RU2823211C1 - Способ прогнозирования рецидива у больных базальноклеточным раком кожи после хирургического удаления опухоли - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования рецидива у больных базальноклеточным раком кожи после хирургического удаления опухоли. В 10% гомогенатах образцов хирургически удаленной опухоли, ее перифокальной зоны и линии резекции методом иммуноферментного анализа определяют уровень VEGFA и VEGFC. При уровне VEGFA в опухоли от 110,8 пг/г ткани и более, в перифокальной зоне от 136,6 пг/г ткани и более, в линии резекции от 233,9 пг/г ткани и более; при уровне VEGFC в опухоли от 231,09 пг/г ткани и более, в перифокальной зоне от 186,23 пг/г ткани и более, в линии резекции от 306,12 пг/г ткани и более прогнозируют развитие рецидива заболевания в сроки 12-15 месяцев. Способ обеспечивает возможность прогнозирования возникновения рецидива базальноклеточного рака кожи на этапе хирургического удаления опухоли за счет определения уровня VEGFA и VEGFC в образцах хирургически удаленной опухоли, ее перифокальной зоны и линии резекции. 1 табл., 6 пр.

Description

Изобретение относится к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования развития рецидива заболевания у больных базальноклеточным раком кожи после хирургического удаления опухоли.

Базальноклеточная карцинома (БКР) – рак кожи с низкой местной агрессивностью и низкой склонностью к метастазированию, заболеваемость которой во всем мире неуклонно растет, характерна для лиц старше 50 лет и чаще встречается у мужчин, чем у женщин [1]. 

БКР возникает из базальных кератиноцитов и гистологически характеризуется однородными и мультифокальными агрегатами базалоидных клеток, которые инфильтрируют дерму и/или подкожную клетчатку, часто в связи с эпидермисом [2]. Факторами риска развития БКР являются: продолжительность и интенсивность воздействия ультрафиолета (УФ), особенно в раннем детстве и подростковом возрасте [3; 4]. На молекулярном уровне БКР в основном характеризуется активацией пути Hedgehog (HH): PTCH1 (73%), SMO (20%) и SUFU (8%) [5; 6].

Одним из центральных механизмов прогрессирования и распространения рака является образование новых кровеносных и лимфатических сосудов из ранее существовавшей сосудистой сети. Новый ангиогенез фактически играет ключевую роль в развитии опухолей, инвазии и образовании метастазов многих видов рака, включая БКР [ 7]. Острое УФВ-облучение, являющееся фактором риска возникновения БКР, увеличивает проницаемость сосудов за счет сверхэкспрессии фактора роста эндотелия сосудов A (VEGF-A), клаудина-5 и окклюденсного белка 1 (ZO-1) [8].

Сосудистая сеть внутри опухоли облегчает транспорт питательных веществ, кислорода и иммунных клеток и регулируется про- и антиангиогенными факторами. Почти четыре десятилетия назад VEGF был идентифицирован как критический фактор, способствующий сосудистой проницаемости и ангиогенезу, после чего были идентифицированы лиганды семейства VEGF и их рецепторы (VEGFR) [9]. 

Агрессивный фенотип злокачественных новообразований человека в основном определяется способностью опухоли проникать и распространяться в другие органы. Пять полипептидных факторов роста, кодируемых семейством генов фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), VEGF-A, B, C, D и E, особенно важны из-за их ангиогенных и лимфангиогенных способностей, которые способствуют прогрессированию и метастазированию рака [10]. Семейство факторов роста эндотелия сосудов (VEGF) считается фундаментальным ключевым фактором, участвующим в ангиогенезе, влияющим на прогрессирование, прогноз и терапию различных форм рака [11; 12; 13].

Новые кровеносные сосуды образуются в результате процесса, известного как ангиогенез. Эндотелиальные клетки, выстилающие внутреннюю часть кровеносных артерий, в ходе этого процесса подвергаются миграции, пролиферации и дифференцировке. Лимфангиогенез относится к процессу образования новых лимфатических сосудов из ранее существовавших лимфатических сосудов; этот процесс происходит во время эмбрионального развития, заживления ран и различных патологических ситуаций, включая рак. Для этого VEGF активируют тирозинкиназные рецепторы VEGFR-1 [рецепторы VEGF (VEGFR)] и VEGFR-2 [14].

Известно, что хроническое ультрафиолетовое облучение является одним из основных факторов, приводящих к воспалению и внешнему старению кожи. В коже поверхностные лимфатические капилляры, доходящие до дермального сосочка, собирают интерстициальную жидкость в лимфатические сосуды (ЛС), которые играют важную роль в поддержании баланса жидкости и гомеостаза. Нарушенные ЛС неспособны поддерживать устойчивое состояние микроокружения и обеспечивать здоровый внеклеточный матрикс для клеток, тем самым ускоряя процесс пагубных изменений во внутренней и внешней стареющей коже.  Ремоделирование и расширение ЛС, включая лимфангиогенез (образование новых) и расширение ранее существовавших сосудов, требуют присутствия фактора роста эндотелия сосудов C (VEGF-C) и его рецептор, рецептор фактора роста эндотелия сосудов 3 (VEGFR-3) [8]. 

Воспаление, вызванное УФ, является важным и динамичным событием на всех стадиях формирования рака кожи [15], позволяющим понять динамические изменения иммунного микроокружения и облегчить воспаление, вызванное УФ, для предотвращения старения кожи и развития рака кожи. Существует сильная корреляция между лимфатическими сосудами и инфильтрацией иммунных клеток при метастатическом раке человека [16; 17].

Ma S. и др. обнаружили, что молодая кровеносная среда способна задерживать старение за счет восстановления стволовых клеток и их ниш в отдельных тканях [18]. Это указывает на то, что омоложение ЛС потенциально может устранить воспалительные факторы и обеспечить здоровую микросреду для стволовых клеток, что способствует омоложению кожи.

VEGF-A активируется в опухолях как за счет гипоксически-зависимых, так и за счет гипоксически-независимых механизмов. В ответ на гипоксический стресс фактор, индуцируемый гипоксией (HIF), стабилизируется и напрямую способствует транскрипции VEGF-A [9]. Сравнительный анализ экспрессии факторов роста в злокачественных и доброкачественных кожных новообразованиях показал важную роль VEGF в малигнизации доброкачественных невусов. А повышенная насыщенность меланоцитарных невусов некоторыми факторами роста, свидетельствует о высокой пролиферативной активности клеток и возможности митогенного действия на них, усилении неоангиогенеза и изменения проницаемости мембран [19; 20].

В экспериментальных исследованиях было установлено, что на протяжении всего развития перевивной меланомы B16/F10 в организме активно реализуются механизмы образования различных сосудов – неоангиогенез, неолимфогенез и васкулогенная мимикрия. Факторы роста и их рецепторы синтезируются не только опухолью, но и окружающими тканями и даже отдаленными от опухоли участками интактной кожи [21].

Когда дело доходит до координации формирования и поддержания здоровья лимфатических и кровеносных сосудов, VEGFR имеют решающее значение [22]. Аутокринный эффект обусловлен одновременной экспрессией VEGFR и их лигандов. Например, экзогенный VEGF-A увеличивает пролиферацию клеток за счет активации VEGFR-2 при раке желудка [23]. Кроме того, VEGFR-2 участвует в митогенном воздействии VEGF-A на лейкозные клетки человека, включая их способность пролиферировать, мигрировать и продуцировать матриксную металлопротеиназу 9 (MMP9). Кроме того, VEGF-A усиливает миграцию и адгезию клеток посредством интегрина AVB3 при раке кожи и стимулирует пролиферацию клеток в клетках молочной железы и поджелудочной железы [24].

Известно, что VEGF играет решающую роль в развитии немеланомного рака кожи. Фактически, VEGF могут влиять на канцерогенез кожи, напрямую взаимодействуя с кератиноцитами, опухолевыми клетками и иммунными клетками напрямую активируя опухолевые клетки.  [25]. Более того, несколько исследований выявили прямое воздействие VEGF на кератиноциты и опухолевые клетки кожи. Эти исследования показали, что помимо усиления ангиогенеза VEGF может способствовать канцерогенезу кожи, изменяя выживаемость, пролиферацию или стволовость кератиноцитов и опухолевых клеток аутокринным образом [26].

Стимулирующий рак лиганд фактора роста эндотелия сосудов-C (VEGF-C) активирует рецептор VEGF-3 (VEGFR-3). Ось VEGF-C/VEGFR-3 экспрессируется рядом опухолевых клеток человека в дополнение к лимфатическим эндотелиальным клеткам. Активация передачи сигналов VEGF-C/VEGFR-3 усиливает метастазирование, способствуя лимфангиогенезу и ангиогенезу внутри и вокруг опухолей. Стимуляция передачи сигналов VEGF-C/VEGFR-3 способствует метастазированию опухолей, таких как опухоли яичников, почек, поджелудочной железы, предстательной железы, легких, кожи, желудка, колоректальной кишки, шейки матки, лейкемии, мезотелиомы, саркомы Капоши и карциномы эндометрия [10].

Лимфангиогенез, являющийся ключевым этапом лимфатического метастазирования опухоли, регулируется сигнальным путем VEGFC-VEGFR3, опосредованным иммунными клетками, главным образом макрофагами, в микроокружении опухоли. Инфильтрация опухолеассоциированных нейтрофилов увеличивается при прогрессировании ряда злокачественных опухолей, в частности при метастатическом раке мочевого пузыря, что способствует лимфангиогенезу, регулируя передачу сигналов VEGFC-VEGFR3 и связана с плохим прогнозом [27; 28].

Общие инвазивные свойства опухолей ответственны за рекрутирование дополнительных лимфатических сосудов, но данные показывают, что VEGF-C или VEGF-D, которые продуцируются опухолями, активно привлекают эти сосуды. Животные модели, в которых была активирована ось VEGF-C/VEGFR-3, показали повышенное лимфатическое распространение опухолей. Многочисленные исследования связали экспрессию VEGF-C в опухолях человека с метастатическим раком в близлежащих лимфатических узлах. В исследовании изучалась роль VEGF-C в активации рецептора VEGF-3 и хемокинового рецептора-4 в адгезии клеток меланомы [29].

Lu Q. и др. [30] сообщили, что активация нейтрофилов микроокружения опухоли способствует секреции VEGFC, стимулирующего лимфангиогенез и поддерживаюния опухолевого ангиогенеза за счет высвобождения проангиогенных факторов BV8 и MMP9, которые активируют VEGFA [31]. Кроме того, нейтрофилы, привлеченные к участкам воспаления, усиливают лимфангиогенез путем секреции VEGFA и VEGFD в отсутствие B-клеток [32]. При этом продуцируемый нейтрофилами VEGFA, также стимулирует лимфангиогенез посредством секретируемых макрофагами VEGFC и VEGFD [28].

Считают, что в патогенезе базальноклеточной карциномы кожи участвует активация сигнальных путей воспаления. Было показано, что БКР могут реагировать на воспалительные сигналы из стромы путем экспрессии белков теплового шока (HSP), а ингибиторы HSP могут служить эффективной терапевтической стратегией для подавления роста опухоли [33]. Предполагают, что дифференциальная генетически детерминированная экспрессия фактора роста эндотелия сосудов-А (VEGF-A) и трансформирующего фактора роста-β может модулировать молекулярную «среду», участвующую в этиопатогенезе немеланомного рака кожи, в частности БКР [26]. Полиморфизмы генов, кодирующих молекулы, участвующие в ангиогенезе и воспалительной реакции, могут генерировать провоспалительные генотипы, которые модулируют и усиливают хроническое воспаление и, в свою очередь, определяют формирование молекулярной среды, способной ускорить развитие и прогрессирование рака [34, 35]. 

Недавно было получено несколько доказательств того, что VEGF усиливает выработку активных форм кислорода (АФК) в качестве вторичных посредников в клеточной передаче сигналов, что связано с миграцией и пролиферацией эндотелиальных клеток [36]. АФК включают супероксид-анион, перекись водорода и оксид азота (NO). Кроме того, в развитии ЛС и лимфатических клапанов ключевую роль играет Yes-ассоциированный белок (YAP), требующий участия VEGF [37; 38].

Одной из важных задач онкологии является поиск критериев прогноза заболевания до клинического проявления метастазов и рецидивов, что может способствовать индивидуализации тактики методов лечения и, в конечном итоге, определить продолжительность жизни больного. Зачастую образцы удаленной опухоли и окружающих ее тканей несут в себе информацию о биологической агрессивности злокачественного процесса и возможности его прогрессии несмотря на проводимое противоопухолевое лечение.

Известен способ прогнозирования развития метастазов у больных меланомой кожи, когда проводили исследование уровней фактора роста эндотелия сосудов (VEGF C и VEGF A), рассчитывали соотношение VEGF C к VEGF A, при увеличении этого показателя относительно значений в интактной коже, полученной при оперативном лечении неонкологических больных, в 5 и более раз прогнозируют метастазы в лимфатические узлы, тогда как при снижении этого соотношения в 10 и более раз прогнозируют гематогенное метастазирование [39]. 

Также известен способ прогнозирования рецидива заболевания у больных меланомой кожи женщин репродуктивного возраста. Когда у женщин репродуктивного возраста определяют суточную экскрецию с мочой эстрона, эстрадиола и эстриола, рассчитывают величину соотношения экскреции эстриола к суммарной величине экскреции эстрадиола и эстрона после лечения и на этапе контрольного наблюдения, и при увеличении указанного соотношения прогнозируют рецидив через 11-12 месяцев после лечения [40].

В патентных источниках, а также в открытой печати способов прогнозирования рецидива базальноклеточного рака кожи после его хирургического лечения авторами не было обнаружено.

Техническим результатом изобретения является разработка способа, позволяющего у больных базальноклеточным раком кожи на этапе хирургического удаления опухоли прогнозировать возникновение рецидива заболевания.

Технический результат достигается тем, что в 10% гомогенатах образцов хирургически удаленной опухоли, ее перифокальной зоны и линии резекции методом иммуноферментного анализа определяют уровень VEGFA и VEGFC, и при уровне VEGFA в опухоли от 110,8 пг/г ткани и более, в перифокальной зоне от 136,6 пг/г ткани и более, в линии резекции от 233,9 пг/г ткани и более; при уровне VEGFC в опухоли в пределах от 231,09 пг/г ткани и более, в перифокальной зоне от 186,23 пг/г ткани и более, в линии резекции от 306,12 пг/г ткани и более, прогнозируют развитие рецидива заболевания в сроки 12-15 месяцев.

Изобретение «Способ прогнозирования рецидива у больных базальноклеточным раком кожи после хирургического удаления опухоли» является новым, так как оно неизвестно в онкологии при прогнозировании рецидивов базальноклеточного рака кожи при оперативных вмешательствах.

Новизна изобретения заключается в том, что во время операции по поводу базальноклеточного рака кожи в образцах опухоли, ее перифокальной зоне и линии резекции методом ИФА определяют содержание VEGFA, и VEGFC. При уровне VEGFA в опухоли от 110,8 пг/г ткани и более, в перифокальной зоне от 136,6 пг/г ткани и более, в линии резекции от 233,9 пг/г ткани и более; при уровне VEGFC в опухоли в пределах от 231,09 пг/г ткани и более, в перифокальной зоне от 186,23 пг/г ткани и более, в линии резекции от 306,12 пг/г ткани и более, прогнозируют развитие рецидива заболевания в сроки 12-15 месяцев.

Способ прогнозирования рецидива у больных базальноклеточным раком кожи после хирургического удаления опухоли выполняется следующим образом.

После хирургической операции по поводу удаления базальноклеточного рака кожа из препарата выделили образцы ткани опухоли, ее перифокальной зоны (на расстоянии 5 мм) и линии резекции массой около 100 мг каждый. Навески полученных образцов гомогенизируют на льду с 1 мл 0,1 M калий-фосфатного буфера pH 7.4, содержащего 0,1% Твин-20 и 1% БСА. В полученных гомогенатах иммуноферментным методом (ИФА) с использованием стандартных тест-систем определяют уровень VEGF A и VEGF C. При уровне VEGFA в опухоли от 110,8 пг/г ткани и более, в перифокальной зоне от 136,6 пг/г ткани и более, в линии резекции от 233,9 пг/г ткани и более; при уровне VEGFC в опухоли в пределах от 231,09 пг/г ткани и более, в перифокальной зоне от 186,23 пг/г ткани и более, в линии резекции от 306,12 пг/г ткани и более, прогнозируют развитие рецидива заболевания в сроки 12-15 месяцев.

В ходе разработки способа, после выписки из стационара больные находились под динамическим наблюдением. Ретроспективный анализ уровня VEGF A и VEGF C был сопоставлен с продолжительностью безрецидивной периода.

Установлено, что у больных базальноклеточным раком кожи с развившимися рецидивами в течение 12-15 месяцев после хирургического удаления опухоли уровень VEGFA в опухоли и ее перифокальной зоне превышал показатели у пациентов без последующих рецидивов в среднем более чем в 3 раза, а в образцах линии резекции в 5,9 раза (см. Таблица 1).

Таблица 1

Уровень VEGFA и VEGFC у больных базальноклеточным раком кожи в зависимости от наличия или отсутствия рецидива.

	VEGFA пг/гтк	VEGFC пг/гтк
Больные базальноклеточным раком кожи без рецидивов (n 27)
Опухоль	43,27±4,3	68,49±6,7
Перифокальная зона	42,15±4,2	77,03±7,5
Линия резекции	41,45±4,0	82,93±8,1
Больные базальноклеточным раком кожи с последующими рецидивами
Опухоль	126±15,171	234,3±3,221
Перифокальная зона	139,7±3,11	194±7,771
Линия резекции	244,4±10,51	309,3±3,181

Примечание. Значимые отличия: - сравнение показателей у больных без рецидивов с аналогичными образцами у мужчин с рецидивами (р˂0,05)

Концентрация VEGFC в образцах опухоли и перифокальной зоны у больных с последующими рецидивами была выше, чем в аналогичных образцах у больных без рецидивов в 3,4 раза и в 2,5 раза соответственно, а в линии резекции в 3,7 раза. У пациентов с последующими рецидивами заболевания уровень VEGFA и VEGFC в линии резекции превышал показатели в опухоли в 1,9 раза и в 1,3 раза соответственно, тогда как у пациентов без рецидивов значимых отличий не обнаружено.

Если уровень VEGFA в опухоли от 110,8 пг/г ткани и более, в перифокальной зоне от 136,6 пг/г ткани и более, в линии резекции от 233,9 пг/г ткани и более; при уровне VEGFC в опухоли в пределах от 231,09 пг/г ткани и более, в перифокальной зоне от 186,23 пг/г ткани и более, в линии резекции от 306,12 пг/г ткани и более, прогнозируют развитие рецидива заболевания в сроки 12-15 месяцев.

Приводим клинические примеры применения способа.

Пример №1.

Больной Т., 1961 г.р., поступил в отделение реконструктивно-пластической хирургии 25.10.2022 г. с диагнозом: Рак кожи шеи справа T2N0M0, stII, кл.гр. 2 При поступлении предъявлял жалобы на образование кожи шеи.

Объективно: на коже шеи справа образование до 2,5 см в диаметре, бугристое, розового цвета, частично покрыто корками. Регионарные лимфоузлы не увеличены, безболезненны при пальпации, не спаяны с окружающими тканями.

Цитологическое исследование: Базальноклеточная карцинома.

Проведенное лечение: операция 25.10.2022 - широкое иссечение новообразования кожи с реконструктивно-пластическим компонентом.

Верификация процесса (гистологический анализ): Базальноклеточная карцинома, узловая форма, солидный вариант, инфильтративный тип. Инвазия III уровня. Толщина опухоли - 2,2 мм. Эпидермис изъязвлен. Лимфоцитарная инфильтрация. Опухоль удалена в пределах здоровых тканей. pT2

Послеоперационный период протекал гладко, без осложнений. В п/о периоде проводилась Обезболивающая терапия: кетопрофен 2,0 в/м при боли. Рубец розовый. Заживление первичным натяжением.

Заключительный диагноз: (С 44.4) Рак кожи шеи справа T2N0M0, st. II, состояние после хирургического лечения 25.10.2022 гр.3

Уровень VEGFA в образцах линии резекции составил 238 пг/гтк, в перифокальной зоне опухоли 139,1 пг/гтк; в опухоли 141 пг/гтк. VEGFC в образцах линии резекции 309 пг/гтк, в перифокальной зоне опухоли 201 пг/гтк, в опухоли 233,6 пг/гтк. У больного спустя 12 месяцев после иссечения опухоли развился рецидив заболевания.

Пример №2.

Больной Ч., 1948 г.р., поступил в отделение реконструктивно-пластической хирургии 03.11.2021г. с диагнозом: Рак кожи шеи слева T1N0M0, stI, кл.гр. 2 При поступлении предъявлял жалобы на образование кожи шеи.

Объективно: на коже шеи слева солидное опухолевидное образование до 0,5 см в диаметре, поверхность глянцевая, розового цвета, периодически подвергается травматизации. Регионарные лимфоузлы не увеличены, безболезненны при пальпации, не спаяны с окружающими тканями.

Цитологическое исследование - базальноклеточная карцинома.

Проведенное лечение: операция 04.11.2021 - широкое иссечение новообразования кожи с реконструктивно-пластическим компонентом.

Верификация процесса (гистологический анализ): Базальноклеточная карцинома, узловая форма, аденоидный вариант. Инвазия V уровня. Толщина опухоли - 2,2 мм. Эпидермис изъязвлен. Воспаление. Определяется лимфоваскулярная инвазия. Опухоль удалена в пределах здоровых тканей. pT1

Послеоперационный период протекал гладко, без осложнений. В п/о периоде проводилась Обезболивающая терапия: кетопрофен 2,0 в/м при боли. Рубец розовый. Заживление первичным натяжением.

Заключительный диагноз: (С 44.4) Рак кожи шеи слева T1N0M0, stI, состояние после хирургического лечения 04.11.2021, кл.гр.3

Уровень VEGFA в образцах линии резекции 234,2 пг/гтк, в перифокальной зоне опухоли 142,3 пг/гтк, в опухоли 139,0; VEGFC в образцах линии резекции 312 пг/гтк, в перифокальной зоне опухоли 198 пг/гтк, в опухоли 232,1 пг/гтк. У больного спустя 15 месяцев после иссечения опухоли развился рецидив заболевания.

Пример № 3.

Больной И., 1961г.р., поступил в отделение реконструктивно-пластической хирургии 28.11.2021г. с диагнозом: Рак кожи спины T1N0M0, stI, кл.гр. 2. При поступлении предъявлял жалобы на образование кожи спины.

Объективно: на коже спины солидное опухолевидное образование до 1,5 см в диаметре, поверхность изъязвлена. Регионарные лимфоузлы не увеличены, безболезненны при пальпации, не спаяны с окружающими тканями.

Цитологическое исследование - в доставленном материале обнаружены единичные группы базальноклеточной карциномы среди базальноклеточной гиперплазиию.

Проведенное лечение: операция 28.11.2021 - широкое иссечение новообразования кожи с реконструктивно-пластическим компонентом.

Верификация процесса (гистологический анализ): в кожном лоскуте - базальноклеточная карцинома, узловой вариант, размером 1,2х1,5 см, толщина опухоли 4 мм, с изъязвлением, фокусами некроза, с прорастанием в ретикулярный слой дермы, с очаговой лимфоидной инфильтрацией. Периневральной и лимфоваскулярной инвазии опухоли не определяется. В периферической и глубокой линиях резекции признаков опухолевого роста не определяется.

Послеоперационный период протекал гладко, без осложнений. В п/о периоде проводилась Обезболивающая терапия: кетопрофен 2,0 в/м при боли. Рубец розовый. Заживление первичным натяжением.

Заключительный диагноз: (С 44.5) Рак кожи спины, T1N0M0, st I, состояние после хирургического лечения 28.11.2021, кл.гр.3

Уровень VEGFA в образцах линии резекции 251 пг/гтк, в перифокальной зоне 137,6, в опухоли 126 пг/гтк; VEGFC в образцах линии резекции 306 пг/гтк, в перифокальной зоне опухоли 189 пг/гтк, в опухоли 232,2 пг/гтк. У больного спустя 15 месяцев после иссечения опухоли развился рецидив заболевания.

Пример № 4.

Больной У., 1967 г.р., поступил в отделение реконструктивно-пластической хирургии 11.11.2021г. с диагнозом: Рак кожи спины T1N0M0, stI, кл.гр.2. При поступлении предъявлял жалобы на наличие образования кожи спины.

Объективно: на коже спины - инфильтративное образование до 0,7 см, розового цвета. Регионарные л/у не увеличены.

Цитологическое исследование - базальноклеточная карцинома.

Проведенное лечение: операция 11.11.2021 - широкое иссечение новообразования кожи с реконструктивно-пластическим компонентом.

Верификация процесса (гистологический анализ): в кожном лоскуте «спины» - базальноклеточная карцинома, поверхностно распространяющаяся, размером 1,5х 0,8 см, с инвазией сетчатого слоя дермы, с перитуморальной лимфоцитарной инфильтрацией, лимфоваскулярной и периневральной инвазии не обнаружено. В крае резекции - опухолевого роста не определяется.

Послеоперационный период протекал гладко, без осложнений. В п/о периоде проводилась Обезболивающая терапия: кетопрофен 2,0 в/м при боли. Рубец розовый. Заживление первичным натяжением.

Заключительный диагноз: (С 44.5) Рак кожи спины рT1N0M0, stI, состояние после хирургического лечения 11.11.2021, кл.гр.3

Уровень VEGFA в образцах линии резекции 44 пг/гтк, в опухоли 41 пг/гтк, в перифокальной зоне 39 пг/гтк; VEGFC опухоль 62, п/зона 70, линия резекции 75 пг/гтк . В течение более чем 2-х лет рецидива заболевания не обнаружено

Пример № 5.

Больной Р., 1937 г.р., поступил в отделение реконструктивно-пластической хирургии 25.10.2021г. с диагнозом: Рак кожи правого плеча T2N0M0, stII, кл.гр.2. При поступлении предъявлял жалобы на наличие образования кожи спины.

Объективно: на коже правого плеча - образование до 2,2 см, солидное, розового цвета, с изъязвлением, покрытое коркой. Регионарные л/у не увеличены.

Цитологическое исследование - базальноклеточная карцинома.

Проведенное лечение: операция 26.10.2021 - широкое иссечение новообразования кожи с реконструктивно-пластическим компонентом.

Верификация процесса (гистологический анализ): Базальноклеточная карцинома, узловая форма, солидный вариант. Инвазия III уровня. Толщина опухоли - 2,3 мм. Воспаление. Эпидермис без изъязвления. Солнечный эластоз. Опухоль удалена в пределах здоровых тканей. Края резекции имеют обычное строение. pT2.

Послеоперационный период протекал гладко, без осложнений. В п/о периоде проводилась Обезболивающая терапия: кетопрофен 2,0 в/м при боли. Рубец розовый. Заживление первичным натяжением.

Заключительный диагноз: (С 44.5) Рак кожи правого плеча T2N0M0, stII, состояние после хирургического лечения 26.10.2022, кл.гр.3.

Уровень VEGFA в образцах линии резекции 38 пг/гтк, в опухоли 47,5 пг/гтк, в перифокальной зоне 45 пг/гтк; VEGFC опухоль 75,0 пг/гтк, п/зона 84 пг/гтк, линия резекции 91 пг/гтк . В течение более чем 2-х лет рецидива заболевания не обнаружено.

Пример № 6.

Больной Б., 1958 г.р., поступил в отделение реконструктивно-пластической хирургии 19.12.2021г. с диагнозом: Рак кожи левого плеча T2N0M0, stII, кл.гр.2. При поступлении предъявлял жалобы на наличие образования кожи спины.

Объективно: на коже левого плеча - образование до 2,5 см, солидное, розового цвета, частично покрыто корками. Регионарные л/у не увеличены.

Цитологическое исследование - базальноклеточная карцинома.

Проведенное лечение: операция 19.12.2021 - широкое иссечение новообразования кожи с реконструктивно-пластическим компонентом.

Верификация процесса (гистологический анализ): Узловая форма базальноклеточной карциномы, солидный вариант. Эпидермис изъязвлен. Инвазия в некоторых препаратах распространяется до V уровня. Толщина опухоли - от 2 до 6 мм. Лимфоцитарная инфильтрация. В некоторых фрагментах имеются структуры внутридермального невуса. Опухоль удалена в пределах здоровых тканей. Края резекции имеют обычное строение. pT2

Послеоперационный период протекал гладко, без осложнений. В п/о периоде проводилась Обезболивающая терапия: кетопрофен 2,0 в/м при боли. Рубец розовый. Заживление первичным натяжением.

Заключительный диагноз: (С 44.5) Рак кожи левого плеча T2N0M0, stII, состояние после хирургического лечения 19.12.2021, кл.гр.3.

Уровень VEGFA в образцах линии резекции 40 пг/гтк, в опухоли 36,1 пг/гтк, в перифокальной зоне 39 пг/гтк; VEGFC опухоль 72,6 пг/гтк, п/зона 71 пг/гтк, линия резекции 80 пг/гтк . В течение более чем 2-х лет рецидива заболевания не обнаружено

Изобретение «Способ прогнозирования рецидива у больных базальноклеточным раком кожи после хирургического удаления опухоли» является промышленно применимым и может быть многократно воспроизведено в здравоохранении в лечебных учреждениях специализированного профиля для лечения онкологических больных с данной локализацией злокачественного процесса.

Технико-экономическая эффективность способа прогнозирования рецидива у больных базальноклеточным раком кожи после хирургического удаления опухоли заключается в том, что его применение позволяет после удаление опухоли прогнозировать развитие рецидива в ближайшие 12-15 месяцев. При этом уровень VEGFA и VEGFC в образцах опухоли, перифокальной зоны и линии резекции служат информативным лабораторным тестом для предикторной оценки характера дальнейшего развития заболевания. Применение предлагаемого способа позволит уже на этапе хирургического вмешательства выделять группы больных с высоким риском развития рецидивов для осуществления их углубленного обследования с целью своевременного проведения адекватных лечебных мероприятий.

Список используемой литературы:

1. Basset-Seguin N., Herms F. Update in the Management of Basal Cell Carcinoma. Acta Derm. Venereol. 2020;100:284–290. doi: 10.2340/00015555-3495

2. Proietti I, Filippi L, Tolino E, Bernardini N, Svara F, Trovato F, Di Cristofano C, Petrozza V, Bagni O, Vizzaccaro A, Skroza N, Potenza C. Supraorbital Basosquamous Carcinoma Treated with Cemiplimab Followed by Sonidegib: A Case Report and Review of the Literature. Biomedicines. 2023 Oct 26;11(11):2903. doi: 10.3390/biomedicines11112903

3. Dika E., Scarfì F., Ferracin M., Broseghini E., Marcelli E., Bortolani B., Campione E., Riefolo M., Ricci C., Lambertini M. Basal Cell Carcinoma: A Comprehensive Review. Int. J. Mol. Sci. 2020;21:5572. doi: 10.3390/ijms21155572

4. McDaniel B., Badri T., Steele R.B. StatPearls. StatPearls Publishing; Treasure Island, FL, USA: 2023. Basal Cell Carcinoma

5. Di Nardo L., Pellegrini C., Di Stefani A., Ricci F., Fossati B., Del Regno L., Carbone C., Piro G., Corbo V., Delfino P., et al. Molecular alterations in basal cell carcinoma subtypes. Sci. Rep. 2021;11:13206. doi: 10.1038/s41598-021-92592-3

6. Kang S., Amagai M., Bruckner A.L., Enk A.H., Margolis D.J., McMichael A.J., Orringer J.S., editors. Fitzpatrick’s Dermatology. 9th ed. McGraw Hill Education; New York, NY, USA: 2019

7. Richarz N.A., Boada A., Carrascosa J.M. Angiogenesis in Dermatology—Insights of Molecular Mechanisms and Latest Developments. Acta Dermosifiliogr. 2017;108:515–523. doi: 10.1016/j.ad.2016.12.001

8. Yang Y, Wang X, Wang P. Signaling mechanisms underlying lymphatic vessel dysfunction in skin aging and possible anti-aging strategies. Biogerontology. 2023 Oct;24(5):727-740. doi: 10.1007/s10522-023-10016-3

9. Patel SA, Nilsson MB, Le X, Cascone T, Jain RK, Heymach JV. Molecular Mechanisms and Future Implications of VEGF/VEGFR in Cancer Therapy. Clin Cancer Res. 2023 Jan 4;29(1):30-39. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-22-1366

10. Vimalraj S, Hariprabu KNG, Rahaman M, Govindasami P, Perumal K, Sekaran S, Ganapathy D. Vascular endothelial growth factor-C and its receptor-3 signaling in tumorigenesis. 3 Biotech. 2023 Oct;13(10):326. doi: 10.1007/s13205-023-03719-4

11. Annese T., Tamma R., Ribatti D. RNAscope for VEGF-A Detection in Human Tumor Bioptic Specimens. Meth. Mol. Biol. 2022;2475:143–155. doi: 10.1007/978-1-0716-2217-9_10

12. Li S., Zhang Q., Hong Y. Tumor Vessel Normalization: A Window to Enhancing Cancer Immunotherapy. Technol. Cancer Res. Treat. 2020;19:1533033820980116. doi: 10.1177/1533033820980116

13. Saba N.F., Vijayvargiya P., Vermorken J.B., Rodrigo J.P., Willems S.M., Zidar N., de Bree R., Mäkitie A., Wolf G.T., Argiris A., et al. Targeting Angiogenesis in Squamous Cell Carcinoma of the Head and Neck: Opportunities in the Immunotherapy Era. Cancers. 2022;14:1202. doi: 10.3390/cancers14051202

14. Apte RS, Chen DS, Ferrara N (2019) VEGF in signaling and disease: beyond discovery and development. Cell 176(6):1248–1264. https://doi.org/10.1016/j.cell.2019.01.021

15. Yang Y, Wu R, Sargsyan D, Yin R, Kuo HC, Yang I, et al. UVB drives different stages of epigenome alterations during progression of skin cancer. Cancer Lett. 2019;449:20–30. doi: 10.1016/j.canlet.2019.02.010.

16. Pilkington SM, Bulfone-Paus S, Griffiths CEM, Watson REB. Inflammaging and the Skin. J Invest Dermatol. 2021;141(4s):1087–1095. doi: 10.1016/j.jid.2020.11.006

17. Yang YL, Zhou C, Chen Q, Shen SZ, Li JD, Wang XL, Wang PR. YAP1/Piezo1 involve in the dynamic changes of lymphatic vessels in UVR-induced photoaging progress to squamous cell carcinoma. J Transl Med. 2023 Nov 16;21(1):820. doi: 10.1186/s12967-023-04458-z

18. Ma S, Wang S, Ye Y et al (2022) Heterochronic parabiosis induces stem cell revitalization and systemic rejuvenation across aged tissues. Cell Stem Cell 29(6):990-1005.e1010. https://doi.org/10.1016/j.stem.2022.04.017

19. Франциянц Е.М., Комарова Е.Ф., Бандовкина В.А., Позднякова В.В., Черярина Сравнительная оценка экспрессии факторов роста в пигментных новообразованиях кожи Н.Д. Молекулярная медицина. 2015. № 3. С. 14-16.

20. Франциянц Е.М., Бандовкина В.А., Курышова М.И., Ткаля Л.Д. Изучение в сравнительном аспекте изменений гормонального профиля и некоторых факторов роста, характерных для доброкачественных и злокачественных аномалий меланоцитарной системы. Фундаментальные исследования. 2015. № 2-26. С. 5840-5844.

21. Франциянц Е.М., Бандовкина В.А., Каплиева И.В., Трепитаки Л.К., Погорелова Ю.А., Черярина Н.Д. Факторы роста эндотелия сосудов и рецепторов в динамике развития перевиваемой меланомы B16/F10 Российский онкологический журнал. 2015. Т. 20. № 2. С. 32-37.

22. Monaghan RM, Page DJ, Ostergaard P, Keavney BD (2021) The physiological and pathological functions of VEGFR3 in cardiac and lymphatic development and related diseases. Cardiovasc Res 117(8):1877–1890. https://doi.org/10.1093/cvr/cvaa291

23. Lin Y, Zhai E, Liao B, Xu L, Zhang X, Peng S, He Y, Cai S, Zeng Z, Chen M (2017) Autocrine VEGF signaling promotes cell proliferation through a PLC-dependent pathway and modulates Apatinib treatment efficacy in gastric cancer. Oncotarget 8(7):11990–12002. https://doi.org/10.18632/oncotarget.14467

24. Lian L, Li XL, Xu MD, Li XM, Wu MY, Zhang Y, Tao M, Li W, Shen XM, Zhou C, Jiang M (2019) VEGFR2 promotes tumorigenesis and metastasis in a pro-angiogenic-independent way in gastric cancer. BMC Cancer 19(1):183. https://doi.org/10.1186/s12885-019-5322-0

25. Nie X.J., Liu W.M., Zhang L. Association of VEGF Gene Polymorphisms with the Risk and Prognosis of Cutaneous Squamous Cell Carcinoma. Med. Sci. Monitor Int. Med. J. Exp. Clin. Res. 2016;22:3658–3665. doi: 10.12659/MSM.896710

26. Scola L, Bongiorno MR, Forte GI, Aiello A, Accardi G, Scrimali C, Spina R, Lio D, Candore G. TGF-β/VEGF-A Genetic Variants Interplay in Genetic Susceptibility to Non-Melanocytic Skin Cancer. Genes (Basel). 2022 Jul 13;13(7):1235. doi: 10.3390/genes13071235

27. Bieniasz‐Krzywiec P., Martín‐Pérez R., Ehling M., García‐Caballero M., Pinioti S., Pretto S., Kroes R., Aldeni C., Di Matteo M., Prenen H., Tribulatti M. V., Campetella O., Smeets A., Noel A., Floris G., Van Ginderachter J. A., Mazzone M., Cell Metab. 2019, 30, 917.

28. Zhang Q, Liu S, Wang H, Xiao K, Lu J, Chen S, Huang M, Xie R, Lin T, Chen X. ETV4 Mediated Tumor-Associated Neutrophil Infiltration Facilitates Lymphangiogenesis and Lymphatic Metastasis of Bladder Cancer. Adv Sci (Weinh). 2023 Apr;10(11):e2205613. doi: 10.1002/advs.202205613

29. Vimalraj S, Hariprabu KNG, Rahaman M, Govindasami P, Perumal K, Sekaran S, Ganapathy D. Vascular endothelial growth factor-C and its receptor-3 signaling in tumorigenesis. 3 Biotech. 2023 Oct;13(10):326. doi: 10.1007/s13205-023-03719-4

30. Lu Q., Yin H., Deng Y., Chen W., Diao W., Ding M., Cao W., Fu Y., Mo W., Chen X., Zhang Q., Zhao X., Guo H., Cell Death Discovery 2022, 8, 243

31. Jaillon S., Ponzetta A., Di Mitri D., Santoni A., Bonecchi R., Mantovani A., Nat. Rev. Cancer 2020, 20, 485.

32. Tan K. W., Chong S. Z., Wong F. H. S., Evrard M., Tan S. M.‐L., Keeble J., Kemeny D. M., Ng L. G., Abastado J.‐P., Angeli V., Blood 2013, 122, 3666.

33. Guerrero-Juarez CF, Lee GH, Liu Y, Wang S, Karikomi M, Sha Y, Chow RY, Nguyen TTL, Iglesias VS, Aasi S, Drummond ML, Nie Q, Sarin K, Atwood SX. Single-cell analysis of human basal cell carcinoma reveals novel regulators of tumor growth and the tumor microenvironment. Sci Adv. 2022 Jun 10;8(23):eabm7981. doi: 10.1126/sciadv.abm7981

34. Hosseini K., Trus P., Frenzel A., Werner C., Fischer-Friedrich E. Skin epithelial cells change their mechanics and proliferation upon snail-mediated EMT signalling. Soft Matter. 2022;18:2585–2596. doi: 10.1039/D2SM00159D

35. Neagu M., Constantin C., Caruntu C., Dumitru C., Surcel M., Zurac S. Inflammation: A key process in skin tumorigenesis. Oncol. Lett. 2019;17:4068–4084. doi: 10.3892/ol.2018.9735

36. Khan AQ, Agha MV, Sheikhan K et al (2022) Targeting deregulated oxidative stress in skin inflammatory diseases: an update on clinical importance. Biomed Pharmacother 154:113601. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2022.113601

37. Cha B, Ho YC, Geng X et al (2020) YAP and TAZ maintain PROX1 expression in the developing lymphatic and lymphovenous valves in response to VEGF-C signaling. Development. https://doi.org/10.1242/dev.195453

38. Cho H, Kim J, Ahn JH et al (2019) YAP and TAZ negatively regulate Prox1 during developmental and pathologic lymphangiogenesis. Circ Res 124(2):225–242. https://doi.org/10.1161/circresaha.118.313707

39. Франциянц Е.М., Комарова Е.Ф., Позднякова В.В., Бандовкина В.А. Способ прогнозирования развития метастазов у больных меланомой кожи. Патент на изобретение RU 2546035 C1, 10.04.2015. Заявка № 2014115180/15 от 15.04.2014. https://yandex.ru/patents/doc/RU2546035C1_20150410

40. Сидоренко Ю.С. с соавторами Опубликовано: 2006.04.27 RU 2 275 637C2 https://yandex.ru/patents/doc/RU2275637C2_20060427.

Claims (1)

1. Способ прогнозирования рецидива у больных базальноклеточным раком кожи после хирургического удаления опухоли, заключающийся в том, что в 10% гомогенатах образцов хирургически удаленной опухоли, ее перифокальной зоны и линии резекции методом иммуноферментного анализа определяют уровень VEGFA и VEGFC и при уровне VEGFA в опухоли от 110,8 пг/г ткани и более, в перифокальной зоне от 136,6 пг/г ткани и более, в линии резекции от 233,9 пг/г ткани и более; при уровне VEGFC в опухоли в пределах от 231,09 пг/г ткани и более, в перифокальной зоне от 186,23 пг/г ткани и более, в линии резекции от 306,12 пг/г ткани и более прогнозируют развитие рецидива заболевания в сроки 12-15 месяцев.