SU1703681A1 - Способ выделени бактерий BacILLUS масеRаNS из почвы - Google Patents
Способ выделени бактерий BacILLUS масеRаNS из почвы Download PDFInfo
- Publication number
- SU1703681A1 SU1703681A1 SU904801038A SU4801038A SU1703681A1 SU 1703681 A1 SU1703681 A1 SU 1703681A1 SU 904801038 A SU904801038 A SU 904801038A SU 4801038 A SU4801038 A SU 4801038A SU 1703681 A1 SU1703681 A1 SU 1703681A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- culture
- soil
- agar
- hours
- sample
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 24
- 239000002689 soil Substances 0.000 title claims abstract description 23
- 241000178960 Paenibacillus macerans Species 0.000 title claims abstract description 7
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims abstract description 15
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims abstract description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- HFHDHCJBZVLPGP-RWMJIURBSA-N alpha-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO HFHDHCJBZVLPGP-RWMJIURBSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims abstract description 6
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims abstract description 5
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 7
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 claims description 5
- 229920001450 Alpha-Cyclodextrin Polymers 0.000 claims description 4
- 229940043377 alpha-cyclodextrin Drugs 0.000 claims description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 8
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 abstract description 4
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 abstract description 4
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 abstract description 4
- 238000009331 sowing Methods 0.000 abstract description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 abstract description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 abstract description 2
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 abstract description 2
- 239000006152 selective media Substances 0.000 abstract description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 2
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 14
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 13
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 241000132152 Polymyxa Species 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001660259 Cereus <cactus> Species 0.000 description 1
- WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N beta-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к микробиологии , в частности к селекции микроорганизмов, и может быть использовано при выделении новых штаммов Bacillus macerans. Целью изобретени вл етс ускорение процесса выделени , а также повышение его селективности . Способ осуществл ют следующим образом. Накопительную культуру получают путем внесени пробы из водной суспензии образца почвы в селективную среду, содержащую, г/л: альфа-декстрин 3- 10; кукурузный экстракт 0.19-0.21; К2НР04 0.19-0.21; (МН4)2НР04 0,19-0.21; вода до 1 л. и инкубированием ее в атмосфере N2 при 48-49&deg;С в течение 48-50 ч. Чистую культуру выдел ют путем высева пробы из накопительной культуры на картофельно-глюкоз- ном агаре (КГА) и инкубировзнием npt- 48-49&deg;С в течение 48-50 ч. Полученные на КГА изолированные однотипные по морфологии колонии микроорганизмов пересевают нам со-пептонныйагар(МПА)и идентифицируют . Способ способствует 100% выделению бактерий Bacillus macerans. 6 табл. (/) С
Description
Изобретение относитс к экспериментальной микробиологии в частности к селекции микроорганизмов, может быть использовано при выделении новых штаммов Bacillus macerans.
Известен способ выделени В.macerans. предложенный F.Schardingem более подробно разработанный J.H.Northrop 1.2. Способ заключаетс в том. накопительную культуру получают путем инкубировани в течение 4-6 дней проб, вз тых с поверхности клубней картофел и помещенных в пробирки , содержащие ломтики стерильного картофел . Выращивание накопительной культуры провод т при 37°С. Чистую культуру получают высевом пробы из накопительной культуры методом Коха на глюкозный агар и инкубацией в течение 2 сут при 37°С.
Данный способ не обеспечивает селективности выделени Вас.macerans. так как на картофельной среде хорошо развиваютс Bac.subtilis, Bac.polimyxa. Bac.cereus, Bac.licheniformis. Bac.circulans и другие представители рода Bacillus, причем наиболее сильно доминируют виды Bac.subtilis и Bac.polymyxa, что очень сильно затрудн ет выделение Вас.macerans на стадии чистой культуры.
Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому эффекту вл етс способ выделени микроорганизмов вида Вас.macerans, включающий получение накопительной культуры путем 10-дневного инкубировани в анаэробных услови х, атмосфере N2. влажного образца почвы с периодическим (3 раза) добавлением к нему ШОз. Чистую культуру получают
о
со о
00
следующим образом. По окончании инкубации 1 г образца почвы суспендируют в стерильной воде и рассевают методом Коха на чашки Петри, содержащие глицериновый агар. Засе нные чашки Петри инкубируют при 28°С в течение 3-4 сут 3.
К недостаткам способа относитс то. что он длителен по времени и трудоемок, особенно на стадии получени накопительной культуры. Трудоемкость заключаетс в необходимости дискретного добавлени КМОз в образец почвы с последующим созданием анаэробных условий и поддержани определенной влажности образца почвы на прот жении 10 сут. Существенным недостатком вл етс также то. что в накопительной культуре кроме Bac.macerans хорошо развиваютс Bac.polymyxa и Bac.lichemiformis, что снижает селективность процесса выделени . Кроме того, способ неэффективен со многими образцами почв.
Целью изобретени вл етс ускорение процесса выделени , а также повышение его селективности.
Поставленна цель достигаетс тем, что согласно способу выделени микроорганизмов вида Bac.macerans из почвы, включающему получение накопительной культуры из образца почвы в анаэробных услови х в атмосфере азота с последующим пересевом на агаровую среду, культивированием бактерий и отбором типичных колоний по культура л ьно-морфологичес ким признакам, получение накопительной культуры осуществл ют путем посева суспензии, приготовленной из образца почвы на питательную среду, содержащую г/л:
Альфа-циклодекстрин3-10 Кукурузный экстракт 0.19-0,21 К2НРСм 0,19-0,21 (NH4bHPCU 0,19-0,21 Вода До 1 л из агаровых сред используют картофельно- глюкозный агар (КГА). при этом получение накопительной культуры и культивирование на агаровой среде осуществл ют при 48- 49°С в течение 48-50 ч.
Способ осуществл ют следующим образом .
Накопительную культуру получают путем внесени пробы из водной суспензии образца почвы в селективную среду особого состава с содержанием компонентов, г/л: Альфа-циклодекстрин3-10 Кукурузный экстракт 0.19-0,21 К2НРСм 0,19-0,21 (NHofcHPCU 0,19-0,21 Вода До 1 л и выращиванием в атмосфере N2 при 48- 49°С в течение 48-50 ч. Чистую культуру
выдел ют путем высева пробы из накопительной культуры на КГА и инкубированием при 48 49°С в течение 48 50 ч. Полученные на КГА изолированные колонии микроорганизмов одного морфологического типа пересевают на м со-пептонный агар (МПЛ) и идентифицируют известными методами Пример (прототип). К каждому из дес ти образцов почвы,
0 произвольно отобранных в лесопарковой зоне г.Уфы (диаметр образца 11 см, высота 7 см), добавл ют по 2,1 г КМОз и помещают в анаэростат. Инкубирование провод т при 28°С, в атмосфере N2, при посто нной влаж5 ности образца, равной 55%. Через 3 и 6 сут к каждому образцу почвы добавл ют повторно 2.1 г KNOa. Врем инкубации 10 сут. Чистую культуру выдел ют следующим образом: 1 г из каждого образца почвы по оконча0 нии .инкубации суспендируют в 100 мл стерильной воды и полученную суспензию высевают методом Коха на чашки Петри с глицериновым агаром, состава, г/л: Глицерин1.0
5Пептон 1,0 Дрожжевой экстракт 0,1 КМОз 3,0 Агар 10,0 Вода До 1 л
0Инкубируют засе нные чашки Петри при 28°С в течение 4 сут. По окончании инкубации на чашках Петри получают изолированные колонии различных морфологических типов (изол ты). Их пересевают на
5 кос ки с МПА и идентифицируют по Берги и Гордон 3,4. Результаты идентификации и количество колоний, высе нных с каждого образца почвы, приведены в табл. 1.
Пример 2. 1г почвы из образцов.
0 отобранных при тех же услови х, что и в примере 1, суспендируют в 50 мл стерильной воды и 0,5 мл полученной суспензии внос т в пробирки с 5 мл стерильной среды, состава, г/л:
5 Альфа-циклодекстрин5,0 Кукурузный экстракт 0,2 К2НРСМ 0.2 (МН4)2НР04 0,2 Вода До 1 л
0Пробирки помещают в анаэростат и инкубируют при 48°С в течение 48 ч в атмосфере N2. По окончании выращивани пробы из каждой пробирки рассевают методом Коха на чашки Петри со стерильным КГА. За- 5 се нные чашки Петри инкубируют при 48°С в течение 48 ч. По окончании инкубации на чашках Петри получают изолированные колонии одного морфологического типа. Их пересевают на кос ки с МПА и идентифицируют по Берги и Гордон 3,4. Результаты
идентификации и количество изол тов. высе нных с каждою образца почвы, приведены в табл. 2.
П р и м е р 3. 1 г почвы образца 1 суспендируют в 50 мл стерильной воды и 0.5 мл полученной суспензии внос т в пробирки с 5 мл стерильных сред, состав которых приведен в табл. 4. Инокулированные пробирки помещают в анаэростат и выращивают первую повторность при 48°С. вторую - при 49°С в течение 48 ч в атмосфере N2. По окончании выращивани пробы из каждой пробирки пересевают методом Коха на чашки Петри с КГА. Засе нные чашки инкубируют при 48°С в течение 48 ч, По окончании инкубации на чашках Петри получают изолированные колонии одного морфологического типа. Их пересевают на кос ки с МПА и идентифицируют по Берги и Гордон 3.4. Результаты идентификации и количество изол тов. выросших из пробирок со средами 1-17. при 48 и 49°С. представлены в табл. 3.
Пример 4. 1 г почвы образца 1 суспендируют в 50 мл стерильной воды и 0,5 мл полученной суспензии внос т в пробирки с 5 мл стерильной среды 2 (см. табл. 4). Инокулированные пробирки помещают в анаэростат и выращивают при 48°С в атмосфере N2. Врем инкубировани одной пробирки составл ет 24 ч, второй - 36 ч. третьей - 45 ч. четвертой - 48 ч. п той - 50 ч, шестой 72 ч. По окончании инкубации пробы из каждой пробирки пересевают методом Коха на чашки Петри с КГА. Засе нные чашки инкубируют 48 ч при 48°С. По окончании инкубации на чашках Петри получают изолированные колонии одного морфологического типа. Их пересевают на кос ки с МПА и идентифицируют по Берги и Гордон 3,4. Результаты идентификации и количество изол тов. выросших на КГА. представлены в табл. 5,
Пример 5. 1 г почвы образца 1 суспендируют в 50 мл стерильной воды и 0,5 мл полученной суспензии ввод т в пробирки с 5 мл стерильной среды 2 (см табл. 4). Инокулированные пробирки выращивают в атмосфере No Одну пробирку при 50°С вторую при 49°С. третью при 48°С. четвертую при 45°С, п тую при 40°С. Врем инкубации составл ет 48 ч. По окончании инкубации пробы из каждой пробирки высевают методом Коха на чашки Петри с КГА Засе нные чашки Петри инкубир,ют при 48°С в течение 48 ч. По окончании инкубации на чашках Петри получают изолировэнные колонии, которые пересевают на кос ки с МПА и идентифицируют по Берги и Гордон 3.4. Результаты идентификации и количество изол тов, полученных на КГА. представлены в табл. 6.
Использование дл выращивани накопительной культуры жидкой среды с а/.ьфа- циклодекстрином позвол ет ускорить процесс выделени микроорганизмов вида B.macerans. Процесс выделени поданному
способу осуществл етс в течение 4 дней, в прототипе за 14 дней. Кроме этого, использование альфа-циклодекстрина в качестве единственного источника углерода и высокой температуры выращивани (48-49°С)
обеспечивает практически 100% селективность процесса выделени Bac.macerans из-за того, что представители этого вида наиболее хорошо приспособлены к потреблению этого углевода в анаэробных
услови х, при высокой температуре (48- 49°С). нежели другие виды микроорганизмов .
Claims (1)
- Формула изобретениСпособ выделени бактерий Bacillus macerans из почвы, включающий получение накопительной культуры из образца почвы в анаэробных услови х в атмосфере азота с последующим пересевом на агаровую среду . и культивированием бактерий и отбором типичных колоний по культурально-морфо- логическим признакам, отличающий- с тем. что. с целью ускорени процесса выделени и повышени его селективности.получение накопительной культуры осуществл ют путем посева суспензии, приготовленной из образца почвы, на питательную среду, содержащую, г/л:Альфа-циклодекстрин3-10Кукурузный экстракт 0.19-0.21 КаНРСМ 0,19-0.21 (МН4)НР04 0,19-0.21 Вода До 1 л. из агаровых сред используют картофельноглюкозный агар, при этом получение накопительной культуры и культивирование на агаровой среде осуществл ют при 48-49°С в течение 48-50 ч.Таблица 1Продолжение табл.3Таблица 4Таблица 5Таблица 6
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU904801038A SU1703681A1 (ru) | 1990-01-11 | 1990-01-11 | Способ выделени бактерий BacILLUS масеRаNS из почвы |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU904801038A SU1703681A1 (ru) | 1990-01-11 | 1990-01-11 | Способ выделени бактерий BacILLUS масеRаNS из почвы |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1703681A1 true SU1703681A1 (ru) | 1992-01-07 |
Family
ID=21501237
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU904801038A SU1703681A1 (ru) | 1990-01-11 | 1990-01-11 | Способ выделени бактерий BacILLUS масеRаNS из почвы |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1703681A1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2713120C1 (ru) * | 2019-05-29 | 2020-02-03 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Алтайский государственный университет" | Способ выделения бактерий p. Bacillus из ризопланы и ризосферы прикорневой зоны растений |
-
1990
- 1990-01-11 SU SU904801038A patent/SU1703681A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Zentr. Bact. Parasitenk. 1905. 14,772-781. Agricaltur Handbook, N 427. 1973, 275. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2713120C1 (ru) * | 2019-05-29 | 2020-02-03 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Алтайский государственный университет" | Способ выделения бактерий p. Bacillus из ризопланы и ризосферы прикорневой зоны растений |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2428467C2 (ru) | Жидкие бактериальные инокулянты с повышенным сроком годности и повышенной стабильностью на семенах | |
| Aspiras et al. | Potential biological control of bacterial wilt in tomato and potato with Bacillus polymyxa FU6 and Pseudomonas fluorescens | |
| CN102965315B (zh) | 一种龟裂链霉菌突变株及其制备方法和应用 | |
| CA2984620C (en) | Biofertilizer to increase agricultural yield | |
| CN114480171A (zh) | 一株大豆根瘤菌及其应用 | |
| CN111088169B (zh) | 一种木霉菌、微生物菌剂及其应用 | |
| Fermor et al. | Bacterial blotch disease of the cultivated mushroom Agaricus bisporus: screening, isolation and characterization of bacteria antagonistic to the pathogen (Pseudomonas tolaasii) | |
| SU1703681A1 (ru) | Способ выделени бактерий BacILLUS масеRаNS из почвы | |
| Patel et al. | Interactions of Azotobacter with rhizosphere and root-surface microflora | |
| JP6236660B2 (ja) | 植物の生育促進剤 | |
| CN109609399A (zh) | 一种苏云金芽孢杆菌DavⅣ及其应用 | |
| EP0380649B1 (en) | Biological inoculant effective against aphanomyces | |
| CN118909893B (zh) | 萎缩芽孢杆菌n-3及其在防治植物病害中的应用 | |
| Held | Improved culture methods for Rozella and for Olpidiopsis | |
| JP2001245656A (ja) | 新規微生物および当該微生物を利用した馬鈴薯そうか病防除方法 | |
| Eklund et al. | Establishment and disappearance of introduced pseudomonads in the rhizoplane of peat grown cucumber plants | |
| Hadi et al. | The Characteristics of Buprofezin Resistant Bacteria From Cassava Rhizosphere | |
| CN119040226B (zh) | 一株具有生防促生功效的水稻噬几丁质菌及其应用 | |
| CN108676765A (zh) | 一株烟草节杆菌及其在防治冬瓜根结线虫中的应用 | |
| JPH107483A (ja) | 植物の栽培促進剤およびそれを用いた植物の栽培促進方法 | |
| JP2846355B2 (ja) | 土壌病害防止法 | |
| RU2032345C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus licheniformis для получения препарата против белой гнили подсолнечника | |
| KR102105603B1 (ko) | 식물 생장 촉진 및 식물병 방제 활성을 갖는 판토에아 브렌네리 ang4 균주 및 이의 용도 | |
| US3793449A (en) | Antibiotic complex as an insecticidal and mothproofing agent | |
| KR0177478B1 (ko) | 에리스리톨 생성능을 갖는 칸디다속 균주 및 이를 이용한 에리스리톨의 제조방법 |