TW202144348A

TW202144348A - 一種吡唑并[1,5-a]吡啶類衍生物及其製備方法，組合物以及用途

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Publication number: TW202144348A
Application number: TW110114585A
Authority: TW
Inventors: 程輝敏; 温曉明; 劉志強; 方磊; 陳譽; 魏勇; 張國剛; 李傳聖; 馬松齡; 齊珍珍; 陳萍; 牛春意; 張佩宇; 賴力鵬; 馬健; 温書豪
Original assignee: 大陸商深圳晶泰科技有限公司
Priority date: 2020-04-22
Filing date: 2021-04-22
Publication date: 2021-12-01
Also published as: EP4141003A4; WO2021213476A1; CN115605477A; US20230159523A1; EP4141003A1; CN115605477B

Abstract

本發明涉及一種吡唑并[1,5-a]吡啶類衍生物及其製備方法，組合物以及用途。具體地，本發明涉及式(I)化合物及其在用於治療和/或預防與野生型、基因融合型（包括但不限於KIF5B、CCDC6和NCOA4）及突變型（包括但不限於G804、G810和M918）RET激酶相關的疾病，包括由RET激酶媒介的疾病或病症。

Description

一種吡唑并[1,5-a]吡啶類衍生物及其製備方法，組合物以及用途

本發明是有關於一種藥物領域，特別是指一種吡唑并[1,5-a]吡啶類衍生物及其可藥用鹽，和以它們作為活性成分的藥物組合物用。本發明還提供了所述化合物的製備方法和作為藥物的應用。

癌症是由不受控制且不受調節的細胞增殖產生，導致細胞增殖不受控制且不受調節的原因一直是藥物研究者的重點研究物件。

人類編碼RET蛋白的基因位於10號染色體長臂，其異常（基因融合、突變、擴增）可引起多種疾病，包括甲狀腺乳頭狀癌（PTC）、甲狀腺髓質癌（MTC）、肺腺癌、先天性巨結腸、腸易激症候群等。RET基因所在的染色體重排可能導致RET基因斷裂，斷裂後RET基因的3’端可以與KIF5B、TRIM33、CCDC6或NCOA4等不同的基因發生融合，形成融合基因，表達的融合蛋白表現為持續激活，驅動腫瘤的發生。

RET是屬於酪氨酸激酶超家族的單次跨膜受體，為多種組織和細胞的正常發育、成熟和維持所需。RET信號傳導由膠質細胞源性神經營養因數（GDNF）和家族配體（GFL）的可溶性蛋白質的結合媒介。膠質細胞源性神經營養因數（GDNF）家族不直接與RET結合，而是先與GDNF家族受體α（GFRα）形成複合物GFL–GFRα，繼而催化RET同源二聚，使RET的胞內區域自磷酸化，繼而招募銜接蛋白和通路蛋白來激活包括MAPK、PI3K、JAK-STAT、PKA和PKC在內的多種信號通路，從而參與細胞增殖、神經傳導、細胞遷移和細胞分化（Alexander Drilon, Nature Reviews Clinical Oncology, 2018, 15:151–167），在調節細胞存活、分化、增殖，遷移和趨化上發揮重要作用。

數個多靶點激酶抑制劑對RET有一定的抑制活性，如卡博替尼(Cabozantinib)、凡德他尼(Vandetanib)、樂伐替尼(Lenvatini)和普納替尼(Ponatinib)，但均為非專一性的RET抑制劑。此外，由於RET與VEGFR2的激酶結構域存在大量的同源，因此這些化合物除了抑制RET，還對於包括VEGFR2在內的多個靶點都有一定抑制作用，這導致脫靶毒性風險高，難以發揮令人滿意的療效。

因此，本領域迫切需要開發高專一性的、高效抑制RET激酶的藥物。

因此，本發明的目的是提供一種高專一性的、高效抑制RET激酶的藥物。

本發明第一方面，提供一種式(Ⅰ)化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、立體異構體、同位素化合物或前驅藥：

其中，R₁ 選自下組：氫、鹵素、硝基、氰基、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C1-C6雜烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C6-C14芳基、5-14元雜芳基、-OR₅ 、-O(C1-C6伸烷基)R₅ 、-SR₅ 、-N(R₅ )(R₆ )、-S(O)₂ R₅ 、-S(O)R₅ 、-C(O)R₅ 、-OC(O)R₅ 、-C(O)OR₅ 、-OC(O)O-(C1-C6伸烷基)-C(O)R₅ 、-C(O)-N(R₅ )(R₆ )、-N(R₅ )-C(O)R₆ 、-N(R₅ )-C(O)OR₆ 、-N(R₅ )-C(O)N(R₅ )(R₆ )、-(C1-C6伸烷基)-N(R₅ )-C(O)R₆ 、-N(R₅ )S(O)₂ R₆ 、-P(O)(R₅ )(R₆ )；其中，所述的雜烷基是指烷基碳鏈上的一個或多個碳原子被選自下組的二價連接基取代：-O-、-S-、-NH-或-C(O)-； B獨立地選自下組：氫、鹵素、氰基、CHF₂ 、CF₃ 、-C(O)OR₅ 、C1-C6烷基、C3-C8環烷基； X₁ 、X₂ 和X₃ 各自獨立地為CR或N；其中，各個R各自獨立地選自下組：氫、取代或未取代的C1-C6烷基、鹵素、或氰基，其中，所述的取代是指被獨立選自下組的一個或多個基團取代：鹵素、氰基、羥基、氨基；且X₁ 、X₂ 和X₃ 中有0、1、2或3個為N； R₂ 獨立地選自下組：氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、C1-C6雜烷基、3-8元環雜烷基；其中，所述的烷基、環烷基、雜烷基、環雜烷基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、C3-C8環烷氧基、C1-C6雜烷基、3-8元環雜烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素、氰基、羧基、羰基、羥基、巰基、氨基、甲酯、醯胺、甲基碸、磺醯胺、二甲基磷氧基； R₃ 和R₃ ’各自獨立地選自下組：氫、鹵素、氰基、羥基、巰基、氨基、CHF₂ 、CF₃ 、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、C1-C6雜烷基、3-8元環雜烷基；其中，所述的烷基、烷氧基、環烷基、雜烷基、環雜烷基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、C3-C8環烷氧基、C1-C6雜烷基、3-8元環雜烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素、氰基、羧基、羰基、羥基、巰基、氨基、甲酯、醯胺、甲基碸、磺醯胺、二甲基磷氧基；或者R₃ 和R₃ ’與其連接的C原子一起形成C3-C8環烷基、3-8元雜環基、羰基；其中，所述的環烷基、雜環基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、C3-C8環烷氧基、C1-C6雜烷基、3-8元環雜烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素、氰基、羧基、羰基、羥基、巰基、氨基、甲酯、醯胺、甲基碸、磺醯胺、二甲基磷氧基； A獨立選自下組：C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C14芳基或5-14元伸雜芳基；各R₄ 獨立地選自下組：氫、鹵素、硝基、氰基、羥基、羧基、巰基、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C1-C6雜烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C6-C14芳基、5-14元雜芳基、-OR₅ 、-SR₅ 、-N(R₅ )(R₆ )、-S(O)₂ R₅ 、-S(O)R₅ 、-C(O)R₅ 、-OC(O)R₅ 、-C(O)OR₅ 、-OC(O)O-(C1-C6伸烷基)-C(O)R₅ 、-C(O)-N(R₅ )(R₆ )、-N(R₅ )-C(O)R₆ 、-N(R₅ )-C(O)OR₆ 、-N(R₅ )-C(O)N(R₅ )(R₆ )、-(C1-C6伸烷基)-N(R₅ )-C(O)R₆ 、-N(R₅ )S(O)₂ R₆ 、-P(O)(R₅ )(R₆ )；其中，所述的烷基、環烷基、雜烷基、雜環基、芳基、雜芳基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、C3-C8環烷氧基、C1-C6雜烷基、3-8元環雜烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素、氰基、羧基、羰基、羥基、巰基、氨基、甲酯、醯胺、甲基碸、磺醯胺、二甲基磷氧基； R₅ 和R₆ 各自獨立地選自取代或未取代的下組基團：氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元單雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基、C5-C12稠合雙環、5-12元稠合雜雙環、C5-C12元螺雙環或5-12元螺雜雙環；其中，所述取代是指被獨立選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、C3-C8環烷氧基、C1-C6雜烷基、3-8元環雜烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素、氰基、羧基、羰基、羥基、巰基、氨基、甲酯、醯胺、甲基碸、磺醯胺、二甲基磷氧基；或者R₅ 和R₆ 與其連接的N或P原子一起形成3-8元雜環基；如無特別說明，上述烷基、伸烷基、環烷基、雜烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、雜環基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C1-C6雜烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基、二甲基磷氧基； n為0、1、2或3。

在另一優選例中，X₁ 、X₂ 和X₃ 各自獨立地為CH或N。

在另一優選例中，X₂ 和X₃ 獨立地為N。

在另一優選例中，X₂ 獨立地為N。

在另一優選例中，B獨立地選自下組：氫、鹵素、C1-C6烷基或CN，所述烷基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C1-C6雜烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基、二甲基磷氧基。

在另一優選例中，B獨立地為CN。

在另一優選例中，所述的式Ⅰ化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、立體異構體、同位素化合物或前驅藥，R₂ 選自下組：氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基；其中，所述的烷基、環烷基是未取代或被一個或多個下組基團取代的：C1-C6烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基、二甲基磷氧基。

在另一優選例中，所述的式Ⅰ化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、立體異構體、同位素化合物或前驅藥，R₃ 和R₃ ’各自獨立地選自下組：氫、鹵素、氰基、羥基、CHF₂ 、CF₃ 、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、C1-C6雜烷基；或者R₃ 和R₃ ’與其連接的C原子一起形成C3-C8環烷基、3-8元雜環基、羰基；其中，所述的烷基、烷氧基、環烷基、雜烷基、雜環基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基、二甲基磷氧基。

在另一優選例中，R₃ 和R₃ ’相同或不同，且各自獨立地選自下組：氫、鹵素、氰基、羥基、C1-C6烷基、C3-C6環烷基，或者R₃ 和R₃ ’與其連接的C原子一起形成C3-C6環烷基、羰基；其中，所述的烷基、環烷基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基、二甲基磷氧基。

在另一優選例中，所述的式Ⅰ化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、立體異構體、同位素化合物或前驅藥，R₁ 獨立地選自下組：-OR₅ 、-OC(O)R₅ 、-N(R₅ )(R₆ )、-C(O)-N(R₅ )(R₆ )、-N(R₅ )-C(O)R₆ 、-N(R₅ )-C(O)OR₆ 、-N(R₅ )S(O)₂ R₆ ；其中，R₅ 和R₆ 各自獨立地選自取代或未取代的下組基團：氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；其中，所述取代是指被獨立選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、氰基、鹵素、羥基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基。

在另一優選例中，R₁ 獨立地為-OR₅ ，其中，R₅ 獨立地選自取代或未取代的下組基團：C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；其中，所述取代是指被獨立選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、氰基、鹵素、羥基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基。

在另一優選例中，R₁ 獨立地選自下組：C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C14芳基、5-14元雜芳基，且所述的環烷基、芳基、雜芳基、雜環基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C1-C6雜烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基、二甲基磷氧基。

在另一優選例中，所述的式Ⅰ化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、立體異構體、同位素化合物或前驅藥，A獨立選自下組：C6-C10芳基或5-10元雜芳基，其中，所述芳基、雜芳基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C1-C6雜烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、巰基、胺基、二甲基磷氧基。

在另一優選例中，所述的式Ⅰ化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、立體異構體、同位素化合物或前驅藥，R₄ 獨立地選自下組：氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、C1-C6雜烷基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基、3-8元雜環基、-OR₅ 、-OC(O)R₅ 、-N(R₅ )(R₆ )、-C(O)-N(R₅ )(R₆ )、-N(R₅ )-C(O)R₆ 、-N(R₅ )-C(O)OR₆ 、-N(R₅ )S(O)₂ R₆ ；其中，R₅ 和R₆ 各自獨立地為取代或未取代的選自下組的基團：氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；其中，所述取代是指被獨立選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、氰基、鹵素、羥基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；如無特別說明，所述的烷基、環烷基、雜烷基、雜環基、芳基、雜芳基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基、二甲基磷氧基。

在另一優選例中，各R₄ 獨立地選自下組：氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；所述的烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基可任選且獨立地被一個或多個下組基團取代：C1-C6烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基、二甲基磷氧基。

在另一優選例中，所述的式Ⅰ化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、立體異構體、同位素化合物或前驅藥，其具有選自下組的一個或多個特徵： R₁ 選自下組：-OR₅ 、-OC(O)R₅ 、-N(R₅ )(R₆ )、-C(O)-N(R₅ )(R₆ )、-N(R₅ )-C(O)R₆ 、-N(R₅ )-C(O)OR₆ 、-N(R₅ )S(O)₂ R₆ ，優選地為-OR₅ ； B獨立地選自下組：氫、鹵素、C1-C6烷基或CN，優選地為CN； X₁ 、X₂ 和X₃ 各自獨立地為CH或N； R₂ 選自下組：氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基，優選地為氫、C1-C6烷基，更優選地為C1-C6烷基； R₃ 和R₃ ’各自獨立地選自下組：氫、鹵素、氰基、羥基、CHF₂ 、CF₃ 、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、C1-C6雜烷基，優選地為氫或C1-C6烷基；或者R₃ 和R₃ ’與其連接的C原子一起形成C3-C8環烷基、3-8元雜環基、羰基： A獨立選自下組：C6-C10芳基或5-10元雜芳基；各R₄ 獨立地選自下組：氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、C1-C6雜烷基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基、3-8元雜環基、-OR₅ 、-OC(O)R₅ 、-N(R₅ )(R₆ )、-C(O)-N(R₅ )(R₆ )、-N(R₅ )-C(O)R₆ 、-N(R₅ )-C(O)OR₆ 、-N(R₅ )S(O)₂ R₆ ，優選地為C3-C8環烷基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基、3-8元雜環基；其中，R₅ 和R₆ 各自獨立地為取代或未取代的選自下組基團：氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、氰基、鹵素、羥基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；如無特別說明，上述烷基、環烷基、雜烷基、芳基、雜芳基、雜環基可任選且獨立地被一個或多個下組基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C1-C6雜烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基、二甲基磷氧基。

在另一優選例中，所述的式I化合物具有如下式(II)所示的結構：

(II) 其中，X選自下組：O、S、NR₈ ； m為0、1、2或3； R₇ 和R₈ 各自為取代或未取代的選自下組的基團：H、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元單雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基、C5-C12稠合雙環、5-12元稠合雜雙環、C5-C12元螺雙環或5-12元螺雜雙環；其中，所述取代是指被獨立選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、氰基、鹵素、羥基、C3-C8環烷基、3-8元單雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基、C5-C12稠合雙環、5-12元稠合雜雙環、C5-C12元螺雙環或5-12元螺雜雙環； B、R₂ 、R₃ 、A、R₄ 、n的定義如上所述。

在另一優選例中，X為O。

在另一優選例中，R₇ 為C1-C6烷基，所述烷基可任選地被獨立選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、氰基、鹵素、羥基。

在另一優選例中，所述的式I化合物具有如下式(III)所示的結構：

(III) 其中，B、R₂ 、R₃ 、R₄ 、R₇ 、m、n的定義如上所述。

在另一優選例中，所述的式I化合物具有如下式(IV)所示的結構：

(IV) 其中，R₁ 選自下組：-OR₅ 、-N(R₅ )(R₆ )、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C14芳基、5-14元雜芳基； R₂ 選自下組：氫、C1-C6烷基； R₃ 選自下組：氫、鹵素、氰基、羥基、CHF₂ 、CF₃ 、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基； R₄ 獨立地選自下組：C3-C8環烷基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基、3-8元雜環基、-OR₅ 、-OC(O)R₅ 、-N(R₅ )(R₆ )、-C(O)-N(R₅ )(R₆ )、-N(R₅ )-C(O)R₆ 、-N(R₅ )-C(O)OR₆ 、-N(R₅ )S(O)₂ R₆ ；其中，R₅ 和R₆ 各自獨立地為取代或未取代的選自下組的基團：氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；其中，所述取代是指被獨立選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、氰基、鹵素、羥基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；且所述的烷基、環烷基、芳基、雜芳基、雜環基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C1-C6雜烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基、二甲基磷氧基。

在另一優選例中，所述的化合物的前驅藥或其藥學上可接受的鹽具有式(V)所示的結構：

(V) 其中，R₈ 選自下組：

、

、

、

、

、

； R₉ 和R₁₀ 各自獨立地選自：取代或未取代C1-C6烷基、羥基、OM；M為Na或K； R₁₁ 和R₁₂ 各自獨立地選自：取代或未取代C1-C6烷基、取代或未取代C6-C10芳基、取代或未取代5-10元雜芳基； R₁₃ 和R₁₄ 各自獨立地選自：取代或未取代C1-C6烷基、取代或未取代C6-C10芳基、取代或未取代5-10元雜芳基； p為1、2、3；其中，所述取代是指被獨立選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C1-C6雜烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基； R₁ 、R₂ 、R₃ 和R₄ 的定義如上所述。

在另一優選例中，R₄ 為取代或未取代的5-6元雜芳基，優選地R₄ 為取代或未取代的下組基團：吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、噻二唑基、異噻唑基、呋喃基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、三氮嗪基、三氮唑基及四氮唑基；所述取代是指被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素（優選地為F）、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基、二甲基磷氧基。

在另一優選例中，R₂ 和R₃ 各自獨立地選自下組：氫、C1-C6烷基。

在另一優選例中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、R₁ 、R₂ 、R₃ 、R₃ ’、R₄ 、n、p、A、X、R₇ 、R₈ 和B為實施例中各具體化合物相對應的具體基團。

在另一優選例中，所述的式Ⅰ化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、立體異構體、同位素化合物或前驅藥，所述化合物選自下組：

。

本發明第二方面，提供一種藥物組合物，其包含第一方面所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、同位素化合物或前驅藥；和藥用載體或稀釋劑。

在另一優選例中，所述藥物組合物還包括第二癌症治療劑。

在另一優選例中，所述的第二癌症治療劑包括放射劑、細胞毒試劑、激酶抑制劑、免疫標靶抑制劑和血管生成抑制劑。

在另一優選例中，所述第二癌症治療劑是選自下組的一種或多種：PD-1抑制劑(如納武單抗、派姆單抗、JS-001、SHR-120、BGB-A317、IBI-308、GLS-010、GB-226、STW204、HX008、HLX10、BAT1306、AK105、LZM 009或上述藥物的生物類似藥等)、PD-L1抑制劑(如德瓦魯單抗、阿特珠單抗、CS1001、KN035、HLX20、SHR-1316、BGB-A333、JS003、CS1003、KL-A167、F 520、GR1405、MSB2311或上述藥物的生物類似藥等)、CD20抗體(如利妥昔單抗、奧濱尤妥珠單抗、奧法木單抗、托西莫單抗、替伊莫單抗等)、CD47抗體(如Hu5F9-G4、CC-90002、TTI-621、TTI-622、OSE-172、SRF-231、ALX-148、NI-1701、SHR-1603、IBI188、IMM01)、ALK抑制劑(如色瑞替尼、艾樂替尼、布加替尼、蘿拉替尼、奧卡替尼)、PI3K抑制劑(如艾代拉裡斯、Dactolisib、Taselisib、Buparlisib等)、BTK抑制劑(如依魯替尼、Tirabrutinib、Acalabrutinib等)、EGFR抑制劑(如阿法替尼、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、達克替尼、埃克替尼、卡奈替尼等)、VEGFR抑制劑(如索拉非尼、帕唑帕尼、瑞伐替尼、卡博替尼、舒尼替尼、多納非尼等)、HDAC抑制劑(如Givinostat、Droxinostat、恩替諾特、達西司特、泰克地那林等)、CDK抑制劑(如帕博西尼、瑞博西尼、Abemaciclib、Lerociclib等)、MEK抑制劑(如司美替尼(AZD6244)、曲美替尼(GSK1120212)、PD0325901、U0126、AS-703026、PD184352(CI-1040)等)、Akt抑制劑(如MK-2206、Ipatasertib、Capivasertib、Afuresertib、Uprosertib等)、mTOR抑制劑(如Vistusertib等)、SHP2抑制劑(如RMC-4630、JAB-3068、TNO155等)、IGF-1R抑制劑(如Ceritinib、奧卡替尼、linsitinib、BMS-754807、GSK1838705A等)或其組合。

本發明第三方面，提供一種如第一方面所述的化合物或如第二方面所述的藥物組合物在製備用於抑制細胞或受試者中的RET激酶活性的藥物中的用途。

在另一優選例中，所述藥物用於治療與RET相關疾病的下述失調：RET基因、RET激酶、或其中任何一者的表現或活性或位準失調。其中，RET基因的表現或活性或位準失調由RET基因突變（如點突變和基因融合）導致的。

在另一優選例中，RET相關疾病是指與RET基因、RET激酶(也稱為RET激酶蛋白質)或其中任一者(例如一個或多個)的表現或活性或位準的失調(例如本文所述的RET基因、RET激酶、RET激酶結構域或其任何一個的表現或活性或位準的任何類型的失調)相關或具有該失調的疾病或病症。

在另一優選例中，所述疾病選自下組：腸易激症候群、眼疾疾病、風濕性關節炎、肺纖維化、肝纖維化、腫瘤，所述腫瘤包括：膀胱癌、卵巢癌、腺癌、胃癌、胰腺癌、前列腺癌、結腸癌、肺癌、骨癌、腦癌、神經細胞瘤、直腸癌、家族性腺瘤性息肉性癌、遺傳性非息肉性結直腸癌、食道癌、唇癌、喉癌、下咽癌、舌癌、唾液腺癌、甲狀腺髓質癌、乳頭狀甲狀腺癌、腎實質癌、卵巢癌、子宮頸癌、子宮體癌、子宮內膜癌、絨毛膜癌、胰腺癌、睾丸癌、泌尿癌、黑素瘤、急性淋巴性白血病、慢性淋巴性白血病、急性骨髓性白血病、慢性顆粒球性白血病、肝細胞癌、膽囊癌、支氣管癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、多發性骨髓瘤。

在另一優選例中，RET基因、RET激酶、或其中任何一者的表現或活性或位準失調為所述RET基因中的一個或多個點突變，所述RET基因中的一個或多個點突變引起在一個或多個包括但不限於以下氨基酸位置具有一個或多個氨基酸取代的RET蛋白質的轉譯：378、385、618、620、630、631、633、804、810、883、918。

在另一優選例中，RET基因的表現或活性或位準失調為RET基因融合體，所述RET基因融合體包括但不限於以下：KIF5B-RET、CDC6-RET、NCOA4-RET、CLIP1-RET、ERC1-RET、RUFY3-RET、TFG-RET、PRKAR1A-RET、KTN1-RET。

在另一優選例中，RET相關疾病包括但不限於腫瘤和腸易激症候群。

在另一優選例中，RET相關腫瘤包括但不限於：肺癌、乳頭狀甲狀腺癌、髓質甲狀腺癌、分化的甲狀腺癌、復發性甲狀腺癌、難治性分化甲狀腺癌、2A或2B型多發性內分泌瘤(分別為MEN2A或MEN2B)、嗜鉻細胞瘤、副甲狀腺增生、乳腺癌、結腸直腸癌、乳頭狀腎細胞癌、胃腸道粘膜的神經節瘤病以及子宮頸癌。

在另一優選例中，所述肺癌為RET融合體肺癌或所述癌症為髓質甲狀腺癌。

本發明第四方面，提供一種治療RET相關疾病的方法，所述方法包括給予被鑒定或診斷為具有RET相關疾病的受試者治療有效量的第一方面所述的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物，或第二方面所述的藥物組合物。

本發明第五方面，本發明提供一種用於抑制細胞或受試者中的RET激酶活性的方法，所述方法包括使所述細胞接觸或向所述受試者施用第一方面所述的化合物或第二方面所述的藥物組合物的步驟。

在另一優選例中，所述細胞為哺乳動物細胞。

在另一優選例中，所述受試者為哺乳動物，優選為人。

應理解，在本發明範圍內中，本發明的上述各技術特徵和在下文(如實施例)中具體描述的各技術特徵之間都可以互相組合，從而構成新的或優選的技術方案。限於篇幅，在此不再一一累述。

本發明人經過廣泛而深入的研究，意外地發現了一類具有較好的RET激酶抑制活性，同時對VEGFR2激酶具有較好的選擇性的化合物。此外，所述化合物對RET激酶敏感的細胞均具有優異的抑制活性，並且具有更好藥效學/藥代動力學性能。在此基礎上，完成了本發明。

在本發明中，除非特別指出，所用術語具有本領域技術人員公知的一般含義。

當通過從左向右書寫的常規化學式描述取代基時，該取代基也同樣包括從右向左書寫結構式時所得到的在化學上等同的取代基。舉例而言，-CH₂ O-等同於-OCH₂ -。

術語“烷基”本身或作為另一取代基的一部分，是指具有指定的碳原子數的直鏈或支鏈烴基(即，C1-C6是指包含1、2、3、4、5或6個碳原子)。烷基的實例包括但不限於甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第三丁基、異丁基、第二丁基、正戊基、正己基及其類似烷基。本申請中，烷基還意在包含取代烷基，即烷基中的一個或多個位置被取代，尤其是1-4個取代基，可在任何位置上取代。

術語“烷氧基”是指通過醚氧連接的直鏈或支鏈或環狀烷基，其游離價鍵來自該醚氧。烷氧基優選C1-C6烷氧基，更優選地為C1-C3烷氧基。代表性的例子包括(但並不限於)：甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基和丁氧基等。優選為C1-C3烷氧基。

術語“雜烷基”是指烷基中的碳原子被1、2、3個選自N、O、S、Si或P的雜原子取代的基團，且其中，氮和硫原子任選地被氧化，本發明中“C1-C6雜烷基”是指包含1-6（即1、2、3、4、5或6）個碳原子，和1、2、3個選自N、O、S或P的雜原子的基團，代表性的例子包括(但並不限於)：CH₃ OCH₂ -、CH₃ SCH₂ -、CH₃ CH₂ OCH₂ -等。

術語“環烷基”是指包括飽和單環（如，C3-C8）、雙環（如，C5-C12稠合雙環、C5-C12元螺雙環）或多環的環狀烷基。C3-C8指包括3、4、5、6、7、或8個碳原子的環狀烷基。本發明的代表性的環烷基包括但不限於：環丙基、環丁基、環戊基、環己基、降莰烷基、

、

、

、

等。應理解，取代或未取代的環烷基，例如支化環烷基（如1-甲基環丙基和2-甲基環丙基），均包括在“環烷基”的定義中。

術語“雜環”、“雜環基”或“雜環基團”通常指穩定的單環（如3-8元，即3元、4元、5元、6元、7元或8元）或二環（如5-12元，即5元、6元、7元、8元、9元、10元、11元或12元）或元多環（如7-14元，即7元、8元、9元、10元、11元、12元、13元或14）雜環，包括稠環、螺環和/或橋環結構，其為飽和的、部分不飽和的，且其含有碳原子和1個、2個、3個或4個獨立地選自N、O和S的雜原子。該術語還包括雜環與芳環（如苯環）稠合所形成的多環基團。“雜環”可以是取代的或者未取代的。作為環原子的氮和硫雜原子可任選地被氧化。氮原子為取代的或未取代的(即N或NR，其中R為H或如果被定義，則為另一取代基)。雜環可在得到穩定結構的任何雜原子或碳原子處連接至其側基。如果所得化合物是穩定的，則本文所述的雜環基可在碳或氮原子上被取代。雜環中的氮可任選地被季銨化。優選地，當雜環中S和O原子的總數超過1時，則這些雜原子彼此不相鄰。優選地，雜環中S和O原子的總數不大於1。雜環基團可以連接到環或環系分子的任何雜原子或碳原子的殘基上。雜環的實施例包括但不限於典型的單環雜環基包括但不限於氮雜環丁烷基、吡咯烷基、氧雜環丁烷基、吡唑啉基、咪唑啉基、咪唑烷基、噁唑烷基、異噁唑烷基、噻唑烷基、異噻唑烷基、四氫呋喃基、哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、六氫吖庚因基、4-哌啶酮基、四氫吡喃基、嗎啡啉基、硫代嗎啡啉基、硫代嗎啡啉伸碸基、硫代嗎啡啉碸基、1,3-二噁烷基和四氫-1,1-二氧噻吩等。多環雜環基包括螺環（例如5-12元，優選地7-9元）、稠環（例如5-12元，優選地8-10元）和橋環的雜環基；螺環和稠環的實例包括但不限於

、

、

、

、

、

、

、

、

、

、

等，其中涉及到的螺環、稠環和橋環的雜環基任選與其他基團通過單鍵相連接，或者通過環上的任意兩個或兩個以上的原子與其他環烷基、雜環基、芳基和雜芳基進一步倂環連接。

一類優選的雜環基是指具有指定的環頂點(或成員)數且具有一至五個選自N、O、S或P的雜原子分別取代環骨架中碳原子，且其中，氮和硫原子任選地被氧化，且氮原子任選被季銨化的環烷基環。環雜烷基通常為3-12元環，本發明中優選地為3-8元環，例如3-8元單環、雙環（5-12元稠合雜雙環、5-12元螺雜雙環）或多環系統（8-16元三環）。環雜烷基例子包括但並不限於：吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、丁內醯胺基、戊內醯胺基、咪唑烷酮基、乙內醯脲基、二氧雜環戊烷基、鄰苯二甲醯伸胺基、哌啶基、1,4-二氧六環基、嗎啉基、硫代嗎啉基、硫代嗎啉-S-氧化物、硫代嗎啉-S,S-氧化物、哌嗪基、哌喃基、吡啶酮基、3-吡咯啉基、噻喃基、吡喃酮基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、奎寧環、

、

等及其類似物。

術語“烯基”表示含一個或多個雙鍵且通常長度為2至20個碳原子(或C2-C8)的直鏈或支鏈的烴基。例如，本發明中，“C2-C6烯基”含有2、3、4、5或6個碳原子。烯基包括但不限於例如乙烯基、丙烯基、丁烯基、1-甲基-2-丁烯-1-基等。本發明中，烯基包括取代的烯基。

術語“炔基”表示含一個或多個三鍵且通常長度為2至20個碳原子(或C2-C8)的直鏈或支鏈的烴基。本發明中，“C2-6炔基”是指具有2、3、4、5或6個碳原子的直鏈或支鏈的炔基，包括但不限於乙炔基、丙炔基或類似基團。本發明中，炔基還包括取代炔基，取代基可以為鹵代、羥基、氰基、硝基等。

術語“芳基”，單獨或作為較大部分諸如“芳烷基”、“芳烷氧基”或“芳基氧基烷基”的部分，是指具有總計5至15個環成員的單環、二環或三環的環系統(優選6-10元芳環)，其中所述系統中的至少一個環為芳族的且其中所述系統中的每個環含有3至7個環成員。“芳基”可以是取代的或者未取代的。在本發明的某些實施方案中，“芳基”是指芳族環系統，其包括但不限於苯基、聯苯基、茚滿基、1-萘基、2-萘基和四氫萘基。所述芳基可以稠合於雜芳基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為芳基環。稠合的芳基可在環烷基環或芳族環的合適位置上連接至另一基團。從環系統中畫出的連接線表明鍵可連接至任意合適的環原子。芳基可以是任選取代的或未取代的。

術語“雜芳基”指包含1-4個雜原子、5-14個環原子的雜芳族體系，其中，雜原子選自氧、氮和硫。雜芳基優選5至10元環，更優選為5元或6元，例如吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、噻二唑基、異噻唑基、呋喃基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、三氮嗪基、三氮唑基及四氮唑基等。“雜芳基”可以是取代的或者未取代的，當被取代時，取代基優選為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷基、氘代烷基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、烯基、炔基、烷硫基、烷基氨基、鹵素、氨基、硝基、羥基、巰基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷硫基、氧代基、羧基和羧酸酯基。

在本發明中，“胺基”是指具有-N(R)(R')結構，R和R'可以獨立的代表氫、烷基或取代的烷基（如C1-C6烷基）、環烷基或取代的環烷基、芳基或取代的芳基、雜環或取代的雜環，如上文所定義。R和R'在二烷基胺片段中可以相同或不同。優選地，胺基為氨基（NH₂ ）。

在本發明中，“酯基”是指具有-C(O)-O-R或R-C(O)-O-結構，其中，R獨立地代表氫、烷基、環烷基、芳基、雜芳基、雜環基，如上文所定義。

在本發明中，術語“醯胺基”是指帶有結構-CONRR'的基團，其中，R和R'可以獨立的代表氫、烷基或取代的烷基、環烷基或取代的環烷基、芳基或取代的芳基、雜環或取代的雜環，如上文所定義。R和R'在二烷基胺片段中可以相同或不同。

在本發明中，術語“磺醯胺基”是指帶有結構-SO₂ NRR'的基團，其中R和R'可以獨立的代表氫、烷基或取代的烷基、環烷基或取代的環烷基、芳基或取代的芳基、雜環或取代的雜環，如上文所定義。R和R'在二烷基胺片段中可以相同或不同。

在本發明中，上述的烷基、烷氧基、環烷基、雜烷基、芳基、雜芳基、環雜烷基、烯基、炔烴、雜環、雜環基等中各基團可以是取代的或未取代的。

除非另外說明，假定任何不滿價態的雜原子有足夠的氫原子補充其價態。

當取代基為非末端取代基時，其為相應基團的伸基，例如烷基對應於伸烷基、環烷基對應伸環烷基、雜環基對伸雜環基、烷氧基對應伸烷氧基等。

在本發明中，術語“取代”指特定的基團上的一個或多個氫原子被特定的取代基所取代。特定的取代基為在前文中相應描述的取代基，或各實施例中所出現的取代基。除非特別說明，某個取代的基團可以在該基團的任何可取代的位點上具有一個選自特定組的取代基，所述的取代基在各個位置上可以是相同或不同的，即各個取代之間是相互獨立地。本領域技術人員應理解，本發明所預期的取代基的組合是那些穩定的或化學上可實現的組合。典型的取代包括但不限於一個或多個以下基團：如氫、氘、鹵素(例如，單鹵素取代基或多鹵素取代基，後者如三氟甲基或包含Cl₃ 的烷基)、氰基、硝基、氧代(如=O)、三氟甲基、三氟甲氧基、環烷基、烯基、炔基、雜環、芳環、OR_a 、SR_a 、S(=O)R_e 、S(=O)₂ R_e 、P(=O)₂ R_e 、S(=O)₂ OR_e ，P(=O)₂ OR_e 、NR_b R_c 、NR_b S(=O)₂ R_e 、NR_b P(=O)₂ R_e 、S(=O)₂ NR_b R_c 、P(=O)₂ NR_b R_c 、C(=O)OR_d 、C(=O)R_a 、C(=O)NR_b R_c 、OC(=O)R_a 、OC(=O)NR_b R_c 、NR_b C(=O)OR_e 、NR_d C(=O)NR_b R_c 、NR_d S(=O)₂ NR_b R_c 、NR_d P(=O)₂ NR_b R_c 、NR_b C(=O)R_a 、或NR_b P(=O)₂ R_e ，其中，R_a 可以獨立表示氫、氘、烷基、環烷基、烯基、炔基、雜環或芳環，R_b 、R_c 和R_d 可以獨立表示氫、氘、烷基、環烷基、雜環或芳環，或者R_b 和R_c 與N原子一起可以形成雜環；R_e 可以獨立表示氫、烷基、環烷基、烯基、炔基、雜環或芳環。上述典型的取代基，如烷基、環烷基、烯基、環烯基、炔基、雜環或芳環可以任選取代。所述取代基例如(但並不限於)：鹵素、羥基、氰基、羧基(-COOH)、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C8環烷基、3-12元雜環基、芳基、雜芳基、C1-C8醛基、C2-C10醯基、C2-C10酯基、胺基、C1-C6烷氧基、C1-C10磺醯基、及C1-C6脲基等。

術語“鹵代”或“鹵素”包括氟、氯、溴和碘。

術語“氰基”指-CN。

術語“羥基”指-OH。

術語“二甲基磷氧基”指

。

在本發明中，術語“多個”獨立指2、3、4、5個。

在本發明中，術語“RET基因、RET激酶或其中任何一個的表現或活性或位準的失調”是指基因突變或者由基因突變導致的，包括點突變和基因融合。例如，RET基因、RET蛋白質或其中任何一個的表現或活性或位準的失調可以是編碼RET蛋白質的RET基因中的突變，該RET蛋白質具有組成性活性或相比於由不包括突變的RET基因編碼的蛋白質具有增加的活性。例如，RET基因、RET蛋白質或其中任何一個的表現或活性或位準的失調可以是基因或染色體易位的結果，該基因或染色體易位引起含有包括功能性激酶結構域的RET的第一部分與伴護蛋白(即，非RET的)的第二部分的融合蛋白質的表現。

活性成分

如本文所用，術語“本發明的化合物”或“本發明的活性成分”可互換使用，指式I化合物、或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、同位素化合物(如氘代化合物)或前驅藥（包括但不限於酯、醯胺、磷酸酯、磷酸酯鈉鹽、氨基酸酯等）。該術語還包括外消旋體、光學異構體。

所述的式(I)化合物具有如下結構：

式中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、R₁ 、R₂ 、R₃ 、R₃ ’、R₄ 、n、A和B的定義如上所述。

優選地，式I化合物具有式(II)所示的結構：

(II) 式中，R₂ 、R₃ 、R₄ 、R₇ 、m、n、A、B和X的定義如上所述，

優選地，式I化合物具有式(III)所示的結構

優選地，所述的式I化合物具有如下式(IV)所示的結構：

(IV) 其中，R₁ 選自下組：-OR₅ 、-N(R₅ )(R₆ )、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C14芳基、5-14元雜芳基； R₂ 選自下組：氫、C1-C6烷基； R₃ 選自下組：氫、鹵素、氰基、羥基、CHF₂ 、CF₃ 、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基； R₄ 獨立地選自下組：C3-C8環烷基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基、3-8元雜環基、-OR₅ 、-OC(O)R₅ 、-N(R₅ )(R₆ )、-C(O)-N(R₅ )(R₆ )、-N(R₅ )-C(O)R₆ 、-N(R₅ )-C(O)OR₆ 、-N(R₅ )S(O)₂ R₆ ；其中，R₅ 和R₆ 各自獨立地為取代或未取代的選自下組的基團：氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、氰基、鹵素、羥基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；且所述的烷基、環烷基、芳基、雜芳基、雜環基是未取代或被一個或多個下組基團取代的：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C1-C6雜烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基、二甲基磷氧基。

優選地，上述式I-IV所述的化合物的前驅藥或其藥學上可接受的鹽具有式(V)所示的結構：

(V) 其中，R₈ 選自下組：

、

； R₉ 和R₁₀ 各自獨立地選自：取代或未取代C1-C6烷基、羥基、OM；M為Na或K； R₁₁ 和R₁₂ 各自獨立地選自：取代或未取代C1-C6烷基、取代或未取代C6-C10芳基、取代或未取代5-10元雜芳基； R₁₃ 和R₁₄ 各自獨立地選自：取代或未取代C1-C6烷基、取代或未取代C6-C10芳基、取代或未取代5-10元雜芳基； p為1、2、3；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C1-C6雜烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基； R₁ 、R₂ 、R₃ 和R₄ 的定義如上所述。

優選地，上述式I-VI中，R₄ 為取代或未取代的5-6元雜芳基，優選地R₄ 為取代或未取代的下組基團：吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、噻二唑基、異噻唑基、呋喃基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、三氮嗪基、三氮唑基及四氮唑基；所述取代是指被一個或多個下組基團取代：C1-C6烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素（優選地為F）、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基、二甲基磷氧基；R₂ 和R₃ 各自獨立地選自下組：氫、C1-C6烷基。

本發明中的化合物可能形成的鹽也是屬於本發明的範圍。除非另有說明，本發明中的化合物被理解為包括其鹽類。在此使用的術語“鹽”，指用無機或有機酸和鹼形成酸式或鹼式的鹽。此外，當本發明中的化合物含一個鹼性片段時，它包括但不限於吡啶或咪唑，含一個酸性片段時，包括但不限於羧酸，可能形成的兩性離子(“內鹽”)包含在術語“鹽”的範圍內。藥學上可接受的(即無毒，生理可接受的)鹽是首選，雖然其他鹽類也有用，例如可以用在製備過程中的分離或純化步驟。本發明的化合物可能形成鹽，例如，化合物I與一定量如等當量的酸或鹼反應，在介質中鹽析出來，或在水溶液中冷凍乾燥得來。

本發明中的化合物含有的鹼性片段，包括但不限於胺或吡啶或咪唑環，可能會和有機或無機酸形成鹽。可以成鹽的典型的酸包括醋酸鹽(如用醋酸或三鹵代醋酸，如三氟乙酸)、己二酸鹽、藻朊酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦鹽、樟腦磺酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二甘醇酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、延胡索酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、羥基乙磺酸鹽(如，2-羥基乙磺酸鹽)、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、萘磺酸鹽(如，2-萘磺酸鹽)、煙酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、苯丙酸鹽(如3-苯丙酸鹽)、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽，水楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽(如與硫酸形成的)、磺酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽如對甲苯磺酸鹽、十二烷酸鹽等等。

本發明的某些化合物可能含有的酸性片段，包括但不限於羧酸，可能會和各種有機或無機鹼形成鹽。典型的鹼形成的鹽包括銨鹽、鹼金屬鹽如鈉、鋰、鉀鹽，鹼土金屬鹽如鈣、鎂鹽和有機鹼形成的鹽(如有機胺)，如苄星、二環已基胺、海巴胺(與N,N-二(去氫樅基)乙二胺形成的鹽)、N-甲基-D-葡糖胺、N-甲基-D-葡糖醯胺、第三丁基胺，以及和氨基酸如精氨酸、賴氨酸等等形成的鹽。鹼性含氮基團可以與鹵化物季銨鹽，如小分子烷基鹵化物(如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物及碘化物)，二烷基硫酸鹽(如，硫酸二甲酯、硫酸二乙酯，硫酸二丁酯和硫酸二戊酯)，長鏈鹵化物(如癸基、十二烷基、十四烷基和十四烷基的氯化物、溴化物及碘化物)，芳烷基鹵化物(如苄基和苯基溴化物)等等。

本發明中化合物的前驅藥及溶劑合物也在涵蓋的範圍之內。此處術語“前驅藥”是指一種化合物，在治療相關疾病時，經過代謝或化學過程的化學轉化而產生本發明中的化合物、鹽、或溶劑合物。本發明的化合物包括溶劑合物，如水合物。

本發明中的化合物、鹽或溶劑合物，可能存在的互變異構形式(例如醯胺和伸胺醚)。所有這些互變異構體都是本發明的一部分。

所有化合物的立體異構體(例如，那些由於對各種取代可能存在的不對稱碳原子)，包括其對掌形式和非對掌形式，都屬於本發明的設想範圍。本發明中的化合物獨立的立體異構體可能不與其他異構體同時存在(例如，作為一個純的或者實質上是純的光學異構體具有特殊的活性)，或者也可能是混合物，如消旋體，或與所有其他立體異構體或其中的一部分形成的混合物。本發明的手性中心有S或R兩種構型，由理論與應用化學國際聯合會(IUPAC)1974年建議定義。外消旋形式可通過物理方法解決，例如分步結晶，或通過衍生為非對掌異構體分離結晶，或通過手性柱色譜法分離。單個的光學異構體可通過合適的方法由外消旋體得到，包括但不限於傳統的方法，例如與光學活性酸成鹽後再結晶。

本發明中的化合物，依次通過製備、分離純化獲得的該化合物其重量含量等於或大於90%，例如，等於或大於95%，等於或大於99%(“非常純”的化合物)，在正文描述列出。此處這種“非常純”本發明的化合物也作為本發明的一部分。

本發明的化合物所有的構型異構體都在涵蓋的範圍之內，無論是混合物、純的或非常純的形式。在本發明化合物的定義包含順式(Z)和返式(E)兩種烯烴異構體，以及碳環和雜環的順式和反式異構體。

在整個說明書中，基團和取代基可以被選擇以提供穩定的片段和化合物。

特定官能團和化學術語定義都詳細介紹如下。對本發明來說，化學元素與Periodic Table of the Elements, CAS version,Handbook of Chemistry and Physics , 75^th Ed.中定義的一致。特定官能團的定義也在其中描述。此外，有機化學的基本原則以及特定官能團和反應性在“Organic Chemistry”，Thomas Sorrell，University Science Books，Sausalito: 1999，也有說明，其全部內容納入參考文獻之列。

本發明的某些化合物可能存在於特定的幾何或立體異構體形式。本發明涵蓋所有的化合物，包括其順式和反式異構體、R和S對掌異構體、非對掌異構體、(D)型異構體、(L)型異構體、外消旋混合物和其它混合物。另外不對稱碳原子可表示取代基，如烷基。所有異構體以及它們的混合物，都包涵在本發明中。

按照本發明，同分異構體的混合物含有異構體的比率可以是多樣的。例如，在只有兩個異構體的混合物可以有以下組合：50:50，60:40，70:30，80:20，90:10，95:5，96:4，97:3，98:2，99:1，或100:0，異構體的所有比率都在本發明範圍之內。本專業內一般技術人員容易理解的類似的比率，及為更複雜的異構體的混合物的比率也在本發明範圍之內。

本發明還包括同位素標記的化合物，等同於原始化合物在此公開。不過實際上對一個或更多的原子被與其原子量或質量序數不同的原子取代通常會出現。可以列為本發明的化合物同位素的例子包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟和氯同位素，分別如² H、³ H、¹³ C、¹¹ C、¹⁴ C、¹⁵ N、¹⁸ O、¹⁷ O、³¹ P、³² P、³⁵ S、¹⁸ F和³⁶ Cl。本發明中的化合物，或對掌異構體，非對掌異構體，異構體，或藥學上可接受的鹽或溶劑化物，其中含有上述化合物的同位素或其他同位素原子都在本發明的範圍之內。本發明中某些同位素標記化合物，例如³ H和¹⁴ C的放射性同位素也在其中，在藥物和基質的組織分佈實驗中是有用的。氚，即³ H和碳-14，即¹⁴ C，它們的製備和檢測比較容易。是同位素中的首選。此外，較重同位素取代如氘，即² H，由於其很好的代謝穩定性在某些療法中有優勢，例如在體內增加半衰期或減少用量，因此，在某些情況下可以優先考慮。同位素標記的化合物可以用一般的方法，通過用易得的同位素標記試劑替換為非同位素的試劑，用批露在示例中的方案可以製備。

如果要設計一個本發明的化合物特定的對掌的合成，它可以不對稱合成製備，或用手性輔劑衍生化，將所產生的非對掌混合物分離，再除去手性輔劑而得到純的對掌異構體。另外，如果分子中含有一個鹼性官能團，如氨基酸，或酸性官能團，如羧基，可以用合適的光學活性的酸或鹼的與之形成非對掌異構體鹽，再通過分離結晶或色譜等常規手段分離，然後就得到了純的對掌。

如本文所述，本發明中的化合物可與任何數量取代基或官能團取而擴大其包涵範圍。通常，術語“取代”不論在術語“可選”前面或後面出現，在本發明配方中包括取代基的通式，是指用指定結構取代基，代替氫自由基。當特定結構中的多個在位置被多個特定的取代基取代時，取代基每一個位置可以是相同或不同。本文中所使用的術語“取代”包括所有允許有機化合物取代。從廣義上講，允許的取代基包括非環狀的、環狀的、支鏈的、非支鏈的、碳環的和雜環的，芳環的和非芳環的有機化合物。在本發明中，如雜原子氮可以有氫取代基或任何允許的上文所述的有機化合物來補充其價態。此外，本發明是無意以任何方式限制允許取代有機化合物。本發明認為取代基和可變基團的組合在以穩定化合物形式在疾病的治療上是很好的。此處術語“穩定”是指具有穩定的化合物，在足夠長的時間內檢測足以維持化合物結構的完整性，最好是在足夠長的時間內都在效，本文在此用於上述目的。

本申請所涉及的化合物及其藥學可接受的鹽的代謝產物，以及可以在體內轉變為本申請所涉及的化合物及其藥學可接受的鹽的結構的前驅藥，也包含在本申請的請求項中。

製備方法

以下方案和實例中描述了製備式I的化合物的方法。原料和中間體從商業來源購買，由已知步驟製備，或以其他方式說明。在某些情況下，可以改變執行反應方案的步驟的順序，以促進反應或避免不需要的副反應產物。

下面更具體地描述本發明式(I)結構化合物的製備方法，但這些具體方法不對本發明構成任何限制。本發明化合物還可以任選將在本說明書中描述的或本領域已知的各種合成方法組合起來而方便的制得，這樣的組合可由本發明所屬領域的技術人員容易的進行。

通常，在製備流程中，各反應通常惰性氣體保護下，適當溶劑中，在0到90℃下進行，反應時間通常為2-24小時。

方法一：

X₁ 、X₂ 、X₃ 、A、B、R₁ 、R₂ 、R₃ 、R₃ ’和R₄ 具有上面所述的定義；所述方法包括以下步驟：（i）惰性溶劑中（例如DMF），鹼性條件下（例如，Cs₂ CO₃ ），化合物1-1發生反應，得到化合物1-2；（ii）鹼性條件（例如，Na₂ CO₃ ）和催化劑（例如，鈀催化劑）存在下，化合物1-2和化合物1-3進行偶聯反應，得到化合物1-4；（iii）惰性溶劑中（例如，DMSO），高溫及鹼性條件（例如，K₂ CO₃ ）下，化合物1-4和化合物1-5反應，得到化合物1-6。

方法二：

X₁ 、X₂ 、X₃ 、A、B、R₁ 、R₂ 、R₃ 、R₃ ’和R₄ 具有上面所述的定義；所述方法包括以下步驟：（i'）惰性溶劑中（例如，DMSO），高溫及鹼性條件（例如，K₂ CO₃ ）下，化合物2-1和2-2反應得到化合物2-3；（ii'）惰性溶劑中（例如，DMF），催化劑（例如，鈀催化劑）存在下，化合物2-3與Sn₂ (Bu-n)₆ 反應，得到錫試劑化合物2-4；（iii'）惰性溶劑中（例如，二甲苯），催化劑（例如，鈀催化劑）存在下，化合物2-4錫試劑和化合物2-5偶聯，得到化合物2-6。

方法三：

式中，X₁ 、X₂ 、X₃ 、A、B、R₁ 、R₂ 、R₃ 、R₃ ’和R₄ 具有上面所述的定義；所述方法包括以下步驟：（i）惰性溶劑中（例如，DMF），鹼性條件（例如，DIPEA）下，化合物3-1和N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺反應得到化合物3-2；（ii）在混合溶劑中（例如，二氧六環/水），催化劑（例如，鈀催化劑）存在下，化合物3-2與化合物3-3耦聯，得到化合物3-4；（iii）鹼性條件（例如，碳酸銫）和催化劑（例如，鈀催化劑）存在下，化合物3-4和化合物3-5反應得到化合物3-6。

以上各反應步驟中，反應溶劑、反應溫度、反應時間、催化劑等可以根據具體的反應物進行選擇。

藥物組合物和施用方法

本發明所述的藥物組合物用於預防和/或治療以下疾病：炎症、癌症、心血管疾病、感染、免疫性疾病、代謝性疾病。

通式(I)所述化合物可以與已知的治療或改進相似病狀的其他藥物聯用。聯合投藥時，原來藥物的投藥方式和劑量可以保持不變，而同時或隨後服用式I的化合物。當式I化合物與其它一種或幾種藥物同時服用時，可以優選使用同時含有一種或幾種已知藥物和式I化合物的藥用組合物。藥物聯用也包括在重疊的時間段服用式I化合物與其它一種或幾種已知藥物。當式I化合物與其它一種或幾種藥物進行藥物聯用時，式I化合物或已知藥物的劑量可能比它們單獨用藥的劑量低。

可以與通式(I)所述化合物進行藥物聯用的藥物或活性成分包括但不局限為：PD-1抑制劑(如納武單抗、派姆單抗、JS-001、SHR-120、BGB-A317、IBI-308、GLS-010、GB-226、STW204、HX008、HLX10、BAT1306、AK105、LZM 009或上述藥物的生物類似藥等)、PD-L1抑制劑(如德瓦魯單抗、阿特珠單抗、CS1001、KN035、HLX20、SHR-1316、BGB-A333、JS003、CS1003、KL-A167、F 520、GR1405、MSB2311或上述藥物的生物類似藥等)、CD20抗體(如利妥昔單抗、奧濱尤妥珠單抗、奧法木單抗、托西莫單抗、替伊莫單抗等)、CD47抗體(如Hu5F9-G4、CC-90002、TTI-621、TTI-622、OSE-172、SRF-231、ALX-148、NI-1701、SHR-1603、IBI188、IMM01)、ALK抑制劑(如色瑞替尼、艾樂替尼、布加替尼、蘿拉替尼、奧卡替尼)、PI3K抑制劑(如艾代拉裡斯、Dactolisib、Taselisib、Buparlisib等)、BTK抑制劑(如依魯替尼、Tirabrutinib、Acalabrutinib等)、EGFR抑制劑(如阿法替尼、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、達克替尼、埃克替尼、卡奈替尼等)、VEGFR抑制劑(如索拉非尼、帕唑帕尼、瑞伐替尼、卡博替尼、舒尼替尼、多納非尼等)、HDAC抑制劑(如Givinostat、Droxinostat、恩替諾特、達西司特、泰克地那林等)、CDK抑制劑(如帕博西尼、瑞博西尼、Abemaciclib、Lerociclib等)、MEK抑制劑(如司美替尼(AZD6244)、曲美替尼(GSK1120212)、PD0325901、U0126、AS-703026、PD184352(CI-1040)等)、Akt抑制劑(如MK-2206、Ipatasertib、 Capivasertib、Afuresertib、Uprosertib等)、mTOR抑制劑(如Vistusertib等)、SHP2抑制劑(如RMC-4630、JAB-3068、TNO155等)、IGF-1R抑制劑(如Ceritinib、奧卡替尼、linsitinib、BMS-754807、GSK1838705A等)或其組合。

本發明藥物組合物的劑型包括(但並不限於)：注射劑、片劑、膠囊劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、外用擦劑、控釋型或緩釋型或奈米製劑。

本發明的藥物組合物包含安全有效量範圍內的本發明化合物或其藥理上可接受的鹽及藥理上可以接受的賦形劑或載體。其中“安全有效量”指的是：化合物的量足以明顯改善病情，而不至於產生嚴重的副作用。通常，藥物組合物含有1-2000mg本發明化合物/劑，更佳地，含有10-1000mg本發明化合物/劑。較佳地，所述的“一劑”為一個膠囊或藥片。

“藥學上可以接受的載體”指的是：一種或多種相容性固體或液體填料或凝膠物質，它們適合於人使用，而且必須有足夠的純度和足夠低的毒性。“相容性”在此指的是組合物中各組份能和本發明的化合物以及它們之間相互摻和，而不明顯降低化合物的藥效。藥學上可以接受的載體部分例子有纖維素及其衍生物(如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素鈉、纖維素乙酸酯等)、明膠、滑石、固體潤滑劑(如硬脂酸、硬脂酸鎂)、硫酸鈣、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄欖油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化劑(如吐溫®)、潤濕劑(如十二烷基硫酸鈉)、著色劑、調味劑、穩定劑、抗氧化劑、防腐劑、無熱原水等。

本發明化合物或藥物組合物的施用方式沒有特別限制，代表性的施用方式包括(但並不限於)：口服、瘤內、直腸、腸胃外(靜脈內、肌肉內或皮下)、和局部投藥。

用於口服投藥的固體劑型包括膠囊劑、片劑、丸劑、散劑和顆粒劑。在這些固體劑型中，活性化合物與至少一種常規惰性賦形劑(或載體)混合，如檸檬酸鈉或磷酸二鈣，或與下述成分混合：(a) 填料或增容劑，例如，澱粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和矽酸；(b) 粘合劑，例如，羥甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯膠；(c) 保濕劑，例如，甘油；(d) 崩解劑，例如，瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯澱粉或木薯澱粉、藻酸、某些複合矽酸鹽、和碳酸鈉；(e) 延緩溶解劑，例如石蠟；(f) 吸收加速劑，例如，季胺化合物；(g) 潤濕劑，例如鯨蠟醇和單硬脂酸甘油酯；(h) 吸附劑，例如，高嶺土；和(i) 潤滑劑，例如，滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、十二烷基硫酸鈉，或其混合物。膠囊劑、片劑和丸劑中，劑型也可包含緩衝劑。

固體劑型如片劑、糖丸、膠囊劑、丸劑和顆粒劑可採用包衣和殼材製備，如腸衣和其它本領域公知的材料。它們可包含不透明劑，並且，這種組合物中活性化合物或化合物的釋放可以延遲的方式在消化道內的某一部分中釋放。可採用的包埋組分的實例是聚合物質和蠟類物質。必要時，活性化合物也可與上述賦形劑中的一種或多種形成微膠囊形式。

用於口服投藥的液體劑型包括藥學上可接受的乳液、溶液、懸浮液、糖漿或酊劑。除了活性化合物外，液體劑型可包含本領域中常規採用的惰性稀釋劑，如水或其它溶劑，增溶劑和乳化劑，例知，乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲醯胺以及油，特別是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油或這些物質的混合物等。

除了這些惰性稀釋劑外，組合物也可包含助劑，如潤濕劑、乳化劑和懸浮劑、甜味劑、矯味劑和香料。

除了活性化合物外，懸浮液可包含懸浮劑，例如，乙氧基化異十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脫水山梨醇酯、微晶纖維素、甲醇鋁和瓊脂或這些物質的混合物等。

用於腸胃外注射的組合物可包含生理上可接受的無菌含水或無水溶液、分散液、懸浮液或乳液和用於重新溶解成無菌的可注射溶液或分散液的無菌粉末。適宜的含水和非水載體、稀釋劑、溶劑或賦形劑包括水、乙醇、多元醇及其適宜的混合物。

用於局部投藥的本發明化合物的劑型包括軟膏劑、散劑、貼劑、噴射劑和吸入劑。活性成分在無菌條件下與生理上可接受的載體及任何防腐劑、緩衝劑，或必要時可能需要的推進劑一起混合。

本發明治療方法可以單獨施用，或者與其它治療手段或者治療藥物聯用。

使用藥物組合物時，是將安全有效量的本發明化合物適用於需要治療的哺乳動物(如人)，其中施用時劑量為藥學上認為的有效投藥劑量，對於60kg體重的人而言，日投藥劑量通常為1～2000mg，優選50～1000mg。當然，具體劑量還應考慮投藥途徑、病人健康狀況等因素，這些都是熟練醫師技能範圍之內的。

本發明還提供了一種藥物組合物的製備方法，包括步驟：將藥學上可接受的載體與本發明所述通式(I)化合物或其晶型、藥學上可接受的鹽、水合物或溶劑合物進行混合，從而形成藥物組合物。

本發明還提供了一種治療方法，它包括步驟：給需要治療的物件施用本發明中所述通式(I)化合物，或其晶型、藥學上可接受的鹽、水合物或溶劑合物，或施用本發明所述的藥物組合物，用於選擇性地抑制RET。

本發明具有以下主要優點：(1)本發明化合物對RET激酶具有優良的抑制能力，以及對RET激酶具有優良選擇性，對VEGFR2等其他激酶的抑制活性低；(2)本發明化合物具有較低的毒副作用。(3)本發明化合物具有較好的藥效學、藥代動力學性能。

實施例

通用方法

下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用於說明本發明而不用於限制本發明的範圍。下列實施例中未註明具體條件的實驗方法，通常按照常規條件如Sambrook等人，分子選殖：實驗室手冊(New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press，1989)中所述的條件，或按照製造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則百分比和份數按重量計算。

除非另行定義，文中所使用的所有專業與科學用語與本領域熟練人員所熟悉的意義相同。此外，任何與所記載內容相似或均等的方法及材料皆可應用于本發明方法中。文中所述的較佳實施方法與材料僅作示範之用。

本發明的化合物結構是通過核磁共振(NMR)和液相層析聯用質譜(LC-MS)來確定的。

NMR是使用Bruker AVANCE-400和Bruker AVANCE-500核磁儀檢測的，測定溶劑包含氘代二甲亞碸(DMSO-d₆ )、氘代丙酮(CD₃ COCD₃ )、氘代氯仿(CDCl₃ )及氘代甲醇(CD₃ OD)等，內標採用四甲基矽烷(TMS)，化學位移以百萬分之一(ppm)的單位計量。

液相層析聯用質譜(LC-MS) 是使用Agilent 1260質譜儀檢測的。HPLC的測定使用Agilent 1100高壓層析儀(Microsorb 5 micron C18 100 x 3.0mm層析柱)。

薄層層析矽膠板使用青島GF254矽膠板，TLC採用的是0.15-0.20 mm，製備薄層層析採用的是0.4mm-0.5mm。柱層析一般使用青島矽膠200-300目矽膠作為載體。

本發明實施例中的起始原料都是已知並有市售的，或者可以採用或按照本領域已報導的文獻資料合成的。

除特殊說明外，本發明所有反應均在乾燥的惰性氣體(如氮氣或氬氣)保護下通過連續磁力攪拌進行，反應溫度均為攝氏度。

下列簡寫詞的使用貫穿本發明。THF：四氫呋喃；DCM：二氯甲烷；PE：石油醚；Na₂ CO₃ ：碳酸鈉；MeOH：甲醇；HCl：鹽酸；Pd(PPh₃ )₄ ：四三苯基膦鈀；K₂ CO₃ ：碳酸鉀；H₂ O：水；TEA：三乙胺；DIEA：N,N-二異丙基乙胺；DMF：N,N-二甲基甲醯胺；DMSO：二甲基亞碸；NaBH₄ ：硼氫化鈉；Sn₂ (Bu-n)₆ ：六己基二錫；CuI：碘化亞銅；Cs₂ CO₃ ：碳酸銫；K₃ PO₄ ：磷酸鉀；Pd₂ (dba)₃ ：三(二亞苄基丙酮)二鈀；Pd/C：鈀碳；Xantphos：2-二環己基磷-2,4,6-三異丙基聯苯；EA：乙酸乙酯；Boc₂ O：二碳酸二第三丁酯；Pd(dppf)₂ Cl₂ ：[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀；NaH：氫鈉；CH₃ I：碘甲烷；L-Proline：L-脯氨酸；L-Selectride：三第二丁基硼氫化鋰。

中間體 1 的合成 ：

步驟 1: 3- 羥基 -2,2- 二甲基丙腈 室溫下，將2-氰基-2-甲基丙酸甲酯(2.0 g, 15.7mmol)溶解到THF/H₂ O= 20 /40 mL當中，冷卻到0℃，分批加入硼氫化鈉(1.78 g, 53.4mmol)，加料結束，室溫反應4h，反應完全。EA萃取，乾燥，過濾，濃縮，柱層析(PE:EA=1:1)，得到3-羥基-2,2-二甲基丙腈1.4 g，收率90%。MS m/z(ESI)：100.2 [M+H]⁺ 。步驟 2: 2- 氰基 -2- 甲基丙基 -4- 甲基苯磺酸酯 室溫下，將3-羥基-2,2-二甲基丙腈(1.4 g, 14.1mmol)、DIEA(2.85 g, 28.28mmol)溶解到二氯甲烷(20 mL)中，冷卻到0℃，加入對甲苯磺醯氯(2.6 g, 14.1mmol)，加料結束，室溫反應過夜，反應完全。DCM萃取，乾燥，過濾，濃縮，柱層析(PE:EA=3:1)，得到2-氰基-2-甲基丙基4-甲基苯磺酸酯1.4 g，收率36 %。MS m/z(ESI)：254.1 [M+H]⁺ 。步驟 3: 4- 溴 -6-(2- 氰基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈室溫下，將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(350 mg, 1.37 mmol)、2-氰基-2-甲基丙基4-甲基苯磺酸酯(564 mg, 2.2 mmol)溶解到DMF(10 mL)當中，加入碳酸鉀(1.43 g,4.44 mmol)，加料結束，100℃攪拌反應過夜，反應完全。過濾，濃縮移除溶劑，柱層析(PE:EA=2:1)，得到4-溴-6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈170 mg，收率36%。MS m/z(ESI)：319.6 [M+H]⁺ 。

中間體 2 的合成 ：

步驟 1: 合成 4- 溴 -6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈室溫下，將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(2.0 g, 8.4 mmol)、2,2-二甲基環氧乙烷(7.38 mL, 84 mmol)溶解到DMF(10 mL)當中，加入碳酸鉀(3.38 g,25 mmol)，加料結束，封管80℃攪拌反應過夜，反應完全。過濾，濃縮移除溶劑，柱層析(PE:EA=2:1)，得到4-溴-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈1.5g，收率57%。MS m/z(ESI)：310.6 [M+H]⁺ 。步驟 2: 合成 4-(6- 氟吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(2.0 g, 6.4 mmol)與2-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶(2.16 g, 9.9 mmol)溶解在二噁烷：水=(4:1, 50 mL)中，然後分別加入Pd(PPh₃ )₄ (747 mg, 0.64 mmol)與碳酸鈉(2.73 g, 25.7mmol)，氮氣保護，90℃攪拌過夜，反應完全後加入水淬滅反應，分出有機相，水洗，乾燥，柱層析(DCM:MeOH=20:1)，得到4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈1.7 g，收率80%。MS m/z(ESI)：327.2 [M+H]⁺ 。

中間體 3 的合成 ：

步驟 1: 合成 (R)-2-((4- 溴 -3- 氰基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -6- 基 ) 氧基 ) 甲基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁酯 將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.0 g, 4.2 mmol)、(R)-2-溴甲基嗎啉-4-甲酸第三丁酯(1.6 g, 5.9 mmol)、碳酸銫(4.1 g, 12.6 mmol)溶解到DMF(20 mL)當中，50℃攪拌反應18小時，反應完全。乙酸乙酯稀釋，過濾，減壓濃縮移除溶劑，柱層析(PE:EA=2:1)，得到(R)-2-((4-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯1.13 g，收率61%。MS m/z(ESI)：438.6 [M+H]⁺ 。步驟 2: 合成 (R ） -2-((3- 氰基 -4-(6- 氟吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -6- 基 ) 氧基 ) 甲基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁酯 將2-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜戊烷-2-基)吡啶(807 mg, 3.62 mmol)，(R)-2-((4-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(1.13 g, 2.59 mmol)溶解在二噁烷：水=6:1，(30 mL)中，然後分別加入Pd(PPh₃ )₄ (300 mg, 0.259 mmol)與碳酸鈉(823 mg, 7.78 mmol)，氮氣保護，90℃攪拌過夜，反應完全後加水淬滅反應，分出有機相，水洗，乾燥，柱層析(DCM:MeOH=10:1)得到(R)-2-((3-氰基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯0.9 g，收率76%。MS m/z(ESI)：454.1[M+H]⁺ 。

實施例 1 ： 4-(6-(((6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 煙腈將6-氯煙腈(1.3 g, 9.4 mmol)、4-氟-1H-吡唑(0.8 g, 9.4 mmol)和碳酸銫(6.1 g, 18.8 mmol)加入到單口瓶中，然後加入DMF(10 mL)，加熱90℃反應10小時，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(20 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(PE:EA=10:1)，得到6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)煙腈1.5 g。MS m/z(ESI)：189.3[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 (6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲胺將6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)煙腈(0.3 g, 1.6 mmol)、Pd/C(0.05 g)加入到單口瓶中，再加入甲醇(5 mL)，然後滴加3滴濃鹽酸，氫氣氛圍下室溫反應過夜，反應完全後，過濾，旋乾母液，得到(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺0.22 g。MS m/z(ESI)：193.1[M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 4-(6-(((6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2 g, 0.62 mmol)、(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(0.23 g, 1.2 mmol)和碳酸鉀(0.17 g, 1.2 mmol)加入到單口瓶中，然後加入DMSO(10 mL)，加熱130℃反應15小時，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(20 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到4-(6-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物 1 )30 mg。MS m/z(ESI)：498.7[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.63 (dd,J = 13.0, 3.2 Hz, 2H), 8.53 (s, 1H), 8.43 (d,J = 1.8 Hz, 1H), 8.19 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 7.95 (dd,J = 8.5, 2.2 Hz, 1H), 7.86 (dd,J = 15.8, 6.3 Hz, 2H), 7.63 (dd,J = 8.6, 2.4 Hz, 1H), 7.51 (t,J = 5.9 Hz, 1H), 7.24 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 6.63 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 4.67 (s, 1H), 3.83 (s, 2H), 1.80 (d,J = 13.5 Hz, 2H), 1.18 (s, 6H)。

實施例 2 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙 -1- 酮將2-氯-5-乙醯基吡啶(2 g, 12.8 mmol)、4-氟-1H-吡唑(1.1 g, 12.8 mmol)和碳酸銫(8.4 g, 25.6 mmol)加入到單口瓶中，然後加入DMF(20 mL)，加熱90℃反應10小時，反應完全後，加水(30 mL)淬滅反應，DCM(40 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(PE:EA=10:1)，得到1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮1.8 g。MS m/z(ESI)：206.2[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 (R)-N-((S)-1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 將1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮(1.0 g, 4.8 mmol)、R-(+)-第三丁基亞磺醯胺(0.58 g, 4.8 mmol)和乙醇鈦(IV)(2.2 g, 9.6 mmol)加入到二口瓶中，然後加入THF(15 mL)，反應液回流反應過夜，反應完全後，冷卻，然後降溫至-75℃，然後在慢慢滴加L-Selectride(14.4 mL, 1 N)，加完後再低溫下攪拌半小時，然後再慢慢升溫至室溫反應2小時，反應完全後，在低溫下加入甲醇淬滅反應，加入水(20 mL)，乙酸乙酯(50 mL*2)萃取，有機相乾燥，旋乾，柱層析(PE:EA=5:1)，得到(R)-N-((S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺0.9 g。MS m/z(ESI)：311.1[M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 (S)-1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙 -1- 胺將(R)-N-((S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.9 g，2.9 mmol)溶解於少量甲醇中，然後在低溫下加入4N HCl/二噁烷(6 mL)，室溫下攪拌反應2小時，反應完全後，加入乙醚形成粘性固體，倒掉上層液，加入石油醚攪拌析出固體，過濾，得到(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺0.45 g。MS m/z(ESI)：207.5[M+H]⁺ 。步驟 4 ：合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2 - 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2 g, 0.62 mmol)、(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(0.25 g, 1.2 mmol)和碳酸鉀(0.17 g, 1.2 mmol)加入到單口瓶中，然後加入DMSO(10 mL)，加熱130℃反應15小時左右，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(20 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到(S)-4-(6-((1-（6-（4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2 -羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 2 ）25 mg。MS m/z(ESI)：512.8[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.65 – 8.58 (m, 2H), 8.51 (s, 1H), 8.47 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 8.12 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 7.98 (dd,J = 8.5, 2.3 Hz, 1H), 7.85 (dd,J = 13.4, 6.4 Hz, 2H), 7.60 (dd,J = 8.7, 2.5 Hz, 1H), 7.48 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 7.21 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 6.62 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 4.65 (s, 1H), 3.81 (s, 2H), 1.50 (d,J = 7.0 Hz, 3H), 1.17 (s, 6H)。

實施例 3 ： (R)-4-(6-(((6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-( 嗎啉 -2- 基甲氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成第三丁基 (R)-2-(((3- 氰基 -4-(6-(((6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶基 -6- 基 ) 氧基 ) 甲基 ) 嗎啉 -4- 羧酸酯 將(R)-2-(((3-氰基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)嗎啉-4-羧酸第三丁酯(0.25 g, 0.55 mmol)、(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(0.22 g, 1.1 mmol)和碳酸鉀(0.16 g, 1.1 mmol)加入到單口瓶中，然後加入DMSO(10 mL)，加熱130℃反應15小時左右，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到第三丁基(R)-2-(((3-氰基-4-(6-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶 -3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶基-6-基)氧基)甲基)嗎啉-4-羧酸酯50 mg。MS m/z(ESI)：626.1[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 (R)-4-(6-(((6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-( 嗎啉 -2- 基甲氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將第三丁基(R)-2-(((3-氰基-4-(6-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶基-6-基)氧基)甲基)嗎啉-4-羧酸酯(50 mg)溶解於少量二氯甲烷中，然後，在低溫下加入4N HCl/二噁烷(1 mL)，室溫下攪拌反應1小時，反應完全後，加入碳酸氫鈉水溶液中和，然後用DCM(10 mL*2)萃取，有機相乾燥，旋乾，柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到(R)-4-(6-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(嗎啉-2 -基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 3 ）30 mg。MS m/z(ESI)：525.9[M+H]⁺ 。¹ H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.69 – 8.62 (m, 2H), 8.55 (s, 1H), 8.45 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 8.21 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 7.97 (dd,J = 8.5, 2.3 Hz, 1H), 7.90 – 7.82 (m, 2H), 7.64 (dd,J = 8.6, 2.5 Hz, 1H), 7.52 (t,J = 6.0 Hz, 1H), 7.27 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 6.65 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 4.60 (d,J = 5.9 Hz, 2H), 4.05 (d,J = 5.1 Hz, 2H), 3.78 – 3.68 (m, 2H), 3.46 (td,J = 10.9, 3.3 Hz, 1H), 2.87 (dd,J = 12.1, 2.1 Hz, 1H), 2.72 – 2.59 (m, 2H)。

實施例 4 ： (R)-4-(6-((((S)-1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙 -1 基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-( 嗎啉 -2- 基甲氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成第三丁基 (R)-2-(((3- 氰基 -4-(6-((((S)-1-6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙 -1- 基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶基 -6- 基 ) 氧基 ) 甲基 ) 嗎啉 -4- 羧酸酯 將(R)-2-(((3-氰基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)嗎啉-4-羧酸第三丁酯(0.30 g, 0.66 mmol)、(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(0.27 g, 1.3 mmol)和碳酸鉀(0.19 g, 1.3 mmol)加入到單口瓶中，然後，加入DMSO(10 mL)，加熱130℃反應15小時左右，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(20 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到第三丁基(R)-2-(((3-氰基-4-(6-((((S)-1-6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-基)胺基)吡啶 -3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶基-6-基)氧基)甲基)嗎啉-4-羧酸酯65 mg。MS m/z(ESI)：640.3[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 (R)-4-(6-((((S)-1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙 -1 基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-( 嗎啉 -2 - 基甲氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將第三丁基(R)-2-(((3-氰基-4-(6-((((S)-1-6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶基-6-基)氧基)甲基)嗎啉-4-羧酸酯(65 mg)溶解於少量二氯甲烷中，然後，在低溫下加入4N HCl/二噁烷(1 mL)，室溫下攪拌反應1小時，反應完全後，加入碳酸氫鈉水溶液中和，然後，用DCM(10 mL*2)萃取，乾燥，旋乾，柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到(R)-4-(6-((((S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1基)胺基)吡啶-3-基)-6-(嗎啉-2 -基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 4 ）40 mg。MS m/z(ESI)：540.2[M+H]⁺ 。¹ H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.64 (dd,J = 4.6, 0.7 Hz, 2H), 8.53 (s, 1H), 8.49 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 8.14 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 8.00 (dd,J = 8.5, 2.3 Hz, 1H), 7.89 – 7.83 (m, 2H), 7.61 (dd,J = 8.7, 2.5 Hz, 1H), 7.48 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 7.23 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 6.63 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 5.24 – 5.15 (m, 1H), 4.03 (d,J = 5.3 Hz, 2H), 3.77 – 3.66 (m, 2H), 3.45 (td,J = 10.8, 3.3 Hz, 1H), 2.85 (dd,J = 12.1, 2.1 Hz, 1H), 2.64 (dd,J = 10.7, 3.2 Hz, 2H), 1.51 (d,J = 7.0 Hz, 3H)。

實施例 5 ： (R)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2 - 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 (S)-N-((R)-1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 將1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮(0.5 g, 2.4 mmol)、S-(-)-第三丁基亞磺醯胺(0.3 g, 2.4 mmol)和乙醇鈦(IV)(1.1 g, 4.8 mmol)加入到二口瓶中，然後加入THF(10 mL)，反應液回流反應過夜，反應完全後，冷卻，然後降溫至-75℃，然後在慢慢滴加L-Selectride(7.2 mL, 1 N)，加完後再低溫下攪拌半小時，然後再慢慢升溫至室溫反應2小時，反應完全後，在低溫下加入甲醇淬滅反應，加入水(20 mL)、乙酸乙酯(40 mL*2)萃取，有機相乾燥，旋乾，柱層析(PE:EA=5:1)，得到(S)-N-((R)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺0.5 g。MS m/z(ESI)：311.1[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 (R)-1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙 -1- 胺將(S)-N-((R)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.5 g，1.6 mmol)溶解於少量甲醇中，然後在低溫下加入4N HCl/二噁烷(4 mL)，室溫下攪拌反應2小時，反應完全後，加入乙醚形成粘性固體，倒掉上層液，加入石油醚攪拌析出固體，過濾得到(R)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺0.25 g。MS m/z(ESI)：207.5[M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 (R)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2 - 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2 g, 0.62 mmol)、(R)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(0.25 g, 1.2 mmol)和碳酸鉀(0.17 g, 1.2 mmol)加入到單口瓶中，然後加入DMSO(10 mL)，加熱130℃反應15小時左右，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(20 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到(R)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2 -羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 5 ）15 mg。MS m/z(ESI)：512.8[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.65 – 8.58 (m, 2H), 8.51 (s, 1H), 8.47 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 8.12 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 7.98 (dd,J = 8.5, 2.3 Hz, 1H), 7.85 (dd,J = 13.4, 6.4 Hz, 2H), 7.60 (dd,J = 8.7, 2.5 Hz, 1H), 7.48 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 7.21 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 6.62 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 4.65 (s, 1H), 3.81 (s, 2H), 1.50 (d,J = 7.0 Hz, 3H), 1.17 (s, 6H)。

實施例 6 ： 4-(6-((1-(6-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2 - 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 N-(1-(1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 將1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮(1.5 g, 7.2 mmol)、第三丁基亞磺醯胺(0.9 g, 7.2 mmol)和乙醇鈦(IV)(3.3 g, 14.4 mmol)加入到二口瓶中，然後加入THF(20 mL)，反應液回流反應過夜，反應完全後，冷卻，然後降溫至-75℃，然後在慢慢滴加L-Selectride(21.6 mL, 1 N)，加完後再低溫下攪拌半小時，然後再慢慢升溫至室溫反應2小時，反應完全後，在低溫下加入甲醇淬滅反應，加入水(30 mL),乙酸乙酯(50 mL*2)萃取，有機相乾燥，旋乾，柱層析(PE:EA=5:1)，得到N-(1-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺1.2 g。MS m/z(ESI)：311.1[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙 -1- 胺將N-(1-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.2 g，3.9 mmol)溶解於少量甲醇中，然後在低溫下加入4N HCl/二噁烷(8 mL)，室溫下攪拌反應2小時，反應完全後，加入乙醚形成粘性固體，倒掉上層液，加入石油醚攪拌析出固體，過濾，得到1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺0.7 g。MS m/z(ESI)：207.5[M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 4-(6-((1-(6-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2 - 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.4 g, 1.2 mmol)、1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(0.5 g, 2.4 mmol)和碳酸鉀(0.4 g, 2.4 mmol)加入到單口瓶中，然後加入DMSO(10 mL)，加熱130℃反應15小時左右，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(20 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到4-(6-((1-(6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2 -甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 6 ）50 mg。MS m/z(ESI)：512.8[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.65-8.58 (m, 2H), 8.51 (s, 1H), 8.47 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 8.12 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 7.98 (dd,J = 8.5, 2.3 Hz, 1H), 7.85 (dd,J = 13.4, 6.4 Hz, 2H), 7.60 (dd,J = 8.7, 2.5 Hz, 1H), 7.48 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 7.21 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 6.62 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 4.65 (s, 1H), 3.81 (s, 2H), 1.50 (d,J = 7.0 Hz, 3H), 1.17 (s, 6H)。

實施例 7 ： 4-(6-(((6-(1H- 咪唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1, 5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 6-(1H- 咪唑 -1- 基 ) 煙腈將6-氯煙腈(1.0 g, 7.3 mmol)、1H-咪唑(0.5 g, 7.3 mmol)和碳酸銫(4.7 g, 14.6 mmol)加入到單口瓶中，加入DMF(10 mL)，加熱90℃反應10小時。反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(PE:EA=6:1)，得到6-(1H-咪唑-1-基)煙腈1.1 g。MS m/z(ESI)：171.2[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 (6-(1H- 咪唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲胺將6-(1H-咪唑-1-基)煙腈(0.5 g, 2.9 mmol)、Pd/C(0.06 g)加入到單口瓶中，再加入甲醇(5 mL)，然後滴加3滴濃鹽酸，氫氣氛圍下室溫反應過夜，反應完全後，過濾，旋乾母液，得到(6-(1H-咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺0.4 g。MS m/z(ESI)：175.2[M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 4-(6-(((6-(1H- 咪唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1, 5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.3 g, 0.92 mmol)、(6-(1H-咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(0.33 g, 1.84 mmol)和碳酸鉀(0.26 g, 1.84 mmol)加入到單口瓶中，然後加入DMSO(10 mL)，加熱130℃反應15小時左右，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到4-(6-(((6-(1H-咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1, 5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 7 ）45 mg。MS m/z(ESI)：481.6[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.63 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 8.55 (s, 2H), 8.49 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 8.21 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 8.00 – 7.92 (m, 2H), 7.77 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 8.6, 2.4 Hz, 1H), 7.54 (t,J = 5.9 Hz, 1H), 7.25 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.66 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.60 (d,J = 5.8 Hz, 2H), 3.84 (s, 2H), 1.20 (s, 6H)。

實施例 8 ： 6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-((6-(2- 氧吡咯烷 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1, 5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 ((6-(2-(2- 氧吡咯烷 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 胺基甲酸第三丁酯 將((6-氯吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯(0.3 g, 1.3 mmol)、吡咯烷-2-酮(0.42 g, 5.2 mmol)、磷酸鉀(1.3 g，6.5 mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(0.22 g，0.26 mmol)和xantphos(0.15 g，0.3 mmol)溶解在甲苯(15 ml)中，氮氣保護下該反應80℃攪拌反應6小時，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析(PE:EA=3:1)，得到((6-(2-(2-氧吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯0.3 g。MS m/z(ESI)：292.3[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 1-(5-( 甲胺基 ) 吡啶 -2- 基 ) 吡咯烷 -2- 酮將((6-(2-(2-氧吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯(0.4 g，1.4 mmol)溶解於少量二氯甲烷中，然後在低溫下加入4N HCl/二噁烷(2 mL)，室溫下攪拌反應2小時，反應完全後，旋乾反應液，加入石油醚攪拌析出固體，過濾得到1-(5-(甲胺基)吡啶-2-基)吡咯烷-2-酮0.2 g。MS m/z(ESI)：192.3[M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-((((6-(2- 氧吡咯烷 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基胺 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1, 5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2 g, 0.62 mmol)、1-(5-(甲胺基)吡啶-2-基)吡咯烷-2-酮(0.23 g, 1.24 mmol)和碳酸鉀(0.17 g, 1.24 mmol)加入到單口瓶中，然後加入DMSO(10 mL)，加熱130℃反應15小時左右，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(20 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((((6-(2-氧吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1, 5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 8 ）35 mg。MS m/z(ESI)：498.6[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.65 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.59-7.61 (m, 1H), 7.48-7.51 (m, 1H), 7.24(s, 1H),6.56 (d, 1H), 6.48 (d, 1H), 4.69 (s, 1H), 3.84 (s, 1H),2.30 (s, 4H),1.60 (s, 6H)。

實施例 9 ： 4-(6-(([2,3'- 聯吡啶 ]-5- 基甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 ([2,3'- 聯吡啶 ]-5- 基甲基 ) 胺基甲酸第三丁酯 將3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼硼烷-2-基)吡啶(0.5 g, 2.43 mmol)、((6-氯吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯(0.6 g，2.43 mmol)、Pd(dppf)₂ Cl₂ (0.19 g，0.24mmol)、碳酸銫(1.6 g，4.86 mmol)加入到二氧六環(15 ml)和水(5 ml)中，該反應在80℃攪拌反應16 h，監測反應完全後，冷卻，EA (20 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析(PE:EA=5:1)，得到([2,3'-聯吡啶] -5-基甲基)胺基甲酸第三丁酯0.45 g。MS m/z(ESI)：286.5 [M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 [2,3'- 聯吡啶 ]-5- 基甲胺 將([2,3'-聯吡啶] -5-基甲基)胺基甲酸第三丁酯(0.4 g，1.4 mmol)溶解於少量二氯甲烷中，然後在低溫下加入4N HCl/二噁烷(2 mL)，室溫下攪拌反應2小時，反應完全後，旋乾反應液，加入石油醚攪拌析出固體，過濾，得到[2,3'-聯吡啶]-5-基甲胺0.25 g。MS m/z(ESI)：186.4.3[M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 4-(6-(([[2,3'- 聯吡啶 ]-5- 基甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2 g, 0.62 mmol)、[2,3'-聯吡啶]-5-基甲胺(0.17 g, 0.92 mmol)和碳酸鉀(0.17 g, 1.24 mmol)加入到單口瓶中，然後加入DMSO(10 mL)，加熱130℃反應15小時左右，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(20 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到4-(6-(([[2,3'-聯吡啶]-5-基甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 9 ）35 mg。MS m/z(ESI)：492.8[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.63 (m, 1H), 8.55 (s, 2H), 8.49 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 8.21 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 7.92 (m, 2H), 7.77 (m, 1H), 7.65 (dd,J = 8.6, 2.4 Hz, 1H),7.45 (m 1H), 7.34 (m, 2H), 7.13 (s, 1H), 6.96 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.60 (d,J = 5.8 Hz, 2H), 3.84 (s, 2H), 1.20 (s, 6H)。

實施例 10 ： 6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-(((6-( 吡咯烷 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 合成 6-( 吡咯烷 -1- 基 ) 煙鹼腈 室溫下，將四氫吡咯(0.5 g, 7.2 mmol)、6-氯煙腈(0.5 g, 3.6 mmol)，溶解到DMF 10 mL當中，加入碳酸鉀(1.5 g, 10.8 mmol)，加料結束，90℃攪拌反應過夜，反應完全，淬滅，萃取，洗滌，濃縮，柱層析 (PE:EA=2:1)得到6-(吡咯烷-1-基)煙鹼腈600 mg。MS m/z(ESI)：174.1 [M+H]⁺ 。步驟 2: 合成 (6-( 吡咯烷 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基胺 將6-(吡咯烷-1-基)煙鹼腈(0.3 g, 1.7 mmol)溶解到甲醇(10 mL)當中，加入Pd/C(30 mg)，氫氣置換三次，室溫攪拌4h，反應完全。過濾，濃縮。柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲基胺165 mg。MS m/z(ESI)：178.3[M+H]⁺ 。步驟 3: 合成 6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-((6-( 吡咯烷 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈室溫下，將(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲基胺(0.15 g, 0.84 mmol)與4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.14 g, 0.42 mmol)溶解到DMSO(5 mL)當中，加入碳酸鉀(0.18 g,1.26 mmol)，氮氣保護，135℃攪拌反應過夜，反應完全。萃取，洗滌，柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 10 ）16 mg,收率8%。MS m/z(ESI)：484.5 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.63 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.59-7.61 (m, 1H), 7.48-7.51 (m, 1H), 7.24(s, 1H),6.56 (d, 1H), 6.38 (d, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.34 (d, 2H), 3.84 (s, 1H),1.90 (s, 4H),1.20 (s, 6H)。

實施例 11 ： 6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-((6-(4- 甲基 -1H- 咪唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 合成 6-(4- 甲基 -1H- 咪唑 -1- 基 ) 煙鹼腈 室溫下，將4-甲基-1H-咪唑(0.6 g, 2.3 mmol)、6-氯煙腈(0.5 g, 3.6 mmol)，溶解到DMF 10 mL當中，加入碳酸鉀(2.5 g, 18 mmol)，90℃攪拌反應過夜，反應完全，淬滅，萃取，洗滌，濃縮，柱層析(PE:EA=2:1)，得到6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)煙鹼腈650 mg。MS m/z(ESI)：184.5 [M+H]⁺ 。步驟 2: 合成 6-(4- 甲基 -1H- 咪唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基胺 將6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)煙鹼腈(0.65 g, 3 mmol)溶解到甲醇(10 mL)當中，加入Pd/C(65mg)，氫氣置換三次，室溫攪拌4h，反應完全，過濾，濃縮。柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲基胺200 mg。MS m/z(ESI)：189.1 [M+H]⁺ 。步驟 3: 合成 6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-((6-(4- 甲基 -1H- 咪唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈室溫下，將4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.12 g, 0.36 mmol)與6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲基胺(0.2 g, 0.73 mmol)溶解到DMSO(5 mL)當中，加入碳酸鉀(0.25 g,1.8 mmol)，氮氣保護下135℃攪拌反應過夜，反應完全，經萃取，洗滌，柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 11 ）16 mg。MS m/z(ESI)：495.2 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.63 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.20(d, 1H), 7.62-7.69 (m, 3H), 7.50 (m, 1H), 7.25 (s, 1H), 6.63 (s, 1H), 4.68 (s, 1H), 4.57 (d, 2H), 3.84 (s, 2H), 2.15 (m, 3H), 1.20 (s, 6H)。

實施例 12 ： 6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-((((6- 嗎啉代吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 6- 嗎啉代煙腈 室溫下，將嗎啉(0.32 g, 3.6 mmol)、6-氯煙腈(0.5 g, 3.6 mmol)，溶解到DMF(10 mL)當中，加入碳酸銫(1.0 g,7.2 mmol)，加熱90℃反應10小時，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(PE:EA=6:1)，得到6-嗎啉代煙腈0.55 g。MS m/z(ESI)：190.2[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 (6- 嗎啉代吡啶 -3- 基 ) 甲胺將6-嗎啉代煙腈(0.5 g, 2.6 mmol)、Pd/C(0.05 g)加入到單口瓶中，再加入甲醇(5 mL)，然後滴加3滴濃鹽酸，氫氣氛圍下室溫反應過夜，反應完全後，過濾，旋乾母液，得到(6-嗎啉代吡啶-3-基)甲胺0.3 g。MS m/z(ESI)：193.8[M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-((((6- 嗎啉代吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.3 g, 0.92 mmol)、(6-嗎啉代吡啶-3-基)甲胺(0.35 g, 1.8 mmol)和碳酸鉀(0.26 g, 1.8 mmol)加入到單口瓶中，然後加入DMSO(10 mL)，加熱130℃反應15小時左右，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((((6-嗎啉代吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 12 ）45 mg。MS m/z(ESI)：500.3[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.63 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.20 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 8.14 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 7.59 (ddd,J = 15.5, 8.7, 2.4 Hz, 2H), 7.30 (t,J = 5.8 Hz, 1H), 7.24 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 6.79 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 6.59 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.39 (d,J = 5.7 Hz, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.70 – 3.61 (m, 4H), 3.41-3.34 (m, 4H), 1.20 (s, 6H)。

實施例 13 ： 6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-( 喹啉 -7- 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

室溫下，將4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.15 g, 0.46 mmol)、喹啉-7-基甲胺(0.15 g, 0.92 mmol)溶解到DMSO(5 mL)當中，加入碳酸鉀(0.13 g,0.92 mmol)，加熱到130℃攪拌反應過夜，反應完全，萃取，洗滌，柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(喹啉-7-甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 13 ）30 mg。MS m/z(ESI)：465.1 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.84 (dd,J = 4.2, 1.6 Hz, 1H), 8.64 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.32 (dd,J = 29.6, 5.1 Hz, 2H), 7.96 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 7.76 (dd,J = 9.0, 2.5 Hz, 2H), 7.67 (dd,J = 8.7, 1.7 Hz, 1H), 7.49 (dd,J = 8.3, 4.2 Hz, 1H), 7.29 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 6.82 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 5.06 (s, 2H), 3.85 (s, 2H), 1.20 (s, 6H)。

實施例 14 ： 6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-( 甲基 ( 喹啉 -6- 基甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 ( 喹啉 -6- 基甲基 ) 胺基甲酸第三丁酯 室溫下，將喹啉-6基甲胺(0.5 g, 3.2 mmol)、三乙胺(0.96 g, 9.6 mmol)，溶解到DCM(20 mL)當中，然後再加入Boc₂ O(0.7 g,3.2 mmol)，室溫下攪拌反應3小時，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(20 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，得到(喹啉-6-基甲基)胺基甲酸第三丁酯0.6 g。MS m/z(ESI)：259.5[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 ( 喹啉 -6- 基甲基 ) 甲基胺基甲酸第三丁酯 室溫下，將(喹啉-6-基甲基)胺基甲酸第三丁酯(0.6 g, 2.3 mmol)，溶解到THF(10 mL)當中，然後降溫至0℃，再加入慢慢加入NaH(0.1 g，4.6 mmol)，低溫下攪拌反應半小時，然後再加入碘甲烷(0.33 g，2.3 mmol)，加完後低溫繼續反應6小時，反應完全後，低溫下加甲醇淬滅反應，EA(20 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，得到(喹啉-6-基甲基)甲基胺基甲酸第三丁酯0.55 g。MS m/z(ESI)：272.9[M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 N- 甲基 -1-( 喹啉 -6- 基 ) 甲胺將(喹啉-6-基甲基)甲基胺基甲酸第三丁酯(0.55 g，2.0 mmol)溶解於少量二氯甲烷中，然後在低溫下加入4N HCl/二噁烷(3 mL)，室溫下攪拌反應2小時，反應完全後，旋乾反應液，加入石油醚攪拌析出固體，過濾得到N-甲基-1-(喹啉-6-基)甲胺0.3 g。MS m/z(ESI)：172.7[M+H]⁺ 。步驟 4 ：合成 6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-( 甲基 ( 喹啉 -6- 基甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.3 g, 0.92 mmol)、N-甲基-1-(喹啉-6-基)甲胺(0.31 g, 1.8 mmol)和碳酸鉀(0.26 g, 1.8 mmol)加入到單口瓶中，然後加入DMSO(10 mL)，加熱130℃反應15小時左右，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(甲基(喹啉-6-基甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 14 ）60 mg。MS m/z(ESI)：479.3[M+H]⁺ 。¹ H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.84 (dd,J = 4.2, 1.6 Hz, 1H), 8.64 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.32 (dd,J = 29.6, 5.1 Hz, 2H), 7.96 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 7.76 (dd,J = 9.0, 2.5 Hz, 2H), 7.67 (dd,J = 8.7, 1.7 Hz, 1H), 7.49 (dd,J = 8.3, 4.2 Hz, 1H), 7.29 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 6.82 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 5.06 (s, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.14 (s, 3H), 1.20 (s, 6H)。

實施例 15 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 丙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 丙 -1- 酮將1-(6-氯吡啶-3-基)-1-丙酮(1.5 g, 8.88 mmol)、4-氟-1H-吡唑(0.76 g, 8.88 mmol)和碳酸銫(5.8 g, 17.6 mmol)加入到單口瓶中，然後加入DMF(20 mL)，加熱90℃反應10小時，反應完全後，加水(20 mL)淬滅反應，DCM(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(PE:EA=10:1)，得到1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙-1-酮1.4 g。MS m/z(ESI)：220.2[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 (R)-N-((S)-1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 丙基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 將1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙-1-酮(1.4 g, 6.4 mmol)、R-(+)-第三丁基亞磺醯胺(0.77 g, 6.4 mmol)和乙醇鈦(IV)(2.9 g, 12.8 mmol)加入到二口瓶中，然後加入THF(20 mL)，反應液回流反應過夜，反應完全後，冷卻，然後降溫至-75℃，然後在慢慢滴加L-Selectride(19.2 mL, 1 N)，加完後再低溫下攪拌半小時，然後再慢慢升溫至室溫反應2小時，反應完全後，在低溫下加入甲醇淬滅反應，加入水(20 mL)，乙酸乙酯(60 mL*2)萃取，有機相乾燥，旋乾，柱層析(PE:EA=5:1)，得到(R)-N-((S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺1.0 g。MS m/z(ESI)：325.5[M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 (S)-1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 丙 -1- 胺將(R)-N-((S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.0 g，3.0 mmol)溶解於少量甲醇中，然後在低溫下加入4N HCl/二噁烷(4 mL)，室溫下攪拌反應2小時，反應完全後，加入乙醚形成粘性固體，倒掉上層液，加入石油醚攪拌析出固體，過濾，得到(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙-1-胺0.5 g。MS m/z(ESI)：221.3[M+H]⁺ 。步驟 4 ：合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 丙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2 - 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.35 g, 1.1 mmol)、(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙-1-胺(0.47 g, 2.2 mmol)和碳酸鉀(0.31 g, 2.2 mmol)加入到單口瓶中，然後加入DMSO(15 mL)，加熱130℃反應15小時左右，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2 -羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 15 ）50 mg，MS m/z(ESI)：527.6[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.65-8.58 (m, 2H), 8.51 (s, 1H), 8.47 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 8.12 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 7.98 (dd,J = 8.5, 2.3 Hz, 1H), 7.85 (dd,J = 13.4, 6.4 Hz, 2H), 7.60 (dd,J = 8.7, 2.5 Hz, 1H), 7.48 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 7.21 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 6.62 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 4.65 (s, 1H), 3.81 (s, 2H), 2.61 (s, 2H),1.50 (d,J = 7.0 Hz, 3H), 1.17 (s, 6H)。

實施例 16 ： (S)-4-(6-((1-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 1-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 苯基 ) 乙 -1- 酮將1-(4-溴苯基)乙-1-酮(2.5 g, 12.6 mmol)、4-氟-1H-吡唑(1.1 g, 12.6 mmol)和碳酸鉀(3.5 g, 25.2 mmol)、碘化亞銅(0.22 g, 1.26 mmol)和L-Proline(0.27 g, 2.52 mmol)加入到二口瓶中，然後加入DMSO(20 mL)，氮氣保護下加熱130℃反應5小時，反應完全後，加水(30 mL)淬滅反應，DCM(50 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(PE:EA=10:1)，得到1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙-1-酮1.1 g。MS m/z(ESI)：205.2[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 (R)-N-((S)-1-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 將1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙-1-酮(1.1 g, 5.4 mmol)、R-(+)-第三丁基亞磺醯胺(0.65 g, 5.4 mmol)和乙醇鈦(IV)(2.4 g, 10.8 mmol)加入到二口瓶中，然後加入THF(15 mL)，反應液回流反應過夜，反應完全後，冷卻，然後降溫至-75℃，然後在慢慢滴加L-Selectride(16.2 mL, 1 N)，加完後再低溫下攪拌半小時，然後再慢慢升溫至室溫反應2小時。反應完全後，在低溫下加入甲醇淬滅反應，加入水(20 mL)，乙酸乙酯(60 mL*2)萃取，有機相乾燥，旋乾，柱層析(PE:EA=5:1)，得到(R)-N-((S)-1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺0.8 g。MS m/z(ESI)：310.7[M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 (S)-1-(4-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 苯基 ) 乙 -1- 胺將(R)-N-((S)-1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.8 g，2.6 mmol)溶解於少量甲醇中，然後在低溫下加入4N HCl/二噁烷(4 mL)，室溫下攪拌反應2小時，反應完全後，加入乙醚形成粘性固體，倒掉上層液，加入石油醚攪拌析出固體，過濾，得到(S)-1-(4-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙-1-胺0.35 g。MS m/z(ESI)：206.3[M+H]⁺ 。步驟 4 ：合成 (S)-4-(6-((1-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2 - 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2 g, 0.62 mmol)、(S)-1-(4-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙-1-胺(0.19 g, 0.92 mmol)和碳酸鉀(0.17 g, 1.24 mmol)加入到單口瓶中，然後加入DMSO(10 mL)，加熱130℃反應15小時左右，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到(S)-4-(6-((1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 16 ）30 mg。MS m/z(ESI)：512.7[M+H]⁺ 。¹ H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.61 (dd,J = 6.0, 3.3 Hz, 2H), 8.53 (s, 1H), 8.13 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 7.78 (d,J = 4.2 Hz, 1H), 7.69 (d,J = 8.6 Hz, 2H), 7.60 (dd,J = 8.7, 2.4 Hz, 1H), 7.50 (d,J = 8.6 Hz, 2H), 7.43 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 7.21 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 6.60 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 5.16-5.08 (m, 1H), 4.67 (s, 1H), 3.82 (s, 2H), 1.47 (d,J = 6.9 Hz, 3H), 1.18 (s, 6H)。

實施例 17 ： (S)-6-(2- 氰基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-((1-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 苯基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 (S)-(1-(1-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 胺基甲酸第三丁酯 室溫下，將(S)-1-(4-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙-1-胺(1.0 g, 4.88 mmol)、三乙胺(0.98 g, 9.8 mmol)溶解到DCM(20 mL)中，然後再加入Boc₂ O (1.07 g，4.88 mmol)，室溫下攪拌反應4小時，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(20 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，得到(S)-(1-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)胺基甲酸第三丁酯1.2 g。MS m/z(ESI)：306.5[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 (S)-(1-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 苯基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基甲酸第三丁酯 室溫下，將(S)-(1-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)胺基甲酸酯第三丁基(1.2 g, 3.9 mmol)，溶解到THF (15 mL)中，然後降溫至0℃，再加入慢慢加入NaH(0.19 g，7.8 mmol)，低溫下攪拌反應半小時，然後再加入碘甲烷(0.56 g，3.9 mmol)，加完後低溫繼續反應5小時，反應完全後，低溫下加甲醇淬滅反應，EA(20 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(PE:DCM=1:1)得到(S)-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯1.1 g。MS m/z(ESI)：319.9[M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 (S)-1-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 苯基 )-N- 甲基 -1- 胺將(S)-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯(1.1 g，3.5 mmol)溶解於少量二氯甲烷中，然後在低溫下加入4N HCl/二噁烷(4 mL)，室溫下攪拌反應2小時，反應完全後，旋乾反應液，加入石油醚攪拌析出固體，過濾得到(S)-1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)-N-甲基-1-胺0.6 g，MS m/z(ESI)：219.7[M+H]⁺ 。步驟 4 ：合成 (S)-5- 溴 -N-(1-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-N- 甲基吡啶 -2- 胺將(S)-1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)-N-甲基-1-胺(0.6 g, 2.73 mmol)，2-氟-5-溴吡啶(4.8 g, 27.3 mmol)和碳酸銫(1.78 g, 5.46 mmol)加入到單口瓶中，然後加入DMSO(15 mL)，加熱130℃反應40小時左右，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(PE:DCM=1:1)，得到(S)-5-溴-N-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺0.5 g。MS m/z(ESI)：376.3[M+H]⁺ 。步驟 5 ：合成 (S)-N-(1-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-N- 甲基 -5-( 三丁基錫烷基 ) 吡啶 -2- 胺將(S)-5-溴-N-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺(0.5 g, 1.33 mmol)溶解在DMF (10 mL)中，加入六丁基二錫(1.1 g, 2.0mmol)和四三苯基膦(0.15 g, 0.13 mmol)，然後140℃攪拌反應2 h，監測反應完全後，用氯化銨溶液(10 mL)淬滅反應，乙酸乙酯(10 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析(PE:EA=10:1)，得到(S)-N-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)-N-甲基-5-(三丁基錫烷基)吡啶-2-胺0.2 g。MS m/z(ESI)：586.3[M+H]⁺ 。步驟 6 ：合成 (S)-6-(2- 氰基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-((1-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 苯基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.15 g, 0.47 mmol)、(S)-N-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)-N-甲基-5-(三丁基錫烷基)吡啶-2-胺(0.27 g, 0.47 mmol)、碘化亞銅(9 mg, 0.047 mmol)和四三苯基膦鈀(54 mg, 0.047 mmol)溶解在二甲苯 (15 mL)中，反應液130℃下攪拌反應4 h，監測反應完全後，用水 (10 mL)淬滅反應，EA (20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析(DCM:MeOH=10:1)，得到(S)-6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 17 ）40 mg。MS m/z(ESI)：535.1[M+H]⁺ 。¹ H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.71 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 8.56 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 8.41 (s, 2H), 8.30 (s, 2H), 7.92 (dd,J = 6.4, 3.3 Hz, 2H), 7.87 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.80 (dd,J = 8.8, 2.7 Hz, 1H), 7.40 (d,J = 2.9 Hz, 1H), 6.83 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 4.45 (s, 1H), 3.47 (d,J = 6.9 Hz, 2H), 2.83 (s, 3H), 1.81 (d,J = 7.0 Hz, 3H), 1.46 (s, 6H)。

實施例 18 ： (S)-6-(2- 氰基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 (S)-(1-(6-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 胺基甲酸第三丁酯 室溫下，將(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(1.5 g, 7.28 mmol)、三乙胺(1.48 g, 14.5 mmol)溶解到DCM(20 mL)當中，然後再加入Boc₂ O(1.59 g，7.28 mmol)，室溫下攪拌反應4小時，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(20 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，得到(S)-(1-(6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯1.8 g。MS m/z(ESI)：307.4[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 (S)-(1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基甲酸第三丁酯 室溫下，將(S)-(1-(6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(1.8 g, 5.9 mmol)，溶解到THF(20 mL)中，然後降溫至0℃，再加入慢慢加入NaH(0.29 g，11.8 mmol)，低溫下攪拌反應半小時，然後再加入碘甲烷(0.84 g，3.9 mmol)，加完後低溫繼續反應5小時，反應完全後，低溫下加甲醇淬滅反應，EA(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(PE:DCM=1:1)，得到(S)-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯1.7 g。MS m/z(ESI)：321.3[M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 (S)-1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 )-N- 甲基 -1- 胺將(S)-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯(1.7 g，5.3 mmol)溶解於少量二氯甲烷中，然後在低溫下加入4N HCl/二噁烷(6 mL)，室溫下攪拌反應2小時，反應完全後，旋乾反應液，加入石油醚攪拌析出固體，過濾，得到(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基-1-胺0.8 g。MS m/z(ESI)：221.2[M+H]⁺ 。步驟 4 ：合成 (S)-5- 溴 -N-(1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N- 甲基吡啶 -2- 胺將(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基-1-胺(0.8 g, 3.62 mmol)、2-氟-5-溴吡啶(6.3 g, 36.2 mmol)和碳酸鉀(2.4 g, 7.24 mmol)加入到單口瓶中，然後加入DMSO(15 mL)，加熱130℃反應40小時左右，反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(PE:DCM=1:1)，得到(S)-5-溴-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺0.7 g。MS m/z(ESI)：377.2[M+H]⁺ 。步驟 5 ：合成 (S)-N-(1-(6-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N- 甲基 -5-( 三丁基錫烷基 ) 吡啶 -2- 胺將(S)-5-溴-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺(0.7 g, 1.86 mmol)溶解在DMF(10 mL)中，加入六丁基二錫(1.6 g, 2.79mmol)和四三苯基膦鈀(0.21 g, 0.186 mmol)，然後140℃攪拌反應2 h，監測反應完全後，用氯化銨溶液(10 mL)淬滅反應，乙酸乙酯(10 mL*2.)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析(PE:EA=10:1)，得到(S)-N-(1-(6-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(三丁基錫烷基)吡啶-2-胺0.3 g。MS m/z(ESI)：587.4[M+H]⁺ 。步驟 6 ：合成 (S)-6-(2- 氰基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2 g, 0.63 mmol)、(S)-N-(1-(6-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(三丁基錫烷基)吡啶-2-胺(0.37 g, 0.63 mmol)、碘化亞銅(12 mg, 0.063 mmol)和四三苯基膦鈀(73 mg, 0.063 mmol)溶解在二甲苯 (15 mL)中，反應液130℃下攪拌反應4 h，監測反應完全後，用水 (10 mL)淬滅反應，EA (20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析(DCM:MeOH=10:1)得到(S)-6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 18 ）50 mg。MS m/z(ESI)：536.6[M+H]⁺ 。¹ H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.76 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 8.66 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.40 (s, 2H), 7.92 (dd,J = 6.4, 3.3 Hz, 2H), 7.87 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.83 (dd,J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 7.40 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 6.83 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 4.35 (s, 1H), 3.43 (d,J = 6.9 Hz, 2H), 2.83 (s, 3H), 1.61 (d,J = 7.0 Hz, 3H), 1.44 (s, 6H)。

實施例 19 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 合成 6- 溴 -3- 氰基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -4- 基三氟甲磺酸酯 將6-溴-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈 (4 g, 16.88 mmol)、N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(7.3 g, 20.25mmol)和N, N-二異丙基乙胺(4.35 g，33.76mmol)溶解在40 mL DMA中，該反應室溫攪拌反應16 h。監測反應完全後，加入水淬滅反應，EA (50 mL*2)萃取，有機相鹽水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸鹽(4.5 g)。MS m/z(ESI)：370[M+H]⁺ 。步驟 2: 合成 (S)-6- 溴 -4-(6-((1-(6-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 )-3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶基 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸鹽(2 g, 5.42 mmol)、碳酸鈉(1.56 g, 14.75 mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(2.08 g, 4.93 mmol)和[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(403 mg, 0.542 mmol)溶解在二氧六環：水=45 mL：15 mL的混合溶液中，該反應液在80℃反應16 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析得到(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶)-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶基-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈510 mg。MS m/z(ESI)：517[M+H]⁺ 。步驟 3: 合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -(4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶)-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶基-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(50 mg, 0.097 mmol)、碳酸銫(94.9 mg, 0.291 mmol)、N-甲基哌嗪(39.1 mg, 0.291 mmol)、4,5-雙二苯基膦-9,9-二甲基氧雜蒽(5.6 mg, 0.0097 mmol)和三(二亞苄基丙酮)二鈀(8.9 mg, 0.0097 mmol)溶解在甲苯(10 ml)中, 該反應液在120℃反應16 h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 19 ）13 mg。MS m/z(ESI)：537[M+H]⁺ 。¹ H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.65 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.39 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.36 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.92-7.85 (m, 3H), 7.79 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.29 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 3.19 (t, J = 4.9 Hz, 4H), 2.81 (s, 3H), 2.47 (d, J = 4.8 Hz, 4H), 2.22 (s, 3H), 1.60 (d, J = 7.1 Hz, 3H)。

實施例 20 ： ((S) -4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基乙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 合成 4- 溴 -6-(2- 羥基乙氧基 ) 吡唑 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(500 mg, 2.11 mmol)、碳酸鉀(582.3 mg, 4.22 mmol)和環氧乙烷的四氫呋喃溶液(3M)(2.1 ml, 6.33 mmol)溶解在DMF(10 mL)中, 該反應液在70℃反應16 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到4-溴-6-(2-羥基乙氧基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈305 mg。MS m/z(ESI)：281[M+H]⁺ 。步驟 2: ((S) -4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基乙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-(2-羥基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(305 mg, 1.08 mmol)、碳酸鈉(345 mg, 3.25 mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(456.8 mg, 1.08 mmol)和四(三苯基膦)鈀(124.7 mg, 0.108 mmol)溶解在二氧六環：水=15 mL：5 mL中，該反應液在80℃反應16 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羥基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 20 ）150 mg。MS m/z(ESI)：498[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.67-8.61 (m, 2H), 8.55 (s, 1H), 8.37 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.35 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.92-7.87 (m, 2H), 7.84 (dd, J = 8.6, 0.8 Hz, 1H), 7.78 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.25 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 4.93 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.10 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.73 (q, J = 5.1 Hz, 2H), 2.80 (s, 3H), 1.58 (d, J = 7.0 Hz, 3H)。

實施例 21 ： 6-(3,3- 二氟氮雜環丁烷 -1- 基 )-4-(4-((3R)-3-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 苯基 ) 丁 -2- 基 ) 苯基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 6-(3,3- 二氟氮雜環丁烷 -1- 基 )-4-(4-((3R)-3-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 苯基 ) 丁 -2- 基 ) 苯基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)甲基胺)吡啶-3-基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(50 mg, 0.097 mmol)、3,3-二氟氮雜環丁烷(38 mg, 0.293 mmol)、碳酸銫(126.4 mg，0.388 mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(9 mg，0.0097 mmol)和(9,9-二甲基-9H-氧雜蒽-4,5-二基)雙(二苯基膦)(60 mg，0.097 mmol)溶解在5 mL甲苯中，氮氣保護，該反應130℃攪拌反應過夜，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30 mL*2) 萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析得到42 mg 6-(3,3-二氟氮雜環丁烷-1-基)-4-(4-((3R)-3-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)丁-2-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 21 ）。MS m/z(ESI)：527.2[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.66 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.38 (dd,J = 7.5, 2.2 Hz, 2H), 8.28 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 7.90 (dt,J = 15.1, 5.6 Hz, 3H), 7.81 (dd,J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 7.11 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 6.83 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 6.28 (d,J = 7.1 Hz, 1H), 4.39 (t,J = 12.3 Hz, 4H), 2.83 (s, 3H), 1.62 (t,J = 7.7 Hz, 4H), 1.26–1.17 (m, 2H), 1.06 (s, 2H), 0.83 (d,J = 7.2 Hz, 1H)。

實施例 22 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-( 哌啶 -4- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成第三丁基 (S)-4-(3- 氰基 -4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -6- 基 ) 哌啶 -1- 羧酸酯 將(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈 (50 mg, 0.097 mmol)、哌嗪-1-羧酸第三丁酯(55 mg，0.293 mmol)、碳酸銫(126.4 mg，0.388 mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(9 mg，0.0097 mmol)和(9,9-二甲基-9H-氧雜蒽-4,5-二基)雙(二苯基膦)(60 mg，0.097 mmol)溶解在5 mL甲苯中，氮氣保護，該反應130℃攪拌反應過夜，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30 mL*2) 萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到52 mg第三丁基(S)-4-(3-氰基-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)哌啶-1-羧酸酯。MS m/z(ESI)：621.3[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -( 哌啶 -4- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將第三丁基(S)-4-(3-氰基-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)哌啶-1-甲酸 (52 mg, 0.083 mmol)溶解在鹽酸/乙酸乙酯 3 mL 中，反應在0℃攪拌30分鐘，監測反應完全後，濃縮至乾，用碳酸鈉溶液調節pH到7~8，EA (30 mL*2) 萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到42 mg (S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6 -(哌啶-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 22 ）。MS m/z(ESI)：521.25[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.66 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.38 (dd,J = 12.0, 2.2 Hz, 2H), 8.27 (d,J = 1.8 Hz, 1H), 7.95-7.83 (m, 3H), 7.80 (dd,J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 7.48 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 6.81 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 6.29 (q,J = 6.7 Hz, 1H), 3.18-3.04 (m, 4H), 2.92-2.73 (m, 7H), 1.89 (s, 1H), 1.61 (d,J = 7.0 Hz, 3H), 1.23 (d,J = 11.5 Hz, 2H), 0.83 (d,J = 7.3 Hz, 1H)。

實施例 23 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -(4- 羥基 -4- 甲基哌啶 -1- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -(4- 羥基 -4- 甲基哌啶 -1- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150 mg, 0.29 mmol)溶解在甲苯(5 mL)中，加入4-甲基哌啶-4-醇(100 mg, 0.87 mmol)、(9,9-二甲基-9H-氧雜蒽-4,5-二基)雙(二苯基膦)(168 mg, 0.29 mmol)、碳酸銫(378 mg, 1.16 mmol)、Pd₂ (dba)₃ (27 mg, 0.03 mmol)，氮氣保護下加熱至130℃反應過夜，待原料全部消耗完，將體系降到室溫，用水洗滌，EA萃取，合併有機相，乾燥旋乾，柱層析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(4-羥基-4-甲基哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 23 ）104 mg。MS m/z(ESI)：552.6 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.65 (d,J = 3.9 Hz, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.39 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 8.36 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 8.28 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 7.92 (d,J = 3.4 Hz, 1H), 7.90 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 7.86 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.79 (dd,J = 8.8, 2.5 Hz 1H), 7.46 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 6.80 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 4.33 (s, 1H), 2.81 (s, 3H), 1.59 (m, 6H), 1.21 (s, 1H), 1.15 (s, 3H)。

實施例 24 ： (S)-6-(3- 氰基 -3- 甲基氮雜環丁烷 -1- 基 )-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 (S)-6-(3- 氰基 -3- 甲基氮雜環丁烷 -1- 基 )-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150 mg, 0.29 mmol)溶解在甲苯(5 mL)中，加入3-甲基氮雜環丁烷-3-甲腈(84 mg, 0.87 mmol)、(9,9-二甲基-9H-氧雜蒽-4,5-二基)雙(二苯基膦)(168 mg, 0.29 mmol)、碳酸銫(378 mg, 1.16 mmol)、Pd₂ (dba)₃ (27 mg, 0.03 mmol)，氮氣保護下加熱至130℃反應過夜，待原料全部消耗完，將體系降到室溫，用水洗滌，EA萃取，合併有機相，乾燥旋乾，柱層析得到(S)-6-(3-氰基-3-甲基氮雜環丁烷-1-基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 24 ）105 mg。MS m/z(ESI)：533.6 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.65 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.38 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 8.35 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 8.17 (d,J = 1.8 Hz, 1H), 7.91 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 7.89 (d,J = 3.6 Hz, 1H), 7.86 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 7.78 (dd,J = 8.8, 2.5 Hz 1H), 7.02 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 6.81 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 4.25 (d,J = 7.7 Hz, 2H), 3.89 (d,J = 7.7 Hz, 2H) 2.82 (d,J = 5.5 Hz, 3H), 2.48 (m, 5H), 1.64 (s, 3H), 1.59 (d,J = 7.0 Hz, 3H)。

實施例 25 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -(2- 氧 -7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -(2- 氧 -7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈 (150 mg, 0.29 mmol)溶解在甲苯(5 mL)中，加入2-氧-7-氮雜螺[3.5]壬烷(110 mg, 0.87 mmol)、(9,9-二甲基-9H-氧雜蒽-4,5-二基)雙(二苯基膦)(168 mg, 0.29 mmol)、碳酸銫(378 mg, 1.16 mmol)、Pd₂ (dba)₃ (27 mg, 0.03 mmol)，氮氣保護下加熱至回流反應過夜，待原料消失，將體系降到室溫，用水洗滌，EA萃取，合併有機相，乾燥旋乾，柱層析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6 -(2-氧-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 25 ）55 mg。MS m/z(ESI)：564.3 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.65 (dd,J = 4.6, 0.8 Hz, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.38 (dd,J = 14.1, 2.2 Hz, 2H), 8.28 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.90 (dd,J = 3.0, 1.2 Hz, 1H), 7.87 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.80 (dd,J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 7.48 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 6.81 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 6.28 (d,J = 7.1 Hz, 1H), 4.34 (s, 3H), 3.15-3.11 (m, 3H), 2.83 (s, 3H), 1.98-1.83 (m, 4H), 1.61 (d,J = 7.0 Hz, 2H), 1.22 (s, 4H)。

實施例 26 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 - 嗎啉代吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 - 嗎啉代吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150 mg, 0.29 mmol)溶解在甲苯(5 mL)中，加入嗎啉(76 mg, 0.87 mmol)、(9,9-二甲基-9H-氧雜蒽-4,5-二基)雙(二苯基膦)(168 mg, 0.29 mmol)、碳酸銫(378 mg, 1.16 mmol)、Pd₂ (dba)₃ (27 mg, 0.03 mmol)，氮氣保護下加熱至回流反應過夜，待原料消失將體系降到室溫，用水洗滌，EA萃取，合併有機相，乾燥旋乾，柱層析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6 -嗎啉代吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 26 ）69 mg。MS m/z(ESI)：524.1 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.63 (dd,J = 4.5, 0.7 Hz, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.36 (dd,J = 10.2, 2.2 Hz, 2H), 8.29 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.93-7.82 (m, 3H), 7.78 (dd,J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 7.49 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 6.79 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 6.26 (q,J = 6.7 Hz, 1H), 3.76-3.67 (m, 4H), 3.20-3.10 (m, 4H), 2.80 (s, 3H), 1.58 (d,J = 7.0 Hz, 3H)。

實施例 27 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(3- 羥基 -3- 甲基 -1- 炔 -1- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 合成 (S)-6- 溴 -4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈室溫下6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲烷磺酸酯(452 mg, 1.22 mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環-2-基)吡啶-2-胺(400 mg, 0.94 mmol)、Pd(dppf)Cl₂ CH₂ Cl₂ (76 mg, 0.0114 mmol)，溶解在1,4-dioxane:水=5:1(24 mL)中，然後加入KOAc(277 mg, 2.82 mmol)，氮氣保護，50℃攪拌過夜，冷卻到室溫，加水淬滅、經萃取、水洗、乾燥，柱層析，得到(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈93 mg，收率：30%。MS m/z(ESI)：517[M+H]⁺ 。步驟 2: 合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(3- 羥基 -3- 甲基 -1- 炔 -1- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈室溫下將(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(186 mg, 0.36 mmol)、2-甲基-3-炔-2-醇(30 mg, 0.36 mmol) 、PdCl(PPh₃ )₂ (13 mg, 0.08 mmol) 、CuI(7 mg, 0.036 mmol)溶解在二乙胺(10 mL)中，50℃攪拌反應5h。反應完全，加水淬滅、經萃取、洗滌、乾燥，柱層析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(3-羥基-3-甲基-1-炔-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 27 ）37 mg，收率：20%，白色固體。MS m/z(ESI)：521[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.06 (s, 1 H), 8.72 (s, 1 H), 8.65-8.66 (m, 1 H), 8.37-8.40 (m, 1 H), 7.80-7.91 (m,4 H), 7.40 (s, 1 H), 6.81 (d, 1 H), 6.26-6.36 (m, 1 H), 5.56 (s,1 H), 2.82 (s, 3 H),1.60-1.62(d, 3 H), 1.48 (s, 6 H)。

實施例 28 ： (S)-6-( 環丙基甲氧基 )-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1, 5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 4- 溴 -6-( 環丙基甲氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg, 0.84 mmol)、(氯甲基)環丙烷 (0.17 ml, 1.68 mmol)、碳酸銫(554.4mg, 1.68 mmol)溶解在3 mL DMF中，反應在60℃攪拌過夜，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應。EA(30 mL*2) 萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到170 mg 4-溴-6-(環丙基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。MS m/z(ESI)：291.00[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 (S)-6-( 環丙基甲氧基 )-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1, 5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-(環丙基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(170 mg, 0.58 mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(247 mg, 0.58 mmol)、碳酸鈉(186 mg, 1.75 mmol)、四三苯基膦鈀(68 mg, 0.058 mmol)溶解在3 mL二氧六環和1mL水中，氮氣保護，該反應90℃攪拌反應過夜。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30 mL*2) 萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到48 mg (S)-6-(環丙基甲氧基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1, 5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 28 ）。MS m/z(ESI)：507.22 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.66 (dd,J = 4.6, 0.7 Hz, 1H), 8.61-8.51 (m, 2H), 8.38 (dd,J = 10.9, 2.2 Hz, 2H), 7.96-7.83 (m, 3H), 7.80 (dd,J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 7.32 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 6.82 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 6.28 (d,J = 7.0 Hz, 1H), 5.75 (s, 1H), 4.34 (t,J = 5.1 Hz, 1H), 3.94 (d,J = 7.1 Hz, 2H), 3.43 (ddd,J = 14.0, 7.0, 5.1 Hz, 2H), 1.61 (d,J = 7.0 Hz, 3H), 1.32-1.19 (m, 2H), 1.05 (t,J = 7.0 Hz, 2H), 0.64-0.56 (m, 2H), 0.40-0.28 (m, 2H)。

實施例 29 ： (S)-6-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 合成 4- 甲氧基 -6-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡唑 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(510 mg, 2.03 mmol)、碳酸鈉(646 mg, 6.09 mmol)、1-甲基-1H-吡唑-4-硼酸頻那醇酯(507 mg, 2.44 mmol)和四(三苯基膦)鈀(234.2 mg, 0.203 mmol)溶解在二氧六環：水(15 ml ：5 ml)中，該反應液在80℃反應16 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析得到4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈400 mg。MS m/z(ESI)：254[M+H]⁺ 。步驟 2: 合成 4- 羥基 -6-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡唑 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈(430 mg, 1.70 mmol)、三氯化鋁(678 mg，5.10mmol)溶解在30 mL DCE中，該反應室溫攪拌反應16 h。監測反應完全後，加入水淬滅反應，EA(30 mL*2)萃取，有機相鹽水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到160 mg 4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈。MS m/z(ESI)：240[M+H]⁺ 。步驟 3: 合成 3- 氰基 -6-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡唑 [1,5-a] 吡啶 -4- 基三氟甲基磺酸酯 將4-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈 (160 mg, 0.669 mmol)、N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(287 mg, 0.803mmol)和N, N-二異丙基乙胺(173 mg, 1.34mmol)溶解在20 mL DMA中，該反應室溫攪拌反應16 h。監測反應完全後，加入水淬滅反應，EA (30 mL*2)萃取，有機相鹽水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到120 mg 3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲基磺酸酯。MS m/z(ESI)：372[M+H]⁺ 。步驟 4: 合成 (S)-6-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲基磺酸酯(120 mg, 0.323 mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(29.3 mg, 0.032 mmol)、2-二環己基磷-2,4,6-三異丙基聯苯(30.9 mg, 0.065 mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(164.2 mg, 0.388 mmol)溶解在二氧六環：水(15 ml：5 ml)中，該反應液在85℃下攪拌反應16 h。用10 mL水淬滅反應，EA(20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到(S)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 29 ）30 mg，MS m/z(ESI)：519[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.22 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.68- 8.63 (m, 2H), 8.44-8.37 (m, 3H), 8.12 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.94-7.84 (m, 4H), 7.80 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.30 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.84 (s, 3H), 1.62 (d, J = 7.0 Hz, 3H)。

實施例 30 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 - 乙氧基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 合成 4- 溴 -6- 乙氧基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200 mg, 0.844 mmol)、碳酸鉀(256 mg, 1.857 mmol)和碘乙烷(263 mg, 1.688 mmol)溶解在DMF(20 mL)中，該反應液在60℃反應16 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA (20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到4-溴-6-乙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈190 mg。MS m/z(ESI)：266[M+H]⁺ 。步驟 2: 合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 - 乙氧基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-乙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(190 mg, 0.717 mmol)、碳酸鈉(228 mg, 2.15 mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(363 mg, 0.86 mmol)和四(三苯基膦)鈀(83 mg, 0.0717 mmol)溶解在二氧六環：水(15 ml ：5 ml)中，該反應液在80℃反應16 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA (20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 30 ）65 mg。MS m/z(ESI)：483[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.68-8.61 (m, 2H), 8.56 (s, 1H), 8.41-8.35 (m, 2H), 7.94-7.84 (m, 3H), 7.79 (dd,J = 8.8, 2.6 Hz, 1H), 7.28 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 6.84-6.78 (m, 1H), 6.28 (q,J = 6.9 Hz, 1H), 4.14 (q,J = 6.9 Hz, 2H), 2.82 (s, 3H), 1.60 (d,J = 7.0 Hz, 3H), 1.37 (t,J = 6.9 Hz, 3H)。

實施例 31 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6- 烯丙氧基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈

步驟 1: 合成 4- 溴 -6- 烯丙氧基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200 mg, 0.844 mmol)、碳酸鉀(256 mg, 1.857 mmol)和烯丙基溴(112 mg, 0.928 mmol)溶解在DMF(20 ml)中，該反應液在60℃反應16 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA (20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到4-溴-6-烯丙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈120 mg。MS m/z(ESI)：278[M+H]⁺ 。步驟 2: 合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 - 烯丙氧基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-烯丙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(120 mg, 0.433 mmol)、碳酸鈉(138 mg, 1.299 mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(220 mg, 0.520 mmol)和四(三苯基膦)鈀(50mg, 0.0433 mmol)溶解在二氧六環：水(15 ml：5 ml)中，該反應液在80℃反應16 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA (20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-烯丙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 31 ）20 mg。MS m/z(ESI)：495[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d₆ ) δ 10.14 (s, 1H), 8.66 (dd,J = 4.5, 0.9 Hz, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.40 (dt,J = 1.7, 0.8 Hz, 1H), 8.33 (dd,J = 2.6, 0.7 Hz, 1H), 7.94 – 7.85 (m, 3H), 7.76 (dd,J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.82 (dd,J = 8.9, 0.8 Hz, 1H), 6.28 (q,J = 6.9 Hz, 1H), 6.04 – 5.94 (m, 1H), 5.15 – 5.03 (m, 2H), 3.92 (d,J = 6.2 Hz, 2H), 2.82 (s, 3H), 1.61 (d,J = 7.0 Hz, 3H)。

實施例 32 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 - 氰基甲氧基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 合成 4- 溴 -6- 氰基甲氧基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200 mg, 0.844 mmol)、碳酸鉀(256 mg, 1.857 mmol)和溴乙腈(112 mg, 0.928 mmol)溶解在DMF(20 ml)中，該反應液在60℃反應16 h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到4-溴-6-氰基甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈190 mg。MS m/z(ESI)：277[M+H]⁺ 。步驟 2: 合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 - 氰基甲氧基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-氰基甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(190 mg, 0.688 mmol)、碳酸鈉219mg, 2.065 mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(350 mg, 0.826 mmol)和四(三苯基膦)鈀(79 mg, 0.0688 mmol)溶解在二氧六環：水(15 ml：5 ml)中，該反應液在80℃反應16 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-氰基甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 32 ）32 mg。MS m/z(ESI)：494[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.93 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.71-8.64 (m, 2H), 8.43-8.38 (m, 2H), 7.95-7.86 (m, 3H), 7.83 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.86-6.81 (m, 1H), 6.29 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 5.34 (s, 2H), 2.83 (s, 3H), 1.61 (d, J = 7.0 Hz, 3H)。

實施例 33 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 - 異丁氧基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 合成 4- 溴 -6- 異丁氧基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200 mg, 0.844 mmol)，碳酸鉀(256 mg, 1.857 mmol)，和異丁基基溴(127 mg, 0.928 mmol)溶解在DMF(20 ml)中, 該反應液在60℃反應16 h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到4-溴-6-異丁氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈110 mg。MS m/z(ESI)：294[M+H]⁺ 。步驟 2: 合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 - 異丁氧基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-異丁氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(110 mg, 0.375 mmol)、碳酸鈉(120 mg, 1.126 mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(190 mg, 0.451 mmol)和四(三苯基膦)鈀(43 mg, 0.0375 mmol)溶解在二氧六環：水(15 ml：5 ml)中，該反應液在80℃反應16 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA (20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-異丁氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 33 ）50 mg。MS m/z(ESI)：511[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.69-8.63 (m, 2H), 8.57 (s, 1H), 8.39 (ddd, J = 9.3, 2.7, 0.8 Hz, 2H), 7.95-7.84 (m, 3H), 7.81 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.29 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 3.88 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 2.82 (s, 3H), 2.06 (dt, J = 13.2, 6.6 Hz, 1H), 1.61 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.00 (d, J = 6.7 Hz, 6H)。

實施例 34 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -(2,2- 二氟乙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 合成 4- 溴 -6-(2,2- 二氟乙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200 mg, 0.844 mmol)、碳酸鉀(233 mg, 1.688 mmol)和1-溴-2,2-二氟乙烷(184 mg, 1.266 mmol)溶解在DMF(20 ml)中，該反應液在60℃反應16 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到4-溴-6-(2,2-二氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈150mg。MS m/z(ESI)：302[M+H]⁺ 。步驟 2: (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -(2,2- 二氟乙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-(2,2-二氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150 mg, 0.498 mmol)、碳酸鈉(158 mg, 1.49 mmol)、(S) -N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(253 mg, 0.598 mmol)和四(三苯基膦)鈀(58 mg, 0.0498 mmol)溶解在二氧六環：水(15 ml：5 ml)中，該反應液在80℃反應16 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2,2-二氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 34 ）60 mg。MS m/z(ESI)：519[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.82 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.66 (dd, J = 4.5, 0.9 Hz, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.39 (dd, J = 5.5, 2.4 Hz, 2H), 7.94 – 7.85 (m, 3H), 7.82 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.46 (tt, J = 54.1, 3.5 Hz, 1H), 6.28 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 4.49 (td, J = 14.6, 3.5 Hz, 2H), 2.83 (s, 3H), 1.61 (d, J = 7.0 Hz, 3H)。

實施例 35 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2,2,2- 三氟乙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 合成 4- 溴 -6-(2,2,2- 三氟乙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200 mg, 0.844 mmol)、碳酸鉀(233 mg, 1.688 mmol)和1-溴-2,2,2-三氟乙烷(206 mg, 1.266 mmol)溶解在DMF(20 ml)中，該反應液在60℃反應16 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA (20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到4-溴-6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈120 mg。MS m/z(ESI)：320[M+H]⁺ 。步驟 2: 合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -(2,2,2- 三氟乙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(120 mg, 0.376 mmol)，碳酸鈉(120 mg, 1.129 mmol)、(S) -N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(191 mg, 0.451 mmol)和四(三苯基膦)鈀(43 mg, 0.0376 mmol)溶解在二氧六環：水(15 ml：5 ml)中，該反應液在80℃反應16 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA (20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6 -(2,2,2-三氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 35 ）55 mg。MS m/z(ESI)：537[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.88 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.65 (dd, J = 4.5, 0.9 Hz, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.41-8.36 (m, 2H), 7.94-7.80 (m, 4H), 7.46 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.28 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 4.94 (q, J = 8.8 Hz, 2H), 2.83 (s, 3H), 1.61 (d, J = 7.0 Hz, 3H)。

實施例 36 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -(2- 羥丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 合成 4- 溴 -6-(2- 羥丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(300 mg, 1.27 mmol)、碳酸鉀(524 mg, 3.80 mmol)和環氧丙烷(220 mg, 3.80 mmol)溶解在DMF(20 ml)中。該反應液在60℃反應16 h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA (20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到4-溴-6-(2-羥丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈150 mg。MS m/z(ESI)：296[M+H]⁺ 。步驟 2: 合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -(2- 羥丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-(2-羥丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150 mg, 0.508 mmol)、碳酸鈉(162 mg, 1.525 mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(237 mg, 0.559 mmol)和四(三苯基膦)鈀(59 mg, 0.0508 mmol)溶解在二氧六環：水(15 ml：5 ml)中，該反應液在80℃反應16 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6 -(2-羥丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 36 ）30 mg。MS m/z(ESI)：513[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.73-8.65 (m, 2H), 8.57 (s, 1H), 8.42-8.35 (m, 2H), 7.94-7.84 (m, 3H), 7.80 (ddd, J = 8.8, 2.6, 1.4 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.29 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 4.94 (dd, J = 11.8, 5.1 Hz, 1H), 3.96 (hept, J = 3.2, 2.8 Hz, 2H), 3.57-3.40 (m, 1H), 2.82 (s, 3H), 1.61 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.16 (d, J = 6.1 Hz, 3H)。

實施例 37 ： (S)-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-( 甲基 (1-(6-(4- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 合成 1-(6-(4- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙 -1- 酮將4-甲基-1H-吡唑(5 g, 24.4 mmol)、1-(6-氯吡啶-3-基)乙-1-酮(9.5 g, 24.4mmol)和碳酸鉀(16.8 g，48.8mmol)溶解在60 mL DMF中，該反應110℃攪拌反應16 h，監測反應完全後，加入水淬滅反應。EA(50 mL*2)萃取，有機相鹽水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到6.8 g 1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮。MS m/z(ESI)：206[M+H]⁺ 。步驟 2: 合成 2- 甲基 -N-((S)-1-(6-(4- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺 將1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮( 3.5 g, 17.4 mmol)、鈦酸四乙酯(7.9 g, 34.8 mmol)和(S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(2.7 g, 22.64 mmol)溶解在四氫呋喃(50 mL)中，該反應液在75℃反應16 h，監測反應完全後，冷卻至-78℃，滴加2M三第二丁基硼氫化鋰(34.8 ml, 34.8mmol)。監測反應完全後加入水淬滅反應，EA(70 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到2-甲基-N-((S)-1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺5.3g。MS m/z(ESI)：307[M+H]⁺ 。步驟 3: 合成 (S)-1-(6-(4-(4- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙 -1- 胺將2-甲基-N-((S)-1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺(3 g, 9.80mmol)溶解在50 mL二氯甲烷中，滴加2M的鹽酸乙酸乙酯溶液(29.4 ml, 58.8 mmol)，該反應液在室溫反應2 h。監測反應完全後，EA(50 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮得到(S)-1-(6-(4-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺1.8 g。MS m/z(ESI)：203[M+H]⁺ 。步驟 4: 合成 (S)-(1-(6-(4-(4- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 胺基甲酸第三丁酯 將(S)-1-(6-(4-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(1.8 g, 8.91mmol)、Boc酸酐(2.1 g, 9.8mmol)和三乙胺(4.5 g，44.55mmol)溶解在50 mL二氯甲烷中，該反應室溫攪拌反應3 h。監測反應完全後，加入水淬滅反應，EA(50 mL*2)萃取，有機相鹽水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到2.5 g (S)-(1-(6-(4-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯。MS m/z(ESI)：303[M+H]⁺ 。步驟 5: 合成第三丁基 (S)- 甲基 (1-(6-(4- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 胺基甲酸酯 將(S)-(1-(6-(4-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(2.5 g, 8.28 mmol)溶解在四氫呋喃(50 mL)中，加入氫化鈉(0.5 g,12.4mmol)該反應液在室溫反應30 min，滴加碘甲烷(1.2 g, 8.3 mmol)，監測反應完全後，加入水淬滅反應，EA (20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析得到第三丁基(S)-甲基(1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸酯2.5g。MS m/z(ESI)：317[M+H]⁺ 。步驟 6: 合成 (S)-N- 甲基 -1-(6-(4- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙 -1- 胺將第三丁基(S)-甲基(1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸酯(2.5 g, 7.91mmol)溶解在50 mL 二氯甲烷中，滴加2M的鹽酸乙酸乙酯溶液(23.7 ml, 47.47 mmol)，該反應液在室溫反應2 h。監測反應完全後，EA (50 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮得到(S)-N-甲基-1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺1.6g。MS m/z(ESI)：217[M+H]⁺ 。步驟 7: 合成 (S)-5- 溴 -N- 甲基 -N-(1-(6-(4- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 吡啶 -2- 胺將(S)-N-甲基-1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(1.6 g, 7.4 mmol)、碳酸鉀(5.1 g, 37.03 mmol)和2-氟-5-溴吡啶(6.5 g, 37.03 mmol)溶解在DMSO(50 ml)中，該反應液在140℃反應24 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析得到(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺 2.1g。MS m/z(ESI)：372[M+H]⁺ 。步驟 8: 合成 ((S)-N- 甲基 -N-(1-(6-(4- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-5-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼雜環戊烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 胺將(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺(1 g, 2.70 mmol)、乙酸鉀(796 mg, 8.09 mmol)、聯硼頻哪醇酯(2.05 g, 8.09 mmol)和[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(220 mg, 0.27 mmol)溶解在二氧六環(50 mL)中。該反應液在80℃反應16 h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到(S)-N-甲基-N-(1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺500 mg。MS m/z(ESI)：420[M+H]⁺ 。步驟 9: 合成 4- 溴 -6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(300 mg, 1.27 mmol)，碳酸鉀(524 mg, 3.80 mmol)和2,2-二甲基環氧乙烷(273 mg, 3.80 mmol)溶解在DMF(20 mL)中。該反應液在60℃反應16 h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到4-溴-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈 248 mg。MS m/z(ESI)：310[M+H]⁺ 。步驟 10: 合成 (S)-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-( 甲基 (1-(6-(4- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(248 mg, 0.803 mmol)、碳酸鈉(255 mg, 2.409 mmol)、(S)-N-甲基-N-(1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(370 mg, 0.883 mmol)和四(三苯基膦)鈀(93 mg, 0.0803 mmol)溶解在二氧六環：水(15 ml：5 ml)中。該反應液在80 ℃反應16 h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到(S)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(甲基(1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 37 ）65 mg。MS m/z(ESI)：523[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.65 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.39-8.33 (m, 3H), 7.87-7.78 (m, 3H), 7.61 (s, 1H), 7.31 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.27 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 4.71 (s, 1H), 3.87 (s, 2H), 2.81 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.59 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.22 (s, 6H)。

實施例 38 ： (S)-6-(1- 乙基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 合成 6-(1- 乙基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-4- 羥基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將6-溴-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(300 mg, 1.26 mmol)、碳酸鈉(402 mg, 3.79 mmol)、1-乙基-1H-吡唑-4-硼酸頻那醇酯(337 mg, 1.52 mmol)和四(三苯基膦)鈀(146 mg, 0.126 mmol)溶解在二氧六環：水(15 ml：5 ml)中。該反應液在80℃反應16 h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到6-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈310 mg。MS m/z(ESI)：254[M+H]⁺ 。步驟 2: 3- 氰基 -6-(1- 乙基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡唑 [1,5-a] 吡啶 -4- 基三氟甲基磺酸酯 將6-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(310 mg, 1.23 mmol)、N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(539 mg, 1.47 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(316 mg，2.45mmol)溶解在30 mL DMA中，該反應室溫攪拌反應16 h，監測反應完全後，加入水淬滅反應，EA (30 mL*2)萃取，有機相鹽水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到325 mg 3-氰基-6-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲基磺酸鹽。MS m/z(ESI)：386[M+H]⁺ 。步驟 3: 合成 (S)-6-(1- 乙基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將3-氰基-6-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲基磺酸鹽(325 mg, 0.84 mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(49 mg, 0.084 mmol)、2-二環己基磷-2,4,6-三異丙基聯苯(80 mg, 0.168 mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(426 mg, 1.01 mmol)溶解在二氧六環：水(15 ml：5 ml)中，該反應液在85℃下攪拌反應16 h。用10 mL水淬滅反應，EA (20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到(S)-6-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 38 ）100 mg，MS m/z(ESI)：533[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.22 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.66 (dd, J = 4.6, 0.9 Hz, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.46 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 8.42 (dd, J = 2.6, 0.7 Hz, 1H), 8.40 (dd, J = 2.0, 1.1 Hz, 1H), 8.13 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.94-7.83 (m, 4H), 7.81 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.87 – 6.82 (m, 1H), 6.30 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 4.15 (q, J = 7.3 Hz, 2H), 2.84 (s, 3H), 1.62 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.41 (t, J = 7.3 Hz, 3H)。

實施例 39 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 - 丙氧基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 合成 4- 溴 -6- 丙氧基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(300 mg, 1.26 mmol)、碳酸鉀(523 mg, 3.79 mmol)和1-溴丙烷(187 mg, 1.52 mmol)溶解在DMF(20 ml)中，該反應液在60℃反應16 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到4-溴-6-丙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈210 mg。MS m/z(ESI)：280[M+H]⁺ 。步驟 2: (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 - 丙氧基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-丙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(210 mg, 0.75 mmol)、碳酸鈉(239 mg, 2.26 mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(381 mg, 0.9 mmol)和四(三苯基膦)鈀(87 mg, 0.075 mmol)溶解在二氧六環：水(15 ml：5 ml)中，該反應液在80℃反應16 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA (20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6 -丙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 39 ）110 mg，MS m/z(ESI)：497[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.64 (dd, J = 4.6, 0.9 Hz, 1H), 8.63 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.40-8.38 (m, 1H), 8.36 (dd, J = 2.5, 0.7 Hz, 1H), 7.93-7.84 (m, 3H), 7.79 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.81 (dd, J = 8.9, 0.8 Hz, 1H), 6.27 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 4.05 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.81 (s, 3H), 1.76 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 1.60 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.99 (t, J = 7.4 Hz, 3H)。

實施例 40 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 - 甲氧基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈

步驟 1: (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 - 甲氧基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(100 mg, 0.39 mmol)、碳酸鈉(126 mg, 1.19 mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(198 mg, 0.47 mmol)和四(三苯基膦)鈀(45 mg, 0.039 mmol)溶解在二氧六環：水(15 mL：5 mL)中，該反應液在80℃反應16 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA (20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6 -甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 40 ）110 mg。MS m/z(ESI)：469[M+H]⁺ 。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.66 – 8.63 (m, 2H), 8.57 (s, 1H), 8.39 (dd, J = 1.9, 1.1 Hz, 1H), 8.36 (dd, J = 2.5, 0.7 Hz, 1H), 7.92-7.84 (m, 3H), 7.79 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.81 (dd, J = 8.9, 0.8 Hz, 1H), 6.27 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.82 (s, 3H), 1.60 (d, J = 7.1 Hz, 3H)。

實施例 41 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -(2- 氟乙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 合成 4- 溴 -6-(2- 氟乙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(100 mg, 0.42 mmol)，碳酸鉀(175 mg, 1.27 mmol)，和1-溴-2-氟乙烷(64 mg, 0.50 mmol)溶解在DMF(20 ml)中, 該反應液在60℃反應16 h，監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到4-溴-6-(2-氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈103 mg。MS m/z(ESI)：284[M+H]⁺ 。步驟 2: (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -(2- 氟乙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-(2-氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(103 mg, 0.36 mmol)、碳酸鈉(114 mg, 1.08 mmol)、(S) -N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(183 mg, 0.43 mmol)和四(三苯基膦)鈀(42 mg, 0.036 mmol)溶解在二氧六環：水(15 mL ：5 mL)中，該反應液在80℃反應16 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA (20 mL*3)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6 -(2-氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 41 ）90 mg，MS m/z(ESI)：501[M+H]⁺ 。¹ H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.73 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.66 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.40 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.38 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.94-7.84 (m, 3H), 7.82 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.29 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.88-4.80 (m, 1H), 4.77-4.71 (m, 1H), 4.47-4.42 (m, 1H), 4.40-4.35 (m, 1H), 2.83 (s, 3H), 1.61 (d, J = 6.9 Hz, 3H)。

實施例 42 ： (S)-4-(6-((1-(6-( 二乙胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 1-(6-( 二乙胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙烷 -1- 酮室溫下，將2-氯-5-乙醯基吡啶(2.1 g, 19.43 mmol)、二乙胺(4.9 g, 7.48 mmol)和 K₂ CO₃ (5.5, g 4.47 mmol) 溶解到DMF(20 mL)當中，110℃攪拌過夜。冷卻到室溫，水(100 mL)稀釋，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙烷-1-酮2.3 g，收率：88% MS m/z(ESI)：193 [M+H]⁺ 。步驟 2: N-((S)-1-(6-( 二乙胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞硫醯胺 室溫下，在反應瓶中加入(R)-2-甲基丙烷-2-磺醯亞胺(1.45g, 11.98 mmol)和1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙烷-1-酮(2.3 g, 11.98 mmol)、THF(50 mL)，然後加入鈦酸四乙酯(5.56 g,24.4 mmol)，滴加完畢後升至75℃反應16小時。將反應液冷卻至-78℃，緩慢滴加L-selectride (36 mL,35.94 mmol)，滴加完畢，升至室溫反應15分鐘。然後在-50℃加甲醇淬滅，加水(50 mL)，EA(200mL)充分攪拌後過濾、萃取、無水硫酸鈉乾燥、過濾，濃縮得粗品，柱層析純化得N-((S)-1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞硫醯胺2.5g，收率：71%。MS m/z(ESI)：298[M+H]⁺ 。步驟 3 ： N-((S)-1-(6-( 二乙胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N, 2- 二甲基丙烷 -2- 亞硫醯胺 室溫下，將N-((S)-1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞硫醯胺(2.25 g, 7.5 mmol)溶解到THF (20 mL)，-78oC，緩慢滴加MeI(1.17 g, 8.25 mmol)，-78℃反應1h。水(30 mL)稀釋，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到N-((S)-1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-N, 2-二甲基丙烷-2-亞硫醯胺1.6 g，收率：69%。MS m/z(ESI)：312 [M+H]⁺ 。步驟 4: (S) -N, N- 二乙基 -5-(1-( 甲胺基 ) 乙基 ) 吡啶 -2- 胺室溫下，將N-((S)-1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-N, 2-二甲基丙烷-2-亞硫醯胺(1.6 g, 5.14 mmol)溶解到MeOH (2 mL)，然後加入HCl/Dioxane (20 mL,4M)，室溫反應1h。真空減壓濃縮移除溶劑，NaHCO₃ 淬滅，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析得到(S)-N,N-二乙基-5-(1-(甲胺基)乙基)吡啶-2-胺0.8 g，收率：80%。MS m/z(ESI)：208[M+H]⁺ 。步驟 5: (S) -5- 溴 -N-(1-(6-( 二乙胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N- 甲基吡啶 -2- 胺室溫下，將(S) -N，N-二乙基-5-(1-(甲胺基)乙基)吡啶-2-胺(0.7 g, 0.24 mmol)、5-溴-2-氟吡啶(4.76 g, 1.2 mmol)、K₂ CO₃ (2.3 g, 0.72 mmol)溶解到DMSO (10 mL)，140℃反應24h。冷卻到室溫，水稀釋、萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到(S)-5-溴-N-(1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺0.8 g，收率：57%。MS m/z(ESI)：363[M+H]⁺ 。步驟 6: (S)-N-(1-(6-( 二乙胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N- 甲基 -5-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼雜環戊烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 胺室溫下，將(S) -5-溴-N-(1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺(0.7 g, 0.13 mmol)、聯硼酸頻那醇酯(1.4 g, 0.41 mmol)、Pd(dppf)ClCH₂ Cl₂ (140 mg, 0.013 mmol)，KOAc(560 mg, 0.041 mmol)，溶解到Dioxane(15 mL)，90℃反應6h，真空減壓濃縮移除溶劑。NaHCO₃ 稀釋、萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到(S)-N-(1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺437 mg，收率：50.8%，MS m/z(ESI)：329[M+H]⁺ 。步驟 7: (S)-4-(6-((1-(6-( 二乙胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈室溫下氮氣保護將4-溴-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈 (240 mg, 0.77 mmol)、(S)-N-(1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺 (480 mg, 1.17 mmol)、Pd(PPh₃ )₄ (88 mg, 0.076 mmol)、Na₂ CO₃ (324 mg, 3.05 mmol)溶解在1,4-dioxane:水=5:1(12 mL)中，100℃攪拌反應12h。冷卻到室溫，加水淬滅、經萃取、水洗、乾燥，柱層析(S) 4-(6-((1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 42 ）92 mg，收率：23%，白色固體。MS m/z(ESI)：514[M+H]⁺¹ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.64 (d, 1H), 8.56 (s,1 H), 8.34 (d, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.74-7.77(m, 1 H), 7.29-7.38 (m, 1 H), 7.36 -7.38 (d, 1 H), 6.73 (d, 1 H),6.56 (d, 1 H),4.68 (s, 1 H),3.84 (s, 2 H), 3.41-3.46 (m, 4H), 2.73 (s, 3 H), 1.37-1.48 (m, 3 H), 1.20 (s, 6 H)。

實施例 43 ： (S)-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-((1-(6- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: N-((S)-1-(6- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞碸醯胺 室溫下向反應瓶中加入(R)-2-甲基丙烷-2-磺醯亞胺(4.8 g, 39.6 mmol)和5-乙醯基-2-甲氧基吡啶(4.0 g, 26 mmol)、THF (50 mL)，鈦酸四乙酯(11.86 g, 52 mmol)，80℃反應16小時。將反應液冷卻至-78℃，緩慢滴加L-selectride(18.8 mL,188 mmol)，滴加完畢，升至室溫反應15分鐘。然後在-50℃甲醇淬滅，加50 mL水，EA(200 mL)充分攪拌後過濾、萃取、乾燥、過濾，濃縮。粗品柱層析純化得N-((S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞碸醯胺2.0 g，收率30%。MS m/z(ESI)：257 [M+H]⁺ 。步驟 2: N-((S)-1-(6- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N, 2- 二甲基丙烷 -2- 亞硫醯胺 室溫下將N-((S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-N, 2-二甲基丙烷-2-亞硫醯胺(2.0 g, 7.8 mmol)溶解到THF (20 mL)中，-78℃下緩慢滴加LiHMDS(15.6 mL,15.6 mmol)，-78℃反應1h。向體系中添加MeI(1.22 g,8.58 mmol)，-78℃反應3h。加水淬滅，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到N-((S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-N, 2-二甲基丙烷-2-亞硫醯胺1.9 g，收率90%。MS m/z(ESI)：271 [M+H]⁺ 。步驟 3: (S)-1-(6- 甲氧基吡啶 -3- 基 )-N- 甲基乙烷 -1- 胺室溫下將N-((S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-N, 2-二甲基丙烷-2-亞硫醯胺(1.9 g, 7.0 mmol)溶解到DCM (10 mL)中，然後加入HCl/Dioxane (20 mL,4M)，室溫反應1h，真空減壓濃縮移除溶劑。經NaHCO₃ 稀釋，萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析得到(S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-N-甲基乙烷-1-胺 0.81 g，收率：69%。MS m/z(ESI)：167[M+H]⁺ 。步驟 4: (S)-5- 溴 -N- 甲基 -N-(1-(6-( 甲基胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 吡啶 -2- 胺室溫下，將(S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-N-甲基乙烷-1-胺(0.8 g, 4.8 mmol)、5-溴-2-氟吡啶(6.8 g, 39 mmol)、K₂ CO₃ (2.0g, 14.6 mmol)溶解到DMSO(10 mL)，140℃反應24h。冷卻到室溫，加水稀釋、萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析得到(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6-(甲基胺基)吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺860 mg，收率：57 %。MS m/z(ESI)：321[M+H]⁺ 。步驟 5: (S)-N-(1-(6- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N- 甲基 -5-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼雜環戊烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 胺室溫下將(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6-(甲基胺基)吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺(0.5 g, 1.5 mmol)、聯硼酸頻那醇酯(1.18 g, 4.67 mmol)、Pd(dppf)ClCH₂ Cl₂ (122 mg, 0.15 mmol)、KOAc(460 mg, 4.67 mmol)溶解到Dioxane(15 mL)中，90℃反應12h。真空減壓濃縮移除溶劑，NaHCO₃ 稀釋，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到(S)-N-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺770 mg，收率：100 %。MS m/z(ESI)：288[M+H]⁺ 。步驟 6: (S) -6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-((1-(6- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈室溫下將4-溴-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(140 mg, 0.45 mmol)、(S)-N-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺 (334 mg, 0.9 mmol)、Pd(PPh₃ )₄ (40 mg, 0.045 mmol)、Na₂ CO₃ (143 mg, 1.35 mmol)溶解在1,4-dioxane:水=5:1(12 mL)中，氮氣保護，100℃攪拌反應12h。冷卻到室溫，加水淬滅、經萃取、水洗、乾燥，柱層析(S)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 43 ）66 mg，收率：31%，白色固體MS m/z(ESI)：473[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.65 (d, 1 H), 8.57 (s, 1H), 8.35 (d, 1 H), 8.10 (d, 1 H), 7.75-7.80 (m, 1 H), 7.59-7.63 (m, 2 H), 7.30 (d, 1 H), 6.72-6.79 (dd, 2H), 3.80 (s, 2 H), 3.81 (s, 3 H), 2.75 (s, 3 H), 1.52 (d, 3 H), 1.21 (s, 6 H)。

實施例 44 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑基 ) 吡啶 -3- 基 ) 丙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 第三丁基 (S)-(1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 丙基 )( 甲基 ) 胺基甲酸酯 室溫下將第三丁基(S)-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)胺基甲酸酯(470 mg, 1.46 mmol)溶解到THF(20 mL)當中，氮氣保護，0℃加入鈉氫(117 mg,3.0 mmol)，保溫反應0.5h。加入MeI(248 mg,1.75 mmol)，室溫反應5h。加水稀釋，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析得到第三丁基(S)-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)(甲基)胺基甲酸酯400mg，收率：81%。MS m/z(ESI)：335[M+H]⁺ 。步驟 2: (S)-1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 )-N- 甲基丙烷 -1- 胺室溫下將第三丁基(S)-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)(甲基)胺基甲酸酯(400 mg, 1.19 mmol)溶解到MeOH (2 mL)，然後加入HCl/Dioxane(10 mL,4M)，室溫反應1h，真空減壓濃縮移除溶劑。NaHCO₃ 稀釋，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基丙烷-1-胺276 mg，收率：100%。MS m/z(ESI)：225[M+H]⁺ 。步驟 3: (S)-5- 溴 -N-(1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑基 ) 吡啶 -3- 基 ) 丙基 )-N- 甲基吡啶 -2- 胺室溫下將(S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-N-甲基乙烷-1-胺(480 mg，1.18 mmol)、5-溴-2-氟吡啶(1.25 g, 7.1 mmol)、K₂ CO₃ (987 mg, 7.1 mmol)溶解到10 mL DMSO中，140℃反應24h。冷卻到室溫，經加水稀釋、萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析得到得到(S)-5-溴-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑基)吡啶-3-基)丙基)-N-甲基吡啶-2-胺160 mg，收率19%。MS m/z(ESI)：390[M+H]⁺ 。步驟 4: (S)-N-(1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 丙基 )-N- 甲基 -5-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼雜環戊烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 胺室溫下，將(S) -5-溴-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑基)吡啶-3-基)丙基)-N-甲基吡啶-2-胺(160 mg, 0.4 mmol)、聯硼酸頻那醇酯(313 mg, 1.23mmol)、Pd(dppf)ClCH₂ Cl₂ (32 mg, 0.04 mmol)、KOAc(121 mg, 1.23 mmol)溶解到Dioxane(10 mL)，90℃反應12h。真空減壓濃縮移除溶劑，NaHCO₃ 稀釋，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺160 mg，收率：89%。MS m/z(ESI)：456 [M+H]⁺ 。步驟 5: (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑基 ) 吡啶 -3- 基 ) 丙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈室溫氮氣保護下將4-溴-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(96 mg, 0.3 mmol)、(S) -N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(160 mg, 0.35 mmol)、Pd(PPh₃ )₄ (34 mg, 0.03 mmol)、Na₂ CO₃ (95 mg, 0.9 mmol)溶解在1,4-dioxane:水=5:1(12 mL)中，90℃攪拌反應12h。冷卻到室溫，加水淬滅、經萃取、水洗、乾燥、柱層析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑基)吡啶-3-基)丙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 44 ）31 mg，收率：18%；白色固體，MS m/z(ESI)：541[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.75 (s, 1 H), 8.64 (s,1 H), 8.56 (s,1 H),8.37 (d, 1 H),7.60-7.94 (m, 3 H), 7.58-7.62 (m, 2 H), 7.30 (s, 1 H), 6.81 (d, 1 H), 6.28 (d, 1H), 4.70 (s, 1 H), 3.87 (s, 2 H), 2.83(s, 3 H), 1.61 (s, 2 H), 1.40 (s, 3 H), 1.22 (s, 6 H)。

實施例 45 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氯 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 1-(6-(4- 氯 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙烷 -1- 酮室溫下將2-氯-5-乙醯基吡啶(4.0 g, 29.26 mmol)、4-氟-1H-吡唑(2.0 g, 19.50 mmol)，K₂ CO₃ (8.1 g, 58.5 mmol)溶解到DMF(20 mL)當中，110℃攪拌過夜。冷卻到室溫，加水(50 mL)稀釋，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙烷-1-酮4.0 g，收率：93%。MS m/z(ESI)：222 [M+H]⁺ 。步驟 2: N-((S)-1-(6-(4- 氯 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞硫醯胺 室溫下向反應瓶中加入(R)-2-甲基丙烷-2-磺醯亞胺(1.8 g, 14.89 mmol)和1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙烷-1-酮 (2.2 g, 9.9 mmol)、THF (50 mL)，然後加入鈦酸四乙酯(4.5,g, 19.8 mmol)，75℃反應16小時。將反應液冷卻至-78℃，緩慢滴加L-selectride (20 mL,19.8 mmol)，滴加完畢，-78℃反應3h。加水(50 mL)，EA (200mL)充分攪拌後過濾、萃取、無水硫酸鈉乾燥、過濾，濃縮得粗品，柱層析純化得N-((S)-1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞硫醯胺3.0 g，收率：93%。MS m/z(ESI)：298 [M+H]⁺ 。步驟 3 ： (S) -1-(6-(4- 氯 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙烷 -1- 胺室溫下將N-((S)-1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞硫醯胺(4.0 g, 12.26 mmol)溶解到DCM (20 mL)當中，然後加入HCl/Dioxane (50 mL, 4M)，室溫反應1h。真空減壓濃縮移除溶劑，NaHCO₃ 鹼化，萃取、乾燥、過濾、濃縮得到(S)-1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙烷-1-胺 2.28 g，收率：89%。MS m/z(ESI)：223 [M+H]⁺ 。步驟 4: 第三丁基 (S)-(1-(6-(4- 氯 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 胺基甲酸酯 室溫下將(S)-1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙烷-1-胺(2.28 g, 10.2 mmol)、三乙胺(3.7 g, 36 mmol)溶解到DCM(20 mL)當中，然後加入二碳酸二第三丁酯(3.0 g, 13.5 mmol)，室溫攪拌5h。經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到第三丁基(S)-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸酯5 g，收率：45%。MS m/z(ESI)：266[M-56]⁺ 。步驟 5: 第三丁基 (S)-(1-(6-(4- 氯 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基甲酸酯 室溫下將第三丁基(S)-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸酯(1.5 g, 4.6 mmol)溶解到THF (20 mL)中，0 ℃加鈉氫(276 mg, 6.9 mmol)，保溫反應0.5h。向體系中加入MeI(0.85 g, 6.0 mmol)，0℃反應1h，水(50 mL)淬滅，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到第三丁基(S)-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基甲酸酯1.2 g，收率77%。MS m/z(ESI)：337 [M+H]⁺ 。步驟 6: (S) -1-(6-(4- 氯 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 )-N- 甲基乙烷 -1- 胺室溫下將第三丁基(S)-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基甲酸酯(1.2 g, 3.57 mmol)溶解到DCM(5 mL)中，然後加入HCl/Dioxane(20 mL, 4M)，室溫反應1h。真空減壓濃縮移除溶劑，NaHCO₃ 稀釋，萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析得到(S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-N-甲基乙烷-1-胺560 mg，收率：66%。MS m/z(ESI)：237[M+H]⁺ 。步驟 7: (S) -5- 溴 -N-(1-(6-(4- 氯 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N- 甲基吡啶 -2- 胺室溫下將((S)-1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基乙烷-1-胺(560 mg, 2.36 mmol)、5-溴-2-氟吡啶 (2.5 g, 14 mmol)、K₂ CO₃ (1.6 g, 11.8 mmol)溶解到DMSO(10 mL)中，140℃反應24h。冷卻到室溫，加水稀釋、萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得(S) -5-溴-N-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺300 mg，收率：32 %。MS m/z(ESI)：392[M+H]⁺ 。步驟 8: (S)-N-(1-(6-(4- 氯 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N- 甲基 -5-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼雜環戊烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 胺室溫下將(S) -5-溴-N-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺(200 mg, 0.51 mmol)、聯硼酸頻那醇酯(390 mg, 1.53 mmol)、Pd(dppf)ClCH₂ Cl₂ (41 mg, 0.051 mmol)、KOAc(150 mg, 1.53 mmol)溶解到Dioxane(10 mL)中，0℃反應12h。真空減壓濃縮移除溶劑，NaHCO₃ 稀釋，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到 (S) -N-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺 210 mg，收率：95%。MS m/z(ESI)：358[M+H]⁺ 。步驟 9: (S) 4-(6-((1-(6-(4- 氯 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈室溫氮氣保護下將4-溴-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(170 mg, 0.55 mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(268 mg,0.61 mmol)、Pd(PPh₃ )₄ (63 mg, 0.055 mmol)、Na₂ CO₃ (175 mg, 1.65 mmol)溶解在1,4-dioxane:水=5:1(12 mL)中，85℃攪拌反應12h。冷卻到室溫，加水淬滅、經萃取、水洗、乾燥，柱層析，得到(S) 4-(6-((1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 45 ）40 mg，收率20% 。MS m/z(ESI)：543 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.76 (s, 1H), 8.65 (s,1H), 8.57 (s,1H),8.38 (d, 1H),7.60-7.94 (m, 3H), 7.59-7.62 (m, 2H), 7.31 (s, 1H), 6.81 (d, 1H), 6.28 (d, 1H), 4.70 (s, 1H), 3.87 (s, 2H), 2.83(s, 3H), 1.61 (s, 3H), 1.22 (s, 6H)。

實施例 46 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-((1- 羥基環丙基 ) 甲氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 合成 2-(( 四氫 -2H- 吡喃 -2- 基 ) 氧基 ) 乙酸甲酯 室溫下將3,4-二氫-2H-吡喃 (6.0 g, 72 mmol)、2 -羥基乙酸乙酯 (5.0 g, 48 mmol)和PPTs(1.2 g, 4.8 mmol)溶解到DCM(30 mL)當中，室溫攪拌過夜。反應完全，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析得到2-(四氫-2H吡喃-2-基)氧基)乙酸乙酯6.0 g，收率：66%。步驟 2: 合成 1-(( 四氫 -2H- 吡喃 -2- 基 ) 氧基 ) 甲基 ) 環丙烷 -1- 醇室溫下將2-(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)乙酸甲酯(1.0 g, 5.32 mmol)與Ti(Oi-Pr)₄ (301 mg, 1.06 mmol)溶解到無水乙醚(30 mL)中，0℃下滴加乙基溴化鎂(6.6 mL, 2M)，0℃攪拌反應1小時。加20 mL水淬滅，乙酸乙酯(30 mL x3)萃取，有機層合併，Na₂ SO₄ 乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到1-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)環丙烷-1-醇870 mg，收率：95%。步驟 3: 合成 1-(( 四氫 -2H- 吡喃 -2- 基 ) 氧基 ) 甲基 ) 環丙基苯甲酸酯 室溫下將1-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)環丙烷-1-醇(1.23 g, 2.9 mmol)、三乙胺(880 mg, 8.72 mmol)溶解在在無水DCM(10 mL)中，0℃滴加入苯甲醯氯(490 mg, 3.48 mmol)，室溫攪拌過夜。加20 mL水淬滅，DCM(30 mL x 3)萃取。合併有機層，Na₂ SO₄ 乾燥、過濾、濃縮、柱層析得1-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)環丙基苯甲酸酯1.3g，收率：65%。步驟 4: 合成 1-( 羥甲基 ) 環丙基苯甲酸酯 室溫下將1-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)環丙基苯甲酸酯(600 mg, 2.17 mmol)和PPTs(817 mg, 3.2 mmol)溶解在10mL甲醇中，室溫攪拌2小時。經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，獲得1-(羥甲基)環丙基苯甲酸酯230 mg，收率：55%。MS m/z(ESI)：193 [M+H]⁺ 。步驟 5: 合成 1-(( 對甲苯氧基 ) 甲基 ) 環丙基苯甲酸酯 室溫下將1-(羥甲基)環丙基苯甲酸酯(230 mg, 1.2 mmol)與三乙胺(363 mg, 3.6 mmol)溶解在無水THF(10 mL)中，0℃下滴加對甲苯磺醯氯(253 mg, 1.33 mmol) ，室溫攪拌過夜。加10 mL水淬滅，EA(20 mL x 3)萃取，合併有機層，Na₂ SO₄ 乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得1-((對甲苯氧基)甲基)環丙基苯甲酸酯110 mg，收率：27%。MS m/z(ESI)：369 [M+Na]⁺ 。步驟 6: 合成 1-((4- 溴 -3- 氰基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -6- 基 ) 氧基 ) 甲基 ) 環丙基苯甲酸酯 室溫下將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(60 mg, 0.21 mmol)、1-((對甲苯氧基)甲基)環丙基苯甲酸酯(110 mg, 0.31 mmol)、碳酸鉀(86 mg, 0.63 mmol)溶解在2 mL無水DMF中，80℃攪拌反應3h。冷卻到室溫，加10 mL水淬滅反應，EA(20 mL x 3)萃取，合併有機層，Na₂ SO₄ 乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得1-((4-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)環丙基苯甲酸酯56 mg，收率：70%。MS m/z(ESI)：412 [M+H]⁺ 。步驟 7: 合成 4- 溴 -6-((1- 羥基環丙基 ) 甲氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈室溫下將1-((4-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)環丙基苯甲酸酯(120 mg, 0.29 mmol)溶解到7 mL甲醇：水=2:1的混合溶液中，然後加入氫氧化鈉(23 mg, 0.58 mmol)，室溫反應2h。加10 mL水淬滅反應，DCM(20 mL x 3)萃取，有機層合併，Na₂ SO₄ 乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得4-溴-6-((1-羥基環丙基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈35mg，收率：38%。MS m/z(ESI)：308 [M+H]⁺ 。步驟 8: (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-((1- 羥基環丙基 ) 甲氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈室溫氮氣保護下，將4-溴-6-((1-羥基環丙基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈 (35 mg, 0.114 mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(63 mg, 0.148 mmol)、Pd(PPh₃ )₄ (15 mg, 0.0114 mmol)溶解在1,4-dioxane:水=5:1的混合溶液(6 mL)中，然後加入碳酸鉀(50 mg, 0.342 mmol)，90℃攪拌過夜。冷卻到室溫，加水淬滅，分出有機相、水洗、乾燥、柱層析，得(DCM:EA=10:1)得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-((1-羥基環丙基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 46 ）8 mg。MS m/z(ESI)：525[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.75 (s, 1H), 8.64 (s,1 H), 8.56 (s,1 H),8.37 (d, 1 H),7.60-7.94 (m, 3 H), 7.59-7.62 (m, 2 H), 7.31 (s, 1 H), 6.81 (d, 1 H), 6.28 (d, 1 H), 4.70 (s, 1 H), 3.87 (s, 2 H), 2.83(s, 3 H), 1.60 (s, 3 H), 1.22 (m, 4H)。

實施例 47 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -( 哌啶 -1- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 4-((4- 甲氧基苄基 ) 氧基 )-6-( 哌啶 -1- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.0 g, 2.79 mmol)溶解在DCM(5 mL)中，加入哌啶(0.96 g, 11.17 mmol)、磷酸鉀(1.93 g, 8.37 mmol)、碘化亞銅(0.96 g, 11.17 mmol)，加熱至90℃反應5h，待原料全部消耗完將體系倒入冰水中。EA萃取，合併有機相，乾燥旋乾，柱層析，得到4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈0.15 g，MS m/z(ESI)：363.4 [M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 4- 羥基 -6-( 哌啶 -1- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg, 0.41 mmol)溶解在二氯甲烷(5 mL)中，然後加入三氟乙酸(5 mL)，在室溫下攪拌30min。反應完全後，將體系旋乾得到粗產品4-羥基-6-(哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈0.1 g，MS m/z(ESI)：243.3[M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 3- 氰基 -6-( 哌啶 -1- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -4- 基三氟甲磺酸酯 將4-羥基-6-(哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈 (100 mg, 0.41 mmol)溶解在二氯甲烷(5 mL)中，加入1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺醯基)甲磺醯胺(177 mg, 0.50 mmol)和DIEA(267mg, 2.06 mmol) ，室溫下攪拌30min。反應完全後體系用水洗滌，二氯甲烷萃取，合併有機相，乾燥旋乾，柱層析得到3-氰基-6-(哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯0.105 g，MS m/z(ESI)：375.3[M+H]⁺ 。步驟 4 ：合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -( 哌啶 -1- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將3-氰基-6-(哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(0.15 g, 0.4 mmol)溶解在4 mL二氧六環：水=3：1的混合溶液中，然後再加入(S)-N-(1-(6-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基 -1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(0.20 g, 0.48 mmol)、Pd₂ (dba)₃ (0.036 g, 0.04 mmol)、X-Phos (0.038 g, 0.08 mmol)、碳酸鈉(0.212 g, 2.0 mmol)，該反應液加熱至80℃反應過夜。反應完全後將反應液用水洗滌，EA萃取，合併有機相，乾燥旋乾，矽膠柱層析後得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 47 ）0.05 g，MS m/z(ESI)：522.6[M+H]⁺ 。¹ H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.65 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.36 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.86 (d,J =8.5 Hz, 1H), 7.79 (dd,J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 7.46 (d,J =1.8 Hz, 1H), 6.80 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 3.15 (m, 4H), 1.97 (s, 1H), 1.62 (m, 3H), 1.60 (d,J = 7.0 Hz, 3H), 1.53 (d,J = 4.3 Hz, 2H), 1.21 (m, 4H)。

實施例 48 ： ((S)-6-(4,4- 二氟哌啶 -1- 基 )-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 6-(4,4- 二氟哌啶 -1- 基 )-4-((4- 甲氧基苄基 ) 氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.0 g, 2.79 mmol)溶解在DMSO(10 mL)中，加入4,4-二氟哌啶(1.35 g, 11.2 mmol)、磷酸鉀(1.93 g, 8.37 mmol)、碘化亞銅(0.53 g, 2.79 mmol)、L-脯氨酸(0.32 g, 2.79 mmol)加熱至90℃反應5h，待原料全部消耗完將體系倒入冰水中。EA萃取，合併有機相，乾燥旋乾，柱層析得到6-(4,4-二氟哌啶-1-基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈0.14 g，MS m/z(ESI)：399.4 [M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 6-(4,4- 二氟哌啶 -1- 基 )-4- 羥基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將6-(4,4-二氟哌啶-1-基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200 mg, 0.50 mmol)溶解在二氯甲烷(5 mL)中，然後加入三氟乙酸(5 mL)，在室溫下攪拌30min。反應完全後，將體系旋乾得到粗產品6-(4,4-二氟哌啶-1-基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈0.14 g。MS m/z(ESI)：279.3 [M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 3- 氰基 -6-(4,4- 二氟哌啶 -1- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -4- 基三氟甲磺酸酯 將6-(4,4-二氟哌啶-1-基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(139 mg, 0.50 mmol)溶解在二氯甲烷(5 mL)中，加入1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺醯基)甲磺醯胺(214 mg, 0.60 mmol)和DIEA(323mg, 2.50 mmol)。室溫下攪拌30min，反應完全後體系用水洗滌，二氯甲烷萃取，合併有機相，乾燥旋乾，柱層析，得到3-氰基-6-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯0.165 g，MS m/z(ESI)：411.3 [M+H]⁺ 。步驟 4 ：合成 ((S)-6-(4,4- 二氟哌啶 -1- 基 )-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將3-氰基-6-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(165mg, 0.4 mmol)溶解在4 mL 1,4-二氧六環/水=3：1的混合溶劑中，然後再加入(S)-N-(1-(6-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基 -1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(204 mg, 0.48 mmol)、Pd₂ (dba)₃ (23 mg, 0.04 mmol)、X-Phos (38 mg, 0.08 mmol)、碳酸鈉(213 mg, 2.0 mmol)，該反應液加熱至80℃反應過夜。反應完全後將反應液用水洗滌，EA萃取，合併有機相，乾燥旋乾，矽膠柱層析後得到((S)-6-(4,4-二氟哌啶-1-基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 48 ）30 mg，MS m/z(ESI)：558.6[M+H]⁺ 。¹ H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.65 (d,J = 4.6 Hz, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.42 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.37 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 7.91 (d,J = 3.6 Hz, 1H), 7.90 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 7.86 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.80 (dd,J = 8.8, 2.5 Hz 1H), 7.54 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 6.81(d,J = 8.9 Hz, 1H), 2.87 (s, 3H), 2.07 (m, 4H), 1.60 (d,J = 7.0 Hz, 3H), 1.21 (m, 4H)。

實施例 49 ： (S)-6-(( 環丙基甲基 ) 胺基 )-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 6-(( 環丙基甲基 ) 胺基 )-4-((4- 甲氧基苄基 ) 氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈氮氣保護下將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.07 g, 3 mmol)、環丙基甲基胺(640 mg, 9 mmol)、碘化亞銅(57 mg, 0.3 mmol)、磷酸鉀(1.27 g, 6mmol)及L-脯氨酸(69 mg, 0.6 mmol)分散於10 mL二甲基亞碸中，120℃下攪拌反應4h。反應完成後加入水(50 mL)，用EA(50 mL×3)萃取，合併有機相并用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析得到6-((環丙基甲基)胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈420 mg。MS m/z(ESI)：349.3 [M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 6-(( 環丙基甲基 ) 胺基 )-4- 羥基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將6-((環丙基甲基)胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(420 mg, 1.2 mmol)溶解在二氯甲烷(10 mL)中，冰水浴下加入三氟乙酸(3 mL)，室溫下反應30min，反應完成後，旋乾反應液直接進行下一步。步驟 3 ：合成 3- 氰基 -6-(( 環丙基甲基 ) 胺基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -4- 基三氟甲磺酸酯 將6-((環丙基甲基)胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(420 mg, 1.2 mmol)溶解在二氯甲烷(10 mL)中，冰水浴下加入DIPEA(311 mg, 2.4mmol)及N-苯基雙(三氟甲磺醯)亞胺(515 mg, 1.44 mmol)，室溫下反應1h。反應完成後，向反應混合物中加入30mL水，萃取分離有機相，水層進一步用DCM(30mL×2)萃取。合併有機相，用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥後濃縮，柱層析，得到3-氰基-6-((環丙基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸鹽310 mg。MS m/z(ESI)：361.2 [M+H]⁺ 。步驟 4 ：合成 (S)-6-(( 環丙基甲基 ) 胺基 )-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈氮氣保護下將三(二亞苄基丙酮)二鈀(38.5 mg, 0.1mol)、2-二環己基磷-2,4,6-三異丙基聯苯(40.1 mg, 0.2mol)、3-氰基-6-((環丙基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸鹽(150 mg, 1.0 mmol)、(S)-N-(1-(6-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(211.7 mg, 1.2 mmol)及碳酸鈉(38.5 mg, 5mmol分散於二氧六環:水=6:1的混合溶劑中，90℃反應過夜。反應完成後加入50 mL水，用EA(50 mL×3)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析，得到(S)-6-((環丙基甲基)胺基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑並[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 49 ）35 mg。MS m/z(ESI)：508.5[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.66 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 8.40 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.31 (d,J = 2.5 Hz, 1H), 7.95-7.89 (m, 3H), 7.86 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.74 (dd,J = 8.8, 2.6 Hz, 1H), 7.12 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 6.81 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 6.28 (q,J = 7.0 Hz, 1H), 6.02 (t,J = 5.4 Hz, 1H), 2.92 (t,J = 6.0 Hz, 2H), 2.81 (s, 3H), 1.60 (d,J = 7.0 Hz, 3H), 1.06 (s, 1H), 0.55-0.46 (m, 2H), 0.29-0.20 (m, 2H)。

實施例 50 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-( 異丙胺基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 6-( 異丙基胺基 )-4-((4- 甲氧基苄基 ) 氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈在室溫下將6-溴-4-(4-甲氧基苄氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(400 mg, 1.12 mmol)溶於DMSO(5 mL)中，然後依次加入異丙胺(460 μL, 5.6 mmol)、CuI(23 mg, 0.112 mmol)、L-proline(26 mg, 0.224 mmol)、K₃ PO₄ (480 mg, 2.24 mmol)，反應瓶用氮氣置換3次後，將反應在氮氣保護條件下升溫到115℃攪拌6 h。TLC監測反應結束，將反應液到于20 mL水中，用乙酸乙酯(20 mL*3)萃取，合併有機相。有機相用飽和食鹽水(10 mL*2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，抽濾、旋蒸得粗品。粗品經快速層析柱系統純化，純化後得到4-(4-甲氧基苄氧基)-6-(異丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(220 mg) 。MS: m/z= 337.1[M+1]⁺ 。步驟 2 ：合成 4- 羥基 -6-( 異丙基胺基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈在室溫下，將化合物4-(4-甲氧基苄氧基)-6-(異丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(220 mg, 0.651 mmol)溶於二氯甲烷(8 mL)，滴加TFA(2 mL)。反應液室溫下攪拌0.5 h，TLC(石油醚/乙酸乙酯= 1/1)和LCMS監測反應結束。將反應液濃縮，油泵拉乾得粗品4-羥基-6-(異丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈，直接用於下一步反應。MS: m/z = 217.0[M+1]⁺ 。步驟 3 ：合成 3- 氰基 -6-( 異丙基胺基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -4- 基三氟甲磺酸酯 在室溫下將上步所得粗品4-羥基-6-(異丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈溶於DMF(3 mL)，向反應液中加入DIPEA(314 μL)和化合物1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺醯)甲磺醯胺(408 mg, 1.14 mmol)。反應液在室溫下攪拌1 h，TLC監測反應結束。將反應倒入10 mL水中，用乙酸乙酯(20 mL *2)萃取，合併有機相。有機相用飽和食鹽水(10 mL*2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，抽濾、旋蒸得粗品。粗品經快速層析柱系統純化後，得到3-氰基-6-異丙胺基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲基磺酸酯280 mg，LCMS: m/z = 348.9[M+1]⁺ 。步驟 4 ：合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -( 異丙胺基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈在室溫下將3-氰基-6-異丙胺基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲基磺酸酯(280 mg, 0.603 mmol)溶於1,4-二氧六環(6 mL)和水(2 mL)的混合液中，室溫下依次加入化合物(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊環-2-基)吡啶-2-胺(443 mg, 1.05 mmol)、Pd₂ (dba)₃ (160 mg, 0.17 mmol)、X-Phos(333 mg, 0.70 mmol)、Na₂ CO₃ (185 mg, 1.74 mmol)。反應瓶用氮氣置換3次後，將反應在氮氣保護條件下升溫到85℃攪拌12 h。TLC監測反應結束，將反應液到于10 mL水中，乙酸乙酯(20 mL*3)萃取，合併有機相。有機相用飽和食鹽水(10 mL*2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，抽濾、旋蒸得粗品。粗品經快速層析柱系統純化後得到(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺)-吡啶-3-基)-6-異丙胺基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 50 ）50 mg，MS: m/z = 496.2[M+1]⁺ 。¹ HNMR(400MHz， DMSO-d₆ )δ：8.81 (d,J = 16.0 Hz, 1H), 8.51-8.32 (m, 3H), 7.93-7.81 (m, 4H), 7.77-7.74 (m, 1H), 6.83 (d,J = 8.00 Hz, 1H), 6.51-6.36 (m, 1H), 3.50 (s, 1H), 3.2 (s, 1H),2.82 (s, 3H), 1.86-1.58 (m, 3H), 0.97 (t,J = 8.00Hz, 6H)。

實施例 51 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -( 乙胺基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 6-( 乙胺基 )-4-((4- 甲氧基苄基 ) 氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈室溫氮氣保護下，將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.0 g, 2.8 mmol)、碘化亞銅(53 mg, 0.28 mmol)、L-脯氨酸(48 mg, 0.42 mmol)、碳酸鉀(3.8 g, 28 mmol)溶解到15 mL無水DMSO當中，加入乙胺鹽酸鹽(2.28 g, 28 mmol)。100℃反應過夜，反應完全，冷卻到室溫，EA(50 mL)和水(20 mL)稀釋，攪拌過濾，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析(PE:EA=3:1)，得到6-(乙胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈(470 mg)。MS m/z(ESI)：323.1 [M+H]⁺ 。步驟 2 ： 6-( 乙胺基 )-4- 羥基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈室溫下將6-(乙胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈(2.28 g, 7 mmol)溶解到DCM 10 mL當中，0℃加入三氟乙酸10 mL，反應0.5h。反應完全，室溫濃縮抽乾，不需要進一步純化，產物直接用於下一步。MS m/z(ESI)：203.1 [M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 3- 氰基 -6-( 乙胺基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -4- 基三氟甲磺酸酯 室溫下將6-(乙胺基)-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.43 g,7 mmol)、DIEA(2.7 g, 21 mmol)溶解到DMF(10 mL)中，0℃加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺 (2.5 g, 7 mmol)，室溫攪拌反應0.5h。反應完全，加入水(10 mL)，EA(20 mL*2)萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析 (PE:EA=3:1)，得到3-氰基-6-(乙胺基)吡唑[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(1.74 g)，MS m/z(ESI)：335.1 [M+H]⁺ 。步驟 4 ：合成 (S)-6-( 乙胺基 )-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 - 3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈在室溫下將3-氰基-6-(乙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(300 mg, 0.89 mmol)溶於1,4-二氧六環(9 mL)和水(3 mL)的混合液中，依次加入(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊環-2-基)吡啶-2-胺(379 mg, 0.89 mmol)、Pd₂ (dba)₃ (91 mg, 0.1 mmol)、 X-Phos(127 mg, 0.26 mmol)、Na₂ CO₃ (185 mg, 1.78 mmol)。反應瓶用氮氣置換3次後，將反應在氮氣保護條件下升溫到85℃攪拌12 h。TLC監測反應結束，將反應液倒于水(10 mL)中，乙酸乙酯(20 mL*3)萃取，合併有機相。有機相用飽和食鹽水(10 mL*2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，抽濾、旋蒸得粗品。粗品經快速層析柱系統純化後得到(S)-6-(乙胺基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 51 ）80 mg，MS: m/z = 482.2[M+1]⁺ ，¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.64 (dd,J = 4.6, 0.8 Hz, 1H), 8.40-8.34 (m, 2H), 8.32-8.26 (m, 1H), 7.88 (ddd,J = 20.0, 11.9, 5.0 Hz, 4H), 7.72 (dd,J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 7.02 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 6.79 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 6.25 (q,J = 6.9 Hz, 1H), 5.88 (s, 1H), 3.03 (dd,J = 6.8, 4.3 Hz, 2H), 2.79 (s, 3H), 1.58 (d,J = 7.0 Hz, 3H), 1.08 (d,J = 9.0 Hz, 3H)。

實施例 52 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -( 甲胺基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 4-((4- 甲氧基苄基 ) 氧基 )-6-( 甲胺基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈室溫氮氣保護下將6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(500 mg, 1.4 mmol)、碘化亞銅(40 mg, 0.21 mmol)、L-脯氨酸(32 mg, 0.28 mmol)、碳酸鉀(1.9 g, 14 mmol)溶解到無水DMSO(15 mL)中，加入甲胺鹽酸鹽(940 mg, 14 mmol)。100℃反應10小時，反應完全，冷卻到室溫，EA(50 mL*2)萃取，加水(50 mL)稀釋，攪拌過濾，經分液，萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析(PE:EA=3:1)，得到4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150 mg)。MS m/z(ESI)：309.1 [M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 4- 羥基 -6-( 甲胺基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈室溫下，將4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg, 0.48 mmol)溶解到DCM (3 mL)中，0℃加入三氟乙酸(1mL)，反應0.5h。反應完全，室溫濃縮抽乾，不需要進一步純化，產物直接用於下一步。MS m/z(ESI)：189.1 [M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 3- 氰基 -6-( 甲胺基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -4- 基三氟甲磺酸酯 將4-羥基-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150 mg, 0.8 mmol)、DIEA(307 mg, 2.4 mmol)溶解到DMF 5mL中，0℃加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺 (286 mg, 0.8 mmol)，室溫攪拌反應0.5h。反應完全，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析(PE:EA=3:1)，得到3-氰基-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(180 mg)。MS m/z(ESI)：321.3 [M+H]⁺ 。步驟 4 ：合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -( 甲胺基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈在室溫下，將3-氰基-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(300 mg, 0.93 mmol)溶於1,4-二氧六環(9 mL)和水(3 mL)的混合液中，室溫下依次加入化合物(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊環-2-基)吡啶-2-胺(385 mg, 0.93 mmol)、Pd₂ (dba)₃ (91 mg, 0.1 mmol)、X-Phos(127 mg, 0.26 mmol)、Na₂ CO₃ (190 mg, 1.86 mmol)。反應瓶用氮氣置換3次後，將反應在氮氣保護條件下升溫到85℃攪拌12 h。TLC監測反應結束，將反應液倒于水(10 mL)中，乙酸乙酯(20 mL*3)萃取，合併有機相。有機相用飽和食鹽水(10 mL*2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，抽濾、旋蒸得粗品。粗品經快速層析柱系統純化後得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 52 ）60 mg，MS m/z(ESI)：468.3 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.64 (dd, 1H), 8.40-8.34 (m, 2H), 8.32-8.28 (m, 1H), 7.88 (s, 4H), 7.72 (dd,J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 7.02 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 6.79 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 6.25 (q,J = 6.9 Hz, 1H), 5.89 (s, 1H), 2.89 (s, 3H), 1.88 (s, 3H), 1.28 (s, 3H)。

實施例 53 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-( 丙 -2- 炔 -1- 基氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 4- 溴 -6-( 丙 -2- 炔 -1- 基氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg, 0.84 mmol)、3-氯丙炔(189 mg, 2.52 mmol)、碳酸銫(554.4mg, 1.68 mmol)溶解在3 mL DMF中，反應在60℃攪拌過夜。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到4-溴-6-(丙-2-炔-1-基氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈150 mg。MS m/z(ESI)：277.2[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -( 丙 -2- 炔 -1- 基氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈氮氣保護下將4-溴-6-(丙-2-炔-1-基氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150 mg, 0.54 mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊環-2-基)吡啶-2-胺(230 mg, 0.54 mmol)、碳酸鈉(172 mg, 1.62 mmol)、四三苯基膦鈀(63 mg, 0.054 mmol)溶解在6 mL二氧六環和2mL水中，該反應90℃攪拌反應過夜。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30 mL*2) 萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(丙-2-炔-1-基氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 53 ）60 mg 。MS m/z(ESI)：493.2 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.93 (s 1H), 8.71-8.64 (m, 2H), 8.43-8.38 (m, 2H), 7.95-7.86 (m, 3H), 7.83 (s, 1H), 7.47 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.86-6.81 (m, 1H), 5.34 (s, 1H), 4.14 (s, 1H),2.83 (s, 3H), 1.61 (d, J = 7.0 Hz, 3H)。

實施例 54 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -(2- 甲氧基乙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 4- 溴 -6-(2- 甲氧基乙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg, 0.84 mmol)、2-氯乙基甲基醚(239 mg, 2.52 mmol)、碳酸銫(554.4mg, 1.68 mmol)溶解在3 mL DMF中，反應在60℃攪拌過夜。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到4-溴-6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈180 mg，MS m/z(ESI)：297.1[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -(2- 甲氧基乙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈氮氣保護下將4-溴-6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(180 mg, 0.61mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊環-2-基)吡啶-2-胺(256 mg, 0.61 mmol)、碳酸鈉(129 mg, 1.22 mmol)、四三苯基膦鈀(70 mg, 0.061 mmol)溶解在6 mL二氧六環和2mL水中，該反應90℃攪拌反應過夜。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30 mL*2) 萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6 -(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 54 ）75 mg。MS m/z(ESI)：513.5 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.66 (dd,J = 11.5, 3.3 Hz, 2H), 8.57 (s, 1H), 8.38 (dd,J = 9.9, 2.3 Hz, 2H), 7.84 (ddd,J = 13.3, 11.3, 3.0 Hz, 4H), 7.31 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 6.81 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 6.28 (d,J = 7.0 Hz, 1H), 4.27-4.17 (m, 2H), 3.69 (dd,J = 5.2, 3.5 Hz, 2H), 3.31 (s, 3H), 2.82 (s, 3H), 1.60 (d,J = 7.0 Hz, 3H)。

實施例 55 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -( 甲氧基甲氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 4- 溴 -6-( 甲氧基甲氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg, 0.84 mmol)、2-氯甲基甲基醚(201 mg, 2.52 mmol)、碳酸銫(554.4mg, 1.68 mmol)溶解在3 mL DMF中，反應在60℃攪拌過夜。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到4-溴-6-(甲氧基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈170 mg，MS m/z(ESI)：283.1[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -( 甲氧基甲氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈氮氣保護下將4-溴-6-(甲氧基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(170 mg, 0.61mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊環-2-基)吡啶-2-胺(256 mg, 0.61 mmol)、碳酸鈉(129 mg, 1.22 mmol)、四三苯基膦鈀(70 mg, 0.061 mmol)溶解在二氧六環(6 mL)和水(2mL)中，該反應90℃攪拌反應過夜。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(甲氧基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 55 ）55 mg 。MS m/z(ESI)：499.4 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.66 (dd,J = 11.5, 3.3 Hz, 2H), 8.57 (s, 1H), 8.38 (dd,J = 9.9, 2.3 Hz, 2H), 7.84 (ddd,J = 13.3, 11.3, 3.0 Hz, 4H), 7.31 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 6.81 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 6.28 (d,J = 7.0 Hz, 1H), 4.27-4.17 (m, 2H), 3.35 (s, 3H), 2.92 (s, 3H), 1.65 (d,J = 7.0 Hz, 3H)。

實施例 56 ： 4-(6-(((6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 - 2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 ((6-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 胺基甲酸第三丁酯 室溫下將(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(1.5 g, 7.8 mmol)、三乙胺(1.58 g, 15.6 mmol)溶解到DCM (20 mL)當中，再加入Boc-酸酐(1.6 g, 7.8 mmol)室溫下攪拌反應4小時。反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(20 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，得到((6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯1.5 g，MS m/z(ESI)：293.4[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成第三丁基 (((6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 )( 甲基 ) 胺基甲酸酯 室溫下將((6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯(1.5 g, 5.1 mmol)，溶解到THF (20 mL)當中。降溫至0℃，再加入慢慢加入NaH(0.25 g，10.2 mmol)，低溫下攪拌反應半小時，加入碘甲烷(0.94 g，6.6 mmol)，加完後低溫反應5小時。反應完全後，低溫下加甲醇淬滅反應，EA(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(PE:DCM=1:1)，得到第三丁基(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)(甲基)胺基甲酸酯1.7 g，MS m/z(ESI)：307.3[M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 )-N- 甲基甲胺 將第三丁基(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)(甲基)胺基甲酸酯(1.7 g，5.5 mmol)溶解於少量二氯甲烷中，然後在低溫下加入4N HCl/二噁烷(6 mL)，室溫下攪拌反應2小時。反應完全後，旋乾反應液，加入石油醚攪拌析出固體，過濾得到1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基甲胺0.9 g，MS m/z(ESI)：207.2[M+H]⁺ 。步驟 4 ：合成 5- 溴 -N-(((6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 )-N- 甲基吡啶 -2- 胺將1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基甲胺(0.9 g, 4.3 mmol)、2-氟-5-溴吡啶(3.8 g, 21.7 mmol)和碳酸銫(4.1 g, 12.9 mmol)加入到單口瓶中，加入DMSO(25 mL)，加熱130℃反應40小時。反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(PE:DCM=1:1)，得到5-溴-N-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-N-甲基吡啶-2-胺0.6 g，MS m/z(ESI)：363.2[M+H]⁺ 。步驟 5 ：合成 N-(((6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 )-N- 甲基 -5-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2 - 二氧硼雜環戊烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 胺室溫下將5-溴-N-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-N-甲基吡啶-2-胺(0.6 g, 1.65 mmol)、聯硼酸頻那醇酯(0.84 g, 3.3 mmol)、Pd(dppf)Cl₂ CH₂ Cl₂ (0.13 g, 0.1 mmol)、KOAc(0.97 g, 9.9 mmol)溶解到二氧六環中(15 mL)，90℃反應6h。真空減壓濃縮移除溶劑，NaHCO₃ 稀釋、萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到N-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺0.45 g，MS m/z(ESI)：410.1[M+H]⁺ 。步驟 6 ：合成 4-(6-(((6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 - 2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈室溫氮氣保護下下將4-溴-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.24 g, 0.77 mmol)、N-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(0.48 g, 1.17 mmol)、Pd(PPh₃ )₄ (0.01 g, 0.076 mmol)、Na₂ CO₃ (0.33 g, 3.05 mmol)溶解在二氧六環(15 mL)和水(5 mL)中，100℃攪拌反應5h。冷卻到室溫，加水淬滅、經萃取、水洗、乾燥，柱層析，得到4-(6-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 56 ）90 mg，MS m/z(ESI)：513.3[M+H]⁺ 。¹ H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.68-8.61 (m, 2H), 8.55 (s, 1H), 8.37 (dd,J = 18.8, 2.0 Hz, 2H), 7.97-7.81 (m, 3H), 7.78 (dd,J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 7.30 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 6.82 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 4.94 (s, 2H), 3.86 (s, 2H), 3.11 (s, 3H), 1.22 (s, 6H)。

實施例 57 ： 4-(6-( 乙基 ((6-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成第三丁基乙基 ((6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 胺基甲酸酯 室溫下將((6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯(2.0 g, 6.8 mmol)，溶解到THF (20 mL)當中，然後降溫至0℃，慢慢加入NaH(0.33 g, 13.6 mmol)，低溫下攪拌反應半小時，然後再加入碘乙烷(1.3 g, 8.8 mmol)，加完後低溫反應5小時，反應完全後，低溫下加甲醇淬滅反應，EA(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(PE:DCM=1:1)得到第三丁基乙基((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸酯1.8 g，MS m/z(ESI)：321.5[M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 N-((6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基乙胺 將第三丁基乙基((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸酯(1.8 g, 5.6 mmol)溶解於少量二氯甲烷中，然後在低溫下加入4N HCl/二噁烷(6 mL)，室溫下攪拌反應2小時，反應完全後，旋乾反應液，加入石油醚攪拌析出固體，過濾得到N-((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基乙胺1.1 g，MS m/z(ESI)：221.2[M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 5- 溴 -N- 乙基 -N-(((6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 胺將N-((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基乙胺(0.9 g, 5.0 mmol)、2-氟-5-溴吡啶(4.4 g, 25.0 mmol)和碳酸銫(4.9 g, 15.0 mmol)加入到單口瓶中，加入DMSO(25 mL)，加熱130℃反應40小時。反應完全後，加水(10 mL)淬滅反應，DCM(30 mL*2)萃取，有機相水洗，乾燥，旋乾，柱層析(PE:DCM=1:1)，得到5-溴-N-乙基-N-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)吡啶-2-胺0.8 g，MS m/z(ESI)：377.2[M+H]⁺ 。步驟 4 ：合成 N- 乙基 -N-(((6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 )-5-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2 - 二氧硼雜環戊烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 胺室溫下將5-溴-N-乙基-N-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)吡啶-2-胺(0.8 g, 2.1 mmol)、聯硼酸頻那醇酯(1.0 g, 4.2 mmol)、Pd(dppf)Cl₂ CH₂ Cl₂ (0.26 g, 0.2 mmol)、KOAc(0.97 g, 9.9 mmol)溶解到二氧六環中(20 mL)，90℃反應6h。真空減壓濃縮移除溶劑，NaHCO₃ 稀釋、萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到N-乙基-N-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺0.5 g，MS m/z(ESI)：424.1[M+H]⁺ 。步驟 5 ：合成 4-(6-( 乙基 ((6-(4-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈室溫氮氣保護下將4-溴-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.3 g, 0.97 mmol)、N-乙基-N-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(0.5 g,1.2 mmol)、Pd(PPh₃ )₄ (0.015 g, 0.1 mmol)、Na₂ CO₃ (0.32 g, 3.0 mmol)溶解在二氧六環(15 mL)和水(5 mL)中，100℃攪拌反應5h。冷卻到室溫，加水淬滅、經萃取、水洗、乾燥，柱層析，得到4-(6-(乙基((6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 57 ）70 mg，MS m/z(ESI)：527.5[M+H]⁺ 。¹ H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.65 (dd,J = 6.8, 1.4 Hz, 2H), 8.56 (s, 1H), 8.40 (d,J = 1.7 Hz, 1H), 8.34 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 7.96-7.86 (m, 2H), 7.85 (s, 1H), 7.76 (dd,J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 7.30 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 6.80 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 4.89 (s, 2H), 3.86 (s, 2H), 3.62 (d,J = 7.0 Hz, 2H), 1.21 (s, 6H), 1.14 (t,J = 7.0 Hz, 3H)。

實施例 58 ： (S)-4-(6-((1-(6-(1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 1-(6-(1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙 -1- 酮室溫下將2-氯-5-乙醯基吡啶 (4.0 g, 25.8 mmol)、吡唑(1.75 g, 25.8 mmol)和K₂ CO₃ (7.1 g, 51.6 mmol)溶解到DMF(40 mL)中，90℃攪拌過夜。冷卻到室溫，加水(50 mL)稀釋，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到得到1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮4.1 g，MS m/z(ESI)：188.2 [M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 (R)-N-((S)-1-(6-(1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 室溫下，反應瓶中加入(R)-2-甲基丙烷-2-磺醯亞胺(1.6 g, 12.7 mmol)和1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮 (2.0 g, 10.6 mmol)、THF (50 mL)，然後滴加鈦酸四乙酯(4.9 g, 21.2 mmol)，75℃反應16小時。將反應液冷卻至-78℃，緩慢滴加L-selectride (21.2 mL，21.2 mmol)，滴加完畢，-78℃反應3h。加水(50 mL)，EA (200mL)充分攪拌後過濾、萃取、無水硫酸鈉乾燥、過濾，濃縮得粗品，柱層析純化得(R)-N-((S)-1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺2.5 g，MS m/z(ESI)：293.3 [M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 (S)-1-(6-(1-(1-H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙 -1- 胺室溫下，將(R)-N-((S)-1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(4.0 g, 13.6 mmol)溶解到DCM (20 mL)中，加入HCl/Dioxane (20 mL，4M)，室溫反應1h。真空減壓濃縮移除溶劑，NaHCO₃ 鹼化，萃取、乾燥、過濾、濃縮得到(S)-1-(6-(1-(1-H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺 2.3 g，MS m/z(ESI)：189.5 [M+H]⁺ 。步驟 4 ：合成 (S)-(1-(1-(6-(1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 胺基甲酸第三丁酯 室溫下將(S)-1-(6-(1-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(2.3 g, 12.2 mmol)、三乙胺(2.5 g, 24.4 mmol)溶解到20 mL DCM中，加入二碳酸二第三丁酯(3.0 g, 13.5 mmol)，室溫攪拌5h。經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到(S)-(1-(1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯4.6 g，MS m/z(ESI)：289.4[M+H]⁺ 。步驟 5 ：合成 (S)-(1-(6-(1-(6-H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基甲酸第三丁酯 室溫下將(S)-(1-(1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(2.0 g, 6.9mmol)溶解到THF (20 mL)中，0℃加鈉氫(0.32 g, 13.8 mmol)，保溫反應0.5h。加入碘甲烷(1.3 g，9.0 mmol)，0℃繼續反應4h。反應完全後加水(20 mL)淬滅，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到(S)-(1-(6-(1-(6H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯1.8 g。步驟 6 ：合成 (S)-1-(6-(1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 )-N- 甲基 -1- 胺室溫下將(S)-(1-(6-(1-(6H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯(1.8 g, 6.0 mmol)溶解到DCM (5 mL)中，然後加入HCl/Dioxane (10 mL, 4M)，室溫反應1h。反應完真空減壓濃縮移除溶劑，NaHCO₃ 稀釋，萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到(S)-1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基-1-胺0.9 g，MS m/z(ESI)：203.6[M+H]⁺ 。步驟 7 ：合成 (S)-N-(1-(6-(6-(1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-5- 溴 -N- 甲基吡啶 -2- 胺室溫下將(S)-1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基-1-胺(0.9 g, 4.5 mmol)、5-溴-2-氟吡啶 (3.9 g, 22.5 mmol)、K₂ CO₃ (1.9 g, 13.5 mmol)溶解到DMSO(10 mL)，140℃反應30h。冷卻到室溫，水稀釋、萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到(S)-N-(1-(6-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-5-溴-N-甲基吡啶-2-胺0.5 g，MS m/z(ESI)：359.3[M+H]⁺ 。步驟 8 ：合成 (S)-N-(1-(6-(6-(1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N- 甲基 -5-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3, 2- 二氧雜硼烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 胺室溫下將(S)-N-(1-(6-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-5-溴-N-甲基吡啶-2-胺(0.5 g, 1.4 mmol)、聯硼酸頻那醇酯(0.7 g, 2.8 mmol)、Pd(dppf)ClCH₂ Cl₂ (90 mg, 0.14 mmol)、KOAc(0.27 g, 2.8 mmol)溶解到二氧六環(15 mL)中，90℃反應12h。真空減壓濃縮移除溶劑，NaHCO₃ 稀釋，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到(S)-N-(1-(6-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺0.3 g，MS m/z(ESI)：406.1[M+H]⁺ 。步驟 9 ：合成 (S)-4-(6-((1-(6-(1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈室溫氮氣保護下將4-溴-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2g, 0.65 mmol)、(S)-N-(1-(6-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(0.27 g, 0.65 mmol)、Pd(PPh₃ )₄ (0.07 g, 0.065 mmol)、Na₂ CO₃ (0.18 g, 1.65 mmol)溶解在二氧六環:水=5:1的混合溶液(12 mL)中，85℃攪拌反應12h。冷卻到室溫，加水淬滅、經萃取、水洗、乾燥，柱層析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 58 ）65 mg，MS m/z(ESI)：509.2 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.78 (s, 1H), 8.65 (s,1H), 8.50 (s,1H),8.18 (d, 1H),7.80-7.90 (m, 3H), 7.50-7.66 (m, 2H), 7.32 (s, 1H), 6.81 (d, 1H), 6.28 (d, 1H), 6.03 (d, 1H), 5.57 (s, 1H), 3.87 (s, 2H), 2.83(s, 3H), 1.61 (s, 3H), 1.23 (s, 6H)。

實施例 59 ： (S)-N-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺 )- 吡啶 -3- 基 )-6-( 吡咯烷 -1- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1. 合成 4-(4- 甲氧基苄氧基 )-6-( 吡咯烷 -1- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈在室溫下將6-溴-4-(4-甲氧基苄氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(800 mg, 2.23 mmol)溶於DMSO(5 mL)中，依次加入四氫吡咯(900 μL, 11.6 mmol)、CuI(43 mg, 0.223 mmol)、L-proline(52 mg, 0.446 mmol)、K₃ PO₄ (958 mg, 4.86 mmol)。反應瓶用氮氣置換3次後，將反應在氮氣保護條件下升溫到115℃攪拌12 h。TLC(石油醚/乙酸乙酯= 5/1，R_f1 = 0.55，R_f2 = 0.25)監測反應結束，將反應液倒于水(100 mL)中，然後乙酸乙酯(80 mL*2)萃取，合併有機相。有機相用飽和食鹽水(50 mL*2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，抽濾、旋蒸得粗品。粗品經快速層析柱系統(石油醚：乙酸乙酯= 20/1 ~ 5/1)純化後得到4-(4-甲氧基苄氧基)-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(155 mg)，收率19.1%。MS: m/z= 349.1[M+1]⁺ 。步驟 2. 合成 4- 羥基 -6-( 吡咯烷 -1- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈在室溫下將4-(4-甲氧基苄氧基)-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(155 mg, 0.445 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)，滴加TFA(0.5 mL)。反應液室溫下攪拌0.5 h，TLC(石油醚/乙酸乙酯= 2/1，R_f1 =0.80，R_f2 =0.1)和LCMS監測。反應結束後將反應液濃縮，油泵拉乾得粗品4-羥基-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈，粗品直接用於下一步反應。MS: m/z = 229.0[M+1]⁺ 。步驟 3. 合成 3- 氰基 -6-( 吡咯烷 -1- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -4- 三氟甲基磺酸酯 在室溫下將上步所得粗品4-羥基-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈溶於DMF(3 mL)，向反應液中加入DIPEA(400 μL)和1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺醯)甲磺醯胺(344 mg, 0.963 mmol)。反應液在室溫下攪拌1 h，TLC(石油醚/乙酸乙酯= 5/1，R_f1 =0.15，R_f2 =0.6)監測反應結束。將反應倒入水(50 mL)中，用乙酸乙酯(30 mL *2)萃取，合併有機相。有機相用飽和食鹽水(30 mL*2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，抽濾、旋蒸得粗品。粗品經快速層析柱系統(石油醚：乙酸乙酯= 20/1 ~ 5/1)純化後得到3-氰基-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲基磺酸酯(95 mg, 0.246 mmol，兩步收率59.3 %)。MS: m/z = 360.9[M+1]⁺ 。步驟 4. 合成 (S)-N-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺 )- 吡啶 -3- 基 )-6-( 吡咯烷 -1- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈在室溫下將3-氰基-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲基磺酸酯(130 mg, 0.361 mmol)溶於1,4-二氧六環(3 mL)和水(0.6 mL)的混合液中，室溫下依次加入(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊環-2-基)吡啶-2-胺(230 mg, 0.541 mmol)、Pd₂ (dba)₃ (66 mg, 0.072 mmol)、X-Phos(138 mg, 0.289mmol)、Na₂ CO₃ (76.5 mg, 0.722 mmol)。反應瓶用氮氣置換3次後，將反應在氮氣保護條件下升溫到85℃攪拌12h。TLC(石油醚/乙酸乙酯= 5/1，R_f1 =0.7，R_f2 =0.45)和LCMS監測反應結束，將反應液倒于水(50 mL)中，乙酸乙酯(30 mL*2)萃取，合併有機相。有機相用飽和食鹽水(30 mL*2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，抽濾、旋蒸得粗品。粗品經快速層析柱系統(石油醚：乙酸乙酯= 20/1 ~ 5/1)，純化後得到(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺)-吡啶-3-基)-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 59 ）8 mg (純度 92.5%)。MS:m/z = 508.1[M+1]⁺ ，¹ HNMR(400MHz, DMSO-d₆ )δ：8.67 (d,J = 4.00 Hz, 1H), 8.43-8.38 (m, 3H), 8.07-8.02 (m, 1H), 7.94-7.87 (m, 3H), 7.83-7.80 (m, 1H), 7.18-7.14 (m, 1H), 6.84 (d,J = 8.00 Hz, 1H), 6.30-6.28 (m, 1H), 2.84 (s, 3H), 2.0-1.96(m, 4H), 1.63 (d,J = 8.00Hz, 3H), 1.33-1.23 (m, 4H)。

實施例 60 ： (S)-N-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺 )- 吡啶 -3- 基 )-6- 丙胺基 - 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1. 合成 4-(4- 甲氧基苄氧基 )-6-( 丙胺基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈在室溫下將6-溴-4-(4-甲氧基苄氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(800 mg, 2.23 mmol)溶於DMSO(5 mL)中，依次加入丙胺(918 μL, 11.2 mmol)、CuI(43 mg, 0.223 mmol)、L-proline(52 mg, 0.446 mmol)、K₃ PO₄ (950 mg, 4.27 mmol)。反應瓶用氮氣置換3次後，將反應在氮氣保護條件下升溫到115℃攪拌12 h。TLC(石油醚/乙酸乙酯= 5/1，R_f1 =0.55，R_f2 =0.3)監測反應結束，將反應液倒于水(100 mL)中，然後乙酸乙酯(50 mL*3)萃取，合併有機相。有機相用飽和食鹽水(50 mL*2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，抽濾、旋蒸得粗品。粗品經快速層析柱系統(石油醚：乙酸乙酯= 20/1 ~ 5/1)純化後得到4-(4-甲氧基苄氧基)-6-(丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(320 mg, 0.951 mmol，收率42.6%)。MS: m/z= 337.0[M+1]⁺ 。步驟 2. 合成 4- 羥基 -6-( 丙胺基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈在室溫下將化合物4-(4-甲氧基苄氧基)-6-(丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(320 mg, 0.951 mmol)溶於二氯甲烷(8 mL)，然後滴加TFA(2 mL)。反應液室溫下攪拌0.5 h，TLC(石油醚/乙酸乙酯=1/1，R_f2 =0.5，R_f3 =0.1)和LCMS監測反應結束。將反應液濃縮，油泵拉乾得粗品4-羥基-6-(丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈，粗品直接用於下一步反應。MS: m/z = 217.0[M+1]⁺ 。步驟 3. 合成 3- 氰基 -6- 丙胺基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -4- 三氟甲基磺酸酯 在室溫下將上步所得粗品4-羥基-6-(丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈溶於DMF(3.00 mL)，向反應液中加入DIPEA(314 μL)和化合物1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺醯)甲磺醯胺(408 mg, 1.14 mmol)。反應液在室溫下攪拌1 h，TLC(石油醚/乙酸乙酯= 5/1，R_f3 =0.1，R_f4 =0.5)監測反應結束。將反應倒入水(100 mL)中，用乙酸乙酯(50 mL*2)萃取，合併有機相。有機相用飽和食鹽水(100 mL*2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，抽濾、旋蒸得粗品。粗品經快速層析柱系統(石油醚：乙酸乙酯= 20/1 ~ 5/1)純化後得到3-氰基-6-丙胺基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲基磺酸酯280 mg(純度75.0%，兩步收率63.3 %)。LCMS: m/z = 348.9[M+1]⁺ 。步驟 4. 合成 (S)-N-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺 )- 吡啶 -3- 基 )-6- 丙胺基 - 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈在室溫下將3-氰基-6-丙胺基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲基磺酸酯(280 mg, 0.603 mmol)溶於1,4-二氧六環(6 mL)和水(2 mL)的混合液中，室溫下依次加入 (S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊環-2-基)吡啶-2-胺(443 mg, 1.05 mmol)、Pd₂ (dba)₃ (160 mg, 0.17 mmol)、X-Phos(333 mg, 0.70 mmol)、Na₂ CO₃ (185 mg, 1.74 mmol)。反應瓶用氮氣置換3次後，將反應在氮氣保護條件下升溫到85℃攪拌12 h。TLC(石油醚/乙酸乙酯=3/1，R_f4 =0.7，R_fT =0.3)和LCMS監測反應結束，將反應液倒于水(100 mL)中，乙酸乙酯(50 mL*3)萃取，合併有機相。有機相用飽和食鹽水(100 mL*2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，抽濾、旋蒸得粗品。粗品經快速層析柱系統(石油醚：乙酸乙酯= 20/1 ~ 2/1)純化後得到(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺)-吡啶-3-基)-6-丙胺基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 60 ）80 mg (收率 26.8%，純度 93.45%)，MS: m/z=496.1[M+1]⁺ 。¹ HNMR(400MHz, DMSO-d₆ )δ：8.71 (d,J = 16.0 Hz, 1H), 8.41-8.32 (m, 3H), 7.93-7.88 (m, 4H), 7.77-7.74 (m, 1H), 6.83 (d,J = 8.00 Hz, 1H), 6.31-6.26 (m, 1H), 3.00 (t,J = 8.00Hz, 2H), 2.82 (s, 3H), 1.86-1.58 (m, 5H), 0.97 (t,J = 8.00Hz, 3H)。

實施例 61 ： (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 (S)-4-(6-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 )-6 -(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈將4-溴-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200 mg, 0.65 mmol)、碳酸鈉(205 mg, 1.93 mmol)、(S) -N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(409 mg, 0.97 mmol)和四(三苯基膦)鈀(115 mg, 0.1 mmol)溶解在二氧六環：水(15 mL:5 mL)中, 該反應液在90℃反應6 h。監測反應完全後，冷卻，加入水淬滅反應，EA(20 mL*3)萃取，經有機相水洗、乾燥濃縮、柱層析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 61 ）50 mg。MS m/z(ESI)：527.3[M+H]⁺ 。¹ H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.70-8.61 (m, 2H), 8.57 (s, 1H), 8.38 (dd,J = 8.0, 2.3 Hz, 2H), 7.84 (ddd,J = 12.8, 11.4, 3.4 Hz, 4H), 7.31 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 6.81 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 6.29 (d,J = 6.9 Hz, 1H), 3.86 (s, 2H), 2.81 (s, 3H), 1.60 (d,J = 7.0 Hz, 3H), 1.21 (s, 6H)。

實施例 62 ： (S)-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-( 甲基 (1-(6-( 吡咯烷基 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1: 合成 1-(6-( 吡咯烷 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙 -1- 酮室溫下，將2-氯-5-乙醯基吡啶(2.0 g, 12.9 mmol)、四氫吡咯(2.7 g , 38.7 mmol)和K₂ CO₃ (3.6 g , 25.8 mmol)溶解到DMF(20 mL)當中，80℃攪拌過夜。反應完全後冷卻到室溫，加水(20 mL)淬滅，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮1.8 g ，MS m/z(ESI)：191.4 [M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 2- 甲基 -N-((S)-1-(6-( 吡咯烷 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺 室溫下，在反應瓶中加入(R)-2-甲基丙烷-2-磺醯亞胺(1.2 g, 9.4 mmol)和1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮(1.8 g, 9.4 mmol) 、THF(20 mL)，加入鈦酸四乙酯(4.3 g, 18.8 mmol)，滴加完畢後升至75℃反應16小時。將反應液冷卻至-78℃，緩慢滴加L-selectride(18.8 mL, 18.8 mmol)，滴加完畢，升至室溫反應15分鐘。然後在-50℃甲醇淬滅，加水(20 mL)，EA(60mL)充分攪拌後過濾、萃取、無水硫酸鈉乾燥、過濾，濃縮得粗品，柱層析純化得2-甲基-N-((S)-1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺2.0 g, MS m/z(ESI)：296.1 [M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 N, 2- 二甲基 -N-((S)-1-(6-( 吡咯烷基 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺 室溫下將2-甲基-N-((S)-1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺(2.0 g, 6.75 mmol)溶解到THF(20 mL)，降溫至-78℃，向體系中慢慢滴加雙三甲基矽基胺基鋰(8.25 mmol)，低溫下攪拌半小時，再緩慢滴加MeI(1.17 g, 8.25 mmol)，-78℃反應1h。加水(30 mL)淬滅反應，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到N ,2-二甲基-N-((S)-1-(6-(吡咯烷基-1-基)吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺1.5 g，MS m/z(ESI)：310.2 [M+H]⁺ 。步驟 4 ：合成 (S)-N- 甲基 -1-(6-( 吡咯烷基 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙 -1- 胺室溫下，將N, 2-二甲基-N-((S)-1-(6-(吡咯烷基-1-基)吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺(1.5 g, 4.8 mmol)溶解到MeOH (2 mL)中，然後加入HCl/Dioxane (6 mL, 4M)，室溫反應1h。真空減壓濃縮移除溶劑，NaHCO₃ 淬滅，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到(S)-N-甲基-1-(6-(吡咯烷基-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺0.8 g， MS m/z(ESI)：206.3[M+H]⁺ 。步驟 5 ：合成 (S)-5- 溴 -N- 甲基 -N-(1-(6-( 吡咯烷 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 吡啶 -2- 胺室溫下，將(S)-N-甲基-1-(6-(吡咯烷基-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(0.8 g, 3.8 mmol)、5-溴-2-氟吡啶(3.4 g, 19 mmol)、K₂ CO₃ (1.6 g, 11.4 mmol) 溶解到DMSO(10 mL)，140℃反應24h。冷卻到室溫，水稀釋、萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺0.7 g，MS m/z(ESI)：362[M+H]⁺ 。步驟 6 ：合成 (S)-N- 甲基 -N-(1-(6-( 吡咯烷 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-5-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼雜環戊烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 胺室溫下將(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺(0.7 g , 1.9 mmol)、聯硼酸頻那醇酯(0.74 g, 2.9 mmol)、Pd(dppf)ClCH₂ Cl₂ (155 mg, 0.19 mmol)、KOAc(559 mg, 5.7 mmol)溶解到Dioxane(15 mL)，90℃反應6h。真空減壓濃縮移除溶劑，NaHCO₃ 稀釋、萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到(S)-N-甲基-N-(1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2 -二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺0.4 g，MS m/z(ESI)：409.2[M+H]⁺ 。步驟 7 ：合成 (S)-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-( 甲基 (1-(6-( 吡咯烷基 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈氮氣保護室溫下，將4-溴-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200 mg, 0.65 mmol)、(S)-N-甲基-N-(1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2 -二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(400 mg, 0.97 mmol)、Pd(PPh₃ )₄ (76 mg, 0.065 mmol)、Na₂ CO₃ (207 mg, 1.95 mmol)溶解在1,4-dioxane:H2O=5:1(12 mL)中，90℃攪拌反應8h。冷卻到室溫，加水淬滅、經萃取、水洗、乾燥，柱層析，得到(S)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(甲基(1-(6-(吡咯烷基-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3- 基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-碳腈（化合物 62 ）80 mg。¹ H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8.64 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.35 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 8.01 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 7.76 (dd,J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 7.38 (dd,J = 8.7, 2.3 Hz, 1H), 7.29 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 6.75 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 6.37 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 6.07 (d,J = 6.8 Hz, 1H), 3.86 (s, 2H), 3.32 (d,J = 6.3 Hz, 4H), 2.71 (s, 3H), 1.90 (t,J = 6.4 Hz, 4H), 1.47 (d,J = 6.9 Hz, 3H), 1.21 (s, 6H)。

實施例 63 ： (S)-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-( 甲基 (1-(6-(6- 甲基吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1 ：合成 2- 甲基 -N-((S)-1-(6- 甲基吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺 室溫下，在反應瓶中加入(R)-2-甲基丙烷-2-磺醯亞胺(1.8 g, 14.8 mmol)和2-甲基-5-乙醯基吡啶(2.0 g, 14.8 mmol)、THF(20 mL)，加入鈦酸四乙酯(6.7 g, 29.6 mmol)，滴加完畢後升至75℃反應16小時。將反應液冷卻至-78℃，緩慢滴加L-selectride (30 mL, 29.6 mmol)，滴加完畢，升至室溫反應15分鐘。然後在-50℃甲醇淬滅，加水 (20 mL)，EA(60mL)充分攪拌後過濾、萃取、無水硫酸鈉乾燥、過濾，濃縮得粗品，柱層析純化得2-甲基-N-((S)-1-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺2.6 g, MS m/z(ESI)：241.1 [M+H]⁺ 。步驟 2 ：合成 N, 2- 二甲基 -N-((S)-1-(6- 甲基吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺 室溫下將2-甲基-N-((S)-1-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺(2.6 g, 10.8 mmol)溶解到THF(20 mL)，然後降溫至-78℃，緩慢滴加雙三甲基矽基胺基鋰(10.8 mmol)，低溫下攪拌半小時，再緩慢滴加MeI(1.5 g,10.8 mmol)，-78℃反應1h。加水(30 mL)淬滅反應，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到N, 2-二甲基-N-((S)-1-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺2.0 g，MS m/z(ESI)：255.2 [M+H]⁺ 。步驟 3 ：合成 (S)-N- 甲基 -1-(6- 甲基吡啶 -3- 基 ) 乙 -1- 胺室溫下，將N, 2-二甲基-N-((S)-1-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺(2.0 g, 7.8 mmol)溶解到MeOH (4 mL)，然後加入HCl/Dioxane (6 mL, 4M)，室溫反應1h。真空減壓濃縮移除溶劑，NaHCO₃ 淬滅，經萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到(S)-N-甲基-1-(6-甲基吡啶-3-基)乙-1-胺1.2 g，MS m/z(ESI)：151.3[M+H]⁺ 。步驟 4: 合成 (S)-5- 溴 -N- 甲基 -N-(1-(6- 甲基吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 吡啶 -2- 胺室溫下將(S)-N-甲基-1-(6-甲基吡啶-3-基)乙-1-胺(1.2 g, 7.9 mmol)、5-溴-2-氟吡啶(6.9 g, 40 mmol)、K₂ CO₃ (3.2 g, 23.7 mmol)溶解到DMSO (20 mL)，140℃反應24h。冷卻到室溫，加水稀釋、萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺1.0 g，MS m/z(ESI)：306.5[M+H]⁺ 。步驟 5 ：合成 (S)-N- 甲基 -N-(1-(6- 甲基吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-5-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼雜環戊烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 胺室溫下，將(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺(1.0 g, 3.3 mmol)、聯硼酸頻那醇酯(1.3 g, 4.9 mmol)、Pd(dppf)ClCH₂ Cl₂ (266 mg, 0.33 mmol)、KOAc(970 mg, 9.9 mmol)溶解到Dioxane(15 mL)，90℃反應6h。真空減壓濃縮移除溶劑，NaHCO₃ 稀釋、萃取、乾燥、過濾、濃縮、柱層析，得到(S)-N-甲基-N-(1-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺0.6 g，MS m/z(ESI)：354.2[M+H]⁺ 。步驟 6 ：合成 (S)-6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 )-4-(6-( 甲基 (1-(6-(6- 甲基吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈氮氣保護下，室溫下將4-溴-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-碳腈(200 mg, 0.65 mmol)、(S)-N-甲基-N-(1-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-胺(360 mg, 0.97 mmol)、Pd(PPh₃ )₄ (76 mg, 0.065 mmol)、Na₂ CO₃ (207 mg, 1.95 mmol)溶解在1,4-dioxane:H₂ O=5:1(12 mL)中，90℃攪拌反應8h。冷卻到室溫，加水淬滅、經萃取、水洗、乾燥，柱層析，得到(S)-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(甲基(1-(6-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5 -a]吡啶-3-甲腈（化合物 63 ）100 mg，MS m/z(ESI)：457.2[M+H]⁺ 。¹ H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8.66 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.37 (dd,J = 7.0, 2.2 Hz, 2H), 7.79 (dd,J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 7.58 (dd,J = 8.0, 2.3 Hz, 1H), 7.30 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.20 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 6.78 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 6.20 (q,J = 6.8 Hz, 1H), 3.86 (s, 2H), 2.76 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 1.55 (d,J = 7.0 Hz, 3H), 1.21 (s, 6H)。

實施例 64 ： N-(5-(3- 氰基 -6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-N- 甲基 -6-( 吡咯烷酮 -1- 基 ) 煙醯胺

步驟 1: 合成 6-( 吡咯烷 -1- 基 ) 煙酸甲酯 將6-氯煙酸甲酯(2 g, 11.66 mmol)、吡咯烷(1.95mL, 23.31 mmol)、碳酸銫(11g, 34.97 mmol)溶於20 mL DMF中，65℃攪拌過夜，監測反應完全。加水淬滅，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，得到6-(吡咯烷-1-基)煙酸甲酯2.4g，收率99.85%，MS m/z (ESI): 207.1 [M+H]⁺ 。步驟 2: 合成 6-( 吡咯烷 -1- 基 ) 煙酸將6-(吡咯烷-1-基)煙酸甲酯(2.4 g, 11.64 mmol) 溶於THF(12 mL)和水(12 mL)中，加入氫氧化鈉(1.4 g, 34.92 mmol) 室溫攪拌過夜，監測反應完全。濃縮反應液，加水，加入濃鹽酸調節pH至中性或者偏酸性，抽濾，得到6-(吡咯烷-1-基)煙酸1.6g，收率71.51%，MS m/z (ESI): 191.0 [M-H]^- 。步驟 3: 合成 6-( 吡咯烷 -1- 基 ) 煙醯氯 將6-(吡咯烷-1-基)煙酸(0.6 g, 3.12 mmol)溶於SOCl₂ (10 mL)中，加入2滴DMF，85℃回流反應2h，監測反應完全。濃縮反應液，得到粗品產物，直接投下一步。步驟 4: 合成 N-(5- 溴吡啶 -2- 基 )-N- 甲基 -6-( 吡咯烷 -1- 基 ) 煙醯胺 N₂ 保護下將5-溴-N-甲基吡啶-2-胺(0.35g, 1.87 mmol) 溶解在DME(4 mL)中，加入TEA(0.78 mL, 5.61 mmol)，0℃下加入上一步得到的粗品，70℃攪拌過夜，監測反應完全。加入適量的水，乙酸乙酯萃取，有機相乾燥濃縮，柱層析分離，得到N-(5-溴吡啶-2-基)-N-甲基-6-(吡咯烷-1-基)煙醯胺0.52g，收率76.93%，MS m/z (ESI): 360.9 [M+H]⁺ 。步驟 5: 合成 N- 甲基 -6-( 吡咯烷 -1- 基 )-N-(5-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼雜環戊烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 煙醯胺 氮氣保護下，將N-(5-溴吡啶-2-基)-N-甲基-6-(吡咯烷-1-基)煙醯胺(0.3g, 0.83 mmol)、聯硼頻哪醇酯(0.42g, 1.66mmol)、醋酸鉀(0.25 g, 2.49mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷錯合物(69mg, 0.08 mmol)溶於二氧六環(5 mL)中，90℃下攪拌過夜，監測反應完全。冷卻至室溫，加入適量的水，乙酸乙酯萃取，有機相乾燥濃縮，柱層析分離，得到N-甲基-6-(吡咯烷-1-基)-N-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)煙醯胺0.20g，收率59%，MS m/z (ESI): 327.0 [M+H]⁺ 。步驟 6: 合成 N-(5-(3- 氰基 -6-(2- 羥基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-N- 甲基 -6-( 吡咯烷酮 -1- 基 ) 煙醯胺 氮氣保護下，將N-甲基-6-(吡咯烷-1-基)-N-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)吡啶-2-基)煙醯胺(60 mg, 0.15 mmol)、4-溴-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(55 mg, 0.18 mmol)、Pd₂ (dba)₃ (14 mg, 0.01 mmol)、X-phos(14 mg, 0.03 mmol)、碳酸鈉(78mg, 0.74 mmol)溶於二氧六環(3 mL)和水(1 mL)中，90℃下攪拌過夜，監測反應完全。冷卻至室溫，濃縮反應液，加水，二氯甲烷萃取，有機相水洗，乾燥濃縮，柱層析，得到N-(5-(3-氰基-6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-甲基-6-(吡咯烷酮-1-基)煙醯胺(化合物 64 )16mg，收率21%，MS m/z (ESI): 512.1 [M+H]⁺ 。¹ H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.75 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 8.64 (d,J = 2.5 Hz, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.19 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.93 (dd,J = 8.3, 2.5 Hz, 1H), 7.42 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.26 (t,J = 9.2 Hz, 2H), 6.24 (d,J = 9.0 Hz, 1H), 4.70 (s, 1H), 3.87 (s, 2H), 3.47 (s, 3H), 3.36 (s, 4H), 1.90 (s, 4H), 1.22 (s, 6H)。

實施例 65 ： (S)-N-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 甲基胺 )- 吡啶 -3- 基 )-6- 乙炔基 - 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1. 合成 6- 溴 -3- 氰基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -4- 三氟甲基磺酸酯 在室溫下，將6-溴-4-羥基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.00 g, 4.20 mmol)溶於DMF(10.0 mL)中，然後在攪拌狀態下依次加入DIPEA(1.46 mL, 8.40 mmol)和1,1,1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基磺醯基)甲烷磺醯胺(1.80 g, 5.04 mmol)。反應液在室溫條件下室溫攪拌1 h。TLC(石油醚/乙酸乙酯=10/1，R_fT1 =0.25，R_fT2 =0.4)監測反應結束後，將反應倒入100 mL水中，用乙酸乙酯(50 mL *3)萃取，合併有機相。有機相用飽和食鹽水(50 mL*2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，抽濾、旋蒸得粗品。粗品經快速層析柱系統(石油醚：乙酸乙酯= 100/1 ~ 10/1)，純化後得到6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲基磺酸酯(1.13 g, 3.05 mmol, 收率72.7%)MS m/z：370.0[M+1]⁺ 。步驟 2. 合成 (S)-6- 溴 -N-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺 )- 吡啶 -3- 基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈在室溫下，將6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲基磺酸酯(400 mg, 1.08 mmol)溶於1,4-二氧六環(8 mL)和水(0.8 mL)的混合液中，然後依次加入(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜戊環-2-基)吡啶-2-胺(503 mg, 1.19 mmol)、Pd₂ (dba)₃ (18 mg, 0.216 mmol)、X-Phos (412 mg, 0.864 mmol)、Na₂ CO₃ (229 mg, 2.16 mmol)。反應瓶用氮氣置換3次後，將反應在室溫下氮氣保護條件下攪拌12 h。TLC(石油醚/乙酸乙酯= 3/1，R_fT2 =0.65，R_fT3 =0.4)和LCMS監測反應結束，將反應液到于水(100 mL)中，乙酸乙酯(50 mL*2)萃取，合併有機相。有機相用飽和食鹽水(50 mL*2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，抽濾、旋蒸得粗品。粗品經快速層析柱系統(石油醚：乙酸乙酯= 10/1 ~ 3/1)純化後，得到(S)-6-溴-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺)-吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈128 mg (22.9%)。MS m/z : 517.0[M+1]⁺ 。步驟 3. 合成 (S)-N-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 甲基胺 )- 吡啶 -3- 基 )-6-(( 三甲基矽基 ) 乙炔基 )- 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈在室溫下，將化合物(S)-6-溴-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)甲基胺)-吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(400 mg, 1.08 mmol)溶於DMF(2.00 mL)中，然後依次加入化合物三甲基矽乙炔(49 mg, 70 μL, 0.494 mmol)、Pd(PPh₃ )₂ Cl₂ (17.3 mg, 0.025 mmol)、PPh₃ (3.24 mg, 0.012 mmol)、TEA (75 mg, 103 μL, 0.74 mmol)。反應瓶用氮氣置換3次後，將反應氮氣保護條件下升溫到65℃攪拌3h。TLC(石油醚/乙酸乙酯= 5/1，R_fT3 =0.3，R_fT4 =0.4)和LCMS監測反應結束，將反應液到于水(50 mL)中，乙酸乙酯(30 mL*2)萃取，合併有機相。有機相用飽和食鹽水(30 mL*2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，抽濾、旋蒸得粗品。粗品經快速層析柱系統(石油醚：乙酸乙酯= 50/1 ~ 5/1)，純化後得到(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)甲基胺)-吡啶-3-基)-6-((三甲基矽基)乙炔基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈109 mg (82.4%)。MS: m/z = 535.1[M+1]⁺ 。步驟 4. 合成 (S)-N-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 甲基胺 )- 吡啶 -3- 基 )-6- 乙炔基 - 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈在室溫條件下，將(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)甲基胺)- 吡啶-3-基)-6-((三甲基矽基)乙炔基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(109 mg, 0.203 mmol)溶於DCM/MeOH(2/1, 5mL)，然後加入K₂ CO₃ (10.0 mg, 0.073mmol)。反應液在室溫條件下攪拌2 h，TLC(石油醚/乙酸乙酯= 5/1，R_fT4 =0.4，R_fT3 =0.3)和LCMS監測反應結束。將反應液旋乾得粗品，然後粗品經快速層析柱系統(石油醚：乙酸乙酯= 50/1 ~ 5/1)，純化後得到(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)甲基胺)-吡啶-3-基)-6-乙炔基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈（化合物 65 ）(89 mg, 0.192 mmol, 純度96.96%，收率94.6%)。MS m/z: 463.0[M+1]⁺ 。¹ HNMR(400MHz, DMSO-d₆ )δ：9.23 (d,J = 1.08 Hz, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.67-8.65 (m, 1H), 8.40-8.38 (m, 2H), 7.93-7.86 (m, 3H), 7.83-7.80 (m, 1H), 7.51 (d,J = 4.00 Hz, 1H), 6.30-6.26 (m, 1H), 4.47 (s, 1H), 2.83 (s, 3H), 1.62 (d,J = 8.00 Hz, 3H)。

實施例 66 ： (S)-N-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 甲基胺 )- 吡啶 -3- 基 )-6- 乙基 - 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈的製備

步驟 1. 合成 (S)-N-((1-(6-(4- 氟 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 ) 甲基胺 )- 吡啶 -3- 基 )-6- 乙基 - 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲腈在室溫下，將(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)甲基胺)-吡啶-3-基)-6-乙炔基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(70 mg, 0.151 mmol)溶於EtOH(3.00 mL)，然後加入10% Pd/C(8 mg)，反應體系用H₂ (15 psi)置換3次。然後在H₂ (15 psi)氛圍下室溫攪拌24h。LCMS和TLC(石油醚/乙酸乙酯= 4/1，R_fT4 =0.5，R_f3 =0.3)監測反應結束。將反應液通過矽藻土抽濾、EtOH(20 mL *3)洗滌。濾液旋乾得粗品，然後粗品經快速層析柱系統(石油醚：乙酸乙酯= 50/1 ~ 5/1)，純化後得到(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)甲基胺)-吡啶-3-基)-6-乙基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物66)(13.4 mg, 0.029 mmol，純度98.6%，收率19.0%)。MS: m/z = 467.1[M+1]⁺ ，¹ HNMR(400MHz，DMSO-d₆ )δ：8.77 (d,J = 4.00 Hz, 1H), 8.66 (d,J = 4.00 Hz, 3H), 8.61 (s, 1H), 8.40-8.37 (m, 2H), 7.93-7.86 (m, 3H), 7.82-7.79 (m, 1H), 7.46 (s, 2H), 2.83 (s, 3H), 2.74-2.70 (m, 2H), 2.02-1.95(m,1H), 1.28 (t,J = 4.00Hz, 3H)。

生物活性測試例 1

(a)體外篩選實驗-HTRF方法檢測化合物對RET的抑制活性，方法如下： 1. 1x激酶緩衝液的配製：5x酶緩衝液與蒸餾水以1：4混勻，終濃度是5mM氯化鎂; 1mM二硫蘇糖醇。 2. 用100%二甲基亞碸將測試化合物(5 mM儲液)稀釋5倍至1 mM，在384孔稀釋板中以1:3進行等比稀釋10個濃度。 3. 使用Echo 550移液系統將0.2 μL梯度稀釋的化合物加到384孔板中，每個濃度2個複孔，二甲基亞碸終濃度為0.5%(v/v)。測試化合物的梯度濃度為5000、1666.7、555.5、185.18、61.72、20.57、6.858、2.286、0.764、0.254 nM。 4. 用1x激酶緩衝液配製2xRET(0.1 ng/μl)。 5. 在384孔板加入5μl的2x RET，1000g離心30s，室溫孵育10 min。 6. 用1x激酶緩衝液配製2x酪氨酸激酶-生物素標記的基質(2 μM)和腺嘌呤核苷三磷酸(20μM)混合液。 7. 加入5μL酪氨酸激酶-生物素標記的基質和腺嘌呤核苷三磷酸混合液以啟動反應。1000g離心30s，封板，室溫孵育30 min。 8. 用均相時間分辨螢光技術檢測緩衝液配製2xSa-XL 665(註：一種試劑)(125 μM)和酪氨酸激酶-抗體-穴狀化合物混合液。 9. 每孔加入10μL Sa-XL 665和酪氨酸激酶-抗體-穴狀化合物混合液，1000g離心30s，室溫孵育1h。 10. Envision 2104酶標儀615 nm和665 nm讀板，計算比率 (665/615nm)。 11.抑制率%計算如下：抑制率%=[1-

]×100 式中， R0是溶媒空白組的酶標儀板平均比率 R1是測試化合物酶標儀板比率 R2是100%抑制RET酶活性的酶標儀板平均比率通過將化合物濃度的抑制率值和對數擬合到非線性回歸(劑量反應-可變斜率)中，用GraphPad 6.0軟體計算IC₅₀ 。

(b)體外篩選實驗-HTRF方法檢測化合物抑制VEGFR2活性測試，實驗步驟： 1.1x激酶緩衝液配製：5x酶緩衝液與蒸餾水以1：4混勻，終濃度是5mM 氯化鎂; 1mM二硫蘇糖醇;1mM氯化錳。 2.用100%二甲基亞碸將測試化合物(5 mM儲液)稀釋5倍至1 mM，在384孔稀釋板中以1:3 進行等比稀釋10個濃度。 3.使用Echo 550移液系統將0.2 μL梯度稀釋的化合物加到384孔細胞培養板(Corning，3570)中，每個濃度2個複孔，二甲基亞碸終濃度為0.5%(v/v)。測試化合物的梯度濃度為5000、1666.7、555.5、185.18、61.72、20.57、6.858、2.286、0.764、0.254 nM。 4.用1x 激酶緩衝液配製2x VEGFR2(0.02 ng/μL)。 5.在384孔板加入5μl的2x VEGFR2，1000g離心30s，室溫孵育10 min。 6.用1x激酶緩衝液配製2x酪氨酸激酶-生物素標記的基質(2 μM)和ATP(8 μM)混合液。 7.加入5μl酪氨酸激酶-生物素標記的基質和腺嘌呤核苷三磷酸混合液以啟動反應。1000g離心30s，封板，室溫孵育40 min。 8.用均相時間分辨螢光技術檢測緩衝液配製2x Sa-XL 665(125 μM)和酪氨酸激酶-抗體-穴狀化合物混合液。 9.每孔加入10μL Sa-XL 665和酪氨酸激酶-抗體-穴狀化合物混合液，1000g離心30s，室溫孵育1h。 10.Envision 2104酶標儀615 nm和665 nm讀板，計算比率(665/615nm)。 11.抑制率%計算如下: 抑制率%=[1-

]×100 式中， R0是溶媒空白組的酶標儀板平均比率 R1是測試化合物酶標儀板比率 R2是100%抑制RET酶活性的酶標儀板平均比率 12. 通過將化合物濃度的抑制率值和對數擬合到非線性回歸(劑量反應-可變斜率)中，用GraphPad 6.0計算IC₅₀ 。

(c)體外篩選實驗-CellTiter-Glo發光法檢測化合物抑制Ba/F3-KIF5B-RET細胞活力測試，實驗步驟： 1.利用Neon®轉染系統方法將包含人源KIF5B-RET cDNA的哺乳動物細胞表現載體導入Ba/F3細胞，經嘌呤黴素篩選過後存活的轉殖株進行細胞生長抑制功能實驗和蛋白免疫印跡法驗證RET穩定高表現的細胞系。 2.細胞培養于RPMI 1640培養液、10%胎牛血清、1%青黴素-鏈黴素、2μg/mL嘌呤黴素的培養基中，置於37℃、5%二氧化碳細胞培養箱中培養。 3.用100%二甲基亞碸將測試化合物(5 mM儲液)稀釋2.5倍至2 mM，在384孔稀釋板中以1:3進行等比稀釋10個濃度。 4.使用Echo 550移液系統將0.2μL梯度稀釋的化合物加到384孔細胞培養板(Corning，3570)中，每個濃度2個複孔，二甲基亞碸終濃度為0.5%(v/v)。測試化合物的梯度濃度為5000、1666.7、555.5、185.18、61.72、20.57、6.858、2.286、0.764、0.254 nM。 5.每孔加入40 μL含800個Ba/F3-KIF5B-RET細胞懸液，於5%二氧化碳細胞培養箱培養72h。 6.按每孔20μL Cell Titer-Glo試劑加入細胞培養板，震盪混勻2min以裂解細胞，然後室溫孵育30min，用Envision 2104酶標儀讀取螢光信號值。 7.資料由XLFit 5.0按4參數公式： Y=Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^((LogIC₅₀ -X)*HillSlope))擬合計算IC₅₀ 值。

化合物活性匯總如下表1所示表1

化合物	RET激酶活性(nM)	Ba/F3-KIF5B-RET細胞活性(nM)	VEGFR2激酶活性(nM)
卡博替尼	22.51	-	12.26
凡德替尼	7.67	-	69.18
1	0.34	13.87	7.37
2	0.46	10.66	3.51
3	0.19	17.99	1.078
4	0.18	12.01	0.31
5	6.3	85.1	44.72
6	1.2	50.53	11.79
7	7.14	203.4	72.09
8	9.4	68.5	170.5
9	19.6	145.4	116
10	2.08	7.3	90.80
11	12.54	613.1	110.2
12	12.83	75.5	106.7
13	5.17	50.78	136.2
14	16.58	219.9	346.8
15	0.58	10.37	2.95
16	1.63	35.47	15.57
17	18.41	184	1208
18	0.40	40.01	135.1
19	0.42	40.97	41.14
20	0.25	13.46	10.06
21	1.17	22.39	＞5000
22	0.40	44.2	41.88
23	0.82	18.08	74.94
24	0.99	5.85	64.64
25	0.54	14.68	61.06
26	0.245	7.40	32.98
27	1.33	43.77	21.88
28	2.25	177	1194
29	0.36	0.75	3.285
30	0.47	15.05	175.1
31	269.4	-	＞5000
32	4.23	223.6	＞5000
33	3.04	413.1	＞5000
34	1.55	119	128.2
35	6.94	395.6	818.6
36	2.76	19.91	46.98
37	-	18.57	270.4
38	0.56	5.142	7.39
39	1.93	181.7	＞5000
40	0.83	-	48.28
41	0.34	-	49.74
42	17.97	-	199.4
43	2.05	34.95	245.4
44	0.26	18.62	17.99
45	-	39.33	1976
46	0.73	13.63	80.52
47	5.45	236.4	＞5000
48	4.32	141.6	5436
49	1.25	30.66	＞5000
50	1.67	104.1	155.8
51	0.47	5.024	4.139
52	0.29	-	5.62
53	5.52	431.8	293.4
54	0.30	-	21.14
55	3.79	379.7	＞5000
56	0.68	13.87	30.17
57	1.30	40.72	59.18
58	0.50	42.77	26.52
59	3.49	-	64.27
60	0.98	11.62	43.95
61	0.48	1.53	25.49
62	1.85	1030	175.5
63	4.56	-	361.3
64	＞500	1121	2477
65	2.66	-	779.8
66	4.35	-	240.7
‘-’表示沒有測試。

結果表明：相較于現有已知的化合物(卡博替尼和凡德替尼)，本發明所設計的化合物均具有較好的RET激酶活性，同時對VEGFR2激酶具有較好的選擇性，部分化合物的選擇性可達1000倍以上。此外，所述化合物均具有較好的RET激酶敏感的細胞抑制活性。

在本發明提及的所有文獻都在本申請中引用作為參考，就如同每一篇文獻被單獨引用作為參考那樣。此外應理解，在閱讀了本發明的上述講授內容之後，本領域技術人員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落於本申請所附發明申請專利範圍所限定的範圍。

無。

Claims

式(Ⅰ)化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、立體異構體、同位素化合物或前驅藥；
其中，R₁ 選自下組：氫、鹵素、硝基、氰基、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C1-C6雜烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C6-C14芳基、5-14元雜芳基、-OR₅ 、-O(C1-C6伸烷基)R₅ 、-SR₅ 、-N(R₅ )(R₆ )、-S(O)₂ R₅ 、-S(O)R₅ 、-C(O)R₅ 、-OC(O)R₅ 、-C(O)OR₅ 、-OC(O)O-(C1-C6伸烷基)-C(O)R₅ 、-C(O)-N(R₅ )(R₆ )、-N(R₅ )-C(O)R₆ 、-N(R₅ )-C(O)OR₆ 、-N(R₅ )-C(O)N(R₅ )(R₆ )、-(C1-C6伸烷基)-N(R₅ )-C(O)R₆ 、-N(R₅ )S(O)₂ R₆ 、-P(O)(R₅ )(R₆ )；其中，所述的雜烷基是指烷基碳鏈上的一個或多個碳原子被選自下組的二價連接基取代：-O-、-S-、-NH-或-C(O)-； B獨立地選自下組：氫、鹵素、氰基、CHF₂ 、CF₃ 、-C(O)OR₅ 、C1-C6烷基、C3-C8環烷基； X₁ 、X₂ 和X₃ 各自獨立地為CR或N；其中，各個R各自獨立地選自下組：氫、取代或未取代的C1-C6烷基、鹵素、或氰基，其中，所述的取代是指被獨立選自下組的一個或多個基團取代：鹵素、氰基、羥基、氨基；且X₁ 、X₂ 和X₃ 中有0、1、2或3個為N； R₂ 獨立地選自下組：氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、C1-C6雜烷基、3-8元環雜烷基；其中，所述的烷基、環烷基、雜烷基、環雜烷基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、C3-C8環烷氧基、C1-C6雜烷基、3-8元環雜烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素、氰基、羧基、羰基、羥基、巰基、氨基、甲酯、醯胺、甲基碸、磺醯胺、二甲基磷氧基； R₃ 和R₃ ’各自獨立地選自下組：氫、鹵素、氰基、羥基、巰基、氨基、CHF₂ 、CF₃ 、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、C1-C6雜烷基、3-8元環雜烷基；其中，所述的烷基、烷氧基、環烷基、雜烷基、環雜烷基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、C3-C8環烷氧基、C1-C6雜烷基、3-8元環雜烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素、氰基、羧基、羰基、羥基、巰基、氨基、甲酯、醯胺、甲基碸、磺醯胺、二甲基磷氧基；或者R₃ 和R₃ ’與其連接的C原子一起形成C3-C8環烷基、3-8元雜環基、羰基；其中，所述的環烷基、雜環基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、C3-C8環烷氧基、C1-C6雜烷基、3-8元環雜烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素、氰基、羧基、羰基、羥基、巰基、氨基、甲酯、醯胺、甲基碸、磺醯胺、二甲基磷氧基； A獨立選自下組：C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C14芳基或5-14元伸雜芳基；各R₄ 獨立地選自下組：氫、鹵素、硝基、氰基、羥基、羧基、巰基、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C1-C6雜烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C6-C14芳基、5-14元雜芳基、-OR₅ 、-SR₅ 、-N(R₅ )(R₆ )、-S(O)₂ R₅ 、-S(O)R₅ 、-C(O)R₅ 、-OC(O)R₅ 、-C(O)OR₅ 、-OC(O)O-(C1-C6伸烷基)-C(O)R₅ 、-C(O)-N(R₅ )(R₆ )、-N(R₅ )-C(O)R₆ 、-N(R₅ )-C(O)OR₆ 、-N(R₅ )-C(O)N(R₅ )(R₆ )、-(C1-C6伸烷基)-N(R₅ )-C(O)R₆ 、-N(R₅ )S(O)₂ R₆ 、-P(O)(R₅ )(R₆ )；其中，所述的烷基、環烷基、雜烷基、雜環基、烯基、炔基、芳基、雜芳基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、C3-C8環烷氧基、C1-C6雜烷基、3-8元環雜烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素、氰基、羧基、羰基、羥基、巰基、氨基、甲酯、醯胺、甲基碸、磺醯胺、二甲基磷氧基； R₅ 和R₆ 各自獨立地選自取代或未取代的下組基團：氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元單雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基、C5-C12稠合雙環、5-12元稠合雜雙環、C5-C12元螺雙環或5-12元螺雜雙環；其中，所述取代是指被獨立選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、C3-C8環烷氧基、C1-C6雜烷基、3-8元環雜烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素、氰基、羧基、羰基、羥基、巰基、氨基、甲酯、醯胺、甲基碸、磺醯胺、二甲基磷氧基；或者R₅ 和R₆ 與其連接的N或P原子一起形成3-8元雜環基；上述烷基、伸烷基、環烷基、雜烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、雜環基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C1-C6雜烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基、二甲基磷氧基； n為0、1、2或3。
如請求項1所述的式(Ⅰ)化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、立體異構體、同位素化合物或前驅藥，其中，R₂ 選自下組：氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基；其中，所述的烷基、環烷基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基、二甲基磷氧基。
如請求項1或2所述的式(Ⅰ)化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、立體異構體、同位素化合物或前驅藥，其中，R₃ 和R₃ ’各自獨立地選自下組：氫、鹵素、氰基、羥基、CHF₂ 、CF₃ 、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、C1-C6雜烷基：或者R₃ 和R₃ ’與其連接的C原子一起形成C3-C8環烷基、3-8元雜環基、羰基；其中，所述的烷基、烷氧基、環烷基、雜烷基、雜環基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基、二甲基磷氧基。
如請求項1所述的式(Ⅰ)化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、立體異構體、同位素化合物或前驅藥，其中，R₁ 獨立地選自下組：-OR₅ 、-OC(O)R₅ 、-N(R₅ )(R₆ )、-C(O)-N(R₅ )(R₆ )、-N(R₅ )-C(O)R₆ 、-N(R₅ )-C(O)OR₆ 、-N(R₅ )S(O)₂ R₆ ；其中，R₅ 和R₆ 各自獨立地選自取代或未取代的下組基團：氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；其中，所述取代是指被獨立選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、氰基、鹵素、羥基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基。
如請求項1所述的式(Ⅰ)化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、立體異構體、同位素化合物或前驅藥，其中，A獨立選自下組：C6-C10芳基或5-10元雜芳基，其中，所述芳基、雜芳基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C1-C6雜烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、巰基、胺基、二甲基磷氧基。
如請求項1所述的式(Ⅰ)化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、立體異構體、同位素化合物或前驅藥，其中，R₄ 獨立地選自下組：氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、C1-C6雜烷基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基、3-8元雜環基、-OR₅ 、-OC(O)R₅ 、-N(R₅ )(R₆ )、-C(O)-N(R₅ )(R₆ )、-N(R₅ )-C(O)R₆ 、-N(R₅ )-C(O)OR₆ 、-N(R₅ )S(O)₂ R₆ ；其中，R₅ 和R₆ 各自獨立地為取代或未取代的選自下組的基團：氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；其中，所述取代是指被選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、氰基、鹵素、羥基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；所述的烷基、環烷基、雜烷基、雜環基、芳基、雜芳基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、CHF₂ 、CF₃ 、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基、二甲基磷氧基。
如請求項1-6中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、立體異構體、同位素化合物或前驅藥，其中，所述化合物具有式(II)所示的結構；
(II) 其中，X選自下組：O、S、NR₈ ； m為0、1、2或3； R₇ 和R₈ 各自為取代或未取代的選自下組的基團：H、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元單雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基、C5-C12稠合雙環、5-12元稠合雜雙環、C5-C12元螺雙環或5-12元螺雜雙環；其中，所述取代是指被獨立選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、氰基、鹵素、羥基、C3-C8環烷基、3-8元單雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基、C5-C12稠合雙環、5-12元稠合雜雙環、C5-C12元螺雙環或5-12元螺雜雙環； B、R₂ 、R₃ 、A、R₄ 、n的定義如請求項1所述。
如請求項1-7中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、立體異構體、同位素化合物或前驅藥，其中，所述的化合物具有式(III)所示的結構；
(III) 其中，B、R₂ 、R₃ 、R₄ 、R₇ 、m、n的定義如請求項7所述。
如請求項1-6中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、立體異構體、同位素化合物或前驅藥，其中，所述的化合物具有式(IV)所示的結構：
(IV) 其中，R₁ 選自下組：-OR₅ 、-N(R₅ )(R₆ )、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C6-C14芳基、5-14元雜芳基； R₂ 選自下組：氫、C1-C6烷基； R₃ 選自下組：氫、鹵素、氰基、羥基、CHF₂ 、CF₃ 、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基； R₄ 獨立地選自下組：C3-C8環烷基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基、3-8元雜環基、-OR₅ 、-OC(O)R₅ 、-N(R₅ )(R₆ )、-C(O)-N(R₅ )(R₆ )、-N(R₅ )-C(O)R₆ 、-N(R₅ )-C(O)OR₆ 、-N(R₅ )S(O)₂ R₆ ；其中，R₅ 和R₆ 各自獨立地為取代或未取代的選自下組的基團：氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；其中，所述取代是指被獨立選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、氰基、鹵素、羥基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C6-C10芳基、5-10元雜芳基；且所述的烷基、烯基、炔基、環烷基、芳基、雜芳基、雜環基是未取代或被一個或多個獨立選自下組的基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C1-C6雜烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基、二甲基磷氧基。
一種請求項1-9中任一項所述化合物的前驅藥或其藥學上可接受的鹽，其特徵在於，其具有式(V)所示的結構：
(V) 其中，R₈ 選自下組：
、
、
、
、
、
； R₉ 和R₁₀ 各自獨立地選自：取代或未取代C1-C6烷基、羥基、OM；M為Na或K； R₁₁ 和R₁₂ 各自獨立地選自：取代或未取代C1-C6烷基、取代或未取代C6-C10芳基、取代或未取代5-10元雜芳基； R₁₃ 和R₁₄ 各自獨立地選自：取代或未取代C1-C6烷基、取代或未取代C6-C10芳基、取代或未取代5-10元雜芳基； p為1、2、3；其中，所述取代是指被獨立選自下組的一個或多個基團取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環烷基、3-8元雜環基、C1-C6雜烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、鹵素、氰基、羥基、羧基、酯基、醯胺基、磺醯胺基、羰基、巰基、胺基； R₁ 、R₂ 、R₃ 和R₄ 的定義如請求項4所述。
如請求項1-10中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、立體異構體、同位素化合物或前驅藥，其中，所述化合物選自下組：

。
一種藥物組合物，其中，包含如請求項1-11中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、同位素化合物或前驅藥；和藥用載體或稀釋劑。
一種請求項1至11中任一項所述的化合物或如請求項12所述的藥物組合物在製備治療與RET相關疾病的藥物中的用途。
如請求項13所述的用途，其中，所述藥物用於治療與RET相關疾病的下述失調：RET基因、RET激酶、或其中任何一者的表現或活性或位準失調。
如請求項14所述的用途，其中，RET基因、RET激酶、或其中任何一者的表現或活性或位準失調為所述RET基因中的一個或多個點突變，所述RET基因中的一個或多個點突變引起在一個或多個包括以下氨基酸位置具有一個或多個氨基酸取代的RET蛋白質的轉譯：378、385、618、620、630、631、633、804、810、883、918。
如請求項14所述的用途，其特徵在於，RET基因的表現或活性或位準失調為RET基因融合體，其中，所述RET基因融合體包括：KIF5B-RET、CDC6-RET、NCOA4-RET、CLIP1-RET、ERC1-RET、RUFY3-RET、TFG-RET、PRKAR1A-RET、KTN1-RET。
如請求項13-16中任一項所述的用途，其中，RET相關疾病包括腫瘤和腸易激症候群。
如請求項13-17中任一項所述的用途，其中，RET相關疾病包括：肺癌、乳頭狀甲狀腺癌、髓質甲狀腺癌、分化的甲狀腺癌、復發性甲狀腺癌、難治性分化甲狀腺癌、2A或2B型多發性內分泌瘤、嗜鉻細胞瘤、副甲狀腺增生、乳腺癌、結腸直腸癌、乳頭狀腎細胞癌、胃腸道粘膜的神經節瘤病以及子宮頸癌。