RU2813111C2 - Фармацевтическая комбинация, содержащая tno155 и рибоциклиб - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии, и раскрывает способ лечения рака, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, фармацевтической композиции, содержащей (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амин или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации со вторым терапевтическим средством, где второе терапевтическое средство представляет собой ингибитор CDK4/6, такой как 7-циклопентил-N,N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль, где рак выбран из плоскоклеточной карциномы пищевода или головы и шеи, колоректального рака, рака яичника, рака поджелудочной железы или немелкоклеточного рака легкого и почечно-клеточной карциномы и где 7-циклопентил-N,N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят перорально в дозе 200 мг в день, 300 мг в день, 400 мг в день, 500 мг в день или 600 мг в день, и где (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амин или его фармацевтически приемлемую соль вводят перорально в дозе 20 мг в день, или 30 мг в день, или 40 мг в день, или 50 мг в день, или 60 мг в день. Техническим результатом изобретения является повышенная эффективность по сравнению с одним отдельным средством в лечении плоскоклеточной карциномы пищевода или головы и шеи, колоректального рака, рака яичника, рака поджелудочной железы или немелкоклеточного рака легкого и почечно-клеточной карциномы. 5 з.п. ф-лы, 4 ил., 5 пр.

Description

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

[0001] Настоящее изобретение относится к фармацевтической комбинации, содержащей TNO155 и рибоциклиб; фармацевтическим композициям, содержащим их; и способам применения таких комбинаций и композиций в лечении или предупреждении состояний, при которых ингибирование SHP2 в сочетании с ингибированием CDK4/6 является полезным, например, в лечении форм рака.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0001] TNO155 представляет собой пероральный биодоступный аллостерический ингибитор домена Src homology-2, содержащий протеинтирозинфосфатазу-2 (SHP2, кодируемый геном PTPN11), который преобразует сигналы от активированных рецепторов тирозинкиназ (RTK) в нисходящие сигнальные пути, включая путь митоген-активируемой протеинкиназы (MAPK). SHP2 также имеет отношение к иммунной контрольной точке и передаче сигналов рецептора цитокинов. Для TNO155 продемонстрирована эффективность в отношении широкого диапазона RTK-зависимых линий раковых клеток человека и ксенотрансплантатов опухолей in vivo.

[0002] Белки циклина D имеют решающее значение в делении раковых клеток и образуют комплекс с протеинкиназами CDK4 и CDK6, способствуя активации G1 путем гиперфосфорилирования и активации белка ретинобластомы (pRb). Рибоциклиб ингибирует специфическое для CDK4/6 фосфорилирование pRb, останавливая тем самым клеточный цикл в фазе G1. Циклин D1 является эффектором передачи нисходящих сигналов мутантного EGFR и других RTK, что позволяет предположить, что ось циклина D1-CDK4/6 играет важную роль в пролиферации нисходящих RTK.

[0003] Комбинация TNO155 и рибоциклиба по настоящему изобретению демонстрирует повышенную эффективность по сравнению с одним отдельным средством в лечении плоскоклеточной карциномы пищевода или головы и шеи; колоректального рака, рака яичника, рака поджелудочной железы или немелкоклеточного рака легкого и почечно-клеточной карциномы.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0004] Настоящее изобретение представляет фармацевтическую комбинацию, содержащую

[0005] (а) ингибитор SHP2, выбранный из (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амина (TNO155) или его фармацевтически приемлемой соли, характеризующиеся структурой

; и

8-(6-амино-5-((2-(трифторметил)пиридин-3-ил)тио)пиразин-2-ил)-8-азаспиро[4.5]декан-1-амин или его фармацевтически приемлемую соль, характеризующийся структурой

; и

[0006] (b) 7-циклопентил-N,N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид (рибоциклиб) или его фармацевтически приемлемую соль, характеризующаяся структурой

.

[0007] Комбинации TNO155 или его фармацевтически приемлемой соли и рибоциклиба или его фармацевтически приемлемой соли также будут называться в данном документе "комбинацией по настоящему изобретению".

[0008] В другом варианте осуществления комбинации по настоящему изобретению TNO155 или его фармацевтически приемлемая соль и рибоциклиб или его фармацевтически приемлемая соль находятся в одном составе.

[0009] В другом варианте осуществления комбинации по настоящему изобретению TNO155 или его фармацевтически приемлемая соль и рибоциклиб или его фармацевтически приемлемая соль находятся в отдельных составах.

[0010] В другом варианте осуществления комбинация по настоящему изобретению предназначена для одновременного или последовательного (в любом порядке) введения.

[0011] В другом варианте осуществления представлен способ лечения или предупреждения рака у субъекта, нуждающегося в этом, предусматривающий введение субъекту терапевтически эффективного количества комбинации по настоящему изобретению.

[0012] В дополнительном варианте осуществления способа рак выбран из плоскоклеточной карциномы пищевода или головы и шеи; колоректального рака, рака яичника, рака поджелудочной железы или немелкоклеточного рака легкого и почечно-клеточной карциномы.

[0013] В другом варианте осуществления способа рак выбран из рака прямой кишки, рака яичника, рака поджелудочной железы и немелкоклеточного рака легкого.

[0014] В следующем осуществления способа рак представляет собой почечно-клеточную карциному.

[0015] В дополнительном варианте осуществления комбинация по настоящему изобретению предусмотрена для применения в изготовлении лекарственного препарата для лечения рака, выбранного из плоскоклеточной карциномы пищевода или головы и шеи; колоректального рака, рака яичника, рака поджелудочной железы или немелкоклеточного рака легкого и почечно-клеточной карциномы.

[0016] В другом варианте осуществления представлена фармацевтическая композиция, содержащая комбинацию по настоящему изобретению.

[0017] В дополнительном варианте осуществления фармацевтическая композиция дополнительно содержит один или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

[0018] Фигура 1: комбинация in vitro обеспечивает преимущества TNO155 и рибоциклиба в клетках NSCLC с EGFR^mut.

[0019] Фигура 2: предупреждение индуцированного рибоциклибом накопления циклина D1 TNO155 в клетках NSCLC с EGFR^mut.

[0020] Фигура 3: преимущества комбинации SHP2i (TNO155 и LWS391) и рибоциклиба в клеточных линиях NSCLC и CRC.

[0021] Фигура 4: TNO155 и рибоциклиб более эффективны, чем любое отдельное средство при множественных показаниях в исследовании PTX.

Определения

[0022] Общие термины, применяемые выше и далее в данном документе, предпочтительно имеют следующие значения в контексте данного изобретения, если не указано иное, где более общие термины, используемые где-либо еще, независимо друг от друга могут быть заменены на более конкретные определения или оставаться без изменения, определяя таким образом более подробные варианты осуществления настоящего изобретения.

[0023] Используемые в данном документе термины "субъект" или "пациент" предназначены для включения животных, которые могут быть подвержены раку или любому нарушению, прямо или опосредовано включающему рак, или страдать от него. Примеры субъектов включают млекопитающих, например, людей, человекообразных обезьян, обезьян, собак, коров, лошадей, свиней, овец, коз, кошек, мышей, кроликов, крыс и трансгенных животных, отличных от человека. В одном варианте осуществления субъектом является человек, например, человек, страдающий от рака, с риском развития рака или потенциально способный страдать от форм рака.

[0024] Термины "осуществление лечения" или "лечение", используемые в данном документе, предусматривают лечение, облегчающее, уменьшающее или ослабляющее по меньшей мере один симптом у субъекта или обеспечивающее эффект задержки прогрессирования заболевания. Например, лечение может заключаться в снижении интенсивности одного или нескольких симптомов нарушения или полном устранении нарушения, такого как рак. В пределах значения настоящего изобретения термин "лечить" также означает приостановку, задержку наступления (т. е. периода до клинического проявления заболевания) и/или снижение риска развития или обострения заболевания.

[0025] Термины "содержащий" и "включающий" используются в данном документе в открытом и неограничивающем смысле, если не указано иное.

[0026] Формы ед. числа и подобные формы в контексте описания настоящего изобретения (в частности, в контексте нижеследующей формулы изобретения), следует истолковывать с охватом как формы ед. числа, так и формы мн. числа, если в данном документе не указано иное или нет явного противоречия по контексту. Если форма мн. числа используется для соединений, солей и т. п., то это также означает одно соединение, соль или т. п.

[0027] Термины "комбинированная терапия" или "в комбинации с" относятся к введению двух или более терапевтических средств для лечения состояния или нарушения, описанных в настоящем изобретении (например, рака). Такое введение охватывает совместное введение этих терапевтических средств практически одновременно, например, в одной капсуле, имеющей фиксированное соотношение активных ингредиентов. В качестве альтернативы такое введение охватывает совместное введение в многоместных или в отдельных контейнерах (например, капсулы, порошки и жидкости) для каждого активного ингредиента. Порошки и/или жидкости можно ресуспендировать или разбавить до требуемой дозы перед введением. Кроме того, такое введение также охватывает применение каждого типа терапевтического средства последовательно, при этом примерно в одно и то же время, либо в разные моменты времени. Так или иначе схема лечения будет обеспечивать благоприятные эффекты комбинации лекарственных средств при лечении состояний или нарушений, описанных в данном документе.

[0028] Комбинированная терапия может обеспечивать "синергизм" и оказаться "синергической", т. e. эффект, достигаемый при совместном применении активных ингредиентов, превышает сумму эффектов, которые являются результатом применения соединений по отдельности. Синергический эффект может достигаться, если активные ингредиенты (1) составлены вместе и вводятся или доставляются одновременно в виде комбинированного состава с однократной дозой; (2) доставляются по очереди или параллельно как отдельные составы или (3) применяется какой-либо другой режим. При доставке в качестве чередующейся терапии синергический эффект может достигаться, в случае если соединения вводят или доставляют последовательно, например, посредством различных инъекций в отдельных шприцах. Как правило, во время чередующейся терапии эффективные дозы каждого активного ингредиента вводят последовательно, т. е. серийно, тогда как при комбинированной терапии эффективные дозы двух или более активных ингредиентов вводят совместно.

[0029] Используемый в данном документе термин "фармацевтическая комбинация" относится либо к фиксированной комбинации в одной единичной лекарственной форме, либо к нефиксированной комбинации или набору из частей для комбинированного введения, где два или более терапевтических средств можно вводить независимо в одно и то же время или по отдельности через промежутки времени, особенно в случае, если эти промежутки времени обеспечивают возможность проявления партнерами по комбинации кооперативного, например, синергического эффекта.

[0030] Используемый в данном документе термин "синергетический эффект" относится к действию двух терапевтических средств, таких как, например, соединение TNO155 в качестве ингибитора SHP2 и рибоциклиб в качестве ингибитора CDK4/6, вызывающих эффект, например, замедления прогрессирования клинической симптоматики пролиферативного заболевания, в частности рака, или его симптомов, который сильнее простого суммирования эффектов каждого лекарственного средства, вводимого отдельно. Синергетический эффект может быть рассчитан, например, с применением подходящих способов, таких как сигмовидное уравнение Emax (Holford, N. H. G. and Scheiner, L. B., Clin. Pharmacokinet. 6: 429-453 (1981)), уравнение аддитивности Loewe (Loewe, S. and Muischnek, H., Arch. Exp. Pathol Pharmacol. 114: 313-326 (1926)) и уравнение медианного эффекта (Chou, T. C. and Talalay, P., Adv. Enzyme Regul. 22: 27-55 (1984)). Каждое из уравнений, указанных выше, можно использовать в отношении экспериментальных данных, чтобы cгенерировать соответствующий график, способный помочь в оценке эффектов комбинации лекарственных средств. Соответствующими графиками, ассоциированными с уравнениями, указанными выше, являются кривая концентрация-эффект, кривая изоболограммы и кривая показателя аддитивности, соответственно.

[0031] Комбинация TNO155 и рибоциклиба по настоящему изобретению также предназначена для представления немеченых форм, а также меченых изотопами форм соединений. Меченые изотопами соединения содержат один или несколько атомов, замененных атомом, имеющим выбранную атомную массу или массовое число. Примеры изотопов, которые могут быть включены в TNO155 и рибоциклиб, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода и хлора, например, ²H, ³H, ¹¹C, ¹³C, ¹⁴C, ¹⁵N, ³⁵S, ³⁶Cl. Настоящее изобретение включает меченые изотопами TNO155 и рибоциклиб, например, в котором присутствуют радиоактивные изотопы, такие как ³H и ¹⁴C, или нерадиоактивные изотопы, такие как ²H и ¹³C. Меченые изотопами TNO155 и рибоциклиб полезны в исследованиях метаболизма (с ¹⁴C), исследованиях кинетики реакций (например, с ²H или ³H), в методиках обнаружения или визуализации, таких как позитронно-эмиссионная томография (PET) или однофотонная эмиссионная компьютерная томография (SPECT), включая исследования распределения лекарств или субстратов в тканях, или в радиотерапии пациентов. Изотопно меченые соединения по настоящему изобретению, как правило, можно получать с помощью традиционных методик, известных специалистам в данной области, или с помощью способов, аналогичных способам, описанным в сопутствующих примерах, с использованием подходящих изотопно меченых реагентов.

[0032] Кроме того, замещение более тяжелыми изотопами, в частности дейтерием (т. е. ²H или D), может обеспечивать определенные терапевтические преимущества, что обусловлено более высокой метаболической стабильностью, например, увеличение периода полувыведения in vivo, или снижение требований в отношении дозировки, или улучшение терапевтического индекса. Следует понимать, что дейтерий в данном контексте рассматривается как заместитель либо TNO155, либо рибоциклиба. Концентрация такого более тяжелого изотопа, в частности дейтерия, может определяться коэффициентом изотопного обогащения. Используемый в данном документе термин "коэффициент изотопного обогащения" означает соотношение между содержанием изотопа и распространенностью в природе указанного изотопа. Если заместитель в TNO155 или рибоциклибе обозначен как дейтерий, то такое соединение характеризуется коэффициентом изотопного обогащения для каждого указанного атома дейтерия, составляющим по меньшей мере 3500 (введение 52,5% дейтерия по каждому обозначенному атому дейтерия), по меньшей мере 4000 (введение 60% дейтерия), по меньшей мере 4500 (введение 67,5% дейтерия), по меньшей мере 5000 (введение 75% дейтерия), по меньшей мере 5500 (введение 82,5% дейтерия), по меньшей мере 6000 (введение 90% дейтерия), по меньшей мере 6333,3 (введение 95% дейтерия), по меньшей мере 6466,7 (введение 97% дейтерия), по меньшей мере 6600 (введение 99% дейтерия) или по меньшей мере 6633,3 (введение 99,5% дейтерия).

Описание предпочтительных вариантов осуществления

[0033] TNO155 представляет собой исследуемое средство, которое представляет собой низкомолекулярный ингибитор активности SHP2, доступный при пероральном введении. SHP2 передает нисходящие сигналы активированных RTK. В доклинических моделях зависимость опухоли от RTK предсказывает зависимость от SHP2.

[0034] В одном варианте осуществления представлен способ лечения рака, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, фармацевтической композиции, содержащей (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амин или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации со вторым терапевтическим средством.

[0035] В дополнительном варианте осуществления рак выбран из плоскоклеточной карциномы пищевода или головы и шеи; колоректального рака, рака яичника, рака поджелудочной железы или немелкоклеточного рака легкого и почечно-клеточной карциномы.

[0036] В дополнительном варианте осуществления рак представляет собой рак пищевода.

[0037] В дополнительном варианте осуществления рак представляет собой плоскоклеточную карциному головы и шеи.

[0038] В дополнительном варианте осуществления рак представляет собой колоректальный рак.

[0039] В дополнительном варианте осуществления рак представляет собой рак яичника.

[0040] В дополнительном варианте осуществления рак представляет собой рак поджелудочной железы.

[0041] В дополнительном варианте осуществления рак представляет собой немелкоклеточный рак легкого.

[0042] В следующем осуществления рак представляет собой почечно-клеточную карциному.

[0043] В дополнительном варианте осуществления (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амин или его фармацевтически приемлемую соль и второе терапевтическое средство вводят одновременно, по отдельности или в течение некоторого периода времени.

[0044] В дополнительном варианте осуществления (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амина или его фармацевтически приемлемой соли, вводимое субъекту, нуждающемуся в этом, является эффективным для лечения рака.

[0045] В дополнительном варианте осуществления способ включает второе терапевтическое средство.

[0046] В дополнительном варианте осуществления количество (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амина или его фармацевтически приемлемой соли и второго терапевтического средства, вводимое субъекту, нуждающемуся в этом, является эффективным для лечения рака.

[0047] В дополнительном варианте осуществления второе терапевтическое средство представляет собой ингибитор CDK4/6.

[0048] В дополнительном варианте осуществления ингибитор CDK4/6 представляет собой 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль.

[0049] В дополнительном варианте осуществления (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амин вводят перорально в дозе, составляющей приблизительно 1,5 мг в сутки, или 3 мг в сутки, или 6 мг в сутки, или 10 мг в сутки, или 20 мг в сутки, или 30 мг в сутки, или 40 мг в сутки, или 50 мг в сутки, или 60 мг в сутки, или 70 мг в сутки, или 80 мг в сутки, или 90 мг в сутки, или 100 мг в сутки.

[0050] В дополнительном варианте осуществления (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амин вводят перорально в суточной дозе 20 мг в 21-дневном цикле состоящем из 2 недель приема лекарственного средства с последующим перерывом в приеме лекарственного средства на 1 неделю.

[0051] В дополнительном варианте осуществления 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид вводят перорально в дозе, составляющей приблизительно 100 мг в сутки, или 200 мг в сутки, или 300 мг в сутки, или 400 мг в сутки, или 500 мг в сутки, или 600 мг в сутки.

[0052] В дополнительном варианте осуществления 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид вводят перорально в количестве 200 мг в течение 21 дня.

[0053] В дополнительном варианте осуществления 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид вводят перорально в количестве 300 мг в течение 21 дня с последующим перерывом в лечении на 7 дней.

[0054] В дополнительном варианте осуществления 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид вводят перорально в количестве 600 мг в течение 21 дня с последующим перерывом в лечении на 7 дней.

[0055] В другом варианте осуществления представлен способ лечения рака, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амина перорально в дозе, составляющей приблизительно 1,5 мг в сутки, или 3 мг в сутки, или 6 мг в сутки, или 10 мг в сутки, или 20 мг в сутки, или 30 мг в сутки, или 40 мг в сутки, или 50 мг в сутки, или 60 мг в сутки, или 70 мг в сутки, или 80 мг в сутки, или 90 мг в сутки, или 100 мг в сутки.

[0056] В дополнительном варианте осуществления (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амин вводят перорально в суточной дозе 20 мг в 21-дневном цикле состоящем из 2 недель приема лекарственного средства с последующим перерывом в приеме лекарственного средства на 1 неделю.

[0057] В дополнительном варианте осуществления рак выбран из плоскоклеточной карциномы пищевода или головы и шеи; колоректального рака, рака яичника, рака поджелудочной железы или немелкоклеточного рака легкого и почечно-клеточной карциномы.

[0058] В дополнительном варианте осуществления рак представляет собой рак пищевода.

[0059] В дополнительном варианте осуществления рак представляет собой плоскоклеточную карциному головы и шеи.

[0060] В дополнительном варианте осуществления рак представляет собой колоректальный рак.

[0061] В дополнительном варианте осуществления рак представляет собой рак яичника.

[0062] В дополнительном варианте осуществления рак представляет собой рак поджелудочной железы.

[0063] В дополнительном варианте осуществления рак представляет собой немелкоклеточный рак легкого.

[0064] В следующем осуществления рак представляет собой почечно-клеточную карциному.

[0065] В дополнительном варианте осуществления способ включает второе терапевтическое средство.

[0066] В дополнительном варианте осуществления (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амин или его фармацевтически приемлемую соль и второе терапевтическое средство вводят одновременно, по отдельности или в течение некоторого периода времени.

[0067] В дополнительном варианте осуществления второе терапевтическое средство представляет собой ингибитор CDK4/6.

[0068] В дополнительном варианте осуществления ингибитор CDK4/6 представляет собой 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль.

[0069] В дополнительном варианте осуществления 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид вводят перорально в дозе, составляющей приблизительно 100 мг в сутки, или 200 мг в сутки, или 300 мг в сутки, или 400 мг в сутки, или 500 мг в сутки, или 600 мг в сутки.

[0070] В дополнительном варианте осуществления 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид вводят перорально в количестве 600 мг в течение 21 дня с последующим перерывом в лечении на 7 дней.

[0071] В одном варианте осуществления в отношении фармацевтической комбинации по настоящему изобретению эта фармацевтическая комбинация содержит (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амин или его фармацевтически приемлемую соль и 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль.

[0072] В дополнительном варианте осуществления (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амин или его фармацевтически приемлемая соль и 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль вводятся по отдельности, одновременно или последовательно, в любом порядке.

[0073] В дополнительном варианте осуществления фармацевтическая комбинация предназначена для перорального введения.

[0074] В дополнительном варианте осуществления (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амин представлен в пероральной лекарственной форме.

[0075] В дополнительном варианте осуществления 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид представлен в пероральной лекарственной форме.

[0076] В другом варианте осуществления представлена фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтическую комбинацию (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амина или его фармацевтически приемлемой соли и 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли и по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого носителя.

[0077] В дополнительном варианте осуществления представлена фармацевтическая комбинация (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амина или его фармацевтически приемлемой соли и 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для применения в лечении плоскоклеточной карциномы пищевода или головы и шеи.

[0078] В другом варианте осуществления представлена фармацевтическая комбинация (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амина или его фармацевтически приемлемой соли и 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для применения в лечении колоректального рака, рака яичника, рака поджелудочной железы или немелкоклеточного рака легкого.

[0079] В другом варианте осуществления представлена фармацевтическая комбинация (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амина или его фармацевтически приемлемой соли и 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для применения в лечении почечно-клеточной карциномы.

[0080] В другом варианте осуществления представлено применение фармацевтической комбинации (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амина или его фармацевтически приемлемой соли и 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного препарата для лечения рака, выбранного из плоскоклеточной карциномы пищевода или головы и шеи, колоректального рака, рака яичника, рака поджелудочной железы или немелкоклеточного рака легкого и почечно-клеточной карциномы.

[0081] В другом варианте осуществления представлен способ лечения рака, выбранного из плоскоклеточной карциномы пищевода или головы и шеи; колоректального рака, рака яичника, рака поджелудочной железы или немелкоклеточного рака легкого и почечно-клеточной карциномы; включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, фармацевтической комбинации (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амина или его фармацевтически приемлемой соли и 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли, или фармацевтической композиции, содержащей фармацевтическую комбинацию (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амина или его фармацевтически приемлемой соли и 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли и по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого носителя.

[0082] В другом варианте осуществления представлен способ лечения рака, выбранного из плоскоклеточной карциномы пищевода или головы и шеи; колоректального рака, рака яичника, рака поджелудочной железы или немелкоклеточного рака легкого и почечно-клеточной карциномы; включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, фармацевтической комбинации (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амина или его фармацевтически приемлемой соли и 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли, или фармацевтической композиции, содержащей фармацевтическую комбинацию (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амина или его фармацевтически приемлемой соли и 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли и по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого носителя.

[0083] В другом варианте осуществления (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амин вводят перорально в дозе, составляющей приблизительно 1,5 мг в сутки, или 3 мг в сутки, или 6 мг в сутки, или 10 мг в сутки, или 20 мг в сутки, или 30 мг в сутки, или 40 мг в сутки, или 50 мг в сутки, или 60 мг в сутки.

[0084] В дополнительном варианте осуществления 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид вводят перорально в дозе, составляющей приблизительно 100 мг в сутки, или 200 мг в сутки, или 300 мг в сутки, или 400 мг в сутки, или 500 мг в сутки, или 600 мг в сутки.

[0085] В дополнительном варианте осуществления 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид вводят перорально в дозе, составляющей приблизительно 100 мг в сутки, или 200 мг в сутки, или 300 мг в сутки, или 400 мг в сутки, или 500 мг в сутки, или 600 мг в сутки непрерывно.

[0086] В дополнительном варианте осуществления 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид вводят перорально в дозе, составляющей приблизительно 100 мг в сутки, или 200 мг в сутки, или 300 мг в сутки, или 400 мг в сутки, или 500 мг в сутки, или 600 мг в течение 21 дня с последующим перерывом в лечении на 7 дней.

[0087] В дополнительном варианте осуществления 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид вводят перорально в количестве 600 мг в течение 21 дня с последующим перерывом в лечении на 7 дней.

Фармакология и применимость

[0088] Немелкоклеточный рак легкого: в 2012 году у примерно 1,8 миллиона человек во всем мире диагностировали рак легкого, и по оценкам 1,6 миллиона человек умерли от этого заболевания. Немелкоклеточный рак легкого составляет примерно 85% форм рака легкого, причем наиболее распространенными подтипами являются аденокарциномы и плоскоклеточные карциномы. Стандарт лечения поздних стадий немелкоклеточных карцином легкого (NSCLC), который не содержит генетических изменений в поддающихся воздействию лекарственных средств онкогенах-возбудителях, таких как EGFR, ALK или ROS, включает химиотерапию и иммунотерапию, применяемые одновременно или последовательно. Хотя эти методы лечения обеспечивают улучшение клинических показателей, у большинства пациентов заболевание прогрессирует в течение года, и прогноз для пациентов с распространенным NSCLC остается плохим. Иммунотерапия NSCLC с помощью ингибиторов иммунных контрольных точек оказалась многообещающей, и у некоторых пациентов с NSCLC удалось достичь надежного контроля заболевания в течение многих лет. Однако такие не прогрессирующие долговременно случаи встречаются редко, и стратегии комбинированного лечения, которые могут способствовать увеличению доли пациентов, отвечающих на иммунотерапию с использованием ингибиторов контрольных точек, и достижению стойкой ремиссии, необходимы срочно. Активирующие мутации в онкогене KRAS встречаются в примерно 30% аденокарцином легкого, и в некоторых исследованиях их ассоциировали с плохим исходом. Никакие одобренные препараты не нацелены непосредственно на мутантный ген KRAS, поэтому стандартом лечения поздней стадии NSCLC, ассоциированного с мутантным геном KRAS, также является химиотерапия и иммунотерапия, как описано выше.

[0089] Плоскоклеточный рак головы и шеи: формы плоскоклеточного рака являются наиболее распространенными формами рака головы и шеи; по оценкам, во всем мире заболеваемость раком ротоглотки и гортани составляет около 686000 случаев. Употребление алкоголя и табака являются наиболее распространенными факторами риска форм плоскоклеточного рака головы и шеи (HNSCC), причем инфекция вируса папилломы человека (HPV), вероятно, также играет роль фактора риска. Более чем у 90% HNSCC наблюдается сверхэкспрессия EGFR или его лигандов. Для пациентов с метастазами стандартное системное лечение включает химиотерапию с использованием препаратов на основе платины с цетуксимабом или без него. Исторически сложилось так, что средняя выживаемость при системной химиотерапии составляет примерно шесть месяцев, и только для примерно 20% пациентов выживаемость составляет один год. Совсем недавно было показано повышение выживаемости для ниволумаба, антитела к белку-1 запрограммированной смерти клетки (PD-1) по сравнению со стандартным отдельным средством терапии второй линии (доцетакселом, метотрексатом или цетуксимабом) у пациентов, у которых наблюдалось прогрессирование в результате химиотерапии с использованием препаратов на основе платины. Тем не менее, показатель выживаемости через один год для пациентов, получавших лечение с помощью ниволумаба, составляла всего 36%. Следовательно, существует большая потребность в улучшенных видах лечения этого агрессивного и тяжело протекающего рака.

[0090] Колоректальный рак: колоректальный рак (CRC) является вторым по распространенности раком у женщин и третьим по распространенности раком у мужчин, на долю которого в 2012 году во всем мире приходилось 1,4 миллиона новых случаев рака. В патогенезе CRC играют роль как хромосомная нестабильность, так и микросателлитная нестабильность. Хромосомная нестабильность обнаруживается в примерно 85% случаев спорадического колоректального рака и характеризуется мутациями в генах пути Wnt, APC и CTNNB1. Мутации в гене KRAS, чаще всего встречающиеся в кодоне 12 или 13, присутствуют в примерно 45% этих случаев и делают виды терапии против EGFR неэффективными. Микросателлитная нестабильность (MSI), возникающая из-за дефектной репарации ошибочно спаренных оснований ДНК, участвует в примерно 15% спорадических CRC, а также CRC, возникающих при синдроме Линча вследствие герминативной мутации в гене репарации ошибочно спаренных оснований. CRC с высоким уровнем MSI, как правило, имеют лучший прогноз, чем CRC без MSI, а также по-разному реагируют на некоторые системные виды терапии. Системная терапия метастатического CRC включает различные средства, применяемые отдельно или в комбинации, включая химиотерапию, такую​как 5-фторурацил/лейковорин, капецитабин, оксалиплатин и иринотекан; антиангиогенные средства, такие как бевацизумаб и рамуцирумаб; средства против EGFR, включая цетуксимаб и панитумумаб, для форм рака KRAS/NRAS дикого типа; и иммунотерапию, включая ниволумаб и пембролизумаб. Однако, несмотря на многочисленные активные виды терапии, метастатический CRC остается неизлечимым. В то время как CRC, у которых отсутствует репарация ошибочно спаренных оснований (MSI-high), демонстрируют высокую скорость ответа на терапию ингибиторами иммунных контрольных точек, тогда как у CRC, обладающих повышенной способностью репарации ошибочно спаренных оснований, этого не наблюдается. Поскольку KRAS-мутантные CRC, как правило, обладают повышенной функцией репарации ошибочно спаренных оснований и не являются кандидатами для терапии против EGFR, - этот подтип CRC особенно нуждается в улучшенных видах терапии.

[0091] TNO155 является первым представителем нового класса аллостеричесого ингибитора SHP2 дикого типа. SHP2 представляет собой повсеместно экспрессируемую нерецепторную протеинтирозинфосфатазу (PTP), состоящую из двух N-концевых доменов SH2, классического домена PTP и С-концевого хвоста. Активность фосфатазы автоматически ингибируется двумя доменами SHP2, которые связываются с доменом PTP (закрытая конформация). После активации рецепторных тирозинкиназ (RTK) SHP2 рекрутируется на плазматическую мембрану, где связывается с активированными RTK и несколькими адаптерными белками для передачи сигналов с помощью активации пути RAS/MAPK. TNO155 связывает неактивную или "закрытую" конформацию SHP2, предупреждая тем самым его открытие в активную конформацию. Это предупреждает передачу сигналов от активированных RTK в нисходящий сигнальный путь RAS/MAPK.

[0092] Для TNO155 продемонстрирована эффективность в отношении широкого диапазона RTK-зависимых линий раковых клеток человека и ксенотрансплантатов in vivo. Доклиническая оценка TNO155 in vitro и in vivo демонстрирует селективное и сильное ингибирование фосфатазы SHP2 на человеческих моделях RTK-зависимого рака, например, рака пищевода, HNSCC и NSCLC. Ингибирование SHP2 может быть измерено с помощью оценки биомаркеров сигнального пути MAPK, таких как снижение уровней фосфорилированной ERK1/2 (pERK) и понижающее регулирование транскрипта mRNA фосфатазы 6 с двойной специфичностью (DUSP6). В линиях раковых клеток KYSE-520 (плоскоклеточная карцинома пищевода) и DETROIT-562 (плоскоклеточная карцинома глотки) значения IC50 in vitro pERK составляли 8 нМ (3,4 нг/мл) и 35 нМ (14,8 нг/мл), а IC50 антипролиферации составляла 100 нМ (42,2 нг/мл) и 470 нМ (198,3 нг/мл), соответственно. Было обнаружено, что антипролиферативный эффект TNO155 наиболее выражен в линиях раковых клеток, которые зависят от передачи сигналов RTK. In vivo ингибирование SHP2 с помощью перорального введения TNO155 (20 мг/кг) приводило к примерно 95% снижению количества транскрипта mRNA DUSP6 в EGFR-зависимой линии раковых клеток DETROIT-562 и к 47% регрессии в случае дозирования по схеме два раза в сутки. Исследования фракционирования дозы в сочетании с модуляцией опухолевого биомаркера DUSP6 показывают, что максимальная эффективность осуществляется в случае, когда ингибирование PD на 50% достигается в течение по меньшей мере 80% интервала дозирования. Учитывая обширную перекрестную связь между путями MAPK и CDK4/6 в раковых клетках, исследовали комбинации TNO155 с селективным ингибитором CDK4/6 рибоциклибом.

[0093] Рибоциклиб (LEE011, Kisqali^®) представляет собой пероральный биодоступный высокоселективный низкомолекулярный ингибитор циклинзависимых киназ 4 и 6 (CDK4/6). Рибоциклиб одобрен рядом учреждений здравоохранения, в том числе Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (U.S. FDA) и Европейской комиссией, в качестве начальной эндокринной терапии для лечения женщин в постменопаузе с распространенным или метастатическим раком молочной железы, положительного в отношении рецепторов гормонов (HR), и отрицательного в отношении рецепторов-2 эпидермального фактора роста человека (HER2) в сочетании с ингибитором ароматазы (AI) на основе рандомизированного двойного слепого плацебо-контролируемого международного клинического исследования (MONALEESA-2 [CLEE011A2301]). 18 июля 2018 года U.S. FDA расширила показания для рибоциклиба в комбинации с AI, включив женщин в пре/перименопаузе с HR-положительным, HER2-отрицательным распространенным или метастатическим раком молочной железы в качестве начальной эндокринной терапии. Расширенные показания также включают рибоциклиб в комбинации с фулвестрантом для женщин в постменопаузе с HR-положительным, HER2-отрицательным распространенным или метастатическим раком молочной железы в качестве начальной эндокринной терапии или после прогрессирования заболевания на фоне эндокринной терапии (MONALEESA-7 [CLEE011E2301] и MONALEESA-3 [CLEE011F2301] соответственно). Дополнительные разрешения на медицинское применение препарата против HR-положительного, HER2-отрицательного распространенного или метастатического рака молочной железы находятся на рассмотрении органов здравоохранения по всему миру. В настоящее время проводятся дополнительные клинические испытания фазы III лечения пациентов с HR-положительным раком молочной железы, а также несколько других клинических исследований фазы I или II.

[0094] Рибоциклиб ингибирует ферментные комплексы CDK4/циклин D (CCND1) и CDK6/CCND3 со значениями биохимических анализов IC₅₀ 0,01 и 0,039 мкМ соответственно, демонстрируя высокую степень селективности в отношении CDK4/6 по сравнению с другими циклинзависимыми киназами. В более чем 40 pRb-положительных клеточных линиях, полученных из различных типов рака, рибоциклиб ингибировал фосфорилирование белка ретинобластомы (pRb) и препятствовал прогрессированию клеточного цикла в фазе G1 в S. Напротив, в линиях pRb-отрицательных клеток, совпадающих по типу клона, не наблюдали эффекта рибоциклиба в отношении протекания клеточного цикла.

[0095] Рибоциклиб хорошо переносился мышами и крысами в течение 28 дней в дозах соответственно не более 250 мг/кг один раз в сутки перорально или 150 мг/кг один раз в сутки перорально с потерей веса тела, не превышающей 12,5%. Однако наблюдалась миелосупрессия, которая коррелировала с ингибированием pRb. Рибоциклиб продемонстрировал противоопухолевую активность in vivo в субпопуляциях моделей ксенотрансплантатов опухолей, включая без ограничения опухоль молочной железы, меланому, нейробластому, злокачественный рабдоид, опухоли легкого, поджелудочной железы и гематологические злокачественные образования. Кроме того, рибоциклиб проявляет противоопухолевую активность в сочетании с целевыми средствами, которые ингибируют сигнальные пути, которые, как известно, регулируют уровни циклина D, включая ингибиторы RAF, митоген-активируемую протеинкиназу киназы (MEK), фосфоинозитид-3-киназу (PI3K) и мишень путей рапамицина млекопитающих (mTOR).

[0096] Рецептор эпидермального фактора роста (EGFR) является установленной критической терапевтической мишенью для NSCLC, несущего активирующие мутации EGFR. Многочисленные испытания ингибиторов EGFR первого (например, эрлотиниба, гефитиниба) и второго (например, афатиниба, дакомитиниба) поколений EGFR были проведены в популяции мутантных по EGFR клеток распространенного/неоперабельного NSCLC и неизменно демонстрировали более высокую эффективность ингибиторов EGFR тирозинкиназы (TKI) по сравнению с химиотерапией у данной популяции. Было показано, что устойчивость к TKI EGFR 1^-го поколения возникает в результате развития мутации EGFR "привратника" T790M, которая нарушает связывание TKI, а также в результате активации альтернативных путей RTK, включая амплификацию MET и ERBB2. Клинические испытания с использованием необратимых ингибиторов EGFR 3^-го поколения (например, осимертиниба, роцилетиниба), которые ингибируют активацию EGFR и мутации привратника, продемонстрировали эффективность в отношении NSCLC, мутантных по EGFR T790M, подчеркивая их постоянную зависимость от передачи сигналов EGFR. Новые данные о раковых заболеваниях, которые стали устойчивыми к ингибиторам 3^-го поколения, предполагают, что эти формы рака продолжают выбирать активированную передачу сигналов RTK, при этом были описаны мутации устойчивости в EGFR (C797S), а также амплификации RTK (MET, ERBB2, FGFR1). Ограниченные варианты лечения доступны для пациентов, у которых рак развил устойчивость к TKI EGFR 1^-го, 2^-го и 3^-го поколений. Поскольку SHP2 трансдуцирует передачу сигналов EGFR, а доклинические модели продемонстрировали сильную корреляцию между зависимостью от RTK и зависимостью от SHP2, предполагается, что TNO155 обеспечит клиническую пользу при этих формах рака, независимо от того, вызвана ли устойчивость сигналом от EGFR или другого RTK.

[0097] Более 90% случаев рака головы и шеи характеризуются сверхэкспрессией или амплификацией EGFR; амплификация/сверхэкспрессия других RTK, в частности FGFR, и их лигандов также является обычным явлением. Ингибирование EGFR цетуксимабом на поздних стадиях HNSCC также продемонстрировало клиническую пользу, хотя контроль над заболеванием не был продолжительным. Умеренная эффективность ингибирования EGFR в HNSCC может быть связана с компенсаторной передачей сигналов через другие RTK, которая, как ожидается, будет подавлена посредством ингибирования SHP2 при лечении TNO155. Кроме того, доклинические испытания выявили клетки рака головы и шеи в качестве линии с самой высокой частотой чувствительности к ингибированию SHP2.

[0098] Состояние пациентов с метастатическими или неоперабельными RTK-обусловленными формами рака, такими как NSCLC с восстановленной киназой анапластической лимфомы (ALK) или мутантная стромальная опухоль желудочно-кишечного тракта (GIST) с рецепторами фактора стволовых клеток (KIT), улучшается при воздействии молекул, непосредственно нацеленных на RTK, но устойчивость к этим средствам возникает неизменно. Механизмы устойчивости часто включают устойчивые к лекарственным средствам мутации в целевом RTK и/или активацию обходных путей RTK; в большинстве случаев возможности дальнейшего лечения ограничены. Нацеливание на SHP2 с TNO155 является рациональным подходом при таких RTK-зависимых формах рака.

[0099] Белки циклина D имеют решающее значение в делении раковых клеток и образуют комплекс с протеинкиназами CDK4 и CDK6, способствуя активации G1 путем гиперфосфорилирования и активации белка ретинобластомы (pRb). Циклин D1 является эффектором передачи нисходящих сигналов мутантного EGFR и других RTK, что позволяет предположить, что ось циклина D1-CDK4/6 играет важную роль в пролиферации нисходящих RTK.

[00100] Доклинические данные, представленные в приведенных ниже примерах, предоставляют доказательства in vitro и in vivo того, что комбинация ингибитора SHP2, TNO155 и ингибитора CDK4/6, рибоциклиба, показывает значительное преимущество комбинации на нескольких линиях рака. In vitro TNO155 и другой селективный ингибитор SHP2, LWS391, оценивали на четырех моделях NSCLC и одной модели CRC. Комбинация ингибиторов SHP2 с рибоциклибом продемонстрировала более сильные антипролиферативные эффекты у клеток, чем у любого отдельного средства. In vivo комбинацию TNO155 и рибоциклиба оценивали на широкой панели различных линий первичных ксенотрансплантатов человека, которые были имплантированы мышам с ослабленным иммунитетом. Во всех линиях, оцениваемых по эффективности комбинации (NSCLC, CRC, HNSCC, Esoph SCC и Renal), время до прогрессирования опухоли было значительно увеличено при введении комбинации TNO155 и рибоциклиба. На основе исследований ингибирования, описанных в разделе "Примеры" ниже, данные in vivo и in vitro показывают повышенную эффективность комбинации TNO155 и рибоциклиба по сравнению с любым отдельным средством по нескольким показаниям.

Фармацевтические композиции

[00101] В другом аспекте настоящее изобретение представляет фармацевтически приемлемые композиции, которые содержат терапевтически эффективное количество TNO155 и рибоциклиба, составленные вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями (добавками) и/или разбавителями. Как подробно описано ниже, фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть специально составлены для введения в твердой или жидкой форме, включая формы, адаптированные для перорального введения, например, жидкие лекарственные формы для перорального введения (водные или неводные растворы или суспензии), таблетки, например, таблетки, предназначенные для трансбуккальной, подъязычной и системной абсорбции, болюсы, порошки, гранулы, пасты для нанесения на язык.

[00102] Фраза "терапевтически эффективное количество" в контексте настоящего описания означает такое количество соединения, материала или композиции, содержащих соединение по настоящему изобретению, которое является эффективным для получения некоторого требуемого терапевтического эффекта, в по меньшей мере субпопуляции клеток животного с разумным соотношением польза/риск, применимым к любому медицинскому лечению.

[00103] Фраза "фармацевтически приемлемый" используется в данном документе для обозначения тех соединений, материалов, композиций и/или лекарственных форм, которые с медицинской точки зрения подходят для применения в контакте с тканями людей и животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции или другой проблемы или осложнения в соответствии с разумным соотношением польза/риск.

[00104] Используемая в данном документе фраза "фармацевтически приемлемый носитель" означает фармацевтически приемлемый материал, композицию или среду-носитель, такую как жидкий или твердый наполнитель, разбавитель, вспомогательное вещество, вспомогательное средство для изготовления (например, смазывающее средство, тальк, магний, стеарат кальция или цинка или стеариновая кислота) или материал, инкапсулирующий растворитель, участвующий в переносе или транспорте рассматриваемого соединения из одного органа или части тела в другой орган или часть тела. Каждый носитель должен быть "приемлемым" в смысле совместимости с другими ингредиентами состава и не причинять вреда пациенту. Некоторые примеры материалов, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей, включают: (1) сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; (2) виды крахмала, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; (3) целлюлозу и ее производные, такие как натрийкарбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; (4) порошкообразный трагакант; (5) солод; (6) желатин; (7) тальк; (8) вспомогательные вещества, такие как масло какао и суппозиторные воски; (9) масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, сафлоровое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло; (10) гликоли, такие как пропиленгликоль; (11) полиолы, такие как глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль; (12) сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; (13) агар; (14) буферные средства, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; (15) альгиновую кислоту; (16) апирогенную воду; (17) изотонический солевой раствор; (18) раствор Рингера; (19) этиловый спирт; (20) буферные растворы для доведения pH; (21) сложные полиэфиры, поликарбонаты и/или полиангидриды; и (22) другие нетоксичные совместимые вещества, используемые в фармацевтических составах.

[00105] Как указано выше, определенные варианты осуществления соединений по настоящему изобретению могут содержать основную функциональную группу, такую как амино или алкиламино, и таким образом способны образовывать фармацевтически приемлемые соли с фармацевтически приемлемыми кислотами. Термин "фармацевтически приемлемые соли" в данном отношении относится к относительно нетоксичным неорганическим и органическим солям присоединения кислоты соединений по настоящему изобретению. Эти соли могут быть получены in situ в среде-носителе для введения, или в процессе изготовления лекарственной формы, или посредством осуществления отдельной реакции очищенного соединения по настоящему изобретению в форме его свободного основания с подходящей органической или неорганической кислотой и выделения образованной таким образом соли в ходе последующей очистки. Иллюстративные соли включают гидробромид, гидрохлорид, сульфат, бисульфат, фосфат, нитрат, ацетат, валерат, олеат, пальмитат, стеарат, лаурат, бензоат, лактат, фосфат, тозилат, цитрат, малеат, фумарат, сукцинат, тартрат, нафтилат, мезилат, глюкогептонат, лактобионат и лаурилсульфонатные соли и т. п. (см., например, Berge et al. (1977) "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci. 66:1-19).

[00106] Фармацевтически приемлемые соли рассматриваемых соединений включают общепринятые нетоксичные соли или соли четвертичного аммония соединений, например, из нетоксичных органических или неорганических кислот. Например, такие общепринятые нетоксичные соли включают соли, полученные из неорганических кислот, таких как хлористоводородная, бромистоводородная, серная, сульфаминовая, фосфорная, азотная и т. п.; и соли, полученные из органических кислот, таких как уксусная, пропионовая, янтарная, гликолевая, стеариновая, молочная, яблочная, винная, лимонная, аскорбиновая, пальмитиновая, малеиновая, гидроксималеиновая, фенилуксусная, глутаминовая, бензойная, салициловая, сульфаниловая, 2-ацетоксибензойная, фумаровая, толуолсульфоновая, метансульфоновая, этандисульфоновая, щавелевая, изотионовая и т. п. Фармацевтически приемлемая соль TNO155, например, сукцинат и рибоциклиб.

[00107] В других случаях соединения по настоящему изобретению могут содержать одну или несколько кислотных функциональных групп и, таким образом, способны образовывать фармацевтически приемлемые соли с фармацевтически приемлемыми основаниями. Термин "фармацевтически приемлемые соли" в этих случаях относится к относительно нетоксичным неорганическим и органическим солям присоединения основания соединений по настоящему изобретению. Эти соли также можно получать in situ в среде-носителе для введения, или в процессе изготовления лекарственной формы, или посредством осуществления отдельной реакции очищенного соединения в форме его свободной кислоты с подходящим основанием, таким как гидроксид, карбонат или бикарбонат фармацевтически приемлемого катиона металла, с аммиаком или с фармацевтически приемлемым органическим первичным, вторичным или третичным амином. Иллюстративные соли щелочных или щелочноземельных металлов включают соли лития, натрия, калия, кальция, магния и алюминия и т. п. Иллюстративные органические амины, применимые для образования солей присоединения основания, включают этиламин, диэтиламин, этилендиамин, этаноламин, диэтаноламин, пиперазин и т. п. (см., например, Berge et al. выше)

[00108] В композициях также могут присутствовать смачивающие средства, эмульгаторы и смазывающие средства, такие как лаурилсульфат натрия и стеарат магния, а также красящие средства, средства для высвобождения, покрывающие средства, подсластители, ароматизаторы и отдушки, консерванты и антиоксиданты.

[00109] Примеры фармацевтически приемлемых антиоксидантов включают: (1) водорастворимые антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота, гидрохлорид цистеина, бисульфат натрия, метабисульфит натрия, сульфит натрия и т. п.; (2) жирорастворимые антиоксиданты, такие как аскорбилпальмитат, бутилированный гидроксианизол (BHA), бутилированный гидрокситолуол (BHT), лецитин, пропилгаллат, альфа-токоферол и т. п.; и (3) металл-хелатирующие средства, такие как лимонная кислота, этилендиаминтетрауксусная кислота (EDTA), сорбит, винная кислота, фосфорная кислота и т. п.

[00110] Составы по настоящему изобретению включают составы, подходящие для перорального, назального, местного (включая трансбуккальное и подъязычное), ректального, вагинального и/или парентерального введения. Для удобства составы могут быть представлены в виде стандартной лекарственной формы и могут быть получены с помощью любых способов, хорошо известных в области фармацевтики. Количество активного ингредиента, которое можно объединять с материалом носителя для получения единичной лекарственной формы, будет варьироваться в зависимости от хозяина, подлежащего лечению, конкретного способа введения. Количество активного ингредиента, которое можно объединять с материалом носителя для получения единичной лекарственной формы, обычно будет представлять собой такое количество соединения, которое обеспечивает терапевтический эффект. Как правило, из ста процентов это количество будет варьироваться от приблизительно 0,1 процента до приблизительно девяноста девяти процентов активного ингредиента, предпочтительно от приблизительно 5 процентов до приблизительно 70 процентов, наиболее предпочтительно от приблизительно 10 процентов до приблизительно 30 процентов.

[00111] В определенных вариантах осуществления состав по настоящему изобретению содержит вспомогательное вещество, выбранное из группы, состоящей из циклодекстринов, целлюлоз, липосом, мицеллообразующих средств, например желчных кислот, и полимерных носителей, например сложных полиэфиров и полиангидридов; и соединение по настоящему изобретению. В определенных вариантах осуществления вышеупомянутый состав обеспечивает пероральную биодоступность соединения по настоящему изобретению.

[00112] Способы получения этих составов или композиций включают стадию объединения соединения по настоящему изобретению с носителем и необязательно одним или несколькими дополнительными ингредиентами. Как правило, составы получают посредством равномерного и тщательного объединения соединения по настоящему изобретению с жидкими носителями или тонкоизмельченными твердыми носителями, или обоими, а затем, при необходимости, придания продукту формы.

[00113] Составы по настоящему изобретению, подходящие для перорального введения, могут быть представлены в виде капсул, саше, пилюль, таблеток, леденцов (с использованием ароматизированной основы, обычно сахарозы и аравийской камеди или трагаканта), порошков, гранул или в виде раствора, суспензии или твердой дисперсии в водной или неводной жидкости, или в виде жидкой эмульсии типа масло-в-воде или вода-в-масле, или в виде настойки или сиропа, или в виде пастилок (с применением инертной основы, такой как желатин и глицерин или сахароза и аравийская камедь), и/или в виде ополаскивателей для полости рта и т. п., при этом каждый из них в качестве активного ингредиента содержит предварительно определенное количество соединения по настоящему изобретению. Соединение по настоящему изобретению также можно вводить в виде болюса, электуария или пасты.

[00114] В твердых лекарственных формах по настоящему изобретению для перорального введения (капсулах, таблетках, пилюлях, драже, порошках, гранулах, таблетках для рассасывания и т. п.) активный ингредиент смешан с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, такими как цитрат натрия или дикальций-фосфат, и/или любым из следующего: (1) наполнителями или сухими разбавителями, такими как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и/или кремниевая кислота; (2) связующими, такими как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и/или аравийская камедь; (3) увлажняющими средствами, такими как глицерин; (4) разрыхляющими средствами, такими как агар-агар, карбонат кальция, картофельный или тапиоковый крахмал, альгиновая кислота, определенные силикаты и карбонат натрия; (5) замедлителями растворения, такими как парафин; (6) ускорителями абсорбции, такими как соединения четвертичного аммония и поверхностно-активные вещества, такие как полоксамер и лаурилсульфат натрия; (7) смачивающими средствами, такими как, например, цетиловый спирт, моностеарат глицерина и неионные поверхностно-активные вещества; (8) абсорбентами, такими как каолин и бентонитовая глина; (9) смазывающими средствами, такими как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия, стеарат цинка, стеарат натрия, стеариновая кислота и их смеси; (10) красящими средствами и (11) средствами для контролируемого высвобождения, такими как кросповидон или этилцеллюлоза. В случае капсул, таблеток и пилюль фармацевтические композиции также могут содержать буферные средства. Твердые композиции подобного типа также можно использовать в качестве наполнителей в желатиновых капсулах с мягкой и твердой оболочкой с использованием таких вспомогательных веществ, как лактоза или молочные сахара, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли и т. п.

[00115] Таблетку можно получить посредством прессования или формования, необязательно с одним или несколькими дополнительными ингредиентами. Прессованные таблетки можно получать с использованием связующего (например, желатина или гидроксипропилметилцеллюлозы), смазывающего средства, инертного разбавителя, консерванта, разрыхлителя (например, крахмалгликолята натрия или сшитой натрийкарбоксиметилцеллюлозы), поверхностно-активного или диспергирующего средства. Формованные таблетки можно получать посредством формования в подходящем устройстве для смешивания порошкообразного соединения, увлажненного инертным жидким разбавителем.

[00116] Таблетки и другие твердые лекарственные формы фармацевтических композиций по настоящему изобретению, такие как драже, капсулы, пилюли и гранулы, могут необязательно быть делимыми или получаемыми с покрытиями и оболочками, такими как кишечнорастворимые покрытия и другие покрытия, хорошо известные в области фармацевтического составления. Их также можно составлять таким образом, чтобы обеспечить медленное или контролируемое высвобождение активного ингредиента, содержащегося в них, с использованием, например, гидроксипропилметилцеллюлозы в различных соотношениях для обеспечения необходимого профиля высвобождения, других полимерных матриц, липосом и/или микросфер. Их можно составлять для быстрого высвобождения, например, подвергать сублимационному высушиванию. Их можно стерилизовать, например, посредством фильтрации через фильтр для удерживания бактерий или посредством включения в их состав стерилизующих средств в форме стерильных твердых композиций, которые можно растворять в стерильной воде или какой-либо другой стерильной инъекционной среде непосредственно перед применением. Эти композиции также могут необязательно содержать замутняющие средства и могут представлять собой композицию, из которой активный(-ые) ингредиент(-ы) высвобождается(-ются) исключительно или предпочтительно в определенном отделе желудочно-кишечного тракта, необязательно с задержкой. Примеры герметизирующих композиций, которые можно применять, включают полимерные вещества и воски. Активный ингредиент также может быть представлен в микроинкапсулированной форме, если необходимо с одним или несколькими из описанных выше вспомогательных веществ.

[00117] Жидкие лекарственные формы для перорального введения соединений по настоящему изобретению включают фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и настойки. В дополнение к активному ингредиенту жидкие лекарственные формы могут содержать инертные разбавители, обычно используемые в данной области, такие как, например, вода или другие растворители, солюбилизирующие средства и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, масла (в частности, хлопковое, арахисовое, кукурузное, зародышевое, оливковое, касторовое и кунжутное масла), глицерин, тетрагидрофуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирных кислот и сорбитана, а также их смеси.

[00118] Помимо инертных разбавителей композиции для перорального применения могут также содержать вспомогательные средства, такие как смачивающие средства, эмульгаторы и суспендирующие средства, подсластители, ароматизаторы, красящие средства, отдушки и консерванты.

[00119] Суспензии, в дополнение к активным соединениям, могут содержать суспендирующие средства, такие как, например, этоксилированные изостеариловые спирты, полиоксиэтиленсорбит и сложные эфиры сорбитана, микрокристаллическая целлюлоза, метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар и трагакант, а также их смеси.

[00120] Примеры подходящих водных и неводных носителей, которые можно использовать в фармацевтических композициях по настоящему изобретению, включают воду, этанол, полиолы (такие как глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и т. п.) и их подходящие смеси, растительные масла, такие как оливковое масло, и инъекционные органические сложные эфиры, такие как этилолеат. Надлежащую текучесть можно поддерживать, например, с помощью использования материалов для покрытия, таких как лецитин, посредством поддержания необходимого размера частиц в случае дисперсий и с помощью использования поверхностно-активных веществ.

[00121] Эти композиции также могут содержать вспомогательные средства, такие как консерванты, смачивающие средства, эмульгирующие средства и диспергирующие средства. Предупреждение воздействия микроорганизмов на рассматриваемые соединения можно обеспечивать посредством включения различных антибактериальных и противогрибковых средств, например, парабена, хлорбутанола, фенолсорбиновой кислоты и т. п. Также может быть желательным включать в композиции изотонические средства, такие как сахара, хлорид натрия и т. п.

[00122] В случае если соединения по настоящему изобретению вводят в качестве фармацевтических средств людям или животным, - их можно применять per se или в качестве фармацевтической композиции, содержащей, например, 0,1-99% (более предпочтительно 10-30%) активного ингредиента в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем.

[00123] Соединения по настоящему изобретению, которые можно применять в подходящей гидратированной форме, и/или фармацевтические композиции по настоящему изобретению составляют в фармацевтически приемлемые лекарственные формы с помощью общепринятых способов, известных специалистам в данной области.

[00124] Фактические уровни дозы активных ингредиентов в фармацевтических композициях по настоящему изобретению могут варьироваться с тем, чтобы получить количество активного ингредиента, которое является эффективным для достижения требуемого терапевтического ответа у конкретного пациента, эффективным в отношении композиции и способа введения, не являясь токсичным для пациента.

[00125] Выбранный уровень дозы будет зависеть от множества факторов, включая активность конкретного используемого соединения по настоящему изобретению или его сложного эфира, соли или амида, путь введения, время введения, скорость экскреции или метаболизма конкретного используемого соединения, скорость и степень абсорбции, длительность лечения, другие лекарственные средства, соединения и/или материалы, используемые в комбинации с конкретным применяемым соединением, возраст, пол, вес, состояние, общее состояние здоровья и предшествующий анамнез пациента, подлежащего лечению, и подобных факторов, хорошо известных в области медицины.

[00126] Врач или ветеринар средней квалификации в данной области легко может определить и назначить эффективное количество необходимой фармацевтической композиции. Например, врач или ветеринар мог бы начинать введение доз соединений по настоящему изобретению, используемых в фармацевтической композиции, при уровнях ниже, чем это необходимо для достижения требуемого терапевтического эффекта, и постепенно увеличивать дозу до достижения требуемого эффекта.

[00127] Как правило, подходящей суточной дозой комбинации по настоящему изобретению будет такое количество каждого соединения, которое является наиболее низкой дозой, эффективной для получения терапевтического эффекта. Как правило, такая эффективная доза будет зависеть от описанных выше факторов.

[00128] В другом аспекте в настоящем изобретении предусмотрены фармацевтически приемлемые композиции, которые содержат терапевтически эффективное количество одного или нескольких рассматриваемых соединений, как описано выше, составленных вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями (добавками) и/или разбавителями.

Примеры

TNO155 и рибоциклиб

[00129] (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амин(TNO155) и 8-(6-амино-5-((2-(трифторметил)пиридин-3-ил)тио)пиразин-2-ил)-8-азаспиро[4.5]декан-1-амин синтезировали в соответствии с примером 69 и примером 1 из WO2015/107495 соответственно. 7-циклопентил-N,N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид(рибоциклиб) синтезировали в соответствии с примером 74 из WO2010/020675.

[00130] Полезность TNO155 и рибоциклиба, описанных в данном документе, может быть подтверждена тестированием в нижеследующих примерах.

Пример 1

Преимущества комбинации TNO155 и рибоциклиба in vitro в клетках NSCLC с EGFR^mut

[00131] В каждую лунку 6-луночного планшета высевали по десять тысяч клеток HCC827 в 2 мл сред для выращивания клеток. Через день добавляли в указанных концентрациях TNO155, или рибоциклиб, или комбинацию. Через 14 дней клетки промывали фосфатно-солевым буфером (PBS) и окрашивали 2 мл буфера для окрашивания кристаллическим фиолетовым (1% кристаллического фиолетового, 1% параформальдегида, 1% метанола в PBS). После 10-минутной инкубации буфер для окрашивания кристаллический фиолетовый аспирировали и клетки два раза промывали с помощью PBS и один раз водой (5 минут для каждой промывки). Планшеты высушивали и изображения получали с помощью сканера EPSON. Комбинация TNO155 и рибоциклиба в нескольких концентрациях давала антипролиферативную комбинацию.

Пример 2

Предупреждение индуцированного рибоциклибом накопления циклина D1 TNO155 в клетках NSCLC с EGFR^mut

[00132] Клетки HCC827 высевали в 6-луночные планшеты при плотности 2×10⁵ клеток/лунка в 2 мл полной культуральной среды. Через 24 часа клетки обрабатывали указанными концентрациями TNO155 или рибоциклиба или их комбинации. Через 48 часов после обработки клетки отбирали в свежеполученный буфер для лизиса клеток RIPA, дополненный коктейлем из ингибиторов протеазы и фосфатазы. Белки, экстрагированные из клеточных лизатов, разделяли с помощью электрофореза с использованием геля NuPAGE, 4-12% Bis-Tis, и переносили на нитроцеллюлозные мембраны с последующим проведением стандартных процедур иммуноблоттинга. Все использованные первичные антитела были от Cell Signaling Technology со следующими номерами в каталоге: фосфо-RB (S807/811, № 8516), Cyclin D1 (№ 2978), расщепленный PARP (№ 9546), фосфо-ERK (T202/Y204, № 4370), фосфо-RSK3 (T356/S360, № 9348), фосфо-AKT (S473, № 4060) и тубулин (№ 3873). Сигналы визуализировали путем одновременной инкубации со вторичными антителами козы к антигену кролика, конъюгированных с Alexa Fluor® 700, и вторичными антителами козы к антигену мыши, конъюгированными с IRDye 800 CW для тубулина (контроль загрузки белка), и сканирования с помощью системы для получения ИК-изображений Odyssey.

[00133] См. результаты на фигуре 2, демонстрирующие предупреждение индуцированного рибоциклибом накопления циклина D1 с помощью TNO155 и повышенное ингибирование с помощью комбинирования p-RB рибоциклиба и TNO155 по сравнению с рибоциклибом или TNO155 по отдельности.

Пример 3

Комбинация SHP2i (TNO155 или LWS391) и рибоциклиба обладает преимуществом в клеточных линиях NSCLC и CRC

[00134] В каждую лунку 6-луночного планшета высевали ~10000 клеток в 2 мл сред для выращивания клеток. Через день TNO155, или LWS391, или рибоциклиб, растворенные в DMSO, добавляли в указанных конечных концентрациях. Составы обновляли каждые 7 дней. Через 7-14 дней, когда клетки в группах, обработанных DMSO, достигали требуемой конфлюентности, клетки промывали фосфатно-солевым буфером (PBS) и окрашивали 2 мл буфера для окрашивания кристаллическим фиолетовым (1% кристаллического фиолетового, 1% параформальдегида, 1% метанола в PBS). После 10-минутной инкубации буфер для окрашивания кристаллический фиолетовый аспирировали и клетки два раза промывали с помощью PBS и один раз водой (5 минут для каждой промывки). Планшеты высушивали и изображения получали с помощью сканера EPSON. Тестировали следующие линии раковых клеток: SK-MES-1 (NSCLC, EGFR WT); NCI-H226 (NSCLC EGFR WT); А-427 (NSCLC, KRAS G12D); NCI-H747 (CRC, KRAS G13D) и HCC366 (NSCLC, EGFR WT, 1 мкМ TNO155.

[00135] См. результаты на фигуре 3, преимущества in vitro комбинации аллостерического ингибитора SHP2, TNO155 или LWS391 и рибоциклиба оценивали в 7-14-дневном двухмерном анализе колониеобразования с использованием панели клеточных линий NSCLC и CRC. Комбинация TNO155 или LWS391 в концентрации 1 или 3 мкМ и рибоциклиба в концентрации 1 мкМ нарушала образование колоний лучше, чем любое отдельное средство, в трех линиях клеток EGFR/ALK/KRAS NSCLC дикого типа, SK-MES-1, и NCI-H226, и HCC366, а также в двух линиях клеток, мутантных по KRAS, A-427 (NSCLC) и NCI-H747 (CRC).

Пример 4

Преимущество комбинации TNO155 и рибоциклиба в первичных человеческих ксенотрансплантатных моделях нескольких линий, имплантированных мышам с ослабленным иммунитетом Nu/Nu

[00136] Полученные от пациентов ксенотрансплантатные модели (PDX) немелкоклеточного рака легкого (NSCLC) человека, колоректального рака (CRC), рака головы и шеи (HNSCC), рака поджелудочной железы (Panc), рака пищевода (Esoph SCC), рака почки и рака яичника вживляли с помощью прямой подкожной имплантации опухолевой ткани пациента безтимусным мышам. Для каждой линии количество оцененных первичных моделей человека составило: NSCLC=32 модели, CRC=38 моделей, HNSCC=33 модели, Panc=21 модель, Esoph SCC=30 моделей, рак почки=21 модель, рак яичника=18 моделей. TNO155 и рибоциклиб вводили ежедневно через желудочный зонд в хорошо переносимых дозах. TNO155 вводили в опухолестатической дозе 10 мг/кг BID, рибоциклиб вводили в дозе 75 мг/кг QD, дозе, которая обеспечивала воздействие на мышей, аналогичное таковому, достигаемому у людей при клинически значимой дозе 400 мг QD. Комбинация TNO155 и рибоциклиба осуществлялась на уровнях доз отдельного средства и оказалась хорошо переносимой. Преимущество комбинации TNO155 с рибоциклибом оценивали путем расчета доли моделей опухолей, у которых отсутствовало удвоение опухоли, из популяции ксенотрансплантатов первичной опухоли, подвергаемых лечению.

[00137] См. результаты на фигуре 4, где показаны графики Каплана-Мейера, изображающие долю опухолей для каждого типа рака, которые не удвоились, нанесенные на график в зависимости от времени. Комбинация TNO155 и рибоциклиба более эффективна, чем монотерапия TNO155 или рибоциклибом при нескольких показаниях, в частности, при NSCLC, CRC, HNSCC, Esoph SCC и раке почки.

Пример 5

[00138] Начальная схема приема TNO155 в комбинации с рибоциклибом основана на данных из исследования TNO155, впервые проведенного с участием людей, CTNO155X2101. Первоначально TNO155 вводили ежедневно (QD) в течение 2 недель введения/1 недели перерыва в 21-дневном цикле (начиная с 20 мг QD). Рибоциклиб вводят в дозе 200 мг QD непрерывно в течение 21-дневного цикла, что составляет менее чем 50% как суточной, так и общей дозы за цикл стандартной меченой дозы 600 мг QD, 3 недели приема/1 неделя перерыва. Дополнительные схемы приема включают: (i) TNO155 QD 2 недели приема/1 неделя перерыва+рибоциклиб QD непрерывно в течение 21-дневного цикла; (ii) TNO155 QD 3 недели приема/1 неделя перерыва+рибоциклиб QD непрерывно в течение 28-дневного цикла; (iii) TNO155 QD 3 недели приема/1 неделя+рибоциклиб QD 3 недели приема/1 неделя перерыва в течение 28-дневного цикла; (iv) TNO155 QD непрерывно+рибоциклиб QD непрерывно в течение 28-дневного цикла; (v) TNO155 QD непрерывно+рибоциклиб QD 3 недели приема/1 неделя перерыва в течение 28-дневного цикла; и/или (vi) схемы BID TNO155 и/или рибоциклиба также могут быть исследованы согласно любому из этих графиков дозирования.

[00139] Получали лечение пациенты с распространенными солидными опухолями (поддающимися оценке), входящими в одну из следующих групп: i) распространенный NSCLC после прогрессирования на фоне комбинированной химиотерапии с использованием препаратов на основе платины или ее непереносимости и терапии антителами к PD-1 или антителами к PD-L1; ii) распространенный HNSCC или SCC пищевода после прогрессирования на фоне комбинированной химиотерапии с использованием препаратов на основе платины или ее непереносимости и терапии антителами к PD-1 или антителами к PD-L1, если такая терапия доступна или считается стандартной терапией (SOC) в соответствии с внутренними рекомендациями. Виды лечения с применением ранее установленной в расширенной популяции максимальной переносимой дозы получали пациенты с запущенными солидными опухолями, с по меньшей мере одним поддающимся измерению опухолевым очагом, которые входили в одну из следующих групп: i) распространенный NSCLC с EGFR WT, ALK WT, KRAS WT после прогрессирования на фоне комбинированной химиотерапии с использованием препаратов на основе платины или ее непереносимости и после прогрессирования на фоне терапии антителами к PD-1 или антителами к PD-L1, если такая терапия доступна и считалась SOC; ii) распространенный CRC, несущий мутацию кодона 12, 13 или 61 в гене KRAS, после прогрессирования на фоне SOC или ее непереносимости в соответствии с внутренними рекомендациями.

[00140] Следует понимать, что примеры и варианты осуществления, описанные в данном документе, предназначены только для иллюстративных целей, и что различные модификации или изменения в их свете будут предложены специалистам в данной области и должны быть включены в сущность и область действия настоящей заявки и объем прилагаемой формулы изобретения.

Claims (9)

1. Способ лечения рака, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, фармацевтической композиции, содержащей (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амин или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации со вторым терапевтическим средством,

где второе терапевтическое средство представляет собой ингибитор CDK4/6, такой как 7-циклопентил-N,N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль,

где рак выбран из плоскоклеточной карциномы пищевода или головы и шеи, колоректального рака, рака яичника, рака поджелудочной железы или немелкоклеточного рака легкого и почечно-клеточной карциномы, и

где 7-циклопентил-N,N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят перорально в дозе 200 мг в день, 300 мг в день, 400 мг в день, 500 мг в день или 600 мг в день, и где (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амин или его фармацевтически приемлемую соль вводят перорально в дозе 20 мг в день, или 30 мг в день, или 40 мг в день, или 50 мг в день, или 60 мг в день.

2. Способ по п. 1, где (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амин или его фармацевтически приемлемую соль и второе терапевтическое средство вводят одновременно, по отдельности или в течение некоторого периода времени.

3. Способ по п. 1 или 2, где количество (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амина или его фармацевтически приемлемой соли, вводимое субъекту, нуждающемуся в этом, является эффективным для лечения рака.

4. Способ по любому из пп. 1-3, где количество (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амина или его фармацевтически приемлемой соли и второго терапевтического средства, вводимое субъекту, нуждающемуся в этом, является эффективным для лечения рака.

5. Способ по любому одному из пп. 1-4, где 7-циклопентил-N,N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят i) непрерывно или ii) в течение 3 недель приема/1 недели перерыва в течение 28-дневного цикла.

6. Способ любому одному из пп. 1-5, где (3S,4S)-8-(6-амино-5-((2-амино-3-хлорпиридин-4-ил)тио)пиразин-2-ил)-3-метил-2-окса-8-азаспиро[4.5]декан-4-амин или его фармацевтически приемлемую соль вводят i) в течение 2 недель приема/1 недели перерыва в течение 21-дневного цикла; ii) в течение 3 недель приема/1 неделя перерыва в течение 28-дневного цикла; или iii) непрерывно.

Images