TW202007411A - 荔枝花萃取物用於製備抑制酪胺酸酶組成物之用途 - Google Patents

Abstract

本發明有關於一種荔枝花(Litchi chinensis flower)萃取物用於製備抑制酪胺酸酶組成物之用途，係將一荔枝花萃取物投予至一所需個體，以抑制酪胺酸酶之活性；其中該荔枝花萃取物之製備方法包含以一乾燥步驟處理一荔枝花材料，以獲得一乾燥材料，再將該乾燥材料以一溶劑萃取，以獲得該荔枝花萃取物；本案之荔枝花萃取物可有效抑制酪胺酸酶活性，因此可應用於製備美白的化妝保養品。

Description

荔枝花萃取物用於製備抑制酪胺酸酶組成物之用途

本發明係有關於荔枝花(Litchi chinensis flower)萃取物用於製備抑制酪胺酸酶組成物之用途。

維持皮膚白皙以及減少皮膚斑點的形成是皮膚保養的一大重點，因此如何抑制黑色素的生成以達到皮膚白皙與減少斑點形成一直為相關領域的研究重點。在皮膚黑色素形成的過程中，酪胺酸酶(tyrosinase)為催化黑色素合成的重要的酵素，酪胺酸酶會先將體內的L-酪胺酸(L-tyrosine)轉化成L-DOPA(3,4-dihydroxy- phenylalanine)，再將L-DOPA轉化成多巴醌(dopaquinone)，多巴醌再經過一系列反應後，生成黑色素(melanin)，因此具有酪胺酸酶抑制功效的物質可做為抑制黑色素形成的美白材料。現有已知具有美白功效的物質包含維生素C、麴酸(kojic acid)、傳明酸(tranexamic acid)、熊果素(arbutin)或鞣花酸(ellagic acid)等等，其中麴酸、熊果素與鞣花酸即為酪胺酸酶抑制劑；然而，維生素C容易氧化較不穩定，麴酸與傳明酸可能會引起皮膚泛紅與接觸性皮膚炎，而熊果素在使用不當的情況下則可能會誘發黑色素生成，且麴酸與熊果素在使用量過高時亦具有細胞毒性，因此現有的美白成分仍具有使用安全上的疑慮，故所屬領域者亦持續研究並開發安全性高的美白成分或物質。

近年來，有關於植物萃取物的應用越來越廣泛，因植物萃取物的安全性高、於使用上的較不會產生副作用，適合長期使用。例如中華民國專利第TW I619501 (B)號發明專利為具備抑制酪胺酸酶與彈性蛋白酶之牛蒡葉萃取物及其製備方法，雖然此專利揭示之牛蒡葉的萃取物具有抑制酪胺酸酶活性，但其抑制率僅大約為30%上下，效果仍有待加強。

今，發明人鑑於現有可應用於美白的天然物質相關研究仍為不足，於是乃一本孜孜不倦之精神，並藉由其豐富專業知識及多年之實務經驗所輔佐，據此研創出本發明。

本發明主要目的為提供一種荔枝花(Litchi chinensis flower)萃取物用於製備抑制酪胺酸酶(tyrosinase)組成物之用途，係將一荔枝花萃取物投予至一所需個體，以抑制酪胺酸酶之活性；其中該荔枝花萃取物之製備方法包含以一乾燥步驟處理一荔枝花材料，以獲得一乾燥材料，再將該乾燥材料以一溶劑萃取，以獲得該荔枝花萃取物。

於本發明之一實施例中，溶劑為乙醇、丙酮或是純水。

於本發明之一實施例中，乾燥步驟係為一凍乾步驟或一40-80℃之乾燥步驟。

於本發明之一實施例中，荔枝花萃取物之酪胺酸酶活性的半抑制濃度(the half maximal inhibitory concentration，IC₅₀ )介於0.5-26 mg/mL。

於本發明之一實施例中，荔枝花萃取物之酪胺酸酶活性的半抑制濃度(IC₅₀ )為0.55 mg/mL。

藉此，本發明之荔枝花萃取物可應用於製備具美白功效的化妝保養組成物或醫藥組成物，係可抑制酪胺酸酶活性，降低黑色素生成並達到美白的功效。

本發明之目的及其結構功能上的優點，將依據以下圖面所示之結構，配合具體實施例予以說明，俾使審查委員能對本發明有更深入且具體之瞭解。

本發明一種荔枝花萃取物用於製備抑制酪胺酸酶活性組成物之用途，其係將一荔枝花萃取物投予至一所需個體，以抑制酪胺酸酶活性；其中荔枝花萃取物之製備方法包含以一乾燥步驟處理一荔枝花材料，以獲得一乾燥材料，乾燥步驟可為凍乾步驟，或是以40-80℃之溫度進行乾燥；再將乾燥材料以一溶劑萃取，以獲得該荔枝花萃取物，所使用的溶劑可為乙醇、丙酮或是純水；藉此，本發明之荔枝花萃取物可藉由抑制酪胺酸酶活性，降低黑色素產生以達到美白功效。

此外，藉由下述具體實施例，可進一步證明本發明可實際應用之範圍，但不意欲以任何形式限制本發明之範圍。

一、荔枝花萃取物之製備方法

本試驗係所使用之荔枝花(Litchi chinensis Sonn. )作為材料，於荔枝樹開花後，將荔枝花採下，再將荔枝花以一乾燥步驟處理，獲得一乾燥材料；乾燥步驟包含將荔枝花材料以凍乾(lyophilization)步驟處理，或是放置於40℃、50℃、60℃或80℃之烘箱中進行乾燥。接著，將乾燥後的荔枝花，浸泡入純水，如蒸餾水中，於98±2℃萃取1小時，以獲得荔枝花的水初萃液。又或者將乾燥後的荔枝花，放置入一有機溶劑中，於室溫下萃取24-48小時，以獲得一荔枝花初萃液，於本試驗中所使用的溶劑包含乙醇(ethanol)與丙酮(acetone)。接著，再將上述獲得的各初萃液進行減壓濃縮或是冷凍乾燥，以獲得本案之荔枝花萃取物，並保存於-20℃；使用時再將荔枝花萃取物溶解於一溶劑，如二亞基亞碸(dimethyl sulfoxide，DMSO)中使用。

請參見表一，為各種荔枝花之乾燥材料以不同溶劑萃取後，將萃取液乾燥所得到之荔枝花萃取物的產率；根據表一，各種乾燥步驟中，以純水萃取者的萃取物產率都較高，其中又以凍乾步驟搭配純水萃取所獲得的萃取物產率最高。

表一

二、荔枝花萃取物之酪胺酸酶活性抑制能力

將上述以不同乾燥步驟搭配不同萃取溶劑所獲得的荔枝花萃取物，先回溶於DMSO之後，再以1X PBS緩衝液稀釋至總體積為125 μL之測試樣本；於測試樣本中加入125 μL、濃度為250 unit/mL之酪胺酸酶(tyrosinase)溶液，混勻以獲得第一混合物；將第一混合物於37℃中作用，且每1分鐘測試一次第一混合物於波長475 nm之吸光值，總共測試100分鐘；100分鐘後，再於第一混合物中加入25 μL、濃度為0.2 mg/mL之L-DOPA (3,4-dihydroxyphenylalanine)，並於37℃中作用，且每1分鐘測試一次於波長475 nm之吸光值，總共測試100分鐘。將獲得的吸光值進行計算，以獲得各測試樣本對於酪胺酸酶的半抑制濃度(the half maximal inhibitory concentration，IC₅₀ )，若一測試樣本的IC₅₀ 濃度越低，代表其具有較佳的酪胺酸酶抑制能力。

請參見表二，為不同製備方法所獲得的荔枝花萃取物抑制酪胺酸酶活性的IC₅₀ ，其中以荔枝殼(litchi shell)萃取物、麴酸(kojic acid)與傳明酸(tranexamic acid)作為對照組，所使用的荔枝殼為常溫曬乾的荔枝殼。此試驗中，每一種測試樣本進行三次試驗，表二所示為三次試驗結果的「平均值±標準差(SD)」，而標記不同的英文字母者，代表其具有顯著差異(p＜0.05)。

表二

根據表二，本案之各荔枝花萃取物對於酪胺酸酶活性的IC₅₀ 介於0.5-26 mg/mL，且大部分荔枝花萃取物的IC₅₀ 皆低於傳明酸的的IC₅₀ (24.71±1.74 mg/mL)；此外，以凍乾步驟與50℃乾燥步驟處理所製得之荔枝花萃取物對於酪胺酸酶活性的IC₅₀ 皆小於10 mg/mL；又，經過凍乾步驟處理、再分別以純水、乙醇或丙酮萃取所獲得的三種荔枝花萃取物，其對於酪胺酸酶活性的IC₅₀ 皆與麴酸相似，甚至低於麴酸。根據實驗結果亦可得知，相較於已知具有抑制酪胺酸酶活性之荔枝殼，本案凍乾步驟處理所製得之荔枝花萃取物對於酪胺酸酶活性的抑制效果為荔枝殼萃取物的6.6 -10倍。

另外，本案發明人亦使用己烷作為荔枝花乾燥材料的萃取溶劑，但是製得之荔枝花己烷萃取物並無法有效抑制酪胺酸酶的活性。

由上述之實施說明可知，本發明之荔枝花萃取物，具有抑制酪胺酸酶活性的功效，可抑制酪胺酸酶將L-DOPA轉化成多巴醌(dopaquinone)，進而抑制黑色素的生成，因此可應用於製備具有美白功效的化妝保養品；再者，荔枝花萃取物係萃取自天然植物，使用上亦相對安全。

綜上所述，本發明之荔枝花萃取物用於製備抑制酪胺酸酶組成物之用途，的確能藉由上述所揭露之實施例，達到所預期之使用功效，且本發明亦未曾公開於申請前，誠已完全符合專利法之規定與要求。爰依法提出發明專利之申請，懇請惠予審查，並賜准專利，則實感德便。

惟，上述所揭之圖示及說明，僅為本發明之較佳實施例，非為限定本發明之保護範圍；大凡熟悉該項技藝之人士，其所依本發明之特徵範疇，所作之其它等效變化或修飾，皆應視為不脫離本發明之設計範疇。

無

第一圖：本案荔枝花萃取物製備流程圖。

Claims (5)

1. 一種荔枝花(Litchi chinensis flower)萃取物用於製備抑制酪胺酸酶組成物之用途，係將一荔枝花萃取物投予至一所需個體，以抑制酪胺酸酶之活性；其中該荔枝花萃取物之製備方法包含以一乾燥步驟處理一荔枝花材料，以獲得一乾燥材料，再將該乾燥材料以一溶劑萃取，以獲得該荔枝花萃取物。
2. 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該溶劑為乙醇、丙酮或是純水。
3. 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該乾燥步驟係為一凍乾步驟或一40-80℃之乾燥步驟。
4. 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該荔枝花萃取物之酪胺酸酶活性的半抑制濃度(the half maximal inhibitory concentration，IC₅₀ )介於0.5-26 mg/mL。
5. 如申請專利範圍第4項所述之用途，其中該荔枝花萃取物之酪胺酸酶活性的半抑制濃度(IC₅₀ )為0.55 mg/mL。

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