SU1586740A1 - Способ получени сорбента дл аффинной хроматографии - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к биоспецифическим сорбентам и позвол ет повысить сорбционную емкость и сократить длительность процесса получени  сорбента. Хлопковые волокна обрабатывают водным раствором периодата натри  до степени окислени  5-10%, затем носитель обрабатывают 5-20%-ным раствором альбумина в физиологическом растворе при PH 8-10 в течение 6 ч. Носитель промывают водой и обрабатывают 2-5%-ным раствором гормона в 70%-ном диоксане в присутствии карбодиимида. Продукт промывают диоксаном. 80--ным водным этанолом и водой. Получают сорбент с содержанием гормона 15-25 мг/г. 2 табл.

Description

Изобретение относитс  к биоспецифическим сорбентам и может быть использовано дл  выделени  чистых белковых рецепторов и антител гормонов.

Целью изобретени   вл етс  повышение сорбционной емкости и сокращение длительности процесса получени  сорбенТ 3.

Пример 1. Юг хлопковых волокон обрабатывают водным раствором периода- Р отношении йодной кислоты U,U7035 г на 1 г волокон при рН 4,5, модуле 5 и комнатной температуре в течение 24 ч Получают волокно со степенью окислени  5 X,. Полученное волокно обрабатывают 5%- ным раствором альбумина в забуференном физиологическом растворе при рН 8, модуле 5 в течение 6 ч при 20°С.

Волокно промывают водой в течение 1 ч при модуле 10 при 20°С и провод т

иммобилизацию гидрокортизона обработкой его 2%-ным раствором в 70%-ном водном диоксане в присутствии 50 мг 1-зтил-3-(3-диметиламинопропил)-карбоди- имида. Обработку продолжают 4 ч и добавл ют еще 50 мг карбодиимидаМодуль обработки 5. Врем  14 ч при 20°С.

Промывку целевого продукта провод т диоксаном в течение 1 ч при модуле 10 ч 80%-ным водным этанолом при модуле 51 ч и ВОДОЙ при модуле 10 15 мин. Контроль качества промывки провод т спектрофото- метрически. Целевой продукт содержит 50 мг/г альбумина и 15 мг/г гемисукцината гидрокортизона (табл. 1).

Пример 2. 10 г хлопковых волокон окисл ют по примеру 1, но при отношении йодной кислоты 0,09849 г на 1 г волокна Получают волокно со степенью окислени  7%. Полученное волокно обрабатывают

сл

00

ON К4

10%-ным раствором альбумина в забуфе- ренном физиологическом растворе при рН 9, модуле 5 в течение 6 ч при 20°С. Волокно промывают водой и провод т иммобилизацию гидрокортизона обработкой его 3%- ным раствором в70%-ном водном диоксане в услови х примера 1. Промывку провод т по примеру 1. Целевой продукт содержит 100 мг альбумина на 1 г носител  и 20 мг гемисукцината гидрокортизона на 1 г носител .

Пример 3. Окисление хлопковых .волокон провод т по примеру 1, но при отношении йодной кислоты 0,1407 г на 1 г волокна. Получают волокно со степенью окислени  10%. Полученное волокно обрабатывают 20%-ным раствором альбумина в забуференном физиологическом растворе при рН 10, модуле 5 в течение 6 ч при 20°С Волокно промывают водой и провод т обра ботку 5%-ным раствором гидрокортизона Б 70 %-ном водном диоксане в услови х при мера 1. Промывку провод т по примеру 1, Целевой продукт содержит 200 мг альбумина и 25 мл гормона на 1.г носител .

Пример 4. Юг хлопковых волокон обрабатывают по примеру 1 дл  получени  волокна, содержащего 50 мг/г альбумина. Вместо гемисукцината гидрокортизона к содержащему альбумин волокну добавл ют 2%-ный раствор гемисукцината эстрадиола и иммобилизацию его провод т по примеру 1 дл  геммсукцината гидрокортизона. Целевой продукт содержит 50 мг/г альбумина и 16 мг/г гемисукцината эстрадиола.

Сорбционные свойства Приведены в табл.2.

-

Пример 5. Юг хлопковых волокон обрабатывают по примеру 2. но вместо гемисукцината гидрокортизона добавл ют такое же количество гемисукцината эстрадиола. Промывку провод т по примеру 1. Целевой продукт содержит 100 мг альбумина на 1 г носител  и 22 мг гемисукцината эстрадиола на 1 г носител  (табл. 2).

Пример 6. Окисление 10 г хлопкового волокна и иммобилизацию на него альбумина провод т по примеру 3. При обработке гормоном вместо гемисукцината гидрокортизона добавл ют такое же количество гемисукцината эстрадиола (5%-ный раствор в 70%-ном диоксане в услови х примера 1), Промывку провод т по примеру 1. Целевой продукт содержит 200 мг альбумина и 27 мг гормона на 1 г носител  (табл. 2).

Данные по сорбционной емкости сорбентов , полученных предлагаемым и известным способами,представлены в табл. 1 и 2.

15

Из табл. 1 и 2 видно, что предлагаегльм способ позвол ет получить сорбент, содержащий в 10 раза больше иммобилизованного гормона, сорбционной емкостью в 220-370 раз больше, чеи у сорбента, получа- 20 sMoro по известному спссойу. Длительность процесса сокращаетс  с 73 до 40 ч, а полуна- емый сорбент не требует особых условий хранени  и может хранитьс  при атмосферном давлении и комнатной температуре.

Claims (1)

1. 25Формула изобретени 

   Способ получени  сорбента дл  аффинной хроматографии, включающий последовательную обработку текстильного носител , содержащего альдегидные группы, водным

   30 раствором альбумина.и раствором гормона в 70%-ном водном диоксане в присутствии карбодиимида с последующей промывкой полученного сорбента, отличающийс  тем, что, с целью повышени  сорбционной

   35 емкости и сокращени  длительности процесса , в качестве текстильного носител  используют альдегидсодержащий целлюлозный материал со степенью окислени  5- 10%, обработку провод т 5-20%-ным

   40 раствором альбумина в физиологическом растворе прирН 8-Ю до содержани  альбумина 50-200 мг/г носител  и затем 2-5%- ным раствором гормона до содеркани  15-25 мг/г носител  и продукт последова45 тельно промывают диоксаном, 80%-ным водным раствором этанола и водой.

   Таблица 1

   Таблица 2