TR2024020596T2

TR2024020596T2 - INTRAARTIAL GEL FOR TISSUE AND CARTILAGE REGENERATION

Info

Publication number: TR2024020596T2
Application number: TR2024/020596
Authority: TR
Inventors: Patir Suleyman
Original assignee: Süleyman Patir
Filing date: 2023-09-15
Publication date: 2025-01-21

Abstract

Mevcut buluş, doku ve kıkırdak rejenerasyonunu destekleyen bir eklem içi jel bileşimi ve bunun bir taşıyıcı sıvı içerisinde sunulduğu bir jel formülasyonunu sağlamaktadır. Söz konusu bileşim ve formülasyon sodyum hyaluronatın yanı sıra glisin ve prolin amino asitlerini ihtiva etmektedir.The present invention provides an intra-articular gel composition that promotes tissue and cartilage regeneration and a gel formulation wherein the composition and formulation is presented in a carrier liquid. The composition and formulation contains sodium hyaluronate as well as the amino acids glycine and proline.

Description

Tarifname DOKU VE KIKIRDAK REIENERASYONU IÇIN EKLEM IÇI IEL Bulusun Ilgili Oldugu Alan Mevcut bulus, doku ve kikirdak rejenerasyonu saglayan bir eklem içi jel bilesimi ve bunun bir tasiyici sivi içerisinde sunuldugu jel formülasyonu ile ilgilidir. Daha özel olarak mevcut bulus, pH stabilitesi büyük ölçüde iyilestirilmis olan bir eklem içi jel bilesimi ve formülasyonu ile ilgilidir. Teknigin Bilinen Durumu Osteoartrit (0A), eklemin kemik ve yumusak dokularini etkileyen dejeneratif bir eklem hastaligidir. Romatizmal hastaliklar grubuna girmekte olan osteoartrit, bu kategori içerisinde bir tür artrit (eklem iltihabi /kireçlenmesi] olarak nitelendirilir. Osteoartrit (0A), hastalarda belirgin bir agriya ve hareket güçlügüne sebep olan kronik ve ilerleyici bir hastaliktir. Kikirdak, sinoviyal sivinin yardimiyla neredeyse sürtünmesiz eklem hareketine imkan saglayan sert ve kaygan bir dokudur. Osteoartrit, eklemlerdeki kemiklerin uç kisimlarinda tampon vazifesi gören kikirdagin asinmasi ile meydana gelir. Bir diger deyisle, osteoartrit hastalarinda kikirdakta yipranma ve asinma meydana gelir ve zamanla kikirdak dokusu bozulur. Bu da kemik yapisinda degisikliklere yol açarak, eklemi bir arada tutan ve kaslari kemige baglayan bag dokularin dejenerasyonuna yol açar. Bunlara ek olarak, eklem kapsülünde enflamasyon olusur. Sinoviyal sivi, eklemlerde iki kemigin birlestigi bölgeyi saran sinoviyal zarin salgiladigi kayganlastirici bir maddedir. Bu kayganlastirici madde eklemin kolaylikla hareket etmesini saglar. Sinoviyal sivinin normal fizyolojik kosullar altindaki pH'i alkalidir ve yaklasik 7.3 ila 7.6 araligindadir. Ancak osteoartrit hastalarinda, eklem dokusu içinde ve çevresinde enflamatuar metabolik ürünlerin birikmesi nedeniyle, sinoviyal sivinin pH'i asidik araliga dogru ilerlemekte ve kimi zaman 6.0 degerine kadar düsebilmektedir (jin, T., vd. (2020]. Intra-articular delivery of celastrol by hollow mesoporous Silica nanoparticles for pH-sensitive anti-inflammatory therapy against knee osteoarthritis. ] Nanobiotechnol 18, 94). Osteoartrit tedavisinde, eklem bosluguna enjekte edilerek kullanima uygun olan doku ve kikirdagin rejenerasyonuna yönelik terapötik ajanlarin/kompozisyonlarin pH'inin sinoviyal sivinin pH'indan önemli ölçüde farklilik göstermesi durumunda hastalarda eklem dokusunda tahris ve/veya agri meydana gelebilmektedir. Buna ek olarak, eklem içi uygulamaya yönelik terapötik kompozisyonlarin pH'inin, osteoartrit hastalarindaki düsük pH degerleri ile uyumlu olmasi, kompozisyon içinde yer alan etken maddenin etkinliginin ve stabilitesinin eklem içinde de korunmasini mümkün kilmaktadir. Osteoartrit tedavisine yönelik eklem içi enjeksiyonlarin incelendigi bir derleme yayin kapsaminda, eklem içi enjeksiyon sonrasinda agri, alevlenme, cilt pigment degisiklikleri, yag atrofisi ve eklem enfeksiyonu gibi çesitli olumsuz etkilerin ortaya çikabilecegi; 7.4 veya bundan düsük bir pH degerine sahip kompozisyonlarin ise enflamatuar enzimleri aktive etmeden ilaci stabilize edebilecegi belirtilmektedir (lannitti, T., Lodi, D., & Palmieri, B. (201 1). lntra-articular injectionsfor the treatment of osteoartliritis: focus on the clinical use of hyaluronic acid. Drugs in R&D, 11 ( 1), 13-27). Bu bilgiler isiginda görülmektedir ki, eklem içi uygulamaya yönelik formülasyonlarin pH degerlerinin, osteoartrit hastalarinin sinoviyal sivilarinda gözlenen ve saglikli insanlarin sinoviyal sivilarinda gözlenen pH degerlerine kiyasla düsük olan pH degerleriyle (örnegin pH 7.0 civari] uyumlu olacak sekilde stabil tutulmasi ilgili teknik alanda önem arz etmektedir. Kikirdak dejenerasyonun erken safhasinda yaygin olarak uygulanan eklem içi sivi takviyelerinin örnekleri arasinda; hyaluronik asit-sodyum, hyaluronik asit-sodyum/kondroitin sülfat veya hyaluronik asit-sodyum/kondroitin sülfat/N-asetilglukozamin ihtiva eden karisimlar yer almaktadir. Hyaluronat (hyaluronik asit ve hyaluronan olarak da bilinmektedir] yüksek hayvanlarin hücre disi boslugunda, özellikle yumusak bag dokularinda dogal olarak bulunan yüksek moleküler kütleli bir polisakkarittir. Tekrarlayan n-asetilglukozamin ve glukuronik asit monomerlerinden olusan lineer bir polimerdir. Hyaluronat, eklem yüzeyleri boyunca yük aktarimini tamponlayarak eklem lubrikasyonuna katkida bulunmak suretiyle sinoviyal eklemin korunmasinda önemli bir rol oynar (Schiavinato, A., Finesso, M., Cortivo, R., & Abatangelo, G. (2002]. Comparison ofthe eßects of intra-articular injections onyaluronan and its chemically cross-linked derivative (Hylan G-FZO) in normal rabbit kneejoints. Clinical and experimental rheumatology, 20(4], 445-454). Osteoartrit tedavisinde doku rejenerasyonu amaciyla kullanimi bulunan hyaluronatin en yaygin kullanilan formu, sodyum tuzu olan sodyum hyaluronattir. Sodyum hyaluronat, eklem için hem tampon hem de kayganlastirici (lubrikant) olarak islev görmesi için osteoartrit tedavisi kapsaminda eklem içine enjekte edilir. Sinoviyal sivinin viskozitesini artirarak, eklemde kayganlastirmaya, yastiklamaya ve agriyi azaltmaya yardimci olur. Sodyum hyaluronat asagida verilen kimyasal yapiya sahiptir: Sodyum hyaluronat Kimyasal yapisi asagida verilen N-Asetilglukozamin (GlcNAc) ise, monosakarit glikozun bir amid türeVidir. Glukozamin ve asetik asit arasinda ikincil bir amiddir. A.R. Shikhman ve çalisma grubu tarafindan fareler üzerinde yapilan çalismalar sonucunda, N-asetil-D-glukozamin'in kikirdak matriksi bilesenlerinin üretiminde önemli bir rol oynadigi ortaya koyulmustur (Shikhman, A. R., vd. (2005). Chondroprotective activity of N-acetylglucosamine in rabbits with experimental osteoarthritis. Annals of the rheumatic diseases, 64( 1), 89-94). N-Asetilglukozamin EP2886104A1 sayili patent dokümani kapsaminda, sodyum hyaluronat, N-asetil glukozamin ve kondroitin sülfat ihtiva eden ve osteoartrit tedaVisinde kullanima yönelik olarak sunulan bir eklem içi jel formülasyonu açiklanmaktadir. Glisin, NHz-CHz-COOH kimyasal formülüne sahiptir ve en basit kararli amino asittir. Glisin farmasötik formülasyonlarda tampon ajan, islatici ajan, hacim arttirici ajan, diyet takViyesi, tablet parçalayici ve dondurarak kurutma ajani olarak kullanilabilmektedir (Raymond C Rowe, Paul ], Sheskey & Marian E, Quinn (. Bir diger amino asit olan prolin, EP3544616A1 sayili patent dokümani kapsaminda dalbavansin içeren liyofilize formülasyonun stabilizasyonunun saglanmasi amaciyla söz konusu formülasyona dahil edilmektedir. Glisin ve prolin amino asitleri, eksipiyan olarak kullanimlarinin yani sira eklemlerdeki kolajen sentezi için önemli yapitaslaridir. Osteoartrit hastalari, osteoartrite bagli olarak azalan kolajen sentezinin normal seViyelere yükseltilmesi için büyük oranlarda glisin, prolin ve lizine ihtiyaç duymaktadir (de Paz-Lugo, P., vd. (2018], High glycine concentration increases collagen synthesis by articular chondrocytes in vitro: acute glycine deficiency could be an important cause of EP1713464A2 sayili patent dokümani, bu tür bir artisa ihtiyaç duyan bir hayvanda kikirdak esnekligini artirmaya yönelik bir yöntem ile ilgilidir. Söz konusu yöntem bir memeliye, glisin ve prolinin en az birinin kikirdak esnekligini artirmak için etkili bir miktarda uygulanmasini içerir. EP2515897B1 sayili patent dokümani glisin ve prolin kombinasyonunu ihtiva eden bir eklem içi jelin osteoartrit tedavisinde kullanimina iliskindir. Söz konusu kombinasyon ayrica, dogal veya sentetik Viskozite kontrol eden bir polimer ihtiva edebilmektedir. Görülecegi üzere, ilgili alanda osteoartrit tedavisine yönelik eklem içi jel formülasyonlari bilinmektedir. Ancak ilgili teknik alanda, doku ve kikirdak rejenerasyonu tedavisinde kullanimi bulunan ve pH stabilitesi saglanmis olan eklem içi jel formülasyonlarina yönelik ihtiyaç devam etmektedir. Mevcut bulus bu amaçla, osteoartrit hastalarinda gözlenen sinoviyal sivi pH araligi ile uyumlu olan stabil bir pH'a sahip bir eklem içi jel formülasyonu saglamaktadir. Söz konusu formülasyon, uygulama sirasinda ve sonrasinda ortaya çikabilecek tahris ve agrinin önüne geçerek hasta uyuncunu artirmaktadir. Ayrica mevcut bulus ile, yüksek stabiliteye sahip ve böylece raf ömrü uzatilmis bir bilesim ve formülasyon saglanmis olmaktadir. Dolayisiyla mevcut bulusa ait bilesim ve formülasyonlar, pH stabilitesine sahip, etken maddenin etkinlik ve stabilitesinin korundugu ve yan etkilerin minimize edildigi ürünlerin saglamasi sebepleriyle avantajlidir. Bulusun Kisa Açiklamasi Bulus bir yönüyle bir eklem içi jel bilesimi saglamakta olup, söz konusu bilesim agirlik itibariyle asagidaki bilesenleri ihtiva etmektedir: - %0.1 ila %2 NaH2P04, - %1 ila %8 NazHPO4, - %25 ila %15 NaCl, - %20 ila %40 N-asetil-D-glukozamin, - %75 ila %225 glisin, - %35 ila %20 prolin, ve - %15 ila %45 sodyum hyaluronat. Bulusa ait eklem içi jel bilesimi tercihen agirlik itibariyle asagidaki bilesenleri ihtiva etmektedir: - %025 ila %1.75 NaH2P04, - %15 ila %6 NazHPO4, - %35 ila %125 NaCl, - %225 ila %375 N-asetil-D-glukozamin, - %10 ila %20 glisin, - %5 ila %15 prolin, ve - %20 ila %40 sodyum hyaluronat. Bulusun daha ileri tercih edilen bir yapilanmasinda, bulusa ait eklem içi jel bilesimi agirlik itibariyle asagidaki bilesenleri ihtiva etmektedir: - %05 ila %15 NaH2P04, - %2 ila %5 NazHPO4, - %5 ila %10 NaCl, - %25 ila %35 N-asetil-D-glukozamin, - %125 ila %175 glisin, - %75 ila %125 prolin, ve - %25 ila %35 sodyum hyaluronat. Bulusa ait eklem içi jel bilesimi ayrica bir tasiyici sivi, daha tercihen enjeksiyonluk su ile karistirilarak uygun formülasyonlar olusturulabilmektedir. Bulusa ait eklem içi jel formülasyonu 1 ml su içerisinde tercihen 5 mg ila 40 mg arasinda sodyum hyaluronat ihtiva etmektedir. Daha ileri tercihlerde, sodyum hyaluronat miktari 15 mg'dir. Bulusa ait eklem içi jel bilesimi veya formülasyonunda yer alan prolin ve glisin amino asitleri tercihen L konfigürasyonundadir. Bulus bir diger yönüyle, insanlar veya hayvanlarda doku ve/veya dejenerasyonunun önlenmesi ve /veya tedavisinde kullanilmak üzere bulusa ait eklem içi jel formülasyonunu saglamaktadir. Söz konusu doku ve/veya kikirdak dejenerasyonu tercihen osteoartrite bagli doku ve/veya kikirdak dejenerasyonudur. Bulusun Ayrintili Açiklamasi Mevcut bulus, pH stabilitesi yüksek bir eklem içi jel formülasyonu ile ilgilidir. Söz konusu formülasyon NaH, N-asetil-D-glukozamin, glisin, prolin ve sodyum hyaluronat ihtiva etmektedir. Bulusa ait eklem içi jel formülasyonu, kikirdakta meydana gelen dejenerasyonun önlenmesi ve/veya tedavi edilmesinde, özellikle de ostesoartrit tedavisinde etkilidir. Dolayisiyla mevcut bulus bir yönüyle bir eklem içi jel formülasyonu saglamakta olup, söz konusu formülasyon agirlik itibariyle asagidaki bilesenleri ihtiva etmektedir: - %0.1 ila %2 NaH2P04, - %1 ila %8 NazHPO4, - %25 ila %15 NaCl, - %20 ila %40 N-asetil-D-glukozamin, - %75 ila %225 glisin, - %35 ila %20 prolin, ve - %15 ila %45 sodyum hyaluronat. Bulusa ait formülasyon söz konusu bilesenleri tercihen agirlik itibariyle asagidaki oranlarda ihtiva etmektedir: - %025 ila %1.75 NaH2P04, - %15 ila %6 NazHPO4, - %35 ila %125 NaCl, - %225 ila %375 N-asetil-D-glukozamin, - %10 ila %20 glisin, - %5 ila %15 prolin, ve - %20 ila %40 sodyum hyaluronat. Bulusa ait formülasyon söz konusu bilesenleri daha tercihen agirlik itibariyle asagidaki oranlarda ihtiva etmektedir: - %05 ila %15 NaH2P04, - %2 ila %5 NazHPO4, - %5 ila %10 NaCl, - %25 ila %35 N-asetil-D-glukozamin, - %125 ila %175 glisin, - %75 ila %125 prolin, ve - %25 ila %35 sodyum hyaluronat. Mevcut bulusa göre olan bilesim veya formülasyon ile, pH stabilitesi yüksek bir ürünün ortaya koyulmasi amaçlanmaktadir. Mevcut bulus sahipleri, bilesime ait bilesenlerin yukarida verilen oranlarda bir araya getirilmesinin, ileride daha detayli olarak açiklanacagi gibi, pH stabilitesi yüksek bir ürünün eldesine imkan verdigini fark etmislerdir. Buna göre, mevcut bulusa ait bilesim NaH2P04, NazHPO4, NaCl, N-asetil-D-glukozamin, glisin, prolin ve sodyum hyaluronat bilesenlerini yukarida belirtilen agirlikça yüzde araliklari içinde yer alan herhangi bir yüzdede, %100'e tamamlanacak sekilde ihtiva edebilir. Örnegin bulusa ait eklem içi jel bilesimi agirlikça: - %2 NaH2P04, - %4 NazHPO4, - %7 NaCl, - %30 N-asetil-D-glukozamin, - %15 glisin, - %10 prolin, ve - %32 sodyum hyaluronat ihtiva edebilir. Mevcut bulusa ait bilesim ayrica bir tasiyici sivi, daha tercihen enjeksiyonluk su ile karistirilarak bulusa ait formülasyonlar elde edilebilmektedir. Formülasyondaki bilesenlerin içinde çözüldügü enjeksiyonluk su miktari tercihen 1 ml'dir. Bulusa ait eklem içi jel bilesiminde yer alan prolin ve glisin amino asitleri tercihen L konfigürasyonundadir. Bulus diger bir yönüyle, insanlarda veya hayvanlarda doku ve/veya kikirdak dejenerasyonunun önlenmesi ve/veya tedavisinde kullanilmak üzere bulusa göre olan eklem içi jel bilesimi veya formülasyonunu saglamaktadir. Söz konusu doku ve/veya kikirdak dejenerasyonu tercihen osteoartrite bagli doku ve/veya kikirdak dejenerasyonudur. Bulusa ait eklem içi jel bilesiminin ihtiva ettigi sodyum hyaluronatin molekül agirligi tercihen 800 kDa ila 3 MDa araliginda, daha tercihen 1 MDa ila 2.5 MDa araligindadir. Bulusa ait formülasyonda yer alan sodyum hyaluronatin moleküler agirligi örnegin 800 kDa, 1 MDa, 1.5 MDa, 2 MDa, 2.5 MDa veya 3 MDa olabilir. Bulusa ait eklem içi jel formülasyonunun 1 ml'sindeki (yani, 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki] sodyum hyaluronat miktari tercihen 5 mg ila 40 mg araliginda, daha tercihen 7.5 mg ila 30 mg araligindadir. Daha özel olarak, 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki sodyum hyaluronat miktari 10 mg ila 20 mg araligindadir. 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki sodyum hyaluronat miktari örnegin hyaluronat miktari en tercihen 15 mg'dir. Bulusa ait eklem içi jel formülasyonunun 1 ml'sindeki (yani, 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki] glisin miktari tercihen 1 mg ila 15 mg araliginda, daha tercihen 2.25 mg ila 12.5 mg araligindadir. Daha özel olarak, 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki glisin miktari 5 mg ila 10 mg araligindadir. 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki glisin miktari örnegin 5 mg, 6 mg, 7.5 mg, 9 mg veya 10 mg olabilir. 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki glisin miktari en tercihen 7.5 mg'dir. Söz konusu glisin tercihen L-glisindir. Bulusa ait eklem içi jel formülasyonunun 1 ml'sindeki (yani, 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki] prolin miktari tercihen 1 mg ila 12.5 mg araliginda, daha tercihen 2.5 mg ila 7.5 mg araligindadir. Daha özel olarak, 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki prolin miktari 3.75 mg ila 6.5 mg araligindadir. 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki prolin miktari örnegin 3.75 mg, 4 mg, 4.5 mg, 5 mg, 5.5 mg, 6 mg veya 6.5 mg olabilir. 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki prolin miktari en tercihen mg'dir. Söz konusu prolin tercihen L-prolindir. Bulusa ait eklem içi jel formülasyonunun 1 ml'sindeki (yani, 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki] N-asetil-D-glukozamin miktari tercihen 5 mg ila 30 mg araliginda, daha tercihen 7.5 mg ila 25 mg araligindadir. Daha özel olarak, 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki N-asetil-D-glukozamin miktari mg ila 20 mg araligindadir. 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki prolin miktari örnegin 10 mg, 12.5 mg, 15 mg, 17.5 mg olabilir. 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki N-asetil-D-glukozamin miktari en tercihen 15 mg'dir. Söz konusu N-asetil-D-glukozamin sentetik olabilir. Bulusa ait eklem içi jel formülasyonunun 1 ml'sindeki (yani, 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki] mg ila 0.60 mg araligindadir. 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki NaHzPO4 miktari en tercihen 0.45 Bulusa ait eklem içi jel formülasyonunun 1 ml'sindeki (yani, 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki] NazHPO4 (disodyum fosfat] miktari tercihen 0.5 mg ila 5 mg araliginda, daha tercihen 1 mg ila 3.5 mg araligindadir. 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki NazHPO4 miktari en tercihen 2 mg'dir. Bulusa ait eklem içi jel formülasyonunun 1 ml'sindeki (yani, 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki] NaCl (sodyum klorür) miktari tercihen 2.5 mg ila 7.5 mg araliginda, daha tercihen 3.5 mg ila 6 mg araligindadir. 1 ml enjeksiyonluk su içerisindeki NaHzPO4 miktari en tercihen 4.5 mg'dir. Bulusa ait formülasyon, formülasyona ait bilesenlerin yukarida verilen miktar araliklarina karsilik gelen miktarlarinin herhangi bir kombinasyonunu ihtiva edebilir. Bulus sahipleri, formülasyonu olusturan bilesenlerin bu miktar araliklarinda bir araya getirilmesinin avantajli olarak hem etken maddenin etkinliginin hem de formülasyonun pH stabilitesinin yüksek tutulmasina imkan verdigini kesfetmislerdir. F 0 rm ülasyon Örnek 1: 1 ml Enieksivonluk Su Icerisindeki Eklem Ici lel Formülasvonu Mevcut bulusun tercih edilen bir yapilanmasina göre olan eklem içi jel formülasyonu asagidaki Tablo 1'de verilmektedir. Tablo 1: 1 ml Enjeksiyonluk Su Içerisindeki Eklem Içi [el Formülasyonu Bilesen ismi Miktar (mg) NazHPO4 2.00 N-Asetil-D-glukozamin 15.00 L-glisin 7.50 L-prolin 5.00 Sodyum hyaluronat 15.00 Örnek 1'e ait jel, sinoviyal sivi yetersizligine bagli olarak ortaya çikan osteoartrit, dejeneratif eklem hastaliklari ve dejeneratif menisküs yirtigi tedavisinde ve kikirdak rejenerasyonunun desteklenmesinde etkili olan bir eklem içi matriks jeldir. Söz konusu jel, enjeksiyon yoluyla eklem içine uygulanir. DH Stabilitesi Calismalari Yukarida ayrintili olarak açiklandigi gibi, eklem içi jel formülasyonlarinin tercih edilen bir pH degerinde stabil tutulmasi zaruridir. Bulus sahipleri, gerçeklestirdikleri gözlemler sonucunda osteoartrit hastalarina uygulamaya yönelik olarak sunulan bulusa ait jelin pH 7.0 civarinda stabil tutulmasi gerektigini fark etmislerdir. Bulusa göre olan ve asagidaki Tablo 2 ve Tablo 3'te Hyaluronat ihtiva eden eklem içi jel formülasyonlari için iki farkli kosulda pH stabilitesi degerlendirmesi yapilmistir: 1] Glisin ve Prolin Içermeyen ]el Örnekleri için pH Degerleri (Tablo 2] ve 2] Glisin ve Prolin Içeren ]el Örnekleri için pH Degerleri (Tablo 3). Tablo 2: Glisin ve Prolin Içermeyen [el Örneklerinin Sterilizasyon Öncesi ve Sterilizasyon Sonrasi pH Degerleri .. _ _ .. _ pH (Sterilizasyon Sonrasi) Ornekler pH (Sterilizasyon Oncesi) (121°C 15 dakika) mg/ml Hyaluronat içeren 7.01 7.16 eklem içi iel formulasyonu 13 mg/ml Hyaluronat içeren 6.92 7.09 eklem içi iel formulasyonu mg/ml Hyaluronat içeren 7.28 7.60 eklem içi iel formulasyonu 18 mg/ml Hyaluronat içeren 7.03 7.26 eklem içi iel formulasyonu mg/ml Hyaluronat içeren iel 7.05 7.45 formulasyonu Tablo 3: Glisin ve Prolin Içeren [el Örneklerinin Sterilizasyon Öncesi ve Sterilizasyon Sonrasi pH Degerleri .. _ _ .. _ pH (Sterilizasyon Sonrasi) Ornekler pH (Sterilizasyon Oncesi) (121°C 15 dakika) mg/ml Hyaluronat içeren 7.00 6.93 eklem içi iel formulasyonu 13 1 H 1 t ' mg/m_ . ya urona içeren 6.99 6.98 eklem içi iel formulasyonu mg/ml Hyaluronat içeren 7.01 7.00 eklem içi iel formulasyonu 18 mg/ml Hyaluronat içeren 7.00 6.98 eklem içi iel formulasyonu mg/ml Hyaluronat içeren 7.00 6.99 eklem içi iel formulasyonu Tablo Z'ye bakildiginda, glisin ve prolin içermeyen jel formülasyonlarinin pH degerlerinin Hyaluronat içeren formülasyonlarin ise 7.0 civarinda bulundugu görülmektedir. Ancak 121°C'de dakika otoklavin ardindan tüm konsantrasyonlar için pH degerlerinde büyük bir sapma gözlenmekte ve hatta pH degerleri kimi konsantrasyonlar için 7.4 degerinin üzerine çikmaktadir. Tablo 3'e bakildiginda ise, glisin ve prolin içeren jel formülasyonlarinin pH degerlerinin hem sterilizasyon öncesinde hem de sterilizasyon sonrasinda pH 7.0 civarinda yüksek bir stabilite gösterdigi görülmektedir. Bu bilgiler isiginda görülmektedir ki, bulusa ait jel formülasyonu örnekleri, glisin ve prolin ihtiva etmeleri durumunda sterilizasyon (otoklav) öncesinde ve sonrasinda pH stabilitelerini büyük ölçüde korumaktadir. 7.4 veya bundan yüksek bir pH degerine sahip eklem içi kompozisyonlarin enflamatuar enzimleri aktive ederek enjeksiyon sonrasinda agri, alevlenme, cilt pigment degisiklikleri, yag atrofisi ve eklem enfeksiyonu gibi çesitli olumsuz etkilere yol açabilecegi ve ilacin stabilizasyonunu olumsuz etkileyebilecegi ilgili teknikte bilinmektedir (Iannitti, T., Lodi, D., clinical use of hyaluronic acid. Drugs in R&D, 11( 1), 13-27). Dolayisiyla, mevcut bulusa ait olan ve glisin ve prolin bilesenleri ve bunlarin formülasyon içindeki spesifik yüzdeleri sayesinde yüksek derecede stabil bir pH degerine sahip olan formülasyonlar, sahip olduklari pH stabilitesi sayesinde hasta uyuncunu artirmakta ve etken maddenin maksimum etkinlikle enjektesine imkan vermektedir. Mevcut bulusa ait eklem içi jel formülasyonu, içerdigi bilesenler ve bunlarin spesifik agirlikça yüzdeleri sayesinde stabildir, formülasyonun pH seviyesi 7.0 civarinda büyük ölçüde korunur ve böylece hastada tahris veya agriya sebep olmadan sinoviyal siviya güvenle enjekte edilebilir. TR TR TR TR Description INTRA-ARTILAR IEL FOR TISSUE AND CARTILAGE REGENERATION Field of the Invention The present invention relates to an intra-articular gel composition for tissue and cartilage regeneration and to a gel formulation in a carrier liquid. More particularly, the present invention relates to an intra-articular gel composition and formulation having greatly improved pH stability. State of the Art Osteoarthritis (0A) is a degenerative joint disease affecting the bone and soft tissues of the joint. Osteoarthritis, which falls into the group of rheumatic diseases, is classified as a type of arthritis (joint inflammation/calcification). Osteoarthritis (0A) is a chronic and progressive disease that causes significant pain and difficulty in movement in patients. Cartilage is a hard, slippery tissue that allows for almost frictionless joint movement with the help of synovial fluid. Osteoarthritis occurs when the cartilage, which acts as a cushion at the ends of the bones in the joints, wears and tears. In other words, in patients with osteoarthritis, wear and tear occurs in the cartilage, and over time, the cartilage tissue deteriorates. This leads to changes in the bone structure, leading to degeneration of the connective tissues that hold the joint together and connect the muscles to the bone. In addition, inflammation occurs in the joint capsule. Synovial fluid, It is a lubricating substance secreted by the synovial membrane surrounding the area where the bones meet. This lubricating substance allows the joint to move easily. The pH of synovial fluid under normal physiological conditions is alkaline and ranges from approximately 7.3 to 7.6. However, in osteoarthritis patients, due to the accumulation of inflammatory metabolic products in and around the joint tissue, the pH of the synovial fluid moves towards the acidic range and can sometimes drop to 6.0 (Jin, T., et al. (2020). Intra-articular delivery of celastrol by hollow mesoporous Silica nanoparticles for pH-sensitive anti-inflammatory therapy against knee osteoarthritis. ] Nanobiotechnol 18, 94). In the treatment of osteoarthritis, it is a therapeutic agent for the regeneration of tissue and cartilage suitable for use by injecting into the joint cavity. If the pH of the agents/compositions differs significantly from the pH of the synovial fluid, patients may experience irritation and/or pain in the joint tissue. In addition, the compatibility of the pH of therapeutic compositions intended for intra-articular application with the low pH values in osteoarthritis patients enables the effectiveness and stability of the active substance contained in the composition to be maintained within the joint. In a review publication examining intra-articular injections for the treatment of osteoarthritis, it is stated that various adverse effects such as pain, exacerbation, skin pigment changes, fat atrophy and joint infection may occur after intra-articular injection; however, compositions with a pH value of 7.4 or lower may stabilize the drug without activating inflammatory enzymes (Lannitti, T., Lodi, D., & Palmieri, B. (201 1). Intra-articular injections for In light of this information, it is important in the relevant technical field to keep the pH values of formulations intended for intra-articular application stable to match the pH values observed in the synovial fluid of osteoarthritis patients (e.g., around pH 7.0), which are lower than those observed in the synovial fluid of healthy humans. Examples of intra-articular fluid supplements commonly applied in the early stages of cartilage degeneration include mixtures containing hyaluronic acid-sodium, hyaluronic acid-sodium/chondroitin sulfate, or hyaluronic acid-sodium/chondroitin sulfate/N-acetylglucosamine. Hyaluronate (hyaluronic acid and Hyaluronan, also known as hyaluronan, is a high molecular weight polysaccharide naturally found in the extracellular space of higher animals, particularly in soft connective tissues. It is a linear polymer composed of repeating monomers of n-acetylglucosamine and glucuronic acid. Hyaluronate plays an important role in protecting the synovial joint by contributing to joint lubrication by buffering load transfer across the articular surfaces (Schiavinato, A., Finesso, M., Cortivo, R., & Abatangelo, G. (2002). Comparison of the effects of intra-articular injections of hyaluronan and its chemically cross-linked derivative (Hylan G-FZO) in normal rabbit knee joints. Clinical and Experimental Rheumatology, 20(4], 445-454). Hyaluronan, which is used for tissue regeneration in the treatment of osteoarthritis, is the most widely used The most commonly used form is sodium hyaluronate, which is its sodium salt. Sodium hyaluronate is injected into a joint as part of the treatment of osteoarthritis to act as both a buffer and a lubricant for the joint. By increasing the viscosity of the synovial fluid, it helps lubricate, cushion and reduce pain in the joint. Sodium hyaluronate has the chemical structure given below: Sodium hyaluronate N-Acetylglucosamine (GlcNAc), whose chemical structure is given below, is an amide derivative of the monosaccharide glucose. It is a secondary amide between glucosamine and acetic acid. As a result of studies conducted on mice by A.R. Shikhman and his study group, it was revealed that N-acetyl-D-glucosamine plays an important role in the production of cartilage matrix components (Shikhman, A. R., et al. (2005). Chondroprotective activity of N-acetylglucosamine in rabbits with experimental osteoarthritis. Annals of the rheumatic diseases, 64( 1), 89-94). N-Acetylglucosamine is described in the patent document numbered EP2886104A1, an intra-articular gel formulation containing sodium hyaluronate, N-acetyl glucosamine and chondroitin sulfate for use in the treatment of osteoarthritis. Glycine has the chemical formula NH2-CH2-COOH and is the simplest stable amino acid. Glycine can be used in pharmaceutical formulations as a buffering agent, wetting agent, bulking agent, dietary supplement, tablet disintegrator and freeze-drying agent (Raymond C Rowe, Paul ], Sheskey & Marian E, Quinn (. Another amino acid, proline, EP3544616A1 In order to ensure the stabilization of the lyophilized formulation containing dalbavancin within the scope of the patent document numbered , glycine and proline are included in the formulation in question. In addition to their use as excipients, glycine and proline amino acids are important structures for collagen synthesis in joints. Osteoarthritis patients require large amounts of glycine, proline and lysine to increase collagen synthesis, which decreases due to osteoarthritis, to normal levels (de Paz-Lugo, P., et al. (2018), High glycine concentration increases collagen synthesis by articular chondrocytes in vitro: acute glycine deficiency could be an important cause of EP1713464A2). The patent document numbered EP1713464A2 relates to a method for increasing cartilage elasticity in an animal in need of such an increase. The method includes administering to a mammal at least one of glycine and proline in an amount effective to increase cartilage elasticity. Patent document numbered EP2515897B1 relates to the use of an intra-articular gel containing a combination of glycine and proline in the treatment of osteoarthritis. This combination may also contain a natural or synthetic viscosity-controlling polymer. As can be seen, intra-articular gel formulations for the treatment of osteoarthritis are known in the relevant field. However, there is still a need in the relevant technical field for intra-articular gel formulations with pH stability that are suitable for use in tissue and cartilage regeneration treatment. The present invention provides an intra-articular gel formulation with a stable pH compatible with the synovial fluid pH range observed in osteoarthritis patients. This formulation increases patient compliance by preventing irritation and pain that may occur during and after application. Furthermore, the present invention provides a composition and formulation with high stability, thus extending shelf life. Therefore, the compositions and formulations of the present invention are advantageous in that they provide products that are pH stable, maintain the efficacy and stability of the active ingredient, and minimize side effects. Brief Description of the Invention In one aspect, the invention provides an intra-articular gel composition, said composition comprising the following components by weight: - 0.1 to 2% NaH 2 PO 4 , - 1 to 8% Na 2 HPO 4 , - 25 to 15% NaCl, - 20 to 40% N-acetyl-D-glucosamine, - 75 to 225% glycine, - 35 to 20% proline, and - 15 to 45% sodium hyaluronate. The intra-articular gel composition of the invention preferably comprises the following components by weight: - 0.25 to 1.75% NaH 2 PO 4 , - 15 to 6% Na2HPO4, - 35 to 125% NaCl, - 225 to 375% N-acetyl-D-glucosamine, - 10 to 20% glycine, - 5 to 15% proline, and - 20 to 40% sodium hyaluronate. In a further preferred embodiment of the invention, the intra-articular gel composition of the invention contains the following components by weight: - 0.5 to 15% NaH2PO4, - 2 to 5% Na2HPO4, - 5 to 10% NaCl, - 25 to 35% N-acetyl-D-glucosamine, - 125 to 175% glycine, - 75 to 125% proline, and - 25 to 35% sodium hyaluronate. The intra-articular gel composition of the invention may also be mixed with a carrier liquid, more preferably water for injections, and administered in a suitable The intra-articular gel formulation of the invention preferably contains 5 mg to 40 mg of sodium hyaluronate in 1 ml of water. In further preferences, the amount of sodium hyaluronate is 15 mg. The proline and glycine amino acids contained in the intra-articular gel composition or formulation of the invention are preferably in the L configuration. In another aspect, the invention provides the intra-articular gel formulation of the invention for use in the prevention and/or treatment of tissue and/or cartilage degeneration in humans or animals. Said tissue and/or cartilage degeneration is preferably tissue and/or cartilage degeneration due to osteoarthritis. Detailed Description of the Invention The present invention relates to an intra-articular gel formulation with high pH stability. Said formulation contains NaH, N-acetyl-D-glucosamine, glycine, proline and sodium hyaluronate. The intra-articular gel formulation of the invention, in preventing and/or treating cartilage degeneration, particularly in the treatment of osteoarthritis. Thus, the present invention in one aspect provides an intra-articular gel formulation, said formulation containing the following components by weight: - 0.1 to 2% NaH2PO4, - 1 to 8% NaHPO4, - 25 to 15% NaCl, - 20 to 40% N-acetyl-D-glucosamine, - 75 to 225% glycine, - 35 to 20% proline, and - 15 to 45% sodium hyaluronate. The formulation of the invention preferably contains said components in the following proportions by weight: - 0.25 to 1.75% NaH2PO4, - 15 to 6% NaHPO4, - 35 to 125% NaCl, - 225 to 375% N-acetyl-D-glucosamine, - 10 to 20% glycine, - 5 to 15% proline, and - 20 to 40% sodium hyaluronate. The formulation of the invention more preferably contains the said components in the following proportions by weight: - 0.5 to 15% NaH2PO4, - 2 to 5% Na2HPO4, - 5 to 10% NaCl, - 25 to 35% N-acetyl-D-glucosamine, - 125 to 175% glycine, - 75 to 125% proline, and - 25 to 35% sodium hyaluronate. The composition or formulation according to the present invention is intended to provide a product with high pH stability. The present inventors have shown that combining the components of the composition in the above-mentioned proportions results in a product with high pH stability, as will be explained in more detail later. Accordingly, the composition of the present invention may contain the components NaH2PO4, Na2HPO4, NaCl, N-acetyl-D-glucosamine, glycine, proline and sodium hyaluronate in any percentage range by weight specified above, up to 100%. For example, the intra-articular gel composition of the present invention may contain by weight: - 2% NaH2PO4, - 4% Na2HPO4, - 7% NaCl, - 30% N-acetyl-D-glucosamine, - 15% glycine, - 10% proline, and - 32% sodium hyaluronate. The composition of the present invention may also be mixed with a carrier liquid, more preferably water for injection, to obtain formulations of the invention. The amount of water for injection in which the components of the formulation are dissolved is preferably 1 ml. The proline and glycine amino acids contained in the intra-articular gel composition of the invention are preferably in the L configuration. In another aspect, the invention provides the intra-articular gel composition or formulation of the invention for use in the prevention and/or treatment of tissue and/or cartilage degeneration in humans or animals. Said tissue and/or cartilage degeneration is preferably tissue and/or cartilage degeneration due to osteoarthritis. The molecular weight of sodium hyaluronate contained in the intra-articular gel composition of the invention is preferably in the range of 800 kDa to 3 MDa, more preferably in the range of 1 MDa to 2.5 MDa. The molecular weight of sodium hyaluronate contained in the formulation of the invention may be, for example, 800 kDa, 1 MDa, 1.5 MDa, 2 MDa, 2.5 MDa or 3 MDa. The intra-articular gel composition of the invention The amount of sodium hyaluronate in 1 ml of the gel formulation (i.e., in 1 ml of water for injection) is preferably in the range of 5 mg to 40 mg, more preferably in the range of 7.5 mg to 30 mg. More particularly, the amount of sodium hyaluronate in 1 ml of water for injection is in the range of 10 mg to 20 mg. The amount of sodium hyaluronate in 1 ml of water for injection is, for example, most preferably 15 mg of hyaluronate. The amount of glycine in 1 ml of the intra-articular gel formulation of the invention is preferably in the range of 1 mg to 15 mg, more preferably in the range of 2.25 mg to 12.5 mg. More particularly, the amount of glycine in 1 ml of water for injection is in the range of 5 mg to 10 mg. The amount of glycine in 1 ml of water for injection is, for example, 5 mg, 6 mg, The amount of proline in 1 ml of water for injections is most preferably 7.5 mg. Said glycine is preferably L-glycine. The amount of proline in 1 ml of the intra-articular gel formulation of the invention (i.e. in 1 ml of water for injections) is preferably in the range of 1 mg to 12.5 mg, more preferably in the range of 2.5 mg to 7.5 mg. More particularly, the amount of proline in 1 ml of water for injections is in the range of 3.75 mg to 6.5 mg. The amount of proline in 1 ml of water for injections may, for example, be 3.75 mg, 4 mg, 4.5 mg, 5 mg, 5.5 mg, 6 mg or 6.5 mg. The amount of proline in 1 ml of water for injections is most preferably mg. Said proline is preferably L-proline. The intra-articular gel of the invention The amount of N-acetyl-D-glucosamine in 1 ml of the formulation (i.e. in 1 ml of water for injection) is preferably in the range of 5 mg to 30 mg, more preferably in the range of 7.5 mg to 25 mg. More particularly, the amount of N-acetyl-D-glucosamine in 1 ml of water for injection is in the range of 10 mg to 20 mg. The amount of proline in 1 ml of water for injection may be, for example, 10 mg, 12.5 mg, 15 mg, 17.5 mg. The amount of N-acetyl-D-glucosamine in 1 ml of water for injection is most preferably 15 mg. The N-acetyl-D-glucosamine may be synthetic. The amount of NaH2PO4 in 1 ml of the intra-articular gel formulation of the invention is in the range of 10 mg to 0.60 mg. The amount of NaH2PO4 in 1 ml of water for injection is most preferably 0.45 The amount of NazHPO4 (disodium phosphate) in 1 ml of the intra-articular gel formulation of the invention (i.e., in 1 ml of water for injection) is preferably in the range of 0.5 mg to 5 mg, more preferably in the range of 1 mg to 3.5 mg. The amount of NazHPO4 in 1 ml of water for injection is most preferably 2 mg. The amount of NaCl (sodium chloride) in 1 ml of the intra-articular gel formulation of the invention (i.e. in 1 ml of water for injection) is preferably in the range of 2.5 mg to 7.5 mg, more preferably in the range of 3.5 mg to 6 mg. The amount of NaH2PO4 in 1 ml of water for injection is most preferably 4.5 mg. The formulation of the invention may contain any combination of the components of the formulation corresponding to the amount ranges given above. The inventors have discovered that combining the components of the formulation in these amount ranges advantageously allows both the effectiveness of the active substance and the pH stability of the formulation to be kept high. Formulation Example 1: Intra-articular Gel Formulation in 1 ml of Water for Injection In a preferred embodiment of the present invention, the intra-articular gel formulation in water for injection is The gel formulation is given in Table 1 below. Table 1: Intra-Articular Formulation in 1 ml Water for Injection Ingredient name Amount (mg) NaHPO4 2.00 N-Acetyl-D-glucosamine 15.00 L-glycine 7.50 L-proline 5.00 Sodium hyaluronate 15.00 The gel of Example 1 is an intra-articular matrix gel which is effective in the treatment of osteoarthritis, degenerative joint diseases and degenerative meniscus tears due to synovial fluid deficiency and in supporting cartilage regeneration. The gel is administered into the joint by injection. DH Stability Studies As explained in detail above, it is essential that intra-articular gel formulations be kept stable at a preferred pH value. The inventors, in their studies, As a result of observations, they realized that the gel of the invention presented for application to osteoarthritis patients should be kept stable around pH 7.0. pH stability evaluation was carried out for the intra-articular gel formulations according to the invention containing hyaluronate in the following Tables 2 and 3 under two different conditions: 1] pH Values for Hand Samples Containing No Glycine and Proline (Table 2) and 2] pH Values for Hand Samples Containing Glycine and Proline (Table 3). Table 2: pH Values of Hand Samples Containing No Glycine and Proline before and after sterilization .. _ _ .. _ pH (After Sterilization) Samples pH (Before Sterilization) (121°C 15 minutes) mg/ml Intra-articular gel formulation containing hyaluronate 7.01 7.16 13 mg/ml Hyaluronate-containing 6.92 7.09 intra-articular gel formulation 18 mg/ml Hyaluronate-containing 7.03 7.26 intra-articular gel formulation 13 mg/ml Hyaluronate-containing 6.99 6.98 intra-articular gel formulation Table 3: pH Values of Hand Samples Containing Glycine and Proline before and after Sterilization .. _ _ .. _ pH (After Sterilization) Samples pH (Before Sterilization) (121°C 15 minutes) mg/ml Hyaluronate-containing 7.00 6.93 intra-articular gel formulation 18 mg/ml Hyaluronate-containing 7.03 7.26 intra-articular gel formulation 18 mg/ml Hyaluronate-containing 7.05 7.45 formulation 7.01 7.00 intra-articular gel formulation containing 18 mg/ml Hyaluronate 7.00 6.98 intra-articular gel formulation containing mg/ml Hyaluronate 7.00 6.99 intra-articular gel formulation When Table Z is examined, it is seen that the pH values of the gel formulations not containing glycine and proline are around 7.0, while the pH values of the formulations containing hyaluronate are around 7.0. However, after autoclaving at 121°C for 1 minute, a large deviation is observed in the pH values for all concentrations, and the pH values even exceed 7.4 for some concentrations. When Table 3 is examined, it is seen that the pH values of the gel formulations containing glycine and proline show a high stability around pH 7.0 both before and after sterilization. In light of this information, it is seen that the gel formulation examples of the invention, if they contain glycine and proline, They largely maintain their pH stability before and after sterilization (autoclave). It is known in the relevant art that intra-articular compositions with a pH value of 7.4 or higher can activate inflammatory enzymes and cause various adverse effects such as pain, inflammation, skin pigment changes, fat atrophy and joint infection after injection and can negatively affect the stabilization of the drug (Iannitti, T., Lodi, D., Clinical Use of Hyaluronic Acid. Drugs in R&D, 11( 1), 13-27). Therefore, the formulations of the present invention, which have a highly stable pH value thanks to the glycine and proline components and their specific percentages in the formulation, increase patient compliance thanks to their pH stability and enable the injection of the active substance with maximum efficiency. The intra-articular gel formulation of the present invention is stable thanks to the components it contains and their specific weight percentages, The pH level of the formulation is largely maintained around 7.0 and thus can be safely injected into the synovial fluid without causing irritation or pain to the patient.TR TR TR TR

Claims

REQUESTS

1. It is an intra-articular gel composition, and its feature is that it contains the following components by weight:

2. Intra-articular gel composition according to claim 1, characterized in that it contains the following components by weight:

3. Intra-articular gel composition as claimed in claim 2, characterized in that it contains the following components by weight:

4. An intra-articular gel composition according to any one of claims 1 to 3, characterised in that the amino acids glycine and proline present in the composition are in the L configuration. An intra-articular gel formulation comprising the intra-articular gel composition according to any one of the preceding claims together with water for injections. An intra-articular gel formulation according to claim 5, characterised in that it contains between 5 mg and 40 mg of sodium hyaluronate in 1 ml of water for injections. An intra-articular gel formulation according to claim 6, characterised in that it contains 15 mg of sodium hyaluronate in 1 ml of water for injections. Intra-articular gel formulation as claimed in claim 5, characterized in that it contains the following components by weight: Ingredient name Amount (mg) NazHPO4 2.00 N-Acetyl-D-glucosamine 15.00 L-glycine 7.50 L-proline 5.00 Sodium hyaluronate 15.00 Intra-articular gel composition as claimed in any one of claims 1 to 4 or intra-articular gel formulation as claimed in any one of claims 5 to 8 for use in the prevention and/or treatment of tissue and/or cartilage degeneration in humans or animals. Composition or formulation suitable for use as claimed in claim 9, characterized in that said tissue and/or cartilage degeneration is tissue and/or cartilage degeneration due to osteoarthritis.