[go: up one dir, main page]

SU1013470A1 - Питательна среда дл выращивани тул ремийного микроба - Google Patents

Питательна среда дл выращивани тул ремийного микроба Download PDF

Info

Publication number
SU1013470A1
SU1013470A1 SU813373500A SU3373500A SU1013470A1 SU 1013470 A1 SU1013470 A1 SU 1013470A1 SU 813373500 A SU813373500 A SU 813373500A SU 3373500 A SU3373500 A SU 3373500A SU 1013470 A1 SU1013470 A1 SU 1013470A1
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
glucose
medium
tyrosine
valine
proline
Prior art date
Application number
SU813373500A
Other languages
English (en)
Inventor
Виктор Григорьевич Майский
Игорь Николаевич Шишов
Юлия Васильевна Солдатова
Original Assignee
Научно-исследовательский противочумный институт Кавказа и Закавказья
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Научно-исследовательский противочумный институт Кавказа и Закавказья filed Critical Научно-исследовательский противочумный институт Кавказа и Закавказья
Priority to SU813373500A priority Critical patent/SU1013470A1/ru
Application granted granted Critical
Publication of SU1013470A1 publication Critical patent/SU1013470A1/ru

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ ТУЛЯРЕМИЙНОГО МИКРОБА, содержаща  1 -аргинин НС1, 1-цистен НС1, 1-гистидин НС1, dl-изoлeйцин,l-лейцин , (й -лизин HCl, dl-метионин, 1-пролин , dl-треонин, 1-тирозин, Т-валин, , NaCl, MgSO,. , соль фосфорной кислоты, тиамин, глюкозу и дистиллированную йоду, отличают а   с   тем, что, с целью унифицировани  среды, она дополнительно содержит пантотенат кальци , в качестве соли фосфорной кислоты она содержит при следующем количественном соотношении компонентов, г/л дистиллированной воды: 1-Аргинин НС10,15-0,25 1-Цистеин НС11,3-1,7 1-Гистидин НС11,8-2,2 dl-Изолейцин0,12-0,17 0,35-0,5 1-Лейцин 0,35-0, 1-Лизин НС1 0,,55 d1-Метионин 0,9-1,1 1-Пролин i dl-Треонин 1.9-2,1 0,15-0,25 I-Тирозин 0,75-0,85 1-Валин 2,6-3,1 КНуРО. Natr 1,5-5,5 0,03-0,05 MgS04-7H,,0 1,5-1.8 Хиамин СО,О15-0,025 Пантотенат 0,04-0., 06 СО 4ib кальци  :1A,0-16,0 Глюкоза

Description

Изобретение относитс  к микробиологии и касаетс  синтетических питательных сред дл  выращивани  тул ремийного микроба. Известна питательна  среда дл  выращивани  тул ремийного микроба кров ной глюкозо-цистиновый ПИ1 ательный агар Д ЮОднако на этой питательной среде не всегда возможно проводить мно гие бактериологические, генетические и биохимические исследовани  тул ремийного микроба. Наиболее близкой к изобретению  в л етс  питательна  среда дл  выращив ни  тул ремийного микроба, содержаща 1-аргинин НС1 , 1-цистеин НС1, 1-гист дин НС1 , dl-изолейцин, 1-лейцин, 1лизин НС1, dl-метионин, 1-пролин, dl-треонин, 1-тирозин, 1-валин, ., HaCl, MgSO 7H20 соль фосфорной кислоты, тиамин, глюкозу и ди тиллированную воду С 1 Однако на известной питательной среде невозможно получить рост широкого круга тул ремийных микробов. Целью изобретени   вл етс  уни цирование среды. Цель достигаетс  тем, что пита тельна  среда дл  выращивани  тул мийного микроба, содержаща  1-арг НС1, 1-цистеин НС1 .1-гистидин НС dl-изолейцин, 1-лейцин, 1-лизин Н dl-метионин, 1-пролин, dl-треонин 1-тирозин, 1-валин, KUgPO, NaCI, MgSO -7H/jO, соль фосфорной кисло ты, тиамин, глюкозу и дистиллиров ную воду, дополнительно содержит тотенат кальци , в качестве соли форной кислоты она содержит Ма„НР при следующем количественном соот шении компонентов, г/л дистиллиро ванной воды: 0,15-0,25 1-Аргинин НС1 1,3-1,7 1-Цистеин НС1 1,8-2,2 1-Гистидин НС1 dl-Изолейцин 0,12-0,17 0,35-0, -Лейцин 0,33-0,its -Лизин НС1 0,,55 d -Метионин -Пролин 0,9-1,1 -Треонин 1,9-2,1 0,15-0,25 -Тирозин 0,75-0,85 -Валин 2,6-3,1 КНгРО ,5-5,5 MgSO..- 71-LO 0,03-0,05 1,5-1,8 NajHPO Тиамин0,015-0,025 Пантотенат кальци 0,,06 Глюкоза . 14,0-16,0 Готов т питательную среду следующим образом. П р и.м е р 1, Берут 1,5 г двузамещенного фосфорнокислого натри  (Na,jHPO.) и в него заливают 375 мл дистиллированной воды. Эту смесь подогревают на вод ной бане до и перемешивают до полного растворени . Затем 2,6 г рднозамещенного фосфорнокислого кали  (КН РО.) заливают 625 мл дистиллированной воды, эту смесь подогревают на вод ной бане до иперемешивают до полного растворени . Затем растворы фосфорнокислых солей объедин ют, добавл   к натриевой соли соль кали , при этом образуетс  калиево-натриевый фосфатный буфер, рН -6,6, который  вл етс  основой дл  получени  жидкой питательной синтетической средЫо Дл  получеНИЯ плотной синтетической питательной среды в калиево-натриевый фосфатный буфер добавл ют 10-15 г/л агар-агара о Агар-агар внос т в полученный калиево-натриевый фосфатный буфер и расплавл ют его на кип щей вод ной бане (100°С) в течение 20 мин. Затем отвешивают аминокислоты, г: 1-Аргинин НС1 0,15 1-Цистеин нее 1,3 1-Гистидин 1,8 dI-Изолейцин 0,24 1-Лейцин0,35 1-Лизин НС 1 0,35 dl-Метионин 0,9 I-Пролин0,9 dl-Треонин 3,8 1-Валин0,75 Каждую из навесок аминокислот раствор ют поочередно в 10 мл приготовленного ранее калиево-натриевого фосфатного буфера, нагревают до 90°С с помешиванием до полного растворени , сливают в одну емкость объемом более Тли перемешивают Затем к 0,15 г 1-тирозина добавл ют -J: мл 1 н. едкого натра (NaOH), после«этого к навеске 1-тиродина с 1 н. едким натром добавл ют 40 мл приготовленного ранее фосфатного буфера, нагревают до 90°С при помешивании и сразу же после его растворени  сливают в емкость со смесью аминокислот. Потом раствор ют k,S г хлористо ,го натри  (NaCl) в 20 мл фосфатного буфера при нагревании до 70°С и помешивании, затем 0,03 г сернокисло го магни  (MgSO), 0,015 г тиамина, 0,04 г пантотената кальци  - каждую из навесок раствор ют в 2 мл дистиллированной воды при нагревании до и помешивании. Растворенные компоненты добавл ют поочередно с по мешиванием к смеси растворов аминокислот . После этого объем среды довод т до 1 л приготовленным ранее фосфатным буфером и стерилизуют в автоклаве в течение 30 мин при 0,5 атм. Затем готов т раствор глюкозы Дл  этого берут 1,0 г глюкозы, раствор ют в iO мл дистиллированной воды и стерилизуют в автоклаве при режиме 1 атм в течение $ мин. П р им ер 2. Берут 1,8 г двузамещенного фосфорнокислого натри  (), заливают 375 мл дистиллированной воды и эту смесь подогревают на вод ной бане до и перемеши .вают до полного растворени . Затем 3,1 г однозамещенного фосфорнокислого кали  () заливают 625 мл дистиллированной воды, эту смесь подогревают на вод ной бане до 70°С и перемешивают до полного растворени . Затем растворы фосфорнокислых солей объедин ют, образу  калиево-на риевый фосфатньТй буфер, рН -6,6. Дл  получени  плотной синтетической сред примен ют агар-агары. Агар-агары вно с т в полученный калиево-натриевый фосфатный буфер рН-6,6 и расплавл ют на кип щей вод ной бане () в течение 20 мин. Затем отвешивают аминокислоты, г: 1-Аргинин НС1 1-Цистеин НС1 1-Гистидин dl-Изолейцин 1-Лейцин 1-Лизин НС1 dl-Метионин 1,1 . 1-Пролин dl-Треонин 1-Валин0,85 Каждую из навесок аминокислот ра створ ют в АО мл приготовленного ра нее калиево-натриевого фосфатного б фера при нагревании до 90°С с помешиванием до полного растворени  и 1 0 объемом босливают в одну емкость лее 1 л. Затем к 0,25 г 1-тирозина добавл ют 2 мл 1 н. едкого натра, после этого к навеске 1-тирозина с 1 н. едким натрием добавл ют kO мл приготовленного ранее фосфатного буфера, нагревают до 90°С при помешивании и сразу же после его растворени  сливают в емкость со смесью аминокислот . Потом раствор ют 5,5 г хлористого натри  в 20 мл фосфатного буфера при нагревании до и помешивании , затем отвешивают 0,05 г сернокислого магни  (МдБОд) 0,025 г тиамина, 0,06 г пантотената кали  каждый раствор ют в 2 мл дистиллированной воды при нагревании до 70°С и помешивании. Растворенные компо- . ненты добавл ют поочереднб с помешиванием к смеси растворов аминокислот. После этого объем среды довод т до 1 л приготовленным ранее фосфатным буфером и стерилизуют в автоклаве в течение 30 мин при 0,5 атм (l10j8°C). Затем готов т раствор глюкозы. Дл  этого 16,0 г глюкозы раствор ют в АО мл дистил-. лированной воды и стерилизуют в автоклаве в течение 5 мин при 1 атм. Стерилизованную питательную среду и раствор глюкозы хран т разделСно в холодильнике при до использовани .. Срок хранени .до 60 сут. Предлагаемую питательную среду используют следующим образом, о Перед посевом берут жидкую среду и в нее внос т АО мл приготовленного 35 или АО -ного раствора глюкозы, в зависимости от концентрации компонентов по граничным пределам. Затем разлива-от во флаконы или колбы по 1050 мл. В отличие от известной жидкой питательной среды выращивание на предлагаемой жидкой среде провод т без принудительной аэрации. Если посевы проводить на плотную питательную среду, то ее предварительно расплавл ют на вод ной бане, затем в нее внос т АО мл 35 АО -ного раствора глюкозы и перемешивают. После это го среду разливают в пробирки по 5 мл и скашивают или в чашки Петри по ZS 30 мл. Посев производ т на застывшие агаровые поверхности. Плотна  среда прозрачна , что позвол ет четко наблюдать Аорфологию колонии. . |1редложенна  питательна  среда . , позвол ет обеспечить стабильный и до$1 статочный рост тул ремийного микроба ( м к/мл среды ) по оптическому стандарту мутности ТИСХ (кишечному Выход бактерий на жидкой среде получают на 3 пор дка выше посевной дозы, а также получают и сплошной рост на плотной среде. Предлагаема  питательна  среда обеспечивает достаточный рост нсследованных штампов тул ремийного микроба , представл ющих все известные раз 706 новидности этого возбудител  - голарктическую , неарктичёскую и среднеазиатскую расы. Рост, всех рас тул ремийного микроба на предлагаемой среде позвол ет изучать его свойства на более высоком уровне, а именно таких как особенности неготипа, путей метаболизма, активности р да ферментов, знание этих свойств имеет практ1.|Ческое значение дл  борьбы с этой инфекцией

Claims (1)

  1. ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ ТУЛЯРЕМИЙНОГО МИКРОБА, содержащая 1-аргинин НС1, 1-цистен НС 1, 1-гистидин НС1, dl-изолейцин,!-лейцин, dl-лизин НС 1, dl-метионин, 1-пролин, dl-треонин, 1-тирозин, Т-валин, KHgPO^, NaC1, MgSO^O, соль фосфорной кислоты, тиамин, глюкозу и дистиллированную боду, от л и ч βίο щ а я с я тем, что, с целью унифицирования среды, она дополнительно содержит пантотенат кальция, в качестве соли фосфорной кислоты она содержит Na2HPO4 при следующем количественном соотношении компонентов, г/л дистиллированной воды:
    1-Аргинин HCI 0,15-0,25 1-Цистеин НС1 1.3-1,7 1-Гистидин НС 1 1,8-2,2 dl-Изолейцин 0,12-0,17 1-Лейцин 0,35-0,45 1-Лизин НС1 0,35-0', 45 d1-Метионин 0,45-0,55 1-Пролин 0,9-1,1 3 dl-Треонин 1.9-2,1 » 1-Тирозин 0,15-0,25 гл 1-Валин 0,75-0,85 КН9РО. Natl 4 2,6-3,1 4,5-5,5 1 MgSO4 ·7Η20 Na2H?04 * 0,03-0,05 1,5-1,8 Хиамин >0,015-0,025 о Пантотенат кальция 0,04-0,06 СО Глюкоза 114,0-16,0 м о
    >
    0,04-0,06
    14,0-16,0
    Тиамин
    Пантотенат кальция Глюкоза
    Готовят питательную среду следующим образом.
    П р и.м е р 1. Берут Г,5 г двузамещенного фосфорнокислого натрия (На^НРОф) и в него заливают 375 мл дистиллированной воды. Эту смесь подогревают на водяной бане до 90°С и перемешивают до полного растворения. Затем 2,6 г однозамещенного фосфорнокислого калия (KHgPO^) заϊΟ
SU813373500A 1981-12-29 1981-12-29 Питательна среда дл выращивани тул ремийного микроба SU1013470A1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU813373500A SU1013470A1 (ru) 1981-12-29 1981-12-29 Питательна среда дл выращивани тул ремийного микроба

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU813373500A SU1013470A1 (ru) 1981-12-29 1981-12-29 Питательна среда дл выращивани тул ремийного микроба

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU1013470A1 true SU1013470A1 (ru) 1983-04-23

Family

ID=20989358

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU813373500A SU1013470A1 (ru) 1981-12-29 1981-12-29 Питательна среда дл выращивани тул ремийного микроба

Country Status (1)

Country Link
SU (1) SU1013470A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2518282C1 (ru) * 2013-06-25 2014-06-10 Федеральное казенное учреждение здравоохранения "Российский научно-исследовательский противочумный институт "Микроб" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека ("РосНИПЧИ "Микроб") Питательная среда для глубинного культивирования туляремийного микроба

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2518282C1 (ru) * 2013-06-25 2014-06-10 Федеральное казенное учреждение здравоохранения "Российский научно-исследовательский противочумный институт "Микроб" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека ("РосНИПЧИ "Микроб") Питательная среда для глубинного культивирования туляремийного микроба

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Udaka Screening method for microorganisms accumulating metabolites and its use in the isolation of Micrococcus glutamicus
SU1013470A1 (ru) Питательна среда дл выращивани тул ремийного микроба
RU2626568C1 (ru) Питательная среда плотная для культивирования и сбора биомассы чумного микроба вакцинного штамма Y.pestis EV
RU2681285C1 (ru) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ПЛОТНАЯ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ БРУЦЕЛЛ ВИДА Brucella neotomae
RU2702174C1 (ru) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ПЛОТНАЯ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ И СБОРА БИОМАССЫ ВАКЦИННОГО ШТАММА ЧУМНОГО МИКРОБА Y.pestis EV
RU2708029C1 (ru) Питательная среда для культивирования yersinia pestis ev
RU2748492C1 (ru) Питательная среда плотная для контроля количества живых микробных клеток вакцинного штамма чумного микроба y. pestis ev
RU2745504C1 (ru) Питательная среда жидкая для выращивания и сброса биомассы вакционного штамма чумного микроба yersinia pestis ev
RU2460774C1 (ru) Питательная среда для выращивания легионелл
RU2688335C1 (ru) Питательная среда плотная для культивирования возбудителя бруцеллёза
RU2792438C1 (ru) Селективная питательная среда с маннитом, желчью и полимиксином для выявления бактерий родов Proteus, Morganella, Providencia сухая
RU2394905C1 (ru) Питательная среда для культивирования чумного микроба
RU2800127C1 (ru) Питательная среда для культивирования микроорганизмов
RU2693892C1 (ru) Способ выделения и идентификации бактерий групп pseudomonas putida и pseudomonas fluorescens
RU2158758C2 (ru) Питательная среда для накопления листерий
RU2757428C1 (ru) Питательная среда жидкая для глубинного выращивания вакцинного штамма чумного микроба y. pestis ev
RU2265654C2 (ru) Питательная среда для выделения гемокультур
RU2803258C1 (ru) Способ ферментации углеводов бактериями escherichia coli
Miller Jr et al. The influence of inorganic salts on the multiplication of gonococcus
RU2175671C1 (ru) Питательная среда для выделения гемокультуры при диагностике брюшного тифа и паратифов
RU2681116C2 (ru) Питательная среда плотная для хранения микроба чумы
RU2728217C1 (ru) Жидкая питательная среда для культивирования vibrio cholerae во флаконах и бутылях
RU2059715C1 (ru) Солевая основа питательной среды для культивирования микобактерий туберкулеза
RU2769434C1 (ru) Способ выделения бактерий вида acinetobacter baylyi из речной воды
RU2785826C1 (ru) Питательная среда жидкая с повышенными накопительными свойствами для получения биомассы yersinia pestis ev