SE466203B - Estrar foer framstaellning av en beta-laktamas-inhibitor - Google Patents

Description

466 203 2 Fdreningen med strukturen s a S a¿N.__å__š °H2°1 (IH: //' ä.

Q CCXDH avsiöjas i de amerikanska patentskrifterna 3 954 732, 3 989 685, 3 993 646, 4 009 159 och 4 036 847.

Den amerikanska patentskriften 4 155 912 beskriver 2-penem-3-karboxy1syra- föreningar med formeïn Ffs/ “B 4-N CCKDH' och estrar och salter därav; se även Farmdoc 8209UA, T0336B och 44337BJ Föreningen (med beteckningen CP-45899) med strukturen coon är en irreversibeït -verkande beta-laktamasinhibitor med utmärkt stabiiitet i ïösning. Den har svag antibakterieii aktivitet och potentierar aktivi- teten in vitro och in vivo av ampiciiïin med avseende på beta-1aktamas- producerande stammar [Ã.R. English §§_al: Antimicrobiaï Agents and Che- motherapy_lfi (1978)'414-419; Aswapokee gt_al.: J. Antibiotics §l1l§l De. 1978) 1238-1244; Derwent's Farmdoc Abstracts 89627A och 7386657. 466 2Û3 Av B. Ba1tzer et a1.: Mutua1 Pro Drugs of beta-Lactam Antibiotics and beta-Lactamase Inhibitors, J. Antibiotics, 33(10) (1980) 1183-1192 av- s1öjas att principen att kombinera beta-laktamantibiotika med en beta- -1aktamasinhibitor i en enda mo1eky1, som tjänar som pro1äkemede1 för de två aktiva komponenterna, kan âskâd1iggöras av de nedan angivna kopp1ade -estrarna 3 och 4, i vi1ka ampici11in respektive meci11inam är kombinera- 'de med beta-1aktamasinhibitorn penici11ansyrasu1fon. Författarna visar 'att dessa estrar hos människa absorberas utomordent1igt vä1 från mag- -tarmkana1en och efter absorption hydro1yseras under samtidigt frigöran- de av de aktiva komponenterna. Som en fö1jd härav uppnås höga b1od- och *vävnadsnivåer av antibiotikum och beta-1aktamasinhibitor i ett baianse- rat förhå11ande. Förde1arna med “mutua1 pro-drugs" jämfört med enk1a kom- binationer diskuteras.

Ovan angivna estrar 3 och 4 har strukturform1erna ©- fïï, ' “co cH-co-Nim o NH ä Ek, o N ._ 0 , ° o o * f _ o Rs? q /l/ í/ ~ /f- ' -co -o -n-]_ o GÅ co- I GB 2 044 255 pub1icerad den 15 oktober 1980 avs1öjas de hitinti11s okän- da föreningarna med den a11männa formeln 1: H Rl-cH-co-Nak; .

RQ . di 466 205 4 vari R] betecknar fenyl, 4-hydroxifenyl, 1,4-cyklohexadienyl eller 3-tien- yl, R2 betecknar en primär amino- eller en karboxigrupp, R3 betecknar en väteatom eller lägre alkyl, aryl eller aralkyl och A betecknar en beta- -laktamasinhibitorgrupp innehållande en beta-laktamring liksom en karb- oxigrupp, varvid A är bunden till resten av molekylen via karboxigruppen.

De nya föreningarna är användbara vid behandling av bakterieinfektioner och är i synnerhet kraftigt aktiva gentemot beta-laktamasproducerande bakterier. Se även Farmdoc 6D773C och 607766.

Föreliggande uppfinning tillhandahåller följaktligen syran med formeln O. \\ 4* 0 a ; \\s cnzcl s ' 11,, I I CH3 öâF__N_ Éoon och farmaceutiskt"godtagbara-salter“och”TätthydroTyserade“estrar"avinämndaIa syra.

De farmaceutiskt godtagbara salter som kommer ifråga i föreliggande samman- hang inkluderar ogiftiga metallsalter såsom salter av natrium, kalium, kal- cium och magnesium, ammoniumsalter och substituerade ammoniumsalter, ex- empelvis salter av sådana ogiftiga aminer som trialkylaminer (exempelvis trietylamin), prokain, dibensylamin, N-bensyl-beta-fenetylamin, l-efen- amin, N,N'-dibensyl-etylendiamin, dehydroabietylamin, N,N'-bis(dehydroabi- etyl)etylendiamin, N-(lägre alkyl)piperidin (exempelvis N-etylpiperidin) och andra aminer, som tidigare har använts för framställning av farmaceu- tiskt godtagbara salter av penicilliner och cefalosporiner. De mest fö- redragna salterna är alkalimetallsalterna, dvs. natrium- och kaliumsal- terna, och ammoniumsaltet.

Med "lätthydrolyserade estrar" avses i föreliggande sammanhang sådana far- maceutiskt godtagbara estrar som är kända inom tekniken atthydrolyseras s 466 203 till den fria syraformen in vivo. Exempel på lämpliga lätthydrolyserade estrar innefattar fenacyl, acetoximetyl, pivaloyloximetyl, alfa-acetoxi- etyl, alfa-acetoxibensyl, alfa-pivaloyloxietyl, ftalidyl(3-ftalidyl), in- danyl(5-indanyl), metoximetyl, bensoyloximetyl, alfa-etylbutyryloxi- metyl, propionyloximetyl, valeryloximetyl, isobutyryloximetyl, 6-LKR)-2- amino-2-fenylacetamidd7-3,3-dimetyl-7-oxo-4-tia-l-azabicykloA3.2.Q7hep- tan-2-karbonyloximetyl och 6-LKR)-2-amino-2-p-hydroxifenylacetamiddf- -3,3-dimetyl-7-oxo-4-tia-1-azabicyklo13.2.Q]heptan-2-karbonyloximetyl.

De föredragna estrarna är acetoximetyl, pivaloyloximetyl, metoximetyl, ftalidyl, 5-indanyl, 6-LR)-2-amino-2-fenylacetamid§7-3,3-dimetyl-7-oxo- -4-tia-l-azabicykloL3.2.Qïheptan-2-karbonyloximetyl och 6-[1R)-2-amino- -2-p-hydroxifenylacetamidQ7-3,3-dimetyl-7-oxo-4-tia-l-azabicyklo[3.2.Q7- heptan-2-karbonyloximetyl.

Vidare tillhandahålls enligt föreliggande uppfinning ett förfarande för framställning av syran med formeln ffgfëlfl eller ett farmaceutiskt godtagbart salt eller en lätthydrolyserad ester därav, varvid förfarandet utmärks av att man a) katalytiskt hydrerar, exempelvis med en ädelmetallkatalysator såsom pal- ladium, en ester med formeln i cxazcl .BI-bh . ï fil; u _A- Ä-N ' of - ”coz al vari R] är bensyl eller substituerad bensyl och därefter b) oxiderar den hydrerade produkten för framställning av den önskade 466 203 6 syran eller saltet därav och därefter om så önskas c) förestrar syran eller saltet därav för framställning av en lätt- hydrolyserad ester av syran.

Föreliggande uppfinning tillhandahåller vidare ett förfarande för fram- ställning av syran med formeln o o \s/ cnzcl I “C33 ' _14 ' z? ÉooH eller ett farmaceutiskt godtagbart salt eller en lätthydrolyserad ester därav, varvid förfarandet utmärks av att man a) oxiderar, exempelvis med KMn04, H202 eller liknande peroxid eller per- syra, en ester med formeln 0 .i I I", r-N 0 ä-0CHéCC13 för framställning av en estersulfoxid med formeln 0 0 Bra 7 466 zoa och därefter b) omsätter estersulfoxiden med en metall i syra, såsom med zink i isät- tika, för framställning av den önskade syran eller saltet därav och där- efter, om så önskas ic) förestrar syran eller saltet därav för framställning av en lätthydroly- 'serad ester av syran.

Man kan använda en varierande mångfald av oxidanter, som är kända inom .tekniken för oxidation av sulfider till sulfoner. Speciellt lämpliga rea- gens är emellertid alkalimetallpermanganater, exempelvis kaliumpermanga- nat, och organiska persyror, exempelvis 3-klorperbensoesyra.

Speciellt användbara skyddsgrupper för substituenten R] är bensylgruppen och substituerade bensylgrupper, speciellt 4-nitrobensyl. Bensylgruppen och substituerade bensylgrupper kan bekvämt avlägsnas genom katalytisk hydrering. I detta fall omrörs eller skakas en lösning i ett inert lös- ningsmedel av föreningen med fonneln A ovan,,vari R] ärabenSyIfel1ir,sub~a¿ stituerad bensyl, under en atmosfär av väte eller väte blandat med"ett " inert utspädningsmedel såsom kväve eller argon i närvaro av en kataly- tisk mängd av en hydreringskatalysator. Lämpliga lösningsmedel för denna hydrering är lägre alkanoler såsomlmáanol, etrar såsom tetrahydrofuran och dioxan, lågmolekylära estrar såsom etylacetat och butylacetat, vat- ten och blandningar av dessa lösningsmedel. Det är emellertid vanligt att välja betingelser under vilka utgângsmaterialet är lösligt. Hydreringen utförs vanligtvis vid en temperatur inom intervallet 0-60°C och vid ett tryck av l-l0D kg/cmz. De vid denna hydreringsreaktion använda katalysa- torerna tillhör den typ av medel som är kända inom tekniken för denna typ av reaktion och lämpliga exempel är ädelmetaller såsom nickel, palladium, platina och rodium. Katalysatorn är vanligtvis närvarande i en mängd av 0,0l-2,5 vikt% och företrädesvis 0,l-l,0 vikt%, räknat pâ föreningen med formeln A. Det är ofta lämpligt att suspendera katalysatorn på en inert bärare; en speciellt lämplig katalysator är palladium avsatt på en inert bärare såsom kol. Dessutom är det vanligt att buffra reaktonsblandningen i syfte att arbeta vid ett pH inom intervallet 4-9 och företrädesvis 6-8.

Borat- och fosfatbuffertar används vanligen. Reaktionen tar normalt ca. 456 203 l time.

Enligt uppfinningen tillhandahålls vidare estrar med formeln c R-QoH-co ma... S Fä N22 I "C153 f _ I .0/ l'”c=o o o I _ é _ Q s* cnzcl (I) I, ' _ | . I fç eng 4""*- zíä I .o c----o II , o varxïR-ä-r' O .<:',f H2 enar 31 där R] är väte eller hydroxi och Rz är väte, hydr- oxi, metyl, metoxi eller klor.

Uppfinningen avser företrädesvis estrarna med formeln 9 466 203 m2 ¿,__N___'.,,l H3 0 " c=o I l 'ff C CH2 ár-'èlf . 1,, fi; I o - f; 0 och med formeln och även ett förfarande för framställning av en dylik ester, vilket förfa- rande utmärks av att man med syra behandlar en lösning av en förening med formeln 'lf 0 C 0 || Û RNRWÖQÉ. Q: G, ES¶ Il eller _ H , där R4 är väte eller hydroxi och R5 är väte, R. hydroxi, metylg metoxiieïlérflklorš ocfi“vari*REräF“äTKyT; araTkyl*eTler*ar- yl, R2 är väte, alkyl, aralkyl eller aryl och R3 är alkyl, aralkyl, aryl, alkoxi, aralkoxi, aryloxi eller Rll -Nv“' \R5 där R4 och R5 vardera är väte, alkyl, aralkyl eller aryl eller tillsammans med kväveatomen betecknar piperidino eller morfolino, varvid behandlingen med syran företrädesvis utförs i ett organiskt lösningsmedel såsom aceton eller kloroform eller i vattenlösning eller partiell vattenlösning och företrädesvis mellan pH l och pH 5 vid rumstemperatur.

Det är vidare föredraget att i den aminoskyddande gruppen R] är metyl, R2 är väte och R3 är metoxi, etoxi eller metyl; detta kräver användning- en av metylacetoacetat, etylacetoacetat eller acetylaceton.

Vid avlägsnande av alfa-amino-skyddsgruppen är det föredraget att man an- n 466 2Û3 vänder en stark mineralsyra såsom klorvätesyra eller att man använder myrsyra.

Föreliggande uppfinning tillhandahåller även som nya mellanprodukter est- rar med formeln S C82Cl ff, 3 :f "01 äs. vari R är bensyl eller substituerad bensyl, företrädesvis p-nitrobensyl, och ett förfarande för framställning därav, vilket förfarande utmärks av att man upphettar, företrädesvis under återflöde, en förening med fonneln B _ 0 Bmx, -E f-N-v / 'i ink 0/ . *g-g3,, _» 0 vari R är bensyl eller substituerad bensyl och företrädesvis p-nitrobensyl, i ett inert, vattenfritt organiskt lösningsmedel, företrädesvis dioxan, i närvaro av stora och företrädesvis ekvimolära mängder av en svag tertiär amin, företrädesvis kinolin, och en syraklorid, företrädesvis bensoylklo- rid, till dess reaktionen i huvudsak har fullbordats.

Vidare tillhandahållas enligt uppfinningen såsom nya mellanprodukter est- rar med formeln ~ ; a 0 vari R är bensyl eller substituerad bensyl, företrädesvis p-nitrobensyl, 466 203 12 och ett förfarande för framställning därav, vilket förfarande utmärks av att man oxiderar en lösning i ett inert lösningsmedel, företrädesvis met- ylenklorid, av en förening med formeln Br, S °H2c1 I I /l 'll /r- N ff ° eo on u' o vari R är bensyl eller substituerad bensyl, företrädesvis p-nitrobensyl, vid ungefärligen rumstemperatur genom användning av en persyra, företrä- desvis m-klorperoxibensoesyra.

Föreliggande uppfinning tillhandahåller också som ny mellanprodukt estern med fonneln och ett förfarande för framställning därav, vilket förfarande utmärks av att man oxiderar en lösning i ett inert lösningsmedel, företrädesvis met- ylenklorid, av en förening med formeln Jr I 2 caecl ' fo, ;S :Z Icflš 4 o ä.. ocnzcclj vid ungefärligen rumstemperatur genom användning av ett oxidationsmedel såsom KMn04, H202 eller liknande peroxid eller företrädesvis en persyra, i synnerhet m-klorperoxibensoesyra.

B 466 203 Uppfinníngen âskádïiggörs närmare medelst föïjande utföringsexempeï, vari temperaturerna avser Ceïsiusgrader. "Skelïysoïve B" är en petroïeumeter- fraktion med kokpunkten 60-68°C, viïken i huvudsak består av n-hexan.

Exemgeï 1 Framstäïïning av kaïium-2beta-klormetyï-2a1fa-metylpenam-3a1fa-karboxy1at- suïfon §BL-P2013) |»-. |aa BI' å' efnuïš Qåï i àíf as? få 'à [W o \ o i CHZCI mo \s7 cazcl 'ff 4 š r-“I *fen Ye 3 Ä I 3 N _ N 2025 0/ /l/'cozx (BL-PZOI3) 466 203 M 6alfa-brompenicillansyra-S-sulfoxid (ll 37,5 mmol 6alfa-brompenicillansyra-N,N'-dibensyletylendiaminsalt LG. Cignarella et al.: J.0rg.Chem. gl (1962) 2668 och E. Evrard: Na- ture _2_0_l_ (l964flll24 upplöstes i 330 ml metylenklorid. Blandningen omrördes och kyldes till 0°C. Därefter tillsattes långsamt l3 ml (l56 mmol) koncentrerad klorvätesyra till metylenkloridlösningen. Dibensyl- etylendiamin.HCl-saltet(DBED;HCl) utfälldes inom en minut. Den erhåll- na uppslamningen omrördes l0 minuter vid 0-5°C.

För att avlägsna DBED-HCl-fällningen filtrerades blandningen genom ett diatomacêjordfilter ("Dicalite") och filterkakan tvättades med l50 ml metylenklorid. (Filtreringen bör fullbordas så snabbt som möjligt och man bör undvika att ha den sura metylenkloridlösningen stående under en längre tid. Vissa filtreringsproblem kan uppkomma till följd av fällning- ens finhet, varför tillsats av filterhjälpmedel till uppslamningen kan vara till hjälp).

Det:kombinerade.metylenklonidfiiitratetutvättadesrmedäñfifimfifkaältflvatfiemwf* under 5 minuters omröring; varefter vattenfasenikasserades.iTvättvätškans pH-värde var 2,0-2,3. Metylenkloridlösningen innehållande 6alfa-brompeni- cillansyra koncentrerades under reducerat tryck till en volym av 65-80 ml.

Lösningen kyldes under omröring till 5°C.

Under kraftig omröring tillsattes försiktigt l3 ml (86,9 mmol) 40%-ig per- ättiksyra under 30 minuter. Reaktionen var exotermisk och temperaturen hölls mellan l5 och l8°C med hjälp av isbadskylning. Sulfoxiden började utkristallisera efter det att 10 ml perättiksyra hade tillsatts. Uppslam- ningen kyldes under omröring till 0-5° under 2 timmar.

Uppslamningen filtrerades och den snövita filterkakan tvättades på följan- de sätt: l0 ml vatten med temperaturen 5°, därefter l0 ml metylenklorid med temperaturen 0-50 och slutligen l5 ml heptan.

Filterkakan torkades i en ugn vid temperaturen 45° till konstant vikt, vilket tog 6-l0 timmar. (Alltför långvarig torkning kan framkalla spår ,5 466 203 av en ljusröd färg). Mängden av produkt l var l6,26 g och utbytet 73,241.

Reaktionsblandningen och slutprodukten kunde övervakas medelst tunnskikts- kromatografi under användning av lösningsmedelssystemen l5 delar toluen/ 4 delar aceton/ldel ättiksyra eller 8 delar aceton/8 delar metanol/3 de- lar toluen/l del ättiksyra. Slutprodukten analyserades medelst NHR och IR. g;nitrobensyl-6alfa-brompenicillanat-S-sulfoxid (2).

Till en lösning av 12 g (0,04 mol) 6alfa-brompenicillansyra-S-sulfoxid i l00 ml aceton sattes 7,5 g (0,04l mol) kalium-2-etylhexanoat.Saltet till- varatogs genom filtrering, tvättades med kall aceton och lufttorkades för erhållande av totalt l0 g. Det kristallina kaliumsaltet upplöstes i 75 ml dimetylacetamid och 7,8 g (0,04 mol) p-nitrobensylbromid tillsattes. Lös- ningen omrördes 24 timmar vid 23°. Blandningen späddes med 500 ml vatten och extraherades med etylacetat. Etylacetatskiktet tvättades 4 gånger med vatten och torkades över vattenfritt magnesiumsulfat. Lösningsmedlet in- dunstades vid 35° (15 mm) till en olja, som kristalliserade. De ljusbruna kristalJerna av produkten 2 uppslammades med eterwoch ti1lvanatosngenong@.;, filtrering~ifett utbyte av«9 g (70%) och med"smältpunkten~l24-T25°”(sön-A derdelning).

Analys Ber. för C]5H]5BrN206S: C 41,98 H 3,05 N 6,52 Funnet: C 42,00 H 3,48 N 6,98 IR(KBr): l800(s), l740(s), l6l0(w), lS20(s), l450(m), l350(s), l060(m), 740(m) cm_]. H-NMR (60 mHz, DMSO): ¿§ 1,22 (s,3H), l,6 (s,3H), 4,67 (S, lH), 5,2 (d,Jnfl-5 Hz,lH), 5,45 (s,2H), 5,68 (d, Jfvl-5 Hz,lH), 7,5-8,5 (m,4H). g;nitrobensyl-2beta-klormetyl-Zalfa-metyl-6-brompenam-3alfa-karboxylat (§) En lösning av 5 g (0,0l2 mol) p-nitrobensyl-6alfa-brompenicillanat-S- -sulfoxid (2) i l20 ml vattenfri dioxan återloppskokades 4 timmar under kväve med 1,5 g (0,0l2 mol) kinolin och l,6 g (0,0l2 mol) bensoylklorid.

Lösningen späddes med 600 ml vatten och extraherades med etylacetat. Et- ylacetatextraktet tvättades med en 5%-ig natriumbikarbonatlösning, en 466 203 ' W %-ig fosforsyra1ösning och s1ut1igen med vatten. Det organiska skiktet torkades över vattenfritt magnesiumsulfat och indunstades ti11 en o1ja vid 35° (15 mn). 0Tjan kristalliserade och ti11varatogs, tvättades med eter och s1ut1igen med ka11 to1uen, varvid man erhö11 3,5 g av produkten 3 (ssz) med smäifpunkten iso-1ss° (sanderaeining).

Ana1Xs Ber. för C15H15C1BrN205S: C 40,06, H 3,14 N 6,23 Funnet: “ C 40,19 H 3,12 N 6,75 1R(kßr)= i792(s), 174o(s), 1e1o(w), 1520(s), 1ssa(s), 1zso(m), 1o2s(w), 99o(w), 7so(w) cm'1, NMR (so mHz, nMso)= di 1,45 (s,3H), 3,5-4,3 (m,2H), s,os (s,1H), 5,42 (s,2H), s,s(d,a-1,5 Hz,1H), 5,62 (d,a««i,s Hz,1H), 7,s-s,s (m,4H). p-nitrobensy1-Zbeta-k1ormety1-2a1fa-mety1penam-6a1fa-karboxy1atsu1foxid (i) En 1ösníng._ av.. 1» g. 0902241101).._p-nfigtrobensylàhetawktlometyl-Zalía-metgglf- -6a1fa-brompenam-3aTfa-karboxyïat (3ï,suppIö§tfiæ50*müämetylenkloridy' t " omrördes med 473 mg (0,0022 mo1) m-k1orperoxibensoesyra. Lösningen om- rördes 3 timmar vid 230. Mety1enk1oriden indunstades ti11 20 m1 vid 15 mm och 33° och den koncentrerade 1ösningen späddes med 50 m1 “Ske11yso1ve B".

Lösningsmed1et dekanterades och återstoden upps1ammades med eter, varvid produkten 4 snart krista11iserade i ett utbyte av 250 mg (24%) med smä1t- punkten 136-1370 (sönderde1ning).

Ana1ys Ber. för C15H]4BrC1N206S: C 38,68 H 3,02 N 6,02 Funnet: C 39,14 H 3,13 N 5,96 IR(KBr): 1800(s), 1760(s), 1520(s), 1350(s), 1200(s), 1050(m), 830(w), 740(w) cmJ. H-NMR (60 mHz, DMSO): d' 1,32 (s,3H), 3-8-4,5 (m,2H), 4,97 (s,1H), 5,25 (d,J~1,5 Hz,1H), 5,45 (s,2H), 5,6 (d,J~1,5 Hz,1H), 7,8-8,5 (m,4H). _. f. I U 466 203 Kalium-Zbeta-klonnetyl-Zalfa-metylpenam-3alfa-karboxylatsulfon (§) BL-Pzors) Till en lösning av 7 g (0,0l5 mol) p-nitrobensyl-2beta-klormetyl-2alfa- -metyl-6alfa-brompenam-3alfa-karboxylatsulfoxid (4) i l5Q ml etylacetat sattes en suspension av 4 g 30% palladium på diatomacëjord ("Celite") och 2,8 g natriumbikarbonat i l50 ml vatten. Blandningen hydrerades 3 'timmar vid ett tryck av 3,5 kg/cmz. Katalysatorn avlägsnades genom fil- trering och vattenskiktet avskiljdes och behandlades med l,5 g kaliumper- manganat i 50 ml vatten. Blandningen omrördes l timme och 250 mg natri- -umbisulfit tillsattes. Blandningen filtrerades och filtratet inställ- des på pH 2 med koncentrerad klorvätesyra. Lösningen lyofiliserades för erhållande av ett vitt amorft pulver. Det fasta materialet extraherades med etylacetat, indunstades till en volym av 20 ml och späddes med 100 ml "Skellysolve B". Vit, hygroskopisk, fast 2beta-klormetyl-2alfa-metyl- penam-3alfa-karboxylsyrasulfon tillvaratogs. Syran upplöstes i aceton och behandlades med fast kalium-2-etylhexanoat. Ett kristallint vitt salt utföll och efter filtrering erhölls l70 mg av produkten 5 med en smält- punkf«aversr1ganae«14o9»çsanaerde1n1ng;,.

Anal vs Ber. för C8H7ClKN05S-2H20: C 28,27 H 3,24 N 4,12 Funnet: C 28,27 H 3,69 N 3,84 IR(KBr): l790(s), l770(m), l620(s), l460(m), l370(s), l3l0(s), l200(s), ll40(s), 955(m), 740(m) cm'], H-NMR (l0O mHz, D20): 8' l,68(s,3H), 3,2- -3,9 (m,J~2 Hz, J~4 Hz, J~6 Hz,2H), 4,0-4,4 (m,2H), 4,3 (s,lH), 5,02 (d d, J~4 Hz), JN2 Hz,lH).

Exempel 2 Pivaloyloximetyl-2beta-klormetyl-2alfa-metylpenam-3alfa-karboxylatsulfon 2beta-klormetyl-2alfa-metylpenam-3alfa-karboxylsyrasulfon i dimetylform- amid behandlades med en ekvivalent trietylamin och omrördes för att åstad- komma upplösning.Brommetylpivalat (l ekvivalent) i dimetylformamid till- sattes därefter. Den erhållna blandningen omrördes vid rumstemperatur.

Blandningen klarades därefter genom filtrering och filtratet hälldes i 466 205 18 isvatten. Det avskiljda fasta materialet tillvaratogs genom filtrering, tvättades med vatten och torkades för erhållande av den i rubriken angiv- na estern.

Respektive acetoximetyl-, metoximetyl-, acetonyl- och fenacylestrar av sanna syra framställdes genom att man vid förfarandet ovan ersatte det däri använda brommetylpivalatet med en ekvimolär mängd klormetylacetat, klormetylmetyleter, kloraceton respektive fenacylbromid.

Exempel 3 Pivaloyloximetyl-Zbeta-klormetyl-Zalfa-metylpenam-3alfa-karboxylatsulfon (Lï-išß) Q O \\s// C33 \\\\\ o CH C1 ' _ "_ aceton (306) -_ 0 CO2°K (BL~P20l3)1 Q\ 0 CH _12$”\~° 3 låF___ 42. CHZCI O l 0 cozcaz-o-å-c (css) 3 (BL-P2024) .

Till en omrörd suspension av l4,6 g (0,0487 mol) av föreningen BL-P20l3 (§) i 200 ml aceton sattes 4 ml av en l0%-ig vattenlösning av natriumjo- did och blandningen bringades att âterloppskoka på ångbad. Till den åter- loppskokande suspensionen sattes l4,8 ml (0,l mol) omdestillerat klormet- ylpivalat (kokpunkt 34° vid 7 mm Hg) i en portion. Blandningen omrördes vid återflöde under 3 timmar och kyldes därefter till rumstemperatur (22°). Det kristallina fasta materialet tillvaratogs genom filtrering och tvättades med 3 x 30 ml aceton och de kombinerade filtraten indunstades till en olja i vakuum vid en temperatur under 22°. Oljan upptogs därefter i 500 ml etylacetat och tvättades en gång med 200 ml vatten och en gång W 466 203 med en mättad natriumsulfatlösning under omröring med 2 g avfärgande kol och under kylning (isbad). Efter 20 minuter sugfiltrerades blandningen genom en diatomacëjorddyna (“Dicalite“) och dynan tvättades med 4 x 100 ml etylacetat. De kombinerade filtraten koncentrerades i vakuum vid 22° till en olja. Oljan koncentrerades därefter ytterligare vid ca 22° och vid ett tryck understigande l mm Hg för avlägsnande av merparten av det resterande klormetylpivalatet. Den kvarvarande oljan triturerades däref- ter två gånger med 50-ml-portioner av n-pentan och fick därefter stå över veckoslutet i kylrum (ca lD°) under n-pentan. Den fasta kristallina mas- san sönderdelades därefter till ett fast pulver under 40 ml av en 4:l- -blandning av eter-n-pentan. Produkten tillvaratogs genom filtrering, tvättades med en l:l-blandning av eter och pentan och därefter med pen- tan och lufttorkades. Efter torkning i vakuum under 5 timmar över P205 erhölls l3,37 g pivaloyloximetyl-Zbeta-klormetyl-2alfa-metylpenam-3alfa- -karboxylat-sulfon (ca 75% utbyte) med smältpunkten 93-95°.

Analys Ber. för C]4H20ClN07S: C 44,03 H 5,27 N 3,67 Funnetze C 44,11 H 5,08 , N_3,85. , Exempel 4 Omkristallisation av kalium-2beta-klormetyl-Zalfa-metylpenam-3alfa-karb- oxylat-sulfon (BL-P20l3) Till en blandning av 20 ml n-butanol och l g av föreningen BL-P20l3 (§) sattes vatten, l ml i taget, från en separertratt under omskakning till dess en blekgul lösning erhölls. Den klara lösningen filtrerades genom ett veckat filterpapper och kolven och filterpapperet tvättades med ca. l0 ml av en 9:l-blandning av n-butanol och vatten och de kombinerade fil- traten späddes med ytterligare 20 ml n-butanol. Den erhållna lösningen infördes i en rundbottnad kolv i en rotationsförängare och indunstades under reducerat tryck till ungefär halva den ursprungliga volymen. Den snövita kristallina produkten tillvaratogs genom filtrering, tvättades med 6 x 10 ml aceton och lufttorkades. Utbyte 8l0 mg. Efter vakuumtork- ning 6 timmar över P205 vid ett tryck understigande l mm Hg erhölls 800 mg produkt med smältpunkten 2l5° (sönderdelning), vilket motsvarade 466 203 2D ett utbyte av 80%.

Anaïvs Ber. för C8H9C1N05SK-1H20: C 29,67 H 3,39 I N 4,63 C1 10,94; K.F.H20, 5,56.

Funnet: C 29,23 H 3,38 N 4,49 C1 10,74; K.F.H20, 5,74.

Detta omkristaïïisationsförfarande gav ett kristallint monohydrat, som skiïjer sig från utgångsmaterialet, vilket var i huvudsak vattenfritt.

Exemgeï 5 3 'å cH3o-c-c1 f312 E clcaê-o-c-cl [jag +c1so H i > 3 __ 6:a o, se chemim Abstract; _21, 2427' och _22, 3828 sam es 299064. å * Öí-'H-w-NH g3C"“c,fNÉ~. _ l! EK \\ c f m; |\o OO! um m 466 203 6 clsozcngcl (_) NaI aceton Që 49 HÉCI ff 0 g-øcag: Ou- [03 S C II//lc l/l, COOK (ILS. 3:3l6,2ll7) 466 203 _ 22 c cH-co_.m; S H3 I __\l"" N "ß Ha 0033 o 22 o -o §s4 cngcl I 1,033 IC o/'J -'@..____0 Il o I HI “s 03-- .__ S *CO NH,..__T4 ”oc N I ¿... “ß *N32 'o° "'c-o . *ï ' o AE °§ 1/0 c c1 *s H2 - 1 kan C åp-N x, 3 I Il 23 466 203 En lösning av 0,115 mol klormetylklorsulfat i 40 ml diklormetan sattes droppvis, under det att reaktionstemperaturen hölls under 30°, till en lösning av 0,1 mol av förening 5, 0,3 mol kaliumbikarbonat och 0,01 mol tetrabutylammoniumvätesulfat i 200 ml av en 1:1-blandning av diklormetan och vatten. Vid slutet av tillsatsen omrördes blandningen vid rumstempe- ratur 30 minuter, den organiska fasen avskiljdes och vattenfasen extrahe- rades med 50 ml diklormetan. De kombinerade organiska faserna torkades över natriumsulfat och indunstades till vakuum för erhållande av en åter- stod, som upplöstes i 150 ml eter. Olösligt material avfiltrerades efter tillsats av diatomacëjord och filtratet indunstades i vakuum för erhål- lande av förening 7. b) Till en suspension av 1,5 g av förening 5 i 12 ml dimetylformamid sat- tes 1,6 g bisklormetylsulfat och blandningen omrördes vid rumstemperatur under 45 minuter. Efter spädning med 50 ml etylacetat tvättades blandning- en med vatten och därefter med en vattenlösning av natriumbikarbonat, tor- kades och indunstades i vakuum för erhållande av förening 7 som en olja. c) Till en lösning_av 0,005 mol av förening 5 i 7,5 nl dinetylformamid, sattes 0,007 mol trietylamin och 0,030 mol klorjodmetän'och~bTandningen*> i omrördes 4 timmar vid rumstemperatur. Efter spädning med 30 ml etylacetat tvättades blandningen med 3 x 10 ml vatten, följt av 5 ml av en mättad vattenlösning av natriumklorid, torkades och indunstades i vakuum för er- hållande av förening 7 som en olja. d) Till en blandning av 0,15 mol av förening 5, 0,15 mol silvernitrat och 7,5 g silveroxid i 750 ml acetonitril sattes 1,5 mol klorjodmetan. Efter omröring 48 timmar vid rumstemperatur avfiltrerades silversalterna och filtratet indunstades till torrhet i vakuum. Aterstoden upplöstes i 200 ml etylacetat och lösningen tvättades med en mättad vattenlösning av na- triumklorid, filtrerades, torkades och indunstades i vakuum för erhållan- de av förening 7.

Förening 7 och andra mellanprodukter och slutprodukter enligt föreliggande uppfinning renas om så önskas medelst kolonnkromatografering, såsom på "Sephadex“ LH 20 under användning av en 65:35-blandning av kloroform och 466 205 M hexan som e1ueringsmede1, e11er genom kise1ge1kromatografering, exem- pe1vis under användning av Ma11inckrodt CC-7 och en 3:2-b1andning av hexan och ety1acetat, en 8:2-, 7:3-, 1:9- e11er 15:85-blandning av ety1- acetat och petro1eumeter, en 4:6- e11er 3:1-blandning av etylacetat och n-hexan, en 3:1-, 1:1- e11er 1:4-b1andning av hexan och ety1acetat e1- 1er en 1:1-b1andning av cyk1ohexan och ety1acetat.

Tunnskiktskromatografi är även användbar. "Sephadex" är förnätad dextran- -2-(diety1amino)-ety1-2-[Z2-(diety1amino)etylïdiety1aminq7ety1eterk1orid- hydrok1oridepik1orhydrin (se Merck Index, 9:e upplagan, nr 7337).

En 1ösning av 0.2 mo1 av förening 7 och 0,3 mo1 natriumjodid i 150 m1 aceton omrördes 18 timmar vid rumstemperatur. Den erhå11na suspensio- nen ky1des ti11 ca O° och instä11des på pH 7,2 genom ti11sats av en mät- tad vatten1ösning av natriumbikarbonat under omröring. Efter avfärgning genom titrering med 0,5M av en vatten1ösning av natriumtiosu1fat sattes 150 m1 vatten droppvis ti11 den omrörda b1andningen för utfä11ning av den fasta föreningen 8, som ti11varatogs genom fi1trering, tvättades med 2 x 20 ml av en-1:1-blandning,av_acetonaochevatten.a2axaZflmml.isofi_- propano1 och 2 X 20"m1 eter samt torkadesif Ampici11in omvand1ades ti11 förening 9 genom användning av mety1aceto- acetat vid förfarandet en1igt det amerikanska patentet 3 316 247. Däref- ter sattes ti11 en omrörd 1ösning av 0,57 mo1 av förening 9 i 1 1iter dimety1formamid 0,5 mo1 av förening 8 vid 5°. Efter omröring 15 minuter vid 5° hä11des reaktionsb1andningen på en isky1d b1andning av 4 1iter ety1acetat och 2 1iter av en mättad vatten1ösning av ka1ciumk1orid under' omröring. Det organiska skiktet avski1jdes, tvättades med 2 x 500 m1 av en mättad vatten1ösning av ka1ciumk1orid, fi1trerades och indunstades ti11 ca 1 1iter i vakuum för erhâ11ande av en koncentrerad 1ösning av förening 10. Ti11 detta koncentrat sattes 500 m1 vatten och 500 m1 n- -butano1 och därefter ti11sattes droppvis 4 N k1orvätesyra under omrö- ring ti11 dess den aminoskyddande gruppen hade av1ägsnats för erhâ11ande av en 1ösning av förening 11. Efter fu11bordad ti11sats av syran ti11- sattes 1 1iter eter och 500 m1 vatten ti11 den omrörda b1andningen, vat- tenfasen avski1jdes och den organiska fasen extraherades med 800 m1 vat- ten. De kombinerade vattenextrakten tvättades med 1 1iter eter och där- 466 203 efter tillsattes 640 g natriumklorid och 2 liter diklormetan och bland- ningen omrördes 15 minuter. Den organiska fasen avskiljdes och vattenfa- sen extraherades med l liter diklormetan och de kombinerade organiska ex- trakten torkades över magnesiumsulfat och indunstades till ca 600 ml un- der reducerat tryck för erhållande av en koncentrerad lösning av förening ll. Tillsats till koncentratet av 200 ml 2-butanon, följt av kylning, ut- fällde fast 6-LIR)-2-amino-2-fenylacetamidq]-3,3-dimetyl-7-oxo-4-tia-l-aza- bicyklolß.2.Qlheptan-2-karbonyloximetyl-2beta-klormetyl-2alfa-metylpenam- -3alfa-karboxylatsulfon (ll), som tillvaratogs genom filtrering.

Exempel 6 6-élR)-2-amino-2-p-hydroxifenylacetamid§]-3,3-dimetyl-7-oxo-4-tia-l-aza- bicyklo[3.2.Q7heptan-2-karbonyloximetyl-Zbeta-klormetyl-2-alfa-metylpenam- -3alfa-karboxylat-sulfon med formeln Ho-Ö- cH-co -NH ._ l A 4 _NH2 ° ___u o* o. framställdes genom att man ersatte ampicillin med amoxicillin vid för- farandet enligt exempel 5. 466 zos - N Exemgeï 7 a> i *a qi Ü* N-bromsuccinimid \ O a-azb-isobutyronitril CClu C *ia C/ E. \ \o I eniighet med amerikanska patentet 3 860 579 återloppskokades 50 g (0,375 moi) omkristailiserad ftalid och 0,375 moi omkristalïiserad N' -bromsuccirnimidf4,.5'.atimær:ï<-i:f.- nämamræv,æaaæmik=:nagï,;-ïæIfa-azobutyronrïatri'Ia 1' i 1 iiter cci4. ßiandningen kyides :iii ca is” acñ fiicrerades för av-* ïägsnande av succinimid, som tvättades med ca 100 ml CC14 och filtrera- des. De kombinerade CC14-faserna koncentrerades i vakuum tili ca 150 m1, varvid man erhöll fast 3-bromftaiid, som tilïvaratogs genom fiïtrering, tvättades med ca 50 m1 C014 och ïufttorkades för erhåïïande av 54 g, viïken produktvikt minskade tili 50 g efter omkristaïlisation ur kokan- de cykionexan. smäitpunkt 84-as°.

CIflBr o' o - \! ca c1 \ 2 _ o I” a ' l+ -r i :H3 a: 12 ær-I-N _ t, . o "_" a c-ox - u ä. ° .

INEF 22' 2; 466 203 o '/o \s/ cnzcl - ”m3 .H -. * fi'°;°H"' / BL-Pzoßó o o o lå Till en omrörd partiell lösning och partiell suspension av 2,3 g (0,0075 moD av förening 5 (BL-P20l3) i 20 ml dimetylformamid (DMF; torkad minst 3 veckor över 3A molekylsil) sattes 1,7 g (0,008 mol) 3-bromftalid (12) och blandningen omrördes 4 timmar vid 220. Den erhållna blandningen häll- des i en blandning av 200 ml iskylt vatten och 200 ml iskyld etylacetat (kolven sköljdes med en liten mängd etylacetat) och blandningen skakades.

Därefter avskiljdes den organiska lösningsmedelsfasen och tvättades med 7 portioner»iskyTtWvatten (JOD ml). Etylacetatfasen tvättades;entgâug§næxL,. en mättad vattenlösning av natriumsulfat, torkades i kyla över natrium- sulfat, filtrerades och indunstades till torrhet i vakuum, varvid man som återstod erhöll en olja, som triturerades tvâ gånger med 25 ml metylcyklo- hexan, tvâ gånger med 25 ml “Skellysolve B" och fyra gånger med 25 ml n- -hexan för erhållande av 2,5 g av förening l3 som ett näranog vitt fast material efter torkning i luft. Denna produkt torkades över P205 vid ett tryck understigande l mm Hg, varvid man erhöll 2,5 g av förening 13 med smältpunkten l04° (sönderdelning). Dess uppskattade renhet var 85-95°.

Analys Ber. för C16H]4ClN07S: C 5l,6l H 3,79 N 3,77 Cl 9,53 Funnet: C 52,59 H 4,67 N 3,21 Cl 7,73; K.F.H2Û, 0,27. 466 203 æ Exemgel 8 Pivaloyloximetyl-2beta-klormetyl-2alfa-metylpenam-3alfa-karboxylat-sulfon En blandning av l g (0,003l mol) kalium-2beta-klormetyl-2alfa-metylpenam- -3alfa-karboxylat-sulfonhydrat och l g 3A molekylsil omrördes i l5 ml di- metylacetamid 2 timmar vid 23°. Till denna blandning sattes 470 mg (0,003l mol) pivaloyloximetylklorid och omröringen fortsattes 18 timmar.

Molekylsilen tillvaratogs och filtratet späddes med l00 ml vatten och ex- traherades med etylacetat. Etylacetatet tvättades nio gånger med vatten och torkades över vattenfritt magneisumsulfat. Lösningsmedlet avlägsnades vid 30° (l5 mm Hg) för erhållande av en olja, som kromatograferades på si- likagel under användning av Silicar CC-7 (8 delar metylenklorid, 2 delar etylacetat), varvid man erhöll en fläck med ett Rf-värde av 0,5. Den er- hållna återstoden kristalliserades ur heptan ("Skellysolve B"), varvid man erhöll l00 mg pivaloyloximetyl-2beta-klormetyl-2alfa-metylpenam-3alfa- -karboxylat-sulfon med smältpunkten 94-950. Éflšllší ~ ~ Ber. : i C 44;031i1H-5;27'i N ¥;67"*' ~' Funnet: C 44,20 H 5,24 N 3,63 NMR- och IR-spektra var i överensstämmelse med strukturen.

Exempel 9 Natrium-2beta-klormetyl-2alfa-metylpenam-3alfa-karboxylat-sulfon Qšyåfi cá.cl H+ Nggg 'q§{íÉQ'CH2Cl F-f ”en _(2_)_> I I I [C33 3 -- N Å* N y Å /léozllla °°2K c8H9c1No5sNa (396) - <289.6v> Till en omrörd lösning av 500 mg av föreningen BL-P20l3 (kaliumsaltet) N 466 203 I i 5 ml vatten och l0 ml etylacetat sattes 2N HCl till dess man erhöll ett pH-värde av l (utfördes i isbad under kraftig omröring). Blandning- en mättades därefter med natriumsulfat, vattenskiktet avskiljdes och den organiska fasen torkades hastigt i is över natriumsulfat, filtrerades och behandlades droppvis med 50%-ig NaEH (natrium-2-etylhexanoat) i vattenfri n-butanol till dess neutral reaktion kunde påvisas med fuktat pH-papper.

Produkten kristalliserade icke vid skrapning och vid koncentrering av blandningen i vakuum erhölls en olja, som upplöstes i 5 ml aceton. Vid skrapning erhölls fortfarande icke några kristaller och-icke heller då eter tillsattes till grumlingspunkten. Koncentrering i vakuum på en rotations- förångare till en olja, som upplöstes i etylacetat, gav icke heller någ- ra kristaller vid skrapning efter tillsats av en droppe vatten. Vid kon- centrering i vakuum och triturering av återstoden med 5 ml n-butanol er- hölls 200 mg av ett amorft vitt pulver, som tvättades med eter, lufttor- kades och vakuumtorkades över P205 24 timmar. Därvid erhölls l80 mg na- trium-2beta-klormetyl-2alfa-metylpenam-3alfa-karboylat-sulfon med en obe- stämd sönderdelningspunkt överstigande l00°.

Analys; _ V Ber; för C8H9CTN05SNa:' C 33,l0“ß H SJT3' N 4;89“»¥ Funnet: C 33,20 H 3,69 N 4,44 K.F.H20, 4,04 Exempel 10 Kalium-Zbeta-klormetyl-2-metylpenam-3-karboxylat-sulfon (BL-P20l3) Till l0 liter vatten, 130 g (l,25 mol) natriumvätekarbonat och 200 g O l0% Pd på bariumsulfat sattes 272 g (0,565 mol) p-nitrobensyl-6alfa-brom- -Zbeta-klormetyl-2-metylpenam-3-karboxylat-sulfon, upplöst i 5 liter etylacetat. Blandningen hydrerades vid 400 och ett tryck av l kg. Efter timmar blev väteupptagningen mycket långsam och 200 g l0% Pd på bari- umsulfat tillsattes, varefter blandningen hydrerades till dess någon yt- terligare väsentlig väteabsorption inte kunde påvisas.

Uppslamningen filtrerades genom en diatomacëjorddyna (“Celite“) och dynan tvättades med vatten, varefter vattenfasen tvättades med 3 liter etylace- 456 203 0* w tat. Ti11 vatteniösningen sattes 3 liter etylacetat och biandningens pH- -värae inscändes pa 1,5 med iso m1 12 N Hci vid io°. nen organiska fa- sen avskiljdes och vattenlösningen mättades med Na2S04'10 H20 och extra- herades med 2 x 1 liter etyïacetat. De kombinerade extrakten torkades med mê9fl8SíUmSU1fflt- Torkmedïet aviägsnades och 260 m1 2 N ka1ium-2-ety1- hexansyra i butanoï tiiïsattes vid 00.

Efter omröring 2 timmar vid 0° tiïivaratogs kalium-2beta-klormetyl-2-met- yïpenam-3-karboxylat-su1fon (BL-P2013) och torkades i vakuum vid rumstem- peratur. Utbyte 134,8 g (ca. 70%).

Exemgei 11 p-nitrobensyï-6a1fa-brompenici1ïamat-suïfoxid o -lär gg ”ff l/ .+ TEA + 131-032 -G-Noz (101) -n-w I/-iiw _. (295) eL;TßS:f Ä"'N e o cozcnz-Q N02 ;n31¿2s) Ti11 200 m1 N,N-dimetylacetamid sattes 44 g (0,148 mol) 6a1fa-brompenici1- ïansyra-suïfoxid, föijt av 20,5 m1 (0,148 mol) trietyiamin och 38,2 g (0,177 moi) p-nitrobensyïbromid. Biandningen omrördes 20 timmar vid 22°. 31 466 203 1 Reaktionsblandningen hälldes i l liter vatten och extraherades med 3 x 300 ml metylenklorid. De kombinerade metylenkloridextrakten tvät- tades med 200 ml av en 5%-ig vattenlösning av natriumbikarbonat och tor- kades över natriumsulfat l/2 timme vid 5°. Lösningen filtrerades och in- dunstades i vakuum till en återstod. Aterstoden späddes med eter och det fasta materialet tillvaratogs genom filtrering, varvid man erhöll 54 g p- -nitrobensyl-6alfa-brompenicillänat-sulfoxid efter torkning i ett utbyte _ av 85%. NMR var i överensstämmelse med strukturen.

Utbytet i detta steg var samma som vid förestring av K-saltet. Fördelen med detta steg är att man icke behöver framställa något K-salt (utbytet i detta steg uppgår till 85-90%).

Exempel l2 p-nitrobensyl-6alfa-brompenicillanat-sulfoxid Till 4,375 liter N,N-dimetylacetamid sattes 873,0 g (2,95 mol) 6alfa-brom- penicillansyra-(S)-sulfoxid och därefter tillsattes,nundenn0mrörifl9,0Cb~ni H under det att den inre temperaturen hölls under 35°; 293 gf(2}95 moi) tri%* ' etylamin följt av 764 g (3,54 mol) p-nitrobensylbromid. Blandningen omrör- des därefter vid rumstemperatur 5 timmar och fick stå över natten.

Reaktionsblandningen hälldes i 20 liter vatten och extraherades med 3 x 7 liter metylenklorid. De kombinerade organiska extrakten tvättades med x 7 liter vatten och därefter med 7 liter av en 5%-ig vattenlösning av natriumbikarbonat och torkades över vattenfritt magnesiumsulfat. Magnesi- umsulfatet avfiltrerades och lösningen indunstades till en kristallin åter- stod; 4 liter dietyleter tillsattes och kristallerna tillvaratogs, varvid man efter torkning vid rumstemperatur erhöll ll7l g (92%) p-nitrobensyl- -Galfa-brompenicillanat-sulfoxid.

Funnet: Br l8,48% (ber. l8,53%); °(D (0,25% Me0H) + 1620. 466 203 32 Exempel l3 _p;nitrobensyl-öalfà-brom-Zbeta-klormetyl-2-metylpenam-3-karboxylat-sulfon Till 16 liter ättiksyra sattes 364,6 g (0,8l2 mol) p-nitrobensyl-6alfa- -brom-Zbeta-klormetyl-2-metylpenam-3-karboxylat. Till den på sä sätt er- hållna och vid rumstemperatur omrörda lösningen sattes droppvis under 3 timmar en lösning av 282 g (l,78 mol) kaliumpermanganat i 26 liter vatten.

Blandningen omrördes därefter vid rumstemperatur under l timme och 37%-ig väteperoxid tillsattes droppvis till dess man erhöll en färglös lösning. liter vatten tillsattes därefter, blandningen omrördes l time vid rums- temperatur och den kristallina fällningen tillvaratogs, tvättades med 3 x liter vatten och med 2 x 2 liter etanol och torkades i vakuum vid rums- temperatur. Utbyte 297 g (76%). an (msz cnzciz) + 7s,9° Exempel l4 St-P20l3 som fri syra;§gfj c cl 11201 ”à H2 H-fpoll- 'IC . - n» 1 H3 --> H; v- f, e e - ,, f! 'C02 x g i fcoga Till en blandning av 25 ml etylacetat och 10 ml vatten sattes 800 mg (0,0026l mol) av föreningen BL-P20l3 som kaliumsaltet. Efter det att allt fast material hade upplösts behandlades blandningen droppvis med en 50%-ig vattenlösning av fosforsyra under kraftig omskakning till dess något yt- terligare material ej utfälldes från vattenskiktet. Etylacetatskiktet av- skiljdes, tvättades därefter med en mättad natriumkloridlösning och torka- des över vattenfritt magnesiumsulfat. Torkmedlet avlägsnades genom filtre- ring och tvättades med lO ml etylacetat. Tvättlösningsmedlet kombinerades med det ursprungliga filtratet. "Skellysolve B" sattes därefter till etyl- 3, 466 203 acetatet till dess grumlingspunkten uppnåddes (ca. l0 ml). Blandningen behandlades med 500 mg aktivt kol ("Darko KB") och filtrerades. Filtra- tet späddes med l5 ml "Skellysolve B" och försattes därefter med grodd- kristaller av föreningen BL-P20l3 i form av den fria syran. Efter ca. 3 timmar vid rumstemperatur tillvaratogs den kristallina fällningen av den fria syran och torkades i vakuum (l5 minuter) över P205, varvid man er- höll 323 mg (46%). Produkten smälte under långsam sönderdelning över ioo°.

Analys Ber. för C8H10C1N05S: C 35,89 H 3,77 N 5,23 Cl 13,25 Funnet: C 35,88 H 3,91 N 5,41 Cl 13,52 Produkten visade sig vara instabil då den förvarades vid 23° under 7 dygn.

Exempel l5 öalfa-brompenicillansyra-sulfoxidfl, f 'BI-lea s _ Bra' S (G6 CHZNHC )2,__, _ \@___ .4CO HÉ Hé > N. a- '. MQOQII W8°°ß4 MV 296,14 Till 3 liter metylenklorid sattes 300 g (0,75 mol) 6alfa-brompenicillansy- ra-N,N'-dibensyletylendiaminsalt och denna suspension kyldes till 5°. Där- efter tillsattes droppvis under l5 minuter och under god omröring l30 ml koncentrerad saltsyra. Blandningen filtrerades därefter via en dyna av di- atomacêjord ("Celite") och fi lterkakan tvättades med 3 x 250 ml metylen- klorid. De kombinerade metylenkloridlösningarna tvättades med 2 x 500 ml vatten och torkades över natriumsulfat under l5 minuter. Natriumsulfatet 466 205 M avlägsnades genom filtrering och filtratet indunstades under reducerat tryck till en volym av ca 750 ml.

Den erhållna lösningen kyldes till 50 och under kraftig omröring tillsattes droppvis l30 ml 40%-ig perättiksyra på ett sådant sätt att temperaturen hölls vid 5-l2°. Reaktionen var kraftigt exotermisk. Mot slutet av till- satsen omrördes uppslamningen 2 timmar vid 5° och produkten tillvaratogs genom filtrering och tvättades med 100 ml kallt vatten (50) och l00 ml kall metylenklorid (5°). Man erhöll l26 g (57%) 6alfa-brompenicillansyra- -sulfoxid med smältpunkten l29°. IR- och NMR-spektra var i överensstäm- melse med strukturen för den önskade produkten.

Analys Ber. för C8H10BrN04S: C 32,44 H 3,40 N 4,73 Funnet: C 32,30 H 3,35 N 4,7l H20, 2.l8 Kalium-6alfa-brompenicillanat-sulfoxid . a - . ' ' __ __¿.~V , f? ' ,-. i , _ _ Bål-y; S _r ; r - i r- ”0023 . wc 021: Mv :zman Till 3 liter aceton sattes l26 g (0,43 mol) 6alfa-brompenicillansyra-sulf- oxid och l62 ml 50%-ig (vikt%) kalium-2-etylhexansyra i n-butanol. Efter omröring l timme vid 220 tillvaratogs produkten genom filtrering, tvätta- des med 2 x 250 ml aceton och torkades. Man erhöll l27 g (90%) kalium- -Galfa-brompenicillanat-sulfoxid med smältpunkten l85°. IR- och NMR-spektra var i överensstämmelse med den önskade strukturen.

Analvs Ber. för C8H9BrKN04S: C 28,75 H 2,71 N 4,l9 Funnet: C 29,03 H 2,78 N 4,04. ß 466 203 ggnitrobensyl-6alfa-brompenicillanat-sulfoxid Br § Br 2 wo '+ I-l 'ÛICQ K v-- o Q 2 y cozc 02 uv 431,28 Till l liter N,N-dimetylacetamid sattes l45 g (0,43 mol) kalium-6alfa- -brompenicillanat-sulfoxid och under omröring tillsattes därefter ll5 g (0,53 mol) p-nitrobensylbromid vid 22°. Blandningen omrördes 20 timmar vid 22°.

Reaktionsblandningen hälldes i 3 liter vatten och extraherades med 3 x l500 ml etylacetat. De kombinerade etylacetatextrakten tvättades med 2 x 500 ml av en 5%-ig vattenlösning av natriumbikarbonat och torkades över natriumsulfat;unden'O,5-timmar; Natriunsuüfatetfavfiltreradesaoch_fo filtratet indunstades under reducerat tryck till en återstod, till"vilken ' l liter dietyleter sattes, vilket fick produkten att kristallisera. Kris- tallerna tillvaratogs genom filtrering, tvättades med 2 x 100 ml dietyl- eter och torkades till ett utbyte av l62 g (87%) p-nitrobensyl-6alfa- -brompenicillanat-sulfoxid med smältpunkten lll°. IR- och NMR-spektra var i överensstämmelse med den önskade strukturen.

Analvs Ber. för C15H16BrN206S: C 41,78 H 3,5l N 6,50 Funnet: C 4l,66 H 3,45 N 6,85 H20, 0.69. p-nitrobensyl-6alfa-brom-2beta-klormetyl-2-metylpenam-3-karboxylat 0 -' . _ Br š ' Br' _ l z \ 4 ”*c F--IW 466 203 % Till l liter p-dioxan sattes 70 g (0,l6 mol) p-nitrobensyl-6alfa-brompeni- cillanat-sulfoxid, följt av 2l,2 ml (0,l0 mol) bensoylklorid och 21,8 ml (0,l9 mol) kinolin. Reaktionsblandningen återloppskokades 4 timmar och kyldes därefter till 22°, hälldes i 2500 ml vatten och extraherades med 3 x 800 ml etylacetat. De kombinerade etylacetatextrakten tvättades med 300 ml av en 5%-ig vattenlösning av natriumbikarbonat, 300 ml av en 5%- -ig vattenlösning av fosforsyra och 300 ml vatten. Etylacetatlösningen torkades över natriumsulfat under 0,5 timmar och natriumsulfatet avlägs- nades genom filtrering. Filtratet indunstades under reducerat tryck till en återstod, som âterupplöstes i l liter etylacetat och ånyo indunstades under reducerat tryck till en återstod. Därefter tillsattes 1 liter di- etyleter och produkten tillvaratogs genom filtrering i ett utbyte av 4l g (57%) p-nitrobensyl-6alfa-brom-2beta-klormetyl-2-metylpenam-3-karboxylat med smältpunkten l32°. IR- och NMR-spektra var i överensstämmelse med den önskade strukturen. 0 Analys Ber. för C15H]4BrClN205S: C 40,06 H 3,l4 N 6,23 Funnet: - - C1-.4!11-,.fi2;~. * p-nitrobensyl-6alfa-brom-Zbeta-klormetyl-2-metylpenam-3-karboxylat-sulfoxid 0 i c 31,; s 3201 Bry' S H2° /I I' II” of' /Éfo c - Ü . f? 2 N02 ' ~ co2GrL¿©_ N02 _ uvllöšfil _ Till l200 ml metylenklorid sattes 51 g (0,ll mol) p-nitrobensyl-6alfa-brom- -2beta-klormetyl-2-metylpenam-3-karboxylat, följt av 23 g (0,l2 mol) m- -klorperoxibensoesyra. Lösningen omrördes 2 timmar vid 22° och indunsta- ' des under reducerat tryck till en fuktig återstod. Aterstoden omrördes med 4 liter dietyleter under l timme och fick stå 20 tünmar vid l0°. Produkten N 466 205 utkristalliserade och tillvaratogs genom filtrering, tvättades med 2 x 200 ml dietyleter och torkades, vilket gav 39 g p-nitrobensyl-Galfa-brom-2beta- -klormetyl-2-metylpenam-3-karboxylat-sulfoxid (75%) med smältpflflktêfl l32°.

IR- och NMR-spektra var i överensstämmelse med den önskade strukturen.

Anal vs Ber. för C]5H14BrClN206S: C 38,69 H 3,03 N 6,07 Funnet: C 38,98 H 3,04 N 5,84 H20, 0,35.

Kalium-Zbeta-klormetyl-2-metylpenam-3-karboxylat-sulfon (BL-P20l3) O.

Bg, š Cfizßl _ x/ f-'Hzf-'l “L Tee “t -fi I 'm5 /1/ __ 0,, <5/ °I°2 CRTQ- N02 J *f-cozx Till 600 ml vatten sattes 8 g 30% Pd pâ "Celite“ och l6 g (0,l9 mol) na- triumbikarbonat. Därefter upplöstes 32 g (0,69 mol) p-nitrobensyl-6alfa- -brom-2beta-klormetyl-2-metylpenam-3-karboxylat-sulfoxid i 400 ml etyl- acetat och sattes till den vattenhaltiga uppslamningen. Blandningen hyd- rerades i en Parr-apparat vid ett tryck av 3,5 kg/cmz vid 22° under 4 timmar. Uppslamningen filtrerades genom en tunn "Celite"-dyna pâ en sintrad glastratt, dynan tvättades med 2 x 50 ml vatten och vattenskiktet från kombinationen av filtrat och tvättvätskor avskiljdes. Vattenskiktet A tvättades med 200 ml dietyleter och kyldes därefter till 5° och under om- röring tillsattes droppvis en lösning av l2 g (0,076 mol) kaliumpermanga- nat i 200 ml vatten under 0,5 timmar, varvid pH-värdet hölls mellan 7,5 och 8,0 genom tillsats av 40%-ig fosforsyra. När den ljusröda färgen icke försvann efter 5 minuter tillsattes icke någon mera kaliumpermanganatlös- ning. Reaktionsblandningen omrördes med en liten mängd (ca. 50 mg) natri- umbisulfit under 0,5 timmar och därefter filtrerades uppslamningen genom 466 205 w en “Ce1ite"-dyna. Dynan tvättades med 2 x 50 ml vatten. Kombinationen av filtrat och tvättvätskor beskiktades med 500 ml etylacetat och under om- röring inställdes pH-värdet på 1,5 genom tillsats av 2 N saltsyra. Skikten separerades och vattenskiktet mättades med natriumsulfat. Det áterextra- herades med 2 x 400 ml etylacetat och de kombinerade etylacetatextrakten torkades över natriumsulfat vid 5° under 0,5 timmar. Natriumsulfatet av- lägsnades genom filtrering och filtratet indunstades under reducerat tryck till en återstod. Återstoden upplöstes i 160 ml aceton och 160 ml dietyleter och 50 vikt% kalium-2-etylhexanoat i n-butanol tillsattes till dess lösningen uppvisade neutral reaktion vid provning med fuktigt pH-papper. Kaliumsaltet av föreningen BL-P20l3 utkristalliserade, tillva- ratogs genom filtrering, tvättades med dietyleter och torkades. Utbytet uppgick till 16 g kalium-Zbeta-klormetyl-2-metylpenam-3-karboxy1at-su1- fon (BL-P20l3) (76%) med smältpunkten 2020.. IR- och NMR-spektra var i överensstämmelse med den önskade strukturen.

Analys Ber. för C8H9ClKN05S: C 31,42 H 2,97 N 4,58 ,18! t _ .2ig.g_8§:1'u= 40151* - Q-ggt-atmvf; Exempel 16 Pivaloyloximetyl-Zbeta-klormetyl-2-metylpenam-3-karboxylat-sulfon §BL-P2024! 'o o 0' 0 Rs/ cazcl _ R ß H2°1 o;- *ocozx ('- ”'co'2o_1_1_2ococ(ci13)3 BL-Paozu ., lßjV 381183 __ _______ Till en omrörd suspension av 14,6 g (0,0487 mol) ka1ium-2beta-k1ormety1- -2-metylpenam-3-karboxylat-sulfon (BL-P2013) i 200 ml aceton sattes 4 ml av en 10%-ig vattenlösning av natriumjodid och blandningen bringades att E 466 203 âterloppskoka på ångbad. Till den àterloppskokande suspensionen sattes l4,8 ml (0,l mol) omdestillerat klormetylpivalat (kokpunkt 34° vid 7 um Hg) i en portion. Blandningen återloppskokades 3 timmar och kyldes där- efter till rumstemperatur (220). Det kristallina fasta materialet till- varatogs genom filtrering och tvättades med 3 x 30 ml aceton och de kombinerade filtraten indunstades till en olja under reducerat tryck vid en temperatur understigande 22°. Oljan upptogs därefter i 500 ml etylacetat och tvättades en gång med 200 ml vatten och en gäng med 200 ml av en mättad natriumsulfatlösning. Lösningen torkades därefter has- tigt över natriumsulfat under kylning (isbad) och under det att den om- rördes med 2 g avfärgande kol. Efter 20 minuter filtrerades blandningen genom en "Celite"-dyna och dynan tvättades med 4 x l00 ml etylacetat. De kombinerade filtraten koncentrerades under reducerat tryck vid 22° till en olja. Oljan koncentrerades därefter ytterligare vid ca 220 och vid ett tryck understigande l mm Hg för avlägsnande av huvuddelen av det reste- rande klormetylpivalatet. Den kvarvarande oljan triturerades två gånger med 50-ml-portioner av n-pentan och fick därefter stå över veckoslutet vid ca l0° under n-pentan. Den erhållna fasta kristallina massan sönder- delades-därefter:tillfett^pulver=under¿40«nloav,enf4:l-hlanduingmau,dietyl-WW eter och n-pentan. Produkten tillvaratgs genom filtrering; tvättads med” en l:l-blandning av dietyleter och n-pentan och lufttorkades. Efter tork- ning i högvakuum under 4 timmar över P205 erhölls l3,37 g pivaloyloximet- yl-Zbeta-klormetyl-2-metylpenam-3-karboxylat-sulfon (BL-P2024) (75%) med smältpunkten 93-950.

Rening av BL-P2024 Ca. 3 g oren BL-P2024 (erhâllen på ovan beskrivet sätt) upplöstes i 5 ml etylacetat, applicerades på en 4,5 x 40 cm kolonn av silikagel (Mallin- ckrodt CC-7) och eluerades med en 4:l-volymblandning av CH2Cl2 och etyl- acetat. De fraktioner som uppvisade en enda fläck vid ett Rf-värde av 0,84 (tunnskiktskromatografering på silikagelplatta med en 4:l- blandning av CH2Cl2 och etylacetat; 12-detektering) kombinerades och kon- centrerades under reducerat tryck till l,38 g av ett kristallint fast ma- terial. En portion av detta material (900 mg) upplöstes i 5 ml etylace- tat; den resterande lösningen filtrerades, späddes nästan till grumlings- punkten med petroleumeter (“Skellysolve B") och förvarades därefter vid 466 203 4., rumstemperatur under 3 dygn. De bildade kristallerna tillvaratogs genom filtrering, tvättades med petroleumeter och torkades för erhållande av 560 mg renad BL-P2024 med smältpunkten l00-l0l°.

Analys Ber. för C14H2oClN07S: C 44,03 H 5,27 N 3,67 Funnet: C 44,ll H 5,08 N 3,85 Exempel l7 Ammoniumsaltet av BL-P20l3 250 mg av den fria syran av BL-P20l3, upplöst i 20 ml av en l:l-volymbland- ning av aceton och metanol, filtrerades för erhållande av en klar lösning.

Vattenfri ammoniumlösning framställdes genom tillsats av l ml ammonium- hydroxid (30%, reagenskvalitet) till 10 ml av en lzl-volymblandning av aceton och metanol och därefter tillsattes l g vattenfritt magneisumsul- fat till lösningen under försiktig omröring och blandningen filtrerades genom=ett»filterpapper;edettaofiltrat.var.PvattenfricammoníumlösninqH, Till filtratet av den fria syran sattes gradvis ca 2 ml “vattenfri am- moniumlösning" och det hela omblandades väl. 100 ml dietyleter blandades i en portion med den erhållna blandningen för utfällning av ammoniumsal- tet av BL-P20l3. Det vita ammoniumsaltet isolerades från lösningsmedlet och tvättades med 2 portioner om vardera 50 ml dietyleter. Det isolerade pulvret torkades vid 350 i vakuumugn över natten.

Analysdata var följande: Ber. % C 33,7 H 4,6 N 9,8 Funnet: C 33,66 H 4,63 N lD,l2 Produkten visade sig vara torr vid provning enligt Karl Fischer-metoden.

Mikroskopisk undersökning av produkten visade att den var en kristallin substans.

Exempel l8 Icke-hygroskopiskt natriumsalt av BL-P20l3 50 mg av den fria syran av BL-P20l3 upplöstes i 4 ml av en l:l-volymbland- 41 466 203 ning av aceton och metanol. Blandningen filtrerades för erhållande av en klar lösning.

Natrium-2-etylhexanoatlösning framställdes genom att man upplöste 40 mg natrium-2-etylhexanoat i 10 ml av en 1:1-volymblandning av aceton och metanol. Till filtratet av den fria syran sattes l0 ml av natrium-2- -etylhexanoatlösningen och det hela omblandades väl. 5 ml dietyleter blandades i en portion med den erhållna blandningen för utfällning av natriumsaltet av BL-P20l3. Det vita saltet uppslammades i dietyleter under l-2 timmar och avskiljdes därefter från lösningsmedlet och tvättades med 3 portioner om vardera 5 ml dietyleter. Det isolerade pulvret torkades vid 300 i vakuumugn över natten.

Exempel l9 mkristallisation av föreningen BL-P20l3 V U -. \=g//_* omxrisf. 'ff C33 HzO-acetona' f- "' co2x-H2o 400 mg av föreningen BL-P20l3 upplöstes i en minsta möjliga mängd av en l:l-volymblandning av aceton och vatten och späddes med l0 ml aceton, filtrerades, späddes därefter med aceton till ca 25 ml och skrapades och efter 30 minuter tillvaratogs det kristallina hydratet genom filtrering, tvättades väl med aceton, lufttorkades och vakuumtorkades därefter vid ett tryck understigande l mm Hg över natten. Utbyte 280 mg.

Anal vs Ber. för C8H9ClN0SK-H20: C 29,67 H 3,39 N 4,63 Cl l0,94; H20 5,55, Funnet: C 29,32 H 3,32 N 4,44 Cl ll,3l; H20 5,90. 466 205 f 42 Exempel 20 N,N'-dibensyletylendiaminsaltet av BL-P20l3 BL-P20l3 + l/2 N,N'-dibensyletylendiamin-diacetat Omkrist. i aceton'-et_er o\\ f/O CH2Cl i : f' CHB r-_]' 1,, J co2x.c6H5cH2NH-c1¶2 306 mg (0,00l mol) av föreningen BL-P20l3 upplöstes i 7 ml vatten och sattes till en lösning av l8O mg (0,0005 mol) N,N'-dibensyletylendiamin- -diacetat 1' 7 ml vatten. Blandningenomrördes och saltet utkristallise- rade och eften omröringficæ. lüflåsminuterfitillvaxatogs,salietsgenomsfi1-s, treringaoch^lofttorkädesffö%“erhällandeflavä3fl0"mgmäv+N%N§*¿*bBH$YTëfi¥$ëflå¶*'*f aminsaltet av BL-P20l3. Materialet omkristalliserades genom upplösning 1' ca l0 ml kokande aceton och spädning med eter till grumlingspunkten. Man erhöll 260 mg lufttorkat och vakuumtorkat material.

Analys Ber. c 51,69 H 5,42 N 7,53 c1'9,ss runner: c 49,39 H 5,49 N 7,05 ' ci 8,96 H20, 1,23 (KF).

Exempel 2l Klormetylester av BL-P20l3 o o- \\ / 03201 .+ clcxz-ofso cl 2 f-»CHB f_ (clgcfiacäcnahlvæflsoug Q “Icoox * 3 KH°°3 605,7) å cnáclz 320 ü 466 203 0 AV o :s Ö g-ocxgcl o (315»17) HQCI Ilcä I \ I Till en kraftigt omrörd blandning av 15,25 g (0,05 mol) av föreningen BL-P20l3 (5), l5 g (O,l5 mol) KHC03 och l,7 g (0,005 mol) tetrabutyl- ammoniumvätesulfat (Aldrich Chem. Co.) i en blandning av 50 ml vatten och 50 ml CH2Cl2 sattes droppvis en lösning av 9,5 g (0,0575 mol) ClCH2-0-S02Cl i 40 ml CH2Cl2. Temperaturen steg till 260 och efter till- satsen (som tog ca. l5 minuter) omrördes blandningen ytterligare 30 minu- ter. Eftersom produkten utkristalliserade tillsattes ytterligare CH2Cl2 (ca. 400 ml) för erhållande av en lösning. Det avskiljda CH2Cl2-skiktet och 50 ml CH2Cl2-tvättvätska kombinerades och torkades över magnesiumsul- fat under omröring, varefter 2 g avfärgande kol ("Darco KB") tillsattes.

Efter ca 30 minuter filtrerades blandningen och koncentrerades till ca 50 ml-och^l50:mT:isoPf°P¥laJkohot.tiíTsattes;flÅterstodeuaCH¿GIä¿awläggnadsag; därefter under reducerat tryck. Den erhållna kristallina fällningen tillß A varatogs genom filtrering, tvättades väl med isopropylalkohol och lufttor- kades. Efter vakuumtorkning vid ett tryck understigande l mm Hg erhölls 8,5 g klormetyl-2beta-klormetyl-2-metylpenam-3-karboxylat-sulfon (7) med smältpunkten ll6° (sönderdelning; mörknar över lO0°).

Anal ys Ber. för C9H]]Cl2N05S: C 34,l8 H 3,5l N 4,43 Cl 22,43 Funnet: C 34,l6 H 3,45 N 4,47 Cl 22,46; H20, 0,33 (KF).

Uppskattad renhet var 90-95%.

Jodmetylester av BL-P20l3 0 0 0 0 \\ ß CH Cl \\ // CH2Cl s 2 N I s a» . lll/CH; “___-à I ”lf/GHz --43 o /' c-ocazcl oj 'ff/f 466 203 44 Till en omrörd blandning av 5 g (0,0l59 mol) av klormetylestern av föreningen BL-P20l3_(7) i 25 ml aceton sattes 3 g (0,02 mcl) natriumjo- did. Den erhållna uppslamningen omrördes l7 timmar och kyldes därefter till ca 0°. 2 droppar av en mättad vattenlösning av kaliumvätekarbonat tillsattes och blandningen späddes droppvis med vatten under l0 mi- nuter till dess 50 ml hade tillsatts. Uppslamningen undergick en plöts- lig färgändring från gult via grått och purpur till svart och därför tillvaratogs kristallerna omedelbart genom filtrering och tvättades med en kall l:2-blandning av aceton och vatten, därefter med 3 x 10 ml iso- propylalkohol, dietyleter och slutligen med n-pentan och lufttorkades för erhållande av 5,55 g (9l% utbyte) av jodmetylestern av BL-P20l3 (8) med smältpunkten ll8-ll9° (sönderdelning). Uppskattad renhet var ca 90 %. 6-LKR)-2-amino-2-fenylacetamidq]-3,3-dimetyl-7-oxo-4-tia-l-azabicyklo- ŧ¿2.Q7heptan-2-karbonyloximetyl-Zbeta-klormetyl-2-alfa-metylpenam- -3alfa-karboxylat-sulfon (ll) (ett Dane-salt av ampicillin; se US-P 3 3l6 247) 45 466 203 Ö- ïH-co -NH 'f/ N c-c/ \ ”ß 4:, ocn; 0 _ o . §sff 021201 I IIICH) ïH2 of' ' '§-_0 o I s C33 C ca -co -qm __Tß (å, CH; N I 4- ,, N32' 0 _ IC=O 0 'E °\ /Åo c1-12c1 xs/ f f, °H2 Ifls oJF-N l-ko _466 203 % Till en i isbad kyld omrörd blandning av 5,46 g (0,0l mol) av det an- givna Dane-saltet av ampicillin (9; var solvatiserat med en molekyl iso- propylalkohol) i 60 ml aceton sattes 4,08 g (0,0l mol) av jodmetylestern av BL-P20l3 (8) och den erhållna näranog klara lösningen omrördes 5 tim- mar med isbadet avlägsnat efter 30 minuter. Huvuddelen av acetonet av- lägsnades i vakuum i en rotationsindunstare och den erhållna koncentre- rade lösningen upplöstes i 200 ml kallt etylacetat som därefter tvätta- des med 2 x 50 ml iskylt vatten och 2 x 100 ml av en mättad vattenlös- ning av natriumsulfat. Etylacetatlösningen torkades därefter över natri- umsulfat och filtrerades och huvuddelen av etylacetatet avlägsnades i vakuum i rotationsindunstare. Återstoden triturerades med 2 x 200 ml torr dietyleter och det erhållna fasta materialet tillvaratogs genom filtre- ring, varvid man erhöll 5,5 g av föreningen 10 som ett ljusrött pulver.

Detta pulver omrördes i en blandning av 50 ml vatten, 50 ml n-butanol och 20 ml etylacetat medan 6N saltsyra tillsattes droppvis till pH 2,5.

Därefter tillsattes en eller tvâ droppar saltsyra då och då för att hål- la pH vid 2,2-2,5 under 45 minuter. När pH-värdet icke längre visade ten- dens att stiga sattes till blandningen 100 ml dietyleter under god om- röring. Vattenfasen avskiljdes och kombineradesamed,eti,andra,25-ml-vat-2 tenextrakt^av~det=organisHææfififinetïfivattenlösníngenfefiflraheradesäenegang4~ med 50 ml dietyleter, som därefter kasserades.

Vattenskiktet omrördes därefter kraftigt under ett skikt av 100 ml 2-bu- tanon (metyletylketon) medan natriumsulfat tillsattes för att mätta vat- tenskiktet. 2-butanonskiktet avskiljdes, torkades över natriumsulfat un- der 30 minuter i isbad, filtrerades och koncentrerades i vakuum till nä- ranog torrhet. Den återstående oljan triturerades till ett fast material med n-butanol, tvättades väl med eter och därefter med n-pentan, lufttor- kades och vakuumtorkades över P205 vid ett tryck understigande 1 mm Hg för erhållande av 1,6 g 6-[1R)-2-amino-2-fenylacetamiddf-3,3-dimetyl-7- -oxo-4-tia-l-azabicyklo[3.2.Q7heptan-2-karbonylmetyl-2beta-klormetyl-2- -alfa-metylpenam-3alfa-karboxylat-sulfon (11) i oren form. IR- och NMR- -spektra var i överensstämmelse med strukturen för föreningen ll men an- tydde att produkten ej var höggradigt ren. Denna fasta produkt uppskat- tades innehålla minst 40% och kanske så mycket som 80% 6-[IR)-2-amino- -2-fenylacetamidQ73,3-dimetyl-7-oxo-4-tia-1-azabicyklo[B.2.Q7heptan-2- -karbonyloximetyl-Zbeta-klormetyl-2-alfa-metylpenam-3alfa-karboxylat- -sulfon. vnn: ; M 466 205 Exemgel 22 Förbättrad syntes av BL-P20l3 Detta förfarande förenklar framställningen av BL-P20l3 genom att den tidigare användningen av katalytisk reduktion elimineras.

Steg l o Br, 1 Oz S I I ' + 'on cc13 + n1cyk1anexy1xarb°ai1m1a . /-- f, I 2 0/ 'cooH °H Ä Pyriain cH2c12 m: (Se sid. 633 i Cephalosporins and Penicillins, redigerad av Edwin H.

Flynn, Academic Press, New York, l972). g (0,1 mol) 6alfa-brompenicillansyra-sulfoxid (l) upplöstes i l liter torr CH2Cl2, följt av en tillsats av l6,2 ml (0,2 mol) pyridin och 29,8 g (0,2 mol) trikloretanol. Därefter tillsattes 20 g (0,1 mol) dicyklohex- ylkarbodiimid och blandningen omrördes 16 timmar vid 220. Dicyklohexyl- karbamid började utfalla; efter avslutad utfällning avlägsnades karba- miden genom filtrering. Filtratet tvättades med 200 ml av en 5%-ig vatten- 4.66 203 48 iösning av natriumbikarbonat, 200 mi av i0%-ig fosforsyra och 100 mi av en mättad vatteniösning av natriumsuifat. Den organiska fasen torkades över natriumsuifat vid 50 under 30 minuter, fiitrerades och indunstades tiii en oija. Dietyieter tiiisattes och under skrapning utkristaiiisera- de produkten 2 i en mängd av 27 g (utbyte 63%).

Steg 2 .+ 3 _ ~'Kino1in IN 26,5 g (0,062 moi) av förening 2 uppiöstes i 500 mi p-dioxan och där- efter tiiisattes 8,5 mi (0,078 moi) bensoyikiorid och 8,75 mi (0,078 moi) kinoiin. Lösningen återioppskokades 4 timmar och häiides därefter i ii00 mi vatten och produkten 3 extraherades med 2 x 400 mi etyiacetat.

Etyiacetatextrakten kombinerades, tvättades i tur och ordning med 200 mi av en 5%-ig vatteniösning av natriumbikarbonat, 200 mi 5%-ig fosforsyra och 200 mi av en mättad vatteniösning av natriumsuifat, torkadeš över natriumsuifat vid 5° under 30 minuter och indunstades tiii en oija (3), som användes som sådan vid efterföijande reaktion. 49 466 203 Steg 3 2", + mou+112o2 1 isättika ' 0 0 l/-íT /I//Cæg u, r-N «« ' <> o ' _ É Den i föregående steg erhållna föreningen 3.upplöstes i l liter isättika p och" under* omröriffngß vidta-ZZP* ti-Tlsattëšfšdroppvisff'ttadw vattenïöšrfingzavfiz'.gf_f__.l'r~ kaliumpermanganat till dess en ljusröd färg kvarstod (dvs. en droppe pla- cerad på en bit filterpapper gav en ljusröd färgning). Därefter tillsat- tes droppvis 30%-ig väteperoxid under kylning till dess en klar lösningerhölls; en viss mängd vit fällning var närvarande. Lösningen hälldes i 2,5 liter vatten och produkten 4 extraherades med 3 x 500 ml etylacetat. Etylacetatet tvät- tades med en 5%-ig vattenlösning av natriumbikarbonat till en neutral re- aktion (dvs. till dess några bubblor icke längre uppträdde vid tillsats), torkades över natriumsulfat och indunstades för erhållande av produkten 4 som återstod. Denna fick stå l dygn vid l0° och triturerades därefter med "Skellysolve B" för erhållande av 9,1 g av den fasta produkten 4. Ut- bytet var 28% av det teoretiska värdet för stegen 2 och 3 i kombination. 466 205 50 Steg 4 L; "' 1 isättiksyra + ®KEH o o \\ // nagon.

S m/C 5 (BL-Paola) Hz l,__N å o 2 c (Se US-P 4 164 497) 3;7$'9'zinkstoftiuppslammades f' 5“mF”išätüikàfocfi“É?Tdes“tiTT”5°%¿TïlÜ””f denna blandning sattes en lösning av 3 g (0,0057 mol) av föreningen 4 i l5 ml dimetylformamid och den erhållna uppslamningen omrördes 2,5 timmar vid 5°. Zinken avfiltrerades därefter och den blekgula lösningen hälldes i 80 ml av en 5%-ig vattenlösning av klorvätesyra. Blandningen extrahera- des med 3 x 25 ml etylacetat. De kombinerade etylacetatextrakten extrahe- rades med 3 x 20 ml av en 5%-ig vattenlösning av natriumbikarbonat, var- vid etylacetatfasen tillvaratogs efter separation.

Bikarbonatextrakten kombinerades, infördes under ett skikt av etylacetat, inställdes på pH l,5 genom tillsats av 2N saltsyra och mättades med na- triumsulfat. Etylacetatet avskiljdes och vattenfasen extraherades med 2 x 30 ml etylacetat. Samtliga etylacetatfaser ovan kombinerades, torka- des över natriumsulfat och indunstades till en olja (som utgjordes av den fria syraformen av BL-P20l3), som upplöstes i ca 20 ml aceton, till vil- ket 2O ml dietyleter därefter sattes. Därefter tillsattes 50%-igt kalium- -2-etylhexanoat (KEH) i torr n-butanol till neutral reaktion. Produkten si 466 205 (BL-P20l3) utkristalliserade. Efter omröring 0,5 timmar vid 220 till- varatogs produkten genom filtrering, varvid man erhöll 650 mg av produk- ten 5 (37% utbyte).

Ett 50-mg-prov av produkten 5 upplöstes i 0,5 ml vatten och 20 mg N,N'- -dibensyletylendiamin (DBED)-diacetat tillsattes. DBED-saltet av produk- ten 5 utkristalliserade, tillvaratogs genom filtrering, tvättades med vatten och torkades över P205 i vakuum, varvid man erhöll N,N'-dibensyl- etylendiamin-2beta-klormetyl-2-metylpenam-3-karboxylat-sulfon (DBED-sal- tet av den fria syran 5).

Ett annat prov av produkten 5 (450 mg) upplöstes i 3 ml vatten och till lösningen sattes en lösning av 270 mg DBED-diacetat i 2 ml vatten. Un- der skrapning utkristalliserade DBED-saltet av produkten 5 (430 mg). Om- kristallisation ur ca 5 ml kokande aceton gav 270 mg.

Exempel 23 6-¿§R)-2-amino-2-p-hydroxifenylacetamidQ7¿3,3-dimetyl-7-oxof4-tia-l-aza- bicyklo[3¿2.QZhêptanf2-karbonyloximetyl~2betaeklormetyl-2~aTfa-metyhpenamfïn..» -3alfa-karboxylat-sulfon med formeln wa IHD CIí--430--NH¶.,- S , _ I Qkcíäâ _ I _ _N J ”f NI-Iz o I c C=0 vil» 0 -o esf/ ci-Lzcl C 1 ”C33 I .l-fl 466 203 æ framställdes genom att man ersatte den vid förfarandet enligt exempel 2l använda ampicillinen med motsvarande Dane-salt av amoxycillin.

BIOLOGISKA DATA Produkten 5 enligt exempel l med formeln 'qäí/° cnzcl 'f " w COZK kommer nedan att betecknas BL-P20l3.

Ehuru föreningen BL-P20l3 i sig är ett mycket svagt antibakteriellt me- del inhiberar föreningen beta-laktamaser och skyddar ceforanid och amoxy- cillin från angrepp av beta-laktamasproducerande bakterier in vitro och infvivoavídfianvändnšngpiikombinationfimedßdéšsamtvâšmedeüåš*.2§{ 53 Tabeii 1 466 203 Antibakterieli aktivitet hos BL-P2013 i jämförelse med ampiciïiin "IK 019m) Organism BL-P20l3 Ampicillin . pneumoniae _ A-9585 16 0.004 B. pyogenes A-9604 63 0.004 lä: aureus A-9537 >l25 0.16 S. aureus + 50% serum A-9537 >l25 0.06 S. aureus Pen- Eaes A-ssoe >12s >l25 S. aureus Meth- Res Al5097 >l25 125 S. faecalis. A20688 = >l25-" . 0.l3w§ n.. C611 » Alsns « S12?- i' h ' ' i ' E. coli A2034ll25 >l25 K. pneumoniae Al5l30 >l25 125 K. pneumoniae A20468 >l25 >l25 P. mirabilis A-9900 >l25 0.13 P. vulgaris A2l559 >l25- _l2S P. morganii Al5l53 >l25 >l25 P. rettgeri A21203 >l25 4 S. marcescens A200l9 >l25 16* E. cloacae A-9659 >l25 63 E. cloacae A-9656 >l25 >l25 P. aeruginosa A~9843A >l25 >l25 P. aeruginosa A21213 >l25 >l25 466 205 ~ 54 Tabe11 2 Bacteroidèsaktivítet hos ceføraníd och amoxycíïïin separat och i kom- bination med BL-P2013 _ 1261:6- _ MIK (pslfmUš . _ °F låšš ”ršzïšâ” íââfšâäïâ 333; 1192611111 êäa* in (l:l) (lzl) B. fragilis 1121916 + 63 2 >12s 2 a 1122053* + 32 2 63 2 a 1122021 + ' 32 2 32 _2_ 4 1121375 + 32 2 63 2 a 1122534 + >12s 22 125 ä >12s 1122697 + 63 2 63 2 s 212269 + 63 _4_ 63 2 16 1122694 + 125 22 63 2 16 112269 + >12s _1_6_ 32 2 125 E2269 f tvi; >l2S;1%' _§§g, ;§fl ñ3fip'" 3§¿¿_2§ >I251.2, 22253 + 5 ”>12s” _32*- 32" 32" 5 ' 112253 + >12s 22 125 _3_2_ >12s 112279 + >12s 2 32 _4_ 125 112279 + 32 2 32 2 s 112279 + 32 _4_ 32 2 s 212279 + 63 ' 2 32 _4_ 16 112279 + 63 2 63 2 16 112279 + 32 2 63 2 58 13. théta- iotaomíc- - _ H gon A222? + 125 2 63 2 16 , 112227 + 125 2 63 2 16 55 466 203 Tabell 2 (forts.) Anti-Bacteroides-aktivitet hos ceforanid och amoxycillin separat och i kom- bination med BL-P20l3 -n- o-. em-_ MIK (fls/mll* Organism läkt-f Cefo- Ceforanid MFP *Ämoxycill in Amoxvz amas rania +sL-p2 013 2013 +3_z.-1=2o13 cinm ' (l.:l) (1 :l) Bacteroides- ,stammar"" A2o93 + 32 _4¿ 32 2 s A219s + 63 ¿_ 32 2 16 22092 + ss _4_ 32 _2_ 16 A2l95 + 63 Lä 63 2 16 _ A209: + 63 _1_¿s_ 63 _ 5_ a A2093 + 125 å 125 g_ 32 " A209: + 63 5_ 32 _2_ 16 i ~ Azoszï- - 2o:;$'=;. 13.2. 63: (xml-if o'.."13ï~f~ ål A2093 4 2 2 125 0.132 0;I3 ' -- god synergism marginell synergism - * Minimuminhiberingskoncentrationen (-MIK) uppmättes medelst agarutspäd- ningsmetoden under användning av 50 gångers spädning av 24-tinwnars-kulturer som inokulat, vilka hade förvarats i en Steers inokulator. Analysmediet ut- gjordes av Brucella-agar plus 5% lakat fårblod och lO pg/ml vitamin K. 466 203 - 56 Tabell 3 Terapeutisk aktivitet hos amoxycillin i kombination med BL-P20l3 vid ad- ministrering ti11 möss infekterade experimentellt med en beta-1aktamas- stam av Staphylococcus aureus Infektionsdos PD50/behandling (mg/kg) Organism (antal orga- nismer) Amoxycillin (A) BL-P2013 (B) A+B (1:1) IM P0 IM P0 IM P0 s. aureus s x 108 > soo åsoo _> so > zoo 6,3 44 A-9606 5 x 108 > 800 > 800 > 50 > 200 19 77 7 x m8 .> soo - .> so - 9.5 - Behandlingsschema: föreningarna administrerades 0 och 2 timmar efter in- fektion.

Tabell 4 Blodnivåer av BL-P20l3 och dess pivaloyloximetylester (BL-P2024) efter oralfadminístrering.tñJH?niEfiâ¿g¿¿mi.. _ Blodnivå (pg/ml) u . Dos Halve- Test- Forening (mg/kg) 15 30 60 90 120 150 ríngstid orga_ Minuter efter administrering (min.) nism 100 4.5 5.1 3.9 2.3 1.5 0.8 50 E. coli A-9675 ßL-Pzois wo 4.6 4.1 3 < 2.6 <2.6 <2.s - s. aureus A-9606 200 7.4 9.8 7.~1 4.1 2.8 42.6 50 _._- S. aureus* ' A-9606 100 12.8 12.9 9.7 7.2 5.5 4.2 70 E. coli A-9675 BL-P2024 100 13.1 12 8 5.7 3.8(2.5 60 S. aureus A-9606 200 14.7 14.4 9.8 8.7 5.1 < 2.5 60 S. aureus _ A-9606 De i tabe11en angivna värdena utgör medelvärdena av 2-4 försök 57 466 205 Tabe11 5 B1odnivåer och ha1veringstider för BL-P2024 efter øra1 administrering av o1ika doser ti11 möss Biodnivå (pg/mi) Förening gas/k ) is so so so izø iso r 1/2 mg 9 Minuter efter administrering (min.) 5.9 6.2 3.6 1.9 1.3 0.7 40 BL-P2024 50 7.7 9.5 6.3 4.7 3;5 2.3 60 100 12.3 12.2 9.4 7.2 5.7 4.6 85 200 14.7 14.4 9.8 8.7 5.1 <š2.5 60 BL-P2024 suspenderades i Tween-CMC-vatten.

De i tabe11en angivna värdena utgör medeïvärdena av 2 försök vid dose- ringsnivâerna 25 och 50 mg/kg, av 5-6 försök vid doseringsnivân 100 mg/kg och av 2-3 försök vid doseringsnivån 200 mg/kg.

Testorganism: E. co1i A9675 vid samtliga dosnivåer med undantag av 200 mg/kg av BL-P2024 (Sa auneus.A9606). 466 203 QONA m.n~ß QQNA mofl X ß _ coN^. ,vfl.m.fi wav wflu Mum oomn men X w MNNANÉ QONA mnm nuw ooNA mofi X ß «H0O .N OONA mflflmm Omnofl uum www OONA mofi X w mvwoN< OONA Hfinfifl m.m«HH OQNA med X m fiflOO .N QQNA øßumm nvflnv mflflom . ooN^ noe X m mßncmfi vßfi wßumfl vvnnm mN“mN Nnuev vvuefiw. ooNA maa X w mflwuflm .m OONA NmA«ww oofinocfl ßmuvfifi Ü ooæA maa X m Hmomfl< °°~^ ««"«v mnflwß @@“~ww¶ °=~^ »QX x « møuusn .m =@~^ °~,=H vfluvfi ßflnnn °°@^ QQH x ~ w°w@< ==~^ Qafißmw wßumn nnnnn -.«v °m^.°°mMl °=~^ Qøfl x ß mswusø .w nflcfl vad Nufl flufi flufl anv 1 - I x@. =+~_Wu Åßwsm-= m Am nflonmflhm” =ICuAxøE< |axoe< nøoßo 23.5: Emflcmmuø 1. _ moum=o@«¥m»= -- in.. twåmsv m5=ë2wn..\o¶nnm *Foo .u zuo mnwgzm .w >~ Lmssßvm wu=mLmu=uo;Qm@E~ wxflpløumn UQE v~Pw¥CmEwLOQx0 UUGL |0Hxw%:w mmm E -~p mzwgwguwwcwsum uv> m~oN@|4m uws :o@~n=_nso¥ W m -Pwpøh =?__~u>xos~ >~ »wpw>~»xø xmwu=mq~;w» 466 203 .uzufi W wumLwu=wQm:m Lm> øcgwmcwcugmm .zcwpxwwcw xwuww Løsswv N :oo o vpmgo wwvmgwgpmwzwsum ~:L~m:@=wLm» uøsuzuwwmc*-ucwzwm °=~^ @~,m w.m. wuw n«~.- °°«^ med x W ==~^ m¿m.~ ßaß . n.w n.~.e~ ; °°~^ mofi x ß m~wm< °°~^ w~.« ~w« nwn nww ~.@ °°~^ møfi x Q flfico .m - . .V \ nfiøu «.~. ~»~ «.H H.~ . .H.« _§W__@u>x°E< ^L~Ew.= .

.Tum . m_oN.T._m:_.-_Zu>.x°s<.... » . .èmLo ÉÉS Emficnmuo , N . woum=ow»¥mw=~ ^@¥\@Ev @=*_¶=~=«@\°mnw_J_ .

*Foo .m zuo m=mL:~ .m >~ Løeampm muc~@mu=uo»Qw~sm»xø~|~uwn ams »~_mp:we«LwQxo own; nmøzwwcw mmmë -~u mcwamxuwpcwsum w+> m-o~@|4m Ume copuølwpëox v :@-«uäxoEø >ø uw»w>waxø xmPu:waøLwh Ü~I|III|IIII .møgow Q -mnøH é0 466 203 @?_m@_ L~> =?__Wu>x°E< .omza &mm«? ~@@_m@_ L~> ß=L~=°w-=?@E°¥-<~°~@-4m"=p__Pu>x°E<@ ,@°@p¥w»=W L@~»@ Lßeawp N Sug 0 »_~L° ~u~_u=~=@@ wmwzß .wgflgwn ~==mn P cowmcmqmaw som_wu m;wL~wP=~sv~ «~oN@|4m :mums ^ømo_=-Pwu-æuwewxopgmx -=«@=h @w»_ß==@»->V 0:0» W .; m~w«< °°~^ >.> m.~.> «.~“~.m °°Q», uzua mafl x w fifioo .m _ L» w>w@< mw ^ www mun ~"@ °°@~ uzoa møfi x ß flfiøu .m _ ... omzo mßwmc _. m~ A qnw m.m“> m.~”°H °°»~ »cm møfl x ß fiflou .m . ;" omzn mßwmm mw A. man nn» ~H”~H Qcflk »om maa x m flfico .m _ B» «ß@°~< °°~ ann @,~H QQW. uzoa øøfl x m unwusß .m _ _. ~@=mfi< °°~^ fimußm nnuww =°@w@ ozua @°fi.x m mswuøfl .m ”_ vwow fl.H Aufl fiuv =@W~wv n=ww=m»m:=m Agmsmwc _ mLun vuoumlam» E. ~Eu>xos< ..>.xos< 2 Pwškm :mv -mono Évcß Euflcømuø _ .i ._ x: mLøL: . ß n @C W _. Om. Gå w°Üm=°HP.¥@*>»-% w~OU .w :OO w3UL:ß.m >ø LøE @=wL@L@m*=PEw~ vv, ~_o~@-4= w =@_~@o»xosø >~ »m»~>«u¥~ xmwøzunøgwh |s~ßm ww=~»mu=uo;Qmßs~ux-|~pw@ was »-w»=ms*Lunxw,mu~Lwp¥w+=P mwms -pwp >~ ^«NoN@-4mv =;w»mw~»»ms@xo->o~ø>~Q vws Lmzopßufwßaox mxwpo ~ ~_m;ß» 466 203 ^-P=¥°=P »_.= "m.@ n =Qv _ V m~wm< @_ou .u Uswmcmmgouwwh »mp->»uwmWw=wu«»=o¥ «mw|wmm »mn »mm>~ ww»=wL~Q soc* ~=wu»m> -â =w»»m>»uzu|=wwz» W ~u__w«ms~L» ø=;mm=~=w;wm á/ ^m.w~M.H~ ^n.=w+mHv Amwmmwv ^w.mflm %w.mww»nV ^#»mwH.mv oofl n~omm»nm :flwflwdv Qámfiâ Swwwflfiv G.M4H_A~ awfiwwwwv Cmwmwäv om Doäàm w.ov w.ov w.ov_ ^m.%@w.ov iw.H«w»¶v ^ww«mH.Hv mw n~omm-@m Smmwdv Sáwflfi. Quwmmi :fiwflmxï Sßwfiwm, âwmwæv 02 wåfizfim w.ov ^m.~wmmo. ^:.~m+»ov ^n.m~m.HV ~^nwmm«v ^ww@mw.~v_ om wno«m-Am w.ov w.ov m.øv .^n.w~m.ov >@^wmwmmv ^nww«n.Hv mm wnowm|qm .@=@LmL~m«=«su~»L@w+w gmïzcwz ømfl omfi .om Seša: Låfiïšwmfim on ma wuzßms mficuàï F xnmßmm mmmë -wu mcwgugumwcwëvm ~m»m.uw> vmoNm|4m :oo m~oNm|4m .mmo~@|4m >ø aww>*:uo~m m ~_wnø». ^»~_=¥° N_.o “@.@ u :av m~mm< W-ou.m Usmwcmmgofiwmh ?m=wu*w=ox mmw|Nmm »mn Lww>~ mw»=mß~Q soc* ~=wuLw> :w~u~>|u:u«m wa» :oo Poxzpmcwpzaogn am W av-muwemgw ucgømzwzwgmm 62 466 205 Amßš , 2%: sfimwmmv afifn å åšåm QWWS Gamww.. Gfimmfiv :nwmlv om wââua m.ov ^>.Hm@wov ^w.~w++ov ^w.w~w.Hv .M m.n mm wnowm-qm Awwmå âøwwwmv Cuwmfinv Ankmqwav Smfimmfiv 03 .aomnïqm SWWS :Émmwflv :Hfifimc :fimflnæwv cw.fi__wflwm_._fiv RAMQQ om âowïhm w.o^ m.ov ^æ.~m@wov ^æ.m«m.ov Wwmwwnv ^mM@ww.«v mm =mo«mL»m @=*»w&«m*=*E¶~ ;@p»@ gw»==~= omfl ¶ 93 ¶ om om . om 3 Awåwwfi 9.222 ~_E\@=v Lw«>*=@Q_= N xmwgmm 466 203 ^-.=¥° N_.° u@.@ U :av m~mm< W-øu.u "sw@=øm;o»mw» »wF~@>ßmwmvm=«u?»=o¥ ~m«|wmm »mv Lwm>~ mwpcmgøn sea* ~=wuLw> =w~«~>|u:u|=um:» zuo ~o¥æ~m=w~aQoL= um w mwp-mumsmgw øcgømcpcwßmu fw.. 63 m xmmxmm ^@flw.fl~ ^w.m-w.«v Mwwnv ^m.wm@wmv ^@@mW~w.nV % M oofi wnowmfqm ^m.m~w.ov ^n|«.Hv ^=mwmHv Abwwwflv @w¶w~w.nv ^N.w~w.mV om wnomm|qn Awnwlfiv ^m.=|Hv ^æ.:wmwHv ^~.>w+wHv fiw@m~m.mv ^m.m~w.«v mm wno~m|qm ^m.mflw.ov ^w.æm«»~v ^æ.mHwwwnv %fim»w»>v ^w.mflm.=v cofi nHowm»qm ïwmfls fimwmms cnmuumv :mwwmwv anwa om nñšaæ.

Andwwwov Sïmmfiov Awwæmwnwïfiv ^m.*fi~...%..fiv mw nHommLHm @=*Lw;»m*=@su~ Luuww Lwwfmrz A .m _ _w¥<@w=v šv: om .466 203 54 Föreningarna enligt föreliggande uppfinning är således användbara för att vid oral och parenteral administrering förbättra effektiviteten av beta-laktamantibiotika med avseende på beta-laktamasproducerande bakte- rier. På viktbasis är doseringen från l/5 till 5 gånger och företrädes- vis lika med doseringen av beta-laktamantibiotika. Som exempel kan näm- nas att föreningarna enligt föreliggande uppfinning i ett förhållande av l:l märkbart förbättrar aktiviteten av ceforanid och amoxycillin med avseende på beta-laktamasproducerande stammar av anaeroba Bacteroider, såsom B. fragilis, B. thetaiotaomicron och andra arter tillhörande det släktet och även med avseende på resistenta stammar av Staphylococcus aureus. Föreningarna enligt föreliggande uppfinning administreras an- tingen i blandning med eller samtidigt med beta-laktamantibiotikumet i en dosering inom det angivna förhållandet till den kända och sedvanliga doseringen av antibiotikumet.

Förmågan hos föreningarna enligt föreliggande uppfinning att förstärka effektiviteten av ett beta-laktamantibiotikum med avseende på vissa be- ta-laktamasproducerande bakterier gör dem således värdefulla för samti- dig administrering med vissa beta-laktamantibiotikaeuid.behandlingaav bakteriinfektionen~hos~däggdšur;:specieñttahosemähmtskauavid~behandlinggj~ av en bakterieinfektion kan en förening enligt föreliggande uppfinning blandas med beta-laktamantibiotikumet och de två medlen kan därvid admi- nistreras samtidigt. Alternativt kan en förening enligt föreliggande upp- finning administreras som ett separat medel under pågående behandling med ett beta-laktamantibiotikum.

Vid användning av en förening enligt uppfinningen eller ett salt därav . för att förstärka den antibakteriella aktiviteten hos ett beta-laktaman- tibiotikum kan föreningen administreras som sådan eller företrädesvis i en beredning tillsammans med farmaceutiska standardbärare och -utspäd- ningsmedel. En förening enligt föreliggande uppfinning, som föreligger i syraformen eller som ett farmaceutiskt godtagbart salt därav, kan admi- nistreras oralt eller parenteralt; en förening enligt föreliggande upp- finning i form av en ester, som lätt hydrolyseras in vivo, administreras bäst oralt. Parenterala administreringssätt inkluderar intramuskulär, sub- kutan, intraperitoneal och intravenös administrering. 65 466 203 När en förening enligt föreliggande uppfinning används i närvaro av en bärare eller utspädningsmedel väljs bäraren eller utspädningsmedlet med avseende på det avsedda administreringssättet. Om man exempelvis avser att administrera föreningen oralt kan den användas i form av tabletter. kapslar, pastiller, pulver, siraper, tinkturer och mixturer, vattenlös- ningar och vattenhaltiga suspensioner och liknande, i enlighet med far- maceutiskt standardiserad praxis. Förhållandet aktiv beståndsdel till bärare är naturligtvis beroende på den aktiva beståndsdelens kemiska be- skaffenhet, löslighet, stabilitet och potens liksom på den avsedda dose- ringen. Dessa farmaceutiska kompositioner innehåller emellertid vanligt- vis 5-80% bärare. När det gäller tabletter för oralt bruk innefattar vanligen använda bärare sådana ämnen som laktos, natriumcitrat och sal- ter av fosforsyra. Olika disintegreringsmedel, såsom stärkelse, och smörjmedel, såsom magnesiumstearat, natriumlaurylsulfat och talk, används vanligtvis i tabletter. För oral administrering i kapselform är använd- bara utspädningsmedel laktos och högmolekylära polyetylenglykoler. När vattenhaltiga suspensioner krävs för oralt bruk kombineras de aktiva be- ståndsdelarna med emulgerings- och suspenderingsmedel. Om så önskas kan vissa:sötningsmedel_och/el1er.smakämnen,tállsättas.,För.parenteral,admi- nistrertng; som;innefattan:intramuskuíärt;~intraperitnuea§t,msubkfißqntfw-za ~ och intravenöst bruk, framställs vanligtvis sterila lösningar av den ak- tiva bestândsdelen och lösningarnas pH-värde inställs och buffras lämp- ligen. För intravenöst bruk bör den totala koncentrationen av lösliga ämnen kontrolleras för att göra preparatet isotoniskt.

Ehuru den läkare som behandlar patienten slutligen bestämmer den dose- ring som skall gälla för patienten ifråga, är normalt förhållandet mel- lan den dagliga doseringen av en förening enligt föreliggande uppfinning eller ett salt därav och av beta-laktamantibiotikumet från l:5 till 5:1 och företrädesvis l:l. Dessutom är den dagliga orala doseringen av var- je komponent normalt l0-200 mg per kg kroppsvikt och den dagliga parente- rala doseringen av varje komponent är normalt l0-l00 mg per kg kropps- vikt. Dessa värden är endast åskådliggörande och i vissa fall kan det va- ra nödvändigt att använda doseringar utanför de angivna gränserna.

Claims (2)

466 205 46 PATENTKRAV

1. Estrar med formeln 32Cl 324% S --1* ”C33 _ É'0R vari R är bensyl eller substituerad bensyl.

2. Förfarande för framställning av en förening enligt krav 1, k äfn nueat@e«eæk n eat .därfixfi,at&nman_uQgQettar,en förr eningïmed«forme1n~ N--_. °4L- 4?C-OR || 'O vari R är bensyl eller substituerad bensyl, i ett inert, vattenfritt organiskt lösningsmedel i närvaro av stora, ekvi- "molära mängder av en svag tertíär amin och en syraklorid, till dess reaktionen i huvudsak har fullbordats.