[go: up one dir, main page]

TW202136303A - 抗mertk抗體及其使用方法 - Google Patents

抗mertk抗體及其使用方法 Download PDF

Info

Publication number
TW202136303A
TW202136303A TW109143983A TW109143983A TW202136303A TW 202136303 A TW202136303 A TW 202136303A TW 109143983 A TW109143983 A TW 109143983A TW 109143983 A TW109143983 A TW 109143983A TW 202136303 A TW202136303 A TW 202136303A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
seq
acid sequence
amino acid
hvr
antibody
Prior art date
Application number
TW109143983A
Other languages
English (en)
Inventor
李承周
誠之 梁
安琪 葉
瑪麗娜 羅爾
阿儂 洛森泰爾
Original Assignee
美商阿列克特有限責任公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 美商阿列克特有限責任公司 filed Critical 美商阿列克特有限責任公司
Publication of TW202136303A publication Critical patent/TW202136303A/zh

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2827—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against B7 molecules, e.g. CD80, CD86
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/53—Hinge
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/71—Decreased effector function due to an Fc-modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
    • G01N2333/91—Transferases (2.)
    • G01N2333/912—Transferases (2.) transferring phosphorus containing groups, e.g. kinases (2.7)
    • G01N2333/91205—Phosphotransferases in general
    • G01N2333/9121—Phosphotransferases in general with an alcohol group as acceptor (2.7.1), e.g. general tyrosine, serine or threonine kinases

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本發明大體而言係關於包括特異性地結合MerTK多肽(例如哺乳動物MerTK或人類MerTK)之抗體(例如單株抗體、抗體片段等)的組合物，及此等組合物於治療有需要之個體之用途。

Description

抗MERTK抗體及其使用方法
本發明係關於抗MerTK抗體及此等抗體之用途(例如，治療用途)。
Mer酪胺酸激酶(MerTK)屬於受體酪胺酸激酶之TAM (T yro3、A xl及M erTK)家族。MerTK係單程1型跨膜蛋白，其細胞外域具有兩個免疫球蛋白(Ig)樣及兩個纖維連接蛋白(FN) III型基序(Graham等人, 2014, Nat Rev Cancer, 14:769-785；Rothlin等人, 2015, Annu Rev Immunol, 33:355-391)。
已鑑別了MerTK之數種配位體，包括蛋白S (ProS或ProS1)、生長停滯特異性基因6 (Gas6)、Tubby、Tubby樣蛋白1 (TULP-1)及Galectin-3。MerTK經由配位體結合之後的激活轉導來自細胞外空間之信號，從而導致MerTK酪胺酸自體磷酸化(Cummings等人, 2013, Clin Cancer Res, 19:5275-5280；Verma等人, 2011, Mol Cancer Ther, 10:1763-1773)及後續ERK及AKT相關信號轉導。
MerTK調控多種生理過程，包括細胞存活、遷移及分化。MerTK配位體ProS及Gas6促進數種致癌過程，諸如細胞存活、侵襲、遷移、化學抗性及轉移，其中其表現通常與不良臨床結果相關。另外，MerTK牽涉於多種癌症中，且MerTK或ProS缺乏引起抗腫瘤效應(Cook等人, 2013, J Clin Invest, 123:3231-3242；Ubil等人, 2018, J Clin Invest, 128:2356-2369；Huey等人, 2016, Cancers, 8:101)。然而，MerTK亦在視網膜色素上皮細胞上表現且在清除眼部脫落之光受體外節中發揮關鍵作用；MerTK中之功能損失突變導致色素性視網膜炎及其他視網膜營養不良(參見例如Al-khersan等人, Graefes Arch Clim Exp Ophthalmol, 2017, 255:1613-1619；Lorach等人, Nature Scientific Reports, 2018, 8:11312；Audo等人, Human Mutation, Wiley, 2018, 39:997-913；LaVail等人, Adv Exp Med Biol, 2016, 854:487-493)。
MerTK在吞噬細胞對凋亡細胞之吞噬作用(胞葬作用)中發揮基本作用，導致M2樣巨噬細胞極化、產生抗發炎細胞介素且促進免疫抑制性腫瘤微環境。減少吞噬細胞之胞葬作用會增加M1樣巨噬細胞極化，導致促發炎細胞介素及免疫活性環境之產生。調節胞葬作用可提供針對抗腫瘤活性之有效手段。
抗MerTK抗體先前已描述於例如國際專利申請公開案：第WO2020/214995號、第WO2020/076799號、第WO2020/106461號、第WO2020/176497號、第WO2019/084307號、第WO2019/005756號、第WO2016/106221號、第WO2016/001830號、第WO2009/062112號及第WO2006/058202號中；及例如Dayoub及Brekken, 2020, Cell Communications and Signaling, 18:29；Zhou等人, 2020, Immunity, 52:1-17；Kedage等人, 2020, MABS, 12:e1685832；Cummings等人, 2014, Oncotarget, 5:10434-10445中。
需要有效治療諸如癌症之疾患之新穎治療性抗MerTK抗體。本發明藉由提供有效介導抗腫瘤免疫性、減少胞葬作用且促進M1樣巨噬細胞極化之抗MerTK抗體來滿足此需要。
本文中所引用之所有參考文獻(包括專利申請案及公開案)均藉此以引用之方式整體併入。
本發明一般而言係關於抗Mer酪胺酸激酶(MerTK)抗體及使用此等抗體之方法。本文所提供之方法可用於治療患有癌症之個體。在一些實施例中，本發明提供一種用於治療患有癌症之個體的方法，該方法包括向有需要之個體投與治療有效量之抗MerTK抗體。
在一態樣中，本發明係關於結合於MerTK蛋白之經分離抗MerTK抗體，其中該抗體包含重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該重鏈可變區包含：a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO: 329、330、331、332及333組成之群的胺基酸序列；及c) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO: 138、334、335、336、337、338及339組成之群的胺基酸序列；且其中該輕鏈可變區包含：d) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO: 158、340、341、342、343及344組成之群的胺基酸序列；e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210。
在一態樣中，本發明係關於結合於MerTK蛋白之經分離抗MerTK抗體，其中該抗體包含：(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:99；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:158；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:334；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:158；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:330；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:158；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:340；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:335；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:331；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:342；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:336；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:337；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:343；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:332；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:338；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:333；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:334；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:158；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:332；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:336；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:339；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:344；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；或(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:158；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210。
在一態樣中，本發明係關於結合於MerTK蛋白之經分離抗MerTK抗體，其中該抗體包含重鏈可變域(VH)及輕鏈可變域(VL)，其中該VH及VL係選自由以下組成之群：包含胺基酸序列SEQ ID NO:19之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:54之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:234之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:247之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:235之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:247之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:236之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:248之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:236之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:249之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:237之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:249之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:238之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:249之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:239之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:250之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:240之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:251之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:241之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:252之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:242之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:249之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:243之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:247之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:244之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:251之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:245之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:253之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:246之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:247之VL；及包含胺基酸序列SEQ ID NO:246之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:254之VL。
在一態樣中，本發明係關於結合於MerTK蛋白之經分離抗MerTK抗體，其中該抗體包含重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該重鏈可變區包含：a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:84；b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO: 99及329組成之群的胺基酸序列；及c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 139；且其中該輕鏈可變區包含：d) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO: 169及345組成之群的胺基酸序列；e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:195；及f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:219。
在一態樣中，本發明係關於結合於MerTK蛋白之經分離抗MerTK抗體，其中該抗體包含(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:84；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:139；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:169；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:195；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:219；或(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:84；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:99；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:139；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:345；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:195；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:219。
在一態樣中，本發明係關於結合於MerTK蛋白之經分離抗MerTK抗體，其中該抗體包含重鏈可變域(VH)及輕鏈可變域(VL)，其中該VH及VL係選自由以下組成之群：包含胺基酸序列SEQ ID NO:255之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:257之VL；及包含胺基酸序列SEQ ID NO:256之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:258之VL。
在一態樣中，本發明係關於結合於MerTK蛋白之經分離抗MerTK抗體，其中該抗體包含重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該重鏈可變區包含：a) HVR-H1，其包含選自由SEQ ID NO:95、346及347組成之群的胺基酸序列；b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO: 119、348、349、350、351、352、353及354組成之群的胺基酸序列；及c) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO: 151、355及356組成之群的胺基酸序列；且其中該輕鏈可變區包含：d) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO: 181、341、357及358組成之群的胺基酸序列；e) HVR-L2，其包含選自由SEQ ID NO:187及359組成之群的胺基酸序列；及f) HVR-L3，其包含選自由SEQ ID NO:208、360、361及362組成之群的胺基酸序列。
在一態樣中，本發明係關於結合於MerTK蛋白之經分離抗MerTK抗體，其中該抗體包含(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:151；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:181；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:208；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:346；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:348；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:355；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:360；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:355；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:361；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:349；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:346；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:350；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:347；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:352；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:353；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:346；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:354；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:363；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:346；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:348；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:357；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:346；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:354；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:358；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；或(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:348；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:151；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:181；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:208。
在一態樣中，本發明係關於結合於MerTK蛋白之經分離抗MerTK抗體，其中該抗體包含重鏈可變域(VH)及輕鏈可變域(VL)，其中該VH及VL係選自由以下組成之群：包含胺基酸序列SEQ ID NO:33之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:68之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:259之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:274之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:260之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:275之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:261之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:276之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:262之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:263之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:264之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:265之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:266之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:267之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:278之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:268之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:279之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:269之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:279之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:264之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:280之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:270之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:281之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:265之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:282之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:264之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:283之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:271之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:284之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:272之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:285之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:271之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:286之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:273之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:287之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:273之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:288之VL；及包含胺基酸序列SEQ ID NO:273之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:289之VL。
在一態樣中，本發明係關於結合於MerTK蛋白之經分離抗MerTK抗體，其中該抗體包含重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該重鏈可變區包含：a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO: 122、364、365、366、367及368組成之群的胺基酸序列；及c) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO: 155、373、374及375組成之群的胺基酸序列；且其中該輕鏈可變區包含：d) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO: 184、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386及387組成之群的胺基酸序列；e) HVR-L2，其包含選自由SEQ ID NO:203、388、389、390及391組成之群的胺基酸序列；及f) HVR-L3，其包含選自由SEQ ID NO:231、392、393及394組成之群的胺基酸序列。
在一態樣中，本發明係關於結合於MerTK蛋白之經分離抗MerTK抗體，其中該抗體包含(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:122；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:184；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:373；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:376；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:388；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:377；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:374；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:365；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:276；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:392；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:376；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:389；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:379；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:366；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:380；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:373；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:381；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:367；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:382；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:383；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:374；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:384；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:376；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:393；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:376；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:369；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:370；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:371；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:178；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:385；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:395；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:390；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:372；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:391；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:375；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:386；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394；或(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:387；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394。
在一態樣中，本發明係關於結合於MerTK蛋白之經分離抗MerTK抗體，其中該抗體包含重鏈可變域(VH)及輕鏈可變域(VL)，其中該VH及VL係選自由以下組成之群：包含胺基酸序列SEQ ID NO:37之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:72之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:290之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:309之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:291之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:310之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:292之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:311之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:293之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:312之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:294之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:313之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:295之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:314之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:296之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:315之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:290之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:316之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:297之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:317之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:298之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:318之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:292之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:319之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:299之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:320之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:300之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:311之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:301之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:321之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:302之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:322之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:303之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:311之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:304之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:322之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:305之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:322之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:301之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:323之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:301之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:324之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:301之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:325之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:306之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:326之VL；包含胺基酸序列SEQ ID NO:307之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:327之VL；及包含胺基酸序列SEQ ID NO:308之VH及包含胺基酸序列SEQ ID NO:328之VL。
在一態樣中，本發明係關於結合於MerTK蛋白之經分離抗MerTK抗體，其中該抗體包括重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該重鏈可變區包括：HVR-H1，其包含選自由SEQ ID NO:75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97及98組成之群的胺基酸序列；HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO:99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123及124組成之群的胺基酸序列；及HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO:125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156及157組成之群的胺基酸序列；且該輕鏈可變區包括：HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO:158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185及186組成之群的胺基酸序列；HVR-L2，其包含選自由SEQ ID NO:187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204及205組成之群的胺基酸序列；及HVR-L3，其包含選自由SEQ ID NO:207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232及233組成之群的胺基酸序列。
在一態樣中，本發明係關於結合於MerTK蛋白之經分離抗MerTK抗體，其中該抗體包含HVR-H1、HVR-H2、HVR-H3、HVR-L1、HVR-L2及HVR-L3，其包含以下胺基酸序列：(i) 分別地，SEQ ID NO: 75、99、125、158、187及207；(ii) 分別地，SEQ ID NO: 76、100、126、159、187及208；(iii) 分別地，SEQ ID NO: 77、101、127、160、188及209；(iv) 分別地，SEQ ID NO: 75、99、128、158、187及210；(v) 分別地，SEQ ID NO: 78、102、129、161、189及211；(vi) 分別地，SEQ ID NO: 75、103、130、158、187及212；(vii) 分別地，SEQ ID NO: 77、101、127、162、188及209；(viii) 分別地，SEQ ID NO: 75、99、131、163、187及213；(ix) 分別地，SEQ ID NO: 79、104、132、164、190及214；(x) 分別地，SEQ ID NO: 80、105、133、165、191及215；(xi) 分別地，SEQ ID NO: 81、106、134、166、192及216；(xii) 分別地，SEQ ID NO: 82、107、135、167、193及217；(xiii) 分別地，SEQ ID NO: 77、108、136、167、194及209；(xiv) 分別地，SEQ ID NO: 75、109、137、168、187及218；(xv) 分別地，SEQ ID NO: 83、99、138、158、187及210；(xvi) 分別地，SEQ ID NO: 84、99、139、169、195及219；(xvii) 分別地，SEQ ID NO: 85、99、140、170、196及220；(xviii) 分別地，SEQ ID NO: 86、99、141、171、191及221；(xix) 分別地，SEQ ID NO:87、110、142、172、197及222；(xx) 分別地，SEQ ID NO: 88、99、143、173、191及223；(xxi) 分別地，SEQ ID NO: 89、111、143、173、198及221；(xxii) 分別地，SEQ ID NO: 90、112、144、174、199及224；(xxiii) 分別地，SEQ ID NO: 91、113、145、175、200及225；(xxiv) 分別地，SEQ ID NO: 90、114、146、176、201及226；(xxv) 分別地，SEQ ID NO: 92、115、147、177、195及227；(xxvi) 分別地，SEQ ID NO: 93、116、148、178、188及209；(xxvii) 分別地，SEQ ID NO: 94、117、149、179、195及228；(xxviii) 分別地，SEQ ID NO: 95、118、150、180、187及229；(xxix) 分別地，SEQ ID NO: 95、119、151、181、187及208；(xxx) 分別地，SEQ ID NO: 90、120、152、182、202及230；(xxxi) 分別地，SEQ ID NO: 96、118、153、183、202及230；(xxxii) 分別地，SEQ ID NO: 96、121、154、181、187及210；(xxxiii) 分別地，SEQ ID NO: 90、122、155、184、203及231；(xxxiv) 分別地，SEQ ID NO: 90、122、155、184、203及231；(xxxv) 分別地，SEQ ID NO:97、123、156、185、204及232；或(xxxvi) 分別地，SEQ ID NO: 98、124、157、186、205及233。
在可與本文所提供之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體係結合於MerTK蛋白之經分離抗體，其中該抗體包含MTK-01、MTK-02、MTK-03、MTK-04、MTK-05、MTK-06、MTK-07、MTK-08、MTK-09、MTK-10、MTK-11、MTK-12、MTK-13、MTK-14、MTK-15、MTK-16、MTK-17、MTK-18、MTK-19、MTK-20、MTK-21、MTK-22、MTK-23、MTK-24、MTK-25、MTK-26、MTK-27、MTK-28、MTK-29、MTK-30、MTK-31、MTK-32、MTK-33、MTK-34、MTK-35或MTK-36抗體之HVR-H1、HVR-H2、HVR-H3、HVR-L1、HVR-L2及HVR-L3序列。在一些實施例中，該等HVR係Kabat定義之HVR、Chothia定義之HVR或AbM定義之HVR。
在可與本文所提供之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體係結合於MerTK蛋白之經分離抗體，其中該抗體包含MTK-15.1、MTK-15.2、MTK-15.3、MTK-15.4、MTK-15.5、MTK-15.6、MTK-15.7、MTK-15.8、MTK-15.9、MTK-15.10、MTK-15.11、MTK-15.12、MTK-15.13、MTK-15.14及MTK-15.15、MTK-16.1及MTK-16.2、MTK-29.1、MTK-29.2、MTK-29.3、MTK-29.4、MTK-29.5、MTK-29.6、MTK-29.7、MTK-29.8、MTK-29.9、MTK-29.10、MTK-29.11、MTK-29.12、MTK-29.13、MTK-29.14、MTK-29.15、MTK-29.16、MTK-29.17、MTK-29.18、MTK-29.19、MTK-29.20及MTK-29.21、MTK-33.1、MTK-33.2、MTK-33.3、MTK-33.4、MTK-33.5、MTK-33.6、MTK-33.7、MTK-33.8、MTK-33.9、MTK-33.10、MTK-33.11、MTK-33.12、MTK-33.13、MTK-33.14、MTK-33.15、MTK-33.16、MTK-33.17、MTK-33.18、MTK-33.19、MTK-33.20、MTK-33.21、MTK-33.22、MTK-33.23或MTK-33.24抗體之HVR-H1、HVR-H2、HVR-H3、HVR-L1、HVR-L2及HVR-L3序列。在一些實施例中，該等HVR係Kabat定義之HVR、Chothia定義之HVR或AbM定義之HVR。
在可與本文所提供之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體係結合於MerTK蛋白之經分離抗體，其中該抗體包括重鏈可變區，其中該重鏈可變區包括選自由SEQ ID NO:5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38及39組成之群的胺基酸序列。
在可與本文所提供之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體係結合於MerTK蛋白之經分離抗體，其中該抗體包括重鏈可變區，其中該重鏈可變區包括選自由SEQ ID NO:234-246、255、256、259-379及290-308組成之群的胺基酸序列。
在可與本文所提供之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體係結合於MerTK蛋白之經分離抗體，其中該抗體包括輕鏈可變區，其中該輕鏈可變區包括選自由SEQ ID NO:40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73及74組成之群的胺基酸序列。
在可與本文所提供之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體係結合於MerTK蛋白之經分離抗體，其中該抗體包括輕鏈可變區，其中該輕鏈可變區包括選自由SEQ ID NO:247-254、257、258、274-289及309-328組成之群的胺基酸序列。
在可與本文所提供之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體係結合於MerTK蛋白之經分離抗體，其中該抗體包括重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該重鏈可變區包括選自SEQ ID NO:5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38及39之胺基酸序列，且該輕鏈可變區包括選自SEQ ID NO: 40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73及74之胺基酸序列。
在可與本文所提供之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體係結合於MerTK蛋白之經分離抗體，其中該抗體包括重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該重鏈可變區包括選自234-246、255、256、259-379及290-308之胺基酸序列，且該輕鏈可變區包括選自SEQ ID NO: 247-254、257、258、274-289及309-328之胺基酸序列。
在可與本文所提供之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體係結合於MerTK蛋白之經分離抗體，其中該抗體包括重鏈可變區及輕鏈可變區，該等可變區包含以下胺基酸序列：分別地，SEQ ID NO:5及40；分別地，SEQ ID NO:6及41；分別地，SEQ ID NO:7及42；分別地，SEQ ID NO:8及43；分別地，SEQ ID NO:9及44；分別地，SEQ ID NO:10及45；分別地，SEQ ID NO:11及46；分別地，SEQ ID NO:12及47；分別地，SEQ ID NO:13及48；分別地，SEQ ID NO:14及49；分別地，SEQ ID NO:15及50；分別地，SEQ ID NO:16及51；分別地，SEQ ID NO:17及52；分別地，SEQ ID NO:18及53；分別地，SEQ ID NO:19及54；分別地，SEQ ID NO:20及55；分別地，SEQ ID NO:21及56；分別地，SEQ ID NO:22及57；分別地，SEQ ID NO:23及58；分別地，SEQ ID NO:24及59；分別地，SEQ ID NO:25及60；分別地，SEQ ID NO:26及61；分別地，SEQ ID NO:27及62；分別地，SEQ ID NO:28及63；分別地，SEQ ID NO:29及64；分別地，SEQ ID NO:30及65；分別地，SEQ ID NO:31及66；分別地，SEQ ID NO:32及67；分別地，SEQ ID NO:33及68；分別地，SEQ ID NO:34及69；分別地，SEQ ID NO:35及70；分別地，SEQ ID NO:36及71；分別地，SEQ ID NO:37及72；分別地，SEQ ID NO:38及73；及分別地，SEQ ID NO:39及74。
在一態樣中，本發明係關於結合於MerTK蛋白之經分離抗體，其中該抗體競爭性地抑制本文中之任何實施例之一或多種抗體針對結合於MerTK之結合。
在另一態樣中，本發明係關於結合於MerTK蛋白之經分離抗體，其中該抗體結合MerTK上與本文中之任何實施例之抗體基本上相同或重疊之抗原決定基。
在可與本文中之任何實施例組合的某些實施例中，MerTK蛋白為哺乳動物蛋白或人類蛋白。在可與本文中之任何實施例組合的某些實施例中，MerTK蛋白為野生型蛋白。在可與本文中之任何實施例組合的某些實施例中，MerTK蛋白為天然存在之變異體。在可與本文中之任何實施例組合的某些實施例中，抗MerTK抗體結合於人類MerTK且結合於食蟹獼猴MerTK及/或鼠科動物MerTK。在可與本文中之任何實施例組合的某些實施例中，抗MerTK抗體結合於人類MerTK及鼠科動物MerTK，結合於人類MerTK及食蟹獼猴MerTK，或結合於人類MerTK、鼠科動物MerTK及食蟹獼猴MerTK。
在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體抑制或減少一或多種配位體與MerTK之結合。在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體抑制或減少ProS與MerTK之結合。在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體抑制或減少ProS與MerTK之結合達至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%。在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以0.58 nM至25.9 nM的IC50值抑制或減少ProS與MerTK之結合。在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以0.58 nM至1 nM、1 nM至2.5 nM、2.5 nM至5 nM、5 nM至10 nM或10 nM至25 nM的IC50值抑制或減少ProS與MerTK之結合。
在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體抑制或減少Gas6與MerTK之結合。在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體抑制或減少Gas6與MerTK之結合達至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%。在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以0.29 nM至32 nM的IC50值抑制或減少Gas6與MerTK之結合。在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以0.29 nM至1 nM、1 nM至5 nM、5 nM至10 nM、10 nM至25 nM或25 nM至32 nM的IC50值抑制或減少Gas6與MerTK之結合。
在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體抑制或減少Gas6與MerTK之結合且抑制或減少ProS與MerTK之結合。在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體抑制或減少Gas6與MerTK之結合且抑制或減少ProS與MerTK之結合達至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%且其中該抗體減少或抑制Gas6與MerTK之結合達至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%。在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以0.58 nM至25.9 nM的IC50值抑制或減少Gas6與MerTK之結合且抑制或減少ProS與MerTK之結合且其中該抗體以0.29 nM至32 nM的IC50值減少或抑制Gas6與MerTK之結合。
在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體抑制或減少ProS與MerTK之結合且不抑制或減少Gas6與MerTK之結合。
在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體不抑制或減少ProS與MerTK之結合且不抑制Gas6與MerTK之結合。
在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體減少Gas6介導之AKT磷酸化。在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以0.019 nM至7.74 nM的IC50值減少Gas6介導之AKT磷酸化。在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以0.019 nM至0.25 nM、0.25 nM至0.5 nM、0.5 nM至1 nM、1 nM至2.5 nM、2.5 nM至5 nM或5 nM至7.74 nM的IC50值減少Gas6介導之AKT磷酸化。
在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以1.4 nM至81 nM的結合親和力結合於人類MerTK。在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以1.6 nM至107 nM的結合親和力結合於人類MerTK。在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以30 nM至186 nM的結合親和力結合於人類MerTK。
在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體減少或抑制ProS與MerTK之結合的效力係減少或抑制Gas6與MerTK之結合的效力的至少1.7倍、至少2.3倍、至少2.4倍、至少5倍、至少7.7倍或至少8.5倍。
在可與此處所提供之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體降低或減少吞噬細胞之胞葬作用(例如，達至少50%)。在可與此處所提供之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體降低或減少吞噬細胞之胞葬作用達至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%。在可與此處所提供之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以0.13 nM至30 nM的IC50值降低或減少吞噬細胞之胞葬作用。在可與此處所提供之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以0.13 nM至1 nM、1 nM至5 nM、5 nM至10 nM或10 nM至30 nM的IC50值降低或減少吞噬細胞之胞葬作用。在一些實施例中，吞噬細胞為巨噬細胞。在一些實施例中，吞噬細胞為腫瘤相關巨噬細胞。在一些實施例中，吞噬細胞為樹突狀細胞。
在可與本文中所提供之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體增加或誘導M1樣巨噬細胞極化。在可與本文中所提供之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體增加促發炎細胞介素之產生、表現及/或分泌。在某些實施例中，促發炎細胞介素為腫瘤壞死因子(TNF)、干擾素(IFN)或介白素-12 (IL-12)。在某些實施例中，促發炎細胞介素為趨化介素(C-X-C基序)配位體1 (CXCL-1、KC)、單核球化學吸引蛋白-1 (MCP1、CCL2)、巨噬細胞發炎蛋白-1-α (MIP-1α、CCL3)、巨噬細胞發炎蛋白-1-β (MIP-1β、CCL4)或介白素-6 (IL-6)。在可與本文中所提供之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體增加活體外促發炎細胞介素之產生、表現及/或分泌。在可與本文中所提供之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體增加活體內促發炎細胞介素之產生、表現及/或分泌。
在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體為單株抗體。在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，抗體為人類抗體。在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，抗體為人類化抗體。在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，抗體為雙特異性抗體。在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，抗體為多價抗體。在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，抗體為嵌合抗體。
在一態樣中，本發明係關於結合於MerTK蛋白之經分離抗MerTK抗體，其中該抗體為本文所提供之抗MerTK抗體的人類化形式。
在可與本文中之任何實施例組合的一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體屬於IgG類別、IgM類別或IgA類別。在一些實施例中，抗體屬於IgG類別且具有IgG1、IgG2或IgG4同型。在一些實施例中，抗體屬於IgG1同型，其具有選自由SEQ ID NO：396、397、398、399、400及401組成之群的Fc胺基酸序列。
在可與本文中之任何實施例組合的某些實施例中，抗體為全長抗體。在可與本文中之任何實施例組合的某些實施例中，抗體為抗體片段。在可與本文中之任何實施例組合的某些實施例中，抗體係結合於人類MerTK或哺乳動物MerTK蛋白上之抗原決定基的抗體片段。在可與本文中之任何實施例組合的某些實施例中，抗體片段為Fab、Fab’、Fab’-SH、F(ab’)2、Fv或scFv片段。
在另一態樣中，本發明係關於一種經分離核酸，其包括編碼前述實施例中之任一者的抗MerTK抗體之核酸序列。在一些實施例中，本發明係關於包括前述實施例中之任一者的核酸之載體。在一些實施例中，本發明係關於一種經分離宿主細胞，其包括前述實施例中之任一者的核酸或前述實施例中之任一者的載體。在一些實施例中，本發明係關於一種經分離宿主細胞，其包含(i)包含編碼前述實施例中之任一者的抗MerTK抗體之VH之核酸序列的核酸及(ii)包含編碼抗MerTK抗體之VL之核酸序列的核酸。
在另一態樣中，本發明係關於一種產生結合於人類MerTK抗體之抗體的方法，其包括培養前述實施例中之任一者的宿主細胞，使得產生抗MerTK抗體。在某些實施例中，該方法進一步包括回收由細胞產生之抗MerTK抗體。
在另一態樣中，本發明係關於一種醫藥組合物，其包括前述實施例中之任一者的抗MerTK抗體及醫藥學上可接受之載劑。
在一態樣中，本發明係關於一種治療患有癌症之個體的方法，該方法包括向有需要之個體投與治療有效量的前述實施例中之任一者的抗MerTK抗體。在一些實施例中，癌症為結腸癌、卵巢癌、肝癌或子宮內膜癌。在一些實施例中，癌症係選自肉瘤、膀胱癌、乳癌、結腸癌、子宮內膜癌、腎癌(kidney cancer)、腎癌(renal cancer)、白血病、肺癌、非小細胞肺癌、黑色素瘤、淋巴瘤、胰臟癌、前列腺癌、卵巢癌、胃癌、甲狀腺癌、子宮癌、肝癌、子宮頸癌、睾丸癌、鱗狀細胞癌、神經膠質瘤、神經膠質母細胞瘤、腺瘤及神經母細胞瘤。在一些實施例中，癌症係選自多形性神經膠質母細胞瘤、膀胱癌及食道癌。在一些實施例中，癌症為三陰性乳癌。在一些實施例中，癌症可為原發性腫瘤。在一些實施例中，癌症可為第二位點處源自上文癌症類型中之任一者的轉移性腫瘤。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體可用於治療有需要之個體的癌症，其中該癌症表現MerTK。在一些實施例中，減少胞葬作用之本發明之抗MerTK抗體的投與不會在個體中導致視網膜病變。在一些實施例中，該方法進一步包括向個體投與抗PD-L1抗體、抗PD-L2抗體或抗PD抗體(例如，同時或依序地)。
在一態樣中，本發明係關於一種偵測樣品中之MerTK的方法，該方法包括使該樣品與前述實施例中之任一者的抗MerTK抗體接觸，視情況其中該方法進一步包括偵測該抗體與樣品中之MerTK之結合。
應理解，本文所述之多個實施例之一種、一些或全部特性可組合以形成本發明之其他實施例。本發明之此等及其他態樣對於熟習此項技術者而言將變得顯而易知。本發明之此等及其他態樣藉由以下實施方式進一步描述。
相關申請案之交叉引用
本申請案主張2019年12月13日提出申請之美國臨時申請案第62/947,855號、2020年4月28日提出申請之美國臨時申請案第63/016,821號及2020年12月4日提出申請之美國臨時申請案第63/121,773號的權益，該等美國臨時申請案中之每一者均以引用之方式整體併入本文中。呈 ASCII 文本檔案形式之序列表的提交
呈ASCII文本檔案形式之以下提交的內容係以引用之方式整體併入本文中：序列表之電腦可讀形式(CRF) (檔案名稱：4503_010PC03_SeqListing_ST25.TXT，記錄日期：2020年12月11日，大小：477,412位元組)。
本發明係關於抗MerTK抗體(例如，單株抗體)；製備及使用此等抗體之方法；包含此等抗體之醫藥組合物；編碼此等抗體之核酸；及包含編碼此等抗體之核酸的宿主細胞。
本文所描述或所提及之技術及程序一般由熟習此項技術者充分理解且通常使用習知方法加以使用，諸如廣泛使用之方法，諸如Sambrook等人，Molecular Cloning: A Laboratory Manual 第3版 (2001) Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.；Current Protocols in Molecular Biology (F.M. Ausubel等人編, (2003)；Monoclonal Antibodies: A Practical Approach (P. Shepherd及C. Dean編, Oxford University Press, 2000)中所述之彼等。I. 定義
除非另外指示，否則術語「MerTK」或「MerTK多肽」或「MerTK蛋白」在本文中可互換使用，在本文中係指來自任何脊椎動物來源，包括哺乳動物，諸如靈長類動物(例如，人類及食蟹獼猴(cyno))及囓齒動物(例如，小鼠及大鼠)之任何天然MerTK。MerTK亦稱作c-mer、MER、原癌基因c-Mer、受體酪胺酸激酶MerTK、酪胺酸-蛋白激酶Mer、STK激酶、RP38及MGC133349。在一些實施例中，該術語涵蓋野生型序列及天然存在之變異體序列，例如剪接變異體或等位基因變異體。在一些實施例中，該術語涵蓋「全長」未加工MerTK以及由細胞中之加工產生的任何形式之MerTK。在一些實施例中，MerTK為人類MerTK。如本文所用，術語「人類MerTK」係指具有胺基酸序列SEQ ID NO: 1之多肽。
術語「抗MerTK抗體」、「結合於MerTK之抗體」及「特異性地結合MerTK之抗體」係指能夠以足夠親和力結合MerTK之抗體，使得該抗體可作為診斷及/或治療劑用於靶向MerTK。在一實施例中，抗MerTK抗體與無關、非MerTK多肽之結合程度低於該抗體與MerTK之結合的約10%，如例如藉由放射性免疫分析(RIA)所量測。在某些實施例中，結合於MerTK之抗體具有＜ 1 μM、＜ 100 nM、＜ 10 nM、＜ 1 nM、＜ 0.1 nM、＜ 0.01 nM或＜ 0.001 nM (例如10-8 M或更低，例如10-8 M至10-13 M，例如10-9 M至10-13 M)之解離常數(KD)。在某些實施例中，抗MerTK抗體結合於在來自不同物種之MerTK中保守的MerTK抗原決定基。
關於抗體與標靶分子之結合，術語「特異性結合」或「特異性地結合」或對特定多肽或特定多肽標靶上之抗原決定基「具特異性」意謂顯著不同於非特異性相互作用之結合。特異性結合可例如藉由與對照分子之結合相比測定分子結合來量測。例如，特異性結合可藉由與類似於標靶之對照分子(例如，過量非標記標靶)競爭來測定。在此情況下，若經標記標靶與探針之結合受到過量非標記標靶競爭性地抑制，則指示特異性結合。如本文所用，術語「特異性結合」或「特異性地結合於」或對特定多肽或特定多肽標靶上之抗原決定基「具特異性」可例如藉由對標靶具有約10-4 M或更低、10-5 M或更低、10-6 M或更低、10-7 M或更低、10-8 M或更低、10-9 M或更低、10-10 M或更低、10-11 M或更低、10-12 M或更低中之任一者之KD或在10-4 M至10-6 M或10-6 M至10-10 M或10-7 M至10-9 M範圍內之KD的分子展現。如熟練技術人員應理解，親和力及KD值相反地相關。對抗原之高親和力係藉由低KD值量度。在一實施例中，術語「特異性結合」係指如下結合，其中分子結合於特定多肽或特定多肽上之抗原決定基，實質上未結合於任何其他多肽或多肽抗原決定基。
術語「免疫球蛋白 」 (Ig)與「抗體 」在本文中可互換使用。術語「抗體」在本文中以最广泛意义使用且特定地涵蓋單株抗體、多株抗體、多特異性抗體(例如雙特異性抗體) (包括由至少兩種完整抗體形成之彼等)及抗原結合抗體片段，只要該等抗原結合抗體片段展現所需生物活性即可。
「天然抗體 」通常係約150,000道爾頓之異四聚醣蛋白，由兩條一致輕(「L」)鏈及兩條一致重(「H」)鏈構成。各輕鏈由一個共價二硫鍵連接至重鏈，而二硫鍵聯之數目因不同免疫球蛋白同型之重鏈而變化。各重鏈及輕鏈亦具有規則間隔之鏈內二硫橋。各重鏈具有處於一端之可變域(VH )及繼其之後的衆多恒定域。各輕鏈具有處於一端之可變域(VL )及處於其另一端之恒定域；輕鏈之恒定域與重鏈之第一恒定域對準，且輕鏈可變域與重鏈之可變域對準。據信特定胺基酸殘基在輕鏈與重鏈可變域之間形成界面。
關於不同類別之抗體之結構及特性，參見例如Basic and Clinical Immunology , 第8版, Daniel P. Stites, Abba I. Terr及Tristram G. Parslow (編), Appleton & Lange, Norwalk, CT, 1994, 第71頁及第6章。
來自任何脊椎動物物種之輕鏈均可基於其恆定域之胺基酸序列而分配至稱作卡帕(「κ」)及拉姆达(「λ」)之兩種明顯不同的類型之一。視免疫球蛋白之重鏈(CH)的恒定域之胺基酸序列而定，免疫球蛋白可分配至不同類別或同型。存在五個類別之免疫球蛋白：IgA、IgD、IgE、IgG及IgM，其重鏈分別指定為阿爾法(「α」)、德爾塔(「δ」)、艾普西隆(「ε」)、伽馬(「γ」)及繆(「μ」)。γ及α類別基於CH序列及功能之相對較小差異而進一步分成子类(同型)，例如人類表現以下子类：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1及IgA2。不同類別之免疫球蛋白之次單元結構及三維組態係熟知的且一般描述於例如Abbas等人, Cellular and Molecular Immunology, 第4版(W.B. Saunders Co., 2000)中。
諸如本發明之抗MerTK抗體之抗體的「可變區 」或「可變域 」係指抗體重鏈或輕鏈之胺基端域。重鏈及輕鏈之可變域分別可稱作「VH 」及「VL 」。此等域一般為抗體之最可變部分(相對於相同類別之其他抗體)且含有抗原結合位點。
術語「可變 」係指如下實情，即可變域之某些區段在抗體(諸如本發明之抗MerTK抗體)之中在序列方面廣泛不同。可變域介導抗原結合且限定特定抗體對其特定抗原之特異性。然而，可變性未均勻地分佈於可變域之整個跨度內。相反，其集中於輕鏈及重鏈可變域兩者中之三個稱作高變區(HVR)之區段中。可變域之更高度保守部分係稱作構架區(FR)。天然重鏈及輕鏈之可變域各自包含四個FR區，該等FR區主要採用β-折疊組態，由三個HVR連接，其形成連接β-折疊結構且在一些情況下形成β-折疊結構之一部分的環。各鏈中之HVR由FR區緊密保持在一起且與另一鏈中之HVR一起促進抗體之抗原結合位點的形成(參見Kabat等人, Sequences of Immunological Interest , 第五版, National Institute of Health, Bethesda, MD (1991))。恆定域未直接地參與抗體與抗原之結合，但展現多種效應子功能，諸如抗體參與抗體依賴性細胞毒性。
如本文所用，術語「單株抗體 」係指獲自實質上均質抗體之群體的抗體，諸如本發明之單株抗MerTK抗體，亦即，構成該群體之個別抗體除了可微量存在之可能天然存在之突變及/或轉譯後修飾(例如異構化、醯胺化等)以外係一致的。針對單一抗原位點，單株抗體具高度特異性。與典型地包括針對不同決定子(抗原決定基)之不同抗體的多株抗體製劑相反，各單株抗體係針對抗原上之單一決定子。除了其特異性以外，單株抗體之優勢亦在於其係藉由融合瘤培養而合成，未受其他免疫球蛋白污染。修飾語「單株」指示抗體之特徵係獲自實質上均質抗體群體，而不應被視為需要藉由任何特定方法產生抗體。舉例而言，欲根據本發明使用之單株抗體可藉由多種技術製造，包括但不限於以下方法中之一或多種：用DNA、病毒樣粒子、多肽及/或細胞中之一或多者使動物(包括但不限於大鼠、小鼠、兔、豚鼠、倉鼠及/或雞)免疫之方法、融合瘤方法、B細胞選殖方法、重組DNA方法及用於在具有部分或全部人類免疫球蛋白基因座或編碼人類免疫球蛋白序列之基因的動物中產生人類或人類樣抗體之技術。
術語「全長抗體 」、「完整抗體 」或「全 抗體」可互換使用以指如與抗體片段相對，呈其實質上完整形式之抗體，諸如本發明之抗MerTK抗體。特定言之，全抗體包括具有包括Fc區之重鏈及輕鏈的抗體。恆定域可為天然序列恆定域(例如，人類天然序列恆定域)或其胺基酸序列變異體。在一些情況下，完整抗體可具有一或多種效應子功能。
「抗體片段」 係指非完整抗體之分子，其包含完整抗體中結合該完整抗體所結合之抗原的部分。抗體片段之實例包括Fab、Fab'、F(ab')2 及Fv片段；雙功能抗體；線性抗體(參見美國專利5641870，實例2；Zapata等人, Protein Eng. 8(10):1057-1062 (1995))；單鏈抗體分子及由抗體片段形成之多特異性抗體。
抗體(諸如本發明之抗MerTK抗體)之木瓜蛋白酶消化產生兩個一致抗原結合片段，稱作「Fab 」片段，及殘餘「Fc 」片段(名稱反映容易結晶之能力)。Fab片段由完整輕鏈連同重鏈之可變區域(VH )及一條重鏈之第一恒定域(CH 1)組成。各Fab片段就抗原結合而言為單價的，亦即，其具有單一抗原結合位點。抗體之胃蛋白酶處理產生單一大F(ab')2 片段，其大致對應於具有不同抗原結合活性之兩個二硫鍵連接之Fab片段且仍能够與抗原交聯。Fab'片段與Fab片段的不同之處在於在CH 1域之羧基端具有數個額外殘基，包括來自抗體鉸鏈區之一或多個半胱胺酸。Fab'-SH在本文中係其中恆定域之半胱胺酸殘基携帶游離硫醇基之Fab'的名稱。F(ab')2 抗體片段最初作為Fab'片段對產生，該等片段之間具有鉸鏈半胱胺酸。抗體片段之其他化學偶合亦為已知的。
Fc片段包含藉由二硫鍵保持在一起之兩條重鏈的羧基端部分。抗體之效應子功能由Fc區中之序列決定，該區亦藉由在某些類型之細胞上發現的Fc受體(FcR)識別。
抗體(諸如本發明之抗MerTK抗體)之「功能片段 」包含完整抗體之一部分，一般包括完整抗體之抗原結合或可變區或者抗體中保留或具有經修飾之FcR結合能力的Fc區。抗體片段之實例包括線性抗體、單鏈抗體分子及由抗體片段形成之多特異性抗體。
術語「雙功能抗體 」係指藉由以下方式製備之小抗體片段：在VH 與VL 域之間用短連接子(約5-10個殘基)構築sFv片段(參見前一段)，以致實現可變域之鏈間而非鏈內配對，由此產生二價片段，亦即，具有兩個抗原結合位點之片段。雙特異性雙功能抗體係兩個「交叉」 sFv片段之異二聚體，其中該兩個抗體之VH 及VL 域存在於不同的多肽鏈上。
如本文所用，「嵌合抗體 」係指抗體(免疫球蛋白)，諸如本發明之嵌合抗MerTK抗體，其中重鏈及/或輕鏈之一部分與源於特定物種或者屬於特定抗體類別或子類之抗體中的相應序列一致或同源，而該(等)鏈之剩餘部分與源於另一物種或者屬於另一抗體類別或子類之抗體以及該等抗體之片段中的相應序列一致或同源，只要其展現所需生物活性即可。本文中所關注之嵌合抗體包括PRIMATIZED® 抗體，其中該抗體之抗原結合區係源於藉由例如用所關注之抗原使獼猴免疫而產生之抗體。如本文所用，「人類化抗體」用作「嵌合抗體」之子集。
非人類(例如鼠科動物)抗體之「人類化 」形式(諸如本發明之抗MerTK抗體的人類化形式)係包含來自非人類HVR之胺基酸殘基及來自人類FR之胺基酸殘基的嵌合抗體。在某些實施例中，人類化抗體將包含至少一個且典型地兩個可變域中之實質上全部，其中全部或實質上全部HVR (例如，CDR)對應於非人類抗體之彼等，且全部或實質上全部FR對應於人類抗體之彼等。人類化抗體視情況可包含源於人類抗體之抗體恒定區的至少一部分。抗體(例如，非人類抗體)之「人類化形式」係指已經歷人類化之抗體。
「人類抗體 」係胺基酸序列對應於由人類產生及/或已使用如本文所揭示之用於製造人類抗體之技術中之任一種製造的抗體(諸如本發明之抗MerTK抗體)之彼胺基酸序列的抗體。人類抗體之此定義明確排除包含非人類抗原結合殘基之人類化抗體。人類抗體可使用此項技術中已知之多種技術，包括噬菌體呈現文庫及酵母呈現文庫來製造。人類抗體可藉由向已經修飾以回應於抗原攻擊而產生該等抗體但内源基因座已失能之基因轉殖動物(例如，經免疫之異种小鼠)投與抗原来製備以及經由人類B細胞融合瘤技術產生。
術語「高變區 」、「HVR 」或「HV 」當用於本文中時係指抗體可變域(諸如本發明之抗MerTK抗體之彼抗體可變域)中在序列方面具高變性及/或形成結構確定之環的區。一般而言，抗體包含六個HVR；三個在VH 中(H1、H2、H3)，且三個在VL 中(L1、L2、L3)。在天然抗體中，H3及L3呈現該六個HVR之最大多樣性，且尤其，據信H3在向抗體賦予精細特異性方面發揮獨特作用。僅由重鏈組成之天然存在之駱駝科動物抗體在輕鏈不存在下具功能性且穩定。
本文中使用且涵蓋許多HVR描繪。在一些實施例中，HVR基於序列變異性可為Kabat互補決定區(CDR)且最常用(Kabat等人，上述)。在一些實施例中，HVR可為Chothia CDR。而Chothia係指結構環之位置(Chothia及LeskJ. Mol. Biol. 196:901-917 (1987))。在一些實施例中，HVR可為AbM HVR。AbM HVR表示Kabat CDR與Chothia結構環之間的折衷，且由Oxford Molecular之AbM抗體建模軟體使用。在一些實施例中，HVR可為「contact」 HVR。「contact」 HVR係基於對可用之複雜晶體結構的分析。以下注明來自此等HVR中之每一者的殘基。
環 Kabat AbM Chothia Contact
L1 L24-L34 L24-L34 L26-L32 L30-L36
L2 L50-L56 L50-L56 L50-L52 L46-L55
L3 L89-L97 L89-L97 L91-L96 L89-L96
H1 H31-H35B H26-H35B H26-H32 H30-H35B (Kabat編號)
H1 H31-H35 H26-H35 H26-H32 H30-H35 (Chothia編號)
H2 H50-H65 H50-H58 H53-H55 H47-H58
H3 H95-H102 H95-H102 H96-H101 H93-H101
HVR可包含如下「延伸之HVR」：VL中之24-36或24-34 (L1)、46-56或50-56 (L2)及89-97或89-96 (L3)，及VH中之26-35 (H1)、50-65或49-65 (較佳實施例) (H2)及93-102、94-102或95-102 (H3)。可變域殘基係根據Kabat等人，上述，針對此等延伸之HVR定義中之每一者進行編號。
「構架 」或「FR 」殘基係除如本文所定義之HVR殘基以外的彼等可變域殘基。
如本文所用，「受體人類構架 」係包含源於人類免疫球蛋白構架或人類共有構架之VL 或VH 構架之胺基酸序列的構架。「源於」人類免疫球蛋白構架或人類共有構架之受體人類構架可包含其相同胺基酸序列，或其可包含預存在之胺基酸序列變化。在一些實施例中，預存在之胺基酸變化之數目為10或更少、9或更少、8或更少、7或更少、6或更少、5或更少、4或更少、3或更少或者2或更少。在預存在之胺基酸變化存在於VH中時，較佳彼等變化僅出現於位置71H、73H及78H中之三者、二者或一者處；舉例而言，在彼等位置處之胺基酸殘基可變為71A、73T及/或78A。在一實施例中，VL受體人類構架在序列方面與VL 人類免疫球蛋白構架序列或人類共有構架序列一致。
「人類共有構架 」係表示在選擇人類免疫球蛋白VL 或VH 構架序列時最常出現之胺基酸殘基的構架。一般而言，人類免疫球蛋白VL 或VH 序列自可變域序列之子組進行選擇。一般而言，序列之子組係如Kabat等人,Sequences of Proteins of Immunological Interest , 第5版 Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)中之子組。 實例包括關於VL ，子組可為如Kabat等人，上述中之子組κI、κII、κIII或κIV。另外，關於VH ，子組可為如Kabat等人，上述中之子組I、子組II或子組III。
例如本發明之抗MerTK抗體之規定位置處的「胺基酸修飾 」係指規定殘基之取代或缺失，或者在規定殘基相鄰處插入至少一個胺基酸殘基。在規定殘基「相鄰」處插入意謂在距其一至兩個殘基內插入。插入可在規定殘基之N端或C端。本文中之較佳胺基酸修飾為取代。
「Fv 」係包含完全抗原識別及結合位點之最小抗體片段。此片段由一個重鏈可變區域與一個輕鏈可變區域緊密、非共價締合之二聚體組成。由此兩個域之折疊發出六個高變環(來自H鏈及L鏈之各3個環)，該等高變環貢獻胺基酸殘基以供抗原結合且向抗體賦予抗原結合特異性。然而，即使單一可變域(或僅包含三個抗原特異性HVR之半Fv)亦能夠識別且結合抗原，不過親和力低於完整結合位點。
「單鏈 Fv 」亦縮寫為「sFv 」或「scFv 」，其係包含連接至單一多肽鏈中之VH及VL抗體域的抗體片段。較佳地，sFv多肽進一步包含在VH 與VL 域之間的多肽連接子，其使得sFv能夠形成抗原結合所需之結構。
抗體「效應子功能 」係指可歸因於抗體Fc區(天然序列Fc區或胺基酸序列變異體Fc區)之彼等生物活性，且隨抗體同型而變化。
術語「Fc 區 」在本文中用於定義免疫球蛋白重鏈之C端區，包括天然序列Fc區及變異體Fc區。儘管免疫球蛋白重鏈Fc區之邊界可能變化，但人類IgG重鏈Fc區通常係定義為自位置Cys226處之胺基酸殘基或自Pro230延伸至其羧基端。Fc區之C端離胺酸(殘基447，根據EU編號系統)可例如在抗體之產生或純化期間或藉由重組工程改造編碼抗體之重鏈的核酸而經移除。因此，完整抗體之組合物可包含移除所有K447殘基之抗體群體、未移除K447殘基之抗體群體及具有含及不含K447殘基之抗體的混合物之抗體群體。用於本發明抗體中之合適天然序列Fc區包括人類IgG1、IgG2、IgG3及IgG4。
「天然序列 Fc 區 」包含與自然界中發現之Fc區之胺基酸序列一致的胺基酸序列。天然序列人類Fc區包括天然序列人類IgG1 Fc區(非A及A同種異型)；天然序列人類IgG2 Fc區；天然序列人類IgG3 Fc區；及天然序列人類IgG4 Fc區以及其天然存在之變異體。
「變異體 Fc 區 」包含由於至少一種胺基酸修飾、較佳地一或多個胺基酸取代而與天然序列Fc區之胺基酸序列不同的胺基酸序列。較佳地，變異體Fc區與天然序列Fc區或與親本多肽之Fc區相比具有天然序列Fc區中或親本多肽之Fc區中的至少一個胺基酸取代，例如約一個至約十個胺基酸取代，且較佳地約一個至約五個胺基酸取代。本文中之變異體Fc區將較佳地與天然序列Fc區及/或與親本多肽之Fc區具有至少80%同源性，且最佳地與其具有至少90%同源性，更佳地與其具有至少95%同源性。
「Fc 受體 」或「FcR 」描述結合於抗體之Fc區之受體。較佳FcR為天然序列人類FcR。此外，較佳FcR係結合IgG抗體之FcR (γ受體)且包括FcγRI、FcγRII及FcγRIII子類之受體，包括此等受體之等位基因變異體及替代剪接形式，FcγRII受體包括FcγRIIA (「激活受體」)及FcγRIIB (「抑制受體」)，其具有相似的胺基酸序列，主要不同之處在於其細胞質域。激活受體FcγRIIA在其細胞質域中含有基於免疫受體酪胺酸之激活基序(「ITAM」)。抑制受體FcγRIIB在其細胞質域中含有基於免疫受體酪胺酸之抑制基序(「ITIM」)。在本文中，術語「FcR」涵蓋其他FcR，包括有待將來鑑別之彼等。FcR亦可增加抗體之血清半衰期。
如本文所用，「胺基酸序列一致性百分比 (%) 」及「同源性百分比 (%) 」就肽、多肽或抗體序列而言係指在比對序列且在必要時引入空位以實現最大百分比序列一致性之後，候選序列中與特定肽或多肽序列中之胺基酸殘基一致之胺基酸殘基的百分率，且任何保守取代皆未被視為序列一致性之一部分。出於測定胺基酸序列一致性百分比之目的而進行之比對可以在本領域之技能內的多種方式，例如使用公開可得之電腦軟體，諸如BLAST、BLAST-2、ALIGN或MEGALIGNTM (DNASTAR)軟體來實現。熟習此項技術者可確定用於量測比對之適當參數，包括在所比較之序列的全長內實現最大比對所需之此項技術中已知之任何算法。
當在競爭同一抗原決定基或重疊抗原決定基之抗體的背景中使用時，術語「競爭 」意謂如藉由分析所測定之抗體之間的競爭，在該分析中所測試之抗體阻止或抑制(例如，減少)參考分子(例如，配位體或參考抗體)特異性結合於共同抗原(例如，MerTK或其片段)。多種類型之競爭性結合分析可用於確定抗體是否與另一抗體競爭，例如：固相直接或間接放射性免疫分析(RIA)、固相直接或間接酶免疫分析(EIA)、夾心競爭分析(參見例如Stahli等人, 1983, Methods in Enzymology 9:242-253)；固相直接生物素-抗生物素蛋白EIA (參見例如Kirkland等人, 1986, J. Immunol. 137:3614-3619)；固相直接標記分析、固相直接標記夾心分析(參見例如Harlow及Lane, 1988, Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press)；使用I-125標記之固相直接標記RIA (參見例如Morel等人, 1988, Molec. Immunol. 25:7-15)；固相直接生物素-抗生物素蛋白EIA (參見例如Cheung等人, 1990, Virology 176:546-552)；及直接標記RIA (Moldenhauer等人, 1990, Scand. J. Immunol. 32:77-82)。典型地，該種分析涉及使用結合於攜帶此等未經標記之測試抗體及經標記之參考抗體中的任一者之固體表面或細胞之經純化抗原。藉由測定在測試抗體存在下結合於固體表面或細胞之標記的量來量測競爭性抑制。通常，測試抗體過量存在。藉由競爭分析鑑別之抗體(競爭性抗體)包括與參考抗體結合於同一抗原決定基之抗體，及結合於與由參考抗體結合之抗原決定基足夠接近以發生空間位阻的相鄰抗原決定基之抗體。通常，當競爭性抗體過量存在時，其將抑制(例如減少)參考抗體與共同抗原之特異性結合達至少20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、85%、90%、95%、97.5%及/或接近100%。
如本文所用，MerTK多肽與第二多肽之間的「相互作用 」涵蓋但不限於蛋白質-蛋白質相互作用、物理相互作用、化學相互作用、結合、共價結合及離子結合。如本文所用，當抗體破壞、減少或完全地消除兩種多肽之間的相互作用時，該抗體抑制該兩種多肽之間的「相互作用」。當本發明抗體結合於該兩種多肽之一時，其抗體抑制該兩種多肽之間的「相互作用」。在一些實施例中，相互作用可經抑制達至少20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、85%、90%、95%、97.5%及/或接近100%中之任一者。
術語「抗原決定基」包括能夠由抗體結合之任何決定子。抗原決定基係抗原中由靶向彼抗原之抗體結合的區，且當抗原為多肽時，包括直接地接觸抗體之特定胺基酸。大多數情況下，抗原決定基位於多肽上，但在一些情況下，可位於諸如核酸之其他種類之分子上。抗原決定基決定子可包括諸如胺基酸、糖側鏈、磷酰基或磺酰基之分子的化學活性表面分組，且可具有特定三維結構特徵及/或特定電荷特徵。一般而言，對特定標靶抗原具特異性之抗體將優先地識別多肽及/或巨分子之複雜混合物中之標靶抗原上之抗原決定基。
「經分離 」抗體(諸如本發明之經分離抗MerTK抗體)係已自其產生環境(例如，天然地或重組地)之組分鑑別、分離及/或回收的抗體。較佳地，經分離抗體不與來自其產生環境之所有其他污染組分締合。來自其產生環境之污染組分(諸如由重組轉染細胞產生之組分)係將典型地干擾抗體之研究、診斷或治療用途的材料，且可包括酶、激素及其他蛋白質或非蛋白質溶質。在較佳實施例中，抗體將經純化：(1)至超過95重量%之抗體，如藉由例如罗氏方法(Lowry method)所测定，且在一些實施例中至超過99重量%；(2)至足以獲得N端或內部胺基酸序列之至少15個殘基的程度，藉由使用轉杯式測序儀所測定，或(3)至均質，藉由在非還原或還原條件下使用考馬斯藍(Coomassie blue)或較佳地銀染色進行SDS-PAGE所測定。經分離抗體包括重組T細胞內之原位抗體，因為抗體之天然環境的至少一種組分將不存在。然而，經分離多肽或抗體通常將藉由至少一個純化步驟來製備。
編碼抗體(諸如本發明之抗MerTK抗體)之「經分離 」核酸分子係自至少一種污染核酸分子鑑別且分離之核酸分子，該核酸分子在其產生環境中通常與該污染核酸分子締合。較佳地，經分離核酸與所有與產生環境相關之組分均不締合。編碼本文中之多肽及抗體之經分離核酸分子係呈不同於其在自然界中之發現形式或設定的形式。因此，經分離核酸分子不同於天然存在於細胞中之編碼本文中之多肽及抗體的核酸。
如本文所用，術語「載體 」意欲指能夠轉運已與其連接之另一核酸的核酸分子。一種類型之載體為「質體」，其係指其中可接合額外DNA區段之環狀雙鏈DNA。另一類型之載體為噬菌體載體。另一類型之載體為病毒載體，其中額外DNA區段可接合至病毒基因體中。某些載體能夠在引入其之宿主細胞中自主複製(例如，具有細菌複製起點之細菌載體及游離型哺乳動物載體)。其他載體(例如非游離型哺乳動物載體)可在引入至宿主細胞中時整合至宿主細胞之基因體中，且由此與宿主基因體一起複製。此外，某些載體能夠指導與其可操作性連接之基因的表現。此等載體在本文中稱作「重組表現載體」或簡稱作「表現載體」。一般而言，在重組DNA技術中具有實用性之表現載體通常呈質體形式。在本說明書中，「質體」及「載體」可互換使用，因為質體為最常用之載體形式。
如本文中可互換使用之「多肽 」或「核酸 」係指任何長度之核苷酸聚合物，且包括DNA及RNA。核苷酸可為去氧核糖核苷酸、核糖核苷酸、經修飾之核苷酸或鹼基及/或其類似物，或者可藉由DNA或RNA聚合酶或藉由合成反應併入至聚合物中之任何受質。
「宿主細胞 」包括可作為或已作為用於併入聚核苷酸插入物之載體之接受者的個別細胞或細胞培養物。宿主細胞包括單一宿主細胞之子代，且該子代可歸因於天然、偶然或有意突變而未必與原始親本細胞完全一致(在形態方面或在基因體DNA補體方面)。宿主細胞包括經本發明之聚核苷酸活體內轉染的細胞。
如本文所用，「載劑 」包括在所用劑量及濃度下對暴露於其之細胞或哺乳動物無毒的醫藥學上可接受之載劑、賦形劑或穩定劑。
如本文所用，術語「治療 」係指經設計用於在臨床病理學之過程中改變所治療之個體的自然病程的臨床干預。所需治療效果包括降低特定疾病、病症或疾患之進展速率、改善或減輕其病理狀態以及緩解或改良其預後。例如，若與特定疾病、病症或疾患有關之一或多種症狀得以緩解或消除，則個體經成功「治療」。
「有效量 」係指至少在必需之劑量及時間段下有效實現所需治療結果之量。有效量可在一或多次投與中提供。有效量亦為其中治療之任何毒性或有害效應均由治療有益效應超過之量。關於治療用途，有益或所需結果包括以下臨床結果，諸如減輕由疾病引起之一或多種症狀、增加罹患疾病者之生活品質、降低治療疾病所需之其他藥劑之劑量、增强另一藥劑之效應(諸如經由靶向)、延遲疾病之進展及/或延長存活。藥物、化合物或醫藥組合物之有效量係足以直接地或間接地實現治療性治療之量。如在臨床情形下應理解，藥物、化合物或醫藥組合物之有效量可或可不聯合另一藥物、化合物或醫藥組合物來達成。因此，在投與一或多種治療劑之情形下可考慮「有效量」，且若聯合一或多種其他劑可達成或達成所需結果，則可考慮給予有效量之單一劑。
出於治療目的，「個體 」係指歸類為哺乳動物之任何動物，包括人類、家畜及農場動物，以及動物園動物、競技動物或寵物，諸如犬、馬、兔、牛、豬、倉鼠、沙鼠、小鼠、雪貂、大鼠、貓及其類似動物。 在一些實施例中，個體為人類。
如本文所用，與另一化合物或組合物「聯合 」投與包括同時投與及/或在不同時間投與。聯合投與亦涵蓋呈共調配物形式投與或呈獨立組合物形式投與，包括以不同給藥頻率或時間間隔，及使用相同投與途徑或不同投與途徑。在一些實施例中，聯合投與意謂作為同一治療方案之一部分的投與。
如本文所用，術語「約 」係指此技術領域中之技術人員容易獲知之各別值之通常誤差範圍。本文中提及「約 」某一值或參數包括(且描述)針對彼值或參數自身之實施例。
除非上下文另外清楚指示，否則如本文及隨附申請專利範圍中所用，單數形式「一(a)」、「一(an)」及「該」包括複數個提及物。舉例而言，對一「抗體」之提及係對一至多個抗體之提及，諸如莫耳量，且包括熟習此項技術者已知之其等效物，諸如此類。
應理解，本文中所述之本發明之態樣及實施例包括「包含」態樣及實施例、「由其組成」及「基本上由其組成」。 I. 抗 MerTK 抗體
本文提供抗MerTK抗體。本文所提供之抗體可用於例如MerTK相關病症之診斷或治療。
在一態樣中，本發明提供結合於本發明之MerTK蛋白或多肽內的抗原決定基之經分離(例如，單株)抗體。本發明之MerTK蛋白或多肽包括但不限於哺乳動物MerTK蛋白或多肽、人類MerTK蛋白或多肽、小鼠(鼠科動物) MerTK蛋白或多肽及食蟹獼猴MerTK蛋白或多肽。本發明之MerTK蛋白及多肽包括MerTK的天然存在之變異體。在一些實施例中，本發明之MerTK蛋白及多肽係膜結合的。在一些實施例中，本發明之MerTK蛋白及多肽係MerTK之可溶性細胞外域。
在一些實施例中，MerTK在細胞中表現。在一些實施例中，MerTK在吞噬細胞，包括但不限於巨噬細胞及樹突狀細胞中表現。在一些實施例中，MerTK在單核球、天然殺手細胞、天然殺手T細胞、小神經膠質細胞、內皮細胞、巨核細胞及血小板中表現。在一些實施例中，亦在卵巢、前列腺、睾丸、肺、視網膜及腎中發現高水準之MerTK表現。另外，MerTK在多種癌症中呈現異位或過表現(Linger等人, 2008, Adv Cancer Res, 100:35-83)。 抗體活性
在一些實施例中，提供結合於人類MerTK但不結合於食蟹獼猴MerTK之抗MerTK抗體。在一些實施例中，提供結合於人類MerTK但不結合於鼠科動物MerTK之抗MerTK抗體。在一些實施例中，提供結合於人類MerTK但不結合於食蟹獼猴MerTK且不結合於鼠科動物MerTK之抗MerTK抗體。在一些實施例中，提供結合於人類MerTK且結合於食蟹獼猴MerTK之抗MerTK抗體。在一些實施例中，提供結合於人類MerTK且結合於食蟹獼猴MerTK但不結合於鼠科動物MerTK之抗MerTK抗體。在一些實施例中，提供結合於人類MerTK且結合於鼠科動物MerTK之抗MerTK抗體。在一些實施例中，提供結合於人類MerTK且結合於鼠科動物MerTK但不結合食蟹獼猴MerTK之抗MerTK抗體。在一些實施例中，提供結合於人類MerTK、食蟹獼猴MerTK及鼠科動物MerTK之抗MerTK抗體。結合於人類、食蟹獼猴及鼠科動物MerTK之抗MerTk抗體有利於在疾病(例如癌症)之哺乳動物模型中執行活體內研究，以及在非人類靈長類動物中執行研究。 MerTK 結合搭配物
本發明之MerTK蛋白與一或多種配位體或結合搭配物，包括但不限於蛋白S (ProS或ProS1)、生長停滯特異性基因6 (Gas6)、Tubby、Tubby樣蛋白1 (TULP-1)及半乳糖凝集素-3相互作用(例如結合)。本發明之抗MerTK抗體可影響MerTK與其多種配位體及結合搭配物中之一或多者的相互作用。
鑑別了阻斷ProS結合及Gas6結合於MerTK，僅阻斷ProS結合於MerTK，或不阻斷ProS或Gas6結合於MerTK之結合的本發明之抗MerTK抗體。僅ProS阻斷性抗MerTK抗體不會與ProS/Gas6雙重阻斷性抗MerTK抗體(如下文實例中所示)建倉，表明本文所鑑別之此兩類抗MerTK抗體具有非重疊性抗原決定基。
因此，在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體抑制(亦即，阻斷)或減少MerTK與一或多種MerTK配位體之間的結合。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體抑制或減少ProS與MerTK之結合。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體抑制或減少ProS與MerTK之結合，但不抑制或減少Gas6與MerTK之結合。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體抑制或減少Gas6與MerTK之結合。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體抑制或減少Gas6與MerTK之結合，但不抑制或減少ProS與MerTK之結合。在其他實施例中，本發明之抗MerTK抗體抑制或減少ProS與MerTK之結合且抑制或減少Gas6與MerTK之結合。在其他實施例中，本發明之抗MerTK抗體不抑制或減少ProS與MerTK之結合且不抑制或減少Gas6與MerTK之結合。
關於Gas6配位體結合於MerTK之抑制或阻斷或關於ProS配位體結合於MerTK之抑制或阻斷的IC50值可使用熟習此項技術者已知之方法，諸如本文中描述於下文實例(例如實例13)中者來測定。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體活體外抑制或減少Gas6配位體結合於MerTK或者抑制或減少ProS配位體結合於MerTK。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以0.29 nM至32 nM範圍內之IC50值抑制或減少Gas6配位體結合於人類MerTK。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以0.29 nM至1.0 nM範圍內、1.0 nM至5 nM範圍內、5 nM至10 nM範圍內、10 nM至25 nM範圍內或25 nM至32 nM範圍內之IC50值抑制或減少Gas6配位體結合於人類MerTK。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以0.58 nM至25.9 nM範圍內之IC50值抑制或減少ProS配位體結合於人類MerTK。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以0.58 nM至1 nM範圍內、1 nM至2.5 nM範圍內、2.5 nM至5 nM範圍內、5 nM至10 nM範圍內、10 nM至25 nM範圍內之IC50值抑制或減少ProS配位體結合於人類MerTK。
抗體減少或抑制ProS及Gas6與MerTK之結合的相對有效性可使用此等IC50值來測定。例如，一種抗體抑制Gas6與MerTK之結合的IC50值係其抑制ProS與MerTK之結合的IC50值的1.7倍，其減少或抑制ProS與MerTK之結合的效力係減少或抑制Gas6與MerTK之結合的效力的1.7倍。在一些實施例中，抗MerTK抗體減少或抑制ProS與MerTK之結合的效力係減少或抑制Gas6與MerTK之結合的效力的至少1.7倍、至少2.3倍、至少2.4倍、至少5倍、至少7.7倍或至少8.5倍。
在一些實施例中，與本發明之抗MerTK抗體不存在下Gas6配位體結合於MerTK相比，本發明之抗MerTK抗體抑制或減少Gas6配位體結合於MerTK達至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%。在一些實施例中，與本發明之抗MerTK抗體不存在下ProS配位體結合於MerTK相比，本發明之抗MerTK抗體抑制或減少ProS配位體結合於MerTK達至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%。Gas6配位體結合於MerTK或ProS配位體結合於MerTK之抑制或減少百分比可藉由使用熟習此項技術者已知之標準方法(諸如本文實例13中所述)量測IC50值來測定。
本文進一步提供篩選結合MerTK且阻斷或減少MerTK與一或多種MerTK配位體或結合搭配物之間的相互作用之抗MerTK抗體之方法。 pAKT
AKT活性係Gas6結合於MerTK、Axl或Tyro-3受體之下游目標。例如，MerTK配位體Gas6與MerTK之結合誘導AKT磷酸化(pAKT) (參見例如Angelillo-Scherrer等人, 2008, J Clin Invest, 118:583-596；Moody等人, 2016, Int J Cancer, 139:1340-1349)。本發明之抗MerTK抗體以劑量依賴性方式有效抑制人類巨噬細胞(例如，M2c巨噬細胞)中的Gas6介導之磷酸化AKT (pAKT)活性。因此，如藉由pAKT水準之抑制所證明，本發明之抗MerTK抗體有效抑制Gas6介導之MerTK信號傳導。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體活體外抑制或減少Gas6介導之pAKT活性。
抗MerTK抗體減少或抑制細胞中之pAKT活性之相對有效性可藉由量測IC50值來測定。關於抑制Gas6介導之pAKT活性的IC50值可使用熟習此項技術者已知之方法，諸如本文在下文實例22中所述者來測定。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以介於0.019 nM至7.74 nM範圍內的IC50值抑制巨噬細胞(例如，M2c巨噬細胞)中Gas6介導之pAKT活性。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以0.019 nM至0.25 nM、0.25 nM至0.50 nM、0.50 nM至1.0 nM、1.0 nM至2.5 nM、2.5 nM至5.0 nM或5.0 nM至10 nM的IC50值抑制巨噬細胞(例如，M2c巨噬細胞)中Gas6介導之pAKT活性。 胞葬作用
胞葬作用係指垂死或凋亡細胞之吞噬清除。胞葬作用可藉由專職性吞噬細胞(例如巨噬細胞、樹突狀細胞、小神經膠質細胞)、非專職性吞噬細胞(例如上皮細胞、成纖維細胞、視網膜色素上皮細胞)或特殊吞噬細胞來實現。(Elliott等人, 2017, J Immunol, 198:1387-1394)。胞葬作用導致死亡或垂死細胞在其膜完整性被破壞且其細胞內含物洩漏至周圍組織中之前經移除，從而防止組織暴露於毒性酶、氧化劑及其他細胞內組分。
凋亡細胞在其細胞表面上暴露多種分子(「吃我」信號)，該等分子由吞噬細胞上之受體識別。一種此等「吃我」信號傳導分子為磷脂酰絲胺酸(PtdSer)，其通常局限於細胞膜之內葉。在細胞凋亡期間，PtdSer暴露於細胞膜之外葉。MerTK配位體ProS及Gas6在其N端域附近含有γ-羧化麩胺酸殘基；麩胺酸域之γ-羧化使得能夠結合於磷脂酰絲胺酸。Gas6或ProS結合於凋亡細胞上之PtdSer且同時結合吞噬細胞上之MerTK。此配位體與MerTK之銜接會激活胞葬作用。
如以下實例所示，本發明之抗MerTK抗體有效減少或降低多種吞噬細胞中之胞葬作用。僅阻斷ProS結合於MerTK之抗MerTK抗體顯示胞葬作用之強烈抑制，其IC50與阻斷ProS及Gas6兩者結合於MerTK之抗MerTK抗體可相當。考慮到ProS及Gas6兩者之遺傳缺陷係由於視網膜退化而發展視力喪失所必需的(ProS或Gas6單一基因剔除不會導致視網膜病變)，作為ProS特異性阻斷劑之抗MerTK抗體可提供用於抗腫瘤反應之經改良治療指數而不會誘導眼睛毒性問題。
因此，在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體降低或減少吞噬細胞之胞葬作用。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體降低或減少巨噬細胞之胞葬作用。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體降低或減少樹突狀細胞之胞葬作用。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體降低或減少骨髓源性巨噬細胞之胞葬作用。在一些實施例中，與抗MerTK抗體不存在下吞噬細胞中的胞葬作用水準相比，本發明之抗MerTK抗體降低或減少吞噬細胞之胞葬作用達至少10%、至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%。胞葬作用之減少百分比可使用熟習此項技術者已知之標準方法(諸如本文實例11中所述)來測定。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以約0.13 nM至約30 nM範圍內的IC50降低或減少吞噬細胞(例如人類巨噬細胞)之胞葬作用，如藉由本文在下文實例(例如，實例11)中所述之方法所評估。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體以0.13 nM至1.0 nM範圍內、1 nM至5 nM範圍內、5 nM至10 nM範圍內或10 nM至30 nM範圍內之IC50值降低或減少吞噬細胞之胞葬作用。
阻斷胞葬作用會驅動M1樣巨噬細胞極化，導致增加之促發炎細胞介素(例如TNF、IFN、IL-12)產生及細胞毒性細胞(諸如CD8+ T細胞及天然殺手細胞)募集，從而介導抗腫瘤免疫性。藉由減少吞噬細胞之胞葬作用，本發明之抗MerTK抗體有效增加M1樣巨噬細胞極化且增加促發炎細胞介素/趨化介素之產生、表現及/或分泌，包括TNF、IFN、IL-6、IL-1、IL-12、趨化介素(C-X-C基序)配位體1 (CXCL-1、KC)、單核球化學吸引蛋白-1 (MCP1、CCL2)、巨噬細胞發炎蛋白-1-α (MIP-1α、CCL3)及/或巨噬細胞發炎蛋白-1-β (MIP-1β、CCL4)。因此，在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體增加M1樣巨噬細胞極化。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體增加一或多種促發炎細胞介素之巨噬細胞產生、表現或分泌。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體增加TNF、IFN、IL-6、IL-1、IL-12、CXCL-1、MCP1、MIP-1α及/或MIP-1β之巨噬細胞產生、表現或分泌。
因此，在一些實施例中，本文提供一種用於增加有需要之個體中的促發炎細胞介素產生、表現及/或分泌之方法，該方法包括向該個體投與本發明之抗MerTK抗體，使得該個體中的一或多種促發炎細胞介素之產生、表現及/或分泌增加。在一些實施例中，TNF之產生、表現及/或分泌增加。在一些實施例中，IFN之產生、表現及/或分泌增加。在一些實施例中，IL-12之產生、表現及/或分泌增加。在一些實施例中，CXCL-1之產生、表現及/或分泌增加。在一些實施例中，MCP1之產生、表現及/或分泌增加。在一些實施例中，MIP-1α之產生、表現及/或分泌增加。在一些實施例中，MIP-1β之產生、表現及/或分泌增加。
在一些實施例中，本文提供一種用於增加有需要之個體中的M1樣巨噬細胞極化之方法，該方法包括向該個體投與本發明之抗MerTK抗體，使得該個體中的M1樣巨噬細胞極化增加。增加之M1樣巨噬細胞極化藉由熟習此項技術者已知之多種方法，諸如一或多種促發炎細胞介素(包括TNF、IFN、IL-12、CXCL1、MCP1、MIP-1α及/或MIP-1β)的增加之產生、表現或分泌來量測。
胞葬作用與癌症進展之間的聯繫已加以描述。例如，使用膜聯蛋白V實現之胞葬作用阻斷會阻斷PtdSer與吞噬細胞之胞葬作用機制相互作用，從而充分地減少腫瘤進展及轉移(Stach等人, 2000, Cell Death Diff, 7:911；Bondanza等人, 2004, J Exp Med, 200:1157；Werfel及Cook, 2018, Sem Immunopathology, 40:545-554)。此外，MerTK與多種人類癌症之不良預後及存活相關，其PtdSer橋接配位體Gas6亦如此(Graham等人, 2014, Nat Rev Cancer, 14:769；Linger等人, 2010, Expert Opin Ther Targets, 14:1073-1090；Wang等人, 2013, Oncogene, 32:872；Jansen等人, 2011, J Proteome Res, 11:728-735；Tworkoski等人, 2011, Mol Cancer Res, p.molcanres-0512；Graham等人, 2006, Clin Cancer Res, 12:2662-2669；Keating等人, 2006, Oncogene, 25:6092)。因此，減少吞噬細胞之胞葬作用的本發明之抗MerTK抗體因此有效減少腫瘤進展及轉移。
食蟹獼猴研究指示在一些情況下，與投與了阻斷ProS結合於MerTK但不阻斷Gas6與MerTK之結合的抗MerTK抗體(例如，抗MerTK抗體MTK-15或MTK-29)之食蟹獼猴中所觀察到的情況相比，阻斷結合於Gas6及ProS兩者之抗MerTK抗體(例如，抗MerTK抗體MTK-16)顯示較低活體內毒性(例如體重損失)。因此，在一些實施例中，與阻斷ProS與MerTK之結合但不阻斷Gas6與MerTK之結合的本發明之抗MerTK抗體相比，阻斷Gas6及ProS兩者與MerTK之結合的本發明之抗MerTK抗體可呈現較低全身活體內毒性。抗MerTk抗體MTK-16 (其阻斷Gas6及ProS兩者與MerTK之結合)結合於MerTK蛋白之Ig1域，而抗MerTK抗體MTK-15及MTK-29 (其阻斷ProS與MerTK之結合，但其不阻斷Gas6與MerTK之結合)結合於MerTK蛋白之Ig2及FN1域兩者。因此，在一些實施例中，與結合於MerTK之Ig2及FN1域兩者的抗MerTK抗體相比，結合於MerTK之Ig1域的抗MerTK抗體可呈現較低全身活體內毒性。 A. 例示性抗體及某些其他抗體實施例
在一些實施例中，本文提供包含選自以下之至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個HVR之抗MerTK抗體：(a) HVR-H1，其包含選自由SEQ ID NO:75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97及98組成之群的胺基酸序列；(b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO:99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123及124組成之群的胺基酸序列；(c) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO:125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156及157組成之群的胺基酸序列；(d) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO:158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185及186組成之群的胺基酸序列；(e) HVR-L2，其包含選自由SEQ ID NO:187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204及205組成之群的胺基酸序列；及(f) HVR-L3，其包含選自由SEQ ID NO:207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232及233組成之群的胺基酸序列。
在一些實施例中，本文提供包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VH HVR序列之抗MerTK抗體：(a) HVR-H1，其包含選自由SEQ ID NO: 75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97及98組成之群的胺基酸序列；(b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO: 99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123及124組成之群的胺基酸序列；及(c) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO: 125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156及157組成之群的胺基酸序列。
在一些實施例中，本文提供包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VL HVR序列之抗MerTK抗體：(a) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO: 158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185及186組成之群的胺基酸序列；(b) HVR-L2，其包含選自由SEQ ID NO: 187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204及205組成之群的胺基酸序列；及(c) HVR-L3，其包含選自由SEQ ID NO: 207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232及233組成之群的胺基酸序列。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含(a) VH 域，其包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VH HVR序列：(i) HVR-H1，其包含選自由SEQ ID NO: 75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97及98組成之群的胺基酸序列，(ii) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO: 99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123及124組成之群的胺基酸序列，及(iii) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO: 125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156及157組成之群的胺基酸序列，及(b) VL 域，其包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VL HVR序列：(i) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO: 158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185及186組成之群的胺基酸序列，(ii) HVR-L2，其包含選自由SEQ ID NO: 187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204及205組成之群的胺基酸序列，及(iii) HVR-L3，其包含選自由SEQ ID NO: 207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232及233組成之群的胺基酸序列。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含：(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:75；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:99；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:125；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:158；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:207；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:76；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:100；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:126；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:159；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:208；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:77；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:101；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:127；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:160；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:188；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:209；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:75；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:99；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:128；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:158；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:78；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:102；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:129；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:161；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:189；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:211；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:75；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:103；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:130；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:158；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:212；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:77；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:101；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:127；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:162；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:188；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:209；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:75；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:99；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:131；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:163；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:213；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:79；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:104；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:132；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:164；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:190；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:214；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:80；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:105；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:133；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:165；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:191；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:215；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:81；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:106；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:134；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:166；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:192；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:216；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:82；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:107；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:135；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:167；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:193；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:217；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:77；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:108；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:136；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:167；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:194；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:209；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:75；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:109；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:137；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:168；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:218；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:999；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:158；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:84；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:99；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:139；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:169；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:195；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:219；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:85；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:99；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:140；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:170；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:196；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:222；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:86；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:99；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:141；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:171；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:191；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:221；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:87；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:110；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:142；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:172；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:197；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:222；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:88；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:99；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:143；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:173；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:191；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:223；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:89；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:111；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:143；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:173；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:198；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:221；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:112；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:144；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:174；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:199；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:224；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:91；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:113；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:145；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:175；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:200；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:225；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:114；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:146；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:176；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:201；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:226；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:92；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:115；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:147；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:177；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:195；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:227；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:93；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:116；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:148；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:178；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:188；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:209；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:94；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:117；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:149；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:179；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:195；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:228；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:118；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:150；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:180；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:229；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:151；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:181；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:208；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:120；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:152；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:182；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:202；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:230；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:96；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:118；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:153；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:183；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:202；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:230；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:96；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:121；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:154；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:181；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:122；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:184；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:97；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:123；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:156；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:185；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:204；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:232；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:98；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:124；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:157；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:186；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:205；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:233。
在另一態樣中，抗MerTK抗體包含與選自由SEQ ID NO:5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38及39組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之重鏈可變域(VH )序列。在某些實施例中，與選自由SEQ ID NO: 5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38及39組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之VH 序列相對於參考序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗MerTK抗體保留結合於MerTK之能力。在某些實施例中，在SEQ ID NO: 5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38或39中，總計1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，在SEQ ID NO: 5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38或39中，總計1至5個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失出現於HVR外部之區中(亦即，FR中)。視情況，抗MerTK抗體包含VH 序列SEQ ID NO: 5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38或39，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VH 包含選自以下之一個、兩個或三個HVR：(a) HVR-H1，其包含選自由SEQ ID NO:75-98組成之群的胺基酸序列，(b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO:99-124組成之群的胺基酸序列，及(c) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO:125-157組成之群的胺基酸序列。
在另一態樣中，提供一種抗MerTK抗體，其中該抗體包含與選自由SEQ ID NO:40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73及74組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之輕鏈可變域(VL )。在某些實施例中，與選自由SEQ ID NO: 40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73及74組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之VL 序列相對於參考序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗MerTK抗體保留結合於MerTK之能力。在一些實施例中，在SEQ ID NO: 40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73或74中，總計1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，在SEQ ID NO: 40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73或74中，總計1至5個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失出現於HVR外部之區中(亦即，FR中)。視情況，抗MerTK抗體包含VL 序列SEQ ID NO: 40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73或74，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VL 包含選自以下之一個、兩個或三個HVR：(a) HVR-Ll，其包含選自由SEQ ID NO:158-186組成之群的胺基酸序列，(b) HVR-L2，其包含選自由SEQ ID NO: 187-205組成之群的胺基酸序列，及(c) HVR-L3，其包含選自由SEQ ID NO: 207-233組成之群的胺基酸序列。
在一些實施例中，提供一種抗MerTK抗體，其中該抗體包含如上文所提供之實施例中之任一者中的VH ，及如上文所提供之實施例中之任一者中的VL 。在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，其中該抗體包含如上文所提供之實施例中之任一者中的VH ，及如上文所提供之實施例中之任一者中的VL 。在一實施例中，該抗體分別包含VH 及VL 序列SEQ ID NO:5-39及SEQ ID NO:40-74，包括彼等序列之轉譯後修飾。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，其包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )，其中該VH 及VL 係選自由以下組成之群：包含胺基酸序列SEQ ID NO:5之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:40之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:6之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:41之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:7之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:42之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:43之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:9之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:44之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:10之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:45之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:11之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:46之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:12之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:47之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:13之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:48之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:14之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:49之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:15之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:50之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:16之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:51之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:17之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:52之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:18之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:53之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:19之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:54之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:20之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:55之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:21之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:56之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:22之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:57之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:23之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:58之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:24之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:59之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:25之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:60之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:26之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:61之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:27之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:62之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:28之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:63之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:29之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:64之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:30之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:65之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:31之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:66之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:32之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:67之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:33之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:68之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:34之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:69之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:35之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:70之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:36之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:71之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:37之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:72之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:38之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:73之VL ；及包含胺基酸序列SEQ ID NO:39之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:74之VL 。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含選自以下之至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個HVR：(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO:99、329、330、331、332及333組成之群的胺基酸序列；(c) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO:138、334、335、336、337、338及339組成之群的胺基酸序列；(d) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO:158、340、341、342、343及344組成之群的胺基酸序列；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VH HVR序列：(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO:99、329、330、331、332及333組成之群的胺基酸序列；及(c) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO:138、334、335、336、337、338及339組成之群的胺基酸序列。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VL HVR序列：(a) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO:158、340、341、342、343及344組成之群的胺基酸序列；(b) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(c) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含(a) VH 域，其包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VH HVR序列：(i) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 83，(ii) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO: 99、329、330、331、332及333組成之群的胺基酸序列，及(iii) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO: 138、334、335、336、337、338及339組成之群的胺基酸序列，及(b) VL 域，其包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VL HVR序列：(i) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO: 158、340、341、342、343及344組成之群的胺基酸序列，(ii) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 187，及(iii) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 210。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含：(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:99；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:158；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:334；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:158；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:330；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:158；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:340；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:335；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:331；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:342；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:336；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:337；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:343；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:332；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:338；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:333；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:334；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:158；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:332；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:336；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:339；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:344；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:158；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210。
在另一態樣中，抗MerTK抗體包含與選自由SEQ ID NO:19、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245及246組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之重鏈可變域(VH )序列。在某些實施例中，與選自由SEQ ID NO: 19、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245及246組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之VH 序列相對於參考序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗MerTK抗體保留結合於MerTK之能力。在某些實施例中，在SEQ ID NO: 19、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245或246中，總計1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，在SEQ ID NO: 19、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245或246中，總計1至5個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失出現於HVR外部之區中(亦即，FR中)。視情況，抗MerTK抗體包含VH 序列SEQ ID NO: 19、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245或246，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VH 包含選自以下之一個、兩個或三個HVR：(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83，(b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO: 99、329、330、331、332及333組成之群的胺基酸序列，及(c) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO:138、334、335、336、337、338及339組成之群的胺基酸序列。
在另一態樣中，提供一種抗MerTK抗體，其中該抗體包含與選自由SEQ ID NO:54、247、248、249、250、251、252、253及254組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之輕鏈可變域(VL )。在某些實施例中，與選自由SEQ ID NO: 54、247、248、249、250、251、252、253及254組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之VL 序列相對於參考序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗MerTK抗體保留結合於MerTK之能力。在一些實施例中，在SEQ ID NO：54、247、248、249、250、251、252、253或254中，總計1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，在SEQ ID NO：54、247、248、249、250、251、252、253或254中，總計1至5個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失出現於HVR外部之區中(亦即，FR中)。視情況，抗MerTK抗體包含VL 序列SEQ ID NO: 54、247、248、249、250、251、252、253或254，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VL 包含選自以下之一個、兩個或三個HVR：(a) HVR-Ll，其包含選自由SEQ ID NO:158、340、341、342、343及344組成之群的胺基酸序列，(b) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 187，及(c) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 210。
在一些實施例中，提供一種抗MerTK抗體，其中該抗體包含如上文所提供之實施例中之任一者中的VH ，及如上文所提供之實施例中之任一者中的VL 。在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，其中該抗體包含如上文所提供之實施例中之任一者中的VH ，及如上文所提供之實施例中之任一者中的VL 。在一實施例中，該抗體分別包含VH 及VL 序列SEQ ID NO:19、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245及246及SEQ ID NO:54、247、248、249、250、251、252、253及258，包括彼等序列之轉譯後修飾。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，其包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )，其中該VH 及VL 係選自由以下組成之群：包含胺基酸序列SEQ ID NO:19之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:54之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:234之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:247之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:235之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:247之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:236之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:248之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:236之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:249之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:237之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:249之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:238之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:249之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:239之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:250之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:240之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:251之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:241之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:252之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:242之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:249之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:243之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:247之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:244之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:251之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:245之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:253之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:246之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:247之VL ；及包含胺基酸序列SEQ ID NO:246之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:254之VL 。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含選自以下之至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個HVR：(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:84；(b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO:99及329組成之群的胺基酸序列；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:139；(d) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO:169及345組成之群的胺基酸序列； (e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:195；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:219。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VH HVR序列：(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:84；(b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO:99及329組成之群的胺基酸序列；及(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:139。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VL HVR序列：(a) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO:169及345組成之群的胺基酸序列；(b) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:195；及(c) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:219。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含(a) VH 域，其包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VH HVR序列：(i) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 84，(ii) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO: 99、329組成之群的胺基酸序列，及(iii) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 139，及(b) VL 域，其包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VL HVR序列：(i) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO: 169及345組成之群的胺基酸序列，(ii) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 195，及(iii) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 219。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含：(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:84；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:99；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:139；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:169；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:195；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:219；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:84；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:139；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:169；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:195；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:219；及(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:84；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:99；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:139；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:345；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:195；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:219。
在另一態樣中，抗MerTK抗體包含與選自由SEQ ID NO:20、255及256組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之重鏈可變域(VH )序列。在某些實施例中，與選自由SEQ ID NO:  20、255及256組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之VH 序列相對於參考序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗MerTK抗體保留結合於MerTK之能力。在某些實施例中，在SEQ ID NO：20、255或256中，總計1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，在SEQ ID NO：20、255或256中，總計1至5個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失出現於HVR外部之區中(亦即，FR中)。視情況，抗MerTK抗體包含VH 序列SEQ ID NO: 20、255或256，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VH 包含選自以下之一個、兩個或三個HVR：(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:84，(b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO:99及329組成之群的胺基酸序列，及(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:139。
在另一態樣中，提供一種抗MerTK抗體，其中該抗體包含與選自由SEQ ID NO:55、257及258組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之輕鏈可變域(VL )。在某些實施例中，與選自由SEQ ID NO: 55、257及258組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之VL 序列相對於參考序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗MerTK抗體保留結合於MerTK之能力。在一些實施例中，在SEQ ID NO：55、257或258中，總計1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，在SEQ ID NO：55、257或258中，總計1至5個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失出現於HVR外部之區中(亦即，FR中)。視情況，抗MerTK抗體包含VL 序列SEQ ID NO: 55、257或258，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VL 包含選自以下之一個、兩個或三個HVR：(a) HVR-Ll，其包含選自由SEQ ID NO:169及345組成之群的胺基酸序列，(b) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 195，及(c) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 219。
在一些實施例中，提供一種抗MerTK抗體，其中該抗體包含如上文所提供之實施例中之任一者中的VH ，及如上文所提供之實施例中之任一者中的VL 。在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，其中該抗體包含如上文所提供之實施例中之任一者中的VH ，及如上文所提供之實施例中之任一者中的VL 。在一實施例中，該抗體分別包含VH 及VL 序列SEQ ID NO:20、255及256及SEQ ID NO:55、257及258，包括彼等序列之轉譯後修飾。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，其包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )，其中該VH 及VL 係選自由以下組成之群：包含胺基酸序列SEQ ID NO:20之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:55之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:255之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:257之VL ；及包含胺基酸序列SEQ ID NO:256之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:258之VL 。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含選自以下之至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個HVR：(a) HVR-H1，其包含選自由SEQ ID NO:95、346及347組成之群的胺基酸序列；(b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO:119、348、349、350、351、352、353及354組成之群的胺基酸序列；(c) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO:151、355及356組成之群的胺基酸序列；(d) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO:181、341、357及358組成之群的胺基酸序列；(e) HVR-L2，其包含選自由SEQ ID NO:187及359組成之群的胺基酸序列；及(f) HVR-L3，其包含選自由SEQ ID NO:208、360、361及362組成之群的胺基酸序列。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VH HVR序列：(a) HVR-H1，其包含選自由SEQ ID NO:95、346及347組成之群的胺基酸序列；(b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO:119、348、349、350、351、352、353及354組成之群的胺基酸序列；及(c) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO:151、355及356組成之群的胺基酸序列。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VL HVR序列：(a) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO:181、341、357及358組成之群的胺基酸序列；(b) HVR-L2，其包含選自由SEQ ID NO:187及359組成之群的胺基酸序列；及(c) HVR-L3，其包含選自由SEQ ID NO:208. 360、361及362組成之群的胺基酸序列。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含(a) VH 域，其包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VH HVR序列：(i) HVR-H1，其包含選自由SEQ ID NO: 95、346及347組成之群的胺基酸序列，(ii) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO: 119、348、349、350、351、352、353及354組成之群的胺基酸序列，及(iii) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO: 151、355及356組成之群的胺基酸序列，及(b) VL 域，其包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VL HVR序列：(i) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO: 181、341、357及358組成之群的胺基酸序列，(ii) HVR-L2，其包含選自由SEQ ID NO: 187及359組成之群的胺基酸序列，及(iii) HVR-L3，其包含選自由SEQ ID NO: 208、360、361及362組成之群的胺基酸序列。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含：(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:151；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:181；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:208；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:346；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:348；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:355；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:360；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:355；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:361；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:349；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:346；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:350 (c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:347；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:352；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:353；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:346；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:354；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:363；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:346；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:348；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:357；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:346；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:354；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:358；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:348；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:151；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:181；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:208。
在另一態樣中，抗MerTK抗體包含與選自由SEQ ID NO:33、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、270、271、272及273組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之重鏈可變域(VH )序列。在某些實施例中，與選自由SEQ ID NO: 33、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、270、271、272及273組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之VH 序列相對於參考序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗MerTK抗體保留結合於MerTK之能力。在某些實施例中，在SEQ ID NO: 33、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、270、271、272或273中，總計1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，在SEQ ID NO: 33、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、270、271、272或273中，總計1至5個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失出現於HVR外部之區中(亦即，FR中)。視情況，抗MerTK抗體包含VH 序列SEQ ID NO: 33、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、270、271、272或273，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VH 包含選自以下之一個、兩個或三個HVR：(a) HVR-H1，其包含選自由SEQ ID NO:95、346及347組成之群的胺基酸序列，(b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO:119、348、349、350、351、352、353及354組成之群的胺基酸序列，及(c) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO:151、355及356組成之群的胺基酸序列。
在另一態樣中，提供一種抗MerTK抗體，其中該抗體包含與選自由SEQ ID NO:68、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288及289組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之輕鏈可變域(VL )。在某些實施例中，與選自由SEQ ID NO: 68、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288及289組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之VL 序列相對於參考序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗MerTK抗體保留結合於MerTK之能力。在一些實施例中，在SEQ ID NO: 68、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288或289中，總計1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，在SEQ ID NO: 68、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288或289中，總計1至5個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失出現於HVR外部之區中(亦即，FR中)。視情況，抗MerTK抗體包含VL 序列SEQ ID NO: 68、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288或289，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VL 包含選自以下之一個、兩個或三個HVR：(a) HVR-Ll，其包含選自由SEQ ID NO:181、341、357及358組成之群的胺基酸序列，(b) HVR-L2，其包含選自由SEQ ID NO: 187及359組成之群的胺基酸序列，及(c) HVR-L3，其包含選自由SEQ ID NO: 208、360、361及362組成之群的胺基酸序列。
在一些實施例中，提供一種抗MerTK抗體，其中該抗體包含如上文所提供之實施例中之任一者中的VH ，及如上文所提供之實施例中之任一者中的VL 。在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，其中該抗體包含如上文所提供之實施例中之任一者中的VH ，及如上文所提供之實施例中之任一者中的VL 。在一實施例中，該抗體分別包含VH 及VL 序列SEQ ID NO: 33、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、270、271、272及273及SEQ ID NO: 68、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288及289，包括彼等序列之轉譯後修飾。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，其包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )，其中該VH 及VL 係選自由以下組成之群：包含胺基酸序列SEQ ID NO:33之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:68之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:259之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:274之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:260之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:275之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:261之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:276之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:262之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:263之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:264之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:265之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:266之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:267之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:278之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:268之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:279之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:269之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:279之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:264之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:280之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:270之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:281之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:265之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:282之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:264之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:283之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:271之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:284之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:272之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:285之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:271之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:286之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:273之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:287之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:273之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:288之VL ；及包含胺基酸序列SEQ ID NO:273之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:289之VL 。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含選自以下之至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個HVR：(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO:122、364、365、366、367及368組成之群的胺基酸序列；(c) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO:155、373、374及375組成之群的胺基酸序列；(d) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO:184、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386及387組成之群的胺基酸序列；(e) HVR-L2，其包含選自由SEQ ID NO:203、388、389、390及391組成之群的胺基酸序列；及(f) HVR-L3，其包含選自由SEQ ID NO:231、392、393及394組成之群的胺基酸序列。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VH HVR序列：(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO: 122、364、365、366、367及368組成之群的胺基酸序列；及(c) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO: 155、373、374及375組成之群的胺基酸序列。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VL HVR序列：(a) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO: 184、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386及387組成之群的胺基酸序列；(b) HVR-L2，其包含選自由SEQ ID NO: 203、388、389、390及391組成之群的胺基酸序列；及(c) HVR-L3，其包含選自由SEQ ID NO: 203、388、389、390及391組成之群的胺基酸序列。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含(a) VH 域，其包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VH HVR序列：(i) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 90，(ii) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO: 122、364、365、366、367及368組成之群的胺基酸序列，及(iii) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO: 155、373、374及375組成之群的胺基酸序列，及(b) VL 域，其包含選自以下之至少一個、至少兩個或全部三個VL HVR序列：(i) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO: 184、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386及387組成之群的胺基酸序列，(ii) HVR-L2，其包含選自由SEQ ID NO: 203、388、389、390及391組成之群的胺基酸序列，及(iii) HVR-L3，其包含選自由SEQ ID NO: 231、392、393及394組成之群的胺基酸序列。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，該等抗MerTK抗體包含：(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:122；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:184；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:373；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:376；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:388；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:377；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:374；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:365；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:276；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:392；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:376；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:389；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:379；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:366；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:380；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:373；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:381；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:367；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:382；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:383；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:374；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:384；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:376；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:393；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:376；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:369；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:370；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:371；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:178；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:385；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:395；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:390；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:372；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:391；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:375；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:386；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394；(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:387；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394。
在另一態樣中，抗MerTK抗體包含與選自由SEQ ID NO:37、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307及308組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之重鏈可變域(VH )序列。在某些實施例中，與選自由SEQ ID NO: 37、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307及308組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之VH 序列相對於參考序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗MerTK抗體保留結合於MerTK之能力。在某些實施例中，在SEQ ID NO: 37、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307或308中，總計1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，在SEQ ID NO: 37、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307或308中，總計1至5個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失出現於HVR外部之區中(亦即，FR中)。視情況，抗MerTK抗體包含VH 序列SEQ ID NO: 37、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307或308，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VH 包含選自以下之一個、兩個或三個HVR：(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90，(b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO:122、364、365、366、367及368組成之群的胺基酸序列，及(c) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO:155、373、374及375組成之群的胺基酸序列。
在另一態樣中，提供一種抗MerTK抗體，其中該抗體包含與選自由SEQ ID NO:72、309、310、311、312、313、314、315、316、316、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327及328組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之輕鏈可變域(VL )。在某些實施例中，與選自由SEQ ID NO: 72、309、310、311、312、313、314、315、316、316、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327及328組成之群的胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之VL 序列相對於參考序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗MerTK抗體保留結合於MerTK之能力。在一些實施例中，在SEQ ID NO: 72、309、310、311、312、313、314、315、316、316、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327或328中，總計1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，在SEQ ID NO: 72、309、310、311、312、313、314、315、316、316、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327或328中，總計1至5個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失出現於HVR外部之區中(亦即，FR中)。視情況，抗MerTK抗體包含VL 序列SEQ ID NO: 72、309、310、311、312、313、314、315、316、316、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327或328，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VL 包含選自以下之一個、兩個或三個HVR：(a) HVR-Ll，其包含選自由SEQ ID NO:184、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386及387組成之群的胺基酸序列，(b) HVR-L2，其包含選自由SEQ ID NO: 203、388、389、390及391組成之群的胺基酸序列，及(c) HVR-L3，其包含選自由SEQ ID NO: 231、392、393及394組成之群的胺基酸序列。
在一些實施例中，提供一種抗MerTK抗體，其中該抗體包含如上文所提供之實施例中之任一者中的VH ，及如上文所提供之實施例中之任一者中的VL 。在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，其中該抗體包含如上文所提供之實施例中之任一者中的VH ，及如上文所提供之實施例中之任一者中的VL 。在一實施例中，該抗體分別包含VH 及VL 序列SEQ ID NO: 37、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307及308及SEQ ID NO: 72、309、310、311、312、313、314、315、316、316、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327及328，包括彼等序列之轉譯後修飾。
在一些實施例中，本文提供抗MerTK抗體，其包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )，其中該VH 及VL 係選自由以下組成之群：包含胺基酸序列SEQ ID NO:37之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:72之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:290之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:309之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:291之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:310之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:292之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:311之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:293之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:312之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:294之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:313之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:295之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:314之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:296之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:315之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:290之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:316之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:297之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:317之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:298之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:318之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:292之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:319之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:299之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:320之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:300之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:311之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:301之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:321之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:302之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:322之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:303之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:311之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:304之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:322之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:305之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:322之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:301之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:323之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:301之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:324之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:301之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:325之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:306之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:326之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:307之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:327之VL ；及包含胺基酸序列SEQ ID NO:308之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:328之VL 。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體競爭性地抑制選自MTK-01、MTK-02、MTK-03、MTK-04、MTK-05、MTK-06、MTK-07、MTK-08、MTK-09、MTK-10、MTK-11、MTK-12、MTK-13、MTK-14、MTK-15 (包括MTK-15.1、MTK-15.2、MTK-15.3、MTK-15.4、MTK-15.5、MTK-15.6、MTK-15.7、MTK-15.8、MTK-15.9、MTK-15.10、MTK-15.11、MTK-15.12、MTK-15.13、MTK-15.14及MTK-15.15)、MTK-16 (包括MTK-16.1及MTK-16.2)、MTK-17、MTK-18、MTK-19、MTK-20、MTK-21、MTK-22、MTK-23、MTK-24、MTK-25、MTK-26、MTK-27、MTK-28、MTK-29 (包括MTK-29.1、MTK-29.2、MTK-29.3、MTK-29.4、MTK-29.5、MTK-29.6、MTK-29.7、MTK-29.8、MTK-29.9、MTK-29.10、MTK-29.11、MTK-29.12、MTK-29.13、MTK-29.14、MTK-29.15、MTK-29.16、MTK-29.17、MTK-29.18、MTK-29.19、MTK-29.20及MTK-29.21)、MTK-30、MTK-31、MTK-32、MTK-33 (包括MTK-33.1、MTK-33.2、MTK-33.3、MTK-33.4、MTK-33.5、MTK-33.6、MTK-33.7、MTK-33.8、MTK-33.9、MTK-33.10、MTK-33.11、MTK-33.12、MTK-33.13、MTK-33.14、MTK-33.15、MTK-33.16、MTK-33.17、MTK-33.18、MTK-33.19、MTK-33.20、MTK-33.21、MTK-33.22、MTK-33.23及MTK-33.24)、MTK-34、MTK-35及MTK-36及其任何組合之至少一種參考抗體針對結合於MerTK之結合。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體結合於人類MerTK中與由選自MTK-01、MTK-02、MTK-03、MTK-04、MTK-05、MTK-06、MTK-07、MTK-08、MTK-09、MTK-10、MTK-11、MTK-12、MTK-13、MTK-14、MTK-15 (包括MTK-15.1、MTK-15.2、MTK-15.3、MTK-15.4、MTK-15.5、MTK-15.6、MTK-15.7、MTK-15.8、MTK-15.9、MTK-15.10、MTK-15.11、MTK-15.12、MTK-15.13、MTK-15.14及MTK-15.15)、MTK-16 (包括MTK-16.1及MTK-16.2)、MTK-17、MTK-18、MTK-19、MTK-20、MTK-21、MTK-22、MTK-23、MTK-24、MTK-25、MTK-26、MTK-27、MTK-28、MTK-29 (包括MTK-29.1、MTK-29.2、MTK-29.3、MTK-29.4、MTK-29.5、MTK-29.6、MTK-29.7、MTK-29.8、MTK-29.9、MTK-29.10、MTK-29.11、MTK-29.12、MTK-29.13、MTK-29.14、MTK-29.15、MTK-29.16、MTK-29.17、MTK-29.18、MTK-29.19、MTK-29.20及MTK-29.21)、MTK-30、MTK-31、MTK-32、MTK-33 (包括MTK-33.1、MTK-33.2、MTK-33.3、MTK-33.4、MTK-33.5、MTK-33.6、MTK-33.7、MTK-33.8、MTK-33.9、MTK-33.10、MTK-33.11、MTK-33.12、MTK-33.13、MTK-33.14、MTK-33.15、MTK-33.16、MTK-33.17、MTK-33.18、MTK-33.19、MTK-33.20、MTK-33.21、MTK-33.22、MTK-33.23及MTK-33.24)、MTK-34、MTK-35及MTK-36之至少一種參考抗體結合的MerTK抗原決定基相同或重疊之抗原決定基。用於定位與抗體結合之抗原決定基的詳細例示性方法提供於Morris (1996) 「Epitope Mapping Protocols」，Methods in Molecular Biology 第66卷 (Humana Press, Totowa, NJ)中。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體競爭性地抑制至少一種參考抗體之結合，或結合於人類MerTK中與由至少一種參考抗體結合的MerTK抗原決定基相同或重疊之抗原決定基，其中該參考抗體係包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )之抗MerTK抗體，其中該VH 及VL 係選自由以下組成之群：包含胺基酸序列SEQ ID NO:5之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:40之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:6之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:41之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:7之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:42之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:43之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:9之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:44之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:10之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:45之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:11之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:46之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:12之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:47之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:13之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:48之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:14之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:49之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:15之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:50之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:16之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:51之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:17之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:52之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:18之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:53之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:19之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:54之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:20之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:55之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:21之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:56之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:22之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:57之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:23之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:58之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:24之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:59之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:25之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:60之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:26之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:61之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:27之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:62之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:28之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:63之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:29之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:64之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:30之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:65之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:31之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:66之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:32之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:67之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:33之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:68之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:34之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:69之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:35之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:70之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:36之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:71之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:37之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:72之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:38之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:73之VL ；及包含胺基酸序列SEQ ID NO:39之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:74之VL 。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含全長重鏈胺基酸序列，該全長重鏈胺基酸序列包含可變重鏈胺基酸序列SEQ ID NO: 234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245或246，及選自由SEQ ID NO: 396-411組成之群的重鏈Fc；且包含全長輕鏈胺基酸序列，該全長輕鏈胺基酸序列包含可變輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:247、248、249、250、251、252、253或254，及包含胺基酸序列SEQ ID NO:412之輕鏈Fc。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含全長重鏈胺基酸序列，該全長重鏈胺基酸序列包含可變重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:255或256及選自由SEQ ID NO: 396-411組成之群的重鏈Fc；且包含全長輕鏈胺基酸序列，該全長輕鏈胺基酸序列包含可變輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:257或258及包含胺基酸序列SEQ ID NO:412之輕鏈Fc。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含全長重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:413、414、415、416、417、418、419或420及全長輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO: 421。因此，在一些實施例中，抗MerTK抗體包含重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:413及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:421；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:414及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:421；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:415及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:421；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:416及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:421；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:417及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:421；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:418及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:421；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:419及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:421；或重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:420及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:421。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含全長重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:422、423、424、425、426、427、428或429及全長輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO: 430。因此，在一些實施例中，抗MerTK抗體包含重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:422及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:430；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:423及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:430；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:424及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:430；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:425及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:430；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:426及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:430；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:427及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:430；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:428及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:430；或重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:429及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:430。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含全長重鏈胺基酸序列，該全長重鏈胺基酸序列包含可變重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、270、271、272或273及選自由SEQ ID NO: 396-411組成之群的重鏈Fc；且包含全長輕鏈胺基酸序列，該全長輕鏈胺基酸序列包含可變輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288或289及包含胺基酸序列SEQ ID NO:412之輕鏈Fc。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含全長重鏈胺基酸序列，該全長重鏈胺基酸序列包含可變重鏈胺基酸序列SEQ ID NO: 290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307或308及選自由SEQ ID NO: 396-411組成之群的重鏈Fc；且包含全長輕鏈胺基酸序列，該全長輕鏈胺基酸序列包含可變輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327或328及包含胺基酸序列SEQ ID NO:412之輕鏈Fc。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含全長重鏈胺基酸序列SEQ ID NO: 431、432、433、434、435、436、437或438及全長輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:439。因此，在一些實施例中，抗MerTK抗體包含重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:431及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:439；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:432及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:439；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:433及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:439；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:434及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:439；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:435及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:439；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:436及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:439；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:437及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:439；或重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:438及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:439。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含全長重鏈胺基酸序列SEQ ID NO: 464、465、466、467、468、469、470及471及全長輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:472。因此，在一些實施例中，抗MerTK抗體包含重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:464及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:472；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:465及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:472；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:466及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:472；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:467及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:472；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:468及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:472；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:469及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:472；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:470及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:472；或重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:471及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:472。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含全長重鏈胺基酸序列SEQ D NO: 440、441、442、443、444、445、446或447及全長輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:448。因此，在一些實施例中，抗MerTK抗體包含重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:440及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:448；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:441及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:448；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:442及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:448；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:443及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:448；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:444及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:448；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:445及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:448；重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:446及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:448；或重鏈胺基酸序列SEQ ID NO:447及輕鏈胺基酸序列SEQ ID NO:448。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體競爭性地抑制至少一種參考抗體之結合，或結合於人類MerTK中與由至少一種參考抗體結合的MerTK抗原決定基相同或重疊之抗原決定基，其中該參考抗體係包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )之抗MerTK抗體，其中該VH 及VL 係選自由以下組成之群：包含胺基酸序列SEQ ID NO:19之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:54之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:234之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:247之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:235之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:247之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:236之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:248之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:236之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:249之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:237之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:249之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:238之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:249之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:239之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:250之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:240之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:251之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:241之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:252之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:242之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:249之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:243之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:247之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:244之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:251之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:245之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:253之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:246之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:247之VL ；及包含胺基酸序列SEQ ID NO:246之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:254之VL 。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體競爭性地抑制至少一種參考抗體之結合，或結合於人類MerTK中與由至少一種參考抗體結合的MerTK抗原決定基相同或重疊之抗原決定基，其中該參考抗體係包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )之抗MerTK抗體，其中該VH 及VL 係選自由以下組成之群：包含胺基酸序列SEQ ID NO:20之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:55之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:255之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:257之VL ；及包含胺基酸序列SEQ ID NO:256之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:258之VL 。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體競爭性地抑制至少一種參考抗體之結合，或結合於人類MerTK中與由至少一種參考抗體結合的MerTK抗原決定基相同或重疊之抗原決定基，其中該參考抗體係包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )之抗MerTK抗體，其中該VH 及VL 係選自由以下組成之群：包含胺基酸序列SEQ ID NO:33之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:68之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:259之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:274之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:260之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:275之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:261之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:276之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:262之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:263之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:264之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:265之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:266之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:267之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:278之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:268之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:279之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:269之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:279之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:264之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:280之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:270之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:281之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:265之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:282之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:264之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:283之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:271之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:284之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:272之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:285之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:271之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:286之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:273之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:287之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:273之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:288之VL ；及包含胺基酸序列SEQ ID NO:273之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:289之VL 。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體競爭性地抑制至少一種參考抗體之結合，或結合於人類MerTK中與由至少一種參考抗體結合的MerTK抗原決定基相同或重疊之抗原決定基，其中該參考抗體係包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )之抗MerTK抗體，其中該VH 及VL 係選自由以下組成之群：包含胺基酸序列SEQ ID NO:37之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:72之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:290之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:309之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:291之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:310之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:292之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:311之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:293之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:312之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:294之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:313之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:295之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:314之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:296之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:315之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:290之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:316之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:297之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:317之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:298之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:318之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:292之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:319之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:299之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:320之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:300之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:311之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:301之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:321之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:302之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:322之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:303之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:311之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:304之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:322之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:305之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:322之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:301之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:323之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:301之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:324之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:301之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:325之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:306之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:326之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:307之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:327之VL ；及包含胺基酸序列SEQ ID NO:308之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:328之VL 。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含：(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:383；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:232。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )，其中該VH 包含胺基酸序列SED ID NO: 298且該VL 包含胺基酸序列SEQ ID NO:318。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 464且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:472。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 465且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:472。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 466且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:472。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 467且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:472。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 468且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:472。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 469且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:472。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含：(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:84；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:99；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:139；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:345；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:195；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:219。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )，其中該VH 包含胺基酸序列SED ID NO: 256且該VL 包含胺基酸序列SEQ ID NO:258。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 422且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:430。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 423且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:430。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 424且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:430。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 425且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:430。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 426且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:430。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 427且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:430。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含：(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:376；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:393。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )，其中該VH 包含胺基酸序列SED ID NO: 299且該VL 包含胺基酸序列SEQ ID NO:320。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 440且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:448。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 441且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:448。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 442且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:448。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 443且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:448。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 444且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:448。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 445且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:448。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含：(a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:84；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:139；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:169；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:195；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:219。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )，其中該VH 包含胺基酸序列SED ID NO: 225且該VL 包含胺基酸序列SEQ ID NO:257。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 413且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:421。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 414且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:421。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 415且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:421。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 416且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:421。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 417且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:421。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO: 418且該輕鏈包含胺基酸序列SEQ ID NO:421。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體結合於人類MerTK之細胞外域(ECD)。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體結合於人類MerTK之N端域。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體結合於胺基酸序列SEQ ID NO:449內之一或多個胺基酸。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體結合於人類MerTK之免疫球蛋白樣域1 (Ig1)。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體結合於胺基酸序列SED ID NO:450內之一或多個胺基酸殘基。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體結合於人類MerTK之免疫球蛋白樣域2 (Ig2)。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體結合於胺基酸序列SEQ ID NO:451內之一或多個胺基酸殘基。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體結合於人類MerTK之纖維連接蛋白III型域1 (FN1)。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體結合於胺基酸序列SEQ ID NO: 452內之一或多個胺基酸殘基。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體結合於人類MerTK之近膜域(JM)。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體結合於胺基酸序列SEQ ID NO:454內之一或多個胺基酸殘基。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體結合於人類MerTK蛋白之細胞外域，但不結合於人類Axl蛋白之細胞外域。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體結合於人類MerTK之細胞外域內的一或多個域。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體結合於人類MerTK之免疫球蛋白樣1域1 (Ig1)及纖維連接蛋白III型域1 (FN1)。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體結合於人類MerTK之免疫球蛋白樣域2 (Ig2)及纖維連接蛋白III型域1 (FN1)。
在一些實施例中，根據以上實施例中之任一者的抗MerTK抗體為單株抗體，包括人類化及/或人類抗體。在一些實施例中，抗MerTK抗體為抗體片段，例如Fv、Fab、Fab'、scFv、雙功能抗體或F(ab')2片段。在一些實施例中，抗MerTK抗體為實質上全長抗體，例如IgG1抗體、IgG2a抗體或如本文所定義之其他抗體類別或同型。
在一些實施例中，根據以上實施例中之任一者的抗MerTK抗體可併入如以下部分1-7中所述之任何特徵(單獨或組合)：(1) 抗 MerTK 抗體結合親和力
在本文所提供之抗體中之任一者的一些實施例中，抗體具有＜ 1 μM、＜ 100 nM、＜ 10 nM、＜ 1 nM、＜ 0.1 nM、＜ 0.01 nM或＜ 0.001 nM (例如10-8 M或更低，例如10-8 M至10-13 M，例如10-9 M至10-13 M)之解離常數(KD )。解離常數可藉由任何分析技術來測定，包括任何生物化學或生物物理技術，諸如ELISA、表面電漿共振(SPR)、生物層干涉術(參見例如Octet System, ForteBio)、等溫滴定量熱法(ITC)、差示掃描量熱法(DSC)、圓二色性(CD)、停流分析及比色或螢光蛋白熔化分析。在一實施例中，Kd藉由經放射性標記之抗原結合分析(RIA)來量測。在一些實施例中，RIA用所關注抗體之Fab形式及其抗原執行，例如如Chen等人J. Mol. Biol. 293:865-881 (1999)所述。在一些實施例中，KD 使用BIACORE表面電漿共振分析來量測，例如，使用BIACORE -2000或BIACORE -3000 (BIAcore, Inc., Piscataway, NJ)之分析在25℃下用固定抗原CM5晶片在約10反應單位(RU)下執行。在一些實施例中，KD 使用單價抗體(例如Fab)或全長抗體來測定。在一些實施例中，KD 使用呈單價形式之全長抗體來測定。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體結合於人類MerTK，其中結合於人類MerTK之KD 係約1.4 nM至約81 nM。在一些實施例中，抗MerTK抗體結合於cyno MerTK，其中結合於cyno MerTK之KD 係約1.6 nM至約107 nM。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體結合於鼠科動物MerTK，其中結合於鼠科動物MerTK之KD 係約30 nM至約186 nM。(2) 抗體片段
在本文所提供之抗體中之任一者的一些實施例中，抗體為抗體片段。抗體片段包括但不限於Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2 、Fv及scFv片段以及下文所述之其他片段。關於某些抗體片段之綜述，參見Hudson等人Nat. Med. 9:129-134 (2003)。關於scFv片段之綜述，參見例如WO 93/16185；及美國專利第5571894號及第5587458號。關於包含挽救受體結合抗原決定基殘基且具有增加之活體內半衰期的Fab及F(ab')2 片段之論述，參見美國專利第5869046號。
雙功能抗體係具有兩個抗原結合位點之抗體片段，其可為二價或雙特異性的。參見例如EP404097；WO 1993/01161；Hudson等人Nat. Med. 9:129-134 (2003)。三功能抗體及四功能抗體亦描述於Hudson等人Nat. Med . 9:129-134 (2003)中。單域抗體係包含抗體之全部或一部分重鏈可變域或者全部或一部分輕鏈可變域之抗體片段。在某些實施例中，單域抗體係人類單域抗體(參見例如美國專利第6248516號)。
抗體片段可藉由多種技術製得，包括但不限於完整抗體之蛋白水解消化以及由重組宿主細胞(例如大腸桿菌或噬菌體)產生，如本文所述。(3) 嵌合及人類化抗體
在本文所提供之抗體中之任一者的一些實施例中，抗體為嵌合抗體。某些嵌合抗體描述於例如美國專利第4816567號中。在一實例中，嵌合抗體包含非人類可變區(例如，源於小鼠、大鼠、倉鼠、兔或諸如猴之非人類靈長類動物的可變區)及人類恒定區。在另一實例中，嵌合抗體係「類別轉換」抗體，其中類別或子類相對於親本抗體之類別或子類已發生變化。嵌合抗體包括其抗原結合片段。
在本文所提供之抗體中之任一者的一些實施例中，抗體為人類化抗體。典型地，非人類抗體經人類化以減少針對人類之免疫原性，同時保留親本非人類抗體之特異性及親和力。在某些實施例中，人類化抗體在人類中實質上為非免疫原性的。在某些實施例中，人類化抗體對標靶之親和力與來自產生該人類化抗體之另一物種的抗體實質上相同。參見例如美國專利第5530101號；第5693761號；第5693762號；及第5585089號。在某些實施例中，鑑別出可在不減弱抗原結合域之天然親和力同時減少其免疫原性之情況下經修飾之抗體可變域胺基酸。參見例如美國專利第5766886號及第5869619號。一般而言，人類化抗體包含一或多個可變域，其中HVR (或其部分)係源於非人類抗體，且FR (或其部分)係源於人類抗體序列。人類化抗體視情況亦將包含人類恒定區之至少一部分。在一些實施例中，人類化抗體中之一些FR殘基經來自非人類抗體(例如，產生HVR殘基之抗體)之相應殘基取代，例如，以恢復或改良抗體特異性或親和力。
人類化抗體及其製造方法綜述於例如Almagro等人Front. Biosci. 13:161 9-1633 (2008)中，且進一步描述於例如美國專利第5821337號、第7527791號、第6982321號及第7087409號中。可用於人類化之人類構架區包括但不限於：使用「最佳擬合」方法選擇的構架區(參見例如Sims等人J. Immunol. 151:2296 (1993))；源於輕鏈或重鏈可變區之特定子組之人類抗體的共有序列之構架區(參見例如Carter等人Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:4285 (1992)；及Presta等人,J. Immunol . 151 :2623 (1993))；人類成熟(體細胞突變)構架區或人類生殖系構架區(參見例如Almagro及FranssonFront. Biosci. 13:1619-1633 (2008))；及源於篩選FR文庫之構架區(參見例如Baca等人J. Biol. Chem. 272:10678-10684 (1997)及Rosok等人J. Biol. Chem . 271:22611-22618 (1996))。(4) 人類抗體
在本文所提供之抗體中之任一者的一些實施例中，抗體為人類抗體。人類抗體可使用此項技術中已知之多種技術產生。人類抗體一般描述於van Dijk等人Curr. Opin. Pharmacol . 5:368-74 (2001)及LonbergCurr. Opin. Immunol . 20:450-459 (2008)中。
人類抗體可藉由向已經修飾以回應於抗原攻擊而產生完整人類抗體或具有人類可變區之完整抗體的基因轉殖動物投與免疫原來製備。吾人可用人類Ig基因座之大片段工程改造缺乏小鼠抗體產生之小鼠品系，預期此小鼠將在小鼠抗體不存在下產生人類抗體。大的人類Ig片段可保留大的可變基因多樣性以及對抗體產生及表現之適當調控。藉由利用關於抗體多樣化及選擇以及對人類蛋白質之免疫耐受性缺乏之小鼠機制，此等小鼠品系中再現之人類抗體譜系可產生針對任何所關注抗原(包括人類抗原)之高親和力全人類抗體。使用融合瘤技術，可產生且選擇具有所需特異性之抗原特異性人類MAb。某些例示性方法描述於美國專利第5545807號、EP 546073及EP 546073中。亦參見例如描述XENOMOUSE™技術之美國專利第6075181號及第6150584號；描述HUMAB®技術之美國專利第5770429號；描述K-M MOUSE®技術之美國專利第7041870號；及描述VELOCIMOUSE®技術之美國專利申請公開案第US 2007/0061900號。來自由該等動物產生之完整抗體之人類可變區可例如藉由與不同的人類恒定區組合進一步經修飾。
人類抗體亦可藉由基於融合瘤之方法製得。已描述用於產生人類單株抗體之人類骨髓瘤及小鼠-人類異源骨髓瘤細胞株。(參見例如KozborJ. Immunol . 133:3001 (1984)及Boerner等人J. Immunol. 147:86 (1991))。經由人類B-細胞融合瘤技術產生之人類抗體亦描述於Li等人Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 1 03:3557-3562 (2006)中。額外方法包括描述於例如美國專利第7189826號(描述由融合瘤細胞株產生單株人類IgM抗體)中之彼等方法。人類融合瘤技術(Trioma技術)亦描述於Vollmers等人Histology and Histopathology 20(3) :927-937 (2005)及Vollmers等人Methods and Findings in Experimental and Clinical Pharmacology 27(3):185-91 (2005)中。人類抗體亦可藉由分離選自人類源性噬菌體呈現文庫之Fv純系可變域序列而產生。該等可變域序列可接著與所需人類恒定域組合。用於自抗體文庫選擇人類抗體之技術描述於下文。
在本文所提供之抗體中之任一者的一些實施例中，該抗體係藉由活體外方法及/或篩選組合文庫中具有所需一或多種活性之抗體而分離之人類抗體。合適實例包括但不限於噬菌體呈現(CAT、Morphosys、Dyax、Biosite/Medarex、Xoma、Symphogen、Alexion (先前稱為Proliferon)、Affimed)、核糖體呈現(CAT)、酵母呈現(Adimab)及其類似方法。在某些噬菌體呈現方法中，藉由聚合酶鏈反應(PCR)單獨地選殖VH及VL基因之譜系，且隨機地重組於噬菌體文庫中，接著可在該等噬菌體文庫中篩選抗原結合噬菌體，如Winter等人Ann. Rev. Immunol . 12: 433-455 (1994)中所述。舉例而言，此項技術中已知用於產生噬菌體呈現文庫及篩選該等文庫中具有所需結合特徵之抗體的多種方法。亦參見Sidhu等人J. Mol. Biol. 338(2): 299-310, 2004；Lee等人J. Mol. Biol. 340(5): 1073-1093, 2004；FellouseProc. Natl. Acad. Sci. USA 101(34):12467-12472 (2004)；及Lee等人J. Immunol. Methods 284( -2):1 19-132 (2004)。噬菌體典型地將抗體片段呈現為單鏈Fv (scFv)片段或Fab片段。來自經免疫來源之文庫提供針對免疫原之高親和力抗體而無需構築融合瘤。或者，可選殖(例如，自人類)原生譜系以在不進行任何免疫之情況下提供針對多種非自體以及自體抗原之單一抗體来源，如Griffiths等人EMBO J . 12: 725-734 (1993)所述。最後，原生文庫亦可藉由自幹細胞選殖未重排之V-基因區段，且使用包含隨機序列之PCR引子來編碼高變HVR3區且實現活體外重排而以合成方式製得，如Hoogenboom等人J. Mol. Biol ., 227: 381-388, 1992所述。描述人類抗體噬菌體文庫之專利公開案包括例如：美國專利第5750373號及美國專利公開案第2007/0292936號及第2009/0002360號。自人類抗體文庫分離之抗體在本文中被視為人類抗體或人類抗體片段。(5) 包括 Fc 區之恆定區
在本文所提供之抗體中之任一者的一些實施例中，抗體包含Fc。在一些實施例中，Fc為人類IgG1、IgG2、IgG3及/或IgG4同型。在一些實施例中，抗體屬於IgG類別、IgM類別或IgA類別。
在本文所提供之抗體中之任一者的某些實施例中，抗體具有IgG2同型。在一些實施例中，抗體含有人類IgG2恆定區。在一些實施例中，人類IgG2恆定區包括Fc區。在一些實施例中，抗體誘導一或多種MerTK活性或與結合於Fc受體無關。在一些實施例中，抗體結合抑制性Fc受體。在某些實施例中，抑制性Fc受體為抑制性Fc-γ受體IIB (FcγIIB)。
在本文所提供之抗體中之任一者的某些實施例中，抗體具有IgG1同型。在一些實施例中，抗體含有小鼠IgG1恆定區。在一些實施例中，抗體含有人類IgG1恆定區。在一些實施例中，人類IgG1恆定區包括Fc區。在一些實施例中，抗體結合抑制性Fc受體。在某些實施例中，抑制性Fc受體為抑制性Fc-γ受體IIB (FcγIIB)。
在本文所提供之抗體中之任一者的某些實施例中，抗體具有IgG4同型。在一些實施例中，抗體含有人類IgG4恆定區。在一些實施例中，人類IgG4恆定區包括Fc區。在一些實施例中，抗體結合抑制性Fc受體。在某些實施例中，抑制性Fc受體為抑制性Fc-γ受體IIB (FcγIIB)。
在本文所提供之抗體中之任一者的某些實施例中，抗體具有雜交IgG2/4同型。在一些實施例中，抗體包括包含人類IgG2之胺基酸118至260 (根據EU編號)及人類IgG4之胺基酸261-447 (根據EU編號)的胺基酸序列(WO 1997/11971；WO 2007/106585)。
在一些實施例中，如與包含不包含胺基酸取代之Fc區的相應抗體相比，Fc區增加叢集而不激活補體。在一些實施例中，抗體誘導該抗體特異性地結合之標靶的一或多種活性。在一些實施例中，抗體結合於MerTK。
亦可需要修飾本發明之抗MerTK抗體以修飾抗體之效應子功能及/或增加血清半衰期。舉例而言，恆定區上之Fc受體結合位點可經修飾或突變，以移除或減少與某些Fc受體(諸如FcγRI、FcγRII及/或FcγRIII)之結合親和力，從而減少抗體依賴性細胞介導之細胞毒性。在一些實施例中，藉由移除抗體之Fc區(例如，在IgG之CH2域中)的N-糖基化來削弱效應子功能。在一些實施例中，藉由修飾人類IgG之区(諸如233-236、297及/或327-331)來削弱效應子功能，如WO 99/58572及Armour等人Molecular Immunology 40: 585-593 (2003)；Reddy等人J. Immunology 164:1925-1933 (2000)中所述。在其他實施例中，亦可需要修飾本發明之抗MerTK抗體以修飾效應子功能，從而增加針對含ITIM之FcgRIIb (CD32b)的發現選擇性，以增加MerTK抗體在相鄰細胞上之叢集，而不激活體液反應，包括抗體依賴性細胞介導之細胞毒性及抗體依賴性細胞吞噬作用。
舉例而言，為了增加抗體之血清半衰期，吾人可將挽救受體結合抗原決定基併入至抗體(尤其抗體片段)中，如美國專利5739277中所述。如本文所用，術語「挽救受體結合抗原決定基 」係指IgG分子(例如IgG1 、IgG2 、IgG3 或IgG4 )之Fc區中負責增加IgG分子之活體內血清半衰期的抗原決定基。其他胺基酸序列修飾。(6) 抗體變異體
在本文所提供之抗體中之任一者的一些實施例中，涵蓋抗體之胺基酸序列變異體。舉例而言，可需要改良抗體之結合親和力及/或其他生物特性。 (i) 取代、插入及缺失變異體
在本文所提供之抗體中之任一者的一些實施例中，提供具有一或多個胺基酸取代之抗體變異體。抗體之胺基酸序列變異體可藉由將適當修飾引入至編碼該抗體之核苷酸序列中，或藉由肽合成來製備。該等修飾包括例如抗體之胺基酸序列內的殘基之缺失及/或插入及/或取代。表 A ：胺基酸取代
初始殘基 例示性取代 較佳取代
Ala (A) Val；Leu；Ile Val
Arg (R) Lys；Gln；Asn Lys
Asn (N) Gln；His；Asp；Lys；Arg Gln
Asp (D) Glu；Asn Glu
Cys (C) Ser；Ala Ser
Gln (Q) Asn；Glu Asn
Glu (E) Asp；Gln Asp
Gly (G) Ala Ala
His (H) Asn；Gln；Lys；Arg Arg
Ile (I) Leu；Val；Met；Ala；Phe；正白胺酸 Leu
Leu (L) 正白胺酸；Ile；Val；Met；Ala；Phe Ile
Lys (K) Arg；Gln；Asn Arg
Met (M) Leu；Phe；Ile Leu
Phe (F) Leu；Val；Ile；Ala；Tyr Tyr
Pro (P) Ala Ala
Ser (S) Thr Thr
Thr (T) Ser Ser
Trp (W) Tyr；Phe Tyr
Tyr (Y) Trp；Phe；Thr；Ser Phe
Val (V) Ile；Leu；Met；Phe；Ala；正白胺酸 Leu
抗體之生物特性的實質性修飾藉由選擇取代來實現，該等取代在其對維持(a)取代區域中之多肽骨架的結構，例如呈薄片或螺旋構形，(b)該分子在標靶位點處之電荷或疏水性，或(c)側鏈之大小的影響方面顯著不同。天然存在之殘基基於常見的側鏈特性分至各組： (1) 疏水性：正白胺酸、Met、Ala、Val、Leu、Ile； (2) 中性親水性：Cys、Ser、Thr、Asn、Gln； (3) 酸性：Asp、Glu； (4) 鹼性：His、Lys、Arg； (5) 影響鏈取向之殘基：Gly、Pro；及 (6) 芳香性：Trp、Tyr、Phe。
舉例而言，非保守取代可涉及將此等類別之一的成員交換成另一類別之成員。該等經取代殘基可經引入至例如人類抗體中與非人類抗體同源之區中，或引入至該分子之非同源區中。
根據某些實施例，在對本文所述之多肽或抗體進行改變時，可考慮胺基酸之親水指數(hydropathic index)。各胺基酸已基於其疏水性及電荷特徵經指派親水指數。其为：異白胺酸(+4.5)；纈胺酸(+4.2)；白胺酸(+3.8)；苯丙胺酸(+2.8)；半胱胺酸/胱胺酸(+2.5)；甲硫胺酸(+1.9)；丙胺酸(+1.8)；甘胺酸(-0.4)；蘇胺酸(-0.7)；絲胺酸(-0.8)；色胺酸(-0.9)；酪胺酸(-1.3)；脯胺酸(-1.6)；組胺酸(-3.2)；麩胺酸(-3.5)；麩醯胺(-3.5)；天冬胺酸(-3.5)；天冬醯胺(-3.5)；離胺酸(-3.9)；及精胺酸(-4.5)。
此項技術中應理解胺基酸親水指數在對蛋白質賦予交互性生物功能中之重要性。Kyte等人J. Mol. Biol ., 157:105-131 (1982)。已知某些胺基酸可取代具有相似親水指數或評分之其他胺基酸且仍保留相似生物活性。在基於親水指數進行改變時，在某些實施例中，包括親水指數在±2內之胺基酸的取代。在某些實施例中，包括在±1內之彼等取代，且在某些實施例中，包括在±0.5內之彼等取代。
此項技術中亦應理解，可基於親水性有效地進行類似胺基酸之取代，尤其在由此產生之生物學功能蛋白或肽意欲用於免疫學實施例中時，如在本發明之情況下。在某些實施例中，蛋白質之最大局部平均親水性(如由其相鄰胺基酸之親水性決定)與其免疫原性及抗原性，亦即，與蛋白質之生物特性相關。
以下親水性值已經指派至此等胺基酸殘基：精胺酸(+3.0)；離胺酸(+3.0±1)；天冬胺酸(+3.0±1)；麩胺酸(+3.0±1)；絲胺酸(+0.3)；天冬醯胺(+0.2)；麩醯胺(+0.2)；甘胺酸(0)；蘇胺酸(-0.4)；脯胺酸(-0.5±1)；丙胺酸(-0.5)；組胺酸(-0.5)；半胱胺酸(-1.0)；甲硫胺酸(-1.3)；纈胺酸(-1.5)；白胺酸(-1.8)；異白胺酸(-1.8)；酪胺酸(-2.3)；苯丙胺酸(-2.5)及色胺酸(-3.4)。在基於相似親水性值進行改變時，在某些實施例中，包括親水性值在±2內之胺基酸取代，在某些實施例中包括在±1內之彼等取代，且在某些實施例中，包括在±0.5內之彼等取代。吾人亦可基於親水性自一級胺基酸序列鑑別抗原決定基。此等區亦稱作「抗原決定基核心區」。
在上文所提供之變異體VH及VL序列的某些實施例中，各HVR係不變的。
胺基酸序列插入物包括長度介於一個殘基至包含一百個或一百個以上殘基之多肽範圍內的胺基端及/或羧基端融合物，以及單個或多個胺基酸殘基之序列內插入物。末端插入物之實例包括具有N端甲硫胺醯基殘基之抗體。抗體分子之其他插入變異體包括抗體之N端或C端與酶(例如，關於ADEPT)或增加抗體之血清半衰期的多肽之融合物。
在HVR外部且不參與維持抗體之適當構形的任何半胱胺酸殘基一般地亦可經絲胺酸取代，以改良分子之氧化穩定性且防止異常交聯。相反，半胱胺酸鍵可添加至抗體中以改良其穩定性(尤其在抗體係諸如Fv片段之抗體片段時)。 (ii) 糖基化變異體
在本文所提供之抗體中之任一者的一些實施例中，改變抗體以增加或降低抗體之糖基化程度。抗體中之糖基化位點的添加或缺失可藉由改變胺基酸序列以致產生或移除一或多個糖基化位點而便利地實現。
抗體之糖基化典型地為N連接或O連接的。N連接係指碳水化合物部分附接至天冬醯胺殘基之側鏈。三肽序列天冬醯胺-X-絲胺酸及天冬醯胺-X-蘇胺酸(其中X為除脯胺酸以外之任何胺基酸)係用於碳水化合物部分酶促附接至天冬醯胺側鏈之識別序列。因此，多肽中存在此等三肽序列中之任一者均產生潜在糖基化位點。O連接之糖基化係指糖N-乙醯基半乳糖胺、半乳糖或木糖之一附接至羥基胺基酸，最通常為絲胺酸或蘇胺酸，不過亦可使用5-羥基脯胺酸或5-羥基離胺酸。
抗體中之糖基化位點的添加係藉由改變胺基酸序列以致其含有上文所述之三肽序列中之一或多者而便利地實現(關於N連接之糖基化位點)。該改變亦可藉由在初始抗體之序列中添加一或多個絲胺酸或蘇胺酸殘基或由一或多個絲胺酸或蘇胺酸殘基取代來進行(關於O連接之糖基化位點)。
在抗體包含Fc區時，其所附接之碳水化合物可發生改變。由哺乳動物細胞產生之天然抗體典型地包含分支鏈、雙觸角寡醣，該寡醣一般地藉由N鍵聯附接至Fc區之CH2域的Asn297 (根據Kabat編號)。該寡醣可包括多種碳水化合物，例如甘露糖、N-乙醯基葡糖胺(GlcNAc)、半乳糖及唾液酸，以及附接至雙觸角寡醣結構之「幹」中之GlcNAc的岩藻醣。在一些實施例中，可對本發明抗體中之寡醣進行修飾以便產生具有某些經改良特性之抗體變異體。
在一實施例中，提供具有缺乏(直接地或間接地)附接至Fc區之岩藻醣的碳水化合物結構之抗體變異體。參見例如美國專利公開案第2003/0157108號及第2004/0093621號。關於「去岩藻醣基化」或「岩藻醣缺乏」抗體變異體之公開案的實例包括：US 2003/0157108；US 2003/0115614；US 2002/0164328；US 2004/0093621；US 2004/0132140；US 2004/0110704；US 2004/0110282；US 2004/0109865；Okazaki等人J. Mol. Biol. 336:1239-1249 (2004)；Yamane-Ohnuki等人Biotech. Bioeng . 87:614 (2004)。能夠產生去岩藻醣基化抗體之細胞株的實例包括缺乏蛋白質岩藻醣基化之Led 3 CHO細胞(Ripka等人Arch. Biochem. Biophys . 249:533-545 (1986)；US 2003/0157108)，及基因剔除細胞株，諸如α-1,6-岩藻醣基轉移酶基因FUT8基因剔除CHO細胞(參見例如Yamane-Ohnuki等人Biotech. Bioeng . 87: 614 (2004)及Kanda等人Biotechnol. Bioeng . 94(4):680-688 (2006))。 (iii) 經修飾之恆定區
在本文所提供之抗體中之任一者的一些實施例中，抗體Fc為抗體Fc同型及/或修飾。在一些實施例中，抗體Fc同型及/或修飾能夠結合於Fc γ受體。
在本文所提供之抗體中之任一者的一些實施例中，經修飾之抗體Fc為IgG1經修飾之Fc。在一些實施例中，IgG1經修飾之Fc包含一或多種修飾。舉例而言，在一些實施例中，IgG1經修飾之Fc包含一或多種胺基酸取代(例如，相對於同一同型之野生型Fc區)。在一些實施例中，該一或多種胺基酸取代係選自N297A (Bolt S等人 (1993)Eur J Immunol 23:403-411)、D265A (Shields等人 (2001)R. J. Biol. Chem. 276, 6591–6604)、L234A、L235A (Hutchins等人 (1995)Proc Natl Acad Sci USA, 92:11980-11984；Alegre等人, (1994)Transplantation 57:1537-1543. 31；Xu等人, (2000)Cell Immunol , 200:16-26)、G237A (Alegre等人 (1994)Transplantation 57:1537-1543. 31；Xu等人 (2000)Cell Immunol , 200:16-26)、C226S、C229S、E233P、L234V、L234F、L235E (McEarchern等人, (2007)Blood , 109:1185-1192)、P331S (Sazinsky等人, (2008)Proc Natl Acad Sci USA 2008, 105:20167-20172)、S267E、L328F、A330L、M252Y、S254T及/或T256E，其中胺基酸位置係根據EU編號慣例。
在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含N297A突變(根據EU編號)。在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含D265A及N297A突變(根據EU編號)。在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含D270A突變(根據EU編號)。在一些實施例中，IgG1經修飾之Fc包含L234A及L235A突變(根據EU編號)。在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含L234A及G237A突變(根據EU編號)。在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含L234A、L235A及G237A突變(根據EU編號)。在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含P238D、L328E、E233、G237D、H268D、P271G及A330R突變(根據EU編號)中之一或多者(包括全部)。在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含S267E/L328F突變(根據EU編號)中之一或多者。在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含P238D、L328E、E233D、G237D、H268D、P271G及A330R突變(根據EU編號)。在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含P238D、L328E、G237D、H268D、P271G及A330R突變(根據EU編號)。在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含P238D、S267E、L328E、E233D、G237D、H268D、P271G及A330R突變(根據EU編號)。在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含P238D、S267E、L328E、G237D、H268D、P271G及A330R突變(根據EU編號)。在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含C226S、C229S、E233P、L234V及L235A突變(根據EU編號)。在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含L234F、L235E及P331S突變(根據EU編號)。在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含S267E及L328F突變(根據EU編號)。在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含N325S及L328F突變(根據EU編號)。在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含S267E突變(根據EU編號)。在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含用CH1取代IgG1之恆定重鏈1 (CH1)及鉸鏈區以及用κ輕鏈取代IgG2之鉸鏈區(IgG2之胺基酸118-230，根據EU編號)。
在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包括兩種或更多種胺基酸取代，如與具有不包括該兩種或更多種胺基酸取代之Fc區的相應抗體相比，該兩種或更多種胺基酸取代增加抗體叢集而不激活補體。因此，在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，IgG1經修飾之Fc為包含Fc區之抗體，其中該抗體包含根據EU編號在位置E430G處之胺基酸取代及Fc區中在選自以下之殘基位置處的一或多種胺基酸取代：L234F、L235A、L235E、S267E、K322A、L328F、A330S、P331S及其任何組合。在一些實施例中，IgG1經修飾之Fc包含根據EU編號在位置E430G、L243A、L235A及P331S處之胺基酸取代。在一些實施例中，IgG1經修飾之Fc包含根據EU編號在位置E430G及P331S處之胺基酸取代。在一些實施例中，IgG1經修飾之Fc包含根據EU編號在位置E430G及K322A處之胺基酸取代。在一些實施例中，IgG1經修飾之Fc包含根據EU編號在位置E430G、A330S及P331S處之胺基酸取代。在一些實施例中，IgG1經修飾之Fc包含根據EU編號在位置E430G、K322A、A330S及P331S處之胺基酸取代。在一些實施例中，IgG1經修飾之Fc包含根據EU編號在位置E430G、K322A及A330S處之胺基酸取代。在一些實施例中，IgG1經修飾之Fc包含根據EU編號在位置E430G、K322A及P331S處之胺基酸取代。
在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，根據EU編號慣例，IgG1經修飾之Fc可在本文中進一步包含，可與A330L突變(Lazar等人Proc Natl Acad Sci USA , 103:4005-4010 (2006))，或L234F、L235E及/或P331S突變中之一或多者(Sazinsky等人Proc Natl Acad Sci USA , 105:20167-20172 (2008))組合以消除補體激活。在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，IgG1經修飾之Fc可進一步包含A330L、A330S、L234F、L235E及/或P331S中之一或多者(根據EU編號)。在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，IgG1經修飾之Fc可進一步包含一或多種突變以增强人類血清中之抗體半衰期(例如，M252Y、S254T及T256E突變(根據EU編號慣例)中之一或多者(包括全部))。在IgG1經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，IgG1經修飾之Fc可進一步包含E430G、E430S、E430F、E430T、E345K、E345Q、E345R、E345Y、S440Y及/或S440W中之一或多者(根據EU編號)。
本發明之其他態樣係關於具有經修飾之恆定區(亦即，Fc區)的抗體。依賴於結合於FcgR受體來激活靶向受體之抗體若經工程改造以消除FcgR結合，則可喪失其促效劑活性(參見例如Wilson等人Cancer Cell 19:101-113 (2011)；Armour等人Immunology 40:585-593 (2003)；及White等人Cancer Cell 27:138-148 (2015))。因而，認為當具有正確抗原決定基特異性的本發明之抗MerTK抗體具有來自人類IgG2同型之Fc域(CH1及鉸鏈區)或能夠優先結合抑制性FcgRIIB r受體的另一類型之Fc域或其變化形式時，該抗體可激活標靶抗原，同時具有最小副作用。
在本文所提供之抗體中之任一者的一些實施例中，經修飾之抗體Fc為IgG2經修飾之Fc。在一些實施例中，IgG2經修飾之Fc包含一或多種修飾。舉例而言，在一些實施例中，IgG2經修飾之Fc包含一或多種胺基酸取代(例如，相對於同一同型之野生型Fc區)。在IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，該一或多種胺基酸取代係選自V234A (Alegre等人Transplantation 57:1537-1543 (1994)；Xu等人Cell Immunol , 200:16-26 (2000))；G237A (Cole等人Transplantation , 68:563-571 (1999))；H268Q、V309L、A330S、P331S (US 2007/0148167；Armour等人Eur J Immunol 29: 2613-2624 (1999)；Armour等人The Haematology Journal 1(增刊1):27 (2000)；Armour等人The Haematology Journal 1(增刊1):27 (2000))、C219S及/或C220S (White等人Cancer Cell 27, 138-148 (2015))；S267E、L328F (Chu等人Mol Immunol , 45:3926-3933 (2008))；及M252Y、S254T及/或T256E (根據EU編號慣例)。在IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置V234A及G237A處之胺基酸取代。在IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置C219S或C220S處之胺基酸取代。在IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置A330S及P331S處之胺基酸取代。在IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置S267E及L328F處之胺基酸取代。
在IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含C127S胺基酸取代(根據EU編號慣例) (White等人, (2015)Cancer Cell 27, 138-148；Lightle等人Protein Sci. 19:753-762 (2010)；及WO 2008/079246)。在IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，該抗體具有含包含C214S胺基酸取代(根據EU編號慣例)之κ輕鏈恆定域的IgG2同型(White等人Cancer Cell 27:138-148 (2015)；Lightle等人Protein Sci. 19:753-762 (2010)；及WO 2008/079246)。
在IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含C220S胺基酸取代(根據EU編號慣例)。在IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，該抗體具有含包含C214S胺基酸取代(根據EU編號慣例)之κ輕鏈恆定域的IgG2同型。
在IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含C219S胺基酸取代(根據EU編號慣例)。在IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，該抗體具有含包含C214S胺基酸取代(根據EU編號慣例)之κ輕鏈恆定域的IgG2同型。
在IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包括IgG2同型重鏈恆定域1 (CH1)及鉸鏈區(White等人Cancer Cell 27:138-148 (2015))。在IgG2經修飾之Fc中之任一者的某些實施例中，IgG2同型CH1及鉸鏈區包含胺基酸序列118-230 (根據EU編號)。在IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，抗體Fc區包含S267E胺基酸取代、L328F胺基酸取代或兩者，及/或N297A或N297Q胺基酸取代(根據EU編號慣例)。
在IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc進一步包含根據EU編號在位置E430G、E430S、E430F、E430T、E345K、E345Q、E345R、E345Y、S440Y及S440W處之一或多種胺基酸取代。在IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc可進一步包含一或多種突變以增强人類血清中之抗體半衰期(例如，M252Y、S254T及T256E突變(根據EU編號慣例)中之一或多者(包括全部))。在IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc可進一步包含A330S及P331S。
在IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc為IgG2/4雜交Fc。在一些實施例中，IgG2/4雜交Fc包含IgG2 aa 118至260及IgG4 aa 261至447。在任何IgG2經修飾之Fc之一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置H268Q、V309L、A330S及P331S處之一或多種胺基酸取代。
在IgG1及/或IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號選自A330L、L234F、L235E或P331S之一或多種額外胺基酸取代；及其任何組合。
在IgG1及/或IgG2經修飾之Fc中之任一者的某些實施例中，Fc包含根據EU編號在選自C127S、L234A、L234F、L235A、L235E、S267E、K322A、L328F、A330S、P331S、E345R、E430G、S440Y及其任何組合之殘基位置處的一或多種胺基酸取代。在IgG1及/或IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置E430G、L243A、L235A及P331S處之胺基酸取代。在IgG1及/或IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置E430G及P331S處之胺基酸取代。在IgG1及/或IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置E430G及K322A處之胺基酸取代。在IgG1及/或IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置E430G、A330S及P331S處之胺基酸取代。在IgG1及/或IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置E430G、K322A、A330S及P331S處之胺基酸取代。在IgG1及/或IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置E430G、K322A及A330S處之胺基酸取代。在IgG1及/或IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置E430G、K322A及P331S處之胺基酸取代。在IgG1及/或IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置S267E及L328F處之胺基酸取代。在IgG1及/或IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置C127S處之胺基酸取代。在IgG1及/或IgG2經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置E345R、E430G及S440Y處之胺基酸取代。
在本文所提供之抗體中之任一者的一些實施例中，經修飾之抗體Fc為IgG4經修飾之Fc。在一些實施例中，IgG4經修飾之Fc包含一或多種修飾。舉例而言，在一些實施例中，IgG4經修飾之Fc包含一或多種胺基酸取代(例如，相對於同一同型之野生型Fc區)。在IgG4經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，該一或多種胺基酸取代係選自L235A、G237A、S229P、L236E (Reddy等人J Immunol 164:1925-1933(2000))、S267E、E318A、L328F、M252Y、S254T及/或T256E (根據EU編號慣例)。在IgG4經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc可進一步包含L235A、G237A及E318A (根據EU編號慣例)。在IgG4經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc可進一步包含S228P及L235E (根據EU編號慣例)。在IgG4經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，IgG4經修飾之Fc可進一步包含S267E及L328F (根據EU編號慣例)。
在IgG4經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，IgG4經修飾之Fc包含可與S228P突變(根據EU編號慣例) (Angal等人Mol Immunol. 30:105-108 (1993))及/或與描述於(Peters等人J Biol Chem. 287(29):24525-33 (2012))中之一或多種突變組合以增強抗體穩定化。
在IgG4經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，IgG4經修飾之Fc可進一步包含一或多種突變以增强人類血清中之抗體半衰期(例如，M252Y、S254T及T256E突變(根據EU編號慣例)中之一或多者(包括全部))。
在IgG4經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含L235E (根據EU編號)。在IgG4經修飾之Fc中之任一者的某些實施例中，Fc包含根據EU編號在選自C127S、F234A、L235A、L235E、S267E、K322A、L328F、E345R、E430G、S440Y及其任何組合之殘基位置處的一或多種胺基酸取代。在IgG4經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置E430G、L243A、L235A及P331S處之胺基酸取代。在IgG4經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置E430G及P331S處之胺基酸取代。在IgG4經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置E430G及K322A處之胺基酸取代。在IgG4經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置E430處之胺基酸取代。在IgG4經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc區包含根據EU編號在位置E430G及K322A處之胺基酸取代。在IgG4經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置S267E及L328F處之胺基酸取代。在IgG4經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置C127S處之胺基酸取代。在IgG4經修飾之Fc中之任一者的一些實施例中，Fc包含根據EU編號在位置E345R、E430G及S440Y處之胺基酸取代。(7) 其他抗體修飾
在該等抗體中之任一者的一些實施例中，抗體為衍生物。術語「衍生物」係指包括除胺基酸(或核酸)之插入、缺失或取代以外的化學修飾之分子。在某些實施例中，衍生物包含共價修飾，包括但不限於與聚合物、脂質或其他有機或無機部分之化學鍵結。在某些實施例中，經化學修飾之抗原結合蛋白可具有比未經化學修飾之抗原結合蛋白長的循環半衰期。在某些實施例中，經化學修飾之抗原結合蛋白可具有經改良之靶向所需細胞、組織及/或器官的能力。在一些實施例中，衍生之抗原結合蛋白係經共價修飾以包括一或多種水溶性聚合物附接，包括但不限於聚乙二醇、聚氧乙二醇或聚丙二醇。參見例如美國專利第4640835號、第4496689號、第4301144號、第4670417號、第4791192號及第4179337號。在某些實施例中，衍生之抗原結合蛋白包含一或多種聚合物，包括但不限於單甲氧基-聚乙二醇、葡聚糖、纖維素、乙二醇/丙二醇之共聚物、羧甲基纖維素、聚乙烯吡咯啶酮、聚-1,3-二氧戊環、聚-1,3,6-三噁烷、乙烯/順丁烯二酸酐共聚物、聚胺基酸(均聚物或無規共聚物)、聚-(N-乙烯基吡咯啶酮)-聚乙二醇、丙二醇均聚物、聚環氧丙烷/環氧乙烷共聚物、聚氧乙基化多元醇(例如，甘油)及聚乙烯醇，以及此等聚合物之混合物。
在某些實施例中，衍生物係經聚乙二醇(PEG)次單元共價修飾。在某些實施例中，一或多種水溶性聚合物鍵結於衍生物之一或多個特定位置處，例如胺基端。在某些實施例中，一或多種水溶性聚合物隨機附接至衍生物之一或多條側鏈。在某些實施例中，使用PEG來改良抗原結合蛋白之治療能力。在某些實施例中，使用PEG來改良人類化抗體之治療能力。某些此等方法論述於例如美國專利第6133426號中，該專利出於任何目的由此以引用之方式併入。
肽類似物在醫藥工業中通常用作非肽藥物，其特性類似於模板肽之彼等特性。此等類型之非肽化合物係稱作「肽模擬物」或「擬肽物」。Fauchere,J. Adv. Drug Res ., 15:29 (1986)；及Evans等人J. Med. Chem ., 30:1229 (1987)，其出於任何目的以引用之方式併入本文中。此等化合物通常藉助於電腦化分子建模來開發。在結構上類似於治療上可用之肽的肽模擬物可用於產生相似治療效果。通常，擬肽物在結構上類似於範例多肽(亦即，具有生物化學特性或藥理學活性之多肽)，諸如人類抗體，但具有視情況藉由此項技術中熟知之方法經選自以下之鍵聯置換的一或多個肽鍵聯：-CH2 NH-、-CH2 S-、-CH2 -CH2 -、-CH=CH-(順式及反式)、-COCH2 -、-CH(OH)CH2 -及-CH2 SO-。用相同類型之D-胺基酸系統性取代共有序列之一或多個胺基酸(例如，D-離胺酸替代L-離胺酸)可用於某些實施例中以產生更穩定肽。另外，包含共有序列或實質上一致之共有序列變異的約束性肽可藉由此項技術中已知之方法(Rizo及GieraschAnn. Rev. Biochem ., 61:387 (1992)，出於任何目的以引用之方式併入本文中)；例如，藉由添加能夠形成環化該肽之分子內二硫橋的內部半胱胺酸殘基而產生。
藥物結合涉及使生物活性細胞毒性(抗癌)有效載荷或藥物偶合至特異性地靶向特定腫瘤標記物(例如，理想情況下僅發現於腫瘤細胞中或腫瘤細胞上之多肽)之抗體。抗體在體內追踪到此等蛋白質且將自身附接至癌細胞之表面。抗體與標靶蛋白(抗原)之間的生物化學反應會觸發腫瘤細胞中之信號，該腫瘤細胞接著吸收或內化抗體以及細胞毒素。在ADC經內化之後，細胞毒性藥物得到釋放且殺死癌症。歸因於此靶向，理想情況下，與其他化學治療劑相比，該藥物具有較低副作用且提供較寬治療窗。所揭示之結合抗體之技術係此項技術中已知的(參見例如Jane de Lartigue OncLive 2012年7月5日; ADC Review on antibody-drug conjugates；及Ducry等人Bioconjugate Chemistry 21 (1):5-13 (2010))。 II. 核酸、載體及宿主細胞
本發明之抗MerTK抗體可使用重組方法及組合物，例如如美國專利第4816567號中所述而產生。在一些實施例中，提供具有編碼本發明之抗MerTK抗體中之任一者的核苷酸序列之經分離核酸。該等核酸可編碼包含抗MerTK抗體之VL 的胺基酸序列及/或包含該抗體之VH 的胺基酸序列(例如，該抗體之輕鏈及/或重鏈)。在一些實施例中，提供包含該等核酸之一或多種載體(例如表現載體)。在一些實施例中，亦提供包含該核酸之宿主細胞。在一些實施例中，宿主細胞包含(例如，已經以下各物轉導)：(1)載體，其包含編碼包含該抗體之VL 的胺基酸序列及包含該抗體之VH 的胺基酸序列之核酸，或(2)第一載體，其包含編碼包含該抗體之VL 的胺基酸序列之核酸，及第二載體，其包含編碼包含該抗體之VH 的胺基酸序列之核酸。在一些實施例中，宿主細胞為真核的，例如中國倉鼠卵巢(CHO)細胞或淋巴樣細胞(例如Y0、NS0、Sp20細胞)。本發明之宿主細胞亦包括但不限於經分離細胞、活體外培養之細胞及離體培養之細胞。
提供製造本發明之抗MerTK抗體的方法。在一些實施例中，該方法包括在適於抗體表現之條件下培養包含編碼抗MerTK抗體之核酸的本發明之宿主細胞。在一些實施例中，抗體隨後自宿主細胞(或宿主細胞培養基)回收。
為了重組產生本發明之抗MerTK抗體，分離編碼該抗MerTK抗體之核酸且將其插入至一或多種載體中以便在宿主細胞中進一步選殖及/或表現。該核酸可容易地加以分離且使用習知程序(例如，藉由使用能够特異性地結合於編碼該抗體之重鏈及輕鏈之基因的寡核苷酸探針)進行測序。
本文所述之包含編碼本發明之抗MerTK抗體中之任一者或其細胞表面表現片段或多肽多肽(包括抗體)的核酸序列之合適載體包括但不限於選殖載體及表現載體。合適選殖載體可根據標準技術經構築，或可選自此項技術中可用之眾多選殖載體。儘管所選擇之選殖載體可根據意欲使用之宿主細胞而變化，但可用選殖載體一般地具有自主複制能力，可具有針對特定限制性核酸內切酶之單一標靶，及/或可攜帶針對可用於選擇包含該載體之純系的標記物之基因。合適實例包括質體及細菌病毒，例如pUC18、pUC19、Bluescript (例如pBS SK+)及其衍生物、mpl8、mpl9、pBR322、pMB9、ColE1、pCR1、RP4、噬菌體DNA及穿梭載體(諸如pSA3及pAT28)。此等及許多其他選殖載體可獲自商業供應商，諸如BioRad、Strategene及Invitrogen。
用於抗體編碼載體之選殖或表現的合適宿主細胞包括原核細胞或真核細胞。舉例而言，本發明之抗MerTK抗體可在細菌中產生，尤其在不需要糖基化及Fc效應子功能時。關於抗體片段及多肽在細菌中之表現(例如，美國專利第5648237號、第5789199號及第5840523號)。在表現之後，該抗體可自細菌細胞漿中之可溶性部分分離且可進一步經純化。
除了原核生物以外，真核微生物(諸如絲狀真菌或酵母)亦為用於抗體編碼載體之合適選殖或表現宿主，包括糖基化路徑已經「人類化」，導致產生具有部分或完全人類糖基化模式之抗體的真菌及酵母菌株(例如GerngrossNat. Biotech. 22:1409-1414 (2004)；及Li等人Nat. Biotech. 24:210-215 (2006))。
用於糖基化抗體之表現的合適宿主細胞亦可源於多細胞生物體(無脊椎動物及脊椎動物)。無脊椎動物細胞之實例包括植物及昆蟲細胞。已鑑別出多種桿狀病毒菌株，其可與昆蟲細胞聯合使用，尤其用於草地貪夜蛾(Spodoptera frugiperda )細胞之轉染。植物細胞培養物亦可用作宿主(例如美國專利第5959177號、第6040498號、第6420548號、第7125978號及第6417429號，描述用於在基因轉殖植物中產生抗體之PLANTIBODIES™技術)。
脊椎動物細胞亦可用作宿主。例如，經過調適以在懸浮液中生長之哺乳動物細胞株可有用。可用哺乳動物宿主細胞株之其他實例為藉由SV40轉型之猴腎CV1株(COS-7)；人類胚胎腎株(293或293細胞，如例如Graham等人J. Gen Virol. 36:59 (1977)中所述)；幼倉鼠腎細胞(BHK)；小鼠賽爾托利細胞(sertoli cell)(TM4細胞，如例如Mather,Biol. Reprod. 23:243-251 (1980)中所述)；猴腎細胞(CV1)；非洲綠猴腎細胞(VERO-76)；人類子宮頸癌細胞(HELA)；犬腎細胞(MDCK；布法羅大鼠(buffalo rat )肝細胞(BRL 3A)；人類肺細胞(W138)；人類肝細胞(Hep G2)；小鼠乳房腫瘤(MMT 060562)；TRI細胞，如例如Mather等人Annals N.Y. Acad. Sci. 383:44-68 (1982)中所述；MRC 5細胞；及FS4細胞。其他可用哺乳動物宿主細胞株包括中國倉鼠卵巢(CHO)細胞，包括DHFR-CHO細胞(Urlaub等人Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216 (1980))；及骨髓瘤細胞株，諸如Y0、NS0及Sp2/0。關於適於抗體產生之某些哺乳動物宿主細胞株的綜述，參見例如Yazaki及Wu,Methods in Molecular Biology, 第248卷(B.K.C. Lo編, Humana Press, Totowa, NJ), 第255-268頁(2003)。 III. 醫藥組合物 / 調配物
本文提供包含本發明之抗MerTK抗體及醫藥學上可接受之載劑的醫藥組合物及/或醫藥調配物。
在一些實施例中，醫藥學上可接受之載劑較佳地在所用劑量及濃度下對接受者無毒。欲用於活體內投與之醫藥組合物及/或醫藥調配物可為無菌的。此舉容易藉由經由例如無菌濾膜過濾來實現。
本文所提供之醫藥組合物及/或醫藥調配物可用作藥劑，例如用於治療癌症。 IV. 治療用途
如本文所揭示，本發明之抗MerTK抗體可用於治療疾病及病症。在一些實施例中，本發明提供用於治療患有癌症之個體之方法，其包括向該個體投與治療有效量的本發明之抗MerTK抗體。
MerTK之異位或表現已在多種腫瘤中觀察到；MerTK之過表現及激活已牽涉於淋巴樣白血病、淋巴瘤、腺瘤、黑色素瘤、胃癌、前列腺癌及乳癌中；且MerTK過表現已與轉移相關聯。(Schlegel等人, 2013, J Clin Invest, 123:2257-2267；Tworkoski等人, 2013, Pigment Cell Melanoma, 26:527-541；Yi等人, 2017, Oncotarget, 8:96656-96667；Linger等人, 2013, Blood, 122:1599-1609；Lee-Sherick等人, 2013, Oncogene, 32:5359-5368；Brandao等人, 2013, Blood Cancer, 3:e101；Xie等人, 2015, Oncotarget, 6:9206-9219；Shi等人, 2018, J Hematology & Oncology, 11:43)。因此，用本發明之抗MerTK抗體調節MerTK活性係治療癌症之有效手段。
在某些態樣中，本文提供用於治療有需要之個體之癌症的方法，該方法包括向該個體投與本發明之抗MerTK抗體，或包含本發明之抗MerTK抗體的醫藥組合物。在一些實施例中，提供一種用於治療有需要之個體之癌症的方法，該方法包括向該個體投與本發明之抗MerTK抗體，其中該抗MerTK抗體減少吞噬細胞之胞葬作用。在一些實施例中，提供一種用於治療有需要之個體之癌症的方法，該方法包括向該個體投與本發明之抗MerTK抗體，其中該抗MerTK抗體誘導M1樣巨噬細胞極化。
在一些實施例中，癌症係選自肉瘤、膀胱癌、乳癌、結腸癌、子宮內膜癌、腎癌(kidney cancer)、腎癌(renal cancer)、白血病、肺癌、非小細胞肺癌、黑色素瘤、淋巴瘤、胰臟癌、前列腺癌、卵巢癌、胃癌、甲狀腺癌、子宮癌、肝癌、子宮頸癌、睾丸癌、鱗狀細胞癌、神經膠質瘤、神經膠質母細胞瘤、腺瘤及神經母細胞瘤。在一些實施例中，癌症係選自多形性神經膠質母細胞瘤、膀胱癌及食道癌。在一些實施例中，癌症為三陰性乳癌。在一些實施例中，癌症可為原發性腫瘤。在一些實施例中，癌症可為第二位點處源自上文癌症類型中之任一者的轉移性腫瘤。在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體可用於治療有需要之個體的癌症，其中該癌症表現MerTK。
在一些實施例中，本發明之抗MerTK抗體可聯合一或多種充當檢查點抑制劑之治療劑投與。在一些實施例中，該方法進一步包括向該個體投與特異性地結合於抑制性免疫檢查點分子之至少一種抗體，及/或另一標准或研究性抗癌療法。在一些實施例中，該抑制性檢查點分子係選自PD1、PD-L1及PD-L2，在一些實施例中，特異性地結合於抑制性檢查點分子之至少一種抗體與本發明之抗MerTK抗體組合投與。
在一些實施例中，特異性地結合於抑制性檢查點分子之至少一種抗體係選自抗PD-L1抗體、抗PD-L2抗體及抗PD-1抗體。
在一些實施例中，個體(subject/individual)為哺乳動物。哺乳動物包括但不限於馴養動物(例如牛、綿羊、貓、犬及馬)、靈長類動物(例如人類及非人類靈長類動物，諸如猴)、兔及囓齒動物(例如小鼠及大鼠)。在一些實施例中，個體為人類。 V. 診斷用途
在該等抗體中之任一者的一些實施例中，本文所提供之抗MerTK抗體中之任一者均可用於偵測樣品或個體中MerTK之存在。如本文所用，術語「偵測」涵蓋定量或定性偵測。本文提供使用本發明抗體來實現診斷目的(諸如個體中或源於個體之組織樣品中MerTK之偵測)之方法。在一些實施例中，個體為人類。在一些實施例中，組織樣品為吞噬細胞(例如巨噬細胞、樹突狀細胞)、腫瘤組織、癌細胞等。
該偵測方法可涉及抗原結合之抗體的定量。生物樣品中之抗體偵測可藉由此項技術中已知之任何方法，包括免疫螢光顯微術、免疫細胞化學、免疫組織化學、ELISA、FACS分析、免疫沉澱或微正電子发射斷層掃描來進行。在某些實施例中，該抗體例如經18 F放射性標記且隨後使用微正電子發射斷層掃描分析加以偵測。患者中之抗體結合亦可藉由非侵入性技術，諸如正電子发射斷層掃描(PET)、X射線電腦斷層掃描、單光子發射電腦斷層掃描(SPECT)、電腦斷層掃描(CT)及電腦軸向斷層掃描(CAT)經定量。 VI. 製品
本文提供包含本文所述之抗MerTK抗體的製品(例如套組)。製品可包括一或多個包含本文所述之抗體的容器。容器可為任何合適之包裝，包括但不限於小瓶、瓶、廣口瓶、撓性包裝(例如經密封Mylar或塑膠袋)及其类似物。容器可為單位劑量、大包裝(例如多劑量包裝)或亞單位劑量。
在一些實施例中，套組可進一步包括第二劑。在一些實施例中，該第二劑為醫藥學上可接受之緩沖劑或稀釋劑。在一些實施例中，該第二劑為醫藥活性劑。
在該等製品中之任一者的一些實施例中，該等製品進一步包括根據本發明方法使用之說明書。說明書一般地包括關於預期治療之劑量、給藥方案及投與途徑之資訊。在一些實施例中，此等說明書包含根據任何本發明方法投與本發明之經分離抗體(例如本文所述之抗MerTK抗體)以治療患有疾病、病症或損傷(諸如癌症)之個體的描述。在一些實施例中，該等說明書包括抗MerTK抗體及第二劑(例如第二医药活性劑)之使用說明書。
本發明將藉由參考以下實例更充分地加以理解。然而，其不應被視為限制本發明之範疇。本發明通篇之所有引用藉此明確地以引用之方式併入。實例 實例 1 ： His 結合及鼠科動物 Fc 結合之 MerTK 多肽的產生
如下產生含有polyHis或TEVS/凝血酶/鼠科動物IgG2a-Fc標記之融合蛋白的人類、cyno及鼠科動物MerTK多肽，其用於本發明之抗MerTK抗體的產生及表徵。編碼人類MerTK (SEQ ID NO: 2)、cyno MerTK (SEQ ID NO: 3)及鼠科動物MerTK (SEQ ID NO: 4)之細胞外域(ECD)的核酸各自選殖至含有編碼異源信號肽之核酸以及含有PolyHis Fc標籤或TEVS/凝血酶/鼠科動物IgG2a Fc標籤之哺乳動物表現載體中。
人類MerTK、人類MerTK細胞外域、cyno MerTK細胞外域及鼠科動物MerTK細胞外域之胺基酸序列陳述於下文中。
人類MerTK胺基酸序列(SEQ ID NO: 1)：
Figure 02_image001
Figure 02_image003
人類MerTK ECD胺基酸序列(SEQ ID NO: 2)：
Figure 02_image005
Cyno MerTK ECD胺基酸序列(SEQ ID NO: 3)：
Figure 02_image007
鼠科動物MerTK ECD胺基酸序列(SEQ ID NO: 4)：
Figure 02_image009
將人類、cyno及鼠科動物MerTK核酸融合構築體短暫地轉染至HEK293細胞中。根據製造商之說明書，使用Mabselect樹脂(GE Healthcare，目錄號17519902)自細胞之上清液純化重組融合多肽。另外，市售DDDDK標記之人類MerTK融合多肽(Sino Biological, Wayne, PA，目錄號10298-HCCH)或人類IgG1 Fc標記之鼠科動物MerTK融合多肽(R&D systems, Minneapolis, MA，目錄號591-MR-100)亦用於如下文所述之抗MerTK抗體表徵。 實例 2 ：人類及鼠科動物 MerTK 過表現性 CHO 細胞株之產生
如下製備人類MerTK及鼠科動物MerTK過表現性CHO細胞株。分別使用人類MerTK開放閱讀框(ORF)純系慢病毒粒子(目錄號RC215289L4V)及小鼠MerTK ORF純系慢病毒粒子(目錄號MR225392L4V) (Origene, Rockville, MD) (均經mGFP標記)來製備人類MerTK過表現性CHO-K1及鼠科動物MerTK過表現性CHO-K1穩定細胞株。
在含有10% FBS (Gibco)之F12-K培養基(ATCC，目錄號ATCC 30-2004)中培養CHO細胞，直至＞80%匯合。該等細胞接著用胰蛋白酶緩衝液(0.25% EDTA/胰蛋白酶，Gibco，目錄號25200056)解離，且在用人類或鼠科動物MerTK慢病毒構築體轉導之前24小時以70-80%匯合接種於6孔板中。次日，細胞在4℃下用慢病毒粒子培育持續2小時且接著在37℃下在5% CO2 中培育該等板。兩天后，添加嘌呤黴素(Invivogen, San Diego, CA，目錄號ant-pr-1)以進行選擇；所選擇之嘌呤黴素抗性細胞在細胞回收冷凍培養基(Gibco，目錄號12648010)中經冷凍，以備後用。
關於此等細胞株之FACS分析，如上文所述產生之人類MerTK過表現性CHO細胞(CHO-huMerTK OE細胞)及小鼠MerTK過表現性CHO細胞(CHO-muMerTK OE細胞)以1-2×105 個細胞/孔接種於96孔U型底板中，且在冰上用市售小鼠抗人類MerTK單株抗體(BioLegend，純系：590H11G1E3，目錄號367608, San Diego, CA)或市售大鼠抗小鼠MerTK單株抗體(ThermoFisher，純系：DS5MMER，目錄號12-5751-82)培育持續30分鐘。細胞用冰冷FACS緩衝液(2% FBS+PBS)沖洗兩次且接著在冰上用APC結合之山羊抗小鼠抗體(Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA，目錄號115-606-071)或山羊抗大鼠抗體(Jackson ImmunoResearch，目錄號112-606-071)培育持續30 min。在第二抗體培育之後，細胞用冰冷FACS緩衝液洗滌且接著再懸浮於最終體積為50-200 μl之含有0.25 μl/孔之碘化丙啶(BD，目錄號556463)的FACS緩衝液中。使用FACS CantoII系統(BD Biosciences)執行分析。
所得人類MerTK及鼠科動物MerTK過表現性CHO細胞株用於後續研究以如下文所述表徵抗MerTK抗體。 實例 3 ： MerTK 表現譜
在多種人類細胞類型及組織，包括U937細胞(ATCC CRL-1593.2；人類巨噬細胞細胞株)、SK-MEL-5細胞(ATCC HTB-70；人類黑色素瘤細胞株)、A375細胞(ATCC CRL-1619；人類黑色素瘤細胞株)、THP-1細胞(ATCC TIB-202；人類單核球樣細胞株)、CHO-huMerTK OE細胞、人類單核球、人類單核球源性巨噬細胞及人類單核球源性樹突狀細胞上檢查MerTK表現。另外，如下文所概述，在獲自人類腫瘤樣品之人類單核球、巨噬細胞及樹突狀細胞上檢查MerTK表現。
使用RosetteSep單核球分離抗體混合液(StemCell Technologies)自健康人類供體之外周血單核細胞(PBMC)分離單核球。經分離人類單核球用50 ng/mL M-CSF (Peprotech)分化成人類巨噬細胞，或用100 ng/mL GM-CSF及100 ng/mL IL-4 (Peprotech)分化成人類樹突狀細胞(DC)。該等人類巨噬細胞或人類樹突狀細胞在暗處在冰上用市售螢光染料結合之抗人類MerTK抗體(BioLegend，純系590H11G1E3)培育持續30分鐘。細胞在FACS緩衝液(PBS + 2% FBS, 2 mM EDTA)中洗滌兩次，且使用BD FACS CantoII系統執行對細胞表面上之MerTK表現的分析。
圖 1 顯示人類骨髓細胞(亦即，樹突狀細胞、巨噬細胞)上之人類MerTK表現之FACS分析的結果。如圖 1 所示，來自兩個不同人類供體之樹突狀細胞(DC)及巨噬細胞呈現抗MerTK抗體反應性，指示此等細胞在其細胞表面上表現MerTK。圖 2 顯示包括A375細胞、THP-1細胞、U937細胞、SK-MEL-5細胞及CHO-huMerTK OE細胞在內的多種細胞株上之人類MerTK表現之FACS分析的結果。如圖 2 所示，U937細胞、SK-MEL-5細胞及CHO-huMerTK OE細胞呈現抗MerTK抗體反應性，指示此等細胞株在其細胞表面上表現MerTK。
為了分析獲自腫瘤樣品之多種骨髓細胞類型(例如單核球、巨噬細胞、樹突狀細胞)上的MerTK表現，執行以下實驗。用解剖刀將獲自人類個體之多種腫瘤樣品(來自卵巢、肝及子宮內膜癌)切成小塊且轉移至含有酶混合物之GentleMACS C管(Miltenyi Biotec, Sunnyvale, CA)中。根據製造商之方案，樣品在GentleMACS (Miltenyi Biotec)上解離。在解離之後，在FACS染色之前，細胞經由100 μm過濾器過濾。樣品接著在4℃下用Aqua Live Dead (Thermo Scientific，目錄號L34957)以及抗人類CD16 (純系3G8，BioLegend，目錄號302002)、抗人類CD32 (純系AT10，Thermo Scientific，目錄號MA1-81191)及抗人類CD64 (純系10.1，BioLegend，目錄號305002)抗體之混合物染色持續30 min。
在用FACS緩衝液洗滌之後，細胞接著在4℃下用以下抗體染色持續30 min以用於FACS分選及分析：抗人類CD45-Alexa Fluor 700 (純系HI30，BioLegend，目錄號304024)、抗人類CD3-APCCy7 (純系OKT3，BioLegend，目錄號317342)、抗人類HLA-DR-BV711 (純系L243，BioLegend，目錄號307644)、抗人類CD15-BV605 (純系W6D3，BioLegend，目錄號323032)、抗人類CD14-BUV395 (純系MoP9，BD bioscience，目錄號563561)、抗人類CD19-BV650 (純系HIB19，BioLegend，目錄號302238)、抗人類CD56-PE Dazzle 594 (純系HCD56，BioLegend，目錄號318348)、抗人類CD1c-PerCPCy5.5 (純系L161，BioLegend，目錄號331514)、抗人類CD206-PECy5 (純系15-2，BioLegend，目錄號321108)及抗人類MerTK-BV421 (純系590H11G1E3，BioLegend，目錄號367604)。細胞用FACS緩衝液洗滌且在BD FACS Fortessa X20上加以採集。使用FlowJo軟體分析所有FACS數據。鑑別出單核球(經定義且閘控為CD45+CD3-CD14+)、巨噬細胞(經定義且閘控為CD45+CD3-CD14+CD206+)及樹突狀細胞(經定義且閘控為CD45+CD3-CD14-CD56-HLA-DR+CD1c+)。
如圖 3 所示，藉由FACS分析在獲自健康人類個體之外周血單核細胞(PBMC)之單核球、巨噬細胞及樹突狀細胞中觀察到MerTK表現。在獲自由人類個體獲得之卵巢癌、肝癌及子宮內膜癌的腫瘤源性單核球、巨噬細胞及樹突狀細胞中亦觀察到MerTK表現。
總之，此數據顯示在多種人類細胞及人類細胞株上，在自健康人類個體分離之單核球、巨噬細胞及樹突狀細胞上，及在獲自人類卵巢、肝及子宮內膜癌腫瘤組織之單核球、巨噬細胞及樹突狀細胞上偵測到MerTK表現。 實例 4 ：抗 MerTK 融合瘤抗體之產生
為了獲得針對MerTK之抗體，執行以下實驗以便產生抗MerTK融合瘤。每週兩次藉由皮下或腹膜內注射具有或不具有佐劑之人類、cyno及小鼠MerTK之經純化細胞外域多肽(如上文實例1中所述而獲得)來使BALB/c小鼠(Charles River Laboratories, Wilmington, MA)或MerTK基因剔除(KO)小鼠(Jackson Laboratories, Bar Harbor, ME)免疫。經過4週執行總計8次注射。在最後一次注射之後三天，自小鼠收集脾臟及淋巴結以用於融合瘤細胞株產生。
分離來自經免疫小鼠之脾臟及淋巴結的淋巴細胞，且接著經由電融合(Hybrimmune, BTX, Holliston, MA)與P3X63Ag8.653 (CRL-1580, American Type Culture Collection, Rockville, MD)或SP2/mIL-6 (CRL-2016, American Type Culture Collection, Rockville, MD)小鼠骨髓瘤細胞融合，且在37℃、5% CO2 下在Clonacell-HY培養基C (STEMCELL Technologies, Vancouver, BC, Canada，目錄號03803)中培育隔夜。次日，融合細胞經離心且再懸浮於10 ml具有抗小鼠IgG Fc-FITC (Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA)之ClonaCell-HY培養基C中，且接著與90 ml含有HAT組分的基於甲基纖維素之ClonaCell-HY培養基D (STEMCELL Technologies，目錄號03804)輕柔地混合。該等細胞接種於Nunc OmniTrays (Thermo Fisher Scientific, Rochester, NY)中，且使其在37℃、5% CO2 下生長持續七天。接著選擇螢光群落，且使用Clonepix 2 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA)將其轉移至含有Clonacell-HY培養基E (STEMCELL Technologies，目錄號03805)之96孔板中。總計選擇1,728個IgG分泌性融合瘤純系。在培養六天之后，如下文所述藉由FACS分析針對結合人類或小鼠MerTK之特異性篩選來自融合瘤之組織培養物上清液。 實例 5 ：藉由 FACS 篩選抗 MerTK 抗體融合瘤上清液
來自如上文所述而獲得的1,728個融合瘤之融合瘤培養物上清液針對其結合多種細胞類型上之MerTK的能力進行篩選，該等細胞類型包括穩定地過表現人類MerTK (CHO-huMerTK OE細胞)或穩定地過表現小鼠MerTK (CHO-muMerTK OE細胞)之CHO細胞(如上文所述而產生)，及CHO親本細胞；U937細胞(ATCC CRL-1593.2)、SK-MEL-5細胞(ATCC HTB-70) (其內源性地表現人類MerTK)、J774A.1細胞(ATCC TIB-67) (其內源性地表現小鼠MerTK)及A375細胞(ATCC CRL-1619)。在此等實驗中，不表現或最低程度地表現MerTK之THP-1細胞(ATCC TIB-202)充當非MerTK表現性陰性對照細胞。
為了篩選融合瘤細胞培養物上清液，使用多重FACS實驗設計來測定抗MerTK抗體與此等多種細胞株之結合。簡言之，細胞用多種濃度及組合之CellTrace細胞增殖染料CFSE及Violet (分別為ThermoFisher，目錄號C34554及目錄號34557)染色，以創建具獨特條形碼之細胞群體。各具條形碼之細胞類型的70,000個細胞等分至96孔U型底板中，且在冰上用50 μl融合瘤細胞培養物上清液或5 μg/ml之市售經純化小鼠抗人類MerTK單株抗體(BioLegend，目錄號367602；充當陽性抗MerTK抗體)培育持續30分鐘。在使用多種MerTK表現性細胞類型之此第一抗MerTK融合瘤上清液培育之後，經由離心移除上清液，細胞用175 μl冰冷FACS緩衝液(PBS + 1% FBS + 2mM EDTA)洗滌兩次，且細胞接著在冰上用抗小鼠IgG Fc-異藻藍蛋白(APC) (Jackson Labs，目錄號115-136-071) (1:1000稀釋)進一步培育持續20分鐘。在此第二抗體培育之後，細胞再次用冰冷FACS緩衝液洗滌兩次且再懸浮於最終體積為30 μl之含有0.25 μl/孔之碘化丙啶(BD Biosciences，目錄號556463)的FACS緩衝液中。使用FACS Canto系統(BD Biosciences)分析細胞上之結合強度，其中繪製分選閘以排除死(亦即，碘化丙啶陽性)細胞。針對所測試之各抗MerTK融合瘤上清液，測定各具條形碼之細胞群體上的APC平均螢光強度(MFI)比率。
根據此特異性融合瘤上清液篩選，鑑別出總計308種抗MerTK融合瘤純系，與針對親本或陰性對照細胞類型所觀察到的結合相比，該等純系與穩定地過表現或內源性地表現人類或小鼠MerTK之細胞的結合(如藉由MFI所測定)呈現大於2倍之差異。如下文所述，進一步表徵使用此篩選鑑別之抗MerTK抗體。 實例 6 ：藉由重組 MerTK 蛋白結合分析篩選抗 MerTK 抗體融合瘤上清液
來自如上文所述而獲得的1,728個融合瘤之融合瘤培養物上清液針對其結合polyHis標記之人類、cyno及小鼠MerTK (如上文實例1中所述而製備)的能力進行篩選，如與結合於不相關的His標記之對照蛋白相比。簡言之，96孔聚苯乙烯板在4℃下經1 µg/ml於包被緩衝液(0.05 M碳酸鹽緩衝液，pH 9.6, Sigma，目錄號C3041)中之人類、cyno或小鼠poly-His標記之MerTK多肽包被隔夜。經包被之板接著用ELISA稀釋劑(PBS + 0.5% BSA + 0.05% Tween20)封閉持續一小時且用300 μl PBST (PBS + 0.05% Tween20, Thermo 28352)洗滌三次。該等融合瘤細胞培養物上清液或兩種市售經純化小鼠抗人類MerTK單株抗體(BioLegend目錄號367602；R&D目錄號MAB8912)添加(50 µl/孔)至各孔中。在30 min培育(室溫，震蕩)之後，該等板用300 μl PBST洗滌三次。抗小鼠IgG Fc-HRP (Jackson Immunoresearch，目錄號115-035-071)第二抗體以1:5000稀釋於ELISA稀釋劑中，以50 μl/孔添加至各孔中，且在室溫下在震蕩下培育持續30分鐘。在最後一組洗滌(PBST中3×300 μl)之後，50 μl/孔之TMB受質(BioFx，目錄號TMBW-1000-01)添加至該等孔中。該反應在5-10 min之後用50 μl/孔之停止溶液(BioFx，目錄號BSTP-1000-01)淬滅。使用GEN5 2.04軟體，用BioTek Synergy微板讀取器偵測經淬滅之反應孔在650 nm下的吸光度。根據此融合瘤上清液篩選，鑑別出總計326種抗MerTK融合瘤純系，與背景相比，該等純系與重組MerTK之結合呈現大於10倍之差異。如下文所述，進一步表徵使用此篩選鑑別之抗MerTK抗體。 實例 7 ：使用抗 MerTK 融合瘤上清液之 MerTK 配位體 Gas6 及配位體 ProS 阻斷分析
如上文所述而鑑別的抗MerTK抗體融合瘤上清液藉由ELISA評估其阻斷人類Gas6配位體與人類MerTK之結合及/或阻斷人類ProS配位體與人類MerTK之結合的能力。簡言之，兔抗人類IgG抗體(Jackson ImmunoResearch，目錄號309-005-008)在4℃下以2 μg/ml包被於高蛋白結合板上隔夜。在用PBS中之0.05% Tween20洗滌三次之後，添加PBS中之5% BSA持續1小時。添加2 μg/ml之重組人類MerTK-人類Fc嵌合蛋白(R&D systems，目錄號391-MR-100)持續1小時且洗滌板，然後添加40 μl之抗MerTK融合瘤上清液及40 μl 3μg/ml的His標籤結合之重組Gas6 (R&D systems，目錄號885-GSB-050)或20 μg/ml的His標籤結合之重組ProS (R&D systems，目錄號9489-PS-100)。在進一步培育持續1小時之後，洗滌板且用HRP結合之抗6x His標記抗體(Abcam, Cambridge, MA，目錄號ab1187)培育持續1小時。接著洗滌板且添加HRP受質TMB以使該等板顯影。藉由添加50 μl 2N H2 SO4 使該反應停止且使用分光光度計(BioTek)量測OD。
總計308種抗MerTK融合瘤上清液純系針對其阻斷Gas6及/或阻斷ProS配位體結合於MerTK之能力進行篩選。二十九(29)種抗MerTK融合瘤純系阻斷ProS配位體及Gas6配位體兩者與重組人類MerTK蛋白之結合。一百四十五(145)種抗MerTK融合瘤純系僅阻斷ProS配位體與人類MerTK蛋白之結合，且不阻斷Gas6配位體與重組人類MerTK蛋白之結合。藉由此分析篩選之308種抗MerTK融合瘤純系的剩餘部分在此分析中不阻斷ProS配位體或Gas6配位體結合於重組人類MerTK蛋白。如下文所述，該等融合瘤上清液進一步關於其阻斷吞噬細胞之胞葬作用的能力進行表徵。 實例 8 ：使用抗 MerTK 融合瘤上清液之胞葬作用阻斷分析
上文經鑑別為對MerTK結合反應性呈陽性之抗MerTK抗體融合瘤上清液針對其阻斷人類巨噬細胞之胞葬作用的能力如下進行評估。在人類M-CSF存在下，人類巨噬細胞自人類單核球分化持續7天。收集巨噬細胞(藉由刮擦)，再懸浮於PBS中，且以5×104 個細胞/孔接種於96孔板上。使細胞飢餓持續1小時，隨後在37℃下添加抗MerTK融合瘤上清液至各孔中持續30 min。Jurkat細胞在37℃下用1 μM星形孢菌素(SigmaAldrich)處理持續3小時(以誘導細胞凋亡)，且在室溫下用pHrodo (ThermoFisher)標記持續30 min。在用PBS洗滌之後，經pHrodo標記之Jurkat細胞以1:4比率(1個巨噬細胞:4個Jurkat細胞)添加至各孔中持續1小時。用PBS洗滌該等板，且接著細胞在暗處在冰上用APC結合之抗人類CD14染色持續30分鐘。細胞接著在FACS緩衝液(PBS + 2% FBS)中洗滌兩次，且在BD FACS CantoII上執行流式細胞術。使用FlowJo軟體分析數據。能夠進行胞葬作用之巨噬細胞吞噬經標記之凋亡Jurkat細胞，該等經標記之凋亡Jurkat細胞接著被偵測到，而被阻斷進行胞葬作用之巨噬細胞顯示經標記之凋亡Jurkat細胞的吞噬減少。
在此等實驗中，藉由將pHrodo CD14雙陽性細胞設定為分析閘且接著將此精確閘應用於所有樣品來鑑別胞葬作用陽性巨噬細胞。使用僅用培養基培養之巨噬細胞來確立基線胞葬作用水準，且將此水準設定為100%胞葬作用活性。相對胞葬作用水準係計算為與用抗MerTK融合瘤上清液處理之細胞中觀察到的胞葬作用相比，僅用培養基處理之細胞中觀察到的胞葬作用之百分比。在此等實驗中，使用以下額外抗MerTK抗體：小鼠抗人類MerTK抗體H1 (BioLegend，純系ID: 590H11G1E3，小鼠IgG1)及人類抗人類MerTK抗體M6 (揭示於WO2016/106221中)。
下文表 1 及表 2 顯示此等胞葬作用實驗之結果，以胞葬作用% (僅培養基係設定為100%胞葬作用)表示。在下表 1 中，所測試之例示性融合瘤上清液在左側加以指示，且經標記為融合瘤上清液ID號；此等上清液係來自由野生型BALB/c小鼠之免疫鑑別的融合瘤純系。在下表 2 中，所測試之例示性融合瘤上清液在左側加以指示，且經標記為融合瘤上清液ID號；此等上清液係來自由MerTK KO小鼠之免疫鑑別的融合瘤純系。在表 1 及表 2 中，抗體ID係指本發明之抗MerTK抗體，其經選擇用於額外表徵且因此給出特定抗MerTK抗體名稱，如所指示。第三、第四及第五欄(「供體」鑑別號)指示相對於僅培養基處理之胞葬作用百分比。應注意，與抗體不存在下巨噬細胞中之胞葬作用相比(僅培養基處理)，在經同型對照小鼠IgG1抗體處理之細胞中未觀察到胞葬作用之顯著變化。表 1
融合瘤上清液 ID 抗體 ID 供體 689 供體 692 供體 806
1 89.4 80.8 94.4
2 126.0 105.3 109.0
3 MTK-01 34.1 34.2 70.1
4 MTK-02 20.8 32.2 62.9
5 68.9 101.6 73.1
6 MTK-03 25.2 16.9 53.6
7 MTK-04 23.8 25.6 58.3
8 107.7 109.0 112.6
9 86.3 109.0 88.3
10 MTK-05 36.1 18.2 43.0
11 MTK-06 16.1 16.0 67.5
12 MTK-07 18.8 17.4 56.8
13 68.9 101.6 73.1
14 MTK-08 30.9 19.0 35.7
15 65.4 n.a. 88.8
16 MTK-09 19.9 17.6 50.5
17 68.5 72.2 71.8
18 MTK-10 18.8 12.6 50.0
19 MTK-11 14.3 11.9 30.8
20 MTK-12 14.6 12.4 38.6
21 67.6 74.6 83.0
22 MTK-13 21.8 12.2 45.6
23 88.1 92.9 82.5
24 MTK-14 25.2 17.5 55.3
25 82.4 n.a. n.a.
26 MTK-15 27.2 23.7 n.a.
27 86.8 61.8 78.9
28 65.8 79.9 n.a.
29 MTK-16 25.6 n.a. n.a.
30 MTK-17 22.7 n.a. n.a.
31 75.9 74.7 89.3
32 MTK-18 24.2 n.a. n.a.
33 106.0 76.1 116.5
34 MTK-19 48.0 n.a. n.a.
35 MTK-20 21.4 n.a. n.a.
36 98.1 86.1 85.7
37 106.0 87.1 93.7
38 74.1 62.8 90.5
39 115.1 106.8 80.6
40 108.1 62.0 100.2
41 MTK-21 22.2 n.a. n.a.
42 MTK-22 25.7 n.a. n.a.
43 76.7 61.1 87.4
44 97.2 71.8 69.4
45 75.4 73.0 73.3
46 MTK-23 17.0 n.a. n.a.
47 100.3 n.a. 95.9
48 65.4 n.a. 71.6
49 56.7 66.9 69.9
50 63.7 n.a. 74.0
培養基 100.0 100.0 100.0
mIgG1 104.5 95.6 96.0
H1 31.2 16.5 57.9
M6 14.9 n.a. 35.1
n.a.意謂數據不可得表 2
融合瘤上清液 ID 抗體 ID 供體 914 供體 915 供體 916 供體 783
1 MTK-24 25.42 40.49 43.39 70.57
2 86.61 66.80 72.73 106.69
3 80.65 56.68 55.79 109.36
4 MTK-25 44.05 31.01 25.50 21.37
5 MTK-26 24.67 24.25 37.73 30.80
6 83.04 73.28 68.18 103.01
7 77.98 92.31 114.05 142.47
8 100.30 92.71 102.07 123.08
9 MTK-27 33.63 27.49 34.59 19.26
10 78.87 63.56 73.14 92.31
11 MTK-28 38.10 42.91 51.65 69.23
12 96.73 87.85 102.48 123.08
13 MTK-29 32.14 36.40 28.26 49.83
14 97.92 73.68 80.99 122.07
15 94.64 73.28 88.84 126.76
16 106.55 86.23 97.93 130.43
17 98.81 66.80 87.19 128.76
18 101.79 95.55 100.00 115.72
19 MTK-30 30.65 29.27 34.71 33.78
20 MTK-31 41.37 37.85 32.60 32.78
31 89.58 65.59 72.31 79.60
21 79.17 47.37 68.60 93.98
22 MTK-32 63.10 54.25 57.44 73.24
23 MTK-33 25.54 22.35 36.61 13.55
24 80.06 67.61 66.94 100.00
25 68.15 51.42 55.37 62.21
26 MTK-35 40.48 24.21 39.34 30.37
27 86.61 64.37 88.02 119.40
28 84.82 83.40 88.84 112.37
29 78.57 61.94 73.97 122.41
30 75.60 76.92 71.90 111.04
31 75.30 78.95 76.86 117.39
32 79.76 89.88 83.06 118.73
33 72.02 75.30 68.60 98.33
34 MTK-36 73.51 93.52 82.23 120.74
35 71.73 82.59 74.79 128.76
僅培養基 100.00 100.00 100.00 100.00
M6 17.47 20.40 28.31 14.82
同型對照 88.99 104.05 104.55 93.65
H1 24.76 34.33 40.79 34.78
在表 1 及表 2 中，顯示來自不同供體之人類巨噬細胞的胞葬作用百分比，在兩個表中僅培養基(不添加抗體)均設定為100%胞葬作用。儘管多種抗MerTK抗體融合瘤上清液之胞葬作用阻斷活性的程度在獲自各供體之巨噬細胞中不同，但在來自不同供體之巨噬細胞中，抗MerTK抗體之胞葬作用阻斷趨勢係一致的。如上文表 1 及 2 所示，本發明之抗MerTK融合瘤上清液在不同程度上減少人類巨噬細胞之胞葬作用(例如，減少胞葬作用達約50%-85%)。此等結果指示，如本文所述而獲得的抗MerTK抗體有效減少或阻斷吞噬細胞之胞葬作用。 實例 9 ：抗 MerTK 抗體之分子選殖
來自上述融合瘤之抗MerTK抗體如下經次選殖。收集5×105 個融合瘤細胞且用PBS洗滌，且接著細胞集結粒在乾冰中速凍且儲存於-20℃下。根據製造商之方案，藉由使用RNeasy Mini套組(QIAGEN，目錄號74104)來提取總RNA。根據製造商之方案，使用Clontech之SMARTer RACE 5’/3’套組(Takara Bio USA，目錄號634859)產生cDNA。使用RACE套組中提供之5′ UPM引子及識別重鏈及輕鏈恆定區之反向引子，藉由降落PCR (touchdown PCR)單獨地選殖可變重鏈及輕鏈免疫球蛋白區。純化所得PCR產物且接合至pCR2.1-TOPO選殖載體(TOPO TA選殖套組, Invitrogen目錄號450641)中，且轉型至大腸桿菌(E. coli )細胞中。分離經轉型群落，且對各相應融合瘤細胞株之可變重鏈(VH)及可變輕鏈(VL)核酸測序。在序列測定之後，使用含有核酸內切酶限制位點之引子藉由PCR擴增可變重鏈區及可變輕鏈區，且接著次選殖至編碼人類IgG1-Fc-LALAPS (包含胺基酸取代L234A、L235A及P331S之人類IgG1 Fc，根據EU編號)及IgG κ之pLEV-123 (LakePharma, San Carlos, CA)哺乳動物表現載體中。
本發明之抗MerTK抗體的可變重鏈及可變輕鏈之胺基酸序列提供於下表 3 中。在表 3 中，CDR/HVR序列(根據Kabat)加下劃線。表 3
抗體 重鏈可變 SEQ ID NO: 輕鏈可變 SEQ ID NO:
MTK-01 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTNYGMN WVKQAPGKGLKCMGWINTYTGEPTYADDFKG RFAFSLETSATTAYLQINNLKNEDTATYFCARRDRYTWFAY WGQGTLVTVSA    5 QIVLSQSPAILSASPGEKVTMTCRASSSVSYMH WYQQKPGSSPKPWIYATSNLAS GVPARFSGSGSGTSYSLTISRVEAEDAATYYCQQWSSNPPT FGGGTKLEIK 40
MTK-02 QIQLVQSGPELKQPGETVKISCKASGYTFTDYGVN WVKQAPGKGLKWMGWINTYSGEPTYAGDFKG RFAFSLESSASTAFLQINNLKNEDMATYFCARRVRYWYFDV WGAGTSVTVSS    6 QIVLSQSPAILSASPGERVTMTCRANSSVSYMH WYQQKPGSSPKPWIYATSNLAS GVPARFSASGSGTSYSLTVSRVEAEDAATYYCQQWGSNPFT FGSGTKLEIK 41
MTK-03 DVQLQESGPGLVKPSQSLSLTCSVTGYSITSGYYWN WIRQFPGNTLEWMGYMSFDGDNKFNPSLKN RISITRDTSKNQFFLRLNSVTTEDTATYYCARGGYNYGSTEAN WGQGTLVTVSA    7 QIVLTQSPAIMSAFPGEKVTITCSASSSVNYMH WFQQKPGTSPKLWIYSTSNLAS GVPARFSGSGSGTSYSLTISRMEAEDAATYYCQQRSSYPFT FGSGTKLEIK 42
MTK-04 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTNYGMN WVKQAPGKGLKCMGWINTYTGEPTYADDFKG RFAFSLETSASTAYLQINNLKNEDMATYFCAKYDNYAWFAY WGQGTLVTVSA    8 QIVLSQSPAFLSASPGEKVTMTCRASSSVSYMH WYLQKPGSSPKPWIYATSNLAS GVPVRFSGSGSGTSYSLTISRVEAEDAATYYCQQWSSNPRT FGGGTKLEIR 43
MTK-05 QVQLQQSGAELVQPGTSVRLSCKTSGYTFTSYWIQ WVKQRPGQGLGWIGEIFPGTGTTYYNEKFKG KATLTIDTSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYFCARDGAYFDV WGAGTTVTVSS    9 DIQMTQSPASLSASVGETVTFTCRASENIFSYLA WYQQKQGKSPQLLVYNAKTLAE GVPSRFSGSGSGTHFSLKINSLQPEDFGSYYCLHHYGTPLT FGAGTKLELK 44
MTK-06 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTNYGMN WVKQAPGKGLKWMGWINTNTGEPTYAEEFKG RFAFSLETSASTAYLQINNLKNEDTATYFCARYYNYWYFDV WGAGTTVTVSS    10 QIVLSQSPAILSASPGEKVTMTCRASSSVSYMH WYQQKPGSSPKPWIYATSNLAS GVPARFSGSGSGTSYSLTISRVEAEDAATYYCQQWSSKPPT FGGGTKLEIK 45
MTK-07 DVQLQESGPGLVKPSQSLSLTCSVTGYSITSGYYWN WIRQFPGNTLEWMGYMSFDGDNKFNPSLKN RISITRDTSKNQFFLRLNSVTTEDTATYYCARGGYNYGSTEAN WGQGTLVTVST    11 QIVLTQSPAIMSAFPGEKVTITCSASSSVTYMH WFQQKPGTSPKLWIFSTSNLAS GVPARFSGSGSGTSYSLTISRMEAEDAATYYCQQRSSYPFT FGSGTKLEIK    46
MTK-08 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTNYGMN WVKQAPGKGLKWMGWINTYTGEPTYADDFKG RFAFSLETSASTAYLQINNLKNEDTATYFCAREVRYWYFDV WGAGTTVTVSS    12 QIVLSQSPAILSASPGEKVTMTCRATSSVSYMH WFQQKPGSSPKPWIYATSNLAS GVPARFSGSGSGTSYSLTISRVEAEDAAAYYCQHWSGNPRT FGGGTKLEIK 47
MTK-09 QVQLQQSGAELVRPGASVKISCKAFGYTFTNHHIK WVKQRPGQGLDWIGYIDPYNDYTTYNQNFKG KATLTVDKSSSTAYMELSSLTSEDSAVYYCARRAYDGYYVDWYFDV WGAGTTVTVSS    13 DIVMTQSHKFMSTSVGDRVSITCKASQDVTTSVA WYHQKPGQSPELLIYSASYRYT GVPDRFTGSGSGTDFTFTISSVQAEDLAIYYCQQHYSTPLT FGSGTKLQLK 48
MTK-10 QVTLKESGPGILQPSQTLSLTCSFSGFSLTTSGMGVG WIRQPSGKGLEWLAHIWSDDDKRSNPALKS RLTISQDSSTNQVFLKIASVDTADSATYYCSHLTPVREFAY WGPGTLVTVSE    14 DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCSASQGISNYLN WFQQKPDGTVKLLIYYTSRLHS GVPSRFSGSGSGTDFSLTISNLEPEDIATYYCQQYTKLPYT FGGGTKLEIK 49
MTK-11 QVQLKQSGPGLVQPSQSLSITCTVSGFSLTDYGVH WVRQSPGKGLEWLGVIWSSGTTDYNEAFIS RLSISKDNSKSHVFFKMNSLQAIDTAIYYCARKGHDPYAMDY WGQGTSVTVSS    15 QIVLTQSPAIMSASLGERVTMTCTASSSISSSYFH WYQQKPGSSPKLWIYSTSNLPS GVPARFSGSGSGTSYSLTISSMEAEDAATYYCHQYYRSPLT FGAGTKLELK 50
MTK-12 QVQLQQSGPQLVRPGASVKISCKASGYSFTSHWMH WVKQRPGQGLEWIGMIDPSDGESRLNQKFKD KATLTVDKSSSTAYMQLSSPTFEDSAVYYCARGIYYYGITYAMDY WGQGTSVTVSS    16 QIVLTQSPAIMSASPGEKVTMTCSASSSVSYMY WYQQKPRSSPRLLIYDTSNLAS GVPVRFSGSGSGTSYSLTISRMEAEDAATYYCQQWSSYPLT FGAGTKLELK 51
MTK-13 DVQLQESGPGLVKPSQSLSLTCSVTGYSITSGYYWN WIRQFPGNKLEWMGNIDYDGSNKYNPSLKN RISITRDTSKNHFFLKLNSVTPEDTATYFCARDGGNYRSFAY WGQGTLVTVSA    17 QIVLTQSPPIMSASPGEKVTITCSASSSVSYMY WFQQKPGTSPKLWIYSTFNLAS GVPARFSGSGSGTSYSLTISRMEAEDVATYYCQQRSSYPFT FGSGTKLEIK 52
MTK-14 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTNYGMN WVKQAPGKDLQWMGWINTYTGEPTYADDFTG RFAFSLETSASTAYLQINNLKNEDTATYFCAKGGHYAWFAY WGQGTLVTVSA    18 QIVLSQSPAILSASPGEKVTMTCRSSSSVSYMH WYQQKPGSSPKPWIYATSNLAS GVPGRFSGSGSGTSYSLTISRVEAEDAATYYCQQWGSNPRT FGGGTKLEIK 53
MTK-15 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTNYGVH WVKQAPGKGLKWMGWINTYTGEPTYADDFKG RFAFSLETSASTAYLQINNLKNEDMATYFCARGNRYAYMDY WGQGTSVTVSS    19 QIVLSQSPAILSASPGEKVTMTCRASSSVSYMH WYQQKSGSSPKPWIYATSNLAS GVPARFSGSGSGTSYSLTISRVEAEDAATYYCQQWSSNPRT FGGGTKLEIK 54
MTK-16 LIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTNHGMN WVKQDPGKGLKWMGWINTYTGEPTYADDFKG RFVFSMETSASAAFLQINNLKNEDTATYFCARKGVTAARYFDY WGQGTTLTVSS    20 DIVMTQSPKFMSTSVGDRVSITCKASQNVRTAVA WYKKKPGQSPKALINLASNRHT GVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVQSEDLADYFCLQHWNYPLT FGGGTKLEIK 55
MTK-17 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTNFGMN WVKQAPGKGLKWMGWINTYTGEPTYADDFKG RFAFSLETSASTAYLQINNLKNEDTATYFCSRGAVLRAGAMDC WGQGTSVTVSS    21 DIQMTQSSSYLSVSLGGRVTITCKASDHINNWLA WYQQKPGNAPRLLISGATSLET GVPSRFSGSGSGKDYTLSITSLQTEDVATYYCQQYWSTPRT FGGGTKLEIK 56
MTK-18 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTHYGMT WVKQAPGKGLKWMGWINTYTGEPTYADDFKG RFAFSLETSASTAYLQINNLKNEDTATYFCARGGGQLGLRPLDY WGQGTTLTVSS    22 DIQMTQTTSSLSASLGDRVTFSCRASQAISNYLN WYQQKPDGTVKLLIYYTSRLHS GVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPWT FGGGTKLEIK 57
MTK-19 EVQLQQSGPELVKPGASVKISCKTSGYTFTEYTMH WVKQSHGKSLEWLGGFNPNNVITSYNQRFQG RATLTVDKSSSTAYMELRSLTSDDSAVYYCTRGDLLWSLLLPGNYFDY WGQGTTLTVSS    23 DVVMTQSSLTLSVTIGQPASISCKSSQSLLDSDGKTYLN WLLQRPGQSPKRLIYLVSKLDS GVPDRFTGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYYCWQGTHFPWT FGGGTKLEIK 58
MTK-20 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTNYGMT WVKQAPGKGLKWMGWINTYTGEPTYADDFKG RFALSLETSASTAYLQINNLKNEDTATYFCARGGGRLGLRPLDY WGQGTTLTVSS    24 DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDINNYLN WYQQKPDGTVKLLIYYTSRLHS GVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPW TFGGGTKLEIK 59
MTK-21 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTNFGMT WVRQAPGMDLKWMGWINTYTGEPKYADDFKG RFALSLETSASTAYLQITNFKNEDTATYFCARGGGRLGLRPLDY WGQGTTLTVSS    25 DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDINNYLN WYQQKPDGTVKLLIYYTSSLHS GVPSRFSGSGSGTDYSLTITNLEQEDIATYFCQQGNTLPWT FGGGTRLEIK 60
MTK-22 QVQLQQPGADLVEPGASVKLSCKASGYTFTSYWMH WVKQRPGQGLEWIGEIDPSDSSSNYNQKFKG KATLTVDKSSSTAYMHLNSLTSEDSAVYYCARRYYYGSLYFDN WGQGTTLTVSS    26 DVVMTQSHKFMSTSVGDRVSITCKASQDVGTAIA WYQQKPGQSPKLLIYWASTRHT GVPDRFTGSRSGTVFTLTISNVQSEDLADYFCQQYTSYPLT FGSGTKLEIK 61
MTK-23 QVQLQQSGADLVRPGASVKISCKAFGYTFTNHHIN WVKQRPGQGLDWIGNVDPYNDYSTYNQKFKG KATLTVDKSSSTAYMELSSLTSEDSAVYYCARRVYDGFYVDWYFDV WGAGTTVTVSS    27 DIVMTQSHKFMSTPVGDRVSITCKASRDVSTAVA WFHQKPGQSPKLLIYSASYRST GVPDRFTGSGSGTDFTFTISSVQAEDLAVYYCQQHYSAPLT FGAGTKLELK 62
MTK-24 QVQLQQPGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMH WVKQRPGQGLEWIGMIHPNINTNYNEKFKS KATLTVDISSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCAKRSPYSNYDWYFDV WGTGTTVTVSS    28 DIQMTQSPASLSVSVGETVTITCRASENIYSNLA WYQQKQGKSPQLLVYAATNLAD GVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDFGSYYCQHFWGTPLT FGAGTKLELK 63
MTK-25 EVKLVESEGGLVQPGSSMKLSCTASGFTFSDYYMA WVRQVPEKGLEWVANINYEGSSTYYLGSLKS RFIISRDNAENILYLQMSSLKSEDTATYYCARYYYGSVDY WGQGTTLTVSS    29 DIVMTQSQKFMSTSVGDRVSITCKASQNVRTTVA WYQQKPGQSPKTLIYLASNRHT GVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVQSEDLADYFCLQLWNYPWT FGGGTKLEIK 64
MTK-26 AVQFQESGPGLVKLSQSLSLTCSVTGYSITSGYYWD WIRQFPGNKLEWMGYISYDGSNNYNPSLKN RISITRDTSKNQFFLKLNSVTTEDTATYYCAREGGYYRSMDY WGQGTSVTVSS    30 QIVLTQSPAIMSASPGEKVTIACSASSSVSFMH WFQQKPGTSPRLWIYSTSNLAS GVPARFSGSGSGTSYSLTISRMEAEDAATYYCQQRSSYPFT FGSGTKLEIK 65
MTK-27 EVQLQQSGTELVRPGASVKLSCTASGFNIKDDYMH WVQQRPEQGLEWIGWIDPENGNTEYASKFQG KATITADASSNTAYLQLSSLTSEDTAVYYCSTLFSNYFDY WGQGTTLTVSS    31 DIVMTQSQKFMSTSVGDRVSITCKASQNVRTSVA WYQQKPGQSPKALIYLASNRHT GVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVRSEDLADYFCLQHWNYPYT FGGGTKLEIK 66
MTK-28 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTTYGMS WVKQAPGKGLKWMGWINTYSGVPTYADDFKG RFAFSLETSASTAYLQINTLKNEDTTTYFCARFLRYYYFDY WGQGTTLTVSS    32 QIVLSQSPVILSASPGEKVTMTCRASSSVTYMH WYQQQPGSSPKPWIYATSNLAS GVPARFSGSGSGTSYSLTISRVETEDAATYYCHQWSGNPT FGGGTKLEIN 67
MTK-29 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKSSGFTFTTYGMS WVKQAPGKGLKWMGWINTYSGVPTYTDDFKG RFAFSLETSASTASLQINNLKNEDTATYFCARYTNYGYFDY WGQGTTLTVSS    33 QIVLSQSPAILSASPGEKVTMTCRATSSVGYMH WYQQKPGSSPKPWIYATSNLAS GVPARFSGSGSGTSYSLTISRVEAEHAATYYCQQWGSNPFT FGSGTKLEIK 68
MTK-30 QVQLQQPGTELVRPGASVKLSCKASGYTFTSYWMH WVKQRPGQGLEWIGNLNPNNGGTYYNEKFKS KATLTVDKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCARQILLYFDY WGQGTTLTVSS    34 DVLMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSIVHSNGDTYLE WYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFS GVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYYCFQGSHVPWT FGGGTKLEIK 69
MTK-31 QIQLVQSGPELKKSGETVKISCKASGYTFTSYGMS WVKQAPGKGLKWMGWINTYSGVPTYADDFKG RFAFSLETSASTAYLQINNLKNEDTATYFCASLSYDGSLYHAMDY WGQGTSVTVSS    35 DVSMTQTPLSLPVSLGDQASISSRSSQTIVHSNGNTYLE WYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFS GVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYYCFQGSHVPWT FGGGTKLEIK 70
MTK-32 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTSYGMS WVHQAPGKGLKWLGWINTYSGVPTYADDFRG RFAFSLDTSVSTASLEINNLQNEDTATYFCAREDNWAWFAY WGQGTLVTVST    36 QIVLSQSPAILSASPGEKVTMTCRATSSVGYMH WYQRKPGSSPKPWIYATSNLAS GVPARFSGSGSGTSYSLTISRVEAEDAATYYCQQWSSNPRT FGGGTKLEIK 71
MTK-33 QVQLQQPGPELVRPGTSVKLSCKASGYTFTSYWMH WIKQRPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFKG KATLTVDTSSSTAYLQLSSLTSEDSAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTTLTVSS    37 SIVMTQTPKFLLVSAGDRVIITCKASQSVSNTVA WYQQKPGQSPKLLIYYASNRYT GVPDRFTGSGYGTDFTFTISTVQAEDLAVYFCQQDYRSPFT FGSGTQLEMK 72
MTK-34 QVQLQQPGPELVRPGTSVKLSCKASGYTFTSYWMH WIKQRPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFKG KATLTVDTSSSTAYLQLSSLTSEDSAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTTLTVSS    37 SIVMTQTPKFLLVSAGDRVIITCKASQSVSNTVA WYQQKPGQSPKLLIYYASNRYT GVPDRFTGSGYGTDFTFTISTVQAEDLAVYFCQQDYRSPFT FGSGTQLEMK 72
MTK-35 QVLLQQSGPELVKPGASVQLSCKASDYTFTSYDIH WVKQRPGQGLEWIGWIYPRDGYTKYNEIFKG KATLTVDTSSTTAYMELHSLTSEDSAVYFCARAYYTNWYYFDY WGQGTTLTVSS    38 EIVLTQSPTTMAASPGEKITITCRASSSISSHYLH WYQQKPGFSPKLLIYRTSNLAS GVPARFSGSGSGTSYSLTIGTMEAEDVATYYCQQGSTIPLT FGAGTKLVLK 73
MTK-36 QVTLKESGPGILQPSQTLSLTCSFSGFSLSTFGMGVG WIRQPSGKGLEWLAHIWWYDDKYYEPALKS RLTISKDSSKNQVFLKIANVDTADTATYYCARIYYGTSYRYFDV WGTGTTVTVSS    39 QIVLSQSPAILSAFPGEKVTMTCRATSSVRYMH WYQQKPGSSPKPWIYATYNLTS GVPARFSGSGSGTSYSLTISRVEAEDAATYYCHQWSSNPYT FGGGTKLEIK 74
本發明之抗MerTK抗體的CDR序列(根據Kabat)提供於下文表 4 (重鏈)及表 5 (輕鏈)中。表 4
抗體 HVR-H1 SEQ ID NO: HVR-H2 SEQ ID NO: HVR-H3 SEQ ID NO:
MTK-01 NYGMN 75 WINTYTGEPTYADDFKG 99 RDRYTWFAY 125
MTK-02 DYGVN 76 WINTYSGEPTYAGDFKG 100 RVRYWYFDV 126
MTK-03 SGYYWN 77 YMSFDGDNKFNPSLKN 101 GGYNYGSTEAN 127
MTK-04 NYGMN 75 WINTYTGEPTYADDFKG 99 YDNYAWFAY 128
MTK-05 SYWIQ 78 EIFPGTGTTYYNEKFKG 102 DGAYFDV 129
MTK-06 NYGMN 75 WINTNTGEPTYAEEFKG 103 YYNYWYFDV 130
MTK-07 SGYYWN 77 YMSFDGDNKFNPSLKN 101 GGYNYGSTEAN 127
MTK-08 NYGMN 75 WINTYTGEPTYADDFKG 99 EVRYWYFDV 131
MTK-09 NHHIK 79 YIDPYNDYTTYNQNFKG 104 RAYDGYYVDWYFDV 132
MTK-10 TSGMGVG 80 HIWSDDDKRSNPALKS 105 LTPVREFAY 133
MTK-11 DYGVH 81 VIWSSGTTDYNEAFIS 106 KGHDPYAMDY 134
MTK-12 SHWMH 82 MIDPSDGESRLNQKFKD 107 GIYYYGITYAMDY 135
MTK-13 SGYYWN 77 NIDYDGSNKYNPSLKN 108 DGGNYRSFAY 136
MTK-14 NYGMN 75 WINTYTGEPTYADDFTG 109 GGHYAWFAY 137
MTK-15 NYGVH 83 WINTYTGEPTYADDFKG 99 GNRYAYMDY 138
MTK-16 NHGMN 84 WINTYTGEPTYADDFKG 99 KGVTAARYFDY 139
MTK-17 NFGMN 85 WINTYTGEPTYADDFKG 99 GAVLRAGAMDC 140
MTK-18 HYGMT 86 WINTYTGEPTYADDFKG 99 GGGQLGLRPLDY 141
MTK-19 EYTMH 87 GFNPNNVITSYNQRFQG 110 GDLLWSLLLPGNYFDY 142
MTK-20 NYGMT 88 WINTYTGEPTYADDFKG 99 GGGRLGLRPLDY 143
MTK-21 NFGMT 89 WINTYTGEPKYADDFKG 111 GGGRLGLRPLDY 143
MTK-22 SYWMH 90 EIDPSDSSSNYNQKFKG 112 RYYYGSLYFDN 144
MTK-23 NHHIN 91 NVDPYNDYSTYNQKFKG 113 RVYDGFYVDWYFDV 145
MTK-24 SYWMH 90 MIHPNINTNYNEKFKS 114 RSPYSNYDWYFDV 146
MTK-25 DYYMA 92 NINYEGSSTYYLGSLKS 115 YYYGSVDY 147
MTK-26 SGYYWD 93 YISYDGSNNYNPSLKN 116 EGGYYRSMDY 148
MTK-27 DDYMH 94 WIDPENGNTEYASKFQG 117 LFSNYFDY 149
MTK-28 TYGMS 95 WINTYSGVPTYADDFKG 118 FLRYYYFDY 150
MTK-29 TYGMS 95 WINTYSGVPTYTDDFKG 119 YTNYGYFDY 151
MTK-30 SYWMH 90 NLNPNNGGTYYNEKFKS 120 QILLYFDY 152
MTK-31 SYGMS 96 WINTYSGVPTYADDFKG 118 LSYDGSLYHAMDY 153
MTK-32 SYGMS 96 WINTYSGVPTYADDFRG 121 EDNWAWFAY 154
MTK-33 SYWMH 90 VIDPSDNYINYNQKFKG 122 EAGTRGYFDY 155
MTK-34 SYWMH 90 VIDPSDNYINYNQKFKG 122 EAGTRGYFDY 155
MTK-35 SYDIH 97 WIYPRDGYTKYNEIFKG 123 AYYTNWYYFDY 156
MTK-36 TFGMGVG 98 HIWWYDDKYYEPALKS 124 IYYGTSYRYFDV 157
表 5
抗體 HVR-L1 SEQ ID NO: HVR-L2 SEQ ID NO: HVR-L3 SEQ ID NO:
MTK-01 RASSSVSYMH 158 ATSNLAS 187 QQWSSNPPT 207
MTK-02 RANSSVSYMH 159 ATSNLAS 187 QQWGSNPFT 208
MTK-03 SASSSVNYMH 160 STSNLAS 188 QQRSSYPFT 209
MTK-04 RASSSVSYMH 158 ATSNLAS 187 QQWSSNPRT 210
MTK-05 RASENIFSYLA 161 NAKTLAE 189 LHHYGTPLT 211
MTK-06 RASSSVSYMH 158 ATSNLAS 187 QQWSSKPPT 212
MTK-07 SASSSVTYMH 162 STSNLAS 188 QQRSSYPFT 209
MTK-08 RATSSVSYMH 163 ATSNLAS 187 QHWSGNPRT 213
MTK-09 KASQDVTTSVA 164 SASYRYT 190 QQHYSTPLT 214
MTK-10 SASQGISNYLN 165 YTSRLHS 191 QQYTKLPYT 215
MTK-11 TASSSISSSYFH 166 STSNLPS 192 HQYYRSPLT 216
MTK-12 SASSSVSYMY 167 DTSNLAS 193 QQWSSYPLT 217
MTK-13 SASSSVSYMY 167 STFNLAS 194 QQRSSYPFT 209
MTK-14 RSSSSVSYMH 168 ATSNLAS 187 QQWGSNPRT 218
MTK-15 RASSSVSYMH 158 ATSNLAS 187 QQWSSNPRT 210
MTK-16 KASQNVRTAVA 169 LASNRHT 195 LQHWNYPLT 219
MTK-17 KASDHINNWLA 170 GATSLET 196 QQYWSTPRT 220
MTK-18 RASQAISNYLN 171 YTSRLHS 191 QQGNTLPWT 221
MTK-19 KSSQSLLDSDGKTYLN 172 LVSKLDS 197 WQGTHFPWT 222
MTK-20 RASQDINNYLN 173 YTSRLHS 191 QQGNTLPW 223
MTK-21 RASQDINNYLN 173 YTSSLHS 198 QQGNTLPWT 221
MTK-22 KASQDVGTAIA 174 WASTRHT 199 QQYTSYPLT 224
MTK-23 KASRDVSTAVA 175 SASYRST 200 QQHYSAPLT 225
MTK-24 RASENIYSNLA 176 AATNLAD 201 QHFWGTPLT 226
MTK-25 KASQNVRTTVA 177 LASNRHT 195 LQLWNYPWT 227
MTK-26 SASSSVSFMH 178 STSNLAS 188 QQRSSYPFT 209
MTK-27 KASQNVRTSVA 179 LASNRHT 195 LQHWNYPYT 228
MTK-28 RASSSVTYMH 180 ATSNLAS 187 HQWSGNPT 229
MTK-29 RATSSVGYMH 181 ATSNLAS 187 QQWGSNPFT 208
MTK-30 RSSQSIVHSNGDTYLE 182 KVSNRFS 202 FQGSHVPWT 230
MTK-31 RSSQTIVHSNGNTYLE 183 KVSNRFS 202 FQGSHVPWT 230
MTK-32 RATSSVGYMH 181 ATSNLAS 187 QQWSSNPRT 210
MTK-33 KASQSVSNTVA 184 YASNRYT 203 QQDYRSPFT 231
MTK-34 KASQSVSNTVA 184 YASNRYT 203 QQDYRSPFT 231
MTK-35 RASSSISSHYLH 185 RTSNLAS 204 QQGSTIPLT 232
MTK-36 RATSSVRYMH 186 ATYNLTS 205 HQWSSNPYT 233
實例 10 ：抗 MerTK 抗體之產生
在無血清融合瘤培養基中培養抗MerTK融合瘤純系，且使用蛋白A尖端(Phynexus Inc, San Jose, CA)在Hamilton STAR平台(Hamilton Company, Reno, NV)上純化上清液中之抗MerTK抗體。抗MerTK抗體亦經由將獲自融合瘤之可變基因區直接選殖至重組表現質體中以產生含有人類Fc域(含有上述LALAPS胺基酸取代的人類IgG1)之嵌合抗體而產生。使用Tuna293TM 製程(LakePharma, San Carlos, CA)，將HEK293細胞接種至震蕩燒瓶中，且使用無血清化學成分確定之培養基進行擴增。該等表現質體短暫地轉染至該等細胞中，且7天后收集培養物上清液。在藉由離心及過濾澄清之後，經由蛋白A層析純化上清液中之抗MerTK抗體。 實例 11 ：用重組抗 MerTK 抗體阻斷胞葬作用
如下評估本發明之抗MerTK抗體阻斷吞噬細胞(例如人類巨噬細胞或小鼠骨髓源性巨噬細胞)之胞葬作用的能力。在人類M-CSF存在下，人類巨噬細胞自人類單核球分化持續7天。在小鼠M-CSF (Peprotech，目錄號315-02)存在下，小鼠骨髓源性巨噬細胞自小鼠骨髓細胞分化持續7天。7天后，收集(藉由刮擦)人類巨噬細胞及小鼠巨噬細胞，再懸浮於PBS中，且以5×104 個細胞/孔接種於96孔板上。關於胞葬作用IC50測定，使細胞飢餓持續1小時，隨後在37℃下添加10 μl重組抗MerTK抗體至各孔中持續30 min。關於本文所述之其他研究，將重組抗MerTK抗體滴定至66.6 nM至4 pM之間的最終濃度範圍且接著在37℃下將各連續稀釋之抗體添加至各孔中持續30 min。
Jurkat細胞在37℃下用1 μM星形孢菌素(SigmaAldrich)處理持續3小時(以誘導細胞凋亡)，且在室溫下用pHrodo (ThermoFisher)標記持續30 min。在用PBS洗滌之後，經pHrodo標記之Jurkat細胞以1:4比率(1個巨噬細胞:4個Jurkat細胞)添加至各孔中持續1小時。用PBS洗滌該等板，且接著細胞在暗處在冰上用APC結合之抗人類CD14或抗小鼠CD11b染色持續30分鐘。細胞接著在FACS緩衝液(PBS + 2% FBS)中洗滌兩次，且在BD FACS Canto II上執行流式細胞術。使用FlowJo軟體分析數據。
除了本發明之抗MerTK抗體以外，以下抗MerTK抗體亦用於此等胞葬作用研究：大鼠抗小鼠MerTK抗體DS5MMER (eBioscience，純系ID：DS5MMER，大鼠IgG2a)、小鼠抗人類MerTK抗體H1 (BioLegend，純系ID：590H11G1E3，小鼠IgG1)、小鼠抗人類MerTK抗體H2 (R&D systems，純系ID：125518，小鼠IgG2b)、小鼠抗人類MerTK抗體H3 (R&D systems，純系ID：125508，小鼠IgG2b)、小鼠抗人類MerTK抗體H6 (eBioscience，純系ID：A3KCAT，小鼠IgG1)、小鼠抗人類MerTK抗體H7 (Sino Biological，純系ID：09，小鼠IgG2b)、人類抗人類MerTK抗體M6 (揭示於WO2016/106221中，huIgG1 LALAPS)及人類抗人類MerTK抗體CDX AB2000-A7 (揭示於WO2019/084307中，huIgG1)。
在此等實驗中，藉由將pHrodo CD14雙陽性細胞設定為分析閘且接著將此精確閘應用於所有樣品來鑑別胞葬作用陽性巨噬細胞。使用僅用培養基培養之巨噬細胞來確立基線胞葬作用水準，且將此水準設定為100%胞葬作用活性。相對胞葬作用水準係計算為與用抗MerTK抗體處理之細胞中觀察到的胞葬作用相比，僅用培養基處理之細胞中觀察到的胞葬作用之百分比。
與抗體不存在下之巨噬細胞相比(僅培養基處理)，使用同型對照人類IgG1 LALAPS、小鼠IgG1或小鼠IgG2b時未觀察到胞葬作用之顯著變化。
藉由將10 μg/ml之本發明之重組抗MerTK抗體添加至巨噬細胞中來執行胞葬作用阻斷研究。表 6 及表 7 顯示針對獲自多個人類供體之巨噬細胞的胞葬作用活性，本發明之抗MerTK抗體的胞葬作用%。表 6
抗體 在 10 μg/mL 下之胞葬作用 %
供體922 供體923 供體924
MTK-01 14.45 12.45 18.20
MTK-02 4.27 8.11 6.59
MTK-03 11.64 14.51 14.55
MTK-04 21.24 15.71 20.20
MTK-05 34.72 27.78 47.61
MTK-06 14.41 10.71 13.79
MTK-07 11.98 14.35 15.75
MTK-08 9.51 11.25 10.86
MTK-09 9.42 17.54 16.06
MTK-10 2.55 5.00 3.84
MTK-11 5.99 6.56 6.10
MTK-12 5.78 0.57 3.85
MTK-13 4.04 8.03 5.43
MTK-14 8.67 12.53 11.03
MTK-15 5.57 8.30 8.50
MTK-16 1.79 2.68 1.40
MTK-17 3.43 4.35 3.98
MTK-18 3.33 2.91 2.92
MTK-19 4.31 4.15 3.41
MTK-20 4.08 4.42 4.13
MTK-21 4.08 3.13 3.28
MTK-22 4.94 1.65 4.29
MTK-23 3.12 3.83 3.98
huIgG1 LALAPS 114.35 96.22 131.70
muIgG1 119.37 101.26 97.44
muIgG2b 121.88 111.35 112.12
M6 4.52 1.04 1.22
H1 7.87 21.38 23.36
H2 8.96 13.50 16.60
H3 88.8 111.35 104.56
H6 103.04 119.11 124.14
H7 108.9 100.1 99.22
表 7
抗體 在 10 μg/mL 下之胞葬作用 %
供體930 供體929
MTK-24 26.16 11.29
MTK-25 30.93 41.66
MTK-26 23.85 13.07
MTK-27 35.26 17.57
MTK-28 33.40 19.38
MTK-29 41.75 20.49
MTK-30 38.66 20.36
MTK-31 22.59 18.02
MTK-32 48.56 28.05
MTK-33 24.90 21.63
MTK-35 30.03 19.52
MTK-36 21.68 21.43
培養基 96.49 93.73
M6 21.49 13.17
H1 24.09 14.31
如上文表 6 及表 7 所示，本發明之抗MerTK抗體減少或降低人類巨噬細胞之胞葬作用(例如，減少胞葬作用達約50%至約98%)。儘管抗MerTK抗體之胞葬作用阻斷活性因供體而異，但各抗體存在一般趨勢。
圖 4 及圖 5 顯示本發明之例示性抗MerTK抗體的胞葬作用阻斷結果。如圖 4 所示，本發明之抗MerTK抗體MTK-06、MTK-10、MTK-15、MTK-16及MTK-21以劑量依賴性方式抑制人類巨噬細胞對凋亡細胞之胞葬作用。此等結果指示，本發明之抗MerTK抗體有效減少或降低人類巨噬細胞之胞葬作用活性。
如圖 5 所示，本發明之抗MerTK抗體MTK-24、MTK-29、MTK-31及MTK-33以劑量依賴性方式抑制小鼠骨髓源性巨噬細胞對凋亡細胞之胞葬作用。此等結果指示，本發明之抗MerTK抗體有效減少或降低小鼠骨髓源性巨噬細胞之胞葬作用活性。
下表 8 顯示本發明之抗MerTK抗體針對減少或降低人類巨噬細胞之胞葬作用的IC50值，存在IC50值之範圍。如表8所示，本發明之抗MerTK抗體減少或降低人類巨噬細胞之胞葬作用，其IC50範圍為約1.2 nM至約28 nM。表 8
抗體 胞葬作用 IC50 (nM) 供體 940
MTK-01 6.91
MTK-02 1.20
MTK-03 14.16
MTK-05 28.12
MTK-06 0.77
MTK-08 1.31
MTK-10 1.45
MTK-11 1.36
MTK-13 4.90
MTK-14 1.79
MTK-15 0.86
MTK-16 0.80
MTK-17 7.76
MTK-18 1.53
MTK-19 10.50
MTK-20 1.42
MTK-21 14.11
MTK-22 16.62
M6 0.56
表 9 及表 10 顯示針對小鼠巨噬細胞及獲自多個人類供體之巨噬細胞的胞葬作用活性，本發明之抗MerTK抗體的IC50值。表 9
抗體 胞葬作用 IC50 (nM)
供體673 供體960 小鼠Mac
MTK-24 3.89 1.09 0.18
MTK-26 0.54 0.43 -
MTK-27 0.71 0.21 -
MTK-28 0.15 0.08 -
MTK-29 0.33 0.23 11.5
MTK-30 0.45 0.13 0.10
MTK-31 8.447 1.42E+24* -
MTK-32 29.95 7.04 -
MTK-33 0.25 0.33 0.03607
MTK-35 19856 3.70 -
MTK-36 0.41 0.44 -
M6 0.11 0.12
CDX AB2000-A7 n.a 0.09402
DS5MMER n.a - 0.02361
n.a.意謂數據不可得 *指示異常值表 10 [nM]
抗體 供體 993 供體 996 供體 896 供體 897
MTK-09 0.3418 0.7776 0.712 0.603
MTK-23 0.1518 0.365 0.600 0.488
MTK-25 0.1125 0.1584 n.a n.a
MTK-27 0.3386 0.5349 n.a n.a
MTK-31 0.9309 5.551 n.a n.a
MTK-36 0.128 0.2313 n.a n.a
CDX AB2000-A7 0.1099 0.2517 n.a n.a
H1 0.4212 1.905 1.631 0.847
H2 0.6921 1.474 n.a n.a
M6 0.04335 0.1086 0.222 0.213
n.a.意謂數據不可得
如上文表 8 、表 9 及表 10 所示，本發明之抗MerTK抗體有效減少人類巨噬細胞及小鼠巨噬細胞之胞葬作用。另外，此等結果顯示，本發明之抗MerTK抗體以約0.13 nM至約30 nM之IC50減少人類巨噬細胞之胞葬作用。 實例 12 ：抗 MerTK 抗體結合於 SK-MEL-5 細胞及 CHO-muMerTK OE 細胞
為了確定本發明之重組抗人類MerTK抗體是否結合於內源性地表現於SK-MEL-5細胞上的人類MerTK及過表現小鼠MerTK之CHO細胞(CHO-muMerTK OE細胞)，執行以下實驗。以40,000個細胞/孔接種SK-MEL-5細胞及CHO-muMerTK OE細胞。將抗MerTK抗體滴定至66.6 nM至4 pM之間的最終濃度範圍且接著添加至細胞中。在冰上30 min之後，洗滌細胞且接著在冰上在Fc阻斷溶液存在下用APC結合之小鼠抗人類κ抗體(Southern Biotech，目錄號9230-11, Birmingham, AL)及活力染料(Life Technologies)染色持續30分鐘，且接著用冷FACS緩衝液(PBS中之2% FBS)洗滌兩次。細胞用PBS中之4%聚甲醛固定。在BD FACS Canto II細胞儀上採集經染色細胞且用FlowJo軟體計算平均螢光強度(MFI)，且用Prism軟體計算K值。此等結果中之Kd值類似於EC50值，但藉由Prism軟體根據由FACS分析生成之數據計算得出。較低Kd值反映抗體與細胞之較高結合。
圖 6 顯示抗人類MerTK抗體MTK-06、MTK-10、MTK-11、MTK-13、MTK-15及MTK-16以劑量依賴性方式結合於內源性地表現於SK-MEL-5上之MerTK。
下文表 11 、表 12 及表 13 顯示來自結合於SK-MEL-5細胞(表 11 及表 12 )及結合於CHO-muMerTK-OE細胞(表 13 )之抗MerTK抗體之FACS分析的Kd值。表 11
抗體 FACS Kd 值 (nM)
MTK-01 0.049
MTK-02 0.024
MTK-03 2.64
MTK-04 0.037
MTK-06 0.005
MTK-07 3.21
MTK-08 0.079
MTK-10 0.076
MTK-11 3.54
MTK-12 0.009
MTK-13 0.68
MTK-14 0.021
MTK-15 0.19
MTK-16 1.66
MTK-17 12.68
MTK-18 0.38
MTK-19 3.07
MTK-20 0.11
MTK-21 23.36
MTK-22 2.78E-06*
M6 0.27
H1 0.22
H2 0.03
*指示異常值表 12
抗體 FACS Kd 值 (nM)
MTK-24 0.59
MTK-26 1.38
MTK-27 2.55
MTK-28 0.52
MTK-29 0.14
MTK-30 0.47
MTK-31 2.311E-11*
MTK-32 0.40
MTK-33 0.93
MTK-35 1.29
MTK-36 1.42
M6 5.302E-13*
CDX AB2000-A7 0.19
H1 0.06436
H2 2.455E-08*
*指示異常值表 13
抗體 FACS Kd 值 (nM)
MTK-24 0.22
MTK-29 5.22
MTK-30 0.24
MTK-31 2.913
MTK-32 2.455E-08*
MTK-33 0.53
*指示異常值
抗MerTK抗體以劑量依賴性方式結合於SK-MEL-5或CHO-muMerTK過表現性細胞，其Kd值在皮莫耳至奈莫耳範圍內。與M6抗體相比，抗MerTK抗體(諸如MTK-06或MTK-12)顯示與SK-MEL-5之較佳結合。上文表11、12及13中之數據亦顯示抗MerTK抗體MTK-24、MTK-29、MTK-30、MTK-31及MTK-33結合於內源性地表現於人類SK-MEL-5細胞上的人類MerTK且結合於重組表現於CHO細胞中之鼠科動物MerTK。 實例 13 ：阻斷配位體 Gas6 及配位體 ProS 結合於 MerTK 之抗 MerTK 抗體
為了確定本發明之抗MerTK抗體的配位體阻斷活性，執行配位體阻斷分析以測試既定抗MerTK抗體是否阻斷配位體Gas6或配位體ProS與人類MerTK之結合。
兔抗人類IgG多株抗體(Jackson ImmunoResearch，目錄號309-005-008)在4℃下以2 μg/ml經捕捉至高蛋白結合板隔夜。在用PBS中之0.05% Tween20洗滌三次之後，添加PBS中之5% BSA持續1小時。添加2 μg/ml之重組人類MerTK人類Fc嵌合蛋白(R&D systems，目錄號391-MR-100)持續1小時且接著洗滌該等板。將抗MerTK抗體滴定至66.6 nM至4 pM之間的最終濃度範圍，且接著滴定40 μl連續稀釋之抗體及40 μl 3 μg/ml的His標籤結合之重組Gas6蛋白(R&D systems，目錄號885-GSB-050)或20 μg/ml的His標籤結合之重組ProS蛋白(R&D systems，目錄號9489-PS-100)。在進一步培育持續1小時之後，洗滌板且用HRP結合之抗6x His標籤抗體(Abcam，目錄號ab1187)培育持續1小時。接著洗滌板且使用HRP受質(TMB)使該等板顯影。在觀察到充分顏色變化之後，藉由添加50 μl 2N H2 SO4 來停止反應且使用分光光度計(BioTek)來量測OD。
圖 7 顯示本發明之例示性抗MerTK抗體(MTK-07、MTK-16及MTK-21)以劑量依賴性方式抑制(例如，阻斷) Gas6配位體結合於人類MerTK。如圖 7 所示，抗MerTK抗體MTK-06、MTK-08、MTK-09及MTK-15不阻斷Gas6配位體結合於人類MerTK。
圖 8 顯示本發明之例示性抗MerTK抗體(MTK-03、MTK-07、MTK-09、MTK-17、MTK-18及MTK-23)以劑量依賴性方式抑制(例如，阻斷) ProS配位體結合於人類MerTK。
根據此等實驗，使用獲自用Prism軟體分析之劑量反應曲線的OD450值來測定IC50值[nM]。表 14 及表 15 顯示針對抗MerTK抗體阻斷Gas6配位體結合及ProS配位體結合於MerTK測定之IC50值。抗MerTK抗體MTK-22不阻斷Gas6配位體結合於MerTK或ProS配位體結合於MerTK；然而，如上文實例所示，抗MerTK抗體MTK-22有效減少胞葬作用。短線指示缺乏顯著阻斷；「n.a.」指示數據不可得。表 14
抗體 Gas6 配位體阻斷 IC50 ProS 配位體阻斷 IC50
MTK-01 - 2.85
MTK-02 - 3.94
MTK-03 8.53 3.65
MTK-04 - 12.81
MTK-05 - 6.51
MTK-06 - 2.17
MTK-07 7.97 3.27
MTK-08 - 3.80
MTK-09 - 7.84
MTK-10 32.38 3.80
MTK-11 - 24.24
MTK-12 25.97 3.36
MTK-13 18.93 3.76
MTK-14 n.a. 7.61
MTK-15 - 4.20
MTK-16 6.32 8.59
MTK-17 14.47 8.35
MTK-18 4.22 4.76
MTK-19 n.a. 11.27
MTK-20 4.96 5.16
MTK-21 5.98 13.50
MTK-23 - 25.92
表 15
抗體 Gas6 阻斷 IC50 ProS 阻斷 IC50
MTK-24 0.74 0.5792
MTK-26 2.93 1.203
MTK-27 1.42 2.543
MTK-28 - 2.781
MTK-29 - 2.664
MTK-30 1.26 1.572
MTK-31 1.29 1.51E+15*
MTK-32 - 2.781
MTK-33 n.a. 0.6005
MTK-35 0.31 0.924
MTK-36 0.29 1.402
M6 0.28 1.339
CDX AB2000-A7 0.49 2.514
H1 - 2.513
*指示異常值
在此等研究中，本發明之三十五(35)種抗MerTK抗體針對其阻斷Gas6配位體結合於人類MerTK及/或ProS配位體結合於人類MerTK之能力進行測試。本發明之十九(19)種抗MerTK抗體(MTK-03、MTK-07、MTK-10、MTK-12、MTK-13、MTK-16、MTK-17、MTK-18、MTK-20、MTK-21、MTK-24、MTK-25、MTK-26、MTK-27、MTK-30、MTK-31、MTK-33、MTK-35及MTK-36)阻斷ProS配位體及Gas6配位體兩者與重組人類MerTK蛋白之結合(本文中稱作ProS/Gas6雙重阻斷劑)；本發明之十五(15)種抗MerTK抗體(MTK-01、MTK-02、MTK-04、MTK-05、MTK-06、MTK-08、MTK-09、MTK-11、MTK-14、MTK-15、MTK-19、MTK-23、MTK-28、MTK-29、MTK-32)阻斷ProS配位體結合(但不阻斷Gas6配位體結合)於重組人類MerTK (本文中稱作ProS特異性阻斷劑)。如此分析中所量測，抗MerTK抗體MTK-22不阻斷ProS配位體或Gas6配位體結合於重組人類MerTK蛋白；然而，如上文實例所示，抗MerTK抗體MTK-22有效減少胞葬作用。抗MerTK抗體M6及抗MerTK抗體CDX AB2000-A7呈現ProS配位體及Gas6配位體阻斷。抗MerTK抗體H1及抗MerTK抗體H2僅呈現ProS配位體阻斷；此等抗體均未呈現Gas6配位體阻斷。
此等結果表明，本發明之抗MerTK抗體可選擇性地調節Gas6及ProS結合於MerTK且可選擇性地調節Gas6及ProS活性。 實例 14 ：抗 MerTK 抗體之結合動力學
使用Carterra LSA儀器(Carterra, Salt Lake City, UT)來評估本發明之人類抗MerTK IgG1 LALAPS抗體與人類、cyno及鼠科動物MerTK之結合動力學。簡言之，抗MerTK抗體藉由以300 µl /孔在10 mM乙酸鹽pH 4.25 (Carterra)中稀釋至10 µg/ml來製備。使用單通道流動池用100 mM MES pH 5.5、100 mM sulfo-NHS、400 mM EDC (均在MES pH 5.5中重構；即將運行分析之前，將100 µl各物質混合於小瓶中)之1:1:1混合物之7分鐘注射來激活HC200M感測器晶片(Carterra)。在轉換至多通道陣列流動池之後，將該等抗體注射於96點陣列中之激活晶片上持續15分鐘。接著，藉由使用單通道流動池注射1 M乙醇胺pH 8.5 (Carterra)持續7分鐘來阻斷晶片上之剩餘未結合活性基團。
在用具有0.5 mg/ml BSA (Sigma)之運行緩衝液(HBS-TE, Carterra)起動之後，經固定之抗MerTK抗體針對其結合於多種形式的重組MerTK細胞外域(包括如上文所述之人類、食蟹獼猴及小鼠直系同源物)之能力進行測試。藉由使用單通道流動池在整個抗體陣列上注射各分析物來生成親和力之估計值。MerTK分析物在運行緩衝液中經稀釋至33.3、100及300 nM，且自最低濃度至最高濃度連續注射而無需再生。在各系列之間運行兩個緩衝液空白(每個系列一個物種)。使用NextGenKIT高通量動力學分析軟體(Carterra)來處理且分析數據。
接著，由本發明之抗MerTK抗體的經擬合之締合及解離速率常數(k-締合及k-解離)計算平衡解離常數(KD )。亦對抗MerTK抗體H1 (BioLegend，純系ID：590H11G1E3)、H2 (R&D systems，純系ID：125518)、M6 (WO2016/106221)及CDX AB2000-A7 hIgG1 (WO2019/084307)執行結合動力學分析。KD 值概述於下表 16 中。表 16
抗體 KD (nM) 人類 KD (nM) cyno KD (nM) 小鼠
MTK-01 NF 99 NB
MTK-02 22 24 NB
MTK-03 54 55 NB
MTK-04 33 44 NB
MTK-05 6.7 NB NB
MTK-06 18 17 NB
MTK-07 43 53 NB
MTK-08 37 42 NB
MTK-10 2.0 1.9 NB
MTK-11 3.0 2.9 NB
MTK-12 5.3 NB NB
MTK-13 37 39 NB
MTK-14 45 53 NB
MTK-15 2.7 3.0 NB
MTK-16 1.4 1.6 NB
MTK-17 25 24 NB
MTK-18 18 18 NB
MTK-19 2.4 12 130
MTK-20 9.3 9.2 NB
MTK-21 40 43 NB
MTK-22 54 LB NB
MTK-24 41 44 55
MTK-26 30 30 NB
MTK-27 71 71 NB
MTK-28 4.1 4.5 NB
MTK-30 23 24 30
MTK-31 81 91 165
MTK-32 59 107 186
MTK-33 6.5 6.6 75
MTK-35 14 13 NB
MTK-36 6.4 5.9 NB
CDX AB2000-A7 38 52 NB
H1 7.2 6.8 NB
H2 18 18 NB
H3 151 LB NB
H6 26 116 NB
H7 6.1 10 NB
M6 5.6 5.4 NB
NB = 無結合；LB = 低結合；NF = 無擬合，意謂所獲得的數據未擬合1:1結合平衡模型。
此等結果顯示，本發明之抗MerTK抗體顯示一定範圍之對MerTK之親和力及物種結合特異性。詳言之，本發明之抗MerTK抗體結合於人類MerTK的親和力介於1.4 nm至81 nM範圍內；本發明之抗MerTK抗體結合於cyno MerTK的親和力介於1.6 nm至107 nM範圍內；且本發明之抗MerTK抗體結合於鼠科動物MerTK的親和力介於30 nM至186 nM範圍內。 實例 15 ：抗 MerTK 抗體對人類、 cyno 及小鼠 MerTK 之交叉反應性
根據上述結合動力學分析數據來確定本發明之抗MerTK抗體的物種交叉反應性。物種結合交叉反應性分析之結果顯示於下表 17 中。表 17
人類 MerTK 反應性 人類 -Cyno MerTK 交叉反應性 人類 - 小鼠 MerTK 交叉反應性
MTK-05 MTK-12 MTK-01、MTK-02、MTK-03、MTK-04、MTK-06、MTK-07、MTK-08、MTK-09、MTK-10、MTK-11、MTK-13、MTK-14、MTK-15、MTK-16、MTK-17、MTK-18、MTK-19、MTK-20、MTK-21、MTK-22、MTK-24、MTK-26、MTK-27、MTK-28、MTK-30、MTK-31、MTK-32、MTK-33、MTK-34、MTK-35、MTK-36 CDX AB2000-A7、H1、H2、H7、M6 微弱交叉反應性： H3、H6 MTK-19、MTK-24、MTK-30、MTK-31、MTK-32、MTK-33
此等結合實驗顯示，所測試的本發明之大多數抗MerTK抗體顯示與人類及cyno MerTK兩者之結合交叉反應性(MTK-01、MTK-02、MTK-03、MTK-04、MTK-06、MTK-07、MTK-08、MTK-09、MTK-10、MTK-11、MTK-13、MTK-14、MTK-15、MTK-16、MTK-17、MTK-18、MTK-19、MTK-20、MTK-21、MTK-22、MTK-24、MTK-26、MTK-27、MTK-28、MTK-30、MTK-31、MTK-32、MTK-33、MTK-34、MTK-35及MTK-36)。本發明之兩種抗MerTK抗體顯示僅特異性結合於人類MerTK，且未顯示結合於cyno或小鼠MerTK (抗體MTK-05及抗體MTK-12)。所測試的本發明之六種抗MerTK抗體呈現對人類及小鼠MerTK兩者之交叉反應性(MTK-19、MTK-24、MTK-30、MTK-31、MTK-32及MTK-33)。所測試的本發明之六種抗MerTK抗體呈現對人類、cyno及小鼠MerTK之交叉反應性(MTK-19、MTK-24、MTK-30、MTK-31、MTK-32及MTK-33)。另外，以上實例12顯示抗MerTK抗體MTK-24及MTK-29亦結合於人類及鼠科動物MerTK。 實例 16 ：抗 MerTK 抗體之抗原決定基建倉分析
藉由使用Carterra LSA儀器(Carterra, Salt Lake City, UT)執行串聯注射方法，對本發明之抗MerTK抗體執行抗原決定基建倉分析。簡言之，本發明之融合瘤經純化小鼠抗MerTK抗體、抗MerTK抗體H1、H2、H3、H6及M6以及抗his IgG以300 µl/孔在10 mM乙酸鹽pH 4.75 (Carterra)中稀釋至15 µg/ml。藉由在相同緩衝液中將抗體5倍稀釋至3 µg/ml來製備第二組樣品。使用單通道流動池用100 mM MES pH 5.5、100 mM sulfo-NHS、400 mM EDC (如上文所述)之1:1:1混合物之7分鐘注射來激活HC200M感測器晶片(Carterra)。在轉換至多通道陣列流動池之後，將抗體之15 µg/ml稀釋液注射於96點陣列中之激活晶片上持續15分鐘。藉由在第二96點陣列中注射抗體之3 µg/ml稀釋液來印刷第二陣列。接著，藉由使用單通道流動池在整個晶片表面上注射1 M乙醇胺pH 8.5 (Carterra)持續7分鐘來阻斷晶片上之剩餘未結合活性基團。
在用含有0.5 mg/ml BSA (Sigma)之運行緩衝液(HBS-TE, Carterra)起動之後，經固定之抗體針對其結合於重組人類MerTK細胞外域之能力進行測試。藉由0.425%磷酸(Carterra)之兩次30秒注射來移除結合之MerTK。在各循環中，將MerTK注射於晶片上，隨後測試抗體在運行緩衝液中稀釋至30 µg/ml。使用抗原決定基高通量建倉分析軟體(Carterra)來處理且分析數據。能夠結合由經固定抗體捕捉之抗原的抗體係稱作「夾心」或「配對」抗體，且此等抗體經指派至與經固定抗體之抗原決定基倉不同的抗原決定基倉中。由此等實驗之結合結果建構配對及非配對抗體之矩陣，這允許生成抗MerTK抗體之抗原決定基倉景觀。
由此等研究鑑別之抗MerTK抗體的抗原決定基倉概述於圖 9 中。結果顯示，除了包括於倉2中之MTK-19，大多數ProS配位體特異性阻斷劑均屬於倉1組。ProS特異性阻斷劑抗MerTK對照抗體H1屬於倉1組。所有ProS/Gas6雙重阻斷劑均屬於倉3至倉8組。一些抗體識別部分相鄰之抗原決定基，因此具有重疊建倉。例如，MTK-03及MTK-07具有倉3、倉5、倉6及倉8之最廣泛重疊抗原決定基。ProS/Gas6雙重阻斷劑抗MerTK對照抗體M6屬於倉4且H6屬於倉5組。此等結果表明，ProS及Gas6可結合於MerTK上之不同抗原決定基或區。 實例 17 ：抗 MerTK 抗體抑制活體內腫瘤生長
使用MC38小鼠同基因結腸癌模型執行活體內功效研究以測定抗MerTK抗體對腫瘤生長之影響。MC38細胞以5×106 個細胞/ml再懸浮於PBS中。100 μl細胞經皮下注射於C57BL/6小鼠之剃毛右側腹上。當腫瘤大小達到大約60-100 mm3 體積時，基於腫瘤體積將小鼠隨機分至治療組(N=10)或對照組中。治療組接受10 mg/kg對照抗體、單獨3 mg/kg抗PDL1 (純系：BM1)、單獨10 mg/kg抗MerTK抗體DS5MMER或3 mg/kg抗PDL1加上抗MerTK抗體DS5MMER一起。在起始抗體給藥之後，對小鼠稱重，且每週兩次使用卡尺量測腫瘤體積。當對照組中之腫瘤達到大約2000 mm3 時，終止研究。
圖 10A 及10B 顯示單獨或與抗PDL1抗體治療組合之抗MerTK抗體DS5MMER治療減少活體內腫瘤生長。此等結果指示，抗MerTK抗體活體內有效減少腫瘤體積且延遲腫瘤生長。此等結果進一步顯示，與單獨任一抗體相比，當與抗PD-L1抗體組合使用時，抗MerTK抗體呈現較大的腫瘤體積及生長減少。 實例 18 ：調節促發炎細胞介素產生
如下檢查抗MerTK抗體對骨髓細胞中之促發炎細胞介素產生的影響。為了產生單核球源性巨噬細胞及樹突狀細胞，根據製造商之方案，使用RosetteSep人類單核球增濃混合液(STEMCELL Technologies)自肝素化人血(Blood Centers of the Pacific)分離人類原代單核球。將單核球接種於含有10%胎牛血清(Hyclone)及50 ng/mL IL-4及GM-CSF (Peprotech)以誘導樹突狀細胞分化或50 ng/mL M-CSF (Biolegend)以誘導巨噬細胞分化之RPMI (Invitrogen)中。6-7天后，藉由刮擦細胞收集樹突狀細胞或巨噬細胞。巨噬細胞或樹突狀細胞以5×104 個細胞/孔接種於96孔板上且在37℃下用10 μg/mL抗體培養隔夜。次日，收集上清液，且根據製造商之方案使用13重人類促發炎趨化介素及人類巨噬細胞/小神經膠質細胞LEGENDplex珠粒陣列(BioLegend)。所有樣品均在BD FACS Canto II上運行，且使用LEGENDplex分析軟體(BioLegend)執行分析。
圖 11A 、 11B 、 11C 及 11D 分別顯示在用抗MerTK抗體MTK-15、MTK-16、MTK-29或MTK-33處理隔夜之後，人類巨噬細胞中之MCP1 (CCL2)、MIP-1α (CCL3)、MIP-1β (CCL4)及TNF的變化水準。抗MerTK抗體MTK-16及MTK-29顯著地增加人類巨噬細胞中之MCP1、MIP-1α、MIP-1β及TNF的水準。與用對照抗體處理時觀察到的MCP1水準相比，MCP1水準回應於抗MerTK抗體MTK-33顯著地增加。此等結果證明抗MerTK抗體MTK-15、MTK-16、MTK-29及MTK-33以MerTK依賴性方式誘導人類巨噬細胞中之促發炎趨化介素或細胞介素產生。此等結果進一步顯示，本發明之抗MerTK抗體有效增加骨髓細胞中之促發炎細胞介素及趨化介素，指示本發明之抗MerTK抗體有效激活骨髓細胞(例如巨噬細胞)。此等結果亦顯示，本發明之抗MerTK抗體有效增加M1樣巨噬細胞極化且因此介導抗腫瘤免疫性。 實例 19 ：抗 MerTK 抗體活體內治療結腸癌之效果
執行以下研究以測試本發明之抗MerTK抗體活體內減少腫瘤負荷之能力。在此等實驗中，400,000個MC38小鼠結腸癌細胞經皮下植入C57BL/6小鼠之剃毛右側腹上。當腫瘤大小達到大約80-120 mm3 體積時，基於腫瘤體積將小鼠分組，以確保出於分析目的起始腫瘤體積之分佈相似。每週兩次經由腹膜內注射以10 mg/kg劑量投與抗MerTK抗體MTK-29及MTK33或對照抗體(每組N=9)。同時，每週兩次經腹膜內向所有治療組投與3 mg/kg之抗PDL1抗體(純系BM1)。使用卡尺每週三次量測腫瘤體積。當腫瘤體積達到大約2000 mm3 或發生潰瘍時，人道地對小鼠實施安樂死。在此等研究中執行兩個獨立活體內實驗。
圖 12A 及圖 12B 顯示，與用單獨抗PDL1抗體或用對照抗體治療之小鼠中所觀察到的腫瘤生長速率相比，用抗PDL1抗體及抗MerTK抗體MTK-29或MTK-33治療小鼠會減少腫瘤生長速率(顯示為隨時間推移之腫瘤體積)。此等結果顯示，與用單獨抗PDL1抗體治療時所觀察到的腫瘤體積相比，當與抗PDL1抗體組合投與時，抗MerTK抗體MTK-29及MTK-33在減少腫瘤體積(減少之腫瘤生長速率)方面具有協同作用。
亦使用抗PDL1抗體及抗MerTK抗體MTK-29或抗MerTK抗體MTK-33之組合執行另一組活體內實驗。如圖 13 所示，與用對照抗體治療所觀察到的腫瘤體積相比，抗PDL1抗體之投與引起減少之腫瘤體積。與投與單獨抗PDL1抗體之小鼠相比，投與抗PDL1抗體及抗MerTK抗體MTK-29或MTK-33之組合導致腫瘤體積的較大減少。特定言之，與用單獨抗PDL1抗體治療之小鼠中所觀察到的腫瘤生長速率減少相比，與抗PDL1抗體組合投與之抗MerTK抗體MTK-29導致腫瘤生長速率之顯著較大(p ≤ 0.05)減少。在此等研究中，與用單獨抗PDL1抗體治療之小鼠中所觀察到的細胞生長速率相比，使用與抗MerTK抗體MTK-33組合之抗PDL1抗體的治療特別地顯著減少MC38結腸癌細胞的生長速率。與用對照抗體治療之動物中所觀察到的腫瘤體積相比，用20 mg/kg作為單一療法之抗MerTK抗體MTK-33治療的動物亦顯示腫瘤體積之減少(數據未顯示)。
圖 14A 、 14B 、 14C 及 14D (以及圖 15A 、 15B 、 15C 及 15D )分別顯示對照物、單獨抗PDL1抗體、與抗MerTK抗體MTK-29組合之抗PDL1抗體以及與抗MerTK抗體MTK-33組合之抗PDL1抗體在個別小鼠的腫瘤生長速率(隨時間推移之腫瘤體積)方面的差異。圖 14A 、 14B 、 14C 及 14D 係在y軸上使用線性標度繪製的。圖 15A 、 15B 、 15C 及 15D 係在y軸上使用Log2標度繪製之此等相同結果。如此等圖中所示，使用抗PDL1抗體及抗MerTK抗體MTK-29或MTK-33之組合治療導致在此等研究中檢查的9隻小鼠中之4隻存在腫瘤之接近完全衰退。
圖 16 顯示此等研究中之荷瘤小鼠的存活曲線。投與對照抗體之小鼠的中值存活時間為28天；投與單獨抗PDL1抗體之小鼠的中值存活時間為35天；投與與抗MerTK抗體MTK-29組合之抗PDL1抗體之小鼠的中值存活時間為35天；且投與與抗MerTK抗體MTK-33組合之抗PDL1抗體之小鼠的中值存活時間延伸超出腫瘤植入時間點後之最終42天：在此組合治療之後的第42天，9隻小鼠中之6隻仍活著。總之，圖12A、12B、13、14A、14B、14C、14D、15A、15B、15C、15D及16中呈現之結果證明與使用單獨抗PDL1抗體的治療相比，抗MerTK抗體MTK-29及MTK-33與抗PDL1抗體之組合在抑制腫瘤生長及改良癌症免疫療法方面具有增強功效。 實例 20 ：小鼠中之促發炎細胞介素或趨化介素產生的調節
如下檢查本發明之抗MerTK抗體對小鼠中之促發炎細胞介素或趨化介素產生的影響。對照抗體或抗MerTK抗體MTK-24、MTK-29、MTK-30或MTK-33經由腹膜內注射以20 mg/kg劑量投與至C57BL/6小鼠(每組N=5)。一小時後，自各動物抽取血液以用於量測促發炎細胞介素或趨化介素水準之變化。根據製造商之說明書，如下使用LEGENDplex小鼠促發炎趨化介素組(Biolegend，目錄號740451)及LEGENDplex小鼠巨噬細胞/小神經膠質細胞組(Biolegend，目錄號740846)。簡言之，來自小鼠之血清樣品用分析緩衝液稀釋4倍。標準混合液用分析緩衝液連續地稀釋。為了建立標準液，添加25 μl基質B、25 μl標準溶液及25 μl混合珠粒。為了建立樣品孔，添加25 μl分析緩衝液、25 μl經稀釋之血清樣品及25 μl混合珠粒。各板以500 rpm置於板式震蕩器上持續2小時。在洗滌該等板之後，25 μl偵測抗體添加至各孔中，且接著將板置於板式震蕩器上持續1小時。添加25 μl SA-PE，且接著使板震蕩持續30分鐘。在洗滌之後，樣品再懸浮於1X洗滌緩衝液中，且在BD FACS CantoII (Becton Dickinson, San Jose, CA)上進行採集，且使用LEGENDplex軟體(Biolegend)分析數據。
圖 17A 、 17B 、 17C 、 17D 及 17E 分別顯示在投與本發明之抗MerTK抗體之後，小鼠中的KC (CXCL1)、MCP1 (CCL2)、MIP-1α (CCL3)、MIP-1β (CCL4)及IL-6之水準。如此等圖中所示，與投與對照抗體之小鼠中所觀察到的水準相比，回應於小鼠中之抗MerTK抗體MTK-24、MTK-29、MTK-30及MTK-33投與，此等趨化介素或細胞介素中之每一者的水準均增加。此等結果顯示，抗MerTK抗體MTK-24、MTK-29、MTK-30或MTK-33以MerTK依賴性方式誘導小鼠外周細胞中之促發炎趨化介素或細胞介素產生。此等結果亦證明，本發明之抗MerTK抗體活體內有效增加促發炎趨化介素/細胞介素水準，因此提供進一步證據表明本發明之抗MerTK抗體有效激活抗腫瘤免疫反應。 實例 21 ：非人類靈長類動物中之促發炎細胞介素或趨化介素產生的調節
如下在食蟹獼猴中測試本發明之抗MerTK抗體對活體內促發炎細胞介素或趨化介素產生的影響。抗MerTK抗體MTK-15、MTK-16或MTK-21經由靜脈內注射以10 mg/kg劑量給予食蟹獼猴(每組N=3)。在給藥之前(給藥前)以及在給藥後1小時、6小時、12小時、24小時、72小時、168小時及216小時抽取血液。根據製造商之說明書，使用LEGENDplex NHP發炎組(Biolegend，目錄號740389)及LEGENDplex NHP趨化介素/細胞介素組(Biolegend，目錄號740317)來測定促發炎細胞介素及趨化介素之水準。簡言之，血漿樣品用分析緩衝液稀釋4倍。標準混合液用分析緩衝液連續地稀釋。為了建立標準孔，添加25 μl基質B、25 μl標準溶液及25 μl混合珠粒。為了建立樣品孔，添加25 μl分析緩衝液、25 μl經稀釋之血漿樣品及25 μl混合珠粒。板以500 rpm置於板式震蕩器上持續2小時。在洗滌之後，添加25 μl偵測抗體，且接著使板震蕩持續1小時。添加25 μl SA-PE，且接著使板震蕩持續30分鐘。在洗滌之後，樣品再懸浮於1X洗滌緩衝液中，且在BD FACS CantoII (Becton Dickinson, San Jose, CA)上進行採集，且使用LEGENDplex軟體(Biolegend)分析數據。各圖係繪製為在各特定時間點處之細胞介素/趨化介素水準相對於在給藥前之細胞介素/趨化介素水準的倍數增加。
圖 18A 、 18B 、 18C 及 18D 分別顯示獲自投與抗MerTK抗體MTK-15、MTK-16或MTK-21或媒劑對照物之食蟹獼猴的血漿中之MCP1 (CCL2)、MIP-1β (CCL4)、TNF及IFN水準變化之時程。MCP1之峰值水準出現於給藥後12小時左右。抗MerTK抗體MTK-15之投與導致MIP-1β、TNF及IFN水準之增加直至給藥後72小時。總之，此等結果證明抗MerTK抗體MTK15、MTK-16或MTK-21以MerTK依賴性方式增加食蟹獼猴外周細胞中之促發炎趨化介素或細胞介素產生。此等結果進一步指示在非人類靈長類動物中，本發明之抗MerTK抗體活體內有效增加MCP1、MIP-1b 、TNF及IFN (其為促發炎細胞介素/趨化介素)。
在投與抗MerTK抗體MTK-15或抗MerTK抗體MTK-29 (兩者均阻斷ProS與MerTK之結合，但不阻斷Gas6與MerTK之結合，且兩者均結合於MerTK的Ig2及FN1域)或投與抗MerTK抗體MTK-16 (其阻斷ProS及Gas6兩者與MerTK之結合且其結合於MerTK的Ig1域)之食蟹獼猴中執行兩項額外研究。在此等初步研究中，與投與抗MerTK抗體MTK-15或抗MerTK抗體MTK-29之動物相比，投與抗MerTK抗體MTK-16之動物呈現降低的全身毒性。此等初步結果表明，與阻斷ProS與MerTK之結合但不阻斷Gas6與MerTK之結合的抗MerTK抗體相比，阻斷ProS及Gas6兩者與MerTK之結合的抗MerTK抗體可提供較佳活體內安全性型態。此等初步結果亦表明，與結合於MerTK之Ig2及FN1域兩者的抗MerTK抗體相比，結合於MerTK之Ig1域的抗MerTK抗體可提供較佳活體內安全性型態。 實例 22 ：人類巨噬細胞中之磷酸化 AKT 分析
如下評估本發明之抗MerTK抗體在人類Gas6 (huGas6)蛋白存在下阻斷磷酸化AKT信號傳導之能力。分化之人類巨噬細胞用100 nM地塞米松(Sigma-Aldrich，目錄號D4902)及10 ng/ml huM-CSF (R&D systems，目錄號216MC25CF)處理持續2天以極化成M2c巨噬細胞。將100,000個細胞接種於96孔板中。次日，使細胞血清飢餓持續4小時。細胞在37℃用抗MerTK抗體處理持續30 min，且接著將200 nM huGas6 (R&D systems，目錄號885-GSB-050)添加至細胞中。在30 min培育之後，使細胞溶解以根據製造商之說明書測定磷酸化AKT (pAKT) (CisBio，目錄號63ADK082PEG)或總AKT (CisBio，目錄號64NKTPEG)均相時間解析螢光(HTRF)分析。pAKT信號針對總AKT信號正規化以定量最終pAKT活性。表 18
抗體 平均 IC50 (nM) 來自兩個不同供體
MTK-01 1.28
MTK-03 0.019
MTK-05 0.2464
MTK-07 0.371
MTK-09 1.665
MTK-11 2.627
MTK-12 1.283
MTK-15 2.8
MTK-16 7.74
MTK-17 3.422
MTK-18 1.30
MTK-19 0.902
MTK-20 1.483
MTK-22 0.531
MTK-29 5.37
MTK-33 4.28
圖 19A 及 19B 顯示本發明之例示性抗MerTK抗體(MTK-9、MTK-12、MTK-15、MTK-16、MTK-18、MTK-20、MTK-21、MTK-22、MTK-29及MTK-33)以劑量依賴性方式抑制Gas6介導之pAKT活性。上文表 18 顯示針對抗MerTK抗體阻斷Gas6介導之pAKT活性而測定的IC50值。如表 18 所示，本發明之抗MerTK抗體抑制配位體(例如Gas6)介導之MerTK信號傳導。此等結果進一步顯示，如藉由pAKT水準所量測，本發明之抗MerTK抗體抑制Gas6介導之MerTK信號傳導，其中IC50值介於0.019 nM至7.74 nM範圍內。 實例 23 ：抗 MerTK 抗體之域結合分析
執行以下研究以分析本發明之多種抗MerTK抗體在人類MerTK上的結合位點。
MerTK為TAM家族之成員，該家族之成員共享一種獨特的域結構，該結構含有一個N端區(N)、兩個免疫球蛋白樣域(Ig1及Ig2)、兩個纖維連接蛋白III型域(FN1及FN2)、一個近膜區(JM)及一個細胞內酪胺酸激酶域。MerTK在該蛋白質之N端且在該MerTK蛋白之近膜(JM)區中亦含有弱結構化區；在近膜區的裂解導致可溶性MerTK細胞外域(ECD)之釋放。人類MerTK ECD可分為以下域，其胺基酸序列顯示於下表 19 中：表 19
人類 MerTK 域 序列 SEQ ID NO:
人類MerTK ECD之N端域(N) AITEAREEAKPYPLFPGPFPGSLQTDHTPLLSLPHASGYQPALMFSPTQPGRPHTGNVAIPQVTSVE 449
人類MerTK ECD之免疫球蛋白樣域(Ig1) SKPLPPLAFKHTVGHIILSEHKGVKFNCSISVPNIYQDTTISWWKDGKELLGAHHAITQFYPDDEVTAIIASFSITSVQRSDNGSYICKMKINNEEIVSDPIYIEVQ 450
人類MerTK ECD之免疫球蛋白樣域(Ig2) GLPHFTKQPESMNVTRNTAFNLTCQAVGPPEPVNIFWVQNSSRVNEQPEKSPSVLTVPGLTEMAVFSCEAHNDKGLTVSKGVQIN 451
人類MerTK ECD之纖維連接蛋白III型域(FN1) IKAIPSPPTEVSIRNSTAHSILISWVPGFDGYSPFRNCSIQVKEADPLSNGSVMIFNTSALPHLYQIKQLQALANYSIGVSCMNEIGWSAVSPWILAST 452
人類MerTK ECD之纖維連接蛋白III型域(FN2) TEGAPSVAPLNVTVFLNESSDNVDIRWMKPPTKQQDGELVGYRISHVWQSAGISKELLEEVGQNGSRARISVQVHNATCTVRIAAVTRGGVGPFSDPV 453
人類MerTK ECD之近膜域區(JM) KIFIPAHGWVDYAPSSTPAPGNADPVLII 454
TAM家族之另一成員Axl蛋白與MerTK共享共同的域結構，在其ECD中具有以下域及相關胺基酸序列：表 20
人類 Axl 域 序列 SEQ ID NO:
人類Axl ECD之N端域(N) APRGTQAEESPFVGNPGNITGARGLTG 455
人類Axl ECD之免疫球蛋白樣域(Ig1) TLRCQLQVQGEPPEVHWLRDGQILELADSTQTQVPLGEDEQDDWIVVSQLRITSLQLSDTGQYQCLVFLGHQTFVSQPGYVGLE 456
人類Axl ECD之免疫球蛋白樣域(Ig2) GLPYFLEEPEDRTVAANTPFNLSCQAQGPPEPVDLLWLQDAVPLATAPGHGPQRSLHVPGLNKTSSFSCEAHNAKGVTTSRTATITVLP 457
人類Axl ECD之纖維連接蛋白III型域(FN1) QQPRNLHLVSRQPTELEVAWTPGLSGIYPLTHCTLQAVLSDDGMGIQAGEPDPPEEPLTSQASVPPHQLRLGSLHPHTPYHIRVACTSSQGPSSWTHWLPVETPEG 458
人類Axl ECD之纖維連接蛋白III型域(FN2) VPLGPPENISATRNGSQAFVHWQEPRAPLQGTLLGYRLAYQGQDTPEVLMDIGLRQEVTLELQGDGSVSNLTVCVAAYTAAGDGPWS 459
人類Axl ECD之近膜域(JM) LPVPLEAWRPGQAQPVHQLVKEPSTPAFSWPWW 460
在此等實驗中，一系列嵌合蛋白經重組表現，其中人類MerTK之各域與相應人類Axl域交換。所得嵌合蛋白重組表現於Expi293細胞中，且本發明之多種抗MerTK抗體的結合接著針對其結合Axl/MerTK域交換之嵌合體之能力進行分析。具有信號序列(在MerTK構築體中為MGWSCIILFLVATATGVHS (SEQ ID NO:461)，且在Axl構築體中為MGWSCIILFLVATATG (SEQ ID NO:462))及連接子+His+Avi標籤(GGSGHHHHHHGGGLNDIFEAQKIEWHE；SEQ ID NO:463)的編碼域交換之嵌合體及缺失突變體之DNA係藉由基因合成來製備且經選殖至表現載體pcDNAtopo3.4 (GeneArt, ThermoFisher)中。根據推薦之程序(ThermoFisher)，Expi293細胞用20 μg質體及ExpiFectamine轉染。經轉染細胞在37℃及5% CO2 下在震蕩下在20 mL培養物中生長持續四天。細胞藉由離心集結成粒，且上清液經由0.2 μM過濾器真空過濾。
表 21 顯示為用於此等研究中而產生之多種Axl/MerTK域交換之嵌合體的組態。在表 21 中，M (MerTK)或A (Axl)指示來自該蛋白之特定域包括(亦即，交換)於相應的嵌合蛋白構築體中；N (N端域)、Ig1 (免疫球蛋白樣域1)、Ig2 (免疫球蛋白樣域2)、FN1 (纖維連接蛋白III型域1)、FN2 (纖維連接蛋白III型域2)及JM (近膜域)。表 21
Axl/MerTK 嵌合 N Ig1 Ig2 FN1 FN2 JM
完整MerTK M M M M M M
具有交換之N的MerTK A M M M M M
具有交換之Ig1的MerTK M A M M M M
具有交換之Ig2的MerTK M M A M M M
具有交換之FN1的MerTK M M M A M M
具有交換之FN2的MerTK M M M M A M
具有交換之JM的MerTK M M M M M A
完整Axl A A A A A A
具有交換之N的Axl M A A A A A
具有交換之Ig1的Axl A M A A A A
具有交換之Ig2的Axl A A M A A A
具有交換之FN1的Axl A A A M A A
具有交換之FN2的Axl A A A A M A
具有交換之JM的Axl A A A A A M
缺失N之MerTK    M M M M M
缺失N/Ig1之MerTK       M M M M
缺失N/Ig1/Ig2之MerTK          M M M
缺失N/Ig1/Ig2/FN1之MerTK             M M
缺失N/Ig1/Ig2/FN1/FN2之MerTK                M
使用Carterra LSA藉由表面電漿共振(SPR)測試本發明之抗MerTK抗體與此等域交換之嵌合體或缺失突變體(如上文所述而製備)的結合。根據製造商之說明書(先前所述)，藉由胺偶合將經純化抗MerTK抗體一式兩份固定於HC30M晶片(Carterra)上。含有該等構築體之上清液用含有0.5 mg/mL BSA (HBS-TE, Carterra)之運行緩衝液1:1稀釋且注射於經固定抗體上。在每次構築體注射之後，用10 mM甘胺酸pH2.0使表面再生。使用Carterra Epitope軟體分析感測圖，以鑑別構築體結合模式。評估與具有域缺失或Axl域交換之MerTK構築體的結合之損失，及/或與具有MerTK域交換之Axl構築體的結合之增益。使用此等研究中之數據來建構抗MerTK抗體及其與人類MerTK之多個域的結合之域結合圖。
除了本發明之抗MerTK抗體以外，以下抗MerTK抗體亦用於此等研究：大鼠抗小鼠MerTK抗體DS5MMER (eBioscience，純系ID DS5MMER，大鼠IgG2a)、小鼠抗人類MerTK抗體H1 (BioLegend，純系ID: 590H11G1E3，小鼠IgG1)、小鼠抗人類MerTK抗體H2 (R&D systems，純系ID：125518，小鼠IgG2b)、小鼠抗人類MerTK抗體H3 (R&D systems，純系ID 125508，小鼠IgG2b)、小鼠抗人類MerTK抗體H6 (eBioscience，純系ID：A3KCAT，小鼠IgG1)、小鼠抗人類MerTK抗體H7 (Sino Biological，純系ID：09，小鼠IgG2b)、人類抗人類MerTK抗體M6 (揭示於WO2016/106221中，huIgG1 LALAPS)及人類抗人類MerTK抗體CDX AB3000 (揭示於WO2020/106461中)。表 22
抗體 結合域
H6 N端
MTK-10 Ig1
MTK-16
MTK-21
MTK-25
MTK-33
M6
MTK-22
MTK-06 Ig2/FN1
MTK-15
MTK-29
MTK-30
CDX AB3000
H1
H2
H3 近膜域
H7
此等結合研究之結果顯示於上文表 22 中。如表 22 所示，抗MerTK抗體H6結合於含有人類MerTK之N端區的嵌合蛋白構築體。抗MerTK抗體MTK-10、MTK-16、MTK-21、MTK-25、MTK-33及M6結合於含有MerTK Ig1域之構築體。抗MerTK抗體MTK-22結合於含有MerTK Ig1之嵌合蛋白構築體；然而，抗MerTK抗體MTK-22結合受MerTK FN1域之存在影響。抗MerTK抗體MTK-06、MTK-15、MTK-29、MTK-30、CDX AB3000、H1及H2僅結合於含有MerTK Ig2及FN1域兩者之嵌合蛋白構築體。抗MerTK抗體H3及H7結合於含有MerTK近膜區之嵌合蛋白構築體。上文所測試之抗MerTK抗體均未結合於人類Axl之ECD域(數據未顯示)。
此等結果顯示，阻斷Gas6及ProS兩者與MerTK之結合的本發明之抗MetTK抗體一般結合於人類MerTK之Ig1域。此等結果亦顯示，僅阻斷ProS與MerTK之結合的本發明之抗MerTK抗體一般結合於兩個Ig2/FN1域之組合。 實例 24 ：抗 MerTK 抗體治療在基因轉殖小鼠結腸癌模型中之效果
使用活體內小鼠結腸癌模型，如下執行活體內抗MerTK抗體對腫瘤生長之影響，其中小鼠係基因轉殖的以包括人類MerTK。MC38小鼠癌細胞經皮下植入huMerTK基因敲入(KI)小鼠(Ozgene, Perth, Australia)之剃毛右側腹上，其中人類MerTK經引入至小鼠基因體中。當腫瘤大小達到大約80-130 mm3 體積時，小鼠每週兩次用10 mg/kg MTK-33加上3 mg/kg抗PDL1 (純系BM1)、10 mg/kg MTK-16加上3 mg/kg抗PDL1、單獨3 mg/kg抗PDL1或10 mg/kg對照抗體治療。每週三次量測腫瘤體積。
圖 20A 顯示，與用單獨抗PDL1抗體或用對照抗體治療之小鼠中所觀察到的腫瘤生長速率相比，抗PDL1抗體與抗MerTK抗體MTK-16或抗MerTK抗體MTK-33之組合適度地減少腫瘤生長速率。圖 20B 顯示各組中之個別小鼠的腫瘤生長，且抗PDL1與MTK-16或MTK-33之組合治療導致9隻小鼠中之3隻或4隻存在腫瘤完全衰退。因此，此數據顯示結合與抗PDL1抗體組合之抗MerTK抗體MTK-16或MTK-33的人類MerTK會改良抑制腫瘤生長之功效 實例 25 ：鼠科動物抗 MERTK 小鼠抗體之人類化
如下產生本發明之某些親本小鼠抗MerTK抗體的人類化變異體。
親本小鼠抗MerTK抗體MTK-16含有重鏈可變區，其包含胺基酸序列：LIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTNHGMNWVKQDPGKGLKWMGWINTYTGEPTYADDFKGRFVFSMETSASAAFLQINNLKNEDTATYFCARKGVTAARYFDYWGQGTTLTVSS (SEQ ID NO:20)，及輕鏈可變區，其包含胺基酸序列：DIVMTQSPKFMSTSVGDRVSITCKASQNVRTAVAWYKKKPGQSPKALINLASNRHTGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVQSEDLADYFCLQHWNYPLTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO:55)。
親本小鼠抗MerTK抗體MTK-33含有重鏈可變區，其包含胺基酸序列：QVQLQQPGPELVRPGTSVKLSCKASGYTFTSYWMHWIKQRPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFKGKATLTVDTSSSTAYLQLSSLTSEDSAVYYCAREAGTRGYFDYWGQGTTLTVSS (SEQ ID NO:37)，及輕鏈可變區，其包含胺基酸序列：SIVMTQTPKFLLVSAGDRVIITCKASQSVSNTVAWYQQKPGQSPKLLIYYASNRYTGVPDRFTGSGYGTDFTFTISTVQAEDLAVYFCQQDYRSPFTFGSGTQLEMK (SEQ ID NO:72)。
親本小鼠抗MerTK抗體MTK-15含有重鏈可變區，其包含胺基酸序列：QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTNYGVHWVKQAPGKGLKWMGWINTYTGEPTYADDFKGRFAFSLETSASTAYLQINNLKNEDMATYFCARGNRYAYMDYWGQGTSVTVSS (SEQ ID NO:19)，及輕鏈可變區，其包含胺基酸序列：QIVLSQSPAILSASPGEKVTMTCRASSSVSYMHWYQQKSGSSPKPWIYATSNLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISRVEAEDAATYYCQQWSSNPRTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO:54)。
親本小鼠抗MerTK抗體MTK-29含有重鏈可變區，其包含胺基酸序列：QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKSSGFTFTTYGMSWVKQAPGKGLKWMGWINTYSGVPTYTDDFKGRFAFSLETSASTASLQINNLKNEDTATYFCARYTNYGYFDYWGQGTTLTVSS (SEQ ID NO:33)，及輕鏈可變區，其包含胺基酸序列：QIVLSQSPAILSASPGEKVTMTCRATSSVGYMHWYQQKPGSSPKPWIYATSNLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISRVEAEHAATYYCQQWGSNPFTFGSGTKLEIK (SEQ ID NO:68)。
一種人類化非人類抗體之方法係將來自非人類(例如鼠科動物)抗體之CDR移植至人類抗體受體構架上。歸因於其構架中之擾動，該CDR移植可導致人類化抗體對其標靶之親和力的減弱或完全損失。結果，人類構架中之某些胺基酸殘基可需要由鼠科動物抗體構架中之相應位置的胺基酸殘基置換(稱作反向突變)，以便恢復由人類化引起之親和力減弱或損失。因此，必須確定在所選擇之人類抗體生殖系受體構架的背景下欲經置換之胺基酸殘基，使得人類化抗體實質上保留功能及互補位。另外，為了良好可製造性及下游開發，需要保留或改良之熱穩定性及溶解性。
簡言之，使欲經人類化之小鼠抗MerTK單株抗體的VH及VL胺基酸序列與取自IMGT (http://www.imgt.org/)之人類VL、VH、LJ及HJ功能性生殖系胺基酸序列進行比較。此等分析排除假基因及開放閱讀框。每一種小鼠單株抗體(查詢)，選擇一或兩個最相似之VH及一個最相似之VL生殖系胺基酸序列，且與最相似的VJ及HJ基因組合，從而產生一或兩個人類化胺基酸序列。欲移植至人類構架上之CDR根據AbM定義來定義。
在使用MOE (Molecular Operating Environment, Chemical Computing Group, Montreal, Canada)之BioMOE模塊人類化小鼠抗MerTK單株抗體MTK-15及MTK-29的過程中使用基於結構之抗體建模。簡言之，使小鼠單株抗體MTK-15及MTK-29之VH及VL胺基酸序列與取自如上文所提及的IMGT (http://www.imgt.org/)之人類VL、VH、LJ及HJ功能性生殖系胺基酸序列進行比較。選擇三個最相似之VH及三個最相似之VL生殖系胺基酸序列，且與最相似的VJ及HJ基因組合，從而產生五個至八個人類化胺基酸序列。
使用查詢及人類化胺基酸序列，以使用MOE (Molecular Operating Environment, Chemical Computing Group, Montreal, Canada)之BioMOE模塊或Antibody Modeler模塊創建Fv同源性模型。經由完整抗體同源性建模過程，將AMBER10:EHT力場分析用於能量最小化。基於所獲得的Fv同源性模型，藉由MOE所提供之評分指標來計算、分析且分選分子描述符，諸如VL與VH之間的相互作用能、基於座標之等電點(3D pI)、疏水性補丁及帶電表面積。使用此等分子描述符來對人類化單株抗體進行優先排序以用於下游實驗程序，包括蛋白質表現、純化、結合親和力研究及功能分析。
MOE之BioMOE模塊提供一種工具「突變位點特性」，以使潛在殘基顯現且分類用於反向突變。在本文中，反向突變係定義為胺基酸取代，其恢復為初始查詢胺基酸序列來置換人類化胺基酸序列。使用此工具，使初始查詢(參考)個別地與針對一級胺基酸序列與3D Fv同源性模型之3D結構兩者所選擇的人類化變異體進行比較。
參考(亦即，親本)抗體與人類化變異體之間的變化係基於胺基酸類型差異、與CDR殘基之相互作用電勢、針對VL / VH配對之衝擊電勢以及在CDR中及CDR附近的疏水性及帶電表面積中之電勢變化進行分類。
個別地評估具有顯著電荷差異或含有強H鍵相互作用之CDR或VL/VH界面附近的突變，且將顯著破壞性突變恢復為初始查詢殘基。
亦執行人類化抗MerTK抗體MTK-33、MTK-29及MTK-16之親和力成熟。簡言之，選擇性地對重鏈或輕鏈中之某些胺基酸殘基進行突變誘發，且經由額外多輪篩選來選擇改良結合之突變體。此過程同時改良特異性、物種交叉反應性及可開發性。本文所述之親和力成熟抗MerTK抗體的表徵包括Carterra LSA上之SPR親和力量測及人類巨噬細胞上之胞葬作用阻斷分析。在多輪親和力成熟之後，獲得具有所需親和力之抗MerTK抗體。可變重鏈(VH)及可變輕(VL)鏈之胺基酸序列提供於下文表 23 (MTK-15變異體)、表 24 (MTK-16變異體)、表 25 (MTK-29變異體)及表 26 (MTK-33變異體)中。在表 23 、 24 、 25 及 26 中，各鏈中之高變區(HVR)加下劃線。
表 27 及表 28 分別提供抗MerTK抗體MTK-15變異體之重鏈HVR及輕鏈HVR的胺基酸序列。表 29 及表 30 分別提供抗MerTK抗體MTK-16變異體之重鏈HVR及輕鏈HVR的胺基酸序列。表 31 及表 32 分別提供抗MerTK抗體MTK-29變異體之重鏈HVR及輕鏈HVR的胺基酸序列。表 33 及表 34 分別提供抗MerTK抗體MTK-33變異體之重鏈HVR及輕鏈HVR的胺基酸序列。表 23
抗體 重鏈可變 SEQ ID NO: 輕鏈可變 SEQ ID NO:
MTK-15.1 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGVH WVRQAPGQGLEWMGWINTYTGEPTYAQGFTG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARGNRYAYQDY WGQGTLVTVSS 234 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVSYMH WYQQKPGQAPRPLIYATSNLAS GIPARFSGSGSGTSYTLTISSLEPEDFAVYYCQQWSSNPRT FGGGTKVEIK    247
MTK-15.2 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGVH WVRQAPGQGLEWMGWGNTYTGEPTYAQGFTG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARGNRYAYMDY WGQGTLVTVSS 235 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVSYMH WYQQKPGQAPRPLIYATSNLAS GIPARFSGSGSGTSYTLTISSLEPEDFAVYYCQQWSSNPRT FGGGTKVEIK    247
MTK-15.3 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGVH WVRQAPGQGLEWMGWINTYTGEPTYAQGFTG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARGNRYAYMDY WGQGTLVTVSS 236 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSHVSYMH WYQQKPGQAPRPLIYATSNLAS GIPARFSGSGSGTSYTLTISSLEPEDFAVYYCQQWSSNPRT FGGGTKVEIK    248
MTK-15.4 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGVH WVRQAPGQGLEWMGWINTYTGEPTYAQGFTG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARGNRYAYMDY WGQGTLVTVSS 236 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVGYMH WYQQKPGQAPRPLIYATSNLAS GIPARFSGSGSGTSYTLTISSLEPEDFAVYYCQQWSSNPRT FGGGTKVEIK    249
MTK-15.5 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGVH WVRQAPGQGLEWMGWINTYTGEPTYAQGFTG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCTRGTRYAYMDY WGQGTLVTVSS 237 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVGYMH WYQQKPGQAPRPLIYATSNLAS GIPARFSGSGSGTSYTLTISSLEPEDFAVYYCQQWSSNPRTFGGGTKVEIK    249
MTK-15.6 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGVH WVRQAPGQGLEWMGWINTYTGEPYYAQGFTG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARGNRYAYMDY WGQGTLVTVSS 238 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVGYMH WYQQKPGQAPRPLIYATSNLAS GIPARFSGSGSGTSYTLTISSLEPEDFAVYYCQQWSSNPRT FGGGTKVEIK    249
MTK-15.7 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGVH WVRQAPGQGLEWMGWINTYTGEPTYAQGFTG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCVRGNRYAYMDY WGQGTLVTVSS    239 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSGVSYMH WYQQKPGQAPRPLIYATSNLAS GIPARFSGSGSGTSYTLTISSLEPEDFAVYYCQQWSSNPRT FGGGTKVEIK    250
MTK-15.8 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGVH WVRQAPGQGLEWMGWINTYTGEPTYAQGFTG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARGVRYAYMDY WGQGTLVTVSS 240 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVGYMH WYQQKPGQAPRPLIYATSNLAS GIPARFSGSGSGTSYTLTISSPEPEDFAVYYCQQWSSNPRT FGGGTKVEIK    251
MTK-15.9 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGVH WVRQAPGQGLEWMGWINTYTGEPTYAQGFTG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARGYRYAYMDY WGQGTLVTVSS    241 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSTSYMH WYQQKPGQAPRPLIYATSNLAS GIPARFSGSGSGTSYTLTISSLEPEDFAVYYCQQWSSNPRT FGGGTKVEIK    252
MTK-15.10 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFANYGVH WVRQAPGQGLEWMGWINTYQGEPTYAQGFTG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCTRGARYAYMDY WGQGTLVTVSS    242 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVGYMH WYQQKPGQAPRPLIYATSNLAS GIPARFSGSGSGTSYTLTISSLEPEDFAVYYCQQWSSNPRT FGGGTKVEIK    249
MTK-15.11 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFANYGVH WVRQAPGQGLEWMGWINTYEGEPTYAQGFTG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARGNRYAYQDY WGQGTLVTVSS 243 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVSYMH WYQQKPGQAPRPLIYATSNLAS GIPARFSGSGSGTSYTLTISSLEPEDFAVYYCQQWSSNPRT FGGGTKVEIK    247
MTK-15.12 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFANYGVH WVRQAPGQGLEWMGWINTYQGEPTYAQGFTG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARGVRYAYMDY WGQGTLVTVSS    244 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVGYMH WYQQKPGQAPRPLIYATSNLAS GIPARFSGSGSGTSYTLTISSPEPEDFAVYYCQQWSSNPRT FGGGTKVEIK    251
MTK-15.13 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGVH WVRQAPGQGLEWMGWINTYTGEPTYAQGFTG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARGNRYAYEDY WGQGTLVTVSS    245 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVQYMH WYQQKPGQAPRPLIYATSNLAS GIPARFSGSGSGTSYTLTISSLEPEDFAVYYCQQWSSNPRT FGGGTKVEIK    253
MTK-15.14 qvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnygvh wvrqapgqglewmgwintytgeptyaqgftg rfvfsldtsvstaylqicslkaedtavyycargnryaymdywgqgtlvtvss    246 Eivltqspatlslspgeratlscrasssvsymh wyqqkpgqaprpliyatsnlas giparfsgsgsgtsytltisslepedfavyycqqwssnprt fgggtkveik    247
MTK-15.15 qvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnygvh wvrqapgqglewmgwintytgeptyaqgftg rfvfsldtsvstaylqicslkaedtavyycargnryaymdy wgqgtlvtvss    246 qivltqspgtlslspgeratlscrasssvsymh wyqqkpgqaprpliyatsnlas gipdrfsgsgsgtsytltisrlepedfavyycqqwssnprt fgggtkveik    254
表 24
抗體 重鏈可變 SEQ ID NO: 輕鏈可變 SEQ ID NO:
MTK-16.1 qvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnhgmn wvrqapgqglewmgwintytgeptyaqgftg rfvfsldtsvstaylqisslkaedtavyycarkgvtaaryfdy wgqgtlvtvss    255 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQNVRTAVA WYQQKPGKAPKRLIYLASNRHT GVPSRFSGSGSGTEFTLTISNLQPEDFATYYCLQHWNYPLT FGGGTKVEIK    257
MTK-16.2 Qvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnhgmn wvrqapgqglewmgwintytgeptyaddfkg rfvfsldtsvstaylqisslkaedtavyycarkgvtaaryfdy wgqgtlvtvss    256 DiqmtqspsslsasvgdrvtitcrasQNVRTAVA wyqqkpgkapkrliyLASNRHT gvpsrfsgsgsgteftltisnlqpedfatyycLQHWNYPLT FGGGTKLEIK    258
表 25
抗體 重鏈可變 SEQ ID NO: 輕鏈可變 SEQ ID NO:
MTK-29.1 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYIFTSYGLS WVRQAPGQGLEWMGWINTYSGVPTYAQGFTG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARYTNYGIFDY WGQGTLVTVSS 259 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVGYMH WYQQKPGQAPRPLIYATSNLAS GIPARFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQWGSWPFT FGQGTKLEIK    274
MTK-29.2 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGFTFTTYGMS WVRQAPGQGLEWMGWINTYSGVPTYTDDFKG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARYTNYGIFDY WGQGTLVTVSS 260 DIQltqspsflsasvgdrvtitcrasssvgymh wyqqkpgkapkpliyatsnlas gvpsrfsgsgsgteftltisslqpedfatyycqqwgsipft fgggtkveik    275
MTK-29.3 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGFTFTTYGMS WVRQAPGQGLEWMGWINTYSGVPAYTDDFKG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARYTNYGVFDY WGQGTLVTVSS    261 DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVGYMH WYQQKPGKAPKLLIYATSNLAS GVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQWGSLPFT FGQGTKLEIK 276
MTK-29.4 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASSYTFTTYGMS WVRQAPGQGLEWMGWINTYSGVPTYTDDFKG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARYTNYGVFDY WGQGTLVTVSS    262 Diqltqspsflsasvgdrvtitcrasssvgymh wyqqkpgkapklliyatsnlaq gvpsrfsgsgsgteftltisslqpedfatyycqqwgslpft fgqgtkleik 277
MTK-29.5 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYIFTSYGLS WVRQAPGQGLEWMGWINTYSGVPTYTDDFKG RFVFSLDTSVSTAYLQISPLKAEDTAVYYCARYTNYGVFDY WGQGTLVTVSS    263 DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVGYMH WYQQKPGKAPKLLIYATSNLAQ GVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQWGSLPFT FGQGTKLEIK 277
MTK-29.6 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASSYTFTTYGMS WVRQAPGQGLEWMGWINTMSGVPTYTDDFKG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARYTNYGVFDY WGQGTLVTVSS    264 DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVGYMH WYQQKPGKAPKLLIYATSNLAQ GVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQWGSLPFT FGQGTKLEIK 277
MTK-29.7 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASSYTFTTYGMS WVRQAPGQGLEWMGWINTYSGVPSYTDDFKA RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARYTNYGVFDY WGQGTLVTVSS    265 DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVGYMH WYQQKPGKAPKLLIYATSNLAQ GVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQWGSLPFT FGQGTKLEIK 277
MTK-29.8 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYIFTTYGLS WVRQAPGQGLEWMGWINTYSGVPTYTDDFKG RFVFSLDTNVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARYTNYGVFDY WGQGTLVTVSS 266 DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVGYMH WYQQKPGKAPKLLIYATSNLAQ GVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQWGSLPFT FGQGTKLEIK 277
MTK-29.9 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYIFTSYGLS WVRQAPGQGLEWMGWINTYSGVPTYTDDFKG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARYTNYGVFDY WGQGTLVTVSS 267 DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVGYMH WYQQKPGKAPKLLIYATSNLAQ GVPSRFSGSGSGTGFTLTISSLQPEDFATYYCQQWGSLPFT FGQGTKLEIK    278
MTK-29.10 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKTSSYTFTTYGMS WVRQAPGQGLEWMGWINTYSGVPTYTDDFKG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARYTNYGVFDY WGQGTLVTVSS 268 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVGYMH WYQQKPGQAPRLLIYATSNLAS GIPARFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQWGSLPFT FGGGTKLEIK    279
MTK-29.11 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASSYTFTTYGMS WVRQAPGQGLEWMGWINTDSGVPTYTDDFKG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARYTNYGVFDY WGQGTLVTVSS 269 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVGYMH WYQQKPGQAPRLLIYATSNLAS GIPARFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQWGSLPFT FGGGTKLEIK 279
MTK-29.12 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASSYTFTTYGMS WVRQAPGQGLEWMGWINTMSGVPTYTDDFKG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARYTNYGVFDY WGQGTLVTVSS 264 DIQLTQSPGFLSASVGDRVTITCRASSSVGYMH WYQQKPGKAPKLLIYATSNLAQ GVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQWGSLPFT FGQGTKLEIK 280
MTK-29.13 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASSYTFTTYGMS WVRQAPGQGLEWMGWINTASGVPTYTDDFKG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARYTNYGVFDY WGQGTLVTVSS    270 DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVGYMH WYQQEPGKAPKLLIYATSNLAQ GVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQWGSLPFT FGQGTKLEIK    281
MTK-29.14 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASSYTFTTYGMS WVRQAPGQGLEWMGWINTYSGVPSYTDDFKA RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARYTNYGVFDY WGQGTLVTVSS 265 DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVGYMH WYQQKPGKAPKLLIYATSNLAQ GVPSRFSGSGSGTEFTLTIFSLQPEDFATYYCQQWGSLPFT FGQGTKLEIK    282
MTK-29.15 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASSYTFTTYGMS WVRQAPGQGLEWMGWINTMSGVPTYTDDFKG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARYTNYGVFDY WGQGTLVTVSS 264 DIQLTQSPSFPSASVGDRVTITCRASSSVGYMH WYQQKPGKAPKLLIYATSNLAQ GVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQWGSLPFT FGQGTKLEIK    283
MTK-29.16 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYIFTSYGLS WVRQAPGQGLEWMGWVNTYSGVPTYTDDFKG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARYTNYGVFDY WGQGTLVTVSS    271 DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVGYMH WYQQKPGKAPKLLIYATSNLAQ GVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQWGRLPFT FGQGTKLEIK    284
MTK-29.17 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYIFTSYGLS WVRQAPGQGLEWMGWINTYSGVPTYAQGFTG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARYTNYGVFDY WGQGTLVTVSS    272 DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRSSSSVGYMH WYQQKPGKAPKLLIYATSNLAQ GVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQWGSLPFT FGQGTKLEIK 285
MTK-29.18 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYIFTSYGLS WVRQAPGQGLEWMGWVNTYSGVPTYTDDFKG RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARYTNYGVFDY WGQGTLVTVSS    271 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSTVGYMH WYQQKPGQAPRLLIYATSNLAS GIPARFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQWGSLPFT FGGGTKLEIK 286
MTK-29.19 qvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgftfttygms wvrqapgqglewmgwintysgvptyaqgftg rfvfsldtsvstaylqicslkaedtavyycarytnygyfdy wgqgtlvtvss    273 qivltqspgtlslspgeratlscratssvgymh wyqqkpgqaprpliyatsnlas gipdrfsgsgsgtsytltisrlepedfavyycqqwgsnpft fgqgtkleik 287
MTK-29.20 qvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgftfttygms wvrqapgqglewmgwintysgvptyaqgftg rfvfsldtsvstaylqicslkaedtavyycarytnygyfdy wgqgtlvtvss 273 Qivltqspatlslspgeratlscratssvgymh wyqqkpglaprpliyatsnlas gipdrfsgsgsgtsytltisrlepedfavyycqqwgsnpft fgqgtkleik 288
MTK-29.21 qvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgftfttygms wvrqapgqglewmgwintysgvptyaqgftg rfvfsldtsvstaylqicslkaedtavyycarytnygyfdy wgqgtlvtvss    273 Qivltqspatlslspgeratlscratssvgymh wyqqkpgqaprpliyatsnlas giparfsgsgsgtsytltisslepedfavyycqqwgsnpft fgqgtkleik 289
表 26
抗體 重鏈可變 SEQ ID NO: 輕鏈可變 SEQ ID NO:
MTK-33.1 qvqlvqsgaevkkpgasvkvsckasgytftsywmh wvrqapgqglewigvidpsdnyinynqkfqg rvtmtrdtststvymelsslrsedtavyycareawtrgyfny wgqgtlvtvss    290 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQSVSNTVA WYQQKPGKAPKLLIYYASLRYT GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQDYRSPFT FGQGTKLEIK 309
MTK-33.2 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTSTSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFQG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTLVTVSS    291 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASGSVSNTVA WYQQKPGKAPKLLIYYASNRYT GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQDYRSPFT FGQGTKLEIK    310
MTK-33.3 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFQG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAWTRGYFDY WGQGTLVTVSS    292 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASRSVSNTVA WYQQKPGKAPKLLIYYASNRYT GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQDYRSPFT FGQGTKLEIK 311
MTK-33.4 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINMNQKFQG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTLVTVSS    293 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQSVSNTVA WYQQKPGKAPKLLIYYASNRYT GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQDRRSPFT FGQGTKLEIK 312
MTK-33.5 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCMASGYTFGSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFQG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTLVTVSS    294 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQSVSNTVA WYQQKPGKAPKLLIYYASNRET GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIGTYYCQQDYRSPFT FGQGTKLEIK 313
MTK-33.6 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCMASGYTFRSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFQG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTLVTVSS    295 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASRSVSNTMA WYQQKPGKAPKLLIYYASNRYT GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQDYRSPFT FGQGTKLEIK 314
MTK-33.7 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNAKFQG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTLVTVSS    296 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCGASQSVSNTVA WYQQKPGKAPKLLIYYASNRYT GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQDYRSPFT FGQGTKLEIK 315
MTK-33.8 qvqlvqsgaevkkpgasvkvsckasgytftsywmh wvrqapgqglewigvidpsdnyinynqkfqg rvtmtrdtststvymelsslrsedtavyycareawtrgyfny wgqgtlvtvss    290 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQSVSRTVA WYQQKPGKAPKLLIYYASNRYT GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQDYRSPFT FGQGTKLEIK 316
MTK-33.9 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVIDPSDRYINYNQKFQG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTLVTVSS    297 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASASVSNTVA WYQQKPGKAPKLLIYYASNRYT GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQDYRSPFT FGQGTKLEIK 317
MTK-33.10 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASSYSFTSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTLVTVSS 298 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQAGQSVSNTVA WYQQKPGKAPKLLIYYASNRYT GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQDYRSPFT FGQGTKLEIK 318
MTK-33.11 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFQG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAWTRGYFDY WGQGTLVTVSS    292 Diqmtqspsslsasvgdrvtitcqasrsvrntva wyqqkpgkapklliyyasnryt gvpsrfsgsgsgtdftftisslqpediatyycqqdyrspft fgqgtkleik 319
MTK-33.12 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFVSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTLVTVSS    299 Diqmtqspsslsasvgdrvtitcqasqsvsntva wyqqkpgkapklliyyasnryt gvpsrfsgsgsgtdftftisslqpediatyycrqdtrspft fgqgtklelk 320
MTK-33.13 qvqlvqsgaevkkpgasvkvsckasgytftsywmh wvrqapgqglewigvidpsdnyinynqkfqg rvtmtrdtststvymelsslrsedtavyycareagtrgyfdy wgqgtlvtvss    300 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASRSVSNTVA WYQQKPGKAPKLLIYYASNRYT GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQDYRSPFT FGQGTKLEIK 311
MTK-33.14 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTLVTVSS    301 diqmtqspsslsasvgdrvtitcqasqsvsntva wyqqkpgkapklliyyasnryt gvpsrfsgsgsgtdftftisslqpediatyycqqdyrspft fgqgtkleik 321
MTK-33.15 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFQV RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTLVTVSS    302 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASRSVSNTVA WYQQKPGKAPKLLIYYASNRYT GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQDMRSPFT FGQGTKLEIK 322
MTK-33.16 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASWYTFTSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFQG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTLVTVSS    303 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASRSVSNTVA WYQQKPGKAPKLLIYYASNRYT GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQDYRSPFT FGQGTKLEIK 311
MTK-33.17 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVIAPSDNYINYNQKFRG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTLVTVSS    304 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASRSVSNTVA WYQQKPGKAPKLLIYYASNRYT GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQDMRSPFT FGQGTKLEIK 322
MTK-33.18 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVISPSDNYINYNQKFRG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTLVTVSS    305 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASRSVSNTVA WYQQKPGKAPKLLIYYASNRYT GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQDMRSPFT FGQGTKLEIK 322
MTK-33.19 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTLVTVSS    301 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASRSVSATVA WYQQKPGKAPKLLIYYASNRYT GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQDMRSPFT FGQGTKLEIK 323
MTK-33.20 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTLVTVSS    301 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASRSVSNTVA WYQQKPGKAPKLLIYYASNRYT GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCAQDMRSPFT FGQGTKLEIK 324
MTK-33.21 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTLVTVSS    301 Diqmtqspsslsasvggrvtitcqasrsvsntva wyqqkpgkapklliyyvsnryt gvpsrfsgsgsgtdftftisslqpediatyycqqdmrspft fgqgtkleik 325
MTK-33.22 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKLRG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTLVTVSS    306 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASRSVSNTVA WYQQKPGKAPKLLIYYASNRRT GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQDMRSPFT FGQGTKLEIK 326
MTK-33.23 qvqlvqsgaevkkpgasvkvsckasgytftsywmh wvrqapgqglewigvidpsdnyinynqkfrg rvtmtrdtststvymelsslrsedtavyycareaytrgyfdy wgqgtlvtvss    307 Diqmtqspsslsasvgdrvtitciasrsvsntva wyqqkpgkapklliyyasnryt gvpsrfsgsgsgtdftftisslqpediatyycqqdmrspft fgqgtkleik 327
MTK-33.24 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASSYTFTSYWMH WVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDY WGQGTLVTVSS    308 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASRSVSRTVA WYQQKPGKAPKLLIYYASNRYT GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQDMRSPFT FGQGTKLEIK 328
表 27
抗體 HVR-H1 SEQ ID NO: HVR-H2 SEQ ID NO: HVR-H3 SEQ ID NO:
MTK-15.1 NYGVH 83 WINTYTGEPTYAQGFTG 329 GNRYAYQDY 334
MTK-15.2 NYGVH 83 WGNTYTGEPTYAQGFTG 330 GNRYAYMDY 138
MTK-15.3 NYGVH 83 WINTYTGEPTYAQGFTG 329 GNRYAYMDY 138
MTK-15.4 NYGVH 83 WINTYTGEPTYAQGFTG 329 GNRYAYMDY 138
MTK-15.5 NYGVH 83 WINTYTGEPTYAQGFTG 329 GTRYAYMDY 335
MTK-15.6 NYGVH 83 WINTYTGEPYYAQGFTG 331 GNRYAYMDY 138
MTK-15.7 NYGVH 83 WINTYTGEPTYAQGFTG 329 GNRYAYMDY 138
MTK-15.8 NYGVH 83 WINTYTGEPTYAQGFTG 329 GVRYAYMDY 336
MTK-15.9 NYGVH 83 WINTYTGEPTYAQGFTG 329 GYRYAYMDY 337
MTK-15.10 NYGVH 83 WINTYQGEPTYAQGFTG 332 GARYAYMDY 338
MTK-15.11 NYGVH 83 WINTYEGEPTYAQGFTG 333 GNRYAYQDY 334
MTK-15.12 NYGVH 83 WINTYQGEPTYAQGFTG 332 GVRYAYMDY 336
MTK-15.13 NYGVH 83 WINTYTGEPTYAQGFTG 329 GNRYAYEDY 339
MTK-15.14 nygvh 83 wintytgeptyaqgftg 329 gnryaymdy 138
MTK-15.15 nygvh 83 wintytgeptyaqgftg 329 gnryaymdy 138
表 28
抗體 HVR-L1 SEQ ID NO: HVR-L2 SEQ ID NO: HVR-L3 SEQ ID NO:
MTK-15.1 RASSSVSYMH 158 ATSNLAS 187 QQWSSNPRT 210
MTK-15.2 RASSSVSYMH 158 ATSNLAS 187 QQWSSNPRT 210
MTK-15.3 RASSHVSYMH 340 ATSNLAS 187 QQWSSNPRT 210
MTK-15.4 RASSSVGYMH 341 ATSNLAS 187 QQWSSNPRT 210
MTK-15.5 RASSSVGYMH 341 ATSNLAS 187 QQWSSNPRT 210
MTK-15.6 RASSSVGYMH 341 ATSNLAS 187 QQWSSNPRT 210
MTK-15.7 RASSGVSYMH 342 ATSNLAS 187 QQWSSNPRT 210
MTK-15.8 RASSSVGYMH 341 ATSNLAS 187 QQWSSNPRT 210
MTK-15.9 RASSSTSYMH 343 ATSNLAS 187 QQWSSNPRT 210
MTK-15.10 RASSSVGYMH 341 ATSNLAS 187 QQWSSNPRT 210
MTK-15.11 RASSSVSYMH 158 ATSNLAS 187 QQWSSNPRT 210
MTK-15.12 RASSSVGYMH 341 ATSNLAS 187 QQWSSNPRT 210
MTK-15.13 RASSSVQYMH 344 ATSNLAS 187 QQWSSNPRT 210
MTK-15.14 rasssvsymh 158 atsnlas 187 qqwssnprt 210
MTK15.15 rasssvsymh 158 atsnlas 187 qqwssnprt 210
表 29
抗體 HVR-H1 SEQ ID NO: HVR-H2 SEQ ID NO: HVR-H3 SEQ ID NO:
MTK-16.1 nhgmn 84 wintytgeptyaqgftg 329 kgvtaaryfdy 139
MTK-16.2 nhgmn 84 wintytgeptyaddfkg 99 kgvtaaryfdy 139
表 30
抗體 HVR-L1 SEQ ID NO: HVR-L2 SEQ ID NO: HVR-L3 SEQ ID NO:
MTK-16.1 KASQNVRTAVA 169 LASNRHT 195 LQHWNYPLT 219
MTK-16.2 rasQNVRTAVA 345 LASNRHT 195 LQHWNYPLT 219
表 31
抗體 HVR-H1 SEQ ID NO: HVR-H2 SEQ ID NO: HVR-H3 SEQ ID NO:
MTK-29.1 SYGLS 346 WINTYSGVPTYAQGFTG 348 YTNYGIFDY 355
MTK-29.2 TYGMS 95 WINTYSGVPTYTDDFKG 119 YTNYGIFDY 355
MTK-29.3 TYGMS 95 WINTYSGVPAYTDDFKG 349 YTNYGVFDY 356
MTK-29.4 TYGMS 95 WINTYSGVPTYTDDFKG 119 YTNYGVFDY 356
MTK-29.5 SYGLS 346 WINTYSGVPTYTDDFKG 119 YTNYGVFDY 356
MTK-29.6 TYGMS 95 WINTMSGVPTYTDDFKG 350 YTNYGVFDY 356
MTK-29.7 TYGMS 95 WINTYSGVPSYTDDFKA 351 YTNYGVFDY 356
MTK-29.8 TYGLS 347 WINTYSGVPTYTDDFKG 119 YTNYGVFDY 356
MTK-29.9 SYGLS 346 WINTYSGVPTYTDDFKG 119 YTNYGVFDY 356
MTK-29.10 TYGMS 95 WINTYSGVPTYTDDFKG 119 YTNYGVFDY 356
MTK-29.11 TYGMS 95 WINTDSGVPTYTDDFKG 352 YTNYGVFDY 356
MTK-29.12 TYGMS 95 WINTMSGVPTYTDDFKG 350 YTNYGVFDY 356
MTK-29.13 TYGMS 95 WINTASGVPTYTDDFKG 353 YTNYGVFDY 356
MTK-29.14 TYGMS 95 WINTYSGVPSYTDDFKA 351 YTNYGVFDY 356
MTK-29.15 TYGMS 95 WINTMSGVPTYTDDFKG 350 YTNYGVFDY 356
MTK-29.16 SYGLS 346 WVNTYSGVPTYTDDFKG 354 YTNYGVFDY 356
MTK-29.17 SYGLS 346 WINTYSGVPTYAQGFTG 348 YTNYGVFDY 356
MTK-29.18 SYGLS 346 WVNTYSGVPTYTDDFKG 354 YTNYGVFDY 356
MTK-29.19 tygms 95 wintysgvptyaqgftg 348 ytnygyfdy 151
MTK-29.20 tygms 95 wintysgvptyaqgftg 348 ytnygyfdy 151
MTK-29.21 tygms 95 wintysgvptyaqgftg 348 Ytnygyfdy 151
表 32
抗體 HVR-L1 SEQ ID NO: HVR-L2 SEQ ID NO: HVR-L3 SEQ ID NO:
MTK-29.1 RASSSVGYMH 341 ATSNLAS 187 QQWGSWPFT 360
MTK-29.2 rasssvgymh 341 atsnlas 187 qqwgsipft 361
MTK-29.3 RASSSVGYMH 341 ATSNLAS 187 QQWGSLPFT 362
MTK-29.4 rasssvgymh 341 atsnlaq 359 qqwgslpft 362
MTK-29.5 RASSSVGYMH 341 ATSNLAQ 359 QQWGSLPFT 362
MTK-29.6 RASSSVGYMH 341 ATSNLAQ 359 QQWGSLPFT 362
MTK-29.7 RASSSVGYMH 341 ATSNLAQ 359 QQWGSLPFT 362
MTK-29.8 RASSSVGYMH 341 ATSNLAQ 359 QQWGSLPFT 362
MTK-29.9 RASSSVGYMH 341 ATSNLAQ 359 QQWGSLPFT 362
MTK-29.10 RASSSVGYMH 341 ATSNLAS 187 QQWGSLPFT 362
MTK-29.11 RASSSVGYMH 341 ATSNLAS 187 QQWGSLPFT 362
MTK-29.12 RASSSVGYMH 341 ATSNLAQ 359 QQWGSLPFT 362
MTK-29.13 RASSSVGYMH 341 ATSNLAQ 359 QQWGSLPFT 362
MTK-29.14 RASSSVGYMH 341 ATSNLAQ 359 QQWGSLPFT 362
MTK-29.15 RASSSVGYMH 341 ATSNLAQ 359 QQWGSLPFT 362
MTK-29.16 RASSSVGYMH 341 ATSNLAQ 359 QQWGRLPFT 363
MTK-29.17 RSSSSVGYMH 357 ATSNLAQ 359 QQWGSLPFT 362
MTK-29.18 RASSTVGYMH 358 ATSNLAS 187 QQWGSLPFT 362
MTK-29.19 ratssvgymh 181 atsnlas 187 qqwgsnpft 208
MTK-29.20 ratssvgymh 181 atsnlas 187 qqwgsnpft 208
MTK-29.21 ratssvgymh 181 atsnlas 187 qqwgsnpft 208
表 33
抗體 HVR-H1 SEQ ID NO: HVR-H2 SEQ ID NO: HVR-H3 SEQ ID NO:
MTK-33.1 sywmh 90 vidpsdnyinynqkfqg 364 eawtrgyfny 373
MTK-33.2 SYWMH 90 VIDPSDNYINYNQKFQG 364 EAGTRGYFDY 155
MTK-33.3 SYWMH 90 VIDPSDNYINYNQKFQG 364 EAWTRGYFDY 374
MTK-33.4 SYWMH 90 VIDPSDNYINMNQKFQG 365 EAGTRGYFDY 155
MTK-33.5 SYWMH 90 VIDPSDNYINYNQKFQG 364 EAGTRGYFDY 155
MTK-33.6 SYWMH 90 VIDPSDNYINYNQKFQG 364 EAGTRGYFDY 155
MTK-33.7 SYWMH 90 VIDPSDNYINYNAKFQG 366 EAGTRGYFDY 155
MTK-33.8 sywmh 90 vidpsdnyinynqkfqg 364 eawtrgyfny 373
MTK-33.9 SYWMH 90 VIDPSDRYINYNQKFQG 367 EAGTRGYFDY 155
MTK-33.10 SYWMH 90 VIDPSDNYINYNQKFRG 368 EAGTRGYFDY 155
MTK-33.11 SYWMH 90 VIDPSDNYINYNQKFQG 364 EAWTRGYFDY 374
MTK-33.12 SYWMH 90 VIDPSDNYINYNQKFRG 368 EAGTRGYFDY 155
MTK-33.13 sywmh 90 vidpsdnyinynqkfqg 364 eagtrgyfdy 155
MTK-33.14 SYWMH 90 VIDPSDNYINYNQKFRG 368 EAGTRGYFDY 155
MTK-33.15 SYWMH 90 VIDPSDNYINYNQKFQV 369 EAGTRGYFDY 155
MTK-33.16 SYWMH 90 VIDPSDNYINYNQKFQG 364 EAGTRGYFDY 155
MTK-33.17 SYWMH 90 VIAPSDNYINYNQKFRG 370 EAGTRGYFDY 155
MTK-33.18 SYWMH 90 VISPSDNYINYNQKFRG 371 EAGTRGYFDY 155
MTK-33.19 SYWMH 90 VIDPSDNYINYNQKFRG 368 EAGTRGYFDY 155
MTK-33.20 SYWMH 90 VIDPSDNYINYNQKFRG 368 EAGTRGYFDY 155
MTK-33.21 SYWMH 90 VIDPSDNYINYNQKFRG 368 EAGTRGYFDY 155
MTK-33.22 SYWMH 90 VIDPSDNYINYNQKLRG 372 EAGTRGYFDY 155
MTK-33.23 sywmh 90 vidpsdnyinynqkfrg 368 eaytrgyfdy 375
MTK-33.24 SYWMH 90 VIDPSDNYINYNQKFRG 368 EAGTRGYFDY 155
表 34
抗體 HVR-L1 SEQ ID NO: HVR-L2 SEQ ID NO: HVR-L3 SEQ ID NO:
MTK-33.1 QASQSVSNTVA 376 YASLRYT 388 QQDYRSPFT 231
MTK-33.2 QASGSVSNTVA 377 YASNRYT 203 QQDYRSPFT 231
MTK-33.3 QASRSVSNTVA 378 YASNRYT 203 QQDYRSPFT 231
MTK-33.4 QASQSVSNTVA 376 YASNRYT 203 QQDRRSPFT 392
MTK-33.5 QASQSVSNTVA 376 YASNRET 389 QQDYRSPFT 231
MTK-33.6 QASRSVSNTMA 379 YASNRYT 203 QQDYRSPFT 231
MTK-33.7 GASQSVSNTVA 380 YASNRYT 203 QQDYRSPFT 231
MTK-33.8 QASQSVSRTVA 381 YASNRYT 203 QQDYRSPFT 231
MTK-33.9 QASASVSNTVA 382 YASNRYT 203 QQDYRSPFT 231
MTK-33.10 QAGQSVSNTVA 383 YASNRYT 203 QQDYRSPFT 231
MTK-33.11 qasrsvrntva 384 yasnryt 203 qqdyrspft 231
MTK-33.12 qasqsvsntva 376 yasnryt 203 rqdtrspft 393
MTK-33.13 QASRSVSNTVA 378 YASNRYT 203 QQDYRSPFT 231
MTK-33.14 qasqsvsntva 376 yasnryt 203 qqdyrspft 231
MTK-33.15 QASRSVSNTVA 378 YASNRYT 203 QQDMRSPFT 394
MTK-33.16 QASRSVSNTVA 378 YASNRYT 203 QQDYRSPFT 231
MTK-33.17 QASRSVSNTVA 378 YASNRYT 203 QQDMRSPFT 394
MTK-33.18 QASRSVSNTVA 378 YASNRYT 203 QQDMRSPFT 394
MTK-33.19 QASRSVSATVA 385 YASNRYT 203 QQDMRSPFT 394
MTK-33.20 QASRSVSNTVA 378 YASNRYT 203 AQDMRSPFT 395
MTK-33.21 qasrsvsntva 378 yvsnryt 390 qqdmrspft 394
MTK-33.22 QASRSVSNTVA 378 YASNRRT 391 QQDMRSPFT 394
MTK-33.23 iasrsvsntva 386 yasnryt 203 qqdmrspft 394
MTK-33.24 QASRSVSRTVA 387 YASNRYT 203 QQDMRSPFT 394
實例 26 ：用人類化及親和力成熟抗 MerTK 抗體阻斷胞葬作用
使用如上文實例11中所述之方法且進行以下修改來評估本發明之人類化及親和力成熟抗MerTK抗體阻斷胞葬作用的能力。分化之人類巨噬細胞用100 nM地塞米松(Sigma-Aldrich)及10 μg/ml huM-CSF (R&D systems)處理持續2天。將經極化巨噬細胞中之50,000個細胞接種於96孔板中。將人類化或親和力成熟抗MerTK抗體滴定至66.6 nM至4 pM之間的最終濃度範圍且接著在37℃下將各連續稀釋之抗體添加至各孔中持續30 min。
星形孢菌素誘導之凋亡Jurkat細胞經pHrodo (ThermoFisher)標記且接著以1:4比率(1個巨噬細胞:4個Jurkat細胞)添加至各孔中持續1小時。用PBS洗滌該等板，且接著細胞在暗處在冰上用APC結合之抗人類CD14染色持續30分鐘。細胞接著在FACS緩衝液(PBS + 2% FBS)中洗滌兩次，且在BD FACS Canto II上執行流式細胞術。使用FlowJo軟體分析數據。在此等實驗中，使用僅用培養基培養之巨噬細胞來確立基線胞葬作用水準，且將此水準設定為100%胞葬作用活性。相對胞葬作用活性係計算為與用抗MerTK抗體處理之細胞中觀察到的胞葬作用相比，僅用培養基處理之細胞中觀察到的胞葬作用之百分比。此等研究之結果顯示於下表 35 中。表 35
抗體 胞葬作用阻斷活性 平均 IC50 (nM) 來自至少三個不同供體
MTK-15.1 0.594
MTK-15.2 0.867
MTK-15.3 1.006
MTK-15.4 0.764
MTK-15.5 0.556
MTK-15.6 0.506
MTK-15.7 0.789
MTK-15.8 0.648
MTK-15.9 2.432
MTK-15.10 0.579
MTK-15.11 1.014
MTK-15.12 1.016
MTK-15.13 0.722
MTK-15.14 0.902
MTK-15.15 0.228
MTK-16.1 0.363
MTK-16.2 1.010
MTK-29.5 0.572
MTK-29.7 0.768
MTK-29.8 0.844
MTK-29.9 0.632
MTK-29.10 0.823
MTK-29.11 1.006
MTK-29.12 1.119
MTK-29.13 0.974
MTK-29.14 0.719
MTK-29.15 0.963
MTK-29.16 0.433
MTK-29.17 0.963
MTK-29.18 0.697
MTK-29.19 0.705
MTK-29.20 0.500
MTK-29.21 0.819
MTK-33.1 5.5
MTK-33.5 2.248
MTK-33.7 7.542
MTK-33.8 23.69
MTK-33.10 8.850
MTK-33.11 0.453
MTK-33.12 0.257
MTK-33.13 1.641
MTK-33.14 3.568
MTK-33.15 0.480
MTK-33.16 0.807
MTK-33.17 7.494
MTK-33.19 0.348
MTK-33.20 0.457
MTK-33.21 0.534
MTK-33.22 0.629
MTK-33.23 0.405
MTK-33.24 0.480
MTK-33.25 0.457
如表 35 中所示，本發明之人類化及親和力成熟抗MerTK抗體有效阻斷人類巨噬細胞之胞葬作用，呈現多種IC50值。抗MerTK抗體MTK-15、MTK-16及MTK-33之某些親和力成熟變異體呈現與相應的親本抗MerTK抗體相似之IC50值(參見上文實例11)。抗MerTK抗體之某些其他親和力成熟變異體呈現較低的針對阻斷胞葬作用之IC50值(例如MTK-15.1、MTK-15.4、MTK-15.5、MTK-15.6、MTK-15.7、MTK-15.8、MTK-15.10、MTK-15.13、MTK-15.15、MTK-16.1及MTK-33.15)。MTK-15之親和力成熟變異體顯示0.228 nM至2.4 nM之IC50值範圍；MTK-16之親和力成熟變異體顯示0.36 nM至1.01 nM之IC50值範圍；MTK-29之親和力成熟變異體顯示0.5 nM至1.12 nM之IC50值範圍；MTK-33之親和力成熟變異體顯示0.41 nM至23.9 nM之IC50值範圍。 實例 27 ：人類化及親和力成熟抗 MerTK 抗體之結合動力學
如下評估本發明之人類化及親和力成熟抗MerTK抗體與人類、鼠科動物及食蟹獼猴MerTK蛋白之結合動力學。簡言之，抗MerTK抗體藉由以300 µl /孔在10 mM乙酸鹽pH 4.25 (Carterra, Salt Lake City, Utah)中稀釋至10 µg/ml來製備。使用單通道流動池用100 mM MES pH 5.5、100 mM sulfo-NHS、400 mM EDC (均在MES pH 5.5中重構；即將運行分析之前，將100 µl各物質混合於小瓶中)之1:1:1混合物之7分鐘注射來激活HC200M感測器晶片(Carterra)。在轉換至多通道陣列流動池之後，將該等抗體注射於96點陣列中之激活晶片上持續15分鐘。接著，藉由使用單通道流動池注射1 M乙醇胺pH 8.5 (Carterra)持續7分鐘來阻斷晶片上之剩餘未結合活性基團。
在用具有0.5 mg/ml BSA (Sigma)之運行緩衝液(HBS-TE, Carterra)起動之後，經固定之抗MerTK抗體針對其結合於多種形式的重組MerTK細胞外域(包括如上文所述之人類、食蟹獼猴及小鼠直系同源物)之能力進行測試。
藉由使用單通道流動池在整個抗體陣列上注射各分析物來生成親和力之估計值。MerTK分析物在運行緩衝液中經稀釋至33.3、100及300 nM，且自最低濃度至最高濃度連續注射而無需再生。在各系列之間運行兩個緩衝液空白(每個系列一個物種)。使用NextGenKIT高通量動力學分析軟體(Carterra)來處理且分析數據。在此等實驗中，抗MerTK抗體係含有Fc變異體LALAPS之人類IgG1同型。
接著，由本發明之抗MerTK抗體的經擬合之締合及解離速率常數(k-締合及k-解離)計算平衡解離常數(KD )。獲自此等實驗之KD 值概述於下表 36 中。表 36
抗體 KD (nM)
huMerTK moMerTK cynoMerTK
MTK-15.1 8.3 1500 8.0
MTK-15.2 21.5 NB 21.5
MTK-15.3 21.5 NB 23
MTK-15.4 NF NB 1450
MTK-15.5 0.1 690 0.8
MTK-15.6 1.0 1700 1.5
MTK-15.7 0.1 705 0.3
MTK-15.8 4.9 NB 5.0
MTK-15.9 10 850 11.5
MTK-15.10 3.3 2800 3.3
MTK-15.11 12.5 140 12.5
MTK-15.12 17.5 114 18
MTK-15.13 2.3 130 2.8
MTK-16.1 86 NB 170
MTK-16.2 80 NB 160
MTK-29.5 4.4 135 4.4
MTK-29.7 3.6 95 3.2
MTK-29.8 23 310 22.5
MTK-29.9 5.7 140 5.8
MTK-29.10 4.5 116 4.2
MTK-29.11 2.1 59 2.4
MTK-29.12 23 250 21
MTK-29.13 13 170 11
MTK-29.14 7.6 100 7.3
MTK-29.15 7.4 NB 8.4
MTK-29.16 8.6 205 8.8
MTK-29.17 9.6 170 9.9
MTK-29.18 4.7 140 4.9
MTK-33.5 28 140 26
MTK-33.7 78 800 78
MTK-33.8 41 465 41
MTK-33.10 41 150 38
MTK-33.11 11 115 10.1
MTK-33.12 8.6 230 7.9
MTK-33.13 20 225 18
MTK-33.14 30.5 275 29
MTK-33.15 4.6 105 4.0
MTK-33.16 10.9 225 10.1
MTK-33.17 20.4 505 19.9
MTK-33.21 0.4 44 0.3
MTK-33.25 1.2 53 1.1
NB = 未結合 NF = 未擬合，意謂所獲得的數據未擬合1:1結合平衡模型
此等結果顯示，本發明之人類化及親和力成熟抗MerTK抗體呈現一定範圍之對人類、食蟹獼猴及鼠科動物MerTK蛋白之親和力。
此等結果亦顯示，本發明之人類化及親和力成熟抗MerTK抗體以不同方式呈現與人類、鼠科動物及食蟹獼猴MerTK之物種結合特異性及交叉反應性。詳言之，本發明之抗MerTK抗體結合於人類MerTK的親和力介於0.1 nM至86 nM範圍內；本發明之抗MerTK抗體結合於cyno MerTK的親和力介於0.3 nM至1450 nM範圍內；且本發明之抗MerTK抗體結合於鼠科動物MerTK的親和力介於44 nM至2800 nM範圍內。與親本抗MerTK抗體MTK-15相比，某些親和力成熟抗MerTK抗體MTK-15變異體得到與小鼠MerTK之結合活性，該活性介於114 nM至2800 nM範圍內。
下表 37 陳述多種人類重鏈免疫球蛋白Fc變異體之胺基酸序列。表 37
人類 Ig 重鏈 Fc 變異體 序列 SEQ ID NO
huIgG1 WT Fc ，具有 C 端離胺酸 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 396
huIgG1 WT Fc ，無 C 端離胺酸 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 397
huIgG1 LALAPS Fc ，具有 C 端離胺酸 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 398
huIgG1 LALAPS Fc ，無 C 端離胺酸 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 399
huIgG1 NSLF Fc ，具有 C 端離胺酸 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSSKAFPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 400
huIgG1 NSLF Fc ，無 C 端離胺酸 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSSKAFPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 401
huIgG1 YTE Fc ，具有 C 端離胺酸 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLYITREPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 402
huIgG1 YTE Fc ，無 C 端離胺酸 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLYITREPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 403
huIgG1 LS Fc ，具有 C 端離胺酸 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALHSHYTQKSLSLSPGK 404
huIgG1 LS Fc ，無 C 端離胺酸 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALHSHYTQKSLSLSPG 405
huIgG1 LV5-112 Fc ，具有 C 端離胺酸 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGGCALYPTNCGGGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 406
huIgG1 LV5-112 Fc ，無 C 端離胺酸 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGGCALYPTNCGGGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 407
huIgG2 WT Fc ，具有 C 端離胺酸 ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 408
huIgG2 WT Fc ，無 C 端離胺酸 ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 409
huIgG4 WT Fc ，具有 C 端離胺酸 ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK 410
huIgG4 WT Fc ，無 C 端離胺酸 ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG 411
人類IgG1輕鏈恆定區胺基酸序列陳述於下文： RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 412)。
本發明之某些抗MerTK抗體的全長重鏈胺基酸序列顯示於下表 38 中。表 38
抗體 序列 SEQ ID NO:
含具有 C 端離胺酸之 huIgG1 WT Fc 的 MTK-16.1 qvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnhgmnwvrqapgqglewmgwintytgeptyaqgftgrfvfsldtsvstaylqisslkaedtavyycarkgvtaaryfdywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 413
具有無 C 端離胺酸之 huIgG1 WT Fc 的 MTK-16.1 qvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnhgmnwvrqapgqglewmgwintytgeptyaqgftgrfvfsldtsvstaylqisslkaedtavyycarkgvtaaryfdywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 414
含具有 C 端離胺酸之 huIgG1 LALAPS Fc 的 MTK-16.1 qvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnhgmnwvrqapgqglewmgwintytgeptyaqgftgrfvfsldtsvstaylqisslkaedtavyycarkgvtaaryfdywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 415
具有無 C 端離胺酸之 huIgG1 LALAPS Fc 的 MTK-16.1 qvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnhgmnwvrqapgqglewmgwintytgeptyaqgftgrfvfsldtsvstaylqisslkaedtavyycarkgvtaaryfdywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 416
含具有 C 端離胺酸之 huIgG1 NSLF Fc 的 MTK-16.1 qvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnhgmnwvrqapgqglewmgwintytgeptyaqgftgrfvfsldtsvstaylqisslkaedtavyycarkgvtaaryfdywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSSKAFPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 417
具有無 C 端離胺酸之 huIgG1 NSLF Fc 的 MTK-16.1 qvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnhgmnwvrqapgqglewmgwintytgeptyaqgftgrfvfsldtsvstaylqisslkaedtavyycarkgvtaaryfdywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSSKAFPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 418
含具有 C 端離胺酸之 huIgG4 Fc 的 MTK-16.1 qvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnhgmnwvrqapgqglewmgwintytgeptyaqgftgrfvfsldtsvstaylqisslkaedtavyycarkgvtaaryfdywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK 419
具有無 C 端離胺酸之 huIgG4 Fc 的 MTK-16.1 qvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnhgmnwvrqapgqglewmgwintytgeptyaqgftgrfvfsldtsvstaylqisslkaedtavyycarkgvtaaryfdywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG 420
MTK-16.1輕鏈胺基酸序列陳述於下文： DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQNVRTAVAWYQQKPGKAPKRLIYLASNRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLTISNLQPEDFATYYCLQHWNYPLTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 421)
本發明之某些抗MerTK抗體的全長重鏈胺基酸序列顯示於下表 39 中。表 39
抗體 序列 SEQ ID NO:
含具有 C 端離胺酸之 huIgG1 WT Fc 的 MTK-16.2 QvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnhgmnwvrqapgqglewmgwintytgeptyaddfkgrfvfsldtsvstaylqisslkaedtavyycarkgvtaaryfdywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 422
具有無 C 端離胺酸之 huIgG1 WT Fc 的 MTK-16.2 QvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnhgmnwvrqapgqglewmgwintytgeptyaddfkgrfvfsldtsvstaylqisslkaedtavyycarkgvtaaryfdywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 423
含具有 C 端離胺酸之 huIgG1 LALAPS Fc 的 MTK-16.2 QvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnhgmnwvrqapgqglewmgwintytgeptyaddfkgrfvfsldtsvstaylqisslkaedtavyycarkgvtaaryfdywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 424
具有無 C 端離胺酸之 huIgG1 LALAPS Fc 的 MTK-16.2 QvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnhgmnwvrqapgqglewmgwintytgeptyaddfkgrfvfsldtsvstaylqisslkaedtavyycarkgvtaaryfdywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 425
含具有 C 端離胺酸之 huIgG1 NSLF Fc 的 MTK-16.2 QvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnhgmnwvrqapgqglewmgwintytgeptyaddfkgrfvfsldtsvstaylqisslkaedtavyycarkgvtaaryfdywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSSKAFPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 426
具有無 C 端離胺酸之 huIgG1 NSLF Fc 的 MTK-16.2 QvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnhgmnwvrqapgqglewmgwintytgeptyaddfkgrfvfsldtsvstaylqisslkaedtavyycarkgvtaaryfdywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSSKAFPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 427
含具有 C 端離胺酸之 huIgG4 Fc 的 MTK-16.2 QvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnhgmnwvrqapgqglewmgwintytgeptyaddfkgrfvfsldtsvstaylqisslkaedtavyycarkgvtaaryfdywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK 428
具有無 C 端離胺酸之 huIgG4 Fc 的 MTK-16.2 Qvqlvqsgselkkpgasvkvsckasgytftnhgmnwvrqapgqglewmgwintytgeptyaddfkgrfvfsldtsvstaylqisslkaedtavyycarkgvtaaryfdywgqgtlvtvss ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK 429
MTK-16.2輕鏈胺基酸序列陳述於下文： DiqmtqspsslsasvgdrvtitcrasQNVRTAVAwyqqkpgkapkrliyLASNRHTgvpsrfsgsgsgteftltisnlqpedfatyycLQHWNYPLTFGGGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 430)
本發明之某些抗MerTK抗體的全長重鏈胺基酸序列顯示於下表 40 中。表 40
抗體 序列 SEQ ID NO:
含具有 C 端離胺酸之 huIgG1 WT Fc 的 MTK-33.1 qvqlvqsgaevkkpgasvkvsckasgytftsywmhwvrqapgqglewigvidpsdnyinynqkfqgrvtmtrdtststvymelsslrsedtavyycareawtrgyfnywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 431
具有無 C 端離胺酸之 huIgG1 WT Fc 的 MTK-33.1 qvqlvqsgaevkkpgasvkvsckasgytftsywmhwvrqapgqglewigvidpsdnyinynqkfqgrvtmtrdtststvymelsslrsedtavyycareawtrgyfnywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 432
含具有 C 端離胺酸之 huIgG1 LALAPS Fc 的 MTK-33.1 qvqlvqsgaevkkpgasvkvsckasgytftsywmhwvrqapgqglewigvidpsdnyinynqkfqgrvtmtrdtststvymelsslrsedtavyycareawtrgyfnywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 433
具有無 C 端離胺酸之 huIgG1 LALAPS Fc 的 MTK-33.1 qvqlvqsgaevkkpgasvkvsckasgytftsywmhwvrqapgqglewigvidpsdnyinynqkfqgrvtmtrdtststvymelsslrsedtavyycareawtrgyfnywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 434
含具有 C 端離胺酸之 huIgG1 NSLF Fc 的 MTK-33.1 qvqlvqsgaevkkpgasvkvsckasgytftsywmhwvrqapgqglewigvidpsdnyinynqkfqgrvtmtrdtststvymelsslrsedtavyycareawtrgyfnywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSSKAFPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 435
具有無 C 端離胺酸之 huIgG1 NSLF Fc 的 MTK-33.1 qvqlvqsgaevkkpgasvkvsckasgytftsywmhwvrqapgqglewigvidpsdnyinynqkfqgrvtmtrdtststvymelsslrsedtavyycareawtrgyfnywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSSKAFPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 436
含具有 C 端離胺酸之 huIgG4 Fc 的 MTK-33.1 qvqlvqsgaevkkpgasvkvsckasgytftsywmhwvrqapgqglewigvidpsdnyinynqkfqgrvtmtrdtststvymelsslrsedtavyycareawtrgyfnywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK 437
具有無 C 端離胺酸之 huIgG4 Fc 的 MTK-33.1 qvqlvqsgaevkkpgasvkvsckasgytftsywmhwvrqapgqglewigvidpsdnyinynqkfqgrvtmtrdtststvymelsslrsedtavyycareawtrgyfnywgqgtlvtvssASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG 438
MTK-33.1輕鏈胺基酸序列陳述於下文： DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQSVSNTVAWYQQKPGKAPKLLIYYASLRYTGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQDYRSPFTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 439)
本發明之某些抗MerTK抗體的全長重鏈胺基酸序列顯示於下表 41 中。表 41
抗體 序列 SEQ ID NO:
含具有 C 端離胺酸之 huIgG1 WT Fc 的 MTK-33.12 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFVSYWMHWVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 440
具有無 C 端離胺酸之 huIgG1 WT Fc 的 MTK-33.12 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFVSYWMHWVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 441
含具有 C 端離胺酸之 huIgG1 LALAPS Fc 的 MTK-33.12 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFVSYWMHWVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 442
具有無 C 端離胺酸之 huIgG1 LALAPS Fc 的 MTK-33.12 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFVSYWMHWVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 443
含具有 C 端離胺酸之 huIgG1 NSLF Fc 的 MTK-33.12 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFVSYWMHWVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSSKAFPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 444
具有無 C 端離胺酸之 huIgG1 NSLF Fc 的 MTK-33.12 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFVSYWMHWVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSSKAFPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 445
含具有 C 端離胺酸之 huIgG4 Fc 的 MTK-33.12 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFVSYWMHWVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK 446
具有無 C 端離胺酸之 huIgG4 Fc 的 MTK-33.12 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFVSYWMHWVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG 447
MTK-33.12輕鏈胺基酸序列陳述於下文： DiqmtqspsslsasvgdrvtitcqasqsvsntvawyqqkpgkapklliyyasnrytgvpsrfsgsgsgtdftftisslqpediatyycrqdtrspftfgqgtklelkRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 448)
本發明之某些抗MerTK抗體的全長重鏈胺基酸序列顯示於下表 42 中。表 42
抗體 序列 SEQ ID NO:
含具有 C 端離胺酸之 huIgG1 WT Fc 的 MTK-33.10 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASSYSFTSYWMHWVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 464
具有無 C 端離胺酸之 huIgG1 WT Fc 的 MTK-33.10 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASSYSFTSYWMHWVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 465
含具有 C 端離胺酸之 huIgG1 LALAPS Fc 的 MTK-33.10 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASSYSFTSYWMHWVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 466
具有無 C 端離胺酸之 huIgG1 LALAPS Fc 的 MTK-33.10 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASSYSFTSYWMHWVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 467
含具有 C 端離胺酸之 huIgG1 NSLF Fc 的 MTK-33.10 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASSYSFTSYWMHWVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSSKAFPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 468
具有無 C 端離胺酸之 huIgG1 NSLF Fc 的 MTK-33.10 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASSYSFTSYWMHWVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSSKAFPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 469
含具有 C 端離胺酸之 huIgG4 Fc 的 MTK-33.10 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASSYSFTSYWMHWVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK 470
具有無 C 端離胺酸之 huIgG4 Fc 的 MTK-33.10 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASSYSFTSYWMHWVRQAPGQGLEWIGVIDPSDNYINYNQKFRGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAREAGTRGYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG 471
MTK-33.10輕鏈胺基酸序列陳述於下文： DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQAGQSVSNTVA WYQQKPGKAPKLLIYYASNRYT GVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQDYRSPFT FGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO:472)
圖 1 闡明數據，其顯示來自兩個人類供體之樹突狀細胞(DC)及巨噬細胞上的人類MerTK表現之FACS分析。圖 2 闡明數據，其顯示在包括A375、THP-1、U937、SK-MEL-5及CHO-huMerTK OE細胞在內之多種細胞株上的人類MerTK表現之FACS分析。圖 3 闡明數據，其顯示獲自健康人類個體或獲自由人類個體獲得之卵巢、肝臟或子宮內膜腫瘤之單核球、巨噬細胞及樹突狀細胞中的人類MerTK表現之FACS分析。圖 4 闡明數據，其顯示本發明之抗MerTK抗體對減少人類巨噬細胞中的胞葬作用之影響。圖 5 闡明數據，其顯示本發明之抗MerTK抗體對減少小鼠骨髓源性巨噬細胞中的胞葬作用之影響。圖 6 闡明數據，其顯示本發明之抗MerTK抗體結合SK-MEL-5細胞。圖 7 闡明數據，其顯示本發明之抗MerTK抗體以劑量依賴性方式阻斷Gas6配位體結合於人類MerTK。圖 8 闡明數據，其顯示本發明之抗MerTK抗體以劑量依賴性方式阻斷ProS配位體結合於人類MerTK。圖 9 闡明數據，其顯示本發明之抗MerTK抗體的抗原決定基建倉(binning)結果。圖 10A 及 10B 闡明數據，其顯示單獨或與抗PD-L1抗體治療組合之抗MerTK抗體治療減少活體內腫瘤生長。圖 11A 、 11B 、 11C 及 11D 闡明數據，其顯示在用本發明之抗MerTK抗體隔夜處理之後人類巨噬細胞中的MCP1、MIP-1α、MIP-1β及TNF之水準之變化。圖 12A 及 12B 闡明數據，其顯示投與與本發明之抗MerTK抗體組合之抗PDL1抗體之小鼠中的減少之腫瘤生長。圖 13 闡明數據，其顯示投與與本發明之抗MerTK抗體組合之抗PDL1抗體之小鼠中的減少之腫瘤生長。圖 14A 、 14B 、 14C 及 14D 闡明數據，其顯示投與與本發明之抗MerTK抗體組合之抗PDL1抗體之小鼠中的腫瘤生長速率之差異，使用線性標度y軸繪製。圖 15A 、 15B 、 15C 及 15D 闡明數據，其顯示投與與本發明之抗MerTK抗體組合之抗PDL1抗體之小鼠中的腫瘤生長速率之差異，使用log2標度y軸繪製。圖 16 闡明數據，其顯示投與與本發明之抗MerTK抗體組合之抗PDL1抗體之荷瘤小鼠的存活曲線。圖 17A 、 17B 、 17C 、 17D 及 17E 闡明數據，其顯示在投與本發明之抗MerTK抗體之後來自小鼠的血漿中之趨化介素(C-X-C基序)配位體1 (CXCL-1、KC)、單核球化學吸引蛋白-1 (MCP1、CCL2)、巨噬細胞發炎蛋白-1-α (MIP-1α、CCL3)、巨噬細胞發炎蛋白-1-β (MIP-1β、CCL4)及介白素-6 (IL-6)之水準之變化。圖 18A 、 18B 、 18C 及 18D 闡明數據，其顯示來自投與本發明之抗MerTK抗體之食蟹獼猴的血漿中之MCP1、MIP-1β、腫瘤壞死因子(TNF)及干擾素(IFN)之水準之變化。圖 19A 及 19B 闡明數據，其顯示用本發明之多種抗MerTK抗體處理之細胞中的磷酸化AKT (pAKT):總AKT (tAKT)比率之變化。圖 20A 、 20B 、 20C 、 20D 及 20E 闡明數據，其顯示在投與與本發明之多種抗MerTK抗體組合之抗PDL-1抗體之動物中的活體內MC38腫瘤小鼠模型中之腫瘤體積之變化。圖 21 闡明數據，其顯示本發明之抗MerTK抗體與人類(hu)、鼠科動物(mu)及食蟹獼猴(cy) MerTK蛋白之結合平衡解離常數(KD )。
Figure 12_A0101_SEQ_0001
Figure 12_A0101_SEQ_0002
Figure 12_A0101_SEQ_0003
Figure 12_A0101_SEQ_0004
Figure 12_A0101_SEQ_0005
Figure 12_A0101_SEQ_0006
Figure 12_A0101_SEQ_0007
Figure 12_A0101_SEQ_0008
Figure 12_A0101_SEQ_0009
Figure 12_A0101_SEQ_0010
Figure 12_A0101_SEQ_0011
Figure 12_A0101_SEQ_0012
Figure 12_A0101_SEQ_0013
Figure 12_A0101_SEQ_0014
Figure 12_A0101_SEQ_0015
Figure 12_A0101_SEQ_0016
Figure 12_A0101_SEQ_0017
Figure 12_A0101_SEQ_0018
Figure 12_A0101_SEQ_0019
Figure 12_A0101_SEQ_0020
Figure 12_A0101_SEQ_0021
Figure 12_A0101_SEQ_0022
Figure 12_A0101_SEQ_0023
Figure 12_A0101_SEQ_0024
Figure 12_A0101_SEQ_0025
Figure 12_A0101_SEQ_0026
Figure 12_A0101_SEQ_0027
Figure 12_A0101_SEQ_0028
Figure 12_A0101_SEQ_0029
Figure 12_A0101_SEQ_0030
Figure 12_A0101_SEQ_0031
Figure 12_A0101_SEQ_0032
Figure 12_A0101_SEQ_0033
Figure 12_A0101_SEQ_0034
Figure 12_A0101_SEQ_0035
Figure 12_A0101_SEQ_0036
Figure 12_A0101_SEQ_0037
Figure 12_A0101_SEQ_0038
Figure 12_A0101_SEQ_0039
Figure 12_A0101_SEQ_0040
Figure 12_A0101_SEQ_0041
Figure 12_A0101_SEQ_0042
Figure 12_A0101_SEQ_0043
Figure 12_A0101_SEQ_0044
Figure 12_A0101_SEQ_0045
Figure 12_A0101_SEQ_0046
Figure 12_A0101_SEQ_0047
Figure 12_A0101_SEQ_0048
Figure 12_A0101_SEQ_0049
Figure 12_A0101_SEQ_0050
Figure 12_A0101_SEQ_0051
Figure 12_A0101_SEQ_0052
Figure 12_A0101_SEQ_0053
Figure 12_A0101_SEQ_0054
Figure 12_A0101_SEQ_0055
Figure 12_A0101_SEQ_0056
Figure 12_A0101_SEQ_0057
Figure 12_A0101_SEQ_0058
Figure 12_A0101_SEQ_0059
Figure 12_A0101_SEQ_0060
Figure 12_A0101_SEQ_0061
Figure 12_A0101_SEQ_0062
Figure 12_A0101_SEQ_0063
Figure 12_A0101_SEQ_0064
Figure 12_A0101_SEQ_0065
Figure 12_A0101_SEQ_0066
Figure 12_A0101_SEQ_0067
Figure 12_A0101_SEQ_0068
Figure 12_A0101_SEQ_0069
Figure 12_A0101_SEQ_0070
Figure 12_A0101_SEQ_0071
Figure 12_A0101_SEQ_0072
Figure 12_A0101_SEQ_0073
Figure 12_A0101_SEQ_0074
Figure 12_A0101_SEQ_0075
Figure 12_A0101_SEQ_0076
Figure 12_A0101_SEQ_0077
Figure 12_A0101_SEQ_0078
Figure 12_A0101_SEQ_0079
Figure 12_A0101_SEQ_0080
Figure 12_A0101_SEQ_0081
Figure 12_A0101_SEQ_0082
Figure 12_A0101_SEQ_0083
Figure 12_A0101_SEQ_0084
Figure 12_A0101_SEQ_0085
Figure 12_A0101_SEQ_0086
Figure 12_A0101_SEQ_0087
Figure 12_A0101_SEQ_0088
Figure 12_A0101_SEQ_0089
Figure 12_A0101_SEQ_0090
Figure 12_A0101_SEQ_0091
Figure 12_A0101_SEQ_0092
Figure 12_A0101_SEQ_0093
Figure 12_A0101_SEQ_0094
Figure 12_A0101_SEQ_0095
Figure 12_A0101_SEQ_0096
Figure 12_A0101_SEQ_0097
Figure 12_A0101_SEQ_0098
Figure 12_A0101_SEQ_0099
Figure 12_A0101_SEQ_0100
Figure 12_A0101_SEQ_0101
Figure 12_A0101_SEQ_0102
Figure 12_A0101_SEQ_0103
Figure 12_A0101_SEQ_0104
Figure 12_A0101_SEQ_0105
Figure 12_A0101_SEQ_0106
Figure 12_A0101_SEQ_0107
Figure 12_A0101_SEQ_0108
Figure 12_A0101_SEQ_0109
Figure 12_A0101_SEQ_0110
Figure 12_A0101_SEQ_0111
Figure 12_A0101_SEQ_0112
Figure 12_A0101_SEQ_0113
Figure 12_A0101_SEQ_0114
Figure 12_A0101_SEQ_0115
Figure 12_A0101_SEQ_0116
Figure 12_A0101_SEQ_0117
Figure 12_A0101_SEQ_0118
Figure 12_A0101_SEQ_0119
Figure 12_A0101_SEQ_0120
Figure 12_A0101_SEQ_0121
Figure 12_A0101_SEQ_0122
Figure 12_A0101_SEQ_0123
Figure 12_A0101_SEQ_0124
Figure 12_A0101_SEQ_0125
Figure 12_A0101_SEQ_0126
Figure 12_A0101_SEQ_0127
Figure 12_A0101_SEQ_0128
Figure 12_A0101_SEQ_0129
Figure 12_A0101_SEQ_0130
Figure 12_A0101_SEQ_0131
Figure 12_A0101_SEQ_0132
Figure 12_A0101_SEQ_0133
Figure 12_A0101_SEQ_0134
Figure 12_A0101_SEQ_0135
Figure 12_A0101_SEQ_0136
Figure 12_A0101_SEQ_0137
Figure 12_A0101_SEQ_0138
Figure 12_A0101_SEQ_0139
Figure 12_A0101_SEQ_0140
Figure 12_A0101_SEQ_0141
Figure 12_A0101_SEQ_0142
Figure 12_A0101_SEQ_0143
Figure 12_A0101_SEQ_0144
Figure 12_A0101_SEQ_0145
Figure 12_A0101_SEQ_0146
Figure 12_A0101_SEQ_0147
Figure 12_A0101_SEQ_0148
Figure 12_A0101_SEQ_0149
Figure 12_A0101_SEQ_0150
Figure 12_A0101_SEQ_0151
Figure 12_A0101_SEQ_0152
Figure 12_A0101_SEQ_0153
Figure 12_A0101_SEQ_0154
Figure 12_A0101_SEQ_0155
Figure 12_A0101_SEQ_0156
Figure 12_A0101_SEQ_0157
Figure 12_A0101_SEQ_0158
Figure 12_A0101_SEQ_0159
Figure 12_A0101_SEQ_0160
Figure 12_A0101_SEQ_0161
Figure 12_A0101_SEQ_0162
Figure 12_A0101_SEQ_0163
Figure 12_A0101_SEQ_0164
Figure 12_A0101_SEQ_0165
Figure 12_A0101_SEQ_0166
Figure 12_A0101_SEQ_0167
Figure 12_A0101_SEQ_0168
Figure 12_A0101_SEQ_0169
Figure 12_A0101_SEQ_0170
Figure 12_A0101_SEQ_0171
Figure 12_A0101_SEQ_0172
Figure 12_A0101_SEQ_0173
Figure 12_A0101_SEQ_0174
Figure 12_A0101_SEQ_0175
Figure 12_A0101_SEQ_0176
Figure 12_A0101_SEQ_0177
Figure 12_A0101_SEQ_0178
Figure 12_A0101_SEQ_0179
Figure 12_A0101_SEQ_0180
Figure 12_A0101_SEQ_0181
Figure 12_A0101_SEQ_0182
Figure 12_A0101_SEQ_0183
Figure 12_A0101_SEQ_0184
Figure 12_A0101_SEQ_0185
Figure 12_A0101_SEQ_0186
Figure 12_A0101_SEQ_0187
Figure 12_A0101_SEQ_0188
Figure 12_A0101_SEQ_0189
Figure 12_A0101_SEQ_0190
Figure 12_A0101_SEQ_0191
Figure 12_A0101_SEQ_0192
Figure 12_A0101_SEQ_0193
Figure 12_A0101_SEQ_0194
Figure 12_A0101_SEQ_0195
Figure 12_A0101_SEQ_0196
Figure 12_A0101_SEQ_0197
Figure 12_A0101_SEQ_0198
Figure 12_A0101_SEQ_0199
Figure 12_A0101_SEQ_0200
Figure 12_A0101_SEQ_0201
Figure 12_A0101_SEQ_0202
Figure 12_A0101_SEQ_0203
Figure 12_A0101_SEQ_0204
Figure 12_A0101_SEQ_0205
Figure 12_A0101_SEQ_0206
Figure 12_A0101_SEQ_0207
Figure 12_A0101_SEQ_0208
Figure 12_A0101_SEQ_0209
Figure 12_A0101_SEQ_0210
Figure 12_A0101_SEQ_0211
Figure 12_A0101_SEQ_0212
Figure 12_A0101_SEQ_0213
Figure 12_A0101_SEQ_0214
Figure 12_A0101_SEQ_0215
Figure 12_A0101_SEQ_0216
Figure 12_A0101_SEQ_0217
Figure 12_A0101_SEQ_0218
Figure 12_A0101_SEQ_0219
Figure 12_A0101_SEQ_0220
Figure 12_A0101_SEQ_0221
Figure 12_A0101_SEQ_0222
Figure 12_A0101_SEQ_0223
Figure 12_A0101_SEQ_0224
Figure 12_A0101_SEQ_0225
Figure 12_A0101_SEQ_0226
Figure 12_A0101_SEQ_0227
Figure 12_A0101_SEQ_0228
Figure 12_A0101_SEQ_0229
Figure 12_A0101_SEQ_0230
Figure 12_A0101_SEQ_0231
Figure 12_A0101_SEQ_0232
Figure 12_A0101_SEQ_0233
Figure 12_A0101_SEQ_0234
Figure 12_A0101_SEQ_0235
Figure 12_A0101_SEQ_0236
Figure 12_A0101_SEQ_0237
Figure 12_A0101_SEQ_0238
Figure 12_A0101_SEQ_0239
Figure 12_A0101_SEQ_0240
Figure 12_A0101_SEQ_0241
Figure 12_A0101_SEQ_0242
Figure 12_A0101_SEQ_0243
Figure 12_A0101_SEQ_0244
Figure 12_A0101_SEQ_0245
Figure 12_A0101_SEQ_0246
Figure 12_A0101_SEQ_0247
Figure 12_A0101_SEQ_0248
Figure 12_A0101_SEQ_0249
Figure 12_A0101_SEQ_0250
Figure 12_A0101_SEQ_0251
Figure 12_A0101_SEQ_0252
Figure 12_A0101_SEQ_0253
Figure 12_A0101_SEQ_0254
Figure 12_A0101_SEQ_0255
Figure 12_A0101_SEQ_0256
Figure 12_A0101_SEQ_0257
Figure 12_A0101_SEQ_0258
Figure 12_A0101_SEQ_0259
Figure 12_A0101_SEQ_0260
Figure 12_A0101_SEQ_0261
Figure 12_A0101_SEQ_0262
Figure 12_A0101_SEQ_0263
Figure 12_A0101_SEQ_0264
Figure 12_A0101_SEQ_0265
Figure 12_A0101_SEQ_0266
Figure 12_A0101_SEQ_0267
Figure 12_A0101_SEQ_0268
Figure 12_A0101_SEQ_0269
Figure 12_A0101_SEQ_0270
Figure 12_A0101_SEQ_0271
Figure 12_A0101_SEQ_0272
Figure 12_A0101_SEQ_0273
Figure 12_A0101_SEQ_0274
Figure 12_A0101_SEQ_0275
Figure 12_A0101_SEQ_0276
Figure 12_A0101_SEQ_0277
Figure 12_A0101_SEQ_0278
Figure 12_A0101_SEQ_0279
Figure 12_A0101_SEQ_0280
Figure 12_A0101_SEQ_0281
Figure 12_A0101_SEQ_0282
Figure 12_A0101_SEQ_0283
Figure 12_A0101_SEQ_0284
Figure 12_A0101_SEQ_0285
Figure 12_A0101_SEQ_0286
Figure 12_A0101_SEQ_0287
Figure 12_A0101_SEQ_0288
Figure 12_A0101_SEQ_0289
Figure 12_A0101_SEQ_0290
Figure 12_A0101_SEQ_0291
Figure 12_A0101_SEQ_0292
Figure 12_A0101_SEQ_0293
Figure 12_A0101_SEQ_0294
Figure 12_A0101_SEQ_0295
Figure 12_A0101_SEQ_0296
Figure 12_A0101_SEQ_0297
Figure 12_A0101_SEQ_0298
Figure 12_A0101_SEQ_0299
Figure 12_A0101_SEQ_0300
Figure 12_A0101_SEQ_0301
Figure 12_A0101_SEQ_0302
Figure 12_A0101_SEQ_0303
Figure 12_A0101_SEQ_0304
Figure 12_A0101_SEQ_0305
Figure 12_A0101_SEQ_0306
Figure 12_A0101_SEQ_0307
Figure 12_A0101_SEQ_0308
Figure 12_A0101_SEQ_0309
Figure 12_A0101_SEQ_0310
Figure 12_A0101_SEQ_0311
Figure 12_A0101_SEQ_0312
Figure 12_A0101_SEQ_0313
Figure 12_A0101_SEQ_0314
Figure 12_A0101_SEQ_0315
Figure 12_A0101_SEQ_0316
Figure 12_A0101_SEQ_0317
Figure 12_A0101_SEQ_0318
Figure 12_A0101_SEQ_0319
Figure 12_A0101_SEQ_0320
Figure 12_A0101_SEQ_0321
Figure 12_A0101_SEQ_0322
Figure 12_A0101_SEQ_0323
Figure 12_A0101_SEQ_0324
Figure 12_A0101_SEQ_0325
Figure 12_A0101_SEQ_0326
Figure 12_A0101_SEQ_0327
Figure 12_A0101_SEQ_0328
Figure 12_A0101_SEQ_0329
Figure 12_A0101_SEQ_0330
Figure 12_A0101_SEQ_0331
Figure 12_A0101_SEQ_0332
Figure 12_A0101_SEQ_0333
Figure 12_A0101_SEQ_0334
Figure 12_A0101_SEQ_0335
Figure 12_A0101_SEQ_0336
Figure 12_A0101_SEQ_0337
Figure 12_A0101_SEQ_0338
Figure 12_A0101_SEQ_0339
Figure 12_A0101_SEQ_0340
Figure 12_A0101_SEQ_0341
Figure 12_A0101_SEQ_0342
Figure 12_A0101_SEQ_0343
Figure 12_A0101_SEQ_0344
Figure 12_A0101_SEQ_0345
Figure 12_A0101_SEQ_0346
Figure 12_A0101_SEQ_0347
Figure 12_A0101_SEQ_0348
Figure 12_A0101_SEQ_0349
Figure 12_A0101_SEQ_0350
Figure 12_A0101_SEQ_0351
Figure 12_A0101_SEQ_0352
Figure 12_A0101_SEQ_0353
Figure 12_A0101_SEQ_0354
Figure 12_A0101_SEQ_0355
Figure 12_A0101_SEQ_0356
Figure 12_A0101_SEQ_0357
Figure 12_A0101_SEQ_0358
Figure 12_A0101_SEQ_0359

Claims (117)

  1. 一種結合人類Mer酪胺酸激酶(MerTK)之經分離抗體，其中該抗體減少吞噬細胞之胞葬作用。
  2. 如請求項1之抗體，其中與同型對照抗體相比，該抗體減少胞葬作用達至少50%。
  3. 如請求項2之抗體，其中該抗體減少胞葬作用達至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%。
  4. 如請求項1之抗體，其中該抗體以0.13 nM至30 nM之IC50值減少胞葬作用。
  5. 如請求項4之抗體，其中該抗體以0.13 nM至1 nM、1 nM至5 nM、5 nM至10 nM或10 nM至30 nM之IC50值減少胞葬作用。
  6. 如請求項1至5中任一項之抗體，其中該吞噬細胞為巨噬細胞、腫瘤相關巨噬細胞或樹突狀細胞。
  7. 如請求項1至6中任一項之抗體，其中該抗體減少ProS與MerTK之結合。
  8. 如請求項7之抗體，其中該抗體減少ProS與MerTK之結合達至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%。
  9. 如請求項7之抗體，其中該抗體以0.58 nM至25.9 nM之IC50值減少ProS與MerTK之結合。
  10. 如請求項9之抗體，其中該抗體以0.58 nM至1 nM、1 nM至2.5 nM、2.5 nM至5 nM、5 nM至10 nM或10 nM至25 nM之IC50值減少ProS與MerTK之結合。
  11. 如請求項1至6中任一項之抗體，其中該抗體減少Gas6與MerTK之結合。
  12. 如請求項11之抗體，其中該抗體減少Gas6與MerTK之結合達至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%。
  13. 如請求項11之抗體，其中該抗體以0.29 nM至32 nM之IC50值減少Gas6與MerTK之結合。
  14. 如請求項13之抗體，其中該抗體以0.29 nM至1 nM、1 nM至5 nM、5 nM至10 nM、10 nM至25 nM或25 nM至32 nM之IC50值減少Gas6與MerTK之結合。
  15. 如請求項1至6中任一項之抗體，其中該抗體減少ProS與MerTK之結合且減少Gas6與MerTK之結合。
  16. 如請求項15之抗體，其中該抗體減少ProS與MerTK之結合達至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%且其中該抗體減少Gas6與MerTK之結合達至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%。
  17. 如請求項15之抗體，其中該抗體以0.58 nM至25.9 nM之IC50值減少ProS與MerTK之結合且其中該抗體以0.29 nM至32 nM之IC50值減少Gas6與MetTK之結合。
  18. 如請求項1至17中任一項之抗體，其中該抗體結合於人類MerTK及鼠科動物MerTK，結合於人類MerTK及食蟹獼猴MerTK，或結合於人類MerTK、鼠科動物MerTK及食蟹獼猴MerTK。
  19. 如請求項1至18中任一項之抗體，其中該抗體以1.4 nM至81 nM之結合親和力結合於人類MerTK。
  20. 如請求項18或19之抗體，其中該抗體以1.6 nM至107 nM之結合親和力結合於食蟹獼猴MerTK。
  21. 如請求項19至20中任一項之抗體，其中該抗體以30 nM至186 nM之結合親和力結合於鼠科動物MerTK。
  22. 如請求項1至21中任一項之抗體，其中該抗體減少Gas6介導之AKT磷酸化。
  23. 如請求項22之抗體，其中該抗體以0.019 nM至7.74 nM之IC50值減少Gas6介導之AKT磷酸化。
  24. 如請求項23之抗體，其中該抗體以0.019 nM至0.25 nM、0.25 nM至0.5 nM、0.5 nM至1 nM、1 nM至2.5 nM、2.5 nM至5 nM或5 nM至7.74 nM之IC50值減少Gas6介導之AKT磷酸化。
  25. 如請求項1至24中任一項之抗體，其中該抗體增加或誘導M1樣巨噬細胞極化。
  26. 如請求項1至25中任一項之抗體，其中該抗體增加一或多種促發炎細胞介素之巨噬細胞表現。
  27. 如請求項26之抗體，其中該抗體增加TNF、IFN、IL-6、IL-1、IL-12、CXCL-1、MCP1、MIP-1α及/或MIP-1β之巨噬細胞表現。
  28. 一種結合於人類MerTK之經分離抗體，其中該抗體包含重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該重鏈可變區包含： a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83； b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO: 99、329、330、331、332及333組成之群的胺基酸序列；及 c) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO: 138、334、335、336、337、338及339組成之群的胺基酸序列；且 其中該輕鏈可變區包含： d) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO: 158、340、341、342、343及344組成之群的胺基酸序列； e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及 f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210。
  29. 如請求項29之抗體，其中該抗體包含： (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:99；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:158；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:334；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:158；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:330；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:158；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:340；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:335；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:331；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:342；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:336；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:337；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:343；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:332；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:338；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:333；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:334；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:158；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:332；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:336；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:339；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:344；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210；或 (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:83；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:138；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:158；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:210。
  30. 如請求項28或29之抗體，其中該抗體包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )，其中該VH 及VL 係選自由以下組成之群：包含胺基酸序列SEQ ID NO:19之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:54之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:234之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:247之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:235之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:247之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:236之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:248之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:236之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:249之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:237之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:249之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:238之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:249之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:239之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:250之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:240之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:251之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:241之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:252之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:242之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:249之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:243之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:247之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:244之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:251之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:245之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:253之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:246之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:247之VL ；及包含胺基酸序列SEQ ID NO:246之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:254之VL 。
  31. 一種結合於人類MerTK之經分離抗體，其中該抗體包含重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該重鏈可變區包含： a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:84； b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO: 99及329組成之群的胺基酸序列；及 c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 139；且 其中該輕鏈可變區包含： d) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO: 169及345組成之群的胺基酸序列； e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:195；及 f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:219。
  32. 如請求項31之抗體，其中該抗體包含： (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:84；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:139；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:169；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:195；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:219；或 (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:84；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:99；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:139；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:345；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:195；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:219。
  33. 如請求項31或32之抗體，其中該抗體包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )，其中該VH 及VL 係選自由以下組成之群：包含胺基酸序列SEQ ID NO:255之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:257之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:256之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:258之VL 。
  34. 一種結合於人類MerTK之經分離抗體，其中該抗體包含重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該重鏈可變區包含： a) HVR-H1，其包含選自由SEQ ID NO:95、346及347組成之群的胺基酸序列； b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO: 119、348、349、350、351、352、353及354組成之群的胺基酸序列；及 c) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO: 151、355及356組成之群的胺基酸序列；且 其中該輕鏈可變區包含： d) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO: 181、341、357及358組成之群的胺基酸序列； e) HVR-L2，其包含選自由SEQ ID NO:187及359組成之群的胺基酸序列；及 f) HVR-L3，其包含選自由SEQ ID NO:208、360、361及362組成之群的胺基酸序列。
  35. 如請求項34之抗體，其中該抗體包含： (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:151；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:181；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:208； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:346；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:348；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:355；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:360； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:355；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:361； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:349；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:346；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:350； (c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:347；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:352；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:353；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:346；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:354；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:363； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:346；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:348；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:357；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:346；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:354；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:358；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362；或 (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:348；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:151；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:181；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:187；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:208。
  36. 如請求項34或35之抗體，其中該抗體包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )，其中該VH 及VL 係選自由以下組成之群：包含胺基酸序列SEQ ID NO:33之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:68之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:259之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:274之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:260之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:275之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:261之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:276之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:262之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:263之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:264之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:265之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:266之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:277之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:267之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:278之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:268之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:279之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:269之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:279之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:264之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:280之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:270之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:281之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:265之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:282之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:264之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:283之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:271之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:284之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:272之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:285之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:271之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:286之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:273之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:287之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:273之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:288之VL ；及包含胺基酸序列SEQ ID NO:273之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:289之VL 。
  37. 一種結合於人類MerTK之經分離抗體，其中該抗體包含重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該重鏈可變區包含： a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90； b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO: 122、364、365、366、367及368組成之群的胺基酸序列；及 c) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO: 155、373、374及375組成之群的胺基酸序列；且 其中該輕鏈可變區包含： d) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO: 184、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386及387組成之群的胺基酸序列； e) HVR-L2，其包含選自由SEQ ID NO:203、388、389、390及391組成之群的胺基酸序列；及 f) HVR-L3，其包含選自由SEQ ID NO:231、392、393及394組成之群的胺基酸序列。
  38. 如請求項37之抗體，其中該抗體包含： (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:122；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:184；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:373；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:376；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:388；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:377；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:374；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:95；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:119；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:356；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:341；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:359；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:362； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:365；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:276；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:392； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:376；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:389；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:379；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:366；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:380；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:373；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:381；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:367；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:382；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:383；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:374；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:384；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:376；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:393； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:364；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:376；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:369；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:370；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:371；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:178；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:385；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:395； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:390；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:372；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:378；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:391；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394； (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:375；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:386；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394；或 (a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90；(b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；(c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；(d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:387；(e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及(f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:394。
  39. 如請求項37或38之抗體，其中該抗體包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )，其中該VH 及VL 係選自由以下組成之群：包含胺基酸序列SEQ ID NO:37之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:72之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:290之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:309之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:291之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:310之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:292之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:311之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:293之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:312之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:294之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:313之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:295之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:314之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:296之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:315之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:290之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:316之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:297之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:317之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:298之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:318之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:292之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:319之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:299之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:320之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:300之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:311之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:301之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:321之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:302之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:322之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:303之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:311之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:304之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:322之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:305之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:322之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:301之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:323之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:301之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:324之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:301之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:325之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:306之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:326之VL ；包含胺基酸序列SEQ ID NO:307之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:327之VL ；及包含胺基酸序列SEQ ID NO:308之VH 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:328之VL 。
  40. 一種結合於人類MerTK之經分離抗體，其中該抗體包含重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該重鏈可變區包含： a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90； b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；及 c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；且 其中該輕鏈可變區包含： d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:383； e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及 f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:231。
  41. 如請求項40之抗體，其中該抗體包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )，其中該VH 包含胺基酸序列SEQ ID NO:298且該VL 包含胺基酸序列SEQ ID NO:318。
  42. 如請求項40或41之抗體，其中該抗體包含(a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:466之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:472之輕鏈；或(b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:467之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:472之輕鏈。
  43. 如請求項40或41之抗體，其中該抗體包含(a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:464之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:472之輕鏈；(b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:465之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:472之輕鏈；(c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:468之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:472之輕鏈；或(d)包含胺基酸序列SEQ ID NO:469之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:472之輕鏈。
  44. 一種結合於人類MerTK之經分離抗體，其中該抗體包含重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該重鏈可變區包含： a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:84； b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:99；及 c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:139；且 其中該輕鏈可變區包含： d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:345； e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:195；及 f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:219。
  45. 如請求項44之抗體，其中該抗體包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )，其中該VH 包含胺基酸序列SEQ ID NO:256且該VL 包含胺基酸序列SEQ ID NO:258。
  46. 如請求項44或45之抗體，其中該抗體包含(a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:424之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:430之輕鏈；或(b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:425之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:430之輕鏈。
  47. 如請求項44或45之抗體，其中該抗體包含(a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:422之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:430之輕鏈；(b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:423之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:430之輕鏈；(c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:426之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:430之輕鏈；或(d)包含胺基酸序列SEQ ID NO:427之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:430之輕鏈。
  48. 一種結合於人類MerTK之經分離抗體，其中該抗體包含重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該重鏈可變區包含： a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:90； b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:368；及 c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:155；且 其中該輕鏈可變區包含： d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:376； e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:203；及 f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:393。
  49. 如請求項48之抗體，其中該抗體包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )，其中該VH 包含胺基酸序列SEQ ID NO:299且該VL 包含胺基酸序列SEQ ID NO:320。
  50. 如請求項48或49之抗體，其中該抗體包含(a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:442之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:448之輕鏈；或(b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:443之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:448之輕鏈。
  51. 如請求項48或49之抗體，其中該抗體包含(a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:440之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:448之輕鏈；(b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:441之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:448之輕鏈；(c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:444之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:448之輕鏈；或(d)包含胺基酸序列SEQ ID NO:445之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:448之輕鏈。
  52. 一種結合於人類MerTK之經分離抗體，其中該抗體包含重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該重鏈可變區包含： a) HVR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:84； b) HVR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:329；及 c) HVR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:139；且 其中該輕鏈可變區包含： d) HVR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:169； e) HVR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:195；及 f) HVR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:219。
  53. 如請求項52之抗體，其中該抗體包含重鏈可變域(VH )及輕鏈可變域(VL )，其中該VH 包含胺基酸序列SEQ ID NO:255且該VL 包含胺基酸序列SEQ ID NO:257。
  54. 如請求項52或53之抗體，其中該抗體包含(a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:415之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:421之輕鏈；或(b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:416之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:421之輕鏈。
  55. 如請求項52或53之抗體，其中該抗體包含(a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:413之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:421之輕鏈；(b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:414之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:421之輕鏈；(c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:417之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:421之輕鏈；或(d)包含胺基酸序列SEQ ID NO:418之重鏈及包含胺基酸序列SEQ ID NO:421之輕鏈。
  56. 一種結合於人類MerTK之經分離抗體，其中該抗體包含重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該重鏈可變區包含： a) HVR-H1，其包含選自由SEQ ID NO:75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97及98組成之群的胺基酸序列； b) HVR-H2，其包含選自由SEQ ID NO:99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123及124組成之群的胺基酸序列；及 c) HVR-H3，其包含選自由SEQ ID NO:125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156及157組成之群的胺基酸序列；且 其中該輕鏈可變區包含： d) HVR-L1，其包含選自由SEQ ID NO:158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185及186組成之群的胺基酸序列； e) HVR-L2，其包含選自由SEQ ID NO:187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204及205組成之群的胺基酸序列；及 f) HVR-L3，其包含選自由SEQ ID NO:207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232及233組成之群的胺基酸序列。
  57. 如請求項56之抗體，其中該抗體包含HVR-H1、HVR-H2、HVR-H3、HVR-L1、HVR-L2及HVR-L3，其包含以下胺基酸序列： (i) 分別地，SEQ ID NO: 75、99、125、158、187及207； (ii) 分別地，SEQ ID NO: 76、100、126、159、187及208； (iii) 分別地，SEQ ID NO: 77、101、127、160、188及209； (iv) 分別地，SEQ ID NO: 75、99、128、158、187及210； (v) 分別地，SEQ ID NO: 78、102、129、161、189及211； (vi) 分別地，SEQ ID NO: 75、103、130、158、187及212； (vii) 分別地，SEQ ID NO: 77、101、127、162、188及209； (viii) 分別地，SEQ ID NO: 75、99、131、163、187及213； (ix) 分別地，SEQ ID NO: 79、104、132、164、190及214； (x) 分別地，SEQ ID NO: 80、105、133、165、191及215； (xi) 分別地，SEQ ID NO: 81、106、134、166、192及216； (xii) 分別地，SEQ ID NO: 82、107、135、167、193及217； (xiii) 分別地，SEQ ID NO: 77、108、136、167、194及209； (xiv) 分別地，SEQ ID NO: 75、109、137、168、187及218； (xv) 分別地，SEQ ID NO: 83、99、138、158、187及210； (xvi) 分別地，SEQ ID NO: 84、99、139、169、195及219； (xvii) 分別地，SEQ ID NO: 85、99、140、170、196及220； (xviii) 分別地，SEQ ID NO: 86、99、141、171、191及221； (xix) 分別地，SEQ ID NO:87、110、142、172、197及222； (xx) 分別地，SEQ ID NO: 88、99、143、173、191及223； (xxi) 分別地，SEQ ID NO: 89、111、143、173、198及221； (xxii) 分別地，SEQ ID NO: 90、112、144、174、199及224； (xxiii) 分別地，SEQ ID NO: 91、113、145、175、200及225； (xxiv) 分別地，SEQ ID NO: 90、114、146、176、201及226； (xxv) 分別地，SEQ ID NO: 92、115、147、177、195及227； (xxvi) 分別地，SEQ ID NO: 93、116、148、178、188及209； (xxvii) 分別地，SEQ ID NO: 94、117、149、179、195及228； (xxviii) 分別地，SEQ ID NO: 95、118、150、180、187及229； (xxix) 分別地，SEQ ID NO: 95、119、151、181、187及208； (xxx) 分別地，SEQ ID NO: 90、120、152、182、202及230； (xxxi) 分別地，SEQ ID NO: 96、118、153、183、202及230； (xxxii) 分別地，SEQ ID NO: 96、121、154、181、187及210； (xxxiii) 分別地，SEQ ID NO: 90、122、155、184、203及231； (xxxiv) 分別地，SEQ ID NO: 90、122、155、184、203及231； (xxxv) 分別地，SEQ ID NO:97、123、156、185、204及232；或 (xxxvi) 分別地，SEQ ID NO: 98、124、157、186、205及233。
  58. 一種結合於人類MerTK之經分離抗體，其中該抗體包含MTK-01、MTK-02、MTK-03、MTK-04、MTK-05、MTK-06、MTK-07、MTK-08、MTK-09、MTK-10、MTK-11、MTK-12、MTK-13、MTK-14、MTK-15、MTK-16、MTK-17、MTK-18、MTK-19、MTK-20、MTK-21、MTK-22、MTK-23、MTK-24、MTK-25、MTK-26、MTK-27、MTK-28、MTK-29、MTK-30、MTK-31、MTK-32、MTK-33、MTK-34、MTK-35、MTK-36、MTK-15.1、MTK-15.2、MTK-15.3、MTK-15.4、MTK-15.5、MTK-15.6、MTK-15.7、MTK-15.8、MTK-15.9、MTK-15.10、MTK-15.11、MTK-15.12、MTK-15.13、MTK-15.14及MTK-15.15、MTK-16.1及MTK-16.2、MTK-29.1、MTK-29.2、MTK-29.3、MTK-29.4、MTK-29.5、MTK-29.6、MTK-29.7、MTK-29.8、MTK-29.9、MTK-29.10、MTK-29.11、MTK-29.12、MTK-29.13、MTK-29.14、MTK-29.15、MTK-29.16、MTK-29.17、MTK-29.18、MTK-29.19、MTK-29.20及MTK-29.21、MTK-33.1、MTK-33.2、MTK-33.3、MTK-33.4、MTK-33.5、MTK-33.6、MTK-33.7、MTK-33.8、MTK-33.9、MTK-33.10、MTK-33.11、MTK-33.12、MTK-33.13、MTK-33.14、MTK-33.15、MTK-33.16、MTK-33.17、MTK-33.18、MTK-33.19、MTK-33.20、MTK-33.21、MTK-33.22、MTK-33.23或MTK-33.24抗體之HVR-H1、HVR-H2、HVR-H3、HVR-L1、HVR-L2及HVR-L3序列。
  59. 如請求項58之抗體，其中該等HVR係Kabat定義之HVR、Chothia定義之HVR或AbM定義之HVR。
  60. 如請求項1至27、58及59中任一項之抗體，其中該抗體包含重鏈可變區，該重鏈可變區包含選自由SEQ ID NO:5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、234-246、255、256、259-379及290-308組成之群的胺基酸序列或與SEQ ID NO: 5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、234-246、255、256、259-379及290-308具有至少90%一致性之胺基酸序列。
  61. 如請求項1至27及58至60中任一項之抗體，其中該抗體包含輕鏈可變區，該輕鏈可變區包含選自由SEQ ID NO:40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、247-254、257、258、274-289及309-328組成之群的胺基酸序列或與SEQ ID NO: 40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、247-254、257、258、274-289及309-328具有至少90%一致性之胺基酸序列。
  62. 一種結合於人類MerTK之經分離抗體，其中該抗體包含重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該重鏈可變區包含選自由SEQ ID NO:5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、234-246、255、256、259-379及290-308組成之群的胺基酸序列。
  63. 一種結合於人類MerTK之經分離抗體，其中該抗體包含重鏈可變區及輕鏈可變區，其中該輕鏈可變區包含選自由SEQ ID NO:40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、247-254、257、258、274-289及309-328組成之群的胺基酸序列。
  64. 如請求項1至27及58至63中任一項之抗體，其中該抗體包含重鏈可變區及輕鏈可變區，該等可變區包含以下胺基酸序列：分別地，SEQ ID NO:5及40；分別地，SEQ ID NO:6及41；分別地，SEQ ID NO:7及42；分別地，SEQ ID NO:8及43；分別地，SEQ ID NO:9及44；分別地，SEQ ID NO:10及45；分別地，SEQ ID NO:11及46；分別地，SEQ ID NO:12及47；分別地，SEQ ID NO:13及48；分別地，SEQ ID NO:14及49；分別地，SEQ ID NO:15及50；分別地，SEQ ID NO:16及51；分別地，SEQ ID NO:17及52；分別地，SEQ ID NO:18及53；分別地，SEQ ID NO:19及54；分別地，SEQ ID NO:20及55；分別地，SEQ ID NO:21及56；分別地，SEQ ID NO:22及57；分別地，SEQ ID NO:23及58；分別地，SEQ ID NO:24及59；分別地，SEQ ID NO:25及60；分別地，SEQ ID NO:26及61；分別地，SEQ ID NO:27及62；分別地，SEQ ID NO:28及63；分別地，SEQ ID NO:29及64；分別地，SEQ ID NO:30及65；分別地，SEQ ID NO:31及66；分別地，SEQ ID NO:32及67；分別地，SEQ ID NO:33及68；分別地，SEQ ID NO:34及69；分別地，SEQ ID NO:35及70；分別地，SEQ ID NO:36及71；分別地，SEQ ID NO:37及72；分別地，SEQ ID NO:38及73；及分別地，SEQ ID NO:39及74。
  65. 一種結合於人類MerTK之經分離抗體，其中該抗體競爭性地抑制如請求項1至64中任一項之抗體中的一或多者針對結合於人類MerTK之結合，視情況其中該抗體競爭性地抑制MTK-10、MTK-12、MTK-13、MTK-19、MTK-20或MTK-22之結合。
  66. 一種結合於人類MerTK之經分離抗體，其中該抗體結合MerTK上與用於結合於人類MerTK的如請求項1至64中任一項之抗體基本上相同或重疊之抗原決定基，視情況其中該抗體結合MerTK上與MTK-10、MTK-12、MTK-13、MTK-19、MTK-20或MTK-22基本上相同或重疊之抗原決定基。
  67. 如請求項28至66中任一項之抗體，其中該抗體減少吞噬細胞之胞葬作用。
  68. 如請求項67之抗體，其中與同型對照抗體相比，該抗體減少胞葬作用達至少50%。
  69. 如請求項68之抗體，其中該抗體減少胞葬作用達至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%。
  70. 如請求項67之抗體，其中該抗體以0.13 nM至30 nM之IC50值減少胞葬作用。
  71. 如請求項70之抗體，其中該抗體以0.13 nM至1 nM、1 nM至5 nM、5 nM至10 nM或10 nM至30 nM之IC50值減少胞葬作用。
  72. 如請求項67至71中任一項之抗體，其中該吞噬細胞為巨噬細胞、腫瘤相關巨噬細胞或樹突狀細胞。
  73. 如請求項28至72中任一項之抗體，其中該抗體(i)減少ProS與MerTK之結合，但不減少Gas6與MerTK之結合，或(ii)減少ProS與MerTK之結合且減少Gas6與MerTK之結合。
  74. 如請求項73之抗體，其中該抗體減少ProS與MerTK之結合達至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%。
  75. 如請求項73之抗體，其中該抗體以0.58 nM至25.9 nM之IC50值減少ProS與MerTK之結合。
  76. 如請求項75之抗體，其中該抗體以0.58 nM至1 nM、1 nM至2.5 nM、2.5 nM至5 nM、5 nM至10 nM或10 nM至25 nM之IC50值減少ProS與MerTK之結合。
  77. 如請求項28至72中任一項之抗體，其中該抗體減少Gas6與MerTK之結合。
  78. 如請求項77之抗體，其中該抗體減少Gas6與MerTK之結合達至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%。
  79. 如請求項77之抗體，其中該抗體以0.29 nM至32 nM之IC50值減少Gas6與MerTK之結合。
  80. 如請求項79之抗體，其中該抗體以0.29 nM至1 nM、1 nM至5 nM、5 nM至10 nM、10 nM至25 nM或25 nM至32 nM之IC50值減少Gas6與MerTK之結合。
  81. 如請求項28至72中任一項之抗體，其中該抗體減少ProS與MerTK之結合且減少Gas6與MerTK之結合。
  82. 如請求項81之抗體，其中該抗體減少ProS與MerTK之結合達至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%且其中該抗體減少Gas6與MerTK之結合達至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%。
  83. 如請求項81之抗體，其中該抗體以0.58 nM至25.9 nM之IC50值減少ProS與MerTK之結合且其中該抗體以0.29 nM至32 nM之IC50值減少Gas6與MetTK之結合。
  84. 如請求項28至83中任一項之抗體，其中該抗體結合於人類MerTK及鼠科動物MerTK，結合於人類MerTK及食蟹獼猴MerTK，或結合於人類MerTK、鼠科動物MerTK及食蟹獼猴MerTK。
  85. 如請求項28至84中任一項之抗體，其中該抗體以1.4 nM至81 nM之結合親和力結合於人類MerTK。
  86. 如請求項84或85之抗體，其中該抗體以1.6 nM至107 nM之結合親和力結合於食蟹獼猴MerTK。
  87. 如請求項84至86中任一項之抗體，其中該抗體以30 nM至186 nM之結合親和力結合於鼠科動物MerTK。
  88. 如請求項28至87中任一項之抗體，其中該抗體減少Gas6介導之AKT磷酸化。
  89. 如請求項88之抗體，其中該抗體以0.019 nM至7.74 nM之IC50值減少Gas6介導之AKT磷酸化。
  90. 如請求項89之抗體，其中該抗體以0.019 nM至0.25 nM、0.25 nM至0.5 nM、0.5 nM至1 nM、1 nM至2.5 nM、2.5 nM至5 nM或5 nM至7.74 nM之IC50值減少Gas6介導之AKT磷酸化。
  91. 如請求項1至6、11至72及77至90中任一項之抗體，其中該抗體減少ProS與MerTK之結合的效力係減少Gas6與MerTK之結合的效力的至少1.7倍、至少2.3倍、至少2.4倍、至少5倍、至少7.7倍或至少8.5倍。
  92. 如請求項28至91中任一項之抗體，其中該抗體增加或誘導M1樣巨噬細胞極化。
  93. 如請求項28至92中任一項之抗體，其中該抗體增加一或多種促發炎細胞介素之巨噬細胞表現。
  94. 如請求項93之抗體，其中該抗體增加TNF、IFN、IL-6、IL-1、IL-12、CXCL-1、MCP1、MIP-1α及/或MIP-1β之巨噬細胞表現。
  95. 如請求項1至94中任一項之抗體，其中該抗體亦結合於食蟹獼猴MerTk。
  96. 如請求項1至95中任一項之抗體，其中該抗體亦結合於鼠科動物MerTK。
  97. 如請求項1至98中任一項之抗體，其中該抗體為鼠科動物抗體、人類抗體、人類化抗體、雙特異性抗體、單株抗體、多價抗體、結合抗體或嵌合抗體。
  98. 一種如請求項1至96中任一項之抗體之人類化形式。
  99. 如請求項1至98中任一項之抗體，其中該抗體屬於IgG類別、IgM類別或IgA類別。
  100. 如請求項99之抗體，其中該抗體屬於IgG類別且具有IgG1、IgG2或IgG4同型。
  101. 如請求項100之抗體，其中該抗體屬於IgG1同型，其具有選自由SEQ ID NO：396、397、398、399、400及401組成之群的Fc胺基酸序列。
  102. 如請求項1至101中任一項之抗體，其中該抗體為全長抗體。
  103. 如請求項1至41、44、45、48、49、52、53及56至102中任一項之抗體，其中該抗體為抗體片段。
  104. 如請求項103之抗體，其中該片段為Fab、Fab’、Fab’-SH、F(ab’)2、Fv或scFv片段。
  105. 一種經分離核酸，其包含編碼如請求項1至104中任一項之抗體之核酸序列。
  106. 一種載體，其包含如請求項105之核酸。
  107. 一種經分離宿主細胞，其包含如請求項105之核酸或如請求項106之載體。
  108. 一種經分離宿主細胞，其包含(i)包含編碼如請求項1至104中任一項之抗體之VH的核酸序列之核酸及(ii)包含編碼該抗MerTK抗體之VL的核酸序列之核酸。
  109. 一種產生結合於人類MerTK之抗體之方法，該方法包括培養如請求項107或108之細胞，使得產生該抗體。
  110. 如請求項109之方法，其進一步包括回收由該細胞產生之該抗體。
  111. 一種藉由如請求項109或110之方法產生之抗體。
  112. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至104及111中任一項之抗體及醫藥學上可接受之載劑。
  113. 一種治療患有癌症之個體的方法，該方法包括向有需要之個體投與治療有效量的如請求項1至104及111中任一項之抗體或如請求項112之醫藥組合物。
  114. 如請求項113之方法，其中該癌症為結腸癌、卵巢癌、肝癌或子宮內膜癌。
  115. 如請求項113或114之方法，其中該投與不引起該個體之視網膜病變。
  116. 如請求項113至115中任一項之方法，其進一步包括向該個體投與抗PD-L1抗體、抗PD-L2抗體或抗PD抗體。
  117. 一種用於偵測樣品中之MerTK的方法，其包括使該樣品與如請求項1至104及114中任一項之抗體接觸。
TW109143983A 2019-12-13 2020-12-11 抗mertk抗體及其使用方法 TW202136303A (zh)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201962947855P 2019-12-13 2019-12-13
US62/947,855 2019-12-13
US202063016821P 2020-04-28 2020-04-28
US63/016,821 2020-04-28
US202063121773P 2020-12-04 2020-12-04
US63/121,773 2020-12-04

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW202136303A true TW202136303A (zh) 2021-10-01

Family

ID=74186824

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW109143983A TW202136303A (zh) 2019-12-13 2020-12-11 抗mertk抗體及其使用方法

Country Status (18)

Country Link
US (2) US11897968B2 (zh)
EP (1) EP4072680A1 (zh)
JP (1) JP2023506465A (zh)
KR (1) KR20220127252A (zh)
CN (1) CN115151307A (zh)
AU (1) AU2020401319A1 (zh)
BR (1) BR112022011570A2 (zh)
CA (1) CA3160210A1 (zh)
CL (1) CL2022001554A1 (zh)
CO (1) CO2022008314A2 (zh)
CR (1) CR20220329A (zh)
EC (1) ECSP22055004A (zh)
IL (1) IL293827A (zh)
MX (1) MX2022007231A (zh)
PE (1) PE20221326A1 (zh)
PH (1) PH12022551398A1 (zh)
TW (1) TW202136303A (zh)
WO (1) WO2021119508A1 (zh)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FI3930847T3 (fi) 2019-02-26 2024-04-23 Inspirna Inc Korkea-affiinisia anti-MERTK-vasta-aineita ja niiden käyttöjä
JP2023506465A (ja) 2019-12-13 2023-02-16 アレクトル エルエルシー 抗ＭｅｒＴＫ抗体及びその使用方法
WO2022241212A2 (en) * 2021-05-14 2022-11-17 Inspirna, Inc. Mertk peptides and uses thereof
JP2024527262A (ja) 2021-06-16 2024-07-24 アレクトル エルエルシー 二重特異性抗ＭｅｒＴＫ及び抗ＰＤＬ１抗体ならびにその使用方法
WO2022266221A1 (en) 2021-06-16 2022-12-22 Alector Llc Monovalent anti-mertk antibodies and methods of use thereof
AU2022368026A1 (en) * 2021-10-15 2024-05-02 Chiome Bioscience Inc. Antibody or fragment thereof binding specifically to mertk, and anti-tumor agent
CN119654342B (zh) * 2022-07-28 2025-07-18 乐普创一生物科技（上海）有限公司 抗MerTK抗体及其用途

Family Cites Families (71)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4179337A (en) 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
JPS6023084B2 (ja) 1979-07-11 1985-06-05 味の素株式会社 代用血液
US4640835A (en) 1981-10-30 1987-02-03 Nippon Chemiphar Company, Ltd. Plasminogen activator derivatives
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4496689A (en) 1983-12-27 1985-01-29 Miles Laboratories, Inc. Covalently attached complex of alpha-1-proteinase inhibitor with a water soluble polymer
DE3675588D1 (de) 1985-06-19 1990-12-20 Ajinomoto Kk Haemoglobin, das an ein poly(alkenylenoxid) gebunden ist.
US6548640B1 (en) 1986-03-27 2003-04-15 Btg International Limited Altered antibodies
US4791192A (en) 1986-06-26 1988-12-13 Takeda Chemical Industries, Ltd. Chemically modified protein with polyethyleneglycol
GB8823869D0 (en) 1988-10-12 1988-11-16 Medical Res Council Production of antibodies
JP2919890B2 (ja) 1988-11-11 1999-07-19 メディカル リサーチ カウンスル 単一ドメインリガンド、そのリガンドからなる受容体、その製造方法、ならびにそのリガンドおよび受容体の使用
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
US5959177A (en) 1989-10-27 1999-09-28 The Scripps Research Institute Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6075181A (en) 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
ATE158021T1 (de) 1990-08-29 1997-09-15 Genpharm Int Produktion und nützung nicht-menschliche transgentiere zur produktion heterologe antikörper
CA2405246A1 (en) 1990-12-03 1992-06-11 Genentech, Inc. Enrichment method for variant proteins with alterred binding properties
US5571894A (en) 1991-02-05 1996-11-05 Ciba-Geigy Corporation Recombinant antibodies specific for a growth factor receptor
LU91067I2 (fr) 1991-06-14 2004-04-02 Genentech Inc Trastuzumab et ses variantes et dérivés immuno chimiques y compris les immotoxines
GB9114948D0 (en) 1991-07-11 1991-08-28 Pfizer Ltd Process for preparing sertraline intermediates
EP0861893A3 (en) 1991-09-19 1999-11-10 Genentech, Inc. High level expression of immunoglobulin polypeptides
FI941572L (fi) 1991-10-07 1994-05-27 Oncologix Inc Anti-erbB-2-monoklonaalisten vasta-aineiden yhdistelmä ja käyttömenetelmä
US5869619A (en) 1991-12-13 1999-02-09 Xoma Corporation Modified antibody variable domains
JP4157160B2 (ja) 1991-12-13 2008-09-24 ゾーマ テクノロジー リミテッド 改変抗体可変領域の調製のための方法
WO1993016185A2 (en) 1992-02-06 1993-08-19 Creative Biomolecules, Inc. Biosynthetic binding protein for cancer marker
US5789199A (en) 1994-11-03 1998-08-04 Genentech, Inc. Process for bacterial production of polypeptides
US5840523A (en) 1995-03-01 1998-11-24 Genetech, Inc. Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides
US5641870A (en) 1995-04-20 1997-06-24 Genentech, Inc. Low pH hydrophobic interaction chromatography for antibody purification
US5739277A (en) 1995-04-14 1998-04-14 Genentech Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US5869046A (en) 1995-04-14 1999-02-09 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
AU7378096A (en) 1995-09-28 1997-04-17 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Porcine cell interaction proteins
US6133426A (en) 1997-02-21 2000-10-17 Genentech, Inc. Humanized anti-IL-8 monoclonal antibodies
US6040498A (en) 1998-08-11 2000-03-21 North Caroline State University Genetically engineered duckweed
US6610833B1 (en) 1997-11-24 2003-08-26 The Institute For Human Genetics And Biochemistry Monoclonal human natural antibodies
JP4460155B2 (ja) 1997-12-05 2010-05-12 ザ・スクリプス・リサーチ・インステイチユート マウス抗体のヒト化
GB9809951D0 (en) 1998-05-08 1998-07-08 Univ Cambridge Tech Binding molecules
ES2248127T3 (es) 1999-10-04 2006-03-16 Medicago Inc. Metodo para regular la transcripcion de genes foraneos en presencia de nigtrogeno.
US7125978B1 (en) 1999-10-04 2006-10-24 Medicago Inc. Promoter for regulating expression of foreign genes
US6946292B2 (en) 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
US7064191B2 (en) 2000-10-06 2006-06-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Process for purifying antibody
US6596541B2 (en) 2000-10-31 2003-07-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
CN1487996B (zh) 2000-11-30 2010-06-16 米德列斯公司 用于生产人类抗体的转基因转染色体啮齿动物
EP1443961B1 (en) 2001-10-25 2009-05-06 Genentech, Inc. Glycoprotein compositions
US20040093621A1 (en) 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
AU2003236017B2 (en) 2002-04-09 2009-03-26 Kyowa Kirin Co., Ltd. Drug containing antibody composition
JPWO2003085118A1 (ja) 2002-04-09 2005-08-11 協和醗酵工業株式会社 抗体組成物の製造方法
CN102911987B (zh) 2002-04-09 2015-09-30 协和发酵麒麟株式会社 基因组被修饰的细胞
US7749753B2 (en) 2002-04-09 2010-07-06 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd Cells in which activity of the protein involved in transportation of GDP-fucose is reduced or lost
MXPA06011199A (es) 2004-03-31 2007-04-16 Genentech Inc Anticuerpos anti-tgf-beta humanizados.
US20080267975A1 (en) 2004-11-24 2008-10-30 The Regents Of The University Of Colorado Mer Diagnostic and Therapeutic Agents
US7700099B2 (en) 2005-02-14 2010-04-20 Merck & Co., Inc. Non-immunostimulatory antibody and compositions containing the same
EP1790664A1 (en) * 2005-11-24 2007-05-30 Ganymed Pharmaceuticals AG Monoclonal antibodies against claudin-18 for treatment of cancer
SI2359834T1 (sl) 2006-03-15 2017-02-28 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Zdravljenje pacientov,ki imajo paroksizmalno nočno hemoglobinurijo, z zaviralcem komplementa
CA2651567A1 (en) 2006-05-09 2007-11-22 Genentech, Inc. Binding polypeptides with optimized scaffolds
UY30776A1 (es) 2006-12-21 2008-07-03 Medarex Inc Anticuerpos cd44
CN100592373C (zh) 2007-05-25 2010-02-24 群康科技(深圳)有限公司 液晶显示面板驱动装置及其驱动方法
WO2010008411A1 (en) 2007-11-09 2010-01-21 The Salk Institute For Biological Studies Use of tam receptor inhibitors as immunoenhancers and tam activators as immunosuppressors
WO2016001830A1 (en) 2014-07-01 2016-01-07 Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research Combination of a brafv600e inhibitor and mertk inhibitor to treat melanoma
JP7211703B2 (ja) * 2014-12-22 2023-01-24 ザ ロックフェラー ユニバーシティー 抗ｍｅｒｔｋアゴニスト抗体及びその使用
CA3068672A1 (en) 2017-06-28 2019-01-03 The Rockefeller University Anti-mertk agonistic antibody-drug conjugates and uses thereof
CN107312098B (zh) * 2017-07-18 2020-06-12 深圳市免疫基因治疗研究院 一种基于cd22的嵌合抗原受体及其应用
WO2019084307A1 (en) 2017-10-26 2019-05-02 Celldex Therapeutics, Inc. ANTI-MERTK ANTIBODIES AND METHODS OF USE
WO2020076799A1 (en) 2018-10-09 2020-04-16 Bristol-Myers Squibb Company Anti-mertk antibodies for treating cancer
WO2020106461A2 (en) 2018-11-08 2020-05-28 Celldex Therapeutics, Inc. Anti-mertk antibodies and methods of use thereof
FI3930847T3 (fi) 2019-02-26 2024-04-23 Inspirna Inc Korkea-affiinisia anti-MERTK-vasta-aineita ja niiden käyttöjä
CA3134522A1 (en) 2019-04-19 2020-10-22 Genentech, Inc. Anti-mertk antibodies and their methods of use
JP2023506465A (ja) 2019-12-13 2023-02-16 アレクトル エルエルシー 抗ＭｅｒＴＫ抗体及びその使用方法
EP4126937A1 (en) 2020-03-31 2023-02-08 Alector LLC Anti-mertk antibodies and methods of use thereof
JP2024527262A (ja) 2021-06-16 2024-07-24 アレクトル エルエルシー 二重特異性抗ＭｅｒＴＫ及び抗ＰＤＬ１抗体ならびにその使用方法
WO2022266221A1 (en) 2021-06-16 2022-12-22 Alector Llc Monovalent anti-mertk antibodies and methods of use thereof

Also Published As

Publication number Publication date
CL2022001554A1 (es) 2023-03-24
BR112022011570A2 (pt) 2022-12-13
US20210261685A1 (en) 2021-08-26
CA3160210A1 (en) 2021-06-17
US20240287204A1 (en) 2024-08-29
MX2022007231A (es) 2022-07-12
AU2020401319A1 (en) 2022-06-30
PH12022551398A1 (en) 2023-10-09
US11897968B2 (en) 2024-02-13
CR20220329A (es) 2022-11-23
CO2022008314A2 (es) 2022-07-08
WO2021119508A1 (en) 2021-06-17
ECSP22055004A (es) 2022-08-31
KR20220127252A (ko) 2022-09-19
JP2023506465A (ja) 2023-02-16
PE20221326A1 (es) 2022-09-09
CN115151307A (zh) 2022-10-04
IL293827A (en) 2022-08-01
EP4072680A1 (en) 2022-10-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20240301071A1 (en) Anti-SIRPa Antibodies and Methods of Use Thereof
US11897968B2 (en) Anti-MerTK antibodies and methods of use thereof
US20240294650A1 (en) Anti-mertk antibodies and methods of use thereof
US11667699B2 (en) Anti-MS4A4A antibodies and methods of use thereof
US20240279341A1 (en) Bispecific anti-mertk and anti-pdl1 antibodies and methods of use thereof
JP2023113896A (ja) 抗ｍｓ４ａ６ａ抗体及びその使用方法
US20240279358A1 (en) Monovalent anti-mertk antibodies and methods of use thereof
WO2022204274A1 (en) Anti-tmem106b antibodies for treating and preventing coronavirus infections
US20240254227A1 (en) Anti-CD300LB Antibodies and Methods of Use Thereof
US20240270866A1 (en) Anti-SIRP-Alpha Antibodies and Methods of Use Thereof
HK40075433A (zh) 抗mertk抗體和其使用方法
HK40084838A (zh) 抗mertk抗體及其使用方法
WO2024148232A2 (en) Anti-il18 binding protein antibodies and methods of use thereof
WO2024026447A1 (en) Anti-gpnmb antibodies and methods of use thereof
CN117396514A (zh) 单价抗mertk抗体及其使用方法
CN117157321A (zh) 用于治疗和预防冠状病毒感染的抗tmem106b抗体