SK5982003A3

SK5982003A3 - 1-Methylcarbapenem derivatives

Info

Publication number: SK5982003A3
Application number: SK598-2003A
Authority: SK
Inventors: Yoshiyuki Kobayashi; Tsuyoshi Shinozuka; Osamu Kanno
Original assignee: Sankyo Co
Priority date: 2000-11-16
Filing date: 2001-11-14
Publication date: 2004-05-04
Also published as: EP1340757A1; NO20032198D0; ATE342266T1; CA2429346A1; AU1521202A; DE60123827D1; NZ525934A; CZ20031325A3; PT1340757E; DE60123827T2; CN1486317A; KR100832287B1; MXPA03004372A; NO20032198L; CZ300137B6; RU2247725C2; PL362132A1; DK1340757T3; CN1289498C; EP1340757A4

Description

DERIVÁTY l-METYLKARBAPENÉMU

Oblasť techniky

Predkladaný vynález sa týka 1 -metylkarbapenémových zlúčenín, ktoré majú vynikajúcu antibakteriálnu účinnosť, ich farmakologicky prijateľných esterov alebo solí, farmaceutických prípravkov (zvlášť antibakteriálnych činidiel), ktoré sú ich účinnou zložkou, použitia uvedených zlúčenín, esterových derivátov alebo solí na výrobu uvedených farmaceutických prípravkov, alebo spôsobu na prevenciu alebo liečbu chorôb (zvlášť bakteriálnych infekcií), ktorý zahrnuje podanie farmaceutický účinného množstva uvedených zlúčenín, esterových derivátov alebo solí teplokrvným živočíchom (zvlášť ľuďom).

Doterajší stav techniky

Je potrebné vyvíjať karbapenémové deriváty, ktoré majú silný a vyvážený antibakteriálny účinok proti širokému spektru patogénnych baktérií. 1-metylkarbapenémové zlúčeniny, ktoré majú štruktúrne anaiógy so zlúčeninami v predkladanom vynáleze sú uvedené v japonskej patentovej prihláške (Kokai) číslo 8-53 453.

Vynálezca vykonával výskum 1-metylkarbapenémových zlúčenín dlhú dobu. Bolo zistené, že v porovnaní s konvenčnými 1-metylkarbapenémovými derivátmi majú zlúčeniny všeobecného vzorca I predkladaného vynálezu silnejší antibakteriálny účinok a sú účinné ako antibakteriálne činidlo na liečbu alebo prevenciu (zvlášť liečbu) bakteriálnych infekcií, zvlášť infekcií dýchacieho systému.

Podstata vynálezu

Predkladaný vynález sa týka 1-metylkarbapenémových zlúčenín všeobecného vzorca I:

alebo ich farmaceutický prijateľných solí alebo ich esterov.

(1) skupinu predstavovanú vzorcom COOR³, kde R³ je vodík, Ci až C₆, alkylová skupina alebo C₃ až C₆ cykloalkylová skupina, (2) skupinu predstavovanú vzorcom CONR⁴R⁵, kde R⁴ a R⁵ môžu byť rovnaké alebo rozdielne a každý je vodík, Ci až C₆ alkylová skupina (ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov A nižšie uvedené), C₃ až C₆

Vo vzorci R¹ predstavuje:

cykloalkylová skupina alebo 3 až 6 členná heterocyklická skupina alebo C₆ až C₃o arylová skupina (ktorá môže byť substituované jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B nižšie uvedené) alebo spoločne s atómom dusíka, ku ktorému sú viazané, predstavujú 3 až 6 členný heterocyklus obsahujúci dusík (ktorý môže byť substituovaný jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B nižšie uvedené), (3) kyano skupinu, (4) skupina predstavovaná vzorcom CH₂OR⁶, kde R^D je vodík, Ci až C₆ alkylová skupina alebo C₃ až C₆ cykloalkylová skupina alebo (5) skupina predstavovaná vzorcom CH₂NR⁷R⁸, kde R⁷ je vodík, Ci až C₆ alkylová skupina alebo C₃ až C₆ cykloalkylové skupina, R³ je vodík, Ci až C_e alkylová skupina alebo C₃ až C₆ cykloalkylové skupina, Ci až C$ alkanoylová skupina, (Cé už Cio aryl)karbonylová skupina (ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B nižšie uvedené), (C_x až C₆alkoxy) karbonylová skupina, 5 alebo 6 členná aromatické heterocyklokarbonylová skupina, Ci až C₆ alkylsulfonylové skupina alebo C6 až Cio arylsulfonylová skupina alebo R⁷ a R⁸, spoločne s atómom dusíka, ku ktorému sú viazané predstavujú sukcinimidovú skupinu (ktorá môže byť kondenzovaná s fenylovou skupinou),

R² predstavuje vodík alebo Ci až Ce alkylovú skupinu; n predstavuje 1, 2 alebo 3;

X predstavuje síru alebo kyslík, substituent skupiny A zahrnuje hydroxylovú skupinu, amino skupinu (ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma Ci až C₆alkylovými skupinami), karbamoylovú skupinu (ktorej amínová skupina môže byť substituovaná jednou alebo dvoma Ci až C₆alkylovými skupinami), karboxylovú skupinu, kyano skupinu a Ci až C₆ alkoxylovou skupinu, a substituent skupiny B zahrnuje hydroxy-Ci až C₄-alkylovú skupinu, amino-Ci až C₄-alkylovú skupinu (amínová skupina môže byť substituovaná jednou alebo dvoma Ci až Cg alkylovými skupinami), karbamoylovú skupinu (amínová skupina môže byť substituovaná jednou alebo dvoma Ci až C₅ alkylovými skupinami), karboxylovú skupinu, hydroxylovú skupinu, amino skupinu (ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma Ci až Cg alkylovými skupinami), C₃až Cg alkoxylovú skupinu a Ci až Cg alkylovú skupinu.

V horeuvedenom opise „Ci-C₆ alkylová skupina podía definícií R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, subst ituentove j skupiny A a substituentovej skupiny B je priama alebo rozvetvená nasýtená uhlovodíková skupina obsahujúca 1 až 6 atómov uhlíka. Jej príklady zahrnujú metyl, etyl, n-propyl, izopropyl, n-butyl, izobutyl, r⁷,

R\ je s kupmy sec.butyl, terc.butyl, n-pentyl, izopentyl, 2-metylbutyl, neopentyl, 1-etylpropyl, n-hexyl, izohexyl, 4-metylpentyl, 3-metylpentyl, 2-metyipenty1, i-metylpentyl, 3,2-dimetylbutyl,

2,2-dimetylbutyl, 1,1-dimetylbutyl, 1,2-dimetylbutyl, 1,3-dimetylbutyl, 2,3-dimetylbutyl, 2-etylbutyl a i-metyl-2-metyl-propyl skupinu. Podľa definícií R², R³, substituentovej skupiny A a substituentovej uprednostňovaná C₃ až C₃ alkylová skupina a zvlášť uprednostňovaná je metylová skupina. Podľa definície R'¹ je uprednostňovaná Ci až C3 alkylová skupina a zvlášť uprednostňovaná je metylová skupina alebo izopropylová skupina. Podľa definície R⁵ je uprednostňovaná C2 až C₆alkylová skupina a zvlášť uprednostňovaná je i-metyl-2-metyl-propylová skupina.

„C₃ až C₆ cykloalkylová skupina podľa definícií R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ a R⁸ je cyklická uhľovodíková skupina obsahujúca 3 až 6 atómov uhlíka. Príklady tejto skupiny zahrnujú cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl a cyklohexyl, kde je cyklopropylová skupina uprednostňovaná.

„3 až 6 členná heterocyklická skupina podľa definícií R⁴ a R⁵je nasýtená heterocyklická skupina obsahujúca jeden alebo dva atómy kyslíka, dusíka aiebo síry. Príklady tejto skupiny zahrnujú azíridinyl, azetidínyl, pyrolidinyl, piperidinyl, oxiranyl, oxetanyl, tetrahydrofuranyl, tetrahydropyranyl, tetrahydrotienyl, morfolinyl, piperazinyl a tiomorfolinyl, kde 4 až ô členná heterocyklická skupina obsahujúca dusík je uprednostňovaná a azetidínyl, pyrolidinyl alebo piperidinyl sú uprednostňované viac.

Príklady „C₆ až Cio arylovej skupiny podľa definícií R⁴ a R⁵ „C₆ až Cio arylovej skupiny (C₆ až C_i0 aryl) karbonyiove j skupiny a „Cé až Cio arylsulfonylovej skupiny podľa definície R⁸ zahrnujú fenyl, indenyl a naftyl, kde fenylová skupina je uprednostňovaná.

Dusík obsahujúci heterocyklus 3 až 6 členného dusík obsahujúceho heterocyklu podľa definícií skupina tvorená pomocou R⁴a R⁵, spolu s atómom dusíka, ku ktorému sú viazané, je saturované heterocyklická skupina obsahujúca jeden alebo dva atómy dusíka, a ktorá môže obsahovať atóm kyslíka alebo síry. Príklady tejto skupiny zahrnujú aziridino, azetídino, pyrolidino, piperidino, morfolino, piperazino a tiomorfolino skupiny, kde 4 až 6 členný heterocyklus obsahujúci dusík je uprednostňovaný a azetídino, piperazino, morfolino alebo tiomorfolino skupiny sú uprednostňované viac.

„Ci až C₆ alkanoyl skupina podía definície R⁸ je priama alebo rozvetvená nasýtená alkanoylová skupina obsahujúca 1 až 6 atómov uhlíka. Jej príklady zahrnujú formyi, acetyl, propionyl, butyryl, izobutyryl, valeryl, izovaleryl, pivaloyl a hexanoyl, kde Ci až C3 alkanoylová skupina je uprednostňovaná a acetylová skupina je uprednostňovaná najviac.

„Ci až C₆ alkoxy skupina (Ci až C₆ alkoxy)karbonylové skupiny podľa definície R⁸ a „Ci až C₆ alkoxy skupina podľa definície substituentových skupín je priama alebo rozvetvená alkoxylová skupina obsahujúca 1 až 6 atómov uhlíka. Príklady tejto skupiny zahrnujú metoxy, etoxy, propoxy, izopropoxy, butoxy, pentyloxy a hexyloxy skupiny, kde Ci až C3 alkoxy skupina je uprednostňovaná a metoxy skupina je najviac uprednostňovaná.

„5 až 6 členná aromatická heterocyklické skupina „5 až 6 členné aromatické heterocyklokarbonylové skupiny podľa definície R⁸ je aromatický heterocyklus obsahujúci od jedného do troch atómov kyslíka, dusíka a síry. Príklady tohto heterocyklu zahrnujú pyrol, imidazol, tiazol, oxazol, izoxazol, furan, tiofén, triazol, tiadiazol, pyridín, pyrimidín, pyridazín a triazín, kde furan, tiofén alebo pyridín sú uprednostňované.

Príklady „hydroxy-Ci až C₄-alkyl skupiny substituentovej skupiny B zahrnujú hydroxymetyl, hydroxyetyl, hydroxypropyl a hydroxybutyl skupiny, kde hydroxy-Ci až C2~alkyl skupina je uprednostňovaná a hydroxymetyl skupina je najviac uprednostňovaná.

Príklady „amino-Ci až C₄-alkyl skupiny substituentovej skupiny B zahrnujú aminometyl, aminoetyl, aminopropyl a aminobutyl skupiny, kde amino-Ci až C₂-alkyl skupina je uprednostňovaná a aminometyl skupina je najviac uprednostňovaná.

Prednostne substituentová skupina A obsahuje hydroxylovú skupinu, amino skupinu (ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma Ci až C₃ alkyl skupinami) a karbamoyl skupinu, kde amino skupina (ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma metyl alebo etyl skupinami) je najviac uprednostňovaná.

Prednostne substituentová skupina B obsahuje hydroxy-Ci až C₄-alkyl skupinu, amino-Cj. až C₄-aikyl skupinu (amino skupina môže byť substituovaná jednou alebo dvoma C₃ až C₃ alkyl skupinami), karbamoyl skupinu (amino skupina môže byť substituovaná jednou alebo dvoma C₃ až C₃ alkyl skupinami), hydroxylovú skupinu a amino skupinu (ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma Cú až C₃alkyl skupinami), kde skupina obsahujúca hydroxymetylovú skupinu, aminometylovú skupinu (kde amino skupina môže byť substituovaná jednou alebo dvoma metyl alebo etyl skupinami), karbamoylovú skupinu (kde amino skupina môže byť substituovaná jednou alebo dvoma metyl alebo etyl skupinami), hydroxylovú skupinu a amino skupina (ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma metyl alebo etyl skupinami) je uprednostňovaná, aminometyl skupina a amino skupina sú ešte viac uprednostňované.

„Farmakologicky prijateľný ester zlúčeniny I je ester, u ktorého sú niektoré karboxylové skupiny alebo hydroxylové skupiny zlúčeniny I chránené skupinou, ktorá sa dá odštiepiť v tele človeka alebo zvieraťa chemickou alebo biologickou metódou akou je hydrolýza počas vzniku pôvodnej zlúčeniny I alebo jej soli. Či je odvodená látka taký ester, môže sa stanoviť orálnym alebo intravenóznym podaním tejto látky pokusnému zvieraťu ako je potkan alebo myš a študovaním telových tekutín zvieraťa a detekciou pôvodnej zlúčeniny I alebo jej soli.

Príklady ochranných skupín, ktoré tvoria estery karboxylovej skupiny zahrnujú Ci až C₁₀ alkylovú skupinu, C₃ až C₆ cykloalkylovú skupinu, C₃ až C& cykloalkylovú-Ci až C₄-alkylovú skupinu, C₂ až Cio alkanoyloxy-Ci až C₄-alkylovú skupinu, (Ci až Ci₀aikoxy)karbonyloxy-Ci až C₄-alkylovú skupinu, fenylovú skupinu (uvedená fenylová skupina môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami vybranými z halogénu, Ci až C₄ alkylovej skupiny, Ci až C₄ alkoxylovej skupiny, metyléndioxyovej skupiny a Ci až C₆ alkanoyloxyovej skupiny), Ci až C_i0 alkanoyloxybenzylovú skupinu, ftalidylovú skupinu a 5-metyl-2-oxo-l,3-dioxolén-4-ylmetylovú skupinu.

Príklady ochranných skupín, ktoré tvoria estery s hydroxylovou skupinou zahrnujú Ci až Ci₀ alkanoyl skupinu, (C₆ až Ci₀aryl)karbonyl skupinu, (Ci až C₁₀ alkoxy)karbonyl skupinu a aminoacyl skupinu.

Horeuvedené príklady „Ci až Ci₀ alkylovej skupiny zahrnujú metyl, etyl, propyl, izopropyl, butyl, izobutyl, sec.butyl, terc.butyl, pentyl, 2-pentyl, 3-pentyl, izopentyl, hexyl, 2-hexyl, 3-hexyl, izohexyl, heptyl, oktyl, nonyl a decyl skupiny, kde Ci až C₆ alkylová skupina je uprednostňovaná, C₂ až C₄ alkylová skupina je viac uprednostňovaná a etylová skupina je najviac uprednostňované.

Príklady „C3 až cykloalkylovej skupiny zahrnujú cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl a cyklohexyl skupiny, kde cyklopentyl alebo cyklohexyl skupina je uprednostňovaná.

Príklady „C₃ až Cs cykloalkyl-Ci až C₄-alkylovej skupiny zahrnuj! cyklopropylmetyl, cyklopropyletyl, cyklopropylpropyl, cyklopropylbutyl, cyklobutylmetyl, cyklobutyletyl, cyklobutylpropyl, cyklopentylmetyl, cyklopentyletyl, cyklopentylpropyl, cyklohexylmetyl a cyklohexyletyl skupiny, kde cyklopropylmetylová skupina je uprednostňovaná.

Príklady „C₂ až C10 alkanoyloxy-Ci až C4~alkylovej skupiny zahrnujú acetoxymetyl, 1-(acetoxy)etyl, 1-(acetoxy)propyl, 1-(acetoxy)butyl, propionyloxymetyl, 1-propionyloxy)etyl, izopropionyloxymetyl, 1-(izopropionyloxy)etyl, butyryloxymetyl, izobutyryloxymetyl, 1-(izobutyryloxy)etyl, 1-(pivaloyloxy)etyl, izovaleryloxymetyl,

1-(hexanoyloxy)etyl,

1-(butyryloxy)etyl, pivaloyloxymetyl,

1-(valeryloxy)etyl, hexanoyloxymetyl,

1-(oktanoyloxy)etyl, valeryloxymetyl, 1-(izovaleryloxy)etyl, oktanoyloxymetyl, dekanoyloxymetyl, cyklopentylkarbonyloxymetyl,

1-metyl-cyklopentylkarbonyloxymetyl, cyklohexylkarbonyloxymetyl a

1-metylcyklohexylkarbcnyloxymetyl skupiny, kde C₂ až C_salkanoyloxymetyl alebo 1-(C₂ až C₆ alkanoyloxy)etyl skupina je uprednostňovaná.

Príklady (Ci až Ci₀ alkoxy)karbonyloxy-Ci až C₄-alkylovej skupiny zahrnujú metoxykarbonyioxymetyl, 1-(metoxykarbonyloxy) etyl, et oxykarbony loxymety 1, 1-(etoxykarbonyloxy)etyl,

1-(etoxykarbonyloxy)propyl, propoxykarbonyloxymetyl, i zopropoxykarbonyioxymetyl, butoxykarbonyioxymetyl, i zobútoxykarbonyioxymetyl, sec.butoxykarbonyioxymetyl, terc. butoxykarbonyloxymetyl, pentyloxykarbonyioxymetyl, (1-metylbutyloxykarbonyloxy)metyl, -metylbutyloxykarbonyioxy)etyl, i

1-(etoxykarbonyloxy)butyl, 1-(propoxykarbonyloxy)etyl,

1-(izopropoxykarbonyloxy)etyl, 1-(butoxykarbonyioxy)ethyl,

1- (izobutoxykarbonyloxy)etyl, 1- ( soc.butoxykarbonyioxy) etyl,

1-terc.butoxykarbonyioxy)etyl,

1-(pentyloxykarbonyloxy)etyl, l-(i2-metylbutyloxykarbonyioxy)metyl, i-(2-metyIbutyloxykarbonyloxy)etyl, (3-metylbutyloxykarbonyloxy)metyl, 1- ( 3-metylbutyloxykarbonyloxy) etyl, (1-etylpropyloxykarbonyloxy) metyl, etyl, hexyloxykarbonyloxymetyl, (1-metyipentyioxykarbonyloxy)metyl, -metylpentyloxykarbonyloxy)etyl,

1-(oktyloxykarbonyloxy)etyl,

1-(decyloxykarbonyloxy)etyl, cyklopentylkarbonyioxymetyl,

-(cyklopentyloxykarbonyloxy)etyl, cyklohexylkarbonyloxymetyl

1-(1-etylpropyloxykarbonyloxy)

1-(hexyloxykarbonyloxy)etyl,

1-(ίο kty1oxykarbony1oxymety1, decyloxykarbonyioxymetyl, 1a

1-(cyklohexyloxykarbonyloxy)etyl skupiny, kde (Ci až C₆alkoxy)karbonyioxymetyl alebo l-((Ci až C₆ alkoxy)karbonyloxy) etyl skupina je uprednostňovaná.

Príklady „fenylovej skupiny, ktorá môže byť substituovaná zahrnujú fenyl, 3-fluórfenyl, 4-fluórfenyl, 3,4-difluórfenyl, 3-metylfenyl, 4-metylfenyl, 3-metoxyfenyl, 4-metoxyfenyl, 3,4-dimetoxyfenyl, 3,4-metylénóioxyfenyl, 3-acetoxyfenyl a 4-acetoxyfenyl skupiny, kde je uprednostňovaná nesubstituovaná fenylová skupina.

Príklady „G₂ až C10 alkanoyloxybenzylovej skupiny zahrnujú

2- acetoxybenzyl, 3-acetoxybenzyl, 4-acetoxybenzyl,

3- propionyloxybenzyl, 4-propionyloxybenzyl, 4-butyryloxybenzyl, 4-valeryloxybenzyl, 4-nexanoyloxybenzyl, 4-oktanoyloxybenzyl a 4-dekanoyloxybenzyl skupiny, kde 3- alebo 4-(C₂ až C₄alkanoyloxy)benzylová skupina je uprednostňovaná.

Príklady „Ci až Ci₀ alkanoylovéj skupiny zahrnujú formyl, acetyl, propionyl, butyryl, pentanoyl, hexanoyl, oktanoyl a dekanoyl skupiny, kde C₂ až Cé alkanoylová skupina je uprednostňovaná.

Príklady (Cg až C10 aryl)karbonylovej skupiny zahrnujú benzoyl, 1-naftoyl a 2-naftoyl skupiny, kde benzoylová skupina je uprednostňovaná.

Príklady „(Ci až C₁₀ alkoxy)karbonylovej skupiny zahrnujú metoxykarbonyl, etoxykarbonyl, propoxykarbonyl, butoxykarbonyl, pentyloxykarbonyl, hexyloxykarbonyl, oktyloxykarbonyl a decyloxykarbonyl skupiny, kde C₂ až C₆ alkoxykarbonylová skupina je uprednostňovaná.

Príklady „aminoacylovej skupiny zahrnujú aminokyselinovú skupinu, ako je glycyl, alanyl, p-alanyl, leucyl, izoleucyl, fenylalanyl, ’nistidyl, asparagyl, prolyl a lysyl, kde glycylová skupinu je uprednostňovaná.

Zlúčenina I a jej farmakologicky prijatelné soli predkladaného vynálezu môžu tvoriť farmakologicky prijatelné soli, ak je to nutné.

„Farmakologicky prijateľné soli sú soli, na ktoré je možné konvertovať zlúčeninu I predkladaného vynálezu. Uprednostňované príklady takých solí zahrnujú soli alkalických kovov, ako sú sodíková sol, draselná sol a lítiová sol, soli alkalických zemín ako je vápenatá sol a horečnatá soľ, kovové soli ako je hliníková sol, železná soľ, zinkové soľ, medená sol, niklová sol a kobaltová sol, amínové soli ako sú anorganické soli, ako je amónna sol a organické soli ako je terc.oktylamínová sol, dibenzylamínová sol, morfolínová sol, glukózamínová sol, fenylglycinalkylesterová sol, ecylenediamínová sol, N-metylglukamínová sol, guanidínová sol, dietylamínová sol, tríetylamínová sol, dicyklohexylamínová sol, N,N'-dibenzyletyléndiamínová sol, chloroprokaínová sol, prokaínová sol, dietanolamínová sol, N-benzylfenetylamínová soľ, piperazínová sol, tetrametylamóniová sol a tris (hydroxymetyl) aminometánová soľ; soli anorganických kyselín ako sú soli halogénovej kyseliny ako je fluorovodík, chlorovodík, bromovodík, jodovodík, nitráty, perchloráty, sulfáty alebo fosfáty, nižšie alkensulfonáty ako je metánsulfonát, trifluorometánsulfonát alebo eténsulfonát;

arylsulfonáty ako je benzénsulfonát alebo p-toluénsulfonát; a soli organických kyselín, ako je acetát, malát, fumarát, sukcinát, citrát, tartarát, oxalát alebo maleát; a soli aminokyselín ako je glycínová sol, lyzínová soľ, argininová sol, ornitinová sol, glutamát alebo aspartát.

Zlúčeniny I, ich farmakologicky prijateľné soli a esterové deriváty predkladaného vynálezu zahrnujú tiež ich hydráty alebo solváty.

Medzi zlúčeninami všeobecného vzorca I sú uprednostňované nasledujúce zlúčeniny:

(1) Vzťahujúce sa na R¹:

(1-1) zlúčeniny, kde R¹ predstavuje skupinu predstavovanú vzorcom CONR⁴R⁵ a kyano skupinu alebo skupinu predstavovanú vzorcom CH₂NR⁷RC ;

(1-2) zlúčeniny, kde R¹ predstavuje skupinu predstavovanú vzorcom. CONR⁴R⁵ alebo skupinu predstavovanú vzorcom CH₂NR⁷R⁸;

(1-3) zlúčeniny, kde R¹ predstavuje skupinu predstavovanú vzorcom CONR⁴R⁵.

(2) Vzťahujúce sa na R²:

(2-1) zlúčeniny, kde R² predstavuje vodík alebo Ci až C₃alkylovú skupinu;

(2-2) zlúčeniny, kde R² predstavuje vodík.

(3) Vzťahujúce sa na R³:

(3-1) zlúčeniny, kde R³ predstavuje vodík alebo Ci až C₃alkylovú skupinu;

(3-2) zlúčeniny, kde R³ predstavuje vodík, metylovú skupinu alebo etylovú skupinu.

(4) Vzťahujúce sa na R⁴:

(4-1) zlúčeniny, kde R⁴ predstavuje vodík alebo Ci až C3 alkylovú skupinu;

(4-2) zlúčeniny, kde R⁴ predstavuje vodík, metylovú skupinu alebo izopropylovú skupinu.

(5) Vzťahujúce sa na R⁵:

(5-1) zlúčeniny, kde R⁵ predstavuje vodík, Ci až C₆ alkylovú skupinu (ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov A) alebo 4 až 6 členný heterocyklus obsahujúci dusík, (5-2) zlúčeniny, kde R⁵ predstavuje vodík, Ci až C₆ alkylovú skupinu (ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov A), alebo azetidinyl, pyrolidinyl alebo piperidinyi skupinu.

(6) Vzťahujúce sa na R⁴ a R⁵:

(6-1) zlúčeniny, kde R⁴ a R⁵ spoločne s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, predstavujú 4 až 6 členný heterocyklus obsahujúci dusík (ktorý môže byť substituovaný jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B);

(6-2) zlúčeniny kde R⁴ a R⁵, spoločne s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, predstavujú azetidino, piperazino, morfolíno alebo tiomorfolíno skupinu (ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B).

(7) Vzťahujúce sa na R⁶:

(7-1) zlúčeniny, kde R⁶ predstavuje vodík alebo Ci až C₃alkylovú skupinu;

(7-2) zlúčeniny, kde R⁶ predstavuje vodík.

(8) Vzťahujúce sa na R⁷:

(8-1) zlúčeniny, kde R⁷ predstavuje vodík alebo Ci až C₃ alkylovú skupinu;

(8-2) zlúčeniny, kde R⁷ predstavuje vodík alebo metylovú skupinu;

(8-3) zlúčeniny, kde R⁷ predstavuje vodík.

(9) Vzťahujúce sa na R⁸:

(9-1) zlúčeniny, kde R predstavuje vodík, Cj až C₃alkylovú skupinu, C₃ až C₃ alkanoyl skupinu, benzoyl skupinu, ktorá môže byť substituované jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B) , (Ci až C₃ alkoxy)karbonyl skupinu, tienylkarbonyl skupinu, furylkarbonyl skupinu alebo pyridylkarbonyl skupinu;

(9-2) zlúčeniny, kde R⁸ predstavuje vodík, benzoyl skupinu (ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B), (2-tienyi)karbonyl skupinu, (2-furyl)karbonyl skupinu alebo (3-pyridyl)karbonyl skupinu.

(10) Vzťahujúce sa na n:

(10-1) zlúčeniny, kde n predstavuje 1.

(11) Vzťahujúce sa na X:

(11-1) zlúčeniny, kde X predstavuje kyslíkový atóm.

Zlúčeniny získané ľubovoľnou kombináciou 2 alebo viac horeuvedených uprednostňovaných substituentov sú viac uprednostňované. Viac uprednostňované príklady zlúčenín zahrnujú nasledujúce zlúčeniny:

(12) zlúčeniny, kde R¹ predstavuje skupinu predstavovanú vzorcom CONR⁴R⁵ (kde R⁴ predstavuje vodík alebo C3 až C3 alkylovú skupinu; R⁵ predstavuje vodík, Cx až C6 alkylovú skupinu (ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov A) alebo 4 až 6 členný heterocyklus obsahující dusík); R² predstavuje vodík; n predstavuje 1; a X predstavuje kyslík alebo síru.

(13) zlúčeniny, kde R¹ predstavuje skupinu predstavovanú vzorcom CONR⁴R⁵ (kde R⁴ predstavuje vodík, metylovú skupinu alebo izopropylovú skupinu; R⁵ predstavuje vodík, Ci až C6 alkylovú skupinu (ktoré môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byt rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov A), alebo azetidinyl, pyrolidinyl alebo piperidinyl skupinu); n predstavuje 1; a X predstavuje kyslík alebo síru.

(14) zlúčeniny, kde R¹ predstavuje skupinu predstavovanú vzorcom CONR⁴R⁵ (kde R⁴ a R⁵, spoločne s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, predstavujú 4 až 6 členný heterocyklus obsahujúci dusík (ktorý môže byť substituovaný jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B) ) ; R² predstavuje vodík; n predstavuje 1; a X predstavuje kyslík alebo síru.

(15) zlúčeniny, kde R¹ predstavuje skupinu predstavovanú vzorcom CONR⁴R⁵ (kde R⁴ a R⁵ spoločne s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, predstavujú azetidino, piperazino, morfolino alebo tiomorfolino skupinu (ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B) ) ; R² predstavuje vodík; n predstavuje 1; a X predstavuje kyslík alebo síru.

(16) zlúčeniny, kde R¹ predstavuje kyano skupinu; R^zpredstavuje vodík; n predstavuje 1; a X predstavuje kyslík alebo síru.

(17) zlúčeniny, kde R¹ predstavuje skupinu predstavovanú vzorcom CH2NR⁷R⁸ (kde R⁷ predstavuje vodík alebo Ci až C3 alkylovú skupinu; R⁸ predstavuje vodík, Ci až C3 alkylovú skupinu, Cx až C3 alkanoylovú skupinu, benzoylovú skupinu (ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B) (Ci až C₃ alkoxy)karbonylovú skupinu, tienylkarbonyl skupinu, furylkarbonyl skupinu alebo pyridylkarbonyi skupinu); R²predstavuje vodík; n predstavuje 1; a X predstavuje kyslík alebo síru.

(18) zlúčeniny, kde R¹ predstavuje skupinu predstavovanú vzorcom CH₂NR⁷R⁸ (kde R⁷ predstavuje vodík alebo metylovú skupinu; R⁸predstavuje vodík, benzoylovú skupinu (ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B) ,

-karbonylovú skupinu, (2-furyl)-karbonylovú skupinu

-pyridyl)-karbonylovú skupinu); R² predstavuje vodík; n predstavuje 1, a X predstavuje kyslík alebo síru.

Určité zlúčeniny I predkladaného vynálezu sú špecificky uvedené v tabuľkách i až 5. Je známe, že zlúčeniny I predkladaného vynálezu nie sú obmedzené uvedenými zlúčeninami.

V tabuľkách 1 až 5 Me predstavuje metylovú skupinu, Et etylovú skupinu, Pr propylovú skupinu, iPr izopropylovú skupinu, Bu butylovú skupinu, Pen pentylovú skupinu, Hex hexylovú skupinu, cPr cyklopropylovú skupinu, cBu cyklobutylovú skupinu, cPen (2-tienyl)alebo (3cyklopentylovú skupinu, azetidinylovú skupinu, piperidinylovú skupinu a znamená väzobné miesto síry.

cHex cyklohexylovú skupinu, Azt Pyr pyrolidinylovú skupinu, Pip Ph fenylovú skupinu. Výraz pozícia

Tabuľka 1.

1-1'

Zlúčenina	X	n	Pozícia	R²	R³
1	S	1	3	H	H
2	S	1	3	H	Me
3	s	1	3	H	Et
4	s	1	3	H	Pr
5	s	1	3	H	iPr

6	S	1	3	H	Bu
' 7	S	1	3	H	Pen
8	S	1	3	H	Hex
9	S	1	3	H	CPr
10	S	1	3	H	Cbu
11	S	1	3	H	Cpen
12	s	1	3	H	Chex
13	s	1	3	Me	H
14	s	1	3	Me	Me
15	s	1	3	Me	Et
16	s	1	3	Me	Pr
17	s	1	3	Me	Ipr
18	s	1	3	Me	Bu
19	s	1	3	Me	Pen
20	s	1	3	Me	Hex
21	s	1	3	Me	CPr
22	s	1	3	Me	CBu
23	s	1	3	Me	cPen
24	s	1	3	Me	cHex
26	s	2	3	H	H
27	s	2	3	H	Me
28	s	2	3	H	Et
29	s	2	3	H	Pr
30	s	2	3	H	IPr
31	s	2	3	H	Bu
32	s	2	3	H	Pen
33	s	2	3	H	Hex
34	s	2	3	H	CPr
35	s	2	3	H	Cbu
36	s	2	3	H	Cpen
37	s	2	3	H	CHex
38	s	2	3	Me	H

39	S	2	3	Me	Me
40	S	2	3	M e	Et
41	S	2	3	Me	Pr
42	S	2	3	Me	iPr
43	S	2	3	Me	Bu
44	S	2	3	Me	Pen
45	S	2	3	Me	Hex
46	S	2	3	M e	cPr
47	S	2	3	Me	cBu
48	S	2	3	Me	c Pen
49	S	2	3	Me	cHex
51	S	3	4	H	H
52	S	3	4	H	Me
53	S	3	4	H	Et
54	S	3	4	H	Pr
55	S	3	4	H	iPr
56	S	3	4	H	Bu
57	S	3	4	H	Pen
58	S	3	4	H	Hex
59	s	3	4	H	cPr
60	s	3	4	H	cBu
61	s	3	4	H	cPen
62	s	3	4	H	cHex
63	s	3	4	Me	H
64	s	3	4	Me	Me
65	s	3	4	Me	Et
66	s	3	4	Me	Pr
67	s	3	4	Me	iPr
68	s	3	4	Me	Bu
69	s	3	4	Me	Pen
70	s	3	4	Me	Hex
71	s	3	4	Me	cPr

72	S	3	4	Me	cBu
73	S	3	4	Me	cPen
74	S	3	4	Me	cHex
76	0	1	3	H	H
77	0	1	3	H	Me
78	0	1	3	H	Et
79	0	1	3	H	Pr
80	0	1	3	H	iPr
81	0	1	3	H	Bu
82	0	1	3	H	Pen
83	0	1	3	H	Hex
84	0	1	3	H	cPr
85	0	1	3	H	CBu
86	0	1	3	H	cPen
87	0	1	3	H	cHex
88	0	1	3	Me	H
89	0	1	3	Me	Me
90	0	1	3	Me	Et
91	0	1	3	Me	Pr
92	0	1	3	Me	iPr
93	0	1	3	Me	Bu
94	0	1	3	Me	Pen
95	0	1	3	Me	Hex
96	0	1	3	Me	cPr
97	0	1	3	Me	cBu
98	0	1	3	Me	cPen
99	0	1	3	Me	cHex
101	0	2	3	H	H
102	0	2	3	H	Me
103	0	2	3	H	Et
104	0	2	3	H	Pr
105	0	2	3	H	iPr

106	2	3	Η	Bu
107	2	3	Η	Pen
108	2	3	Η	Hex
109	2	3	Η	CPr
110	2	3	Η	CBu
111	2	3	Η	CPen
112	2	3	Η	CHex
113	2	3	Μ e	H
114	2	3	Me	M e
115	2	3	Me	Et
116	2	3	Μ e	Pr
117	2	3	Me	IPr
118	2	3	Me	Bu
119	2	3	Me	Pen
120	2	3	Me	Hex
121	2	3	Me	cPr
122	2	3	Me	c3u
123	2	3	Me	cPen
124	2	3	Me	cHex
126	3	4	H	n
127	3	4	H	M e
128	3	4	H	tí
129	3	4	H	P 2ľ
130	3	4	H	iPr
131	3	4 /1	H	B u
132	3	4	H	Pen
133	3	4	H	Hex
134	3	4	H	cPr
135	3	4	H	cBu
136	3	4	H	cPen
137	3	4	H	cHex
138	3	4	Me	H

139	3	4	Me	Me
140	3	4	Me	Er
141	3	4	Me	Pr
142	3	4	Me	IPr
143	3	4	Me	B u
144	3	4	Me	Pen
145	3	4	Me	Hex
146	3	4	Me	cPr
147	3	4	Me	cBu
148	3	4	Me	cPen
149	3	4	Me	cHex

Tabuika 2

(1-2)

Zlúčenina	X	n	Pozícia	R²	R⁴	R⁵
1	S	1	3	H	H	H
2	S	1	3	H	H	Me
3	S	1	3	H	H	Et
4	S	1	3	H	H	Pr
5	S	1	3	H	H	iPr
6	S	1	3	H	H	Bu
7	s	1	3	H	Me	Me
8	s	1	3	H	Me	Et
9	s	1	3	H	Me	Pr
10	s	1	3	H	Me	IPr
11	s	1	3	H	Me	Bu
12	s	1	3	H	Et	Et
13	s	1	3	H	Et	Pr

14	S	1	3	H	Et	iPr
15	S	1	3	H	Et	Bu
16	s	1	3	H	Pr	Pr
17	S	1	3	H	Pr	iPr
18	S	1	•''i u	H	Pr	Bu
19	S	1	3	H	iPr	iPr
20	S	1	3	H	iPr	Bu
21	s	1	3	H	B u	Bu
22	s	1	3	H	H	CH₂CH₂OH
23	s	1	3	H	Me	ch₂ch₂oh
24	s	1	3	H	Et	ch₂ch₂oh
25	s	1	3	H	Pr	ch₂ch₂oh
26	s	1	3	H	iPr	ch₂ch₂oh
27	s	i	3	H	H	CH (CH₃) CH₂OH
28	s	1	3	H	H	CH(CH₂0H)CH₂0H
29	s	1	3	H	H	CH(CH₂CH₃)CH₂OH
30	s	1	3	H	H	CH (CH (CH₃) ₂) CH₂OH
31	s	1	3	H	H	ch₂ch₂nh₂
32	s	1	3	H	H	CH (CH₃) CH₂NH₂
33	s	1	3	H	H	CH(CH₂CH₃)CH₂NH₂
34	s	1	3	H	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂NH₂
35	s	1	3	H	H	ch₂cooh
36	s	1	3	H	H	CH (CH₃) COOH
37	s	1	3	H	H	CH(CH₂OH)COOH
38	s	1	3	H	H	CH (CH₂CH₃) COOH
3 9	s	1	3	H	H	CH (CH (CH₃) ₂) COOH
40	s	1	3	H	H	CH₂CONH₂
41	s	1	3	H	H	CH(CH₃)CONH₂
42	s	1	3	H	H	CH(CH₂OH)CONH₂
43	s	1	3	H	H	CH (CH₂CH₃)CONH₂
44	s	1	3	H	H	CH(CH(CH₃)₂)CONH₂
45	s	1	3	H	H	cPr

46	S	1	3	H	H	cBu
47	S	1	o	H	H	cPen
48	S	1	3	H	H	cHex
49	s	1	3	H	H	3-Azt
50	s	1	3	H	H	3-Pyr
51	s	1	3	H	H	3-Pip
52	s	1	3	H	H	4-Pip
53	s	1	3	H	H	2-COOH-Ph
54	s	1	3	H	H	2-CONH₂-Ph
55	s	1	3	H	H	3-COOH-Ph
56	s	1	3	H	H	3-CONH₂-Ph
57	s	1	3	H	H	4-COOH-Ph
58	s	1	3	H	H	4-CONH₂-Ph
59	s	1	3	H	-ch₂ch₂ch₂-
60	s	1	3	H	-ch₂ch₂ch₂ch₂-
61	s	1	3	H	-ch₂ch₂ch₂ch₂ch₂-
62	s	1	3	H	-ch₂ch₂och₂ch₂-
63	s	1	3	H	-ch₂ch₂sch₂ch₂-
64	s	1	3	H	-ch₂ch₂nhch₂ch₂-
65	s	1	3	H	-CH₂CH(OH)CH₂-
66	s	1	3	H	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
67	s	1	3	H	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂CH₂-
68	s	1	3	H	-CH₂CH₂CH (OH) ch₂ch₂-
69	s	1	3	H	-CH(COOH)CH₂CH₂-
70	s	1	3	H	-CH(CONH₂)CH₂CH₂-
71	s	1	3	H	-CH (CH₂OH)CH₂CH₂-
72	s	1	3	H	-CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂-
73	s	1	3	H	-CH(COOH)CH₂CH₂CH₂-
74	s	1	3	H	-CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂-
75	s	1	3	H	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂CH₂-
76	s	1	3	H	-CH (CH₂NH₂) ch₂ch₂ch₂-
77	s	1	3	H	-CH (COOH) CH₂CH₂CH₂CH₂-

78	S	1	3	H	-CH (CONH₂) CH₂CH2CH₂CH₂-
79	S	1	3	H	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂CH₂CH₂-
80	S	1	3	H	-CH (CH₂NH₂) CH₂CH₂CH₂CH₂-
81	S	1	3	H	-CH₂CH (COOH) ch₂ch₂ch₂-
82	S	1	3	H	-ch₂ch (CONH₂) ch₂ch₂ch₂-
83	S	1	3	H	-CH₂CH(CH₂OH)CH2CH₂CH₂-
84	S	1	3	H	-CH₂CH (CH2NH2) ch₂ch₂ch₂-
85	s	1	3	H	-CH₂CH₂CH (COOH) ch₂ch₂-
86	s	1	3	H	-CH₂CH₂CH ( CONH₂ ) ch₂ch₂-
87	s	1	3	H	-CH₂CH₂CH (CH₂OH) ch₂ch₂-
88	s	1	3	H	-CH₂CH₂CH (CH₂NH₂) ch₂ch₂-
8 9	s	1	3	Me	H	H
90	s	1	3	Me	H	Me
91	s	Ί x	3	Me	H	Et
92	s	Ί x	3	Me	H	Pr
93	s	1	3	Me	H	iPr
94	s	1	3	Me	H	Bu
95	s	1	3	Me	Me	Me
96	s	1	3	Me	Me	Et
97	s	1	3	Me	Me	Pr
98	s	1	3	Me	Me	IPr
99	s	1	3	Me	Me	Bu
100	s	1	3	Me	Et	Et
101	s	1	3	Me	Et	Pr
102	s	1	3	Me	Et	iPr
103	s	1	3	Me	Et	Bu
104	s	1	3	Me	Pr	Pr
105	s	1	3	Me	Pr	iPr
106	s	1	3	Me	Pr	Bu
107	s	1	3	Me	iPr	iPr
108	s	1	3	Me	iPr	Bu
109	s	1	3	Me	Bu	Bu

110	S	1	3	Me	H	CH₂CH₂OH
111	S	1	3	Me	Me	ch₂ch₂oh
112	S	1	3	Me	Et	ch₂ch₂oh
113	S	1	3	Me	Pr	ch₂ch₂oh
114	S	1	3	Me	iPr	ch₂ch₂oh
115	s	1	3	Me	H	CH (CH₃) CH₂OH
116	s	1	3	Me	H	CH(CH₂OH) CH₂OH
117	s	1	3	M e	H	CH(CH₂CH₃)CH₂OH
118	s	1	3	Me	K	CH(CH(CH₃)₂)CH₂OH
119	s	1	3	Me	H	ch₂ch₂nh₂
120	s	1	3	Me	H	CH(CH₃)CH₂NH₂
121	s	1	3	Me	H	CH (CH₂CH₃)CH₂NH₂
122	s	1	3	Me	H	CH (CH (CH₃)₂)CH₂NH₂
123	s	1	3	Me	H	ch₂cooh
124	s	1	3	Me	K	CH (CH₃)COOH
125	s	1	3	Me	H	CH(CH₂OH)COOH
126	s	1	3	Me	U 1 1	CH(CH₂CK₃)COOH
127	s	1	3	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)COOH
128	s	1	3	Me	H	ch₂conh₂
129	s	1	3	Me	H	CH(CH₃)CONH₂
130	s	1	3	Me	H	CH(CH₂OH)CONH₂
131	s	1	3	Me	H	CH (CH₂CH₃)CONH₂
132 .	s	1	3	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)CONH₂
133	s	1	3	Me	H	cPr
134	s	1	3	Me	H	cBu
135	s	1	3	Me	H	cPen
136	s	1	3	Me	H	cHex
137	s	1	3	Me	H	3-Azt
138	s	1	3	Me	H	3-Pyr
139	s	1	3	Me	H	3-Pip
140	s	1	3	Me	H	4-Pip
141	s	1	3	Me	H	2-COOH-Ph

143	S	1	3	Me	H 3-COOH-Ph
144	S	1	3	Me	H 3-CONH₂-Ph
145	s	1	3	Me	H 4-COOH-Ph
14 β	s	1	3	Me	H 4-CONH₂-Ph
147	s	1	3	Me	-ch₂ch₂ch₂-
148	s	1	3	Me	-ch₂ch₂ch₂ch₂-
149	s	1	3	Me	-ch₂ch₂ch₂ch₂ch₂-
150	s	1	3	Me	-ch₂ch₂och₂ch₂-
151	s	1	3	Me	-ch₂ch₂sch₂ch₂-
152	s	1	3	Me	-ch₂ch₂nhch₂ch₂-
Ί Ζ Ό ± U J	s	1	3	Me	-CH₂CH (OH)CH₂-
154	s	1	3	Me	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
155	s	1	3	Me	-CH₂CH (OH) ch₂ch₂ch₂-
156	s	1	3	Me	-CH₂CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
157	s	1	3	Me	-CH(COOH)CH₂CH₂-
158	s	1	3	Me	-CH (CONH₂) CH₂CH₂-
159	s	1	3	M e	-CH (CH₂OH)CH₂CH₂-
160	s	1	3	Me	-CH(CH₂NH₂)CH₂CH2-
161	s	1	3	Me	-CH(COOH)CH₂CH₂CH₂-
162	s	1	3	Me	-CH (CONH₂) ch₂ch₂ch₂-
163	s	1	3	Me	-CH (CH₂OH) ch₂ch₂ch₂-
164	s	1	3	Me	-CH (CH₂NH₂) ch₂ch₂ch₂-
165	s	1	3	Me	-ch (COOH) ch₂ch₂ch₂ch₂-
166	s	1	3	Me	-ch (CONH₂) ch₂ch₂ch₂ch₂-
167	s	1	3	Me	-CH (CH₂OH) ch₂ch₂ch₂ch₂-
168	s	1	3	Me	-ch ( ch₂nh₂ ) ch₂ch₂ch₂ch₂-
169	s	1	3	Me	-CH₂CH(COOH) CH₂CH₂CH_r
170	s	1	3	Me	-ChýCH (CONH₂) ch₂ch₂ch₂-
171	s	1	3	Me	-ch₂ch (CH₂OH) ch₂ch₂ch₂-
172	s	1	3	Me	-ch₂ch (CH₂NH₂) ch₂ch₂ch₂-
173	s	1	3	Me	-CH₂CH₂CH (COOH) ch₂ch₂-
174	s	1	3	Me	-CH₂CH₂CH (CONH₂) ch₂ch₂-

175	S	1	3	Me	-CH₂CH₂CH ( CH₂OH) CH2CH2-
176	S	1	3	Me	-CH₂CH₂CH (CH2NH2) CH2CH2-
177	S	2	3	H	H	H
178	S	2	3	H	H	M e
179	S	2	3	H	H	Et
180	S	2	3	H	H	Pr
181	S	2	3	H	H	iPr
182	S	2	3	H	H	Bu
183	S	2	3	H	Me	Me
184	S	2	3	H	Me	Et
185	S	2	3	H	Me	Pr
186	S	2	3	H	Me	iPr
187	S	2	3	H	Me	Bu
188	s	2	3	H	Et	Et
189	s	2	3	H	Et	Pr
190	s	2	3	H	Et	iPr
191	s	2	3	H	Et	Bu
192	s	2	3	H	Pr	Pr
193	s	2	3	H	Pr	iPr'
194	s	2	3	H	Pr	Bu
195	s	2	3	H	iPr	iPr
196	s	2	3	H	iPr	Bu
197	s	2	3	H	Bu	Bu
198	s	2	3	H	H	CH₂CH₂OH
199	s	2	3	H	Me	CH₂CH₂OH
200	s	2	3	H	Et	CH2CH2OH
201	s	2	3	H	Pr	CH2CH2OH
202	s	2	3	H	iPr	CH₂CH₂OH
203	s	2	3	H	H	CH (CH₃)CH₂OH
204	s	2	3	H	H	CH(CH₂OH)CH₂OH
205	s	2	3	H	H	CH(CH₂CH₃)CH₂OH
206	s	2	3	H	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂OH

207	S	2	3	H	H	ch₂ch₂nh₂
208	S	2	3	H	H	CH(CH₃)CH₂NH₂
209	S	2	3	H	H	CH (CH₂CH₃) CH₂NH₂
210	S	2	3	H	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂NH₂
211	S	2	3	H	H	ch₂cooh
212	S	2	3	H	H	CH(CH₃)COOH
213	S	2	3	H	H	CH(CH₂OH)COOH
214	S	2	3	H	H	CH (CH₂CH₃) COOH
215	S	2	3	H	H	CH(CH ( CH₃ )₂ ) COOH
216	S	2	3	H	H	CH₂CONH₂
217	S	2	3	H	H	CH (CH₃) CONH₂
218	S	2	3	H	H	CH(CH₂OH)CONH₂
219	s	2	3	H	H	CH(CH₂CH₃) CONH₂
220	s	2	3	H	H	CH(CH (CH₃)₂ ) CONH₂
221	s	2	3	H	H	cPr
222	s	2	3	H	H	cEu
223	s	2	n ú	H	H	cPen
224	s	2	3	H	H	cHex
225	s	2	3	H	H	3-Azt
226	s	2	3	H	H	3-Pyr
227	s	2	3	H	H	3 - P i p
228	s	2	3	H	H	4-Pip
229	s	2	3	H	H	2-COOH-Ph
230	s	2	3	H	H	2-CONH₂-Ph
231	s	2	3	H	H	3-COOH-Ph
232	s	2	3	H	H	3-CONH₂-Ph
233	s	2	3	H	H	4-COOH-Ph
234	s	2	3	H	H	4-CONH₂-Ph
235	s	2	3	H	-ch₂ch₂ch₂-
236	s	2	3	H	-ch₂ch₂ch₂ch₂-
237	s	2	3	H	-ch₂ch₂ch₂ch₂ch₂-
238	s	2	3	H	-ch₂ch₂och₂ch₂-

239	S	2	3	H	-CH2CH2SCH2CH2-
240	S	2	3	H	-CH2CH2NHCH2CH2-
241	s	2	3	H	-CH₂CH(OH)CH₂-
242	s	2	3	H	-CH₂CH(OH)CH₂CH2-
243	s	2	3	H	-CH₂CH (OH) ch₂ch₂ch₂-
244	s	2	3	H	-CH₂CH₂CH(OH)CH2CH2-
245	s	2	3	H	-CH(COOH)CH2CH2-
246	s	2	3	H	-CH (CONH₂) CH2CH2-
247	s	2	3	H	-CH (CH₂OH) CH2CH2-
248	s	2	3	H	-CH(CH₂NH2)CH₂CH2-
249	s	2	3	H	-CH(COOH)CH₂CH₂CH2-
250	s	2	3	H	-CH(CONH₂)CH2CH₂CH₂-
251	s	2	3	H	-CH (CH₂OH) CH2CH2CH2-
252	s	2	3	H	-CH (CH2NH2) CH2CH2CH2-
253	s	2	3	H	-CH (COOH) CH2CH2CH2CH2-
254	s	2	3	H	-CH (CONH2) CH2CH2CH2CH2-
255	s	2	3	H	-CH (CH₂OH) CH2CH2CH2CH2-
256	s	2	3	H	-CH (CH₂NH₂) CH2CH2CH2CH2-
257	s	2	3	H	-CH₂CH (COOH) CH2CH2CH2-
258	s	2	3	H	-CH₂CH (CONH₂) CH2CH2CH2-
259	s	2	3	H	-CH₂CH (CH₂OH) CH2CH2CH2-
260	s	2	3	H	-CH2CH (CH2NH2) CH₂CH₂CH₂-
261	s	2	3	H	-CH2CH2CH (COOH) CH2CH2-
262	s	2	3	H	-CH2CH2CH (CONH₂) CH2CH2-
263	s	2	3	H	-CH2CH2CH (CH₂OH) CH2CH2-
264	s	2	3	H	-CH2CH2CH (CH2NH2) CH2CH2-
265	s	2	3	Me	H	H
266	s	2	3	Me	H	Me
267	s	2	3	Me	H	Et
268	s	2	3	Me	H	Pr
269	s	2	3	Me	H	iPr
270	s	2	3	Me	H	Bu

271	S	2	3	Me	Me	Me
272	S	2	3	Me	Me	Et
273	s	2	3	Me	Me	Pr
274	s	2	3	Me	Me	iPr
275	s	2	3	Me	Me	Bu
276	s	2	3	Me	Et	Et
277	s	2	3	Me	Et	Pr
278	s	2	3	Me	Et	iPr
279	s	2	3	Me	Et	Bu
280	s	2	3	Me	Pr	Pr
281	s	2	U	Me	Pr	iPr
282	s	2	3	Me	Pr	Bu
283	s	2	3	Me	iPr	iPr
284	s	2	3	Me	iPr	Bu
285	s	2	3	Me	Bu	Bu
286	s	2	3	Me	H	ch₂ch₂oh
287	s	2	3	Me	Me	ch₂ch₂oh
288	s	2	3	Me	Et	ch₂ch₂oh
289	s	2	3	Me	Pr	ch₂ch₂oh
290	s	2	3	Me	iPr	ch₂ch₂oh
291	s	2	3	Me	H	CH(CH₃)CH₂OH
292	s	2	3	Me	H	CH(CH₂OH)CH₂OH
293	s	2	3	Me	H	CH (CH₂CH₃)CH₂OH
294	s	2	3	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂OH
295	s	2	3	Me	H	ch₂ch₂nh₂
296	s	2	3	Me	H	CH (CH₃)CH₂NH₂
297	s	2	3	Me	H	CH (CH₂CH₃) CH₂NH₂
298	s	2	3	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂NH₂
299	s	2	3	Me	H	ch₂cooh
300	s	2	3	Me	H	CH (CH₃) COOH
301	s	2	3	Me	H	CH(CH₂OH)COOH
302	s	2	3	Me	H	CH (CH₂CH₃) COOH

303	S	2	3	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)COOH
304	S	2	3	Me	H	ch₂conh₂
305	S	2	3	Me	H	CH(CH₃)CONH₂
306	S	2	3	Me	H	CH(CH₂OH) conh₂
307	S	2	3	Me	H	CH(CH₂CH₃)CONH₂
308	S	2	3	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)CONH₂
309	S	2	3	Me	H	cPr
310	S	2	3	Me	H	cBu
311	S	2	3	Me	H	cPen
312	S	2	3	Me	H	cHex
313	S	2	3	Me	H	3-Azt
314	S	2	3	Me	H	3-Pyr
315	S	2	3	Me	H	3-Pip
316	S	2	3	Me	H	4-Pip
317	S	2	3	Me	H	2-COOH-Ph
318	S	2	3	Me	H	2-CONH₂-Ph
319	S	2	3	Me	H	3-COOH-Ph
320	S	2	3	Me	H	3-CONH₂-Ph
321	S	2	3	Me	H	4-COOH-Ph
322	S	2	3	Me	H	4-CONH₂-Ph
323	S	2	3	Me	-ch₂ch₂ch₂-
324	S	2	3	Me	-ch₂ch₂ch₂ch₂-
325	S	2	3	Me	-ch₂ch₂ch₂ch₂ch₂-
326	S	2	3	Me	-ch₂ch₂ock₂ch₂-
327	S	2	3	Me	-ch₂ch₂sch₂ch₂-
328	S	2	3	Me	-ch₂ch₂nhch₂ch₂-
329	s	2	3	Me	-CH₂CH(OH)CH₂-
330	s	2	3	Me	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
331	s	2	3	Me	-CH₂CH (OH) ch₂ch₂ch₂-
332	s	2	3	Me	-CH₂CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
333	s	2	3	Me	-CH(COOH)CH₂CH₂-
334	s	2	3	Me	-CH(CONH₂)CH₂CH₂-
335	s	2	3	Me	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂-

336	s	2	3	Me	-CH (CH₂NH₂) CH₂CH₂-
337	S	2	3	Me	-CH(COOH) CH₂CH₂CH₂-
338	s	2	3	Me	-CH (CONH₂) CH₂CH₂CH₂-
339	s	2	3	Me	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂CH₂-
340	s	2	3	Me	-CH(CH₂NH₂)ch₂ch₂ch₂-
341	s	2	3	Me	-CH (COOH) CH₂CH₂CH₂CH₂-
342	s	2	3	Me	-CH (CONH₂) ch₂ch₂ch₂ch₂-
343	s	2	3	Me	-CH (CH₂OH) ch₂ch₂ch₂ch₂-
344	s	2	3	Me	-CH (CH₂NH₂) ch₂ch₂ch₂ch₂-
345	s	2	3	Me	-CH₂CH (COOH) ch₂ch₂ch₂-
346	s	2	3	Me	-ch₂ch (CONH₂) ch₂ch₂ch₂-
347	s	2	3	Me	-ch₂ch(CH₂OH)ch₂ch₂ch₂-
348	s	2	3	Me	-ch₂ch (CH₂NH₂) ch₂ch₂ch₂-
349	s	2	3	Me	-CH₂CH₂CH (COOH) ch₂ch₂-
350	s	2	3	Me	-ch₂ch₂ch ( conh₂ ) ch₂ch₂-
351	s	2	3	Me	-CH₂CH₂CH (CH₂OH)CH₂CH₂-
352	s	2	3	Me	-ch₂ch₂ch (CH₂NH₂) ch₂ch₂-
353	s	3	4	H	H	H
354	s	3	4	H	H	Me
355	s	3	4	H	H	Et
356	s	3	4	H	H	Pr
357	s	3	4	H	H	IPr
358	s	3	4	H	H	Bu
359	s	3	4	H	Me	Me
360	s	3	4	H	Me	Et
361	s	3	4	H	Me	Pr
362	s	3	4	H	Me	IPr
363	s	3	4	H	Me	Bu
364	s	3	4	H	Et	Et
365	s	3	4	H	Et	Pr
366	s	3	4	H	Et	iPr
367	s	3	4	H	Et	Bu

368	S	3	4	H	Pr	Pr
369	S	3	4	H	Pr	iPr
370	S	3	4	H	Pr	Bu
371	S	3	4	H	iPr	iPr
372	S	3	4	H	iPr	Bu
373	s	3	4	H	Bu	Bu
374	s	3	4	H	H	CH₂CH₂OH
375	s	3	4	H	Me	CH₂CH₂OH
376	s	3	4	H	Et	ch₂ch₂oh
377	s	3	4	H	Pr	CH2CH2OH
378	s	3	4	H	iPr	CH₂CH₂OH
379	s	3	4	H	H	CH(CH₃)CH₂OH
380	s	3	4	H	H	CH(CH₂OH)CH₂OH
381	s	3	4	H	H	CH(CH₂CH₃)CH₂OH
382	s	3	4	H	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂OH
383	s	3	4	H	H	ch₂ch₂nh₂
384	s	3	4	H	H	CH(CH₃)CH₂NH₂
385	s	3	4	H	H	CH(CH₂CH₃)CH₂NH2
386	s	3	4	H	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂NH₂
387	s	3	4	H	H	ch₂cooh
388	s	3	4	H	H	CH(CH₃)COOH
389	s	3	4	H	H	CH(CH₂OH)COOH
390	s	3	4	H	H	CH(CH₂CH₃)COOH
391	s	3	4	H	H	CH (CH (CH₃)₂)COOH
392	s	3	4	H	H	CH2CONH2
393	s	3	4	H	H	CH(CH₃)CONH₂
394	s	3	4	H	H	CH(CH₂OH)conh₂
395	s	3	4	H	H	CH(CH₂CH₃)CONH₂
396	s	3	4	H	H	CH(CH(CH₃)₂)CONH₂
397	s	3	4	H	H	cPr
398	s	3	4	H	H	cBu
399	s	3	4	H	H	cPen

400	S	3	4	H	H	cHex
401	S	3	4	H	H	3-Azt
402	S	3	4	H	H	3-Pyr
403	S	3	4	H	H	3-Pip
404	S	3	4	H	H	4-Pip
405	s	3	4	H	H	2-COOH-Ph
406	s	3	4	H	H	2-CONH₂-Ph
407	s	3	4	H	H	3-COOH-Ph
408	s	3	4	H	H	3-CONH₂-Ph
409	s	3	4	H	H	4-COOH-Ph
410	s	3	4	H	H	4-CONH₂-Ph
411	s	3	4	H	-ch₂ch₂ch₂-
412	s	3	4	H	-ch₂ch₂ch₂ch₂-
413	s	3	4	H	-ch₂ch₂ch₂ch₂ch₂-
414	s	3	4	H	-ch₂ch₂och₂ch₂-
415	s	3	4	H	-ch₂ch₂sch₂ch₂-
416	s	3	4	H	-ch₂ch₂nhch₂ch₂-
417	s	3	4	H	-CH₂CH (OH)CH₂-
418	s	3	4	H	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
419	s	3	4	H	-CH₂CH (OH) ch₂ch₂ch₂-
420	s	3	4	H	-CH₂CH₂CH (OH) ch₂ch₂-
421	s	3	4	H	-CH(COOH)CH₂CH₂-
422	s	3	4	H	-CH(CONH₂)CH₂CH₂-
423	s	3	4	H	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂-
424	s	3	4	H	-CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂-
425	s	3	4	H	-CH (COOH) CH₂CH₂CH₂-
426	s	3	4	H	-CH (CONH₂) ch₂ch₂ch₂-
427	s	3	4	H	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂CH₂-
428	s	3	4	H	-CH (CH₂NH₂) ch₂ch₂ch₂-
429	s	3	4	H	-CH (COOH) CH₂CH₂CH₂CH₂-
430	s	3	4	H	-CH (CONH₂) CH₂CH₂CH₂CH₂-
431	s	3	4	H	-CH (CH₂OH) CH₂CH₂CH₂CH₂-

A

JJ

432	S	3	4	H	-CH (CH₂NH₂) CH₂CH₂CH₂CH₂-
433	S	3	4	H	-CH₂CH (COOH) CH2CH2CH2-
434	S	3	4	H	-CH₂CH (CONH₂)CH₂CH₂CH₂-
435	S	3	4	H	-CH₂CH (CH₂OH)CH₂CH₂CH₂-
436	S	3	4	H	-CH₂CH (CH2NH2) CH2CH2CH2-
437	S	3	4	H	-CH2CH2CH (COOH) CH2CH2-
438	S	3	4	H	-CH₂CH₂CH(CONH2)CH2CH2-
439	S	3	4	H	-CH2CH2CH (CH₂OH) CH2CK2-
440	S	3	4	H	-CH2CH2CH (CH₂NH₂) ch₂ch₂-
441	S	3	4 '	Me	h	H
442	S	3	4	Me	h	Me
443	S	3	4	Me	H	Et
444	S	3	4	Me	H	Pr
445	S	3	4	Me	H	iPr
446	S	3	4	Me	H	Bu
447	S	3	4	Me	Me	Me
448	S	3	4	Me	Me	Et
449	S	3	4	Me	Me	Pr
450	S	3	4	Me	Me	iPr
451	S	3	4	Me	Me	Bu
452	S	3	4	Me	Et	Et
453	S	3	4	Me	Et	Pr
454	S	3	4	Me	Et '	iPr
455	S	3	4	Me	Et	Bu
456	S	3	4	Me	Pr	Pr
457	S	3	4	Me	Pr	iPr
458	S	3	4	Me	Pr	Bu
459	s	3	4	Me	iPr	iPr
460	s	3	4	Me	iPr	Bu
461	s	3	4	Me	Bu	Bu
462	s	3	4	Me	H	CH₂CH₂OH
463	s	3	4	Me	Me	CH2CH2OH

464	S	3	4	Me	Et	CH₂CH₂OH
465	S	3	4	Me	Pr	CH₂CH₂OH
466	S	3	4	Me	iPr	CH₂CH₂OH
467	S	3	4	Me	H	CH (CH₃) CH₂OH
468	S	3	4	Me	H	CH(CH₂OH)CH₂OH
469	S	3	4	Me	H	CH (CH₂CH₃)CH₂OH
470	s	3	4	Me	H	CH ( CH ( CH₃) ₂ ) CH₂OH
471	s	3	4	Me	H	ch₂ch₂nh₂
472	s	3	4	Me	H	CH (CH₃) CH₂NH₂
473	s	3	4	Me	H	CH (CH₂CH₃) ch₂nh₂
474	s	J	4	Me	H	CH (CH (CH₃) ₂ ) CH₂NH₂
475	s	3	4	Me	H	CHoCOOH
476	s	3	4	Me	H	CH (CH₃) COOH
477	s	— 0	4	Me	H	CH(CH₂OH)COOH
478	s	3	4	Me	H	CH (CH₂CH₃) COOH
479	s	3	4	Me	H	CH(CH (CH₃ )2) COOH
480	s	3	4	Me	H	CH2COONH2
481	s	3	4	Me	H	CH (CH₃) CONH₂
482	s	3	4	Me	H	CH(CH₂OH)CONH₂
483	s	3	d	Me	H	CH (CH2CH3) COHN2
484	s	3	4	Me	H	CH (CH (CH₃) ₂) CONH₂
485	s	3	4	Me	H	CPr
486	s	3	4	Me	H	cBu
487	s	3	4	Me	H	cPen
488	s	3	4	Me	H	cHex
489	s	3	4	Me	H	3-Azt
490	s	3	4	Me	H	3-Pvr
491	s	3	4	Me	H	3-Pip
492	s	3	4	Me	H	4-Pip
493	s	3	4	Me	H	2-COOH-Ph
494	s	3	4	Me	H	2-CONH₂-Ph
495	s	3	4	Me	H	3-COOH-Ph

496	S	3	4	Me	H	3-CONH₂-Ph
497	S	3	4	Me	H	4-COOH-Ph
498	S	3	4	Me	H	4-CONH₂-Ph
499	S	3	4	Me	-CH2CH2CH2-
500	S	3	4	Me	-ch₂ch₂ch₂ch₂-
501	S	3	4	Me	-ch₂ch₂ch₂ch₂ch₂-
502	S	3	4	Me	-ch₂ch₂och₂ch₂-
503	S	3	4	Me	-CH₂CH₂SCH₂CH2-
504	S	3	4	Me	-ch₂ch₂nhch₂ch₂-
505	s	3	4	Me	-CH₂CH(0H)CH₂-
506	s	3	4	Me	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
507	s	3	4	Me	-CH₂CH(OH)CH2CH₂CH2-
508	s	3	4	Me	-CH₂CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
509	s	3	4	Me	-CH(COOH)CH₂CH₂-
510	s	3	4	Me	-CH (CONHz) CH₂CH₂-
511	s	3	4	Me	-CH(CH₂OH)CH₂CH2-
512	s	3	4	Me	-CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂-
513	s	3	4	Me	-CH (COOH) CH₂CH₂CH₂-
514	s	3	4	Me	-CH (CONH2) CH₂CH₂CH₂-
515	s	3	4	Me	-CH(CH2OH)CH₂CH₂CH2-
516	s	3	4	Me	-CH (CH₂NH₂) CH₂CH₂CH₂-
517	s	3	4	Me	-CH (COOH) CH₂CH₂CH₂CH₂-
518	s	3	4	Me	-CH (CONH₂) CH₂CH₂CH₂CH₂-
519	s	3	4	Me	-CH (CH?OH) CH₂CH₂CH₂CH₂-
520	s	3	4	Me	-CH (CH₂NH₂) CH2CH2CH2CH2-
521	s	3	4	Me	-CH₂CH (COOH) CH2CH2CH2-
522	s	3	4	Me	-CH₂CH (CONH2) CH₂CH₂CH₂-
523	s	3	4	Me	-CH2CH (CH₂OH) CH₂CH₂CH₂-
524	s	3	4	Me	-CH₂CH (CH2NH2) CH₂CH₂CH₂-
525	s	3	4	Me	-CH₂CH₂CH (COOH) ch₂ch₂-
526	s	3	4	Me	-CH₂CH₂CH (CONH₂) CH2CH2-
527	s	3	4	Me	-CH₂CH₂CH (CH₂OH) ch₂ch₂-

528	S	3	4	Me	-CH₂CH₂CH (CH2NH2) CH2CH2-
529	0	1	3	H	H	H
530	0	1	3	H	H	Me
531	0	1	3	H	H	Et
532	0	1	3	H	H	Pr
533	0	1	3	H	H	iPr
534	0	1	3	H	H	Bu
535	0	1	3	H	Me	Me
536	0	1	3	H	Me	Et
537	0	1	3	H	Me	Pr
538	0	1	N 3	H	Me	iPr
539	0	1	3	H	Me	Bu
540	0	1	3	H	Et	Et
541	0	1	3	H	Et	Pr
542	0	1	3	H	E t	iPr
543	0	1	3	H	Et	Bu
544	0	1	3	H	Pr	Pr
545	0	1	3	H	Pr	iPr
546	0	1	3	H	Pr	Bu
547	0	1	3	H	iPr	iPr
548	0	1	3	H	iPr	Bu
549	0	1	3	H	Bu	Bu
550	0	1	3	H	H	CH₂CH₂OH
551	0	1	3	H	Me	ch₂ch₂oh
552	0	1	3	H	Et	CH₂CH₂OH
553	0	1	3	H	Pr	CH₂CH₂OH
554	0	1	3	H	iPr	CH₂CH₂OH
555	0	1	3	H	H	CH(CH₃)CH₂OH
556	0	1	3	H	H	CH (CH₂OH) CH₂OH
557	0	1	3	H	H	CH (CH2CH3) CH₂OH
558	0	1	3	H	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂OH
559	0	1	3	H	H	CH₂CH₂NH₂

560	1	3	Η	Η	CH(CH₃)CH₂NH₂
561	1	3	Η	Η	CH(CH₂CH₃)CH₂NH₂
562	1	3	Η	Η	CH (CH (CH₃)₂)CH₂NH₂
563	1	3	Η	Η	ch₂cooh
564	1	3	Η	Η	CH(CH3) COOH
565	1	3	Η	Η	CH(CH₂OH)COOH
566	1	3	Η	Η	CH(CH₂CH₃)COOH
567	1	3	Η	Η	CH(CH(CH₃)₂)COOH
568	1	3	Η	Η	ch₂conh₂
569	1	3	Η	Η	CH(CH₃)CONH₂
570	1	3	Η	Η	CH(CH₂OH)CONH₂
571	1	3	Η	Η	CH(CH₂CH₃)CONH₂
572	1	3	Η	Η	CH(CH(CH₃)₂)CONH₂
573	1	3	Η	Η	cPr
574	1	3	Η	Η	cBu
575	1	3	Η	Η	cPen
576	1	3	Η	Η	cHex
577	1	3	Η	Η	3-Azt
578	1	3	Η	Η	3-Pyr
579	1	3	Η	Η	3-Pip
580	1	3	Η	Η	4-Pip
581	1	3	Η	Η	2-COOH-Ph
582	1	3	Η	Η	2-CONH₂-Ph
583	1	3	Η	Η	3-COOH-Ph
584	1	3	Η	Η	3-CONH₂-Ph
585	1	3	Η	Η	4-COOH-Ph
586	1	3	Η	Η	4-CONH₂-Ph
587	1	3	Η	-ch₂ch₂ch₂-
588	1	3	Η	- CK₂CH₂CH₂CH₂-
589	1	3	Η	-ch₂ch₂ch₂ch₂ch₂-
590	1	3	Η	-ch₂ch₂och₂ch₂-
591	1	3	Η	-ch₂ch₂sch₂ch₂-

592	1	3	Η	-CH2CH2NHCH2CH2-
593	1	3	Η	-CH₂CH(OH)CH₂-
594	1	3	Η	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
595	1	3	Η	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂CH₂-
596	1	ο	Η	-CH₂CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
597	1	3	Η	-CH(COOH)CH₂CH₂-
598	2	3	Η	-CH(CONH₂)CH₂CH₂-
599		3	Η	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂-
600	-	3	Η	-CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂-
601	-	3	Η	-CH (COOH) CH₂CH₂CH₂-
602		3	Η	-CH (CONH₂) ch₂ch₂ch₂-
603	_ί_	3	Η	-CH (CH₂OH)CH₂CH₂CH₂-
604	η	3	Η	-ch(ch₂nh₂)ch₂ch₂ch₂-
605		ο	Η	-CH (COOH) CH₂CH₂CH₂CH₂-
606	-	3	Η	-ch (CONH₂) ch₂ch₂ch₂ch₂-
607	1	3	Η	-ch (CH₂OH) ch₂ch₂ch₂ch₂-
608	-	3	Η	-ch ( ch₂nh₂ ) ch₂ch₂ch₂ch₂-
609	2	3	Η	-CH₂CH (COOH) ch₂ch₂ch₂-
610	¹	3	Η	-ch₂ch ( conh₂ ) ch₂ch₂ch₂-
611	-	3	Η	—ch₂ch (CH₂OH) ch₂ch₂ch₂-
612	-	3	Η	-CH₂CH (CH₂NH₂) ch₂ch₂ch₂-
613		3	Η	-CH₂CH₂CH (COOH) ch₂ch₂-
614	-	3	Η	-CH₂CH₂CH (CONH₂) ch₂ch₂-
615		3	Η	-CH?CH₂CH (CH₂OH) ch₂ch₂-
616	2	3	Η	-ch₂ch₂ch (CH₂NH₂) ch₂ch₂-
617	-	3	Me	h h
618	2	3	Me	H Me
619	2	3	Me	H Et
620	ι	3	Me	H Pr
621	2	3	Me	H iPr
622	Ί	3	Me	H Bu
623	η	3	Me	Me Me

624	1	3	Me	Me	Et
625	1	3	Me	Me	Pr
626	1	3	Me	Me	iPr
627	1	3	Me	Me	Bu
628	1	ο	Me	Et	Et
629	1	3	Me	Et	Pr
630	1	3	Me	Et	iPr
631	1	3	Me	Et	Bu
632	1	3	Me	Pr	Pr
633	1	3	Me	Pr	iPr
634	1	3	Me	Pr	Bu
635	1	3	Me	iPr	iPr
636	1	3	Me	iPr	Bu
637	1	3	Me	Bu	Bu
638	1	3	Me	H	ch₂ch₂oh
639	1	3	Me	Me	CH2CH2OH
640	1	3	Me	Et	ch₂ch₂oh
641	1	3	Me	Pr	ch₂ch₂oh
642	1	3	Me	IPr	ch₂ch₂oh
643	1	3	Me	H	CH(CH₃) ch₂oh
644	1	3	Me	H	CH(CH₂OH)CH₂0H
645	1	3	Me	H	CH(CH₂CH₃)CH₂OH
646	1	3	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂OH
647	1	3	Me	H	CH₂CH₂NH₂
648	1	3	Me	H	CH(CH₃)CH₂NH₂
649	1	3	Me	H	CH(CH₂CH₃)CH₂NH₂
650	1	3	Me	H	CH (CH (CH₃)₂)CH₂NH₂
651	1	3	Me	H	CH₂COOH
652	1	3	Me	H	CH(CH₃)COOH
653	1	3	Me	H	CH(CH₂0H)COOH
654	1	3	Me	H	CH(CH₂CH₃)COOH
655	1	3	Me	H	CH (CH (CH₃)₂)COOH

656	1	3	Me	H	ch₂conh₂
657	1	3	Me	H	CH (CH₃) CONH₂
658	1	3	Me	H	CH(CH₂OH)CONH₂
659	1	3	Me	H	CH (CH₂CH₃) conh₂
660	1	ο	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)CONH₂
661	1	3	Me	H	CPr
662	1	3	Me	H	Cbu
663	1	3	Me	H	Cpen
664	1	3	Me	H	Chex
665	1	3	Me	H	3-Azt
666	1	3	Me	H	3-Pyr
667	1	3	Me	H	3-Pip
668	1	3	Me	H	4-Pip
669	1	3	Me 1	H	2-COOH-Ph
670	1	3	Me	H	2-CONH₂-Ph
671	1	3	Me	H	3-COOH-Ph
672	1	3	Me	H	3-CONH₂-Ph
673	1	3	Me	H	4-COOH-Ph
674	1	3	Me	H	4-CONH₂-Ph
675	1	3	Me	-ch₂ch₂ch₂-
676	1	3	Me	-CH₂CH₂CH₂CH₂-
677	1	3	Me	-ch₂ch₂ch₂ch₂ch₂-
678	1	3	Me	-ch₂ch₂och₂ch₂-
679	1	3	Me	-ch₂ch₂sch₂ch₂-
680	1	3	Me	-ch₂ch₂nhch₂ch₂-
681	1	3	Me	-CH₂CH(OH)CH₂-
682	1	3	Me	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
683	1	3	Me	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂CH₂-
684	1	3	Me	-CH₂CH₂CH (OH) ch₂ch₂-
685	1	3	Me	-CH (COOH) CH₂CH₂-
686	1	3	Me	-CH(CONH₂)CH₂CH₂-
687	1	3	Me	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂-

688	1	3	Me	-CH(CH₂NH2)CH₂CH2-
689	1	3	Me	-CH(COOH)CH₂CH₂CH₂-
690	1	3	Me	-CH (CONH₂) ch₂ch₂ch₂-
691	1	3	Me	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂CH₂-
692	1	J	Me	-CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂CH₂-
693	1	3	Me	-CH (COOH) CH₂CH₂CH₂CH₂-
694	1	3	Me	-CH (CONH₂) ch₂ch₂ch₂ch₂-
695	1	3	Me	-CH (CH₂OH) CH₂CH₂CH₂CH₂-
696	1	3	Me	-CH (CH₂NH₂) ch₂ch₂ch₂ch₂-
697	1	3	Me	-CH₂CH (COOH) ch₂ch₂ch₂-
698	1	3	Me	-ch₂ch (CONH₂) ch₂ch₂ch₂-
699	1	3	Me	-ch₂ch (CH₂OH) ch₂ch₂ch₂-
700	1	3	Me	-ch₂ch ( ch₂nh₂ ) ch₂ch₂ch₂-
701	1	3	Me	-CH₂CH₂CH (COOH) ch₂ch₂-
702	1	3	Me	-CH₂CH,CH (CONH,) CH₂CH₂-
703	1	3	Me	-CH₂CH₂CH (CH₂OH) ch₂ch₂-
704	1	3	Me	-CH₂CH₂CH (CH₂NH₂) ch₂ch₂-
705	2	3	H	H	H
706	2	3	H	H	Me
707	2	3	H	H	Et
708	2	3	H	H	Pr
709	2	3	H	H	iPr
710	2	3	H	H	Bu
711	2	3	H	Me	Me
712	2	3	H	Me	Et
713	2	3	H	Me	Pr
714	2	3	H	Me	iPr
715	2	3	H	Me	Bu
716	2	3	H	Et	Et
717	2	3	H	Et	Pr
718	2	3	H	Et	iPr
719	2	3	H	Et	Bu

720	2	3	Η	Pr	Pr
721	2	3	Η	Pr	iPr
722	2	3	Η	Pr	Bu
723	2	3	Η	iPr	iPr
724	2	3	Η	iPr	Bu
725	2	3	Η	Bu	Bu
726	2	3	Η	H	CH₂CH₂OH
727	2	3	Η	Me	ch₂ch₂oh
728	2	3	Η	Et	ch₂ch₂oh
729	2	3	Η	Pr	ch₂ch₂oh
730	2	3	Η	iPr	ch₂ch₂oh
731	2	3	Η	H	CH(CH₃)CH₂OH
732	2	3	Η	H	CH(CH₂OH)CH₂OH
733	2	3	Η	H	CH(CH₂CH₃)CH₂OH
734	2	3	Η	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂OH
735	2	3	Η	H	CH₂CH₂NH₂
736	2	3	Η	H	CH (CH₃)CH₂NH₂
737	2	3	Η	H	CH (CH₂CH₃)CH₂NH₂
738	2	3	Η	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂NH₂
739	2	3	Η	H	ch₂cooh
740	2	3	Η	H	CK(CH₃)COOH
741	2	3	Η	H	CH(CH₂OH)COOH
742	2	3	Η	H	CH (CH₂CH₃)COOH
743	2	3	Η	H	ch(ch(ch₃)₂)cooh
744	2	3	Η	H	ch₂conh₂
745	2	3	Η	H	CH (CH₃)CONH₂
746	2	3	Η	H	CH (CH₂OH) conh₂
747	2	3	Η	H	CH(CH₂CH₃)CONH₂
748	2	3	Η	H	CH(CH(CH₃)₂)CONH₂
749	2	3	Η	H	cPr
750	2	3	Η	H	cBu
751	2	3	Η	H	cPen

752	2	3	Η	Η	cHex
753	2	3	Η	Η	3-Azt
754	2	3	Η	Η	3-Pyr
755	2	3	Η	Η	3-Pip
756	2	3	Η	Η	4-Pip
757	2	3	Η	Η	2-COOH-Ph
758	2	3	Η	Η	2-CONH₂-Ph
759	2	3	Η	Η	3-COOH-Ph
760	2	3	Η	Η	3-CONH₂-Ph
761	2	3	Η	Η	4-COOH-Ph
762	2	3	Η	Η	4-CONH₂-Ph
763	2	3	Η	-CH₂CH₂CH₂-
764	2	3	Η	-CH₂CH₂CH₂CH₂-
765	2	3	Η	-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂-
766	2	3	Η	-ch₂ch₂och₂ch₂-
767	2	3	Η	-ch₂ch₂sch₂ch₂-
768	2	3	Η	-ch₂ch₂nhch₂ch₂-
769	2	3	Η	-CH₂CH(OH)CH₂-
770	2	3	Η	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
771	2	3	Η	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂CH₂-
772	2	3	Η	-CH₂CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
773	2	3	Η	-CH(COOH)CH₂CH₂-
774	2	3	Η	-CH(CONH₂) ch₂ch₂-
775	2	3	Η	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂-
776	2	3	Η	-CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂-
777	2	3	Η	-CH (COOH) CH₂CH₂CH₂-
778	2	3	Η	-CH(CONH₂)CH₂CH₂CH₂-
779	2	3	Η	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂CH₂-
780	2	3	Η	-CH (CH₂NH₂) CH₂CH₂CH₂-
781	2	3	Η	-CH (COOH) CH₂CH₂CH₂CH₂-
782	2	3	Η	-CH (CONH₂) CH₂CH₂CH₂CH₂-
783	2	3	Η	-CH (CH₂OH) CH₂CH₂CH₂CH₂-

784	2	3	Η	-CH (CH₂NH₂) CH2CH2CH2CH2-
785	2	3	Η	-CH₂CH (COOH) CH₂CH₂CH₂-
786	2	3	Η	-CH₂CH (CONH₂) ch₂ch₂ch₂-
787	2	3	Η	-CH2CH (CH₂OH) ch₂ch₂ch₂-
788	2	3	Η	-ch₂ch ( ch₂nh₂ ) ch₂ch₂ch₂-
789	2	3	Η	-CH₂CH₂CH (COOH) ch₂ch₂-
790	2	3	Η	-ch₂ch₂ch (CONH2) ch₂ch₂-
791	2	3	Η	-ch₂ch₂ch (CH₂OH) ch₂ch₂-
792	2	3	Η	-ch₂ch₂ch (CH2NH2) ch₂ch₂-
793	2	3	Me	H	H
794	2	3	Me	H	Me
795	2	3	Me	H	Et
796	2	3	Me	H	Pr
797	2	3	Me	H	iPr
798	2	3	Me	H	Bu
799	2	3	Me	Me	Me
800	2	3	Me	Me	Et
801	2	3	Me	Me	Pr
802	2	3	Me	Me	iPr
803	2	3	Me	Me	Bu
804	2	3	Me	Et	Et
805	2	3	Me	Et	Pr
806	2	3	Me	Et	iPr
807	2	3	Me	Et	Bu
8 08	2	3	Me	Pr	Pr
809	2	3	Me	Pr	iPr
810	2	3	Me	Pr	Bu
811	2	3	Me	iPr	iPr
812	2	3	Me	iPr	Bu
813	2	3	Me	Bu	Bu
814	2	3	Me	H	CH₂CH₂OH
815	2	3	Me	Me	CH₂CH₂OH

816	2	3	Me	Et	CH₂CH₂OH
817	2	3	Me	Pr	CH₂CH₂OH
818	2	3	Me	iPr	CH2CH2OH
819	2	3	Me	H	CH(CH₃)CH₂OH
820	2	3	Me	H	CH (CH₂OH) CH₂OH
821	2	3	Me	H	CH(CH₂CH₃)CH₂OH
822	2	3	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂OH
823	2	3	Me	H	CH2CH2NH2
824	2	3	Me	H	CH(CH₃)CH₂NH₂
825	2	3	Me	H	CH(CH₂CH3)CH₂NH2
826	2	3	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂NH₂
827	2	3	Me	H	CH2COOH
828	2	3	Me	H	CH(CH₃) COOH
829	2	3	Me	H	CH(CH₂OH)COOH
830	2	3	Me	H	CH(CH₂CH₃)COOH
831	2	3	Me	H	CH (CH (CH₃)₂)COOH
832	2	3	Me	H	CH2CONH2
833	2	3	Me	H	CH(CH₃) conh₂
834	2	3	Me	H	CH(CH₂OH)conh₂
835	2	3	Me	H	CH(CH₂CH₃)CONH₂
836	2	3	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)CONH₂
837	2	3	Me	H	cPr
838	2	3	Me	H	cBu
839	2	3	Me	H	cPen
840	2	3	Me	H	cHex
841	2	3	Me	H	3-Azt
842	2	3	Me	H	3-Pyr
843	2	3	Me	H	3-Pip
844	2	3	Me	H	4-Pip
845	2	3	Me	H	2-COOH-Ph
846	2	3	Me	H	2-CONH₂-Ph
847	2	3	Me	H	3-COOH-Ph

848	1 ⁰	2	3	Me	H	3-CONH₂-Ph
849	0	2	3	Me	H	4-COOH-Ph
850	0	2	3	Me	H	4-CONH₂-Ph
851	0	2	3	Me	-ch₂ch₂ch₂-
852	0	2	3	Me	-ch₂ch₂ch₂ch₂-
853	0	2	3	Me	-ch₂ch₂ch₂ch₂ch₂-
854	0	2	3	Me	-ch₂ch₂och₂ch₂-
855	0	2	3	Me	-ch₂ch₂sch₂ch₂-
856	0	2	3	Me	-ch₂ch₂nhch₂ch₂-
857	0	2	3	Me	-CH₂CH(OH)CH₂-
858	0	2	3	Me	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
859	0	2	3	Me	-ch₂ch (OH) ch₂ch₂ch₂-
860	0	2	3	Me	-ch₂ch₂ch (oh) ch₂ch₂-
861	0	2	3	Me	-CH(COOH)CH₂CH₂-
862	0	2	3	Me	-CH ( CONH₂ ) CH₂CH₂-
863	0	2	3	Me	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂-
864	0	2	3	Me	-CH (CH₂NH₂) CH₂CH₂-
865	0	2	3	Me	-CH (COOH) CH₂CH₂CH₂-
866	0	2	3	Me	-CH (CONH₂) CH₂CH₂CH₂-
867	0	2	3	Me	-CH (CH₂OH) ch₂ch₂ch₂-
868	0	2	3	Me	-CH ( ch₂nh₂ ) ch₂ch₂ch₂-
869	0	2	3	Me	-CH (COOH) CH₂CH₂CH₂CH₂-
870	0	2	3	Me	-CH (CONH₂ ) ch₂ch₂ch₂ch₂-
871	0	2	3	Me	-CH (CH₂OH) CH₂CH₂CH₂CH2-
872	0	2	3	Me	-CH (CH₂NH₂ ) CH₂CH₂CH₂CH₂-
873	0	2	3	Me	-CH₂CH (COOH) ch₂ch₂ch₂-
874	0	2	3	Me	-ch₂ch (CONH₂) ch₂ch₂ch₂-
875	0	2	3	Me	-CH₂CH (CH₂OH) ch₂ch₂ch₂-
876	0	2	3	Me	-ch₂ch (CH₂NH₂) ch₂ch₂ch₂-
877	0	2	3	Me	-CH₂CH₂CH (COOH)ch₂ch₂-
878	0	2	3	Me	-ch₂ch₂ch (CONH₂) ch₂ch₂-
879	0	2	3	Me	-CH₂CH₂CH (CH₂OH) ch₂ch₂-

880	2	3	Me	-CH₂CH₂CH (CH₂NH₂) ch₂ch₂-
881	3	4	H	H	H
882	3	4	H	H	Me
883	3	4	H	H	Et
884	3	4	H	H	Pr
885	3	4	H	H	iPr
886	3	4	H	H	Bu
887	3	4	H	Me	Me
888	3	4	H	Me	Et
889	3	4	H	Me	Pr
890	—i J	4	H	Me	iPr
891	3	4	H	Me	Bu
892	3	4	H	Et	Et
893	3	4	H	Et	Pr
894	3	4	H	Et	iPr
895	3	4	H	Et	Bu
896	3	4	H	Pr	Pr
897	3	4	H	Pr	iPr
898	3	4	H	Pr	Bu
899	3	4	H	iPr	iPr
900	3	4	H	iPr	Bu
901	3	4	H	Bu	Bu
902	3	4	H	H	ch₂ch₂oh
903	3	4	H	Me	ch₂ch₂oh
904	3	4	H	Et	ch₂ch₂oh
905	3	4	H	Pr	ch₂ch₂oh
906	3	4	H	iPr	ch₂ch₂oh
907	3	4	H	H	CH(CH₃)CH₂OH
908	3	4	H	H	CH(CH₂OH)CH₂OH
909	3	4	H	H	CH(CH₂CH₃) CH₂OH
910	3	4	H	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂OH
911	3	4	H	H	ch₂ch₂nh₂

912	0	3	4	Η	Η	CH(CH₃)CH₂NH₂
913	0	3	4	Η	Η	CH(CH₂CH₃)CK₂NH₂
914	0	3	Λ “3	Η	Ή	CH(CH(CH₃)₂)CH₂NH₂
915	0	3	4	Η	Η	ch₂cooh
916	0	3	4	Η	Η	CH (CH₃) COOH
917	0	3	4	Η	Η	CH(CH₂OH j COOH
918	0	3	4	Η	Η	CH(CH₂CH₃) COOH
919	0	3	4	Η	Η	CH(CH (CH₃)₂) COOH
920	0	3	4	Η	Η	CH₂CONH₂
921	0	3	4	Η	Η	CH (CH₃) CONH₂
922	0	3	4	Η	Η	CH(CH₂OH)CONHz
923	0	3	4	Η	Η	CH (CH₂CH₃) CONH₂
924	0	3	4	Η	Η	CH(CH(CH₃)₂)CONH₂
925	0	3	4	Η	Η	cPr
926	0	3	4	Η	Η	cBu
927	0	3	4	Η	Η	cPen
928	0	3	4	Η	Η	cHex
929	0	3	4	Η	Η	3-Azt
930	0	3	4	Η	Η	3-Pyr
931	0	3	4	Η	Η	3-Píp
932	0	3	4	Η	Η	4-Pip
933	0	3	4	Η	Η	2-COOH-Ph
934	0	3	4	Η	Η	2-CONH₂-Ph
935	0	3	4	Η	Η	3-COOH-Ph
936	0-	3	4	Η	Η	3-CONH₂-Ph
937	0	3	4	Η	Η	4-COOH-Ph
938	0	3	4	Η	Η	4-CONH₂-Ph
939	0	3	4	Η	-ch₂ch₂ch₂-
940	0	3	4	Η	-ch₂ch₂ch₂ch₂-
941	0	3	4	Η	-ch₂ch₂ch₂ch₂ch₂-
942	0	3	4	Η	-CH₂CH₂OCH₂CH₂-
943	0	3	4	Η	-ch₂ch₂sch₂ch₂-

944	3	4	Η	-ch₂ch₂nhch₂ch₂-
945	3	4	Η	-CH₂CH(OH)CH₂-
946	3	4	Η	-CH₂CH(OH) CH₂CH₂-
947	3	4	Η	-CH₂CH (OH) ch₂ch₂ch₂-
948	3	4	Η	-CH₂CH₂CH (OH) CH₂CH₂-
949	3	4	Η	-CH (COOH) CH₂CH₂-
950	3	4	Η	-CH(CONH₂)CH₂CH₂-
951	3	4	Η	-CH (CH₂OH)CH₂CH₂-
952	3	4	Η	-CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂-
953	3	4	Η	-CH (COOH) CH₂CH₂CH₂-
954	3	4	Η	-CH (CONH₂) CH₂CH₂CH₂-
955	3	4	Η	-CH (CH₂OH) CH₂CH₂CH₂-
956	3	4	Η	-CH (CH₂NH₂) ch₂ch₂ch₂-
957	3	4	Η	-CH (COOH) CH₂CH₂CH₂CH₂-
958	3	4	Η	-CH (CONH₂) ch₂ch₂ch₂c.h₂-
959	3	4	Η	-CH (CH₂OH) ch₂ch₂ch₂ch₂-
960	3	4	Η	-CH (CH₂NH₂) ch₂ch₂ch₂ch₂-
961	3	4	Η	-CH₂CH (COOH) ch₂ch₂ch₂-
962	3	4	Η	-CH₂CH ( conh₂ ) ch₂ch₂ch₂-
963	3	4	Η	-CH₂CH (CH₂OH) ch₂ch₂ch₂-
964	3	4	Η	-ch₂ch (CH₂NH₂) ch₂ch₂ch₂-
965	3	4	Η	-CH₂CH₂CH (COOH) ch₂ch₂-
966	3	4	Η	-CH₂CH₂CH (CONH₂) ch₂ch₂-
967	3	4	Η	-CH₂CH₂CH (CH₂OH) ch₂ch₂-
968	3	4	Η	-CH₂CH₂CH (CH₂NH₂) ch₂ch₂-
969	3	4	Me	h	H
970	3	4	Me	h	Me
971	3	4	Me	h	Et
972	3	4	Me	H	Pr
973	3	4	Me	H	iPr
97 4	3	4	Me	H	Bu
975	3	4	Me	Me	Me

976	3	4	Me	Me	Et
977	3	4	Me	M e	Pr
978	3	4	Me	Me	iPr
979	3	4	Me	Me	Bu
980	3	4	Me	Et	Et
981	3	4	Μθ	Et	Pr
982	3	4	Me	Et	iPr
983	3	4	Me	Et	Bu
984	3	4	Me	P 2ľ	Pr
985	3	4	Me	Pr	iPr
986	3	4	Me	Pr	Bu
987	3	4	Me	iPr	iPr
988	3	4	Me	iPr	Bu
989	3	4	Me	Bu	Bu
990	3	4	M e	H	CH₂CH₂OH
991	3	4	Me	Me	ch₂ch₂oh
992	3	4	Me	Et	ch₂ch₂oh
993	3	4	M e	Pr	ch₂ch₂oh
994	3	4	Me	iPr	ch₂ch₂oh
995	3	4	Me	H	CH (CH₃) CH₂OH
996	3	4	Me	H	CH(CH₂OH)CH₂OH
997	3	4	Me	H	CH (CH₂CH₃) CH₂OH
998	3	4	Me	H	CH (CH (CH₃) ₂) CH₂OH
999	3	4	Me	H	ch₂ch₂nh₂
1000	3	4	M e	H	CH(CH₃)CH₂NH₂
1001	3	4	Me	H	CH(CH₂CH₃)CH₂NH₂
1002	3	4	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)CH₂NH₂
1003	3	4	Me	H	CH₂COOH
1004	3	4	Me	H	CH(CH₃)COOH
1005	3	4	Me	H	CH(CH₂OH) COOH
1006	3	4	Me	H	CH(CH₂CH₃)COOH
1007	3	4	Me	H	CH (CH (CH₃) 2) COOH

1008	3	4	Me	H	CH₂CONH₂ '
1009	3	4	Me	H	CH(CH₃)CONH₂
1010	3	4	Me	H	CH (CH₂OH)CONH₂
1011	3	4	Me	H	CH(CH₂CH₃)CONH₂
1012	3	4	Me	H	CH(CH(CH₃)₂)CONH₂
1013	3	4	Me	H	cPr
1014	3	4	Me	H	cBu
1015	3	4	Me	H	cPen
1016	3	4	Me	H	cHex
1017	3	4	Me	H	3-Azt
1018	3	4	Me	H	3-Pyr
1019	3	4	Me	H	3-Pip
1020	3	4	Me	H	4-Pip
1021	3	4	Me	H	2-COOH-Ph
1022	3	4	Me	H	2-CONH₂-Ph
1023	3	4	Me	H	3-COOH-Ph
1024	3	4	Me	H	3-CONH₂-Ph
1025	3	4	Me	H	4-COOH-Ph
1026	3	4	Me	H	4-CONH₂-Ph
1027	3	4	Me	-ch₂ch₂ch₂-
1028	3	4	Me	-CH₂CH₂CH₂CH₂-
1029	3	. 4	Me	-CH2CH2CH2CH2CH2-
1030	3	4	Me	-CH₂CH₂OCH₂CH₂-
1031	3	4	Me	-ch₂ch₂sch₂ch₂-
1032	3	4	Me	-CH₂CH₂NHCH₂CH₂-
1033	3	4	Me	-CH₂CH(OH)CH₂-
1034	3	4	Me	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂-
1035	3	4	Me	-CH₂CH(OH)CH₂CH₂CH₂-
1036	3	4	Me	-CH₂CH₂CH (OH) CH₂CH₂-
1037	3	4	Me	-CH(COOH)CH₂CH₂-
1038	3	4	Me	-CH(CONH₂)CH₂CH₂-
1039	3	4	Me	-CH(CH₂OH)CH₂CH₂-

1040	0	3	4	Me	-CH(CH₂NH₂)CH₂CH₂-
1041	0	3	4	Me	-CH	COOH) CH₂CH₂CH₂-
1042	0	3	4	Me	-CH	CONH₂)CH₂CH₂CH₂-
1043	0	3	4	Me	-CH	CH₂OH) ch₂ch₂ch₂-
1044	0	3	4	Me	-CH(CH₂NH2)CH₂CH2CH2-
1045	0	3	4	Me	-CH	COOH) ch₂ch₂ch₂ch₂-
1046	0	3	4	Me	-CH (	conh₂) ch₂ch₂ch₂ch₂-
1047	0	3	4	Me	-CH(CH₂OH) CH₂CH₂CH₂CH₂-
1048	0	3	4	Me	-CH (CH₂NH2)CH2CH₂CH2CH2-
1049	0	3	4	Me	-ch₂	CH(COOH)CH₂CH₂CH2-
1050	0	3	4	Me	-ch₂ch (conh₂) ch₂ch₂ch₂-
1051	0	3	4	Me	-CH₂CH (CH₂OH) ch₂ch₂ch₂-
1052	0	3	4	Me	-ch₂ch(CH₂NH₂)ch₂ch₂ch₂-
1053	0	3	4	Me	-CH₂CH₂CH (COOH) ch₂ch₂-
1054	0	3	4	Me	-CH₂CH₂CH (CONH₂) ch₂ch₂-
1055	0	3	4	Me	-ch₂ch₂ch (CH₂OH) ch₂ch₂-
1056	0	3	4	Me	-ch₂ch₂ch (CH₂NH₂) ch₂ch₂-
1057	s	1	3	H	h	CH(CH₂ (CH₃)₂)CH₂OH
1058	s	1	3	H	h	CH(CH₂ (CH₃)₂)CH₂NH₂
1059	s	1	3	H	H	CH(CH₂(CH₃)₂)COOH
1060	s	1	3	H	H	CH (CH₂ (CH₃)₂)CONH2
1061	s	1	3	H	H	CH(CH₂OH)CH₂NH₂
1062	s	1	3	H	H	CH (CH (CH₃) CH₂CH₃) CH₂OH
1063	s	1	3	H	H	CH (CH (CH₃) CH2CH3) CH₂N
1064	s	1	3	H	H	CH (CH (CH₃) CH₂CH₃) COOH
1065	s	1	3	H	H	CH (CH (CH₃) CH2CH3) CONH₂
1066	s	1	3	H	Me	CH2CH2NH2
1067	s	1	3	H	Me	CH2COOH
1068	s	1	3	H	Me	CH₂CONH₂
1069	s	1	3	H	iPr	ch₂ch₂nh₂
1070	s	1	3	H	iPr	CH2COOH
1071	s	1	3	H	iPr	CH₂CONH₂

1072	S	1	3	H	CH₂CH(NH₂)CH₂
1073	S	1	3	H	CH₂CH(OCH₃)CH₂
1074	S	1	3	H	CH₂CH(NCH₃)CH₂CH₂
1075	S	2	3	H	H	CH (CH₂ (CH₃)₂)CH₂OH
1076	S	2	3	H	H	CH(CH₂(CH₃)₂)CH₂NH₂
1077	S	2	3	H	H	CH(CH₂(CH₃)₂)COOH
1078	S	2	3	H	H	CH(CH₂(CH₃)2)CONH₂
1079	S	2	3	H	H	CH(CH₂OH)CH₂NH₂
1080	s	2	3	H	H	CH (CH (CH₃) CH₂CH₃) CH₂OH
1081	s	2	3	H	H	CH (CH (CH₃) CH₂CH₃) CH₂NH₂
1082	s	2	3	H	H	CH (CH (CH₃) CH₂CH₃) COOH
1083	s	2	3	H	H	CH (CH (CH₃) CH₂CH₃) CONH₂
1084	s	2	. 3	H	Me	ch₂ch₂nh₂
1085	s	2	3	H	Me	ch₂cooh
1086	s	2	3	H	Me	ch₂conh₂
1087	s	2	3	H	iPr	ch₂ch₂nh₂
1088	s	2	3	H	iPr	ch₂cooh
1089	s	2	3	H	iPr	ch₂conh₂
1090	s	2	3	H	CH₂CH(NH₂)CH₂
1091	s	2	3	H	CH₂CH(OCH₃)CH₂
1092	s	2	3	H	CH₂CH (NCH₃)CH₂CH₂
1093	s	3	4	H	H	CH(CH₂(CH₃)₂)CH₂OH
1094	s	3	4	H	H	CH(CH₂(CH₃)₂)CH₂NH₂
1095	s	3	4	H	H	CH(CH₂(CH₃)₂)COOH
1096	s	3	4	H	H	CH(CH₂(CH₃)₂)CONH₂
1097	s	3	4	H	H	CH(CH₂OH)CH₂NH₂
1098	s	3	4	H	H	CH (CH (CH₃) CH₂CH₃) CH₂OH
1099	s	3	4	H	H	CH (CH (CH₃) CH₂CH₃) CH₂NH₂
1100	s	3	4	H	H	CH (CH (CH₃) CH₂CH₃) COOH
1101	s	3	4	H	H	CH (CH (CH₃) CH₂CH₃) CONH₂
1102	s	3	4	H	Me	CH₂CH₂NH₂
1103	s	3	4	H	Me	ch₂cooh
1104	s	3	4	H	Me	ch₂conh₂

1105	S	3	4	H	iPr	CH₂CH₂NH₂
1106	S	3	4	H	iPr	ch₂cooh
1107	S	3	4	H	iPr	ch₂conh₂
1108	S	3	4	H	CH₂CH (NH₂) ch₂
1109	S	3	4	H	ch₂ch (OCH₃) ch₂
1110	S	3	4	H	CH₂CH (NCH₃) ch₂ch₂
1111	0	1	3	H	H	CH(CK₂(CH₃)₂)CH₂0H
1112	0	1	3	H	H	CH(CH₂(CH₃)₂)CH₂NH₂
1113	0	1	3	H	H	CH (CH₂ (CH₃) ₂) COOH
1114	0	1	3	H	H	CH(CH₂(CH₃)2'CONH₂
1115	0	1	3	H	H	CH(CH₂OH)CH₂NH₂
1116	0	1	3	H	H	CH (CH (CH₃) CH₂CH₃) CH₂OH
1117	0	1	3	H	H	CH (CH (CK₃) CH₂CH₃) CH₂NH₂
1118	0	1	3	H	H	CH (CH (CH₃ ) CH₂CH₃) CCOH
1119	0	1	3	H	H	CH (CH (CH₃ ) CH₂CH₃) CCNH₂
1120	0	1	3	H	Me	ch₂ch₂nh₂
1121	0	1	3	H	Me	ch₂cooh
1122	0	1	3	H	Me	ch₂conh₂
1123	0	1	3	H	iPr	ch₂ch₂nh₂
1124	0	1	3	H	iPr	CH₂COOH
1125	0	1	3	H	iPr	CH₂CONH₂
1126	0	1	3	H	CH₂CH (NH₂) ch₂
1127	0	1	3	H	CH₂CH (OCH₃) ch₂
1128	0	1	3	H	ch₂ch (NCH₃) ch₂ch₂
1129	0	2	3	H	H	CH (CH₂ (CH₃) ₂) CH₂OH
1130	0	2	3	H	H	CH(CH₂ (CH₃)₂)CH₂NH₂
1131	0	2	3	H	H	CH(CH₂(CH₃)₂)COOH
1132	0	2	3	H	H	CH(CH₂ (CH₃) ₂) conh₂
1133	0	2	3	H	H	ch(ch₂oh) ch₂nh₂
1134	0	2	3	H	H	CH (CH (CH₃) CH₂CH₃) CH₂OH
1135	0	2	3	H	H	CH (CH ( CH₃ ) CH₂CH₃) CH₂NH₂
1136	0	2	3	H	H	CH ( CH (CH₃ ) CH₂CH₃) COOH
1137	0	2	3	H	H	CH (CH (CH₃) CH₂CH₃) CONH₂

1138	2	3	H	Me	ch₂ch₂nh₂
1139	2	3	H	Me	ch₂cooh
1140	2	3	H	Me	ch₂conh₂
1141	2	3	H	iPr	ch₂ch₂nh₂
1142	2	3	H	iPr	ch₂cooh
1143	2	3	H	iPr	ch₂conh₂
1144	2	3	H	CH₂CH(NH₂)CH₂
1145	2	3	H	CH₂CH (OCH₃) ch₂
1146	2	3	H	CH₂CH (NCH₃)CH₂CH₂
1147	3	4	H	H	CH (CH₂ (CH₃) ₂) CH₂OH
1148	3	4	H	H	CH(CH₂(CH₃)₂)CH₂NH₂
1149	3	4	H	H	CH (CH₂ (CK₃)₂) COOH
1150	3	4	H	H	CH(CH₂(CH₃)₂)CONH₂
1151	3	4	H	H	CH (CH₂OH) CH₂NH₂
1152	3	4	H	H	CH (CH (CH₃) CH₂CH₃) CH₂OH
1153	3	4	H	H	CH (CH (CH₃) CH₂CH₃) CH₂NH₂
1154	3	4	H	H	CH (CH (CH₃) CH₂CH₃) COOH
1155	3	4	H	H	CH(CH(CH₃)ch₂ch₃) conh₂
1156	3	4	H	Me	ch₂ch₂nh₂
1157	3	4	H	Me	ch₂cooh
1158	3	4	H	Me	ch₂conh₂
1159	3	4	H	iPr	ch₂ch₂nh₂
1160	3	4	H	iPr	ch₂cooh
1161	3	4	H	iPr	ch₂conh₂
1162	3	4	H	CH₂CH	(NH₂)CH₂
1163	3	4	H	CH₂CH(OCH₃)CH₂
1164	3	4	H	CH₂CH(NCH₃)CH₂CH₂

Tabuľka 3

Zlúčenina	X	N	Pozícia	R²
1	S	1	3	H
2	s	1	3	Me
3	s	2	3	H
4	s	2	3	Me
5	s	3	4	H
6	s	3	4	M e
7	0	1	3	H
8	0	1	3	Me
9	0	2	3	H
10	0	2	3	Me
11	0	3	4	H
12	0	3	4	Me

Tabuľka 4

Zlúčenina	X	n	Pozícia	R²	R⁶
1	S	1	3	H	H
2	S	1	3	H	Me
3	s	1	3	H	Et
4	s	1	3	H	Pr
5	s	1	3	H	iPr
6	s	1	3	H	Bu
7	s	1	3	H	cPr

8	S	1	3	H	cBu
9	S	1	3	H	cPen
10	S	1	3	H	cHex
11	S	1	3	Me	H
12	S	1	3	Me	Me
13	S	1	3	Me	Et
14	S	1	3	Me	Pr
15	S	1	3	Me	iPr
16	S	1	3	Me	Bu
17	S	1	3	Me	cPr
18	S	1	3	Me	cBu
19	S	1	3	Me	cPen
20	S	1	3	Me	cHex
21	S	2	3	H	H
22	S	2	3	H	Me
23	S	2	3	H	Et
24	S	2	3	H	Pr
25	S	2	3	H	iPr
26	S	2	3	H	Bu
27	S	2	3	H	cPr
28	S	2	3	H	cBu
29	S	2	3	H	cPen
30	s	2	3	H	cHex
31	s	2	3	Me	H
32	s	2	3	Me	Me
33	s	2	3	Me	Et
34	s	2	3	Me	Pr
35	s	2	3	Me	iPr
36	s	2	3	Me	Bu
37	s	2	3	Me	cPr
38	s	2	3	Me	cBu
39	s	2	3	Me	cPen

40	S	2	3	Me	cHex
41	S	3	4	H	H
42	S	3	4	H	Me
43	S	3	4	H	Et
44	S	3	4	H	Pr
45	S	3	4	H	iPr
46	S	3	4	H	Bu
47	S	3	4	H	cPr
48	S	3	4	H	cBu
49	S	3	4	H	cPen
50	S	3	4	H	cHex
51	s	3	4	Me	H
52	s	3	4	Me	Me
53	s	3	4	Me	Et
54	s	3	4	Me	Pr
55	s	3	4	Me	iPr
56	s	3	4	Me	Bu
57	s	3	4	Me	cPr
58	s	3	4	Me	cBu
59	s	3	4	Me	cPen
60	s	3	4	Me	cHex
61	0	1	3	H	H
62	0	1	3	H	Me
63	0	1	3	H	Et
64	0	1	3	H	Pr
65	0	1	3	H	iPr
66	0	1	3	H	Bu
67	0	1	3	H	cPr
68	0	1	3	H	cBu
69	0	1	3	H	cPen
70	0	1	3	H	cHex
71	0	1	3	Me	H

72	1	3	Me	Me
73	1	3	Me	Et
74	1	3	Me	Pr
75	1	3	Me	iPr
76	1	3	Me	Bu
77	1	3	Me	cPr
78	1	3	Me	cBu
79	1	3	Me	cPen
80	1	3	Me	cHex
81	2	3	H	H
82	2	3	H	Me
83	2	3	H	Et
84	2	3	H	Pr
85	2	3	H	iPr
86	2	3	H	Bu
87	2	3	H	cPr
88	2	3	H	cBu
89	2	3	H	cPen
90	2	3	H	cHex
91	2	3	Me	H
92	2	3	Me	Me
93	2	3	Me	Et
94	2	3	Me	Pr
95	2	3	Me	iPr
96	2	3	Me	Bu
97	2	3	Me	cPr
98	2	3	Me	cBu
99	2	3	Me	cPen
100	2	3	Me	cHex
101	3	4	H	H
102	3	4	H	Me
103	3	4	H	Et

104	3	4	H	Pr
105	3	4	H	iPr
106	3	4	H	Bu
107	3	4	H	cPr
108	3	4	H	cBu
109	3	4	H	cPen
110	3	4	H	cHex
111	3	4	Me	H
112	3	4	Me	Me
113	3	4	Me	Et
114	3	4	Me	Pr
115	3	4	Me	iPr
116	3	4	Me	Bu
117	3	4	Me	cPr
118	3	4	Me	cBu
119	3	4	Me	cPen
120	3	4	Me	cHex

Tabuľka 5

Zlúčenina	X	n	pozícia	R²	R⁷	R⁸
1	S	1	3	H	H	H
2	S	1	3	H	H	Me
3	S	1	3	H	H	Et
4	S	1	3	H	H	C0CH₃
5	S	1	3	H	H	COCH2CH3
6	s	1	3	H	H	coch₂ch₂ch₃
7	S	1	3	H	H	COPh

8	S	1	3	H	H	COOMe
9	S	1	3	H	H	COOEt
10	S	1	3	H	Me	Me
11	S	1	3	H	Et	Et
12	S	1	3	H	Me	COCH₃
13	S	1	3	H	Me	COPh
14	S	1	3	H	Me	COOMe
15	S	1	3	H	Me	COOEt
16	S	1	3	Me	H	H
17	S	1	3	Me	H	Me
18	S	1	3	Me	H	Et
19	S	1	3	Me	H	COCH₃
20	S	1	3	Me	H	COCH2CH3
21	S	1	3	Me	H	COCH2CH2CH3
22	S	1	3	Me	H	COPh
23	S	1	3	Me	H	COOMe
24	s	1	3	Me	H	COOEt
25	s	1	3	Me	Me	Me
26	s	1	3	Me	Et	Et
27	s	1	3	Me	Me	COCH3
28	s	1	3	Me	Me	COPh
29	s	1	3	Me	Me	COOMe
30	s	1	3	Me	Me	COOEt
31	s	2	3	H	H	H
32	s	2	3	H	H	Me
33	s	2	3	H	H	Et
34	s	2	3	H	H	COCH3
35	s	2	3	H	H	COCH2CH3
36	s	2	3	H	H	COCH2CH2CH3
37	s	2	3	H	H	COPh
38	s	2	3	H	H	COOMe
39	s	2	3	H	H	COOEt

40	S	2	3	H	Me	Me
41	S	2	3	H	Et	Et
42	s	2	3	H	Me	COCH₃
43	s	2	3	H	Me	COPh
44	s	2	3	H	Me	COOMe
45	s	2	3	H	Me	COOEt
46	s	2	3	Me	H	H
47	s	2	3	Me	H	Me
48	s	2	3	Me	H	Et
49	s	2	3	Me	H	coch₃
50	s	2	3	Me	H	coch₂ch₃
51	s	2	3	Me	H	coch₂ch₂ch₃
52	s	2	3	Me	H	COPh
53	s	2	3	Me	H	COOMe
54	s	2	3	Me	H	COOEt
55	s	2	3	Me	Me	Me
56	s	2	3	Me	Et	Et
57	s	2	3	Me	Me	COCH₃
58	s	2	3	Me	Me	COPh
59	s	2	3	Me	Me	COOMe
60	s	2	3	Me	Me	COOEt
61	s	3	4	H	H	H
62	s	3	4	H	H	Me
63	s	3	4	H	H	Et
64	s	3	4	H	H	COCH₃
65	s	3	4	H	H	coch₂ch₃
66	s	3	4	H	H	coch₂ch₂ch₃
67	s	3	4	H	H	COPh
68	s	3	4	H	H	COOMe
69	s	3	4	H	H	COOEt
70	s	3	4	H	Me	Me
71	s	3	4	H	Et	Et

72	S	3	4	H	Me	COCH₃
73	S	3	4	H	Me	COPh
74	S	3	4	H	Me	COOMe
75	S	3	4	H	Me	COOEt
76	S	3	4	Me	H	H
77	S	3	4	Me	H	Me
78	S	3	4	Me	H	Et
79	S	3	4	Me	H	COCH3
80	S	3	4	Me	H	COCH2CH3
81	S	3	4	Me	H	COCH2CH2CH3
82	S	3	4	Me	H	COPh
83	S	3	4	Me	H	COOMe
84	S	3	4	Me	H	COOEt
85	S	3	4	Me	Me	Me
86	S	3	4	Me	Et	Et
87	s	3	4	Me	Me	COCH3
88	s	3	4	Me	Me	COPh
89	s	3	4	Me	Me	COOMe
90	s	3	4	Me	Me	COOEt
91	0	1	3	H	H	H
92	0	1	3	H	H	Me
93	0	1	3	H	H	Et
94	0	1	3	H	H	COCH3
95	0	1	3	H	H	COCH2CH3
96	0	1	3	H	H	COCH2CH2CH3
97	0	1	3	H	H	COPh
98	0	1	3	H	H	COOMe
99	0	1	3	H	H	COOEt
100	0	1	3	H	Me	Me
101	0	1	3	H	Et	Et
102	0	1	3	H	Me	COCH3
103	0	1	3	H	Me	COPh

104	1	3	Η	Me	CO OMe
105	1	3	Η	Me	COOEt
106	1	3	Me	H	H
107	1	3	Me	H	Me
108	1	3	Me	H	Et
109	1	3	Me	H	COCH₃
110	1	3	Me	H	COCH₂CH₃
111	1	3	Me	H	coch₂ch₂ch₃
112	1	3	Me	H	COPh
113	1	3	Me	H	COOMe
114	1	3	Me	H	COOEt
115	1	3	Me	Me	Me
116	1	3	Me	Et	Et
117	1	3	Me	Me	COCH3
118	1	3	Me	Me	COPh
119	1	3	Me	Me	COOMe
120	1	3	Me	Me	COOEt
121	2	3	H	H	H
122	2	3	H	H	Me
123	2	3	H	H	Et
124	2	3	H	H	COCH3
125	2	3	H	H	COCH2CH3
126	2	3	H	H	coch₂ch₂ch₃
127	2	3	H	H	COPh
128	2	3	H	H	COOMe
129	2	3	H	H	COOEt
130	2	3	H	Me	Me
131	2	3	H	Et	Et
132	2	3	H	Me	coch₃
133	2	3	H	Me	COPh
134	2	3	H	Me	COOMe
135	2	3	H	Me	COOEt

136	2	3	Me	H	H
137	2	3	Me	H	Me
138	2	3	Me	H	Et
139	2	3	Me	H	COCH₃
140	2	3	Me	H	COCH2CH3
141	2	3	Me	H	COCH2CH2CH3
142	2	3	Me	H	COPh
143	2	3	Me	H	COOMe
144	2	3	Me	H	COOEt
145	2	3	Me	Me	Me
146	2	3	Me	Et	Et
147	2	3	Me	Me	COCH3
148	2	3	Me	Me	COPh
149	2	3	Me	Me	COOMe
150	2	3	Me	Me	COOEt
151	3	4	H	H	H
152-	3	4	H	H	Me
153	3	4	H	H	Et
154	3	4	H	H	COCH3
155	3	4	H	H	COCH₂CH₃
156	3	4	H	H	coch₂ch₂ch₃
157	3	4	H	H	COPh
158	3	4	H	H	COOMe
159	3	4	H	H	COOEt
160	3	4	H	Me	Me
161	3	4	H	Et	Et
162	3	4	H	Me	COCH3
163	3	4	H	Me	COPh
164	3	4	H	Me	COOMe
165	3	4	H	Me	COOEt
167	3	4	Me	H	H
168	3	4	Me	H	Me

169	0	3	4	Me	H	Et
170	0	3	4	Me	H	coch₃
171	0	3	4	Me	H	COCH₂CH₃
172	0	3	4	Me	H	COCH2CH2CH3
173	0	3	4	Me	H	COPh
174	0	3	4	Me	H	COOMe
175	0	3	4	Me	H	COOEt
176	0	3	4	Me	Me	Me
177	0	3	4	Me	Et	Er
178	0	3	4	Me	Me	COCH3
179	0	3	4	Me	Me	COPh
180	0	3	4	Me	Me	COOMe
181	0	3	4	Me	Me	COOEt
182	S	1	3	H	H	CO-cPr
183	S	1	3	H	H	CO-cBu
184	S	1	3	H	H	CO-cPen
185	s	1	3	H	H	CO-cHex
186	s	1	3	H	H	CO-2-tienyl
187	s	1	3	H	H	CO-2-furyl
188	s	1	3	H	H	CO-2-pyridyl
189	s	1	3	H	H	CO-3-pyridyl
190	s	1	...g_____ ...	H -------	H	C9-4=pyridyl
191	s	1	3	H	H	SO₂-Ph
192	s	1	3	H	H	CO-Ph-2-COOH
193	s	1	3	H	H	CO-Ph-2-CONH₂
194	s	1	3	H	H	CO-Ph-2-CH₂OH
195	s	1	3	H	H	CO-Ph-2-CH₂NH₂
196	s	1	3	H	H	CO-Ph-3-COOH
197	s	1	3	H	H	CO-Ph-3-CONH₂
198	s	1	3	H	H	CO-Ph-3-CH₂OH
199	s	1	3	H	H	CO-Ph-3-CH₂NH₂
200	s	1	3	H	H	CO-Ph-4-COOH

201	S	1	3	H	H	CO-Ph-4-CONH₂
202	S	1	3	H	H	CO-Ph-4-CH₂OH
203	S	1	3	H	H	CO-Ph-4-CH₂NH₂
204	S	2	3	H	H	CO-cPr
205	S	2	3	H	H	CO-cBu
206	S	2	3	H	H	CO-cPen
207	S	2	3	H	H	CO-cHex
208	S	2	3	H	H	CO-2-tienyl
209	S	2	3	H	H	CO-2-furyl
210	S	2	3	H	H	CO-2-pyridyl
211	S	2	3	H	H	CO-3-pyridyl
212	S	2	3	H	H	CO-4-pyridyl
213	S	2	3	H	H	SO₂-Ph
214	S	2	3	H	H	CO-Ph-2-COOH
215	S	2	3	H	H	CO-Ph-2-CONH₂
216	S	2	3	H	H	CO-Ph-2-CH₂OH
217	S	2	3	H	H	CO-Ph-2-CH₂NH₂
218	S	2	3	H	H	CO-Ph-3-COOH
219	S	2	3	H	H	CO-Ph-3-CONH₂
220	S	2	3	H	H	CO-Ph-3-CH₂OH
221	S	2	3	H	H	CO-Ph-3-CH₂NH₂
222	s	•2	3	H	H	CO-Ph-4-COOH
223	s	2	3	H	H	CO-Ph-4-CONH₂
224	s	2	3	H	H	CO-Ph-4-CH₂OH
225	s	2	3	H	H	CO-Ph-4-CH₂NH₂
226	s	3	4	H	H	CO-cPr
227	s	3	4	H	H	CO-cBu
228	s	3	4	H	H	CO-cPen
229	s	3	4	H	H	CO-cHex
230	s	3	4	H	H	CO-2-tienyl
231	s	3	4	H	H	CO-2-furyl
232	s	3	4	H	H	CO-2-pyridyl

233	S	3	4	H	K	CO-3-pyridyl
234	S	3	4	H	H	CO-4-pyridyl
235	S	3	4	H	H	SO₂-Ph
236	S	3	4	H	H	CO-Ph-2-COOH
237	S	3	4	H	H	CO-Ph-2-CONH₂
238	S	3	4	H	H	CO-Ph-2-CH₂OH
239	S	3	4	H	H	CO-Ph-2-CH₂NH₂
240	S	3	4	H	H	CO-Ph-3-COOH
241	S	3	4	H	H	CO-Ph-3-CONH₂
242	S	3	4	H	H	CO-Ph-3-CH₂OH
243	S	3	4	H	H	CO-Ph-3-CH₂NH₂
244	S	3	4	H	K	CO-Ph-4-COOH
245	s	3	4	H	H	CO-Ph-4-CONH₂
246	s	3	4	H	H	CO-Ph-4-CH₂OH
247	s	3	4	H	H	CO-Ph-4-CH₂NH₂
248	0	1	3	H	H	CO-cPr
249	0	1	3	H	H	CO-cBu
250	0	1	3	H	H	CO-cPen
251	0	1	3	H	H	CO-cHex
252	0	1	3	H	H	CO-2-tienyl
253	0	1	3	H	H	CO-2-furyl
254	0	1	3	U l.	H	CO-2-pyridyl
255	0	1	3	H	H	CO-3-pyridyl
256	0	1	3	H	H	CO-4-pyridyl
257	0	1	3	H	H	SO₂-Ph
258	0	1	3	H	H	CO-Ph-2-COCH
259	0	1	3	H	H	CO-Ph-2-CONH₂
260	0	1	3	H	H	CO-Ph-2-CH₂OH
261	0	1	3	H	H	CO-Ph-2-CH₂NH₂
262	0	1	3	H	H	CO-Ph-3-COCH
263	0	1	3	H	H	CO-Ph-3-CONH₂
264 J	0	7 ±	3	H	H	CO-Ph-3-CK₂CH

265	1	3	Η	Η	CO-Ph-3-CH₂NH₂
266	1	3	Η	Η	CO-Ph-4-COOK
267	1	3	Η	Η	CO-Ph-4-CONK₂
268	1	3	Η	Η	CO-Ph-4-CH₂OK
269	1	3	Η	Η	CO-Ph-4-CH₂NH₂
270	2	3	Η	Η	CO-cPr
271	2	3	Η	Η	CO-cBu
272	2	3	Η	Η	CO-cPen
273	2	3	Η	Η	CO-cHex
274	2	3	Η	Η	CO-2-tienyl
275	2	3	Η	Η	CO-2-furyl
276	2	3	Η	Η	CO-2-pyridyi
277	2	3	Η	Η	CO-3-pyridyl
278	2	3	Η	Η	CO-4-pyridyl
279	2	3	Η	Η	SO₂-Ph
280	2	3	Η	Η	CO-Ph-2-COOH
281	2	3	Η	Η	CO-Ph-2-CONH₂
282	2	3	Η	Η	CO-Ph-2-CH₂OH
283	2	3	Η	Η	CO-Ph-2-CH₂NH₂
284	2	3	Η	Η	CO-Ph-3-COOH
285	2	3	Η	Η	CO-Ph-3-CONH₂
. 286	2	3	Η	Η	CO-Ph-3-CH₂OH
287	2	3	Η	Η	CO-Ph-3-CH₂NH₂
288	2	3	Η	Η	CO-Ph-4-COOH
289	2	3	Η	Η	CO-Ph-4-CONH₂
290	2	3	Η	Η	CO-Ph-4-CH₂OH
291	2	3	Η	Η	CO-Ph-4-CH₂NH₂
292	3	4	Η	Η	CO-cPr
293	3	4	Η	Η	CO-cBu
294	3	4	Η	Η	CO-cPen
295	3	4	Η	Η	CO-cHex
296	3	4	Η	Η	CO-2-tienyl

297	0	3	4	H	H	CO-2-furyl
298	0	3	4	H	H	CO-2-pyridyl
299	0	3	4	H	H	CO-3-pyridyl
300	0	3	4	H	TJ i x	CO-4-pyridyl
301	0	3	4	H	H	SO₂-Ph
302	0	3	4	H	H	CO-Ph-2-COOH
303	0	3	4	H	TJ	CO-Ph-2-CONH₂
304	0	3	4	H	H	CO-Ph-2-CH₂OH
305	0	3	4	H	H	CO-Ph-2-CH₂NH₂
306	0	3	4	H	H	CO-Ph-3-COOH
307	0	3	4	H	H	CO-Ph-3-CONH₂
308	0	3	4	H	H	CO-Ph-3-CH₂OH
309	0	3	4	H	H	CO-Ph-3-CH₂NH₂
310	0	3	4	H	H	COPh-4-COOH
311	0	3	4	H	H	CO-Ph-4-CONH₂
312	0	3	4	H	H	CO-Ph-4-CH₂OH
313	0	3	4	H	H	CO-Ph-4-CH₂NH₂
314	s	1	3	H	co-ch₂ch₂-co
315	s	1	3	H	CO-1,2-Ph-CO
316	s	2	3	H	co-ch₂ch₂-co
317	s	2	3	H	CO-1,2-Ph-CO
318	s	3	4	H	co-ch₂ch₂-co
319	s	3	4	H	CO-1,2-Ph-CO
320	0	1	3	H	co-ch₂ch₂-co
321	0	1	3	H	CO-1,2-Ph-CO
322	0	2	3	H	co-ch₂ch₂-co
323	0	2	3	H	CO-1,2-Ph-CO
324	0	3	4	H	CO-CH₂CH₂-CO
325	0	3	4	H	CO-1,2-Ph-CO

Medzi zlúčeninami, uvedenými v horeuvedených tabuľkách sú uprednostňované zlúčeniny s číslom príkladu: 1, 2, 3, 13, 14, 15, 26, 27, 28, 38, 39, 40, 51, 52, 53, 63, 64, 65, 76, 77, 78, 88, 89, 90,

101, 102, 103, 113, 114, 115, 126, 127, 128, 138, 139 a 140 v Tabuľke

1, zlúčeniny s číslom príkladu: 1, 2, 7, 22, 26, 31, 32, 34, 35, 39,

40,	44, 49, 5C	b 51	, 52,	59,	62,	63, 64, 65	_r 89,	90,	95,	110,	114,
119,	120, 122,	123,	127,	128,	132,	137, 138,	139,	140,	147,	150,	151,
152,	153, 177,	178,	183,	198,	202,	207, 208,	210,	211,	215,	216,	220,
225,	226, 227,	228,	235,	238,	239,	240, 241,	265,	266,	271,	286,	290,
295,	296, 298,	299,	303,	304,	308,	313, 314,	315,	316,	323,	326,	327,
328,	329, 353,	354,	359,	374,	378,	383, 384,	386,	387,	391,	392,	396,
401,	402, 403,	404,	411,	414,	415,	416, 417,	441,	442,	447,	462,	466,
471,	472, 474,	475,	479,	480,	484,	489, 490,	491,	492,	499,	502,	503,
504,	505, 529,	530,	535,	550,	554,	559, 560,	562,	563,	567,	568,	572,
577,	578, 579,	580,	587,	590,	591,	592, 593,	617,	618,	623,	638,	640,
647,	648, 650,	651,	655,	656,	660,	665, 666,	675,	678,	679,	680,	681,
705,	706, 711,	726,	730,	735,	753,	754, 755,	756,	763,	766,	767,	768,
769,	793, 794,	799,	814,	818,	823,	824, 826,	827,	831,	832,	836,	841,
851,	854, 855,	856,	857,	881,	882,	887, 902,	906,	911,	912,	914,	915,
919,	920, 924,	929,	930,	931,	932,	939, 942,	943,	944,	945,	969,	970,

975,	990, 994, 999, 1000, 1002, 1003,	1007,	1008,	1012,	1017,	1018,
1019,	1020, 1027, 1030, 1031, 1032,	1033,	1057,	1058,	1059,	1060,
1063,	1064, 1065, 1066, 1067, 1068,	1069,	1070,	1071,	1072,	1073,
1074,	1075, 1076, 1077, 1078, 1081,	1082,	1083,	1084,	1085,	1086,
1087,	1088, 1089, 1090, 1091, 1092,	1093,	1094,	1095,	1096,	1099,
1100,	1101, 1102, 1103, 1104, 1105,	1106,	1107,	1108,	1109,	1110,
1111,	1112, 1113, 1114, 1117, 1118,	1119,	1120,	1121,	1122,	1123,
1124,	1125, 1126, 1127, 1128, 1129,	1130,	1131,	1132,	1135,	1136,
1137,	1138, 1139, 1140, 1141, 1142,	1143,	1144,	1145,	1146,	1147,
1148,	1149, 1150, 1153, 1154, 1155,	1156,	1157,	1158,	1159,	1160,
1161,	1162, 1163 a 1164 v Tabuľke 2 sú	uprednostňované,
zlúčeniny s číslom príkladu: 1,	3, 5,	7, 9 a 11 v	Tabuľke 3
sú uprednostňované,
zlúčeniny s číslom príkladu: 1, 2	, 11,	12, 21	, 22,	31, 32	, 41,
42, 51, 52, 61, 62, 71, 72, 81, 82,	91, 92	, 101,	102,	111 a	112 v

Tabulke 4 sú uprednostňované, a

	zlúčeniny	s číslom príkladu: 1	, 2,	4, 7, 8, 10,	12, 13, 14	, 16,
17,	19, 22, 23	, 25, 27, 28, 29, 31	., 32	, 34, 37, 38,	40, 42, 43	, 44,
46,	47, 49, 52	, 53, 55, 57, 58, 5S	>, 61	, 62, 64, 67,	68, 70, 72	, 73,
74,	76, 77, 79,	. 82, 83, 85, 87, 88,	89,	91, 92, 94, 97, 98, 100,	102,
103,	104, 106,	107, 109, 112, 113,	115,	117, 118, 119,	121, 122,	124,
127,	128, 130,	132, 133, 134, 136,	137,	139, 142, 143,	145, 147,	148,
149,	151, 152,	154, 157, 158, 160,	162,	163, 164, 167,	168, 170,	173,
174,	176, 178,	179, 180, 182, 184,	185,	186, 187, 188,	189, 190,	191,
192,	193, 194,	195, 196, 197, 198,	199,	200, 201, 202,	203, 204,	205,
206,	207, 208,	209, 210, 211, 212,	213,	214, 215, 216,	217, 218,	219,
220,	221, 222,	223, 224, 225, 226,	227,	228, 229, 230,	231, 232,	233,
234,	235, 236,	237, 238, 239, 240	, 241, 242, 243,	244, 245,	246,

247, 248, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259,

260, 261, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 270, 271, 272,

273, 274, 275, 276, 277, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285,

286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298,

299, 300, 301, 302, 303, 304, 305, 306, 307, 308, 309, 310, 311,

312, 313, 314, 315, 316, 317, 318, 319, 320, 321, 322, 323, 324, 325 a 326 v Tabuľke 5 sú uprednostňované.

Medzi nimi, zlúčeniny s číslom príkladu: 3, 28, 53, 78, 103 a 128 v Tabuľke 1 sú viac uprednostňované, zlúčeniny s číslom príkladu: 1, 2, 7, 26, 31, 32, 34, 35, 39, 40, 44, 49, 50, 5-1,- 52, 59,~ 62, 63, 64, 65, 529, 530, 535, 554, 559, 560, 562, 563, 567, 568, 572, 577, 578, 579, 580, 587, 590, 591, 592, 593, 1057, 1058, 1059, 1060, 1063, 1069, 1070, 1071, 1072, 1073, 1074, 1111, 1112, 1113, 1114, 1117, 1123,

1124, 1125, 1126, 1127 a 1128 v Tabuľke 2 sú viac uprednostňované, zlúčeniny s číslom príkladu: 1, 3, 7 a 11 v Tabuľke 3 sú viac uprednostňované, zlúčeniny s číslom príkladu: 1, 2, 21, 22, 41, 42, 61, 62, 81, 82, 101 a 102 v Tabuľke 4 sú viac uprednostňované, a zlúčeniny s číslom príkladu: 1, 2, 4, 7, 8, 91, 92, 94, 97, 98, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193,

194, 19c, 196, 19/, 198, 199, '200, 201 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257,

263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 314 5 sú viac uprednostňované.

, 202, ‘203, 248, 258, 259, 260, , 315, 320 a 321

249, 250, 261, 2 62, v Tabuľke

Najviac uprednostňované zlúčeniny sú uvedené nižšie:

(TR,5S,6S)-2-(1-(4-karbamoyl-i,3-tiazol-2yíjazetidín-3-yiJ ] tio-6- ( (±Kj -I-hydroxy-etyl] -l-metyikarbapén-2-em-3-karboxyiová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-l,3-oxazol-2-yľ) azetidín-3-yl] j tio-6- [ (TR) -i-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (IR,5S,6S)-2-[l-(4-hydroxymetyl-l,3-tiazol-2-yľ) azetidin-3-yl] tio-6- {(ÍR) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovä kyselina, (ÍR,5S,65)-2-(1-(4-hydroxymetyI-I,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl] tio-6- f (ÍR) -1-hydroxy-etyl'J-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovä kyselina, (ÍR,5S,6S) -2-(I- (4-kyano-l,'3-tiazoI-2-yl) azetid'in-3-yl] tio-6- ( (IR) -1-hydroxyetylj-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-(1-(4-kyano-l,3-oxazol-2-yl)azetidin-3-yl]tio-6-((TR) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (IR, 5S, 6S) -2- (1-( 4-morfolinokarbonyl-i, 3-tíazoI-2-yl) azetídin-3-yi] tio-6-ý(ÍR) - i-hydroxyetylJ-l-i[ietyikarbapén-2-em-3-karboxyIová kyselina, (ÍR, 5S, 6S) -2- [1- (4-morfolinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl j azetídin-3-yí] tio-6- [ (TR) -I-hydroxyetyl J-I-metylkarbapén-2-em-3-karbonyiovä kyselina, (ÍR,5S,65)-2-(1-(4-azetidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yi) ) azetídin-3-yi]tio-6- ((ÍR) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovä kyselina, (IR,55,65)-2-(I-(4-azetidinokarbonyi-l,3-oxazol-2-yI) )azetidín-3-yi J tio-6-((ÍR)-i-hydroxyetylj-I-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-{i-(4-(3-amínoazetidíno)karbonyl-í,3-tiazol-274

-ylj azetidin-3-yl]tio-b-Ĺ(ÍR)-1-hydroxyetyij-i-metyikarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (IR, 5S, 63)-2-(1-)4- (' 3-aminoazetidino) karbonyl-l, 3-oxazol-2-yl J azetidín-3-yl} tío-6'-[ (ÍR) -1-hydroxyetyiJ -l-metyikarbapén-2-em-3-karboxyIová kyselina, (IR,53,63]-2-{1-[4-(J-hydroxyazetídino)karbonyl-l,3-tíazol-2 -yl]azetidín-3-yl}tio-b-( (ÍR)-1-hydroxyetyij-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR, 5S, 6S) -2- {i-[4- (3-hydroxyazetídínoj karbonyl-l,3-oxazol-2 -yl]azetidín-3-yI}tio-6-[(IR)-1-nydroxyetyI]-i-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR, 5S, 6S)-2-[I-(4-tiomorfolinokarbonyl-l,3-tiazoi-2-yľ) ) azetídín-3-yi] tío-5- Ĺ (ÍR) -I-hydroxyetyiJ-l-metyIkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,63]-2-[I-('4-tiomorfolinokarbonyI-I,3-oxazoi-2-yI) ) azetldln-3-yl] tlo-6- [ (ÍR) -1-hydroxyetyl] -l-metyikarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR, 53, 63) -2- {i- [4- (píperídín-4-yikarbamoyl] -i, 3-tíazoi-2-ylj azetidín-3-yl ] tio-b-Ĺ (R) -i-hydroxyetyi ] -i-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovä kyselina, (ÍR, 53, 63)-2-(1-(4- (piperidin-4-y 1 karbamoyl') -1,'3-oxazoi-2-yiJ azetídín-3-yI } t í o-6- ( (R) -1-nydroxyetyI]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxyiová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-(azetídín-3-ylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-ylJ azetidin-3-yI}tio-6-Ľ(R)-1-hydroxyetyl]-l-metyikarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,53,6S)-2-(1-(4-(azetidin-3-yikarbamoyl)-1,3-oxazol-2yl] azetÍdín-3-yl}tío-6-[ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metyikarbapén-2— -em-3-karboxyIovä kyselina, (ÍR,53,6S)-2-{I-[4-((33]-pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-i,3tíazol-2-yl J azetídln-3-yI} tio-b- f (R) -1-hydroxyetyl] -1-metyikarbapén2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-(1-í 4-((5S)-pyroiidin-3-ylkarbamoy1)-1,3oxazoI-2-yI] azetidin-3-y±}tio-b- ( (R) -1-hydroxyetyi] -i75

-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-((3R) -pyrolidín-3-ylkarbamoyl)-1,3-tíazol-2-yl]azetídin-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metyikarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,53,63)-2-{I—[4—((3R)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín-3-y'l}tio-6-( (R) -1-hydroxyetyl] -1-metyikarbapén-2-em-3-karboxylovä kyselina, (ÍR,5S,63)-2-(1-(4-(píperazin-l-karbonyl)-1,3-tíazol-2-ylj azetidín-3-yl}tio-6-Ĺ(R)-i-hydroxyetyl]-1-met yl’karbapén-2 -em- 3-karboxylová kysel i na, (ÍR,5S,6S)-2-(1-(4-(piperazín-l-karbonyľ)-1,3-oxazol-2-yl j azetídín-3-yl} tío-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovä kyselina, (ÍR, 53,63)-2-(i-(4-(2-amino-etyikarbamoyI)-i,3-tiazoi-2-yl ] azetidin-3-yl} tío-6'-((R) -1-hydroxyetylJ -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,53,63)-2-(1-(4-(2-amino-etyikarbamoyľ) -1,3-oxazol-2-yl] azetidín-3-yľ} tio-6- ((R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovä kyselina, (ÍR, 53,63)—2—{1—[4-((IS)-l-amínometyl-2-metyi-propylkarbamoyl) -1, 3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl }tio-6-( (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR, 53, 6S) -2-( 1- (4-( (IS)-l-amínometyl-2-metyl— - -

-propylkarbamoyľ) -1,3-oxazoi-2-yl j azetídín-3-yi} tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,53, 63)-2-(1-{4- [N-(2-amino-etyl)-N-izopropyl-karbamoyl]-1,3-tíazol-2-yľ}azetidin-3-yľ} tio-6-1 (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR, 53,63)-2-(i-{4-(N-(2-amino-etyl)-N-izopropyl-karbamoylj -1, 3-oxazol-2-yl}azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovä kyselina, (ÍR, 5S, 6S) -2- (1- (4- [N- (2-hydroxyetyl) -N-ízopropyl-karbamoyl] -1,3-tíazol-2-yl}azetidin-3-ylJtio-6-[(R)-i-hydroxyecyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxyiová kyselina, ιό (ÍR,5S₅6S)-2-(1-{4 - (N- (2-hyároxyetyl) -N-izopropyl-karbamoyi j -1,3-oxazol-2-yl}azetidín-3-yl}tio-6-1(R)-1-hydroxyetyl]-1-metyl'karbapén-2-em-3-karboxylovä kyselina, (±R, 5S, 6'S) -2- [i- (4-aminometyi-i,3-tiazol-2-yi) azetidín-3-yi j tío-6-( (R) -i-hydroxyetyi]-i-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-(1-(4-aminometyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-ylJ tío-6'- Γ (R) -i-hydroxyetyíJ -i-metyifcarbapén~2-em-3-karboxylovä kyselina, (ÍR,55,bS)-2-{i-[4-(benzoylaminometyl)-i,3-tiazoI-2-yl] azetidin-3-yl'} tio-6- ( (R) -1-hydroxy-etyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,63)-2-(1-[4 - (benzoylaminometyl)-1,3-cxazoi-2-ylj azetidín-3-yl}tio-6-[ (R)-i-hydroxyetyi]-i-metyikarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR, 5S, 6S)-2-(1-(4- (benzenesulfonylaminometyl) -1,3-tíazol-2-y 1 j azetidín-3-yl} tio-b - ((R) -i-hydroxyetyij -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-(1-(4-(benzenesulfonylaminometyl)-i,3-oxazol-2-yiJ azetidin-3-yí}tío-6-((R)-1-hydroxyetyíj-i-metyikarbapén-2-em-3-karboxylovä kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-(1-(4-((tiofén-2-karbonyiamino)metylj-i,3-tiazoi-2 --yl} azetídln-3-yl) tio-6- ((R) -i-hydroxyetyi] -1-metyikarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR, 53, 6S) -2- (i-{ 4- ( (tiofén-2-karbonyiamino) metyl] -1, 3— -oxazol-2-yl} azetidín-3-yl)tio-6-[ (R; - i-hydroxyetyi] -I-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovä kyselina, (ÍR, 5S,6S)-2-(i-{4-((furan-2-karbonyiamíno)metylj-i,3-tiazoi-2-yl}azetíďin-3-yi] tío-6-((R) -i-hydroxyetyi] -1-metyikarbapén-2-em-3-karboxyiová kyselina, a (ÍR, 55,65 5-2-(1-{4 -[(furan-2-karbonyiamino)metylj-1,3-oxazoi-2-yľ} azetídín-3-yľ) tio-6'- ((R) -1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina

Spôsoby uskutočnenia vynálezu

1-Metylkarbapenémové deriváty predstavované všeobecným vzorcom I predkladaného vynálezu môžu byť pripravené pomocou spôsobov opísaných v postupe A a v postupe B, uvedených nižšie.

Postup A

Postup A je spôsob prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca I reakciou karbapenémového derivátu všeobecného vzorca II s mer'kaptovou zlúčeninou všeobecného vzorca III a následným vykonaním eliminácie ochrannej skupiny.

V horeuvedených vzorcoch R¹, R^z, X n majú rovnaký význam, ako je uvedené vyššie, 1/ predstavuje skupinu, ktorá

OO. t:-L-LILL-LHU. J e 7 predstavuje ochrannú skupinu karboxylovej skupinu ako etánsuifonyl, skupiny a R¹p predstavuje R¹, ktoré môže mať ochrannú skupinu.

Príklady „ochranných skupín karboxylovej skupiny”, vhodné ako P¹ zahrnujú benzylovú skupinu, ktorá môže mať substituent (substituent je nitro, metyl, chlór alebo metoxy), ako je benzyl, 4-metoxybenzyi, 4-nítrobenzyl alebo 2-nítrobenzyl; benzynydryl skupinu; aiylovú skupinu, ktorá môže mať substituent na pozícii 2 (substituent je chlór alebo metyl), ako je aiyl, 2-chlóralyl alebo 2-metyialyl; a skupinu tvoriacu hore farmakologicky prijateľné estery, kde benzyiová skupina, ktorá môže mať substituent (zvlášt 4-nitrobenzyiová skupina), je uprednostňovaná.

Príklady eliminačných skupín ako 1/ zahrnujú skupinu všeobecného vzorca -OR^¹ alebo -S(O)R^iZ.

Príklady skupiny R¹¹ zahrnujú Ci až C₄ alkanesulfonyl je metánsulfonyl, trifluórmetánsulfonyl, propänsulfonyi, ízopropänsulfonyl alebo butänsulfonyl skupinu; až Cic arylsulfonyl skupinu ako je fenyisulfonyi, tolylsulfonyl alebo naftyisuifonyi; di-Cý až C₆alkylŕosforyl skupinu ako je dimetylfosforyl, dietylfosforyl, dipropy!fosfory!,- díízopropylfosforyi, díbutyifosforyl, aípentyifosforyi alebo díhexyifosforyl; alebo αί-Ο_δ až Ci₀arylfosforyl skupinu ako je difenyifosforyi alebo ditolylfosforyl, kde difenyifosforyi skupina je uprednostňovaná.

Príklady skupín R¹² zahrnujú Ci až C₄ alkyl skupinu ako je metyl, etyl, propyl alebo izopropyl; halogénovú Ci až C₄ alkyl skupinu ako je fluórmetyl, chlórmetyl, fluóretyl, chlóretyl, fluórpropyl, dífluórmetyl, difluóretyl, díchlóretyl, trifluórmetyl alebo trifluóretyl; 2-acetyiamínoetyi skupinu; 2-acetyiaminovinyi skupinu; alebo C₆ až Cio aryl skupinu (arylová skupina môže mať 1 až 3 substituenty, ktoré môžu byt rovnaké alebo rozdielne, a substituent môže obsahovať halogénový atóm ako je fluór, chlór alebo bróm; Ci až C₄ alkyl skupinu ako je metyl, etyl, propyl alebo izopropyl; C₄ až C₄alkoxy skupinu ako je metoxy, etoxy, propoxy alebo ízopropoxy; (Ci až C₄ alkoxy)karbonyl skupinu ako je metoxykarbonyi, etoxykarbonyi alebo terc.butoxykarbonyl; karbamoyl, mono- alebo di-(Ci až C₄ alkyl)'karbamoyl skupinu; nitro skupinu; hydroxy! skupinu; alebo kyano skupinu), ako je fenyl alebo naftyl, ktorý môže mať substituenty; alebo heteroaryl skupinu, ktorá môže mať jeden alebo dva atómy dusíka (heteroaryl skupina môže mať jeden až tri substituenty, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne, a substituent môže obsahovať halogénový atóm ako je fluór, chlór alebo bróm; Ci až C₄ alkyl skupinu ako je metyl, etyl, propyl alebo izopropyl; Ci až C₄ alkoxy skupinu ako je metoxy, etoxy, propoxy alebo ízopropoxy; (Ci až C₄alkoxy)karbonyl skupinu ako je metoxykarbonyi, etoxykarbonyi alebo terc.butoxykarbonyl; karbamoyl alebo mono- alebo di-( Ci až C₄ alkyl)karbamoyl skupinu; nitro skupinu; hydroxyl skupinu; alebo kyano skupinu) , ako je pyridyl alebo pyrímídínyi, ktorý môže mať substituenty.

Fríklady ochranných skupín hydroxylovéj skupiny” zahrnuté v definícii R^xp zahrnujú benzyloxykarbonyl skupinu, ktorá môže byť substituovaná (substituent -môž-e- obsahovať nitro-,·-' metyl, chlór alebo metoxy), ako je benzyloxykarbonyl, 4-nitrobenzyloxykarbonyl, 4-cnlórbenzyIoxykarbonyl alebo 4-metoxybenzyloxykarbonyl; alyloxykarbonyl skupinu, ktorá môže byť substituovaná na pozícií 2 (substituent môže obsahovať chlór alebo metyl), ako je alyloxykarbonyl, 2-cnlóraIyloxykarbonyl a 2-metyialyloxykarbonyl; tri-(Ci až C₄alkyl)silyl skupinu, ako je trimetylsilyl, trietylsílyl alebo terc.butyldímetylsíryl; a skupinu tvoriacu hore farmakologicky príjatelný ester, kde trí-(Ci až C₄alkyl) siiyl skupina (zvlášt terc.butyldimetylsilyl skupina) je uprednostňovaná.

Príklady ochranných skupín amino skupiny oosiannuĽé v íť-p zahrnujú alyloxykarbonyl skupinu, ktorá môže byť substituovaná na pozícii 2 (substituent môže obsahovať chlór alebo metyl), ako je alyloxykarbonyl, 2-chióralyloxykarbonyi a 2-metyIalyloxykarbonyi; a benzyloxykarbonyl skupinu, ktorá môže byť substituovaná (substituent môže obsahovať metyl, metoxy, chlór alebo nitro) ako je benzyloxykarbonyl, 4-metyibenzyloxykarbonyl, 4-metoxybenzyloxykarbonyl, 4-cniórbenzyloxykarbonyi alebo 4-nitrobenzyloxykarbcnyI, kde alyloxykarbonylovä skupina alebo 4-nitrobenzyloxykarbonyl skupina je uprednostňovaná a 4-nitrobenzyioxykarbonyí skupina je viac uprednostňovaná.

Ochranná skupina použitá hore ako P¹ môže byť použitá ako Ochranná skupina karboxylovej skupiny obsiahnutá v R-'p.

Predkladaný postup je postup, keď zlúčenina všeobecného vzorca TV je pripravená reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca II so zlúčeninou všeobecného vzorca III za prítomnosti bázy (Krok Al) a zlúčeniny všeobecného vzorca I, a je následne pripravená odstránením všetkých ochranných skupín (Krok Ά2). V prípade, kde L^x predstavuje skupinu predstavovanú všeobecným vzorcom: -OR¹¹, je zlúčenina všeobecného vzorca II, ktorá je použitá ako počiatočná látka, pripravená podía spôsobu opísanom v D.H.S'híh et al., Heterocycles 21, 2-9 (-1984) - alebo podľa analogického zpôsobu. V prípade kde L¹ predstavuje skupinu predstavovanú všeobecným vzorcom: -S(O)R, počiatočná zlúčenina II je pripravená podía spôsobu opísanom v Japonskej patentovej prihláške (Kokaí) No. Sho 62-30781 alebo podía analogického spôsobu. Všetky kroky budú opísané nižšie.

(Krok Alj

Krok Al je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca IV, ktorý je vykonaný pomocou reakcie zlúčeniny všeobecného vzorca II s merkaptänovým derivátom všeobecného vzorca III za prítomnosti bázy v inertnom rozpúšťadle.

Nie je tu zvláštne obmedzenie podstaty použitého «I rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady vhodných rozpúšťadiel zahrnujú halogénované uniovodiky, ako je metyiénchioríd, 1,2-díchióretán alebo chloroform; nitrily ako je acetonitril; amidy ako je N,N-dimetyiformamid alebo N,N-dimetylacetamid; estery ako je etylacetát alebo metylacetát; a étery ako je dietyléter, tetrahydrofurán alebo díoxán, kde acetonitril, N,N-dimetylformamid alebo tetrahydrofurán je uprednostňovaný a acetonitril je zvlášť uprednostňovaný.

Uprednostňované príklady použiteľných báz zahrnujú organické amíny ako je trietylamín, diizopropyletylamín, pyridín alebo dimetylaminopyridín; alebo anorganické bázy ako je uhličitan draselný, uhličitan sodný alebo hydrogénuhličitan sodný, kde organické amíny (zvlášť diizopropyletylamín) sú uprednostňované.

Reakcia sa bežne vykonáva pri teplote od -20°C do 40^oC (prednostne od -ÍO^C do 20^cC). Doba reakcie je v rozsahu od 30 minút do 108 hodín (prednostne od 1 hodiny do 18 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina všeobecného vzorca TV, ktorá je produktom predkladaného kroku získaná z reakčnej zmesi známymi spôsobmi, napríklad, pridaním organického rozpúšťadla nemiesatelného s vodou do reakčnej zmesi alebo do zvyšku, získaného destiláciou rozpúšťadla z reakčnej zmesí. V prípade potreby takto získaná požadovaná zlúčenina môže byt ďalej čistená známymi spôsobmi, napríklad rekryštalizáciou, zrážaním alebo chromatograf icky. Je tiež možné použiť požadovanú zlúčeninu všeobecného vzorca IV pre ďalší krok bez izolácie, v prípade potreby.

(Krok A2')

Krok Az je krok konverzie slúčeniny všeobecného vzorca IV na zlúčeninu všeobecného vzorca I, ktorý je vykonaný odstránením akejkolvek ochrannej skupiny, ktorú obsahuje zlúčenina všeobecného vzorca IV.

«2

Aj keď spôsob odstránenia ochrannej skupiny závisí na type ochrannej skupiny, je vykonaný pomocou spôsobov všeobecne používaných v odbore chémie organických syntéz (napríklad spôsob opísaný v Proteczive Groups in Organic Synthesis, Second Edition, John Wiley & Sons, Inc. 1991 napísané podía T.W. Greene a P.G.M. Wuts).

(ľ) Keď ochranná skupina je benzylová skupina, ktorá môže mať substituent, benzyhydryl skupinu alebo benzyloxykarbonyl skupinu, ktorý môže mať substituent, táto ochranná skupina môže byť odstránená reakciou s vodíkom za prítomnosti katalytického redukčného činidla v rozpúšťadle.

Príklady katalytických redukčných činidiel zahrnujú paládium-uhlíkový katalyzátor, platinový katalyzátor alebo ródium-uhlíkový katalyzátor, kde paládium-uhlíkový katalyzátor je uprednostňovaný.

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady vhodných rozpúšťadiel zahrnujú alkoholy ako je metanol alebo etanol; étery ako je tetrahydrofurán alebo dioxán; a zmes týchto organických rozpúšťadiel a vodu, kde zmes tetrahydrofuranu a vody je uprednostňovaná.

Reakčná teplota ' je bežne v rozsahu O’⁵C až 50^0 (prednostne od 10~C do 40^cC). Napriek tomu, že reakčná doba závisí na počiatočnej zlúčenine a povahe katalyzátora, je bežne v rozsahu 5 minút až 12 hodín (prednostne od 30 minút do 4 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesi známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná filtráciou nerozpustných látok, ako je katalyzátor z reakčnej zmesi a pouom destiláciou rozpúšťadla. Keď je to potrebné, môže byť takto získaná zlúčenina čistená konvenčnými postupmi ako je rekryštalížacia, preparativna tenkovrstvovä chromatografia aiebo kolónová chrómatograŕia.

(2) Keď ochranná skupina je alyl skupina, ktorá môže byť substituovaná alebo aiyioxykarbonyi skupina, ktorá môže byť substituovaná, môžu byť tieto ochranné skupiny odstránené reakciou s hydrídem tri-(Ci až C₆alkyl) činu a soli alkalického kovu a organickej karboxylovej kyseliny za prítomností zlúčeniny paládia v rozpúšťadle. Môžu byť pridané organické bázy alebo organické prípravky na zachytenie alylovej skupiny.

Zlúčenina paládia môže prednostne obsahovať chlorid bis (trífenylfosf in) paládia alebo tetrakis {trifenylfosfín') paládium. Hydrid tríaikyicinu môže prednostne obsahovať hydrid tríbutylcínu. Alkalická sol organickej karboxylovej kyseliny môže prednostne obsahovať 2-etylhexanoát draselný alebo 2-etylhexanoät sodný. Organická báza na zachytenie aiyiovej skupiny môže prednostne obsahovať morfolín a organický prípravok na zachytenie aiyiovej skupiny môže prednostne obsahovať dimedon.

Uprednostňované kombinácie ochranných činidiel môžu zahrnovať kombináciu chloridu bis(tríŕenylŕosfínjparádia a hydridu tríbutylcínu alebo kombináciu tetrakis (trifenylfosfín)paládia a 2-etylhexanoätu draselného.

Nie je tu zvláštne obmedzenie- na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a maio by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa.

rozpúšťadiel zahrnujú halogénované metylénchloríd, chloroform alebo 1,2ako je etylacetát; étery ako je

Príklady vhodných uhľovodíky ako je -díchíóretän; estery tetrahydrofuran, dioxan alebo í,2-di-metoxyetán; nitrily ako je acetonitril; alkoholy ako je metanol, etanol alebo propanol; vodu; alebo zmes týchto rozpúšťadiel, kde metylénchloríd, etylacetát alebo icn zmes je uprednostňovaná.

Aj keď tu nie je zvláštne obmedzenie reakčnej teploty, je reakcia bežne vykonaná pri teplote od -20“C do 100°C (prednostne od O’C do 60’C) . Reakčná doba je bežne v rozsahu 30 minút až 48 hodín (prednostne od 30 minút do 12 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesí známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byt získaná filtráciou nerozpustných látok vyzrážaných z reakčnej zmesi a potom destiláciou rozpúšťadla. Ak je to nutné, môže byť takto získaná zlúčenina čistená konvenčnými postupmi ako je rekryštalizácia, preparatívna tenkovrstvová chromatografia alebo kolónovä chromatografia.

(3) Keď je ochranná skupina založená na siiyie, tak táto ochranná skupina môže byť odstránená reakciou so zdrojom fluoridových aniónov ako je tetrabutylamôníum fluorid, kyselina fluorovodíková, kyselina fiuorovodíková-pyrídín alebo fluorid draselný, aiebo reakciou s organickou kyselinou ako je octové kyselina, metánsulfonová kyselina, p-toiuénsuifonovä kyselina, trífiuóroctovä kyselina aiebo rrífluórmetänsuifonovä kyselina, aiebo anorganická kyselina ako je chlorovodíková kyselina, v rozpúšťadle.

Keď ochranná skupina je odstránená pomocou fluoridového aniónu, reakcia niekedy prebieha pri miernych podmienkach pridaním organickej kyseliny ako je mravčia kyselina, octová kyselina alebo propánová kyselina.

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Uprednostňované príklady vhodných rozpúšťadiel zahrnujú étery ako je dietyiéter, diizopropyiéter, tetrahydrofurán, dioxan, dímetoxyetän aiebo díetyiéngiykoídimetyíéter; nítríiy ako je acetonitril aiebo izobutyronitrii; vodu; organické kyseliny ako je octová kyselina; a zmes týchto rozpúšťadiel.

Reakčna teplota je bežne v rozsahu O’C do 100’C (prednostne od 10⁼C do 30’C) . Aj keď tu nie je zvláštne obmedzenie, je reakčná doba obvykle v rozsahu 1 hodiny až 24 hodín (prednostne od 1 hodiny do 4 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesi známymi spôsobmi, napríklad, pridaním organického rozpúšťadla nemíešatelného s vodou do reakčnej zmesí alebo do zvyšku, získaného destiláciou rozpúšťadla z reakčnej zmesí. Keď je to nutné, takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená známymi spôsobmi, napríklad, rekryštalizáciou, zrážaním alebo chromatograficky.

(4) Keď ochranná skupina je skupina tvoriaca farmakologicky prijatelný ester karboxylovej skupiny alebo a hydroxylovú skupinu, tieto ochranné skupiny sú odstránené reakciou hydroläzy vo vode alebo zmesi vody a organického rozpúšťadla.

Uprednostňované príklady organického rozpúšťadla miešaného s vodou zahrnujú éter alebo alkohol miešateľný s vodou ako je tetrahydrofurán, dioxan, metanol, etanol alebo propanoi.

Je uprednostňované, že solí alkalických kovov ako je fosforečnan sodný, acetát sodný alebo hydrogénuhiíčítan sodný sú pridané do vody alebo zmes vody a organického rozpúšťadla, alebo pH upravované do rozsahu od 6 do 8 pri použití roztoku pufra ako je pufrovy roztok fosforečnej kyseliny.

Nie je tu obmedzenie na pôvod poskytnutej hydroläzy, ktorá môže hydrolyzovať esterovú väzbu. Príklady takej hydroläzy zahrnujú esterázy získané z prasačej pečene.

Reakčná doba je bežne v rozsahu 10 minút až 8 hodín (prednostne od 30 minút do 2 hodín) a reakčná teplota od 10”C do 50°C (prednostne od 30“C do 40’C) .

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina izolovaná a vyčistená íónovo výmennou chromatografiou, kolónovou chromatografiou na obrátenej fáze, zrážaním, rekryštaiiz-äciou, atď.

Keď zlúčenina všeobecného vzorca IV obsahuje dva alebo viac druhov ochranných skupín, požadované zlúčeniny všeobecného vzorca I môžu byť získané úspešným vykonaním kombinácie horeuvedených eliminácii ochrannej skupiny. Keď je požadovaný farmakologicky prijateľný ester zlúčeniny všeobecného vzorca I, nie je nutné odstránit skupinu tvoriacu farmakologicky prijateľný ester ako ochrannú skupinu.

Takto získané zlúčeniny všeobecného vzorca T môžu byť konvertované do farmakologicky prijateľných solí alebo esteru ak je to nutné, podľa spôsobu alebo technológie známej v odbore medicínska chémia, zvlášť potom antibiotiká založené na β-laktame.

Farmakologicky prijateľný ester karboxylovej skupiny zlúčeniny všeobecného vzorca I môže byť pripravený reakciou halogénovanej zlúčeniny zodpovedajúcej požadovanému esterovému zvyšku zlúčeniny všeobecného vzorca I za prítomností bázy v rozpúšťadle.

Príklady použitelnej halogénovanej zlúčeniny zahrnujú chlorid, bromid alebo jodid, kde jodid je uprednostňovaný. Keď je použitý chlorid alebo bromid, môže byť reakcia podporená pridaním katalytického množstva jodidu sodného do reakčného roztoku.

Príklady použiteľných báz zahrnujú organické amíny ako je trietylamín, dí ízopropyletyiamin, 4-dimetyiamínopyrídín alebo pyridín; a uhličitany alkalických kovov ako je uhličitan draselný, uhličitan sodný alebo hydrogénuhličitan sodný, kde organické amíny (zvlášť 4-dimetyiamínopyrídin·) 'sú uprednostňované.

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú nítríiy ako je acetonitril; amidy ako je N,N-dímetylŕormamíd; a halogénovane uhlovod'íky ako je metylénchlorid, kde amidy (zvlášť dimetyiacetamid) alebo nitrily (zvlášť acetonitril) sú uprednostňované.

Reakčná	teplota	je	bežne
(prednostne	od -1(TC	do	20⁼C)
rozsahu ΰ, 5	hodiny do	108	hodín

v rozsahu -20°C do 50 C a reakčná doba je bežne v (prednostne od jednej hodiny čo 24 hodín).

Zlúčenina izolovaná hore ako sol reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca I s bázou môže tiež reagovať s halogenidom ako je uvedeno vyššie.

Alternatívne zlúčenina všeobecného vzorca I môže byť pripravená reakciou alkoholu, ktorý zodpovedá požadovanému esterovému zvyšku, na zlúčeninu všeobecného vzorca T za prítomností kondenzačného činidla a bázy.

Príklady kondenzačného činidla zahrnujú Mítsunobu činidlá ako je dietylazodikarboxyiát; kondenzačné činidlá založené na fosforečných esteroch ako je di fenylfosforyiazíd; kondenzačné činidlá založené na karboímide ako je dicyklohexylkarbodiimid alebo l-etyi-3-(3-dimetyiaminopropyl)karbodiimid; a kondenzačné činidlá založené na oniu ako je 2-chlór-l-metylpyridínjodid.

Príklad použiteľných báz zahrnuje organické amíny a'ko je trietylamín, tríbutyiamín, díízopropyíetyiamín alebo 4-dimetylaminopyridín.

Príklady ďalších prídavkov zahrnujú fosfíny ako je trifenylfosfin a tributylfosfin; a alkoholy tvoriace účinný ester ako je 1-hydroxybenzotriazoi.

Príklady rozpúšťadiel zahrnujú halogénované uhlovoaíky ako je metylénchloríd alebo dichlóretán; amidy ako je N,N-díme tyl f ormamid; nítríly ako je acetonitril; a étery ako je tetrahydrofurán.

Príklady uprednostňovaných kombinácií týchto látok zahrnujú dietylazodikarboxyiát a trifenylfosfin; 2-chlor-l-metylpyrídinjodid a tríbutyiamín alebo trietylamín; l-etyl-3- 13-di-mety±amínopropy±)karbodiimid a 4-dímetyiaminopyrídín alebo i-’nydroxybenzotriazol.

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesi známymi spôsobmi, napríklad, pridaním organického rozpúšťadla, ktoré nie je míešateľné s vodou, do reakčnej zmesi alebo do zvyšku získaného destiláciou «-8 rozpúšťadla z reakčnej zmesi a následným premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Keď je to nutné, takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čisrenä známymi spôsobmi, napríklad, rekryštaiízäcíou, zrážaním alebo chromatograficky.

[Spôsob B]

Spôsob B je spôsob prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca 111 použitej ako počiatočná látka v spôsobe A.

V horeuvedenej schéme:

R^p, R^z, X a n majú rovnaký význam ako je definované hore;

R² predstavuje ochrannú skupinu karboxylovej skupiny; príklady P²zahrnujú a Ci až C₄ alkyl skupinu ako je metyl, etyl, propyl alebo butyl; a benzyl skupina, ktorá môže byť substituovaná ako je benzyl alebo 4-metoxybenzyl, kde Ci až C₄ alkyl skupina je uprednostňovaná a etyl skupina je zvlášť uprednostňovaná; p·⁵ predstavuje ochrannú skupinu hydroxylové j skupiny; príklady P³zahrnujú ochranné skupiny založené na silyle ako je trimetylsiiyi, trietyisiiyl, fcerc.butyldimetylsilyi alebo terc.'Outyldífenylsilyí, kde terc.butyídífenyísiiyi skupina je uprednostňovaná;

L^z predstavuje odštiepiteinú skupinu; príklady L² zahrnujú halogénový atóm ako je chlór, bróm alebo jód; Ci až C₄aikylsulfonyloxy skupinu, ktorá môže byť substituovaná fluórom alebo benzénsuifonyioxy skupinu, ktorá môže byť substituovaná alkylom ako je metänsuifonyloxy, etänsuifonyloxy, trifluórmetänsulfonyloxy, benzénsuifonyioxy alebo toluénsuífonyíoxy, kde Ci až C₄ aikylsulfonyloxy skupina, ktorá môže byť substituovaná fluórom je uprednostňovaná; a

P⁴ predstavuje ochrannú skupinu merkaptovej skupiny; príklady P⁴zahrnujú a Ci až C₄ alkanoyl skupinu ako je formyl, acetyl, propionyl alebo butyryl a benzoyl skupina, ktorá môže byť substituovaná ako je benzoyl, toluoyl alebo anísoyi, kde Q až C₄ alkanoyl skupina (zvlášť acetyiová skupina] je uprednostňovaná.

(Krok BI) — ....

Krok BI je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca VI zavedením amidovej skupiny predstavovanej všeobecným vzorcom C(=X)NH₂ na atóm dusíka zlúčeniny všeobecného vzorca V.

(ľ) Tento krok je dosiahnutý reakciou kyanátu alebo tiokyanátu so zlúčeninou všeobecného vzorca V v rozpúšťadle.

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú étery ako je tetrahydrofurán alebo dietyléter; halogénované uhiovodíky ako je metylénchlorid alebo dichlóretán; a zmes týchto rozpúšťadiel a vodu, kde zmes éteru a vody (zvlášť zmes tetranyaroŕuranu a vody) je uprednostňovaná.

Príklady solí kyanovej kyseliny alebo tiokyanovej kyseliny zahrnujú solí alkalických kovov ako je sodná alebo draselná soľ; amóniové solí; alebo organické amóniové solí ako je trietyiamóniová soľ, kde soli alkalických kovu (zvlášť draselná soľ) sú uprednostňované.

Kyseliny môžu byť tiež použité na konverziu kyanátu alebo a tiokyanätu na zodpovedajúcu kyselinu. Príľklady takých kyselín zahrnujú organické kyseliny ako je octová kyselina a minerálne kyseliny ako je chlorovodíková kyselina, kde octová kyselina alebo chlorovodíková kyselina sú uprednostňovaná.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu -2C/C do 150^OC (prednostne od -10”C do 100^JC) a reakčná doba je bežne v rozsahu 0,5 do 108 hodín (prednosrne od 1 do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesí známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemiešateľnéno s vodou do zvyšku získaného destilovaním reakčnej zmesi alebo destiláciou rozpúšťadla z reakčnej zmesí, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštalizácia, zrážaním alebo chromatograficky. .

(2) Alternatívne tento krok môže byť dosiahnutý nasledujúcim spôsobom. Predkladaný spôsob obsahuje reakciu na prípravu nasledujúcej zlúčeniny všeobecného vzorca XTII zo zlúčeniny všeobecného vzorca V a reakciu na prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca VI zo zlúčeniny všeobecného vzorca XIII.

H¹ ,NH—COOR

S x

(XIII)

9i

V horeuvedenom vzorci, X a n majú rovnaký význam ako je definovaný vyššie a R³ predstavuje Ci až C₄ alkyl skupinu (prednostne etylovú skupinu') .

Krok prípravy zlúčeniny XIII zo zlúčeniny V je dosiahnutý reakciou zlúčeniny predstavovanej všeobecným vzorcomm X=C=N-C00R³ (kde X a R³ majú rovnaký význam ako je uvedené vyššie) na zlúčeninu všeobecného vzorca V v rozpúšťadle.

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú étery ako je tetrahydrofurán alebo dietyléter; halogénované uhlovodíky ako je metylénchlorid alebo dichlóretán; a zmes týchto rozpúšťadiel a vodu, kde éter alebo zmes éteru a vody (zvlášť tetrahydrofurán alebo zmes tetrahydrofuranu a vody) je uprednostňovaná.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu -20C do 150^sC (prednostne od -10^eC do 50^0) a reakčná doba je bežne v rozsahu

0,5 do ±08 hodín

Po skončení (prednostne od i do 24 hodín).

reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesí známymi spôsobmi. Napríklad zlúčenina môže byť získaná pridaním organického požadovaná rozpúšťadla nemiešatelnéno s vodou, do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesi alebo destiláciou rozpúšťadla z reakčnej zmesi, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštalizácia, zrážaním alebo chrómatograficky.

Krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca VI zo zlúčeniny všeobecného vzorca XIII je dosiahnutý reakciou bázy so zlúčeninou XIII v rozpúšťadle.

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa.

Príklady rozpúšťadiel zahrnujú alkoholy ako je metanol alebo etanol; étery ako je tetrahydrofurán alebo dietyléter; a zmes týchto rozpúšťadiel a vodu, kde alkohol alebo zmes alkoholu a vody (zvlášť etanol alebo zmes etanolu a vody) je uprednostňovaná.

Príklady použitelných báz zahrnujú anorganické bázy ako je hydroxíd sodný, hydroxid draselný, hydrogénuhličitan sodný, uhličitan sodný a uhličitan draselný; a organické bázy ako je metoxid sodný a etoxid sodný, kde hydroxid sodný je uprednostňovaný.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu -20'³C do 15^0 (prednostne od -1CTC do 100^cC) a reakčná doba je bežne v rozsahu 0,5 do 108 hodín (prednostne od 1 co 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesi známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemíešatelného s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesi alebo destiláciou rozpúšťadla z reakčnej zmesí, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštaiízácía, zrážaním alebo chromatograficky.

(Krok E2) .. ..

Krok B2 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca Vil pomocou reakcie amidovej skupiny zlúčeniny všeobecného vzorca VI za vzniku cyklickej štruktúry.

Tento krok je dosiahnutý reakciou zlúčeniny predstavovanej všeobecným vzorcam R^ZCHL°COCOOP^Z (kde R^z a P^zmajú rovnaký význam ako je definovane vyššie a L^J predstavuje odštíepítelnú skupinu) so zlúčeninou všeobecného vzorca VI za prítomnosti bázy v rozpúšťadle. uprednostňované príklady odštiepitelnej skupiny Ľ⁵ zahrnujú halogénový atóm, kde bróm je zvlášť uprednostňovaný.

Nie je ru zvláštne obmedzenie na podsratu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú alkoholy ako je metanol alebo etanol; étery ako je tetrahydrofurán alebo dietyléter; haiogénované uhiovodíky ako je metylénchiorid alebo dichlóretän; a amidy ako je Ν,Ν-dimetylformamid, kde alkoholy (zvlášť etanol) sú uprednostňované.

Príklady použitelných báz zahrnujú organické bázy ako je trietylamín a díízopropyiamín; a anorganické bázy ako je unxicitan sodný, uhličitan draselný a sodný, kde organické bázy (zvlášť uprednostňované.

Reakčná teplota je nyarogenuhlicitan trietylamín) sú

-20³C do 150’C bežne v rozsahu (prednostne od -10^DC do 100°C) a reakčná doba je bežne v rozsahu 0,5 do 108 hodín (prednostne od 1 do '24 hodín) .

Fo skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesi známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemíešatelného s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesi alebo destiláciou rozpúšťadla z reakčnej zmesi, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak jeto nutné, pomocou konvenčných postupov· ako je rekryštaiizäcia, zrážaním alebo chromatograficky.

(Krok B3)

Krok B3 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca VIII zavedením ochrannej skupiny P³ na hydroxylovú skupinu zlúčeniny všeobecného vzorca VII.

Tento krok môže byť dosiahnutý pomocou spôsobu bežne používaného v odbore organických syntéz ('napríklad spôsob opísaný v Protective Groups in Organic Synthesis, Second Edition, John Wiley & Sons, Inc. 1991, authors T.W. Greene a P.G.M. Wuts,.

Zavedenie ochrannej skupiny založenej na síiyle je dosiahnuté reakciou silyiové'no naiogeniau alebo a silyltriflátu, ktorý obsahuje požadovaný substituent, so zlúčeninou všeobecného vzorca Vil za prítomnosti bazy v rozpúšťadle.

Príklady sílylového nalogenidu zahrnujú trímetylsílylchioríd, trietylsilylchlorid, terc. butyldimetylsiiylc'niorid a terc.butyídífenylsílylchloríd, kde terc.butyldlfenylsílylchloríd je uprednostňovaný.

Príklady silyltriflátu zahrnujú trimetylsiiyitriflát, tríerylsilyltriflát, terc.butyIdimetylsilyltriflát a terc. butyidíŕenylsíiyltríŕlät, kde terc.butyidífenyisiiyitríflät je uprednostňovaný.

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú amidy ako je dimetylformamid; nalogénované uhiovodíky ako je metylénchlorid alebo dichióretän; a étery ako je tetrahydrofurán alebo dietyléter, kde amidy (zvlášť dimetylformamid) alebo halogenované uhiovodíky (zvlášť metylénchlorid) sú uprednostňované.

Fríkiady použitelnýcn báz zahrnujú organické bázy ako je imidazol, trietylamín, lutidln, pyridín alebo dímetyíamínopyrídin, kde imidazol alebo 2,6-iutídín .. sú uprednostňované.

Reakčná teplota (prednostne od -10°C je bežne v rozsahu -20 ⁼ C do 50“C do 40°C) a reakčná doba je bežne v rozsahu 0,o do 108 hodín (prednostne od i do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesi známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemíešatelného s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesi alebo destiláciou rozpúšťadla z reakčnej zmesi, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštalizácia, zrážaním alebo chromatograficky.

(Krok B4')

Krok B4 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca IX pomocou konverzie skupiny predstavovanej všeobecným vzorcom COOP^Z v zlúčenine VIII na požadovanú skupinu R^xp.

Tento krok môže byť dosiahnutý pomocou použitia konverznej reakcie funkčnej skupiny bežne používanej v odbore organických syntéz. Detaily sú opísané v spôsobe C až spôsobe H, nižšie.

(Krok B5)

Krok B5 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca X pomocou odstránenia ochrannej skupiny P^J hydroxylovej skupiny zlúčeniny všeobecného vzorca IX.

Tento krok môže byť dosiahnutý pomocou spôsobu bežne používaného v odbore organických syntéz (napríklad spôsob opísaný v Protective Groups in Organic Synthesis, Secona Edition, John Wiley & Sons, Inc. ±991, authors T.W. Greene a P.G.M. Wuts).

Keď ochranná skupina P^J hydroxylovej skupiny je ochranná skupina založená na sílyle, jej eliminácia je dosiahnutá podobným spôsobom ako v spôsobe opísanom v kroku A2 (3) .

(Krok Bfe) . . ..

Krok Bfe je krok prípravy zlúčeniny XI pomocou konverzie hydroxylovej skupiny zlúčeniny všeobecného vzorca X na odštiepiteľnú skupinu L².

(1)Keď odštiepiteľnú skupinu L p reds t avu je t yp s ulfonyloxy skupiny, je tento krok dosiahnutý reakciou sulfonylačného činidla so zlúčeninou všeobecného vzorca X za prítomností bázy v rozpúšťadle.

Príklady sulfonylačného činidla zahrnujú metánsulfonylchlorid, etänsulfonylchloríd, trífluórmetánsulfonylchlorid, benzénsulfonylcnlorid alebo toluénsulfonylchlorid, kde metánsuiŕonylchlorid je uprednostňovaný.

9č

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú nalogénované uhlovodiky ako je metylénchlorid, dichlóretán alebo chloroform; a étery ako je tetrahydrofurán alebo dietyiéter, kde halogénované uhlovodiky (zvlášť metylénchlorid') sú uprednostňované.

Príklady použiteľných báz zahrnujú organické bázy ako je trietylamín, diízopropyletyiamín, pyridín aiebo dimetyiaminopyridín, kde trietylamín je uprednostňovaný.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu -20’C do 80’C (prednostne od -10⁼C do 40⁼C) a reakčná doba je bežne v rozsahu 0,5 do 108 hodín (prednostne od i do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesi známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemíešateľné'ho s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesí alebo destiláciou rozpúšťadla z reakčnej zmesí, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistené, ak je to nutné, pomocou 'konvenčných postupov ako je rekryštalizácia, zrážaním alebo chromatograficky.

(2) Keď odštiepiteľnou skupinou L^z je halogénový -atóm,je tento krok dosiahnutý reakciou halogenačného činidla so zlúčeninou všeobecného vzorca X v rozpúšťadle.

Príklady použiteľných nalogenačných činidiel zahrnujú pentachiorid fosforu, tionyicniorid, oxycniorid fosforu, jód,

N-chlór-sukcinimid, díetylamínosíry, kde tetrabrómmetán, tetrachlórmetán,

N-bromosukcínimid alebo trífluorid tetrabrómmetán je uprednostňovaný.

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú halogénované uhlovodiky ako je metylénchloríd alebo dichlóretän; a étery ako je tetrahydrofuran alebo dietyléter, kde halogénované uhlovodíky (zvlášť metylénchloríd) sú uprednostňované.

Príklady použitých pomocných látok zahrnujú fosfíny ako je trifenylfosfin a tributylfosfin, kde trifenylfosfín je uprednostňovaný.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu -20°C do 100°C (prednostne od -1CTC do 50”C) a reakčná doba je bežne v rozsahu 10 minút až 108 hodín (prednostne od 0,5 do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesí známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byt získaná pridaním organického rozpúšťadla nemiešatelného s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesí alebo destiláciou rozpúšťadla z reakčnej zmesí, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštalízäcia, zrážaním alebo chromatograficky.

(Krok B7)

Krok B7 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca XII pomocou konverzie odštiepitelnej skupiny 1/ zlúčeniny všeobecného vzorca XI na ochrannú merkapto skupinu.

Tento krok je dosiahnutý reakciou merkapto-tvoríaceho činidla so zlúčeninou všeobecného vzorca XI v rozpúšťadle.

Príklady použitých činidel tvoriacich merkapto zahrnujú soli alkalických kovov tiokarboxylovej kyseliny ako je tíoacetät sodný, tíoacetät draselný, tíopropíonät sodný alebo tíobenzoät sodný; alebo solí alkalických kovov 4-metoxybenzylmerkaptánu, kde tioacetát draselný je uprednostňovaný.

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú étery ako je tetrahydrofuran alebo dioxan; acetáty ako je erylacetát alebo ir.etylacetát; nitrily ako je acetonitril; a amidy ako je dimetylformamid alebo dimetylacetamíd, kde amid (zvlášť dimetylformamid') je uprednostňovaný.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu -20³C do 150⁼C (prednostne od O^C do ÍOO^C) a reakčná doba je bežne v rozsahu 0,5 do 108 hodín (prednostne od 1 do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesí známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemiešatelnéno s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesi alebo destiláciou rozpúšťadla z reakčnej zmesi, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byt ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštaiizácia, zrážaním alebo chromatograficky.

(Krok B8)

Krok B8 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca III pomocou odstránenia ochrannej skupiny P⁴ merkapto skupiny zlúčeniny všeobecného vzorca XII.

(1) Keď ochranná skupina P⁴ je alkanoylová skupina alebo arylkarbonyiová skupina, je tento krok dosiahnutý reakciou soli ’nydrazínovej zlúčeniny so zlúčeninou-XII v rozpúšťadle.

Príklady soli hydrazínovej zlúčeniny zahrnuje hydrazin/octová kyselina alebo N,N-dímetyihydrazin/octovä kyselina, kde hydrazin/octová kyselina je uprednostňovaná.

Ako použitelné rozpúšťadla so môžu použiť rozpúšťadlá použité v prvom 'kroku.

Reakčná teplota nie je zvlášť obmedzená a je bežne v rozsahu -10°C do 40°C (prednostne od lO^C do 30^uC) . Aj keď reakčná doba závisí na rozpúšťadle, reakčnej teplote a pôvode čínidel, je bežne v rozsahu 30 minút až 24 hodín (prednostne od 1 hodiny do 8 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesi známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemíešateľného s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesí alebo destiláciou rozpúšťadla z reakčnej zmesí premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštaiízäcía, zrážaním alebo chromatografícky.

Keď je sol hydrazínovej zlúčeniny použitá ako eliminačné činidlo, zlúčenina všeobecného vzorca III môže byť použitá ako počiatočná látka horeuvedeného kroku Al bez izolácie z reakčného roztoku.

Predkladaný krok je tiež dosiahnutý reakciou bázy so zlúčeninou všeobecného vzorca XII v rozpúšťadle.

Príklady použiteľných báz zahrnujú soli alkalických kovov ako je hydroxid sodný, hydroxid draselný, uhličitan draselný, uhličitan sodný, metoxid sodný alebo etoxíd sodný, kde metoxid sodný je uprednostňovaný.

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú alkoholy ako je metanol alebo etanol; étery ako je tetrahydrofuran alebo dietyléter; amidy ako je dimetylformamid; a halogénované uhlovodi'ky ako je metylénchlorid alebo dichlóretán, kde alkoholy (zvlášť metanol) sú uprednostňované.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu -20³C do 100°C (prednostne od -10°C do 40°C) a reakčná doba je bežne v rozsahu 10 minút až 10'8 hodín (prednostne od 0,5 do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesí známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemiešatelnéno s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesi alebo rozpúšťadla v reakčnej zmesi, jeho

100 neutralizáciou, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla.

Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, keď je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštaiizácia, zrážaním alebo chromatograficky.

(2) Keď P⁴ je 4-metoxybenzyl skupina, je tento krok dosiahnutý reakciou kyseliny so zlúčeninou všeobecného vzorca XII v rozpúšťadle.

Príklady použiteľných kyselín zahrnujú suifonové kyseliny ako je metänsulfonovä kyselina alebo trifiuórmetánsulfonová kysiina, kde trifluórmetánsuifonová kyselina je uprednostňovaná. Reakcia môže byť urýchlená existenciou anízoiu alebo tíoanízoiu.

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mat nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú halogénované uhiovodíky ako je metyiénchiorid alebo dichióretän; étery ako je tetrahydrofuran alebo dietyléter; a voliteľné substituované octové kyseliny ako je octová kyselina a trifluóroctovä kyselina, kde voliteľné substituované octové kyseliny (zvlášť trifluóroctovä kyselina) sú uprednostňované.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu -20 ⁼ C do 100 ⁼C (prednostne od -10°C do 80°C) a reakčná doba je bežne v rozsahu Í0 minút až 108 hodín (prednostne od 0,5 do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesi známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemiešateľného s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesi alebo rozpúšťadla v reakčnej zmesi, jeho neutralizáciou, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštaiizácia, zrážaním alebo chromatograficky.

ΙΟΙ [Spôsob C]

Spôsob C je spôsob prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca IX-1 obsahujúci požadovanú esterovu skupinu pomocou konverzie chránenej karboxylovej skupiny zlúčeniny všeobecného vzorca VIII.

P³O

COOP2

Krok C1

P³O.

Krok C4

P³O, ch₂oh

Krok C2

COOR3p

V horeuvedenej schéme, R², X, n, P^z a P majú rovnaký význam ako je definované vyššie, a R^3p predstavuje R³, ktorý môže byť chránený.

(Krok Cl)

Krok Cí je krok prípravy zlúčeniny XTV pomocou redukcie karboxyiesterovej skupiny zlúčeniny všeobecného vzorca VTTT na hydroxymetyl skupinu. Tento krok je dosiahnutý reakciou redukčného činidla so zlúčeninou všeobecného vzorca VIII v rozpúšťadle.

Použičelné redukčné činidlo nie je zvlášť obmedzené

102 pokial môže konvertovat karboxylesterovú skupinu na hydroxymetyl skupinu pomocou redukcie. Príklady redukčných činidiel zahrnujú hydrídy hliníka a alkalických 'kovov a'kc je nydríd hlínítoiítny; hydrídy bóru a alkalických kovov ako je bórhydrid iítny alebo bórhydrid sodný, kde hydrid hiinitclítny je uprednostňovaný.

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú étery ako je tetrahydrofurán alebo dietyléter, kde tetrahydrof urán je uprednostňovaný.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu -ŽO'C do 1OO’C (prednostne od -10’C do 40~C) a reakčná doba je bežne v rozsahu 10 minút až 24 hodín (prednostne od 0,5 do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesi známymi spôsobmi. Napríklad požadované zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemíešatelného s vodou do reakčnej zmesi, jeho neutralizáciou, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštalizácia, zrážaním alebo cnrómatografícky.

(Krok C2;

Krok C2 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca XV oxidáciou hydroxymetyl skupiny zlúčeniny všeobecného vzorca XIV.

Tento krok je dosiahnutý reakciou oxidačného činidla so zlúčeninou všeobecného vzorca XIV v rozpúšťadle a zahrnuje krok oxidácie hydroxymetyl skupiny na aldehydovú skupinu a krok oxidácie aidenydovej skupiny na karboxylovú skupinu.

(i) Krok oxidácie hydroxymetylovej skupiny na aldehydovú skupinu

Použiteľné oxidačné činidlo nie je zvlášť obmedzené pokial môže oxidovať hydroxymetyl skupinu a zmeniť ju na

103 aldehydovú skupinu. Príklady zahrnujú pyridíniumchlórcnromät, oxalylchlorid-dimetylsulfoxid, bezvodú trifluóroctovú kyselinu-dímetyl suifoxíd, aktívny oxid manganíčítý aiebo Dess-Martin činidlo, kde aktívny oxid manganíčítý je uprednostňovaný.

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú halogénované u'niovodiky ako je metylénchlorid aiebo dichlóretán, kde metylénchlorid je uprednostňovaný.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu 100'°C do 100⁵C (prednostne od -100^aC do 50*0 a reakčná doba je bežne v rozsahu 30 minút až 108 hodín (prednostne od í do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesi známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemiešatelnéno s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesi alebo rozpúšťadla v reakčnej zmesi, jeho neutralizáciou, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštalizácia, zrážaním alebo chrómatograficky.

(2) Krok oxidácie aidehydovej karboxylovú skupinu

Použitelné oxidačné činidlo nie je pokial môže oxidovať aldehydovú skupinu karboxylovú skupinu. Príklady oxidačného manganistan draselný, oxid ruteníčeíý, skupiny na zvlášť obmedzené a zmeniť ju na činidla zahrnujú chiorítan sodný-dihydrogénfosfät-2-metyi-2-buten sodný (alebo draselný), kae chloritan sodný - čihydrogénfosfát-2-metyl-'2-buten sodný je uprednostňovaný.

104

ky ako je
ako	je
je	terc.
kde	zmes
	je
do	50°C

Príklady rozpšťadiei zahrnujú halogénované uniovodiky ako je metyiénchioríd alebo dichlóretán; étery tetrahydrofurán alebo dietyléter; alkoholy ako butanoi; a zmes týchto rozpúšťadiel a vodu, tetrahydrofurán-metyiénchlorid-voda-terc.butanoi uprednostňovaný.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu -20° (prednostne od -10°C do 4O'^cC) a reakčná doba je bežne v rozsahu 10 minút až 108 hodín (prednostne od 0,5 do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesí známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemiesatelného s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesí alebo rozpúšťadla v reakčnej zmesi, jeho neutralizáciou, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nurné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštalizäcia, zrážaním alebo chromatograficky.

(Krok C3)

Krok C3 je krok prípravy karboxylovej kyseliny zlúčeniny všeobecného vzorca XV alternatívnym spôsobom a je dosiahnutý pomocou odstránenia ochrannej skupiny zlúčeniny VTTT. Tento krok môže byť vykonaný podobným spôsobom ako krok A2 spôsobu A.

(Krok C4)

Krok C4 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca IX-i esterifíkáciou karboxylovej skupiny zlúčeniny všeobecného vzorca XV.

(í) Tento krok je dosiahnutý reakciou požadovaného alkoholu predstavovaného všeobecným vzorcom R^jpOH so zlúčeninou všeobecného vzorca XV za prítomnosti kondenzačného činidla v rozpúšťadle.

Použiteľné kondenzačné činidlá sú opísané v oddelení tvorby esteru v kroku A2 spôsobe A. Kondenzácia môže tiež byť dosiahnutá cestou cez kyslý chlorid za použiria

105 oxalyicnloridu.

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú halogénované uhiovodíky ako je metylénchlorid alebo dichlóretán; étery ako je tetrahydrofurán alebo dietyléter; amidy ako je dimetylformamid; a nitrily ako je destilovaním zmesí, jeho acetonitril, kde halogénované uhiovodíky (zvlášť metylénchlorid) sú uprednostňované.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu -50 C do 100'⁼C (prednostne od -20³C do 50”0 a reakčná doba je bežne v rozsahu 0,5 do 108 hodín (prednostne od 1 do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesí známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemiešatelného s vodou do zvyšku získaného reakčnej zmesí alebo rozpúšťadla v reakčnej neutralizáciou, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštalizäcía, zrážaním alebo chromatograficky.

(2) Predkladaný krok je tiež dosiahnutý reakciou požadovanej zlúčeniny predstavovanej všeobecným vzorcom R^jpL^J so zlúčeninou všeobecného vzorca XV za prítomnosti bázy v rozpúšťadle. L^J predstavuje odštiepiteinú skupinu, prednostne atóm halogénu(zvlášť jód alebo bróm).

Ako použiteľné bázy sa môžu použiť anorganické bázy alebo organické bázy. Anorganické bázy môžu obsahovať uhličitany ako je uhličitan sodný, uhličitan draselný alebo alebo nydrogénuhiíčítany ako je sodný alebo hydrogénuhličitan draselný, prednostne uhličitan césny. Organická báza môže obsahovať terciärne amíny ako je trietylamín alebo diizopropyletylamín; alebo bicykiické organické bázy ako je DBU alebo DBN, prednostne uhličitan cesný hydrogénuhličitan

ΙΟό diizopropyletylamín.

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú haiogénované uhiovodíky ako je metylénchiorid alebo dlchlóretán; étery ako je tetrahydrofurán alebo dietyléter; amidy ako je dímetylformamíd; a nitríiy ako je acetonítríl, kde amidy (zvlášť dímetyiformamíd) sú uprednostňované.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu -50~C do 100^sC (prednostne od -20’C do 100’C) a reakčná doba je bežne v rozsahu 0,5 do 108 hodín (prednostne od 1 do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesí známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byt získaná pridaním organického rozpúšťadla nemíešatelného s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesí alebo rozpúšťadla v reakčnej zmesí, jeho neutralizáciou, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštaiizäcia, zrážaním alebo chromatograficky.

[Spôsob DJ

Spôsob D je spôsob prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca IX-2 obsahujúci požadovaný amiaový zvyšok pomocou konverzie karboxylovej skupiny zlúčeniny XV.

V horeuvedenej schéme, R^z, X, n a P^J majú rovnaký význam ako je definované vyššie, a R^4p a R^3p predstavujú R⁴ a R³ ktoré môžu

ΪΏ7 byť chránené.

(Krok Dl)

Tento krok je dosiahnutý reakciou požadovanej zlúčeniny všeobecného vzorca HNR^R⁵⁵ so zlúčeninou všeobecného vzorca XV za prítomnosti kondenzačné’no činidla v rozpúšťadle.

Fredkiadaný krok môže byť vykonaný za použitia amino zlúčeniny všeobecného vzorca HNR^4pR^op namiesto zlúčeniny alkoholu všeobecného vzorca R^OH v horeuvedenom kroku C4 zpôsobu C.

Príklady kondenzačného činidla zahrnujú kondenzačné činidlá založené na estere fosforečnej kyseliny ako je kyanid dietylfosforylu; kondenzačné činidlá založené na karbonátoch ako je karbonyldiimidazol, kde kyanid dietylfosforylu alebo karbonyldiimidazol sú uprednostňované.

[Spôsob Ej

Spôsob E je spôsob prípravy požadovanej zlúčeniny všeobecného vzorca TX-2 obsahujúci amidovu skupinu pomocou konverzie a karboxylovej esterovej skupiny zlúčeniny VTII.

P3O.

COOp2a

Krok E1

P3Q.

V horeuvedenej schéme, R^z, X, n, P^J, R^4p a R^op majú rovnaký význm ako je definováno vyššie, a P^za predstavuje C_x až C₄ alkyl skupinu ako ochrannú skupinu P² horeuvedenej karboxylovej skupiny.

(Krok El)

Tento krok je dosiahnutý reakciou požadovanej amino zlúčeniny predstavovanej všeobecným vzorcom HNR^R⁵⁵ so zlúčeninou všeobecného vzorca VIII za prítomnosti katalyzátora v rozpúšťadle.

Príklady použiteľného katalyzátora zahrnujú trí-Ci až C₄ aíylhííniky ako je trímetylhlínik, kde trimetylhíinik je i os uprednostňovaný.

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú aromatické rozpúšťadlá ako je benzén, toluén alebo mesitylén; halogénované uhlovodiky ako je metylénchlorid alebo dichlóretán, kde aromatické rozpúšťadlá (zvlášť benzén alebo toluén) sú uprednostňované.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu -20⁼C čo 150°C (prednostne od -10^cC do ÍOO^C) a reakčná doba je bežne v rozsahu 0,5 do 108 hodín (prednostne od 1 do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesí známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemiešatelnéno s vodcu do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesi alebo rozpúšťadla v reakčnej zmesi, jeho neutralizáciou, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštali2ácia, zrážaním alebo chromatografícky.

[Spôsob F]

Spôsob F je spôsob prípravy kyano zlúčeniny všeobecného vzorca IX-3 pomocou konverzie a karboxylovej esterovej skupiny zlúčeniny všeobecného vzorca VIII.

(VIII) (IX-3)

V horeuvečenej schéme, R^z, X, n, P^J a P^za majú rovnaký význam ako je definované vyššie.

(Krok Fl)

Tento krok je dosiahnutý použitím amôníovej solí namiesto ίΰ9 amino zlúčeniny v horeuvedenom kroku eí spôsobe E a reakcii pri vyšších teplotách.

Chlorid amónny je prednostne použitý ako amóníovä sol a reakčná teplota je bežne v rozsahu -20^OC do 150^OC (prednostne od -10^cC do 100’C).

[Spôsob G]

Spôsob G je spôsob prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca IX4 zavedením požadovaného substituentu R⁶ na hydroxylovú skupinu zlúčeniny všeobecného vzorca XIV.

P3O,

CH₂OH P³O

Krok G1

CH₂OR⁶p

X (Xiv)

R2

X(IX-t)

R2

Tento krok je dosiahnutý reakciou alkylačného činidla so zlúčeninou všeobecného vzorca XIV za prítomnosti bázy v rozpúšťadle alebo reakciou redukčného činidla a požadovanej karbonyi zlúčeniny so zlúčeninou všeobecného vzorca XTV za prítomnosti kyslého katalyzátora v rozpúšťadle.

(1) Alkylačný spôsob v základných podmienkach

Príklady použiteľných rozpúšťadiel zahrnujú amidy ako je Ν,Ν-dímetylformamíd; a étery ako je tetrahydrofurán alebo aietyléter, kde amidy (zvlášť N,N-dimetylformamid) sú uprednostňované.

Príklady použiteľných báz zahrnujú hydrídy alkalických kovov ako je hydrid sodný alebo hydrid draselný; anorganické bázy ako je hydroxid sodný alebo hydroxid draselný; a organické bázy ako je trietylamín alebo diizopropylamin, 'kde hydrídy alkalických kovov (zvlášť hydrid sodný) sú uprednostňované.

Príklady použiteľného alkylačného činidla zahrnujú aíkyľnalídy ako je metyljodíd alebo etyljodid; díalkylsulfáty ako je dimetylsulfät a dietylsulfát, kde aikyihaliay (zvlášť alkyljodid) sú uprednostňované.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu -50^ΰΟ do ÍOO^C ιιυ v rozsahu (prednostne od -10°C do 40“C) a reakčná doba je bežne 10 minút až 108 hodín (prednostne od 0,5 do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesí známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemiešatelného s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesi alebo rozpúšťadla v reakčnej zmesi, jeho neutralizáciou, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštaiizácia, zrážaním alebo chrómatograficky. (2) Alkylačný spôsob v kyslých podmienkach Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mat nepriaznivý účinok na reakciu a maio by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú halogénované uhlovodíky ako je metylénchloríd alebo dichlóretän; a étery ako je tetrahydrofuran alebo dietyléter, kde halogénované uhlovodíky (zvlášť metylénchloríd) sú uprednostňovanné.

Príklady kyslých katalyzátorov zahrnujú tríalkyisíiyitrífiaty ako je trímetylsíiyltriflát, tríetylsíiyitríflät alebo terc.butyidimetyisilyitriflát, kde trimetylsilyltriflät je uprednostňovaný.

Príklady požadovanej karbonylovej zlúčeniny zahrnujú ketóny ako je acetón, metyietyiketón a cyklohexylketón; aikyiaídenydy ako je acetaidehyd a propionaldenyd, kde ketóny sú uprednostňované.

Príklady redukčného činidla zahrnujú trialkylsliany ako je tríetyisíian a dífenyimetyisiian, kde tríaí'kylsíiany (zvlášť tríetyisíian) sú uprednostňované.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu -50^GC do lOO^C (prednostne od -10°C do 40^GC) a reakčná doba je bežne v rozsahu 10 minút až 108 hodín (prednostne od 0,5 do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesi známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina

III môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemiešateľného s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesi alebo rozpúšťadla v reakčnej zmesí, jeho neutralizáciou, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštaiizácia, zrážaním alebo chromatograficky.

[Spôsob H]

Spôsob Ή je spôsob prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca IX-5 pomocou konverzie hydroxyiovej skupiny zlúčeniny všeobecného vzorca XIV na požadovanú skupinu predstavovanú všeobecným vzorcom _Nr⁷pr®p.

COOH

R2 (IX-5) (Krok Hi)

Krok Hl je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca XV ϊ 12 zavedením odštiepiteľnej skupiny L³ na zlúčeninu všeobecného vzorca XIV a môže byť dosiahnutý podobným spôsobom ako krok B6 spôsobu B, horeuvedený.

(Krok Ή2)

Krok H2 je krok prípravy amínovej zlúčeniny všeobecného vzorca IX-5a zo zlúčeniny všeobecného vzorca XV a prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca IX-5b, ak je to nutné, zavedením substituentu.

(A) Príprava aminovej zlúčeniny všeobecného vzorca TX-5a

Tento krok môže byt dosiahnutý reakciou aminačného činidla so zlúčeninou všeobecného vzorca XV v rozpúšťadle. Tento krok môže 'byť tiež dosiahnutý prípravou azídovej zlúčeniny reakciou azídačnéno činidla so zlúčeninou všeobecného vzorca XV v rozpúšťadle, a následnou redukciou redukčným činidlom.

(i) Spôsob s použitím aminačného činidla

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mat nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú amidy ako je dimetylformamid; alkoholy ako je metanoi alebo etanol; a étery ako je tetrahydrofurán alebo dietyléter, prednostne amidy [zvlášť dimetylformamid') .

Príklady použiteľného aminačného činidla zahrnujú primárne alkylamíny, ktoré môžu byť substituované ako je metyiamin alebo etyiamin; aromatické aminy, které môžu byť substituované ako je anilín alebo aminotíazol; sekundárne alkylamíny, ktoré môžu byť substituované ako je metyietylamín alebo dimetyiamín; a soli týchto amínov (napríklad, hydrochlorid), kde primárne alebo sekundárne alkylamíny, ktoré môžu byť substituované a ich soli (zvlášť metyiamin hydrochlorid alebo dimetyiamín hydrochlorid) sú uprednostňované.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu 0~C do 150 C (prednostne od 10^eC do 100^JC) a reakčná doba je bežne v rozsahu 0,5 do 108 hodín (prednostne od 1 do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z i 13 reakčnej zmesi známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemiešatelného s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zm.esi alebo rozpúšťadla v reakčnej zmesí, jeho neutralizáciou, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. 'Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštaiizácia, zrážaním alebo chromatograficky.

(2j Spôsob s použitím azídačného činidla a redukčného činidla

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú amidy ako je dimetylformamid; alkoholy ako je metanoi alebo etanol; a étery ako je tetrahydrofuran alebo dietyléter, kde amidy (zvlášť dimetylformamid) sú uprednostňované.

Príklady azídačného činidla zahrnujú azídy alkalických kovov ako je azid sodný alebo azíd iitny, kde azidy alkalických kovov (zvlášť azid sodný) sú uprednostňované.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu 0°C do 150³C (prednostne od ΙΟ'Ό do 100^cC) a reakčná doba je bežne v rozsahu 0,5 do 108 hodín (prednostne od 1 do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesí známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byt získaná pridaním organického rozpúšťadla nemiešatelného s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesi alebo rozpúšťadla v reakčnej zmesi, jeho neutralizáciou, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštaiizácia, zrážaním alebo chromatograficky.

Takto získaný azid je konvertovaný na amín všeobecného vzorca IX-5a redukciou.

Príklady použitelného redukčného činidla zahrnujú hliníkové hydridy alkalických kovov ako je hydrid hlinito-lítny; fosfiny ako je trifenyífosfin; kovové katalyzátory používajúce í 14 katalytickú hyarogenáciu ako je paiádium-uhiík alebo platinový katalyzátor, kde katalytická hydrogenácia (zvlášť v prípade kde je použitý palädíum-uhiik a'ko katalyzátor) je uprednostňovaná.

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú étery ako je tetrahydrofurán alebo dietyiéter; alkoholy ako je metanol aiebo etanol, kde étery (zvlášť tetrahydrofurán) sú uprednostňované.

Príklady použiteľných rozpúšťadiel pre katalytickú hydrogenäcíu zahrnujú alkoholy ako je metanol alebo etanol, kde metanol je uprednostňovaný.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu -10°C do 15D°C (prednostne od O’C do 100’C) a reakčná doba je bežne v rozsahu 0,5 do 108 hodín (prednostne od i do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesí známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemiešateľnéno s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesi aiebo rozpúšťadla v reakčnej zmesí, jeho neutralizáciou, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštalizácia, zrážaním alebo chromatograficky.

(B) Príprava zlúčeniny IX-5b

Tento krok je krok, ktorý je vykonaný ak je to nutné na prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca IX-5b zavedením substituentu na amín zlúčeniny všeobecného vzorca ±X-5a.

Predkladaný krok je dosiahnutý reakciou požadovaného acyiačného činidla, suifonyiačného činidla, a fosforyiačného činidla aiebo esteru chlórmravčej kyseliny s amínom zlúčeniny všeobecného vzorca IX-5a za prítomnosti bázy v rozpúšťadle.

Príklady acyiačného činidla zahrnujú anhydridy kyselín ako je anhydrid octovej kyseliny aiebo anhydrid benzoovej kyseliny; chloridy kyselín ako je aceryichlorid aiebo benzoylcnlorid, kde

115 chloridy kyselín (zvlášť acetyicniorid) sú uprednostňované.

Príklady sulfonylačného činidla zahrnujú chloridy kyselín ako je metänsuifonylchloríd alebo p-toluénsulfonylchloríd; a anhydrídy kyselín ako je anhydrid metänsuitonovej kyseliny alebo anhydrid p-toluénsulfonovej kyseliny, kde chloridy kyselín (zvlášť metánsulfonylchlorid) sú uprednostňované.

Príklady fosforylačného činidla zahrnujú chloridy 'kyselín ako je dietyifosforyichiorid alebo dimetylfosforylchlorid, kde dietyifosforyichiorid je uprednostňovaný.

Fríklady esteru chlórmravčej kyseliny zahrnujú esterové zlúčeniny ako je metylchlórformiät, etylc'hlórformiät alebo benzylchlórformíät, kde estery chlórmravčej kyseliny (zvlášť metyichiórŕormíät) sú uprednostňované.

Príklady použiteľných báz zahrnujú organické bázy ako je trietylamín, diizopropyietylamin alebo pyridín; anorganické bázy ako je uhličitan sodný, uhličitan draselný alebo hydrogénuhličitan sodný, kde organické bázy (zvlášť trietylamín) sú uprednostňované.

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú étery ako je tetrahydrofuran alebo dietyléter; a halogénované uhiovodíky ako je metylénchloríd alebo dichióretän, kde étery (zvlášť tetrahydrofuran) sú uprednostňované.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu 0®C do 100’C (prednostne od 10^oC do 50’C) a reakčná doba je bežne v rozsahu 0,5 do 108 hodín (prednostne od í do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesí známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemiešateľného s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesi alebo rozpúšťadla v reakčnej zmesi, jeho neutralizáciou, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina

Ιό môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštalizácia, zrážaním alebo chromatograficky.

(Krok H3)

Krok Ή'3 je krok prípravy amínovej zlúčeniny všeobecného vzorca iX-5a so zlúčeninou všeobecného vzorca XIV na azidovu zlúčeninu a prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca IX-5b zavedením substituentu ak je to nutné.

(A) Príprava azídovej zlúčeniny

Predkladaný krok je vykonaný reakciou azidačnej zlúčeniny (zvlášť difenyifosforylazidu), dietylazodikarboxylátu a trifenylŕosíin so zlúčeninou všeobecného vzorca XIV v rozpúšťadle.

Nie je tu zvláštne obmedzenie na podstatu použitého rozpúšťadla, a nemalo by mať nepriaznivý účinok na reakciu a malo by rozpúšťať počiatočnú látku do určitého stupňa. Príklady rozpúšťadiel zahrnujú amidy ako je dimetylformamid a étery ako je tetrahydrofurán alebo dietyléter, kde étery (zvlášť tetrahydrofurán) sú uprednostňované.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu O¹⁵C do 50^JC (prednostne od 10’C do 30³C) a reakčná doba je bežne v rozsahu 0,5 do 108 hodín (prednostne od 1 do 24 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesi známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemiešatelného s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesi alebo rozpúšťadla v reakčnej zmesi, jeho neutralizáciou, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byt ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštalizácia, zrážaním alebo chromatografIcky.

(B) Príprava amínovej zlúčeniny

Toto je krok prípravy amínu všeobecného vzorca IX-5a pomocou redukcie azidcvej zlúčeniny a môže byť vykonaný podobným spôsobom ako redukcia opísaná v kroku H2 (A) (2) .

(C) Príprava zlúčeniny TX-5b

ΪΙ7

Tento krok, vykonaný ak je to nutné, je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca IX-5b zavedením substituentu na amín všeobecného vzorca IX-5a a môže byť vykonaný podobným spôsobom ako krok Ή2 (B) uvedený vyššie.

Zlúčeniny všeobecného vzorca IX-1 až IX-5 získané v spôsobe C až spôsobe H môžu byť konvertované na zlúčeninu všeobecného vzorca 111, 'ktorá je použitá ako počiatočná látka bočného reťazca na pozícií 2 zlúčeniny všeobecného vzorca I podía krokov po kroku B5 spôsobu B.

(Spôsob I]

Spôsob I je spôsob prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca IX-6, ktorá je zlúčeninou všeobecného vzorca IX, mezíproduktu syntetickej cesty spôsobu B, kde X je atóm kyslíka, pomocou iného postupu.

R\.OH

R2. .OH

Krok 1-1

ZHN'^COOH (XV la)

ZHN R p (XVI)

R₂ OP^JKrok l-2^ jT

ZHN^R¹p (XVII)

Krok I-3

Krok I-5

OH

R\ .OP³

R\ ΌΡ³

Krok I-4 (XVIII)

R\ ΌΡ³

N NH Rp ,A

S=C=N^ Xp (XIX)

Krok l-6^ p°O

R\ .OH

S

U

N^ NH' R‘p ¹ (XXI) (XX)

118

V horeuvedenej schéme, R^]p, R², P³ a n majú rovnaký význam ako je definované vyššie; Z predstavuje ochrannú skupinu amino skupiny, prednostne benzyloxykarbonyl skupinu; a P⁵ predstavuje ochrannú skupinu hydroxylovj skupiny, prednostne ochrannú skupinu založenú na acyle ako je acetyl, benzoyl alebo pivaloyi, najprednostnejšie benzoyl skupinu.

(Krok 1-1)

Krok 1-1 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca

XVI pomocou konverzie karboxylovj skupiny aminokyseliny XVIa kde amino skupina je chránená pomocou požadovanej R^.

Tento krok môže byť vykonaný podlá spôsobu vybraného z horeuvedených spôsobov C až H. Malo by sa vedieť, že v zlúčenine všeobecného vzorca XVIa, ktorá tvorí počiatočnú látku, zlúčenina, kde R je atóm vodíka, môže byť pripravená zo serínu a zlúčenina, kde R je metylová skupina, môže byť pripravená z treonínu. Zlúčeniny, kde R² je skupina iná ako vodík nebo metyl skupina, sa môžu tiež pripraviť podľa spôsobu známeho odborníkom v obbore.

(Krok 1-2)

Krok 1-2 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca

XVII zavedením ochrannej skupiny na hydroxyl skupiny zlúčeniny všeobecného vzorca XVI.

Tento krok môže byť vykonaný podobným spôsobom ako krok B3 spôsobu B. Uprednostňované príklady ochrannej skupiny založené na silyle, vhodné ako P³ zahrnujú terc.butyldimetylsilyl skupinu.

(Krok 1-3)

Krok 1-3 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca

XVIII pomocou odstránenia ochrannej skupiny z amino skupiny i 19 zlúčeniny všeobecného vzorca XVII.

Tento krok môže byť vykonaný podobným spôsobom ako spôsob kroku A2 (ľ) spôsobu A. Uprednostňované rozpúšťadlo je metanol.

(Krok 1-4)

Krok 1-4 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca XIX pomocou konverzie amino skupiny zlúčeniny všeobecného vzorca XVIII na ízotíokyanätovú skupinu.

Tento krok je dosiahnutý reakciou sírouhlíka a denydrosulfidačného činidla so zlúčeninou všeobecného vzorca XVIII za prítomnosti bázy v rozpúšťadle.

Uprednostňované príklady rozpúšťadiel zahrnujú haiogénované uhiovodíky (zvlášť metylénchiorid).

Uprednostňované príklady denydrosulfidačného činidla zahrnujú haiogénované estery mravčej kyseliny (zvlášť etylchlórformíát) alebo kvartérne činidlá obsahujíce dusík (zvlášť 2-chlór-I-metyIpyrídiníumjodíd nebo 2-chlór-l-etyibenzoxazoliumtetrafiuórborät).

Uprednostňované príklady bázy zahrnujú terclärne aminy ako je trietylamín, diizopropyletylamín alebo tributylamín (zvlášť trietylamín).

Reakčná teplota je bežne v rozsahu -20^sC do 100°C (prednostne od O’C -to- 60°C) a reakčná doba je bežne v rozsahu 0,5 do 48 hodín (prednostne od jednej do 12 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesí známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemíešatelného s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesi nebo rozpúšťadla v reakčnej zmesi, jeho neutralizáciou, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštalizácia, zrážaním alebo chromatograficky.

i 20 (Krok 1—5)

Krok 1-5 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca XX reakciou požadovaného cyklického aminu so zlúčeninou všeobecného vzorca XIX. Tento krok môže byť vykonaný podlá kroku BI spôsobu B.

(Krok 1-6)

Krok 1-6 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca XXI zavedením ochrannej skupiny založenej na acyle P° na hydroxyl skupiny zlúčeniny XX a následne odstránením ochrannej skupiny založenej na silyle P^J.

(1) Zavedenie ochrannej skupiny založenej na acyle P³

Tento krok môže byť vykonaný podlá kroku H2 (B) spôsobe B.

(2) Krok odstránenia ochrannej skupiny založenej na silyle P°

Tento krok môže byť vykonaný podlá kroku A2 spôsobe A.

(Krok 1-7)

Krok 1-7 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca XXII podstúpením zlúčeniny všeobecného vzorca XXI reakcii, kde dochádza k uzavieraniu kruhu. Tento krok sa dosiahol reakciou cyklizačného činidla (denydrosulfidačného činidla) so zlúčeninou všeobecného vzorca XXI za prítomnosti bázy v rozpúšťadle.

Príklady rozpúšťadiel zahrnujú amidy ako je dimetylformamid alebo dimetylacetamid; halogénované uhlovodiky ako je metylénchlorid; a nitrily ako je acetonitril; kde acetonitril je uprednostňovaný.

Uprednostňované príklady bázy zahrnujú tercíärne aminy ako je trietylamín, diizopropyietyiamín alebo tributyiamín (zvlášť trietylamín).

Uprednostňované príklady cyklizačného (dehydrosulfidačného) činidla zahrnujú ortuťnaté soli ako je oxid ortuťnatý a chlorid ortuťnatý; alebo kvartérne činidlá obsahujúce dusík (zvlášť 2-chiór-l-metyipyridíniumjodid alebo 2-chior-l-etylbenzoxazoliumtetrafluorborät).

Reakčná teplota je bežne v rozsahu -ŽO^C do 1QCUC (prednostne od 0^cC to 60 ~C) a reakčná doba je bežne v rozsahu

Ϊ2Ι

0,5 do 48 hodín (prednostne od í do 12 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesí známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemiešatelného s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesi alebo rozpúšťadla v reakčnej zmesi, jeho neutralizáciou, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekrštaiizácia, zrážaním nebo chrómatograficky.

(Krok 1-8)

Krok 1-8 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca XXIII pomocou dehydrogenácie zlúčeniny všeobecného vzorca XXII.

Tento krok je dosiahnutý reakciou dehydrogenačného činidla so zlúčeninou všeobecného vzorca XXII v rozpúšťadle.

Príklady rozpúšťadiel zahrnujú aromatické uhlovodíky ako je benzén nebo toluén; a halogénované uhlovodíky ako je metylénchlorid nebo dichlóretán.

Príklady dehydrogénačného činidla zahrnujú oxidačné činidlá ako je oxid manganíčítý.

Reakčná teplota je bežne v rozsahu O’C do 100’C (prednostne od O^C <to 60°C) a reakčná doba je bežne v rozsahu 0,5 do 48 hodín (prednostne od i do 12 hodín).

Po skončení reakcie je požadovaná zlúčenina získaná z reakčnej zmesí známymi spôsobmi. Napríklad požadovaná zlúčenina môže byť získaná pridaním organického rozpúšťadla nemiešatelného s vodou do zvyšku získaného destiláciou reakčnej zmesi alebo rozpúšťadla v reakčnej zmesí, odstránením nerozpustných časti filtráciou, premytím vodou a destiláciou rozpúšťadla. Takto získaná požadovaná zlúčenina môže byť ďalej čistená, ak je to nutné, pomocou konvenčných postupov ako je rekryštalizácia, zrážaním alebo chrómatograficky.

(Krok 1-9)

Krok 1-9 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca IX122

-6 pomocou odstránenia ochrannej skupiny založenej na acyle P³zlúčeniny všeobecného vzorca XXIII a následným zavedením ochrannej skupiny založenej na sílyle P³.

(1) Eliminácia ochrannej skupiny založenej na acyle P⁵

Tento krok môže byť vykonaný podlá spôsobu prípravy zlúčenín všeobecného vzorca VI zo zlúčeniny všeobecného vzorca XIII v kroku Bl (2) spôsobe 8.

(2) Zavedenie ochrannej skupiny založenej na silyle P³

Tento krok môže byť vykonaný podlá kroku B3 spôsobu B.

[Spôsob J]

Zlúčenina všeobecného vzorca I môže byť tiež pripravená iným postupom ako podlá spôsobu A, a to nasledujúcim spôsobom J. Spôsob J môže byť použitý na prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca 1-1 alebo 1-2 kde R¹ je predstavovaný všeobecným vzorcom COOR³ alebo všeobecným vzorcom CONR⁴R°.

(IH) (IIH)

123

Krok J3

(O

V horeuvedenej schéme, R¹, R¹?, R², P¹, P³, X, L¹ a n majú rovnaký význam ako je definovaný vyššie. Uprednostňovaný príklad P³ je terc.butyldimemylsilylová skupina.

(Krok Jl)

Krok Jl je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca IV-1 pomocou kondenzácie zlúčeniny všeobecného vzorca II-l, ktorá je chránená ochrannou skupinou založenou na.-silyle P³ a zlúčeniny všeobecného vzorca III-l kde R³p je karboxylová skupina chránená alylovou skupinou.

Tento krok môže byť vykonaný podobným spôsobom ako krok Al spôsobe A. Zlúčenina všeobecného vzorca II-l použitá ako počiatočná látka môže byť pripravená reakciou silylačného činidla so zlúčeninou všeobecného vzorca II a tento krok môže byť vykonaný podlá kroku B 3 spôsobe B. Zlúčenina všeobecného vzorca III-l môže byť pripravená podlá spôsobu B.

(Krok J2)

Krok J2 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca IV-2 pomocou odstránenia alylovej ochrannej skupiny zo zlúčeniny

Í24 všeobecného vzorca IV-I. Tento krok môže byť vykonaný podía kroku A2(2) spôsobu A.

(Krok J3)

Krok J'3 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca IV-3 modifikáciou karboxylovej skupiny zlúčeniny všeobecného vzorca IV-2. Tento krok môže byť vykonaný podía kroku B4 spôsobu B (zvlášť spôsob C a spôsob D).

(Krok J4)

Krok J4 je krok prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca T pomocou odstránenia ochrannej skupiny P^J a P¹ zo zlúčeniny všeobecného vzorca IV-3.

(1) Eliminácia ochrannej skupiny P¹

Tento krok môže byť vykonaný podía kroku Ά2 (3) spôsobu Ä.

(2) Eliminácia ochrannej skupiny P¹

Tento krok môže byť vykonaný podobným spôsobom ako krok A2 spôsobu A.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo ich farmakologicky prijatelné soli predkladaného vynálezu vykazuj! silnú a širokú antibakteriáinu účinnosť proti rôznym patogénnym baktériám zahrnujúce gram-pozitivne baktérie ako je Staphylococcus a Bacillus subtííís, gram-negativne baktérie ako je Escheríchía coli, Klebsiella pneumoniae, Shigella, Proteus vuigaris, Serratia, Enterobacter a Pseudomonas aerginosa _r a anaeróbne baktérie ako je Bacteroides fragílís, a, zvlášť majú silnú antíbakteríäiní účinnosť proti Streptococcus pneumoniae (zahrnujúce baktérie rezistentné voči penicilínu) a Haemophilus influenzae (zahrnujúce baktérie produkujúce β-laktamázu), ktoré spôsobujú infekcie respiračného traktu. Zlúčeniny všeobecného vzorca I predkladaného vynálezu majú vysokú stabilitu proti β-laktamázam vrátane metalo^-laktamázy. Zlúčeniny všeobecného vzorca I predkladaného vynálezu vykazujú dobrú ťarmakokinetiku ako je vysoká maximálna koncentrácia v séru a dlhá životnosť v séru, keď sú podané ako orálne tak inou cestou. Prečo se pri zlúčeninách všeobecného vzorca I

125 predkladaného vynálezu očakáva značný terapeutický účinok, aj keď sú podávané menej často, v menších dávkach, v porovnaní s existujúcimi liečivami. Zlúčeniny všeobecného vzorca I predkladaného vynálezu majú nízku toxicitu pre ľadviny. Preto sú zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo ich farmakologicky prijatelné soli alebo estery predkladaného vynálezu vhodné, napríklad, ako farmaceutiká a sú zvlášť vhodné ako antibakteriálne činidlá pri liečbe alebo prevencii (prednostne liečbe) bakteriálnych infekcií spôsobených rôznymi druhmi patogénnych baktérií, zvlášť baktérií spôsobujúcimi infekciu respiračného traktu.

Keď zlúčeniny všeobecného vzorca I, ich farmakologicky prijatelné estery alebo soli sú použité ako farmaceutiká, zvlášť antibakteriálne činidlá, môžu byť podané orálne vo forme tabliet, kapsúl, granúl, prášku alebo sirupu a to buď samostatne alebo v zmesi s vhodným farmakologicky prijateľným aditívom ako sú pomocné látky alebo riediace látky, alebo podané parenterálne vo forme injekcií.

Tieto prípravky môžu byť pripravené známym postupom pri použití aditív. Príklady aditív zahrnujú pomocné látky (napr., deriváty cukru ako je laktóza, sacharóza, glukóza, manitol a sorbitol; deriváty škrobu ako je kukuričný škrob, zemiakový škrob, α-škrob,' ' dextrín a karboxymetylškrob; celulózové deriváty ako je kryštalická celulóza, málo substituovaná hydroxypropylcelulóza, hydroxypropylmety1celulóza, karboxymetylcelulóza, vápenatá karboxymetylcelulóza a vnútorne zosieťovaná sodná karboxymetylcelulóza; arabskú gumu; dextrán; pululan; deriváty silikátu ako je ľahký kremičitý anhydrid, syntetický hlinitý silikát, horečnatý hlinitometasilikát; fosfátové deriváty ako je vápenatý fosfát; uhličitanové deriváty ako je uhličitan vápenatý; alebo sulfátové deriváty ako je vápenatý sulfát), spojivá (napr. horeuvedené pomocné látky; želatína; polyvinylpyrolidon; alebo Macrogol); dezintegrátory (napr.horeuvedené pomocné látky; alebo chemicky

126 modifikované deriváty škrobu alebo celulózy ako je sodná kroskarmelóza alebo sodný karboxymetylškrob; alebo zosieťovaný polyvinylpyrolidón); lubrikačné látky (napr. talok; stearová kyselina; kovové soli stearovej kyseliny ako je vápenatý stearát alebo horečnatý stearát; koloidná kremenka; „veegum; vosky ako je včelí vosk a tuk z vorvaňa; borová kyselina; glykol; karboxylové kyseliny ako je fumarová kyselina nebo adipová kyselina; sodné karboxyláty ako je benzoát sodný; sulfáty ako je sodný sulfát; leucín; laurylové sulfáty ako je sodný laurylsulfát alebo horečnatý lauryisulfát; kremičité kyseliny ako je kremičitý anhydrid alebo kremičitý hydrát; alebo škrobové deriváty uvedené vyššie ako pomocné látky), stabilizátory (napr. estery p-hydroxybenzoovej kyseliny ako je metylparabén alebo propylparabén; alkoholy ako je chlórbutanol, benzylalkohol alebo fenyletylalkohol; benzalkoniumchlorid; fenoly ako je fenol a kresol; timerosal; anhydrid kyseliny octovej; alebo sorbová kyselina), pomocné chuťové látky (napr. všeobecne používané sladidlá, okyslujúce činidlá alebo aromatické látky), suspenzačné činidlá (napr. Polysorbát 80 alebo sodná karboxymetylcelulóza), riediace látky a rozpúšťadlá pre prípravok (napr. voda, etanol nebo glycerín).

Dávka zlúčeniny všeobecného vzorca I bude v závislosti na kondícii a veku pacienta. Orálne sú podávané v množstve 10 mg (prednostne 50 mg) v jednej dávke ako spodný limit a 2000 mg (prednostne 1000 mg) v jednej dávke ako horný limit, intravenózne sú podávané v množstve 10 mg (prednostne 100 mg) v jednej dávke ako spodný limit a 3000 mg (prednostne 2000 mg) v jednej dávke ako horný limit. Je žiaduce, že zlúčenina je podaná dospelému človekovi v jednej dávke alebo v rozdelených dávkach (šiestich) za deň v závislosti na kondícii pacienta.

127

Príklady uskutočnenia vynálezu

Najlepší spôsob uskutočnenia vynálezu

Predkladaný vynález bude ďalej detailnejšie ilustrovaný nasledujúcimi príkladmi, porovnávacími príkladmi, príkladmi testu a príkladmi prípravku. Rozsah vynálezu nie je obmedzený týmito príkladmi. Pri spektroch magnetickej rezonancie v príkladoch a porovnávacích príkladoch bol použitý ako vnútorný štandard trimetylsilylpropionát-d₄ sodný v deuterovanej vode a tetrametylsilan bol použitý ako vnútorný štandard v iných rozpúšťadlách. Keď nebol použitý vnútorný štandard pri meraní v deuterovanej vode, meranie bolo vykonané na základe signálu HOD v deuterovanej vode, ktorý sa objavuje na 4,65 ppm.

Príklad 1 (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-Etoxykarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S) -2-[1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (468 mg, 1,71 mol) (získaného podľa popisu v referenčnom príklade 1) v dimetylformamide (15 ml) bol pridaný hydrazínacetát (171,0 mg, 1,86 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl128

-(ÍR,5S,6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (1,02 g, 1,72 mol) v acetonitrile (30 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesou v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (1,5 ml, 8,61 mmmol). Zmes bola ponechaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesou. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýtenými vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát) počas vzniku p-nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-[l-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[ (R)-l-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu ako bledožltá pevná látka (752 mg, výťažok 75%) .

^XK-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : ó(ppm) 8,23 (2H, d, J=8,6 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,6 Hz), 7,50 (IH, s), 5,50 (IH, d, J=13,7 Hz), 5,25 (IH, d, J=13,7 Hz), 4,55 (2H, dd, J=14,4, 8,0 Hz), 4,36 (2H, q, J=7,l Hz), 4,35 až 4,20 (3H, m), 4,20 až 4,05 (2K, m), 3,29 (IH, dd, J=6,7, 2,4 Hz), 3,20 (IH, dq, J=10,3, 8,3 Hz), 1,82 (IH, br, s), 1,42 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,40 (3H, t, J=7,l Hz) , 1,26 (3H, t, J=7,5 Hz).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 589 [M-rH] ⁺ (2) (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-Etoxykarbonyl-l,3-tiazoi-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-[l-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (744 mg, 1,26 mol) (získaný

129 podľa popisu v príklade 1(1)) v zmesou tetrahydrofuránu (46 ml) a destilovanej vody (23 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia (736 mg) v vodnom kúpeli (30°C) 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (106 mg), zmes etylacetátu a tetrahydrofuránu (1:1) a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená, premytá zmesou etylacetátu a tetrahydrofuránu (1:1) a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčištený chrómatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 3% acetonitrilu; destilovanej vody - 5% acetomtrilu;

destilovanej vody - 7% acetomtrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny, sodnej soli (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-etoxykarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny (376 mg, výťažok 63%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂0) : ô(ppm) 7,68 (1K, s), 4,50 (2H, t, J=12,6 Hz), 4,40 až 4,10 (5H, m obsahujúci q na 4,30 ppm, J=8,4 Hz), 4,10 až 3,95 (2H, m), 3,45 až 3,35 (1H, m), 3,30 až 3,25 (1H, m), 1,30 (3H, t, J=8,4 Hz), 1,25 (3H, d, J=6,7 Hz),

1,15 (3H, d, J=9,2 Hz) . ·

IR(KBr) : 1749, 1720, 1602, 1544, 1395, 1316 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 476 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané Cx₉H₂₃O₆N₃S₂Na : 476,0912, nájdené: 476,0938 [M+K]⁺

Príklad 2 (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-Karboxyl-1, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, disodná sol

130

COO'Na⁺ (1) p-Nitrobenzyl-í ÍR,5S,6S)-2-(1-(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetylj -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidíu (380 mg, 1,0 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 2) v dimetylformamide (15 ml) bol pridaný hydrazínacetát (115 mg, 1,25 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2-difenylfosforyloxy-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (695 mg, 1,17 mol) v acetonitríle (30 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,84 ml, 4,82 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesy. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-R-em-S-karboxylátu ako hnedá penová pevná látka (336 mg, výťažok 50%).

¹H-NMR (4 00 M Hz

CDCls): Ô(ppm) 8,23 (2H, d, J=8,6 Hz),

131

8,22 (2Η, d, J=8,6 Hz), 7,66 (2H, d, J-8,6 Hz), 7,59 (2H, d,

J=8,6 Hz), 7,57 (1H, s), 5,51 (1H, d, J=13,7 Hz), 5,43 (2H,

s), 5,25 (1H, d, J=13,7 Hz), 4,56 (2H, dd, J=15,7, 8,7 Hz),

4,31 až 4,20 (3H, m), 4,19-4,05 (3H, m), 3,29 (1H, dd, J=7,l, 2,9 Hz), 3,20 (1H, dq, J=9,2, 7,4 Hz), 1,38 (3H, d, J-6,5 Hz), 1,27 (3H, d, J=7,2 Hz) .

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 696 [M+H] ⁺ (2) (ÍR, 5S, 6S)-2-[1-(4-Karboxyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, disodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-1, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (330 mg, 0,474 mol) (získaný podlá opisu v príklade 2(1)) v zmesi tetrahydrofuranu (16 ml) a destilovanej vody (8 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia (325 mg) vo vodnom kúpeli (30°C) 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogenuhličitan sodný (45 mg), zmes etylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a destilovanej vody. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená, premytá zmesou etylacetátu 'ä tetrahydrofuranu (1:1) a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčištený chromatografický na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S, 6S)-2-[1-(4-karboxyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínl-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylové kyseliny, disodná sol (86 mg, výťažok 41%) ako biela pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, D₂O) : Ô(ppm) 7,10 (1H, s), 4,35 (2H, t, J=8,0 Hz), 4,20 až 4,10 (1H, m), 4,10 až 4,00 (2H, m), 3,90 až 3,80 (2H, m), 3,25 až 3,20 (1H, m), 3,15 až 3,00 (1H, m), 1,12 (3H, d, J=6,0 Hz), 1,00 (3H, d, J=9,2 Hz).

132

IR(KBr): 1745, 1594 , 1541, 1400, 1316, 1282 cm’¹.

Hmotnostné spektrum (FAB+): 470 [M+H]+

Príklad 3 (1 R,5S,6S)-2-[1- (4-Karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yll tio-6-((R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

conh₂ (1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,13 g, 4,39 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 3) v dimetylformamide (57 rol) bol pridaný hydrazínacetát (485 mg, 5,27 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S, 6S)-2-difenylfosforyloxy-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (2,61 g, 4,39 mol) v acetonitrile (130 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (3,1 ml, 17,6 mol) . Zmes bola miešaná 3 hodiny pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M vodným roztokom chloridu sodného, nasýteným vodným

133 roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagelovej kolóne za použitia metylénchioridu-3% metanolu, metylénchloridu-6% metanolu, metylénchloridu-9% metanolu a metylénchloridu ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu ako bledožltá pevná látka (2,61 g, výťažok 94%) .

	^XH-NMR (400	M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H,	d, J=8,8 Hz),	7,66
(2H,	d, J=8,8	Hz), 7,48 (1H, s), 6,99 (1H,	br, s), 5,55	(1H,
bs) ,	5,51 (1H,	d, J=13,9 Hz), 5,25 (1H, d,	J=13,9 Hz),	4,50
(2H,	dd, J=16,	0, 8,0 Hz), 4,31 až 4,20 (3H,	m) , 4,10 až	4,00
(2H,	m) , 3,30	(1H, dd, J=6,6, 2,2 Hz), 3,21	(1H, dq, J=	10,6,
8,0	Hz), 1,83	(1H, br, s), 1,38 (3H, d, J=6	,6 Hz) , 1,28	(3H,
d, 0	=7,3 Hz) .
	Hmotnostné	spektrum (FAB⁺) : 566 [M+H] ⁺

(2) (ÍR,5S,6S)-2- [1- (4-Karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (2,2 g, 3,93 mol) (získaný podía opisu v príklade 3(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (110 ml) a destilovanej vody (110 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (2,2 g) pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (330 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 2%

134 acetonitrilu; destilovanej vody - 4% acetonitrilu; destilovanej vody - 6% acetonitrilu; destilovanej vody - 8% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (lR,5S,6S)-2-[l-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ (1,12 g, výťažok 64%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR	(400	M Hz, D₂O, TSP):	5 (ppm)	7,54	(IH, s), 4,56	(2H,
t, J=8,6 Hz), 4	,40-4,30 (IH, m),	4,52	(IH,	kvintet, J=6,2	Hz),
4,21 (IH,	dd,	J=9,l, 2,5 Hz),	4,07	(2H,	m), 3,44 (IH,	dd,
J= 6,2, 2,5	Hz) ,	. 4,07 (2H, dt,	J=8,6,	4,2	Hz), 3,44 (IH,	dd,
J=6,2, 2,5	Hz)	, 3,26 (IH, dd,	J=9,l,	7,2	Hz), 1,30 (3H	, d,
J=6,2 Hz),	1,20	(3H, d, J=7,2 Hz	) ·

IR(KBr): 1749, 1671, 1598, 1546, 1394, 1287 cm⁴

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 447 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané Ci7H2o05N₄S₂Na : 447,0773, nájdené: 447,0734 (M+H] ⁺

Príklad 4 (ÍR,5S,6S)-2-(1-(4-Kyano-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-kyano-1,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-kyano-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (760 mg, 3,18 mol) (získaného podľa opisu v

135 referenčnom príklade 4) v dimetylformamide (38 ml) bol pridaný hydrazínacetát (351 mg, 3,81 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S,6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (1,89 g, 3,18 mol) v acetonitrile (95 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (2,21 ml, 12,7 mol). Zmes bola miešaná 4 hodiny pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M vodným roztokom chloridu sodného, nasýteným vodným sodného a vysušená filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetát (1 : 4) a etylacetátu ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-kyano-l,3-tiazol-2-yl) azetidin-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu ako bledožltá pevná látka (1,65 g, výťažok 96%) .

roztokom roztokom sodný, hydrogénuhličitanu chloridu sodného, nasýteným vodným cez bezvodý síran

¹H-NMR	(400 M Hz, CDC1₃) :	5 (ppm)	8,23 (2H, d,	J=8,8	Hz),
7,66 (2H,	d, J-8,8 Hz), 7,29 (	1H, s	), 5,51 (1H, d,	13, 9	Hz) ,
5,25 (1H,	d, J=13,9 Hz), 4,54	(2H,	dd, J=16,0, 8,0	Hz) ,	4,36
až 4,24 (	3H, m), 4,12 až 4,04	(2H,	m), 3,30 (1H,	dd, J=	=6, 6,

2,9 Hz), 3,20 (1H, dq, J=9,4, 7,3 Hz), 1,80 (1H, br, s), 1,38 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,27 (3H, d, J=7,3 Hz).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 542 [M+H] ⁺ (2) (ÍR, 5S,6S)-2-[1-(4-Kyano-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-l-hydroxyetvl]-l-metylkarbapén-2-em-3136

-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-[l-(4-kyano-1,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6-[(R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (600 mg, 1,11 mol) (získaný podľa opisu v príklade 4(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (30 ml) a destilovanej vody (30 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (600 mg) pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogenuhličitan sodný (93 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 3% acetonitrilu; destilovanej vody - 6% acetonitrilu;

destilovanej vody - 9% acetonitrilu; destilovanej vody - 12% acetonitrilu; destilovanej vody - 15% acetonitrilu;

destilovanej vody - 18% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2- [1-(4-kyano-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ (285 mg, výťažok 60%) ako biela pevná látka.

''H-NMR (400 M Hz, D₂0, TSP) : 8(ppm) 7,68 (1H, s), 4,57 (2H,

t,	J=8,2 Hz), 4,44 až 4,32 (1H, m), 4,25	(1H, kvintet,	J=6, 2
Hz	), 4,21 (1H, dd, J=9,0, 2,3 Hz), 4,07 (2H, dt, 8,2, 4,7	Hz) ,
3,	44 (1H, dd, J=6,2, 2,3 Hz), 3,25 (1H,	do, J=9,0, 7,2	Hz) ,
1,	31 (3H, d, J=6,2 Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2	Hz) .
	IR(KBr): 2231, 1750, 1599, 1549, 1470,	1397, 1307 cm*¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 429 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané Ci7Hi8O₄N₄S₂Na : 429, 0668, nájdené: 429, 0662 [M+H]⁺

Príklad 5 (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-Metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2137

-yl)azetidín-3-yl]tio-6- [ (R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-metylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-N-metylkarbamoyl-l, 3-tiazol-

-2-yl)azetidínu (570 mg,	2,10	mol)	(získaného	podľa	opisu v
referenčnom príklade 5)	v	dimetylformamide	(28	ml) bol
pridaný hydrazínacetát	(291	mg,	3,16 mol)	pri	teplote

miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-di-fenylfosforyloxy-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (1,25 g, 2,10 mol) v acetonitrile (25 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (1,83 ml, 10,5 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (2 : 3) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2- [1-(4-N-metylkarbamoyl-l, 3-tiazol-2-vl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1138

-metylkarbapén-2-em~3-karboxylátu ako bledožltá pevná látka (774 mg, výťažok 64%).

hí-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,8 Hz),

7,66 (2H, d, J-8,8 Hz), 7,43 (1H, s), 7,14 (1H, s), 5,51 (1K, d, J=13,8 Hz), 5,25 (1H, d, J=13,8 Hz), 4,48 (2H, dd, J=17,2, 8,9 Hz), 4,35-4,20 (3H, m), 4,10-4,00 (2H, m), 3,35-3,15 (2H, m), 2,96 (3H, d, J=5,l Hz), 1,70 (1H, br, s), 1,38 (3H, d, J=6,2 Hz), 1,27 (3H, d, J=7,3 Hz).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 57 4 [M+H] ⁺ (2) (IR,5S,6S)-2-[l-(4-N-Metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (768 mg, 1,34 mol) (získaný podía opisu v príklade 5(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (38 ml) a destilovanej vody (19 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia (757 mg) vo vodnom kúpeli (30°C) 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhiíčítan sodný (115 mg), zmes etylacetátu a tetrahydrofuránu (1:1) a destilovanej' vody. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola premytá zmesou etylacetátu a tetrahydrofuránu (1:1), oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 3% acetonitrilu; destilovanej vody - 5% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-metylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ (392 mg, výťažok 64%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O) : ô(ppm) 7,30 (1H, s), 4,40 (2H, t,

139

J=8,O Hz), 4,30 až 4,18 (1H, m), 4,18 až 4,00 (2H, m), 3,90 až 3,85 (2H, m), 3,30 (1H, dd, J=6,3, 3,8 Hz), 3,20 až 3,05 (1H, m), 1,18 (3H, d, J=6, 4 Hz), 1,06 (3H, d, J=7,2 Hz).

IR(KBr): 1749, 1650, 1599, 1552, 1397, 1316 cm'¹Hrnotnostné spektrum (FAB⁺) 461 [M+H] ⁺

Príklad 6 (ÍR, 5S, 6S)-2-[1-(4-N,N-Dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (563 mg, 1,49 mol) (získaného podľa' opisu v referenčnom príklade 6) v dimetylformamide (28 ml) bol pridaný hydrazínacetát (264 mg, 2,87 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (1,15 g, 1,94 mol) v acetonitrile (23 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (1,7 ml, 9,76 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie,

140 etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (2:3) ako eluennu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[ i-( 4-N, N-dimety 1 karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl) azetidíη-3-yl] tio-6- Ĺ 'R) -1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu ako bledožltá pevná látka (777 mg, výťažok 68%).

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): 8(ppm) 8,22 (2H, d, J=8,2 Hz),

7, 66	(2H,	d, J=8,2 Hz), 7,09	(IH, s) , 5,50 (IH	, d, u ±	3,5
Hz) ,	5,25	(IH, d, J=13, 5 Hz) ,	4,60 až 4,40 (2H,	m) , 4,35	o Z
4,20	(3H,	m), 4,20 až 4,00 (	2 H, m), 3,32 až 3,	25 (IH,	rrh ,
3,25	až 3	,12 (4H, m), 3,05 (	3H, br, s) , 1,57 (	IH, br,	s) ,
1,38	( 3H,	d, J=6,2 Hz), 1,25 (	3H, d, J=7,l Hz).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 588 [M+H]⁺ (2) (ÍR, 5S,6S)-2-F1-(4-N,N-Dimetyikarbamoyl-i,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6- [ (R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodné soľ p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetylj-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (772 mg, 1,31 mol) (získaný podľa opisu v príklade 6(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (33 ml) a destilovanej vody (19 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia (768 mg) vo vodnom kúpeli (30°C) 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (112 mg), zmes etylacetátu a tetrahydrofuránu (1:1) a destilovanej vody. Zmes bola

141 trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená, premytá zmesou etylacetátu a tetrahydrofuránu (1:1) a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chromatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (1R,5S,6S)-2- [1- ( 4-N, N-dimetylkarbamoyl-1, 3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-

-karboxylová kyselina, sodná sol biela pevná látka.	(	375	mg,	výťažok	60%) ako
^-NMR (400 M Hz, D₂O) : ô(ppm)	7	,00	(1H,	s), 4,56	až 4,36
(2H, m), 4,31 až 4,21 (1H, m), 4,	21	až	4,06	(2H, m),	4,01 až
3,91 (2H, m), 3,41 až 3,32 (1H,	m	), 3	,21	až 3,11	(1H, m),

3,00 (3H, s), 2,91 (3H, s), 1,21 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,11 (3H, d, J=7,1 Hz) .

IR(KBr): 1750, 1610, 1540, 1397, 1305 cm^-1Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 475 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum velkého rozlíšenia (FAB⁺): počítané Ci9H₂₄O₅N₄S₂Na : 475,1087, nájdené: 475,1085 [M+H]⁺

Príklad 7 (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-Etylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S, 6S)-2-[1-(4-N-etylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azitidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-N-etylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (450 mg, 1,58 mol) (získaného podlá opisu v

142 referenčnom príklade aime t v j. t o rnam o e (23 mi ooi pridaný hydrazínacetát (174 mg, 1,39 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)- 2-di-fenylfos fcry1 cxy-g- ) (R)-1-hydroxyetyl]-1-metyikarbapén-2-em-3-karboxylátu (939 mg, 1,58 mol) v acetonitrile (47 ml) pridaný cc kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (í,10 ml, 6,31 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti reakcie, etylacetát a

Po skontrolovaní ukončenia nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi.

Výsledná zmes bola treoaná deliacom lieviku etylacetárová vrstva bola delená, premyté 0,5 M kyselinou nasýteným chlorovodíkovou, hydrogénuhličitanu chloridu sodného, vooným roztoKom sodného a nasýteným vodným roztokom vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu - 10% metanolu a etylacetátu ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-etylkarbamoyl-1,3-tiazoi-2-yl)azetidín-3-yljtio-6-ľ(R)-1-’nydroxyetyl j -i-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu ako bledožltá pevná látka (753 mg, výťažok 81%).

Mí-NMR (400 M Hz, CDC1₃): Ô(ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz),

7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,43 (IH, s), 7,12 (IH, t, J=5,l Hz), 5,51 (IH, d, J=13,9 Hz), 5,25 (IH, d, J=13,9 Hz), 4,49 (2H, dd, J=16,l, 8,1 Hz), 4,32 až 4,20 (3H, m), 4,10-4,00 (2H, m),

3,44 (2H, dq, J=7,3, 5,0 Hz), 3,29 (IH, dd, J=7,3, 2,9 Hz),

3,21 (IH, dq, J=8,9, 7,3 Hz), 1,38 (3H, o, J=5,9 Hz), 1,23 (3H, d, J=7,3 Hz), i , 2 3 ( 3 H,t, J=7 , 3Hz) .

Hmotnostné spektrum (EA3*): 588 [M+H)⁺ (2) (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-Ety1karbamoyl-1,3-tiazol-2143

-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-etylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6- [(R) -1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (750 mg, 1,23 mol) (získaný podía popisu v príklade 7(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (38 ml) a destilovanej vody (38 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (750 mg) pri teplote miestnosti 1,7 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (103 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 3% acetonitrilu; destilovanej vody - 6% acetonitrilu; destilovanej vody - 9% acetonitrilu;

destilovanej vody - 12% acetonitrilu; destilovanej vody - 15% acetonitrilu; destilovanej vody - 18% acetonitrilu;

destilovanej vody - 21% acetonitrilu; a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-etylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (384 mg, výťažok 66%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O, TSP) : ô(ppm) 7,45 (1H, s), 4,60 až

4,48 (2H, m), 4,40 až 4,29 (1H, m), 4,25 (1H, kvintet, J=6,2

Hz), 4,20 (1H, dd, J=9,l, 2,3 Hz), 4,12 až 4,00 (2H, m), 3,43 (1H, dd, J=6,2, 2,3 Hz), 3,37 (3H, q, J=7,2 Hz), 3,32 až 3,18 (1H, m), 1,30 (3H, d, J=6,2 Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2 Hz), 1,19 (3H, t, J=7,2 Hz).

IR(KBr): 1750, 1659, 1604, 1548, 1394, 1315 cm¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 475 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané C₁₉H₂z,O₅N₄S₂Na : 475,1086, nájdené: 475,1070 [M+H] ⁺

144

Príklad 8 (ÍR,5S,6S)-2-íl-(4-N-Izopropylkarbamoyi-i, 3-tiazol-2-

(1) p-Nitrobenzyl-íiR,5S,6S)-2-ri-(4-N-izopropy1karbamoyi-1,3-tiazoi-2-yl)azetidín-3-ylj tio-6 - [ (R)-1-hydroxyetylJ-1 -metylkarbapén-2-em-3-karbexyiát

Do roztoku 3-acetyitio-i-(4-N-izopropylkarbamoyi-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (460 mg, 1,65 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 8) v dimetyiformamide (23 ml) bol pridaný hydrazínacetát (182 mg, 1,98 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná i hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrcbenzyi-(ÍR, 5S, 6S)-2-aifenyifosforyloxy-6-[(R)-1-hydroxyetylj-1-metylkarbapén-2-em-3-karbcxylátu (981 mg, 1,65 mol) v acetonitrile (49 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (1,15 mi, 6,60 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrované počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 2); etylacetát - 5% metanolu a

145 etylacetátu ako eluenta počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S) -2-[1-(4-N-izopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu ako bledožltá pevná látka (790 mg, výťažok 80%).

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : ô(ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz),

7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,42 (1H, s), 6,95 (1H, d, J=8,l Hz), 5,51 (1H, d, J-13,6 Hz), 5,25 (1H, d, J=13,6 Hz), 4,49 (2H, dd, J=14,6, 8,1 Hz), 4,32 až 3,40 (5H, m), 3,30 (1H, dd, J=7,3, 2,9 Hz), 3,21 (1H, dq, J=8,8, 7,3 Hz), 1,60 (1H, br, s), 1,38 (1H, d, J=6,6 Hz), 1,30 až 1,20 (9H, m).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 602 [M+H] (2) (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-izopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-izopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (790 mg, 1,31 mol) (získaný podľa opisu v príklade 8(1)) v zmesi tetrahydrofuranu (40 ml) a destilovanej vody (40 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (790 mg) pri teplote miestnosti 1,7 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hyčrogénuhličitan sodný (110 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v čeliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 4% acetonitrilu; destilovanej vody - 8% acetonitrilu; destilovanej vody - 12% acetonitrilu;

destilovanej vody - 16% acetonitrilu; destilovanej vody - 20% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizoaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (1R,5S,6S)-2-(1-( 4-N-izopropylkarbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3146

-karboxylová kyselina, sodná soľ (389 mg, výťažok 61%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O, TSP): ô(ppm) 7,45 (1H, s), 4,55 (2H,

t,	u = 8, 4	Hz), 4,40 až 4,30	(1H, m)	, 4,25 (1H,	kvintet, J=6,3
Hz)	, 4,19	(1H, dd, J=9,0, 2,	4 Hz),	4,14 až 4,03	(3H, m), 3,43
í 1H	, dd,	J=6,3, 2,4 Hz), 3,	25 (1H,	dq, J=9,0,	7,2 Hz), 1,30
(3H	, d,	J=6,3 Hz), 1,23	(6H,	d, J=6,7	Hz), l,20(3H,
d, J:	=7,2Hz	) ·
	IR(KBr): 1751, 1657, 1548	, 1492,	1469, 1393,	1303, 1263 cm¹

Hmotnostné spektrum (FAB+): 489 [M+H] +

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB+): počítané

C2oH2sOsN4S₂Na : 489, 1242, nájdené: 489,1234 [M+H]+

Príklad 9 (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-Cyklopentylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

(1) p-Nit robenzyl- (ÍR, 5 S, 6 S ) - 2- (1- ( 4 -N-cyklopentyl karbamoyl-1, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1 -hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-N-cyklopentylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (550 mg, 1,67 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 9) v dimetylformamide (28 ml) bol pridaný hydrazínacetát (187 mg, 2,03 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S,6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metyikarbapén-2-em-3-karboxylátu (993 mg, 1,67 mol) v

147 acetonitrile (50 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (1,16 ml, 6,68 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená preš bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná za zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas vzniku p-nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2- [1- (4-N-cyklopentylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínl-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu ako bledožltá pevná látka (346 mg, výťažok 33%).

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : ó(ppm) 8,24 (2H, d, J=8,0 Hz),

7, 66	(2H,	d, J=8,0 Hz), 7,42 (	1H, s), 7,05 (1H,	bd, J=8,0 Hz),
5,51	(1H,	d, J=13,6 Hz), 5,26	(1H, d, J=13,6 Hz)	, 4,49 (2H, dd,
J=15,	6, 8	,1 Hz), 4,38 až 4,24	(3H, m), 4,10-4,00 (2H, m), 3,30
(1H,	dd,	J=6,2, 2,1 Hz), 3,22	(1H, dq, J=9,4,	8,3 Hz), 2,12-
2,00	(2H,	m) , 1,81 (1H, br,	s) , 1,78 až 1,44	(6H-, m), 1,38
(3H,	d, J=	=5,8 Hz), 1,28(3H, d,	J=7,3Hz).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 628 [M+H]⁺ (2) (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-cyklopentylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbäpén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2- [1-(4-N-cyklopentylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (340 mg, 0,542 mol) (získaný podía opisu v príklade 9(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (17 ml) a destilovanej vody (17 ml) bol katalytický hydrogénovaný za

148 prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (340 mg) pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (46 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 4% acetonitrilu; destilovanej vody - 8% acetonitrilu; destilovanej vody - 12% acetonitrilu;

destilovanej vody - 16% acetonitrilu; destilovanej vody - 20% acetonitrilu; destilovanej vody - 24% acetonitrilu;

destilovanej vody - 28% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (1R,5S, 6S)-2-[1-(4-N-cyklopentylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-ylJ tio-6-[ (R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (159 mg, výťažok 57%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O, TSP): Ô(ppm) 7,45 (1H, s), 4,55 (1H, dt, J=8,l, 1,3 Hz), 4,40 až 4,30 (1H, m), 4,30 až 4,16 (3H, m obsahujúci q na 4,25, J=6,3 Hz a dd na 4,19, J=9,l, 2,6 Hz), 4,12 až 4,00 (2H, m), 3,43 (1H, dd, J=6,3, 2,6 Hz), 3,24 (1H, dq, J=9,l, 7,3 Hz), 2,06 až 1,94 (2H, m), 1,80 až 1,50 (6H, m), 1,30 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,19 (3H, d, J=7,3 Hz).

IR(KBr): 1751, 1658, 1605, 1547, 1393, 1315 cm^-1

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 515 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané

C₂₂H₂₈O₅N₄S₂Na : 515,1398 nájdené 515,1398 [M+H] ⁺

Príklad 10 (ÍR,5S, 6S)—2—[1—(4-N-Cyklohexylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

COO'Na

149 hydrogénluhličitanu sodného chloridu sodného, vysušená (1) p-Nitrobenzyl-(ÍR, 5S,6S)-2- [1-(4-N-cyklohexylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-N-cyklohexylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (121 mg, 1,09 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 10) v dimetylformamide (19 ml) bol pridaný hydrazínacetát (121 mg, 1,31 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná i hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)—l— -hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (648 mg, 1,09 mol) v acetonitrile (32 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,759 ml, 4,36 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom a nasýteným vodným roztokom cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 4); etylacetát - 5% metanolu a etylacetátu ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S, 6S)-2-[1-(4-N-cyklohexylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu ako bledožltá pevná látka (598 mg, výťažok 86%) .

^XNMR (400 M Hz, CDC1₃) : ô(ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,42 (1H, s), 7,00 (1H, d, J=8, 8 Hz), 5,51 (1H, d, J=13,5 Hz), 5,25 (1H, d, J=13,5 Hz), 4,49 (2H, dd, J=15,4, 8,8 Hz), 4,32 až 4,20 (3H, m), 4,11 až 4,00 (2H, m), 3,96 až 3,80 (1H, m), 3,29 (1H, dd, J=6,6, 2,2 Hz), 3,21 (1H,

150 dq, J=8,8, 7,3 Hz), 2,01 až 1,18 (16H, m obsahujúci 3H, d na

1,38, J=5,9Hz a 3H, d na 1,28, J=7,3 Hz).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 642 [M+H] ⁺ (2) (ÍR, 5S,6S)-2-[1-(4-N-Cyklohexylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metyikarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-cyklohexylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát {590 mg, 0,919 mol) (získaný podľa opisu v príklade 10(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (30 ml) a destilovanej vody (30 ml) bol katalytickz hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (590 mg) pri teplote miestnosti 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (77 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaný v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 4% acetonitrilu; destilovanej vody - 8% acetonitrilu; destilovanej vody

12% acetonitrilu;

destilovanej vody - 16% acetonitrilu; destilovanej vody - 20%

24^! acetonitrilu;

acetonitrilu; destilovanej vody destilovanej vody - 28% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-cyklohexylkarbamoyl-i,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ (318 mg, výťažok 66%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 MHz, D₂O, TSP) : ó(ppm) 7,45 (1H, s), 4,55 (2H, dt, J=8,5, 1,9 Hz), 4,40 až 4,30 (1H, m), 4,25 (1H, kvintet,

J=6,3 Hz), 4,19 (1H,	dd, J=9,0, 2,4 Hz), 4,10 až 4,00 (2H,	m),
3,80	až 3,70 (1H, m)	, 3,43 (1H, dd, J=6,3, 2,4 Hz), 3,24	(1H,
dq,	J=9,0, 7,1 Hz),	1,96 až 1,84 (2H, m), 1,83 až 1,70	(2H,

151

m), 1,69 až 1,58 (IH, m), 1,46 až 1,10 (11H, m obsahujúci 3H, d, na 1,30, J=6,3 Hz a 3H, d, na 1,19, J=7,l Hz).

IR(KBr): 1751, 1660, 1605, 1545, 1492, 1393, 1310, 1296 cm'¹Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 529 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FA3⁺) : počítané C23H3o05N₄S₂Na : 529, 1555, nájdené: 529, 1575 [M+H]⁺

Príklad 11 (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-Morfolínokarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinokarbonyl-1, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-morfolínokarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (410 mg, 1,50 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 11) v dimetylformamide (20 ml) bol pridaný hydrazínacetát (138 mg, 1,50 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2-difenylfosforyloxy-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (743 mg, 1,25 mol) v acetonitrile (37 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,873 ml, 5,01 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný

152 do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M vodným roztokom vodným roztokom síran horečnatý, Zvyšok bol kolóne pri nasýteným a nasýteným cez bezvodý kyselinou chlorovodíkovou, hydrogénuhličitanu sodného chloridu sodného, vysušená filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku vyčistený chromatograficky na silikagélovej použití etylacetát - 10% metanolu a etylacetátu ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl - (ÍR, 5S, 6S) - 2- [1- ( 4-morfolínokarbonyl-1, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[ (R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu ako bledožltá pevná látka (485 mg, výťažok 62%).

		¹H-NMR	(400 M	Hz, CDClj): Ô (ppm) 8,23	(2H,	d, J=8,8	Hz) ,
7,	66	(2H,	d, J=8,8	Hz), 7,19 (1H, s), 5,51	(1H,	d, J=13,9	Hz) ,
5,	25	(1H,	d, J=13,	9 Hz) , 4,50 (2H, ddd, J=	=13, 9	, 8,1, 2,2	Hz) ,
4,	35	až 4,	20 (3H,	m), 4,10 až 4,00 (2H, m)	, 3,	95 až 3,60	(8H,
m)	r	3,29	(1H, dd,	J=6,6, 2,2 Hz), 3,20	(1H,	dq, J=8,8,	7,3
Hz	)'	1,38	(3H, d, >	J=6,6 Hz), 1,27 (3H, d, J=	=7,3	Hz) .

Hrnotnostné spektrum (FAB^1-): 630 [M+H] ⁺ (2) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-Morfolinokarbonyl-l,3-tiazol-2yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[i-(4-morfolinokarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (480 mg, 0,762 mol) (získaný podlá opisu v príklade 11(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (24 ml) a destilovanej vody (24 mi) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (480 mg) pri teplote miestnosti 1,3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (64 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol

153 vyčistený chromatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 3% acetonitrilu; destilovanej vody - 6% acetonitrilu; destilovanej vody - 9% acetonitrilu;

destilovanej vody - 12% acetonitrilu; destilovanej vody - 15% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (236 mg, výťažok 60%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O, TSP) : δ	(ppm)	7,15	(IH, s), 4,56
(2H, dt, J=8,4,	0,9 Hz), 4,42 až	4,32	(IH,	m) , 4,25	(IH,
kvintet, J=6,3 Hz)	, 4,21 (IH, dd, J=9	,0, 2,	3 Hz)	, 4,05 (2H	, m),
3,90 až 3,60 (8H,	m), 3,44 (IH, dd,	J=6,3,	2,3	Hz), 3,25	(IH,
dq, J=9,0, 7,3	Hz), 1,30 (3H,	d,	J=6,	3 Hz) ,	1,20

(3H,d,J=7,3Hz).

IR(KBr): 1799, 1608, 1536, 1392, 1311, 1236, 1113 cm^-1

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 517 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum velkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané C₂iH26O6N4S₂Na : 517,1192, nájdené: 517,1186 (M+H]⁺

Príklad 12 (ÍR, 5S, 6S)-2-[1-(4-Etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidín-4-yl]tio-6-[(R)-l-hydroxyetvl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-etoxykarbonyl-3-tiazol-2-yl) piper idi n-4-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

154

Do roztoku 4-acetyltio-l-(4-ethoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidínu (400 mg, 1,27 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 13) v dimetylformamide (12 ml) bol pridaný hydrazínacetát (152 mg, 1,65 mol) pri teplote miestnoszi pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 2,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-niorobenzyi-(ÍR,5S,6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-i-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (755 mg, 1,27 mol) v acetonitrile (21 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (1,11 ml, 6,37 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 2) a etylacetátu ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-etoxykarbonyi-i,3-tiazol-2-yl)piperidín-4-y1]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu ako bledožltá pevná látka (296 mg, výťažok 38%) .

^H-NMR	(400 M Hz, CDC1₃)	: δ (ppm)	8,27	(2H, d, J=8,7	Hz) ,
7,71	(2H,	d, J=8,7 Hz), 7,51	(1H, s),	5,56	(1H, d, J=13,7	Hz) ,
5,28	(1H,	d, J=13,7 Hz) , 4,40 (2H, q	, J=7,	1 Hz), 4,39 až	4,30
(2H,	m) ,	4,10 až 4,00 (2H,	m) , 3,60	až 3,	20 (5H, m), 2,	20 až
2,00	(2H,	m) , 1,90 až 1,70	(3H, m),	1,43	(3H, d, J=6, 5	Hz) ,
1,41	(3H,	t, J=7,1 Hz), 1,36	(7,2 Hz)

(2) (lR,5S,6S)-2-[l-{4-Etoxykarbonyi-1,3-tiazol-2-yl) piperidíη-4-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén155

-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidín-4-y1]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (291 mg, 0,578 mol) (získaný podía opisu v príklade 12(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (14 ml) a destilovanej vody (7 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia (291 mg) vo vodnom kúpeli (30°C) 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (42 mg), zmes etylacetátu a tetrahydrofuránu (1:1) a destilovanej vody. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená, premytá zmesou etylacetátu a tetrahydrofuránu (1:1) a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 5% acetonitrilu; destilovanej vody - 7% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidín-4-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (69 mg, výťažok 29%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O, TSP) : δ (ppm) 7,69 (1H, s), 4,35 (2Η, q, 1=7,1 Hz), 4,30 až 4,20 (2H, m obsahujúci ad na 4,23, J=9,2, 2,5 Hz), 4,00 až 3,85 {2Η, m), 3,55 až 3,20 (5H,m) ,

2,20 až 2,05 (2H, m), 1,75 až 1,60 (2H, m), 1,36 (3H, t, J=7,l Hz), 1,31 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,23 (3H, d, J=7,2 Hz).

IR(KBr): 1750, 1729, 1603, 1540, 1448, 1385, 1337, 1265,

1223, 1210 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 504 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané C₂iH₂₇O6N₃S₂Na : 504,1239, nájdené: 504,1246 [M+H] ⁺

156

Príklad 13 (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-Karboxyl-1,3-tiazo1-2-y1)piperidín-4-yl] tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, disodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-[l-(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-3-tiazol-2-yl) piperidín-4-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyi] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 4-acetyltio-l-(4-p-nitrobenzylkarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidínu (150 mg, 0,353 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 14) v dimetylf ormamide (7,5 ml) bol pridaný hydrazínacetát (46 mg, 0,49 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S,6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (200 mg, 0,353 mol) v acetonitrile (3,0 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférpu dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,09 ml, 0,517 mmmol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne počas

157 vzniku p-nitrobenzyl- (1R_Z 5S, 6S) -2- [1- ( 4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-1, 3-tiazol-2-yl)piperidín-4-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu ako bledožltá pevná látka (220 mg, výťažok 89%).

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,6 Hz), 8,22 (2H, d, J=8,6 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,6 Hz), 7,59 (2H, d, J=8,6 Hz), 7,53 (1H, s), 5,51 (1H, d, J=13,8 Hz), 5,43 (2H,

s), 5,22 (1H, d, J=13,8 Hz), 4,35 až 4,20 (2H, m), 4,05 až 3,90 (2H, m), 3,50 až 3,10 (6H, m), 2,20 až 1,95 (2H, m), 1,90 až 1,50 (3H, m), 1,38 (3H,d, J=6,2 Hz), 1,31 (3H, d, J=7,2 Hz).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 724 [M+H] ⁺ (2) (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-Karboxy1-1,3-tiazol-2-yl) piperidín-4-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, disodná soľ p-Nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-[1-(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl·)piperidín-4-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (570 mg, 0,788 mol) (získaný podľa opisu v príklade 13(1)) v zmesi tetrahydrofuranu (38 ml) a destilovanej vody (19 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia (572 mg) vo vodnom kúpeli (30°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (132 mg), zmes etylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a destilovanej vody. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená, premytá zmesou etylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 3% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karboxyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidín-4-y1]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, disodná soľ (285 mg, výťažok 76%) ako biela pevná látka.

158 ^’H-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 7,22 (1H, s), 4,30 až 4,10 (2H, m), 4,00 až 3,78 (2H, m), 3,60 až 3,05 (5H, m), 2,15 až 2,00 (2H, m), 1,80 až 1,55 (2H, m), 1,26 (3H, d, J=6,4 Hz),

1,18(3H, d, J=7,2Hz).

IR(KBr): 1747, 1597, 1532, 1397, 1289 cm'¹

Príklad 14 (ÍR, 5S, 6S) -2- [1-(4-Karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidín— 4 —ylΊtio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-1,3- tiazol-2-yl) piperidí n-4-yl ] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 4-acetyltio-l-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-

-yl)piperidínu (400	mg,	1,40	mol)	(získaného	podía opisu v
referenčnom príklade	15)	v dimetylformamide (20	ml) bol pridaný
hydrazínacetát (142	mg,	1,54	mol)	pri teplote	miestnosti pod
atmosférou dusíka	a	zmes	bola	miešaná	2 hodiny. Po

skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S, 6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (1,25 g, 2,10 mol) v acetonitrile (37 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,61 ml, 3,50 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný

159 do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným hydrogenuhličitanu sodného a nasýteným chloridu sodného, vysušená vodným roztokom vodným roztokom síran horečnatý, cez bezvodý filtrovaná a koncentrovaná počas sníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne pri použitia etylacetátu a etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-moyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidín-4-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu ako bledožltá pevná látka (348 mg, výťažok 42%).

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,6 Hz),

7,66 (2H, d, J=8,6 Hz), 7,44 (IH, s), 6,99 (1H, br,s),5,56 (1H, br, s), 5,51 (IH, d, J=13,8 Hz), 5,24 (IH, d, J=13,8 Hz), 4,35 až 4,20 (2H, m obsahujúci dd na 4,28, J=9,7, 2,9 Hz), 4,04 až 3,85 (3H, m), 3,50 až 3,10 (6H, m), 2,20 až 2,00 (2H, m), 1,95 až 1,70 (3H, m), 1,39 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,31 (3H, d, J=7,3 Hz) .

Hmotnostné spektrum (FAB+): 587 [M+H]⁺ (2) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-Karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidín-4-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxy-etyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidín-4-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (493 mg, 0,839 mol) (získaný podlá opisu v príklade 14(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (30 ml) a destilovanej vody (15 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia (0,50 g) vo vodnom kúpeli (30°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (71 mg), zmes etylacetátu a tetrahydrofuránu (1:1) a destilovanej vody. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená,

160 premytá zmesou etylacetátu a tetrahydrofuránu (1:1) a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 3% acetonitrilu; destilovanej vody - 5% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidin-4-y1]tio-6-[ (R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (127 mg, výťažok 32%) ako biela pevná látka.

	’-H-NMR (4 00 M	Hz, D₂O) : δ (ppm) 7,70	(IH,	s), 4,50	až 4,35
(2H,	m obsahujúci	dd na 4,18, J=9,2, 2,	8 Hz)	i, 4,00	až 3,80
(2H,	m) , 3,50 až	3,10 (5H, m) , 2,15 až	1,95	(2H, m) ,	1,75 až
1,55	(2H, m), 1,26	(3H, d, J=6,5 Hz), 1,19	(3H,	d, J=9,0	Hz) .
	IR (KBr): 1749,	1667, 1594, 1547, 1386 <	cm^-1

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 475 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané Ci9H₂4O5N₄S2Na : 475, 1086, Nájdené: 475,1070 [M+H]⁺

Príklad 15 (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-Metylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl) piperidín-4-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) piperidín-4-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 4-acetyltio-l-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidínu (1,21 g, 4,04 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 16) v dimetylformamide (36 ml) bol pridaný hydrazínacetát (408 mg, 4,43 mol) pri teplote miestnosti pod

161 atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S, 6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-ΙΟ,12 g, 5,25 mol) ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, diizopropyletylamínu (1,76 ml, 10,1 mol) vodným roztokom síran horečnatý,

-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu acetonitrile (72 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v nasledovaný pridaním Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným chloridu sodného, vysušená cez bezvodý filtrovaná a koncentrovaná počas sníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát: metanolu (20 : 1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidín-4-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu ako bledožltá pevná látka (1,336 g, výťažok 55%) .

'•H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,64

(2H,	d, J=8,0 Hz)	, 7,40 (1H, s	), 7,	19 (1H, br, s),	5,50 (1H, d,
J=12,	8 Hz), 5,22	(1H, d, J=12,	8 Hz)	, 4,40 až 4,20	(2H, m), 4,00
až 3,	80 (2H, m),	3,50 až 3,10	(5H,	m), 2,95 (3H,	d, J=6,4 Hz),
2,15	až 1,90 (3H,	m) , 1,90 až	1,70	(2H, m), 1,39	(3H, d, J=6,4
Hz) ,	1,20 (3H, d,	J=9,6 Hz).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 602 [M+H] ⁺ (2) (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-Metylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl) piperidín-4-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(ÍR, 5S,6S)-2-[1-(4-N-metylkarbamoyl-l,3162

-tiazol-2-yl)piperidín-4-yl] tio-6-[ (R)-i-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (857 mg, 1,424 mol) (získaný podľa opisu v príklade 15(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (40 ml) a destilovanej vody (20 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia (853 mg) vo vodnom kúpeli (30°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hyarogénuhličitan sodný (120 mg), zmes etylacetátu a tetrahydrofuránu (1:1) a destilovanej vody. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená, premytá zmesou etylacetátu a tetrahydrofuránu (1:1) a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 3% acetonitrilu; destilovanej vody 5% acetonitrilu; destilovanej vody - 7% acetonitrilu; destilovanej vody - 9% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny ' (ÍR, 5S,6S)-2-[1-(4-N-metylkarbamoyl-1,3-tiazoi-2-yl) píperidín-4-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-

-3-karboxylová kyselina, sodná soľ (317	mg,	výťažok 46%)	ako
biela pevná látka.
¹H-NMR (400 M Hz, D₂0) : δ (ppm) 7,34	(IH,	s) , 4,25 až	4,10
(2H, m obsahujúci dd na 4,16, J=9,2, 2,2	Hz) ,	3,95 až 3,80	(2H,
m), 3,50 až 3,10 (5H, m), 2,84 (3H, s),	2, 15	až 1,95 (2H,	m) ,

1,75 až 1,50 (2H, m), 1,24 (3H, č, J=6,3 Hz), 1,17 (3H, d, J=7,3 Hz) .

IR(KBr): 1750, 1654, 1602, 1553, 1385, 1266 cm’¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 489 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané CzoHzsOs^SzNa : 489, 1242, nájdené: 489,1255 [M+H] ⁺

Príklad 16 (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-Dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl) piper idín-4-yl ]tio-6-[ (R) -1-hydroxyetyl ] -l-metylkarbapér.-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

163

(1) p-Nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidín-4-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 4-acetyltio-l-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidínu (620 mg, 1,98 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 17) v dimetylformamide (35 ml) bol pridaný hydrazínacetát (201 mg, 2,18 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S, 6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (2,35 g, 3,96 mol) v acetonitrile (65 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (1,40 ml, 8,04 mol) . Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas sníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu a etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-dimetyl-karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidín-4-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu ako bledožltá pevná látka (495 mg, výťažok 41%).

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,09 (IH, s), 5,51 (IH, d, J=13,8 Hz), 5,23

164 (1Η, d, J=13,8 Hz), 4,35 až 4,20 (2H, m), 4,00 až 3,85 (2H, m), 3,50 až 3,00 (12H, m obsahujúci 3H x2, každý br, s na 3,22 a 3,07), 2,20 až 1,95 (2H, m), 1,93 až 1,70 (3H, m) , 1,38 (3H, d,

J=6,2 Hz), 1,31 (3H, d, J=7,3 Hz).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 616 [M+H]⁺ (2) (ÍR, 5S,6S)-2-[1-(4-N,N-Dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidín-4-yl]tio-6-[(R)-l-hydroxvetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S, 6S)-2-[1-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidíη-4-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (487 mg, 0,791 mol) (získaný podía opisu v príklade 16(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (22 ml) a destilovanej vody (11 ml) bol katalytický hydrogínovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia (485 mg) vo vodnom kúpeli (30°C) 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu hydrogénuhličitan sodný (67 mg), tetrahydrofuránu (1:1) a destilovanej vody. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená, premytá zmesou etylacetátu a tetrahydrofuránu (1:1) a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 5% acetonitrilu;

destilovanej vody - 7% acetonitrilu; destilovanej vody - 9% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-(1-(4-N, N-dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidín-4-yl]tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, reakcie bola bol pridaný zmes etylacetátu a

sodná sol (183 mg, ¹H-NMR (400 M	výťažok 46%) ako biela Hz, D₂O) : δ (ppm) 7,00	pevná látka.	4	,10
(1H,	s) , 4,30 až
(2H, m obsahujúci	dd na 4,17, J=9,0, 2,3	Hz) ,	3,95 až 3,75	(	2H,
m), 3,50 až 3,10	(5Η, m) , 3, 07 (3H, s) ,	3,00	(3H, s) , 2,	15	až
1,95 (2H, m), 1,80	až 1,50 (2H, m), 1,25	(3H,	d, J=6,3 Hz),	1	,18

(3H, d, J=7,2 Hz).

165

IR(KBr): 1750, 1612, 1538, 1395 cm*¹Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 503 [M+H]⁺

Príklad 17 (ÍR,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-Karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)pyrolidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetylj-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)pyrolidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku (3S)-3-acetyltio-l-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)pyrolidínu (210 mg, 0,721 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 18) v dimetylformamide (10 ml) bol pridaný hydrazínacetát (80 mg, 0,865 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (429 mg, 0,721 mol) v acetonitrile (20 ml) pridaný po kvapkách di výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,502 ml, 2,88 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas sníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej

166 kolóne za použitia metylénchloridu - 10% metanolu a metylénchloridu ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl(ÍR,5S, 6S) - 2- [ (3S) -1- (4-karbamoyl-l, 3-t iazol-2-yl) pyroličín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu ako bledožltá pevná látka (412 mg, výťažok 100%).

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,65

(2H,	d, J=8,8 Hz), 7,4C	) (IH,	s), 7,03 (IH, br, s), 5,50 (IH, d,
J=13,	6 Kz), 5,48 (IH,	br s)	, 5,22 (IH, d, J=13,6 Hz), 4,36 až
4,25	(2H, m obsahujúci	dd na	4,32, J=9,5, 2,2 Hz), 3,71 až 3,60
(IH,	m), 3,60 až 3,49	(2H,	m), 3,40 (IH, dq, J=9, 5, 7,3 Hz),
3,30	(1K, dd, J=6, 6, 2,	2 Hz) ,	2,60 až 2,45 (IH, m), 2,40 až 2,05
(IH,	m), 1,77 (IH, d,	J=4,4	Hz), 1,39 (3H, d, J=6,6 Hz), 1,31
(3H,	d, J=7,3 Hz).

Hmotnostné spektrum (FAB^4-): 574 [M+H]⁺ (2) (ÍR,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-Karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) pyrolidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)pyrolidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (410 mg, 0,715 mol) (získaný podľa opisu v príklade 17(1)) v zmesi tetrahydrofuranu (15 ml) a destilovanej vody (15 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (410 mg) pri teplote miestnosti 1,7 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénunličitan sodný (60 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 3% acetonitrilu; destilovanej vody - 6% acetonitrilu;

destilovanej vody - 9% acetonitrilu; destilovanej vody - 12% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofyiizcvaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)pyrolidín-3-yl]tio-6-[(R)167

-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (150 mg, výťažok 46%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm)	7,41	(IH, s), 4,35 až	4,20
(2H, m), 4,05 (IH, kvintet, J=5,2 Hz)	3,	90 (IH, dd, J=1O,8,	5,9
Hz), 3,75 až 3,65 (IH, m), 3,60 až	3,40	(4H, m) , 2,60 až	2,45
(IH, m), 2,20 až 2,15 (IH, m), 1,31	(3H,	d, J=6,4 Hz), 1,25	(3H,
d, J=8,9 Hz) .

IR(KBr): 1749, 1669, 1599, 1557, 1391, 1289 cm¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 461 (M+H]⁺

Hmotnostné spektrum velkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané Ci₈H22O5N₄S₂Na : 461,0929, nájdené: 461,0926 [M+H]⁺

Príklad 18 (ÍR, 5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-Kyano-l,3-tiazol-2-yl)pyrolidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[(3S)—1—(4-kyano-l,3-tiazol-2-yl)pyrolidín-3-yl]tio-6- [ (R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku (3S)-3-acetyltio-l-(4-kyano-l,3-tiazol-2-yl)pyrolidínu (137 mg, 0,541 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 19) v dimetylformamide (7 ml) bol pridaný hydrazínacetát (60 mg, 0,649 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (322 mg, 0,541 mol) v acetonitrile (16 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod

168 atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,376 ml, 2,16 mol). Zmes bola miešaná 2 hodiny pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestností. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný co reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas sníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 3) a etylacetátu ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyi-(ÍR,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4 - kyano-1,3-tiazol-2-yl) pyrolidín-3yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu ako bledožlutá pevná látka (251 mg, výtažok 84%).

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,65

(2H,	d, J=8 , 8 Hz ) ,	7,21 (1H, s),	5, 50	(1H, d, J=13,6 Hz), 5,	22
(1H,	d, J=13,9 Hz),	4,35 až 4,24	(2H,	m), 3,90 (2H, m), 3,74	až
3, 45	(3H, m), 3,38	(1H, dq, J=9,4	, 4,7	Hz) , 3,30 (1H, dd, J=7,	3,
2,9	Hz), 2,60 až 2	,48 (1H, m),	2,24	až 2,10 (1H, m), 1,62	až
1,50	(1H, br, s), 1,	38 (3H, d, J=5	, 9 Hz	), 1,31 (3H, d, J=7,3 Hz	) ·

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 556 [M+H]⁺ (2) (ÍR, 5S, 6S)-2-[(3S)-1-(4-Kyano-1,3-tiazol-2-yl) pyrolidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-kyano-l,3-tiazol-2-yl)pyrolidín-3-yl]tio-6- [ (R)-l-hydroxyetvl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (250 mg, 0,450 mol) (získaný podľa popisu v príklade 18(1)) ve zmesi tetrahydrofuránu (12 ml) a destilovanej vody (12 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (250 mg) pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes

169 filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (38 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas sníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 3% acetonitrilu; destilovanej vody - 6% acetonitrilu; destilovanej vody - 9% acetonitrilu; destilovanej vody - 12% acetonitrilu;

destilovanej vody - 15% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S, 6S)— 2— [ (3S)-l-( 4-kyano-1,3-tiazol-2-yl) pyrolidin-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (128 mg, výťažok 64%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz,	D₂O) :	δ (ppm)	7,56	(1H,	s) ,	4,32 až	4,22
(2H, m), 4,10 až 4,00	(1H,	m) , 3,88	(1H,	dd,	J=1C	i,8, 5,9	Hz) ,
3,74 až 3,62 (1K, m) ,	3, 62	až 3,53	(1H,	m) , 1	i,52	až 3,38	(3H,
m), 2,60 až 2,48 (1H,	m) ,	2,19 až	2,08	(1H,	m) ,	1,31 (3H	z d,
J=6, 4 Hz) , 1,24 (3H, d,	J=7,	3 Hz) .
IR (KBr): 2229, 1751, 1604, 1560,	1391,	1310	cm'¹

Hrnotnostné spektrum (FAB⁺): 443 [M+H]⁺

Hrnotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané C₁₈H2o04N4S₂Na : 443,0824, nájdené: 443,0799 [M+H] ⁺

Príklad 19 ........

(ÍR, 5S, 6S)-2-[(3R)-1-(4-Karbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl) pyrolidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[(3R)-1-(4-karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl) pyrolidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1170

-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku (3R)-3-acetyltio-l-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)Pyrolidínu (500 mg, 1,84 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 20) v dimetylformamide (25 ml) bol pridaný hydrazínacetát (204 mg, 2,21 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)-i-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (1,09 g, 1,84 mol) v acetonitrile (55 ml) pridaný po kvapkách di výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (1,28 ml, 7,36 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas sníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu - 9% metanolu a metylénchloridu ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S, 6S)-2-[(3R)-1-(-4-karbamoy-l-1, 3-tiazol-2-yl)pyrolidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu ako bledožltá pevná latka (917 mg, výťažok 87%).

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,2 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,2 Hz), 7,40 (1H, s), 7,05 (1H, br, s), 5,55 (1H, br, s), 5,51 (1H, d, J=14,1 Hz), 5,24 (1H, d, J=14,l Hz), 4,35 až

4,25 (2H, m), 4,05 až 3,90 (2H, m), 3,70 až 3,60 (1H, m), 3,60 až 3,40 (4H, m), 3,31 (1H, dd, J=6,9, 2,9 Hz), 2,60 až 2,40 (1H, m), 2,20 až 2,05 (1H, m), 1,95 (1H, br, s), 1,39 (3H, d, J=5,9 Hz) , 1,33(3H,d,J=6, 8Hz) .

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 574 [M+H]⁺

171 (2) (1R,5S,6S)-2-[(3R)4-(4-Karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)pyrolidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[(3R)-1-(4-karbamoyi-1,3-tiazol-2-yl)pyrolidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (917 mg, 1,60 mol) (získaný podía opisu v príklade 19(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (45 ml) a destilovanej vody (45 ml) bol katalytický hydrogenovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (917 mg) pri teplote miestnosti 1,7 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (134 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 2% acetonitrilu; destilovanej vody - 4% acetonitrilu;

destilovanej vody - 6% acetonitrilu; destilovanej vody - 8% acetonitrilu; destilovanej vody - 10% acetonitrilu;

destilovanej vody - 12% acetonitrilu; destilovanej vody - 14% acetonitrilu; destilovanej vody - 16% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (lR,5S,6S)-2-[(3R)-l-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)pyrolidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (338 mg, výťažok 46%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂0) : δ (ppm) 7,41 (1H, s), 4,35 až 4,20 (2H, m), 4,10 až 4,00 (1H, m), 3,89 (1H, dd, J=ll,2, 6,7 Hz), 3,70 až 3,60 (1H, m), 3,58 až 3,40 (4H, m), 2,60 až 2,45 (1H, m), 2,20 až 2,10 (1H, m), 1,31 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,25 (3H, d, J=7,3 Hz).

IR (KBr): 1748, 1608, 1597, 1559, 1391, 1289 cm^-1

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 461 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané Ci₈H₂₂O₅N₄S₂Na : 461,0929 nájdené: 461,0938 [M+H] ⁺

172

Príklad 20 (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-Hydroxymetyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxy-etyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

HO

OH

COO'Na (1) p-Nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2- [1- (4-terc.butyldimetylsilyloxymetyl-1,3-tíazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-f4-terc.butyldinietylsilyloxymetyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (415 mg, 1,16 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 12) v dimetylformamide (20,8 ml) bol pridaný hydrazínacetát (137,0 mg, 1,39 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metyikarbapén-2-em-3-karboxylátu (690 mg, 1,16 mol) v acetonitrile (34,4 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizpropyietylamínu (1,34 ml, 7,69 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného·, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4 - terc.

butyldimetylsilyloxymetyl-1,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6173

- [ (R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu ako bledožltý sirup (719 mg, výťažok 94%) .

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,3 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 6,48 (IH, s), 5,50 (IH, d, J=13,9 Hz), 5,25 (IH, d, J=13,9 Hz), 4,66 (2H, s), 4,46 (2H, dd, J=15,4, 8,1 Hz), 4,32 až 4,20 (3H, m), 4,08 až 4,00 (2H, m), 3,28 (IH, dd, J=6,6, 2,2 Hz), 3,21 (IH, d, dq, J=9,l, 7,3 Hz), 1,95 (IH, br, s), 1,37 (3H,d, J=5,9 Hz), l,26(3H,d, J=7,3 Hz),0,94 (9H, s), 0,10(6H, s).

(2) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-hydroxymetyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-terc.butyldimetylsilyloxymetyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl] tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (719 mg, 1,09 mol) (získaného podľa opisu v príklade 20(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (36 ml) bola pridaná kyselina octová (0,19 ml, 3,3 mol) a roztok tetra-n-butyl-amóniumf luoridu v tetrahydrofurane (3,3 ml, 3,3 mol) v ľadovom kúpeli. Výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný hydrogénuhličitan sodný a vodná vrstva bola dôkladne extrahovaná' etylacetátom. Organické vrstvy boly premyté nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušené cez bezvodý síran horečnatý, filtrované a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (15 : 1) ako eluentu počas vzniku požadovanej zlúčeniny p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-hydroxymetyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (426,2 mg, výťažok 72%) ako žltý sirup.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,20 (2H, d, J=8,l Hz), 7,66 (2H, d, J=8,l Hz), 6,50 (IH, s), 5,54 (IH, d, J=13,6 Hz), 5,27 (IH, d, J=13,6 Hz), 4,56 (IH, d, J=13,6 Hz), 4,53 (IH, d, J=13,6

174

Hz) ,	4,	47 (IH, t,	J=8,5 Hz), 4,41	(IH, t, J=	^:8,	5 Hz), 4,32 (IH,
kvin	tet	, J=6,4 Hz)	, 4,28 až 4,20	(2H, m), 4,	08	(IH, dd, J=8,5,
5,4	Hz)	, 3,88 (IH,	dd, J=5,4, 8,5	Hz), 3,304	(	IH, dd, 6,2, 2,7
Hz) ,	3,	204 (IH, dq	, J=9,2, 7,3 Hz)	, 1,35 (3H,	d,	, J=6,2 Hz) , 1,25
(3H,	d,	J=7,3 Hz) .

( 3) (ÍR,5S,6S)-2-[l-(4-Hydroxymetyl-l,3-1iazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-hydroxymetyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metyikarbapén-2-em-3-karboxylát (426,2 mg, C,78 mol) (získaný podľa opisu v príklade 20(2)) v zmesi tetrahydrofuránu (20 ml) a destilovanej vody (10 ml) bol katalytický hydrogenovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia (530 mg) pri teplote miestnosti 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (65,5 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas sníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 3% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-hydroxymetyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ (156 mg, výťažok 46%) ako biela pevná látka.

	¹H-NMR (400 M Hz, D₂0) :	5 (ppm)	6,50 (IH,	s) ,	4,36 až 4,28
(4H,	m), 4,19 až 4,10 (IH,	m), 4,10	až 3,98	(2H,	m obsahujúci
IH,	dd na 4,01, J=8,0, 3,0	Hz), 3,88	až 3,68	(2H,	m), 3,24 (IH,
dd,	J=6,6, 2,9 Hz), 3,12 až	3,00 (IH,	m), 1,11	(3H,	d, J=5,9 Hz),

1,00 (3H, d, J=7,3 Hz).

IR(KBr): 3357, 1748, 1600, 1528, 1470, 1396, 1311 cm^-1Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 434 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺): počítané

175

C_X7H2iO₅N₃S2Na : 434,0820, nájdené: 434,0796 [M+H]⁺

Príklad 21 (ÍR, 5S,6S)-2-[1-(4-N-Metylkarbamoyl-1,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR, 5S, 6S)-2-[1-(4-N-Metylkarbamoyl-1,3-oxazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (142 mg, 0,56 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 21) v dimetylformamide (7 ml) bol pridaný hydrazínacetát (62 mg, 0,67 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (333 mg, 0,56 mol) v acetonitrile (7 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,39 ml, 2,24 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti ukončenia roztok

Po skontrolovaní nasýtený vodný reakcie, etylacetát a hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas

176 zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S,6S)-2-[1-(4-N-metylkarbamoyl-1,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (274 mg, výťažok 88%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2K, d, J=8,8 Hz), 7,77

(IH,	s) , 7,66	(2H, d, J=8,8 Hz), 6,78 (IH, br, s), 5,51 (IH, d,
J=13	,9 Hz), 5	, 25	(IH, d, J=13,2 Hz), 4,51	(2H,	q, J=8,1 Hz),
4,30	až 4,21	(3H,	m), 4,08 (2H, dd, J=5, 9,	8,1	Hz), 3,30 (IH,
dd,	J=2,9, 7,	3 Hz)	), 3,24 až 3,16 (IH, m),	2,94	(3H, d, J=5,1

Hz), 1,38 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,26 (3H, d, J=7,4 Hz).

(2) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-N-Mety1karbamoyl-1,3-oxazol-2-yl) azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2 - [1- ( 4-N-metylkarbamoyl-l, 3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (344 mg, 0,62 mol) (získaný podľa opisu v príklade 21(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (17 ml) a destilovanej vody (9 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia (344 mg) vo vodnom kúpeli (30°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (52 mg), zmes etylacetátu a tetrahydrofuránu (1:1) a destilovanej vody. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola premytá zmesou etylacetátu a tetrahydrofuránu (1:1), oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 5% acetonitrilu ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S, 6S)-2-[1-(4-N-metylkarbamoyl-1,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (166 mg, výťažok 60%) ako biela pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, D₂0) : δ (ppm) 7,73 (IH, s), 4,44 (2H, t,

177

J=8,	1 Hz) , 4,20 až 4,13	(1H, m), 4,10 i	;ih,	t, J=	^:6, 6 Hz ) , 4,05
(1H,	d, J=9,5 Hz), 3,94	(2H, kvínt., J=	=4,4	Hz) ,	3,28 (1H, dd,
J=2,	2, 5,9 Hz), 3,09 (1H	, kvínt., J=7, 3	Hz) ,	2,73	(3H, s), 1,15
(3H,	d, J=6,6 Hz) , 1,04	(3H, d, J=7,3 Hz)	•
	IR (KBr): 3415, 1750,	1625, 1531, 1388	cm'¹

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) počítané

Ci8H₂₂0sN₄SNa : 445, 1157, nájdené: 445,1162 [M+H] ⁺

Príklad 22 (ÍR, 5S, 6S)-2-[1-(4-Karbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1)p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-l,3-oxazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-karbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (275 mg, 1,14 mol)(získaného podľa opisu v referenčnom príklade 22) v dimetylformamide (14 ml) bol pridaný hydrazínacetát (126 mg, 1,37 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (677 mg, 1,14 mol) v acetonitrile (14 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod dusíkovou atmosférou, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,79 ml, 4,56 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol

178 pridaný do reakčnej zmesí. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluénu : acetonitrilu : metanolu (10 : 10 : 1) ako eluennu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-1, 3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (313 mg, výťažok 51%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CD₃OD) : δ (ppm) 8,08 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,77 (1H, s), 7,55 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,32 (1H, d, J=13,9 Hz), 5,14 (1H, d, J-13,9 Hz), 4,43 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,28 až 4,20 (1H, m), 4,13 (1K, dd, J=2,9, 9,5 Hz), 4,00 (1H, t, J=6,6 Hz), 3,90 (2H, dt, J=4,4, 9,5 Hz), 3,23 až 3,18 (2H, m), 1,18 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,09 (3H, d, J=7,3 Hz).

(2) (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-Karbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ ρ-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-((R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (313 mg, 0,582 mol) (získaného podľa opisu v príklade 22(1)) v zmesi tetrahydrofuranu (16 ml) a destilovanej vody (8 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paléaia (313 mg) vo vodnom kúpeli (30°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (49 mg), zmes etylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1) a destilovanej vody. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola premytá zmesou etylacetátu a tetrahydrofuranu (1:1), oddelená a

179 koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 5% acetonitrilu ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-l,3-oxazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (110 mg, výťažok 44%) ako biela pevná látka.

^•H-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 7,79 (1H, s), 4,46 (2H, t,

J=8,l Hz), 4,20 až 4,16 (1H,	m), 4,10 (1H, t, J=5,9	Hz) ,	4,06
(1H, dd, J=2,9,	9,5	Hz), 3,95	(2H, kvínt., J=4,4 Hz),	3,28	(1H,
dd, J=2,9, 5,9	Hz) ,	3,12 až	3,08 (1H, m), 1,15 (3H,	d,	J=6, 6

Hz) , 1,05 (3H, d, J=7,3 Hz).

IR (KBr): 3360, 1749, 1671, 1625, 1384, 1275 cm^-1Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané :

431,0992, nájdené: 431,1008 [M+H]⁺

Príklad 23 (ÍR, 5S,6S)-2-[1-(4-Kyano-l,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-kyano-l,3-oxazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-kyano-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (156 mg, 0,70 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 23) v dimetylformamide (8 ml) bol pridaný hydrazínacetát (77 mg, 0,84 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2180

-diŕenylfosforyloxy-6-[ (R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (416 mg, 0,70 mol) v acetonitrile (8 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,49 ml, 2,80 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2- [1- (4-kyano-l, 3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-

-3-karboxylátu (309 mg, výťažok 84%) ako bledožltá pevná látka.
¹H-NMR	(400 M Hz, CDC1₃) :	5 (ppm)	8,22 (2H, d, J=8,8	Hz) ,
7,74 (IH,	s), 7,66 (2H, d, J=S	3,8 Hz),	5,51 (IH, d, J=13,9	Hz) ,
5,25 (IH,	d, J=13,2 Hz), 4,56	(2H, q,	J=8,1 Hz) , 4,29 až	4,22
(3H, m),	4,15 až 4,10 (2H, m)	, 3,30 (IH, dd, J=2,9, 7,3	Hz) ,
3,19 (IH,	dt, J=7,3, 9,5 Hz) ,	1,37 (3H,	d, J=6,6 Hz), 1,26	(3H,
d, J=7,3 Hz).

(2) (ÍR, 5S, 6S)-2-[1-(4-Kyano-1,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl ] tio-6 - [ (R) -1-hydroxyetyl] -1 -metyIkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-kyano-l,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[ (R)-1-hydroxyetyl]-l-metvlkarbapén-2-em-3-karboxylát (309 mg, 0,59 mol) (získaný podľa opisu v príklade 23(1)) v zmesi tetrahydroruranu (16 ml) a destilovanej vody (8 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia (309 mg) vo vodnom kúpeli (30°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (50 mg), zmes

181 etylacetátu a tetrahydrofuránu (1:1) a destilovanej vody. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola premytá zmesou etylacetátu a tetrahydrofuránu (1:1), oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 5% acetonitrilu ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-kyano-l,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (150 mg, výťažok 60%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D_z0) : δ (ppm) 7,92 (1H, s), 4,45 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,20 až 4,16 (1H, m), 4,09 (1H, t, J=6,6 Hz), 4,05 (1H, d, J=8,8 Hz), 3,95 (2H, kvínt., J=4,4 Hz), 3,28 (1H, d, J=6, 6 Hz), 3,08 (1H, kvint., J=8,l Hz), 1,14 (3H, d, J=6,6 Hz), 1,03 (3H, d, J=7,3 Hz).

IR(KBr): 3372, 1750, 1628, 1394, 1283 cm^-1

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané : 413,0860, nájdené: 413,0921 [M+H] ⁺

Príklad 24 (ÍR, 5S, 6S) -2- [1- (4-Azetídinokarbonyl-1,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-azetidínokarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] -tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-azetidínokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (247 mg, 0,83 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 24) v dimetylformamide (12 ml) bol pridaný hydrazínacetát (92 mg, 1,0 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní

182 ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (493 mg, 0,83 mol) v acetonitrile (25 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,58 ml, 3,32 mol) . Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným hydrogénuhličitanom sodným a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a bol vyčistený použitia 10% koncentrovaná počas chromatograficky na

H,	d, J=8,7 Hz),	7,66
d,	J=13,7 Hz),	5,25
	4,50 až 4,40	(2H,
na	4,17, J-7,4	Hz) ,
_; Hz), 3,29 (IH,	dd,
r	2,30 (2H, kvintet,
IH	OH skupinu) ,	1,38

sníženého tlaku. Zvyšok silikagélovej kolóne za metanolu-etylacetátu ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2- [1-(4-azetidínokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (321 mg, výťažok 65%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J-=8,7 Hz), 7,41 (IH, s), 5,51 (11 (IH, d, J=13,7 Hz), 4,56 (2H, t, J=7,4 1

m), 4,35 až 4,10 (5H, m obsahujúci 2H,

4,04 (IH, t, J=5,4 Hz), 4,02 (IH, t, J=5,4 Hz J=7,0, 2,5 Hz), 3,18 (IH, dq, J=8,9, 7,3 Hz J=7,4 Hz), 1,95 až 1,50 (neostrý obsahujúci (3H, d, J=6,3 Hz), 1,26 (3H, d, J=7,3 Hz).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 600 [M+H] ⁺ (2) (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-Azetidínokarbony1-1,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-azetidínokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1183

-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (321 mg, 0,54 mol) (získaný podlá opisu v príklade 24(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (15 ml) a destilovanej vody (15 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktávnom uhlí (321 mg) pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (45 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola premytá zmesou rozpúšťadiel opísaných vyššie, oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na kolóne Cosmosil za použitia destilovanej vody - 5% acetonitrilu; destilovanej vody - 10% acetonitrilu; destilovanej vody - 15% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-azetidínokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina,

sodná sol	(162	mg, výťažok	65%)	ako	biela	pevná	látka.
^-NMR	(400	M Hz, D₂O,	TSP)	: δ	(ppm)	7,34	(1H, s),	4,95	až
4,65 (4H,	m) ,	4,40 až 4	, 30	(1H,	m) ,	4,30	až 4,13	(4H,	m
obsahujúci	1H,	kvintet na	4,25	, J=	=6,3	Hz a	1H, dd,	na 4,	19,

J=14,4, 7,2 Hz), 4,10 až 4,00 (2H, m), 3,43 (1H, dd, J=6,3, 2,5 Hz), 3,26 (1H, kvintet, J=7,2 Hz), 2,37 (2H, kvintet, J=7,9 Hz), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2 Hz).

IR(KBr): 1750, 1607, 1538, 1455, 1435, 1393, 1308, 1292 cm^-1Hrnotnostné spektrum (FAB⁺) : 487 [M+H] ⁺

Príklad 25 (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-Tiomorfolinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina,

COO'Na

184 (1) p-Nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-(1-(4-tiomorfolinokarbonyi— -1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxyiát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-tiomorfoiinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (207 mg, 0,62 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 25) v dimetylformamide (8 ml) bol pridaný hydrazínacetát (68,4 mg, 0,74 mol) pri 0°C pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-difenylfosforyloxy-6-[(R)— -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (370,5 mg, 0,62 mol) v acetonitrile (16 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,43 ml, 2,48 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia 5% metanolu-etylacetátu ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(1-(1,3-tiazol-4-tiomorfolinokarbonyi-2-yl)azetidín-3-yl)tio-6-((R)-l-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (246 mg, výťažok 61%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDCI3) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,67 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,12 (1H, s), 5,51 (1H, d, J=13,8 Hz), 5,25 (1H, d, J=13,8 Hz), 4,60 až 4,40 (2H, m), 4,35 až 4,22 (3H, m), 4,10 až 4,00 (2H, m), 4,00 až 3,90 (4H, m), 3,29 (1H, dd, J=6,4, 2,6 Hz), 3,21 (1H, dq, J=9,2, 7,3 Hz), 2,80 až 2,60 (4H, m),

1,80 až 1,50 (neostrý obsahujúci 1H OH skupinu), 1,38 (3H, d,

J=6,4 Hz), 1,27 (3H, d, J=7,3 Hz).

185

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 646 [M+H] ⁺ (2) (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-Tiomorfolinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6- [ (R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-[l-(4-tiomorfolinokarbonyl-l,3-1iazol-2-yl)azetidín-3-yl]-tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl ] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (543 mg, 0,84 mol) (získaný podlá opisu v príklade 25(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (30 ml) a destilovanej vody (30 ml) bol katalytický hydrogénovaný počas prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (543 mg) pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (70,6 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na kolóne Cosmosil počas použitia destilovanej vody - 5% acetonitrilu; destilovanej vody - 10% acetonitrilu; destilovanej vody - 15% acetonitrilu; destilovanej vody -20% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-tiomorfolinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (277 mg, výťažok 62%) ako biela pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, D₂O, TSP): 5 (ppm) 7,10 (1H, s), 4,56 (2H, t, J=8,0 Hz), 4,42 až 4,30 (1H, m), 4,25 (1H, kvintet, J=6,3 Hz), 4,21 (2H, dd, J=7,8, 2,4 Hz), 4,12 až 4,02 (2H, m), 3,96 až 3,85 (2H, m), 3,85 až 3,75 (2H, m), 3,44 (1H, dd, J=6,3, 2,4 Hz), 3,26 (1H, dq, J=8,9, 7,8 Hz), 2,86 až 2,70 (2H, m), 2,70 až 2,60 (2H, m), 1,30 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,20 (3H, d, J=7,8 Hz).

IR (KBr) : 1749, 1608, 1535, 1454 cm^-1

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 533 [M+H] ⁺

186

Príklad 26

Etyl (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-Karbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

HO

S

Do roztoku (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovéj kyseliny, sodná soľ (357 mg, 0,80 mol) získanej podľa opisu v príklade 3) v dimetylformamide (5 ml) bol pridaný etyljodid (357 mg, 2,40 mol) pri 0°C pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Zmes bola ďalej miešaná 2 hodiny pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Na konci bol do reakčnej zmesi pridaný etylacetát a organická vrstva bola postupne premytá 10% vodným roztokom chloridu sodného, 10% vodným roztokom tiosíranu sodného, nasýteným vodnými roztokom hydrogénuhličitanu sodného, nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia etylacetát - 20% acetonitrilu; etylacetát -40% acetonitrilu;

etylacetát - 60% acetonitrilu a etylacetátu počas vzniku vyčisteného produktu, který bol rozpustený v metylénchloride a dietyléter a hexán boli postupne pridané do roztoku počas vzniku etyl (ÍR, 5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-l, 3-1iazol-2-yl)azetičín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (387 mg, výťažok 95%) ako bezfarebný prášok.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,48 (IH, s), 6,99 (IH, br,

s), 5,61 (IH, br, s), 4,48 (2H, q, J=8,5 Hz), 4,19 až 4,43 (4H,

m), 4,02 až 4,13 (2H, m), 3,26 (2H, dd, J=7,l, 2,7 Hz), 3,10 (IH, dq, J=9,0, 7,3 Hz), 2,07 (IH, d, J=4, 8 Hz), 1,37 (3H, d, J=6,9

187

Hz), 1,36 (3H, t, J=7,5 Hz), 1,25(3H, d, J=7,2Hz).

IR (KBr): 1770, 1669, 1602, 1543, 1324, 1283 cm^-1Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 453 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum velkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané

C₁₉H₂₅O₅N₄S2 453,1267, nájdené 453,1235 [M+H] ⁺

Príklad 27

Fenyl(ÍR,5S,6S)-2- [1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny, sodná sol (162 mg, 0,36 mol) (získanej podlá opisu v príklade 3) v zmesi vody (1 ml) a tetrahydrofuráne (1 ml) bola pridaná IM kyselina chlorovodíková (0,33 ml, 0,36 mol) pri 0°C. Zmes bola koncentrovaná počas zníženého tlaku. Do roztoku zvyšku v acetonitrile (10 ml) bol pridaný fenol (102 mg, 1,1 mol), dimetyiaminopyridín (22 mg, 0,18 mol) a l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimidhydrochlorid (139 mg, 0,73 mol) pri teplote miestnosti. Po miešaní zmesi 30 minút, bol pridaný l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl) karbodiimidhydrochlorid (139 mg, 0,73 mol) a výsledná zmes bola miešaná 30 minút. Na konci bol do reakčnej zmesi pridaný etylacetát a organická vrstva bola postupne premytá rozriedenou kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný,

188 filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia etylacetát - 20% acetonitrilu; etylacetát - 40% acetonitrilu; etylacetát - 60% acetonitrilu a etylacetát počas vzniku fenyl(ÍR,5S, 6S)-2-[1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidin-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (66 mg, výťažok 36%) ako bezfarebný prášok.

^-H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,48 (1H, s), 7,38 až 7,43 (2H, m), 7,23 až 7,28 (3H, m), 6,99 (1H, br, s), 5,60 (1H, br, s), 4,40 až 4,55 (2H, m), 4,24 až 4,36 (3H, m), 4,03 až 4,13 (2H, m), 3,32 (1H, dd, J=7,0, 2,6 Hz), 3,25 (1H, dq, J=9,2, 7,3 Hz),

2,09 (1H, br), 1,39 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,30 (3H, d, J=7,3 Hz).

IR(KBr): 1771, 1668, 1542, 1195 cm¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 501 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺): počítané C23H25O5N4S2 501,1266, nájdené 501,1266 [M+H] ⁺

Príklad 28

Pivaloyloxymetyl(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku (ÍR, 5S, 6S)-2-[1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny, sodná soľ (402 mg, 0,90 mol) (získanej podľa opisu v príklade 3) v dimetylacetamide (5 mi)

189 bol pridaný jodometylpivalát (261 mg, 1,08 mol) pri 0°C pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Na konci bol do reakčnej zmesi pridaný etylacetát a organická vrstva bola postupne premytá 10% vodným roztokom chloridu sodného, 10% vodným roztokom tiosíranu sodného, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Do zvyšku bol pridaný dietyléter počas vzniku pivaloyloxymetyl(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-1, 3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (450 mg, výťažok 93%) ako bezfarebný prášok.

¹H-NMR (400 M Hz, DMSO-d_s) : δ (ppm) 7,47 (IH, s), 7,43 (IH,

br,	s), 7,32 (IH, br	, s), 5,89	(IH,	d,	J=5,9 Hz),	5,74	(IH, d,
J=5,	9 Hz), 5,09 (IH,	d, J=5,2	Hz) ,	4,42 až 4,58	(3H,	m) , 4,20
(IH,	dd, J=9,4, 2,4	Hz), 3,89	až 4	, 02	(3H, m) ,	3, 37	(IH, dq,
J=9,	1, 7,4 Hz), 3,26	(IH, dd, J=	=6,3,	2, 6	Hz), 1,14	(3H,	d, J=7,4
Hz) ,	1,13 (9H, s), 1,	11 (3H, d,	J=6, 5	Hz)	_e

IR(KBr): 1778, 1754, 1602, 1545, 1282, 1118 cm'¹Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 539 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum velkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané C23H31O7N4S2 539, 1634, nájdené 539, 1634 [M+H]'

Príklad 29

1-(Izopropoxykarbonyloxy)etyl(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

190

Do roztoku (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny, sodná soľ (245 mg, 0,55 mol) získanej podľa opisu v príklade 3 v dimetylacetamide (5 ml) bol peidaný 1-jodoetylizopropylkarbonát (317 mg, 1,21 mol) pri 0°C pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1,5 hodiny. Výsledná zmes bola ďalej miešaná 1,5 hodiny pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Na konci bol do reakčnej zmesi pridaný etylacetát a organická vrstva bola postupne premytá 10% vodným roztokom chloridu sodného, 0,1 M kyselinou chlorovodíkovou, 10% vodným roztokom tiosíranu sodného, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia etylacetát - 20% acetonitrilu; etylacetát -40% acetonitrilu; etylacetát - 60% acetonitrilu a etylacetátu počas vzniku vyčisteného produktu, který bol rozpustený v metylénchloride a dietyléter a hexán boli postupne pridané do roztoku počas vzniku 1-(izopropoxykarbonyloxy)etyl(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-l-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (266mg, výťažok 88%) ako bezfarebný prášok.

¹H-NMR (400 M Hz,	CDC1₃) : δ	(ppm)	7,48	(1H, s), 7,00 l	:iH,	br,
s), 6,82 až 6,92 (	1H,	m) , 5,65 i	(1H, br, s)	, 4,84 až	4,97 i	:ih,	m) ,
4,43 až 4,52 (2H,	m)	, 4,18 až	4,39	(3H,	m), 4,02	až 4,	07	(2H,

m), 3,25 (1H, dd, J=7,0, 2,5 Hz), 3,17 (1H, dq, J=9,3, 7,3 Hz), 2,16 (1H, br, s), 1,61(3/2 H, d, J=5,9 Hz), 1,59 (3/2 H, d, J=5,5 Hz) , 1,18 až 1,39 (12H, m) .

IR(KBr) : 1763, 1669, 1542, 1276, 1074 cm¹Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 555 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺): počítané C23H3iO₈N₄S₂ 555, 1584 , nájdené 555,1570 (M+H] ⁺

191

Príklad 30

1-(3-Pentyloxykarbonyloxy)etyl(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku (ÍR, 5S, 6S)-2-[1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny, sodná soľ (402 mg, 0,90 mol) (získanej podlá opisu v príklade 3) v dimetylacetamide (8 mi) bol pridaný 1-jodoetyl-3-pentylkarbonát (568 mg, 1,98 mol) pri 0°C pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Výsledná zmes bola ďalej miešaná 2 hodiny pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Na konci bol do reakčnej zmesi pridaný etylacetát a organická vrstva bola postupne premytá 10% vodným roztokom chloridu sodného, 0,1 M kyselinou chlorovodíkovou, 10% vodným roztokom tiosíranu sodného, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagelovej kolóne počas použitia etylacetát - 20% acetonitrilu; etylacetát - 40% acetonitrilu; etylacetát - 60% acetonitrilu a etylacetát počas vzniku 1—(3— -pentyloxykarbonyloxy) etyl- (ÍR, 5S, 6S)-2- [1- (4-karbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[ (R) -1-hydroxyetyl ] -l-metylkarbapén-2-em192

-3-karboxylátu (506 mg, výťažok 96%) ako bezfarebná amorfná látka. ¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,48 (1H, s), 7,00 (1H, br,

s) , 6,85	až 6,93 (	1H, m), 5,58	(1H, br, s), 4,57 až 4,66	(1H,
m), 4,42	až 4,52 1	(2H, m) , 4,15	až 4,32 (3H, m), 4,02 až	4,10
(2H, m),	3,24 (1H,	dd, J=7,l, 2,	6 Hz), 3,17 (1H, dq, J=9,3,	7,4
Hz), 2,00	(1H, br,	s) , 1,50 až	1,72 (7H, m), 1,34 (3/2 H	, d,

J=6,9 Hz), 1,36 (3/2H, d, J=6,5 Hz), 1,24 (3/2 H, d, J=7,3 Hz),

1,25 (3/2 H, d, J=7,3 Hz), 0,84 až 0,98 (6H, m).

IR(KBr): 1761, 1671, 1542, 1268, 1074 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 583 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺): počítané C25H35O8N4S2 583,1896, nájdené 583,1907 [M+H]⁺

Príklad 31 (ÍR, 5S,6S)-2-[1-(4-Pyrolidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-pyrolidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-pyrolidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (235 mg, 0,84 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 26) v dimetylformamide (12 ml) bol pridaný hydrazínacetát (103 mg, 110 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 3 hodiny. Po skontrolovaní

193 ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2- (difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (499 mg, 0,84 mol) v acetonitrile (25 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,56 ml, 3,36 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia etylacetátu a etylacetát : methanolu (9:1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2- [1- ( 4-pyrolidinokarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (240 mg, výťažok 46%) ako bledožlutá pevná látka.

1	H-NMR	(400 M Hz, CDC1₃) :	δ (ppm) 8,23 (	2H, d,	J=	8,7	Hz) ,
7,66	(2H,	d, J= 8,7 Hz)	, 7,28	(1H, s), 5,51	(1H, d,	J=	13,8	Hz) ,
5,25	(1H,	d, J= 13,8 Hz)	, 4,49	(2H, dd, J= 14,	.6, 8,5	Hz)	, 4,	35 až
4,20	(3H,	m), 4,05 (1H,	t, J=	6,1 Hz), 4,04	(1H, t,	J=	6,1	Hz) ,
3,78	(2H,	t, J=6,5 Hz)	, 3,62	(2H, t, J=6,5	Hz) , 3	,29	(1H	, dd,

J=7,2, 2,5 Hz), 3,20 (1H, dq, J=9,0, 7,3 Hz), 1,82 až 1,98 (4H, m), 1,38 (3H, d, J=6,l Hz), 1,27 (3H, d, J=7,2 Hz).

(2) (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-Pyrolidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(1R,5S,6S )-2-(1-(4-pyrolidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-y1]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1194

-metyl karbapén-2-em-3-karboxylát (240 mg, 0,39 mol) ''získaný podľa opisu v príklade 31(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (12 ml j a destilovanej vody (12 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom ohli (240 mg) vo voonom kúpeli (30°C) 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol príoaný hydrogénuhličitan sodný (33 mg), kyselina octová a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženéno tlavu. Zvyšok ool vyčistený chrómatograficky na kolóne Cosmosil počas použitia destilovanej vody - 3% acetonitrilu; destilovanej vody - 6% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-pyrolidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetiaíη-3-yl]tio-6- ľ (R) -1-hydroxyetylj -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny,

sodná sol	(113 mg, výťažok 60%) ako biela pevná látka.
-NMR	(400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 7,40 (IH, s), ^Ĺ	(, o 6	(2H, t,
J=8,6 Hz),	4,43 až 4,30 (IH, m), 4,25 (IH, kvínt.,	J=6	,4 Hz),
4,20 (IH,	dd, J=8,9, 2,4 Hz), 4,10 až 3,98 (2H, m),	3,62	(2H, t,
J= 6,6 Hz),	3,54 (2H, t, J=6,6 Hz), 3,26 (IH, dq, J=8	, 9, 7	,4 Hz),
3,43 (1H,	dd, J=8,9, 2,4 Hz), 2,05 až 1,85 (4H, m),	1,30	(3H, o,
J=6,4 Hz),	1,27 (3H, d, J=7,4 Hz).
IR(KBr): 3375,7, 1605,9, 1537,4, 1468,9, 1423,6, (	(396,í	- r

1298,2 cm ¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): m/z: 501 (M+H]⁺

Príklad 32 (ÍR, 5S,6S)-2-[1-(4-Piperidinokarbonyi-1,3-tiazol-2-yl)azetióíη-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyi j-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxyiová kyselina, sodná sol

195

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-piperidinokarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-l-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-piperidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (276 mg, 0,85 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 27) v dimetylformamide (20 ml) bol pridaný hydrazínacetát (94 mg, 1,02 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (505 mg, 0,85 mol) v acetonitrile (20 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,59 ml, 3,40 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia etylacetátu a etylacetát : metanolu (9:1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2- [1- ( 4-piperidinokarbonyl-l, 3- tiazol-2-yl) azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu

196 (464 mg, výťažok 87%) ako bledožltá pevná látka.

^]H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,7 Hz),

7,66 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,02 (1H, s), 5,51 (1H, d, J=13,7 Hz), 5,26 (1H, d, J=13,7 Hz), 4,51 (1H, t, J=8,l Hz), 4,50 (1H, t, J= 8,1 Hz), 4,32 až 4,20 (3H, m obsahujúci 4,25 (1H, dd, J=8,0, 2,5 Hz)), 4,07 (1H, t, J=5,7 Hz), 4,05 (1H, t, J=5,7 Hz), 3,72 až

3,58 (4H, m), 3,28 (1H, dd, J=6,8, 2,5 Hz), 3,20 (1H, dq, J=8,4, 7,3 Hz), 1,80 až 1,45 (6H, m), 1,38 (3H, d, J=6, 8 Hz), 1,26 (3H, d, J= 7,1 Hz) .

(2) (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-Piperidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetídín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-[l-(4-piperidinokarbonyl-1,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (464 mg, 0,74 mol) (získaný podlá opisu v príklade 32(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (20 ml) a destilovanej vody (20 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (464 mg) ve vodnom kúpeli (35°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (62 mg), kyselina octová a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na kolóne Cosmosil počas použitia destilovanej vody - 2% acetonitrilu; destilovanej vody - 5% acetonitrilu; destilovanej vody - 10% acetonitrilu; destilovanej vody - 20% acetonitrilu; destilovanej vody - 30% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S,6S)-2-[1-(4-piperidinokarbonyl-1,3-tiazoi-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (171 mg, výťažok 45%) ako biela pevná látka.

197 ¹H-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 7,04 (IH, s), 4,10 až 4,00 (2H, m), 4,42 až 4,30 (IH, m), 4,25 (IH, kvínt., J=6,2 Hz), 4,21 (IH, dd, J=9,0, 2,4 Hz), 4,05 (2H, ddd, J=8,3, 5,4, 2,7 Hz), 3,62 (2H, t, J=5,3 Hz), 3,49 (2H, t, J=5,3 Hz), 3,44 (IH, dd,

J=6,2, 2,4 Hz), 3,26 1	)1H, dq, J=7,7,	7,4 Hz),	1,70 až 1,	60 (4H,
m) , 1,60 až 1,50 (2H,	m), 1,30 (3H,	d, J=6,4	Hz),1,27	(3H, d,
J= 7,2 Hz) .
IR(KBr): 3382,5,	1747,7, 1605,9	, 1538,4,	1400,4,	1310,7,

124 9, 0 cm ¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 515 [M+H] ⁺

Príklad 33 (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-cyklopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-cyklopropylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-N-cyklopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (342 mg, 1,15 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 28) v dimetylformamide(12 ml) bol pridaný hydrazínacetát (127 mg, 1,38 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (684 mg, 1,15 mol) v acetonitrile (25 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu

198 (0,80 ml, 4,60 mol). Zm.es bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M vodným roztokom chloridu sodného, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia etylacetátu a etylacetát : metanolu (9:1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(iR,5S,6S)-2-[l-(4-N-cyklopropylkarbamoyl -1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (606 mg, výťažok 88%) ako bledožltá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,7 Hz),

7, 66	(2H, d, J=8,7 Hz), 7,	44 (	IH,	s) ,	7,23 (IH, br,	s) ,	5,51
(IH,	d, J=13,7 Hz), 5,25	(IH,	d,	J=1	3,7 Hz), 4,49	(2H,	dd,
J=14,	3, 7,6 Hz), 4,37 až 4	, 19	(3H	, m) ,	3,98 až 4,12	(3H,	m) ,
3,30	(IH, dd, J=9,2, 7,3 Hz)	, 3,	20	(IH,	dq, J=9,2, 7,3	Hz) ,	2,80

až 2,94 (1K, m), 1,38 (3K, d, J=6,4 Hz), 1,27 (3H, d, J=7,3 Hz), 0,85 (IH, t, J=5,5 Hz), 0,83 (IH, t, J=5,5 Hz), 0,58 až 0,70 (2H, m).

(2) (ÍR,5S,6S)-2-[i-(4-N-Cyklopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S_Z 6S)-2-[1-(4-N-cyklopropylkarbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (606 mg, 1,01 mol) (získaný podľa opisu v príklade 33(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (30 ml) a destilovanej vody (30 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (606 mg) vo vodnom

199 kúpeli (35°C) 2,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (85 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na kolóne Cosmosil počas použitia destilovanej vody - 5% acetonitrilu; destilovanej vody - 10% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-cyklopropylkarbamoyl-1, 3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (275 mg, výťažok 56%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂0) : δ (ppm) 7,46 (IH, s), 4,54 (2H, t,

J=8,2 Hz), 4,38 až 4,30 (IH, m), 4,25 (IH, kvínt., J=6,3 Hz),

4,19 (IH, dd, J=8,9, 2,4 Hz), 4,10 až 4,19 (IH, dd, J=8,9, 2,4

Hz), 3,43 (IH, dd, J=6,3, 2,4 Hz), 3,24 (IH, dq, J=8,9, 7,3 Hz),

2,78 až 2,70 (IH, m), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,19 (3H, d, J=7,2 Hz), 0,85 (IH, t, J=5,2 Hz), 0,84 (IH, t, J=5,2 Hz), 0,73 až

0, 61 (2H, m) .

IR(KBr): 3397,0, 1750,1, 1603,5, 1545,7, 1489,7, 1470,5,

1393,3, 1312,3 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 465 [M+H] ⁺

Príklad 34 (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-Cyklobutylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

COO’Na

200 (1) p-Nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-[l-(4-N-cyklobutylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-N-cyklobutylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (398 mg, 1,28 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 29) v dimetylformamide (15 ml) bol pridaný hydrazínacetát (141 mg, 1,53 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 2,5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-i-hydroxyetyi]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (761 mg, 1,28 mol) v acetonitrile (30 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,88 ml, 5,12 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M vodným roztokom chloridu sodného, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýtenými vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia etylacetátu a etylacetát : metanolu (9:1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-cyklobutylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (578 mg, výťažok 74%) ako bledožltá pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,41 (IH, s), 5,51 (IH, d, J=13,7 Hz), 5,25 (IH, d, J=13,7 Hz), 4,60 až 4,42 (3H, m obsahujúci 4,52 (2H, kvint., J=7,8 Hz)), 4,36 až 4,20 (3H, m), 3,30 (IH, dd, J=6,9, 2,5 Hz), 3,21 (IH, dq, J=9,2, 7,4 Hz), 2,47 až 2,33 (2H,

201

m), 2,10 až 1,92 (2H, m),1,85 až 1,65 (2H, m), 1,39 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,28 (3H, d, J=7,3 Hz).

(2) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-N-Cyklobutylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl]tio-6-[ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-cyklobutylkarbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (578 mg, 0,94 mol) (získaný podľa opisu v príklade 34(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (30 ml) a destilovanej vody (30 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (578 mg) vo vodnom kúpeli (35°C) 2,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (79 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na kolóne Cosmosil počas použitia destilovanej vody - 5% acetonitrilu; destilovanej vody - 10% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-N-cyklobutylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ (322 mg, výťažok 68%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 7,45 (1H, s), 4,56 (2H, t, J=8,0 Hz), 4,44 až 4,29 (2H, m), 4,25 (1H, kvínt., J=6,3 Hz), 4,20 (1H, dd, J=8,8, 2,4 Hz), 4,12 až 4,00 (2H, m), 3,44 (1H, dd, J=6,3, 2,5 Hz), 3,26 (1H, dq, J=8,8, 7,4 Hz), 2,41 až 2,28 (2H, m), 2,15 až 2,00 (2H, m), 1,87 až 1,72 (2H, m), 1,31 (3H, d, J=6,2 Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2 Hz).

IR(KBr): 3395,1, 1750,1, 1659,4, 1604,5, 1545,7, 1490,7,

1470, 5, 1393, 8, 1310, 4, 1251, 6 cm¹

Hmotnostné spektrum (EAB⁺) : m/z: 501 [M+H] ⁺

202

Príklad 35 (ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(4-Metylpiperazín-1-karbonyi)-1, 3-tiazol2-yljazetidín-3-yl}tio-6em-3-karboxylová kyselina, ' R) -1-hydroxyeryl j -1-metylkarbapé sodná soľ

(i ) p-Nitrobenzyl-TR,5S,6S)— 2 —{1—T-í4-meoylpiperazín- i-karbonyi) -1,3-tiazol-2-ylj -azetidín-3-yl} tio-6- [ (R) -1-hydroxyeoyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-[4-(4-metylpiperazín-i-karbonyl)-1, 3-tiazol-2-yl]azetidínu T, 35 g, 3,97 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 30) v dimetylformamide (40 ml) bol pridaný hydrazínacetát (438 mg, 4,76 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná i hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S, 6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyiJ-l-metyikarbapén-2-em-3-karboxylátu (2,36 g, 3,97 mol) v acetonitrile (40 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (2,77 ml, 15,9 mol) zvyšovaní teploty ukončenia . Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný oo reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne

203 počas použitia etylacetátu a etylacetát : metanolu (1 : 5) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-(4-metylpiperazín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[ (R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (828 mg, výťažok 60%) ako bledožltá pevná látka.

'•H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,7 Hz),

7,66	(2H, d,	J=8,7 Hz), 7,16	(IH, s), 5,51	(IH, d, J=13,8	Hz) ,
5,25	(IH, d,	J=13,8 Hz), 4,50	(IH, t, J=4,	9 Hz), 4,49 (IH	z t,
J=4,	9 Hz), 4,	33 až 4,20 (3H,	m) , 4,06 (IH,	t, J=4,9 Hz),	4,05
(IH,	t, J=4,9	Hz) 3,99 až 3,73	(4H, m), 3,29	(IH, dd, J=7,0,	2,5
Hz) ,	3,20 (IH	, dq, J=9,l, 7,3	Hz) , 2,74 až	2,48 (4H, m),	1,38
(3H,	d, J=6,3	Hz), 1,27 (3H, d,	J=7,3 Hz).

(2) (ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(4-Metylpiperazín-1-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl- (ÍR, 5 S , 6S)—2—{1— [4 — (4-metylpiperazŕn-1-karbonyl) -1,3-tiazol-2-yl]-azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (500 mg, 0,78 mol) (získaný podlá opisu v príklade 35(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (25 ml) a destilovanej vody (25 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (500 mg) vo vodnom kúpeli (35°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bola pridaná kyselina octová a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená, premytá zmesou rozpúšťadiel uvedených vyššie a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na kolóne Cosmosil počas použitia destilovanej vody - 2% acetonitrilu; destilovanej vody - 4% acetonitrilu; destilovanej vody - 6% acetonitrilu; destilovanej vody - 8% acetonitrilu; destilovanej vody - 10% acetonitrilu;

destilovanej vody - 12% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej

204 zlúčeniny (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(4-metylpiperazín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl} tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ (192 mg, výťažok 49%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂0) :δ (ppm) 7,24 (1H, s), 4,57 (2H, t, J=8,4 Hz), 4,39 až 4,30 (1H, m), 4,25 (1H, kvínt., J=6,3 Hz), 4,20 (1K, dd, J=9,0, 2,4 Hz), 4,15 až 3,05 (12H, m obsahujúci 4,04 (2H, dd, J=8,4, 4,9 Hz), 3,44 (1H, dd, d = 6,3, 2,6 Hz), 3,25 (1H, dq, J=9,0, 7,0 Hz)), 2,88 (3H, s), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,20 (3H, d, J=7,1 Hz) .

IR(KBr): 3397,0, 1757,8, 1606,4, 1536,0, 1457,9, 1429,0,

1383,7, 1312,3 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 508 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FSI⁺) : počítané

C22H3oO₅N₅S₂Na 508,1688, nájdené 508,1688 [M+H] ⁺

Príklad 36 (ÍR,5S,6S)—2—{1— [4-(3-Metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl} tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

COO'Na⁺ (1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl) -1, 3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl·} tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1, 3-tiazol-2-yl]azetidínu (350 mg, 1,07 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 31) v dimetylformamide (18 ml) bol pridaný hydrazínacetát (118 mg, 1,28 mol) pri teplote miestnosti

205 pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (636 mg, 1,07 mol) v acetonitrile (32 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (746 μΐ, 4,28 mol). Zmes bola miešaná 6 hodín pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 10% vodným roztokom chloridu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia etylacetát : metanolu (95 : 5 a 9 : 1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2—{1— -[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl} tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (636 mg, výťažok 94%) ako bledožltá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66

(2H,	d,	J=8,8 Hz), 7,44 (1H,	S) ,	5,51	(1H, d, J=13,9	Hz), 5,25
(1H,	d,	J=13,2 Hz), 4,75 až 4	,69	(1H,	m), 4,51 až 4,4	3 (2H, m),.
4,42	až	4,37 (1H, m) , 4,32 až	4,20	(5H	, m), 4,04 (2H,	dt, J=8,l,
5,1	Hz) ,	, 3,33 (3H, s), 3,29	(1H,	dd,	J=2,2, 6,6 Hz),	3,20 (1H,
dq,	J=9,	,2, 7,3 Hz), 1,38 (3H,	d,	J=6,	6 Hz), 1,27 (3H	, d, J=7,3

Hz) .

(2) (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(3-Metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-(4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl) -1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1206

-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (630 mg, 1,00 mol) (získaný podľa opisu v príklade 36(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (32 ml) a destilovanej vody (32 mol) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (630mg) pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (84 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na kolóne Cosmosil počas použitia destilovanej vody a destilovanej vody : acetonitrilu (92 : 8) ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(3-metoxyazetičín-1-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl] -azetidín-3-yl} tío-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (239 mg, výťažok 46%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂0) : δ (ppm) 7,39 (1H, s), 4,76 až 4,69 (1H, m), 4,56 (2H, d, J=8,l Hz), 4,44 až 4,31 (4H, m), 4,25 (1H, dq, J=6,l, 6,4 Hz), 4,20 (1H, dd, J=2,4, 9,1 Hz), 4,09 až 3,99 (3H, m), 3,43 (1H, dd, J=2,4, 6,1 Hz), 3,37 (3H, s), 3,26 (1H, dq, J-9,1, 7,2 Hz), 1,30 (3H, d, J-6,4 Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2

Hz)

IR(KBr): 1750, 1607, 1538, 1449, 1395, 1306 cm^-1

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): m/z: 539 [M+Na]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FSI⁺) : počítané C₂₁H5₂O6N₄S₂Na2 539, 0111, nájdené 539,1026 [M+Na] ⁺

Elementárna analýza počítané C₂jH₂₅O₆N₄S₂Na, 3/2H₂O C:46,40%; H:5,19%; N:10,31%; 8:11,80% nájdené C:46,48%; H:5,53%; N:10,60%; S:ll,66%

Príklad 37 (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-Fenylkarbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

207

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-fenylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-fenylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (893 mg, 2,68 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 32) v dimetylformamide (40 ml) bol pridaný hydrazínacetát (296 mg, 3,21 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (1,59 g, 3,21 mol) v acetonitrile (53 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (1,87 ml, 10,7 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepána v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia etylacetátu a etylacetát : metanolu (9 : 1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-f enylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-t(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (1,2 g, výťažok 71%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,29 až 8,18 (2H, m), 7,73

208 až 7,62 (4H, m), 7,62 až 7,50 (IH, m), 7,42 až 7,82 (2H, m), 7,18 až 7,09 (IH, m), 5,51 (IH, d, J=13,8 Hz), 5,25 (IH, d, J=13,8 Hz), 4,54 (2H, dd, J=15,6, 7,8 Hz), 4,40 až 4,21 (3H, m), 4,21 až 4,08 (2H, m), 3,31 (IH, dd, J=6, 9, 2,5 Hz), 3,23 (IH, dq,

J=9,l, 7,3 Hz), 1,39 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,29 (3H, d, J=7,3 Hz).

(2) (ÍR, 5S, 6S)-2-[1-(4-Fenylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-[l-(4-fenylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidin-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (400 mg, 0,63 mol) (získaný podía opisu v príklade 37(1)) v zmesi tetrahydrofuranu (120 ml) a destilovanej vody (120 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomností 7,5% paládia na aktívnom uhlí (400 mg) pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (53 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepanáa v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na kolóne Cosmosil počas použitia destilovanej vody - 4% acetonitrilu;

destilovan'ej vody - 8% acetonitrilu; destilovanej vody - 12% acetonitrilu; destilovanej vody -16% acetonitrilu ...a. destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (lR,5S,6S)-2-[l-(4-fenylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (211 mg,

výťažok 64%) ako biela pevná látka.	7, 60	až 7,51 (3H, m),	7,54 až
¹H-NMR	(400 M Hz, D₂O) : δ	(ppm)
7,42 (2H,	m), 7,36 až 7,27	(IH, m)	, 4,	63 až 4,52 (2H,	m) , 4,29
až 4,39 (	IH, m), 4,25 (IH,	kvínt	. , J=	= 6,3 Hz) , 4,20	(IH, dd,
J=9,0, 2,3	Hz), 4,09 (IH, t,	J=8, 8	Hz) ,	4,08 (IH, t, J=	=8,8 Hz),
3,44 (IH,	dd, J=6,6, 1,9 Hz)	, J , z 5	(IH,	dq, J=6, 3, 5,9	Hz), 1,3

209 (3Η, d, J=6,4 Hz), 1,20 (3H, dd, J=7,2, 2,4 Hz).

IR(KBr): 3368,1, 1750,1, 1676,8, 1598,7, 1538,9, 1506,1,

1470,5, 1440, 6, 1394,3, 1324,9, 1295, 9, 1245,8 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 501 [M+H] ⁺

Príklad 38 (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(2-Hydroxyetylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

HO

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[2-terc.

butyldimetylsilyloxy)etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-{4-[2-(terc.butyldimetylsilyloxy) etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (398,2 mg, 0,96 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 33) v dimetylformamide (20 ml) bol pridaný hydrazínacetát_ýllQ mg, 1,19 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxyláru (561,4 mg, 0,94 mol) v acetonitrile (38 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,7 ml, 4,02 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do

210 reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia toluén : acetonitrilu (2 :

1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(l-{4-[2- (terc. butyldimetylsilyloxy) e tyl karbamoyl ] — 1,3-tiazol-2-yl} azetidín-3-yl) tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (605,3 mg, výťažok 80%) ako bledožlutý sirup.

¹H-NMR (500 M Hz, CDC1₃) : Ó (ppm) 8,79 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,54 (1H, t, J=5,8 Hz), 7,42 (1H, s), 5,51 (1H, d, J=13,7 Hz), 5,26 (1H, d, J=13,7 Hz), 4,48 (1H, dd, J=8,3,

7,3 Hz), 4,45 (1H, dd, J=8,3, 7,3 Hz), 4,32 až 4,23 (3H, m), 4,06 (1H, dd, J=8,3, 5,9 Hz), 4,03 (1H, dd, J=8,3, 5,9 Hz), 3,76 (2H, t, J=5,8 Hz), 3,52 (2H, q, J=5, 8 Hz), 3,30 (1H, dd, J=6,8, 2,0

Hz), 3,208 (1H, dq, J=9,0, 7,4 Hz), 1,95 (1H, br, s), 1,38 (3H, d, J=5,7 Hz), 1,27 (3H, d, J=6,8 Hz), 0,91 (9H, s), 0,07 (6H, s).

(2) p-Nitrobenzyl-(ÍR, 5S,6S)-2-{l-[4-(2-hydroxy-etylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R) -1-hydroxyetyl]~l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-(4-[2-(terc.

butyldimetylsilyloxy)etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (605,3 mg, 0,84 mol) v tetrahydrofurane (30 ml) bola pridaná kyselina octová (0,15 ml, 2,6 mol) a roztok 1 M tetrabutylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (2,5 ml, 2,5 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia zmes rozdelená medzi etylacetát a hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva

1 hodinu	pri	teplote
reakcie	bola	reakčná
nasýtený	vodný	roztok
vrstva	bola	premytá

211 nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia toluén : acetonitrilu (2 : 3) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(2-hydroxyetylkarbamoyl) -1, 3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl) tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (383,7 mg, výťažok 75%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (500 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=7,9 Hz), 7,66 (2H, d, J=7,9 Hz), 7,53 (1H, t, J=5,3 Hz), 7,45 (1H, s), 5,508 (1H, d, J=13,7 Hz), 5,255 (1H, d, J-13,7 Hz), 4,50 (1H, t, J=8,6 Hz), 4,48 (1H, t, J=8,6 Hz), 4,32 až 4,24 (3H, m), 4,07 (1H, dd, J=8,6, 5,3 Hz), 4,05 (1H, dd, J=8,6, 5,3 Hz), 3, 807 (2H, t, J=5,3 Hz), 3,58 (2H, q, J=5,3 Hz), 3,295 (1H, dd, J=7,6, 2,3 Hz), 3,21 (1H, dq, J=9,l, 7,6 Hz), 2,78 (1H, br, s), 1,92 (1H, br, s), 1,38 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,24 (3H, d, J=7,6 Hz).

(3) (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(2-Hydroxyetylkarbamoyl)-1,3-tiazol2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1 -hydroxyetyl] -1 -metylkarbapén-2em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(ÍR, 5S,6S)-2-{l-[4-(2-hydroxyletylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (383,7 mg, 0,64 mol) (získaný podľa opisu v príklade 38(2)) v zmesi tetrahydrofuránu (20 ml) a destilovanej vody (9,6 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia na aktívnom uhlí (400 mg) vo vodnom kúpeli (30°C) 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (53,4 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na kolóne Cosmosil počas použitia destilovanej vody - 3% acetonitrilu; destilovanej vody - 5%

212 acetonitrilu; destilovanej vody -10% acetonitrilu a destilovanej vody ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (lR,5S,6S)-2-{l-(4-(2-hydroxyetylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ (152,2 mg, výťažok 49%) ako biela pevná látka.

P-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 7,29 (IH, s), 4,36 (2H, t,

J=8,4 Hz), 4,20 až 4,10 (IH, m), 4,05 (IH, kvintet, J=6, 6 Hz), 4,00 (IH, dd, J=10,9, 2,2 Hz), 3,90 až 3,83 (2H, m), 3,55 (2H, t, J=5, 5 Hz), 3,32 (2H, t, J=5,5 Hz), 3,24 (IH, dd, J=6, 6, 2,2 Hz), 3,06 (IH, dq, J=10,9, 8,6 Hz), 1,11 (3H, d, J=6,6 Hz), 1,00 (3H, d, J=8,6 Hz) .

IR(KBr): 3396, 1748, 1649, 1599, 1551, 1395, 1315, 1265 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): m/z: 491 [M+Hp

Hmotnostné spektrum velkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané C₁₉H₂3O6N₄S₂Na 491,1035, nájdené 491,1024 [M+H1 ⁺

Príklad 39 (ÍR, 5S, 6S ) -2- {1-(4-( (1S) -1-Hydroxymetyl-propylkarbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

(1) p-Nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-(l-{4-((lS)-l-(terc.

Butyldimetylsilyloxymetyl)-propylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-vl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku

3-acetyltio-l-{4-[(1S)-1- (terc.

213 butyldimetylsilyloxymetyl)-propylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidinu (610 mg, 1,37 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 34) v dimetylformamide (30 ml) bol pridaný hydrazínacetát (152 mg, 1,65 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (814 mg, 1,37 mol) v acetonitrile (40 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (955 jol, 5,48 mol) . Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 10% vodným roztokom chloridu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 2) a etylacetátu ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1- (terc. butyldimetylsilyloxymetyl) -propylkarbamoyl] -1, 3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (928 mg, výťažok 89%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,42 (IH, s), 7,42 až 7,38 (IH, br, d, J=9,5 Hz), 5,51 (IH, d, J=13,9 Hz), 5,25 (IH, d, J=13,9 Hz), 4,50 (IH, t, J=8,l Hz), 4,45 (IH, t, J=8,l Hz), 4,31 až 4,23 (2H, m), 4,27 (IH, dd, J=8,8, 2,6 Hz), 4,07 až 1,01 (2H, m), 4,00 až 3,94 (IH, m), 3,72 (IH, dd, J=10,3, 2,6 Hz), 3,65 (IH, dd, J=10,3, 4,0

Hz), 3,30 (IH, dd, J=7,3, 2,6 Hz), 3,21 (IH, dq, J=8,8, 6,6 Hz), 1,72 až 1,56 (2H, m), 1,38 (3H, d, J=5,7 Hz), 1,27 (3H, d, J=6,6 Hz), 0,95 (3H, t, J=7,3 Hz), 0,90 (9H, s), 0,06 (6H, s).

214 (2) p-Nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-hydroxymetyl-propylkarbamoyl)-1,3-thiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(l-{4-[(1S)-1-(terc. butyidimetylsiiyloxymetyl)-propylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (920 mg, 1,23 mol) (získaného podía opisu v príklade 39(1)) v tetrahydrofuráne (46 ml) bola pridaná kyselina octová (208 ul, 3,63 mol) a roztok 1 M tetrabutylamoniumíluoridu v tetrahydrofuránu (3,63 ml, 3,63 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná 2 dni pri teplote miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená mezí etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia etylacetátu a etylacetát : metanolu (95 : 5) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-{l-[4-((1S)-1-hydroxymetyl-propylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (437 mg, výťažok 56%) ako bledožltá pevná látka.

^H-NMR (500 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,44 (1H, s), 7,24 až 7,19 (1H, br, d, J=7,8

Hz) ,	5,51 (1H, d, J=13,7 Hz), 5,26 (1H, d,	J=13,7 Hz), 4,50 (	2H,
dt,	J=8,8, 4,9 Hz), 4,32 až 4,24 (3H, m),	4,07 (2H, dt, J=8	,8,
5,9	Hz), 4,01 až 3,93 (1H, m), 3,81 až 3,75	(1H, m) , 3,71 až 3	,64
(1H,	m), 3,30 (1H, dd, J=6,8, 2,9 Hz), 3,21 (1H, dq, J=9,0,	6, 8
Hz) ,	1,75 až 1,66 (1H, m), 1,65 až 1,55 (	1H, m) , 1,38 (3H,	d,
J=6,	8 Hz), 1,28 (3H, d, J=7,8 Hz), l,00(3H,	t, J=7,8Hz).

(3) (ÍR, 5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-Hydroxymetyl-propylkarbamoyl) -i, 3-riazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1215

-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-hydroxymetyl-propylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (430 mg, 0,681 mol) (získaný podlá opisu v príklade 39(2)) v zmesi tetrahydrofuranu (22 ml) a destilovanej vody (22 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (430 mg) pri teplote miestnosti 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (57 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na kolóne Cosmosil počas použitia destilovanej vody a destilovanej vody : acetonitrilu (94 : 6) ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (lR,5S,6S)-2-{l-[4-((lS)-l-hydroxymetyl-propylkarbamoyi)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (212 mg, výťažok 60%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O, TSP): δ (ppm) 7,49 (1H, s), 4,59 až 4,52 (2H, m), 4,39 až 4,31 (1H, m), 4,25 (1H, dq, J=6,8, 6,3 Hz), 4,21 (1H, dd, J=9,0, 2,4 Hz), 4,10 až 4,03 (2H, m), 4,01 až 3,93 (1H, m), 3,71 (1H, dd, J=ll,7, 4,5 Hz), 3,64 (1H, dd, J=ll,7, 6,8 Hz),

3,43 (1H, dd, J=6,3, 2,4 Hz), 3,26 (1H, dq, J=8,8, 7,2 Hz), 1,73 až 1,62 (1H, m), 1,57 až 1,44 (1H, m), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz),

1,20 (3H, d, J=7,2 Hz), 0,93 (3H, t, J=7,4 Hz).

IR(KBr): 1750, 1650, 1602, 1547, 1393, 1313 cm^-1

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 519 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané

519,1348, nájdené 519,1339 [M+H]⁺

Elementárna analýza počítaná C₂iH₂₇O6N₄S₂Na, 7/4H₂O

C:45,85%;H:5,79%;N:10,18%;S:11,66% nájdená C:46,07%; H:5,78%; N:10,29%; S:ll,61%

216

Príklad 40 (ÍR, 5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-Hydroxymetyl-etylkarbamoyl)-1, 3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

COO'Na⁺ (1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(l-{4-[(1S)-2- (terc. Butyldimetylsilyloxy)-1-metyletylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-{4-[(1S)-2-(terc.

butyldimetylsilyloxy)-lmetylety1karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl] azetidínu (645 mg, 1,50 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 35) v dimetylformamide (32 ml) bol pridaný hydrazínacetát (166 mg, 1,80 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-l-nydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxyiátu (892 mg, 1,50 mol) v acetonitrile (45 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (1,05 ml, 6,0 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 10% vodným roztokom chloridu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený

ΊΛΊ chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 2) a etylacetátu ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S, 6S) -2- (1-{4-[(IS) -2-terc.butyldimetylsilyloxy) -1-metyl]-etylkarbamoyl}-!,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (94 9 mg, výťažok 86%) ako bledožltá pevná látka.

hi-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,44 až 7,38 (IH, br, d, J=5,9 Hz), 7,42 (IH,

S) ,	5,51	(IH, d, J=13,9 Hz	5,	25	(IH, d, J=13,9 Hz), 4,	52 až
4,42	(2H	,m) , 4,33 až 4,22	(3H,	m)	, 4,22 až 4,14 (IH, m),	4,04
(2H,	ddd,	J=14,0, 5,9, 2,9	Hz) ,	3,	67 (IH, dd, J=10,3, 4,4	Hz) ,
3, 62	(IH,	, dd, J=10,3, 2,9	Hz) ,	3,	30 (IH, dd, J=6,6, 2,2	Hz),
3,21	(IH,	dq, J=7,3 , 6,6 Hz	), i,	38	(3H, d, J=5,9 Hz), 1,27	(3H,
d, J=	=7,3	Hz), 1,25 (3H, d, J	=6, 6	Hz	), 0,92 (9H, s), 0,07 (6H	, s) .

(2) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-((IS)-2-hydroxy-l-metyletylkarbamoyl)-1,3-thiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[(IS)-2-(terc. butyldimetylsilyloxy) -1-metyletylkarbamoyl] -1, 3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (940 mg, 1,28 mol) (získaného podľa opisu v príklade 40(1)) v tetrahydrofurane (47 ml) bola pridaná kyselina octová (221 μΐ, 3,8 5 mol) a roztok 1 M tetrabutylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (3,85 ml, 3,85 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná 3 dni pri teplote miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená mezi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia etylacetát : metanolu (99 : 1 a 9 : 1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-[4-((IS)-2-hydroxy-1218

-metyletylkarbamoyl )-l, 3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (462 mg, výťažok 58%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,44 (IH, s), 7,23 až 7,19 (IH, br, d, J=7,3 Hz), 5,51 (IH, d, J=13,9 Hz), 5,25 (IH, d, J=13,9 Hz), 4,52 až 4,46 (2H, m), 4,31 až 4,24 (2H, m), 4,27 (IH, dd, J=9,5, 2,0

Hz), 4,22 až 4,15 (IH, m), 4,06 (2H, dt, J=8,l, 5,1 Hz), 3,79 až 3,71 (IH, m), 3,66 až 3,59 (IH, m), 3,30 (IH, dd, J=6,6, 2,2 Hz), 3,21 (IH, dq, J=9,5, 7,3 Hz), 1,38 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,28 (6H, d, J=7,3 Hz) .

(3) (ÍR, 5S, 6S)—2 — {1— [4 — ( (1S) -2-Hydroxy-1-metyletylkarbamoyl·) -1,3-tiazol-2-yi] azetidín-3-yl} tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-{l-[4-((1S)-2-hydroxy-1-metyletylkarbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl] azetidin-3-yl} tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (460 mg, 0,745 mol) (získaný podía opisu v príklade 40(2)) v zmesi tetrahydrofuránu (23 ml) a destilovanej vody (23 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (460 mg) pri teplote miestnosti 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (63 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na kolóne Cosmosil počas použitia destilovanej vody a destilovanej vody : acetonitrilu (82 : 12) ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-2-hydroxy-l-metyletylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ (179 mg, výťažok 48%) ako biela pevná látka.

219 ¹H-NMR (400 M Hz, D₂O, TSP): δ (ppm) 7,48 (IH, s), 4,56 (2H, dd, J=8,3, 8,3 Hz), 4,39 až 4,32 (IH, m), 4,25 (IH, dq, J=6,3, 6,4 Hz), 4,20 (IH, dd, J=9,l, 2,4 Hz), 4,18 až 4,11 (IH, m),

4,10 až 4,03 (2H, m), 3,68 (IH, dd, J=ll,6, 4,8 Hz), 3,61 (IH, dd, J=ll,6, 6,7 Hz), 3,44 (IH, dd, J=6,3, 2,4 Hz), 3,26 (IH, dq, J=9,l, 6,6 Hz), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,22 (3H, d, J=6,7 Hz), 1,20 (3H, d, J=6,6 Hz) .

IR (KBr): 1749, 1650, 1602, 1547, 1393, 1313, 1295 cm’¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): m/z: 505 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané

C₂oH₂60₆N₄S₂Na 505,1191, nájdené 505,1196 [M+H] ⁺

Elementárna analýza počítaná C₂₀H₂₅O6N4S₂Na, 4/3H₂O

C:45,45%; H:5,28%; N:10,60%; S:12,13% nájdená C:45,63%; H:5,35%; N:10,66%; S:ll,91%

Príklad 41 (ÍR, 5S, 6S) -2-{1- [4 - ( (IS) -1—Hydroxymetyl-2-nietylpropylkarbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl] -azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[(IS)-1-(terc.

butyldimetylsilyloxymetyl) -2-metylpropylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6- [ (R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-{4-[(IS)-1-(terc.

butyldimetylsilyloxymetyl)-2-metylpropyl-karbamoyl]-l,3-tiazol-2-yl}azetidínu (500 mg, 1,09 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 36) v dimetylformamide (25 ml) bol pridaný

220 hydrazínacetát (121 mg, 1,31 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S, 6S)-2- (difenylfosforyloxy) -6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (64 8 mg, 1,09 mol) v acetonitrile (33 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (759 μΐ, 4,36 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný co reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 10% vodným roztokom chloridu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 2 a 1 : 4) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S, 6S)-2-(l-{4-[(lS)-l-(terc.butyldimetylsilyloxymetyl)-2-metyl-propylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)-tio-6-[(R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (649 mg, výťažok 84%) ako bledožltá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : ô(ppm) 8,23 (2 H, d, J=8,8 Hz), 7,66

(2H, d,	J=8,8	Hz) ,	7,47 až 7,52 (IH, br, d,	J=9,8	Hz), 7,43	(IH,
s) , 5,52	(IH,	d, J=	=13,7 Hz), 5,25 (IH, d, J	= 13,7	Hz), 4,51	(IH,
t, J=7,8	Hz) ,	4,45	(IH, t, J=7,8 Hz), 4,28	(IH,	dd, J=9,3,	2, 0
Hz), 4,31 až	4,25	(2H, m), 4,05 (2H, ddd, J=7,8,	5,6, 1,2	Hz) ,
3,86 až	3,80	(2H,	m), 3,62 (IH, dd, J=9,8,	3,9	Hz), 3,30	(IH,
dd, J=6,	8, 2,	0 Hz)	, 3,22 (IH, dq, J=9,3, 6,	8 Hz)	, 2,05 až	1,95
(IH, m),	1,39	(3H,	d, J—5,9 Hz), 1,28 (3H,	d, J=6,8 Hz) ,	0,99
(3H, d,	J=6,8	Hz) ,	0,97 (3H, d, J=6,8 Hz) ,	0, 91	(9H, s),	0,06
(6H, s) . (2)	p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-((	IS) -i·	-hydroxymetyl-

-2-metylpropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6221

-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(l-{4-[(1S)-1(terc.butyldimetylsilyloxymetyl) -2-metylpropylkarbamoyi] -1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl) tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (690 mg, 0,914 mol) (získaného podľa opisu v príklade 41(1)) v tetrahydrofurane (35 ml) bola pridaná kyselina octová (157 μΐ, 2,7 4 mol) a roztok 1 M tetrabutylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (2,74 ml, 2,74 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná 2 dni pri teplote miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená mezi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia etylacetátu a etylacetát : metanolu (9:1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-{l-[4-((1S)-1-hydroxymetyl-2-metylpropylkarbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl) tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (388 mg, výťažok 66%) ako bledožltá pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,44 (1H, s), 7,33 až 7,28 (1H, br, d, J=8,8 Hz), 5,51 (1H, d, J=13,9 Hz), 5,25 (1H, d, J=13,9 Hz), 4,50 (2H, ddd, J=8,l, 8,1, 3,7 Hz), 4,32 až 4,24 (2H, m), 4,27 (1H, dd, J=9,2, 2,5 Hz), 3,88 až 3,76 (2H, m), 3,74 (1H, dd, J=ll,0, 6,6 Hz), 3,30 (1H, dd, J=7,0, 2,5 Hz), 3,22 (1H, dq, J=7,2, 7,3 Hz), 2,06 až 1,95 (lH,m) , 1,38 (3H, d, J=6, 6 Hz), 1,28 (3H, d,

J=7,3 Hz), 1,02 (3H, d, J=7,3 Hz), 0,99 (3H, d, J=6,6 Hz).

(3) (ÍR, 5S, 6S)-2-{1-[4-((1S)-l-Hydroxymetyl-2-metylpropylkarbamoyi) -1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

222 p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2—{1-[4-( (1S)-l-hydroxymetyl-2-metylpropylkarbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (380 mg, 0,588 mol) získaný podlá opisu v príklade 41(2) v zmesi tetrahydrofuránu (19 ml) a destilovanej vody (19 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (380 mg) pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (49 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na kolóne Cosmosil počas použitia destilovanej vody a destilovanej vody : acetonitrilu (76 : 24) ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S, 6S) — 2 — {1 — [4 - ( (1S) -1-hydroxyme t y 1-2-metylpropyl karbamoyl) -1, 3-tiazol-2-yl] azetidin-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (164 mg, výťažok 52%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂0, TSP) : δ (ppm) 7,49 (IH, s), 4,61 až

4,53	(2H,	m) ,	4,39 až 4,31 (IH, m) ,	, 4,25	(IH,	, dq, J=6,2, 6,3	Hz) ,
4,20	(IH,	dd,	J=2,4, 9,1 Hz), 4,11	až 4,04 (	2H, m), 3,87 až	3,83
(IH,	m) ,	3,80	(IH, dd, J=3,8, 11,7	Hz), 3	,71	(IH, dd, J=7,5,	11,7
Hz) ,	3, 43	(IH,	dd, J=2,4, 6,2 Hz),	3,26	(IH,	dq, J=9,l, 7,2	Hz) ,
1,97	až 1	,84 (	IH, m), 1,30 (3H, d,	J=6, 3	Hz)	, 1,20 (3H, d,	J=7,2
Hz) ,	0, 97	(3H,	d, J=6,8 Hz), 0,93 (	3H, d,	J=6	,9 Hz).

IR(KBr): 1749, 1651, 1600, 1547, 1493, 1470, 1393, 1315 cm'¹Hmotnostné spektrum (FAB⁺): m/z: 555 [M+Na] ⁺

Hmotnostné spektrum velkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané

C₂₂H₃₀O₆N₄S₂Na 533,1505, nájdené 533,1497 [M+H] ⁺

Elementárna analýza počítaná C₂₂H₂₉O6N₄S₂Na, 5/3H₂O

C:46,96%; H:5,79%; N: 9,96%; S:ll,40 % nájdená C:46,89%; H:5,86%; N:10,41%; S:ll,15%

223

Príklad 42 (lR,5S,6S)-2-{l-[4-( (IS) -1-Hydroxyme tyl-3-metylbutylkarbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl] -azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[(IS)-1-(terc.

Butyldimetylsilyloxymetyl) -3-metylbutylkarbamoyl]-1, 3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-[(IS)-1-fterc.

butyldimetylsilyloxymetyl) -3-metylbutylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl} azetidínu (450 mg, 0,954 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 37) v dimetylformamide (23 ml) bol pridaný hydrazínacetát (105 mg, 1,14 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2- (difenylfosforyloxy) -6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (567 mg, 0, 954 mol) v acetonitrile (28 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (665 μΐ, 3,82 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 10% vodným roztokom chloridu

224 sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 2 a 1 : 4) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S )-2- (1- {4- [ (1S) -1- ( fcerc.butyldifenylsilyloxy) -3-metylbutylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-y1}azetidín-3-yl)tio-6-[(R) -l-nydroxyetyl]-1-

-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (	)645	mg,	výťažok	87%) ako
bledožltá pevná látka.
^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm)	8,23	(2H,	d, J=8,8	Hz), 7,66
(2H, d, J=8,8 Hz), 7,41 (IH, s), 7,	35 až	7,30	(IH, br,	d, J=9,5

Hz) , 5,51	(IH, d, J=13	,9 Hz),	5,25 (	IH, d, J=13, 9 Hz) ,	4,50	(IH,
dd, J=8,1	Hz), 4,45 (	IH, dd,	J=8,1	Hz), 4,31 až 4,24	(3H,	m) ,
4,21 až 4,	13 (IH, m),	4,06 (	)1H, dd	, J=5,9, 2,9 Hz),	4,03	(IH,
dd, J=5,9,	2,2 Hz),	3,66 (	2H, d,	J=2,9 Hz), 3,30	(IH,	dd,
J=7,3, 2,9	Hz), 3,21 (	IH, dq,	J=6, 6,	, 7,3 Hz) , 1,68 až	1,57	(IH,

m) , 1,52 (IH, ddd, J=14,6, 8,8, 5,9 Hz), 1,44 (IH, ddd, J=14,6, 8,8, 5,9 Hz), 1,38 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,28 (3H, d, J=7,3 Hz),

0,95 (6H, t, J=6,6 Hz), 0,91 (9H, s), 0,05 (6H, s).

(2) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-((1S)-1-Hydroxymetyl-3-metylbutylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1-(terc.butyldimetylsilyloxymetyl)-3-metylbutylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (640 mg, 0,827 mol) (získaného podľa opisu v príklade 42(1)) v tetrahydrofurane (32 ml) bola pridaná kyselina octová (142 μΐ, 2,48 mol) a roztok 1 M tetrabutylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (2,48 ml, 2,48 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná 2 dni pri teplote miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá

225 nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia etylacetátu a etylacetát: metanolu (9:1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{i-[4-((IS)-1-hydroxymetyl-3-metylbutyl-karbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (302 mg, výťažok 55%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,44 (1H, s), 7,18 až 7,14 (1H, br, d, J=7,8 Hz), 5,51 (1H, d, J=13,7 Hz), 5,26 (1H, d, J=13,7 Hz), 4,53 až 4,47 (2H, m), 4,31 až 4,25 (3H, m), 4,20 až 4,13 (1H, m), 4,07 (2H, ddd, J=8,8, 4,9, 4,9 Hz), 3,80 až 3,74 (1H, m), 3,66 až 3,60 (1H, m), 3,30 (1H, dd, J=6,8, 2,9 Hz), 3,22 (1H, dc, J=6,8, 6,8

Hz), 2,79 až 2,74 (1H, bt, J=5,9 Hz), 1,74 až 1,65 (1H, m), 1,51 (1H, ddd, J=14,7, 8,8, 5,9 Hz), 1,43 (1H, ddd, J=14,7, 8,8, 5,9 Hz), 1,38 (3H, d, J=6,8 Hz), 1,28 (3H, d, J=6,8 Hz), 0,96 (3H, d, J=4,9 Hz), 0,95 (3H, d, J=4,9 Hz).

(3) (lR,5S,6S)-2-{l-[4-((IS)-l-Hydroxymetyi-3-metylbutylkarbamoyl)—1,3-tiazol-2-yl]azetidíη-3-yl}tio-6 - (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2—{1-[4-((IS)4-hydroxymetyl-3-metylbutylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (300 mg, 0,455 mol) získaný podľa opisu v príklade 42(2) v zmesi tetrahydrofuránu (15 ml) a destilovanej vody (15 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (380 mg) pri teplote miestnosti 2,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (38 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná

226 vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil počas použitia destilovanej vody a destilovanej vody : acetonitrilu (76 : 24) ako eluentu. Eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-((1S)-l-hyčroxymetyl-3-metylbutylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (131 mg, výťažok 53%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂0, TSP) _; ô(ppm) 7,45 (1H, s), 4,60 až 4,53

(2K,	m), 4,39 až	4,31 (1H, m	), 4,25 (1H,	dq,	J=6, 0,	6,4	Hz) ,	4,19
(1H,	dd, J=2,0,	9,1 Hz), 4	,19 až 4,13	(1H,	m) ,	4,06	(2H,	dd,
J=4,	9, 8,4 Hz),	3,68 (1H,	dd, J=4,7,	11, 6	Hz) ,	3,59	(1H,	dd,
J=6,	7, 11,6 Hz),	3,43 (1H,	dd, J=2,0,	6, 0	Hz) ,	3,26	(1H,	dq,

J=9,l, 7,2 Hz), 1,69 až 1,57 (1H, m), 1,50 (1H, ddd, J=4,5, 9,2,

14,1 Hz), 1,39 (1H, ddd, J=4,5, 9,2, 14,1 Hz), 1,39 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,20 (3K, d, J=7,2 Hz), 0,91 (6H, t, J=6,2 Hz).

IR(KBr): 1750, 1651, 1604, 1547, 1492, 1470, 1390, 1311 cm’¹Hmotnostné spektrum (FAB*): m/z: 547 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané

C₂3H₃₂O₆N₄S₂Na 547,1661, nájdené 547,1674 [M+H] ⁺

Príklad 43 (ÍR, 5S, 6S) -2 - (1- [ 4- ( (1S, 2S) -1 -hydroxymetyl-2-metylbutylkarbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl]-azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

COO'Na

227 (1) p-Nitrobenzyl-(1R_;5S, 6S)-2- (1-{4-[ (13,2S)-1-(terc.butyldimetylsilyloxymetyl)-2-metylbutylkarbamoyl] -1, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl)tic-6-[ (R)-1-hydroxyetyl)-1-metyl-karbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-{4-[(1S,2S)-1-(terc.

butyldimetylsilyloxymet)-2-merylbutylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidínu (910 mg, 1,93 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 38) v dimetyiformamide (46 ml) bol pridaný hydrazínacetát (213 mg, 2,31 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl- (ÍR, 5S_s6S) -2- (difenylfosforyloxy) -6- [ (R) -1-hydroxyetyl j-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxyiátu (1,15 g, 1,93 mol) v acetonitrile (58 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (1,34 ml, 7,72 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 10% chloridom sodným a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: n-hexáne: etylacetát (1:1 až 1:4)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S,2S)-(terc.

butyldimetylsilyloxymetyl) -2-metylbutylkarbamoyl] -1, 3-tiazol-2-yl} azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-i-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (765 mg, výťažok 51%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : Ô (ppm) 8,23 (2H, č, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,50 až 7,45 (1H, br, d, J=9,5 Hz), 7,42 (1H, s),

5,66 (1H, d, J=13,9 Hz), 5,25 (1H, d, J=13,9 Hz), 4,50 (1H, t, J=8,l

Hz), 4,44 (1H, t, J=8,l Hz), 4,32 až 4,24 (2H, m), 4,27 (1H, dd,

J=2,6, 9,7 Hz), 4,07 až 4,02 (2H, m), 3,91 až 3,85 (1H, m), 3,83 (1H, dd, J=2,9, 10,3 Hz), 3,63 (1H, dd, J=3,7, 10,3 Hz), 3,30 (1H,

228 dd, J=2,6, 7,0 Hz), 3,21 (1H, dq, J=9,7, 6,6 Hz), 1,88 až 1,84 (1H, br, s), 1,80 až 1,70 (1H, m), 1,58 až 1,50 (1H, m), 1,38 (3H, d, J=6, 6 Hz), 1,27 (3H, d, J=7,3 Hz), 1,22 až 1,10 (1H, m), 0,95 (3H,d, J=7,3 Hz), 0,90 (3H, t, J=7,4 Hz), 0,91(9H, s),0,05(6H, s).

(2) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-((1S,2S)-1-hydroxymetyl-2-metylbutylkarbamoyl) -1, 3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-l-{4-[(1S, 2S)-1-(terc. butyldimetylsilyloxymetyl) -2-metylbutylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl) tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (760 mg, 0,982 mol) (získaný pódia opisu v príklade 43(1)) v tetranydrofurane (38 ml) bol pridaný do kyseliny octovej (169 μΐ, 2,95 mol) a 1 M tetrabutylamóniumfluorid v roztoku tetrahydrofuránu (2,95 ml, 2,95 mol) a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 3 dni. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a voda boli pridané do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušené počas bezvodým síranom sodným, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne (eluent : etylacetát —> etylacetát: metanol (9:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-[4-((1S,2S)-1-hydroxymetyl-2-metylbutylkarbarmoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu

(390 mg, výťažok 60%) ako bledožltá	pevná látka.	Hz) , 7,66
'H-NMR (400 M Hz, CDC1₃	) : δ (ppm)	8,23	(2H, d, J=8,8
(2H, d, J=8,8 Hz), 7,44 (1H, s), 7,	33 až	7,29 (1H, br,	d, J=8,8
Hz), 5,51 (1H, d, J=13,8	Hz), 5,25	(1H,	d, J=13,8 Hz),	4,53 až
4,46 (2H, m), 4,31 až 4,28	(2H, m),	4,28 (	1H, dd, J=9,5,	2,2 Hz) ,
4,10 až 4,03 (2H, m), 3,94	až 3,87 (	1H, m)	, 3,85 až 3,79	(1H, m) ,
3,78 až 3,72 (1H, m), 3,30	(1H, dd,	J=7,0,	2,2 Hz), 3,21	(1H, dq,
J=9,5, 7,3 Hz), 1,83 až 1,	72 (1H, m)	), 1,61 až 1,48 (1H,	m), 1,38

229 (3Η, d, J=6,6 Hz), 1,28 (3H, d, J=7,3 Hz), 1,26 až 1,14 (1H, m),

0,99 (3H, d, J=6,6 Hz), 0,93 (3H, t, J=7,3 Hz).

(3) (ÍR,5S,6S)-2-{1-(4-((IS,2S)-l-hydroxymetyl-2-metylbutylkarbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl} tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-((IS,2S)-l-hydroxymetyl-2-metylbutylkarbamoyl) -1, 3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (390 mg, 0,591 mol) (získaný podía opisu v príklade 43(2)) v zmesi tetrahydrofuránu (20 ml) a destilovanej vody (20 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (390 mg) pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (50 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas chrómatograficky vyčistený na destilovaná voda -> destilovaná voda : cetonitril (76:24)) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (lR,5S,6S)-2-(1-(4-( (IS, 2S) -l-hydroxymetyl-2-metylbutyl-karbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6- [ (R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (136 mg, výťažok 42%) ako biela pevná látka.

zníženého tlaku. Zvyšok bol kolóne Cosmosil (eluent :

¹H-NMR (400 M Hz, D₂0, TSP): δ (ppm) 7,49 (1H, s), 4,61 až 4,53 (2H, m), 4,39 až 4,31 (1H, m), 4,25 (1H, dq, J=6,2, 6,3 Hz), 4,20 (1H, dd, J=9,0, 2,3 Hz), 4,11 až 4,04 (2H, m), 3,91 (1H, ddd,

J=7,4,	3,6, 3,6 Hz	), 3,í	31 (1H	, dd, J=ll,8, 3,6 Hz),	3,72	(1H, dd,
1=11,8,	7,4 Hz),	3,43	(1H,	dd, J=6,2, 2,3 Hz),	3,25	(1H, dq,
J=9,0,	7,2 Hz), 1,	7 6 až	1, 64	(1H, m), 1,55 až 1,44	(1H,	m) , 1,30
(3H, d,	J-6,3 Hz),	1,20	(3H,	d, J=7,2 Hz), 1,22 až	1,11	(1H, m),
0,95 (3	H, d, 3=6,9	Hz) ,	0, 88	(3H, t, J=7,4 Hz) .
IR(	KBr):1750,	1651,	1602,	, 1547, 1493, 1470, 13	194, 1	31 lem^-1

230

Hmotnostné spektrum (FAB*): m/z: 547 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané pre C₂3H₃₂O₆N₄S₂Na 547,1661; nájdené : 547,1647 [M+H]⁺

Príklad 44 (ÍR, 5S, 6S) -2- {1- [4- (2-hydroxy-l- (hydroxymetyl) etylkarbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1—{4—[(2-terc.

butyldimetylsilyloxy) - (1-terc.butyldifenylsilyloxymetyl) etylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-{ 4-[(2-terc.butyldimetylsilyloxy) -(l-terc.butyldifenylsilyioxymetyl)etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (770 mg, 1,45 mol) (získaného podľa opisu referenčnom príklade 39) v dimetylformamide (39 ml) bol pridaný hydrazínacetát (160 mg, 1,74 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2- (difenylfosforyloxy) -6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (862 mg, 1,45 mol) v acetonitrile (43 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní atmosférou dusíka, (1,01 ml, 5,79 mol) zvyšovaní teploty ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný hydrogénuhličitan

231 sodný bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 10% chloridom sodným a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografieky na silikagélovej kolóne (eluent: n-hexáne : etylacetát (1:2 -> 1:4)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1—{4-[(2-terc.

butyldimetylsilyloxy) - (1-terc.butyldifenylsilyloxymetyl) etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (951 mg, výťažok 76%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDCL₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,57 až 7,52 (IH, br, d, J=8,8 Hz), 7,42 (IH, s), 5,52 (IH, d, J=13,9 Hz), 5,25 (IH, d, J=13,9 Hz), 4,47 (IH, t, J=8,l Hz), 4,44 (IH, t, J=8,l Hz), 4,26 (IH, dd, J=3,6, 9,2 Hz), 4,31 až 4,23 (2H, m), 4,09 až 3,99 (3H, m), 3,86 až 3,81 (IH, m), 3,61 (IH, dd, J=6,6, 9,5 Hz), 3,30 (IH, dd, J=2,6, 7,0 Hz), 3,21 (IH, dq, J=9,2, 6,6 Hz), 1,38 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,27 (3H, č, J=6,6 Hz), 0,91 (9H, s), 0,07 (6H, s).

(2) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2— <1—[4-(2-hydroxy-l-hydroxymetyl) etyl karbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát p-Nitrobenzyl-(ÍR, 5S, 6S) -2- (1-{ 4- [ (2-terc.butyldimetylsilyloxy) - (1-terc.butyldimetylsilyloxymetyl) etyl karbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl }azetidín-3-yl) tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (950 mg, 1,10 mol) (získaný podía opisu v príklade 44(1)) v tetrahydrofurane (48 ml) bol pridaný do kyseliny octovej (378 μΐ, 6,60 mol)a IM tetrabutylamóniumfluoridu v roztoku tetrahydrofuránu (6,60 ml, 6,60 mol) a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 3 dni. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a voda boli pridané do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu

232 sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent : etylacetát : metanoi (9:1 —> 85: 15)) počas vzniku p-nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2-{l- [4- (2-hydroxy-l- (hydroxymetyl) etylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (499 mg, výťažok 72%) ako bledožltá pevná látka.

T-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,73

(2H,	d, J=8,8	Hz), 7,4	9 (1H,	. s)	, 7,4.	5 (1H, d	, J=8,l	Hz), 5,46 (1H,
d, J	= 13,9 Hz)	, 5,31 (	1H, d	, J=	= 13,9	Hz), 5,	09 (1H,	d, J=4,4 Hz) ,
4,85	až 4,77	(2H, m),	4,57	až	4,42	(3H, m),	4,22 (	)1H, dd, J=l,7,
8,8	Hz), 4,01	až 3,95	(2H,	m),	3,89	až 3,82	(1H, m)	, 3,56 až 3,50
(2H,	m) , 3,49	až 3,41	(2H,	m) ,	3, 41	až 3,27	(2H, m)	, 1,16 (3H, d,

J=6,6 Hz), 1,14 (3H, d, J=6,6 Hz).

(3) (ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(2-hydroxy-l-(hydroxymetyl) etylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]-azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2—{1-[4-(2-hydroxy-l-(hydroxymetyl) etylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (490 mg, 0,773 mol) (získaný podľa opisu v príklade 44(2)) v zmesi tetrahydrofuránu (25 ml) a destilovanej vody (25 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (490 mg) pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (65 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent: destilovanej vody —» destilovanej vody: acetonitrile (9:1) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2- {1- [4-(2-hydroxy-l-(hydroxymetyl)etylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2233 yl]azetidín-3-yl}tio-6-[ (R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (1 87 mg, výťažok 47%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O, TSP): 6 (ppm) 7,51 (IH, s), 4,56 (2H, t, J=8,2 Hz), 4,39 až 4,31 (IH, m), 4,25 (IH, dq, J=6,3, 6,4 Hz), 4,20 (IH, dd, J=2,4, 9,0 Hz), 4,19 až 4,14 (IH, m), 4,06 (2H, ddd, J=3,6, 4,9, 8,6 Hz), 3,78 (2H, dd, J=5,l, 11,7 Hz), 3,72 (2H, dd, J=6,6, 11,7 Hz), 3,43 (IH, dd, J=2,4, 6,3 Hz), 3,25 (IH, dq, J=9,0, 7,2 Hz), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2 Hz).

IR(KBr): 1748, 1649, 1599, 1547, 1393, 1313 cm^-1

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 521 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB*): počítané C₂oH₂6N₄0₇S₂Na: 521,1141, nájdené: 521,1155[M+H]⁺

Elementárna analýza: C₂oH₂5N₄0₇S₂Na. 4/3H₂O vypočítaná : C, 44,11% H, 5,12% N, 10,29% S, 11,78 % nájdená: C, 44,21% H, 5,12% N, 10,31% S, 11,46%

Príklad 45 (ÍR, 5S, 6S)-2-(1—{4-[N-(2-hydroxyetyl)-N-metyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4—{2—[N- (terc.butyldimetylsilyloxy) etyl] -N-metyl karbamoyl·} -1,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl ] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-{2-[N-(terc.

butyldimetylsilyloxy)etyl]-N-metyl-karbamo-yl}-l,3-tiazol-2-yi)

234 azetidínu (384 mg, 0,89 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 40) v dimetylformamide (11 ml) bol pridaný hydrazinacetát (99 mg, 1,07 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (5,29 mg, 0,8 9 mol) v acetonitrile (22 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,62 ml, 3,56 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýzený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát —» etylacetát: metanol (9:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-(2-[N-(terc.butyldimetylsilyloxy) etyl]-N-metyl-karbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]-tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (263 mg, výťažok 50%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,63 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,14 (0,6 H, s), 7,03 (0,4 H, s), 5,48 (1H, d, J=l,3 Hz), 5,25 (1H, d, J=l,3 Hz), 4,50 (1H, t, J=8,0 Hz), 4,23 (2H, t, J=9,0 Hz), 4,31 až 4,18 (3H, m), 4,05 (1H, dd, J=8,3, 5,4 Hz), 3,89 až 3,80 (1H, m), 3,80 až 3,72 (1H, m), 3,72 až 3,63 (1H, m), 3,63 až 3,51 (1H, m), 3,26 (1H, dd, J=7,l, 2,5 Hz), 3,26 (1,8 H, s), 3,18 (1H, dq, J=8,3, 7,5 Hz), 3,07 (1, 2H, s), 1,35 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,22 (3H, d, J=6, 9 Hz), 0,86 (9H, dd, J=7,8, 1,4

Hz), 0,27 (6H, dd, J=12,4, 3,2 Hz).

(2)p-Nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-(l-{4-[N-(2-hydroxyetyl)-N235

-metyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát ρ-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-(2-[N-(terc. butyldimetylsilyloxy) etyl]-N-metylkarbamoyl}-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (622 mg, 0,85 mol) (získaný podľa opisu v príklade 45(1)) v tetrahydrofurane (30 ml) bol pridaný do kyseliny octovej (0,15 ml, 2,55 mol) a 1 M tetrabutylamóniumfluorid v roztoku tetrahydrofuránu (2,55 ml, 2,55 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent : etylacetát -» etylacetát : metanol (9:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-hydroxyetyl)-N-metylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6- [ (R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (263 mg, výťažok 50%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,66

(2H,	d,	J=8,7	Hz) ,	7,25 (	IH, s), 5,50 (IH, d,	J=l,4	Hz),	5,26 (IH,
d, J=	=1,	4 Hz),	4,62	až 4,	40 (2H, m), 4,36 až	4,20	(3H,	m ) , 4,08
(IH,	t,	J-9,1	Hz) ,	4,06	(IH, t, J= 9,1 Hz),	. 3,84	(2H,	t, J=4,9
Hz) ,	3,	63 (2H,	. dd,	J=4,9	Hz), 3,29 (IH, dd,	J=6,4,	2, 6	Hz), 3,21

(IH, kvint., J=7,5 Hz), 3,08 (3H, s), 1,38 (3H, d, J=6,2 Hz), 1,26 (3H, d, J=7,3 Hz) .

(3) (ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-hydroxyetyl)-N-metyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1—{4—[N-(2-hydroxyetyl)-N-metyl-karbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl) tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (401 mg, 0,65 mol) (získaný

236 podía opisu v príklade 45(2)) v zmesi tetrahydrofuránu (20 ml) a destilovanej vody (20 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (401 mg) vo vodnom kúpeli (35°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (5 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelené a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chromatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda —> 2% acetonitril v destilovanej vode —> 4% acetonitril v destilovanej vode) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2(1— {4— [ (2-hydroxyetyl) -metylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (134 mg, výťažok 41%) ako biela pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, D₂O, TSP): δ (ppm) 7,31 (0,6 H, s), 7,11 (0,4

H, s), 4,56 (2H, t, J=8,2 Hz), 4,41 až 4,31 (2H, m), 4,25 (1H, kvínt., J=6,2 Hz), 4,21 (1H, dd, J=9,l, 2,4 Hz), 4,12 až 4,00 (2H, m), 3,85 (1H, t, J=5,4 Hz), 3,74 (1H, t, J=5,4 Hz), 3,70 až

3,60 (2H, m), 3,44 (1H, dd, J=6,2, 2,4 Hz), 3,26 (1H, dq, J=9,l,

7,4 Hz), 3,07 (1,2 H, s), 3,08 (1,8 H, s), 1,30 (3H, d, J=6,5 Hz),

I, 20 (3H, d, J=7,3 Hz).

IR(KBr): 3397,0, 1749,1, 1606,4, 1538,9, 1469,5, 1398,1,

1311,4, 1266, 0 cm'¹

Mass spectrun (FAB⁺): m/z: 505 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (ESI ⁺ ) : počítané C₂oH2₅N₄0₆S2Na2 : 505,1191, nájdené: 505,1185 [M+Na] ⁺

Elementárna analýza :C₂oH₂sN₄07S₂Na. 4/3H₂O vypočítaná : C, 44,11% H, 5,12% N, 10,29% S, S, 11,78%

Príklad 46 (ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(karboxymetylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, disodná soľ

237

HO

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR, 5S, 6S) -2- {1- [4-(p..-nitrobenzyloxykarbonylmetylkarbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl j azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-{l-[4-(p-nitrobenzyloxykarbonylmetylkarbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl·} tio-6- [ (R) -1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (209,7 mg, 0,24 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 41(10)) v tetrahydrofurane (10 ml) bola pridaná kyselina octová (0,042 ml, 0,7 mol) a 1 M tetrabutylamóniumfluorid v roztoku tetrahydrofuránu (0,72 ml, 0,72 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 4 dni. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom- lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne (eluent : toluén: acetonitril (2:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2—{1—[4—(p-nitrobenzyloxykarbonylmetylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (94,5 mg, výťažok 53%) ako bledožltá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=7,9 Hz), 8,22 (2H, d, J=7,9 Hz), 7,66 (2H, d, J=7,9 Hz), 7,60 (IH, t, J=6, 6 Hz), 7,54 (2H, d, J=7,9 Hz), 7,47 (IH, s), 5,505 (IH, d, J=13,8 Hz),

238

5,30	(2H,	s) ,	5,255	(IH,	d, J=13,8 Hz), 4,50 (IH, t, J=8,3 Hz),
4,40	(IH,	t,	J=8,3	Hz) ,	4,32 až 4,24 (4H, m), 4,06 (IH, dd,
J=8,3,	6, 2	Hz)	, 4,05	(IH,	dd, J=8,3, 6,2 Hz), 3,30 (IH, dd, J=7,0,

3,1 Hz), 3,21 (IH, dq, J=9,0, 7,4 Hz), 1,98 (IH, br, s), 1,38 (3H, 1=5,7 Hz), 1,27 (3H, d, J=7,4 Hz).

(2) (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(karboxymetylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyi]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny, disodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(p-nitrobenzyloxykarbonylmetylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (330,4 mg₃ 0,38 mol) získaný podía opisu v príklade 46(1) v zmesi tetrahydrofuránu (16,5 ml) a destilovanej vody (8,3 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia na aktívnom uhlí (350 mg) pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (63,9 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S, 6S) —2—{1—[4-(karboxymetylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny, disodná sol (158,7 mg, výťažok 79%) ako biela pevná látka.

i-H-NMR (400 MHz, D₂O) : δ (ppm) 7,83 (IH, s), 4,45 (IH, t, J=8,3 Hz), 4,43 (IH, t, J=8,3 Hz), 4,28 až 4,21 (IH, m), 4,124 (IH, kvintet, J=5,8 Hz), 4,08 (IH, dd, J=8,8, 2,0 Hz), 3,99 až 3,92 (2H, m), 3,80 (2H, s), 3,31 (IH, dd, J=5,9, 2,0 Hz), 3,14 (IH, dq, J=8,8, 6,8 Hz), 1,18 (3H, d, J=5, 9 Hz), 1,08 (3H, d, J=6,8 Hz).

IR (KBr): 3388, 1748, 1602, 1550, 1398, 1314, 1267 cm’¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 527 [M+H]^4-

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAľC):

239 počítané C₁₉H₂iN₄ O₇S₂Na:, nájdené: ⁺

Príklad 47 (ÍR, 5S,6S)-2-{1-[4-(3-hydroxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metyíkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-(3-hydroxyazetidín-1-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]-azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-terc. butyldimetylsilyloxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(l-{4-[3-(terc.butyldifenylsilyloxy)azetidín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (850 mg, 0,878 mol) získaného podlá opisu v referenčnom príklade 42(2) v tetrahydrofuráne (43 ml) bola pridaná kyselina octová (301 μΐ, 5,27 mol) a 1 M tetrabutylamóniumfluorid v roztoku tetrahydrofuránu (5,27 ml, 5,27 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 deň. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a voda boli pridané do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent : etylacetát: metanol (95:5) -> metylénchloridu : metanol (9:1) počas

240 vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-(3-hydroxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (355 mg, výťažok 66%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J-8,7 Hz), 7,66

(2H,	d,	J=8,7	Hz) ,	. 7,44 (1H,	s), 5,51 (1H, d, J=1	3,7 Hz	) ,
(1H,	d,	J=13,	7 Hz)	) , 4,82 až 4	, 77 (1H, m), 4,71 až	4,65 (	1H,
4,51	až	4,36	(4H,	m) , 4,31 až	4,23 (3H, m), 4,07 až	3,96 (	3H,
3,29	(1H	, dd,	J=2,	4, 7,0 Hz),	3,20 (1H, dq, J=9,2,	7,1 Hz	) ,
(3H,	d,	J=6, 3	Hz) ,	1,27 (3H, d,	J=7,1 Hz).

(2) (ÍR, 5S, 6S) —2 — {1— [4- ( 3-hydroxyazetidín-l-karbonyl) -1, 3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(3-’nydroxyazetidín-l-karbonyl)-l,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[ (R) -1-terc. butyldimetylsilyloxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (350mg,

0,568 mol) (získaný podľ opisu v príklade 47(1)) v zmesi tetrahydrofuranu (18 ml) a destilovanej vody (18 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (350 mg) pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (48 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chromatografický vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda -> destilovaná voda : acetonitril (9:1)), a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S,6S)-2-{1-(4-(3-hydroxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[ (R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (118 mg, výťažok 42%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂0, TSP): δ (ppm) 7,33 (1Η, s), 4,78 až

4,67 (2Η, m), 4,56 (2Η, t, J=8,0 Hz), 4,45 až 4,31 (3Η, m), 4,25

241

(IH, dq, J=6,3, 6,3	Hz) ,	4,20	(IH, dd, J=2,3, 9,0	Hz),	4,	10 až
4,03 (2H, m), 3,97	(IH,	dd,	J=3,7, 11,5 Hz) , 3	,44	(IH	, dd,
J=2,3, 6,3 Hz), 3,25	(IH,	dq,	J=9,0, 7,2 Hz) , 1,30	(3H,	d,	J=6, 3

Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2 Hz).

IR(KBr): 1749, 1603, 1540, 1452, 1394, 1306 cm'¹Hmotnostné spektrum (FAB⁺): m/z: 503 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum velkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané C₂oH₂4N₄06S₂Na:503,1035, nájdené: 503,1040 [M+Hj⁺

Elementárna analýza: C₂₀H₂3N₄O₆S₂Na. 8 / 3H₂O vypočítaná : C, 43,63% H, 5,19% N, 10,18% S, 11,65% nájdené: C, 44,04% H, 4,93% N, 9,86% S, 11,30%

Príklad 48 (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(N-karboxymetyl-N-metylkarbamoyl)-1, 3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tic-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, disodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(N-metyl-N-p-nitrobenzyloxykarbonylmetylkarbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(N-metyl-N-p-nitrobenzyloxykarbonylmetylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (997 mg, 1,15 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 43(3)) v tetrahydrofuráne (50 ml) bola pridaná kyselina octová (0,2 ml, 3,44 mol) a 1 M

242 tetrabutylamóniumfluorid v roztoku tetrahydrofuránu (3,44 ml, 3,44 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 dni. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný hydrogénuhličitan sodný boli pridané do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá nasýteným vodným chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent : etylacetát —> etylacetát: metanol (19:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl- (ÍR, 5S,6S) —2— {1— [4- (N-metyl-N-p-nitrobenzyloxykarbonylmetylkarbamoyl) -1, 3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu roztokom horečnatý,

(413 mg, ''H-NMR	výťažok 47%) ako bledožltá pevná látka. (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,32 až 8,10	(4H, m),	7,75	až
7,60 (2H,	m), /,60 až	7,45 (2H, m), 7,75 (0,5H,	S), 7,41	(0,	5H,
s), 5,51	(IH, Č,	J=13,6 Hz), 5,38 až	5,20 1	:3h,	m
obsahujúci	5,26 (IH,	d, J=13,6 Hz)), 4,75	až 3,71	(9H,	m
obsahujúci	4,36 (IH, s	ý, 4,56 až 4,46 (IH, m), :	3,93 až 3,	83 (	IH,
m)), 3,45	až 3,05 (4H	, m obsahujúci 3,36 (0,9H,	s) , 3,16	(2,	IH,
s)), 3,29	(IH, d, J=6,	3 Hz) , 1,38 (3H, d, J=6,1	Hz), 1,33	až 1	, 20
(3H, m) .

(2) (ÍR, 5S,6S)-2-{l-[4-(N-karboxymetyl-N-metylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl ] azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny, čisodná sol p-Nirrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(N-metyl-N-p-nitrobenzyloxykarbonylmetyl-karbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-r(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (413 mg, 0,54 mol) (získaný podľa opisu v príklade 48(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (20 ml) a destilovanej vody (20 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (413 mg) pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol

243 pridaný hydrogénuhličitan sodný (91 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S, 6S)-2-{1-[4-(N-karboxymetyl-N-metylkarbamovl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny, disodná soľ (126 mg, výťažok 43%) ako biela pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, D₂O, TSP): δ (ppm) 7,18 (0,6H, s), 7,03 (0,4H, s), 4,41 až 4,32 (0, 2H, m), 4,25 (1H, kvínt., J=6,3 Hz), 4,15 až 3,98 (4H, m), 3,43 (1H, dd, J=6,3, 2,2 Hz), 3,26 (1H, kvínt., J=8,2 Hz), 3,11 (1,2H, s), 3,06 (1,8H, s), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,20 (3H, d, 7,1 Hz).

IR(KBr): 3389,3, 1748,2, 1605,4, 1541,8, 1469,5, 1394,3 cm'¹

Hmotnostné spektrum (ESI⁺): m/z: 519 [M~Na+2H]⁺

Hmotnostné spektrum velkého rozlíšenia (ESI*): počítané C₂₀K₂4N4O7S₂Na : 519,0984, nájdené: 519,0956[M-Na+2H]⁺

Príklad 49 (ÍR, 5S, 6S) -2- [1-(4-N-karbamoylmetyl-N'-metyl-karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-(N-karbamoylmetyl-N-metylkarbamoyl)-1, 3-tíazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1244

-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(N-karbamoylmetyl-N-merylkarbamoyi)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1- terc. butyldimetylsilyloxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (932 mg, 1,27 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 44(2)) v tetrahydrofurane (50 ml) ' bola pridaná kyselina octová (0,22 ml, 3,81 mol) a 1 M tetrabutylamóniumfluorid v roztoku tetrahydrofuránu (3,81 ml, 3,81 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 dni. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný hydrogénuhličitan sodný bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent : etylacetát —> etylacetát: metanol (10:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl- (lR,5S)6S)-2-(l-[4- (N-karbamoylmetyl-N-metylkarbamoyl)-1,3-tiazoi-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metyl-karbapén-2-em-3-karboxylátu (424 mg, výťažok 53%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=7,8 Hz), 7,66

(2H, d,	J=7,8	Hz), 7,36 (0,2H, s), 7,24 (0,8H, s), 5,51 (1H, d,
J=13,7 .	Hz) , 5	,25	(1H, d, J= 13,7	Hz) , 4,59 až 4,39 (2H, m) ,	4,39
až 3,94	(7H,	m) ,	3,36 (0,6H, s) ,	3,29 (1H, dd, J=6,9, 3,3	Hz),
3,25 až	3,14 i	UH,	m), 3,11 (2,4H,	s) , 1,38 (3H, d, J=6,1 Hz),	1,26
(3H, d,	J=7,1	Hz)

(2) (ÍR, 5S, 6S)—2—{1—[4-(N-karbamoylmetyl-N-metylkarbamoyl)-1, 3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) —2— {1— [4- (N-karbamoylmetyl-N-metylkarbamoyi) -1, 3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl·} tio-6- [ (R)—l— -hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (424 mg, 0,67 mol) (získaný podľa opisu v príklade 49(1)) v zmesi tetrahydrofuránu

245 (20 ml) a destilovanej vody (20 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (424 mg) pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtráru bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (57 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky čistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda —> 2% acetonitril v destilovanej vode —> 4% acetonitril v destilovanej vode) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadované zlúčeniny (ÍR, 5S, 6S)-2-{l-[4-(N-karbamoylmetyl-N-metylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (115 mg, výťažok 33%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR	(400	M Hz, D₂0, TSP):	δ	(ppm)	7,22	(0,5H, s),	7,20
(0,5H, s),	4,55	(2H, dd, J=17,4,	8,4	Hz),	4,41	až 4,32 (1H,	m),
4,25 (1H,	kvint.	, J=6,3 Hz), 4,23	až	4,18	(3H, m obsahujúci	4,22
(2H, s)),	4,05	(2H, ddd, J=17,3,	8,	8, 4,	9 Hz)	, 3,44 (1H,	dd,

J=6,2, 2,4 Hz), 3,31 až 3,20 (1H, m), 3,18 (1,5H, s), 3,09 (1,5H,

s), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,20 (3H, d, 7,1 Hz).

IR (KBr): 3384,5, 1748,2, 1681,6, 1603,5, 1539,9, 1469,5, 1397,2, 1310, 4 cm*¹

Hmotnostné spektrum (t'AB⁺j : m/*z: 518 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (ESI^4-) : počítané C₂oH₂5N50₆S₂Na : 518,1144, nájdené: 518,1168 [M+H] ⁺

Príklad 50 (ÍR, 5S, 6S)-2-{l-[4-(karbamoylmetyl-karbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

246

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(karbamoylmetyl-karbamoyl) -1, 3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) 1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(karbamoylmetyi-karbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-terc. butyldimetylsilyloxyetyi]-l·-metyl·karbapén-2-em-3-karboxylátu (428,6 mg, 0,6 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 45(2)) v tetrahydrofurane (21 ml) bola pridaná kyselina octová (0,11 ml, 1,9 mol) a 1 M tetrabutylamóniumf luorid v roztoku tetrahydrofuránu (1,8 ml, 1,8 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 3 dni. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný hydrogénuhličitan sodný bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušené cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne (eluent : etylacetát: metanol (8:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(karbamoylmetyl-karbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-i-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (310,5 mg, výťažok 85%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M	Hz, DMSO-d₆) : δ	(ppm)	8,24	(2H, d, J=	=8,8 Hz), 7,96
(1H, t, J=5,7 Hz) ,	7,72 (2H, d, J	=8,8	Hz) ,	7,50 (1H,	s), 7,40 (1H,
br, s), 7,08 (1H,	br, s) , 5,46	(1H,	d, J=	=13,9 Hz),	5,32 (1H, d,
J=13,9 Hz), 5,09	(1H, d, J=5,l	Hz) ,	4,58	až 4,40	(3H, m), 4,22
(1H, dd, J=9,2, 2	,7 Hz), 4,01 až	3; 96	(3H,	m), 3,81	(2H, d, J=5,7

247

Hz), 3,44 až 3,30 (2H, m), 1,16 (3H, d, J-6,6 Hz), 1,14 (3H,d,J=7,3Hz).

(2) (ÍR,5S,6S)—2—{1-[4-(karbamoylmetyl-karbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(karbamoylmetyl-karbamoyl)-1, 3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (310,5 mg, 0,5 mol) (získaný podía opisu v príklade 50(1)) v zmesi tetrahydrofranu (15,5 ml) a destilovanej vody (7,8 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia na aktívnom uhlí (360 mg) vo vodnom kúpeli (35°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (42,3 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chromatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda —> 5% acetonítríl v destilovanej vode —> 10% acetonítríl v destilovanej vode) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S,6S)—2—{1—[4-(karbamoylmetyl-karbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6- [ (R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (157 mg, výťažok 62%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂0): δ (ppm) 7,43 (1H, s), 4,45 (2H, t, J=7,8 Hz), 4,28 až 4,18 (1H, m), 4,13 (1H, kvintet, J=5,9 Hz), 4,08 (1H, dd, J=9,3, 2,3 Hz), 4,00 až 3,92 (4H, m), 3,31 (1H, dd, J=5,9, 2,3 Hz), 3,14 (1H, dq, J=9,3, 7,8 Hz), 1,13 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,08 (3H, d, J=7,8 Hz) .

IR(KBr): 3384, 1748, 1660, 1600, 1549, 1492, 1471, 1394,

1315, 1264 cm^-1

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 504 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺):

počítané CigH^O&NsS^Na : 504,0988,

248 nájdené: 504,1018[M+H]⁺

Príklad 51 (ÍR, 5S,6S)-2-{l-[4-((1S)-l-karboxyl-2-metylpropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, disodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-(l-{4-[(iS)-2-metyl-l-(p-nitrobenzyloxykarboyl)propylkarbamoyl]-1, 3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S, 6S)-2-(l-{4-[ (1S)-2-ruetyl-l- (p-nitrobenzyloxykarboyl) propylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl }azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (l,15g, 1,29 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 46(3)) v tetrahydrofurane (58 ml) bola pridaná kyselina octová (222 μΐ, 3,87 mol) a 1 M tetrabutylamóniumfluorid v roztoku tetrahydrofuránu (3,87 ml, 3,87 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 dni. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný chlorid sodný boli pridané do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent : n-hexáne: etylacetát (1 : 2) —> etylacetát) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(l-{4-[(1S)-2-metyl-l-(p-nitrobenzyloxykarboxyl)propylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yi}azetidín249

-3-yl)tio-6-[(R)-1-hyčroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (377 mg, výťažok 37%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,58 až 7,55 (1H, br, s), 7,54 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,45 (1H, s), 5,51 (1H, d, J=13,5 Hz), 5,28 (2H, s), 5,26 (1H, d, J=13,5 Hz), 4,74 (1H, dd, J=5,l, 8,8 Hz), 4,53 až 4,47 (2H, m), 4,32 až 4,26 (3H, m), 4,10 až 4,05 (2H, m), 3,30 (1H, dd, J=2,9, 6,6 Hz), 3,22 (1H, dq, J=9,5, 6,6 Hz), 2,32 až 2,24 (1H, m), 1,39 (3H, d, J=5,8 Hz), 1,28 (3H, d, J=6,6 Hz), 1,00 (3H, d, J=7,3 Hz), 0,97 (3H, d, J=7,3 Hz).

(2)(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4- ((1S)-l-karboxyl-2-metylpropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, disodná sol p-Nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2- (1—{4- [ (1S) -2-metyl-l- (p-nitrobenzyloxykarboyl)-propylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl) tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (370 mg, 0,465 mol) (získaný podía opisu v príklade 51(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (19 ml) a destilovanej vody (19 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (370 mg) pri teplote miestnosti 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (80 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chromatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda -» destilovaná voda : acetonitril (96:4)) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-l-karboxyl-2-metyl-propylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidin-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny, disodná sol (165 mg, výťažok 63%) ako biela pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, D₂O, TSP) : δ (ppm) 7,51 (1H, s), 4,59 (2H, dt, J=8,0, 5,6 Hz), 4,40 až 4,34 (1H, m), 4,29 až 4,23 (2H, m),

250

4,20 (1Η, dd, J=2,4, 9,0 Hz), 4,10 (2H, dt, J=9,0, 5,2 Hz), 3,44 (1H, dd, J=2,4, 6,4 Hz), 3,27 (1H, dq, J=9,0, 7,2 Hz), 2,28 až 2,16 (1H, m), 1,30 (3H, d, J=6,2 Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2 Hz), 0,98 (3H, d, J=6,S Hz), 0,95 (3H, d, J=6,8 Hz).

IR(KBr): 1749, 1599, 1547, 1491, 1471, 1400, 1314, 1292,

1264om'¹

Hmotnostné spektrum (ESI⁺) : m/z: 591 [M+Na] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (ESI⁺): vypočítané C22H26N4O7S2Na2: 591, 0936, nájdené: 591, 0952 [M+Na]⁺Elementárna analýza: C22H₂₆N₄O7S₂Na₂.8 /3H₂O vypočítaná : C, 42,85% H, 5,12% N, 9,09% S, 10,40% nájdená: C, 42,78% H, 5,33% N, 9,14% S, 10,12%

Príklad 52 (ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-((1S)-l-karbamoyl-2-metyl-propylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-((1S)-l-karbamoyi-2-mety 1-propylkarbamoyl) -l_s3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyl-(iR,5S,6S)-2-{l-[4-((lS)-l-karbamoyl-2-metylpropyl-karbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)— -1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (930 mg, 1,20 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 47(3)) v tetrahydrofuráne (47 ml) bola pridaná kyselina octová (206 μΐ, 3,60 mol) a 1 M tetrabutylamóniumfluorid v roztoku tetrahydrofuránu (3,60 ml, 3,60 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola

251 miešaná pri teplote miestnosti 2 dni. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a voda boli pridané do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent : etylacetát -> etylacetát: metanoi (95:5)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-{l-[4-((lS)-l-karbamoyl-2-metyl-propylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6- [ (R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxvlátu (383 mg, výťažok 48%) ako bledožltá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, tí, J=8,8 Hz), 7,66

(2H,	d, J=8,8 Hz), 7, 61	až 7,56 (1H, br, d,	J=9,	5 Hz) ,	6,05 až	6,01
(1H,	br, s), 5,51 (1H,	d, J=13,5 Hz), 5,	43 až	5,39	(1H, br,	S) z
5,26	(1H, d, J=13,5 Hz)	i, 4,54 až 4,47 (2H	r m),	4,38	až 4,33	(1H,
m),	4,32 až 4,25 (2H,	m), 4,10 až 4,04	(2H,	m) , 3	,30 (1H,	dd,
J=6,	6, 2,9 Hz), 3,22 (	1H, dq, J=9,5, 7,3	Hz) ,	2,33	až 2,24	(1H,
m),	1,38 (3H, d, J=5,9	Hz), 1,28 (3H, d,	J=7,3	Hz) ,	1,03 (3H	z d,

J=6,6 Hz), 10,1 (3H, d, J=6, 6 Hz).

(2) (ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-((lS)-l-karbamoyl-2-metyl-propylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]-azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-l-karbamoyl-2-metyl-propylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (380 mg, 0,577 mol) (získaný podľa opisu v príklade 52(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (19 ml) a destilovanej vody (19 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (380 mg) pri teplote miestnosti 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (48 mg), etylacetát a

252 destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda -> destilovaná voda:acetonitril (81:9)), a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-((IS)-l-karbamoyl-2-metylpropyikarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidin-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (170 mg, výťažok 54%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR	(400	M Hz, D₂O, TSP): δ (ppm) 7,55	(IH, s	), 4,58 (2H, t,
J=8,2 Hz),	4,40	až 4,34 (IH, m), 4,29 (IH, d,	J=6, 9	Hz), 4,25 (IH,
dq, J=6,2,	6,4	Hz), 4,20 (IH, dd, J=2,4, 9,	0 Hz) ,	4,09 (2H, dt,
J=9,0, 4,6	Hz) ,	3,43 (IH, dd, J-2,4, 6,2 Hz),	3,26	(IH, dq, J=9,0,
7,2 Hz), 2	,26 až 2,16 (IH, m), 1,30 (3H, d,	J=6, 4	Hz), 0,20 (3H,

d, J=7,2 Hz), 1,02 (6H, d, J=6,8 Hz).

IR(KBr): 1749, 1662, 1603, 1545, 1490, 1471, 1394, 1316,

1293, 1260 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FÄB⁺): m/z: 546 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (ESI ⁺ ) :

počítané C₂₂H₂₈N₅O6SNa₂: 568,1276, nájdené: 568,1271 [M+Na] ⁺

Elementárna analýza: C₂₂H₂8N₅O₆Sna.3H₂O vypočítaná : C, 44,07% H, 5,72% N, 11,68% S, 10,69 % nájdená: C, 44,17% H, 6,18% N, 11,84% S, 10,67%

Príklad 53 (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(N-karboxymetyl-N-izopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny, disodná soľ

NCOO'Na

N-

O'Na

253 (1) Do roztoku 3-acetyltio-l-{4-[N-izopropyl-N-(p-nitrobenzyloxykarbonylmetyl) -karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (312 mg, 0,63 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 48) v dimetylformamide (9 ml) bol pridaný hydrazínacetát (70 mg, 0,76 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2- (difenylfosforyloxy) -6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (452 mg, 0,76 mol) v acetonitrile (20 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,44 ml, 2,52 mol). Zmes bola miešaná 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát -> etylacetát: metanol (20:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(l-{4-[N-izopropyl-N-(p-nitrobenzyl-oxykarbonylmetyl)-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (193 mg, výťažok 39%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (4H, d, J= 8,9 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,9 Hz), 7,56 (1H, d, J=8,0 Hz), 7,43 až 7,32 (1,4H, m), 7,15 (0,6H, br, s), 5,51 (1H, d, J=13,8 Hz), 5,28 (1,2H, br, s), 5,25 (1H, d, J=13,8 Hz), 5,20 (0,8H, br, s), 5,05 až 4,65 (0,4H, m), 4,85 až 4,65 (0,6H, m), 4,65 až 3,95 (8H, m

obsahujúci 4	,50	(2H, t,	J=7,4	Hz), 4,	11 (2H,	t, J=7,	4 Hz)),	3, 93
až 3,75 (1H,	m)	, 3,29 (	1H, dd,	, J=6,6,	2,0 Hz)	) , 3,25	až 3,08	(1H,
m),1,38 (3H,	d,	J=6, 4Hz)	i,l,35	(3H, d,	J=7,2Hz)	, 1,20	(6H, br,	s) .

254 (2) (ÍR, 5S, 6S) -2 - {1- [4 - (N-karboxymetyl-N-izopropylkarbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, disodná soľ p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-1-{4-[N-izopropyl-N-(p-nitrobenzyloxykarbonylmetyl)-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (193 mg, 0,24 mol) (získaný podľa opisu v príklade 53(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (9 ml) a destilovanej vody (9 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (193 mg) vo vodnom kúpeli (35°C) 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (40 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepána v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená, premytá horeuvedenými zmiešanými rozpúšťadlami a koncentrovaná počas zníženého tlaku.

chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : voda), a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku zlúčeniny (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(karboxymetylizopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny, disodná sol (63 mg, výťažok 45%) ako biela pevná látka.

’-H-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 7,08 (0,6H, br, s), 7,04 (0,4H, br, s), 4_;70 až 4,69 (0,2H, m), 4,53 (2H, d, J=8,0 Hz),

4,42 až 4,31 (IH, m), 4,18 až 4,09 (0,8H, m), 4,25 (IH, kvint.,

J=6, 4 Hz), 4,20 (IH, d, J=9,l Hz), 4,09 až 4,02 (2H, m), 3,95 (2H, d, J=5,8 Hz), 3,43 (IH, dd, J=6,4, 0,8 Hz), 3,26 (IH, kvint., J=7,6 Hz), 1,31 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,26 až 1,10 (9H, m).

IR (KBr): 3398,0, 1749,1, 1603,5, 1539,9, 1467., 1453,1,

1392,4, 1310,4, 1277, 6 cm’¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): m/z: 569 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB’j : počítané C₂₂H₂707N₄S₂Na₂2 :569, 1116, nájdené 569,1119 [M+Hj⁺

Zvyšok bol destilovaná požadovanej

255

Príklad 54 (ÍR, 5S, 6S)-2-(1- [4- (N-karbamoylmetyl-N-izopropylkarbamoyl)-l,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl} tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-(4-(N-karbamoylmetyl-N-izopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-[4-(N-karbamoylmetyl-N-izopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (347 mg, 0,97 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 49) v dimetylformamide (10 ml) bol pridaný hydrazínacetát (108 mg, 1,17 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2- (difenylfosforyloxy) -6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (696 mg, 1,17 mol) v acetonitrile (20 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,68 ml, 3,88 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku.

256

Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát: metanol (10:1) počas vzniku p-nitrobenzyl- (lRj 5S,6S)-2-{1-[4-(N-karbamoylmetyl-N-izopropylkarbamoyl)-1, 3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (359 mg, výťažok 56%) ako bledožltá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,6 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,6 Hz), 7,05 až 6,72 (IH, m), 5,51 (IH, d, J=13,8 Hz), 5,25 (11H, d, J=13,8 Hz), 4,80 až 4,45 (IH, m), 4,45 až 4,35 (2H, m), 4,35 až 4,17 (3H, m), 4,03 (4H, m), 3,29 (IH, dd, J=7,0, 2,5

Hz), 3,25 až 3,05 (IH, m), 1,38 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,33 až 0,98 (9H, m obsahujúci 1,25 (3H, d, J=7,l Hz)).

(2) (ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-(N-karbamoylmetyl-N-izopropylkarbamoyl)-1, 3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1- [4-(N-karbamoylmetyl-N- i zopropyl karbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl} tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (359 mg, 0,55 mol) (získaný podľa opisu v príklade 54(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (12 ml) a destilovanej vody (12 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% hydroxidu paládia (359 mg) vo vodnom kúpeli (35°C) 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (46 mg), kyselina octová a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda -» 2% acetonitril v destilovanej vode) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-(N-karbamoyimetyl-N-izopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2—em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ (195 mg, výťažok 65%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂0): δ (ppm) 7,17 (0,2H, br, s), 7,12 (0,8H,

257 br, s), 4,56 (2H, dd, J—17,4, 9,0 Hz), 4,42 až 4,16 (4H, m obsahujúci 4,25 (IH, kvint., J=6,3 Hz), 4,21 (IH, dd, J=8,4, 2,3 Hz), 4,09 až 3,97 (2H, m), 3,44 (IH, dd, J=6,3, 2,5 Hz), 3,26 (IH, kvint., J=8,4 Hz), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,25 až 1,08 (9H, m obsahujúci 1,19 (3H, d, J=6,7 Hz)).

IR(KBr): 3404,7, 1749,1, 1681,6, 1605,4, 1538,0, 1468,5,

1448,3, 1395,2, 1306,5, 1277,6 cm¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 546 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum velkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané C₂2H29N₅O₆S2Na:546,1457, nájdené: 546,1458 [M+H]⁺

Príklad 55 (ÍR, 5S,6S)-2-{1-[4- (N-kyanometyl-N-izopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(N-kyanometyl-N-ízopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-((R) -1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-[4-(N-kyanometyl-N-izopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidínu (344 mg, 1,01 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 50) v dimetylformamide (10 ml) bol pridaný hydrazínacetát (112 mg, 1,22 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1258

-’nydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (725 mg, 1,22 mol) v acetonitrile (20 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,70 ml, 4,04 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát —» etylacetát: metanol (10:1) počas vzniku pnitrobenzyl- (TR, 5S, 6S ) -2- {1- [4- (N-kyanometyl-N-izopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tío-6-[(R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (245 mg, výťažok 39%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,6 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,48 až 7,15 (IH, m), 5,51 (IH, d, J=14,0 Hz), 5,26 (IH, d, J=14,0 Hz), 4,86 (IH, kvínt., J=6,5 Hz), 4,72 až 3,76 (9H, m obsahujúci 4,52 (2H, t, J=8,l Hz), 4,27 (2H, dd, J=6,6, 2,5 Hz)), 3,29 (IH, dd, J=6,9, 2,5 Hz), 3,21 (IH, kvínt., J=9,3, 7,3 Hz), 1,38 (3H, d, J=6,2 Hz), 1,35 až 1,20 (9H, m obsahujúci 1,25 (3H, d, J=7,3 Hz) ) .

(2) (ÍR,5S,6S)-2-{l- [4-(N-kyanometyl-N-izopropylkarbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyi]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxyíová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(N-kyanometyl-N-izopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]-azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (245 mg, 0,39 mol) (získaný podlá opisu v príklade 55(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (12 ml) a destilovanej vody (12 ml) bol katalytický hydrogénovaný

259 za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (245 mg) vo vodnom kúpeli (35°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (33 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená, premytá horeuvedeným rozpúšťadlom zo zmesí a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chromatografický vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda —> 2% acetonitril v destilovanej vode -> 4% acetonitril v destilovanej vode —> 6% acetonitril v destilovanej vode) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-(N-kyanometyl-N-izopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (87 mg, výťažok 42%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂0) : δ (ppm) 7,20 (1H, br, s), 4,58 (2H, t, J=8,0 Hz), 4,49 až 4,31 (3H, m obsahujúci 4,41 (2H, s)), 4,25 (1H, kvínt., J=6,3 Hz), 4,21 (1H, dd, J=9,0, 2,3 Hz), 4,19 až 3,80 (3H, m obsahujúci 4,07 (2H, dd, J=8,6, 4,9 Hz), 3,44 (1H, dd, J=6,3,

2,4 Hz), 3,26 (1H, dq, J=9,0, 7,2Hz), 1,43 až 1,25 (9H, m obsahujúci 1,31 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2 Hz)).

IR(KBr): 3398,0, 1750,1, 1606,4, 1537,0, 1468,5, 1426,1,

1401,0, 1373,1, 1332, 6, 1311,4, 1274,7 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 550 [M+Na] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané C₂₂H₂gN5O5S₂Na₂: 550, 1171, nájdené: 550,1179 [M+Na]⁺

Príklad 56 (ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-(piperidím-4-ylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-i-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny

260

COOH (1) p-Nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-(l-{4-[i-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperidín-4-yl-karbamoyl]-1, 3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-{4-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperidín-4-yl -karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (260 mg, 0,500 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 51) v dimetylformamide (13 ml) bol pridaný hydrazínacetát (55 mg, 0,600 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2- (difenylfosforyloxy) -6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (297 mg, 0,500 mol) v acetonitrile (15 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (348 μΐ, 2,00 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát etylacetát: metanol (9:1) počas vzniku p-nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-(l-{4-[l - (p-nitrobenzyloxykarbonyl) -piperidín-4-y 1' -karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1261

-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (348 mg, výťažok 85%) ako bledožltá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (4H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,52 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,43 (IH, s), 7,05 až

7,01 (IH, br, d,	J=8,8 Hz)	, 5,	51 (IH, d, J=13,7 Hz), 5,25 (IH	, d,
J=13,7 Hz), 5,23	(2H, s),	4,52	až 4,46 (2H, m), 4,31 až 4,25	(3H,
m) , 4,23 až 4,04	(3H, m),	4,05	(2H, dt, J=8,8, 5,9 Hz) , 3,30	(IH,
dd, J=2,4, 7,3 :	Hz), 3,21	(IH,	dq, J=6,8, 8,8 Hz), 3,11 až	2,95

(2H, m), 2,07 až 2,00 (2H, m), 1,55 až 1,41 (2H, m), 1,38 (3H, d, J=6,8 Hz), 1,28 (3H, d, J=5,9Hz).

(2) (ÍR, 5S,6S)-2-{1-[4-(piperidín-4-ylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl} tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina p-Nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2- (1- {4- [1- (p-nitrobenzyloxykarbonyl) -piperidín-4-yl -karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (340 mg, 0,414 mol) (získaný podlá opisu v príklade 56(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (17 ml) a destilovanej vody (17 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhli (340 mg) pri teplote miestnosti 4,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu boli pridané etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda -> destilovaná voda: acetonitril (8:2)) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S, 6S)-2-{l-[4-(piperidín-4-yl·

-karbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl} tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny (70 mg, výťažok 33%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 7,50 (IH, s), 4,55 (2H, t, J=8,2

Hz), 4,36 až 4,29 (IH, m), 4,24 (IH, dq, J=6,2, 6,4 Hz), 4,17 (IH, dd, J=2,2, 9,1 Hz), 4,17 až 4,08 (IH, m), 4,03 (IH, dd, J=5,0,

262

8,3 Hz), 3,53 (2H, dt, J=13,3, 3,1 Hz), 3,43 (1H, dd, J=2,2, 6,2 Hz), 3,25 (1H, dq, J=9,l, 7,2 Hz), 3,17 (2H, dt, J=12,8, 2,9 Hz), 2,20 (1H, dd, J=2,9, 14,2 Hz), 1,93 až 1,80 (2H, m), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,19 (3H, d, J=7,2 Hz).

IR(KBr): 1754, 1658, 1602, 1545, 1385, 1315 cm'¹

Hrnotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 508 [M+H]⁺

Hrnotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané·’ C₂₂H3oN₅0₅S₂ 508,1688 nájdené: 508, 1693[M+H]

Elementárna analýza: C₂₂H₂₉N5O₅S₂.3H₂0 vypočítaná : C, 47,05% H, 6,28% N, 12,47% S, 11,42% nájdená: C, 47,07% H, 6,38% N, 12,37% S, 11,14%

Príklad 57 (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-((3S)-pyrolidín-3-yl-karbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina

(1) p-Nitrobenzyi-(ÍR,5S,6S)-2-(l-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyi) -pyrolidín-3-yi -karbamoyl·] -1, 3-tiazol-2-yl] azetidin-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-{4-[(3S)-1- (p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tíazol-2-yl}azetidínu (280 mg, 0,554 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 52) v dimetylformamide (14 ml) bol pridaný hydrazínacetát (61 mg, 0,665 mol) pri teplote miestnosti pod

263 atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (329 mg, 0,554 mol) v acetonitrile (16 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (356 μΐ, 2,22 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent etylacetát: metanol (9:1)) počas vzniku

- (ÍR, 5S, 6S ) -2- (1- { 4- [ (3S) -1- (p-nitrobenzyloxykarbonyl) -pyrolidín-3-y1karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)-tio-6-[(R)-1bol vyčistený etylacetát -> p-nitrobenzyl'399 mg,

-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu výťažok 89%) ako bledožltá pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 8,20 (2H, č, J=8,8 Hz)., 7,53 (2H, dd, J=8,8, 7,17 až 7,12 (1H, br, t, J=7,8 Hz), 5,51 5 (1H, d, J=13,7 Hz), 5,30 až 5,18 (2H,

n), 4,54 až 4,46 (2H, m), 4,32 až 4,24 )2H, m), 3,84 až 3,76 (1H, m), 3,65 až 5,40 (1H, m), 3,30 (1H, dd, J=2,9, 6,8 i, 6,6 Hz), 2,32 až 2,22 (lH,m), 2,09 až

(2H, d, J=8,8 Hz), 7,66
13,7 Hz),	7,45 (1H, s),
(1H, d, ď	=13,7 Hz), 5,2
m) , 4,68	až 4,59 (1H,
(3H, m),	4,09 až 4,00
3,53 (2H,	m), 3,46 až
Hz), 3,22	(1H, dq, J=8,
1,94 (1H,	m), 1,38 (3H,
(2)	(1R,5S,6S)-2-

-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[(3S)-1-(p264

-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tío-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (390 mg, 0,483 mol) (získaný podľa opisu v príklade 57(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (20 ml) a destilovanej vody (20 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia na aktívnom uhlí (390 mg) pri teplote miestnosti 4,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu boli pridané etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda -> destilovaná voda acetonitril (76:24)) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-(1-(4-( (3S)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl] azet idín-3-yl} tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] - l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny (90 mg, výťažok 38%) ako biela pevná látka.

	¹H-NMR (400 M Hz,	D₂0): δ	(ppm) 7,52	(IH,	s) ,	4,69 až	4, 62
(IH,	m), 4,59 až 4,50	(2H, m)	, 4,37 až 4	,39 (	IH,	m), 4,22	(IH,
dq,	J=6,4, 6,4 Hz), 4,	11 (IH,	dd, J=2,4,	9,0	Hz) ,	4,07 až	4,01
(2H,	m), 3,65 až 3,55	(2H, m)	, 3,48 až 3	,39 (	3H,	m) , 3,21	(IH,
dq,	J=9,0, 7,2 Hz), 2,	50 až 2,	40 (IH, m),	2,23	až	2,14 (IH,	m),
1,30	(3H, d, J=6,4Hz),	1,18 (3H, d, J=7,2	Hz) .
	IR(KBr): 1754, 1654	, 1597,	1545, 1386,	1313	cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): m/z: 494 (M+H]⁺

Hmotnostné spektrum velkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané C21H28N5O5S2: 494,1532, nájdené 494,1529[M+H]⁺

Elementárna analýza: C21H27NSO5S2.7/3H₂O vypočítaná C, 47,09% H, 5,96% N, 13,08% S, 11,97% nájdená C, 47,04% H, 5,95% N, 13,04% S, 11,83%

Príklad 58 (ÍR,53,6S)-2-(1-(4-( (3R)-pyrolidín-3-y1karbamoyl)-1,3265

-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina

COOH (1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{4 - [(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-yl-karbamoyl]-i,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (280 mg, 0,554 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 53) v dimetylformamide (14 ml) bol pridaný hydrazinacetát (61 mg, 0,665 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2- (difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (329 mg, 0,554 mol) v acetonitrile (16 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (386 μΐ, 2,22 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne (eluent:

266 etylacetát -» etylacetát: metanol (9:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (416 mg, výťažok 93%) ako bledožltá pevná látka.

^H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 8,19

(2H, d, J=	8,8 Hz),	7,66	(2H,	d,	J=8,8 Hz), 7,53	(2H, dd, J=8,8,
15,6 Hz),	7,45 (1H,	s) ,	7,17	až	7,11 (1H, br, s	), 5,51 (1H, d,
J=13,8 Hz)	, 5,30 až	5,18 (3H,	m)	, 4,67 až 4,58 (	1H, m), 4,53 až
4,47 (2H,	m) , 4,32	až	4,23	(3H	, m) , 4,06 (2H,	dt, J=8,8, 5,9
Hz), 3,81	až 3,76	(1H,	m) , 3	, 65	až 3,53 (2H, m)	l , 3,47 až 3,40
(1H, m), 3	,30 (1H,	dd,	J=2,9,	6,	8 Hz), 3,22 (1H,	dq, J=8,8, 7,8
Hz), 2,32	až 2,25	(1H,	m) , 2	,09	až 1,95 (1H, m)	, 1,39 (3H, d,
J=5,9 Hz),	1,28 (3H,	d,	J=7,8	Hz)	-
(2)	(ÍR,5S,6S)-2-	-{1-[4-	- ((3R)-pyroiidín-3-y1karbamoyl)-

-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metvlkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (410 mg, 0,508 mol) (získaný podía opisu v príklade 58(1)) v zmesi tetrahydrofuranu (21 ml) a destilovanej vody (21 ml) bol katalytický hydrogénovaný počas prítomnosti 20% hydroxidu paládia na aktívnom uhlí (410 mg) pri teplote miestnosti 4,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená, premytá horeuvedeným zmesovým rozpúšťadlom a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda -^· destilovaná voda:acetonitril (76:24)) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku

267 požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny (101 mg, výťažok 41%) ako biela pevná látka.

	¹H-NMR (400 M	Hz, D₂0) :	δ (ppm) 7,52	(1H, S),	4,69	až	4,62
(1H,	m) , 4,60 až	4,52 (2H,	m), 4,38 až 4	,30 (1H,	m), 4,	,24	(1H,
dq,	J=6,3, 6,3 Hz	), 4,16 (1	H, dd, J=2,3,	8,9 Hz),	4,09	až	4,02
(2H,	m) , 3,67 až	3,54 (2H,	m), 3,49 až 3	,40 (3H,	m) , 3,	,24	(1H,
dq,	J=8,9, 7,2 Hz)	1, 2,49 až	2,40 (1H, m),	2,24 až	2,14	(1H,	m) ,
1,30	(3H, d, J=6,3	Hz), 1,20	(3H, d, J=7,2	Hz) .

IR(KBr): 1756, 1656, 1598, 1544, 1384, 1313 cm'¹Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 494 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum velkého rozlíšenia (FAB⁺) :

počítané C₂iH₂₃N₅O₅S₂ : 494,1532, nájdené: 494,1519 [M+H]⁺Elementárna analýza: C₂iH₂7N₅O₅S₂· 3H₂O vypočítaná C, 46,06% H, 6,07% N, 12,79% S, 11,71% nájdená C, 46,35% H, 5,75% N, 12,82% S, 11,68%

Príklad 59 (ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-(azetidín-3-ylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina

COOH (1) p-Nitrobenzyl-(ÍR, 5S,6S)-2-(1-{4-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) -azetidín-3-ylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl} azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

268

Do roztoku 3-acetyltio-l-{4-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-azetidín-3-ylkarbamoyl]-1, 3-tiazol-2-yl}azetidínu (400 mg, 0,814 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 54) v dimetylformamide (20 ml) bol pridaný hydrazínacetát (90 mg, 0,977 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6- [(R)-1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (484 mg, 0,814 mol) v acetonitrile (25 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (568 μΐ, 3,26 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát —> etylacetát: metanol (9:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(l-{4-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-azetidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl) tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (496 mg, výťažok 77%) ako bledožltá pevná látka.

’-H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : Ô (ppm) 7,54 (IH, s), 8,23 (4H, d, J=8,8 Hz), 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,52 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,52 až 7,47 (IH, m), 7,45 (IH, s), 5,51 (IH, d, J=13,9 Hz), 5,25 (IH, d, J=13,9 Hz), 4,90 až 4,80 (IH, m), 4,54 až 4,47 (2H, m), 4,47 až 4,38 (2H, m), 4,42 (2H, dd, J=8,8, 8,8 Hz), 4,13 až 4,25 (2H, m), 4,27 (IH, dd, J-2,2, 9,5 Hz), 4,09 až 3,96 (4H, m), 3,30 (IH, dd, J=2,2, 7,0 Hz), 3,21 (IH, dq,

J=9,5, 6,6 Hz), 1,38 (3H, d, J=6,6 Hz), 1,28 (3H, d, J=5,9 Hz).

(2) (ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(azetidín-3-ylkarbamoyl)-1,3-tiazol269

-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-azetidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (490 mg, 0,617 mol) (získaný podľa opisu v príklade 59(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (25 ml) a destilovanej vody (25 mi) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia (490 mg) pri teplote miestnosti 4,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu boli pridané etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chromatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda —> destilovaná voda: acetonitril (76:24)) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-(azetidín-3-ylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny (143 mg, výťažok 49%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 7,54 (1H, s), 4,97 až 4,87 (1H, m), 4,60 až 4,54 (2H, m), 4,44 (2H, dd, J=ll,9, 8,4 Hz), 4,39 až 4,30 (3H, m), 4,23 (1H, qd, J=6,4, 6,2 Hz), 4,15 (1H, dd, J=9,0, 2,4 Hz), 4,10 až 4,03 (2H, m), 3,43 (1H, dd, J=6,3, 2,4 Hz), 3,23 (1H, dq, J=9,0, 7,2 Hz), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz),

1,19 (3H, d, J=7,2 Hz).

IR (KBr): 1753, 1655, 1600, 1545, 1387, 1314 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 480 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané C₂oH₂₆N50₅S₂: 480, 1375 nájdené 480,1391[M+H]⁺ '

Elementárna analýza: C₂₀H₂5N₅O5S2.9/4H₂O vypočítaná C, 46,19% H, 5,72% N, 13,47% S, 12,33% nájdené C, 46,06% H, 5,38% N, 13,70% S, 12,33%

270

Príklad 60 (1R,5S,6S)-2-{l-[4-(piperazín-l-karbonyl)-1,3-tiazol 2

-yl] azetidín-3-yl} tio-6-[ (R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperazín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-{4-[(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperazín-l-karbonyl]-i,3-tiazol-2-yl}azetidínu (546 mg, 1,07 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 55) v dimetylformamide (15 ml) bol pridaný hydrazínacetát (118 mg, 1,29 mol) v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6- [(R)-1-hyčroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (636 mg,· 1,07 mol) v acetonitrile (30 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,22 ml, 1,29 mol). Zmes bola miešaná 1 hodinu pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas

271 zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát -> etylacetát: metanoi (1:20)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[(4-p-nitrobenzyloxykarbonyi)-piperazín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(Rl -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (215 mg, výťažok 29%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 8,22 (4H, dd, J=8,5, 5,2

Hz), 7,66 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,52 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,22 (IH, s), 5,51 (1H, d, J=13,8 Hz), 5,25 (1H, d, J=13,8 Hz), 5,25

(2H,	s), 4,50	(1H, t, J=8,0 Hz), 4,49	(1H, t, J=8,0 Hz), 4,35 až
4,20	(3H, m),	4,04 (1H, t, J=8,5Hz),	4,31 (1H, t, J=8,5 Hz),
3,98	až 3,69	(4H, m) , 3,69 až 3,48	(4H, m), 3,29 (1H, dd,
J=6,	8, 2,6Hz),	3,20 (1H, dq, J=9,2, 7,	2 Hz), 1,36 (3H, d, J=6,3
Hz) ,	1,26 (3H,	d, J=7,5 Hz) .

(2) (ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(piperazín-l-karbonyl)-1, 3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6- [ (R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-(4-[(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperazín-l-karbonyl] -1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl)tio-6-[ (R) - 1 -hydroxyetyl]-Tmetylkarbapén-2-em-3-karboxylát (539 mg, 0,79 mol) (získaný podía opisu v príklade 60(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (30 ml) a destilovanej vody (30 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (539 mg) vo vodnom kúpeli (35°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu boli pridané etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda -> 2% acetonitril v destilovanej vode -> 4% acetonitril v destilovanej vode —> 6% acetonitril v destilovanej vode —> 8% acetonitril v destilovanej vode —> 10% acetonitril v

272 destilovanej vode —> 13% acetonitril v destilovanej vode —> 16% acetonitril v destilovanej vode 20% acetonitril v destilovanej vode) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčenine (lR,5S,6S)-2-{l-[4- (piperazín-l-karbonyl) -1,3-tiazoi-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metyikarbapén-2-em-3-karbcxylove j kyseliny (107 mg, výťažok 27%) ako biela pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 7,23 (1H, s), 4,56 (22, z, J=5, i Hz), 4,40 až 4,30 (1H, m), 4,24 (1H, kvínt., J=6,2 Hz), 4,20 (1H, dd, J=8,7, 2,2 Hz), 4,03 (2H, dd, J=8,7, 2,2 Hz), 3,25 )4H, t, J=5,2 Hz), 3,43 (1H, dd, J=6,2, 2,4 Hz), 3,40 až 3,29 (4H, m), 3,24 (1H, dq, J=8,7, 7,3 Hz), 1,29 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,19 (3H, d, J=7,9 Hz).

IR(KBr): 3415,3, 1759,7, 1620, 9, 1536, 0, 1456, 0, 1431, 9,

1384,6, 1313,3, 1246, 8 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 494 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (ESI⁺) : počítané C21H28N5O5S2 : 494,2532, nájdené 494,1529[M+H]^T

Príklad 61 (1R,5S,6S)—2-{1-[4-((2-aminoetyl)karbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yi } tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina

HO

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(i-{4-[(2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)etyl)karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}

273 azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-{4-[(2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)etyl)karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidínu (330,6 mg, 0,68 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 56) v dimetylformamide (17 ml) bol pridaný hydrazínacetát (82 mg, 0,89 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (426 mg, 0,72 mol) v acetonitrile (21 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,5 ml, 2,9 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného boli pridané do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrované a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne (eluent : toluén : acetonitril (1:2)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S, 6S)-2-{1—{4-[(2-(p-nitrobenzyl-oxykarbonylamino)etyl)karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (348,1 mg, výťažok 66%) ako bledožltá pevná látka.

	¹H-NMR	(500	M	Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d,	J=7,8	Hz), 8,14
(2H,	d, J=	^;8,8	Hz)	, 7,66 (2H, d, J=7,8 Hz), 7,47	(2H,	d, J=8,8
Hz) ,	7,43	(IH,	s)	1, 7,38 (IH, t, J=6,3 Hz), 5,51	(IH,	d, J=13,7
Hz) ,	5,51	(IH,	t,	J=6,3 Hz), 5,25 (IH, d, J=13,7	Hz) ,	5,18 (2H,

s), 4,48 (IH, t, J=8,3 Hz), 4,46 (IH, t, J=8,3 Hz), 4,32 až 4,24 (3H, m), 4,05 (IH, dd, J=8,3, 5,6 Hz), 4,03 (IH, dd, J=8,3, 5,6

274

Hz), 3,55 (2H, d, 6,3 Hz), 3,44 (2H, q, 6,3 Hz), 3,30 (1H, dd,

J=6,9, 1,9 Hz), 3,22 (1H, dq, J=8,8, 6,5 Hz), 1,73 (1H, br, s),

1,38 (3H, d, J=6,5 Hz), 1,28 (3H, d, J=6,5 Hz).

(2) (ÍR, 5S,6S)-2-{l-[4-((2-aminoetyl)karbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl} tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina p-Nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-(l-{4-[(2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)etyl)karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (328,4 mg, 0,42 mol) (získaný podlá opisu v príklade 61(1)) ve zmesi tetrahydrofurane (16,4 ml) a destilovanej vody (8,2 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia na aktívnom uhlí (328, 4 mg) vo vodnom kúpeli (30°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bola pridaná zmes etylacetát-tetrahydrofuranu (1:1) a destilovanej vody. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená, premytá horeuvedeným zmesovým rozpúšťadlom a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chromatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda —> 5% acetonitril v destilovanej vode —> 10% acetonitril v destilovanej vode -» 15% acetonitril v destilovanej vode) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S, 6S)-2-{l-[4-( (2-aminoetyl) karbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny (96,4 mg, výťažok 49%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 7,37 (1H, s), 4,42 (1H, t, J=8, 4 Hz), 4,42 (1H, t, J=8,4 Hz), 4,24 až 4,16 (1H, m), 4,10

(1H,	kvintet, J=6,6	Hz) ,	4,00	(1H, dd, J=8,9,	2,4	Hz), 3,94 (1H,
dd,	J=8,4, 4,8 Hz),	3,90	(íh,	dd, J=8, 4, 4,8	Hz)	, 3,57 (2H, t,
J=5,	9 Hz), 3,26 (1H,	dd,	J=6, 6	, 2,4 Hz), 3,12	(2H,	t, J=5,9 Hz) ,
3,08	(1H, dq, J=8 , 9 ,	7,3	Hz) ,	1,16 (3H, d, J=	6,6	Hz) , 1,05 ( 3H,

d, J=7,3 Hz) .

275

IR(KBr): 3383, 1755, 1652, 1599, 1547, 1387, 1314 cm^-1Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 4 68 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané C19H26O5N5S2 : 4 68,1366, nájdené 468,1365 [M+H]⁺

Príklad 62 (ÍR,5S,6S)-2-{1- [4-(3-aminoazetidín-1-karbonyl)-1,3-tiazol—2—yl J azetidín-3-yl} tio-6- [ (R) -l-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina

(1) p-Nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonyiamino) azetidín-l-karbonyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yi}tío-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-ylJazetidínu (390 mg, 0,793 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 57) v dimetylformamide (20 ml) bol pridaný hydrazínacetát (88 mg, 0,952 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (471 mg, 0,793 mol) v acetonitrile (24 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (552 μΐ, 3,17 mol). Zmes bola miešaná

276 počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v čeliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 10% chloridom sodným solution a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát: metanol (93:7)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-(l-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-azetidín-1-karbonyl]-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yi}tio-6-[(R)-1-hydroxyetylj-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (587 mg, výťažok 93%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (4H, d, J=8,8 Hz), 7,66

(2H,	d, J=8,8 Hz),	7,51 (2H, d, J=8,8	Hz), 7,46	(2H, s	) , 5,5
(IH,	d, J=13,9 Hz),	5,40 až 5,37 (IH,	m) , 5,25 (	IH, d,	J=13,
Hz) ,	5,21 (2H, s),	4,92 až 4,86 (IH, m	) , 4,59 až	4,42 (	4 H, m)
4,40	až 4,32 (IH, m)	, 4,30 až 4,23 (3H,	m) , 4,04 až	3,92 (	3H, m)
3,30	(IH, dd, J=2,2,	6,6 Hz) , 3,21 (IH,	dq, J=7,3,	9, 0 Hz	), 1,3
(3H,	d, J=6,6 Hz), 1	,27 (3H, d, J=7,3 Hz)

(2) (ÍR, 5S,6S)—2—{1—[4-(3-aminoazetidino-1-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl·} tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina p-Nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-{(1-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)azetidín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-i-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (580 mg, 0,731 mol) (získaný podľa opisu v príklade 62(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (30 ml) a destilovanej vody (30 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (580 mg) pri teplote miestnosti 5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu boli pridané etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená,

277 premytá horeuvedenými zmiešanými rozpúšťadlami a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chromatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda —» destilovaná voda : acetonitril (8:2)) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S, 6S)-2-{1-[4-(3-aminoazetidín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny (135 mg, výťažok 39%) ako biela pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, D₂0) : δ (ppm) 7,45 (IH, s), 4,98 až 4,85 (IH, m), 4,64 až 4,49 (4H, m), 4,38 až 4,30 (IH, m), 4,31 až 4,17 (4H, m), 4,07 až 4,00 (2H, m), 3,44 (IH, dd, J=2,0, 5,9 Hz), 3,24 (IH, qd, J=7,2, 8,5 Hz), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2 Hz) .

IR (KBr): 1756, 1607, 1537, 1449, 1387, 1309, 1291, 1261 cm’¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 50 [M+Na] ⁺

Hmotnostné spektrum velkého rozlíšenia (ESI⁺) : počítané C₂oH₂5N₅0₅S₂Na : 502,1195, nájdené 502,1179 [M+Na] ⁺

Elementárna analýza: C₂oH₂₅Ns05S₂. 3H₂O vypočítaná C, 45,02% H, 5,86% N, 13,12% S, 12,02% nájdená C, 44,27% H, 5,28% N, 13,26% S, 12,68%

Príklad 63 (ÍR, 5S, 6S)-2-(1-(4- [ (2-aminoetyl) -metyl-karbamoyl ] -1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina

COOH

278 (1) p-Nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-[l-(4-{metyl-[2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino) etyl] - karbamoyi} -1,3-tiazol-2-yl)azeridín-3-yl]tio-6- [ (R)-1-hydroxyetyi]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-{metyl-[2-(p-nitrobenzylcxykarbonylamino)-etyl]karbamoyi}-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (348,9 mg, 0,71 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 58) v dimetylformamide (17,5 ml) bol pridaný hydrazínacetát (85,2 mg, 0,93 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyi-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6- [ (R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (420,3 mg, 0,71 mol) v acetonitrile (21 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,49 ml, 2,8 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: toluén:acetonitril (1:2)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-{metyl-[2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino) etyl]karbamoyi}-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (267,5 mg, výťažok 47%) ako bledožltá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (4H, d, J=8,8 Hz), 7,66

(2H,	d, J=8,8 Hz)	, 1,56	až 7,46	(3H, m	obsahuj úci	2H, d,	na 7
ppm,	J=8,8 Kz),	7,22 (	(0,7H, s)	r 7,21	(0,3H, s)	, 5,52	(1H,
J=13,	9 Hz), 5,25	(1H, d	, J=13,9	Hz), 5,	172 (2H, s	), 4,52	až 4

279 (2Η, m), 4,32 až 4,10 (3H, m), 4,10 až 3,98 (2H, m), 3,74 až (2H, m), 3,56 až 3,40 (2H, m), 3,30 až 3,26 (IH, m), 3,16 až (IH, m), 3,24 (0,9H, s), 3,04 (2,1H, s), 1,77 (IH, d, J=4,4

1,38 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,22(3H, J=7,3Hz).

3,58 3,06 Hz) , (2) (ÍR,5S,6S)-2-(1-(4-[(2-aminoetyl)-metyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-{metyl-[2- (p-nitrobenzyloxykarbonylamino)etyl]-karbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (267,5 mg, 0,33 mol) (získaný podľa opisu v príklade 63(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (14 ml) a destilovanej vody (6,7 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia na aktívnom uhlí (300 mg) a pri 30°C vo vodnom kúpeli 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bola pridaná zmes etylacetát-tetrahydrofuranu (1:1) a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola oddelená, premytá horeuvedeným zmesovým rozpúšťadlom a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda -> 5% acetonitril v destilovanej vode —> 10% acetonitril v destilovanej vode -» 15% acetonitril v destilovanej vode), a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S, 6S) -2-(l-{ 4- [ (2-aminoetyl)-metyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny (81,6 mg, výťažok 51%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR	(400	M Hz, D₂O) : δ	(ppm) 7,11 (0,4H,	s), 7,05 (0,6H,
s), 4,43 (	7H,	t, J=8,8 Hz),	4,26 až 4,18	(IH,	m) , 4,12	(IH,
kvintet, J=	=5,9	Hz), 4,08 (IH,	dd, J=8,8, 2,3	Hz)	, 3,91 (2H,	dd,
J=8,8, 4,9	Hz) ,	3,70 (2H, t,	5,9 Hz), 3,31	(IH,	dd, J=5,9,	2,3

Hz), 3,23 až 3,16 (2H, m), 3,12 (IH, dq, J=8,8, 7,8 Hz), 3,00 (1,8H, s), 2,94 (1,2H, s), 1,17 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,07 (3H, d,

280

J=7, 8 Hz).

IR(KBr): 3419, 2966, 1754, 1607, 1540, 1470, 1391, 1315 cm'

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): m/z: 482 [M+H]⁺

Príklad 64 (ÍR, 5S, 6S)-2-(1-{4-[(2-hydroxyetyl)-izopropyl-karbamoyl]-1,3-tíazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyi]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina

HO

COOH (1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[l-(4-{[2-(terc.butyldimetylsilyloxy)etyl]-izopropyl-karbamoyl}-!,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-{[2-('fcerc.butyldimetylsiiyloxy)-etyl]-izopropylkarbamoyl}-l, 3-tiazol-2-yl)azetidínu (618 mg, 1,35 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 59) v dimetylformamide (30 ml) bol pridaný hydrazínacetát (149 mg, 1,62 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (963 mg, 1,62 mol) v acetonitrile (60 mi) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,94 ml, 5,40 mol). Zmes bola miešaná 8 hodín pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a

281 etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát -> etylacetát: metanol (10:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{[1-(4-{ [2-(terc.butyldimetylsilyloxy)etyl]-izopropyl-karbamoyl}-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]-tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (310 mg, výťažok 30%) ako bledožltá pevná látka.

¹NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J= 8,4 Hz), 7,64 (2H, d, J= 8,4 Hz), 7,12 až 6,90 (IH, m), 5,45 (IH, d, J= 13,7 Hz), 5,25 (IH, d, J=13,7 Hz), 4,69 až 4,18 (6H, m obsahujúci 4,45 (2H, dd, J=7,9, 6,5 Hz), 4,24 (IH, kvint., J=6,3 Hz), 4,22 (IH, dd, J=9,0, 2,5 Hz)), 3,89 až 3,72 (IH, m), 3,72 až 3,46 (2H, m), 3,46 až 3,32 (IH, m), 3,26 (IH, dd, J=6,3, 2,5 Hz), 3,17 (IH, dq, J=9,0, 7,3 Hz), 1,36 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,31 až 1,09 (9H, m obsahujúci 1,25 (3H, d, J=7,2 Hz)), 0,87 (9H, s), 0,06 (6H, d,

J=2,9 Hz) .

(2) p-Nitrobenzyi-(ÍR,5S,6S)-2-{1—{4—[(2-hydroxyetyl)-izopropyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát ρ-Nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-(1-(4-([2—(terc. butyldimetylsilyloxy) etyl] -izopropylkarbamoyl}-l, 3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (4,47 g, 5,88 mol) (získané podlá opisu v príklade 64(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (220 ml) bol pridaný do kyseliny octovej (0,40 ml, 7,06 mol) a IM tetrabutylamóniumfluoridu v roztoku tetrahydrofuránu (7,06 ml, 7,06 mol) a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 deň. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacon lieviku a etylacetátová vrstva bola

282 oddelená, premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne (eluent : etylacetát -» etylacetát : metanol (10:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{ 4- [ (2-hydroxyetyl) -izopropyl-karbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl) tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (1,79 g, výťažok 47%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,20 (0,6H, br, s), 7,09 (0,4H, br, s), 5,50 (1H, d, J=13,8 Hz), 5,26 (1H, d, J=13,8 Hz), 4,62 až 4,18 (6H, m obsahujúci 4,49 (2H, t, J=8,4 Hz), 4,26 (1H, dd, J=9,3, 2,6 Hz)), 4,04 (2H, dd, J=8,4, 5,4 Hz), 3,80 (2H, br, s), 3,56 (2H, br, s), 3,28 (1H, dd, J=7,5, 2,5 Hz), 3,19 (1H, br, s),1,38 (3H, d, J=6,2 Hz), 1,35 (3,6H, br, s), 1,26 (3H, d, J=7,3 Hz),

1,21 (2,4H, br, s).

reakčná (3) (ÍR,5S,6S)-2-(1—{4—[(2-hydroxyetyi)-izopropyl-karbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-hydroxyetyl)-izopropyl-karbamoyl] -1, 3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl) tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (1,79 g, 2,77 mol) (získaný podľa opisu v príklade 64(2)) v zmesi tetrahydrofuránu (90 ml) a destilovanej vody (90 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (1,79 g) vo vodnom kúpeli (35°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola filtrovaná a do filtrátu bol pridaný zmes hydrogénuhličitan sodný (23 mg), etylacetát a destilovaná voda. Zmes bola trepaná v deliacom lieviku. Vodná vrstva bola zníženého tlaku, kolóne Cosmosil

Zvyšok bol (eluent :

oddelená a koncentrovaná počas chromatograficky vyčistený na destilovaná voda —> 2% acetonítríl v destilovanej vode -e- 4% acetonítríl v destilovanej vode) a eluát bol lyofylizovaný počas

283 vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S, 6S)-2-(l-{ 4-[ (2-hydroxyetyl) -izopropyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny (897 mg výťažok 61%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 7,08 (0,2H, s), 7,02 (0,8H,

s), 4,56 (2H, t, J=8,0 Hz), 4,50 až 4,40 (0,3H, m), 4,40 až 4,30 (IH, m), 4,25 (IH, kvínt., J=6,5 Hz), 4,21 (IH, dd, J=8,4, 2,2 Hz), 4,16 až 4,06 (0,7H, m), 4,05 (2H, dd, J=8,0, 4,8 Hz), 3,69 až 3,60 (0,5H, m), 3,60 až 3,52 (0,5H, m), 3,52 (2H, t, J=6,3

Hz), 3,43 (1K, dd, J=6,5, 2,4 Hz), 3,25 (IH, kvínt., J=8,4 Hz), 1,42 až 1,07 obsahujúci 1,30 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,20 (3H, d,

J=7,1 Hz)) .

IR(KBr): 3382,5, 1750,1, 1603,5, 1537,0, 1468,5, 1452,1,

1396,2, 1312,3, 1284,4 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 533 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (ESI⁺) : počítané C₂₂H₂9N4O5S₂Na : 533,1504 nájdené 533,1489 [M+H] ⁺

Príklad 65 (ÍR,5S,6S)-2-(1—{4—[(2-aminoetyl)-izopropyl-karbamoyl]-1, 3-tiazol-2-yl}azetidín-3yl) tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina

COOH (1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-{izopropyl-[2-(p·

-nitrobenzyloxyamino) -etyl] karbamoyl} -1,3-tiazol-2-yl) azetidín-3284

-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-kar-boxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-{izopropyl-[2-(p-nitrobenzyloxyamino)-etyl]-karbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (746 mg, 1,43 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 60) v dimetylformamide (22 ml) bol pridaný hydrazínacetát (158 mg, 1,72 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (1,02 g, 1,72 mol) v acetonitrile (45 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (1,00 ml, 5,72 mol). Zmes bola miešaná 3 hodiny pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát —> etylacetát: metanol (10:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-{izopropyl-[2-(p-nitrobenzyloxyamino)etyl]-karbamoyl}-!,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (610 mg, výťažok 52%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,21 (4H, dd, J=ll,0, 8,6

Hz), 7,66 (2H, d, J=8,6 Hz), 7,50 (2H, d, J=8,6 Hz), 7,25 až 6,95 (1H, m), 5,51 (1H, d, J=13,7 Hz), 5,25 (1H, d, J=13,7 Hz), 5,19 )2H,

1H,

s), 4,63 až 3,88 (8H, m), 3,91 až 3,35 (4H, m), 3,29 dd, J=6,8, 2,2 Hz), 3,25 až 3,08 (1H, m), 1,38 (3H, d, J=6,2

Hz), 1,31 (3H, br, s), 1,25 (3H, d, J=7,3 Hz), 1,21 (3H, br,s).

(2) (ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-aminoetyl)-izopropyl285

-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-{izopropyl-[2 —(p—

-nitrobenzyloxyamino) etyl] karbamoyl}-l, 3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (610 mg, 0,74 mol) (získaný podía opisu v príklade 65(1)) v zmesi tetrahydrofuranu (30 ml) a destilovanej vody (30 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (610 mg) vo vodnom kúpeli (35°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a destilovaná voda bola pridaná do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda -> 2% acetonitril v destilovanej vode —> 4% acetonitril v destilovanej vode —> 6% acetonitril v destilovanej vode —> 8% acetonitril v destilovanej vode' -» 10% acetonitril v destilovanej vode -> 12% acetonitril v destilovanej vode —> 14% acetonitril v destilovanej vode -» 16% acetonitril v destilovanej vode —» 18% acetonitril v destilovanej vode) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S, 6S) -2- (1— {4— [ (2-aminoetyl) -izopropyl-karbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-

-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej	kyseliny (	104	mg,	výťažok
28%) ako biela pevná látka.
¹H-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm)	7,06 (1H,	s),	4,56	(2H, t,
J=8,4 Hz), 4,41 až 4,31 (1H, m), 4,	29 až 4,09	(3H,	m obsahujúci
4,24 (1H, kvínt., J=6,3 Hz), 4,20 (	1H, dd, J=8,	9, 2	,4 Hz)	1), 4,03
(2H, dd, J=8,4, 4,8 Hz), 3,43 (1H,	dd, J=6,3,	2,4	Hz) ,	3,37 až

3,16 (3H, m obsahujúci 3,25 (1H, dq, J=8,9, 7,4 Hz)), 1,29 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,25 až 1,15 (9H, m obsahujúci 1,19 (3H, d, J=7,0 Hz) )

IR(KBr): 3381,6, 1759,7, 1597,7, 1537,0, 1469,5, 1424,2,

1388,5, 1371,1, 1314,3, 1282,4 on¹

286

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): m/z: 510 (M+H]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (ESI⁺): počítané C₂₂H₃2N₅O5S₂Na : 510, 1845, nájdená 510,1826[M+H]⁺

Príklad 66 (ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-((l S)-l-aminometyl-2-metylpropylkarbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl} tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina

(1) p-Nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-[l-(4-{(1S)-2-metyl-[1- (p-ni t robenzyloxykarbonylamino) metyl] propyl karbamoyl}-!, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-{(1S)-2-metyl-[1-(p-ni t robenzyloxykarbonylamino) metyl] -propyl karbamoyl} -1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (780 mg, 1,50 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 61) v dimetylformamide (40 ml) bol pridaný hydrazínacetát (166 mg, 1,80 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,53,6S)-2- (difenylfosforyloxy) -6- [ (R) -1-hydroxyetyl] - l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (892 mg, 1,50 mol) v acetonitrile (45 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (1,05 ml, 6,00 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom

287 zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 10% roztokom chloridu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát -» etylacetát: metanol (98:2)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2—[1—(4—{(IS)-2-metyl-[1-(p-nitrobenzyl-oxykarbonylamino)metyl]propylkarbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-rnetylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (950 mg, výťažok 77%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 8,09 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,43 (1H, s), 7,40 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,12 (1H, br, d, J=8,8 Hz), 5,51 (1H, d,

J=13,2 Hz), 5,25 (1H, d, J=13,2 Hz), 5,23 (1H, d, J=13,2 Hz),

5,05 (1H, d, J=13,2 Hz), 4,51 (1H, t, J=8,l Hz), 4,44 (1H, t,

J=8,l Hz), 4,32 až 4,25 (3H, m), 4,06 až 3,96 (3H, m), 3,45 až 3,32 (2H, m), 3,30 (1H, dd, J=2,2, 6,6 Hz), 3,21 (1H, dq, J=7,3,

9,5 Hz), 1,93 až 1,84 (1H, m), 1,38 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,28 (3H, d, J=7,3 Hz), 1,00 (3H, d, J=6,6 Hz), 0,98 (3H, d, J=7,3 Hz).

(2) (ÍR, 5S, 6S)-2-{1-(4-((IS)-l-aminometyl-2-metylpropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]-azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4—{(IS)-2-metyl-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)metyl]propylkarbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (950 mg, 1,15 mol) (získaný podľa opisu v príklade 66(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (48 ml) a destilovanej vody (48 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (950 mg) pri teplote miestnosti 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes

288 filtrovaná a do filtrátu boli pridané erylacetát a destilovaná voda. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a vodná vrstva bola oddelená, premytá horeuvedeným zmesovým rozpúšťadlom a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chromatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda —> destilovaná voda : acetonitril ¢76:24)) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S, 6S) -2-{1- [4- ( (IS ) -1-aminometyl-2-metyIpropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl)tio-6- [(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny (103 mg, výťažok 18%) ako biela pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, D₂0) : ô(ppm) 8,18 až 8,03 (IH, m), 7,51 (IH, s), 4,47 (2H, t, J=8,l Hz), 4,24 až 4,14 (IH, m), 3,99 až 3,85 (4H, m), 3,84 až 3,77 (IH, m), 3,09 až 2,88 (4H, m), 1,94 až 1,84 (IH, m), 1,14 (3H, d, J=6,2 Hz), 1,03 (3H, d, J=7,0 Hz),

0,89 (3H, d, J=6,6 Hz), 0,84 (3H, d, J=6,6 Hz).

IR(KBr): 1752, 1660, 1605, 1545, 1494, 1471 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): m/z: 510 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum velkého rozlíšenia (FAB^): počítané C22H32N5O6S2 :510,1845 nájdené 510,1846[M+H]⁺

Elementárna analýza: C22H31N5O6S2.13/7H₂0 vypočítaná C, 48,65%‘H, 6,44% N, 12,90% S, 11,81% nájdená C, 48,92% H, 6,29% N, 12,60% S, 12,04%

Príklad 67 (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-aminometyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidin-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina

COOH

289 (1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6Sj—2-{l—[4—(p—

-nitrobenzylkarbonylaminometyl) -1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl} tio-6- [ (R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-[4-(p-nitrobenzylkarbonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (265,2 mg, 0,63 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 62) v dimetylformamide (14 ml) bol pridaný hydrazínacetát (76,4 mg, 0,5 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 0,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metyl-karbapén-2-em-3-karboxylátu (390 mg, 0,66 mol) v acetonitrile (19 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,44 ml, 2,5 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne' (eluent : toluén : acetonitril (2:3)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(p-nitrobenzyl-karbonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (268,4 mg, výťažok 59%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (4H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,51 (2H, d, J=8,8 Hz), 6,45 (1H, s), 5,51 (1H, d, J=13,9 Hz), 5,37 (1H, br, s), 5,25 (1K, d, J=13,9 Hz),

5,21 (2H, s), 4,48 (1H, t, J=7,8 Hz), 4,46 (1H, t, J=7,8 Hz), 4,35 až 4,20 (5H, m), 4,03 (2H, dd, J=7,8, 4,9 Hz), 3,29 (1H, dd, J=6,2, 2,5 Hz), 3,22 (1H, dq, J=8,9, 7,3 Hz), 1,80 (1H, d, J=4,4

290

Hz), 1,38(3H, d, J=5,9 Hz),1,27 (3H,d, J=7,3 Hz).

(2) (ÍR,5S, 6S)-2-[1-(4-aminometyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S, 6S)-2-1-[4-(p-nitrobenzylkarbonylaminometyl)-l,3-tiazol-2-yl]-azetidín-3-yl}tío-6-[(R)-1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (660 mg, 0,89 mol) (získaný podľa opisu v príklade 67(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (30 ml) a destilovanej vody (30 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (606 mg) vo vodnom kúpeli (35°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu boli pridané etylacetát a destilovaná voda. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chromatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda —> 2% acetonitril v destilovanej vode —» 4% acetonitril v destilovanej vode —> 6% acetonitril v destilovanej vode -» 8% acetonitril v destilovanej vode 10% acetonitril v destilovanej vode —> 13% acetonitril v destilovanej vode -> 15% acetonitril v destilovanej vode) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (lR,5S,6S)-2-[l-(4-aminometyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6 - [(R)-1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny (123 mg, výťažok 34%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 6,85 (1H, s), 4,54 (2H, t,

J=8,	1 Hz)	, 4,	38 až 4,30 (1H,	m) ,	4,25	(1H, kvint. ,	J=6,3 Hz),
4,25	(1H,	dd,	J=8,9, 2,5 Hz),	4,07	(2H,	s), 4,02 (2H,	dd, J=8,l,
4,0	Hz) ,	3, 44	(1H, dd, J=6,3,	2,5	Hz) ,	3,25 (1H, dq,	J=8,9, 7,3
Hz) ,	1, 30	(3H,	d, J=6,4 Hz), 1	,20	(3H, d	,J=7,2Hz).

IR(KBr): 3362,3, 1756,8, 1589, 1, 1527,3, 1469, 5, 1386,6,

1309,4, 1286,3, 1259, 3 cm'¹

Hrnotnostné spektrum (FAB'): m/z: 411 [M+H]⁺

291

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (ESI⁺) : počítané C17H23N4O4S2 : 411,4161 nájdené 411,1173 [M+H]⁺

Príklad 68 (ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-(metoxykarbonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S>-2-{1-[4-(metoxykarbonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]-azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-[4-(metoxykarbonylamino-metyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (441 mg, 1,39 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 63) v dimetylformamide (13 ml) bol pridaný hydrazínacetát (154 mg, 1,67 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (993 mg, 1,67 mol) v acetonitrile (26 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,97 ml, 5,56 mol). Zmes bola miešaná 30 minút pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného boli pridané do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová

292 vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(metoxykarbonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (307 mg, výťažok 53%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,66 (2H, d, J=8, 7 Hz), 6,45 (IH, s), 5,51 (IH, d, J=13,7 Hz), 5,26 (IH, d, J=13,7 Hz), 4,48 (2H, t, J=8,0 Hz), 4,43 až 4,18 (5H, m), 4,09 až 3,99 (2H, m), 4,09 až 3,99 (2H, m), 3,69 (3H, s), 3,29 (IH, dd, J=6,7, 2,7 Hz), 3,21 (IH, dq, J=9, 0, 7,3 Hz), 1,38 (3H, d, J=6,l Hz), 1,25 (3H, d, J=7,3 Hz).

(2) (ÍR,5S,6S)-2-{1- [4-(metoxykarbonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}-tio-6- [ (R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-[1R,5S,6S)-2-(1-(4-(metoxykarbonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (307 mg, 0,52 mol) (získaný podľa opisu v príklade 68(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (15 ml) a destilovanej vody (15 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (307 mg) vo vodnom kúpeli (35°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (44 mg), etylacetát a destilovaná voda. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chromatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent :

destilovaná voda

2% acetonitril v destilovanej vode

4% acetonitril v destilovanej vode —> 6% acetonitril v destilovanej vode) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej

293 zlúčeniny (ÍR, 5S,6S)-2-(1- [4-(metoxykarbonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl·}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (135 mg, výťažok 53%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 6,59 (1H, s), 4,51 (2H, t, J=8,l Hz), 4,38 až 4,29 (1H, m), 4,25 (1H, kvínt., J=6,2 Hz),

4,20 (1H, dd, J=9,l, 2,5 Hz), 4,19 (2H, s), 4,05 až 3,98 (2H, m), 3,68 (3H, s), 3,43 (1H, dd, J=6,2, 2,4 Hz), 3,25 (1H, dq,

J=9,l, 7,4 Hz), 1,30 (3H, d, J=6,2 Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2 Hz).

IR(KBr): 3355,5, 1748,2, 1725,1, 1600,6, 1525,4, 1470,5,

1395,2, 1311,4, 1290,1, 1254,5 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 513 [M+Na] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané CigH₂3N4O₅S₂Na₂:513,0855, nájdené 513, 0850 [M+Na]⁺

Príklad 69 (ÍR, 53,6S)-2- {1-[4-(benzoylaminometyl)-1, 3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl ] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

NHCO· // (1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(benzoylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-1-[4-(benzoylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (698 mg, 2,01 mol) (získaného podlá opisu v

294 (1,40 ml, 8,94 mol) zvyšovaní teploty ukončenia referenčnom príklade 64) v dimetylformamide (20 ml) bol pridaný hydrazinacetát (222 mg, 2,41 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyi-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (1,43 g, 2,41 mol) v acetonitrile (40 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu . Zmes bola miešaná 2,5 hodiny pri postupnom na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného boli pridané do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát -» etylacetát: metanol (20:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(benzoylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1bledožltá pevná látka.

• u (	:85i	mg,	výťažok 65%)	ako
δ (ppm)	8,21	(2H, d, J=8,7	Hz) ,
(2H,	d,	J=8,7	Hz) , 7,56 až	7,38
(1H,	s) ,	5,51	(1H, d, J=13,7	Hz) ,
:2h,	dd,	J-5, 3,	2,9 Hz), 4,47	(2H,
rn)	, 4,	10 až	3,95 (2H, m),	3,28
:ih,	dq,	J=7,9,	6,4 Hz), 1,37	(3H,

d, J=6,4 Hz), 1,26 (3H, d, J=7,3 Hz).

(2) (lR,5S,6S)-2-(l-[4-(benzoylaminometyl)-l,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl} tio-6- [ (R) -i-hyaroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

295 p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(benzoylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}-tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (851 mg, 1,31 mol) (získaný podlá opisu v príklade 69(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (40 ml) a destilovanej vody (40 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (851 mg) vo vodnom kúpeli (35°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (110 mg), etylacetát a destilovaná voda. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda —> 2% acetonitril v destilovanej vode -> 4% acetonitril v destilovanej vode —> 6% acetonitril v destilovanej vode —> 8% acetonitril v destilovanej vode -» 10% acetonitril v destilovanej vode —» 15% acetonitril v destilovanej vode) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (1R,5S,6S)—2—{1—[4-(benzoylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (144 mg, výťažok 20%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz,	D₂0) :	: δ (ppm)	7,81	(2H,	d, J=7,4 Hz) ,	7,70
až 7,55 (3H, m) , 6,62	(IH,	d, J=8,6	Hz) ,	4,52	(2H, t, J=7,9	Hz) ,
4,47 (2H, s), 4,37 až	4,28	(IH, m),	4,24	(IH,	kvint., J=6,2	Hz) ,
4,19 (IH, dd, J=8,8,	2,2	Hz), 4,05	až 3	,97	(2H, m) , 3,43	(IH,
dd, J=6,2, 2,2 Hz), 3	,26	(IH, dq,	J=8,8,	7,2	Hz), 1,29 (3H	, d,

J=6, 4 Hz), 1,19 (3H, d, J=7,2 Hz).

IR(KBr): 3336,2, 1750,2, 1645,9, 1601,6, 1526,4, 1488,8,

1470, 5, 1396,2, 1308,5, 1294,0 an¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 537 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané C₂4H₂6N405S2Na : 537,1243 nájdené 537,1246[M+H]⁺

296

Príklad 70 (ÍR, 5S,6S)—2—{1—[4—(benzénsulfonylaminometyl) -1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-(benzénsulfonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-[4-(benzénsulfonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (1,00 g, 2,68 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 65) v dimetylformamide (30 ml) bol pridaný hydrazínacetát (296 mg, 3,21 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (1,75 g, 2,94 mol) v acetonitrile (60 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (1,87 ml, 10,7 mol). Zmes bola miešaná 3 hodiny pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran

297 horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: hexán: etylacetát (1:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S,6S)-2-{1-[4-(benzénsulfonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (1,13 g, výťažok 61%) ¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ

7,83 (2H, d, J=7,5 Hz), 7,66 (2H, m), 6,33 (IH, s), 5,58 (IH, br, s) (IH, d, J=13,7 Hz), 4,48 (2H, t,

Hz), 4,36 až 4,18 (3H, m), 4,13 (IH, dd, J=12,7, 6,0 Hz), 4,01 (IH, dd, J=8,6, 5,6 Hz), 3,30 (IH, dq, J=8,9, 7,4 Hz), 1,37 (3H, d, ,

1,2 Hz) .

ako bledožltá pevná látka.

(ppm) 8,21 (2H, d, J=8,7 Hz), d, J=8,7 Hz), 7,60 až 7,43 (3H, , 5,51 (IH, d, J=13,7 Hz), 5,26

J=7,	8 Hz), 4,44 (2H	, t,	J=7,8
(IH,	kvint., J=7,2	Hz) ,	4,08
IH,	dd, J=8,6, 5,6	Hz) ,	3,94
dd,	J= 6,7, 2,6 Hz),	3,21	(IH,
=6,2	Hz), 1,23 (3H,	dd, J	=7,2,

(2) (lR,5S,6S)-2-{l-[4 - (benzénsulfonylaminometyl) -1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(benzénsulfonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (1,13 g, 1,65 mol) (získaný podlá opisu v príklade 70(1))' v zmesi tetrahydrofuránu (55 ml) a destilovanej vody (55 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (1,13 g) vo vodnom kúpeli (35°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (139 mg), etylacetát a destilovaná voda. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda —> 2% acetonitril v destilovanej vode -> 4% acetonitril v destilovanej vode —> 8% acetonitril v destilovanej vode —» 12% acetonitril v destilovanej vode —> 16% acetonitril v

298 destilovanej vode —> 20% acetonitril v destilovanej vode) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (1R,5S,6S)—2—{1—[4-(benzénsulfonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metyikarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (627 mg, výťažok 66%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR	(400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 7,71 až 7,68	(3H, m), 7,61	až
7,52	(2H,	m) , 6,52 (IH, s), 4,35 až	4,18 (5H,	m obsahujúci	4,	22
(IH,	dd,	J=9,l, 2,4 Hz)), 4,12 (2H,	s) , 3,78	až 3,65 (2H,	r m	) ,
3,36	(IH,	dd, J=6,2, 2,4 Hz), 3,23	(IH, dq,	J=8,8, 7,2	Hz	) z
1,31	(3H,	d, J=6,4 Hz), 1,21 (3H, d,	J=7,2 Hz) .

IR(KBr): 3293,8, 1748,2, 1597,7, 1528,3, 1470,5, 1447,3, 1397,2, 1314,3 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 573 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum velkého rozlíšenia (FAB⁺) :

počítané C₂3H₂6N₄O5S₂Na : 573,0093 nájdené 573,0911[M+H]⁺

Príklad 71 (1R,5S,6S)—2—(1—(4—[(Tiofén-2-karbonylamino)metyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

(1) p-Nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-(l-{4-[(tiofén-2-karbonylamino)metyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidin-3-yl) tio-6-[ (R) -1-nydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxyiát

299

Do roztoku 3-acetyltio-l-{4-[(tiofén-2-karbonylamino)metyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (490 mg, 1,52 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 66) v dimetylformamide (15 ml) bol pridaný hydrazínacetát (169 mg, 1,83 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (1,09 g, 1,83 mol) v acetonitrile (30 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (1,06 ml, 0,68 mol). Zmes bola miešaná 2,5 hodiny pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent : etylacetát) počas vzniku p-nitrobenzyl(ÍR,5S,6S)-2-(l-{4-[(tiofén-2-karbonylamino)metyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1- .....

-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (997 mg, výťažok 100%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,0 Hz),

8,02 (2H, s), 7,66 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,47 (IH, d, J=5,2 Hz),

7,07 (IH, d, J=4,2 Hz), 6,55 (IH, s), 5,50 (IH, d, J=13,7 Hz), 5,26 (IH, d, J=13,7 Hz), 4,67 až 4,55 (2H, m), 4,51 (2H, d,

J=5,3 Hz), 4,35 až 4,22 (2H, m), 4,22 až 4,03 (3H, m), 3,29 (IH, dd, J=6,8, 2,6 Hz), 3,18 (IH, dq, J=9,0, 7,5 Hz), 1,37 (3H, d,

J=6,3 Hz), 1,25 (3H, d, J=7,3 Hz).

(2) (ÍR, 5S,6S)-2-(1-{4-[(tiofén-2-karbonylamino)metyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1300

-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1—{4—[(tiofén-2-karbonylamino) metyl]-1,3-tiazol-2-yl}-azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (997 mg, 1,52 mol) (získaný podľa opisu v príklade 71(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (35 ml) a destilovanej vody (35 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (997 mg) vo vodnom kúpeli (35°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (128 mg), etylacetát a destilovaná voda. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku.

chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil

Zvyšok bol (eluent :

d, J=2,7 Hz) ,	7,19
4,49 (2H, t,	J=7,5
(1H, kvint.,	J=6,3
t, J=4,7 Hz) ,	3,97
i,4 Hz), 3,22	(1H,
(3H, d, J=7,l	Hz) .

destilovaná voda -> 4% acetonitril v destilovanej vode -> 8% acetonitril v destilovanej vode 12% acetonitril v destilovanej vode —> 15% acetonitril v destilovanej vode -> 20% acetonitril v destilovanej vode) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S, 6S)-2-(1-{4-[(tiofén-2-karbonylamino)metyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxy-etyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ (287 mg, výťažok 35%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 7,73 (2H, d, J=2,7 (1H, t, J=4,4 Hz), 6,59 (1H, d, J=0,7 Hz), 4,49 (2H,

Hz), 4,43 (2H, s), 4,35 až 4,27 (1H, m), 4,24 (1H, kvi:

Hz), 4,18 (1H, dd, J=8,3, 2,4 Hz), 3,99 (1H, t, J=4,7 (1H, t, J=4,7 Hz), 3,42 (1H, dd, J=6,3, 2,4 Hz), kvint.,J=8,3 Hz), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,18 (3H, d, J=7,1 Hz)

IR(KBr): 3324,7, 1749,1, 1599,7, 1530,2, 1469,5, 1418,4,

1396,2 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): m/z: 521 [M-Na+2H]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (ESI ⁺ ) : počítané C₂₂H₂5N₄O₅S3 : 521,0942 nájdené 521,0992[M-Na+2H]⁺

301

Príklad 72 (ÍR,5S,6S)-2-(1—{4—[(furan-2-karbonylamino)metyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(1R,5S,6S) -2-(1-{4-[(furan-2-karbonylamino)metyl]-1,3-tiazol-2-yl}-azetidín-3-yl)tio-6-[ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-{4-[(furan-2-karbonylamino)metyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (341 mg, 1,12 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 67) v dimetylformamide (10 ml) bol pridaný hydrazínacetát (123 mg, 1,34 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu ” ” (797 mg, 1,34' mol) v acetonitrile (20 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,78 ml, 4,48 mol). Zmes bola miešaná 3 hodiny pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku.

302

Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S}-2-(1— {4 — [ (furan-2-karbonylamino)metyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (641 mg, výťažok 89%) ako bledožltá pevná látka.

^’H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=7,8 Hz),

7,66 (2H, d, J=7,8 Hz), 7,45 (IH, s), 7,13 (IH, d, J=3,5 Hz),

6,53 (IH, s), 6,49 (IH, d, J=5,l Hz), 5,48 (IH, d, J=13,7 Hz), 5,26 (IH, d, J=13,7 Hz), 4,60 až 4,40 (4H, m obsahujúci 4,5i (2H, d, J=5,6 Hz)), 4,35 až 4,20 (2H, m), 4,20 až 4,00 (3H, m),

3,29 (IH, dd, J=6,9, 2,5 Hz), 3,19 (IH, dq, J=9,3, 7,3 Hz), 1,37 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,26 (3H, d, J=7,3 Hz).

(2) (lR,5S,6S)-2-(l-{4-[(furan-2-karbonyiamino)metyl]-l,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)-tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1—{4—[(furan-2-karbonylamino) metyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (640 mg, 1,00 mol) (získaný podľa opisu v príklade 72(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (32 ml) a destilovanej vody (32 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (640 mg) vo vodnom kúpeli (35°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (84 mg), etylacetát a destilovaná voda. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda —» 2% acetonitril v destilovanej vode —> 4% acetonitril v destilovanej vode —> 6% acetonitril v destilovanej vode —> 8% acetonitril v destilovanej vode —> 10% acetonitril v destilovanej vode —> 15% acetonitril v destilovanej vode) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (1R,5S,6S)~

303 —2—(1—{4—[(furan-2-karbonylamino)metyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ (218 mg, výťažok 41%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂0): δ (ppm) 7,69 (1H, dd, J=l,7, 0,8 Hz), 7,19 (1H, dd, J=3,6, 0,7 Hz), 6,64 (1H, dd, J=3,6, 1,7 Hz), 4,51 (2H, t, J=8,2 Hz), 4,44 (2H, s), 4,38 až 4,28 (1H, m), 4,25 (1H, kvínt., J=6,3 Hz), 4,19 (1H, dd, J=8,9, 2,2 Hz), 4,02 (1H, dd,

J=5,0, 3,2 Hz), 4,00 (1H, dd, J=5,0, 2,9 Hz), 3,43 (1H, dd,

J=6,3, 2,5 Hz), 3,24 (1H, dq, J=8,9, 7,1 Hz), 1,30 (3H, d, J=6,4

Hz), 1,19 (3H, d, J=7,l Hz).

IR(KBr): 3367,1, 1749,1, 1653,7, 1594,8, 1524,5, 1472,4,

1395,2 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB'¹') : m/z: 505 [M-Na+2H] ⁺

Hmotnostné spektrum velkého rozlíšenia (ESI⁺) : počítané C₂₂H₂₅N₄O₆S : 505, 1216 nájdené 505,1208[M-Na+2H]⁺

Príklad 73 (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-ftalimidometyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

HO O

COO'Na (1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-ftalimidometyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]-tio-6-[ (R)-1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-ftalimidometyi-l,3-tiazol-2304

-yl)azetidínu (599 mg, 1,60 mol) získaného podľa opisu v referenčnom príklade 68 v dimetylformamide (18 ml) bol pridaný hydrazínacetát (177 mg, 1,92 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (1,14 g, 1,92 mol) v acetonitrile (36 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletyiaminu (1,11 ml, 6,40 mol) . Zmes bola miešaná 30 minút pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti.

Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent : etylacetát) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-ftalimidometyl-1,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-

-karboxylátu ( ¹H-NMR (400	640 mg, výťažok 59%) ako M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,	bledožltá 22 (2H, d,	pevná J=8,7	látka.
Hz) ,'	7,88
(2H, dd, J=5,5,	, 3,1 Hz), 7,73 (2H, dd,	J=5,5, 3,1	Hz) ,	7,65	(2H,
d, J=8,7 Hz),	6,41 (IH, s), 5,49 (IH,	d, J=13,7	Hz) ,	5,25	(IH,
d, J=13,7 Hz),	4,80 (2H, s), 4,46 (IH	, t, J=8,l	Hz) ,	4,43	(IH,
t, J=8,l Hz),	4,32 až 4,18 (3H, m,	obsahujúci	4,24	(IH,	dd,
J=9,2, 2,4 Hz)	), 4,02 (IH, dd, J=5,5	, 2,8 Hz),	4,00	(IH,	dd,
J=5,5, 2,8 Hz)	), 3,2 6 (IH, dd, J=6, 9,	2,5 Hz),	3, 19	(IH,	dq,
J=9,2, 7,3 Hz)	, 1,38 (3H, d, J=6,2 Hz), 1,25 (	)3H, dd, J=	7,3,
2,1 Hz).

(2) (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-ftalimidometyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl) tio-6- [ (R) -1-hydr oxy etyl ] -1-metyl karbapén-2305

-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-[1-(4-ftalimidometyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (640 mg, 0,95 mol) (získaný podlá opisu v príklade 73(1)) v zmesi tetrahydrofurane (32 ml) a destilovanej vody (32 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (640 mg) vo vodnom kúpeli C35°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (80 mg), etylacetát a destilovaná voda. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda -> 2% acetonitril v destilovanej vode -» 4% acetonitril v destilovanej vode —> 6% acetonitril v destilovanej vode -e- 8% acetonitril v destilovanej vode -» 10% acetonitril v destilovanej vode -» 15% acetonitril v destilovanej vode —> 20% acetonitril v destilovanej vode) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S, 6S)-2-[1-(4-ftalimidometyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl] tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (202 mg, výťažok 38%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400	M Hz, D₂O)	: δ	(PPm)	7,90	až	7,78 (4H, m),	6,56
(IH, d, J=2,7·	Hz), 4,70	(2H,	s) ,	4,43 (	IH,	t, J=7,9 Hz),	4,42
(IH, t, J=7,9	Hz), 4,31	až	4,19	(2H,	m obsahujúci 4,24	(IH,
kvint., J=6,3 Hz)), 4,17	(IH,	dd,	J=8,7,	2,	0 Hz), 3,94 (IH	, t,
J=7,9 Hz), 3,92	(IH, t, J=	=7,9	Hz), 3,18 i	:ih,	dq, J=8,7, 7,2	Hz) ,

1,29 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,15 (3H, d, J=7,2 Hz).

IR(KBr): 3409,5, 1768,4, 1750,1, 1717,3, 1601,6, 1528,3, 1425,1, 1393,3, 1313,3 cm^-1

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 563 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺): počítané C₂5H₂₃N₄O6S₂Na₂ : 585,08 64 nájdené 585,0865[M+Na]⁺

306

Príklad 74 (ÍR, 5S,6S)—2—[1—(4-sukcinimidometyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-(1-(4-sukcinimidometyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]-tio-6-((R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-sukcinimidometyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (238 mg, 0,73 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 69) v dimetylformamide (7 ml) bol pridaný hydrazínacetát (8i mg, 0,88 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-((R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarfoapén-2-em-3-karboxylátu (523 mg, 0,88 mol) v acetonitrile (14 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (0,5i mi, 2,92 mol). Zmes bola miešaná 2 hodiny pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 0,5 M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý

307 síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát -» etylacetát: metanol (20:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-sukcinimidometyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (211 mg, výťažok 46%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR	(400 M Hz, CDC1₃) :	δ (ppm)	8,23	(2H, d, J=8,7	Hz) ,
7,66 (2H,	d, J=8,7 Hz), 6,42 (	JH, s),	5,50	(1H, d, J=13,8	Hz) ,
5,25 (1H,	d, J=13,8 Hz), 4,61	(2H, s),	4,46	(1H, t, J=8,0	Hz) ,
4,45 (1H,	t, J=8,0 Hz), 4,32	až 4,18	(3H,	m, obsahujúci	4,25
(1H, dd, J	=9,1, 2,3 Hz)), 4,02	(1H, t,	J=4,8	Hz), 4,00 (1H,	dd,

J=4,8, 3,7 Hz), 3,28 (1H, dd, J=6,9, 2,5 Hz), 3,20 (1H, dq, J=9,l, 7,3 Hz), 2,76 (4H, s), 1,38 (3H, d, J=6,2 Hz), 1,27 (3H, d, J=7,3 Hz) .

(2) (ÍR,5Ξ,6S)-2-[1-(4-sukcinimidometyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl]tio-6-[(R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-sukcinimidometyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (211 mg, 0,34 mol) (získaný podľa opisu v príklade 74(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (10. ml) a destilovanej vody (10 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 7,5% paládia na aktívnom uhlí (211 mg) vo vodnom kúpeli (35°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (29 mg), etylacetát a destilovaná voda. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda -> 2% acetonitril v destilovanej vode -» 4% acetonitril v destilovanej vode) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4308

-sukcinimidometyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (115 mg, výťažok 66%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 6,59 (1H, s), 4,57 (2H, s), 4,50 (2H, t, J=8,l Hz), 4,38 až 4,29 (1H, m), 4,25 (1H, kvint.,

J=6,3 Hz), 4,20 (1H, dd, J=8,7, 2,3 Hz), 4,01 (1H, t, J=4,2 Hz), 3,99 (1H, t, J=4,2 Hz), 3,43 (1H, dd, J=6,3, 2,4 Hz), 3,24 (1H, dq, J=8,7, 7,4 Hz), 2,48 (4H, s), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,19 (3H, d, J=7,2 Hz) .

IR(KBr): 3381,6, 1749,1, 1794,8, 1601,6, 1526,4, 1470,5,

1424,2, 1399,1, 1312,3, 1295,0, 1168,7 cm^-1

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): m/z: 515 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺) : počítané C₂iH₂₄N₄O₆S₂Na : 515,1035 nájdené 515, 1034 [M+H] ⁺

Príklad 75 (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl) azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-azetidinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (330 mg, 1,17 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 71) v dimetylformamide (17 ml) bol pridaný hydrazinacetát (130 mg, 1,41 mol) pri teplote miestnosti pod

309 atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (696 mg, 1,17 mol) v acetonitrile (35 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (815 μΐ, 4,68 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu- sodného boli pridané do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 10% chloridom sodným solution a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát: metanoi (9:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (605 mg, výťažok 89%) ako bledožltá pevná látka.

^’H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,7i (1H, s), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,51 (1H, d, J=13,9 Hz), 5,25 (1H, d, J=13,9 Hz), 4,54 až 4,47 (4H, m), 4,29 až 4,12 (2H, m), 4,26 (1H, dd,’ J=2,2, 9,5 Hz), 4,09 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,07 (2H, t, J=8,9 Hz), 3,29 (1H, dd, J=2,2, 6,6 Hz), 3,19 (1H, dq, J=9,5, 7,3 Hz), 2,37 až 2,27 (2H, m), 1,38 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,26(3H, d, J=7,3Hz).

(2) (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (600 mg, 1,03 mol) (získaný podía opisu v príklade 75(1)) v zmesi tetrahydrofuránu

310 (30 ml) a destilovanej vody (30 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (600 mg) pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (86 mg), etylacetát a destilovaná voda. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chromatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda —> destilovaná voda : acetonitril (9:1)) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (lR,5S,6S)-2-[l-(4-azetidinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (278 mg, výťažok 58%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂0, TSP): δ (ppm) 7,80 (1H, s), 4,59 (2K, t, J-8,3 Hz), 4,45 (2H, t, J=7,8 Hz), 4,35 až 4,27 (1H, m), 4,25 (1H, dq, J=6,2, 6,4 Hz), 4,20 (1H, dd, J=2,4, 9,1 Hz), 4,16 (2H, t, J=7,8 Hz), 4,08 (2H, dt, J=9,2, 4,6 Hz), 3,43 (1H, dd, J=2,4,

6,2 Hz), 3,24 (1H, dq, J=9,l, 7,2 Hz), 2,39 (1H, kvintet, J=7,8

Hz), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,19 (3H, d, J=7,2 Hz).

IR(KBr): 1750, 1619, 1468, 1443, 1383 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 493 [M+Na]*

Hmotnostné sp.ektrum .veľkého rozlíšenia (ESI*):

počítané C₂₀H₂₃N₄O₆SNa2 : 493, 1133 nájdené 493,1167[M+Na]*

Elementárna analýza: C₂₀H₂₃N₄O₆SNa.H₂O vypočítaná C, 49,18% H, 5,16% N, 11,47% S, 6,56 % nájdená C, 49,04% H, 5,46% N, 11,57% S, 6,29%

Príklad 76 (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl) azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

311

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR, 5S,6S)-2- [1-(4-morfolinokarbonyi-1,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl] -tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-morfolinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (260 mg, 0,835 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 72) v dimetylformamide (13 ml) bol pridaný hydrazínacetát (92 mg, 1,00 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (496 mg, 0,835 mol) v acetonitrile (25 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (582 μΐ, 3,34 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 10% chloridom sodným soiution a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát : metanoi (9:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (552 mg, výťažok 100%) ako bledožltá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDCI3): δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,73 (1H, s), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,51 (1H, d, J=13,2 Hz), 5,25

312

(IH,	d, J=13,2	Hz) ,	4,52 (2H, q, J=8,l	Hz), 4,	31	až 4,20	(3H,	m) ,
4,13	až 4,06	(2H,	m), 3,76 až 3,65 (	8H, br,	s	), 3,29	(IH,	dd,
J2,5,	7,0 Hz),	3,19	(1K, dq, J=9,5, 7,	3 Hz) ,	1,	38 (3H,	d, J=	=5, 9
Hz) ,	1,26 (3H,	d, J	=7,3 Hz).

(2) (lR,5S,6S)-2-[i-(4-morfolinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyi] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2- [1- (4-morfolinokarbonyl-l, 3-oxazoi-2-yl)azetidín-3-ylj tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (550 mg, 0,835 mol) (získaný podľa opisu v príklade 76(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (28 ml) a destilovanej vody (28 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (550 mg) pri teplote miestnosti 2,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (70 mg), etylacetát a destilovaná voda. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chromatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda —» destilovaná a eluát bol lyofylizovaný počas (ÍR, 5S, 6S) -2 - [1- ( 4-morfolinokarbonyl-1,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ (193 mg, výťažok 46%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O, TSP): δ (ppm) 7,77 (IH, s), 4,60 (2H, t, J=8,2 Hz), 4,36 až 4,28 (IH, m), 4,25 (IH, dq, J=6,l, 6,3 Hz), 4,21 (IH, dd, J=2,2, 9,0 Hz), 4,09 (IH, dt, J=8,9, 4,5 Hz), 3,90 až 3,66 (8H, m), 3,43 (IH, dd, J=2,2, 6,1 Hz), 3,25 (IH, dq, J=9,0, 7,2 Hz),1,30 (3H,d,J=6,3 Hz), 1,19 (3H, d, J=7,2 Hz).

IR (KBr): 1750, 1618, 1459, 1443, 1385, 1304 cm’

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): m/z: 523 [M+Na] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (ESI⁺): počítané C₂iH₂5N₄O7SNa₂ 523,1240, voda : acetonitril (9:1)) vzniku požadovanej zlúčeniny

-i

313 nájdené 523,1238 [M+Na]⁺

Elementárna analýza : C₂iH₂₅N₄O7SNa/H2O vypočítaná C, 48,64% H, 5,25% N, 10,81% S, 6,18% nájdená C, 48,45% H, 5,41% N, 10,45% S, 5,55%

Príklad 77 (ÍR, 5S, 6S)-2-{l-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl) -1,3-oxazol-2-yl]-azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metyikarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-(3-metoxyazetídín-l-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl)azetidínu (330 mg, 1,06 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 73) v dimetylformamide (17 ml) bol pridaný hydrazínacetát (117 mg, 1,27 mol) pri teplote miestností pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S, 6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (630 mg, 1,06 mol) v acetonitrile (32 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (739 μιηΐ, 4,24 mol). Zmes bola miešaná počas

314 noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 10% chloridom sodným solution a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát : metanol (95:5 -» 9:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-{l-[4-(3-metoxyazetidín-1-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (550 mg, výťažok 85%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,74

(1H,	s) ,	7,66	(2H,	d, J=8,8 Hz), 5,55 (1H, d,	J=13,2	Hz) ,	5,25
(1H,	d, J=13,2	Hz) ,	4,71 až 4,63 (1H, m), 4,51 (	2H, q, J=8,l	Hz) ,
4,38	až 4,20	(6H,	m), 4,10 až 4,05 (2H, m), 4	,04 až	3, 98	(1K,
m) ,	3,32	(3H,	s) ,	3,29 (1H, dd, J=2,2, 6,6 Hz	), 3,20	(1H,	dq,

J=9,2, 7,3 Hz), 1,38 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,26 (3H, d, J=7,3 Hz).

(2) (ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl] azetidín-3-yl} tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ p-Nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2-{ 1- [4- ( 3-metoxyazetidín-l-karbonyl) -1,3-oxazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (550 mg, 0,896 mol) (získaný podľa opisu v príklade 77(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (28 ml) a destilovanej vody (28 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (550 mg) pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (75 mg), kyselina octová a destilovaná voda. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná oočas zníženého tlaku.

315

Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda —» destilovaná voda : acetonitril (92:8)) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S, 6S)-2-{1-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6- [ (R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol (276 mg, výťažok 62%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm)	7,84 (IH, s), 4,66	(IH, dd,
J=6,4, 10,3 Hz), 4,60 (2H, t, J=8,	3 Hz), 4,46 až 4,30	(4H, m),
4,25 (IH, dq, J=6,2, 6,4 Hz), 4,20	(IH, dd, J=2,4, 9,0	Hz), 4,09
(2H, kvintet, J=4,5 Hz), 4,04 až	3,98 (IH, m), 3,43	(IH, dd,
J=2,4., 6,2 Hz), 3,37 (3H, s), 3,25	(IH, dq, J=9,0, 7,2	Hz), 1,30
(3H, d, J=6,4 Hz), 1,19 (3H, d, J=7,	,2 Hz).

IR (KBr) : 1750, 1622, 1457, 1385 cm^-1Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 523 [M+Na] ⁺

Hmotnostné spektrum velkého rozlíšenia (ESI⁺) : počítané C₂iH₂sN₄O7SNa₂ : 523,1239, nájdené 523,1227[M+Na]⁺

Elementárna analýza: C₂iH₂₅N₄07SNa. 4/3H₂O vypočítaná C, 48,09% H, 5,32% N, 10,68% S, 6,11% nájdená C, 48,07% H, 5,61% N, 10,78% S, 6,03%

Príklad 78 (ÍR,5S,6S)-2-{1- [4-(3-hydroxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl] azetidín-3-yl]tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol

(1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-(4-[3- (terc.

butyldifenylsilyloxy)-azetidín-l-ylkarbonyl]-1,3-oxazol-2-yl}

316 azetidin-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-[4-[3-(terc.butyldifenylsilyloxy) -azetidín-l-ylkarbonyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidínu (860 mg, 1,61 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 74) v dimetylformamide (43 ml) bol pridaný hydrazínacetát (178 mg, 1,93 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (957 mg, 1,6i mol) v acetonitrile (48 ml) pridaný po kvapkách čo výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (1,12 ml, 6,44 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 10% chloridom sodným solution a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát —> etylacetát: metanol (95:5)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1—{4—[3-(terc.butyldifenylsilyloxy)-azetidín-l-ylkarbonyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-

-em-3-karboxylátu	(1,20 g, výťažok 89%	)	ako	bledožltá pevná
látka.
^-NMR (400 M Hz, CDC1₃): 5(ppm) 8,23	(2H	, d,	J=8,8 Hz), 7,69
(IH, s), 7,66 (2H,	d, J=8,8 Hz), 7,64 až	7,	59 (	4H, m) , 7,47 až
7,36 (6H, m), 5,51	(1H, d, J=13,5 Hz) , 5,	25	(1H,	d, J=13,5 Hz),
4,65 až 4,59 (1H,	m), 4,69 až 4,50 (1H,	m) ,	4,50 (2H, q, J=8,1
Hz) , 4,39 až 4,32	(1H, m), 4,30 až 4,20	(2H, m)	, 4,26 (1H, dd,
J=2,9, 9,5 Hz), 4,	18 až 3,99 (4H, m), 3,	29	(1H,	dd, J=2,9, 7,3
Hz), 3,20 (1H, dq,	J=9,5, 7,3 Hz), 1,38 i	'3H,	d,	J=6,5 Hz), 1,27

317 (3Η, d, J=7,3 Hz), 1,06 (9H, s).

(2) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(3-hydroxyazetidín-l-karbonyl) -1,3-oxazol-2-yl] azetidín-3-yl} tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát p-Nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2- (1- { 4 - [3- (terc.butyldif enylsilyloxy) -azetidín-l-ylkarbonyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (1,20 g, 1,43 mol) (získaný podía opisu v príklade 78(1)) v tetrahydrofurane (60 ml) bol pridaný do kyseliny octovej (240 μΐ, 4,30 mol) a 1 M tetrabutylamóniumfluorid v roztoku tetrahydrofuránu (4,30 ml, 4,30 mol) a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 4 dni. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného bol pridaný do zmiešavacej reakcie. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent : etylacetát: metanol (95:5 —> 9:1)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2- {1- [4- (3-hydroxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (325 mg, výťažok 38%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,74 (IH, s), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,51 (IH, d, J=13,7 Hz), 5,25 (IH, d, J-13,7 Hz), 4,80 až 4,68 (2H, m), 4,50 (2H, q, J=8,0

Hz), 4,43 až 4,29 (2H, m), 4,29 až 4,20 (3H, m), 4,13 až 4,05 (2H, m), 4,02 až 3,95 (IH, m), 3,29 (IH, dd, J=2,7, 6,9 Hz),

3,20 (IH, dq, J=9,3, 7,3 Hz), 1,38 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,26 (3H, d, J=7,3 Hz).

(3) (ÍR, 5S, 6S)—2 — {1—[4-(3-hydroxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná sol p-Nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-(1-(4-(3-hydroxyazetidín-l318

-karbonyi)-1,3-oxazol-2-yl]azetidin-3-y1}tio-6-[(R)-l-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (320 mg, 0,534 mol) (získaný podľa opisu v príklade 78(2)) v zmesi tetrahydrofuranu (16 ml) a destilovanej vody (16 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (320 mg) pri teplote miestnosti 5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu bol pridaný hydrogénuhličitan sodný (45 mg), etylacetát a destilovaná voda. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chromatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent: destilovaná voda -> destilovaná voda:acetonitril (9:1)) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (1R,5S,6S)—2—{1—[4—(3-hydroxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, sodná soľ (144 mg, výťažok 56%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O, TSP) : δ (ppm) 7,84 (IH, s), 4,75 až

4,66 (2H, m), 4,60 (2H, t, J=8,2 Hz), 4,44 až 4,38 (IH, m), 4,35 až 4,23 (3H, m), 4,20 (IH, dd, J-2,4, 9,0 Hz), 4,09 (2H, dt, J=8,9, 4,5 Hz), 3,98 až 3,93 (IH, m), 3,43 (IH, dd, J=2,4, 6,2

Hz), 3,24 (IH, dq, J=9,0, 7,2 Hz), 1,30 (3H, d, J=6, 4 Hz), 1,19 (3H, d, J=7,2 Hz) .

IR (Kor): 1750, 1621, 1470, 1385, 1294, 1277 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): m/z: 509 [M+Na]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (ESI⁺): počítané 509,1083, nájdené 509/1102[M+Na]⁺

Elementárna analýza:

vypočítaná C, 49,38% H, 4,77% N, 11,52% S, 6,59% nájdená C, 46,25% H,. 6,23% N, 11,07% S, 5,90?

Príklad 79 (ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(3-aminoazetidín-1-karbonyi)-1, 3-oxazo1-2-yl] azet idi η-3-yl} t io-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina

319

COOH (1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{l-{4-[3~(p-nitrobenzyloxykarbonylamino) azetidín-l-yl-karbonyi] -1,3-oxazol-2-yl}azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-{4-[3-(p-ni t robenzyloxy karbonyi amino) azet idí n- 1-y.l karbonyi] -1,3-oxazol-2-yl}azetidínu (190 mg, 0,383 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 75) v dimetylformamide (10 ml) bol pridaný hydrazínacetát (42 mg, 0,460 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (228 mg, 0,383 mol) v acetonitrile (11 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletyiaminu (268 μΐ_r 1,53 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 10% chloridom sodným solution a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent : etylacetát : metanol (93:7)) počas vzniku p-nitrobenzyl(ÍR, 5S,6S)-2-(1-(4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino) azetidín-l-ylkarbonyi]-1,3-oxazol-2-yl}azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (257 mg, výťažok 86%) ako bledožltá pevná látka.

320

1	'H-NMR	(400	M Hz	, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (4H, d, J=8,8	Hz) ,	7,75
(IH,	S) , 7	',66	(2H,	d, J=8,8 Hz), 7,51 (2H, d, J=8,8	Hz) ,	5,51
(IH,	d, J=	=13,7	Hz) ,	5,34 až 5,31 (IH, m), 5,25 (IH,	d, J=	= 13, 7
Hz) ,	5,21	(2H,	s) ,	4,87 až 4,82 (IH, m), 4,60 až 4,42	(2H,	m) ,
4, 49	(2H,	q, J=	= 8,8	Hz), 4,38 až 4,30 (IH, m), 4,28 až	4,20	(3H,
m) ,	4,06 (	2H,	dt,	J=8,8, 4,9 Hz), 4,00 až 3,93 (IH,	m) ,	3,29
(IH,	dd, J=	= 2,9,	6, 8	Hz), 3,18 (IH, dq, J=9,0, 6,8 Hz),	1, 38	(3H,

d, J=5,9 Hz), 1,26 (3H, d, J=6,8 Hz).

(2) (ÍR, 5S, 6S)-2-(1-[4-(3-aminoazetidín-l-karbonyi)-1,3-oxazol-2-yl] azetidín-3-yl} tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina ρ-Nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-{l-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidín-l-ylkarbonyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (250 mg, 0,321 mol) (získaný podľa opisu v príklade 79(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (13 ml) a destilovanej vody (13 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (250 mg) pri teplote miestnosti 3,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do filtrátu boli pridané etylacetát a destilovaná voda. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda —> destilovaná voda : acetonitril (82:18)) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(3-aminoazetidín-1-karbonyi)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovéj kyseliny (68 mg, výťažok 46%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 7,88 (IH, s), 4,60 (2H, ť,

J=8,2 Hz), 4,57 až 4,49 (2H, m), 4,35 až 4,16 (6H, m), 4,08 (2H, dt, J=8,6, 4,5 Hz), 3,44 (IH, dd, J=2,5, 6,2 Hz), 3,24 (IH, dq,

J=9,0, 7,2 Hz), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,19 (3H, d, J=7,2 Hz).

IR(KBr): 1754, 1624, 1457, 1380 cm¹

321

Hmotnostné spektrum (ESI⁺) : m/z: 486[M+Na]⁺Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (ESI*): počítané C20H26N5O6S: 464,1603, nájdené 464,1609[M+H]⁺

Elementárna analýza: C20H25N5O6S. 10/3H₂O vypočítaná C, 45,85% H, 5,69% N, 13,62% S, 6,18% nájdená C, 45,88% H 6,10% N, 13,38% S, 6,12%

Príklad 80 (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-((3S)-pyrolidin-3-ylkarbamoyl)-1,3-oxazol•2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2•em-3-karboxylová kyselina

XO-NH—\ ]

V^NH (1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(l-{4-[ (3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-yl-karbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) -pyrolidín-3-ylkarbamoyl] -1,3-oxazol-2-yl}azetidínu (530 mg, 1,08 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 76) v dimetylformamide (27 ml) bol pridaný hydrazínacetát (120 mg, 1,30 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (642 g, 1,08 mol) v acetonitrile (32 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (753 μΐ, 4,32 mol). Zmes bola miešaná počas noci pri postupnom

322 zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 10% chloridom sodným solution a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát —> etylacetát: metanol (95:5)) počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S, 6S)-2-(1—{4 —[(3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl }azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (652 mg, výťažok 76%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (4H, d, J=8,8 Hz), 7,77 (1H, s), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,53 (2H, t, J=8,8 Hz), 6,82 až

6,78 (1H, m), 5,51 (1H, d, J=13, 6 Hz), 5,25 (1H, d, J=13,6 Hz), 5,30 až 5,18 (2H, m), 4,66 až 4,58 (1H, m), 4,57 až 4,46 (2H,

m), 4,11 až 4,20 (2H, m), 4,26 (1H, dd, J=2,2, 8,8 Hz), 4,14 až 4,04 (2H, m), 3,82 až 3,74 (1H, m), 3,64 až 3,55 (2H, m), 3,46 až 3,40 (1H, m), 3,29 (1H, dd, J=2,2, 6,6 Hz), 3,20 (1H, dq, J=8,8,

7,2 Hz), 2,30 až 2,20 (1H, m), 2,10 až 1,92 (1H, m), 1,38 (3H, d,

J=6,6 Hz), 1,27 (3H, d, J=7,2 Hz).

(2) (ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-((3S)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín-3-yl}-tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) -pyrolidín-3-yl-karbamoyl] -1,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (650 mg, 0,821’ mol) (získaný podľa opisu v príklade 80(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (33 ml) a destilovanej vody (33 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (650 mg) pri teplote miestnosti 4,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes

323 filtrovaná a do filtrátu boli pridané etylacetát a destilovaná voda. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda -» destilovaná voda : acetonitril (76:24)) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S, 6S)—2—{1—[4-((3S)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín-3-yl}-tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovéj kyseliny (129 mg, výťažok 33%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 7,94 (IH, s), 4,68 až 4,60 (IH, m), 4,60 (2H, t, J=8,2 Hz), 4,35 až 4,28 (IH, m), 4,25 (IH, dq, J=6,2, 6,4 Hz), 4,19 (IH, dd, J=2,4, 9,1 Hz), 4,09 (2H, dt,

J=8,9, 4,4 Hz), 3,63 (IH, dd, J=7,0, 12,6 Hz), 3,58 (IH, dt, J=12,0, 7,6 Hz), 3,50 až 2,98 (3H, m), 3,24 (IH, dq, J=9,l, 7,2 Hz), 2,49 až 2,39 (IH, m), 2,22 až 2,13 (IH, m), 1,30 (3H, d,

J=6,4 Hz), 1,19 (3H, d, J=7,2Hz).

IR (KBr): 1755, 1626, 1543, 1386 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 478 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (FAB⁺): počítané C₂iH₂8N5O6S : 478,1761, nájdené 478,1768[M+H]⁺

Elementárna analýza: C₂iH₂₇N₅O₆S . 3H₂O vypočítaná C, 47,45% H, 6,26% N, 13,17% S, 6,06% nájdená C, 47,33% H, 5,52% N, 12,9% S, 5,97%

Príklad 81 (ÍR, 5S, 6S) —2— {1— [4- ( (3R) -pyrolidín-3-ylkarbamoyl) -1,3-oxazol-2-yl] azetidín-3-yl} tio-6 [ (R) -1-hydroxyetyl] - 1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina

COOH

324 (1) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2—{1—[4-((3R)-pyrolidín-3-ylkarbamoyi)-1,3-oxazol-2-yl]-azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-[4-((3R)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidínu (280 mg, 0, 572 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 77) v dimetylformamide (14 ml) bol pridaný hydrazínacetát (63 mg, 0,686 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (340 g, 0,572 mol) v acetonitrile (17 ml) pridaný po kvapkách do výslednej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka, nasledovaný pridaním diizopropyletylamínu (399 ul, 2,29 mol). Zmes bola miešaná 4,5 hodiny pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného bol pridaný do reakčnej zmesi. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a etylacetátová vrstva bola oddelená, premytá 10% chloridom sodným solution a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne (eluent: etylacetát —> etylacetát: metanol (95:5)) počas vzniku p-nitrobenzyl(ÍR,5S,6S)-2-1-[4-((3R)-pyrolidín-3-y1karbamoyi)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín-3-yl}-tio-6-[(R) -1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (323 mg, výťažok 73%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz),

8,22 (2H, dd, J=8,8, 12,7 Hz), 7,77 (1H, s), 7,66 (2H, d, J=8,8

Hz) ,	7,52	(	2H	, dd,	J=8,8, 12,7	Hz) ,		6,82 až 6,78	(1H,	bt, J=6,8
Hz) ,	5,51	(	1H	, d,	J=13,7 Hz),	5,23		(1H, d, J=13,	.7 Hz)	, 5,25 až
5,19	(2H,	m	) ,	4,66	až 4,58 (1H,	m) ,	4	,56 až 4,49 (	2H, m)	, 4,30 až
4,21	(3H,	m;	1 ,	4,13	až 4,04 (2H,	m) ,	3	,80 až 3,74 (	1H, m)	, 3,64 až
3,53	(2H,	m(	) ,	3,44	až 3,39 (1H,	m) ,	3	,29 (1H, dd,	J=2,9,	6,8 Hz),

325

3,20 (1Η, dq, 1=7,8,7,8 Hz), 2,30 až 2,20 (1H, m), 2,10 až 1,94 (1H, m), 1,38 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,27 (3H, d, J=7,8 Hz).

(2) (ÍR, 5S, 6S)-2- {1- [4- ( (3R) -pyrolidín-3-ylkarbamoyl)-1, 3-oxazol-2-yl] azetidín-3-yi}-tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina p-Ni t robenzyl- (ÍR, 5S, 6S ) - 2-1- [4 - ( (3R) -pyrolidín-3-ylkarbamoyl) -1,3-oxazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát (320 mg, 0,404 mol) (získaný podlá opisu v príklade 81(1)) v zmesi tetrahydrofuranu (16 ml) a destilovanej vody (16 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (320 mg) pri teplote miestnosti 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a čo filtrátu boli pridané etylacetát a destilovaná voda. Výsledná zmes bola trepaná v deliacom lieviku a vodná vrstva bola oddelená a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol chrómatograficky vyčistený na kolóne Cosmosil (eluent : destilovaná voda -> destilovaná voda : acetonitril (79:21)) a eluát bol lyofylizovaný počas vzniku požadovanej zlúčeniny (ÍR, 5S, 6S)—2—{1—[4-((3R)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylovej kyseliny (88 mg, výťažok 46%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, D₂O) : δ (ppm) 7,94 (1H, s), 4,67 až 4,60 (1H, m), 4,60 (2H, t, J=8,3 Hz), 4,35 až 4,28 (1H, m), 4,25 (1H, dq, J=6,2, 6,4 Hz), 4,20 (1H, dd, J=2,4, 9,1 Hz), 4,08 (2H, dt, J=8,8, 4,5 Hz), 3,63 (1H, dd, J=7,0, 12,6 Hz), 3,57 (1H, dt, J=12,0, 7,6 Hz), 3,49 až 3,37 (3H, m), 3,24 (1H, dq, J=9,l, 7,2 Hz), 2,49 až 2,38 (1H, m), 2,22 až 2,13 (1H, m), 1,30 (3H, d,

J=6,4 Hz), 1,19(3H, d, J=7,2Hz).

IR (KBr): 1758, 1625, 1543, 1385 cm'¹

Hmotnostné spektrum (ESI⁺) : m/z: 478 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum veľkého rozlíšenia (ESI⁺) : počítané C₂iH_2aN₅O6S : 478,1760,

326 nájdené 478,1739[M+H]⁺

Elementárna analýza: C₂iH₂7N₅O₆S. 3H₂O vypočítaná C, 47,45% H, 6,26% N, 13,17% S, 6,03% nájdená C, 47,30% H, 5,88% N, 13,14% S, 6,01%

Referenčný príklad 1

3-Acetyltio-l-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

AcS

N

COOEt (1) (3-Hydroxyazetidín-l-karbotioyl)karbamová kyselina, etylester

Roztok N-benzhydryl-3-hydroxyazetidínu (20 g, 83,6 mol) v metanole (600 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (20 g) vo vodnom kúpeli (50°C) pri 1 atmosfére tlaku vodíka 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná pre odstránenie katalyzátora a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol rozdelený medzi etylacetát a destilovanú vodu. Organická vrstva bola oddelená a ďalej extrahovaná destilovanou vodou. Vodné vrstvy boli koncentrované počas zníženého tlaku a vysušený počas vzniku produktu ako hnedého oleja. Do roztoku produktu v zmesi tetrahydrofuránu (180 ml) a destilovanej vody (60 ml) bol pridaný etoxykarbonylizotiokyanát (19,7 ml, 167 mol) v ladovom kúpeli. Po miešaní zmesi 10 minút v ladovom kúpeli bola výsledná zmes miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 1) —> etylacetátu ako eluentu počas vzniku (3-hydroxyazetidín-l-karbotioyl)karbamovej kyseliny,

327 etylesteru (7,4 g, výťažok 43%) ako žltý olej.

^’H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ 7,63 (IH, br, s), 4,80 až 4,50 (3H, m), 4,40 až 4,00 (4H, m obsahujúci 2H, q, at 4,18, J=7,3 Hz), 2,28 (IH, br, s), 1,29 (3H, t, 7,3 Hz).

(2) 1-(4-Etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidín Do roztoku etylesteru (3-hydroxyazetidín-l-karbotioyl) karbamovej kyseliny (14,4 g, 70,5 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 1(1)) v zmesi etanolu (72 ml) a destilovanej vody (72 ml) bol pridaný hydroxid sodný (14,1 g, 353 mol). Zmes bola zohrievaná pod refluxom 16 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes ochladená na teplotu miestnosti. Do reakčnej zmesi bol pridaný 4N chlorovodík v dioxane (88 ml) v ľadovom kúpeli, nasledovaný pridaním etyl-2-brómpyruvátu (17,7 ml, 141 mol) a trietylamín (19,8 ml, 141 mol) . Výsledná zmes bola zohrievaná pod refluxom 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (3 : 1 -> 1 : 1) ako eluentu počas vzniku 1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (8,5 g, výťažok 53%) ako bledohnedá pevná látka.

	^’H-NMR (4 00 M	Hz,	CDC1₃	): δ	7,46	(IH,	s), 4,88 až 4,78 (IH,
m)	, 4,42 až 4,32	(4H,	m) ,	4,02	(2H,	ddd,	J=10,3, 5,6, 1,5 Hz),
2,	05 (IH, br, s) ,	1,37	(3H,	t, 7	,3 Hz;	) .

(3)1- (4-Etoxykarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl) -3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (67 6 mg, 2,96 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 1(2)) v metylénchloride (20,5 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,28 ml, 3,63 mol) a trietylamín

328 (0,495 ml, 3,56 mol) v ladovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ladovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný do reakčnej zmesi etanol v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýreným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 2) ako eluentu počas vzniku 1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (748 mg, výťažok 82%) ako bledohnedá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,52 (1H, s), 5,50 až 5,30 (1H, m), 4,51 (2H, dd, J=9,9, 6,7 Hz), 4,37 (2H, q, J=7,l Hz), 4,32 (2H, dd, J=10,l, 3,7 Hz), 3,09 (3H,s), 1,37 (3H, t, J=7,1 Hz) .

(4) 3-Acetyltio-l-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (742 mg, 2,42 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 1(3)) v dimetylformamide (37 ml) bol pridaný tioacetát ' draselný (1,11 g, 9,72 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 6 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1:1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (494 mg, 'výťažok 71%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 7,49 (1H, s), 4,58 (2H, t,

329

J=8,3 Hz), 4,50 až 4,30 (3H, m, obsahujúci 2H, q, at 4,36, J=7,2 Hz), 4,03 (2H, dd, J=8,3, 5,7 Hz), 2,36 (3H, s), 1,37 (3H, t, J=7,2 Hz) .

Hmotnostné spektrum (FAB⁺); 287 [M+H] ⁺

Referenčný príklad 2

3-Acetyltio-l-(4-p-nitrobenzylkarbonyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín

COOPNB

AcS (1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-l-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (8,5 g, 37,2 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 1(2)) v dimetylformamide (255 ml) bol pridaný terc.butyldifenylsilylchlorid (19,4 ml, 74,5 mol) a imidazol (5,07 g, 74,5 mol) v ľadovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ľadovom kúpeli bola výsledná zmes miešaná pri teplote miestnosti 2,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etanol (2,59 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli a .výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (6:1 -> 2 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (14,85 g, výťažok 86%) ako bledohnedá pevná látka.

^’H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,64 až 7,58 (4H, m), 7,50

330 až 7,36 (6H, m), 7,43 (IH, s), 4,79 až 4,50 (IH, m), 4,35 (2H, q, J=7,3 Hz), 4,13 (2H, dd, J=9,0, 6,6 Hz), 4,06 (2H, dd, J=9,0, 5,1 Hz), 1,36 (3H, t, J=7,1 Hz), 1,06 (9H, s).

(2) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-hydroxymetyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Roztok 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (5,0 g, 10,7 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 2(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (100 ml) bol pridaný po kvapkách do roztoku hydridu hlinitolítneho (1,22 g, 32,1 mol) v bezvodom tetrahydrofurane (250 ml) v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1,5 hodiny v rovnakých podmienkach. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli postupne pridaný dekahydrát síranu horečnatého. Po ukončení penenia bola výsledná zmes miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Do reakčnej zmesi bol postupné pridaný etylacetát. Výsledná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (3 : 1 —> 1 ’: 2 ) ako eluentu počas vzniku 3- terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-hydroxymetyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidínu (3,88 g, výťažok 86%) ako biela pevná látka.

^•H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,66 až 7,58 (4H, m), 7,50 až 7,38 (6H, m), 6,40 (IH, s), 4,78 až 4,70 (IH, m), 4,53 (2H, s), 4,10 (2H, dd, J=9,2, 6,6 Hz), 4,01 (2H, ddd, J=9,2, 5,1, 1,3 Hz), 2,24 (IH, br, s), 1,06 (9H, s).

(3) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-hydroxymetyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc..butyldifenylsilyloxy-l-(4-hydroxymetyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (3,88 g, 9,15 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(2)) v bezvodom metylénchloride

331 (194 ml) bol pridaný aktivovaný oxid manganičitý (19,4 g) a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 7 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a filtrát koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (3 : 1 —> 1 : 1 ) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-hydroxymetyl-l,3-tiazol-2-yl)

azetidínu	(3,54 g, výťažok	92%)	ako biela	pevná	látka.
^•H-NMR	(400 M Hz, CDC1₃	): δ	(ppm) 9,69	(1H,	s) , 7,64 až	7,59
až (4H, m	) , 7,50 až 7,36	(7H,	m) , 4,80	až 4,	72 (1H, m),	4,16
(2H, dd,	J=9,5, 6,6 Hz),	4,08	(2H, ddd,	J=9,	5, 5,1, 1,5	Hz) ,
1,06 (9H,	s) .

(4) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-karboxyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-karboxyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidínu (3,5 g, 8,28 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(3)) v bezvodom metylénchloride (21 ml) bol pridaný terc.butanol (105 ml) a roztok 2M 2-metyl-2-butanu v tetrahydrofurane (41,4 ml), nasledovaný pridaním roztoku chlórnanu sodného po kvapkách (1,88 g, 16,6 mol) a dihyčrogénfosforečnanu sodného (1,99 g, 16,6 mol) vo vode (21 ml) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola do reakčnej zmesi pridaná IM kyselina chlorovodíková s pH od 2 do 3. Výsledná zmes bola extrahovaná etylacetátom. Organická vrstva bola oddelená, premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát —> 5% metanolu v etylacetáte ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-karboxyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (2,34 g, výťažok 67%) ako hnedý sirup.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,62 až 7,56 (4H, m), 7,50

332

(1H,	s), 7,49	až 7,36 (	(6H, m), 4,81 až	4,72	(1H,	m) , 4,16 až
4,08	(2H, m),	4,04 (2H,	dd, J=9,5, 5,1	Hz) ,	2, 00	(1H, br, s),
1,07	(9H, s) .

(5) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-p-nitrobenzylkarbonyl—1,3-tiazol-2—yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-karboxyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (224,8 mg, 0,51 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(4)) v bezvodom metylénchloride (11,2 ml) bol pridaný oxalylchlorid (0,067 ml, 0,76 mol) a katalytické množstvo čimetylmamidu (0,022 ml) v ľadovom kúpeli. Zmes bola miešaná 2 hodiny a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vysušený počas vzniku produktu. Do roztoku produktu v bezvodom dichlórometane (11,2 ml) bol pridaný p-nitrobenzylalkohol (157 mg, 1,0 mol) a trietyiamín (0,14 ml, 1,0 mol) v ľadovom kúpeli. Zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (3 : 1) ako eluentu počas vzniku 3- terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-p-nitrobenzylkarbonyi-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (93 mg, výťažok 32%) ako bledožltý sirup.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ	(ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,64
až 7,56 (4H, m), 7,50	(1H, s)	, 7,48 až 7,36 (6H, m),	5,42	(2H,
s), 4,79 až 4,72 (1H,	m) , 4,	16 (2H, dd, J=8,8, 6,8	Hz) ,	4,07
(2H, dd, J=8,8, 4,8 Hz)	, 1,06	(9H, s) .

(6) 1-(4-p-Nitrobenzyloxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-p-nitrobenzylkarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (93 mg, 0,16 mol)

333 (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 2(5)) v bezvodom tetrahydrofuráne (4,7 ml) bola pridaná kyselina octová (0,028 ml, 0,49 mol) a roztok IM tetrabutylamóniumf luoridu v tetrahydrofuráne (0,48 ml, 0,48 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (2:1) ako eluentu počas vzniku 1-(4-p-nitro-benzyloxykarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (42,4 mg, výťažok 81%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,59 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,53 (IH, s), 5,40 (2H, s), 4,90 až 4,78 (IH, m), 4,39 až (2H, dd, J=9,7, 7,2 Hz), 4,03 (2H, dd, J=9,7, 5,1 Hz), 2,28 (IH, d, J=6,2 Hz).

(7) 1-(4-p-Nitrobenzyloxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (648 mg, 1,93 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 2(6)) v metylénchloride (20 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,31 ml, 3,95 mol) a trietylamín (0,55 ml, 3,95 mol) v ladovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ladovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol rekryštalizovaný zo zmesi n-hexánu a etylacetátu počas vzniku 1-(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3334

-meténsulfonyloxyazetidínu (789 mg, výťažok 99%) ako biela pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,59 (IH, s), 7,59 (2H, d, J=8,7 Hz), 5,50 až 5,40 (3H, mi obsahujúci IH, s at 5,44), 4,52 (2H, dd, J=10,3, 6,6 Hz), 4,32 (2H, dd,

J=10,3, 4,1 Hz), 3,10 (3H, s).

(8) 3-Acetyltio-l-(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 1-(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (77 6 mg, 1,88 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(7)) v dimetylformamide (35 ml) bol pridaný tioacetát draselný (860 mg, 7,53 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C) 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (73,8 mg, výťažok 11%) ako bledohnedá pevná látka.

’-H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,6 Hz), 7,59

(2H, d, J=8,6 Hz), 7,55	(IH, s), 5,43 (	)2H, s), 4,59 (2H, t,	J=8,5
Hz), 4,50 až 4,40 (IH,	m), 4,04 (2H,	dd, J=8,5, 5,7 Hz ) ,	2,36
(3H, s) .

Referenčný príklad 3

3-Acetyltio-l-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

AcS

N // conh₂

335 (1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (5,85 g, 12,5 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (290 ml) bol pridaný roztok 0,67M chloridu amónneho-trimetylhliníka v benzéne (56,4 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná vo vodnom kúpeli (40°C) 17 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (100 ml) a etylacetát (50 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po pridaní etylacetátu bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (3 : 1 -> 1 : 2 ) ako eluentu počas vzniku 3-terc. butyldifenylsilyloxy-1-(4-karbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidínu

7 g,	výťažok	91%)	ako bledohnedá pevná	látka.
’H-NMR (400 M	Hz,	CDC1₃) : δ (ppm) 7,66	až 7,58 (4H, m) ,	7,50
,38	(7H, m),	6, 99	(IH, bs), 5,48 (IH,	br, s), 4,80 až	4,72
m) ,	4,10 (2H	, dd,	, J=8,8, 6,6 Hz), 4,	01 (2H, dd, J=8,8,	5,1

Hz), 1,07 (9H, s).

(2) 1-(4-Karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (6,7 g, 15,3 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 3(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (200 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (18,4 ml) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát

336

-> 10% metanolu v etylacetáte ako eluentu počas vzniku l-(4-karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (2,78 g, výťažok 91%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,43 (1H, s), 7,05 (1H, br,

s), 5,47 (1H, br, s), 4,90 až 4,80 (1H, m), 4,35 (2H, dd, J=9,5, 6,6 Hz), 3,97 (2H, dd, J=9,5, 4,4 Hz), 2,31 (1H, d, J=9,6 Hz).

(3) 1-(4-Karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (1,0 g, 5,02 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 3(2)) v zmesi metylénchloridu (30 ml) a pyridínu (5 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,967 ml, 12,5 mol) a trietylamín (1,75 ml, 12,5 mol) v ľadovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ľadovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 2,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, metanol (0,405 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Do zvyšku bol pridaný izopropyléter a zmes bola filtrovaná počas vzniku 1—(4 — -karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-metán-sulfonyloxyazetičínu (1,30 g, výťažok 94%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 7,50 (1H, s), 6,99 (1H, br

s), 5,60 až 5,40 (2H, m), 4,46 (2H, ddd, J=9,5, 6,6, 1,5 Hz),

4,28 (2H, ddd, J=9,5, 4,4, 1,5 Hz), 3,11 (1H, s).

(4) 3-Acetyltio-l-(4-karbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (3,04 g, 11,0 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 3(3)) v dimetylformamide (152 ml) bol pridaný tioacetát draselný (7,5 g, 65,8 mol) pri teplote

337 miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 10 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát -» 4% metanolu v etylacetáte ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-azetidínu (1,97 g, výťažok 70%) ako bledohnedá pevná látka.

	¹H-NMR (400 M	Hz, CDCla) : δ	(ppm) 7	,46 (IH, s),	7,00	(IH, br
S) ,	5,55 (IH, br,	s), 4,53 (2H,	t, J=8	,1 Hz), 4,50	až 4,	40 (IH,
m) ,	3,99 (2H, dd,	J=8,l, 5,1 Hz)	, 2,37	(3H, s) .

Referenčný príklad 4

3-Acetyltio-l-(4-kyano-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

AcS

N //

CN (1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-l-(4-kyano-l,3-tiazol-2-yl) azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (7,73 g, 16,6 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (370 ml) bol pridaný roztok 0,67M chloridu amónneho-trimetylhliníka v benzéne (75 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná vo vodnom kúpeli (50°C) 17 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (100 ml) a etylacetát (50 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola extrahovaná etylacetátom. Organická vrstva

338 bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (3 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-kyano-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (6,98 g, výťažok 76%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ 7,64 (4H, m), 7,50 až 7,37 (6H,

m), 7,20 (IH, s), 4,80 až 4,74 (IH, m), 4,13 (2H, dd, J=8,8, 6,8 Hz), 4,04 (2H, dd, J=8,8, 4,9 Hz), 1,07 (9H, s).

IR (KBr): 2230, 1535, 1465, 1310, 1114 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 420 [M+H]⁺ (2) 1-(4-Kyano-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-kyano-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (2,36 g, 5,62 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 4(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (115 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (6,7 ml, 6,7 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : etylacetátu (1 : 2) ako eluentu počas vzniku

1-(4-kyano-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (0,78 g, výťažok 77%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,26 (IH, s), 4,92 až 4,86 (IH, m), 4,37 (2H, dd, J=9,8, 6,8 Hz), 4,02 (2H, dd, J=9,8, 4,9

Hz), 2,34 (IH, d, J=5,9 Hz).

(3) 1-(4-Kyano-1,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-kyano-1,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (0,78 g, 4,3 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade

4(2)) v metylénchloride (40 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid

339 (1,0 ml, 12,9 mol) a trietylamín (1,8 ml, 12,9 mol) v ladovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ladovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 40 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný metanol do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez koncentrovaná počas chromatograficky na etylacetátu (1 : 1) bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený silikagélovej kolóne za použitia toluén ako eluentu počas vzniku 1-(4-nitril-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (1,12 g, výťažok 100%) ako biela pevná látka.

^ľH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,31 (1H, s), 5,50 až 5,40 (1H, m), 4,50 (2H, dd, J=9,9, 6,6 Hz), 4,31 (2H, dd, J=9,9, 4,4 Hz) , 3,11 (3H, s).

(4) 3-Acetyltio-l-(4-kyano-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 1-(4-kyano-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (1,12 g, 4,32 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 4(3)) v dimetylformamide (56 ml) bol pridaný tioacétát draselný (3,89 g, 27,0 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 4

Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes medzi etylacetát a hodiny, rozdelená nasýtený vodný hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola roztok premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-kyano-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (0,767 g, výťažok 75%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,28 (1H, s), 4,57 (2H, t,

340

J=8,3 Hz), 4,50 až 4,40 (1H, m), 4,03 (2H, dd, J=8,3, 5,5 Hz),

2,39 (3H, s) .

Referenčný príklad 5

3-Acetyltio-l-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

CONHMe

AcS

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-metylkarbamoyl-1, 3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (500 mg, 1,07 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (25 ml) bol pridaný roztok 0,67M metylamínhydrochloridu-trimetylhliníka v benzéne (3,21 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod refluxom 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (25 ml) a etylacetát (50 ml) boli pridané do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná 30 minút pri teplote miestnosti. Reakčná zmes bola extrahovaná etylacetátom. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (479 mg, výťažok 99%) ako bledohnedá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 7,65 až 7,59 (4H, m), 7,50 až 7,34 (7H, m), 7,14 (1H, br, s), 4,80 až 4,70 (1H, m), 4,09 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,00 (2H, dd, J=8,8, 5,1 Hz), 2,95 (3H, d,

J=5,1Hz), 1,06(9H, s).

341 (2) 1-(4-N-Metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-metylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (4,74 g, 10,5 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 5(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (240 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (12,6 ml, 12,6 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku 1-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (2,10 g, výťažok 96%) ako biela pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,34 (2H, s), 7,20 (1H, br

s), 4,85 až 4,75 (1H, m), 4,31 (2H, dd, J=9,7, 6,4 Hz), 3,94 (2H, dd,J=9,7, 5,5 Hz), 3,1O(1H, br, s), 2,96(3H, d, J=5,l Hz).

Hrnotnostné spektrum: 213 [M⁺] (3) 1-(4-N-Metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (2,15 g, 10,1 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 5(2)) v metylénchloride (45 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (3,12 ml, 40,3 mol) a trietylamín (7,04 ml, 50,5 mol) v ladovom kúpeli. Po miešaní zmesi v ľadovom kúpeli 10 minút bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný metanol do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná 30 minút pri teplote miestnosti. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku 1-(4-N-metylkarbamoyl-l/3-tiazol-2342

-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (2,95 g, výťažok 100%) ako bledožltá penová pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,44 (1H, s), 7,18 (1H, br

s), 5,50 až 5,39 (1H, m), 4,45 82H, dd, J=9,7, 6,6 Hz), 4,26 (2H, dd, J=9,7, 4,3 Hz), 3,11 (3H, s), 2,97 (3H, d, J=5,l Hz).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 292 [M+H]⁺ (4) 3-Acetyltio-l- (4-N-metylkarbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl) azetidín

Do roztoku 1-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (3,0 g, 10,3 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 5(3)) v dimetylformamide (150 ml) bol pridaný tioacetát draselný (7,07 g, 61,9 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograf icky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 4 -> 1:10) ako eluentu počas vzniku

3-acetyltio-l-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (2,41 g, výťažok 86%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,44 (1H, s) s), 4,53 (2H, t, J=8,0 Hz), 4,50 až 4,40 (1H, m) (2H, m), 2,95 (3H, d, J=6,0 Hz), 2,38 (3H, s).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 272 [M+H]⁺

7,18 (1H, br

4,50 až 3, 95

Referenčný príklad 6

3-Acetyltio-l- ( 4-N, N-dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl) azetidín

AcS

CONMe₂ (1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-1,3343

-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (500 mg, 1,07 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (25 ml) bol pridaný roztok 0,67M dimetylamínhydrochloridu-trimetylhliníka v benzéne (3,21 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod refluxom 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (50 ml) a etylacetát (50 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná 30 minút pri teplote miestnosti. Reakčná zmes bola extrahovaná etylacetátom. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (3 : 1 —> 1 : 3 ) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (500 mg, výťažok 100%) ako bledohnedá pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,70 až 7,60 (4H, m), 7,52 až 7,40 (6H, m), 7,00 (1H, s), 4,79 až 4,70 (1H, m), 4,11 (2H, dd, J=9,5, 7,5 Hz), 4,02 (2H, dd, J=9,5, 5,0 Hz), 3,19 (3H, s), 3,05 (3H, s), 1,06 (9H, s). ' (2) 1- (4-N, N-dimetyl karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl) -3-hydroxyazetidín Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (5,13 g, 10,7 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 6(1)) v bezvodom tetrahydrofuráne (250 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (12,0 ml, 12,0 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas

344 vzniku 1-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (2,42 g, výťažok 100%) ako číry sirup.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,03 (1H, s), 4,90 až 4,70 (1H, m), 4,32 (2K, t, J=8,2 Hz), 3,95 (2H, dd, J=8,2, 4,5 Hz),

3,20 (3H, br, s), 3,05 (3H, br, s), 2,85 (1H, br, s).

Hmotnostné spektrum: 227 [M⁺] (3) 1-(4-N,N-Dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1- (4-N,N-dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (2,56 g, 10,7 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 6(2)) v metylénchloride (50 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (2,4 ml, 31,0 mol] a trietylamín (7,4 ml, 53,1 mol) v ľadovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ľadovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 2,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný metanol do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu a etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku l-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (3,28 g, výťažok 100%) ako bledohnedý olej.

¹H-NMR (400 M Hz, CDCI3): δ (ppm) 7,13 (1H, s), 5,50 až 5,38 (1H, m), 4,46 (2H, dd, J=9,7, 6,6 Hz), 4,26 (2H, dd, J=9,7, 4,3 Hz), 3,21 (3H, br, s), 3,10 (3H, s), 3,07 (3H, br, s).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 306 [M+H] ⁺ (4) 3-Acetyltio-l-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl) azetidín

Do roztoku 1-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-3345

-metánsulfonyloxyazetidínu (3,40 g, 11,1 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 6(3)) v dimetylformamide (170 ml) bol pridaný tioacetát draselný (7,62 g, 66,7 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : n-hexánu (4:1 -> 5:1—> 7:1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl) azetidínu (2,71 g, výťažok 85%) ako hnedý sirup.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,09 (1H, s), 4,53 (2H, dd, J=9,0, 7,9 Hz), 4,50 až 4,40 (1H, m), 3,99 (2H, dd, J=9,0, 5,5

Hz), 3,20 (3H, br, s), 3,06 (3H, br, s), 2,36 (3H, s).

Referenčný príklad 7

3-Acetyltio-l-(4-N-etylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

AcS

CONHEt (1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-etylkarbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,0 g, 2,14 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (50 ml) bol pridaný roztok 0,67M etylamínhydrochloridu-trimetylhliníka v benzéne (6,42 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod refluxom 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (50 ml) a etylacetát (100 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi a výsledná zmes bola

346 miešané pri teplote miestnosti 30 minút. Po pridaní etylacetátu bola reakčné zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (5:1 -» 1 : i) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-N-etylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (997 mg, výťažok 100%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,66 až 7,58 (4H, m), 7,50 až 7,37 (6H, m), 7,35 (IH, s), 7,14 (IH, br, s), 4,80 až 4,76 (IH, m), 4,16 až 4,06 (2H, m), 4,01 (2H, dd, J=8,8, 5,1 Hz), 3,43 (2H, dc, J=7,3, 5,6 Hz), 1,22 (3H, t, J=7,3 Hz), 1,07 (9H, s).

(2) 1-(4-N-Etylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidín Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-etylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (990 mg, 2,14 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 7(1)) v bezvodcm tetrahydrofuráne (30 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-r.-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (2,56 ml, 2,56 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 1,3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný etylacetát a reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 2) —> etylacezát —> 5% metanolu v etylacetáte ako eluentu počas vzniku 1-(4-N-etyl-karbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (461 mg, výťažok 95%) ako biela pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,36 (IH, s), 7,20 (IH, br

s), 4,90 až 4,78 (IH, m), 4,32 (2H, dd, J=9,0, 7,3 Hz), 3,96

347 (2Η, dd, J=9,0, 4,3 Hz), 3,44 (2H, dq, J=7,2, 5,4 Hz), 2,61 (1H, d, J=6,6 Hz), 1,22 (3H, t, J=7,2 Hz).

(3) 1-(4-N-Etylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (460 mg, 2,02 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 7(2)) v metylénchloride (23 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,469 ml, 6,06 mol) a trietylamín (0,849 ml, 6,06 mol) v ľadovom kúpeli. Reakčná zmes bola zohriata na teplotu miestnosti za 10 minút a miešaná 1,3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 3) —> etylacetátu ako eluentu počas vzniku 1- (4-N-etylkarbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl) -3-metánsulfonyloxyazetidínu (598 mg, výťažok 97%) ako bledožltá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,44 (1H, s), 7,13 (1H, br

s), 5,48	až 5,38 (1H,	m) , 4	,46 (2H,	ddd,	J=9,5,	, 6,6, 1,5 Hz) ,
4,27 (2H,	ddd, J=9,5,	4,4,	1,5 Hz),	3, 45	(2H,	dq, J=7,3, 5,0
Hz), 3,10	(3H, s), 1,24	(3H,	t, J=7,3	Hz) .

(4) 3-Acetyltio-l-(4-N-etylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín Do roztoku 1-(4-N-etylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonylazetidínu (590 mg, 1,93 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 7(3)) v dimetylformamide (30 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,32 g, 11,6 mol) pri teplote miestnosti. Reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelené medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom

348 hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 3 —> 1 : 2) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-1- ( 4-N-etylkarbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl) azetidínu (4 53 mg, výťažok 82%) ako bledohnedá pevná látka.

^•H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,40 (IH, s), 7,14 (IH, br

(3H, t, J=7,3 Hz) .

Referenčný príklad 8

3-Acetyltio-l-(4-N-izopropylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín

AcS

CONH (1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-izopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,0 g, 2,14 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (50 ml) bol pridaný roztok 0,67M izopropylaminhydrochloridu-trimetylhliníka v benzéne (6,42 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod refluxom 2,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (50 ml) a etylacetát (100 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Po pridaní etylacetátu bola reakčná zmes rozdelená medzi erylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a

349 koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas vzniku 3-terc. butyldifenylsilyloxy-1- (4-N-izopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)

azetidínu (1,01	5/	výťažok 99%)	ako	bledohnedá	pevná látka.
^XH-NMR (400	M	Hz, CDC1₃) : Ô	(ppm) 7,66 až	7,58 (4H, m), 7,50
až 7,36 (6H, m)	Z	7,34 (IH, s),	6, 98	(IH, br,	d, J=8,l Hz), 4,80
až 4,70 (IH, m)	z	4,26 až 4,16	(IH,	m), 4,11	(2H, dd, J=8,8, 7,3
Hz), 4,02 (2H,	dd	, J=8,8, 4,4	Hz) ,	1,24 (6H,	d, J=6,6 Hz), 1,07
(9H, s) .

(2) 1-(4-N-Izopropylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl) -3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-izopropylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,01 g, 2,11 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 8(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (30 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (2,53 ml) v ľadovom kúpeli. Zmes bola miešaná 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1:3)-» etylacetátu ako eluentu počas vzniku 1-(4-N-izopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (681 mg, výťažok 100%) ako biela pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : 5 (ppm) 7,36 (IH, s), 7,00 (IH, br d, J=8,0 Hz), 4,90 až 4,78 (IH, m), 4,32 (2H, »dd, J=9,9, 8,7 Hz), 3,97 (2H, ddd, J=9,9, 7,3, 1,7 Hz), 2,55 (IH, d, J=8,0 Hz), 1,25 (6H,d,J=6,6Hz).

(3) 1-(4-N-Izopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3350

-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-N-izopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (490 mg, 2,03 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 8(2)) v metylénchloride (15 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,471 ml, 6,09 mol) a trietylamín (0,854 ml, 6,0 9 mol) v ľadovom kúpeli. Reakčná zmes bola zohriata na teplotu miestnosti za 10 minút a miešaná 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1:3) —»etylacetátu ako eluentu počas vzniku 1-(4-N-izopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) -3-metánsulfonyloxyazetidínu (681 mg, výťažok 100%) ako bledožltá pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,44 (IH, s), 7,00 (IH, br, d, J=8,0 Hz), 5,48 až 5,38 (IH, m), 4,46 (2H, dd, J=9,5, 6,6 Hz), 4,32 až 4,18 (3H, m obsahujúci 2H, dd, na 4,28, J=9,5, 5,1 Hz),

3,11 (3H, s), 1,25 (6H, d, J=6,6 Hz).

(4) 3-Acetyltio-l-(4-N-izopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 1-(4-N-izopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (680 mg, 2,03 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 8(3)) v dimetylformamide (35 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,39 g, 12,2 mol) pri teplote miestnosti. Reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, cez

351 filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-N-izopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidínu (461 mg, výťažok 81%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,40 (1H, s), 6,98 (1H, br s), 4,54 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,50 až 4,40 (1H, m), 4,26 až 4,16 (1H, m), 3,99 (2H, dd, J=8,8, 5,9 Hz), 2,37 (3H, s), 1,24 (6H, d, J=5,9 Hz).

Referenčný príklad 9

3-Acetyltio-l-(4-N-cyklopentylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-cyklopentylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,0 g, 2,14 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (50 ml) bol pridaný roztok 0,67M cyklopentylamínu-trimetylhliníka v benzéne (6,42 ml) priteplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod refluxom 5 hodín.- Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol 10% vodný roztok kyseliny octovej (50 ml) a etylacetát (100 ml) pridaný do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Po pridaní etylacetátu bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne počas vzniku 3 - terc. butyldifenylsilyloxy-1- ( 4-N-cyklopentylkarbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl(azetidínu (1,07 g, výťažok 99%) ako bledohnedá pevná látka.

352

	'H-NMR (400	M Hz,	CDC1₃	): δ	(ppm)	7,66 až	7,60 (4H,	m), 7,50
až	7,38 (6H, m)	, 7,34	(IH,	s),	7,08	(IH, br,	d, J=8,l	Hz), 4,80
až	4,70 (IH, m)	, 4,38	až 4	,26	(IH, m	), 4,11	(2H, dd, J	=8,8, 5,6
Hz)	, 4,02 (2H,	dd, J=	=8,8,	4,4	Hz) ,	2,12 až	2,20 (2H,	m), 1,80
až	1,40 (6H, m)	, 1,07	(9H,	S) .

(2) 1~( 4-N-Cyklopentylkarbamoyl-l, 3-tíazol-2-yl) -3-hyčroxyazetidín Do roztoku 3-terc.butyldifenylsi.lyloxy-1-(4-N-cyklopentylkarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,07 g, 2,12 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 9(1)) v bezvodom tetrahydrofuráne (32 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (2,54 ml, 2,54 mol) v ľadovom kúpeli. Zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 40 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas vzniku 1-(4-N-cyklopentylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetiaínu (528 mg, výťažok 93%) ako biela pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,36 (IH, s), 7,11 (IH, d, J-4,4 Hz), 4,88 až 4,78 (IH·, m), 4,40 až 4,25 (3H, m), 3,96 (2H, dd, J=9,5, 4,4 Hz), 2,54 (IH, d, J=6,0 Hz), 2,12 až 2,00 (2H,m), 1,80 až 1,44 (6H, m) .

( 4 ) 1-(4-N-Cyklopentylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-N-cyklopentylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (520 mg, 1,95 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 9(2)) v metylénchloride (16 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,452 ml, 5,84 mol) a trietylamín (0,818 ml, 5,8 4 mol) v ladovom kúpeli. Reakčná zmes bola zohriata na teplotu miestnosti za 10 minút a miešaná počas noci. Po

353 skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 2) —> etylacetátu ako eluentu počas vzniku 1-(4-N-cyklopentyl-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (691 mg, výťažok 100%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,43 (1H, s), 7,07 (1H, br, d, J=8,l Hz), 5,48 až 5,38 (1H, m), 4,46 (2H, ddd, J=9,9, 6,6, 1,5 Hz), 4,40 až 4,20 (3H, m obsahujúci 2H, ddd, J=9,9, 4,9, 1,5 Hz),

3,11 (3H, s), 2,15 až 1,98 (2H, m), 1,80 až 1,40 (6H, m).

(4) 3-Acetyltio-l-(4-N-cyklopentylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 1-(4-N-cyklopentylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (670 mg, 1,95 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 9(3)) v dimetylformamide (34 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,34 g, 11,7 mol) pri teplote miestnosti. Reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2 : 1 —> 1 : 2 ) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-N-cv<lopentylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (550 mg, výťažok 87%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,40 (1H, s), 7,10 (1H, d,

J=8,0 Hz), 4,53 (2H, dd, J=9,2, 6,9 Hz), 4,48 až 4,38 (1H, m),

354

4,38 až 4,26 (IH, m), 3,99 (2H, dd, J=9,2, 4,6 Hz), 2,36 (3H, s),

2,12 až 2,06 (2H, m), 1,80 až 1,40 (6H, m).

Referenčný príklad 10

3-Acetyltio-l-(4-N-cyklohexylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-cyklohexylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,0 g, 2,14 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (50 ml) bol pridaný roztok 0,67M cyklohexylamínu-trimetylhliníka v benzéne (6,42 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola zohrievaná pod refluxom 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (50 ml) a etylacetátu (100 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli a reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Do reakčnej zmesi bol postupne pridaný etylacetát a reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (5:1 —> 1:1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-cyklohexylkarbamoyl-

-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu	(1,09 g, výťažok	99%)	ako bledohnedá
pevná látka.
^’H-NMR (400 M Hz, CDC1₃)	: δ (ppm) 7,66 až	7,58	(4H, m), 7,50
až 7,38 (6H, m), 7,34 (IH,	s), 7,04 (IH, br	d, J=	=8,8 Hz), 4,80
až 4,70 (IH, m), 4,11 (2H,	dd, J=8,8 , 6,6	Hz) ,	4,02 (2H, dd,
J-8,8, 5,1 Hz), 3,98 až 3,80 (IH, m), 2,02 až	1, 94	(2H, m), 1,80

355 až 1,70 (2H, m), 1,70 až 1,10 (6H,m), 1,07 (9H, s).

(2) 1-(4-N-Cyklohexylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-cyklohexylkarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,09 g, 2,10 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 10(1)) v bezvodom tetrahydrofuráne (55 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (2,52 ml) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 1) -» etylacetátu ako eluentu počas vzniku l-(4-N-cyklohexylkarbamoyl-1, 3-tiazol-2-yl) -3-hydroxyazetidinu (570 mg, výťažok 97%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,36 (IH, s), 7,07 (IH, d, J=8,l Hz), 4,99 až 4,78 (IH, m), 4,33 (2H, dd, J=9,0, 7,3 Hz), 4,00 až 3,80 (3H, m obsahujúci 2H, dd, J=9,0, 4,4 Hz), 2,56 (IH, d, J=8,3 Hz), 2,02 až 1,92 (2H, m), 1,80 až 1,70 (2H, m), 1,70 až 1,10 (6H, m).

(3) 1-(4-N-Cyklohexylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3’-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-N-cyklohexylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (570 mg, 2,03 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 10(2)) v metylénchloride (17 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,471 ml, 6,08 mol) a trietylamín (0,852 ml, 6,08 mol) v ladovom kúpeli. Reakčná zmes bola zohriata na teplotu miestnosti za 10 minút a miešaná pri teplote miestnosti 17 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola

356 reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého riaku. Do získaného zvyšku bol pridaný izopropyléter a výsledná zmes bola filtrovaná počas vzniku 1-(4-N-cyklohexylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (739 mg, výťažok 100%) ako bledožltá pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,43 (IH, s), 7,02 (IH, br d, J=8,l Hz), 5,48 až 5,39 (IH, m), 4,46 (2H, ddd, J=9,5, 6,6, 1,5 Hz), 4,27 (2H, dd, J=9,5, 5,1 Hz), 3,98 až 3,84 (IH, m), 3,11 (3H, s), 2,01 až 1,94 (2H, m), 1,80 až 1,70 (2H, m), 1,70 až 1,10 (6H, m).

(4) 3-Acetyltio-l-(4-N-cyklohexylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 1-(4-N-cykiohexylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (730 mg, 2,03 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 10(3)) v dimetylformamide (37 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,39 g, 12,2 mol) pri teplote miestnosti a reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 15 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2:1-» 1 : 2) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-1-(4-N-cyklohexylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (372 mg, výťažok 54%) ako bledohnedá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 7,40 (IH, s), 7,06 (IH, br d, J=8,0 Hz), 4,53 (IH, dd, J=9,5, 8,2 Hz), 4,48 až 4,40 (IH,

m), 3,99 (2H, dd, J=9,5, 3,7 Hz), 3,95 až 3,85 (IH, m), 2,37 (3H,

357

s), 2,01 až 1,96 (2H, m), 1,80 až 1,10 (8H, m).

Referenčný príklad 11

3-Acetyltio-l-(4-morfolinokarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-l-(4-N-morfolinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,0 g, 2,14 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (50 ml) bol pridaný roztok 0,67M morfolínu-trimetylhliníka v benzéne (6,42 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Reakčná zmes bola zohrievaná pod refluxom 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (50 ml) a etylacetát (100 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky· na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (3:1—» 1:3) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-morfolinokarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,05 g, výťažok 97%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (	400	M Hz, CDC1₃) : δ	(ppm)	7,64	až	7,58	(4H, m),	7,50
až 7,36 (6H	, m)	, 7,12 (IH, s),	4,80	až 4,	70	(IH,	m) , 4,10	(2H,
dd, J=9,6,	8,0	Hz), 4,00 (2H,	dd, J=	^:9,6,	4,8	Hz) ,	3,96 až	3,60

(8H, m), 1,06 (9H, s).

(2) 1-(4-N-Morfolinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidín

358

Do roztoku

3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-morfolinokarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,05 g, 2,07 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 11(1)) v bezvodom tetrahydrofuráne (32 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (2,48 ml, 2,48 mol) a reakčná zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku a zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát —> 10% metanolu v etylacetáte ako eluentu počas vzniku 1-(4-morfolinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetiaínu (542 mg, výťažok 97%) ako biela pevná látka.

^lH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,15 (1H, s), 4,90 (1H, m),

(3)

Do

1-(4-N-Morfolinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín roztoku 1-(4-morfolinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (540 mg, 2,01 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 11 (2)) v metylénchloride (27 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,467 ml, 6,03 mol) a trietylamín (0,845 ml, 6,03 mol) v ľadovom kúpeli. Reakčná zmes bola zohriata na teplotu miestnosti za 10 minút a miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýreným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia 5% metanolu v etylacetáte ako eluentu počas vzniku l—(4— -morfolinokarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (688 mg, výťažok 99%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 7,23 (1H, s), 5,45 až 5,40

359 (1Η, m), 4,45 (2H, dd, J=9,5, 6,6 Hz), 4,26 (2H, ddd, J=9,5, 4,4, 1,5 Hz), 4,00 až 3,60 (8H, m), 3,10 (3H, s).

(4) 3-Acetyltio-l-(4-N-morfolinokarbonyl-l,3-tiazo1-2-yl)azetidín

Do roztoku 1-(4-morfolinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (680 mg, 1,96 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 11(3)) v dimetylformamide (20 ml) bol pridaný tioacetát draselný (671 mg, 5,87 mol) pri teplote miestnosti a reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 18 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 3) —> etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-1-(4-morfolinokarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidínu (411 mg, výťažok 64%) ako bledohnedá pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,20 (1H, s), 4,52 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,48 až 4,38 (1H, m), 3,98 (2H, dd, J=8,8, 5,1 Hz), 4,00 až 3,60 (8H, m), 2,36 (3H, s).

Referenčný príklad 12

3-Acetyltio-l-(4-terc.butyldimetylsilyloxymetyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín

N'-^/^OTBDMS

AcS (1) 1- (4-Hydroxymetyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-hydroxymetyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (548,5 mg, 1,29 mol) (získaného

360 podľa opisu v referenčnom príklade 2(2)) v bezvodom tetrahydrofurane (28 ml) bol pridaný roztok 1,OM tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (1,56 ml, 1,56 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát: metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku 1-(4-hydroxymetyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (230 mg, výťažok 96%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CD₃OD) : δ (ppm) 6,54 (1H, s), 4,76 až 4,68 (1H, m), 4,46 (2H, s), 4,32 až 4,24 (2H, m), 3,88 až 3,82 (2H, m) .

(2) 1-(4-terc.Butyldimetylsilyloxymetyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidín

Do roztoku 1-(4-hydroxymetyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (226,5 mg, 1,22 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 12(1)) v dimetylformamide (11,5 ml) bol pridaný terc.butyldimetylsilylchlorid (220 mg, 1,46 mol) a imidazol (120 mg, 1,7 6 mol) v ľadovom kúpeli. Reakčná zmes bola zohriata na teplotu miestnosti za 10 minút a miešaná 5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný v ľadovom kúpeli metanol '(2 ml) a reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu počas vzniku l-(4-terc.

butyldimetylsilyloxymetyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (300,4 mg, výťažok 82%) ako biela pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 6,43 (1H, s), 4,86 až 4,78 (1H, m), 4,66 (2H, s), 4,30 (2H, dd, J=9,5, 7,0 Hz), 3,93 (2H,

361 dd, J=9,5, 4,4 Hz), 2,80 (1H, br s), 0,94 (9H, s), 0,10 (6H, s).

(3) 1-(4-terc.Butyldimetylsilyioxymetyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-terc.butyldimetylsilyloxymetyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (300,4 mg, 1,00 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 12(2)) v metylénchloride (15 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,2 ml, 2,49 mol) a trietyiamín (0,35 ml, 2,51 mol) v ľadovom kúpeli a reakčná zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1:1) ako eluentu počas vzniku 1-(4-terc.butyldimetylsilyloxymetyl-1, 3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (326,5 mg, výťažok 86%) ako žltý sirup.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 6,50 (1H, s), 5,44 až 5,38 (1H, m), 4,43 (2H, dd, J=9,9, 5,5 Hz), 4,23 (2H, dd, J=9,9, 4,1 Hz), 3,10 (3H, s), 0,90 (9H, s), 0,10 (6H, s).

(4 ) 3-Acetyltio-l-(4-terc.butyldimetylsilyloxymetyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 1-(4-terc.butyldimetylsiiyloxymetyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (326,5 mg, 0,86 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 12(3)) v dimetylformamide (16 ml) bol pridaný tioacetát draselný (780 mg, 5,41 mol) pri teplote miestnosti a reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premyté nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez

362 bezvodý síran horečnarý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (4 : ij ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-terc.

butyldimetylsilyloxymetyi-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (19i mg, výťažok 62%) ako hnedý sirup.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 6,45 (IH, s), 4,66 (2H, s), 4,50 (2H, t, J=8,6 Hz), 3,95 (2H, dd, J=8,6, 5,1 Hz), 2,35 (3H,

s) , 0,93 (9 H, s) , 0,10 (6 H, s) .

Referenčný príklad 13

4-Acetyltio-1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidín

COOEt

AcS íl) (4-Hydroxypiperidín-l-karbotioyl)karbamová kyselina, etylester

Do roztoku 3-hydroxypiperidínu (1,0 g, 9,89 mol) v tetrahydrofurane (50 ml) bol pridaný etoxykarbonylizotiokyanát (1,4 ml, 11,9 mol) v ľadovom kúpeli. Reakčná zmes bola zohriata na teplotu miestnosti počas 10 minút a miešaná počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia toluén : etylacetátu (1 : 2) ako eluentu počas vzniku (4-hydroxypiperidín-l-karbotioyl) karbamovej kyseliny, etylesteru (2,3 g, výťažok 100%) ako žltý olej.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 4,26 (IH, br s), q, J=8,3 Hz), 4,06 (IH, m), 4,0 až 3,4 (3H, neostré s),

4,19 (2H,

2,10 (2H,

m), 1,80 až 1,60 (4H, m), 1,29 (3H, t, J=8,3 Hz).

363 (2) 1-(4-Etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-4-hydroxypiperidín

Do roztoku (4-hydroxypiperidín-l-karbotioyl)karbamovej kyseliny, etylesteru (2,3 g, 9,89 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 13(1)) v etanole (23 ml) a destilovanej vode (23 ml) bol pridaný hydroxid sodný (1,98 g, 49,5 mol) a zmes bola zohrievaná pod refluxom 15 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes zohriata na teplotu miestnosti a roztok 4N chlorovodíku v dioxane (12,4 mi) bol pridaný do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli, etyl-2-brómpyruvátu (2,5 ml, 19,8 mol), potom bol pridaný trietylamín (2,8 ml, 20,1 mol) a reakčná zmes bola zohrievaná pod refluxom 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia toluén : etylacetátu (2:1) ako eluentu počas vzniku 1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-4-hydroxypiperidínu (0,99 g, výťažok 39%) ako bledožltý sirup.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,46 (1H, s), 4,35 (2H, q, J=7,8 Hz), 3,96 (1H, m), 3,88 (2H, dt, J=13,5, 3,0 Hz), 3,31 (2H, ddd, J=13,5, 9,0, 3,0 Hz), 2,04 až 1,96 (2H,m) , 1,74 až 1,56 (3H, m), 1,37 (3H, t, J=7,8 Hz).

Hrnotnostné spektrum: 256 [M⁺] (3) 1-(4-Etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-4-metánsulfonyloxypiperidin

Do roztoku 1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-4-hydroxypiperidínu (128 mg, 0,50 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 13(2)) v metylénchloride (6,5 ml) bol pridaný metánsulfonyl chloridu (0,043 ml, 0,56 mol) a trietylamín (0,084 ml, 0,60 mol) v ľadovom kúpeli. Reakčná zmes bola zohriata na teplotu miestnosti počas 10 minút a miešaná 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol v ľadovom kúpeli

364 pridaný etanol (1 ml) a reakčná zmes bola miešaná 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol rekryštalizovaný z roztoku etylacetát : n-hexánu (5: 1) počas vzniku 1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl) -4-metánsulfonyloxypiperidínu (81,0 mg, výťažok 49%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR	(400	M Hz, CDC1₃)	: δ (ppm)	7,49	(IH,	s), 5,01	až 4,90
(IH, m), 4	,45 (	2H, q, J=8,0	Hz), 3,80	(2H,	ddd,	J=12,6,	8,4, 4,2
Hz), 3,52	(2H,	ddd, J=12,6,	8,4, 4,2	Hz) ,	3,05	(3H, s),	2,20 až

1,90 (4H, m), 1,36 (3H, t, J=8,0 Hz).

Hmotnostné spektrum: 334 [>T] (4) 4-Acetyltio-l-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidín Do roztoku 1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-4-metánsulfonyloxypiperidínu (76 mg, 0,23 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 13(3)) v dimetylformamide (4,0 ml) bol pridaný tioacetát draselný (145 mg, 1,3 mol) pri teplote miestnosti a reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 8 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia n-hexán : etylacetátu (1:1) ako eluentu počas vzniku 4-acetyltio-l-(4-etoxykarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl)piperidínu (67 mg, výťažok 94%) ako bledohnedá pevná látka.

^XH-NMR	(400 M Hz, CDCI3) : δ (ppm)	7,45	(IH,	s), 4,34 (2H, g,
J=7,1 Hz),	3,88 (2H, dt, J=13,4, 3,2	Hz) ,	3,80	až 3,60 (IH, m),
3,33 (ddd,	J=13,6, 8,5, 3,2 Hz), 2,33	(3H,	s) ,	2,15 až 1,95 (2H,

365

m), 1,85 až 1,65 (2H, m), 1,37 (3H, t, J=7,l Hz).

Hmotnostné spektrum: 314 [M⁺]

Referenčný príklad 14

4-Acetyltio-l- (4 -p-nitrobenzylkarbonyl-1,3-tiazol-2-yl) piperidín

AcS

COOPNB

Do (1) 4-terc.Butyldimetylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl)piperidín

Do roztoku 1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-4-hydroxypiperidínu (1,00 g, 3,90 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 13(2)) v dimetylformamide (50 ml) bol pridaný terc.butyldimetylsilylchlorid (1,2 g, 7,96 mol) a imidazol (0,6 g, 8,8 mol) v ladovom kúpeli. Reakčná zmes bola zohriata na teplotu miestnosti počas 10 minút a miešaná 18 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, bol pridaný v ladovom kúpeli etanol a reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (4:1) ako eluentu počas vzniku 4-terc. butyldimetylsilyloxy-1- (4-etoxykarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl) azetidínu (1,38 g, výťažok 95%) ako bledožltý olej.

^rH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,42 (1H, s), 4,35 (2H, q, J=7,l Hz), 4,03 až 3,89 (1H, m), 3,70 (2H, ddd, J=12,4, 8,5, 3,7 Hz), 3,46 (2H, ddd, 12,4, 8,5, 3,7 Hz), 1,90 až 1,77 (2H, m), 1,71 až 1,59 (2H, m), 1,37 (3H, t, J=7,l Hz), 0,90 (9H, s), 0,08 (6H, s) .

Hmotnostné spektrum: 370 [M⁺]

366 (2) 4-terc.Butyldimetylsilyloxy-1-(4-karboxyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidín

Do roztoku 4-terc.butyldimetylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidínu (1,00 g, 2,7 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 14(1)) v etanole (20 ml) bol pridaný IN vodný roztok hydroxidu sodného (5,4 ml, 5,4 mol) v ľadovom kúpeli a reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 3,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, 2N vodný roztok kyseliny chlorovodíkovej (1,8 ml) bol pridaný v ľadovom kúpeli. Reakčné zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol rekryštalizovaný z roztoku metanolu v etylacetáte počas vzniku bielych kryštálov (471 mg) ako primárnych kryštálov. Následne bol zvyšok získaný koncentráciou materského roztoku, vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : 2-propanol : vody (10:4:1 —> 5:2:1) ako eluentu počas vzniku 4-terc. butyldimetylsilyloxy-1- (4-karboxyl-l, 3-tiazol-2-yl) piperidínu (440 mg, výsledné množstvo 911 mg, výťažok 99%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃ + D₂O) : δ (ppm) 7,35 (1H, s), 4,10 až 3,85 (1H, m), 3,75 až 3,50 (2H, m), 3,50 až 3,25 (2H, m), 1,90 až 1,70 (2H, m), 1,70 až 1,50 (2H, m), 0,90 (9H, s), 0,07 (6H, m) .

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 343[M+H]⁺ (3) 4-terc.Butyldimetylsilyloxy-1-(4-p-nitrobenzyloxykarboxyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidín

Do roztoku 4-terc.butyldimetylsilyloxy-1-(4-karboxyl-l, 3-tiazol-2-yl)piperidínu (902 mg, 2,63 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 14(2)) v bezvodom metylénchloride (40 ml) bol pridaný hydroxybenzotriazol (710 mg, 5,3 mol), l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimidhydrochlorid (WSC) (1,254 g, 6,6 mol) a p-nitrobenzylalkohol (788 mg, 5,2 mol)

367 v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol silikagélovej kolóne počas : 1) ako eluentu počas vzniku vyčistený chrómatograficky na použitia n-hexán : etylacetátu (1 4-terc.butyldimetylsilyloxy-1-[4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl) piperidínu (916 mg, výťažok 73%) ako žltá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,5 Hz), 7,60 , 42 (2H, s), 4,05 až 3,95 (IH,

(2H, d,	J=8,5	Hz) ,	7,49 (IH	/ s) ,
m) , 3,70	(2H,	ddd,	J=12,6,	8,6,
6/2, 4,2	Hz) ,	1,92	až 1,76	(2H,
(9H, s),	0,07	(6H,	s) .

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 478 [M+H] ⁺ (4) 1-(4-p-Nitrobenzyloxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-4-hydroxypiperidín

Do roztoku 4-terc.butyldimetylsilyloxy-1-(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-1,3-tiazol-2-ýÍ)piperidínu (300 mg, 0,628 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 14(3)) v bezvodom tetrahydrofurane (15 ml) bola pridaná kyselina octová (0,22 ml, 0, 628 mol) a roztok IM tetrabutylamóniumf luoridu v tetrahydrofurane (3,76 ml, 3,76 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 21 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia

368 etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku l-(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)-4-hydroxypiperidínu (123 mg, výťažok 54%) ako bledožltá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃ + D₂O) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,0

Hz), 7,60 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,50 (1H, s), 5,42 (2H, s), 4,02 až 3,94 (1H, m), 3,89 (2H, dt, J=12,0, 4,0 Hz), 3,33 (2H, ddd,

J=12,0, 8,0, 4,0 Hz), 2,05 až 1,94 (2H, m), 1,75 až 1,55 (2H, m).

Hmotnostné spektrum: 363 [M⁺] (5) 4-Metánsulfonyloxy-l-(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl)piperidin

Do roztoku 1-(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-4-hydroxypiperidínu (0,75 g, 2,06 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 14(4)) v bezvodom metylénchloride (38 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,18 ml, 2,33 mol) a trietylamín (0,35 ml, 2,51 mol) v ľadovom kúpeli. Zmes bola zohriata na teplotu miestnosti v priebehu 10 minút a miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia n-hexán: etylacetátu (2 : 1) ako eluentu počas vzniku 4-metán-sulfonyloxy-l-(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidínu (0,87 g, výťažok 96%) ako bezfarebná pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,5 Hz), 7,59

(2H, d, J=	= 8,5	Hz), 7,54 (	:ih,	s), 5,42 (2H,	s), 5,05	až 4	, 95	(1H,
m), 3,79	(2H,	ddd, J=12,	2, 7	,6, 4,0 Hz),	3,55 (2H,	ddd,	J=	12,2,
7,2, 4,0	Hz) ,	3,07 (3H,	s) ,	2,18 až 2,06	(2H, m),	2,00	až	1,80
(2H, m).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 441 [M+H]

369 (G) 4-Acetyltio-l-(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidin

Do roztoku 4-metánsulfonyloxy-l-(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidínu (1,2 g, 2,72 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 14(5)) v dimetylformamide (60 ml) bol pridaný tioacetát draselný (625 mg, 5,47 mol) pri teplote miestnosti a reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C)

3,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia n-hexán : etylacetátu (1:1) ako eluentu počas vzniku 4-acetyltio-l-(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidínu (769 mg, výťažok 88%) ako bledohnedá pevná látka.

	^-NMR (400 M Hz,	CDC1₃) : δ	(ppm) 8,23 (	2H, d, J=8,4	Hz) ,	7,59
(2H,	d, J=8,4 Hz), 7,	51 (1H, s)	, 5,42 (2H,	s) , 3,95 až	3,80	(2H,
m) ,	3,80 až 3,60 (1H	, m), 3,34	(2H, ddd,	J=13,l, 9,9,	3,1	Hz),
2,34	(3H, s), 2,25 až	1,95 (2H,	m) , 1,85 až	1,65 (2H, m)

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 422 [M+H] ⁺

Referenčný príklad 15

4-Acetyltio-l-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidin

AcS

N conh₂

N s· (1) 4-terc.Butyldimetylsilyloxy-l-(4-karbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl)piperidin

Do roztoku 4-terc.butyldimetylsilyloxy-l-(4-karboxyl-l, 3-tiazol-2-yl)piperidínu (4,99 g, 14,6 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 14(2)) v metylénchloride (150 ml) bol

370 pridaný karbonyldiimidazol (2,80 g, 17,3 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a reakčná zmes bola miešaná 1,5 hodiny za rovnakých podmienok. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, 28% vodný roztok amoniaku bol pridaný a reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Následne bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol rozdelený medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu počas vzniku 4-terc.butyldimétylsilyloxy-l-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) piperidínu (2,90 g, výťažok 59%) ako bledožltá pevná látka.

¹ H-NMR	(400 M Hz,	CDC1₃) :	δ	(ppm)	7,39 (IH, s), 7,03 (IH, br
s) , 5,50	(IH, br s)	, 4,05	až	3, 95	(IH, m), 3,66 (2H, ddd,
J=12,5, 8,6, 3,7 Hz),	3,43 (	2H,	ddd,	J=12,5, 6,5, 4,2 Hz), 1,92
až 1,75 (2H, m), 1,75	až 1,55	(2H, m),	0,90 (9H, s), 0,08 (6H, s) .

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 342 [M+H]⁴· (2) 1-(4-Karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-4-hydroxypiperidín

Do roztoku 4-terc.butyldimetylsilyloxy-l-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidínu (1,226 g, 3,59 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 15(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (30 ml) bola pridaná kyselina octová (1,85 ml) a roztok l,0M tetra-n-butylamóniumf luoridu v tetrahydrofurane (32,3 ml, 32,3 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná 24 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas vzniku 1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-4-hydroxypiperidínu (0,82 g, výťažok 100%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CD₃OD) : δ (ppm) 7,38 (IH, s), 3,95 až 3,80 (IH, m), 3,40 až 3,20 (2H, m), 2,00 až 1,85 (2H, m), 1,75 až

1,50 (2H, m) .

371

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 228 [M+H]⁺ (3) 1- (4-Karbamoyl-1, 3-tiazol-2-yl) -4-metánsulfonyloxypiperidín

Do roztoku 1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-4-hydroxypiperidínu (1,93 g, 8,49 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 15(2)) v metylénchloride (100 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (10,0 ml, 129 mol) a trietylamín (18,0 ml, 129 mol) v ľadovom kúpeli. Po miešaní zmesi v ľadovom kúpeli 10 minút bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 24 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný metanol do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku l-(4-karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-4-metánsulfonyloxypiperidínu (31 a) (1,59 g, výťažok 61%) ako bledožltá pevná látka.

^lH-NMR (400 M Hz, CD₃OD) : δ (ppm) 7,42 (IH, s), 5,10 až 4,90 (IH, m), 3,77 (2H, ddd, J=13,0, 7,4, 4,0 Hz), 3,53 (2H, ddd,

J=13,0, 7,7, 4,0 Hz), 3,12 (3H, s), 2,18 až 2,07 (2H, m), 2,00 až 1,89 (2H, m).

Hmotnostné spektrum: 305 [M⁺] (4) 4-Acetyltio-l-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidín

Do roztoku 1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-4-metánsulfonyloxypiperidínu (31a) (1,59 g, 5,21 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 15(3)) v dimetylformamide (80 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,19 g, 10,4 mol) pri teplote miestnosti a reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C)

2,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok

372 hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : n-hexánu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku 4-acetyltio-l-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidínu (1,01 g, výťažok 68%) ako hnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,41 (1H, s), 7,00 (1H, br s), 5,55 (1H, br s), 3,90 až 3,78 (2H, m), 3,78 až 3,64 (1H, m),

3,35 až 3,25 (2H, m), 2,32 (3H, s), 2,10 až 2,00 (2H, m), 1,80 až 1,65 (2H, m).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 285 [M+H]⁺

Referenčný príklad 16

4-Acetyltio-l-(4-N-metylkarbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl)piperidín

AcS

(1) 4-terc.Butyldimetylsilyloxy-1-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidín

Do roztoku 4-terc.butyldimetylsilyloxy-1-(4-karboxyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidínu (200 mg, 0,584 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 14(2)) v dimetylformamide (6,0 ml) bol pridaný karbonyldiimidazol (114 mg, 0,703 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (50°C) 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, bol pridaný 40% vodný roztok metylamínu (0,23 ml) a reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Potom bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (5 : 4)

373 ako eluentu počas vzniku 4-terc.butyldimetylsilyloxy-1-(4-N-metylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidínu (202,5 mg, výťažok 97%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,36 (IH, s), 7,20 (IH, br s), 4,10 až 3,98 (IH, m), 3,68 (2H, ddd, J=12,6, 8,5, 3,7 Hz), 3,45 (2H, ddd, J=12,6, 6,4, 4,2 Hz), 2,99 (3H, d, J=4,8 Hz), 1,95 až l,78(2H,m), 1,78 až l,60(2H, m), 0,93(H, s), 0,ll(6H, s).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 356 [M+H] ⁺ (2) 1-(4-N-Metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-4-hydroxypiperidín

Do roztoku 4-terc.butyldimetylsilyloxy-1-(4-N-metylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidínu (1,69 g, 4,75 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 16(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (85 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (23,8 ml, 23,8 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (50°C)

14,5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku l-(4-N-metylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-4-hydroxypiperidínu (1,48 g, výťažok 97%) ako biela pevná látka.

^-NMR (4 00 M	Hz,	CDC1₃)	: δ	7,35	(IH, s), 7,18 (IH,	br, s),
4,05 až 3,90 (IH,	m) ,	3,74	(2H,	ddd,	J=12,7, 4,7 Hz), 3	,28 (2H,
ddd, J=12,7, 9,0,	3, 6	Hz) ,	2,10	až	1,90 (2H, m), 1,80	až 1,50

(3H, m).

Hmotnostné spektrum: 241 [M⁺] (3) 4-Metánsulfonyloxy-l-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidin

Do roztoku 1-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-4-hydroxypiperidínu (1,143 g, 4,74 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 16(2)) v metylénchloride (35 mi) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,44 ml, 5,63 mol) a trietylamín

374 (0,86 ml, 5,68 mol) v ľadovom kúpeli. Po miešaní zmesi v ľadovom kúpeli 10 minút bola zmes miešaná pri teplote miestností 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný metanol do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Do zvyšku bol pridaný etylacetát a zmes bola filtrovaná počas vzniku 4-metánsulfonyloxy-l- (4-N-metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl-piperidínu

(1,438 g, výťažok 95%) ako bledožltá pevná látka.	s), 7,14 (IH, br
¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ	(ppm)	7,38	(IH,
s), 5,06 až 4,93 (IH, m), 3,74	(2H,	ddd,	J=13,	2, 7,5, 4,2 Hz),
3,48 (2H, ddd, J=13,2, 7,2, 4,2	Hz) ,	3, 07	(3H,	S), 2,97 (3H, d,
J=5,l Hz), 2,20 až 1,90 (4H, m).

Hmotnostné spektrum (FAB'¹’): 320 [M+Hj⁺ (4)4-Acetyltio-l-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidín Do roztoku 4-metánsulfonyloxy-l-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidínu (1,438 g, 4,50 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 16(3)) v dimetylformamide (72 ml) bol pridaný tioacetát draselný ”(1,03 g, 9,00 mol) pri teplote miestnosti. Reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C)

2,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : n-hexánu (10 : 1) —> etylacetátu ako eluentu počas vzniku 4-acetyltio-l-(4-N-metylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidínu (1,22 g, výťažok 91%) ako bledohnedá pevná látka.

375 ^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,38 (1H, s), 7,15 (1H, br s), 3,82 (2H, dt, J=12,7, 4,8 Hz), 3,78 až 3,63 (1H, m), 3,30 (2H, ddd, J=12,7, 11,1, 4,7 Hz), 2,95 (3H, d, J=6,4 Hz), 2,35 (3H, s), 2,15 až 1,95 (2H, m), 1,85 až 1,35 (2H, m).

Hmotnostné spektrum (FAB*) : 300 [M+H] ⁺

Referenčný príklad 17

4-Acetyltio-l-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

N-^-CONMe, s·^

(1) 4-terc.Butyldimetylsilyloxy-1-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidín

Do roztoku 4-terc.butyldimetylsilyloxy-1-(4-karboxyl-l,3-tiazol-2-yl)piperidínu (0,98 g, 2,86 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 14(2)) v dimetylformamide (30 ml) bol pridaný karbonyldiimidazol (559 mg, 3,45 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (50°C) 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, bol pridaný 50% vodný roztok dimetylamínu (100 ml) a reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Následne bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodný roztok. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2 : 3) ako eluentu počas vzniku 4- terc. butyldimetylsilyloxy-1- (4-N, N-dime tyl karbamoyl-1,3-tiazol-

-2-yl)piperidínu (440 mg, výsledné množstvo	995 mg,	výťažok	94%)
ako bledožltý olej .
^lH-NMR (400 M Hz, CDCI3) : δ (ppm) 7,04	(1H, s),	4,05 až	3, 95
(1H, m), 3,67 (2H, ddd, J=12,6, 8,4, 4,3	Hz), 3,	41 (2H,	ddd,

376

J=12,6, 7,0, 4,3 Hz), 3,26 (3H, br s), 3,07 (3H, br s), 1,92 až 1,75 (2H, m), 1,72 až 1,50 (2H, m), 0,90 (9H, s), 0,08 (6H, s).

Hmotnostné spektrum (FAB) : 370 [M+Hj’ (2) 1-( 4-N,N-Dimetylkarbamoyl-1,3-tiazoi-2-yl) -4-hydroxypiperidín

Do roztoku 4-terc.butyldimerylsilyloxy-l-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidinu (2,13 g, 5,76 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 17(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (85 ml) bola pridaná kyselina octová (1,65 ml, 28,8 mol) a roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (28,8 ml, 28,8 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (50°C) 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát: metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku 1-(4-N,N-dimetyikarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-4-hydroxypiperidínu (1,47 g, výťažok 100%) ako biela pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 7,07 (IH, s), 4,03 až 3,89 (IH, m), 3,83 (2H, ddd, J=12,0, 5,0 Hz), 3,35 až 3,20 (5H, m),

3,08 (3H, br s), 2,05 až 1,90 (2H, m), 1,90 až 1,55 (3H, m).

Hmotnostné spektrum: 255 [M^{3 4-}] (3) 1-(4-N,N-Dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-4-metánsulfonyloxypiperidín

Do roztoku 1-(4-N,N-dimetylkarbanoyl-l,3-tiazol-2-yl)-4-hydroxypiperidinu (1,47 g, 5,76 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 17(2)) v metylénchloride (60 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,82 ml, 10,6 mol) a trietylamín (1,48 ml, 10,6 mol) v ľadovom kúpeli. Po miešaní zmesi v ľadovom kúpeli 10 minút bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný metanol do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická

377 vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku 1-(4-N, N-dimetylkarbamoyl-1, 3-tiazol-2-yl)-4-metánsulfonyloxypiperidínu (1,38 g, výťažok 72%) ako bledožltá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 7,12 (1H, s), 5,05 až 4,90 (1H, m), 3,85 až 3,65 (2H, m), 3,60 až 3,40 (2H, m), 3,23 (3H, br s), 3,08 (6H, br s), 2,20 až 1,90 (4H, m).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 334 [M+H] ⁺ (4) 4-Acetyltio-l-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidín

Do roztoku 1-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-4-metánsulfonyloxypiperidínu (1,33 g, 3,99 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 17(3)) v dimetylformamide (66 ml) bol pridaný tioacetát draselný (940 mg, 8,23 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C) 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : n-hexánu (5 : 1 —> 7 : 1) ako eluentu počas vzniku 4-acetyltio-l-(4-N,N-dimetylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)piperidínu (629 mg, výťažok 50%) ako bledohnedá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,07 (1H, s), 3,90 až 3,78 (3H, m), 3,75 až 3,60 (2H, m), 3,40 až 3,15 (5H, m), 3,08 (3H, br s), 2,32 (3H, s), 2,12 až 1,98 (2H, m), 1,82 až 1,60 (2H, m).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 314 [M+H] ⁺

378

Referenčný príklad 18 (3S)-3-Acetyltio-l-(4-karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)pyrolidín

AcS/_//f.

N

N-// conh₂ (1) [(3R)-3-Hydroxypyrolidín-l-karbotioyl]karbamová kyselina, etylester (3R)-3-hydroxypyrolidínhydrochlorid (15 g, 121,4 mol) bol rozpustený v tetrahydrofurane (450 ml) a etoxykarbonylizotiokyanát (15,7 ml) bol pridaný v ladovom kúpeli. Roztok zmesi bol zohriaty na teplotu miestnosti počas 10 minút a miešaný počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol rekryštalizovaný zo zmesi etylacetátu a n-hexánu počas vzniku [(3R)-3-hydroxypyrolidín-l-karbotioyl]karbamovej kyseliny,

etylesteru (24,62	g, výťažok 93%	) ako	žlté kryštály.
^XH-NMR (400 M	Kz, CDC1₃) : δ	(Ppm)	7,38 až 7,25	(1H, br s),
4,35 až 3,63 (5H,	m), 4,16 (2H,	q, J=	6,8 Hz), 2,19	až 2,05 (2H,
m), 1,30 (3H, t, J--	-6,8 Hz).

(2) (3R)-1-(4-Etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxypyrolidín Do roztoku hydrochloridu [(3R)-3-hydroxypyrolidín-l-karbotioyl]karbamovej kyseliny (24,6 g, 113 mol) (získanej podlá opisu v referenčnom príklade 18(1)) v etanole (125 ml) a destilovanej vode (125 ml) bol pridaný hydroxid sodný (31,6 g, 789 mol) a zmes bola zohrievaná pod refluxom počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes ochladená na teplotu miestnosti. Do reakčnej zmesi bol pridaný roztok 4N chlorovodíka v dioxane v ladovom kúpeli až pH zmesi bolo 7, boli pridané etyl-2-bróm.pyruvátu (28,4 ml, 226 mol) a trietylamín

379 (31,7 ml, 226 mol) a reakčná zmes bola zohrievaná pod refluxom 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (1 : 1 -» 1 : 2) ako eluentu počas vzniku (3R)-1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxypyrolidínu (19,26 g, výťažok 70%) ako bledohnedá pevná látka.

’-H-NMR (400 M Kz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,39 (IH, s), 4,66 až 4,61 (IH, m), 4,36 (2H, q, J=7,3 Hz), 3,72 až 3,65 (2H, m), 3,62 až 3,56 (2H, m), 2,23 až 2,15 (IH, m), 2,14 až 2,07 (IH, m), 1,37 (3H, t, J=7,3Hz).

(3) (3R)-3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)pyrolidín

Do roztoku (3R)-1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxypyrolidínu (3,0 g, 12,4 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 18(2)) v dimetylformamide (90 ml) bol pridaný tero.butyldifenylsilylchlorid (6,45 ml, 24,8 mol) a imidazol (1,69 g, 24,8 mol) v ľadovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ladovom kúpeli bola výsledná zmes miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie etanol (2,59 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (4 : 1 —> 1:1) ako eluentu počas vzniku

380 (3R)-3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)pyrolidínu (5,85 g, výťažok 90%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,69 až 7,60 (4H, m), 7,48 až 7,35 (6H, m), 7,39 (IH, s), 4,56 až 4,50 (IH, m), 4,12 (2H, q, J=7,3 Hz), 3,77 až 3,70 (IH, m), 3,56 až 3,46 (3H, m), 2,06 až

1,90 (2H, m), 1,38 (3H, t, J=7,3 Hz), 1,05 (9H, s).

(4) (3R)-3-terc.Butyldifenylsilyloxy-l-(4-karboxyl-l, 3-tiazol-2-yl)pyrolidín

Do roztoku (3R)-3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)pyrolidínu (300 mg, 0,624 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 18(3)) v zmesi etanolu (12 ml) a destilovanej vody (3 ml) bol pridaný IN vodný roztok hydroxidu sodného (1,56 ml, 1,56 mol) pri teplote miestnosti a reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 6 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, IN vodný roztok kyseliny chlorovodíkovej (1,8 ml) bol pridaný do ľadového kúpeľa pokiaľ pH reakčnej zmesi bolo 4 až 5. Reakčná zmes bola rozdelené medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku za vzniku (3R)-3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-karboxyl-l, 3-tiazol-2-yl)

pyrolidínu (305 mg, výťažok 97%)	ako	biela	pevná látka.
¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ	(ppm)	7,68	až 7,60 (4H,	m), 7,48
až 7,35 (6H, m), 7,40 (IH, s),	4,57 až	4,50 (IH, m) ,	3,72 až
3,62 (IH, m), 3,50 až 3,36 (3H,	m) ,	2,10	až 1,92 (2H,	m), 1,05

(9H, s).

(5) (3R)-3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-karbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl)pyrolidín

Do roztoku (3R)-3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-karboxvl-1,3-tiazol-2-yl)pyrolidínu (910 mg, 2,01 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 18(4)) v dimetylformamide (30 ml)

381 bol pridaný karbonyldiimidazol (652 mg, 4,02 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (50°C) 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, bol pridaný 28% vodný roztok amoniaku a reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Následne bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograf icky na silikagélovej kolóne počas vzniku (3R)-3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl) pyrolidínu (730 mg, výťažok 80%) ako bledohnedá pevná látka.

^’H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,71 až 7,64 (4H, m), 7,48 až 7,38 (6H, m), 7,09 až 7,05 (1H, br s), 5,50 až 5,44 (1H, br

s), 4,57 až 4,52 (1H, m), 3,72 až 3,66 (1H, m), 3,51 až 3,45 (1H,

m), 3,45 až 3,43 (2H, m), 2,09 až 2,02 (1H, m), 2,08 až 1,93 (1H,

m), 1,08 (9H, s).

(6) (3R) -1- (4-Karbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl) -3-hydroxypyrolidín

Do roztoku (3R)-3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl) pyrolidínu (950 mg, 2,10 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 18(5)) v bezvodom tetrahydrofuráne (20 ml) bol pridaný roztok 1,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (2,52 ml, 2,52 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 1) —> 10% metanolu v etylacetáte ako eluentu počas vzniku (3R)-1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxypyrolidínu (428 mg, výťažok 96%) ako biela pevná látka.

^lH-NMR (400 M Hz, DMSO-d₆) : δ (ppm) 7,42 až 7,36 (1H, br s),

7,30 až 7,23 (1H, br s), 7,27 (1H, s), 5,08 (1H, d, J=3,7 Hz),

382

4.42 až 4,37 (1H, m), 3,51 (1H, dd, J=11,O, 4,4 Hz), 3,90 až

3.43 (2H, m), 3,30 až 3,27 (1H, m), 2,14 až 2,01 (1H, m), 1,99 až 1,86 (1H, m) .

( 7 ) (3R)-1-(4-Karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxypyrolidín a (3R)-1-(4-kyano-l,3-tiazol-2-yl) -3-metánsulfonyloxypyrolidín

Do roztoku (3R)-1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxypyrolidínu (290 mg, 1,36 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 18(6)) suspenzovanom v metylénchloride (9 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,684 ml, 8,85 mol) a trietylamín (1,24 ml, 8,85 mol) v ladovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ladovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, metanol (0,33 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestností 30 minút. Reakčná zmes bola koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia 5% metanolu v etylacetáte -> 10% metanolu v etylacetáte ako eluentu počas vzniku (3R)-1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxypyrolidínu (148 mg, výťažok 40%) ako bledožltá pevná látka.

(3R) -1- (4-Karbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl) -3-metánsulfonyloxypyrolidín (a)

	^-NMR (	400 M Hz, CDC1₃) : δ	(ppm) 7,41 l	:ih, s),	7,10	až
6, 98	(1H, bs	), 5,60 až 5,52 (1H,	br s), 5,50	až 5,40	(1H,	m) ,
3,88	až 3,76	(2H, m), 3,65 až 3,60	(2H, m), 3,08	(3H, s),	2,50	až
2,41	(1H, m),	2,39 až 2,32 (1H, m)	_e

(3R) -1- (4-Kyano-1,3-tiazol-2-yl) -3-metánsulfonyloxypyrolidín (b) ^-H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,23 (1H, s), 5,45 až

5,42 (1H, m), 3,88 až 3,76 (2H, m), 3,69 až 3,62 (2H, m), 3,08 (3H, s), 2,55 až 2,47 (1H, m), 2,43 až 2,32 (1H, m).

(8) (3S)-3-Acetyltio-1-(4-karbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl)pyrolidín

Do roztoku (3R)-1-(4-karbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl)-3383

-metánsulfonyloxypyrolidínu (190 mg, 0,652 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 18(7)) v acetonitrile (6 ml) bol pridaný tioacetát draselný (223 mg, 1,96 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola zohrievaná pod refluxom 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 1) -> etylacetát —> 2% metanole v etylacetáte ako eluentu počas vzniku (3S)-3-acetyltio-l-(4-karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)pyrolidínu (135 mg, výťažok 77%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDCI3) : δ (ppm) 7,37 (IH, s), 7,08 až 7,02 (IH, br s), 5,50 až 5,44 (IH, br s), 4,26 až 4,12 (IH, m), 3,94 (IH, dd, J=ll,0, 6,6 Hz), 3,62 až 3,50 (2H, m), 3,44 (IH, dd, J=ll,0, 5,1 Hz), 2,54 až 2,45 (IH, m), 2,36 (3H, s), 2,13 až 2,04 (IH, m).

Referenčný príklad 19 (3S)-3-Acetyltio-l-(4-kyano-l, 3-tiazol-2-yl)pyrolidín

Do roztoku (3R)-1-(4-kyano-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxypyrolidínu (300 mg, 1,10 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 18(7)) v acetonitrile (9 ml) bol pridaný tioacetát draselný (376 mg, 3,30 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola zohrievaná pod refluxom 5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu

384 sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolene za použitia n-hexán : etylacetátu (5 : 1 —> 1 : 1 ) ako eluentu počas vzniku (3S)-3-acetyltio-l-(4-kyano-l, 3-tiazol-2-yl)pyrolidínu (137 mg, výťažok 50%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDCI3) : δ (ppm) 7,19 (IH, s), 4,19 až 4,12 (IH, m), 3,94 (IH, dd, J=ll,0, 6,6 Hz), 3,64 až 3,53 (2H, m),

3,43 (IH, dd, J=ll,0, 5,1 Hz), 2,55 až 2,48 (IH, m), 2,36 (3H, s), 2,15 až 2,06 (IH, m).

Referenčný príklad 20 (3R)-3 -Acetyltio-1-(4-karbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl)pyroiidín

AcS

N

CONH₂ (1) (3R)-1-(4-Etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxypyrolidín

Do roztoku(3R)-1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxypyrolidínu (97 0 mg, 4,-00 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 18(2)) v metylénchloride (30 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (1,24 ml, 16,0 mol) a trietylamín (2,24 ml, 16,0 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, bol pridaný etanol (0,81 ml) a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (4:1 -> 1 : 1) ako eluentu počas

385 vzniku (3R)-1-(4-etoxykarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl) -3-metánsulfonyloxypyrolidínu (1,00 g, výťažok 78%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,43 (1H, s), 5,44 až 5,41 (1H, m), 4,36 (2H, q, J=7,0 Hz), 3,92 (1H, dd, J=12,5, 1,5 Hz), 3,85 (1H, dd, J=12,5, 3,7 Hz), 3,72 až 3,65 (2K, m), 3,06 (3H, s), 2,52 až 2,46(lH,m), 2,40 až 2,31(lH,m), 1,38 (3H,t, J=7,0Hz).

(2) (3S) -3-Acetyl-l-'( 4-etoxykarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl)pyroiidín Do roztoku (3R)-1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxypyrolidínu (1,0 g, 3,12 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 20(1)) v dimetylformamide (30 ml) bol pridaný tioacetát draselný (919 mg, 9,36 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 5,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (3 : 1 -» 1 : 1) ako eluentu počas vzniku (3S)-3-acetyl-1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-vl)pyrolidínu (877 mg, výťažok 99%) ako bledohnedá pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,41 (1H, s), 5,45 až 5,41 (1H, m), 4,36 (2H, q, J=7,3 Hz), 3,44 (1H, dd, J=ll,7, 5,1 Hz), 3,70 až 3,60 (3H, m), 2,35 až 2,17 (2H, m), 2,05 (3H, s), 1,38 (3H, t, 7,3 Hz).

(3) (3S)-1-(4-Etoxykarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl)-3-hydroxypyrolidín

Do roztoku (3S)-3-acetyl-l-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)pyrolidínu (5,0 g, 17,6 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 20(2)) v etanole (150 ml) bol pridaný etoxid sodný (60 mg, 0,879 mol) pri teplote miestnosti a zmes

386 bola miešaná počas noci pri rovnakých podmienkach. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný roztok 4N chlorovodíka v 1,4-dioxane (0,22 ml) na neutralizáciu zmesi. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (i : 1 _» 1 : 2) ako eluentu počas vzniku (3S)-1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxypyrolidínu (4,16 g, výťažok 98%) ako biela pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 7,39 (IH, s), 4,67 až 4,61 (IH, m), 4,36 (2H, q, J=7,3 Hz), 3,72 až 3,56 (4H, m), 2,24 až 2,07 (2H, m), 1,37 (3H, t, J=7,3 Hz).

(4) (3S)-3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)pyrolidín

Do roztoku (3S)-1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxypyrolidínu (4,1 g, 16,9 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 20(3)) v dimetylformamide (120 ml) bol pridaný terc.butyldifenylsilylchlorid (8,8 ml, 33,8 mol) a imidazol (2,3 g, 33,8 mol) v ladovom kúpeli a reakčná zmes bola zohriata na teplotu miestnosti v priebehu 10 minút a miešaná počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etanol (1,18 ml) bol pridaný v ľadovom kúpeli a reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (4:1 —» 1 : 1) ako eluentu počas vzniku (3S)-3-terc. butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)pyrolidinu

387 (7,60 g, výťažok 94%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,68 až 7,61 (4H, m), 7,52 až 7,35 (6H, m), 7,37 (1H, s), 4,56 až 4,51 (1H, m), 4,36 (2H, q, J=7,0 Hz), 3,77 až 3,69 (1H, m), 3,58 až 3,48 (3H, m), 2,05 až

1,88 (2H, m), 1,38 (3H, t, J=7,0 Hz), 1,05 (9H, s).

(5) (3S)-3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-karboxyl-l,3-tiazol-2-yl)pyrolidín

Do roztoku (3S)-3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)pyrolidínu (5,0 g, 10,4 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 20(4)) v zmesi etanolu (200 ml) a destilovanej vody (50 ml) bol pridaný IN vodný roztok hydroxidu sodného (26,0 ml, 26,0 mol) pri teplote miestnosti a reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 7,5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, IN vodný roztok kyseliny chlorovodíkovej bol pridaný v ľadovom kúpeli pokial pH reakčnej zmesi dosiahlo 4 až 5. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku za vzniku (3S)-3-terc. butyldifenylsilyloxy-1-(4-karboxyl-l,3-tiazol-2-yl)pyrolidínu (4,71 g, výťažok 100%) ako biela pevná látka.

^XH-NMR (400_M Hz, CDC1₃) :. Ô . (ppm) 7,70 až 7,52 .(4H,. m),. .7,.52 až 7,25 (6H, m), 7,40 (1H, s), 4,57 až 4,40 (1H, m), 3,68 až

3,55 (1H, m), 3,48 až 3,24 (3H, m), 2,04 až 1,86 (2H, m), 1,07 (9H, s) .

(6) (3S)-3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)pyrolidín

Do roztoku (3S)-3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-karboxyl-1,3-tiazol-2-yl)pyrolidínu (4,7 g, 10,4 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 20(5)) v dimetylformamide (140 ml) bol pridaný karbonyldiimidazol (3,37 g, 20,8 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a reakčná zmes bola miešaná v

388 olejovom kúpeli (50°C) 3,5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, 28% vodný roztok amoniaku bol pridaný a reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vednými roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (4 : 1 —> 2:1) ako eluentu počas vzniku (3S)-3-terc. butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)pyrolidínu (3,14 g, výťažok 67%) ako bledohnedá pevná látka.

'H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,68 až 7,62 (4H, m), 7,48 až 7,36 (6H, m), 7,34 (1H, s), 7,08 až 7,05 (1H, br s), 5,49 až

5,44 (1H, br s), 4,57 až 4,51 (1H, m), 2,10 až 1,93 (2H, m), 1,06 (9H, s) .

(7)(3S)-1-(4-Karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxypyrolidín

Do roztoku (3S)-3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)pyrolidínu (3,1 g, 6,86 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 20(6)) v bezvodom tetrahydrofuráne (90 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (8,24 ml, 8,24 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát —> 10% metanolu v etylacetáte ako eluente počas vzniku (3S)-1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxypyrolidínu (1,42 g, výťažok 98%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, DMSO-d₆) : δ (ppm) 7,43 až 7,36 (1H, br s),

7,74	až 7,22	(1H,	br	s) ,	7,27 (1H, s	), 5,09 (1H, d, J=3,7 Hz),
4,44	až 4,38	(1H,	m)	, 3,	51 (1H, dd,	J=ll,0, 4,4 Hz), 3,49 až
3,42	(2H, m),	3,33	až	3,28	(1H, m), 2,	15 až 2,02 (1H, m), i,97 až

389

1,89 (IH, m).

(8) (3S)-1-(4-Karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxypyrolidín

Do roztoku (3S)-1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxypyrolidínu (1,42 g, 6,66 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 20(7)) suspenzovanom v zmesi metylénchloridu (40 ml) a pyridínu (9 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (2,58 ml, 33,3 mol) a trietylamín (4,67 ml, 33,3 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, metanol (1,2 ml) bol pridaný v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia 5% metanolu v etylacetáte -» 10% metanolu v etylacetáte ako eluentu počas vzniku(3S)-1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) -3-metánsulfonyloxypyrolidínu (1,15 g, výťažok 60%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,41 (IH, s), 7,08 až 7,02 (IH, br s), 5,57 až 5,46 (IH, br s), 5,45 až 5,43 (IH, m), 3,86 (IH, dd, J=12,5 Hz), 3,80 (IH, dd, J=12,5, 4,4 Hz), 3,68 až 3,60 (2H, m), 3,08 (3H, s), 2,52 až 2,40 (IH, m), 2,39 až 2,31 (lH,m).

(9) (3R)-3-Acetyltio-l-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)pyrolidín

Do roztoku (3S)-1-(4-karbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxypyrolidínu (1,15 g) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 20(7)) v acetonitrile (35 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,35 g, 11,8 mol) pri teplote miestnosti a zmes bola zohrievaná pod refluxom 6 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická

390 vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát -> 2% metanolu v etylacetáte ako eluentu počas vzniku (3R)-3-acetyltio-l-(4-karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)pyrolidínu (962 mg, výťažok 90%) ako bledohnedá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz,	CDCla) : δ (ppm)	7,37 (IH,	s), 7,13	až	6, 99
(IH, br s), 5,59 až 5	, 45 (IH, br s),	4,19 až 4,	09 (IH, i	m) ,	3, 94
(IH, dd, J=ll,0, 6,6	Hz) , 3,61 až 3,	50 (2H, m	), 3,44	(IH,	dd,
J=il,0, 5,1 Hz), 2,54	až 2,45 (IH, m),	2,37 (3H,	s), 2,14	až	2,05
(IH, m) .

Referenčný príklad 21

3-Acetyltio-l-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

CONHMe (1) l-Karbamoyl-3-hydroxyazetidín

Roztok N-benzhydryl-3-hydroxyazetidínu (5,36 g, 22,4 mol) v metanole (250 ml) bol katalytický-hydrogénovaný za prítomnosti 10% hydroxidu paládia (5,36 g) a vodného kúpela (50°C) pri 1 atmosfére tlaku vodíka. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná na odstránenie katalyzátora. Filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol rozdelený medzi etylacetát a destilovanú vodu. Organická vrstva bola extrahovaná destilovanou vodou. Získaná vodná vrstva bola koncentrovaná počas zníženého tlaku za vzniku a bledohnedej mastnej látky. Následne bol produkt vysušený počas zníženého tlaku a rozpustený v zmesi kyseliny octovej (10 ml) a destilovanej vody (20 ml), vodný roztok (20 ml) kyanidu sodného (2,91 g) bol potom pridaný pri teplote miestnosti a reakčná zmes bola miešaná 2 hodiny. Fo

391 skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná. Získaný zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu : metanol (5:1) ako eluentu počas vzniku l-karbamoyl-3-hydroxyazetidínu ako bezfarebný olej.

¹H-NMR (500 M Hz, CD₃OD): δ (ppm) 4,54 až 4,50 (1H, m), 4,16 až 4,12 (2H, m), 3,74 (2H, dd, J=4,4, 9,7 Hz).

(2) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-l-karbamoylazetidín

Do roztoku l-karbamoyl-3-hydroxyazetidínu (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 21(1)) v dimetylformamide (100 ml) bol pridaný terc.butyldifenylsilylchlorid (18,0 ml, 66,9 mol) a imidazol (4,55 g, 66,9 mol) v ľadovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ľadovom kúpeli bola výsledná zmes miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, etanol (1 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-karbamoylazetidínu (1,45 g, celkový výťažok 18%) ako biela pevná látka.

^ľH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,60 (4H, d, J=8,1 Hz), 7,46 až 7,36 (6H, m), 4,59 až 4,54 (1H, m), 4,26 (2H, br s), 3,96(2H, t, J=8,8 Hz), 3,91(2H, dd, J=5,l, 8,8 Hz), 1,06 (9H,s).

(3) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-karbamoylazetidínu (3,47 g, 9,79 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 21(2)) v tetrahydrofurane (170 ml) bol pridaný

392 hydrogénuhličitan sodný (4,11 g, 48,95 mol) a etyl-2-brómopyruvát (2,5 ml, 19,58 mol) a reakčná zmes bola zohrievaná pod reflexom 8 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (5:1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-1,3-oxazol-2-yl)azetidínu (2,96 g, výťažok 45%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,76 (1H, s), 7,60 (4H, d, J=7,8 Hz), 7,46 až 7,37 (6H, m), 4,71 až 4,67 (1H, m), 4,34 (2H, q, J=6,8 Hz), 4,14 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,09 (2H, dd, J=5,9, 9,8 Hz), 1,34 (3H, t, J=6,8 Hz), 1,05 (9H, s).

(4) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-metylkarbamoyl-l, 3-oxazol-2-yi)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-etoxykarbonyl-1,3-oxazol-2-yl)azetidínu (325 mg, 0,72 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 21(3)) v benzéne (7 ml) bol pridaný roztok 0,67M metylamínu-trimetylhliníka v benzéne (2,7 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod refluxom 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (20 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a vodu. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia hexán : etylacetátu (1:1) ako eluentu počas

393 vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-metylkarbamoyl-l, 3-oxazol-2-yl)azetidínu (236 mg, výťažok 75%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,72 (1H, s), 7,61 (4H, d, J=7,8 Hz), 7,47 až 7,38 (6H, m), 6,88 (1H, brs), 4,74 až 4,68 (1H, m), 4,10 (2H, t, J=8,7 Hz), 4,04 (2H, dd, J=5, 6, 8,8 Hz), 2,92 (3H, d, J=5,0 Hz), 1,06 (9H, s).

(5) 1-(4-N-Metylkarbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (662 mg, 1,52 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 21(4)) v tetrahydrofuráne (33 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (1,5 ml, 1,5 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát: metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku l-(4-N-metylkarbamoyl-1,3-oxazol-2-yl)azetidínu (210 mg, výťažok 70%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CD₃OD) : δ (ppm) 7,83 (1H, s), 4,86 až 4,66 (1H, m), 4,33 (2H, dd, J=6,6, 8,1 Hz), 3,93 (2H, dd, J=5,l, 8,8 Hz), 2,85 (3H, s).

(6) 1-(4-N-Metylkarbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (209 mg, 1,06 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 21(5)) v zmesi metylénchloridu (5 ml) a pyridinu (15 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,41 ml, 5,30 mol) a trietylamín (0,74 ml, 5,30 mol) v ľadovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ľadovom kúpeli bola zmes miešaná pri replote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, bol pridaný metanoi (1 ml) a reakčná zmes bola miešaná pri

394 teplote miestnosti 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na silikagélovej kolóne počas použitia etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku l-(4-N-metylkarbamoyl-1,3-oxazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (253 mg, výťažok 86%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR	(400	M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,78	(1H, s), 6,80	(1H,
brs), 5,41	až	5,35 (1H, m), 4,48 (2H, dd,	J= 6,6, 10,3	Hz) ,
4,30 (2H,	dd,	J=4,4, 10,3 Hz), 3,10 (3H,	s), 2,94 (3H	, d,
J=5, 1 Hz) .

(7) 3-Acetyltio-l-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín Do roztoku 1-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (252 mg, 0,92 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 21(6)) v dimetylformamide (12 ml) bol pridaný tioacetát draselný (0,63 g, 5,52 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 8 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-N-metylkarbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (136 mg, výťažok 58%) ako biela pevná látka.

	^-NMR	(500 M Hz, CDCI3): δ	(ppm)	7,75	(1H,	s),	6,79	(1H,
brs (	1, 4,55	(2H, t, J=8,4 Hz), 4,	4 3 až	4,37	(1H,	m) ,	4,02	(2H,
dd,	J=5,8,	8,9 Hz), 2,94 (3H, d,	J=5,1	Hz) ,	2,36	(3H,	s) .

Referenčný príklad 22

3-Acetyltio-l-(4-N-karbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín

395

AcS

N// zCONH, (1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-karbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-etoxykarbonyl-1,3-oxazol-2-yl)azetidínu (1,70 g, 3,77 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 21(3)) v benzéne (38 ml) bol pridaný roztok 0,67M metylamínu-trimetylhliníka v benzéne (13,7 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná vo vodnom kúpeli (50°C) 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (100 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a vodu. Získaná organická vrstva bola dostatočne premytá nasýteným vodným roztokom sodného a nasýteným vysušená cez bezvodý filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-terc. butyldifenylsilyloxy-1-(4-karbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (0,83 g, výťažok 52%) ako biela pevná látka.

^XH-NMR (500 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,75 (1H, s), 7,61 (4H, d, J=6,7 Hz), 7,47 až 7,36 (6H, m), 6,72 (1H, brs), 5,69 (1H, brs), 4,74 až 4,69 (1H, m), 4,12 (2H, t, J=6,7 Hz), 4,05 (2H, dd,

J=5,0, 7,8 Hz), 1,06 (9H, s).

hydrogénuhličitanu chloridu sodného, vodným roztokom síran horečnatý, (2) 1-(4-Karbamoyl-l·,3-oxazol-2-yl)-3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-karbamoyl-l, 3-oxazol-2-yl) azetidínu (1,30 g, 3,08 mol) v tetrahydrofurane (60 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (3,1 ml) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná

396 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku 1-(4-karbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (0,43 g, výťažok 75%) ako biela pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CD₃OD) : δ (ppm) 7,87 (IH, s), 4,70 až 4,65 (IH, m), 4,34(2H, dd, J=6,6, 9,5 Hz), 3,94(2H,dd, J=5,9, 9,5 Hz).

(3) 1-(4-Karbamoyl-l,3-oxazol-2-yl) -3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-karbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (423 mg, 2,31 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 22(2)) v zmesi metylénchloridu (10 ml) a pyridínu (30 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,90 ml, 11,55 mol) a trietylamín (1,60 ml, 11,55 mol) v ladovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ladovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, metanol (1 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku 1-(4-karbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (470 mg, výtažok 78%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CD₃OD) : δ (ppm) 7,91 (IH, s), 5,45 až 5,42 (IH, m), 4,51 (2H, dd, J=6,6, 9,5 Hz), 4,28 (2H, dd, J=4,4, 9,5 Hz), 3,16 (3H, s).

(4) 3-Acetyltio-l-(4-karbamoyl-l, 3-oxazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 1-(4-karbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (469 mg, 1,80 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 22(3)) v dimetylformamide (23 ml)

397 bol pridaný tioacetát draselný (1,23 g, 10,80 mol) pri teplote miestnosti a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 8 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metánolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyl-tio-l-(4-karbamoyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (275 mg, výťažok 63%) ako biela pevná látka.

^’H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : 5 (ppm) 7,79 (1H, s), 6,69 (1H, brs), 5,60 (1H, brs), 4,56 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,44 až 4,37 (1H, m), 4,03 (2H, dd, J=5,l, 8,8 Hz), 2,36 (3H, s).

Referenčný príklad 23

3-Acetyltio-l-(4-kyano-l,3-oxazol-2-yl)azetidín

CN

AcS

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-kyano-l,3-oxazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-1,3-oxazol-2-yl)azetidínu (357 g, 0,79 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 21(3)) v benzéne (8 ml) bol pridaný roztok 0,67M metylamínu-trimetylhliníka v benzéne (2,8 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná vo vodnom kúpeli (60°C) 7 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (10 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a vodu. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a

398 nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia hexán : etylacetátu (5:1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-kyano-1,3-oxazol-2-yl)azetidínu (130 mg, výťažok 41%) ako bezfarebný olej.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 7,66 (IH, s), 7,60 (4H, d, J=8,l Hz), 7,48 až 7,38 (6H, m), 4,73 až 4,70 (IH, m), 4,14 (2H, dd, J=6,6, 8,8 Hz), 4,08 (2H, dd, J=5,l, 9,5 Hz), 1,06 (9H, s).

(2) 1 -(4-Kyano-l,3-oxazol-2-yl)-3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-kyano-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (0,61 g, 1,51 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 23(1)) v tetrahydrofurane (30 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (1,5 ml) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku 1-(4-kyano-l,3-oxazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (0,21 g, výťažok 86%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,70 (IH, s), 4,83 až 4,81 (IH, m), 4,40 (2H, dd, J=6, 6, 9,5 Hz), 4,06 (2H, dd, J=4,4, 8,8 Hz), 2,26 (IH, d, J=5,9 Hz).

(3) 1-(4-Kyano-l,3-oxazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-kyano-l,3-oxazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (214 mg, 1,30 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 23(2)) v zmesi metylénchloridu (10 ml) a pyridínu (5 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,50 ml, 6,50 mol) a trietylamín (0,90 ml, 6,50 mol) v ladovom kúpeli. Pc 10 minútovom miešaní zmesi v ladovom kúpeli bola výsledná zmes miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie,

399 metanol (1 ml) bol pridaný v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku l-(4-kyano-1,3-oxazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (310 mg, výťažok 98%) ako bezfarebný olej.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,76 (IH, s), 5,42 až 5,36 (IH, m), 4,53 (2H, dd, J=6,6, 11,0 Hz), 4,34 (2H, dd, J=4,4, 11,0 Hz) , 3,11 (3H, s) .

(4) 3-Acetyltio-l-(4-kyano-l,3-oxazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 1-(4-kyano-l,3-oxazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (309 mg, 1,27 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 23(3)) v dimetylformamide (15 ml) bol pridaný tioacetát draselný (0,87 g, 7,62 mol) pri teplote miestnosti. Reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (2:1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-kyano-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (157 mg, výťažok 55%) ako bezfarebný olej.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,72 (IH, s), 4,60 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,45 až 4,38 (IH, m), 4,07 (2H, dd, J=5,9, 8,8 Hz), 2,37 (3H, s).

Referenčný príklad 24

3-t-Acetyltio-l-(4-kyano-l,3-oxazol-2-yl)azetidín

400 (1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-azetidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilvloxy-l-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,0 g, 2,14 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (50 ml) bol pridaný roztok 0,67M azetídín-trimetylhliníka v benzéne (4,6 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod refluxom 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (50 ml) a etylacetát (100 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola extrahovaná etylacetátom. Organická vrstva bola dostatočne premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-azetidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (0,60 g, výťažok 55%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,62 (4H, dd, J=8,0, 1,4 Hz), 7,51 až 7,36 (6H, m), 7,42 (IH, s), 4,80 až 4,68 (IH, m), 4,56 (2H, t, J=7,7 Hz), 4,16 (2H, t, J=7,7 Hz), 4,09 (2H, t, J=8,7 Hz), 4,00 (2H, dd, J=8,7, 4,9 Hz), 2,28 (2H, kvintet, J=7,7 Hz), 1,06 (9H, s).

(2) 1-(4-Azetidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilvloxy-l-(4-azetidinokarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (0,60 g, 1,18 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 24(1)) v bezvodom tetrahydrofuráne (25 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (1,42 ml, 1,42 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi

401 etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia 5% metanolu v etylacetáte ako eluentu za vzniku l-(4-azetidinokarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (242 mg, výťažok 86%) ako biela pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,35 (1H, s), 4,86 až 4,78 (2H, t, J=7,7 Hz), 4,30 (2H, dd, J=9,5, 6,6 Hz), 4,16 (2H, t, J=7,7 Hz), 3,93 (2H, dd, J=9,5, 5,0 Hz), 2,29 (2H, kvintet, J=7,7 Hz), 1,95 až 1,5 (neostrý, obsahujúci 1H OH skupiny).

(3) 1-(4-Azetidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-azetidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (242 mg, 1,01 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 24(2)) v metylénchloride (10 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,43 ml, 3,04 mol) a trietylamín (0,24 ml, 3,04 mol) v ladovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ladovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Do zvyšku bol pridaný izopropyléter a výsledná zmes bola filtrovaná za vzniku 1-(4-azetidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (302 mg, výťažok 94%) ako bledožltá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,44 (1H, s), 5,46 až 5,38 (1H, m), 4,58 (2H, t, J=7,8 Hz), 4,43 (2H, ddd, J=9,6, 6,6, 1,0 Hz), 4,24 (1H, ddd, J=9,6, 4,6, 1,0 Hz), 4,17 (2H, t, J=7,8 Hz), 3,10 (3H, s), 2,30 (2H, kvintet, J=7,8 Hz).

402 ( 4 ) 3-Acetyltio-l- ( 4-azetidinokarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl) azetidín Do roztoku 1-(4-azetidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (302 mg, 0,95 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 24(3)) v dimetylformamide (10 ml) bol pridaný tioacetát draselný (0,65 g, 5,70 mol) pri teplote miestnosti a reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 6 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola dostatočne premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2 : i) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-azetidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (247 mg, výťažok 87%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M	Hz,	CDC1₃) :	δ (ppm) 7,4C (IH, s)	, 4,57 (2H, t,
J-7,8 Hz), 4,51 (	2H,	t,	J-8,	4 Hz) , 4,46 až 4,36	(IH, m), 4,16
(2H, t, J-7,8 Hz)	, 3,	96	(2H,	dd, J=8,4, 5,3 Hz),	2,36 (3H, s),
2,29 (2H, kvintet,	J-7	,8 Hz).

Referenčný príklad 25

3-Acetyltio-l- ( 4-tiomorfolinokarbonyl-l, 3-tiazoi-2-yl) azetidín

CO-N S

AcS

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-l-(4-tiomorfolinokarbonyl-1,3-tiazcl-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,0 g, 2,14 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (50 ml) bol pridaný roztok 0,67M tiomorfolinc-trimetylhliníka v benzéne (4,6 ml) pri

403 teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod refluxom 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (50 ml) a etylacetát (100 ml) boli pridané do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes bola extrahovaná etylacetátom. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne počas použitia n-hexán : etylacetátu (1:1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1- (4-tiomorfolino-karbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,16 g, výťažok 98%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,32 (4H, dd, J=7,9, 1,4 Hz), 7,54 až 7,35 (6H, m), 7,07 (IH, s), 4,80 až 4,70 (IH, m), 4,10 (2H, dd, J=8,8, 6,5 Hz), 4,10 až 3,86 (6H, m obsahujúci 2H, dd na 4,00, J=8,8, 4,8 Hz), 2,80 až 2,55 (4H, m), 1,06 (9H, s).

(2 ) 1- ( 4-Tiomorfolinokarbonyl-l, 3-tiazol-2-l) -3-hydroxyazetidín Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-tiomorfolinokarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,16 g, 2,10 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 25(1)) v bezvodom tetrahydrofuráne (35 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (2,52 ml, 2,52 mol) a reakčná zmes bola miešaná 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku a zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku l-(4-tiomorfolinokarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (599 mg, výťažok 100%) ako biela pevná látka.

^XH-NMR	(4 00	M Hz, CDC1₃) : δ (ppm)	7,09	(IH,	s) ,	4,89	až 4,77
(IH, m),	4,32	(2H, dd, J=9,l, 6,7	Hz) ,	4,10	až	3, 90	(6H, m
obsahujúci	2H,	dd na 3,96, J=9,l, 4,3	Hz) ,	2,80	až	2,58	(4H, m),

2,50 (IH, br s) .

404 (30 ml) bol a trietylamín (3) 1-(4-Tiomorfolinokarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-tiomorfolinokarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (599 g, 2,50 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 25(2)) v metylénchloride pridaný metánsulfonylchlorid (0,49 ml, 6,30 mol) (0,88 ml, 6,30 mol) v ľadovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ľadovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 40 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia 5% metánolu v etylacetáte ako eluentu počas vzniku 1-(4-tíomorfolinokarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (709 mg, výťažok 93%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,17 (IH, s), 5,46 až 5,38 (IH, m), 4,45 (2H, ddd, J=9,8, 6,7, <1,1 Hz), 4,26 (2H, ddd,

J=9,8, 4,4, 1,1 Hz), 4,08 až 3,93 (4H, m), 3,11 (3H, s), 2,80 až 2,60 (4H, m).

(4) 3-Acetyltio-1-(4-tiomorfolinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín

Do roztoku 1-(4-tiomorfolinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (709 g, 1,95 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 25(3)) v dimetylformamide (20 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,34 g, 11,7 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu

405 sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : n-hexánu : metylénchloridu (1 : 1 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-tiomorfolinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (413 mg, výťažok 64%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 7,13 (1H, s), 4,53 (2H, t, J=8,4 Hz), 4,48 až 4,40 (1H, m), 4,13 až 3,86 (6H, m obsahujúci 2H, dd na 3,98, J=8,4, 5,2 Hz), 2,80 až 2,60(4H,m), 2,36(3H, s).

Referenčný príklad 26

3-Acetyltio-l-(4-pyrolidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

AcS

CO-N (1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-pyrolidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,00 g, 2,14 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (50 ml) bol pridaný roztok 0,67M pyrolidín-trimetylhliníka v benzéne (7,6 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod refluxom 6 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (50 ml) a etylacetát (100 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po pridaní etylacetátu bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.

406 butyldifenylsilyloxy-1-(4-pyrolidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidínu (775 mg, výťažok 78%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M	Hz,	CDCI3)	: δ	(ppm) 7,70 až 7,56	(4H, m),	7,35
až 7,50 (6H, m), 7	,21	(1H, s	) ,	4,80 až 4,70 (1H, m)	, 4,18 až	4,06
(2H, m), 4,00 (2H,	dd,	J= 8,	6,	5,1 Hz) , 3,80 (2H,	t, J= 6,5	Hz) ,
3,60 (2H, t, J=6,5	Hz)	, 1,83	až	1,98 (4H, m) , 1,06	(9H, s).

(2) 3-Hydroxy-1-(4-pyrolidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butvldifenylsilyloxy-l-(4-pyrolidinokarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (775 mg, 1,58 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 26(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (30 ml) bol pridaný roztok ľ, OM tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (2,01 ml, 2,01 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát -> etylacetát : metanolu (20 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-(4-pyrolidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-azetidínu (290 mg, výťažok 72%) ako biela pevná látka.

\H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,42 (1H, s), 4,88 až 4,78 (1H, m), 4,32 (2H, dd, J= 9,0, 6,8 Hz), 3,95 (2H, dd, J=9,0, 4,3 Hz), 3,82 (2H, t, J=6,5 Hz), 3,61 (2H, t, J=6,5 Hz), 2,43 (1H, d, J=6,8 Hz), 1,83 až 1,97 (4H, m).

(3) 3-Metánsulfonyloxy-l-(4-pyrolidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-(4-pyrolidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (290 mg, 1,14 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 26(2)) v metylénchloride (9 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,30 ml, 5,12 mol) a trietylamín (0,70 ml, 5,12 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu

407 sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu : etylacetát (1 : 1) -> etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-metánsulfonyloxy-l-(4-pyrolidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (335 mg, výťažok 89%) ako bledožltá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,33 (1H, s), 5,48 až 5,38 (1H, m), 4,45 (2H, ddd, J=10,l, 6,6, 1,2 Hz), 4,26 (2H, ddd, J=10,l, 4,4, 1,1 Hz), 3,82 (2H, t, J=6,6 Hz), 3,62 (2H, t, J=6,6 Hz), 3,10 (3H, s), 2,00 až 1,83 (4H, m).

(4) 3-Acetyltio-l-(4-pyrolidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-(4-pyrolidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín (335 mg, 1,01 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 26(3)) v dimetylformamide (15 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,10 g, 8,80 mol) pri teplote miestnosti a reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu , sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu za vzniku 3-acetyltio-l-(4-pvrolidinokarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (235 mg, výťažok 75%) ako bledohnedá pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,28 (1H, s), 4,52 (2H, dd,

J=8,4, 8,4 Hz), 4,39 až 4,48 (1H, m), 3,98 (2H, dd, J=8,4, 5,2

Hz), 3,82 (2H, t, J=6,5 Hz), 3,61 (2H, t, J=6,5 Hz), 2,36 (3H,

s) , 1, 98 až 1, 82 (4H, m) .

408

Referenčný príklad 27

3-Acetyltio-l-(4-piperidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-piperidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,00 g, 2,14 mol) (získaného pódia opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (50 ml) bol pridaný roztok 0,67M piperidín-trimetylhliníka v benzéne (7,3 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod refluxom 5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (50 ml) a etylacetát (100 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po pridaní etylacetátu bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1 : 2) ako eluentu počas vzniku 3-terc. butyldifenylsilyloxy-1-(4-piperidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)

azetidínu (607	mg, výťažok 56%)	1 ako	bledohnedá	pevná látka.
^’H-NMR (400	M Hz, CDC1₃) : δ	(ppm)	7,61 (4H,	dd, J=6,2 Hz),	7,	35
až 7,50 (6H, m)	, 6,95 (1H, s),	4,78	až 4,70 (1H, m), 4,17 až	4,	05
(2H, m), 4,01	(2H, dd, J=8,6,	4,9	Hz), 3,64	(4H, t, J=5, 4	Hz	) r

1,75 až 1,48 (6H, m), 1,06 (9H, s).

(2) 3-Hydroxy-1-(4-piperidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butvldifenylsilyloxy-l-(4-piperidinokarbony1-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (607 mg, 1,20 mol)

409 (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 27(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (25 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumf luoridu v tetrahydrofurane (1,40 ml, 1,40 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát -» etylacetát : metanolu (9:1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-(4-piperidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-azetidínu (310 mg, výťažok 97%) ako biela pevná látka.

’-H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 6,97 (IH, s), 4,87 až 4,77 (IH, m), 4,33 (2H, ddd, J=9,8, 6,6, 1,1 Hz), 3,96 (2H, dd,

J=9,8, 4,4 Hz), 3,57 až 3,72 (4H, t, J=5,4 Hz), 1,81 až 1,45 (6H, m) .

(3) 3-Metánsulfonyloxy-l-(4-piperidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-(4-piperidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (310 mg, 1,16 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 27(2)) v metylénchloride (10 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,27 ml, 3,48 mol) a trietylamín (0,49 ml, 3,48 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-metánsulfonyloxy-l-(4-piperidinokarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (346 mg, výťažok 86%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,06 (IH, s), 5,37 až 5,47 (IH, m), 4,46 (2H, dd, J=9,8, 6,7 Hz), 4,27 (2H, dd, J=9,8, 4,3

Hz), 3,65 (4H, t, J=5,2 Hz), 3,10 (3H, t, J=5,2 Hz), 1,78 až

410

1,47 (6Η, m).

(4) 3-Acetyltio-l-(4-piperidinokarbonyi-1,3-tiazol-2-yl) azetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-(4-piperidinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (346 mg, 1,00 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 27(3)) v dimetylformamide (15 ml) bol pridaný tioacetát draselný (687 g, 6,0i mol) pri teplote miestnosti. Reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C) 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzí etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-piperidinokarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)-azetidínu (276 mg, výťažok 85%) ako bledohnedá pevná látka.

^rH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,02 (IH, s), 4,54 (2H, dd, J=8,5 Hz), 4,39 až 4,49 (IH, m), 3,99 (2H, dd, J=8,5, 5,4 Hz), 3,65 (4H, t, J=5,4 Hz), 2,36 (3H, s), 1,90 až 1,40 (6H, m).

Referenčný príklad 28

3-Acetyltio-l-(4-N-cyklopentylkarbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl) azetidín

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-cyklopropylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,00 g, 2,14 mol) (získaného podľa

411 opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (50 ml) bol pridaný roztok 0,67M cyklopropylamínu-trimetylhliníka v benzéne (7,20 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zahrievaná pod refluxom 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (50 ml) a etylacetát (100 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po pridaní etylacetátu bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1:2) ako eluentu počas vzniku 3-terc. butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-cyklopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (979 mg, výťažok 90%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,62 až 7,62 (4H, m), 7,33 až 7,50 (6H, m), 7,36 (1H, s), 4,80 až 4,68 (1H, m), 4,18 až

4,06 (3H, m), 4,02 (2H, dd, J=8,2, 5,8 Hz), 3,80 až 3,70 (1H, m), 1,06 (9H, s), 0,83 (1H, t, J=6,9 Hz), 0,82 (1H, t, J=6,9 Hz), 0,70 až 0,58 (2H, m).

(2) 1-(4-N-Cyklopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-cyklopropylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (907 mg, 1,94 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 28(1)) v bezvodom tetrahydrofuráne (40 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (2,30 ml, 2,30 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý,

412 filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku l-(4-N-cyklopropylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (367 mg, výťažok 81%) ako biela pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,37 (IH, s), 7,23 (IH, s), 4,67 až 4,80 (IH, m), 4,32 (2H, dd, J=9,0, 6,7 Hz), 3,96 (2H, dd, J=9,0, 4,3 Hz), 2,82 až 2,70 (IH, m), 0,84 (IH, t, J=7,1 Hz), 0,83 (IH, t, J=7,1 Hz), 0,55 až 0,70 (2H, m).

(3) 1-(4-N-Cyklopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-N-cyklopropylkarbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (376 mg, 1,57 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 28(2)) v metylénchloride (10 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,36 ml, 4,71 mol) a trietylamín (0,66 ml, 4,71 mol) v ľadovom kúpeli a reakčná zmes bola miešaná 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok, bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1:1) ako eluentu počas vzniku 1-(4-N-cyklopropylkarbamoyl-i,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (343 mg, výťažok 88%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,45 (IH, s), 7,18 (IH, s),

5, 48	až 5,36 (IH, m), 4,44	(2H, dd,	J=10,2,	6, 6	Hz), 4,26 (2H,
dd,	J=10,2, 4,4 Hz), 3,11 i	(3H, s),	2,91 až	2,79	(IH, m), 0,85
(IH,	d, J=6,9 Hz) , 0,84 (IH,	d, J=6,9	Hz), 0,	72 až	0, 66 (2H, m) .

(4 ) 3-Acetyltio-l-(4-N-cyklopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

413

Do roztoku 1-(4-N-cyklopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (433 mg, 1,31 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 28(3)) v dimetylformamide (20 ml) bol pridaný tioacetát draselný (895 mg, 7,84 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C) 5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-N-cyklopropylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (343 mg, výťažok 88%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,14 (IH, s), 7,20 (IH, br s), 4,52 (2H, t, J=8,6 Hz), 4,49 až 4,38 (IH, m), 3,98 (2H, dd, J—8,6, 5,9 Hz), 3,98 (2H, dd, J=8,6, 5,9 Hz), 2,90 až 2,82 (IH, m), 2,36 (3H, s), 0,84 (IH, t, J=7,0 Hz), 0,83 (IH, t, J=7,0 Hz), 0,70 až 0,56 (2H, m).

Referenčný príklad 29

3-Acetylťio-l-(4-N-cyklobutylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

AcS

CONH· (1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-l-(4-N-cyklobutylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-N-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,00 g, 2,14 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (50 ml) bol pridaný roztok 0,67M cyklobutylamínu-trimetylhliníka v benzéne (7,30 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes

414 bola zohrievaná pod refluxom 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (50 ml) a etylacetát (100 ml) boli pridané do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po pridaní etylacetátu bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu počas vzniku 3- terc.butyldifenylsilyloxy-1- (4-N-cyklobutylkarbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidínu (965 mg, výťažok 87%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,62 (4H, d, J=8,0 Hz), 7,28 až 7,39 (6H, m), 7,34 (1H, s), 4,70 až 4,80 (1H, m), 4,58 až 4,46 (1H, m), 4,11 (2H, dd, J=8,8, 6,5 Hz), 4,02 (2H, dd, J=8,8, 4,0 Hz), 2,35 až 2,20 (2H, m), 2,05 až 1,92 (2H, m), 1,69 až 1,80 (2H, m), 1,07 (9H, s) .

(2)1-( 4-N-Cyklobutylkarbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl) -3-hydroxyazetidín Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-N-cyklobutylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (966mg, 1,86 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 29(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (40 ml) bol pridaný roztok 1,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (2,20 ml, 2,20 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1 : 1) —> etylacetátu ako eluentu počas vzniku l-(4-N-cyklobutylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (433

415 mg, výťažok 95%) ako biela pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,35 (1H, s), 4,89 až 4,78 (1H, m), 4,60 až 4,45 (1H, m), 4,34 (2H, dd, J=9,3, 6,7 Hz), 3,96 (2H, dd, J=9,3, 6,7 Hz), 2,32 až 2,48 (2H, m), 2,48 až 2,32 (1H, m), 1,72 až 1,68 (2H, m).

(3) 1-(4-N-Cyklobutylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-{4-N-cyklobutylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidín (433 mg, 1,71 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 29(2)) v metylénchloride (10 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,30 ml, 5,12 mol) a trietylamín (0,70 ml, 5,12 mol) v ladovom kúpeli a reakčná zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku 1-(4-N-cyklobutylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (567 mg, výťažok 100%) ako bledožltá pevná látka.

^rH-NMR (400 M Hz, CDCI3): δ (ppm) 7,43 (1H, s), 5,48 až 5,38 (1H, m), 4,60 až 4,38 (3H, m obsahujúci 4,47 (2H, dd, J=9,6, 6,6 Hz)), 4,28 (2H, dd, J=9,6, 4,6 Hz), 3,11 (3H, s), 2,48, 2,33 (2K, m), 2,07 až 1,92 (2H, m), 1,85 až 1,68 (2H, m).

(4) 3-Acetyltio-l-(4-N-cyklobutylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín

Do roztoku 1-(4-N-cyklobutylkarbamoyl-l,3-tiazol-2~yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (567 mg, 1,71 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 29(3)) v dimetylformamide (10 ml)

416 bol pridaný tioacetát draselný (1,17 g, 10,3 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C) cez noc. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1 : 3) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-N-cyklobutylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (318 mg, výťažok 75%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,33 (1H, s), 4,62 až 4,37 (4H, m obsahujúci 4,54 (2H, t, J=8,6 Hz), 4,00 (2H, dd, J=8,6, 2,5 Hz)), 2,31 až 2,48 (5H, m obsahujúci 2,37 (3H, s)), 2,07 až

1,93 (2H, m), 1,84 až 1,67 (2H, m).

Referenčný príklad 30

3-Acetyltio-1-[4-(4-metylpiperazín-1-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-l-[4-(4-metylpiperazín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,00 g, 2,14 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(1)) v toluéne (50 ml) bol pridaný roztok C,67M 1-metylpiperazín-trimetylhliníka v toluéne (7,40 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod refluxom 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (50 ml) a etylacetát

417 (100 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po pridaní etylacetátu bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-[4-(4-metylpiperazín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (941 mg, výťažok 85%) ako bledohnedá pevná látka.

'H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,62 (4H, dd, J=8,0, 1,4

Hz), 7,50 až 7,36 (6H, m), 7,08 (1H, s), 4,10 (2K, dd, J=10,3, 6,9 Hz), 4,00 (2H, dd, J=10,3, 5,0 Hz)), 3,98 až 3,65 (4H, m), 2,63 až 2,42 (4H, m), 2,37 (3H, m), 1,06 (9H, s).

(2) 3-Hydroxy-l-[4-(4-metylpiperazín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-[4-(4-metylpiperazín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (941 mg, 1,81 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 30(1)) v bezvodom tetrahydrofuráne (47 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (2,17 ml, 2,17 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (3:1) ako eluentu za vzniku 3-hydroxy-1- [4 - (4-metylpiperazín-l-karbonyl) -1,3-1 iazol-2-yl]azetidínu (422 mg, výťažok 83%) ako biela pevná látka.

'H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,01 (1H, s), 4,88 až 4,80 (1H, m), 4,26 (2H, dd, J=8,6, 7,1 Hz), 3,96 (2H, dd, J=8,6, 4,8

Hz), 3,89 až 3,68 (4H, m), 2,80 až 2,58 (4H, m), 2,31 (3H, s).

418 (3) 3-Metánsulfonyloxy-l-[4-(4-metylpiperazín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-[4-(4-metylpiperazín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (422 mg, 1,49 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 30(2)) v metylénchloride (21 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,14 ml, 1,79 mol) a trietylamín (0,25 ml, 1,79 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : metanolu (3:1) ako eluentu počas vzniku 3-metánsulfonyloxy-1-[4-(4-metylpiperazín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-

-2-yl]azetidínu	(537 mg, výťažok	100%	) ako	bledožltá pevná látka.
¹H-NMR (400	M Hz, CDC1₃) : δ	(ppm)	7, 36	(IH, s) , 5,47 až 5,40
(IH, m), 4,4 6	(2H, dd, J=10,0,	6, 6	Hz) ,	4,27 (2H, dd, J=10,0,
4,3 Hz), 3,56 až 3,47 (4H, m),	3,11	(3H,	s), 2,96 až 2,86 (4H,
m) , 2,81 (3H,	s) -

(4) 3-Acetyltio-l-(4-(4-metylpiperazín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-[4-(4-metylpiperazín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (537 mg, 1,49 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 26(3)) v dimetylformamide (16 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,02 g, 8,94 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C) 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol·

419 vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-1-[4-(4-metylpiperazín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidínu (261 mg, výťažok 51%) ako bledohnedá pevná látka.

^’H-NMR (400 M Kz, CDCI3) : δ (ppm) 7,15 (IH, s), 4,53 (2H, t, J=8,5 Hz), 4,48 až 4,38 (IH, m), 3,98 (2H, dd, J=8,5, 5,4 Hz),

3,96 až 3,74 (4H, m), 2,63 až 2,42 (4H, m), 3,49 (6H, s).

Referenčný príklad 31

3-Acetyltio-l-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

(1) 1-terc.Butoxykarbonyl-3-metoxyazetidín

Roztok l-benzhydryl-3-hydroxyazetidínu (10,0 g, 41,8 mol) v metanole (300 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia (10,0 g) na aktívnom uhlí pri teplote miestnosti 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná, na odstránenie katalyzátora. Do filtrátu bol pridaný di-terc.butoxykarbónový anhydrid (18,2 g, 83,6 mol) a reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (l:l-> 1:2) ako eluentu počas vzniku 1-terc.butoxykarbonyl-3-hydroxyazetidínu (7,05 g, výťažok 97%). Následne, do roztoku 1-terc.butoxykarbonyl-3-hydroxyazetidínu (2,5 g, 14,4 mol) v dimetylformamide (125 ml) bol pridaný hydrid sodný (55% olejová disperzia) v ladovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ľadovom kúpeli bola výsledná zmes miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Do reakčnej zmesi bol pridaný metyljodid (1,79 ml, 28

420 mol) v ladovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ladovom kúpeli bola reakčná zmes miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej bol pridaný v ladovom kúpeli a reakčná zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2:1) ako eluentu počas vzniku 1-terc. butoxykarbonyl-3-metoxyazetidínu (2,18 g, výťažok 81%) ako bezfarebný olej.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 4,16 až 4,10 (IH, m), 4,09 až 4,03 (2H, m), 3,82 (2H, dd, J=10,2, 4,4 Hz), 3,28 (3H, s), 1,44 (9H, s) .

(2) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 1-terc.butoxykarbonyl-3-metoxyazetidínu (2,60 g, 13,9 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 31(1)) v 1,4-dioxane (26 ml) bol pridaný roztok 4N chlorovodíka v 1,4-. -dioxane (26 ml) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a do zvyšku bol pridaný etylacetát a diizopropyléter. Výsledná zmes bola filtrovaná a zvyšok bol premytý diizopropyléterom a vysušený počas zníženého tlaku za vzniku 3-metoxyazet idínhydrochloridu (1,84 g, výťažok 100%) ako biele kryštály. Následne, do roztoku 3-terc.

butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (500 mg, 1,07 mol) v toluéne (25 ml) bol pridaný roztok 0,67M

3-metoxyazetidín-trimetylhliníka v benzéne (3,21 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná ve

421 vodnom kúpeli (80°C) 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (20 ml) a etylacetát (50 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po pridaní etylacetátu bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-terc. butyl·difenyl·sil·yloxy-l-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (366 mg, výťažok 67%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,64 až 7,60 (4H, m), 7,49 až 7,38 (6H, m), 7,36 (1H, s), 4,78 až 4,70 (2H, m), 4,42 až 4,36 (1H, m), 4,32 až 4,25 (1H, m), 4,24 až 4,18 (1H, m), 4,09 (2H, t, J=7,3 Hz), 4,03 až 3,96 (3H, m), 3,33 (3H, s), 1,07 (9H, s).

(3) 3-Hydroxy-l-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidínu (870 mg, 1,71 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 31(2)) v bezvodom tetrahydrofuráne (45 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (2,06 ml, 2,06 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (9:1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidínu (481 mg, výťažok 100%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,38 (1H, s), 4,85 až 4,79

422 (1Η, m), 4,75 (1H, dd, J=10,3, 5,9 Hz), 4,41 (1H, dd, J=11,O, 2,9 Hz), 4,34 až 4,25 (3H, m), 4,22 (1H, tt, J=6,6, 4,4 Hz), 4,01 (lH,dd, J=10,3, 2,9 Hz), 3,93(2H,dd, J=8,8, 4,4 Hz), 3,32(3H, s).

(4) 3-Metánsulfonyloxy-l-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-i-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (480 mg, 1,71 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 31(3)) v metylénchloride (25 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (397 μΐ, 5,13 mol) a trietyiamín (719 μΐ, 5,13 mol) v ľadovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ľadovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (95 : 5) ako eluentu počas vzniku 3-metánsulfonyloxy-l-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (568 mg, výťažok 96%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,46 (1K, s), 5,45 až 5,39 (1H, m), 4,74 (1H, dd, J=10,6, 6,2 Hz), 4,47 až 4,37 (3H, m), 4,33 až 4,19 (4H, m), 4,04 až 3,99 (1H, m), 3,33 (3H, s), 3,10 (3H, s).

(5) 3-Acetyltio-l-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-[4-(3-metoxyazetídín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]-azetidínu (560 mg, 1,61 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 31(4)) v dimetylformamide (28 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,10 g, 9,67 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v

423 olejovom kúpeli (80°C) 4,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát -> etylacetát : metanolu (97 : 3) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-[4-(3-metoxy-azetidín-1-karbonyi)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (356 mg, výťažok 68%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,43 (1H, s), 4,73 (1H, dd J=10,3, 5,1), 4,51 (2H, t, J=8,l Hz), 4,46 až 4,37 (2H, m), 4,32 až 4,26 (1H, m), 4,21 (1H, tt, J=6,6, 4,4 Hz), 4,00 až 3,93 (2H, m), 3,78 až 3,72 (1H, m), 3,32 (3H, s), 2,36 (3H, s).

Referenčný príklad 32

3-Acetyltio-l-(4-fenylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-fenylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (2,00 g, 4,29 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 2(1)) v toluéne (100 ml) bol pridaný roztok 0,67M anilín-trimetylhliníka v benzéne (14,6 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod refluxom 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (100 ml) a etylacetát (200 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 3 hodiny. Po pridaní etylacetátu bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická

424 vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (2:1) ako eluentu za vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-fenyl-karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (2,20 g, výťažok 100%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDCla): δ (ppm) 7,73 až 7,61 (6H, m), 7,51 až 7,30 (9H, m), 7,14 až 7,08 (IH, m), 4,82 až 4,76 (IH, m), 4,14 (2H, dd, J=15,2, 8,2 Hz),4,06(2H, dd, J=8,9, 4,6 Hz), l,08(9H,s).

(2) 3-Hydroxy-l-(4-fenylkarbamoyl-l,3-tiazcl-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenyisilyloxy-l-(4-fenylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (2,20 g, 4,29 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 32(1)) v bezvodom tetrahydrofuráne (110 ml) bol pridaný roztok 1,OM tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (5,15 ml, 5,15 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l·-(4-fenylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl) azetidínu (1,18 g, výťažok 100%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 9,04 (IH, br s), 7,76 až 7,65 (2H, m), 7,51 až 7,37 (3H, m), 7,18 až 7,08 (IH, m), 4,90 až 4,80 (IH, m), 4,36 (2H, dd, J=9,l, 6,6 Hz), 3,99 (2H, dd, J=9,l, 4,3 Hz) .

(3) 3-Metánsulfonyloxy-1-(4-fenylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-(4-fenylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,18 g, 4,29 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 32(2)) v metylénchloride (60 ml) bol pridaný

425 metánsulfonylchlorid (0,50 ml, 6,44 mol) s trietylamín (0,90 ml, 6,44 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu : etylacetát (9:1) ako eluentu počas vzniku 3-metánsulfonyloxy-l-(4-fenylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,36 g, výťažok 89%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR	(400 M	Hz, CDC1₃) : δ (ppm)	8,98 (IH, br s) , 7,68	(2H,
d, J=7,6 Hz) , 7,55	(IH, s), 7,36 (2K,	d, J=8,0 Hz), 7,18 až	7,08
(IH, m),	5,50 až	5,40 (IH, m), 4,51	(2H, ddd, J=9,6, 6,6,	1,0

Hz), 4,32 (2H, ddd, J=9,6, 4,3, 1,0 Hz), 3,12 (3H, s).

(4) 3-Acetyltio-l-(4-fenylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-(4-fenylkarbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,28 g, 3,85 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 32(3)) v dimetylformamide (40 ml) bol pridaný tioacetát draselný (2,60 g, 23,1 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C) 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1:2) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-fenylkarbamoyl-1,3-tiazol-2-yl)-azetidínu (893 mg, výťažok 70%) ako bledohnedá pevná látka.

^lH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 9,01 (IH, br, s), 7,68 (2H, d, J=8,6 Hz), 7,35 (2H, t, J=7,5 Hz), 7,20 až 7,28 (IH, m), 4,58

426

Hz), 2,83 (3H, s).

Referenčný príklad 33

3-Acetyltio-l-{4 — [2 — (terc.butyldimetylsilyloxy) etylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidín

AcS

CONH (1) [2-(terc.Butyldifenylsilyloxy)etyl]karbamic acid benzyl ester

Do roztoku aminoetanolu (2,0 g, 32,7 mol) v metylénchloride (60 ml) bol pridaný chloromic acid benzyl ester (5,6 ml, 41,3 mol) a trietylamín (5,5 ml, 39,5 mol) v ľadovom kúpeli. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého rlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (3 : 2) ako eluentu počas vzniku benzylesteru (2-hydroxyetyl) karbamovej kyseliny (5,37 g, výťažok 840%) ako biela pevná látka. Následne, do roztoku (N-benzyloxykarbonyl)-2-aminoetanolu (5,37 g, 27,5 mol) v dimetylformamide (160 ml) bol pridaný terc.butyldifenylsilylchlorid (8,6 ml, 33,0 mol) a imidazol (2,3 g, 33,8 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, bol pridaný etanol a reakčná zmes bola miešaná 2 hodiny. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý

427 síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (5:1) ako eluentu počas vzniku benzylesteru [2- (terc.butyldifenylsilyloxy) etyl] karbamovej kyseliny (11,93 g, výťažok 100%) ako bezfarebný priehľadný sirup.

¹K-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,64 (4H, d, J=6,8 Hz), 7,46 až 7,28 (12H, m), 5,10 (2H, s), 3,73 (2H, t, J=4,9 Hz), 3,35 (2H, q, J=4,9 Hz), 1,05 (9H, s).

(2) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-l-{4-[2-(terc. butyldifenylsilyloxy)etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl·} azetidín

Roztok benzylesteru [2- (terc.butyldifenylsilyloxy) etyl] karbamovej kyseliny (3,01 g, 6,9 mol) (získanej podľa opisu v referenčnom poklade 33(1)) v metanole (150 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia na aktívnom uhlí (3,0 g) pri teplote miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná na odstránenie katalyzátora a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu : metanol (10 : 1) ako eluentu počas vzniku 2-(terc.butyldifenylsilyloxy)etylamínu (1,49 g, výťažok 72%) ako bledohnedý sirup. Následne, do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,16 g, 2,49 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (8,5 ml) bol pridaný roztok 0,67M 2-(terc.butyldifenylsilyloxy) etylamínu-trimetyihliníka v benzéne (6,42 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod refluxom 5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (50 ml) a etylacetát (200 ml) boli pridané do reakčnej zmesi a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po pridaní etylacetátu bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý

428 síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (3 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-{4- [2- (terc.

butyldifenylsilyloxy)etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,68 g, výťažok 94%) ako bledohnedá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,74 (IH, br t, J=4,6 Hz),

7, 67	(4H,	d, J=7,5	Hz), 7,60 (4H, d, J=7,5	Hz) , 7,42 až	7,32
(13H,	m) ,	4,78 až 4	,68 (IH, m), 4,08 (2H, t,	J=7,8 Hz) , 4,	03 až
3, 98	(2H,	m), 3,79	(2H, t, J=4,6 Hz), 3,56	(2H, t, J=4,6	Hz) ,
1,08	(9H,	s), 1,06 (	9H, s) .

(3) 3-Hydroxy-l-(4-hydroxyetylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-{4-[2-(terc. butyldifenylsilyloxy) etylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,68 g, 2,33 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 33(2)) v bezvodom tetrahydrofurane (75 ml) bol pridaný roztok 1, OM tetra-n-butyl-amóniumfluoridu v tetrahydrofurane (5,6 ml, 5,6 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-(4-hydroxyetylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (481,2 mg, výťažok 85%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CD₃OD) : δ (ppm) 7,39 (IH, s), 4,78 (IH, m), 4,31 (2H, dd, J=8,4, 7,0 Hz), 3,89 (2H, dd, J=8,4, 4,8 Hz), 3,67 (2H, t, J=5,9 Hz), 3,46 (2H, t, J=5,9 Hz).

(4) 1-{4-[2-(terc.Butyldimetylsilyloxy)etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-(4-hydroxyetylkarbamoyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (481,2 mg, 1,98 mol) (získaného podľa opisu v

429 referenčnom príklade 33(3)) v dimetylformamide (24,0 ml) bol pridaný terc.butyldimetylsilylchlorid (352 mg, 2,3 mol) a imidazol (116,3 mg, 2,4 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný metanol a reakčná zmes bola miešaná 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (2: 3) ako eluentu počas vzniku 1-(4-(2- (terc.butyldimetylsilyloxy) -etylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}-3-hyčroxyazetidínu (531,1 mg, výťažok 75%) ako bezfarebný priehľadný sirup.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,60 (1H, t, J=5,9 Hz), 7,35 (1H, s), 4,88 až 4,76 (1H, m), 4,30 (2H, dd, J=9,8, 7,8 Hz), 3,93 (2H, dd, J=9,8, 4,9 Hz), 3,75 (2H, t, J=5,9 Hz), 3,52 (2H, q, J=5,9 Hz), 2,85 (1H, d, J=6,8 Hz), 0,92 (9H, s), 0,08 (6H, s) .

(5) 1-(4-[2-(terc.Butyldimetylsiiyloxy)etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku l-(4-[2-(terc.butyldimetylsilyloxy)etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-3-hydroxyazetidínu (531,1 mg, 1,49 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 33(4)) v metylénchloride (26,6 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,3 ml, 3,9 mol) a trietylamín (0,52 ml, 3,7 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná v ladovom kúpeli hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol do reakčnej zmesi pridaný metanol a výsledná zmes bola miešaná 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený

430 chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu za vzniku 1-{4-[2-(terc. butyldimetylsilyloxy)etylkarbamoyi]-1,3-tiazol-2-yl}-3-metánsulfonyloxyazetidínu (647,1 mg, výťažok 100%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 7,54 (1H, br t, J=5,9 Hz), 7,44 (1H, s), 5,46 až 5,39 (1H, m), 4,43 (2H, dd, J=9,7, 6,8 Hz), 4,24 (2H, dd, J=9,7, 3,9 Hz), 3,76 (2H, t, J=5,9 Hz), 3,53 (2H, t, J=5,9 Hz), 3,11 (3H, s), 0,93 (9H, s), 0,08 (6H, s).

( 6) 3-Acetyltio-1- { 4-2 (terc. butyldimetylsilyloxy) e tyl karbamoyi] -1,3-tiazol-2-yl}-azetidín

Do roztoku 1-(4-[2-(terc.butyldimetylsilyloxy)etylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}-3-metánsulfonyloxyazetidínu (647,1 mg, 1,49 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 33(5)) v dimetylformamide (32,0 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,28 mg, 8,9 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (3 : 2) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-[2-[terc.butyldimetylsilyloxy)etylkarbamoyi]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (398,2 mg, výťažok 65%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,55 (1H, br t, J=5,4 Hz), 7,40 (1H, s), 4,51 (2H, dd, J=8,8, 7,8 Hz), 4,48 až 4,40 (1H, m), 3,96 (2H, dd, J-8,8, 4,9 Hz), 3,75 (2H, t, J=5,4 Hz), 3,52 (2H, q, J=5,4 Hz), 2,37 (3H, s), 0,92 (9H, s), 0,08 (6H, s).

431

Referenčný príklad 34

3-Acetyltio-l-{4- [ (IS)-1-fterc.butyldimetylsilyloxymetyl) propylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yljazetidín

AcS

CONH

OTBDMS (1) Benzylester[(IS)-1-(terc.butylóifenylsilyloxymetyl)propyl] karbamovej kyseliny

Do roztoku L-etylglycinolu (2,00 g, 22,4 mol) v metylénchloride (60 ml) bol pridaný benzylester kyseliny chrómovej (3,84 ml, 26,9 mol) a trietylamín (3,77 ml, 26,9 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2 : 1 -> 1 : 2 ) ako eluentu počas vzniku benzylesteru [(IS)-1-(hydroxymetyl)propyl] karbamovej kyseliny (4,27 g, 85%) ako bezfarebný olej. Následne, do roztoku benzylesteru [(IS)-1-(hydroxymetyl)propyl]karbamovej kyseliny (4,27 g, 19,1 mol) v dimetylformamide (128 ml) bol pridaný terc.butyldifenylsilylchlorid (5,97 ml, 22,9 mol) a imidazol (1,56 g, 22,9 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia

432 n-hexán : etylacetátu (6 : 1 —> 4 : 1 ) ako eluentu počas vzniku benzylesteru [(13)-1-( terc.butyldifenylsilyloxymetyl)propyl] karbamovej kyseliny (9,48 g, výťažok 100%) ako biela pevná látka.

''H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,65 až 7,60 (4H, m), 7,44 až 7,29 (11H, m), 5,09 (2H, s), 4,92 až 4,86 (IH, br d, J=8,8 Hz), 3,71 až 3,47 (3H, m), 1,68 až 1,60 (2H, m), 1,05 (9H, s), 0,88 (3H, t, J=7,3 Hz).

(2) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-[(1S)-1-(terc.

butyldifenylsilyloxymetyl) propyl karbamoyl ] -1,3-1 iazol-2-yl[azetidín

Roztok benzylesteru[(1S)-1-(terc.butyldifenylsilyloxymetyl) propyl]karbamovej kyseliny (3,70 g, 8,00 mol) (získaný podľa opisu v referenčnom príklade 34(1)) v metanole (185 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (3,70 g) pri teplote miestnosti 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná pre odstránenie katalyzátora a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchlorídu : metanol ( 9 : 1 ) ako eluentu za vzniku (1S)-1-(terc.butyldifenylsilyloxymetyl) propylamínu (2,32 g, výťažok 88%) ako bezfarebný olej. Následne, do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (2,00 g, 4,29 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (100 ml) bol pridaný roztok 0,67M (1S)-1-(terc.butyldifenylsilyloxymetyl) propylamínu-trimetylhliníka v benzéne (12,9 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod refluxom počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (100 ml) a etylacetát (200 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Reakčná zmes bola extrahovaná etylacetátom. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným

433 roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (6:1 —> 2:1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-[(1S)-1-(terc.

butyldifenylsilyloxymetyl)-propylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidínu (2,52 g, výťažok 79%) ako bledohnedá pevná látka.

^lH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,57 až 7,69 (8H, m), 7,28 až 7,46 (12H, m), 7,36 (1H, s), 4,69 až 4,74 (1H, m), 3,76 až

4,11 <5H, m), 3,74 (1H, dd, J=10,3, 2,9 Hz), 3,70 (1H, dd,

J=10,3, 4,1 Hz), l,08(9H, s), l,05(9H, s), 0,93 (3H,t, J=7,3 Hz).

(3) 3-Hydroxy-1-(4-[(1S)-1-(hydroxymetyl)-propylkarbamoyl]—

-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-{4-[(1 S)—1— - (terc.butyldifenylsilyloxymetyl) -propylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (2,52 g, 3,50 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 34(2)) v bezvodom tetrahydrofurane (126 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (8,40 ml, 8,40 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne. za použitia etylacetát -> etylacetát : metanolu (9 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-{4-[(1S)-1-(hydroxymetyl) propylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (947 mg, výťažok 100%) ako bledožltý olej.

^•H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,36 (1H, s), 4,86 až 4,75 (1H, m), 4,33 (2H, dd, J=8,l, 6,6 Hz), 4,02 až 3,91 (3H, m),

3,79 (1H, dd, J=ll,0, 1,2 Hz), 3,67 (1H, dd, J=ll,0, 6,6 Hz), 3,19 až 3,10 (1H, br s), 3,02 až 2,97 (1H, br s), 1,73 až 1,64 (2H, m), 1,00 (3H, t, J=7,3 Hz).

(4) 1-{4-[(1S)-1-(terc.Butyldimetylsilyloxymetyl)434

-propylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-3-hydroxyazetidín Do roztoku 3-hydroxy-l-{4-[(1S)-1-(hydroxymetyl)-propylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-azetidínu (940 mg, 3,50 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 34(3)) v dimetylformamide (47 ml) bol pridaný terc.

butyldimetylsilylchlorid (633 mg, 4,20 mol) a imidazol (286 mg, 4,20 mol) v ladovom kúpeli a reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2 : 1 —> 1 : 3 ) ako eluentu počas vzniku 1-(4-( (1S) -1- (terc.butyldimetylsilyloxymetyl) propyl-karbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}-3-hydroxyazetidínu (1,00 g, výťažok 74%) ako bledožltý olej.

1	H-NMR (400 M	Hz,	CDC1₃) : δ (ppm) 7,50 až	7,44	(1H, m) , 7,36
(1H,	s), 4,86 až 4	,79	(1H, m), 4,33 až 4,27 (2	H, m!	1 , 4,01 až 3,92
(3H,	m), 3,72 (1H,	dd	, J=9, 9, 2, 6 Hz) , 3, 65	(1H,	dd, J=9,9, 4,0
Hz) ,	1,70 až 1,60	(2H,	m), 0,95 (3H, t, J=7,3	Hz) ,	0,92 (9H, s),
0,06	(6H, s) .

(5)1-{4-[(1S)-1-( terc.Butyldimetylsilyloxymetyl)propylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-[(1S)-1-(terc.butyldimetylsilyloxymetyl) propylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-3-hydroxyazetidínu (1,00 mg, 2,59 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 34(4)) v metylénchloride (50 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (602 μΐ, 7,78 mol) a trietylamín (1,09 ml, 7,78 mol) v ladovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ladovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený

435 vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2 : 1-+1:2) ako eluentu počas vzniku 1-{4-[ (1S)-1-(terc.butyldimetylsilyloxymetyl) propylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-3-metánsulfonyloxyazetidínu (1,02 g, výťažok 85%) ako bledožltý olej.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) :	δ	(PPm)	7,44	(1H, s), 7,44	až 7,38
(1H, m), 5,45 až 5,39 (1H,	m)	, 4,47	až	4,40 (2H, m),	4,29 až
4,21 (2H, m), 4,02 až 3,95 1	(1H, m),	3,73	(1H, dd, J=10	,3, 2,9
Hz), 3,65 (1H, dd, J=10,3, 4	,4	Hz) ,	3,11	(3H, s) , 0,95	(3H, t,
J=7,3 Hz), 0,92 (9H, s) , 0,06	(	6H, s)

(6) 3-Acetyltio-l-{4- [ (1S) -1- f terc. butyldimetylsilyloxymetyl) propylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 1-(4-[ (1S)-1-(terc.butyldimetylsilyloxymetyl) propylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl]-3-metánsulfonyloxyazetidínu (1,02 g, 2,20 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 34(5)) v dimetylformamide (50 ml) bol pridaný tioacetát draseiný (1,51 mg, 13,2 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (4:1 -+ 2:1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l- {4-[(1S) -1- (terc .butylčimetylsilyloxymety 1) propylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (618 mg, výťažok 63%) ako bledohnedý olej.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 7,43 až 7,39 (1H, m), 7,40 (1H, s), 4,53 až 4,47 (2H, m), 4,46 až 4,41 (1H, m), 4,00 až

436

3,93 (3Η, m), 3,74 až 3,70 (IH, m), 3,67 až 3,62 (IH, m), 2,37 (3H, s), 1,72 až 1,56 (2H, m), 0,95 (3H, t, J=7,3 Hz), 0,91 (9H, s), 0,06 (6H, s).

Referenčný príklad 35

3-Acetyltio-l-{4-[(1 S)-2-(terc.butyldimetylsilyloxy)-1-metyletylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidín

AcS

CONH

OTBDMS (1) Benzylester[(IS)-2-(terc.butyldifenylsilyloxy)-1-metyl-etyl]karbamovej kyseliny

Do roztoku L-alaninolu (2,00 g, 26,6 mol) v metylénchloride (60 ml) bol pridaný benzylester kyseliny chrómovej (4,57 ml, 32,0 mol) a trietylamín (4,48 ml, 32,0 mol) v ľadovom kúpeli. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2 : 1 -> 1 : 2 ) ako eluentu počas vzniku benzylesteru [(IS)-2-hydroxy-l-metyl-etyl]karbamovej kyseliny (4,61 g, výťažok 83%) ako biele kryštály. Následne, do roztoku benzylesteru [(IS)-1-(hydroxymetyl)etyl]karbamovej kyseliny (4,61 g, 22,0 mol) v dimetylformamide (140 mi) bol pridaný terc.butylčifenylsilylchlorid (6,87 ml, 26,4 mol) a imidazol (1,80 g, 26,4 mol) v ľadovom kúpeli. Výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 6 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným

437 vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (8 : 1 —> 6:1) ako eluentu počas vzniku benzylesteru [(1S)-2-(terc.butyldifenylsilyloxy)-1-metyletyl] karbamamovej kyseliny (10,7 g, výťažok 100%) ako bezfarebný olej.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,67 až 7,60 (4H, m), 7,42 až 7,29 (11H, m), 5,10 (2H, s), 4,96 až 4,85 (1H, br s), 3,91 až 3,80 (1H, m), 3,67 (1H, dd, J=10,3, 2,6 Hz), 3,56 (1H, dd,

J=10,3, 3,7 Hz), 1,55 (3H, d, J=1 1,7 Hz), 1,09 (9H, s).

(2) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-[(1S)-2-(terc.

butyldifenylsilyloxy) -1-metyletylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Roztok benzylesteru [(1S)-2-(terc.butyldifenylsilyloxy)-1-metyletyl]karbamovej kyseliny (6,71 g, 15,0 mol) (získaný podía opisu v referenčnom príklade 35(1)) v metanole (340 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (6,71 g) pri teplote miestnosti 2,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná na odstránenie katalyzátora a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu -» metylénchloridu : metanol (85 : 15) ako eluentu počas vzniku (1S)-2-(terc.butyldifenylsilyloxy)-1-metyl-etylamínu (3,93 g, výťažok 84%) ako bledožltý olej. Následne, do roztoku 3-terc. butyldifenylsilyloxy-1- (4-etoxykarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl) azetidínu (2,0 g, 4,29 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (100 ml) bol pridaný roztok 0,67M (lS)-2- (terc.butyldifenylsilyloxy) -1-metyletylamínu-trimetylhliníka v benzéne (12,9 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod refluxom počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej

438 (100 ml) a etylacetát (200 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po pridaní etylacetátu bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetáru (6 : 1 -> 2 : 1 ) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-{4-[(1S) -2-(terc.butyldifenylsilyloxy)-1-metyletylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (2,77 g, výťažok 88%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,69 až 7,65 (4H, m), 7,61

až 7,57	(4H,	m) , 7	,46 až 7	,30 (12H, m),	7,	35 (1H, s), 4,75	až
4,68 (1H,	m) ,	4,28	až 4,18	(1H, m), 4,10	až	4,03 (H,m), 4,03	až
3,97 (2H,	m) ,	3,72	(1H, dd,	J=9,9, 4,1 Hz)		3,64 (1H, dd, J=9,	9,
3,3 Hz) ,	1,31	(3H,	d, J=6,6	Hz), 1,09 (9K,	s	), 1,05 (9H, s).

(3) 3-Hydroxy-l-[4-((1S)-2-hydroxy-l-metyletylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-{4-[(1S)-2-(terc. butyldifenylsilyloxy)-1-metyl-etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidínu (2,77 g, 3,77 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 35(2)) v bezvodom tetrahydrofuráne (140 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (9,06 ml, 9,06 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 3,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát —> etylacetát : metanolu (9 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-[4-((1S)-2-hydroxy-l-metyletylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (911 mg, výťažok 94%) ako biela pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) :

δ (ppm) 7,34 (1H, s), 7,26 až 7,10

439

(IH,	br	s) ,	4,86 až 4,77	(IH, m),	4,32 (2H	t	dd, J=8,8,	6, 6	Hz)
4,24	až	4,12	(lH,m), 3,99	až 3,92	(2H, m),	3,	79 až 3,71	(IH,	m)
3, 66	až	3, 58	(IH, m), 3,28	až 3,21	(IH, br	s)	, 2,99 až	2,92	(IH
br,	č, J	=5,1	Hz), 1,25 (3H,	d, J=7,	2 Hz) .

(4) 1— {4— [ (1S) -2- (terc.Butyldimetylsilyloxy) -l-metyletylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}-3-hydroxyazetidin

Do roztoku 3-hydroxy-l-[4-((lS)-2-hydroxy-l-metyletylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidínu (910 mg, 3,54 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 35(3)) v dimetylformamide (46 ml) bol pridaný terc.butyldimetylsilylchlorid (586 mg, 3,89 mol) a imidazol (265 mg, 3,89 mol) v ladovom kúpeli a reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 6 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 1 -> 1 : 4 ) ako eluentu počas vzniku 1-{4-[(1S) -2- (terc.butyldimetylsilyloxy) -l-metyletylkarbamoyl ] -1, 3-tiazol-2-yl}-3-hydroxyazetidínu (935 mg, výťažok 71%) ako bledožltý olej .

^XH-NMR (400 M Hz, CDCI3) *- δ (ppm) 7,48 až 7,42 (IH, br, d, J=8,8 Hz), 7,36 (IH, s), 4,86 až 4,79 (IH, m), 4,30 (2H, ddd, J=15,6, 5,9, 2,9 Hz), 4,34 až 4,27 (IH, m), 3,97 až 3,91 (2H, m), 3,68 (IH, dd, J=9,5, 4,4 Hz), 3,63 (IH, dd, J=9,5, 2,9 Hz), 1,25 (3H, d, J=7,3 Hz), 0,93 (9H, s), 0,07 (6H, s).

(5) l-{4-[(1S)-2-(terc.Butyldimetylsilyloxy)-1-metyietylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-{4-[(1S)-2-(terc.butyldimetylsilyloxy)-1-metyletylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-3-hydroxyazetidínu (930 mg,

440

2,50 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 35(4)) v metylénchloride (47 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (480 ul, 6,20 mol) a trietylamín (869 μΐ, 6,20 mol) v ladovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ladovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2 : 1 -> 1 : 2) ako eluentu počas vzniku 1-{4-[(IS)-2-(terc.

butyldimetylsilyloxy)-1-metyletylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-3-metánsulfonyloxyazetidínu (1,16 g, výťažok 100%) ako bledožltý olej .

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 7,43 (1H, s), 7,43 až 7,39

(1H,	br s), 5,44 až 5,39 I	:ih,	m) , 4,	43 (2H, ddd,	J=6,6,	5,9, 1,5
Hz) ,	4,27 až 4,21 (2H, m)	, 4	,21 až	4,13 (1H, m	) , 3,68	(1H, dd,
J=9,	5, 4,4 Hz), 3,63 (1H,	dd,	J=9,5,	2,9 Hz), 3,	11 (3H,	s), 1,25

(3H, d, J=6,6 Hz), 0,93 (9H, s), 0,07 (6H, s).

(6) 3-Acetyltio-l-{4-[(IS)— 2—(terc.butyldimetylsilyloxy) -1-metyletylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidín

Do roztoku 1-{4-[(IS)-2-(terc.butyldimetylsilyloxy)-1-metyletylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl} -3-metánsulfonyloxyazetidinu (1,16 g, 2,50 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 35(5)) v dimetylformamide (60 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,71 mg, 15,0 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku.

441

Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (4:1 -* 2:1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-[(IS)-2-(terc.butyldimetylsilyloxy)-1-metyletylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (709 mg, výťažok 60%) ako bledohnedý olej.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,45 až 7,40 (IH, br, s), 7,39 (IH, s), 4,54 až 4,47 (2H, m), 4,46 až 4,41 (IH, m), 4,20 až 4,15 (IH, m), 4,00 až 3,93 (2H, m), 3,67 (IH, dd, J=10,3, 4,4

Hz), 3,62 (IH, dd, J=10,3, 3,7 Kz) , 2,37 (3H, s), 1,24 (3H, d,

J=6,6 Hz), 0,92 (9H, s), 0,07 <6H, s).

Referenčný príklad 36

3-Acetyltio-l-{4-[(IS)-1-(terc.butyldimetylsilyloxy)-2-metylpropylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidín

CONH

OTBDMS

AcS· (1) Benzylester [(lS)-l-(terc.Butyldifenylsilyloxy)-2-metylpropyl]karbamovej kyseliny

Do roztoku L-valinolu (2,00 g, 19,4 mol) v metylénchloride (60 ml) bol pridaný benzylester kyseliny chrómovej (3,32 ml, 23,3 mol) a trietylamín (3,27 ml, 23,3 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 4,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2 : 1 -» 1:2) ako eluentu počas vzniku benzylesteru [(IS)-1-(hydroxymetyl)-2-metylpropyl]karbamovej kyseliny (4,56 g, výťažok 99%) ako biele kryštály. Následne, do

442 roztoku benzylesteru [(1S)-1-(hydroxymetyl)-2-metylpropyl] karbamovej kysliny (4,56 g, 19,2 mol) v dimetylformamide (140 ml) bol pridaný terc.butyldifenylsilylchlorid (6,00 ml, 23,1 mol) a imidazol (1,57 g, 23,1 mol) v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (8 : 1-+6:1) ako eluentu počas vzniku benzylesteru [(1S)-1-(terc. butyldifenylsilyloxy)-2-metylpropyl]-karbamovej kyseliny (10,1 g, výťažok 100%) ako biele kryštály.

	¹H-NMR	(4 00	M Hz, CDC1₃) : δ (	)ppm)	7,65 až 7,60 (	4H,	m) , 7,45
až	7,29 (	11H,	m) , 5,09 (2H, s),	4,92	až	4,84	! IH,	br	d, J=9,5
Hz)	, 3,71	(IH,	dd, J=10,3, 4,4	Hz) ,	3,66	(IH,	dd,	J=	10,3, 4,4
Hz)	, 3,55	až 3	,46 (IH, m), 1,99	až 1	, 87 l	)1H, m	), 1	, 05	(9H, s),

0,89 (6K, d, J=7,3 Hz).

(2) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-[(1S)-1-(terc.

butyldifenylsilyloxy)-2-metylpropylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Roztok benzylesteru [(lS)-l-(terc.butyldifenylsilyloxy)-2-metylpropyl]karbamovej kyseliny (7,14 g, 15,0 mol) (získanej podľa opisu v referenčnom príklade 36(1)) v metanole (215 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (7,14 g) pri teplote miestnosti 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná na odstránenie katalyzátora a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu : metanolu (98 :2-+9:1) ako eluentu počas vzniku (1S)-1-(terc.

443 butyldifenylsilyloxymetyl)-2-metylpropyiamínu (3,73 g, výťažok 73%) ako bezfarebný olej. Následne, do roztoku 3-terc. butyldifenylsilyloxy-1- (4-etoxykarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl) azetidínu (2,0 g, 4,29 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (100 ml) bol pridaný roztok 0,67M (1S)-1-(terc. butyldifenylsilyloxymetyl)-2-metylpropylamínu-trimetylhliníka v benzéne (12,9 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod refluxom počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (100 ml) a etylacetát (200 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po pridaní etylacetátu bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (6 : 1 -> 4 : 1 ) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-{4- [ (1S) -1-terc.butyldifenylsilyloxy) -2-metylpropylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-ylJazetidínu (1,98 g, výťažok 61%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,69 až 7,56 (8H, m), 7,44 až 7,31 (12H, m), 7,37 (IH, s), 4,74 až 4,67 (IH, m), 4,09 až 3,94 (4H, m), 3,87 až 3,78 (IH, m), 3,85 (IH, dd, J=10,3, 2,1 Hz), 3,67 (IH, dd, J=10,3, 3,9 Hz), 2,17 až 2,05 (IH, m), 1,09 (9H, s),l,06(9H, s), 0,99(3H, d,J=6,9 Hz), 0,97(3H, d, J=6,8 Hz).

(3) 3-Hydroxy-l-{4-[(1S)-1-(hydroxymetyl)-2-metylpropylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-{4-[(1S)-1-(terc. butyldifenylsilyloxy)-2-metyl-propylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidínu (1,98 g, 2,60 mol) (získaného pódia opisu v referenčnom príklade 36(2)) v bezvodom tetrahydrofurane (100 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane

444 (6,23 ml, 6,23 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát -» etylacetát : metanolu (95 : 5) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l - {4 - [ (1S) -1- (hydroxymetyl·) -2-metylpropylkarbamoyl ] -1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (755 mg, výťažok 100%) ako bezfarebný olej .

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,34 (IH, s), 7,35 až 7,3í (IH, br s), 4,84 až 4,75 (IH, m), 4,32 2H, dd, J=8,8, 6,8 Hz), 3,97 (IH, dd, J=8,8, 4,4 Hz), 3,94 (IH, dd, J=8,8, 4,4 Hz), 3,87 až 3,77 (2H, m), 3,73 (IH, dd, J=10,7, 6,8 Hz), 3,33 až 3,21 (IH, br s), 3,24 až 2,94 (IH, br s), 1,98 (IH, septet, J=6,8 Hz), 1,01 (3H, d, J=6,8 Hz), 0,98 (3H, d, J=6,8 Hz).

(4) l-{4- [ (1S.) -1- (terc.Butyldimetylsilyloxymetyl) -2-metylpropylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-(4-[(1S)-1-(hydroxymetyl)-2-metylpropylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (750 mg, 2,60 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 36(3)) v dimetylformamide (38 ml) bol pridaný terc.butyldimetylsilylchlorid (470 mg, 3,12 mol) a imidazol (212 mg, 3,12 mol) v ladovom kúpeli a reakčná zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola dostatočne premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2 : 1 —> 1 : 3 ) ako eluentu počas vzniku 1-{4-[ (1S)-1- (terc.butyldimetylsilyloxymetyl) -2-metyl-propylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}-3-hydroxyazetidínu (700 mg, výťažok 67%) ako bledožltý olej.

445 ¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,54 až 7,50 (IH, br d, J=9,8 Hz), 7,37 (IH, s), 4,86 až 4,80 (IH, m), 4,35 až 4,27 (2H, m), 3,98 až 3,92 (2H, m), 3,84 (IH, dd, J=9,8, 2,9 Hz), 3,84 až 3,79 (IH, m), 3,62 (IH, dd, J=9,8, 3,9 Hz), 2,00 (IH, septet, J=6,8 Hz), 0,98 (3H, d, J=6,8 Hz), 0,96 (3H, d, J=6,8 Hz), 0,91 (9H, s), 0,06 (6H, s).

(5) 1-{4-[(IS)-1-(terc.Butyldimetylsilyloxymetyl)-2-metylpropylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-[(IS)-1-(terc.butyldimetylsilyloxymetyl)-2-metylpropylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-3-hydroxyazetidínu (700 mg, 1,75 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 36(4)) v metylénchloride (35 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (406 μΐ, 5,25 mol) a trietylamín (736 μΐ, 5,25 mol) v ľadovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ľadovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2 : 1 —> 1 : 2) ako eluentu počas vzniku 1-(4-((15)-1-(terc.butyldimetylsilyloxymetyl)-2-metylpropylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl]-3-metánsulfonyloxyazetidínu (895 mg, výťažok 100%) ako bledožltý olej.

hí-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,50 až 7,45 (IH, br d, J=9,5 Hz), 7,44 (IH, s), 5,45 až 5,39 (IH, m), 4,43 (2H, ddd,

J=ll,0, 6,6, 1,5 Hz), 4,24 (2H, ddd, J=ll,0, 4,4, 1,5 Hz), 3,83 (IH, dd, J=10,7, 2,6 Hz), 3,84 až 3,79 (IH, m), 3,62 (IH, dd,

J=10,7, 4,8 Hz), 3,11 (3H, s), 2,04 až 1,94 (IH, m), 0,98 (3H, č, J=7,3 Hz), 0,96 (3H, d, J=6,6 Hz), 0,91 (9H, s), 0,06 (6H,s).

(6)3-Acetyltio-l-(4-[(IS)-1- (terc.butyldimetylsilyloxymetyl)446

-2-metylpropylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín Do roztoku 1-(4-[(1S)-1-(terc.butyldimetylsilyloxymetyl)-2-metylpropylkarbamoyl ] -1,3-tiazol-2-yl} -3-metánsulfonyloxyazet idí nu (890 mg, 1,75 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 36(5)) v dimetylformamide (45 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,20 g, 10,5 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola dostatočne premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej etylacetátu (3 : 1-+1:1) ako

3-acetyltio-l-{4-[(1S)-1-(terc.

butyldímetylsilyloxymetyl)-2-metylpropyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (502 mg, výťažok 63%) ako bledohnedý olej.

kolóne za použitia n-hexán eluentu počas vzniku

¹H-NMR (400 M Hz,	CDC1₃) : δ	(ppm) 7,50 až 7,45 (IH, br	d,
J=9,5 Hz)	, 7,40 (IH, s)	, 4,54 až	4,43 (2H, m), 4,47 až 4,40 (	IH,
m) , 4,00	až 3,93 (2H,	m)_r 3,86	až 3,78 (2H, m), 3,64 až 3	,59
(IH, m),	2,04 až 1,94 (	(IH, m), 0,	98 (3H, d, J=6,6 Hz), 0,96 (	3H,
d, J=6,6	Hz), 0,91 (9H,	s) , 0,05	(6H, s) .

Referenčný príklad 37

3-Acetyltio-l-{4-[ (1S)-1-fterc.butyldimetylsilyloxymetyl)-3-metylbutylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidín

(1) Benzylester [(1S)-1-(terc.butyldifenylsilyloxymetyl)-3-metylbutyl]karbamovej kyseliny

447

Do roztoku L-leucinolu (1,00 g, 8,53 mol) v metylénchloride (30 ml) bol pridaný benzylester kyseliny chrómovej (1,46 ml, 10,2 mol) a trietylamín (1,43 ml, 10,2 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 3 dni. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2:1 —> 1 : 1) ako eluentu počas vzniku benzylesteru [(IS)-1-(hydroxymetyl)-3-metylbutyljkarbamovej kyseliny (2,31 g, výťažok 100%) ako bezfarebný olej. Následne, do roztoku benzylesteru [(IS)-1-(hydroxymetyl)-3-metylbutyl] karbamovej kyseliny (4,84 g, 19,3 mol) v dimetylformamide (145 ml) bol pridaný terc.butyldifenylsilylchlorid (6,01 ml, 23,1 mol) a imidazol (1,57 g, 23,1 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 8 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola dostatočne premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas' zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (19 : 1 —» 7:1) ako eluentu počas vzniku benzylesteru [(IS)-1-(terc. butyldifenylsilyloxymetyl)-3-metylbutyl]karbamovej kyseliny (9,22 g, výťažok 98%) ako bezfarebný olej.

^XH-NMR	(400 M Hz, CDC1₃)	: δ (ppm) 7,65	až 7,61 (4H, m	.), 7	,45
až 7,32 (	11H ,m), 5,09 (2H,	d, J=	=2,9 Hz),	4,85 až 4,80	(1H,	br
d, J=8,8	Hz) , 3,86 až 3,77	(1H,	m) , 3,70	(1H, dd, J=9	,8,	2,9
Hz), 3,59	(1H, dd, J=9,8, 2,	9 Hz),	1,63 až	1,54 (1H, m),	1,43	až
1,37 (2H,	m), 1,06 (9H, s),	0,91 (	3H, d, J=	=ó,8 Hz), 0,89	(3H,	d,
J=6,8 Hz).

448 (2) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-[(1S)-1-(terc.

butyldifenylsilyloxymetyl)-3-metyl-butylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-y1}azetidín

Roztok benzylesteru [(1S)-1-( terc.butyldifenylsilyloxymetyl) -3-metylbutyl]karbamovej kyseliny (7,35 g, 15,0 mol) (získanej podlá opisu v referenčnom príklade 37(1)) v metanole (220 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (7,35 g) pri teplote miestnosti 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná na odstránenie katalyzátora a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu : metánol (98 : 2 —> 9 : 1) ako eluentu počas vzniku (1S)-1-(terc.butyldifenylsilyloxymetyl)-3-metylbutylamínu (4,50 g, výťažok 84%) ako bezfarebný olej. Následne, do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (2,00 g, 4,29 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (100 ml) bol pridaný roztok 0,67M (1S)-1-(terc.

butyldifenylsilyloxymetyl) -3-metylbutylamínu-trimetylhliníka v benzéne (12,9 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod refluxom počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (100 ml) a etylacetát (200 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 0 hodinu. Po pridaní etylacetátu bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola dostatočne premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (6 : 1 -> 4 : 1 ) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-{4-[(1S)-1- ( terc.butyldifenylsilyloxymetyl) -3-metylbutylkarbamoyi] -1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (2,14 g, výťažok 64%) ako bledohnedá pevná látka.

449 ^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : 5(ppm) 7,68 až 7,62 (4H, m), 7,62 až

7,56	(4H, m), 7,46 až	7,28 (12H, m),	7,37 (1H, s	)	, 4,74 až	4,69
(1H,	m) , 4,24 až 4,16	(1H, m), 4,11	až 4,03 (2H	r	m), 1,00	(1H,
dd,	J=10,7, 4,9 Hz),	3,98 (1H, dd,	J=ll,7, 4,9		Hz), 3,72	(1H,
dd,	J=9,8, 3,9 Hz), 3	,67 (1H, dd, J	=9,8, 2,9 Hz	)	, 1,65 až	1,46
(3H,	m), 1,08 (9H, s),	1,05 (9H, s),	0,94 (3H, d,		J=5,9 Hz),	0,92
(3H,	d, J=5, 9 Hz) .

(3) 3-Hydroxy-l- (4- [ (1S) -1- (hydroxymetyl) -3-metylbutylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-{4-[(1S)-1-terc.

butyldifenylsilyloxymetyl)-3-metylbutylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (2,14 g, 3,72 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 37(2)) v bezvodom tetrahydrofuráne (107 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (8,94 ml, 8,94 mol) v ľadovom kúpeli. Zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát -» etylacetát : metanolu (9:1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-{4-[(1S)-1-(hydroxymetyl)-3-metyl-butylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-ylJazetidínu (825 mg, výťažok 74%) ako bledožltý olej.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,36 (1H, s), 7,24 až 7,17 (1H, br d, J=8,8 Hz), 4,85 až 4,77 (1H, m), 4,32 (2H, dd, J=8,8,

7,3 Hz), 4,20 až 4,12 (1H, m), 3,96 (2H, ddd, J=8,8, 8,8, 4,4 Hz), 3,77 (1H, dd, J=10,9, 1,3 Hz), 3,61 (1H, dd, J=10,9, 5,9 Hz), 3,17 až 3,08 (1H, br s), 3,08 až 2,95 (1H, br s), 1,75 až 1,65 (1H, m), 1,55 až 1,46 (1H, m), 1,46 až 1,37 (1H, m), 0,95 (3H, d, J=6,6 Hz), 0,94 (3H, d, J=6,6 Hz).

(4) 1-(4-[(1S)-1-(terc.Butyldimetylsilyloxymetyl)-3-met y lbu tyl karbamoyl] -1, 3-tiazol-2-yl }-3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-{4-[(1S)-1-(hydroxymetyl)-3450

-metylbutylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (820 mg, 2,74 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 37(3)) v dimetylformamide (41 ml·) bol pridaný terc.butyldimetylsilylchlorid (495 mg, 3,29 mol) a imidazol (224 mg, 3,29 mol) v ľadovom kúpeli a reakčná zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodný, filtrovaná a Zvyšok bol vyčistený sodného, vysušené cez bezvodý síran koncentrovaná počas zníženého tlaku, chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2 : 1 —> i : 2 ) ako eluentu počas vzniku 1-{4~[(1S)-1- (terc.butyldimerylsiiyloxymetyl) -3-metylbutylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}-3-hydroxyazetidínu (731 mg, výťažok 65%) ako bledožltý olej.

i

H-NMR (4 00 M Hz,	CDC1₃(	) : δ	(ppm) 7,40 až	7,37 (IH,	br	s) ,
(1H, s) , 4,87 až	4,79	(IH,	m), 4,31 (2H	, dd, J=15	,0,	8,4
4,21 až 4,12 (IH,	m) ,	3,98	až 3,92 (2H,	m) , 3,68	až	3,65
m), 1,68 až 1,60	(IH,	m), 1	,56 až 1,40 (	2H, m), 0,	95	(3H,

d, J-6,6 Hz), 0,94(3H, d, J=6,6 Hz), 0,92 (9H, s,), 0,06 (6H,s).

(5) 1-(4-[(IS)-1- (terc.Butyldimetylsilyloxymetyl)-3-metylbutylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku l-(4-[(lS)-l-('terc.butyldimetylsilyloxymetyl)-3-metyIbutylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-3-hydroxyazetidínu (730 mg, 1,76 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 37(4)) v metylénchloride (37 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (409 μΐ, 5,29 mol) a trietylamín (741 μΐ,

5,29 mol) v ľadovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ladovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá

451 nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2:1 -> 1:2) ako eluentu počas vzniku 1— { 4 — [ (IS) -1- (terc.butyldimetylsilyloxymetyl) -3-metylbutylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl} -3-metánsulf onyloxyazet idínu (846 mg, výťažok 98%) ako bledožltý olej.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,43 (IH, s), 7,36 až 7,30 (IH, br d, J=9,5 Hz), 5,45 až 5,39 (IH, m), 4,47 až 4,39 (2H, m), 4,28 až 4,20 (2H, m), 4,20 až 4,14 (IH, m), 3,66 (2H, d, J=3,7

Hz), 3,11 (3H, s), 1,70 až 1,58 (IH, m), 1,53 (IH, ddd, J=13,9, 8,8, 5,9 Hz), 1,44 (IH, ddd, J=13,9, 8,8, 5,9 Hz), 0,95 (6H, t, J=6,3 Hz), 0,92 (9H, s), 0,09 (6H, s).

( 6) 3-Acetyltio-l- (4- [ (IS ) -1 - (terc. butyldimetylsilyloxymetyl) -3-metylbutylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 1-{ 4-[(IS)-1-fterc.butyldimetylsilyloxymetyl)-3-metylbutylkarbamoyl ] -1,3-tiazol-2-yl} -3-metánsulfonyloxyazetidínu (840 mg, 1,71 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 37(5)) v dimetylformamide (42 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,17 mg, 10,2 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola dostatočne premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (3:l-> 1:1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l- { 4- [ (IS ) -1- (terc. butyldimetylsilyloxymetyl) -3-metyl-butylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl Jazetidínu (452 mg, výťažok 56%) ako bledohnedý olej.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,39 (IH, s), 7,36-7,31 (IH, br d, J=9,5 Hz), 4,54 až 4,39 (3H, m), 4,20 až 4,12 (IH,

452

3,97	(1H,	dd,	J=8,8	Hz) ,	3,96 (1H,	dd, J=	= 8,8	Hz), 3,66	(2H,
J=3,7	Hz) ,	1,7	0 až 1	,60 (	1H, m), 1,	58 až	1,40	(2H, m),	0,95
, ó,	J=6, 6	Hz)	, 0,94	(3H,	, d, J= 6, 6	Hz) ,	0, 91	(9H, s),	0, 05

(6Η, S) .

Referenčný príklad 38

3-Acetyltio-l-{4-[(1S,2S)-1-(terc.butyldimetylsilyloxymetyl) -2-metylbutylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-y1}azetidín

(1) Benzylester [(1S, 2S)-1-(terc.Butyldifenylsilyloxymetyl)-2-metylbutyl]karbamovej kyseliny

Do roztoku L-izoleucinolu (2,20 g, 18,8 mol) v metylénchloride (66 ml) bol pridaný benzylester kyseliny chrómovej (3,22 ml, 22,5 mol) a trietyiamín (3,15 ml, 22,5 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2:1 —> 1 : 1) ako eluentu za vzniku benzylesteru [(lS,2S)-l-(hydroxymetyl)-2-metylbutyl]karbamovej kyseliny (4,17 g, výťažok 88%) ako bezfarebný olej. Následne, do roztoku [ (2S) - (N-benzyloxykarbonyl) -2-amino-3-metylbutanolu (4,17 g, 16,6 mol) v dimetylformamide (125 ml) bol pridaný terc.butyldifenylsilylchlorid (5,18 ml, 19,9 mol) a imidazol (1,35 g, 19,9 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 4 hodiny. Po skontrolovaní

453 ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (19:1 5:1) ako eluentu počas vzniku benzylesteru [(lS,2S)-l-( ter c. butyldifenylsilyloxymetyl) -2-metylbutyl]karbamovej kyseliny (6,72 g, výťažok 83%) ako bezfarebné kryštály.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,65 až 7,60 (4H, m), 7,45 až 7,30 (11H, m), 5,09 (2H, m), 4,93 až 4,84 (1H, br d, J=8,8 Hz), 3,74 až 3,60 (2H, m), 3,60 až 3,52 (1H, m), 1,74 až 1,64 (1H, m), 1,53 až 1,44 (1H, m), 1,14 až 1,06 (1H, m), 1,04 (9H, s), 0,92 až 0,8 (6H, m).

(2) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-{4-[(1S,2S)-1-(terc.

butyldifenylsilyloxymetyl)-2-metylbutylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Roztok benzylesteru [(lS,2S)-l-(terc.butyldifenylsilyloxymetyl)-2-metylbutyl]karbamovej kyseliny (6,72 g, 13,7 mol) (získanej podľa opisu v referenčnom príklade 38(1)) v metanole (200 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (6,72 g) pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná na odstránenie katalyzátora a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograf icky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu : metánol (98 :

-> 9:1) ako eluentu počas vzniku (1S,2S)-1-(terc. butyldifenylsilyloxymetyl)-2-metylbutylamínu (4,04g, výťažok 83%). Následne, do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (2,00 g, 4,29 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (100 ml) bol pridaný roztok 0,67M (1S,2S)-1-(terc.

454 butyldifenylsilyloxymetyl)-2-metylbutylamínu-trimetylhliníka v benzéne (12,9 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod refluxom počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (100 ml) a etylacetát (200 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 30 minút. Po pridaní etylacetátu bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (β : 1 -> 1 : 3) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-[(1S,2S)-1-(terc.

butyldifenylsilyloxymetyl)-2-metylbutylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yljazetidínu (1,89 g, výťažok 57%) ako bledohnedá pevná látka.

1	H-NMR	(400 M	Hz, CDC1₃) : δ (	ppm) 7,70 až Ί,	,57 (8H, m), 7,46
až 7	,26 (	12H, m) ,	7,36 (1H, s),	4,73 až 4,67	(1H, m) , 4,09 až
3,94	(4H,	m) , 3,93 až 3,86 (1H,	m), 3,84 (1H,	dd, J=10,7, 2,0
HZ) ,	3,67	(1H, dd,	J=10,7, 3,4 Hz	), 1,90 až 1,82	(1H, m), 1,22 až
1,11	(1H,	m) , 1,07	(9H, s), 1,04	(9H, s), 0,93 (	3H, d, J=6, 9 Hz) ,
0, 90	(3H,	t, J=7,3	Hz) .

(3) 3-Hydroxy-l-(4-[(1S,2S)-1-(hydroxymetyl)-2-metylbutylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-{4-[(1S, 2S)-1- (terc.butyldifenylsilyloxymetyl)-2-metylbutylkarbamoyl] -1, 3-tiazol-2-yl}azetidínu (1,89 g, 2,45 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 38(2)) v bezvodom tetrahydrofuráne (95 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (5,87 ml, 5,87 mol) v ľadovom kúpeli. Zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za

455 použitia etylacetát -> etylacetát : metanolu (9:1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-{4-[(1S,2S)-1-(hydroxymetyl)-2-metylbutylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-ylJazetidínu (811 mg, výťažok 100%) ako bledožltý olej.

'H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,37 (1H, s), 7,35 až 7,31

(1H,	br	s) , '	4,87	až	4,7% (	1H, m), 4,33	(2H, dd, J=10,3, 6,6
4,00	až	3,93	(2H,	m)	, 3,92	až 3,86 (1H,	m), 3,86 až 3,78 (1H
3,78	až	3,70	(1H,	m)	, 3,05	až 2,98 (1H,	br s), 2,75 až 2,71
br d	, J-	=7,3	Hz) ,	1,	80 až	1,70 (1H, m)	, 1,59 až 1,50 (1H,
1,27	až	1,13	(lH,m	) ,	0, 98 (3:	H,d, J=7,3 Hz]	i, 0,93(3H, t, J=7,3

(4) 3-Hydroxy-l- (4- [ (1S, 2S) -1- (terc.butyldimetylsilyloxymetyl) -2-metylbutylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-{4-[(1S,2S)-1-(hydroxymetyl)-2-metylbuty1karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (1,34 g, 4,48 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 38(3)) v dimetylformamide (67 ml) bol pridaný terc.butyldimetylsilylchlorid (810 mg, 5,37 mol) a imidazol (527 mg, 5,37 mol) v ľadovom kúpeli a reakčná zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 2,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola dostatočne premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (5 : 1 -» 3 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-{4-[(1S,2S)-1-(terc.butyldimetylsilyloxymetyl)-2-metylbutylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (1,35 g, výťažok 97%) ako bledožltý olej.

'H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ	(ppm) 7,57	až 7,51 (	1H, br d,
8 Hz) , 7,36 (1H, s), 4,86 až	4,79 (1H, m)	, 4,34 až	4,26 (2H,
3,98 až 3,91 (2H, m), 3,90	až 3,84 (1H,	, m), 3,84	(1H, dd,
8, 2,4 Hz), 3,63 (1H, dd, J=	^:9,8, 3,9 Hz)	, 2,63 až	2,59 (1H,

456 br d, J=5,9 Hz), 1,80 až 1,71 (1H, m), 1,60 až 1,51 (1H, m), 1,20 až 1,12 (1H, m), 0,95 (3H, d, J=6,8 Hz), 0,91 (9H, s), 0,90 (2H, t, J=6,8 Hz), 0,05 (6H, s).

(5) l-{4-[(1S,2S)-1 - (terc.Butyldimetylsilyloxymetyl)-2-metylbutylkarbamoylj-1,3-tiazol-2-yl}-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-{4-[(IS,2S)-1-(terc.

butyldimetylsilyloxymetyl)-2-metylbutylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yljazetidínu (1,35 g, 3,26 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 38(4)) v metylénchloride (68 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (758 μΐ, 9,79 mol) a trietylamín (1,37 ml, 9,79 mol) v ladovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ľadovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2:1 -> 1:2) ako eluentu počas vzniku l-{4-[(IS,2S)-1-(terc.butyldimetylsilyloxymetyl)-2-metylbutylkarbamoyl ] -1,3-tiazol-2-yl} -3-metánsulfonyloxyazetidínu (1,55 g, výťažok 97%) ako bledožltý olej.

^-NMR	(400 M Hz,	CDC1₃) : δ (ppm) 7,50 až 7,46 (	1H, br d,
J=9,8 Hz),	7,43 (1H,	s), 5,45 až 5,39 (1H, m), 4,45	(1H, dd,
J=8,8, 6,8	Hz), 4,42	(1H, dd, J=8,8, 6,8 Hz), 4,26	(1H, dd,
J=9,8, 3,9	Hz), 4,23	(1H, dd, J=9,8, 3,9 Hz), 3,91 až	3,85 (1H,

m), 3,84 (1H, dd, J=10,3, 2,4 Hz), 3,63 (1H, dd, J=10,3, 3,4 Hz), 3,11 (3H, s), 1,80 až 1,71 (1H, m), 1,59 až 1,51 (1H, m), 1,22 až 1,12 (1H, m), 0,95 (3H, d, J=3,8 Hz), 0,91 (9H, s), 0,91 (3H, t, J=6,8 Hz), 0,05 (6H, s).

(6) 3-Acetyltio-l-{4-[(lS,2S)-l-(terc.

457 butyldimetylsilyloxymetyl)-2-metylbutylkarbamoyl]-1, 3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 1-{4-[(1S,2S)-1-(terc.butyldimetylsilyloxymetyl)-2-metylbutylkarbamoyl] -1,3-1 iazol-2-yl}-3-metánsulf onyioxyazetidínu (1,55 g, 3,15 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 38(5)) v dimetylformamide (78 ml) bol pridaný tioacétát draselný (2,16 g, 18,9 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (3 : 1 -> 2:1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l - (4 - [ (1S, 2S) -1-terc.butyldimetylsilyloxymetyl) -2-metylbutylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (910 mg, výťažok 61%) ako bledohnedý olej.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,52 až 7,46 (1H, br d,

J=9,5 Hz), 7,39 (1H, s), 4,54 až 4,40 (3H, m), 4,00 až 3,92 (2H, m), 3,91 až 3,84 (1H, m), 3,83 (1H, dd, J=10,3, 2,2 Hz), 3,63 (1H, dd, J=10,3, 3,7 Hz), 2,37 (3H, s), 1,81 až 1,70 (1H, m),

1,58 až 1,50 (1H, m), 1,20 až 1,09 (1H, m), 0,95 (3H, d, J=6,6 Hz), 0,91 (9H, s), 0,90 (3H, t, J=7,3 Hz), 0,05 (6H, s).

Referenčný príklad 39

3-Acetyltio-l-{4-[2-(terc.butyldimetylsilyloxy)-1-(terc. butyldimetylsilyloxymetyl) etylkarbamoyl] -1, 3-tiazol-2-yl}azetidín .OTBDMS

AcS

.CONH

OTBDMS

458 (1) Metylester terc.butyldifenylsilyloxv-N-karbobenzyloxy-L-serínu

Do roztoku N-karbobenzyloxy-L-serínu (4,0 g, 16,7 mol) v benzéne (200 ml) a metanolu (50 ml) bol pridaný roztok 2M trimetylsilyldiazometánu v hexáne (10,9 ml, 21,7 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (l:l-> 1:3) ako eluentu počas vzniku N-karbobenzyloxy-L-serínu, metylesteru (4,40 g, výťažok 100%) ako bezfarebný olej. Následne, do roztoku N-karbobenzyloxy-L-serínu, metylesteru (4,40 g, 16,7 ml bol pridaný

20,0 mol) a imidazol mol) v dimetylformamide (210 terc.butyldifenylsilylchlorid (5,20 ml, (1,36 g, 20,0 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 3 dni. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola dostatočne premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky použitia n-hexán : etylacetátu (!

vzniku terc.butyldifenylsilyloxy-N-karbobenzyloxy-L-serínu, metylesteru (18,8 g, 99%).

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,61 až 7,56 (4H, m), 7,45 až 7,31 (11H, m), 5,69 až 5,62 (IH, br d, J=8,8 Hz), 5,12 (2H, s), 4,45 (IH, dt, J=8,l, 2,9 Hz), 4,09 (IH, dd, J=10,3, 2,9 Hz), 3,90 (IH, dd, J=10,3, 2,9 Hz), 3,74 (3H, s).

na silikagélovej kolóne za :1 -» 6:1) ako eluentu počas (2) Benzylester [2-(terc.Butyldifenylsilyloxy)-1-(terc.

butyldifenylsilyloxymetyl)etyl]-karbamovej kyseliny

Do roztoku terc.butyldifenylsilyloxy-N-karbobenzyloxy-L-serínu, metylesteru (11,5 g, 24,8 mol) (získaného podlá opisu v

459 referenčnom príklade 39(1)) v zmesi tetrahydrofuránu (115 ml) a etanolu (230 ml) bol pridaný borohydrid sodný (1,88 g, 49,6 mol) a chlorid lítny (2,10 g, 49,6 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi metylénchlorid a 10% vodný roztok kyseliny octovej. Organická vrstva bola dostatočne premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (3 : 1 —> 1:1) ako eluentu počas vzniku benzylesteru [2 - (terc.butyldifenylsilyloxy) -1- (hydroxymetyl) etyl] karbamovej kyseliny (9,26 g, výťažok 81%) ako bezfarebný olej. Následne, do roztoku benzylesteru [2-(terc.butyldifenylsilyloxy)-1-(hydroxymetyl)etyl]-karbamovej kyseliny (9,26 g, 20,0 mol) v dimetylformamide (280 ml) bol pridaný terc. butyldifenylsilylchlorid (7,79 ml, 30,0 mol) a imidazol (2,04 g, 30,0 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola dostatočne premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (19 : 1 -» 9 : 1) ako eluentu počas vzniku benzylesteru [2-(terc.butyldifenylsilyloxy)-1-(terc.butyldifenylsilyloxymetyl)etyl]karbamovej kyseliny (13,6 g, 97%) ako bezfarebný olej.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : ô(ppm) 7,65 až 7,60 (8H, m), 7,44 až 7,29 (17H, m), 5,05 (2H, s), 4,99 až 4,93 (1H, br d, J=8,8 Hz), 3,94 až 3,87 (1H, m), 3,85 (2H, dd, J=9,8, 3,9 Hz), 3,76 (2H, dd, J=9,8, 5,9 Hz), 1,02 (18H, s).

460 (3) 3-terc.Butyldifenyloxy-1-{4- [2- (terc.butyldifenylsilyloxy)·-1- [terc.butyldifenylsilyloxymetyl) etyl karbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl)azetidín

Roztok benzylesteru [2-(terc.butyldifenylsilyloxy)-1-(terc. butyldifenylsilyloxymetyl)etyl]-karbamovej kyseliny (13,6 g, 19,5 mol) (získaný podľa opisu v referenčnom príklade 39(2)) v metanole (410 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (13,6 g) pri teplote miestnosti 3,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrována na odstránenie katalyzátora a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu : metanolu (98 : 2 —» 9 : 1 ) ako eluentu počas vzniku 2- (terc.butyldifenylsilyloxy) -1-terc.butyldifenylsilyloxymetyl) etylamínu (9,34 g, výťažok 84%) ako bezfarebný olej. Následne, do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (2,00 g, 4,29 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (100 ml) bol pridaný roztok 0,67M 2-(terc.butyldifenylsilyloxy)-1-(terc.

butyldifenylsilyloxymetyl)etylamínu-trimetylhliníka v benzéne (12,9 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod refluxom počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný .roztok kyseliny octovej (200 ml) a etylacetát (200 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 3 hodiny. Po pridaní etylacetátu bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola dostatočne premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (6 : 1 -+ 4:1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.

butyldifenyloxy-l-{4-[2-(terc.butyldifenylsilyloxy)-1- (terc.

butyldifenylsilyloxymetyl)etylkarbamoyl]-1, 3-1iazol-2-yl}azetidínu

461 (3,19 g, výťažok 75%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,70 až 7,65 (8H, m), 7,59 až 7,55 (4H, m), 7,44 až 7,28 (18H, m), 7,33 (IH, s), 4,71 až 4,64 (IH, m), 4,31 až 4,22 (IH, m), 4,04 až 3,97 (4H, m), 3,94 (2H, dd, J=9,2, 4,4 Hz), 3,82 (2H, dd, J=9,2, 6,2 Hz).

(4) 3-Hydroxy-l-{4-[2-hydroxy-1(hydroxymetyl)etylkarbamoyl]

-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenyloxy-l-{4-[2-(terc.

butyldifenylsilyloxy) -1- ('terc.butyldifenylsilyloxymetyl) e tyl karbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (3,19 g, 3,23 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 39(3)) v bezvodom tetrahydrofurane (160 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (11,6 ml, 11,6 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metánolu (9 : 1 -» 8 : 2) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-{ 4- [2-hydroxy-l- (hydroxymetyl) -etylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (1,21 g, výťažok 100%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR	(400 M Hz, DMSO-d₆) : δ (ppm)	7,47 až 7,41 (IH, br	d,
J=8,8 Hz),	7,42 (IH, s), 5,84 -(IH, d,	J=6, 6 Hz) , 4,80 (2H,	t,
J=5, 5 Hz) ,	4,66 až 4,58 (IH, m), 4,28	až 4,21 (2H, m), 3,88	až
3,81 (IH,	m), 3,80 (2H, dd, J=8,8, 4,4	Hz), 3,53 (2H, m), 3,	45
(2H, m).

(6) l-{4-[2-(terc.Butyldimetylsilyloxy)-1-(terc.

butyldimetylsilyloxymetyl) etylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}~ -3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-{4-[2-hydroxy-l-(hydroxymetyl) etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (750 mg, 2,74 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 39(4)) v dimetylformamide (38 ml) bol pridaný terc.butyldimetylsilylchlorid

462 (951 mg, 6,31 mol) a imidazol (430 mg, 6,31 mol) v ladovom kúpeli a reakčná zmes bola miešaná v ladovom kúpeli počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (3 : 1 —» 1:1) ako eluentu počas vzniku 1-{4-[2- (terc.butyldimetylsilyloxy) -1- (terc.butyldimetylsilyloxymetyl) etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-3-h-ydroxyazetidínu (070 mg, výťažok 71%) ako bledožltá pevná látka.

'“'H-NMR	(400 M Hz, DMSO-d₆) : δ	(ppm)	7,62	až	7,57 (IH, br d,
J=8,l Hz),	7,38 (IH, s), 4,87 až	4,78	(IH,	m)	, 4,30 (2H, dd,
J=10,3, 6,	6 Hz), 4,12 až 4,04 (IH,	m) ,	3,93	(2K	, dd, J=9, 5, 4,4
Hz), 3,84	(2H, dd, J=9,5, 3,7 Hz) ,	3, 62	(2H,	dd,	J=9,5, 6,6 Hz),
2,26 až 2,	22 (IH, br d, J=6,6 Hz) ,	0,92	(18H,	s) ,	0,08 (12H, s).

(7) l-{4-[2-(terc.Butyldimetylsilyloxy)-1-(terc.

butyldimetylsilyloxymetyl)etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-{4-[2-(terc.butyldimetylsilyloxy)-1-(terc. butyldimetylsilyloxymetyl)etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-3-hydroxyazetidínu (1,27 g, 2,53 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 39(5)) v metylénchloride (64 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (587 μΐ, 7,59 mol) a trietylamín (1,06 ml, 7,59 mol) v ladovom kúpeli. Po miešaní zmesi v ľadovom kúpeli 10 minút bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku.

463

Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (3 : 1 —> 1 : 2 ) ako eluentu počas vzniku 1-{4-[2(terc.butyldimetylsilyloxy)-1-(terc.butyldimetylsilyloxymetyl)etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (1,56 g, výťažok 100%) ako bledožltá pevná látka.

		-NMR (4 00 M	Hz,	CDC1₃)	: δ (ppm) 7,58	až	7,53 (IH, br d,
J=8,	8	Hz)	, (	IH,	s) , 5,	43 až 5,38 (IH,	m)	, 4,41 (2H, dd,
J=9,	5,	6,	6 Hz), 4,	23 (	2H, dd	, J=9,5, 5,9 Hz)	, 4	,12 až 4,03 (IH,
m) ,	3,	84	(IH, dd,	J=9,	5, 2,9	Hz), 3,64 (2H,	dd,	J=9, 5, 5,9 Hz) ,
3,11	(	3H,	s), 0,91	(18H, s),	0,07 (12H, s) .

(7) 3-Acetyltio-l-{4-[2-(terc.butyldimetylsilyloxy)-1-(terc.butyldimetylsilyloxymetyl)-etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku l-{4-[2-(terc.butyldimetylsilyloxy)-1-(terc. butyldimetylsilyloxymetyl)etylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl }-3-metánsulfonyloxyazetidínu (1,56 g, 2,53 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 39(6)) v dimetylformamide (78 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,73 g, 15,2 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola dostatočne premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (4:1 —> 2 : 1 ) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-{4-[2-(terc.butyldimetylsilyloxy)-1-(terc.

butyldimetylsilyloxymetyl) -etylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (773 mg, výťažok 57%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,59 až 7,53 (IH, br d,

J=8,8 Hz), 7,40 (IH, s), 4,52 až 4,42 (3H, m), 4,11 až 4,06 (IH,

464

m), 3,94 (2H, dd, J=8,4, 4,8 Hz), 3,83 (2H, dd, J=9,5, 3,3 Hz), 3,61 (2H, dd, J=9,5, 6,6 Hz), 2,37 (3H, s), 0,91 (18H, s), 0,07 (12H, s) .

Referenčný príklad 40

3-Acetyltio-l-4-{[2-(terc.butyldimetylsilyloxy)etyl]-metyl-karbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl}azetidín co-n^-^otbdms

(1) Benzylester [2-(terc.butyldifenylsilyloxy)etyl] metylkarbamovej kyseliny

Do roztoku N-metylaminoetanol (1,20 ml, 15,0 mol) v metylénchloride (36 ml) bol pridaný benzylester kyseliny chrómovej (2,56 ml, 18,0 mol) a trietylamín (2,52 ml, 18,0 mol) v ľadovom kúpeli. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku benzylesteru (2-hydroxyetyl)metylkarbamovej kyseliny (2,8 g, výťažok 90%) ako bledožltý olej. Následne, do roztoku benzylesteru (2-hydroxyetyl)metylkarbamovej kyseliny

13,5 (2,82 g, pridaný imidazol (85 bol ml mor v dimetylformamide terc.butyldifenylsilylchlorid (4,21 ml, 16,2 mol (1,10 g, 16,2 mol) v ladovom kúpeli. Výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný metanol a reakčná zmes bola miešaná 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený

465 vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : evzniku benzylesteru metylkarbamovej kyseliny (5 pevná látka.

ylacetátu (9 : 1) ako eluentu počas [2-(terc.butyldifenylsilyloxy)etyl] 7 g, výťažok 94%) ako bledožltá

	¹H-NMR (400 M	Hz, CDC1₃(
Hz)	, 7,47	až 7,20	(11H, m),
s) ,	5,05	(1H, s),	3,80 (1H,
Hz)	, 3,45	(1H, t,	J= 5,6 Hz)
s) ,	1,03	(9H, s) .

: δ (ppm)	7,72	(1H,	dd,	J=7,4,	1,6
7,64 (4H,	t, J=	6,1	Hz) ,	5,12	(1H,
t, J= 5,5	Hz) ,	3,73	(1H,	t, J=	5,5
, 3,41 (1H,	t, J=	= 5,6	Hz) ,	2,99	(3H,

(2) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-l-(4—{[2-(terc.

butyldifenylsilyloxy) etyl] metyl karbamoyl} -1,3-1 iazol-2-yl)azetidín

Roztok benzylesteru [2-(terc.butyldifenylsilyloxy)-etyl] metylkarbamovej kyseliny (5,7 g, 12,7 mol) (získanej podlá opisu v referenčnom príklade 40(1)) v metanole (285 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (5,7 g) pri teplote miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná na odstránenie katalyzátora a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (19 : 2) —» etylacetát : metanolu (1:1) ako eluentu počas vzniku [2-(terc.butyldifenylsilyloxy) etyl]metylamínu (2,67 g, výťažok 69%) ako priehladný olej. Následne, do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-etoxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,91 g, 4,09 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(1)) v benzéne (100 ml) bol pridaný roztok 0,67M [2-(terc.butyldifenylsilyloxy)-etyl]metylamínu-trimetylhliníka v benzéne (13,6 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka. Zmes bola zohrievaná pod

466 refluxom počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie 10% vodný roztok kyseliny octovej (100 ml) a etylacetát (100 ml) bol pridaný do reakčnej zmesi v ladovom kúpeli a výsledná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po pridaní etylacetátu bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1:1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-{[2-(terc. butyldifenylsilyloxy) etyl] metyl karbamoyl} — 1, 3-tiazol-2-yl) azetidínu (2,54 g, výťažok 85%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDCi₃) : δ (ppm) 7,74 až 7,55 (8H, m), 7,50 až 7,31 (12H, m), 7,00 (IH, s), 4,79 až 4,64 (IH, m), 4,08 až 3,59 (7H, m, obsahujúci 4,80 až 4,00 (2H, m), 3,85 až 3,73 (2H, m)), 3,27(0,3 H, s), 3,07(0,7 H, s), 1,06 (9H, s), 1,02 (9H, s).

(3) 3-Hydroxy-l-{4- [ (2-hydroxyetyl)-metyl-karbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl) azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-{[2- (terc.butyldifenylsilyloxy)etyl]metylkarbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (2,24 g, 3,05 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 40(2)) v bezvodom tetrahydrofuráne (70 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butyl-amóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (7,32 ml, 7,32 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (20 : 1) —> etylacetát :

metanolu (15 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-{4-[(2-nydroxyetyl)-metyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (833 mg, výťažok 94%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,18 (IH, s), 4,86 až 4,74

467 (1Η, m), 4,29 (2H, t, J= 8,4 Hz), 3,94 (2H, dd, J= 8,4, 4,9 Hz), 3,86 (2H, t, J= 5,0 Hz), 3,65 (2H, t, J= 5,0 Hz), 3,07 (3H, s).

(4) 1-(4-{[2-(terc.Butyldimetylsilyloxy)etyl]-metyl-karbamoyi} -1,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-{4-[(2-hydroxyetyl)metylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (576 mg, 2,24 mol) (získaného pódia opisu v referenčnom príklade 40(3)) v dimetylformamide (29 ml) bol pridaný terc.butyldimetylsilylchlorid (354 mg, 2,35 mol) a imidazol (160 mg, 2,35 mol) v ľadovom kúpeli a reakčná zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (3:1)—» etylacetátu ako eluentu počas vzniku 1—(4 — -{ [2- (terc.butyldimetylsilyloxy) etyl]metylkarbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (489 mg, výťažok 60%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,11 (0,7H, s), 7,01 (0,3H, s), 4,87 až 4,76 (1H, m), 4,31 (2H, t, J=8,3 Hz), 3,96 (2H, dd, J=8,3, 4,5 Hz), 3,91 až 3,83 (1H, m), 3,79 (1H, d, J=4,5 Hz), 3,74 (1H, d, J=4,5 Hz), 3,66 až 3,52 (1H, m), 3,28 (0,9H, s),

3,11 (2,1H, s), 0,88 (9H, s), 0,05 (6H, d, J=14,0 Hz).

(5) 1-(4-( [2- (terc. Butyldimetylsilyloxy) etyl] -metyl-karbamoyl} -1,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-{[2-(terc.butyldimetylsilyloxy)etyl] metylkarbamoyl}-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (442 mg, 1,19 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 40(4)) v metylénchloride (15 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,12 ml, 1,49 mol) a trietylamín (0,20 ml, 1,49 mol) v ľadovom

468 kúpeli. Zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcia bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1:2) ako eluentu počas vzniku 1-(4-{[2- (terc. butyldimetylsilyloxy) etyl] metyl karbamoyl} -1,3-tiazol-2-yl) -3-metánsulfonyloxyazetidínu (517 mg, výťažok 97%) ako bledožltá pevná látka.

^rK-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,18 (0,6H, S), 7,08 (0,4H,

s), 5,45	až 5,35 (IH, m)	) , 4,42 (2H, t, J=8,7 Hz) , 4,23	(2H, dd,
J=8,7, 3,	7 Hz), 3,91 až	3,81 (IH, m), 3,81 až 3,74 (IH,	m) , 3,74
až 3,67	(IH, m), 3, 62	až 3,53 (IH, m), 3,26 (1,2H,	s), 3,09
(1,8H, s)	, 0,85 (9H, s),	0,01 (6H, s).

(6) 3-Acetyltio-l-(4-{[2-(terc.butyldimetylsilyloxy)etyl]-metylkarbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 1-(4-{[2-(terc.butyldimetylsilyloxy)etyl] metylkarbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (516 mg, 1,14 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 40(5)) v dimetylformamide (15 ml) bol pridaný tioacetát draselný (815 mg, 7,14 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C) 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1:2) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l- (4-{ [2 — (terc.butyldimetylsilyloxy)etyl]-metyl-karbamoyl}-!,3-tiazol-2-yl)azetidínu (279 mg, výťažok 57%) ako

469 bledohnedá pevná látka.

^’H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,08 (0,7H, s), 7,16 (0,4H, s), 4,52 (2H, t, J=7,3 Hz), 4,48 až 4,39 (1H, m), 3,97 (2H, t, J=7,3 Hz), 3,92 až 3,82 (1H, m), 3,78 (1H, d, J=4,l Hz), 3,75 (1H, d, J=4,l Hz), 3,66 až 3,50 (1H, m), 3,59 (0,9H, s), 3,92 (2,1H, s), 2,39 (3H, s), 0,88 (9H, d, J=4,7 Hz), 0,04 (6H, d,

J=l,5 Hz).

Referenčný príklad 41 p-Nitrobenzyl - (ÍR, 5S, 6S) -2 - {1- [4 - (p-nitrobenzyloxykarbonylmetyl) karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-terc. butyldimetylsilyloxyetyl] -1-me tylkarbapén-2-em-3-karboxylát

^OPNB (1) 1-(4-Alyloxykarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-terc. butyldifenylsilyloxyazetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-karboxyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (6,73 g, 15,3 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade . 2 (4)). v dimetylformamide (330 ml) bol pridaný alylbromid (1,59 ml, 18,4 mol) a diizopropyletylamín (3,21 ml, 18,4 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 10 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (5:1) ako eluentu počas vzniku 1- ( 4-alyloxykarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl) -3 - terc.

470 butyldifenylsilyloxyazetidínu (5,31 g, výťažok 73%) ako hnedý olej .

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,63 až 7,59 (4H, m), 7,46

(IH,	s) ,	7,47	až	7,36	(6H, m) ,	6,04 až 5,95 (IH, m), 5,40 až
5,35	(IH,	m) ,	5,28	až 5,	24 (IH, m)	, 4,80 až 4,78 (2H, m), 4,77 až
4,71	(IH,	m) ,	4,16	(2H,	dd, J=8,8	, 6, 6 Hz) , 4,06 (2H, dd, J=8,8,
4,4	Hz) ,	1,06	(9H,	s) .

(2) 1-(4-Alyloxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidín Do roztoku 1-(4-alyloxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-terc.

butyldifenylsilyloxyazetidínu (5,31 g, 11,1 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 41(1)) v bezvodom tetrahydrofuráne (266 ml) bol pridaný roztok IM tetrabutylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (13,3 ml, 13,3 mol) v ľadovom kúpeli. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku 1-(4-alyloxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (2,91 g, výťažok 100%) ako bledohnedé kryštály.

’-H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 7,49 (IH, s), 6,06 až 5,96

(IH,	m) , 5,42 až 5,	r 35	(IH,	m) , 5,29 až	5,24	(IH, m) , 4,87 až
4,80	(IH, m), 4,79	(2H,	d,	J=5,9 Hz), 4,	, 38 (	2H, t, J=8,8 Hz),
4,02	(2H, dd, J=9,8,	3,9	Hz)	, 2,52 až 2,37	(IH,	br s) .

(3) 1-(4-Alyloxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-alyloxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (2,91 g, 11,1 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 41(2)) v metylénchloride (146 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (2,58 ml, 33,3 mol) a trietylamín (4,67 ml, 33,3 mol) v ľadovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní

471 zmesi v ľadovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Do zvyšku bol pridaný etylacetát a diizopropyiéter a zmes bola filtrovaná a výsledný zvyšok bol premytý diizopropyléterom počas vzniku 1-(4-alyloxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (2,71 g, výťažok 77%) ako bledohnedé kryštály.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,55 (IH, s), 6,07 až

5, 96	(IH,	m) , 5,45 až 5,35 (	2H,	m), 5,30 až 5,25 (IH, m), 4,81
(2H,	dt,	J=5,9, 1,5 Hz), 4,	51	(2H, dd, J=ll,0, 6,6, 1,5 Hz),
4,31	(2H,	ddd, J=ll,0, 4,4,	1,5	Hz), 3,10 (3H, s).

(4) 3-Acetyltio-l- ( 4-alyloxykarbonyl-l, 3-t iazol-2-yl) azetidín

Do roztoku 1-(4-alyloxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (2,70 g, 8,51 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 41(3)) v dimetylformamide (135 ml) bol pridaný tioacetát draselný (5,83 g, 51,1 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 10 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2 : 1) ako eluentu počas vzniku

3-acetyltio-l- (4-alyloxykarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl) azetidínu (1, 61 g, výťažok 63%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,51 (IH, s), 6,06 až

5,96 (IH, m), 5,41 až 5,35 (IH, m), 5,29 až 5,26 (IH, m), 4,58 (2H, t, J=8,l Hz), 4,47 až 4,40 (IH, m), 4,04 (2H, dd, J=9,5,

472

5,9 Hz), 2,36 (3H, s).

(5) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-6-[(R)-1-terc.

butyldimetylsilyloxyetyl]-2-(difenylfosforyloxy)-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyl (ÍR, 5S, 6S ) -2-(dif enylfosforyloxy) -6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (5,00 g, 8,41 mol) v dimetylformamide (250 ml) bol pridaný terc.butyldimetylsilylchlorid (2,54 g, 16,8 mol) a imidazol (1,14 g, 16,8 mol) v ladovom kúpeli a reakčná zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 7 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný metanol a výsledná zmes bola miešaná 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (3 : 1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl - (ÍR, 5S, 6S ) - 6- [ (R) -1- terc.butyldimetyl-silyloxyetyl]-2-(difenylfosforyloxy)-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (5,27 g, výťažok 88%) ako bledožltý olej.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,14 (2H,'d, J=8,8 Hz), 7,56 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,39 až 7,29 (4H, m), 7,28 až 7,17 (6H, m),

5,34 (IH, d, J=13,9 Hz), 5,23 (IH, d, J=13,9 Hz), 4,24 (IH, dq, J=5,9, 5,9 Hz), 4,20 (IH, dd, J=10,3, 2,9 Hz), 3,43 (IH, dq,

J=10,3,7,3 Hz), 3,28 (IH, dd, J=5,9, 2,9 Hz), 1,23 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,20 (3H, d, J=7, 3 Hz), 0,86 (9H, s), 0,06 (6H, d, J=3,7

Hz) .

( 6) p-Nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2- [1- (4-alyloxykarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6-[ (R) -1 - terc.butyldimetyisilyloxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 3-acetyltio-l-(4-alyloxykarbonyl-l,3-tiazol-2473

-yl)azetidínu (1,61 g, 5,40 mol) (získaného v referenčnom príklade 41(4)) v dimetylformamide (80 ml) bol pridaný hydrazínacetát (596 mg, 6,47 mol) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1,5 hodiny v rovnakých podmienkach. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-6-[(R)-1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl] -2- (difenylfosforyloxy) -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (3,83 g, 5,40 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 41(5)) v acetonitrile (190 ml) pridaný po kvapkách do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Následne diizopropyletylamín (3,76 ml, 21,6 mol) bol pridaný do reakčnej zmesi a zmes bola miešaná počas noci pri postupnom zvyšovaní teploty na teplotu miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu za vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1- (4-alyloxykarbonyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl] -1-metyl-karbapén-2-em-3-karboxylátu (3,73 g, výťažok 97%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,65 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,53 (1H, s), 6,07 až 5,96 (1H, m), 5,45 (1H, d, J=13,9 Hz), 5,42 až 5,35 (1H, m), 5,30 až 5,25 (1H, m), 5,26 (1H, d, J=13,9 Hz), 4,80 (2H, d, J=5,l Hz), 4,55 (2H, q, J=8,l Hz), 4,32 až 4,22 (3H, m), 4,15 až 4,09 (3H, m), 3,26 (1H, dd, J=5,l, 2,9 Hz), 3,13 (1H, J=9,5, 7,3 Hz), 1,25 (3H, d, J=5,9

Hz), 1,24(3H, d, J=7,3 Hz), 0,87 (9H, s), 0,08 (6H, Č, J=5,lHz).

(7) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2- [1-(4-karboxy-l,3-tiazol-2-y1) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl] -1474

-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2- [1- (4-alyloxykarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (3,73 g, 5,2 mol) (získaného v referenčnom príklade 41(6)) v metylénchloride (180 ml) bol pridaný dimedone (1,46 g, 10,4 mol), tetrakis(trifenylfosfin) paládium(O) (603 mg, 0,522 mol) a trifenylfosfin (205 mg, 0,783 mol) a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (10 : 1) -> metylénchloridu : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karboxy-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl) tio-6- [ (R) -1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl] -1-metyl-karbapén-2-em-3-karboxylátu (1,91 g, výťažok 54%) ako bledohnedá pevná látka.

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z : 675 [M+H] ⁺ (8) p-Nitrobenzylester N-(terc.butoxykarbonyl)glycínu Do roztoku N-(terc.butoxykarbonyl)glycínu (1,51 g, 8,62 mol) v bezvodom metylénchloride (75 ml) bol pridaný p-nitrobenzylalkohol (2,63 ml, 17,2 mol), l-etyl-3-(3-di-metylaminopropyl)karbodiimidhydrochlorid (ďalej označovaný ako WSC) (3,3 g, 17,2 mol) a 4-dimetylaminopyridín (106 mg, 0,87 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na

475 silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (2:1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzylesteru N-(terc.butoxykarbonyl) glycínu (2,67 g, výťažok 100%) ako biele kryštály.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, ó, J=7,5 Hz), 7,53 (2H, d, J=7,5 Hz), 5,28 (2H, s), 5,02 (IH, br t, J=3,3 Hz), 4,00 (2H, d, J=3,3 Hz), 1,46 (9H, s) .

(9) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{l-[4 - (p-nitrobenzyloxykarbonylmetyl)karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl} tio-6- [ (R) -1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl] -l-metyl-karbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzylesteru N-(terc.butoxykarbonyl) glycínu (2,67 g, 8,62 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 41(8)) v 1,4-dioxane (27 ml) bol pridaný roztok 4N chlorovodíka v 1,4-dioxane (27 ml) v ladovom kúpeli. Reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný dietyléter a reakčná zmes bola miešaná 30 minút. Výsledná reakčná zmes bola filtrovaná a získaný zvyšok bol premytý dietyléterom a vysušený počas vzniku hydrochloridu p-nitrobenzylesteru glycínu (1,59 g, výťažok 75%) ako biele kryštály. Následne do suspenzie p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karboxy-l,3-tiazol-2-yl)-azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-terc.butyldimetylsilyloxyety-1]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (207,4 mg, 0,31 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 41(7)) a hydrochloridu p-nitrobenzylesteru glycínu (116 mg, 0,47 mol) (získaného ako je uvedené vyššie) v dimetylformamide (10,5 ml) bol pridaný dietylfosforylkyanid (0,072 ml, 0,47 mol) a trietylamín (0,14 ml, 1,00 mol) v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá 0,5M vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu

476 sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (3:1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-(i-(4-(p-nitrobenzyloxykarbonylmetyl)karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-t-butyldimetylsilyloxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (209,7 mg, výťažok 77%) ako bledožltý sirup.

	¹H-NMR (400	M	Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, ,	J=8,8 Hz), 8,22
(2H,	d, J=8,8	Hz:	), 7,65	(2H, d, J=8, 8 Hz), 7,59	(IH, t, J=3,3
Hz) ,	7,54 (2H,	d	, J=8,8	Hz), 7,47 (IH, s), 5,46	(IH, c, J=13,9
Hz) ,	5,30 (2H,	s	), 5,27	(IH, d, J=13,9 Hz), 4,51	(IH, t, J=8,3
Hz) ,	4,47 (IH,	t,	J=8,3	Hz), 4,37 až 4,23 (5H, m),	4,08 (IH, dd,
J=8,	3, 3,3 Hz)	r	4,06 (	IH, dd, J=8,3, 3,3 Hz),	3,27 (IH, dd,
J=6,	2, 3,6 Hz)	r	3,16 (	IH, dq, J=ll,5, 8,8 Hz),	1,27 (3H, d,
J-8,	8 Hz), 1,25	(3H, d,	J=8, 8 Hz), 0,87 (9H, s),	0,09 (3H, s),
0,08	(3H, s).

Referenčný príklad 42 p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-(4-(3-terc.

butyldifenylsilyloxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

OTBDPS (1) 1-Benzyloxykarbonyl-3-terc.butyldifenylsilyloxyazetidín

Roztok l-benzhydryl-3-hydroxyazetidínu (10 g, 41,8 mol) v metanole (300 ml) bol katalytický hydrogénovaný za príromnosti

10% paládia (10 g) na aktívnom uhlí vo vodnom kúpeli (50°C) 3

477 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a zvyšok premytý metanolom. Kombinovaný filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol rozdelený medzi etylacetát a destilovanú vodu. Organická vrstva bola koncentrovaná a získaný zvyšok bol vysušený počas zníženého tlaku. Výsledný surový produkt bol rozpustený v zmesi metylénchloridu (120 ml) a metanolu (120 ml), benzylesteru chloromovej kyseliny (8,95 ml, 62,7 mol), potom bol pridaný trietylamín (8,79 ml, 62,7 mol) a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 1) -+ etylacetátu ako eluentu počas vzniku l-benzyloxykarbonyl-3-hyčroxyazetičínu (1,91 g, výťažok 22%). Následne, do roztoku l-benzyloxykarbonyl-3-hydroxyazetidínu (1,91 g, 9,22 mol) v dimetylformamide (96 ml) bol pridaný terc.butyldifenylsilylchlorid (2,88 ml, 11,1 mol) a imidazol (756 mg, 11,1 mol) v ladovom kúpeli. Výsledná zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 6 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (6:1) ako eluentu počas vzniku l-benzyloxykarbonyl-3-terc.butyldifenylsilyloxyazetidínu (4,04 g, výťažok 98%) ako bezfarebný olej.

¹H-NMR (400	M Hz, CDC1	₃) : δ	(ppm)	7,73	až 7	,70 (1H,	m) , 7,60
až 7,56 (4H, m)	i , 7,46 až	7,29	(10H,	m) ,	5, 07	(2H, s),	4,58 až
4,52 (1H, m) ,	4,01 (2H,	m) ,	3,95	(2H,	dd,	J=9,8,	4,9 Hz),

478

1,05(9Η,s) .

(2) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S, 6S)-2-{l-[4-(3-terc. butyldifenylsilyloxyazetidín-l-karbonyl)-i,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Roztok 1-benzy loxy karbony 1-3- terc.butyldif enyl s i lyloxyazet idínu (4,04 g, 9,07 mol) v metanole (20C ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (4,04 g) pri teplote miestnosti 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a filtrát koncentrovaný pri zníženom tlaku a získaný zvyšok bol vysušený počas zníženého tlaku za vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxyazetidínu (2,70 g, výťažok 96%) ako bezfarebný olej. Následne do roztoku p-ni trobenzyl- (lR,5S,6S)-2-[l-( 4-karboxy-1,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl ] -i-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (1,71 g, 2,53 mol) a 3-terc. butyldifenylsilyloxyazetidínu (947 mg, 3,04 mol) (získaného ako je uvedené vyššie) v dimetylformamide (86 ml) bol pridaný dietylfosforylkyanid (461 μΐ, 3,04 mol) a trietylamín (426 μΐ, 3,04 mol) v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 5,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá 0,5M vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (4 : 1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(3- terc.butyldif enylsilyloxyazetidín-l-karbonyl) -1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (789 mg, výťažok 32%).

479 ^ľH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66

Referenčný príklad 43 p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2—(1—{4 —[metyl-(p-nitrobenzyloxykarbonyi)metyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

TBDMSO O

OPNB

COOPNB (1) (terc.Butoxykarbonylmetylamino)octová kyselina, p-nitrobenzylester

Do roztoku sarkozínu (3,56 g, 40 mol) v zmesi metanolu (180 ml) a destilovanej vody (90 ml) bol pridaný IM vodný roztok hydroxidu sodného (80 ml) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, Dowex-50W bol pridaný v ladovom kúpeli na úpravu pH reakčnej zmesi na 5 až 4. Reakčná zmes bola filtrovaná a filtrát koncentrovaný počas zníženého tlaku pri vzniku (terc. butoxykarbonyl-metyl-amino)octovej kyseliny (7,57 g) ako surový produkt. Následne do roztoku (terc.butoxykarbonyl-metyl-amino) octové j kyseliny (2,52 g, 13,3 mol) a p-nitrobenzylalkohol (4,07 g, 26,6 mol) v metylénchloride (125 ml) bol pridaný WSC (5,10 g, 26,6 mol) a 4-dimetylaminopyridín (252 mg, 1,33 mol) v

480 ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1:1) ako eluentu počas vzniku (t-butoxykarbonyl-metyl-amino)octovej kyseliny, p-nitrobenzylesteru (4,30 g, výťažok 88%) ako bledožltý olej .

^lH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,28 až 8,29 (2H, m), 7,58. až 7,47 (2H, m), 5,72 (2H, d, J=2,2 Hz), 4,07 (1,2H, s), 3,99 (0,8H, s), 2,95(3H, d, J=5,8 Hz), 1,47(5,4H, s), 1,39 (3,6H, s).

(2) Hydrochlorid p-nitrobenzylesteru sarkozínu

Do roztoku (terc. butoxykarbonyl-metyl-amino) octovej kyseliny, p-nitrobenzylesteru (4,30 g, 133 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 43(1)) bol pridaný roztok 4N chlorovodíka v 1,4-dioxane- (4,3 ml) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný dietyléter a reakčná zmes bola miešaná 30 minút. Výsledná reakčná zmes bola filtrovaná a získaný zvyšok bol premytý dietyléterom a vysušený počas vzniku hydrochloridu p-nitrobenzylesteru sarkozínu (3,04 g, výťažok 88%).

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 8,32 až 8,23 (2H, m), 7,72 až 7,60 (2H, m), 5,42 (2H, s), 4,08 (2H, s), 2,77 (3H, s).

(3) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[metyl-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)metylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidín-3-yl)tio-6- [ (R)-1- (terc.butyldimetylsilyloxy)etyl] -l-metyl-karbapén-2-em-3-karboxylát

Do suspenzie p-nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2- [1- (4 - karboxy-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl]-1481

-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (1,00 g, 1,51 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 41(7)) a hydrochloride pnitrobenzylesteru sarkozínu (590 mg, 2,26 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 43(2)) v dimetylformamide (30 ml) bol pridaný dietylfosforyikyanid (0,37 ml, 2,26 mol) a trietylamín (0,95 ml, 6,80 mol) v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešané pri teplote miestnosti 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá 0,5M vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1 : 1) -> etylacetátu ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2- (1-{4- [metyl-(p-nitrobenzyloxy karbonyl) metyl-karbamoyl ] -1,3-tiazol-2-yl} azetidín-3-yl) tio-6- [ (R) -1- f terc.butyldimetylsilyloxy) etyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (997 mg, výťažok 76%).

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,29 až 8,15 (4H, m), 7,71 až 7,62 (2H, m), 7,58 až 7,42 ( 2H, m), 7,40 (0,6H, s), 7,25 (0,4H,

s), 5,46 (1H, d, J=13,8 Hz), 5,34 až 5,22 (3H, m obsahujúci 5,26 (1H, d, J=13,9 Hz)), 4,63 (1H, s), 4,57 až 4,45 (1H, m), 4,27 (2H, t, J=9,6 Hz), 4,26 (2H, t, J=9, 6 Hz), 3,89 (1H, dd, J=7,7,5,8 Hz),

3,36 (1,2H, s), 3,15 (1,8H, s), 3,26 (1H, dd, J=5,0,2,6 Hz), 1,25 (6H, d, J=7,2 Hz), 0,86 (9H, s), 0,08 (6H, d, J=5,0 Hz).

Referenčný príklad 44 p-Nitrobenzyl- (ÍR, 5S, 6S) -2- (l-{ 4- [metyl- (karbamoyl)metylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-terc. butyldimetylsilyloxyetyi]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

482

(1) Karbamoylmetylmetylkarbamová kyselina, terc.butylester Do roztoku (terc.butoxykarbonylmetylamino)octovej kyseliny (5,03 g, 26,6 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 43(1)) v metylénchloride (250 ml) bol pridaný 1-hydroxybenzotriazol (7,19 g, 53,2 mol), WSC (10,2 g, 53,2 mol) a 4-dimetyl-aminopyridín (325 mg, 2,66 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka 2 dni. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, bol pridaný 28% vodný roztok amoniaku a reakčná zmes bola miešaná 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku karbamoylmetylmetylkarbamovej kyseliny, terc.butylesteru (848 mg, výťažok 17%) ako bledožltý olej.

'H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 3,87 (2H, s), 2,96 (3H, s),

1,47 (9H, s).

(2) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[metyl-(karbamoyl)metyl-karbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl) tio-6- [ (R)-l-úerc. butyldimetylsilyloxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxy lát

Do roztoku karbamoylmetylmetylkarbamovej kyseliny, terc. butylesteru (848 mg, 4,50 mol) (získaného pódia opisu v referenčnom príklade 44(1)) v 1,4-dioxane (8,50 ml) bol pridaný roztok 4N chlorovodíka v 1,4-dioxane (8,50 ml) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný dietyléter a reakčná zmes bola

483 miešaná 30 minút. Výsledná reakčná zmes bola filtrovaná a získaný zvyšok bol premytý dietyléterom a vysušený počas vzniku 2-metylaminoacetamidhydrochloridu (421 mg, výťažok 75%). Následne do suspenzie p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karboxy-l,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (1,00 g, 1,51 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 41(7)) a 2-metylaminoacetamidhydrochloridu (282 mg, 2,26 mol) (získaného ako je uvedené vyššie) v dimetylformamide (30 ml) bol pridaný dietylfosforylkyanid (0,37 ml, 2,26 mol) a trietylamín (0,95 ml, 6,80 mol) v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 3,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá 0,5M vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát —> etylacetát : metánolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[metyl- (karbamoyl) metyl-karbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl) tio-6- [ (R) -1- (terc.butyldimetylsilyloxy) etyl]'-i-metyl-karbapén-2-em-3-karboxylátu (932 mg, výťažok 84%).

¹H-NMR (400 M Hz, CDCI3) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=7,9 Hz), 7,65 (2H, d, J=7,9), 7,35 (0,7H, s), 7,23 (0,3H, s), 5,46 (1H, d, J=13,9 Hz), 5,26 (1H, d, J=13,9 Hz), 4,62=4,40 (2H, m), 4,40 až 4,22 (3H, m), 4,20 (1H, s), 4,12 (2H, dd, J=14,2, 7,1 Hz), 4,07 až 3,97 (1H, m), 4,04 (0,6H, br s), 3,27 (1H, dd, J=5,0, 2,8 Hz), 3,15 (1H, dq, J=9,5, 7,3 Hz), 3,11 (2,4H, br s), 1,25 (6H, d,

J=5,8 Hz), 0,87 (9H, s), 0,08 (6H, d, J=5,0 Hz).

Referenčný príklad 45 p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(karbamoylmetyl)karbamoyl-1,3484

-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-terc.

butyldimetylsilyloxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát ľBQMSO

COOPNB (1) (Karbamoylmetyl)karbamová kyselina, terc.butylester

Do roztoku N-(terc.butoxykarbonyl)glycínu (3,01 g, 17,2 mol) v bezvodom metylénchloride (150 ml) bol pridaný 1-hydroxybenzotriazol (4,63 g, 34,3 mol), WSC (6,60 g, 34,4 mol) a 4-dimetylaminopyridín (210 mg, 1,7 2 mol) v ľadovom kúpeli.

Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, bol pridaný 28% vodný roztok amoniaku a výsledná zmes bola miešaná 15 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi metylénchloríd a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku (karbamoylmetyl)karbamovej kyseliny, terc.butylesteru (717,7 mg, výťažok 24%) ako bezfarebný priehľadný sirup.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 6, 202 (IH, br s), 5,763 (IH, br s), 5,267 (IH, br t, J až 5,1 Hz), 3,820 (2H, d, J=5,l Kz), 1,456 (9K, s).

(2) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(karbamoylmetyl) karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-terc. butyldimetylsilyloxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku (karbamoylmetyl)karbamovej kyseliny, terc.butylesteru (717,2 mg, 4,12 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 45(1)) v 1,4-dioxane (7,2 ml) bol pridaný roztok 4N chlorovodíka v 1,4-dioxane (7,2 ml) v ľadovom kúpeli.

485

Reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný dietyléter a reakčná zmes bola miešaná 30 minút. Výsledná reakčná zmes bola filtrovaná a získaný zvyšok bol premytý dietyléterom a vysušený počas vzniku glycinamidhydrochloridu (389 mg, výťažok 86%) ako biele kryštály. Následne, do suspenzie p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karboxy-1,3-tiazol-2-yl) azetidín-3-yl] tio-6- [ (R) -1-terc.

butyldimetylsilyloxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (566,6 mg, 0,85 mol) (získanej podľa opisu v referenčnom príklade 41(7)) a glycínamidhydrochloride (154,3 mg, 1,40 mol) (získanej ako je uvedené vyššie) v dimetylformamide (28,0 ml) bol pridaný dietylfosforylkyanid (0,2 ml, 1,32 mol) a trietylamín (0,36 ml, 2,6 mol) v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá 0,5M vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (2 : 3) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR, 5S, 6S)-2-{l-[4-(karbamoylmetyl)karbamoyl-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl]-1-metyl-karbapén-2-em-3-karboxylátu (428,6 mg, výťažok 70%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,4 Hz), 7,70

(IH, t,	J=5,3	Hz) , 7,65 1	[2H, d, J=	=8,4 Hz), 7,46	(IH, s),	6,15
(IH, br	s ) , 5,	46 (IH, d,	J=13,4 Hz	), 5,43 (IH, br	s), 5,27	(IH,
d, J=13,	4 Hz) ,	4,52 (IH,	t, J=8,3	Hz), 4,50 (IH,	t, J=8,3	Hz) ,
4,345 až	4,24 (	3H, m), 4,12	až 4,04 (	4H, m) , 3,265 (	IH, dd, J--	=5,1,
2,7 Hz) ,	3,155	(IH, dq, J=	=9,4, 7,0	Hz), 1,264 (3H,	d, J=7,0	Hz) ,
1,22 (3H	, d, J=	=4,8 Hz), 0,	86 (9H, s)	l, 0,09 (3H, s),	0,08 (3H,	s) .

486

Referenčný príklad 46 p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2 — {1—[4—((1S)-2-mety1-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) -propylkarbamoyi) -1, 3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6-f(R)-1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

TBDMSO

OPNB

(1) p-Nitrobenzylester N-(terc.butoxykarbonyl)-L-valínu Do roztoku N-(terc.butoxykarbonyl)-L-valínu (2,50 g, 11,5 mol) v metylénchloride (125 ml) bol pridaný p-nitrobenzylalkohol (3,52 g, 23,0 mol), WSC (4,41 g, 23,0 mol) a 4-dimetylaminopyridín (140 mg, 1,15 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka 4,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2:1) ako eluentu počas vzniku N-(terc. butoxykarbonyl]-L-valínu, p-nitrobenzylesteru (3,07 g, výťažok 76%) ako biele kryštály.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,53

(2H,	d,	J=8,8	Hz), 5,26 (2H,	d,	J=5,1 Hz)	, 5,	00 až 4,94 (1H, m),
2,21	až	2,10	(1H, m), 1,45	(9H,	s), 0,97	(3H,	d, J=7,3 Hz), 0,88
(3H,	d,	J=6, 6	Hz) .

(2) L-Valín-p-nitrobenzylalkoholhydrochlorid Do roztoku N-(terc.butoxykarbonyl)-L-valínu, p-nitrobenzylesteru (3,07 g, 8,71 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 46(1)) v 1,4-dioxane (31 ml) bol pridaný

487 roztok 4N chlorovodíka v 1,4-dioxane (31 ml) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku, do získaného zvyšku bol pridaný etylacetát a zmes bola filtrovaná. Výsledný zvyšok bol premytý etylacetátom a vysušený počas vzniku hydrochloridu p-nitrobenzylesteru L-valínu (2,21 g, výťažok 88%).

Elementárna analýza:

sledovaná C, 48,77% H, 5,63% N, 9,49% Cl, 12,38% vypočítaná C, 49,92% H, 5,93% N, 9,70% Cl, 12,28%

Do (514 mg, príklade dietylfosforylkyanid )3) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-((IS)-2-metyl-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-propylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-terc.

butyldimetylsilyloxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát roztoku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karboxy-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-terc.

butyldimetylsilyloxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (1,00 g, 1,48 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 41(7)) a hydrochloridu p-nitrobenzylesteru L-valínu 1,78 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom 46(2)) v dimetylformamide (50 ml) bol pridaný (27 5 μΐ, 1,78 mol) a diizopropyletylamín (620 μΐ, 3,56 mol) v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2 : 1 —> 1 : 1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl(ÍR, 5S, 6S)-2-{l-[4-( (IS)-2488

-m.etyl-1- (p-nitrobenzyloxykarbonyl) -propylkarbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[ (R)-1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl]-1-metylkarbapén~2-em-3-karboxylátu (l,15g, výťažok 86%).

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : 5 (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 8,21

Referenčný príklad 47 p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-((1S)-1-karbamoyl-2-metylpropylkarbamoyl) -1, 3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

TBDMSO

COOPNB (1) (1S)-l-Karbamoyl-2-metylkarbamová kyselina, terc. butylester

Do roztoku N-(terc.butoxykarbonyl)-L-valínu (3,00 g, 13,8 mol) v bezvodom metylénchloride (150 ml) bol pridaný 1-hydroxybenzotriazol (3,73 g, 27,6 mol), WSC (5,29 g, 27,6 mol) a 4-dimetylaminopyridin (169 mg, 1,38 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, bol pridaný 28% vodný roztok amoniaku a reakčná zmes bola miešaná 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená

489 medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu : metanol (9 : 1) ako eluentu počas vzniku (1S) — -l-karbamoyl-2-metylkarbamovej kyseliny, terc.butylesteru (2,81 g, výťažok 94%) ako biele kryštály.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 5,93 až 5,84 (IH, br s), 5,45 až 5,36 (IH, br s), 5,06 až 5,00 (IH, br s), 3,98 až 3,91 (IH, m), 2,21 až 2,12 (IH, m), 1,45 (9H, s), 0,99 (3H, d, J=6,6 Hz), 0, 94 (3H, d, J=6,6 Hz) .

(2) 2-Amino-3-metylbutylamidhydrochlorid

Do roztoku l-karbamoyl-2-metylkarbamovej kyseliny, terc.butylesteru (2,81 g, 13,0 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 47(1)) v 1,4-dioxane (28 ml) bol pridaný roztok 4N chlorovodíka v 1,4-dioxane (28 ml) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný etylacetát, reakčná zmes bola filtrovaná a získaný zvyšok premytý etylacetátom a vysušený počas vzniku (2S)-2-amino-3-metylbutylamid-hydrochloridu (1,94 g, výťažok 98%).

Elementárna analýza:

sledovaná C, 39,21% H, 8,34% N, 18,31% Cl, 23,38% vypočítaná C, 39,35% H, 8,59% N, 18,35% Cl, 23,23% (3) p-Nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-((1S)-l-karbamoyl-2-metyl-propylkarbamoyl) -1, 3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl} tio-6- [ (R) -1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylát

Do roztoku p-nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-[l-(4-karboxy-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(R)-1-terc.

butyldimetylsilyloxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (1,00 g, 1,48 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade

490

41(7)) a L-valínamidhydrochloridu (272 mg, 1,78 mol) získaného podľa opisu v referenčnom príklade 47(2) v dimetylformamide (50 ml) bol pridaný dietylfosforylkyanid (275 μΐ, 1,78 mol) a diizopropyletylamín (620 μΐ, 3,56 mol) v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 3) -> metylénchloridu : etylacetátu (3 : 1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzyl-(ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-((IS)-1-karbamoyl-2-metylpropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl} tio-6-[(R)-1-terc.butyldimetylsilyloxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylátu (934 mg, výťažok 82%).

	¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm)	8,22	(2H, d, J=8,8	Hz), 7,65
(2H,	d, J=8,8 Hz), 7,61 až 7,56 (1H,	br	d, J=9,5 Hz),	7,43 (1H,
s) ,	6,06 až 6,00 (1H, br s), 5,46	(1H,	d, J=13,9 Hz)	, 5,42 až
5,37	(1H, br s), 5,27 (1H, d, J=13,9	Hz) ,	4,50 (1H, dt,	1=8,1,4,4
Hz) ,	4,36 (1H, dd, J=8,8, 6,6 Hz),	4,32	až 4,25 (3H,	m) , 4,08
(2H,	dd, J=8,l, 5,1 Hz), 3,27 (1H, dd, J=	=5,1, 2,2 Hz) ,	3,16 (1H,
dq,	J=9,5, 7,3 Hz), 2,34 až 2,24 (	1H,	m), 1,26 (3H,	d, J=7,3
Hz) ,	1,25 (3H, d, J=6,6 Hz), 1,03 (	3H,	d, J=6,6 Hz),	1,01 (3H,

d, J=6, 6 Hz), 0,87 (9H, s), 0,08 (6H, d, J=4,4 Hz).

Referenčný príklad 48

3-Acetyltio-l-{4-[izopropyl-(p-nitorobenzyloxykarbonylmetyl)-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl[azetidín

491 (1) (terc.Butoxykarbonyl-izopropyl-amino)octová kyselina, metyl ester

Do roztoku hydrochloridu metylesteru glycínu (3,03 g, 24,1 mol) v metanole (150 ml) bol pridaný trietylamín (3,4 ml, 24,4 mol) a acetón (17,7 ml, 241,1 mol) a zmes bola miešaná vo vodnom kúpeli (50°C) 1,5 hodiny. Následne bol pridaný kyanoborohydrid sodný (3,03 g, 48,2 mol) v ladovom kúpeli a roztok 10% chlorovodíku v metanole bol pridaný do reakčnej zmesi na úpravu pH reakčnej zmesi na 3 až 4 a výsledná reakčná zmes bola miešaná 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku a zvyšok bol vysušený za zníženého tlaku. Do suspenzie získaného surového produktu v zmesi metanolu (45 ml) a metylénchloridu (90 ml) bol pridaný di-terc.butoxykarbónový anhydrid (10,5 g, 48,1 mol) a trietylamín (13,5 ml, 96,9 mol) v ladovom kúpeli a reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : etylacetátu (5:1) ako eluentu počas vzniku (terc. butoxykarbonylizopropylamino)octovej kyseliny, metylesteru (3,93 g, výťažok 70%) ako bezfarebný priehľadný sirup.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 4,54 až 4,40 (0,6H, m), 4,24 až 4,10 (0,4H, m), 3,86 (0,8H, s), 3,74 (1,2H, s), 3,72 (3H, s), 1,48 (3,6H, s), 1,42 (5,4H, s), 1,11 (2,4H, d, J=7,7 Hz), 1,09 (3,6H, d, J=7,7Hz) .

(2) (terc.Butoxykarbonylizopropylamino)octová kyselina, p-nitrobenzylester

492

Do roztoku (terc.butoxykarbonylizopropylami.no) octovej kyseliny, metylesteru (5,59 g, 24,2 mol) v zmesi metanolu (112 ml) a destilovanej vody (56 ml) bol pridaný IM vodný roztok hydroxidu sodného (37 ml) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 7 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, bol pridaný Dowex-50W v ľadovom kúpeli na úpravu pH reakčnej zmesi na 5 až 4. Reakčná zmes bola filtrovaná a filtrát koncentrovaný počas zníženého tlaku za vzniku (terc. butoxykarbonyl-izopropyl-amino)octovej kyseliny (5,25 g) ako surový produkt. Následne, do roztoku (terc. butoxykarbonylizopropylamino)octovej kyseliny (2,05 g, 9,44 mol) a p-nitrobenzylalkohole (2,89 g, 18,9 mol) v metylénchloride (100 ml) bol pridaný WSC (3,62 g, 18,9 mol) a 4-dimetylaminopyridín (120 mg, 0,98 mol) v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (5 : 2) ako eluentu počas vzniku (terc.butoxykarbonyl-izopropyl-amino) octovej kyseliny, p-nitrobenzylesteru (1,93 g, výťažok 58%) ako bledožltý priehľadný sirup.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,24 (1H, d, J=8,0 Hz), 8,22 (1H, d, J=8,0 Hz), 7,53 (2H, d, J=8,0 Hz), 5,26 (2H, s), 4,54 až 4,42 (0,5H, m), 4,28 až 4,16 (0,5H, m), 3,94 (1H, s), 3,84 (1H, s), 1,48 (4,5H, s), 1,36 (4,5H, s), 1,12 (3H, d, J=7,7 Hz), 1,10 (3H, d, J=7,7 Hz) .

(3) Hydrochlorid p-nitrobenzylesteru (izopropylamino) octovej kyseliny

Do roztoku (terc.butoxykarbonylizopropylamino)octovej kyseliny, p-nitrobenzylesteru (1,93 g, 5,48 mol) v 1,4-dioxane (20 ml) bol pridaný roztok 4N chlorovodíka v 1,4-dioxane (20 ml)

493 v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný dietyléter a reakčná zmes bola miešaná a filtrovaná 30 minút a získaný zvyšok bol premytý dietyléterom a vysušený počas vzniku hydrochloridu p-nitrobenzylesteru (izopropylamino)octovéj kyseliny (1,50 g, výťažok 95%) ako biele kryštály.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 8,26 (2H, d, J=8,8 Hz),

7,67 (2H, d, J-8,8 Hz), 5,43 (2H, s), 4,11 (2H, s), 3,50 až 3,40 (IH, m), 1,34 (6H, d, J=5,9 Hz).

(4) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-l-(4-[izopropyl-(p-nitorobenzyloxykarbonylmetyl) karbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl} azetidín

Do roztoku hydrochloridu p-nitrobenzylesteru ; izopropylamino)octovej kyseliny, (500 mg, 1,73 mol) (získanej

48(3)

3-terc.

podľa opisu v referenčnom príklade butyldifenylsilyloxy-1- (4-karboxyl-l, 3-tiazol-2-yl) azetidínu (506 mg, 1,15 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(4)) v dimetylformamide (15 ml) bol pridaný dietylfosforylkyanid (0,28 ml, 1,73 mol) a trietylamín (0,60 ml, 4,32 mol) v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá 0,5M vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej nasýtenej vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-{4- [izopropyl- (p-nitrobenzyloxykarbonylmetyl) karbamoyl] -1, 3-tiazol-2-yl}azetidínu (578 mg, výťažok 75%) ako bledožltý sirup.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,28 až 8,18 (2H, m), 7,70

494 až 7,30 (12H, m), 7,38 (0,4H, br s), 7,10 (0,6H, br s), 5,29 (0,8H, br s), 5,16 (1,2H, br s), 5,04 až 4,44 (3H, m), 4,20 až 3,85 (5H, m), 1,17 (6H, br s), 1,06 (9H, br s).

(5) 3-Hydroxy-l-{4-[izopropyl-(p-nitrobenzyloxykarbonylmetyl) karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldífenylsilyloxy-1-{4-[izopropyl-(p-nitrobenzyloxykarbonylmetyl) karbamoyl] -1,3-tiazol-2-yi}azetidínu (1,81 g, 2,69 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 48(4)) v bezvodom tetrahydrofurane (90 ml) bola pridaná kyselina octová (0,18 ml, 3,23 mol) a roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (3,23 ml, 3,23 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu· : etylacetát (1:1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-{4-[izopropyl-(p-nitrobenzyloxykarbonylmetyl)karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (968 mg, výťažok 83%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Kz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,22 (2H, d, J= 8,0 Hz),

7,55 (1H, d, J= 8,0 Hz), 7,42 (1H, d, J= 8,0 Hz), 7,39 (0,4H,

s), 7,12 (0,6H, s), 5,29 (1,2H, br s), 5,22 (0,8H, br s), 5,03 až 4,89 (0,5H, m), 4,89 až 4,76 (1H, m), 4,59 (1H, br s), 4,32 (1H, t, J=7,3 Hz), 4,22 až 4,02 (2H, m), 4,02 až 3,85 (1H, m), 3,85 (1H, m), 1,10 až 1,03 (6H, m).

(6) 1-{4-[Izopropyl-(p-nitrobenzyloxykarbonylmetyl) karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-(4-[izopropyl-(p-nitrobenzyloxykarbonylmetyl) karbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (968 mg, 2,23 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 48(5)) v metylénchloride (50 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,42 ml, 5,34 mol) a trietylamín (0,37 ml, 2,67 mol) v ľadovom kúpeli. Reakčná zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená

495 medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýreným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu počas vzniku

1—{4—[izopropyl-(p-nitrobenzyloxykarbonylmetyl)karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-3-metánsulfonyloxyazetidínu (835 mg, výťažok 73%) ako bledožltá pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=7, 9 Hz),

7,55 (IH, d, J=7,9 Hz), 7,48 (0,4H, br s), 7,43 (IH, d, J= 7,9

Hz), 7,26 (0,6H, br s), 5,51 až 5,16 (3H, m obsahujúci 5,29 (1,2H, s), 5,22 (0,8H, s)), 5,04 až 4,89 (0,4H, m), 4,89 až 4,72 (IH, m), 4,59 až 4,48 (IH, m), 4,48 až 4,37 (IH, m), 4,37 až 4,18 (2H, m), 4,18 až 3,96 (2H, m), 3,11 (3H, s), 1,30 až 1,17 (6H, m) .

(7) 3-Acetyltio-l- {4 - [izopropyl- (p-nitrobenzyloxykarbonylmetyl) karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidín

Do roztoku l-{4-[izopropyl-(p-nitrobenzyloxykarbonylmetyl) karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}-3-metánsulfonyloxyazetidínu (835 mg, 1,63 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 48(6)) v dimetylformamide (42 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,12 g, 9,77 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C) 7 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1:1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-1-{4-[izopropyl-(p-nitrobenzyloxykarbonylmetyl)karbamoyl]-1,3-tiazol-2-ylJazetidínu (312 mg, výťažok 39%) ako bledohnedá pevná látka.

496

^-NMR	(400 M Hz, CDC1₃) : δ	(ppm)	8,21	(2H, d, J=6, 9 Hz) ,
7,55 (IH,	d, J=8,3 Hz), 7,44 (0	/ 6H,	br s),	7,43 (IH, d, J=8,3
Hz), 7,17	(0,6H, br s) , 5,19 (1,	2H, s	), 5,22	(0,8H, br s), 5,02
až 4,90 (0	,6H, m), 4,90 až 4,78	(0,4H,	m) , 4,	65 až 3,65 (7H, m) ,
2,36 (3H,	br s), 1,40 - 1,18 (6H,	m) .

Referenčný príklad 49

3-Acetyltio-l-[4-(karbamoylmetylizopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín

(1) KarbamoyImetyl-izopropyl-karbamové kyselina, terc.butyiester

Do roztoku (t-butoxykarbonylizopropylamino)octovej kyseliny (3,20 mg, 14,7 mol) (získanej podľa opisu v referenčnom príklade 48(2)) a 1-hydroxybenzotriazolu (4,0 g, 29,6 mol) v metylénchloride (150 ml) bol pridaný WSC (5,6 g, 29,2 mol) a 4-dimetyl-aminopyridín (200 mg, 1,64 mol) v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie, bol pridaný 28% vodný roztok amoniaku (40 ml) a výsledná zmes bola miešaná 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi metylénchlorid a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku karbamoylmetylizopropylkarbamovej kyseliny, terc.butylesteru (2,67 g, výťažok 84%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 5,434 (IH, br s), 4,25 (IH, br s), 3,735 (2H, s), 1,478 (9H, s), 1,14 (6H, d, J=6,6Hz).

497 (2) 2-Izopropylaminoacetamidhydrochlorid

Do roztoku karbamoylmetylizopropylkarbamovej kyseliny, terc.butylesteru (2,67 g, 12,3 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 49(1)) v 1,4-dioxane (30 ml) bol pridaný roztok 4N chlorovodíka v 1,4-dioxane (30 ml) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný dietyléter a reakčná zmes bola miešaná 30 minút. Výsledná zmes bola filtrovaná a zvyšok bol premytý dietyléterom a vysušený počas zníženého tlaku za vzniku 2-izopropylaminoacetamidhydrochloridu (1,82 g, výťažok 97%) ako biele kryštály.

¹H-NMR (500 M Hz, CD₃OD): δ (ppm) 3,80 (2H, s), 3,46 až 3,38 (1H, m), 1,34 (6H, d, J=6,8 Hz) (3) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-[4-(karbamoylmetylizopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 2-izopropylaminoacetamidhydrochloridu (500 mg, 3,28 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 49(2)) a 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l- ( 4-karboxyl-l, 3-tiazol-2-y 1) azetidínu (961 mg, 2,19 mol) v dimetylformamide (29 ml) bol pridaný dietylfosforyikyanid (0,54 ml, 3,29 mol) a trietylamín (1,15 ml, 8,19 mol) v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná pri teplote, miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá 0,5M vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-[4-(karbamoylmetylizopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-y1]azetidínu (1,18 g, výťažok 100%) ako bledožltý olej.

498

H-NMR (400 M	Hz,	CDC1₃) : δ	(ppm)	7,62 (4H,	d, J=6,6 Hz),	7,52
,36 (6H,	m) ,	7,	21	až 6,85	(1H,	m), 4,80	až 4,72 (1H,	m) ,
(1H, t,	u=7	,3	Hz	), 4,24	(1H,	t, J=7,3	Hz) , 4,16 až	4,01
m), 4,01	až	3,8	8 (	(2H, m),	1,25	(6H, d, J=	^:6, 7 Hz ) , 1,07	(9H,

br s) .

(4) 1-[4-(Karbamoylmetylizopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-ylj-3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-[4- (karbamoylmetylizopropylkarbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl] azetidínu (6,52 g, 11,8 mol) (získaného podľa, opisu v referenčnom príklade 49(3)) v bezvodom tetrahydrofuráne (326 ml) bol pridaný a 1,OM roztok tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (14,2 ml, 14,2 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát: metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku 1-[4-(karbamoylmetylizopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]-3-hydroxyazetidínu (2,35 g, výťažok 67%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,20 až 7,02 (0,6H, m), 7,02

až 6,80	(0,6H, m),	5,86	až	5, 62	m)	1, 5,62	až	5,32	(0,6H,
m), 5,25	až 5,14 (.0	,3H,	m),	4,90	až 4,75	(0,7H,	m) ,	4,67	(0,7H,
kvint., i	J=6, 6 Hz) ,	4, 43	až	4,34	(0,4H,	), 4,34	až	4,22	(0,6H,
m) , 4,03	(2H, s),	4,00	až	3, 91	(2H, m)	, 3,89	(0,	3H,	kvint.,
J=6,0 Hz)	, 1,26 (6H,	dd,	J=6	,7, 2,	.4 Hz) .

(5) 1-[4-(Karbamoylmetylizopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]-3-metánsulfonyloxyazetidín a l-[4- ( kyanometylizopropylkarbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl] -3-meuánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku I-[4-(karbamoylmetylizopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yi]-3-hydroxyazetidínu (2,35 g, 7,88 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 49(4)) v metylénchloride (120

499

11,8 mol) a

Reakčná zmes skontrolovaní ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,91 ml, trietylamín (1,66 ml, 11,8 mol) v ladovom kúpeli bola miešaná v ladovom kúpeli 2 hodiny. Po ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku 1- [4-(karbamoylmetylizopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]-3-metánsulfonyloxyazetidínu (516 mg, výťažok 17%) ako bledožltá pevná látka a 1-[4-(kyanometylizopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]-3-metánsulfonyloxyazetidínu (634 mg, výťažok 22%) ako bledožltá pevná látka.

1-[4-(Karbamoylmetylizopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]-3-metánsulfonyloxyazetidín

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,15 až	6,72	(IH, m),	5,65
až 5,15 (IH, m), 4,79 až 4,62 (-1H, m), 4,44	(2H,	t, J=6,7	Hz) ,
4,26(2H, d, J=6,7 Hz), 4,05 (2H, m), 3,11 (3H,	s) ,	1,26 (6H,	m) .

1-[4-(Kyanometylizopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]-3-metánsulfonyloxyazetidín

	¹H-NMR	(400 M	Hz, CDCI3) : δ	(ppm)	7,55	až 7,	10 (	IH, m) , 5,50
až	5,38 (3	H, m) ,	4,93 až 4,78	(IH,	m) ,	4, 60	až	4,00 (6H, m
ob£	sahujúci	4,51	(2H, t, J=9,6	Hz) ,	4,32	(2H,	dd,	J=9,6, 3,7
Hz)	), 3,11	(3H, s:	I, 1,31 (6H, d,	J=6,8	Hz) .

(6) 3-Acetyltio-l-[4-(karbamoylmetylizopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 1-[4-(karbamoylmetylizopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]-3-metánsulfonyloxyazetidínu (516 mg, 1,37 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 49(5)) v dimetylformamide (15 ml) bol pridaný tioacetát draselný (939 mg, 8,22 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C)

500 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát —> etylacetát : metanolu (20 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-1-[4-(karbamoylmetylizopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (347 mg, výťažok 71%) ako bledohnedá pevná látka.

^Ή-ΝΜΡ. (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,45 až 6,72 (1H, m), 4,76 až 4,61 (1H, m), 4,51 (2H, t, J=7,4 Hz), 4,47 až 4,40 (1H, m), 4,40 (2H, s), 3,98 (2H, t, J=7,4 Hz), 2,37 (3H, s), 1,26 (6H, d, J=6,8 Hz).

Referenčný príklad 50

3-Acetyltio-l-[4-(kyanometylizopropyl-karbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

(1) 3-Acetyltio-l-[4-(kyanometylizopropyl-karbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 1-[4-(kyanometylizopropylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]-3-metánsulfonyloxyazetidínu (635 mg, 1,77 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 49(5)) v dimetylformamide (19 mi) bol pridaný tioacetát draselný (1,21 g, 10,6 mol) pri teplote miestnosti a reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C) 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným

501 roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1:1)-» etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-[4-(kyanometylizopropyl-karbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl]-azetidínu (344 mg, výťažok 57%) ako bledohnedá pevná látka.

'H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,58 až 7,18 (1H, m), 4,96 až 4,82 (1H, m), 4,82 až 4,10 (5H, m obsahujúci 4,54 (2H, t, J=8,4 Hz), 4,50 až 4,40 (1H, m)), 4,01 (2H, t, J=8,4 Hz), 2,36 (3H, s), 1,30 (6H, d, J=6,8 Hz).

Referenčný príklad 51

3-Acetyltio-l-{4-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperidín-4-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl)azetidín

(1) 4-Hydroxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)piperidín Do roztoku 4-hydroxypiperidínhydrochloridu (3,0 g, 21,8 mol) v zmesi metylénchloridu (90 ml) a pyridínu (15 ml) bol pridaný p-nitrobenzylester chloromovej kyseliny (15,4 g, 72,0 mol) a trietylamín (13,1 ml, 93,8 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 3 dni. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 1) —» etylacetátu ako eluentu počas vzniku 4-hydroxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)piperidínu (2,96 g, výťažok 48%) ako

502 bledožlté kryštály.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,l Hz), 8,51 (2H, d, J=8,l Hz), 5,23 (2H, s), 3,98 až 3,87 (3H, m), 3,30 až 3,15 (2H, m), 1,96 až 1,85 (2H, m), 1,59 až 1,48 (2H, m).

(2) 4-Metánsulfonyloxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)piperidín Do roztoku 4-hydroxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)piperidínu (2,96 g, 14,8 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 51(1)) v metylénchloride (90 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (1,15 ml, 14,8 mol) a trietylamín (2,07 ml, 14,8 mol) v ladovom kúpeli. Reakčná zmes bola zohriata na teplotu miestnosti za 10 minút a miešaná 6 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol rekryštalizovaný z roztoku hexán : etylacetátu (1 : 1) za vzniku 4-metánsulfonyloxy-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyi)piperidínu (3,31 g, výťažok 87%) ako bledožlté kryštály.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,51

(2H,	d, J=8,8	Hz) ,	5,23, (2H,s),	4,96 až 4,90	(IH, m) , 3, 79 až
3,72	(2H, m),	3,51	až 3,44 (2H,	m), 3,05 (3H,	s) , 2,10 až 1,96
(2H,	m), 1,92	až 1,	84 (2H, m).

(3) 4-Azido-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)piperidín

Do roztoku 4-metánsulfonyloxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl( piperidínu (3,31 g, 9,24 referenčnom príklade 51(2)) mol) (získaného podlá opisu v v dimetylformamide (100 ml) bol pridaný azid sodný (660 mg, 10,2 mol) a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (100°C) 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran

503 sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (3 : 1 -» 1 : 1 ) ako eluentu počas vzniku 4-azido-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)piperidínu (2,81 g, výtažok 100%) ako bledožlté kryštály.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,51 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,22 (2H, s), 3,86 (2H, dt, J=13,9, 5,1 Hz), 3,68 až 3,62 (IH, m), 3,32 až 3,20 (2H, m), 1,98 až 1,85 (2H, m), 1, 68 až 1,61 (2H, m) .

(4) 4-Amino-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)piperidín Do roztoku 4-azido-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperidínu (2,81 g, 9,17 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 51(3)) v acetonitrile (84 ml) bol pridaný trifenylfosfín (2,53 g, 9,63 mol) a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (70°C) 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný dekahydrát síranu sodného (3,10 g, 9,63 mol) a reakčná zmes bola miešaná 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a rozdelená medzi metylénchlorid a 0,lM vodný roztok chlorovodíka. Do získanej vodnej vrstvy bol pridaný metylénchlorid a hydrogénuhličitan sodný a vodná vrstva bola extrahovaná metylénchloridom. Získaná organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vysušený za zníženého tlaku počas vzniku 4-amino-l-(p-nitrobenzyl-oxykarbonyl)piperidínu (2,33 g, výťažok 91%) ako bledožlté kryštály.

¹H-NMR (400 M	Hz,	CDC1₃) : δ (ppm)	8,22	(2H, d, 8,8 Hz),	7,51
(2H, d, 8,8 Hz),	5,22	(2H, s), 4,18 až	4,06	(2H, m), 3,01 až	2,83
(2H, m), 1,88 až	1, 80	(2H, m), 1,34 až	1,22	(2H, m).

(5) 3-terc. Butyldifenyloxy-1-{4- [1- (p-nitrobenzyloxykarbonyl) -piperidín-4-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 4-amino-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)piperidínu (382 mg, 1,37 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade

504

51(4)) a 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-karboxyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (500 mg, 1,14 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 2(4)) v dimetylformamide (25 ml) bol pridaný dietylfosf orylkyanid (208 μΐ, 1,37 mol) a trietyiamín (192 μΐ, 1,37 mol) v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej etylacetátu (1:1 -> 1 : 3) ako

3-terc.butyldifenyloxy-1-{4- (1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperidín-4-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (574 mg, výťažok 72%) ako bledožltá pevná látka.

kolóne za použitia n-hexán eluentu počas vzniku

	¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃)	: δ (ppm) 8,24 i	(2H, d, J=8	,8 Hz), 7,62
(4H,	d, J=8,8 Hz), 7,54 až	7,38 (6H, m),	7,36 (1H,	s ) , 7,09 až
7,04	(1H, br d, J=8,8 Hz) ,	5,23 (2H, s),	4,79 až 4,	,72 (1H, m),
4,22	až 4,04 (5H, m) , 4,01	(2H, dd, J=8,8,	5,1 Hz),	3,08 až 2,97
(2H,	m) , 2,08 až 2,00 (2H,m	) , 1,55 až 1,42	(2H,m), 1,	07 (9H, s).

(6) 3-Hydroxy-l-(4-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperidín-4-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl(azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenyloxy-1-{4-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperidín-4-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl(azetidínu (570 mg, 0,820 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 51(5)) v bezvodom tetrahydrofuráne (17 ml) bola pridaná kyselina octová (56 μΐ, 0, 984 mol) a l,0M roztok tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (984 μΐ, 0,984 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá

505 nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1:3)-» etylacetát : metanolu (95 : 5) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-{4-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperidín-4-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yljazetidínu (360 mg, výťažok 95%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,51 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,39 (1H, s), 7,11 až 7,06 (1H, br d, J=8,l Hz), 5,23 (2H, s), 4,88 až 4,80 (1H, m), 4,32 (2H, dd, J=8,8,

6,6 Hz),	4,24	až	4,04	(3H, m),	3,96	(2H,	dd,	J=9,5,	4,4 Hz),	3,12
až 2,95	(2H,	m) ,	2,37	až 2,32	(1H,	d,	J=5,	9 Hz),	2,04 až	1,99
(2H, m),	1,55	až	1, 43	(2H, m).

(7) 3-Metánsulfonyloxy-l-(4-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperidín-4-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-{4-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperidín-4-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (360 mg, 0,780 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 51(6)) v metylénchloride (18 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (181 μΐ, 2,34 mol) a trietylamín (328 μΐ, 2,34 mol) v ladovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ladovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát —» etylacetát : metanolu (98 : 2) ako eluentu počas vzniku S-metánsulfonyloxy-l-M-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperidín-4-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl(azetidínu (390 mg, výťažok 93%) ako bledožltá pevná látka.

506 ^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,52 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,52 (1H, s), 7,06 až 7,02 (1H, br d, J=7,7

Hz), 5,45 až 5,40 (1H, m), 5,23 (2H, s), 4,45 (2H, dd, J=10,3,

6,8 Hz), 4,27 (2H, dd, J=10,3, 4,3 Hz), 4,24 až 4,06 (3H, m),

3,11 (3H, s), 3,10 až 2,95 (2H, m), 2,07 až 2,00 (2H, m), 1,56 až 1,44 (2H, m).

(8) 3-Acetyltio-l-{4- [1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperidín-4-ylkarbamoyi]-1,3-tiazol-2-yl(azetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-{4-[1-(p-nitrobénzyloxykarbonyl)-piperidín-4-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (390 mg, 0,723 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 51(7)) v dimetylformamide (20 ml) bol pridaný tioacetát draselný (496 mg, 4,34 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 2) —» etylacetátu ako eluentu počas vzniku

3-acetyltio-l-{4-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperidin-4-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl(azetidínu (262 mg, výťažok 70%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,l Hz), 7,51

(2H,	d, J=8,l	Hz), 7,41 (1H, s), 7,08 až	7,04	(1H, br	d, J
Hz) ,	5,23 (2H	, s), 4,53 (2H, t, J=8,8 Hz),	4,46	až 4,40	(IH,
4,22	až 4,04	(3H, m), 3,98 (2H, dd, J=8,8,	5,9 Hz), 3,12	až :
(2H,	m), 2,37	(3H, s), 2,06 až 2,00 (2H, m),	1,55	až 1,43	(2H,i

Referenčný príklad 52

3-Acetyltio-l-(4-[(3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín507

-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

AcS

NV^NPNZ (1) (3R)-3-Hydroxy-l-{p-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrolidín

Do suspenzie (3R)-3-hydroxypyrolidínhydrochlorid (7,00 g, 56,6 mol) v metylénchloride (210 ml) bol pridaný p-nitrobenzylester chloromovej kyseliny (13,4 g, 62,3 mol) a trietylamín (17,4 ml, 125 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 1) —> etylacetátu ako eluentu počas vzniku (3R)-3-hydroxy-l-(p-nitrobenzyl-oxykarbonyl) pyrolidínu (13,6 g, výťažok 90%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,l Hz), 7,53 (2H, d, J=8,l Hz), 5,24 (2H, s), 4,55 až 4,50 (1H, m), 3,63 až 3,53 (3H, m), 3,51 až 3,44 (ÍH, m), 2,09 až 1,93 (2H, m) (2) (3R) -3-Metánsulfonyloxy-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) pyrolidín

Do roztoku (3R)-3-hydroxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) pyrolidínu (9,0 g, 33,8 mol) v metylénchloride (270 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (2,88 ml, 37,2 mol) a trietylamín (5,21 ml, 37,2 mol) v ladovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ľadovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá

508 nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 2) -» etylacetátu ako eluentu počas vzniku (3R)-3-metánsuifonyloxy-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrolidínu (11,5 g, výťažok 99%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,1 Hz), 7,53 (2H, m), 5,33 až 5,23 (IH, m) 5,24 (2H, s), 3,82 (IH, dd, J=12,5, 5,1 Hz), 3,72 až 3,53 (3H, m), 3,06 (3H, s), 2,42 až

2,26 (IH, m), 2,26 až 2,11 (IH, m).

(3) (3S)-3-Azido-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrolidín

Do roztoku (3R) -3-metánsulfonyloxy-l- (p-nitrobenzyloxykarbonyl) -pyrolidínu (4,00 g, 11,6 referenčnom príklade 52(2)) mol) (získaného podía opisu v v dimetylformamide (120 ml) bol pridaný azid sodný (831 mg, 12,8 mol) a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (100°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (3 : 1 —» 1:2) ako eluentu počas vzniku (3S)-3-azido-l-(p-nitrobenzyl-oxykarbonyl) pyrolidínu (3,43 g, výťažok 100%) ako bledožltá pevná látka.

^•H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,54 (2H, d, J=8,7 Hz), 5,18 (2H, s), 4,24 až 4,38 (IH, m), 3,62 až

3,48 (4H, m), 2,19 až 2,11 (2H, m).

(4) (3S)-3-Amino-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrolidín

Do roztoku (3S)-3-azido-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) pyrolidínu (3,43 g, 11,6 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 52(3)) v acetonitrile (103 mi) bol pridaný

509 trifenylfosfín (3,19 g, 12,2 mol) a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (7Q°C) 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný dekahydrát síranu sodného (3,93 g, 12,2 mol) a reakčná zmes bola miešaná 5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a rozdelená medzi metyiénchioríd a 0, IM vodný roztok chlorovodíka. Do získanej vodnej vrstvy bol pridaný metyiénchioríd a hydrogénuhličitan sodný a vodná vrstva bola extrahovaná metylénchloridom. Získaná organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vysušený počas zníženého tlaku za vzniku (3S)-3-amino-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) pyrolidínu (2,83 g, výťažok 92%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,52 (2H, d, J=8,7 Hz), 5,23 (2H, s), 3,68 až 3,57 (3H, m), 3,52 až 3,44 (IH, m), 3,19 až 3,11 (IH, m), 2,14 až 2,04 (IH, m), 1,77 až 1,64 (IH, m).

(5) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-yl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do suspenzie (3S)-3-amino-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) pyrolidínu (363 mg, 1,37 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 52(4)) a 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-karboxyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (500 mg, 1,14 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 2(4)) v dimetylformamide (25 ml) bol pridaný dietylfosforylkyanid (208 μΐ, 1,37 mol) a trietylamín (192 μΐ, 1,37 mol) v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na

510 silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 1 —>

: 3) ako eluentu počas vzniku 3-terc. butyldifenylsilyloxy-1- (4- [ (3S) -1- (p-nitrobenzyloxykarbonyl) -pyrolidín-3-ylkarbamoyl ] -1, 3-tiazol-2-yl}azetidínu (566 mg, výťažok 72%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, m), 7,61 (4H, d,

J-8,8	Kz	) , 7,	53 (2H, m), 7,48 až	7,38	(6H,	m), 7,37 (IH, s),
7,22	až	7,15	(IH, br t, J-8,3 Hz),	5,24	(2H,	d, J=10,7 Hz), 4,80
až 4,	74	(IH,	m), 4,67 až 4,59 (IH	, m) ,	4,11	(2H, t, J=7,3 Hz),
4,07	až	4,00	(2H, m), 3,81 (IH,	dt, J=	= 10,7	, 5,9 Hz) , 3,67 až

3,52 (2H, m), 3,40 (IH, dd, J=ll,2, 5,4 Hz), 2,33 až 2,22 (IH,

m), 2,08 až 1,92 (IH, m), 1,07 (9H, s).

(6) 3-Hydroxy-l-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-terc.butyidifenylsilyloxy-1-{4-[(3S)-1- (p-nitrobenzyioxykarbonyl)-pyrolidín-3-ylkarbamoyi]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (560 mg, 0,816 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 52(5)) v bezvodom tetrahydrofuráne (17 ml) bola pridaná kyselina octová (56 ul, 0,980 mol) a roztok 1,OM tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (980 μΐ, 0,980 mol) v ľadovom kúpeli. Zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný etylacetát a voda a vodná vrstva bola extrahovaná etylacetátom. Získaná organická vrstva bola dostatočne premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát -» etylacetát: metanolu (95 : 1) ako eluentu počas vzniku

3-hydroxy-l-{ 4- [ (3S) -1- (p-nitrobenzyloxykarbonyl) -pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (359 mg, výťažok 98%) ako biela pevná látka.

511 ^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, m), 7,53 (2H, m), 7,40 (1H, s), 7,24 až 7,17 (1H, br s), 5,30 až 5,18 (2H, m), 4,89 až 4,82 (1H, m), 4,66 až 4,58 (1H, m), 4,33 (2H, t, J=7,8 Hz), 3,96 (2H, dd, J=8,8, 3,9 Hz), 3,80 (1H, dt, J=ll,2, 5,8 Hz), 3,66 až 3,52 (2H, m), 3,46 až 3,39 (1H, m), 2,44 až 2,37 (1H, br s), 2,33 až 2,22 (1H, m), 2,10 až 1,95 (1H, m).

(7) 3-Metánsulfonyloxy-l-{4- [ (3S) -1- (p-nitrobenzyloxykarbonyl) -pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1, 3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-{ 4-[( 3S )-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) -pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (350 mg, 0,782 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 52(6)) v metylénchloride (18 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (182 μΐ, 2,35 mol) a trietylamín (329 μΐ, 2,35 mol) v ladovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ladovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát -> etylacetát : metanolu (98 : 2) ako eluentu počas vzniku 3-metánsulfonyloxy-l— {4—[(3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (410 mg, výťažok 99%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR	(400 M Hz, CDCI3) : δ (ppm)	8,21	(2H,	m), 7,53	(2H, m),
7,46 (1H,	s), 7,20 až 7,14 (1H, br	s) ,	5,45	až 5,40	(1H, m),
5,24 (2H,	d, J=8,8 Hz), 4,66 až 4	,59	(1H,	m) , 4,46	(2H, t,
J=8,l Hz),	4,27 (2H, dd, J=9,9, 4,0	Hz) ,	3,81	(1H, dt,	J=ll,0,
6,3 Hz), 3	,67 až 3,52 (2H, m), 3,42	(1H	, dd,	J=ll,0,	5,1 Hz),

3,12 (3H, s), 2,31 až 2,24 (1H, m), 2,07 až 1,95 (1H, m).

(8) 3-Acetyltio-l-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)512

-pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-yl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidínu (410 mg, 0,780 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 52(7)) v dimetylformamide (21 ml) bol pridaný tioacetát draselný (534 mg, 4,68 mol) pri teplote miestnosti a reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 2) -> etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-ylJazetidínu (287 mg, výťažok 73%) ako bledohnedá pevná látka.

	1	H-NMR (400 M Hz, CDC1₃	) : δ	(ppm) 8,22 (2H, m),	7,52	(2H,	m) ,
7,	42	(1H, s), 7,20 až 7,15	(1H,	br s), 5,24 (2H,	d, J=	10,7	Hz) ,
4,	66	až 4,59 (1H, m),	4,53	(2H, t, J=8,3	Hz) ,	4, 47	až
4,	41	(1H, m), 3,99 (2H, t,	J=6,	4 Hz), 3,84 až 3,76	(1H,	m) ,	3, 65
až	3	,53 (2H, m), 3,41 (1H	r dd,	J=ll,7, 4,9 Hz),·	2, 37	(3H,	s) ,
2,	33	až 2,20 (1H, m), 2,07	až 1,	,93 (1H, m).

Referenčný príklad 53

3-Acetyltio-l-{ 4- [ (3R) -1- (p-nitrobenzyloxykarbonyl) -pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

AcS-

\^-NPNZ (D (3S)-3-Acetoxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl·)pyrolidín

513

Do roztoku (3R)-3-metánsulfonyloxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrolidínu (7,50 g, 21,8 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 52(2)) v dimetylformamide (225 ml) bol pridaný acetát draselný (6,41 g, 65,3 mol) a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá 10% vodným roztokom chloridu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2 : 1 -» 1:2) ako eluentu počas vzniku (3S)-3-acetoxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrolidínu (5,51 g, výťažok 82%) ako biele kryštály.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,l Hz), 7,53 (2H, d, J=8,l Hz), 5,33 až 5,29 (IH, m), 5,24 (2H, s), 3,68 až 3,50 (4H, m), 2,19 až 2,02 (2H, m), 2,04 (3H, s).

(2) (3S)-3-Hydroxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrolidín

Do roztoku (3S)-3-acetoxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidínu (5,51 g, 17,8 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 53(1)) v metanole (200 ml) bolo pridané katalytické množstvo metoxidu sodného a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 4,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol roztok 4N chlorovodíka v 1,4-dioxane (4,3 ml) pridaný na neutralizáciu zmesi. Výsledná reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 2) -» etylacetátu ako eluentu počas vzniku (3S)-3-hydroxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)

514 pyrolidínu (4,00 g, výťažok 84%) ako biele kryštály.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,l Hz), 7,53 (2H, d, J=8,l Hz), 5,24 (2H, s), 4,55 až 4,50 (IH, m), 3,63 až 3,52 (3H, m), 3,52 až 3,44 (IH, m), 2,09 až 1,92 (2H, m).

(3) (3S)-3-Metánsulfonyloxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) pyroiidín

Do roztoku (3S)-3-hydroxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) pyrolidínu (4,00 g, 15,0 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 53(2)) v metylénchloride (120 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (1,28 ml, 16,5 mol) a trietylamín (2,31 ml, 16,5 mol) v ladovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ladovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 2,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 2) -» etylacetátu ako eluentu počas vzniku (3S)-3-metánsulfonyloxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) pyrolidínu (5,33 g, výťažok 100%) ako bezfarebný priehladný sirup.

	^H-NMR	(400 M Hz, CDCI3) : δ (ppm) 8,23	(2H, d, J=8,8	Hz) ,
7,	53 (2H,	dd, J=8,l, 3,7 Hz), 5,33 až 5,23	(IH, m)_r 5,24	(2H,
s)	, 3,82 1	(IH, dd, J=12,5, 5,1 Hz), 3,72 až	3,53 (3H, m),	3,06

(3H, s), 2,42 až 2,26 (IH, m), 2,26 až 2,11 (IH, m).

(4) (3R) -3-Azido-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyroiidín

Do roztoku (3S)-3-metánsulfonyloxy-l- (p-nitrobenzyloxykarbonyl) pyrolidínu (5,33 g, 15,0 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 53(3)) v dimetylformamide (159 ml) bol pridaný azid sodný (1,07 g, 16,5 mol) a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (100°C) 3,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia

515 reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá 10% vodným roztokom chloridu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (3:1 —» 1:2) ako eluentu počas vzniku (3R)-3-azido-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrolidínu (4,48 g, výťažok 100%) ako bezfarebný olej.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,53 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,24 (2H, s), 4,24 až 4,18 (IH, m), 3,62 až 3,48 (4H, m), 2,19 až 2,02 (2H, m).

(5) (3R)-3-Amino-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrolidín

Do roztoku (3R)-3-azido-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) pyrolidínu (4,48 g, 15,4 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 53(4)) v acetonitrile (134 ml) bol pridaný trifenylfosfín (4,22 g, 16,1 mol) a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (70°C) 1,5 hodiny. Po odstránení surových reaktantov bol pridaný dekahydrát síranu sodného (5,19 g, 16,1 mol) a reakčná zmes bola miešaná 5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a rozdelená medzi metylénchlorid a 0,lM vodný roztok chlorovodíka. Do získanej vodnej vrstvy bol pridaný metylénchlorid a hydrogénuhličitan sodný a vodná vrstva bola extrahovaná metylénchloridom. Získaná organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vysušený počas zníženého tlaku za vzniku (3R)-3-amino-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) pyrolidínu (3,53 g, výťažok 86%) ako bledožlté kryštály.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,52 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,23 (2H, s), 3,66 až 3,58 (3H, m), 3,52 až

3,45 (IH, m), 3,19 až 3,12 (IH, m), 2,13 až 2,04 (IH, m), 1,76 až

1, 66 (IH, m) .

516 (6) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-yl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do suspenzie (3R)-3-amino-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl·) pyrolidínu (363 mg, 1,37 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 53(5)) a 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-karboxvl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (500 mg, 1,14 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(4)) v dimetylformamide (25 ml) bol pridaný dietylfosforylkyanid (208 μΐ, 1,37 mol) a trietylamín (192 μΐ, 1,37 mol) v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1:1 —> 1:3) ako eluentu počas vzniku 3-terc. butyldifenylsilyloxy-1-(4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (598 mg, výťažok 51%) ako bledožltá pevná látka.

'H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,62 (4H, d, J=8,l Hz), 7,56 až 7,38 (8H, m), 7,37 (1H, s), 7,22 až 7,16 (1H, br s), 5,24 (2H, d, J=8,8 Hz), 4,76 (1H, ddd, J=6, 6, 5,1 Hz), 4,67 až 4,58 (1H, m), 4,15 až 4,07 (2H, m), 4,06 až 3,98 (2H, m), 3,86 až 3,78 (1H, m), 3,67 až 3,52 (2H, m), 3,40 (1H, dd, J=ll,0, 5,1 Hz), 2,34 až 2,20 (1H, m), 2,02 až 1,90 (1H,m), 1,07(9H,s).

(7) S-Hydroxy-l-B^- [ (3R) -1- (p-nitrobenzyloxykarbonyl) -pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do suspenzie 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-í4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) -pyrolidín-3-ylkarbamoyl] -1, 3-tiazol-2517

-yl}azetidínu (590 mg, 0,860 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 53(6)) v bezvodom tetrahydrofurane (18 ml) bola pridaná kyselina octová (59 μΐ, 1,03 mol) a roztok 1, OM tetra-n-butylamóniumf luoridu v tetrahydrofurane (1,03 ml, 1,03 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát etylacetát :

metanolu (95 : 5) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-yl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-ylJazetidínu (378 mg, výťažok 98%) ako biela pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,21 (2H, m), 7,53 (2H, m), 7,40 (IH, s), 7,24 až 7,18 (IH, br s), 5,30 až 5,18 (2H, m), 4,88 až 4,81 (IH, m), 4,66 až 4,58 (IH, m), 4,32 (2H, t, J=7,8

Hz), 3,96 (2H, dd, J=8,8, 4,9 Hz), 3,80 (IH, dt, J=12,2, 6,8 Hz),

3,66 až 3,52 (2H, m), 3,46 až 3,40 (IH, m), 2,49 až 2,41 (IH, br s), 2,33 až 2,22 (IH, m), 2,09 až 1,95 (IH, m).

(8 ) 3-Metánsulfonyloxy-l- {4- [ (3R) -1- (p-nitrobenzyloxykarbonyl) -pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl·)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (370 mg, 0,827 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 53(7)) v metylénchloride (19 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (192 μΐ, 2,48 mol) a trietylamín (348 μΐ, 2,48 mol) v ľadovom kúpeli. Reakčná zmes bola zohriata na teplotu miestnosti za 10 minút a miešaná pri teplote miestnosti 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom

518 chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu -> etylacetát : metanolu (98 : 2) ako eluentu počas vzniku 3-metánsulfonyloxy-l-{4- [ (3R) -1- (p-nitrobenzyloxykarbonyl) -pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (422 mg, výťažok 97%) ako bledožltá pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,21 (2H, m), 7,53 (2H, m), 7,46 (IH, s), 7,19 až 7,13 (IH, br s), 5,45 až 5,40 (IH, m), 5,24 (2H, d, J=10,7 Hz), 4,66 až 4,59 (IH, m), 4,46 (2H, t, J=7,8 Hz), 4,27 (2H, dd, J=9,8, 2,9 Hz), 3,81 (IH, dt, J=13,7,5,9 Hz), 3,66 až 3,54 (2H, m), 3,43 (IH, dd, J=ll,2, 4,4 Hz), 3,12 (3H, s), 2,30 až 2,22 (IH, m), 2,09 až 1,95 (IH, m).

(9) 3-Acetyltio-l-{4 —[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl>azetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-<4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) -pyrolidín-3-yl-karbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (420 mg, 0,799 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 53(8)) v dimetylformamide (21 ml) bol pridaný tioacetát draselný (548 mg, 4,79 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 2) —> etylacetát: metanolu (99 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) -pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-ylJazetičínu (280 mg, výťažok 69%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 8,22 (2H, m), 7,3 (2H, m),

519

7,42 (1Η, s), 7,21 až 7,15 (1H, br s), 5,24 (2H, d, J=10,7 Hz),

4.66 až 4,58 (lH,m), 4,53 (2H, dd, J=8,8, 7,8 Hz), 4,47 až 4,41 (1H, m), 3,99 (2H, dd, J=6,8, 5,9 Hz), 3,84 až 3,76 (1H, m),

3.66 až 3,53 (2H, m), 3,41 (1H, dd, J=ll,7, 4,9 Hz), 2,37 (3H, s), 2,33 až 2,23 (1H, m), 2,03 až 1,94 (1H, m).

Referenčný príklad 54

3-Acetyltio-l-{4- [ (1-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-azetidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

(1) 3-Hydroxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)azetidín Roztok l-benzhydryl-3-hydroxyazetidínu (9,00 g, 37,6 mol) v metanole (270 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (9,00 g) vo vodnom kúpeli (50°C) 5,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná na odstránenie katalyzátora a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol rozdelený medzi etylacetát a destilovanú vodu. Organická vrstva bola koncentrovaná počas zníženého tlaku a vysušená vo vákuu počas vzniku surového produktu. Do roztoku surového produktu v zmesi metylénchloridu (82 ml) a metanolu (55 ml) bol pridaný p-nitrobenzylester chloromovej kyseliny (8,90 g, 41,3 mol) a trietyiamín (5,79 ml, 41,3 mol) v ľadovom kúpeli. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán :

520 etylacetátu (1 : 1) —> etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)azetidínu (3,52 g, výťažok 37%) ako bledožlté kryštály.

	¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22	(2H,	d, J=8,8 Hz),	7,50
(2H,	d, J=8,8 Hz), 5,19 (2H, s), 4,71 až	4, 64	(1H, m), 4,27	(2H,
dd,	J=9,9, 7,0 Hz), 3,93 (2H, dd, 3=9,9,	4,0	Hz) , 2,20 až	2,16
(1H,	. br d, J=5,9 Hz).

(2) 3-Metánsulfonyloxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)azetidínu (3,52 g, 14,0 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 54(1)) v metylénchloride (106 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (1,19 ml, 15,4 mol) a trietylamín (2,16 ml, 15,4 mol) v ladovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ladovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1:1 -> 1:3) ako eluentu počas vzniku 3-metánsulfonyloxy-l- (p-nitrobenzyloxykarbo.nyl) -azetidínu (4,63 g, výťažok 100%) ako bledožlté kryštály.

^H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,50 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,29 až 5,22 (1H, m), 5,20 (2H, s), 4,40 (2H, dd, J=10,2, 6,2 Hz), 4,22 (2H, dd, J=10,2, 4,0 Hz), 3,08 (3H, s).

(3) 3-Azido-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)azetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) azetidínu (4,63 g, 14,0 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 54(2)) v dimetylformamide (140 ml) bol pridaný azid sodný (1,37 g, 21,0 mol) a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (100°C) 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola

521 reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2 : 1 —» 1 : 1 ) ako eluentu počas vzniku 3-azido-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)azetidínu (2,15 g, výťažok 55%) ako bledožlté kryštály.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,50 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,19 (2H, s), 4,33 až 4,28 (3H, m), 4,03 až

3,96 (2H, m) .

(4) 3-Amino-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)azetidín

Do roztoku 3-azido-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)azetidínu (2,15 g, 7,76 mol) (získaného pódia opisu v referenčnom príklade 54(3)) v acetonitrile (65 ml) bol pridaný trifenylfosfin (2,14 g, 8,14 mol) a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (70°C) 2 hodiny. Po odstránení východzích látok bol pridaný dekahydrát síranu sodného (2,62 g, 8,14 mol) a reakčná zmes bola miešaná 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a rozdelená medzi metylénchlorid a 0,lM vodný roztok chlorovodíka. Do získanej vodnej vrstvy bol pridaný, metylénchlorid á hydrogénuhličitan sodný a vodná vrstva bola extrahovaná metylénchloridom. Získaná organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vysušený za zníženého tlaku pri vzniku 3-amino-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-azetidínu (1,87 g, výťažok 96%) ako bledožlté kryštály.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,50 (2H, d, J=8, 8 Hz), 5,18 (2H, s), 4,27 (2H, dd, J=8,6, 8,6 Hz),

3,87 (IH, tt, J=5,l,7,3 Hz), 3,70 (2H, dd, J=8,8, 5,1 Hz).

(5) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-l-{4- [ (1-p-nitrobenzyloxykarbonyl) 522

-azetidín-3-ylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidín Do roztoku 3-amino-l-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-azetidínu (549 mg, 2,18 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 54(4)) a 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-karboxy1-1,3-tiazol-2-yl) azet idínu (800 mg, 1,82 mol) v dimetylformamide (40 ml) bol pridaný dietylfosforylkyanid (331 μΐ, 2,18 mol) a trietylamín (306 μΐ, 2,18 mol) v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1:1 -» 1:3) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-{4-[(1-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-

-azetidín-3-yl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetj	Ldínu (	1,06
výťažok 49%) ako bledožltá pevná látka.
¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H,	d, J=8,l	Hz) ,	7,62
(4H, d, J=8,l Hz), 7,54 až 7,39 (8H, m), 7,37	(1H, s),	5,21	(2H,
s), 4,89 až 4,81 (1H, m), 4,81 až 4,73 (1H,	m), 4,41	(2H,	dd,
J=8,8, 8,8 Hz), 4,12 (2H, dd, J=8,8, 8,8 Hz),	4,05 až	3, 98	(4H,

m) , 1,07 (9H, s) .

(6) 3-Hydroxy-l-{4- [ (1-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-azetidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-{4-[ (1-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-azetidín-3-ylkarbamoylj -1,3-tiazol-2-yl) azetidínu (1,06 g, 1,58 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 54(5)) v bezvodom tetrahydrofuráne (53 ml) bola pridaná kyselina octová (109 μΐ, 1,90 mol) a l,0M roztok tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (1,90 ml, 1,90 mol) v

523 ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát -> etylacetát: metanolu (95 : 5) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-{4-[(1-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-azetidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidínu (649 mg, výťažok 95%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M	Hz,	CDC1₃) : δ	(ppm) 8,22	(2H, d, J=8,8 Hz)	Z 7,58
až 7,50 (1H, br	s) ,	7,52 (2H,	d, J=8,8	Hz), 7,40 (1H, s)	, 5,20
(2H, s), 4,90 až	4,80	(1H, m),	4,42 (2H,	dd, J=8,8, 8,8 Hz)	z 4,34
(2H, dd, J=9,5,	6,6	Hz), 4,02	(2H, dd,	J=9,5, 5,2 Hz), 4	,00 až
3,96 (2H, m) .

(7) 3-Metánsulfonyloxy-l-<4-[(1-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-azetidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-{4-[(1-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-azetidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (640 mg, 1,48 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 54(6)) v metylénchloride (20 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (343 μΐ, 4,43 mol) a trietylamín (621 μΐ, 4,43 mol) v ladovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ľadovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát -» etylacetát : metanolu (98 : 2) ako eluentu počas vzniku 3-metánsulfonyloxy-l-{4-[(1-p524

-nitrobenzyloxykarbonyl)-azetidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidínu (611 mg, výťažok 81%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,51

(2H,	d, J=8,8	Hz) ,	7,50 až 7,46	(1H, br	s), 7,46 (1H,	s), 5,46 až
5,41	(1H, m),	5,20	(2H, s), 4,	89 až 4,	80 (1H, m), 4	,49 až 4,38
(4H,	m) , 4,28	(2H,	dd, J=ll,8,	4,4 Hz),	4,01 (2H, dd,	J=9,5, 5,3
Hz) ,	3,12 (3H,	s) .

(8) 3-Acetyltio-l-{4-[(1-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-azetidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl[azetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-{4-[ (1-p-nitrobenzyloxyka.rbon.yl·)-azetidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (610 mg, 1,19 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 54(7)) v dimetylformamide (81 ml) bol pridaný tioacetát draselný (817 mg, 7,15 mol) pri teplote miestnosti. Reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 2) -> etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-{4-[(1-p-nitrobenzyloxykarbonyl) -azetidín-3-ylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (405 mg, výťažok 69%) ako bledohnedá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz,	cdci₃;	) : δ (ppm)	8,22	(2H, d, J=8,8	Hz) ,	7,53
až 7,49 (1H, m), 7,51	(2H,	d, J=8,8	Hz) ,	7,43 (1H, s),	5,20	(2H,
s), 4,89 až 4,79 (1H,	m) ,	4,54 (2H,	dd,	J=8,l, 8,1 Hz)	, 4,	48 až
4,18 (3H, m), 4,04 až	3, 97	(2H, m),	2,37	(3H, s) .

Referenčný príklad 55

3-Acetyltio-1-(4-[(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperazín-1-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

525

AcS

NCO-N

NPNZ (1) 4-(p-Nitrobenzyloxykarbonyl)piperazínhydrochlorid

Do roztoku 4-(terc.butoxykarbonyl)piperazínu (1,50 g, 8,05 mol) v metylénchloride (68 ml) bol pridaný p-nitrobenzylester chloromovej kyseliny (1,90 g, 8,8 6 mol) a tritylamin (1,24 ml, 8,86 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu = (1:3) ako eluentu počas vzniku 1-(terc.butoxykarbonyl)-4-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)piperazínu (2,60 g, výťažok 89%) ako bledožltý olej. Následne, do roztoku produktu (2,60 g, 7,12 mol) v acetonitrile (100 ml) bol pridaný 4N roztok chlorovodíka a etylacetát (15,0 ml) v ladovom kúpeli a reakčná zmes bola miešaná •v ľadovom kúpeli- 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia rea-kcie. bol pridaný dietyléter a reakčná zmes bola miešaná 30 minút. Reakčná zmes bola filtrovaná a premytá dietyléterom počas vzniku 4-(p-nitro-benzyloxykarbonyl)piperazínhydrochloridu (2,4 g, výťažok 86%) ako biela pevná látka.

(2 ) 3 - terc.Butyldifenylsilyloxy-1- { 4- [ (4-p-nitrobenzyloxykarbonyl) -piperazín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidín

Do roztoku 4-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) piperazínhydrochloridu (874 mg, 2,19 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade

55(1)) a 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-karboxyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidínu (800 mg, 1,82 mol) (získaného podľa opisu v

526 referenčnom príklade 2(4)) v dimetylformamide (40 ml) bol pridaný dietylfosforylkyanid (0,33 ml, 2,19 mol) a trietylamín (0,30 ml, 2,19 mol) v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá 0,5M vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1:1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-{4-[(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperazín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidínu (915 mg, výťažok 73%) ako bledožltý olej.

^lH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,24 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,61 (4H, dd, J=7,9, 1,4 Hz), 7,52 <2H, d, J=8,7 Hz), 7,49 až 7,37 (6H, m), 7,14 (IH, s), 5,25 (2H, s), 4,80 až 4,71 (IH, m), 4,11 (2H, dd, J=8,7, 6,6 Hz), 4,01 (2H, dd, J=8,7, 4,9 Hz), 3,95 až 3,66 (4H, m), 3,65 až 3,52 (4H, m), l,06(9H, s).

(3) 3-Hydroxy-l-{4-[(4-p-nitrobenzyloxykarbony1)-piperazín-1-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-[(4—p—

-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperazín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl·} azetidínu (1,77 g, 1,71 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 55(2)) v bezvodom tetrahydrofurane (35 ml) bola pridaná kyselina octová (0,11 ml, 1,8 mol) a roztok 1,OM tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (1,88 ml, 1,88 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez

527 bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát -> etylacetát : metanolu (9 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-{4-[(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperazín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidínu (726 mg, výťažok 95%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR	(400 M Hz,	CDC1₃)	: δ	(ppm)	8,24 (2H,	d, J=8,6	Hz) ,
7,52 (2H,	d, J=8,6 Hz)	r	(IH,	s) , 5	,25 (2H, s)	, 4,89 až	4,79
(IH, m),	4,32 (2H, dd,	J=9,1	, 6,7	Hz) ,	3,96 (2H,	dd, J=9,l,	4,5
Hz), 3,93	až 3,68 (4H,	m) , 3,	66 až	3,52	(4H, m) .

(4) 3-Metánsulfonyloxy-1-{4-[(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperazín-l-karbonyl]-1,3-tiázol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-{4-[(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperazín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (804 mg, 1,80 mol) (získaného pódia opisu v referenčnom príklade 55(3)) v metylénchloride (40 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,30 ml, 2,15 mol) a trietylamín (0,17 ml, 2,15 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát —> etylacetát : metanolu (9 : 1) ako eluentu za vzniku 3-metánsulfonyloxy-l-{4-[(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperazln-1-karbonyl]-1, 3-t.iazol-2-yl}azetidínu (550 mg, výťažok 58%) ako bledožlutá pevná látka.

'H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ	(ppm)	8,23 (2H, d, J=8,5	Hz) ,
7,53 (2H, d, J=8,5 Hz), 7,25 (IH,	s) ,	5, 50 až 5,39 (IH, m),	5,26
(2H, s), 4,49 (2H, t, J=9,6 Hzj,	4,26	(2H, dd, J=9,6, 4,2	Hz) ,
4,00 až 3,66 (4H, m), 3,66 až 3,47	(4H,	m), 3,11 (3H, s).

528 (5) 3-Acetyltio-l-{4 - [(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperazín-1-karbonylJ-1,3-tiazoi-2-yl(azetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-{ 4-[ (4-p-nitrobenzyloxykarbonyl) -piperazín-l-karbonyi]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (550 mg, 1,05 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 55(4)) v dimetylformamide (40 ml) bol pridaný tioacetát draselný (717 mg, 6,28 mol) pri teplote miestnosti. Reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C) 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola dostatočne premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1:1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-{4-[(4-p-nitrobenzyloxykarbonyl)-piperazín-1-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (345 mg, výťažok 64%) ako bledohnedá pevná látka.

ⁱH-NMR	(400 M	Hz, CDC1₃) : δ	(ppm) 8,23	(2H, d, J=8,7 Hz)
7,53 (2H,	d, J=8,7	Hz), 7,22 (IH,	s), 5,25 (	2H, s), 4,52 (2H, t
J=8,4 Hz),	4,48 až	4,39 (IH, m),	3,98 (2H,	dd, J=8,4, 5,3 Hz)
3,95 až 3,	68 (4H, m	) , 3,45 až 3,68	(4H, m), 2	,33 (3H, s).

Referenčný príklad 56

3-Acetyltio-l-{4- [2- (p-nitrobenzyloxykarbonylamino) etylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl(azetidín

(1)terc.Butylester (2-hydroxyetyl)karbamovej kyseliny

Do roztoku aminoetanolu (2,51 g, 41,1 mol) v zmesi metylénchloridu (50 ml) a metanolu (50 ml) bol pridaný di-terc.butoxykarbónový anhydrid (13,5 g, 61,9 mol) a trietylamín

529 (8,6 ml, 61,7 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol rozdelený medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu počas vzniku (2-hydroxyetyl)karbamovej kyseliny, terc.butylesteru (6,18 g, výťažok 93%) ako bezfarebný priehľadný sirup.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 5,01 (1H, br s), 3,70 (2H, br s), 3,29 (2H, q, J=5,l Hz), 2,65 (1H, br s), 1,45 (9H, s).

(2)terc.Butylester (2-azidoetyl)karbamovej kyseliny Do roztoku (2-hydroxyetyl)karbamovej kyseliny, terc.

butylesteru (1,5 g, 6,2 mol) v tetrahydrofuráne (75 ml) bol pridaný azid difenylfosforylu (3,0 ml, 13,9 mol), trifenylfosfín (3,7 g, 14,1 mol) a 40% roztok dietylazodikarboxylátu v toluéne (5,1 g, 13,9 mol) v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 4 hodiny pri rovnakých podmienkach. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, fi-ltrovaná a·: koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (3:1) ako eluentu počas vzniku (2-azidoetyl)karbamovej kyseliny, terc.butylesteru (1,24 g, výťažok 72%) ako bezfarebný priehľadný sirup.

¹H-NMR (500 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 4,85 (1H, br s), 3,42 (2H, t, J=4,8 Hz), 3,31 (2H, t, J=4,8Hz), l,45(9H,s).

IR (kvapalný film): 2103, 1697, 1521, 1368, 1272, 1253 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 187 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum vysokého rozlíšenia (FAB⁺) :

obdržaná hodnota 187,1186 [M+H]⁺,

530 vypočítaná hodnota 187,1195 (C7H₁₅O₂N4) (3) p-Nitrobenzylester (2-terc.butoxykarbonylaminoetyl) karbamovej kyseliny

Roztok (2-azidoetyl)karbamovej kyseliny, terc.butylesteru (1,22 g, 6,55 mol) v metanole (60 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia na aktívnom uhlí (1,22 g) pri teplote miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Do roztoku získaného surového produktu v metylénchloride (60 ml) bol pridaný p-nitrobenzylester chloromovej kyseliny (2,12 g, 9,8 mol) a trietylamín (1,37 mi, 9,8 mol) v ľadovom kúpeli a reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (3:1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzylesteru (2-terc. butoxykarbonylaminoetyl)karbamovej kyseliny (1,46 g, výťažok 66%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (500 M-Hz-,· CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=9,0 Hz), 7-,51 (2H, d, J=9,0 Hz), 5,37 (IH, br s), 5,20 (2H, s), 4,82 (IH, br

s), 3,35 až 3,25 (4H, m), 1,45 (9H, s).

IR(KBr): 3355, 1708, 1692, 1534, 1350, 1263, 1170 cm¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 340 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum vysokého rozlíšenia (FAB⁺): obdržaná hodnota 340,1512 [M+H]⁺, vypočítaná hodnota 340, 1508 (Ci₅H₂₂O6N₃) (4) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-l-{4-[2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

531

Do roztoku p-nitrobenzylesteru (2-terc.butoxykarbonylaminoetyl) karbamovej kyseliny (1,46 g, 4,3 mol) v 1,4-dioxane (15 ml) bol pridaný a 4N roztok chlorovodíka v 1,4-dioxane (15 ml) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 5,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný dietyléter a reakčná zmes bola miešaná 30 minút. Výsledná reakčná zmes bola filtrovaná a premytá dietyléterom počas vzniku 1- (p-nitrobenzyloxykarbonylamino)etylamínhydrochloridu (1/18 g, výťažok 100%) ako biela pevná látka. Následne, do suspenzie 2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)etylamínhydrochloridu (490 mg, 1,77 mol) opísanej vyššie a 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-karboxyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (530 mg, 1,21 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(4)) v dimetylformamide (26,5 ml) bol pridaný dietylfosforylkyanid (0,3 ml, 1,98 mol) a trietylamín (0,5 ml, 3,59 mol) v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá 0,5M vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (2:1) ako eluentu počas vzniku 3-terc. butyldifenylsilyloxy-1-(4-[2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)

etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl[azetidínu	(630	mg, výťažok	79%)
ako bledožltá pevná látka.
¹H-NMR (500 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,16	(2H,	d, J=8,8 Hz),	7,62
(4H, d, J=6,8 Hz), 7,50 až 7,38 (9H, m),	7,35	(IH, s), 5,62	(IH,
br t, J=5,9 Hz), 5,17 (2H, s), 4,79 až	4,72	(IH, m), 4,09	(2H,
dd, J=8,8, 6,6 Hz), 4,00 (2H, dd, J=8,8,	• 4,9	Hz), 3,55 (2H	/ q/

J=5,9 Hz), 3,43 (2H, q, J=5,9 Hz), 1,07 (9H, s).

IR(KBr): 1724, 1660, 1547, 1523, 1346, 1318, 1255, 1113 cm^-1

532

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 660 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum vysokého rozlíšenia (FAB^4-) : obdržaná hodnota 660,2324 [M+H]⁺, vypočítaná hodnota 660,2312 (C₃₃H3₃₈O6SSi) (5) 3-Hydroxy-l-{4-[2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino) etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-{4-[2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino) etylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (1,21 g, 1,84 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 56(4)) v bezvodom tetrahydrofuráne (60,6 ml) bola pridaná kyselina octová (0,13 ml, 2,27 mol) a roztok 1,OM tetra-n-butylamóniumf luoridu v tetrahydrofuráne (2,2 ml, 2,2 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná 2,5 hodiny za rovnakých podmienok. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Do zvyšku bol pridaný izopropyléter a zmes bola miešaná, premytá a filtrovaná počas vzniku 3-hydroxy-l-{4-[2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}

azetidínu	(667 mg, výťažok 86%)	ako žltá pevná	látka.
¹H-NMR	(500 M Hz	, DMSO-d₆) :	δ (ppm) 8,21	(2H, d, J=8,8 Hz)
8,03 (1H,	t, J=5,9	Hz), 7,59	(2H, d, J=8,8	Hz), 7,50 (1H, t
J=5,9 Hz),	7,41 (1H,	s) , 5,83	(1H, d, J=5,9	Hz), 5,17 (2H, s)
4,66 až 4,	58 (1H, m)	, 4,23 (2H,	dd, J=8,8, 7,	0 Hz), 3,79(2H, dd
J=8,8, 4,9	Hz), 3,31	(2H, q, J=	5,9 Hz), 3,16	(2H, q, J=5,9 Hz).

IR(KBr): 1698, 1655, 1552, 1520, 1343, 1279 cm'¹Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 422 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum vysokého rozlíšenia (FAB^4-): obdržaná hodnota 444,0952 [M+Na]⁺, vypočítaná hodnota 444,0953 (Ci7H₁₉O₆N5SNa)

533 (6) 3-Metánsulfonyloxy-l-{4-[2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino) etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-{4-[2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino) etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl·}azetidínu (658,4 mg, 1,56 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 56(5)) v zmesi metylénchloridu (33 ml) a pyridínu (5 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,31 ml, 4,00 mol) a trietylamín (0,57 ml, 4,09 mol) v ľadovom kúpeli. Po miešaní zmesi v ľadovom kúpeli 10 minút bola výsledná zmes miešaná pri teplote miestnosti 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá 0,5M vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (1 : 2) ako eluentu počas vzniku 3-metánsulfonyioxy-1-{4- [2- (p-nitro-benzyloxykarbonylamino) -etylkarbamoyl] -1, 3-tiazol-2-yl}azetidínu (607,3 mg, výťažok 78%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, DMSO-de): δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,8 Hz), 8,10 (IH, t, J=5,9 Hz), 7,59 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,51 (IH, t, J=5,9 Hz), 7,50 (IH, s), 5,46 až 5,41 (IH, m), 5,17 (2H, s), 4,45 (2H, dd, J=9,9, 6,6 Hz), 4,17 (2H, dd, J=9,9, 4,0 Hz), 3,29 (3H, s).

IR(KBr): 1720, 1658, 1547, 1523, 1348, 1255, 1184, 1 169 cm^-1

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : 500 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum vysokého rozlíšenia (FAB⁺) : obdržaná hodnota 500,0910 [M+H]⁺, vypočítaná hodnota 500, 0910 (C18H22O8N5S2) (7) 3-Acetyltio-l-{4-[2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-ylJazetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-{4-[2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino) etylkarbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (607,3 mg, 1,22 mol)

534 (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 56(6)) v dimetylformamide (33 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,06 g, 7,35 mol) pri teplote miestnosti. Reakčná zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 7 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá 0,5M vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (1 : 2) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-1-{4-[2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-etylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (335, pevná látka.

mg, výťažok 58%) ako bledohnedá

¹H-NMR	(500	M Hz, DMSO-dg) :	δ (ppm)	8,21	(2H,	d,	J=8,3 Hz)
8,05 (IH,	t, J=	= 5,9 Hz), 7,58	(2H, d,	J=8,3	Hz) ,	7,	50 (IH, t
J=5,9 Hz),	7,47	(IH, s), 5,17	(2H, s),	4,50	(2H,	t,	J=8,8 Hz)

4,42 až 4,36 (IH, m), 3,92 (2H, dd, J=8,8, 4,6 Hz), 3,305 (2H, q, J=5,9 Hz), 3,16 (2H, q, J=5,9 Hz), 2,36 (3H, s).

IR(KBr): 3368, 1690, 1677, 1543, 1520, 1494, 1349, 1255,

1239, 1108 cm'¹

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 480 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum vysokého rozlíšenia (FAB⁺) : obdržaná hodnota 480,1002 [M+H]⁺, vypočítaná hodnota: 480,1011 (C19H22O6N5S2)

Referenčný príklad 57

3-Acetyltio-l-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-azetidín-1-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

NNHPNZ

535 (1) 1-terc.Butoxykarbonyl-3-(metánsulfonyloxy)azetidín

Do roztoku 1-terc.butoxykarbonyl-3-hydroxyazetidínu (3,24 g, 18,7 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 31(1)) v metylénchloride (160 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (1,59 ml, 20,6 mol) a trietylamín (2,89 ml, 20,6 mol) v ľadovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ladovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 6 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1:1 ->

1:2) ako eluentu počas vzniku 1-terc.butoxykarbonyl-3-(metánsulfonyloxy)azetidínu (4,71 mg, výťažok 100%) ako bledožltý olej.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 5,23 až 5,17 (1H, m), 4,28 (2H, dd, 1=6,6,1,5 Hz), 4,10 (2H, m), 3,07 (3H, s), 1,46 (9H, s).

(2) 3-Azido-l-fterc.butoxykarbonyi)azetidín

Do roztoku 1-terc.butoxykarbonyl-3-(metánsulfonyloxy) azetidínu (4,71 g, 18,7 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 57(1)) v dimetylformamide (140 ml) bol pridaný azid sodný (3,65 g, 5 6,1 mol) a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C) počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (4 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-azido-l-(terc.butoxykarbonyl)-azetidínu (3,44 g, výťažok 93%) ako bezfarebný olej.

536 ¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 4,25 až 4,15 (3H, m), 3,92 až 3,87 (2H, m), 1,45 (9H, s).

(3) 1-terc.Butoxykarbonyl-3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino) azetidín

Roztok 3-azido-l-(terc.butoxykarbonyl)azetidínu (3,44 g, 17,4 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 57(2)) v metanole (170 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (3,44 g) pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná, aby sa odstránil katalyzátor. Filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku za vzniku 3-amino-l-terc. butoxykarbonylazetidín ako surový produkt. Tento produkt bol rozpustený v metylénchloride (170 ml) a p-nitrobenzylester chloromovej kyseliny (5,63 g, 26,1 mol) a trietylamín (3,66 ml, 26,1 mol) bol pridaný v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 1 —> 1 : 2 ) ako eluentu počas vzniku 1-terc.butoxykarbonyl-3-(p-nitrobenzyl-oxykarbonylamino)azetidínu (4,84 g, výťažok 79%) ako bezfarebný olej .

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃)	: δ (ppm)	8,23	(2H,	d, J=8,l Hz), 7,50
(2H, d, J=8,l Hz), 5,26 až	5,18 (1H	, br	s) ,	5,26 (2H, s), 5,84
(1H, d, J=5,l Hz), 4,50 až	4,40 (1H,	m) ,	4,24	(2H, t, J=9,5 Hz),

3,76 (2K, dd, J=9,5, 5,1 Hz), 1,43 (9H, s).

(4) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-{4-[3- (p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-azetidín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

537

Do roztoku l-terc.butoxykarbonyl-3- (p-nitrobenzyloxykarbonylamino) azetidín (4,84 g, 13,8 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 57(3)) v 1,4-dioxane (50 ml) bol pridaný a 4N roztok chlorovodíka v 1,4-dioxane (50 ml) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2,5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Do zvyšku bol pridaný etylacetát a výsledná zmes bola filtrovaná a zvyšok bol premytý etylacetátom a vysušený počas zníženého tlaku za vzniku 3—(p— -nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidínhydrochloridu (2,31 g, výťažok 58%) ako bledožlté kryštály. Následne, do suspenzie 3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-azetidínhydrochloridu (944mg, 3,28 mol) (získaného ako je uvedené vyššie) a 3-terc. butyidifenylsiiyloxy-l-(4-karboxyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidínu (1,2 g, 2,74 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(4)) v dimetylformamide (60 ml) bol pridaný dietylfosforylkyanid (498 (μΐ, 3,28 mol) a trietylamín (922 μΐ, 6,58 mol) v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-terc.

butyldifenylsilyloxy-1-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-azetidín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (853mg, výťažok 53%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,64 až 7,59 (4H, m), 7,52 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,48 až 7,37 (6H, m),

7,37 (1H, s), 5,58 až 5,51 (1H, br d, J=8,1 Hz), 5,22 (2H, s),

4,93 až 4,84 (1H, m), 4,76 až 4,70 (1H, m), 4,60 až 4,50 (1H,

m), 4,50 až 4,41 (1H, m), 4,39 až 4,30 (1H, m), 4,11 až 4,03

538 (2Η, m), 3,97 (2Η, dd,

1,06 (9Η, s).

1=8,1, 5,1 Hz), 4,00 až 3,92 (IH, m), diizopropyléter a diizopropyléterom (5) 3-Hydroxy-l-{4- [3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-azetidín-1-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl(azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino) azetidín-l-karbonyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (850 mg, 1,27 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 57(4)) v bezvodom tetrahydrofurane (43 ml) bola pridaná kyselina octová (87 μΐ, 1,52 mol) a roztok 1, OM tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (1,52 ml, 1,52 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Do zvyšku bol pridaný etylacetát a výsledná zmes bola filtrovaná a premytá počas vzniku 3-hydroxy-l-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-azetidín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl(azetidínu (486 mg, výťažok 88%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,25 (2H, d, J=8,8 Hz), 8,14 5,83

(IH,	d,	J=7,3	Hz) ,	7,61	(2H,	d,	J=8,8 Hz), 7,43	(IH,	s) ,
(IH,	d,	J=5, 9	Hz) ,	5, 19	(2H,	s) ,	4,74 až 4,67 (IH	, m) ,	4,
4,58	(IH	, m) ,	4,40	až 4,	34 (IH,	m) , 4,32 až 4,26	(IH,	m) ,
až 4,	17	(3H, m	), 3,	86 až	3,80	(IH	, m), 3,79 až 3,71	(2H,	m) .

( 6) 3-Metánsulfonyloxy-l-(4-(3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-azetidín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-{4-(3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-azetidín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (630 mg, 1,45 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 57(5)) v zmesi metylénchloridu (32 ml) a pyridínu (12 ml) bol pridaný

539 metánsulfonylchlorid (377 μΐ, 4,36 mol) a trietylamín (611 μΐ, 4,36 mol) v ladovom kúpeli. Po miešaní zmesi v ladovom kúpeli 10 minút bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Do zvyšku bol pridaný etylacetát a diizopropyléter a zmes bola filtrovaná a premytá diizopropyléterom za vzniku 3-metánsulfonyloxy-l-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-azetidín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (766 mg, výťažok 100%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : Ô (ppm) 8,25 (2H, d, J=8,8 Hz), 8,15

(2H,	d, J=7,3	Hz	) ,	7, 61	(2H, d, J=8,8 Hz), 7,52 (IH	, s) , 5,50 až
5,43	(IH, m),	5,	19	(2H,	s) , 4,72 (IH, t, J=8,8 Hz) ,	4,46 až 4,27
(4H,	m) , 4,25	až	4,	11 (	3H, m), 3,85 (IH, dd, J=9,9,	5,5 Hz), 3,29
(3H,	s) .

(7) 3-Acetyltio-l-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-azetidín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-azetidín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (760 mg, 1,45 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 57(6)) v dimetylformamide (38 ml) bol pridaný tioacetát draselný (993 mg, 8,70 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 9 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-acetyl-tio-l-{4-[3-(p540

-nitrobenzyloxykarbonylamino)-azetidín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (397 mg, výťažok 56%) ako bledohnedá pevná látka.

'H-NMR (400 M	Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23	(2H,	d, u = 8	,8	Hz), 7,52
(2H, d, J=8,8 Hz)	, 7,44 (1H, s), 5,36 až	5,30	(1H, m]	1 ,	5,21 (2H,
s), 4,74 až 4,83	(1H, m) , 4,60 až 4,34	(6H,	m) , 3,	95	(3H, m) ,

2,37 (3H, s).

Referenčný príklad 58

3-Acetyltio-l-(4-{metyl-[2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-etyl]karbamoyl}-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-{4-[metyl-(2-hydroxyetyl) karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do suspenzie N-metylaminoetanolu (1,0 ml, 12,4 mol) a 3-terc. butyldifenylsilyloxy-1- ( 4-karboxy 1-1,3-tiazol-2-yl) azetidínu (3,64 g, 8,3 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(4)) v dimetylformamide (180 ml) bol pridaný dietylfosforylkyanid (1,9 ml, 12,5 mol) a trietylamín (1,73 ml, 12,4 mol) v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 7 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá 0, 5M vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (1 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-{4-[metyl-(2-hydroxyetyl)karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (3,41 g,

541 výťažok 83%) ako bledožltý priehľadný sirup.

¹H-NMR (400 MHz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,61 (4H, d, J=7,0 Hz), 7,48

až	7,36 (	6H, m) , 7,17 (	IH, s), 4,79 až 4,71 (IH, m),	4,17 (2H,
t,	J=6, 8	Hz), 4,05 (2H,	dd, J=6,8, 2,7 Hz), 3,84 (2H,	t, J=5,4
Hz)	, 3,64	(2H, t, J=5,4	Hz) , 3,28 (IH, br s), 3,05 (3H,	s), 1,06
(9H	, s) .

(2) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-{4-[(2-azidoetyl)-metyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-{4-[metyl-(2-hydroxyetyl)karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (997,5 mg, 2,0 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 58(1)) v tetrahydrofurane (50 ml) bol pridaný azid difenylfosforylu (0,65 ml, 3,02 mol), trifenylfosfín (793 mg, 3,02 mol) a 40% roztok dietylazodikarboxylátu v toluéne (1,12 g, 3,04 mol) v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná počas noci pri rovnakých podmienkach. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : etylacetátu (1:1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-{4-[(2-azidoetyl)-metyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (1,05 g, výťažok 100%) ako bezfarebný priehľadný sirup.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,80 až 7,00 (11H, m), 4,90 až 3,00 (11H, m), 1,06 (9H, s).

(3) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-{metyl-[2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino) etyl] -karbamoyl} -1,3-tiazol-2-yl)azetidín

Roztok 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-{4-ľ(2-azidoetyl)-metyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (1,05 g, 2,02 mol)

542 (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 58(2)) v metanole (60 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia na aktívnom uhlí (1,05 g) pri teplote miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná, aby sa koncentrovaný počas odstránil katalyzátor a filtrát bol zníženého tlaku. Do roztoku získaného surového produktu v metylénchloride (52,3 ml) bol pridaný p-nitrobenzylester chloromovej kyseliny (650,7 mg, 3,02 mol) a trietyiamín (0,42 ml, 3,01 mol) v ľadovom kúpeli. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bezvodý síran zníženého tlaku bola vysušená cez koncentrovaná počas sodný,

Zvyšok filtrovaná bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén acetonitrilu (2:1) ako eluentu za vzniku

3-terc.

butyldifenylsilyloxy-1- (4-{metyl- [2- (p-nitrobenzyl-oxykarbonylamino) -etyl]karbamoyl}-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (699,5 mg, výťažok 52%) ako bledožltá pevná látka.

^H-NMR (500 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,12 (2H, d, J=7,8 Hz), 7,78 (1H, br s), 7,68 až 7,30 (13H, m), 5,18 (0,5 H, s), 5,13 (1,5H, s), 4,80 až 4,64 (1H, m), 4,10 (2H, t, J=7,3 Hz), 4,01 (2H, dd, J=7,3, 5,4 Hz), 3,72 (2H, m), 3,50 (2H, m), 3,25 (0,75H, s), 3,02 (2,25H, s), 1,03 (9H, s).

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): 674 [M+H]⁺

Hmotnostné spektrum vysokého rozlíšenia (FAB⁺) : obdržaná hodnota 674,2490 [M+H]⁺, vypočítaná hodnota 674,2468 (C34H40OSN5SSÍ) (4) 3-Hydroxy-l-(4-{metyl-[2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-etyl]karbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-{metyl-{2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-etyl]karbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl) azetidínu (806,9 mg, 1,20 mol) (získaného podľa opisu v

543 referenčnom príklade 58(3)) v bezvodom tetrahydrofuráne (40 ml) bola pridaná kyselina octová (0,09 ml, 1,57 mol) a roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (1,44 ml, 1,44 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (15 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-(4-{metyl-[2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-etyl]karbamoyl}-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (428,2 mg, výťažok 84%) ako biela pevná látka.

^’H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,71 (IH, t, J=5,5 Hz), 7,49 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,17 (IH, s), 5,18 (2H, s), 4,88 až 4,70 (IH, m), 4,27 (2H, dd, J=9,l, 7,8 Hz), 3,93 (2H, dd, J=9,l, 4,8 Hz), 3,68 (2H, t, J=5,5 Hz), 3,47 (2H, q, J=5,5Hz), 3,25(0,8H, s), 3,03(2,2H, s), 2,40(lH,d, J=5,9Hz).

(5) 3-Metánsulfonyloxy-l-(4-{metyl-[2- (p-nitrobenzyloxykarbonylamino)etyl]karbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-(4-{metyl-[2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino) -etyl] karbamoyl }-l, 3-tiazol-2-yl) azetidínu (428,2 mg, 1,01 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 56(5)) v metylénchloride (21,4 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,25 ml, 3,23 mol) a trietylamín (0,45 ml, 3,23 mol) v ľadovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ľadovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 6 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý

544 síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (15 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-metánsulfonyioxy-l- ( 4- {metyl- {2- (p-nitrobenzyloxykarbonylamino) -etyl jkarbamoyi}-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (480,1 mg, výťažok 93%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,1 Hz),

7,60 až 7,44 (3H, m obsahujúci d, na 7,50 ppm, J=8,l Hz), 7,26 (0,3H, s), 7,24 (0,7H, s), 5,41 (0,3K, m), 5,34 (0,7H, m), 5,18 (2H, s), 4,42 (2H, dd, J=9,0, 7,4 Hz), 4,25 (2H, dd, J=9,0, 3,2 Hz), 3,66 (2H, t, J=5,2 Hz), 3,60 až 3,42 (2H, m), 3,26 (0,9H, br s), 3,10 (0,9H, br s), 3,08 (2,1H, s), 3,03 (2,1H, s).

(7 ) 3-Acetyltio-1- ( 4 - {metyl- [ 2- (p-nitrobenzyloxykarbonylamino) etyl]karbamoyl}-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-(4-{metyl-[2-(p-nltrobenzyloxykarbonylamino) etyl] -karbamoyi} -1, 3-tíazol-2-yi) azetidínu (480,1 mg, 0,93 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 56(6)) v dimetylformamide (24 ml) bol pridaný tioacenát draselný (820 mg, 5,69 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá 0,5M vodným roztokom kyseliny chlorovočíkovej, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (15 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-{metyl-[2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)etyl]karbamoyi}-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (348,9 mg, výťažok 76%) ako bledohnedá pevná látka.

^ľK-NMR (500 M

CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,73

545

(1H,	br s) , 7,49 (2H, d, J=8,8	Hz), 7	,29 (0,4H, s), 7,20 (0,	6H,
s) ,	5,18 (2H, s), 4,47 (2H, t,	u=8,8	Hz), 4,40 až 4,28 (1H,	m) ,
3, 92	(2H, dd, J=8,8, 5,7 Hz),	3,66 (	2H, t, J=5,4 Hz), 3,52	až
3,44	(2H, m), 3,26 (1,2H, s),	3, 03	(1,8H, s), 2,36 (1,2H,	s),
2,34	(1,8H, s).

Referenčný príklad 59

3-Acetyltio-l-(4-{[2-(terc.butyldimetylsilyloxy)etyl] -izopropyl-karbamoyl}-!, 3-tiazol-2-yl) azetidín

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-{4-[(2-hydroxyetyl)-izopropyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do suspenzie N-izopropylaminoetanol (0,61 ml, 1,38 mol) a 3- terc. butyldifenylsilyloxy-1- (4-karboxyi-l, 3-tiazol-2-yl) azetidínu (500 mg, 1,14 mol) v dimetylformamide (15 ml) bol pridaný dietylfosforylkyanid (0,23 ml, 1,38 mol) a trietylamín (0,19 ml, 0,23 mol) v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná 2 hodiny pri rovnakých podmienkach. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá 0,5M vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu za vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-{4-[(2-hydroxyetyl)-izopropyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (318 mg, výťažok 56%) ako bledožltý olej.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,57 (4H, d, J=6,5 Hz), 7,50

546 až 7,30 (6H, m), 7,07 (Ο,βΗ, s), 6,92 (0,4H, s), 4,81 až 4,63 (IH, m), 4,49 (0,5 H, s), 4,33 (0,5H, s), 4,22 až 3,88 (4H, m, obsahujúci 4,06 (2H, dd, J=14,3, 7,7 Hz)), 3,88 až 3,62 (2H, m), 1,39 až 1,08 (6H, m), 1,02 (9H, s).

(2) 3-Hydroxy-l-{4 — [(2-hydroxyetyl)-izopropyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-{4-[(2-hydroxyetyl) -izopropyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl) azetidínu (2,49 g, 4,75 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 59(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (100 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumf luoridu v tetrahydrofurane (5,70 ml, 5,70 mol) v ladovom kúpeli. Zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-{4- [ (2-hydroxyetyl) -izopropyl-karbamoyl] -1, 3-tiazol-2-yl}azetidínu (1,33 g, výťažok 98%) ako biela pevná látka.

^Ή—NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,13 (0,7H, s), 7,03 (0,3H, s), 4,62 až 4,48 (IH, m), 4,48 až 4,36 (IH, m), 4,29 (2H, t, J= 8,0 Hz), 3,94 (2H, dd, J=8,0, 4,1 Hz), 3,80 (2H, br s), 3,57 (2H, br s), 1,35 (3H, br s), 1,20 (3H, br s).

(3) 1-(4-((2-( terc.Butyldimetylsilyloxy)etyl]-izopropyl-karbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-(4-((2-hydroxyetyl)-izopropyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (1,33 g, 4,66 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 59(2)) v dimetylformamide (40 ml) bol· pridaný terc.Putyldimemylsilylchlorid (738 mg, 4,89 mol) a imidazol (333 mg, 4,89 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný metanol a zmes bola miešaná 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola

547 reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným, roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1:1)-» etylacetátu ako eluentu počas vzniku 1-(4-( [2- (terc.butyldimetylsilyloxy) -etyl] -izopropyl-karbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (1,26 g, výťažok 69%) ako bledožltý olej.

hí-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 6,99 (0,2H, s), 6,91 (0,8H,

s) ,	4,84	až 4,72	(1H,	m), 4,72	až 4,35	(1H, m) , 4,72 až	4,35
(1H,	m) ,	4,27 (2H,	dd,	J=9,4, 6,	8 Hz), 3,	91 (2H, dd, J=9,4	, 4,8
Hz) ,	3,71	až 3,35	(1H,	m), 3,71	až 3,50	(2H, m) , 3,50 až	3,28
(1H,	m) ,	1,17 (6H,	br s)	<, 0,87(9H	, br s),	0,06(6H, d, J=2,8	Hz) .

(4) 1-(4-((2-( terc.Butyldimetylsilyloxy)etyl]-izopropy1-karbamoyl}-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-{[2-(terc.butyldimetylsilyloxy)etyl]-izopropy!-karbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (1,24 g, 3,23 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 59(3)) v metylénchloride (62 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,30 ml, 3,88 mol) a trietylamín (0,54 ml, 3,88 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1:1)—» etylacetátu ako eluentu počas vzniku 1—(4— -{ [2-(terc.butyldimetylsilyloxy)-etyl]-izopropyl-karbamoyl}-l, 3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (649 mg, výťažok 42%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,16 až 6,95 (1H, m), 5,46

548 až 5,36 (IH, m), 4,49 až 3,68 (3H, m obsahujúci 4,41 (2H, ddd, J= 9,6, 6,6, 1,0 Hz)), 4,23 (2H, dd, J=9,6, 4,4 Hz), 3,91 až 3,72 (IH, m), 3,72 až 3,51 (2H, m), 3,51 až 3,30 (IH, m), 3,07 (3H, s), 1,24 (6H, br s), 0,83 (9H, s), 0,06 (6H, d, J=3,4 Hz).

(5) 3-Acetyltio-l-(4-{[2-(terc.butyldimetylsilyloxy)etyl]-izopropyl-karbamoyl}-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 1-(4-{[2-(terc.butyldimetylsilyloxy)etyl] -izopropyl-karbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl) -3-metánsulfonyloxyazetidínu (649 mg, 1,35 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 59(4)) v dimetylformamide (19 ml) bol pridaný tioacetát draselný (930 mg, 8,14 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejové lázni (90°C) 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zme.s rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (3:1)—» etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-{[2-(terc.butyldimetylsilyloxy)-etyl]-izopropyl-karbamoyl}-!,3-tiazol-2-yl)azetidínu (618 mg, výťažok 100%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 7,20 až 6,89 (IH, m), 4,68 až 4,18 (4H, m obsahujúci 4,48 (2H, t, J=8,5 Hz)), 3,94 (2H, dd, J=8,5, 5,3 Hz), 3,88 až 3,23 (4H, m), 2,39 (3H, s), 1,16 (6H, br s), 0,86 (9H, s), 0,04 (6H, d, J=l,4 Hz).

Referenčný príklad 60

3-Acetyltio-l-(4-{izopropyl-[2-(p-nitrobenzyloxyamino)etyl] -karbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)azetidín

549

(1) 1—{4—[(2-Azidoetyl)-izopropyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidín-3-terc.butyldifenylsilyloxyazetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-{4-[(2-hydroxyetyl) -izopropyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (1,46 g, 2,79 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 59(1)) v tetrahydrofuráne (73 ml) bol pridaný azid difenylfosforylu (0,90 ml, 4,18 mol), trifenylfosfín (1,10 g, 4,18 mol) a 40% roztok dietylazodikarboxylát v toluéne (1,54 g, 4,18 mol) v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 3 hodiny pri rovnakých podmienkach. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (2:1) ako eluentu počas vzniku 1-{4-((2-azidoetyl)-izopropyl-karbamoyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-terc.butyldifenyloxyazetidínu (1,38 g, výťažok 87%) ako bledožltý olej.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,62 (4H, dd, J=8,0, 1,4

Hz), 7,36 až 7,26 (6H, m), 7,26 až 6,90 (1H, m), 4,80 až 4,76 (1H, m), 4,75 až 4,61 (1H, m), 4,13 (1H, t, J=7,4 Hz), 4,10 (1H, t, J=7,4 Hz), 4,01 (2H, dd, J=8,7, 4,0 Hz), 3,80 až 3,33 (4H, m obsahujúci 3,56 (2H, br s)), 1,20 (6H, br s), 1,06 (9H, s).

(2) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-{izopropyl-[2-(p-nitrobenzyloxyamino)-etyl] karbamoyl}-l,3-tiazol-2-yl) azetidín

Roztok 1-(4-((2-azido-etyl)-izopropyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-terc.butyldifenyloxyazetidínu (1,33 g, 2,42 mol) (získaný podľa opisu v referenčnom príklade 60(1)) v metanole

550 (65 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia na aktívnom uhlí (1,33 g) pri teplote miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná, aby sa odstránil katalyzátor a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Do roztoku získaného surového produktu v metylénchloride (63 ml) bol pridaný p-nitrobenzylester chloromovej kyseliny (627 mg, 2,90 mol) a trietylamín (0,41 ml, 2,90 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná 1 hodinu pri rovnakých podmienkach. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran koncentrovaná počas zníženého tlaku, chromatografický na silikagélovej etylacetát -> etylacetát : metanolu (10 vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-{izopropyl-[2-(p-nitrobenzyloxyamino)etyl]-karbamoyl}-!,3-tiazcl-2-yl)azetidínu (945 mg, výťažok 56%) ako bledožltý olej.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,60 (4H, d, J=l,0 Hz), 7,55 až 7,32 (10H, m), 7,12 (0,4H, br s), 6,95 (0,6H, br s), 5,28 až sodný, filtrovaná a

Zvyšok kolóne : 1 bol vyčistený za použitia ako eluentu počas

5, 18	(2H,	m) , 4,81 až 4,67 (1H,	m) , 4,24 až	4,06 (2H, m), 4,00
(2H,	dd,	J=8,7, 4,9 Hz), 3,70 až	3,18 (4H, m)	, 1,20 (6H, br s),
1,06	(9H,	d, J=l,6 Hz) .

(3) 3-Hydroxy-l-(4-{izopropyl-[2-(p-nitrobenzyloxyamino)etyl] -karbamoyl}-i,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-{izopropyl-[2-(p-nitrobenzyloxyamino)-etyl]karbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (945 mg, 1,38 mol) (získaného pódia opisu v referenčnom príklade 60(2)) v bezvodom tetrahydrofurane (50 ml) bola pridaná kyselina octová (0,10 ml, 1,66 mol) a 1,0M roztok tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (1,66 ml, 1,66 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená

551 medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát -» etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-(4-{izopropyl-[2-(p-nitrobenzyloxyamino) -etyl] -karbamoyl}-1, 3-tiazol-2-yl) azetidínu (433 mg, výťažok 66%) ako biela pevná látka.

^H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,5 Hz),

7,49 (2H, d, J=8,5 Hz), 7,11 (0,4H, s), 6,95 (0,6H, s), 5,18 (2H, s), 4,88 až 4,62 (1H, m), 4,62 až 4,18 (3H, m), 3,93 (2H, dd, J= 8,8, 4,4 Hz), 3,72 až 3,36 (4H, m), 1,30 (3H, br s), 1,20 (3Ή, br s) .

(4) 1- (4-{Izopropyl- [2- (p-nitrobenzyloxyamino) -etyl] -karbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín Do roztoku 3-hydroxy-l- (4-{izopropyl- [2- (p-nitrobenzyloxyamino) -etyl]-karbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,43 g, 3,09 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 60(3)) v metylénchloride (72 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,29 a trietylamín (0,52 ml, 3,70 mol) v ľadovom bola miešaná v ľadovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej etylacetát -> etylacetát : metanolu (20 vzniku 1- (4-{izopropyl- [2- (p-nitrobenzyloxyamino) etyl] -karbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (766 mg, výťažok 46%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,20 (2H, d, J=8,4 Hz),

7,50 (2H, d, J=8,4 Hz), 7,20 (0,4H, br s), 7,07 (0,6H, br s), ml, 3,70 mol) kúpeli a zmes kolóne za použitia : 1) ako eluentu počas

552

5,41	(IH, br	s), 5,19 (2H, s), 4,	66	až 4,18 (5H, m obsahujúci
4,44	(2H, t,	J=8,8 Hz), 4,25 (2H,	t,	J=8,8 Hz)), 3,68 až 3,36
(4K,	m) , 3,10	(3H, s), 1,31 (3H, br	s)	, 1,22 (3H, br s).

(5) 3-Acetyltio-l-(4-{izopropyl-[2-(p-nitrobenzyloxyamino) etyl]-karbamoyl}-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 1-(4-{izopropyl-[2-(p-nitrobenzyloxyamino)etyl]-karbamoyl}-l, 3-tiazol-2-yl) -3-metánsulfonyloxyazetidínu (77 6mg, 1,43 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 60(4)) v dimetylformamide (23 ml) bol pridaný tioacetát draselný (982 mg, 8,60 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C) 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1:2) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-{izopropyl-[2-(p-nitrobenzyloxyamino)etyl]-karbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (746 mg, výťažok 46%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,4 Hz),

7,50 (2H, d, J=8,4 Hz), 7,15 (0,4H, br s), 7,04 (0,6H, br s), 5,19 (2H, s), 4,66 až 4,20 (4H, m), 4,08 až 3,88 (2H, m), 3,66 až 3,26 (4H, m), 2,96 (3H, s), 2,36 (3H, br s), 1,63 (3H, br s).

Referenčný príklad 61

3-Acetyltio-l-(4—{(IS)-2-metyl-[1-(2-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino) metyl)propylkarbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

553 (1) ((IS)-l-Hydroxymetyl-2-metylpropyl)karbamová kyselina, terc.butylester

Do roztoku L-valinolu (2,00 g, 19,4 mol) v zmesi metylénchloridu (50 ml) a metanolu (50 ml) bol pridaný di-terc. butoxykarbónový anhydrid (5,08 g, 23,3 mol) v ladovom kúpeli a reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu počas vzniku ((1S)-1-hydroxymetyl-2-metylpropyl)karbamovej kyseliny, terc.butylesteru (4,19 mg, výťažok 100%) ako bezfarebný olej.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 4,70 až 4,59 (IH, br s), 3,74 až 3,66 (IH, m), 3,65 až 3,57 (IH, m), 3,48 až 3,39 (IH, m), 2,38 až 2,30 (IH, br s), 1,89 až 1,78 (IH, m), 1,45 (9H, s), 0,96 (3H, d, J=6,6 Hz), 0,94 (3H, d, J=6,6 Hz).

(2) ((IS)-l-Azidometyl-2-metylpropyl)karbamová kyselina, terc.butylester

Do roztoku ((IS)-l-hydroxymetyl-2-metylpropyl·)karbamovej kyseliny, terc.butylesteru (3,00 g, 14,8 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 61(1)) v tetrahydrofuráne (150 ml) bol pridaný azid difenylfosforylu (4,78 ml, 22,2 mol), trifenylfosfín (5,82 g, 22,2 mol) a 40% roztok dietylazodikarboxylát v toluéne (9,67 g, 22,2 mol) v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 2 hodiny pri rovnakých podmienkach. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej

554 kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (9:1) ako eluentu počas vzniku ( ( 1S ) - 1 -a z idorae t y 1 - 2 -metylpropyl) karbamovej kyseliny, terc.butylesteru (3,26 g, výťažok 90%) ako bezfarebný olej .

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 4,59 až 4,45 (1H, m), 3,56 až 3,47 (1H, m), 3,42 (2H, d, J=4,4 Hz), 1,86 až 1,74 (1H, m), 1,45 (9H, s), 0,95 (3H, d, J=6, 6 Hz), 0,93 (3H, d, J=7,3 Hz).

(3) p-Nitrobenzylester ((2S)-2-terc.butoxykarbonylamino-3-metylbutyl)karbamovej kyseliny

Roztok ((1S)-l-azidometyl-2-metylpropyl)karbamovej kyseliny, terc.butylesteru (3,26 g, 13,3 mol) (získaný podlá opisu v referenčnom príklade 61(2)) v metanole (160 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí (3,26 g) pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná, aby sa odstránil katalyzátor a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Do roztoku získaného surového produktu v metylénchloride (160 ml) bol pridaný p-nitrobenzylester chloromovej kyseliny (4,31 g, 20,0 mol) a trietylamín (2,80 ml, 20,0 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (8 : 1 1:1) ako eluentu počas vzniku p-nitrobenzylesteru ( (2S) -2-terc. butoxykarbonylamlno-3-me ty lbutyl) karbamovej kyseliny (3,13 mg, výťažok 62%) ako bledožlté kryštály.

^’H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,50 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,43 až 5,31 (1H, br s), 5,19 (2H, s), 4,57 až 4,49 (1H, br d, J=8,8 Hz), 3,60 až 3,49 (1H, m), 3,40 až 3,29

555 (1Η, m), s), 0,96

3,26 až 3,13 (1H, m), 1,82 až 1,71 (1H, m), 1,43 (9H, (3H, d, J=7,3 Hz), 0,93 (3H, d, J=6,6 Hz).

(4) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-l-(4-{(13)-2-metyl-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)metyl] -propylkarbamoyl}-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku p-nitrobenzylesteru ( (2S)-2-terc.butoxykarbonylamino-3-metylbutyl)karbamovej kyseliny (3,13 g, 8,21 mol) (získanej podľa opisu v referenčnom príklade 61(3)) v 1,4-dioxane (31 ml) bol pridaný a 4N roztok chlorovodíka v 1,4-dioxane (31 ml) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Etyl acetát bol pridaný do zvyšku a výsledná zmes bola filtrovaná a premytá etylacetátom za vzniku hydrochloridu p-nitrobenzylesteru ((2S)-2-amino-3-metylbutyl)karbamovej kyseliny (1,82 g, výťažok 70%) ako bledožlté kryštály. Následne, do suspenzie hydrochloridu p-nitrobenzylesteru ((2S)-2-amino-3-metylbutyl)karbamovej kyseliny (1,29 g, 4,05 mol) získanej ako je uvedené vyššie a 3-terc. butyldifenylsilyloxy-1-(4-karboxyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,48 g, 3,37 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(4)) v dimetylformamide (74 ml) bol pridaný dietylfosforyikyanid (615 μΐ, 4,05 mol) a trietylamín (1,14 ml, 8,10 mol) v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-{(IS)-2-metyl-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino) metyl] -propylkarbamoyl} -1,3-t iazol-2556

-yl)azetidínu (1,55 g, výťažok 74%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 8,11 (2K, d, J=8,8 Hz),

7,64 až 7,60 (4H, m), 7,49 až 7,39 (8H, m), 7,35 (IH, s), 7,20 až 7,18 (IH, br d, J=9,8 Hz), 5,56 až 5,48 (IH, br s), 5,20 (IH, d, 3=13,7 Hz), 5,08 (IH, d, J=13,7 Hz), 4,78 až 4,72 (IH, m), 4,14 až 4,06 (2H, m), 4,04 až 3,94 (3H, m), 3,46 (IH, dt,

J=13,7, 3,9 Hz), 3,31 (IH, ddd, J=13,7, 10,7, 5,9 Hz), 1,95 až

1,86 (IH, m), 1,07 (9H, s), 1,01 (3H, d, J=6,8 Hz), 0,99 (3H, d, J=6,8 Hz) .

(5) 3-Hydroxy-l-(4-{(1S)-2-metyl-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)metyl]propyl-karbamoyl}-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-{(1S)-2-metyl-[1- (p-nitrobenzyloxykarbonylamino ) metyl ] propyl karbamoyl} -1,3-tiazol-2-yi)azetidínu (1,54 g, 2,20 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 61(4)) v bezvodom tetrahydrofurane (78 ml) bola pridaná kyselina octová (151 μΐ) a l,0M roztok tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (2,64 ml, 2,64 mol) v ľadovom kúpeli. Zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a vodu. Získaná organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-(4-{ (1S)-2-metyl-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)metyl]-propylkarbamoyl}-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (927 mg, výťažok

91%) ako biela pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,C9 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,41 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,39 (IH, s), 7,19 až 7,14 (IH, br d, J=9,5

Hz), 5,54 až 5,46 (IH, m), 5,22 (IH, d, J=13,6 Hz), 5,06 (IH, d, J=13,6 Hz), 4,87 až 4,78 (IH, m), 4,37 až 4,26 (2H, m), 4,04 až

557

3,90	(3H,	m)	1, 3,47	až 3,40	(IH,	m), 3,38 až	3,30	(IH, m), 2,38
(IH,	d, J=	=7,	3 Hz) ,	1,94 až 1,	. 83	(IH, m), 1,00	(3H,	d, J-7,3 Hz),
0,99	(3H,	d,	J=7,3	Hz) .

(6) 3-Metánsulfonyloxy-l-(4-{(IS)-2-metyl-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)metyl] -propylkarbamoyl }-l, 3-tiazol-2-yl) azetidín.

Do roztoku 3-hydroxy-l-(4-{(IS)-2-metyl-(1-(nitrobenzyloxykarbonylamino)metyl]propylkarbamoyl}-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (920 mg, 1,98 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 61(5)) v metylénchloride (46 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (461 μΐ, 5,95 mol) a trietylamín (834 μΐ, 5,95 mol) v ľadovom kúpeli. Po 10 minútovom miešaní zmesi v ľadovom kúpeli bola zmes miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 4) ako eluentu počas vzniku 3-metánsulfonyloxy-l-(4-{(IS)-2-metyl-[1-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)metyl]-propylkarbamoyl}-1,3-tiazoi-2-yl)azetidínu (1,06 g, výťažok 99%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,10 (2H, d, J-8,8 Hz), 7,45 (IH, s), 7,41 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,18 až 7,12 (IH, br d, J=8,8

Hz), 5,50 až 5,45 (IH, br s), 5,42 (lH, tt, J=6,6, 4,4 Hz), 5,22 (IH, d, J=13,2 Hz), 5,08 (IH, d, J=13,2 Hz), 4,49 až 4,40 (2H, m), 4,29 až 4,20 (2H, m), 4,04 až 3,95 (IH, m), 3,44 (IH, dt, J=13,9, 4,4 Hz), 3,38 až 3,24 (IH, m), 3,12 (3H, s), 1,94-1,85 (IH, m), l,01(3H, d, J-6,6 Hz), 0,99(3H, d, J=6,6 Hz).

(7 ) 3-Acetyltio-l- ( 4-{ (IS) -2-metyl- [1- (p-nitrobenzyloxykarbonylamino) metyl]-propylkarbamoyl}-!,3-tiazol-2-yl)azetidín

558

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-(4-{(lS)-2-metyl-[l-(p~

-nitrobenzyloxykarbonylamino)metyl]propylkarbamoyl(-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,06 g, 1,96 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 61(6)) v dimetylformamide (53 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,34 mg, 11,7 mol) pri teplote miestnosti. Zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 8,5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2 : 3) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-{(1S)-2-metyl-(1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl-amino)metyl]-propylkarbamoyl}-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (785 mg, výťažok

77%) ako bledohnedá pevná látka.

^XH-NMR	(400 M Hz,	CDC1₃) : δ (ppm) 8,12	(2H	, d, J =8,8	Hz) ,
7,42 (2H,	d, J=8, 8	Hz)	, 7,41 (IH, s), 7,20	až	7,16 (IH,	br d,
J=9, 5 Hz) ,	5,54 až	5,	45 (IH, br s), 5,21	(IH	, d, J=13,2	Hz) ,
5,09 (IH,	d, J=13,2	Hz	), 4,51 (2H, dt, J=ll	,0,	8,4 Hz), 4,	47 až
4,39 (IH,	m) , 4,03	až	3,93 (3H, m), 3,45	(IH,	dt, J=13,2	, 4,0
Hz), 3,37	až 3,68 (	IH,	m), 2,37 (3H, s), 1	,95	až 1,84 (IH	, m) ,

1,00 (3H, d, J=7,3 Hz), 0,99 (3H, d, J=7,3 Hz).

Referenčný príklad 62

3-Acetyltio-l-{4-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)mety1-1,3-tiazol-2-yl(azetidín

(1) 1-(4-Azidometyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-terc. butyldifenylsilyloxyazetidín

559

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-hydroxymetyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,02 g, 2,39 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 2(2)) v tetrahydrofuráne (50 ml) bol pridaný azid difenylfosforylu (0,8 ml, 3,71 mol), trifenylfosfín (950 mg, 3,62 mol) a 40% dietylazodikarboxylát v roztoku toluénu (1,32 g, 3,59 mol) v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (8:1) ako eluentu počas vzniku l-(4-azidometyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-terc.butyldifenylsilyloxyazetidínu (1,06 g, výťažok 99%) ako bezfarebný sirup.

¹H-NMR	(400	M Hz, CDCI3) : δ (ppm) 7,66 až	7,36	(10H, m), 6,45
(1H, s),	4,78	až 4,71 (1H, m), 4,24 (2H,	s) ,	4,12 (2H, dd,
J=8,6, 6,2	Hz) ,	4,02 (2H, dd, J=8,6, 5,7 Hz),	1,06	(9H, s) .

IR (kvapalný film):. 2858, 2170, 2100, 1527, 1313, 1182,

1143om^-1

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) 450 [M+H] ⁺

Hmotnostné spektrum vysokého rozlíšenia (FAB⁺) : počítaná C23H28ONSSSÍ: 450,1784 nájdená 450,1793 [M+H]⁺ (2) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-[4-(p-nitrobenzyloxykarbonylaminometyl) -1, 3-tiazol-2-yl] azetidín

1-(4-Azidometyi-l,3-tiazol-2-y1)-3-terc. butyldifenylsilyloxyazetidín (1,06 g, 2,37 mol) (získaný podľa opisu v referenčnom príklade 62(1)) v metanole (53 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia na aktívnom uhlí (1,05 g) pri teplote miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná, aby sa odstránil katalyzátor a filtrát koncentrovaný počas

560 zníženého tlaku. Zvyšok bol rozpustený v metylénchloride (53,2 ml). Do zmesi bol pridaný p-nitrobenzyl chloromate (0,76 g, 3,52 mol) a trietylamín (0,5 ml, 3,59 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes destilovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol rozdelený medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : etylacetátu (3 : 2) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxyl-1-[4-(p-nitrobenzyloxykarbonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (867,2 mg, výťažok 61%) ako žltá pevná látka.

¹H-NMR (500 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,3 Hz), 7,62

(4H,	d, J=	=8,3	Hz) ,	7,50 (2H, d, J=8,3 Hz), 7,50 až 7,34 (6H, m),
6,37	(IH,	S) ,	5,38	(IH, br t, J=5,4 Hz), 5,20 (2H, s), 4,78 až
4,71	(IH,	m) ,	4,26	(2H, d, J=5,4 Hz), 4,10 (2H, dd, J=8,3, 6,8
Hz) ,	4,00	(2H,	dd,	J=8,3, 4,7 Hz), 1,06 (9H, s) .

(3) 3-Hydroxy-l-[4-(p-nitrobenzyloxykarbonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-fcerc.butyldifenylsilyloxyl-l-[4-(p-nitrobenzyloxykarbonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (867,2 mg, 1,44 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 62(2)) v bezvodom tetrahydrofurane (45 ml) bola pridaná kyselina octová (0,1 ml, 1,75 mol) a l,0M tetra-n-butylamóniumfluorid v tetrahydrofurane (1,72 ml, 1,72 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 4,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený

561 chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (15 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-[4-(p-nitrobenzyloxykarbonyiaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (457 mg, výťažok 87%) ako žltá pevná látka.

¹H-NMR (500 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,6 Hz), 7,51 (2H, d, J=8,6 Hz), 6,40 (IH, s), 5,38 (IH, br s), 5,21 (2H, s), 4,88 až 4,80 (IH, m), 4,32(2H, dd, J=9,l, 6,8 Hz), 4,27 (2H, d, J=5,7 Hz), 3,95 (2H, dd, J=9,l, 4,5 Hz), 2,23 (IH, d, J=7,9 Hz).

(4) 3-Metánsulfonylcxy-1- [4- (p-nitrobenzyloxykarbonylaminometyl) -1,3-tiazol-2-yljazetidín

Do roztoku 3-hydrcxy-l-[4-(p-nitrobenzyloxykarbonylaminometyl) -1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (457 mg, 1,25 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 62(3)) v metylénchloride (25 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid' (0,29 ml, 3,75 mol) a trietylamín (0,53 ml, 3,80 mol) v ľadovom kúpeli. Po miešaní zmesi 10 minút v ľadovom kúpeli bola výsledná zmes miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (1:1) ako eluentu za vzniku 3-metánsulfonyloxy-l-[4-(p-nitrobenzyloxykarbonylaminometyl) -1,3-tiazol-2-ýl]azetidínu (499,4 mg, výťažok 90%) ako žltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=7,8 Hz), 7,51 (2H, d, J=7,8 Hz), 6,46 (IH, s), 5,44 až 5,38 (2H, m), 5,26 (2H, s), 4,43 (2H, dd, J=9,8, 6,8 Hz), 4,28 (2H, d, J=5,9 Hz), 4,24 (2H, dd, J=9,8, 4,4 Hz), 3,10 (3H, s).

(5) 3-Acetyltio-l-[4-(p-nitrobenzyloxykarbonylaminometyl)-1, 3-tiazol-2-yl]azetidín

562

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-[4-(p-nitrobenzyloxykarbonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (499,4 mg, 1,13 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 62(4)) v dimetylformamide (25 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,0 g, 6,93 mol) pri teplote miestnosti a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 6,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá 0,5 M kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (2:1) ako eluentu za vzniku 3-acetyltio-1-[4-(p-nitrobenzyloxykarbonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidínu (265,2 mg, výťažok 56%) ako bledohnedá pevná látka.

''H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,42 Hz),

7,51 (2H, d, J=8,4 Hz), 6,42 (1H, s), 5,39 (1H, br t, J=7,5 Hz), 5,21 (2H, s), 4,51 (2H, t, J=8,l Hz), 4,50 až 4,38 (1H, m), 4,27 (2H, d, J=7,5 Hz), 3,96 (2H, dd, J=8,l, 5,1 Hz), 2,36 (3H, s) .

Referenčný príklad 63

3-Acetyltio-l-[4-(metoxykarbonylamino)metyl-l,3-tiazol-2-yl] azetidín

AcS

N

NHCOOMe (1) 3 -terc. Butyldifenylsilyloxy-1- [4 - (metoxykarbonylaminometyl) -1,3-tiazol-2-yl]azetidín

1-(4-Azidometyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-terc.

butyldifenylsilyloxyazetidín (2,12 g, 4,71 mol) (získaný podľa opisu v referenčnom príklade 62(1)) v metanole (106 ml) bol katalytický redukovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia (2,12

563

g) pri teplote miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná, aby sa odstránil katalyzátor a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol rozpustený v metylénchloride (100 ml) . Do zmesi bol pridaný metylchloromát (0,43 ml, 5,65 mol) a trietylamín (0,79 ml, 5,65 mol) a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes destilovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol rozdelený medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1- [4- (metoxykarbonylarninometyl) -1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (1,88 g, výťažok 45%) ako bledožltý olej .

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,60 (4H, d, J=l,5 Hz), 7,48 až 7,31 (6H, m), 7,19 (1H, t, J=8,l Hz), 7,00 (1H, s), 4,78 až 4,68 (1H, m), 4,24 (2H, d, J=5,8 Hz), 4,09 (2H, t, J=9,0, 6,6 Hz), 3,99 (2H, t, J=9,0, 5,0 Hz), 3,67 (3H, s), 1,06 (9H, s).

(2) 3-Hydroxy-l-[4-(metoxykarbonylarninometyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-[4-(metoxykarbonylarninometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (1,88 g, 3,90 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 63(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (94 ml) bola pridaná kyselina octová (0,27 ml, 4,68 mol) a l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (4,68 ml, 4,68 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a filtrovaná

564 koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu za vzniku 3-hycroxy-l-[4-(metoxykarbonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (426 mg, výťažok 45%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 6,39 (IH, s), 4,79 až 4,39 (IH, m), 4,31 (2H, dd, J=9,l, 6,7 Hz), 4,25 (2H, d, J=5,S Hz), 3,94 (2H, dd, J=9,l, 4,3 Hz), 3,68 (3H, s).

(3) 3-Metánsulf onyloxy-1- [4- (metoxykarbonylaminometyl) -1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-[4-(metoxykarbonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (426 mg, 1,75 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 63(2)) v metylénchloride (20 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,16 ml, 2,10 mol) a trietylamín (0,29 ml, 2,10 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-metánsulfonyloxy-l-[4-(metoxykarbonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (448 mg, výťažok 80%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR	(400 M Hz, CDC1₃) : δ	(ppm) 6,45	(IH,	s),	5,45	až 5,36
(IH, m), 4,	43 (2H, dd, J=9,6, 6,	7 Hz), 4,25	(2H,	S) ,	4,25	(IH, t.
J=5,8 Hz) ,	4,23 (IH, t.J=5,8 Hz)	, 3,69 (3H,	S) ,	3,10	(3H,	s) .

(4) 3-Acetyltio-l-[4-(metoxykarbonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-[4-(metoxykarbonylamino-metyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (448 mg, 1,39 mol)(získaného podľa opisu v referenčnom príklade 63(3)) v dimetylformamide (13 ml) bol pridaný tioacetát draselný (952 mg, 8,34 mol) pri teplote

565 miestnosti a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C) 6 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1 : 2) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-[4-(metoxykarbonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (441 mg, výťažok 100%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 6,41 (IH, s), 4,50 (2H, t,

Referenčný príklad 64

3-Acetyltio-l-[4-(benzoylaminometyl)-l,3-tiazol-2-yl]azetidín

AcS (1) 1-[4-(Benzoylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]-3-terc.

butyldifenylsilyloxyazetidín

1-(4-Azidometyl-l, 3-tiazol-2-yl)-3-terc. butyldifenylsilyloxyazetidín (2,53 g, 5,60 mol) (získaný podľa opisu v referenčnom príklade 62(1) v metanole (120 ml) bol katalytický redukovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia (2,53 g) pri teplote miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná, aby sa odstránil katalyzátor. Do filtrátu bol pridaný benzoic anhydride (1,90 ml, 8,40 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná 2,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes destilovaná počas zníženého tlaku.

566

Zvyšok bol rozdelený medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrované počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (3 : 1) —> etylacetátu ako eluentu počas vzniku 1-[4-(benzoylamincmetyi)-1,3-tiazol-2-yl] -3-terc.butyldifenylsilyloxyazetidínu (1 ,49 g, výťažok 50%) ako bledožltý olej.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,79 (2H, d, J=7,3 Hz), 7,63 až 7,55 (4H, m), 7,55 až 7,31 (9H, m), 6,79 (1H, br s), 6,44 (1H, s), 4,79 až 4,68 (1H, m), 4,51 (2H, d, J=5, 4 Hz), 4,11 (2H, dd,

J=8,4, 7,3 Hz), 4,01 (2H, dd, J=8,4, 5,0 Hz), 1,06 (9H, s).

(2) 1- [4- (Benzoylaminometyl) -1,3-tiazol-2-yl] -3-hydroxya.zetidín

Do roztoku 1-[4-(benzoylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]-3-terc. butyldifenylsilyloxyazetidínu (1,49 g, 2,82 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 64(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (75 ml) bol pridaný a 1,0 M roztok tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (3,39 ml, 3,39 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešané v ladovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zm.es rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán :

etylacetátu (1 : 2) -» etylacetát : metanolu (9 : 1) ako eluentu počas vzniku 1-[ 4-(benzoylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]-3-hydroxyazetidínu (582 mg, výťažok 71%) ako biela pevná látka.

	^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃)	: δ (ppm)	7,79 (2H,	dd,	J=7,4	Hz) ,	7,60
až	7,36 (3H, m), 6,82 (1H,	br s ) , 6,	46 (1H, s)	Z 4 z	85 a z	4,77	(1H,
m) ,	4,51 (2H, d, J=5, 6 Hz	1, 4,31 (	2H, dd, J=	= 8,9,	6, 6	Hz) ,	3,95

(2H, dd, J=8,5, 4,4 Hz).

567 (3) 1-[4-(Benzoylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-[4-(benzoylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]-3-hydroxyazetidínu (582 mg, 2,01 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 64(2)) v metylénchloride (30 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,19 ml, 2,41 mol), trietylamín (0,34 ml, 2,41 mol) a pyridín (5,8 ml) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu za vzniku l-[4- (benzoylaminometyl) -1, 3-tiazol-2-yl] -3-metánsulfonyloxyazetidínu (739 mg, výťažok 100%) ako bledožltá pevná látka.

	^’H-NMR (400 M	Hz,	CDC1₃) : δ (ppm) 7	,80 (2H, d, J=6,9	Hz), 7,57
až	7,41 (3H, m) ,	6,71	(1H, bs), 6,53	(1H, s), 5,46 až	5,38 (1H,
m) ,	4,54 (2H, d,	J=5,	2 Hz), 4,44 (2H,	ddd, J=9,6, 6,6,	0,9 Hz) ,

4,25 (2H, ddd, J=9,6, 9,3, 0,9 Hz), 3,10 (3H, s).

(4) 3-Acetyltio-l-[4-(benzoylamino-metyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín

Do roztoku 1-[4-(benzoylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl]-3-metánsulfonyloxyazetidínu (739 mg, 2,01 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 64(3)) v dimetylformamide (20 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,38 g, 12,1 mol) pri teplote miestnosti a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C) 3,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na

568 silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu = (1:1)-+ etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-[4-(benzoylamínometyl)-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (698 mg, výťažok 100%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : Ô (ppm) 7,08 (2H, d, J=7,8 Hz), 7,55 až 7,46 (3H, m), 6,77 (1H, br s), 6,49 (1H, s), 4,47 až 4,38 (4H, m), 4,47 až 4,38 (1H, m), 3,97 (2H, dd, J=8,6, 5,2 Hz),

2,37 (3H, s) .

Referenčný príklad 65

3-Acetyltio-l-[4-(benzénsulfonylamino)metyl-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

M.

nhso₂-

\ /

AcS

N// (1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-[4-(benzénsulfonylamino) metyl-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

1-(4-Azidometyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-terc. butyldifenylsilyloxyazetidín (2,12 g, 4,71 mol) (získaný podľa opisu v referenčnom príklade 62(1)) v metanole (106 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia (2,12 g) pri teplote miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakčná zmes filtrovaná, aby sa odstránil filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku.

Zvyšok bol rozpustený v metylénchloride (100 ml). Do zmesi bol pridaný benzénsulfonyl chloridu (0,90 g, 7,07 mol) a trietylamín (0,98 ml, 7,07 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie reakcie bola katalyzátor a bola zmes rozdelený hydrogénuhličitanu destilovaná počas medzi etylacetát sodného. Organická zníženého tlaku. Zvyšok bol a nasýtený vodný roztok vrstva nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, bola premytá vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na

569 silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu za vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-[4-(benzénsulfonylamino) metyl-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (755 mg, výťažok 28%) ako bledožltý olej.

1	H-NMR (	400 M	Hz, CDC1₃)	: Ô	(ppm) 7,80	(2H,	d, J=7,5	Hz) ,
7, 61	(4H, d,	J=6, 3	Hz), 7,54	až	7,30 (9K, m),	6, 21	(IH, s),	5,07
(IH,	t, J=6,	0 Hz) ,	4,74 až 4,	r 66	(IH, m), 4,05	(2H,	d, J=6,3	Hz),
3, 99 l	(2H, dd,	J=7, 6	Hz), 3,89(	2H,	dd, J=8,8, 4,	8 Hz)	, l,07(9H,	s) .

(2) 1- [4-(Benzénsulfonylamino)metyl-1,3-tiazol-2-yl] -3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1- [4- (benzénsulfonylamino) metyl-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu podía opisu v referenčnom (2,79 g, 4,95 mol) (získaného príklade 65(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (140 ml) bol pridaný roztok 1,0 M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (5,94 ml, 5,94 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku.

chrómatograficky na silikagélovej etylacetátu ako eluentu počas vzniku 1-[4-(benzénsulfonylamino) metyl-1,3-tiazol-2-yl]-3-hydroxyazetidínu (1,06 g, výťažok 66%) ako biela pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,79 (2H, d, J=7,5 Hz), 7,50 až 7,41 (3H, m), 6,25 (IH, s), 5,51 (IH, br s), 4,80 až 4,70 (IH, m), 4,19 (2H, t, J=9,l Hz), 4,03 (2H, t, J=3,5 Hz), 3,83 (2H, dd, J=9,1,4.Hz).

Zvyšok bol vyčistený kolóne za použitia (3) 1-[4-(Benzénsulfonylamino)metyl-1,3-tiazol-2-yl]-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-[4-(benzénsulfonylamino)metyl-1, 3-tiazol-2-yl] 570

-3-hydroxyazetidínu (1,06 g, 3,26 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 65(2)) v metylénchloride (50 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,38 ml, 4,89 mol) a trietylamín (0,68 ml, 4,89 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku 1-[4-(benzénsulfonylamino)metyl-l,3-tiazol-2-yl]-3-metánsulfonyloxyazetidínu (1,16 mg, výťažok 91%) ako bledožltá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,82 (2H, d, J=7,3 Hz), 7,61 až 7,46 (3H, m), 6,33 (1H, s), 5,42 až 5,33 (1H, m), 5,15 (1H, t, J=5,9 Hz), 4,34 (2H, dd, J=9,8, 6,7 Hz), 4,14 (2H, dd, J=9,8, 4,1 Hz), 4,08 (2K, d, J=6,3 Hz), 3,10 (3H, s).

(4) 3-Acetyltio-l-[4-(benzénsulfonylamino)metyl-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 1-[4-(benzénsulfonylamino)metyl-1,3-tiazol-2-yl]-3-metánsulfonyloxyazetidínu (1,16 g, 2,98 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 65(3)) v dimetylformamide (35 ml) bol pridaný tioacetát draselný (2,04 g, 17,9 mol) pri teplote miestnosti a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C) 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu : etylacetátu (5:1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-[4-(benzénsulfonylamino)metyl-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (1,00 g,

571 výťažok 91 %) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,82 (2H, d, J=7,4 Hz), 7,58 až 7,42 (3H, m), 6,23 (IH, s), 5,40 až 5,50 (IH, m), 4,48 až 4,30 (3H, m), 4,09 (2H, d, J=5,8 Hz), 3,90 (2H, dd, J=8,3, 4,5 Hz),

2,37 (3H, s) .

Referenčný príklad 66

3-Acetyltio-l-[4-(tiofén-2-karbonylamino)metyl-1,3-tiazol2-yl]azetidín ' ·

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-[4-(tiofén-2-karbonylamino) metyl-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

1-(4-Azidometyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-terc. butyldifenylsilyloxyazetidínu (2,47 g, 5,50 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 62(1)) v metanole (120 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia (2,47 g) pri teplote miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná, aby sa odstránil katalyzátor a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol rozpustený v metylénchloride (115 ml) . Do zmesi bol pridaný tienylchlorid (0,71 ml, 6,60 mol) a trietylamín (0,92 ml, 6,60 mol) a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes destilovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol rozdelený medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-[4-(tiofén-2-karbonylamino)metyl-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (1,88 g, výťažok 64%) ako bledožltý olej.

572

	¹H-NMR (400	M Hz, CDCI3	): δ (ppm) 7	,75	až	7,32 (13H, m),	7,11
až	7,03 (1H, m)	, 6,65 (1H,	br s), 4,80	až	4,7	0 (1H, m), 4,47	(2H,
d,	J=5,0 Hz),	4,11 (2H, t,	J=8,5 Hz),	4,	01	(2H, dd, J=8,5,	5,0
Hz)	, 1,06 (9H,	s) .

(2) 3-Hydroxy-l-[4-(tiofén-2-karbonylamino)metyl-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-[4-(tiofén-2-karbonylamino)metyl-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (2,18 g, 4,08 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 66(1)) v bezvodom tetrahydrofuráne (110 ml) bol pridaný roztok 1,0 M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (4,90 ml, 4,90 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku.

chrómatograficky na silikagélovej etylacetát : metanolu (10 : 1) ako

3-hydroxy-l-(4-(tiofén-2-karbonylamino)metyl-l,3-tiazol-2-yl] azetidínu (571 mg, výťažok 47%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,53 (1H, d, J=3,5 Hz), 7,46 (1H, d, J=5,4 Hz), 7,60 (1H, dd, J=4,9, 3,8 Hz), 6,87 (1H, br s), 6,46 (1H, s), 4,87 až 4,78 (1H, m), 4,48 (2H, d, J=5,6

Hz), 4,33 (2H, dd, J=8,7, 4,6 Hz), 3,98 (2H, dd, J=8,7, 4,6 Hz).

Zvyšok bol vyčistený kolóne za použitia eluentu počas vzniku (3)3-Metánsulfonyloxy-l-[4-(tiofén-2-karbonylamino)metyl-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-[4-(tiofén-2-karbonylamino)metyl-1,3-tiazol-2-yl] azetidínu (571 mg, 1,93 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 66(2)) v metylénchloride (28 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,18 ml, 2,32 mol) a trietylamín (0,33 ml, 2,32 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná 1

573 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (1:1) ako eluentu za vzniku 3-metánsulfonyloxy-l- [4- (tiofén-2-karbonylamino)metyl-l, 3-tiazol-2-yl]azetidínu (490 mg, výťažok 91%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M	Hz,	CDC1₃)	: δ	(ppm) 7,56	(IH, d, J=5,4 Hz), 7,47
(IH, d, J=5,4	Hz)	, 7,07	(IH,	dd, J=5,	1, 3,7 Hz), 6,87 (IH, br
S), 6,50 (IH,	s) ,	4,57.	(2H,	t, J=8,6	Hz), 4,50 (2H, t, J=5,4
Hz), 4,50 (2H,	d,	J=5, 4	Hz)	, 4,48 až	4,37 (IH, m), 4,36 (2H,
dd, J=8,6, 5,5	Hz)	, 2,36	(3H,	s) .

(4) 3-Acetyltio-l-[4-(tiofén-2-karbonylamino)metyl-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-[4-(tiofén-2-karbonylamino) metyl-1,3-tiazol-2-yljazetidínu (623 mg, 1,67 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 66(3)) v dimetylformamide (18 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,14 g, 10,0 mol) pri teplote miestnosti a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C) 4' hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakciebola zmeu rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1 : 1) -» etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-[4-(tiofén-2-karbonylamino)metyl-1,3-tiazol-2-yl]azetidínu (490 mg, výťažok 91%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 7,56 (IH, d, J=5,4 Hz),

7,47 (IH, d, J=5, 4 Hz), 7,07 (IH, dd, J=5,l, 3,7 Hz), 6,87 (IH,

574 br s), 6,50 (1H, s), 4,57 (2H, t, J=8,6 Hz), 4,50 (2H, t, J=5,4

Hz), 4,50 (2H, d, J=5,4 Hz), 4,48 až 4,37 (1H, m), 4,36 (2H, dd, J=8,6, 5,5 Hz), 2,36 (3H, s).

Referenčný príklad 67

3-Acetyltio-l-[4-(furan-2-karbonylamino)metyl-1,3-tiazol-2~yl]azetidín

AcS

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-[4 - (furan-2-karbonylamino) metyl-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

1-(4-Azidometyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-terc. butyldifenylsilyloxyazetidín (2,47 g, 5,50 mol) (získaný podľa opisu v referenčnom príklade 62(1)) v metanole (120 ml) bol katalytický redukovaný za prítomnosti 20% hydroxidu paládia (2,47 g) pri teplote miestnosti. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes filtrovaná, aby sa odstránil katalyzátor a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol rozpustený v metylénchloride (115 ml). Do zmesi bol pridaný

2-furoylchlorid (0,65 ml, 6,60 mol) a trietylamín (0,92 ml, 6,60 mol) a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes destilovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol rozdelený medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-[4-(furan-2-karbonylamino) metyl-1,3-tiazol-2-yl] azetidínu (1,60 g, výťažok 60%) ako bledožltý olej.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,75 až 7,58 (4H, m), 7,50

575

až 7,09	(9H,	m) , 6, 68	(IH,	br	s) , 4,	82 až 4,70	(IH, m), 4,47
(2H, d,	J=5,5	Hz), 4,11	(2H,	t,	J=8,3	Hz), 4,02 i	I2H, dd, J=8,3,
5,0 Hz) ,	1,06	(9H, s) .

(2) 1-[4-(Furan-2-karbonylamino)metyl-l,3-tiazol-2-yl]-3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-[4-(furan-2-karbonyl-amino)metyl-l,3-tiazol-2-yl]azetidínu (1,90 g, 3,68 mol) (získaného pódia opisu v referenčnom príklade 67(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (95 ml) bol pridaný roztok 1,0 M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (4,41 ml, 4,41 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (10 : 1) ako eluentu počas vzniku 1—[4— -(furan-2-karbonylamino)metyl-l,3-tiazol-2-yl]-3-hydroxyazetidínu (426 mg, výťažok 47%) ako biela pevná látka.

^H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,44 (IH, s), 7,12 (IH, d, J=3,5 Hz), 7,04 (IH, br s), 6,49 (IH, dd, J=3,4, 1,7 Hz), 6,45 (IH, s), 4,86 až 4,78 (IH, m), 4,48 (2H, d, J=5,7 Hz), 4,33 (2H, t, J=8,8 Hz), 3,98 (2H, dd, J=8,8, 4,4 Hz).

(3) 1-[4-(Furan-2-karbonylamino)metyl-l,3-tiazol-2-yl] -3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-[4-(furan-2-karbonylamino)metyl-l,3-tiazol-2-yl]-3-hydroxyazetidínu (426 mg, 1,72 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 67(2)) v metylénchloride (20 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,16 ml, 2,07 mol) a trietylamín (0,29 ml, 2,07 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi

576 etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (20 : 1) ako eluentu počas vzniku 1-[4-(furan-2-karbonylamino)metyl-1,3-tiazol-2-yl]-3-metánsulfonyloxyazetidínu (481 mg, výťažok 78%) ako bledožltá pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,45 (1H, d, J=0,9 Hz), 7,13 (1H, d, J=3,5 H), 7,00 (1H, s), 6,53 (1H, s), 6,50 (1H, dd, J=3,5,

1,8 Hz), 5,49 až 5,38 (1H, m), 4,51 (2H, d, J=5, 8 Hz), 4,48 (2H, dd, J=3,l, 1,0 Hz), 4,29 (2H, dd, J=5,8, 4,9 Hz), 3,10 (3H, s).

(4)3-Acetyltio-l-[4-(furan-2-karbonylamino)metyl-l,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 1-[4-(furan-2-karbonylamino)metyl-l,3-tiazol-2-yi]-3-metánsulfonyloxyazetidínu (481 mg, 1,34 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 67(3)) v dimetylformamide (14 ml) bol pridaný tioacetát draselný (921 mg, 8,07 mol) pri teplote miestnosti a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C) 6 hodín.

Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýtenýmvodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-[4-(furan-2-karbonylamino)metyl-l,3-tiazol-2-yl]azetidínu (341 mg, výťažok 83%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,45 (1H, s), 7,12 (1H, d, J= 3,5 Hz), 7,09 až 6,94 (2H, m), 6,49 (2H, t, J=2,5 Hz), 4,56 (2H, t, J=8,5 Hz), 4,50 (2H, d, J=5,7 Hz), 4,48 až 4,38 (1Ή, m), 4,02 (2H, dd, J=8,5, 6,1 Hz), 2,36 (3H, s).

577

Referenčný príklad 68

3-Acetyltio-l-(4-ftalimidometyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-ftalimidometyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-hydroxymetyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,50 g, 3,53 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(2)) v tetrahydrofurane (75 ml) bol pridaný ftalimide (519 mg, 5,30 mol), trifenyífosfin (1,39 g, 5,30 mol) a 40% dietyl azodikarboxylát v roztoku toluénu (2,03 ml, 5,30 mol) v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1 : 5) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1- (4-ftalimidometyl-l, 3-tiazol-2-yl) azetidínu (1,52 mg, výťažok 78%)- ako bledožltý olej.

^H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,88 (2H, dd, J=5,5, 3,1

Hz), 7,33 (2H, dd, J=5,5, 3,1 Hz), 7,60 (4H, dd, J=7,9, 1,4 Hz), 7,47 až 7,34 (6H, m), 6,26 (IH, s), 4,83 (2H, s), 4,76 až 4,68 (IH, m), 4,26 až 4,08(2H, m), 4,08 až 3,92 (2H, m), 1,05 (9H, s).

(2) 1-(4-Ftalimidometyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-ftalimidometyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,52 g, 2,57 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 68(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (76 ml) bol pridaný a 1,0 M roztok tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (3,29 ml, 3,29 mol) v

578 ladovom kúpeli a zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku, chromatograficky na silikagélovej etylacetátu ako eluentu počas vzniku 1-(4-ftalimidometyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (864 mg, výťažok 100%) ako biela pevná látka.

^LH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,87 (2H, dd, J=5,4, 3,1

Hz), 7,73 (2H, dd, J=5,4, 3,1 Hz), 6,32 (IH, s), 4,79 (2H, s), 4,78 až 4,70 (IH, m), 4,27 (2H, dd, J=9,2, 6,9 Hz), 3,91 (2H, dd, J=9,2, 4,6 Hz) .

Zvyšok bol vyčistený kolóne za použitia (3) 1-(4-Ftalimidometyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku 1-(4-ftalimidometyl-l,3-tiazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (864 mg, 2,74 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 68(2)) v metylénchloride (35 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,25 ml, 3,29 mol) a rrietylamín (0,46 ml, 3,29 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný do zmesi dietyléter a zmes bola miešaná 30 minút. Zmes bola filtrovaná, pevná látka odobratá a premytá dietyléterom počas vzniku 1-(4-ftalimidometyl-1,3-tiazol-2-yl)-3-metánsulfonyloxyazetidínu (726 mg, výtažok 67%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,91 (2H, dd, J=5,5, 2,8 Hz), 7,86 (2H, dd, J=5,5, 3,5 Hz), 6,70 (IH, s), 5,46 až 5,39 (IH, m), 4,63 (2H, s), 4,36 (2H, dd, J=10,0, 6,6 Hz), 4,09 (2H, dd, J= 10,0, 3,4 Hz), 3,27 (3H, s).

(4) 3-Acetyltio-l-(4-ftalimidometyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 1-(4-ftalimidometyl-l,3-tiazol-2-yl)-3579

-metánsulfonyloxyazetidínu (726 mg, 1,85 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 68(3)) v dimetylformamide (22 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,26 g, 11,1 mol) pri teplote miestnosti a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (90°C) 6,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu za vzniku 3-acetyltio-l-(4-ftalimidometyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (599 mg, výťažok 87%) ako bledohnedá pevná látka.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃:	1 : δ (ppm)	7,88 (2H,	dd,	J=5,4, 2,9	Hz),
7,73 (2H, dd, J=5,4, 3,1	Hz), 6,35	(1H, S),	4,82	(2H, s),	4,52
(2H, t, J=8,4 Hz), 4,45 až	4,35 (1H,	m) , 3,98	(2H,	dd, J=8,4,	5,7

Hz), 2,34 (3H, s) .

Referenčný príklad 69

3-Acetyltio-l -(4-sukcinimidometyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-sukcinimidometyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-hydroxymetyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,50 g, 3,53 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 2(2)) v tetrahydrofuráne (75 ml) bol pridaný sukcinimid (525 mg, 5,30 mol), trifenylfosfin (1,39 g, 5,30 mol) a 40 % dietylazodikarboxylát v roztoku toluénu (2,03 ml, 5,30 mol) v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka. Zmes bola miešaná v ľadovom

580 kúpeli 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná 'počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia hexán : etylacetátu (1 : 1) ako eluentu počas vzniku

3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-sukcinimidometyl-i,3-tiazol-2-yl) azetidínu (1,79 g, výťažok 100%) ako bledožltý olej.

'H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,65 až 7,57 (4H, m), 7,49 až 7,36 (6H, m), 6,30 (1H, s), 4,75 až 4,66 (1H, m), 4,60 (2H, s),

4,21 (4H, dd, J=14,2, 7,1 Hz), 4,12 (4H, dd, J=i4,2, 7,1 Hz), 4,09 (2H, t, J=8,5 Hz), 3,99 (2H, dd, J=8,5, 4,9 Hz), 1,05 (9H, s).

(2) 3-Hydroxy-l-(4-sukcinimičometyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-sukcinimidometyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (1,79 g, 3,53 mol) [získaného podlá opisu v referenčnom príklade 69(1)) v bezvodom tetranydrofurane (141 ml) bol pridaný roztok 1,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofarane (4,24 ml, 4,24 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran horečnatý, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát etylacetát : metanolu (20 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-(4-sukcinimidometyl-l,3-tiazol-2-

-yl)azetidínu (456	mg,	výťažok 49%) ako	biela	pevná látka.
¹H-NMR (400 M	Hz,	CDCI3) : δ (ppm)	6,34 (	1H, s), 4,84	až 4,74
(1H, m), 4,62 (2H,	s) ,	4,31 (2H, dd, J=	=9,9, 6	, 6 Hz) , 3, 94	(2H, dd,

J=9,9, 4,4 Hz), 2,76 (4H, m).

(3) 3-Metánsulfonyloxy-l-(4-sukcinímidometyl-l33-tiazol-2-yl)azetidín

581

Do roztoku 3-hydroxy-l-(4-sukcinimidometyl-l,3-tiazol-2-yl) azetidínu (459 mg, 1,72 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 69(2)) v metylénchloride (50 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (0,16 ml, 2,06 mol) a trietylamín (0,29 ml, 2,06 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-metánsulfonyíoxy-l-(4-sukcmimidometyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (515 mg, výťažokk 87%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 6,43 (IH, s), 5,44 až 5,34 (IH, m), 4,62 (2H, s), 4,44 (2H, dd, J=10,3, 6,6 Hz), 4,24 (2H, dd, J=10,3, 4,2 Hz), 3,09 (3H, s), 2,76 (4H, s).

(4) 3-Acetyltio-l-(4-sukcinimidometyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-(4-sukcinimidometyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidínu (515 mg, 1,49 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 69(3)) v dimetylformamide (15 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,02 g,~ 8,95 mol) pri teplote miestnosti bol miešaný v olejovom kúpeli (90°C) 8 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-sukcinimidometyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidínu (238 mg, výťažok 49%) ako bledohnedá pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 6,37 (IH, s), 4,62 (2H, s),

582

4,51 (2Η, t, J=8,5 Hz), 4,45 až 4,35 (IH, m), 3,97 (2H, dd, J=8,4, 5,4 Hz), 2,76 (4H, s), 2,35 (3H, m).

Referenčný príklad 70

3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-karboxyl-l,3-oxazol-2-yl) azetidín

O

TBDPSO

O

OH (1) Metylester (2S)-3-(terc.butyldifenylsilyloxy)-2-izotiokyanatopropánovej kyseliny terc.Butyldifenylsilvloxy-N-benzyloxvkarbonyl-L-serín, metylester (32,0 g, 65,1 mol) (získaný podlá opisu v referenčnom príklade 39(1)) v metanole (960 ml) bol katalytický hydrogénovaný za prítomnosti 10% paládia na aktívnom uhlí pri teplote miestnosti 2 hodiny. Potom bola reakčná zmes filtrovaná a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu : metanolu (95 : 5) ako eluentu počas vzniku terc.butyldifenylsilyloxy-L-serínu, metylesteru (19,7 g, výťažok 85%) ako bezfarebný olej. Do roztoku produktu (terc. butyldifenylsilyloxy-L-serínu, metylesteru) (19,7 g, 55,0 mol) v metylénchloride (590 ml) bol pridaný sírouhlík (6,62 ml, 110 mol) a trietylamín (19,3 ml, 138 mol) pri teplote miestnosti a zmes bola miešaná počas noci. Do výslednej zmesi bol pridaný etylchlórmat (13,2 ml, 138 mol) a trietylamín (19,3 ml, 138 mol) a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol do reakčnej zmesi pridaný metanol a výsledná zmes bola miešaná 30 minút. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluénu ako eluentu za vzniku metylesteru (2S)-3- (terc.butyldifenylsilyloxy)-2-izotiokyanátopropanovej kyseliny

583 (14,8 g, výťažok 67%) ako žlté kryštály.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,70 až 7,62 (4H, m), 7,48 až 7,38 (6H, m), 4,28 (1H_; dd, J=3,7, 5,1 Hz), 4,05 (1H, dd, J=5,l, 10,3 Hz), 3,95(1H, dd, J=3,7, 10,3 Hz), 3,80(3H, s), 1,06 (9H, s).

(2) Metylester (2S)-3-(terc.Butyldifenylsilyloxy)-2-[(3-hydroxyazetidín-l-karbotioyl)-amino]propánovej kyseliny

Do roztoku metylesteru 3-(terc.butyldifenylsilyloxy)-2-izotiokyanátopropánovej kyseliny (13,4 g, 33,5 mol) (získanej podlá opisu v referenčnom príklade 70(1)) v tetrahydrofuráne (245 ml) bol pridaný roztok 3-hydroxyazetidínu (4,90 g, 67,1 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 31(1)) vo vode (50 ml) pri teplote miestnosti a zmes bola miešaná počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluénu a toluén : acetonitrilu (3 : 1) ako eluentu počas vzniku (2S)-3- (terc.butyldifenylsilyloxy)-2-[(3-hydroxyazetidín-l-karbotioyl) amino]propánovej kyseliny, metylesteru (9,60 g, výťažok 61%) ako žltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,61 až 7,55 (4H, m), 7,47 až

7,36	(6H,	m) ,	5,94	(1H, br d, J=8,1 Hz) , 5	,19	(1H,	dt, J=2,9,	8,1
Hz) ,	4,71	až	4,64	(1H, m), 4,40 až 4,33	(1H	, m)	, 4,31 až	4,23
(1H,	m) ,	4,18	(1H,	dd, J=2,2, 10,3 Hz), 4,	04 (	1H,	dd, J=2,9,	10,3
Hz) ,	4,02	až	3,96	(1H, m), 3,94 až 3,88	(1H,	m) ,	3,76 (3H,	s),
2,24	(1H,	br d	, J=5	,9 Hz), 1,04 (9H, s).

(3) Metylester (2S)-2-{[3-(benzoyloxy)-azetidín-l-karbotioyl] amino}-3-(terc.butyldifenylsilyloxy)propánovej kyseliny

Do roztoku metylesteru (2S)-3-(terc.butyldifenylsilyloxy)-2- [ (3-hydroxyazetidín-l-karbotioyl) -amino] propánovej kyseliny (21,1 g, 44,6 mol) (získanej podľa opisu v referenčnom príklade

584

0,5 M kyselinou hydrogénuhličitanu

70(2)) v pyridíne (630 ml) bol pridaný roztok anhydridu kyseliny benzoovej (30,0 g, 133 mol) a 4-dimetylaminopyridín (545 mg, 4,46 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (4 : 1) ako eluentu počas vzniku metylesteru {2S)-2-{[3-(benzoyloxy)-azetidín-l-karbotioyl] amino}-3-(terc.butyidifenylsilyloxy)propánovej kyseliny, (23,3 g, výťažok 91%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,10 až 8,05 (2H, m), 7,65 až 7,54 (4H, m), 7,52 až 7,45 (3H, m), 7,44 až 7,35 (6H, m), 5,96 (IH, br d, J=8,l Hz), 5,47 až 5,40 (IH, m), 5,20 (IH, dt, J=8,l, 2,9 Hz), 4,57 až 4,51 (IH, m), 4,49 až 4,40 (IH, m), 4,27 až 4,20 (IH, m), 4,20 (IH, dd, J=2,2, 10,3 Hz), 4,06 (IH, dd, J-2,9, 10,3 Hz), 3,77 (3H, s), 1,04 (9H, s).

(4) Metylester (2S)-2-{[3-(benzoyloxy)-azetidín-l-karbotioyl] amino}-3-hydroxypropánovej kyseliny

Do roztoku metylesteru (2S)-2-{[3-(benzoyloxy)-azetidín-1-karbotioyl]amino}-3-(terc.butyldifenylsilyloxy)propánovej kyseliny (23,3 g, 40,0 mol) (získanej podía opisu v referenčnom príklade 70(3)) v tetrahydrofuráne (700 ml) bol pridaný a 1,0 M roztok tetra-n-butyl-amóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (48,4 g, 48,4 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzí etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén :

585 acetonitrilu (3 : 1) ako eluentu počas vzniku metylesteru (2S)-2-{ [3- (benzoyloxy) -azetidín-l-karbotioyl] amino}-3-hydroxy-propánovej kyseliny, (12,6 g, výťažok 92%) ako biela pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,08 až 8,04 (2H, m), 7,64 až 7,59 (1H, m), 7,51 až 7,45 (2H, m), 6,00 (1H, d, J=7,3 Hz), 5,49 až 5,43 (1H, m), 5,25 (1H, dt, J=7,3, 3,7 Hz), 4,63 až 4,56 (2H, m), 4,32 až 4,24 (2H, m), 4,12 až 4,02 (2H, m), 3,82 (3H, s).

(5) 3-Benzoyloxy-l-[(4S)-4-metoxykarbonyl-l,3-oxazolín-2-yl] azetidín

Do roztoku 2-chloro-3-etylbenzoxazoltetrafluoroborátu (15,1 g, 55,9 mol) v acetonitrile (380 ml) bol pridaný po kvapkách roztok metylesteru (2S)-2-{[3-(benzoyloxy)-azetidín-l-karbotioyl]amino}-3-hydroxypropánovej kyseliny (získanej podlá opisu v referenčnom príklade 70(4)) (12,6 g, 37,2 mol) v acetonitrile (500 ml) v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná 1 hodinu. Do výslednej zmesi bol pridaný trietylamínu (10,4 ml, 74,4 mol) a zmes bola miešaná 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného a organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu a etylacetát : metanolu (95 : 5) ako eluentu počas vzniku 3-benzoyloxy-l-[(4S)-(4-metoxykarbonyl-l,3-oxazolín-2-yl)azetidínu (9,12 g, výťažok 81%) ako bledohnedá pevná látka.

	¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,08 až 8,04 (2H, m), 7,63	až
7,58	(1H, m), 7,49 až	7,44	(2H, m), 5,50 až 5,44 (1H, m), 4,69 (	1H,
dd,	J=6, 6, 9,5 Hz) ,	4,55	(1H, dd, J=6,6, 8,1 Hz), 4,51 až 4	,44
(3H,	m) , 4,20 až 4,14	(2H,	m), 3,78 (3H, s).

(6) 3-Benzoyloxy-l-[4-metoxykarbonyl-l,3-oxazol-2-yl]azetidín Do roztoku 3-benzoyloxy-l-(4-metoxykarbonyl-l,3-oxazolín-2-yl)azetidínu (9,12 g, 30,0 mol) (získaného podľa opisu v

586 referenčnom príklade 70(5)) v zmesi toluéne (450 ml) a metylénchloridu (180 ml) bol pridaný oxid manganičitý (63,8 g) a zmes bola zohrievaná pod refluxom 5 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes filtrovaná a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia toluén : acetonitrilu =1:1 ako eluentu počas vzniku 3-benzoyloxy-l-(4-metoxykarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (5,24 g, výťažok 58%) ako bledožlté kryštály.

^-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,08 až 8,04 (2H, m), 7,84

(1H,	S) ,	7,63 až 7,58 (1H, m) ,	7,50	až 7,44	(2H, m), 5,60 až 5,53
(1H,	m) ,	4,61 (1H, dd, J=5,9,	9,5	Hz), 4,31	(1H, dd, J=3,4, 9,5
Hz) ,	3,89	(3H, s) .

(7) 3-Hydroxy-l-[4-metoxykarbonyl-l,3-oxazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-benzoyloxy-l-(4-metoxykarbonyl-l,3-oxazol-2-yl) azetidínu (5,24 g, 17,3 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 70(6)) v zmesi metanole (260 ml) a metylénchloride (80 ml) bolo pridané katalytické množstvo metoxidu sodného pri teplote miestnosti a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes neutralizovaná 4M chlorovodíkom v dioxane a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu : metanolu (95 : 5) ako eluentu za vzniku 3-hydroxy-l-(4-metoxykarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (2,65 g, výťažok 77%) ako bledohnedé kryštály.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,81 (1H, s), 4,83 až 4,76 (1H, br s), 4,41 (2H, dd, J=6,6, 9,5 Hz), 4,06 (2H, dd, J=4,4, 9,5 Hz), 3,88 (3H, s), 2,39 až 2,30 (1H, br s).

(8) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-metoxykarbonyl-l,3-oxazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-(4-metoxykarbonyl-l,3-oxazol-2-yl) azetidínu (2,64 g, 13,4 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 70(7)) v dimetylformamide (80 ml) bol pridaný

587 terc.butyldifenylsilan (6,97 ml, 26,8 mol) a imidazol (1,82 g, 26,8 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol pridaný metanol do reakčnej zmesi a zmes bola miešaná 30 minút. Výsledná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran koncentrovaná počas zníženého tlaku, chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (4:3 —» 3:1) ako eluentu za vzniku 3-terc.

butyldifenylsilyloxy-1-(4-metoxykarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (4,95 g, výťažok 85%) ako bledožltá pevná látka.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,78 (IH, s), 7,62 až 7,58 (4H, m), 7,48 až 7,36 (6H, m), 4,74 až 4,67 (IH, m), 4,15 (IH, dd, J=6,6, 9,5 Hz), 4,08 (IH, dd, J=5,l, 9,5 Hz), 3,87 (3H, s), 1,06 (9H, s) .

sodný, filtrovaná a Zvyšok bol vyčistený ( 9) 3-terc. Butyldifenylsilyloxy-1- (4-hydroxymetyl-l, 3-oxazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-metoxykarbonyl-1,3-oxazol-2-yl)azetidínu (4,95 g, 11,3 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 70(8)) v bezvodom tetrahydrofurane (100 ml) bola pridaná po kvapkách suspenzia hydridu hlinitolítneho (1,29 g, 33,9 mol) v bezvodom tetrahydrofurane (250 ml) v ľadovom kúpeli pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli 5 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bol do reakčnej zmesi v ľadovom kúpeli postupne pridaný dekahydrát síranu horečnatého. Po skončení penenia bola výsledná zmes miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Do reakčnej zmesi bol postupne pridaný etylacetát. Výsledná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej

588 kolóne za použitia toluén : acetonitrilu (3 : 1) ako eluentu za vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-hydroxymetyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (3,88 g, výťažok 84%) ako biela pevná látka.

^H-NMR (400 M Hz, CDCI3) : δ (ppm) 7,63 až 7,59 (4H, m), 7,47 až 7,36 (6H, m), 7,13 (IH, s), 4,73 až 4,66 (IH, m), 4,45 (2H, s), 4,11 (2H, dd, J=6,6, 8,8 Hz), 4,04 (2H, dd, J=5,l, 8,8 Hz), 2,21 až 2,15 (IH, br s), 1,06 (9H, s).

(10) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-myl-l,3-oxazol-2-yl) azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-hydroxymetyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (3,88 g, 9,50 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 70(9)) v metylénchloride (190 ml) bol pridaný aktivovaný oxid manganičitý (19,4 g) a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes filtrovaná a filtrát bol koncentrovaný počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (3 : 1) ako eluentu za vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-myl-l,3-oxazol-2-yl) azetidínu (3,09 g, výťažok 80%) ako bledožlté kryštály.

hi-NMR (4 00 M	Hz,	CDCI3) :	δ (ppm)	9,75 (	IH, s),	7,80 (	IH, s),
7,63 až 7,58 (4H,	m) ,	7,48 až	7,37 (	6H, m) ,	4,75 až	4,68 (	IH, s),
4,16 (2H, dd, J=6	, 6,	9,5 Hz),	4,10 1	I2H, dd,	J=5,l,	9,5 Hz	), 1,06

(9H, s) .

(11) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-karboxyl-2-yl) azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-myl-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (3,09 g, 7,60 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 70(10)) v bezvodom metylénchloride (18 ml) boli pridané terc.butanol (93 ml) a roztok 2M 2'-metyl-2-buténu v tetrahydrofurane (5,70 ml, 11,4 mol), následne bol po kvapkách pridaný roztok chlórnanu sodného (1,72 g, 15,2 mol) a dihydrogénfosforečnan sodný (1,82 g, 15,2 mol) vo vode (18 ml) v

589 ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola do reakčnej zmesi pridaná IM kyselina chlorovodíková v rozmedzí pH 2 až 3. Výsledná zmes bola extrahovaná etylacetátom. Organická vrstva bola oddelená, premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu a metylénchloridu (9 :1) ako eluentu za vzniku

3-terc.butyldifenylsilyloxy-1- (4-karboxyl-l, 3-tiazol-2-yl) azetidínu (1,90 g, výťažok 59%) ako hnedá pevná látka.

Hmotnostné spektrum (FAB⁺) : m/z: 423 [M+H] ⁺

Referenčný príklad 71

3-Acetyltio-l-(4-azetidínokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín

(1) 1-(4-Azetidínokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)-3-terc. butyldifenylsilyloxyazetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-metoxykarbonyl-1,3-oxazol-2-yl) azetidínu (2,00 g, 4,58 mol) v toluéne (100 ml) bol pridaný roztok 0,67 M azetičín-trimetylhliníka v benzéne (13,7 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (100°C) 5,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola do rekčnej zmesi pridaná 10% vodná kyselina chlorovodíková (100 ml) a etylacetát (200 ml) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Reakčná zmes bola rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatografický na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 1) a etylacetátu ako eluentu

590 počas vzniku 1-(4-azetidinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)-3-terc. butyldifenylsilyloxyazetidínu (875 mg, výťažok 41%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,67 (IH, s), 7,65 až 7,57 (4H, m), 7,48 až 7,37 (6H, m), 4,72 až 4,66 (IH, m), 4,54 až 4,47 (2H, m), 4,18 až 4,11 (2H, m), 4,10 (2H, dd, J=6,6, 8,8 Hz), 4,04 (2H, dd, J=5,l, 8,8 Hz), 2,30(2H, kvintet, J=7,7 Hz), l,06(9H, s).

(2) 1- (4-Azetidinokarbonyl-l, 3-oxazol-2-yl) -3-hydroxyazetidín Do roztoku 1-(4-azetidinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)-3-terc.

butyldifenylsilyloxyazetidínu (870 mg, 1,88 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 71(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (44 ml) bol pridaný roztok 1,0 M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (2,26 ml, 2,26 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (9 : 1) ako eluentu počas vzniku 1-(4-azetidinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (396 mg, výťažok 94%) ako biele kryštály.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,70 (IH, s), 4,81 až 4,74

(IH,	m) ,	4,53	(2H,	dd,	J=6,8, 7,	8 Hz), 4,34	(2H, dd,
Hz) ,	4,16	(2H,	dd,	J=6,	.8, 7,8 Hz	), 3,99 (2H,	dd, J=4,9
2,34	(IH,	d, J=	=7,8	Hz) ,	2,31 (2H,	kvintet, J=7,	, 8 Hz) .

(3)1- (4-Azetidinokarbonyl-l, 3-oxazol-2-yl) -3-metánsulfonylazetidín Do roztoku 1-(4-azetidinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)-3-hydroxyazetidínu (390 mg, 1,75 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 71(2)) v metylénchloride (20 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (406 μΐ, 5,24 mol) a trietylamín (734 μΐ, 5,24 mol) v ľadovom kúpeli, po 10 minútovom miešaní zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá

591 nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý chlorid sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Do zvyšku bol pridaný etylacetát a diizopropyléter počas vzniku pevnej látky, ktorá bola odobratá, premytá diizopropyléterom a vysušená vo vákuu za vzniku 1-(4-azetidinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)-3-metánsulfonylazetidínu (449 mg, výťažok 85%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,74 (1H, m), 5,40 až 5,34 (1H, m), 4,55 až 4,49 (2H, br t, J=7,3 Hz), 4,47 (2H, ddd, J=ll,0, 6,6, 0,7 Hz), 4,29 (2H, dd, J=ll,0, 4,4 Hz), 4,19 až 4,12 (2H, br t, J=7,3 Hz), 3,09 (3H, s), 2,32 (2H, kvintet, J=7,3 Hz).

(4)3-Acetyltio-l-(4-azetidinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 1-(4-azetidinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl) -3-metánsulfonylazetidínu (470 mg, 1,56 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 71(3)) v dimetylformamide (25 ml) bol pridaný tioacétát draselný (1,07 g, 9,36 mol) pri teplote miestnosti a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 8,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu a etylacetát : metanolu (95 : 5) ako eluentu za vzniku 3-acetyltio-l-(4-azetidinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)-azetidín (330 mg, výťažok 75%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,71 (1H, s), 4,54 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,55 až 4,49 (2H, br t, J=8,l Hz), 4,43 až 4,35 (1H, m), 4,18 až 4,12 (2H, br t, J=8,l Hz), 4,00 (2H, dd, J=8,8, 5,9 Hz), 2,35 (3H, s), 2,36 až 2,26 (2H, m).

Referenčný príklad 72

3-Acetyltio-l-(4-morfolinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín

592

Ο

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-(4-morfolinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-metoxykarbonyl-1,3-oxazol-2-yl)azetidínu (1,00 g, 2,29 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 70(8)) v toluéne (50 ml) bol pridaný roztok 0,67M morfolínu-trimetylalumínia v toluéne (6,87 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 4 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola do rekčnej zmesi pridaná 10% vodná kyselina chlorovodíková (50 ml) a etylacetát (100 ml) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Do reakčnej zmesi bol pridaný etylacetát. Zmes bola rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 2) ako eluentu počas vzniku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-morfolinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (400 mg, výťažok 36%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz,	CDC1₃) :	δ (ppm) 7,68 (	(IH, s),	7, 62	až	7,59
4H, m), 7,48 až 7,37	(6H, m)	, 4,73 až 4,67	(1H, m),	4,15	až	4,09
2H, m), 4,05 (2H, dd,	J=8,8,	5,1 Hz), 3,75	až 3,65	(8H,	br	s) ,

1,06 (9H, s) .

(2)3-Hydroxy-l-(4-morfolinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-morfolinokarbonyl-1,3-oxazol-2-yl)azetidínu (730 mg, 1,48 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 72(1)) v bezvodom tetrahydrofuráne (37 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v

593 tetrahydrofurane (1,78 ml, 1,78 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát: metanolu (95 : 5 -» 9 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-(4-morfolinokarbonyl-1,3-oxazol-2-yl)azetidínu (377 mg, výťažok 100%) ako biele kryštály.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,71 (IH, s), 4,82 až 4,74 (IH, m), 4,35 (2H, dd, J=9,5, 6,6 Hz), 4,00 (2H, dd, J=9,5, 4,4

Hz), 3,76 až 3,65 (8H, m), 2,42 až 2,30 (IH, br s).

(3) 3-Metánsulfonyloxy-l-(4-morfolinokarbonyl-1,3-oxazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-(4-morfolinokarbonyl-1,3-oxazol-2-yl) azetidínu (370 mg, 1,48 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 72(2)) v metylénchloride (19 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (344 μΐ, 4,44 mol) a trietylamín (622 μΐ, 4,44 mol) v ladovom kúpeli, zmes bola miešaná 10 minút a pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý chlorid sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (93 : 7) ako eluentu počas vzniku

3-metánsulfonyloxy-l- (4-morf olinokarbonyl-1,3-oxazol-2-yl) azetidínu (404 mg, výťažok 100%) ako bledožlté kryštály.

^XH-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,75 (IH, s), 5,41 až 5,34 (IH, m), 4,48 (2H, ddd, J=9,5, 6,6, 1,5 Hz), 4,30 (2H, ddd, J=9,5, 4,0, 1,5 Hz), 3,78 až 3,65 (8H, m), 3,10 (3H, s).

(4) 3-Acetyltio-l-(4-morfolinokarbonyl-1,3-oxazol-2-yl)azetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-(4-morfolinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (400 mg, 1,21 mol) (získaného podía opisu v

594 referenčnom príklade 72(3)) v dimetylformamide (20 ml) bol pridaný tioacetát draselný (827 mg, 7,24 mol) pri teplote miestnosti a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 6 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premyté nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát —> etylacetát : metanolu (95 : 5) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-l-(4-morfolinokarbony-l, 3-oxazol-2-yl)azetidínu (266 mg, výťažok 71%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,72 (1H, s), 4,55 (2H, t,

J=8,4 Hz), 4,43 až 4,36 (ÍH, m), 4,02 (2H, dd, J=9,5, 5,9 Hz),

3,76 až 3,66 (8H, br s), 2,36 (3H, s).

Referenčný príklad 73

3-Acetyltio-l-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín

AcS

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-(4-metoxykarbonyl-1,3-oxazol-2-yl)azetidínu (1,57 g, 3,60 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 70(8)) v toluéne (80 ml) bol pridaný roztok 0,67M 3-metoxyazetidínu (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 31(2)) -trimetylalumínum v toluéne (10,8 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (60°C) 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola do rekčnej zmesi pridaná 10% vodná kyselina chlorovodíková (100 ml) a etylacetát (200 ml) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu. Do reakčnej zmesi bol pridaný

595 etylacetát. Zmes bola rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetátu ako eluentu za vzniku 3-terc. butyldifenylsilyloxy-1- [4- (3-metoxyazetičín-l-karbonyl) -1,3-oxazol-2-yl]azetidínu (1,50 g, výťažok 90%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,69 (IH, s), 7,63 až 7,59 (4H, m), 7,48 až 7,37 (6H, m), 4,73 až 4,76 (2H, m), 4,37 až 4,19 (3H, m), 4,10 (2H, dd, J=8,8, 6,6 Hz), 4,03 (2H, dd, J=8,8, 5,1 Hz), 4,02 až 3,98 (IH, m), 3,32 (3H, s), 1,06 (9H, s).

(2) 3-Hydroxy-l-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-[4-(3-metoxyazetidín-1-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidínu (1,49 g, 3,23 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 72(1)) v bezvodom tetrahydrofuráne (75 ml) bol pridaný roztok l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (3,88 ml, 3,88 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 1 hodinu. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát : metanolu (95 : 5 -» 9 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-[4-(3-metoxyazetidín-1-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]-azetidínu (486 mg, výťažok 60%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDCI3) : δ (ppm) 7,71 (IH, s), 4,81 až 4,66 (2H, m), 4,34 (2H, dd, J=9,5, 6,6 Hz), 4,39 až 4,20 (3H, m), 4,04 až 3,98 (IH, m), 3,99 (2H, dd, J=9,6, 4,4 Hz), 3,32 (3H,s), 2,45 (lH,d,J=6,6 Hz).

(3) 3-Metánsulfonyloxy-l-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín

596

Do roztoku 3-hydroxy-l-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidínu (480 mg, 1,89 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 73(2)) v metylénchloride (24 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (439 μΐ, 5,67 mol) a trietylamín (795 ml, 5,67 mol) v ľadovom kúpeli, zmes bola miešaná 10 minút a pri teplote miestnosti 30 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý chlorid sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Do zvyšku bol pridaný etylacetát a diizopropyiéter počas vzniku a solid pevná látka odobratá, premytá diizopropyléterom za vzniku 3-metánsulfonyloxy-l-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyi)-1,3-oxazol-2-yl]azetidínu (586 mg, výťažok 94%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz,	CDC1₃) :	δ (ppm) 7,76	(IH, s) , 5,41 až	5,34
(IH, m), 4,72 až 4,63	(IH, m)	, 4,29 (2H, dd,	J=ll,0, 4,4 Hz),	4,38
až 4,20 (5H, m), 4,03	až 3,97	(IH, m), 3,32 (	3H, s), 3,10 (3H,	s) .

(4) 3-Acetyltio-l-[4-(3-metoxy-azetidín-l-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]-azetidínu (580 mg, 1,75 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 73(3)) v dimetylformamide (30 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,20 g, 10,5 mol) pri teplote miestnosti a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 6 hodín. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát —> etylacetát:metanolu (97:3) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-1-[4-(3-metoxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidínu (336

597 mg, výťažok 62%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,73 (IH, s), 4,72 až 4,65 (IH, m), 4,54 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,43 až 4,19 (4H, m), 4,03 až 3,97(1H, m), 4,01(2H, dd, J=8,8, 5,1 Hz), 3,31(3H, s), 2,35 (3H,s).

Referenčný príklad 74

3-Acetyltio-l-[4-(3-terc.butyldifenylsilyloxyazetidín-1karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín

(1) 1-[4-(3-čerc.butyldifenylsilyloxyazetidín-l-karbonyl)-1, 3-oxazol-2-yl]-3-hydroxyazetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-(4-metoxykarbonyl-l,3-oxazol-2-yl) azetidínu (500 mg, 2,52 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 70(7)) v toluéne (25 ml) bol pridaný roztok 0,67M 3-terc.butyldifenylsilyloxyazetidínu (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 42(2)) -trimetylalumínum v toluéne (11,3 ml) pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 15 minút. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola do rekčnej zmesi pridaná 10% vodná kyselina chlorovodíková (20 ml) a etylacetát (50 ml) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 0,5 hodiny. Do reakčnej zmesi bol pridaný etylacetát. Zmes bola rozdelená medzi etylacetát a vodu. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu : metanolu (95 : 5 -» 9 : 1) ako eluentu počas vzniku 1-[4-(3-terc.butyidifenylsilyloxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]-3-hydroxyazetidínu (1,24 g, výťažok 100%) ako bledohnedá pevná látka.

598 ¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 7,68 (1H, s), 7,61 (4H, dd, J=8,l, 1,5 Hz), 7,47 až 7,36 (6H, m), 4,81 až 4,74 (1H, m), 4,65 až 4,52 (2H, m), 4,40 až 4,36 (1H, m), 4,33 (2H, dd, J=9,5, 6,6 Hz), 4,18 až 4,11 (1H, m), 4,06 až 3,97 (1H, m), 3,98 (2H, dd, J=9,5, 5,1 Hz), 1,06 (9H, s).

(2) 1-(4-(3-terc.Butyldifenylsilyloxyazetidín-l-karbonyl)-1, 3-oxazol-2-yl]-3-metánsulfonyloxyazetidín

Do roztoku l-[4-(3-terc.butyldifenylsilyloxyazetidín-l-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]-3-hydroxyazetidínu (1,68 g, 3,53 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 74(1)) v metylénchloride (84 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (820 μΐ, 10,6 mol) a trietylamín (1,49 ml, 10,6 mol) v ladovom kúpeli, zmes bola miešaná 10 minút a pri teplote miestnosti 0,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný hydrogénuhličitan sodný. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu:etylacetátu (1:1) ako eluentu za vzniku 1-[4-(3-terc.butyldifenylsilyloxyazetidin-1-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]-3-metánsulfonyloxyazetidínu (1,56 g, výťažok 80%) ako bledožltá pevná látka.

	¹H-NMR	(400	M Hz,	CDCI3) :	δ (ppm) 7,72 (1H, s),	7,61	(4H, d,
J=6,	8 Hz) ,	7,45	(2H,	t, J=6,8	Hz), 7,39 (4H, t, J=6,8	Hz) ,	5,40 až
5,34	(1H, m	), 4,	64 až	4,59 (1H	, m), 4,59 až 4,52 (1H,	m) , 4	,45 (2H,
dd,	J=10,7,	5,9	Hz) ,	4,39 až	4,32 (1H, m), 4,28 (2H	, dd,	J=10,7,
4,9	Hz), 4,	18 až	4,12	(1H, m),	4,05 až 4,00 (1H, m),	3,10	(3H, s),
1,07	(9H, s	) ·

(3) 3-Acetyltio-l-[4-(3-terc.butyldifenylsilyloxyazetidín-1-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 1-[4-(3-terc.butyldifenylsilyloxyazetičín-1-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl]-3-metánsulfonyloxyazetidínu (1,56 g,

599

2,81 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 74(2)) v dimetylformamide (80 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,92 g, 16,8 mol) pri teplote miestnosti a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 7,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (2 : 1 —» 1 : 1) ako eluentu počas vzniku 3-acetyltio-1- (4- (3-terc.butyldifenylsilyloxyazetidín-l-karbonyl) -1, 3-oxazol-2-yl]azetidínu (863 mg, výťažok 57%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR	(400 M Hz, CDC1₃) :	δ (ppm) 7,69 (IH,	s) ,	7, 63
(4H, m), 7	,47 až 7,36 (6H, m)	, 4,64 až 4,54 (2H,	m) ,	4,53
J=8,8 Hz),	4,43 až 4,32 (2H,	m) , 4,18 až 4,13	(IH,	m),
4,00 (IH,	m), 4,00 (2H, dd,	J=8,8, 5,9 Hz), 2,	36 (	3H, ,

(9H, s)

1,06

Referenčný príklad 75

3-Acetyltio-l-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidín-1-karbonyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidín

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3- (p-nitrobenzyloxykarbonylamino) azetidínhydrochloridu (1,39 g, 4,83 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade

57(4)) a 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-karboxyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (1,70 g, 4,02 mol) (získaného podľa opisu v

600 referenčnom príklade 70(11)) v dimetylformamide (85 mi) bol pridaný dietyifosforylkyanid (801 μΐ, 4,83 mol) a trietylamín (1,70 ml, 12,1 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný hydrogénuhličitan sodný. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodný, filtrovaná a Zvyšok bol vyčistený sodného, vysušená cez bezvodý síran koncentrovaná počas zníženého tlaku, chromatografický na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 2) —> etylacetátu ako eluentu počas vzniku

3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino) azetidín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-ylJazetidínu (596 mg, výťažok 23%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,71

(1H,	s), 7,61	(4H, d,	J=8,8	Hz) , 7	, 53 až	7,49	(2H,	m) ,	7,47 až
7,38	(6H, m),	5,30 až	5,26	(1H, m)	, 5,21	(2H,	s) ,	4,89	až 4,80
(1H,	m), 4,72	až 4,66	(1H, m)	U 4,59	až 4,51	. (IH,	m) ,	4,51	až 4,42
(1H,	m), 4,37	až 4,30 (	1H, m)	, 4,12	až 4,06	(2H,	m) ,	4,02	(2H, dd,
J=8,8, 4,9 Hz)	, 3,97 až	3,90	(1H, m),	1,06 (	9H, s)	1 .

(2) 3-Hydroxy-l-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidín-1-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl]azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-l-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)-azetidín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidínu (640 mg, 0,976 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 75(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (32 ml) bol pridaný roztok kyseliny octovej (67 μΐ, 1,17 mol) a l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (1,17 ml, 1,17 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná v ladovom kúpeli 1,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý

601 síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu : metanolu (95:5 -» 9:1) ako eluentu počas vzniku 3-hydroxy-l-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidín-1-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (360 mg, výťažok 88%) ako biela pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,73 (1H, s), 7,51 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,46 až 5,40 (1H, m), 5,21 (2H, s), 4,89 až 4,74 (2H, m), 4,60 až 4,40 (2H, m), 4,39 až 4,31 (1H, m), 4,33 (2H, dd, J=9,5, 6,6 Hz), 3,98 (2H, dd, J=9,5, 5,1 Hz), 3,96 až 3,90 (1H, m).

(3) 3-Metánsulfonyloxy-l-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino) azetidín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino) azetidín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl[azetidínu (360 mg, 0,863 mol) (získaného podlá opisu v referenčnom príklade 75(2)) v metylénchloride (18 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (200 μΐ, 2,59 mol) a trietylamín (363 μΐ, 2,59 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná 10 minút a pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi nasýtený vodný hydrogénuhličitan sodný. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia metylénchloridu —» metylénchloridu : metanolu (95 : 5) ako eluentu počas vzniku 3-metánsulfonyloxy-l-{4- [3- (p-nitrobenzyloxykarbonylamino) -azetidín-l-karbonyl] -1,3-tiazol-2-yl}azetidínu (390 mg, výťažok 91%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,77 (1H, s), 7,51 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,40 až 5,34 (1H, m), 5,11 až

5,27 (1H, m), 5,21 (2H, s), 4,90 až 4,81 (1H, m), 4,60 až 4,53 s kontrolovaní etylacetát a

602 (IH, m), 4,45 (2H, dd, J=10,3, 6,6 Hz), 4,39 až 4,30 (IH, m), 4,27 (2H, dd, J=10,3, 4,4 Hz), 3,99 až 3,92 (IH, m), 3,10 (3H, s).

(4 ) 3-Acetyltio-l- { 4- [3- (p-nitrobenzyloxykarbonylamino) azetidín-1-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidín-l-karbonyl]-1,3-tiazol-2-yl} azetidínu (390 mg, 0,787 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 75(3)) v dimetylformamide (20 ml) bol pridaný tioacetát draselný (539 mg, 4,72 mol) pri teplote miestnosti a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 10,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličítanú sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1:3) -» etylacetátu ako eluentu za vzniku

3-acetyltio-l-{4-[3-(p-nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidín-1-karbonyl]-1,3-tiazol-2-ylJazetidínu (195 mg, výťažok 52%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,24 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,75

(IH,	s) ,	7,51 (2H, d, J=8,8	Hz) ,	5, 16	až 5,10	(IH, br d, J=5,9
Hz) ,	5,21	(2H, s), 4,89 až	4,80	(IH,	m) , 4,60	až 4,10 (4H, m) ,
4,53	(2H,	t, J=8,8 Hz) , 3, 99	(2H,	dd, J=	=9,5, 5,9	Hz), 3,98 až 3,91

(IH, m), 2,36 (3H, s) .

Referenčný príklad 76

3-Acetyltio-l-{4—[(3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidín

O

603 (1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-yl-karbamoyl] -1,3-oxazol-2-yl}azetidín

Do roztoku (3S)-3-amino-l-p-nitrobenzyloxykarbonylpyrolidínu (905 mg, 3,41 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 52(4)) a 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-(4-karboxyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidínu (1,20 g, 2,84 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 70(11)) v dimetylformamide (36 ml) bol pridaný dietylfosforylkyanid (556 μΐ, 3,41 mol) a trietylamín (478 μΐ, 3,41 mol) v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1:2 —» 1 : 3) ako eluentu počas vzniku

3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-{4- [ (3S) -1- (p-nitrobenzyloxykarbonyl) pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-oxazol-2-ylJazetidínu (936 mg, výťažok 49%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, m), 7,72 (1H, s),

7, 63	až 7,58 (4H, m),	7,53 (2H, m), 7,48 až. 7,37 (6H, m), 6,85 až
6,80	(1H, br t, J=8,	1 Hz), 5,24	(2H, d, J=8,l Hz),	4,75 až	4,67
(1H,	m), 4,65 až 4,58	(1H, m), 4,16 až 4,09 (2H, m),	4,06 (2H	, dd,
J=8,8	, 5,1 Hz), 3,83	až 3,75 (1H,	m), 3,64 až 3,46	(2H, m),	3,38
(1H,	dd, J=ll,0, 4,4	Hz) , 2,30 až	2,20 (1H, m), 2,04	až 1,90	(1H,

m), 1,06 (9H, s).

(2) 3-Hydroxy-l-{4-[{3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl·)pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl} azetidínu (1,10 g, 1,64 mol) (získaného podía opisu v referenčnom

604 príklade 76(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (55 ml) bol pridaný roztok kyseliny octovej (113 μΐ, 1,97 mol) a 1,OM tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (1,97 ml, 1,97 mol) v ladovom kúpeli a zmes bola miešaná v ľadovom kúpeli počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát —> etylacetát :

metanolu (95 : 5) ako eluentu za vzniku 3-hydroxy-l-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrolidín-3-y1karbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl}

azetidínu	(687 mg, výťažok 97%)	ako biela pevná látka.
	¹H-NMR	(400 M Hz, CDC1₃) :	: δ	(ppm) 8,22 (2H, m), 7,75	(IH, s),
7,52	(2H,	m) , 6,89 až 6,82 (	IH,	m), 5,27 až 5,20 (2H, m),	4,84 až
4,77	(IH,	m) , 4,66 až 4,59 (	IH,	m), 4,36 (2H, dd, J=8,8,	7,3 Hz) ,
4,01	(2H,	dd, J=8,8, 5,2 Hz)	r :	3,82 až 3,74 (IH, m), 3,67	až 3,52
(3H,	m) , 3	,45 až 3,39 (IH, m	),	2,30 až 2,20 (IH, m), 2,03	až 1,93
(IH,	m) .

(3) 3-Metánsulfonyloxy-l- { 4- [ (3S ) -1- (p-nitrobenzyloxykarbonyl· ) pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl) azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl·) pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl)azetidínu (680 mg, 1,53 mol) (získaného pódia opisu v referenčnom príklade 76(2)) v metylénchloride (34 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (366 μΐ, 4,73 mol) a trietylamín (663 μΐ, 4,73 mol) v ľadovom kúpeli, zmes bola miešaná 10 minút a pri teplote miestnosti 2 hodiny. Pc skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a nasýtený vodný hydrogénuhličitan sodný. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát —» etylacetát : metanolu (96 : 4) ako eluentu za vzniku 3-metánsulfonyloxy-l-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrolidín-3-y1karbamoyl]605

-1,3-oxazol-2-yl}azetidínu (760 mg, výťažok 95%) ako bledožltá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, m), 7,78 (IH, s),

7,52	(2H	, m),	6,85	až 6,80 (IH, m) ,	5,42	až 5,37	(IH,	m), 5,24
(2H,	d,	J=8,l	Hz) ,	4,66 až 4,58 (IH	, m) ,	4,49 (2H	, dd,	J=10,3,
6, 6	Hz) ,	4,31	(2H,	dd, J=10,3, 4,4	Hz) ,	3,82 až	3,74	(IH, m),
3,64	až	3,75	(2H,	m) , 3,44 až 3,38	(IH,	m) , 3,11	(3H,	s), 2,30
až 2	,20	(IH, m	.), 2,	04 až 1,96 (IH, m)

(4) 3-Acetyltic-l-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyi) pyrolidín-3-yl-karbamoyl] -1,3-oxazol-2-yl}azetidínu (760 mg, 1,49 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 76(3)) v dimetylformamide (38 ml) bol pridaný tioacetát draselný (1,02 g, 8,95 mol) pri teplote miestnosti a všetko bolo miešané v olejovom kúpeli (80°C) 10,5 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 6) etylacetátu ako eluentu počas vzniku

3-acetyltio-l-{4-[(3S)-i-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidínu (533 mg, výťažok 73%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, m), 7,76 (IH, s),

7,	52	(2H, m),	6,87 až 6,80 (IH, br s), 5,24 (	2H, d,	J=7,3	Hz) ,
4,	66	až 4,58	(IH, m), 4,56 (2H, t, J=8,8 Hz),	4,44 až	4,36	(IH,
m)	, 4	,03 (2H,	dd, J=8,8, 5,9 Hz), 3,79 (IH, dt,	J=ll,0	, 6,6	Hz) ,
3,	65	až 3,51	(2H, m), 3,40 (IH, dd, J=ll,0, 4	,4 Hz),	2,36	(3H,
s)	, 2	,32 až 2,	.20 (IH, m), 2,23 až 1,91 (IH, m).

606

Referenčný príklad 77

3-Acetyltio-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidín

(1) 3-terc.Butyldifenylsilyloxy-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrolidín-3-yl-karbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl[azetidín

Do roztoku (3R)-3-amino-i-p-nitrobenzyloxykarbonylpyrolidínu (798 mg, 3,01 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 53(5)) a 3-terc.butyldifenylsilyloxy-1- ( 4-karboxyl-l, 3-oxazol-2-yl)azetidínu (1,06 g, 2,51 mol) (získaného podía opisu v referenčnom príklade 70(11)) v dimetylformamidu (50 ml) bol pridaný dietylfosforylkyanid (464 μ1_ζ 3,01 mol) a trietylamín (422 μΐ, 3,01 mol) v ladovom kúpeli pod atmosférou dusíka a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným hydrogénuhličitanom sodným a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 2 -> 1:3) ako eluentu počas vzniku

3-terc.butyldifenylsilyloxy-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxy-karbonyl)pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1, 3-oxazol-2-yl[azetidínu (813 mg, výťažok 48%) ako bledohnedá pevná látka.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 8,22 (2H, m), 7,72 (1H, s)

7.63 až 7,59 (4H, m), 7,53 (2H, m), 7,48 až 7,38 (6H, m), 6,86 až 6,60 (1H, m), 5,24 (2H, d, J=8,l Hz), 4,77 až 4,68 (1H, m),

4.64 až 4,58 (1H, m), 4,15 až 4,09 (2H, m), 4,05 (2H, dd, J=8,8,

5,1 Hz), 3,82 až 3,75 (1H, m), 3,64 až 3,49 (2H, m), 3,38 (1H, dd, J=ll,0, 5,1 Hz), 2,30 až 2,20 (1H, m), 2,06 až 1,90, (1H, m)

607

1,06 (9Η, s).

(2) 3-Hydroxy-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-terc.butyldifenylsilyioxy-i-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidínu (810 mg, 1,21 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 77(1)) v bezvodom tetrahydrofurane (40 ml) bol pridaný roztok kyseliny octovej (83 μΐ, 1,45 mol) a l,0M tetra-n-butylamóniumfluoridu v tetrahydrofurane (1,45 ml, 1,45 mol) v ľadovom kúpeli a zmes bola miešaná v ladovom kúpeli počas noci. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola reakčná zmes koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chromatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát -> etylacetát : metanolu (95 : 5) ako eluentu počas vzniku

3-hydroxy-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrolidín-3-yl-karbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidínu (507 mg, výťažok 97%) ako bledožltý olej.

¹H-NMR (400 M Hz, CDC1₃) : δ (ppm) 8,22 (2H, m), 7,75 (1H, s), 7,52 (2H, m), 6,89 až 6,83 (1H, br s), 5,28 až 5,20 (2H, m), 4,84 až 4,76 (1H, m), 4,66 až 4,58 (1H, m), 4,36 (2H, dd, J=8,8, 6,6 Hz), 4,01 (2H, dd, J=8,8, 4,4 Hz), 3,82 až 3,74 (1H, m),

3,64 až 3,51 (2H, m), 3,44 až 3,37 (1H, m), 2,32 až 2,20 (1H,

m), 2,08 až 1,92 (1H, m).

(3) 3-Metánsulfonyloxy-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-hydroxy-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-ylkarbamoyi]-1,3-oxazol-2-yl} azetidínu (500 mg, 1,16 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 77(2)) v metylénchloride (25 ml) bol pridaný metánsulfonylchlorid (269 μΐ, 3,48 mol) a trietylamín (488 μΐ, 3,48 mol) v ľadovom kúpeli, zmes bola miešaná 10 minút a pri teplote miestnosti 3 hodiny. Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi

608 etylacetát a nasýtený vodný hydrogénuhličitan sodný. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia etylacetát -» etylacetát : metanolu (96 : 4) ako eluentu počas vzniku 3-metánsulfonyloxy-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl}-azetidínu (546 mg, výťažok 92%) ako bledožltá pevná látka.

Hmotnostné spektrum (FAB⁺): m/z: 510 [M+H]⁺ (4) 3-Acetyltio-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl) pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidín

Do roztoku 3-metánsulfonyloxy-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidínu (540 mg, 1,06 mol) (získaného podľa opisu v referenčnom príklade 77(3)) v dimetylformamide (27 ml) bol pridaný tioacetát draselný (726 mg, 6,36 mol) pri teplote miestnosti a zmes bola miešaná v olejovom kúpeli (80°C) 9 hodín.

Po skontrolovaní ukončenia reakcie bola zmes rozdelená medzi etylacetát a 10% vodný roztok chloridu sodného. Organická vrstva bola premytá nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysušená cez bezvodý síran sodný, filtrovaná a koncentrovaná počas zníženého tlaku. Zvyšok bol vyčistený chrómatograficky na silikagélovej kolóne za použitia n-hexán : etylacetátu (1 : 6) —> etylacetátu ako eluentu za vzniku

3-acetyltio-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenzyloxykarbonyl)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidínu (281 mg, výťažok 54%) ako bledohnedá pevná látka.

'H-NMR (400 M Hz, CDC1₃): δ (ppm) 8,22 (2H, m), 7,76 (1H, s), 7,52 (2H, m), 6,86 až 6,80 (1H, m), 5,23 (2H, d, J=7,3 Hz), 4,64 až 4,58 (1H, m), 4,56 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,44 až 3,86 (1H, m), 4,03 (2H, dd, J=8,8, 5,9 Hz), 3,79 (1H, dd, J=ll,0, 6,6 Hz),

609

3,65 až 3,52 (2H, m), 3,40 (IH, dd, J=ll,0, 4,4 Hz), 2,12 (3H,

s), 2,32 až 2,20 (IH, m), 2,23 až 1,92 (IH, m).

Testovací príklad 1

Antibakteriálna účinnosť in vitro

Pre odhad antibakteriálnej účinnosti zlúčenín bola stanovená minimálna koncentrácia (gg/ml) zlúčenín inhibujúcich rast rôznych patogénnych baktérií pomocou riediacej metódy na agarovom pláte. Výsledky sú uvedené v tabulke 6. V tejto tabulke boli použité nasledujúce baktérie A, B a C :

A : Staphylococcus aureus

B : Streptococcus pneumoniae

C : Haemophilis influenzae strain 9787 (a strain producing β-lactamase)

Tabuľka 6

Zlúčeniny	Minimálna koncentrácia inhibujúca rast (gg/ml)
		použitých baktérií
		A	B	C
Príklad	3	0,05	0,20	0,10
Príklad	4	0,05	0,20	0,20
Príklad	5	0,05	0,20	0,20
Príklad	6	0,05	0,20	0,20
Príklad	19	0,05	0,20	0,10
Príklad	22	0,05	0,20	0,10
Príklad	24	<0,012	0,025	0,05
Príklad	25	0,025	0,10	0,39
Príklad	56	0,05	0,20	0,20
Príklad	57	0,025	0,20	0,20
Príklad	58	<0,012	0,20	0,20
Príklad	59	<0,012	0,20	0,20
Príklad	60	0,025	0,39	0,39
Príklad	61	0,025	0,20	0,39

610

Príklad	67	<0,012	0,39	0,20
Príklad	69	<0,012	<0,012	0,78
Príklad	70	<0,012	<0,012	0, 78
Príklad	71	<0,012	<0,012	0,39
Príklad	72	<0,012	0,025	0,20
Príklad	76	0, 05	0,20	0, 39
Príklad	80	0, 025	0,20	0,39
Príklad	81	<0,012	0,20	0,39

Tieto výsledky ukazujú, že zlúčeniny predkladaného vynálezu vykazujú dostatočnú antibakteriálnu účinnosť.

parametre sú uvedené v Tabuľke 7. V Tabuľke C_max, Ti/₂

Testovací príklad 2

Farmakokinetiká

Zlúčeniny predkladaného vynálezu (20 mg/kg) boli podkožné injektované do myší (n=3, ddY, samcov, získaných SLC Japan). Koncentrácia plazmy stanovená testovacím spôsobom počas 5, 15 a 30 minút a 1, 1,5 a 2 hodín po podaní. Stanovené farmakinetické a AUCaii koncentráciu v prostredí, stanovuje maximálnu koncentrácie plazmy v koncentračnom čase.

plazmy, znamená krivka zlúčeniny polčas v plazme

Tabuľka 7

Zlúčenina		Cmax (gg/ml)	Tl/2 (hr)	AUCall (gg.h/ml)
Príklad	3	127,17	0, 25	83, 90
Príklad	4	157,38	1,02	165,19
Príklad	11	56,56	0, 33	40,38
Príklad	57	48,15	0, 38	45, 31
Príklad	58	63,88	0,41	47, 38
Príklad	60	46,14	0, 30	27,88
Príklad	67	40,20	0, 45	34, 13
Príklad	76	52,80	0, 19	27,88

611

Testovací príklad 3

Antibakteriálna účinnosť in vivo

Samčie ddY myši starej 4 týždne (kúpené od SLC Japan) boli intraperitonálne inokulované S. pneumoniae 9605 (PRSP) s objemom 0,2 ml (obsahujúce 5% mucín, 1 až 5 x 10³ kolóniou tvoriacich jednotiek (cfu)/myš). Okamžite po infikovaní boli myši subkutánne liečené jednotlivou testovacou zlúčeninou s objemom 0,1 ml. Eolo použitých sedem myší na skupinu. V experimente bol použitý roztok testovacej zlúčeniny rozriedený v dvoch krokoch. ED₅₀ hodnoty zlúčenín boli počítané pomocou Probit metódy z počtu jedincov, ktorí prežili 7 dní po infikovaní. Výsledky sú uvedené v tabulke 8.

Tabulka 8

Zlúčeniny EDso (mg/kg)
Príklad	57	0, 855
Príklad	58	0,899
Príklad	59	' 1,08
Príklad	60	1,41
Príklad	61	1,79
Príklad	67	1,60
Príklad	76	0,534

Príklad prípravy 1 (injekčné činidlo)

500 mg zlúčeniny z príkladu 3 rozpustenej v 5 ml destilovanej vody bolo lyofylizované po prefiltrovaní cez sterilizačný filter počas vzniku lyofylizovaného injekčného prípravku.

Príklad prípravy 2 (kapsule) Zlúčenina príkladu 24 Laktóza mg 128 mg

612

Kukuričný škrob Stearát horečnatý

0 mg mg 250 mg

Prášok horeuvedeného prípravku bol zmiešaný, zmes bola preosiata cez sito 60, 250 mg prášku bolo naplnené do želatínových kapsúl č. 3 počas vzniku požadovaných kapsúl.

Príklad prípravy 3 (Tablety)

Zlúčenina príkladu 24 Laktóza

Kukuričný škrob Stearát horečnatý mg

6 mg 23 mg 1 mg 200 mg

Prášok horeuvedeného prípravku bol zmiešaný, zmes bola granulovaná za mokra pri použití kukuričného škrobu a vysušená, boli pripravené 200 mg tablety. Tieto tablety v prípade potreby môžu byť potiahnuté cukrom...

Účinnosť vynálezu

1-metylkarbapénové zlúčeniny všeobecného vzorca I predkladaného vynálezu a ich farmaceutický prijatelné soli majú vynikajúce antibakteriálne účinky, sú stabilné voči dehydropeptidáze I a p-laktamáze a majú vysoký pomer nájdenia v moči. Pretože vykazujú nízku toxicitu pre ladviny, sú zlúčeniny vhodné ako farmaceutiká, zvlášť antibakteriálne činidlá.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina všeobecného vzorca I:

(D, kde:

R¹ predstavuje (1) skupinu predstavovanú vzorcom COOR³, kde R³ je vodík, Ci až C6 alkylová skupina alebo C3 až C6 cykloalkylová skupina, (2) skupinu predstavovanú vzorcom CONR⁴R⁵, kde R⁴ a R⁵ môžu byť rovnaké alebo rozdielne a každý je vodík, Ci až Cg alkylová skupina, ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov A nižšie uvedené, C₃ až C₆ cykloalkylová skupina, 3 až 6 členná heterocyklická skupina nebo C6 až C10 arylová skupina, ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B nižšie uvedené, alebo kde R⁴ a R^s spoločne s atómom dusíka, ku ktorému sú viazané, predstavujú 3 až 6 členný heterocyklus obsahujúci dusík, ktorý môže byť substituovaný jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B nižšie uvedené, (3) kyano skupinu, (4) skupinu predstavovanú vzorcom CH₂OR^S, kde R^s je vodík, C_xaž Ce alkylová skupina alebo C₃ až C6 cykloalkylová skupina alebo (5) skupinu predstavovanú vzorcom CH₂NR⁷R⁸, kde R⁷ je vodík, C: až Cg alkylová skupina alebo C3 až Cg cykloalkylová skupina, R⁸je vodík, Ci až alkylová skupina alebo C3 až Cg cykloalkylová

614 skupina, Ci až C₆ alkanoylová skupina, (C₆ až Ci₀ aryl)karbonylová skupina, ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B nižšie uvedené, (Ci až C₆ alkoxy) karbonylová skupina, 5 alebo 6 členná aromatická heterocyklokarbonylová skupina, Ci až C₆ alkylsulfonylová skupina alebo C6 až Cio arylsulfonylová skupina, alebo R⁷ a R⁸, spoločne s atómom dusíka, na ktorý sú viazané predstavujú sukcinimidovú skupinu, ktorá môže byť kondenzovaná s fenylovou skupinou,

R² predstavuje vodík nebo Ci až C₆ alkylovú skupinu; n predstavuje 1, 2 alebo 3;

X predstavuje síru alebo kyslík, substituent skupiny A zahrnuje hydroxylovú skupinu, amino skupinu, ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma Ci až C_salkylovými skupinami, karbamoylovú skupinu, ktorej amínová skupina môže byť substituovaná jednou alebo dvoma Ci až C₆alkylovými skupinami, karboxylovú skupinu, kyano skupinu a C_x až C& alkoxylovú skupinu, a substituent skupiny B zahrnuje hydroxy-Ci až C₄-alkylovú skupinu, amino-Ci až C₄-alkylovú skupinu, kde amínová skupina môže byť substituovaná jednou alebo dvoma Ci až Ce alkylovými skupinami, karbamoylovú skupinu, kde amínová skupina - môže byťsubstituovaná jednou alebo dvoma Ci až C₆ alkylovými skupinami, karboxylovú skupinu, hydroxylovú skupinu, amino skupinu, ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma Ci až Cz alkylovými skupinami, Ci až C$ alkoxylovú skupinu a Ci až alkylovú skupinu, alebo ich farmakologicky prijateľné soli alebo esterové deriváty.
2. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina nebo jej farmakologicky prijateľná soľ alebo esterový derivát podľa nároku 1, kde R¹predstavuje skupinu predstavovanú všeobecným vzorcom CONR⁴R⁵, kyano skupinu alebo skupinu predstavovanú všeobecným vzorcom CH₂NR⁷R⁸.

615
3. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná sol alebo esterový derivát podlá nároku 1, kde R¹predstavuje skupinu predstavovanú všeobecným vzorcom CONR⁴R⁵, alebo skupinu predstavovanú všeobecným vzorcom CH₂NR⁷R⁸.
4. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijatelná sol alebo esterový derivát podľa nároku 1, kde R¹predstavuje skupinu predstavovanú všeobecným vzorcom CONR⁴R^S.
5. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijatelná sol alebo esterový derivát podľa nárokov 1 až 4, kde R² predstavuje atóm vodíka alebo Ci až C₃ alkylovú skupinu.
6. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijatelná sol alebo esterový derivát podlá nárokov 1 až 4, kde R² predstavuje atóm vodíka.
7. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná sol alebo esterový derivát podľa nárokov 1 až 6, kde R³ predstavuje atóm vodíka alebo C_x až C₃ alkylovú skupinu.
8. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijatelná sol alebo esterový derivát podľa nárokov 1 až 6, kde R³ predstavuje atóm vodíka, metylovú skupinu alebo etylovú skupinu.
9. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijatelná sol alebo esterový derivát podía nárokov 1 až 8, kde R⁴ predstavuje-atóm vodíka alebo C_x až C₃ alkylovú skupinu.
10. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijatelná sol alebo esterový derivát podía nárokov 1 až 8, kde R⁴ predstavuje atóm vodíka, metylovú skupinu alebo etylovú skupinu.
11. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijatelná sol alebo esterový derivát podľa nárokov 1 až 10, kde R⁵ predstavuje atóm vodíka, Ci až C₆ alkylovú skupinu, ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov A alebo 4 až 6 členný heterocyklus obsahujúci dusík.

616
12. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná soľ alebo esterový derivát podľa nárokov 1 až 10, kde R⁵ predstavuje atóm vodíka, Cx až C₆ alkylovú skupinu, ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké nebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov A alebo azetidinyl, pyrolidinyl nebo piperidinyl.
13. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná soľ alebo esterový derivát podľa nárokov 1 až 8, kde R⁴ a R⁵ spoločne s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, predstavujú 4 až 6 členný heterocyklus obsahujúci dusík, ktorý môže byť substituovaný jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B.
14. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná sol alebo esterový derivát podľa nárokov 1 až 8, kde R⁴ a R⁵ spoločne s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, predstavujú azetidínovú, piperazínovú, morfolínovú alebo tiomorfolínovú skupinu, ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B.
15. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná soľ alebo esterový derivát podľa nárokov 1 až 14, kde R^s predstavuje atóm vodíka alebo Ci až C₃ alkylovú skupinu.
16. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná soľ alebo esterový derivát podľa nárokov 1 až 14, kde R⁶ predstavuje atóm vodíka.
17. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná sol alebo esterový derivát podľa nárokov 1 až 16, kde R⁷ predstavuje atóm vodíka alebo Ci až C₃ alkylovú skupinu.
18. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná soľ alebo esterový derivát podľa nárokov 1 až 16, kde R⁷ predstavuje atóm vodíka alebo metylovú skupinu.
19. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná soľ alebo esterový derivát podľa nárokov 1 až 16, kde

617

R⁷ predstavuje atóm vodíka.
20. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná sol alebo esterový derivát podľa nárokov 1 až 19, kde R⁸ predstavuje atóm vodíka, Ci až C₃ alkylovú skupinu, C₃ až C₃ alkanoylovú skupinu, benzoylovú skupinu, ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B, (Ci až C₃ alkoxy)karbonylovú skupinu, tienylkarbonylovú skupinu, furylkarbonylovú skupinu alebo pyridylkarbonylovú skupinu.
21. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná soľ alebo esterový derivát podľa nárokov 1 až 19, kde R⁸ predstavuje atóm vodíka, benzoylovú skupinu, ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B, (2-tienyl)karbonylovú skupinu, (2-furylkarbonylovú skupinu alebo (3-pyridyl)karbonylovú skupinu.
22. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná soľ alebo esterový derivát podľa nárokov 1 až 21, kde n predstavuje 1.
23. Metylkarbapenémové zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná soľ alebo esterový derivát podľa nárokov 1 až 22, kde X predstavuje atóm kyslíka.
24. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná soľ alebo esterový derivát podľa nároku 1, kde:

R¹ predstavuje skupinu predstavovanú všeobecným vzorcom CONR⁴R^s, kde R⁴ predstavuje atóm vodíka alebo Ci až C3 alkylovú skupinu, R⁵ predstavuje atóm vodíka, C3 až C₆ alkylovú skupinu, ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov A alebo 4 až 6 členný heterocyklus obsahujúci dusík,

R² predstavuje atóm vodíka, n predstavuje 1, a

618

X predstavuje atóm kyslíka alebo síry.
25. 1-Metylkarbapenémové zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná soľ alebo esterový derivát podľa nároku 1, kde:

R¹ predstavuje skupinu predstavovanú všeobecným vzorcom CONR⁴R⁵, kde R⁴ predstavuje atóm vodíka, metylovú skupinu alebo izopropylovú skupinu, a R⁵ predstavuje atóm vodíka, Ci až C₆alkylovú skupinu, ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov A alebo azetidinyl, pyrolidinyl alebo piperidinyl, n predstavuje 1, a

X predstavuje atóm kyslíka alebo síry.
26. 1-Metylkarbapenémové zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná soľ alebo esterový derivát podľa nároku 1, kde:

R¹ predstavuje skupinu predstavovanú všeobecným vzorcom CONR⁴R⁵, kde R⁴ a R⁵ spoločne s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, predstavujú 4 až 6 členný heterocyklus obsahujúci dusík, ktorý môže byť substituovaný jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B,

R² predstavuje atóm vodíka, n predstavuje 1, a

X predstavuje atóm kyslíka alebo síry.
27. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná soľ alebo esterový derivát podľa nároku 1, kde:

R¹ predstavuje skupinu predstavovanú všeobecným vzorcom CONR⁴R⁵, kde R⁴ a R⁵ spoločne s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, predstavujú azetidínovú, piperizínovú, morfolínovú alebo tiomorfolínovú skupinu, ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B,

R² predstavuje atóm vodíka,

619 n predstavuje 1, a

X predstavuje atóm kyslíka alebo síry.
28. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná soľ alebo esterový derivát podľa nároku 1, kde:

R¹ predstavuje kyano skupinu,

R² predstavuje atóm vodíka, n predstavuje 1, a

X predstavuje atóm kyslíka alebo síry.
29. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná soľ alebo esterový derivát podľa nároku 1, kde:

R¹ predstavuje skupinu predstavovanú všeobecným. vzorcom CH2NR⁷R⁸, kde R⁷ predstavuje atóm vodíka alebo Ci až C3 alkylovú skupinu, R⁸ predstavuje atóm vodíka, Ci až C₃ alkylovú skupinu, Ci až C₃ alkanoylovú skupinu, benzoylovú skupinu, ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B, (Ci až C₃ alkoxy) karbonylovú skupinu, tienylkarbonylovú skupinu, furylkarbonylovú skupinu alebo pyridylkarbonylovú skupinu,

R² predstavuje atóm vodíka, •n predstavuje 1, a - X predstavuje atóm kyslíka alebo síry.
30. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná soľ alebo esterový derivát podľa nároku 1, kde:

R¹ predstavuje skupinu predstavovanú všeobecným vzorcom CH₂NR⁷R⁸, kde R⁷ predstavuje atóm vodíka alebo metylovú skupinu, a R⁸ predstavuje atóm vodíka, benzoylovú skupinu, ktorá môže byť substituovaná jednou alebo dvoma skupinami, ktoré môžu byť rovnaké nebo rozdielne a sú vybrané zo skupiny substituentov B, (2-tienyl)karbonylovú skupinu, (2-furyl-karbonylovú skupinu alebo (3-pyridyl)karbonylovú skupinu,

R² predstavuje atóm vodíka,

620 n predstavuje 1, a

X predstavuje atóm kyslíka alebo síry.
31. 1-Metylkarbapenémová zlúčenina vybraná z nasledujúcej skupiny zlúčenín:

(ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(ÍR)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-karbamoyl-l, 3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(ÍR)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-hydroxymetyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl] tio-6-[(ÍR)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-hydroxymetyl-l, 3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl] tio-6-[(ÍR)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,53,6S)-2-[1-(4-kyano-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6- [ (ÍR) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (lR,5S,6S)-2-[l-(4-kyano-l,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6- [(ÍR) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR, 5S,6S)-2- [ľ-(4-morfolinokarbonyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl] tio-6-[(ÍR)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR, 5S,6S)-2-[1-(4-morfolinokarbonyl-l, 3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl] tio-6- [ (ÍR) -1-hydroxyetyl] -l-memylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinokarbonyl-1,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl] tio-6- [ (ÍR) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinokarbonyl-l,3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6-[(ÍR)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina,

621 (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(3-aminoazetidino)karbonyl-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (ÍR)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(3-aminoazetidino)karbonyl-1,3-oxazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (ÍR) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(3-hydroxyazetidino)karbonyl-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl]tio-6-[(ÍR) -1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(3-hydroxyazetidino)karbonyl-1,3-oxazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (ÍR) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR, 5S,6S)-2-[1-(4-tiomorfolinokarbonyl-l, 3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl] tio-6- [ (ÍR) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR, 5S, 6S) -2- [1- (4-tiomorfolinokarbonyl-l, 3-oxazol-2-yl) azetidín· -3-yl] tio-6- [ (ÍR) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(piperidín-4-ylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(piperidin-4-ylkarbamoyl)-1,3-oxazol-2-yl] azetidin-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(azetidín-3-ylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(azetidin-3-ylkarbamoyl)-1,3-oxazol-2-yl] azetidin-3-yl}tio-6-[(R)-1-hyčroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-((3S)-pyrolidin-3-ylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-((3S)-pyrolidin-3-ylkarbamoyl)-1,3-oxazol-2622

-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em

-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-{l-[4-((3R)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -l-nydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-pyrolidín-3-ylkarbamoyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6- [ (R)-1-hydroxyetyl]-i-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(piperazin-l-karbonyl)-1,3-tiazol-2-yl] azet idín-3-yl} tio-6- [ (R) - l-nydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(piperazín-l-karbonyl)-1,3-oxazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-{1-[4-(2-amino-etylkarbamoyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(2-amino-etylkarbamoyl)-1,3-oxazol-2-yl] azetidín-3-yl} tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR, 5S, 6S) -2-{ 1- [4 - ( (1S) -1-aminomety 1-2-metyl-propylkarbamoyl) -1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (1R,5S,6S)-2-(1-(4-( {1S) -l-aminometyl-2-mety 1-propylkarbamoyl) -1,3-oxazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-(l-{4-[N-(2-amino-etyl)-N-izopropyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyi]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-amino-etyl)-N-izopropyl-karbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-(l-{4-[N-(2-hydroxy-etyl)-N-izopropyl-karbamoyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl}tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -1-metylkarbapén623

-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR, 5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-hydroxy-etyl)-N-izopropyl-karbamoyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-1-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR, 5S,6S)-2-[1-(4-aminometyl-l,3-tiazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-[1-(4-aminometyl-l, 3-oxazol-2-yl)azetidín-3-yl]tio-6- [ (R) -1-hydroxyetyl] -l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR, 5S,6S)-2-{1-[4-(benzoylaminometyl)-i,3-tiazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxy-etyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)—2 — {1—[4-(benzoylaminometyl)-1,3-oxazol-2-yl]azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(benzenesulfonylaminometyl)-1,3-tiazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)—2—{1—[4-(benzenesulfonylaminometyl)-1,3-oxazol-2-yl] azetidín-3-yl}tio-6- [ (R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-(1-{4-[(tiofén-2-karbonylamino)metyl]-l,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-y1)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-(1—{4—[(tiofén-2-karbonylamino)metyl]-1,3-oxazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina, (ÍR,5S,6S)-2-(1—{4—[(furan-2-karbonylamino)metyl]-1,3-tiazol-2-yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em-3-karboxylová kyselina a (ÍR, 5S,6S)-2-(1-(4-[(furan-2-karbonylamino)metyl]-1,3-oxazol-2yl}azetidín-3-yl)tio-6-[(R)-1-hydroxyetyl]-l-metylkarbapén-2-em624

-3-karboxylové kyselina
32. Farmaceutický prípravok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje zlúčeninu alebo jej farmakologicky prijateľnú soľ alebo esterový derivát definovaný v nárokoch 1 až 32 ako účinnú zložku.
33. Farmaceutický prípravok podľa nároku 32, vyznačujúci sa tým, že farmaceutický prípravok je prípravok na prevenciu alebo liečbu bakteriálnych infekcií.
34. Zlúčenina alebo jej farmakologicky prijateľná soľ alebo esterový derivát podľa nárokov 1 až 31, ktorý je používaný ako liečivo.
35. Použitie zlúčeniny alebo jej farmakologicky prijateľnej soli alebo esterového derivátu podľa nárokov 1 až 31 pri výrobe liečiv na prevenciu alebo liečbu bakteriálnych infekcií.