SU1723120A1 - Strain of influenza virus a (hio ni) for preparing diagnostic preparations - Google Patents
Strain of influenza virus a (hio ni) for preparing diagnostic preparations Download PDFInfo
- Publication number
- SU1723120A1 SU1723120A1 SU904842334A SU4842334A SU1723120A1 SU 1723120 A1 SU1723120 A1 SU 1723120A1 SU 904842334 A SU904842334 A SU 904842334A SU 4842334 A SU4842334 A SU 4842334A SU 1723120 A1 SU1723120 A1 SU 1723120A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- strain
- recombinant
- virus
- influenza
- influenza virus
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 7
- 241001500351 Influenzavirus A Species 0.000 title description 2
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 claims abstract description 5
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 claims abstract description 3
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 abstract description 7
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 abstract description 7
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 abstract description 7
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 abstract description 7
- 239000012502 diagnostic product Substances 0.000 abstract description 4
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 abstract description 3
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000006798 recombination Effects 0.000 abstract description 3
- 238000005215 recombination Methods 0.000 abstract description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 abstract description 3
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 abstract description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 6
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 6
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 5
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 5
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 5
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 5
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 3
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 3
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000700112 Chinchilla Species 0.000 description 1
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000607598 Vibrio Species 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000003067 hemagglutinative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 208000037797 influenza A Diseases 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000004985 myeloid-derived suppressor cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 210000003501 vero cell Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к вирусологии, в частности к производству вирусологических диагностических препаратов. Цель изобретени - использу метод рекомбинации , получить новый вариант штамма-ре- комбинанта вируса гриппа H10N1, обладающего специфической иммуноген- ной активностью, позвол ющей использовать его дл приготовлени диагностических препаратов при идентификации вновь выдел емых вирусов гриппа. Штамм (Ш) вируса гриппа A(C10N1) представл ет собой селекционированный ре- комбинант вирусов гриппа человека и птиц с новой антигенной формулой. LL агглютинирует эритроциты кур в титрах 1:640, активно репродуцируетс при оптимальной This invention relates to virology, in particular to the production of virological diagnostic products. The purpose of the invention is to use a recombination method to obtain a new variant of the H10N1 influenza virus recombinant, which has a specific immunogenic activity that allows it to be used to prepare diagnostic products for identifying newly isolated influenza viruses. The strain (III) of influenza A virus (C10N1) is a selective recombinant of human and avian influenza viruses with a new antigen formula. LL agglutinates chicken erythrocytes in titers of 1: 640, is actively reproduced at optimal
Description
Изобретение относитс к вирусологии , в частности к производству вирусологических диагностических препаратов .This invention relates to virology, in particular to the production of virological diagnostic products.
Возможность экспериментального получени антигенных рекомбинантов, обладающих гемагглютинином одного вируса и нейраминидазой другого, продемонстрирована р дом исследователей, Большое количество подобных штаммов в последние годы изолировано от диких и домашних птиц и в естественных услови х в результате широко развернутого экологического изучени диких птиц в различных странах. Однако отсутствуют сведени о получении штамма- рекомбинанта вируса гриппа человека и птиц с сочетанием поверхностных антигенов H10JXII.The possibility of experimentally producing antigen recombinants possessing hemagglutinin of one virus and neuraminidase of another has been demonstrated by a number of researchers. A large number of such strains have been isolated from wild and domestic birds in recent years as a result of extensive environmental studies of wild birds in various countries. However, there is no information about obtaining recombinant strain of human and avian influenza virus with a combination of surface antigens H10JXII.
Цель изобретени - использу метод рекомбинации,- получить новый вариант штамма-рекомбинанта вируса гриппа H10N1, обладающего специфической имму- ногенной активностью, позвол ющей ис- пользовать его. дл приготовлени диагностических препаратов при идентификации вновь выдел емых вирусов гриппа.The purpose of the invention, using the recombination method, is to obtain a new variant of the recombinant strain of the H10N1 influenza virus, which has a specific immunogenic activity that allows it to be used. for the preparation of diagnostic products for the identification of newly isolated influenza viruses.
Штамм получен в опытах рекомбинации между вирусом гриппа человека A/PR/8/34 (H1N1) и вирусом гриппа птиц А/Трав- ник/Алма-Ата/760/79 (H10N5). Направленна селекци проводилась в системе куриных эмбрионов в присутствии гипериммунной сыворотки к рекомбинантному штамму H1N5. После 5 последовательных пассажей в присутствии сыворотки выделен рекомбинант, обозначенный R-1 с антигенной формулой H10N1. Полученный рекомбинант трижды клонирован методом предельных разведений и был генетически стабилен. Антигенна характеристика и результаты изучени генетических признаков у родительских вирусов и рекомбинантов представлены в табл. 1 и 2.The strain was obtained in recombination experiments between the human influenza virus A / PR / 8/34 (H1N1) and the avian influenza virus A / Travnik / Alma-Ata / 760/79 (H10N5). Directed selection was carried out in the chicken embryo system in the presence of hyperimmune serum to the recombinant strain H1N5. After 5 consecutive passages in the presence of serum, the recombinant, designated R-1 with the antigenic formula H10N1, was isolated. The recombinant obtained was cloned three times by limiting dilution and was genetically stable. The antigenic characterization and results of the study of genetic traits in parental viruses and recombinants are presented in Table. 1 and 2.
Из таблицы следует, что рекомбинант обладал гемагглютинином птичьего вируса - НЮ и нейраминидазой N1 человеческого штамма.It follows from the table that the recombinant possessed the avian virus hemagglutinin — NU and neuraminidase N1 of the human strain.
Представленный штамм депонирован под номером ГКВ № 2235 и имеет следующие молекул рно-биологические свойства.The presented strain was deposited under STB number No. 2235 and has the following molecular biological properties.
Адаптационные свойства. Полученный рекомбинант активно репродуцируетс в системе куриного эмбриона при оптималь- ной (36°С), повышенной (40°С) температурах до инфекционного титра 8,25-8,75 Ig ЭИДзо/0,2 мл и менее активно при пониженной (28°С) температуре инкубации. Рекомбинант обладает высокой гемагглю- тинирующей(титр 1/512-1/1024) и иммуно- генной активностью.Adaptation properties. The resulting recombinant is actively reproduced in the chicken embryo system at optimal (36 ° C), elevated (40 ° C) temperatures to an infectious titer of 8.25-8.75 Ig EIDzo / 0.2 ml and less active at low (28 ° C) incubation temperature. The recombinant has a high hemagglutinating (titer 1 / 512-1 / 1024) and immunogenic activity.
Полученный рекомбинант репродуцируетс в клетках МДСК до 4,0 Ig ТЦД50, в клетках Vero - 4647 до 3,01д ТЦДзо, в клет- ках ВНК-21 до 2,01д ТЦДбО и в первичных клетках ФЭЧ до 2,01д ТЦЦбО.The resulting recombinant is reproduced in MDSC cells to 4.0 Ig TCD50, in Vero cells - 4647 to 3.01 d TCDzo, in BHK-21 cells to 2.01 d TPDBO, and in primary PHC cells to 2.01 d TCLO.
У рекомбинанта R-1 степень репродукции в органных культурах почек эмбриона человека на 1-21д была выше способностиIn recombinant R-1, the degree of reproduction in organ cultures of the kidneys of a human embryo was 1-21d higher than
к репродукции обоих родителей (A/PR/8/34, А/Травник/Алма-Ата/760/79).to the reproduction of both parents (A / PR / 8/34, A / Travnik / Alma-Ata / 760/79).
Терморезистентность (Tse - признак). Селекционированный рекомбинант обладает так же, как и один из родительских штаммов A/PR/8/34 (H1N1), терморезистентным гемагглютинином (Tse - 2 ч). Однако гемагг- лютинин вируса-рекомбинанта был более устойчив к прогреванию, чем гемагглюти- нин другого родительского штамма А/трав- ник/Алма-Ата/760/79.Thermal resistance (Tse - sign). The selected recombinant possesses, as well as one of the parent strains A / PR / 8/34 (H1N1), a heat-resistant hemagglutinin (Tse - 2 h). However, the hemagglutinin of the recombinant virus was more resistant to heating than the hemagglutinin of another parent strain A / Travnik / Alma-Ata / 760/79.
Патогенные свойства. Исследуемый штамм-рекомбинант про вл ет слабо выраженную патогенность (2,01g LDso) дл белых мышей по сравнению со штаммом A/PR/8/34(H1N1), вызывающим гибельжи- вотных в дозе 4,01g LDso.Pathogenic properties. The recombinant strain under study shows mild pathogenicity (2.01g LDso) for white mice compared with the strain A / PR / 8/34 (H1N1), which causes death of bovine at a dose of 4.01g LDso.
Моле кул рно-биологический анализ. Анализ генов предлагаемого штамма показал , что рекомбинант R-1 приобрел от родительского штамма A/PR/8/34 4 гена (NP, NA, М и NS), остальные4 гена (РВ1, РВ2, РА, НА) - от другого родител А/травник/Алма- Ата/760/79.Molecular biological analysis. An analysis of the genes of the proposed strain showed that recombinant R-1 acquired 4 (NP, NA, M and NS) genes from the parent strain A / PR / 8/34, and the remaining 4 genes (PB1, PB2, PA, ON) from another parent A / herbalist / Alma-Ata / 760/79.
Пример. Диагностическую иммунную сыворотку получают на кроликах породы шиншилла или на белых крысах. В качестве антигена дл иммунизации используют элюат вируса из формалинизированных эритроцитов кур. Титр гемагглютининов составл ют 1/1024..Example. Diagnostic immune serum is obtained on chinchilla rabbits or on white rats. As an antigen for immunization, a virus eluate from formalinized chicken erythrocytes is used. The titer of hemagglutinins is 1/1024 ..
Схема иммунизации. Кролику непосредственно в оба подколенных лимфатических узла ввод т 0,1 мл антигена с адьювантом. Через мес ц повторно инъецируют антиген в том же количестве, но без адьюванта. Антиген развод т в большом количестве физиологического раствора и ввод т кролик м внутривенно (0,2 мл), внутримышеч о (передн лапа; 0,4 мл) и в область одного из подколенных лимфатических узлов (0,4 мл). Кровь у кроликов берут из краевой вены уха через 10-14 дней после иммунизации.Immunization scheme. The rabbit was injected directly into both popliteal lymph nodes with 0.1 ml of antigen with adjuvant. After months, the antigen is re-injected in the same amount, but without the adjuvant. The antigen is diluted with a large amount of saline and the rabbit is administered intravenously (0.2 ml), intramuscular (front paw; 0.4 ml) and in the region of one of the popliteal lymph nodes (0.4 ml). Rabbit blood is taken from the marginal ear vein 10–14 days after immunization.
Специфичность и активность антисывороток определ ют в РТГА, Полученные сыворотки имеют титр антигемагглютини- рующих антител 1:5120 и выше.The specificity and activity of antisera is determined in rtga. The resulting sera have a titer of anti-haemagglutinating antibodies of 1: 5120 and above.
Иммунную сыворотку освобождают от неспецифических ингибиторов обработкой отечественным препаратом нейраминида- зы из нехолерного вибриона (RDE).The immune serum is freed from non-specific inhibitors by treatment with a domestic preparation of neuraminidase from non-cholera vibrio (RDE).
Предлагаемый штамм-рекомбинант вируса гриппа A(H10N1)-R-1 и изготовленный на его основе диагностический препарат может найти применение в вирусологической практике дл идентификации вновьThe proposed recombinant strain of influenza A (H10N1) -R-1 virus and a diagnostic preparation based on it can be used in virological practice for identifying again
выделенных штаммов и изучени иммунологической структуры населени , домашних и диких животных.isolated strains; and studying the immunological structure of the population, domestic and wild animals.
Ф о р м у л а и з о б р ет е н и Штамм вируса гриппа А(Н10М1), ГКВ F o rm u l a i z o b r e e n Strain of influenza A virus (H10M1), STB
2235, дл приготовлени диагностических2235, for the preparation of diagnostic
препаратов.drugs.
Таблица 1 Изучение антигенного состава родительских штаммов и рекомбинантаTable 1 The study of the antigenic composition of the parent strains and recombinant
Таблица2Table 2
Антигенные и биологические свойства родительских штаммов и рекомбинантовAntigenic and biological properties of parental strains and recombinants
А/РК/В/ЗA / RK / B / C
H1N1H1N1
М 5,0M 5.0
8,08.0
5,05.0
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU904842334A SU1723120A1 (en) | 1990-05-11 | 1990-05-11 | Strain of influenza virus a (hio ni) for preparing diagnostic preparations |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU904842334A SU1723120A1 (en) | 1990-05-11 | 1990-05-11 | Strain of influenza virus a (hio ni) for preparing diagnostic preparations |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1723120A1 true SU1723120A1 (en) | 1992-03-30 |
Family
ID=21522640
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU904842334A SU1723120A1 (en) | 1990-05-11 | 1990-05-11 | Strain of influenza virus a (hio ni) for preparing diagnostic preparations |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1723120A1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1313605C (en) * | 2005-07-08 | 2007-05-02 | 扬州大学 | Gene recombinant fowl influenza virus D3/F-R2/6 and its construction method |
-
1990
- 1990-05-11 SU SU904842334A patent/SU1723120A1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Эпидемиологи - В кн. Вирусы гриппа и грипп /Под ред, Э.Д.Кильбурна. М., 1978.- 1.526-580. Murphy B.R., Buckler - White A.J., London W.T. et al. Avian-human reassortant in fluenza A viruses derived by mating avian and kuman influenza A viruses,- J. Infect. Dis,- 1984- vol. 150, N 6- p. 841-850. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1313605C (en) * | 2005-07-08 | 2007-05-02 | 扬州大学 | Gene recombinant fowl influenza virus D3/F-R2/6 and its construction method |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Henle et al. | Studies on the toxicity of influenza viruses: II. The effect of intra-abdominal and intravenous injection of influenza viruses | |
| Öppling et al. | Heterogeneity of the antigenic site responsible for the induction of neutralizing antibodies in infectious bursal disease virus | |
| Sha et al. | Induction of CD4+ T-cell-independent immunoglobulin responses by inactivated influenza virus | |
| Kilbourne | Comparative efficacy of neuraminidase-specific and conventional influenza virus vaccines in induction of antibody to neuraminidase in humans | |
| Lu et al. | Immunity to influenza A H9N2 viruses induced by infection and vaccination | |
| Riberdy et al. | Protection against a lethal avian influenza A virus in a mammalian system | |
| Warren | The relationships of the viruses of measles, canine distemper, and rinderpest | |
| EP0235391B1 (en) | Peptides corresponding to antigenic and immunogenic determinants of major neutralizing proteins of rotaviruses | |
| Balkovic et al. | Immunoglobulin G subclass antibody responses of mice to influenza virus antigens given in different forms | |
| Kennedy et al. | Production and characterization of bovine monoclonal antibodies to respiratory syncytial virus | |
| Hinshaw et al. | Antigenic comparisons of swine-influenza-like H1N1 isolates from pigs, birds and humans: an international collaborative study | |
| US4115195A (en) | Rabies vaccine preparation | |
| Pokrić et al. | Application of the immune complex for immune protection against viral disease | |
| SU1723120A1 (en) | Strain of influenza virus a (hio ni) for preparing diagnostic preparations | |
| Virelizier et al. | The role of humoral immunity in host defence against influenza A infection in mice | |
| Webster et al. | Studies on the origin of pandemic influenza: IV. Selection and transmission of “new” influenza viruses in vivo | |
| Laver et al. | Diversity of the antibody response to the different antigenic determinants on the hemagglutinin subunits of influenza viruses | |
| Nakanaga et al. | Differences in antibody production against mouse hepatitis virus (MHV) among mouse strains | |
| Adorini et al. | Monoclonal suppressor T-cell factor displaying VH restriction and fine antigenic specificity | |
| Laeeq et al. | Preferential selection of receptor-binding variants of influenza virus hemagglutinin by the neutralizing antibody repertoire of transgenic mice expressing a human immunoglobulin mu minigene | |
| RU2031118C1 (en) | Influenza b virus strain 151/91 for making diagnostics | |
| Ogier et al. | Distribution and phenotype of murine rotavirus‐specific B cells induced by intranasal immunization with 2/6 virus‐like particles | |
| Gordon et al. | Response of ferrets to mumps virus | |
| KR102656435B1 (en) | Novel fowl adenovirus and Fowl adenovirus polyvalent vaccine comprising the same as effective component | |
| SU1752765A1 (en) | Strain of chicken paramyxovirus, used for diagnostic preparations |