SU600179A1 - Штамм 220-тесткультура дл вы влени вирулентных и умеренных бактериофагов мезофильных молочнокислых стрептококков - Google Patents

Description

в диаметре. Форма клеток кокки, диплококки н короткие цепочки по 4-6 сегментов. На поверхности агара с гидролизованным молоком через двое суток образует круглые белые колонии с гладкими кра ми и размером 1- 2 мм в диаметре. На агаре с гидролизованным молоком и мелом и бромкрезолпурпуром двухсуточные колонии белые, слегка матовые, с ровным краем и зонами. Размер их 1,8- 4,0 мм в диаметре дает обильный рост па жидком гидролизованном молоке, сусле и каиустном отваре, образу  равномерное помутнение культуральиой среды и слабый осадок. Оптимальна  темнература роста 28-30° С. За 6-7 ч при росте па молоке образует плотный колющнйс  сгусток со слегка крупитчатой консистенцией.

Физиолого-биохимические лр-изпа.ки. Энерги  кислотообразовани  88-96° Т, предел кислотообразовапи  120° Т. В течение 17 ч культивировани  образует 0,9 мл 0,1 N NaOH летучих кислот и незначительное количество (следы) четырехуглеродных соединений. При сбраживании аргинина образует аммиак.

Протеолитическа  активность 6,5 мг. % тирозина .

Отношение к источникам углерода.

Сбраживает арабинозу, глюкозу, фруктозу, галактозу, мальтозу, лактозу и декстрин. Не сбраживает рафинозу, маннит и сорбит.

Дл  сравнени  чувствительности вы вленного штамма 220 к фагам были проведены исследовани  культур из отраслевой коллекции В НИМИ.

Было установлено, что по сравнению со штаммами 553 и 629 он обладает более высокой чувствительностью к внрулентным фагам и в отличие от них снособен лизироватьс  умеренными фагами, следовательно, вы вл ть лизогенные культуры. Кроме того, понул цн  указанного штамма отличаетс  тем, что полностью состоит из клеток, чувствительных к фагам. Это свидетельствует о гомогенности попул ции штамма, т. е. о его ценности как тест-культуры.

Пример 1. Вы вление лизогенного состо ни  культур мезофильных молочнокислых стрентококков на тест-культуре 220 при селекции культур.

Испытуемую на лнзогенность культуру выращнвают в гидролизованном молоке. После 5-6 ч роста ее обрабатывают хлороформом, внесенным в соотношении 10:1, смесь взбалтывают и центрифугируют при 4-5 тыс. об/мин в течении 30 мин. Наличие фага в надосадочной жидкости исследуют методом агаровых слоев. Нижним слоем  вл етс  агар из гндролизованного молока (1,5%). Верхний слой готовитс  следующихм образом: в нробирку с 3,5 мл полужидкого агара с гидролизованным молоком (0,75%) внос т 0,1-0,2 мл 5-6-часовой тест-культуры Str. lactis 220 и 1 мл надосадочной жидкости исследуемого на лизогенпость штамма. Чашки термостатируют

17-19 ч, после этого отмечают наличие или отсутствие негативных колоний фага.

Наличие мелких негативных колоний с мутным центром свндетельствует о лизогенносги культур.

Пример 2. Вы вление вирулентных бактериофагов мезофильных молочнокислых стрентококков на тест-культуре Str. lactis 220 в производственных услови х.

Р1сследование вирулентных бактериофагов на тест-культуре Str. lactis 220 нровод т следуюнгим образом. На чашку Петри с подсун енной плотной питательной средой (1,5% агара) нанос т 0,1-0,2 мл 5-6-часовой тесткультуры Str. lactis 220, выращенной в гидролизованном молоке, и распредел ют шпателем на поверхностн дл  получени  сплошного роста культуры (газона). Образцы, подготовленные дл  исследовани 

на наличие фага (лабораторна  и производственна  закваска, сыворотка, сырое и пастеризованное молоко, смывы с оборудовани  и т. д.), нанос т дорожкой на культуру, засе нную газоном; чашки термостатируют при

30° С 17-19 ч. Если в месте нанесени  образна по вл етс  зона лизиса или отдельные негативные колонии круглые нрозрачные d 1,8-2,3 мм, то считают, что в нем имеетс  бактериофаг. При отсутствии зон лизиса или

отдельных негативных колоний в месте нанесенн  образца считают, что в нем (образце) бактериофаг отсутствует.

Использование предлагаемого шта.мма Str. lactis 220 в качестве тест-культуры дл  онределени  вирулентных фагов с широким спектром литического действи  и умеренных фагов, продуцируемых лизогеннымн культурами, позвол ет достаточно нолно вы вл ть вирулентные фаги и лизогенные культуры (носнтели

умеренных фагов) и тем самым своевременно нредунреждать случаи нарушени  кисломолочного процесса на производстве, вызываемого бактериофагом.

Claims (3)

1.Авторское свидетельство СССР Л 557099 С 12К 1/02, 1975.

2.Авторское свидетельство ио за вке Л9 2357583/28-13, кл. С 12К 1/02, 1976, но которой прин то решение о выдаче авторского свидетельства.

3.Von G. Engel, К- Е. von Milczewski und А. Lembke. Versuche zur Differenzierung von Phagen der Streptococcus lactis- und creinorisGruppe: Bakterienspektrum, serologische Beziehungen und morphologische Kriterien.- «Kiel rnilchwirtschaftliche Forschungsberichte, 1975, V. 27, No. 1, S. 25-48.