SK2772004A3 - Composition inhibiting matrix-metallproteinases for the treatment of neoplastic diseases - Google Patents

Description

Oblasť techniky

Predložený vynález sa týka použitia zlúčenín v kombinácii s ďalšími potravinovými inhibícii matrix-metaloproteináz. Predložený predovšetkým týka použitia kompozície kyselinu askorbovú, lyzín a kých ochorení.

prolín, katechínových zložkami pri vynález sa obsahujúcej katechín, na liečenie neoplasticDoterajší stav techniky

Polyfenolové zlúčeniny, známe tiež ako katechíny, sú prítomné v zelenom čaji a zistilo sa, že poskytujú ochranu proti rozmanitým chorobám, vrátane rakoviny (Mukhtar, H., Ahmed, N., Am. J. Clin. Nutr. 7_1, 1698S - 1702S (2000)). Sadzuka a kol. ukázali, že orálne podávanie zeleného čaju zvyšovalo tumor-inhibujúce účinky doxorubicínu u myší.

Protirakovinová aktivita katechínov môže súvisieť s ich účinkami na niektoré faktory zapojené do proliferácie rakovinových buniek a ich metastáz. Je známe, že katechíny spôsobujú zastavenie bunkového cyklu buniek karcinómu u človeka (Ahmad, N., Feyes, D. K., Nieminen, A. L., Agarwal, R., Mukhtar, H. J., Natl. Cancer. Inst. 8 9, 1881 - 1886 (1997)). Ukázalo sa, že polyfenolová frakcia zo zeleného čaju chráni proti zápalu a cytokinéze vyvolanej nádormi.

Polyfenolové zlúčeniny predstavujú 30 % sušiny v zelenom čaji. Zahrnujú flavanoly, flavandioly, flavonoidy a fenolové kyseliny. Flavanoly sú spomedzi polyfenolov v zelenom čaji najhojnejšie a bežne sú známe ako katechíny. V zelenom čaji sa vyskytujú štyri hlavné katechíny: 1) (-)-epikatechín, 2) (-)-epi katechí r.-3-galát, 3) ( - )-epigalokatechín a 4) (-)-epi

- 2 galokatechín-3-galát (EGCG). Spomedzi katechinov je EGCG hlavnou polyfenovou zložkou v zelenom čaji.

EGCG je účinná antioxidačná zlúčenina (J. Celí. Biochem. 265, 236-257 (1996)) a môže sa jej prisúdiť protirakovinová aktivita zeleného čaju. Uvádza sa, že antimetastauická aktivita katechínových zlúčenín sa uplatňuje zamedzením procesu angiogenézy (Cay, Y., Cao, R., Náture 398, 381 (1999)). Tiež sa ukázalo, že EGCG interferuje s aktivitou urokinázy (uplazmninogénový aktivátor), jedným z najčastejšie exprimovaných enzýmov pri karcinómoch u človeka (Jankun, J., Selman, S. H., Swiercz, R., Skrzypcak, J. E. Náture 387-567 (1997)).

Avšak potvrdilo sa, že biologická dostupnoť je u človeka extrémne nízka

Yang, C.S.

Drug

Metab. Dispos. 25, 1045

Yang,

Lee, M.J., Balentine,

D.A., Kuo, M.

C:, Schantz

S.,

Cancer Epidemol. Biomark.

Prev. 7, 351-35

J.

R., Donovan, J.L., Wong,

R., Waterhouse, H., Germán, J.

B. ,

Walzem, R.L., Kasim, K.

Am.

Y., Alberts,

Dorr, R., Shahi, F., Crowell,

J. A. ,

Yang,

Cancer Epidemol. Biomark. Prev. 10,

53-58 (2001)) . Uvedené literárne odkazy sú tu týmto začlenené v celom rozsahu. Nízka koncentrácia v tkanivách značne znižuje terapeutickú hodnotu polyfenolov, vrátane EGCG. Pretrváva potreba nájsť lepšiu kompozíciu obsahujúcu polyfenoly, ktorá by bola účinná pri liečbe neoplastických ochorení. Prekvapujúco bola nájdená kompozícia obsahujúca katechiny, kyselinu askorbovú, prolin a lyzín, ktorá môže uplatňovať účinnú anti-proliferačnú a anti-metastatickú aktivitu proti neoplastickým ochoreniam.

Podstata vynálezu

Predložený vynález sa týka kompozície biochemických látok obsahujúcej katechín, antioxidant, prolin a lyzín,

- 3 ktoré sú účinné pri liečení humánnych ochorení.

Predložený vynález sa týka kompozície biochemických látok obsahujúcej katechín, antioxidant, prolín a lyzín, ktoré sú účinné pri inhibícii matrix-metaloproteinázy.

Predložený vynález sa týka spôsobu liečenia neoplastických ochorení súvisiacich s nadmernou degradáciou extracelulárneho matrixu, pričom toto liečenie zahrnuje podávanie účinného množstva kompozície obsahujúcej katechínovú zlúčeninu, antioxidant, prolin a lyzín.

Prehľad obrázkov na výkresoch

Obrázok 1 zobrazuje inhibičné účinky EGCG na bunkovú proliferáciu rakovinových buniek prsníka (MDA-MB 231).

Obrázok 2 zobrazuje synergické inhibičné účinky kombinácie EGCG, kyseliny askorbovej, prolínu a lyzínu na bunkovú proliferáciu rakovinových buniek prsníka (MDA-MB 231).

Obrázok 3 zobrazuje synergické inhibičné účinky Kombinácie EGCG, kyseliny askorbovej, prolinu a lyzínu na bunkovú proliferáciu rakovinových buniek hrubého čreva (HCT 116) .

Obrázok 4 zobrazuje, že EGCG (20 pg/ml) rakovinovými bunkami prsníka o kyseliny askorbovej, prolínu Kombinácia kyseliny

Matrigelovú inváziu

%. Kombinácia inhibuje približne %

inhibuj e približne a lyzínu askorbovej, prolínu a lyzínu s EGCG (2

100 %) Matrigelovú inváziu.

pg/ml) úplne inhibuje (približne

Obrázok 5 zobrazuje kombináciu kyseliny askorbovej, prolínu a lyzínu s EGCG (20 pg/ml), ktorá synergicky inhibuje na 100 % Matrigelovú inváziu bunkami melanómu (A 2058) .

- 4 Obrázok 6 zobrazuje zymogram znázorňujúci zníženie aktivity MMP2 vylučovanej rakovinovými bunkami prsníka vplyvom EGCG.

Obrázok 7 zobrazuje normálnu morfológiu buniek melanómu po skúške Matrigelovej invázie.

Obrázok 8 zobrazuje zmeny vyvolané kombináciou kyseliny askorbovej, prolinu a lyzínu v morfológii buniek melanómu.

Obrázok 9 zobrazuje apoptotické účinky kombinácie kyseliny askorbovej, prolinu a lyzínu s EGCG.

V ďalšom uskutočnení sa predložený vynález týka kompozície obsahujúcej katechíny prítomné v čajových extraktoch, červenom víne v kombinácii s ďalšími potravinovými zložkami, pokiaľ ide o synergické účinky, proti neoplastickým ochoreniam a celému radu ďalších chorôb. Potravinové zložky obsiahnuté v tejto prihláške zahrnujú, ale nie sú obmedzené na tie, ktoré sú podrobne opísané v tejto prihláške.

Katechínové zlúčeniny sa môžu použiť v kombinácii s ďalšími antioxidantmi, ako je vitamín E, glutatión, s ďalšími flavinoidmi, s facilitačnými činidlami, ako je kyselina listová, a s kovmi, ako je selén, o ktorých je známe, že vhodne modifikujú aktivitu matrix-metaloproteináz, čo poskytuje možnosť znížiť účinnú koncentráciu, pri ktorej EGCG môže manifestovať svoju protinádorovú aktivitu.

V ďalšom uskutočnení sa predložený vynález týka kompozície obsahujúcej katechíny, ktoré sú účinné pri redukcii transformácie normálneho tela buniek na rakovinové bunky.

V ďalšom uskutočnení sa predložený vynález týka kompozície obsahujúcej katechíny, ktoré sú účinné pri prevencii bunkovej proliferácie rakovinových buniek a pri redukcii syntézy, sekrécie a/alebo aktivity rozmanitých matrix-metaloproteináz, ktoré trávia extra-celulárny matrix (ECM).

Ešte v ďalšom uskutočnení sa predložený vynález týka spôsobu prevencie a úpravy neplastických podmienok podávaním takejto kompozície obsahujúcej katechíny, kyselinu askorbovú, prolín a lyzín, orálne alebo topickou aplikáciou.

Predložený vynález je v ďalšom opísaný podrobnejšie s odkazmi na nasledujúce príklady uskutočnenia, ktoré však v žiadnom prípade neznamenajú obmedzenie rozsahu vynálezu.

Všeobecné experimentálne podmienky (a) Línie buniek

V štúdiách sa použili nasledujúce línie rakovinových buniek, ktoré sa získali z ATCC:

(i) Ľudské rakovinové bunky prsníka MDA-MB 231 (ii) Ľudské rakovinové bunky hrubého čreva HCT 116 (iii) Ľudské melanómové bunky A 2058 (b) Štúdie proliferácie buniek

Na skúmanie účinkov katechínov a diétnej kompozície na bunkovú proliferáciu ľudských rakovinových buniek sa rozličné línie ľudských rakovinových buniek kultivovali v 24-jamkových platničkách pri kultivačných podmienkach, ktoré stanovil ATCC (dodávateľ bunkových línií). Bunky sa všeobecne inkubovali počas 3 až 4 dní (pred dosiahnutím koalescencie) . Celkový počet buniek v kultivačnej .jamke sa stanovil farbením buniek s vitálnym farbivom (MTT) a následným stanovením OD vo farebnom roztoku. MTT farbi len mŕtve bunky a množstvo absorpcie farbiva súvisí s počtom mŕtvych buniek v kultúre. Percento inhibície sa vypočítalo porovnaním OD ošetrených skupín s OD kontrolných skupín.

(c) Štúdie Matrigelovej invázie

Štúdie Matrigelovej invázie sa uskutočnili s použitím vložier Matrigelu (Becton Dickinson) v kompatibilných 24jamkových platničkách. Táto skúška je osvedčenou skúškou na vyhodnotenie metastáz rakoviny.

Ľudské fibroblastové bunky sa naočkovali a nechali sa rásť v 24-jamkových platničkách s použitím kultivačného média obsahujúceho približne 10 % séra. Keď fibroblasty dosiahli koalescenciu kultivačné médium so sérom sa odstránilo a nahradilo sa čerstvým médiom bez séra. K médiu bez séra sa pridala kombinácia katechínových zlúčenín spolu s diétnou kompozíciou a ľudské rakovinové bunky sa naočkovali na horný povrch Matrigelových vložiek.

Po 18 hodinách sa médiá odstránili. Niektoré médiá sa odložili na zymogramové štúdie. Bunky na hornom povrchu vložiek sa mierne zotreli s použitím vatového tampónu. Bunky, ktoré penetrovali cez Matrigelovú membránu a migrovali do spodného povrchu Matrigelu sa farbili farbivom Quick Stain a spočítali sa pod mikroskopom.

(d) Zymogramové štúdie

Médiá (25 až 30 μΐ) zo štúdií Matrigelovej invázie sa aplikovali na Novexové zymogramové gély (Invitrogen). Gélové platne sa vyvíjali a farbili podlá odporúčania výrobcu. Pásy matrix-metaloproteináz (MMP) sa identifikovali na základe ich známych molekulových hmotností.

(e) Morfologické štúdie

Morfológia ľudských rakovinových buniek, ktoré migrovali do spodného povrchu Macrigelovej membrány sa farbili farbivom Quick Scain a fotografovali sa pod mikroskopom (10CX).

- 7 Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Inhibičné účinky epigalokatechíngalátu (EGCG) na bunkovú proliferáciu ľudských rakovinových buniek prsníka (MDA MB

231)

V týchto štúdiách sa 5 x 10⁴ rakovinových buniek prsníka (MDA MB 231) naočkovalo do každej jamky 24-jamkovej platne. Kontrolnou skupinou boli rakovinové bunky prsníka, ktoré sa nechali rásť v Liebovitzovom médiu doplnenom s 10 % fetálneho hovädzieho séra (fetal bovine sérum, FBS). Ošetrovanou skupinou boli rakovinové bunky prsníka, ktoré sa nechali rásť v Liebovitzovom médiu doplnenom s 10 % fetálneho hovädzieho séra (FBS) plus buď 0, 10, 20, 50, 100 alebo 200 pg/ml EGCG. Platne sa inkubovali v okolitom ovzduší (bez doplnku C0₂) počas 4 dní.

Na konci tejto doby sa kultivačné médiá odstránili a bunky v každej jamke sa farbili s MTT. Nadbytok MTT sa vymyl. Vyfarbené MTT rakovinové bunky sa rozpustili v 1 ml roztoku DMSO. Pre každú jamku sa stanovila optická hustota (optical density, OD) roztoku. Hodnota optickej hustoty pre jamku bola priamo úmerná počtu mŕtvych buniek. Hodnota optickej hustoty s MTT vyfarbených rakovinových buniek, ktoré sa predtým kultivovali bez prítomnosti EGCG sa použila ako referenčná vzorka a považovala sa za rovnú 100. Percento inhibície sa vypočítalo s použitím vzorca: % Inhibície = (OD referenčnej vzorky - OD testovanej úpravy)/OD referenčnej vzorky x 100 %.

EGCG v množstve 20 pg/ml poskytovalo inhibíciu 3 % v množstve 50 pg/ml poskytovalo inhibíciu 34 %, v množstve 100 pg/ml poskytovalo inhibíciu 66 % a v množstve 200 pg/rnl poskytovalo 70 % inhibíciu bunkovej proliferácie ľudských rakovinových buniek (obrázok 1). EGCG v množstve 10 μσ/ml neposkytoval inhibíciu bunkovej proliferácie.

Príklao 2

Inhibičný účinok kombinácie kyseliny askorbovej, prolinu a lyžicu s rozličnými koncentráciami EGCG na bunkovú proliferáciu ludských rakovinových buniek prsníka (MDA MB 2 31)

Všeobecný postup pri týchto štúdiách bol rovnaký ako v príklade 1.

V týchto štúdiách sa bazálne kultivačné média doplnili nasledovne:

i) kyselina askorbová (100 μΜ) + prolín (140 μΜ) ;

it kyselina askorbová (100 μΜ) + prolín (140 μΜ)+ lyzin (400 μΜ) ;

iii) kyselina askorbová (100 μΜ) + prolín (140 μΜ)+ lyzin (400 μΜ) plus 20 pg/ml EGCG;

iV kyselina askorbová (100 μΜ) + prolín (140 μΜ)e lyzín (400 μΜ) plus 50 pg/ml EGCG; alebo

v) kyselina askorbová (100 μΜ) + prolín (140 μΜ)+ lyzin (400 μΜ) plus 100 pg/ml EGCG.

Kyselina askorbová + prolín nespôsobovali žiadnu inhibíciu bunkovej proliferácie. Kyselina askorbová + prolín + lyzin inhibovali bunkovú proliferáciu o približne 14 % (obrázox 2). Kombinácia kyseliny askorbovej + prolinu + lyzínu plus 20 pg/ml EGCG poskytovali 20 % inhibíciu bunkovej proliferácie (obrázok 2) . Samotný EGCG v množstve 20 pg/ml poskytoval len 3 % inhibíciu bunkovej proliferácie (príklad

- 9 1) . Kombinácia kyseliny askorbovej -r prolinu + lyzinu pôsobí teda synergicky s EGCG pri inhibicii proliferácie rakovinových buniek.

Príklad 3

Inhibičné účinky kombinácie kyseliny askorbovej, prolinu a lyzinu s rozličnými hladinami EGCG na bunkovú proliferáciu ľudských rakovinových buniek hrubého čreva (HCT 116)

V tejto štúdii sa ľudské rakovinové bunky hrubého čreva nechali rásť na McCoyovom médiu s 10 % fetálneho hovädzieho séra (FBS) v atmosfére 5 % CCý. Použil sa rovnaký všeobecný postup a spôsob skúmania ako v príklade 2.

Kombinácia kyseliny askorbovej, prolinu a lyzinu s EGCG synergicky zvyšovala inhibičné účinky na bunkovú proliferáciu z 0 % na 31 % pri 20 pg/ml EGCG a na približne 95 % pri 50 pg/ml EGCG (obrázok 3).

Inhibičné účinky EGCG a kombinácie kyseliny askorbovej, prolinu a lyzinu na inváziu Matrigelu rakovinovými bunkami

Príklad 4

Inhibičné účinky odstupňovaných hladín EGCG a kombinácie kyseliny askorbovej, prolinu a lyzinu s rozličnými hladinami EGCG na inváziu rakovinových buniek prsníka (MDA MB 231) cez Matrigel

Všeobecný postup pre Matrigelovú invazívnu skúšku bol opísaný vyššie. V tejto skúške sa na každú vložku naočkovali ľudské rakovinové bunky prsníka (5 x 10⁴) . K Liebovitzovmu médiu sa pridali rozličné doplnky. Platne sa inkubovali v inkubátore v okolitom ovzduší bez doplnku CO₂.

Kompozícia obsahujúca 20 pg/ml EGCG v médiu inhibovala inváziu rakovinovými bunkami prsníka o približne 26 % a

- 10 kompozícia obsahujúca 50 μς/ιηΐ EGCG v médiu inhibovala inváziu rakovinovými bunkami prsníka o približne 100 %. Zatiaľ čo kyselina askorbová (100 μΜ) + prolín (140 μΜ) + lyzír. (400 μΜ) v médiách poskytovala 65 % inhibíciu, kombinácia kyseliny askorbovej (100 μΜ) + prolínu (140 μΜ) + lyzínu (400 μΜ) plus 20 μς/ml EGCG úplne inhibovala (100 % inhibícia) inváziu rakovinovými bunkami (Obrázok 4).

Príklad 5

Inhibičné účinky odstupňovaných hladín EGCG a kombinácie kyseliny askorbovej, prolínu a lyzínu s rozličnými hladinami EGCG na inváziu ľudských melanómových buniek (A 2058) cez Man rigel

Všeobecný postup pre Matrigelovú invazívnu skúšku bol opísaný vyššie. Ľudské melanómové bunky (A 2058) (5 x 10⁴) sa naočkovali na každú vložku. K DMEM sa pridali rozličné doplnky. Platne sa inkubovali v inkubátore v atmosfére 5 % CO₂.

Zatial čo kombinácia kyseliny askorbovej (100 μΜ) + prolínu (140 μΜ) + lyzínu (400 μΜ) poskytovala len 13 % inhibíciu, kombinácia kyseliny askorbovej (100 μΜ) + prolínu (140 μΜ) + lyzínu (400 μΜ) plus 20 pg/ml EGCG úplne zamedzovala invázii melanómových buniek cez Matrigel (Obrázok

5) .

Zymogramové štúdie

Príklad 6

Účinky odstupňovaných hladín EGCG na produkciu MMP2 ľudskými rakovinovými bunkami prsníka (MSA MB 231)

- 11 Médiá z rozličných úprav v skúške Matrigelovej invázie (Príklad 4) sa aplikovali na gél Novex Zymogram (Invitrogen).

Platne sa vyvíjali a farbili podlá odporúčania výrobcu. Pásy matrix-metaloproteináz (MMP) sa identifikovali na základe ich známych molekulových hmotností (Obrázok 6) .

Zymogram kultivačných médií zo skúšok Matrigelovej invázie preukázal, že 20 pg/ml EGCG v médiách znižovalo produkciu MMP2 a úplne inhibovalo produkciu MMP9 (Obrázok 6). Pri koncentráciách EGCG 50 pg/ml a 100 pg/ml bola ako aktivita MMP2 tak aj aktivita MMP9 úplne inhibovaná (Obrázok

6) .

Morfológia buniek tríklad 7

Účinky EGCG a kombinácie kyseliny askorbovej, prolínu a lyzínu na bunkovú morfológiu ľudských melanómových buniek (A 2058)

Mikrografy rakovinových buniek migrácia cez Matrigel sú zobrazené kombinácie kyseliny askorbovej (100 v bazálnych médiách a ich na Obrázku 7. Začlenenie

8) . Evidentná bola médií menilo morfológiu buniek (Obrázok zreteľným rozšírením distenzia buniek so jadra. Pridanie 20 pg/ml EGCG ku kombinácii kyseliny askorbovej + lyzínu v médiách (100 μΜ) + prolínu (140 μΜ) spôsobovalo rozsiahle apoptotické zmeny (Obrázok

Tieto zistenia opísané v príkladoch 1 až 7 ukazujú, že prostredníctvom EGCG sa uplatňoval silný synergický účinok, ak sa EGCG použil v kombinácii kyseliny askorbovej + prolínu + lyzínu. Tieto štúdie ukazujú teda prekvapujúci synergický účinok kombinácie EGCG a kyseliny askorbovej + prolínu +

- 12 lyzinu, čo umožňuje veľmi výhodne využiť anti-proliferačnú a anti^metastázovú aktivitu

EGCG pri pomerne nízkej hladine jeho koncentrácie v tkanive.

Tieto predložené zistenia majú teda nesmierny význam, pretože môžu priblížiť účinnú hladinu katechinov bližšie k úrovni, ktorá sa dá dosiahnuť v tkanivách.

Bolo poukázané na to, že proliferácia rakovinových buniek a zlepšenie regulácie ich enzýmov je spôsobené zvýšenou koncentráciou druhov reaktívneho kyslíka (react ive oxygen species, ROS). V tejto situácii bude použitie kombinácií rozličných biologických antioxidantov, ako sú tokoferoly, karotinoidy, spolu s ďalšími facilitačnými činidlami, ako sú ubichinoly, biflavonoidy, kyselina lipoová, karnitín, poskytovať účinnejšie synergické zmesi na liečenie vyššie uvedených chorôb.

Predložený vynález poskytuje prekvapujúci poznatok, že kombinácia obsahujúca katechínové zlúčeniny by poskytovala synergickú aktivitu a tým umožňovala dosiahnuť vlastnú účinnú protirakovinovú aktivitu pri nižších hladinách katechinov v tkanivách. Vyššie uvedené zistenia otvárajú možnosť použitia rozličných zložiek v kombinácii s rôznymi zložkami pri účinných hladinách pri prevencii a liečení neoplastických ochorení.

Odborník skúsený v odbore si bude vedomý toho, že prolín a lyzín nie sú obmedzené len na prolín a lyzin. Rozsah predloženého vynálezu je mienený tak, že zahrnuje deriváty lyzinu a jeho prekurzory, deriváty prolínu a jeho prekuzrory.

Odborník skúsený v odbore si bude vedomý toho, že antioxidant, kyselina askorbová, bude zahrnovať deriváty a prekurzory kyseliny askorbovej.

Ďalšie biologické antioxidanty zahrnujú tokoferoly a príbuzné zlúčeniny, kyselinu trans-retinovú a príbuzné

- 13 zlúčeniny, karotinoidy a príbuzné zlúčeniny, glutat ión a príbuzné zlúčeniny, ubichinoly a príbuzné zlúčeniny, foláty a príbuzné zlúčeniny, bioflavonoidy a príbuzné zlúčeniny, ako aj zlúčeniny selénu.

Klinické aplikácie

Vynález sa zameriava na preventívne a terapeutické použitie katechínu v kombinácii s antioxidantom, prolínom a lyzínom. Kombinované použitie katechínu s antioxidantom, prolínom a lyzínom zvyšuje účinnosť katechínovej zlúčeniny pri liečení humánnych ochorení.

Humánne ochorenia zahrnujú, ale nie sú obmedzené na, neoplastické ochorenia, zápalové stavy, infekčné ochorenia, kardiovaskulárne choroby a ďalšie patologické stavy zahrnujúce degradáciu extra-celulárneho matrixu. Takéto stavy zahrnujú abnormálnu angiogenézu, patologickú intravazáciu, reumatoidnú artritídu a osteoartritídu, aterosklerózu, dilatovanú kardiomyopatiu, emfyzém a ďalšie chronické stavy.

Predložený vynález poskytuje spôsob liečenia a prevencie humánnych ochorení zahrnujúcich degradáciu extra-celulárneho matrixu, ako sú

i) neoplastické ochorenia;

ii) zápalové stavy (vrátane, ale bez obmedzenia na alergie, emfyzém, reumatoidnú artritídu a osteoartritídu, periodontitídu, neurodermatitídu);

iii) infekčné ochorenia (vrátane, ale bez obmedzenia na vírusové infekcie, ako je bežné nachladnutie, chrípka, hepatitída, herpes, HIV; bakteriálne infekcie, ako je pneumónia, tuberkulóza, meningitída, kvapavka, syfilis a hubovité ochorenia);

kardiovaskulárne choroby (vrátane, ale bez obmedzenia na ateros klerózu kardiomyopatiu restenózu po degenerauívne ochorenia ale bez obmedzenia na osteoporózu a ochorenia (vrátane, ale bez obmedzenia na

Alzheimerovu ochorenia autoimunity (vrátane, ale bez obmedzenia na podávaním účinných množstiev kompozícii opísaných v tejto prihláške.

Claims (11)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Kompozícia biochemických látok, vyznačujúca sa tým, že zahrnuje katechinovú zlúčeninu, antioxidant, prolín a lyzín, ktorá je účinná pri inhibicii matrix-metaloproteiná zy.
2. 2. Kompozícia podľa nároku 1, vyznačujúca sa t ým, že katechínová zlúčenina je zvolená zo skupiny zahrnujúcej epikatechiny, epigalokatechín, epikatechíngalát a epigalokatechíngalát.
3. 3. Kompozícia podľa nároku 1, vyznačujúca sa t ý m, že katechínovou zlúčeninou je epigalokatechíngalát.
4. 4. Kompozícia podľa nároku 1, vyznačujúca sa tým, že antioxidant je zvolený zo skupiny zahrnujúcej kyselinu askorbovú, tokoferoly, tokotrienoly, karotinoidy, glutatió.n, kyselinu alfa-lipoovú, ubichinoly, biof lavonoidy a karnitín.
5. 5. Kompozícia podľa nároku 1, v y z n a č u ú c a sa tým, že antioxidantom je kyselina askorbová.
6. 6.

   Kompozícia podľa nároku 5, vyznačujúca tým, že kyselina askorbová je zvolená zo skupiny zahrnuj úcej prekurzory askorbátu, metabolity askorbátu a askorbátovú soľ.
7. 7. Kompozícia podľa nároku 1, vyznačujúca sa tým, že antioxidant ďalej zahrnuje kyselinu listovú.
8. 8. Kompozícia podlá nároku 7, vyznačujúca sa tým, že kyselinou listovou je fcláu.

   - 16 9.

   Kompozícia podľa nároku 1, v m, že kompozícia ďalej zahrnuje y z n a č u j selén.

   Kompozícia že selén z ý a mezylselinát.

   pod je zvolený zo nároku
9. 9, v y

   s kupiny z n a č u j zahrnujúcej podľa nároku

   1, v

   11. Kompozícia matrix-metaloproteináza matrix-metaloproteinázu ú c a sa tým, že zahrnuj úcej názu 2, matrix-metaloproteinázu 3, matrix-metaloproteinázu 4, matrix-metaloproteinázu 5, matrix-metaloproteinázu 6, matrixmetaloproteinázu 7, matrix-metaloproteinázu 8, matrix-metaloproteinázu 9, matrix-metaloproteinázu teinázu 11, matrix-metaloproteinázu 12 je

   1, zo skupiny matrix-metaloproteizvolená
10. 10, matrix-metaloproa matrix-metaloproteinázu 14.

    značujúca sa matrix-metaloproteináza t ý

    9.

    Kompozícia podľa nároku 1, že matrix-metaloproteinázou

    1.. / v y je značujúca sa matrix-metaloproteináza

    Spôsob liečenia zvýšenou aktivitou pacientovi, biochemických antioxidant, ochorení súvisiacich so humánnych matrix-metaloproteinázy, ktorý potrebuje takéto liečenie, látok zahrnujúcich prolín a lyzín, ktorá matrix-metaloproteinázy.

    katechínovú podávaním kompozície zlúčeninu, je účinná pri inhibícii podľa nároku 14, v katechínová zlúčenina

    Y z je n a č u j ú zvolená zo c i sa skupiny

    - 17 zahrnujúcej epikatechiny, epigalokatechín, epikatechingalát a epigalokatechíngalát.

    16. Spôsob podľa nároku 14, vyznačujúci sa tým, že katechínovou zlúčeninou je epigalokatechíngalát.

    17. Spôsob podľa nároku 14, vyznačujúci sa tým, že antioxidant je zvolený zo skupiny zahrnujúcej kyselinu askorbovú, tokoferoly, tokotrienoly, karotinoidy, glutatión, kyselinu alfa-lipoovú, ubichinoly, bioflavonoidy a karnitin.

    18. Spôsob podľa náreku 14, vyznačujúci sa tým, že antioxidantom je kyselina askorbová.

    19. Spôsob podľa nároku 14, vyznačujúci sa tým, že kyselina askorbová ďalej zahrnuje askorbát zvolený zo skupiny zahrnujúcej prekurzory askorbátu, metabolity askorbátu a askorbátové soli.

    20.

    Spôsob podľa nároku
11. 14, vyznačujúci tým, že antioxidant ďalej zahrnuje kyselinu listovú.

    21. Spôsob podľa nároku 20, vyzná čujúci s a t ý m, že kyselinou listovou je folát. 22. Spôsob podľa nároku 14, vyzná čujúci s a

    tým, že kompozícia ďalej zahrnuje selén.

    23. Spôsob podľa nároku

    14, vyzná tým, že selén je zvolený zo skupiny zahrnujúcej seleničitan a metylselinát.

    24. Spôsob podlá nároku 14, vyznačujúci sa t ý m, že humánne ochorenie je zvolené zo skupiny zahrnujúcej neoplastické ochorenia, zápalové ochorenia, infekčné ochorenia, kardiovaskulárne choroby, degeneratívne ochorenia, neurologické ochorenia a ochorenia autoimunity.

    25. Spôsob liečenia neoplastických ochorení súvisiacich s nadmernou degradáciou extracelulárneho matrixu, vyznačujúci sa tým, že zahrnuje podávanie účinného množstva kompozície obsahujúcej kauechinovú zlúčeninu, antioxidant, prolín a lyzín.

    26. Spôsob tým, že epikatechiny, techin-galát.

    podlá nároku 25, v katechín je zvolený epigalokatechin, epikatechíngalát y z n a č u zo skupiny ú c i sa zahrnuj úcej a epigaloka27 .

    podľa m,

    Spôsob , že katechínom nároku 25, v y z n a č u je epigalo-katechíngalát.

    nároku

    Spôsob podľa m, že antioxidant je t ý kyselinu askorbovú, glutatión, kyselinu a karnitín.

    zvolený tokoferoly, alfa-lipoovú,

    25, v y z n a č u zo skupiny tokotrienoly, ubichinoly, ú c i sa zahrnujúcej karotinoidy, bioflavcnoidy

    29 . Spôsob podľa nároku 25, vyznačuj ú c i s a t ý m, že antioxidantom je kyselina askorbová. 30. Spôsob podľa nároku 25, vyznačuj ú c i s a t ý m, že kyselina askorbová ďalej zahrnuje prekurzory askorbátu, metabolity askorbátu a askorbátovú soľ.

    31. Spôsob podľa nároku 25, vyznačujúcisa tým, že anrioxidant ďalej zahrnuje je kyselinu listovú.

    32. Spôsob podľa nároku 31, vyznačujúcisa t ý m, že kyselinou listovou je folát.

    33. Spôsob podľa nároku 25, vyznačujúcisa tým, že kompozícia ďalej zahrnuje selén.

    34. Spôsob podľa nároku 33, vyznačujúcisa tým, že selén je zvolený zo skupiny zahrnujúcej seleničitan a metylselinát.

    35. Farmakologický prípravok podľa nároku 1.

    36. Farmaceutický prípravok/prípravky podľa nároku 1, vyznačujúci satým, že farmakologický prípravok sa používa na orálne podávanie alebo na topickú aplikáciu.