RU2826621C2 - Haemostatic composition (embodiments) - Google Patents
Haemostatic composition (embodiments) Download PDFInfo
- Publication number
- RU2826621C2 RU2826621C2 RU2022117545A RU2022117545A RU2826621C2 RU 2826621 C2 RU2826621 C2 RU 2826621C2 RU 2022117545 A RU2022117545 A RU 2022117545A RU 2022117545 A RU2022117545 A RU 2022117545A RU 2826621 C2 RU2826621 C2 RU 2826621C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- mbgs
- animals
- bleeding
- chitosan
- blood
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 29
- 229940030225 antihemorrhagics Drugs 0.000 title abstract description 17
- 230000000025 haemostatic effect Effects 0.000 title abstract 2
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims abstract description 48
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 19
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M Formate Chemical compound [O-]C=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 16
- 230000002439 hemostatic effect Effects 0.000 claims description 16
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 abstract description 43
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 abstract description 42
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 abstract 2
- 208000010496 Heart Arrest Diseases 0.000 abstract 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 abstract 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 70
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 26
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 26
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 20
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 18
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 18
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 16
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 14
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 14
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 13
- 239000002874 hemostatic agent Substances 0.000 description 13
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 11
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 9
- 230000034994 death Effects 0.000 description 9
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 9
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 8
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 8
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 8
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 8
- 210000003815 abdominal wall Anatomy 0.000 description 7
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 6
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 6
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 6
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 230000036387 respiratory rate Effects 0.000 description 6
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 5
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 5
- 231100000753 hepatic injury Toxicity 0.000 description 5
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 5
- -1 polyhexamethylene guanidine hydrochloride Polymers 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 5
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 4
- 206010067979 Traumatic liver injury Diseases 0.000 description 4
- 229920000122 acrylonitrile butadiene styrene Polymers 0.000 description 4
- 239000004676 acrylonitrile butadiene styrene Substances 0.000 description 4
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 4
- 210000002565 arteriole Anatomy 0.000 description 4
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 4
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002350 laparotomy Methods 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 4
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 4
- 210000000264 venule Anatomy 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 3
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 3
- 238000011887 Necropsy Methods 0.000 description 3
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 3
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 3
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 3
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 3
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 3
- 238000013461 design Methods 0.000 description 3
- GYZLOYUZLJXAJU-UHFFFAOYSA-N diglycidyl ether Chemical class C1OC1COCC1CO1 GYZLOYUZLJXAJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 3
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 3
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 3
- 238000007468 re-laparotomy Methods 0.000 description 3
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000005714 Chitosan hydrochloride Substances 0.000 description 2
- 206010011703 Cyanosis Diseases 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010061249 Intra-abdominal haemorrhage Diseases 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 206010033546 Pallor Diseases 0.000 description 2
- 206010071229 Procedural haemorrhage Diseases 0.000 description 2
- 229910000639 Spring steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 208000001871 Tachycardia Diseases 0.000 description 2
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 2
- XECAHXYUAAWDEL-UHFFFAOYSA-N acrylonitrile butadiene styrene Chemical compound C=CC=C.C=CC#N.C=CC1=CC=CC=C1 XECAHXYUAAWDEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 2
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000006196 deacetylation Effects 0.000 description 2
- 238000003381 deacetylation reaction Methods 0.000 description 2
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 description 2
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 2
- 238000005534 hematocrit Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 2
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 229920005787 opaque polymer Polymers 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 229920000139 polyethylene terephthalate Polymers 0.000 description 2
- 239000005020 polyethylene terephthalate Substances 0.000 description 2
- 239000002861 polymer material Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000006794 tachycardia Effects 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- ZUYKJZQOPXDNOK-UHFFFAOYSA-N 2-(ethylamino)-2-thiophen-2-ylcyclohexan-1-one;hydrochloride Chemical compound Cl.C=1C=CSC=1C1(NCC)CCCCC1=O ZUYKJZQOPXDNOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NJERAXSSDSHLGE-UHFFFAOYSA-N 4-(2-fluorophenyl)-1,3,8-trimethyl-6h-pyrazolo[3,4-e][1,4]diazepin-7-one;hydrochloride Chemical compound Cl.N=1CC(=O)N(C)C(N(N=C2C)C)=C2C=1C1=CC=CC=C1F NJERAXSSDSHLGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TYJOQICPGZGYDT-UHFFFAOYSA-N 4-methylsulfonylbenzenesulfonyl chloride Chemical compound CS(=O)(=O)C1=CC=C(S(Cl)(=O)=O)C=C1 TYJOQICPGZGYDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003591 Ataxia Diseases 0.000 description 1
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 1
- 241000700112 Chinchilla Species 0.000 description 1
- GHXZTYHSJHQHIJ-UHFFFAOYSA-N Chlorhexidine Chemical compound C=1C=C(Cl)C=CC=1NC(N)=NC(N)=NCCCCCCN=C(N)N=C(N)NC1=CC=C(Cl)C=C1 GHXZTYHSJHQHIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 206010052804 Drug tolerance Diseases 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 206010015548 Euthanasia Diseases 0.000 description 1
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N Formic acid Chemical class OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-M Glycolate Chemical compound OCC([O-])=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010018873 Haemoconcentration Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010020651 Hyperkinesia Diseases 0.000 description 1
- 208000000269 Hyperkinesis Diseases 0.000 description 1
- 238000012313 Kruskal-Wallis test Methods 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 208000002847 Surgical Wound Diseases 0.000 description 1
- ZJCCRDAZUWHFQH-UHFFFAOYSA-N Trimethylolpropane Chemical compound CCC(CO)(CO)CO ZJCCRDAZUWHFQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001793 Wilcoxon signed-rank test Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-L adipate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCCCC([O-])=O WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003444 anaesthetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 210000000436 anus Anatomy 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 230000004872 arterial blood pressure Effects 0.000 description 1
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 1
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- CDQSJQSWAWPGKG-UHFFFAOYSA-N butane-1,1-diol Chemical compound CCCC(O)O CDQSJQSWAWPGKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- VAAUVRVFOQPIGI-SPQHTLEESA-N ceftriaxone Chemical compound S([C@@H]1[C@@H](C(N1C=1C(O)=O)=O)NC(=O)\C(=N/OC)C=2N=C(N)SC=2)CC=1CSC1=NC(=O)C(=O)NN1C VAAUVRVFOQPIGI-SPQHTLEESA-N 0.000 description 1
- 229960004755 ceftriaxone Drugs 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 210000000080 chela (arthropods) Anatomy 0.000 description 1
- 229960003260 chlorhexidine Drugs 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N diethylene glycol Chemical compound OCCOCCO MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 238000000556 factor analysis Methods 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000004674 formic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 208000018879 impaired coordination Diseases 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 229940053973 novocaine Drugs 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 1
- 210000000505 parietal peritoneum Anatomy 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 206010034674 peritonitis Diseases 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M salicylate Chemical compound OC1=CC=CC=C1C([O-])=O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960001860 salicylate Drugs 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 208000013220 shortness of breath Diseases 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 210000001562 sternum Anatomy 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 210000004304 subcutaneous tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000035488 systolic blood pressure Effects 0.000 description 1
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 1
- 229960001594 tiletamine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- GYDJEQRTZSCIOI-LJGSYFOKSA-N tranexamic acid Chemical compound NC[C@H]1CC[C@H](C(O)=O)CC1 GYDJEQRTZSCIOI-LJGSYFOKSA-N 0.000 description 1
- 229960000401 tranexamic acid Drugs 0.000 description 1
- ZIBGPFATKBEMQZ-UHFFFAOYSA-N triethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCO ZIBGPFATKBEMQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003708 urethra Anatomy 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
- 210000002417 xiphoid bone Anatomy 0.000 description 1
- 229960004175 xylazine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 238000004383 yellowing Methods 0.000 description 1
Images
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины, в частности к гемостатическим средствам, а именно к местным биоразлагаемым гемостатическим средствам (далее - «МБГС») для остановки внутриполостного кровотечения.The invention relates to the field of medicine, in particular to hemostatic agents, namely to local biodegradable hemostatic agents (hereinafter referred to as "MBHA") for stopping intracavitary bleeding.
Известно местное гемостатическое средство (Местное гемостатическое средство: патент RU 2519220, Российская Федерация, заявка RU 2013108191, заявл. 26.02.2013, опубл. 10.06.2014), включающее 75-95 мас. % соли хитозана из ряда полидисперсных порошков гидрохлорида, гидробромида, формиата, ацетата, сукцината, цитрата, гликолата либо лактата хитозана и 4-20 мас. % полигексаметиленгуанидин гидрохлорида. Соль хитозана и полигексаметиленгуанидин гидрохлорид ковалентно сшиваются 1-5 мас. % полифункционального соединения из ряда глицидиловых эфиров. Соль хитозана выбирается со средним размером частиц 0,2÷2,0 мм, степенью деацетилирования хитозана 0,75÷0,95, молекулярной массой 10÷500 кДа. В качестве полифункционального соединения из ряда глицидиловых эфиров используется диглицидиловый эфир бутандиола, ди- или триэтиленгликоля или полипропиленгликоля, олигоэтиленоксида, а также триглицидиловые эфиры глицерина или триметилолпропана. Средство обладает высокой сорбционной способностью по крови, коротким временем наступления гемостаза и высокой антимикробной активностью.A local hemostatic agent is known (Local hemostatic agent: patent RU 2519220, Russian Federation, application RU 2013108191, declared 26.02.2013, published 10.06.2014), including 75-95 wt. % chitosan salt from a series of polydisperse powders of hydrochloride, hydrobromide, formate, acetate, succinate, citrate, glycolate or lactate of chitosan and 4-20 wt. % polyhexamethylene guanidine hydrochloride. Chitosan salt and polyhexamethylene guanidine hydrochloride are covalently crosslinked with 1-5 wt. % polyfunctional compound from a series of glycidyl ethers. Chitosan salt is selected with an average particle size of 0.2÷2.0 mm, a degree of chitosan deacetylation of 0.75÷0.95, and a molecular weight of 10÷500 kDa. Diglycidyl ether of butanediol, di- or triethylene glycol or polypropylene glycol, oligoethylene oxide, as well as triglycidyl ethers of glycerol or trimethylolpropane are used as a polyfunctional compound from a series of glycidyl ethers. The product has a high sorption capacity for blood, a short time for hemostasis to occur, and high antimicrobial activity.
Вышеприведенное средство представляет собой порошок, который может быть использован для остановки наружного кровотечения, но не применим для остановки внутреннего кровотечения.The above remedy is a powder which can be used to stop external bleeding but is not applicable to stop internal bleeding.
Известен гидрогель на основе комплексной соли хитозана и способ его получения (Гидрогель на основе комплексной соли хитозана и способ его получения: патент RU2617501, Российская Федерация, заявка RU 2015152528, заявл. 08.12.2015, опубл. 25.04.2017). Способ получения гидрогеля, включает растворение хитозансодержащего вещества в водном растворе органической кислоты и последующее введение в раствор гелеобразователя. В качестве хитозансодержащего вещества используют гидрохлорид хитозана, в качестве органической кислоты используют аскорбиновую или молочную кислоту, в качестве гелеобразователя используют растворы глицеролата кремния в глицерине при мольном соотношении глицеролат кремния:глицерин 1:2-1:6, причем исходные компоненты взяты в количестве, мас. %: гидрохлорид хитозана 1.5-20.0, аскорбиновая кислота 1.5-10.0, или молочная кислота 0.5-2.0, раствор глицеролата кремния в глицерине 10.0-60.0, вода - остальное.A hydrogel based on a complex salt of chitosan and a method for producing it are known (Hydrogel based on a complex salt of chitosan and a method for producing it: patent RU2617501, Russian Federation, application RU 2015152528, declared 08.12.2015, published 25.04.2017). The method for producing a hydrogel includes dissolving a chitosan-containing substance in an aqueous solution of an organic acid and then introducing a gelling agent into the solution. Chitosan hydrochloride is used as the chitosan-containing substance, ascorbic or lactic acid is used as the organic acid, and silicon glycerolate solutions in glycerin are used as the gelling agent at a molar ratio of silicon glycerolate:glycerin of 1:2-1:6, wherein the initial components are taken in an amount of, wt. %: chitosan hydrochloride 1.5-20.0, ascorbic acid 1.5-10.0, or lactic acid 0.5-2.0, silicon glycerolate solution in glycerin 10.0-60.0, water - the rest.
Недостатком данного технического решения является относительно низкая эффективность, так как данные композиции в первую очередь нацелены на ранозаживляющее действие. При этом описанный способ получения гидрогеля является сложным, многостадийным и многокомпонентным.The disadvantage of this technical solution is its relatively low efficiency, since these compositions are primarily aimed at wound-healing action. At the same time, the described method for obtaining hydrogel is complex, multi-stage and multi-component.
Также известно гемостатическое покрытие (заявка US 2017326171. опубликована 16.11.2017 г.), содержащее гемостатический биополимер в концентрации от 0,1 до 3,0 масс. %, вторичный полимер, ионный сшивающий агент в концентрации от 0,1 до 1,0 масс. % и растворитель. В качестве гемостатического полимера может быть использован формиат хитозана. В качестве вторичного полимера может быть использован поливиниловый спирт с молекулярной массой от 50000 до 300000 Да.Also known is a hemostatic coating (application US 2017326171, published 16.11.2017), containing a hemostatic biopolymer in a concentration of 0.1 to 3.0 wt. %, a secondary polymer, an ionic cross-linking agent in a concentration of 0.1 to 1.0 wt. %, and a solvent. Chitosan formate can be used as a hemostatic polymer. Polyvinyl alcohol with a molecular weight of 50,000 to 300,000 Da can be used as a secondary polymer.
Недостатком данного покрытия является его сложный многокомпонентный состав и относительно высокая сложность его получения. Это обусловлено необходимостью регулировать реологические свойства гемостатического средства путем изменения молекулярной массы полимера, концентрации полимера, типа сшивающего агента или концентрации сшивающего агента. Средство может состоять из полностью вторичного полимера с гемостатическим полимером в качестве добавки или может состоять из вторичного полимера в растворителе, например воде или органических растворителях.The disadvantage of this coating is its complex multi-component composition and the relatively high difficulty of its production. This is due to the need to regulate the rheological properties of the hemostatic agent by changing the molecular weight of the polymer, the concentration of the polymer, the type of cross-linking agent or the concentration of the cross-linking agent. The agent may consist of a completely secondary polymer with a hemostatic polymer as an additive or may consist of a secondary polymer in a solvent, such as water or organic solvents.
Наиболее близким к заявляемому изобретению является гель для остановки крови на основе хитозана (WO 2013096448 А1), включающий соль хитозана, выбранную из ацетата хитозана, сукцината хитозана, адипата хитозана, хлорида хитозана, глутамата хитозана, лактата хитозана, аспартата хитозана, пирувата хитозана, хитозанфосфата, хитозанфосфата. аскорбат, салицилат хитозана, формиат хитозана и маната хитозана. Также гель включает воду и уксусную кислоту. Данное техническое решение принято за прототип.The closest to the claimed invention is a gel for stopping bleeding based on chitosan (WO 2013096448 A1), including a chitosan salt selected from chitosan acetate, chitosan succinate, chitosan adipate, chitosan chloride, chitosan glutamate, chitosan lactate, chitosan aspartate, chitosan pyruvate, chitosan phosphate, chitosan phosphate ascorbate, chitosan salicylate, chitosan formate and chitosan mannate. The gel also includes water and acetic acid. This technical solution is accepted as a prototype.
Недостатком прототипа является сложность приготовления, обусловленную необходимостью одновременного обезвоживания и прессования полимеризованного хитозанового геля.The disadvantage of the prototype is the complexity of preparation, due to the need for simultaneous dehydration and pressing of the polymerized chitosan gel.
Технической проблемой является необходимость разработки простого в изготовлении и эффективного гемостатического средства на основе хитозана, лишенного вышеприведенных недостатков.The technical problem is the need to develop an easy-to-manufacture and effective hemostatic agent based on chitosan, devoid of the above-mentioned disadvantages.
Технический результат состоит в обеспечении простой в изготовлении и нетоксичной гемостатической композиции с высокой эффективностью.The technical result consists in providing a simple-to-manufacture and non-toxic hemostatic composition with high efficiency.
Технический результат достигается тем, что гемостатическая композиция в виде пасты, содержащая формиат хитозана и воду, согласно изобретению содержит компоненты в следующих соотношениях, мас. %:The technical result is achieved in that the hemostatic composition in the form of a paste containing chitosan formate and water, according to the invention, contains components in the following ratios, wt. %:
формиат хитозана 20Chitosan formate 20
вода остальноеwater the rest
Для приготовления заявляемой композиции в виде пасты в реактор-смеситель загружают 40 г формиат хитозана и 100 мл воды, оставляют для набухания на 60 мин. Добавляют оставшееся количество воды и перемешивают со скоростью (50 - 100) об/мин в течение (60 - 70) мин до получения желтой или светло-желтой пасты (см. таблицу 1).To prepare the claimed composition in the form of a paste, 40 g of chitosan formate and 100 ml of water are loaded into a reactor-mixer and left to swell for 60 minutes. The remaining amount of water is added and mixed at a speed of (50 - 100) rpm for (60 - 70) minutes until a yellow or light yellow paste is obtained (see Table 1).
Для приготовления заявляемой композиции в виде геля в реактор-смеситель при включенной мешалке загружают 190 мл воды и 10 г лактата хитозана. Перемешивание проводят со скоростью (50 - 100) об/мин в течение 40 - 60 мин до получения однородной гелеобразной массы (см. таблицу 1).To prepare the claimed composition in the form of a gel, 190 ml of water and 10 g of chitosan lactate are loaded into the reactor-mixer with the mixer turned on. Mixing is carried out at a speed of (50 - 100) rpm for 40 - 60 minutes until a homogeneous gel-like mass is obtained (see Table 1).
Основные показатели данных композиций представлены в таблице 2.The main indicators of these compositions are presented in Table 2.
Заявляемое изобретение используют следующим образом.The claimed invention is used as follows.
При проведении операций на органах брюшной полости используют композицию в виде пасты. Для этого в первую очередь убирают кровь с раневой поверхности. Выдавливают МБГС из шприца непосредственно на раневую поверхность. МБГС должен полностью контактировать с кровоточащей поверхностью. Выполняют мануальную компрессию МБГС к участку кровотечения минимум на 2 мин. После выполнения компрессии осматривают рану, оценивают уровень гемостаза. Избыток МБГС аккуратно удаляют механическим путем или смывают. В случае продолжающегося кровотечения ввести дополнительно МБГС, выполнить повторную компрессию в течение 2 мин или дольше (при необходимости).When performing operations on abdominal organs, a composition in the form of a paste is used. To do this, first remove the blood from the wound surface. Squeeze MBGS from a syringe directly onto the wound surface. MBGS should be in full contact with the bleeding surface. Perform manual compression of MBGS to the bleeding site for at least 2 minutes. After performing compression, inspect the wound, assess the level of hemostasis. Excess MBGS is carefully removed mechanically or washed off. In case of ongoing bleeding, administer additional MBGS, perform repeated compression for 2 minutes or longer (if necessary).
При оказании помощи пострадавшему с продолжающимся внутрибрюшным кровотечением используют композицию в виде геля. Для этого ниже пупка, в случае переломов костей - выше пупка, по средней линии живота выполнить местную инфильтрационную анестезию на всю толщину передней брюшной стенки. Сделать продольный разрез кожи и подкожной клетчатки длиной до (1,5 - 2) см Для исключения ложноположительного результата на кровоточащие сосуды накладывают зажимы. Апоневроз белой линии живота захватывают однозубым крючком или бельевыми цапками. Передняя брюшная стенка левой рукой оперирующего оттягивается краниально и вверх. Затем перпендикулярно приподнятой и натянутой брюшной стенке (примерно 45 градусов к поверхности стола) сразу под крючком осторожными вращательными движениями троакара последовательно прокалывают апоневроз и париетальная брюшина. Затем стилет извлекают, в брюшную полость через гильзу троакара вводят прозрачный катетер. Появление в катетере крови является признаком продолжающегося внутрибрюшного кровотечения. Затем катетер проводят по гильзе троакара в правое подреберьеWhen providing assistance to a victim with ongoing intra-abdominal bleeding, use a composition in the form of a gel. For this purpose, perform local infiltration anesthesia below the navel, in case of bone fractures - above the navel, along the midline of the abdomen for the entire thickness of the anterior abdominal wall. Make a longitudinal incision of the skin and subcutaneous tissue up to (1.5 - 2) cm long. To exclude a false positive result, apply clamps to the bleeding vessels. Grasp the aponeurosis of the white line of the abdomen with a single-pronged hook or linen pincers. The anterior abdominal wall is pulled cranially and upward with the left hand of the surgeon. Then, perpendicular to the raised and stretched abdominal wall (approximately 45 degrees to the surface of the table), immediately under the hook, carefully pierce the aponeurosis and parietal peritoneum with rotational movements of the trocar. Then the stylet is removed, a transparent catheter is inserted into the abdominal cavity through the trocar sleeve. The appearance of blood in the catheter is a sign of ongoing intra-abdominal bleeding. The catheter is then passed through the trocar sleeve into the right hypochondrium.
В корпус специального средства доставки МБГС (представлено на фигуре) устанавливают емкость с гемостатическим гелем (сменный картридж с внутренним поршнем). Катетер, введенный в брюшную полость, соединяют со штоком средства доставки. 10 нажатиями на рукоятку средства доставки в брюшную полость вводят МБГС. Катетер, введенный в брюшную полость, отсоединяют от штока средства доставки МБГС.A container with hemostatic gel (replaceable cartridge with an internal piston) is installed in the body of the special MBGS delivery device (shown in the figure). The catheter inserted into the abdominal cavity is connected to the rod of the delivery device. MBGS is inserted into the abdominal cavity by pressing the handle of the delivery device 10 times. The catheter inserted into the abdominal cavity is disconnected from the rod of the MBGS delivery device.
Катетер проводят по гильзе троакара в левое подреберье. Катетер, введенный в брюшную полость. Производят смену картриджа с МБГС и снова катетер соединяют со штоком средства доставки. 10 нажатиями на рукоятку подачи средства доставки МБГС в брюшную полость вводят гемостатический гель. Катетер, введенный в брюшную полость, отсоединяют от штока средства доставки МБГС.The catheter is passed through the trocar sleeve into the left hypochondrium. The catheter is inserted into the abdominal cavity. The cartridge with MBGS is changed and the catheter is again connected to the rod of the delivery device. By pressing the handle for feeding the MBGS delivery device 10 times, hemostatic gel is introduced into the abdominal cavity. The catheter inserted into the abdominal cavity is disconnected from the rod of the MBGS delivery device.
После введения гемостатического средства катетер удаляют, операционная рана послойно ушивается отдельными узловыми швами. На область зашитой раны накладывают асептическую повязку (наклейка).After the introduction of the hemostatic agent, the catheter is removed, the surgical wound is sutured layer by layer with separate interrupted sutures. An aseptic dressing (sticker) is applied to the area of the sutured wound.
Рекомендовано наложение бандажа брюшной полости для улучшения эффективности гемостаза. Для этого необходимо вскрыть упаковку с компрессионной повязкой и придерживая свободный край повязки наложить циркулярную повязку на уровне мезо- и гипогастральной области живота.It is recommended to apply an abdominal bandage to improve the effectiveness of hemostasis. To do this, open the package with the compression bandage and, holding the free edge of the bandage, apply a circular bandage at the level of the meso- and hypogastric region of the abdomen.
В случае наличия индикатора компрессии на бандажной повязке, растянуть эластическое полотно повязки таким образом, чтобы индикатор компрессии приобрел форму в соответствии с инструкцией по применению данной повязки.If there is a compression indicator on the bandage, stretch the elastic fabric of the bandage so that the compression indicator takes shape in accordance with the instructions for use of this bandage.
Механическое средство доставки МБГС в брюшную полость представлено на фигуре и состоит из следующих элементов:The mechanical means of delivering MBGS into the abdominal cavity is shown in the figure and consists of the following elements:
- поз.1 корпус из твердого непрозрачного полимерного материала - ABS (акрилонитрил бутадиен стирол);- pos. 1 body made of solid opaque polymer material - ABS (acrylonitrile butadiene styrene);
- поз.2 рукоятка подачи (курок) из твердого непрозрачного полимерного материала - ABS или полиэтилентерефталата.- pos. 2 feed handle (trigger) made of hard opaque polymer material - ABS or polyethylene terephthalate.
- поз.3 шток из алюминия, диаметр штока 8 мм;- pos. 3 aluminum rod,
- поз.4 стопор прямого хода, изготовленный из стали;- pos. 4 forward stroke stopper made of steel;
- поз.5 Стопор обратного хода, изготовленный из стали;- pos.5 Reverse stop made of steel;
- поз.6 пружина прямого хода, изготовленная из пружинной стали;- pos. 6 direct travel spring made of spring steel;
- поз.7 пружина обратного хода, изготовленная из пружинной стали;- pos. 7 return spring made of spring steel;
- поз.8 рукоятка отвода поршня из ABS или полиэтил ентерефталата;- pos. 8 piston retraction handle made of ABS or polyethylene terephthalate;
- поз.9 полипропиленовый картридж с металлическим бандажом для МБГС (150 см3 эффективного объема).- pos. 9 polypropylene cartridge with a metal bandage for MBGS (150 cm3 effective volume).
Конструкция позволяет вводить объем 150 см3 за (10-12) нажатий рукоятки (в течение 25 с).The design allows for the introduction of a volume of 150 cm3 in (10-12) presses of the handle (within 25 s).
Заявляемое изобретение поясняется примерами.The claimed invention is illustrated by examples.
Пример 1. Скрининг по выбору перспективных форм и концентраций местных биоразлагаемых гемостатических средствExample 1. Screening for the selection of promising forms and concentrations of local biodegradable hemostatic agents
На основе анализа литературных данных в качестве основного компонента композиций были выбраны соли молочной и муравьиной кислот. Лактат хитозана был закуплен для исследований, а формиат был получен в лаборатории ООО «НОВОПЛАСТ-М».Based on the analysis of literature data, salts of lactic and formic acids were selected as the main component of the compositions. Chitosan lactate was purchased for research, and formate was obtained in the laboratory of NOVOPLAST-M LLC.
Соль муравьиной кислоты была получена из хитозана со степенью деацетилирования 90%. Водный раствор соли был получен при добавлении эквимольного количества кислоты к водной суспензии хитозана при комнатной температуре. Выделяли из водного раствора упариванием воды или высаживанием из этилового спирта. Соль сушили в вакууме при комнатной температуре до постоянной массы.Formic acid salt was obtained from chitosan with a degree of deacetylation of 90%. An aqueous solution of the salt was obtained by adding an equimolar amount of acid to an aqueous suspension of chitosan at room temperature. It was isolated from the aqueous solution by evaporation of water or precipitation from ethyl alcohol. The salt was dried in a vacuum at room temperature to constant weight.
В результате серии опытов были определены оптимальные концентрации соли хитозана в местом биоразлагаемом гемостатическом средстве (далее - «МБГС»). Основным показателем при выборе были реологические свойства полученного средства.As a result of a series of experiments, the optimal concentrations of chitosan salt in a locally biodegradable hemostatic agent (hereinafter referred to as "MBGS") were determined. The main indicator in the selection was the rheological properties of the resulting agent.
Из наработанных образцов МБГС были выбраны четыре для проведения дальнейших исследований на эффективность.Of the developed MBGS samples, four were selected for further studies on their effectiveness.
МБГС 0102: Хитозан формиат - 5 г; Вода очищенная - до 100 г. MBGS 0102: Chitosan formate - 5 g; Purified water - up to 100 g.
МБГС 0103: Хитозан формиат - 25 г; Вода очищенная - до 100 г. MBGS 0103: Chitosan formate - 25 g; Purified water - up to 100 g.
МБГС 0401: Хитозан лактат - 5 г; Вода очищенная - до 100 г. MBGS 0401: Chitosan lactate - 5 g; Purified water - up to 100 g.
МБГС 0402: Хитозан лактат - 5 г; Транексамовая кислота - 5 г;MBGS 0402: Chitosan lactate - 5 g; Tranexamic acid - 5 g;
Вода очищенная - до 100 г. Purified water - up to 100 g.
Для изучения эффективности четырех составов МБГС использовали модель травматического повреждения печени кролика, адаптированную к условиям проведения эксперимента. Данный подход рекомендован для оценки эффективности гемостатических средств местного действия.To study the effectiveness of four MBGS formulations, a model of traumatic liver injury in rabbits adapted to the experimental conditions was used. This approach is recommended for assessing the effectiveness of local hemostatic agents.
В данном исследовании в качестве тест-системы были использованы самцы кролики. На кроликах разработаны методические подходы, позволяющие моделировать травматическое повреждение печени, сопровождающееся кровопотерей.In this study, male rabbits were used as a test system. Methodological approaches were developed on rabbits that allow modeling traumatic liver injury accompanied by blood loss.
В эксперименте было задействовано 35 самцов кроликов, и еще 5 самцов были доступны на случай необходимости замены в течение периода адаптации. После окончания периода адаптации незадействованные животные выполняли роль сентинельных животных, т.е. содержались в одинаковых условиях с экспериментальными животными до окончания эксперимента.The experiment involved 35 male rabbits, with 5 more males available for replacement during the adaptation period. After the adaptation period, the unused animals served as sentinels, i.e. were kept in the same conditions as the experimental animals until the end of the experiment.
Была проведена рандомизация животных по группам (см. таблицу 3).Animals were randomized into groups (see Table 3).
Всего 9 групп, группа №1 - контрольная (7 кроликов).There are 9 groups in total, group No. 1 is the control group (7 rabbits).
Каждое животное внутри группы было промаркировано посредством нанесения перманентным маркером индивидуального номера на внутренней стороне ушной раковины. Данный номер состоял из двух частей: 1-я - номер группы и 2-я - порядковый номер животного в группе. Нумерация в пределах группы сплошная.Each animal within the group was marked by applying an individual number with a permanent marker on the inside of the auricle. This number consisted of two parts: 1st - the group number and 2nd - the ordinal number of the animal in the group. The numbering within the group is continuous.
В данном исследовании тестируемые составы МБГС вводили животным однократно в брюшную полость, как аналог планируемого применения в клинической практике при лечении внутренних кровотечений II-й и III-й степени. Все животные получили исследуемые объекты однократно в объеме 10 мл готовой лекарственной формы на одно животное без учета массы тела.In this study, the tested MBGS formulations were administered to animals once into the abdominal cavity, as an analogue of the planned use in clinical practice in the treatment of internal bleeding of the II and III degrees. All animals received the studied objects once in a volume of 10 ml of the finished dosage form per animal, without taking into account body weight.
Была разработана модель оперативного вмешательства на брюшной полости (кролика) с нанесением ранения средней доли печени животного с интенсивностью кровотечения 3 степени.A model of surgical intervention on the abdominal cavity (rabbit) was developed with the infliction of a wound to the middle lobe of the animal's liver with a bleeding intensity of grade 3.
Спустя (5-7) мин после наступления состояния наркоза животное фиксировали на операционном столе в положении «на спине». Затем осуществляли местную инфильтрационную анестезию средней линии живота с помощью подкожного введения 0,25% раствора препарата Новокаин, начиная от мечевидного отростка грудины.After (5-7) minutes from the onset of anesthesia, the animal was fixed on the operating table in the "on its back" position. Then local infiltration anesthesia of the midline of the abdomen was performed using subcutaneous injection of 0.25% Novocaine solution, starting from the xiphoid process of the sternum.
Далее выполняли верхнесрединную лапаротомию (длина разреза (8-10) см) и осуществляли отдельный разрез передней брюшной стенки по средней линии живота ниже лапаротомии. Среднюю долю печени выводили в лапаротомический разрез и отграничивали салфетками. Через второй разрез в брюшную полость вставляли трубку длинной 20 см, диаметром 5 мм с тремя боковыми отверстиями [(2-3) мм в диаметре, на расстоянии (1-3) см от конца трубки] для обеспечения введения тестируемых МБГС.Next, an upper midline laparotomy was performed (incision length (8-10) cm) and a separate incision was made in the anterior abdominal wall along the midline of the abdomen below the laparotomy. The middle lobe of the liver was brought out into the laparotomy incision and delimited with napkins. Through the second incision, a 20 cm long tube with a diameter of 5 mm with three lateral openings [(2-3) mm in diameter, at a distance of (1-3) cm from the end of the tube] was inserted into the abdominal cavity to ensure the introduction of the tested MBGS.
Нанесение раны печени выполняли с помощью специального пластмассового трафарета-ограничителя с квадратным отверстием (размером 2x2 см). Трафарет прикладывали к диафрагмальной поверхности печени, надавливали и осуществляли резекцию выступившей части печени лезвием на глубину (толщину) около 0,3 см в центре участка печени. В результате чего получали поверхностное паренхиматозное кровотечение.The liver wound was inflicted using a special plastic stencil-limiter with a square hole (2x2 cm). The stencil was applied to the diaphragmatic surface of the liver, pressed, and the protruding part of the liver was resected with a blade to a depth (thickness) of about 0.3 cm in the center of the liver area. As a result, superficial parenchymatous bleeding was obtained.
Образовавшаяся рана с ровными краями и равномерной кривизной имела общую площадь около 4 см2 и глубину около 0,3 см. В течение 2 мин после нанесения травмы печень погружали в брюшную полость, ранее введенную трубку подводили к ране. Далее лапаротомический разрез послойно зашивали, осуществляли введение исследуемых объектов, трубку удаляли и разрез зашивали. С целью уменьшения объема брюшной полости осуществляли «бандажирование» нижней части живота, путем наложения циркулярной повязки при помощи фиксирующего эластичного бинта.The resulting wound with smooth edges and uniform curvature had a total area of about 4 cm2 and a depth of about 0.3 cm. Within 2 minutes after the injury, the liver was immersed in the abdominal cavity, and the previously inserted tube was brought to the wound. Then the laparotomy incision was sutured layer by layer, the objects under study were inserted, the tube was removed, and the incision was sutured. In order to reduce the volume of the abdominal cavity, the lower abdomen was “bandaged” by applying a circular bandage using a fixing elastic bandage.
Для животных контрольной группы осуществляли травму печени по описанному выше методу, за исключением выполнения отдельного прокола передней брюшной стенки и установки трубки.For animals in the control group, liver injury was performed using the method described above, with the exception of performing a separate puncture of the anterior abdominal wall and installing a tube.
Животным групп №№ 1-5 спустя 2 мин после нанесения раны на печень осуществляли введение тестируемых МБГС через ранее установленную трубку, согласно дизайну исследования. Животным групп №№ 6-9 тестируемые препараты вводили аналогичным способом без моделирования экспериментальной патологии.Animals of groups 1-5 were administered the tested MBGS through a previously installed
Животному, находившегося в состоянии наркоза и зафиксированного на операционном столе в положении лежа на спине, выполняли небольшой разрез (прокол) передней брюшной стенки по средней линии живота и устанавливали трубку. Через трубку, выведенную на переднюю брюшную стенку, вводили исследуемые объекты, согласно дизайну исследования. После введения трубку удаляли и зашивали разрез.The animal, which was anesthetized and fixed on the operating table in a supine position, had a small incision (puncture) made in the anterior abdominal wall along the midline of the abdomen and a tube was installed. The objects to be studied were introduced through the tube, which was brought out to the anterior abdominal wall, according to the study design. After the introduction, the tube was removed and the incision was sutured.
После введения животных групп №№ 6-9 размещали на подогреваемых ковриках до выхода из наркозного состояния.After administration, animals of groups No. 6-9 were placed on heated mats until they emerged from the anesthetic state.
В таблице 4 представлен график манипуляций с животными по группам.Table 4 shows the schedule of animal manipulations by groups.
Оценку эффективности исследуемых объектов во время оперативного вмешательства животных групп №№ 1-5 проводили по следующим показателям:The effectiveness of the objects under study during surgical intervention of animals of groups No. 1-5 was assessed according to the following indicators:
- оценка функционального состояния сердечно-сосудистой системы (ССС) и дыхательной системы;- assessment of the functional state of the cardiovascular system (CVS) and respiratory system;
- гематологические исследования;- hematological studies;
- оценка интенсивности кровотечения;- assessment of bleeding intensity;
- регистрация времени остановки кровотечения;- registration of the time of bleeding cessation;
- примерный объем кровопотери.- approximate volume of blood loss.
Оценку проводили на основании показателей АД, ЧСС и ЧДД. Для данных показателей был зафиксирован исходный уровень (до начала оперативного вмешательства), а также через 60 мин и перед релапаротомией через два и три часа после моделирования патологии.The assessment was performed based on the parameters of blood pressure, heart rate and respiratory rate. For these parameters, the initial level (before the start of the surgical intervention), as well as after 60 minutes and before relaparotomy two and three hours after pathology modeling were recorded.
Регистрацию ЧДД осуществляли с помощью пневмографа с пьезодатчиком (ADInstruments Pty Ltd, Австралия). Непосредственно после регистрации ЧДД проводили регистрацию ЧСС при помощи компьютерного электрокардиографа для ветеринарии «Поли-спектр-8Е» (ООО «Нейрософт», Россия). После регистрации ЧСС у животных измеряли АД неинвазивным методом при помощи прибора для измерения артериального давления у лабораторных животных (ООО «Zoomed», Россия).The respiratory rate was recorded using a pneumograph with a piezoelectric transducer (ADInstruments Pty Ltd, Australia). Immediately after the respiratory rate was recorded, the heart rate was recorded using a computer electrocardiograph for veterinary medicine "Poly-Spectrum-8E" (OOO "Neurosoft", Russia). After the heart rate was recorded, the animals' blood pressure was measured non-invasively using a device for measuring arterial pressure in laboratory animals (OOO "Zoomed", Russia).
Оценку интенсивности кровотечения проводили через 120 мин после моделирования патологии. Проводили релапаротомию и визуально регистрировали интенсивность кровотечения по адаптированной под массу животного бальной шкале интенсивности полостного кровотечения Validated Intraoperative Bleeding Scale (VIBe Scale):The bleeding intensity was assessed 120 min after pathology modeling. Relaparotomy was performed and the bleeding intensity was visually recorded using the Validated Intraoperative Bleeding Scale (VIBe Scale), a point scale of cavity bleeding intensity adapted to the animal's weight:
- отсутствие кровотечения - 0 баллов;- no bleeding - 0 points;
- просачивание (капиллярное) - 1 балл;- seepage (capillary) - 1 point;
- натекание (кровотечение из венул и артериол) - 2 балла;- leakage (bleeding from venules and arterioles) - 2 points;
- сильное кровотечение (из нецентральных венул и артериол) - 3 балла;- severe bleeding (from non-central venules and arterioles) - 3 points;
- струйное кровотечение (из вен и артерий) - 4 балла.- spurting bleeding (from veins and arteries) - 4 points.
После этого осуществляли сведение краев раны зажимом. Манипуляцию повторяли через 3 ч после нанесения травмы на печень.After this, the edges of the wound were brought together with a clamp. The manipulation was repeated 3 hours after the injury to the liver.
Через 120 и 180 мин после моделирования патологии осуществляли регистрацию остановки кровотечения.After 120 and 180 minutes of pathology modeling, the bleeding cessation was recorded.
С целью выявления отклонений в состоянии здоровья и поведения ежедневно осуществляли клиническое наблюдение и регистрацию гибели животных групп №№6-9 на протяжении 14 дней после введения исследуемых объектов.In order to identify deviations in health and behavior, clinical observation and registration of deaths of animals in groups No. 6-9 were carried out daily for 14 days after the introduction of the test objects.
Регистрировали:Registered:
- поведение: угнетение / возбуждение;- behavior: depression / agitation;
- реакцию на раздражители: снижение / повышение;- reaction to stimuli: decrease / increase;
- кожные покровы: покраснение / бледность / синюшность / желтушность;- skin: redness/pallor/cyanosis/yellowing;
- слизистые оболочки: покраснение / бледность / синюшность / желтушность;- mucous membranes: redness / pallor / cyanosis / yellowness;
- выделения: из глаз / из носа / из анального отверстия / из уретры;- discharge: from the eyes / from the nose / from the anus / from the urethra;
- тонус мускулатуры: снижение / повышение;- muscle tone: decrease / increase;
- нарушение координации движений: атаксия / гиперкинез;- impaired coordination of movements: ataxia/hyperkinesis;
- одышка;- shortness of breath;
- смерть.- death.
Регистрировали суточное потребление воды до введения препаратов (за 1-2 дня до процедуры), через 24 ч после введения, а также на 7-й и 13-й дни эксперимента. Для этого за 1 день до манипуляции животным помещали в клетки индивидуального содержания. Производили выдачу поилок с водой в объеме 0,5 мл. На следующий день производили регистрацию остаточного объема. На данный период животные не были лишены корма.Daily water consumption was recorded before the administration of the drugs (1-2 days before the procedure), 24 hours after the administration, and on the 7th and 13th days of the experiment. For this purpose, 1 day before the manipulation, the animals were placed in individual cages. Drinking bowls with water in the volume of 0.5 ml were issued. The following day, the residual volume was recorded. During this period, the animals were not deprived of food.
Непосредственно до введения препаратов, через 24 ч после, а также на 3-й, 7-й и 14-й дни у животных проводили сбор образцов крови для клинического анализа.Immediately before administration of the drugs, 24 hours after, and on the 3rd, 7th, and 14th days, blood samples were collected from the animals for clinical analysis.
Кровь собирали из краевой вены ушной раковины кроликов в пробирки с ЭДТА-КЗ (IMPROMINI®). У животных групп №№1-5 кровь забирали до моделирования экспериментальной патологии, через 60, 120 и 180 мин. У животных групп №№6-9 - до введения тестируемых препаратов, через 24 ч, на 3-й, 7-й и 14-й дни эксперимента.Blood was collected from the marginal vein of the auricle of rabbits into test tubes with EDTA-KZ (IMPROMINI®). In animals of groups 1-5, blood was collected before modeling the experimental pathology, after 60, 120 and 180 min. In animals of groups 6-9 - before the introduction of the test drugs, after 24 hours, on the 3rd, 7th and 14th days of the experiment.
В образцах цельной крови на гематологическом анализаторе Mythic 18 Vet (Orphee, Швейцария) определяли следующие параметры:The following parameters were determined in whole blood samples using a Mythic 18 Vet hematology analyzer (Orphee, Switzerland):
- количество эритроцитов;- number of red blood cells;
- уровень гемоглобина;- hemoglobin level;
- гематокрит;- hematocrit;
- количество тромбоцитов;- platelet count;
- количество лейкоцитов;- number of leukocytes;
- лимфоциты;- lymphocytes;
- средние клетки (моноциты, эозинофилы, базофилы);- middle cells (monocytes, eosinophils, basophils);
- гранулоциты.- granulocytes.
Данные гематологического анализа животных групп №1-5, которым вводили тестируемые препараты на фоне экспериментальной патологии, клинически значимых изменений вышеперечисленных показателей не наблюдали. В связи с этим дополнительные параметры общего клинического анализа крови не изучали.The hematological analysis data of animals of groups No. 1-5, which were administered the tested preparations against the background of experimental pathology, did not show any clinically significant changes in the above-mentioned parameters. In this regard, additional parameters of the general clinical blood test were not studied.
В раках оценки переносимости тестируемых препаратов макроскопическому анализу подлежали животные групп №№6-9. Некропсию выполняли под непосредственным наблюдением патоморфолога. После эвтаназии животные были тщательно обследованы на предмет внешних патологических признаков. Было проведено исследование состояния грудной и брюшной полости и макроскопическое исследование внутренних органов и тканей, непосредственно контактирующих с тестируемыми препаратами. Аналогичные исследования проводили в отношении павших животных с заполнением карты некропсии.Animals of groups 6-9 were subjected to macroscopic analysis to assess the tolerance of the tested drugs. Necropsy was performed under the direct observation of a pathologist. After euthanasia, the animals were carefully examined for external pathological signs. A study of the condition of the chest and abdominal cavity and a macroscopic study of the internal organs and tissues directly in contact with the tested drugs were conducted. Similar studies were carried out with respect to dead animals with the filling of a necropsy card.
При некропсии были отобраны органы (фрагменты органов) и ткани, указанные ниже, и зафиксированы в 10% рН-нейтральном формалине:During necropsy, the following organs (organ fragments) and tissues were collected and preserved in 10% pH-neutral formalin:
- для животных групп №1-5 отобран участок печени, где моделировали экспериментальную патологию;- for animals of groups No. 1-5, a section of the liver was selected where the experimental pathology was modeled;
- для животных групп №№6-9 отобраны печень, селезенка, почки, фрагменты тонкого и толстого отделов кишечника, где наблюдали макроскопические патологичные изменения.- for animals of groups No. 6-9, the liver, spleen, kidneys, and fragments of the small and large intestines were selected, where macroscopic pathological changes were observed.
Для всех полученных данных была применена описательная статистика: данные были проверены на соответствие закону нормального распределения с помощью критерия Шапиро-Уилка (Shapiro-Wilkes W test) по группам. В случае нормального распределения был применен параметрический анализ (критерий Стьюдента, однофакторный анализ (ANOVA) с применением критерия Тьюки). В случаях несоответствия данных как минимум одной из экспериментальных групп закону нормального распределения применяли непараметрический анализ (критерий Манна-Уитни, критерий Вилкоксона для связанных данных, критерий Краскела-Уоллиса с множественными сравнениями средних рангов).Descriptive statistics were used for all the obtained data: the data were tested for compliance with the normal distribution law using the Shapiro-Wilks W test by groups. In case of normal distribution, parametric analysis was used (Student's t-test, one-factor analysis (ANOVA) using the Tukey criterion). In cases of non-compliance of the data of at least one of the experimental groups with the normal distribution law, nonparametric analysis was used (Mann-Whitney test, Wilcoxon test for related data, Kruskal-Wallis test with multiple comparisons of mean ranks).
Различия определяли при уровне значимости р<0,05. Статистический анализ выполнялся с помощью программного обеспечения GraphPad Prism 9.0 (GraphPad Software, США).Differences were determined at a significance level of p<0.05. Statistical analysis was performed using GraphPad Prism 9.0 software (GraphPad Software, USA).
Ввиду малой выборки групп №№6-9, сформированных для оценки переносимости исследуемых МБГС, статистически анализ данных не проводили.Due to the small sample size of groups No. 6–9, formed to assess the tolerability of the studied MBGS, statistical analysis of the data was not performed.
Анализ данных, полученных в результате эксперимента, показал, что введение исследуемых образцов МБГС статистически значимо снижало интенсивность кровотечения. Однако полученные результаты не отличались между группами животных, получавших исследуемые препараты.Analysis of the data obtained as a result of the experiment showed that the introduction of the studied MBGS samples statistically significantly reduced the intensity of bleeding. However, the results obtained did not differ between the groups of animals receiving the studied drugs.
В результате исследования у всех животных, получивших тестируемый препарат МБГС 0103 в объеме 10 мл, наблюдали полную остановку кровотечения через 120 мин, что говорит о выраженном гемостатическом эффекте. Сформированный тромб был достаточно устойчивый, плотный и не разрушался при осмотре места кровотечения печени на 120-й и 180-й минуте.As a result of the study, all animals that received the tested drug MBGS 0103 in a volume of 10 ml, showed complete cessation of bleeding after 120 minutes, which indicates a pronounced hemostatic effect. The formed thrombus was quite stable, dense and did not break down when examining the site of liver bleeding at the 120th and 180th minutes.
У животных, получавших препараты МБГС 0102 и МБГС 0401, отсутствие кровотечения могли наблюдать через 180 мин. После введения препарата МБГС 0402 остановку кровотечения регистрировали лишь у 80% животных из группы (у 4 из 5 кроликов). Образовавшийся тромб после введения МБГС 0401 был устойчивым к механическим воздействиям во время осмотра кровотечения печени на 120-й и 180-й минуте. Тромбы, сформированные из тестируемых препаратов МБГС 0102 и МБГС 0402, легко разрушались, что приводило к возобновлению кровотечения.In animals treated with MBGS 0102 and MBGS 0401, no bleeding could be observed after 180 minutes. After administration of MBGS 0402, bleeding cessation was recorded only in 80% of animals in the group (in 4 out of 5 rabbits). The thrombus formed after administration of MBGS 0401 was resistant to mechanical effects during examination of liver bleeding at the 120th and 180th minutes. Thrombi formed from the tested MBGS 0102 and MBGS 0402 preparations were easily destroyed, which led to resumption of bleeding.
У животных, которым ввели тестируемый препарат МБГС 0102 в объеме 10 мл после индукции травмы печени, наблюдали статистически значимое снижение ЧСС через 180 мин. У животных, получивших тестируемый препарат МБГС 0401 и МБГС 0402, регистрировали снижение систолического АД через 180 мин после формирования экспериментального кровотечения печени. Однако анализ данных примерного объема кровопотери, ЧСС, ЧДД, АД и показателей гематологического исследования не показал статистически значимого отличия между экспериментальными группами.In animals that were administered the test drug MBGS 0102 in a volume of 10 ml after induction of liver injury, a statistically significant decrease in heart rate was observed after 180 minutes. In animals that received the test drug MBGS 0401 and MBGS 0402, a decrease in systolic blood pressure was recorded after 180 minutes after the formation of experimental liver bleeding. However, analysis of the data on the approximate volume of blood loss, heart rate, respiratory rate, blood pressure and hematological study parameters did not show a statistically significant difference between the experimental groups.
Таким образом, было установлено, что в результате моделирования травмы печени у животных кровотечение сохранялось на протяжении 3 ч наблюдения. В связи с этим наблюдали снижение ЧСС и АД через (60 - 120) мин после резекции срединной доли печени.Thus, it was established that as a result of modeling liver injury in animals, bleeding persisted for 3 hours of observation. In this regard, a decrease in heart rate and blood pressure was observed (60 - 120) minutes after resection of the median lobe of the liver.
Исследование показало, что из четырех, тестируемых препаратов МБГС 0103 (ООО «НОВОПЛАСТ-М», Россия) оказал выраженное гемостатическое действие, при котором наблюдали остановку кровотечения через 120 мин после индукции травматического повреждения печени и отсутствие статистически значимого снижения ЧСС, ЧДД и АД у всех животных в группе. Остальные исследуемые препараты оказали менее выраженное действие на паренхиматозное кровотечение печени.The study showed that of the four tested drugs, MBGS 0103 (OOO NOVOPLAST-M, Russia) had a pronounced hemostatic effect, in which bleeding was stopped 120 minutes after induction of traumatic liver injury and there was no statistically significant decrease in heart rate, respiratory rate, and blood pressure in all animals in the group. The other drugs tested had a less pronounced effect on parenchymal liver bleeding.
Полученные результаты не позволяют сделать однозначный выбор состава МБГС. В результате макроскопического исследования животных, проведенного в рамках оценки переносимости препаратов, после однократного введения всех тестируемых препаратов через 14 дней было выявлено образование спаек в брюшной полости и признаки перитонита. Таким образом, необходимо провести дополнительное исследование по выбору оптимального состава МБГС, а также биосовместимости разработанного состава препарата.The obtained results do not allow making an unambiguous choice of the composition of MBGS. As a result of macroscopic examination of animals, conducted within the framework of assessment of drug tolerance, after a single administration of all tested drugs, the formation of adhesions in the abdominal cavity and signs of peritonitis were detected after 14 days. Thus, it is necessary to conduct additional research on the choice of the optimal composition of MBGS, as well as the biocompatibility of the developed composition of the drug.
На основании полученных результатов были выбраны два состава МБГС:Based on the obtained results, two MBGS compositions were selected:
МБГС 0103 (25% формиат хитозана) - оказал наиболее выраженное гемостатическое действие;MBGS 0103 (25% chitosan formate) - had the most pronounced hemostatic effect;
МБГС 0401 (5% лактат хитозана) - оказал менее выраженное гемостатическое действие в сравнении с МБГС 0103, но обеспечивал стабильный временный гемостаз.MBGS 0401 (5% chitosan lactate) had a less pronounced hemostatic effect compared to MBGS 0103, but provided stable temporary hemostasis.
Образовавшийся тромб после введения был устойчивым к механическим воздействиям во время осмотра кровотечения печени на 120-й и 180-й минуте. Тромбы, сформированные из препаратов МБГС 0102 и МБГС 0402, легко разрушались, что приводило к возобновлению кровотечения.The thrombus formed after administration was resistant to mechanical effects during the examination of liver bleeding at the 120th and 180th minutes. Thrombi formed from the preparations MBGS 0102 and MBGS 0402 were easily destroyed, which led to the resumption of bleeding.
Для дальнейших испытаний предложено изменить состав МБГС 0103, приготовить составы гемостатического средства с меньшим содержанием формиата хитозана (15 и 20%). Полученные в результате эксперимента данные позволят оптимизировать состав МБГС 0103. Пример 2. Выбор оптимального состава и концентрации МБГС.For further testing, it was proposed to change the composition of MBGS 0103, to prepare hemostatic agent compositions with a lower content of chitosan formate (15 and 20%). The data obtained as a result of the experiment will allow optimizing the composition of MBGS 0103. Example 2. Selecting the optimal composition and concentration of MBGS.
Для выбора оптимального состава и концентрации МБГС были проведены исследования на модели травматического повреждения печени у кроликов.To select the optimal composition and concentration of MBGS, studies were conducted on a model of traumatic liver injury in rabbits.
На испытание были предоставлены образцы гемостатических средств на основе соли хитозана - лактат и формиат. В таблице 5 представлены описание и состав исследуемых образцов.Samples of hemostatic agents based on chitosan salt - lactate and formate - were provided for testing. Table 5 presents the description and composition of the samples under study.
В эксперимент были переданы клинически здоровые животные. Было использовано 53 кролика - самки породы советская шиншила (масса (3,21±0,23) кг). Каждому животному был присвоен индивидуальный номер, в соответствии с которым была нанесена отметка на ухо животного.Clinically healthy animals were transferred to the experiment. 53 female rabbits of the Soviet Chinchilla breed (weight (3.21±0.23) kg) were used. Each animal was assigned an individual number, according to which a mark was applied to the animal's ear.
Перед проведением экспериментального исследования провели рандомизацию животных по группам, в таблице 6 представлено распределение животных на группы в сериях острых экспериментов.Before conducting the experimental study, animals were randomized into groups; Table 6 shows the distribution of animals into groups in the series of acute experiments.
Для всех животных были определены фоновые (физиологические) показатели, характеристика фоновых показателей экспериментальных групп представлена в таблице 7.For all animals, background (physiological) parameters were determined; the characteristics of the background parameters of the experimental groups are presented in Table 7.
За 12 ч до начала эксперимента животным прекращали доступ к воде и корму. В день операции животных взвешивали на электронных весах «Карапуз» (ООО «МИДЛ С», Россия). Максимальный предел взвешивания - 20 ООО г, минимальный предел взвешивания - 100 г. Цена поверочного деления - 5 г. Класс точности - 3. Затем в экспериментальной операционной для индукции анестезии внутримышечно вводились тилетамина гидрохлорид и золазепама гидрохлорид (Zoletil®100) в дозировке 7,5 мг/кг и кслазина гидрхлорида (Xyla) в дозировке 0,15 мл/кг. Дополнительно в группах животных со сроками наблюдения одни и трое суток перед оперативным вмешательством внутримышечно вводили цефтриаксон из расчета 50 мг/кг (повторные введения через 24 и 48 ч в дозировке 20 мг/кг).Animals were deprived of food and water 12 hours before the experiment. On the day of surgery, the animals were weighed using Karapuz electronic scales (MIDL S LLC, Russia). The maximum weighing limit was 20,000 g, the minimum weighing limit was 100 g. The verification division value was 5 g. Accuracy class was 3. Then, in the experimental operating room, tiletamine hydrochloride and zolazepam hydrochloride (Zoletil®100) were administered intramuscularly at a dosage of 7.5 mg/kg and xylazine hydrochloride (Xyla) at a dosage of 0.15 ml/kg were administered to induce anesthesia. Additionally, in the groups of animals with observation periods of one and three days before surgery, ceftriaxone was administered intramuscularly at a dosage of 50 mg/kg (repeated administrations after 24 and 48 hours at a dosage of 20 mg/kg).
После наступления медикаментозного сна животное временно фиксировали на операционном столе в положении на животе, проводили пункцию ушной вены, осуществляли забор крови для общего анализа крови. Затем животное переворачивали на спину, фиксировали. Устанавливали электроды монитора витальных функций, с использованием ветеринарного тонометра «PetMap» измеряли артериальное давление.After the onset of drug-induced sleep, the animal was temporarily fixed on the operating table in a prone position, the ear vein was punctured, and blood was taken for a general blood test. Then the animal was turned over on its back and fixed. Vital function monitor electrodes were installed, and blood pressure was measured using a PetMap veterinary tonometer.
Проводили подготовку операционного поля:The surgical field was prepared:
- удаление шерсти на животе животного;- removal of hair from the animal's belly;
- троекратная обработка кожи спиртовым раствором хлогексидина;- triple treatment of the skin with an alcohol solution of chlorhexidine;
отграничение операционного поля стерильными салфетками.delimitation of the surgical field with sterile napkins.
Для оценки состояния животного наблюдали за изменением значений АД, ЧСС и ЧДД. Регистрировали значения данных показателей до начала оперативного вмешательства, а затем через 60 мин и перед релапаротомией на 120-й минуте после моделирования повреждения.To assess the animal's condition, changes in blood pressure, heart rate, and respiratory rate were monitored. The values of these indicators were recorded before the start of the surgical intervention, then 60 minutes later, and before relaparotomy at 120 minutes after the injury was simulated.
В случае выживания животного через 180 мин после нанесения повреждения, показатели регистрировались перед выведением животного из эксперимента. В группах суточного и трехсуточного наблюдения показатели фиксировались через 24, 48 и 72 ч соответственно.In case of animal survival 180 min after the injury, the parameters were recorded before the animal was removed from the experiment. In the daily and three-day observation groups, the parameters were recorded after 24, 48 and 72 hours, respectively.
Для оценки интенсивности кровотечения из экспериментальной раны печени использовали адаптированную под массу животного бальную шкалу интенсивности полостного кровотечения Validated Intraoperative Bleeding Scale (VIBe Scale):To assess the intensity of bleeding from the experimental liver wound, a Validated Intraoperative Bleeding Scale (VIBe Scale), adapted to the animal's weight, was used:
- отсутствие кровотечения - 0 баллов;- no bleeding - 0 points;
- просачивание (капиллярное) - 1 балл;- seepage (capillary) - 1 point;
- натекание (кровотечение из венул и артериол) - 2 балла;- leakage (bleeding from venules and arterioles) - 2 points;
- сильное кровотечение (из нецентральных венул и артериол) - 3 балла;- severe bleeding (from non-central venules and arterioles) - 3 points;
- струйное кровотечение (из вен и артерий) - 4 балла.- spurting bleeding (from veins and arteries) - 4 points.
Исследование проводили, добившись кровотечения с интенсивностью 2-3 балла. Гематологические исследования проводили с использованием гематологического анализатора Abacus Junior 30ND, кровь забирали из краевой ушной вены животного.The study was conducted by achieving bleeding with an intensity of 2-3 points. Hematological studies were conducted using the Abacus Junior 30ND hematological analyzer, blood was taken from the marginal ear vein of the animal.
Определяемые показатели:The indicators to be determined:
- уровень гемоглобина;- hemoglobin level;
- количество эритроцитов;- number of red blood cells;
- количество лейкоцитов;- number of leukocytes;
- количество тромбоцитов.- platelet count.
Гематологические показатели изучали: перед оперативным вмешательством, 180 мин наблюдения, через 24 ч, на вторые и третьи сутки, соответственно.Hematological parameters were studied: before surgery, 180 minutes of observation, after 24 hours, on the second and third days, respectively.
Объем излившейся в ходе эксперимента крови определяли гравиметрическим методом по разности масс. С этой целью в ходе исследования для осушения использовали предварительно взвешенные малые марлевые салфетки. После проведения эксперимента весь перевязочный материал собирали и взвешивали, по разности масс определяли количество излившейся крови. При расчете учитывали массу тромбов, извлеченных из брюшной полости и объем крови, взятый на операционном столе для анализов. На секции оценивали массу сгустков и жидкой крови, обнаруженных в брюшной полости.The volume of blood spilled during the experiment was determined gravimetrically by the difference in mass. For this purpose, small pre-weighed gauze napkins were used for drying during the study. After the experiment, all the dressing material was collected and weighed, and the amount of spilled blood was determined by the difference in mass. The calculation took into account the mass of the thrombi removed from the abdominal cavity and the volume of blood taken on the operating table for analysis. The mass of clots and liquid blood found in the abdominal cavity was assessed in the section.
В случае констатации смерти в течение первых 3 ч наблюдения (отсутствие электрической активности сердца по данным мониторинга ЭКГ на протяжении 5 и более минут) выносили заключение «Животное погибло в первые 3 часа». В остальных случаях делали заключение «Животное выжило в первые 3 часа». В случае констатации смерти после 3 ч наблюдения выносилось заключение «Животное погибло» и указывали сутки, на которые наступила смерь.In case of death being confirmed during the first 3 hours of observation (absence of electrical activity of the heart according to ECG monitoring data for 5 minutes or more), the conclusion was made "The animal died in the first 3 hours". In other cases, the conclusion was made "The animal survived the first 3 hours". In case of death being confirmed after 3 hours of observation, the conclusion was made "The animal died" and the day on which death occurred was indicated.
Оценку гемостатической эффективности проводили на основании анализа выживаемости, продолжительности жизни, зафиксированного объема кровопотери из экспериментальной раны печени, данные наблюдений представлены в таблице 8.The hemostatic efficiency was assessed based on the analysis of survival, life expectancy, and the recorded volume of blood loss from the experimental liver wound; the observation data are presented in Table 8.
В целом объем кровопотери составил в контрольной группе (19±11) % от расчетного объема ОЦК. В опытной группе №1 этот показатель был на уровне (12±4) %, во второй опытной (9±3) % и статистически (р<0,05) отличался от показателей контрольной. В третьей опытной группе кровопотеря в среднем составила (10±9) %.In general, the volume of blood loss in the control group was (19±11) % of the calculated volume of the BCC. In the experimental group No. 1, this indicator was at the level of (12±4) %, in the second experimental group (9±3) % and statistically (p<0.05) differed from the control indicators. In the third experimental group, blood loss averaged (10±9) %.
В опытных группах №1 и №2 все животные выжили в сроки, оговоренные протоколом настоящего исследования. В опытной группе №3 наблюдали случай неудачного гемостаза, когда на фоне острой массивной кровопотери до 33% ОЦК животное погибло на столе, сходный случай имел место в контрольной группе.In experimental groups No. 1 and No. 2, all animals survived within the timeframes specified in the protocol of this study. In experimental group No. 3, a case of unsuccessful hemostasis was observed, when, against the background of acute massive blood loss of up to 33% of the BCC, the animal died on the table; a similar case occurred in the control group.
Учитывая особенности биологических объектов, использованных в работе (кролики очень чувствительны к кровопотере), отмечали закономерные реакции со стороны сердечнососудистой системы в виде падения артериального давления и тахикардии.Taking into account the characteristics of the biological objects used in the work (rabbits are very sensitive to blood loss), we noted natural reactions from the cardiovascular system in the form of a drop in blood pressure and tachycardia.
Через 3 ч артериальное давление у большинства животных нормализовалось, в первую очередь за счет тахикардии.After 3 hours, blood pressure in most animals returned to normal, primarily due to tachycardia.
Изменения в показателях общего анализа крови (количество эритроцитов и тромбоцитов, концентрация гемоглобина, гематокрит) свидетельствовали о гемоконцентрации и не имели статистически значимых различий в группах.Changes in general blood test parameters (red blood cell and platelet counts, hemoglobin concentration, hematocrit) indicated hemoconcentration and did not have statistically significant differences in the groups.
В группах в первые 3 ч погибло три животных: два животных в контрольной группе, одно животное в опытной группе №3. Причина смерти - острая массивная кровопотеря с потерей более 30% ОЦК. Остальные животные выжили и были выведены из эксперимента в сроки, соответствующие программе исследования.In the groups, three animals died in the first 3 hours: two animals in the control group, one animal in the experimental group No. 3. The cause of death was acute massive blood loss with a loss of more than 30% of the circulating blood volume. The remaining animals survived and were withdrawn from the experiment within the timeframes corresponding to the study program.
Результаты острого эксперимента свидетельствуют о гемостатической эффективности опытных образцов МБГС на модели ранения печени у кролика.The results of the acute experiment indicate the hemostatic effectiveness of the experimental samples of MBGS on the liver injury model in a rabbit.
На фоне 66,7% летальности в первые 3 ч после нанесения повреждения в контрольной группе, в опытных группах №1 и №2 случаев гибели животных от острой кровопотери не было. В группе №3 летальность составила 11,1%. Сводные данные по оценке общебиологических критериев (выживаемость, средняя продолжительность жизни животных), косвенные и прямые данные по изменению интенсивности кровотечения из раны печени у кролика представлены в таблице 9.Against the background of 66.7% mortality in the first 3 hours after injury in the control group, there were no cases of death of animals from acute blood loss in experimental groups No. 1 and No. 2. In group No. 3, mortality was 11.1%. Summary data on the assessment of general biological criteria (survival, average life expectancy of animals), indirect and direct data on changes in the intensity of bleeding from a liver wound in a rabbit are presented in Table 9.
Анализ данных таблицы 7 свидетельствует о надежном гемостазе (стабилизация САД, относительная стабилизация ЧСС, отсутствием гибели животных в посттравматическом периоде на фоне умеренной кровопотери) характерном в эксперименте с образцом МБГС 0401.Analysis of the data in Table 7 indicates reliable hemostasis (stabilization of SBP, relative stabilization of HR, absence of death of animals in the post-traumatic period against the background of moderate blood loss) characteristic of the experiment with the MBGS 0401 sample.
Представленные образцы МБГС обладают гемостатической активностью в модели ранения печени у кролика. Наибольшая скорость наступления гемостаза, характеризующаяся меньшей кровопотерей и отсутствием гибели животных, отмечена у рецептуры МБГС 0103 20%. Далее дополнительно была проведена оценка воздействия гемостатических средств на общее состояние животных в суточном и трехсуточном наблюдении, результаты которой показала рецептура МБГС 0401. Данный состав обеспечивает временный гемостаз и не оказывает воздействие на ткани и органы, находясь в брюшной полости до трех суток.The presented MBGS samples have hemostatic activity in the rabbit liver injury model. The highest rate of hemostasis onset, characterized by less blood loss and no animal death, was noted for the MBGS 0103 20% formulation. Further, an additional assessment of the effect of hemostatic agents on the general condition of animals was carried out in daily and three-day observations, the results of which were shown by the MBGS 0401 formulation. This composition provides temporary hemostasis and does not affect tissues and organs, being in the abdominal cavity for up to three days.
По результатам проведенных испытаний были выбраны два наиболее эффективных состава: 20 мас. % формиата хитозана для пасты и 5 мас. % лактата хитозана для геля.Based on the results of the tests, two most effective compositions were selected: 20 wt.% chitosan formate for the paste and 5 wt.% chitosan lactate for the gel.
Claims (2)
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2022117545A RU2022117545A (en) | 2023-12-27 |
| RU2826621C2 true RU2826621C2 (en) | 2024-09-13 |
Family
ID=
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1976537A1 (en) * | 2005-12-29 | 2008-10-08 | Medtrade Products Ltd. | Hemostatic material |
| WO2013096448A1 (en) * | 2011-12-22 | 2013-06-27 | Agenta Biotechnologies, Inc | Composition, preparation, and use of dense chitosan membrane materials |
| RU2519220C1 (en) * | 2013-02-26 | 2014-06-10 | Владислав Анатольевич Шафалинов | Local hemostatic agent |
| US9717821B2 (en) * | 2011-07-06 | 2017-08-01 | Mallinckrodt Pharma Ip Trading D.A.C. | Formulations for wound therapy |
| RU178466U1 (en) * | 2017-12-18 | 2018-04-04 | Общество с ограниченной ответственностью "Специальная и медицинская техника" (ООО "Спецмедтехника") | HEMOSTATIC DEVICE |
| RU2682336C2 (en) * | 2013-05-30 | 2019-03-19 | Медтрейд Продактс Лимитед | Degradable haemostat composition |
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1976537A1 (en) * | 2005-12-29 | 2008-10-08 | Medtrade Products Ltd. | Hemostatic material |
| US9717821B2 (en) * | 2011-07-06 | 2017-08-01 | Mallinckrodt Pharma Ip Trading D.A.C. | Formulations for wound therapy |
| WO2013096448A1 (en) * | 2011-12-22 | 2013-06-27 | Agenta Biotechnologies, Inc | Composition, preparation, and use of dense chitosan membrane materials |
| RU2519220C1 (en) * | 2013-02-26 | 2014-06-10 | Владислав Анатольевич Шафалинов | Local hemostatic agent |
| RU2682336C2 (en) * | 2013-05-30 | 2019-03-19 | Медтрейд Продактс Лимитед | Degradable haemostat composition |
| RU178466U1 (en) * | 2017-12-18 | 2018-04-04 | Общество с ограниченной ответственностью "Специальная и медицинская техника" (ООО "Спецмедтехника") | HEMOSTATIC DEVICE |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Klokkevold et al. | Effect of chitosan on lingual hemostasis in rabbits | |
| US10238768B2 (en) | Wound-healing and hemostatic sponge of squid ink polysaccharide/chitosan, preparation method and use thereof | |
| DE69838614T2 (en) | Carboxypolysaccharide polyether complex compositions for use in relieving surgical adhesions | |
| EP3000487A1 (en) | Hemostatic compositions and therapeutic regimens | |
| EP0262890A2 (en) | Heparin-containing adhesion prevention barrier and process | |
| JP2009533527A (en) | Method for preparing swellable and deformable microspheres | |
| BR112018009306B1 (en) | COMPOSITION OF FIBERS AND/OR HEMOSTATIC AGGREGATE BASED ON CELLULOSE, METHOD OF MANUFACTURING, GEL, AND METHOD FOR FORMATION OF A GEL | |
| KR20210120026A (en) | Mixtures of skin regenerating and healing peptide ingredients and uses thereof | |
| JP2752782B2 (en) | Soluble hemostatic fabric | |
| CN109821059A (en) | A kind of preparation method of absorbable fluid gelatin hemostatic material | |
| RU2826621C2 (en) | Haemostatic composition (embodiments) | |
| US10946039B2 (en) | Chitosan acrylic acid derivative hemostatic powder | |
| CN103705910A (en) | Ziconotide injection hypodermic implant and preparation method thereof | |
| CN110624112A (en) | Hydrogel connected with prostaglandin E2, and preparation method and application thereof | |
| JP2021531244A (en) | A pharmaceutical composition for wound healing or skin activation containing beta-glucan, glycitin and 4', 6,7-trimethoxyisoflavone. | |
| CN109276745A (en) | A kind of cellulose combine dressing of high wet strength and preparation method thereof | |
| CN107715167A (en) | Chitosan-based hemostatic paste and preparation method as bone wax substitute | |
| CN107982568A (en) | Degradable biological auxiliary material and its preparation method and application | |
| Frantz | Experimental studies of alginates as hemostatics | |
| RU2828316C2 (en) | Method of delivery of a hemostatic agent | |
| CN114732787A (en) | A kind of nano-drug particles loaded with quercetin on cross-linked cyclodextrin metal organic framework and its application | |
| RU2627855C1 (en) | Hemostatic sponge (versions) | |
| CN111905139B (en) | Composite dressing capable of rapidly stopping bleeding and preparation method thereof | |
| RU2337704C1 (en) | Method of postsurgery rehabilitation of fishes | |
| Tucker et al. | Chitosan‐based agent use for hemostasis after cryptorchidectomy in a horse |