RU2828843C1 - Method for increasing productivity of hybridoma cells by culturing them in presence of colchicine - Google Patents
Method for increasing productivity of hybridoma cells by culturing them in presence of colchicine Download PDFInfo
- Publication number
- RU2828843C1 RU2828843C1 RU2024110791A RU2024110791A RU2828843C1 RU 2828843 C1 RU2828843 C1 RU 2828843C1 RU 2024110791 A RU2024110791 A RU 2024110791A RU 2024110791 A RU2024110791 A RU 2024110791A RU 2828843 C1 RU2828843 C1 RU 2828843C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hybridoma cells
- productivity
- concentration
- colchicine
- cultivation
- Prior art date
Links
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 title claims abstract description 29
- IAKHMKGGTNLKSZ-INIZCTEOSA-N (S)-colchicine Chemical compound C1([C@@H](NC(C)=O)CC2)=CC(=O)C(OC)=CC=C1C1=C2C=C(OC)C(OC)=C1OC IAKHMKGGTNLKSZ-INIZCTEOSA-N 0.000 title claims abstract description 25
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 229960001338 colchicine Drugs 0.000 title claims abstract description 13
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 title claims abstract description 13
- 238000012258 culturing Methods 0.000 title claims description 7
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 12
- MFBOGIVSZKQAPD-UHFFFAOYSA-M sodium butyrate Chemical compound [Na+].CCCC([O-])=O MFBOGIVSZKQAPD-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 10
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 8
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 claims abstract description 7
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 claims abstract description 4
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 claims abstract description 4
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 claims abstract description 4
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 claims description 4
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 claims description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 abstract description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 3
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 3
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- 238000011138 biotechnological process Methods 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M potassium acetate Chemical compound [K+].CC([O-])=O SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001481710 Cerambycidae Species 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- VSNHCAURESNICA-UHFFFAOYSA-N Hydroxyurea Chemical compound NC(=O)NO VSNHCAURESNICA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003237 betaine Drugs 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N glycine betaine Chemical compound C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001330 hydroxycarbamide Drugs 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000012740 non-selective inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 235000011056 potassium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000004017 serum-free culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000008054 signal transmission Effects 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Abstract
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕFIELD OF TECHNOLOGY TO WHICH THE INVENTION RELATES
Изобретение относится к области биотехнологии и может применяться в производстве моноклональных антител методом in vitro культивирования гибридомных клеток. Кроме того, изобретение может найти применение в научных исследованиях. Изобретение направлено на повышение продуктивности гибридомных клеток с помощью добавления в культуральную среду колхицина.The invention relates to the field of biotechnology and can be used in the production of monoclonal antibodies by in vitro cultivation of hybridoma cells. In addition, the invention can find application in scientific research. The invention is aimed at increasing the productivity of hybridoma cells by adding colchicine to the culture medium.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИLEVEL OF TECHNOLOGY
К настоящему времени описаны методы повышения продуктивности гибридомных клеток, основанные на различных принципах, включая:To date, methods for increasing the productivity of hybridoma cells have been described based on various principles, including:
- оптимизацию физических условий культивирования (температуры, осмолярности, рН среды, скорости перемешивания, вида перемешивающего устройства) [K. Øyaas, Karin Øyaas, Т. Е. Ellingsen, N. Dyrset, and D. W. Levine, "Hyperosmotic hybridoma cell cultures: Increased monoclonal antibody production with addition of glycine betaine", Biotechnology and Bioengineering, vol. 44, no. 8, pp. 991-998, Oct. 1994, doi: 10.1002/bit.260440816];- optimization of physical cultivation conditions (temperature, osmolarity, pH of the medium, stirring speed, type of stirring device) [K. Øyaas, Karin Øyaas, T. E. Ellingsen, N. Dyrset, and D. W. Levine, "Hyperosmotic hybridoma cell cultures: Increased monoclonal antibody production with the addition of glycine betaine", Biotechnology and Bioengineering, vol. 44, no. 8, pp. 991-998, Oct. 1994, doi: 10.1002/bit.260440816];
- подбор режима культивирования (стартовая концентрация клеток, общее время культивирования, время и скорость внесения дополнительных питательных веществ) [Y. Т. Luan, R. Mutharasan, R. Mutharasan, and W. E. Magee, "Strategies to extend longevity of hybridomas in culture and promote yield of monoclonal antibodies," Biotechnology Letters, vol. 9, no. 10, pp. 691-696, Oct. 1987, doi: 10.1007/bf01024599];- selection of the cultivation mode (starting cell concentration, total cultivation time, time and rate of addition of additional nutrients) [Y. T. Luan, R. Mutharasan, R. Mutharasan, and W. E. Magee, "Strategies to extend longevity of hybridomas in culture and promote yield of monoclonal antibodies," Biotechnology Letters, vol. 9, no. 10, pp. 691-696, Oct. 1987, doi: 10.1007/bf01024599];
- поиск более дешевых компонентов питательных сред, способных поддерживать рост гибридомных клеток [K. Yamada, I. Ikeda, Т. Sugahara, S. Shirahata, and H. Murakami, "Screening of Immunoglobulin Production Stimulating Factor (IPSF) in Foodstuffs Using Human-human Hybridoma HB4C5 Cells," Agricultural and Biological Chemistry, vol. 53, no. 11, pp. 2987-2991, 1989, doi: 10.1080/00021369.1989.10869785.]; - использование ингибиторов роста гибридомных клеток [Е. Suzuki and D. F. Ollis, "Enhanced antibody production at slowed growth rates: experimental demonstration and a simple structured model," Biotechnol. Prog., vol. 6, no. 3, pp. 231-236, 1990, doi: 10.1021/bp00003a013].- search for cheaper components of nutrient media capable of supporting the growth of hybridoma cells [K. Yamada, I. Ikeda, T. Sugahara, S. Shirahata, and H. Murakami, "Screening of Immunoglobulin Production Stimulating Factor (IPSF) in Foodstuffs Using Human-human Hybridoma HB4C5 Cells," Agricultural and Biological Chemistry, vol. 53, no. 11, pp. 2987-2991, 1989, doi: 10.1080/00021369.1989.10869785.]; - use of inhibitors of hybridoma cell growth [E. Suzuki and D. F. Ollis, "Enhanced antibody production at slowed growth rates: experimental demonstration and a simple structured model," Biotechnol. Prog., vol. 6, no. 3, pp. 231-236, 1990, doi: 10.1021/bp00003a013].
Ранее были предложены ингибиторы пролиферации гибридомных клеток, способные повышать их продуктивность и работающие по различным механизмам: ингибиторы синтеза ДНК (тимидин, гидроксимочевина), неселективные ингибиторы синтеза белка (ацетат калия), вторичные посредники передачи внутриклеточных сигналов (цАМФ), ингибиторы внутриклеточных белков (бутират натрия).Previously, inhibitors of hybridoma cell proliferation were proposed that are capable of increasing their productivity and work by various mechanisms: inhibitors of DNA synthesis (thymidine, hydroxyurea), non-selective inhibitors of protein synthesis (potassium acetate), secondary messengers of intracellular signal transmission (cAMP), inhibitors of intracellular proteins (sodium butyrate).
Наиболее близким к заявляемому способу по технической сущности и достигаемому результату является метод, предложенный Field, R. [Field, R. (2022). Enhanced production of proteins by cell culture (Patent No. CA 1341367). The Canadian Patent Office]. Суть этого метода заключается в повышении продуктивности клеток, полученных методами генетической инженерии, путем их культивирования при постоянном присутствии в культуральной среде алкановых кислот или их солей в концентрациях от 0.1 до 200 мМ. Культивирование клеток при этом может проводиться как в бессывороточных культуральных средах, так и в средах с добавлением сыворотки. Особое внимание в материалах описываемого метода уделяется использованию бутирата натрия (или бутановой кислоты) для повышения продукции иммуноглобулинов (в том числе IgG) гибридомными клетками. В частности, показан положительный эффект бутирата натрия на продуктивность гибридомных клеток при их культивировании в среде DMEM в колбах при перемешивании, при концентрации углекислого газа 5% и температуре 37 °С.The closest to the claimed method in technical essence and the achieved result is the method proposed by Field, R. [Field, R. (2022). Enhanced production of proteins by cell culture (Patent No. CA 1341367). The Canadian Patent Office]. The essence of this method is to increase the productivity of cells obtained by genetic engineering methods by culturing them in the constant presence of alkanoic acids or their salts in the culture medium at concentrations from 0.1 to 200 mM. Cell cultivation can be carried out both in serum-free culture media and in media with the addition of serum. Particular attention in the materials of the described method is paid to the use of sodium butyrate (or butanoic acid) to increase the production of immunoglobulins (including IgG) by hybridoma cells. In particular, a positive effect of sodium butyrate on the productivity of hybridoma cells was shown when they were cultured in DMEM medium in flasks with stirring, at a carbon dioxide concentration of 5% and a temperature of 37 °C.
С позиции критики необходимо отметить, что одновременное применение нескольких методов повышения продуктивности может иметь кумулятивный эффект, что делает поиск новых методов важным для разработки более эффективных биотехнологических процессов. Поэтому поиск новых стимуляторов продуктивности гибридом может с одной стороны помочь обнаружить вещества, которые способны более эффективно воздействовать на некоторые клеточные линии, чем уже известные аналоги, а с другой вновь обнаруженные вещества могут иметь потенциал для совместного использования с уже известными аналогами для повышения их эффективности.From a critical standpoint, it should be noted that the simultaneous use of several productivity enhancing methods can have a cumulative effect, which makes the search for new methods important for the development of more efficient biotechnological processes. Therefore, the search for new stimulators of hybridoma productivity can, on the one hand, help to discover substances that are able to act more effectively on some cell lines than already known analogues, and on the other hand, newly discovered substances may have the potential for joint use with already known analogues to increase their efficiency.
Заявляемый способ позволяет решать задачу повышения продуктивности гибридомных клеток за счет использования колхицина в процессе культивирования. Это имеет существенное значение, особенно в ситуациях, когда для используемой в биотехнологическом процессе клеточной линии иные методы повышения продуктивности малоэффективны или их эффективность может быть повышена использованием заявленного способа.The claimed method allows solving the problem of increasing the productivity of hybridoma cells by using colchicine in the cultivation process. This is of significant importance, especially in situations where other methods of increasing productivity are ineffective for the cell line used in the biotechnological process or their effectiveness can be increased by using the claimed method.
РАСКРЫТИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯDISCLOSURE OF INVENTION
Задачей, на решение которой направлено заявляемое изобретение, является повышение продуктивности гибридомных клеток при их in vitro культивировании с целью получения моноклональных антител. В качестве меры продуктивности при этом используется концентрация продуцируемых клетками IgG в культуральной среде по окончанию культивирования.The task to which the claimed invention is directed is to increase the productivity of hybridoma cells during their in vitro cultivation for the purpose of obtaining monoclonal antibodies. The concentration of IgG produced by the cells in the culture medium at the end of cultivation is used as a measure of productivity.
Предлагаемый способ заключается в культивировании гибридомных клеток-продуцентов IgG в среде, содержащей DMEM, сыворотку крови крупного рогатого скота и бутират натрия в присутствии колхицина.The proposed method consists of culturing hybridoma cells producing IgG in a medium containing DMEM, bovine serum and sodium butyrate in the presence of colchicine.
Сущность изобретенияThe essence of the invention
В стандартную культуральную среду DMEM (используется DMEM High Glucose (4,5 g/l) w/o L-Glutamin, компании Capricorn Scientific), добавляется сыворотка KPC до конечной концентрации 10%, L-глутамин до конечной концентрации 2 мМ, пируват натрия до конечной концентрации 1.2 мМ, гентамицин до конечной концентрации 30 мкг/мл и бутират натрия до конечной концентрации 1 мМ. Среду описанного состава используют в качестве контроля. В среду, используемую в качестве контроля, добавляется колхицин до конечной концентрации 10 нг/мл. Вносятся клетки гибридомы и осуществляется культивирование в условиях температуры 37 °С и концентрации СО2 5% в течение 9 дней. По окончании культивирования клетки гибридомы удаляются центрифугированием, а в супернатанте определяют концентрацию полученных иммуноглобулинов.In a standard DMEM culture medium (DMEM High Glucose (4.5 g/l) w/o L-Glutamin, Capricorn Scientific) are added KPC serum to a final concentration of 10%, L-glutamine to a final concentration of 2 mM, sodium pyruvate to a final concentration of 1.2 mM, gentamicin to a final concentration of 30 μg/ml, and sodium butyrate to a final concentration of 1 mM. The medium of the described composition is used as a control. Colchicine is added to the medium used as a control to a final concentration of 10 ng/ml. Hybridoma cells are introduced and cultivated at 37 °C and 5% CO 2 for 9 days. Upon completion of the cultivation, the hybridoma cells are removed by centrifugation, and the concentration of the obtained immunoglobulins is determined in the supernatant.
Достигаемый изобретением технический результат заключается в том, что обеспечивается значимое повышение продуктивности гибридомных клеток, заключающееся в приросте концентрации IgG в культуральной среде по окончанию культивирования по сравнению с результатом культивирования в среде, содержащей бутират натрия.The technical result achieved by the invention consists in the fact that a significant increase in the productivity of hybridoma cells is ensured, consisting in an increase in the concentration of IgG in the culture medium at the end of cultivation compared to the result of cultivation in a medium containing sodium butyrate.
Признаки способа, отвечающие критерию новизны, состоят в том, что для повышения продуктивности гибридомных клеток используется введение в уже известную и применяемую культуральную среду нового вещества - колхицина, для которого ранее не была показана биологическая активность в отношении гибридом.The features of the method that meet the criterion of novelty consist in the fact that in order to increase the productivity of hybridoma cells, a new substance is introduced into an already known and used culture medium - colchicine, for which biological activity in relation to hybridomas has not previously been demonstrated.
Заявляемое изобретение иллюстрируется следующим примером осуществления.The claimed invention is illustrated by the following example of implementation.
Пример 1Example 1
Все процедуры проводят в ламинарных шкафах II класса биологической защиты с использованием стерильной одноразовой посуды и реагентов.All procedures are carried out in laminar flow cabinets of class II biological protection using sterile disposable utensils and reagents.
Исходный раствор колхицина готовят из стерильного порошка, растворяя его в стерильной бидистиллированной воде до концентрации 1 мкг/мл. Раствор бутирата натрия готовят путем смешивания равных объемов 200 мМ раствора бутановой кислоты и 200 мМ раствора NaOH и стерилизуют пропусканием через шприцевой фильтр с диаметром пор 0.22 мкм.The stock solution of colchicine is prepared from the sterile powder by dissolving it in sterile bidistilled water to a concentration of 1 μg/ml. The sodium butyrate solution is prepared by mixing equal volumes of 200 mM butanoic acid and 200 mM NaOH and sterilized by passing through a syringe filter with a pore diameter of 0.22 μm.
В культуральную среду DMEM, содержащую 10% ABS (сыворотка крови крупного рогатого скота), 2 мМ глутамина, 1.2 мМ пирувата натрия, 30 мкг/мл гентамицина и 1 мМ бутирата натрия добавляют колхицин до конечной концентрации 10 нг/мл.Colchicine was added to the DMEM culture medium containing 10% ABS (bovine serum), 2 mM glutamine, 1.2 mM sodium pyruvate, 30 μg/ml gentamicin and 1 mM sodium butyrate to a final concentration of 10 ng/ml.
Клетки гибридомы G3D3 в экспоненциальной фазе роста центрифугируют при 120g 5 мин. Супернатант удаляют. Клетки ресуспендируют в подготовленной культуральной среде, содержащей колхицин и вносят в лунки плоскодонного 48-ми луночного планшета. Культивирование проводят при 37 °С и концентрации СО2 5%. На 9 день из лунок отбирают пробы, которые центрифугируют при 10000g 10 мин и определяют концентрацию мышиных иммуноглобулинов G в супернатанте методом ИФА в трехкратной повторности. Результаты измерений для приведенного примера представлены в таблице 1 (приведены медиана и медианное абсолютное отклонение). Концентрация IgG в таблице указана в процентах от их концентрации в контрольной группе (не содержащей колхицин). Использование заявляемого способа культивирования гибридомных клеток позволяет повысить их продуктивность по сравнению с прототипом на 43%.G3D3 hybridoma cells in the exponential growth phase are centrifuged at 120g for 5 min. The supernatant is removed. The cells are resuspended in the prepared culture medium containing colchicine and added to the wells of a flat-bottomed 48-well plate. Cultivation is carried out at 37 °C and a CO2 concentration of 5%. On the 9th day, samples are taken from the wells, centrifuged at 10,000g for 10 min, and the concentration of mouse immunoglobulins G in the supernatant is determined by the ELISA method in triplicate. The measurement results for the given example are presented in Table 1 (the median and median absolute deviation are given). The IgG concentration in the table is indicated as a percentage of their concentration in the control group (not containing colchicine). The use of the claimed method for culturing hybridoma cells allows increasing their productivity by 43% compared to the prototype.
Таким образом, технический результат от использования предлагаемого изобретения заключается, в том, что разработанный способ культивирования гибридомных клеток позволяет повысить их продуктивность за счет добавления в культуральную среду колхицина.Thus, the technical result from the use of the proposed invention is that the developed method for culturing hybridoma cells allows for increasing their productivity by adding colchicine to the culture medium.
Claims (1)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2828843C1 true RU2828843C1 (en) | 2024-10-21 |
Family
ID=
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA1341367C (en) * | 1986-03-14 | 2002-06-11 | Raymond Paul Field | Enhanced production of proteins by cell culture |
| RU2431667C2 (en) * | 2006-04-13 | 2011-10-20 | Медикал Энд Байолоджикал Лэборетериз Ко., Лтд. | Fused partner cell |
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA1341367C (en) * | 1986-03-14 | 2002-06-11 | Raymond Paul Field | Enhanced production of proteins by cell culture |
| RU2431667C2 (en) * | 2006-04-13 | 2011-10-20 | Медикал Энд Байолоджикал Лэборетериз Ко., Лтд. | Fused partner cell |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| LUAN Y.Т. et al. "Strategies to extend longevity of hybridomas in culture and promote yield of monoclonal antibodies", Biotechnology Letters, vol. 9, no. 10, pp. 691-696, Oct. 1987, doi: 10.1007/bf01024599. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US12018070B2 (en) | Methods of shifting an isoelectric profile of a protein product and uses thereof | |
| JP6943972B2 (en) | Perfusion medium | |
| CN108884428B (en) | Connecting perfusion to continuous flow stirred tank reactor cell culture system | |
| EP2188371A2 (en) | Use of perfusion to enhance production of fed-batch cell culture in bioreactors | |
| AU2015369809B2 (en) | Methods of culturing a mammalian cell | |
| EP4008774A1 (en) | Cell culture method and application thereof based on high-density and continuous inoculation | |
| AU2020207824A1 (en) | Perfusion media | |
| RU2828843C1 (en) | Method for increasing productivity of hybridoma cells by culturing them in presence of colchicine | |
| Thyden et al. | Recycling spent animal cell culture media using the thermally resistant microalga Chlorella sorokiniana | |
| CN109576212B (en) | Culture method of seed cells in high-density inoculation culture and application thereof | |
| US20220333054A1 (en) | Methods of perfusion culturing a mammalian cell | |
| CN119709591A (en) | Method for producing antibody by improving cell inoculation density through seed perfusion culture and application | |
| Lindbom et al. | High throughput hybridoma cultivation | |
| RU2811104C2 (en) | Methods of cultivating mammal cells | |
| Ott | Upstream Process Intensification Using an Ultra-High Cell Density Chinese Hamster Ovary Cell Bank | |
| Wang et al. | High cell density perfusion culture of hybridoma cells for production of monoclonal antibodies in the celligen packed bed reactor | |
| Tolbert et al. | Perfusion culture | |
| CN116376802A (en) | Universal serum-free protein-free culture medium and application thereof | |
| Marx¹ et al. | ADAPTATION OF A MURINE MONOCLONAL HYBRIDOMA CELL LINE TO A LOW COST SERUMFREE MEDIUM BY A REPEATED BATCH FERMENTATION PROCEDURE |