SE453497B - Antitumormedel och kompositioner pa basis derav samt forfarande for framstellning av dessa kompositioner - Google Patents

Description

453 497 mänhet administreras intravenöst, medan ett vattenolösligt material är begränsat till andra former av parenteral admi-V nistrering såsom intramuskulär och subkutan administrering.

Ett-terapeutiskt medel med vattenlöslighet underlättar även framställningen av orala och icke-intravenösa parenterala do- seringsformer för human administrering. Det är således avgjort fördelaktigt om ett terapeutiskt medel är vattenlösligt, spe- ciellt om man beaktar att den mest direkta vägen för uppnåen- de av terapeutiska blodnivåer av ett läkemedel i människokrop- pen är genom intravenös administrering.

Den fria basformen av m-AMSA har mycket begränsad löslighet i vatten och kan således icke användas i en doseringsform för intravenös administrering. Försök har gjorts att framställa syraadditionssalter i syfte att eliminera detta löslighetspro- blem, men de i litteraturen angivna monohydroklorid- och mono- metansulfonatsalterna har även visat sig ha otillräcklig vat- tenlöslighet för kliniskt bruk. Den beredning som för närva- rande utnyttjas kliniskt består av två sterila vätskor, som kombinerats före användning. En lösning av m-AMSA i vattenfri N,N-dimetylacetamid är innesluten i en ampull. En separat am- pull innehåller en vattenlösning av mjölksyra för användning som utspädningsmedel. Efter blandning administreras den erhåll- na m-AMSA-lösningen genom intravenös infusion. Ehuru den för närvarande kliniskt utnyttjade beredningen tillhandahåller en intravenös doseringsform uppvisar den flera nackdelar. Förutom de uppenbara svårigheterna med att framställa och administrera doseringsformen innehåller den dimetylacetamid som bärare. Di- metylacetamid har i litteraturen rapporterats ge olika toxiska symptom hos djur och kan således Visa sig vara oacceptabel el- ler icke önskvärd såsom farmaceutisk bärare.

Det är således ett ändamål med föreliggande uppfinning att tillhandahålla en vattenlöslig) stabil, terapeutiskt godtagbar form av m-AMSA, som kan administreras intravenöst (liksom me- delst andra administreringssätt) och som icke innehåller el- ler kräver dimetylacetamid som farmaceutisk bärare. Detta än- 10 15 20 25 30 35 453; 497» damål uppnås i enlighet med föreliggande uppfinning.

Enligt en aspekt tillhandahåller föreliggande uppfinning ett nytt vattenlösligt syraadditionssalt av mÉAMSA, som vid re- konstituering med sterilt vatten kan administreras intrave- nöst och som icke uppvisar de nackdelar som är förknippade med de kända intravenösa formerna av detta medel.Uppfinningen avser närmare bestämt det kristallina monoglukonatsaltet av m-AMSA.

Enligt en annan aspekt tillhandahåller uppfinningen en stabil, fast, vattenlöslig komposition för rekonstituering med vatten som en stabil lösning av m-AMSA, varvid kompositionen utgörs av en blandning av ca 1 mol m-AMSA-monoglukonatsalt per 1-3 mol av en organisk syra (eller förstadieförening därtill), som utgörs av glukonsyra, glukonolakton eller blandningar därav. Uppfinningen tillhandahåller även förfaranden för framställning av ovan angivna salt och komposition.

Uppfinningen beskrivs närmare med hänvisning till bifogade ritningar där FIG. 1 visar infraröd~absorptionsspektrum för det kristallina glukonatsaltet vid pelletering i kaliumbromid och FIG. 2 visar infraröd-absorptionsspektrum för en typisk vat- tenlöslig komposition vid pelletering i kaliumbromid.

Många konventionella farmaceutiskt godtagbara syradditions- salter av m-AMSA är endast ringa lösliga i vatten och är så- ledes olämpliga för intravenös administrering till human- patienter. Detta framgår av litteraturen över hydroklorid- och metansulfonatsalterna liksom av löslighetsundersökningar, som har utförts av uppfinnarna med avseende på sådana salter som levulinatet, citratet och laktobionatet. 10 15 20 25 30 35 " ';.;.2*.1"':; "Wri ._ wrficrg-ü 3.; - i, ~ v- Wwwniw ,r\ u c ,¶HH .,H ,w(fi EEHMÉ ïßfläffl 455 497 Vid undersökning av löslighetsegenskaperna hos syraadditions- salter av m-AMSA har det överraskande visat sig att ett speci- ellt kristallint salt av m-AMSA uppvisar tillräckligt hög vat- tenlöslighet vid rumstemperatur för att tillhandahålla en god- tagbar intravenös doseringsform. Det nya monoglukonatsaltet av m-AMSA enligt uppfinningen har således en vattenlöslighet vid rumstemperatur av ca 25 mg/ml. Detta glukonatsalt har även visat sig ha godtagbar stabilitet, både som ett kristallint fast material och i form av en vattenlösning vid rekonstitue- ring.

Framställningen av det kristallina glukonatsaltet av m-AMSA utförs genom att man (1) framställer en lösning av m-AMSA och en organisk syra (eller förstadieförening därtill), som ut- görs av glukonsyra (D-glukonsyra), glukonolakton É (D-glukonsyra-(f-lakton) eller en blandning därav, i ett inert, vattenhaltigt polärt organiskt lös- ningsmedel, som utgörs av polära alkoholer eller ketoner, varvid molförhållandet organisk syra till m-Amszyär från ca 1:1 till ca 2=1, ccn (2) kristalliserar det önskade glukonatsaltet ur den på så sätt erhållna lösningen.

Det speciella inerta, polära organiska lösningsmedel ifråga som används för solubilisering av m-AMSA-basen utgörs av polära alkoholer och ketoner, såsom metanol, etanol, n-pro- panol, isopropanol, aceton, n-butanol, 2-butanon, n-pentan- ol, n-hexanol, dietylenglykol, metylisobutylketon, 3-pentanon etc. Speciellt lämpligt lösningsmedel är etanol. Lösningsme- delssystemet bör innehålla en liten andel vatten (exempelvis ca.

O,5%), som antingen kan sättas till det organiska lösningsmed- let eller företrädesvis, tillföras i form av vattenhaltig glu- konsyralösning eller glukonolaktonlösning. 453 497 Med uttrycket "organisk syra" avses i föreliggande samanhanq glukonsyra som sådan eller en förstadieförening därtill, som hydrolyseras i vattenlösning under bildning av glukonsyra, exempelvis glukonolakton. Glukonsyra är svår att framställa i en väldefinierad kristallin form och därför tillhandahålls kommersiell glukonsyra som en 50%-ig vattenlösning. Glukono- lakton å andra sidan är ett väldefinierat kristallint materi- al, som lätt hydrolyseras i vattenlösninq till glukonsyra. På grund av lättillgängligheten av kristallin glukonolakton är det föredraget att använda glukonolakton som källa till glu- konsyra vid framställning av glukonatsaltet. Glukonolaktonen kan sättas till en vattenlösning av det oolära organiska lös- ningsmedlet för alstring av glukonsyran eller kan sättas till det organiska lösningsmedlet i form av en vattenlösning.

Den temperatur vid vilken upplösning âstadkoms är icke kritisk och kan variera från lösningsmedelssystemets fryspunkt till dess kokpunkt. Man använder med fördel temperaturer runt rums- temperatur eller däröver. Det har visat siq att lösligheten maximeras om blandningen bringats till âterflödestemperatur.

Glukonsyran eller glukonolaktonen kan användas i molförhâllan- den av ca l«2 mol per mol m«AMSA«bas. Den kvalitativt bästa produkten har emellertid erhållits vid användning av ekvimo- lära mängder av m-AMSA och den organiska syran.

Efter framställning av en lösning av mfAMSA och syra är det föredraget att utföra ett filtreringssteg innan kristallisa- tion äger rum. Man kan'därvid använda standardkristallisations- teknik för erhållande av det önskade glukonatsaltet. Grodd- kristaller av glukonatsaltet kan sättas till reaktionsbland- ningen för att inducera och/eller förstärka kristallisationen.

Efter utvinning tvättas det kristallina saltet (exempelvis med etanol) och torkas på konventionellt sätt. Omkristallisation (t.ex. ur etanol) kan utnyttjas för erhållande av produkten i högren form. 10 15 20 25 30 35 455 497 Enligt en annan aspekt tillhandahåller föreliggande uppfin- ning en stabil, fast vattenlöslig komposition, som är lämplig som en stabil lösning av m-AMSA vid rekonstruering med vatten, varvid kompositionen utgörs av en blandning av ca 1 mol m-AMSA- -monoglukonatsalt per 1-3 mol av en organisk syra (eller för- stadieförening därtill), som utgörs av glukonsyra, glukonolak- ton eller en blandning därav.

Ovan beskrivna komposition kan användas i form av antingen en torrampullprodukt eller lyofiliserad produkt men är företrä- desvis en lyofiliserad blandning. Kompositionen kan snabbt och bekvämt rekonstitueras med sterilt vatten för tillhanda- hållande av verkliga lösningar av m-AMSA innehållande minst 5 mg/ml m-AMSA med utmärkta stabilitetsegenskaper.

Framställningen av den vattenlösliga kompositionen kan bekvämt åstadkommas medelst ett konventionellt lyofiliseringsförfaran- de. Man framställer således en vattenlösning av m-AMSA och ett överskott av glukonsyra eller en källa till glukonsyra (exem- pelvis en organisk syra som hydrolyserar i vattenlösning under bildning av glukonsyra) och denna lösning underkastas däref- ter ett standardlyofiliseringsförfarande för erhållande av den önskade fasta kompositionen.

Glukonsyran (eller dess ekvivalent) användes i ett molförhål- lande av ca 2-4 mol (i synnerhet ca 2,5 mol) per mol m-AMSA- -bas. Eftersom, såsom har angivits ovan, kommersiell glukonsy- ra icke är tillgänglig i en väldefinierad kristallin form är det föredraget att använda kristallin glukonolakton som orga- nisk syra. Glukonolaktonen hydrolyserar snabbt i vatten under bildning av glukonsyra. Under lyofiliseringen omvandlas glukon- syra åtminstone delvis till glukonolakton. Den lyofiliserade produkten innefattar därför en blandning av monoglukonatsaltet av m-AMSA och ca 1-3 mol glukonsyraöverskott, varvid syran dáä- vis föreligger i glukonsyraform och delvis i glukonolaktonform. 10 15 20 25 30 35 4531497 Efter framställning av vattenlösningen av m-AMSA och syra filtreras reaktionsblandningen företrädesvis före lyofili- sering. Lyofiliseringen kan utföras i konventionella labora- torie- eller industrilyofilisatorer. Föredragna lyofilise- ringsparametrar är följande: -55°c; _ -SOOC under 2 timmar; -40oC under tryck +30OC under förfrysning vid frysning vid sublimering vid ca 68 timmar vid ett av ca 4 x 10-2 torr;' torkning vid ca 48 timmar.

Det kristallina glukonatsaltet och den vattenlösliga komposi- tion som tillhandahålles enligt föreliggande uppfinning upp- visar väsentligen samma antitumöregenskaper som tidigare inom tekniken kända m-AMSA-former. Till följd av deras höga vatten- löslighet kan de emelertid användas för framställning av do- seringsformer för intravenös administrering, som icke innehål- ler någon icke önskvärd farmaceutisk bärare, såsom dimetylacet- amid. Saltet och kompositionen kan vidare användas för fram- ställning av individuella torrproduktampuller eller lyofilise- rade produkter för rekonstituering med sterilt vatten. En föredragen bärare för rekonstituering av glukonatsaltet är en vattenlösning av glukonsyra. m-AMSA-saltet och kompositionen enligt föreliggande uppfinning kan användas för framställning av orala eller icke-intravenösa parenterala doseringsformer liksom för framställning av den föredragna, intravenöst injicerbara produkten. Saltet och kom- positionen har godtagbar stabilitet, både i fast form och i form av en vattenlösning, och har tillräcklig vattenlöslighet för att medge administrering av en effektiv dos av m-MASA i en relativt liten volym parenteral lösning (vilket således möj- liggör bolus-injektioner intravenöst.) Vid behandling av tumörer hos däggdjur kan saltet och komposi- ,. , v... , , _ __ _ “- Én *í í W' w. ...,,..,».. 455 497, tionen enligt föreliggande uppfinning administreras antingen oralt eller parenteralt men företrädesvis parenteralt i såda- na doseringar (som anpassas efter mängden m-AMSA-bas) och en- ligt sådant doseringsschema som tidigare har angivits i lit- teraturen.

Uppfinningen åskådliggörs närmare medelst följande utförings- exempel, vari temperaturerna avser Celsiusgrader.

Exempel l Framställning av m-AMSA-monoglukonatsalt 0,89 g (0,005 mol) 1,95 g (0,005 mol) m-AMSA-bas och 100 ml etanol tillsattes och blandningen återloppskokades därefter under kort tid, dvs. 5- -10 minuter. Den erhållna lösningen fick stå över natten, var- efter kristallint material avskiljdes från lösningen. Produk- ten omkristalliserades ur 100 ml etanol, varvid man erhöll l,l0 g kristallint m-AMSA-monoglukonatsalt.

Egenskaper hos qlukonatsalt av m-AMSA m-AMSA-halt enligt UV = 62,6% (teoretisk halt 66,6%) glukonsyrahalt enligt UV¶= 36,9 % glukonolaktonhalt enligt UV = l,l% löslighet i vatten: 30 mg/ml vid 50-600 och 25 mg/ml vid rumstemperatur.

Vid upplösning i vatten i en koncentration av 7,1 pg/ml ger glukonatsaltet ultraviolettabsorptionstoppar vid 208 nm (optisk densitet = 0,527), 247,5 nm (optisk den- sitet = 0,567), 263 nm (optisk densitet = 0,425) och 412 nm (optisk densitet = 0,121).

FIG. l visar infrarödabsorptionsspektrum för glukonat- saltet vid pêletteriflg i kaliumbromid. 453 497 Exempel 2 Framställning av en vattenlöslig komposition av m-AMSA Denna komposition utnyttjades för framställning av ampuller med en aktivitet av 75 mg m-AMSA.

Beståndsdelar 'Per ampull Per liter sats m-AMSA-bas 75 mg 5 g glu onolakton (glukonsyra- " - -lakton) 93,46 mg 6,23 g vatten för injektionsändamål q.s. till l5 ml q.s.1flll lliter l. Man framställde en 10%-ig lösning av glukonolakton genom att inväga l0 g av denna förening och under omröring sätta laktonen till 80 ml vatten för injektionsändamål i en glas- behållare. Omröringen fortsattes till dess fullständig upp? lösning hade erhållits. Därefter fyllde man upp till 100 ml med vatten för injektionsändamål och rörde om det hela 5 minu- ter. Lösningen användes efter att ha stått 24 timmar vid rums- temperatur. 2. 5 g m-AMSA-bas invägdes. 3. Till en lämplig glasbehållare innehållande 600 ml vatten för injektionsändamâl sattes under omröring 25 ml av den lO%- -iga glukonolaktonlösningen. 4. Under kraftig omröring sattes långsamt 5 g av m«AMSA-basen till glasbehållaren. Omröringen fortsattes 30 minuter. 5. Under omröring sattes 20 ml av den 10%-iga glukonolaktonlös- ningen till reaktionsblandningen. Blandningen omrördes 30 mi- nuter. 6. Återstoden av den lO%«iga glukonolaktonlösningen (l7,3 ml) sattes långsamt till reaktionsblandningen. Omröringen fortsat- i 455 497 10 I» tes till dess fullständig upplösning hade erhållits. 7. Man fyllde på vatten för injektionsändamål till l liter. 8. Under kvävgas fick lösningen passera ett 0,22 mikron fil- ter. 9. Lösningen tappades på 30-38 ml flintglasampuller (15 ml lös- ning per flWXfll)- Röda lyofiliseringsproppar av butylgummi in- sattes partiellt. 10. Ampullerna underkastades frystorkning vid följande paramet- rar: ' förfrysning vid -55°c; frysning vid -50oC under 2 timmar; sublimering vid -400 under ca 68 timmar vid ett tryck av ca 4 x lO_2 torr; torkning vid +30OC under ca 48 timmar. ll. Ampullerna förslöts i vakuum eller under kväveatmosfär och förseglades. 12. För rekonstituering användes 20 ml vatten för injektions- ändamål per ampull.

Egenskaper hos den lyofiliserade kompositionen: Rekonstitueringstid med 20 ml vatten: 4-5 minuter.

Lösningens pH-värde: 3,65 Analys på 0,l72 g total komposition: ca 72 mg m-AMSA, ca 93 mg t0tal91Uk0nSYfa(potentiometriskt), varav ca 40 mg var 5 -glukonolakton (gaskromatografi). Halten föroreningar låg under detekteringsgränsen.

Vattenhalt enligt Karl Fischer: 0,8 % Den rekonstituerade produktens vattenstabilitet var till- fredsställande efter 24 timmar. Potensförlusten var knap- past märkbar och några föroreningar kunde icke påvisas.

" 'W"*0Phflv '=~°>~~~:v-“ æw;-fi:yw;,_,g-,x,m-,wä,..-,HM., __ _,_w~,.,_,, , 453 497 ll Vid upplösning i vatten i en koncentration av 12,17 pg/ml uppvisade den lyofiliserade kompositionen ultraviolettab- sorptionstoppar vid 209 nm (optisk densitet = 0,607), 247,5 nm (optisk densitet = 0,607), 266 nm (optisk den- sitet = 0,534), 413 nm (optisk densitet = 0,145) och 435 nm (optisk densitet = 0,143).

FIG. 2 visar infrarödabsorptionsspektrum för den lyofili~ serade kompositionen vid peletterinq i kaliumbromid.

Claims (14)

10 15 20 25 30 35 453 497 12 Eatentkrav

1. Det kristallina glukonatsaltet av 4'-(9-akridinylamino)- metansulfon-m-anisidid (m-AMSA).

2. Förfarande för framställning av det kristallina glukonat-_ saltet av m-AMSA enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a t där- av, att man V (1) framställer en lösning av m-AMSA och en organisk syra, som utgörs av glukonsyra, glukonolakton eller en blandning därav, i ett inert, vattenhaltigt po- lärt organiskt lösningsmedel, som utgörs av polära alkoholer eller ketoner, varvid molförhållandet or- ganisk syra till m-AMSA är från 1:1 till 2:1 och (2) kristalliserar det önskade glukonatsaltet ur den på så sätt erhållna lösningen-

3. Förfarande enligt krav 2, k ä n n e t e c k n a t därav, att man använder ca 1 mol organisk syra per mol m-AMSA.

4. Förfarande enligt krav 2, k ä n n e t e c k n a t därav, att det organiska lösningsmedlet är etanol.

5. Förfarande enligt krav 2, k ä n n e t e c k n a t därav, att steg (1) utförs vid àterflödestemperatur.

6. Förfarande enligt krav 2, k ä n n e t e c k n a t därav, att den i steg (1) framställda lösningen filtreras före kris- tallisationen._

7. Stabil, fast vattenlöslig komposition för rekonstituering med vatten för bildning av en stabil lösning av m-AMSA, k ä n n e t e c k n a d därav, att den utgörs av en bland- ning av ca 1 mol m-AMSA-glukonatsalt per 1-3 mol av en orga- nisk syra, som utgörs av glukonsyra, glukonolakton eller en blandning därav.

8. Komposition enligt krav 7, k ä n n e t e c k n a d därav, 10 15 20 30 35 __; oc) att den utgörs av ca 1 mol m-ÄMSA-glukonatsalt per 1,5 mol organisk syra. O

9. Stabil, fast vattenlöslig komposition för rekonstituering med vatten för bildning av en stabil lösning av m-AMSA, Z k ä n n e t e c k n a d därav, att den har framställts genom datt man (1) bildar en vattenlösning av m-AMSA och en organisk syra, som utgörs av glukonsyra, glukonolakton eller en blandning därav, varvid molförhàllandct organisk syra till m-AMSA är från 2:1 till 4:1 och (2) lyofiliserar-den på så sätt erhållna vattenlösningen.

10. Förfarande för framställning av en stabil, fast vattenlös- lig komposition enligt krav 9 för rekonstruering med vatten för bildning av en stabil lösning av m-AMSA, k ä n n e - t e c k n a t därav, att man (1) framställer en vattenlösning av m-AMSA och en orga- nisk syra, som utgörs av glukonsyra, glukonolakton eller en blandning därav, varvid molförhållandet organisk syra till m-AMSA är från 2:1 till 4:1 och (2) lyofiliserar den på så sätt framställda vattenlösningen.

11. Förfarande enligt krav 10, k ä n n e t e,c k n a t därav, att man använder ca 2,5 mol organisk syra per mol m-AMSA.

12. Förfarande enligt krav 10 eller 11, k ä n n e t e c k - n a t därav, att den använda organiska syran är glukonolakton.

13. Förfarande enligt krav 10, k ä n n e t e c k n a t därav, att man framställer vattenlösningen i steg (1) genom att om- sätta ca 5 g m-AMSA och 6,23 g glukonolakton per liter lösning.

14. Förfarande enligt krav 10, k ä n n e t e c k n a t därav, att man filtrerar vattenlösningen i steg (1) före lyofilise- ringen.