGGCCTACTCCAACAACTCTATCGCTATCCCCACCAACTTCACCATCAGCGTGACCACAGAGATCCTGCCTGTGTCCATGACCAAGACCAGCGTGGACTGCACCATGTACATCTGCGGCGATTCCACCGAGTGCTCCAACCTGCTGCTGCAGTACGGCAGCTTCTGCACCCAGCTGAAAAGAGCCCTGACAGGGATCGCCGTGGAACAGGACAAGAACACCCAAGAGGTGTTCGCCCAAGTGAAGCAGATCTACAAGACCCCTCCTATCAAGTACTTCGGCGGCTTCAATTTCAGCCAGATTCTGCCCGATCCTAGCAAGCCCAGCAAGCGGAGCTTCATCGAGGACCTGCTGTTCAACAAAGTGACACTGGCCGACGCCGGCTTCATCAAGCAGTATGGCGATTGTCTGGGCGACATTGCCGCCAGGGATCTGATTTGCGCCCAGAAGTTTAACGGACTGACAGTGCTGCCTCCTCTGCTGACCGATGAGATGATCGCCCAGTACACATCTGCCCTGCTGGCCGGCACAATCACAAGCGGCTGGACATTTGGAGCAGGCGCCGCTCTGCAGATCCCCTTTGCTATGCAGATGGCCTACCGGTTCAACGGCATCGGAGTGACCCAGAATGTGCTGTACGAGAACCAGAAGCTGATCGCCAACCAGTTCAACAGCGCCATCGGCAAGATCCAGGACAGCCTGAGCAGCACAGCAAGCGCCCTGGGAAAGCTGCAGGACGTGGTCAACCACAATGCCCAGGCACTGAACACCCTGGTCAAGCAGCTGTCCTCCAAGTTCGGCGCCATCAGCTCTGTGCTGAACGATATCCTGAGCAGACTGGACCCTCCTGAGGCCGAGGTGCAGATCGACAGACTGATCACAGGCAGACTGCAGAGCCTCCAGACATACGTGACCCAGCAGCTGATCAGAGCCGCCGAGATTAGAGCCTCTGCCAATCTGGCCGCCACCAAGATGTCTGAGTGTGTGCTGGGCCAGAGCAAGAGAGTGGACTTTTGCGGCAAGGGCTACCACCTGATGAGCTTCCCTCAGTCTGCCCCTCACGGCGTGGTGTTTCTGCACGTGACATATGTGCCCGCTCAAGAGAAGAATTTCACCACCGCTCCAGCCATCTGCCACGACGGCAAAGCCCACTTTCCTAGAGAAGGCGTGTTCGTGTCCAACGGCACCCATTGGTTCGTGACACAGCGGAACTTCTACGAGCCCCAGATCATCACCACCGACAACACCTTCGTGTCTGGCAACTGCGACGTCGTGATCGGCATTGTGAACAATACCGTGTACGACCCTCTGCAGCCCGAGCTGGACAGCTTCAAAGAGGAACTGGACAAGTACTTTAAGAACCACACAAGCCCCGACGTGGACCTGGGCGATATCAGCGGAATCAATGCCAGCGTCGTGAACATCCAGAAAGAGATCGACCGGCTGAACGAGGTGGCCAAGAATCTGAACGAGAGCCTGATCGACCTGCAAGAACTGGGGAAGTACGAGCAGTACATCAAGTGGCCCTGGTACATCTGGCTGGGCTTTATCGCCGGACTGATTGCCATCGTGATGGTCACAATCATGCTGTGTTGCATGACCAGCTGCTGTAGCTGCCTGAAGGGCTGTTGTAGCTGTGGCAGCTGCTGCAAGTTCGACGAGGACGATTCTGAGCCCGTGCTGAAGGGCGTGAAACTGCACTACACATGATGA
72 RBP020.22之全長RNA構築體序列 AGAAUAAACUAGUAUUCUUCUGGUCCCCACAGACUCAGAGAGAACCCGCCACCAUGUUCGUGUUCCUGGUGCUGCUGCCUCUGGUGUCCAGCCAGUGUGUGAACCUGAUCACCAGAACACAGUCAUACACCAACAGCUUUACCAGAGGCGUGUACUACCCCGACAAGGUGUUCAGAUCCAGCGUGCUGCACUCUACCCAGGACCUGUUCCUGCCUUUCUUCAGCAACGUGACCUGGUUCCACGCCAUCUCCGGCACCAAUGGCACCAAGAGAUUCGACAACCCCGUGCUGCCCUUCAACGACGGGGUGUACUUUGCCAGCACCGAGAAGUCCAACAUCAUCAGAGGCUGGAUCUUCGGCACCACACUGGACAGCAAGACCCAGAGCCUGCUGAUCGUGAACAACGCCACCAACGUGGUCAUCAAAGUGUGCGAGUUCCAGUUCUGCAACGACCCCUUCCUGGACGUCUACUACCACAAGAACAACAAGAGCUGGAUGGAAAGCGAGUUCCGGGUGUACAGCAGCGCCAACAACUGCACCUUCGAGUACGUGUCCCAGCCUUUCCUGAUGGACCUGGAAGGCAAGCAGGGCAACUUCAAGAACCUGCGCGAGUUCGUGUUUAAGAACAUCGACGGCUACUUCAAGAUCUACAGCAAGCACACCCCUAUCAACCUCGGCCGGGAUCUGCCUCAGGGCUUCUCUGCUCUGGAACCCCUGGUGGAUCUGCCCAUCGGCAUCAACAUCACCCGGUUUCAGACACUGCUGGCCCUGCACAGAAGCUACCUGACACCUGGCGAUAGCAGCAGCGGAUGGACAGCUGGUGCCGCCGCUUACUAUGUGGGCUACCUGCAGCCUAGAACCUUCCUGCUGAAGUACAACGAGAACGGCACCAUCACCGACGCCGUGGAUUGUGCUCUGGAUCCUCUGAGCGAGACAAAGUGCACCCUGAAGUCCUUCACCGUGGAAAAGGGCAUCUACCAGACCAGCAACUUCCGGGUGCAGCCCACCGAAUCCAUCGUGCGGUUCCCCAAUAUCACCAAUCUGUGCCCCUUCGACGAGGUGUUCAAUGCCACCAGAUUCGCCUCUGUGUACGCCUGGAACCGGAAGCGGAUCAGCAAUUGCGUGGCCGACUACUCCGUGCUGUACAACUUCGCCCCCUUCUUCGCAUUCAAGUGCUACGGCGUGUCCCCUACCAAGCUGAACGACCUGUGCUUCACAAACGUGUACGCCGACAGCUUCGUGAUCCGGGGAAACGAAGUGCGGCAGAUUGCCCCUGGACAGACAGGCAACAUCGCCGACUACAACUACAAGCUGCCCGACGACUUCACCGGCUGUGUGAUUGCCUGGAACAGCAACAAGCUGGACUCCAAAGUCGGCGGCAACUACAAUUACAGGUACCGGCUGUUCCGGAAGUCCAAUCUGAAGCCCUUCGAGCGGGACAUCUCCACCGAGAUCUAUCAGGCCGGCAACAAGCCUUGUAACGGCGUGGCAGGCGUGAACUGCUACUUCCCACUGCAGUCCUACGGCUUUAGGCCCACAUACGGCGUGGGCCACCAGCCCUACAGAGUGGUGGUGCUGAGCUUCGAACUGCUGCAUGCCCCUGCCACAGUGUGCGGCCCUAAGAAAAGCACCAAUCUCGUGAAGAACAAAUGCGUGAACUUCAACUUCAACGGCCUGACCGGCACCGGCGUGCUGACAGAGAGCAACAAGAAGUUCCUGCCAUUCCAGCAGUUUGGCCGGGAUAUCGCCGAUACCACAGACGCCGUUAGAGAUCCCCAGACACUGGAAAUCCUGGACAUCACCCCUUGCAGCUUCGGCGGAGUGUCUGUGAUCACCCCUGGCACCAACACCAGCAAUCAGGUGGCAGUGCUGUACCAGGGCGUGAACUGUACCGAAGUGCCCGUGGCCAUUCACGCCGAUCAGCUGACACCUACAUGGCGGGUGUACUCCACCGGCAGCAAUGUGUUUCAGACCAGAGCCGGCUGUCUGAUCGGAGCCGAGUACGUGAACAAUAGCUACGAGUGCGACAUCCCCAUCGGCGCUGGAAUCUGCGCCAGCUACCAGACACAGACAAAGAGCCACCGGAGAGCCAGAAGCGUGGCCAGCCAGAGCAUCAUUGCCUACACAAUGUCUCUGGGCGCCGAGAACAGCGUGGCCUACUCCAACAACUCUAUCGCUAUCCCCACCAACUUCACCAUCAGCGUGACCACAGAGAUCCUGCCUGUGUCCAUGACCAAGACCAGCGUGGACUGCACCAUGUACAUCUGCGGCGAUUCCACCGAGUGCUCCAACCUGCUGCUGCAGUACGGCAGCUUCUGCACCCAGCUGAAAAGAGCCCUGACAGGGAUCGCCGUGGAACAGGACAAGAACACCCAAGAGGUGUUCGCCCAAGUGAAGCAGAUCUACAAGACCCCUCCUAUCAAGUACUUCGGCGGCUUCAAUUUCAGCCAGAUUCUGCCCGAUCCUAGCAAGCCCAGCAAGCGGAGCUUCAUCGAGGACCUGCUGUUCAACAAAGUGACACUGGCCGACGCCGGCUUCAUCAAGCAGUAUGGCGAUUGUCUGGGCGACAUUGCCGCCAGGGAUCUGAUUUGCGCCCAGAAGUUUAACGGACUGACAGUGCUGCCUCCUCUGCUGACCGAUGAGAUGAUCGCCCAGUACACAUCUGCCCUGCUGGCCGGCACAAUCACAAGCGGCUGGACAUUUGGAGCAGGCGCCGCUCUGCAGAUCCCCUUUGCUAUGCAGAUGGCCUACCGGUUCAACGGCAUCGGAGUGACCCAGAAUGUGCUGUACGAGAACCAGAAGCUGAUCGCCAACCAGUUCAACAGCGCCAUCGGCAAGAUCCAGGACAGCCUGAGCAGCACAGCAAGCGCCCUGGGAAAGCUGCAGGACGUGGUCAACCACAAUGCCCAGGCACUGAACACCCUGGUCAAGCAGCUGUCCUCCAAGUUCGGCGCCAUCAGCUCUGUGCUGAACGAUAUCCUGAGCAGACUGGACCCUCCUGAGGCCGAGGUGCAGAUCGACAGACUGAUCACAGGCAGACUGCAGAGCCUCCAGACAUACGUGACCCAGCAGCUGAUCAGAGCCGCCGAGAUUAGAGCCUCUGCCAAUCUGGCCGCCACCAAGAUGUCUGAGUGUGUGCUGGGCCAGAGCAAGAGAGUGGACUUUUGCGGCAAGGGCUACCACCUGAUGAGCUUCCCUCAGUCUGCCCCUCACGGCGUGGUGUUUCUGCACGUGACAUAUGUGCCCGCUCAAGAGAAGAAUUUCACCACCGCUCCAGCCAUCUGCCACGACGGCAAAGCCCACUUUCCUAGAGAAGGCGUGUUCGUGUCCAACGGCACCCAUUGGUUCGUGACACAGCGGAACUUCUACGAGCCCCAGAUCAUCACCACCGACAACACCUUCGUGUCUGGCAACUGCGACGUCGUGAUCGGCAUUGUGAACAAUACCGUGUACGACCCUCUGCAGCCCGAGCUGGACAGCUUCAAAGAGGAACUGGACAAGUACUUUAAGAACCACACAAGCCCCGACGUGGACCUGGGCGAUAUCAGCGGAAUCAAUGCCAGCGUCGUGAACAUCCAGAAAGAGAUCGACCGGCUGAACGAGGUGGCCAAGAAUCUGAACGAGAGCCUGAUCGACCUGCAAGAACUGGGGAAGUACGAGCAGUACAUCAAGUGGCCCUGGUACAUCUGGCUGGGCUUUAUCGCCGGACUGAUUGCCAUCGUGAUGGUCACAAUCAUGCUGUGUUGCAUGACCAGCUGCUGUAGCUGCCUGAAGGGCUGUUGUAGCUGUGGCAGCUGCUGCAAGUUCGACGAGGACGAUUCUGAGCCCGUGCUGAAGGGCGUGAAACUGCACUACACAUGAUGACUCGAGCUGGUACUGCAUGCACGCAAUGCUAGCUGCCCCUUUCCCGUCCUGGGUACCCCGAGUCUCCCCCGACCUCGGGUCCCAGGUAUGCUCCCACCUCCACCUGCCCCACUCACCACCUCUGCUAGUUCCAGACACCUCCCAAGCACGCAGCAAUGCAGCUCAAAACGCUUAGCCUAGCCACACCCCCACGGGAAACAGCAGUGAUUAACCUUUAGCAAUAAACGAAAGUUUAACUAAGCUAUACUAACCCCAGGGUUGGUCAAUUUCGUGCCAGCCACACCCUGGAGCUAGCAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAGCAUAUGACUAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA
73 RBP020.22之全長DNA構築體序列 AGAATAAACTAGTATTCTTCTGGTCCCCACAGACTCAGAGAGAACCCGCCACCATGTTCGTGTTCCTGGTGCTGCTGCCTCTGGTGTCCAGCCAGTGTGTGAACCTGATCACCAGAACACAGTCATACACCAACAGCTTTACCAGAGGCGTGTACTACCCCGACAAGGTGTTCAGATCCAGCGTGCTGCACTCTACCCAGGACCTGTTCCTGCCTTTCTTCAGCAACGTGACCTGGTTCCACGCCATCTCCGGCACCAATGGCACCAAGAGATTCGACAACCCCGTGCTGCCCTTCAACGACGGGGTGTACTTTGCCAGCACCGAGAAGTCCAACATCATCAGAGGCTGGATCTTCGGCACCACACTGGACAGCAAGACCCAGAGCCTGCTGATCGTGAACAACGCCACCAACGTGGTCATCAAAGTGTGCGAGTTCCAGTTCTGCAACGACCCCTTCCTGGACGTCTACTACCACAAGAACAACAAGAGCTGGATGGAAAGCGAGTTCCGGGTGTACAGCAGCGCCAACAACTGCACCTTCGAGTACGTGTCCCAGCCTTTCCTGATGGACCTGGAAGGCAAGCAGGGCAACTTCAAGAACCTGCGCGAGTTCGTGTTTAAGAACATCGACGGCTACTTCAAGATCTACAGCAAGCACACCCCTATCAACCTCGGCCGGGATCTGCCTCAGGGCTTCTCTGCTCTGGAACCCCTGGTGGATCTGCCCATCGGCATCAACATCACCCGGTTTCAGACACTGCTGGCCCTGCACAGAAGCTACCTGACACCTGGCGATAGCAGCAGCGGATGGACAGCTGGTGCCGCCGCTTACTATGTGGGCTACCTGCAGCCTAGAACCTTCCTGCTGAAGTACAACGAGAACGGCACCATCACCGACGCCGTGGATTGTGCTCTGGATCCTCTGAGCGAGACAAAGTGCACCCTGAAGTCCTTCACCGTGGAAAAGGGCATCTACCAGACCAGCAACTTCCGGGTGCAGCCCACCGAATCCATCGTGCGGTTCCCCAATATCACCAATCTGTGCCCCTTCGACGAGGTGTTCAATGCCACCAGATTCGCCTCTGTGTACGCCTGGAACCGGAAGCGGATCAGCAATTGCGTGGCCGACTACTCCGTGCTGTACAACTTCGCCCCCTTCTTCGCATTCAAGTGCTACGGCGTGTCCCCTACCAAGCTGAACGACCTGTGCTTCACAAACGTGTACGCCGACAGCTTCGTGATCCGGGGAAACGAAGTGCGGCAGATTGCCCCTGGACAGACAGGCAACATCGCCGACTACAACTACAAGCTGCCCGACGACTTCACCGGCTGTGTGATTGCCTGGAACAGCAACAAGCTGGACTCCAAAGTCGGCGGCAACTACAATTACAGGTACCGGCTGTTCCGGAAGTCCAATCTGAAGCCCTTCGAGCGGGACATCTCCACCGAGATCTATCAGGCCGGCAACAAGCCTTGTAACGGCGTGGCAGGCGTGAACTGCTACTTCCCACTGCAGTCCTACGGCTTTAGGCCCACATACGGCGTGGGCCACCAGCCCTACAGAGTGGTGGTGCTGAGCTTCGAACTGCTGCATGCCCCTGCCACAGTGTGCGGCCCTAAGAAAAGCACCAATCTCGTGAAGAACAAATGCGTGAACTTCAACTTCAACGGCCTGACCGGCACCGGCGTGCTGACAGAGAGCAACAAGAAGTTCCTGCCATTCCAGCAGTTTGGCCGGGATATCGCCGATACCACAGACGCCGTTAGAGATCCCCAGACACTGGAAATCCTGGACATCACCCCTTGCAGCTTCGGCGGAGTGTCTGTGATCACCCCTGGCACCAACACCAGCAATCAGGTGGCAGTGCTGTACCAGGGCGTGAACTGTACCGAAGTGCCCGTGGCCATTCACGCCGATCAGCTGACACCTACATGGCGGGTGTACTCCACCGGCAGCAATGTGTTTCAGACCAGAGCCGGCTGTCTGATCGGAGCCGAGTACGTGAACAATAGCTACGAGTGCGACATCCCCATCGGCGCTGGAATCTGCGCCAGCTACCAGACACAGACAAAGAGCCACCGGAGAGCCAGAAGCGTGGCCAGCCAGAGCATCATTGCCTACACAATGTCTCTGGGCGCCGAGAACAGCGTGGCCTACTCCAACAACTCTATCGCTATCCCCACCAACTTCACCATCAGCGTGACCACAGAGATCCTGCCTGTGTCCATGACCAAGACCAGCGTGGACTGCACCATGTACATCTGCGGCGATTCCACCGAGTGCTCCAACCTGCTGCTGCAGTACGGCAGCTTCTGCACCCAGCTGAAAAGAGCCCTGACAGGGATCGCCGTGGAACAGGACAAGAACACCCAAGAGGTGTTCGCCCAAGTGAAGCAGATCTACAAGACCCCTCCTATCAAGTACTTCGGCGGCTTCAATTTCAGCCAGATTCTGCCCGATCCTAGCAAGCCCAGCAAGCGGAGCTTCATCGAGGACCTGCTGTTCAACAAAGTGACACTGGCCGACGCCGGCTTCATCAAGCAGTATGGCGATTGTCTGGGCGACATTGCCGCCAGGGATCTGATTTGCGCCCAGAAGTTTAACGGACTGACAGTGCTGCCTCCTCTGCTGACCGATGAGATGATCGCCCAGTACACATCTGCCCTGCTGGCCGGCACAATCACAAGCGGCTGGACATTTGGAGCAGGCGCCGCTCTGCAGATCCCCTTTGCTATGCAGATGGCCTACCGGTTCAACGGCATCGGAGTGACCCAGAATGTGCTGTACGAGAACCAGAAGCTGATCGCCAACCAGTTCAACAGCGCCATCGGCAAGATCCAGGACAGCCTGAGCAGCACAGCAAGCGCCCTGGGAAAGCTGCAGGACGTGGTCAACCACAATGCCCAGGCACTGAACACCCTGGTCAAGCAGCTGTCCTCCAAGTTCGGCGCCATCAGCTCTGTGCTGAACGATATCCTGAGCAGACTGGACCCTCCTGAGGCCGAGGTGCAGATCGACAGACTGATCACAGGCAGACTGCAGAGCCTCCAGACATACGTGACCCAGCAGCTGATCAGAGCCGCCGAGATTAGAGCCTCTGCCAATCTGGCCGCCACCAAGATGTCTGAGTGTGTGCTGGGCCAGAGCAAGAGAGTGGACTTTTGCGGCAAGGGCTACCACCTGATGAGCTTCCCTCAGTCTGCCCCTCACGGCGTGGTGTTTCTGCACGTGACATATGTGCCCGCTCAAGAGAAGAATTTCACCACCGCTCCAGCCATCTGCCACGACGGCAAAGCCCACTTTCCTAGAGAAGGCGTGTTCGTGTCCAACGGCACCCATTGGTTCGTGACACAGCGGAACTTCTACGAGCCCCAGATCATCACCACCGACAACACCTTCGTGTCTGGCAACTGCGACGTCGTGATCGGCATTGTGAACAATACCGTGTACGACCCTCTGCAGCCCGAGCTGGACAGCTTCAAAGAGGAACTGGACAAGTACTTTAAGAACCACACAAGCCCCGACGTGGACCTGGGCGATATCAGCGGAATCAATGCCAGCGTCGTGAACATCCAGAAAGAGATCGACCGGCTGAACGAGGTGGCCAAGAATCTGAACGAGAGCCTGATCGACCTGCAAGAACTGGGGAAGTACGAGCAGTACATCAAGTGGCCCTGGTACATCTGGCTGGGCTTTATCGCCGGACTGATTGCCATCGTGATGGTCACAATCATGCTGTGTTGCATGACCAGCTGCTGTAGCTGCCTGAAGGGCTGTTGTAGCTGTGGCAGCTGCTGCAAGTTCGACGAGGACGATTCTGAGCCCGTGCTGAAGGGCGTGAAACTGCACTACACATGATGACTCGAGCTGGTACTGCATGCACGCAATGCTAGCTGCCCCTTTCCCGTCCTGGGTACCCCGAGTCTCCCCCGACCTCGGGTCCCAGGTATGCTCCCACCTCCACCTGCCCCACTCACCACCTCTGCTAGTTCCAGACACCTCCCAAGCACGCAGCAATGCAGCTCAAAACGCTTAGCCTAGCCACACCCCCACGGGAAACAGCAGTGATTAACCTTTAGCAATAAACGAAAGTTTAACTAAGCTATACTAACCCCAGGGTTGGTCAATTTCGTGCCAGCCACACCCTGGAGCTAGCAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAGCATATGACTAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA
表 9 ：如上表8中所示之RBP020.22 (奧密克戎BA.4/BA.5特異性SARS-CoV-2 RNA疫苗)之描述
構築體 奧密克戎BA.4/BA.5 P2
抗原 P2突變之全刺突蛋白
變化 胺基酸 a mRNA核苷酸(位置)
弗林蛋白酶位點 RRAR (SEQ ID NO: 178) CGGAGAGCCAGA (SEQ ID NO: 179) (2082-2093)
脯胺酸 K986P CCU (3000-3002)
V987P CCU (3003-3005)
譜系 T19I AUC (108-110)
L24del /
P25del /
P26del /
A27S UCA (123-125)
H69del /
V70del /
G142D GAC (462-464)
V213G GGC (675-677)
G339D GAC (1053-1055)
S371F UUC (1149-1151)
S373P CCC (1155-1157)
S375F UUC (1161-1163)
T376A GCA (1164-1166)
D405N AAC (1251-1253)
K417N AAC (1287-1289)
N440K AAG (1356-1358)
L452R AGG (1392-1394)
S477N AAC (1467-1469)
T478K AAG (1470-1472)
E484A GCA (1488-1490)
F486V GUG (1494-1496)
Q498R AGG (1530-1532)
N501Y UAC (1539-1541)
Y505H CAC (1551-1553)
D614G GGC (1878-1880)
H655Y UAC (2001-2003)
N679K AAG (2073-2075)
P681H CAC (2079-2081)
N764K AAA (2328-2330)
D796Y UAC (2424-2426)
Q954H CAC (2898-2900)
N969K AAG (2943-2945)
表10：奧密克戎BA.4/BA.5特異性SARS-CoV-2 RNA疫苗之一個實施例之序列
SEQ ID NO. 簡述 序列
74 來自奧密克戎BA.4/BA.5變異體之RNA編碼SARS-CoV-2 S蛋白之胺基酸序列(在對應於SEQ ID NO: 1之K986P及V987P之位置處具有PRO突變；亦即，SEQ ID NO: 74之位置981及982處的PRO突變) MFVFLVLLPLVSSQCVNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAISGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYYHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLGRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKVGGNYNYRYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDPPEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT
75 編碼來自奧密克戎BA.4/BA.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA序列(在對應於SEQ ID NO: 1之K986P及V987P之位置處具有PRO突變；亦即，SEQ ID NO: 74之位置981及982處的PRO突變) AUGUUCGUGUUCCUGGUGCUGCUGCCUCUGGUGUCCAGCCAGUGUGUGAACCUGAUCACCAGAACACAGAGCUACACCAACAGCUUUACCAGAGGCGUGUACUACCCCGACAAGGUGUUCAGAUCCAGCGUGCUGCACUCUACCCAGGACCUGUUCCUGCCUUUCUUCAGCAACGUGACCUGGUUCCACGCCAUCUCCGGCACCAAUGGCACCAAGAGAUUCGACAACCCCGUGCUGCCCUUCAACGACGGGGUGUACUUUGCCAGCACCGAGAAGUCCAACAUCAUCAGAGGCUGGAUCUUCGGCACCACACUGGACAGCAAGACCCAGAGCCUGCUGAUCGUGAACAACGCCACCAACGUGGUCAUCAAAGUGUGCGAGUUCCAGUUCUGCAACGACCCCUUCCUGGACGUGUACUACCACAAGAACAACAAGAGCUGGAUGGAAAGCGAGUUCCGGGUGUACAGCAGCGCCAACAACUGCACCUUCGAGUACGUGUCCCAGCCUUUCCUGAUGGACCUGGAAGGCAAGCAGGGCAACUUCAAGAACCUGCGCGAGUUCGUGUUUAAGAACAUCGACGGCUACUUCAAGAUCUACAGCAAGCACACCCCUAUCAACCUCGGCCGGGAUCUGCCUCAGGGCUUCUCUGCUCUGGAACCCCUGGUGGAUCUGCCCAUCGGCAUCAACAUCACCCGGUUUCAGACACUGCUGGCCCUGCACAGAAGCUACCUGACACCUGGCGAUAGCAGCAGCGGAUGGACAGCUGGUGCCGCCGCUUACUAUGUGGGCUACCUGCAGCCUAGAACCUUCCUGCUGAAGUACAACGAGAACGGCACCAUCACCGACGCCGUGGAUUGUGCUCUGGAUCCUCUGAGCGAGACAAAGUGCACCCUGAAGUCCUUCACCGUGGAAAAGGGCAUCUACCAGACCAGCAACUUCCGGGUGCAGCCCACCGAAUCCAUCGUGCGGUUCCCCAAUAUCACCAAUCUGUGCCCCUUCGACGAGGUGUUCAAUGCCACCAGAUUCGCCUCUGUGUACGCCUGGAACCGGAAGCGGAUCAGCAAUUGCGUGGCCGACUACUCCGUGCUGUACAACUUCGCCCCCUUCUUCGCCUUCAAGUGCUACGGCGUGUCCCCUACCAAGCUGAACGACCUGUGCUUCACAAACGUGUACGCCGACAGCUUCGUGAUCCGGGGAAACGAAGUGAGCCAGAUUGCCCCUGGACAGACAGGCAACAUCGCCGACUACAACUACAAGCUGCCCGACGACUUCACCGGCUGUGUGAUUGCCUGGAACAGCAACAAGCUGGACUCCAAAGUCGGCGGCAACUACAAUUACAGGUACCGGCUGUUCCGGAAGUCCAAUCUGAAGCCCUUCGAGCGGGACAUCUCCACCGAGAUCUAUCAGGCCGGCAACAAGCCUUGUAACGGCGUGGCCGGCGUGAACUGCUACUUCCCACUGCAGUCCUACGGCUUUAGGCCCACAUAUGGCGUGGGCCAUCAGCCCUACAGAGUGGUGGUGCUGAGCUUCGAACUGCUGCAUGCCCCUGCCACAGUGUGCGGCCCUAAGAAAAGCACCAAUCUCGUGAAGAACAAAUGCGUGAACUUCAACUUCAACGGCCUGACCGGCACCGGCGUGCUGACAGAGAGCAACAAGAAGUUCCUGCCAUUCCAGCAGUUUGGCCGGGAUAUCGCCGAUACCACAGACGCCGUUAGAGAUCCCCAGACACUGGAAAUCCUGGACAUCACCCCUUGCAGCUUCGGCGGAGUGUCUGUGAUCACCCCUGGCACCAACACCAGCAAUCAGGUGGCAGUGCUGUACCAGGGCGUGAACUGUACCGAAGUGCCCGUGGCCAUUCACGCCGAUCAGCUGACACCUACAUGGCGGGUGUACUCCACCGGCAGCAAUGUGUUUCAGACCAGAGCCGGCUGUCUGAUCGGAGCCGAGUACGUGAACAAUAGCUACGAGUGCGACAUCCCCAUCGGCGCUGGAAUCUGCGCCAGCUACCAGACACAGACAAAGAGCCACCGGAGAGCCAGAAGCGUGGCCAGCCAGAGCAUCAUUGCCUACACAAUGUCUCUGGGCGCCGAGAACAGCGUGGCCUACUCCAACAACUCUAUCGCUAUCCCCACCAACUUCACCAUCAGCGUGACCACAGAGAUCCUGCCUGUGUCCAUGACCAAGACCAGCGUGGACUGCACCAUGUACAUCUGCGGCGAUUCCACCGAGUGCUCCAACCUGCUGCUGCAGUACGGCAGCUUCUGCACCCAGCUGAAGAGAGCCCUGACAGGGAUCGCCGUGGAACAGGACAAGAACACCCAAGAGGUGUUCGCCCAAGUGAAGCAGAUCUACAAGACCCCUCCUAUCAAGUACUUCGGCGGCUUCAAUUUCAGCCAGAUUCUGCCCGAUCCUAGCAAGCCCAGCAAGCGGAGCUUCAUCGAGGACCUGCUGUUCAACAAAGUGACACUGGCCGACGCCGGCUUCAUCAAGCAGUAUGGCGAUUGUCUGGGCGACAUUGCCGCCAGGGAUCUGAUUUGCGCCCAGAAGUUUAACGGACUGACAGUGCUGCCUCCUCUGCUGACCGAUGAGAUGAUCGCCCAGUACACAUCUGCCCUGCUGGCCGGCACAAUCACAAGCGGCUGGACAUUUGGAGCAGGCGCCGCUCUGCAGAUCCCCUUUGCUAUGCAGAUGGCCUACCGGUUCAACGGCAUCGGAGUGACCCAGAAUGUGCUGUACGAGAACCAGAAGCUGAUCGCCAACCAGUUCAACAGCGCCAUCGGCAAGAUCCAGGACAGCCUGAGCAGCACAGCAAGCGCCCUGGGAAAGCUGCAGGACGUGGUCAACCACAAUGCCCAGGCACUGAACACCCUGGUCAAGCAGCUGUCCUCCAAGUUCGGCGCCAUCAGCUCUGUGCUGAACGAUAUCCUGAGCAGACUGGACCCUCCUGAGGCCGAGGUGCAGAUCGACAGACUGAUCACAGGCAGACUGCAGAGCCUCCAGACAUACGUGACCCAGCAGCUGAUCAGAGCCGCCGAGAUUAGAGCCUCUGCCAAUCUGGCCGCCACCAAGAUGUCUGAGUGUGUGCUGGGCCAGAGCAAGAGAGUGGACUUUUGCGGCAAGGGCUACCACCUGAUGAGCUUCCCUCAGUCUGCCCCUCACGGCGUGGUGUUUCUGCACGUGACAUAUGUGCCCGCUCAAGAGAAGAAUUUCACCACCGCUCCAGCCAUCUGCCACGACGGCAAAGCCCACUUUCCUAGAGAAGGCGUGUUCGUGUCCAACGGCACCCAUUGGUUCGUGACACAGCGGAACUUCUACGAGCCCCAGAUCAUCACCACCGACAACACCUUCGUGUCUGGCAACUGCGACGUCGUGAUCGGCAUUGUGAACAAUACCGUGUACGACCCUCUGCAGCCCGAGCUGGACAGCUUCAAAGAGGAACUGGACAAGUACUUUAAGAACCACACAAGCCCCGACGUGGACCUGGGCGAUAUCAGCGGAAUCAAUGCCAGCGUCGUGAACAUCCAGAAAGAGAUCGACCGGCUGAACGAGGUGGCCAAGAAUCUGAACGAGAGCCUGAUCGACCUGCAAGAACUGGGGAAGUACGAGCAGUACAUCAAGUGGCCCUGGUACAUCUGGCUGGGCUUUAUCGCCGGACUGAUUGCCAUCGUGAUGGUCACAAUCAUGCUGUGUUGCAUGACCAGCUGCUGUAGCUGCCUGAAGGGCUGUUGUAGCUGUGGCAGCUGCUGCAAGUUCGACGAGGACGAUUCUGAGCCCGUGCUGAAGGGCGUGAAACUGCACUACACAUGAUGA
76 編碼來自奧密克戎BA.4/BA.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之DNA序列(在對應於SEQ ID NO: 1之K986P及V987P之位置處具有脯胺酸殘基) ATGTTCGTGTTCCTGGTGCTGCTGCCTCTGGTGTCCAGCCAGTGTGTGAACCTGATCACCAGAACACAGAGCTACACCAACAGCTTTACCAGAGGCGTGTACTACCCCGACAAGGTGTTCAGATCCAGCGTGCTGCACTCTACCCAGGACCTGTTCCTGCCTTTCTTCAGCAACGTGACCTGGTTCCACGCCATCTCCGGCACCAATGGCACCAAGAGATTCGACAACCCCGTGCTGCCCTTCAACGACGGGGTGTACTTTGCCAGCACCGAGAAGTCCAACATCATCAGAGGCTGGATCTTCGGCACCACACTGGACAGCAAGACCCAGAGCCTGCTGATCGTGAACAACGCCACCAACGTGGTCATCAAAGTGTGCGAGTTCCAGTTCTGCAACGACCCCTTCCTGGACGTGTACTACCACAAGAACAACAAGAGCTGGATGGAAAGCGAGTTCCGGGTGTACAGCAGCGCCAACAACTGCACCTTCGAGTACGTGTCCCAGCCTTTCCTGATGGACCTGGAAGGCAAGCAGGGCAACTTCAAGAACCTGCGCGAGTTCGTGTTTAAGAACATCGACGGCTACTTCAAGATCTACAGCAAGCACACCCCTATCAACCTCGGCCGGGATCTGCCTCAGGGCTTCTCTGCTCTGGAACCCCTGGTGGATCTGCCCATCGGCATCAACATCACCCGGTTTCAGACACTGCTGGCCCTGCACAGAAGCTACCTGACACCTGGCGATAGCAGCAGCGGATGGACAGCTGGTGCCGCCGCTTACTATGTGGGCTACCTGCAGCCTAGAACCTTCCTGCTGAAGTACAACGAGAACGGCACCATCACCGACGCCGTGGATTGTGCTCTGGATCCTCTGAGCGAGACAAAGTGCACCCTGAAGTCCTTCACCGTGGAAAAGGGCATCTACCAGACCAGCAACTTCCGGGTGCAGCCCACCGAATCCATCGTGCGGTTCCCCAATATCACCAATCTGTGCCCCTTCGACGAGGTGTTCAATGCCACCAGATTCGCCTCTGTGTACGCCTGGAACCGGAAGCGGATCAGCAATTGCGTGGCCGACTACTCCGTGCTGTACAACTTCGCCCCCTTCTTCGCCTTCAAGTGCTACGGCGTGTCCCCTACCAAGCTGAACGACCTGTGCTTCACAAACGTGTACGCCGACAGCTTCGTGATCCGGGGAAACGAAGTGAGCCAGATTGCCCCTGGACAGACAGGCAACATCGCCGACTACAACTACAAGCTGCCCGACGACTTCACCGGCTGTGTGATTGCCTGGAACAGCAACAAGCTGGACTCCAAAGTCGGCGGCAACTACAATTACAGGTACCGGCTGTTCCGGAAGTCCAATCTGAAGCCCTTCGAGCGGGACATCTCCACCGAGATCTATCAGGCCGGCAACAAGCCTTGTAACGGCGTGGCCGGCGTGAACTGCTACTTCCCACTGCAGTCCTACGGCTTTAGGCCCACATATGGCGTGGGCCATCAGCCCTACAGAGTGGTGGTGCTGAGCTTCGAACTGCTGCATGCCCCTGCCACAGTGTGCGGCCCTAAGAAAAGCACCAATCTCGTGAAGAACAAATGCGTGAACTTCAACTTCAACGGCCTGACCGGCACCGGCGTGCTGACAGAGAGCAACAAGAAGTTCCTGCCATTCCAGCAGTTTGGCCGGGATATCGCCGATACCACAGACGCCGTTAGAGATCCCCAGACACTGGAAATCCTGGACATCACCCCTTGCAGCTTCGGCGGAGTGTCTGTGATCACCCCTGGCACCAACACCAGCAATCAGGTGGCAGTGCTGTACCAGGGCGTGAACTGTACCGAAGTGCCCGTGGCCATTCACGCCGATCAGCTGACACCTACATGGCGGGTGTACTCCACCGGCAGCAATGTGTTTCAGACCAGAGCCGGCTGTCTGATCGGAGCCGAGTACGTGAACAATAGCTACGAGTGCGACATCCCCATCGGCGCTGGAATCTGCGCCAGCTACCAGACACAGACAAAGAGCCACCGGAGAGCCAGAAGCGTGGCCAGCCAGAGCATCATTGCCTACACAATGTCTCTGGGCGCCGAGAACAGCGTGGCCTACTCCAACAACTCTATCGCTATCCCCACCAACTTCACCATCAGCGTGACCACAGAGATCCTGCCTGTGTCCATGACCAAGACCAGCGTGGACTGCACCATGTACATCTGCGGCGATTCCACCGAGTGCTCCAACCTGCTGCTGCAGTACGGCAGCTTCTGCACCCAGCTGAAGAGAGCCCTGACAGGGATCGCCGTGGAACAGGACAAGAACACCCAAGAGGTGTTCGCCCAAGTGAAGCAGATCTACAAGACCCCTCCTATCAAGTACTTCGGCGGCTTCAATTTCAGCCAGATTCTGCCCGATCCTAGCAAGCCCAGCAAGCGGAGCTTCATCGAGGACCTGCTGTTCAACAAAGTGACACTGGCCGACGCCGGCTTCATCAAGCAGTATGGCGATTGTCTGGGCGACATTGCCGCCAGGGATCTGATTTGCGCCCAGAAGTTTAACGGACTGACAGTGCTGCCTCCTCTGCTGACCGATGAGATGATCGCCCAGTACACATCTGCCCTGCTGGCCGGCACAATCACAAGCGGCTGGACATTTGGAGCAGGCGCCGCTCTGCAGATCCCCTTTGCTATGCAGATGGCCTACCGGTTCAACGGCATCGGAGTGACCCAGAATGTGCTGTACGAGAACCAGAAGCTGATCGCCAACCAGTTCAACAGCGCCATCGGCAAGATCCAGGACAGCCTGAGCAGCACAGCAAGCGCCCTGGGAAAGCTGCAGGACGTGGTCAACCACAATGCCCAGGCACTGAACACCCTGGTCAAGCAGCTGTCCTCCAAGTTCGGCGCCATCAGCTCTGTGCTGAACGATATCCTGAGCAGACTGGACCCTCCTGAGGCCGAGGTGCAGATCGACAGACTGATCACAGGCAGACTGCAGAGCCTCCAGACATACGTGACCCAGCAGCTGATCAGAGCCGCCGAGATTAGAGCCTCTGCCAATCTGGCCGCCACCAAGATGTCTGAGTGTGTGCTGGGCCAGAGCAAGAGAGTGGACTTTTGCGGCAAGGGCTACCACCTGATGAGCTTCCCTCAGTCTGCCCCTCACGGCGTGGTGTTTCTGCACGTGACATATGTGCCCGCTCAAGAGAAGAATTTCACCACCGCTCCAGCCATCTGCCACGACGGCAAAGCCCACTTTCCTAGAGAAGGCGTGTTCGTGTCCAACGGCACCCATTGGTTCGTGACACAGCGGAACTTCTACGAGCCCCAGATCATCACCACCGACAACACCTTCGTGTCTGGCAACTGCGACGTCGTGATCGGCATTGTGAACAATACCGTGTACGACCCTCTGCAGCCCGAGCTGGACAGCTTCAAAGAGGAACTGGACAAGTACTTTAAGAACCACACAAGCCCCGACGTGGACCTGGGCGATATCAGCGGAATCAATGCCAGCGTCGTGAACATCCAGAAAGAGATCGACCGGCTGAACGAGGTGGCCAAGAATCTGAACGAGAGCCTGATCGACCTGCAAGAACTGGGGAAGTACGAGCAGTACATCAAGTGGCCCTGGTACATCTGGCTGGGCTTTATCGCCGGACTGATTGCCATCGTGATGGTCACAATCATGCTGTGTTGCATGACCAGCTGCTGTAGCTGCCTGAAGGGCTGTTGTAGCTGTGGCAGCTGCTGCAAGTTCGACGAGGACGATTCTGAGCCCGTGCTGAAGGGCGTGAAACTGCACTACACATGATGA
表 11. 奧密克戎BA.4/BA.5特異性SARS-CoV-2 RNA疫苗之一個實施例之序列
SEQ ID NO. 簡述 序列
77 來自奧密克戎BA.4/BA.5變異體之RNA編碼SARS-CoV-2 S蛋白之胺基酸序列(在對應於SEQ ID NO: 1之K986P及V987P之位置處具有PRO突變；亦即，SEQ ID NO: 77之位置981及982處的PRO突變) MFVFLVLLPLVSSQCVNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAISGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYYHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLGRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVRQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKVGGNYNYRYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDPPEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT
78 編碼來自奧密克戎BA.4/BA.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA序列 AUGUUCGUGUUCCUGGUGCUGCUGCCUCUGGUGUCCAGCCAGUGUGUGAACCUGAUCACCAGAACACAGUCAUACACCAACAGCUUUACCAGAGGCGUGUACUACCCCGACAAGGUGUUCAGAUCCAGCGUGCUGCACUCUACCCAGGACCUGUUCCUGCCUUUCUUCAGCAACGUGACCUGGUUCCACGCCAUCUCCGGCACCAAUGGCACCAAGAGAUUCGACAACCCCGUGCUGCCCUUCAACGACGGGGUGUACUUUGCCAGCACCGAGAAGUCCAACAUCAUCAGAGGCUGGAUCUUCGGCACCACACUGGACAGCAAGACCCAGAGCCUGCUGAUCGUGAACAACGCCACCAACGUGGUCAUCAAAGUGUGCGAGUUCCAGUUCUGCAACGACCCCUUCCUGGACGUCUACUACCACAAGAACAACAAGAGCUGGAUGGAAAGCGAGUUCCGGGUGUACAGCAGCGCCAACAACUGCACCUUCGAGUACGUGUCCCAGCCUUUCCUGAUGGACCUGGAAGGCAAGCAGGGCAACUUCAAGAACCUGCGCGAGUUCGUGUUUAAGAACAUCGACGGCUACUUCAAGAUCUACAGCAAGCACACCCCUAUCAACCUCGGCCGGGAUCUGCCUCAGGGCUUCUCUGCUCUGGAACCCCUGGUGGAUCUGCCCAUCGGCAUCAACAUCACCCGGUUUCAGACACUGCUGGCCCUGCACAGAAGCUACCUGACACCUGGCGAUAGCAGCAGCGGAUGGACAGCUGGUGCCGCCGCUUACUAUGUGGGCUACCUGCAGCCUAGAACCUUCCUGCUGAAGUACAACGAGAACGGCACCAUCACCGACGCCGUGGAUUGUGCUCUGGAUCCUCUGAGCGAGACAAAGUGCACCCUGAAGUCCUUCACCGUGGAAAAGGGCAUCUACCAGACCAGCAACUUCCGGGUGCAGCCCACCGAAUCCAUCGUGCGGUUCCCCAAUAUCACCAAUCUGUGCCCCUUCGACGAGGUGUUCAAUGCCACCAGAUUCGCCUCUGUGUACGCCUGGAACCGGAAGCGGAUCAGCAAUUGCGUGGCCGACUACUCCGUGCUGUACAACUUCGCCCCCUUCUUCGCAUUCAAGUGCUACGGCGUGUCCCCUACCAAGCUGAACGACCUGUGCUUCACAAACGUGUACGCCGACAGCUUCGUGAUCCGGGGAAACGAAGUGCGGCAGAUUGCCCCUGGACAGACAGGCAACAUCGCCGACUACAACUACAAGCUGCCCGACGACUUCACCGGCUGUGUGAUUGCCUGGAACAGCAACAAGCUGGACUCCAAAGUCGGCGGCAACUACAAUUACAGGUACCGGCUGUUCCGGAAGUCCAAUCUGAAGCCCUUCGAGCGGGACAUCUCCACCGAGAUCUAUCAGGCCGGCAACAAGCCUUGUAACGGCGUGGCAGGCGUGAACUGCUACUUCCCACUGCAGUCCUACGGCUUUAGGCCCACAUACGGCGUGGGCCACCAGCCCUACAGAGUGGUGGUGCUGAGCUUCGAACUGCUGCAUGCCCCUGCCACAGUGUGCGGCCCUAAGAAAAGCACCAAUCUCGUGAAGAACAAAUGCGUGAACUUCAACUUCAACGGCCUGACCGGCACCGGCGUGCUGACAGAGAGCAACAAGAAGUUCCUGCCAUUCCAGCAGUUUGGCCGGGAUAUCGCCGAUACCACAGACGCCGUUAGAGAUCCCCAGACACUGGAAAUCCUGGACAUCACCCCUUGCAGCUUCGGCGGAGUGUCUGUGAUCACCCCUGGCACCAACACCAGCAAUCAGGUGGCAGUGCUGUACCAGGGCGUGAACUGUACCGAAGUGCCCGUGGCCAUUCACGCCGAUCAGCUGACACCUACAUGGCGGGUGUACUCCACCGGCAGCAAUGUGUUUCAGACCAGAGCCGGCUGUCUGAUCGGAGCCGAGUACGUGAACAAUAGCUACGAGUGCGACAUCCCCAUCGGCGCUGGAAUCUGCGCCAGCUACCAGACACAGACAAAGAGCCACCGGAGAGCCAGAAGCGUGGCCAGCCAGAGCAUCAUUGCCUACACAAUGUCUCUGGGCGCCGAGAACAGCGUGGCCUACUCCAACAACUCUAUCGCUAUCCCCACCAACUUCACCAUCAGCGUGACCACAGAGAUCCUGCCUGUGUCCAUGACCAAGACCAGCGUGGACUGCACCAUGUACAUCUGCGGCGAUUCCACCGAGUGCUCCAACCUGCUGCUGCAGUACGGCAGCUUCUGCACCCAGCUGAAAAGAGCCCUGACAGGGAUCGCCGUGGAACAGGACAAGAACACCCAAGAGGUGUUCGCCCAAGUGAAGCAGAUCUACAAGACCCCUCCUAUCAAGUACUUCGGCGGCUUCAAUUUCAGCCAGAUUCUGCCCGAUCCUAGCAAGCCCAGCAAGCGGAGCUUCAUCGAGGACCUGCUGUUCAACAAAGUGACACUGGCCGACGCCGGCUUCAUCAAGCAGUAUGGCGAUUGUCUGGGCGACAUUGCCGCCAGGGAUCUGAUUUGCGCCCAGAAGUUUAACGGACUGACAGUGCUGCCUCCUCUGCUGACCGAUGAGAUGAUCGCCCAGUACACAUCUGCCCUGCUGGCCGGCACAAUCACAAGCGGCUGGACAUUUGGAGCAGGCGCCGCUCUGCAGAUCCCCUUUGCUAUGCAGAUGGCCUACCGGUUCAACGGCAUCGGAGUGACCCAGAAUGUGCUGUACGAGAACCAGAAGCUGAUCGCCAACCAGUUCAACAGCGCCAUCGGCAAGAUCCAGGACAGCCUGAGCAGCACAGCAAGCGCCCUGGGAAAGCUGCAGGACGUGGUCAACCACAAUGCCCAGGCACUGAACACCCUGGUCAAGCAGCUGUCCUCCAAGUUCGGCGCCAUCAGCUCUGUGCUGAACGAUAUCCUGAGCAGACUGGACCCUCCUGAGGCCGAGGUGCAGAUCGACAGACUGAUCACAGGCAGACUGCAGAGCCUCCAGACAUACGUGACCCAGCAGCUGAUCAGAGCCGCCGAGAUUAGAGCCUCUGCCAAUCUGGCCGCCACCAAGAUGUCUGAGUGUGUGCUGGGCCAGAGCAAGAGAGUGGACUUUUGCGGCAAGGGCUACCACCUGAUGAGCUUCCCUCAGUCUGCCCCUCACGGCGUGGUGUUUCUGCACGUGACAUAUGUGCCCGCUCAAGAGAAGAAUUUCACCACCGCUCCAGCCAUCUGCCACGACGGCAAAGCCCACUUUCCUAGAGAAGGCGUGUUCGUGUCCAACGGCACCCAUUGGUUCGUGACACAGCGGAACUUCUACGAGCCCCAGAUCAUCACCACCGACAACACCUUCGUGUCUGGCAACUGCGACGUCGUGAUCGGCAUUGUGAACAAUACCGUGUACGACCCUCUGCAGCCCGAGCUGGACAGCUUCAAAGAGGAACUGGACAAGUACUUUAAGAACCACACAAGCCCCGACGUGGACCUGGGCGAUAUCAGCGGAAUCAAUGCCAGCGUCGUGAACAUCCAGAAAGAGAUCGACCGGCUGAACGAGGUGGCCAAGAAUCUGAACGAGAGCCUGAUCGACCUGCAAGAACUGGGGAAGUACGAGCAGUACAUCAAGUGGCCCUGGUACAUCUGGCUGGGCUUUAUCGCCGGACUGAUUGCCAUCGUGAUGGUCACAAUCAUGCUGUGUUGCAUGACCAGCUGCUGUAGCUGCCUGAAGGGCUGUUGUAGCUGUGGCAGCUGCUGCAAGUUCGACGAGGACGAUUCUGAGCCCGUGCUGAAGGGCGUGAAACUGCACUACACAUGAUGA
79 編碼來自奧密克戎BA.4/BA.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之DNA序列 ATGTTCGTGTTCCTGGTGCTGCTGCCTCTGGTGTCCAGCCAGTGTGTGAACCTGATCACCAGAACACAGTCATACACCAACAGCTTTACCAGAGGCGTGTACTACCCCGACAAGGTGTTCAGATCCAGCGTGCTGCACTCTACCCAGGACCTGTTCCTGCCTTTCTTCAGCAACGTGACCTGGTTCCACGCCATCTCCGGCACCAATGGCACCAAGAGATTCGACAACCCCGTGCTGCCCTTCAACGACGGGGTGTACTTTGCCAGCACCGAGAAGTCCAACATCATCAGAGGCTGGATCTTCGGCACCACACTGGACAGCAAGACCCAGAGCCTGCTGATCGTGAACAACGCCACCAACGTGGTCATCAAAGTGTGCGAGTTCCAGTTCTGCAACGACCCCTTCCTGGACGTCTACTACCACAAGAACAACAAGAGCTGGATGGAAAGCGAGTTCCGGGTGTACAGCAGCGCCAACAACTGCACCTTCGAGTACGTGTCCCAGCCTTTCCTGATGGACCTGGAAGGCAAGCAGGGCAACTTCAAGAACCTGCGCGAGTTCGTGTTTAAGAACATCGACGGCTACTTCAAGATCTACAGCAAGCACACCCCTATCAACCTCGGCCGGGATCTGCCTCAGGGCTTCTCTGCTCTGGAACCCCTGGTGGATCTGCCCATCGGCATCAACATCACCCGGTTTCAGACACTGCTGGCCCTGCACAGAAGCTACCTGACACCTGGCGATAGCAGCAGCGGATGGACAGCTGGTGCCGCCGCTTACTATGTGGGCTACCTGCAGCCTAGAACCTTCCTGCTGAAGTACAACGAGAACGGCACCATCACCGACGCCGTGGATTGTGCTCTGGATCCTCTGAGCGAGACAAAGTGCACCCTGAAGTCCTTCACCGTGGAAAAGGGCATCTACCAGACCAGCAACTTCCGGGTGCAGCCCACCGAATCCATCGTGCGGTTCCCCAATATCACCAATCTGTGCCCCTTCGACGAGGTGTTCAATGCCACCAGATTCGCCTCTGTGTACGCCTGGAACCGGAAGCGGATCAGCAATTGCGTGGCCGACTACTCCGTGCTGTACAACTTCGCCCCCTTCTTCGCATTCAAGTGCTACGGCGTGTCCCCTACCAAGCTGAACGACCTGTGCTTCACAAACGTGTACGCCGACAGCTTCGTGATCCGGGGAAACGAAGTGCGGCAGATTGCCCCTGGACAGACAGGCAACATCGCCGACTACAACTACAAGCTGCCCGACGACTTCACCGGCTGTGTGATTGCCTGGAACAGCAACAAGCTGGACTCCAAAGTCGGCGGCAACTACAATTACAGGTACCGGCTGTTCCGGAAGTCCAATCTGAAGCCCTTCGAGCGGGACATCTCCACCGAGATCTATCAGGCCGGCAACAAGCCTTGTAACGGCGTGGCAGGCGTGAACTGCTACTTCCCACTGCAGTCCTACGGCTTTAGGCCCACATACGGCGTGGGCCACCAGCCCTACAGAGTGGTGGTGCTGAGCTTCGAACTGCTGCATGCCCCTGCCACAGTGTGCGGCCCTAAGAAAAGCACCAATCTCGTGAAGAACAAATGCGTGAACTTCAACTTCAACGGCCTGACCGGCACCGGCGTGCTGACAGAGAGCAACAAGAAGTTCCTGCCATTCCAGCAGTTTGGCCGGGATATCGCCGATACCACAGACGCCGTTAGAGATCCCCAGACACTGGAAATCCTGGACATCACCCCTTGCAGCTTCGGCGGAGTGTCTGTGATCACCCCTGGCACCAACACCAGCAATCAGGTGGCAGTGCTGTACCAGGGCGTGAACTGTACCGAAGTGCCCGTGGCCATTCACGCCGATCAGCTGACACCTACATGGCGGGTGTACTCCACCGGCAGCAATGTGTTTCAGACCAGAGCCGGCTGTCTGATCGGAGCCGAGTACGTGAACAATAGCTACGAGTGCGACATCCCCATCGGCGCTGGAATCTGCGCCAGCTACCAGACACAGACAAAGAGCCACCGGAGAGCCAGAAGCGTGGCCAGCCAGAGCATCATTGCCTACACAATGTCTCTGGGCGCCGAGAACAGCGTGGCCTACTCCAACAACTCTATCGCTATCCCCACCAACTTCACCATCAGCGTGACCACAGAGATCCTGCCTGTGTCCATGACCAAGACCAGCGTGGACTGCACCATGTACATCTGCGGCGATTCCACCGAGTGCTCCAACCTGCTGCTGCAGTACGGCAGCTTCTGCACCCAGCTGAAAAGAGCCCTGACAGGGATCGCCGTGGAACAGGACAAGAACACCCAAGAGGTGTTCGCCCAAGTGAAGCAGATCTACAAGACCCCTCCTATCAAGTACTTCGGCGGCTTCAATTTCAGCCAGATTCTGCCCGATCCTAGCAAGCCCAGCAAGCGGAGCTTCATCGAGGACCTGCTGTTCAACAAAGTGACACTGGCCGACGCCGGCTTCATCAAGCAGTATGGCGATTGTCTGGGCGACATTGCCGCCAGGGATCTGATTTGCGCCCAGAAGTTTAACGGACTGACAGTGCTGCCTCCTCTGCTGACCGATGAGATGATCGCCCAGTACACATCTGCCCTGCTGGCCGGCACAATCACAAGCGGCTGGACATTTGGAGCAGGCGCCGCTCTGCAGATCCCCTTTGCTATGCAGATGGCCTACCGGTTCAACGGCATCGGAGTGACCCAGAATGTGCTGTACGAGAACCAGAAGCTGATCGCCAACCAGTTCAACAGCGCCATCGGCAAGATCCAGGACAGCCTGAGCAGCACAGCAAGCGCCCTGGGAAAGCTGCAGGACGTGGTCAACCACAATGCCCAGGCACTGAACACCCTGGTCAAGCAGCTGTCCTCCAAGTTCGGCGCCATCAGCTCTGTGCTGAACGATATCCTGAGCAGACTGGACCCTCCTGAGGCCGAGGTGCAGATCGACAGACTGATCACAGGCAGACTGCAGAGCCTCCAGACATACGTGACCCAGCAGCTGATCAGAGCCGCCGAGATTAGAGCCTCTGCCAATCTGGCCGCCACCAAGATGTCTGAGTGTGTGCTGGGCCAGAGCAAGAGAGTGGACTTTTGCGGCAAGGGCTACCACCTGATGAGCTTCCCTCAGTCTGCCCCTCACGGCGTGGTGTTTCTGCACGTGACATATGTGCCCGCTCAAGAGAAGAATTTCACCACCGCTCCAGCCATCTGCCACGACGGCAAAGCCCACTTTCCTAGAGAAGGCGTGTTCGTGTCCAACGGCACCCATTGGTTCGTGACACAGCGGAACTTCTACGAGCCCCAGATCATCACCACCGACAACACCTTCGTGTCTGGCAACTGCGACGTCGTGATCGGCATTGTGAACAATACCGTGTACGACCCTCTGCAGCCCGAGCTGGACAGCTTCAAAGAGGAACTGGACAAGTACTTTAAGAACCACACAAGCCCCGACGTGGACCTGGGCGATATCAGCGGAATCAATGCCAGCGTCGTGAACATCCAGAAAGAGATCGACCGGCTGAACGAGGTGGCCAAGAATCTGAACGAGAGCCTGATCGACCTGCAAGAACTGGGGAAGTACGAGCAGTACATCAAGTGGCCCTGGTACATCTGGCTGGGCTTTATCGCCGGACTGATTGCCATCGTGATGGTCACAATCATGCTGTGTTGCATGACCAGCTGCTGTAGCTGCCTGAAGGGCTGTTGTAGCTGTGGCAGCTGCTGCAAGTTCGACGAGGACGATTCTGAGCCCGTGCTGAAGGGCGTGAAACTGCACTACACATGATGA
表 12. 例示性奧密克戎BA.2.75特異性RNA疫苗之一個實施例之序列
SEQ ID NO. 簡述 序列
149 來自奧密克戎BA.2.75變異體之RNA編碼SARS-CoV-2 S蛋白之胺基酸序列(在對應於SEQ ID NO: 1之位置K986P及V987P之位置處具有PRO突變；亦即，SEQ ID NO: 80之位置983及984處的PRO突變) MFVFLVLLPLVSSQCVNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAIHVSGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYYHENNKSRMESELRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPVNLGRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSSWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFHEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKVSGNYNYLYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGFNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDPPEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT
150 編碼來自奧密克戎BA.2.75變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA序列 auguucguguuccuggugcugcugccucugguguccagccagugugugaaccugaucaccagaacacagucauacaccaacagcuuuaccagaggcguguacuaccccgacaagguguucagauccagcgugcugcacucuacccaggaccuguuccugccuuucuucagcaacgugaccugguuccacgccauccacguguccggcaccaauggcaccaagagauucgacaaccccgugcugcccuucaacgacgggguguacuuugccagcaccgagaaguccaacaucaucagaggcuggaucuucggcaccacacuggacagcaagacccagagccugcugaucgugaacaacgccaccaacguggucaucaaagugugcgaguuccaguucugcaacgaccccuuccuggacgucuacuaccacgagaacaacaagagcaggauggaaagcgagcuccggguguacagcagcgccaacaacugcaccuucgaguacgugucccagccuuuccugauggaccuggaaggcaagcagggcaacuucaagaaccugcgcgaguucguguuuaagaacaucgacggcuacuucaagaucuacagcaagcacaccccugugaaccucggccgggaucugccucagggcuucucugcucuggaaccccugguggaucugcccaucggcaucaacaucacccgguuucagacacugcuggcccugcacagaagcuaccugacaccuggcgauagcagcagcagcuggacagcuggugccgccgcuuacuaugugggcuaccugcagccuagaaccuuccugcugaaguacaacgagaacggcaccaucaccgacgccguggauugugcucuggauccucugagcgagacaaagugcacccugaaguccuucaccguggaaaagggcaucuaccagaccagcaacuuccgggugcagcccaccgaauccaucgugcgguuccccaauaucaccaaucugugccccuuccacgagguguucaaugccaccagauucgccucuguguacgccuggaaccggaagcggaucagcaauugcguggccgacuacuccgugcuguacaacuucgcccccuucuucgcauucaagugcuacggcguguccccuaccaagcugaacgaccugugcuucacaaacguguacgccgacagcuucgugauccggggaaacgaagugucacagauugccccuggacagacaggcaacaucgccgacuacaacuacaagcugcccgacgacuucaccggcugugugauugccuggaacagcaacaagcuggacuccaaagucagcggcaacuacaauuaccuguaccggcuguuccggaaguccaagcugaagcccuucgagcgggacaucuccaccgagaucuaucaggccggcaacaagccuuguaacggcguggcaggcuucaacugcuacuucccacugcaguccuacggcuuuaggcccacauacggcgugggccaccagcccuacagagugguggugcugagcuucgaacugcugcaugccccugccacagugugcggcccuaagaaaagcaccaaucucgugaagaacaaaugcgugaacuucaacuucaacggccugaccggcaccggcgugcugacagagagcaacaagaaguuccugccauuccagcaguuuggccgggauaucgccgauaccacagacgccguuagagauccccagacacuggaaauccuggacaucaccccuugcagcuucggcggagugucugugaucaccccuggcaccaacaccagcaaucagguggcagugcuguaccagggcgugaacuguaccgaagugcccguggccauucacgccgaucagcugacaccuacauggcggguguacuccaccggcagcaauguguuucagaccagagccggcugucugaucggagccgaguacgugaacaauagcuacgagugcgacauccccaucggcgcuggaaucugcgccagcuaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcguggccagccagagcaucauugccuacacaaugucucugggcgccgagaacagcguggccuacuccaacaacucuaucgcuauccccaccaacuucaccaucagcgugaccacagagauccugccuguguccaugaccaagaccagcguggacugcaccauguacaucugcggcgauuccaccgagugcuccaaccugcugcugcaguacggcagcuucugcacccagcugaaaagagcccugacagggaucgccguggaacaggacaagaacacccaagagguguucgcccaagugaagcagaucuacaagaccccuccuaucaaguacuucggcggcuucaauuucagccagauucugcccgauccuagcaagcccagcaagcggagcuucaucgaggaccugcuguucaacaaagugacacuggccgacgccggcuucaucaagcaguauggcgauugucugggcgacauugccgccagggaucugauuugcgcccagaaguuuaacggacugacagugcugccuccucugcugaccgaugagaugaucgcccaguacacaucugcccugcuggccggcacaaucacaagcggcuggacauuuggagcaggcgccgcucugcagauccccuuugcuaugcagauggccuaccgguucaacggcaucggagugacccagaaugugcuguacgagaaccagaagcugaucgccaaccaguucaacagcgccaucggcaagauccaggacagccugagcagcacagcaagcgcccugggaaagcugcaggacguggucaaccacaaugcccaggcacugaacacccuggucaagcagcuguccuccaaguucggcgccaucagcucugugcugaacgauauccugagcagacuggacccuccugaggccgaggugcagaucgacagacugaucacaggcagacugcagagccuccagacauacgugacccagcagcugaucagagccgccgagauuagagccucugccaaucuggccgccaccaagaugucugagugugugcugggccagagcaagagaguggacuuuugcggcaagggcuaccaccugaugagcuucccucagucugccccucacggcgugguguuucugcacgugacauaugugcccgcucaagagaagaauuucaccaccgcuccagccaucugccacgacggcaaagcccacuuuccuagagaaggcguguucguguccaacggcacccauugguucgugacacagcggaacuucuacgagccccagaucaucaccaccgacaacaccuucgugucuggcaacugcgacgucgugaucggcauugugaacaauaccguguacgacccucugcagcccgagcuggacagcuucaaagaggaacuggacaaguacuuuaagaaccacacaagccccgacguggaccugggcgauaucagcggaaucaaugccagcgucgugaacauccagaaagagaucgaccggcugaacgagguggccaagaaucugaacgagagccugaucgaccugcaagaacuggggaaguacgagcaguacaucaaguggcccugguacaucuggcugggcuuuaucgccggacugauugccaucgugauggucacaaucaugcuguguugcaugaccagcugcuguagcugccugaagggcuguuguagcuguggcagcugcugcaaguucgacgaggacgauucugagcccgugcugaagggcgugaaacugcacuacacaugauga
151 編碼來自奧密克戎BA.2.75變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之DNA序列 atgttcgtgttcctggtgctgctgcctctggtgtccagccagtgtgtgaacctgatcaccagaacacagtcatacaccaacagctttaccagaggcgtgtactaccccgacaaggtgttcagatccagcgtgctgcactctacccaggacctgttcctgcctttcttcagcaacgtgacctggttccacgccatccacgtgtccggcaccaatggcaccaagagattcgacaaccccgtgctgcccttcaacgacggggtgtactttgccagcaccgagaagtccaacatcatcagaggctggatcttcggcaccacactggacagcaagacccagagcctgctgatcgtgaacaacgccaccaacgtggtcatcaaagtgtgcgagttccagttctgcaacgaccccttcctggacgtctactaccacgagaacaacaagagcaggatggaaagcgagctccgggtgtacagcagcgccaacaactgcaccttcgagtacgtgtcccagcctttcctgatggacctggaaggcaagcagggcaacttcaagaacctgcgcgagttcgtgtttaagaacatcgacggctacttcaagatctacagcaagcacacccctgtgaacctcggccgggatctgcctcagggcttctctgctctggaacccctggtggatctgcccatcggcatcaacatcacccggtttcagacactgctggccctgcacagaagctacctgacacctggcgatagcagcagcagctggacagctggtgccgccgcttactatgtgggctacctgcagcctagaaccttcctgctgaagtacaacgagaacggcaccatcaccgacgccgtggattgtgctctggatcctctgagcgagacaaagtgcaccctgaagtccttcaccgtggaaaagggcatctaccagaccagcaacttccgggtgcagcccaccgaatccatcgtgcggttccccaatatcaccaatctgtgccccttccacgaggtgttcaatgccaccagattcgcctctgtgtacgcctggaaccggaagcggatcagcaattgcgtggccgactactccgtgctgtacaacttcgcccccttcttcgcattcaagtgctacggcgtgtcccctaccaagctgaacgacctgtgcttcacaaacgtgtacgccgacagcttcgtgatccggggaaacgaagtgtcacagattgcccctggacagacaggcaacatcgccgactacaactacaagctgcccgacgacttcaccggctgtgtgattgcctggaacagcaacaagctggactccaaagtcagcggcaactacaattacctgtaccggctgttccggaagtccaagctgaagcccttcgagcgggacatctccaccgagatctatcaggccggcaacaagccttgtaacggcgtggcaggcttcaactgctacttcccactgcagtcctacggctttaggcccacatacggcgtgggccaccagccctacagagtggtggtgctgagcttcgaactgctgcatgcccctgccacagtgtgcggccctaagaaaagcaccaatctcgtgaagaacaaatgcgtgaacttcaacttcaacggcctgaccggcaccggcgtgctgacagagagcaacaagaagttcctgccattccagcagtttggccgggatatcgccgataccacagacgccgttagagatccccagacactggaaatcctggacatcaccccttgcagcttcggcggagtgtctgtgatcacccctggcaccaacaccagcaatcaggtggcagtgctgtaccagggcgtgaactgtaccgaagtgcccgtggccattcacgccgatcagctgacacctacatggcgggtgtactccaccggcagcaatgtgtttcagaccagagccggctgtctgatcggagccgagtacgtgaacaatagctacgagtgcgacatccccatcggcgctggaatctgcgccagctaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcgtggccagccagagcatcattgcctacacaatgtctctgggcgccgagaacagcgtggcctactccaacaactctatcgctatccccaccaacttcaccatcagcgtgaccacagagatcctgcctgtgtccatgaccaagaccagcgtggactgcaccatgtacatctgcggcgattccaccgagtgctccaacctgctgctgcagtacggcagcttctgcacccagctgaaaagagccctgacagggatcgccgtggaacaggacaagaacacccaagaggtgttcgcccaagtgaagcagatctacaagacccctcctatcaagtacttcggcggcttcaatttcagccagattctgcccgatcctagcaagcccagcaagcggagcttcatcgaggacctgctgttcaacaaagtgacactggccgacgccggcttcatcaagcagtatggcgattgtctgggcgacattgccgccagggatctgatttgcgcccagaagtttaacggactgacagtgctgcctcctctgctgaccgatgagatgatcgcccagtacacatctgccctgctggccggcacaatcacaagcggctggacatttggagcaggcgccgctctgcagatcccctttgctatgcagatggcctaccggttcaacggcatcggagtgacccagaatgtgctgtacgagaaccagaagctgatcgccaaccagttcaacagcgccatcggcaagatccaggacagcctgagcagcacagcaagcgccctgggaaagctgcaggacgtggtcaaccacaatgcccaggcactgaacaccctggtcaagcagctgtcctccaagttcggcgccatcagctctgtgctgaacgatatcctgagcagactggaccctcctgaggccgaggtgcagatcgacagactgatcacaggcagactgcagagcctccagacatacgtgacccagcagctgatcagagccgccgagattagagcctctgccaatctggccgccaccaagatgtctgagtgtgtgctgggccagagcaagagagtggacttttgcggcaagggctaccacctgatgagcttccctcagtctgcccctcacggcgtggtgtttctgcacgtgacatatgtgcccgctcaagagaagaatttcaccaccgctccagccatctgccacgacggcaaagcccactttcctagagaaggcgtgttcgtgtccaacggcacccattggttcgtgacacagcggaacttctacgagccccagatcatcaccaccgacaacaccttcgtgtctggcaactgcgacgtcgtgatcggcattgtgaacaataccgtgtacgaccctctgcagcccgagctggacagcttcaaagaggaactggacaagtactttaagaaccacacaagccccgacgtggacctgggcgatatcagcggaatcaatgccagcgtcgtgaacatccagaaagagatcgaccggctgaacgaggtggccaagaatctgaacgagagcctgatcgacctgcaagaactggggaagtacgagcagtacatcaagtggccctggtacatctggctgggctttatcgccggactgattgccatcgtgatggtcacaatcatgctgtgttgcatgaccagctgctgtagctgcctgaagggctgttgtagctgtggcagctgctgcaagttcgacgaggacgattctgagcccgtgctgaagggcgtgaaactgcactacacatgatga
152 編碼來自奧密克戎BA.2.75變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之全長RNA構築體 agaauaaacuaguauucuucugguccccacagacucagagagaacccgccaccauguucguguuccuggugcugcugccucugguguccagccagugugugaaccugaucaccagaacacagucauacaccaacagcuuuaccagaggcguguacuaccccgacaagguguucagauccagcgugcugcacucuacccaggaccuguuccugccuuucuucagcaacgugaccugguuccacgccauccacguguccggcaccaauggcaccaagagauucgacaaccccgugcugcccuucaacgacgggguguacuuugccagcaccgagaaguccaacaucaucagaggcuggaucuucggcaccacacuggacagcaagacccagagccugcugaucgugaacaacgccaccaacguggucaucaaagugugcgaguuccaguucugcaacgaccccuuccuggacgucuacuaccacgagaacaacaagagcaggauggaaagcgagcuccggguguacagcagcgccaacaacugcaccuucgaguacgugucccagccuuuccugauggaccuggaaggcaagcagggcaacuucaagaaccugcgcgaguucguguuuaagaacaucgacggcuacuucaagaucuacagcaagcacaccccugugaaccucggccgggaucugccucagggcuucucugcucuggaaccccugguggaucugcccaucggcaucaacaucacccgguuucagacacugcuggcccugcacagaagcuaccugacaccuggcgauagcagcagcagcuggacagcuggugccgccgcuuacuaugugggcuaccugcagccuagaaccuuccugcugaaguacaacgagaacggcaccaucaccgacgccguggauugugcucuggauccucugagcgagacaaagugcacccugaaguccuucaccguggaaaagggcaucuaccagaccagcaacuuccgggugcagcccaccgaauccaucgugcgguuccccaauaucaccaaucugugccccuuccacgagguguucaaugccaccagauucgccucuguguacgccuggaaccggaagcggaucagcaauugcguggccgacuacuccgugcuguacaacuucgcccccuucuucgcauucaagugcuacggcguguccccuaccaagcugaacgaccugugcuucacaaacguguacgccgacagcuucgugauccggggaaacgaagugucacagauugccccuggacagacaggcaacaucgccgacuacaacuacaagcugcccgacgacuucaccggcugugugauugccuggaacagcaacaagcuggacuccaaagucagcggcaacuacaauuaccuguaccggcuguuccggaaguccaagcugaagcccuucgagcgggacaucuccaccgagaucuaucaggccggcaacaagccuuguaacggcguggcaggcuucaacugcuacuucccacugcaguccuacggcuuuaggcccacauacggcgugggccaccagcccuacagagugguggugcugagcuucgaacugcugcaugccccugccacagugugcggcccuaagaaaagcaccaaucucgugaagaacaaaugcgugaacuucaacuucaacggccugaccggcaccggcgugcugacagagagcaacaagaaguuccugccauuccagcaguuuggccgggauaucgccgauaccacagacgccguuagagauccccagacacuggaaauccuggacaucaccccuugcagcuucggcggagugucugugaucaccccuggcaccaacaccagcaaucagguggcagugcuguaccagggcgugaacuguaccgaagugcccguggccauucacgccgaucagcugacaccuacauggcggguguacuccaccggcagcaauguguuucagaccagagccggcugucugaucggagccgaguacgugaacaauagcuacgagugcgacauccccaucggcgcuggaaucugcgccagcuaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcguggccagccagagcaucauugccuacacaaugucucugggcgccgagaacagcguggccuacuccaacaacucuaucgcuauccccaccaacuucaccaucagcgugaccacagagauccugccuguguccaugaccaagaccagcguggacugcaccauguacaucugcggcgauuccaccgagugcuccaaccugcugcugcaguacggcagcuucugcacccagcugaaaagagcccugacagggaucgccguggaacaggacaagaacacccaagagguguucgcccaagugaagcagaucuacaagaccccuccuaucaaguacuucggcggcuucaauuucagccagauucugcccgauccuagcaagcccagcaagcggagcuucaucgaggaccugcuguucaacaaagugacacuggccgacgccggcuucaucaagcaguauggcgauugucugggcgacauugccgccagggaucugauuugcgcccagaaguuuaacggacugacagugcugccuccucugcugaccgaugagaugaucgcccaguacacaucugcccugcuggccggcacaaucacaagcggcuggacauuuggagcaggcgccgcucugcagauccccuuugcuaugcagauggccuaccgguucaacggcaucggagugacccagaaugugcuguacgagaaccagaagcugaucgccaaccaguucaacagcgccaucggcaagauccaggacagccugagcagcacagcaagcgcccugggaaagcugcaggacguggucaaccacaaugcccaggcacugaacacccuggucaagcagcuguccuccaaguucggcgccaucagcucugugcugaacgauauccugagcagacuggacccuccugaggccgaggugcagaucgacagacugaucacaggcagacugcagagccuccagacauacgugacccagcagcugaucagagccgccgagauuagagccucugccaaucuggccgccaccaagaugucugagugugugcugggccagagcaagagaguggacuuuugcggcaagggcuaccaccugaugagcuucccucagucugccccucacggcgugguguuucugcacgugacauaugugcccgcucaagagaagaauuucaccaccgcuccagccaucugccacgacggcaaagcccacuuuccuagagaaggcguguucguguccaacggcacccauugguucgugacacagcggaacuucuacgagccccagaucaucaccaccgacaacaccuucgugucuggcaacugcgacgucgugaucggcauugugaacaauaccguguacgacccucugcagcccgagcuggacagcuucaaagaggaacuggacaaguacuuuaagaaccacacaagccccgacguggaccugggcgauaucagcggaaucaaugccagcgucgugaacauccagaaagagaucgaccggcugaacgagguggccaagaaucugaacgagagccugaucgaccugcaagaacuggggaaguacgagcaguacaucaaguggcccugguacaucuggcugggcuuuaucgccggacugauugccaucgugauggucacaaucaugcuguguugcaugaccagcugcuguagcugccugaagggcuguuguagcuguggcagcugcugcaaguucgacgaggacgauucugagcccgugcugaagggcgugaaacugcacuacacaugaugacucgagcugguacugcaugcacgcaaugcuagcugccccuuucccguccuggguaccccgagucucccccgaccucgggucccagguaugcucccaccuccaccugccccacucaccaccucugcuaguuccagacaccucccaagcacgcagcaaugcagcucaaaacgcuuagccuagccacacccccacgggaaacagcagugauuaaccuuuagcaauaaacgaaaguuuaacuaagcuauacuaaccccaggguuggucaauuucgugccagccacacccuggagcuagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcauaugacuaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
153 編碼來自奧密克戎BA.2.75變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之全長DNA構築體 agaataaactagtattcttctggtccccacagactcagagagaacccgccaccatgttcgtgttcctggtgctgctgcctctggtgtccagccagtgtgtgaacctgatcaccagaacacagtcatacaccaacagctttaccagaggcgtgtactaccccgacaaggtgttcagatccagcgtgctgcactctacccaggacctgttcctgcctttcttcagcaacgtgacctggttccacgccatccacgtgtccggcaccaatggcaccaagagattcgacaaccccgtgctgcccttcaacgacggggtgtactttgccagcaccgagaagtccaacatcatcagaggctggatcttcggcaccacactggacagcaagacccagagcctgctgatcgtgaacaacgccaccaacgtggtcatcaaagtgtgcgagttccagttctgcaacgaccccttcctggacgtctactaccacgagaacaacaagagcaggatggaaagcgagctccgggtgtacagcagcgccaacaactgcaccttcgagtacgtgtcccagcctttcctgatggacctggaaggcaagcagggcaacttcaagaacctgcgcgagttcgtgtttaagaacatcgacggctacttcaagatctacagcaagcacacccctgtgaacctcggccgggatctgcctcagggcttctctgctctggaacccctggtggatctgcccatcggcatcaacatcacccggtttcagacactgctggccctgcacagaagctacctgacacctggcgatagcagcagcagctggacagctggtgccgccgcttactatgtgggctacctgcagcctagaaccttcctgctgaagtacaacgagaacggcaccatcaccgacgccgtggattgtgctctggatcctctgagcgagacaaagtgcaccctgaagtccttcaccgtggaaaagggcatctaccagaccagcaacttccgggtgcagcccaccgaatccatcgtgcggttccccaatatcaccaatctgtgccccttccacgaggtgttcaatgccaccagattcgcctctgtgtacgcctggaaccggaagcggatcagcaattgcgtggccgactactccgtgctgtacaacttcgcccccttcttcgcattcaagtgctacggcgtgtcccctaccaagctgaacgacctgtgcttcacaaacgtgtacgccgacagcttcgtgatccggggaaacgaagtgtcacagattgcccctggacagacaggcaacatcgccgactacaactacaagctgcccgacgacttcaccggctgtgtgattgcctggaacagcaacaagctggactccaaagtcagcggcaactacaattacctgtaccggctgttccggaagtccaagctgaagcccttcgagcgggacatctccaccgagatctatcaggccggcaacaagccttgtaacggcgtggcaggcttcaactgctacttcccactgcagtcctacggctttaggcccacatacggcgtgggccaccagccctacagagtggtggtgctgagcttcgaactgctgcatgcccctgccacagtgtgcggccctaagaaaagcaccaatctcgtgaagaacaaatgcgtgaacttcaacttcaacggcctgaccggcaccggcgtgctgacagagagcaacaagaagttcctgccattccagcagtttggccgggatatcgccgataccacagacgccgttagagatccccagacactggaaatcctggacatcaccccttgcagcttcggcggagtgtctgtgatcacccctggcaccaacaccagcaatcaggtggcagtgctgtaccagggcgtgaactgtaccgaagtgcccgtggccattcacgccgatcagctgacacctacatggcgggtgtactccaccggcagcaatgtgtttcagaccagagccggctgtctgatcggagccgagtacgtgaacaatagctacgagtgcgacatccccatcggcgctggaatctgcgccagctaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcgtggccagccagagcatcattgcctacacaatgtctctgggcgccgagaacagcgtggcctactccaacaactctatcgctatccccaccaacttcaccatcagcgtgaccacagagatcctgcctgtgtccatgaccaagaccagcgtggactgcaccatgtacatctgcggcgattccaccgagtgctccaacctgctgctgcagtacggcagcttctgcacccagctgaaaagagccctgacagggatcgccgtggaacaggacaagaacacccaagaggtgttcgcccaagtgaagcagatctacaagacccctcctatcaagtacttcggcggcttcaatttcagccagattctgcccgatcctagcaagcccagcaagcggagcttcatcgaggacctgctgttcaacaaagtgacactggccgacgccggcttcatcaagcagtatggcgattgtctgggcgacattgccgccagggatctgatttgcgcccagaagtttaacggactgacagtgctgcctcctctgctgaccgatgagatgatcgcccagtacacatctgccctgctggccggcacaatcacaagcggctggacatttggagcaggcgccgctctgcagatcccctttgctatgcagatggcctaccggttcaacggcatcggagtgacccagaatgtgctgtacgagaaccagaagctgatcgccaaccagttcaacagcgccatcggcaagatccaggacagcctgagcagcacagcaagcgccctgggaaagctgcaggacgtggtcaaccacaatgcccaggcactgaacaccctggtcaagcagctgtcctccaagttcggcgccatcagctctgtgctgaacgatatcctgagcagactggaccctcctgaggccgaggtgcagatcgacagactgatcacaggcagactgcagagcctccagacatacgtgacccagcagctgatcagagccgccgagattagagcctctgccaatctggccgccaccaagatgtctgagtgtgtgctgggccagagcaagagagtggacttttgcggcaagggctaccacctgatgagcttccctcagtctgcccctcacggcgtggtgtttctgcacgtgacatatgtgcccgctcaagagaagaatttcaccaccgctccagccatctgccacgacggcaaagcccactttcctagagaaggcgtgttcgtgtccaacggcacccattggttcgtgacacagcggaacttctacgagccccagatcatcaccaccgacaacaccttcgtgtctggcaactgcgacgtcgtgatcggcattgtgaacaataccgtgtacgaccctctgcagcccgagctggacagcttcaaagaggaactggacaagtactttaagaaccacacaagccccgacgtggacctgggcgatatcagcggaatcaatgccagcgtcgtgaacatccagaaagagatcgaccggctgaacgaggtggccaagaatctgaacgagagcctgatcgacctgcaagaactggggaagtacgagcagtacatcaagtggccctggtacatctggctgggctttatcgccggactgattgccatcgtgatggtcacaatcatgctgtgttgcatgaccagctgctgtagctgcctgaagggctgttgtagctgtggcagctgctgcaagttcgacgaggacgattctgagcccgtgctgaagggcgtgaaactgcactacacatgatgactcgagctggtactgcatgcacgcaatgctagctgcccctttcccgtcctgggtaccccgagtctcccccgacctcgggtcccaggtatgctcccacctccacctgccccactcaccacctctgctagttccagacacctcccaagcacgcagcaatgcagctcaaaacgcttagcctagccacacccccacgggaaacagcagtgattaacctttagcaataaacgaaagtttaactaagctatactaaccccagggttggtcaatttcgtgccagccacaccctggagctagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcatatgactaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
表 13. 例示性奧密克戎BA.2.75.2特異性RNA疫苗之一個實施例之序列
SEQ ID NO. 簡述 序列
154 來自奧密克戎BA.2.75.2變異體之RNA編碼SARS-CoV-2 S蛋白之胺基酸序列(在對應於SEQ ID NO: 1之K986P及V987P之位置處具有PRO突變；亦即，SEQ ID NO: 85之位置983及984處的PRO突變) MFVFLVLLPLVSSQCVNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAIHVSGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYYHENNKSRMESELRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPVNLGRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSSWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFHEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKVSGNYNYLYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGSNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDPPEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLINLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT
155 編碼來自奧密克戎BA.2.75.2變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA序列 auguucguguuccuggugcugcugccucugguguccagccagugugugaaccugaucaccagaacacagucauacaccaacagcuuuaccagaggcguguacuaccccgacaagguguucagauccagcgugcugcacucuacccaggaccuguuccugccuuucuucagcaacgugaccugguuccacgccauccacguguccggcaccaauggcaccaagagauucgacaaccccgugcugcccuucaacgacgggguguacuuugccagcaccgagaaguccaacaucaucagaggcuggaucuucggcaccacacuggacagcaagacccagagccugcugaucgugaacaacgccaccaacguggucaucaaagugugcgaguuccaguucugcaacgaccccuuccuggacgucuacuaccacgagaacaacaagagcaggauggaaagcgagcuccggguguacagcagcgccaacaacugcaccuucgaguacgugucccagccuuuccugauggaccuggaaggcaagcagggcaacuucaagaaccugcgcgaguucguguuuaagaacaucgacggcuacuucaagaucuacagcaagcacaccccugugaaccucggccgggaucugccucagggcuucucugcucuggaaccccugguggaucugcccaucggcaucaacaucacccgguuucagacacugcuggcccugcacagaagcuaccugacaccuggcgauagcagcagcagcuggacagcuggugccgccgcuuacuaugugggcuaccugcagccuagaaccuuccugcugaaguacaacgagaacggcaccaucaccgacgccguggauugugcucuggauccucugagcgagacaaagugcacccugaaguccuucaccguggaaaagggcaucuaccagaccagcaacuuccgggugcagcccaccgaauccaucgugcgguuccccaauaucaccaaucugugccccuuccacgagguguucaaugccaccaccuucgccucuguguacgccuggaaccggaagcggaucagcaauugcguggccgacuacuccgugcuguacaacuucgcccccuucuucgcauucaagugcuacggcguguccccuaccaagcugaacgaccugugcuucacaaacguguacgccgacagcuucgugauccggggaaacgaagugucacagauugccccuggacagacaggcaacaucgccgacuacaacuacaagcugcccgacgacuucaccggcugugugauugccuggaacagcaacaagcuggacuccaaagucagcggcaacuacaauuaccuguaccggcuguuccggaaguccaagcugaagcccuucgagcgggacaucuccaccgagaucuaucaggccggcaacaagccuuguaacggcguggcaggcagcaacugcuacuucccacugcaguccuacggcuuuaggcccacauacggcgugggccaccagcccuacagagugguggugcugagcuucgaacugcugcaugccccugccacagugugcggcccuaagaaaagcaccaaucucgugaagaacaaaugcgugaacuucaacuucaacggccugaccggcaccggcgugcugacagagagcaacaagaaguuccugccauuccagcaguuuggccgggauaucgccgauaccacagacgccguuagagauccccagacacuggaaauccuggacaucaccccuugcagcuucggcggagugucugugaucaccccuggcaccaacaccagcaaucagguggcagugcuguaccagggcgugaacuguaccgaagugcccguggccauucacgccgaucagcugacaccuacauggcggguguacuccaccggcagcaauguguuucagaccagagccggcugucugaucggagccgaguacgugaacaauagcuacgagugcgacauccccaucggcgcuggaaucugcgccagcuaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcguggccagccagagcaucauugccuacacaaugucucugggcgccgagaacagcguggccuacuccaacaacucuaucgcuauccccaccaacuucaccaucagcgugaccacagagauccugccuguguccaugaccaagaccagcguggacugcaccauguacaucugcggcgauuccaccgagugcuccaaccugcugcugcaguacggcagcuucugcacccagcugaaaagagcccugacagggaucgccguggaacaggacaagaacacccaagagguguucgcccaagugaagcagaucuacaagaccccuccuaucaaguacuucggcggcuucaauuucagccagauucugcccgauccuagcaagcccagcaagcggagcuucaucgaggaccugcuguucaacaaagugacacuggccgacgccggcuucaucaagcaguauggcgauugucugggcgacauugccgccagggaucugauuugcgcccagaaguuuaacggacugacagugcugccuccucugcugaccgaugagaugaucgcccaguacacaucugcccugcuggccggcacaaucacaagcggcuggacauuuggagcaggcgccgcucugcagauccccuuugcuaugcagauggccuaccgguucaacggcaucggagugacccagaaugugcuguacgagaaccagaagcugaucgccaaccaguucaacagcgccaucggcaagauccaggacagccugagcagcacagcaagcgcccugggaaagcugcaggacguggucaaccacaaugcccaggcacugaacacccuggucaagcagcuguccuccaaguucggcgccaucagcucugugcugaacgauauccugagcagacuggacccuccugaggccgaggugcagaucgacagacugaucacaggcagacugcagagccuccagacauacgugacccagcagcugaucagagccgccgagauuagagccucugccaaucuggccgccaccaagaugucugagugugugcugggccagagcaagagaguggacuuuugcggcaagggcuaccaccugaugagcuucccucagucugccccucacggcgugguguuucugcacgugacauaugugcccgcucaagagaagaauuucaccaccgcuccagccaucugccacgacggcaaagcccacuuuccuagagaaggcguguucguguccaacggcacccauugguucgugacacagcggaacuucuacgagccccagaucaucaccaccgacaacaccuucgugucuggcaacugcgacgucgugaucggcauugugaacaauaccguguacgacccucugcagcccgagcuggacagcuucaaagaggaacuggacaaguacuuuaagaaccacacaagccccgacguggaccugggcgauaucagcggaaucaaugccagcgucgugaacauccagaaagagaucgaccggcugaacgagguggccaagaaucugaacgagagccugaucaaccugcaagaacuggggaaguacgagcaguacaucaaguggcccugguacaucuggcugggcuuuaucgccggacugauugccaucgugauggucacaaucaugcuguguugcaugaccagcugcuguagcugccugaagggcuguuguagcuguggcagcugcugcaaguucgacgaggacgauucugagcccgugcugaagggcgugaaacugcacuacacaugauga
156 編碼來自奧密克戎BA.2.75.2變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之DNA序列 atgttcgtgttcctggtgctgctgcctctggtgtccagccagtgtgtgaacctgatcaccagaacacagtcatacaccaacagctttaccagaggcgtgtactaccccgacaaggtgttcagatccagcgtgctgcactctacccaggacctgttcctgcctttcttcagcaacgtgacctggttccacgccatccacgtgtccggcaccaatggcaccaagagattcgacaaccccgtgctgcccttcaacgacggggtgtactttgccagcaccgagaagtccaacatcatcagaggctggatcttcggcaccacactggacagcaagacccagagcctgctgatcgtgaacaacgccaccaacgtggtcatcaaagtgtgcgagttccagttctgcaacgaccccttcctggacgtctactaccacgagaacaacaagagcaggatggaaagcgagctccgggtgtacagcagcgccaacaactgcaccttcgagtacgtgtcccagcctttcctgatggacctggaaggcaagcagggcaacttcaagaacctgcgcgagttcgtgtttaagaacatcgacggctacttcaagatctacagcaagcacacccctgtgaacctcggccgggatctgcctcagggcttctctgctctggaacccctggtggatctgcccatcggcatcaacatcacccggtttcagacactgctggccctgcacagaagctacctgacacctggcgatagcagcagcagctggacagctggtgccgccgcttactatgtgggctacctgcagcctagaaccttcctgctgaagtacaacgagaacggcaccatcaccgacgccgtggattgtgctctggatcctctgagcgagacaaagtgcaccctgaagtccttcaccgtggaaaagggcatctaccagaccagcaacttccgggtgcagcccaccgaatccatcgtgcggttccccaatatcaccaatctgtgccccttccacgaggtgttcaatgccaccaccttcgcctctgtgtacgcctggaaccggaagcggatcagcaattgcgtggccgactactccgtgctgtacaacttcgcccccttcttcgcattcaagtgctacggcgtgtcccctaccaagctgaacgacctgtgcttcacaaacgtgtacgccgacagcttcgtgatccggggaaacgaagtgtcacagattgcccctggacagacaggcaacatcgccgactacaactacaagctgcccgacgacttcaccggctgtgtgattgcctggaacagcaacaagctggactccaaagtcagcggcaactacaattacctgtaccggctgttccggaagtccaagctgaagcccttcgagcgggacatctccaccgagatctatcaggccggcaacaagccttgtaacggcgtggcaggcagcaactgctacttcccactgcagtcctacggctttaggcccacatacggcgtgggccaccagccctacagagtggtggtgctgagcttcgaactgctgcatgcccctgccacagtgtgcggccctaagaaaagcaccaatctcgtgaagaacaaatgcgtgaacttcaacttcaacggcctgaccggcaccggcgtgctgacagagagcaacaagaagttcctgccattccagcagtttggccgggatatcgccgataccacagacgccgttagagatccccagacactggaaatcctggacatcaccccttgcagcttcggcggagtgtctgtgatcacccctggcaccaacaccagcaatcaggtggcagtgctgtaccagggcgtgaactgtaccgaagtgcccgtggccattcacgccgatcagctgacacctacatggcgggtgtactccaccggcagcaatgtgtttcagaccagagccggctgtctgatcggagccgagtacgtgaacaatagctacgagtgcgacatccccatcggcgctggaatctgcgccagctaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcgtggccagccagagcatcattgcctacacaatgtctctgggcgccgagaacagcgtggcctactccaacaactctatcgctatccccaccaacttcaccatcagcgtgaccacagagatcctgcctgtgtccatgaccaagaccagcgtggactgcaccatgtacatctgcggcgattccaccgagtgctccaacctgctgctgcagtacggcagcttctgcacccagctgaaaagagccctgacagggatcgccgtggaacaggacaagaacacccaagaggtgttcgcccaagtgaagcagatctacaagacccctcctatcaagtacttcggcggcttcaatttcagccagattctgcccgatcctagcaagcccagcaagcggagcttcatcgaggacctgctgttcaacaaagtgacactggccgacgccggcttcatcaagcagtatggcgattgtctgggcgacattgccgccagggatctgatttgcgcccagaagtttaacggactgacagtgctgcctcctctgctgaccgatgagatgatcgcccagtacacatctgccctgctggccggcacaatcacaagcggctggacatttggagcaggcgccgctctgcagatcccctttgctatgcagatggcctaccggttcaacggcatcggagtgacccagaatgtgctgtacgagaaccagaagctgatcgccaaccagttcaacagcgccatcggcaagatccaggacagcctgagcagcacagcaagcgccctgggaaagctgcaggacgtggtcaaccacaatgcccaggcactgaacaccctggtcaagcagctgtcctccaagttcggcgccatcagctctgtgctgaacgatatcctgagcagactggaccctcctgaggccgaggtgcagatcgacagactgatcacaggcagactgcagagcctccagacatacgtgacccagcagctgatcagagccgccgagattagagcctctgccaatctggccgccaccaagatgtctgagtgtgtgctgggccagagcaagagagtggacttttgcggcaagggctaccacctgatgagcttccctcagtctgcccctcacggcgtggtgtttctgcacgtgacatatgtgcccgctcaagagaagaatttcaccaccgctccagccatctgccacgacggcaaagcccactttcctagagaaggcgtgttcgtgtccaacggcacccattggttcgtgacacagcggaacttctacgagccccagatcatcaccaccgacaacaccttcgtgtctggcaactgcgacgtcgtgatcggcattgtgaacaataccgtgtacgaccctctgcagcccgagctggacagcttcaaagaggaactggacaagtactttaagaaccacacaagccccgacgtggacctgggcgatatcagcggaatcaatgccagcgtcgtgaacatccagaaagagatcgaccggctgaacgaggtggccaagaatctgaacgagagcctgatcaacctgcaagaactggggaagtacgagcagtacatcaagtggccctggtacatctggctgggctttatcgccggactgattgccatcgtgatggtcacaatcatgctgtgttgcatgaccagctgctgtagctgcctgaagggctgttgtagctgtggcagctgctgcaagttcgacgaggacgattctgagcccgtgctgaagggcgtgaaactgcactacacatgatga
157 編碼來自奧密克戎BA.2.75.2變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之全長RNA構築體 agaauaaacuaguauucuucugguccccacagacucagagagaacccgccaccauguucguguuccuggugcugcugccucugguguccagccagugugugaaccugaucaccagaacacagucauacaccaacagcuuuaccagaggcguguacuaccccgacaagguguucagauccagcgugcugcacucuacccaggaccuguuccugccuuucuucagcaacgugaccugguuccacgccauccacguguccggcaccaauggcaccaagagauucgacaaccccgugcugcccuucaacgacgggguguacuuugccagcaccgagaaguccaacaucaucagaggcuggaucuucggcaccacacuggacagcaagacccagagccugcugaucgugaacaacgccaccaacguggucaucaaagugugcgaguuccaguucugcaacgaccccuuccuggacgucuacuaccacgagaacaacaagagcaggauggaaagcgagcuccggguguacagcagcgccaacaacugcaccuucgaguacgugucccagccuuuccugauggaccuggaaggcaagcagggcaacuucaagaaccugcgcgaguucguguuuaagaacaucgacggcuacuucaagaucuacagcaagcacaccccugugaaccucggccgggaucugccucagggcuucucugcucuggaaccccugguggaucugcccaucggcaucaacaucacccgguuucagacacugcuggcccugcacagaagcuaccugacaccuggcgauagcagcagcagcuggacagcuggugccgccgcuuacuaugugggcuaccugcagccuagaaccuuccugcugaaguacaacgagaacggcaccaucaccgacgccguggauugugcucuggauccucugagcgagacaaagugcacccugaaguccuucaccguggaaaagggcaucuaccagaccagcaacuuccgggugcagcccaccgaauccaucgugcgguuccccaauaucaccaaucugugccccuuccacgagguguucaaugccaccaccuucgccucuguguacgccuggaaccggaagcggaucagcaauugcguggccgacuacuccgugcuguacaacuucgcccccuucuucgcauucaagugcuacggcguguccccuaccaagcugaacgaccugugcuucacaaacguguacgccgacagcuucgugauccggggaaacgaagugucacagauugccccuggacagacaggcaacaucgccgacuacaacuacaagcugcccgacgacuucaccggcugugugauugccuggaacagcaacaagcuggacuccaaagucagcggcaacuacaauuaccuguaccggcuguuccggaaguccaagcugaagcccuucgagcgggacaucuccaccgagaucuaucaggccggcaacaagccuuguaacggcguggcaggcagcaacugcuacuucccacugcaguccuacggcuuuaggcccacauacggcgugggccaccagcccuacagagugguggugcugagcuucgaacugcugcaugccccugccacagugugcggcccuaagaaaagcaccaaucucgugaagaacaaaugcgugaacuucaacuucaacggccugaccggcaccggcgugcugacagagagcaacaagaaguuccugccauuccagcaguuuggccgggauaucgccgauaccacagacgccguuagagauccccagacacuggaaauccuggacaucaccccuugcagcuucggcggagugucugugaucaccccuggcaccaacaccagcaaucagguggcagugcuguaccagggcgugaacuguaccgaagugcccguggccauucacgccgaucagcugacaccuacauggcggguguacuccaccggcagcaauguguuucagaccagagccggcugucugaucggagccgaguacgugaacaauagcuacgagugcgacauccccaucggcgcuggaaucugcgccagcuaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcguggccagccagagcaucauugccuacacaaugucucugggcgccgagaacagcguggccuacuccaacaacucuaucgcuauccccaccaacuucaccaucagcgugaccacagagauccugccuguguccaugaccaagaccagcguggacugcaccauguacaucugcggcgauuccaccgagugcuccaaccugcugcugcaguacggcagcuucugcacccagcugaaaagagcccugacagggaucgccguggaacaggacaagaacacccaagagguguucgcccaagugaagcagaucuacaagaccccuccuaucaaguacuucggcggcuucaauuucagccagauucugcccgauccuagcaagcccagcaagcggagcuucaucgaggaccugcuguucaacaaagugacacuggccgacgccggcuucaucaagcaguauggcgauugucugggcgacauugccgccagggaucugauuugcgcccagaaguuuaacggacugacagugcugccuccucugcugaccgaugagaugaucgcccaguacacaucugcccugcuggccggcacaaucacaagcggcuggacauuuggagcaggcgccgcucugcagauccccuuugcuaugcagauggccuaccgguucaacggcaucggagugacccagaaugugcuguacgagaaccagaagcugaucgccaaccaguucaacagcgccaucggcaagauccaggacagccugagcagcacagcaagcgcccugggaaagcugcaggacguggucaaccacaaugcccaggcacugaacacccuggucaagcagcuguccuccaaguucggcgccaucagcucugugcugaacgauauccugagcagacuggacccuccugaggccgaggugcagaucgacagacugaucacaggcagacugcagagccuccagacauacgugacccagcagcugaucagagccgccgagauuagagccucugccaaucuggccgccaccaagaugucugagugugugcugggccagagcaagagaguggacuuuugcggcaagggcuaccaccugaugagcuucccucagucugccccucacggcgugguguuucugcacgugacauaugugcccgcucaagagaagaauuucaccaccgcuccagccaucugccacgacggcaaagcccacuuuccuagagaaggcguguucguguccaacggcacccauugguucgugacacagcggaacuucuacgagccccagaucaucaccaccgacaacaccuucgugucuggcaacugcgacgucgugaucggcauugugaacaauaccguguacgacccucugcagcccgagcuggacagcuucaaagaggaacuggacaaguacuuuaagaaccacacaagccccgacguggaccugggcgauaucagcggaaucaaugccagcgucgugaacauccagaaagagaucgaccggcugaacgagguggccaagaaucugaacgagagccugaucaaccugcaagaacuggggaaguacgagcaguacaucaaguggcccugguacaucuggcugggcuuuaucgccggacugauugccaucgugauggucacaaucaugcuguguugcaugaccagcugcuguagcugccugaagggcuguuguagcuguggcagcugcugcaaguucgacgaggacgauucugagcccgugcugaagggcgugaaacugcacuacacaugaugacucgagcugguacugcaugcacgcaaugcuagcugccccuuucccguccuggguaccccgagucucccccgaccucgggucccagguaugcucccaccuccaccugccccacucaccaccucugcuaguuccagacaccucccaagcacgcagcaaugcagcucaaaacgcuuagccuagccacacccccacgggaaacagcagugauuaaccuuuagcaauaaacgaaaguuuaacuaagcuauacuaaccccaggguuggucaauuucgugccagccacacccuggagcuagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcauaugacuaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
158 編碼來自奧密克戎BA.2.75.2變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之全長DNA構築體 agaataaactagtattcttctggtccccacagactcagagagaacccgccaccatgttcgtgttcctggtgctgctgcctctggtgtccagccagtgtgtgaacctgatcaccagaacacagtcatacaccaacagctttaccagaggcgtgtactaccccgacaaggtgttcagatccagcgtgctgcactctacccaggacctgttcctgcctttcttcagcaacgtgacctggttccacgccatccacgtgtccggcaccaatggcaccaagagattcgacaaccccgtgctgcccttcaacgacggggtgtactttgccagcaccgagaagtccaacatcatcagaggctggatcttcggcaccacactggacagcaagacccagagcctgctgatcgtgaacaacgccaccaacgtggtcatcaaagtgtgcgagttccagttctgcaacgaccccttcctggacgtctactaccacgagaacaacaagagcaggatggaaagcgagctccgggtgtacagcagcgccaacaactgcaccttcgagtacgtgtcccagcctttcctgatggacctggaaggcaagcagggcaacttcaagaacctgcgcgagttcgtgtttaagaacatcgacggctacttcaagatctacagcaagcacacccctgtgaacctcggccgggatctgcctcagggcttctctgctctggaacccctggtggatctgcccatcggcatcaacatcacccggtttcagacactgctggccctgcacagaagctacctgacacctggcgatagcagcagcagctggacagctggtgccgccgcttactatgtgggctacctgcagcctagaaccttcctgctgaagtacaacgagaacggcaccatcaccgacgccgtggattgtgctctggatcctctgagcgagacaaagtgcaccctgaagtccttcaccgtggaaaagggcatctaccagaccagcaacttccgggtgcagcccaccgaatccatcgtgcggttccccaatatcaccaatctgtgccccttccacgaggtgttcaatgccaccaccttcgcctctgtgtacgcctggaaccggaagcggatcagcaattgcgtggccgactactccgtgctgtacaacttcgcccccttcttcgcattcaagtgctacggcgtgtcccctaccaagctgaacgacctgtgcttcacaaacgtgtacgccgacagcttcgtgatccggggaaacgaagtgtcacagattgcccctggacagacaggcaacatcgccgactacaactacaagctgcccgacgacttcaccggctgtgtgattgcctggaacagcaacaagctggactccaaagtcagcggcaactacaattacctgtaccggctgttccggaagtccaagctgaagcccttcgagcgggacatctccaccgagatctatcaggccggcaacaagccttgtaacggcgtggcaggcagcaactgctacttcccactgcagtcctacggctttaggcccacatacggcgtgggccaccagccctacagagtggtggtgctgagcttcgaactgctgcatgcccctgccacagtgtgcggccctaagaaaagcaccaatctcgtgaagaacaaatgcgtgaacttcaacttcaacggcctgaccggcaccggcgtgctgacagagagcaacaagaagttcctgccattccagcagtttggccgggatatcgccgataccacagacgccgttagagatccccagacactggaaatcctggacatcaccccttgcagcttcggcggagtgtctgtgatcacccctggcaccaacaccagcaatcaggtggcagtgctgtaccagggcgtgaactgtaccgaagtgcccgtggccattcacgccgatcagctgacacctacatggcgggtgtactccaccggcagcaatgtgtttcagaccagagccggctgtctgatcggagccgagtacgtgaacaatagctacgagtgcgacatccccatcggcgctggaatctgcgccagctaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcgtggccagccagagcatcattgcctacacaatgtctctgggcgccgagaacagcgtggcctactccaacaactctatcgctatccccaccaacttcaccatcagcgtgaccacagagatcctgcctgtgtccatgaccaagaccagcgtggactgcaccatgtacatctgcggcgattccaccgagtgctccaacctgctgctgcagtacggcagcttctgcacccagctgaaaagagccctgacagggatcgccgtggaacaggacaagaacacccaagaggtgttcgcccaagtgaagcagatctacaagacccctcctatcaagtacttcggcggcttcaatttcagccagattctgcccgatcctagcaagcccagcaagcggagcttcatcgaggacctgctgttcaacaaagtgacactggccgacgccggcttcatcaagcagtatggcgattgtctgggcgacattgccgccagggatctgatttgcgcccagaagtttaacggactgacagtgctgcctcctctgctgaccgatgagatgatcgcccagtacacatctgccctgctggccggcacaatcacaagcggctggacatttggagcaggcgccgctctgcagatcccctttgctatgcagatggcctaccggttcaacggcatcggagtgacccagaatgtgctgtacgagaaccagaagctgatcgccaaccagttcaacagcgccatcggcaagatccaggacagcctgagcagcacagcaagcgccctgggaaagctgcaggacgtggtcaaccacaatgcccaggcactgaacaccctggtcaagcagctgtcctccaagttcggcgccatcagctctgtgctgaacgatatcctgagcagactggaccctcctgaggccgaggtgcagatcgacagactgatcacaggcagactgcagagcctccagacatacgtgacccagcagctgatcagagccgccgagattagagcctctgccaatctggccgccaccaagatgtctgagtgtgtgctgggccagagcaagagagtggacttttgcggcaagggctaccacctgatgagcttccctcagtctgcccctcacggcgtggtgtttctgcacgtgacatatgtgcccgctcaagagaagaatttcaccaccgctccagccatctgccacgacggcaaagcccactttcctagagaaggcgtgttcgtgtccaacggcacccattggttcgtgacacagcggaacttctacgagccccagatcatcaccaccgacaacaccttcgtgtctggcaactgcgacgtcgtgatcggcattgtgaacaataccgtgtacgaccctctgcagcccgagctggacagcttcaaagaggaactggacaagtactttaagaaccacacaagccccgacgtggacctgggcgatatcagcggaatcaatgccagcgtcgtgaacatccagaaagagatcgaccggctgaacgaggtggccaagaatctgaacgagagcctgatcaacctgcaagaactggggaagtacgagcagtacatcaagtggccctggtacatctggctgggctttatcgccggactgattgccatcgtgatggtcacaatcatgctgtgttgcatgaccagctgctgtagctgcctgaagggctgttgtagctgtggcagctgctgcaagttcgacgaggacgattctgagcccgtgctgaagggcgtgaaactgcactacacatgatgactcgagctggtactgcatgcacgcaatgctagctgcccctttcccgtcctgggtaccccgagtctcccccgacctcgggtcccaggtatgctcccacctccacctgccccactcaccacctctgctagttccagacacctcccaagcacgcagcaatgcagctcaaaacgcttagcctagccacacccccacgggaaacagcagtgattaacctttagcaataaacgaaagtttaactaagctatactaaccccagggttggtcaatttcgtgccagccacaccctggagctagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcatatgactaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
表 14. 例示性奧密克戎BA.4.6/BF.7特異性RNA疫苗之一個實施例之序列
SEQ ID NO. 簡述 序列
159 來自奧密克戎BA.4.6/BF.7變異體之RNA編碼SARS-CoV-2 S蛋白之胺基酸序列(在對應於SEQ ID NO: 1之K986P及V987P之位置處具有PRO突變；亦即，SEQ ID NO: 90之位置981及982處的PRO突變) MFVFLVLLPLVSSQCVNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAISGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYYHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLGRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVRQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKVGGNYNYRYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDPPEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT
160 編碼來自奧密克戎BA.4.6/BF.7變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA序列 auguucguguuccuggugcugcugccucugguguccagccagugugugaaccugaucaccagaacacagucauacaccaacagcuuuaccagaggcguguacuaccccgacaagguguucagauccagcgugcugcacucuacccaggaccuguuccugccuuucuucagcaacgugaccugguuccacgccaucuccggcaccaauggcaccaagagauucgacaaccccgugcugcccuucaacgacgggguguacuuugccagcaccgagaaguccaacaucaucagaggcuggaucuucggcaccacacuggacagcaagacccagagccugcugaucgugaacaacgccaccaacguggucaucaaagugugcgaguuccaguucugcaacgaccccuuccuggacgucuacuaccacaagaacaacaagagcuggauggaaagcgaguuccggguguacagcagcgccaacaacugcaccuucgaguacgugucccagccuuuccugauggaccuggaaggcaagcagggcaacuucaagaaccugcgcgaguucguguuuaagaacaucgacggcuacuucaagaucuacagcaagcacaccccuaucaaccucggccgggaucugccucagggcuucucugcucuggaaccccugguggaucugcccaucggcaucaacaucacccgguuucagacacugcuggcccugcacagaagcuaccugacaccuggcgauagcagcagcggauggacagcuggugccgccgcuuacuaugugggcuaccugcagccuagaaccuuccugcugaaguacaacgagaacggcaccaucaccgacgccguggauugugcucuggauccucugagcgagacaaagugcacccugaaguccuucaccguggaaaagggcaucuaccagaccagcaacuuccgggugcagcccaccgaauccaucgugcgguuccccaauaucaccaaucugugccccuucgacgagguguucaaugccaccaccuucgccucuguguacgccuggaaccggaagcggaucagcaauugcguggccgacuacuccgugcuguacaacuucgcccccuucuucgcauucaagugcuacggcguguccccuaccaagcugaacgaccugugcuucacaaacguguacgccgacagcuucgugauccggggaaacgaagugcggcagauugccccuggacagacaggcaacaucgccgacuacaacuacaagcugcccgacgacuucaccggcugugugauugccuggaacagcaacaagcuggacuccaaagucggcggcaacuacaauuacagguaccggcuguuccggaaguccaaucugaagcccuucgagcgggacaucuccaccgagaucuaucaggccggcaacaagccuuguaacggcguggcaggcgugaacugcuacuucccacugcaguccuacggcuuuaggcccacauacggcgugggccaccagcccuacagagugguggugcugagcuucgaacugcugcaugccccugccacagugugcggcccuaagaaaagcaccaaucucgugaagaacaaaugcgugaacuucaacuucaacggccugaccggcaccggcgugcugacagagagcaacaagaaguuccugccauuccagcaguuuggccgggauaucgccgauaccacagacgccguuagagauccccagacacuggaaauccuggacaucaccccuugcagcuucggcggagugucugugaucaccccuggcaccaacaccagcaaucagguggcagugcuguaccagggcgugaacuguaccgaagugcccguggccauucacgccgaucagcugacaccuacauggcggguguacuccaccggcagcaauguguuucagaccagagccggcugucugaucggagccgaguacgugaacaauagcuacgagugcgacauccccaucggcgcuggaaucugcgccagcuaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcguggccagccagagcaucauugccuacacaaugucucugggcgccgagaacagcguggccuacuccaacaacucuaucgcuauccccaccaacuucaccaucagcgugaccacagagauccugccuguguccaugaccaagaccagcguggacugcaccauguacaucugcggcgauuccaccgagugcuccaaccugcugcugcaguacggcagcuucugcacccagcugaaaagagcccugacagggaucgccguggaacaggacaagaacacccaagagguguucgcccaagugaagcagaucuacaagaccccuccuaucaaguacuucggcggcuucaauuucagccagauucugcccgauccuagcaagcccagcaagcggagcuucaucgaggaccugcuguucaacaaagugacacuggccgacgccggcuucaucaagcaguauggcgauugucugggcgacauugccgccagggaucugauuugcgcccagaaguuuaacggacugacagugcugccuccucugcugaccgaugagaugaucgcccaguacacaucugcccugcuggccggcacaaucacaagcggcuggacauuuggagcaggcgccgcucugcagauccccuuugcuaugcagauggccuaccgguucaacggcaucggagugacccagaaugugcuguacgagaaccagaagcugaucgccaaccaguucaacagcgccaucggcaagauccaggacagccugagcagcacagcaagcgcccugggaaagcugcaggacguggucaaccacaaugcccaggcacugaacacccuggucaagcagcuguccuccaaguucggcgccaucagcucugugcugaacgauauccugagcagacuggacccuccugaggccgaggugcagaucgacagacugaucacaggcagacugcagagccuccagacauacgugacccagcagcugaucagagccgccgagauuagagccucugccaaucuggccgccaccaagaugucugagugugugcugggccagagcaagagaguggacuuuugcggcaagggcuaccaccugaugagcuucccucagucugccccucacggcgugguguuucugcacgugacauaugugcccgcucaagagaagaauuucaccaccgcuccagccaucugccacgacggcaaagcccacuuuccuagagaaggcguguucguguccaacggcacccauugguucgugacacagcggaacuucuacgagccccagaucaucaccaccgacaacaccuucgugucuggcaacugcgacgucgugaucggcauugugaacaauaccguguacgacccucugcagcccgagcuggacagcuucaaagaggaacuggacaaguacuuuaagaaccacacaagccccgacguggaccugggcgauaucagcggaaucaaugccagcgucgugaacauccagaaagagaucgaccggcugaacgagguggccaagaaucugaacgagagccugaucgaccugcaagaacuggggaaguacgagcaguacaucaaguggcccugguacaucuggcugggcuuuaucgccggacugauugccaucgugauggucacaaucaugcuguguugcaugaccagcugcuguagcugccugaagggcuguuguagcuguggcagcugcugcaaguucgacgaggacgauucugagcccgugcugaagggcgugaaacugcacuacacaugauga
161 編碼來自奧密克戎BA.4.6/BF.7變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之DNA序列 atgttcgtgttcctggtgctgctgcctctggtgtccagccagtgtgtgaacctgatcaccagaacacagtcatacaccaacagctttaccagaggcgtgtactaccccgacaaggtgttcagatccagcgtgctgcactctacccaggacctgttcctgcctttcttcagcaacgtgacctggttccacgccatctccggcaccaatggcaccaagagattcgacaaccccgtgctgcccttcaacgacggggtgtactttgccagcaccgagaagtccaacatcatcagaggctggatcttcggcaccacactggacagcaagacccagagcctgctgatcgtgaacaacgccaccaacgtggtcatcaaagtgtgcgagttccagttctgcaacgaccccttcctggacgtctactaccacaagaacaacaagagctggatggaaagcgagttccgggtgtacagcagcgccaacaactgcaccttcgagtacgtgtcccagcctttcctgatggacctggaaggcaagcagggcaacttcaagaacctgcgcgagttcgtgtttaagaacatcgacggctacttcaagatctacagcaagcacacccctatcaacctcggccgggatctgcctcagggcttctctgctctggaacccctggtggatctgcccatcggcatcaacatcacccggtttcagacactgctggccctgcacagaagctacctgacacctggcgatagcagcagcggatggacagctggtgccgccgcttactatgtgggctacctgcagcctagaaccttcctgctgaagtacaacgagaacggcaccatcaccgacgccgtggattgtgctctggatcctctgagcgagacaaagtgcaccctgaagtccttcaccgtggaaaagggcatctaccagaccagcaacttccgggtgcagcccaccgaatccatcgtgcggttccccaatatcaccaatctgtgccccttcgacgaggtgttcaatgccaccaccttcgcctctgtgtacgcctggaaccggaagcggatcagcaattgcgtggccgactactccgtgctgtacaacttcgcccccttcttcgcattcaagtgctacggcgtgtcccctaccaagctgaacgacctgtgcttcacaaacgtgtacgccgacagcttcgtgatccggggaaacgaagtgcggcagattgcccctggacagacaggcaacatcgccgactacaactacaagctgcccgacgacttcaccggctgtgtgattgcctggaacagcaacaagctggactccaaagtcggcggcaactacaattacaggtaccggctgttccggaagtccaatctgaagcccttcgagcgggacatctccaccgagatctatcaggccggcaacaagccttgtaacggcgtggcaggcgtgaactgctacttcccactgcagtcctacggctttaggcccacatacggcgtgggccaccagccctacagagtggtggtgctgagcttcgaactgctgcatgcccctgccacagtgtgcggccctaagaaaagcaccaatctcgtgaagaacaaatgcgtgaacttcaacttcaacggcctgaccggcaccggcgtgctgacagagagcaacaagaagttcctgccattccagcagtttggccgggatatcgccgataccacagacgccgttagagatccccagacactggaaatcctggacatcaccccttgcagcttcggcggagtgtctgtgatcacccctggcaccaacaccagcaatcaggtggcagtgctgtaccagggcgtgaactgtaccgaagtgcccgtggccattcacgccgatcagctgacacctacatggcgggtgtactccaccggcagcaatgtgtttcagaccagagccggctgtctgatcggagccgagtacgtgaacaatagctacgagtgcgacatccccatcggcgctggaatctgcgccagctaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcgtggccagccagagcatcattgcctacacaatgtctctgggcgccgagaacagcgtggcctactccaacaactctatcgctatccccaccaacttcaccatcagcgtgaccacagagatcctgcctgtgtccatgaccaagaccagcgtggactgcaccatgtacatctgcggcgattccaccgagtgctccaacctgctgctgcagtacggcagcttctgcacccagctgaaaagagccctgacagggatcgccgtggaacaggacaagaacacccaagaggtgttcgcccaagtgaagcagatctacaagacccctcctatcaagtacttcggcggcttcaatttcagccagattctgcccgatcctagcaagcccagcaagcggagcttcatcgaggacctgctgttcaacaaagtgacactggccgacgccggcttcatcaagcagtatggcgattgtctgggcgacattgccgccagggatctgatttgcgcccagaagtttaacggactgacagtgctgcctcctctgctgaccgatgagatgatcgcccagtacacatctgccctgctggccggcacaatcacaagcggctggacatttggagcaggcgccgctctgcagatcccctttgctatgcagatggcctaccggttcaacggcatcggagtgacccagaatgtgctgtacgagaaccagaagctgatcgccaaccagttcaacagcgccatcggcaagatccaggacagcctgagcagcacagcaagcgccctgggaaagctgcaggacgtggtcaaccacaatgcccaggcactgaacaccctggtcaagcagctgtcctccaagttcggcgccatcagctctgtgctgaacgatatcctgagcagactggaccctcctgaggccgaggtgcagatcgacagactgatcacaggcagactgcagagcctccagacatacgtgacccagcagctgatcagagccgccgagattagagcctctgccaatctggccgccaccaagatgtctgagtgtgtgctgggccagagcaagagagtggacttttgcggcaagggctaccacctgatgagcttccctcagtctgcccctcacggcgtggtgtttctgcacgtgacatatgtgcccgctcaagagaagaatttcaccaccgctccagccatctgccacgacggcaaagcccactttcctagagaaggcgtgttcgtgtccaacggcacccattggttcgtgacacagcggaacttctacgagccccagatcatcaccaccgacaacaccttcgtgtctggcaactgcgacgtcgtgatcggcattgtgaacaataccgtgtacgaccctctgcagcccgagctggacagcttcaaagaggaactggacaagtactttaagaaccacacaagccccgacgtggacctgggcgatatcagcggaatcaatgccagcgtcgtgaacatccagaaagagatcgaccggctgaacgaggtggccaagaatctgaacgagagcctgatcgacctgcaagaactggggaagtacgagcagtacatcaagtggccctggtacatctggctgggctttatcgccggactgattgccatcgtgatggtcacaatcatgctgtgttgcatgaccagctgctgtagctgcctgaagggctgttgtagctgtggcagctgctgcaagttcgacgaggacgattctgagcccgtgctgaagggcgtgaaactgcactacacatgatga
162 編碼來自奧密克戎BA.4.6/BF.7變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之全長RNA構築體 agaauaaacuaguauucuucugguccccacagacucagagagaacccgccaccauguucguguuccuggugcugcugccucugguguccagccagugugugaaccugaucaccagaacacagucauacaccaacagcuuuaccagaggcguguacuaccccgacaagguguucagauccagcgugcugcacucuacccaggaccuguuccugccuuucuucagcaacgugaccugguuccacgccaucuccggcaccaauggcaccaagagauucgacaaccccgugcugcccuucaacgacgggguguacuuugccagcaccgagaaguccaacaucaucagaggcuggaucuucggcaccacacuggacagcaagacccagagccugcugaucgugaacaacgccaccaacguggucaucaaagugugcgaguuccaguucugcaacgaccccuuccuggacgucuacuaccacaagaacaacaagagcuggauggaaagcgaguuccggguguacagcagcgccaacaacugcaccuucgaguacgugucccagccuuuccugauggaccuggaaggcaagcagggcaacuucaagaaccugcgcgaguucguguuuaagaacaucgacggcuacuucaagaucuacagcaagcacaccccuaucaaccucggccgggaucugccucagggcuucucugcucuggaaccccugguggaucugcccaucggcaucaacaucacccgguuucagacacugcuggcccugcacagaagcuaccugacaccuggcgauagcagcagcggauggacagcuggugccgccgcuuacuaugugggcuaccugcagccuagaaccuuccugcugaaguacaacgagaacggcaccaucaccgacgccguggauugugcucuggauccucugagcgagacaaagugcacccugaaguccuucaccguggaaaagggcaucuaccagaccagcaacuuccgggugcagcccaccgaauccaucgugcgguuccccaauaucaccaaucugugccccuucgacgagguguucaaugccaccaccuucgccucuguguacgccuggaaccggaagcggaucagcaauugcguggccgacuacuccgugcuguacaacuucgcccccuucuucgcauucaagugcuacggcguguccccuaccaagcugaacgaccugugcuucacaaacguguacgccgacagcuucgugauccggggaaacgaagugcggcagauugccccuggacagacaggcaacaucgccgacuacaacuacaagcugcccgacgacuucaccggcugugugauugccuggaacagcaacaagcuggacuccaaagucggcggcaacuacaauuacagguaccggcuguuccggaaguccaaucugaagcccuucgagcgggacaucuccaccgagaucuaucaggccggcaacaagccuuguaacggcguggcaggcgugaacugcuacuucccacugcaguccuacggcuuuaggcccacauacggcgugggccaccagcccuacagagugguggugcugagcuucgaacugcugcaugccccugccacagugugcggcccuaagaaaagcaccaaucucgugaagaacaaaugcgugaacuucaacuucaacggccugaccggcaccggcgugcugacagagagcaacaagaaguuccugccauuccagcaguuuggccgggauaucgccgauaccacagacgccguuagagauccccagacacuggaaauccuggacaucaccccuugcagcuucggcggagugucugugaucaccccuggcaccaacaccagcaaucagguggcagugcuguaccagggcgugaacuguaccgaagugcccguggccauucacgccgaucagcugacaccuacauggcggguguacuccaccggcagcaauguguuucagaccagagccggcugucugaucggagccgaguacgugaacaauagcuacgagugcgacauccccaucggcgcuggaaucugcgccagcuaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcguggccagccagagcaucauugccuacacaaugucucugggcgccgagaacagcguggccuacuccaacaacucuaucgcuauccccaccaacuucaccaucagcgugaccacagagauccugccuguguccaugaccaagaccagcguggacugcaccauguacaucugcggcgauuccaccgagugcuccaaccugcugcugcaguacggcagcuucugcacccagcugaaaagagcccugacagggaucgccguggaacaggacaagaacacccaagagguguucgcccaagugaagcagaucuacaagaccccuccuaucaaguacuucggcggcuucaauuucagccagauucugcccgauccuagcaagcccagcaagcggagcuucaucgaggaccugcuguucaacaaagugacacuggccgacgccggcuucaucaagcaguauggcgauugucugggcgacauugccgccagggaucugauuugcgcccagaaguuuaacggacugacagugcugccuccucugcugaccgaugagaugaucgcccaguacacaucugcccugcuggccggcacaaucacaagcggcuggacauuuggagcaggcgccgcucugcagauccccuuugcuaugcagauggccuaccgguucaacggcaucggagugacccagaaugugcuguacgagaaccagaagcugaucgccaaccaguucaacagcgccaucggcaagauccaggacagccugagcagcacagcaagcgcccugggaaagcugcaggacguggucaaccacaaugcccaggcacugaacacccuggucaagcagcuguccuccaaguucggcgccaucagcucugugcugaacgauauccugagcagacuggacccuccugaggccgaggugcagaucgacagacugaucacaggcagacugcagagccuccagacauacgugacccagcagcugaucagagccgccgagauuagagccucugccaaucuggccgccaccaagaugucugagugugugcugggccagagcaagagaguggacuuuugcggcaagggcuaccaccugaugagcuucccucagucugccccucacggcgugguguuucugcacgugacauaugugcccgcucaagagaagaauuucaccaccgcuccagccaucugccacgacggcaaagcccacuuuccuagagaaggcguguucguguccaacggcacccauugguucgugacacagcggaacuucuacgagccccagaucaucaccaccgacaacaccuucgugucuggcaacugcgacgucgugaucggcauugugaacaauaccguguacgacccucugcagcccgagcuggacagcuucaaagaggaacuggacaaguacuuuaagaaccacacaagccccgacguggaccugggcgauaucagcggaaucaaugccagcgucgugaacauccagaaagagaucgaccggcugaacgagguggccaagaaucugaacgagagccugaucgaccugcaagaacuggggaaguacgagcaguacaucaaguggcccugguacaucuggcugggcuuuaucgccggacugauugccaucgugauggucacaaucaugcuguguugcaugaccagcugcuguagcugccugaagggcuguuguagcuguggcagcugcugcaaguucgacgaggacgauucugagcccgugcugaagggcgugaaacugcacuacacaugaugacucgagcugguacugcaugcacgcaaugcuagcugccccuuucccguccuggguaccccgagucucccccgaccucgggucccagguaugcucccaccuccaccugccccacucaccaccucugcuaguuccagacaccucccaagcacgcagcaaugcagcucaaaacgcuuagccuagccacacccccacgggaaacagcagugauuaaccuuuagcaauaaacgaaaguuuaacuaagcuauacuaaccccaggguuggucaauuucgugccagccacacccuggagcuagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcauaugacuaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
163 編碼來自奧密克戎BA.4.6/BF.7變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之全長DNA構築體 agaataaactagtattcttctggtccccacagactcagagagaacccgccaccatgttcgtgttcctggtgctgctgcctctggtgtccagccagtgtgtgaacctgatcaccagaacacagtcatacaccaacagctttaccagaggcgtgtactaccccgacaaggtgttcagatccagcgtgctgcactctacccaggacctgttcctgcctttcttcagcaacgtgacctggttccacgccatctccggcaccaatggcaccaagagattcgacaaccccgtgctgcccttcaacgacggggtgtactttgccagcaccgagaagtccaacatcatcagaggctggatcttcggcaccacactggacagcaagacccagagcctgctgatcgtgaacaacgccaccaacgtggtcatcaaagtgtgcgagttccagttctgcaacgaccccttcctggacgtctactaccacaagaacaacaagagctggatggaaagcgagttccgggtgtacagcagcgccaacaactgcaccttcgagtacgtgtcccagcctttcctgatggacctggaaggcaagcagggcaacttcaagaacctgcgcgagttcgtgtttaagaacatcgacggctacttcaagatctacagcaagcacacccctatcaacctcggccgggatctgcctcagggcttctctgctctggaacccctggtggatctgcccatcggcatcaacatcacccggtttcagacactgctggccctgcacagaagctacctgacacctggcgatagcagcagcggatggacagctggtgccgccgcttactatgtgggctacctgcagcctagaaccttcctgctgaagtacaacgagaacggcaccatcaccgacgccgtggattgtgctctggatcctctgagcgagacaaagtgcaccctgaagtccttcaccgtggaaaagggcatctaccagaccagcaacttccgggtgcagcccaccgaatccatcgtgcggttccccaatatcaccaatctgtgccccttcgacgaggtgttcaatgccaccaccttcgcctctgtgtacgcctggaaccggaagcggatcagcaattgcgtggccgactactccgtgctgtacaacttcgcccccttcttcgcattcaagtgctacggcgtgtcccctaccaagctgaacgacctgtgcttcacaaacgtgtacgccgacagcttcgtgatccggggaaacgaagtgcggcagattgcccctggacagacaggcaacatcgccgactacaactacaagctgcccgacgacttcaccggctgtgtgattgcctggaacagcaacaagctggactccaaagtcggcggcaactacaattacaggtaccggctgttccggaagtccaatctgaagcccttcgagcgggacatctccaccgagatctatcaggccggcaacaagccttgtaacggcgtggcaggcgtgaactgctacttcccactgcagtcctacggctttaggcccacatacggcgtgggccaccagccctacagagtggtggtgctgagcttcgaactgctgcatgcccctgccacagtgtgcggccctaagaaaagcaccaatctcgtgaagaacaaatgcgtgaacttcaacttcaacggcctgaccggcaccggcgtgctgacagagagcaacaagaagttcctgccattccagcagtttggccgggatatcgccgataccacagacgccgttagagatccccagacactggaaatcctggacatcaccccttgcagcttcggcggagtgtctgtgatcacccctggcaccaacaccagcaatcaggtggcagtgctgtaccagggcgtgaactgtaccgaagtgcccgtggccattcacgccgatcagctgacacctacatggcgggtgtactccaccggcagcaatgtgtttcagaccagagccggctgtctgatcggagccgagtacgtgaacaatagctacgagtgcgacatccccatcggcgctggaatctgcgccagctaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcgtggccagccagagcatcattgcctacacaatgtctctgggcgccgagaacagcgtggcctactccaacaactctatcgctatccccaccaacttcaccatcagcgtgaccacagagatcctgcctgtgtccatgaccaagaccagcgtggactgcaccatgtacatctgcggcgattccaccgagtgctccaacctgctgctgcagtacggcagcttctgcacccagctgaaaagagccctgacagggatcgccgtggaacaggacaagaacacccaagaggtgttcgcccaagtgaagcagatctacaagacccctcctatcaagtacttcggcggcttcaatttcagccagattctgcccgatcctagcaagcccagcaagcggagcttcatcgaggacctgctgttcaacaaagtgacactggccgacgccggcttcatcaagcagtatggcgattgtctgggcgacattgccgccagggatctgatttgcgcccagaagtttaacggactgacagtgctgcctcctctgctgaccgatgagatgatcgcccagtacacatctgccctgctggccggcacaatcacaagcggctggacatttggagcaggcgccgctctgcagatcccctttgctatgcagatggcctaccggttcaacggcatcggagtgacccagaatgtgctgtacgagaaccagaagctgatcgccaaccagttcaacagcgccatcggcaagatccaggacagcctgagcagcacagcaagcgccctgggaaagctgcaggacgtggtcaaccacaatgcccaggcactgaacaccctggtcaagcagctgtcctccaagttcggcgccatcagctctgtgctgaacgatatcctgagcagactggaccctcctgaggccgaggtgcagatcgacagactgatcacaggcagactgcagagcctccagacatacgtgacccagcagctgatcagagccgccgagattagagcctctgccaatctggccgccaccaagatgtctgagtgtgtgctgggccagagcaagagagtggacttttgcggcaagggctaccacctgatgagcttccctcagtctgcccctcacggcgtggtgtttctgcacgtgacatatgtgcccgctcaagagaagaatttcaccaccgctccagccatctgccacgacggcaaagcccactttcctagagaaggcgtgttcgtgtccaacggcacccattggttcgtgacacagcggaacttctacgagccccagatcatcaccaccgacaacaccttcgtgtctggcaactgcgacgtcgtgatcggcattgtgaacaataccgtgtacgaccctctgcagcccgagctggacagcttcaaagaggaactggacaagtactttaagaaccacacaagccccgacgtggacctgggcgatatcagcggaatcaatgccagcgtcgtgaacatccagaaagagatcgaccggctgaacgaggtggccaagaatctgaacgagagcctgatcgacctgcaagaactggggaagtacgagcagtacatcaagtggccctggtacatctggctgggctttatcgccggactgattgccatcgtgatggtcacaatcatgctgtgttgcatgaccagctgctgtagctgcctgaagggctgttgtagctgtggcagctgctgcaagttcgacgaggacgattctgagcccgtgctgaagggcgtgaaactgcactacacatgatgactcgagctggtactgcatgcacgcaatgctagctgcccctttcccgtcctgggtaccccgagtctcccccgacctcgggtcccaggtatgctcccacctccacctgccccactcaccacctctgctagttccagacacctcccaagcacgcagcaatgcagctcaaaacgcttagcctagccacacccccacgggaaacagcagtgattaacctttagcaataaacgaaagtttaactaagctatactaaccccagggttggtcaatttcgtgccagccacaccctggagctagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcatatgactaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
表 15. 例示性奧密克戎XBB特異性RNA疫苗之一個實施例之序列
SEQ ID NO. 簡述 序列
164 來自奧密克戎XBB變異體之RNA編碼SARS-CoV-2 S蛋白之胺基酸序列(在對應於SEQ ID NO: 1之K986P及V987P之位置處具有PRO突變；亦即，SEQ ID NO: 95之位置981及982處的PRO突變) MFVFLVLLPLVSSQCVNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAIHVSGTNGTKRFDNPALPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYQKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKEGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLERDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFHEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVIYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKPSGNYNYLYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGSNCYSPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDPPEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT
165 編碼來自奧密克戎XBB變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA序列 auguucguguuccuggugcugcugccucugguguccagccagugugugaaccugaucaccagaacacagUCAuacaccaacagcuuuaccagaggcguguacuaccccgacaagguguucagauccagcgugcugcacucuacccaggaccuguuccugccuuucuucagcaacgugaccugguuccacgccauccacguguccggcaccaauggcaccaagagauucgacaaccccgcccugcccuucaacgacgggguguacuuugccagcaccgagaaguccaacaucaucagaggcuggaucuucggcaccacacuggacagcaagacccagagccugcugaucgugaacaacgccaccaacguggucaucaaagugugcgaguuccaguucugcaacgaccccuuccuggacgucuaccagaagaacaacaagagcuggauggaaagcgaguuccggguguacagcagcgccaacaacugcaccuucgaguacgugucccagccuuuccugauggaccuggaaggcaaggagggcaacuucaagaaccugcgcgaguucguguuuaagaacaucgacggcuacuucaagaucuacagcaagcacaccccuaucaaccucgagcgggaucugccucagggcuucucugcucuggaaccccugguggaucugcccaucggcaucaacaucacccgguuucagacacugcuggcccugcacagaagcuaccugacaccuggcgauagcagcagcggauggacagcuggugccgccgcuuacuaugugggcuaccugcagccuagaaccuuccugcugaaguacaacgagaacggcaccaucaccgacgccguggauugugcucuggauccucugagcgagacaaagugcacccugaaguccuucaccguggaaaagggcaucuaccagaccagcaacuuccgggugcagcccaccgaauccaucgugcgguuccccaauaucaccaaucugugccccuuccacgagguguucaaugccaccaccuucgccucuguguacgccuggaaccggaagcggaucagcaauugcguggccgacuacuccgugaucuacaacuucgcccccuucuucgcauucaagugcuacggcguguccccuaccaagcugaacgaccugugcuucacaaacguguacgccgacagcuucgugauccggggaaacgaagugucacagauugccccuggacagacaggcaacaucgccgacuacaacuacaagcugcccgacgacuucaccggcugugugauugccuggaacagcaacaagcuggacuccaaacccagcggcaacuacaauuaccuguaccggcuguuccggaaguccaagcugaagcccuucgagcgggacaucuccaccgagaucuaucaggccggcaacaagccuuguaacggcguggcaggcagcaacugcuacagcccacugcaguccuacggcuuuaggcccacauacggcgugggccaccagcccuacagagugguggugcugagcuucgaacugcugcaugccccugccacagugugcggcccuaagaaaagcaccaaucucgugaagaacaaaugcgugaacuucaacuucaacggccugaccggcaccggcgugcugacagagagcaacaagaaguuccugccauuccagcaguuuggccgggauaucgccgauaccacagacgccguuagagauccccagacacuggaaauccuggacaucaccccuugcagcuucggcggagugucugugaucaccccuggcaccaacaccagcaaucagguggcagugcuguaccagggcgugaacuguaccgaagugcccguggccauucacgccgaucagcugacaccuacauggcggguguacuccaccggcagcaauguguuucagaccagagccggcugucugaucggagccgaguacgugaacaauagcuacgagugcgacauccccaucggcgcuggaaucugcgccagcuaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcguggccagccagagcaucauugccuacacaaugucucugggcgccgagaacagcguggccuacuccaacaacucuaucgcuauccccaccaacuucaccaucagcgugaccacagagauccugccuguguccaugaccaagaccagcguggacugcaccauguacaucugcggcgauuccaccgagugcuccaaccugcugcugcaguacggcagcuucugcacccagcugaaaagagcccugacagggaucgccguggaacaggacaagaacacccaagagguguucgcccaagugaagcagaucuacaagaccccuccuaucaaguacuucggcggcuucaauuucagccagauucugcccgauccuagcaagcccagcaagcggagcuucaucgaggaccugcuguucaacaaagugacacuggccgacgccggcuucaucaagcaguauggcgauugucugggcgacauugccgccagggaucugauuugcgcccagaaguuuaacggacugacagugcugccuccucugcugaccgaugagaugaucgcccaguacacaucugcccugcuggccggcacaaucacaagcggcuggacauuuggagcaggcgccgcucugcagauccccuuugcuaugcagauggccuaccgguucaacggcaucggagugacccagaaugugcuguacgagaaccagaagcugaucgccaaccaguucaacagcgccaucggcaagauccaggacagccugagcagcacagcaagcgcccugggaaagcugcaggacguggucaaccacaaugcccaggcacugaacacccuggucaagcagcuguccuccaaguucggcgccaucagcucugugcugaacgauauccugagcagacuggacccuccugaggccgaggugcagaucgacagacugaucacaggcagacugcagagccuccagacauacgugacccagcagcugaucagagccgccgagauuagagccucugccaaucuggccgccaccaagaugucugagugugugcugggccagagcaagagaguggacuuuugcggcaagggcuaccaccugaugagcuucccucagucugccccucacggcgugguguuucugcacgugacauaugugcccgcucaagagaagaauuucaccaccgcuccagccaucugccacgacggcaaagcccacuuuccuagagaaggcguguucguguccaacggcacccauugguucgugacacagcggaacuucuacgagccccagaucaucaccaccgacaacaccuucgugucuggcaacugcgacgucgugaucggcauugugaacaauaccguguacgacccucugcagcccgagcuggacagcuucaaagaggaacuggacaaguacuuuaagaaccacacaagccccgacguggaccugggcgauaucagcggaaucaaugccagcgucgugaacauccagaaagagaucgaccggcugaacgagguggccaagaaucugaacgagagccugaucgaccugcaagaacuggggaaguacgagcaguacaucaaguggcccugguacaucuggcugggcuuuaucgccggacugauugccaucgugauggucacaaucaugcuguguugcaugaccagcugcuguagcugccugaagggcuguuguagcuguggcagcugcugcaaguucgacgaggacgauucugagcccgugcugaagggcgugaaacugcacuacacaugauga
166 編碼來自奧密克戎XBB變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之DNA序列 atgttcgtgttcctggtgctgctgcctctggtgtccagccagtgtgtgaacctgatcaccagaacacagTCAtacaccaacagctttaccagaggcgtgtactaccccgacaaggtgttcagatccagcgtgctgcactctacccaggacctgttcctgcctttcttcagcaacgtgacctggttccacgccatccacgtgtccggcaccaatggcaccaagagattcgacaaccccgccctgcccttcaacgacggggtgtactttgccagcaccgagaagtccaacatcatcagaggctggatcttcggcaccacactggacagcaagacccagagcctgctgatcgtgaacaacgccaccaacgtggtcatcaaagtgtgcgagttccagttctgcaacgaccccttcctggacgtctaccagaagaacaacaagagctggatggaaagcgagttccgggtgtacagcagcgccaacaactgcaccttcgagtacgtgtcccagcctttcctgatggacctggaaggcaaggagggcaacttcaagaacctgcgcgagttcgtgtttaagaacatcgacggctacttcaagatctacagcaagcacacccctatcaacctcgagcgggatctgcctcagggcttctctgctctggaacccctggtggatctgcccatcggcatcaacatcacccggtttcagacactgctggccctgcacagaagctacctgacacctggcgatagcagcagcggatggacagctggtgccgccgcttactatgtgggctacctgcagcctagaaccttcctgctgaagtacaacgagaacggcaccatcaccgacgccgtggattgtgctctggatcctctgagcgagacaaagtgcaccctgaagtccttcaccgtggaaaagggcatctaccagaccagcaacttccgggtgcagcccaccgaatccatcgtgcggttccccaatatcaccaatctgtgccccttccacgaggtgttcaatgccaccaccttcgcctctgtgtacgcctggaaccggaagcggatcagcaattgcgtggccgactactccgtgatctacaacttcgcccccttcttcgcattcaagtgctacggcgtgtcccctaccaagctgaacgacctgtgcttcacaaacgtgtacgccgacagcttcgtgatccggggaaacgaagtgtcacagattgcccctggacagacaggcaacatcgccgactacaactacaagctgcccgacgacttcaccggctgtgtgattgcctggaacagcaacaagctggactccaaacccagcggcaactacaattacctgtaccggctgttccggaagtccaagctgaagcccttcgagcgggacatctccaccgagatctatcaggccggcaacaagccttgtaacggcgtggcaggcagcaactgctacagcccactgcagtcctacggctttaggcccacatacggcgtgggccaccagccctacagagtggtggtgctgagcttcgaactgctgcatgcccctgccacagtgtgcggccctaagaaaagcaccaatctcgtgaagaacaaatgcgtgaacttcaacttcaacggcctgaccggcaccggcgtgctgacagagagcaacaagaagttcctgccattccagcagtttggccgggatatcgccgataccacagacgccgttagagatccccagacactggaaatcctggacatcaccccttgcagcttcggcggagtgtctgtgatcacccctggcaccaacaccagcaatcaggtggcagtgctgtaccagggcgtgaactgtaccgaagtgcccgtggccattcacgccgatcagctgacacctacatggcgggtgtactccaccggcagcaatgtgtttcagaccagagccggctgtctgatcggagccgagtacgtgaacaatagctacgagtgcgacatccccatcggcgctggaatctgcgccagctaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcgtggccagccagagcatcattgcctacacaatgtctctgggcgccgagaacagcgtggcctactccaacaactctatcgctatccccaccaacttcaccatcagcgtgaccacagagatcctgcctgtgtccatgaccaagaccagcgtggactgcaccatgtacatctgcggcgattccaccgagtgctccaacctgctgctgcagtacggcagcttctgcacccagctgaaaagagccctgacagggatcgccgtggaacaggacaagaacacccaagaggtgttcgcccaagtgaagcagatctacaagacccctcctatcaagtacttcggcggcttcaatttcagccagattctgcccgatcctagcaagcccagcaagcggagcttcatcgaggacctgctgttcaacaaagtgacactggccgacgccggcttcatcaagcagtatggcgattgtctgggcgacattgccgccagggatctgatttgcgcccagaagtttaacggactgacagtgctgcctcctctgctgaccgatgagatgatcgcccagtacacatctgccctgctggccggcacaatcacaagcggctggacatttggagcaggcgccgctctgcagatcccctttgctatgcagatggcctaccggttcaacggcatcggagtgacccagaatgtgctgtacgagaaccagaagctgatcgccaaccagttcaacagcgccatcggcaagatccaggacagcctgagcagcacagcaagcgccctgggaaagctgcaggacgtggtcaaccacaatgcccaggcactgaacaccctggtcaagcagctgtcctccaagttcggcgccatcagctctgtgctgaacgatatcctgagcagactggaccctcctgaggccgaggtgcagatcgacagactgatcacaggcagactgcagagcctccagacatacgtgacccagcagctgatcagagccgccgagattagagcctctgccaatctggccgccaccaagatgtctgagtgtgtgctgggccagagcaagagagtggacttttgcggcaagggctaccacctgatgagcttccctcagtctgcccctcacggcgtggtgtttctgcacgtgacatatgtgcccgctcaagagaagaatttcaccaccgctccagccatctgccacgacggcaaagcccactttcctagagaaggcgtgttcgtgtccaacggcacccattggttcgtgacacagcggaacttctacgagccccagatcatcaccaccgacaacaccttcgtgtctggcaactgcgacgtcgtgatcggcattgtgaacaataccgtgtacgaccctctgcagcccgagctggacagcttcaaagaggaactggacaagtactttaagaaccacacaagccccgacgtggacctgggcgatatcagcggaatcaatgccagcgtcgtgaacatccagaaagagatcgaccggctgaacgaggtggccaagaatctgaacgagagcctgatcgacctgcaagaactggggaagtacgagcagtacatcaagtggccctggtacatctggctgggctttatcgccggactgattgccatcgtgatggtcacaatcatgctgtgttgcatgaccagctgctgtagctgcctgaagggctgttgtagctgtggcagctgctgcaagttcgacgaggacgattctgagcccgtgctgaagggcgtgaaactgcactacacatgatga
167 編碼來自奧密克戎XBB變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之全長RNA構築體 agaauaaacuaguauucuucugguccccacagacucagagagaacccgccaccauguucguguuccuggugcugcugccucugguguccagccagugugugaaccugaucaccagaacacagUCAuacaccaacagcuuuaccagaggcguguacuaccccgacaagguguucagauccagcgugcugcacucuacccaggaccuguuccugccuuucuucagcaacgugaccugguuccacgccauccacguguccggcaccaauggcaccaagagauucgacaaccccgcccugcccuucaacgacgggguguacuuugccagcaccgagaaguccaacaucaucagaggcuggaucuucggcaccacacuggacagcaagacccagagccugcugaucgugaacaacgccaccaacguggucaucaaagugugcgaguuccaguucugcaacgaccccuuccuggacgucuaccagaagaacaacaagagcuggauggaaagcgaguuccggguguacagcagcgccaacaacugcaccuucgaguacgugucccagccuuuccugauggaccuggaaggcaaggagggcaacuucaagaaccugcgcgaguucguguuuaagaacaucgacggcuacuucaagaucuacagcaagcacaccccuaucaaccucgagcgggaucugccucagggcuucucugcucuggaaccccugguggaucugcccaucggcaucaacaucacccgguuucagacacugcuggcccugcacagaagcuaccugacaccuggcgauagcagcagcggauggacagcuggugccgccgcuuacuaugugggcuaccugcagccuagaaccuuccugcugaaguacaacgagaacggcaccaucaccgacgccguggauugugcucuggauccucugagcgagacaaagugcacccugaaguccuucaccguggaaaagggcaucuaccagaccagcaacuuccgggugcagcccaccgaauccaucgugcgguuccccaauaucaccaaucugugccccuuccacgagguguucaaugccaccaccuucgccucuguguacgccuggaaccggaagcggaucagcaauugcguggccgacuacuccgugaucuacaacuucgcccccuucuucgcauucaagugcuacggcguguccccuaccaagcugaacgaccugugcuucacaaacguguacgccgacagcuucgugauccggggaaacgaagugucacagauugccccuggacagacaggcaacaucgccgacuacaacuacaagcugcccgacgacuucaccggcugugugauugccuggaacagcaacaagcuggacuccaaacccagcggcaacuacaauuaccuguaccggcuguuccggaaguccaagcugaagcccuucgagcgggacaucuccaccgagaucuaucaggccggcaacaagccuuguaacggcguggcaggcagcaacugcuacagcccacugcaguccuacggcuuuaggcccacauacggcgugggccaccagcccuacagagugguggugcugagcuucgaacugcugcaugccccugccacagugugcggcccuaagaaaagcaccaaucucgugaagaacaaaugcgugaacuucaacuucaacggccugaccggcaccggcgugcugacagagagcaacaagaaguuccugccauuccagcaguuuggccgggauaucgccgauaccacagacgccguuagagauccccagacacuggaaauccuggacaucaccccuugcagcuucggcggagugucugugaucaccccuggcaccaacaccagcaaucagguggcagugcuguaccagggcgugaacuguaccgaagugcccguggccauucacgccgaucagcugacaccuacauggcggguguacuccaccggcagcaauguguuucagaccagagccggcugucugaucggagccgaguacgugaacaauagcuacgagugcgacauccccaucggcgcuggaaucugcgccagcuaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcguggccagccagagcaucauugccuacacaaugucucugggcgccgagaacagcguggccuacuccaacaacucuaucgcuauccccaccaacuucaccaucagcgugaccacagagauccugccuguguccaugaccaagaccagcguggacugcaccauguacaucugcggcgauuccaccgagugcuccaaccugcugcugcaguacggcagcuucugcacccagcugaaaagagcccugacagggaucgccguggaacaggacaagaacacccaagagguguucgcccaagugaagcagaucuacaagaccccuccuaucaaguacuucggcggcuucaauuucagccagauucugcccgauccuagcaagcccagcaagcggagcuucaucgaggaccugcuguucaacaaagugacacuggccgacgccggcuucaucaagcaguauggcgauugucugggcgacauugccgccagggaucugauuugcgcccagaaguuuaacggacugacagugcugccuccucugcugaccgaugagaugaucgcccaguacacaucugcccugcuggccggcacaaucacaagcggcuggacauuuggagcaggcgccgcucugcagauccccuuugcuaugcagauggccuaccgguucaacggcaucggagugacccagaaugugcuguacgagaaccagaagcugaucgccaaccaguucaacagcgccaucggcaagauccaggacagccugagcagcacagcaagcgcccugggaaagcugcaggacguggucaaccacaaugcccaggcacugaacacccuggucaagcagcuguccuccaaguucggcgccaucagcucugugcugaacgauauccugagcagacuggacccuccugaggccgaggugcagaucgacagacugaucacaggcagacugcagagccuccagacauacgugacccagcagcugaucagagccgccgagauuagagccucugccaaucuggccgccaccaagaugucugagugugugcugggccagagcaagagaguggacuuuugcggcaagggcuaccaccugaugagcuucccucagucugccccucacggcgugguguuucugcacgugacauaugugcccgcucaagagaagaauuucaccaccgcuccagccaucugccacgacggcaaagcccacuuuccuagagaaggcguguucguguccaacggcacccauugguucgugacacagcggaacuucuacgagccccagaucaucaccaccgacaacaccuucgugucuggcaacugcgacgucgugaucggcauugugaacaauaccguguacgacccucugcagcccgagcuggacagcuucaaagaggaacuggacaaguacuuuaagaaccacacaagccccgacguggaccugggcgauaucagcggaaucaaugccagcgucgugaacauccagaaagagaucgaccggcugaacgagguggccaagaaucugaacgagagccugaucgaccugcaagaacuggggaaguacgagcaguacaucaaguggcccugguacaucuggcugggcuuuaucgccggacugauugccaucgugauggucacaaucaugcuguguugcaugaccagcugcuguagcugccugaagggcuguuguagcuguggcagcugcugcaaguucgacgaggacgauucugagcccgugcugaagggcgugaaacugcacuacacaugaugacucgagcugguacugcaugcacgcaaugcuagcugccccuuucccguccuggguaccccgagucucccccgaccucgggucccagguaugcucccaccuccaccugccccacucaccaccucugcuaguuccagacaccucccaagcacgcagcaaugcagcucaaaacgcuuagccuagccacacccccacgggaaacagcagugauuaaccuuuagcaauaaacgaaaguuuaacuaagcuauacuaaccccaggguuggucaauuucgugccagccacacccuggagcuagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcauaugacuaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
168 編碼來自奧密克戎XBB變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之全長DNA構築體 agaataaactagtattcttctggtccccacagactcagagagaacccgccaccatgttcgtgttcctggtgctgctgcctctggtgtccagccagtgtgtgaacctgatcaccagaacacagTCAtacaccaacagctttaccagaggcgtgtactaccccgacaaggtgttcagatccagcgtgctgcactctacccaggacctgttcctgcctttcttcagcaacgtgacctggttccacgccatccacgtgtccggcaccaatggcaccaagagattcgacaaccccgccctgcccttcaacgacggggtgtactttgccagcaccgagaagtccaacatcatcagaggctggatcttcggcaccacactggacagcaagacccagagcctgctgatcgtgaacaacgccaccaacgtggtcatcaaagtgtgcgagttccagttctgcaacgaccccttcctggacgtctaccagaagaacaacaagagctggatggaaagcgagttccgggtgtacagcagcgccaacaactgcaccttcgagtacgtgtcccagcctttcctgatggacctggaaggcaaggagggcaacttcaagaacctgcgcgagttcgtgtttaagaacatcgacggctacttcaagatctacagcaagcacacccctatcaacctcgagcgggatctgcctcagggcttctctgctctggaacccctggtggatctgcccatcggcatcaacatcacccggtttcagacactgctggccctgcacagaagctacctgacacctggcgatagcagcagcggatggacagctggtgccgccgcttactatgtgggctacctgcagcctagaaccttcctgctgaagtacaacgagaacggcaccatcaccgacgccgtggattgtgctctggatcctctgagcgagacaaagtgcaccctgaagtccttcaccgtggaaaagggcatctaccagaccagcaacttccgggtgcagcccaccgaatccatcgtgcggttccccaatatcaccaatctgtgccccttccacgaggtgttcaatgccaccaccttcgcctctgtgtacgcctggaaccggaagcggatcagcaattgcgtggccgactactccgtgatctacaacttcgcccccttcttcgcattcaagtgctacggcgtgtcccctaccaagctgaacgacctgtgcttcacaaacgtgtacgccgacagcttcgtgatccggggaaacgaagtgtcacagattgcccctggacagacaggcaacatcgccgactacaactacaagctgcccgacgacttcaccggctgtgtgattgcctggaacagcaacaagctggactccaaacccagcggcaactacaattacctgtaccggctgttccggaagtccaagctgaagcccttcgagcgggacatctccaccgagatctatcaggccggcaacaagccttgtaacggcgtggcaggcagcaactgctacagcccactgcagtcctacggctttaggcccacatacggcgtgggccaccagccctacagagtggtggtgctgagcttcgaactgctgcatgcccctgccacagtgtgcggccctaagaaaagcaccaatctcgtgaagaacaaatgcgtgaacttcaacttcaacggcctgaccggcaccggcgtgctgacagagagcaacaagaagttcctgccattccagcagtttggccgggatatcgccgataccacagacgccgttagagatccccagacactggaaatcctggacatcaccccttgcagcttcggcggagtgtctgtgatcacccctggcaccaacaccagcaatcaggtggcagtgctgtaccagggcgtgaactgtaccgaagtgcccgtggccattcacgccgatcagctgacacctacatggcgggtgtactccaccggcagcaatgtgtttcagaccagagccggctgtctgatcggagccgagtacgtgaacaatagctacgagtgcgacatccccatcggcgctggaatctgcgccagctaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcgtggccagccagagcatcattgcctacacaatgtctctgggcgccgagaacagcgtggcctactccaacaactctatcgctatccccaccaacttcaccatcagcgtgaccacagagatcctgcctgtgtccatgaccaagaccagcgtggactgcaccatgtacatctgcggcgattccaccgagtgctccaacctgctgctgcagtacggcagcttctgcacccagctgaaaagagccctgacagggatcgccgtggaacaggacaagaacacccaagaggtgttcgcccaagtgaagcagatctacaagacccctcctatcaagtacttcggcggcttcaatttcagccagattctgcccgatcctagcaagcccagcaagcggagcttcatcgaggacctgctgttcaacaaagtgacactggccgacgccggcttcatcaagcagtatggcgattgtctgggcgacattgccgccagggatctgatttgcgcccagaagtttaacggactgacagtgctgcctcctctgctgaccgatgagatgatcgcccagtacacatctgccctgctggccggcacaatcacaagcggctggacatttggagcaggcgccgctctgcagatcccctttgctatgcagatggcctaccggttcaacggcatcggagtgacccagaatgtgctgtacgagaaccagaagctgatcgccaaccagttcaacagcgccatcggcaagatccaggacagcctgagcagcacagcaagcgccctgggaaagctgcaggacgtggtcaaccacaatgcccaggcactgaacaccctggtcaagcagctgtcctccaagttcggcgccatcagctctgtgctgaacgatatcctgagcagactggaccctcctgaggccgaggtgcagatcgacagactgatcacaggcagactgcagagcctccagacatacgtgacccagcagctgatcagagccgccgagattagagcctctgccaatctggccgccaccaagatgtctgagtgtgtgctgggccagagcaagagagtggacttttgcggcaagggctaccacctgatgagcttccctcagtctgcccctcacggcgtggtgtttctgcacgtgacatatgtgcccgctcaagagaagaatttcaccaccgctccagccatctgccacgacggcaaagcccactttcctagagaaggcgtgttcgtgtccaacggcacccattggttcgtgacacagcggaacttctacgagccccagatcatcaccaccgacaacaccttcgtgtctggcaactgcgacgtcgtgatcggcattgtgaacaataccgtgtacgaccctctgcagcccgagctggacagcttcaaagaggaactggacaagtactttaagaaccacacaagccccgacgtggacctgggcgatatcagcggaatcaatgccagcgtcgtgaacatccagaaagagatcgaccggctgaacgaggtggccaagaatctgaacgagagcctgatcgacctgcaagaactggggaagtacgagcagtacatcaagtggccctggtacatctggctgggctttatcgccggactgattgccatcgtgatggtcacaatcatgctgtgttgcatgaccagctgctgtagctgcctgaagggctgttgtagctgtggcagctgctgcaagttcgacgaggacgattctgagcccgtgctgaagggcgtgaaactgcactacacatgatgactcgagctggtactgcatgcacgcaatgctagctgcccctttcccgtcctgggtaccccgagtctcccccgacctcgggtcccaggtatgctcccacctccacctgccccactcaccacctctgctagttccagacacctcccaagcacgcagcaatgcagctcaaaacgcttagcctagccacacccccacgggaaacagcagtgattaacctttagcaataaacgaaagtttaactaagctatactaaccccagggttggtcaatttcgtgccagccacaccctggagctagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcatatgactaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
表 16. 例示性奧密克戎BQ.1.1特異性RNA疫苗之一個實施例之序列
SEQ ID NO. 簡述 序列
169 來自奧密克戎BQ.1.1變異體之RNA編碼SARS-CoV-2 S蛋白之胺基酸序列(在對應於SEQ ID NO: 1之K986P及V987P之位置處具有PRO突變；亦即，SEQ ID NO: 100之位置981及982處的PRO突變) MFVFLVLLPLVSSQCVNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAISGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYYHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLGRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSTVGGNYNYRYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDPPEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT
170 編碼來自奧密克戎BQ.1.1變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA序列 AUGUUCGUGUUCCUGGUGCUGCUGCCUCUGGUGUCCAGCCAGUGUGUGAACCUGAUCACCAGAACACAGUCAUACACCAACAGCUUUACCAGAGGCGUGUACUACCCCGACAAGGUGUUCAGAUCCAGCGUGCUGCACUCUACCCAGGACCUGUUCCUGCCUUUCUUCAGCAACGUGACCUGGUUCCACGCCAUCUCCGGCACCAAUGGCACCAAGAGAUUCGACAACCCCGUGCUGCCCUUCAACGACGGGGUGUACUUUGCCAGCACCGAGAAGUCCAACAUCAUCAGAGGCUGGAUCUUCGGCACCACACUGGACAGCAAGACCCAGAGCCUGCUGAUCGUGAACAACGCCACCAACGUGGUCAUCAAAGUGUGCGAGUUCCAGUUCUGCAACGACCCCUUCCUGGACGUCUACUACCACAAGAACAACAAGAGCUGGAUGGAAAGCGAGUUCCGGGUGUACAGCAGCGCCAACAACUGCACCUUCGAGUACGUGUCCCAGCCUUUCCUGAUGGACCUGGAAGGCAAGCAGGGCAACUUCAAGAACCUGCGCGAGUUCGUGUUUAAGAACAUCGACGGCUACUUCAAGAUCUACAGCAAGCACACCCCUAUCAACCUCGGCCGGGAUCUGCCUCAGGGCUUCUCUGCUCUGGAACCCCUGGUGGAUCUGCCCAUCGGCAUCAACAUCACCCGGUUUCAGACACUGCUGGCCCUGCACAGAAGCUACCUGACACCUGGCGAUAGCAGCAGCGGAUGGACAGCUGGUGCCGCCGCUUACUAUGUGGGCUACCUGCAGCCUAGAACCUUCCUGCUGAAGUACAACGAGAACGGCACCAUCACCGACGCCGUGGAUUGUGCUCUGGAUCCUCUGAGCGAGACAAAGUGCACCCUGAAGUCCUUCACCGUGGAAAAGGGCAUCUACCAGACCAGCAACUUCCGGGUGCAGCCCACCGAAUCCAUCGUGCGGUUCCCCAAUAUCACCAAUCUGUGCCCCUUCGACGAGGUGUUCAAUGCCACCACCUUCGCCUCUGUGUACGCCUGGAACCGGAAGCGGAUCAGCAAUUGCGUGGCCGACUACUCCGUGCUGUACAACUUCGCCCCCUUCUUCGCAUUCAAGUGCUACGGCGUGUCCCCUACCAAGCUGAACGACCUGUGCUUCACAAACGUGUACGCCGACAGCUUCGUGAUCCGGGGAAACGAAGUGUCACAGAUUGCCCCUGGACAGACAGGCAACAUCGCCGACUACAACUACAAGCUGCCCGACGACUUCACCGGCUGUGUGAUUGCCUGGAACAGCAACAAGCUGGACUCCACCGUCGGCGGCAACUACAAUUACAGGUACCGGCUGUUCCGGAAGUCCAAGCUGAAGCCCUUCGAGCGGGACAUCUCCACCGAGAUCUAUCAGGCCGGCAACAAGCCUUGUAACGGCGUGGCAGGCGUGAACUGCUACUUCCCACUGCAGUCCUACGGCUUUAGGCCCACAUACGGCGUGGGCCACCAGCCCUACAGAGUGGUGGUGCUGAGCUUCGAACUGCUGCAUGCCCCUGCCACAGUGUGCGGCCCUAAGAAAAGCACCAAUCUCGUGAAGAACAAAUGCGUGAACUUCAACUUCAACGGCCUGACCGGCACCGGCGUGCUGACAGAGAGCAACAAGAAGUUCCUGCCAUUCCAGCAGUUUGGCCGGGAUAUCGCCGAUACCACAGACGCCGUUAGAGAUCCCCAGACACUGGAAAUCCUGGACAUCACCCCUUGCAGCUUCGGCGGAGUGUCUGUGAUCACCCCUGGCACCAACACCAGCAAUCAGGUGGCAGUGCUGUACCAGGGCGUGAACUGUACCGAAGUGCCCGUGGCCAUUCACGCCGAUCAGCUGACACCUACAUGGCGGGUGUACUCCACCGGCAGCAAUGUGUUUCAGACCAGAGCCGGCUGUCUGAUCGGAGCCGAGUACGUGAACAAUAGCUACGAGUGCGACAUCCCCAUCGGCGCUGGAAUCUGCGCCAGCUACCAGACACAGACAAAGAGCCACCGGAGAGCCAGAAGCGUGGCCAGCCAGAGCAUCAUUGCCUACACAAUGUCUCUGGGCGCCGAGAACAGCGUGGCCUACUCCAACAACUCUAUCGCUAUCCCCACCAACUUCACCAUCAGCGUGACCACAGAGAUCCUGCCUGUGUCCAUGACCAAGACCAGCGUGGACUGCACCAUGUACAUCUGCGGCGAUUCCACCGAGUGCUCCAACCUGCUGCUGCAGUACGGCAGCUUCUGCACCCAGCUGAAAAGAGCCCUGACAGGGAUCGCCGUGGAACAGGACAAGAACACCCAAGAGGUGUUCGCCCAAGUGAAGCAGAUCUACAAGACCCCUCCUAUCAAGUACUUCGGCGGCUUCAAUUUCAGCCAGAUUCUGCCCGAUCCUAGCAAGCCCAGCAAGCGGAGCUUCAUCGAGGACCUGCUGUUCAACAAAGUGACACUGGCCGACGCCGGCUUCAUCAAGCAGUAUGGCGAUUGUCUGGGCGACAUUGCCGCCAGGGAUCUGAUUUGCGCCCAGAAGUUUAACGGACUGACAGUGCUGCCUCCUCUGCUGACCGAUGAGAUGAUCGCCCAGUACACAUCUGCCCUGCUGGCCGGCACAAUCACAAGCGGCUGGACAUUUGGAGCAGGCGCCGCUCUGCAGAUCCCCUUUGCUAUGCAGAUGGCCUACCGGUUCAACGGCAUCGGAGUGACCCAGAAUGUGCUGUACGAGAACCAGAAGCUGAUCGCCAACCAGUUCAACAGCGCCAUCGGCAAGAUCCAGGACAGCCUGAGCAGCACAGCAAGCGCCCUGGGAAAGCUGCAGGACGUGGUCAACCACAAUGCCCAGGCACUGAACACCCUGGUCAAGCAGCUGUCCUCCAAGUUCGGCGCCAUCAGCUCUGUGCUGAACGAUAUCCUGAGCAGACUGGACCCUCCUGAGGCCGAGGUGCAGAUCGACAGACUGAUCACAGGCAGACUGCAGAGCCUCCAGACAUACGUGACCCAGCAGCUGAUCAGAGCCGCCGAGAUUAGAGCCUCUGCCAAUCUGGCCGCCACCAAGAUGUCUGAGUGUGUGCUGGGCCAGAGCAAGAGAGUGGACUUUUGCGGCAAGGGCUACCACCUGAUGAGCUUCCCUCAGUCUGCCCCUCACGGCGUGGUGUUUCUGCACGUGACAUAUGUGCCCGCUCAAGAGAAGAAUUUCACCACCGCUCCAGCCAUCUGCCACGACGGCAAAGCCCACUUUCCUAGAGAAGGCGUGUUCGUGUCCAACGGCACCCAUUGGUUCGUGACACAGCGGAACUUCUACGAGCCCCAGAUCAUCACCACCGACAACACCUUCGUGUCUGGCAACUGCGACGUCGUGAUCGGCAUUGUGAACAAUACCGUGUACGACCCUCUGCAGCCCGAGCUGGACAGCUUCAAAGAGGAACUGGACAAGUACUUUAAGAACCACACAAGCCCCGACGUGGACCUGGGCGAUAUCAGCGGAAUCAAUGCCAGCGUCGUGAACAUCCAGAAAGAGAUCGACCGGCUGAACGAGGUGGCCAAGAAUCUGAACGAGAGCCUGAUCGACCUGCAAGAACUGGGGAAGUACGAGCAGUACAUCAAGUGGCCCUGGUACAUCUGGCUGGGCUUUAUCGCCGGACUGAUUGCCAUCGUGAUGGUCACAAUCAUGCUGUGUUGCAUGACCAGCUGCUGUAGCUGCCUGAAGGGCUGUUGUAGCUGUGGCAGCUGCUGCAAGUUCGACGAGGACGAUUCUGAGCCCGUGCUGAAGGGCGUGAAACUGCACUACACAUGAUGA
171 編碼來自奧密克戎BQ.1.1變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之DNA序列 ATGTTCGTGTTCCTGGTGCTGCTGCCTCTGGTGTCCAGCCAGTGTGTGAACCTGATCACCAGAACACAGTCATACACCAACAGCTTTACCAGAGGCGTGTACTACCCCGACAAGGTGTTCAGATCCAGCGTGCTGCACTCTACCCAGGACCTGTTCCTGCCTTTCTTCAGCAACGTGACCTGGTTCCACGCCATCTCCGGCACCAATGGCACCAAGAGATTCGACAACCCCGTGCTGCCCTTCAACGACGGGGTGTACTTTGCCAGCACCGAGAAGTCCAACATCATCAGAGGCTGGATCTTCGGCACCACACTGGACAGCAAGACCCAGAGCCTGCTGATCGTGAACAACGCCACCAACGTGGTCATCAAAGTGTGCGAGTTCCAGTTCTGCAACGACCCCTTCCTGGACGTCTACTACCACAAGAACAACAAGAGCTGGATGGAAAGCGAGTTCCGGGTGTACAGCAGCGCCAACAACTGCACCTTCGAGTACGTGTCCCAGCCTTTCCTGATGGACCTGGAAGGCAAGCAGGGCAACTTCAAGAACCTGCGCGAGTTCGTGTTTAAGAACATCGACGGCTACTTCAAGATCTACAGCAAGCACACCCCTATCAACCTCGGCCGGGATCTGCCTCAGGGCTTCTCTGCTCTGGAACCCCTGGTGGATCTGCCCATCGGCATCAACATCACCCGGTTTCAGACACTGCTGGCCCTGCACAGAAGCTACCTGACACCTGGCGATAGCAGCAGCGGATGGACAGCTGGTGCCGCCGCTTACTATGTGGGCTACCTGCAGCCTAGAACCTTCCTGCTGAAGTACAACGAGAACGGCACCATCACCGACGCCGTGGATTGTGCTCTGGATCCTCTGAGCGAGACAAAGTGCACCCTGAAGTCCTTCACCGTGGAAAAGGGCATCTACCAGACCAGCAACTTCCGGGTGCAGCCCACCGAATCCATCGTGCGGTTCCCCAATATCACCAATCTGTGCCCCTTCGACGAGGTGTTCAATGCCACCACCTTCGCCTCTGTGTACGCCTGGAACCGGAAGCGGATCAGCAATTGCGTGGCCGACTACTCCGTGCTGTACAACTTCGCCCCCTTCTTCGCATTCAAGTGCTACGGCGTGTCCCCTACCAAGCTGAACGACCTGTGCTTCACAAACGTGTACGCCGACAGCTTCGTGATCCGGGGAAACGAAGTGTCACAGATTGCCCCTGGACAGACAGGCAACATCGCCGACTACAACTACAAGCTGCCCGACGACTTCACCGGCTGTGTGATTGCCTGGAACAGCAACAAGCTGGACTCCACCGTCGGCGGCAACTACAATTACAGGTACCGGCTGTTCCGGAAGTCCAAGCTGAAGCCCTTCGAGCGGGACATCTCCACCGAGATCTATCAGGCCGGCAACAAGCCTTGTAACGGCGTGGCAGGCGTGAACTGCTACTTCCCACTGCAGTCCTACGGCTTTAGGCCCACATACGGCGTGGGCCACCAGCCCTACAGAGTGGTGGTGCTGAGCTTCGAACTGCTGCATGCCCCTGCCACAGTGTGCGGCCCTAAGAAAAGCACCAATCTCGTGAAGAACAAATGCGTGAACTTCAACTTCAACGGCCTGACCGGCACCGGCGTGCTGACAGAGAGCAACAAGAAGTTCCTGCCATTCCAGCAGTTTGGCCGGGATATCGCCGATACCACAGACGCCGTTAGAGATCCCCAGACACTGGAAATCCTGGACATCACCCCTTGCAGCTTCGGCGGAGTGTCTGTGATCACCCCTGGCACCAACACCAGCAATCAGGTGGCAGTGCTGTACCAGGGCGTGAACTGTACCGAAGTGCCCGTGGCCATTCACGCCGATCAGCTGACACCTACATGGCGGGTGTACTCCACCGGCAGCAATGTGTTTCAGACCAGAGCCGGCTGTCTGATCGGAGCCGAGTACGTGAACAATAGCTACGAGTGCGACATCCCCATCGGCGCTGGAATCTGCGCCAGCTACCAGACACAGACAAAGAGCCACCGGAGAGCCAGAAGCGTGGCCAGCCAGAGCATCATTGCCTACACAATGTCTCTGGGCGCCGAGAACAGCGTGGCCTACTCCAACAACTCTATCGCTATCCCCACCAACTTCACCATCAGCGTGACCACAGAGATCCTGCCTGTGTCCATGACCAAGACCAGCGTGGACTGCACCATGTACATCTGCGGCGATTCCACCGAGTGCTCCAACCTGCTGCTGCAGTACGGCAGCTTCTGCACCCAGCTGAAAAGAGCCCTGACAGGGATCGCCGTGGAACAGGACAAGAACACCCAAGAGGTGTTCGCCCAAGTGAAGCAGATCTACAAGACCCCTCCTATCAAGTACTTCGGCGGCTTCAATTTCAGCCAGATTCTGCCCGATCCTAGCAAGCCCAGCAAGCGGAGCTTCATCGAGGACCTGCTGTTCAACAAAGTGACACTGGCCGACGCCGGCTTCATCAAGCAGTATGGCGATTGTCTGGGCGACATTGCCGCCAGGGATCTGATTTGCGCCCAGAAGTTTAACGGACTGACAGTGCTGCCTCCTCTGCTGACCGATGAGATGATCGCCCAGTACACATCTGCCCTGCTGGCCGGCACAATCACAAGCGGCTGGACATTTGGAGCAGGCGCCGCTCTGCAGATCCCCTTTGCTATGCAGATGGCCTACCGGTTCAACGGCATCGGAGTGACCCAGAATGTGCTGTACGAGAACCAGAAGCTGATCGCCAACCAGTTCAACAGCGCCATCGGCAAGATCCAGGACAGCCTGAGCAGCACAGCAAGCGCCCTGGGAAAGCTGCAGGACGTGGTCAACCACAATGCCCAGGCACTGAACACCCTGGTCAAGCAGCTGTCCTCCAAGTTCGGCGCCATCAGCTCTGTGCTGAACGATATCCTGAGCAGACTGGACCCTCCTGAGGCCGAGGTGCAGATCGACAGACTGATCACAGGCAGACTGCAGAGCCTCCAGACATACGTGACCCAGCAGCTGATCAGAGCCGCCGAGATTAGAGCCTCTGCCAATCTGGCCGCCACCAAGATGTCTGAGTGTGTGCTGGGCCAGAGCAAGAGAGTGGACTTTTGCGGCAAGGGCTACCACCTGATGAGCTTCCCTCAGTCTGCCCCTCACGGCGTGGTGTTTCTGCACGTGACATATGTGCCCGCTCAAGAGAAGAATTTCACCACCGCTCCAGCCATCTGCCACGACGGCAAAGCCCACTTTCCTAGAGAAGGCGTGTTCGTGTCCAACGGCACCCATTGGTTCGTGACACAGCGGAACTTCTACGAGCCCCAGATCATCACCACCGACAACACCTTCGTGTCTGGCAACTGCGACGTCGTGATCGGCATTGTGAACAATACCGTGTACGACCCTCTGCAGCCCGAGCTGGACAGCTTCAAAGAGGAACTGGACAAGTACTTTAAGAACCACACAAGCCCCGACGTGGACCTGGGCGATATCAGCGGAATCAATGCCAGCGTCGTGAACATCCAGAAAGAGATCGACCGGCTGAACGAGGTGGCCAAGAATCTGAACGAGAGCCTGATCGACCTGCAAGAACTGGGGAAGTACGAGCAGTACATCAAGTGGCCCTGGTACATCTGGCTGGGCTTTATCGCCGGACTGATTGCCATCGTGATGGTCACAATCATGCTGTGTTGCATGACCAGCTGCTGTAGCTGCCTGAAGGGCTGTTGTAGCTGTGGCAGCTGCTGCAAGTTCGACGAGGACGATTCTGAGCCCGTGCTGAAGGGCGTGAAACTGCACTACACATGATGA
172 編碼來自奧密克戎BQ.1.1變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之全長RNA構築體 AgaauaaacuaguauucuucugguccccacagacucagagagaacccgccaccAUGUUCGUGUUCCUGGUGCUGCUGCCUCUGGUGUCCAGCCAGUGUGUGAACCUGAUCACCAGAACACAGUCAUACACCAACAGCUUUACCAGAGGCGUGUACUACCCCGACAAGGUGUUCAGAUCCAGCGUGCUGCACUCUACCCAGGACCUGUUCCUGCCUUUCUUCAGCAACGUGACCUGGUUCCACGCCAUCUCCGGCACCAAUGGCACCAAGAGAUUCGACAACCCCGUGCUGCCCUUCAACGACGGGGUGUACUUUGCCAGCACCGAGAAGUCCAACAUCAUCAGAGGCUGGAUCUUCGGCACCACACUGGACAGCAAGACCCAGAGCCUGCUGAUCGUGAACAACGCCACCAACGUGGUCAUCAAAGUGUGCGAGUUCCAGUUCUGCAACGACCCCUUCCUGGACGUCUACUACCACAAGAACAACAAGAGCUGGAUGGAAAGCGAGUUCCGGGUGUACAGCAGCGCCAACAACUGCACCUUCGAGUACGUGUCCCAGCCUUUCCUGAUGGACCUGGAAGGCAAGCAGGGCAACUUCAAGAACCUGCGCGAGUUCGUGUUUAAGAACAUCGACGGCUACUUCAAGAUCUACAGCAAGCACACCCCUAUCAACCUCGGCCGGGAUCUGCCUCAGGGCUUCUCUGCUCUGGAACCCCUGGUGGAUCUGCCCAUCGGCAUCAACAUCACCCGGUUUCAGACACUGCUGGCCCUGCACAGAAGCUACCUGACACCUGGCGAUAGCAGCAGCGGAUGGACAGCUGGUGCCGCCGCUUACUAUGUGGGCUACCUGCAGCCUAGAACCUUCCUGCUGAAGUACAACGAGAACGGCACCAUCACCGACGCCGUGGAUUGUGCUCUGGAUCCUCUGAGCGAGACAAAGUGCACCCUGAAGUCCUUCACCGUGGAAAAGGGCAUCUACCAGACCAGCAACUUCCGGGUGCAGCCCACCGAAUCCAUCGUGCGGUUCCCCAAUAUCACCAAUCUGUGCCCCUUCGACGAGGUGUUCAAUGCCACCACCUUCGCCUCUGUGUACGCCUGGAACCGGAAGCGGAUCAGCAAUUGCGUGGCCGACUACUCCGUGCUGUACAACUUCGCCCCCUUCUUCGCAUUCAAGUGCUACGGCGUGUCCCCUACCAAGCUGAACGACCUGUGCUUCACAAACGUGUACGCCGACAGCUUCGUGAUCCGGGGAAACGAAGUGUCACAGAUUGCCCCUGGACAGACAGGCAACAUCGCCGACUACAACUACAAGCUGCCCGACGACUUCACCGGCUGUGUGAUUGCCUGGAACAGCAACAAGCUGGACUCCACCGUCGGCGGCAACUACAAUUACAGGUACCGGCUGUUCCGGAAGUCCAAGCUGAAGCCCUUCGAGCGGGACAUCUCCACCGAGAUCUAUCAGGCCGGCAACAAGCCUUGUAACGGCGUGGCAGGCGUGAACUGCUACUUCCCACUGCAGUCCUACGGCUUUAGGCCCACAUACGGCGUGGGCCACCAGCCCUACAGAGUGGUGGUGCUGAGCUUCGAACUGCUGCAUGCCCCUGCCACAGUGUGCGGCCCUAAGAAAAGCACCAAUCUCGUGAAGAACAAAUGCGUGAACUUCAACUUCAACGGCCUGACCGGCACCGGCGUGCUGACAGAGAGCAACAAGAAGUUCCUGCCAUUCCAGCAGUUUGGCCGGGAUAUCGCCGAUACCACAGACGCCGUUAGAGAUCCCCAGACACUGGAAAUCCUGGACAUCACCCCUUGCAGCUUCGGCGGAGUGUCUGUGAUCACCCCUGGCACCAACACCAGCAAUCAGGUGGCAGUGCUGUACCAGGGCGUGAACUGUACCGAAGUGCCCGUGGCCAUUCACGCCGAUCAGCUGACACCUACAUGGCGGGUGUACUCCACCGGCAGCAAUGUGUUUCAGACCAGAGCCGGCUGUCUGAUCGGAGCCGAGUACGUGAACAAUAGCUACGAGUGCGACAUCCCCAUCGGCGCUGGAAUCUGCGCCAGCUACCAGACACAGACAAAGAGCCACCGGAGAGCCAGAAGCGUGGCCAGCCAGAGCAUCAUUGCCUACACAAUGUCUCUGGGCGCCGAGAACAGCGUGGCCUACUCCAACAACUCUAUCGCUAUCCCCACCAACUUCACCAUCAGCGUGACCACAGAGAUCCUGCCUGUGUCCAUGACCAAGACCAGCGUGGACUGCACCAUGUACAUCUGCGGCGAUUCCACCGAGUGCUCCAACCUGCUGCUGCAGUACGGCAGCUUCUGCACCCAGCUGAAAAGAGCCCUGACAGGGAUCGCCGUGGAACAGGACAAGAACACCCAAGAGGUGUUCGCCCAAGUGAAGCAGAUCUACAAGACCCCUCCUAUCAAGUACUUCGGCGGCUUCAAUUUCAGCCAGAUUCUGCCCGAUCCUAGCAAGCCCAGCAAGCGGAGCUUCAUCGAGGACCUGCUGUUCAACAAAGUGACACUGGCCGACGCCGGCUUCAUCAAGCAGUAUGGCGAUUGUCUGGGCGACAUUGCCGCCAGGGAUCUGAUUUGCGCCCAGAAGUUUAACGGACUGACAGUGCUGCCUCCUCUGCUGACCGAUGAGAUGAUCGCCCAGUACACAUCUGCCCUGCUGGCCGGCACAAUCACAAGCGGCUGGACAUUUGGAGCAGGCGCCGCUCUGCAGAUCCCCUUUGCUAUGCAGAUGGCCUACCGGUUCAACGGCAUCGGAGUGACCCAGAAUGUGCUGUACGAGAACCAGAAGCUGAUCGCCAACCAGUUCAACAGCGCCAUCGGCAAGAUCCAGGACAGCCUGAGCAGCACAGCAAGCGCCCUGGGAAAGCUGCAGGACGUGGUCAACCACAAUGCCCAGGCACUGAACACCCUGGUCAAGCAGCUGUCCUCCAAGUUCGGCGCCAUCAGCUCUGUGCUGAACGAUAUCCUGAGCAGACUGGACCCUCCUGAGGCCGAGGUGCAGAUCGACAGACUGAUCACAGGCAGACUGCAGAGCCUCCAGACAUACGUGACCCAGCAGCUGAUCAGAGCCGCCGAGAUUAGAGCCUCUGCCAAUCUGGCCGCCACCAAGAUGUCUGAGUGUGUGCUGGGCCAGAGCAAGAGAGUGGACUUUUGCGGCAAGGGCUACCACCUGAUGAGCUUCCCUCAGUCUGCCCCUCACGGCGUGGUGUUUCUGCACGUGACAUAUGUGCCCGCUCAAGAGAAGAAUUUCACCACCGCUCCAGCCAUCUGCCACGACGGCAAAGCCCACUUUCCUAGAGAAGGCGUGUUCGUGUCCAACGGCACCCAUUGGUUCGUGACACAGCGGAACUUCUACGAGCCCCAGAUCAUCACCACCGACAACACCUUCGUGUCUGGCAACUGCGACGUCGUGAUCGGCAUUGUGAACAAUACCGUGUACGACCCUCUGCAGCCCGAGCUGGACAGCUUCAAAGAGGAACUGGACAAGUACUUUAAGAACCACACAAGCCCCGACGUGGACCUGGGCGAUAUCAGCGGAAUCAAUGCCAGCGUCGUGAACAUCCAGAAAGAGAUCGACCGGCUGAACGAGGUGGCCAAGAAUCUGAACGAGAGCCUGAUCGACCUGCAAGAACUGGGGAAGUACGAGCAGUACAUCAAGUGGCCCUGGUACAUCUGGCUGGGCUUUAUCGCCGGACUGAUUGCCAUCGUGAUGGUCACAAUCAUGCUGUGUUGCAUGACCAGCUGCUGUAGCUGCCUGAAGGGCUGUUGUAGCUGUGGCAGCUGCUGCAAGUUCGACGAGGACGAUUCUGAGCCCGUGCUGAAGGGCGUGAAACUGCACUACACAUGAUGAcucgagcugguacugcaugcacgcaaugcuagcugccccuuucccguccuggguaccccgagucucccccgaccucgggucccagguaugcucccaccuccaccugccccacucaccaccucugcuaguuccagacaccucccaagcacgcagcaaugcagcucaaaacgcuuagccuagccacacccccacgggaaacagcagugauuaaccuuuagcaauaaacgaaaguuuaacuaagcuauacuaaccccaggguuggucaauuucgugccagccacacccuggagcuagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcauaugacuaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
173 編碼來自奧密克戎BQ.1.1變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之全長DNA構築體 AgaataaactagtattcttctggtccccacagactcagagagaacccgccaccATGTTCGTGTTCCTGGTGCTGCTGCCTCTGGTGTCCAGCCAGTGTGTGAACCTGATCACCAGAACACAGTCATACACCAACAGCTTTACCAGAGGCGTGTACTACCCCGACAAGGTGTTCAGATCCAGCGTGCTGCACTCTACCCAGGACCTGTTCCTGCCTTTCTTCAGCAACGTGACCTGGTTCCACGCCATCTCCGGCACCAATGGCACCAAGAGATTCGACAACCCCGTGCTGCCCTTCAACGACGGGGTGTACTTTGCCAGCACCGAGAAGTCCAACATCATCAGAGGCTGGATCTTCGGCACCACACTGGACAGCAAGACCCAGAGCCTGCTGATCGTGAACAACGCCACCAACGTGGTCATCAAAGTGTGCGAGTTCCAGTTCTGCAACGACCCCTTCCTGGACGTCTACTACCACAAGAACAACAAGAGCTGGATGGAAAGCGAGTTCCGGGTGTACAGCAGCGCCAACAACTGCACCTTCGAGTACGTGTCCCAGCCTTTCCTGATGGACCTGGAAGGCAAGCAGGGCAACTTCAAGAACCTGCGCGAGTTCGTGTTTAAGAACATCGACGGCTACTTCAAGATCTACAGCAAGCACACCCCTATCAACCTCGGCCGGGATCTGCCTCAGGGCTTCTCTGCTCTGGAACCCCTGGTGGATCTGCCCATCGGCATCAACATCACCCGGTTTCAGACACTGCTGGCCCTGCACAGAAGCTACCTGACACCTGGCGATAGCAGCAGCGGATGGACAGCTGGTGCCGCCGCTTACTATGTGGGCTACCTGCAGCCTAGAACCTTCCTGCTGAAGTACAACGAGAACGGCACCATCACCGACGCCGTGGATTGTGCTCTGGATCCTCTGAGCGAGACAAAGTGCACCCTGAAGTCCTTCACCGTGGAAAAGGGCATCTACCAGACCAGCAACTTCCGGGTGCAGCCCACCGAATCCATCGTGCGGTTCCCCAATATCACCAATCTGTGCCCCTTCGACGAGGTGTTCAATGCCACCACCTTCGCCTCTGTGTACGCCTGGAACCGGAAGCGGATCAGCAATTGCGTGGCCGACTACTCCGTGCTGTACAACTTCGCCCCCTTCTTCGCATTCAAGTGCTACGGCGTGTCCCCTACCAAGCTGAACGACCTGTGCTTCACAAACGTGTACGCCGACAGCTTCGTGATCCGGGGAAACGAAGTGTCACAGATTGCCCCTGGACAGACAGGCAACATCGCCGACTACAACTACAAGCTGCCCGACGACTTCACCGGCTGTGTGATTGCCTGGAACAGCAACAAGCTGGACTCCACCGTCGGCGGCAACTACAATTACAGGTACCGGCTGTTCCGGAAGTCCAAGCTGAAGCCCTTCGAGCGGGACATCTCCACCGAGATCTATCAGGCCGGCAACAAGCCTTGTAACGGCGTGGCAGGCGTGAACTGCTACTTCCCACTGCAGTCCTACGGCTTTAGGCCCACATACGGCGTGGGCCACCAGCCCTACAGAGTGGTGGTGCTGAGCTTCGAACTGCTGCATGCCCCTGCCACAGTGTGCGGCCCTAAGAAAAGCACCAATCTCGTGAAGAACAAATGCGTGAACTTCAACTTCAACGGCCTGACCGGCACCGGCGTGCTGACAGAGAGCAACAAGAAGTTCCTGCCATTCCAGCAGTTTGGCCGGGATATCGCCGATACCACAGACGCCGTTAGAGATCCCCAGACACTGGAAATCCTGGACATCACCCCTTGCAGCTTCGGCGGAGTGTCTGTGATCACCCCTGGCACCAACACCAGCAATCAGGTGGCAGTGCTGTACCAGGGCGTGAACTGTACCGAAGTGCCCGTGGCCATTCACGCCGATCAGCTGACACCTACATGGCGGGTGTACTCCACCGGCAGCAATGTGTTTCAGACCAGAGCCGGCTGTCTGATCGGAGCCGAGTACGTGAACAATAGCTACGAGTGCGACATCCCCATCGGCGCTGGAATCTGCGCCAGCTACCAGACACAGACAAAGAGCCACCGGAGAGCCAGAAGCGTGGCCAGCCAGAGCATCATTGCCTACACAATGTCTCTGGGCGCCGAGAACAGCGTGGCCTACTCCAACAACTCTATCGCTATCCCCACCAACTTCACCATCAGCGTGACCACAGAGATCCTGCCTGTGTCCATGACCAAGACCAGCGTGGACTGCACCATGTACATCTGCGGCGATTCCACCGAGTGCTCCAACCTGCTGCTGCAGTACGGCAGCTTCTGCACCCAGCTGAAAAGAGCCCTGACAGGGATCGCCGTGGAACAGGACAAGAACACCCAAGAGGTGTTCGCCCAAGTGAAGCAGATCTACAAGACCCCTCCTATCAAGTACTTCGGCGGCTTCAATTTCAGCCAGATTCTGCCCGATCCTAGCAAGCCCAGCAAGCGGAGCTTCATCGAGGACCTGCTGTTCAACAAAGTGACACTGGCCGACGCCGGCTTCATCAAGCAGTATGGCGATTGTCTGGGCGACATTGCCGCCAGGGATCTGATTTGCGCCCAGAAGTTTAACGGACTGACAGTGCTGCCTCCTCTGCTGACCGATGAGATGATCGCCCAGTACACATCTGCCCTGCTGGCCGGCACAATCACAAGCGGCTGGACATTTGGAGCAGGCGCCGCTCTGCAGATCCCCTTTGCTATGCAGATGGCCTACCGGTTCAACGGCATCGGAGTGACCCAGAATGTGCTGTACGAGAACCAGAAGCTGATCGCCAACCAGTTCAACAGCGCCATCGGCAAGATCCAGGACAGCCTGAGCAGCACAGCAAGCGCCCTGGGAAAGCTGCAGGACGTGGTCAACCACAATGCCCAGGCACTGAACACCCTGGTCAAGCAGCTGTCCTCCAAGTTCGGCGCCATCAGCTCTGTGCTGAACGATATCCTGAGCAGACTGGACCCTCCTGAGGCCGAGGTGCAGATCGACAGACTGATCACAGGCAGACTGCAGAGCCTCCAGACATACGTGACCCAGCAGCTGATCAGAGCCGCCGAGATTAGAGCCTCTGCCAATCTGGCCGCCACCAAGATGTCTGAGTGTGTGCTGGGCCAGAGCAAGAGAGTGGACTTTTGCGGCAAGGGCTACCACCTGATGAGCTTCCCTCAGTCTGCCCCTCACGGCGTGGTGTTTCTGCACGTGACATATGTGCCCGCTCAAGAGAAGAATTTCACCACCGCTCCAGCCATCTGCCACGACGGCAAAGCCCACTTTCCTAGAGAAGGCGTGTTCGTGTCCAACGGCACCCATTGGTTCGTGACACAGCGGAACTTCTACGAGCCCCAGATCATCACCACCGACAACACCTTCGTGTCTGGCAACTGCGACGTCGTGATCGGCATTGTGAACAATACCGTGTACGACCCTCTGCAGCCCGAGCTGGACAGCTTCAAAGAGGAACTGGACAAGTACTTTAAGAACCACACAAGCCCCGACGTGGACCTGGGCGATATCAGCGGAATCAATGCCAGCGTCGTGAACATCCAGAAAGAGATCGACCGGCTGAACGAGGTGGCCAAGAATCTGAACGAGAGCCTGATCGACCTGCAAGAACTGGGGAAGTACGAGCAGTACATCAAGTGGCCCTGGTACATCTGGCTGGGCTTTATCGCCGGACTGATTGCCATCGTGATGGTCACAATCATGCTGTGTTGCATGACCAGCTGCTGTAGCTGCCTGAAGGGCTGTTGTAGCTGTGGCAGCTGCTGCAAGTTCGACGAGGACGATTCTGAGCCCGTGCTGAAGGGCGTGAAACTGCACTACACATGATGActcgagctggtactgcatgcacgcaatgctagctgcccctttcccgtcctgggtaccccgagtctcccccgacctcgggtcccaggtatgctcccacctccacctgccccactcaccacctctgctagttccagacacctcccaagcacgcagcaatgcagctcaaaacgcttagcctagccacacccccacgggaaacagcagtgattaacctttagcaataaacgaaagtttaactaagctatactaaccccagggttggtcaatttcgtgccagccacaccctggagctagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcatatgactaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
表 16A. 例示性奧密克戎XBB.1.5特異性RNA疫苗之一個實施例之序列
SEQ ID NO. 簡述 序列
129 來自奧密克戎XBB.1.5變異體之RNA編碼SARS-CoV-2 S蛋白之胺基酸序列(在對應於SEQ ID NO: 1之K986P及V987P之位置處具有PRO突變；亦即，SEQ ID NO: 129之位置982及983處的PRO突變) MFVFLVLLPLVSSQCVNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAIHVSGTNGTKRFDNPALPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYQKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKEGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLERDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPVDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFHEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVIYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKPSGNYNYLYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGPNCYSPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDPPEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT
130 編碼來自奧密克戎XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA序列 auguucguguuccuggugcugcugccucugguguccagccagugugugaaccugaucaccagaacacagucauacaccaacagcuuuaccagaggcguguacuaccccgacaagguguucagauccagcgugcugcacucuacccaggaccuguuccugccuuucuucagcaacgugaccugguuccacgccauccacguguccggcaccaauggcaccaagagauucgacaaccccgcccugcccuucaacgacgggguguacuuugccagcaccgagaaguccaacaucaucagaggcuggaucuucggcaccacacuggacagcaagacccagagccugcugaucgugaacaacgccaccaacguggucaucaaagugugcgaguuccaguucugcaacgaccccuuccuggacgucuaccagaagaacaacaagagcuggauggaaagcgaguuccggguguacagcagcgccaacaacugcaccuucgaguacgugucccagccuuuccugauggaccuggaaggcaaggagggcaacuucaagaaccugcgcgaguucguguuuaagaacaucgacggcuacuucaagaucuacagcaagcacaccccuaucaaccucgagcgggaucugccucagggcuucucugcucuggaaccccugguggaucugcccaucggcaucaacaucacccgguuucagacacugcuggcccugcacagaagcuaccugacaccuguggauagcagcagcggauggacagcuggugccgccgcuuacuaugugggcuaccugcagccuagaaccuuccugcugaaguacaacgagaacggcaccaucaccgacgccguggauugugcucuggauccucugagcgagacaaagugcacccugaaguccuucaccguggaaaagggcaucuaccagaccagcaacuuccgggugcagcccaccgaauccaucgugcgguuccccaauaucaccaaucugugccccuuccacgagguguucaaugccaccaccuucgccucuguguacgccuggaaccggaagcggaucagcaauugcguggccgacuacuccgugaucuacaacuucgcccccuucuucgcauucaagugcuacggcguguccccuaccaagcugaacgaccugugcuucacaaacguguacgccgacagcuucgugauccggggaaacgaagugucacagauugccccuggacagacaggcaacaucgccgacuacaacuacaagcugcccgacgacuucaccggcugugugauugccuggaacagcaacaagcuggacuccaaacccagcggcaacuacaauuaccuguaccggcuguuccggaaguccaagcugaagcccuucgagcgggacaucuccaccgagaucuaucaggccggcaacaagccuuguaacggcguggcaggccccaacugcuacagcccacugcaguccuacggcuuuaggcccacauacggcgugggccaccagcccuacagagugguggugcugagcuucgaacugcugcaugccccugccacagugugcggcccuaagaaaagcaccaaucucgugaagaacaaaugcgugaacuucaacuucaacggccugaccggcaccggcgugcugacagagagcaacaagaaguuccugccauuccagcaguuuggccgggauaucgccgauaccacagacgccguuagagauccccagacacuggaaauccuggacaucaccccuugcagcuucggcggagugucugugaucaccccuggcaccaacaccagcaaucagguggcagugcuguaccagggcgugaacuguaccgaagugcccguggccauucacgccgaucagcugacaccuacauggcggguguacuccaccggcagcaauguguuucagaccagagccggcugucugaucggagccgaguacgugaacaauagcuacgagugcgacauccccaucggcgcuggaaucugcgccagcuaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcguggccagccagagcaucauugccuacacaaugucucugggcgccgagaacagcguggccuacuccaacaacucuaucgcuauccccaccaacuucaccaucagcgugaccacagagauccugccuguguccaugaccaagaccagcguggacugcaccauguacaucugcggcgauuccaccgagugcuccaaccugcugcugcaguacggcagcuucugcacccagcugaaaagagcccugacagggaucgccguggaacaggacaagaacacccaagagguguucgcccaagugaagcagaucuacaagaccccuccuaucaaguacuucggcggcuucaauuucagccagauucugcccgauccuagcaagcccagcaagcggagcuucaucgaggaccugcuguucaacaaagugacacuggccgacgccggcuucaucaagcaguauggcgauugucugggcgacauugccgccagggaucugauuugcgcccagaaguuuaacggacugacagugcugccuccucugcugaccgaugagaugaucgcccaguacacaucugcccugcuggccggcacaaucacaagcggcuggacauuuggagcaggcgccgcucugcagauccccuuugcuaugcagauggccuaccgguucaacggcaucggagugacccagaaugugcuguacgagaaccagaagcugaucgccaaccaguucaacagcgccaucggcaagauccaggacagccugagcagcacagcaagcgcccugggaaagcugcaggacguggucaaccacaaugcccaggcacugaacacccuggucaagcagcuguccuccaaguucggcgccaucagcucugugcugaacgauauccugagcagacuggacccuccugaggccgaggugcagaucgacagacugaucacaggcagacugcagagccuccagacauacgugacccagcagcugaucagagccgccgagauuagagccucugccaaucuggccgccaccaagaugucugagugugugcugggccagagcaagagaguggacuuuugcggcaagggcuaccaccugaugagcuucccucagucugccccucacggcgugguguuucugcacgugacauaugugcccgcucaagagaagaauuucaccaccgcuccagccaucugccacgacggcaaagcccacuuuccuagagaaggcguguucguguccaacggcacccauugguucgugacacagcggaacuucuacgagccccagaucaucaccaccgacaacaccuucgugucuggcaacugcgacgucgugaucggcauugugaacaauaccguguacgacccucugcagcccgagcuggacagcuucaaagaggaacuggacaaguacuuuaagaaccacacaagccccgacguggaccugggcgauaucagcggaaucaaugccagcgucgugaacauccagaaagagaucgaccggcugaacgagguggccaagaaucugaacgagagccugaucgaccugcaagaacuggggaaguacgagcaguacaucaaguggcccugguacaucuggcugggcuuuaucgccggacugauugccaucgugauggucacaaucaugcuguguugcaugaccagcugcuguagcugccugaagggcuguuguagcuguggcagcugcugcaaguucgacgaggacgauucugagcccgugcugaagggcgugaaacugcacuacacaugauga
131 編碼來自奧密克戎XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之DNA序列 atgttcgtgttcctggtgctgctgcctctggtgtccagccagtgtgtgaacctgatcaccagaacacagtcatacaccaacagctttaccagaggcgtgtactaccccgacaaggtgttcagatccagcgtgctgcactctacccaggacctgttcctgcctttcttcagcaacgtgacctggttccacgccatccacgtgtccggcaccaatggcaccaagagattcgacaaccccgccctgcccttcaacgacggggtgtactttgccagcaccgagaagtccaacatcatcagaggctggatcttcggcaccacactggacagcaagacccagagcctgctgatcgtgaacaacgccaccaacgtggtcatcaaagtgtgcgagttccagttctgcaacgaccccttcctggacgtctaccagaagaacaacaagagctggatggaaagcgagttccgggtgtacagcagcgccaacaactgcaccttcgagtacgtgtcccagcctttcctgatggacctggaaggcaaggagggcaacttcaagaacctgcgcgagttcgtgtttaagaacatcgacggctacttcaagatctacagcaagcacacccctatcaacctcgagcgggatctgcctcagggcttctctgctctggaacccctggtggatctgcccatcggcatcaacatcacccggtttcagacactgctggccctgcacagaagctacctgacacctgtggatagcagcagcggatggacagctggtgccgccgcttactatgtgggctacctgcagcctagaaccttcctgctgaagtacaacgagaacggcaccatcaccgacgccgtggattgtgctctggatcctctgagcgagacaaagtgcaccctgaagtccttcaccgtggaaaagggcatctaccagaccagcaacttccgggtgcagcccaccgaatccatcgtgcggttccccaatatcaccaatctgtgccccttccacgaggtgttcaatgccaccaccttcgcctctgtgtacgcctggaaccggaagcggatcagcaattgcgtggccgactactccgtgatctacaacttcgcccccttcttcgcattcaagtgctacggcgtgtcccctaccaagctgaacgacctgtgcttcacaaacgtgtacgccgacagcttcgtgatccggggaaacgaagtgtcacagattgcccctggacagacaggcaacatcgccgactacaactacaagctgcccgacgacttcaccggctgtgtgattgcctggaacagcaacaagctggactccaaacccagcggcaactacaattacctgtaccggctgttccggaagtccaagctgaagcccttcgagcgggacatctccaccgagatctatcaggccggcaacaagccttgtaacggcgtggcaggccccaactgctacagcccactgcagtcctacggctttaggcccacatacggcgtgggccaccagccctacagagtggtggtgctgagcttcgaactgctgcatgcccctgccacagtgtgcggccctaagaaaagcaccaatctcgtgaagaacaaatgcgtgaacttcaacttcaacggcctgaccggcaccggcgtgctgacagagagcaacaagaagttcctgccattccagcagtttggccgggatatcgccgataccacagacgccgttagagatccccagacactggaaatcctggacatcaccccttgcagcttcggcggagtgtctgtgatcacccctggcaccaacaccagcaatcaggtggcagtgctgtaccagggcgtgaactgtaccgaagtgcccgtggccattcacgccgatcagctgacacctacatggcgggtgtactccaccggcagcaatgtgtttcagaccagagccggctgtctgatcggagccgagtacgtgaacaatagctacgagtgcgacatccccatcggcgctggaatctgcgccagctaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcgtggccagccagagcatcattgcctacacaatgtctctgggcgccgagaacagcgtggcctactccaacaactctatcgctatccccaccaacttcaccatcagcgtgaccacagagatcctgcctgtgtccatgaccaagaccagcgtggactgcaccatgtacatctgcggcgattccaccgagtgctccaacctgctgctgcagtacggcagcttctgcacccagctgaaaagagccctgacagggatcgccgtggaacaggacaagaacacccaagaggtgttcgcccaagtgaagcagatctacaagacccctcctatcaagtacttcggcggcttcaatttcagccagattctgcccgatcctagcaagcccagcaagcggagcttcatcgaggacctgctgttcaacaaagtgacactggccgacgccggcttcatcaagcagtatggcgattgtctgggcgacattgccgccagggatctgatttgcgcccagaagtttaacggactgacagtgctgcctcctctgctgaccgatgagatgatcgcccagtacacatctgccctgctggccggcacaatcacaagcggctggacatttggagcaggcgccgctctgcagatcccctttgctatgcagatggcctaccggttcaacggcatcggagtgacccagaatgtgctgtacgagaaccagaagctgatcgccaaccagttcaacagcgccatcggcaagatccaggacagcctgagcagcacagcaagcgccctgggaaagctgcaggacgtggtcaaccacaatgcccaggcactgaacaccctggtcaagcagctgtcctccaagttcggcgccatcagctctgtgctgaacgatatcctgagcagactggaccctcctgaggccgaggtgcagatcgacagactgatcacaggcagactgcagagcctccagacatacgtgacccagcagctgatcagagccgccgagattagagcctctgccaatctggccgccaccaagatgtctgagtgtgtgctgggccagagcaagagagtggacttttgcggcaagggctaccacctgatgagcttccctcagtctgcccctcacggcgtggtgtttctgcacgtgacatatgtgcccgctcaagagaagaatttcaccaccgctccagccatctgccacgacggcaaagcccactttcctagagaaggcgtgttcgtgtccaacggcacccattggttcgtgacacagcggaacttctacgagccccagatcatcaccaccgacaacaccttcgtgtctggcaactgcgacgtcgtgatcggcattgtgaacaataccgtgtacgaccctctgcagcccgagctggacagcttcaaagaggaactggacaagtactttaagaaccacacaagccccgacgtggacctgggcgatatcagcggaatcaatgccagcgtcgtgaacatccagaaagagatcgaccggctgaacgaggtggccaagaatctgaacgagagcctgatcgacctgcaagaactggggaagtacgagcagtacatcaagtggccctggtacatctggctgggctttatcgccggactgattgccatcgtgatggtcacaatcatgctgtgttgcatgaccagctgctgtagctgcctgaagggctgttgtagctgtggcagctgctgcaagttcgacgaggacgattctgagcccgtgctgaagggcgtgaaactgcactacacatgatga
132 編碼來自奧密克戎XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之全長RNA構築體 Agaauaaacuaguauucuucugguccccacagacucagagagaacccgccaccauguucguguuccuggugcugcugccucugguguccagccagugugugaaccugaucaccagaacacagucauacaccaacagcuuuaccagaggcguguacuaccccgacaagguguucagauccagcgugcugcacucuacccaggaccuguuccugccuuucuucagcaacgugaccugguuccacgccauccacguguccggcaccaauggcaccaagagauucgacaaccccgcccugcccuucaacgacgggguguacuuugccagcaccgagaaguccaacaucaucagaggcuggaucuucggcaccacacuggacagcaagacccagagccugcugaucgugaacaacgccaccaacguggucaucaaagugugcgaguuccaguucugcaacgaccccuuccuggacgucuaccagaagaacaacaagagcuggauggaaagcgaguuccggguguacagcagcgccaacaacugcaccuucgaguacgugucccagccuuuccugauggaccuggaaggcaaggagggcaacuucaagaaccugcgcgaguucguguuuaagaacaucgacggcuacuucaagaucuacagcaagcacaccccuaucaaccucgagcgggaucugccucagggcuucucugcucuggaaccccugguggaucugcccaucggcaucaacaucacccgguuucagacacugcuggcccugcacagaagcuaccugacaccuguggauagcagcagcggauggacagcuggugccgccgcuuacuaugugggcuaccugcagccuagaaccuuccugcugaaguacaacgagaacggcaccaucaccgacgccguggauugugcucuggauccucugagcgagacaaagugcacccugaaguccuucaccguggaaaagggcaucuaccagaccagcaacuuccgggugcagcccaccgaauccaucgugcgguuccccaauaucaccaaucugugccccuuccacgagguguucaaugccaccaccuucgccucuguguacgccuggaaccggaagcggaucagcaauugcguggccgacuacuccgugaucuacaacuucgcccccuucuucgcauucaagugcuacggcguguccccuaccaagcugaacgaccugugcuucacaaacguguacgccgacagcuucgugauccggggaaacgaagugucacagauugccccuggacagacaggcaacaucgccgacuacaacuacaagcugcccgacgacuucaccggcugugugauugccuggaacagcaacaagcuggacuccaaacccagcggcaacuacaauuaccuguaccggcuguuccggaaguccaagcugaagcccuucgagcgggacaucuccaccgagaucuaucaggccggcaacaagccuuguaacggcguggcaggccccaacugcuacagcccacugcaguccuacggcuuuaggcccacauacggcgugggccaccagcccuacagagugguggugcugagcuucgaacugcugcaugccccugccacagugugcggcccuaagaaaagcaccaaucucgugaagaacaaaugcgugaacuucaacuucaacggccugaccggcaccggcgugcugacagagagcaacaagaaguuccugccauuccagcaguuuggccgggauaucgccgauaccacagacgccguuagagauccccagacacuggaaauccuggacaucaccccuugcagcuucggcggagugucugugaucaccccuggcaccaacaccagcaaucagguggcagugcuguaccagggcgugaacuguaccgaagugcccguggccauucacgccgaucagcugacaccuacauggcggguguacuccaccggcagcaauguguuucagaccagagccggcugucugaucggagccgaguacgugaacaauagcuacgagugcgacauccccaucggcgcuggaaucugcgccagcuaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcguggccagccagagcaucauugccuacacaaugucucugggcgccgagaacagcguggccuacuccaacaacucuaucgcuauccccaccaacuucaccaucagcgugaccacagagauccugccuguguccaugaccaagaccagcguggacugcaccauguacaucugcggcgauuccaccgagugcuccaaccugcugcugcaguacggcagcuucugcacccagcugaaaagagcccugacagggaucgccguggaacaggacaagaacacccaagagguguucgcccaagugaagcagaucuacaagaccccuccuaucaaguacuucggcggcuucaauuucagccagauucugcccgauccuagcaagcccagcaagcggagcuucaucgaggaccugcuguucaacaaagugacacuggccgacgccggcuucaucaagcaguauggcgauugucugggcgacauugccgccagggaucugauuugcgcccagaaguuuaacggacugacagugcugccuccucugcugaccgaugagaugaucgcccaguacacaucugcccugcuggccggcacaaucacaagcggcuggacauuuggagcaggcgccgcucugcagauccccuuugcuaugcagauggccuaccgguucaacggcaucggagugacccagaaugugcuguacgagaaccagaagcugaucgccaaccaguucaacagcgccaucggcaagauccaggacagccugagcagcacagcaagcgcccugggaaagcugcaggacguggucaaccacaaugcccaggcacugaacacccuggucaagcagcuguccuccaaguucggcgccaucagcucugugcugaacgauauccugagcagacuggacccuccugaggccgaggugcagaucgacagacugaucacaggcagacugcagagccuccagacauacgugacccagcagcugaucagagccgccgagauuagagccucugccaaucuggccgccaccaagaugucugagugugugcugggccagagcaagagaguggacuuuugcggcaagggcuaccaccugaugagcuucccucagucugccccucacggcgugguguuucugcacgugacauaugugcccgcucaagagaagaauuucaccaccgcuccagccaucugccacgacggcaaagcccacuuuccuagagaaggcguguucguguccaacggcacccauugguucgugacacagcggaacuucuacgagccccagaucaucaccaccgacaacaccuucgugucuggcaacugcgacgucgugaucggcauugugaacaauaccguguacgacccucugcagcccgagcuggacagcuucaaagaggaacuggacaaguacuuuaagaaccacacaagccccgacguggaccugggcgauaucagcggaaucaaugccagcgucgugaacauccagaaagagaucgaccggcugaacgagguggccaagaaucugaacgagagccugaucgaccugcaagaacuggggaaguacgagcaguacaucaaguggcccugguacaucuggcugggcuuuaucgccggacugauugccaucgugauggucacaaucaugcuguguugcaugaccagcugcuguagcugccugaagggcuguuguagcuguggcagcugcugcaaguucgacgaggacgauucugagcccgugcugaagggcgugaaacugcacuacacaugaugacucgagcugguacugcaugcacgcaaugcuagcugccccuuucccguccuggguaccccgagucucccccgaccucgggucccagguaugcucccaccuccaccugccccacucaccaccucugcuaguuccagacaccucccaagcacgcagcaaugcagcucaaaacgcuuagccuagccacacccccacgggaaacagcagugauuaaccuuuagcaauaaacgaaaguuuaacuaagcuauacuaaccccaggguuggucaauuucgugccagccacacccuggagcuagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcauaugacuaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
133 編碼來自奧密克戎XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之全長DNA構築體 Agaataaactagtattcttctggtccccacagactcagagagaacccgccaccatgttcgtgttcctggtgctgctgcctctggtgtccagccagtgtgtgaacctgatcaccagaacacagtcatacaccaacagctttaccagaggcgtgtactaccccgacaaggtgttcagatccagcgtgctgcactctacccaggacctgttcctgcctttcttcagcaacgtgacctggttccacgccatccacgtgtccggcaccaatggcaccaagagattcgacaaccccgccctgcccttcaacgacggggtgtactttgccagcaccgagaagtccaacatcatcagaggctggatcttcggcaccacactggacagcaagacccagagcctgctgatcgtgaacaacgccaccaacgtggtcatcaaagtgtgcgagttccagttctgcaacgaccccttcctggacgtctaccagaagaacaacaagagctggatggaaagcgagttccgggtgtacagcagcgccaacaactgcaccttcgagtacgtgtcccagcctttcctgatggacctggaaggcaaggagggcaacttcaagaacctgcgcgagttcgtgtttaagaacatcgacggctacttcaagatctacagcaagcacacccctatcaacctcgagcgggatctgcctcagggcttctctgctctggaacccctggtggatctgcccatcggcatcaacatcacccggtttcagacactgctggccctgcacagaagctacctgacacctgtggatagcagcagcggatggacagctggtgccgccgcttactatgtgggctacctgcagcctagaaccttcctgctgaagtacaacgagaacggcaccatcaccgacgccgtggattgtgctctggatcctctgagcgagacaaagtgcaccctgaagtccttcaccgtggaaaagggcatctaccagaccagcaacttccgggtgcagcccaccgaatccatcgtgcggttccccaatatcaccaatctgtgccccttccacgaggtgttcaatgccaccaccttcgcctctgtgtacgcctggaaccggaagcggatcagcaattgcgtggccgactactccgtgatctacaacttcgcccccttcttcgcattcaagtgctacggcgtgtcccctaccaagctgaacgacctgtgcttcacaaacgtgtacgccgacagcttcgtgatccggggaaacgaagtgtcacagattgcccctggacagacaggcaacatcgccgactacaactacaagctgcccgacgacttcaccggctgtgtgattgcctggaacagcaacaagctggactccaaacccagcggcaactacaattacctgtaccggctgttccggaagtccaagctgaagcccttcgagcgggacatctccaccgagatctatcaggccggcaacaagccttgtaacggcgtggcaggccccaactgctacagcccactgcagtcctacggctttaggcccacatacggcgtgggccaccagccctacagagtggtggtgctgagcttcgaactgctgcatgcccctgccacagtgtgcggccctaagaaaagcaccaatctcgtgaagaacaaatgcgtgaacttcaacttcaacggcctgaccggcaccggcgtgctgacagagagcaacaagaagttcctgccattccagcagtttggccgggatatcgccgataccacagacgccgttagagatccccagacactggaaatcctggacatcaccccttgcagcttcggcggagtgtctgtgatcacccctggcaccaacaccagcaatcaggtggcagtgctgtaccagggcgtgaactgtaccgaagtgcccgtggccattcacgccgatcagctgacacctacatggcgggtgtactccaccggcagcaatgtgtttcagaccagagccggctgtctgatcggagccgagtacgtgaacaatagctacgagtgcgacatccccatcggcgctggaatctgcgccagctaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcgtggccagccagagcatcattgcctacacaatgtctctgggcgccgagaacagcgtggcctactccaacaactctatcgctatccccaccaacttcaccatcagcgtgaccacagagatcctgcctgtgtccatgaccaagaccagcgtggactgcaccatgtacatctgcggcgattccaccgagtgctccaacctgctgctgcagtacggcagcttctgcacccagctgaaaagagccctgacagggatcgccgtggaacaggacaagaacacccaagaggtgttcgcccaagtgaagcagatctacaagacccctcctatcaagtacttcggcggcttcaatttcagccagattctgcccgatcctagcaagcccagcaagcggagcttcatcgaggacctgctgttcaacaaagtgacactggccgacgccggcttcatcaagcagtatggcgattgtctgggcgacattgccgccagggatctgatttgcgcccagaagtttaacggactgacagtgctgcctcctctgctgaccgatgagatgatcgcccagtacacatctgccctgctggccggcacaatcacaagcggctggacatttggagcaggcgccgctctgcagatcccctttgctatgcagatggcctaccggttcaacggcatcggagtgacccagaatgtgctgtacgagaaccagaagctgatcgccaaccagttcaacagcgccatcggcaagatccaggacagcctgagcagcacagcaagcgccctgggaaagctgcaggacgtggtcaaccacaatgcccaggcactgaacaccctggtcaagcagctgtcctccaagttcggcgccatcagctctgtgctgaacgatatcctgagcagactggaccctcctgaggccgaggtgcagatcgacagactgatcacaggcagactgcagagcctccagacatacgtgacccagcagctgatcagagccgccgagattagagcctctgccaatctggccgccaccaagatgtctgagtgtgtgctgggccagagcaagagagtggacttttgcggcaagggctaccacctgatgagcttccctcagtctgcccctcacggcgtggtgtttctgcacgtgacatatgtgcccgctcaagagaagaatttcaccaccgctccagccatctgccacgacggcaaagcccactttcctagagaaggcgtgttcgtgtccaacggcacccattggttcgtgacacagcggaacttctacgagccccagatcatcaccaccgacaacaccttcgtgtctggcaactgcgacgtcgtgatcggcattgtgaacaataccgtgtacgaccctctgcagcccgagctggacagcttcaaagaggaactggacaagtactttaagaaccacacaagccccgacgtggacctgggcgatatcagcggaatcaatgccagcgtcgtgaacatccagaaagagatcgaccggctgaacgaggtggccaagaatctgaacgagagcctgatcgacctgcaagaactggggaagtacgagcagtacatcaagtggccctggtacatctggctgggctttatcgccggactgattgccatcgtgatggtcacaatcatgctgtgttgcatgaccagctgctgtagctgcctgaagggctgttgtagctgtggcagctgctgcaagttcgacgaggacgattctgagcccgtgctgaagggcgtgaaactgcactacacatgatgactcgagctggtactgcatgcacgcaatgctagctgcccctttcccgtcctgggtaccccgagtctcccccgacctcgggtcccaggtatgctcccacctccacctgccccactcaccacctctgctagttccagacacctcccaagcacgcagcaatgcagctcaaaacgcttagcctagccacacccccacgggaaacagcagtgattaacctttagcaataaacgaaagtttaactaagctatactaaccccagggttggtcaatttcgtgccagccacaccctggagctagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcatatgactaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
表 16B. 例示性奧密克戎XBB.1.16特異性RNA疫苗之一個實施例之序列
SEQ ID NO. 簡述 序列
134 來自奧密克戎XBB.1.16變異體之RNA編碼SARS-CoV-2 S蛋白之胺基酸序列(在對應於SEQ ID NO: 1之K986P及V987P之位置處具有PRO突變；亦即，SEQ ID NO: 134之位置982及983處的PRO突變) MFVFLVLLPLVSSQCVNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAIHVSGTNGTKRFDNPALPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYQKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLVGKEGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLERDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPVDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFHEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVIYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKPSGNYNYLYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNRPCNGVAGPNCYSPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDPPEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT
135 編碼來自奧密克戎XBB.1.16變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA序列 AuguucguguuccuggugcugcugccucugguguccagccagugugugaaccugaucaccagaacacagucauacaccaacagcuuuaccagaggcguguacuaccccgacaagguguucagauccagcgugcugcacucuacccaggaccuguuccugccuuucuucagcaacgugaccugguuccacgccauccacguguccggcaccaauggcaccaagagauucgacaaccccgcccugcccuucaacgacgggguguacuuugccagcaccgagaaguccaacaucaucagaggcuggaucuucggcaccacacuggacagcaagacccagagccugcugaucgugaacaacgccaccaacguggucaucaaagugugcgaguuccaguucugcaacgaccccuuccuggacgucuaccagaagaacaacaagagcuggauggaaagcgaguuccggguguacagcagcgccaacaacugcaccuucgaguacgugucccagccuuuccugauggaccugGUGggcaaggagggcaacuucaagaaccugcgcgaguucguguuuaagaacaucgacggcuacuucaagaucuacagcaagcacaccccuaucaaccucgagcgggaucugccucagggcuucucugcucuggaaccccugguggaucugcccaucggcaucaacaucacccgguuucagacacugcuggcccugcacagaagcuaccugacaccuguggauagcagcagcggauggacagcuggugccgccgcuuacuaugugggcuaccugcagccuagaaccuuccugcugaaguacaacgagaacggcaccaucaccgacgccguggauugugcucuggauccucugagcgagacaaagugcacccugaaguccuucaccguggaaaagggcaucuaccagaccagcaacuuccgggugcagcccaccgaauccaucgugcgguuccccaauaucaccaaucugugccccuuccacgagguguucaaugccaccaccuucgccucuguguacgccuggaaccggaagcggaucagcaauugcguggccgacuacuccgugaucuacaacuucgcccccuucuucgcauucaagugcuacggcguguccccuaccaagcugaacgaccugugcuucacaaacguguacgccgacagcuucgugauccggggaaacgaagugucacagauugccccuggacagacaggcaacaucgccgacuacaacuacaagcugcccgacgacuucaccggcugugugauugccuggaacagcaacaagcuggacuccaaacccagcggcaacuacaauuaccuguaccggcuguuccggaaguccaagcugaagcccuucgagcgggacaucuccaccgagaucuaucaggccggcaacAGGccuuguaacggcguggcaggccccaacugcuacagcccacugcaguccuacggcuuuaggcccacauacggcgugggccaccagcccuacagagugguggugcugagcuucgaacugcugcaugccccugccacagugugcggcccuaagaaaagcaccaaucucgugaagaacaaaugcgugaacuucaacuucaacggccugaccggcaccggcgugcugacagagagcaacaagaaguuccugccauuccagcaguuuggccgggauaucgccgauaccacagacgccguuagagauccccagacacuggaaauccuggacaucaccccuugcagcuucggcggagugucugugaucaccccuggcaccaacaccagcaaucagguggcagugcuguaccagggcgugaacuguaccgaagugcccguggccauucacgccgaucagcugacaccuacauggcggguguacuccaccggcagcaauguguuucagaccagagccggcugucugaucggagccgaguacgugaacaauagcuacgagugcgacauccccaucggcgcuggaaucugcgccagcuaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcguggccagccagagcaucauugccuacacaaugucucugggcgccgagaacagcguggccuacuccaacaacucuaucgcuauccccaccaacuucaccaucagcgugaccacagagauccugccuguguccaugaccaagaccagcguggacugcaccauguacaucugcggcgauuccaccgagugcuccaaccugcugcugcaguacggcagcuucugcacccagcugaaaagagcccugacagggaucgccguggaacaggacaagaacacccaagagguguucgcccaagugaagcagaucuacaagaccccuccuaucaaguacuucggcggcuucaauuucagccagauucugcccgauccuagcaagcccagcaagcggagcuucaucgaggaccugcuguucaacaaagugacacuggccgacgccggcuucaucaagcaguauggcgauugucugggcgacauugccgccagggaucugauuugcgcccagaaguuuaacggacugacagugcugccuccucugcugaccgaugagaugaucgcccaguacacaucugcccugcuggccggcacaaucacaagcggcuggacauuuggagcaggcgccgcucugcagauccccuuugcuaugcagauggccuaccgguucaacggcaucggagugacccagaaugugcuguacgagaaccagaagcugaucgccaaccaguucaacagcgccaucggcaagauccaggacagccugagcagcacagcaagcgcccugggaaagcugcaggacguggucaaccacaaugcccaggcacugaacacccuggucaagcagcuguccuccaaguucggcgccaucagcucugugcugaacgauauccugagcagacuggacccuccugaggccgaggugcagaucgacagacugaucacaggcagacugcagagccuccagacauacgugacccagcagcugaucagagccgccgagauuagagccucugccaaucuggccgccaccaagaugucugagugugugcugggccagagcaagagaguggacuuuugcggcaagggcuaccaccugaugagcuucccucagucugccccucacggcgugguguuucugcacgugacauaugugcccgcucaagagaagaauuucaccaccgcuccagccaucugccacgacggcaaagcccacuuuccuagagaaggcguguucguguccaacggcacccauugguucgugacacagcggaacuucuacgagccccagaucaucaccaccgacaacaccuucgugucuggcaacugcgacgucgugaucggcauugugaacaauaccguguacgacccucugcagcccgagcuggacagcuucaaagaggaacuggacaaguacuuuaagaaccacacaagccccgacguggaccugggcgauaucagcggaaucaaugccagcgucgugaacauccagaaagagaucgaccggcugaacgagguggccaagaaucugaacgagagccugaucgaccugcaagaacuggggaaguacgagcaguacaucaaguggcccugguacaucuggcugggcuuuaucgccggacugauugccaucgugauggucacaaucaugcuguguugcaugaccagcugcuguagcugccugaagggcuguuguagcuguggcagcugcugcaaguucgacgaggacgauucugagcccgugcugaagggcgugaaacugcacuacacaugauga
136 編碼來自奧密克戎XBB.1.16變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之DNA序列 AtgttcgtgttcctggtgctgctgcctctggtgtccagccagtgtgtgaacctgatcaccagaacacagtcatacaccaacagctttaccagaggcgtgtactaccccgacaaggtgttcagatccagcgtgctgcactctacccaggacctgttcctgcctttcttcagcaacgtgacctggttccacgccatccacgtgtccggcaccaatggcaccaagagattcgacaaccccgccctgcccttcaacgacggggtgtactttgccagcaccgagaagtccaacatcatcagaggctggatcttcggcaccacactggacagcaagacccagagcctgctgatcgtgaacaacgccaccaacgtggtcatcaaagtgtgcgagttccagttctgcaacgaccccttcctggacgtctaccagaagaacaacaagagctggatggaaagcgagttccgggtgtacagcagcgccaacaactgcaccttcgagtacgtgtcccagcctttcctgatggacctgGTGggcaaggagggcaacttcaagaacctgcgcgagttcgtgtttaagaacatcgacggctacttcaagatctacagcaagcacacccctatcaacctcgagcgggatctgcctcagggcttctctgctctggaacccctggtggatctgcccatcggcatcaacatcacccggtttcagacactgctggccctgcacagaagctacctgacacctgtggatagcagcagcggatggacagctggtgccgccgcttactatgtgggctacctgcagcctagaaccttcctgctgaagtacaacgagaacggcaccatcaccgacgccgtggattgtgctctggatcctctgagcgagacaaagtgcaccctgaagtccttcaccgtggaaaagggcatctaccagaccagcaacttccgggtgcagcccaccgaatccatcgtgcggttccccaatatcaccaatctgtgccccttccacgaggtgttcaatgccaccaccttcgcctctgtgtacgcctggaaccggaagcggatcagcaattgcgtggccgactactccgtgatctacaacttcgcccccttcttcgcattcaagtgctacggcgtgtcccctaccaagctgaacgacctgtgcttcacaaacgtgtacgccgacagcttcgtgatccggggaaacgaagtgtcacagattgcccctggacagacaggcaacatcgccgactacaactacaagctgcccgacgacttcaccggctgtgtgattgcctggaacagcaacaagctggactccaaacccagcggcaactacaattacctgtaccggctgttccggaagtccaagctgaagcccttcgagcgggacatctccaccgagatctatcaggccggcaacAGGccttgtaacggcgtggcaggccccaactgctacagcccactgcagtcctacggctttaggcccacatacggcgtgggccaccagccctacagagtggtggtgctgagcttcgaactgctgcatgcccctgccacagtgtgcggccctaagaaaagcaccaatctcgtgaagaacaaatgcgtgaacttcaacttcaacggcctgaccggcaccggcgtgctgacagagagcaacaagaagttcctgccattccagcagtttggccgggatatcgccgataccacagacgccgttagagatccccagacactggaaatcctggacatcaccccttgcagcttcggcggagtgtctgtgatcacccctggcaccaacaccagcaatcaggtggcagtgctgtaccagggcgtgaactgtaccgaagtgcccgtggccattcacgccgatcagctgacacctacatggcgggtgtactccaccggcagcaatgtgtttcagaccagagccggctgtctgatcggagccgagtacgtgaacaatagctacgagtgcgacatccccatcggcgctggaatctgcgccagctaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcgtggccagccagagcatcattgcctacacaatgtctctgggcgccgagaacagcgtggcctactccaacaactctatcgctatccccaccaacttcaccatcagcgtgaccacagagatcctgcctgtgtccatgaccaagaccagcgtggactgcaccatgtacatctgcggcgattccaccgagtgctccaacctgctgctgcagtacggcagcttctgcacccagctgaaaagagccctgacagggatcgccgtggaacaggacaagaacacccaagaggtgttcgcccaagtgaagcagatctacaagacccctcctatcaagtacttcggcggcttcaatttcagccagattctgcccgatcctagcaagcccagcaagcggagcttcatcgaggacctgctgttcaacaaagtgacactggccgacgccggcttcatcaagcagtatggcgattgtctgggcgacattgccgccagggatctgatttgcgcccagaagtttaacggactgacagtgctgcctcctctgctgaccgatgagatgatcgcccagtacacatctgccctgctggccggcacaatcacaagcggctggacatttggagcaggcgccgctctgcagatcccctttgctatgcagatggcctaccggttcaacggcatcggagtgacccagaatgtgctgtacgagaaccagaagctgatcgccaaccagttcaacagcgccatcggcaagatccaggacagcctgagcagcacagcaagcgccctgggaaagctgcaggacgtggtcaaccacaatgcccaggcactgaacaccctggtcaagcagctgtcctccaagttcggcgccatcagctctgtgctgaacgatatcctgagcagactggaccctcctgaggccgaggtgcagatcgacagactgatcacaggcagactgcagagcctccagacatacgtgacccagcagctgatcagagccgccgagattagagcctctgccaatctggccgccaccaagatgtctgagtgtgtgctgggccagagcaagagagtggacttttgcggcaagggctaccacctgatgagcttccctcagtctgcccctcacggcgtggtgtttctgcacgtgacatatgtgcccgctcaagagaagaatttcaccaccgctccagccatctgccacgacggcaaagcccactttcctagagaaggcgtgttcgtgtccaacggcacccattggttcgtgacacagcggaacttctacgagccccagatcatcaccaccgacaacaccttcgtgtctggcaactgcgacgtcgtgatcggcattgtgaacaataccgtgtacgaccctctgcagcccgagctggacagcttcaaagaggaactggacaagtactttaagaaccacacaagccccgacgtggacctgggcgatatcagcggaatcaatgccagcgtcgtgaacatccagaaagagatcgaccggctgaacgaggtggccaagaatctgaacgagagcctgatcgacctgcaagaactggggaagtacgagcagtacatcaagtggccctggtacatctggctgggctttatcgccggactgattgccatcgtgatggtcacaatcatgctgtgttgcatgaccagctgctgtagctgcctgaagggctgttgtagctgtggcagctgctgcaagttcgacgaggacgattctgagcccgtgctgaagggcgtgaaactgcactacacatgatga
137 編碼來自奧密克戎XBB.1.16變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之全長RNA構築體 AgaauaaacuaguauucuucugguccccacagacucagagagaacccgccaccauguucguguuccuggugcugcugccucugguguccagccagugugugaaccugaucaccagaacacagucauacaccaacagcuuuaccagaggcguguacuaccccgacaagguguucagauccagcgugcugcacucuacccaggaccuguuccugccuuucuucagcaacgugaccugguuccacgccauccacguguccggcaccaauggcaccaagagauucgacaaccccgcccugcccuucaacgacgggguguacuuugccagcaccgagaaguccaacaucaucagaggcuggaucuucggcaccacacuggacagcaagacccagagccugcugaucgugaacaacgccaccaacguggucaucaaagugugcgaguuccaguucugcaacgaccccuuccuggacgucuaccagaagaacaacaagagcuggauggaaagcgaguuccggguguacagcagcgccaacaacugcaccuucgaguacgugucccagccuuuccugauggaccugGUGggcaaggagggcaacuucaagaaccugcgcgaguucguguuuaagaacaucgacggcuacuucaagaucuacagcaagcacaccccuaucaaccucgagcgggaucugccucagggcuucucugcucuggaaccccugguggaucugcccaucggcaucaacaucacccgguuucagacacugcuggcccugcacagaagcuaccugacaccuguggauagcagcagcggauggacagcuggugccgccgcuuacuaugugggcuaccugcagccuagaaccuuccugcugaaguacaacgagaacggcaccaucaccgacgccguggauugugcucuggauccucugagcgagacaaagugcacccugaaguccuucaccguggaaaagggcaucuaccagaccagcaacuuccgggugcagcccaccgaauccaucgugcgguuccccaauaucaccaaucugugccccuuccacgagguguucaaugccaccaccuucgccucuguguacgccuggaaccggaagcggaucagcaauugcguggccgacuacuccgugaucuacaacuucgcccccuucuucgcauucaagugcuacggcguguccccuaccaagcugaacgaccugugcuucacaaacguguacgccgacagcuucgugauccggggaaacgaagugucacagauugccccuggacagacaggcaacaucgccgacuacaacuacaagcugcccgacgacuucaccggcugugugauugccuggaacagcaacaagcuggacuccaaacccagcggcaacuacaauuaccuguaccggcuguuccggaaguccaagcugaagcccuucgagcgggacaucuccaccgagaucuaucaggccggcaacAGGccuuguaacggcguggcaggccccaacugcuacagcccacugcaguccuacggcuuuaggcccacauacggcgugggccaccagcccuacagagugguggugcugagcuucgaacugcugcaugccccugccacagugugcggcccuaagaaaagcaccaaucucgugaagaacaaaugcgugaacuucaacuucaacggccugaccggcaccggcgugcugacagagagcaacaagaaguuccugccauuccagcaguuuggccgggauaucgccgauaccacagacgccguuagagauccccagacacuggaaauccuggacaucaccccuugcagcuucggcggagugucugugaucaccccuggcaccaacaccagcaaucagguggcagugcuguaccagggcgugaacuguaccgaagugcccguggccauucacgccgaucagcugacaccuacauggcggguguacuccaccggcagcaauguguuucagaccagagccggcugucugaucggagccgaguacgugaacaauagcuacgagugcgacauccccaucggcgcuggaaucugcgccagcuaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcguggccagccagagcaucauugccuacacaaugucucugggcgccgagaacagcguggccuacuccaacaacucuaucgcuauccccaccaacuucaccaucagcgugaccacagagauccugccuguguccaugaccaagaccagcguggacugcaccauguacaucugcggcgauuccaccgagugcuccaaccugcugcugcaguacggcagcuucugcacccagcugaaaagagcccugacagggaucgccguggaacaggacaagaacacccaagagguguucgcccaagugaagcagaucuacaagaccccuccuaucaaguacuucggcggcuucaauuucagccagauucugcccgauccuagcaagcccagcaagcggagcuucaucgaggaccugcuguucaacaaagugacacuggccgacgccggcuucaucaagcaguauggcgauugucugggcgacauugccgccagggaucugauuugcgcccagaaguuuaacggacugacagugcugccuccucugcugaccgaugagaugaucgcccaguacacaucugcccugcuggccggcacaaucacaagcggcuggacauuuggagcaggcgccgcucugcagauccccuuugcuaugcagauggccuaccgguucaacggcaucggagugacccagaaugugcuguacgagaaccagaagcugaucgccaaccaguucaacagcgccaucggcaagauccaggacagccugagcagcacagcaagcgcccugggaaagcugcaggacguggucaaccacaaugcccaggcacugaacacccuggucaagcagcuguccuccaaguucggcgccaucagcucugugcugaacgauauccugagcagacuggacccuccugaggccgaggugcagaucgacagacugaucacaggcagacugcagagccuccagacauacgugacccagcagcugaucagagccgccgagauuagagccucugccaaucuggccgccaccaagaugucugagugugugcugggccagagcaagagaguggacuuuugcggcaagggcuaccaccugaugagcuucccucagucugccccucacggcgugguguuucugcacgugacauaugugcccgcucaagagaagaauuucaccaccgcuccagccaucugccacgacggcaaagcccacuuuccuagagaaggcguguucguguccaacggcacccauugguucgugacacagcggaacuucuacgagccccagaucaucaccaccgacaacaccuucgugucuggcaacugcgacgucgugaucggcauugugaacaauaccguguacgacccucugcagcccgagcuggacagcuucaaagaggaacuggacaaguacuuuaagaaccacacaagccccgacguggaccugggcgauaucagcggaaucaaugccagcgucgugaacauccagaaagagaucgaccggcugaacgagguggccaagaaucugaacgagagccugaucgaccugcaagaacuggggaaguacgagcaguacaucaaguggcccugguacaucuggcugggcuuuaucgccggacugauugccaucgugauggucacaaucaugcuguguugcaugaccagcugcuguagcugccugaagggcuguuguagcuguggcagcugcugcaaguucgacgaggacgauucugagcccgugcugaagggcgugaaacugcacuacacaugaugacucgagcugguacugcaugcacgcaaugcuagcugccccuuucccguccuggguaccccgagucucccccgaccucgggucccagguaugcucccaccuccaccugccccacucaccaccucugcuaguuccagacaccucccaagcacgcagcaaugcagcucaaaacgcuuagccuagccacacccccacgggaaacagcagugauuaaccuuuagcaauaaacgaaaguuuaacuaagcuauacuaaccccaggguuggucaauuucgugccagccacacccuggagcuagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcauaugacuaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
138 編碼來自奧密克戎XBB.1.16變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之全長DNA構築體 AgaataaactagtattcttctggtccccacagactcagagagaacccgccaccatgttcgtgttcctggtgctgctgcctctggtgtccagccagtgtgtgaacctgatcaccagaacacagtcatacaccaacagctttaccagaggcgtgtactaccccgacaaggtgttcagatccagcgtgctgcactctacccaggacctgttcctgcctttcttcagcaacgtgacctggttccacgccatccacgtgtccggcaccaatggcaccaagagattcgacaaccccgccctgcccttcaacgacggggtgtactttgccagcaccgagaagtccaacatcatcagaggctggatcttcggcaccacactggacagcaagacccagagcctgctgatcgtgaacaacgccaccaacgtggtcatcaaagtgtgcgagttccagttctgcaacgaccccttcctggacgtctaccagaagaacaacaagagctggatggaaagcgagttccgggtgtacagcagcgccaacaactgcaccttcgagtacgtgtcccagcctttcctgatggacctgGTGggcaaggagggcaacttcaagaacctgcgcgagttcgtgtttaagaacatcgacggctacttcaagatctacagcaagcacacccctatcaacctcgagcgggatctgcctcagggcttctctgctctggaacccctggtggatctgcccatcggcatcaacatcacccggtttcagacactgctggccctgcacagaagctacctgacacctgtggatagcagcagcggatggacagctggtgccgccgcttactatgtgggctacctgcagcctagaaccttcctgctgaagtacaacgagaacggcaccatcaccgacgccgtggattgtgctctggatcctctgagcgagacaaagtgcaccctgaagtccttcaccgtggaaaagggcatctaccagaccagcaacttccgggtgcagcccaccgaatccatcgtgcggttccccaatatcaccaatctgtgccccttccacgaggtgttcaatgccaccaccttcgcctctgtgtacgcctggaaccggaagcggatcagcaattgcgtggccgactactccgtgatctacaacttcgcccccttcttcgcattcaagtgctacggcgtgtcccctaccaagctgaacgacctgtgcttcacaaacgtgtacgccgacagcttcgtgatccggggaaacgaagtgtcacagattgcccctggacagacaggcaacatcgccgactacaactacaagctgcccgacgacttcaccggctgtgtgattgcctggaacagcaacaagctggactccaaacccagcggcaactacaattacctgtaccggctgttccggaagtccaagctgaagcccttcgagcgggacatctccaccgagatctatcaggccggcaacAGGccttgtaacggcgtggcaggccccaactgctacagcccactgcagtcctacggctttaggcccacatacggcgtgggccaccagccctacagagtggtggtgctgagcttcgaactgctgcatgcccctgccacagtgtgcggccctaagaaaagcaccaatctcgtgaagaacaaatgcgtgaacttcaacttcaacggcctgaccggcaccggcgtgctgacagagagcaacaagaagttcctgccattccagcagtttggccgggatatcgccgataccacagacgccgttagagatccccagacactggaaatcctggacatcaccccttgcagcttcggcggagtgtctgtgatcacccctggcaccaacaccagcaatcaggtggcagtgctgtaccagggcgtgaactgtaccgaagtgcccgtggccattcacgccgatcagctgacacctacatggcgggtgtactccaccggcagcaatgtgtttcagaccagagccggctgtctgatcggagccgagtacgtgaacaatagctacgagtgcgacatccccatcggcgctggaatctgcgccagctaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcgtggccagccagagcatcattgcctacacaatgtctctgggcgccgagaacagcgtggcctactccaacaactctatcgctatccccaccaacttcaccatcagcgtgaccacagagatcctgcctgtgtccatgaccaagaccagcgtggactgcaccatgtacatctgcggcgattccaccgagtgctccaacctgctgctgcagtacggcagcttctgcacccagctgaaaagagccctgacagggatcgccgtggaacaggacaagaacacccaagaggtgttcgcccaagtgaagcagatctacaagacccctcctatcaagtacttcggcggcttcaatttcagccagattctgcccgatcctagcaagcccagcaagcggagcttcatcgaggacctgctgttcaacaaagtgacactggccgacgccggcttcatcaagcagtatggcgattgtctgggcgacattgccgccagggatctgatttgcgcccagaagtttaacggactgacagtgctgcctcctctgctgaccgatgagatgatcgcccagtacacatctgccctgctggccggcacaatcacaagcggctggacatttggagcaggcgccgctctgcagatcccctttgctatgcagatggcctaccggttcaacggcatcggagtgacccagaatgtgctgtacgagaaccagaagctgatcgccaaccagttcaacagcgccatcggcaagatccaggacagcctgagcagcacagcaagcgccctgggaaagctgcaggacgtggtcaaccacaatgcccaggcactgaacaccctggtcaagcagctgtcctccaagttcggcgccatcagctctgtgctgaacgatatcctgagcagactggaccctcctgaggccgaggtgcagatcgacagactgatcacaggcagactgcagagcctccagacatacgtgacccagcagctgatcagagccgccgagattagagcctctgccaatctggccgccaccaagatgtctgagtgtgtgctgggccagagcaagagagtggacttttgcggcaagggctaccacctgatgagcttccctcagtctgcccctcacggcgtggtgtttctgcacgtgacatatgtgcccgctcaagagaagaatttcaccaccgctccagccatctgccacgacggcaaagcccactttcctagagaaggcgtgttcgtgtccaacggcacccattggttcgtgacacagcggaacttctacgagccccagatcatcaccaccgacaacaccttcgtgtctggcaactgcgacgtcgtgatcggcattgtgaacaataccgtgtacgaccctctgcagcccgagctggacagcttcaaagaggaactggacaagtactttaagaaccacacaagccccgacgtggacctgggcgatatcagcggaatcaatgccagcgtcgtgaacatccagaaagagatcgaccggctgaacgaggtggccaagaatctgaacgagagcctgatcgacctgcaagaactggggaagtacgagcagtacatcaagtggccctggtacatctggctgggctttatcgccggactgattgccatcgtgatggtcacaatcatgctgtgttgcatgaccagctgctgtagctgcctgaagggctgttgtagctgtggcagctgctgcaagttcgacgaggacgattctgagcccgtgctgaagggcgtgaaactgcactacacatgatgactcgagctggtactgcatgcacgcaatgctagctgcccctttcccgtcctgggtaccccgagtctcccccgacctcgggtcccaggtatgctcccacctccacctgccccactcaccacctctgctagttccagacacctcccaagcacgcagcaatgcagctcaaaacgcttagcctagccacacccccacgggaaacagcagtgattaacctttagcaataaacgaaagtttaactaagctatactaaccccagggttggtcaatttcgtgccagccacaccctggagctagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcatatgactaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
表 16C. 例示性奧密克戎XBB.2.3特異性RNA疫苗之一個實施例之序列
SEQ ID NO. 簡述 序列
139 來自奧密克戎XBB.2.3變異體之RNA編碼SARS-CoV-2 S蛋白之胺基酸序列(在對應於SEQ ID NO: 1之K986P及V987P之位置處具有PRO突變；亦即，SEQ ID NO: 139之位置982及983處的PRO突變) MFVFLVLLPLVSSQCVNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAIHVSGTNGTKRFDNPALPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYQKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKEGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLERDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGGSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFHEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVIYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKPSGNYNYLYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGPNCYSPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHASATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDPPEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT
140 編碼來自奧密克戎XBB.2.3變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA序列 auguucguguuccuggugcugcugccucugguguccagccagugugugaaccugaucaccagaacacagucauacaccaacagcuuuaccagaggcguguacuaccccgacaagguguucagauccagcgugcugcacucuacccaggaccuguuccugccuuucuucagcaacgugaccugguuccacgccauccacguguccggcaccaauggcaccaagagauucgacaaccccgcccugcccuucaacgacgggguguacuuugccagcaccgagaaguccaacaucaucagaggcuggaucuucggcaccacacuggacagcaagacccagagccugcugaucgugaacaacgccaccaacguggucaucaaagugugcgaguuccaguucugcaacgaccccuuccuggacgucuaccagaagaacaacaagagcuggauggaaagcgaguuccggguguacagcagcgccaacaacugcaccuucgaguacgugucccagccuuuccugauggaccuggaaggcaaggagggcaacuucaagaaccugcgcgaguucguguuuaagaacaucgacggcuacuucaagaucuacagcaagcacaccccuaucaaccucgagcgggaucugccucagggcuucucugcucuggaaccccugguggaucugcccaucggcaucaacaucacccgguuucagacacugcuggcccugcacagaagcuaccugacaccuggcggcagcagcagcggauggacagcuggugccgccgcuuacuaugugggcuaccugcagccuagaaccuuccugcugaaguacaacgagaacggcaccaucaccgacgccguggauugugcucuggauccucugagcgagacaaagugcacccugaaguccuucaccguggaaaagggcaucuaccagaccagcaacuuccgggugcagcccaccgaauccaucgugcgguuccccaauaucaccaaucugugccccuuccacgagguguucaaugccaccaccuucgccucuguguacgccuggaaccggaagcggaucagcaauugcguggccgacuacuccgugaucuacaacuucgcccccuucuucgcauucaagugcuacggcguguccccuaccaagcugaacgaccugugcuucacaaacguguacgccgacagcuucgugauccggggaaacgaagugucacagauugccccuggacagacaggcaacaucgccgacuacaacuacaagcugcccgacgacuucaccggcugugugauugccuggaacagcaacaagcuggacuccaaacccagcggcaacuacaauuaccuguaccggcuguuccggaaguccaagcugaagcccuucgagcgggacaucuccaccgagaucuaucaggccggcaacaagccuuguaacggcguggcaggccccaacugcuacagcccacugcaguccuacggcuuuaggcccacauacggcgugggccaccagcccuacagagugguggugcugagcuucgaacugcugcaugccucagccacagugugcggcccuaagaaaagcaccaaucucgugaagaacaaaugcgugaacuucaacuucaacggccugaccggcaccggcgugcugacagagagcaacaagaaguuccugccauuccagcaguuuggccgggauaucgccgauaccacagacgccguuagagauccccagacacuggaaauccuggacaucaccccuugcagcuucggcggagugucugugaucaccccuggcaccaacaccagcaaucagguggcagugcuguaccagggcgugaacuguaccgaagugcccguggccauucacgccgaucagcugacaccuacauggcggguguacuccaccggcagcaauguguuucagaccagagccggcugucugaucggagccgaguacgugaacaauagcuacgagugcgacauccccaucggcgcuggaaucugcgccagcuaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcguggccagccagagcaucauugccuacacaaugucucugggcgccgagaacagcguggccuacuccaacaacucuaucgcuauccccaccaacuucaccaucagcgugaccacagagauccugccuguguccaugaccaagaccagcguggacugcaccauguacaucugcggcgauuccaccgagugcuccaaccugcugcugcaguacggcagcuucugcacccagcugaaaagagcccugacagggaucgccguggaacaggacaagaacacccaagagguguucgcccaagugaagcagaucuacaagaccccuccuaucaaguacuucggcggcuucaauuucagccagauucugcccgauccuagcaagcccagcaagcggagcuucaucgaggaccugcuguucaacaaagugacacuggccgacgccggcuucaucaagcaguauggcgauugucugggcgacauugccgccagggaucugauuugcgcccagaaguuuaacggacugacagugcugccuccucugcugaccgaugagaugaucgcccaguacacaucugcccugcuggccggcacaaucacaagcggcuggacauuuggagcaggcgccgcucugcagauccccuuugcuaugcagauggccuaccgguucaacggcaucggagugacccagaaugugcuguacgagaaccagaagcugaucgccaaccaguucaacagcgccaucggcaagauccaggacagccugagcagcacagcaagcgcccugggaaagcugcaggacguggucaaccacaaugcccaggcacugaacacccuggucaagcagcuguccuccaaguucggcgccaucagcucugugcugaacgauauccugagcagacuggacccuccugaggccgaggugcagaucgacagacugaucacaggcagacugcagagccuccagacauacgugacccagcagcugaucagagccgccgagauuagagccucugccaaucuggccgccaccaagaugucugagugugugcugggccagagcaagagaguggacuuuugcggcaagggcuaccaccugaugagcuucccucagucugccccucacggcgugguguuucugcacgugacauaugugcccgcucaagagaagaauuucaccaccgcuccagccaucugccacgacggcaaagcccacuuuccuagagaaggcguguucguguccaacggcacccauugguucgugacacagcggaacuucuacgagccccagaucaucaccaccgacaacaccuucgugucuggcaacugcgacgucgugaucggcauugugaacaauaccguguacgacccucugcagcccgagcuggacagcuucaaagaggaacuggacaaguacuuuaagaaccacacaagccccgacguggaccugggcgauaucagcggaaucaaugccagcgucgugaacauccagaaagagaucgaccggcugaacgagguggccaagaaucugaacgagagccugaucgaccugcaagaacuggggaaguacgagcaguacaucaaguggcccugguacaucuggcugggcuuuaucgccggacugauugccaucgugauggucacaaucaugcuguguugcaugaccagcugcuguagcugccugaagggcuguuguagcuguggcagcugcugcaaguucgacgaggacgauucugagcccgugcugaagggcgugaaacugcacuacacaugauga
141 編碼來自奧密克戎XBB.2.3變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之DNA序列 atgttcgtgttcctggtgctgctgcctctggtgtccagccagtgtgtgaacctgatcaccagaacacagtcatacaccaacagctttaccagaggcgtgtactaccccgacaaggtgttcagatccagcgtgctgcactctacccaggacctgttcctgcctttcttcagcaacgtgacctggttccacgccatccacgtgtccggcaccaatggcaccaagagattcgacaaccccgccctgcccttcaacgacggggtgtactttgccagcaccgagaagtccaacatcatcagaggctggatcttcggcaccacactggacagcaagacccagagcctgctgatcgtgaacaacgccaccaacgtggtcatcaaagtgtgcgagttccagttctgcaacgaccccttcctggacgtctaccagaagaacaacaagagctggatggaaagcgagttccgggtgtacagcagcgccaacaactgcaccttcgagtacgtgtcccagcctttcctgatggacctggaaggcaaggagggcaacttcaagaacctgcgcgagttcgtgtttaagaacatcgacggctacttcaagatctacagcaagcacacccctatcaacctcgagcgggatctgcctcagggcttctctgctctggaacccctggtggatctgcccatcggcatcaacatcacccggtttcagacactgctggccctgcacagaagctacctgacacctggcggcagcagcagcggatggacagctggtgccgccgcttactatgtgggctacctgcagcctagaaccttcctgctgaagtacaacgagaacggcaccatcaccgacgccgtggattgtgctctggatcctctgagcgagacaaagtgcaccctgaagtccttcaccgtggaaaagggcatctaccagaccagcaacttccgggtgcagcccaccgaatccatcgtgcggttccccaatatcaccaatctgtgccccttccacgaggtgttcaatgccaccaccttcgcctctgtgtacgcctggaaccggaagcggatcagcaattgcgtggccgactactccgtgatctacaacttcgcccccttcttcgcattcaagtgctacggcgtgtcccctaccaagctgaacgacctgtgcttcacaaacgtgtacgccgacagcttcgtgatccggggaaacgaagtgtcacagattgcccctggacagacaggcaacatcgccgactacaactacaagctgcccgacgacttcaccggctgtgtgattgcctggaacagcaacaagctggactccaaacccagcggcaactacaattacctgtaccggctgttccggaagtccaagctgaagcccttcgagcgggacatctccaccgagatctatcaggccggcaacaagccttgtaacggcgtggcaggccccaactgctacagcccactgcagtcctacggctttaggcccacatacggcgtgggccaccagccctacagagtggtggtgctgagcttcgaactgctgcatgcctcagccacagtgtgcggccctaagaaaagcaccaatctcgtgaagaacaaatgcgtgaacttcaacttcaacggcctgaccggcaccggcgtgctgacagagagcaacaagaagttcctgccattccagcagtttggccgggatatcgccgataccacagacgccgttagagatccccagacactggaaatcctggacatcaccccttgcagcttcggcggagtgtctgtgatcacccctggcaccaacaccagcaatcaggtggcagtgctgtaccagggcgtgaactgtaccgaagtgcccgtggccattcacgccgatcagctgacacctacatggcgggtgtactccaccggcagcaatgtgtttcagaccagagccggctgtctgatcggagccgagtacgtgaacaatagctacgagtgcgacatccccatcggcgctggaatctgcgccagctaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcgtggccagccagagcatcattgcctacacaatgtctctgggcgccgagaacagcgtggcctactccaacaactctatcgctatccccaccaacttcaccatcagcgtgaccacagagatcctgcctgtgtccatgaccaagaccagcgtggactgcaccatgtacatctgcggcgattccaccgagtgctccaacctgctgctgcagtacggcagcttctgcacccagctgaaaagagccctgacagggatcgccgtggaacaggacaagaacacccaagaggtgttcgcccaagtgaagcagatctacaagacccctcctatcaagtacttcggcggcttcaatttcagccagattctgcccgatcctagcaagcccagcaagcggagcttcatcgaggacctgctgttcaacaaagtgacactggccgacgccggcttcatcaagcagtatggcgattgtctgggcgacattgccgccagggatctgatttgcgcccagaagtttaacggactgacagtgctgcctcctctgctgaccgatgagatgatcgcccagtacacatctgccctgctggccggcacaatcacaagcggctggacatttggagcaggcgccgctctgcagatcccctttgctatgcagatggcctaccggttcaacggcatcggagtgacccagaatgtgctgtacgagaaccagaagctgatcgccaaccagttcaacagcgccatcggcaagatccaggacagcctgagcagcacagcaagcgccctgggaaagctgcaggacgtggtcaaccacaatgcccaggcactgaacaccctggtcaagcagctgtcctccaagttcggcgccatcagctctgtgctgaacgatatcctgagcagactggaccctcctgaggccgaggtgcagatcgacagactgatcacaggcagactgcagagcctccagacatacgtgacccagcagctgatcagagccgccgagattagagcctctgccaatctggccgccaccaagatgtctgagtgtgtgctgggccagagcaagagagtggacttttgcggcaagggctaccacctgatgagcttccctcagtctgcccctcacggcgtggtgtttctgcacgtgacatatgtgcccgctcaagagaagaatttcaccaccgctccagccatctgccacgacggcaaagcccactttcctagagaaggcgtgttcgtgtccaacggcacccattggttcgtgacacagcggaacttctacgagccccagatcatcaccaccgacaacaccttcgtgtctggcaactgcgacgtcgtgatcggcattgtgaacaataccgtgtacgaccctctgcagcccgagctggacagcttcaaagaggaactggacaagtactttaagaaccacacaagccccgacgtggacctgggcgatatcagcggaatcaatgccagcgtcgtgaacatccagaaagagatcgaccggctgaacgaggtggccaagaatctgaacgagagcctgatcgacctgcaagaactggggaagtacgagcagtacatcaagtggccctggtacatctggctgggctttatcgccggactgattgccatcgtgatggtcacaatcatgctgtgttgcatgaccagctgctgtagctgcctgaagggctgttgtagctgtggcagctgctgcaagttcgacgaggacgattctgagcccgtgctgaagggcgtgaaactgcactacacatgatga
142 編碼來自奧密克戎XBB.2.3變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之全長RNA構築體 Agaauaaacuaguauucuucugguccccacagacucagagagaacccgccaccauguucguguuccuggugcugcugccucugguguccagccagugugugaaccugaucaccagaacacagucauacaccaacagcuuuaccagaggcguguacuaccccgacaagguguucagauccagcgugcugcacucuacccaggaccuguuccugccuuucuucagcaacgugaccugguuccacgccauccacguguccggcaccaauggcaccaagagauucgacaaccccgcccugcccuucaacgacgggguguacuuugccagcaccgagaaguccaacaucaucagaggcuggaucuucggcaccacacuggacagcaagacccagagccugcugaucgugaacaacgccaccaacguggucaucaaagugugcgaguuccaguucugcaacgaccccuuccuggacgucuaccagaagaacaacaagagcuggauggaaagcgaguuccggguguacagcagcgccaacaacugcaccuucgaguacgugucccagccuuuccugauggaccuggaaggcaaggagggcaacuucaagaaccugcgcgaguucguguuuaagaacaucgacggcuacuucaagaucuacagcaagcacaccccuaucaaccucgagcgggaucugccucagggcuucucugcucuggaaccccugguggaucugcccaucggcaucaacaucacccgguuucagacacugcuggcccugcacagaagcuaccugacaccuggcggcagcagcagcggauggacagcuggugccgccgcuuacuaugugggcuaccugcagccuagaaccuuccugcugaaguacaacgagaacggcaccaucaccgacgccguggauugugcucuggauccucugagcgagacaaagugcacccugaaguccuucaccguggaaaagggcaucuaccagaccagcaacuuccgggugcagcccaccgaauccaucgugcgguuccccaauaucaccaaucugugccccuuccacgagguguucaaugccaccaccuucgccucuguguacgccuggaaccggaagcggaucagcaauugcguggccgacuacuccgugaucuacaacuucgcccccuucuucgcauucaagugcuacggcguguccccuaccaagcugaacgaccugugcuucacaaacguguacgccgacagcuucgugauccggggaaacgaagugucacagauugccccuggacagacaggcaacaucgccgacuacaacuacaagcugcccgacgacuucaccggcugugugauugccuggaacagcaacaagcuggacuccaaacccagcggcaacuacaauuaccuguaccggcuguuccggaaguccaagcugaagcccuucgagcgggacaucuccaccgagaucuaucaggccggcaacaagccuuguaacggcguggcaggccccaacugcuacagcccacugcaguccuacggcuuuaggcccacauacggcgugggccaccagcccuacagagugguggugcugagcuucgaacugcugcaugccucagccacagugugcggcccuaagaaaagcaccaaucucgugaagaacaaaugcgugaacuucaacuucaacggccugaccggcaccggcgugcugacagagagcaacaagaaguuccugccauuccagcaguuuggccgggauaucgccgauaccacagacgccguuagagauccccagacacuggaaauccuggacaucaccccuugcagcuucggcggagugucugugaucaccccuggcaccaacaccagcaaucagguggcagugcuguaccagggcgugaacuguaccgaagugcccguggccauucacgccgaucagcugacaccuacauggcggguguacuccaccggcagcaauguguuucagaccagagccggcugucugaucggagccgaguacgugaacaauagcuacgagugcgacauccccaucggcgcuggaaucugcgccagcuaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcguggccagccagagcaucauugccuacacaaugucucugggcgccgagaacagcguggccuacuccaacaacucuaucgcuauccccaccaacuucaccaucagcgugaccacagagauccugccuguguccaugaccaagaccagcguggacugcaccauguacaucugcggcgauuccaccgagugcuccaaccugcugcugcaguacggcagcuucugcacccagcugaaaagagcccugacagggaucgccguggaacaggacaagaacacccaagagguguucgcccaagugaagcagaucuacaagaccccuccuaucaaguacuucggcggcuucaauuucagccagauucugcccgauccuagcaagcccagcaagcggagcuucaucgaggaccugcuguucaacaaagugacacuggccgacgccggcuucaucaagcaguauggcgauugucugggcgacauugccgccagggaucugauuugcgcccagaaguuuaacggacugacagugcugccuccucugcugaccgaugagaugaucgcccaguacacaucugcccugcuggccggcacaaucacaagcggcuggacauuuggagcaggcgccgcucugcagauccccuuugcuaugcagauggccuaccgguucaacggcaucggagugacccagaaugugcuguacgagaaccagaagcugaucgccaaccaguucaacagcgccaucggcaagauccaggacagccugagcagcacagcaagcgcccugggaaagcugcaggacguggucaaccacaaugcccaggcacugaacacccuggucaagcagcuguccuccaaguucggcgccaucagcucugugcugaacgauauccugagcagacuggacccuccugaggccgaggugcagaucgacagacugaucacaggcagacugcagagccuccagacauacgugacccagcagcugaucagagccgccgagauuagagccucugccaaucuggccgccaccaagaugucugagugugugcugggccagagcaagagaguggacuuuugcggcaagggcuaccaccugaugagcuucccucagucugccccucacggcgugguguuucugcacgugacauaugugcccgcucaagagaagaauuucaccaccgcuccagccaucugccacgacggcaaagcccacuuuccuagagaaggcguguucguguccaacggcacccauugguucgugacacagcggaacuucuacgagccccagaucaucaccaccgacaacaccuucgugucuggcaacugcgacgucgugaucggcauugugaacaauaccguguacgacccucugcagcccgagcuggacagcuucaaagaggaacuggacaaguacuuuaagaaccacacaagccccgacguggaccugggcgauaucagcggaaucaaugccagcgucgugaacauccagaaagagaucgaccggcugaacgagguggccaagaaucugaacgagagccugaucgaccugcaagaacuggggaaguacgagcaguacaucaaguggcccugguacaucuggcugggcuuuaucgccggacugauugccaucgugauggucacaaucaugcuguguugcaugaccagcugcuguagcugccugaagggcuguuguagcuguggcagcugcugcaaguucgacgaggacgauucugagcccgugcugaagggcgugaaacugcacuacacaugaugacucgagcugguacugcaugcacgcaaugcuagcugccccuuucccguccuggguaccccgagucucccccgaccucgggucccagguaugcucccaccuccaccugccccacucaccaccucugcuaguuccagacaccucccaagcacgcagcaaugcagcucaaaacgcuuagccuagccacacccccacgggaaacagcagugauuaaccuuuagcaauaaacgaaaguuuaacuaagcuauacuaaccccaggguuggucaauuucgugccagccacacccuggagcuagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcauaugacuaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
143 編碼來自奧密克戎XBB.2.3變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之全長DNA構築體 Agaataaactagtattcttctggtccccacagactcagagagaacccgccaccatgttcgtgttcctggtgctgctgcctctggtgtccagccagtgtgtgaacctgatcaccagaacacagtcatacaccaacagctttaccagaggcgtgtactaccccgacaaggtgttcagatccagcgtgctgcactctacccaggacctgttcctgcctttcttcagcaacgtgacctggttccacgccatccacgtgtccggcaccaatggcaccaagagattcgacaaccccgccctgcccttcaacgacggggtgtactttgccagcaccgagaagtccaacatcatcagaggctggatcttcggcaccacactggacagcaagacccagagcctgctgatcgtgaacaacgccaccaacgtggtcatcaaagtgtgcgagttccagttctgcaacgaccccttcctggacgtctaccagaagaacaacaagagctggatggaaagcgagttccgggtgtacagcagcgccaacaactgcaccttcgagtacgtgtcccagcctttcctgatggacctggaaggcaaggagggcaacttcaagaacctgcgcgagttcgtgtttaagaacatcgacggctacttcaagatctacagcaagcacacccctatcaacctcgagcgggatctgcctcagggcttctctgctctggaacccctggtggatctgcccatcggcatcaacatcacccggtttcagacactgctggccctgcacagaagctacctgacacctggcggcagcagcagcggatggacagctggtgccgccgcttactatgtgggctacctgcagcctagaaccttcctgctgaagtacaacgagaacggcaccatcaccgacgccgtggattgtgctctggatcctctgagcgagacaaagtgcaccctgaagtccttcaccgtggaaaagggcatctaccagaccagcaacttccgggtgcagcccaccgaatccatcgtgcggttccccaatatcaccaatctgtgccccttccacgaggtgttcaatgccaccaccttcgcctctgtgtacgcctggaaccggaagcggatcagcaattgcgtggccgactactccgtgatctacaacttcgcccccttcttcgcattcaagtgctacggcgtgtcccctaccaagctgaacgacctgtgcttcacaaacgtgtacgccgacagcttcgtgatccggggaaacgaagtgtcacagattgcccctggacagacaggcaacatcgccgactacaactacaagctgcccgacgacttcaccggctgtgtgattgcctggaacagcaacaagctggactccaaacccagcggcaactacaattacctgtaccggctgttccggaagtccaagctgaagcccttcgagcgggacatctccaccgagatctatcaggccggcaacaagccttgtaacggcgtggcaggccccaactgctacagcccactgcagtcctacggctttaggcccacatacggcgtgggccaccagccctacagagtggtggtgctgagcttcgaactgctgcatgcctcagccacagtgtgcggccctaagaaaagcaccaatctcgtgaagaacaaatgcgtgaacttcaacttcaacggcctgaccggcaccggcgtgctgacagagagcaacaagaagttcctgccattccagcagtttggccgggatatcgccgataccacagacgccgttagagatccccagacactggaaatcctggacatcaccccttgcagcttcggcggagtgtctgtgatcacccctggcaccaacaccagcaatcaggtggcagtgctgtaccagggcgtgaactgtaccgaagtgcccgtggccattcacgccgatcagctgacacctacatggcgggtgtactccaccggcagcaatgtgtttcagaccagagccggctgtctgatcggagccgagtacgtgaacaatagctacgagtgcgacatccccatcggcgctggaatctgcgccagctaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcgtggccagccagagcatcattgcctacacaatgtctctgggcgccgagaacagcgtggcctactccaacaactctatcgctatccccaccaacttcaccatcagcgtgaccacagagatcctgcctgtgtccatgaccaagaccagcgtggactgcaccatgtacatctgcggcgattccaccgagtgctccaacctgctgctgcagtacggcagcttctgcacccagctgaaaagagccctgacagggatcgccgtggaacaggacaagaacacccaagaggtgttcgcccaagtgaagcagatctacaagacccctcctatcaagtacttcggcggcttcaatttcagccagattctgcccgatcctagcaagcccagcaagcggagcttcatcgaggacctgctgttcaacaaagtgacactggccgacgccggcttcatcaagcagtatggcgattgtctgggcgacattgccgccagggatctgatttgcgcccagaagtttaacggactgacagtgctgcctcctctgctgaccgatgagatgatcgcccagtacacatctgccctgctggccggcacaatcacaagcggctggacatttggagcaggcgccgctctgcagatcccctttgctatgcagatggcctaccggttcaacggcatcggagtgacccagaatgtgctgtacgagaaccagaagctgatcgccaaccagttcaacagcgccatcggcaagatccaggacagcctgagcagcacagcaagcgccctgggaaagctgcaggacgtggtcaaccacaatgcccaggcactgaacaccctggtcaagcagctgtcctccaagttcggcgccatcagctctgtgctgaacgatatcctgagcagactggaccctcctgaggccgaggtgcagatcgacagactgatcacaggcagactgcagagcctccagacatacgtgacccagcagctgatcagagccgccgagattagagcctctgccaatctggccgccaccaagatgtctgagtgtgtgctgggccagagcaagagagtggacttttgcggcaagggctaccacctgatgagcttccctcagtctgcccctcacggcgtggtgtttctgcacgtgacatatgtgcccgctcaagagaagaatttcaccaccgctccagccatctgccacgacggcaaagcccactttcctagagaaggcgtgttcgtgtccaacggcacccattggttcgtgacacagcggaacttctacgagccccagatcatcaccaccgacaacaccttcgtgtctggcaactgcgacgtcgtgatcggcattgtgaacaataccgtgtacgaccctctgcagcccgagctggacagcttcaaagaggaactggacaagtactttaagaaccacacaagccccgacgtggacctgggcgatatcagcggaatcaatgccagcgtcgtgaacatccagaaagagatcgaccggctgaacgaggtggccaagaatctgaacgagagcctgatcgacctgcaagaactggggaagtacgagcagtacatcaagtggccctggtacatctggctgggctttatcgccggactgattgccatcgtgatggtcacaatcatgctgtgttgcatgaccagctgctgtagctgcctgaagggctgttgtagctgtggcagctgctgcaagttcgacgaggacgattctgagcccgtgctgaagggcgtgaaactgcactacacatgatgactcgagctggtactgcatgcacgcaatgctagctgcccctttcccgtcctgggtaccccgagtctcccccgacctcgggtcccaggtatgctcccacctccacctgccccactcaccacctctgctagttccagacacctcccaagcacgcagcaatgcagctcaaaacgcttagcctagccacacccccacgggaaacagcagtgattaacctttagcaataaacgaaagtttaactaagctatactaaccccagggttggtcaatttcgtgccagccacaccctggagctagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcatatgactaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
表 16D. 例示性奧密克戎XBB.2.3.2特異性RNA疫苗之一個實施例之序列
SEQ ID NO. 簡述 序列
144 來自奧密克戎XBB.2.3.2變異體之RNA編碼SARS-CoV-2 S蛋白之胺基酸序列(在對應於SEQ ID NO: 1之K986P及V987P之位置處具有PRO突變；亦即，SEQ ID NO: 144之位置982及983處的PRO突變) MFVFLVLLPLVSSQCVNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAIHVSGTNGTKRFDNPALPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYQKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKEVNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLERDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGGSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFHEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVIYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKPSGNYNYLYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGPNCYSPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHASATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDPPEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT
145 編碼來自奧密克戎XBB.2.3.2變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA序列 auguucguguuccuggugcugcugccucugguguccagccagugugugaaccugaucaccagaacacagucauacaccaacagcuuuaccagaggcguguacuaccccgacaagguguucagauccagcgugcugcacucuacccaggaccuguuccugccuuucuucagcaacgugaccugguuccacgccauccacguguccggcaccaauggcaccaagagauucgacaaccccgcccugcccuucaacgacgggguguacuuugccagcaccgagaaguccaacaucaucagaggcuggaucuucggcaccacacuggacagcaagacccagagccugcugaucgugaacaacgccaccaacguggucaucaaagugugcgaguuccaguucugcaacgaccccuuccuggacgucuaccagaagaacaacaagagcuggauggaaagcgaguuccggguguacagcagcgccaacaacugcaccuucgaguacgugucccagccuuuccugauggaccuggaaggcaaggaggugaacuucaagaaccugcgcgaguucguguuuaagaacaucgacggcuacuucaagaucuacagcaagcacaccccuaucaaccucgagcgggaucugccucagggcuucucugcucuggaaccccugguggaucugcccaucggcaucaacaucacccgguuucagacacugcuggcccugcacagaagcuaccugacaccuggcggcagcagcagcggauggacagcuggugccgccgcuuacuaugugggcuaccugcagccuagaaccuuccugcugaaguacaacgagaacggcaccaucaccgacgccguggauugugcucuggauccucugagcgagacaaagugcacccugaaguccuucaccguggaaaagggcaucuaccagaccagcaacuuccgggugcagcccaccgaauccaucgugcgguuccccaauaucaccaaucugugccccuuccacgagguguucaaugccaccaccuucgccucuguguacgccuggaaccggaagcggaucagcaauugcguggccgacuacuccgugaucuacaacuucgcccccuucuucgcauucaagugcuacggcguguccccuaccaagcugaacgaccugugcuucacaaacguguacgccgacagcuucgugauccggggaaacgaagugucacagauugccccuggacagacaggcaacaucgccgacuacaacuacaagcugcccgacgacuucaccggcugugugauugccuggaacagcaacaagcuggacuccaaacccagcggcaacuacaauuaccuguaccggcuguuccggaaguccaagcugaagcccuucgagcgggacaucuccaccgagaucuaucaggccggcaacaagccuuguaacggcguggcaggccccaacugcuacagcccacugcaguccuacggcuuuaggcccacauacggcgugggccaccagcccuacagagugguggugcugagcuucgaacugcugcaugccucagccacagugugcggcccuaagaaaagcaccaaucucgugaagaacaaaugcgugaacuucaacuucaacggccugaccggcaccggcgugcugacagagagcaacaagaaguuccugccauuccagcaguuuggccgggauaucgccgauaccacagacgccguuagagauccccagacacuggaaauccuggacaucaccccuugcagcuucggcggagugucugugaucaccccuggcaccaacaccagcaaucagguggcagugcuguaccagggcgugaacuguaccgaagugcccguggccauucacgccgaucagcugacaccuacauggcggguguacuccaccggcagcaauguguuucagaccagagccggcugucugaucggagccgaguacgugaacaauagcuacgagugcgacauccccaucggcgcuggaaucugcgccagcuaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcguggccagccagagcaucauugccuacacaaugucucugggcgccgagaacagcguggccuacuccaacaacucuaucgcuauccccaccaacuucaccaucagcgugaccacagagauccugccuguguccaugaccaagaccagcguggacugcaccauguacaucugcggcgauuccaccgagugcuccaaccugcugcugcaguacggcagcuucugcacccagcugaaaagagcccugacagggaucgccguggaacaggacaagaacacccaagagguguucgcccaagugaagcagaucuacaagaccccuccuaucaaguacuucggcggcuucaauuucagccagauucugcccgauccuagcaagcccagcaagcggagcuucaucgaggaccugcuguucaacaaagugacacuggccgacgccggcuucaucaagcaguauggcgauugucugggcgacauugccgccagggaucugauuugcgcccagaaguuuaacggacugacagugcugccuccucugcugaccgaugagaugaucgcccaguacacaucugcccugcuggccggcacaaucacaagcggcuggacauuuggagcaggcgccgcucugcagauccccuuugcuaugcagauggccuaccgguucaacggcaucggagugacccagaaugugcuguacgagaaccagaagcugaucgccaaccaguucaacagcgccaucggcaagauccaggacagccugagcagcacagcaagcgcccugggaaagcugcaggacguggucaaccacaaugcccaggcacugaacacccuggucaagcagcuguccuccaaguucggcgccaucagcucugugcugaacgauauccugagcagacuggacccuccugaggccgaggugcagaucgacagacugaucacaggcagacugcagagccuccagacauacgugacccagcagcugaucagagccgccgagauuagagccucugccaaucuggccgccaccaagaugucugagugugugcugggccagagcaagagaguggacuuuugcggcaagggcuaccaccugaugagcuucccucagucugccccucacggcgugguguuucugcacgugacauaugugcccgcucaagagaagaauuucaccaccgcuccagccaucugccacgacggcaaagcccacuuuccuagagaaggcguguucguguccaacggcacccauugguucgugacacagcggaacuucuacgagccccagaucaucaccaccgacaacaccuucgugucuggcaacugcgacgucgugaucggcauugugaacaauaccguguacgacccucugcagcccgagcuggacagcuucaaagaggaacuggacaaguacuuuaagaaccacacaagccccgacguggaccugggcgauaucagcggaaucaaugccagcgucgugaacauccagaaagagaucgaccggcugaacgagguggccaagaaucugaacgagagccugaucgaccugcaagaacuggggaaguacgagcaguacaucaaguggcccugguacaucuggcugggcuuuaucgccggacugauugccaucgugauggucacaaucaugcuguguugcaugaccagcugcuguagcugccugaagggcuguuguagcuguggcagcugcugcaaguucgacgaggacgauucugagcccgugcugaagggcgugaaacugcacuacacaugauga
146 編碼來自奧密克戎XBB.2.3.2變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之DNA序列 atgttcgtgttcctggtgctgctgcctctggtgtccagccagtgtgtgaacctgatcaccagaacacagtcatacaccaacagctttaccagaggcgtgtactaccccgacaaggtgttcagatccagcgtgctgcactctacccaggacctgttcctgcctttcttcagcaacgtgacctggttccacgccatccacgtgtccggcaccaatggcaccaagagattcgacaaccccgccctgcccttcaacgacggggtgtactttgccagcaccgagaagtccaacatcatcagaggctggatcttcggcaccacactggacagcaagacccagagcctgctgatcgtgaacaacgccaccaacgtggtcatcaaagtgtgcgagttccagttctgcaacgaccccttcctggacgtctaccagaagaacaacaagagctggatggaaagcgagttccgggtgtacagcagcgccaacaactgcaccttcgagtacgtgtcccagcctttcctgatggacctggaaggcaaggaggtgaacttcaagaacctgcgcgagttcgtgtttaagaacatcgacggctacttcaagatctacagcaagcacacccctatcaacctcgagcgggatctgcctcagggcttctctgctctggaacccctggtggatctgcccatcggcatcaacatcacccggtttcagacactgctggccctgcacagaagctacctgacacctggcggcagcagcagcggatggacagctggtgccgccgcttactatgtgggctacctgcagcctagaaccttcctgctgaagtacaacgagaacggcaccatcaccgacgccgtggattgtgctctggatcctctgagcgagacaaagtgcaccctgaagtccttcaccgtggaaaagggcatctaccagaccagcaacttccgggtgcagcccaccgaatccatcgtgcggttccccaatatcaccaatctgtgccccttccacgaggtgttcaatgccaccaccttcgcctctgtgtacgcctggaaccggaagcggatcagcaattgcgtggccgactactccgtgatctacaacttcgcccccttcttcgcattcaagtgctacggcgtgtcccctaccaagctgaacgacctgtgcttcacaaacgtgtacgccgacagcttcgtgatccggggaaacgaagtgtcacagattgcccctggacagacaggcaacatcgccgactacaactacaagctgcccgacgacttcaccggctgtgtgattgcctggaacagcaacaagctggactccaaacccagcggcaactacaattacctgtaccggctgttccggaagtccaagctgaagcccttcgagcgggacatctccaccgagatctatcaggccggcaacaagccttgtaacggcgtggcaggccccaactgctacagcccactgcagtcctacggctttaggcccacatacggcgtgggccaccagccctacagagtggtggtgctgagcttcgaactgctgcatgcctcagccacagtgtgcggccctaagaaaagcaccaatctcgtgaagaacaaatgcgtgaacttcaacttcaacggcctgaccggcaccggcgtgctgacagagagcaacaagaagttcctgccattccagcagtttggccgggatatcgccgataccacagacgccgttagagatccccagacactggaaatcctggacatcaccccttgcagcttcggcggagtgtctgtgatcacccctggcaccaacaccagcaatcaggtggcagtgctgtaccagggcgtgaactgtaccgaagtgcccgtggccattcacgccgatcagctgacacctacatggcgggtgtactccaccggcagcaatgtgtttcagaccagagccggctgtctgatcggagccgagtacgtgaacaatagctacgagtgcgacatccccatcggcgctggaatctgcgccagctaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcgtggccagccagagcatcattgcctacacaatgtctctgggcgccgagaacagcgtggcctactccaacaactctatcgctatccccaccaacttcaccatcagcgtgaccacagagatcctgcctgtgtccatgaccaagaccagcgtggactgcaccatgtacatctgcggcgattccaccgagtgctccaacctgctgctgcagtacggcagcttctgcacccagctgaaaagagccctgacagggatcgccgtggaacaggacaagaacacccaagaggtgttcgcccaagtgaagcagatctacaagacccctcctatcaagtacttcggcggcttcaatttcagccagattctgcccgatcctagcaagcccagcaagcggagcttcatcgaggacctgctgttcaacaaagtgacactggccgacgccggcttcatcaagcagtatggcgattgtctgggcgacattgccgccagggatctgatttgcgcccagaagtttaacggactgacagtgctgcctcctctgctgaccgatgagatgatcgcccagtacacatctgccctgctggccggcacaatcacaagcggctggacatttggagcaggcgccgctctgcagatcccctttgctatgcagatggcctaccggttcaacggcatcggagtgacccagaatgtgctgtacgagaaccagaagctgatcgccaaccagttcaacagcgccatcggcaagatccaggacagcctgagcagcacagcaagcgccctgggaaagctgcaggacgtggtcaaccacaatgcccaggcactgaacaccctggtcaagcagctgtcctccaagttcggcgccatcagctctgtgctgaacgatatcctgagcagactggaccctcctgaggccgaggtgcagatcgacagactgatcacaggcagactgcagagcctccagacatacgtgacccagcagctgatcagagccgccgagattagagcctctgccaatctggccgccaccaagatgtctgagtgtgtgctgggccagagcaagagagtggacttttgcggcaagggctaccacctgatgagcttccctcagtctgcccctcacggcgtggtgtttctgcacgtgacatatgtgcccgctcaagagaagaatttcaccaccgctccagccatctgccacgacggcaaagcccactttcctagagaaggcgtgttcgtgtccaacggcacccattggttcgtgacacagcggaacttctacgagccccagatcatcaccaccgacaacaccttcgtgtctggcaactgcgacgtcgtgatcggcattgtgaacaataccgtgtacgaccctctgcagcccgagctggacagcttcaaagaggaactggacaagtactttaagaaccacacaagccccgacgtggacctgggcgatatcagcggaatcaatgccagcgtcgtgaacatccagaaagagatcgaccggctgaacgaggtggccaagaatctgaacgagagcctgatcgacctgcaagaactggggaagtacgagcagtacatcaagtggccctggtacatctggctgggctttatcgccggactgattgccatcgtgatggtcacaatcatgctgtgttgcatgaccagctgctgtagctgcctgaagggctgttgtagctgtggcagctgctgcaagttcgacgaggacgattctgagcccgtgctgaagggcgtgaaactgcactacacatgatga
147 編碼來自奧密克戎XBB.2.3.2變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之全長RNA構築體 Agaauaaacuaguauucuucugguccccacagacucagagagaacccgccaccauguucguguuccuggugcugcugccucugguguccagccagugugugaaccugaucaccagaacacagucauacaccaacagcuuuaccagaggcguguacuaccccgacaagguguucagauccagcgugcugcacucuacccaggaccuguuccugccuuucuucagcaacgugaccugguuccacgccauccacguguccggcaccaauggcaccaagagauucgacaaccccgcccugcccuucaacgacgggguguacuuugccagcaccgagaaguccaacaucaucagaggcuggaucuucggcaccacacuggacagcaagacccagagccugcugaucgugaacaacgccaccaacguggucaucaaagugugcgaguuccaguucugcaacgaccccuuccuggacgucuaccagaagaacaacaagagcuggauggaaagcgaguuccggguguacagcagcgccaacaacugcaccuucgaguacgugucccagccuuuccugauggaccuggaaggcaaggaggugaacuucaagaaccugcgcgaguucguguuuaagaacaucgacggcuacuucaagaucuacagcaagcacaccccuaucaaccucgagcgggaucugccucagggcuucucugcucuggaaccccugguggaucugcccaucggcaucaacaucacccgguuucagacacugcuggcccugcacagaagcuaccugacaccuggcggcagcagcagcggauggacagcuggugccgccgcuuacuaugugggcuaccugcagccuagaaccuuccugcugaaguacaacgagaacggcaccaucaccgacgccguggauugugcucuggauccucugagcgagacaaagugcacccugaaguccuucaccguggaaaagggcaucuaccagaccagcaacuuccgggugcagcccaccgaauccaucgugcgguuccccaauaucaccaaucugugccccuuccacgagguguucaaugccaccaccuucgccucuguguacgccuggaaccggaagcggaucagcaauugcguggccgacuacuccgugaucuacaacuucgcccccuucuucgcauucaagugcuacggcguguccccuaccaagcugaacgaccugugcuucacaaacguguacgccgacagcuucgugauccggggaaacgaagugucacagauugccccuggacagacaggcaacaucgccgacuacaacuacaagcugcccgacgacuucaccggcugugugauugccuggaacagcaacaagcuggacuccaaacccagcggcaacuacaauuaccuguaccggcuguuccggaaguccaagcugaagcccuucgagcgggacaucuccaccgagaucuaucaggccggcaacaagccuuguaacggcguggcaggccccaacugcuacagcccacugcaguccuacggcuuuaggcccacauacggcgugggccaccagcccuacagagugguggugcugagcuucgaacugcugcaugccucagccacagugugcggcccuaagaaaagcaccaaucucgugaagaacaaaugcgugaacuucaacuucaacggccugaccggcaccggcgugcugacagagagcaacaagaaguuccugccauuccagcaguuuggccgggauaucgccgauaccacagacgccguuagagauccccagacacuggaaauccuggacaucaccccuugcagcuucggcggagugucugugaucaccccuggcaccaacaccagcaaucagguggcagugcuguaccagggcgugaacuguaccgaagugcccguggccauucacgccgaucagcugacaccuacauggcggguguacuccaccggcagcaauguguuucagaccagagccggcugucugaucggagccgaguacgugaacaauagcuacgagugcgacauccccaucggcgcuggaaucugcgccagcuaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcguggccagccagagcaucauugccuacacaaugucucugggcgccgagaacagcguggccuacuccaacaacucuaucgcuauccccaccaacuucaccaucagcgugaccacagagauccugccuguguccaugaccaagaccagcguggacugcaccauguacaucugcggcgauuccaccgagugcuccaaccugcugcugcaguacggcagcuucugcacccagcugaaaagagcccugacagggaucgccguggaacaggacaagaacacccaagagguguucgcccaagugaagcagaucuacaagaccccuccuaucaaguacuucggcggcuucaauuucagccagauucugcccgauccuagcaagcccagcaagcggagcuucaucgaggaccugcuguucaacaaagugacacuggccgacgccggcuucaucaagcaguauggcgauugucugggcgacauugccgccagggaucugauuugcgcccagaaguuuaacggacugacagugcugccuccucugcugaccgaugagaugaucgcccaguacacaucugcccugcuggccggcacaaucacaagcggcuggacauuuggagcaggcgccgcucugcagauccccuuugcuaugcagauggccuaccgguucaacggcaucggagugacccagaaugugcuguacgagaaccagaagcugaucgccaaccaguucaacagcgccaucggcaagauccaggacagccugagcagcacagcaagcgcccugggaaagcugcaggacguggucaaccacaaugcccaggcacugaacacccuggucaagcagcuguccuccaaguucggcgccaucagcucugugcugaacgauauccugagcagacuggacccuccugaggccgaggugcagaucgacagacugaucacaggcagacugcagagccuccagacauacgugacccagcagcugaucagagccgccgagauuagagccucugccaaucuggccgccaccaagaugucugagugugugcugggccagagcaagagaguggacuuuugcggcaagggcuaccaccugaugagcuucccucagucugccccucacggcgugguguuucugcacgugacauaugugcccgcucaagagaagaauuucaccaccgcuccagccaucugccacgacggcaaagcccacuuuccuagagaaggcguguucguguccaacggcacccauugguucgugacacagcggaacuucuacgagccccagaucaucaccaccgacaacaccuucgugucuggcaacugcgacgucgugaucggcauugugaacaauaccguguacgacccucugcagcccgagcuggacagcuucaaagaggaacuggacaaguacuuuaagaaccacacaagccccgacguggaccugggcgauaucagcggaaucaaugccagcgucgugaacauccagaaagagaucgaccggcugaacgagguggccaagaaucugaacgagagccugaucgaccugcaagaacuggggaaguacgagcaguacaucaaguggcccugguacaucuggcugggcuuuaucgccggacugauugccaucgugauggucacaaucaugcuguguugcaugaccagcugcuguagcugccugaagggcuguuguagcuguggcagcugcugcaaguucgacgaggacgauucugagcccgugcugaagggcgugaaacugcacuacacaugaugacucgagcugguacugcaugcacgcaaugcuagcugccccuuucccguccuggguaccccgagucucccccgaccucgggucccagguaugcucccaccuccaccugccccacucaccaccucugcuaguuccagacaccucccaagcacgcagcaaugcagcucaaaacgcuuagccuagccacacccccacgggaaacagcagugauuaaccuuuagcaauaaacgaaaguuuaacuaagcuauacuaaccccaggguuggucaauuucgugccagccacacccuggagcuagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcauaugacuaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
148 編碼來自奧密克戎XBB.2.3.2變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之全長DNA構築體 Agaataaactagtattcttctggtccccacagactcagagagaacccgccaccatgttcgtgttcctggtgctgctgcctctggtgtccagccagtgtgtgaacctgatcaccagaacacagtcatacaccaacagctttaccagaggcgtgtactaccccgacaaggtgttcagatccagcgtgctgcactctacccaggacctgttcctgcctttcttcagcaacgtgacctggttccacgccatccacgtgtccggcaccaatggcaccaagagattcgacaaccccgccctgcccttcaacgacggggtgtactttgccagcaccgagaagtccaacatcatcagaggctggatcttcggcaccacactggacagcaagacccagagcctgctgatcgtgaacaacgccaccaacgtggtcatcaaagtgtgcgagttccagttctgcaacgaccccttcctggacgtctaccagaagaacaacaagagctggatggaaagcgagttccgggtgtacagcagcgccaacaactgcaccttcgagtacgtgtcccagcctttcctgatggacctggaaggcaaggaggtgaacttcaagaacctgcgcgagttcgtgtttaagaacatcgacggctacttcaagatctacagcaagcacacccctatcaacctcgagcgggatctgcctcagggcttctctgctctggaacccctggtggatctgcccatcggcatcaacatcacccggtttcagacactgctggccctgcacagaagctacctgacacctggcggcagcagcagcggatggacagctggtgccgccgcttactatgtgggctacctgcagcctagaaccttcctgctgaagtacaacgagaacggcaccatcaccgacgccgtggattgtgctctggatcctctgagcgagacaaagtgcaccctgaagtccttcaccgtggaaaagggcatctaccagaccagcaacttccgggtgcagcccaccgaatccatcgtgcggttccccaatatcaccaatctgtgccccttccacgaggtgttcaatgccaccaccttcgcctctgtgtacgcctggaaccggaagcggatcagcaattgcgtggccgactactccgtgatctacaacttcgcccccttcttcgcattcaagtgctacggcgtgtcccctaccaagctgaacgacctgtgcttcacaaacgtgtacgccgacagcttcgtgatccggggaaacgaagtgtcacagattgcccctggacagacaggcaacatcgccgactacaactacaagctgcccgacgacttcaccggctgtgtgattgcctggaacagcaacaagctggactccaaacccagcggcaactacaattacctgtaccggctgttccggaagtccaagctgaagcccttcgagcgggacatctccaccgagatctatcaggccggcaacaagccttgtaacggcgtggcaggccccaactgctacagcccactgcagtcctacggctttaggcccacatacggcgtgggccaccagccctacagagtggtggtgctgagcttcgaactgctgcatgcctcagccacagtgtgcggccctaagaaaagcaccaatctcgtgaagaacaaatgcgtgaacttcaacttcaacggcctgaccggcaccggcgtgctgacagagagcaacaagaagttcctgccattccagcagtttggccgggatatcgccgataccacagacgccgttagagatccccagacactggaaatcctggacatcaccccttgcagcttcggcggagtgtctgtgatcacccctggcaccaacaccagcaatcaggtggcagtgctgtaccagggcgtgaactgtaccgaagtgcccgtggccattcacgccgatcagctgacacctacatggcgggtgtactccaccggcagcaatgtgtttcagaccagagccggctgtctgatcggagccgagtacgtgaacaatagctacgagtgcgacatccccatcggcgctggaatctgcgccagctaccagacacagacaaagagccaccggagagccagaagcgtggccagccagagcatcattgcctacacaatgtctctgggcgccgagaacagcgtggcctactccaacaactctatcgctatccccaccaacttcaccatcagcgtgaccacagagatcctgcctgtgtccatgaccaagaccagcgtggactgcaccatgtacatctgcggcgattccaccgagtgctccaacctgctgctgcagtacggcagcttctgcacccagctgaaaagagccctgacagggatcgccgtggaacaggacaagaacacccaagaggtgttcgcccaagtgaagcagatctacaagacccctcctatcaagtacttcggcggcttcaatttcagccagattctgcccgatcctagcaagcccagcaagcggagcttcatcgaggacctgctgttcaacaaagtgacactggccgacgccggcttcatcaagcagtatggcgattgtctgggcgacattgccgccagggatctgatttgcgcccagaagtttaacggactgacagtgctgcctcctctgctgaccgatgagatgatcgcccagtacacatctgccctgctggccggcacaatcacaagcggctggacatttggagcaggcgccgctctgcagatcccctttgctatgcagatggcctaccggttcaacggcatcggagtgacccagaatgtgctgtacgagaaccagaagctgatcgccaaccagttcaacagcgccatcggcaagatccaggacagcctgagcagcacagcaagcgccctgggaaagctgcaggacgtggtcaaccacaatgcccaggcactgaacaccctggtcaagcagctgtcctccaagttcggcgccatcagctctgtgctgaacgatatcctgagcagactggaccctcctgaggccgaggtgcagatcgacagactgatcacaggcagactgcagagcctccagacatacgtgacccagcagctgatcagagccgccgagattagagcctctgccaatctggccgccaccaagatgtctgagtgtgtgctgggccagagcaagagagtggacttttgcggcaagggctaccacctgatgagcttccctcagtctgcccctcacggcgtggtgtttctgcacgtgacatatgtgcccgctcaagagaagaatttcaccaccgctccagccatctgccacgacggcaaagcccactttcctagagaaggcgtgttcgtgtccaacggcacccattggttcgtgacacagcggaacttctacgagccccagatcatcaccaccgacaacaccttcgtgtctggcaactgcgacgtcgtgatcggcattgtgaacaataccgtgtacgaccctctgcagcccgagctggacagcttcaaagaggaactggacaagtactttaagaaccacacaagccccgacgtggacctgggcgatatcagcggaatcaatgccagcgtcgtgaacatccagaaagagatcgaccggctgaacgaggtggccaagaatctgaacgagagcctgatcgacctgcaagaactggggaagtacgagcagtacatcaagtggccctggtacatctggctgggctttatcgccggactgattgccatcgtgatggtcacaatcatgctgtgttgcatgaccagctgctgtagctgcctgaagggctgttgtagctgtggcagctgctgcaagttcgacgaggacgattctgagcccgtgctgaagggcgtgaaactgcactacacatgatgactcgagctggtactgcatgcacgcaatgctagctgcccctttcccgtcctgggtaccccgagtctcccccgacctcgggtcccaggtatgctcccacctccacctgccccactcaccacctctgctagttccagacacctcccaagcacgcagcaatgcagctcaaaacgcttagcctagccacacccccacgggaaacagcagtgattaacctttagcaataaacgaaagtttaactaagctatactaaccccagggttggtcaatttcgtgccagccacaccctggagctagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcatatgactaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
表 17. A/Darwin/6/2021特異性流行性感冒RNA疫苗之一個實施例之序列
SEQ ID NO. 簡述 序列
80 A/Darwin/6/2021之RNA編碼流行性感冒HA蛋白之胺基酸序列 MKTIIALSNILCLVFAQKIPGNDNSTATLCLGHHAVPNGTIVKTITNDRIEVTNATELVQNSSIGEICGSPHQILDGGNCTLIDALLGDPQCDGFQNKEWDLFVERSRANSNCYPYDVPDYASLRSLVASSGTLEFKNESFNWTGVKQNGTSSACIRGSSSSFFSRLNWLTSLNNIYPAQNVTMPNKEQFDKLYIWGVHHPDTDKNQISLFAQSSGRITVSTKRSQQAVIPNIGSRPRIRDIPSRISIYWTIVKPGDILLINSTGNLIAPRGYFKIRSGKSSIMRSDAPIGKCKSECITPNGSIPNDKPFQNVNRITYGACPRYVKQSTLKLATGMRNVPEKQTRGIFGAIAGFIENGWEGMVDGWYGFRHQNSEGRGQAADLKSTQAAIDQINGKLNRLIGKTNEKFHQIEKEFSEVEGRVQDLEKYVEDTKIDLWSYNAELLVALENQHTIDLTDSEMNKLFEKTKKQLRENAEDMGNGCFKIYHKCDNACIGSIRNETYDHNVYRDEALNNRFQIKGVELKSGYKDWILWISFAMSCFLLCIALLGFIMWACQKGNIRCNICI
81 編碼A/Darwin/6/2021之流行性感冒HA蛋白之DNA序列 atgaagaccatcattgccctgagcaacatcctgtgcctggtgttcgcccagaagatccccggcaacgacaatagcaccgccacactgtgtctgggccatcacgctgtgcctaacggcaccatcgtgaaaaccatcaccaacgaccggatcgaagtgaccaacgccacagagctggtgcagaacagcagcatcggcgagatctgtggcagccctcaccagattctggacggcggcaattgcaccctgatcgatgctctgctgggcgaccctcagtgtgacggcttccagaacaaagaatgggacctgttcgtggaaagaagccgggccaacagcaactgctacccctacgatgtgcccgactacgccagcctgagatctctggtggcctctagcggcaccctggaattcaagaacgagagcttcaactggaccggcgtgaagcagaatggcaccagcagcgcctgtatcagaggcagcagctccagcttcttcagcagactgaactggctgaccagcctgaacaacatctaccccgctcagaacgtgaccatgcctaacaaagagcagttcgacaagctgtacatctggggcgtgcaccatcctgacaccgacaagaaccagatcagcctgtttgcccagagcagcggcagaatcaccgtgtccactaagagaagccagcaggccgtgattcccaacatcggcagcagaccccggatcagagacatccccagccggatcagcatctactggacaatcgtgaagcccggcgacatcctgctgatcaacagcaccggcaatctgatcgcccctcggggctacttcaagatcagaagcggcaagagcagcatcatgcggagcgacgcccctatcggcaagtgcaagagcgagtgcatcaccccaaacggcagcatccccaacgacaagcccttccagaatgtgaaccggatcacctacggcgcctgtcctagatacgtgaaacagagcaccctgaagctggccaccggcatgagaaacgtgccagagaagcagaccagaggcatcttcggagccattgccggcttcatcgagaacggctgggaaggcatggtggacggatggtacggcttcagacaccagaacagcgaaggcagaggacaggccgctgacctgaaatctacacaggccgccatcgaccagatcaacggcaagctgaaccggctgatcggcaagaccaacgagaagttccaccagatcgagaaagagttcagcgaggtcgagggcagagtgcaggacctcgagaaatacgtggaagataccaagatcgacctgtggtcctacaatgccgaactgctggtggccctggaaaaccagcacaccatcgacctgaccgacagcgagatgaacaagctgttcgaaaagaccaagaagcagctgcgcgagaacgccgaggatatgggcaacggctgctttaagatctaccacaagtgcgacaacgcctgcatcggctccatccggaacgagacatacgaccacaacgtgtacagagatgaggccctgaacaatcggttccagatcaaaggcgtggaactgaagtccggctacaaggactggatcctgtggatcagcttcgccatgagctgctttctgctgtgtatcgccctgctgggcttcatcatgtgggcctgccagaaaggcaacatcagatgcaacatctgcatctgatga
82 編碼A/Darwin/6/2021之流行性感冒HA蛋白之RNA序列 augaagaccaucauugcccugagcaacauccugugccugguguucgcccagaagauccccggcaacgacaauagcaccgccacacugugucugggccaucacgcugugccuaacggcaccaucgugaaaaccaucaccaacgaccggaucgaagugaccaacgccacagagcuggugcagaacagcagcaucggcgagaucuguggcagcccucaccagauucuggacggcggcaauugcacccugaucgaugcucugcugggcgacccucagugugacggcuuccagaacaaagaaugggaccuguucguggaaagaagccgggccaacagcaacugcuaccccuacgaugugcccgacuacgccagccugagaucucugguggccucuagcggcacccuggaauucaagaacgagagcuucaacuggaccggcgugaagcagaauggcaccagcagcgccuguaucagaggcagcagcuccagcuucuucagcagacugaacuggcugaccagccugaacaacaucuaccccgcucagaacgugaccaugccuaacaaagagcaguucgacaagcuguacaucuggggcgugcaccauccugacaccgacaagaaccagaucagccuguuugcccagagcagcggcagaaucaccguguccacuaagagaagccagcaggccgugauucccaacaucggcagcagaccccggaucagagacauccccagccggaucagcaucuacuggacaaucgugaagcccggcgacauccugcugaucaacagcaccggcaaucugaucgccccucggggcuacuucaagaucagaagcggcaagagcagcaucaugcggagcgacgccccuaucggcaagugcaagagcgagugcaucaccccaaacggcagcauccccaacgacaagcccuuccagaaugugaaccggaucaccuacggcgccuguccuagauacgugaaacagagcacccugaagcuggccaccggcaugagaaacgugccagagaagcagaccagaggcaucuucggagccauugccggcuucaucgagaacggcugggaaggcaugguggacggaugguacggcuucagacaccagaacagcgaaggcagaggacaggccgcugaccugaaaucuacacaggccgccaucgaccagaucaacggcaagcugaaccggcugaucggcaagaccaacgagaaguuccaccagaucgagaaagaguucagcgaggucgagggcagagugcaggaccucgagaaauacguggaagauaccaagaucgaccugugguccuacaaugccgaacugcugguggcccuggaaaaccagcacaccaucgaccugaccgacagcgagaugaacaagcuguucgaaaagaccaagaagcagcugcgcgagaacgccgaggauaugggcaacggcugcuuuaagaucuaccacaagugcgacaacgccugcaucggcuccauccggaacgagacauacgaccacaacguguacagagaugaggcccugaacaaucgguuccagaucaaaggcguggaacugaaguccggcuacaaggacuggauccuguggaucagcuucgccaugagcugcuuucugcuguguaucgcccugcugggcuucaucaugugggccugccagaaaggcaacaucagaugcaacaucugcaucugauga
83 編碼A/Darwin/6/2021之HA蛋白之全長DNA構築體序列 agaataaactagtattcttctggtccccacagactcagagagaacccgccaccatgaagaccatcattgccctgagcaacatcctgtgcctggtgttcgcccagaagatccccggcaacgacaatagcaccgccacactgtgtctgggccatcacgctgtgcctaacggcaccatcgtgaaaaccatcaccaacgaccggatcgaagtgaccaacgccacagagctggtgcagaacagcagcatcggcgagatctgtggcagccctcaccagattctggacggcggcaattgcaccctgatcgatgctctgctgggcgaccctcagtgtgacggcttccagaacaaagaatgggacctgttcgtggaaagaagccgggccaacagcaactgctacccctacgatgtgcccgactacgccagcctgagatctctggtggcctctagcggcaccctggaattcaagaacgagagcttcaactggaccggcgtgaagcagaatggcaccagcagcgcctgtatcagaggcagcagctccagcttcttcagcagactgaactggctgaccagcctgaacaacatctaccccgctcagaacgtgaccatgcctaacaaagagcagttcgacaagctgtacatctggggcgtgcaccatcctgacaccgacaagaaccagatcagcctgtttgcccagagcagcggcagaatcaccgtgtccactaagagaagccagcaggccgtgattcccaacatcggcagcagaccccggatcagagacatccccagccggatcagcatctactggacaatcgtgaagcccggcgacatcctgctgatcaacagcaccggcaatctgatcgcccctcggggctacttcaagatcagaagcggcaagagcagcatcatgcggagcgacgcccctatcggcaagtgcaagagcgagtgcatcaccccaaacggcagcatccccaacgacaagcccttccagaatgtgaaccggatcacctacggcgcctgtcctagatacgtgaaacagagcaccctgaagctggccaccggcatgagaaacgtgccagagaagcagaccagaggcatcttcggagccattgccggcttcatcgagaacggctgggaaggcatggtggacggatggtacggcttcagacaccagaacagcgaaggcagaggacaggccgctgacctgaaatctacacaggccgccatcgaccagatcaacggcaagctgaaccggctgatcggcaagaccaacgagaagttccaccagatcgagaaagagttcagcgaggtcgagggcagagtgcaggacctcgagaaatacgtggaagataccaagatcgacctgtggtcctacaatgccgaactgctggtggccctggaaaaccagcacaccatcgacctgaccgacagcgagatgaacaagctgttcgaaaagaccaagaagcagctgcgcgagaacgccgaggatatgggcaacggctgctttaagatctaccacaagtgcgacaacgcctgcatcggctccatccggaacgagacatacgaccacaacgtgtacagagatgaggccctgaacaatcggttccagatcaaaggcgtggaactgaagtccggctacaaggactggatcctgtggatcagcttcgccatgagctgctttctgctgtgtatcgccctgctgggcttcatcatgtgggcctgccagaaaggcaacatcagatgcaacatctgcatctgatgactcgagctggtactgcatgcacgcaatgctagctgcccctttcccgtcctgggtaccccgagtctcccccgacctcgggtcccaggtatgctcccacctccacctgccccactcaccacctctgctagttccagacacctcccaagcacgcagcaatgcagctcaaaacgcttagcctagccacacccccacgggaaacagcagtgattaacctttagcaataaacgaaagtttaactaagctatactaaccccagggttggtcaatttcgtgccagccacaccctggagctagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcatatgactaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
84 編碼A/Darwin/6/2021之HA蛋白之全長RNA構築體序列 agaauaaacuaguauucuucugguccccacagacucagagagaacccgccaccaugaagaccaucauugcccugagcaacauccugugccugguguucgcccagaagauccccggcaacgacaauagcaccgccacacugugucugggccaucacgcugugccuaacggcaccaucgugaaaaccaucaccaacgaccggaucgaagugaccaacgccacagagcuggugcagaacagcagcaucggcgagaucuguggcagcccucaccagauucuggacggcggcaauugcacccugaucgaugcucugcugggcgacccucagugugacggcuuccagaacaaagaaugggaccuguucguggaaagaagccgggccaacagcaacugcuaccccuacgaugugcccgacuacgccagccugagaucucugguggccucuagcggcacccuggaauucaagaacgagagcuucaacuggaccggcgugaagcagaauggcaccagcagcgccuguaucagaggcagcagcuccagcuucuucagcagacugaacuggcugaccagccugaacaacaucuaccccgcucagaacgugaccaugccuaacaaagagcaguucgacaagcuguacaucuggggcgugcaccauccugacaccgacaagaaccagaucagccuguuugcccagagcagcggcagaaucaccguguccacuaagagaagccagcaggccgugauucccaacaucggcagcagaccccggaucagagacauccccagccggaucagcaucuacuggacaaucgugaagcccggcgacauccugcugaucaacagcaccggcaaucugaucgccccucggggcuacuucaagaucagaagcggcaagagcagcaucaugcggagcgacgccccuaucggcaagugcaagagcgagugcaucaccccaaacggcagcauccccaacgacaagcccuuccagaaugugaaccggaucaccuacggcgccuguccuagauacgugaaacagagcacccugaagcuggccaccggcaugagaaacgugccagagaagcagaccagaggcaucuucggagccauugccggcuucaucgagaacggcugggaaggcaugguggacggaugguacggcuucagacaccagaacagcgaaggcagaggacaggccgcugaccugaaaucuacacaggccgccaucgaccagaucaacggcaagcugaaccggcugaucggcaagaccaacgagaaguuccaccagaucgagaaagaguucagcgaggucgagggcagagugcaggaccucgagaaauacguggaagauaccaagaucgaccugugguccuacaaugccgaacugcugguggcccuggaaaaccagcacaccaucgaccugaccgacagcgagaugaacaagcuguucgaaaagaccaagaagcagcugcgcgagaacgccgaggauaugggcaacggcugcuuuaagaucuaccacaagugcgacaacgccugcaucggcuccauccggaacgagacauacgaccacaacguguacagagaugaggcccugaacaaucgguuccagaucaaaggcguggaacugaaguccggcuacaaggacuggauccuguggaucagcuucgccaugagcugcuuucugcuguguaucgcccugcugggcuucaucaugugggccugccagaaaggcaacaucagaugcaacaucugcaucugaugacucgagcugguacugcaugcacgcaaugcuagcugccccuuucccguccuggguaccccgagucucccccgaccucgggucccagguaugcucccaccuccaccugccccacucaccaccucugcuaguuccagacaccucccaagcacgcagcaaugcagcucaaaacgcuuagccuagccacacccccacgggaaacagcagugauuaaccuuuagcaauaaacgaaaguuuaacuaagcuauacuaaccccaggguuggucaauuucgugccagccacacccuggagcuagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcauaugacuaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
表18. B/Austria/1359417/2021特異性流行性感冒RNA疫苗之一個實施例之序列
SEQ ID NO. 簡述 序列
85 B/Austria/1359417/2021之RNA編碼流行性感冒HA蛋白之胺基酸序列 MKAIIVLLMVVTSNADRICTGITSSNSPHVVKTATQGEVNVTGVIPLTTTPTKSHFANLKGTETRGKLCPKCLNCTDLDVALGRPKCTGKIPSARVSILHEVRPVTSGCFPIMHDRTKIRQLPNLLRGYEHVRLSTHNVINTEDAPGGPYEIGTSGSCLNITNGKGFFATMAWAVPKNKTATNPLTIEVPYICTEEEDQITVWGFHSDDETQMARLYGDSKPQKFTSSANGVTTHYVSQIGGFPNQTEDGGLPQSGRIVVDYMVQKSGKTGTITYQRGILLPQKVWCASGKSKVIKGSLPLIGEADCLHEKYGGLNKSKPYYTGEHAKAIGNCPIWVKTPLKLANGTKYRPPAKLLKERGFFGAIAGFLEGGWEGMIAGWHGYTSHGAHGVAVAADLKSTQEAINKITKNLNSLSELEVKNLQRLSGAMDELHNEILELDEKVDDLRADTISSQIELAVLLSNEGIINSEDEHLLALERKLKKMLGPSAVEIGNGCFETKHKCNQTCLDRIAAGTFDAGEFSLPTFDSLNITAASLNDDGLDNHTILLYYSTAASSLAVTLMIAIFVVYMVSRDNVSCSICL
86 編碼B/Austria/1359417/2021之流行性感冒HA蛋白之DNA序列 atgaaggccatcatcgtgctgctgatggtggtcaccagcaacgccgacagaatctgcaccggcatcaccagcagcaacagccctcacgtggtcaagacagccacacagggcgaagtgaatgtgaccggcgtgatccctctgaccaccacacctaccaagagccacttcgccaacctgaagggcaccgagacaagaggcaagctgtgccccaagtgcctgaactgcaccgatctggatgtggccctgggcagacctaagtgtaccggcaagatccctagcgccagagtgtccatcctgcacgaagtgcggcctgtgaccagcggctgctttcccattatgcacgaccggaccaagatcagacagctgcccaatctgctgcggggctatgaacatgtgcggctgagcacccacaacgtgatcaacacagaggatgcccctggcggcccttacgagatcggaacatctggctcttgcctgaacattaccaacggcaagggcttcttcgccaccatggcttgggccgtgcctaagaacaagaccgccaccaatccactgaccatcgaggtgccctacatctgtaccgaggaagaagatcagatcaccgtctggggcttccacagcgacgacgaaacacagatggccagactgtacggcgacagcaagcctcagaagttcaccagctctgccaacggcgtgaccacacactacgtgtcccagatcggcggcttccccaatcagacagaagatggcggactgccccagagcggaagaatcgtggtggactacatggtgcagaagtccggcaagaccggcacaatcacataccagcggggaatcctgctgcctcagaaagtttggtgcgccagcggcaagagcaaagtgatcaagggcagcctgcctctgatcggcgaagccgattgtctgcacgagaagtacggcggcctgaacaagagcaagccctactacacaggcgagcacgccaaggccatcggcaactgtcctatctgggtcaagacccctctgaagctggccaacggcaccaagtatagacctccagccaagctgctgaaagagcggggcttctttggagctatcgccggctttcttgaaggcggctgggagggaatgattgccggctggcatggctacacatctcatggcgcacatggcgtggcagtggccgctgatctgaagtctacacaagaggccatcaacaagatcaccaagaacctgaacagcctgagcgagctggaagtgaagaacctgcagagactgtccggcgccatggacgagctgcacaacgagatcctggaactggacgagaaggtggacgacctgagagccgataccatctccagccagattgagctggcagtgctgctgtccaacgagggcatcatcaacagcgaggacgagcatctgctggccctggaacggaagctgaagaagatgctgggcccaagcgccgtggaaatcggcaatggctgcttcgagacaaagcacaagtgcaaccagacctgcctggacagaattgccgccggaacatttgacgccggcgagtttagcctgcctaccttcgactccctgaacatcacagccgccagcctgaatgacgacggcctggacaatcacaccatcctgctgtactactccaccgccgcttctagcctggccgtgacactgatgatcgccatctttgtggtgtacatggtgtccagagacaacgtgtcctgcagcatctgcctgtgatga
87 編碼B/Austria/1359417/2021之流行性感冒HA蛋白之RNA序列 augaaggccaucaucgugcugcugaugguggucaccagcaacgccgacagaaucugcaccggcaucaccagcagcaacagcccucacguggucaagacagccacacagggcgaagugaaugugaccggcgugaucccucugaccaccacaccuaccaagagccacuucgccaaccugaagggcaccgagacaagaggcaagcugugccccaagugccugaacugcaccgaucuggauguggcccugggcagaccuaaguguaccggcaagaucccuagcgccagaguguccauccugcacgaagugcggccugugaccagcggcugcuuucccauuaugcacgaccggaccaagaucagacagcugcccaaucugcugcggggcuaugaacaugugcggcugagcacccacaacgugaucaacacagaggaugccccuggcggcccuuacgagaucggaacaucuggcucuugccugaacauuaccaacggcaagggcuucuucgccaccauggcuugggccgugccuaagaacaagaccgccaccaauccacugaccaucgaggugcccuacaucuguaccgaggaagaagaucagaucaccgucuggggcuuccacagcgacgacgaaacacagauggccagacuguacggcgacagcaagccucagaaguucaccagcucugccaacggcgugaccacacacuacgugucccagaucggcggcuuccccaaucagacagaagauggcggacugccccagagcggaagaaucgugguggacuacauggugcagaaguccggcaagaccggcacaaucacauaccagcggggaauccugcugccucagaaaguuuggugcgccagcggcaagagcaaagugaucaagggcagccugccucugaucggcgaagccgauugucugcacgagaaguacggcggccugaacaagagcaagcccuacuacacaggcgagcacgccaaggccaucggcaacuguccuaucugggucaagaccccucugaagcuggccaacggcaccaaguauagaccuccagccaagcugcugaaagagcggggcuucuuuggagcuaucgccggcuuucuugaaggcggcugggagggaaugauugccggcuggcauggcuacacaucucauggcgcacauggcguggcaguggccgcugaucugaagucuacacaagaggccaucaacaagaucaccaagaaccugaacagccugagcgagcuggaagugaagaaccugcagagacuguccggcgccauggacgagcugcacaacgagauccuggaacuggacgagaagguggacgaccugagagccgauaccaucuccagccagauugagcuggcagugcugcuguccaacgagggcaucaucaacagcgaggacgagcaucugcuggcccuggaacggaagcugaagaagaugcugggcccaagcgccguggaaaucggcaauggcugcuucgagacaaagcacaagugcaaccagaccugccuggacagaauugccgccggaacauuugacgccggcgaguuuagccugccuaccuucgacucccugaacaucacagccgccagccugaaugacgacggccuggacaaucacaccauccugcuguacuacuccaccgccgcuucuagccuggccgugacacugaugaucgccaucuuugugguguacaugguguccagagacaacguguccugcagcaucugccugugauga
88 編碼B/Austria/1359417/2021之HA蛋白之全長DNA構築體序列 agaataaactagtattcttctggtccccacagactcagagagaacccgccaccatgaaggccatcatcgtgctgctgatggtggtcaccagcaacgccgacagaatctgcaccggcatcaccagcagcaacagccctcacgtggtcaagacagccacacagggcgaagtgaatgtgaccggcgtgatccctctgaccaccacacctaccaagagccacttcgccaacctgaagggcaccgagacaagaggcaagctgtgccccaagtgcctgaactgcaccgatctggatgtggccctgggcagacctaagtgtaccggcaagatccctagcgccagagtgtccatcctgcacgaagtgcggcctgtgaccagcggctgctttcccattatgcacgaccggaccaagatcagacagctgcccaatctgctgcggggctatgaacatgtgcggctgagcacccacaacgtgatcaacacagaggatgcccctggcggcccttacgagatcggaacatctggctcttgcctgaacattaccaacggcaagggcttcttcgccaccatggcttgggccgtgcctaagaacaagaccgccaccaatccactgaccatcgaggtgccctacatctgtaccgaggaagaagatcagatcaccgtctggggcttccacagcgacgacgaaacacagatggccagactgtacggcgacagcaagcctcagaagttcaccagctctgccaacggcgtgaccacacactacgtgtcccagatcggcggcttccccaatcagacagaagatggcggactgccccagagcggaagaatcgtggtggactacatggtgcagaagtccggcaagaccggcacaatcacataccagcggggaatcctgctgcctcagaaagtttggtgcgccagcggcaagagcaaagtgatcaagggcagcctgcctctgatcggcgaagccgattgtctgcacgagaagtacggcggcctgaacaagagcaagccctactacacaggcgagcacgccaaggccatcggcaactgtcctatctgggtcaagacccctctgaagctggccaacggcaccaagtatagacctccagccaagctgctgaaagagcggggcttctttggagctatcgccggctttcttgaaggcggctgggagggaatgattgccggctggcatggctacacatctcatggcgcacatggcgtggcagtggccgctgatctgaagtctacacaagaggccatcaacaagatcaccaagaacctgaacagcctgagcgagctggaagtgaagaacctgcagagactgtccggcgccatggacgagctgcacaacgagatcctggaactggacgagaaggtggacgacctgagagccgataccatctccagccagattgagctggcagtgctgctgtccaacgagggcatcatcaacagcgaggacgagcatctgctggccctggaacggaagctgaagaagatgctgggcccaagcgccgtggaaatcggcaatggctgcttcgagacaaagcacaagtgcaaccagacctgcctggacagaattgccgccggaacatttgacgccggcgagtttagcctgcctaccttcgactccctgaacatcacagccgccagcctgaatgacgacggcctggacaatcacaccatcctgctgtactactccaccgccgcttctagcctggccgtgacactgatgatcgccatctttgtggtgtacatggtgtccagagacaacgtgtcctgcagcatctgcctgtgatgactcgagctggtactgcatgcacgcaatgctagctgcccctttcccgtcctgggtaccccgagtctcccccgacctcgggtcccaggtatgctcccacctccacctgccccactcaccacctctgctagttccagacacctcccaagcacgcagcaatgcagctcaaaacgcttagcctagccacacccccacgggaaacagcagtgattaacctttagcaataaacgaaagtttaactaagctatactaaccccagggttggtcaatttcgtgccagccacaccctggagctagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcatatgactaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
89 編碼B/Austria/1359417/2021之HA蛋白之全長RNA構築體序列 agaauaaacuaguauucuucugguccccacagacucagagagaacccgccaccaugaaggccaucaucgugcugcugaugguggucaccagcaacgccgacagaaucugcaccggcaucaccagcagcaacagcccucacguggucaagacagccacacagggcgaagugaaugugaccggcgugaucccucugaccaccacaccuaccaagagccacuucgccaaccugaagggcaccgagacaagaggcaagcugugccccaagugccugaacugcaccgaucuggauguggcccugggcagaccuaaguguaccggcaagaucccuagcgccagaguguccauccugcacgaagugcggccugugaccagcggcugcuuucccauuaugcacgaccggaccaagaucagacagcugcccaaucugcugcggggcuaugaacaugugcggcugagcacccacaacgugaucaacacagaggaugccccuggcggcccuuacgagaucggaacaucuggcucuugccugaacauuaccaacggcaagggcuucuucgccaccauggcuugggccgugccuaagaacaagaccgccaccaauccacugaccaucgaggugcccuacaucuguaccgaggaagaagaucagaucaccgucuggggcuuccacagcgacgacgaaacacagauggccagacuguacggcgacagcaagccucagaaguucaccagcucugccaacggcgugaccacacacuacgugucccagaucggcggcuuccccaaucagacagaagauggcggacugccccagagcggaagaaucgugguggacuacauggugcagaaguccggcaagaccggcacaaucacauaccagcggggaauccugcugccucagaaaguuuggugcgccagcggcaagagcaaagugaucaagggcagccugccucugaucggcgaagccgauugucugcacgagaaguacggcggccugaacaagagcaagcccuacuacacaggcgagcacgccaaggccaucggcaacuguccuaucugggucaagaccccucugaagcuggccaacggcaccaaguauagaccuccagccaagcugcugaaagagcggggcuucuuuggagcuaucgccggcuuucuugaaggcggcugggagggaaugauugccggcuggcauggcuacacaucucauggcgcacauggcguggcaguggccgcugaucugaagucuacacaagaggccaucaacaagaucaccaagaaccugaacagccugagcgagcuggaagugaagaaccugcagagacuguccggcgccauggacgagcugcacaacgagauccuggaacuggacgagaagguggacgaccugagagccgauaccaucuccagccagauugagcuggcagugcugcuguccaacgagggcaucaucaacagcgaggacgagcaucugcuggcccuggaacggaagcugaagaagaugcugggcccaagcgccguggaaaucggcaauggcugcuucgagacaaagcacaagugcaaccagaccugccuggacagaauugccgccggaacauuugacgccggcgaguuuagccugccuaccuucgacucccugaacaucacagccgccagccugaaugacgacggccuggacaaucacaccauccugcuguacuacuccaccgccgcuucuagccuggccgugacacugaugaucgccaucuuugugguguacaugguguccagagacaacguguccugcagcaucugccugugaugacucgagcugguacugcaugcacgcaaugcuagcugccccuuucccguccuggguaccccgagucucccccgaccucgggucccagguaugcucccaccuccaccugccccacucaccaccucugcuaguuccagacaccucccaagcacgcagcaaugcagcucaaaacgcuuagccuagccacacccccacgggaaacagcagugauuaaccuuuagcaauaaacgaaaguuuaacuaagcuauacuaaccccaggguuggucaauuucgugccagccacacccuggagcuagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcauaugacuaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
表19. A/Wisconsin/588/2019特異性流行性感冒RNA疫苗之一個實施例之序列
SEQ ID NO. 簡述 序列
90 A/Wisconsin/588/2019之RNA編碼流行性感冒HA蛋白之胺基酸序列 MKAILVVMLYTFTTANADTLCIGYHANNSTDTVDTVLEKNVTVTHSVNLLEDKHNGKLCKLRGVAPLHLGKCNIAGWILGNPECESLSTARSWSYIVETSNSDNGTCYPGDFINYEELREQLSSVSSFERFEIFPKTSSWPNHDSDNGVTAACPHAGAKSFYKNLIWLVKKGKSYPKINQTYINDKGKEVLVLWGIHHPPTIADQQSLYQNADAYVFVGTSRYSKKFKPEIATRPKVRDQEGRMNYYWTLVEPGDKITFEATGNLVAPRYAFTMERDAGSGIIISDTPVHDCNTTCQTPEGAINTSLPFQNVHPITIGKCPKYVKSTKLRLATGLRNVPSIQSRGLFGAIAGFIEGGWTGMVDGWYGYHHQNEQGSGYAADLKSTQNAIDKITNKVNSVIEKMNTQFTAVGKEFNHLEKRIENLNKKVDDGFLDIWTYNAELLVLLENERTLDYHDSNVKNLYEKVRNQLKNNAKEIGNGCFEFYHKCDNTCMESVKNGTYDYPKYSEEAKLNREKIDGVKLDSTRIYQILAIYSTVASSLVLVVSLGAISFWMCSNGSLQCRICI
91 編碼A/Wisconsin/588/2019之流行性感冒HA蛋白之DNA序列 atgaaggccatcctggtggtcatgctgtacaccttcaccaccgccaacgccgacacactgtgtatcggctaccacgccaacaacagcaccgacaccgtggataccgtgctggaaaagaacgtgaccgtgacacacagcgtgaacctgctggaagataagcacaacggcaagctgtgcaagctgagaggcgtggcacctctgcacctgggcaagtgtaatatcgccggctggatcctgggcaaccctgagtgtgaaagcctgagcaccgccagatcctggtcctacatcgtggaaaccagcaacagcgacaacggcacatgctaccccggcgacttcatcaactacgaggaactgcgggaacagctgagcagcgtgtccagcttcgagagattcgagatcttccccaagaccagcagctggcccaaccacgactctgacaatggcgtgacagccgcctgtcctcatgccggcgctaagagcttctacaagaacctgatctggctggtcaagaagggcaagagctaccccaagatcaaccagacctacatcaacgacaagggcaaagaggtgctggtcctctggggcatccaccatcctccaacaatcgccgatcagcagagcctgtaccagaacgccgatgcctatgtgttcgtgggcaccagccggtacagcaagaagttcaagcccgagatcgccaccaggcctaaagtgcgggatcaagagggcagaatgaactactactggaccctggtggaacccggcgacaagatcacatttgaggccaccggcaatctggtggcccctagatacgccttcaccatggaaagagatgccggcagcggcatcatcatcagcgatacccctgtgcacgactgcaacaccacctgtcagacacctgagggcgccatcaataccagcctgcctttccagaacgtgcaccccatcaccatcggcaagtgccccaaatacgtgaagtccaccaagctgaggctggccacaggcctgagaaatgtgccctccatccagagcagaggcctgtttggagccattgccggctttatcgaaggcggctggacaggcatggtggacggatggtacggataccaccaccagaacgagcaaggctctggctatgccgccgacctgaagtctacccagaatgccatcgataagatcaccaacaaagtgaacagcgtgatcgagaagatgaacacccagttcaccgccgtgggaaaagagttcaaccacctggaaaagcgcatcgagaacctgaacaagaaggtggacgacggcttcctggacatctggacctacaatgccgaactgctggtgctgctggagaacgagagaaccctggactaccacgacagcaacgtgaagaacctgtacgagaaagtgcgcaaccagctgaagaacaacgccaaagagatcggcaacggctgcttcgagttctaccacaagtgcgacaatacctgcatggaaagcgtgaagaatggcacctacgactaccctaagtacagcgaggaagccaagctgaaccgcgagaagatcgacggcgtgaagctggatagcacccggatctaccagattctggccatctacagcaccgtggcctctagcctggtgctggtggtttctctgggcgctatcagcttctggatgtgcagcaatggcagcctgcagtgccggatctgcatctgatga
92 編碼A/Wisconsin/588/2019之流行性感冒HA蛋白之RNA序列 augaaggccauccugguggucaugcuguacaccuucaccaccgccaacgccgacacacuguguaucggcuaccacgccaacaacagcaccgacaccguggauaccgugcuggaaaagaacgugaccgugacacacagcgugaaccugcuggaagauaagcacaacggcaagcugugcaagcugagaggcguggcaccucugcaccugggcaaguguaauaucgccggcuggauccugggcaacccugagugugaaagccugagcaccgccagauccugguccuacaucguggaaaccagcaacagcgacaacggcacaugcuaccccggcgacuucaucaacuacgaggaacugcgggaacagcugagcagcguguccagcuucgagagauucgagaucuuccccaagaccagcagcuggcccaaccacgacucugacaauggcgugacagccgccuguccucaugccggcgcuaagagcuucuacaagaaccugaucuggcuggucaagaagggcaagagcuaccccaagaucaaccagaccuacaucaacgacaagggcaaagaggugcugguccucuggggcauccaccauccuccaacaaucgccgaucagcagagccuguaccagaacgccgaugccuauguguucgugggcaccagccgguacagcaagaaguucaagcccgagaucgccaccaggccuaaagugcgggaucaagagggcagaaugaacuacuacuggacccugguggaacccggcgacaagaucacauuugaggccaccggcaaucugguggccccuagauacgccuucaccauggaaagagaugccggcagcggcaucaucaucagcgauaccccugugcacgacugcaacaccaccugucagacaccugagggcgccaucaauaccagccugccuuuccagaacgugcaccccaucaccaucggcaagugccccaaauacgugaaguccaccaagcugaggcuggccacaggccugagaaaugugcccuccauccagagcagaggccuguuuggagccauugccggcuuuaucgaaggcggcuggacaggcaugguggacggaugguacggauaccaccaccagaacgagcaaggcucuggcuaugccgccgaccugaagucuacccagaaugccaucgauaagaucaccaacaaagugaacagcgugaucgagaagaugaacacccaguucaccgccgugggaaaagaguucaaccaccuggaaaagcgcaucgagaaccugaacaagaagguggacgacggcuuccuggacaucuggaccuacaaugccgaacugcuggugcugcuggagaacgagagaacccuggacuaccacgacagcaacgugaagaaccuguacgagaaagugcgcaaccagcugaagaacaacgccaaagagaucggcaacggcugcuucgaguucuaccacaagugcgacaauaccugcauggaaagcgugaagaauggcaccuacgacuacccuaaguacagcgaggaagccaagcugaaccgcgagaagaucgacggcgugaagcuggauagcacccggaucuaccagauucuggccaucuacagcaccguggccucuagccuggugcuggugguuucucugggcgcuaucagcuucuggaugugcagcaauggcagccugcagugccggaucugcaucugauga
93 編碼A/Wisconsin/588/2019之HA蛋白之全長DNA構築體序列 agaataaactagtattcttctggtccccacagactcagagagaacccgccaccatgaaggccatcctggtggtcatgctgtacaccttcaccaccgccaacgccgacacactgtgtatcggctaccacgccaacaacagcaccgacaccgtggataccgtgctggaaaagaacgtgaccgtgacacacagcgtgaacctgctggaagataagcacaacggcaagctgtgcaagctgagaggcgtggcacctctgcacctgggcaagtgtaatatcgccggctggatcctgggcaaccctgagtgtgaaagcctgagcaccgccagatcctggtcctacatcgtggaaaccagcaacagcgacaacggcacatgctaccccggcgacttcatcaactacgaggaactgcgggaacagctgagcagcgtgtccagcttcgagagattcgagatcttccccaagaccagcagctggcccaaccacgactctgacaatggcgtgacagccgcctgtcctcatgccggcgctaagagcttctacaagaacctgatctggctggtcaagaagggcaagagctaccccaagatcaaccagacctacatcaacgacaagggcaaagaggtgctggtcctctggggcatccaccatcctccaacaatcgccgatcagcagagcctgtaccagaacgccgatgcctatgtgttcgtgggcaccagccggtacagcaagaagttcaagcccgagatcgccaccaggcctaaagtgcgggatcaagagggcagaatgaactactactggaccctggtggaacccggcgacaagatcacatttgaggccaccggcaatctggtggcccctagatacgccttcaccatggaaagagatgccggcagcggcatcatcatcagcgatacccctgtgcacgactgcaacaccacctgtcagacacctgagggcgccatcaataccagcctgcctttccagaacgtgcaccccatcaccatcggcaagtgccccaaatacgtgaagtccaccaagctgaggctggccacaggcctgagaaatgtgccctccatccagagcagaggcctgtttggagccattgccggctttatcgaaggcggctggacaggcatggtggacggatggtacggataccaccaccagaacgagcaaggctctggctatgccgccgacctgaagtctacccagaatgccatcgataagatcaccaacaaagtgaacagcgtgatcgagaagatgaacacccagttcaccgccgtgggaaaagagttcaaccacctggaaaagcgcatcgagaacctgaacaagaaggtggacgacggcttcctggacatctggacctacaatgccgaactgctggtgctgctggagaacgagagaaccctggactaccacgacagcaacgtgaagaacctgtacgagaaagtgcgcaaccagctgaagaacaacgccaaagagatcggcaacggctgcttcgagttctaccacaagtgcgacaatacctgcatggaaagcgtgaagaatggcacctacgactaccctaagtacagcgaggaagccaagctgaaccgcgagaagatcgacggcgtgaagctggatagcacccggatctaccagattctggccatctacagcaccgtggcctctagcctggtgctggtggtttctctgggcgctatcagcttctggatgtgcagcaatggcagcctgcagtgccggatctgcatctgatgactcgagctggtactgcatgcacgcaatgctagctgcccctttcccgtcctgggtaccccgagtctcccccgacctcgggtcccaggtatgctcccacctccacctgccccactcaccacctctgctagttccagacacctcccaagcacgcagcaatgcagctcaaaacgcttagcctagccacacccccacgggaaacagcagtgattaacctttagcaataaacgaaagtttaactaagctatactaaccccagggttggtcaatttcgtgccagccacaccctggagctagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcatatgactaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
94 編碼A/Wisconsin/588/2019之HA蛋白之全長RNA構築體序列 agaauaaacuaguauucuucugguccccacagacucagagagaacccgccaccaugaaggccauccugguggucaugcuguacaccuucaccaccgccaacgccgacacacuguguaucggcuaccacgccaacaacagcaccgacaccguggauaccgugcuggaaaagaacgugaccgugacacacagcgugaaccugcuggaagauaagcacaacggcaagcugugcaagcugagaggcguggcaccucugcaccugggcaaguguaauaucgccggcuggauccugggcaacccugagugugaaagccugagcaccgccagauccugguccuacaucguggaaaccagcaacagcgacaacggcacaugcuaccccggcgacuucaucaacuacgaggaacugcgggaacagcugagcagcguguccagcuucgagagauucgagaucuuccccaagaccagcagcuggcccaaccacgacucugacaauggcgugacagccgccuguccucaugccggcgcuaagagcuucuacaagaaccugaucuggcuggucaagaagggcaagagcuaccccaagaucaaccagaccuacaucaacgacaagggcaaagaggugcugguccucuggggcauccaccauccuccaacaaucgccgaucagcagagccuguaccagaacgccgaugccuauguguucgugggcaccagccgguacagcaagaaguucaagcccgagaucgccaccaggccuaaagugcgggaucaagagggcagaaugaacuacuacuggacccugguggaacccggcgacaagaucacauuugaggccaccggcaaucugguggccccuagauacgccuucaccauggaaagagaugccggcagcggcaucaucaucagcgauaccccugugcacgacugcaacaccaccugucagacaccugagggcgccaucaauaccagccugccuuuccagaacgugcaccccaucaccaucggcaagugccccaaauacgugaaguccaccaagcugaggcuggccacaggccugagaaaugugcccuccauccagagcagaggccuguuuggagccauugccggcuuuaucgaaggcggcuggacaggcaugguggacggaugguacggauaccaccaccagaacgagcaaggcucuggcuaugccgccgaccugaagucuacccagaaugccaucgauaagaucaccaacaaagugaacagcgugaucgagaagaugaacacccaguucaccgccgugggaaaagaguucaaccaccuggaaaagcgcaucgagaaccugaacaagaagguggacgacggcuuccuggacaucuggaccuacaaugccgaacugcuggugcugcuggagaacgagagaacccuggacuaccacgacagcaacgugaagaaccuguacgagaaagugcgcaaccagcugaagaacaacgccaaagagaucggcaacggcugcuucgaguucuaccacaagugcgacaauaccugcauggaaagcgugaagaauggcaccuacgacuacccuaaguacagcgaggaagccaagcugaaccgcgagaagaucgacggcgugaagcuggauagcacccggaucuaccagauucuggccaucuacagcaccguggccucuagccuggugcuggugguuucucugggcgcuaucagcuucuggaugugcagcaauggcagccugcagugccggaucugcaucugaugacucgagcugguacugcaugcacgcaaugcuagcugccccuuucccguccuggguaccccgagucucccccgaccucgggucccagguaugcucccaccuccaccugccccacucaccaccucugcuaguuccagacaccucccaagcacgcagcaaugcagcucaaaacgcuuagccuagccacacccccacgggaaacagcagugauuaaccuuuagcaauaaacgaaaguuuaacuaagcuauacuaaccccaggguuggucaauuucgugccagccacacccuggagcuagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcauaugacuaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
表20. A/Cambodia/e0826360/2020特異性流行性感冒RNA疫苗之一個實施例之序列
SEQ ID NO. 簡述 序列
95 A/Cambodia/e0826360/2020之RNA編碼流行性感冒HA蛋白之胺基酸序列 MKTIIALSYILCLVFAQKIPGNDNSTATLCLGHHAVPNGTIVKTITNDRIEVTNATELVQNSSIGEICDSPHQILDGGNCTLIDALLGDPQCDGFQNKEWDLFVERSRANSNCYPYDVPDYASLRSLVASSGTLEFKNESFNWTGVKQNGTSSACIRGSSSSFFSRLNWLTHLNYTYPALNVTMPNNEQFDKLYIWGVHHPSTDKDQISLFAQPSGRITVSTKRSQQAVIPNIGSRPRIRDIPSRISIYWTIVKPGDILLINSTGNLIAPRGYFKIRSGKSSIMRSDAPIGKCKSECITPNGSIPNDKPFQNVNRITYGACPRYVKQSTLKLATGMRNVPEKQTRGIFGAIAGFIENGWEGMVDGWYGFRHQNSEGRGQAADLKSTQAAIDQINGKLNRLIGKTNEKFHQIEKEFSEVEGRVQDLEKYVEDTKIDLWSYNAELLVALENQHTIDLTDSEMNKLFEKTKKQLRENAEDMGNGCFKIYHKCDNACIGSIRNETYDHNVYRDEALNNRFQIKGVELKSGYKDWILWISFAMSCFLLCIALLGFIMWACQKGNIRCNICI
96 編碼A/Cambodia/e0826360/2020之流行性感冒HA蛋白之DNA序列 atgaagaccatcattgccctgagctacatcctgtgcctggtgttcgcccagaagatccccggcaacgacaatagcaccgccacactgtgtctgggccatcacgctgtgcctaacggcaccatcgtgaaaaccatcaccaacgaccggatcgaagtgaccaacgccacagagctggtgcagaacagcagcatcggcgagatctgcgatagccctcaccagatcctggacggcggcaattgcacactgatcgatgccctgctgggcgaccctcagtgtgatggcttccagaacaaagaatgggacctgttcgtggaaagaagccgggccaacagcaactgctacccctacgatgtgcccgactacgccagcctgagatctctggtggcctctagcggcaccctggaattcaagaacgagagcttcaactggaccggcgtgaagcagaatggcaccagcagcgcctgtatcagaggcagcagctccagcttcttcagcagactgaactggctgacccacctgaactacacataccccgctctgaacgtgaccatgcctaacaacgagcagttcgacaagctgtacatctggggcgtgcaccatcctagcaccgacaaggatcagatcagcctgtttgcccagcctagcggcagaatcaccgtgtccactaagagaagccagcaggccgtgattcccaacatcggcagcagaccccggatcagagacatccccagccggatcagcatctactggacaatcgtgaagcccggcgacatcctgctgatcaacagcaccggcaatctgatcgcccctcggggctacttcaagatcagaagcggcaagagcagcatcatgcggagcgacgcccctatcggcaagtgcaagagcgagtgcatcaccccaaacggcagcatccccaacgacaagcccttccagaatgtgaaccggatcacctacggcgcctgtcctagatacgtgaaacagagcaccctgaagctggccaccggcatgagaaacgtgccagagaagcagaccagaggcatcttcggagccattgccggcttcatcgagaacggctgggaaggcatggtggacggatggtacggcttcagacaccagaacagcgaaggcagaggacaggccgctgacctgaaatctacacaggccgccatcgaccagatcaacggcaagctgaaccggctgatcggcaagaccaacgagaagttccaccagatcgagaaagagttcagcgaggtcgagggcagagtgcaggacctcgaaaaatacgtggaagataccaagatcgacctgtggtcctacaatgccgaactgctggtggccctggaaaaccagcacaccatcgacctgaccgacagcgagatgaacaagctgttcgaaaagaccaagaagcagctgcgcgagaacgccgaggatatgggcaacggctgctttaagatctaccacaagtgcgacaacgcctgcatcggctccatccggaacgagacatacgaccacaacgtgtacagagatgaggccctgaacaaccggttccagatcaaaggcgtggaactgaagtccggctacaaggactggatactgtggatcagcttcgccatgagctgctttctgctgtgtatcgctctgctgggcttcatcatgtgggcctgccagaaaggcaacatccggtgcaacatctgcatctgatga
97 編碼A/Cambodia/e0826360/2020之流行性感冒HA蛋白之RNA序列 augaagaccaucauugcccugagcuacauccugugccugguguucgcccagaagauccccggcaacgacaauagcaccgccacacugugucugggccaucacgcugugccuaacggcaccaucgugaaaaccaucaccaacgaccggaucgaagugaccaacgccacagagcuggugcagaacagcagcaucggcgagaucugcgauagcccucaccagauccuggacggcggcaauugcacacugaucgaugcccugcugggcgacccucagugugauggcuuccagaacaaagaaugggaccuguucguggaaagaagccgggccaacagcaacugcuaccccuacgaugugcccgacuacgccagccugagaucucugguggccucuagcggcacccuggaauucaagaacgagagcuucaacuggaccggcgugaagcagaauggcaccagcagcgccuguaucagaggcagcagcuccagcuucuucagcagacugaacuggcugacccaccugaacuacacauaccccgcucugaacgugaccaugccuaacaacgagcaguucgacaagcuguacaucuggggcgugcaccauccuagcaccgacaaggaucagaucagccuguuugcccagccuagcggcagaaucaccguguccacuaagagaagccagcaggccgugauucccaacaucggcagcagaccccggaucagagacauccccagccggaucagcaucuacuggacaaucgugaagcccggcgacauccugcugaucaacagcaccggcaaucugaucgccccucggggcuacuucaagaucagaagcggcaagagcagcaucaugcggagcgacgccccuaucggcaagugcaagagcgagugcaucaccccaaacggcagcauccccaacgacaagcccuuccagaaugugaaccggaucaccuacggcgccuguccuagauacgugaaacagagcacccugaagcuggccaccggcaugagaaacgugccagagaagcagaccagaggcaucuucggagccauugccggcuucaucgagaacggcugggaaggcaugguggacggaugguacggcuucagacaccagaacagcgaaggcagaggacaggccgcugaccugaaaucuacacaggccgccaucgaccagaucaacggcaagcugaaccggcugaucggcaagaccaacgagaaguuccaccagaucgagaaagaguucagcgaggucgagggcagagugcaggaccucgaaaaauacguggaagauaccaagaucgaccugugguccuacaaugccgaacugcugguggcccuggaaaaccagcacaccaucgaccugaccgacagcgagaugaacaagcuguucgaaaagaccaagaagcagcugcgcgagaacgccgaggauaugggcaacggcugcuuuaagaucuaccacaagugcgacaacgccugcaucggcuccauccggaacgagacauacgaccacaacguguacagagaugaggcccugaacaaccgguuccagaucaaaggcguggaacugaaguccggcuacaaggacuggauacuguggaucagcuucgccaugagcugcuuucugcuguguaucgcucugcugggcuucaucaugugggccugccagaaaggcaacauccggugcaacaucugcaucugauga
98 編碼A/Cambodia/e0826360/2020之HA蛋白之全長DNA構築體序列 agaataaactagtattcttctggtccccacagactcagagagaacccgccaccatgaagaccatcattgccctgagctacatcctgtgcctggtgttcgcccagaagatccccggcaacgacaatagcaccgccacactgtgtctgggccatcacgctgtgcctaacggcaccatcgtgaaaaccatcaccaacgaccggatcgaagtgaccaacgccacagagctggtgcagaacagcagcatcggcgagatctgcgatagccctcaccagatcctggacggcggcaattgcacactgatcgatgccctgctgggcgaccctcagtgtgatggcttccagaacaaagaatgggacctgttcgtggaaagaagccgggccaacagcaactgctacccctacgatgtgcccgactacgccagcctgagatctctggtggcctctagcggcaccctggaattcaagaacgagagcttcaactggaccggcgtgaagcagaatggcaccagcagcgcctgtatcagaggcagcagctccagcttcttcagcagactgaactggctgacccacctgaactacacataccccgctctgaacgtgaccatgcctaacaacgagcagttcgacaagctgtacatctggggcgtgcaccatcctagcaccgacaaggatcagatcagcctgtttgcccagcctagcggcagaatcaccgtgtccactaagagaagccagcaggccgtgattcccaacatcggcagcagaccccggatcagagacatccccagccggatcagcatctactggacaatcgtgaagcccggcgacatcctgctgatcaacagcaccggcaatctgatcgcccctcggggctacttcaagatcagaagcggcaagagcagcatcatgcggagcgacgcccctatcggcaagtgcaagagcgagtgcatcaccccaaacggcagcatccccaacgacaagcccttccagaatgtgaaccggatcacctacggcgcctgtcctagatacgtgaaacagagcaccctgaagctggccaccggcatgagaaacgtgccagagaagcagaccagaggcatcttcggagccattgccggcttcatcgagaacggctgggaaggcatggtggacggatggtacggcttcagacaccagaacagcgaaggcagaggacaggccgctgacctgaaatctacacaggccgccatcgaccagatcaacggcaagctgaaccggctgatcggcaagaccaacgagaagttccaccagatcgagaaagagttcagcgaggtcgagggcagagtgcaggacctcgaaaaatacgtggaagataccaagatcgacctgtggtcctacaatgccgaactgctggtggccctggaaaaccagcacaccatcgacctgaccgacagcgagatgaacaagctgttcgaaaagaccaagaagcagctgcgcgagaacgccgaggatatgggcaacggctgctttaagatctaccacaagtgcgacaacgcctgcatcggctccatccggaacgagacatacgaccacaacgtgtacagagatgaggccctgaacaaccggttccagatcaaaggcgtggaactgaagtccggctacaaggactggatactgtggatcagcttcgccatgagctgctttctgctgtgtatcgctctgctgggcttcatcatgtgggcctgccagaaaggcaacatccggtgcaacatctgcatctgatgactcgagctggtactgcatgcacgcaatgctagctgcccctttcccgtcctgggtaccccgagtctcccccgacctcgggtcccaggtatgctcccacctccacctgccccactcaccacctctgctagttccagacacctcccaagcacgcagcaatgcagctcaaaacgcttagcctagccacacccccacgggaaacagcagtgattaacctttagcaataaacgaaagtttaactaagctatactaaccccagggttggtcaatttcgtgccagccacaccctggagctagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcatatgactaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
99 編碼A/Cambodia/e0826360/2020之HA蛋白之全長RNA構築體序列 agaauaaacuaguauucuucugguccccacagacucagagagaacccgccaccaugaagaccaucauugcccugagcuacauccugugccugguguucgcccagaagauccccggcaacgacaauagcaccgccacacugugucugggccaucacgcugugccuaacggcaccaucgugaaaaccaucaccaacgaccggaucgaagugaccaacgccacagagcuggugcagaacagcagcaucggcgagaucugcgauagcccucaccagauccuggacggcggcaauugcacacugaucgaugcccugcugggcgacccucagugugauggcuuccagaacaaagaaugggaccuguucguggaaagaagccgggccaacagcaacugcuaccccuacgaugugcccgacuacgccagccugagaucucugguggccucuagcggcacccuggaauucaagaacgagagcuucaacuggaccggcgugaagcagaauggcaccagcagcgccuguaucagaggcagcagcuccagcuucuucagcagacugaacuggcugacccaccugaacuacacauaccccgcucugaacgugaccaugccuaacaacgagcaguucgacaagcuguacaucuggggcgugcaccauccuagcaccgacaaggaucagaucagccuguuugcccagccuagcggcagaaucaccguguccacuaagagaagccagcaggccgugauucccaacaucggcagcagaccccggaucagagacauccccagccggaucagcaucuacuggacaaucgugaagcccggcgacauccugcugaucaacagcaccggcaaucugaucgccccucggggcuacuucaagaucagaagcggcaagagcagcaucaugcggagcgacgccccuaucggcaagugcaagagcgagugcaucaccccaaacggcagcauccccaacgacaagcccuuccagaaugugaaccggaucaccuacggcgccuguccuagauacgugaaacagagcacccugaagcuggccaccggcaugagaaacgugccagagaagcagaccagaggcaucuucggagccauugccggcuucaucgagaacggcugggaaggcaugguggacggaugguacggcuucagacaccagaacagcgaaggcagaggacaggccgcugaccugaaaucuacacaggccgccaucgaccagaucaacggcaagcugaaccggcugaucggcaagaccaacgagaaguuccaccagaucgagaaagaguucagcgaggucgagggcagagugcaggaccucgaaaaauacguggaagauaccaagaucgaccugugguccuacaaugccgaacugcugguggcccuggaaaaccagcacaccaucgaccugaccgacagcgagaugaacaagcuguucgaaaagaccaagaagcagcugcgcgagaacgccgaggauaugggcaacggcugcuuuaagaucuaccacaagugcgacaacgccugcaucggcuccauccggaacgagacauacgaccacaacguguacagagaugaggcccugaacaaccgguuccagaucaaaggcguggaacugaaguccggcuacaaggacuggauacuguggaucagcuucgccaugagcugcuuucugcuguguaucgcucugcugggcuucaucaugugggccugccagaaaggcaacauccggugcaacaucugcaucugaugacucgagcugguacugcaugcacgcaaugcuagcugccccuuucccguccuggguaccccgagucucccccgaccucgggucccagguaugcucccaccuccaccugccccacucaccaccucugcuaguuccagacaccucccaagcacgcagcaaugcagcucaaaacgcuuagccuagccacacccccacgggaaacagcagugauuaaccuuuagcaauaaacgaaaguuuaacuaagcuauacuaaccccaggguuggucaauuucgugccagccacacccuggagcuagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcauaugacuaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
表21. B/Washington/02/2019特異性流行性感冒RNA疫苗之一個實施例之序列
SEQ ID NO. 簡述 序列
100 B/Washington/02/2019之RNA編碼流行性感冒HA蛋白之胺基酸序列 MKAIIVLLMVVTSNADRICTGITSSNSPHVVKTATQGEVNVTGVIPLTTTPTKSHFANLKGTETRGKLCPKCLNCTDLDVALGRPKCTGKIPSARVSILHEVRPVTSGCFPIMHDRTKIRQLPNLLRGYEHVRLSTHNVINAEDAPGRPYEIGTSGSCPNITNGNGFFATMAWAVPKNKTATNPLTIEVPYICTEGEDQITVWGFHSDNETQMAKLYGDSKPQKFTSSANGVTTHYVSQIGGFPNQTEDGGLPQSGRIVVDYMVQKSGKTGTITYQRGILLPQKVWCASGRSKVIKGSLPLIGEADCLHEKYGGLNKSKPYYTGEHAKAIGNCPIWVKTPLKLANGTKYRPPAKLLKERGFFGAIAGFLEGGWEGMIAGWHGYTSHGAHGVAVAADLKSTQEAINKITKNLNSLSELEVKNLQRLSGAMDELHNEILELDEKVDDLRADTISSQIELAVLLSNEGIINSEDEHLLALERKLKKMLGPSAVEIGNGCFETKHKCNQTCLDRIAAGTFDAGEFSLPTFDSLNITAASLNDDGLDNHTILLYYSTAASSLAVTLMIAIFVVYMVSRDNVSCSICL
101 編碼B/Washington/02/2019之流行性感冒HA蛋白之DNA序列 atgaaggccatcatcgtgctgctgatggtggtcaccagcaacgccgacagaatctgcaccggcatcaccagcagcaacagccctcacgtggtcaagacagccacacagggcgaagtgaatgtgaccggcgtgatccctctgaccaccacacctaccaagagccacttcgccaacctgaagggcaccgagacaagaggcaagctgtgccccaagtgcctgaactgcaccgatctggatgtggccctgggcagacctaagtgtaccggcaagatccctagcgccagagtgtccatcctgcacgaagtgcggcctgtgaccagcggctgctttcccattatgcacgaccggaccaagatcagacagctgcccaatctgctgcggggctatgaacatgtgcggctgagcacccacaacgtgatcaacgccgaagatgcccctggcagaccatacgagatcggcacatctggctcttgccccaacattaccaacggcaacggcttcttcgccaccatggcttgggccgtgcctaagaacaagaccgccaccaatccactgaccatcgaggtgccctacatctgtaccgaaggcgaggaccagatcaccgtgtggggcttccacagcgacaacgagacacagatggccaaactgtacggcgacagcaagccccagaagttcaccagctctgccaacggcgtgaccacacactacgtgtcccagatcggcggcttccccaatcagacagaagatggcggactgccccagagcggaagaatcgtggtggactacatggtgcagaagtccggcaagaccggcacaatcacataccagcggggaatcctgctgcctcagaaagtttggtgcgccagcggccggtccaaagtgatcaaaggatcactgcctctgatcggcgaggccgattgtctgcacgagaaatacggcggcctgaacaagagcaagccctactacacaggcgagcacgccaaggccatcggcaactgtcctatctgggtcaagacccctctgaagctggccaacggcaccaagtatagacctccagccaagctgctgaaagagcggggcttctttggagctatcgccggctttcttgaaggcggctgggagggaatgattgccggctggcatggctacacatctcatggcgcacatggcgtggcagtggccgctgatctgaagtctacacaagaggccatcaacaagatcaccaagaacctgaacagcctgagcgagctggaagtgaagaacctgcagagactgtccggcgccatggacgagctgcacaacgagatcctggaactggacgagaaggtggacgacctgagagccgataccatctccagccagattgagctggcagtgctgctgtccaacgagggcatcatcaacagcgaggacgagcatctgctggccctggaacggaagctgaagaagatgctgggcccaagcgccgtggaaatcggcaatggctgcttcgagacaaagcacaagtgcaaccagacctgcctggacagaattgccgccggaacatttgacgccggcgagtttagcctgcctaccttcgacagcctgaacatcacagccgccagcctgaatgacgacggcctggacaatcacaccatcctgctgtactactccaccgccgcatcttctctggccgtgacactgatgatcgccatctttgtggtgtacatggtgtccagagacaacgtgtcctgcagcatctgcctgtagtga
102 編碼B/Washington/02/2019之流行性感冒HA蛋白之RNA序列 augaaggccaucaucgugcugcugaugguggucaccagcaacgccgacagaaucugcaccggcaucaccagcagcaacagcccucacguggucaagacagccacacagggcgaagugaaugugaccggcgugaucccucugaccaccacaccuaccaagagccacuucgccaaccugaagggcaccgagacaagaggcaagcugugccccaagugccugaacugcaccgaucuggauguggcccugggcagaccuaaguguaccggcaagaucccuagcgccagaguguccauccugcacgaagugcggccugugaccagcggcugcuuucccauuaugcacgaccggaccaagaucagacagcugcccaaucugcugcggggcuaugaacaugugcggcugagcacccacaacgugaucaacgccgaagaugccccuggcagaccauacgagaucggcacaucuggcucuugccccaacauuaccaacggcaacggcuucuucgccaccauggcuugggccgugccuaagaacaagaccgccaccaauccacugaccaucgaggugcccuacaucuguaccgaaggcgaggaccagaucaccguguggggcuuccacagcgacaacgagacacagauggccaaacuguacggcgacagcaagccccagaaguucaccagcucugccaacggcgugaccacacacuacgugucccagaucggcggcuuccccaaucagacagaagauggcggacugccccagagcggaagaaucgugguggacuacauggugcagaaguccggcaagaccggcacaaucacauaccagcggggaauccugcugccucagaaaguuuggugcgccagcggccgguccaaagugaucaaaggaucacugccucugaucggcgaggccgauugucugcacgagaaauacggcggccugaacaagagcaagcccuacuacacaggcgagcacgccaaggccaucggcaacuguccuaucugggucaagaccccucugaagcuggccaacggcaccaaguauagaccuccagccaagcugcugaaagagcggggcuucuuuggagcuaucgccggcuuucuugaaggcggcugggagggaaugauugccggcuggcauggcuacacaucucauggcgcacauggcguggcaguggccgcugaucugaagucuacacaagaggccaucaacaagaucaccaagaaccugaacagccugagcgagcuggaagugaagaaccugcagagacuguccggcgccauggacgagcugcacaacgagauccuggaacuggacgagaagguggacgaccugagagccgauaccaucuccagccagauugagcuggcagugcugcuguccaacgagggcaucaucaacagcgaggacgagcaucugcuggcccuggaacggaagcugaagaagaugcugggcccaagcgccguggaaaucggcaauggcugcuucgagacaaagcacaagugcaaccagaccugccuggacagaauugccgccggaacauuugacgccggcgaguuuagccugccuaccuucgacagccugaacaucacagccgccagccugaaugacgacggccuggacaaucacaccauccugcuguacuacuccaccgccgcaucuucucuggccgugacacugaugaucgccaucuuugugguguacaugguguccagagacaacguguccugcagcaucugccuguaguga
103 編碼B/Washington/02/2019之HA蛋白之全長DNA構築體序列 agaataaactagtattcttctggtccccacagactcagagagaacccgccaccatgaaggccatcatcgtgctgctgatggtggtcaccagcaacgccgacagaatctgcaccggcatcaccagcagcaacagccctcacgtggtcaagacagccacacagggcgaagtgaatgtgaccggcgtgatccctctgaccaccacacctaccaagagccacttcgccaacctgaagggcaccgagacaagaggcaagctgtgccccaagtgcctgaactgcaccgatctggatgtggccctgggcagacctaagtgtaccggcaagatccctagcgccagagtgtccatcctgcacgaagtgcggcctgtgaccagcggctgctttcccattatgcacgaccggaccaagatcagacagctgcccaatctgctgcggggctatgaacatgtgcggctgagcacccacaacgtgatcaacgccgaagatgcccctggcagaccatacgagatcggcacatctggctcttgccccaacattaccaacggcaacggcttcttcgccaccatggcttgggccgtgcctaagaacaagaccgccaccaatccactgaccatcgaggtgccctacatctgtaccgaaggcgaggaccagatcaccgtgtggggcttccacagcgacaacgagacacagatggccaaactgtacggcgacagcaagccccagaagttcaccagctctgccaacggcgtgaccacacactacgtgtcccagatcggcggcttccccaatcagacagaagatggcggactgccccagagcggaagaatcgtggtggactacatggtgcagaagtccggcaagaccggcacaatcacataccagcggggaatcctgctgcctcagaaagtttggtgcgccagcggccggtccaaagtgatcaaaggatcactgcctctgatcggcgaggccgattgtctgcacgagaaatacggcggcctgaacaagagcaagccctactacacaggcgagcacgccaaggccatcggcaactgtcctatctgggtcaagacccctctgaagctggccaacggcaccaagtatagacctccagccaagctgctgaaagagcggggcttctttggagctatcgccggctttcttgaaggcggctgggagggaatgattgccggctggcatggctacacatctcatggcgcacatggcgtggcagtggccgctgatctgaagtctacacaagaggccatcaacaagatcaccaagaacctgaacagcctgagcgagctggaagtgaagaacctgcagagactgtccggcgccatggacgagctgcacaacgagatcctggaactggacgagaaggtggacgacctgagagccgataccatctccagccagattgagctggcagtgctgctgtccaacgagggcatcatcaacagcgaggacgagcatctgctggccctggaacggaagctgaagaagatgctgggcccaagcgccgtggaaatcggcaatggctgcttcgagacaaagcacaagtgcaaccagacctgcctggacagaattgccgccggaacatttgacgccggcgagtttagcctgcctaccttcgacagcctgaacatcacagccgccagcctgaatgacgacggcctggacaatcacaccatcctgctgtactactccaccgccgcatcttctctggccgtgacactgatgatcgccatctttgtggtgtacatggtgtccagagacaacgtgtcctgcagcatctgcctgtagtgactcgagctggtactgcatgcacgcaatgctagctgcccctttcccgtcctgggtaccccgagtctcccccgacctcgggtcccaggtatgctcccacctccacctgccccactcaccacctctgctagttccagacacctcccaagcacgcagcaatgcagctcaaaacgcttagcctagccacacccccacgggaaacagcagtgattaacctttagcaataaacgaaagtttaactaagctatactaaccccagggttggtcaatttcgtgccagccacaccctggagctagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcatatgactaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
104 編碼B/Washington/02/2019之HA蛋白之全長RNA構築體序列 agaauaaacuaguauucuucugguccccacagacucagagagaacccgccaccaugaaggccaucaucgugcugcugaugguggucaccagcaacgccgacagaaucugcaccggcaucaccagcagcaacagcccucacguggucaagacagccacacagggcgaagugaaugugaccggcgugaucccucugaccaccacaccuaccaagagccacuucgccaaccugaagggcaccgagacaagaggcaagcugugccccaagugccugaacugcaccgaucuggauguggcccugggcagaccuaaguguaccggcaagaucccuagcgccagaguguccauccugcacgaagugcggccugugaccagcggcugcuuucccauuaugcacgaccggaccaagaucagacagcugcccaaucugcugcggggcuaugaacaugugcggcugagcacccacaacgugaucaacgccgaagaugccccuggcagaccauacgagaucggcacaucuggcucuugccccaacauuaccaacggcaacggcuucuucgccaccauggcuugggccgugccuaagaacaagaccgccaccaauccacugaccaucgaggugcccuacaucuguaccgaaggcgaggaccagaucaccguguggggcuuccacagcgacaacgagacacagauggccaaacuguacggcgacagcaagccccagaaguucaccagcucugccaacggcgugaccacacacuacgugucccagaucggcggcuuccccaaucagacagaagauggcggacugccccagagcggaagaaucgugguggacuacauggugcagaaguccggcaagaccggcacaaucacauaccagcggggaauccugcugccucagaaaguuuggugcgccagcggccgguccaaagugaucaaaggaucacugccucugaucggcgaggccgauugucugcacgagaaauacggcggccugaacaagagcaagcccuacuacacaggcgagcacgccaaggccaucggcaacuguccuaucugggucaagaccccucugaagcuggccaacggcaccaaguauagaccuccagccaagcugcugaaagagcggggcuucuuuggagcuaucgccggcuuucuugaaggcggcugggagggaaugauugccggcuggcauggcuacacaucucauggcgcacauggcguggcaguggccgcugaucugaagucuacacaagaggccaucaacaagaucaccaagaaccugaacagccugagcgagcuggaagugaagaaccugcagagacuguccggcgccauggacgagcugcacaacgagauccuggaacuggacgagaagguggacgaccugagagccgauaccaucuccagccagauugagcuggcagugcugcuguccaacgagggcaucaucaacagcgaggacgagcaucugcuggcccuggaacggaagcugaagaagaugcugggcccaagcgccguggaaaucggcaauggcugcuucgagacaaagcacaagugcaaccagaccugccuggacagaauugccgccggaacauuugacgccggcgaguuuagccugccuaccuucgacagccugaacaucacagccgccagccugaaugacgacggccuggacaaucacaccauccugcuguacuacuccaccgccgcaucuucucuggccgugacacugaugaucgccaucuuugugguguacaugguguccagagacaacguguccugcagcaucugccuguagugacucgagcugguacugcaugcacgcaaugcuagcugccccuuucccguccuggguaccccgagucucccccgaccucgggucccagguaugcucccaccuccaccugccccacucaccaccucugcuaguuccagacaccucccaagcacgcagcaaugcagcucaaaacgcuuagccuagccacacccccacgggaaacagcagugauuaaccuuuagcaauaaacgaaaguuuaacuaagcuauacuaaccccaggguuggucaauuucgugccagccacacccuggagcuagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcauaugacuaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
表22. B/Phuket/3073/2013特異性流行性感冒RNA疫苗之一個實施例之序列
SEQ ID NO. 簡述 序列
105 B/Phuket/3073/2013之RNA編碼流行性感冒HA蛋白之胺基酸序列 MKAIIVLLMVVTSNADRICTGITSSNSPHVVKTATQGEVNVTGVIPLTTTPTKSYFANLKGTRTRGKLCPDCLNCTDLDVALGRPMCVGTTPSAKASILHEVRPVTSGCFPIMHDRTKIRQLPNLLRGYEKIRLSTQNVIDAEKAPGGPYRLGTSGSCPNATSKIGFFATMAWAVPKDNYKNATNPLTVEVPYICTEGEDQITVWGFHSDNKTQMKSLYGDSNPQKFTSSANGVTTHYVSQIGDFPDQTEDGGLPQSGRIVVDYMMQKPGKTGTIVYQRGVLLPQKVWCASGRSKVIKGSLPLIGEADCLHEEYGGLNKSKPYYTGKHAKAIGNCPIWVKTPLKLANGTKYRPPAKLLKERGFFGAIAGFLEGGWEGMIAGWHGYTSHGAHGVAVAADLKSTQEAINKITKNLNSLSELEVKNLQRLSGAMDELHNEILELDEKVDDLRADTISSQIELAVLLSNEGIINSEDEHLLALERKLKKMLGPSAVDIGNGCFETKHKCNQTCLDRIAAGTFNAGEFSLPTFDSLNITAASLNDDGLDNHTILLYYSTAASSLAVTLMLAIFIVYMVSRDNVSCSICL
106 編碼B/Phuket/3073/2013之流行性感冒HA蛋白之DNA序列 atgaaggccatcatcgtgctgctgatggtggtcaccagcaacgccgacagaatctgcaccggcatcaccagcagcaacagccctcacgtggtcaagacagccacacagggcgaagtgaatgtgaccggcgtgatccctctgaccaccacacctaccaagagctacttcgccaacctgaagggcaccagaaccagaggcaagctgtgccccgattgcctgaactgcaccgatctggatgtggccctgggcagacctatgtgcgtgggaacaacacctagcgccaaggccagcatcctgcatgaagtgcggcctgtgaccagcggctgcttccctattatgcacgaccggaccaagatcagacagctgcccaatctgctgcggggctacgagaagatcaggctgagcacccagaacgtgatcgacgccgaaaaagctcctggcggcccttacagactgggcacatctggctcttgccccaacgctacaagcaagatcggcttcttcgccaccatggcctgggccgtgcctaaggacaactacaagaacgccaccaatcctctgaccgtggaagtgccctacatctgtaccgaaggcgaggaccagatcaccgtgtggggcttccacagcgacaacaagacccagatgaagtccctgtacggcgacagcaaccctcagaagtttaccagcagcgccaacggcgtgaccacacactatgtgtcccagatcggcgacttccccgaccagacagaagatggcggactgcctcagagcggcagaatcgtggtggactacatgatgcagaagcccggcaagaccggcaccatcgtgtatcagagaggcgtcctgctgccacagaaagtttggtgcgccagcggccggtccaaagtgatcaaaggatcactgcctctgatcggcgaggccgactgtctgcacgaagaatatggcggcctgaacaagagcaagccctactacacaggcaagcacgccaaagccatcggcaactgccctatctgggtcaagacccctctgaagctggccaacggcaccaagtatagacctccagccaagctgctgaaagagcggggcttctttggagctatcgccggctttcttgaaggcggctgggagggaatgattgccggctggcatggctacacatctcatggcgcacatggcgtggcagtggccgctgatctgaagtctacacaagaggccatcaacaagatcaccaagaacctgaacagcctgagcgagctggaagtgaagaacctgcagagactgtccggcgccatggacgagctgcacaacgagatcctggaactggacgagaaggtggacgacctgagagccgataccatctccagccagattgagctggcagtgctgctgtccaacgagggcatcatcaacagcgaggacgagcatctgctggccctggaacggaagctgaagaagatgctgggacccagcgccgtggatatcggcaatggctgcttcgagacaaagcacaagtgcaaccagacctgcctggacagaattgccgccggaacctttaacgccggcgagtttagcctgcctaccttcgacagcctgaacatcacagccgccagcctgaatgacgacggcctggacaatcacaccatcctgctgtactactccaccgccgcatcttctctggccgtgacactgatgctggctatcttcatcgtgtacatggtgtccagagacaacgtgtcctgcagcatctgcctgtgatga
107 編碼B/Phuket/3073/2013之流行性感冒HA蛋白之RNA序列 augaaggccaucaucgugcugcugaugguggucaccagcaacgccgacagaaucugcaccggcaucaccagcagcaacagcccucacguggucaagacagccacacagggcgaagugaaugugaccggcgugaucccucugaccaccacaccuaccaagagcuacuucgccaaccugaagggcaccagaaccagaggcaagcugugccccgauugccugaacugcaccgaucuggauguggcccugggcagaccuaugugcgugggaacaacaccuagcgccaaggccagcauccugcaugaagugcggccugugaccagcggcugcuucccuauuaugcacgaccggaccaagaucagacagcugcccaaucugcugcggggcuacgagaagaucaggcugagcacccagaacgugaucgacgccgaaaaagcuccuggcggcccuuacagacugggcacaucuggcucuugccccaacgcuacaagcaagaucggcuucuucgccaccauggccugggccgugccuaaggacaacuacaagaacgccaccaauccucugaccguggaagugcccuacaucuguaccgaaggcgaggaccagaucaccguguggggcuuccacagcgacaacaagacccagaugaagucccuguacggcgacagcaacccucagaaguuuaccagcagcgccaacggcgugaccacacacuaugugucccagaucggcgacuuccccgaccagacagaagauggcggacugccucagagcggcagaaucgugguggacuacaugaugcagaagcccggcaagaccggcaccaucguguaucagagaggcguccugcugccacagaaaguuuggugcgccagcggccgguccaaagugaucaaaggaucacugccucugaucggcgaggccgacugucugcacgaagaauauggcggccugaacaagagcaagcccuacuacacaggcaagcacgccaaagccaucggcaacugcccuaucugggucaagaccccucugaagcuggccaacggcaccaaguauagaccuccagccaagcugcugaaagagcggggcuucuuuggagcuaucgccggcuuucuugaaggcggcugggagggaaugauugccggcuggcauggcuacacaucucauggcgcacauggcguggcaguggccgcugaucugaagucuacacaagaggccaucaacaagaucaccaagaaccugaacagccugagcgagcuggaagugaagaaccugcagagacuguccggcgccauggacgagcugcacaacgagauccuggaacuggacgagaagguggacgaccugagagccgauaccaucuccagccagauugagcuggcagugcugcuguccaacgagggcaucaucaacagcgaggacgagcaucugcuggcccuggaacggaagcugaagaagaugcugggacccagcgccguggauaucggcaauggcugcuucgagacaaagcacaagugcaaccagaccugccuggacagaauugccgccggaaccuuuaacgccggcgaguuuagccugccuaccuucgacagccugaacaucacagccgccagccugaaugacgacggccuggacaaucacaccauccugcuguacuacuccaccgccgcaucuucucuggccgugacacugaugcuggcuaucuucaucguguacaugguguccagagacaacguguccugcagcaucugccugugauga
108 編碼B/Phuket/3073/2013之HA蛋白之全長DNA構築體序列 agaataaactagtattcttctggtccccacagactcagagagaacccgccaccatgaaggccatcatcgtgctgctgatggtggtcaccagcaacgccgacagaatctgcaccggcatcaccagcagcaacagccctcacgtggtcaagacagccacacagggcgaagtgaatgtgaccggcgtgatccctctgaccaccacacctaccaagagctacttcgccaacctgaagggcaccagaaccagaggcaagctgtgccccgattgcctgaactgcaccgatctggatgtggccctgggcagacctatgtgcgtgggaacaacacctagcgccaaggccagcatcctgcatgaagtgcggcctgtgaccagcggctgcttccctattatgcacgaccggaccaagatcagacagctgcccaatctgctgcggggctacgagaagatcaggctgagcacccagaacgtgatcgacgccgaaaaagctcctggcggcccttacagactgggcacatctggctcttgccccaacgctacaagcaagatcggcttcttcgccaccatggcctgggccgtgcctaaggacaactacaagaacgccaccaatcctctgaccgtggaagtgccctacatctgtaccgaaggcgaggaccagatcaccgtgtggggcttccacagcgacaacaagacccagatgaagtccctgtacggcgacagcaaccctcagaagtttaccagcagcgccaacggcgtgaccacacactatgtgtcccagatcggcgacttccccgaccagacagaagatggcggactgcctcagagcggcagaatcgtggtggactacatgatgcagaagcccggcaagaccggcaccatcgtgtatcagagaggcgtcctgctgccacagaaagtttggtgcgccagcggccggtccaaagtgatcaaaggatcactgcctctgatcggcgaggccgactgtctgcacgaagaatatggcggcctgaacaagagcaagccctactacacaggcaagcacgccaaagccatcggcaactgccctatctgggtcaagacccctctgaagctggccaacggcaccaagtatagacctccagccaagctgctgaaagagcggggcttctttggagctatcgccggctttcttgaaggcggctgggagggaatgattgccggctggcatggctacacatctcatggcgcacatggcgtggcagtggccgctgatctgaagtctacacaagaggccatcaacaagatcaccaagaacctgaacagcctgagcgagctggaagtgaagaacctgcagagactgtccggcgccatggacgagctgcacaacgagatcctggaactggacgagaaggtggacgacctgagagccgataccatctccagccagattgagctggcagtgctgctgtccaacgagggcatcatcaacagcgaggacgagcatctgctggccctggaacggaagctgaagaagatgctgggacccagcgccgtggatatcggcaatggctgcttcgagacaaagcacaagtgcaaccagacctgcctggacagaattgccgccggaacctttaacgccggcgagtttagcctgcctaccttcgacagcctgaacatcacagccgccagcctgaatgacgacggcctggacaatcacaccatcctgctgtactactccaccgccgcatcttctctggccgtgacactgatgctggctatcttcatcgtgtacatggtgtccagagacaacgtgtcctgcagcatctgcctgtgatgactcgagctggtactgcatgcacgcaatgctagctgcccctttcccgtcctgggtaccccgagtctcccccgacctcgggtcccaggtatgctcccacctccacctgccccactcaccacctctgctagttccagacacctcccaagcacgcagcaatgcagctcaaaacgcttagcctagccacacccccacgggaaacagcagtgattaacctttagcaataaacgaaagtttaactaagctatactaaccccagggttggtcaatttcgtgccagccacaccctggagctagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcatatgactaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
109 編碼B/Phuket/3073/2013之HA蛋白之全長RNA構築體序列 agaauaaacuaguauucuucugguccccacagacucagagagaacccgccaccaugaaggccaucaucgugcugcugaugguggucaccagcaacgccgacagaaucugcaccggcaucaccagcagcaacagcccucacguggucaagacagccacacagggcgaagugaaugugaccggcgugaucccucugaccaccacaccuaccaagagcuacuucgccaaccugaagggcaccagaaccagaggcaagcugugccccgauugccugaacugcaccgaucuggauguggcccugggcagaccuaugugcgugggaacaacaccuagcgccaaggccagcauccugcaugaagugcggccugugaccagcggcugcuucccuauuaugcacgaccggaccaagaucagacagcugcccaaucugcugcggggcuacgagaagaucaggcugagcacccagaacgugaucgacgccgaaaaagcuccuggcggcccuuacagacugggcacaucuggcucuugccccaacgcuacaagcaagaucggcuucuucgccaccauggccugggccgugccuaaggacaacuacaagaacgccaccaauccucugaccguggaagugcccuacaucuguaccgaaggcgaggaccagaucaccguguggggcuuccacagcgacaacaagacccagaugaagucccuguacggcgacagcaacccucagaaguuuaccagcagcgccaacggcgugaccacacacuaugugucccagaucggcgacuuccccgaccagacagaagauggcggacugccucagagcggcagaaucgugguggacuacaugaugcagaagcccggcaagaccggcaccaucguguaucagagaggcguccugcugccacagaaaguuuggugcgccagcggccgguccaaagugaucaaaggaucacugccucugaucggcgaggccgacugucugcacgaagaauauggcggccugaacaagagcaagcccuacuacacaggcaagcacgccaaagccaucggcaacugcccuaucugggucaagaccccucugaagcuggccaacggcaccaaguauagaccuccagccaagcugcugaaagagcggggcuucuuuggagcuaucgccggcuuucuugaaggcggcugggagggaaugauugccggcuggcauggcuacacaucucauggcgcacauggcguggcaguggccgcugaucugaagucuacacaagaggccaucaacaagaucaccaagaaccugaacagccugagcgagcuggaagugaagaaccugcagagacuguccggcgccauggacgagcugcacaacgagauccuggaacuggacgagaagguggacgaccugagagccgauaccaucuccagccagauugagcuggcagugcugcuguccaacgagggcaucaucaacagcgaggacgagcaucugcuggcccuggaacggaagcugaagaagaugcugggacccagcgccguggauaucggcaauggcugcuucgagacaaagcacaagugcaaccagaccugccuggacagaauugccgccggaaccuuuaacgccggcgaguuuagccugccuaccuucgacagccugaacaucacagccgccagccugaaugacgacggccuggacaaucacaccauccugcuguacuacuccaccgccgcaucuucucuggccgugacacugaugcuggcuaucuucaucguguacaugguguccagagacaacguguccugcagcaucugccugugaugacucgagcugguacugcaugcacgcaaugcuagcugccccuuucccguccuggguaccccgagucucccccgaccucgggucccagguaugcucccaccuccaccugccccacucaccaccucugcuaguuccagacaccucccaagcacgcagcaaugcagcucaaaacgcuuagccuagccacacccccacgggaaacagcagugauuaaccuuuagcaauaaacgaaaguuuaacuaagcuauacuaaccccaggguuggucaauuucgugccagccacacccuggagcuagcaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagcauaugacuaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa
表8及表10至表16D顯示由本文所闡述來自不同變異體之RNA編碼的SARS-CoV-2 S蛋白之胺基酸序列，其在對應於SEQ ID NO: 1之K986P及V987P之位置處具有2個脯胺酸取代。在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼如本文所闡述之SARS-CoV-2 S蛋白(例如，如表8、表10至表16D中所闡述)，其在對應於SEQ ID NO: 1之K986P及V987P之位置處不具有該2個脯胺酸取代。在一些實施例中，本文所闡述之RNA編碼SARS-CoV-2 S蛋白，該蛋白包含本文所闡述變異體(例如如表2中所闡述)之一或多個特徵性突變，且進一步包含至少四個(包括例如至少五個、至少六個或更多個)脯胺酸突變。在一些實施例中，至少4個此等脯胺酸突變包括在對應於SEQ ID NO: 1之殘基817、892、899及942之位置處的突變，例如如WO 2021243122 A2中所闡述，其全部內容係以引用方式併入本文中。在一些實施例中，此一在對應於SEQ ID NO: 1之殘基817、892、899及942之位置處包含脯胺酸取代之SARS-CoV-2 S蛋白可進一步在對應於SEQ ID NO: 1之殘基986及987之位置處包含脯胺酸取代。
在一些實施例中，編碼本文所闡述抗原之RNA (例如如表8及表10-表22中所示)可為未經修飾之RNA。在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如如表8及表10-表22中所示)可為經修飾之RNA。舉例而言，在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如如表8及表10-表22中所示)可包含經修飾之尿苷(例如，如本文所闡述)代替尿苷。在一些實施例中，本文所闡述之RNA (例如如表8及表10-表22中所示)可為自我擴增RNA，例如使用如本文所闡述之構築體。 自我擴增RNA (saRNA)
自我擴增RNA (saRNA)原料藥之活性成分為單股RNA，其可在進入細胞時自我擴增，且所編碼之抗原可在之後經轉譯。與較佳編碼單一蛋白質之mRNA相反，saRNA之編碼區含有兩個開放閱讀框(ORF)。5’-ORF編碼RNA依賴性RNA聚合酶，諸如委內瑞拉馬腦炎病毒(VEEV) RNA依賴性RNA聚合酶(複製酶)。複製酶ORF之3’後為亞基因體啟動子及編碼抗原之第二ORF。此外，saRNA UTR含有自我擴增所需之5’及3’保守序列元件(CSE)。在一些實施例中，saRNA含有針對作為uRNA之RNA之最大功效而最佳化之通用結構元件(5'-帽、5'-UTR、3'-UTR、聚(A)尾)。在一些實施例中，saRNA較佳含有尿苷。對於saRNA，較佳之5’帽結構為β-S-ARCA(D1) (m 2 7,2'-OGppSpG)。
saRNA之細胞質遞送啟動阿爾法病毒樣之生命週期。然而，saRNA不編碼基因體包裝或細胞進入所需之阿爾法病毒結構蛋白；因此產生具有複製能力之病毒顆粒係極不可能的或不可能的。複製不涉及任何產生DNA之中間步驟。因此，saRNA之使用/攝取不會在靶細胞內造成基因體整合或其他永久性遺傳修飾之風險。此外，saRNA本身經由識別dsRNA中間體來有效活化先天性免疫反應，從而防止其持續複製。
在一些實施例中，本文所闡述之saRNA編碼單一抗原(例如，一種HA多肽、一種NA多肽或一種SARS-CoV-2 S多肽)。在一些實施例中，根據本揭示案所用之saRNA編碼兩種或更多種抗原(例如兩種或更多種HA多肽、兩種或更多種NA多肽、兩種或更多種SARS-CoV-2 S多肽、一或多種HA多肽及一或多種NA多肽、一或多種HA多肽及一或多種SARS-CoV-2 S多肽、或一或多種NA多肽及一或多種SARS-CoV-2 S多肽)。在一些實施例中，saRNA編碼兩種HA多肽，該等多肽各自來自不同的流行性感冒毒株。在一些實施例中，saRNA編碼兩種NA多肽，該等多肽各自來自不同的流行性感冒毒株。在一些實施例中，saRNA編碼兩種SARS-CoV-2 S多肽，該等多肽各自來自不同的變異體。在一些實施例中，saRNA編碼HA多肽及NA多肽，其各自來自相同的流行性感冒毒株(例如，如2022年12月12日公佈之「Pfizer Near-Term Launches + High-Value Pipeline Day」；chrome-extension://efaidnbmnnnibpcajpcglclefindmkaj/https://s28.q4cdn.com/781576035/files/doc_presentation/2022/12/B/Pfizer-Near-Term-Launches-High-Value-Pipeline-Day-Presentation_6pm_v2.pdf中所闡述)。
在一些實施例中，編碼抗原性多肽之核苷酸序列位於saRNA複製酶基因下游。在一些實施例中，saRNA包含編碼HA抗原之核苷酸序列及編碼NA抗原之核苷酸序列，其中該編碼HA抗原之核苷酸序列位於該編碼NA抗原之核苷酸序列上游。
在一些實施例中，與其他RNA平臺相比，saRNA平臺可提供某些優點。舉例而言，在一些實施例中，saRNA可提供延長之抗原表現持續時間、更低之劑量水準、改良之耐受性及/或增加之抗原容量，同時維持強勁之抗體及T細胞反應。
該平臺之不同實施例如下： RBS004.1 (SEQ ID NO: 24; SEQ ID NO: 7)結構                       β-S-ARCA(D1)-複製酶-S1S2-PP-FI-A30L70 所編碼抗原            SARS-CoV-2之病毒刺突蛋白(S蛋白)(S1S2全長蛋白，序列變異體) RBS004.2 (SEQ ID NO: 25; SEQ ID NO: 7)結構                     β-S-ARCA(D1)-複製酶-S1S2-PP-FI-A30L70 所編碼抗原            SARS-CoV-2之病毒刺突蛋白(S蛋白)(S1S2全長蛋白，序列變異體) BNT162c1; RBS004.3 (SEQ ID NO: 26; SEQ ID NO: 5)結構                       β-S-ARCA(D1)-複製酶-RBD-GS-纖維蛋白-FI-A30L70 所編碼抗原            SARS-CoV-2之病毒刺突蛋白(S蛋白)(部分序列，S1S2蛋白之受體結合結構域(RBD)) RBS004.4 (SEQ ID NO: 27; SEQ ID NO: 28)結構                     β-S-ARCA(D1)-複製酶-RBD-GS-纖維蛋白-TM-FI-A30L70 所編碼抗原          SARS-CoV-2之病毒刺突蛋白(S蛋白)(部分序列，S1S2蛋白之受體結合結構域(RBD))
在一些實施例中，本文所闡述之RNA包含選自由以下組成之群的核苷酸序列：SEQ ID NO: 15、16、17、19、20、21、24、25、26、27、30及32。本文所闡述之尤佳疫苗RNA包含選自由SEQ ID NO: 15、17、19、21、25、26、30及32組成之群(諸如選自由SEQ ID NO: 17、19、21、26、30及32組成之群)的核苷酸序列。
在一些實施例中，本文所闡述之一或多種RNA可部分或完全囊封於奈米顆粒中。在一些實施例中，囊封一或多種RNA之奈米顆粒包含脂質奈米顆粒、多聚複合物(PLX)、脂質化多聚複合物(LPLX)、脂質體或多糖奈米顆粒。在一些實施例中，本文所闡述之一或多種RNA調配於脂質奈米顆粒(LNP)中。在一個實施例中，LNP包含陽離子脂質、中性脂質、類固醇、聚合物結合之脂質；及一或多種RNA。在一個實施例中，陽離子脂質為ALC-0315，中性脂質為DSPC，類固醇為膽固醇，且聚合物結合之脂質為ALC-0159。較佳之投與模式為肌內投與，更佳係在水性低溫保護劑緩衝液中進行肌內投與。藥物產品較佳為不含防腐劑之無菌RNA分散體，其調配於供肌內投與之水性低溫保護劑緩衝液中之脂質奈米顆粒(LNP)中。
在一些實施例中，藥物產品較佳以如下所示比例或濃度包含如下所示之組分：
組分 功能 比例(mol%)
ALC-0315 [1] 功能性脂質 47.5
ALC-0159 [2] 功能性脂質 1.8
DSPC [3] 結構脂質 10.0
合成膽固醇 結構脂質 40.7
組分 功能 濃度(mg/mL)
原料藥 活性 0.5
ALC-0315 [1] 功能性脂質 7.17
ALC-0159 [2] 功能性脂質 0.89
DSPC [3] 結構脂質 1.56
合成膽固醇 結構脂質 3.1
蔗糖 低溫保護劑 102.69
NaCl 緩衝劑 6.0
KCl 緩衝劑 0.15
Na 2HPO 4 緩衝劑 1.08
KH 2PO 4 緩衝劑 0.18
注射用水 溶劑/媒劑 q.s.
組分 功能 濃度(mg/mL)
原料藥 活性 1.0
ALC-0315 [1] 功能性脂質 13.56
ALC-0159 [2] 功能性脂質 1.77
DSPC [3] 結構脂質 3.11
合成膽固醇 結構脂質 6.20
蔗糖 低溫保護劑 102.69
NaCl 緩衝劑 6.0
KCl 緩衝劑 0.15
Na2HPO4 緩衝劑 1.08
KH2PO4 緩衝劑 0.15
注射用水 溶劑/媒劑 q.s.
[1] ALC-0315 = ((4-羥基丁基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯) / 2-己基癸酸6-[N-6-(2-己基癸醯基氧基)己基-N-(4-羥基丁基)胺基]己基酯 [2] ALC-0159 = 2-[(聚乙二醇)-2000]- N,N-雙十四基乙醯胺/ 2-[2-(ω-甲氧基(聚乙烯醇2000)乙氧基]-N,N-雙十四基乙醯胺 [3] DSPC = 1,2-二硬脂醯基- sn-甘油-3-磷酸膽鹼 q.s.=適量補足(儘可能足夠) ALC-0315 ： ALC-0159 ： DSPC ： 膽固醇：
在一些實施例中，本文所揭示之顆粒調配於包含10 mM Tris及10%蔗糖且視情況pH為約7.4之溶液中。
在一些實施例中，本文所揭示之顆粒調配於包含約103 mg/ml蔗糖、約0.20 mg/ml胺丁三醇(Tris鹼)及約1.32 mg/ml Tris之溶液中。
在一些實施例中，組合物包含：(a)約0.1 mg/mL之RNA，其包含編碼多肽之開放閱讀框，該多肽包含SARS-CoV-2蛋白或其免疫原性片段或變異體，(b)約1.43 mg/ml ALC-0315，(c)約0.18 mg/ml ALC-0159，(d)約0.31 mg/ml DSPC，(e)約0.62 mg/ml膽固醇，(f)約103 mg/ml蔗糖，(g)約0.20 mg/ml胺丁三醇(Tris鹼)，(h)約1.32 mg/ml參(羥基甲基)胺基甲烷鹽酸鹽(Tris HCl)，及(i)適量補足之水。
在一個實施例中，mRNA與總脂質之比率(N/P)介於6.0與6.5之間，諸如為約6.0或約6.3。 含核酸顆粒
可將本文所闡述之核酸(諸如編碼疫苗抗原之RNA)調配成顆粒來投與。
在本揭示案之上下文中，術語「顆粒」係指由分子或分子複合物形成的結構化實體。在一個實施例中，術語「顆粒」係指微米或奈米尺寸之結構，諸如分散在介質中之微米或奈米尺寸之緻密結構。在一個實施例中，顆粒為含核酸顆粒，諸如包含DNA、RNA或其混合物之顆粒。
帶正電荷之分子(諸如聚合物及脂質)與帶負電荷之核酸之間的靜電相互作用參與顆粒形成。此導致核酸顆粒之複合體生成及自發形成。在一個實施例中，核酸顆粒為奈米顆粒。
如在本揭示案中所使用，「奈米顆粒」係指具有適於非經腸投與之平均直徑之顆粒。在一些實施例中，囊封本文所闡述RNA之奈米顆粒之平均直徑可為約50-150 nm。
「核酸顆粒」可用於將核酸遞送至所關注之靶位點(例如細胞、組織、器官及諸如此類)。核酸顆粒可由至少一種陽離子脂質或陽離子可電離脂質或脂質樣物質、至少一種陽離子聚合物(諸如魚精蛋白)或其混合物及核酸形成。核酸顆粒包括基於脂質奈米顆粒(LNP)及基於脂質複合物(LPX)之調配物。在一些實施例中，例示性奈米顆粒包括脂質奈米顆粒、多聚複合物(PLX)、脂質化多聚複合物(LPLX)、脂質體或多糖奈米顆粒。
在一些實施例中，LNP包含一或多種陽離子可電離脂質；一或多種中性脂質(例如在一些實施例中為固醇，諸如膽固醇；及/或磷脂)，以及一或多種聚合物結合之脂質。在一些實施例中，調配物包含ALC-0315 (4-羥基丁基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)、ALC-0159 (2-[(聚乙二醇)-2000]-N,N-雙十四基乙醯胺)、DSPC (1,2-二硬脂醯基-sn-甘油-3-磷酸膽鹼)、膽固醇、蔗糖、胺丁三醇(Tris)、鹽酸胺丁三醇及水。
本文所闡述之RNA顆粒包括奈米顆粒。在一些實施例中，例示性奈米顆粒包括脂質奈米顆粒、脂質複合物、多聚複合物(PLX)、脂質化多聚複合物(LPLX)、脂質體或多糖奈米顆粒。
多聚複合物(PLX)、多糖奈米顆粒及脂質體均為熟習此項技術者熟知之遞送技術。分別參見例如Lächelt, Ulrich及Ernst Wagner. 「Nucleic acid therapeutics using polyplexes: a journey of 50 years (and beyond)」Chemical reviews 115.19 (2015): 11043-11078；Plucinski, Alexander, Zan Lyu及Bernhard VKJ Schmidt，「Polysaccharide nanoparticles: from fabrication to applications.」Journal of Materials Chemistry B (2021)；以及Tenchov, Rumiana等人，「Lipid Nanoparticles- From Liposomes to mRNA Vaccine Delivery, a Landscape of Research Diversity and Advancement」, ACS nano 15.11 (2021): 16982-17015，該等文獻各自之內容係以全文引用的方式併入本文中。
在一些實施例中，醫藥RNA製劑中之RNA濃度為約0.1 mg/ml。在一些實施例中，醫藥RNA製劑中之RNA濃度為約30 μg/ml至約100 μg/ml。在一些實施例中，醫藥RNA製劑中之RNA濃度為約50 μg/ml至約100 μg/ml。
不期望受任何理論束縛，據信，陽離子脂質或陽離子可電離脂質或脂質樣物質及/或陽離子聚合物與核酸組合在一起形成聚集體，且該聚集體產生膠體穩定顆粒。
在一個實施例中，本文所闡述之顆粒進一步包含除陽離子脂質或陽離子可電離脂質或脂質樣物質外之至少一種脂質或脂質樣物質、除陽離子聚合物外之至少一種聚合物或其混合物。
在一些實施例中，核酸顆粒包含一種以上類型之核酸分子，其中核酸分子之分子參數(例如在莫耳質量或基本結構元素(諸如分子架構)、加帽、編碼區或其他特徵方面)可彼此相似或不同。
在一個實施例中，本文所闡述之核酸顆粒之平均直徑範圍可為約30 nm至約1000 nm、約50 nm至約800 nm、約70 nm至約600 nm、約90 nm至約400 nm或約100 nm至約300 nm。
本文所闡述之核酸顆粒可展現出小於約0.5、小於約0.4、小於約0.3、或約0.2或更小之多分散性指數。舉例而言，核酸顆粒可展現出在約0.1至約0.3或約0.2至約0.3範圍內之多分散性指數。
關於RNA脂質顆粒，N/P比率給出脂質中氮基團與RNA中磷酸基團數量之比率。其與電荷比相關，此乃因氮原子(取決於pH)通常帶正電荷，而磷酸基團帶負電荷。電荷平衡時之N/P比率取決於pH。脂質調配物通常以大於4至12之N/P比率形成，此乃因認為帶正電荷之奈米顆粒有利於轉染。在此種情況下，認為RNA完全結合至奈米顆粒。
本文所闡述之核酸顆粒可使用多種方法來製備，該等方法可涉及自至少一種陽離子脂質或陽離子可電離脂質或脂質樣物質及/或至少一種陽離子聚合物獲得膠體，並將該膠體與核酸混合以獲得核酸顆粒。
如本文所用之術語「膠體」係指一種類型之均質混合物，其中分散顆粒不會沈澱出。混合物中之不溶性顆粒係微觀的，其中顆粒大小介於1奈米與1000奈米之間。該混合物可稱為膠體或膠體懸浮液。有時術語「膠體」僅指混合物中之顆粒，而不為整個懸浮液。
對於包含至少一種陽離子脂質或陽離子可電離脂質或脂質樣物質及/或至少一種陽離子聚合物之膠體之製備，習用用於製備脂質體囊泡並作適當調整之方法在本文中係適用的。最常用之製備脂質體囊泡之方法共有以下基本階段：(i)脂質在有機溶劑中之溶出，(ii)所得溶液之乾燥，以及(iii)乾燥脂質之水合(使用各種水性介質)。
在膜水合方法中，首先將脂質溶解在適宜有機溶劑中，並乾燥以在燒瓶底部產生薄膜。使用適當水性介質將所獲得之脂質膜水合以產生脂質體分散體。此外，可包括額外之縮小尺寸步驟。
反相蒸發係用於製備脂質體囊泡之膜水合之替代方法，其涉及在水相與含有脂質之有機相之間形成油包水乳液。需要對該混合物進行短暫音波處理以使系統均質化。減壓除去有機相，產生乳狀凝膠，其隨後變成脂質體懸浮液。
術語「乙醇注射技術」係指一種過程，其中經由針將包含脂質之乙醇溶液快速注射至水溶液中。此種作用將脂質分散在整個溶液中，且促進脂質結構形成，例如脂質囊泡形成，諸如脂質體形成。通常，本文所闡述之RNA脂質複合物顆粒可藉由將RNA添加至膠體脂質體分散體中獲得。在一個實施例中，使用乙醇注射技術，如下形成此種膠體脂質體分散體：在攪拌下，將包含脂質(諸如陽離子脂質及額外脂質)之乙醇溶液注射至水溶液中。在一個實施例中，本文所闡述之RNA脂質複合物顆粒無需擠出步驟即可獲得。
術語「擠出(extruding)」或「擠出(extrusion)」係指產生具有固定橫截面輪廓之顆粒。特定而言，其係指顆粒之尺寸減小，藉此迫使顆粒穿過具有限定孔之過濾器。
根據本揭示案，亦可使用具有無有機溶劑特徵之其他方法來製備膠體。
LNP通常包含四種組分：可電離之陽離子脂質、中性脂質(諸如磷脂)、類固醇(諸如膽固醇)及聚合物結合之脂質(諸如聚乙二醇(PEG)-脂質)。每種組分負責有效載荷之保護，且使得能進行有效細胞內遞送。LNP可藉由將溶解在乙醇中之脂質與核酸在水性緩衝液中快速混合來製備。
術語「平均直徑」係指如藉由動態雷射光散射(DLS)所量測的顆粒之平均流體動力學直徑，其中使用所謂的累積量演算法進行數據分析，其結果提供所謂的具有長度維度之Z 平均及無量綱之多分散性指數(PI)( Koppel, D., J. Chem. Phys. 57, 1972，第4814-4820頁，ISO 13321)。此處，顆粒之「平均直徑」、「直徑」或「大小」與該Z 平均之值同義使用。
「多分散性指數」較佳基於動態光散射量測，藉由「平均直徑」之定義中所提及的所謂累積量分析來計算。在某些先決條件下，其可作為奈米顆粒之裝配體之大小分佈之量度。
不同類型之含核酸顆粒先前已闡述為適於以顆粒形式遞送核酸(例如Kaczmarek, J. C.等人，2017, Genome Medicine 9, 60)。對於非病毒核酸遞送媒劑，核酸之奈米顆粒囊封在物理上保護核酸免於降解，且取決於特定的化學性質，可有助於細胞攝取及內體逃逸。
本揭示案闡述包含核酸、至少一種陽離子脂質或陽離子可電離脂質或脂質樣物質及/或至少一種陽離子聚合物之顆粒，該等顆粒與核酸締合以形成核酸顆粒及包含此等顆粒之組合物。核酸顆粒可包含藉由與顆粒之非共價相互作用以不同形式複合之核酸。本文所闡述之顆粒不為病毒顆粒、特定而言傳染性病毒顆粒，亦即其不能病毒感染細胞。
適宜陽離子脂質或陽離子可電離脂質或脂質樣物質及陽離子聚合物係形成核酸顆粒之彼等物質，且包括在術語「顆粒形成組分」或「顆粒形成劑」中。術語「顆粒形成組分」或「顆粒形成劑」係指與核酸締合以形成核酸顆粒之任何組分。此等組分包括可為核酸顆粒之一部分之任何組分。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如脂質奈米顆粒(LNP))包含兩種或更多種RNA分子，每種RNA分子包含不同的核酸序列。在一些實施例中，含核酸顆粒包含兩種或更多種RNA分子，每種RNA分子編碼不同的免疫原性多肽或其免疫原性片段。在一些實施例中，存在於含核酸顆粒中之兩種或更多種RNA分子包含：第一RNA分子，其編碼來自冠狀病毒之免疫原性多肽或其免疫原性片段，及第二RNA分子，其編碼來自傳染性疾病病原體(例如病毒、細菌、寄生蟲等)之免疫原性多肽或其免疫原性片段。舉例而言，在一些實施例中，存在於含核酸顆粒中之兩種或更多種RNA分子包含：第一RNA分子，其編碼來自冠狀病毒(例如在一些實施例中，SARS-CoV-2武漢毒株或其變異體，例如具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2)之免疫原性多肽或其免疫原性片段，及第二RNA分子，其編碼來自流行性感冒病毒之免疫原性多肽或其免疫原性片段。在一些實施例中，存在於含核酸顆粒中之兩種或更多種RNA分子包含：第一RNA分子，其編碼來自第一冠狀病毒(例如如本文所闡述)之免疫原性多肽或其免疫原性片段，及第二RNA分子，其編碼來自第二冠狀病毒(例如如本文所闡述)之免疫原性多肽或其免疫原性片段。在一些實施例中，第一冠狀病毒不同於第二冠狀病毒。在一些實施例中，第一及/或第二冠狀病毒獨立地來自SARS-CoV-2武漢毒株或其變異體，例如具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2。
在一些實施例中，存在於含核酸顆粒中之兩種或更多種RNA分子各自編碼來自冠狀病毒之相同及/或不同毒株及/或變異體(例如在一些實施例中為SARS-CoV-2毒株或變異體)之免疫原性多肽或其免疫原性片段。舉例而言，在一些實施例中，存在於含核酸顆粒中之兩種或更多種RNA分子各自編碼來自冠狀病毒膜蛋白、冠狀病毒核衣殼蛋白、冠狀病毒刺突蛋白、冠狀病毒非結構蛋白及/或冠狀病毒輔助蛋白之不同免疫原性多肽或其免疫原性片段。在一些實施例中，此等免疫原性多肽或其免疫原性片段可來自相同或不同的冠狀病毒(例如在一些實施例中為SARS-CoV-2武漢毒株或其變異體，例如在一些實施例中為具有流行變異體(諸如奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體))之一或多個特徵性突變之變異體)。在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子，其編碼來自第一毒株或變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段，及第二RNA分子，其編碼來自第二毒株或變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段，其中第二毒株或變異體與第一毒株或變異體不同。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含第一RNA分子，其編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白，及第二RNA分子，其編碼包含奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.2、BA.3、BA.4、BA.5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子，其編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白，及第二RNA分子，其編碼包含奧密克戎BA.1變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.1變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.1變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.1變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子，其編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白，及第二RNA分子，其編碼包含奧密克戎BA.2變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.2變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.2變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.2變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子，其編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白，及第二RNA分子，其編碼包含奧密克戎BA.3變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子，其編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白，及第二RNA分子，其編碼包含奧密克戎BA.4或BA.5變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.4或BA.5變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.4或BA.5變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.4或BA.5變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子，其編碼來自第一奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白，及第二RNA分子，其編碼包含第二奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子，其編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白，及第二RNA分子，其編碼包含BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子編碼包含BA.1奧密克戎變異體毒株之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.2變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子編碼包含BA.1奧密克戎變異體毒株之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.2變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子編碼包含BA.1奧密克戎變異體毒株之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.2變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子，其編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白，及第二RNA分子，其編碼包含BA.3奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子編碼包含BA.1奧密克戎變異體毒株之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.3變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子編碼包含BA.1奧密克戎變異體毒株之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.3變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子編碼包含BA.1奧密克戎變異體毒株之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.3變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子，其編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白，及第二RNA分子，其編碼包含BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子編碼包含BA.1奧密克戎變異體毒株之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.4或BA.5變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子編碼包含BA.1奧密克戎變異體毒株之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.4或BA.5變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子編碼包含BA.1奧密克戎變異體毒株之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.4或BA.5變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子，其編碼來自BA.2奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白，及第二RNA分子，其編碼包含BA.3奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子編碼包含BA.2奧密克戎變異體毒株之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.3變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子編碼包含BA.2奧密克戎變異體毒株之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.3變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子編碼包含BA.2奧密克戎變異體毒株之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.3變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子，其編碼來自BA.2奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白，及第二RNA分子，其編碼包含BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子編碼包含BA.2奧密克戎變異體毒株之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.4或BA.5變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子編碼包含BA.2奧密克戎變異體毒株之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.4或BA.5變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子編碼包含BA.2奧密克戎變異體毒株之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.4或BA.5變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子，其編碼來自BA.3奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白，及第二RNA分子，其編碼包含BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子編碼包含BA.3奧密克戎變異體毒株之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.4或BA.5變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子編碼包含BA.3奧密克戎變異體毒株之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.4或BA.5變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子編碼包含BA.3奧密克戎變異體毒株之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白，該第二RNA分子編碼包含奧密克戎BA.4或BA.5變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含三種或更多種RNA分子，每種RNA分子編碼包含不同SARS-CoV-2變異體之突變之SARS-CoV-2蛋白。在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子，其編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白；第二RNA分子，其編碼包含奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.2、BA.3、BA.4或BA.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白；及第三RNA分子，其編碼包含奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.2、BA.3、BA.4或BA.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白，其中第二RNA分子及第三RNA分子編碼包含不同奧密克戎亞變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子，其編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白；第二RNA分子，其編碼包含BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白；及第三RNA分子，其編碼包含BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子，其編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白；第二RNA分子，其編碼包含BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白；及第三RNA分子，其編碼包含BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子，其編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白；第二RNA分子，其編碼包含BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白；及第三RNA分子，其編碼包含BA.4/5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子，其編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白；第二RNA分子，其編碼包含BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白；及第三RNA分子，其編碼包含BA.4/5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子，其編碼包含BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白；第二RNA分子，其編碼包含BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白；及第三RNA分子，其編碼包含BA.4/5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一些實施例中，含核酸顆粒包含兩種或更多種RNA分子，每種RNA分子包含編碼與不同的流行性感冒病毒相關之抗原(例如HA蛋白)之核苷酸序列。在一些實施例中，含核酸顆粒包含三種或更多種RNA分子，每種RNA分子包含編碼與不同的流行性感冒病毒相關之抗原(例如HA蛋白)之核苷酸序列。在一些實施例中，含核酸顆粒包含四種或更多種RNA分子，每種RNA分子包含編碼與不同的流行性感冒病毒相關之抗原(例如HA蛋白)之核苷酸序列。在一些實施例中，含核酸顆粒包含含有編碼與H1N1流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列的RNA分子、含有編碼與H3N2流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列的RNA分子、含有編碼與B/Victoria譜系流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列的RNA分子及含有編碼與B/Yamagata流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列的RNA分子。在一些實施例中，將組合物中包含編碼與流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列的每一RNA調配於相同的含核酸顆粒中。在一些實施例中，將組合物中包含編碼與流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列的每一RNA調配於單獨的含核酸顆粒中。
在一些實施例中，核酸顆粒包含(i)兩種或更多種RNA，每種RNA包含編碼與不同的冠狀病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列，及(i)兩種或更多種RNA，每種RNA包含編碼與不同的流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列。
在一些實施例中，核酸顆粒包含(i)兩種或更多種RNA，每種RNA包含編碼與不同的冠狀病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列，及(i)四種或更多種RNA，每種RNA包含編碼與不同的流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列。
在一些實施例中，將包含與某一傳染原相關之抗原性多肽之RNA調配於相同的核酸顆粒中。舉例而言，在一些實施例中，組合物包含(i)第一核酸顆粒，其包含兩種或更多種RNA，每種RNA包含編碼與不同的冠狀病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列，及(ii)第二核酸顆粒，其包含四種或更多種RNA，每種RNA包含編碼與不同的流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列(例如，包含編碼與H1N1流行性感冒病毒相關之HA蛋白之核苷酸序列的RNA、包含編碼與H3N2流行性感冒病毒相關之HA蛋白之核苷酸序列的RNA、包含編碼與B/Victoria譜系流行性感冒病毒相關之HA蛋白之核苷酸序列的RNA及包含編碼與B/Yamagata流行性感冒病毒相關之HA蛋白之核苷酸序列的RNA)。
在一些實施例中，包含兩種或更多種RNA分子之含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)以相同量(亦即，以1:1之比率)包含每種RNA分子。
在一些實施例中，包含兩種或更多種RNA分子之含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含不同量之每種RNA分子。舉例而言，在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子及第二RNA分子，其中第一RNA分子之存在量為第二RNA分子之存在量的0.01至100倍(例如，其中第一RNA分子之量為第二RNA分子之0.01至50倍、0.01至4倍、0.01至30倍、0.01至25倍、0.01至20倍、0.01至15倍、0.01至10、0.01至9倍、0.01至8倍、0.01至7倍、0.01至6倍、0.01至5倍、0.01至4倍、0.01至3倍、0.01至2倍、0.01至1.5倍、1至50倍、1至4倍、1至30倍、1至25倍、1至20倍、1至15倍、1至10倍、1至9倍、1至8倍、1至7倍、1至6倍、1至5倍、1至4倍、1至3倍、1至2倍或1至1.5倍)。在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子及第二RNA分子，其中第一RNA分子之濃度為第二RNA分子之濃度的1至10倍。在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子及第二RNA分子，其中第一RNA分子之濃度為第二RNA分子之濃度的1至5倍。在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子及第二RNA分子，其中第一RNA分子之濃度為第二RNA分子之濃度的1至3倍。在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子及第二RNA分子，其中第一RNA分子之濃度為第二RNA分子之濃度的2倍。在一些實施例中，含核酸顆粒包含第一RNA分子及第二RNA分子，其中第一RNA分子之濃度為第二RNA分子之濃度的3倍。
在一些實施例中，包含三種RNA分子之含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)以相同的量(亦即，以1:1:1之比率)包含每種RNA分子。
在一些實施例中，包含三種RNA分子之含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含不同量之每種RNA分子。舉例而言，在一些實例中，第一RNA分子:第二RNA分子:第三RNA分子之比率為1: 0.01-100: 0.01-100 (例如，1: 0.01-50: 0.01-50；1: 0.01-40: 0.01-40；1: 0.01-30: 0.01-25；1: 0.01-25: 0.01-25；1: 0.01-20: 0.01-20；1: 0.01-15: 0.01-15；1: 0.01-10: 0.01-9；1: 0.01-9: 0.01-9；1: 0.01-8: 0.01-8；1: 0.01-7: 0.01-7；1: 0.01-6: 0.01-6；1: 0.01-5: 0.01-5；1: 0.01-4: 0.01-4；1: 0.01-3: 0.01-3；1: 0.01-2: 0.01-2；或1: 0.01-1.5: 0.01-1.5)。在一些實施例中，第一RNA分子:第二RNA分子:第三RNA分子之比率為1:1:3。在一些實施例中，第一RNA分子:第二RNA分子:第三RNA分子之比率為1:3:3。
在一些實施例中，編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之第一RNA分子包含編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之核苷酸序列。在一些實施例中，編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之第一RNA分子包含與SEQ ID NO: 9至少80%一致(例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致)之核苷酸序列。在一些實施例中，編碼來自武漢毒株之SARS-COV-2 S蛋白之第一RNA分子包含與SEQ ID NO: 20至少80%一致(例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致)之核苷酸序列。在一些實施例中，編碼來自武漢毒株之SARS-COV-2 S蛋白之第一RNA分子包含編碼與SEQ ID NO: 7至少80%一致(例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致)之胺基酸序列之核苷酸序列。在一些實施例中，編碼具有奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的第二RNA分子包含編碼SEQ ID NO: 49之胺基酸序列之核苷酸序列。在一些實施例中，編碼包含奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的第二RNA分子包含與SEQ ID NO: 50至少80%一致(例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致)之核苷酸序列。在一些實施例中，編碼包含奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-COV-2 S蛋白的第二RNA分子包含與SEQ ID NO: 51至少80%一致(例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致)之核苷酸序列。在一些實施例中，編碼包含奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-COV-2 S蛋白的第二RNA分子包含編碼與SEQ ID NO: 49至少80%一致(例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致)之胺基酸序列之核苷酸序列。
在一些實施例中，編碼具有奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的第二RNA分子包含編碼SEQ ID NO: 64之胺基酸序列之核苷酸序列。在一些實施例中，編碼包含奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的第二RNA分子包含與SEQ ID NO: 65至少80%一致(例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致)之核苷酸序列。在一些實施例中，編碼包含奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-COV-2 S蛋白的第二RNA分子包含與SEQ ID NO: 67至少80%一致(例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致)之核苷酸序列。在一些實施例中，編碼包含奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-COV-2 S蛋白的第二RNA分子包含編碼與SEQ ID NO: 64至少80%一致(例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致)之胺基酸序列之核苷酸序列。
在一些實施例中，編碼具有奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的第二RNA分子包含編碼SEQ ID NO: 69之胺基酸序列之核苷酸序列。在一些實施例中，編碼包含奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的第二RNA分子包含與SEQ ID NO: 70至少80%一致(例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致)之核苷酸序列。在一些實施例中，編碼包含奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-COV-2 S蛋白的第二RNA分子包含與SEQ ID NO: 72至少80%一致(例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致)之核苷酸序列。在一些實施例中，編碼包含奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-COV-2 S蛋白的第二RNA分子包含編碼與SEQ ID NO: 69至少80%一致(例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致)之胺基酸序列之核苷酸序列。
在一些實施例中，編碼具有奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的第二RNA分子包含編碼SEQ ID NO: 74之胺基酸序列之核苷酸序列。在一些實施例中，編碼包含奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的第二RNA分子包含與SEQ ID NO: 75至少80%一致(例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致)之核苷酸序列。在一些實施例中，編碼包含奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-COV-2 S蛋白的第二RNA分子包含與SEQ ID NO: 77至少80%一致(例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致)之核苷酸序列。在一些實施例中，編碼包含奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-COV-2 S蛋白的第二RNA分子包含編碼與SEQ ID NO: 74至少80%一致(例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致)之胺基酸序列之核苷酸序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 7至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之胺基酸序列的核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含編碼SEQ ID NO: 49之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 49至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之胺基酸序列的核苷酸序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 7至少80%一致之序列，該第二RNA分子編碼SEQ ID NO: 49之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 49至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 7具有80%一致之序列，該第二RNA分子編碼SEQ ID NO: 49之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 49至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 7至少80%一致之序列，該第二RNA分子編碼SEQ ID NO: 49之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 49至少80%一致之序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含SEQ ID NO: 9之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 9至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含SEQ ID NO: 50之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 50至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 9之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 9至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 50之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 50至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 9之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 9至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 50之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 50至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 9之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 9至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 50之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 50至少80%一致之序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 20至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含SEQ ID NO: 51之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 51至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 20至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 51之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 51至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 20至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 51之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 51至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 20至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 51之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 51至少80%一致之序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 7至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之胺基酸序列的核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含編碼SEQ ID NO: 64之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 64至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之胺基酸序列的核苷酸序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 7至少80%一致之序列，該第二RNA分子編碼SEQ ID NO: 49之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 64至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 7至少80%一致之序列，該第二RNA分子編碼SEQ ID NO: 64之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 64至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 7至少80%一致之序列，該第二RNA分子編碼SEQ ID NO: 64之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 64至少80%一致之序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含SEQ ID NO: 9之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 9至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含SEQ ID NO: 65之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 65至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 9之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 9至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 65之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 65至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 9之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 9至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 65之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 65至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 9之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 9至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 65之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 65至少80%一致之序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 20至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含SEQ ID NO: 51之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 67至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 20至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 67之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 67至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 20至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 67之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 67至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 20至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 67之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 67至少80%一致之序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 7至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之胺基酸序列的核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含編碼SEQ ID NO: 69之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 69至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之胺基酸序列的核苷酸序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 7至少80%一致之序列，該第二RNA分子編碼SEQ ID NO: 69之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 69至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 7至少80%一致之序列，該第二RNA分子編碼SEQ ID NO: 69之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 69至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 7至少80%一致之序列，該第二RNA分子編碼SEQ ID NO: 69之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 69至少80%一致之序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含SEQ ID NO: 9之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 9至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含SEQ ID NO: 70之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 70至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 9之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 9至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 70之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 70至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 9之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 9至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 70之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 70至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 9之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 9至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 50之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 70至少80%一致之序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 20至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含SEQ ID NO: 72之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 72至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 20至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 72之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 72至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 20至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 72之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 72至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 20至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 72之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 72至少80%一致之序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 7至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之胺基酸序列的核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含編碼SEQ ID NO: 74之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 74至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之胺基酸序列的核苷酸序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 7至少80%一致之序列，該第二RNA分子編碼SEQ ID NO: 74之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 74至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 7至少80%一致之序列，該第二RNA分子編碼SEQ ID NO: 74之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 74至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 7至少80%一致之序列，該第二RNA分子編碼SEQ ID NO: 74之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 74至少80%一致之序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含SEQ ID NO: 9之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 9至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含SEQ ID NO: 75之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 75至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 9之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 9至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 75之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 75至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 9之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 9至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 75之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 75至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 9之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 9至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 75之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 75至少80%一致之序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 20至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含SEQ ID NO: 77之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 77至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:1，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 20至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 77之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 77至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:2，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 20至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 77之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 77至少80%一致之序列。在一些實施例中，第一RNA分子與第二RNA分子之比率為1:3，該第一RNA分子包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 20至少80%一致之序列，該第二RNA分子包含SEQ ID NO: 77之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 77至少80%一致之序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 7至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之胺基酸序列的核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含編碼SEQ ID NO: 55、58或61之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 55、58或61至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之胺基酸序列的核苷酸序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含SEQ ID NO: 9之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 9至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含SEQ ID NO: 56、59或62之核苷酸序列 或與SEQ ID NO: 56、59或62至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 20至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含SEQ ID NO: 57、60或63之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 57、60或63至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含編碼SEQ ID NO: 58之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 58至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之胺基酸序列的核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含編碼SEQ ID NO: 49、55或61之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 49、55或61至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之胺基酸序列的核苷酸序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含SEQ ID NO: 59之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 59至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含SEQ ID NO: 50、56或62之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 50、56或62至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含SEQ ID NO: 60之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 60至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含SEQ ID NO: 51、57或63之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 51、57或63至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含編碼SEQ ID NO: 49之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 49至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之胺基酸序列的核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含編碼SEQ ID NO: 55或61之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 55或61至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之胺基酸序列的核苷酸序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含SEQ ID NO: 50之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 50至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含SEQ ID NO: 56或62之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 56或62至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含SEQ ID NO: 51之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 51至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含SEQ ID NO: 57或63之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 57或63至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含編碼SEQ ID NO: 55之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 55至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之胺基酸序列的核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含編碼SEQ ID NO: 61之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 61至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之胺基酸序列的核苷酸序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含SEQ ID NO: 56之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 56至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含SEQ ID NO: 62之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 62至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列。
在一些實施例中，含核酸顆粒(例如在一些實施例中，如本文所闡述之LNP)包含：第一RNA分子，其包含SEQ ID NO: 57之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 57至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列；及第二RNA分子，其包含SEQ ID NO: 63之核苷酸序列或與SEQ ID NO: 63至少80% (例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高)一致之核苷酸序列。
在一些實例中，含有編碼不同多肽之核酸(例如RNA)之顆粒(例如在一些實施例中為LNP)可藉由將複數種(例如至少兩種、至少三種或更多種) RNA分子與顆粒形成組分(例如脂質)混合來形成。在一些實施例中，可將編碼不同多肽之核酸(例如RNA)在與顆粒形成組分(例如脂質)混合之前混合(例如在一些實施例中以實質上相等之比例，例如在一些實施例中當存在兩種RNA分子時以1:1之比率)。
在一些實施例中，可將各自編碼不同多肽(例如，如本文所闡述)之兩種或更多種RNA分子與顆粒形成劑混合，以形成如上文所闡述之含核酸顆粒。在替代實施例中，可將各自編碼不同多肽(例如，如本文所闡述)之兩種或更多種RNA分子調配成單獨顆粒組合物，接著將其混合在一起。舉例而言，在一些實施例中，可單獨形成含核酸顆粒之個別群體(每個群體包含編碼不同免疫原性多肽或其免疫原性片段(例如，如本文所闡述)之RNA分子)，且接著例如在製造過程中填充至小瓶中之前，或在即將投與時混合在一起(例如由投與醫療保健專業人員混合)。因此，在一些實施例中，本文闡述包含兩個或更多個顆粒群體之組合物(例如在一些實施例中為脂質奈米顆粒)，每個群體包含至少一種編碼不同免疫原性多肽或其免疫原性片段(例如，來自不同變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或其片段)之RNA分子。在一些實施例中，可以期望比例在組合物中提供每個群體(例如在一些實施例中，可在組合物中以提供相同量RNA分子之量提供每個群體)。 陽離子聚合物
鑑於其化學撓性程度較高，聚合物為基於奈米顆粒之遞送之常用材料。通常，陽離子聚合物用於將帶負電荷之核酸靜電凝聚成奈米顆粒。該等帶正電荷之基團通常由胺組成，該等胺在5.5至7.5之pH範圍內改變其質子化狀態，認為此導致離子不平衡，從而導致內體破裂。聚合物諸如聚-L-離胺酸、聚醯胺基胺、魚精蛋白及聚乙烯亞胺，以及天然聚合物諸如幾丁聚糖均已應用於核酸遞送，且在本文中適於作為陽離子聚合物。另外，一些研究者已合成專門用於核酸遞送之聚合物。特定而言，聚(β-胺基酯)由於其易於合成及可生物降解性，已在核酸遞送中獲得廣泛應用。此等合成聚合物在本文中亦適於作為陽離子聚合物。
如本文所用，給予「聚合物」其一般含義，亦即包含一或多個藉由共價鍵連結之重複單元(單體)之分子結構。重複單元可全部相同，或在一些情況下，在聚合物中可存在一種以上類型之重複單元。在一些情況下，聚合物為生物來源的，亦即生物聚合物，諸如蛋白質。在一些情況下，聚合物中亦可存在額外部分，例如靶向部分，諸如本文所闡述之彼等靶向部分。
若聚合物中存在一種以上類型之重複單元，則稱該聚合物為「共聚物」。應理解，本文使用之聚合物可為共聚物。形成共聚物之重複單元可以任何方式排列。舉例而言，重複單元可以隨機順序、交替順序或作為「嵌段」共聚物排列，亦即包含一或多個各自包含第一重複單元(例如第一嵌段)之區域，及一或多個各自包含第二重複單元(例如第二嵌段)之區域等。嵌段共聚物可具有兩個(二嵌段共聚物)、三個(三嵌段共聚物)或更多數量之不同嵌段。
在某些實施例中，聚合物為生物相容的。生物相容性聚合物係在中等濃度下通常不會導致顯著細胞死亡之聚合物。在某些實施例中，生物相容性聚合物係可生物降解的，亦即該聚合物能夠在生理環境中(諸如在體內)化學及/或生物降解。
在某些實施例中，聚合物可為魚精蛋白或聚伸烷基亞胺，特定而言魚精蛋白。
術語「魚精蛋白」係指各種相對低分子量之強鹼性蛋白質中之任一者，其富含精胺酸，且發現其在各種動物(如魚)之精細胞中代替體細胞組織蛋白尤其與DNA締合。特定而言，術語「魚精蛋白」係指在魚精子中發現的具有強鹼性、可溶於水、不由熱凝固且在水解時主要產生精胺酸之蛋白質。該等蛋白質以純化形式用於長效胰島素調配物且用於中和肝素之抗凝血效應。
根據本揭示案，如本文所用之術語「魚精蛋白」意指包含自天然或生物來源獲得或源自其之任何魚精蛋白胺基酸序列，包括其片段及該胺基酸序列或其片段之多聚體形式，以及(合成)多肽，其為人工的且為特定目的而專門設計的，且不能自天然或生物來源中分離。
在一個實施例中，聚伸烷基亞胺包含聚乙烯亞胺及/或聚丙烯亞胺，較佳為聚乙烯亞胺。較佳聚伸烷基亞胺為聚乙烯亞胺(PEI)。PEI之平均分子量較佳為0.75∙10 2至10 7Da，較佳為1000至10 5Da，更佳為10000至40000 Da，更佳為15000至30000 Da，甚至更佳為20000至25000 Da。
根據本揭示案，較佳者為線性聚伸烷基亞胺，諸如線性聚乙烯亞胺(PEI)。
本文考慮使用之陽離子聚合物(包括聚陽離子聚合物)包括能夠靜電結合核酸之任何陽離子聚合物。在一個實施例中，本文考慮使用之陽離子聚合物包括核酸可與之締合(例如藉由與核酸形成複合物或形成其中封裝或囊封核酸之囊泡)之任何陽離子聚合物。
本文所闡述之顆粒亦可包含除陽離子聚合物外之聚合物，亦即非陽離子聚合物及/或陰離子聚合物。陰離子聚合物及中性聚合物在本文中統稱為非陽離子聚合物。 脂質及脂質樣物質
術語「脂質」及「脂質樣物質」在本文中廣義地定義為包含一或多個疏水部分或基團以及視情況亦有一或多個親水部分或基團之分子。包含疏水部分及親水部分之分子亦常稱為兩親物。脂質通常難溶於水。在水性環境中，兩親性質容許分子自組裝成有組織之結構及不同的相。該等相中之一者由脂質雙層組成，此乃因其存在於水環境中之囊泡、多層/單層脂質體或膜中。疏水性可藉由納入非極性基團來賦予，該等非極性基團包括(但不限於)長鏈飽和及不飽和脂肪族烴基以及經一或多個芳香族、環脂族或雜環基取代之此類基團。親水基團可包含極性及/或帶電荷之基團，且包括碳水化合物、磷酸酯、羧基、硫酸根、胺基、硫氫基、硝基、羥基及其他類似基團。
如本文所用，術語「兩親性」係指同時具有極性部分及非極性部分之分子。通常，兩親性化合物具有與長疏水尾部連接之極性頭部。在一些實施例中，極性部分可溶於水中，而非極性部分不溶於水中。另外，極性部分可帶有形式正電荷或形式負電荷。或者，極性部分可同時具有形式正電荷及形式負電荷，且為兩性離子或內鹽。出於本揭示案之目的，兩親性化合物可為(但不限於)一或複數種天然或非天然脂質及脂質樣化合物。
術語「脂質樣物質」、「脂質樣化合物」或「脂質樣分子」係指在結構及/或功能上與脂質相關但在嚴格意義上可不視為脂質之物質。舉例而言，該術語包括能夠形成兩親性層之化合物，此乃因其存在於水環境中之囊泡、多層/單層脂質體或膜中，且包括表面活性劑，或同時具有親水及疏水部分之合成化合物。一般而言，該術語係指包含具有不同結構組織之親水部分及疏水部分之分子，其可與脂質之結構組織相似或不相似。如本文所用，除非本文另有指示或與上下文明顯矛盾，否則術語「脂質」應解釋為涵蓋脂質及脂質樣物質二者。
可包括在兩親性層中之兩親性化合物之具體實例包括(但不限於)磷脂、胺基脂質及神經鞘脂。
在某些實施例中，兩親性化合物為脂質。術語「脂質」係指一組有機化合物，其特徵在於不溶於水，但溶於許多有機溶劑。一般而言，脂質可分為八類：脂肪酸、甘油脂質、甘油磷脂、神經鞘脂、糖脂質、聚酮(來源於酮脂醯基亞單元之縮合)、固醇脂質及異戊二烯脂質(來源於異戊二烯亞單元之縮合)。儘管術語「脂質」有時用作脂肪之同義詞，但脂肪為脂質之一個亞組，稱為甘油三酯。脂質亦涵蓋諸如脂肪酸及其衍生物(包括甘油三酯、甘油二酯、甘油單酯及磷脂)等分子，以及含固醇之代謝物，諸如膽固醇。
脂肪酸或脂肪酸殘基係由以羧酸基團為末端之烴鏈製得之一組不同分子；此排列賦予分子極性親水端及不溶於水之非極性疏水端。長度通常在4與24個碳之間的碳鏈可為飽和或不飽和的，且可連接至含有氧、鹵素、氮及硫之官能基上。若脂肪酸含有雙鍵，則有順式或反式幾何異構之可能性，此顯著影響分子之構形。順式雙鍵導致脂肪酸鏈彎曲，此為與鏈中更多雙鍵複合之效應。脂肪酸類別中之其他主要脂質種類為脂肪酯及脂肪醯胺。
甘油脂質由單取代、二取代及三取代之甘油構成，最著名的為甘油之脂肪酸三酯，稱為甘油三酯。詞語「三醯基甘油」有時與「甘油三酯」同義使用。在該等化合物中，甘油之三個羥基通常各自由不同的脂肪酸酯化。甘油脂質之其他亞類以糖基甘油為代表，其特徵在於存在一或多個經由糖苷鍵聯與甘油連接之糖殘基。
甘油磷脂係兩親性分子(含有疏水區及親水區二者)，其含有藉由酯鍵聯連接至兩個脂肪酸源性之「尾部」及藉由磷酸酯鍵聯連接至一個「頭部」基團之甘油核心。甘油磷脂通常稱為磷脂(儘管鞘磷脂亦歸類為磷脂)，其實例為磷脂醯膽鹼(亦稱為PC、GPCho或卵磷脂)、磷脂醯乙醇胺(PE或GPEtn)及磷脂醯絲胺酸(PS或GPSer)。
神經鞘脂係一個複雜的化合物家族，其具有共同之結構特徵，亦即類鞘胺醇鹼骨架。哺乳動物中之主要類鞘胺醇鹼通常稱為神經鞘胺醇。神經醯胺(N-醯基-類鞘胺醇鹼)係具有醯胺連接之脂肪酸之類鞘胺醇鹼衍生物之一個主要亞類。脂肪酸通常為飽和或單不飽和的，鏈長為16至26個碳原子。哺乳動物之主要神經鞘磷脂(phosphosphingolipid)為鞘磷脂(sphingomyelin)(神經醯胺磷酸膽鹼)，而昆蟲主要含有神經醯胺磷酸乙醇胺，且真菌具有植物神經醯胺磷酸肌醇(phytoceramide phosphoinositol)及含甘露糖之首基。糖神經鞘脂質係由一或多個經由糖苷鍵與類鞘胺醇鹼連接之糖殘基組成的多樣化分子家族。該等物質之實例為簡單及複雜的糖神經鞘脂質，諸如腦苷脂及神經節苷脂。
固醇脂質，諸如膽固醇及其衍生物，或生育酚及其衍生物，與甘油磷脂及鞘磷脂一起為膜脂質之重要組分。
糖脂質描述脂肪酸直接連接至糖骨架上，從而形成與膜雙層相容之結構之化合物。在糖脂質中，單糖取代甘油脂質及甘油磷脂中存在之甘油骨架。最常見的糖脂質係革蘭氏(Gram)陰性細菌中脂多糖之脂質A組分之醯化葡糖胺前體。典型脂質A分子為葡糖胺之二糖，其衍生有多達七種脂肪醯基鏈。大腸桿菌生長所需之最小脂多糖為Kdo2-脂質A，其為一種用兩個3-去氧-D-甘露-辛酮糖酸(Kdo)殘基糖基化之葡糖胺之六醯化二糖。
聚酮係藉由經典酶以及與脂肪酸合酶具有共同機械特徵之重複及多模塊酶聚合乙醯基及丙醯基亞單元而合成的。其包含大量來自動物、植物、細菌、真菌及海洋來源之次級代謝物及天然產物，且具有巨大的結構多樣性。許多聚酮為環狀分子，其主鏈通常由糖基化、甲基化、羥基化、氧化或其他過程進一步修飾。
根據本揭示案，脂質及脂質樣物質可為陽離子的、陰離子的或中性的。中性脂質或脂質樣物質在所選pH下以不帶電荷或中性兩性離子之形式存在。 陽離子脂質或陽離子可電離脂質或脂質樣物質
本文所闡述之核酸顆粒可包含至少一種陽離子脂質或陽離子可電離脂質或脂質樣物質作為顆粒形成劑。本文考慮使用之陽離子脂質或陽離子可電離脂質或脂質樣物質包括能夠靜電結合核酸之任何陽離子脂質或陽離子可電離脂質或脂質樣物質。在一個實施例中，本文考慮使用之陽離子脂質或陽離子可電離脂質或脂質樣物質可與核酸締合，例如藉由與核酸形成複合物或形成其中封裝或囊封核酸之囊泡。
如本文所用，「陽離子脂質」或「陽離子脂質樣物質」係指具有淨正電荷之脂質或脂質樣物質。陽離子脂質或脂質樣物質藉由靜電相互作用結合帶負電荷之核酸。通常，陽離子脂質具有親脂性部分，諸如固醇、醯基鏈、二醯基或更多醯基鏈，且脂質之首基通常攜帶正電荷。
在某些實施例中，陽離子脂質或脂質樣物質僅在某些pH、特定而言酸性pH下具有淨正電荷，而在不同的、較佳較高之pH諸如生理pH下，較佳不具有淨正電荷，較佳地不帶電荷，亦即為中性的。與在生理pH下保持陽離子之顆粒相比，認為此可電離行為經由幫助內體逃逸及降低毒性來增強功效。
出於本揭示案之目的，除非與環境相矛盾，否則術語「陽離子脂質或脂質樣物質」包含此類「陽離子可電離」脂質或脂質樣物質。
在一個實施例中，陽離子脂質或陽離子可電離脂質或脂質樣物質包含首基，該首基包括至少一個帶正電荷或能夠質子化之氮原子(N)。
陽離子脂質之實例包括(但不限於) 1,2-二油醯基-3-三甲基銨丙烷(DOTAP)；N,N-二甲基-2,3-二油基氧基丙胺(DODMA)、1,2-二-O-十八烯基-3-三甲基銨丙烷(DOTMA)、3-(N-(N',N'-二甲基胺基乙烷)-胺甲醯基)膽固醇(DC-Chol)、二甲基雙十八烷基銨(DDAB)；1,2-二油醯基-3-二甲基銨-丙烷(DODAP)；1,2-二醯氧基-3-二甲基銨丙烷；1,2-二烷基氧基-3-二甲基銨丙烷；雙十八烷基二甲基氯化銨(DODAC)、1,2-二硬脂氧基-N,N-二甲基-3-胺基丙烷(DSDMA)、2,3-二(十四氧基)丙基-(2-羥基乙基)-二甲基氮鎓(DMRIE)、1,2-二肉豆蔻醯基-sn-甘油-3-乙基磷酸膽鹼(DMEPC)、l,2-二肉豆蔻醯基-3-三甲基銨丙烷(DMTAP)、1,2-二油基氧基丙基-3-二甲基-羥基乙基溴化銨(DORIE)及三氟乙酸2,3-二油醯基氧基-N-[2(精胺甲醯胺)乙基]-N,N-二甲基-l-丙銨(DOSPA)、1,2-二亞油基氧基-N,N-二甲基胺基丙烷(DLinDMA)、1,2-二亞麻基氧基-N,N-二甲基胺基丙烷(DLenDMA)、雙十八烷基醯胺基甘胺醯精胺(DOGS)、3-二甲基胺基-2-(膽固-5-烯-3-β-氧基丁-4-氧基)-1-(順式,順式-9,12-十八碳二烯氧基)丙烷(CLinDMA)、2-[5'-(膽固-5-烯-3-β-氧基)-3'-氧雜戊氧基)-3-二甲基-1-(順式,順式-9',12'-十八碳二烯氧基)丙烷(CpLinDMA)、N,N-二甲基-3,4-二油基氧基苄胺(DMOBA)、1,2-N,N'-二油基胺甲醯基-3-二甲基胺基丙烷(DOcarbDAP)、2,3-二亞油醯基氧基-N,N-二甲基丙胺(DLinDAP)、1,2-N,N'-二亞油基胺甲醯基-3-二甲基胺基丙烷(DLincarbDAP)、1,2-二亞油醯基胺甲醯基-3-二甲基胺基丙烷(DLinCDAP)、2,2-二亞油基-4-二甲基胺基甲基-[1,3]-二氧雜環戊烷(DLin-K-DMA)、2,2-二亞油基-4-二甲基胺基乙基-[1,3]-二氧雜環戊烷(DLin-K-XTC2-DMA)、2,2-二亞油基-4-(2-二甲基胺基乙基)-[1,3]-二氧雜環戊烷(DLin-KC2-DMA)、丁酸三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基-4-(二甲基胺基)酯(DLin-MC3-DMA)、N-(2-羥基乙基)-N,N-二甲基-2,3-雙(十四烷基氧基)-1-溴化丙銨(DMRIE)、(±)-N-(3-胺基丙基)-N,N-二甲基-2,3-雙(順式-9-十四烯基氧基)-1-溴化丙銨(GAP-DMORIE)、(±)-N-(3-胺基丙基)-N,N-二甲基-2,3-雙(十二烷基氧基)-1-溴化丙銨(GAP-DLRIE)、(±)-N-(3-胺基丙基)-N,N-二甲基-2,3-雙(十四烷基氧基)-1-溴化丙銨(GAP-DMRIE)、N-(2-胺基乙基)-N,N-二甲基-2,3-雙(十四烷基氧基)-1-溴化丙銨(βAE-DMRIE)、N-(4-羧基苄基)-N,N-二甲基-2,3-雙(油醯基氧基)丙-1-銨(DOBAQ)、2-({8-[(3β)-膽固-5-烯-3-基氧基]辛基}氧基)-N,N-二甲基-3-[(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基氧基]丙-1-胺(辛基-CLinDMA)、1,2-二肉豆蔻醯基-3-二甲基銨-丙烷(DMDAP)、1,2-二棕櫚醯基-3-二甲基銨-丙烷(DPDAP)、N1-[2-((1S)-1-[(3-胺基丙基)胺基]-4-[二(3-胺基-丙基)胺基]丁基甲醯胺基)乙基]-3,4-二[油基氧基]-苯甲醯胺(MVL5)、1,2-二油醯基-sn-甘油-3-乙基磷酸膽鹼(DOEPC)、2,3-雙(十二烷基氧基)-N-(2-羥基乙基)-N,N-二甲基丙-1-溴化銨(DLRIE)、N-(2-胺基乙基)-N,N-二甲基-2,3-雙(十四烷基氧基)丙-1-溴化銨(DMORIE)、8,8'-((((2(二甲基胺基)乙基)硫基)羰基)氮烷二基)二辛酸二((Z)-壬-2-烯-1-基)酯(ATX)、N,N-二甲基-2,3-雙(十二烷基氧基)丙-1-胺(DLDMA)、N,N-二甲基-2,3-雙(十四烷基氧基)丙-1-胺(DMDMA)、十七烷二酸二((Z)-壬-2-烯-1-基)-9-((4-(二甲基胺基丁醯基)氧基)酯(L319)、N-十二烷基-3-((2-十二烷基胺甲醯基-乙基)-{2-[(2-十二烷基胺甲醯基-乙基)-2-{(2-十二烷基胺甲醯基-乙基)-[2-(2-十二烷基胺甲醯基-乙基胺基)-乙基]-胺基}-乙基胺基)丙醯胺(類脂質98N 12-5)、1-[2-[雙(2-羥基十二烷基)胺基]乙基-[2-[4-[2-[雙(2羥基十二烷基)胺基]乙基]六氫吡嗪-1-基]乙基]胺基]十二-2-醇(類脂質C12-200)。
在一些實施例中，陽離子脂質可佔顆粒中所存在之總脂質之約10 mol%至約100 mol%、約20 mol%至約100 mol%、約30 mol%至約100 mol%、約40 mol%至約100 mol%或約50 mol%至約100 mol%。 額外脂質或脂質樣物質
本文所闡述之顆粒亦可包含除陽離子脂質或陽離子可電離脂質或脂質樣物質外之脂質或脂質樣物質，亦即非陽離子脂質或脂質樣物質(包括非陽離子可電離脂質或脂質樣物質)。陰離子及中性脂質或脂質樣物質在本文中統稱為非陽離子脂質或脂質樣物質。除可電離/陽離子脂質或脂質樣物質以外，藉由添加其他疏水部分(諸如膽固醇及脂質)來最佳化核酸顆粒之調配物可增強顆粒穩定性及核酸遞送之功效。
可摻入可能影響或可能不影響核酸顆粒之總電荷之額外脂質或脂質樣物質。在某些實施例中，額外脂質或脂質樣物質為非陽離子脂質或脂質樣物質。非陽離子脂質可包含例如一或多種陰離子脂質及/或中性脂質。如本文所用，「陰離子脂質」係指在所選pH下帶負電荷之任何脂質。如本文所用，「中性脂質」係指在所選pH下以不帶電荷或中性兩性離子形式存在的多種脂質種類中之任一者。在較佳實施例中，額外脂質包含以下中性脂質組分中之一者：(1)磷脂，(2)膽固醇或其衍生物；或(3)磷脂及膽固醇或其衍生物之混合物。膽固醇衍生物之實例包括(但不限於)膽固烷醇、膽固烷酮、膽固烯酮、糞甾烷醇、膽固醇基-2'-羥乙基醚、膽固醇基-4'-羥丁基醚、生育酚及其衍生物以及其混合物。
可使用之具體磷脂包括(但不限於)磷脂醯膽鹼、磷脂醯乙醇胺、磷脂醯甘油、磷脂酸、磷脂醯絲胺酸或鞘磷脂。此等磷脂尤其包括二醯基磷脂醯膽鹼，諸如二硬脂醯磷脂醯膽鹼(DSPC)、二油醯磷脂醯膽鹼(DOPC)、二肉豆蔻醯磷脂醯膽鹼(DMPC)、二十五醯磷脂醯膽鹼、二月桂醯磷脂醯膽鹼、二棕櫚醯磷脂醯膽鹼(DPPC)、二花生醯磷脂醯膽鹼(DAPC)、二山萮醯磷脂醯膽鹼(DBPC)、二十三烷醯磷脂醯膽鹼(DTPC)、雙二十四醯基磷脂醯膽鹼(DLPC)、棕櫚醯油醯基-磷脂醯膽鹼(POPC)、1,2-二-O-十八烯基-sn-甘油-3-磷酸膽鹼(18:0二醚PC)、1-油醯基-2-膽固醇基半琥拍醯基-sn-甘油-3-磷酸膽鹼(OChemsPC)、1-十六烷基-sn-甘油-3-磷酸膽鹼(C16 Lyso PC)及磷脂醯乙醇胺，特定而言二醯基磷脂醯乙醇胺，諸如二油醯基磷脂醯乙醇胺(DOPE)、二硬脂醯基-磷脂醯乙醇胺(DSPE)、二棕櫚醯基-磷脂醯乙醇胺(DPPE)、二肉豆蔻醯基-磷脂醯乙醇胺(DMPE)、二月桂醯-磷脂醯乙醇胺(DLPE)、二植烷醯基-磷脂醯乙醇胺(DPyPE)，以及其他具有不同疏水鏈之磷脂醯乙醇胺脂質。
在某些較佳實施例中，額外脂質為DSPC或DSPC及膽固醇。
在某些實施例中，核酸顆粒包括陽離子脂質及額外脂質二者。
在一個實施例中，本文所闡述之顆粒包括聚合物結合之脂質，諸如聚乙二醇化脂質。術語「聚乙二醇化脂質」係指包含脂質部分及聚乙二醇部分二者之分子。聚乙二醇化脂質為此項技術中所已知。
不希望受理論束縛，與至少一種額外脂質之量相比，至少一種陽離子脂質之量可影響重要的核酸顆粒特徵，諸如核酸之電荷、粒徑、穩定性、組織選擇性及生物活性。因此，在一些實施例中，至少一種陽離子脂質與至少一種額外脂質之莫耳比為約10:0至約1:9、約4:1至約1:2、或約3:1至約1:1。
在一些實施例中，非陽離子脂質、特定而言中性脂質(例如一或多種磷脂及/或膽固醇)可佔顆粒中所存在之總脂質之約0 mol%至約90 mol%、約0 mol%至約80 mol%、約0 mol%至約70 mol%、約0 mol%至約60 mol%、或約0 mol%至約50 mol%。 脂質複合物顆粒
在本揭示案之某些實施例中，本文所闡述之RNA可存在於RNA脂質複合物顆粒中。
在本揭示案之上下文中，術語「RNA脂質複合物顆粒」係指含有脂質、特定而言陽離子脂質及RNA之顆粒。帶正電荷之脂質體與帶負電荷之RNA之間的靜電相互作用導致RNA脂質複合物顆粒之複合及自發形成。帶正電荷之脂質體通常可使用陽離子脂質(諸如DOTMA)及額外脂質(諸如DOPE)來合成。在一個實施例中，RNA脂質複合物顆粒為奈米顆粒。
在某些實施例中，RNA脂質複合物顆粒包括陽離子脂質及額外脂質二者。在一個例示性實施例中，陽離子脂質為DOTMA且額外脂質為DOPE。
在一些實施例中，至少一種陽離子脂質與至少一種額外脂質之莫耳比為約10:0至約1:9、約4:1至約1:2或約3:1至約1:1。在具體實施例中，莫耳比可為約3:1、約2.75:1、約2.5:1、約2.25:1、約2:1、約1.75:1、約1.5:1、約1.25:1或約1:1。在一個例示性實施例中，至少一種陽離子脂質與至少一種額外脂質之莫耳比為約2:1。
在一個實施例中，本文所闡述之RNA脂質複合物顆粒之平均直徑在約200 nm至約1000 nm、約200 nm至約800 nm、約250 nm至約700 nm、約400 nm至約600 nm、約300 nm至約500 nm、或約350 nm至約400 nm範圍內。在具體實施例中，RNA脂質複合物顆粒之平均直徑為約200 nm、約225 nm、約250 nm、約275 nm、約300 nm、約325 nm、約350 nm、約375 nm、約400 nm、約425 nm、約450 nm、約475 nm、約500 nm、約525 nm、約550 nm、約575 nm、約600 nm、約625 nm、約650 nm、約700 nm、約725 nm、約750 nm、約775 nm、約800 nm、約825 nm、約850 nm、約875 nm、約900 nm、約925 nm、約950 nm、約975 nm或約1000 nm。在一個實施例中，RNA脂質複合物顆粒之平均直徑在約250 nm至約700 nm範圍內。在另一實施例中，RNA脂質複合物顆粒之平均直徑在約300 nm至約500 nm範圍內。在一個例示性實施例中，RNA脂質複合物顆粒之平均直徑為約400 nm。
本文所闡述之RNA脂質複合物顆粒及包含RNA脂質複合物顆粒之組合物可用於在非經腸投與後、特定而言在靜脈內投與後將RNA遞送至靶組織。可使用脂質體來製備RNA脂質複合物顆粒，該等脂質體可藉由將脂質在乙醇中之溶液注射至水或適宜水相中獲得。在一個實施例中，水相具有酸性pH。在一個實施例中，水相包含例如約5 mM之量的乙酸。脂質體可用於藉由將脂質體與RNA混合來製備RNA脂質複合物顆粒。在一個實施例中，脂質體及RNA脂質複合物顆粒包含至少一種陽離子脂質及至少一種額外脂質。在一個實施例中，該至少一種陽離子脂質包含1,2-二-O-十八烯基-3-三甲基銨丙烷(DOTMA)及/或1,2-二油醯基-3-三甲基銨-丙烷(DOTAP)。在一個實施例中，該至少一種額外脂質包含1,2-二-(9Z-十八碳烯醯基)-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)、膽固醇(Chol)及/或1,2-二油醯基-sn-甘油-3-磷酸膽鹼(DOPC)。在一個實施例中，該至少一種陽離子脂質包含1,2-二-O-十八烯基-3-三甲基銨丙烷(DOTMA)且該至少一種額外脂質包含1,2-二-(9Z-十八碳烯醯基)-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)。在一個實施例中，脂質體及RNA脂質複合物顆粒包含1,2-二-O-十八烯基-3-三甲基銨丙烷(DOTMA)及1,2-二-(9Z-十八碳烯醯基)-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)。
脾靶向RNA脂質複合物顆粒闡述於WO 2013/143683中，其以引用方式併入本文中。已發現，具有淨負電荷之RNA脂質複合物顆粒可用於優先靶向脾組織或脾細胞，諸如抗原呈遞細胞、特定而言樹突細胞。因此，在投與RNA脂質複合物顆粒後，脾中發生RNA累積及/或RNA表現。因此，本揭示案之RNA脂質複合物顆粒可用於在脾中表現RNA。在一個實施例中，在投與RNA脂質複合物顆粒後，在肺及/或肝中沒有或基本上沒有發生RNA累積及/或RNA表現。在一個實施例中，在投與RNA脂質複合物顆粒後，在抗原呈遞細胞(諸如脾中之專職抗原呈遞細胞)中發生RNA累積及/或RNA表現。因此，本揭示案之RNA脂質複合物顆粒可用於在此等抗原呈遞細胞中表現RNA。在一個實施例中，抗原呈遞細胞為樹突細胞及/或巨噬細胞。 脂質奈米顆粒(LNP)
在一個實施例中，本文所闡述之核酸(諸如RNA)以脂質奈米顆粒(LNP)之形式投與。LNP可包含能夠形成顆粒之任何脂質，一或多種核酸分子附著於該顆粒，或一或多種核酸分子囊封在該顆粒中。
在一個實施例中，LNP包含一或多種陽離子脂質及一或多種穩定脂質。穩定脂質包括中性脂質及聚乙二醇化脂質。
在一個實施例中，LNP包含陽離子脂質、中性脂質、類固醇、聚合物結合之脂質；以及囊封在脂質奈米顆粒內或與脂質奈米顆粒締合之RNA。
在一個實施例中，LNP包含20至60 mol%、40至55 mol%、40至50 mol%、41至49 mol%、41至48 mol%、42至48 mol%、43至48 mol%、44至48 mol%、45至48 mol%、46至48 mol%、47至48 mol%或47.2至47.8 mol%之陽離子脂質。在一個實施例中，LNP包含約47.0 mol%、47.1 mol%、47.2 mol%、47.3 mol%、47.4 mol%、47.5 mol%、47.6 mol%、47.7 mol%、47.8 mol%、47.9 mol%或48.0 mol%之陽離子脂質。
在一個實施例中，中性脂質以5至25 mol%、5至15 mol%、7至13 mol%或9至11 mol%範圍內之濃度存在。在一個實施例中，中性脂質以約9.5 mol%、10 mol%或10.5 mol%之濃度存在。
在一個實施例中，類固醇以25至55 mol%、30至50 mol%、35至45 mol%或38至43 mol%範圍內之濃度存在。在一個實施例中，類固醇以約40 mol%、41 mol%、42 mol%、43 mol%、44 mol%、45 mol%或46 mol%之濃度存在。
在一個實施例中，LNP包含0.5至15 mol%、1至10 mol%、1至5 mol%、或1至2.5 mol%之聚合物結合之脂質。
在一個實施例中，LNP包含20至60 mol%之陽離子脂質、5至25 mol%之非陽離子脂質(例如中性脂質)、25至55 mol%之固醇或類固醇及0.5至15 mol%之聚合物結合之脂質(例如PEG修飾之脂質)。
在一個實施例中，LNP包含40至50 mol%之陽離子脂質；5至15 mol%之中性脂質；35至45 mol%之類固醇；1至10 mol%之聚合物結合之脂質；以及囊封在脂質奈米顆粒內或與脂質奈米顆粒締合之RNA。
在一個實施例中，基於脂質奈米顆粒中所存在的脂質之總mol數確定mol%。
在一個實施例中，中性脂質係選自由以下組成之群：DSPC、DPPC、DMPC、DOPC、POPC、DOPE、DOPG、DPPG、POPE、DPPE、DMPE、DSPE及SM。在一個實施例中，中性脂質係選自由以下組成之群：DSPC、DPPC、DMPC、DOPC、POPC、DOPE及SM。在一個實施例中，中性脂質為DSPC。
在一個實施例中，類固醇為膽固醇。
在一個實施例中，聚合物結合之脂質為聚乙二醇化脂質。在一個實施例中，聚乙二醇化脂質具有以下結構： 或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構物或立體異構物，其中： R 12及R 13各自獨立地為含有10至30個碳原子之直鏈或具支鏈、飽和或不飽和烷基鏈，其中該烷基鏈視情況由一或多個酯鍵中斷；且w具有在30至60範圍內之平均值。在一個實施例中，R 12及R 13各自獨立地為含有12至16個碳原子之直鏈飽和烷基鏈。在一個實施例中，w具有在40至55範圍內之平均值。在一個實施例中，平均w為約45。在一個實施例中，R 12及R 13各自獨立地為含有約14個碳原子之直鏈飽和烷基鏈，且w具有約45之平均值。
在一個實施例中，聚乙二醇化脂質為DMG-PEG 2000，例如具有以下結構：
在一些實施例中，LNP之陽離子脂質組分具有式(III)之結構： (III) 或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構物、前藥或立體異構物，其中： L 1或L 2中之一者為-O(C=O)-、-(C=O)O-、-C(=O)-、-O-、-S(O) x-、-S-S-、-C(=O)S-、SC(=O)-、-NR aC(=O)-、-C(=O)NR a-、NR aC(=O)NR a-、-OC(=O)NR a-或-NR aC(=O)O-，且L 1或L 2中之另一者為-O(C=O)-、-(C=O)O-、-C(=O)-、-O-、-S(O) x-、-S-S-、-C(=O)S-、SC(=O)-、-NR aC(=O)-、-C(=O)NR a-、NR aC(=O)NR a-、-OC(=O)NR a-或-NR aC(=O)O-或直接鍵； G 1及G 2各自獨立地為未經取代之C 1-C 12伸烷基或C 1-C 12伸烯基； G 3為C 1-C 24伸烷基、C 1-C 24伸烯基、C 3-C 8伸環烷基、C 3-C 8伸環烯基； R a為H或C 1-C 12烷基； R 1及R 2各自獨立地為C 6-C 24烷基或C 6-C 24烯基； R 3為H、OR 5、CN、-C(=O)OR 4、-OC(=O)R 4或-NR 5C(=O)R 4； R 4為C 1-C 12烷基； R 5為H或C 1-C 6烷基；且 x為0、1或2。
在式(III)之一些前述實施例中，脂質具有以下結構(IIIA)或(IIIB)中之一者： 或 (IIIA)                                    (IIIB) 其中： A為3員至8員環烷基或伸環烷基環； R 6在每次出現時獨立地為H、OH或C 1-C 24烷基； n為在1至15範圍內之整數。
在式(III)之一些前述實施例中，脂質具有結構(IIIA)，且在其他實施例中，脂質具有結構(IIIB)。
在式(III)之其他實施例中，脂質具有以下結構(IIIC)或(IIID)中之一者： 或 (IIIC)                                  (IIID) 其中y及z各自獨立地為在1至12範圍內之整數。
在式(III)之任何前述實施例中，L 1或L 2中之一者為-O(C=O)-。舉例而言，在一些實施例中，L 1及L 2中之每一者為-O(C=O)-。在任何前述之一些不同的實施例中，L 1及L 2各自獨立地為-(C=O)O-或-O(C=O)-。舉例而言，在一些實施例中，L 1及L 2中之每一者為-(C=O)O-。
在式(III)之一些不同實施例中，脂質具有以下結構(IIIE)或(IIIF)中之一者： 或 。 (IIIE)                                             (IIIF)
在式(III)之一些前述實施例中，脂質具有以下結構(IIIG)、(IIIH)、(IIII)或(IIIJ)中之一者： ； ； (IIIG)                                            (IIIH) 或 。 (IIII)                                               (IIIJ)
在式(III)之一些前述實施例中，n為在2至12、例如2至8或2至4範圍內之整數。舉例而言，在一些實施例中，n為3、4、5或6。在一些實施例中，n為3。在一些實施例中，n為4。在一些實施例中，n為5。在一些實施例中，n為6。
在式(III)之一些其他前述實施例中，y及z各自獨立地為在2至10範圍內之整數。舉例而言，在一些實施例中，y及z各自獨立地為在4至9或4至6範圍內之整數。
在式(III)之一些前述實施例中，R 6為H。在其他前述實施例中，R 6為C 1-C 24烷基。在其他實施例中，R 6為OH。
在式(III)之一些實施例中，G 3未經取代。在其他實施例中，G3經取代。在各種不同的實施例中，G 3為直鏈C 1-C 24伸烷基或直鏈C 1-C 24伸烯基。
在式(III)之一些其他前述實施例中，R 1或R 2為或兩者均為C 6-C 24烯基。舉例而言，在一些實施例中，R 1及R 2各自獨立地具有以下結構： ， 其中： R 7a及R 7b在每次出現時獨立地為H或C 1-C 12烷基；且 a為2至12之整數， 其中R 7a、R 7b及a各自經選擇，使得R 1及R 2各自獨立地包含6至20個碳原子。舉例而言，在一些實施例中，a為在5至9或8至12範圍內之整數。
在式(III)之一些前述實施例中，至少一次出現之R 7a為H。舉例而言，在一些實施例中，R 7a在每次出現時均為H。在前述之其他不同實施例中，至少一次出現之R 7b為C 1-C 8烷基。舉例而言，在一些實施例中，C 1-C 8烷基為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、正己基或正辛基。
在式(III)之不同實施例中，R 1或R 2具有或兩者均具有以下結構中之一者： ； ； ； ； ； ； ； ； ； 。
在式(III)之一些前述實施例中，R 3為OH、CN、-C(=O)OR 4、-OC(=O)R 4或-NHC(=O)R 4。在一些實施例中，R 4為甲基或乙基。
在各種不同的實施例中，式(III)之陽離子脂質具有下表中所列出之結構中之一者。 表25：式(III)之代表性化合物。
編號 結構
III-1
III-2
III-3
III-4
III-5
III-6
III-7
III-8
III-9
III-10
III-11
III-12
III-13
III-14
III-15
III-16
III-17
III-18
III-19
III-20
III-21
III-22
III-23
III-24
III-25
III-26
III-27
III-28
III-29
III-30
III-31
III-32
III-33
III-34
III-35
III-36
在一些實施例中，LNP包含式(III)之脂質、RNA、中性脂質、類固醇及聚乙二醇化脂質。在一些實施例中，式(III)之脂質為化合物III-3。在一些實施例中，中性脂質為DSPC。在一些實施例中，類固醇為膽固醇。在一些實施例中，聚乙二醇化脂質為ALC-0159。
在一些實施例中，陽離子脂質以約40莫耳%至約50莫耳%之量存在於LNP中。在一個實施例中，中性脂質以約5莫耳%至約15莫耳%之量存在於LNP中。在一個實施例中，類固醇以約35莫耳%至約45莫耳%之量存在於LNP中。在一個實施例中，聚乙二醇化脂質以約1莫耳%至約10莫耳%之量存在於LNP中。
在一些實施例中，LNP包含約40莫耳%至約50莫耳%之量的化合物III-3、約5莫耳%至約15莫耳%之量的DSPC、約35莫耳%至約45莫耳%之量的膽固醇及約1莫耳%至約10莫耳%之量的ALC-0159。
在一些實施例中，LNP包含約47.5莫耳%之量的化合物III-3、約10莫耳%之量的DSPC、約40.7莫耳%之量的膽固醇及約1.8莫耳%之量的ALC-0159。
在各種不同的實施例中，陽離子脂質具有下表中所列出之結構中之一者。 表26：代表性陽離子脂質。
編號 結構
A
B
C
D
E
F
在一些實施例中，LNP包含上表中所示之陽離子脂質(例如式(B)或式(D)之陽離子脂質，特定而言式(D)之陽離子脂質)、RNA、中性脂質、類固醇及聚乙二醇化脂質。在一些實施例中，中性脂質為DSPC。在一些實施例中，類固醇為膽固醇。在一些實施例中，聚乙二醇化脂質為DMG-PEG 2000。
在一個實施例中，LNP包含陽離子脂質，該陽離子脂質為可電離之脂質樣物質(類脂質)。在一個實施例中，陽離子脂質具有以下結構：
N/P值較佳為至少約4。在一些實施例中，N/P值在4至20、4至12、4至10、4至8或5至7範圍內。在一個實施例中，N/P值為約6。
在一個實施例中，本文所闡述之LNP之平均直徑可在約30 nm至約200 nm或約60 nm至約120 nm範圍內。 RNA 靶向
本揭示案之一些態樣涉及本文所揭示之RNA (例如，編碼疫苗抗原及/或免疫刺激劑之RNA)之靶向遞送。
在一個實施例中，本揭示案涉及靶向肺。若所投與之RNA為編碼疫苗抗原之RNA，則尤佳靶向肺。RNA可遞送至肺，例如藉由吸入投與可調配成如本文所闡述之顆粒(例如脂質顆粒)之RNA。
在一個實施例中，本揭示案涉及靶向淋巴系統、特定而言次級淋巴樣器官、更具體而言脾。若所投與之RNA為編碼疫苗抗原之RNA，則尤佳靶向淋巴系統、特定而言次級淋巴樣器官、更具體而言脾。
在一個實施例中，靶細胞為脾細胞。在一個實施例中，靶細胞為抗原呈遞細胞，諸如脾臟中之專職抗原呈遞細胞。在一個實施例中，靶細胞為脾中之樹突細胞。
「淋巴系統」係循環系統之一部分且係免疫系統之一個重要部分，其包含攜帶淋巴之淋巴管網路。淋巴系統由淋巴器官、淋巴管傳導網路及循環淋巴組成。初級或中樞淋巴樣器官自未成熟之祖細胞生成淋巴球。胸腺及骨髓構成初級淋巴樣器官。包括淋巴結及脾之次級或外周淋巴樣器官維持成熟的初始淋巴球並引發適應性免疫反應。
RNA可藉由所謂的脂質體複合物調配物遞送至脾，其中RNA結合至包含陽離子脂質及視情況額外或輔助脂質之脂質體，以形成可注射之奈米顆粒調配物。脂質體可藉由將脂質在乙醇中之溶液注射至水或適宜水相中來獲得。可藉由將脂質體與RNA混合來製備RNA脂質複合物顆粒。脾靶向RNA脂質複合物顆粒闡述於WO 2013/143683中，其以引用方式併入本文中。已發現，具有淨負電荷之RNA脂質複合物顆粒可用於優先靶向脾組織或脾細胞，諸如抗原呈遞細胞、特定而言樹突細胞。因此，在投與RNA脂質複合物顆粒後，脾中發生RNA累積及/或RNA表現。因此，本揭示案之RNA脂質複合物顆粒可用於在脾中表現RNA。在一個實施例中，在投與RNA脂質複合物顆粒後，在肺及/或肝中沒有或基本上沒有發生RNA累積及/或RNA表現。在一個實施例中，在投與RNA脂質複合物顆粒後，在抗原呈遞細胞(諸如脾中之專職抗原呈遞細胞)中發生RNA累積及/或RNA表現。因此，本揭示案之RNA脂質複合物顆粒可用於在此等抗原呈遞細胞中表現RNA。在一個實施例中，抗原呈遞細胞為樹突細胞及/或巨噬細胞。
本揭示案之RNA脂質複合物顆粒之電荷為存在於至少一種陽離子脂質中之電荷及存在於RNA中之電荷的總和。電荷比為存在於至少一種陽離子脂質中之正電荷與存在於RNA中之負電荷之比率。藉由以下方程式計算存在於至少一種陽離子脂質中之正電荷與存在於RNA中之負電荷之電荷比：電荷比=[(陽離子脂質濃度(mol)) * (陽離子脂質中之正電荷總數)] / [(RNA濃度(mol)) * (RNA中之負電荷總數)]。
本文所闡述之脾靶向RNA脂質複合物顆粒在生理pH下較佳具有淨負電荷，諸如正電荷與負電荷之電荷比為約1.9:2至約1:2，或約1.6:2至約1:2，或約1.6:2至約1.1:2。在具體實施例中，生理pH下RNA脂質複合物顆粒中正電荷與負電荷之電荷比為約1.9:2.0、約1.8:2.0、約1.7:2.0、約1.6:2.0、約1.5:2.0、約1.4:2.0、約1.3:2.0、約1.2:2.0、約1.1:2.0或約1:2.0。
可藉由向個體投與編碼調配物中之免疫刺激劑之RNA向個體提供免疫刺激劑，該調配物用於將RNA優先遞送至肝或肝組織。若期望表現大量之免疫刺激劑及/或若期望或需要全身性存在免疫刺激劑，特定而言以顯著量，則尤佳將RNA遞送至此類靶器官或組織。
RNA遞送系統對肝臟有固有偏好。此涉及基於脂質之顆粒、陽離子及中性奈米顆粒，特定而言生物結合物中之脂質奈米顆粒，諸如脂質體、奈米膠束及親脂性配位體。肝累積由肝血管系統或脂質代謝(脂質體及脂質或膽固醇結合物)之不連續性質引起。
對於RNA向肝臟之活體內遞送，可使用藥物遞送系統藉由防止RNA降解而將其轉運至肝臟。舉例而言，由聚(乙二醇) (PEG)包被之表面及含有mRNA之核心組成的多聚複合物奈米膠束係有用之系統，此乃因奈米膠束在生理條件下提供RNA之優良活體內穩定性。此外，由緻密PEG柵欄組成之多聚複合物奈米膠束表面提供之隱身性質有效地逃避宿主免疫防禦。
用於靶向肝臟之適宜免疫刺激劑之實例為參與T細胞增殖及/或維持之細胞介素。適宜細胞介素之實例包括IL2或IL7、其片段及變異體，以及該等細胞介素、片段及變異體之融合蛋白，諸如延伸之PK細胞介素。
在另一實施例中，編碼免疫刺激劑之RNA可以調配物形式投與，以優先遞送RNA至淋巴系統、特定而言次級淋巴樣器官、更具體而言脾。若期望免疫刺激劑存在於該器官或組織中(例如，用於誘導免疫反應，特定而言在T細胞引發期間需要免疫刺激劑諸如細胞介素之情況下或用於活化駐留免疫細胞)，而不期望免疫刺激劑全身性存在，特定而言以顯著量存在(例如，由於免疫刺激劑具有全身毒性)，則尤佳將免疫刺激劑遞送至此類靶組織。
適宜免疫刺激劑之實例為參與T細胞引發之細胞介素。適宜細胞介素之實例包括IL12、IL15、IFN-α或IFN-β、其片段及變異體，以及該等細胞介素、片段及變異體之融合蛋白，諸如延伸之PK細胞介素。 免疫刺激劑
在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA可為非免疫原性的。在該實施例及其他實施例中，編碼疫苗抗原之RNA可與免疫刺激劑或編碼免疫刺激劑之RNA共投與。若免疫刺激劑連接至藥物動力學修飾基團(下文稱為「延伸之藥物動力學(PK)」免疫刺激劑)，則本文所闡述之方法及劑尤其有效。若以編碼免疫刺激劑之RNA之形式投與免疫刺激劑，則本文所闡述之方法及劑尤其有效。在一個實施例中，該RNA靶向肝臟用於全身利用。肝細胞可有效地經轉染且能夠產生大量蛋白質。
「免疫刺激劑」係藉由誘導任何免疫系統組分、特定而言免疫效應細胞之活化或增加其活性來刺激免疫系統之任何物質。免疫刺激劑可為促發炎性的。
根據一個態樣，免疫刺激劑為細胞介素或其變異體。細胞介素之實例包括干擾素，諸如干擾素-α (IFN-α)或干擾素-γ (IFN-γ)；介白素，諸如IL2、IL7、IL12、IL15及IL23；群落刺激因子，諸如M-CSF及GM-CSF；以及腫瘤壞死因子。根據另一態樣，免疫刺激劑包括佐劑型免疫刺激劑，諸如APC類鐸受體促效劑或共刺激/細胞黏附膜蛋白。類鐸受體促效劑之實例包括共刺激/黏附蛋白，諸如CD80、CD86及ICAM-1。
細胞介素係一類在細胞信號傳導中重要的小蛋白(約5-20 kDa)。其釋放對其周圍細胞之行為具有效應。細胞介素作為免疫調節劑參與自分泌信號傳導、旁分泌信號傳導及內分泌信號傳導。細胞介素包括趨化介素、干擾素、介白素、淋巴介質及腫瘤壞死因子，但通常不包括激素或生長因子(儘管術語中有一些重疊)。細胞介素由眾多種細胞產生，包括免疫細胞如巨噬細胞、B淋巴球、T淋巴球及肥大細胞，以及內皮細胞、纖維母細胞及各種基質細胞。給定細胞介素可由一種以上類型之細胞產生。細胞介素經由受體起作用，且在免疫系統中尤其重要；細胞介素調節體液與基於細胞之免疫反應之間的平衡，且其調控特定細胞群體之成熟、生長及反應性。一些細胞介素以複雜方式增強或抑制其他細胞介素之作用。
根據本揭示案，細胞介素可為天然細胞介素或其功能片段或變異體。細胞介素可為人類細胞介素，且可來源於任何脊椎動物，尤其任何哺乳動物。一種尤佳之細胞介素為干擾素-α。 干擾素
干擾素(IFN)係一組由宿主細胞因應於幾種病原體(諸如病毒、細菌、寄生蟲以及腫瘤細胞)之存在而產生並釋放之信號傳導蛋白。在典型情況下，病毒感染之細胞將釋放干擾素，此引起附近細胞提高其抗病毒防禦。
基於干擾素發出信號所經由受體之類型，干擾素通常分為三類：I型干擾素、II型干擾素及III型干擾素。
所有I型干擾素結合至稱為IFN-α/β受體(IFNAR)之特異性細胞表面受體複合物，該IFN-α/β受體由IFNAR1及IFNAR2鏈組成。
存在於人類中之I型干擾素為IFNα、IFNβ、IFNε、IFNκ及IFNω。一般而言，當機體識別已侵入機體之病毒時，產生I型干擾素。其由纖維母細胞及單核球產生。一旦釋放，I型干擾素即結合至靶細胞上之特異性受體，此導致蛋白質之表現，該蛋白質將阻止病毒產生及複製其RNA及DNA。
IFNα蛋白主要由漿細胞樣樹突細胞(pDC)產生。其主要參與抗病毒感染之先天性免疫。負責其合成之基因有13種亞型，稱為IFNA1、IFNA2、IFNA4、IFNA5、IFNA6、IFNA7、IFNA8、IFNA10、IFNA13、IFNA14、IFNA16、IFNA17、IFNA21。該等基因一起存在於染色體9上之簇中。
IFNβ蛋白由纖維母細胞大量產生。其具有主要參與先天性免疫反應之抗病毒活性。已闡述兩種類型之IFNβ，亦即IFNβ1及IFNβ3。IFNβ1之天然及重組形式具有抗病毒、抗細菌及抗癌性質。
II型干擾素(人類中之IFNγ)亦稱為免疫干擾素並由IL12活化。此外，II型干擾素由細胞毒性T細胞及T輔助細胞釋放。
III型干擾素經由由IL10R2 (亦稱為CRF2-4)及IFNLR1 (亦稱為CRF2-12)組成之受體複合物發出信號。儘管較I型及II型IFN更晚發現，但最近資訊證明III型IFN在一些類型之病毒或真菌感染中之重要性。
通常，I型及II型干擾素負責調控及活化免疫反應。
根據本揭示案，I型干擾素較佳為IFNα或IFNβ，更佳為IFNα。
根據本揭示案，干擾素可為天然干擾素或其功能片段或變異體。干擾素可為人類干擾素，且可來源於任何脊椎動物，尤其任何哺乳動物。 介白素
介白素(IL)係一組細胞介素(分泌之蛋白質及信號分子)，基於區別性結構特徵可分為四個主要群組。然而，其胺基酸序列相似性相當弱(通常為15%-25%一致性)。人類基因體編碼50種以上之介白素及相關蛋白質。
根據本揭示案，介白素可為天然介白素或其功能片段或變異體。介白素可為人類介白素，且可來源於任何脊椎動物，尤其任何哺乳動物。 延伸之PK基團
本文所闡述之免疫刺激多肽可製備為包括免疫刺激劑部分及異源多肽(亦即不為免疫刺激劑之多肽)之融合或嵌合多肽。免疫刺激劑可與延伸之PK基團融合，此延長循環半衰期。下文闡述延伸之PK基團之非限制性實例。應理解，延長免疫刺激劑(諸如細胞介素或其變異體)之循環半衰期之其他PK基團亦適用於本揭示案。在某些實施例中，延伸之PK基團為血清白蛋白結構域(例如小鼠血清白蛋白、人類血清白蛋白)。
如本文所用，術語「PK」係「藥物動力學」之首字母縮寫詞且涵蓋化合物之性質，包括例如個體之吸收、分佈、代謝及消除。如本文所用，「延伸之PK基團」係指當與生物活性分子融合或一起投與時延長生物活性分子之循環半衰期之蛋白質、肽或部分。延伸之PK基團之實例包括血清白蛋白(例如HSA)、免疫球蛋白Fc或Fc片段及其變異體、轉鐵蛋白及其變異體以及人類血清白蛋白(HSA)結合劑(如美國公開案第2005/0287153號及第2007/0003549號中所揭示)。其他例示性延伸之PK基團揭示於Kontermann, Expert Opin Biol Ther, 2016年7月;16(7):903-15中，其係以全文引用的方式併入本文中。如本文所用，「延伸之PK」免疫刺激劑係指與延伸之PK基團組合之免疫刺激劑部分。在一個實施例中，延伸之PK免疫刺激劑為其中免疫刺激劑部分與延伸之PK基團連接或融合之融合蛋白。
在某些實施例中，延伸之PK免疫刺激劑之血清半衰期相對於單獨之免疫刺激劑(亦即，未與延伸之PK基團融合之免疫刺激劑)延長。在某些實施例中，延伸之PK免疫刺激劑之血清半衰期相對於單獨之免疫刺激劑之血清半衰期長至少20%、40%、60%、80%、100%、120%、150%、180%、200%、400%、600%、800%或1000%。在某些實施例中，延伸之PK免疫刺激劑之血清半衰期為單獨之免疫刺激劑之血清半衰期的至少1.5倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍、4倍、4.5倍、5倍、6倍、7倍、8倍、10倍、12倍、13倍、15倍、17倍、20倍、22倍、25倍、27倍、30倍、35倍、40倍或50倍。在某些實施例中，延伸之PK免疫刺激劑之血清半衰期為至少10小時、15小時、20小時、25小時、30小時、35小時、40小時、50小時、60小時、70小時、80小時、90小時、100小時、110小時、120小時、130小時、135小時、140小時、150小時、160小時或200小時。
如本文所用，「半衰期」係指化合物(諸如肽或蛋白質)之血清或血漿濃度在活體內降低50%所花費之時間，例如由於降解及/或藉由天然機制之清除或螯合。適用於本文之延伸之PK免疫刺激劑藉由例如與抗降解及/或清除或螯合之血清白蛋白(例如HSA或MSA)融合而在活體內穩定且其半衰期延長。半衰期可以本身已知之任何方式測定，諸如藉由藥物動力學分析。熟習此項技術者熟習適宜技術，且該等技術可例如通常涉及以下步驟：向個體適當地投與適宜劑量之胺基酸序列或化合物；以規則之間隔自該個體收集血液樣品或其他樣品；測定該血液樣品中胺基酸序列或化合物之水準或濃度；以及自由此獲得的數據(之圖)計算投藥後直至胺基酸序列或化合物之水準或濃度與初始水準相比降低50%之時間。其他細節提供於例如標準手冊中，諸如Kenneth, A.等人，Chemical Stability of Pharmaceuticals: A Handbook for Pharmacists，及Peters等人，Pharmacokinetic Analysis: A Practical Approach (1996)。亦參考Gibaldi, M.等人，Pharmacokinetics，第2修訂版，Marcel Dekker (1982)。
在某些實施例中，延伸之PK基團包括血清白蛋白或其片段、或血清白蛋白或其片段之變異體(出於本揭示案之目的，所有該等物質均包括在術語「白蛋白」中)。本文所闡述之多肽可與白蛋白(或其片段或變異體)融合以形成白蛋白融合蛋白。此等白蛋白融合蛋白闡述於美國公開案第20070048282中。
如本文所用，「白蛋白融合蛋白」係指藉由至少一個白蛋白分子(或其片段或變異體)與至少一個蛋白質分子(諸如治療性蛋白質、特定而言免疫刺激劑)融合而形成的蛋白質。白蛋白融合蛋白可藉由核酸之轉譯產生，其中編碼治療性蛋白質之多核苷酸與編碼白蛋白之多核苷酸符合讀框地接合。治療性蛋白質及白蛋白一旦成為白蛋白融合蛋白之一部分，則可各自稱為白蛋白融合蛋白之「部分(portion)」、「區域」或「部分(moiety)」(例如「治療性蛋白質部分」或「白蛋白蛋白質部分」)。在高度較佳實施例中，白蛋白融合蛋白包含至少一個治療性蛋白質分子(包括但不限於治療性蛋白質之成熟形式)及至少一個白蛋白分子(包括但不限於白蛋白之成熟形式)。在一個實施例中，白蛋白融合蛋白由宿主細胞(諸如用於投與RNA之靶器官之細胞，例如肝細胞)加工，且分泌至循環中。在用於表現RNA之宿主細胞之分泌路徑中發生的新生白蛋白融合蛋白之加工可包括(但不限於)信號肽裂解；二硫鍵之形成；正確摺疊；碳水化合物之添加及加工(諸如N-及O-連接之糖基化)；特異性蛋白水解裂解；及/或組裝成多聚體蛋白質。白蛋白融合蛋白較佳以非加工形式由RNA編碼，特定而言在其N末端具有信號肽，且在由細胞分泌後較佳以加工形式存在，其中特定而言信號肽已裂解。在最佳實施例中，「白蛋白融合蛋白之加工形式」係指已經歷N末端信號肽裂解之白蛋白融合蛋白產物，在本文中亦稱為「成熟白蛋白融合蛋白」。
在較佳實施例中，與未同白蛋白融合之相同治療性蛋白質之血漿穩定性相比，包含治療性蛋白質之白蛋白融合蛋白具有更高之血漿穩定性。血漿穩定性通常係指治療性蛋白質在活體內投與並攜帶至血流中時與治療性蛋白質降解並自血流中清除進入器官(諸如腎或肝)中時之間的時間段，器官最終將治療性蛋白質自身體中清除。根據治療性蛋白質在血流中之半衰期計算血漿穩定性。治療性蛋白質在血流中之半衰期可藉由此項技術中已知之常用分析容易地測定。
如本文所用，「白蛋白」統稱為白蛋白或胺基酸序列、或具有白蛋白之一或多種功能活性(例如生物活性)之白蛋白片段或變異體。特定而言，「白蛋白」係指人類白蛋白或其片段或變異體，尤其人類白蛋白之成熟形式，或來自其他脊椎動物之白蛋白或其片段，或該等分子之變異體。白蛋白可來源於任何脊椎動物，尤其任何哺乳動物，例如人類、牛、綿羊或豬。非哺乳動物白蛋白包括(但不限於)母雞及鮭魚。白蛋白融合蛋白之白蛋白部分可來自與治療性蛋白質部分不同的動物。
在某些實施例中，白蛋白為人類血清白蛋白(HSA)、或其片段或變異體，諸如US 5,876,969、WO 2011/124718、WO 2013/075066及WO 2011/0514789中所揭示者。
術語人類血清白蛋白(HSA)及人類白蛋白(HA)在本文中可互換使用。術語「白蛋白」及「血清白蛋白」更廣泛，且涵蓋人類血清白蛋白(及其片段及變異體)以及來自其他物種之白蛋白(及其片段及變異體)。
如本文所用，足以延長治療性蛋白質之治療活性或血漿穩定性之白蛋白片段係指在長度或結構上足以穩定或延長蛋白質之治療活性或血漿穩定性之白蛋白片段，使得白蛋白融合蛋白之治療性蛋白質部分之血漿穩定性與非融合狀態下之血漿穩定性相比得到延長或延伸。
白蛋白融合蛋白之白蛋白部分可包含白蛋白序列之全長，或可包括能夠穩定或延長治療活性或血漿穩定性之其一或多個片段。此等片段之長度可為10個或更多個胺基酸，或可包括來自白蛋白序列之約15、20、25、30、50或更多個鄰接胺基酸，或可包括白蛋白之部分或全部特定結構域。舉例而言，可使用跨越前兩個免疫球蛋白樣結構域之HSA之一或多個片段。在較佳實施例中，HSA片段係HSA之成熟形式。
一般而言，白蛋白片段或變異體將為至少100個胺基酸長，較佳至少150個胺基酸長。
根據本揭示案，白蛋白可為天然白蛋白或其片段或變異體。白蛋白可為人類白蛋白，且可來源於任何脊椎動物，尤其任何哺乳動物。
較佳地，白蛋白融合蛋白包含白蛋白作為N末端部分，及治療性蛋白質作為C末端部分。或者，亦可使用包含白蛋白作為C末端部分及治療性蛋白質作為N末端部分之白蛋白融合蛋白。在其他實施例中，白蛋白融合蛋白具有同時融合至白蛋白N末端及C末端之治療性蛋白質。在較佳實施例中，在N末端及C末端融合之治療性蛋白質為相同的治療性蛋白質。在另一較佳實施例中，在N末端及C末端融合之治療性蛋白質為不同的治療性蛋白質。在一個實施例中，不同的治療性蛋白質均為細胞介素。
在一個實施例中，治療性蛋白質經由肽連接體與白蛋白接合。融合部分之間的連接體肽可在部分之間提供更大的物理間隔，且因此使治療性蛋白質部分之可及性最大化，例如，用於結合其同源受體。連接體肽可由胺基酸組成，使得其為撓性的或更剛性的。連接體序列可藉由蛋白酶或化學方法裂解。
如本文所用，術語「Fc區」係指由其兩條重鏈之各別Fc結構域(或Fc部分)形成的天然免疫球蛋白之部分。如本文所用，術語「Fc結構域」係指單一免疫球蛋白(Ig)重鏈之一部分或片段，其中Fc結構域不包含Fv結構域。在某些實施例中，Fc結構域起始於恰好在木瓜蛋白酶裂解位點上游之鉸鏈區且終止於抗體之C末端。因此，完整Fc結構域至少包含鉸鏈結構域、CH2結構域及CH3結構域。在某些實施例中，Fc結構域包含以下中之至少一者：鉸鏈(例如上、中及/或下鉸鏈區)結構域、CH2結構域、CH3結構域、CH4結構域或其變異體、部分或片段。在某些實施例中，Fc結構域包含完整Fc結構域(亦即鉸鏈結構域、CH2結構域及CH3結構域)。在某些實施例中，Fc結構域包含與CH3結構域(或其部分)融合之鉸鏈結構域(或其部分)。在某些實施例中，Fc結構域包含與CH3結構域(或其部分)融合之CH2結構域(或其部分)。在某些實施例中，Fc結構域由CH3結構域或其部分組成。在某些實施例中，Fc結構域由鉸鏈結構域(或其部分)及CH3結構域(或其部分)組成。在某些實施例中，Fc結構域由CH2結構域(或其部分)及CH3結構域組成。在某些實施例中，Fc結構域由鉸鏈結構域(或其部分)及CH2結構域(或其部分)組成。在某些實施例中，Fc結構域缺少CH2結構域之至少一部分(例如CH2結構域之全部或一部分)。本文中之Fc結構域通常係指包含免疫球蛋白重鏈之Fc結構域之全部或一部分之多肽。此包括(但不限於)包含整個CH1、鉸鏈、CH2及/或CH3結構域之多肽，以及僅包含例如鉸鏈、CH2及CH3結構域之此類肽之片段。Fc結構域可來源於任何物種及/或任何亞型之免疫球蛋白，包括(但不限於)人類IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgD、IgA、IgE或IgM抗體。Fc結構域涵蓋天然Fc及Fc變異體分子。如本文所闡述，熟習此項技術者將理解，可修飾任何Fc結構域，使得其在胺基酸序列上不同於天然免疫球蛋白分子之天然Fc結構域。在某些實施例中，Fc結構域具有降低之效應功能(例如FcγR結合)。
本文所闡述之多肽之Fc結構域可來源於不同的免疫球蛋白分子。舉例而言，多肽之Fc結構域可包含來源於IgG1分子之CH2及/或CH3結構域及來源於IgG3分子之鉸鏈區。在另一實例中，Fc結構域可包含部分來源於IgG1分子且部分來源於IgG3分子之嵌合鉸鏈區。在另一實例中，Fc結構域可包含部分來源於IgG1分子及部分來源於IgG4分子之嵌合鉸鏈。
在某些實施例中，延伸之PK基團包括Fc結構域或其片段、或Fc結構域或其片段之變異體(出於本揭示案之目的，所有該等物質均包括在術語「Fc結構域」中)。Fc結構域不含與抗原結合之可變區。適用於本揭示案之Fc結構域可自多種不同來源獲得。在某些實施例中，Fc結構域來源於人類免疫球蛋白。在某些實施例中，Fc結構域來自人類IgG1恆定區。然而，應理解，Fc結構域可來源於另一哺乳動物物種之免疫球蛋白，包括例如齧齒類動物(例如小鼠、大鼠、兔、豚鼠)或非人類靈長類動物(例如黑猩猩、獼猴)物種。
此外，Fc結構域(或其片段或變異體)可來源於任何免疫球蛋白類別，包括IgM、IgG、IgD、IgA及IgE，以及任何免疫球蛋白同型，包括IgG1、IgG2、IgG3及IgG4。
多種Fc結構域基因序列(例如小鼠及人類恆定區基因序列)可以公眾可及之保藏物形式獲得。可選擇缺乏特定效應功能及/或具有特定修飾以降低免疫原性的包含Fc結構域序列之恆定區結構域。已公佈抗體及抗體編碼基因之許多序列，且可使用此項技術中公認之技術自該等序列衍生適宜Fc結構域序列(例如鉸鏈、CH2及/或CH3序列、或其片段或變異體)。
在某些實施例中，該延伸之PK基團為血清白蛋白結合蛋白，諸如US2005/0287153、US2007/0003549、US2007/0178082、US2007/0269422、US2010/0113339、WO2009/083804及WO2009/133208中闡述之彼等血清白蛋白結合蛋白，該等文獻係以全文引用的方式併入本文中。在某些實施例中，延伸之PK基團為轉鐵蛋白，如US 7,176,278及US 8,158,579中所揭示，該等文獻係以全文引用的方式併入本文中。在某些實施例中，延伸之PK基團為血清免疫球蛋白結合蛋白，諸如US2007/0178082、US2014/0220017及US2017/0145062中所揭示之彼等血清免疫球蛋白結合蛋白，該等文獻係以全文引用的方式併入本文中。在某些實施例中，延伸之PK基團為結合血清白蛋白的基於纖連蛋白(Fn)之支架結構域蛋白，如US2012/0094909中所揭示之彼等支架結構域蛋白，該案係以全文引用的方式併入本文中。製備基於纖連蛋白之支架結構域蛋白之方法亦揭示於US2012/0094909中。基於Fn3之延伸之PK基團之非限制性實例為Fn3(HSA)，亦即結合人類血清白蛋白之Fn3蛋白。
在某些態樣中，適於根據本揭示案使用的延伸之PK免疫刺激劑可採用一或多個肽連接體。如本文所用，術語「肽連接體」係指在多肽鏈之線性胺基酸序列中連結兩個或更多個結構域(例如延伸之PK部分及免疫刺激劑部分)之肽或多肽序列。舉例而言，肽連接體可用於將免疫刺激劑部分連結至HSA結構域。
適於將延伸之PK基團與例如免疫刺激劑融合之連接體為此項技術中所熟知。例示性連接體包括甘胺酸-絲胺酸-多肽連接體、甘胺酸-脯胺酸-多肽連接體及脯胺酸-丙胺酸多肽連接體。在某些實施例中，連接體為甘胺酸-絲胺酸-多肽連接體，亦即由甘胺酸及絲胺酸殘基組成之肽。
除了或代替上述異源多肽以外，本文所闡述之免疫刺激多肽亦可含有編碼「標誌物」或「報導子」之序列。標誌物或報導基因之實例包括β-內醯胺酶、氯黴素乙醯轉移酶(CAT)、腺苷去胺酶(ADA)、胺基糖苷磷酸轉移酶、二氫葉酸還原酶(DHFR)、潮黴素-B-磷酸轉移酶(HPH)、胸苷激酶(TK)、β-半乳糖苷酶及黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶(XGPRT)。 醫藥組合物
本文所闡述之劑可以醫藥組合物或藥劑形式投與，且可以適宜醫藥組合物之形式投與。
在一些實施例中，本文所闡述之醫藥組合物係用於誘導針對與至少兩種傳染原(包括例如至少三種傳染原)相關之抗原性多肽之免疫反應的免疫原性組合物。在一些實施例中，至少兩種傳染原可包含冠狀病毒及非冠狀病毒呼吸病毒。在一些實施例中，至少兩種傳染原可包含冠狀病毒及流行性感冒病毒。在一些實施例中，至少兩種傳染原可包含冠狀病毒、流行性感冒病毒及呼吸道融合病毒。
在一些實施例中，醫藥組合物可包含兩種或更多種不同組合物，例如相對於第一傳染原(例如SARS-CoV-2)具有免疫原性之第一組合物及相對於第二傳染原(例如流行性感冒)具有免疫原性之第二組合物。
或者或另外，在一些實施例中，醫藥組合物(且在一些實施例中，一起構成根據本揭示案使用之醫藥組合物之複數種組合物中之個別組合物)可包含兩種或更多種活性劑(例如兩種或更多種RNA，其各自編碼不同的免疫原性多肽)。
在一個實施例中，本文所闡述之醫藥組合物係用於在個體中誘導針對冠狀病毒及流行性感冒之免疫反應的免疫原性組合物。在一些實施例中，此一免疫原性組合物包含一或多種RNA，其各自編碼與冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽。在一些實施例中，此一免疫原性組合物包含或遞送與一或多種流行性感冒病毒相關之一或多種抗原性多肽。在一些實施例中，免疫原性組合物包含商業上獲批之流行性感冒疫苗(例如，在一些實施例中，免疫原性組合物包含(i)一或多種RNA，其各自編碼與冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽，及(ii)商業上獲批之流行性感冒疫苗)。在一些實施例中，免疫原性組合物包含(i)不活化之流行性感冒病毒(例如Fluzone®、Fluzone high-dose quadrivalent®、Fluzone quadrivalent®、Fluzone intradermal quardivalent®、Fluzone quadrivalent southern hemisphere®、Fluad®、Fluad quadrivalent®、Afluria Quardivalent®、Fluarix Quadrivalent®、FluLaval Quadrivalent®或Flucelvax Quadrivalent®)、重組流行性感冒疫苗(例如Flublok quadrivalent®)、活減毒流行性感冒疫苗(例如FluMist Quadrivalent®)、無佐劑流行性感冒疫苗、含佐劑流行性感冒疫苗或亞單位或裂解疫苗，及(ii)一或多種RNA，其各自編碼與冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽。在一些實施例中，免疫原性組合物包含(i)不活化之流行性感冒病毒(例如Fluzone®、Fluzone high-dose quadrivalent®、Fluzone quadrivalent®、Fluzone intradermal quardivalent®、Fluzone quadrivalent southern hemisphere®、Fluad®、Fluad quadrivalent®、Afluria Quardivalent®、Fluarix Quadrivalent®、FluLaval Quadrivalent®或Flucelvax Quadrivalent®)及(ii)一或多種RNA，其各自編碼與冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽。在一些實施例中，免疫原性組合物包含(i) Fluzone®、Fluzone high-dose quadrivalent®、Fluzone quadrivalent®、Fluzone intradermal quardivalent®或Fluzone quadrivalent southern hemisphere®，及(ii)一或多種RNA，其各自編碼與冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽。在一些實施例中，免疫原性組合物包含(i)重組流行性感冒疫苗(例如Flublok quadrivalent®)，及(ii)一或多種RNA，其各自編碼與冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽。
在一個實施例中，本文所闡述之醫藥組合物係用於在個體中誘導針對冠狀病毒及RSV之免疫反應的免疫原性組合物。在一些實施例中，免疫原性組合物包含(i)此項技術中已知之RSV疫苗(例如本文所闡述之RSV疫苗)，及(ii)一或多種RNA，其各自編碼與冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽。在一些實施例中，免疫原性組合物包含(i)一或多種RNA，其各自編碼與冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽，及(ii) RSV疫苗(例如RSVpreF)。
在一個實施例中，本文所闡述之醫藥組合物係用於在個體中誘導針對冠狀病毒、流行性感冒及RSV之免疫反應的免疫原性組合物。在一些實施例中，免疫原性組合物包含(i)此項技術中已知之RSV疫苗(例如本文所闡述之RSV疫苗)，(ii)一或多種RNA，其各自編碼與冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽，及(iii)一或多種RNA，其各自編碼與流行性感冒病毒相關之一或多種抗原性多肽。在一些實施例中，免疫原性組合物包含(i)此項技術中已知之RSV疫苗(例如RSVpreF)，(ii)一或多種RNA，其各自編碼與冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽，及(iii)一或多種RNA，其各自編碼與流行性感冒病毒相關之一或多種抗原性多肽。在一些實施例中，免疫原性組合物包含(i)此項技術中已知之RSV疫苗(例如本文所闡述之RSV疫苗)，(ii)一或多種RNA，其各自編碼與冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽，及(iii)市售流行性感冒疫苗(例如本文所闡述之流行性感冒疫苗)。
在一些實施例中，免疫原性組合物包含(i) RSVpreF，(ii)一或多種RNA，其各自編碼與冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽，及(iii) Fluzone®、Fluzone high-dose quadrivalent®、Fluzone quadrivalent®、Fluzone intradermal quardivalent®或Fluzone quadrivalent southern hemisphere®。在一些實施例中，免疫原性組合物包含(i) RSVpreF，(ii)一或多種RNA，其各自編碼與冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽，及(iii)重組流行性感冒疫苗(例如Flublok)。
在一些實施例中，免疫原性組合物包含(i)一或多種RNA，其各自編碼與冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽，及(ii) RSV疫苗(例如RSVpreF)。
在一些實施例中，免疫原性組合物包含一或多種RNA，其各自編碼與流行性感冒病毒相關之一或多種抗原性多肽。在一些實施例中，免疫原性組合物包含一或多種RNA，其各自編碼與流行性感冒病毒相關之一或多種抗原性多肽，其中該一或多種RNA闡述於本文中。在一些實施例中，免疫原性組合物包含一或多種RNA，其各自編碼與流行性感冒疫苗相關之一或多種此項技術中已知之抗原性多肽(例如Feldman, Robert A.等人，「mRNA vaccines against H10N8 and H7N9 influenza viruses of pandemic potential are immunogenic and well tolerated in healthy adults in phase 1 randomized clinical trials.」Vaccine 37.25 (2019): 3326-3334中所闡述之RNA，該文獻之內容係以全文引用的方式併入本文中)。
在RSV疫苗與(i) SARS-CoV-2疫苗或(ii) SARS-CoV-2及流行性感冒疫苗共投與或共調配之實施例中(例如在RSV疫苗(例如RSVpreF)與(i)一或多種RNA，其各自編碼包含與SARS-CoV-2毒株或變異體相關之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段，(ii)一或多種RNA，其各自編碼包含與SARS-CoV-2毒株或變異體相關之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段，及一或多種RNA，其各自編碼不同的流行性感冒毒株之抗原，或(iii)一或多種RNA，其各自編碼包含與SARS-CoV-2毒株或變異體相關之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段，及市售流行性感冒疫苗(例如本文所闡述之市售疫苗)共投與或共調配之實施例中)，RSV疫苗可以如下劑量投與：(a)標準或批准劑量，(b)已在臨床試驗中測試，(c)計劃在臨床試驗中測試，及/或(d)在臨床試驗中已顯示出功效。舉例而言，在一些實施例中，RSVpreF可以約60 μg、約120 μg或約240 μg總抗原之量共投與或共調配。在一些實施例中，RSV疫苗(例如RSVpreF)與SARS-CoV-2疫苗(例如本文所闡述之SARS-CoV-2二價疫苗)以約0.8 mL之組合量投與。在一些實施例中，將RSV疫苗共投與給60歲及以上之個體。在一些實施例中，將RSV疫苗共投與給65歲及以上之個體。在一些實施例中，RSV疫苗(例如以約60 μg、約120 μg或約240 μg之劑量投與之RSVpreF)與本文所闡述之SARS-CoV-2疫苗或本文所闡述之SARS-CoV-2/流行性感冒組合之共投與使得針對RSV A及/或RSV B毒株之中和效價增加(例如如在投與後28天所量測)。在一些實施例中，RSV疫苗(例如以約60 μg、約120 μg或約240 μg之劑量投與之RSVpreF)與本文所闡述之SARS-CoV-2疫苗或本文所闡述之SARS-CoV-2/流行性感冒組合之共投與所產生的中和效價不次於單獨投與之RSV疫苗、SARS-CoV-2疫苗或流行性感冒疫苗所誘導之中和效價。在一些實施例中，將RSV疫苗(例如以約60 μg、約120 μg或約240 μg之劑量投與之RSVpreF)與本文所闡述之SARS-CoV-2疫苗或本文所闡述之SARS-CoV-2/流行性感冒組合共投與給先前已投與3劑或更多劑SARS-CoV-2疫苗(例如FDA批准之SARS-CoV-2疫苗，例如如本文所闡述)之個體，最近的劑量為至少約2個月前(例如至少3個月前、至少5個月前、至少6個月前或至少150天前)投與之更新的加強劑疫苗。
在一些實施例中，本文所闡述之免疫原性組合物包含至少一種編碼與流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之RNA，且包含或遞送至少一種與冠狀病毒相關之抗原性多肽。在一些實施例中，免疫原性組合物包含經批准或授權之SARS-CoV-2疫苗(例如mRNA-1273疫苗、Ad26.CoV2.S疫苗、ChAdxOx1疫苗、NVX-CoV2373疫苗、CvnCoV疫苗、GAM-COVID0Vac疫苗、CoronaVac疫苗、BBIBP-CorV疫苗、Ad5-nCoV疫苗、zf2001疫苗、SCB-2019疫苗、JNJ 78436735疫苗或其他經批准之mRNA或腺載體疫苗等)。
在一些實施例中，本文所闡述之免疫原性組合物為疫苗。
在本揭示案之所有態樣之一個實施例中，本文所闡述之組分(諸如編碼疫苗抗原之RNA)可以醫藥組合物投與，該醫藥組合物可包含醫藥學上可接受之載劑，且可視情況包含一或多種佐劑、穩定劑等。在一個實施例中，該醫藥組合物用於治療性或預防性治療，例如用於治療或預防冠狀病毒感染。
術語「醫藥組合物」係指包含治療有效劑、較佳連同醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑及/或賦形劑之調配物。藉由向個體投與該醫藥組合物，該醫藥組合物可用於治療、預防疾病或病症或降低其嚴重程度。醫藥組合物在此項技術中亦稱為醫藥調配物。
本揭示案之醫藥組合物可包含一或多種佐劑，或可與一或多種佐劑一起投與。術語「佐劑」係指延長、增強或加速免疫反應之化合物。佐劑包括一組異質化合物，諸如油乳劑(例如弗氏佐劑(Freund's adjuvant))、礦物化合物(諸如明礬)、細菌產物(諸如百日咳桿菌(Bordetella pertussis)毒素)或免疫刺激複合物。佐劑之實例包括(但不限於) LPS、GP96、CpG寡去氧核苷酸、生長因子及細胞介素，諸如單核因子、淋巴介質、介白素、趨化介素。細胞介素可為IL1、IL2、IL3、IL4、IL5、IL6、IL7、IL8、IL9、IL10、IL12、IFNα、IFNγ、GM-CSF、LT-a。其他已知之佐劑為氫氧化鋁、角鯊烯、MF59、AddaVax、弗氏佐劑或油，諸如Montanide® ISA51。用於本揭示案之其他適宜佐劑包括脂肽，諸如Pam3Cys。
根據本揭示案之醫藥組合物通常以「醫藥學上之有效量」及「醫藥學上可接受之製劑」投與。
術語「醫藥學上可接受」係指不與醫藥組合物之活性組分之作用相互作用的材料之無毒性。
術語「醫藥學上之有效量」或「治療有效量」係指單獨或與其他劑量一起達成期望反應或期望效應之量。在治療特定疾病之情況下，期望反應較佳係關於抑制疾病之進程。此包含減緩疾病之進展，且特定而言中斷或逆轉疾病之進展。在疾病治療中之期望反應亦可為延遲該疾病或該疾患之發作或預防該疾病或該疾患之發作。本文所闡述之組合物之有效量將取決於欲治療之疾患、疾病之嚴重程度、患者之個別參數(包括年齡、生理狀況、體型及體重)、治療持續時間、伴隨療法之類型(若存在)、具體投與途徑及類似因素。因此，本文所闡述之組合物之投與劑量可取決於各種此類參數。在患者中之反應在初始劑量下不足之情況下，可使用更高劑量(或藉由不同的、更局部化之投與途徑達成的有效更高劑量)。
本揭示案之醫藥組合物可含有鹽、緩衝劑、防腐劑及視情況其他治療劑。在一個實施例中，本揭示案之醫藥組合物包含一或多種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑及/或賦形劑。
用於本揭示案之醫藥組合物中之適宜防腐劑包括(但不限於)苯扎氯銨、氯丁醇、對羥基苯甲酸酯及硫柳汞。
如本文所用之術語「賦形劑」係指可存在於本揭示案之醫藥組合物中但不為活性成分之物質。賦形劑之實例包括(但不限於)載劑、結合劑、稀釋劑、潤滑劑、增稠劑、表面活性劑、防腐劑、穩定劑、乳化劑、緩衝劑、矯味劑或著色劑。
術語「稀釋劑(diluent)」係指稀釋劑(diluting agent)及/或沖淡劑。此外，術語「稀釋劑」包括流體、液體或固體懸浮液及/或混合介質中之任一或多者。適宜稀釋劑之實例包括乙醇、甘油及水。
術語「載劑」係指可為天然、合成、有機、無機之組分，其中活性組分經組合以便促進、增強或使得能夠投與醫藥組合物。如本文所用之載劑可為一或多種適於投與給個體之相容固體或液體填充劑、稀釋劑或囊封物質。適宜載劑包括(但不限於)無菌水、林格氏溶液(Ringer)、乳酸林格氏溶液、無菌氯化鈉溶液、等滲鹽水、聚伸烷基二醇、氫化萘，及特定而言生物相容之丙交酯聚合物、丙交酯/乙交酯共聚物或聚氧乙烯/聚氧丙烯共聚物。在一個實施例中，本揭示案之醫藥組合物包括等滲鹽水。
用於治療用途之醫藥學上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑為醫藥技術所熟知，且闡述於例如Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co. (A. R Gennaro編輯1985)中。
醫藥載劑、賦形劑或稀釋劑可根據預期投與途徑及標準醫藥實踐來選擇。
在一個實施例中，本文所闡述之醫藥組合物可靜脈內、動脈內、皮下、真皮內或肌內投與。在某些實施例中，醫藥組合物經調配用於局部投與或全身投與。全身投與可包括涉及經由胃腸道吸收之腸內投與，或非經腸投與。如本文所用，「非經腸投與」係指以除經由胃腸道外之任何方式投與，諸如藉由靜脈內注射。在較佳實施例中，醫藥組合物經調配用於肌內投與。在另一實施例中，醫藥組合物經調配用於全身投與，例如用於靜脈內投與。
如本文所用之術語「共投與」係指將不同的化合物或組合物(例如編碼抗原之RNA及編碼免疫刺激劑之RNA)投與給同一患者之過程。不同的化合物或組合物可同時、基本上同時或依序投與。
本文所闡述之醫藥組合物及產品可作為注射用溶液之冷凍濃縮物提供，例如以0.50 mg/mL之濃度提供。在一個實施例中，為製備注射用溶液，將藥物產品解凍且用等滲氯化鈉溶液(例如0.9% NaCl，鹽水)稀釋，例如藉由一步稀釋製程。在一些實施例中，抑菌氯化鈉溶液(例如0.9% NaCl，鹽水)不能用作稀釋劑。在一些實施例中，經稀釋之藥物產品為灰白色懸浮液。注射用最終溶液之濃度端視待投與之各別劑量水準而變化。
在一個實施例中，由於微生物污染之風險且考慮製備過程之多劑量方法，在製備開始後6 h內實施投與。在一個實施例中，在此6 h時間段中，容許兩個條件：室溫製備、處置及轉移，以及2℃至8℃儲存。
本文所闡述之組合物可在溫度受控之條件下運輸及/或儲存，例如約4℃-5℃或更低、約-20℃或更低、-70℃±10℃ (例如-80℃至-60℃)，例如利用冷卻系統(例如，其可為或包括乾冰)以維持期望溫度。在一個實施例中，本文所闡述之組合物在溫度受控之熱裝運箱中運輸。此類裝運箱可含有GPS授權之熱感測器來跟蹤每件貨物之位置及溫度。組合物可藉由用例如乾冰再填充來儲存。
在一些實施例中，本揭示案亦提供包含兩種或更多種最近摻合疫苗之器皿。
在一些實施例中，器皿係適於容納及/或投與疫苗調配物之容器(例如，在適宜儲存條件下不會引起疫苗產品顯著降解、可維持疫苗調配物之無菌性及/或可用於藉由注射來投與疫苗調配物之容器)。在一些實施例中，器皿主要由玻璃或塑膠製成。在一些實施例中，器皿為小瓶(例如玻璃或塑膠小瓶)。在一些實施例中，器皿為注射器(例如玻璃或塑膠注射器)。
如本文所用，術語「摻合物」係指藉由將兩種或更多種藥物產品組合所產生之組合，且術語「摻合疫苗」係指藉由將兩種或更多種疫苗調配物組合所產生之組合(例如，SARS-CoV-2疫苗及流行性感冒疫苗；SARS-CoV-2疫苗及RSV疫苗；流行性感冒疫苗及RSV疫苗；或流行性感冒疫苗、SARS-CoV-2疫苗及RSV疫苗)。在一些實施例中，摻合物包含在投與給個體之前未實質上混合之兩種或更多種藥物產品。在一些實施例中，摻合物包含在投與給個體之前混合之兩種或更多種藥物產品。在一些實施例中，摻合物包含兩種、三種、四種或五種藥物產品。在一些實施例中，摻合物可藉由將兩種或更多種液體藥物產品組合來產生。在一些實施例中，可藉由以下來產生摻合物：(i)在注射器中獲得一定量之第一疫苗，及(ii)使用同一注射器，且不分散該第一疫苗，獲得一定量之第二疫苗(例如，使用與圖3(A)中所示之方法類似之方法)。在一些實施例中，可藉由以下來產生摻合物：(i)在注射器中獲得一定量之第一疫苗，及(ii)使用同一注射器，且不分散該第一疫苗，獲得一定量之第二疫苗，及(iii)使用同一注射器，且不分散該第一疫苗或該第二疫苗，獲得第三疫苗(例如，使用與圖3(B)中所示之方法類似之方法)。在一些實施例中，可藉由用液體藥物產品重懸凍乾藥物產品來形成摻合物(例如，用(i)液體SARS-CoV-2疫苗，(ii)液體流行性感冒疫苗，或(iii)液體SARS-CoV-2/流行性感冒疫苗重構凍乾RSV疫苗)。在一些實施例中，可藉由以下來形成疫苗摻合物：(i)用適當溶劑(例如無菌水)重懸凍乾疫苗，及(ii)將重懸疫苗與一或多種液體疫苗組合(例如，藉由使用本文所闡述之方法合併於小瓶中或合併於注射器中)。在一些實施例中，摻合疫苗包含兩種或更多種疫苗，每種疫苗之量先前已顯示誘導免疫反應，先前已顯示減少與疾病相關之感染及/或有害症狀，及/或已由相關管理機構(例如USFDA或EMA)批准用於針對相關疾病進行疫苗接種。
在一些實施例中，由臨床醫師摻合兩種或更多種疫苗(例如，在即將向個體投與前由臨床醫師摻合)。在一些實施例中，在即將向個體投與前由臨床醫師組合最近摻合之疫苗(例如在向個體投與前約24小時或更短、約12小時或更短、約6小時或更短、約4小時或更短、約2小時或更短、約30分鐘或更短、約20分鐘或更短、約15分鐘或更短、約10分鐘或更短、約5分鐘或更短或約1分鐘或更短)。在一些實施例中，最近摻合之疫苗係在向個體投與摻合疫苗之同一天經組合。在一些實施例中，對於包含在投與給個體前必須製備(例如解凍、稀釋及/或重懸)之一或多種疫苗之摻合疫苗，在不大於該一或多種疫苗在製備後顯示穩定之最長時間及/或該一種或多種疫苗經批准在製備後儲存之最長時間的時間內組合兩種或更多種疫苗。在一些實施例中，摻合物包含在投與給個體前必須製備之兩種或更多種疫苗，且該摻合物係在不大於該兩種或更多種疫苗中之任一者在製備後顯示穩定之最長時間及/或該兩種或更多種疫苗中之任一者經批准在製備後儲存之最長時間的時間內組合(例如，若摻合物包含第一疫苗及第二疫苗，其各自必須在投與給個體前製備，其中該第一疫苗已顯示穩定至多24小時，且該第二疫苗已顯示穩定至多48小時，則包含該第一疫苗及該第二疫苗之最近摻合之組合在投與給個體前24小時或更短時間內摻合)。
在一些實施例中，本揭示案亦提供同時投與兩種或更多種疫苗(例如SARS-CoV-2及流行性感冒、SARS-CoV-2及RSV；或SARS-CoV-2、流行性感冒及RSV)之方法。在一些實施例中，此等方法引起針對兩種或更多種疾病之疫苗接種及/或誘導針對兩種或更多種疾病之免疫反應。在一些實施例中，如本文所用，若兩種或更多種疫苗係以單次注射投與，則認為其係同時投與的。在一些實施例中，可使用與圖3中所示之方法類似之方法同時投與兩種或更多種疫苗。在一些實施例中，可使用一種器皿同時投與兩種或更多種疫苗，該器皿可在分開的區室中容納兩種或更多種疫苗，且亦具有用於將兩種疫苗投與給個體之裝置(例如雙筒注射器(例如如本文所闡述))。 治療
本揭示案提供用於在個體中誘導針對冠狀病毒、流行性感冒病毒或RSV，或其任何組合(包括例如冠狀病毒及流行性感冒病毒、冠狀病毒及RSV、以及冠狀病毒、流行性感冒病毒及RSV)之適應性免疫反應之方法及劑，其包括投與有效量的組合物，該組合物包含編碼冠狀病毒疫苗抗原之RNA及編碼本文所闡述之流行性感冒抗原之RNA。
在一些實施例中，將本文所闡述之方法、組合物或組合投與給由RSV感染引起之嚴重疾病風險增加(例如，具有本文所闡述之風險因素之一)之老年人(例如60歲及以上或65歲及以上之個體)。在一些實施例中，將本文所闡述之方法、組合物或組合投與給由RSV感染引起之嚴重疾病風險增加(例如，具有本文所闡述之風險因素之一)之老年人(例如60歲及以上或65歲及以上之個體)。在一些實施例中，將本文所闡述之方法、組合物或組合投與給由RSV感染引起之嚴重疾病風險增加(例如，具有本文所闡述之風險因素之一)之嬰兒或幼兒。在一些實施例中，將本文所闡述之方法、組合物或組合投與給患有可因RSV感染而惡化之疾患(例如，患有本文所闡述之疾患之一)之個體。
在一個實施例中，本文所闡述之方法及劑在個體中提供對冠狀病毒、冠狀病毒感染或對與冠狀病毒相關之疾病或病症及/或對流行性感冒、流行性感冒感染或對與流行性感冒相關之疾病或病症的免疫性。因此，本揭示案提供用於治療或預防與冠狀病毒及/或流行性感冒相關之感染、疾病或病症之方法及劑。
在一個實施例中，將本文所闡述之方法及劑投與給患有與冠狀病毒及/或流行性感冒相關之感染、疾病或病症之個體。在一個實施例中，將本文所闡述之方法及劑投與給處於發生與冠狀病毒及/或流行性感冒病毒相關之感染、疾病或病症之風險下之個體。舉例而言，可將本文所闡述之方法及劑投與給處於與冠狀病毒及/或流行性感冒病毒接觸之風險下之個體。在一個實施例中，將本文所闡述之方法及劑投與給生活在、旅行至或預期旅行至冠狀病毒及/或流行性感冒流行之地理區域之個體。在一個實施例中，將本文所闡述之方法及劑投與給與生活在、旅行至或預期旅行至冠狀病毒及/或流行性感冒流行之地理區域之另一個人接觸或預期與其接觸之個體。在一個實施例中，將本文所闡述之方法及劑投與給經由其職業或其他接觸而有意暴露於冠狀病毒及/或流行性感冒之個體。在一個實施例中，冠狀病毒為SARS-CoV-2。在一些實施例中，將本文所闡述之方法及劑投與給具有先前暴露於及/或感染有SARS-CoV-2及/或流行性感冒及/或其抗原或抗原決定基或與其交叉反應之證據的個體。舉例而言，在一些實施例中，將本文所闡述之方法及劑投與給其中可偵測及/或已偵測到與SARS-CoV-2刺突蛋白及/或HA蛋白之一或多個抗原決定基反應之抗體、B細胞及/或T細胞之個體。
對於可用作疫苗之組合物，該組合物必須在細胞、組織或個體(例如人類)中誘導針對疾病抗原(例如冠狀病毒抗原及/或流行性感冒抗原)之免疫反應。在一些實施例中，組合物在細胞、組織或個體(例如人類)中誘導針對冠狀病毒抗原之免疫反應。在一些實施例中，組合物在細胞、組織或個體(例如人類)中誘導針對流行性感冒抗原之免疫反應。在一些情況下，疫苗在哺乳動物中誘導保護性免疫反應。本揭示案之治療性化合物或組合物可預防性地(亦即預防疾病或病症)或治療性地(亦即治療疾病或病症)投與給患有疾病或病症或處於發生疾病或病症之風險下(或易感)之個體。可使用標準臨床方法鑑別此類個體。在本揭示案之背景中，預防性投與發生在疾病之明顯臨床症狀顯現之前，使得疾病或病症得以預防或替代地延遲其進展。在醫學領域背景中，術語「預防」涵蓋降低疾病之死亡率或發病率負擔之任何活動。預防可以一級、二級及三級預防水準進行。儘管一級預防避免疾病之發展，但二級及三級預防水準涵蓋目的在於藉由恢復功能及減少疾病相關併發症來防止疾病進展及症狀出現以及減少已確立疾病之負面影響之活動。
如本文所用之術語「劑量」通常係指「劑量量」，其係指每次投與亦即每次投藥所投與之RNA量。
在一些實施例中，本揭示案之免疫原性組合物或疫苗之投與可藉由單次投與進行或藉由多次投與來加強。
在一些實施例中，本文所闡述之方案包括至少一個劑量。在一些實施例中，方案包括第一劑量及至少一個後續劑量。在一些實施例中，第一劑量與至少一個後續劑量之量相同。在一些實施例中，第一劑量與所有後續劑量之量相同。在一些實施例中，第一劑量之量不同於至少一個後續劑量。在一些實施例中，第一劑量之量不同於所有後續劑量。在一些實施例中，方案包含兩個劑量。在一些實施例中，所提供之方案由兩個劑量組成。在一些實施例中，方案包含三個劑量。
在一個實施例中，本揭示案設想投與單劑量。在一個實施例中，本揭示案設想投與初免劑量，隨後投與一或多個加強劑量。加強劑量或第一加強劑量可在投與初免劑量後7至28天或14至24天投與。在一些實施例中，第一加強劑量可在投與初免劑量後1週至3個月(例如1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、9週、10週、11週、12週)投與。在一些實施例中，後續加強劑量可在先前加強劑量後至少1週或更長時間投與，包括例如至少2週、至少3週、至少4週、至少5週、至少6週、至少7週、至少8週、至少9週、至少10週、至少11週、至少12週或更長時間投與。在一些實施例中，後續加強劑量可間隔約5-9週或6-8週投與。在一些實施例中，至少一個後續加強劑量(例如在第一加強劑量後)可在先前劑量後至少3個月或更長時間投與，包括例如至少4個月、至少5個月、至少6個月、至少7個月、至少8個月、至少9個月、至少10個月或更長時間投與。
在一些實施例中，劑量包含0.1 μg至300 μg、0.5 μg至200 μg或1 μg至100 μg之RNA總量，諸如約1 μg、約2 μg、約3 μg、約10 μg、約15 μg、約20 μg、約25 μg、約30 μg、約35 μg、約40 μg、約45 μg、約50 μg、約55 μg、約60 μg、約65 μg、約70 μg、約75 μg、約80 μg、約85 μg、約90 μg、約95 μg或約100 μg。在一些實施例中，劑量包含最多約100 μg之RNA (例如modRNA)總量。在一些實施例中，劑量包含0.1 μg至100 μg之一或多種第一RNA，及0.1 μg至100 μg之一或多種第二RNA，其中該一或多種第一RNA各自包含編碼與第一傳染原(例如冠狀病毒)相關之抗原性多肽之核苷酸序列，且該一或多種第二RNA各自包含編碼與第二傳染原(例如流行性感冒)相關之抗原性多肽之核苷酸序列。在一些實施例中，劑量包含3至60 μg之一或多種第一RNA及3至90 μg之一或多種第二RNA。在一些實施例中，劑量包含3至60 μg之一或多種第一RNA及3至90 μg之一或多種第二RNAs，其中該劑量包含最多100 μg之總RNA。在一些實施例中，劑量包含3至30 μg之一或多種第一RNA及3至60 μg之一或多種第二RNA，其中該劑量包含最多100 μg之總RNA。在一些實施例中，劑量包含3 μg之一或多種第一RNA及3 μg之一或多種第二RNA。在一些實施例中，劑量包含3 μg之一或多種第一RNA及6 μg之一或多種第二RNA。在一些實施例中，劑量包含10 μg之一或多種第一RNA及10 μg之一或多種第二RNA。在一些實施例中，劑量包含10 μg之一或多種第一RNA及20 μg之一或多種第二RNA。在一些實施例中，劑量包含30 μg之一或多種第一RNA及30 μg之一或多種第二RNA。在一些實施例中，劑量包含30 μg之一或多種第一RNA及60 μg之一或多種第二RNA。在一些實施例中，劑量包含60 μg之一或多種第一RNA及30 μg之一或多種第二RNA。
在一些實施例中，劑量包含含有3至60 μg之總RNA之單價或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗以及含有3至60 μg之總RNA之四價流行性感冒RNA疫苗。在一些實施例中，劑量包含單價或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗以及四價流行性感冒RNA疫苗，且包含100 μg之總RNA。在一些實施例中，劑量包含單價或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗以及四價流行性感冒RNA疫苗，且包含約90 μg之總RNA。在一些實施例中，劑量包含單價或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗以及四價流行性感冒RNA疫苗，且包含約60 μg之總RNA。在一些實施例中，劑量包含約含有30 μg總RNA之單價或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗以及含有30 μg總RNA之四價流行性感冒RNA疫苗。在一些實施例中，劑量包含含有30 μg總RNA之單價或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗以及含有60 μg總RNA之四價流行性感冒RNA疫苗。在一些實施例中，劑量包含含有60 μg總RNA之單價或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗以及含有約30 μg總RNA之四價流行性感冒RNA疫苗。
在一些實施例中，劑量包含含有3 μg總RNA (例如3 μg編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或1.5 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及1.5 μg編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA)的單價或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，以及含有3 μg總RNA (例如0.75 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白之RNA、0.75 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白之RNA、0.75 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白之RNA，及0.75 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白之RNA)的四價流行性感冒RNA疫苗。
在一些實施例中，劑量包含含有3 μg總RNA (例如3 μg編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或1.5 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及1.5 μg編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA)的單價或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，以及含有6 μg總RNA (例如1.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白之RNA、1.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白之RNA、1.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白之RNA，及1.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白之RNA)的四價流行性感冒RNA疫苗。
在一些實施例中，劑量包含含有6 μg總RNA (例如6 μg編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或3 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及3 μg編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA)的單價或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，以及含有3 μg總RNA (例如0.75 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白之RNA、0.75 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白之RNA、0.75 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白之RNA，及0.75 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白之RNA)的四價流行性感冒RNA疫苗。
在一些實施例中，劑量包含含有10 μg總RNA (例如10 μg編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或5 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及5 μg編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA)的單價或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，以及含有10 μg總RNA (例如2.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白之RNA、2.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白之RNA、2.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白之RNA，及2.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白之RNA)的四價流行性感冒RNA疫苗。
在一些實施例中，劑量包含含有10 μg總RNA (例如10 μg編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或5 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及5 μg編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA)的單價或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，以及含有20 μg總RNA (例如5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白之RNA、5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白之RNA、5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白之RNA，及5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白之RNA)的四價流行性感冒RNA疫苗。
在一些實施例中，劑量包含含有20 μg總RNA (例如20 μg編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或10 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及10 μg編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA)的單價或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，以及含有10 μg總RNA (例如2.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白之RNA、2.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白之RNA、2.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白之RNA，及2.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白之RNA)的四價流行性感冒RNA疫苗。
在一些實施例中，劑量包含含有30 μg總RNA (例如30 μg編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及15 μg編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA)的單價或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，以及含有30 μg總RNA (例如7.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白之RNA、7.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白之RNA、7.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白之RNA，及7.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白之RNA)的四價流行性感冒RNA疫苗。
在一些實施例中，劑量包含含有30 μg總RNA (例如30 μg編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及15 μg編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA)的單價或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，以及含有60 μg總RNA (例如15 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白之RNA、15 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白之RNA、15 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白之RNA，及15 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白之RNA)的四價流行性感冒RNA疫苗。
在一些實施例中，劑量包含含有60 μg總RNA (例如60 μg編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或30 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及30 μg編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA)的單價或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，以及含有30 μg總RNA (例如7.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白之RNA、7.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白之RNA、7.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白之RNA，及7.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白之RNA)的四價流行性感冒RNA疫苗。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體中包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或(b)或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株中包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體中包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如7.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、7.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 95至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、7.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 100至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA，及7.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體中包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株中包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體中包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含60 μg總RNA (例如，包含15 μg編碼H1N1流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、15 μg編碼H3N2流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 95至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、15 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 100至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA，及15 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含60 μg編碼XBB.1.5變異體中包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼武漢毒株中包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及30 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體中包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，7.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、7.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 95至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、7.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 100至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA，及7.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 130至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 9至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含約30 μg總RNA (例如，7.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之序列的RNA、7.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 97至少85%一致之序列的RNA、7.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 102至少85%一致之序列的RNA，及7.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 130至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 9至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含約60 μg總RNA (例如，15 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之序列的RNA、15 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 97至少85%一致之序列的RNA、15 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 102至少85%一致之序列的RNA，及15 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含60 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 130至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 9至少85%一致之序列的RNA及30 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，7.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之序列的RNA、 7.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 97至少85%一致之序列的RNA、7.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 102至少85%一致之序列的RNA，及7.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 132至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含約30 μg總RNA (例如，7.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之序列的RNA、7.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 99至少85%一致之序列的RNA、7.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 104至少85%一致之序列的RNA，及7.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 132至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含60 μg總RNA (例如，15 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之序列的RNA、15 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 99至少85%一致之序列的RNA、15 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 104至少85%一致之序列的RNA，及15 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含60 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 132至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之序列的RNA及30 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，7.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之序列的RNA、7.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 99至少85%一致之序列的RNA、7.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 104至少85%一致之序列的RNA，及7.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體中包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株中包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體中包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，7.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、7.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 80至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、7.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 85至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA，及7.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體中包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株中包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體中包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含60 μg總RNA (例如，15 μg編碼H1N1流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、15 μg編碼H3N2流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 80至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、15 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 85至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA，及15 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含60 μg編碼XBB.1.5變異體中包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼武漢毒株中包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及30 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體中包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，7.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、7.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 80至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、7.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 85至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA，及7.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 130至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 9至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，7.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之序列的RNA、7.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 82至少85%一致之序列的RNA、7.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 87至少85%一致之序列的RNA，及7.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 130至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 9至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含60 μg總RNA (例如，15 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之序列的RNA、15 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 82至少85%一致之序列的RNA、15 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 87至少85%一致之序列的RNA，及15 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含60 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 130至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 9至少85%一致之序列的RNA及30 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，7.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之序列的RNA、7.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 82至少85%一致之序列的RNA、7.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 87至少85%一致之序列的RNA，及7.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 131至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，7.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之序列的RNA、7.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 84至少85%一致之序列的RNA、7.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 89至少85%一致之序列的RNA，及7.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 131至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含60 μg總RNA (例如，15 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之序列的RNA、15 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 84至少85%一致之序列的RNA、15 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 104至少85%一致之序列的RNA，及15 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 89至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含60 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 131至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之序列的RNA及30 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，7.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之序列的RNA、7.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 84至少85%一致之序列的RNA、7.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 89至少85%一致之序列的RNA，及7.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體中包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或(b)或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株中包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體中包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含45 μg總RNA (例如，11.25 μg編碼H1N1流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、11.25 μg編碼H3N2流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 95至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、11.25 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 100至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA，及11.25 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 130至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 9至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含約45 μg總RNA (例如，11.25 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之序列的RNA、11.25 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 97至少85%一致之序列的RNA、11.25 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 102至少85%一致之序列的RNA，及11.25 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 132至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含約45 μg總RNA (例如，11.25 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之序列的RNA、11.25 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 99至少85%一致之序列的RNA、11.25 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 104至少85%一致之序列的RNA，及11.25 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體中包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株中包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體中包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含45 μg總RNA (例如，11.25 μg編碼H1N1流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、11.25 μg編碼H3N2流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 80至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、11.25 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 85至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA，及11.25 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 130至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 9至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含45 μg總RNA (例如，11.25 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之序列的RNA、11.25 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 82至少85%一致之序列的RNA、11.25 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 87至少85%一致之序列的RNA，及11.25 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 131至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含45 μg總RNA (例如，11.25 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之序列的RNA、11.25 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 84至少85%一致之序列的RNA、11.25 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 89至少85%一致之序列的RNA，及11.25 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體中包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或(b)或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株中包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體中包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含60 μg總RNA (例如，5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 95至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、25 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 100至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA，及25 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 130至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 9至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含60 μg總RNA (例如，5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之序列的RNA、5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 97至少85%一致之序列的RNA、25 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 102至少85%一致之序列的RNA，及25 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 132至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含60 μg總RNA (例如，5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之序列的RNA、5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 99至少85%一致之序列的RNA、25 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 104至少85%一致之序列的RNA，及25 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體中包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株中包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體中包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含60 μg總RNA (例如，5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 80至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、25 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 85至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA，及25 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 130至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 9至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含60 μg總RNA (例如，5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之序列的RNA、5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 82至少85%一致之序列的RNA、25 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 87至少85%一致之序列的RNA，及25 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 131至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含60 μg總RNA (例如，5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之序列的RNA、5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 84至少85%一致之序列的RNA、25 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 89至少85%一致之序列的RNA，及25 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體中包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或(b)或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株中包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體中包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，2.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、2.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 95至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、12.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 100至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA，及12.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 130至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 9至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，2.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之序列的RNA、2.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 97至少85%一致之序列的RNA、12.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 102至少85%一致之序列的RNA，及12.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 132至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，2.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之序列的RNA、2.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 99至少85%一致之序列的RNA、12.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 104至少85%一致之序列的RNA，及12.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體中包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株中包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體中包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，2.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、2.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 80至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、12.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 85至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA，及12.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 130至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 9至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，2.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之序列的RNA、2.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 82至少85%一致之序列的RNA、12.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 87至少85%一致之序列的RNA，及12.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 131至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含15 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之序列的RNA及15 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，2.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之序列的RNA、2.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 84至少85%一致之序列的RNA、12.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 89至少85%一致之序列的RNA，及12.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a) 30 μg單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含60 μg編碼XBB.1.5變異體中包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或(b)或二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼武漢毒株中包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及30 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體中包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，2.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、2.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 95至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、12.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 100至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA，及12.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含60 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 130至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 9至少85%一致之序列的RNA及30 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，2.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之序列的RNA、2.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 97至少85%一致之序列的RNA、12.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 102至少85%一致之序列的RNA，及12.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含60 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 132至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之序列的RNA及30 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，2.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之序列的RNA、2.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 99至少85%一致之序列的RNA、12.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 104至少85%一致之序列的RNA，及12.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含60 μg編碼XBB.1.5變異體中包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼武漢毒株中包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及30 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體中包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，2.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、2.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株中包含與SEQ ID NO: 80至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA、12.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 85至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA，及12.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系中包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之序列的HA蛋白之RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含60 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 130至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 9至少85%一致之序列的RNA及30 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg總RNA (例如，2.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之序列的RNA、2.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 82至少85%一致之序列的RNA、12.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 87至少85%一致之序列的RNA，及12.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，劑量包含(i) (a)單價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含60 μg編碼XBB.1.5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 131至少85%一致之序列的RNA，或(b)二價SARS-CoV-2 RNA疫苗，其包含30 μg編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之序列的RNA及30 μg編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白且包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之序列的RNA，及(ii)四價流行性感冒RNA疫苗，其包含30 μg RNA (例如，2.5 μg編碼H1N1流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之序列的RNA、2.5 μg編碼H3N2流行性感冒毒株之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 84至少85%一致之序列的RNA、12.5 μg編碼B/Victoria流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 89至少85%一致之序列的RNA，及12.5 μg編碼B/Yamagata流行性感冒譜系之HA蛋白且包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之序列的RNA)。
在一些實施例中，將包含一或多種第一RNA (各自包含編碼與冠狀病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列)之組合物及包含一或多種第二RNA (各自編碼與流行性感冒病毒相關之抗原性多肽)之組合物(例如包含至少二價SARS-CoV-2疫苗及至少四價流行性感冒疫苗之組合物)作為加強劑量投與給先前已接受針對冠狀病毒及/或流行性感冒之疫苗(例如本文所闡述之疫苗)的個體。在一些實施例中，此一加強劑量係在先前疫苗接種後至少兩個月投與(例如在針對SARS-CoV-2之先前疫苗接種後至少兩個月或在針對冠狀病毒之先前疫苗接種後至少兩個月)。在一些實施例中，此一加強劑量係作為定期(例如年度)投藥方案之一部分來投與。
在一些實施例中，將包含一或多種第一RNA (各自包含編碼與冠狀病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列)之組合物與包含或遞送同流行性感冒病毒相關之一或多種抗原性多肽之組合物組合投與。在一些實施例中，將該一或多種第一RNA與包含或遞送同流行性感冒病毒相關之一或多種抗原性多肽之組合物分開投與(例如在不同的注射部位I.M.投與)。在一些實施例中，包含或遞送與流行性感冒病毒相關之一或多種抗原性多肽之組合物包含一或多種RNA，其各自編碼一或多種抗原性多肽。在一些實施例中，包含或遞送與流行性感冒病毒相關之一或多種抗原性多肽之組合物係商業上獲批之流行性感冒疫苗。在一些實施例中，包含或遞送與流行性感冒病毒相關之一或多種抗原性多肽之組合物係不活化之流行性感冒病毒(例如Fluzone®、Fluzone high-dose quadrivalent®、Fluzone quadrivalent®、Fluzone intradermal quardivalent®、Fluzone quadrivalent southern hemisphere®、Fluad®、Fluad quadrivalent®、Afluria Quardivalent®、Fluarix Quadrivalent®、FluLaval Quadrivalent®或Flucelvax Quadrivalent®)、重組流行性感冒疫苗(例如Flublok quadrivalent®)、活減毒流行性感冒疫苗(例如FluMist Quadrivalent®)、無佐劑流行性感冒疫苗、含佐劑流行性感冒疫苗或亞單位或裂解疫苗。在一些實施例中，包含或遞送與流行性感冒病毒相關之一或多種抗原性多肽之組合物係奈米顆粒疫苗，例如如Boyoglu-Barnum, Seyhan等人，「Quadrivalent influenza nanoparticle vaccines induce broad protection」, Nature 592.7855 (2021): 623-628中所闡述，其內容係以全文引用的方式併入本文中。
在一些實施例中，將包含一或多種第二RNA (各自編碼與流行性感冒病毒相關之抗原性多肽)之組合物與包含或遞送同冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽之組合物組合投與。在一些實施例中，將該一或多種第二RNA與包含或遞送同冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽之組合物分開投與(例如在不同的注射部位經由I.M.注射)。在一些實施例中，包含或遞送與冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽之組合物為BNT162b2疫苗(包括例如如本文所闡述之變異體適應之BNT162b2)、mRNA-1273疫苗、Ad26.CoV2.S疫苗、ChAdxOx1疫苗、NVX-CoV2373疫苗、CvnCoV疫苗、GAM-COVID0Vac疫苗、CoronaVac疫苗、BBIBP-CorV疫苗、Ad5-nCoV疫苗、zf2001疫苗、SCB-2019疫苗、JNJ 78436735疫苗或其他經批准之mRNA或腺載體疫苗等。
在一些實施例中，將包含一或多種第一RNA (各自包含編碼與冠狀病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列)之組合物及包含一或多種第二RNA (各自編碼與流行性感冒病毒相關之抗原性多肽)之組合物(例如包含至少二價SARS-CoV-2疫苗及至少四價流行性感冒疫苗之組合物)投與給未接受疫苗之個體(亦即，先前未接受針對SARS-CoV-2及/或流行性感冒之疫苗之患者)。在此等實施例中，組合物可分兩個劑量投與(例如，兩個劑量相隔約7至約28天投與)。
在一些實施例中，給予個體之後續劑量(例如作為初次方案或加強方案之一部分)可具有與先前給予個體相同量之RNA。在一些實施例中，與先前給予個體之量相比，給予個體之後續劑量(例如作為初次方案或加強方案之一部分)之RNA之量可不同。舉例而言，在一些實施例中，後續劑量可高於或低於先前劑量，例如基於各種因素之考慮，包括例如由先前劑量誘導之免疫原性及/或反應原性、疾病之流行性等。在一些實施例中，後續劑量可較先前劑量高至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或更高。在一些實施例中，後續劑量可較先前劑量高至少1.5倍、至少2倍、至少2.5倍、至少3倍或更高。在一些實施例中，後續劑量可較先前劑量高至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或更高。在一些實施例中，後續劑量可較先前劑量低至少10%、至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%或更低。在一些實施例中，本文所闡述之RNA每劑可投與0.1 μg至300 μg、0.5 μg至200 μg、或1 μg至100 μg諸如約1 μg、約2 μg、約3 μg、約10 μg、約15 μg、約20 μg、約25 μg、約30 μg、約35 μg、約40 μg、約45 μg、約50 μg、約55 μg、約60 μg、約70 μg、約80 μg、約90 μg或約100 μg之量(例如在給定劑量中投與之RNA總量)。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA每劑可投與60 μg或更低、55 μg或更低、50 μg或更低、45 μg或更低、40 μg或更低、35 μg或更低、30 μg或更低、25 μg或更低、20 μg或更低、15 μg或更低、10 μg或更低、5 μg或更低、3 μg或更低、2.5 μg或更低、或1 μg或更低之量(例如在給定劑量中投與之RNA總量)。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA每劑可投與至少0.25 μg、至少0.5 μg、至少1 μg、至少2 μg、至少3 μg、至少4 μg、至少5 μg、至少10 μg、至少15 μg、至少20 μg、至少25 μg、至少30 μg、至少40 μg、至少50 μg或至少60 μg之量(例如在給定劑量中投與之RNA總量)。在一些實施例中，至少3 ug之量的本文所闡述RNA可以至少一個給定劑量投與。在一些實施例中，至少10 ug之量的本文所闡述RNA可以至少一個給定劑量投與。在一些實施例中，至少15 ug之量的本文所闡述RNA可以至少一個給定劑量投與。在一些實施例中，至少20 ug之量的本文所闡述RNA可以至少一個給定劑量投與。在一些實施例中，至少25 ug之量的本文所闡述RNA可以至少一個給定劑量投與。在一些實施例中，至少30 ug之量的本文所闡述RNA可以至少一個給定劑量投與。在一些實施例中，至少50 ug之量的本文所闡述RNA可以至少一個給定劑量投與。在一些實施例中，至少60 ug之量的本文所闡述RNA可以至少一個給定劑量投與。在一些實施例中，上述量之組合可在包含兩個或更多個劑量之方案中投與(例如，先前劑量及後續劑量可具有如本文所闡述之不同量)。在一些實施例中，上述量之組合可在初次方案及加強方案中投與(例如，在初次方案及加強方案中可給予不同的劑量)。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA每劑可投與0.25 μg至60 μg、0.5 μg至55 μg、1 μg至50 μg、5 μg至40 μg或10 μg至30 μg之量(例如在給定劑量中投與之RNA總量)。在一些實施例中，3 μg至30 μg之量的本文所闡述RNA可以至少一個給定劑量投與。在一些實施例中，3 μg至20 μg之量的本文所闡述RNA可以至少一個給定劑量投與。在一些實施例中，3 μg至15 μg之量的本文所闡述RNA可以至少一個給定劑量投與。在一些實施例中，3 μg至10 μg可之量的本文所闡述RNA可以至少一個給定劑量投與。在一些實施例中，10 μg至30 μg之量的本文所闡述RNA可以至少一個給定劑量投與。
在一些實施例中，向個體投與之方案可包含複數個劑量(例如至少兩個劑量、至少三個劑量或更多)。在一些實施例中，向個體投與之方案可包含第一劑量及第二劑量，其相隔至少2週、相隔至少3週、相隔至少4週或更長時間給予。在一些實施例中，此等劑量可相隔至少1個月、至少2個月、至少3個月、至少4個月、至少5個月、至少6個月、至少7個月、至少8個月、至少9個月、至少10個月、至少11個月、至少12個月或更長時間。在一些實施例中，劑量可相隔數天投與，諸如相隔1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60天或更多天。在一些實施例中，劑量可相隔約1至約3週、或相隔約1至約4週、或相隔約1至約5週、或相隔約1至約6週、或相隔約1至超過6週投與。在一些實施例中，劑量可隔開約7至約60天之時間段，諸如約14至約48天等。在一些實施例中，劑量之間的最少天數可為約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21天或更多。在一些實施例中，劑量之間的最大天數可為約60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48、47、46、45、44、43、42、41、40、39、38、37、36、35、34、33、32、31、30、29、28、27、26、25、24、23、22、21天或更少。在一些實施例中，劑量可相隔約21至約28天。在一些實施例中，劑量可相隔約19至約42天。在一些實施例中，劑量可相隔約7至約28天。在一些實施例中，劑量可為約14至約24天。在一些實施例中，劑量可為約21至約42天。
在一些實施例中，疫苗接種方案包含第一劑量及第二劑量。在一些實施例中，第一劑量與第二劑量相隔至少21天投與。在一些實施例中，第一劑量與第二劑量相隔至少28天投與。
在一些實施例中，疫苗接種方案包含第一劑量及第二劑量，其中第一劑量中投與的RNA之量與第二劑量中投與的RNA之量相同。在一些實施例中，疫苗接種方案包含第一劑量及第二劑量，其中第一劑量中投與的RNA之量不同於第二劑量中投與的RNA之量。
在一些實施例中，疫苗接種方案包含第一劑量及第二劑量，其中第一劑量中投與的RNA之量小於第二劑量中投與的RNA之量。在一些實施例中，第一劑量中投與的RNA之量為第二劑量之10%-90%。在一些實施例中，第一劑量中投與的RNA之量為第二劑量之10%-50%。在一些實施例中，第一劑量中投與的RNA之量為第二劑量之10%-20%。在一些實施例中，第一劑量與第二劑量相隔至少2週投與，包括相隔至少3週、相隔至少4週、相隔至少5週、相隔至少6週或更長時間。在一些實施例中，第一劑量與第二劑量相隔至少3週投與。
在一些實施例中，第一劑量包含小於約30 ug總RNA，且第二劑量包含至少約30 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約1至小於約30 ug總RNA (例如約0.1、約1、約3、約5、約10、約15、約20、約25或小於約30 ug總RNA)，且第二劑量包含約30至約100 ug總RNA (例如約30、約40、約50或約60 ug總RNA)。在一些實施例中，第一劑量包含約1至約20 ug總RNA、約1至約10 ug總RNA、或約1至約5 ug總RNA，且第二劑量包含約30至約60 ug總RNA。
在一些實施例中，第一劑量包含約1至約10 ug總RNA (例如約1、約2、約3、約4、約5、約6、約7、約8、約9或約10 ug總RNA)，且第二劑量包含約30至約60 ug總RNA (例如約30、約35、約40、約45、約50、約55或約60 ug總RNA)。
在一些實施例中，第一劑量包含約1 ug總RNA，且第二劑量包含約30 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約3 ug總RNA，且第二劑量包含約30 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約5 ug總RNA，且第二劑量包含約30 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約10 ug總RNA，且第二劑量包含約30 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約15 ug總RNA，且第二劑量包含約30 ug總RNA。
在一些實施例中，第一劑量包含約1 ug總RNA，且第二劑量包含約60 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約3 ug總RNA，且第二劑量包含約60 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約5 ug總RNA，且第二劑量包含約60 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約6 ug總RNA，且第二劑量包含約60 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約10 ug總RNA，且第二劑量包含約60 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約15 ug總RNA，且第二劑量包含約60 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約20 ug總RNA，且第二劑量包含約60 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約25 ug總RNA，且第二劑量包含約60 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約30 ug總RNA，且第二劑量包含約60 ug總RNA。
在一些實施例中，第一劑量包含小於約10 ug總RNA，且第二劑量包含至少約10 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約0.1至小於約10 ug總RNA (例如約0.1、約0.5、約1、約2、約3、約4、約5、約6、約7、約8或小於約10 ug總RNA)，且第二劑量包含約10至約30 ug總RNA (例如約10、約15、約20、約25或約30 ug總RNA)。在一些實施例中，第一劑量包含約0.1至約10 ug總RNA、約1至約5 ug總RNA或約0.1至約3 ug總RNA，且第二劑量包含約10至約30 ug總RNA。
在一些實施例中，第一劑量包含約0.1至約5 ug總RNA (例如約0.1、約0.5、約1、約2、約3、約4、約5 ug總RNA)，且第二劑量包含約10至約20 ug總RNA (例如約10、約12、約14、約16、約18、約20 ug RNA)。
在一些實施例中，第一劑量包含約0.1 ug總RNA，且第二劑量包含約10 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約0.3 ug總RNA，且第二劑量包含約10 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約1 ug總RNA，且第二劑量包含約10 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約3 ug總RNA，且第二劑量包含約10 ug總RNA。
在一些實施例中，第一劑量包含小於約3 ug總RNA，且第二劑量包含至少約3 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約0.1至小於約3 ug總RNA (例如約0.1、約0.2、約0.3、約0.5、約0.6、約0.7、約0.8、約0.9、約1.0、約1.5、約2.0或約2.5 ug總RNA)，且第二劑量包含約3至約10 ug總RNA (例如約3、約4、約5、約6或約7、約8、約9或約10 ug總RNA)。在一些實施例中，第一劑量包含約0.1至約3 ug總RNA、約0.1至約1 ug總RNA或約0.1至約0.5 ug總RNA，且第二劑量包含約3至約10 ug總RNA。
在一些實施例中，第一劑量包含約0.1至約1.0 ug總RNA (例如約0.1、約0.2、約0.3、約0.4、約0.5、約0.6、約0.7、約0.8、約0.9或約1.0 ug總RNA)，且第二劑量包含約1至約3 ug總RNA (例如約1.0、約1.5、約2.0、約2.5或約3.0 ug總RNA)。
在一些實施例中，第一劑量包含約0.1 ug總RNA，且第二劑量包含約3 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約0.3 ug總RNA，且第二劑量包含約3 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約0.5 ug總RNA，且第二劑量包含約3 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約1 ug總RNA，且第二劑量包含約3 ug總RNA。
在一些實施例中，疫苗接種方案包含第一劑量及第二劑量，其中第一劑量中投與的RNA之量大於第二劑量中投與的RNA之量。在一些實施例中，第二劑量中投與的RNA之量為第一劑量之10%-90%。在一些實施例中，第二劑量中投與的RNA之量為第一劑量之10%-50%。在一些實施例中，第二劑量中投與的RNA之量為第一劑量之10%-20%。在一些實施例中，第一劑量與第二劑量相隔至少2週投與，包括相隔至少3週、相隔至少4週、相隔至少5週、相隔至少6週或更長時間。在一些實施例中，第一劑量與第二劑量相隔至少3週投與。
在一些實施例中，第一劑量包含至少約30 ug總RNA，且第二劑量包含小於約30 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約30至約100 ug總RNA (例如約30、約40、約50或約60 ug總RNA)，且第二劑量包含約1至約30 ug總RNA (例如約0.1、約1、約3、約5、約10、約15、約20、約25或約30 ug總RNA)。在一些實施例中，第二劑量包含約1至約20 ug總RNA、約1至約10 ug總RNA或約1至5 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約30至約60 ug總RNA，且第二劑量包含約1至約20 ug總RNA、約1至約10 ug總RNA或約0.1至約3 ug總RNA。
在一些實施例中，第一劑量包含約30至約60 ug總RNA (例如約30、約35、約40、約45、約50、約55或約60 ug總RNA)，且第二劑量包含約1至約10 ug總RNA (例如約1、約2、約3、約4、約5、約6、約7、約8、約9或約10 ugRNA)。
在一些實施例中，第一劑量包含約30 ug總RNA，且第二劑量包含約1 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約30 ug總RNA，且第二劑量包含約3 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約30 ug總RNA，且第二劑量包含約5 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約30 ug總RNA，且第二劑量包含約10 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約30 ug總RNA，且第二劑量包含約15 ug總RNA。
在一些實施例中，第一劑量包含約60 ug總RNA，且第二劑量包含約1 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約60 ug總RNA，且第二劑量包含約3 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約60 ug總RNA，且第二劑量包含約5 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約60 ug總RNA，且第二劑量包含約6 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約60 ug總RNA，且第二劑量包含約10 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約60 ug總RNA，且第二劑量包含約15 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約60 ug總RNA，且第二劑量包含約20 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約60 ug總RNA，且第二劑量包含約25 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約60 ug總RNA，且第二劑量包含約30 ug總RNA。
在一些實施例中，第一劑量包含至少約10 ug總RNA，且第二劑量包含小於約10 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約10至約30 ug總RNA (例如約10、約15、約20、約25或約30 ug總RNA)，且第二劑量包含約0.1至小於約10 ug總RNA (例如約0.1、約0.5、約1、約2、約3、約4、約5、約6、約7、約8或小於約10 ug總RNA)。在一些實施例中，第一劑量包含約10至約30 ug總RNA或約0.1至約3 ug總RNA，且第二劑量包含約1至約10 ug總RNA或約1至約5 ug總RNA。
在一些實施例中，第一劑量包含約10至約20 ug總RNA (例如約10、約12、約14、約16、約18、約20 ug總RNA)，且第二劑量包含約0.1至約5 ug總RNA (例如約0.1、約0.5、約1、約2、約3、約4或約5 ug總RNA)。
在一些實施例中，第一劑量包含約10 ug總RNA，且第二劑量包含約0.1 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約10 ug總RNA，且第二劑量包含約0.3 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約10 ug總RNA，且第二劑量包含約1 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約10 ug總RNA，且第二劑量包含約3 ug總RNA。
在一些實施例中，第一劑量包含至少約3 ug總RNA，且第二劑量包含小於約3 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約3至約10 ug總RNA (例如約3、約4、約5、約6或約7、約8、約9或約10 ug總RNA)，且第二劑量包含0.1至小於約3 ug總RNA (例如約0.1、約0.2、約0.3、約0.5、約0.6、約0.7、約0.8、約0.9、約1.0、約1.5、約2.0或約2.5 ug總RNA)。在一些實施例中，第一劑量包含約3至約10 ug總RNA，且第二劑量包含約0.1至約3 ug總RNA、約0.1至約1 ug總RNA或約0.1至約0.5 ug總RNA。
在一些實施例中，第一劑量包含約1至約3 ug總RNA (例如約1、約1.5、約2.0、約2.5或約3.0 ug總RNA)，且第二劑量包含約0.1至0.3 ug總RNA (例如約0.1、約0.2、約0.3、約0.4、約0.5、約0.6、約0.7、約0.8、約0.9或約1.0 ug總RNA)。
在一些實施例中，第一劑量包含約3 ug總RNA，且第二劑量包含約0.1 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約3 ug總RNA，且第二劑量包含約0.3 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約3 ug總RNA，且第二劑量包含約0.6 ug總RNA。在一些實施例中，第一劑量包含約3 ug總RNA，且第二劑量包含約1 ug總RNA。
在一些實施例中，疫苗接種方案包含至少兩個劑量，包括例如至少三個劑量、至少四個劑量或更多。在一些實施例中，疫苗接種方案包含三個劑量。在一些實施例中，第一劑量與第二劑量之間的時間間隔可與第二劑量與第三劑量之間的時間間隔相同。在一些實施例中，第一劑量與第二劑量之間的時間間隔可較第二劑量與第三劑量之間的時間間隔長例如數天或數週(包括例如至少3天、至少4天、至少5天、至少6天、至少1週、至少2週、至少3週、至少4週、至少5週、至少6週或更長時間)。在一些實施例中，第一劑量與第二劑量之間的時間間隔可較第二劑量與第三劑量之間的時間間隔短例如數天或數週(包括例如至少3天、至少4天、至少5天、至少6天、至少1週、至少2週、至少3週、至少4週、至少5週、至少6週或更長時間)。在一些實施例中，第一劑量與第二劑量之間的時間間隔可較第二劑量與第三劑量之間的時間間隔短例如至少1個月(包括例如至少2個月、至少3個月、至少4個月、至少5個月、至少6個月、至少7個月、至少8個月、至少9個月、至少10個月、至少11個月、至少12個月或更長時間)。
在一些實施例中，初次方案之最後劑量及加強方案之第一劑量相隔至少2個月、至少3個月、至少4個月、至少5個月、至少6個月、至少7個月、至少8個月、至少9個月、至少10個月、至少11個月、至少12個月或更長時間給予。在一些實施例中，初次方案可包含兩個劑量。在一些實施例中，初次方案可包含三個劑量。
在一些實施例中，第一劑量及第二劑量(及/或其他後續劑量)可藉由肌內注射投與。在一些實施例中，第一劑量及第二劑量(及/或其他後續劑量)可在三角肌中投與。在一些實施例中，第一劑量及第二劑量(及/或其他後續劑量)可在同一臂中投與。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物作為相隔21天之一系列兩次劑量(例如，每次0.3 mL)投與(例如藉由肌內注射)。在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物作為相隔21天之一系列兩次劑量(例如，每次0.2 mL)投與(例如藉由肌內注射)。在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物作為一系列三次劑量(例如0.3 mL或更低，包括例如0.2 mL)投與(例如藉由肌內注射)，其中相隔至少3週給予劑量。在一些實施例中，第一劑量及第二劑量可相隔3週投與，而第二劑量及第三劑量可較第一劑量與第二劑量之間更長的時間間隔投與，例如相隔至少4週或更長時間(包括至少5週、至少6週、至少7週、至少8週、至少9週或更長時間)。在一些實施例中，每個劑量包含約60 ug總RNA。在一些實施例中，每個劑量包含約50 ug總RNA。在一些實施例中，每個劑量包含約30 ug總RNA。在一些實施例中，每個劑量包含約25 ug總RNA。在一些實施例中，每個劑量包含約20 ug總RNA。在一些實施例中，每個劑量包含約15 ug總RNA。在一些實施例中，每個劑量包含約10 ug總RNA。在一些實施例中，每個劑量包含約3 ug總RNA。
在一些實施例中，疫苗接種方案(例如初次疫苗接種方案及/或加強疫苗接種方案)中給予之至少一個劑量包含約60 ug總RNA。在一些實施例中，疫苗接種方案(例如初次疫苗接種方案及/或加強疫苗接種方案)中給予之至少一個劑量包含約50 ug總RNA。在一些實施例中，疫苗接種方案(例如初次疫苗接種方案及/或加強疫苗接種方案)中給予之至少一個劑量包含約30 ug總RNA。在一些實施例中，疫苗接種方案(例如初次疫苗接種方案及/或加強疫苗接種方案)中給予之至少一個劑量包含約25 ug總RNA。在一些實施例中，疫苗接種方案(例如初次疫苗接種方案及/或加強疫苗接種方案)中給予之至少一個劑量包含約20 ug總RNA。在一些實施例中，疫苗接種方案(例如初次疫苗接種方案及/或加強疫苗接種方案)中給予之至少一個劑量包含約15 ug總RNA。在一些實施例中，疫苗接種方案(例如初次疫苗接種方案及/或加強疫苗接種方案)中給予之至少一個劑量包含約10 ug總RNA。在一些實施例中，疫苗接種方案(例如初次疫苗接種方案及/或加強疫苗接種方案)中給予之至少一個劑量包含約3 ug總RNA。
在一個實施例中，每劑投與約60 μg之量的本文所闡述之RNA。在一個實施例中，每劑投與約50 μg之量的本文所闡述之RNA。在一個實施例中，每劑投與約30 μg之量的本文所闡述之RNA。在一個實施例中，每劑投與約25 μg之量的本文所闡述之RNA。在一個實施例中，每劑投與約20 μg之量的本文所闡述之RNA。在一個實施例中，每劑投與約15 μg之量的本文所闡述之RNA。在一個實施例中，每劑投與約10 μg之量的本文所闡述之RNA。在一個實施例中，每劑投與約5 μg之量的本文所闡述之RNA。在一個實施例中，每劑投與約3 μg之量的本文所闡述之RNA。在一個實施例中，投與至少兩個此類劑量。舉例而言，第二劑量可在投與第一劑量後約21天投與。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA疫苗(例如，以兩個劑量投與，其中第二劑量可在投與第一劑量後約21天投與，且例如以每劑約30 μg之量投與)之功效在投與第二劑量後7天開始(例如，若第二劑量在投與第一劑量後21天投與，則在投與第一劑量後28天開始)為至少70%、至少80%、至少90%或至少95%。在一些實施例中，在至少50、至少55、至少60、至少65、至少70歲或以上之群體中觀察到此類功效。在一些實施例中，本文所闡述之RNA疫苗之功效(例如，以兩個劑量投與，其中第二劑量可在投與第一劑量後約21天投與，且例如以每劑約30 μg之量投與)在投與第二劑量後7天開始(例如，若第二劑量在投與第一劑量後21天投與，則在投與第一劑量後28天開始)在至少65歲、諸如65至80歲、65至75歲或65至70歲之群體中為至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%或至少95%。可在長達1個月、2個月、3個月、6個月或甚至更長之時間段內觀察到此類功效。
在一個實施例中，疫苗功效定義為有感染跡象之個體數量減少之百分比(接種疫苗之個體對未接種疫苗之個體)。
在一個實施例中，經由監測COVID-19及/或流行性感冒之潛在病例來評價功效。若在任何時候患者發生急性呼吸道疾病，則出於本文之目的，該患者可視為潛在患有COVID-19疾病及/或流行性感冒疾病。評價可包括鼻(中鼻甲)拭子，其可使用反轉錄-聚合酶鏈式反應(RT-PCR)測試進行測試以偵測SARS-CoV-2或流行性感冒。另外，可評價來自當地標準照護測試之臨床資訊及結果。
在一些實施例中，功效評價可利用SARS-CoV-2相關病例之定義，其中： • 證實之COVID-19：在症狀期期間或症狀期前後4天內存在以下症狀中之至少1項且SARS-CoV-2 NAAT (基於核酸擴增之測試)陽性：發熱；新發或加重之咳嗽；新發或加重之呼吸短促；寒戰；新發或加重之肌肉疼痛；新發味覺或嗅覺喪失；咽喉痛；腹瀉；嘔吐。
或者或另外，在一些實施例中，功效評價可利用SARS-CoV-2相關病例之定義，其中可考慮由CDC定義之以下額外症狀中之一或多者：疲勞；頭痛；鼻塞或流鼻涕；噁心。
在一些實施例中，功效評價可利用SARS-CoV-2相關嚴重病例之定義 • 證實之嚴重COVID-19：證實之COVID-19且存在以下中之至少1項：指示嚴重全身疾病之靜息臨床徵象(例如，RR ≥30次呼吸/分鐘，HR ≥125次搏動/分鐘，海平面室內空氣條件下SpO 2≤93%，或PaO 2/FiO 2＜300 mm Hg)；呼吸衰竭(其可定義為需要高流量吸氧、無創通氣、機械通氣或ECMO)；休克跡象(例如，SBP ＜90 mm Hg，DBP ＜60 mm Hg，或需要升壓藥)；嚴重急性腎、肝或神經功能障礙；入住ICU；死亡。
或者或另外，在一些實施例中，血清學定義可用於沒有臨床呈現COVID-19之患者：例如，證實血清轉化為SARS-CoV-2而沒有證實之COVID-19：例如，陽性N-結合抗體導致患者在先具有陰性N-結合抗體結果。
在一些實施例中，可對血清樣品實施任何或所有以下分析：SARS-CoV-2中和分析；S1-結合IgG水準分析；RBD-結合IgG水準分析；N-結合抗體分析。
在一個實施例中，將本文所闡述之方法及劑投與給兒科群體。在各個實施例中，兒科群體包含或由18歲以下例如5至小於18歲、12至小於18歲、16至小於18歲、12至小於16歲、5至小於12歲或6個月至小於12歲之個體組成。在各個實施例中，兒科群體包含或由5歲以下例如2至小於5歲、12至小於24月齡、7至小於12月齡、或小於6月齡之個體組成。在一些此等實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給小於2歲例如6個月至小於2歲之個體。在一些此等實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給小於6個月例如1個月至小於4個月之個體。在一些實施例中，用於兒科群體之投藥方案(例如劑量及/或投藥時間表)可隨不同年齡組而變化。舉例而言，在一些實施例中，6個月至4歲之個體可根據包含至少三個劑量之初次方案投與，其中初始兩個劑量相隔至少3週(包括例如至少4週、至少5週、至少6週或更長時間)投與，隨後第三劑量在第二劑量後至少8週(包括例如至少9週、至少10週、至少11週、至少12週或更長時間)投與。在一些此等實施例中，所投與之至少一個劑量包含3 ug總RNA (例如本文所闡述之一或多種RNA)。在一些實施例中，5 歲及以上之個體可根據包含至少兩個劑量之初次方案投與，其中該兩個劑量相隔至少3週(包括例如至少3週、至少4週、至少5週、至少6週或更長時間)投與。在一些此等實施例中，所投與之至少一個劑量包含10 ug總RNA (例如本文所闡述之一或多種RNA)。在一些實施例中，5歲及以上之免疫受損個體(例如在一些實施例中，已經歷實體器官移植之個體或被診斷患有視為具有相當的免疫受損狀況之個體)可根據包含至少三個劑量之初次方案投與，其中初始兩個劑量相隔至少3週(包括例如至少3週、至少4週、至少5週、至少6週或更長時間)投與，隨後第三劑量在第二劑量後至少4週(包括例如至少5週、至少6週、至少7週、至少8週、至少9週、至少10週、至少11週、至少12週或更長時間)投與。
在一些實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給12歲或以上之個體，且每個劑量包含約30 ug總RNA。在一些實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給12歲或以上(包括例如18歲或以上)之個體，且每個劑量包含大於30 ug總RNA，包括例如35 ug、40 ug、45 ug、50 ug、55 ug、60 ug、65 ug、70 ug或更高。在一些此等實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給12歲或以上之個體，且每個劑量包含約60 ug總RNA。在一些此等實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給12歲或以上之個體，且每個劑量包含約50 ug總RNA。在一個實施例中，兒科群體包含或由12至小於18歲之個體組成，包括16至小於18歲之個體及/或12至小於16歲之個體。在該實施例中，治療可包含相隔21天之2次疫苗接種，其中在一個實施例中，疫苗以每劑30 μg RNA之量投與，例如藉由肌內投與。在一些實施例中，與較年輕之兒童或嬰兒(例如2至小於5歲、6個月至小於2歲、或小於6個月)相比，向較年長之兒科患者及成人(例如12歲或以上之患者)投與較高劑量。在一些實施例中，與幼兒及/或嬰兒(例如6個月至小於2歲、或小於6個月之幼兒及/或嬰兒)相比，向2至小於5歲之兒童投與較高劑量。
在一個實施例中，兒科群體包含或由5至小於18歲之個體組成，包括12至小於18歲之個體及/或5至小於12歲之個體。在該實施例中，治療可包含相隔21天之2次疫苗接種，其中在各個實施例中，疫苗以每劑10 μg、20 μg或30 μg總RNA之量投與，例如藉由肌內投與。在一些此等實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給5至11歲之個體，且每個劑量為約10 ug/劑。
在一些實施例中，每個劑量包含約5 ug編碼第一變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及約5 ug編碼第二變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一些實施例中，每個劑量包含約5 ug編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及約5 ug編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一些實施例中，每個劑量包含約5 ug編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，包含SEQ ID NO: 20之RNA)及約5 ug編碼BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，包含SEQ ID NO: 51之RNA)。在一些實施例中，每個劑量包含約5 ug編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，包含SEQ ID NO: 20之RNA)及約5 ug編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，包含SEQ ID NO: 72之RNA)。
在一個實施例中，兒科群體包含或由小於5歲之個體組成，包括2至小於5歲之個體、12至小於24月齡之個體、7至小於12月齡之個體、6至小於12月齡之個體及/或小於6月齡之個體。在該實施例中，治療可包含2次疫苗接種，例如相隔21至42天，例如相隔21天，其中在各個實施例中，疫苗以每劑3 μg、6 μg、10 μg、20 μg或30 μg RNA之量投與，例如藉由肌內投與。在一些此等實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給2至小於5歲之個體，且每個劑量包含約3 ug mRNA。在一些此等實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給約6個月至小於約5歲之個體，且每個劑量包含約3 ug mRNA。在一些此等實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給2至小於5歲之個體，且每個劑量包含約6 ug mRNA。在一些此等實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給約6個月至小於約5歲之個體，且每個劑量包含約6 ug mRNA。在一些此等實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給2至小於5歲之個體，且每個劑量包含約10 ug mRNA。在一些此等實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給約6個月至小於約5歲之個體，且每個劑量包含約10 ug mRNA。
在一些實施例中，每個劑量之組合疫苗包含約1.5 ug編碼第一變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及約1.5 ug編碼第二變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一些實施例中，每個劑量包含約1.5 ug編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及約1.5 ug編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一些實施例中，每個劑量包含約1.5 ug編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，包含SEQ ID NO: 20之RNA)及約1.5 ug編碼BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，包含SEQ ID NO: 51之RNA)。在一些實施例中，每個劑量包含約1.5 ug編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，包含SEQ ID NO: 20之RNA)及約1.5 ug編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，包含SEQ ID NO: 72之RNA)。
在一些實施例中，每個劑量之組合疫苗包含約3 ug編碼第一變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及約3 ug編碼第二變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一些實施例中，每個劑量包含約3 ug編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及約3 ug編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一些實施例中，每個劑量包含約3 ug編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，包含SEQ ID NO: 20之RNA)及約3 ug編碼BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，包含SEQ ID NO: 51之RNA)。在一些實施例中，每個劑量包含約3 ug編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，包含SEQ ID NO: 20之RNA)及約6 ug編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，包含SEQ ID NO: 72之RNA)。在一些實施例中，每個劑量包含約5 ug編碼第一變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及約5 ug編碼第二變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一些實施例中，每個劑量包含約5 ug編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及約5 ug編碼奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一些實施例中，每個劑量包含約5 ug編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，包含SEQ ID NO: 20之RNA)及約5 ug編碼BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，包含SEQ ID NO: 51之RNA)。在一些實施例中，每個劑量包含約5 ug編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，包含SEQ ID NO: 20之RNA)及約5 ug編碼BA.4/5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，包含SEQ ID NO: 72之RNA)。
在一些實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給12歲或以上之個體，且在疫苗接種方案(例如初次疫苗接種方案及/或加強疫苗接種方案)中給予的至少一個劑量包含約60 ug mRNA。在一些實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給12歲或以上之個體，且在疫苗接種方案(例如初次疫苗接種方案及/或加強疫苗接種方案)中給予的至少一個劑量包含約30 ug mRNA。在一些實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給12歲或以上之個體，且在疫苗接種方案(例如初次疫苗接種方案及/或加強疫苗接種方案)中給予的至少一個劑量包含約90 ug mRNA。在一些實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給12歲或以上之個體，且在疫苗接種方案(例如初次疫苗接種方案及/或加強疫苗接種方案)中給予的至少一個劑量包含約75 ug mRNA。在一些實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給12歲或以上之個體，且在疫苗接種方案(例如初次疫苗接種方案及/或加強疫苗接種方案)中給予的至少一個劑量包含約15 ug mRNA。在一些實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給5歲至小於12歲之個體，且在疫苗接種方案(例如初次疫苗接種方案及/或加強疫苗接種方案)中給予的至少一個劑量包含約10 ug mRNA。在一些實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給2歲至小於5歲之個體，且在疫苗接種方案(例如初次疫苗接種方案及/或加強疫苗接種方案)中給予的至少一個劑量包含約3 ug mRNA。在一些實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給6個月至小於2歲之個體，且在疫苗接種方案(例如初次接種方案及/或加強接種方案)中給予的至少一個劑量包含約3 ug或更低(包括例如2 ug、1 ug或更低)之mRNA。在一些實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給小於6個月之嬰兒，且在疫苗接種方案(例如初次疫苗接種方案及/或加強疫苗接種方案)中給予的至少一個劑量包含約3 ug或更低(包括例如2 ug、1 ug、0.5 ug或更低)之mRNA。
在一些實施例中，本文所闡述之mRNA組合物作為單次劑量投與(例如藉由肌內注射)。在一些實施例中，單次劑量包含編碼SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段(例如RBD結構域)之單一RNA。在一些實施例中，單次劑量包含至少兩種本文所闡述之RNA，例如，每種RNA編碼來自不同毒株之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段(例如RBD結構域)。在一些實施例中，本文所闡述之此類至少兩種RNA可作為單一混合物投與。舉例而言，在一些此等實施例中，本文所闡述之兩種分開的RNA組合物可在注射前混合以生成單一混合物。在一些實施例中，本文所闡述之此類至少兩種RNA可作為兩種分開的組合物投與，其例如可在不同的注射部位(例如在不同的臂上，或在同一臂上之不同部位)投與。
在一些實施例中，向有需要之個體投與之劑量可包含投與本文所闡述之單一mRNA組合物。
在一些實施例中，向有需要之個體投與之劑量可包含投與至少兩種或更多種(包括例如至少三種或更多種)不同的藥物產品/調配物。舉例而言，在一些實施例中，至少兩種或更多種不同的藥物產品/調配物可包含至少兩種不同的本文所闡述之mRNA組合物(例如在一些實施例中，各自包含不同的RNA構築體)。
在一些實施例中，本文所揭示之mRNA組合物可與靶向不同傳染原之疫苗聯合投與。在一些實施例中，不同的傳染原係當用SARS-CoV-2及該傳染原共感染時增加個體經歷有害症狀之可能性之傳染原。在一些實施例中，傳染原係當用SARS-CoV-2及該傳染原共感染個體時增加SARS-CoV-2之感染性之傳染原。在一些實施例中，本文所闡述之至少一種mRNA組合物可與靶向流行性感冒之疫苗組合投與。在一些實施例中，至少兩種或更多種不同的藥物產品/調配物可包含至少一種本文所闡述之mRNA組合物及靶向不同傳染原之疫苗(例如流行性感冒疫苗)。在一些實施例中，分開投與不同的藥物產品/調配物。在一些實施例中，此等不同的藥物產品/調配物在個體之不同部位(例如在個體之不同臂)同時(例如在相同的疫苗接種期)分開投與。
在一個實施例中，投與至少兩個劑量。舉例而言，第二劑量可在投與第一劑量後約21天投與。
在一些實施例中，本文所揭示之組合物及方法可根據如圖1中所圖解說明之例示性疫苗接種方案使用。 例示性初次投藥方案
在一些實施例中，向個體投與初次投藥方案。初次投藥方案可包含一或多個劑量。舉例而言，在一些實施例中，初次投藥方案包含單次劑量(PD 1)。在一些實施例中，初次投藥方案包含第一劑量(PD 1)及第二劑量(PD 2)。在一些實施例中，初次投藥方案包含第一劑量、第二劑量及第三劑量(PD 3)。在一些實施例中，初次投藥方案包含本文所闡述醫藥組合物中之任一者之第一劑量、第二劑量、第三劑量及一或多個額外劑量(PD n)。
在一些實施例中，PD 1包含投與1至100 ug RNA。在一些實施例中，PD 1包含投與1至60 ug RNA。在一些實施例中，PD 1包含投與1至50 ug RNA。在一些實施例中，PD 1包含投與1至30 ug RNA。在一些實施例中，PD 1包含投與約3 ug RNA。在一些實施例中，PD 1包含投與約5 ug RNA。在一些實施例中，PD 1包含投與約10 ug RNA。在一些實施例中，PD 1包含投與約15 ug RNA。在一些實施例中，PD 1包含投與約20 ug RNA。在一些實施例中，PD 1包含投與約30 ug RNA。在一些實施例中，PD 1包含投與約50 ug RNA。在一些實施例中，PD 1包含投與約60 ug RNA。
在一些實施例中，PD 2包含投與1至100 ug RNA。在一些實施例中，PD 2包含投與1至60 ug RNA。在一些實施例中，PD 2包含投與1至50 ug RNA。在一些實施例中，PD 2包含投與1至30 ug RNA。在一些實施例中，PD 2包含投與約3 ug。在一些實施例中，PD 2包含投與約5 ug RNA。在一些實施例中，PD 2包含投與約10 ug RNA。在一些實施例中，PD 2包含投與約15 ug RNA。在一些實施例中，PD 2包含投與約20 ug RNA。在一些實施例中，PD 2包含投與約30 ug RNA。在一些實施例中，PD 2包含投與約50 ug RNA。在一些實施例中，PD 2包含投與約60 ug RNA。
在一些實施例中，PD 3包含投與1至100 ug RNA。在一些實施例中，PD 3包含投與1至60 ug RNA。在一些實施例中，PD 3包含投與1至50 ug RNA。在一些實施例中，PD 3包含投與1至30 ug RNA。在一些實施例中，PD 3包含投與約3 ug RNA。在一些實施例中，PD 3包含投與約5 ug RNA。在一些實施例中，PD 3包含投與約10 ug RNA。在一些實施例中，PD 3包含投與約15 ug RNA。在一些實施例中，PD 3包含投與約20 ug RNA。在一些實施例中，PD 3包含投與約30 ug RNA。在一些實施例中，PD 3包含投與約50 ug RNA。在一些實施例中，PD 3包含投與約60 ug RNA。
在一些實施例中，PD n包含投與1至100 ug RNA。在一些實施例中，PD n包含投與1至60 ug RNA。在一些實施例中，PD n包含投與1至50 ug RNA。在一些實施例中，PD n包含投與1至30 ug RNA。在一些實施例中，PD n包含投與約3 ug RNA。在一些實施例中，PD n包含投與約5 ug RNA。在一些實施例中，PD n包含投與約10 ug RNA。在一些實施例中，PD n包含投與約15 ug RNA。在一些實施例中，PD n包含投與約20 ug RNA。在一些實施例中，PD n包含投與約30 ug RNA。在一些實施例中，PD n包含投與約50 ug RNA。在一些實施例中，PD n包含投與約60 ug RNA。
在一些實施例中，PD 1包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段之RNA。在一些實施例中，PD 1包含編碼來自在相關轄區流行及/或迅速傳播之SARS-CoV-2毒株之刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 1包含編碼包含來自阿爾法變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 1包含編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 1包含編碼包含來自貝塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 1包含編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 1包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼來自在相關轄區流行及/或迅速傳播之SARS-CoV-2毒株之刺突蛋白或其免疫原性片段的一或多種額外RNA。在一些實施例中，PD 1包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自阿爾法變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 1包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自貝塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 1包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 1包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。
在一些實施例中，PD 2包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段之RNA。在一些實施例中，PD 2包含編碼來自在相關轄區流行及/或迅速傳播之SARS-CoV-2毒株之刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 2包含編碼包含來自阿爾法變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 2包含編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 2包含編碼包含來自貝塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 2包含編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 2包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼來自在相關轄區流行及/或迅速傳播之SARS-CoV-2毒株之刺突蛋白或其免疫原性片段的一或多種額外RNA。在一些實施例中，PD 2包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自阿爾法變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 2包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自貝塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 2包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 2包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。
在一些實施例中，PD 3包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段之RNA。在一些實施例中，PD 3包含編碼來自在相關轄區流行及/或迅速傳播之SARS-CoV-2毒株之刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 3包含編碼包含來自阿爾法變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 3包含編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 3包含編碼包含來自貝塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 3包含編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 3包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼來自在相關轄區流行及/或迅速傳播之SARS-CoV-2毒株之刺突蛋白或其免疫原性片段的一或多種額外RNA。在一些實施例中，PD 3包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自阿爾法變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 3包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自貝塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 3包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD 3包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。
在一些實施例中，PD n包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段之RNA。在一些實施例中，PD n包含編碼來自在相關轄區流行及/或迅速傳播之SARS-CoV-2毒株之刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD n包含編碼包含來自阿爾法變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD n包含編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD n包含編碼包含來自貝塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD n包含編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD n包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼來自在相關轄區流行及/或迅速傳播之SARS-CoV-2毒株之刺突蛋白或其免疫原性片段的一或多種額外RNA。在一些實施例中，PD n包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自阿爾法變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD n包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自貝塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD n包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，PD n包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。
在一些實施例中，PD 1、PD 2、PD 3及PD n可各自獨立地包含複數種(例如至少兩種)本文所闡述之mRNA組合物。在一些實施例中，PD 1、PD 2 、PD 3及PD n可各自獨立地包含第一mRNA組合物及第二mRNA組合物。在一些實施例中，複數種mRNA組合物中之至少一者包含BNT162b2 (例如，如本文所闡述)。在一些實施例中，複數種mRNA組合物中之至少一者包含編碼來自不同SARS-CoV-2變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA。在一些實施例中，複數種mRNA組合物中之至少一者包含編碼來自SARS-CoV-2武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA。在一些實施例中，複數種mRNA組合物中之至少一者包含編碼包含來自在相關轄區流行及/或迅速傳播之變異體的一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，複數種mRNA組合物中之至少一者包含編碼包含來自阿爾法變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段的mRNA。在一些實施例中，複數種mRNA組合物中之至少一者包含編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段的mRNA。在一些實施例中，複數種mRNA組合物中之至少一者包含編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段的mRNA。
在一些實施例中，以PD 1、PD 2 、PD 3及/或PD n給予之複數種mRNA組合物可各自獨立地包含至少兩種不同的mRNA構築體(例如在蛋白質編碼序列方面有所不同)。舉例而言，在一些實施例中，以PD 1、PD 2、PD 3及/或PD n給予之複數種mRNA組合物可各自獨立地包含編碼 來自SARS-CoV-2武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA，以及編碼包含來自在相關轄區流行及/或迅速傳播的變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA。在一些實施例中，以PD 1、PD 2、PD 3及/或PD n給予之複數種mRNA組合物可各自獨立地包含編碼 來源於SARS-CoV-2武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA，以及編碼包含來自在相關轄區流行及/或迅速傳播的變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA。在一些此等實施例中，變異體可為阿爾法變異體。在一些此等實施例中，變異體可為德爾塔變異體。在一些此等實施例中，變異體可為奧密克戎變異體。
在一些實施例中，以PD 1、PD 2、PD 3及/或PD n給予之複數種mRNA組合物中之每一者可獨立地包含至少兩種mRNA，每種mRNA編碼包含來自在相關轄區流行及/或迅速傳播的不同變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段。在一些實施例中，以PD 1、PD 2、PD 3及/或PD n給予之複數種mRNA組合物中之每一者可獨立地包含編碼來自阿爾法變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA，以及編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA。在一些實施例中，以PD 1、PD 2、PD 3及/或PD n給予之複數種mRNA組合物中之每一者可獨立地包含編碼 來自阿爾法變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA，以及編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA。在一些實施例中，以PD 1、PD 2、PD 3及/或PD n給予之複數種mRNA組合物中之每一者可獨立地包含編碼 來自德爾塔變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA，以及編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA。
在一些實施例中，PD 1、PD 2、PD 3及/或PD n各自包含複數種mRNA組合物，其中每種mRNA組合物分開地投與給個體。舉例而言，在一些實施例中，每種mRNA組合物經由肌內注射在不同的注射部位處投與。舉例而言，在一些實施例中，以PD 1、PD 2、PD 3及/或PD n給予之第一mRNA組合物及第二mRNA組合物經由肌內注射分開地投與給個體之不同臂。
在一些實施例中，PD 1、PD 2、PD 3及/或PD n包含投與複數種RNA分子，其中每種RNA分子編碼包含來自不同SARS-CoV-2變異體之突變之刺突蛋白，且其中該複數種RNA分子以單一調配物投與給個體。在一些實施例中，單一調配物包含編碼來自武漢毒株之刺突蛋白或其免疫原性變異體之RNA，以及編碼包含來自阿爾法變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段之RNA。在一些實施例中，單一調配物包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段之RNA，以及編碼包含來自貝塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段之RNA。在一些實施例中，單一調配物包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段之RNA，以及編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段之RNA。在一些實施例中，單一調配物包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段之RNA，以及編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段之RNA。
在一些實施例中，PD 1與PD 2之間的時間長度(PI 1)為至少約1週、至少約2週、至少約3週或至少約4週。在一些實施例中，PI 1為約1週至約12週。在一些實施例中，PI 1為約1週至約10週。在一些實施例中，PI 1為約2週至約10週。在一些實施例中，PI 1為約2週至約8週。在一些實施例中，PI 1為約3週至約8週。在一些實施例中，PI 1為約4週至約8週。在一些實施例中，PI 1為約6週至約8週。在一些實施例中，PI 1為約3至約4週。在一些實施例中，PI 1為約1週。在一些實施例中，PI 1為約2週。在一些實施例中，PI 1為約3週。在一些實施例中，PI 1為約4週。在一些實施例中，PI 1為約5週。在一些實施例中，PI 1為約6週。在一些實施例中，PI 1為約7週。在一些實施例中，PI 1為約8週。在一些實施例中，PI 1為約9週。在一些實施例中，PI 1為約10週。在一些實施例中，PI 1為約11週。在一些實施例中，PI 1為約12週。
在一些實施例中，PD 2與PD 3之間的時間長度(PI 2)為至少約1週、至少約2週或至少約3週。在一些實施例中，PI 2為約1週至約12週。在一些實施例中，PI 2為約1週至約10週。在一些實施例中，PI 2為約2週至約10週。在一些實施例中，PI 2為約2週至約8週。在一些實施例中，PI 2為約3週至約8週。在一些實施例中，PI 2為約4週至約8週。在一些實施例中，PI 2為約6週至約8週。在一些實施例中，PI 2為約3至約4週。在一些實施例中，PI 2為約1週。在一些實施例中，PI 2為約2週。在一些實施例中，PI 2為約3週。在一些實施例中，PI 2為約4週。在一些實施例中，PI 2為約5週。在一些實施例中，PI 2為約6週。在一些實施例中，PI 2為約7週。在一些實施例中，PI 2為約8週。在一些實施例中，PI 2為約9週。在一些實施例中，PI 2為約10週。在一些實施例中，PI 2為約11週。在一些實施例中，PI 2為約12週。
在一些實施例中，PD 3與作為初次投藥方案之一部分的後續劑量之間、或在超出PD 3之任何劑量之各劑量之間的時間長度(PI n)各自單獨且獨立地選自：約1週或更長時間、約2週或更長時間或約3週或更長時間。在一些實施例中，PI n為約1週至約12週。在一些實施例中，PI n為約1週至約10週。在一些實施例中，PI n為約2週至約10週。在一些實施例中，PI n為約2週至約8週。在一些實施例中，PI n為約3週至約8週。在一些實施例中，PI n為約4週至約8週。在一些實施例中，PI n為約6週至約8週。在一些實施例中，PI n為約3至約4週。在一些實施例中，PI 2為約1週。在一些實施例中，PI n為約2週。在一些實施例中，PI n為約3週。在一些實施例中，PI n為約4週。在一些實施例中，PI n為約5週。在一些實施例中，PI n為約6週。在一些實施例中，PI n為約7週。在一些實施例中，PI n為約8週。在一些實施例中，PI n為約9週。在一些實施例中，PI n為約10週。在一些實施例中，PI n為約11週。在一些實施例中，PI n為約12週。
在一些實施例中，以PD 1投與之一或多種組合物係在Tris緩衝液中進行調配。在一些實施例中，以PD 2投與之一或多種組合物係在Tris緩衝液中進行調配。在一些實施例中，以PD 3投與之一或多種組合物係在Tris緩衝液中進行調配。在一些實施例中，以PD n投與之一或多種組合物係在Tris緩衝液中進行調配。
在一些實施例中，初次投藥方案包含投與本文所闡述之兩種或更多種mRNA組合物，且該等mRNA組合物中之至少兩者具有不同的調配物。在一些實施例中，初次投藥方案包含PD 1及PD 2，其中PD 1包含投與在Tris緩衝液中調配之mRNA，且PD 2包含投與在PBS緩衝液中調配之mRNA。在一些實施例中，初次投藥方案包含PD 1及PD 2，其中PD 1包含投與在PBS緩衝液中調配之mRNA，且PD 2包含投與在Tris緩衝液中調配之mRNA。
在一些實施例中，以PD 1、PD 2、PD 3及/或PD n給予之一或多種mRNA組合物可與另一種疫苗組合投與。在一些實施例中，另一種疫苗用於非COVID-19之疾病。在一些實施例中，該疾病係在個體同時感染該疾病及SARS-CoV-2時會增加SARS-CoV-2之有害效應之疾病。在一些實施例中，該疾病係在個體同時感染該疾病及SARS-CoV-2時會增加SARS-CoV-2之傳播率之疾病。在一些實施例中，另一種疫苗係不同的市售疫苗。在一些實施例中，該不同的市售疫苗為RNA疫苗。在一些實施例中，該不同的市售疫苗為基於多肽之疫苗。在一些實施例中，另一種疫苗(例如如本文所闡述)以及以PD 1、PD 2、PD 3及/或PD n給予之一或多種mRNA組合物例如在一些實施例中經由肌內注射在不同的注射部位處分開地投與。舉例而言，在一些實施例中，流行性感冒疫苗以及以PD 1、PD 2、PD 3及/或PD n給予之本文所闡述之一或多種SARS-CoV-2 mRNA組合物經由肌內注射分開地投與給個體之不同臂。 例示性加強投藥方案
在一些實施例中，本文所揭示之疫苗接種方法包含一或多種加強投藥方案。本文所揭示之加強投藥方案包含一或多個劑量。在一些實施例中，將加強投藥方案投與給已投與初次投藥方案(例如如本文所闡述)之患者。在一些實施例中，將加強投藥方案投與給尚未接受本文所揭示之醫藥組合物之患者。在一些實施例中，將加強投藥方案投與給先前已接種與初次投藥方案中所投與之疫苗不同的COVID-19疫苗之患者。
在一些實施例中，初次投藥方案與加強投藥方案之間的時間長度為至少1週、至少2週、至少3週、至少4週、至少5週、至少6週、至少7週、至少8週、至少9週、至少10週、至少11週、至少12週、至少2個月、至少3個月、至少4個月、至少5個月、至少6個月、至少7個月、至少8個月、至少9個月、至少10個月、至少11個月或至少12個月或更長時間。在一些實施例中，初次投藥方案與加強投藥方案之間的時間長度為約1個月。在一些實施例中，初次投藥方案與加強投藥方案之間的時間長度為至少約2個月。在一些實施例中，初次投藥方案與加強投藥方案之間的時間長度為至少約3個月。在一些實施例中，初次投藥方案與加強投藥方案之間的時間長度為至少約4個月。在一些實施例中，初次投藥方案與加強投藥方案之間的時間長度為至少約5個月。在一些實施例中，初次投藥方案與加強投藥方案之間的時間長度為至少約6個月。在一些實施例中，初次投藥方案與加強投藥方案之間的時間長度為約1個月至約48個月。在一些實施例中，初次投藥方案與加強投藥方案之間的時間長度為約1個月至約36個月。在一些實施例中，初次投藥方案與加強投藥方案之間的時間長度為約1個月至約24個月。在一些實施例中，初次投藥方案與加強投藥方案之間的時間長度為約2個月至約24個月。在一些實施例中，初次投藥方案與加強投藥方案之間的時間長度為約3個月至約24個月。在一些實施例中，初次投藥方案與加強投藥方案之間的時間長度為約3個月至約18個月。在一些實施例中，初次投藥方案與加強投藥方案之間的時間長度為約3個月至約12個月。在一些實施例中，初次投藥方案與加強投藥方案之間的時間長度為約6個月至約12個月。在一些實施例中，初次投藥方案與加強投藥方案之間的時間長度為約3個月至約9個月。在一些實施例中，初次投藥方案與加強投藥方案之間的時間長度為約5個月至約7個月。在一些實施例中，初次投藥方案與加強投藥方案之間的時間長度為約6個月。
在一些實施例中，向個體投與加強投藥方案。加強投藥方案可包含一或多個劑量。舉例而言，在一些實施例中，加強投藥方案包含單次劑量(BD 1)。在一些實施例中，加強投藥方案包含第一劑量(BD 1)及第二劑量(BD 2)。在一些實施例中，加強投藥方案包含第一劑量、第二劑量及第三劑量(BD 3)。在一些實施例中，加強投藥方案包含本文所闡述醫藥組合物中之任一者之第一劑量、第二劑量、第三劑量及一或多個額外劑量(BD n)。
在一些實施例中，BD 1包含投與1至100 ug RNA。在一些實施例中，BD 1包含投與1至60 ug RNA。在一些實施例中，BD 1包含投與1至50 ug RNA。在一些實施例中，BD 1包含投與1至30 ug RNA。在一些實施例中，BD 1包含投與約3 ug RNA。在一些實施例中，BD 1包含投與約5 ug RNA。在一些實施例中，BD 1包含投與約10 ug RNA。在一些實施例中，BD 1包含投與約15 ug RNA。在一些實施例中，BD 1包含投與約20 ug RNA。在一些實施例中，BD 1包含投與約30 ug RNA。在一些實施例中，BD 1包含投與約50 ug RNA。在一些實施例中，BD 1包含投與約60 ug RNA。
在一些實施例中，BD 2包含投與1至100 ug RNA。在一些實施例中，BD 2包含投與1至60 ug RNA。在一些實施例中，BD 2包含投與1至50 ug RNA。在一些實施例中，BD 2包含投與1至30 ug RNA。在一些實施例中，BD 2包含投與約3 ug。在一些實施例中，BD 2包含投與約5 ug RNA。在一些實施例中，BD 2包含投與約10 ug RNA。在一些實施例中，BD 2包含投與約15 ug RNA。在一些實施例中，BD 2包含投與約20 ug RNA。在一些實施例中，BD 2包含投與約30 ug RNA。在一些實施例中，BD 2包含投與約50 ug RNA。在一些實施例中，BD 2包含投與約60 ug RNA。
在一些實施例中，BD 3包含投與1至100 ug RNA。在一些實施例中，BD 3包含投與1至60 ug RNA。在一些實施例中，BD 3包含投與1至50 ug RNA。在一些實施例中，BD 3包含投與1至30 ug RNA。在一些實施例中，BD 3包含投與約3 ug RNA。在一些實施例中，BD 3包含投與約5 ug RNA。在一些實施例中，BD 3包含投與約10 ug RNA。在一些實施例中，BD 3包含投與約15 ug RNA。在一些實施例中，BD 3包含投與約20 ug RNA。在一些實施例中，BD 3包含投與約30 ug RNA。在一些實施例中，BD 3包含投與約50 ug RNA。在一些實施例中，BD 3包含投與約60 ug RNA。
在一些實施例中，BD n包含投與1至100 ug RNA。在一些實施例中，BD n包含投與1至60 ug RNA。在一些實施例中，BD n包含投與1至50 ug RNA。在一些實施例中，BD n包含投與1至30 ug RNA。在一些實施例中，BD n包含投與約3 ug RNA。在一些實施例中，BD n包含投與約5 ug RNA。在一些實施例中，BD n包含投與約10 ug RNA。在一些實施例中，BD n包含投與約15 ug RNA。在一些實施例中，BD n包含投與約20 ug RNA。在一些實施例中，BD n包含投與約30 ug RNA。在一些實施例中，BD n包含投與約60 ug RNA。在一些實施例中，BD n包含投與約50 ug RNA。
在一些實施例中，BD 1包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段之RNA。在一些實施例中，BD 1包含編碼來自在相關轄區流行及/或迅速傳播之SARS-CoV-2毒株之刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 1包含編碼包含來自阿爾法變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 1包含編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 1包含編碼包含來自貝塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 1包含編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。
在一些實施例中，BD 1包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼來自在相關轄區流行及/或迅速傳播之SARS-CoV-2毒株之刺突蛋白或其免疫原性片段的一或多種RNA。在一些實施例中，BD 1包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自阿爾法變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 1包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 1包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自貝塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 1包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。
在一些實施例中，BD 2包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段之RNA。在一些實施例中，BD 2包含編碼來自在相關轄區流行及/或迅速傳播之SARS-CoV-2毒株之刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 2包含編碼包含來自阿爾法變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 2包含編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 2包含編碼包含來自貝塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 2包含編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 2包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼來自在相關轄區流行及/或迅速傳播之SARS-CoV-2毒株之刺突蛋白或其免疫原性片段的一或多種RNA。在一些實施例中，BD 2包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自阿爾法變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 2包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 2包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自貝塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 2包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。
在一些實施例中，BD 3包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段之RNA。在一些實施例中，BD 3包含編碼來自在相關轄區流行及/或迅速傳播之SARS-CoV-2毒株之刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 3包含編碼包含來自阿爾法變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 3包含編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 3包含編碼包含來自貝塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 3包含編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。
在一些實施例中，BD 3包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼來自在相關轄區流行及/或迅速傳播之SARS-CoV-2毒株之刺突蛋白或其免疫原性片段的一或多種RNA。在一些實施例中，BD 3包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自阿爾法變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 3包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 3包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自貝塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD 3包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。
在一些實施例中，BD n包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段之RNA。在一些實施例中，BD n包含編碼來自在相關轄區流行及/或迅速傳播之SARS-CoV-2毒株之刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD n包含編碼包含來自阿爾法變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD n包含編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD n包含編碼包含來自貝塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD n包含編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。
在一些實施例中，BD n包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼來自在相關轄區流行及/或迅速傳播之SARS-CoV-2毒株之刺突蛋白或其免疫原性片段的一或多種RNA。在一些實施例中，BD n包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自阿爾法變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD n包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD n包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自貝塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。在一些實施例中，BD n包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA，及編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2刺突蛋白或其免疫原性片段的RNA。
在一些實施例中，BD 1、BD 2、BD 3及BD n可各自獨立地包含複數種(例如至少兩種)本文所闡述之mRNA組合物。在一些實施例中，BD 1、BD 2 、BD 3及BD n可各自獨立地包含第一mRNA組合物及第二mRNA組合物。在一些實施例中，BD 1、BD 2、BD 3及BD n可各自獨立地包含複數種(例如至少兩種) mRNA組合物，其中該複數種mRNA組合物中之至少一者包含BNT162b2 (例如如本文所闡述)。在一些實施例中，複數種mRNA組合物中之至少一者包含編碼來自不同SARS-CoV-2變異體(例如在相關轄區流行或迅速傳播之變異體，例如本文所揭示之變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA。在一些實施例中，複數種mRNA組合物中之至少一者包含編碼來自SARS-CoV-2武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA。在一些實施例中，複數種mRNA組合物中之至少一者包含編碼包含來自在相關轄區流行及/或迅速傳播的變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之RNA。在一些實施例中，複數種mRNA組合物中之至少一者包含編碼包含來自阿爾法變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段的mRNA。在一些實施例中，複數種mRNA組合物中之至少一者包含編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段的mRNA。在一些實施例中，複數種mRNA組合物中之至少一者包含編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段的mRNA。
在一些實施例中，以BD 1、BD 2、BD 3及/或BD n給予之複數種mRNA組合物可各自獨立地包含至少兩種不同的mRNA構築體(例如，具有不同的蛋白質編碼序列之mRNA構築體)。舉例而言，在一些實施例中，以BD 1、BD 2、BD 3及/或BD n給予之複數種mRNA組合物可各自獨立地包含編碼來自SARS-CoV-2武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA，以及編碼包含來自在相關轄區流行及/或迅速傳播的變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA。在一些實施例中，以BD 1、BD 2、BD 3及/或BD n給予之複數種mRNA組合物可各自獨立地包含編碼來源於SARS-CoV-2武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA，以及編碼包含來自在相關轄區流行及/或迅速傳播的變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA。在一些此等實施例中，變異體可為阿爾法變異體。在一些此等實施例中，變異體可為德爾塔變異體。在一些此等實施例中，變異體可為奧密克戎變異體(例如BA.4/5、BA.1、BA.2、XBB、XBB.1、XBB.1.5、XBB.1.16、XBB.2.3、XBB.2.3.2或BQ.1奧密克戎變異體)。
在一些實施例中，以BD 1、BD 2、BD 3及/或BD n給予之複數種mRNA組合物可各自獨立地包含至少兩種mRNA，每種mRNA編碼包含來自在相關轄區流行及/或迅速傳播的不同變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段。在一些實施例中，以BD 1、BD 2、BD 3及/或BD n給予之複數種mRNA組合物可各自獨立地包含編碼來自阿爾法變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA，以及編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA。在一些實施例中，以BD 1、BD 2、BD 3及/或BD n給予之複數種mRNA組合物可各自獨立地包含編碼來自阿爾法變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA，以及編碼包含來自奧密克戎變異體(例如BA.4/5、BA.1、BA.2、XBB、XBB.1、XBB.1.5、XBB.1.16、XBB.2.3、XBB.2.3.2或BQ.1奧密克戎變異體)之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA。在一些實施例中，以BD 1、BD 2、BD 3及/或BD n給予之複數種mRNA組合物可各自獨立地包含編碼來源於SARS-CoV-2武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA，以及編碼包含來自在相關轄區流行及/或迅速傳播的變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA。在一些此等實施例中，變異體可為阿爾法變異體。在一些此等實施例中，變異體可為德爾塔變異體。在一些此等實施例中，變異體可為奧密克戎變異體。
在一些實施例中，以BD 1、BD 2、BD 3及/或BD n給予之複數種mRNA組合物可各自獨立地包含至少兩種mRNA，每種mRNA編碼包含來自在相關轄區流行及/或迅速傳播的不同變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段。在一些實施例中，以BD 1、BD 2、BD 3及/或BD n給予之複數種mRNA組合物可各自獨立地包含編碼來自阿爾法變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA，以及編碼包含來自德爾塔變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA。在一些實施例中，以BD 1、BD 2、BD 3及/或BD n給予之複數種mRNA組合物可各自獨立地包含編碼來自阿爾法變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA，以及編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA。在一些實施例中，以BD 1、BD 2、BD 3及/或BD n給予之複數種mRNA組合物可各自獨立地包含編碼來自德爾塔變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA，以及編碼包含來自奧密克戎變異體之一或多個突變之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之mRNA。
在一些實施例中，以BD 1、BD 2、BD 3及/或BD n給予之複數種mRNA組合物例如在一些實施例中經由肌內注射在不同的注射部位處分開地投與給個體。舉例而言，在一些實施例中，以BD 1、BD 2、BD 3及/或BD n給予之第一mRNA組合物及第二mRNA組合物經由肌內注射分開地投與給個體之不同臂。
在一些實施例中，BD 1與BD 2之間的時間長度(BI 1)為至少約1週、至少約2週、至少約3週或至少約4週。在一些實施例中，BI 1為約1週至約12週。在一些實施例中，BI 1為約1週至約10週。在一些實施例中，BI 1為約2週至約10週。在一些實施例中，BI 1為約2週至約8週。在一些實施例中，BI 1為約3週至約8週。在一些實施例中，BI 1為約4週至約8週。在一些實施例中，BI 1為約6週至約8週。在一些實施例中，BI 1為約3至約4週。在一些實施例中，BI 1為約1週。在一些實施例中，BI 1為約2週。在一些實施例中，BI 1為約3週。在一些實施例中，BI 1為約4週。在一些實施例中，BI 1為約5週。在一些實施例中，BI 1為約6週。在一些實施例中，BI 1為約7週。在一些實施例中，BI 1為約8週。在一些實施例中，BI 1為約9週。在一些實施例中，BI 1為約10週。
在一些實施例中，BD 2與BD 3之間的時間長度(BI 2)為至少約1週、至少約2週或至少約3週。在一些實施例中，BI 2為約1週至約12週。在一些實施例中，BI 2為約1週至約10週。在一些實施例中，BI 2為約2週至約10週。在一些實施例中，BI 2為約2週至約8週。在一些實施例中，BI 2為約3週至約8週。在一些實施例中，BI 2為約4週至約8週。在一些實施例中，BI 2為約6週至約8週。在一些實施例中，BI 2為約3至約4週。在一些實施例中，BI 2為約1週。在一些實施例中，BI 2為約2週。在一些實施例中，BI 2為約3週。在一些實施例中，BI 2為約4週。在一些實施例中，BI 2為約5週。在一些實施例中，BI 2為約6週。在一些實施例中，BI 2為約7週。在一些實施例中，BI 2為約8週。在一些實施例中，BI 2為約9週。在一些實施例中，BI 2為約10週。
在一些實施例中，BD 3與作為加強投藥方案之一部分的後續劑量之間、或在超出BD 3之任何劑量之各劑量之間的時間長度(BI n)各自單獨且獨立地選自：約1週或更長時間、約2週或更長時間或約3週或更長時間。在一些實施例中，BI n為約1週至約12週。在一些實施例中，BI n為約1週至約10週。在一些實施例中，BI n為約2週至約10週。在一些實施例中，BI n為約2週至約8週。在一些實施例中，BI n為約3週至約8週。在一些實施例中，BI n為約4週至約8週。在一些實施例中，BI n為約6週至約8週。在一些實施例中，BI n為約3至約4週。在一些實施例中，BI n為約1週。在一些實施例中，BI n為約2週。在一些實施例中，BI n為約3週。在一些實施例中，BI n為約4週。在一些實施例中，BI n為約5週。在一些實施例中，BI n為約6週。在一些實施例中，BI n為約7週。在一些實施例中，BI n為約8週。在一些實施例中，BI n為約9週。在一些實施例中，BI n為約10週。
在一些實施例中，以BD 1投與之一或多種組合物係在Tris緩衝液中進行調配。在一些實施例中，以BD 2投與之一或多種組合物係在Tris緩衝液中進行調配。在一些實施例中，以BD 3投與之一或多種組合物係在Tris緩衝液中進行調配。在一些實施例中，以BD 3投與之一或多種組合物係在Tris緩衝液中進行調配。
在一些實施例中，加強投藥方案包含投與本文所闡述之兩種或更多種mRNA組合物，且該等mRNA組合物中之至少兩者具有不同的調配物。在一些實施例中，加強投藥方案包含BD 1及BD 2，其中BD 1包含投與在Tris緩衝液中調配之mRNA，且BD 2包含投與在PBS緩衝液中調配之mRNA。在一些實施例中，加強投藥方案包含BD 1及BD 2，其中BD 1包含投與在PBS緩衝液中調配之mRNA，且BD 2包含投與在Tris緩衝液中調配之mRNA。
在一些實施例中，以BD 1、BD 2、BD 3及/或BD n給予之一或多種mRNA組合物可與另一種疫苗組合投與。在一些實施例中，另一種疫苗用於非COVID-19之疾病。在一些實施例中，該疾病係在個體同時感染該疾病及SARS-CoV-2時會增加SARS-CoV-2之有害效應之疾病。在一些實施例中，該疾病係在個體同時感染該疾病及SARS-CoV-2時會增加SARS-CoV-2之傳播率之疾病。在一些實施例中，另一種疫苗係不同的市售疫苗。在一些實施例中，該不同的市售疫苗為RNA疫苗。在一些實施例中，該不同的市售疫苗為基於多肽之疫苗。在一些實施例中，另一種疫苗(例如如本文所闡述)以及以BD 1、BD 2、BD 3及/或BD n給予之一或多種mRNA組合物例如在一些實施例中經由肌內注射在不同的注射部位處分開地投與。舉例而言，在一些實施例中，流行性感冒疫苗以及以BD 1、BD 2、BD 3及/或BD n給予之本文所闡述之一或多種SARS-CoV-2 mRNA組合物經由肌內注射分開地投與給個體之不同臂。 例示性額外加強方案
在一些實施例中，本文所揭示之疫苗接種方法包括投與一種以上加強投藥方案。在一些實施例中，可能需要投與一種以上加強投藥方案以增加中和抗體反應。在一些實施例中，可能需要一種以上加強投藥方案以對抗已顯示很有可能逃避由患者先前接受之疫苗引發的免疫反應之SARS-CoV-2毒株。在一些實施例中，向已確定為產生低濃度中和抗體之患者投與額外加強投藥方案。在一些實施例中，向儘管先前進行疫苗接種但已確定為很有可能容易受到SARS-CoV-2感染之患者(例如免疫受損患者、癌症患者及/或器官移植患者)投與額外加強投藥方案。
上文針對第一加強投藥方案提供之描述亦闡述該一或多種額外加強投藥方案。第一加強投藥方案與第二加強投藥方案之間、或後續加強投藥方案之間的時間間隔可為上文所闡述之在初次投藥方案與第一加強投藥方案之間的可接受時間間隔中之任一者。
在一些實施例中，投藥方案包含初次方案及加強方案，其中初次方案及/或加強方案中給予之至少一個劑量包含含有RNA之組合物，該RNA編碼來自在相關轄區流行或迅速傳播之SARS-CoV-2變異體(例如，如本文所闡述之奧密克戎變異體)之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段。舉例而言，在一些實施例中，初次方案包含至少2個劑量之例如相隔至少3週給予之BNT162b2 (例如編碼武漢毒株)，且加強方案包含至少1個劑量之包含RNA之組合物，該RNA編碼來自在相關轄區流行或迅速傳播之變異體(例如，如本文所闡述之奧密克戎變異體)之S蛋白或其免疫原性片段。舉例而言，在一些實施例中，初次方案包含至少2個劑量之例如相隔至少3週給予之BNT162b2 (例如編碼武漢毒株)，且加強方案包含至少1個劑量之包含RNA之組合物，該RNA編碼來自在相關轄區流行或迅速傳播之變異體(例如，如本文所闡述之奧密克戎變異體)之S蛋白或其免疫原性片段。在一些此等實施例中，加強方案之此一劑量可進一步包含編碼來自武漢毒株之S蛋白或其免疫原性片段之RNA，該RNA可與編碼來自在相關轄區流行或迅速傳播之變異體(例如，如本文所闡述之奧密克戎變異體)之S蛋白或其免疫原性片段之RNA一起作為單一混合物、或作為兩種單獨組合物(例如，以1:1重量比)進行投與。在一些實施例中，加強方案亦可包含至少1個劑量之BNT162b2，其可作為第一加強劑量或後續加強劑量進行投與。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物作為加強劑以較初次方案期間給予之劑量(初次劑量)及/或針對第一加強劑給予之劑量(若存在)更高之劑量給予。舉例而言，在一些實施例中，此一劑量可為60 ug；或在一些實施例中，此一劑量可高於30 ug且低於60 ug(例如55 ug、50 ug或更低)。在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物作為加強劑在最後一次劑量(例如，初次方案之最後一次劑量或加強方案之第一劑量)之後的至少3-12個月或4-12個月、或5-12個月、或6-12個月給予。在一些實施例中，初次劑量及/或第一加強劑量(若存在)可包含BNT162b2，例如每劑為30 ug。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物包含編碼如SEQ ID NO: 49所示之多肽或其免疫原性片段、或其變異體(例如與SEQ ID NO: 49具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 50之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 50具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 51之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 51具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物包含編碼如SEQ ID NO: 55所示之多肽或其免疫原性片段、或其變異體(例如與SEQ ID NO: 55具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 56之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 56具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 57之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 57具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物包含編碼如SEQ ID NO: 58所示之多肽或其免疫原性片段、或其變異體(例如與SEQ ID NO: 58具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 59之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 59具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 60之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 60具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物包含編碼如SEQ ID NO: 61所示之多肽或其免疫原性片段、或其變異體(例如與SEQ ID NO: 61具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 62之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 62具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 63之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 63具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物包含編碼如SEQ ID NO: 129所示之多肽或其免疫原性片段、或其變異體(例如與SEQ ID NO: 129具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 130之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 130具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 132之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 132具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物(例如單價、二價、三價或四價組合物)包含編碼如SEQ ID NO: 134所示之多肽或其免疫原性片段、或其變異體(例如與SEQ ID NO: 134具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 135之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 135具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 137之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 137具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物(例如單價、二價、三價或四價組合物)包含編碼如SEQ ID NO: 139所示之多肽或其免疫原性片段、或其變異體(例如與SEQ ID NO: 139具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 140之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 140具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 142之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 142具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物(例如單價、二價、三價或四價組合物)包含編碼如SEQ ID NO: 144所示之多肽或其免疫原性片段、或其變異體(例如與SEQ ID NO: 144具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 145之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 145具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 147之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 147具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。
在一些實施例中，本文所揭示之調配物可用於實施(下)表27中所闡述之投藥方案中之任一者。 表27：例示性投藥方案：
初次方案 初次方案之最後一次劑量與加強方案之第一劑量之間的時間 加強方案
編號 劑量1 (μg RNA) 劑量2 (μg RNA) 劑量1與劑量2之間的時間 劑量1及劑量2調配物 劑量1 (μg RNA) 劑量2 (μg RNA) 劑量1與劑量2之間的時間 劑量1及劑量2調配物
1 30 30 2至8週 PBS 至少2個月 30 N/A 1 N/A PBS
2 30 30 2至8週 PBS 至少3個月 30 N/A 1 N/A PBS
3 30 30 2至8週 PBS 6至12個月 30 N/A 1 N/A PBS
4 30 30 2至8週 PBS或Tris 4至12個月 15 N/A 1 N/A PBS或Tris
5 30 30 2至8週 PBS或Tris 4至12個月 10 N/A 1 N/A PBS或Tris
6 30 30 2至8週 PBS或Tris 4至12個月 30 30 4至12個月 PBS或Tris
7 30 30 2至8週 PBS或Tris 4至12個月 30 15 4至12個月 PBS或Tris
8 30 30 2至8週 PBS或Tris 4至12個月 30 10 4至12個月 PBS或Tris
9 30 30 2至8週 PBS或Tris 4至12個月 30 60 4至12個月 PBS或Tris
10 30 30 2至8週 PBS或Tris 4至12個月 30 ＞30至＜60 4至12個月 PBS或Tris
11 30 30 2至8週 PBS或Tris 4至12個月 30 50 4至12個月 PBS或Tris
12 30 30 2至8週 PBS 至少6個月 30 N/A 1 N/A PBS
13 30 30 約21天 PBS 至少2個月 30 N/A 1 N/A PBS
14 30 30 約21天 PBS 至少3個月 30 N/A 1 N/A PBS
15 30 30 約21天 PBS 6至12個月 30 N/A 1 N/A PBS
16 30 30 約21天 PBS 至少6個月 30 N/A 1 N/A PBS
17 30 30 21天 PBS 至少6個月 15 15 約21天 PBS
18 30 30 21天 PBS 至少6個月 15 15 約21天 PBS
19 30 30 2至8週 PBS 至少2個月 30 N/A 1 N/A Tris
20 30 30 2至8週 PBS 至少3個月 30 N/A 1 N/A Tris
21 30 30 2至8週 PBS 6至12個月 30 N/A 1 N/A Tris
22 30 30 2至8週 PBS 至少6個月 30 N/A 1 N/A Tris
23 30 30 約21天 PBS 至少2個月 30 N/A 1 N/A Tris
24 30 30 約21天 PBS 至少3個月 30 N/A 1 N/A Tris
25 30 30 約21天 PBS 6至12個月 30 N/A 1 N/A Tris
26 30 30 約21天 PBS 至少6個月 30 N/A 1 N/A Tris
27 30 30 21天 PBS 至少6個月 15 15 約21天 Tris
28 30 30 21天 PBS 至少6個月 15 15 約21天 Tris
29 30 30 2至8週 Tris 至少2個月 30 N/A 1 N/A Tris
30 30 30 2至8週 Tris 至少3個月 30 N/A 1 N/A Tris
31 30 30 2至8週 Tris 6至12個月 30 N/A 1 N/A Tris
32 30 30 2至8週 Tris 至少6個月 30 N/A 1 N/A Tris
33 30 30 約21天 Tris 至少2個月 30 N/A 1 N/A Tris
34 30 30 約21天 Tris 至少3個月 30 N/A 1 N/A Tris
35 30 30 約21天 Tris 6至12個月 30 N/A 1 N/A Tris
36 30 30 約21天 Tris 至少6個月 30 N/A 1 N/A Tris
37 30 30 21天 Tris 至少6個月 15 15 約21天 Tris
38 30 30 21天 Tris 至少6個月 15 15 約21天 Tris
39 10 10 2至8週 Tris 至少2個月 10 N/A 1 N/A Tris
40 10 10 2至8週 Tris 至少3個月 10 N/A 1 N/A Tris
41 10 10 2至8週 Tris 6至12個月 10 N/A 1 N/A Tris
42 10 10 2至8週 Tris 至少6個月 10 N/A 1 N/A Tris
43 10 10 約21天 Tris 至少2個月 10 N/A 1 N/A Tris
44 10 10 約21天 Tris 至少3個月 10 N/A 1 N/A Tris
45 10 10 約21天 Tris 6至12個月 10 N/A 1 N/A Tris
46 10 10 約21天 Tris 至少6個月 10 N/A 1 N/A Tris
47 3 3 2至8週 Tris 至少2個月 3 N/A 1 N/A Tris
48 3 3 2至8週 Tris 至少3個月 3 N/A 1 N/A Tris
49 3 3 2至8週 Tris 6至12個月 3 N/A 1 N/A Tris
50 3 3 2至8週 Tris 至少6個月 3 N/A 1 N/A Tris
51 3 3 約21天 Tris 至少2個月 3 N/A 1 N/A Tris
52 3 3 約21天 Tris 至少3個月 3 N/A 1 N/A Tris
53 3 3 約21天 Tris 6至12個月 3 N/A 1 N/A Tris
54 3 3 約21天 Tris 至少6個月 3 N/A 1 N/A Tris
1N/A係指不需要劑量。
在如上表27中所闡述之某些例示性投藥方案之一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物(例如，包含編碼本文所闡述變異體之RNA)係以初次方案之第一劑量給予。在如上表27中所闡述之某些例示性投藥方案之一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物(例如，包含編碼本文所闡述變異體之RNA)係以初次方案之第二劑量給予。在如上表27中所闡述之某些例示性投藥方案之一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物(例如，包含編碼本文所闡述變異體之RNA)係以初次方案之第一劑量及第二劑量給予。在如上表27中所闡述之某些例示性投藥方案之一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物(例如，包含編碼本文所闡述變異體之RNA)係以加強方案之第一劑量給予。在如上表27中所闡述之某些例示性投藥方案之一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物(例如，包含編碼本文所闡述變異體之RNA)係以加強方案之第二劑量給予。在如上表27中所闡述之某些例示性投藥方案之一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物(例如，包含編碼本文所闡述變異體之RNA)係以加強方案之第一劑量及第二劑量給予。在如上表27中所闡述之某些例示性投藥方案之一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物(例如，包含編碼本文所闡述變異體之RNA)係以初次方案之第一劑量及第二劑量且亦以加強方案之至少一個劑量給予。在如上表27中所闡述之某些例示性投藥方案之一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物(例如，包含編碼本文所闡述變異體之RNA)係以加強方案之至少一個劑量(包括例如至少兩個劑量)給予，且BNT162b2係以初次方案給予。在如上表27中所闡述之某些例示性投藥方案之一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物(例如，包含編碼本文所闡述變異體之RNA)係以加強方案之第二劑量給予，且BNT162b2係以初次方案及以加強方案之第一劑量給予。在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物(例如，包含編碼本文所闡述變異體之RNA)包含編碼如SEQ ID NO: 49所示之多肽或其免疫原性片段、或其變異體(例如與SEQ ID NO: 49具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物(例如，包含編碼本文所闡述變異體之RNA)包含包括SEQ ID NO: 50之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 50具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物(例如，包含編碼本文所闡述變異體之RNA)包含包括SEQ ID NO: 51之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 51具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物包含編碼如SEQ ID NO: 55所示之多肽或其免疫原性片段、或其變異體(例如與SEQ ID NO: 55具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 56之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 56具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 57之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 57具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物包含編碼如SEQ ID NO: 58所示之多肽或其免疫原性片段、或其變異體(例如與SEQ ID NO: 58具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 59之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 59具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 60之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 60具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物包含編碼如SEQ ID NO: 61所示之多肽或其免疫原性片段、或其變異體(例如與SEQ ID NO: 61具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 62之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 62具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。在一些實施例中，RNA組合物包含包括SEQ ID NO: 63之序列或其變異體(例如與SEQ ID NO: 63具有至少70%或更多，包括例如至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或更高之一致性)之RNA。
在一些實施例中，本文所闡述之此一RNA組合物(例如，包含編碼本文所闡述變異體之RNA)可進一步包含編碼不同毒株(例如武漢毒株)之S蛋白或其免疫原性片段之RNA。舉例而言，在一些實施例中，如上表27中所闡述之9號-11號方案之加強方案之第二劑量可包含本文所闡述之RNA組合物(例如，包含編碼本文所闡述之諸如奧密克戎之變異體之RNA，例如在一個實施例中為如本實例中所闡述之RNA)及BNT162b2構築體，例如重量比為1:1。
在如上表27中所闡述之6號方案之一些實施例中，初次方案之第一劑量及第二劑量以及加強方案之第一劑量及第二劑量各自包含本文所闡述之RNA組合物(例如，包含編碼本文所闡述之諸如奧密克戎之變異體之RNA，例如在一個實施例中為如本實例中所闡述之RNA)。在一些此等實施例中，加強方案之第二劑量可能不為必需的。
在如上表27中所闡述之6號方案之一些實施例中，初次方案之第一劑量及第二劑量以及加強方案之第一劑量及第二劑量各自包含本文所闡述之RNA組合物(例如，包含編碼本文所闡述之諸如奧密克戎之變異體之RNA，例如在一個實施例中為如本實例中所闡述之RNA)。在一些此等實施例中，加強方案之第二劑量可能不為必需的。
在如上表27中所闡述之6號方案之一些實施例中，初次方案之第一劑量及第二劑量各自包含BNT162b2構築體，且加強方案之第一劑量及第二劑量各自包含本文所闡述之RNA組合物(例如，包含編碼本文所闡述之諸如奧密克戎之變異體之RNA，例如在一個實施例中為如本實例中所闡述之RNA)。在一些此等實施例中，加強方案之第二劑量可能不為必需的。
在如上表27中所闡述之6號方案之一些實施例中，初次方案之第一劑量及第二劑量以及加強方案之第一劑量各自包含BNT162b2構築體，且加強方案之第二劑量包含本文所闡述之RNA組合物(例如，包含編碼本文所闡述之諸如奧密克戎之變異體之RNA，例如在一個實施例中為如本實例中所闡述之RNA)。
此外，本揭示案提供以下見解：亦即鑑於BA.2及BA.4/5變異體之S蛋白序列之間的相似性，將包含或遞送BA.4及/或BA.5變異體刺突序列之疫苗接種劑量與包含或遞送武漢刺突序列之疫苗接種劑量組合亦可達成尤為廣泛之免疫(亦即，如本文所闡述之協同免疫)。
在一些實施例中，本文所闡述之組合物可包含兩種或更多種SARS-CoV-2抗原，其中該兩種或更多種抗原來自冠狀病毒毒株及/或變異體序列(例如SARS-CoV-2毒株及/或變異體序列)之協同作用類別。在一些實施例中，協同作用類別可基於冠狀病毒毒株及/或冠狀病毒變異體之S糖蛋白中的共享胺基酸改變來定義。舉例而言，儘管RBD中之許多胺基酸變化在奧密克戎亞系(例如BA.1、BA.2、BA.2.12.1及BA.4/5)之間共享，但BA.2及BA.2源性亞系(包括BA.4/5)之NTD內的改變與BA.1中發現之彼等改變大多不同。因此，在一些實施例中，可基於與S蛋白之NTD內存在的共享胺基酸突變之程度來定義冠狀病毒毒株及/或變異體序列(例如SARS-CoV-2毒株及/或變異體序列)之協同作用類別。舉例而言，在兩個SARS-CoV-2毒株及/或變異體序列共享至少50% (包括例如至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或更多)的在S蛋白之NTD中存在的胺基酸突變之一些實施例中，可將SARS-CoV-2毒株及變異體序列兩者分組至同一類別中。在兩個SARS-CoV-2毒株及/或變異體序列共享不超過50% (包括例如不超過45%、不超過40%、不超過30%或更低)的在S蛋白之NTD中存在的胺基酸突變之一些實施例中，可將SARS-CoV-2毒株及變異體序列兩者分組至不同的類別中。此外，本發明之發現提供以下見解：亦即使個體(例如經由感染及/或疫苗接種)暴露於至少兩種具有不同協同作用類別之抗原(例如，如下表所示)可產生更強勁之免疫反應(例如，擴大針對不同變異體之交叉中和譜及/或產生不容易發生免疫逃逸之免疫反應)。
類別I 類別II
武漢毒株 奧密克戎BA.2
阿爾法變異體 奧密克戎BA.2.11.2
貝塔變異體 奧密克戎BA.4
德爾塔變異體 奧密克戎BA.5
奧密克戎BA.1 XBB.1.5
源自上述中任一者之亞系 BA.2.75.2
BQ.1.1
源自上述中任一者之亞系
舉例而言，在一些實施例中，可向沒有先前感染的未接種疫苗之個體投與疫苗組合，該等疫苗中之至少兩者各自適應於具有不同協同作用類別之SARS-CoV-2毒株(例如如本文所闡述)。在一些實施例中，組合中之此等疫苗可在不同時間投與，例如在一些實施例中，作為相隔預定時間段投與的第一劑量及第二劑量(例如，根據如本文所闡述之某些投藥方案)。在一些實施例中，組合中之此等疫苗可作為多價疫苗投與。在一些實施例中，可向感染或疫苗接種一種類別之SARS-CoV-2毒株之個體投與適應於不同類別的SARS-CoV-2毒株之疫苗(例如如本文所闡述)。在一些實施例中，此種疫苗可為基於多肽或基於RNA之疫苗。
在一些實施例中，將包含一或多種類別II疫苗之劑量投與給先前已投與一或多種類別I疫苗之個體。在一些實施例中，將包含一或多種類別I疫苗及一或多種類別II疫苗之劑量投與給先前已投與一或多種類別I疫苗之個體(例如，在一些實施例中，劑量包含先前已投與給個體之至少一種疫苗)。
在一些實施例中，包含來自類別I之疫苗與BA.4/5疫苗之疫苗組合可提供尤為優良之免疫反應(例如，具有尤為強烈之交叉中和效應之免疫反應)。
由於XBB與其變異體之間的大量差異，在一些實施例中，藉由包含類別I疫苗及XBB疫苗之組合可產生尤為改善之協同效應。在一些實施例中，藉由包含BA.4/5疫苗及XBB疫苗之組合可產生尤為改善之協同效應。
雖然本發明之發現係基於對源自不同研究之樣本之回顧性分析，使用相對小之樣本量及在免疫間隔及人口統計學特徵(諸如個體之年齡及性別)方面不完全一致之群組，但本發明之發現為疫苗設計及疫苗接種策略提供有用之見解，以改善針對更廣譜SARS-COV-2變異體之交叉中和作用。
在一些實施例中，疫苗可包含多肽(例如非天然多肽，例如嵌合多肽)，該多肽包含一或多種不同的SARS-CoV-2變異體之一或多個特徵性突變；或編碼該多肽之核酸(例如在一些實施例中為RNA)。在一些實施例中，疫苗可包含多肽(例如非天然多肽，例如嵌合多肽)，該多肽包含第一SARS-CoV-2變異體之一或多個特徵性突變及第二SARS-CoV-2變異體之一或多個特徵性突變；或編碼該多肽之核酸(例如在一些實施例中為RNA)。在一些實施例中，第一SARS-CoV-2變異體可為來自上表類別I之SARS-CoV-2毒株/變異體，而第二SARS-CoV-2變異體可為來自上表類別II之SARS-CoV-2毒株/變異體。舉例而言，在一些實施例中，疫苗可包含多肽，該多肽包含含有第一SARS-CoV-2變異體之一或多個特徵性突變之RBD及含有第二SARS-CoV-2變異體之一或多個特徵性突變之NTD；或編碼該多肽之核酸(例如在一些實施例中為RNA)。
在一些實施例中，疫苗可包含多肽，該多肽包含含有BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之RBD及含有第二SARS-CoV-2變異體(其不為BA.1奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之NTD；或編碼該多肽之核酸(例如在一些實施例中為RNA)。在一些實施例中，疫苗可包含或編碼多肽，該多肽包含含有BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之NTD及含有第二SARS-CoV-2變異體(其不為BA.1奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之RBD。在一些實施例中，疫苗可包含多肽，該多肽包含含有BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之RBD及含有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之NTD；或編碼該多肽之核酸(例如在一些實施例中為RNA)。在一些實施例中，疫苗可包含多肽，該多肽包含含有BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之RBD及含有BA.4/5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之NTD；或編碼該多肽之核酸(例如在一些實施例中為RNA)。
在一些實施例中，疫苗可包含多肽，該多肽包含含有BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之NTD及含有第二SARS-CoV-2變異體(其不為BA.1奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之RBD；或編碼該多肽之核酸(例如在一些實施例中為RNA)。在一些實施例中，疫苗可包含多肽，該多肽包含含有BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之RBD及含有第二SARS-CoV-2變異體(其不為BA.1奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之NTD；或編碼該多肽之核酸(例如在一些實施例中為RNA)。在一些實施例中，疫苗可包含多肽，該多肽包含含有BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之NTD及含有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之RBD；或編碼該多肽之核酸(例如在一些實施例中為RNA)。在一些實施例中，疫苗可包含多肽，該多肽包含BA.1奧密克戎變異體之NTD之一或多個特徵性突變及含有BA.4/5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之RBD；或編碼該多肽之核酸(例如在一些實施例中為RNA)。
在一些實施例中，疫苗可包含多肽，該多肽包含含有BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之RBD及武漢S蛋白之NTD；或編碼該多肽之核酸(例如在一些實施例中為RNA)。在一些實施例中，疫苗可包含多肽，該多肽包含含有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之RBD及武漢S蛋白之NTD；或編碼該多肽之核酸(例如在一些實施例中為RNA)。在一些實施例中，疫苗可包含多肽，該多肽包含含有BA.4/5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之RBD及武漢S蛋白之NTD；或編碼該多肽之核酸(例如在一些實施例中為RNA)。
在一些實施例中，疫苗可包含多肽，該多肽包含含有BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之NTD及武漢S蛋白之RBD；或編碼該多肽之核酸(例如在一些實施例中為RNA)。在一些實施例中，疫苗可包含多肽，該多肽包含含有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之NTD及武漢S蛋白之RBD；或編碼該多肽之核酸(例如在一些實施例中為RNA)。在一些實施例中，疫苗可包含多肽，該多肽包含含有BA.4/5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之NTD及武漢S蛋白之RBD；或編碼該多肽之核酸(例如在一些實施例中為RNA)。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物(例如包含以下之RNA組合物：(a)一或多種RNA，其各自編碼不同的SARS-CoV-2毒株或變異體之S蛋白或其免疫原性片段，及(b) (i)一或多種RNA，其各自編碼不同的流行性感冒毒株之抗原或(ii)市售流行性感冒疫苗(例如本文所闡述之市售疫苗))包含編碼下表D中所列示之SARS-CoV-2毒株或變異體或SARS-CoV-2毒株/變異體組合之S蛋白之RNA。 表D：SARS-CoV-2變異體或毒株或以組合疫苗遞送之毒株/變異體組合之S蛋白
變異體或毒株變異體/毒株組合
1 武漢+奧密克戎BA.4/5
2 武漢+ XBB.1.5
3 武漢+ BQ.1.1
4 武漢+ BA.2.75.2
5 XBB.1.5
6 XBB.1.5 + BA.4/5
7 XBB.1.5 + BA.2.75.2
8 XBB.1.5 + BQ.1.1
9 BA.2.75.2
10 BA.2.75.2 + BQ.1.1
11 BQ.1.1
12 武漢+ BA.4/5 + XBB.1.5
13 武漢+ BA.4/5 + BQ.1.1
14 武漢+ BA.4/5 + BA.2.75.2
15 BA.4/5 + BA.2.75.2
16 BA.4/5 + BQ.1.1
17 XBB.1.16
18 XBB.1.16 + BA.4/5
19 XBB.1.16 +武漢
20 XBB.2.3
21 XBB.2.3 + BA.4/5
22 XBB.2.3 +武漢
23 XBB.2.3.2
24 XBB.2.3.2 + BA.4/5
25 XBB.2.3.2 +武漢
在一些實施例中，例如相對於包含編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之RNA組合物，包含編碼表D中所列示毒株或變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或表D中所列示組合中之每一毒株/變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之RNA組合物可產生改善之免疫反應(例如，針對一或多種所關注SARS-COV-2變異體具有改善之交叉中和作用及/或更高之中和效價之免疫反應)。
在一些實施例中，將包含編碼表D中所列示毒株或變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或表D中所列示組合中之每一毒株/變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之RNA組合物投與給先前未接受SARS-CoV-2疫苗之個體(例如，作為第一劑量及/或作為初免疫苗接種方案之一部分(例如，(i)兩個劑量之此一組合物，相隔大約21天投與，或(ii)三個劑量之此一組合物，其中第一劑量與第二劑量相隔大約21天投與，且第二劑量與第三劑量相隔約28天投與)。
在一些實施例中，將包含編碼表D中所列示毒株或變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或表D中所列示組合中之每一毒株/變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之RNA組合物投與給先前已暴露於SARS-CoV-2抗原之個體(例如先前已接受至少一個劑量(例如完整投藥方案)之SARS-CoV-2疫苗及/或先前已感染一或多次SARS-CoV-2之個體)。在一些實施例中，包含編碼表D中所列示變異體或毒株/變異體組合之一或多種S蛋白的RNA之RNA組合物係作為加強劑量投與。
在一些實施例中，將包含編碼表D中所列示毒株/變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或表D中所列示組合中之每一毒株/變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之RNA組合物投與給先前已投與一或多個劑量之遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA組合物的個體。在一些實施例中，將包含編碼表D中所列示毒株/變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或表D中所列示組合中之每一毒株/變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之RNA組合物作為加強劑量投與給先前已投與組合物(例如RNA組合物)之初免投藥方案之個體，該組合物遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白(例如，先前已投與以下之個體：(i)兩個劑量之編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA疫苗，其中第一劑量與第二劑量相隔約21天投與，或(ii)三個劑量之編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA疫苗，其中第一劑量與第二劑量相隔約21天投與，且第三劑量在第二劑量後約28天投與)。在一些實施例中，將包含編碼表D中所列示毒株/變異體或表D中所列示組合中之每一毒株/變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之RNA組合物作為進一步之加強劑量投與給先前已投與組合物(例如RNA組合物)之初免投藥方案及一或多個加強劑量之個體，該組合物遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白(例如先前已投與以下之個體：(i)三個劑量之編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA疫苗，其中第一劑量與第二劑量相隔約21天投與，且第三劑量在第二劑量後至少約2個月投與，(ii)四個劑量之編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA疫苗，其中第一劑量與第二劑量相隔約21天投與，第三劑量在第二劑量後約28天投與，且第四劑量在第二劑量後至少約三個月投與，或(iii)四個劑量之編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA疫苗，其中第一劑量與第二劑量相隔約21天投與，第三劑量在第二劑量後至少約2個月投與，且第四劑量在第二劑量後至少約兩個月投與)。
在一些實施例中，將包含編碼表D中所列示毒株/變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或表D中所列示組合中之每一毒株/變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之RNA組合物投與給先前已投與一或多個劑量之二價組合物(例如RNA組合物)之個體，該二價組合物遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白及奧密克戎BA.4/5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白。在一些實施例中，將包含編碼表D中所列示毒株/變異體或毒株/變異體組合之一或多種SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之RNA組合物作為加強劑量投與給先前已投與二價組合物(例如RNA組合物)之初免投藥方案之個體，該二價組合物遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白及奧密克戎BA.4/5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白(例如，先前已投與以下之個體：(i)兩個劑量之二價RNA疫苗，其中第一劑量與第二劑量相隔約21天投與，或(ii)三個劑量之二價RNA疫苗，其中第一劑量與第二劑量相隔約21天投與，且第三劑量在第二劑量後約28天投與)。在一些實施例中，將包含編碼表D中所列示毒株/變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或表D中所列示組合中之每一毒株/變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之RNA組合物作為進一步之加強劑量投與給先前已投與二價組合物(例如RNA組合物)之初免投藥方案及一或多個加強劑量之個體，該二價組合物遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白及奧密克戎BA.4/5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白(例如，先前已投與以下之個體：(i)三個劑量之二價RNA疫苗，其中第一劑量與第二劑量相隔約21天投與，且第三劑量在第二劑量後至少約2個月投與，(ii)四個劑量之二價RNA疫苗，其中第一劑量與第二劑量相隔約21天投與，第三劑量在第二劑量後約28天投與，且第四劑量在第二劑量後至少約三個月投與，或(iii)四個劑量之二價RNA疫苗，其中第一劑量與第二劑量相隔約21天投與，第三劑量在第二劑量後至少約2個月投與，且第四劑量在第二劑量後至少約兩個月投與)。
在一些實施例中，將包含編碼表D中所列示毒株/變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或表D中所列示組合中之每一毒株/變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之RNA組合物投與給先前已投與以下之個體：(i)一或多個劑量之遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之組合物，及(ii)一或多個劑量之遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白及奧密克戎BA.4/5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之二價組合物(例如RNA組合物)。在一些實施例中，將包含編碼表D中所列示毒株/變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或表D中所列示組合中之每一毒株/變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之RNA組合物作為加強劑量投與給先前已投與以下之個體：遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之組合物(例如RNA組合物)之初免投藥方案以及遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白及奧密克戎BA.4/5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之二價組合物之至少一個加強劑量。
在一些實施例中，將包含編碼表D中所列示毒株/變異體之SARS-CoV-2 S蛋白或表D中所列示組合中之每一毒株/變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之RNA組合物作為加強劑量投與給先前已投與以下之個體： • 第一劑量之遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA疫苗，及第二劑量之二價組合物，該二價組合物包含編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之第一RNA及編碼奧密克戎BA.4/5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之第二RNA，其中該二價組合物係在遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之組合物的最近一次劑量後約21天投與； • 兩個劑量(相隔約21天投與)之遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA疫苗，及一劑二價組合物，該二價組合物包含編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之第一RNA及編碼奧密克戎BA.4/5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之第二RNA，其中該二價組合物係在遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之組合物的最近一次劑量後至少約兩個月投與； • 三個劑量之遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA疫苗(其中第一劑量與第二劑量相隔約21天投與，且第三劑量在第二劑量後約28天投與)及至少一劑二價疫苗，該二價疫苗包含編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之第一RNA及編碼奧密克戎BA.4/5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之第二RNA，其中該二價組合物係在遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之組合物的最近一次劑量後至少約2個月投與； • 三個劑量之遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA疫苗(其中第一劑量與第二劑量相隔約21天投與，且第三劑量在第二劑量後至少約2個月投與)及至少一劑二價疫苗，該二價疫苗包含編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之第一RNA及編碼奧密克戎BA.4/5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之第二RNA，其中該二價組合物係在遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之組合物的最近一次劑量後至少約2個月投與。 • 四個劑量之遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA疫苗(其中第一劑量與第二劑量相隔約21天投與，第三劑量在第二劑量後約28天投與，且第四劑量在第三劑量後至少約2個月投與)及至少一劑二價疫苗，該二價疫苗包含編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之第一RNA及編碼奧密克戎BA.4/5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之第二RNA，其中該二價組合物係在遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之組合物的最近一次劑量後至少約2個月投與；或 • 四個劑量之遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA疫苗(其中第一劑量與第二劑量相隔約21天投與，第三劑量在第二劑量後至少約2個月投與，且第四劑量在第三劑量後至少約4個月投與)及至少一劑二價疫苗，該二價疫苗包含編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之第一RNA及編碼奧密克戎BA.4/5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之第二RNA，其中該二價組合物係在遞送武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之組合物的最近一次劑量後至少約2個月投與
在一些實施例中，向個體投與包含SARS-CoV-2疫苗及SARS-CoV-2/流行性感冒組合疫苗兩者之劑量的投藥方案(例如下表E中所列示之投藥方案)。 表E：包含3個劑量之例示性投藥方案
第1劑量(SARS-CoV-2疫苗) 第2劑量(SARS-CoV-2疫苗) 第3劑量(SARS-CoV-2/流行性感冒組合疫苗，其遞送來自以下所列示變異體/毒株之SARS-CoV-2抗原)
BNT162b2 BNT162b2 + BA.4/5 (二價) BNT162b2 + BA.4/5
BNT162b2 BNT162b2 + BA.4/5 (二價) XBB.1.5
BNT162b2 BNT162b2 + BA.4/5 (二價) BA.2.75.2
BNT162b2 BNT162b2 + BA.4/5 (二價) BQ.1.1
BNT162b2 BNT162b2 + BA.4/5 (二價) BNT162b2 + BA.4/5+XBB.1.5
BNT162b2 BNT162b2 + BA.4/5 (二價) BNT162b2 + BA.4/5+BA.2.75.2
BNT162b2 BNT162b2 + BA.4/5 (二價) BA.4/5+XBB.1.5
BNT162b2 BNT162b2 + BA.4/5 (二價) BA.4/5 + BA.2.75.2
BNT162b2 BNT162b2 + BA.4/5 (二價) BA.4/5 + BQ.1.1
在一些實施例中，向個體投與包含SARS-CoV-2疫苗及SARS-CoV-2/流行性感冒組合疫苗兩者之劑量的投藥方案(例如下表F中所列示之投藥方案)。 表F：包含4個劑量之例示性投藥方案
第1劑量(SARS-CoV-2疫苗) 第2劑量(SARS-CoV-2疫苗) 第3劑量(SARS-CoV-2疫苗) 第4劑量(SARS-CoV-2/流行性感冒組合疫苗，其遞送來自以下所列示變異體/毒株之SARS-CoV-2抗原)
BNT162b2 BNT162b2 BNT162b2 + BA.4/5 (二價) XBB.1.5
BNT162b2 BNT162b2 BNT162b2 + BA.4/5 (二價) BA.2.75.2
BNT162b2 BNT162b2 BNT162b2 + BA.4/5 (二價) BQ.1.1
BNT162b2 BNT162b2 BNT162b2 + BA.4/5 (二價) BA.4/5+XBB.1.5
BNT162b2 BNT162b2 BNT162b2 + BA.4/5 (二價) BA.4/5 + BA.2.75.2
BNT162b2 BNT162b2 BNT162b2 + BA.4/5 (二價) BA.4/5 + BQ.1.1
在一些實施例中，將表E或表F中所列示之投藥方案投與給未接種疫苗之個體。在一些實施例中，表E或表F中所列示之第一劑量與第二劑量相隔約21天投與。在一些實施例中，表E或表F中所列示之第三劑量係在第二劑量後至少約2個月投與。在一些實施例中，表F中所列示之第四劑量係在第三劑量後至少約兩個月投與。
在一些實施例中，投與至少一個單次劑量。在一些實施例中，將此單次劑量投與給例如先前可能已接受一或多個劑量或完整方案之SARS-CoV-2疫苗(例如BNT162b2疫苗[包括例如如本文所闡述]、mRNA-1273疫苗、Ad26.CoV2.S疫苗、ChAdxOx1疫苗、NVX-CoV2373疫苗、CvnCoV疫苗、GAM-COVID0Vac疫苗、CoronaVac疫苗、BBIBP-CorV疫苗、Ad5-nCoV疫苗、zf2001疫苗、SCB-2019疫苗、JNJ 78436735疫苗或其他經批准之mRNA或腺載體疫苗等)之個體。在一些實施例中，將至少一個單次劑量投與給先前可能已接受一或多個劑量或完整方案之SARS-Cov-2 RNA疫苗(例如，如WO2021/154763、WO2021156267A1或WO2021239880A1中所闡述)之個體。在一些實施例中，將至少一個單次劑量投與給先前已投與至少三個劑量之美國授權COVID-19疫苗(例如mRNA疫苗，例如其中最近一次劑量為變異體適應之加強注射劑)之個體。在一些實施例中，將至少一個單次劑量投與給先前已接受一或多個劑量或完整方案之流行性感冒疫苗(例如Fluzone®、Fluzone High-Dose®、Fluarix®、FluAd®、Flucelvax®、FluBlok Quadrivalent®、FluMist Quadrivalent®或其他經批准疫苗)之個體。在一些實施例中，將至少一個單次劑量投與給先前已接受一或多個劑量或完整方案之RNA流行性感冒疫苗(例如如WO2017070620A2或WO2021239880A1中所闡述)之個體。或者或另外，在一些實施例中，將單次劑量投與給已暴露於及/或感染SARS-CoV-2及/或流行性感冒之個體。在一些實施例中，將至少一個單次劑量投與給已接受一或多個劑量或完整方案之SARS-CoV-2疫苗及流行性感冒疫苗且已暴露於及/或感染SARS-CoV-2及/或流行性感冒之個體。
在一些特定實施例中，其中向已接受一或多個劑量之先前SARS-CoV-2疫苗之個體投與至少一個單次劑量，此類先前SARS-CoV-2疫苗為不同的疫苗，或具有相同活性之疫苗(例如BNT162b2)之不同形式(例如調配物)及/或劑量；在一些此等實施例中，此類個體未接受此類先前疫苗之完整方案及/或已經歷對此類先前疫苗之一或多個所接受劑量之一或多種不期望反應或效應。在一些特定實施例中，此類先前疫苗為或包含較高劑量之相同活性物質(例如BNT162b2)。或者或另外，在一些此等實施例中，在完成此類先前疫苗之完整方案之前(但在一些實施例中，在開始後)，此類個體暴露於及/或感染SARS-CoV-2。
在一個實施例中，投與至少兩個劑量。舉例而言，第二劑量可在投與第一劑量後約21天投與。
在一些實施例中，將本文所闡述之mRNA組合物投與給先前已投與至少兩個劑量之BNT162b2 (例如相隔約21天投與的兩個劑量之BNT162b2)之個體。
在一些實施例中，將本文所闡述之RNA組合物投與給先前已投與疫苗之個體，該疫苗遞送SARS-CoV-2變異體(例如奧密克戎BA.4/5變異體(例如本文所闡述之疫苗))之抗原。
在一個實施例中，投與至少三個劑量。在一些實施例中，此第三劑量在第二劑量後一段時間投與，該時間段同第一劑量與第二劑量之間的時間段相當(例如相同)。舉例而言，在一些實施例中，第三劑量可在投與第二劑量後約21天投與。在一些實施例中，第三劑量相對於第二劑量在比第二劑量相對於第一劑量更長之時間段後投與。在一些實施例中，將三劑量方案投與給免疫受損患者，例如癌症患者、HIV患者、已接受及/或正在接受免疫抑制療法之患者(例如器官移植患者)。在一些實施例中，第二劑量與第三劑量(例如投與給免疫受損患者之第二劑量與第三劑量)之間的時間長度為至少約21天(例如至少約28天)。
在一些實施例中，疫苗接種方案包含以不同劑量(例如，以第一劑量及/或第二劑量及/或第三劑量及/或後續劑量)投與相同量之RNA。在一些實施例中，疫苗接種方案包含以不同劑量投與不同量之RNA。在一些實施例中，一或多個較晚劑量大於一或多個較早劑量(例如，在觀察到疫苗功效自一或多個較早劑量減弱及/或在投與時在相關轄區內觀察到流行或迅速傳播之變異體(例如本文所闡述之一種)之免疫逃逸之情況下)。在一些實施例中，一或多個較晚劑量可較一或多個較早劑量大至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%或更高，前提條件係此類劑量之安全性及/或耐受性係臨床上可接受的。在一些實施例中，一或多個較晚劑量可較一或多個較早劑量大至少1.1倍、至少1.5倍、至少2倍、至少3倍、至少4倍或更高，前提條件係此類劑量之安全性及/或耐受性係臨床上可接受的。在一些實施例中，一或多個較晚劑量小於一或多個較早劑量(例如，在一或多個較早劑量後及/或若在較早劑量與後續劑量之間暴露於及/或感染SARS-CoV-2，則經歷陰性反應)。在一些實施例中，一或多個較晚劑量可較一或多個較早劑量小至少10%、至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%或更高。在一些實施例中，當使用不同的劑量時，其藉由與本文所闡述之共同原液相同及/或稀釋而彼此相關。
在一些實施例中，當投與至少兩個或更多個劑量(例如，在初次方案中投與至少兩個劑量，在加強方案中投與至少兩個劑量，或在初次方案中投與至少一個劑量且在加強方案中投與至少一個劑量)時，本文所闡述之相同RNA組合物可以此類劑量投與，且此類劑量中之每一者可為相同的或不同的(如本文所闡述)。在一些實施例中，當投與至少兩個或更多個劑量(例如，在初次方案中投與至少兩個劑量，在加強方案中投與至少兩個劑量，或在初次方案中投與至少一個劑量且在加強方案中投與至少一個劑量)時，本文所闡述之不同RNA組合物(例如，不同的編碼之病毒多肽，例如來自不同的冠狀病毒進化枝，或來自相同冠狀病毒進化枝之不同毒株；不同的構築體元件，諸如5’帽、3’ UTR、5’ UTR等；不同的調配物，例如不同的賦形劑及/或緩衝液(例如PBS對Tris)；不同的LNP組成；或其組合)可以此類劑量投與，且此類劑量中之每一者可為相同的或不同的(例如如本文所闡述)。
在一些實施例中，向個體投與兩種或更多種RNA (例如，作為初次方案或加強方案之一部分)，其中該兩種或更多種RNA在同一天或同一就診時投與。在一些實施例中，例如藉由將每種RNA投與給個體之單獨部分(例如藉由肌內投與給個體之不同臂或投與給個體之相同臂之不同部位)，將兩種或更多種RNA以分開的組合物投與。在一些實施例中，將兩種或更多種RNA在投與之前混合(例如，在投與之前立即混合，例如由投與從業者混合)。在一些實施例中，將兩種或更多種RNA調配於一起(例如藉由(a)混合LNP之單獨群體，每個群體包含不同的RNA；或(b)藉由在LNP調配之前混合兩種或更多種RNA，使得每個LNP包含兩種或更多種RNA)。在一些實施例中，該兩種或更多種RNA包含編碼來自一種毒株(例如武漢毒株)及在投與時在相關轄區流行或迅速傳播之變異體(例如本文所闡述之變異體)之冠狀病毒S蛋白或其免疫原性片段(例如RBD或其他相關結構域)之RNA。在一些實施例中，此一變異體為奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.2、BA.3、BA.4/5或XBB.1.5變異體)。在一些實施例中，該兩種或更多種RNA包含已顯示在個體中引發廣泛免疫反應之第一RNA及第二RNA。在一些實施例中，該兩種或更多種RNA包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA。在一些實施例中，該兩種或更多種RNA包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及編碼來自BA.2奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA。在一些實施例中，該兩種或更多種RNA包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及編碼來自BA.4或BA.5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA。在一些實施例中，該兩種或更多種RNA包含編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及編碼來自BA.2奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA。在一些實施例中，該兩種或更多種RNA包含編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及編碼來自BA.4或BA.5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA。在一些實施例中，該兩種或更多種RNA包含編碼來自BA.2奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及編碼來自BA.4或5奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA。在一些實施例中，該兩種或更多種RNA包含編碼來自武漢毒株、阿爾法變異體、貝塔變異體或德爾塔變異體或由其衍生之亞系的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA；及編碼來自BA.2、BA.4或5奧密克戎變異體或其衍生之亞系的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA。
在一些實施例中，可向個體投與下表中所列示之組合1至66中之任一者。在一些實施例中，可使用LNP調配物投與此類組合，其中第一RNA及第二RNA囊封在同一LNP中或分開之LNP中。在一些實施例中，此類組合可作為分開的LNP調配物投與(例如藉由在分開的部位投與給個體)。
組合 由第一RNA編碼之SARS-CoV-2 S蛋白 1 由第二RNA編碼之SARS-CoV-2 S蛋白 1
1 武漢 阿爾法
2 武漢 貝塔
3 武漢 德爾塔
4 武漢 BA.1
5 武漢 BA.2
6 武漢 BA.2.12.1
7 武漢 BA.3
8 武漢 BA.4/5
9 武漢 XBB
10 武漢 XBB變異體(例如XBB.1、XBB.2、XBB.1.3)
11 武漢 BQ.1.1
12 阿爾法 貝塔
13 阿爾法 德爾塔
14 阿爾法 BA.1
15 阿爾法 BA.2
16 阿爾法 BA.2.12.1
17 阿爾法 BA.3
18 阿爾法 BA.4/5
19 阿爾法 XBB
20 阿爾法 XBB變異體(例如XBB.1、XBB.2、XBB.1.3)
21 阿爾法 BQ.1.1
22 貝塔 德爾塔
23 貝塔 BA.1
24 貝塔 BA.2
25 貝塔 BA.2.12.1
26 貝塔 BA.3
27 貝塔 BA.4/5
28 貝塔 XBB
29 貝塔 XBB變異體(例如XBB.1、XBB.2、XBB.1.3)
30 貝塔 BQ.1.1
31 德爾塔 BA.1
32 德爾塔 BA.2
33 德爾塔 BA.2.12.1
34 德爾塔 BA.3
35 德爾塔 BA.4/5
36 德爾塔 XBB
37 德爾塔 XBB變異體(例如XBB.1、XBB.2、XBB.1.3)
38 德爾塔 BQ.1.1
39 BA.1 BA.2
40 BA.1 BA.2.12.1
41 BA.1 BA.3
42 BA.1 BA.4/5
43 BA.1 XBB
44 BA.1 XBB變異體(例如XBB.1、XBB.2、XBB.1.3)
45 BA.1 BQ.1.1
46 BA.2 BA.2.12.1
47 BA.2 BA.3
48 BA.2 BA.4/5
49 BA.2 XBB
50 BA.2 XBB變異體(例如XBB.1、XBB.2、XBB.1.3)
51 BA.2 BQ.1.1
52 BA.2.12.1 BA.3
53 BA.2.12.1 BA.4/5
54 BA.2.12.1 XBB
55 BA.2.12.1 XBB變異體(例如XBB.1、XBB.2、XBB.1.3)
56 BA.2.12.1 BQ.1.1
57 BA.3 BA.4/5
58 BA.3 XBB
59 BA.3 XBB變異體(例如XBB.1、XBB.2、XBB.3)
60 BA.3 BQ.1.1
61 BA.4/5 XBB
62 BA.4/5 XBB變異體(例如XBB.1、XBB.2、XBB.1.3)
63 BA.4/5 BQ.1.1
64 XBB XBB變異體(例如XBB.1、XBB.2、XBB.1.3)
65 XBB BQ.1.1
66 XBB變異體(例如XBB.1、XBB.2、XBB.1.3) BQ.1.1
1所列示之RNA編碼具有所指示SARS-CoV-2變異體之特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。
在一些實施例中，向個體投與或組合物包含一或多種第一RNA及一或多種第二RNA，其各自為相同量(亦即，1:1比率)。
在一些實施例中，向個體投與或組合物包含一或多種第一RNA及一或多種第二RNA，其各自為不同量。舉例而言，在一些實施例中，向個體投與或組合物包含一或多種第一RNA，該一或多種第一RNA之量為一或多種第二RNA之量的0.01至100倍(例如，其中該一或多種第一RNA之量為該一或多種第二RNA之量的0.01至50、0.01至4、0.01至30、0.01至25、0.01至20、0.01至15、0.01至10、0.01至9、0.01至8、0.01至7、0.01至6、0.01至5、0.01至4、0.01至3、0.01至2、0.01至1.5、1至50、1至4、1至30、1至25、1至20、1至15、1至10、1至9、1至8、1至7、1至6、1至5、1至4、1至3、1至2或1至1.5倍)。在一些實施例中，向個體投與或組合物包含一或多種第一RNA及一或多種第二RNA，其中該一或多種第一RNA之濃度為該一或多種第二RNA之濃度的1至10倍。在一些實施例中，向個體投與或組合物包含一或多種第一RNA及一或多種第二RNA，其中該一或多種第一RNA之量為該一或多種第二RNA之量的1至5倍。在一些實施例中，向個體投與或組合物包含一或多種第一RNA及一或多種第二RNA，其中該一或多種第一RNA之濃度為該一或多種第二RNA之濃度的1至3倍。在一些實施例中，向個體投與或組合物包含一或多種第一RNA及一或多種第二RNA，其中該一或多種第一RNA之量為該一或多種第二RNA之量的2倍。在一些實施例中，向個體投與或組合物包含一或多種第一RNA及一或多種第二RNA，其中該一或多種第一RNA之濃度為該一或多種第二RNA之濃度的3倍。
在一些實施例中，向個體投與或組合物包含兩種第一RNA，其各自編碼不同SARS-CoV-2毒株或變異體之SARS-CoV-2 S蛋白，且各自之量相同(亦即，1:1比率)。
在一些實施例中，向個體投與或組合物包含兩種第一RNA，其各自編碼不同SARS-CoV-2毒株或變異體之S蛋白，其中每一RNA之量不同。舉例而言，在一些實施例中，兩種第一RNA之比率為1:0.01-100 (例如1: 0.01-50；1: 0.01-40；1: 0.01-30；1: 0.01-25；1: 0.01-20；1: 0.01-15；1: 0.01-10；1: 0.01-9；1: 0.01-8；1: 0.01-7；1: 0.01-6；1: 0.01-5；1: 0.01-4；1: 0.01-3；1: 0.01-2；1: 0.01-1.5、1: 0.1-10、1: 0.1-5、1: 0.1-3、1: 2-10、1: 2-5或1: 2-3)。在一些實施例中，向個體投與或組合物包含比率為1:3之兩種第一RNA。在一些實施例中，向個體投與或組合物包含比率為1:2之兩種第一RNA。
在一些實施例中，向個體投與或組合物包含三種第一RNA，其各自編碼不同SARS-CoV-2毒株或變異體之SARS-CoV-2 S蛋白，且各自之量相同(亦即，1:1:1比率)。
在一些實施例中，向個體投與或組合物包含三種第一RNA，其各自編碼不同SARS-CoV-2毒株或變異體之S蛋白，其中每種RNA之量不同(例如，一種RNA所存在之量與另兩種RNA不同，或所有三種RNA所存在之量均不同)。舉例而言，在一些實施例中，三種第一RNA之比率為1: 0.01-100: 0.01-100 (例如1: 0.01-50: 0.01-50；1: 0.01-40: 0.01-40；1: 0.01-30: 0.01-30；1: 0.01-25: 0.01-25；1: 0.01-20: 0.01-20；1: 0.01-15: 0.01-15；1: 0.01-10: 0.01-10；1: 0.01-9: 0.01-9；1: 0.01-8: 0.01-8；1: 0.01-7: 0.01-7；1: 0.01-6: 0.01-6；1: 0.01-5: 0.01-5；1: 0.01-4: 0.01-4；1: 0.01-3: 0.01-3；1: 0.01-2: 0.01-2；1: 0.01-1.5: 0.01-1.5；1: 0.1-10: 0.1-10、1: 0.1-5: 0.1-5、1: 0.1-3: 0.1-3、1: 2-10: 2-10、1: 2-5: 2-5或1: 2-3: 2-3)。在一些實施例中，向個體投與或組合物包含比率為1:1:3之三種第一RNA。在一些實施例中，向個體投與或組合物包含比率為1:3:3之三種第一RNA。
在一些實施例中，向個體投與或組合物包含兩種或更多種第二RNA，其中之一或多種編碼A型流行性感冒病毒之HA蛋白，且其中之一或多種編碼B型流行性感冒病毒之HA蛋白。在一些實施例中，編碼A型流行性感冒病毒之HA蛋白之該一或多種第二RNA及編碼B型流行性感冒病毒之HA蛋白之該一或多種第二RNA係以相同量存在或投與(亦即，比率為1:1)。在一些實施例中，編碼A型流行性感冒病毒之HA蛋白之該一或多種第二RNA及編碼B型流行性感冒病毒之HA蛋白之該一或多種第二RNA係以不同量投與(例如，比率介於1:10與10:1之間，或比率為1:2、1:3、1:4、1:5、2:1、3:1、4:1或5:1 (編碼A抗原之總RNA:編碼B抗原之總RNA)。
在一些實施例中，向個體投與或組合物包含兩種第二RNA，其各自編碼不同流行性感冒病毒類型之HA蛋白(例如，編碼A型流行性感冒病毒之HA蛋白之第二RNA及編碼B型流行性感冒病毒之HA蛋白之第二RNA)。在一些實施例中，第二RNA係以相同量投與或存在(亦即，1:1比率)。在一些實施例中，第二RNA係以不同量投與或存在(例如，比率介於1:10與10:1之間，或比率為1:2、1:3、1:4、1:5、2:1、3:1、4:1或5:1 (A:B))。
在一些實施例中，向個體投與或組合物包含三種第二RNA，其各自編碼不同流行性感冒病毒亞型之HA蛋白(例如，A/Wisconsin (H1N1)病毒、A/Darwin (H3N2)病毒及B/Austria (Victoria)病毒之HA蛋白)。在一些實施例中，向個體投與或組合物包含三種第二RNA，其各自之量相同(亦即，1:1:1比率)。在一些實施例中，向個體投與或組合物包含不同量之該三種第二RNA中之一或多者(例如，比率介於1:1:2與1:1:10之間(例如，比率為1:1:2、1:1:3、1:1:4或1:1:5)，或比率介於2:2:1與2:2:10之間(例如，比率為2:2:1、3:3:1、4:4:1或5:5:1)。在一些實施例中，向個體投與或組合物包含三種第二RNA，其中兩者編碼不同的流行性感冒A型病毒之HA蛋白，且其中一者編碼流行性感冒B型病毒之HA蛋白。在一些此等實施例中，與編碼來自A型病毒之HA蛋白之任一第二RNA相比，編碼流行性感冒B型病毒之HA蛋白之第二RNA係以更高量存在或投與(例如，在一些實施例中，編碼來自A型流行性感冒病毒之HA蛋白之兩種第二RNA相對於編碼來自B型流行性感冒病毒之HA蛋白之第二RNA的比率為1:1:1-10、1:1:2、1:1:3、1:1:4或1:1:5 (A:A:B))。在一些實施例中，向個體投與或組合物包含三種第二RNA，兩種編碼流行性感冒A型病毒之HA蛋白且一種編碼流行性感冒B型病毒之HA蛋白，其中該三種第二RNA之比率為1:1:4 (A:A:B)。在一些實施例中，與編碼來自B型病毒之HA蛋白之第二RNA相比，編碼流行性感冒A型病毒之HA蛋白之兩種第二RNA各自係以更高量存在或各自係以更高量投與(例如，在一些實施例中，編碼來自A型流行性感冒病毒之HA蛋白之兩種第二RNA相對於編碼來自B型流行性感冒病毒之HA蛋白之第二RNA的比率為1-10:1-10:1、2:2:1、3:3:1、4:4:1或5:5:1 (A:A:B))。
在一些實施例中，向個體投與或組合物包含四種第二RNA，其各自編碼不同流行性感冒病毒亞型之HA蛋白。在一些此等實施例中，該四種第二RNA包含編碼不同流行性感冒A型病毒之HA蛋白之兩種第二RNA及編碼不同流行性感冒B型病毒之HA蛋白之兩種第二RNA (例如H1N1病毒之HA蛋白、H3N2病毒之HA蛋白、B/Victoria譜系病毒之HA蛋白及B/Yamagata譜系病毒之HA蛋白)。在一些實施例中，編碼流行性感冒A型病毒之HA蛋白之該兩種第二RNA中之每一者及編碼流行性感冒B型病毒之HA蛋白之該兩種第二RNA中之每一者係以相同量存在(亦即，該四種第二RNA之比率為1:1:1:1)。在一些實施例中，與編碼來自A型病毒之HA蛋白之任一第二RNA相比，編碼流行性感冒B型病毒之HA蛋白之該兩種第二RNA各自係以更高量投與或各自係以更高量存在(例如，在一些實施例中，編碼來自A型流行性感冒病毒之HA蛋白之該兩種第二RNA相對於編碼來自B型流行性感冒病毒之HA蛋白之該兩種第二RNA的比率為1:1:2-10:2-10、1:1:2-5:2-5、1:1:2:2、1:1:3:3、1:1:4:4、1:1:5:5、1:1:6:6、1:1:7:7、1:1:8:8、1:1:9:9、1:1:10:10 (A:A:B:B))。在一些實施例中，向個體投與或組合物包含四種第二RNA，兩種編碼流行性感冒A型病毒之HA蛋白且兩種編碼流行性感冒B型病毒之HA蛋白，其中該四種第二RNA之比率為1:1:5:5 (A:A:B:B)。在一些實施例中，與編碼來自B型病毒之HA蛋白之任一第二RNA相比，編碼流行性感冒A型病毒之HA蛋白之該兩種第二RNA各自係以更高量投與或各自係以更高量存在(例如，在一些實施例中，編碼來自A型流行性感冒病毒之HA蛋白之該兩種第二RNA相對於編碼來自B型流行性感冒病毒之HA蛋白之該兩種第二RNA的比率為2-10:2-10:1:1、2-5:2-5:1:1、2:2:1:1、3:3:1:1、4:4:1:1、5:5:1:1、6:6:1:1、7:7:1:1、8:8:1:1、9:9:1:1、10:10:1:1 (A:A:B:B))。
在一些實施例中，組合物包含四種第二RNA或向個體投與四種第二RNA，其包含編碼不同的流行性感冒A型病毒之HA蛋白之三種第二RNA及編碼流行性感冒B型病毒之HA蛋白之一種第二RNA (例如，A/Wisconsin (H1N1)、A/Darwin (H3N2)、A/Cambodia (H3N2)及B/Austria (Victoria))。在一些此等實施例中，該四種第二RNA中之每一者係以相同量投與或存在(亦即，1:1:1:1比率)。在一些實施例中，編碼流行性感冒B型病毒之HA蛋白之第二RNA的量高於編碼流行性感冒A型病毒之HA蛋白之第二RNA中之任一者(例如，在一些實施例中，第二RNA之比率為1:1:1:1-10、1:1:1:1-5、1:1:1:2、1:1:1:3、1:1:1:4或1:1:1:5 (A:A:A:B))。在一些實施例中，所投與或在組合物中之第二RNA之比率為1:1:1:5 (A:A:A:B)。在一些實施例中，編碼流行性感冒A型病毒之HA蛋白之第二RNA中之每一者的量高於編碼流行性感冒B型病毒之HA蛋白之第二RNA的量(例如，在一些實施例中，第二RNA之比率為1-10:1-10:1-10:1、1-5:1-5:1-5:1、2:2:2:1、3:3:3:1、4:4:4:1或5:5:5:1 (A:A:A:B))。
在一些實施例中，向個體投與或組合物包含編碼流行性感冒病毒之HA蛋白之一或多種第二RNA (例如，兩種第二RNA、三種第二RNA或四種第二RNA，其各自編碼不同流行性感冒病毒之HA蛋白)，該一或多種第二RNA之總量為0.1至100 μg (例如1至90 μg、3至90 μg、1至60 μg、3至60 μg、5至60 μg、10至60 μg、30至60 μg、3至30 μg)。在一些實施例中，向個體投與或組合物包含編碼流行性感冒病毒之HA蛋白之一或多種第二RNA，其總量為3 μg、5 μg、6 μg、10 μg、15 μg、20 μg、25 μg、30 μg、45 μg、60 μg、75 μg或90 μg。
在一些實施例中，向個體投與或組合物包含三種或四種第二RNA，每種RNA編碼不同流行性感冒毒株之HA抗原，其量為下表C中所列示量中之一者(每一「流行性感冒組分」對應於編碼HA抗原之第二RNA (例如如本文所闡述之第二RNA)。 表C：編碼HA抗原之第二RNA之例示性量
組合編號 流行性感冒組分1 流行性感冒組分2 流行性感冒組分3 流行性感冒組分4 總計
1 7.5 μg (A型) 7.5 μg (A型) 7.5 μg (B型) 7.5 μg (B型) 30 μg
2 15 μg (A型) 15 μg (A型) 15 μg (B型) 15 μg (B型) 60 μg
3 11.25 μg (A型) 11.25 μg (A型) 11.25 μg (B型) 11.25 μg (B型) 45 μg
4 5 μg (A型) 5 μg (A型) 25 μg (B型) 25 μg (B型) 60 μg
5 2.5 μg (A型) 2.5 μg (A型) 12.5 μg (B型) 12.5 μg (B型) 30 μg
6 7.5 μg (A型) 7.5 μg (A型) 30 μg (B型) - 45 μg
7 7.5 μg (A型) 7.5 μg (A型) 7.5 μg (A型) 7.5 μg (B型) 30 μg
在一些實施例中，向個體投與或組合物包含編碼流行性感冒HA蛋白之三種或四種RNA，其量為表C中所列示量中之一者；及編碼SARS-CoV-2 S蛋白之一或多種RNA。在一些實施例中，向個體投與或組合物包含編碼流行性感冒HA蛋白之三種或四種RNA，其量為表C中所列示量中之一者；及編碼SARS-CoV-2抗原之兩種或更多種RNA (例如，兩種或更多種RNA，其各自編碼不同SARS-CoV-2毒株或變異體之S蛋白)。在一些實施例中，組合疫苗包含三種或四種RNA，其量為表C中所列示量中之一者，及30 μg二價疫苗(例如，包含以下之二價疫苗：(i) 15 μg編碼第一SARS-CoV-2毒株或變異體之S蛋白之RNA及15 μg編碼第二毒株或變異體之S蛋白之RNA (例如，其中第一及第二毒株或變異體由合適衛生機構推薦納入更新的疫苗中)；(ii) 15 μg編碼奧密克戎BA.4/5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及15 μg編碼第二SARS-CoV-2毒株或變異體之S蛋白之RNA；或(iii) 15 μg編碼奧密克戎BA.4/5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及15 μg編碼SARS-CoV-2武漢毒株之S蛋白之RNA)。在一些實施例中，組合疫苗包含三種或四種RNA，其量為表C中所列示量中之一者，及60 μg二價疫苗(例如，包含以下之二價疫苗：(i) 30 μg編碼第一SARS-CoV-2毒株或變異體之S蛋白之RNA及30 μg編碼第二毒株或變異體之S蛋白之RNA (例如，其中第一及第二毒株或變異體由合適衛生機構推薦納入更新的疫苗中)；(ii) 30 μg編碼奧密克戎BA.4/5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及30 μg編碼第二SARS-CoV-2毒株或變異體之S蛋白之RNA；或(iii) 30 μg編碼奧密克戎BA.4/5變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及30 μg編碼SARS-CoV-2武漢毒株之S蛋白之RNA)。
在一些實施例中，疫苗接種方案包含第一疫苗接種方案(例如初次方案)，其包括至少兩個劑量之如本文所闡述之RNA組合物，例如，其中第二劑量可在投與第一劑量後約21天投與；及第二疫苗接種(例如加強方案)，其包含單劑量或多個劑量(例如兩個劑量)之如本文所闡述之RNA組合物。在一些實施例中，加強方案之劑量藉由與如本文所闡述之共同原液相同或自其稀釋而與初次方案之劑量相關。在各個實施例中，在投與初次方案後，例如在完成包含至少兩個劑量之初次方案後至少1週、至少2週、至少3週、至少1個月、至少2個月、至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月、至少7個月、至少8個月、至少9個月、至少10個月、至少11個月、至少12個月或更長時間投與(例如起始)加強方案。在各個實施例中，在投與初次方案後，例如在完成包含至少兩個劑量之初次方案後1-12個月、2-12個月、3-12個月、4-12個月、6-12個月、1-6個月、1-5個月、1-4個月、1-3個月或2-3個月投與(例如起始)加強方案。在各個實施例中，在投與初次方案後，例如在完成兩劑量初次方案後1至60個月、2至48個月、2至24個月、3至24個月、6至18個月、6至12個月或5至7個月投與(例如起始)加強方案。在一些實施例中，初次方案之每個劑量為約60 μg/劑量。在一些實施例中，初次方案之每個劑量為約50 μg/劑量。在一些實施例中，初次方案之每個劑量為約30 μg/劑量。在一些實施例中，初次方案之每個劑量為約25 μg/劑量。在一些實施例中，初次方案之每個劑量為約20 μg/劑量。在一些實施例中，初次方案之每個劑量為約15 μg/劑量。在一些實施例中，初次方案之每個劑量為約10 μg/劑量。在一些實施例中，初次方案之每個劑量為約3 μg/劑量。在一些實施例中，加強方案之每個劑量與初次方案之劑量相同。在一些實施例中，加強方案之每個劑量包含與初次方案中投與之劑量相同量的RNA。在一些實施例中，加強方案之至少一個劑量與初次方案之劑量相同。在一些實施例中，加強方案之至少一個劑量包含與初次方案之至少一個劑量相同量的RNA。在一些實施例中，加強方案之至少一個劑量低於初次方案之劑量。在一些實施例中，加強方案之至少一個劑量包含低於初次方案之RNA量。在一些實施例中，加強方案之至少一個劑量高於初次方案之劑量。在一些實施例中，加強方案之至少一個劑量包含高於初次方案之RNA量。
在一些實施例中，將加強方案(例如如本文所闡述)投與給兒科患者(例如2歲至5歲之患者、5歲至11歲之患者或12歲至15歲之患者)。在一些實施例中，向6個月至小於2歲之兒科患者投與加強方案。在一些實施例中，向小於6個月之兒科患者投與加強方案。在一些實施例中，向6個月至小於5歲之兒科患者投與加強方案。在一些實施例中，向2歲至小於5歲之兒科患者投與加強方案。在一些實施例中，向5歲至小於12歲之兒科患者投與加強方案。在一些實施例中，向12歲至小於16歲之兒科患者投與加強方案。在一些實施例中，兒科加強方案之每個劑量包含約3 μg RNA。在一些實施例中，兒科加強方案之每個劑量包含約10 μg RNA。在一些實施例中，兒科加強方案之每個劑量包含約15 μg RNA。在一些實施例中，兒科加強方案之每個劑量包含約20 μg RNA。在一些實施例中，兒科加強方案之每個劑量包含約25 μg RNA。在一些實施例中，兒科加強方案之每個劑量包含約30 μg RNA。在一些實施例中，向非兒科患者(例如16歲或以上之患者、18至64歲之患者及/或65歲及以上之患者)投與加強方案。在一些實施例中，非兒科加強方案之每個劑量包含約3 ug RNA、約10 ug RNA、約25 μg RNA、約30 μg RNA、約40 μg RNA、約45 μg RNA、約50 μg RNA、約55 μg RNA或約60 μg RNA。在一些實施例中，可向兒科患者及非兒科患者兩者(例如投與給12歲或以上之患者)投與相同的加強方案。在一些實施例中，向非兒科患者投與的加強方案以如下調配物及劑量投與：該調配物及劑量如本文所闡述藉由與患者先前所接受之初次方案之調配物及劑量相同或藉由稀釋而與其相關。在一些實施例中，接受劑量低於初次方案之加強方案之非兒科患者可能已經歷對一或多個劑量之此類初次方案之不良反應，及/或可能已在此類初次方案與此類加強方案之間或在此類初次方案及/或此類加強方案之劑量之間暴露於及/或感染SARS-CoV-2。在一些實施例中，當觀察到在較低劑量下疫苗功效減弱時，及/或當觀察到在投與時在相關轄區內流行及/或迅速傳播之變異體之免疫逃逸時，兒科及非兒科患者可接受較初次方案更高劑量之加強方案。
在一些實施例中，加強方案之一或多個劑量不同於初次方案之一或多個劑量。舉例而言，在一些實施例中，所投與之劑量可對應於個體之年齡，且患者可能年齡超出一個治療年齡組並進入下一個治療年齡組。或者或另外，在一些實施例中，所投與之劑量可對應於患者之疾患(例如免疫受損狀態)，且可針對加強方案之一或多個劑量選擇與初次方案不同的劑量(例如由於介入癌症治療、HIV感染、接受免疫抑制療法，例如與器官移植相關)。在一些實施例中，加強方案之至少一個劑量可包含較在初次方案中所投與之至少一個劑量更高之RNA量(例如，在觀察到疫苗功效自一或多個較早劑量減弱及/或在投與時在相關轄區內觀察到流行或迅速傳播之變異體(例如本文所闡述之一種)之免疫逃逸之情況下)。
在一些實施例中，初次方案可涉及一或多個3 ug劑量，且加強方案可涉及一或多個10 ug劑量、及/或一或多個20 ug劑量、或一或多個30 ug劑量。在一些實施例中，初次方案可涉及一或多個3 ug劑量，且加強方案可涉及一或多個3 ug劑量。在一些實施例中，初次方案可涉及兩個或更多個3 ug劑量(例如至少兩個劑量，各自包含3 ug RNA，且在彼此之後約21天投與)，且加強方案可涉及一或多個3 ug劑量。在一些實施例中，初次方案可涉及一或多個10 ug劑量，且加強方案可涉及一或多個20 ug劑量、及/或一或多個30 ug劑量。在一些實施例中，初次方案可涉及一或多個10 ug劑量，且加強方案可涉及一或多個10 ug劑量。在一些實施例中，初次方案可涉及兩個或更多個10 ug劑量(例如，兩個劑量，各自包含10 ug RNA，相隔約21天投與)，且加強方案可涉及一或多個10 ug劑量。在一些實施例中，初次方案可涉及一或多個20 ug劑量，且加強方案可涉及一或多個30 ug劑量。在一些實施例中，初次方案可涉及一或多個20 ug劑量，且加強方案可涉及一或多個20 ug劑量。在一些實施例中，初次方案可涉及一或多個30 ug劑量，且加強方案亦可涉及一或多個30 ug劑量。在一些實施例中，初次方案可涉及兩個或更多個30 ug劑量(例如，兩個劑量，各自包含30 ug RNA，相隔約21天投與)，且加強方案亦可涉及一或多個30 ug劑量。在一些實施例中，初次方案可涉及兩個或更多個30 ug劑量(例如，兩個劑量，各自包含30 ug RNA，相隔約21天投與)，且加強方案可涉及一或多個50 ug劑量。在一些實施例中，初次方案可涉及兩個或更多個30 ug劑量(例如，兩個劑量，各自包含30 ug RNA，相隔約21天投與)，且加強方案可涉及一或多個60 ug劑量。
在一些實施例中，向個體投與包含至少一個30 ug劑量之RNA之加強方案。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含至少一個30 ug劑量之編碼來自SARS-CoV-2武漢毒株(例如BNT162b2)之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含至少一個劑量之30 ug編碼具有SARS-CoV-2變異體(例如本文所闡述之變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含至少一個劑量之30 ug編碼具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.2、BA.3、BA.4/BA.5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一些實施例中，向個體投與包含至少一個劑量之30 ug RNA之加強方案，其中該30 ug RNA包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及編碼包含SARS-CoV-2變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有15 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及15 ug編碼具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量)。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有15 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及15 ug編碼具有BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有10 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及20 ug編碼具有BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有7.5 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及22.5 ug編碼具有BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有15 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及15 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有10 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及20 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有7.5 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及22.5 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有15 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及15 ug編碼具有BA.3奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有10 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及20 ug編碼具有BA.3奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有7.5 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及22.5 ug編碼具有BA.3奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有15 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及15 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有10 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及20 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有7.5 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及22.5 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。
在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有15 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及15 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有10 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及20 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有7.5 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及22.5 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有15 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及15 ug編碼具有BA.3奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有10 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及20 ug編碼具有BA.3奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有7.5 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及22.5 ug編碼具有BA.3奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有15 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及15 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有10 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及20 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有7.5 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及22.5 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。
在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有15 ug編碼來自BA.2奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及15 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有10 ug編碼來自BA.2奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及20 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有7.5 ug編碼來自BA.2奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及22.5 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有15 ug編碼來自BA.3奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及15 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有10 ug編碼來自BA.3奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及20 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有7.5 ug編碼來自BA.3奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及22.5 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。
在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含彼此相隔至少兩個月投與的兩個或更多個劑量之30 ug RNA。舉例而言，在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含兩個劑量之30 ug編碼具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.2、或BA.4、BA.5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含30 ug劑量之編碼具有SARS-CoV-2奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.2、BA.3、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該加強方案係在該初次方案完成後至少兩個月(包括例如至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月或更多)投與。在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含30 ug劑量之RNA，該劑量包含15 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及15 ug編碼具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含30 ug劑量之編碼具有SARS-CoV-2 BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該加強方案係在該初次方案完成後至少兩個月(包括例如至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月或更多)投與。在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含30 ug劑量之RNA，該劑量包含15 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及15 ug編碼具有BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含30 ug劑量之編碼具有SARS-CoV-2 BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該加強方案係在該初次方案完成後至少兩個月(包括例如至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月或更多)投與。在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含30 ug劑量之RNA，該劑量包含15 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及15 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含30 ug劑量之編碼具有SARS-CoV-2 BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該加強方案係在該初次方案完成後至少兩個月(包括例如至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月或更多)投與。在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含30 ug劑量之RNA，該劑量包含15 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及15 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含30 ug劑量之RNA，該劑量包含15 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及15 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含30 ug劑量之RNA，該劑量包含15 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及15 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含30 ug劑量之RNA，該劑量包含15 ug編碼來自BA.2奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及15 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含 至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含至少一個30 ug劑量之編碼來自非BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與組合物作為初次疫苗接種方案之一部分，該組合物包含一或多種第一RNA，其各自編碼與冠狀病毒相關之抗原性多肽，及一或多種第二RNA，其各自編碼與流行性感冒病毒相關之抗原性多肽。在此等實施例中，初次疫苗接種方案可包含相隔約7至約28天投與之兩個劑量。在一些實施例中，初次疫苗接種方案之每個劑量包含約30 ug之該一或多種第一RNA。在一些實施例中，初次疫苗接種方案之每個劑量包含約30 ug之該一或多種第二RNA。在一些實施例中，初次疫苗接種方案之每個劑量包含約60 ug之該一或多種第二RNA。
在一些實施例中，向個體投與組合物作為加強劑量，該組合物包含一或多種第一RNA，其各自編碼與冠狀病毒相關之抗原性多肽，及一或多種第二RNA，其各自編碼與流行性感冒病毒相關之抗原性多肽(例如，投與給先前已接受一或多個劑量之冠狀病毒疫苗之個體)。在此等實施例中，加強劑量可在先前劑量之冠狀病毒疫苗後至少兩個月投與。在一些實施例中，加強劑量包含約30 ug之該一或多種第一RNA及約30 ug之該一或多種第二RNA。在一些實施例中，加強劑量包含約30 ug之該一或多種第一RNA及約60 ug之該一或多種第二RNA。在一些實施例中，可將此一加強劑量投與給先前已接受單次劑量之冠狀病毒疫苗、兩個劑量之冠狀病毒疫苗(例如完整初次疫苗接種投藥方案)、三個劑量之冠狀病毒疫苗(例如完整初次疫苗接種投藥方案及加強劑量)、四個劑量之冠狀病毒疫苗(例如完整初次疫苗接種投藥方案及兩個加強劑量)或者五個或更多個劑量之冠狀病毒疫苗(例如完整初次疫苗接種投藥方案及三個或更多個加強劑量)之個體。在一些實施例中，先前所接受之冠狀病毒疫苗中之一者(例如最近所接受之冠狀病毒疫苗)為二價疫苗(例如包含編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及編碼包含BA.4/5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA的疫苗)。在一些實施例中，向個體投與加強劑量，該個體先前已接受四個劑量之冠狀病毒疫苗(例如完整初次疫苗接種投藥方案及兩個加強劑量)，其中最近所接受之疫苗為二價疫苗(例如包含編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及編碼包含BA.4/5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA的疫苗)。在一些實施例中，向個體投與加強劑量，該個體先前已接受五個劑量之冠狀病毒疫苗(例如完整初次疫苗接種投藥方案及三個加強劑量)，其中最近所接受之疫苗為二價疫苗(例如包含編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及編碼包含BA.4/5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA的疫苗)。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該加強方案係在該初次方案完成後至少兩個月(包括例如至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月或更多)投與，且該兩個加強劑量彼此相隔至少兩個月投與。
在一些實施例中，向個體投與包含至少一個50 ug劑量之RNA之加強方案。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含至少一個劑量之50 ug編碼來自武漢毒株(例如BNT162b2)之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含至少一個劑量之50 ug編碼具有SARS-CoV-2變異體(例如本文所闡述之變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含至少一個劑量之50 ug編碼具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一些實施例中，向個體投與包含至少一個50 ug劑量之RNA之加強方案，其中該50 ug RNA包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及編碼包含SARS-CoV-2變異體之特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，在一些實施例中，向個體投與包含50 ug劑量之RNA之加強方案，其包含25 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及25 ug編碼具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA)。
在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有25 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及25 ug編碼具有BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有25 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及25 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有25 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及25 ug編碼具有BA.3奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有25 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及25 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。
在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有25 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及25 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有25 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及25 ug編碼具有BA.3奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有25 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及25 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。
在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有25 ug編碼來自BA.2奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及25 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有25 ug編碼來自BA.3奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及25 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含至少一個50 ug劑量之編碼具有SARS-CoV-2奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該加強方案係在該初次方案完成後至少兩個月(包括例如至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月或更多)投與。在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含至少一個50 ug劑量之RNA，其中該50 ug RNA包含25 ug編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及25 ug編碼具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該加強方案係在第一加強方案完成後至少兩個月(包括例如至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月或更多)投與。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含50 ug劑量之編碼具有SARS-CoV-2 BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該加強方案係在該初次方案完成後至少兩個月(包括例如至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月或更多)投與。在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含50 ug劑量之RNA，該劑量包含25 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及25 ug編碼具有BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含50 ug劑量之編碼具有SARS-CoV-2 BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該加強方案係在該初次方案完成後至少兩個月(包括例如至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月或更多)投與。在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含50 ug劑量之RNA，該劑量包含25 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及25 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含50 ug劑量之編碼具有SARS-CoV-2 BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該加強方案係在該初次方案完成後至少兩個月(包括例如至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月或更多)投與。在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含50 ug劑量之RNA，該劑量包含25 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及25 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含50 ug劑量之RNA，該劑量包含25 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及25 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含50 ug劑量之RNA，該劑量包含25 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及25 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含50 ug劑量之RNA，該劑量包含25 ug編碼來自BA.2奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及25 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與包含至少一個60 ug劑量之RNA之加強方案。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含60 ug編碼來自武漢變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一些實施例中，向個體投與60 ug編碼具有SARS-CoV-2變異體(例如本文所闡述之變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含60 ug編碼具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一些實施例中，向個體投與包含60 ug RNA之加強方案，其中該RNA包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的第一RNA，及編碼含有SARS-CoV-2變異體之特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的至少一種額外RNA (例如，在一些實施例中，向個體 投與加強方案，該加強方案包含30 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及30 ug編碼具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA)。
在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有30 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及30 ug編碼具有BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有20 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及40 ug編碼具有BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有15 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及45 ug編碼具有BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有30 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及30 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有20 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及40 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有15 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及45 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有30 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及30 ug編碼具有BA.3奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有20 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及40 ug編碼具有BA.3奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有15 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及45 ug編碼具有BA.3奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有30 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及30 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有20 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及40 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有15 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及45 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。
在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有30 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及30 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有20 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及40 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有15 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及45 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有30 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及30 ug編碼具有BA.3奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有20 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及40 ug編碼具有BA.3奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有15 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及45 ug編碼具有BA.3奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有30 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及30 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有20 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及40 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有15 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及45 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。
在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有30 ug編碼來自BA.2奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及30 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有20 ug編碼來自BA.2奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及40 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有15 ug編碼來自BA.2奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及45 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有30 ug編碼來自BA.3奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及30 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有20 ug編碼來自BA.3奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及40 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含含有15 ug編碼來自BA.3奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及45 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之至少一個劑量。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含兩個30 ug劑量之編碼來自SARS-CoV-2武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含至少一個60 ug劑量之編碼來自SARS-CoV-2武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該加強方案係在該初次方案完成後至少兩個月(包括例如至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月或更多)投與。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含至少一個60 ug劑量之編碼具有SARS-CoV-2奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該加強方案係在該初次方案完成後至少兩個月(包括例如至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月或更多)投與。在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔大約21天投與，及(iii)加強方案，其包含至少一個60 ug劑量之RNA，該劑量包含30 ug編碼具有SARS-CoV-2奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及30 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中第二加強方案係在第一加強方案完成後至少兩個月(包括例如至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月或更多)投與。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含60 ug劑量之編碼具有SARS-CoV-2 BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該加強方案係在該初次方案完成後至少兩個月(包括例如至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月或更多)投與。在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含60 ug劑量之RNA，該劑量包含30 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及30 ug編碼具有BA.1奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含60 ug劑量之編碼具有SARS-CoV-2 BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該加強方案係在該初次方案完成後至少兩個月(包括例如至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月或更多)投與。在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含60 ug劑量之RNA，該劑量包含30 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及30 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含60 ug劑量之編碼具有SARS-CoV-2 BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該加強方案係在該初次方案完成後至少兩個月(包括例如至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月或更多)投與。在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含60 ug劑量之RNA，該劑量包含30 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及30 ug編碼具有BA.4/5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含60 ug劑量之RNA，該劑量包含30 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及30 ug編碼具有BA.2奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含60 ug劑量之RNA，該劑量包含30 ug編碼來自BA.1奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及30 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向個體投與(i)初次方案，其包含至少兩個30 ug劑量之編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，其中該兩個劑量相隔至少大約21天投與，及(ii)加強方案，其包含60 ug劑量之RNA，該劑量包含30 ug編碼來自BA.2奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及30 ug編碼具有BA.4或BA.5奧密克戎變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。
在一些實施例中，向患者投與初次方案，該初次方案包含相隔大約21天投與之兩個30 ug劑量，及加強方案，該加強方案包含至少一個60 ug劑量之RNA (例如，60 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，60 ug編碼具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，或30 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及30 ug編碼具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA)。在一些實施例中，向患者投與初次方案，該初次方案包含相隔大約21天投與之兩個30 ug劑量，及加強方案，該加強方案包含至少一個50 ug劑量之RNA (例如，50 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，50 ug編碼具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，或25 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及25 ug編碼具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA)。在一些實施例中，向患者投與初次方案，該初次方案包含相隔大約21天投與之兩個30 ug劑量，及加強方案，該加強方案包含至少一個30 ug劑量之RNA (例如，30 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，30 ug編碼具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，或15 ug編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及15 ug編碼具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA)。
在一些實施例中，初次方案可涉及一或多個30 ug劑量，且加強方案可涉及一或多個20 ug劑量、一或多個10 ug劑量及/或一或多個3 ug劑量。在一些實施例中，初次方案可涉及一或多個20 ug劑量，且加強方案可涉及一或多個10 ug劑量、及/或一或多個3 ug劑量。在一些實施例中，初次方案可涉及一或多個10 ug劑量，且加強方案可涉及一或多個3 ug劑量。在一些實施例中，初次方案可涉及一或多個3 ug劑量，且加強方案亦可涉及一或多個3 ug劑量。
在一些實施例中，加強方案包含單次劑量，例如對於在接受初次方案時經歷不良反應之患者。
在一些實施例中，將與初次方案中所用相同的RNA用於 加強方案中。在一些實施例中，用於初次方案及加強方案中之RNA為BNT162b2。
在一些實施例中，相對於在投與給相同個體的初次方案中所用之RNA，在加強方案中使用不同的RNA。在一些實施例中，BNT162b2用於初次方案但不用於加強方案。在一些實施例中，BNT162b2用於加強方案但不用於初次方案。在一些實施例中，類似的BNT162b2構築體可用於初次方案及加強方案，惟初次方案及加強方案中使用之RNA構築體編碼不同SARS-CoV-2毒株(例如如本文所闡述)之SARS-CoV-2 S蛋白(或其免疫原性部分)。
在一些實施例中，當BNT162b2用於初次方案或加強方案但不為兩者，且在另一種方案中使用不同的RNA時，此類不同的RNA可為編碼相同SARS-CoV-2 S蛋白但具有不同密碼子最佳化或其他不同RNA序列之RNA。在一些實施例中，此類不同的RNA可編碼不同SARS-CoV-2毒株，例如本文所論述變異體毒株之SARS-CoV-2 S蛋白(或其免疫原性部分)。在一些此等實施例中，此類變異體毒株在相關轄區內流行或迅速傳播。在一些實施例中，此類不同的RNA可為編碼SARS-CoV-2 S蛋白或其變異體(或任一種之免疫原性部分)之RNA，其包含本文所闡述之S蛋白變異體諸如SARS-CoV-2 S蛋白變異體、特定而言天然S蛋白變異體之一或多個突變；在一些此等實施例中，SARS-CoV-2變異體可選自由VOC-202012/01、501.V2、群集5及B.1.1.248組成之群。在一些實施例中，SARS-CoV-2變異體可選自由 VOC-202012/01、501.V2、群集5以及B.1.1.248、B.1.1.7、B.1.617.2及B.1.1.529組成之群。在一些實施例中，加強方案包含至少一個劑量之編碼在投與時在相關轄區迅速傳播之變異體的SARS-CoV-2 S蛋白(或其免疫原性片段)之RNA。在一些此等實施例中，在加強方案中投與的由RNA編碼之變異體可不同於在初次方案中投與的由RNA編碼之變異體。
在一些實施例中，加強方案包含投與(i)一劑編碼與初次方案中所投與之RNA相同的SARS-CoV-2 S蛋白(或其免疫原性片段)之RNA (例如，編碼來自SARS-CoV-2武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白(或其免疫原性片段)的RNA)，及(ii)一劑編碼在投與時在相關轄區迅速傳播之變異體之SARS-CoV-2 S蛋白(或其免疫原性片段)的RNA (例如，來自本文所論述SARS-CoV-2變異體中之一者之SARS-CoV-2 S蛋白(或其免疫原性片段))。
在一些實施例中，加強方案包含多個劑量(例如至少兩個劑量、至少三個劑量或更多)。舉例而言，在一些實施例中，加強方案之第一劑量可包含編碼在初次方案中投與的相同SARS-CoV-2 S蛋白(或其免疫原性片段)之RNA，且加強方案之第二劑量可包含編碼在投與時在相關轄區迅速傳播之變異體的SARS-CoV-2 S蛋白之RNA。在一些實施例中，加強方案之第一劑量可包含編碼在投與時在相關轄區迅速傳播之變異體之SARS-CoV-2 S蛋白(或其免疫原性片段)的RNA，且加強方案之第二劑量可包含編碼在初次方案中投與的相同SARS-CoV-2 S蛋白(或其免疫原性片段)之RNA。在一些實施例中，加強方案包含多個劑量，且編碼在相關轄區迅速傳播之變異體之S蛋白的RNA在第一劑量中投與，且編碼在初次方案中投與的S蛋白之RNA在第二劑量中投與。
在一些實施例中，加強方案中之劑量(例如，第一劑量及第二劑量或任何兩個連續劑量)相隔至少2週投與，包括例如相隔至少3週、至少4週、至少5週、至少6週、至少7週、至少8週、至少9週、至少10週、至少11週、至少12週、至少13週、至少14週、至少15週、至少16週或更長投與。在一些實施例中，加強方案中之劑量(例如，第一劑量及第二劑量或任何兩個連續劑量)相隔大約2至168週投與。在一些實施例中，加強方案中之劑量(例如，第一劑量及第二劑量或任何兩個連續劑量)相隔大約3至12週投與。在一些實施例中，加強方案中之劑量(例如，第一劑量及第二劑量或任何兩個連續劑量)相隔大約4至10週投與。在一些實施例中，加強方案中之劑量(例如，第一劑量及第二劑量或任何兩個連續劑量)相隔大約6至8週投與。(例如，相隔約21天，或相隔約6至8週)。在一些實施例中，第一劑量及第二劑量係在同一天投與(例如藉由在個體之不同部位肌內注射)。
在此等實施例中，加強方案可視情況進一步包含在第一劑量及第二劑量後大約2至8週(例如，在第一劑量及第二劑量後約21天，或在第一劑量及第二劑量後約6週至約8週)投與之第三劑量及第四劑量，其中第三劑量及第四劑量亦在同一天投與(例如藉由在個體之不同部位肌內注射)，且包含在加強方案之第一劑量及第二劑量中投與之相同RNA。
在一些實施例中，可投與多個加強方案。在一些實施例中，向先前已投與加強方案之患者投與加強方案。
在一些實施例中，向先前已接受第一加強方案之患者投與第二加強方案，且在第二加強方案之至少一個劑量中所投與之RNA之量高於在第一加強方案之至少一個劑量中所投與之RNA之量。
在一些實施例中，第二加強方案包含投與至少一個劑量之3 ug RNA。在一些實施例中，第二加強方案包含投與至少一個劑量之5 ug RNA。在一些實施例中，第二加強方案包含投與至少一個劑量之10 ug RNA。在一些實施例中，第二加強方案包含投與至少一個劑量之15 ug RNA。在一些實施例中，第二加強方案包含投與至少一個劑量之20 ug RNA。在一些實施例中，第二加強方案包含投與至少一個劑量之25 ug RNA。在一些實施例中，第二加強方案包含投與至少一個劑量之30 ug RNA。在一些實施例中，第二加強方案包含投與至少一個劑量之50 ug RNA。在一些實施例中，第二加強方案包含投與至少一個劑量之60 ug RNA。
在一些實施例中，向個體投與初次方案，該初次方案包含相隔大約21天投與之兩個劑量之30 ug RNA，及加強方案，該加強方案包含至少一個劑量之大約30 ug RNA。在一些實施例中，向個體投與初次方案，該初次方案包含相隔大約21天投與之兩個劑量之30 ug RNA，及加強方案，該加強方案包含至少一個劑量之大約50 ug RNA。在一些實施例中，向個體投與初次方案，該初次方案包含相隔大約21天投與之兩個劑量之30 ug RNA，及加強方案，該加強方案包含至少一個劑量之大約60 ug RNA。
在一些實施例中，向個體投與初次方案，該初次方案包含相隔大約21天投與之兩個劑量之30 ug RNA；第一加強方案，該第一加強方案包含至少一個劑量之大約30 ug RNA；及第二加強方案，該第二加強方案包含至少一個劑量之大約30 ug RNA。在一些實施例中，向個體投與初次方案，該初次方案包含相隔大約21天投與之兩個劑量之30 ug RNA；第一加強方案，該第一加強方案包含至少一個劑量之大約30 ug RNA；及第二加強方案，該第二加強方案包含至少一個劑量之大約50 ug RNA。在一些實施例中，向個體投與初次方案，該初次方案包含相隔大約21天投與之兩個劑量之30 ug RNA；第一加強方案，該第一加強方案包含至少一個劑量之大約30 ug RNA；及第二加強方案，該第二加強方案包含至少一個劑量之大約60 ug RNA。在一些實施例中，第一加強方案包含兩個劑量之RNA，其中每個劑量包含編碼來自不同SARS-CoV-2變異體之刺突蛋白之RNA。在一些實施例中，第一加強方案包含兩個劑量之RNA，其中每個劑量包含編碼來自不同SARS-CoV-2變異體之刺突蛋白之RNA，且其中該兩個劑量之RNA係在同一天投與。在一些實施例中，兩個劑量之RNA以單一組合物投與(例如藉由將包含編碼來自第一SARS-CoV-2變異體之刺突蛋白的RNA之第一組合物與包含編碼來自第二SARS-CoV-2變異體之刺突蛋白的RNA之第二組合物混合)。
在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含第一劑量及第二劑量，該第一劑量包含編碼來自SARS-CoV-2武漢毒株之刺突蛋白之RNA，該第二劑量包含編碼刺突蛋白之RNA，該刺突蛋白包含來自在投與加強方案時在相關轄區流行及/或迅速傳播之變異體之突變，其中該第一劑量及該第二劑量之RNA可在同一天投與。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含第一劑量及第二劑量，該第一劑量包含編碼來自SARS-CoV-2武漢毒株之刺突蛋白之RNA，該第二劑量包含編碼包含來自SARS-CoV-2阿爾法變異體之突變的刺突蛋白之RNA，其中該第一劑量及該第二劑量可在同一天投與。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含第一劑量及第二劑量，該第一劑量包含編碼來自SARS-CoV-2武漢毒株之刺突蛋白之RNA，該第二劑量包含編碼包含來自SARS-CoV-2貝塔變異體之突變的刺突蛋白之RNA，其中該第一劑量及該第二劑量可在同一天投與。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含第一劑量及第二劑量，該第一劑量包含編碼來自SARS-CoV-2武漢毒株之刺突蛋白之RNA，該第二劑量包含編碼包含來自SARS-CoV-2德爾塔變異體之突變的刺突蛋白之RNA，其中該第一劑量及該第二劑量可在同一天投與。在一些實施例中，向個體投與加強方案，該加強方案包含第一劑量及第二劑量，該第一劑量包含編碼來自SARS-CoV-2武漢毒株之刺突蛋白之RNA，該第二劑量包含編碼包含來自SARS-CoV-2奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之突變的刺突蛋白之RNA，其中該第一劑量及該第二劑量可在同一天投與。此類加強投藥方案可投與給例如先前已投與初次投藥方案之個體及/或先前已投與初次投藥方案及加強方案之個體。
在一些實施例中，向個體投與第一加強方案，該第一加強方案包含第一劑量之15 ug編碼來自武漢變異體之刺突蛋白的RNA及第二劑量之15 ug編碼來自SARS-CoV-2奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之刺突蛋白的RNA，其中該第一劑量及該第二劑量係在同一天投與(例如，其中將包含RNA之組合物在投與前混合，且接著將該混合物投與給患者)。在一些實施例中，向個體投與第一加強方案，該第一加強方案包含第一劑量之25 ug編碼來自武漢變異體之刺突蛋白的RNA及第二劑量之25 ug編碼來自SARS-CoV-2奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之刺突蛋白的RNA。在一些實施例中，第一劑量及第二劑量視情況在同一天投與。在一些實施例中，向個體投與第一加強方案，該第一加強方案包含第一劑量之25 ug編碼來自武漢變異體之刺突蛋白的RNA及第二劑量之25 ug編碼來自SARS-CoV-2奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之刺突蛋白的RNA。在一些實施例中，第一劑量及第二劑量係在同一天投與。在一些實施例中，向個體投與第一加強方案，該第一加強方案包含第一劑量之30 ug編碼來自武漢變異體之刺突蛋白的RNA及第二劑量之30 ug編碼來自SARS-CoV-2奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之刺突蛋白的RNA，其中第一劑量及第二劑量視情況在同一天投與(例如，分開投與或作為多價疫苗投與)。在一些實施例中，將此類第一加強方案投與給先前已投與初次方案之個體，該初次方案包含相隔約21天投與之兩個劑量之30 ug RNA，其中第一加強方案係在投與初次方案後至少3個月(例如至少4、至少5或至少6個月)投與。
在一些實施例中，向個體投與第二加強方案，該第二加強方案包含第一劑量之15 ug編碼來自武漢變異體之刺突蛋白的RNA及第二劑量之15 ug編碼來自SARS-CoV-2奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之刺突蛋白的RNA，其中第一劑量及第二劑量係在同一天投與(例如，其中將包含RNA之組合物在投與前混合以形成多價疫苗，且接著將該混合物投與給患者)。在一些實施例中，向個體投與第二加強方案，該第二加強方案包含第一劑量之25 ug編碼來自武漢變異體之刺突蛋白的RNA及第二劑量之25 ug編碼來自SARS-CoV-2奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之刺突蛋白的RNA，其中第一劑量及第二劑量視情況在同一天投與(例如經由投與多價疫苗或經由投與單獨組合物)。在一些實施例中，向個體投與第二加強方案，該第二加強方案包含第一劑量之25 ug編碼來自武漢變異體之刺突蛋白的RNA及第二劑量之25 ug編碼來自SARS-CoV-2奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之刺突蛋白的RNA。在一些實施例中，向個體投與第二加強方案，該第二加強方案包含第一劑量之30 ug編碼來自武漢變異體之刺突蛋白的RNA及第二劑量之30 ug編碼來自SARS-CoV-2奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之刺突蛋白的RNA，其中第一劑量及第二劑量視情況在同一天投與(例如經由投與多價疫苗或經由投與單獨組合物)。在一些實施例中，將此類第二加強方案投與給先前已投與初次方案之個體，該初次方案包含相隔約21天投與之兩個劑量之30 ug RNA。在一些實施例中，將此類第二加強方案投與給先前已投與初次方案及第一加強方案之個體，該初次方案包含相隔約21天投與之兩個劑量之30 ug RNA，該第一加強方案包含一個劑量之30 ug RNA，其中第二加強方案係在投與第一加強方案後至少3個月(例如至少4、至少5或至少6個月)投與。
在一些實施例中，例如在投與一或多個劑量後，監測接受如本文所闡述之RNA組合物之劑量的患者之一或多種特定疾患。在一些實施例中，此類疾患可為或包含過敏反應(特定而言在具有相關過敏或過敏反應史之個體中)、心肌炎(心肌發炎，特定而言在個體為年輕男性及/或可能已經歷既往此類發炎之情況下)、心包炎(心外膜發炎，特定而言在個體為年輕男性及/或可能已經歷既往此類發炎之情況下)、發熱、出血(特定而言在已知個體患有出血性病症或正在接受血液稀釋劑療法之情況下)。或者或另外，可接受更密切監測之患者可為或包括免疫受損或正在接受用影響免疫系統之藥物治療、懷孕或計劃懷孕、哺乳、已接受另一種COVID-19疫苗及/或另一種流行性感冒疫苗、及/或曾有過與注射相關之昏厥之患者。在一些實施例中，在投與本文所揭示組合物中之一者後監測患者之心肌炎。在一些實施例中，在投與本文所揭示組合物中之一者後監測患者之心包炎。可使用當前標準照護來監測及/或治療患者之疾患。
在一些實施例中，在兒科群體(例如本文所闡述)中所闡述之mRNA組合物之功效可藉由本文所闡述之各種度量來評價(包括，例如但不限於，在沒有既往SARS-CoV-2感染之血清學或病毒學證據之個體中每1000人-年之COVID-19發生率，或在無論是否有既往感染證據之個體中每1000人-年之COVID-19及/或流行性感冒發生率；在例如第二劑量後7天量測的SARS CoV-2中和效價及/或流行性感冒病毒中和效價之幾何平均比率(GMR)；等)。
在一些實施例中，在投與本文所闡述之RNA組合物(例如mRNA)後，可監測本文所闡述之兒科群體(例如12歲至小於16歲)之多系統發炎性症候群(MIS)(例如不同身體部位諸如心臟、肺、腎、腦、皮膚、眼睛及/或胃腸器官中之發炎)之發生。兒童MIS之例示性症狀可包括(但不限於)發熱、腹痛、嘔吐、腹瀉、頸痛、皮疹、目赤、感覺過度疲憊及其組合。
在一個實施例中，如上文所闡述投與之RNA係在本文中描述為BNT162b1 (RBP020.3)、BNT162b2 (RBP020.1或RBP020.2)或BNT162b3 (例如BNT162b3c)的核苷修飾之信使RNA (modRNA)。在一個實施例中，如上文所闡述投與之RNA係在本文中描述為RBP020.2的核苷修飾之信使RNA (modRNA)。在一個實施例中，編碼疫苗抗原之RNA係在本文中描述為BNT162b3 (例如BNT162b3c)的核苷修飾之信使RNA (modRNA)。
在一個實施例中，如上文所闡述投與之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 21之核苷酸序列、與SEQ ID NO: 21之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 5之胺基酸序列，或與SEQ ID NO: 5之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列。在一個實施例中，如上文所闡述投與之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 21之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，如上文所闡述投與之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 19或20之核苷酸序列、與SEQ ID NO: 19或20之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 7之胺基酸序列，或與SEQ ID NO: 7之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列。在一個實施例中，如上文所闡述投與之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 19或20之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，如上文所闡述投與之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列、與SEQ ID NO: 20之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 7之胺基酸序列，或與SEQ ID NO: 7之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列。在一個實施例中，如上文所闡述投與之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，如上文所闡述投與之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 30之核苷酸序列、與SEQ ID NO: 30之核苷酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之核苷酸序列，且/或(ii)編碼包含以下之胺基酸序列：SEQ ID NO: 29之胺基酸序列，或與SEQ ID NO: 29之胺基酸序列具有至少99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列。在一個實施例中，如上文所闡述投與之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，且(i)包含SEQ ID NO: 30之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 29之胺基酸序列之胺基酸序列。
在一個實施例中，所投與之RNA係核苷修飾之信使RNA (modRNA)，其(i)包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列；且/或(ii)編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之胺基酸序列，且以每劑約30 μg之量投與。在一個實施例中，投與至少兩個此類劑量。舉例而言，第二劑量可在投與第一劑量後約21天投與。
在一些實施例中，欲用本文所闡述之RNA治療之群體包含年齡為至少50歲、至少55歲、至少60歲或至少65歲之個體，基本上由該等個體組成或由該等個體組成。在一些實施例中，欲用本文所闡述之RNA治療之群體包含年齡在55至90歲、60至85歲或65至85歲之間的個體，基本上由該等個體組成或由該等個體組成。
在一些實施例中，所投與劑量之間的時間段為至少7天、至少14天或至少21天。在一些實施例中，所投與劑量之間的時間段在7天與28天之間，諸如在14天與23天之間。
在一些實施例中，可向個體投與不超過5個劑量、不超過4個劑量或不超過3個劑量之本文所闡述之RNA。
在一些實施例中，投與本文所闡述之方法及劑(在方案中，例如以一定劑量、投藥頻率及/或投藥次數)，使得不良事件(AE)在強度上係輕度或中度的，該等不良事件亦即患者中之任何不希望之醫學事件，例如與醫藥產品之使用相關的任何不利及非預期之徵象、症狀或疾病，無論是否與該醫藥產品相關。在一些實施例中，投與本文所闡述之方法及劑，使得不良事件(AE)可用干預措施來管控，該等干預措施諸如用例如對乙醯胺基酚或提供止痛、解熱(發熱減少)及/或抗炎效應之其他藥物(例如非類固醇抗炎藥(NSAID)，例如阿司匹林(aspirin)、布洛芬(ibuprofen)及萘普生(naproxen))進行治療。未被歸類為NSAID之對乙醯胺基酚或「乙胺酚」發揮弱的抗炎效應，且可作為本揭示案之鎮痛藥投與。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在患有冠狀病毒、冠狀病毒感染或與冠狀病毒相關之疾病或病症之個體中提供中和效應。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後誘導阻斷或中和個體中之冠狀病毒之免疫反應。在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後誘導抗體(諸如阻斷或中和個體中之冠狀病毒之IgG抗體)之生成。在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後誘導阻斷或中和個體中與ACE2結合之冠狀病毒S蛋白之免疫反應。在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後誘導阻斷或中和個體中與ACE2結合之冠狀病毒S蛋白之抗體之生成。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後誘導至少500 U/ml、1000 U/ml、2000 U/ml、3000 U/ml、4000 U/ml、5000 U/ml、10000 U/ml、15000 U/ml、20000 U/ml、25000 U/ml、30000 U/ml或甚至更高之RBD結構域結合抗體(諸如IgG抗體)之幾何平均濃度(GMC)。在一些實施例中，RBD結構域結合抗體之升高的GMC持續至少14天、21天、28天、1個月、3個月、6個月、12個月或甚至更長。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後誘導至少100 U/ml、200 U/ml、300 U/ml、400 U/ml、500 U/ml、1000 U/ml、1500 U/ml或甚至更高之中和抗體(諸如IgG抗體)之幾何平均效價(GMT)。在一些實施例中，中和抗體之升高的GMT持續至少14天、21天、28天、1個月、3個月、6個月、12個月或甚至更長。
如本文所用，術語「中和」係指結合劑(諸如抗體)結合至病毒之生物活性位點(諸如受體結合蛋白)，藉此抑制細胞之病毒感染之事件。如本文所用，關於冠狀病毒、特定而言冠狀病毒S蛋白之術語「中和」係指結合劑(諸如抗體)結合至S蛋白之RBD結構域，藉此抑制細胞之病毒感染之事件。特定而言，術語「中和」係指結合劑消除或顯著降低所關注病毒之毒力(例如感染細胞之能力)之事件。
因應於抗原攻擊而生成之免疫反應之類型通常可藉由參與反應的T輔助性(Th)細胞之子集來區分。免疫反應可大致分為兩種類型：Th1及Th2。Th1免疫活化對於細胞內感染諸如病毒係最佳的，而Th2免疫反應對於體液(抗體)反應係最佳的。Th1細胞產生介白素2 (IL-2)、腫瘤壞死因子(TNFα)及干擾素γ (IFNγ)。Th2細胞產生IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10及IL-13。Th1免疫活化在許多臨床情況中係最高度期望的。專門引發Th2或體液免疫反應之疫苗組合物通常對大多數病毒性疾病無效。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後誘導或促進個體中Th1介導之免疫反應。在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後誘導或促進個體中Th1介導之免疫反應典型的細胞介素型態。在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後誘導或促進個體中介白素2 (IL-2)、腫瘤壞死因子(TNFα)及/或干擾素γ (IFNγ)之產生。在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後誘導或促進個體中介白素2 (IL-2)及干擾素γ (IFNγ)之產生。在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後不誘導或促進個體中Th2介導之免疫反應，或與誘導或促進Th1介導之免疫反應相比，在個體中誘導或促進Th2介導之免疫反應之程度顯著更低。在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後不誘導或促進個體中Th2介導之免疫反應典型的細胞介素型態，或與誘導或促進Th1介導之免疫反應典型之細胞介素型態相比，在個體中誘導或促進Th2介導之免疫反應典型之細胞介素型態之程度顯著更低。在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後不誘導或促進個體中IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10及/或IL-13之產生，或與在個體中誘導或促進介白素2 (IL-2)、腫瘤壞死因子(TNFα)及/或干擾素γ (IFNγ)相比，在個體中誘導或促進IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10及/或IL-13之產生之程度顯著更低。在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後不誘導或促進IL-4之產生，或與在個體中誘導或促進介白素2 (IL-2)及干擾素γ (IFNγ)相比，在個體中誘導或促進IL-4之產生之程度顯著更低。
在一些實施例中，本文所闡述之組合物之特徵在於，其針對至少3種流行性感冒毒株所產生之血清轉化率等於或大於由參考疫苗產生之血清轉化率(例如，其中參考疫苗為單獨投與之四價流行性感冒RNA疫苗，或與經批准之SARS-CoV-2疫苗組合投與的商業上獲批之(非RNA)流行性感冒疫苗)。
在一些實施例中，本文所闡述之組合物之特徵在於，對於編碼抗原之每一流行性感冒病毒，該組合物所產生之流行性感冒中和抗體效價為參考疫苗所產生之彼等效價的至少兩倍以內(例如，其中參考疫苗為單獨投與之四價流行性感冒RNA疫苗，或與經批准之SARS-CoV-2疫苗組合投與的經批准之(非RNA)流行性感冒疫苗)。
在一些實施例中，本文所闡述之組合物之特徵在於，其所產生之SARS-CoV-2中和抗體效價為由參考疫苗所產生之彼等效價的至少兩倍以內(例如，與經批准之SARS-CoV-2疫苗組合投與的經批准之(非RNA)流行性感冒疫苗)。
在一些實施例中，本文所闡述之組合物之特徵在於，其產生局部或全身性不良事件之頻率小於參考疫苗之2倍(例如，其中參考疫苗為單獨投與之四價流行性感冒RNA疫苗，或與SARS-CoV-2 RNA疫苗組合投與之市售(非RNA)疫苗)。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後誘導個體中之抗體反應、特定而言中和抗體反應，其靶向一組不同的S蛋白變異體，諸如SARS-CoV-2 S蛋白變異體、特定而言天然S蛋白變異體。在一些實施例中，該組不同的S蛋白變異體包含至少5個、至少10個、至少15個或甚至更多個S蛋白變異體。在一些實施例中，此類S蛋白變異體包含在RBD結構域中具有胺基酸修飾之變異體及/或在RBD結構域之外具有胺基酸修飾之變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置321 (Q)之胺基酸為S之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置321 (Q)之胺基酸為L之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置341 (V)之胺基酸為I之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置348 (A)之胺基酸為T之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置354 (N)之胺基酸為D之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置359 (S)之胺基酸為N之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置367 (V)之胺基酸為F之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置378 (K)之胺基酸為S之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置378 (K)之胺基酸為R之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置408 (R)之胺基酸為I之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置409 (Q)之胺基酸為E之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置435 (A)之胺基酸為S之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置439 (N)之胺基酸為K之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置458 (K)之胺基酸為R之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置472 (I)之胺基酸為V之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置476 (G)之胺基酸為S之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置477 (S)之胺基酸為N之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置483 (V)之胺基酸為A之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置508 (Y)之胺基酸為H之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置519 (H)之胺基酸為P之其天然變異體。在一個實施例中，此類S蛋白變異體包含SARS-CoV-2 S蛋白或其中對應於SEQ ID NO: 1中位置614 (D)之胺基酸為G之其天然變異體。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後誘導個體中之抗體反應、特定而言中和抗體反應，其靶向S蛋白變異體，諸如SARS-CoV-2 S蛋白變異體，特定而言在對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)之位置處包含突變之天然S蛋白變異體。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)之胺基酸為Y。
在對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)之位置處包含突變之該S蛋白變異體可包含一或多個其他突變。此一或多個其他突變可選自對應於SEQ ID NO: 1中以下位置之位置處的突變：69 (H)、70 (V)、144 (Y)、570 (A)、614 (D)、681 (P)、716 (T)、982 (S)、1118 (D)、80 (D)、215 (D)、484 (E)、701 (A)、18 (L)、246 (R)、417 (K)、242 (L)、243 (A)及244 (L)。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置69 (H)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置70 (V)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置144 (Y)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置570 (A)之胺基酸為D。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置614 (D)之胺基酸為G。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置681 (P)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置716 (T)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置982 (S)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1118 (D)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置80 (D)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置215 (D)之胺基酸為G。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置484 (E)之胺基酸為K。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置701 (A)之胺基酸為V。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置18 (L)之胺基酸為F。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置246 (R)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置417 (K)之胺基酸為N。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置242 (L)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置243 (A)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置244 (L)之胺基酸缺失。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向VOC-202012/01之抗體反應、特定而言中和抗體反應。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，該S蛋白變異體在對應於SEQ ID NO: 1中之以下位置之位置處包含以下突變：缺失69-70、缺失144、N501Y、A570D、D614G、P681H、T716I、S982A及D1118H。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向501.V2之抗體反應、特定而言中和抗體反應。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，該S蛋白變異體在對應於SEQ ID NO: 1中之以下位置之位置處包含以下突變：D80A、D215G、E484K、N501Y及A701V，以及視情況：L18F、R246I、K417N及缺失242-244。該S蛋白變異體亦可在對應於SEQ ID NO: 1中位置614之位置處包含D-＞G突變。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導抗體反應、特定而言中和抗體反應，其靶向S蛋白變異體，諸如SARS-CoV-2 S蛋白變異體，特定而言在對應於SEQ ID NO: 1中位置69 (H)及70 (V)之位置處包含缺失之天然S蛋白變異體。
在一些實施例中，在對應於SEQ ID NO: 1中位置69 (H)及70 (V)之位置處包含缺失之S蛋白變異體可包含一或多個其他突變。此一或多個其他突變可選自對應於SEQ ID NO: 1中以下位置之位置處的突變：144 (Y)、501 (N)、570 (A)、614 (D)、681 (P)、716 (T)、982 (S)、1118 (D)、80 (D)、215 (D)、484 (E)、701 (A)、18 (L)、246 (R)、417 (K)、242 (L)、243 (A)、244 (L)、453 (Y)、692 (I)、1147 (S)及1229 (M)。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置144 (Y)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)之胺基酸為Y。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置570 (A)之胺基酸為D。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置614 (D)之胺基酸為G。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置681 (P)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置716 (T)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置982 (S)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1118 (D)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置80 (D)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置215 (D)之胺基酸為G。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置484 (E)之胺基酸為K。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置701 (A)之胺基酸為V。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置18 (L)之胺基酸為F。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置246 (R)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置417 (K)之胺基酸為N。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置242 (L)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置243 (A)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置244 (L)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置453 (Y)之胺基酸為F。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置692 (I)之胺基酸為V。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1147 (S)之胺基酸為L。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1229 (M)之胺基酸為I。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向VOC-202012/01之抗體反應、特定而言中和抗體反應。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，該S蛋白變異體在對應於SEQ ID NO: 1中之以下位置之位置處包含以下突變：缺失69-70、缺失144、N501Y、A570D、D614G、P681H、T716I、S982A及D1118H。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向「群集5」之抗體反應、特定而言中和抗體反應。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，該S蛋白變異體在對應於SEQ ID NO: 1中之以下位置之位置處包含以下突變：缺失69-70、Y453F、I692V、M1229I及視情況S1147L。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導抗體反應、特定而言中和抗體反應，其靶向S蛋白變異體，諸如SARS-CoV-2 S蛋白變異體，特定而言在對應於SEQ ID NO: 1中位置614 (D)之位置處包含突變之天然S蛋白變異體。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置614 (D)之胺基酸為G。
在一些實施例中，在對應於SEQ ID NO: 1中位置614 (D)之位置處包含突變之S蛋白變異體可包含一或多個其他突變。此一或多個其他突變可選自對應於SEQ ID NO: 1中以下位置之位置處的突變：69 (H)、70 (V)、144 (Y)、501 (N)、570 (A)、681 (P)、716 (T)、982 (S)、1118 (D)、80 (D)、215 (D)、484 (E)、701 (A)、18 (L)、246 (R)、417 (K)、242 (L)、243 (A)、244 (L)、453 (Y)、692 (I)、1147 (S)及1229 (M)。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置69 (H)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置70 (V)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置144 (Y)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)之胺基酸為Y。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置570 (A)之胺基酸為D。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置681 (P)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置716 (T)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置982 (S)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1118 (D)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置80 (D)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置215 (D)之胺基酸為G。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置484 (E)之胺基酸為K。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置701 (A)之胺基酸為V。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置18 (L)之胺基酸為F。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置246 (R)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置417 (K)之胺基酸為N。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置242 (L)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置243 (A)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置244 (L)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置453 (Y)之胺基酸為F。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置692 (I)之胺基酸為V。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1147 (S)之胺基酸為L。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1229 (M)之胺基酸為I。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向VOC-202012/01之抗體反應、特定而言中和抗體反應。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，該S蛋白變異體在對應於SEQ ID NO: 1中之以下位置之位置處包含以下突變：缺失69-70、缺失144、N501Y、A570D、D614G、P681H、T716I、S982A及D1118H。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，該S蛋白變異體在對應於SEQ ID NO: 1中之以下位置之位置處包含以下突變：D80A、D215G、E484K、N501Y、D614G及A701V，以及視情況：L18F、R246I、K417N及缺失242-244。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導抗體反應、特定而言中和抗體反應，其靶向S蛋白變異體，諸如SARS-CoV-2 S蛋白變異體，特定而言在對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)、484 (E)及614 (D)之位置處包含突變之天然S蛋白變異體。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)之胺基酸為Y，對應於SEQ ID NO: 1中位置484 (E)之胺基酸為K，且對應於SEQ ID NO: 1中位置614 (D)之胺基酸為G。
在一些實施例中，在對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)及614 (D)之位置處包含突變之S蛋白變異體可包含一或多個其他突變。此一或多個其他突變可選自對應於SEQ ID NO: 1中以下位置之位置處的突變：69 (H)、70 (V)、144 (Y)、570 (A)、681 (P)、716 (T)、982 (S)、1118 (D)、80 (D)、215 (D)、484 (E)、701 (A)、18 (L)、246 (R)、417 (K)、242 (L)、243 (A)、244 (L)、453 (Y)、692 (I)、1147 (S)及1229 (M)。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置69 (H)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置70 (V)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置144 (Y)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置570 (A)之胺基酸為D。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置681 (P)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置716 (T)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置982 (S)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1118 (D)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置80 (D)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置215 (D)之胺基酸為G。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置484 (E)之胺基酸為K。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置701 (A)之胺基酸為V。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置18 (L)之胺基酸為F。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置246 (R)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置417 (K)之胺基酸為N。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置242 (L)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置243 (A)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置244 (L)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置453 (Y)之胺基酸為F。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置692 (I)之胺基酸為V。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1147 (S)之胺基酸為L。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1229 (M)之胺基酸為I。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向VOC-202012/01之抗體反應、特定而言中和抗體反應。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，該S蛋白變異體在對應於SEQ ID NO: 1中之以下位置之位置處包含以下突變：缺失69-70、缺失144、N501Y、A570D、D614G、P681H、T716I、S982A及D1118H。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，該S蛋白變異體在對應於SEQ ID NO: 1中之以下位置之位置處包含以下突變：D80A、D215G、E484K、N501Y、D614G及A701V，以及視情況：L18F、R246I、K417N及缺失242-244。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導抗體反應、特定而言中和抗體反應，其靶向S蛋白變異體，諸如SARS-CoV-2 S蛋白變異體，特定而言在對應於SEQ ID NO: 1中位置484 (E)之位置處包含突變之天然S蛋白變異體。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置484 (E)之胺基酸為K。
在一些實施例中，在對應於SEQ ID NO: 1中位置484 (E)之位置處包含突變之S蛋白變異體可包含一或多個其他突變。此一或多個其他突變可選自對應於SEQ ID NO: 1中以下位置之位置處的突變：69 (H)、70 (V)、144 (Y)、501 (N)、570 (A)、614 (D)、681 (P)、716 (T)、982 (S)、1118 (D)、80 (D)、215 (D)、701 (A)、18 (L)、246 (R)、417 (K)、242 (L)、243 (A)、244 (L)、453 (Y)、692 (I)、1147 (S)、1229 (M)、20 (T)、26 (P)、138 (D)、190 (R)、417 (K)、655 (H)、1027 (T)及1176 (V)。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置69 (H)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置70 (V)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置144 (Y)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)之胺基酸為Y。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置570 (A)之胺基酸為D。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置614 (D)之胺基酸為G。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置681 (P)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置716 (T)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置982 (S)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1118 (D)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置80 (D)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置215 (D)之胺基酸為G。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置701 (A)之胺基酸為V。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置18 (L)之胺基酸為F。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置246 (R)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置417 (K)之胺基酸為N。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置242 (L)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置243 (A)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置244 (L)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置453 (Y)之胺基酸為F。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置692 (I)之胺基酸為V。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1147 (S)之胺基酸為L。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1229 (M)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置20 (T)之胺基酸為N。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置26 (P)之胺基酸為S。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置138 (D)之胺基酸為Y。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置190 (R)之胺基酸為S。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置417 (K)之胺基酸為T。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置655 (H)之胺基酸為Y。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1027 (T)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1176 (V)之胺基酸為F。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向501.V2之抗體反應、特定而言中和抗體反應。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，該S蛋白變異體在對應於SEQ ID NO: 1中之以下位置之位置處包含以下突變：D80A、D215G、E484K、N501Y及A701V，以及視情況：L18F、R246I、K417N及缺失242-244。該S蛋白變異體亦可在對應於SEQ ID NO: 1中位置614之位置處包含D-＞G突變。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向「B.1.1.28」之抗體反應、特定而言中和抗體反應。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向「B.1.1.248」之抗體反應、特定而言中和抗體反應。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，該S蛋白變異體在對應於SEQ ID NO: 1中之以下位置之位置處包含以下突變：L18F、T20N、P26S、D138Y、R190S、K417T、E484K、N501Y、H655Y、T1027I及V1176F。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導抗體反應、特定而言中和抗體反應，其靶向S蛋白變異體，諸如SARS-CoV-2 S蛋白變異體，特定而言在對應於SEQ ID NO: 1中位置位置501 (N)及484 (E)之位置處包含突變之天然S蛋白變異體。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)之胺基酸為Y，且對應於SEQ ID NO: 1中位置484 (E)之胺基酸為K。
在一些實施例中，在對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)及484 (E)之位置處包含突變之S蛋白變異體可包含一或多個其他突變。此一或多個其他突變可選自對應於SEQ ID NO: 1中以下位置之位置處的突變：69 (H)、70 (V)、144 (Y)、570 (A)、614 (D)、681 (P)、716 (T)、982 (S)、1118 (D)、80 (D)、215 (D)、701 (A)、18 (L)、246 (R)、417 (K)、242 (L)、243 (A)、244 (L)、453 (Y)、692 (I)、1147 (S)、1229 (M)、20 (T)、26 (P)、138 (D)、190 (R)、417 (K)、655 (H)、1027 (T)及1176 (V)。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置69 (H)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置70 (V)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置144 (Y)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置570 (A)之胺基酸為D。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置614 (D)之胺基酸為G。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置681 (P)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置716 (T)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置982 (S)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1118 (D)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置80 (D)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置215 (D)之胺基酸為G。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置701 (A)之胺基酸為V。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置18 (L)之胺基酸為F。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置246 (R)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置417 (K)之胺基酸為N。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置242 (L)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置243 (A)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置244 (L)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置453 (Y)之胺基酸為F。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置692 (I)之胺基酸為V。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1147 (S)之胺基酸為L。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1229 (M)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置20 (T)之胺基酸為N。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置26 (P)之胺基酸為S。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置138 (D)之胺基酸為Y。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置190 (R)之胺基酸為S。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置417 (K)之胺基酸為T。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置655 (H)之胺基酸為Y。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1027 (T)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1176 (V)之胺基酸為F。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向501.V2之抗體反應、特定而言中和抗體反應。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，該S蛋白變異體在對應於SEQ ID NO: 1中之以下位置之位置處包含以下突變：D80A、D215G、E484K、N501Y及A701V，以及視情況：L18F、R246I、K417N及缺失242-244。該S蛋白變異體亦可在對應於SEQ ID NO: 1中位置614之位置處包含D-＞G突變。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向「B.1.1.248」之抗體反應、特定而言中和抗體反應。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，該S蛋白變異體在對應於SEQ ID NO: 1中之以下位置之位置處包含以下突變：L18F、T20N、P26S、D138Y、R190S、K417T、E484K、N501Y、H655Y、T1027I及V1176F。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導抗體反應、特定而言中和抗體反應，其靶向S蛋白變異體，諸如SARS-CoV-2 S蛋白變異體，特定而言在對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)、484 (E)及614 (D)之位置處包含突變之天然S蛋白變異體。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)之胺基酸為Y，對應於SEQ ID NO: 1中位置484 (E)之胺基酸為K，且對應於SEQ ID NO: 1中位置614 (D)之胺基酸為G。
在一些實施例中，在對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)、484 (E)及614 (D)之位置處包含突變之S蛋白變異體可包含一或多個其他突變。此一或多個其他突變可選自對應於SEQ ID NO: 1中以下位置之位置處的突變：69 (H)、70 (V)、144 (Y)、570 (A)、681 (P)、716 (T)、982 (S)、1118 (D)、80 (D)、215 (D)、701 (A)、18 (L)、246 (R)、417 (K)、242 (L)、243 (A)、244 (L)、453 (Y)、692 (I)、1147 (S)、1229 (M)、20 (T)、26 (P)、138 (D)、190 (R)、417 (K)、655 (H)、1027 (T)及1176 (V)。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置69 (H)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置70 (V)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置144 (Y)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置570 (A)之胺基酸為D。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置681 (P)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置716 (T)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置982 (S)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1118 (D)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置80 (D)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置215 (D)之胺基酸為G。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置701 (A)之胺基酸為V。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置18 (L)之胺基酸為F。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置246 (R)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置417 (K)之胺基酸為N。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置242 (L)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置243 (A)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置244 (L)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置453 (Y)之胺基酸為F。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置692 (I)之胺基酸為V。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1147 (S)之胺基酸為L。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1229 (M)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置20 (T)之胺基酸為N。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置26 (P)之胺基酸為S。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置138 (D)之胺基酸為Y。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置190 (R)之胺基酸為S。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置417 (K)之胺基酸為T。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置655 (H)之胺基酸為Y。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1027 (T)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1176 (V)之胺基酸為F。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，該S蛋白變異體在對應於SEQ ID NO: 1中之以下位置之位置處包含以下突變：D80A、D215G、E484K、N501Y、A701V及D614G，以及視情況：L18F、R246I、K417N及缺失242-244。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導抗體反應、特定而言中和抗體反應，其靶向S蛋白變異體，諸如SARS-CoV-2 S蛋白變異體，特定而言在對應於SEQ ID NO: 1中位置242 (L)、243 (A)及244 (L)之位置處包含缺失之天然S蛋白變異體。
在一些實施例中，在對應於SEQ ID NO: 1中位置242 (L)、243 (A)及244 (L)之位置處包含缺失之S蛋白變異體可包含一或多個其他突變。此一或多個其他突變可選自對應於SEQ ID NO: 1中以下位置之位置處的突變：69 (H)、70 (V)、144 (Y)、501 (N)、570 (A)、614 (D)、681 (P)、716 (T)、982 (S)、1118 (D)、80 (D)、215 (D)、484 (E)、701 (A)、18 (L)、246 (R)、417 (K)、453 (Y)、692 (I)、1147 (S)、1229 (M)、20 (T)、26 (P)、138 (D)、190 (R)、417 (K)、655 (H)、1027 (T)及1176 (V)。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置69 (H)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置70 (V)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置144 (Y)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)之胺基酸為Y。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置570 (A)之胺基酸為D。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置614 (D)之胺基酸為G。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置681 (P)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置716 (T)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置982 (S)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1118 (D)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置80 (D)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置215 (D)之胺基酸為G。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置484 (E)之胺基酸為K。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置701 (A)之胺基酸為V。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置18 (L)之胺基酸為F。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置246 (R)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置417 (K)之胺基酸為N。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置453 (Y)之胺基酸為F。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置692 (I)之胺基酸為V。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1147 (S)之胺基酸為L。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1229 (M)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置20 (T)之胺基酸為N。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置26 (P)之胺基酸為S。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置138 (D)之胺基酸為Y。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置190 (R)之胺基酸為S。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置417 (K)之胺基酸為T。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置655 (H)之胺基酸為Y。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1027 (T)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1176 (V)之胺基酸為F。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向501.V2之抗體反應、特定而言中和抗體反應。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，該S蛋白變異體在對應於SEQ ID NO: 1中之以下位置之位置處包含以下突變：D80A、D215G、E484K、N501Y、A701V及缺失242-244，以及視情況：L18F、R246I及K417N。該S蛋白變異體亦可在對應於SEQ ID NO: 1中位置614之位置處包含D-＞G突變。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導抗體反應、特定而言中和抗體反應，其靶向S蛋白變異體，諸如SARS-CoV-2 S蛋白變異體，特定而言在對應於SEQ ID NO: 1中位置417 (K)之位置處包含突變之天然S蛋白變異體。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置417 (K)之胺基酸為N。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置417 (K)之胺基酸為T。
在一些實施例中，在對應於SEQ ID NO: 1中位置417 (K)之位置處包含突變之S蛋白變異體可包含一或多個其他突變。此一或多個其他突變可選自對應於SEQ ID NO: 1中以下位置之位置處的突變：69 (H)、70 (V)、144 (Y)、501 (N)、570 (A)、614 (D)、681 (P)、716 (T)、982 (S)、1118 (D)、80 (D)、215 (D)、484 (E)、701 (A)、18 (L)、246 (R)、242 (L)、243 (A)、244 (L)、453 (Y)、692 (I)、1147 (S)、1229 (M)、20 (T)、26 (P)、138 (D)、190 (R)、655 (H)、1027 (T)及1176 (V)。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置69 (H)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置70 (V)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置144 (Y)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)之胺基酸為Y。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置570 (A)之胺基酸為D。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置614 (D)之胺基酸為G。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置681 (P)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置716 (T)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置982 (S)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1118 (D)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置80 (D)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置215 (D)之胺基酸為G。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置484 (E)之胺基酸為K。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置701 (A)之胺基酸為V。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置18 (L)之胺基酸為F。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置246 (R)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置242 (L)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置243 (A)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置244 (L)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置453 (Y)之胺基酸為F。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置692 (I)之胺基酸為V。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1147 (S)之胺基酸為L。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1229 (M)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置20 (T)之胺基酸為N。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置26 (P)之胺基酸為S。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置138 (D)之胺基酸為Y。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置190 (R)之胺基酸為S。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置655 (H)之胺基酸為Y。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1027 (T)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1176 (V)之胺基酸為F。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向501.V2之抗體反應、特定而言中和抗體反應。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，該S蛋白變異體在對應於SEQ ID NO: 1中之以下位置之位置處包含以下突變：D80A、D215G、E484K、N501Y、A701V及K417N，以及視情況：L18F、R246I及缺失242-244。該S蛋白變異體亦可在對應於SEQ ID NO: 1中位置614之位置處包含D-＞G突變。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向「B.1.1.248」之抗體反應、特定而言中和抗體反應。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，該S蛋白變異體在對應於SEQ ID NO: 1中之以下位置之位置處包含以下突變：L18F、T20N、P26S、D138Y、R190S、K417T、E484K、N501Y、H655Y、T1027I及V1176F。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導抗體反應、特定而言中和抗體反應，其靶向S蛋白變異體，諸如SARS-CoV-2 S蛋白變異體，特定而言在對應於SEQ ID NO: 1中之位置417 (K)及484 (E)及/或501 (N)之位置處包含突變之天然S蛋白變異體。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置417 (K)之胺基酸為N，且對應於SEQ ID NO: 1中位置484 (E)之胺基酸為K及/或對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)之胺基酸為Y。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置417 (K)之胺基酸為T，且對應於SEQ ID NO: 1中位置484 (E)之胺基酸為K及/或對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)之胺基酸為Y。
在一些實施例中，在對應於SEQ ID NO: 1中位置417 (K)及484 (E)及/或501 (N)之位置處包含突變之S蛋白變異體可包含一或多個其他突變。此一或多個其他突變可選自對應於SEQ ID NO: 1中以下位置之位置處的突變：69 (H)、70 (V)、144 (Y)、570 (A)、614 (D)、681 (P)、716 (T)、982 (S)、1118 (D)、80 (D)、215 (D)、701 (A)、18 (L)、246 (R)、242 (L)、243 (A)、244 (L)、453 (Y)、692 (I)、1147 (S)、1229 (M)、20 (T)、26 (P)、138 (D)、190 (R)、655 (H)、1027 (T)及1176 (V)。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置69 (H)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置70 (V)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置144 (Y)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置570 (A)之胺基酸為D。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置614 (D)之胺基酸為G。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置681 (P)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置716 (T)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置982 (S)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1118 (D)之胺基酸為H。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置80 (D)之胺基酸為A。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置215 (D)之胺基酸為G。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置701 (A)之胺基酸為V。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置18 (L)之胺基酸為F。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置246 (R)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置242 (L)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置243 (A)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置244 (L)之胺基酸缺失。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置453 (Y)之胺基酸為F。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置692 (I)之胺基酸為V。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1147 (S)之胺基酸為L。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1229 (M)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置20 (T)之胺基酸為N。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置26 (P)之胺基酸為S。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置138 (D)之胺基酸為Y。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置190 (R)之胺基酸為S。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置655 (H)之胺基酸為Y。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1027 (T)之胺基酸為I。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置1176 (V)之胺基酸為F。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向501.V2之抗體反應、特定而言中和抗體反應。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，該S蛋白變異體在對應於SEQ ID NO: 1中之以下位置之位置處包含以下突變：D80A、D215G、E484K、N501Y、A701V及K417N，以及視情況：L18F、R246I及缺失242-244。該S蛋白變異體亦可在對應於SEQ ID NO: 1中位置614之位置處包含D-＞G突變。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向「B.1.1.248」之抗體反應、特定而言中和抗體反應。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，該S蛋白變異體在對應於SEQ ID NO: 1中之以下位置之位置處包含以下突變：L18F、T20N、P26S、D138Y、R190S、K417T、E484K、N501Y、H655Y、T1027I及V1176F。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向奧密克戎(B.1.1.529)變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，與SEQ ID NO: 1相比，該S蛋白變異體包含以下突變中之至少10個、至少15個、至少20個、至少21個、至少22個、至少23個、至少24個、至少25個、至少26個、至少27個、至少28個、至少29個、至少30個、至少31個、至少32個、至少33個、至少34個、至少35個、至少36個或至少37個：T547K、H655Y、D614G、N679K、P681H、N969K、S373P、S371L、N440K、G339D、G446S、N856K、N764K、K417N、D796Y、Q954H、T95I、A67V、L981F、S477N、G496S、T478K、Q498R、Q493R、E484A、N501Y、S375F、Y505H、V143del、H69del、V70del、N211del、L212I、ins214EPE、G142D、Y144del、Y145del、L141del、Y144F、Y145D、G142del。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，與SEQ ID NO: 1相比，該S蛋白變異體包含以下突變中之至少10個、至少15個、至少20個、至少21個、至少22個、至少23個、至少24個或全部：T547K、H655Y、D614G、N679K、P681H、N969K、S373P、S371L、N440K、G339D、G446S、N856K、N764K、K417N、D796Y、Q954H、T95I、A67V、L981F、S477N、G496S、T478K、Q498R、Q493R、E484A。與SEQ ID NO: 1相比，該S蛋白變異體可包括以下突變中之至少1個、至少2個、至少3個、至少4個、至少5個或全部：N501Y、S375F、Y505H、V143del、H69del、V70del，及/或與SEQ ID NO: 1相比，可包括以下突變中之至少1個、至少2個、至少3個、至少4個、至少5個或全部：N211del、L212I、ins214EPE、G142D、Y144del、Y145del。在一些實施例中，與SEQ ID NO: 1相比，該S蛋白變異體可包括以下突變中之至少1個、至少2個、至少3個或全部：L141del、Y144F、Y145D、G142del。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，與SEQ ID NO: 1相比，該S蛋白變異體包含以下突變中之至少10個、至少15個、至少20個、至少21個、至少22個、至少23個、至少24個、至少25個、至少26個、至少27個、至少28個、至少29個、至少30個、至少31個、至少32個或至少33個： A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、K417N、N440K、G446S、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K及L981F。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，與SEQ ID NO: 1相比，該S蛋白變異體包含以下突變： A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、K417N、N440K、G446S、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K及L981F。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，與SEQ ID NO: 1相比，該S蛋白變異體包含以下突變： A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K及L981F。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向奧密克戎(B.1.1.529)變異體之免疫反應(細胞及/或抗體反應、特定而言中和抗體反應)。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之免疫反應(細胞及/或抗體反應、特定而言中和抗體反應)，與SEQ ID NO: 1相比，該S蛋白變異體包含以下突變中之至少10個、至少15個、至少20個、至少21個、至少22個、至少23個、至少24個、至少25個、至少26個、至少27個、至少28個、至少29個、至少30個、至少31個、至少32個、至少33個、至少34個、至少35個、至少36個或至少37個：T547K、H655Y、D614G、N679K、P681H、N969K、S373P、S371L、N440K、G339D、G446S、N856K、N764K、K417N、D796Y、Q954H、T95I、A67V、L981F、S477N、G496S、T478K、Q498R、Q493R、E484A、N501Y、S375F、Y505H、V143del、H69del、V70del、N211del、L212I、ins214EPE、G142D、Y144del、Y145del、L141del、Y144F、Y145D、G142del。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之免疫反應(細胞及/或抗體反應、特定而言中和抗體反應)，與SEQ ID NO: 1相比，該S蛋白變異體包含以下突變中之至少10個、至少15個、至少20個、至少21個、至少22個、至少23個、至少24個或全部：T547K、H655Y、D614G、N679K、P681H、N969K、S373P、S371L、N440K、G339D、G446S、N856K、N764K、K417N、D796Y、Q954H、T95I、A67V、L981F、S477N、G496S、T478K、Q498R、Q493R、E484A。與SEQ ID NO: 1相比，該S蛋白變異體可包括以下突變中之至少1個、至少2個、至少3個、至少4個、至少5個或全部：N501Y、S375F、Y505H、V143del、H69del、V70del及/或與SEQ ID NO: 1相比，可包括以下突變中之至少1個、至少2個、至少3個、至少4個、至少5個或全部：N211del、L212I、ins214EPE、G142D、Y144del、Y145del。在一些實施例中，與SEQ ID NO: 1相比，該S蛋白變異體可包括以下突變中之至少1個、至少2個、至少3個或全部：L141del、Y144F、Y145D、G142del。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之免疫反應(細胞及/或抗體反應、特定而言中和抗體反應)，與SEQ ID NO: 1相比，該S蛋白變異體包含以下突變中之至少10個、至少15個、至少20個、至少21個、至少22個、至少23個、至少24個、至少25個、至少26個、至少27個、至少28個、至少29個、至少30個、至少31個、至少32個或至少33個： A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、K417N、N440K、G446S、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K及L981F。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之免疫反應(細胞及/或抗體反應、特定而言中和抗體反應)，與SEQ ID NO: 1相比，該S蛋白變異體包含以下突變： A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、K417N、N440K、G446S、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K及L981F。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向S蛋白變異體之免疫反應(細胞及/或抗體反應、特定而言中和抗體反應)，與SEQ ID NO: 1相比，該S蛋白變異體包含以下突變： A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K及L981F。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑在投與給個體後在個體中誘導靶向一或多種S蛋白變異體之抗體反應、特定而言中和抗體反應，該一或多種S蛋白變異體包含與表2中所列示之給定奧密克戎變異體(例如，(i) XBB.1.5變異體，(ii) XBB.1.5、XBB.1.16及XBB.2.3變異體，及/或(iii)一或多種XBB變異體(例如表2中所列示之每一XBB變異體)相關之突變。
如本文所用，術語「對應於位置……之胺基酸」係指對應於SARS-CoV-2 S蛋白、特定而言SEQ ID NO: 1中所示之胺基酸序列中之胺基酸位置編號之胺基酸位置編號。片語「與SEQ ID NO: 1相比」等同於「在對應於SEQ ID NO: 1中以下位置之位置處」。藉由與SARS-CoV-2 S蛋白、特定而言SEQ ID NO: 1中所示之胺基酸序列進行比對，可發現其他冠狀病毒S蛋白變異體(諸如SARS-CoV-2 S蛋白變異體)中之對應胺基酸位置。如何比對序列或序列中之區段且藉此確定序列中與根據本揭示案之胺基酸位置對應之位置認為係此項技術中所熟知的。可使用標準序列比對程式，諸如ALIGN、ClustalW或類似程式，通常以默認設置。
在一些實施例中，抗體反應所靶向之一組不同的S蛋白變異體包含至少5種、至少10種、至少15種或甚至更多種S蛋白變異體，該等S蛋白變異體係選自由上述Q321S、V341I、A348T、N354D、S359N、V367F、K378S、R408I、Q409E、A435S、K458R、I472V、G476S、V483A、Y508H、H519P及D614G變異體組成之群。在一些實施例中，抗體反應所靶向之一組不同的S蛋白變異體包含來自由上述Q321S、V341I、A348T、N354D、S359N、V367F、K378S、R408I、Q409E、A435S、K458R、I472V、G476S、V483A、Y508H、H519P及D614G變異體組成之群的所有S蛋白變異體。
在一些實施例中，抗體反應所靶向之一組不同的S蛋白變異體包含至少5種、至少10種、至少15種或甚至更多種S蛋白變異體，該等S蛋白變異體係選自由上述Q321L、V341I、A348T、N354D、S359N、V367F、K378R、R408I、Q409E、A435S、N439K、K458R、I472V、G476S、S477N、V483A、Y508H、H519P及D614G變異體組成之群。在一些實施例中，抗體反應所靶向之一組不同的S蛋白變異體包含來自由上述Q321L、V341I、A348T、N354D、S359N、V367F、K378R、R408I、Q409E、A435S、N439K、K458R、I472V、G476S、S477N、V483A、Y508H、H519P及D614G變異體組成之群的所有S蛋白變異體。
在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段包含本文針對S蛋白變異體(諸如SARS-CoV-2 S蛋白變異體、特定而言天然S蛋白變異體)所闡述突變中之一或多者。在一個實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段在對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)之位置處包含突變。在一個實施例中，對應於SEQ ID NO: 1中位置501 (N)之胺基酸為Y。在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段包含選自由VOC-202012/01、501.V2、群集5及B.1.1.248組成之群的SARS-CoV-2變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之一或多個突變，諸如所有突變。在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段包含在SEQ ID NO: 1之位置80處具有丙胺酸取代、位置215處具有甘胺酸取代、位置484處具有離胺酸取代、位置501處具有酪胺酸取代、位置701處具有纈胺酸取代、位置18處具有苯丙胺酸取代、位置246處具有異白胺酸取代、位置417處具有天冬醯胺取代、位置614處具有甘胺酸取代、位置242至244處具有缺失以及位置986及987處具有脯胺酸取代之胺基酸序列。
在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段與SEQ ID NO: 1相比包含以下突變中之至少10個、至少15個、至少20個、至少21個、至少22個、至少23個、至少24個、至少25個、至少26個、至少27個、至少28個、至少29個、至少30個、至少31個、至少32個、至少33個、至少34個、至少35個、至少36個或至少37個：T547K、H655Y、D614G、N679K、P681H、N969K、S373P、S371L、N440K、G339D、G446S、N856K、N764K、K417N、D796Y、Q954H、T95I、A67V、L981F、S477N、G496S、T478K、Q498R、Q493R、E484A、N501Y、S375F、Y505H、V143del、H69del、V70del、N211del、L212I、ins214EPE、G142D、Y144del、Y145del、L141del、Y144F、Y145D、G142del。在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼的包含該等突變之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段與SEQ ID NO: 1相比包含K986P及V987P。
在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段與SEQ ID NO: 1相比包含以下突變中之至少10個、至少15個、至少20個、至少21個、至少22個、至少23個、至少24個或全部：T547K、H655Y、D614G、N679K、P681H、N969K、S373P、S371L、N440K、G339D、G446S、N856K、N764K、K417N、D796Y、Q954H、T95I、A67V、L981F、S477N、G496S、T478K、Q498R、Q493R、E484A。該SARs-CoV-2 S蛋白、變異體或片段與SEQ ID NO: 1相比可包括以下突變中之至少1個、至少2個、至少3個、至少4個、至少5個或全部：N501Y、S375F、Y505H、V143del、H69del、V70del，及/或與SEQ ID NO: 1相比可包括以下突變中之至少1個、至少2個、至少3個、至少4個、至少5個或全部：N211del、L212I、ins214EPE、G142D、Y144del、Y145del。在一些實施例中，該SARs-CoV-2 S蛋白、變異體或片段與SEQ ID NO: 1相比可包括以下突變中之至少1個、至少2個、至少3個或全部：L141del、Y144F、Y145D、G142del。在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼的包含該等突變之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段與SEQ ID NO: 1相比包含K986P及V987P。
在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段與SEQ ID NO: 1相比包含以下突變中之至少10個、至少15個、至少20個、至少21個、至少22個、至少23個、至少24個、至少25個、至少26個、至少27個、至少28個、至少29個、至少30個、至少31個、至少32個或至少33個： A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、K417N、N440K、G446S、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K及L981F。在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼的包含該等突變之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段與SEQ ID NO: 1相比包含K986P及V987P。
在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段與SEQ ID NO: 1相比包含以下突變： A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、K417N、N440K、G446S、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K及L981F。
在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼的包含該等突變之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段與SEQ ID NO: 1相比包含K986P及V987P。
在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段與SEQ ID NO: 1相比包含以下突變： A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K及L981F。
在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼的包含該等突變之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段與SEQ ID NO: 1相比包含K986P及V987P。
在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段與SEQ ID NO: 1相比包含以下突變： A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、K417N、N440K、G446S、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K、L981F、K986P及V987P。
在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段與SEQ ID NO: 1相比包含以下突變： A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K、L981F、K986P及V987P。
在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段與SEQ ID NO: 1相比包含以下突變： 在一些實施例中，與SEQ ID NO: 1相比，奧密克戎BA.2變異體中之刺突變化包括T19I、Δ24-26、A27S、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、S477N、T478K、E484A、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K、K986P及V987P。
在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段與SEQ ID NO: 1相比包含以下突變： T19I、Δ24-26、A27S、Δ69/70、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、L452R、S477N、T478K、E484A、F486V、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K、K986P及V987P。在一些實施例中，與投與編碼或包含來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性片段之疫苗相比，投與變異體特異性疫苗(例如本文所揭示之變異體特異性疫苗)可在患者中產生改善的免疫反應。在一些實施例中，與投與包含或編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白(或其免疫原性片段)之疫苗之患者相比，投與變異體特異性疫苗可導致在個體中誘導更廣泛的免疫反應(例如誘導針對更多數量之SARS-CoV-2變異體之更強中和反應及/或識別更多數量之SARS-CoV-2變異體中之抗原決定基之中和反應)。在特定實施例中，當變異體特異性疫苗與包含或編碼來自不同變異體或來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之疫苗組合投與時，可誘導更廣泛的免疫反應(例如，在一些實施例中，當變異體特異性疫苗與包含或編碼來自 武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之疫苗或包含或編碼包含不同SARS-CoV-2變異體特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白之疫苗組合投與時，可誘導更廣泛的免疫反應)。舉例而言，當編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA疫苗與編碼具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA疫苗組合投與時，可誘導更廣泛的免疫反應。在另一實施例中，當編碼包含德爾塔變異體之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA疫苗與編碼包含奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA疫苗組合投與時，可誘導更廣泛的免疫反應。在此等實施例中，「更廣泛的」免疫反應可相對於投與包含或編碼來自單一變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之疫苗(例如，編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA疫苗)之患者來定義。包含或編碼來自不同SARS-CoV-2變異體之S蛋白或其免疫原性片段之疫苗可藉由在不同時間點投與而組合投與(例如， 在不同時間點投與編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之疫苗及編碼具有變異體毒株之一或多個特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白之疫苗，例如，兩者作為初次方案之一部分或加強方案之一部分投與；或一種作為初次方案之一部分投與，而另一種作為加強方案之一部分投與)。在一些實施例中，包含或編碼來自不同SARS-CoV-2變異體之S蛋白或其免疫原性片段之疫苗可藉由投與多價疫苗(例如，包含編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及編碼具有奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.4/5或XBB.1.5奧密克戎變異體)之特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之組合物)而組合投與。在一些實施例中，變異體特異性疫苗可誘導針對該疫苗經專門設計以免疫所針對之變異體之優良免疫反應(例如，誘導更高濃度之中和抗體)，以及針對一或多種其他變異體之免疫反應。在一些此等實施例中，針對其他變異體之免疫反應可與用編碼或包含來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白之疫苗觀察到的免疫反應相當或更高。
在一些實施例中，變異體特異性疫苗誘導之中和抗體之幾何平均比率(GMR)或幾何平均倍數升高(GMFR)為非變異體特異性疫苗誘導之中和抗體之GMR或GMFR的至少 1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8，1.9或2.0倍(例如1.1至4倍、1.1至3.5倍、1.1至3倍、1.5至3倍或1.1至1.5倍) (例如，如在免疫接種後1天至3個月、投與後7天至2個月、投與後約7天或約1個月所量測的)。
在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼的包含該等突變之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列、與SEQ ID NO: 49之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 49之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 49之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼的包含該等突變之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列。
在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼的包含該等突變之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段包含SEQ ID NO: 52之胺基酸序列、與SEQ ID NO: 52之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列，或者SEQ ID NO: 52之胺基酸序列或與SEQ ID NO: 52之胺基酸序列具有至少99.5%、99%、98.5%、98%、98.5%、97%、96%、95%、90%、85%或80%一致性之胺基酸序列的免疫原性片段。在一些實施例中，例如如由本文所闡述之RNA編碼的包含該等突變之SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段包含SEQ ID NO: 52之胺基酸序列。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑(例如mRNA組合物)在投與給個體後誘導細胞介導之免疫反應(例如CD4+及/或CD8+ T細胞反應)。在一些實施例中，誘導識別一或多種抗原決定基(例如MHC I類限制性抗原決定基)之T細胞，該(等)抗原決定基係選自由以下組成之群：LPFNDGVYF (SEQ ID NO: 42)、GVYFASTEK (SEQ ID NO: 43)、YLQPRTFLL (SEQ ID NO: 35)、QPTESIVRF (SEQ ID NO: 40)、CVADYSVLY (SEQ ID NO: 44)、KCYGVSPTK (SEQ ID NO: 45)、NYNYLYRLF (SEQ ID NO: 38)、FQPTNGVGY (SEQ ID NO: 46)、IPFAMQMAY (SEQ ID NO: 41)、RLQSLQTYV (SEQ ID NO: 36)、GTHWFVTQR (SEQ ID NO: 47)、VYDPLQPEL (SEQ ID NO: 48)、QYIKWPWYI (SEQ ID NO: 37)及KWPWYIWLGF (SEQ ID NO: 39)。在一個實施例中，誘導識別抗原決定基YLQPRTFLL (SEQ ID NO: 35)之T細胞。在一個實施例中，誘導識別抗原決定基NYNYLYRLF (SEQ ID NO: 38)之T細胞。在一個實施例中，誘導識別抗原決定基QYIKWPWYI (SEQ ID NO: 37)之T細胞。在一個實施例中，誘導識別抗原決定基KCYGVSPTK (SEQ ID NO: 45)之T細胞。在一個實施例中，誘導識別抗原決定基RLQSLQTYV (SEQ ID NO: 36)之T細胞。在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑(例如mRNA組合物)係根據達成此T細胞誘導之方案來投與。
在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑(例如mRNA組合物)在投與給個體後誘導細胞介導之免疫反應(例如CD4+及/或CD8+ T細胞反應)，該免疫反應在投與後15週或更晚、16週或更晚、17週或更晚、18週或更晚、19週或更晚、20週或更晚、21週或更晚、22週或更晚、23週或更晚、24週或更晚或者25週或更晚可偵測到，該投與例如使用兩個劑量之本文所闡述之RNA (其中第二劑量可在投與第一劑量後約21天投與)。在一些實施例中，本文所闡述之方法及劑(例如mRNA組合物)係根據達成細胞介導之免疫反應之此類誘導之方案來投與。
在一個實施例中，針對本文所闡述之冠狀病毒之疫苗接種，例如使用本文所闡述之RNA，該RNA可以本文所闡述之量及方案投與，例如以30 μg/劑之兩個劑量投與，例如相隔21天投與，可在一段時間後使用與第一次疫苗接種所用相同或不同的疫苗重複進行，例如一旦觀察到針對冠狀病毒感染之保護減弱即重複進行。此一段時間可為至少6個月、1年、兩年等。在一個實施例中，將與第一次疫苗接種所用相同之RNA用於第二次或進一步疫苗接種，然而，以較低之劑量或較低之投與頻率進行。舉例而言，第一次疫苗接種可包含使用約30 μg/劑之劑量進行的疫苗接種，其中在一個實施例中，投與至少兩個此種劑量，(例如第二劑量可在投與第一劑量後約21天投與)且第二次或進一步疫苗接種可包含使用小於約30 μg/劑之劑量進行的疫苗接種，其中在一個實施例中，僅投與一個此等劑量。在一個實施例中，將與第一次疫苗接種所用不同的RNA用於第二次或進一步疫苗接種，例如將BNT162b2用於第一次疫苗接種且將BNT162B1或BNT162b3用於第二次或進一步疫苗接種。
在一個實施例中，疫苗接種方案包含使用至少兩個劑量之本文所闡述組合物、例如兩個劑量之本文所闡述組合物進行的第一次疫苗接種(其中第二劑量可在投與第一劑量後約21天投與)，以及使用單個劑量或多個劑量、例如兩個劑量之本文所闡述組合物進行的第二次疫苗接種。在多個實施例中，第二次疫苗接種在投與第一次疫苗接種後3至24個月、6至18個月、6至12個月或5至7個月，例如在最初之雙劑量方案後投與。第二次疫苗接種之每個劑量中所用之RNA總量可與第一次疫苗接種之每個劑量中所用之RNA量相同或不同。在一個實施例中，第二次疫苗接種之每個劑量中所用之RNA總量等於第一次疫苗接種之每個劑量中所用之RNA總量。在一個實施例中，第二次疫苗接種之每個劑量中所用之RNA總量及第一次疫苗接種之每個劑量中所用之RNA總量為約60 μg/劑。在一個實施例中，第二次疫苗接種之每個劑量中所用之RNA總量及第一次疫苗接種之每個劑量中所用之RNA總量為約90 μg/劑。在一個實施例中，將與第一次疫苗接種所用相同之RNA用於第二次疫苗接種。在一個實施例中，第一次疫苗接種及第二次疫苗接種均投與一劑包含至少二價SARS-CoV-2疫苗及至少四價流行性感冒疫苗之組合物。在一些實施例中，第一次疫苗接種及第二次疫苗接種之每個劑量包含30 ug之至少二價SARS-CoV-2疫苗及30 ug之至少四價流行性感冒疫苗。在一些實施例中，第一次疫苗接種及第二次疫苗接種之每個劑量包含30 ug之至少二價SARS-CoV-2疫苗及60 ug之至少四價流行性感冒疫苗。
在一個實施例中，用於第一次疫苗接種及第二次疫苗接種之組合物包含BNT162b2。
在一些實施例中，當第一次疫苗接種及第二次疫苗接種所用之組合物包含BNT162b2時，目的為誘導靶向SARS-CoV-2變異體(包括但不限於奧密克戎(B.1.1.529)變異體)之免疫反應。因此，在一些實施例中，當第一次疫苗接種及第二次疫苗接種所用之組合物包含BNT162b2時，目的為保護個體免受SARS-CoV-2變異體(包括但不限於奧密克戎(B.1.1.529)變異體)之感染。
在一個實施例中，將與第一次疫苗接種所用不同之組合物用於第二次疫苗接種。在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含BNT162b2，且第二次疫苗接種所用之組合物包含編碼SARS-CoV-2變異體毒株(例如本文所論述毒株)之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含BNT162b2，且第二次疫苗接種所用之組合物包含編碼第二次疫苗接種時流行或迅速傳播之SARS-CoV-2變異體毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA。在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含BNT162b2，且第二次疫苗接種所用之組合物包含編碼SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的RNA，該免疫原性變異體包含針對S蛋白變異體(諸如SARS-CoV-2 S蛋白變異體、特定而言天然S蛋白變異體)之本文所闡述突變中之一或多者。在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含BNT162b2，且第二次疫苗接種所用之組合物包含編碼SARS-CoV-2 S蛋白、其免疫原性變異體或者該SARS-CoV-2 S蛋白或其免疫原性變異體之免疫原性片段的RNA，該免疫原性變異體包含一或多個突變，諸如SARS-CoV-2變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之所有突變，該SARS-CoV-2變異體係選自由VOC-202012/01、501.V2、群集5、B.1.1.248及奧密克戎(B.1.1.529)組成之群。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含RNA，該RNA包含編碼如下多肽之核苷酸序列，該多肽包含在對應於SEQ ID NO:1之986及987之位置處具有脯胺酸殘基取代之胺基酸序列，且第二次疫苗接種所用之組合物包含RNA，該RNA包含編碼如下多肽之核苷酸序列，該多肽包含在SEQ ID NO:1之80位具有丙胺酸取代、在215位具有甘胺酸取代、在484位具有離胺酸取代、在501位具有酪胺酸取代、在701位具有纈胺酸取代、在18位具有苯丙胺酸取代、在246位具有異白胺酸取代、在417位具有天冬醯胺取代、在614位具有甘胺酸取代、在242位至244位具有缺失且在986位及987位具有脯胺酸取代之胺基酸序列。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含編碼如下多肽之RNA，該多肽包含在SEQ ID NO:1之986位及987位具有脯胺酸殘基取代之胺基酸序列，且第二次疫苗接種所用之組合物包含編碼如下多肽之RNA，該多肽包含具有SEQ ID NO:1中之以下突變之胺基酸序列： 與SEQ ID NO: 1相比，A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、K417N、N440K、G446S、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K、L981F、K986P及V987P。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含編碼如下多肽之RNA，該多肽包含具有SEQ ID NO: 1中之以下突變之胺基酸序列：在SEQ ID NO:1之986位及987位之殘基取代，且第二次疫苗接種所用之組合物包含編碼如下多肽之RNA，該多肽包含具有在SEQ ID NO:1中之以下突變之胺基酸序列： 與SEQ ID NO: 1相比，T19I、Δ24-26、A27S、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、S477N、T478K、E484A、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K、K986P及V987P。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含編碼如下多肽之RNA，該多肽包含在SEQ ID NO:1之986位及987位具有脯胺酸殘基取代之胺基酸序列，且第二次疫苗接種所用之組合物包含編碼如下多肽之RNA，該多肽包含具有SEQ ID NO:1中之以下突變之胺基酸序列： 與SEQ ID NO: 1相比，T19I、 Δ24-26、A27S、Δ69/70、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、L452R、S477N、T478K、E484A、F486V、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K、K986P及V987P。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物編碼如下多肽，該多肽包含具有SEQ ID NO: 1中之以下突變之胺基酸序列： A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、K417N、N440K、G446S、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K、L981F、K986P及V987P，且第二次疫苗接種所用之組合物包含編碼如下多肽之RNA，該多肽包含具有SEQ ID NO: 1中之以下突變之胺基酸序列： 與SEQ ID NO: 1相比，T19I、Δ24-26、A27S、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、S477N、T478K、E484A、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K、K986P及V987P。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物編碼如下多肽，該多肽包含具有SEQ ID NO: 1中之以下突變之胺基酸序列： A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、K417N、N440K、G446S、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K、L981F、K986P及V987P，且第二次疫苗接種所用之組合物包含編碼如下多肽之RNA，該多肽包含具有SEQ ID NO: 1中之以下突變之胺基酸序列： 與SEQ ID NO: 1相比，T19I、Δ24-26、A27S、Δ69/70、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、L452R、S477N、T478K、E484A、F486V、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K、K986P及V987P。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物編碼如下多肽，該多肽包含具有SEQ ID NO: 1中之以下突變之胺基酸序列： 與SEQ ID NO: 1相比，T19I、Δ24-26、A27S、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、S477N、T478K、E484A、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K、K986P及V987P，且第二次疫苗接種所用之組合物包含編碼如下多肽之RNA，該多肽包含具有SEQ ID NO: 1中之以下突變之胺基酸序列： 與SEQ ID NO: 1相比，T19I、Δ24-26、A27S、Δ69/70、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、L452R、S477N、T478K、E484A、F486V、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K、K986P及V987P。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的RNA，且第二次疫苗接種所用之組合物包含編碼包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列之多肽的RNA。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含含有SEQ ID NO: 20之核苷酸序列的RNA，且第二次疫苗接種所用之組合物包含含有SEQ ID NO: 51之核苷酸序列的RNA。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的RNA，且第二次疫苗接種所用之組合物包含編碼包含SEQ ID NO: 55、58或61之胺基酸序列之多肽的RNA。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含含有SEQ ID NO: 20之核苷酸序列的RNA，且第二次疫苗接種所用之組合物包含含有SEQ ID NO: 57、60或63之核苷酸序列的RNA。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含編碼包含SEQ ID NO: 58之胺基酸序列之多肽的RNA，且第二次疫苗接種所用之組合物包含編碼包含SEQ ID NO: 49、55或61之胺基酸序列之多肽的RNA。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含含有SEQ ID NO: 60之核苷酸序列的RNA，且第二次疫苗接種所用之組合物包含含有SEQ ID NO: 51、57或63之核苷酸序列的RNA。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含編碼包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列之多肽的RNA，且第二次疫苗接種所用之組合物包含編碼包含SEQ ID NO: 55或61之胺基酸序列之多肽的RNA。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含含有SEQ ID NO: 51之核苷酸序列的RNA，且第二次疫苗接種所用之組合物包含含有SEQ ID NO: 57或63之核苷酸序列的RNA。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含編碼包含SEQ ID NO: 55之胺基酸序列之多肽的RNA，且第二次疫苗接種所用之組合物包含編碼包含SEQ ID NO: 61之胺基酸序列之多肽的RNA。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含含有SEQ ID NO: 57之核苷酸序列的RNA，且第二次疫苗接種所用之組合物包含含有SEQ ID NO: 63之核苷酸序列的RNA。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含編碼如下多肽之RNA，該多肽包含在SEQ ID NO:1之986位及987位具有脯胺酸殘基取代之胺基酸序列，且第二次疫苗接種所用之組合物包含編碼如下多肽之RNA，該多肽包含具有SEQ ID NO:1中之以下突變之胺基酸序列： 與SEQ ID NO: 1相比，A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K、L981F、K986P及V987P。在一些實施例中，由第二次疫苗接種所用之RNA編碼之多肽進一步包含在對應於SEQ ID NO:1之986位及987位之位置處的脯胺酸殘基取代。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之組合物包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的RNA，且第二次疫苗接種所用之組合物包含編碼包含SEQ ID NO: 52之胺基酸序列之多肽的RNA。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列，該加強方案包含至少一個30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列，該加強方案包含至少一個50 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列，該加強方案包含至少一個60 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列，該加強方案包含至少一個30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列之多肽的序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含至少兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列，該加強方案包含至少兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列之多肽的序列，其中在一些實施例中，兩個劑量之加強方案彼此相隔至少2個月(例如彼此相隔至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與。在一些實施例中，此一個體可先前已投與作為加強劑量之30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列，該加強方案包含至少一個50 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼SEQ ID NO: 49之胺基酸序列之核苷酸序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列，該加強方案包含至少一個60 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼SEQ ID NO: 49之胺基酸序列之核苷酸序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列。
在一些實施例中，向個體投與初次方案，該初次方案包含兩個劑量 之30 ug RNA (例如彼此相繼約21天投與)，其中每個30 ug劑量之RNA包含15 ug包含編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之核苷酸序列的RNA及15 ug包含編碼SEQ ID NO: 49之胺基酸序列之核苷酸序列的RNA。在一些實施例中，將此一初次方案投與給未接種疫苗之個體。
在一些實施例中，向個體投與初次方案，該初次方案包含兩個劑量 之30 ug RNA (例如彼此相繼約21天投與)，其中每個30 ug劑量之RNA包含編碼SEQ ID NO: 49之胺基酸序列之核苷酸序列。在一些實施例中，將此一初次方案投與給未接種疫苗之個體。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列，該加強方案包含至少一個 30 ug劑量之RNA，其中該30 ug RNA包含15 ug包含編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之核苷酸序列的RNA及15 ug包含編碼SEQ ID NO: 49之胺基酸序列之核苷酸序列的RNA，其中該兩種RNA視情況在同一組合物中投與，且其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列，該加強方案包含至少一個50 ug劑量之RNA，其中該50 ug RNA包含25 ug包含編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之核苷酸序列的RNA及25 ug包含編碼SEQ ID NO: 49之胺基酸序列之核苷酸序列的RNA，其中該兩種RNA視情況在同一組合物中投與(例如包含兩種RNA之調配物)，且其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列，該加強方案包含至少一個60 ug劑量之RNA，其中該60 ug RNA包含30 ug包含編碼SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之核苷酸序列的RNA及30 ug包含編碼SEQ ID NO: 49之胺基酸序列之核苷酸序列的RNA，其中該兩種RNA視情況在同一組合物中投與，且其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含編碼包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之多肽的序列。
在一個實施例中，第一次疫苗接種所用之RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，且第二次疫苗接種所用之RNA係包含SEQ ID NO: 54之核苷酸序列之RNA。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，該加強方案包含至少一個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，該加強方案包含至少一個50 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，該加強方案包含至少一個60 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，該加強方案包含至少一個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 51之核苷酸序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，該加強方案包含至少一個50 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 51之核苷酸序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，該加強方案包含至少一個60 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 51之核苷酸序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，該加強方案包含至少一個30 ug劑量之RNA，其中該30 ug RNA包含15 ug包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列之RNA及15 ug包含SEQ ID NO: 51之核苷酸序列之RNA，其中該兩種RNA視情況在同一組合物中投與，且其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，該加強方案包含至少一個包含50 ug RNA之劑量，其中該50 ug RNA包含25 ug包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列之RNA及25 ug包含SEQ ID NO: 51之核苷酸序列之RNA，其中該兩種RNA視情況在同一組合物中投與，且其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，該加強方案包含至少一個包含60 ug RNA之劑量，其中該60 ug RNA包含30 ug包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列之RNA及30 ug包含SEQ ID NO: 51之核苷酸序列之RNA，其中該兩種RNA視情況在同一組合物中投與，且其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，該加強方案包含至少一個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 57之核苷酸序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，該加強方案包含至少一個50 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 57之核苷酸序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，該加強方案包含至少一個60 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 57之核苷酸序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，該加強方案包含至少一個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 60之核苷酸序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，該加強方案包含至少一個50 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 60之核苷酸序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，該加強方案包含至少一個60 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 60之核苷酸序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，該加強方案包含至少一個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 63之核苷酸序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列，該加強方案包含至少一個50 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 63之核苷酸序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列。
在一個實施例中，向個體投與初次方案及加強方案，該初次方案包含兩個30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 63之核苷酸序列，該加強方案包含至少一個60 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 57之核苷酸序列，其中該加強方案在投與初次方案後至少2個月(例如至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月)投與，且其中該個體視情況先前已投與第一加強方案，該第一加強方案包含30 ug劑量之RNA，該RNA包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列。
在一個實施例中，疫苗接種方案包含第一次疫苗接種及第二次疫苗接種，該第一次疫苗接種使用兩個劑量之編碼如下多肽之RNA，該多肽包含在SEQ ID NO:1之986位及987位具有脯胺酸殘基取代之胺基酸序列，該兩個劑量相隔約21天投與，該第二次疫苗接種使用單個劑量或多個劑量之編碼如下多肽之RNA，該多肽包含在SEQ ID NO:1之986位及987位具有脯胺酸殘基取代之胺基酸序列，該單個劑量或多個劑量係在投與第一次疫苗接種後、亦即在最初兩個劑量之方案後約4至12個月、5至12個月或6至12個月投與。在一個實施例中，每個RNA劑量包含30 μg RNA。在該實施例中，一個實施例之目的係誘導靶向SARS-CoV-2變異體(包括但不限於奧密克戎(B.1.1.529)變異體)之免疫反應。因此，在該實施例中，一個實施例之目的係保護個體免受SARS-CoV-2變異體(包括但不限於奧密克戎(B.1.1.529)變異體)之感染。
在一個實施例中，疫苗接種方案包含第一次疫苗接種及第二次疫苗接種，該第一次疫苗接種使用兩個劑量之編碼如下多肽之RNA，該多肽包含在SEQ ID NO:1之986位及987位具有脯胺酸殘基取代之胺基酸序列，該兩個劑量相隔約21天投與，該第二次疫苗接種使用單個劑量或多個劑量之編碼如下多肽之RNA，該多肽包含在SEQ ID NO:1之80位具有丙胺酸取代、在215位具有甘胺酸取代、在484位具有離胺酸取代、在501位具有酪胺酸取代、在701位具有纈胺酸取代、在18位具有苯丙胺酸取代、在246位具有異白胺酸取代、在417位具有天冬醯胺取代、在614位具有甘胺酸取代、在242位至244位具有缺失且在986位及987位具有脯胺酸取代之胺基酸序列，該單個劑量或多個劑量係在投與第一次疫苗接種後、亦即在最初兩個劑量之方案後約6至12個月投與。在一個實施例中，每個RNA劑量包含30 μg RNA。
在一個實施例中，疫苗接種方案包含第一次疫苗接種及第二次疫苗接種，該第一次疫苗接種使用兩個劑量之編碼如下多肽之RNA，該多肽包含在SEQ ID NO:1之986位及987位具有脯胺酸殘基取代之胺基酸序列，該兩個劑量相隔約21天投與，且該第二次疫苗接種使用單個劑量或多個劑量之編碼如下多肽之RNA，該多肽包含具有SEQ ID NO:1中之以下突變之胺基酸序列： 與SEQ ID NO: 1相比，A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、K417N、N440K、G446S、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K、L981F、K986P及V987P，該單個劑量或多個劑量例如在投與第一次疫苗接種後、亦即在最初兩個劑量之方案後約6至12個月投與。在一個實施例中，每個RNA劑量包含30 μg RNA。
在一個實施例中，疫苗接種方案包含第一次疫苗接種及第二次疫苗接種，該第一次疫苗接種使用兩個劑量之編碼如下多肽之RNA，該多肽包含在SEQ ID NO:1之986位及987位具有脯胺酸殘基取代之胺基酸序列，該兩個劑量相隔約21天投與，且該第二次疫苗接種使用單個劑量或多個劑量之編碼如下多肽之RNA，該多肽包含具有SEQ ID NO:1中之以下突變之胺基酸序列： 與SEQ ID NO: 1相比，A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K、L981F、K986P及V987P該單個劑量或多個劑量例如在投與第一次疫苗接種後、亦即在最初兩個劑量之方案後約6至12個月投與。在一個實施例中，每個RNA劑量包含30 μg RNA。在一些實施例中，所編碼之多肽進一步包含在對應於SEQ ID NO:1之986位及987位之位置處的脯胺酸殘基取代。
在一個實施例中，疫苗接種方案包含第一次疫苗接種及第二次疫苗接種，該第一次疫苗接種涉及至少兩個劑量之編碼如下多肽之RNA，該多肽包含在SEQ ID NO: 1之986位及987位具有脯胺酸殘基取代之胺基酸序列，該兩個劑量相隔約21天投與，該第二次疫苗接種涉及單個劑量或多個劑量之編碼如下多肽之RNA，該多肽包含具有SEQ ID NO: 1中之以下突變之胺基酸序列： 與SEQ ID NO: 1相比，T19I、Δ24-26、A27S、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、S477N、T478K、E484A、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K、K986P及V987P，該單個劑量或多個劑量例如在投與第一次疫苗接種後、亦即在最初兩個劑量之方案後約6至12個月投與。在一個實施例中，每個或至少一個RNA劑量包含30 μg RNA。
在一個實施例中，疫苗接種方案包含第一次疫苗接種及第二次疫苗接種，該第一次疫苗接種涉及至少兩個劑量之編碼如下多肽之RNA，該多肽包含在SEQ ID NO:1之986位及987位具有脯胺酸殘基取代之胺基酸序列，該至少兩個劑量相隔約21天投與，且該第二次疫苗接種涉及單個劑量或多個劑量之編碼如下多肽之RNA，該多肽包含具有SEQ ID NO:1中之以下突變之胺基酸序列： 與SEQ ID NO: 1相比，T19I、 Δ24-26、A27S、Δ69/70、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、L452R、S477N、T478K、E484A、F486V、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K、K986P及V987P該單個劑量或多個劑量例如在投與第一次疫苗接種後、亦即在最初兩個劑量之方案後約6至12個月投與。在一個實施例中，每個或至少一個RNA劑量包含30 μg RNA。
在一個實施例中，疫苗接種方案包含第一次疫苗接種，該第一次疫苗接種涉及至少兩個劑量之編碼如下多肽之RNA，該多肽包含具有SEQ ID NO:1中之以下突變之胺基酸序列： A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、K417N、N440K、G446S、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K、L981F、K986P及V987P，其中第一次疫苗接種之兩個劑量相隔約21天投與，且其中疫苗接種方案包含第二次疫苗接種，該第二次疫苗接種涉及單個劑量或多個劑量之編碼如下多肽之RNA，該多肽包含具有SEQ ID NO:1中之以下突變之胺基酸序列： 與SEQ ID NO: 1相比，T19I、Δ24-26、A27S、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、S477N、T478K、E484A、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K、K986P及V987P，該單個劑量或多個劑量例如在投與第一次疫苗接種後、亦即在最初兩個劑量之方案後約6至12個月投與。在一個實施例中，每個或至少一個RNA劑量包含30 μg RNA。
在一個實施例中，疫苗接種方案包含第一次疫苗接種，該第一次疫苗接種涉及至少兩個劑量之編碼如下多肽之RNA，該多肽包含具有SEQ ID NO:1中之以下突變之胺基酸序列： A67V、Δ69-70、T95I、G142D、Δ143-145、Δ211、L212I、ins214EPE、G339D、S371L、S373P、S375F、K417N、N440K、G446S、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y、Y505H、T547K、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、N856K、Q954H、N969K、L981F、K986P及V987P，其中第一次疫苗接種之兩個劑量相隔約21天投與，且其中疫苗接種方案包含第二次疫苗接種，該第二次疫苗接種涉及單個劑量或多個劑量之編碼如下多肽之RNA，該多肽包含具有SEQ ID NO:1中之以下突變之胺基酸序列： 與SEQ ID NO: 1相比，T19I、Δ24-26、A27S、Δ69/70、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、L452R、S477N、T478K、E484A、F486V、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K、K986P及V987P，該單個劑量或多個劑量例如在投與第一次疫苗接種後、亦即在最初兩個劑量之方案後約6至12個月投與。在一個實施例中，每個或至少一個RNA劑量包含30 μg RNA。
在一個實施例中，疫苗接種方案包含第一次疫苗接種，該第一次疫苗接種涉及至少兩個劑量之編碼如下多肽之RNA，該多肽包含具有SEQ ID NO:1中之以下突變之胺基酸序列： 與SEQ ID NO: 1相比，T19I、Δ24-26、A27S、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、S477N、T478K、E484A、Q493R、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K、K986P及V987P，其中第一次疫苗接種之兩個劑量相隔約21天投與，且其中疫苗接種方案包含第二次疫苗接種，該第二次疫苗接種涉及單個劑量或多個劑量之編碼如下多肽之RNA，該多肽包含具有SEQ ID NO:1中之以下突變之胺基酸序列： 與SEQ ID NO: 1相比，T19I、Δ24-26、A27S、Δ69/70、G142D、V213G、G339D、S371F、S373P、S375F、T376A、D405N、R408S、K417N、N440K、L452R、S477N、T478K、E484A、F486V、Q498R、N501Y、Y505H、D614G、H655Y、N679K、P681H、N764K、D796Y、Q954H、N969K、K986P及V987P，該單個劑量或多個劑量例如在投與第一次疫苗接種後、亦即在最初兩個劑量之方案後約6至12個月投與。在一個實施例中，每個或至少一個RNA劑量包含30 μg RNA。
在一個實施例中，疫苗接種方案包含(i)第一次疫苗接種，該第一次疫苗接種包含至少三個劑量之本文所闡述之RNA (例如，其中每個劑量包含約30 ug包含SEQ ID NO: 20之核苷酸序列之RNA)，其中第二劑量可在投與第一劑量後約21天投與，且第三劑量可在第二劑量後至少約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12個月投與；以及(ii)第二次疫苗接種，該第二次疫苗接種包含至少一個劑量之本文所闡述之RNA (例如，其中每個劑量包含約30 μg RNA/劑)。在一些實施例中，第二次疫苗接種包含至少一個劑量之本文所闡述之二價疫苗，例如總計約30 μg二價疫苗，例如包含約15 μg編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及約15 μg編碼包含奧密克戎變異體之特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA之二價疫苗(b2+Omi)。在一些實施例中，二價疫苗包含約15 μg編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及約15 μg編碼包含BA.1奧密克戎變異體之特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，15 μg包含SEQ ID NO: 20之序列的RNA及15 μg包含SEQ ID NO: 51之序列的RNA)。在一些實施例中，二價疫苗包含約15 μg編碼來自武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及約15 μg編碼包含BA.4/5奧密克戎變異體之特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA (例如，15 μg包含SEQ ID NO: 20之序列的RNA及15 μg包含SEQ ID NO: 72之序列的RNA)。在一些實施例中，將疫苗接種方案投與給至少約12歲之個體。在一些實施例中，將疫苗接種方案投與給至少約6個月至小於約12歲之個體。
在一個實施例中，第二次疫苗接種引起免疫反應之加強。
在一個實施例中，本文所闡述之RNA與其他疫苗共投與。在一些實施例中，本文所闡述之RNA與包含SARS-CoV-2之一或多個T細胞抗原決定基或編碼該抗原決定基之RNA的組合物共投與。在一些實施例中，本文所闡述之RNA與來源於SARS-CoV-2之M蛋白、N蛋白及/或ORF1ab蛋白之一或多個T細胞抗原決定基或編碼該抗原決定基之RNA共投與，例如WO2021188969中所揭示之組合物，該案之內容係以全文引用的方式併入本文中。在一些實施例中，本文所闡述之組合物(例如包含編碼一或多種SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及編碼一或多種流行性感冒HA蛋白之RNA的組合物)包含及/或與WO2021188969中所闡述之T字串構築體(例如，編碼WO2021/188969之SEQ ID NO: RS C7p2full之RNA)共投與。在一些實施例中，本文所闡述之組合物及WO2021188969中所闡述之T字串構築體以總計最多約100 ug RNA之組合投與。在一些實施例中，將至少2個劑量之本文所闡述之組合物(例如，在一些實施例中，每個劑量60 ug或90 ug總RNA)與T字串構築體(例如，編碼WO2021/188969之SEQ ID NO: RS C7p2full之RNA)組合投與給個體，例如，每個劑量之本文所闡述之RNA與編碼SEQ ID NO: RS C7p2full之RNA的組合總計最多約100 ug RNA，其中兩個劑量例如彼此相隔至少4週或更長(包括例如至少5週、至少6週、至少7週、至少8週、至少9週、至少10週、至少11週或至少12週或更長)投與。在一些實施例中，將至少3個劑量之本文所闡述組合物(例如，在一些實施例中，每個劑量60 ug或90 ug總RNA)與T字串構築體(例如，編碼WO2021/188969之SEQ ID NO: RS C7p2full之RNA)組合投與給個體，例如每個劑量之本文所闡述之RNA與編碼SEQ ID NO: RS C7p2full之RNA的組合總計最多約100 ug RNA，其中第一劑量及第二劑量以及第二劑量及第三劑量各自獨立地彼此相隔至少4週或更長(包括例如至少5週、至少6週、至少7週、至少8週、至少9週、至少10週、至少11週或至少12週或更長)投與。在一些實施例中，本文所闡述之RNA及T字串構築體可作為單獨調配物共投與(例如，在同一天投與至分開的注射部位之調配物)。在一些實施例中，本文所闡述之RNA及T字串構築體可作為共調配物(例如，包含本文所闡述之RNA及T字串構築體之調配物作為單獨LNP調配物或作為包含T字串構築體及本文所闡述RNA二者之LNP調配物)共投與。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物與一或多種針對非SARS-CoV-2疾病之疫苗共投與。在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物與一或多種針對非SARS-COV-2病毒性疾病之疫苗共投與。在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物與一或多種針對非SARS-CoV-2呼吸疾病之疫苗共投與。在一些實施例中，非SARS-CoV-2呼吸疾病由非SARS-CoV-2冠狀病毒、流行性感冒病毒、肺病毒科病毒或副黏液病毒科病毒引起。在一些實施例中，肺病毒科病毒係呼吸道融合病毒(RSV)或間質肺炎病毒。在一些實施例中，間質肺炎病毒係人類間質肺炎病毒(hMPV)。在一些實施例中，副黏液病毒科病毒係副流行性感冒病毒或亨尼帕病毒(Henipavirus)。在一些實施例中，副流行性感冒病毒係PIV3。在一些實施例中，非SAR-CoV-2冠狀病毒係貝塔冠狀病毒(例如SARS-CoV-1)。在一些實施例中，非SARS-CoV-2冠狀病毒係瑪貝病毒(例如MERS-CoV病毒)。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物(例如，(a)包含一或多種各自編碼SARS-CoV-2 S蛋白之RNA之RNA組合物，或(b)包含以下之RNA組合物：(i)一或多種RNA，其各自編碼SARS-CoV-2病毒之抗原，及(ii)一或多種RNA，其各自編碼流行性感冒病毒之抗原)與RSV疫苗(例如，遞送RSV A及/或RSV B病毒之抗原之疫苗)共投與或進一步包含RSV疫苗。在一些實施例中，RSV疫苗包含RSV融合蛋白(F)、RSV附著蛋白(G)、RSV小疏水性蛋白(SH)、RSV基質蛋白(M)、RSV核蛋白(N)、RSV M2-1蛋白、RSV大聚合酶(L)及/或RSV磷蛋白(P)，或其免疫原性變異體之免疫原性片段，或編碼其中任一者或其中任一者之免疫原性片段或免疫原性變異體之核酸(例如RNA)。
多種RSV疫苗為此項技術中所已知，其中之任一者可與本文所闡述之RNA組合物組合及/或共投與。例如，參見全球衛生組織PATH之網站(參見https://www.path.org/resources/rsv-vaccine-and-mab-snapshot/)，以及Mazur, Natalie I.等人，「The respiratory syncytial virus vaccine landscape: lessons from the graveyard and promising candidates」, The Lancet Infectious Diseases 18.10 (2018): e295-e311中所提供之RSV疫苗清單，其各自之內容係以引用的方式併入本文中。在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物與先前已公開之RSV疫苗(例如上文鏈接之PATH網頁上或Mazur等人中所闡述之RSV疫苗)共投與或組合。在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物與以下共投與或組合：活減毒或嵌合疫苗(例如rBCG-N-hRSV (由Ponteificia Uinersidad Catolica de Chile開發)、RSV D46 cp ΔM202 (由Sanofi Pasteur/LID/NIAD/NIH開發)、RSV LID ΔM2-2 1030s (由Sanofi Pasteur/LID/NIAD/NIH開發)、RSV ΔNS2 Δ1313/I1314L (由Sanofi Pasteur/LID/NIAD/NIH開發)、RSV D46 ΔNS2 N ΔM2-2 HindIII (由Sanofi Pasteur/LID/NIAD/NIH開發)或RSV LID ΔM2-2 1030s (由Sanofi Pasteur/LID/NIAD/NIH開發)、MV-012-968 (由Meissa Vaccines開發)、SP0125 (由Sanofi開發)、blb201 (由Blue lake開發)、CodaVax™-RSV (由Cadagenix開發)、RSVDeltaG (由Intravacc開發)或SeVRSV (由SIHPL及St. Jude hospital開發)、基於顆粒之疫苗(例如RSV F奈米顆粒(由Novavax開發)或SynGEM (由Mucosis開發)、Icosavzx (由IVX-121開發)或V-306 (由Virometix開發))、亞單位疫苗(例如GSK RSV F (由GSK開發)、Arexvy (由GSK開發)、DPX-RSV (由Dalousie Univeristy、Immunovaccine及VIB開發)、RSV F DS-Cav1 (由NIH/NIAID/VRC開發)、MEDI-7510 (由MedImmune開發)、RSVpreF (由Pfizer開發，亦稱為Abrysvo TM)、ADV110 (由Advaccine開發)、VN-0200 (由Daiichi Sankyo, Inc.開發))、載體疫苗(例如MVA-BN RSV (由Banarian Nordic開發)、口服VXA-RSVf (由Vaxart開發)、Ad26.RSV.pref (由Janssen開發)、ChAd155-RSV (由GSK開發) Immunovaccine、DPX-RSV (由VIB開發)或DS-Cav1 (由NIH/NIAID/VRC開發)或核酸疫苗(例如正由CureVac開發之mRNA疫苗(目前未命名)或mRNA-1345 (由Moderna開發)或SP0274 (由Sanofi開發))。
在一些實施例中，RSV疫苗遞送單一RSV亞型(例如RSV A亞型或RSV B亞型)之F蛋白(例如融合前穩定之F蛋白)或其免疫原性片段(例如胞外結構域)。在一些實施例中，RSV疫苗遞送兩種或更多種RSV亞型(例如一或多種RSV A亞型及/或一或多種RSV B亞型)之F蛋白(例如融合前穩定之F蛋白)或其免疫原性片段。在一些實施例中，RSV疫苗為遞送A亞型之F蛋白及B亞型之F蛋白或其免疫原性片段之二價疫苗。
使RSV F蛋白之融合前構形穩定之突變為此項技術中所已知(例如，如WO2017/109629A1；WO2020/026147A1；McLellan, Jason S.等人，「Structure-based design of a fusion glycoprotein vaccine for respiratory syncytial virus」, science342.6158 (2013): 592-598；及Che, Ye等人，「Rational design of a highly immunogenic prefusion-stabilized F glycoprotein antigen for a respiratory syncytial virus vaccine」, Science Translational Medicine 15.693 (2023): eade6422；及Crank, Michelle C.等人，「A proof of concept for structure-based vaccine design targeting RSV in humans.」Science 365.6452 (2019): 505-509中所闡述；該等文獻各自之內容係以全文引用的方式併入本文中)。在一些實施例中，RSV F蛋白或其免疫原性片段包含以下中之一或多者：一或多個穩定工程化二硫鍵(例如，對應於T103C-I148C之突變)、一或多個空腔填充突變(例如，在對應於S190之位置處之突變(例如S190I))及一或多個電荷中和突變(例如，在對應於D486之位置處之突變(例如D486S))。在一些實施例中，RSV疫苗包含一或多個穩定工程化二硫鍵(例如，對應於S155C-S290C之突變)，及兩個空腔填充突變(例如，在對應於S190及V296之位置處之突變(例如S190F及V296F)。在一些實施例中，RSV F蛋白或其免疫原性片段包含存在於RSVpreF中之一或多種修飾(例如，如Che, Ye等人，「Rational design of a highly immunogenic prefusion-stabilized F glycoprotein antigen for a respiratory syncytial virus vaccine.」Science Translational Medicine 15.693 (2023): eade6422.中所闡述)。在一些實施例中，RSV F蛋白或其免疫原性片段包含存在於DSCav-1中之一或多種修飾(例如，如Crank, Michelle C.等人，「A proof of concept for structure-based vaccine design targeting RSV in humans.」Science 365.6452 (2019): 505-509中所闡述)。
在一些實施例中，RSV疫苗遞送一或多種F蛋白(例如一或多種融合前穩定之F蛋白)或其免疫原性片段，其各自包含可誘導三聚化之異源結構域(例如T4纖維蛋白源性三聚化結構域(亦稱為「摺疊子」結構域))。
在一些實施例中，RSV疫苗遞送一或多種F蛋白或其免疫原性片段，其各自包含中斷弗林蛋白酶裂解位點及/或pep27裂解位點之突變。
在一些實施例中，RSV疫苗包含WO2017/109629A1、WO2020/026147A1、WO2010/149745A1、WO2010/149743A2、WO2010/006447A1、WO2009/079796A1、WO2008/114149A2及WO2007/068907A2中所闡述之一或多種抗原，該等案件各自之內容係以全文引用的方式併入本文中。
在一些實施例中，RSV疫苗不包括佐劑(例如與亦可存在之RNA及/或LNP分離之佐劑)。在一些實施例中，RSV疫苗包括佐劑。在一些實施例中，RSV疫苗包括佐劑(例如，來自明尼蘇達沙氏桿菌(Salmonella Minnesota)之3-O-去醯基-4’-單磷醯脂質A (MPL)、皂素佐劑(例如QS-21)或其組合(例如，當組合係以脂質體調配物提供時))。在一些實施例中，RSV疫苗包括AS01E作為佐劑。在一些實施例中，RSV疫苗包括如WO2022/248353A1、WO2018/104313A1或WO2005/117958A1中所闡述之佐劑，該等案件各自之內容係以全文引用的方式併入本文中。
在一些實施例中，RSV疫苗遞送融合前穩定之F蛋白或其免疫原性片段(例如以融合前構形穩定之胞外結構域)。在一些實施例中，RSV疫苗為遞送來自兩種RSV亞型之經穩定之融合前F蛋白或其免疫原性片段之二價疫苗(例如，包含基於RSV A及RSV B亞型之序列，例如RSVpreF (亦稱為Abrysvo TM)，如Falsey A.等人，J. Infect Dis 2022;225(12):2056-2066；Walsh E.等人，J. Infect Dis 2022;225(8):1357-1366；Che, Ye等人，「Rational design of a highly immunogenic prefusion-stabilized F glycoprotein antigen for a respiratory syncytial virus vaccine.」Science Translational Medicine 15.693 (2023): eade6422；及/或Baber J.等人，J. Infect Dis 2022年5月11日;jiac189中所闡述，該等文獻各自之內容係以全文引用的方式併入本文中)。在一些實施例中，RSV疫苗為遞送單一RSV亞型之融合前穩定之F蛋白或其免疫原性片段之單價疫苗，且視情況進一步包含佐劑(例如RSV A或RSV B亞型(例如Arexvy TM))。
在一些實施例中，本文所闡述之RNA組合物(例如包含一或多種各自編碼SARS-CoV-2 S蛋白之RNA的組合物)與流行性感冒疫苗(例如非RNA流行性感冒疫苗)共投與。在一些實施例中，流行性感冒疫苗為阿爾法流行性感冒病毒、貝塔流行性感冒病毒、伽馬流行性感冒病毒或德爾塔流行性感冒病毒疫苗。在一些實施例中，疫苗為流行性感冒A病毒、流行性感冒B病毒、流行性感冒C病毒或流行性感冒D病毒疫苗。在一些實施例中，流行性感冒A病毒疫苗包含選自H1、H2、H3、H4、H5、H6、H7、H8、H9、H10、H11、H12、H13、H14、H15、H16、H17及H18之血球凝集素，或其免疫原性片段或變異體，或編碼其中任一者之核酸(例如RNA)。在一些實施例中，流行性感冒A疫苗包含或編碼選自N1、N2、N3、N4、N5、N6、N7、N8、N9、N10及N11之神經胺酸酶(NA)，或其免疫原性片段或變異體，或編碼其中任一者之核酸(例如RNA)。在一些實施例中，流行性感冒疫苗包含至少一種流行性感冒病毒血球凝集素(HA)、神經胺酸酶(NA)、核蛋白(NP)、基質蛋白1 (M1)、基質蛋白2 (M2)、非結構蛋白1 (NS1)、非結構蛋白2 (NS2)、核輸出蛋白(NEP)、聚合酶酸性蛋白(PA)、聚合酶鹼性蛋白PB1、PB1-F2及/或聚合酶鹼性蛋白2 (PB2)，或其免疫原性片段或變異體，或編碼其中任一者之核酸(例如RNA)。
在一些實施例中，本文所提供之RNA組合物與其他一或多種可注射疫苗在不同時間投與。在一些實施例中，本文所提供之RNA組合物與其他一或多種可注射疫苗同時投與。在一些此等實施例中，本文所提供之RNA組合物與至少一種另外的可注射疫苗在不同的注射部位投與。在一些實施例中，本文所提供之RNA組合物不與同一注射器中之任何其他疫苗混合。在一些實施例中，本文所提供之RNA組合物不與作為針對冠狀病毒(例如SARS-CoV-2)之疫苗接種之一部分的其他冠狀病毒疫苗組合。在一些實施例中，本文所提供之RNA組合物與至少一種其他可注射疫苗在同一注射部位投與。
在一些實施例中，將兩種或更多種疫苗(例如本文所闡述之SARS-CoV-2疫苗及流行性感冒疫苗；本文所闡述之SARS-CoV-2疫苗及RSV疫苗；或本文所闡述之SARS-CoV-2疫苗、流行性感冒疫苗及RSV疫苗)在即將投與給個體之前混合。在一些實施例中，本文所闡述之兩種或更多種疫苗係以單次注射投與，且在注射之前實質上不混合(例如，使用與圖3中所示類似之方法投與)。在一些實施例中，本文所闡述之兩種或更多種疫苗係使用雙室注射器以單次注射投與(例如，如Sousa, Liliana B.等人，「Brief report on double-chamber syringes patents and implications for infusion therapy safety and efficiency.」, International Journal of Environmental Research and Public Health 17.21 (2020): 8209中所闡述，該文獻之內容係以全文引用的方式併入本文中)。在一些實施例中，雙室注射器包含兩個直立室(例如，由Credence MedSystems提供之雙室重構注射器(例如如https://www.credencemed.com/dual-chamber/所闡述))。
在一些實施例中，欲投與給個體之一或多種疫苗係凍乾的。在此等實施例中，該一或多種凍乾疫苗可在欲共投與之液體疫苗中重構(例如，在一些實施例中，將凍乾RSV疫苗與液體SARS-CoV-2疫苗及/或液體流行性感冒疫苗共投與，且疫苗係藉由用液體SARS-CoV-2及/或液體流行性感冒疫苗重構凍乾RSV疫苗，接著投與給個體進行共投與)。
實際上，不希望受任何特定理論束縛，本揭示案提出，在一些實施例中，藉由向同一部位及/或在同一時間投與複數種免疫原(例如抗原性多肽及/或編碼該等抗原性多肽之核酸(例如RNA))，可達成某些優點，例如以單一組合物投與，在一些實施例中，該單一組合物可為最近組合及/或混合之組合物。
熟習此項技術者應瞭解各種免疫學原理，該等原理可能偏向分開投與(例如，以分開之組合物及/或在分開之部位及/或在不同時間)不同的疫苗及/或疫苗組分，例如以減少免疫原之間的免疫競爭。然而，本揭示案規定，在許多實施例中，不同的疫苗(及/或其不同的組分)且在一些實施例中所有投與之疫苗可合意地在同一部位、同時一起投與(例如，藉由穿過共用針或埠)。
在一些實施例中，本文所提供之RNA組合物(例如SARS-CoV-2 RNA疫苗)與至少一種其他疫苗(例如市售流行性感冒疫苗)使用同一注射器同時投與(例如，藉由以下進行投與：(i)用注射器自第一容器中取出第一組合物(例如SARS-CoV-2 RNA疫苗或市售流行性感冒疫苗)，(ii)用同一注射器(仍包含第一組合物)自第二容器中取出第二組合物(例如SARS-CoV-2 RNA疫苗或市售流行性感冒疫苗)，及(iii)投與給個體(例如，不經混合及/或顛倒即投與)。
在一些實施例中，本文所提供之RNA組合物(例如SARS-CoV-2 RNA疫苗)與RSV疫苗使用同一注射器同時投與(例如，藉由以下進行投與：(i)用注射器自第一容器中取出第一組合物(例如SARS-CoV-2 RNA疫苗或RSV疫苗(例如RSVpref)，(ii)用同一注射器(仍包含第一組合物)自第二容器中取出第二組合物(例如SARS-CoV-2 RNA疫苗或RSV疫苗(例如RSVpref)，及(iii)投與給個體(例如，不經混合及/或顛倒即投與)。
在一些實施例中，使用同一注射器同時投與包含(i)一或多種各自編碼SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及(ii)一或多種各自編碼流行性感冒HA抗原之RNA的RNA組合物與至少一種其他疫苗(例如RSV疫苗) (例如，藉由以下進行投與：(a)用注射器自第一容器中取出包含(i)一或多種各自編碼SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及(ii)一或多種各自編碼流行性感冒HA抗原之RNA的RNA組合物，及(b)用同一注射器(仍包含RNA組合物)自第二容器中取出RSV疫苗(例如RSVpref)，及(c)投與給個體(例如，不經混合及/或顛倒即投與)。在一些實施例中，使用同一注射器同時投與包含(i)一或多種各自編碼SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及(ii)一或多種各自編碼流行性感冒HA抗原之RNA的RNA組合物與至少一種其他疫苗(例如RSV疫苗) (例如，藉由以下進行投與：(a)用注射器自第一容器中取出RSV疫苗(例如RSVpref)，及(b)用同一注射器(仍包含RNA組合物)自第二容器中取出包含(i)一或多種各自編碼SARS-CoV-2 S蛋白之RNA及(ii)一或多種各自編碼流行性感冒HA抗原之RNA的RNA組合物，及(c)投與給個體(例如，不經混合及/或顛倒即投與)。
在一些實施例中，使用同一注射器同時投與本文所提供之RNA組合物(例如SARS-CoV-2 RNA疫苗)與至少兩種其他疫苗(例如市售流行性感冒疫苗及RSV疫苗(例如RSVpref)) (例如，藉由以下進行投與：(i)用注射器自第一容器中取出第一組合物(例如SARS-CoV-2 RNA疫苗、市售流行性感冒疫苗或RSV疫苗(例如RSVpref)，(ii)用同一注射器(仍包含第一組合物)自第二容器中取出第二組合物(例如SARS-CoV-2 RNA疫苗、市售流行性感冒疫苗或RSV疫苗(例如RSVpref)，(iii)用同一注射器(仍包含第一組合物及第二組合物)自第三容器中取出第三組合物(例如SARS-CoV-2 RNA疫苗、市售流行性感冒疫苗或RSV疫苗(例如RSVpref))，及(iv)投與給個體(例如，不經混合及/或顛倒即投與)。
術語「疾病」係指影響個體身體之異常疾患。通常將疾病解釋為與具體症狀及徵象相關之醫學病況。疾病可由外源因素引起，諸如傳染性疾病，或可由內部功能障礙引起，諸如自體免疫性疾病。在人類中，「疾病」通常更廣泛地用於指導致受影響個體疼痛、功能障礙、痛苦、社交問題或死亡，或對與該個體所接觸者造成類似問題之任何疾患。在此更廣泛之意義上，其有時包括受傷、殘疾、障礙、症候群、感染、孤立症狀、異常行為以及結構及功能之非典型變異，而在其他情況下且出於其他目的，該等可視為可區分之類別。疾病通常不僅在身體上、且亦在情感上影響個體，此乃因感染及患上許多疾病可改變一個人對生活之看法及一個人之性格。
在本文中，術語「治療(treatment、treating)」或「治療性干預」係指出於對抗疾患(諸如疾病或病症)之目的而對個體之管控及照護。該術語意欲包括對個體所患給定疾患之全譜治療，諸如投與治療有效之化合物以緩解症狀或併發症，延遲疾病、病症或疾患之進展，緩解或減輕症狀及併發症，及/或治癒或消除疾病、病症或疾患，以及預防疾患，其中預防應理解為出於對抗疾病、疾患或病症之目的而對個體之管控及照護，且包括投與活性化合物以預防症狀或併發症之發作。
術語「治療性治療」係指改善健康狀況及/或延長(增加)個體壽命之任何治療。該治療可消除個體之疾病，阻止或減緩個體疾病之發展，抑制或減緩個體疾病之發展，降低個體症狀之頻率或嚴重程度，及/或減少目前患有或先前已患有疾病之個體之復發。
術語「預防性治療」或「防止性治療」係指意欲預防個體發生疾病之任何治療。術語「預防性治療」或「防止性治療」在本文中可互換使用。
術語「個體(individual及subject)」在本文中可互換使用。其係指可患有或易患疾病或病症，但可患有或可不患有疾病或病症之人類或另一哺乳動物(例如小鼠、大鼠、兔、狗、貓、牛、豬、綿羊、馬或靈長類動物)。在多個實施例中，個體為人類。除非另有說明，否則術語「個體(individual及subject)」不指示特定年齡，且因此涵蓋成人、老人、兒童及新生兒。在一些實施例中，術語「個體」包括年齡為至少50歲、至少55歲、至少60歲、至少65歲、至少70歲或更大之人類。在一些實施例中，術語「個體」包括年齡為至少65歲，諸如65歲至80歲、65歲至75歲或65歲至70歲之人類。在本揭示案之實施例中，「個體(individual或subject)」為「患者」。
術語「患者」意指供治療之個體(individual或subject)、特定而言患病之個體(individual或subject)。
在本揭示案之一個實施例中，目的係提供針對冠狀病毒之免疫反應，以及預防或治療冠狀病毒感染。
可將包含編碼包含抗原決定基之肽或蛋白質的RNA之醫藥組合物投與給個體，以在個體中引發針對包含該抗原決定基之抗原的免疫反應，該免疫反應可為治療性的或為部分或完全保護性的。熟習此項技術者將知曉，免疫療法及疫苗接種之原理之一係基於以下事實：亦即藉由用抗原或抗原決定基對個體進行免疫可產生對疾病之免疫保護反應，該抗原或抗原決定基與欲治療疾病在免疫學上相關。因此，本文所闡述之醫藥組合物適用於誘導或增強免疫反應。本文所闡述之醫藥組合物由此可用於預防性及/或治療性治療涉及抗原或抗原決定基之疾病。
如本文所用，「免疫反應」係指對抗原或表現抗原之細胞之綜合身體反應，且係指細胞免疫反應及/或體液免疫反應。免疫系統分為更原始之先天性免疫系統以及脊椎動物之獲得性或適應性免疫系統，其各自均含有體液及細胞組分。
「細胞介導之免疫」、「細胞免疫」、「細胞免疫反應」或類似術語意欲包括針對細胞之細胞反應，該細胞反應之特徵在於抗原之表現，特定而言特徵在於具有I類或II類MHC之抗原之呈遞。細胞反應與免疫效應細胞有關，尤其與稱為T細胞或T淋巴球之細胞有關，其充當「輔助者」或「殺傷者」。輔助T細胞(亦稱為CD4 +T細胞)藉由調控免疫反應而發揮核心作用，且殺手細胞(亦稱為細胞毒性T細胞、細胞溶解性T細胞、CD8 +T細胞或CTL)殺死患病細胞，諸如病毒感染之細胞，從而防止更多患病細胞之產生。
免疫效應細胞包括對疫苗抗原有反應之任何細胞。此反應性包括一或多種免疫效應功能之活化、分化、增殖、存活及/或指示。該等細胞尤其包括具有溶解潛力之細胞，尤其淋巴樣細胞，且較佳為T細胞，尤其細胞毒性淋巴球，較佳選自細胞毒性T細胞、天然殺手(NK)細胞及淋巴介質活化之殺手(LAK)細胞。在活化時，該等細胞毒性淋巴球中之每一者觸發靶細胞之破壞。舉例而言，細胞毒性T細胞藉由以下任何一種或兩種方式來觸發靶細胞之破壞。首先，在活化時，T細胞釋放細胞毒素，諸如穿孔素、顆粒酶及粒溶素。穿孔蛋白及粒溶素在靶細胞中產生孔隙，且顆粒酶進入細胞並觸發細胞質中之半胱天冬酶級聯，其誘導細胞凋亡(程式化細胞死亡)。其次，細胞凋亡可經由T細胞與靶細胞之間的Fas-Fas配位體相互作用來誘導。
在本揭示案之上下文中，術語「效應功能」包括由免疫系統之組分介導之任何功能，該等功能導致例如病原體(諸如病毒)之中和作用及/或患病細胞(諸如病毒感染細胞)之殺死。在一個實施例中，在本揭示案之上下文中，效應功能係T細胞介導之效應功能。在輔助T細胞(CD4 +T細胞)之情形下，此等功能包括細胞介素之釋放及/或CD8 +淋巴球(CTL)及/或B細胞之活化，且在CTL之情形下，包括細胞、亦即以表現抗原為特徵之細胞之消除，例如經由細胞凋亡或穿孔蛋白介導之細胞溶解，細胞介素諸如IFN-γ及TNF-α之產生，以及表現抗原之靶細胞之特異性細胞溶解性殺死。
在本揭示案之上下文中，術語「免疫效應細胞」或「免疫反應細胞」係指在免疫反應期間發揮效應功能之細胞。在一個實施例中，「免疫效應細胞」能夠結合抗原，諸如在細胞上之MHC背景下呈遞之抗原或在細胞表面上表現且介導免疫反應之抗原。舉例而言，免疫效應細胞包含T細胞(細胞毒性T細胞、輔助T細胞、腫瘤浸潤性T細胞)、B細胞、天然殺手細胞、嗜中性球、巨噬細胞及樹突細胞。較佳地，在本揭示案之上下文中，「免疫效應細胞」係T細胞，較佳為CD4 +及/或CD8 +T細胞，最佳為CD8 +T細胞。根據本揭示案，術語「免疫效應細胞」亦包括可在適宜刺激下成熟為免疫細胞(諸如T細胞，特定而言T輔助細胞或細胞溶解性T細胞)之細胞。免疫效應細胞包含CD34 +造血幹細胞、未成熟及成熟T細胞以及未成熟及成熟B細胞。當暴露於抗原時，T細胞前體向細胞溶解性T細胞之分化類似於免疫系統之選殖選擇。
「淋巴樣細胞」係能夠產生免疫反應、諸如細胞免疫反應之細胞，或此類細胞之前體細胞，且包括淋巴球，較佳T淋巴球、淋巴母細胞及漿細胞。淋巴樣細胞可為如本文所闡述之免疫效應細胞。較佳之淋巴樣細胞為T細胞。
術語「T細胞」及「T淋巴球」在本文中可互換使用，且包括T輔助細胞(CD4+ T細胞)及細胞毒性T細胞(CTL、CD8+ T細胞)，該等細胞毒性T細胞包含細胞溶解性T細胞。術語「抗原特異性T細胞」或類似術語係指如下T細胞，其識別T細胞所靶向之抗原且較佳發揮T細胞之效應功能。
T細胞屬一組稱為淋巴球之白血球，且在細胞介導之免疫中發揮核心作用。其與其他淋巴球類型(諸如B細胞及天然殺手細胞)之區別在於在其細胞表面上存在特別受體，稱為T細胞受體(TCR)。胸腺係負責T細胞成熟之主要器官。已發現若干不同的T細胞子集，每一子集均具有獨特之功能。
T輔助細胞在免疫過程中協助其他白血球，包括B細胞成熟為漿細胞以及細胞毒性T細胞及巨噬細胞之活化，以及其他功能。該等細胞亦稱為CD4+ T細胞，此乃因其在表面上表現CD4糖蛋白。輔助T細胞在其藉由MHC II類分子呈遞肽抗原時活化，該等MHC II類分子在抗原呈遞細胞(APC)之表面上表現。一旦活化，該等T細胞即迅速分裂且分泌稱為細胞介素之小蛋白質，該等細胞介素調控或協助主動免疫反應。
細胞毒性T細胞破壞病毒感染之細胞及腫瘤細胞，且亦與移植排斥有關。該等細胞亦稱為CD8+ T細胞，此乃因其在表面上表現CD8糖蛋白。該等細胞藉由結合至與MHC I類相關之抗原來識別其靶標，MHC I類幾乎存在於身體之每個細胞之表面上。
大多數T細胞具有以若干蛋白質之複合物形式存在的T細胞受體(TCR)。T細胞之TCR能夠與結合至主要組織相容性複合物(MHC)分子且在靶細胞表面上呈遞之免疫原性肽(抗原決定基)相互作用。TCR之特異性結合觸發T細胞內之信號級聯，導致增殖及分化為成熟之效應T細胞。實際T細胞受體由兩條單獨之肽鏈構成，其由獨立之T細胞受體α及β (TCRα及TCRβ)基因產生，且稱為α-TCR鏈及β-TCR鏈。γδ T細胞(伽馬德爾塔T細胞)代表T細胞之小子集，其在表面上具有獨特之T細胞受體(TCR)。然而，在γδ T細胞中，TCR由一條γ鏈及一條δ鏈構成。該組T細胞較αβ T細胞少得多(佔總T細胞之2%)。
「體液免疫」或「體液免疫反應」係由細胞外液中發現的大分子(諸如分泌之抗體、補體蛋白及某些抗微生物肽)介導之免疫態樣。其與細胞介導之免疫形成對比。其涉及抗體之態樣通常稱為抗體介導之免疫。
體液免疫係指抗體產生及伴隨其之附屬過程，包括：Th2活化及細胞介素產生、生發中心形成及同型轉換、親和力成熟及記憶細胞產生。其亦指抗體之效應功能，包括病原體中和、經典補體活化以及吞噬作用及病原體消除之調理素促進。
在體液免疫反應中，首先B細胞在骨髓中成熟且獲得大量展示在細胞表面上之B細胞受體(BCR)。該等膜結合之蛋白質複合物具有抗原偵測特異性抗體。每個B細胞具有與抗原結合之獨特抗體。成熟B細胞自骨髓遷移至淋巴結或其他淋巴器官，其在該處開始遇到病原體。當B細胞遇到抗原時，抗原結合至受體且藉由內吞作用進入B細胞內部。抗原再次藉由MHC-II蛋白加工且呈遞至B細胞表面上。B細胞等待輔助T細胞(TH)以結合至複合物。此結合將活化TH細胞，TH細胞接著釋放誘導B細胞迅速分裂之細胞介素，從而產生數千個相同之B細胞純系。該等子細胞變為漿細胞或記憶細胞。記憶B細胞在此保持不活動；隨後，當該等記憶B細胞由於再感染而遇到相同的抗原時，其分裂並形成漿細胞。另一方面，漿細胞產生大量自由釋放至循環系統中之抗體。該等抗體將遇到抗原並與其結合。此將干擾宿主與外源細胞之間的化學相互作用，或該等抗體可在抗原位點之間形成橋聯，從而阻礙抗原位點之正常功能，或其存在將吸引巨噬細胞或殺手細胞對其進行攻擊及吞噬。
術語「抗體」包括包含藉由二硫鍵相互連結之至少兩條重(H)鏈及兩條輕(L)鏈之免疫球蛋白。每條重鏈包含重鏈可變區(在本文中縮寫為VH)及重鏈恆定區。每條輕鏈包含輕鏈可變區(在本文中縮寫為VL)及輕鏈恆定區。VH區及VL區可進一步細分成超變區(稱為互補決定區(CDR))及更保守之區(稱為框架區(FR))，二者間雜排列。每個VH及VL由三個CDR及四個FR構成，自胺基末端至羧基末端按以下順序排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。。重鏈及輕鏈之可變區含有與抗原相互作用之結合結構域。抗體之恆定區可介導免疫球蛋白與宿主組織或因子之結合，包括免疫系統之各種細胞(例如效應細胞)及經典補體系統之第一組分(Clq)。抗體結合、較佳特異性結合抗原。
B細胞表現之抗體有時稱為BCR (B細胞受體)或抗原受體。此蛋白質類別中所包括之五個成員為IgA、IgG、IgM、IgD及IgE。IgA係存在於身體分泌物(諸如唾液、淚液、母乳、胃腸道分泌物以及呼吸道及泌尿生殖道之黏液分泌物)中之一級抗體。IgG係最常見的循環抗體。IgM係大多數個體之初次免疫反應中產生之主要免疫球蛋白。其係凝集、補體固定及其他抗體反應中最有效之免疫球蛋白，且在防禦細菌及病毒方面具有重要作用。IgD係不具有已知之抗體功能，但可作為抗原受體之免疫球蛋白。IgE係藉由在暴露於過敏原時引發來自肥大細胞及嗜鹼性球之介質釋放而介導即發性超敏反應之免疫球蛋白。
如本文所用，「抗體重鏈」係指以天然構形存在於抗體分子中之兩種類型之多肽鏈中之較大者。
如本文所用，「抗體輕鏈」係指以天然構形存在於抗體分子中之兩種類型之多肽鏈中之較小者，κ及λ輕鏈係指兩種主要抗體輕鏈同型。
本揭示案考慮可具有保護性、防止性、預防性及/或治療性之免疫反應。如本文所用，「誘導[induces或inducing]免疫反應」可指示在誘導前不存在針對特定抗原之免疫反應，或者其可指示在誘導前存在針對特定抗原之基礎水準之免疫反應，此種免疫反應在誘導後得到增強。因此，「誘導[induces或inducing]免疫反應」包括「增強[enhances或enhancing]免疫反應」。
術語「免疫療法」係指藉由誘導或增強免疫反應來治療疾病或疾患。術語「免疫療法」包括抗原免疫接種或抗原疫苗接種。
術語「免疫接種」或「疫苗接種」描述出於誘導免疫反應之目的、例如出於治療性或預防性原因而將抗原投與給個體之過程。
術語「巨噬細胞」係指由單核球之分化產生的吞噬細胞之子組。由發炎、免疫細胞介素或微生物產物活化之巨噬細胞藉由水解及氧化攻擊非特異性地吞噬及殺死巨噬細胞內之外源病原體，從而導致病原體之降解。來自降解蛋白質之肽展示在巨噬細胞表面上，其可在該處由T細胞識別，且其可直接與B細胞表面上之抗體發生相互作用，從而導致T及B細胞活化以及免疫反應之進一步刺激。巨噬細胞屬於抗原呈遞細胞類別。在一個實施例中，巨噬細胞為脾臟巨噬細胞。
術語「樹突細胞」(DC)係指屬於抗原呈遞細胞類別之吞噬細胞之另一種亞型。在一個實施例中，樹突細胞來源於造血骨髓祖細胞。該等祖細胞最初轉化成不成熟之樹突細胞。該等不成熟細胞之特徵在於高吞噬活性及低T細胞活化潛力。不成熟之樹突細胞不斷對周圍環境進行採樣，以尋找諸如病毒及細菌等病原體。一旦其接觸到可呈遞之抗原，其即活化為成熟之樹突細胞，且開始遷移至脾臟或淋巴結。不成熟之樹突細胞吞噬病原體並將其蛋白質降解為小塊，且在成熟時使用MHC分子將彼等片段呈遞在細胞表面。同時，其使在T細胞活化中作為共受體之細胞表面受體(諸如CD80、CD86及CD40)上調，此極大地增強其活化T細胞之能力。其亦使CCR7上調，CCR7係誘導樹突細胞經由血流進入脾臟或經由淋巴系統進入淋巴結之趨化受體。在本文中，其作為抗原呈遞細胞，且藉由呈遞其之抗原以及非抗原特異性共刺激信號來活化輔助T細胞及殺傷T細胞以及B細胞。因此，樹突細胞可主動誘導T細胞或B細胞相關之免疫反應。在一個實施例中，樹突細胞為脾臟樹突細胞。
術語「抗原呈遞細胞」(APC)係能夠在細胞表面上(或細胞表面處)展示、獲取及/或呈遞至少一種抗原或抗原片段之多種細胞中之一種。抗原呈遞細胞可分為專職抗原呈遞細胞及非專職抗原呈遞細胞。
術語「專職抗原呈遞細胞」係指組成型表現與初始T細胞相互作用所需之主要組織相容性複合體II類(MHC II類)分子之抗原呈遞細胞。若T細胞與抗原呈遞細胞膜上之MHC II類分子複合物相互作用，則抗原呈遞細胞產生共刺激分子，從而誘導T細胞之活化。專職抗原呈遞細胞包含樹突細胞及巨噬細胞。
術語「非專職抗原呈遞細胞」係指不組成型表現MHC II類分子，但在某些細胞介素(諸如干擾素-γ)刺激下組成型表現MHC II類分子之抗原呈遞細胞。例示性非專職抗原呈遞細胞包括纖維母細胞、胸腺上皮細胞、甲狀腺上皮細胞、神經膠質細胞、胰臟β細胞或血管內皮細胞。
「抗原加工」係指抗原降解為加工產物(該等加工產物係該抗原之片段)(例如蛋白質降解為肽)以及該等片段中之一或多者與MHC分子之締合(例如經由結合)，以便於細胞(諸如抗原呈遞細胞)呈遞給特異性T細胞。
術語「涉及抗原之疾病」係指涉及抗原之任何疾病，例如以抗原之存在為特徵之疾病。涉及抗原之疾病可為傳染性疾病。如上文所提及，抗原可為疾病相關抗原，諸如病毒抗原。在一個實施例中，涉及抗原之疾病為涉及表現抗原(較佳在細胞表面上)之細胞之疾病。
術語「傳染性疾病」係指可在個體之間或生物體之間傳播的任何疾病，且係由微生物劑引起的(例如普通感冒)。傳染性疾病為此項技術中所已知，且包括例如病毒性疾病、細菌性疾病或寄生蟲性疾病，該等疾病分別由病毒、細菌及寄生蟲引起。就此而言，傳染性疾病可為例如肝炎、性傳播疾病(例如披衣菌或淋病)、結核病、HIV/獲得性免疫缺失症候群(AIDS)、白喉、B型肝炎、C型肝炎、霍亂、嚴重急性呼吸症候群(SARS)、禽流感及流行性感冒。 某些例示性實施例
實施例1. 一種包含最近摻合之組合之器皿，該組合包含： (a) SARS-CoV-2疫苗；及 (b) 流行性感冒疫苗；其中該SARS-CoV-2疫苗包含一或多種編碼SARS-CoV-2刺突(S)蛋白之免疫原性部分之RNA，且該等RNA調配於奈米顆粒(例如脂質奈米顆粒(LNP))中；且 其中該流行性感冒疫苗：(i)為奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA疫苗，或(ii)包含一或多種流行性感冒病毒毒株之一或多種抗原性多肽(例如HA蛋白)。
實施例2. 一種包含最近摻合之組合之器皿，該組合包含： (a) SARS-CoV-2疫苗；及 (b) RSV疫苗； 其中該SARS-CoV-2疫苗包含一或多種編碼SARS-CoV-2刺突(S)蛋白之免疫原性部分之RNA，且該等RNA調配於奈米顆粒(例如脂質奈米顆粒(LNP))中；且 其中該RSV疫苗包含與一或多種RSV毒株相關之一或多種抗原性多肽(例如F蛋白或其免疫原性片段)。
實施例3. 一種包含最近摻合之組合之器皿，該組合包含： (a) SARS-CoV-2疫苗； (b) RSV疫苗； (c) 流行性感冒疫苗； 其中該SARS-CoV-2疫苗包含一或多種編碼SARS-CoV-2刺突(S)蛋白之免疫原性部分之RNA，且該等RNA調配於奈米顆粒(例如脂質奈米顆粒(LNP))中；且 其中該RSV疫苗包含與一或多種RSV毒株相關之一或多種抗原性多肽(例如F蛋白或其免疫原性片段)；且 其中該流行性感冒疫苗：(i)為奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA疫苗，或(ii)包含一或多種流行性感冒病毒毒株之一或多種抗原性多肽(例如HA蛋白)。
實施例4. 如實施例1至3中任一項之器皿，其中該SARS-CoV-2疫苗為單價或二價疫苗。
實施例5. 如實施例1、3或4中任一項之器皿，其中該流行性感冒疫苗為四價疫苗。
實施例6. 如實施例1、3、4或5中任一項之器皿，其中該流行性感冒疫苗為不活化之流行性感冒病毒、重組流行性感冒疫苗、活減毒流行性感冒疫苗、無佐劑流行性感冒疫苗、含佐劑流行性感冒疫苗或亞單位或裂解疫苗。
實施例7. 如實施例2至6中任一項之器皿，其中該RSV疫苗包含一或多種RSV毒株之融合前穩定之F蛋白(或其免疫原性片段)。
實施例8. 如實施例1至7中任一項之器皿，其中該器皿為注射器或小瓶。
實施例9. 一種對人類個體同時進行針對SARS-CoV-2及流行性感冒中之每一者之疫苗接種之方法，該方法包括： 向同一部位同時投與SARS-CoV-2疫苗組合物及流行性感冒疫苗組合物； 其中該SARS-CoV-2疫苗包含一或多種編碼SARS-CoV-2刺突(S)蛋白之免疫原性部分之RNA，且該等RNA調配於奈米顆粒(例如脂質奈米顆粒(LNP))中；且 其中該流行性感冒疫苗：(i)為奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA疫苗，或(ii)包含一或多種流行性感冒病毒毒株之一或多種抗原性多肽(例如HA蛋白)。
實施例10. 一種對人類個體同時進行針對SARS-CoV-2及RSV中之每一者之疫苗接種之方法，該方法包括： 向同一部位同時投與SARS-CoV-2疫苗組合物及RSV疫苗組合物； 其中該SARS-CoV-2疫苗包含一或多種編碼SARS-CoV-2刺突(S)蛋白之免疫原性部分之RNA，且該等RNA調配於奈米顆粒(例如脂質奈米顆粒(LNP))中；且 其中該RSV疫苗包含與一或多種RSV毒株相關之一或多種抗原性多肽(例如F蛋白或其免疫原性片段)。
實施例11. 一種對人類個體同時進行針對SARS-CoV-2、流行性感冒及RSV中之每一者之疫苗接種之方法，該方法包括： 向同一部位同時投與SARS-CoV-2疫苗組合物、流行性感冒疫苗組合物及RSV疫苗組合物； 其中該SARS-CoV-2疫苗包含一或多種編碼SARS-CoV-2刺突(S)蛋白之免疫原性部分之RNA，且該等RNA調配於奈米顆粒(例如脂質奈米顆粒(LNP))中； 其中該流行性感冒疫苗：(i)為奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA疫苗，或(ii)包含一或多種流行性感冒病毒毒株之一或多種抗原性多肽(例如HA蛋白)；且 其中該RSV疫苗包含與一或多種RSV毒株相關之一或多種抗原性多肽(例如F蛋白或其免疫原性片段)。
實施例12. 如實施例9之方法，其中投與步驟包含經由針或埠注射組合物；且 其中所注射之組合物包括該SARS-CoV-2疫苗組合物及該流行性感冒疫苗組合物兩者；且 其中該SARS-CoV-2疫苗組合物及該流行性感冒疫苗組合物視情況使用注射器(例如雙室注射器)投與。
實施例13. 如實施例10之方法，其中投與步驟包含經由針或埠注射組合物；且 其中所注射之組合物包括該SARS-CoV-2疫苗組合物及該RSV疫苗組合物兩者；且 其中該SARS-CoV-2疫苗組合物及該RSV疫苗組合物視情況使用注射器(例如雙室注射器)投與。
實施例14. 如實施例11之方法，其中投與步驟包含經由針或埠注射組合物； 其中所注射之組合物包括該SARS-CoV-2疫苗組合物、該流行性感冒疫苗組合物及該RSV疫苗組合物中之每一者；且 其中該SARS-CoV-2疫苗組合物、該RSV疫苗組合物及該流行性感冒疫苗組合物視情況使用注射器(例如雙室注射器)投與。
實施例15. 如實施例9或12之方法，其在投與步驟之前進一步包括將該SARS-CoV-2疫苗組合物及該流行性感冒疫苗組合物摻合之步驟。
實施例16. 如實施例10或13之方法，其在投與步驟之前進一步包括將該SARS-CoV-2疫苗組合物及該RSV疫苗組合物摻合之步驟。
實施例17. 如實施例11或14之方法，其在投與步驟之前進一步包括將該SARS-CoV-2疫苗組合物、該流行性感冒疫苗組合物及該RSV疫苗組合物摻合之步驟。
實施例18. 如實施例15至17中任一項之方法，其中該摻合步驟係在該投與步驟之一段時間內實施，該一段時間不超過2小時(例如不超過1小時、30分鐘、20分鐘、15分鐘、10分鐘或5分鐘)。
實施例19. 如實施例1至8中任一項之器皿或如實施例9至18中任一項之方法，其中該SARS-CoV-2疫苗組合物包含兩種或更多種RNA，其各自編碼不同SARS-CoV-2毒株或變異體之S蛋白，且其中該兩種或更多種RNA囊封在單獨之LNP群體中。
實施例20. 如實施例1及3至8中任一項之器皿或如實施例9及11至18中任一項之方法或如實施例19之器皿或方法，其中該流行性感冒疫苗包含兩種或更多種RNA (例如四種RNA)，其各自編碼不同流行性感冒毒株之抗原性多肽(例如HA蛋白)，且其中該兩種或更多種RNA囊封在單獨之LNP群體中。
實施例21. 如實施例1至8中任一項之器皿，或如實施例9至18中任一項之方法，或如實施例19或20之器皿或方法，其中該SARS-CoV-2疫苗包含： (a) (i) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列，其中該RNA編碼包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之胺基酸序列之多肽，且/或包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 9至少85%一致之核苷酸序列，及(ii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自奧密克戎BA.4/5 SARS-CoV-2變異體之S多肽之核苷酸序列，其中該RNA包含編碼多肽之核苷酸序列，該多肽包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列，且/或其中該RNA包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 70至少85%一致之核苷酸序列；或 (b) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列，其中該RNA包含編碼多肽之核苷酸序列，該多肽包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之序列，且/或其中該RNA包含與SEQ ID NO: 132至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 130至少85%一致之核苷酸序列。
實施例22. 如實施例1至8中任一項之器皿，或如實施例9至18中任一項之方法，或如實施例19或20之器皿或方法，其中該流行性感冒疫苗包含： (a) (i) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 92至少85%一致之核苷酸序列；(ii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸 序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 99至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 97至少85%一致之核苷酸序列；(iii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 104至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 102至少85%一致之核苷酸序列；及(iv) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 107至少85%一致之核苷酸序列；或 (b) (i) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該核苷酸序列與SEQ ID NO: 92至少85%一致且/或與SEQ ID NO: 94至少85%一致；(ii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該核苷酸序列與SEQ ID NO: 82至少85%一致且/或與SEQ ID NO: 84至少85%一致；(iii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該核苷酸序列與SEQ ID NO: 87至少85%一致且/或與SEQ ID NO: 89至少85%一致；及(iv) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該核苷酸序列與SEQ ID NO: 107至少85%一致且/或與SEQ ID NO: 109至少85%一致。
實施例23. 一種組合物，其包含： (i) 包含第一核苷酸序列之RNA，該第一核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第一核苷酸序列與SEQ ID NO: 9至少85%一致； (ii) 包含第二核苷酸序列之RNA，該第二核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自該SARS-CoV-2毒株之變異體之第二SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第二核苷酸序列與SEQ ID NO: 70至少85%一致； (iii) 包含第三核苷酸序列之RNA，該第三核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第三核苷酸序列與SEQ ID NO: 92至少85%一致； (iv) 包含第四核苷酸序列之RNA，該第四核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第四核苷酸序列與SEQ ID NO: 97至少85%一致； (v) 包含第五核苷酸序列之RNA，該第五核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第五核苷酸序列與SEQ ID NO: 102至少85%一致；及 (vi) 包含第六核苷酸序列之RNA，該第六核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第六核苷酸序列與SEQ ID NO: 107至少85%一致。
實施例24. 一種組合物，其包含： (i) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之核苷酸序列； (ii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自該SARS-CoV-2毒株之變異體之第二SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之核苷酸序列； (iii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之核苷酸序列； (iv) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 99至少85%一致之核苷酸序列； (v) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 104至少85%一致之核苷酸序列；及 (vi) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之核苷酸序列。
實施例25. 一種組合物，其包含： (i) 包含第一核苷酸序列之RNA，該第一核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第一核苷酸序列與SEQ ID NO: 9至少85%一致； (ii) 包含第二核苷酸序列之RNA，該第二核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自該SARS-CoV-2毒株之變異體之第二SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第二核苷酸序列與SEQ ID NO: 70至少85%一致； (iii) 包含第三核苷酸序列之RNA，該第三核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第三核苷酸序列與SEQ ID NO: 92至少85%一致； (iv) 包含第四核苷酸序列之RNA，該第四核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第四核苷酸序列與SEQ ID NO: 82至少85%一致； (v) 包含第五核苷酸序列之RNA，該第五核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第五核苷酸序列與SEQ ID NO: 87至少85%一致；及 (vi) 包含第六核苷酸序列之RNA，該第六核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第六核苷酸序列與SEQ ID NO: 107至少85%一致。
實施例26. 一種組合物，其包含： (i) 包含第一核苷酸序列之RNA，該第一核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第一核苷酸序列與SEQ ID NO: 20至少85%一致； (ii) 包含第二核苷酸序列之RNA，該第二核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第二SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第二核苷酸序列與SEQ ID NO: 72至少85%一致； (iii) 包含第三核苷酸序列之RNA，該第三核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第三核苷酸序列與SEQ ID NO: 94至少85%一致； (iv) 包含第四核苷酸序列之RNA，該第四核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第四核苷酸序列與SEQ ID NO: 84至少85%一致； (v) 包含第五核苷酸序列之RNA，該第五核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第五核苷酸序列與SEQ ID NO: 89至少85%一致；及 (vi) 包含第六核苷酸序列之RNA，該第六核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第六核苷酸序列與SEQ ID NO: 109至少85%一致。
實施例27. 如實施例23至26中任一項之組合物，其中： (a) RNA (i)-(ii)與RNA (iii)-(vi)之質量比為1:5至5:1、1:4至4:1、1:3至3:1、1:2至2:1； (b) RNA (iii)-(iv)與RNA (v)-(vi)之質量比為1:1至1:5；且/或 (c) RNA (i)與RNA (ii)之質量比為1:1。
實施例28. 如實施例23至27中任一項之組合物，其中RNA (iii)、(iv)、(v)及(vi)係以1:1:1:1或1:1:5:5之質量比存在。
實施例29. 如實施例23至28中任一項之組合物，其中RNA (i)-(vi)之合併質量為約30 ug至約100 ug。
實施例30. 如實施例23至29中任一項之組合物，其中： RNA (i)-(ii)之合併質量為約3 μg至約60 μg (例如約3 μg、約10 μg、約30 μg或約60 μg)；且/或 其中RNA (iii)-(vi)之合併質量為約30 μg至約60 μg (例如約30 μg或約60 μg)。
實施例31. 如實施例23至29中任一項之組合物，其中： (a) RNA (i)及(ii)各自係以約15 μg之量存在，且RNA (iii)-(vi)各自係以約7.5 μg之量存在； (b) RNA (i)及(ii)各自係以約30 μg之量存在，且RNA (iii)-(vi)各自係以約7.5 μg之量存在； (c) RNA (i)及(ii)各自係以約15 μg之量存在，且RNA (iii)-(vi)各自係以約11.25 μg之量存在； (d) RNA (i)及(ii)各自係以約15 μg之量存在，RNA (iii)及(iv)各自係以約5 μg之量存在，且RNA (v)及(vi)各自係以約25 μg之量存在； (e) RNA (i)及(ii)各自係以約15 μg之量存在，RNA (iii)及(iv)各自係以約2.5 μg之量存在，且RNA (v)及(vi)各自係以約12.5 μg之量存在； (f) RNA (i)及(ii)各自係以約30 μg之量存在，RNA (iii)及(iv)各自係以約2.5 μg之量存在，且RNA (v)及(vi)各自係以約12.5 μg之量存在；或 (g) RNA (i)-(vi)各自係以約15 μg之量存在。
實施例32. 一種組合物，其包含： (i) 包含第一核苷酸序列之RNA，該第一核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第一核苷酸序列與SEQ ID NO: 129至少85%一致； (ii) 包含第二核苷酸序列之RNA，該第二核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第二核苷酸序列與SEQ ID NO: 92至少85%一致； (iii) 包含第三核苷酸序列之RNA，該第三核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第三核苷酸序列與SEQ ID NO: 99至少85%一致； (iv) 包含第四核苷酸序列之RNA，該第四核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第四核苷酸序列與SEQ ID NO: 102至少85%一致；及 (v) 包含第五核苷酸序列之RNA，該第五核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第五核苷酸序列與SEQ ID NO: 107至少85%一致。
實施例33. 一種組合物，其包含： (i)RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 132至少85%一致之核苷酸序列； (ii)RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之核苷酸序列； (iii)RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 99至少85%一致之核苷酸序列； (iv)RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 104至少85%一致之核苷酸序列；及 (v)RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之核苷酸序列。
實施例34. 一種組合物，其包含： (i) 包含第一核苷酸序列之RNA，該第一核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第一核苷酸序列與SEQ ID NO: 130至少85%一致； (ii) 包含第二核苷酸序列之RNA，該第二核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第二核苷酸序列與SEQ ID NO: 92至少85%一致； (iii) 包含第三核苷酸序列之RNA，該第三核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第三核苷酸序列與SEQ ID NO: 82至少85%一致； (iv) 包含第四核苷酸序列之RNA，該第四核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第四核苷酸序列與SEQ ID NO: 87至少85%一致；及 (v) 包含第五核苷酸序列之RNA，該第五核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第五核苷酸序列與SEQ ID NO: 107至少85%一致。
實施例35. 一種組合物，其包含： (i) 包含第一核苷酸序列之RNA，該第一核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第一核苷酸序列與SEQ ID NO: 132至少85%一致； (ii) 包含第二核苷酸序列之RNA，該第二核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第二核苷酸序列與SEQ ID NO: 94至少85%一致； (iii) 包含第三核苷酸序列之RNA，該第三核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第三核苷酸序列與SEQ ID NO: 84至少85%一致； (iv) 包含第四核苷酸序列之RNA，該第四核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第四核苷酸序列與SEQ ID NO: 89至少85%一致；及 (v) 包含第五核苷酸序列之RNA，該第五核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第五核苷酸序列與SEQ ID NO: 109至少85%一致。
實施例36. 如實施例32至35中任一項之組合物，其中： RNA (i)及RNA (ii)-(v)係以1:5至5:1、1:4至4:1、1:3至3:1或1:2至2:1之質量比存在； RNA (ii)及(iii)以及RNA (iv)及(v)係以1:1至1:5之質量比存在； 其中RNA (ii)、(iii)、(iv)及(v)係以1:1:1:1或1:1:5:5之質量比存在。
實施例37. 如實施例24至36中任一項之組合物，其中RNA (i)-(v)之合併質量為30 ug至100 ug。
實施例38. 如實施例32至37中任一項之組合物，其中RNA (i)之質量為約3 μg至約60 μg (例如約3 μg、約10 μg、約30 μg或約60 μg)，且/或其中RNA (ii)-(v)之合併質量為約30 μg至約60 μg (例如約30 μg或約60 μg)。
實施例39. 如實施例32至38中任一項之組合物，其中： (a) RNA (i)係以約30 μg之量存在，且RNA (ii)-(v)各自係以約7.5 μg之量存在； (b) RNA (i)係以約60 μg之量存在，且RNA (ii)-(v)各自係以約7.5 μg之量存在； (c) RNA (i)係以約30 μg之量存在，且RNA (ii)-(v)各自係以約11.25 μg之量存在； (d) RNA (i)係以約30 μg之量存在，RNA (ii)及(iii)各自係以約5 μg之量存在，且RNA (iv)及(v)各自係以約25 μg之量存在； (e) RNA (i)係以約30 μg之量存在，RNA (ii)及(iii)各自係以約2.5 μg之量存在，且RNA (iv)及(v)各自係以約12.5 μg之量存在； (f) RNA (i)係以約30 μg之量存在，RNA (ii)及(iii)各自係以約2.5 μg之量存在，且RNA (iv)及(v)各自係以約12.5 μg之量存在；或 (g) RNA (i)係以約30 μg之量存在，且RNA (ii)-(v)各自係以約15 μg之量存在。
實施例40. 如實施例23至39中任一項之組合物，其中該流行性感冒A H1N1毒株為流行性感冒A/Wisconsin/588/2019，且其中該流行性感冒B Yamagata毒株為流行性感冒B/PHUKET/3073/2013。
實施例41. 如實施例23、24、27至31、33、34及37至40中任一項之組合物，其中該流行性感冒A H3N2毒株為流行性感冒A/Cambodia/e0826360/2020，且其中該流行性感冒B Victoria毒株為流行性感冒B/Washington/02/2019。
實施例42. 如實施例25至31及34至39中任一項之組合物，其中該流行性感冒A H3N2毒株為流行性感冒A/Darwin/6/2021
實施例43. 如實施例25至31及34至40中任一項之組合物，其中該流行性感冒A H3N2毒株為流行性感冒A/Darwin/6/2021，且/或其中該流行性感冒B Victoria毒株為流行性感冒B/Austria/1359417/2021。
實施例44. 如實施例23至31中任一項之組合物，其中該第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽來自武漢毒株，且其中該第二SARS-CoV-2 S多肽來自奧密克戎BA.4/5變異體。
實施例45. 如實施例32至43中任一項之組合物，其中該SARS-CoV-2刺突(S)多肽來自XBB.1.5變異體。
實施例46. 如實施例23至45中任一項之組合物，其中該組合物中之每一RNA包含相同的非編碼元件，該等非編碼元件包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列。
實施例47. 一種組合物，其包含： (i) 包含一或多種RNA之冠狀病毒RNA疫苗，每種RNA包含編碼SARS-CoV-2抗原之核苷酸序列；及 (ii) 包含一或多種RNA之流行性感冒RNA疫苗，每種RNA包含一或多種編碼流行性感冒抗原之核苷酸序列，其中該流行性感冒RNA疫苗編碼至少四種流行性感冒抗原，且其中每種流行性感冒抗原來自預測在特定半球之流感季期間傳播之不同的流行性感冒病毒毒株； 其中該組合物中之每一RNA包含相同的非編碼元件，該等非編碼元件包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列。
實施例48. 如實施例47之組合物，其中該冠狀病毒RNA疫苗中之該一或多種RNA中之每一者及該流行性感冒RNA疫苗中之該一或多種RNA中之每一者包括一或多個經修飾之尿苷。
實施例49. 如實施例47或48之組合物，其中該至少四種流行性感冒抗原各自為或包含來自預測在特定半球之流感季期間傳播之不同的流行性感冒病毒毒株之血球凝集素抗原。
實施例50. 如實施例49之組合物，其中基於來自北半球或南半球之人類血清學資料，預測該不同的流行性感冒病毒在流感季期間傳播。
實施例51. 如實施例47至50中任一項之組合物，其中該至少四種流行性感冒抗原各自由單獨之RNA編碼。
實施例52. 如實施例47至51中任一項之組合物，其中該冠狀病毒RNA疫苗編碼至少兩種SARS-CoV-2抗原，其各自來自不同的SARS-CoV-2毒株或變異體。
實施例53. 如實施例52之組合物，其中該至少兩種SARS-CoV-2抗原為或包含來自SARS-CoV-2毒株之SARS-CoV-2刺突(S)多肽及來自該SARS-CoV-2毒株之變異體之SARS-CoV-2 S多肽。
實施例54. 如實施例52或53之組合物，其中該至少兩種SARS-CoV-2抗原各自由單獨之RNA編碼。
實施例55. 如實施例47至54中任一項之組合物，其中該冠狀病毒疫苗中之該等RNA及該流行性感冒疫苗中之該等RNA係以1:5至5:1、1:4至4:1、1:3至3:1或1:2至2:1之質量比存在。
實施例56. 如實施例47至55中任一項之組合物，其中該至少四種流行性感冒抗原包含至少兩種來自流行性感冒A病毒之血球凝集素抗原及至少兩種來自流行性感冒B病毒之血球凝集素抗原。
實施例57. 如實施例56之組合物，其中編碼來自流行性感冒A病毒之血球凝集素抗原之該等RNA及編碼來自流行性感冒B病毒之血球凝集素抗原之該等RNA係以1:1至1:5 (例如1:1或1:5)之質量比存在。
實施例58. 如實施例54至57中任一項之組合物，其中該冠狀病毒疫苗中之該至少兩種RNA之質量比為1:1。
實施例59. 如實施例51至58中任一項之組合物，其中該流行性感冒疫苗中之該至少四種RNA係以1:1:1:1之質量比存在。
實施例60. 如實施例47至59中任一項之組合物，其中該組合物中之RNA總量為約30 ug至約100 ug (例如約30 ug、約45 ug、約60 ug、約75 ug或約90 ug)。
實施例61. 一種組合物，其包含： 一或多種第一RNA，其各自包含編碼與第一傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列； 一或多種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，其中該第二傳染原與該第一傳染原不同； 其中該組合物中之該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者包含相同的非編碼元件，該等非編碼元件包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列，且 其中該等相同的非編碼元件中之至少一者為或包含： (i) 5’-UTR序列，其為或包含經修飾之人類α-球蛋白5’-UTR； (ii) 3’-UTR序列，其為或包含來自分裂之胺基末端增強子(AES)信使RNA之第一序列及來自粒線體編碼之12S核糖體RNA之第二序列； (iii) 包含至少100個A核苷酸之聚A序列，其中該第一RNA及該第二RNA各自在該3’ UTR與該聚A序列之間不包含至少30個鄰接C核苷酸之區段； (iv) 包含A核苷酸之中斷序列之聚A序列，視情況其中該中斷序列包含30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)，之後為70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)，其中該30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)與該70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)由連接體序列隔開；或 (v) 包含帽1結構之5’帽以及包含RNA之+1、+2、+3、+4及+5位之帽近端序列；其中： (a) 該帽1結構包含m7(3’OMeG)(5')ppp(5')(2'OMeA 1)pG 2，其中A 1為RNA之+1位，且G 2為RNA之+2位；且 (b) 該帽近端序列包含該帽1結構之A 1及G 2，以及包含分別位於RNA之+3、+4及+5位之A 3N 4N 5之序列，其中N 4及N 5各自獨立地選自A、G、C及U。
實施例62. 一種組合物，其包含： 一或多種第一RNA，其各自包含編碼與第一傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列； 一或多種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，該第二傳染原與該第一傳染原不同； 其中該組合物中之該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者包含相同的非編碼元件，該等非編碼元件包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列，且 其中該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者之特徵在於： (i) 由該組合物中之RNA誘導之免疫反應水準為由該相同RNA在單獨投與時誘導之免疫反應水準的至少80%；及/或 (ii) 由該組合物中之RNA誘導之免疫反應水準為由該相同RNA在個體身體之不同位置與其他RNA分開投與時誘導之免疫反應水準的至少80%；及/或 (iii) 由該組合物中之RNA誘導之免疫反應水準為由各別參考組合物誘導之免疫反應水準的至少80%。
實施例63. 如實施例62之組合物，其中該各別參考組合物為不活化之病毒疫苗。
實施例64. 如實施例62或63之組合物，其中由該一或多種第一RNA及該一或多種第二RNA誘導之免疫反應各自為當該一或多種第一RNA及該一或多種第二RNA分開投與時由相同RNA誘導之免疫反應水準的至少100%。
實施例65. 如實施例62至64中任一項之組合物，其中由該一或多種第一RNA及該一或多種第二RNA誘導之免疫反應各自大於由分開投與之相同RNA誘導之免疫反應。
實施例66. 如實施例62至64中任一項之組合物，其中該一或多種第一RNA及該一或多種第二RNA各自以低於分開投與之相同RNA之劑量的劑量存在，其中由較低劑量之該一或多種第一RNA及該一或多種第二RNA誘導之免疫反應各自實質上相當於或大於由較大劑量之分開投與的相同RNA誘導之免疫反應。
實施例67. 一種組合物，其包含： 一或多種第一RNA，其各自包含編碼與第一傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列； 一或多種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，該第二傳染原與該第一傳染原不同； 其中該組合物中之該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者包含相同的非編碼元件，該等非編碼元件包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列， 其中該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者分開或一起囊封於奈米顆粒中(例如該等第一RNA中之每一者囊封於第一奈米顆粒群體中且該等第二RNA中之每一者囊封於第二奈米顆粒群體中；或該等第一RNA中之每一者及該等第二RNA中之每一者囊封於相同的奈米顆粒群體中)；且 其中該組合物之特徵在於： (i) 儲存24小時後，該組合物之RNA含量為初始RNA含量之至少95%； (ii) 儲存24小時後，RNA囊封保持為初始RNA囊封之至少95%； (iii) 儲存24小時後，囊封該等第一RNA及該等第二RNA之奈米顆粒維持實質上相同之大小； (iv) 囊封該等第一RNA及該等第二RNA之奈米顆粒在24小時後維持不超過0.3之多分散性；及/或 (v) 儲存24小時後，該第一RNA與該第二RNA之質量比保持實質上相同。
實施例68. 如實施例67之組合物，其中該等奈米顆粒包含脂質奈米顆粒、多聚複合物(PLX)、脂質化多聚複合物(LPLX)、脂質體或多糖奈米顆粒。
實施例69. 如實施例68之組合物，其中該等奈米顆粒包含脂質奈米顆粒。
實施例70. 如實施例69之組合物，其中該等脂質奈米顆粒包含：陽離子可電離脂質、一或多種中性脂質及聚合物結合之脂質。
實施例71. 如實施例70之組合物，其中該聚合物結合之脂質包含PEG結合脂質。
實施例72. 如實施例67至71中任一項之組合物，其中該等奈米顆粒之平均直徑為約50-150 nm。
實施例73. 如實施例67至72中任一項之組合物，其中對於(i)-(v)中之每一者，儲存之最初12小時係在30℃下且儲存之剩餘12小時係在2℃-8℃下。
實施例74. 如實施例67至73中任一項之組合物，其中該一或多種第一RNA包含至少兩種第一RNA，其各自包含編碼與該第一傳染原之不同毒株或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
實施例75. 如實施例67至74中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含至少兩種第二RNA，其各自包含編碼與該第二傳染原之不同毒株或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
實施例76. 如實施例67至75中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含至少三種第二RNA，其各自包含編碼與該第二傳染原之不同毒株或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
實施例77. 如實施例67至76中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含至少四種第二RNA，其各自包含編碼與該第二傳染原之不同變異體或毒株相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
實施例78. 一種組合物，其包含： 複數種第一RNA，其各自包含編碼與第一傳染原或其不同毒株及/或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列； 一或多種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，該第二傳染原與該第一傳染原不同； 且其中該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者分開或一起調配於相同的奈米顆粒調配物中； 其中(i)該等第一RNA及該等第二RNA係以1:2至2:1之質量比存在，且/或(ii)該等第一RNA及該等第二RNA係以每劑約10 ug至約100 ug之總量存在；及 一或多種第一RNA，其各自包含編碼與第一傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列； 一或多種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，其中該第二傳染原與該第一傳染原不同； 其中該組合物中之該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者包含相同的非編碼元件，該等非編碼元件包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列，且 其中該等相同的非編碼元件中之至少一者為或包含： (i) 5’-UTR序列，其為或包含經修飾之人類α-球蛋白5’-UTR； (ii) 3’-UTR序列，其為或包含來自分裂之胺基末端增強子(AES)信使RNA之第一序列及來自粒線體編碼之12S核糖體RNA之第二序列； (iii) 包含至少100個A核苷酸之聚A序列，其中該第一RNA及該第二RNA各自在該3’ UTR與該聚A序列之間不包含至少30個鄰接C核苷酸之區段； (iv) 包含A核苷酸之中斷序列之聚A序列，視情況其中該中斷序列包含30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)，之後為70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)，其中該30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)與該70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)由連接體序列隔開；或 (v) 包含帽1結構之5’帽以及包含RNA之+1、+2、+3、+4及+5位之帽近端序列；其中： (a) 該帽1結構包含m7(3’OMeG)(5')ppp(5')(2'OMeA 1)pG 2，其中A 1為RNA之+1位，且G 2為RNA之+2位；且 (b) 該帽近端序列包含該帽1結構之A 1及G 2，以及包含分別位於RNA之+3、+4及+5位之A 3N 4N 5之序列，其中N 4及N 5各自獨立地選自A、G、C及U。
實施例79. 如實施例61至78中任一項之組合物，其中該等第一RNA中之每一者共調配於相同的奈米顆粒調配物中，或其中該等第一RNA中之每一者調配於單獨的奈米顆粒調配物中。
實施例80. 如實施例61至79中任一項之組合物，其中該等第二RNA中之每一者共調配於相同的奈米顆粒調配物中，或其中該等第二RNA中之每一者調配於單獨的奈米顆粒調配物中。
實施例81. 如實施例61至80中任一項之組合物，其中該等第一RNA及該等第二RNA調配於單獨的奈米顆粒群體中。
實施例82. 如實施例61至81中任一項之組合物，其中該等第一RNA及該等第二RNA全部共調配於相同的奈米顆粒調配物中。
實施例83. 如實施例61至82中任一項之組合物，其中該第一傳染原為或包含冠狀病毒。
實施例84. 如實施例83之組合物，其中該一或多種第一RNA包含(i)包含編碼與第一冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列的RNA，及(ii)包含編碼與第二冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列的RNA。
實施例85. 如實施例61至84中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含複數種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原或其不同毒株及/或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
實施例86. 如實施例61至85中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含至少兩種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原或其不同毒株及/或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
實施例87. 如實施例61至86中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含至少三種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原或其不同毒株及/或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
實施例88. 如實施例61至87中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含至少四種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原或其不同毒株及/或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
實施例89. 如實施例61至88中任一項之組合物，其中該第二傳染原為或包含細菌性傳染原。
實施例90. 如實施例89之組合物，其中該細菌性傳染原為肺炎鏈球菌。
實施例91. 如實施例61至88中任一項之組合物，其中該第二傳染原為或包含病毒性傳染原。
實施例92. 如實施例91之組合物，其中該第二傳染原為誘發傳染性呼吸疾病之病毒性傳染原。
實施例93. 如實施例92之組合物，其中該病毒性傳染原為或包含流行性感冒病毒、肺病毒科病毒或副黏液病毒科病毒。
實施例94. 如實施例93之組合物，其中該肺病毒科病毒為呼吸道融合病毒(RSV)。
實施例95. 如實施例93之組合物，其中該傳染性呼吸疾病為或包含流行性感冒A型、B型及/或C型病毒。
實施例96. 如實施例95之組合物，其中該傳染性呼吸疾病為或包含流行性感冒A型及/或B型病毒。
實施例97. 如實施例96之組合物，其中該一或多種第二RNA包含(i)至少一種RNA，其包含編碼與流行性感冒A型病毒相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，及(ii)至少一種RNA，其包含編碼與流行性感冒B型病毒相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
實施例98. 如實施例96或97之組合物，其中該一或多種第二RNA包含(i)至少兩種RNA，其各自包含編碼與流行性感冒A型病毒之不同毒株相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，及(ii)至少兩種RNA，其各自包含編碼與流行性感冒B型病毒之不同毒株相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
實施例99. 如實施例95至98中任一項之組合物，其中與每一流行性感冒病毒相關的該(等)抗原性多肽各自獨立地為血球凝集素(HA)多肽、神經胺酸酶(NA)多肽或其組合，或其免疫原性片段。
實施例100. 如實施例96至99中任一項之組合物，其中例如基於人類血清學資料，該等流行性感冒A型病毒及該等流行性感冒B型病毒之毒株各自已預測為或為即將到來的流感季之傳播毒株。
實施例101. 如實施例96至100中任一項之組合物，其中該流行性感冒A病毒之毒株係選自H1N1、H1N2、H2N2、H3N1、H3N2、H3N8、H5N1、H5N2、H5N3、H5N8、H5N9、H7N1、H7N2、H7N3、H7N4、H7N7、H7N9、H9N2、H10N7及H10N8病毒。
實施例102. 如實施例101之組合物，其中該流行性感冒A型病毒之毒株係選自H1N1、H3N2、H5N1及H5N8病毒。
實施例103. 如實施例98至102中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含含有編碼與H1N1病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列的RNA。
實施例104. 如實施例103之組合物，其中該H1N1病毒為A/Wisconsin/588/2019。
實施例105. 如實施例104之組合物，其中與A/Wisconsin/588/2019相關之該抗原性多肽為HA多肽，且包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之胺基酸序列。
實施例106. 如實施例104或105之組合物，其中與A/Wisconsin/588/2019相關之該抗原性多肽為HA多肽，且編碼該HA多肽之RNA包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之核苷酸序列。
實施例107. 如實施例98至106中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含含有編碼與H3N2病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列的RNA。
實施例108. 如實施例107之組合物，其中該H3N2病毒為A/Cambodia/e0826360/2020。
實施例109. 如實施例108之組合物，其中與A/Cambodia/e0826360/2020相關之該抗原性多肽為HA多肽，且包含與SEQ ID NO: 95至少85%一致之胺基酸序列。
實施例110. 如實施例108或109之組合物，其中與A/Cambodia/e0826360/2020相關之該抗原性多肽為HA多肽，且編碼該HA多肽之RNA包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之核苷酸序列。
實施例111. 如實施例107之組合物，其中該H3N2病毒為A/Darwin/6/2021。
實施例112. 如實施例111之組合物，其中與A/Darwin/6/2021相關之該抗原性多肽為HA多肽，且包含與SEQ ID NO: 80至少85%一致之胺基酸序列。
實施例113. 如實施例111或112之組合物，其中與A/Darwin/6/2021相關之該抗原性多肽為HA多肽，且編碼該HA多肽之RNA包含與SEQ ID NO: 82至少85%一致之核苷酸序列。
實施例114. 如實施例98至113中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含含有編碼與B/Yamagata或B/Victoria譜系病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列的RNA。
實施例115. 如實施例114之組合物，其中該B/Victoria譜系流行性感冒病毒為B/Washington/02/2019。
實施例116. 如實施例115之組合物，其中與B/Washington/02/2019相關之該抗原性多肽為HA多肽，且包含與SEQ ID NO: 100至少85%一致之序列。
實施例117. 如實施例115或116之組合物，其中與B/Washington/02/2019相關之該抗原性多肽為HA多肽，且編碼該HA多肽之RNA包含與SEQ ID NO: 102至少85%一致之核苷酸序列。
實施例118. 如實施例114之組合物，其中該B/Victoria譜系流行性感冒病毒為B/Austria/1359417/2021。
實施例119. 如實施例118之組合物，其中與B/Austria/1359417/2021相關之該抗原性多肽為HA多肽，且包含與SEQ ID NO: 85至少85%一致之序列。
實施例120. 如實施例118或119之組合物，其中與B/Austria/1359417/2021相關之該抗原性多肽為HA多肽，且編碼該HA多肽之RNA包含與SEQ ID NO: 87至少85%一致之核苷酸序列。
實施例121. 如實施例114之組合物，其中該B/Yamagata譜系流行性感冒病毒為B/Phuket/3073/2013。
實施例122. 如實施例121之組合物，其中與B/Phuket/3073/2013相關之該抗原性多肽為HA多肽，且包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之胺基酸序列。
實施例123. 如實施例121或122之組合物，其中與B/Phuket/3073/2013相關之該抗原性多肽為HA多肽，且編碼該HA多肽之RNA包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之核苷酸序列。
實施例124. 如實施例61至123中任一項之組合物，其中該第一傳染原為冠狀病毒。
實施例125. 如實施例124之組合物，其中該冠狀病毒為阿爾法冠狀病毒、貝塔冠狀病毒、伽馬冠狀病毒或德爾塔冠狀病毒。
實施例126. 如實施例125之組合物，其中該冠狀病毒為貝塔冠狀病毒。
實施例127. 如實施例126之組合物，其中該貝塔冠狀病毒為沙貝病毒、瑪貝病毒、埃貝病毒、諾貝病毒或希貝病毒。
實施例128. 如實施例127之組合物，其中該沙貝病毒為SARS-CoV-1或SARS-CoV-2。
實施例129. 如實施例128之組合物，其中該沙貝病毒為SARS-CoV-2。
實施例130. 如實施例127之組合物，其中該瑪貝病毒為MERS-CoV。
實施例131. 如實施例129之組合物，其中該一或多種第一RNA包含如下RNA，該RNA包含編碼與SARS-CoV-2變異體相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，在投與時該SARS-CoV-2變異體在相關群體中流行或已鑑別為所關注變異體。
實施例132. 如129之組合物，其中該一或多種第一RNA包含如下RNA，該RNA包含編碼與奧密克戎SARS-CoV-2變異體(例如BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5變異體)相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
實施例133. 如實施例129之組合物，其中該一或多種第一RNA包含(i)包含編碼與第一SARS-CoV-2毒株相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列的RNA，其中該第一SARS-CoV-2毒株為SARS-CoV-2原始毒株(武漢毒株)，及(ii)包含編碼與第二SARS-CoV-2變異體相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列的RNA，其中該第二SARS-CoV-2為該SARS-CoV-2原始毒株之變異體，且在投與時在相關群體中流行或已鑑別為所關注變異體。
實施例134. 如實施例129之組合物，其中該一或多種第一RNA包含(i)包含編碼與第一SARS-CoV-2變異體相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列的RNA，及(ii)包含編碼與第二SARS-CoV-2變異體相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列的RNA，其中該第一SARS-CoV-2變異體及該第二SARS-CoV-2變異體各自在投與時在相關群體中流行或已鑑別為所關注變異體。
實施例135. 如實施例133或134之組合物，其中該第二SARS-CoV-2變異體為SARS-CoV-2之奧密克戎變異體。
實施例136. 如實施例135之組合物，其中該SARS-CoV-2之奧密克戎變異體為或包含奧密克戎BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5變異體。
實施例137. 如實施例124至136中任一項之組合物，其中與冠狀病毒相關之該(等)抗原性多肽為刺突(S)多肽或其免疫原性片段或變異體。
實施例138. 如實施例137之組合物，其中該S多肽為融合前穩定之S多肽。
實施例139. 如實施例138之組合物，其中該融合前穩定之S多肽包含至少兩個脯胺酸取代。
實施例140. 如實施例139之組合物，其中該兩個脯胺酸取代包含在對應於SEQ ID NO: 1之殘基986及987之位置處的脯胺酸殘基。
實施例141. 如實施例138至140中任一項之組合物，其中該融合前穩定之S多肽包含至少六個脯胺酸取代。
實施例142. 如實施例141之組合物，其中該至少六個脯胺酸取代中之四者包含在對應於SEQ ID NO: 1之殘基817、892、899及942之位置處的脯胺酸殘基。
實施例143. 如132之組合物，其中編碼與奧密克戎SARS-CoV-2變異體相關之一或多種抗原性多肽之該RNA編碼與XBB.1.5毒株相關且包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之胺基酸序列的S蛋白。
實施例144. 如實施例133至142中任一項之組合物，其中編碼與SARS-CoV-2原始毒株相關之一或多種抗原性多肽之該RNA編碼與武漢毒株相關且包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之胺基酸序列的S蛋白。
實施例145. 如實施例144之組合物，其中編碼SEQ ID NO: 7之該RNA包含與SEQ ID NO: 9至少85%一致之核苷酸序列。
實施例146. 如實施例133至145中任一項之組合物，其中編碼與第二SARS-CoV-2變異體相關之一或多種抗原性多肽之該RNA編碼與BA.4/5變異體相關之S蛋白，且包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之胺基酸序列。
實施例147. 如實施例146之組合物，其中編碼SEQ ID NO: 69之該RNA包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之核苷酸序列。
實施例148. 如實施例61至147中任一項之組合物，其中： 該一或多種第一RNA包含： (a) 包含編碼來自SARS-CoV-2奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5變異體)之SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列的RNA；或 (b) 包含編碼來自SARS-CoV-2原始毒株(武漢毒株)之SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列的RNA，及包含編碼來自SARS-CoV-2奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5變異體)之SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列的RNA；且 其中該一或多種第二RNA包含：(i)包含編碼來自流行性感冒A/H1N1病毒之HA多肽之核苷酸序列的RNA，(ii)包含編碼來自流行性感冒A/H3N2病毒之HA多肽之核苷酸序列的RNA，(iii)包含編碼來自流行性感冒B/Victoria譜系病毒之HA多肽之核苷酸序列的RNA，及(iv)包含編碼來自流行性感冒B/Yamagata病毒之HA多肽之核苷酸序列的RNA。
實施例149. 如實施例148之組合物，其中該H1N1病毒為A/Wisconsin/588/2019。
實施例150. 如實施例149之組合物，其中與A/Wisconsin/588/2019相關之該HA多肽包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之序列。
實施例151. 如實施例149或150之組合物，其中包含編碼與A/Wisconsin/588/2019相關之HA多肽之核苷酸序列的該RNA包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之序列。
實施例152. 如實施例148至151中任一項之組合物，其中該H3N2病毒為A/Cambodia/e0826360/2020。
實施例153. 如實施例152之組合物，其中與A/Cambodia/e0826360/2020相關之該HA多肽包含與SEQ ID NO: 95至少85%一致之序列。
實施例154. 如實施例152或153之組合物，其中包含編碼與A/Cambodia/e0826360/2020相關之HA多肽之序列的該第一RNA包含與SEQ ID NO: 97至少85%一致之序列。
實施例155. 如實施例148至154中任一項之組合物，其中該B/Victoria譜系流行性感冒病毒為B/Washington/02/2019。
實施例156. 如實施例155之組合物，其中與B/Washington/02/2019相關之該HA多肽包含與SEQ ID NO: 100至少85%一致之序列。
實施例157. 如實施例155或156之組合物，其中包含編碼與B/Washington/02/2019相關之HA多肽之核苷酸序列的該RNA包含與SEQ ID NO: 102至少85%一致之序列。
實施例158. 如實施例148至157中任一項之組合物，其中該B/Yamagata譜系流行性感冒病毒為B/Phuket/3073/2013。
實施例159. 如實施例158之組合物，其中與B/Phuket/3073/2013相關之該HA多肽包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之序列。
實施例160. 如實施例158或159之組合物，其中包含編碼與B/Phuket/3073/2013相關之HA多肽之序列的該RNA包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之核苷酸序列。
實施例161. 如實施例148至160中任一項之組合物，其中與武漢毒株相關之該S多肽包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之序列。
實施例162. 如實施例148至161中任一項之組合物，其中包含編碼與武漢毒株相關之S多肽之核苷酸序列的該RNA包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之序列。
實施例163. 如實施例148至162中任一項之組合物，其中該奧密克戎變異體為BA.4/5變異體。
實施例164. 如實施例163之組合物，其中與該BA.4/5奧密克戎變異體相關之該S多肽包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列。
實施例165. 如實施例163或164之組合物，其中包含編碼與BA.4/5奧密克戎變異體相關之S多肽之序列的該RNA包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之序列。
實施例166. 如實施例148至160中任一項之組合物，其中該奧密克戎變異體為XBB.1.5變異體。
實施例167. 如實施例166之組合物，其中與該XBB.1.5奧密克戎變異體相關之該S多肽包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之序列。
實施例168. 如實施例166或167之組合物，其中包含編碼與XBB.1.5奧密克戎變異體相關之S多肽之序列的該RNA包含與SEQ ID NO: 130至少85%一致之序列。
實施例169. 如實施例47至60及62至77中任一項之組合物，其中該等非編碼元件中之至少一者為或包含： (i) 5’-UTR序列，其為或包含經修飾之人類α-球蛋白5’-UTR； (ii) 3’-UTR序列，其為或包含來自分裂之胺基末端增強子(AES)信使RNA之第一序列及來自粒線體編碼之12S核糖體RNA之第二序列； (iii) 包含至少100個A核苷酸之聚A序列，其中該第一RNA及該第二RNA各自在該3’ UTR與該聚A序列之間不包含至少30個鄰接C核苷酸之區段； (iv) 包含A核苷酸之中斷序列之聚A序列，視情況其中該中斷序列包含30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)，之後為70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)，其中該30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)與該70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)由連接體序列隔開；或 (v) 包含帽1結構之5’帽以及包含RNA之+1、+2、+3、+4及+5位之帽近端序列；其中： (a) 該帽1結構包含m7(3’OMeG)(5')ppp(5')(2'OMeA 1)pG 2，其中A 1為RNA之+1位，且G 2為RNA之+2位；且 (b) 該帽近端序列包含該帽1結構之A 1及G 2，以及包含分別位於RNA之+3、+4及+5位之A 3N 4N 5之序列，其中N 4及N 5各自獨立地選自A、G、C及U。
實施例170. 如實施例47至169中任一項之組合物，其中該等相同的非編碼元件中之至少一者為或包含： (i) 5’-UTR序列，其為或包含經修飾之人類α-球蛋白5’-UTR； (ii) 3’-UTR序列，其為或包含來自分裂之胺基末端增強子(AES)信使RNA之第一序列及來自粒線體編碼之12S核糖體RNA之第二序列； (iii) 包含至少100個A核苷酸之聚A序列，其中該第一RNA及該第二RNA各自在該3’ UTR與該聚A序列之間不包含至少30個鄰接C核苷酸之區段； (iv) 包含A核苷酸之中斷序列之聚A序列，視情況其中該中斷序列包含30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)，之後為70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)，其中該30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)與該70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)由連接體序列隔開；及 (v) 包含帽1結構之5’帽以及包含RNA之+1、+2、+3、+4及+5位之帽近端序列；其中： (a) 該帽1結構包含m7(3’OMeG)(5')ppp(5')(2'OMeA 1)pG 2，其中A 1為RNA之+1位，且G 2為RNA之+2位；且 (b) 該帽近端序列包含該帽1結構之A 1及G 2，以及包含分別位於RNA之+3、+4及+5位之A 3N 4N 5之序列，其中N 4及N 5各自獨立地選自A、G、C及U。
實施例171. 如實施例1至46中任一項之組合物，其中每一RNA包含： (i) 5’帽，其中該5’帽視情況包含帽1結構； (ii) 帽近端序列； (iii) 5’ UTR序列，其中該5’ UTR為視情況經修飾之人類α-球蛋白5’-UTR； (iv) 3’ UTR序列，其中該3’ UTR序列視情況包含來自分裂之胺基末端增強子(AES)信使RNA之第一序列及來自粒線體編碼之12S核糖體RNA之第二序列；及/或 (v) 聚A序列，其中該聚A序列視情況包含30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)，之後為70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)，其中該30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)與該70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)由連接體序列隔開。
實施例172. 如實施例47至171中任一項之組合物，其中該5’帽、該帽近端序列、該5’ UTR序列、該3’ UTR序列及該聚A序列係呈5’至3’順序。
實施例173. 如實施例1至172中任一項之組合物，其中每一RNA包含為或包含m 2 7,3’-OGppp(m 1 2’-O)ApG之5’-帽。
實施例174. 如實施例47至169及171至173中任一項之組合物，其中該5' UTR包含人類α-球蛋白5’-UTR或由其組成。
實施例175. 如實施例174之組合物，其中該人類α-球蛋白5’-UTR包含SEQ ID NO: 12。
實施例176. 如實施例47至169及171至175中任一項之組合物，其中該3’ UTR包含來自分裂之胺基末端增強子(AES)信使RNA之第一序列及來自粒線體編碼之12S核糖體RNA之第二序列，或由其組成。
實施例177. 如實施例176之組合物，其中該3’ UTR包含根據SEQ ID NO: 13之序列或由其組成。
實施例178. 如實施例47至177中任一項之組合物，其中該聚A尾序列為中斷之聚A尾序列。
實施例179. 如實施例178之組合物，其中該中斷之聚A尾序列包含30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)，之後為70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)，其中該30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)與該70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)由連接體序列隔開。
實施例180. 如實施例179之組合物，其中該中斷之聚A尾序列包含根據SEQ ID NO: 14之核糖核酸序列或由其組成。
實施例181. 如實施例47至180中任一項之組合物，其中位於該3’UTR 3’端之序列(例如緊鄰該聚A尾序列之序列)為CUXGAGCUAGC (SEQ ID NO: 176)，其中X為G、C、A或U。
實施例182. 如實施例47至181中任一項之組合物，其中位於該3’UTR 3’端之序列(例如緊鄰該聚A尾之序列)為GAGACCUGGUCCAGAGUCGCUAGCCGCGUCGCU (SEQ ID NO: 177)。
實施例183. 如實施例47至182中任一項之組合物，其中位於該3’UTR 3’端之序列(例如緊鄰編碼抗原性多肽之序列之序列)為CUCGAG或GGAUCCGAU。
實施例184. 如實施例1至183中任一項之組合物，其中該組合物中之每一RNA包括經修飾之尿苷代替所有尿苷。
實施例185. 如實施例184之組合物，其中該等經修飾之尿苷各自為N1-甲基-假尿苷。
實施例186. 如實施例47至185中任一項之組合物，其中該等第一RNA與該等第二RNA係以1:5至5:1、1:4至4:1、1:3至3:1或1:2至2:1之質量比存在。
實施例187. 如實施例1至186中任一項之組合物，其中將該組合物中之每一RNA調配於奈米顆粒中。
實施例188. 如實施例47至187中任一項之組合物，其中將所有該等第一RNA一起共調配於相同的奈米顆粒群體中，且將所有該等第二RNA一起共調配於相同的奈米顆粒群體中，且其中該等第一RNA及該等第二RNA調配於單獨的奈米顆粒群體中。
實施例189. 如實施例47至188中任一項之組合物，其中將該等第一RNA及該等第二RNA全部一起共調配於相同的奈米顆粒群體中。
實施例190. 如實施例1至60及96至190中任一項之組合物，其中： (a) 將編碼流行性感冒A病毒之抗原性多肽之每種RNA共調配於第一奈米顆粒群體中，且將編碼流行性感冒B病毒之抗原性多肽之每種RNA共調配於第二奈米顆粒群體中； (b) 將編碼流行性感冒病毒之抗原性多肽之每種RNA調配於單獨的奈米顆粒群體中；或 (c) 將編碼流行性感冒A病毒之抗原性多肽之每種RNA共調配於第一奈米顆粒群體中，且將編碼流行性感冒B病毒之抗原性多肽之每種RNA調配於單獨的奈米顆粒中。
實施例191. 如實施例187至190中任一項之組合物，其中該等奈米顆粒包含脂質奈米顆粒、多聚複合物(PLX)、脂質化多聚複合物(LPLX)、脂質體或多糖奈米顆粒。
實施例192. 如實施例191之組合物，其中該等奈米顆粒包含脂質奈米顆粒。
實施例193. 如實施例192之組合物，其中該等脂質奈米顆粒各自包含：陽離子可電離脂質；及一或多種中性脂質，及聚合物結合之脂質。
實施例194. 如實施例193之組合物，其中該聚合物結合之脂質包含PEG結合脂質。
實施例195. 如實施例188至194中任一項之組合物，其中該等奈米顆粒之平均直徑為約50-150 nm。
實施例196. 如實施例1至195中任一項之組合物，其進一步包含： (a) 一或多種第三RNA，其各自包含編碼與第三傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，該第三傳染原不同於該第一傳染原及該第二傳染原；或 (b) 第三傳染原之一或多種多肽。
實施例197. 如實施例196之組合物，其中該第三傳染原為呼吸病毒(例如不為SARS-CoV-2病毒或流行性感冒病毒之呼吸病毒)。
實施例198. 如實施例197之組合物，其中該第三傳染原為呼吸道融合病毒(RSV)。
實施例199. 如實施例198之組合物，其中： (i) 該組合物包含一或多種RNA，其各自編碼RSV多肽；或 (ii) 該組合物包含一或多種RSV多肽。
實施例200. 如實施例199之組合物，其中： (i) 該組合物包含一或多種RNA，其各自編碼RSV F蛋白、其變異體或者RSV F蛋白或其變異體之免疫原性片段；或 (ii) 該組合物包含一或多種RSV F蛋白、其免疫原性變異體或者RSV F蛋白或其變異體之免疫原性片段。
實施例201. 如實施例199或200之組合物，其中： (i) 該組合物包含一或多種RNA，其各自編碼RSV亞型A病毒之多肽(例如RSV亞型A病毒之F蛋白、其變異體或者RSV亞型B病毒之F蛋白或其變異體之免疫原性片段)，及一或多種RNA，其各自編碼RSV亞型B病毒之多肽(例如RSV亞型B病毒之F蛋白、其變異體或者RSV亞型B病毒之F蛋白或其變異體之免疫原性片段)；或 (ii) 該組合物包含RSV亞型A病毒之一或多種多肽(例如F蛋白、其變異體或者F蛋白或其變異體之免疫原性片段)及RSV亞型B病毒之一或多種多肽(例如F蛋白、其變異體或者F蛋白或其變異體之免疫原性片段)。
實施例202. 如實施例200或201之組合物，其中該RSV F蛋白、該變異體或該免疫原性片段以融合前構形穩定。
實施例203. 如196至202中任一項之組合物，其包含Arexvy TM或Abrysvo TM。
實施例204. 一種醫藥組合物，其包含如實施例1至203中任一項之組合物以及至少一種醫藥學上可接受之賦形劑。
實施例205. 如實施例204之醫藥組合物，其包含低溫保護劑，視情況其中該低溫保護劑為或包含蔗糖。
實施例206. 如實施例204或205之醫藥組合物，其中該醫藥組合物包含緩衝水溶液，視情況其中該緩衝水溶液包含Tris鹼、Tris HCl、NaCl、KCl、Na 2HPO 4及KH 2PO 4中之一或多者。
實施例207. 如實施例204至206中任一項之醫藥組合物，其經調配以提供100 μg或更少劑量之總RNA。
實施例208. 如實施例207之醫藥組合物，其經調配以提供90 μg劑量之總RNA。
實施例209. 如實施例207之醫藥組合物，其經調配以提供60 μg劑量之總RNA。
實施例210. 如實施例208之醫藥組合物，其經調配以提供30 μg劑量之一或多種第一RNA及60 μg劑量之一或多種第二RNA。
實施例211. 如實施例208之醫藥組合物，其經調配以提供60 μg劑量之一或多種第一RNA及30 μg劑量之一或多種第二RNA。
實施例212. 如實施例209之醫藥組合物，其經調配以提供30 μg劑量之一或多種第一RNA及30 μg劑量之一或多種第二RNA。
實施例213. 如實施例208或210之醫藥組合物，其包含四種第二RNA，每種第二RNA包含編碼與不同的流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列，且其中該醫藥組合物經調配以提供15 μg劑量之每種第二RNA。
實施例214. 如實施例209或211之醫藥組合物，其包含四種第二RNA，每種第二RNA包含編碼與不同的流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列，且其中該醫藥組合物經調配以提供7.5 μg劑量之每種第二RNA。
實施例215. 如實施例208至210及212至214中任一項之醫藥組合物，其包含兩種第一RNA，每種第一RNA包含編碼與不同的冠狀病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列，且其中該醫藥組合物經調配以提供15 μg劑量之每種第一RNA。
實施例216. 如實施例211之醫藥組合物，其包含兩種第一RNA，每種第一RNA包含編碼與不同的冠狀病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列，且其中該醫藥組合物經調配以提供30 μg劑量之每種第一RNA。
實施例217. 一種方法，其包括向個體投與一或多個劑量之如實施例1至213中任一項之組合物或一或多個劑量之如實施例204至216中任一項之醫藥組合物。
實施例218. 如實施例217之方法，其中該方法為治療冠狀病毒疾病及流行性感冒疾病之方法。
實施例219. 如實施例217之方法，其中該方法為以下方法：(i)預防冠狀病毒疾病及流行性感冒疾病，或(ii)誘導針對冠狀病毒及/或流行性感冒病毒之免疫反應。
實施例220. 如實施例217至219中任一項之方法，其中該一或多個劑量之該組合物中之每一者或該一或多個劑量之該醫藥組合物中之每一者與針對第三傳染原之疫苗共投與。
實施例221. 如實施例220之方法，其中該第三傳染原為可引起呼吸疾病之病毒。
實施例222. 如實施例220之方法，其中該第三傳染原為RSV。
實施例223. 如實施例222之方法，其中針對該第三傳染原之該疫苗為Arexvy TM或Abrysvo TM。
實施例224. 如實施例220至223中任一項之方法，其中： 在即將投與給該個體之前將針對該第三傳染原之該疫苗與該一或多個劑量之該組合物或該一或多個劑量之該醫藥組合物混合；或 將針對該第三傳染原之該疫苗與該一或多個劑量之該組合物或該一或多個劑量之該醫藥組合物分開投與(例如，其中針對該第三傳染原之該疫苗與該一或多個劑量之該組合物或該一或多個劑量之該醫藥組合物在分開的注射部位(例如在對側手臂上)投與給該個體)。
實施例225. 如實施例1至203中任一項之組合物或如實施例204至216中任一項之醫藥組合物，其用於治療冠狀病毒疾病及流行性感冒疾病，其中該用途包括向個體投與一或多個劑量之該組合物或該醫藥組合物。
實施例226. 如實施例1至203中任一項之組合物或如實施例204至216中任一項之醫藥組合物，其用於： (a) 預防冠狀病毒疾病及流行性感冒疾病，或 (b) 誘導針對冠狀病毒及流行性感冒病毒之免疫反應， 其中該用途包括向個體投與一或多個劑量之該組合物或該醫藥組合物。
實施例227. 如實施例217至224中任一項之方法，或如實施例225或226之所用組合物或醫藥組合物，其中該方法或該用途包括向該個體投與兩個或更多個劑量之該組合物或該醫藥組合物。
實施例228. 如實施例227之所用方法或組合物或醫藥組合物，其中該兩個劑量相隔至少約21天投與。
實施例229. 如實施例217至224中任一項之方法，或如實施例227或228之所用組合物或醫藥組合物，其中該方法或該用途包括向該個體投與三個或更多個劑量之該組合物或該醫藥組合物。
實施例230. 如實施例217至224中任一項之方法，或如實施例225或226所用之組合物或醫藥組合物，其中該個體先前已暴露於冠狀病毒及/或流行性感冒病毒(例如藉由疫苗接種及/或藉由感染)。
實施例231. 如實施例217至230中任一項所用之方法或組合物或醫藥組合物，其中該方法或該用途在該個體中誘導針對一或多種冠狀病毒及一或多種流行性感冒病毒之免疫反應。
實施例232. 如實施例231所用之方法或組合物或醫藥組合物，其中該免疫反應包含B細胞反應。
實施例233. 如實施例232所用之方法或組合物或醫藥組合物，其中該B細胞反應包含產生針對該一或多種抗原之抗體。
實施例234. 如實施例232或233所用之方法或組合物或醫藥組合物，其中該免疫反應包含T細胞反應。
實施例235. 如實施例234所用之方法或組合物或醫藥組合物，其中該T細胞反應為或包含CD4+ T細胞反應。
實施例236. 如實施例234或235所用之方法或組合物或醫藥組合物，其中該T細胞反應為或包含CD8+ T細胞反應。
實施例237. 一種如實施例1至203中任一項之組合物或如實施例204至216中任一項之醫藥組合物之用途，其用於治療個體之冠狀病毒疾病及流行性感冒疾病。
實施例238. 一種如實施例1至203中任一項之組合物或如實施例204至217中任一項之醫藥組合物之用途，其用於預防個體之冠狀病毒疾病及流行性感冒疾病。
實施例239. 一種如實施例1至203中任一項之組合物或如實施例204至217中任一項之醫藥組合物之用途，其用於在個體中誘導針對一或多種冠狀病毒及一或多種流行性感冒病毒之免疫反應。
實施例240. 一種用於誘導針對第一傳染原及第二傳染原之免疫反應之方法，其中該方法包括投與 (i) 第一奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA，其包含編碼與第一傳染原相關之抗原性多肽之核苷酸序列；及 (ii) 第二奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA，其包含編碼與第二傳染原相關之抗原性多肽之核苷酸序列， 其中所誘導之針對該第一傳染原及該第二傳染原中之每一者之免疫反應大於分開投與該等奈米顆粒時所誘導之免疫反應。
實施例241. 一種用於減少產生針對第一傳染原之免疫反應所需的第一奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA之量的方法，其中該第一奈米顆粒調配之RNA之RNA包含編碼與第一傳染原相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列， 其中該方法包括共投與第二奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA，該RNA包含編碼與第二傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，且 其中該第一傳染原不同於該第二傳染原。
實施例242. 一種組合物，其包含： 一或多種RNA，其各自編碼第一傳染原之多肽；及 第二傳染原之一或多種多肽。
實施例243. 如實施例242之組合物，其中該第一傳染原為冠狀病毒。
實施例244. 如實施例243之組合物，其中該冠狀病毒為SARS-CoV-2病毒。
實施例245. 如實施例244之組合物，其中該一或多種RNA各自編碼SARS-CoV-2 S蛋白、其變異體或者SARS-CoV-2 S蛋白或其變異體之免疫原性片段。
實施例246. 如實施例245之組合物，其包含一或多種RNA，每種RNA編碼武漢毒株或SARS-CoV-2變異體(例如奧密克戎變異體(例如奧密克戎BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5變異體(例如本文所闡述之RNA)))之SARS-CoV-2 S蛋白、其變異體或者SARS-CoV-2 S蛋白或其變異體之免疫原性片段。
實施例247. 如實施例242至246中任一項之組合物，其中該第二傳染原為流行性感冒病毒。
實施例248. 如實施例247之組合物，其中該組合物包含一或多種流行性感冒病毒之一或多種多肽(例如兩種或更多種流行性感冒病毒毒株之一或多種多肽(例如在相關轄區流行或已預測在相關轄區流行之四種或更多種流行性感冒病毒毒株之一或多種多肽))。
實施例249. 如實施例247或248之組合物，其包含市售流行性感冒病毒(例如本文所闡述之重組市售流行性感冒病毒)。
實施例250. 如實施例249之組合物，其中該市售流行性感冒病毒為Flublok。
實施例251. 如實施例241至246中任一項之組合物，其中該第二傳染原為RSV。
實施例252. 如實施例251之組合物，其包含與第一RSV亞型相關之一或多種多肽及第二RSV亞型之一或多種多肽。
實施例253. 如實施例251或252之組合物，其中該第二傳染原之該多肽為RSV F蛋白、其變異體或者RSV F蛋白或其變異體之免疫原性片段。
實施例254. 如實施例253之組合物，其中該RSV F蛋白、該變異體或者該免疫原性片段包含一或多個使該F蛋白之融合前構形穩定之突變。
實施例255. 如實施例254之組合物，其包含Arexvy TM或ABRYSVO TM。
實施例256. 如實施例241至255中任一項之組合物，其進一步包含第三傳染原之一或多種多肽。
實施例257. 如實施例256之組合物，其包含： 一或多種RNA，每種RNA編碼冠狀病毒之一或多種多肽(例如SARS-CoV-2 S蛋白、其變異體或前述中任一者之免疫原性片段)； 一或多種流行性感冒病毒之一或多種多肽；及 一或多種RSV之一或多種多肽。
實施例258. 如實施例257之組合物，其包含： 編碼奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA (例如編碼本文所闡述之奧密克戎BA.1、BA.4/5或XBB.1.5變異體之S蛋白的RNA)； 重組流行性感冒疫苗(例如，如本文所闡述(例如FluBlok疫苗))；及 RSV疫苗，其包含融合前穩定之F蛋白或其免疫原性片段(例如本文所闡述之RSV疫苗(例如Arexvy TM或ABRYSVO TM))。
實施例259. 一種組合，其包含SARS-CoV-2疫苗，該SARS-CoV-2疫苗包含編碼融合前穩定之SARS-CoV-2刺突蛋白或其變異體之一或多種mRNA；及 (a) 流行性感冒疫苗，其包含(i)編碼流行性感冒病毒之HA蛋白之一或多種mRNA，或(ii)一或多種HA多肽，及/或 (b) RSV疫苗，其包含一或多種融合前穩定之RSV F蛋白或其免疫原性片段。
實施例260. 如實施例259之組合，其中將編碼融合前穩定之SARS-CoV-2刺突蛋白或其變異體之該一或多種mRNA調配為LNP。
實施例261. 如實施例259或260之組合，其中將編碼流行性感冒病毒之HA蛋白之該一或多種mRNA調配為LNP。
實施例262. 如實施例259至261中任一項之組合，其中(1)該SARS-CoV-2疫苗及(2)該流行性感冒疫苗或該RSV疫苗在單獨的容器(例如小瓶或注射器)中提供。
實施例263. 如實施例259至261中任一項之組合，其中(1)該SARS-CoV-2疫苗及(2)該流行性感冒疫苗或該RSV疫苗在單一容器(例如小瓶或注射器)中提供。
實施例264. 如實施例259至263中任一項之組合，其包含該SARS-CoV-2疫苗、該流行性感冒疫苗及該RSV疫苗。
實施例265. 如實施例264之組合，其中該SARS-CoV-2疫苗、該流行性感冒疫苗及該RSV疫苗在單一容器(例如小瓶或注射器)中提供。
實施例266. 如實施例264之組合，其中該SARS-CoV-2疫苗、該流行性感冒疫苗及該RSV疫苗在單獨的容器(例如單獨小瓶及/或注射器)中提供。
實施例267. 如實施例264之組合，其中： (a) 該SARS-CoV-2疫苗及該流行性感冒疫苗在單一容器中提供，且該RSV疫苗在單獨容器中提供；或 (b) 該SARS-CoV-2疫苗及該RSV疫苗在單一容器中提供，且該流行性感冒疫苗在單獨容器中提供。
實施例268. 如實施例259至267中任一項之組合，其中該SARS-CoV-2疫苗為BNT162b2 (例如本文所闡述之單價或二價疫苗)。
實施例269. 如實施例259至268中任一項之組合，其中該流行性感冒疫苗為重組流行性感冒疫苗(例如，如本文所闡述(例如FluBlok疫苗))；或包含不活化之流行性感冒病毒(例如Fluzone)。
實施例270. 如實施例259至269中任一項之組合，其中該RSV疫苗包含融合前穩定之F蛋白或其免疫原性片段(例如本文所闡述之RSV疫苗(例如Arexvy TM或ABRYSVO TM))。
本文所提及文件及研究之引用並不意欲承認任何前述內容係相關之先前技術。關於該等文件內容之所有陳述均係基於申請人可獲得之資訊，且並不構成對該等文件內容之正確性之任何承認。
本文所引用之每一參考文獻之內容出於本文所闡述之目的均係以全文引用的方式併入。
呈現以下說明以使熟習此項技術者能夠作出並使用各個實施例。對具體裝置、技術及應用之說明僅作為實例提供。熟習此項技術者將易於明瞭對本文所闡述實例之各種修改，且在不背離各個實施例之精神及範圍之情形下，本文所定義之一般原則可應用於其他實例及應用。因此，各個實施例不意欲限於本文所闡述及示出之實例，而是符合與申請專利範圍一致之範圍。 實例 實例1：流行性感冒RNA疫苗臨床試驗
本實例闡述目前正在進行的例示性臨床試驗方案，且該方案研究RNA流行性感冒疫苗(特定而言modRNA、四價modRNA疫苗)。所闡述之臨床試驗方案包含第一1/2期隨機化、觀察者盲化(委托者非盲)研究，該研究正在進行且經設計以評估針對流行性感冒之modRNA疫苗在健康個體中之安全性、耐受性及免疫原性。
在該1/2期研究完成後，接著將實施3期。 1/2 期研究
2021年9月，在65歲至85歲之參與者中啟動一項1/2期研究，以闡述針對流行性感冒之modRNA疫苗在健康個體中之安全性、耐受性及免疫原性。本研究分2個子研究進行，亦即子研究A及子研究B。子研究A闡述4個劑量水準之mIRV (單價流行性感冒RNA疫苗) A或B、呈4個劑量水準組合之同時編碼A及B毒株之bIRV (二價流行性感冒RNA疫苗)以及每種毒株7.5 μg劑量水準之編碼2種A毒株及2種B毒株之qIRV (四價流行性感冒RNA疫苗)的安全性及免疫原性。另外，子研究A闡述： • 在先前接受modRNA疫苗後，由許可QIV引發之免疫反應，以評價免疫反應之潛在引發，及 • 在先前接受許可QIV後，由mIRV A或B引發之免疫反應，以評價QIV後之免疫反應是否可增強。
子研究B闡述以下疫苗接種時間表之安全性及免疫原性： 在65歲至85歲之參與者中： • 2個劑量之編碼2種A毒株及2種B毒株之qIRV，劑量水準為每種毒株7.5 μg，相隔21天投與。 • 2個劑量之許可QIV，相隔21天投與(作為對照組)。 • 一個劑量之許可QIV，之後為一個劑量之編碼2種A毒株之bIRV (劑量水準為每種毒株15 μg或30 μg)，相隔21天投與。 • 一個劑量之許可QIV與編碼2種A毒株之bIRV (劑量水準為每種毒株15 μg或30 μg)在對側手臂中同時投與。 • 一個劑量之編碼2種A毒株之bIRV (劑量水準為每種毒株15 μg)與編碼2種B毒株之bIRV (劑量水準為每種毒株15 μg)在對側手臂中同時投與。 • 一個劑量之編碼2種A毒株及2種B毒株之qIRV，按以下劑量水準組合： • 每種毒株15 μg • 每種A毒株7.5 μg，及每種B毒株22.5 μg • 每種A毒株7.5 μg，及每種B毒株37.5 μg • 一個劑量之許可QIV (作為對照組)。 在18歲至64歲之參與者中： •一個劑量之編碼2種A毒株及2種B毒株之qIRV，劑量水準為每種毒株7.5 μg。 •一個劑量之編碼2種A毒株及2種B毒株之qIRV，劑量水準為每種毒株15 μg。
初步結果指示，30 μg及60 μg qIRV之耐受性良好，主要為輕度至中度局部反應及全身性事件，與BNT162b2所觀察到之比率一致且支持啟動3期研究。迄今為止可獲得之免疫原性資料指示： • 對於A/Wisconsin及A/Cambodia，在1或2個劑量之qIRV (總劑量水準為每個劑量30 μg)後4週達成血清轉化之參與者比例高於在1或2個劑量之QIV後達成血清轉化之參與者比例。另外，在QIV與編碼2種A毒株之bIRV (總劑量為30 μg或60 μg (每種毒株15 μg或30 μg))同時或相隔21天投與後4週，亦似乎高於在1或2個劑量之QIV後達成血清轉化之參與者比例。 • 對於B/Phuket及B/Washington，所有群組(包括1個劑量及2個劑量之QIV接受者)在研究干預後4週達成血清轉化之參與者比例低於針對A/Wisconsin及A/Cambodia達成血清轉化之參與者比例。
基於來自1/2期研究之安全性及免疫原性資料，選擇1個劑量之編碼2種A毒株及2種B毒株之qIRV用於3期研究。 3期研究
基於所收集之1/2期安全性及免疫原性資料，設計3期試驗，以為≥65歲之參與者測試60-μg劑量之四價流行性感冒疫苗(包含兩種A型及兩種B型毒株之15-μg RNA)。審查18歲至64歲成人之1/2期資料分析，以確定此年齡組中之3期劑量水準是否可為60 μg或30-μg (包括2種A型及2種B型毒株各自7.5-μg)。下表35彙總3期研究中正在研究之劑量。
表35. 按年齡組之modRNA流行性感冒疫苗劑量水準及方案
年齡組 劑量水準 疫苗方案
≥65歲 60-μg 意欲作為每年加強劑之qIRV單劑量
18至64歲 30-μg或60-μg 意欲作為每年加強劑之qIRV單劑量
3期研究係一項隨機化、觀察者盲化、多中心研究，用以評估四價流行性感冒RNA疫苗(qIRV，其組成係基於先前1/2期評估來選擇)在≥18歲個體中之功效、安全性、耐受性及免疫原性。該研究將大約25,000名參與者以1:1比率隨機化，以接受單劑量之qIRV或經批准之四價流行性感冒疫苗(QIV，以批准劑量投與)。按年齡對招募情況進行分層，以包括大約13,600名≥65歲之參與者及大約11,400名18至64歲之參與者。
≥65歲之參與者之3期研究選擇60-μg劑量。18至64歲成人欲測試之劑量為30 μg或60-μg，取決於此年齡組正在進行的1/2期資料之結果。
3期研究中之計劃臨床評價包括功效(例如基於實驗室確認之流行性感冒疾病發病率，證明qIRV相對於QIV之優良性)、免疫原性(例如基於HAI效價，證明qIRV相對於QIV之非劣性及/或優良性)及安全性評估(例如反應原性及不良事件[AE]報告)。 實例2：非臨床測試策略概況
已獨立地評估本文所闡述之流行性感冒modRNA及COVID-19 modRNA疫苗之主要藥理學，例如，如先前實例中所闡述。該等研究證明來自modRNA構築體之疫苗抗原在培養細胞中之活體外表現、若干動物物種中之活體內免疫原性及在非人類靈長類動物中之SARS-CoV-2攻擊研究，以評價針對感染之保護且證明疾病並未增強。
ADME表徵包括對LNP調配之編碼螢光素酶之modRNA進行非GLP活體內測試，以檢查IM注射後在BALB/c小鼠及Wistar Han大鼠中之生物分佈。使用螢光素酶表現作為替代報導基因或經放射性標記之[3H]-CHE (一種不可交換之不可代謝脂質標誌物)來評價流行性感冒modRNA-二價COVID-19疫苗之潛在生物分佈。
已分別對流行性感冒modRNA-LNP疫苗及COVID-19疫苗之毒性進行充分表徵，包括在Wistar Han大鼠中實施的多項符合GLP之重複劑量毒性研究及符合GLP之發育及生殖毒性(DART)研究。該等研究選擇肌內(IM)投與途徑。用於流行性感冒modRNA-LNP疫苗及COVID-19疫苗二者之非臨床安全性評估之IM投與途徑及物種選擇(大鼠)的原理與WHO指南相符(世界衛生組織附錄1. WHO Guidelines on the non-clinical evaluation of vaccines. WHO技術報告第927號. Geneva, Switzerland; World Health Organization;2005:31-6.)。基於此先前收集之毒性資料，臨床上支持的組合疫苗之劑量最多為至少100 μg總RNA。 藥理學 簡要概述
流行性感冒modRNA及COVID-19 modRNA疫苗之主要藥理學已在各別疫苗程式中獨立地評估。該等研究證明來自modRNA構築體之疫苗抗原在培養細胞中之活體外表現、modRNA-LNP疫苗在不同動物物種中之活體內免疫原性，且包括在非人類靈長類動物中之SARS-CoV-2攻擊研究，以評價針對感染之保護且證明疾病並未增強。該等活體外及活體內研究證明，SARS-CoV-2 modRNA疫苗及流行性感冒modRNA疫苗二者均可誘導特徵在於強功能性抗體反應以及Th1型CD4+及IFNγ + CD8+ T細胞反應之免疫反應。 藥物動力學 簡要概述
對COVID-19疫苗及流行性感冒疫苗二者之modRNA-LNP調配物之ADME型態評價進行表徵。該等研究包括在BALB/c小鼠中使用螢光素酶表現作為替代報導基因評估流行性感冒modRNA-二價COVID-19疫苗之潛在生物分佈。使用螢光素酶報導基因係由於其為容易獲得之報導基因，該報導基因已廣泛用於拓展對蛋白質/器官表現之理解(Chen等人，2020；Elia等人，2020；Fukuchi等人，2020；Hassett等人，2019；Truong等人，2019；Barry等人，2012；Jeon等人，2006)。向小鼠投與表現螢光素酶之modRNA，其調配類似於流行性感冒modRNA-二價COVID-19疫苗，具有相同之脂質組成。在施加螢光素後，在活體內量測螢光素酶表現。注射後6小時在注射部位處鑑別到螢光素酶表現，且在9天後偵測不到。注射後6小時，肝臟中亦存在較小程度之表現，且在注射後48小時偵測不到。亦使用LNP檢查雄性及雌性Wistar Han大鼠中之分佈，該等LNP具有與流行性感冒modRNA-二價COVID-19疫苗相當之脂質組成，但具有替代性螢光素酶RNA且含有痕量經放射性標記之[3H]-CHE，其為一種不可交換之不可代謝脂質標誌物。發現在兩種性別中，LNP之最大平均濃度保留在注射部位。注射部位以外之LNP總回收率(注射劑量之%)在肝臟中最高，且在脾、腎上腺及卵巢中顯著較少。 分佈
在COVID-19及流行性感冒疫苗之活體內研究中，使用螢光素酶作為替代性標誌物蛋白，利用在LNP中調配之編碼螢光素酶之RNA (例如使用本文所揭示之LNP調配物)來評價生物分佈。藉由在BALB/c小鼠之右後腿及左後腿各自IM注射1 μg (總計2 μg )，向其投與LNP調配之編碼螢光素酶之modRNA。在注射螢光素受質後使用活體內生物發光，在不同時間點在注射部位處偵測到螢光素酶蛋白質表現，在肝臟中偵測到之程度較低且更短暫。向肝臟中之分佈可能係由進入血流中之LNP介導。9天後，注射部位處之螢光素酶表現下降至背景水準。使用具有相同modRNA-LNP平臺之BNT162疫苗，大鼠中之重複劑量毒性研究未顯示肝損傷證據。
不希望受特定理論束縛，由流行性感冒modRNA-二價COVID-19疫苗之RNA組分編碼之抗原的生物分佈可部分地取決於LNP分佈。 毒物學
簡言之，流行性感冒modRNA與COVID-19疫苗之重複劑量及DART毒性結果相似。modRNA-LNP平臺之非臨床安全性先前在COVID-19疫苗之開發中已充分表徵。該等先前研究在2項符合GLP之重複劑量毒性研究及一項符合GLP之組合DART研究中評估多達4種疫苗候選物。在該等研究中未觀察到不良發現。
非不良發現通常與對疫苗之免疫/發炎反應一致。該等疫苗候選物之相似毒物學發現支持基於平臺之安全性。實際上，在單獨程式中，使用相同的modRNA-LNP平臺，在若干種流行性感冒疫苗候選物中觀察到相似之非臨床安全性型態。
在重複劑量毒性研究中，在大鼠中每兩週IM投與一次靶向A/Wisconsin/588/2019、A/Cambodia/e0826360/2020、B/Phuket/3073/2013及B/Washington/02/2019毒株之流行性感冒modRNA疫苗，總計2個劑量直至30 μgRNA/劑係耐受的，無全身毒性證據。注意到與BNT162疫苗候選物(BNT162b1、BNT162b2 [V8或V9]或BNT162b3)之非不良發現相似之非不良發現。觀察到對疫苗之預期發炎性反應，諸如注射部位紅斑及水腫、體溫升高、WBC及急性期反應物升高、A/G比降低、引流髂淋巴結及脾增大以及顯微鏡下注射部位及周圍組織之發炎，以及引流(髂)及腹股溝淋巴結、骨髓及脾之細胞增多。投與modRNA疫苗之動物對疫苗中之所有相關流行性感冒毒株展現出血球凝集素抑制反應。
類似地，每週一次向Wistar Han大鼠IM投與4種BNT162疫苗候選物(使用相同的modRNA-LNP平臺)，總計3週劑量，直至100 μg/劑，具有耐受性，無全身毒性證據。觀察到對疫苗之預期發炎性反應，諸如注射部位紅斑及水腫、體溫升高、WBC及急性期反應物升高、阿爾法-2巨球蛋白增加及A:G比降低、引流髂及/或腹股溝淋巴結及脾增大以及顯微鏡下注射部位及周圍組織之發炎，以及引流(髂)及/或腹股溝淋巴結、骨髓及脾之細胞增多。針對所有BNT162抗原引發強勁之SARS-CoV-2 S特異性抗體反應。
在DART研究中，在妊娠前及妊娠期間以30 μg RNA/劑向Wistar Han雌性大鼠IM投與流行性感冒modRNA疫苗具有耐受性，無母體全身毒性跡象。流行性感冒modRNA疫苗對雌性大鼠之生育能力、妊娠或授乳或對F1子代之胚胎-胎兒或產後存活、生長或發育沒有相關效應。在F0雌性及其F1子代(胎兒或幼崽)中，在所有時間點(DS 22、GD 21及LD 21)均觀察到對該4種流行性感冒毒株中之每一者的疫苗誘導之血球凝集素效價。
類似地，以人類臨床劑量(30 μg RNA/投藥日)在交配開始前向雌性大鼠IM投與兩次3種BNT162疫苗候選物且在妊娠期間投與兩次未顯示對F0雌性大鼠之交配性能、生育能力或任何卵巢或子宮參數或對F1子代直至授乳結束時之胚胎-胎兒或產後存活、生長或發育具有效應。在交配前、妊娠結束時及在授乳結束時，在F0雌性大鼠中證實SARS-CoV-2中和抗體反應。在F1子代(胎兒及幼崽)中亦可偵測到中和抗體。
尚未進行流行性感冒modRNA疫苗與二價COVID-19疫苗之組合毒性研究。然而，兩項研究中之發現相似，且包括無全身毒性，具有對疫苗之預期發炎性反應(注射部位紅斑及水腫、體溫升高、WBC及急性期反應物升高及A/G比降低)。另外，組合疫苗中之總RNA不超過先前測試之最大值(100 μg RNA)。來自兩種疫苗之所有研究之所有發現在本質上均視為非不良且暫時性的。由於該兩個程式中之發現相似，故僅預期在組合研究中之發現將較以個別等效劑量單獨投與時之發現更顯著。 靶器官毒性
尚未進行流行性感冒modRNA疫苗與二價COVID-19疫苗之組合毒性研究。然而，兩項研究中之發現相似，且包括無全身毒性，具有對疫苗之預期發炎性反應。
增加之劑量增加兩個程式中之發現數量。此模式之靶器官包括大鼠之注射部位、免疫器官(引流及局部淋巴結、脾及骨髓)及肝臟。所有發現均為非不良的，且在恢復期期間大部分為可逆的。注射部位之發現包括暫時性紅斑及水腫以及顯微鏡下混合細胞發炎伴水腫。免疫器官效應包括引流及局部淋巴結之肉眼可見增大，其在顯微鏡下與生發中心細胞結構增多及漿細胞增多相關；脾重量增加，其與生發中心細胞結構及增加之造血相關；及骨髓造血增加。所有免疫器官效應均為與疫苗投與相關之免疫刺激及/或發炎之結果。肝細胞空泡形成係最小且可逆的，沒有證據顯示肝細胞損傷且可能與LNP攝取相關。與投與單一疫苗相比，反應原性事件可能增加。另外，組合疫苗中之總RNA不超過先前測試之最大值(100 μg RNA)。 代謝
不希望受特定理論束縛，流行性感冒modRNA-二價COVID-19疫苗中由RNA編碼之蛋白質可如同其他內源性蛋白質一般經蛋白水解降解。RNA由細胞RNA酶降解且經受核酸代謝。核苷酸代謝在細胞內持續發生，核苷降解成廢品且經排泄或再循環用於核苷酸合成。 綜合概述及結論
在開發Covid及流感疫苗期間，對流行性感冒modRNA及COVID-19疫苗之免疫原性獨立地進行評估。兩種疫苗候選物先前均在臨床前動物模型中顯示出具有免疫原性。活體外及活體內研究確立modRNA-LNP疫苗候選物之相似作用機制，亦即編碼疫苗抗原(流行性感冒HA或SARS-CoV-2刺突蛋白)，該疫苗抗原誘導特徵在於強功能性抗體反應以及Th1型CD4+及IFNγ+ CD8+ T細胞反應之免疫反應。
使用表現螢光素酶之modRNA評價流行性感冒modRNA及COVID-19疫苗在BALB/c小鼠中之生物分佈，該modRNA之調配類似於實例(亦即具有相同的脂質組成) 21中所表徵之流行性感冒modRNA-二價COVID-19疫苗。在IM注射編碼螢光素酶之LNP調配之RNA後，在投藥後6小時量測之注射部位處展示出螢光素酶之表現，且在9天後偵測不到。在肝臟中偵測到較小程度之螢光素酶，在注射後6小時在此處存在表現且在注射後48小時時偵測不到。在Wistar Han大鼠中，在IM投與不可代謝之經放射性標記之LNP-mRNA (具有與流行性感冒modRNA-二價COVID-19疫苗相當之脂質組成)後，亦評價生物分佈。類似地，在此項研究中，注射部位處之投與劑量百分比亦最大。在注射部位以外，肝臟中之放射性總回收率最大且脾中之放射性總回收率顯著更低，腎上腺及卵巢中之回收率極低。
已分別對流行性感冒modRNA-LNP疫苗及COVID-19疫苗之非臨床安全性進行充分表徵，包括在Wistar Han大鼠中實施的多項符合GLP之重複劑量毒性研究及符合GLP之發育及生殖毒性(DART)研究。儘管尚未進行modRNA疫苗與二價COVID-19疫苗之組合毒性研究，但兩項程式及研究中之發現相似，且包括無全身毒性，具有對疫苗之預期發炎性反應。靶器官包括大鼠之注射部位、免疫器官(引流及局部淋巴結、脾及骨髓)及肝臟。所有發現均為非不良的且大部分為可逆的。注射部位之發現包括暫時性紅斑及水腫，以及顯微鏡下混合細胞發炎伴水腫。免疫器官效應包括引流及局部淋巴結之肉眼可見增大，其在顯微鏡下與生發中心細胞結構增多及漿細胞增多相關；脾重量增加，其與生發中心細胞結構及增加之造血相關；及骨髓造血增加。所有免疫器官效應均為與疫苗投與相關之免疫刺激及/或發炎之結果。
肝細胞空泡形成係最小且可逆的，沒有證據顯示肝細胞損傷且可能與LNP攝取相關。與投與單一疫苗相比，反應原性事件可能增加。 實例2中所引用之參考文獻
Barry MA, May S, Weaver EA. Imaging luciferase-expressing viruses. Methods Mol Biol 2012;797:79-87。 Chen C-Y, Tran DM, Cavedon A等人，Treatment of Hemophilia A Using Factor VIII Messenger RNA Lipid Nanoparticles. Mol Ther Nucleic Acids 2020;20:534-44。 Elia U, Ramishetti S, Dammes N等人，Design of SARS-CoV-2 RBD mRNA Vaccine Using Novel Ionizable Lipids. bioRxiv 2020.10.15.341537。 Fukuchi M, Saito R, Maki S等人，Visualization of activity-regulated BDNF expression in the living mouse brain using non-invasive near-infrared bioluminescence imaging. Mol Brain 2020;13(1):122。 Hassett KJ, Benenato KE, Jacquinet E等人，Optimization of lipid nanoparticles for intramuscular administration of mRNA vaccines. Molecular Therapy Nucleic Acids 2019;15:1-11。 Jeon YH, Choi Y, Kang JH等人，In vivo monitoring of DNA vaccine gene expression using firefly luciferase as a naked DNA. Vaccine 2006;24(16):3057-62。 Truong B, Allegri G, Liu X-B等人，Lipid nanoparticle-targeted mRNA therapy as a treatment for the inherited metabolic liver disorder arginase deficiency. Proc Natl Acad Sci USA 2019;116(42):21150-9。 WHO. 附錄1.Guidelines on the nonclinical evaluation of vaccines. 技術報告第927號. Geneva, Switzerland: World Health Organization (WHO); 2005.第31-63頁. https://www.who.int/biologicals/vaccines/nonclinial_evaluation_of_vaccines/en/. 實例3：醫藥開發(混合物)
COVID-19 +流行性感冒mRNA組合疫苗可藉由混合COVID-19 RNA疫苗(例如LNP調配之單價(例如XBB.1.5適應的)或二價疫苗(例如武漢及奧密克戎(BA.4/BA.5)變異體)及四價流行性感冒疫苗(Wisconsin、Phuket、Austria及Darwin)藥物產品來製備。在本實例中，將COVID-19二價疫苗與四價流行性感冒疫苗混合，但熟習此項技術者將理解，本實例證明，一般而言，不同的奈米顆粒(例如LNP)調配之群體可經混合以形成穩定組合物。
兩種疫苗藥物產品均為不含防腐劑之脂質奈米顆粒(LNP)之無菌分散體，其於經調配用於肌內注射之水性低溫保護劑緩衝液中。COVID-19單價或二價modRNA疫苗可以0.1 mg/ml RNA調配於10 mM Tris緩衝液、10.3% w/v (300 mM)蔗糖，pH 7.4中。四價流行性感冒modRNA疫苗可以0.06 mg/ml RNA調配於10 mM Tris緩衝液、300 mM蔗糖，pH 7.4中。每種疫苗之例示性調配物提供於下表36及表37中。
表 36. BNT162b2 二價[原始及奧密克戎(BA.4/BA.5)變異體]藥物產品之組成，30 μg總RNA劑量，0.3 mL注射體積，多劑量小瓶(6個劑量)
成分名稱 參考標準 功能 濃度 (mg/mL) 每個2.25 mL小瓶之量a (MDV = 6個劑量) 每30 μg劑量之量
BNT162b2 (原始)原料藥 內部規範 活性成分 0.05 113 μg 15 μg
BNT162b2奧密克戎BA.4/BA.5原料藥 內部規範 活性成分 0.05 113 μg 15 μg
ALC-0315 內部規範 功能性脂質 1.43 3.22 mg 0.43 mg
ALC-0159 內部規範 功能性脂質 0.18 0.41 mg 0.05 mg
DSPC 內部規範 結構脂質 0.31 0.70 mg 0.09 mg
膽固醇 USP-NF及/或Ph. Eur. 結構脂質 0.62 1.40 mg 0.19 mg
蔗糖 USP-NF, Ph. Eur. 低溫保護劑 103 231.8 mg 31 mg
胺丁三醇(Tris鹼)b USP-NF, Ph. Eur. 緩衝組分 0.20 0.45 mg 0.06 mg
參(羥基甲基)胺基甲烷鹽酸鹽(Tris HCl)c 內部規範 緩衝組分 1.32 2.97 mg 0.4 mg
注射用水 USP-NF, Ph. Eur. 溶劑/媒劑 q.s. q.s. q.s.
a. 對值進行舍入以維持與標籤要求相同之精度水準，其中在適用的情況下未示出後面的小數。 b. 亦稱為胺丁三醇 c. 亦稱為胺丁三醇鹽酸鹽(Tromethamine HCl及Trometamol HCl) 縮寫：ALC-0315 = ((4-羥基丁基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)；ALC-0159 = 2-[(聚乙二醇)-2000]-N,N-雙十四基乙醯胺；DSPC = 1,2-二硬脂醯基-sn-甘油-3-磷酸膽鹼；q.s. =適量補足(儘可能足夠)
表 37 . 0.06 mg/mL 四價藥物產品之組成
成分名稱 等級/品質標準 功能 單位配方 (mg/mL) 填量 (總mg/小瓶) 標稱量或淨量 (淨mg/小瓶)
流行性感冒原料藥(Wisconsin) 內部規範 活性成分 0.015 0.010 0.008
流行性感冒原料藥(Darwin) 內部規範 活性成分 0.015 0.010 0.008
流行性感冒原料藥(Austria) 內部規範 活性成分 0.015 0.010 0.008
流行性感冒原料藥(Phuket) 內部規範 活性成分 0.015 0.010 0.008
ALC-0315a 內部規範 功能性脂質 0.86 0.58 0.43
ALC-0159b 內部規範 功能性脂質 0.11 0.07 0.06
DSPCc 內部規範 結構脂質 0.19 0.13 0.10
膽固醇 Ph. Eur., NF 結構脂質 0.37 0.25 0.19
蔗糖 Ph. Eur., NF 低溫保護劑 102.69 69.83 51.35
胺丁三醇(Tris鹼) Ph. Eur., USP 緩衝組分 0.20 0.14 0.10
參(羥基甲基)胺基甲烷鹽酸鹽(Tris HCl) 內部規範 緩衝組分 1.32 0.90 0.66
注射用水 Ph. Eur., USP, JP 溶劑 q.s.d至1.00 mL q.s.d至0.68 mL q.s.d至0.50 mL
a. ALC-0315 = ((4-羥基丁基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯) b. ALC-0159 = 2-[(聚乙二醇)-2000]- N,N-雙十四基乙醯胺 c. DSPC = 1,2-二硬脂醯基- sn-甘油-3-磷酸膽鹼 d. q.s.係適量補足( quantum satis)之縮寫，意指儘可能足夠。
臨床劑量製備
對於本研究，在一些實施例中，個別製備之藥物產品之最低濃度為0.023 mg/mL，且最低可能之組合濃度為0.069 mg/mL。在一些實施例中，製備後之個別藥物產品之最高濃度為0.055 mg/mL，最高可能之組合濃度為0.082 mg/mL。藥物產品劑量之間的計劃比率為2:1、1:2及1:1。藉由混合適當體積之個別疫苗且作為組合疫苗之單次注射進行投與來製備劑量。混合可在注射器或玻璃小瓶中進行。下表38中提供計劃臨床劑量之細節。
表 38. 計劃之臨床劑量及濃度
60 μg劑量(組3) (1:1流行性感冒:COVID-19) 90 μg劑量(組2) (2:1流行性感冒:COVID-19) 90 μg劑量(組1) (1:2 流行性感冒:COVID-19)
最終劑量(ug) 劑量體積(mL) 最終濃度(mg/mL) a 最終劑量(ug) 劑量體積(mL) 最終濃度(mg/mL) a 最終劑量(ug) 劑量體積(mL) 最終濃度(mg/mL) a
四價流行性感冒(0.06 mg/mL) 30 0.5 0.038 60 1 0.046 30 0.5 0.027
COVID二價(0.1 mg/mL) 30 0.3 0.038 30 0.3 0.023 60 0.6 0.055
總計 60 0.8 0.076 90 1.3 0.069 90 1.1 0.082
a. 藉由最終混合物體積中個別組分之總和計算總濃度
劑量驗證研究
實施劑量驗證研究，以證明四價流行性感冒mRNA疫苗藥物產品及COVID-19二價mRNA疫苗藥物產品在混合以進行投與時係相同的，且所有藥物產品及投藥溶液在足以實施劑量製備及投與操作之一段時間內與投與組分相容。劑量驗證研究設計詳述於下表39中，且係基於經設計以支持個別藥物產品濃度為0.02至0.067 mg/mL且組合濃度為0.04至0.1 mg/mL以及三種計劃投藥比率之歸類方法。評價組合疫苗在投藥注射器中在2℃至8℃下在24小時內及在30℃下在12小時內之穩定性。
表 39. 劑量驗證研究設計
研究組 流行性感冒四價疫苗濃度 Covid-19二價疫苗濃度 總mRNA濃度 比率
組1 0.033 mg/mL 0.067 mg/mL 0.1 mg/mL 1:2
組2 0.067 mg/mL 0.033 mg/mL 0.1 mg/mL 2:1
組3 0.02 mg/mL 0.02 mg/mL 0.04 mg/mL 1:1
根據預定實驗計劃測試樣品，且分析外觀、次可見顆粒、pH、RNA含量、RNA完整性、RNA囊封、LNP大小、LNP多分散性及比率(ddPCR)，其詳述於下表40中。如表39中所闡述，對疫苗藥物產品之間的三種比率進行測試，以對所提出之投藥範圍進行歸類。
表 40. 投與模擬研究之分析及例示性結果
分析 例示性結果
外觀 視覺：白色至灰白色懸浮液 微粒物質：基本上不含可見顆粒(EFVP)
pH 6.9-7.9
RNA含量(RiboGreen) T0：報告結果 所有其他樣品：T0之+/- 10%
RNA完整性(藉由片段分析儀進行CGE) ≥ 50%完整RNA
RNA囊封(RiboGreen) ≥ 80%
LNP大小(DLS) 40 - 120 nm
LNP PDI (DLS) ≤ 0.3
序列比率(ddPCR) 僅T0；報告結果
縮寫：CGE =毛細管凝膠電泳；LNP =脂質奈米顆粒；DLS =動態光散射；PDI =多分散性指數
結果彙總於表41至表43中，且證明組合疫苗藥物產品之投藥溶液在投與組分中穩定24小時，其中在30℃下穩定12小時且在2℃-8℃下穩定其餘時間。
表 41. 組1之投藥驗證結果(1:2比率)
品質屬性 驗收準則 T0 T12 小時 T24 小時
30℃ 2℃-8℃
NA PP 注射器 PC 注射器 PP 注射器 PC 注射器
外觀 外觀視覺：白色至灰白色懸浮液 白色至灰白色懸浮液 白色至灰白色懸浮液 白色至灰白色懸浮液 白色至灰白色懸浮液 白色至灰白色懸浮液
外觀(顆粒)：基本上不含可見顆粒 EFVP EFVP EFVP EFVP EFVP
pH 6.9 - 7.9 7.5 7.5 7.5 7.5 7.5
RNA含量(mg/mL) T0：報告結果 所有其他樣品：T0之+/- 10% 0.099 0.099 (±0%) 0.098 (-1%) 0.091 (-8%) 0.098 (-1%)
RNA完整性(%) ≥ 50%完整RNA 78 77 78 77 78
RNA囊封(%) ≥ 80% 97 97 96 96 97
LNP大小(nm) 40 - 120 nm 70 70 70 70 70
LNP多分散性 ≤ 0.3 0.2 0.1 0.2 0.2 0.2
序列比率(%) * 報告結果 總流行性感冒mRNA：40 總COVID mRNA：60 NT NT NT NT
縮寫：EFVP =基本上不含可見顆粒；LNP =脂質奈米顆粒；NT =未測試 *僅對T0樣品測定序列比率
表42. 組2之投藥驗證結果(2:1比率)
品質屬性 驗收準則 T0 T12 小時 T24 小時
30℃ 2℃-8℃
NA PP 注射器 PC 注射器 PP 注射器 PC 注射器
外觀 外觀視覺：白色至灰白色懸浮液 白色至灰白色懸浮液 白色至灰白色懸浮液 白色至灰白色懸浮液 白色至灰白色懸浮液 白色至灰白色懸浮液
外觀(顆粒)：基本上不含可見顆粒 EFVP EFVP EFVP EFVP EFVP
pH 6.9 - 7.9 7.5 7.5 7.5 7.5 7.5
RNA含量(mg/mL) T0：報告結果 所有其他樣品：T0之+/- 10% 0.102 0.098 (-4%) 0.099 (-3%) 0.097 (-5%) 0.102 (±0%)
RNA完整性(%) ≥ 50%完整RNA 82 82 82 82 83
RNA囊封(%) ≥ 80% 96 96 96 95 96
LNP大小(nm) 40 - 120 nm 70 71 70 70 71
LNP多分散性 ≤ 0.3 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
序列比率(%) * 報告結果 總流行性感冒mRNA：72 總COVID mRNA：28 NT NT NT NT
縮寫：EFVP =基本上不含可見顆粒；LNP =脂質奈米顆粒；NT =未測試 *僅對T0樣品測定序列比率
表 43. 組3之投藥驗證結果(1:1比率)
品質屬性 驗收準則 T0 T12 小時 T24 小時
30℃ 2℃-8℃
NA PP 注射器 PC 注射器 PP 注射器 PC 注射器
外觀 外觀視覺：白色至灰白色懸浮液 白色至灰白色懸浮液 白色至灰白色懸浮液 白色至灰白色懸浮液 白色至灰白色懸浮液 白色至灰白色懸浮液
外觀(顆粒)：基本上不含可見顆粒 EFVP EFVP EFVP EFVP EFVP
pH 6.9 - 7.9 7.5 7.5 7.6 7.5 7.5
RNA含量(mg/mL) T0：報告結果 所有其他樣品：T0之+/- 10% 0.036 0.037 (+3%) 0.037 (+3%) 0.038 (+6%) 0.037 (+3%)
RNA完整性(%) ≥ 50%完整RNA 80 81 80 81 81
RNA囊封(%) ≥ 80% 96 96 96 96 96
LNP大小(nm) 40 - 120 nm 70 70 71 71 72
LNP多分散性 ≤ 0.3 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
序列比率(%) * 報告結果 總流行性感冒mRNA：57 總COVID mRNA：43 NT NT NT NT
縮寫：EFVP =基本上不含可見顆粒；LNP =脂質奈米顆粒；NT =未測試 *僅對T0樣品測定序列比率
結論
應在適當環境中使用無菌技術進行劑量製備。基於本實例中所闡述之劑量驗證研究結果，及來自對具有相同調配物之RNA疫苗進行的微生物攻擊之資料，在受控且經驗證之無菌環境中製備之投藥溶液應在第一次刺穿瓶塞後24小時內使用，在最高30℃下不超過12小時且其餘時間在2℃-8℃下使用。若未在受控且經驗證之無菌環境中製備，則投藥溶液應在自第一次刺穿瓶塞後6小時內使用。 實例4：SARS-CoV-2/流行性感冒組合疫苗之臨床試驗設計
本實例闡述用以研究COVID-19與流行性感冒RNA疫苗組合之例示性臨床試驗方案。具體而言，本實例中所闡述之臨床試驗方案經設計以研究包含二價COVID-19 modRNA疫苗及多價流行性感冒modRNA疫苗之組合。所測試之組合疫苗意欲用於免疫接種，以供預防COVID-19及由流行性感冒A及/或B亞型病毒引起之流行性感冒。例示性臨床試驗方案啟動時專注於18至64歲之參與者，且包含1期劑量水準發現子研究，之後為擴展之2/3期子研究。在該等子研究完成後，對≥65歲之參與者實施2/3期子研究。下文提供每項子研究之設計概要，以及每個階段之目標及終點。 1 期：在18至64歲之健康成人中以不同劑量水準測試之組合modRNA疫苗之安全性及耐受性以及免疫原性之隨機化、開放標籤研究(在本實例中，在北半球進行)。 2/3 期：與現行照護標準相比，評估1期中所鑑別之組合劑量水準。2期評估18至64歲以及65歲及以上之參與者。在本實例中，該兩期均係在北半球進行。 3 期：在審查2期資料後啟動之進一步子研究，且係在≥65歲之參與者中實施(在本實例中，在南半球進行)。 開發原理及計劃
針對流行性感冒及COVID-19二者之年度疫苗程式將來有可能在每年之類似時間進行。與單獨地投與疫苗相比，成功開發靶向該兩種疾病之組合疫苗將有可能提高針對該兩種疾病之疫苗接種率，且容許更便捷之疫苗接種排程。
單獨的流行性感冒及COVID-19疫苗目前可商業獲得，但具有侷限性，且目前尚無授權之組合產品。下文提供關於流行性感冒及COVID-19疫苗之當前情況之進一步論述。 當前疫苗之侷限性
美國授權之COVID-19疫苗包括兩種基於RNA之產品，一種為腺病毒載體產品，且一種為含佐劑之蛋白質亞單元產品。由於在初次系列後觀察到中和抗體效價隨時間下降，故建議加強投藥以恢復強勁之免疫力及疾病保護。下表44列示目前批准之COVID-19疫苗。
表 44. 美國目前授權之COVID-19疫苗產品
類別 產品名稱 製造商
modRNA BNT162b2；Pfizer-BioNTech COVID-19疫苗；COMIRNATY ®mRNA-1273；Moderna COVID-19疫苗；Spikevax™ Pfizer/BioNTech 1, 2Moderna 3
腺病毒載體 JNJ-78436735；Janssen COVID-19疫苗* Janssen 4*
蛋白質亞單元 NVX-CoV2373；含佐劑之Novavax COVID-19疫苗* Novavax 5*
*注意：Janssen及Novavax COVID-19疫苗在美國目前獲得僅在此時之緊急使用之授權(未獲許可)。在美國，Pfizer/BioNTech及Moderna疫苗作為初次系列獲得許可，而加強劑目前獲得緊急使用授權。Pfizer-BioNTech二價疫苗原始及奧密克戎BA.4/BA.5加強劑在美國目前獲得緊急使用授權。 1Pfizer-BioNTech COVID-19 Vaccine EUA Fact Sheet for Healthcare Providers, Bivalent Booster. 可在https://www.fda.gov/media/161327/download/獲得 2Comirnaty (COVID-19 Vaccine, mRNA) Suspension for Injection for Intramuscular Use. Package Insert. Pfizer (New York, NY, US). 可在https://www.fda.gov/media/154834/download獲得。 3Spikevax (COVID-19 Vaccine, mRNA) Suspension for Injection for Intramuscular Use. Package Insert. Moderna (Cambridge, MA, US). 可在https://www.fda.gov/media/155675/download獲得。 4Janssen COVID-19 Vaccine EUA Fact Sheet for Healthcare Providers. 可在https://www.fda.gov/media/146304/download獲得。 5Novavax COVID-19 Vaccine, Adjuvanted EUA Fact Sheet for Healthcare Providers. 可在https://www.fda.gov/media/159897/download獲得。
下表45中顯示目前批准之BNT162b2投藥方案
表 45. 按年齡組之BNT162b2 COVID-19疫苗劑量水準及方案
年齡組 劑量水準 疫苗方案
6個月至＜2歲 3-μg BNT162b2三劑量初次系列
2至＜5歲 3-μg BNT162b2三劑量初次系列
5至＜12歲 10-μg BNT162b2兩劑量初次系列及加強劑
≥12歲 30-μg BNT162b2兩劑量初次系列及加強劑
≥12歲 30-μg BNT162b2二價原始及奧密克戎BA.4/BA.5加強劑
相較於疫苗載體及傳統疫苗技術，RNA疫苗可需要更短之製造時間，由此使得其更容易產生針對在投與時流行之流行性感冒毒株之疫苗。此外，儘管美國大約70%之符合條件的個體已接種初次系列之COVID-19疫苗，但加強劑量接種顯著更低，且據報導，符合條件個體之加強劑量接種＜50%。組合疫苗可增加符合條件個體之加強投藥率。 流行性感冒疫苗
目前批准之流行性感冒疫苗包括不活化、重組及活減毒流行性感冒疫苗(LAIV) (下表46中列示批准之流行性感冒疫苗)。不活化疫苗在不活化前在蛋或細胞培養物中生長，且可與佐劑(諸如MF59)組合以增強保護。疫苗通常含有自三種或四種流行性感冒病毒(H1N1、H3N2、B Yamagata及B Victoria)製備之抗原，且稱為三價或四價(quadrivalent)(亦稱為四價(tetravalent))的。不活化及重組疫苗之效能可以HA含量來表述。標準不活化之疫苗通常含有15 μg每種HA以供成人IM注射，但高劑量之不活化疫苗可含有60 μg每種HA。LAIV可藉由鼻內噴霧遞送，其通常用於兒科群體中，且在美國批准用於2至49歲之個體且在歐洲批准用於2至17歲之個體。
表 46. 美國目前批准之流行性感冒疫苗產品(傳統或加速)之實例
類別 商標名 製造商
蛋基，不活化 Fluzone ®Fluzone High-Dose ®Fluarix ® Sanofi Pasteur 1Sanofi Pasteur 2GSK 3
蛋基，不活化，含佐劑(MF59) FluAd ® Seqirus 4
基於哺乳動物細胞，不活化 Flucelvax ® Seqirus 5
重組 FluBlok Quadrivalent ® Protein Sciences 6
活減毒(LAIV) FluMist Quadrivalent ® MedImmune 7
1Fluzone (Influenza Vaccine) Suspension for Intramuscular Injection. Package Insert. Sanofi Pasteur (Swiftwater, PA, US). 可在https://www.fda.gov/media/116102/download獲得。 2Fluzone High-Dose (Influenza Vaccine) Suspension for Intramuscular Injection. Package Insert. Sanofi Pasteur (Swiftwater, PA, US). 可在https://www.fda.gov/media/119870/download獲得。 3Fluarix (Influenza Vaccine) Suspension for Intramuscular Injection. Package Insert. GlaxoSmithKline Biologicals (Rixensart, Belgium). 可在https://www.fda.gov/media/84804/download獲得。 4FluAd (Influenza Vaccine, Adjuvanted) Injectable Emulsion for Intramuscular Use. Package Insert. Seqirus Inc. (Holy Springs, NC, US). 可在https://www.fda.gov/media/94583/download獲得。 5Flucelvax (Influenza Vaccine) Suspension for Intramuscular Injection. Package Insert. Seqirus Inc. (Holy Springs, NC, US). 可在https://www.fda.gov/media/85322/download獲得。 6Flublok Quadrivalent (Influenza Vaccine) Sterile Solution for Intramuscular Injection. Package Insert. Protein Sciences Corporation (Meriden, CT, US). 可在https://www.fda.gov/media/123144/download獲得。 7FluMist Quadrivalent (Influenza Vaccine Live, Intranasal) Intranasal Spray. Package Insert. MedImmune, LLC (Gaithersburg, MD, US). 可在https://www.fda.gov/media/120689/download獲得。
現有流行性感冒疫苗具有若干侷限性，尤其包括相對長之製造時間、製造之複雜性及有限之有效性(Bresee等人)。流行性感冒RNA (例如modRNA)疫苗具有解決需要該等侷限性之潛力。具體而言，RNA (例如modRNA)疫苗可使製造時間減少，此容許稍晚決定納入季節性加強活動中之病毒毒株並提高疫苗匹配最流行傳播毒株之機會，且有可能不需要重配步驟(亦即，改良之製造時間降低疫苗與季節性傳播毒株錯配之機率)。SARS-CoV-2 RNA疫苗(例如BNT162b2，其為modRNA)亦已展示出高的針對COVID-19之VE，此表明與目前批准之流行性感冒疫苗相比，流行性感冒RNA疫苗針對流行性感冒之VE可能更高。特定而言，相對於目前批准之疫苗，RNA疫苗經由誘導強CD4+及CD8+ T細胞反應可提供改良之功效，與一些經批准之COVID-19疫苗(例如BNT162b2)所觀察到之功效類似。
CDC最近關於2021-2022流行性感冒季之資料估計，截至2022年3月，＜50%之≥18歲的美國成人已接受年度流行性感冒疫苗接種，其中觀察到≥65歲之成人接種率更高，接近60%。 COVID-19 與流行性感冒mRNA疫苗組合之優點
本實例中所研究之組合疫苗包括modRNA活性組分，其可提供減弱之先天性免疫感測器活化能力，且由此增強所編碼抗原之表現(例如與未經修飾之RNA及/或saRNA相比)。本實例中所投與之modRNA囊封於LNP中，此使得能夠在IM注射後將RNA轉染至宿主細胞中。LNP囊封亦保護RNA免受RNA酶降解。在本實例中，用於SARS-CoV-2及流行性感冒組分之LNP調配物係相同的，且由四種不同的脂質以界定比率構成。
本實例之組合疫苗包含二價Covid-19疫苗，其包含兩種RNA，每種RNA編碼不同的SARS-CoV-2刺突蛋白抗原(具體而言，野生型(Wuhan)刺突蛋白及推薦用於初免及/或加強劑疫苗接種之SARS-CoV-2變異體(在本實例中為奧密克戎BA.4/5變異體)之刺突蛋白)。對於組合疫苗之多價流行性感冒RNA疫苗部分，modRNA構築體各自編碼推薦用於基於細胞之疫苗或重組疫苗之毒株的HA抗原。
基於modRNA之COVID-19疫苗之經驗支持使用modRNA快速開發疫苗，包括編碼新出現的SARS-CoV-2變異體及季節性適應之HA之抗原的組合疫苗，以用於預防流行性感冒。與其他類型之疫苗相比，RNA (例如modRNA)疫苗之潛在優點尤其包括加速製造(藉此容許稍晚決定納入季節性加強活動中之病毒毒株，此可增加加強劑疫苗將匹配相關流行性感冒毒株之機會)。針對SARS-CoV-2開發之RNA疫苗(例如BNT162b2)亦提供高的針對COVID-19之VE的證據，此表明相對於目前許可之流行性感冒疫苗，RNA疫苗可能具有更高的針對流行性感冒之VE。
下文列示與其他疫苗方法相比，基於RNA之疫苗之其他優點： • 基於RNA之疫苗無感染風險。 • 基於RNA之疫苗可模擬自然感染期間之抗原表現，其係藉由利用抗原設計之高精確度及撓性指導病原體抗原之表現來實施。 • RNA在體內自然產生，藉由身體之天然機制代謝及消除，不整合至基因體中，且瞬時表現。
基於RNA之疫苗可使用無細胞活體外轉錄過程來製造，此可容許容易及快速產生，且有可能在較習用疫苗方法所能達成之更短時間段內產生大量疫苗劑量。此能力對於能夠有效遞送季節性更新疫苗係重要的。
鑑於(1)由持續存在之全球性SARS CoV 2暴發及所關注變異體之出現所造成的持續公共衛生威脅，(2)需要加強劑以克服減弱之免疫力，及(3)對個體之潛在優點，包括接受針對可能最佳匹配所鑑別之傳播毒株的流行性感冒及SARS CoV-2二者之組合加強劑疫苗的便捷性，對靶向流行性感冒及COVID-19之組合modRNA疫苗進行臨床研究係合理的。在一些實施例中，組合疫苗可提供針對新出現的SARS-CoV-2變異體及季節性適應之HA的保護以預防流行性感冒，此可減少所需之疫苗接種次數，簡化程式性攻擊，且最終增加對所推薦之流行性感冒及COVID-19疫苗接種時間表之遵守(例如，與分開投與之疫苗相比)。該等優點中之每一者(單獨或一起)均可使接種疫苗個體之比例增加，從而改善對流行性感冒及COVID-19之嚴重後果之效應。 組合疫苗開發之一般方法
本研究包含第一I期子研究，其經設計以評估並選擇包含四價流行性感冒疫苗及二價COVID-19 modRNA疫苗之組合疫苗之最佳劑量水準，以用於後期開發。在可自1期子研究中獲得資料後，即可啟動2/3期及3期子研究，該等子研究經設計以進一步評估與現行照護標準(共投與之四價流行性感冒疫苗及二價疫苗)相比，所選組合劑量水準對於免疫反應之安全性及非劣性。 計劃之1期研究(子研究A)
子研究A係一項1期隨機化、開放標籤研究，用以評估以不同劑量水準組合IM投與之COVID-19與流行性感冒mRNA疫苗組合在18至64歲之健康成人中之安全性及免疫原性(劑量列示於表47中)。在該研究中，將30名參與者按1:1:1:1:1:1各自隨機化至六個群組中之一者中，以接受如下之單一研究疫苗接種： • 組合疫苗：編碼來自2022/2023流行性感冒季(22/23)之四種所選毒株之抗原的qIRV與編碼來自原始(Wuhan)毒株之抗原及來自SARS-CoV-2奧密克戎(OMI) BA.4/BA.5變異體之抗原的二價COVID-19疫苗(BNT162b2)之組合，以三種劑量水準組合中之一者(1組、2組及3組；劑量水準列示於表47中) • 流行性感冒modRNA疫苗：30-μg qIRV (22/23) (4組) • 流行性感冒modRNA疫苗：60-μg qIRV (22/23) (5組) • 照護標準：共投與之許可QIV +二價BNT162b2武漢+ OMI BA.4/BA.5，30-μg劑量，在對側手臂中同時投與疫苗(6組)
1期招募包括在第一天對至多10名參與者進行疫苗接種，此後不早於24小時進行進一步疫苗接種。端視於對新出現資料之審查，總劑量為90-μg modRNA之1號及/或3號劑量水準組合可自本研究中省略。來自BNT162b2在30-μg或60-μg劑量水準下之先前研究之臨床資料計劃用作組合疫苗研究分析中之歷史對照。
表 47. 1 期研究干預及劑量水準組合
組 號 每組數量 qIRV (22/23)劑量 BNT162b2二價 (原始/OMI BA.4/BA.5)劑量 總劑量modRNA
1 30 30-μg2種A型毒株+ 2種B型毒株，劑量為每種毒株7.5-μg 60-μg30-μg BNT162b2原始+ 30-μg BNT162b2 OMI BA.4/BA.5 90-μg
2 30 30-μg2種A型毒株+ 2種B型毒株，劑量為每種毒株7.5-μg 30-μg15-μg BNT162b2原始+ 15-μg BNT162b2 OMI BA.4/BA.5 60-μg
3 30 60-μg2種A型毒株+ 2種B型毒株，劑量為每種毒株15-μg 30-μg15-μg BNT162b2原始+ 15-μg BNT162b2 OMI BA.4/BA.5 90-μg
4 30 30-μg2種A型毒株+ 2種B型毒株，劑量為每種毒株7.5-μg NA 30-μg
5 30 60-μg2種A型毒株+ 2種B型毒株，劑量為每種毒株15-μg NA 60-μg
6 (照護標準) 30 NA 30-μg15-μg BNT162b2原始+ 15-μg OMI BA.4/BA.5，在許可QIV之對側手臂中同時投與 30-μg
NA =不適用；OMI BA.4/BA.5 = SARS-CoV-2奧密克戎變異體亞系；qIRV =四價流行性感冒modRNA疫苗；QIV =四價流行性感冒疫苗；22/23 = 2022/2023流行性感冒季推薦毒株。
表48：子研究A 1期之目標、終點及被估量：
目標 被估量 終點
主要安全性： 主要安全性： 主要安全性：
描述qIRV (22/23)/二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5)在各種劑量水準組合下之安全性及耐受性 在接受至少1個劑量之研究干預之參與者中，報告以下之參與者百分比： • 在疫苗接種後7天內有局部反應 • 在疫苗接種後7天內有全身性事件 • 自第一次疫苗接種至疫苗接種後4週之AE • 自第一次疫苗接種至疫苗接種後6個月之SAE • 局部反應(注射部位處疼痛、發紅及腫脹) • 全身性事件(發熱、疲勞、頭痛、寒戰、嘔吐、腹瀉、新發或惡化之肌肉疼痛及新發或惡化之關節疼痛) • AE • SAE
具有以下之參與者百分比： •   疫苗接種後2天及1週之異常肌鈣蛋白I實驗室值 肌鈣蛋白I實驗室參數
具有以下之參與者百分比： •   疫苗接種後2天及1週出現新的ECG異常 與極可能或可能之心肌炎或心包炎相符之ECG異常
次要： 次要： 次要：
描述由qIRV (22/23)/二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5)在各種劑量水準組合下引發之免疫反應 在遵守關鍵方案準則之參與者(可評估參與者)中： • 疫苗接種前以及疫苗接種後1週、4週及8週之GMT • 疫苗接種前至疫苗接種後1週、4週及8週之GMFR • 疫苗接種後1週、4週及8週，每種毒株達成HAI血清轉化a之參與者比例 • 疫苗接種前及疫苗接種後1週、4週及8週，每種毒株之HAI效價≥1:40之參與者百分比 • 疫苗接種後1週、4週及8週，所有毒株均達成HAI血清轉化之參與者百分比 • 疫苗接種後1週、4週及8週，所有毒株之HAI效價≥1:40之參與者百分比 WHO推薦用於重組或基於細胞之流行性感冒疫苗之2022/2023季節性毒株(2×A, 2×B)的HAI效價
在接受符合關鍵方案準則之qIRV (22/23)/二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5)之參與者(可評估參與者)中： • 疫苗接種前及疫苗接種後1週、4週及8週，針對每一毒株特異性中和效價之GMT。 • 疫苗接種前至疫苗接種後1週、4週及8週，針對每一毒株特異性中和效價之GMFR。 • 在疫苗接種後1週、4週及8週，針對每一毒株特異性中和效價，具有血清反應b之參與者之百分比 • SARS-CoV-2奧密克戎(BA.4/BA.5)-中和效價 • SARS-CoV-2參考毒株-中和效價
探索性 探索性 探索性
描述對新出現的VOC之免疫反應。 •    尚未指定之VOC之SARS-CoV-2中和效價
a. 血清轉化定義為在疫苗接種前HAI效價＜1:10，且在所關注時間點≥1:40，或在疫苗接種前HAI效價≥1:10，在所關注時間點上升4倍。 b. 血清反應定義為自基線(研究疫苗接種前)達成≥4倍升高。若基線量測值低於LLOQ，則疫苗接種後量測值≥4 × LLOQ視為血清反應。
劑量論證
在本實例所闡述之研究中，對劑量水準組合不超過90 μg之qIRV (22/23)/二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5)進行評估。
以下條件可容許參與者在疾患消退後隨機化，且參與者在其他方面視為符合條件的。若在第1次訪視時符合該等準則之參與者在疾患消退後招募已結束，則視為篩選失敗。 1. 前28天內SARS-CoV-2測試結果(NAAT或快速抗原測試)呈陽性。 2. 研究干預投與前48小時內有當前發熱性疾病(口腔溫度≥38.0℃ [≥100.4℉])或其他急性疾病。此包括可能代表潛在COVID-19疾病之症狀。 注意：當參與者展現出潛在COVID-19症狀或以其他方式收到陽性結果時，應指導參與者經由其主要健康照護提供者在許可之臨床實驗室尋求額外測試，且根據當地指導建議是否採取任何預防措施以待確認測試。 3. 在第1次訪視時進行研究干預投與前28天內接受任何非研究疫苗。 4. 預計在第1次訪視時進行研究干預投與後28天內接受任何非研究疫苗。 5. 接受短期(＜14天)全身性皮質類固醇。應推遲研究干預投與，直至全身性皮質類固醇使用已停止至少28天。允許吸入/霧化、關節內、囊內或外用(皮膚或眼睛)皮質類固醇。 解熱藥劑
在報告期(第1天至第7天)期間，每天在反應原性電子日誌中記錄使用解熱藥劑治療與研究干預投與相關之症狀情況。
對於子研究A，在CRF中記錄以下伴隨藥劑及疫苗接種： • 先前接受任何COVID-19疫苗。 • 先前接受任何肺炎球菌疫苗。 • 許可之流行性感冒疫苗(若在前一個日曆年期間接受)。 • 自研究招募前28天直至最後一次訪視(第6次訪視)所接受之任何疫苗接種。 • 若服用禁止藥劑(下文列示)，則進行記錄，且包括開始及停止日期、藥劑名稱、劑量、單位、途徑及頻率。 研究期間禁止
在下文所列示時間段期間接受以下疫苗及藥劑之參與者可能會自該點起被排除在符合方案分析之外；然而，預計該參與者將不會退出研究。若參與者之醫療照護需要，則不應拒絕給予藥劑。 • 除非認為在醫學上有必要，否則在第1次訪視時之研究疫苗接種前28天及研究疫苗接種後28天內，不應投與除研究干預以外之疫苗。 • 自招募至第5次訪視(8週隨訪)，禁止接受任何其他(非研究)冠狀病毒疫苗。 • 自招募至第5次訪視(8週隨訪)，禁止接受任何其他(非研究)季節性流行性感冒疫苗。 • 在招募前的60天內至研究結束，禁止接受已知免疫抑制藥劑之長期全身治療或放射療法。 • 自招募前28天至投與研究干預後28天，禁止接受全身性皮質類固醇(≥20 mg/天之普賴松(prednisone)或等效物)達≥14天。 • 自研究干預投與前60天至研究結束，接受血液/血漿產品、免疫球蛋白或單株抗體。 • 不允許使用預防性解熱藥及其他疼痛藥劑來預防與研究干預投與相關之症狀。然而，若參與者正在服用針對另一疾患之藥劑，則即使該藥劑可能具有解熱或疼痛減輕性質，亦不應在研究疫苗接種前停用。 研究期間允許 • 允許使用除描述為禁止(上文所列示)以外的治療既往疾患或急性疾病所需之藥劑。 • 允許吸入、外用或局部注射皮質類固醇(例如關節內或囊內投與)。 免疫原性評價
在如上文指定之時間點自所有參與者收集樣品，且運行以下分析： • 針對WHO推薦用於重組或基於細胞之流行性感冒疫苗之季節性毒株(2×A, 2×B)的HAI效價 • SARS-CoV-2中和分析(參考毒株) • SARS-CoV-2中和分析(亦可評估奧密克戎BA.4、奧密克戎BA.5；其他所關注VOC，包括其他奧密克戎亞系) N結合抗體測試
中心實驗室對每一血液樣品實施N結合抗體測試，以確立直至每一時間點之SARS-CoV-2先前暴露。該等資料用於研究分析。 子研究A (1期)研究群體 納入準則
僅在所有以下準則均適用時，參與者才有資格納入子研究A： 年齡及性別：1. 第1次訪視(第1天)時18至64歲之男性或女性參與者。 2. 願意且能夠遵守所有排定訪視、研究計劃、實驗室測試、生活方式考量及其他研究程序之參與者。 3. 藉由病歷、體格檢查(若需要)及研究者之臨床判斷確定有資格納入研究之健康參與者。 注意：可納入患有既往穩定疾病之健康參與者，穩定疾病定義為在招募之前的6週期間不需要顯著改變療法或因疾病惡化而住院之疾病。 4. 能夠簽署如方案中所闡述之知情同意書，其包括遵守ICD中及本方案中所列示之要求及限制。 5. 先前已接受3次30 μg劑量之BNT162b2之參與者，最後一個劑量係在第1次訪視(第1天)前的150至365天。 注意：在隨機化之前必須獲得接受BNT162b2之先前劑量之書面確認。 排除準則
若以下準則中之任一者適用，則將參與者自子研究A中排除： 醫學病況：1. 具有與任何疫苗相關之嚴重不良反應史及/或對研究干預中之任何組分之嚴重過敏反應(例如過敏性)史。 2. 如藉由病史及/或實驗室/體格檢查所確定，患有已知或疑似免疫缺失之免疫受損個體。 3. 根據研究者之意見，與長時間出血相關之出血素質或疾患禁忌肌內注射。 4. 孕期或哺乳期女性。 5. 對卵蛋白(蛋或蛋製品)或雞肉蛋白過敏。 6. 其他醫學或精神疾患，包括近期(去年)或活躍之自殺意念/行為或實驗室異常，其可能增加參與研究之風險，或根據研究者之判斷，使參與者不適合參與研究。 先前/伴隨療法：7.   在招募前的60天內至研究結束，接受已知免疫抑制藥劑(包括細胞毒性劑或全身性皮質類固醇)之長期全身治療或放射療法。 注意：全身性皮質類固醇定義為在整個研究期間，以≥20 mg/天之普賴松或等效物(例如用於癌症或自體免疫性疾病)之劑量投與≥14天或計劃接受之皮質類固醇。允許吸入/霧化、關節內、囊內或外用(皮膚或眼睛)皮質類固醇。 8.     自研究干預投與前60天接受血液/血漿產品、免疫球蛋白或單株抗體，或計劃在整個研究期間接受。 9.     在投與研究干預前的6個月(175天)內，利用任何研究性或許可之流行性感冒疫苗進行疫苗接種。 既往/並行臨床研究經歷：10.   在隨機化之前的28天內參與涉及研究干預之其他研究。預計在接受本研究中之研究干預後28天內參與其他研究。 其他排除準則：11.   直接參與研究實施之研究現場工作人員及其家庭成員、以其他方式受研究者監督之現場工作人員以及直接參與研究實施之委托者及委托者代表員工及其家庭成員。 12.   經由第3次訪視參與劇烈或耐力運動。 13.   心臟病既往史。 14.   任何異常篩選肌鈣蛋白I實驗室值。 15.   如研究者所判斷，篩選12導程ECG與極可能或可能之心肌炎或心包炎相符，或展示出可能影響參與者安全或研究結果解釋之臨床相關異常。篩選12導程ECG顯示平均QTcF間隔＞450 msec、完全性左束支傳導阻滯、急性或不確定年齡心肌梗塞徵象、ST-T間隔變化提示心肌缺血、二度或三度AV阻滯或嚴重緩慢性心率不整或快速性心率不整之參與者應排除在研究參與之外。 研究小組及持續時間： 所投與之研究干預 子研究A (1期)
干預名稱 二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5) (原始BNT162b2及BNT162b2奧密克戎[B.1.1.529亞系BA.4/BA.5]) 預調配成單個小瓶(不需要稀釋) qIRV (22/23) qIRV (22/23)/二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5) QIV
小組名稱(接受具體研究干預或無研究干預之參與者群組) qIRV (22/23)/二價BNT162b2 (原始a/Omi BA.4/BA.5) 或 許可之QIV+二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5) qIRV (22/23)/二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5) 或 30 μg qIRV (22/23) 或 60 μg qIRV (22/23) qIRV (22/23)/二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5)
類型 疫苗 疫苗 疫苗 疫苗
劑量調配物 modRNA modRNA modRNA
單位劑量強度 30 μg/0.3 mL 60 μg/0.6 mL 30 μg/0.3 mL 60 μg/0.6 mL 劑量水準組合1及390 μg/0.9 mL 劑量水準組合260 μg/0.6 mL 如IPM中所詳述
劑量水準 30 μg或60 μg (15 μg原始BNT162b2及15 μg BNT162b2奧密克戎[B.1.1.529亞系BA.4/BA.5]) (30 μg原始BNT162b2及30 μg BNT162b2奧密克戎[B.1.1.529亞系BA.4/BA.5]) 30 μg (每種毒株7.5 μg) 60 μg (每種毒株15 μg) 劑量水準組合190 μg qIRV (22/23) 30 μg (每種毒株7.5 μg) BNT162b2 60 μg (30 μg原始BNT162b2及30 μg BNT162b2奧密克戎[B.1.1.529亞系BA.4/BA.5]) 劑量水準組合260 μg qIRV (22/23) 30 μg (每種毒株7.5 μg) BNT162b2 30 μg (15 μg原始BNT162b2及15 μg BNT162b2奧密克戎[B.1.1.529亞系BA.4/BA.5]) 劑量水準組合390 μg qIRV (22/23) 60 μg (每種毒株15 μg) BNT162b2 30 μg (15 μg原始BNT162b2及15 μg BNT162b2奧密克戎[B.1.1.529亞系BA.4/BA.5])
投與途徑 肌內注射 肌內注射 肌內注射 肌內注射
用途 實驗 實驗 實驗 比較物
尋源 集中提供 集中提供 藉由在現場按上文所詳述之劑量水準組合混合以下物質，產生研究干預： • qIRV (22/23) • 二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5) 集中提供
包裝及貼標籤 在玻璃小瓶中提供研究干預作為開放標籤供應。每個小瓶均按照國家要求貼標籤。 在玻璃小瓶中提供研究干預作為開放標籤供應。每個小瓶均按照國家要求貼標籤。 以PFS或玻璃小瓶形式提供研究干預作為開放標籤供應。每個小瓶均按照國家要求貼標籤。
a.   原始係指原始毒株(Wuhan-Hu-1；USA-WA1/2020)，在本文中亦稱為參考毒株。
研究小組
群組編號 1 2 3 4 5 6
小組標題 qIRV (22/23)/二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5) 劑量水準組合1 qIRV (22/23)/二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5) 劑量水準組合2 qIRV (22/23)/二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5) 劑量水準組合3 30 μg qIRV (22/23) 60 μg qIRV (22/23) 許可之QIV+二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5)
小組類型 實驗 實驗 實驗 實驗 實驗 實驗
小組描述 參與者 以劑量水準組合1 接受qIRV (22/23)/二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5) 參與者以劑量水準組合2 接受IRV (22/23)/二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5) 參與者以劑量水準組合3 接受qIRV (22/23)/二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5) 參與者接受30 μg之qIRV (22/23) 參與者接受60 μg之qIRV (22/23) 參與者 接受30 μg之二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5)，在QIV之對側手臂中同時投與
相連之干預標籤 qIRV (22/23)/二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5) qIRV (22/23)/二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5) qIRV (22/23)/二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5) qIRV (22/23) qIRV (22/23) 二價BNT162b2 (原始/Omi BA.4/BA.5) 及 QIV
統計方法： 子研究A (1期)
由於該子研究本質上係描述性的，故該子研究之計劃樣本大小不基於任何統計假設檢定。
在研究分析期間，來自先前在接受1個劑量之BNT162b2 (劑量水準為30 μg及60 μg)之類似年齡範圍參與者中進行的研究之安全性及免疫原性資料可用作對照。
藉由對每個疫苗組之局部反應、全身性事件及AE/SAE之描述性彙總統計來評估本研究之主要安全性目標。對於主要安全性目標，亦描述性地彙總與極可能或可能之心肌炎或心包炎相符之異常肌鈣蛋白I實驗室參數及ECG異常。
藉由HAI及SARS-CoV-2中和效價之GMT及GMFR描述性地評估次要(免疫原性)目標，以及： • 在各個時間點，每種毒株藉由HAI量測的達成血清轉化之參與者之百分比，以及HAI效價≥1:40之參與者比例。 • 在各個時間點，具有SARS-CoV-2中和效價血清反應之參與者百分比。 2/3 期研究
在審查1期資料後啟動2/3期子研究，且其經設計以評估相對於照護標準，由組合疫苗在選定劑量水準下引發的免疫反應之安全性及非劣性。2期評估包括≥18歲之參與者，每組包括30或120名參與者。3期評估包括18至64歲之參與者，以2:1比率隨機化，以在組合疫苗組中納入3000名參與者且在照護標準比較組中納入1500名參與者。此項2/3期研究係在2022/2023年冬季在北半球進行。在此項2/3期研究中測試之劑量列示於下表49A及49B中。 表49A：在2/3期研究中進行研究之例示性投藥方案(18-64歲之個體)
組 N 注射1 注射2 (備用小組) 調配物
1 30 流感 1/COVID 2：30 μg/30 μg 流感：2xA、2xB各自7.5 μg N/A 床邊混合(流行性感冒及Covid組分在即將投與前混合)
2 120 流感 1/COVID 2：60 μg/30 μg 流感：2xA、2xB各自15 μg N/A
3 120 流感 1/COVID 2：60 μg/30 μg 流感：2xA、2xB各自15 μg N/A 共調配(單個LNP共囊封所有RNA)
4 30 流感 1：30 μg 流感：2xA、2xB各自7.5 μg N/A
5 30 QIV (Flucelvax) COVID 2(30 μg) N/A
6 30 QIV(Flucelvax) 流感AA/COVID：15 μg /30 μg 流感：2xA各自7.5 μg
7 30 流感 1/COVID 2：30/30 流感：2xA、2xB各自7.5 μg N/A 床邊混合
8 30 流感 1/COVID 2：45/30 流感：2xA、2xB各自11.25 μg N/A
9 30 流感/COVID 2：60 μg /30 μg 流感：5 μg 2xA、25 μg 2xB N/A
10 30 流感/COVID 2：30 μg /30 μg 流感：2.5 μg 2xA、12.5 μg 2xB N/A
11 30 流感/COVID 2：30 μg /60 μg 流感：2.5 μg 2xA、12.5 μg 2xB N/A
12 30 流感/COVID 2：45 μg/30 μg。 流感(AAB)：7.5 μg 2xA、30 μg 1xB N/A
13 30 流感/COVID 2：30 μg /30 μg 流感：AAAB (7.5 μg 3xA、1xB) N/A
1投與四價流行性感冒疫苗，其包含4種RNA，兩種編碼來自流行性感冒A型毒株之HA多肽且兩種編碼來自流行性感冒B型毒株之HA多肽。 2投與二價SARS-CoV-2疫苗，其包含編碼來自第一SARS-CoV-2毒株或變異體(本實例中為武漢)之S蛋白之第一RNA，及編碼來自第二SARS-CoV-2毒株或變異體(本實例中為奧密克戎BA.4/5)之S蛋白之第二RNA。在一些實施例中，該兩種RNA係以1:1比率存在。 表49B：在2/3期研究中進行研究之例示性投藥方案(65歲及以上之個體)
組 N 注射1 注射2 (備用小組) 調配物
1 30 流感 1/COVID 2：30 μg/30 μg N/A 床邊混合(流行性感冒及Covid組分在即將投與前混合)
2 30 流感 1/COVID 2：60 μg/30 μg N/A
3 30 流感 1/COVID 2：60 μg/30 μg N/A 共調配(單個LNP共囊封所有RNA)
4 30 流感 1：60 μg N/A
5 30 QIV (Flucelvax) COVID 2(30 μg) 床邊混合
6 30 QIV(Flucelvax) 流感AA/COVID：15 μg /30 μg
7 30 流感/COVID 2：45 μg/30 μg 流感：2xA、2xB各自11.25 μg N/A
8 30 流感/COVID 2：60 μg /30 μg 流感：5 μg 2xA、25 μg 2xB N/A
9 30 流感/COVID 2：30 μg/30 μg 流感：2.5 μg 2xA、12.5 μg 2xB N/A
10 30 流感/COVID 2：30 μg/60 μg 流感：2.5 μg 2xA、12.5 μg 2xB N/A
11 30 流感/COVID 2：45 μg/30 μg。 流感(AAB)：7.5 μg 2xA、30 μg 1xB N/A
12 30 流感/COVID 2：30 μg/30 μg 流感：AAAB (7.5 μg 3xA、1xB) N/A
1投與四價流行性感冒疫苗，其包含4種RNA，兩種編碼來自流行性感冒A型毒株之HA多肽且兩種編碼來自流行性感冒B型毒株之HA多肽。 2投與二價SARS-CoV-2疫苗，其包含編碼來自第一SARS-CoV-2毒株或變異體之S蛋白之第一RNA，及編碼來自第二SARS-CoV-2毒株或變異體之S蛋白之第二RNA。在一些實施例中，該兩種RNA可以1:1比率存在。
在一些實施例中，組合物中之每一RNA可囊封於單獨之LNP中。在一些實施例中，編碼來自第一疾病之抗原的一或多種RNA可共囊封於第一LNP中，且編碼來自第二疾病之抗原的一或多種RNA可共囊封於第二LNP中(例如，對於包含編碼SARS-CoV-2抗原之一或多種RNA及編碼流行性感冒抗原之一或多種RNA的組合物，編碼SARS-CoV-2抗原之每種RNA可共調配於第一LNP中，且編碼流行性感冒抗原之每種RNA可共調配於第二LNP中，且該第一LNP及該第二LNP可在投與之前混合)。在一些實施例中，編碼來自第一疾病之抗原的每種RNA可共調配於相同的LNP中，且編碼來自第二疾病之抗原的每種RNA可共調配於單獨的LNP中(例如，對於包含編碼流行性感冒抗原之兩種或更多種RNA及編碼SARS-CoV-2抗原之兩種或更多種RNA的組合物，編碼流行性感冒抗原之該兩種或更多種RNA可各自調配於單獨的LNP中，且編碼SARS-CoV-2抗原之該兩種或更多種RNA可共調配於相同的LNP中，且所有LNP均可在投與之前混合)。 3 期研究
在審查2期資料後設計進一步的3期子研究，以評估在≥65歲之參與者中，組合疫苗相對於照護標準引發之免疫反應之安全性及非劣性，該等參與者以2:1比率隨機化，以在組合疫苗組中納入3000名參與者且在照護標準比較組中納入1500名參與者。此項3期研究係在南半球進行。 生物醫藥學概況
本實例中所測試之COVID-19與流行性感冒mRNA疫苗組合包括兩種疫苗：qIRV (22/23)及二價BNT162b2 (武漢+ OMI BA.4/BA.5)。下文彙總開發型組合產品中每種疫苗之藥物產品(DP)調配物。在1期及2期研究中，DP可在研究地點混合或可使用共調配物。在3期中，可使用共調配物DP。下文提供本實例中所表徵之個別疫苗之調配物： • 二價COVID-19疫苗(BNT162b2武漢+ OMI BA.4/BA.5)係一種不含防腐劑之LNP無菌分散體，其於水性低溫保護劑緩衝液中以供IM投與。疫苗DP可以0.1 mg/mL RNA之濃度調配於10 mM Tris緩衝液、300 mM蔗糖，pH 7.4中。 • 四價流行性感冒modRNA疫苗(qIRV)係一種不含防腐劑之LNP無菌分散體，其於水性低溫保護劑緩衝液中以供IM投與。疫苗DP可以0.1 mg/mL RNA之濃度調配於10 mM Tris緩衝液、300 mM蔗糖，pH 7.4中。
在本實例中所測試之組合疫苗之二價COVID-19疫苗組分中，構築體各自編碼兩種SARS-CoV-2刺突蛋白抗原中之一者，亦即野生型加上與傳播毒株匹配之變異體，且推薦用於初次或加強疫苗接種。在組合疫苗之qIRV組分中，modRNA構築體各自編碼四種流行性感冒HA抗原中之一者，該四種流行性感冒HA抗原與每年推薦的用於基於細胞之疫苗或重組疫苗之疫苗組分匹配。
在一些實施例中，組合疫苗之流行性感冒及SARS CoV-2組分二者可與所鑑別之傳播毒株匹配。在一些實施例中，此疫苗可提供針對新出現的SARS-CoV-2變異體及推薦在給定季節進行疫苗接種之流行性感冒毒株的保護，且由此減少所需之疫苗接種次數。 計劃之功效評估：COVID-19與流行性感冒mRNA疫苗組合
1期子研究之次要免疫原性目標係描述在各種劑量水準組合下，由qIRV (22/23)/二價BNT162b2 (原始/OMI BA.4/BA.5)疫苗組合引發之免疫反應。次要免疫原性終點包括世界衛生組織(WHO)推薦用於重組或基於細胞之流行性感冒疫苗的2022/2023季節性毒株(2xA, 2xB)之HAI效價，以及針對參考(武漢)毒株及奧密克戎BA.4/BA.5亞系之SARS-CoV-2中和效價。在疫苗接種前及在疫苗接種後1週、4週及8週測試血清，以測定幾何平均效價(GMT)、幾何平均倍數升高(GMFR)、達成血清轉化/血清反應之參與者比例以及針對每種毒株或針對所有毒株之HAI效價≥1:40之參與者比例。
注意：在本研究中，流行性感冒血清轉化定義為在疫苗接種前HAI效價＜1:10且在所關注時間點≥1:40，或在疫苗接種前HAI效價≥1:10且疫苗接種後升高4倍。SARS-CoV-2血清反應定義為自基線(疫苗接種前)達成≥4倍升高，或若基線量測值低於LLOQ，疫苗接種後量測值≥4×LLOQ。
探索性免疫原性目標可包括描述組合疫苗在各個劑量水準組合下引發之對異源流行性感冒毒株之免疫反應，評估為針對不與WHO推薦之2022/23季節性毒株(2xA, 2xB)相匹配的異源毒株之HAI效價。在本研究中，疫苗匹配(抗原性相似)毒株定義為相對於參考血清誘導≤4倍之HAI效價差異。另外，探索性免疫原性目標係基於針對尚未指定之奧密克戎亞系及變異體之SARS-CoV-2中和效價，描述對新出現的所關注SARS-CoV-2變異體之免疫反應。
2/3期及3期子研究包括用以證明相對於照護標準，由組合疫苗引發之免疫反應之非劣性的分析，其中免疫原性終點分析之統計準則將在最終統計分析計劃中指定。
本研究中所表徵之COVID-19及流行性感冒RNA疫苗二者均可引發中和抗體反應。RNA疫苗亦可誘導T細胞反應，且先天性反應可有助於保護。免疫原性、特定而言流行性感冒HA及SARS CoV-2刺突蛋白特異性反應可為適當免疫反應之早期標誌物，此支持對候選物及劑量水準選擇作出決策，且提供不劣於適當比較疫苗之證據，以支持未來許可。 幾何平均效價(GMT)
在進行對數變換且對平均值求冪以按原始標度表述結果之後，GMT可計算為分析結果之平均值。
藉由對分析結果進行對數變換，參照司徒頓t分佈計算95% CI，且對信賴界限求冪，可獲得雙側95% CI。 幾何平均倍數升高(GMFR)
倍數升高可定義為疫苗接種後之結果與疫苗接種前之結果的比率。倍數升高之計算限於在兩個時間點均有非缺失值之參與者。
GMFR可計算為對數變換分析結果(較晚時間點減去較早時間點)之差值之平均值，且對該平均值求冪。可藉由使用按對數標度之平均差之司徒頓t分佈構築CI且對信賴界限求冪來獲得相關之雙側95% CI。 安全性概況
來自BNT162b2及流行性感冒modRNA程式之非臨床研究支持疫苗在直至總計至少100-μg modRNA之臨床測試劑量水準下之有效性。 計劃之安全性評估：COVID-19與流行性感冒mRNA疫苗組合
總之，COVID-19與流行性感冒mRNA疫苗組合需要考慮的潛在風險包括通常與經由IM注射投與之所有疫苗相關之彼等風險，諸如可能源自最終藥物產品(LNP)中之活性疫苗組分(mRNA)或其他組分之局部反應及全身性事件。 益處-風險評價
支持COVID-19與流行性感冒mRNA疫苗組合之臨床開發之有利益處/風險型態可基於：(1)正在進行之二價BNT162b2 COVID-19疫苗臨床研究之安全性及免疫原性(其結果在先前實例中予以闡述)，(2) BNT162b2之大量現實有效性及安全性資料，(3)正在進行之qIRV臨床研究，以及(4) BNT162b2及流行性感冒modRNA疫苗之非臨床研究。
總之，COVID-19與流行性感冒mRNA疫苗組合需要考慮的潛在風險包括通常與經由IM注射投與之所有疫苗相關之彼等風險，諸如可能源自最終藥物產品(LNP)中之活性疫苗組分(mRNA)或其他組分之局部反應及全身性事件。
組合RNA疫苗可解決正在進行之SARS-CoV-2大流行暴發中之重要公共衛生需求，且為個體提供長期潛在優勢，使該等個體能夠接受與每種病毒之當前傳播毒株最匹配之一種組合疫苗，以便最佳地同時保護免受流行性感冒及COVID-19影響。
總體而言，可獲得之臨床及非臨床資料支持組合之COVID-19與流行性感冒RNA疫苗之某些益處超過在健康患者中之潛在相關風險。
1期子研究A之主要目標係描述組合疫苗在不同劑量水準組合下之安全性及耐受性。2/3期及3期子研究包括相同的安全性評價。安全性評估包括： • 在每次疫苗接種後7天內電子日誌(electronic diary、e-diary)中記錄之反應原性 • 第一次疫苗接種至最後一次疫苗接種後4週報告之不良事件(AE) • 第一次疫苗接種至最後一次疫苗接種後4週報告之嚴重AE (SAE)
反應原性包括每天在電子日誌中記錄的在每次投藥後7天時期內所引起之局部反應及全身性事件。局部反應包括注射部位發紅、腫脹及疼痛。全身性事件包括發熱、疲勞、頭痛、寒戰、嘔吐、腹瀉、新發或惡化之肌肉疼痛及新發或惡化之關節疼痛。
額外1期評價意欲基於在最後一次疫苗接種後2天具有異常肌鈣蛋白I實驗室值之參與者百分比或在疫苗接種後2天及1週具有新的心電圖(ECG)異常之參與者百分比，鑑別與極可能或可能之心肌炎/心包炎相符之異常。 某些益處及風險
在一些實施例中，COVID-19與流行性感冒mRNA疫苗組合經由誘導針對疫苗編碼之病毒抗原之中和抗體及T細胞反應提供針對流行性感冒及COVID-19疾病之有效保護。在同一疫苗平臺上開發之modRNA流行性感冒及COVID-19疫苗之非臨床毒物學研究及臨床研究中，可能觀察到且已觀察到通常與IM投與之疫苗相關的反應原性及AE。 實例5：流感/COVID modRNA LNP動物研究設計
本實例中所闡述實驗之目標係量測含有QIRV疫苗(四價流行性感冒RNA) + COVID-19二價RNA疫苗(WT +奧密克戎變異體，例如WT+ BA.4/5奧密克戎)之組合疫苗之免疫原性，及評價組合投與疫苗是否將干擾所編碼HA及/或S多肽之免疫原性(與分開投與之流行性感冒或SARS-CoV-2疫苗相比)。
本實例中所提供之資料證明，在一些實施例中，與由獨立的流感及COVID-19疫苗誘導之免疫反應相比，流感+ COVID-19疫苗組合可引發至少不降低之免疫反應，且可與由獨立的流感及COVID-19疫苗誘導之免疫反應相當或甚至更高。
方法：利用獨立或組合之LNP_流感及LNP_COVID-19 modRNA材料對小鼠進行免疫。在初免後第21天及在第42天(加強免疫後14天)收集血清，且藉由血清學測試(流感HAI及微量中和(MNT)，以及SARS-CoV-2中和分析)進行評估。每組測試10隻小鼠。
意義：本研究評價組合流感+ COVID-19 modRNA疫苗方法之可行性。
材料需求：流感疫苗比較物= NH22-23許可之比較物，內部(Fluad, Fluzone HD)。在本實例中，使用Fluad NH 22-23及Fluzone HD，且與編碼以下毒株之HA多肽之四價modRNA疫苗進行比較： A/Wisconsin/588/2019 (H1N1) A/Darwin/6/2021 (H3N2) B/Austria/1359417/2021 (B-Victoria) B/Phuket/3073/2013 (B-Yamagata) Fluad及Fluzone HD包含來自以下毒株之抗原： A/Victoria/2570/2019 IVR-215 A/Darwin/6/2021 IVR-227 B/Austria/1359417/2021 BVR-26 B/Phuket/3073/2013 BVR-1b
本研究使用二價modRNA COVID-19疫苗，其包含BNT162b2 (編碼WT SARS-CoV-2 S蛋白)及BNT162b2 OMI (編碼包含BA.4/5變異體之特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白)。二價COVID-19疫苗中之兩種RNA均編碼融合前穩定之S蛋白，其在對應於SEQ ID NO: 1之殘基986及987之位置處包含脯胺酸突變。 下表49彙總本研究之某些實驗細節。
組號 小鼠 RNA DP 描述 劑量(μg) 劑量體積/途徑 疫苗接種 ( 天) 抽血 ( 天)
1 10 鹽水 - 50 μl / IM 0, 28 21, 42
2 10 四價modFlu HA (4x HA預混物 1) 總計0.8 (各自0.2 μg) 50 μl / IM 0, 28 21, 42
3 10 二價modCOVID S (WT +奧密克戎BA.4/5_P2 ) 總計0.8 (各自0.4 μg) 50 μl / IM 0, 28 21, 42
4 10 四價modFlu及二價(WT +奧密克戎BA.4/5_P2) modCOVID - (後混物 1) 總計1.6 ug (0.2 μg每種流感HA + 0.4每種COVID modRNA) 50 μl / IM 0, 28 21, 42
5 10 四價modFlu及二價(WT +奧密克戎BA.4/5_P2) modCOVID (後混物 1) 總計0.8 ug (0.1 μg每種流感HA + 0.2每種COVID modRNA) 50 μl / IM 0, 28 21, 42
6 10 四價modFlu及二價(WT +奧密克戎BA.4/5_P2) modCOVID (在每條腿中分開投與) 總計1.6 ug 0.8 (0.2 μg每種流感HA) + 0.8 (0.4每種COVID modRNA) 50 μl / IM流感 1號腿+ 50 μl COVID / IM 2號腿 0, 28 21, 42
7 10 Fluad (NH 22-23) +二價(WT +奧密克戎BA.4/5_P2) modCOVID (在每條腿中分開投與) 2.4 ug Fluad + 0.8 μg Covid (0.4每種COVID modRNA) 20 μl流感1號腿+ 50 μl/ IM COVID 2號腿 0, 28 21, 42
8 10 Fluad (NH 22-23) (60 μg/0.5 mL) 2.4 μg 20 μl/IM 0, 28 21, 42
9 10 Fluad (NH 22-23) (60 μg/0.5 mL) 2.4 μg (稀釋) 50 μl/IM 0, 28 21, 42
10 10 Fluzone HD (NH 22-23) - 240 μg/0.7 mL 10.3 μg 30 μl/IM 0, 28 21, 42
1後混物=調配個別原料藥且將個別LNP混合在一起。預混物=將原料藥合併且接著共調配至LNP中 下表50彙總關於本實驗中欲研究動物之其他細節。
研究細節
動物物種 小鼠
動物品系 Balb/c
動物性別 雌性
動物供應商 Jackson Laboratory
抵達時年齡 5-7週
研究開始時年齡 10-12週
研究中之動物 100
疫苗製備 無菌玻璃小瓶
遞送 0.3 mL胰島素注射器 1/動物 a(1組-5組及8組-10組) 2/動物 a(6組及7組) 初免(1組-5組及8組-10組)，左腿 加強(1組-5組及8組-10組)，右腿 初免(6組及7組)，1號腿左腿， 2號腿右腿 加強(6組及7組)，1號腿右腿， 2號腿左腿
a1/動物指示劑量作為一次注射投與。2/動物指示劑量作為兩次注射投與。 表51研究時間表
天 程序
0 第1次疫苗接種
21 頜下抽血
28 第2次疫苗接種
42 末端抽血(心臟穿刺)
在第21天及第42天，對1組、2組及4組-10組收集之血清樣品實施HIA及微量中和效價(MNT)分析，且收集1組、3組-7組之SARS-CoV-2 pVNT。
第1次投藥後(PD1)及第2次投藥後(PD2)結果示於圖2(A)至圖2(L)中。圖2(A)至圖2(D)分別顯示在投與第一劑量之疫苗後3週，H1N1/Wisconsin、H3N2/Darwin、B/Phuket及B/Austria毒株之MNT分析結果。如圖中所示，當組合投與流行性感冒及COVID-19 modRNA疫苗時，在第一次投藥後，沒有觀察到針對A/Wisconsin及A/Darwin之免疫反應出現顯著干擾，而觀察到針對B/Austria之輕微干擾。當流行性感冒及COVID modRNA疫苗組合投與時，B/Phuket效價在PD1時降低，但效價過低，無法確定是否觀察到干擾。
圖2(H)至圖2(K)分別顯示在投與第二劑量之疫苗後2週，針對H1N1/Wisconsin、H3N2/Darwin、By/Phuket及Bv/Austria之MNT中和結果。如圖中所示，對於H1N1/Wisconsin、H3N2/Darwin及By/Phuket，投與兩個劑量之COVID-19及流行性感冒modRNA組合所產生之中和反應與單獨投與兩個劑量之流行性感冒modRNA疫苗之中和反應類似，而對於Bv/Austria，發現該組合所產生之效價輕微降低。對於所有組，與第一劑量後相比，第二劑量之疫苗後之中和效價更高。
圖2(E)顯示在投與第一劑量之疫苗後3週所收集之血清中針對假病毒之中和效價，該假病毒包含武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白或含有奧密克戎BA.4/5變異體之特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。如圖中所示，當與四價流行性感冒modRNA疫苗或Fluad組合投與時，二價COVID-19疫苗之免疫原性不受影響。
圖2(G)顯示在投與第二劑量之疫苗後2週所收集之血清中針對假病毒之中和效價，該假病毒包含武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白或含有奧密克戎BA.4/5變異體之特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白。類似於第1次投藥後，與單獨投與時相比，當COVID-19疫苗與流行性感冒疫苗組合投與時，未觀察到或觀察到極小之干擾。對於所有組，投與第二劑量之疫苗增加中和反應。
圖2(F)彙總圖2(A)至圖2(E)中所示之SARS-CoV-2免疫反應。如在圖中可見，與獨立的疫苗相比，組合疫苗未觀察到或觀察到極小之干擾。 實例6：流行性感冒RNA疫苗之臨床及非臨床資料
本實例闡述來自臨床及非臨床研究之資料，該等資料表徵意欲預防由流行性感冒病毒引起之疾病之研究型流行性感冒modRNA疫苗。本實例中所表徵之疫苗包含多達8種modRNA，其各自編碼單個流行性感冒HA或NA抗原。所測試modRNA中之RNA修飾減弱先天免疫感測器活化能力，藉此降低RNA降解之速率且促進抗原表現。在本實例中所研究之疫苗中，modRNA囊封於LNP中，此使得能夠在肌內(IM)注射後將modRNA轉染至宿主細胞中。本實例中所用之LNP調配物含有2種功能性脂質，亦即ALC-0315及ALC-0159，以及2種結構脂質，亦即DSPC及膽固醇。modRNA疫苗之效能可藉由LNP囊封而提高，此保護RNA免受細胞外RNA酶之降解。本研究中所表徵之流行性感冒modRNA-LNP平臺與SARS-CoV-2疫苗中所用之平臺BNT162b2 (Comirnaty®)相同，該平臺於2020年12月11日在美國被授權緊急用於≥16歲之個體，且於2021年5月10日被授權用於≥12歲之個體。 非臨床研究之彙總
本實例中所彙總之非臨床研究證明，流行性感冒modRNA疫苗候選物在小鼠及大鼠中具有免疫原性。該等活體外及活體內研究亦確立流行性感冒modRNA疫苗之作用機制，亦即所編碼之流行性感冒HA抗原顯示誘導特徵在於強功能性抗體反應以及Th1型CD4+及IFNg+ CD8+ T細胞反應之免疫反應。此作用機制與針對BNT162b2所確立之作用機制類似。
在小鼠中進行之免疫原性研究以許可之含佐劑不活化之流行性感冒疫苗作為基準，支持多價流行性感冒modRNA疫苗調配物可用於靶向4種不同的流行性感冒病毒毒株。八價HA/NA modRNA疫苗在小鼠中之初步免疫原性研究指示，與單價對照疫苗相比，對流行性感冒A毒株無干擾，且對流行性感冒B毒株之抗體反應略有降低。
使用螢光素酶表現作為替代性報導基因來評價生物分佈，該替代性報導基因使用與本實例中所表徵之流行性感冒modRNA疫苗相同的LNP調配物來調配，具有相同之脂質組成。在BALB/c小鼠中IM注射編碼螢光素酶之LNP調配之RNA後，在投藥後6小時在注射部位處展示螢光素酶表現，且在9天後偵測不到。在肝臟中偵測到較小程度之螢光素酶；注射後6小時存在表現且在注射後48小時時偵測不到。在向大鼠IM投與同流行性感冒modRNA疫苗具有相當脂質組成之經放射性標記之LNP-mRNA後，注射部位處所投與劑量之百分比亦最大。在注射部位以外，肝臟中之放射性總回收率最大且脾中之放射性總回收率顯著更低，腎上腺及卵巢中之回收率極低。
流行性感冒modRNA疫苗之首次用於人體(FIH)研究得到modRNA-LNP平臺之已確立非臨床安全性以及BNT162b2疫苗及編碼HA抗原之疫苗的臨床安全性支持。本實例中所表徵之流行性感冒疫苗所用之modRNA-LNP平臺之非臨床安全性已在COVID-19疫苗程式中得到充分表徵，在Wistar Han大鼠中，4種BNT162 modRNA疫苗候選物以每個劑量最多100 μg mRNA進行最多3次投藥展示出有利之安全性型態。所有4種BNT162 modRNA疫苗候選物之毒物學發現均係相當的，此支持具有相同modRNA-LNP平臺之疫苗共有同等安全性型態之觀點。本研究中所表徵之流行性感冒modRNA疫苗使用與BNT62疫苗相同之RNA製造製程，且係在相同之LNP調配物中。
另外，modRNA編碼之HA抗原之安全性在許可之疫苗及具有大量臨床安全性資料集之臨床試驗中得到充分證明。
流行性感冒modRNA單價HA疫苗候選物(靶向A/Wisconsin/588/2019毒株)或靶向A/Wisconsin/588/2019、A/Cambodia/e0826360/2020、B/Phuket/3073/2013及B/Washington/02/2019毒株之流行性感冒modRNA四價HA疫苗(Quad modRNA)在大鼠中之重複劑量毒性研究證實，疫苗候選物共有與BNT162 modRNA疫苗候選物相似之毒性型態。另外，modRNA四價HA疫苗候選物之符合GLP之DART研究揭示，對雌性大鼠之生育能力、妊娠或授乳或對F1子代之胚胎-胎兒或產後存活、生長或發育沒有疫苗相關之效應。
基於源自BNT162b2疫苗候選物之modRNA-LNP平臺之非臨床經驗以及流行性感冒modRNA單價或四價HA疫苗候選物之重複劑量毒性研究結果，此模式之大鼠靶器官為注射部位、免疫器官(引流及局部淋巴結、脾及骨髓)及肝臟。所有發現均為非不良的，且大多數與對疫苗之免疫/發炎性反應相關，包括注射部位紅斑及水腫以及顯微鏡下混合細胞發炎、引流淋巴結及脾中之細胞結構增多以及骨髓及脾中之造血增多。LNP攝取相關之肝細胞空泡形成不嚴重且係可逆的，沒有肝細胞損傷證據。 臨床研究之彙總
BNT162b2在臨床研究及批准後使用中之經驗指示，modRNA-LNP平臺具有良好之安全性型態且能夠誘導免疫反應。
因此，除流行性感冒modRNA疫苗候選物之非臨床毒物學及免疫原性資料以外，BNT162b2之非臨床及臨床資料包亦支持使用modRNA-LNP平臺以最多100 μg總RNA進行總計3次IM投與對流行性感冒modRNA疫苗候選物進行臨床研究評估。
在利用單價、二價或四價流行性感冒modRNA疫苗進行疫苗接種後4週內獲得之安全性及免疫原性資料亦指示，30 μg及60 μg劑量係安全的且可能引發至少與許可之四價流行性感冒疫苗相似之免疫反應。該等資料支持進一步之臨床開發，包括對＞30 μg劑量之研究。在一些實施例中，商業化流行性感冒疫苗可於在2℃至8℃下穩定≥9個月之液體調配物中，其中劑量水準及劑量數量將在1期劑量探索研究中確定。
探索一(1)劑量及2劑量疫苗接種方案，包括modRNA流行性感冒疫苗與Fluzone HD之組合。
若將來發現需要每年加強劑量之COVID-19疫苗，則計劃對與其他疫苗(包括肺炎球菌疫苗及COVID-19疫苗)之共投與進行進一步研究。
下文列示在2021/2022流感季流行及預計在2022/2023流感季流行之流行性感冒毒株 2021/2022 北半球毒株：• Wisconsin modRNA - A/WISCONSIN/588/2019 (H1N1) • Phuket modRNA - B/PHUKET/3073/2013 (B YAMAGATA) • Washington modRNA - B/WASHINGTON/02/2019 (B VICTORIA) • Cambodia modRNA - A/CAMBODIA/e0826360/2020 (H3N2) 2022/2023 北半球毒株：• Wisconsin modRNA - A/WISCONSIN/588/2019 (H1N1) • Darwin modRNA - A/Darwin/6/2021 (H3N2) • Phuket modRNA - B/PHUKET/3073/2013 (B YAMAGATA) • Austria modRNA - B/AUSTRIA/1359417/2021 (B VICTORIA) 2023 南半球毒株：• Sydney modRNA - A/Sydney/5/2021 (H1N1) • Darwin modRNA - A/Darwin/6/2021 (H3N2) • Phuket modRNA - B/PHUKET/3073/2013 (B YAMAGATA) • Austria modRNA - B/AUSTRIA/1359417/2021 (B VICTORIA)
測試四種單價藥物產品(DP)及兩種四價DP (列示於下文)。可產生其他DP (例如經適應以匹配在相關地點流行及/或預計流行之流行性感冒毒株之DP)。 1. 單價：Wisconsin (PF-07829855) DP 2. 單價：Phuket (PF-07836259) DP 3. 單價：Washington (PF-07836261) DP 4. 單價：Cambodia (PF-07836258) DP 5. 四價：Wisconsin (PF-07829855)、Phuket (PF-07836259)、Washington (PF-07836261)、Cambodia (PF-07836258) DP 6. 四價：Wisconsin (PF-07829855)、Phuket (PF-07836259)、Darwin (PF-07871853)、Austria (PF-07872963) DP
本實例中所論述之流行性感冒modRNA疫苗包含編碼毒株特異性全長、密碼子最佳化之HA包膜糖蛋白(負責病毒結合至靶細胞並介導細胞進入之蛋白質)及/或NA (負責使病毒能夠自宿主細胞中釋放之蛋白質)之modRNA。
本研究中所表徵之modRNA流行性感冒疫苗DP係一種不含防腐劑之LNP無菌分散體，其於水性低溫保護劑緩衝液中以供IM投與。疫苗DP以0.1 mg/mL RNA在10 mM Tris緩衝液、300 mM蔗糖，pH 7.4中調配成單劑量小瓶，每個小瓶之填充體積為0.5 mL，且標稱體積為0.3 mL。 原料藥
特定構築體(亦即Wisconsin modRNA、Phuket modRNA、Washington modRNA、Cambodia modRNA、Darwin modRNA及Austria modRNA)原料藥材料係組合用於製造本實例中所論述之四價DP之唯一活性成分。將原料藥調配於10 mM HEPES緩衝液、0.1 mM EDTA (pH 7.0)中，且儲存在-20±5℃之HDPE瓶EVA撓性容器中。 賦形劑
DP中存在賦形劑胺丁三醇(Tris鹼)及Tris鹽酸鹽(HCl)。 1/2 期研究
對於單價投藥，流行性感冒RNA疫苗可以每個劑量3.75至30 μg之範圍投藥，注射體積為0.3 mL。使用本實例中所闡述之調配物需要用無菌0.9%氯化鈉(生理鹽水)稀釋，30-μg劑量除外。4個劑量水準為： •3.75 μg •7.5 μg •15 μg •30 μg
藉由將2種單價疫苗在0.3 mL之總遞送體積中混合投用二價疫苗。二價疫苗中RNA之投藥範圍(總RNA)及比率為： • 15 μg，1:1 (7.5 μg + 7.5 μg A/A或A/B) • 30 μg，1:1 (15 μg + 15 μg A/A或A/B) • 60 μg，1:1 (30 μg + 30 μg A/A) • 22.5 μg，1:2 (7.5 μg A + 15 μg B) • 18.75 μg，1:4 (3.75 μg A + 15 μg B) 多價流行性感冒modRNA疫苗在小鼠中之免疫原性
目前許可之季節性流行性感冒疫苗經設計以保護抵抗最多4種不同的流行性感冒病毒，包括2種流行性感冒A病毒(H1N1及H3N2亞型)及2種流行性感冒B病毒(B Yamagata及B Victoria譜系)。為評估modRNA流行性感冒疫苗之多價調配物之可行性，產生編碼4種不同的HA蛋白及4種不同的NA蛋白之modRNA。將由接種編碼單個毒株特異性HA或NA之LNP調配之modRNA的小鼠引發之免疫反應與接種八價HA/NA modRNA調配物之群組進行比較。藉由將表現HA或NA之每種modRNA單獨調配在LNP中，且接著將該8種LNP以等比率混合在一起，或藉由預混合該8種modRNA，之後在LNP中進行單一共調配來比較八價調配方法。本研究中包括經許可之含佐劑三價不活化之流行性感冒疫苗(FluAd®, Seqirus)作為基準。
在第0天及第28天，利用2 μg表現HA及NA之每種modRNA作為LNP中之單價或八價疫苗調配物，IM免疫BALB/c小鼠。針對所有HA及NA組分，LNP調配之modRNA均引發強勁之抗體及T細胞反應，其水準與許可之疫苗比較物相似或更高。在第49天(第二次加強免疫後21天)，針對流行性感冒A毒株之個別HA及八價調配物觀察到相似之HAI及中和反應；然而，在B毒株中，觀察到八價調配物有一些干擾。所量測的針對NA之抗體顯示出與HA相似之趨勢。在針對流行性感冒毒株之單價HA及八價調配物中觀察到相似之CD8+及CD4+ T細胞反應，對於B毒株亦注意到一些干擾。總之，HA/NA八價RNA疫苗調配物引發與針對H1N1及H3N2毒株匹配之單價HA調配物相似之抗體反應及T細胞反應，但降低對流行性感冒B病毒之HA之反應。八價HA/NA mRNA疫苗在小鼠中之該等初步免疫原性研究表明，與單價對照疫苗相比，抗體反應略有降低。該2種不同的多價調配方法未觀察到免疫原性差異。
該等資料係用編碼HA及NA蛋白之流行性感冒modRNA疫苗候選物獲得的，該等HA及NA蛋白來源於針對2018-2019北半球流行性感冒季所推薦之病毒毒株，且用與在臨床研究中所用之彼等LNP相關但不相同之LNP調配。該等初步小鼠免疫原性資料支持使用多價modRNA調配物，且經針對2020-2021北半球毒株之流行性感冒modRNA疫苗臨床前證實。該等資料亦證明補充或組合表現HA蛋白之流行性感冒modRNA疫苗與表現NA蛋白之modRNA的潛力。NA可作為合意之疫苗抗原，此乃因有證據表明NA在降低疾病嚴重程度並誘導交叉保護中起作用。 流行性感冒modRNA四價HA疫苗-重複劑量毒性
在一項為期17天之重複劑量符合GLP之毒性研究中，IM投與靶向A/Wisconsin/588/2019、A/Cambodia/e0826360/2020、B/Phuket/3073/2013及B/Washington/02/2019毒株之流行性感冒四價modRNA HA疫苗(30 μg/劑，每2週投與一次，總計2個劑量[第1天及第15天])具有耐受性，無任何全身毒性證據。觀察到非不良變化且其與對疫苗之預期反應相符合及/或繼發於發炎，類似於針對單價modRNA所闡述之彼等變化，唯肝細胞空泡形成被解釋為反映肝細胞對LNP調配物中脂質之攝取。在恢復期結束時，除球蛋白及A/G比率外，所有發現均部分至完全恢復。投與流行性感冒四價modRNA HA疫苗之大鼠展現出血球凝集素抑制反應。
在投藥期結束時，在以下出現非不良流感四價HA modRNA疫苗相關之顯微鏡下觀察結果：注射部位(發炎及水腫)，其與肉眼觀察到之深色相關；引流及腹股溝淋巴結(漿細胞及生發中心之細胞結構增多)；脾(造血細胞及生發中心之細胞結構增多)，其與脾增大及脾重量變高相關；骨髓(造血細胞之細胞結構增多)；及肝臟(門靜脈周肝細胞空泡形成)。在恢復期結束時，所發現結果完全恢復，唯引流淋巴結增大之肉眼可見發現結果及注射部位處發炎之顯微鏡發現結果，以及引流淋巴結及腹股溝淋巴結中漿細胞及生發中心之細胞結構增多部分恢復。
在投藥期期間，觀察到非不良流感四價HA modRNA疫苗相關之較低網狀紅血球及血小板計數以及較高之WBC、嗜中性球、單核球、嗜酸性球及LUC、外周血塗片中之多分葉嗜中性球、PT延長及較高之纖維蛋白原、較低之白蛋白及A/G比率及較高之球蛋白、較低之膽固醇及較高之A1AGP及A2M。所有臨床病理學發現結果均完全恢復，唯較高之球蛋白及較低之A/G比率沒有恢復。
流感四價HA modRNA疫苗相關之非不良平均體重下降及平均食物消耗量減少係短暫的，且在研究之第一週結束時恢復，且在每次投藥後平均體溫變高。
在研究之投藥期及恢復期結束時，投與流感四價HA modRNA導致對疫苗中4種流行性感冒毒株中之每一者之血球凝集素抑制反應。在恢復期結束時，對4種流行性感冒毒株中之每一者之平均效價高於投藥期結束時之效價。在恢復期結束時，對每種毒株之平均效價自最高至最低為A/Wisconsin/588/2019 ＞ B/Phuket/3073/2013 ＞ B/Washington/02/2019 ＞ A/Cambodia/e0826360/2020。 流行性感冒modRNA疫苗生殖及發育毒性
評估流感四價HA modRNA對孕期及哺乳期Wistar han大鼠之生育能力、胚胎-胎兒(包括致畸胎性評估)以及產前及產後發育之效應。將流感四價HA modRNA以30 μg劑量在同居前2次(21天及14天)及在妊娠期期間2次(GD 9及20)肌內投與至雌性大鼠之四頭肌中。
不存在流感四價HA modRNA疫苗相關之臨床徵象或對體重或食物消耗量之效應。不存在疫苗相關之肉眼可見觀察結果。對發情週期、交配、生育能力及妊娠指數或任何卵巢、子宮或產仔參數(包括F1存活、生長或外部、內臟、骨骼畸形或變異)沒有疫苗相關之效應，或對F1幼崽之耳廓分離、睜眼、聽覺驚嚇反應或瞳孔收縮沒有疫苗相關之效應。在F0雌性及其F1子代(胎兒或幼崽)中，流感四價HA modRNA疫苗投與在所有時間點(DS 22、GD 21及LD 21)均產生對4種流行性感冒毒株中之每一者的疫苗誘導之血球凝集素效價。
總之，在孕前及孕中向Wistar Han雌性大鼠肌內投與流感四價HA modRNA疫苗具有耐受性，沒有母體全身毒性之跡象。對雌性大鼠之生育能力、妊娠或授乳或對F1子代之胚胎-胎兒或產後存活、生長或發育沒有流感四價HA modRNA疫苗相關之效應 。 在人類中之效應 子研究A (1期)
實施一項隨機化、觀察者盲化(委托者非盲)之子研究，以評估以下之安全性及免疫原性：4個劑量水準(3.75、7.5、15或30 μg)之單價流行性感冒RNA疫苗(本實例中為A/Wisconsin或B/Phuket)、4個劑量水準組合之二價RNA疫苗(本實例中為A/Wisconsin及B/Phuket)以及針對2種A毒株(本實例中為A/Wisconsin及A/Cambodia)及2種B毒株(本實例中為B/Phuket及B/Washington)之每種HA劑量水準為7.5 μg之qIRV。另外，子研究A描述在先前接受modRNA疫苗後，由許可之QIV (本實例中為Fluzone HD)引發之免疫反應，以評價免疫反應之潛在引發，以及在先前接受許可之QIV後，由mIRV (本實例中為A/Wisconsin或B/Phuket)引發之免疫反應，以評價QIV後之免疫反應是否可增強。
基於第1次疫苗接種後1週之初步免疫原性資料，決定不按研究方案中所計劃將參與者入選人數自255擴增至615。因此，有254名參與者入選子研究A。
入選子研究A中之所有參與者在第1次疫苗接種後均達到4週。
下文闡述迄今為止可自子研究A中獲得之安全性及免疫原性資料(亦即疫苗接種後1週及4週)。
基於該等資料，子研究B中之方案經設計以包括增加劑量之流行性感冒modRNA疫苗，總劑量不超過100 μg。此得到高達30 μg單次劑量之可接受之耐受性型態及增加免疫反應之機會的支持。 安全性
進行安全性分析之群體包括已接受疫苗且具有任何安全性資料之參與者。總計60名參與者(每個劑量水準/劑量水準組合15名參與者)各自隨機化至mIRV-A、mIRV-B以及bIRV-A及bIRV-B組中，且15名參與者隨機化至qIRV組中。所有參與者均接受疫苗接種，mIRV-A 30-μg組中之1名參與者除外。mIRV-B 15-μg組中之一名參與者在疫苗接種後因方案偏差而停止，但繼續參與安全性隨訪研究。在數量上，所有疫苗組中女性參與者更多，mIRV-A疫苗組除外，在該組中男性參與者更多。大多數參與者為白種人。所有疫苗接種組之平均疫苗接種年齡為大約70歲。 局部反應
下文闡述每一疫苗組在疫苗接種後7天內之局部反應。許可之QIV用作比較物。 mIRV-A
在接受mIRV-A之參與者中，25名參與者報告在注射部位有輕度至中度疼痛。在任何mIRV-A劑量水準下均未報告有發紅或腫脹。注意到與劑量相關之反應原性(注射部位疼痛)輕微增加。 mIRV-B
在接受mIRV-B之參與者中，23名參與者報告有任何局部反應。注射部位處疼痛(n=22)係最常報告之局部反應，其次為發紅(n=4)及腫脹(n=3)。所有局部反應在嚴重程度上均為輕度至中度的，且中值持續時間為1至4天。沒有明顯的與劑量相關之反應原性增加。 bIRV-A及bIRV-B
在接受bIRV-A及bIRV-B之參與者中，27名參與者報告有任何局部反應。注射部位處疼痛(n=27)係最常報告之局部反應，其次為發紅及腫脹(各自n=4)。所有局部反應在嚴重程度上均為輕度至中度的，且中值持續時間為1至5天。沒有明顯的與劑量相關之反應原性增加。 qIRV
在接受qIRV之參與者中，13名參與者報告有任何局部反應。注射部位處疼痛(n=13)係最常報告之局部反應，其次為腫脹(n=1)。該兩種局部反應在嚴重程度上均為輕度至中度的，且中值持續時間為2天。 全身性事件
下文闡述每一疫苗組在疫苗接種後7天內之全身性事件。許可之QIV用作比較物。 mIRV-A
在接受mIRV-A之參與者中，19名參與者報告有任何全身性事件。來自30-μg疫苗組中之一名參與者報告≥38.0℃至38.4℃之發熱持續1天。疲勞(n=14)係最常報告之全身性事件，其次為頭痛(n=8)、新發或惡化之肌肉疼痛(n=5)、寒戰及腹瀉(各自n=3)。所有全身性事件在嚴重程度上均為輕度至中度的，且中值持續時間為1至6天。 mIRV-B
在接受mIRV-B之參與者中，18名參與者報告有任何全身性事件。來自3.75-μg疫苗組中之一名參與者報告＞38.4℃至38.9℃之發熱。疲勞(n=13)係最常報告之全身性事件，其次為頭痛(n=12)、寒戰及新發或惡化之肌肉疼痛(各自n=6)、新發或惡化之關節疼痛(n=4)及腹瀉(n=2)。所有全身性事件在嚴重程度上均為輕度至中度的，且中值持續時間為1至8天。 bIRV-A及bIRV-B
在接受bIRV-A及bIRV-B之參與者中，27名參與者報告有任何全身性事件。疲勞(n=22)係最常報告之全身性事件，其次為新發或惡化之肌肉疼痛(n=11)、頭痛(n=10)、新發或惡化之關節疼痛(n=8)、寒戰及腹瀉(各自n=5)及嘔吐(n=1)。值得注意的是，沒有報告全身性發熱事件。所有全身性事件在嚴重程度上均為輕度至中度的，且中值持續時間為1至5.5天。 qIRV
在接受qIRV之參與者中，7名參與者報告有任何全身性事件。疲勞(n=6)係最常報告之全身性事件，其次為頭痛(n=5)、寒戰(n=2)及新發或惡化之肌肉疼痛以及新發或惡化之關節疼痛(各自n=1)。所有全身性事件在嚴重程度上均為輕度至中度的，且中值持續時間為1至5天。 不良事件
下文闡述每一疫苗組在疫苗接種後4週內之AE。許可之QIV用作比較物。本研究中未報告死亡。
值得注意的是，在疫苗接種後，未注意到臨床關注之ECG或安全性實驗室異常。 mIRV-A
在接受mIRV-A之參與者中，7名參與者報告至少1次出現之任何AE。3.75-μg (不適)及7.5-μg (搔癢)疫苗組中各有一名參與者報告與疫苗相關之AE。來自15-μg疫苗組之一名參與者在疫苗接種後8天報告嚴重病毒性胃腸炎，其經判斷與研究干預無關。 mIRV-B
在接受mIRV-B之參與者中，12名參與者報告至少1次出現之任何AE。來自30-μg疫苗組之一名參與者報告與疫苗相關之AE (C-反應蛋白增加)。來自3.75-μg疫苗組之一名參與者報告髖部骨折SAE，其與疫苗無關。 bIRV-A及bIRV-B
在接受bIRV-A及bIRV-B之參與者中，15名參與者報告至少1次出現之任何AE。來自A 7.5-μg + B 15-μg疫苗組之三名參與者報告與疫苗相關之AE (C-反應蛋白增加[n=2]及眼型偏頭痛[n=1])。來自A 3.75-μg + B 15-μg疫苗組之一名參與者報告肋骨骨折SAE，其與疫苗無關。 qIRV
在接受qIRV之參與者中，2名參與者報告至少1次出現之任何AE (注射部位搔癢[n=1]及血紅素減少[n=1])，該二者均評價為與疫苗相關。 四價免疫原性
在接受qIRV之參與者中，在疫苗接種後4週，針對所有毒株之HAI GMT及GMFR相對於基線均升高，此與接受許可QIV之參與者相當。
在投與qIRV後4週，達成A/Wisconsin及A/Cambodia血清轉化之參與者比例高於接受許可QIV之參與者，達成該等毒株之血清轉化之參與者比例有差異，分別為20.0%及13.3%。在投與qIRV後4週，達成B/Phuket血清轉化之參與者比例為14.3% (1.8, 42.8)，相比之下，接受許可QIV之參與者為26.7% (7.8, 55.1)；而20.0%之參與者在投與qIRV或許可QIV後4週達成B/Washington血清轉化。
在投與qIRV後1及4週達成血清轉化之參與者比例示於表52中。
表52. 在疫苗接種後每個時間點每種毒株達成HAI血清轉化之參與者比例差異- qIRV -許可之QIV -可評估之免疫原性群體
取樣時間點 b 毒株 疫苗組(按隨機化) 差異%
qIRV aN cn d(%) (95% CIe) qIRV -許可QIV N cnd (%) (95% CIe)
4週 B/Washington 15 1 (6.7) (0.2, 31.9) 15 0 (0.0) (0.0, 21.8) 20.0
A/Wisconsin 15 13 (86.7) (59.5, 98.3) 15 10 (66.7) (38.4, 88.2) 13.3
A/Cambodia 15 8 (53.3) (26.6, 78.7) 15 6 (40.0) (16.3, 67.7) -12.4
B/Phuket 14 2 (14.3) (1.8, 42.8) 15 4 (26.7) (7.8, 55.1 6.7
B/Washington 15 3 (20.0) (4.3, 48.1) 15 3 (20.0) (4.3, 48.1) 0.0
縮寫：HAI =紅血球凝聚抑制分析；modRNA =核苷修飾之信使核糖核酸；qIRV =四價流行性感冒modRNA疫苗；QIV =四價流行性感冒疫苗。注意：血清轉化定義為在疫苗接種前HAI效價＜1:10，且在所關注時間點≥1:40，或在疫苗接種前HAI效價≥1:10，在所關注時間點上升4倍。注意：選擇在疫苗接種前第1天收集之成對樣品進行血清轉化計算。a.對於以下所編碼毒株中之每一者，qIRV之劑量水準為7.5 μg：A/Wisconsin、A/Cambodia、B/Phuket及B/Washington。b.方案指定之血液樣品收集時間。c. N =在疫苗接種前及在投藥/取樣時間點，在指定分析中具有有效且確定之分析結果之參與者人數。d. n =在投藥/取樣時間點，在指定分析中達成HAI血清轉化的具有有效且確定之分析結果之參與者人數
針對老年個體之子研究B (1/2期)
以下部分闡述一項隨機化、單盲(委托者非盲)子研究，以評估下文所詳述之疫苗接種時間表之安全性及免疫原性。將65至85歲之參與者隨機化至以下疫苗接種時間表中之一者中，且對其接受之1次訪視還是2次訪視疫苗接種時間表不知情： 2 次訪視時間表• 2個劑量之編碼2種A毒株及2種B毒株之qIRV，劑量水準為每種毒株7.5 μg，相隔21天投與。 • 2個劑量之許可QIV，相隔21天投與(作為對照組)。 • 一個劑量之許可QIV，之後為一個劑量之編碼2種A毒株之bIRV (劑量水準為每種毒株15 μg或30 μg)，相隔21天投與。 1 次訪視時間表• 一個劑量之許可QIV與編碼2種A毒株之bIRV (劑量水準為每種毒株15 μg或30 μg)在對側手臂中同時投與。 • 一個劑量之編碼2種A毒株之bIRV (劑量水準為每種毒株15 μg)與編碼2種B毒株之bIRV (劑量水準為每種毒株15 μg)在對側手臂中同時投與。 • 一個劑量之編碼2種A毒株及2種B毒株之qIRV，按以下劑量水準組合： • 每種毒株15 μg • 每種A毒株7.5 μg，及每種B毒株22.5 μg • 每種A毒株7.5 μg，及每種B毒株37.5 μg • 一個劑量之許可QIV (作為對照組)。 初始招募 2 次訪視時間表
將總計63名參與者隨機化至2次訪視時間表中，其中1名來自qIRV 30 μg/qIRV 30 μg投藥組之參與者未接種疫苗。因此，總計62名參與者接受1個劑量之研究干預，且58名參與者接受2個劑量之研究干預。在qIRV 30 μg/qIRV 30 μg組中有14名參與者接種第一劑量之研究干預，且在許可QIV/bIRV A 30 μg組、許可QIV/bIRV A 60 μg及許可QIV/許可QIV組中，各有16名參與者接種疫苗。2次訪視組之平均年齡為大約70歲。 1 次訪視時間表
將總計64名參與者隨機化至1次訪視時間表，且所有參與者均接受1個劑量之研究干預。一名參與者隨機化至許可QIV+bIRV A 30 μg (1次訪視時間表)，但由於用藥失誤，接受許可QIV/bIRV A 30 μg (2次訪視時間表)。在許可QIV+bIRV A 30 μg組、許可QIV+bIRV A 60 μg組、qIRV 60 μg組及許可QIV組中，各有16名參與者接種疫苗。1次訪視組之平均年齡為大約70歲。 局部反應
下文闡述每一疫苗組在疫苗接種後7天內之局部反應。許可之QIV用作比較物。 2 次訪視時間表
在接受第一劑量之研究干預之參與者中，24名參與者報告任何局部反應。注射部位處疼痛(n=23)係最常報告之局部反應，其次為腫脹(n=3)及發紅(n=2)。除1名參與者報告嚴重發紅外，所有其他局部反應在嚴重程度上均為輕度至中度的，且中值持續時間為1至3天。
在接受第二劑量之研究干預之參與者中，17名參與者報告任何局部反應。注射部位處疼痛(n=17)係最常報告之局部反應，其次為發紅及腫脹(各自n=3)。所有局部反應在嚴重程度上均為輕度至中度的，且中值持續時間為1至4天。 1 次訪視時間表
總計27名參與者報告局部反應。注射部位處疼痛(n=26)係最常報告之局部反應，其次為發紅(n=4)及腫脹(n=3)。所有局部反應在嚴重程度上均為輕度至中度的，且中值持續時間為1至7天。 全身性事件
下文闡述每一疫苗組在疫苗接種後7天內之全身性事件。許可之QIV用作比較物。 2 次訪視時間表
在接受第一劑量之研究干預之參與者中，19名參與者報告任何全身性事件。一名參與者報告＞38.4℃至38.9℃之發熱，其持續1天。疲勞(n=17)係最常報告之全身性事件，其次為頭痛(n=12)、寒戰(n=7)、新發或惡化之關節疼痛(n=6)、腹瀉(n=4)及新發或惡化之肌肉疼痛(n=3)。所有報告之全身性事件在嚴重程度上均為輕度至中度的，且中值持續時間為1至8天。
在接受第二劑量之研究干預之參與者中，21名參與者報告任何全身性事件。一名參與者報告＞38.0℃至38.4℃之發熱，其持續1天。疲勞及頭痛(各自n=11)係最常報告之全身性事件，其次為寒戰、新發或惡化之肌肉疼痛(各自n=8)、新發或惡化之關節疼痛(n=5)、腹瀉(n=3)及嘔吐(n=1)。所有全身性事件在嚴重程度上均為輕度至中度的，且中值持續時間為1至7天。 1 次訪視時間表
在單次劑量之疫苗接種後，總計25名參與者報告任何全身性事件。一名參與者報告＞38.0℃至38.4℃之發熱。疲勞(n=19)係最常報告之全身性事件，其次為頭痛(n=15)、新發或惡化之肌肉疼痛(n=13)、寒戰(n=7)、新發或惡化之關節疼痛(n=5)及嘔吐(n=1)。所有全身性事件在嚴重程度上均為輕度至中度的，且中值持續時間為1至4天。 不良事件(初始招募)
下文闡述在疫苗接種後4週內之AE。許可之QIV用作比較物。本研究中未報告死亡。 2 次訪視時間表
在接受2個劑量之研究干預之參與者中，6名參與者報告至少1起AE。該等為以下之AE：關節痛、關節炎、胸痛、心電圖ST段壓低、疲勞、皮膚撕裂、室上性心動過速及牙齒膿腫。來自許可QIV/許可QIV組之一名參與者報告關節痛AE，其與疫苗相關。
常規排定之疫苗接種後ECG顯示分佈在四個2劑量組中之8種新變化，該等變化包括一度AV阻滯、異位房性心律、2名參與者之室性早搏、ST壓低、室上性心動過速及2名參與者之T波變平。在該等變化中，僅無症狀參與者中之ST壓低最初視為具有臨床意義，且產生隨訪ECG，認為其不顯著；此發現最終視為與疫苗投與無關。疫苗接種後未注意到異常肌鈣蛋白值。 1 次訪視時間表
總計3名參與者報告至少1起AE。該等AE為膽石病、咳嗽、醫療器械部位反應及鼻溢。在許可QIV+bIRV A 30 μg疫苗組中，一名參與者報告膽石病SAE。
常規排定之疫苗接種後ECG顯示分佈在三個單劑量組中之6種新變化(許可QIV+bIRV A 60 μg組中之參與者未鑑別出有ECG變化)；該等變化包括左前分支傳導阻滯、室性早搏、右束支傳導阻滯、2名參與者之竇性心動過緩，及T波變平，該等變化均視為不具有臨床意義。 免疫原性
在投與疫苗後4週，觀察到HAI GMT之劑量依賴性增加，其在此時間點相對於基線之GMFR中亦有反映。
關於在投與最後一個劑量之疫苗後4週之血清轉化： • 對於A/Wisconsin，在1或2個劑量之qIRV (總劑量水準為每個劑量30 μg)後達成血清轉化之參與者比例高於在1或2個劑量之QIV後達成血清轉化之參與者比例。另外，對於A/Wisconsin，在QIV與編碼2種A毒株之bIRV (總劑量為30 μg或60 μg (每種毒株15 μg或30 μg))同時或相隔21天投與後4週，達成血清轉化之參與者比例亦似乎高於在1或2個劑量之QIV後達成血清轉化之參與者比例(參見表47)。對於A/Cambodia，在1個劑量之qIRV (每個劑量30 μg)後達成血清轉化之參與者比例高於在QIV後達成血清轉化之參與者比例；此反應與第二劑量後之QIV類似。另外，對於A/Cambodia，在QIV與編碼2種A毒株之bIRV (總劑量為30 μg或60 μg (每種毒株15 μg或30 μg))同時投與後4週，達成血清轉化之參與者比例似乎高於單獨之QIV。 • 對於B/Phuket及B/Washington，所有群組(包括1個劑量及2個劑量之QIV接受者)在研究干預後4週達成血清轉化之參與者比例低於針對A/Wisconsin及A/Cambodia達成血清轉化之參與者比例。對於B/Phuket及B/Washington，在1或2個劑量之qIRV (總劑量水準為每個劑量30 μg)後4週，或在QIV與編碼2種A毒株之bIRV (總劑量水準為30 μg或60 μg (每種毒株15 μg或30 μg))同時或相隔21天投與後，達成血清轉化之參與者比例似乎通常小於或等於在1或2個劑量之QIV後達成血清轉化之參與者比例(參見表53)。
表53. 每個時間點每種毒株達成HAI血清轉化之參與者比例-可評估之免疫原性群體
疫苗組(按隨機化)
2 次訪視時間表 1 次訪視時間表
取樣時間點 a 毒株 qIRV (30 μg)/ qIRV (30 μg) N b n c (%) (95% CI d) 許可QIV/ bIRV A (30 μg) N b n c (%) (95% CI d) 許可QIV/ bIRV A (60 μg ) N b n c (%) (95% CI d)) 許可QIV/ 許可QIV N b n c (%) (95% CI d) 許可QIV+ bIRV A (30 μg) N b n c (%) (95% CI d) 許可QIV+ bIRV A (60 μg) N b n c (%) (95% CI d) qIRV (60 μg) N b n c (%) (95% CI d) 許可QIV N b n c (%) (95% CI d)
在第2次疫苗接種前 A/Wisconsin 10 9 (90.0) (55.5, 99.7) 11 7 (63.6) (30.8, 89.1) 11 7 (63.6) (30.8, 89.1) 13 7 (53.8) (25.1, 80.8) NA NA NA NA
A/Cambodia 10 7 (70.0) (34.8, 93.3) 11 5 (45.5) (16.7, 76.6) 11 5 (45.5) (16.7, 76.6) 13 7 (53.8) (25.1, 80.8) NA NA NA NA
B/Phuket 10 1 (10.0) (0.3, 44.5) 11 3 (27.3) (6.0, 61.0) 11 5 (45.5) (16.7, 76.6) 13 7 (53.8) (25.1, 80.8) NA NA NA NA
B/Washington 10 2 (20.0) (2.5, 55.6) 11 4 (36.4) (10.9, 69.2) 11 4 (36.4) (10.9, 69.2) 13 6 (46.2) (19.2, 74.9) NA NA NA NA
最後一次疫苗接種後1週 A/Wisconsin 10 9 (90.0) (55.5, 99.7) 11 9 (81.8) (48.2, 97.7) 11 10 (90.9) (58.7, 99.8) 13 7 (53.8) (25.1, 80.8) 12 9 (75.0) (42.8, 94.5) 13 7 (53.8) (25.1, 80.8) 15 10 (66.7) (38.4, 88.2) 16 6 (37.5) (15.2, 64.6)
A/Cambodia 10 8 (80.0) (44.4, 97.5) 11 8 (72.7) (39.0, 94.0) 11 7 (63.6) (30.8, 89.1) 13 6 (46.2) (19.2, 74.9) 12 2 (16.7) (2.1, 48.4) 13 3 (23.1) (5.0, 53.8) 15 4 (26.7) (7.8, 55.1) 16 4 (25.0) (7.3, 52.4)
B/Phuket 10 4 (40.0) (12.2, 73.8) 11 3 (27.3) (6.0, 61.0) 11 5 (45.5) (16.7, 76.6) 13 7 (53.8) (25.1, 80.8) 12 4 (33.3) (9.9, 65.1) 13 4 (30.8) (9.1, 61.4) 15 1 (6.7) (0.2, 31.9) 16 3 (18.8) (4.0, 45.6)
B/Washington 10 2 (20.0) (2.5, 55.6) 11 3 (27.3) (6.0, 61.0) 11 4 (36.4) (10.9, 69.2) 13 6 (46.2) (19.2, 74.9) 12 3 (25.0) (5.5, 57.2) 13 4 (30.8) (9.1, 61.4) 15 0 (0.0) (0.0, 21.8) 16 3 (18.8) (4.0, 45.6)
最後一次疫苗接種後4週 A/Wisconsin 10 9 (90.0) (55.5, 99.7) 11 9 (81.8) (48.2, 97.7) 11 10 (90.9) (58.7, 99.8) 13 5 (38.5) (13.9, 68.4) 12 7 (58.3) (27.7, 84.8) 13 7 (53.8) (25.1, 80.8) 15 12 (80.0) (51.9, 95.7) 16 6 (37.5) (15.2, 64.6)
A/Cambodia 10 4 (40.0) (12.2, 73.8) 11 3 (27.3) (6.0, 61.0) 11 5 (45.5) (16.7, 76.6) 13 6 (46.2) (19.2, 74.9) 12 7 (58.3) (27.7, 84.8) 13 8 (61.5) (31.6, 86.1) 15 11 (73.3) (44.9, 92.2) 16 4 (25.0) (7.3, 52.4)
B/Phuket 10 5 (50.0) (18.7, 81.3) 11 3 (27.3) (6.0, 61.0) 11 3 (27.3) (6.0, 61.0) 13 7 (53.8) (25.1, 80.8) 12 6 (50.0) (21.1, 78.9) 13 5 (38.5) (13.9, 68.4) 15 5 (33.3) (11.8, 61.6) 16 2 (12.5) (1.6, 38.3)
B/Washington 10 3 (30.0) (6.7, 65.2) 11 2 (18.2) (2.3, 51.8) 11 2 (18.2) (2.3, 51.8) 13 5 (38.5) (13.9, 68.4) 12 3 (25.0) (5.5, 57.2) 13 5 (38.5) (13.9, 68.4) 15 3 (20.0) (4.3, 48.1) 16 5 (31.3) (11.0, 58.7)
A/Cambodia。注意：選擇在第1天在第1次疫苗接種前收集之成對樣品進行血清轉化計算。注意：血清轉化定義為在第一次疫苗接種前HAI效價＜1:10，且在所關注時間點≥1:40，或在第一次疫苗接種前HAI效價≥1:10，在所關注時間點上升4倍。a. 方案指定之血液樣品收集時間。b. N =在第一次疫苗接種前及在投藥/取樣時間點，在指定分析中具有有效且確定之分析結果之參與者人數。c. n =在投藥/取樣時間點，在指定分析中達成HAI血清轉化的具有有效且確定之分析結果之參與者人數。d.基於Clopper及Pearson方法之確切雙側CI。 擴展招募 局部反應
在接受qIRV 30 μg之參與者中，55名參與者報告任何局部反應。注射部位處疼痛(n=50)係最常報告之局部反應，其次為腫脹(n=12)及發紅(n=4)。除1名參與者報告嚴重腫脹外，所有其他局部反應在嚴重程度上均為輕度至中度的，且中值持續時間為1至2天。
在接受qIRV 60 μg之參與者中，65名參與者報告任何局部反應。注射部位處疼痛(n=63)係最常報告之局部反應，其次為腫脹(n=12)及發紅(n=9)。除2名參與者報告注射部位處嚴重疼痛外，所有其他局部反應在嚴重程度上均為輕度至中度的，且中值持續時間為1至2天。 全身性事件
在接受qIRV 30 μg之參與者中，51名參與者報告任何全身性事件。四名參與者報告≥38.0℃之發熱持續1天。疲勞(n=38)係最常報告之全身性事件，其次為頭痛(n=24)、新發或惡化之肌肉疼痛(n=19)、新發或惡化之關節疼痛(n=15)、寒戰(n=8)及腹瀉(n=5)。一名參與者各自報告嚴重疲勞、頭痛及新發或惡化之關節疼痛。所有其他全身性事件在嚴重程度上均為輕度至中度的。中值持續時間為1天。
在接受qIRV 60 μg之參與者中，63名參與者報告任何全身性事件。七名參與者報告≥38.0℃之發熱持續1天。疲勞(n=49)係最常報告之全身性事件，其次為頭痛(n=32)、新發或惡化之肌肉疼痛(n=25)、寒戰(n=21)、新發或惡化之關節疼痛(n=20)、腹瀉(n=5)及嘔吐(n=3)。兩名參與者報告嚴重疲勞，1名參與者各自報告嚴重頭痛、寒戰、新發或惡化之肌肉疼痛及新發或惡化之關節疼痛。所有其他全身性事件在嚴重程度上均為輕度至中度的。中值持續時間為1至1.5天。 不良事件
下文闡述每一疫苗組在疫苗接種後4週內之AE。無SAE或死亡報告。
在接受qIRV 30 μg之參與者中，總計8名參與者報告任何AE。最常報告之AE (≥2名參與者)為2名參與者報告之注射部位處疼痛。三名參與者報告腹瀉、皮下出血、注射部位處疼痛、注射部位處搔癢之AE，該等AE評價為與研究干預相關。
在接受qIRV 60 μg之參與者中，總計11名參與者報告任何AE。一名參與者報告嚴重AE。三名參與者報告注射部位處疼痛、心肌炎、心包炎、耳鳴、肌鈣蛋白異常之AE，該等AE評價為與研究干預相關。一名參與者具有心肌炎、心包炎及肌鈣蛋白異常事件。
一名66歲非裔美國人女性出現肌鈣蛋白異常、心包炎及心肌炎事件，該女性有慢性阻塞性高血壓醫療史 免疫原性
在投與疫苗後4週觀察到HAI GMT之劑量依賴性增加。
對於A/Wisconsin及A/Cambodia，在qIRV 30 μg及qIRV 60 μg後4週達成血清轉化之參與者比例高於在許可之QIV後達成血清轉化之參與者比例(表54)。
對於B/Phuket及B/Washington，與在許可之QIV後達成血清轉化之參與者比例相比，在qIRV 30 μg及qIRV 60 μg後4週達成血清轉化之參與者比例較低(表54)。
表54. 每個時間點每種毒株達成HAI血清轉化之參與者比例-可評估之免疫原性群體
疫苗組(按隨機化)
取樣時間點 a 毒株 qIRV (30 μg) N bn c(%) (95% CI d) qIRV (60 μg) N bn c(%) (95% CI d) 許可QIV N bn c(%) (95% CI d)
疫苗接種後1週 A/Wisconsin 100 38 (38.0) (28.5, 48.3) 107 48 (44.9) (35.2, 54.8) 107 41 (38.3) (29.1, 48.2)
A/Cambodia 98 21 (21.4) (13.8, 30.9) 106 33 (31.1) (22.5, 40.9) 107 23 (21.5) (14.1, 30.5)
B/Phuket 99 8 (8.1) (3.6, 15.3) 108 13 (12.0) (6.6, 19.7) 107 31 (29.0) (20.6, 38.5)
B/Washington 100 3 (3.0) (0.6, 8.5) 108 8 (7.4) (3.3, 14.1) 107 32 (29.9) (21.4, 39.5)
疫苗接種後4週 A/Wisconsin 102 56 (54.9) (44.7, 64.8) 108 67 (62.0) (52.2, 71.2) 107 51 (47.7) (37.9, 57.5)
A/Cambodia 101 42 (41.6) (31.9, 51.8) 106 61 (57.5) (47.6, 67.1) 107 31 (29.0) (20.6, 38.5)
B/Phuket 101 12 (11.9) (6.3, 19.8) 109 22 (20.2) (13.1, 28.9) 107 34 (31.8) (23.1, 41.5)
B/Washington 100 6 (6.0) (2.2, 12.6) 109 13 (11.9) (6.5, 19.5) 106 35 (33.0) (24.2, 42.8)
縮寫：HAI =紅血球凝聚抑制；modRNA =經修飾之RNA；qIRV =四價流行性感冒modRNA疫苗；QIV =四價流行性感冒疫苗。注意：對於以下所編碼毒株中之每一者，qIRV之劑量水準為7.5 μg或15 μg (總劑量水準分別為30 μg或60 μg)：A/Wisconsin、A/Cambodia、B/Phuket及B/Washington。注意：血清轉化定義為在第一次疫苗接種前HAI效價＜1:10，且在所關注時間點≥1:40，或在第一次疫苗接種前HAI效價≥1:10，在所關注時間點上升4倍。a. 方案指定之血液樣品收集時間。b. N =在第一次疫苗接種前及在投藥/取樣時間點，在指定分析中具有有效且確定之分析結果之參與者人數。c. n =在投藥/取樣時間點，在指定分析中達成HAI血清轉化的具有有效且確定之分析結果之參與者人數。d.基於Clopper及Pearson方法之確切雙側CI。
表55. 在疫苗接種後4週，每種毒株達成HAI血清轉化之參與者比例之差異-可評估之免疫原性群體
疫苗組(按隨機化) 差異 d% (95 % CI e)
毒株 qIRV (30 μg) N a n b (%) (95% CI c) qIRV (60 μg) N a n b (%) (95% CI c) 許可QIV N a n b (%) (95% CI c) qIRV (30 μg) 相對於許可QIV qIRV (60 μg) 相對於許可QIV
A/Wisconsin 102 56 (54.9) (44.7, 64.8) 108 67 (62.0) (52.2, 71.2) 107 51 (47.7) (37.9, 57.5) 7.2 (-6.3, 20.5) 14.4 (1.0, 27.2)
A/Cambodia 101 42 (41.6) (31.9, 51.8) 106 61 (57.5) (47.6, 67.1) 107 31 (29.0) (20.6, 38.5) 12.6 (-0.4, 25.3) 28.6 (15.4, 40.8)
B/Phuket 101 12 (11.9) (6.3, 19.8) 109 22 (20.2) (13.1, 28.9) 107 34 (31.8) (23.1, 41.5) -19.9 (-30.7, -8.9) -11.6 (-23.2, 0.1)
B/Washington 100 6 (6.0) (2.2, 12.6) 109 13 (11.9) (6.5, 19.5) 106 35 (33.0) (24.2, 42.8) -27.0 (-37.3, -16.9) -21.1 (-31.9, -10.2)
縮寫：HAI =紅血球凝聚抑制；modRNA =經修飾之RNA；qIRV =四價流行性感冒modRNA疫苗；QIV =四價流行性感冒疫苗。注意：對於以下所編碼毒株中之每一者，qIRV之劑量水準為7.5 μg或15 μg (總劑量水準分別為30 μg或60 μg)：A/Wisconsin、A/Cambodia、B/Phuket及B/Washington。 注意：血清轉化定義為在第一次疫苗接種前HAI效價＜1:10，且在所關注時間點≥1:40，或在第一次疫苗接種前HAI效價≥1:10，在所關注時間點上升4倍。a. N =在第一次疫苗接種前及在投藥/取樣時間點，在指定分析中具有有效且確定之分析結果之參與者人數。b. n =在投藥/取樣時間點，在指定分析中達成HAI血清轉化的具有有效且確定之分析結果之參與者人數。c. 基於Clopper及Pearson方法之確切雙側CI。d.活性疫苗組相對於作為參考之許可QIV，達成血清轉化之參與者比例差異，以百分比表示。e.針對以百分比表示之比例差異(活性疫苗組相對於許可QIV)，基於Miettinen及Nurminen方法之雙側CI。
表56. 每個時間點所有毒株均達成HAI血清轉化之參與者比例-可評估之免疫原性群體
取樣時間點 a 疫苗組(按隨機化)
qIRV (30 μg) N b n c (%) (95% CI d) qIRV (60 μg) N b n c (%) (95% CI d) 許可QIV N b n c (%) (95% CI d)
疫苗接種後1週 97 0 (0.0) (0.0, 3.7) 105 3 (2.9) (0.6, 8.1) 107 11 (10.3) (5.2, 17.7)
疫苗接種後4週 98 3 (3.1) (0.6, 8.7) 105 8 (7.6) (3.3, 14.5) 106 14 (13.2) (7.4, 21.2)
縮寫：HAI =紅血球凝聚抑制；modRNA =經修飾之RNA；qIRV =四價流行性感冒modRNA疫苗；QIV =四價流行性感冒疫苗。注意：對於以下所編碼毒株中之每一者，qIRV之劑量水準為7.5 μg或15 μg (總劑量水準分別為30 μg或60 μg)：A/Wisconsin、A/Cambodia、B/Phuket及B/Washington。注意：血清轉化定義為在第一次疫苗接種前HAI效價＜1:10，且在所關注時間點≥1:40，或在第一次疫苗接種前HAI效價≥1:10，在所關注時間點上升4倍。a. 方案指定之血液樣品收集時間。b. N =在第一次疫苗接種前及在投藥/取樣時間點，針對所有毒株均具有有效且確定之分析結果之參與者人數。c. n =在投藥/取樣時間點，針對所有毒株均達成HAI血清轉化的具有有效且確定之分析結果之參與者人數。d.基於Clopper及Pearson方法之確切雙側CI。
資料彙總及研究者指南 劑量學及投與方法
流行性感冒modRNA疫苗可為含有囊封於LNP中的RNA之注射用懸浮液；LNP調配物可包含2種功能性脂質，亦即ALC-0315及ALC-01592，及2種結構脂質，亦即DSPC (1,2-二硬脂醯基-sn-甘油-3-磷酸膽鹼)及膽固醇。在每個流行性感冒季期間，可在≥18歲之個體中研究總計小於100 μg之1或2個劑量。
流行性感冒modRNA疫苗可經由IM注射投與至上臂之三角肌區中。當前注射體積為0.3 mL或0.5 mL。 特別警告及使用注意事項 並發疾病
患有急性嚴重發熱性疾病或急性感染之個體應推遲疫苗接種。輕微感染及/或低燒之存在不應延遲疫苗接種。 血小板減少症及凝血病症
與其他IM注射一樣，接受抗凝血療法之個體或患有血小板減少症或任何凝血病症(諸如血友病)之個體應謹慎使用該疫苗，此乃因該等個體在IM投與後可能會發生出血或擦傷。 心肌炎及心包炎
在接種mRNA COVID-19疫苗後，極罕見地報告心肌炎及心包炎病例。通常，在疫苗接種後若干天內接種第二劑量之疫苗後，該等病例更常發生在男性青少年及年輕成人中。該等病例通常為輕微病例，且個體在標準治療及休息後往往在短時間內恢復。患者在其症狀改善後通常可恢復正常日常活動。該等患者應與醫生討論恢復鍛煉或運動。醫療專業人員應警惕疫苗接受者之心肌炎及心包炎之徵象及症狀。目前尚無關於潛在長期後遺症之資訊。
mRNA COVID-19疫苗可引發心肌炎及心包炎病例之機制尚未闡明。若該機制與modRNA或脂質奈米顆粒調配物而非所編碼之抗原有關，則似乎可能的是，流行性感冒modRNA疫苗可存在相同風險、風險因素及預後。 免疫受損個體
在免疫抑制個體中，流行性感冒modRNA疫苗之免疫原性及功效可較低。 實例7：研究RSV/Covid/流行性感冒疫苗共投與之臨床試驗
本實例闡述為表徵組合投與之LNP-RNA疫苗及重組蛋白疫苗(在本實例中為二價SARS-CoV-2疫苗(武漢+ BA.4/5 BNT162b2)及二價RSV疫苗(RSVpreF))而實施之臨床研究。本實例中所彙總之臨床試驗之目的係表徵針對RSV及COVID-19之組合疫苗在與以下一起投與時之安全性及免疫學效應：(i)季節性流感疫苗，或(ii)單獨。本實例中所闡述之資料證明，當該兩種或三種疫苗共投與時，針對所靶向傳染原(SARS-CoV-2 Wuhan及所編碼變異體及RSV亞型)中之每一者所誘導之中和效價不低於單獨投與之疫苗所誘導之中和效價。 設計研究 合格性準則：符合以下準則之個體納入本研究
納入準則： • 第1次訪視(第1天，對應於投與干預/治療之日)時≥65歲之男性或女性參與者； • 願意且能夠遵守所有排定訪視、研究計劃、實驗室測試、生活方式考量及其他研究程序； • 如藉由病歷、體格檢查(若需要)及研究者之臨床判斷確定有資格納入研究之健康參與者； • 先前接受至少3次先前美國授權之mRNA COVID 19疫苗，最後一個劑量係在第1天前至少150天給予之更新(二價)疫苗；及
排除準則： • 在第1天之120天內確診COVID 19、RSV感染或流行性感冒； • 具有與任何疫苗相關之嚴重不良反應史及/或對研究干預中之任何組分之嚴重過敏反應(例如過敏性)史； • 如藉由病史及/或實驗室/體格檢查所確定，患有已知或疑似免疫缺失之免疫受損個體； • 根據研究者之意見，與長時間出血相關之出血素質或疾患禁忌肌內注射； • 對卵蛋白(蛋或蛋製品)或雞肉蛋白過敏； • 任何醫學或精神疾患，包括近期(去年)或活躍之自殺意念/行為或實驗室異常，其可能增加參與研究之風險，或根據研究者之判斷，將使參與者不適合參與研究。 • 在招募前的60天內至研究結束，接受已知免疫抑制藥劑(包括細胞毒性劑或全身性皮質類固醇)之長期全身治療或放射療法； • 自研究干預投與前60天接受血液/血漿產品、免疫球蛋白或單株抗體，或計劃在整個研究期間接受； • 在招募前的任何時間接受任何RSV疫苗，或計劃在整個研究期間接受； • 在研究招募前的120天內接受任何流行性感冒疫苗； • 在隨機化之前的28天內參與涉及研究干預之其他研究。預計在接受本研究中之研究干預後28天內參與其他研究。
將符合上述合格性準則之個體隨機分組，且投與如下表中所闡述之療法。
組 N 注射1 (左臂) 注射2 (右臂) 注射3 (右臂)
1 150 [RSVpreF+BNT162b2] QIV (Fluzone HD) N/A
2 150 [RSVpreF+BNT162b2] 安慰劑 N/A
3 150 BNT162b2 安慰劑 N/A
4 150 RSVpreF 安慰劑 N/A
5 150 許可QIV 安慰劑 N/A
6 a 150 BNT162b2 安慰劑 RSVpreF
7 a 150 BNT162b2 QIV (Fluzone HD) RSVpreF
a將右臂上之投與部位隔開1英吋。
在疫苗接種後約1個月(28-35天)，收集血液樣品以進行中和效價分析。在疫苗接種後約6個月，電話聯繫個體，詢問後續問題。
在本研究中，投與二價SARS-CoV-2 RNA疫苗(對應於BNT162b2，且遞送武漢毒株及奧密克戎BA.4/5變異體之全長融合前穩定之S蛋白)。然而，熟習此項技術者將理解，在一些實施例中，可投與替代性疫苗(例如單價、三價或四價SARS-CoV-2疫苗)。在一些實施例中，SARS-CoV-2疫苗可遞送一或多種毒株或變異體之S蛋白，該一或多種毒株或變異體在相關轄區流行及/或衛生管理機構預測將為所關注變異體。
每種疫苗無論是與安慰劑一起投與還是與其他疫苗組合投與，均係以針對相關群體(65歲及以上之患者)批准之劑量投與。在本研究中，BNT162b2係以包含30 μg RNA (0.3 mL)之劑量投與，RSVpreF係以包含120 μg RSV F抗原(0.5 mL)之劑量投與，且Fluzone HD係以包含180 μg總HA蛋白(以0.5 mL投與)之劑量投與。
[RSVpreF + BNT162b2]指示RSVpreF與BNT162b2疫苗之摻合物。在本實例中，該兩種疫苗在即將投與給個體之前摻合(例如，使用如圖3中所繪示之程序)，使得該兩種疫苗在單次注射中投與。熟習此項技術者將理解，(i)欲投與之疫苗可在臨床前(例如在製造期間)混合，及(ii)若欲在即將投與前混合疫苗，則可使用此項技術中已知之任何適宜方法來摻合疫苗。 結果量測
主要結果量測： • 報告局部反應之參與者百分比(在疫苗接種後7天內) • 注射部位處疼痛、發紅及腫脹 • 報告全身性事件之參與者百分比(在疫苗接種後7天內) • 發熱、疲勞、頭痛、嘔吐、腹瀉、寒戰、新發或惡化之肌肉疼痛及新發或惡化之關節疼痛 • 報告不良事件之參與者百分比(在疫苗接種1個月內) • 報告嚴重不良事件之參與者百分比(在疫苗接種6個月內) • 1組相對於4組之非劣性分析：RSV A及RSV B中和效價(NT)之幾何平均比率(GMR) (疫苗接種後1個月) • 1組相對於3組之非劣性分析：SARS-CoV-2奧密克戎BA.4/BA.5毒株中和效價(NT)之幾何平均比率(GMR) (疫苗接種後1個月(第28天)) • 1組相對於3組之非劣性分析：SARS-CoV-2參考毒株中和效價(NT)之幾何平均比率(GMR) (疫苗接種後1個月)) • 1組相對於5組之非劣性分析：紅血球凝聚抑制(HAI)效價之流行性感冒毒株特異性幾何平均比率(GMR) (疫苗接種後1個月(第28天))。 • 2組相對於4組之非劣性分析：RSV A及RSV B中和效價(NT)之幾何平均比率(GMR) (疫苗接種後1個月) • 2組相對於3組之非劣性分析：SARS-CoV-2奧密克戎BA.4/BA.5毒株中和效價(NT)之幾何平均比率(GMR) (疫苗接種後1個月) • 2組相對於3組之非劣性分析：SARS-CoV-2參考毒株中和效價NT之幾何平均比率(GMR) (疫苗接種後1個月)
次要結果量測： • 7組相對於4組之非劣性分析：RSV A及RSV B中和效價(NT)之幾何平均比率(GMR) (疫苗接種後1個月)。 • 7組相對於3組之非劣性分析：SARS-CoV-2奧密克戎BA.4/BA.5毒株中和效價(NT)之幾何平均比率(GMR) (疫苗接種後1個月)。 • 7組相對於3組之非劣性分析：SARS-CoV-2參考毒株中和效價(NT)之幾何平均比率(GMR) (疫苗接種後1個月) • 7組相對於5組之非劣性分析：紅血球凝聚抑制(HAI)效價之流行性感冒毒株特異性幾何平均比率(GMR) (疫苗接種後1個月) • 6組相對於4組之非劣性分析：RSV A及RSV B中和效價(NT)之幾何平均比率(GMR) (疫苗接種後1個月) • 6組相對於3組之非劣性分析：SARS-CoV-2奧密克戎BA.4/BA.5毒株中和效價(NT)之幾何平均比率(GMR) (疫苗接種後1個月) • 6組相對於3組之非劣性分析：SARS-CoV-2參考毒株中和效價(NT)之幾何平均比率(GMR) (疫苗接種後1個月) 結果
2組、3組及4組各自所觀察到之中和效價示於下頁之表57中。GMT比率示於圖4中。 表57：在疫苗接種後1個月，與安慰劑共投與之[RSVpreF + BNT162b2]與單獨投與之每種疫苗之GMT比較
組 干預 NT50 (奧密克戎BA.4/5) GMT b(97.5% CI) NT50 (武漢) GMT b(97.5% CI b) NT50 (RSV A) GMT b(97.5% CI b) NT50 (RSV B) GMT b(97.5% CI b) 比較 NT50 (奧密克戎BA.4/5) GMR c(97.5% CI c) 比較 NT50 (武漢) 比較 NT50 (RSV A) GMR c(97.5% CI c) 比較 NT50 (RSV B) GMR c(97.5% CI c)
2 30 μg [BNT162b2 + RSVpreF] +安慰劑 3069 (2397.5, 3927.4) N a= 146 10470 (8472.7, 12938.1) N a= 147 18304 (15069.7, 22233.2) N a= 147 17963 (14766.4, 21851.0) N a= 147 0.83 (0.585, 1.173) 0.84 (0.625, 1.117) 0.99 (0.764, 1.281) 1.08 (0.825, 1.407)
3 30 μg BNT162b2 + 安慰劑 3705 (2889.7, 4749.1) N a= 144 12,530 (10253.1, 15312.3) N a= 144 N/A N/A N/A N/A N/A N/A
4 RSVpreF +安慰劑 N/A N/A 18498 (155570.0, 21975.9) N a= 144 16677 (13884, 20031.4) N a= 144 N/A N/A N/A N/A
縮寫：GMR =幾何平均比率；GMT =幾何平均效價；LLOQ =定量下限；NT50 = 50%中和效價； [RSVpreF+BNT162b2]表示RSVpreF與二價BNT162b2 (武漢+ Omi BA.4/5)疫苗之摻合物 RSV A NT50之LLOQ值為242，RSV B NT50之LLOQ值為99，SARS-CoV-2 BA.4/5 NT50之LLOQ值為71，且SARS-CoV-2武漢NT50之LLOQ值為87。低於LLOQ之分析結果設置為0.5 LLOQ。 aN=在可評估之免疫原性群體中，指定分析具有有效且確定之分析結果之參與者人數 b藉由對效價及相應Cis之平均對數求冪計算GMT及相應雙側Cis (基於司徒頓t分佈)。 c藉由對效價及相應Cis之對數的平均差求冪來計算GMR及雙側Cis (基於司徒頓t分佈)。
如表57及圖4中所示，發現[RSVpreF + BNT162b2]摻合物之SARS-CoV-2及RSV中和效價不低於分開投與之RSVpreF及BNT162b2疫苗(基於2倍之差值)。對於摻合疫苗，無論是與QIV同時給予還是單獨投與，均觀察到類似結果(同時給予QIV之個體之資料未示出)。當將兩個摻合疫苗組(1組及2組)合併並分析時，亦觀察到類似結果，信賴區間更窄。對於2種RSV抗原，下界仍大於0.667 (相當於1.5倍差值)。對於2種SARS-CoV-2抗原，下界略低於0.667 (奧密克戎BA.4/5為0.643且武漢毒株為0.659)。
自該等結果可得到結論，與單獨投與之個別疫苗相比，針對與安慰劑一起給予之摻合疫苗之兩種SARS-CoV-2抗原及兩種RSV抗原的中和效價基於2倍差值均滿足非劣性。對於2種RSV抗原，基於1.5倍差值，中和效價亦滿足非劣性。在與QIV同時投與之摻合疫苗中觀察到類似結果。
圖1. 例示性疫苗接種方案之示意圖。 圖2. 投與Covid/流行性感冒組合疫苗之小鼠之免疫反應。在投與第一劑量及第二劑量之單獨流行性感冒疫苗、單獨SARS-CoV-2疫苗或其組合後21天，顯示出小鼠中之中和效價。x軸上指示小鼠群組。「四價流感」或「流感」係指投與包含四種RNA之疫苗之小鼠，每種RNA編碼H1N1/Wisconsin、H3N2/Darwin、By/Phuket或Bv/Austria流行性感冒毒株之HA蛋白，比率為1:1:1:1。「COVID」或「二價COVID」係指投與二價SARS-CoV-2疫苗之小鼠，該二價SARS-CoV-2疫苗包含編碼武漢毒株之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA及編碼包含BA.4/5奧密克戎變異體之特徵性突變之SARS-CoV-2 S蛋白的RNA，比率為1:1。四價流感及二價COVID疫苗係藉由在LNP調配之前混合RNA而產生的(亦即，RNA在相同的LNP中)。藉由(i)在單次注射投與之前混合疫苗(「混合後」)或(ii)在分開的注射部位進行兩次注射(「分開注射」)來投與流行性感冒/SARS-CoV-2組合。「Fluad」及「Fluzone」係指市售流行性感冒疫苗。在投與第一劑量之疫苗後3週，且如藉由微量中和(MNT)分析所測定，自小鼠收集之血清對H1N1/Wisconson、H3N2/Darwin、By/Phuket及Bv/Austria流行性感冒毒株之中和分別示於(A)至(D)中。在投與第一劑量之疫苗後3週，自小鼠收集之血清針對SARS-CoV-2武漢毒株及BA.4/5奧密克戎毒株之假病毒中和效價示於(E)中。(F)彙總在投與第一劑量之疫苗後3週，投與(i) 0.8 μg之單獨二價COVID (「二價Covid」)，(ii) 0.8 μg之二價COVID及0.8 μg之四價流感(「二價COVID +四價流感」)，或(iii) 0.8 μg之單獨四價流感(「四價流感」)之小鼠中的SARS-CoV-2 (「COVID疫苗反應」)及流行性感冒(「流感疫苗反應」)中和反應。在投與第二劑量之疫苗後2週，自小鼠收集之血清針對SARS-CoV-2武漢毒株及BA.4/5奧密克戎毒株之假病毒中和效價示於(G)中。在投與第二劑量之疫苗後2週，且如藉由MNT分析所測定，自小鼠收集之血清對H1N1/Wisconson、H3N2/Darwin、By/Phuket及Bv/Austria流行性感冒毒株之中和分別示於(H)至(K)中。(L)彙總在投與第一劑量之疫苗後3週，投與(i) 0.8 μg之單獨二價COVID (「二價Covid」)，(ii) 0.8 μg之二價COVID及0.8 μg之四價流感(「二價COVID +四價流感」)，或(iii) 0.8 μg之單獨四價流感(「四價流感」)之小鼠中的SARS-CoV-2 (「二價COVID疫苗反應」)及流行性感冒(「四價流感疫苗反應」)中和反應。 圖3. 在單一注射器中共投與兩種或更多種疫苗之例示性方法。(A)顯示共投與兩種疫苗之例示性方法，且(B)顯示共投與三種疫苗之例示性方法。 圖4. BNT16b2及RSVpreF疫苗在共投與時不會彼此干擾。所示為森林圖，其指示在疫苗接種後1個月，與安慰劑共投與之[RSVpreF + BNT162b2]相對於單獨投與之每種疫苗之幾何平均比率(GMR)。GMR =幾何平均比率，LLOQ =定量下限，NT50 = 50%中和效價；[RSVpreF+BNT162b2]表示RSVpreF與二價BNT162b2之摻合物(武漢+ BA.4/5疫苗)。藉由對效價(干預組減去參考組及相應Cis (基於司徒頓t分佈(Student t distribution))之對數的平均差求冪來計算GMR及雙側Cis。
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Claims (268)

  1. 一種包含最近摻合之組合之器皿，該組合包含： (a)    SARS-CoV-2疫苗；及 (b)    流行性感冒疫苗；其中該SARS-CoV-2疫苗包含一或多種編碼SARS-CoV-2刺突(S)蛋白之免疫原性部分之RNA，且該等RNA調配於奈米顆粒(例如脂質奈米顆粒(LNP))中；且 其中該流行性感冒疫苗：(i)為奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA疫苗，或(ii)包含一或多種流行性感冒病毒毒株之一或多種抗原性多肽(例如HA蛋白)。
  2. 一種包含最近摻合之組合之器皿，該組合包含： (a)      SARS-CoV-2疫苗；及 (b)      RSV疫苗； 其中該SARS-CoV-2疫苗包含一或多種編碼SARS-CoV-2刺突(S)蛋白之免疫原性部分之RNA，且該等RNA調配於奈米顆粒(例如脂質奈米顆粒(LNP))中；且 其中該RSV疫苗包含與一或多種RSV毒株相關之一或多種抗原性多肽(例如F蛋白或其免疫原性片段)。
  3. 一種包含最近摻合之組合之器皿，該組合包含： (a)      SARS-CoV-2疫苗； (b)      RSV疫苗； (c)      流行性感冒疫苗； 其中該SARS-CoV-2疫苗包含一或多種編碼SARS-CoV-2刺突(S)蛋白之免疫原性部分之RNA，且該等RNA調配於奈米顆粒(例如脂質奈米顆粒(LNP))中；且 其中該RSV疫苗包含與一或多種RSV毒株相關之一或多種抗原性多肽(例如F蛋白或其免疫原性片段)；且 其中該流行性感冒疫苗：(i)為奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA疫苗，或(ii)包含一或多種流行性感冒病毒毒株之一或多種抗原性多肽(例如HA蛋白)。
  4. 如請求項1至3中任一項之器皿，其中該SARS-CoV-2疫苗為單價或二價疫苗。
  5. 如請求項1、3或4中任一項之器皿，其中該流行性感冒疫苗為四價疫苗。
  6. 如請求項1、3、4或5中任一項之器皿，其中該流行性感冒疫苗為不活化之流行性感冒病毒、重組流行性感冒疫苗、活減毒流行性感冒疫苗、無佐劑流行性感冒疫苗、含佐劑流行性感冒疫苗或亞單位或裂解疫苗。
  7. 如請求項2至6中任一項之器皿，其中該RSV疫苗包含一或多種RSV毒株之融合前穩定之F蛋白或其免疫原性片段。
  8. 如請求項1至7中任一項之器皿，其中該器皿為注射器或小瓶。
  9. 一種對人類個體同時進行針對SARS-CoV-2及流行性感冒中之每一者之疫苗接種之方法，該方法包括： 向同一部位同時投與SARS-CoV-2疫苗組合物及流行性感冒疫苗組合物； 其中該SARS-CoV-2疫苗包含一或多種編碼SARS-CoV-2刺突(S)蛋白之免疫原性部分之RNA，且該等RNA調配於奈米顆粒(例如脂質奈米顆粒(LNP))中；且 其中該流行性感冒疫苗：(i)為奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA疫苗，或(ii)包含一或多種流行性感冒病毒毒株之一或多種抗原性多肽(例如HA蛋白)。
  10. 一種對人類個體同時進行針對SARS-CoV-2及RSV中之每一者之疫苗接種之方法，該方法包括： 向同一部位同時投與SARS-CoV-2疫苗組合物及RSV疫苗組合物； 其中該SARS-CoV-2疫苗包含一或多種編碼SARS-CoV-2刺突(S)蛋白之免疫原性部分之RNA，且該等RNA調配於奈米顆粒(例如脂質奈米顆粒(LNP))中；且 其中該RSV疫苗包含與一或多種RSV毒株相關之一或多種抗原性多肽(例如F蛋白或其免疫原性片段)。
  11. 一種對人類個體同時進行針對SARS-CoV-2、流行性感冒及RSV中之每一者之疫苗接種之方法，該方法包括： 向同一部位同時投與SARS-CoV-2疫苗組合物、流行性感冒疫苗組合物及RSV疫苗組合物； 其中該SARS-CoV-2疫苗包含一或多種編碼SARS-CoV-2刺突(S)蛋白之免疫原性部分之RNA，且該等RNA調配於奈米顆粒(例如脂質奈米顆粒(LNP))中； 其中該流行性感冒疫苗：(i)為奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA疫苗，或(ii)包含一或多種流行性感冒病毒毒株之一或多種抗原性多肽(例如HA蛋白)；且 其中該RSV疫苗包含與一或多種RSV毒株相關之一或多種抗原性多肽(例如F蛋白或其免疫原性片段)。
  12. 如請求項9之方法，其中該投與步驟包含經由針或埠注射組合物；且 其中所注射之組合物包括該SARS-CoV-2疫苗組合物及該流行性感冒疫苗組合物兩者；且 其中該SARS-CoV-2疫苗組合物及該流行性感冒疫苗組合物視情況使用注射器(例如雙室注射器)投與。
  13. 如請求項10之方法，其中該投與步驟包含經由針或埠注射組合物；且 其中所注射之組合物包括該SARS-CoV-2疫苗組合物及該RSV疫苗組合物兩者；且 其中該SARS-CoV-2疫苗組合物及該RSV疫苗組合物視情況使用注射器(例如雙室注射器)投與。
  14. 如實施例11之方法，其中該投與步驟包含經由針或埠注射組合物； 其中所注射之組合物包括該SARS-CoV-2疫苗組合物、該流行性感冒疫苗組合物及該RSV疫苗組合物中之每一者；且 其中該SARS-CoV-2疫苗組合物、該RSV疫苗組合物及該流行性感冒疫苗組合物視情況使用注射器(例如雙室注射器)投與。
  15. 如請求項9或12之方法，其在投與步驟之前進一步包括將該SARS-CoV-2疫苗組合物及該流行性感冒疫苗組合物摻合之步驟。
  16. 如請求項10或13之方法，其在投與步驟之前進一步包括將該SARS-CoV-2疫苗組合物及該RSV疫苗組合物摻合之步驟。
  17. 如請求項11或14之方法，其在投與步驟之前進一步包括將該SARS-CoV-2疫苗組合物、該流行性感冒疫苗組合物及該RSV疫苗組合物摻合之步驟。
  18. 如請求項15至17中任一項之方法，其中該摻合步驟係在該投與步驟之一段時間內實施，該一段時間不超過2小時(例如不超過1小時、30分鐘、20分鐘、15分鐘、10分鐘或5分鐘)。
  19. 如請求項1至8中任一項之器皿或如請求項9至18中任一項之方法，其中該SARS-CoV-2疫苗組合物包含兩種或更多種RNA，其各自編碼不同SARS-CoV-2毒株或變異體之S蛋白，且其中該兩種或更多種RNA囊封在單獨之LNP群體中。
  20. 如請求項1及3至8中任一項之器皿或如請求項9及11至18中任一項之方法或如請求項19之器皿或方法，其中該流行性感冒疫苗包含兩種或更多種RNA (例如四種RNA)，其各自編碼不同流行性感冒毒株之抗原性多肽(例如HA蛋白)，且其中該兩種或更多種RNA囊封在單獨之LNP群體中。
  21. 如請求項1至8中任一項之器皿，或如請求項9至18中任一項之方法，或如請求項19或20之器皿或方法，其中該SARS-CoV-2疫苗包含： (a)      (i) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列，其中該RNA編碼包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之胺基酸序列之多肽，且/或包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 9至少85%一致之核苷酸序列，及(ii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自奧密克戎(Omicron) BA.4/5 SARS-CoV-2變異體之S多肽之核苷酸序列，其中該RNA包含編碼多肽之核苷酸序列，該多肽包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列，且/或其中該RNA包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 70至少85%一致之核苷酸序列；或 (b)      RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列，其中該RNA包含編碼多肽之核苷酸序列，該多肽包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之序列，且/或其中該RNA包含與SEQ ID NO: 132至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 130至少85%一致之核苷酸序列。
  22. 如請求項1至8中任一項之器皿，或如請求項9至18中任一項之方法，或如請求項19或20之器皿或方法，其中該流行性感冒疫苗包含： (a)      (i) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 92至少85%一致之核苷酸序列；(ii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸 序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 99至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 97至少85%一致之核苷酸序列；(iii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 104至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 102至少85%一致之核苷酸序列；及(iv) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之核苷酸序列及/或與SEQ ID NO: 107至少85%一致之核苷酸序列；或 (b)      (i) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該核苷酸序列與SEQ ID NO: 92至少85%一致且/或與SEQ ID NO: 94至少85%一致；(ii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該核苷酸序列與SEQ ID NO: 82至少85%一致且/或與SEQ ID NO: 84至少85%一致；(iii) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該核苷酸序列與SEQ ID NO: 87至少85%一致且/或與SEQ ID NO: 89至少85%一致；及(iv) RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該核苷酸序列與SEQ ID NO: 107至少85%一致且/或與SEQ ID NO: 109至少85%一致。
  23. 一種組合物，其包含： (i)       包含第一核苷酸序列之RNA，該第一核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第一核苷酸序列與SEQ ID NO: 9至少85%一致； (ii)      包含第二核苷酸序列之RNA，該第二核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自該SARS-CoV-2毒株之變異體之第二SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第二核苷酸序列與SEQ ID NO: 70至少85%一致； (iii)     包含第三核苷酸序列之RNA，該第三核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第三核苷酸序列與SEQ ID NO: 92至少85%一致； (iv)     包含第四核苷酸序列之RNA，該第四核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第四核苷酸序列與SEQ ID NO: 97至少85%一致； (v)      包含第五核苷酸序列之RNA，該第五核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第五核苷酸序列與SEQ ID NO: 102至少85%一致；及 (vi)     包含第六核苷酸序列之RNA，該第六核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第六核苷酸序列與SEQ ID NO: 107至少85%一致。
  24. 一種組合物，其包含： (i)       RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 20至少85%一致之核苷酸序列； (ii)      RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自該SARS-CoV-2毒株之變異體之第二SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 72至少85%一致之核苷酸序列； (iii)     RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之核苷酸序列； (iv)     RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 99至少85%一致之核苷酸序列； (v)      RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 104至少85%一致之核苷酸序列；及 (vi)     RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之核苷酸序列。
  25. 一種組合物，其包含： (i)       包含第一核苷酸序列之RNA，該第一核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第一核苷酸序列與SEQ ID NO: 9至少85%一致； (ii)      包含第二核苷酸序列之RNA，該第二核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自該SARS-CoV-2毒株之變異體之第二SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第二核苷酸序列與SEQ ID NO: 70至少85%一致； (iii)     包含第三核苷酸序列之RNA，該第三核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第三核苷酸序列與SEQ ID NO: 92至少85%一致； (iv)     包含第四核苷酸序列之RNA，該第四核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第四核苷酸序列與SEQ ID NO: 82至少85%一致； (v)      包含第五核苷酸序列之RNA，該第五核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第五核苷酸序列與SEQ ID NO: 87至少85%一致；及 (vi)     包含第六核苷酸序列之RNA，該第六核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第六核苷酸序列與SEQ ID NO: 107至少85%一致。
  26. 一種組合物，其包含： (i)         包含第一核苷酸序列之RNA，該第一核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第一核苷酸序列與SEQ ID NO: 20至少85%一致； (ii)        包含第二核苷酸序列之RNA，該第二核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第二SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第二核苷酸序列與SEQ ID NO: 72至少85%一致； (iii)       包含第三核苷酸序列之RNA，該第三核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第三核苷酸序列與SEQ ID NO: 94至少85%一致； (iv)       包含第四核苷酸序列之RNA，該第四核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第四核苷酸序列與SEQ ID NO: 84至少85%一致； (v)        包含第五核苷酸序列之RNA，該第五核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第五核苷酸序列與SEQ ID NO: 89至少85%一致；及 (vi)       包含第六核苷酸序列之RNA，該第六核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第六核苷酸序列與SEQ ID NO: 109至少85%一致。
  27. 如請求項23至26中任一項之組合物，其中： (a)        RNA (i)-(ii)與RNA (iii)-(vi)之質量比為1:5至5:1、1:4至4:1、1:3至3:1、1:2至2:1； (b)        RNA (iii)-(iv)與RNA (v)-(vi)之質量比為1:1至1:5；且/或 (c)        RNA (i)與RNA (ii)之質量比為1:1。
  28. 如請求項23至27中任一項之組合物，其中RNA (iii)、(iv)、(v)及(vi)係以1:1:1:1或1:1:5:5之質量比存在。
  29. 如請求項23至28中任一項之組合物，其中RNA (i)-(vi)之合併質量為約30 ug至約100 ug。
  30. 如請求項23至29中任一項之組合物，其中： RNA (i)-(ii)之合併質量為約3 μg至約60 μg (例如約3 μg、約10 μg、約30 μg或約60 μg)；且/或 其中RNA (iii)-(vi)之合併質量為約30 μg至約60 μg (例如約30 μg或約60 μg)。
  31. 如請求項23至29中任一項之組合物，其中： (a)      RNA (i)及(ii)各自係以約15 μg之量存在，且RNA (iii)-(vi)各自係以約7.5 μg之量存在； (b)      RNA (i)及(ii)各自係以約30 μg之量存在，且RNA (iii)-(vi)各自係以約7.5 μg之量存在； (c)      RNA (i)及(ii)各自係以約15 μg之量存在，且RNA (iii)-(vi)各自係以約11.25 μg之量存在； (d)      RNA (i)及(ii)各自係以約15 μg之量存在，RNA (iii)及(iv)各自係以約5 μg之量存在，且RNA (v)及(vi)各自係以約25 μg之量存在； (e)      RNA (i)及(ii)各自係以約15 μg之量存在，RNA (iii)及(iv)各自係以約2.5 μg之量存在，且RNA (v)及(vi)各自係以約12.5 μg之量存在； (f)       RNA (i)及(ii)各自係以約30 μg之量存在，RNA (iii)及(iv)各自係以約2.5 μg之量存在，且RNA (v)及(vi)各自係以約12.5 μg之量存在；或 (g)      RNA (i)-(vi)各自係以約15 μg之量存在。
  32. 一種組合物，其包含： (i)       包含第一核苷酸序列之RNA，該第一核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第一核苷酸序列與SEQ ID NO: 129至少85%一致； (ii)      包含第二核苷酸序列之RNA，該第二核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第二核苷酸序列與SEQ ID NO: 92至少85%一致； (iii)     包含第三核苷酸序列之RNA，該第三核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第三核苷酸序列與SEQ ID NO: 99至少85%一致； (iv)     包含第四核苷酸序列之RNA，該第四核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第四核苷酸序列與SEQ ID NO: 102至少85%一致；及 (v)      包含第五核苷酸序列之RNA，該第五核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第五核苷酸序列與SEQ ID NO: 107至少85%一致。
  33. 一種組合物，其包含： (i)       RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 132至少85%一致之核苷酸序列； (ii)      RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 94至少85%一致之核苷酸序列； (iii)     RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 99至少85%一致之核苷酸序列； (iv)     RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 104至少85%一致之核苷酸序列；及 (v)      RNA，其包含包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原之核苷酸序列，其中該RNA包含與SEQ ID NO: 109至少85%一致之核苷酸序列。
  34. 一種組合物，其包含： (i)       包含第一核苷酸序列之RNA，該第一核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第一核苷酸序列與SEQ ID NO: 130至少85%一致； (ii)      包含第二核苷酸序列之RNA，該第二核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第二核苷酸序列與SEQ ID NO: 92至少85%一致； (iii)     包含第三核苷酸序列之RNA，該第三核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第三核苷酸序列與SEQ ID NO: 82至少85%一致； (iv)     包含第四核苷酸序列之RNA，該第四核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第四核苷酸序列與SEQ ID NO: 87至少85%一致；及 (v)      包含第五核苷酸序列之RNA，該第五核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第五核苷酸序列與SEQ ID NO: 107至少85%一致。
  35. 一種組合物，其包含： (i)       包含第一核苷酸序列之RNA，該第一核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自SARS-CoV-2毒株之第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽，其中該第一核苷酸序列與SEQ ID NO: 132至少85%一致； (ii)      包含第二核苷酸序列之RNA，該第二核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H1N1毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第二核苷酸序列與SEQ ID NO: 94至少85%一致； (iii)     包含第三核苷酸序列之RNA，該第三核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒A H3N2毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第三核苷酸序列與SEQ ID NO: 84至少85%一致； (iv)     包含第四核苷酸序列之RNA，該第四核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Victoria毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第四核苷酸序列與SEQ ID NO: 89至少85%一致；及 (v)      包含第五核苷酸序列之RNA，該第五核苷酸序列包括經修飾之尿苷且編碼來自流行性感冒B Yamagata毒株之流行性感冒血球凝集素抗原，其中該第五核苷酸序列與SEQ ID NO: 109至少85%一致。
  36. 如請求項32至35中任一項之組合物，其中： RNA (i)及RNA (ii)-(v)係以1:5至5:1、1:4至4:1、1:3至3:1或1:2至2:1之質量比存在； RNA (ii)及(iii)以及RNA (iv)及(v)係以1:1至1:5之質量比存在； 其中RNA (ii)、(iii)、(iv)及(v)係以1:1:1:1或1:1:5:5之質量比存在。
  37. 如請求項24至36中任一項之組合物，其中RNA (i)-(v)之合併質量為30 ug至100 ug。
  38. 如請求項32至37中任一項之組合物，其中RNA (i)之質量為約3 μg至約60 μg (例如約3 μg、約10 μg、約30 μg或約60 μg)，且/或其中RNA (ii)-(v)之合併質量為約30 μg至約60 μg (例如約30 μg或約60 μg)。
  39. 如請求項32至38中任一項之組合物，其中： (a)    RNA (i)係以約30 μg之量存在，且RNA (ii)-(v)各自係以約7.5 μg之量存在； (b)    RNA (i)係以約60 μg之量存在，且RNA (ii)-(v)各自係以約7.5 μg之量存在； (c)    RNA (i)係以約30 μg之量存在，且RNA (ii)-(v)各自係以約11.25 μg之量存在； (d)    RNA (i)係以約30 μg之量存在，RNA (ii)及(iii)各自係以約5 μg之量存在，且RNA (iv)及(v)各自係以約25 μg之量存在； (e)    RNA (i)係以約30 μg之量存在，RNA (ii)及(iii)各自係以約2.5 μg之量存在，且RNA (iv)及(v)各自係以約12.5 μg之量存在； (f)     RNA (i)係以約30 μg之量存在，RNA (ii)及(iii)各自係以約2.5 μg之量存在，且RNA (iv)及(v)各自係以約12.5 μg之量存在；或 (g)    RNA (i)係以約30 μg之量存在，且RNA (ii)-(v)各自係以約15 μg之量存在。
  40. 如請求項23至39中任一項之組合物，其中該流行性感冒A H1N1毒株為流行性感冒A/Wisconsin/588/2019，且其中該流行性感冒B Yamagata毒株為流行性感冒B/PHUKET/3073/2013。
  41. 如請求項23、24、27至31、33、34及37至40中任一項之組合物，其中該流行性感冒A H3N2毒株為流行性感冒A/Cambodia/e0826360/2020，且其中該流行性感冒B Victoria毒株為流行性感冒B/Washington/02/2019。
  42. 如請求項25至31及34至39中任一項之組合物，其中該流行性感冒A H3N2毒株為流行性感冒A/Darwin/6/2021。
  43. 如請求項25至31及34至40中任一項之組合物，其中該流行性感冒A H3N2毒株為流行性感冒A/Darwin/6/2021，且/或其中該流行性感冒B Victoria毒株為流行性感冒B/Austria/1359417/2021。
  44. 如請求項23至31中任一項之組合物，其中該第一SARS-CoV-2刺突(S)多肽來自武漢毒株，且其中該第二SARS-CoV-2 S多肽來自奧密克戎BA.4/5變異體。
  45. 如請求項32至43中任一項之組合物，其中該SARS-CoV-2刺突(S)多肽來自XBB.1.5變異體。
  46. 如請求項23至45中任一項之組合物，其中該組合物中之每一RNA包含相同的非編碼元件，該等非編碼元件包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列。
  47. 一種組合物，其包含： (i)     包含一或多種RNA之冠狀病毒RNA疫苗，每種RNA包含編碼SARS-CoV-2抗原之核苷酸序列；及 (ii)    包含一或多種RNA之流行性感冒RNA疫苗，每種RNA包含一或多種編碼流行性感冒抗原之核苷酸序列，其中該流行性感冒RNA疫苗編碼至少四種流行性感冒抗原，且其中每種流行性感冒抗原來自預測在特定半球之流感季期間傳播之不同的流行性感冒病毒毒株； 其中該組合物中之每一RNA包含相同的非編碼元件，該等非編碼元件包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列。
  48. 如請求項47之組合物，其中該冠狀病毒RNA疫苗中之該一或多種RNA中之每一者及該流行性感冒RNA疫苗中之該一或多種RNA中之每一者包括一或多個經修飾之尿苷。
  49. 如請求項47或48之組合物，其中該至少四種流行性感冒抗原各自為或包含來自預測在特定半球之流感季期間傳播之不同的流行性感冒病毒毒株之血球凝集素抗原。
  50. 如請求項49之組合物，其中基於來自北半球或南半球之人類血清學資料，預測該不同的流行性感冒病毒在流感季期間傳播。
  51. 如請求項47至50中任一項之組合物，其中該至少四種流行性感冒抗原各自由單獨之RNA編碼。
  52. 如請求項47至51中任一項之組合物，其中該冠狀病毒RNA疫苗編碼至少兩種SARS-CoV-2抗原，其各自來自不同的SARS-CoV-2毒株或變異體。
  53. 如請求項52之組合物，其中該至少兩種SARS-CoV-2抗原為或包含來自SARS-CoV-2毒株之SARS-CoV-2刺突(S)多肽及來自該SARS-CoV-2毒株之變異體之SARS-CoV-2 S多肽。
  54. 如請求項52或53之組合物，其中該至少兩種SARS-CoV-2抗原各自由單獨之RNA編碼。
  55. 如請求項47至54中任一項之組合物，其中該冠狀病毒疫苗中之該等RNA及該流行性感冒疫苗中之該等RNA係以1:5至5:1、1:4至4:1、1:3至3:1或1:2至2:1之質量比存在。
  56. 如請求項47至55中任一項之組合物，其中該至少四種流行性感冒抗原包含至少兩種來自流行性感冒A病毒之血球凝集素抗原及至少兩種來自流行性感冒B病毒之血球凝集素抗原。
  57. 如請求項56之組合物，其中編碼來自流行性感冒A病毒之血球凝集素抗原之該等RNA及編碼來自流行性感冒B病毒之血球凝集素抗原之該等RNA係以1:1至1:5 (例如1:1或1:5)之質量比存在。
  58. 如請求項54至57中任一項之組合物，其中該冠狀病毒疫苗中之該至少兩種RNA之質量比為1:1。
  59. 如請求項51至58中任一項之組合物，其中該流行性感冒疫苗中之該至少四種RNA係以1:1:1:1之質量比存在。
  60. 如請求項47至59中任一項之組合物，其中該組合物中之RNA總量為約30 ug至約100 ug (例如約30 ug、約45 ug、約60 ug、約75 ug或約90 ug)。
  61. 一種組合物，其包含： 一或多種第一RNA，其各自包含編碼與第一傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列； 一或多種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，其中該第二傳染原與該第一傳染原不同； 其中該組合物中之該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者包含相同的非編碼元件，該等非編碼元件包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列，且 其中該等相同的非編碼元件中之至少一者為或包含： (i)     5’-UTR序列，其為或包含經修飾之人類α-球蛋白5’-UTR； (ii)    3’-UTR序列，其為或包含來自分裂之胺基末端增強子(AES)信使RNA之第一序列及來自粒線體編碼之12S核糖體RNA之第二序列； (iii)   包含至少100個A核苷酸之聚A序列，其中該第一RNA及該第二RNA各自在該3’ UTR與該聚A序列之間不包含至少30個鄰接C核苷酸之區段； (iv)   包含A核苷酸之中斷序列之聚A序列，視情況其中該中斷序列包含30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)，之後為70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)，其中該30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)與該70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)由連接體序列隔開；或 (v)    包含帽1結構之5’帽以及包含RNA之+1、+2、+3、+4及+5位之帽近端序列；其中： (a)    該帽1結構包含m7(3’OMeG)(5')ppp(5')(2'OMeA 1)pG 2，其中A 1為RNA之+1位，且G 2為RNA之+2位；且 (b)    該帽近端序列包含該帽1結構之A 1及G 2，以及包含分別位於RNA之+3、+4及+5位之A 3N 4N 5之序列，其中N 4及N 5各自獨立地選自A、G、C及U。
  62. 一種組合物，其包含： 一或多種第一RNA，其各自包含編碼與第一傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列； 一或多種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，該第二傳染原與該第一傳染原不同； 其中該組合物中之該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者包含相同的非編碼元件，該等非編碼元件包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列，且 其中該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者之特徵在於： (i)       由該組合物中之RNA誘導之免疫反應水準為由該相同RNA在單獨投與時誘導之免疫反應水準的至少80%；及/或 (ii)      由該組合物中之RNA誘導之免疫反應水準為由該相同RNA在個體身體之不同位置與其他RNA分開投與時誘導之免疫反應水準的至少80%；及/或 (iii)     由該組合物中之RNA誘導之免疫反應水準為由各別參考組合物誘導之免疫反應水準的至少80%。
  63. 如請求項62之組合物，其中該各別參考組合物為不活化之病毒疫苗。
  64. 如請求項62或63之組合物，其中由該一或多種第一RNA及該一或多種第二RNA誘導之免疫反應各自為當該一或多種第一RNA及該一或多種第二RNA分開投與時由相同RNA誘導之免疫反應水準的至少100%。
  65. 如請求項62至64中任一項之組合物，其中由該一或多種第一RNA及該一或多種第二RNA誘導之免疫反應各自大於由分開投與之相同RNA誘導之免疫反應。
  66. 如請求項62至64中任一項之組合物，其中該一或多種第一RNA及該一或多種第二RNA各自以低於分開投與之相同RNA之劑量的劑量存在，其中由較低劑量之該一或多種第一RNA及該一或多種第二RNA誘導之免疫反應各自實質上相當於或大於由較大劑量之分開投與的相同RNA誘導之免疫反應。
  67. 一種組合物，其包含： 一或多種第一RNA，其各自包含編碼與第一傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列； 一或多種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，該第二傳染原與該第一傳染原不同； 其中該組合物中之該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者包含相同的非編碼元件，該等非編碼元件包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列， 其中該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者分開或一起囊封於奈米顆粒中(例如該等第一RNA中之每一者囊封於第一奈米顆粒群體中且該等第二RNA中之每一者囊封於第二奈米顆粒群體中；或該等第一RNA中之每一者及該等第二RNA中之每一者囊封於相同的奈米顆粒群體中)；且 其中該組合物之特徵在於： (i)     儲存24小時後，該組合物之RNA含量為初始RNA含量之至少95%； (ii)    儲存24小時後，RNA囊封保持為初始RNA囊封之至少95%； (iii)   儲存24小時後，囊封該等第一RNA及該等第二RNA之奈米顆粒維持實質上相同之大小； (iv)   囊封該等第一RNA及該等第二RNA之奈米顆粒在24小時後維持不超過0.3之多分散性；及/或 (v)    儲存24小時後，該第一RNA與該第二RNA之質量比保持實質上相同。
  68. 如請求項67之組合物，其中該等奈米顆粒包含脂質奈米顆粒、多聚複合物(PLX)、脂質化多聚複合物(LPLX)、脂質體或多糖奈米顆粒。
  69. 如請求項68之組合物，其中該等奈米顆粒包含脂質奈米顆粒。
  70. 如請求項69之組合物，其中該等脂質奈米顆粒包含：陽離子可電離脂質、一或多種中性脂質及聚合物結合之脂質。
  71. 如請求項70之組合物，其中該聚合物結合之脂質包含PEG結合脂質。
  72. 如請求項67至71中任一項之組合物，其中該等奈米顆粒之平均直徑為約50-150 nm。
  73. 如請求項67至72中任一項之組合物，其中對於(i)-(v)中之每一者，儲存之最初12小時係在30℃下且儲存之剩餘12小時係在2℃-8℃下。
  74. 如請求項67至73中任一項之組合物，其中該一或多種第一RNA包含至少兩種第一RNA，其各自包含編碼與該第一傳染原之不同毒株或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
  75. 如請求項67至74中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含至少兩種第二RNA，其各自包含編碼與該第二傳染原之不同毒株或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
  76. 如請求項67至75中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含至少三種第二RNA，其各自包含編碼與該第二傳染原之不同毒株或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
  77. 如請求項67至76中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含至少四種第二RNA，其各自包含編碼與該第二傳染原之不同變異體或毒株相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
  78. 一種組合物，其包含： 複數種第一RNA，其各自包含編碼與第一傳染原或其不同毒株及/或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列； 一或多種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，該第二傳染原與該第一傳染原不同； 且其中該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者分開或一起調配於相同的奈米顆粒調配物中； 其中(i)該等第一RNA及該等第二RNA係以1:2至2:1之質量比存在，且/或(ii)該等第一RNA及該等第二RNA係以每劑約10 ug至約100 ug之總量存在；及 一或多種第一RNA，其各自包含編碼與第一傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列； 一或多種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，其中該第二傳染原與該第一傳染原不同； 其中該組合物中之該等第一RNA及該等第二RNA中之每一者包含相同的非編碼元件，該等非編碼元件包括相同的5’帽、帽近端序列、5’ UTR序列、3’ UTR序列及聚A序列，且 其中該等相同的非編碼元件中之至少一者為或包含： (i)       5’-UTR序列，其為或包含經修飾之人類α-球蛋白5’-UTR； (ii)      3’-UTR序列，其為或包含來自分裂之胺基末端增強子(AES)信使RNA之第一序列及來自粒線體編碼之12S核糖體RNA之第二序列； (iii)     包含至少100個A核苷酸之聚A序列，其中該第一RNA及該第二RNA各自在該3’ UTR與該聚A序列之間不包含至少30個鄰接C核苷酸之區段； (iv)     包含A核苷酸之中斷序列之聚A序列，視情況其中該中斷序列包含30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)，之後為70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)，其中該30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)與該70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)由連接體序列隔開；或 (v)      包含帽1結構之5’帽以及包含RNA之+1、+2、+3、+4及+5位之帽近端序列；其中： (a)      該帽1結構包含m7(3’OMeG)(5')ppp(5')(2'OMeA 1)pG 2，其中A 1為RNA之+1位，且G 2為RNA之+2位；且 (b)      該帽近端序列包含該帽1結構之A 1及G 2，以及包含分別位於RNA之+3、+4及+5位之A 3N 4N 5之序列，其中N 4及N 5各自獨立地選自A、G、C及U。
  79. 如請求項61至78中任一項之組合物，其中該等第一RNA中之每一者共調配於相同的奈米顆粒調配物中，或其中該等第一RNA中之每一者調配於單獨的奈米顆粒調配物中。
  80. 如請求項61至79中任一項之組合物，其中該等第二RNA中之每一者共調配於相同的奈米顆粒調配物中，或其中該等第二RNA中之每一者調配於單獨的奈米顆粒調配物中。
  81. 如請求項61至80中任一項之組合物，其中該等第一RNA及該等第二RNA調配於單獨的奈米顆粒群體中。
  82. 如請求項61至81中任一項之組合物，其中該等第一RNA及該等第二RNA全部共調配於相同的奈米顆粒調配物中。
  83. 如請求項61至82中任一項之組合物，其中該第一傳染原為或包含冠狀病毒。
  84. 如請求項83之組合物，其中該一或多種第一RNA包含(i)包含編碼與第一冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列的RNA，及(ii)包含編碼與第二冠狀病毒相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列的RNA。
  85. 如請求項61至84中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含複數種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原或其不同毒株及/或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
  86. 如請求項61至85中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含至少兩種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原或其不同毒株及/或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
  87. 如請求項61至86中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含至少三種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原或其不同毒株及/或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
  88. 如請求項61至87中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含至少四種第二RNA，其各自包含編碼與第二傳染原或其不同毒株及/或變異體相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
  89. 如請求項61至88中任一項之組合物，其中該第二傳染原為或包含細菌性傳染原。
  90. 如請求項89之組合物，其中該細菌性傳染原為肺炎鏈球菌( Streptococcus pneumoniae) 。
  91. 如請求項61至88中任一項之組合物，其中該第二傳染原為或包含病毒性傳染原。
  92. 如請求項91之組合物，其中該第二傳染原為誘發傳染性呼吸疾病之病毒性傳染原。
  93. 如請求項92之組合物，其中該病毒性傳染原為或包含流行性感冒病毒、肺病毒科病毒(pneumoviridae virus)或副黏液病毒科病毒(Paramyxoviridae virus)。
  94. 如請求項93之組合物，其中該肺病毒科病毒為呼吸道融合病毒(RSV)。
  95. 如請求項93之組合物，其中該傳染性呼吸疾病為或包含流行性感冒A型、B型及/或C型病毒。
  96. 如請求項95之組合物，其中該傳染性呼吸疾病為或包含流行性感冒A型及/或B型病毒。
  97. 如請求項96之組合物，其中該一或多種第二RNA包含(i)至少一種RNA，其包含編碼與流行性感冒A型病毒相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，及(ii)至少一種RNA，其包含編碼與流行性感冒B型病毒相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
  98. 如請求項96或97之組合物，其中該一或多種第二RNA包含(i)至少兩種RNA，其各自包含編碼與流行性感冒A型病毒之不同毒株相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，及(ii)至少兩種RNA，其各自包含編碼與流行性感冒B型病毒之不同毒株相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
  99. 如請求項95至98中任一項之組合物，其中與每一流行性感冒病毒相關的該(等)抗原性多肽各自獨立地為血球凝集素(HA)多肽、神經胺酸酶(NA)多肽或其組合，或其免疫原性片段。
  100. 如請求項96至99中任一項之組合物，其中例如基於人類血清學資料，該等流行性感冒A型病毒及該等流行性感冒B型病毒之毒株各自已預測為或為即將到來的流感季之傳播毒株。
  101. 如請求項96至100中任一項之組合物，其中該流行性感冒A病毒之毒株係選自H1N1、H1N2、H2N2、H3N1、H3N2、H3N8、H5N1、H5N2、H5N3、H5N8、H5N9、H7N1、H7N2、H7N3、H7N4、H7N7、H7N9、H9N2、H10N7及H10N8病毒。
  102. 如請求項101之組合物，其中該流行性感冒A型病毒之毒株係選自H1N1、H3N2、H5N1及H5N8病毒。
  103. 如請求項98至102中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含含有編碼與H1N1病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列的RNA。
  104. 如請求項103之組合物，其中該H1N1病毒為A/Wisconsin/588/2019。
  105. 如請求項104之組合物，其中與A/Wisconsin/588/2019相關之該抗原性多肽為HA多肽，且包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之胺基酸序列。
  106. 如請求項104或105之組合物，其中與A/Wisconsin/588/2019相關之該抗原性多肽為HA多肽，且編碼該HA多肽之RNA包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之核苷酸序列。
  107. 如請求項98至106中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含含有編碼與H3N2病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列的RNA。
  108. 如請求項107之組合物，其中該H3N2病毒為A/Cambodia/e0826360/2020。
  109. 如請求項108之組合物，其中與A/Cambodia/e0826360/2020相關之該抗原性多肽為HA多肽，且包含與SEQ ID NO: 95至少85%一致之胺基酸序列。
  110. 如請求項108或109之組合物，其中與A/Cambodia/e0826360/2020相關之該抗原性多肽為HA多肽，且編碼該HA多肽之RNA包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之核苷酸序列。
  111. 如請求項107之組合物，其中該H3N2病毒為A/Darwin/6/2021。
  112. 如請求項111之組合物，其中與A/Darwin/6/2021相關之該抗原性多肽為HA多肽，且包含與SEQ ID NO: 80至少85%一致之胺基酸序列。
  113. 如請求項111或112之組合物，其中與A/Darwin/6/2021相關之該抗原性多肽為HA多肽，且編碼該HA多肽之RNA包含與SEQ ID NO: 82至少85%一致之核苷酸序列。
  114. 如請求項98至113中任一項之組合物，其中該一或多種第二RNA包含含有編碼與B/Yamagata或B/Victoria譜系病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列的RNA。
  115. 如請求項114之組合物，其中該B/Victoria譜系流行性感冒病毒為B/Washington/02/2019。
  116. 如請求項115之組合物，其中與B/Washington/02/2019相關之該抗原性多肽為HA多肽，且包含與SEQ ID NO: 100至少85%一致之序列。
  117. 如請求項115或116之組合物，其中與B/Washington/02/2019相關之該抗原性多肽為HA多肽，且編碼該HA多肽之RNA包含與SEQ ID NO: 102至少85%一致之核苷酸序列。
  118. 如請求項114之組合物，其中該B/Victoria譜系流行性感冒病毒為B/Austria/1359417/2021。
  119. 如請求項118之組合物，其中與B/Austria/1359417/2021相關之該抗原性多肽為HA多肽，且包含與SEQ ID NO: 85至少85%一致之序列。
  120. 如請求項118或119之組合物，其中與B/Austria/1359417/2021相關之該抗原性多肽為HA多肽，且編碼該HA多肽之RNA包含與SEQ ID NO: 87至少85%一致之核苷酸序列。
  121. 如請求項114之組合物，其中該B/Yamagata譜系流行性感冒病毒為B/Phuket/3073/2013。
  122. 如請求項121之組合物，其中與B/Phuket/3073/2013相關之該抗原性多肽為HA多肽，且包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之胺基酸序列。
  123. 如請求項121或122之組合物，其中與B/Phuket/3073/2013相關之該抗原性多肽為HA多肽，且編碼該HA多肽之RNA包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之核苷酸序列。
  124. 如請求項61至123中任一項之組合物，其中該第一傳染原為冠狀病毒。
  125. 如請求項124之組合物，其中該冠狀病毒為阿爾法冠狀病毒(alphacoronavirus)、貝塔冠狀病毒(betacoronavirus)、伽馬冠狀病毒(gammacoronavirus)或德爾塔冠狀病毒(deltacoronavirus)。
  126. 如請求項125之組合物，其中該冠狀病毒為貝塔冠狀病毒。
  127. 如請求項126之組合物，其中該貝塔冠狀病毒為沙貝病毒(sarbecovirus)、瑪貝病毒(merbecovirus)、埃貝病毒(embecorvius)、諾貝病毒(nobecovirus)或希貝病毒(hibecorvirus)。
  128. 如請求項127之組合物，其中該沙貝病毒為SARS-CoV-1或SARS-CoV-2。
  129. 如請求項128之組合物，其中該沙貝病毒為SARS-CoV-2。
  130. 如請求項127之組合物，其中該瑪貝病毒為MERS-CoV。
  131. 如請求項129之組合物，其中該一或多種第一RNA包含如下RNA，該RNA包含編碼與SARS-CoV-2變異體相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，在投與時該SARS-CoV-2變異體在相關群體中流行或已鑑別為所關注變異體。
  132. 如129之組合物，其中該一或多種第一RNA包含如下RNA，該RNA包含編碼與奧密克戎SARS-CoV-2變異體(例如BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5變異體)相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列。
  133. 如請求項129之組合物，其中該一或多種第一RNA包含(i)包含編碼與第一SARS-CoV-2毒株相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列的RNA，其中該第一SARS-CoV-2毒株為SARS-CoV-2原始毒株(武漢毒株)，及(ii)包含編碼與第二SARS-CoV-2變異體相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列的RNA，其中該第二SARS-CoV-2為該SARS-CoV-2原始毒株之變異體，且在投與時在相關群體中流行或已鑑別為所關注變異體。
  134. 如請求項129之組合物，其中該一或多種第一RNA包含(i)包含編碼與第一SARS-CoV-2變異體相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列的RNA，及(ii)包含編碼與第二SARS-CoV-2變異體相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列的RNA，其中該第一SARS-CoV-2變異體及該第二SARS-CoV-2變異體各自在投與時在相關群體中流行或已鑑別為所關注變異體。
  135. 如請求項133或134之組合物，其中該第二SARS-CoV-2變異體為SARS-CoV-2之奧密克戎變異體。
  136. 如請求項135之組合物，其中該SARS-CoV-2之奧密克戎變異體為或包含奧密克戎BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5變異體。
  137. 如請求項124至136中任一項之組合物，其中與冠狀病毒相關之該(等)抗原性多肽為刺突(S)多肽或其免疫原性片段或變異體。
  138. 如請求項137之組合物，其中該S多肽為融合前穩定之S多肽。
  139. 如請求項138之組合物，其中該融合前穩定之S多肽包含至少兩個脯胺酸取代。
  140. 如請求項139之組合物，其中該兩個脯胺酸取代包含在對應於SEQ ID NO: 1之殘基986及987之位置處的脯胺酸殘基。
  141. 如請求項138至140中任一項之組合物，其中該融合前穩定之S多肽包含至少六個脯胺酸取代。
  142. 如請求項141之組合物，其中該至少六個脯胺酸取代中之四者包含在對應於SEQ ID NO: 1之殘基817、892、899及942之位置處的脯胺酸殘基。
  143. 如132之組合物，其中編碼與奧密克戎SARS-CoV-2變異體相關之一或多種抗原性多肽之該RNA編碼與XBB.1.5毒株相關且包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之胺基酸序列的S蛋白。
  144. 如請求項133至142中任一項之組合物，其中編碼與SARS-CoV-2原始毒株相關之一或多種抗原性多肽之該RNA編碼與武漢毒株相關且包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之胺基酸序列的S蛋白。
  145. 如請求項144之組合物，其中編碼SEQ ID NO: 7之該RNA包含與SEQ ID NO: 9至少85%一致之核苷酸序列。
  146. 如請求項133至145中任一項之組合物，其中編碼與第二SARS-CoV-2變異體相關之一或多種抗原性多肽之該RNA編碼與BA.4/5變異體相關之S蛋白，且包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之胺基酸序列。
  147. 如請求項146之組合物，其中編碼SEQ ID NO: 69之該RNA包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之核苷酸序列。
  148. 如請求項61至147中任一項之組合物，其中： 該一或多種第一RNA包含： (a)    包含編碼來自SARS-CoV-2奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5變異體)之SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列的RNA；或 (b)    包含編碼來自SARS-CoV-2原始毒株(武漢毒株)之SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列的RNA，及包含編碼來自SARS-CoV-2奧密克戎變異體(例如BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5變異體)之SARS-CoV-2刺突(S)多肽之核苷酸序列的RNA；且 其中該一或多種第二RNA包含：(i)包含編碼來自流行性感冒A/H1N1病毒之HA多肽之核苷酸序列的RNA，(ii)包含編碼來自流行性感冒A/H3N2病毒之HA多肽之核苷酸序列的RNA，(iii)包含編碼來自流行性感冒B/Victoria譜系病毒之HA多肽之核苷酸序列的RNA，及(iv)包含編碼來自流行性感冒B/Yamagata病毒之HA多肽之核苷酸序列的RNA。
  149. 如請求項148之組合物，其中該H1N1病毒為A/Wisconsin/588/2019。
  150. 如請求項149之組合物，其中與A/Wisconsin/588/2019相關之該HA多肽包含與SEQ ID NO: 90至少85%一致之序列。
  151. 如請求項149或150之組合物，其中包含編碼與A/Wisconsin/588/2019相關之HA多肽之核苷酸序列的該RNA包含與SEQ ID NO: 92至少85%一致之序列。
  152. 如請求項148至151中任一項之組合物，其中該H3N2病毒為A/Cambodia/e0826360/2020。
  153. 如請求項152之組合物，其中與A/Cambodia/e0826360/2020相關之該HA多肽包含與SEQ ID NO: 95至少85%一致之序列。
  154. 如請求項152或153之組合物，其中包含編碼與A/Cambodia/e0826360/2020相關之HA多肽之序列的該第一RNA包含與SEQ ID NO: 97至少85%一致之序列。
  155. 如請求項148至154中任一項之組合物，其中該B/Victoria譜系流行性感冒病毒為B/Washington/02/2019。
  156. 如請求項155之組合物，其中與B/Washington/02/2019相關之該HA多肽包含與SEQ ID NO: 100至少85%一致之序列。
  157. 如請求項155或156之組合物，其中包含編碼與B/Washington/02/2019相關之HA多肽之核苷酸序列的該RNA包含與SEQ ID NO: 102至少85%一致之序列。
  158. 如請求項148至157中任一項之組合物，其中該B/Yamagata譜系流行性感冒病毒為B/Phuket/3073/2013。
  159. 如請求項158之組合物，其中與B/Phuket/3073/2013相關之該HA多肽包含與SEQ ID NO: 105至少85%一致之序列。
  160. 如請求項158或159之組合物，其中包含編碼與B/Phuket/3073/2013相關之HA多肽之序列的該RNA包含與SEQ ID NO: 107至少85%一致之核苷酸序列。
  161. 如請求項148至160中任一項之組合物，其中與武漢毒株相關之該S多肽包含與SEQ ID NO: 7至少85%一致之序列。
  162. 如請求項148至161中任一項之組合物，其中包含編碼與武漢毒株相關之S多肽之核苷酸序列的該RNA包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之序列。
  163. 如請求項148至162中任一項之組合物，其中該奧密克戎變異體為BA.4/5變異體。
  164. 如請求項163之組合物，其中與該BA.4/5奧密克戎變異體相關之該S多肽包含與SEQ ID NO: 69至少85%一致之序列。
  165. 如請求項163或164之組合物，其中包含編碼與BA.4/5奧密克戎變異體相關之S多肽之序列的該RNA包含與SEQ ID NO: 70至少85%一致之序列。
  166. 如請求項148至160中任一項之組合物，其中該奧密克戎變異體為XBB.1.5變異體。
  167. 如請求項166之組合物，其中與該XBB.1.5奧密克戎變異體相關之該S多肽包含與SEQ ID NO: 129至少85%一致之序列。
  168. 如請求項166或167之組合物，其中包含編碼與XBB.1.5奧密克戎變異體相關之S多肽之序列的該RNA包含與SEQ ID NO: 130至少85%一致之序列。
  169. 如請求項47至60及62至77中任一項之組合物，其中該等非編碼元件中之至少一者為或包含： (i)       5’-UTR序列，其為或包含經修飾之人類α-球蛋白5’-UTR； (ii)      3’-UTR序列，其為或包含來自分裂之胺基末端增強子(AES)信使RNA之第一序列及來自粒線體編碼之12S核糖體RNA之第二序列； (iii)     包含至少100個A核苷酸之聚A序列，其中該第一RNA及該第二RNA各自在該3’ UTR與該聚A序列之間不包含至少30個鄰接C核苷酸之區段； (iv)     包含A核苷酸之中斷序列之聚A序列，視情況其中該中斷序列包含30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)，之後為70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)，其中該30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)與該70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)由連接體序列隔開；或 (v)      包含帽1結構之5’帽以及包含RNA之+1、+2、+3、+4及+5位之帽近端序列；其中： (a)      該帽1結構包含m7(3’OMeG)(5')ppp(5')(2'OMeA 1)pG 2，其中A 1為RNA之+1位，且G 2為RNA之+2位；且 (b)      該帽近端序列包含該帽1結構之A 1及G 2，以及包含分別位於RNA之+3、+4及+5位之A 3N 4N 5之序列，其中N 4及N 5各自獨立地選自A、G、C及U。
  170. 如請求項47至169中任一項之組合物，其中該等相同的非編碼元件中之至少一者為或包含： (i)       5’-UTR序列，其為或包含經修飾之人類α-球蛋白5’-UTR； (ii)      3’-UTR序列，其為或包含來自分裂之胺基末端增強子(AES)信使RNA之第一序列及來自粒線體編碼之12S核糖體RNA之第二序列； (iii)     包含至少100個A核苷酸之聚A序列，其中該第一RNA及該第二RNA各自在該3’ UTR與該聚A序列之間不包含至少30個鄰接C核苷酸之區段； (iv)     包含A核苷酸之中斷序列之聚A序列，視情況其中該中斷序列包含30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)，之後為70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)，其中該30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)與該70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)由連接體序列隔開；及 (v)      包含帽1結構之5’帽以及包含RNA之+1、+2、+3、+4及+5位之帽近端序列；其中： (a)      該帽1結構包含m7(3’OMeG)(5')ppp(5')(2'OMeA 1)pG 2，其中A 1為RNA之+1位，且G 2為RNA之+2位；且 (b)      該帽近端序列包含該帽1結構之A 1及G 2，以及包含分別位於RNA之+3、+4及+5位之A 3N 4N 5之序列，其中N 4及N 5各自獨立地選自A、G、C及U。
  171. 如請求項1至46中任一項之組合物，其中每一RNA包含： (i)     5’帽，其中該5’帽視情況包含帽1結構； (ii)      帽近端序列； (iii)     5’ UTR序列，其中該5’ UTR為視情況經修飾之人類α-球蛋白5’-UTR； (iv)     3’ UTR序列，其中該3’ UTR序列視情況包含來自分裂之胺基末端增強子(AES)信使RNA之第一序列及來自粒線體編碼之12S核糖體RNA之第二序列；及/或 (v)      聚A序列，其中該聚A序列視情況包含30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)，之後為70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)，其中該30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)與該70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)由連接體序列隔開。
  172. 如請求項47至171中任一項之組合物，其中該5’帽、該帽近端序列、該5’ UTR序列、該3’ UTR序列及該聚A序列係呈5’至3’順序。
  173. 如請求項1至172中任一項之組合物，其中每一RNA包含為或包含m 2 7,3’-OGppp(m 1 2’-O)ApG之5’-帽。
  174. 如請求項47至169及171至173中任一項之組合物，其中該5' UTR包含人類α-球蛋白5’-UTR或由其組成。
  175. 如請求項174之組合物，其中該人類α-球蛋白5’-UTR包含SEQ ID NO: 12。
  176. 如請求項47至169及171至175中任一項之組合物，其中該3’ UTR包含來自分裂之胺基末端增強子(AES)信使RNA之第一序列及來自粒線體編碼之12S核糖體RNA之第二序列，或由其組成。
  177. 如請求項176之組合物，其中該3’ UTR包含根據SEQ ID NO: 13之序列或由其組成。
  178. 如請求項47至177中任一項之組合物，其中該聚A尾序列為中斷之聚A尾序列。
  179. 如請求項178之組合物，其中該中斷之聚A尾序列包含30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)，之後為70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)，其中該30個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 174)與該70個腺嘌呤核苷酸(SEQ ID NO: 175)由連接體序列隔開。
  180. 如請求項179之組合物，其中該中斷之聚A尾序列包含根據SEQ ID NO: 14之核糖核酸序列或由其組成。
  181. 如請求項47至180中任一項之組合物，其中位於該3’UTR 3’端之序列(例如緊鄰編碼抗原性多肽之序列之序列)為CUCGAG或GGAUCCGAU。
  182. 如請求項1至181中任一項之組合物，其中該組合物中之每一RNA包括經修飾之尿苷代替所有尿苷。
  183. 如請求項182之組合物，其中該等經修飾之尿苷各自為N1-甲基-假尿苷。
  184. 如請求項47至183中任一項之組合物，其中該等第一RNA與該等第二RNA係以1:5至5:1、1:4至4:1、1:3至3:1或1:2至2:1之質量比存在。
  185. 如請求項1至184中任一項之組合物，其中將該組合物中之每一RNA調配於奈米顆粒中。
  186. 如請求項47至185中任一項之組合物，其中將所有該等第一RNA一起共調配於相同的奈米顆粒群體中，且將所有該等第二RNA一起共調配於相同的奈米顆粒群體中，且其中該等第一RNA及該等第二RNA調配於單獨的奈米顆粒群體中。
  187. 如請求項47至186中任一項之組合物，其中將該等第一RNA及該等第二RNA全部一起共調配於相同的奈米顆粒群體中。
  188. 如請求項1至60及96至186中任一項之組合物，其中： (a)      將編碼流行性感冒A病毒之抗原性多肽之每種RNA共調配於第一奈米顆粒群體中，且將編碼流行性感冒B病毒之抗原性多肽之每種RNA共調配於第二奈米顆粒群體中； (b)      將編碼流行性感冒病毒之抗原性多肽之每種RNA調配於單獨的奈米顆粒群體中；或 (c)      將編碼流行性感冒A病毒之抗原性多肽之每種RNA共調配於第一奈米顆粒群體中，且將編碼流行性感冒B病毒之抗原性多肽之每種RNA調配於單獨的奈米顆粒中。
  189. 如請求項185至188中任一項之組合物，其中該等奈米顆粒包含脂質奈米顆粒、多聚複合物(PLX)、脂質化多聚複合物(LPLX)、脂質體或多糖奈米顆粒。
  190. 如請求項189之組合物，其中該等奈米顆粒包含脂質奈米顆粒。
  191. 如請求項190之組合物，其中該等脂質奈米顆粒各自包含：陽離子可電離脂質；及一或多種中性脂質，及聚合物結合之脂質。
  192. 如請求項191之組合物，其中該聚合物結合之脂質包含PEG結合脂質。
  193. 如請求項186至192中任一項之組合物，其中該等奈米顆粒之平均直徑為約50-150 nm。
  194. 如請求項1至193中任一項之組合物，其進一步包含： (a)      一或多種第三RNA，其各自包含編碼與第三傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，該第三傳染原不同於該第一傳染原及該第二傳染原；或 (b)      第三傳染原之一或多種多肽。
  195. 如請求項194之組合物，其中該第三傳染原為呼吸病毒(例如不為SARS-CoV-2病毒或流行性感冒病毒之呼吸病毒)。
  196. 如請求項195之組合物，其中該第三傳染原為呼吸道融合病毒(RSV)。
  197. 如請求項196之組合物，其中： (i)       該組合物包含一或多種RNA，其各自編碼RSV多肽；或 (ii)      該組合物包含一或多種RSV多肽。
  198. 如請求項197之組合物，其中： (i)       該組合物包含一或多種RNA，其各自編碼RSV F蛋白、其變異體或者RSV F蛋白或其變異體之免疫原性片段；或 (ii)      該組合物包含一或多種RSV F蛋白、其免疫原性變異體或者RSV F蛋白或其變異體之免疫原性片段。
  199. 如請求項197或198之組合物，其中： (i)       該組合物包含一或多種RNA，其各自編碼RSV亞型A病毒之多肽(例如RSV亞型A病毒之F蛋白、其變異體或者RSV亞型B病毒之F蛋白或其變異體之免疫原性片段)，及一或多種RNA，其各自編碼RSV亞型B病毒之多肽(例如RSV亞型B病毒之F蛋白、其變異體或者RSV亞型B病毒之F蛋白或其變異體之免疫原性片段)；或 (ii)      該組合物包含RSV亞型A病毒之一或多種多肽(例如F蛋白、其變異體或者F蛋白或其變異體之免疫原性片段)及RSV亞型B病毒之一或多種多肽(例如F蛋白、其變異體或者F蛋白或其變異體之免疫原性片段)。
  200. 如請求項198或199之組合物，其中該RSV F蛋白、該變異體或該免疫原性片段以融合前構形穩定。
  201. 如194至200中任一項之組合物，其包含Arexvy TM或Abrysvo TM。
  202. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至201中任一項之組合物以及至少一種醫藥學上可接受之賦形劑。
  203. 如請求項202之醫藥組合物，其包含低溫保護劑，視情況其中該低溫保護劑為或包含蔗糖。
  204. 如請求項202或203之醫藥組合物，其中該醫藥組合物包含緩衝水溶液，視情況其中該緩衝水溶液包含Tris鹼、Tris HCl、NaCl、KCl、Na 2HPO 4及KH 2PO 4中之一或多者。
  205. 如請求項202至204中任一項之醫藥組合物，其經調配以提供100 μg或更少劑量之總RNA。
  206. 如請求項205之醫藥組合物，其經調配以提供90 μg劑量之總RNA。
  207. 如請求項205之醫藥組合物，其經調配以提供60 μg劑量之總RNA。
  208. 如請求項206之醫藥組合物，其經調配以提供30 μg劑量之一或多種第一RNA及60 μg劑量之一或多種第二RNA。
  209. 如請求項206之醫藥組合物，其經調配以提供60 μg劑量之一或多種第一RNA及30 μg劑量之一或多種第二RNA。
  210. 如請求項207之醫藥組合物，其經調配以提供30 μg劑量之一或多種第一RNA及30 μg劑量之一或多種第二RNA。
  211. 如請求項206或208之醫藥組合物，其包含四種第二RNA，每種第二RNA包含編碼與不同的流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列，且其中該醫藥組合物經調配以提供15 μg劑量之每種第二RNA。
  212. 如請求項207或209之醫藥組合物，其包含四種第二RNA，每種第二RNA包含編碼與不同的流行性感冒病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列，且其中該醫藥組合物經調配以提供7.5 μg劑量之每種第二RNA。
  213. 如請求項206至208及210至212中任一項之醫藥組合物，其包含兩種第一RNA，每種第一RNA包含編碼與不同的冠狀病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列，且其中該醫藥組合物經調配以提供15 μg劑量之每種第一RNA。
  214. 如請求項209之醫藥組合物，其包含兩種第一RNA，每種第一RNA包含編碼與不同的冠狀病毒相關之抗原性多肽之核苷酸序列，且其中該醫藥組合物經調配以提供30 μg劑量之每種第一RNA。
  215. 一種方法，其包括向個體投與一或多個劑量之如請求項1至201中任一項之組合物或一或多個劑量之如請求項202至214中任一項之醫藥組合物。
  216. 如請求項215之方法，其中該方法為治療冠狀病毒疾病及流行性感冒疾病之方法。
  217. 如請求項215之方法，其中該方法為以下方法：(i)預防冠狀病毒疾病及流行性感冒疾病，或(ii)誘導針對冠狀病毒及/或流行性感冒病毒之免疫反應。
  218. 如請求項215至217中任一項之方法，其中該一或多個劑量之該組合物中之每一者或該一或多個劑量之該醫藥組合物中之每一者與針對第三傳染原之疫苗共投與。
  219. 如請求項218之方法，其中該第三傳染原為可引起呼吸疾病之病毒。
  220. 如請求項219之方法，其中該第三傳染原為RSV。
  221. 如請求項220之方法，其中針對該第三傳染原之該疫苗為Arexvy TM或Abrysvo TM。
  222. 如請求項218至221中任一項之方法，其中： 在即將投與給該個體之前將針對該第三傳染原之該疫苗與該一或多個劑量之該組合物或該一或多個劑量之該醫藥組合物混合；或 將針對該第三傳染原之該疫苗與該一或多個劑量之該組合物或該一或多個劑量之該醫藥組合物分開投與(例如，其中針對該第三傳染原之該疫苗與該一或多個劑量之該組合物或該一或多個劑量之該醫藥組合物在分開的注射部位(例如在對側手臂上)投與給該個體)。
  223. 如請求項1至201中任一項之組合物或如請求項202至214中任一項之醫藥組合物，其用於治療冠狀病毒疾病及流行性感冒疾病，其中該用途包括向個體投與一或多個劑量之該組合物或該醫藥組合物。
  224. 如請求項1至201中任一項之組合物或如請求項202至214中任一項之醫藥組合物，其用於： (a)    預防冠狀病毒疾病及流行性感冒疾病，或 (b)    誘導針對冠狀病毒及流行性感冒病毒之免疫反應， 其中該用途包括向個體投與一或多個劑量之該組合物或該醫藥組合物。
  225. 如請求項215至222中任一項之方法，或如請求項223或224之所用組合物或醫藥組合物，其中該方法或該用途包括向該個體投與兩個或更多個劑量之該組合物或該醫藥組合物。
  226. 如請求項225之所用方法或組合物或醫藥組合物，其中該兩個劑量相隔至少約21天投與。
  227. 如請求項215至222中任一項之方法，或如請求項225或226之所用組合物或醫藥組合物，其中該方法或該用途包括向該個體投與三個或更多個劑量之該組合物或該醫藥組合物。
  228. 如請求項215至222中任一項之方法，或如請求項223或224所用之組合物或醫藥組合物，其中該個體先前已暴露於冠狀病毒及/或流行性感冒病毒(例如藉由疫苗接種及/或藉由感染)。
  229. 如請求項215至228中任一項所用之方法或組合物或醫藥組合物，其中該方法或該用途在該個體中誘導針對一或多種冠狀病毒及一或多種流行性感冒病毒之免疫反應。
  230. 如請求項229所用之方法或組合物或醫藥組合物，其中該免疫反應包含B細胞反應。
  231. 如請求項230所用之方法或組合物或醫藥組合物，其中該B細胞反應包含產生針對該一或多種抗原之抗體。
  232. 如請求項230或231所用之方法或組合物或醫藥組合物，其中該免疫反應包含T細胞反應。
  233. 如請求項232所用之方法或組合物或醫藥組合物，其中該T細胞反應為或包含CD4+ T細胞反應。
  234. 如請求項232或233所用之方法或組合物或醫藥組合物，其中該T細胞反應為或包含CD8+ T細胞反應。
  235. 一種如請求項1至201中任一項之組合物或如請求項202至214中任一項之醫藥組合物之用途，其用於治療個體之冠狀病毒疾病及流行性感冒疾病。
  236. 一種如請求項1至201中任一項之組合物或如請求項202至215中任一項之醫藥組合物之用途，其用於預防個體之冠狀病毒疾病及流行性感冒疾病。
  237. 一種如請求項1至201中任一項之組合物或如請求項202至215中任一項之醫藥組合物之用途，其用於在個體中誘導針對一或多種冠狀病毒及一或多種流行性感冒病毒之免疫反應。
  238. 一種用於誘導針對第一傳染原及第二傳染原之免疫反應之方法，其中該方法包括投與 (i)       第一奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA，其包含編碼與第一傳染原相關之抗原性多肽之核苷酸序列；及 (ii)      第二奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA，其包含編碼與第二傳染原相關之抗原性多肽之核苷酸序列， 其中所誘導之針對該第一傳染原及該第二傳染原中之每一者之免疫反應大於分開投與該等奈米顆粒時所誘導之免疫反應。
  239. 一種用於減少產生針對第一傳染原之免疫反應所需的第一奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA之量的方法，其中該第一奈米顆粒調配之RNA之RNA包含編碼與第一傳染原相關的一或多種抗原性多肽之核苷酸序列， 其中該方法包括共投與第二奈米顆粒(例如LNP)調配之RNA，該RNA包含編碼與第二傳染原相關之一或多種抗原性多肽之核苷酸序列，且 其中該第一傳染原不同於該第二傳染原。
  240. 一種組合物，其包含： 一或多種RNA，其各自編碼第一傳染原之多肽；及 第二傳染原之一或多種多肽。
  241. 如請求項240之組合物，其中該第一傳染原為冠狀病毒。
  242. 如請求項241之組合物，其中該冠狀病毒為SARS-CoV-2病毒。
  243. 如請求項242之組合物，其中該一或多種RNA各自編碼SARS-CoV-2 S蛋白、其變異體或者SARS-CoV-2 S蛋白或其變異體之免疫原性片段。
  244. 如請求項243之組合物，其包含一或多種RNA，每種RNA編碼武漢毒株或SARS-CoV-2變異體(例如奧密克戎變異體(例如奧密克戎BA.1、BA.2、BA.4/5或XBB.1.5變異體(例如本文所闡述之RNA)))之SARS-CoV-2 S蛋白、其變異體或者SARS-CoV-2 S蛋白或其變異體之免疫原性片段。
  245. 如請求項240至244中任一項之組合物，其中該第二傳染原為流行性感冒病毒。
  246. 如請求項245之組合物，其中該組合物包含一或多種流行性感冒病毒之一或多種多肽(例如兩種或更多種流行性感冒病毒毒株之一或多種多肽(例如在相關轄區流行或已預測在相關轄區流行之四種或更多種流行性感冒病毒毒株之一或多種多肽))。
  247. 如請求項245或246之組合物，其包含市售流行性感冒病毒(例如本文所闡述之重組市售流行性感冒病毒)。
  248. 如請求項247之組合物，其中該市售流行性感冒病毒為Flublok。
  249. 如請求項239至244中任一項之組合物，其中該第二傳染原為RSV。
  250. 如請求項249之組合物，其包含與第一RSV亞型相關之一或多種多肽及第二RSV亞型之一或多種多肽。
  251. 如請求項249或250之組合物，其中該第二傳染原之該多肽為RSV F蛋白、其變異體或者RSV F蛋白或其變異體之免疫原性片段。
  252. 如請求項251之組合物，其中該RSV F蛋白、其變異體或其免疫原性片段包含一或多個使該F蛋白之融合前構形穩定之突變。
  253. 如請求項252之組合物，其包含Arexvy TM或ABRYSVO TM。
  254. 如請求項239至253中任一項之組合物，其進一步包含第三傳染原之一或多種多肽。
  255. 如請求項254之組合物，其包含： 一或多種RNA，每種RNA編碼冠狀病毒之一或多種多肽(例如SARS-CoV-2 S蛋白、其變異體或前述中任一者之免疫原性片段)； 一或多種流行性感冒病毒之一或多種多肽；及 一或多種RSV之一或多種多肽。
  256. 如請求項255之組合物，其包含： 編碼奧密克戎變異體之SARS-CoV-2 S蛋白之RNA (例如編碼本文所闡述之奧密克戎BA.1、BA.4/5或XBB.1.5變異體之S蛋白的RNA)； 重組流行性感冒疫苗(例如，如本文所闡述(例如FluBlok疫苗))；及 RSV疫苗，其包含融合前穩定之F蛋白或其變異體或免疫原性片段(例如本文所闡述之RSV疫苗(例如Arexvy TM或ABRYSVO TM))。
  257. 一種組合，其包含SARS-CoV-2疫苗，該SARS-CoV-2疫苗包含編碼融合前穩定之SARS-CoV-2刺突蛋白或其變異體之一或多種mRNA；及 (a)    流行性感冒疫苗，其包含(i)編碼流行性感冒病毒之HA蛋白之一或多種mRNA，或(ii)一或多種HA多肽，及/或 (b)    RSV疫苗，其包含一或多種融合前穩定之RSV F蛋白或其變異體或免疫原性片段。
  258. 如請求項257之組合，其中將編碼融合前穩定之SARS-CoV-2刺突蛋白或其變異體之該一或多種mRNA調配為LNP。
  259. 如請求項257或258之組合，其中將編碼流行性感冒病毒之HA蛋白之該一或多種mRNA調配為LNP。
  260. 如請求項257至259中任一項之組合，其中(1)該SARS-CoV-2疫苗及(2)該流行性感冒疫苗或該RSV疫苗在單獨的容器(例如小瓶或注射器)中提供。
  261. 如請求項257至259中任一項之組合，其中(1)該SARS-CoV-2疫苗及(2)該流行性感冒疫苗或該RSV疫苗在單一容器(例如小瓶或注射器)中提供。
  262. 如請求項257至261中任一項之組合，其包含該SARS-CoV-2疫苗、該流行性感冒疫苗及該RSV疫苗。
  263. 如請求項262之組合，其中該SARS-CoV-2疫苗、該流行性感冒疫苗及該RSV疫苗在單一容器(例如小瓶或注射器)中提供。
  264. 如請求項262之組合，其中該SARS-CoV-2疫苗、該流行性感冒疫苗及該RSV疫苗在單獨的容器(例如單獨小瓶及/或注射器)中提供。
  265. 如請求項262之組合，其中： (a)    該SARS-CoV-2疫苗及該流行性感冒疫苗在單一容器中提供，且該RSV疫苗在單獨容器中提供；或 (b)    該SARS-CoV-2疫苗及該RSV疫苗在單一容器中提供，且該流行性感冒疫苗在單獨容器中提供。
  266. 如請求項257至265中任一項之組合，其中該SARS-CoV-2疫苗為BNT162b2 (例如本文所闡述之單價或二價疫苗)。
  267. 如請求項257至266中任一項之組合，其中該流行性感冒疫苗為重組流行性感冒疫苗(例如，如本文所闡述(例如FluBlok疫苗))；或包含不活化之流行性感冒病毒(例如Fluzone)。
  268. 如請求項257至267中任一項之組合，其中該RSV疫苗包含融合前穩定之F蛋白或其變異體或免疫原性片段(例如本文所闡述之RSV疫苗(例如Arexvy TM或ABRYSVO TM))。
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Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2025035187A1 (en) * 2023-08-15 2025-02-20 Macfarlane Burnet Institute For Medical Research And Public Health Limited Vaccine antigen

Family Cites Families (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2281579A1 (en) 2009-08-05 2011-02-09 BioNTech AG Vaccine composition comprising 5'-Cap modified RNA
WO2016005004A1 (en) 2014-07-11 2016-01-14 Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh Stabilization of poly(a) sequence encoding dna sequences
WO2017059902A1 (en) 2015-10-07 2017-04-13 Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh 3' utr sequences for stabilization of rna
US20180312545A1 (en) 2015-11-09 2018-11-01 Curevac Ag Optimized nucleic acid molecules
BR112019028280A2 (pt) 2017-07-04 2020-07-14 Curevac Ag moléculas de ácido nucleico
US20230346914A1 (en) 2020-02-07 2023-11-02 Modernatx, Inc. Sars-cov-2 mrna domain vaccines
US20230113170A1 (en) 2020-02-11 2023-04-13 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Sars-cov-2 vaccine
JP2023513913A (ja) 2020-02-13 2023-04-04 アンスティテュ・パストゥール 麻疹ベクターを用いたｃｏｖｉｄ－１９免疫原性組成物及びワクチン
US11376320B2 (en) 2020-03-05 2022-07-05 Iowa State University Research Foundation, Inc. Immunogenic and vaccine compositions against SARS-CoV-2
WO2021202734A2 (en) 2020-03-31 2021-10-07 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Universal influenza vaccine using nucleoside-modifield mrna
BR112022019781A2 (pt) 2020-04-22 2022-12-13 BioNTech SE Vacina para o coronavírus
MX2022015132A (es) * 2020-05-29 2023-03-08 CureVac SE Vacunas combinadas a base de acidos nucleicos.
CA3180554A1 (en) 2020-05-29 2021-12-02 Jason MCLELLAN Engineered coronavirus spike (s) protein and methods of use thereof
WO2022040220A2 (en) 2020-08-17 2022-02-24 Technovax, Inc. Severe acute respiratory syndrome coronavirus [sars-cov-2]-virus-like particle [vlp] vaccine: compositions, delivery strategies, methods and uses
CN112546211A (zh) * 2020-10-23 2021-03-26 嘉晨西海(杭州)生物技术有限公司 基于mRNA的针对冠状病毒和流感病毒的联合疫苗及其制备方法
MX2021003199A (es) 2021-03-18 2022-09-19 Centro De Investig Y De Estudios Avanzados Del I P N Vacunas para prevenir la covid19 basadas en sitios no glicosilados del dominio de union al receptor (rbd) de la proteina s del virus sars-cov-2.
EP4322996A2 (en) 2021-04-12 2024-02-21 Academia Sinica Messenger rna vaccines against wide spectrum of coronavirus variants
AU2022258463A1 (en) * 2021-04-14 2023-11-23 Modernatx, Inc. Influenza-coronavirus combination vaccines
WO2022241229A1 (en) 2021-05-14 2022-11-17 Board Of Regents, The University Of Texas System Stabilized s2 beta-coronavirus antigens
US20250009780A1 (en) 2021-07-15 2025-01-09 BioNTech SE Agents encoding cldn6 and cd3 binding elements for treating cldn6-positive cancers
CN117295756A (zh) 2021-07-23 2023-12-26 神州细胞工程有限公司 一种可诱导广谱中和活性重组多价新冠病毒三聚体蛋白疫苗的制备及应用
WO2023015332A1 (en) 2021-08-11 2023-02-16 Macfarlane Burnet Institute For Medical Research And Public Health Limited Vaccine antigen
WO2023073190A1 (en) 2021-10-28 2023-05-04 BioNTech SE Rna constructs and uses thereof

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