RU2807277C2

RU2807277C2 - Соединения пиримидина и содержащие их фармацевтические композиции для предупреждения или лечения рака

Info

Publication number: RU2807277C2
Application number: RU2021101357A
Authority: RU
Inventors: Ин Хван БЭ; Чжи Сук КИМ; Чже Юль ЧОЙ; Сок Чон КАН; Ён Гиль АН; Кви Хён СУ
Original assignee: Ханми Фарм. Ко., Лтд.
Priority date: 2018-07-25
Filing date: 2019-02-13
Publication date: 2023-11-13

Abstract

Изобретение относится к соединению формулы 14 или его стереоизомеру либо таутомеру, где в формуле 14 Е^а представляет собой водород, гидрокси или С₁-С₄алкоксигруппу; E^b представляет собой водород, галоген, С₁-С₄алкильную группу или С₁-С₄фторалкильную группу; каждый из Е^с и E^d независимо представляет собой водород или гидроксигруппу; X' представляет собой водород или гидроксигруппу; k равно целому числу от 0 до 4; каждый Q независимо представляет собой гидрокси, галоген, С₁-С₄алкильную группу, гидрокси-С₁-С₄алкильную группу или С₁-С₄алкоксигруппу; и Z' представляет собой одновалентную функциональную группу, представленную формулой 15, где в формуле 15 n равно целому числу от 1 до 5; каждый А независимо представляет собой функциональную группу, выбранную из гидрокси, С₁-С₄алкильной группы и гидрокси-С₁-С₄алкильной группы, где, когда n равно двум или более, тогда два А могут быть спиро-связаны с образованием 4,7-диазаспиро[2.5]октана; и L представляет собой водород, С₁-С₄алкил, гидроксигруппу или гидрокси-C₁-С₄алкильную группу. Изобретение также относится к способу ингибирования активности киназы FLT3 и способу лечения FLT3-опосредованного заболевания на основе соединений формулы 14. Технический результат – получены новые соединения, которые могут найти применение в медицине для лечения рака. 8 н. и 11 з.п. ф-лы, 7 табл., 32 пр.

Description

Область техники

Настоящее изобретение относится к новым соединениям пиримидина, способам их получения и их фармацевтическому применению.

Предшествующий уровень техники

Киназы опосредуют реакцию, при которой фосфатная группа из высокоэнергетических молекул, в частности АТР (аденозинтрифосфат), переносится в субстрат. Киназы стабилизируют связи фосфорного ангидрида и помещают субстрат и фосфатную группу в конкретное положение для увеличения скорости реакции. В большинстве случаев переходное состояние, возникающее в результате взаимодействия с фосфатной группой, имеющей отрицательный заряд, электростатически стабилизируется за счет окружающих аминокислот, имеющих положительный заряд, и некоторые киназы могут координироваться с фосфатной группой с использованием металлического кофактора.

Киназы можно классифицировать как, например, протеинкиназы, липидкиназы и углеводкиназы в соответствии с субстратом и характеристиками. Белки, липиды или углеводы могут различаться по их активности, реакционной способности, способности связываться с другими молекулами и т.д. в зависимости от состояния фосфорилирования. Киназы воздействуют на внутриклеточную сигнальную транедукцию и регулируют сложные биологические механизмы в клетках. Вследствие фосфорилирования некоторые молекулы могут иметь повышенную или пониженную активность, и их способность взаимодействовать с другими молекулами может контролироваться. Поскольку многие киназы реагируют на окружающие условия или сигналы, клетки могут контролировать внутриклеточные молекулы, используя киназы, в зависимости от ситуации. Как таковая, киназа играет решающую роль в росте, дифференцировке, пролиферации, выживании клеток, метаболизме, сигнальной транедукции, клеточном транспорте, секреции и многих других клеточных реакционных путях.

Киназы были обнаружены у различных видов, включая бактерии, грибы, насекомых и млекопитающих, и на данный момент 500 или более киназ обнаружены у людей.

Протеинкиназы могут увеличивать или снижать активность белка, являться маркером для стабилизации или деградации, помещать белок в конкретный компартмент клетки или инициировать или нарушать взаимодействия белка с другими белками. Протеинкиназы, как известно, составляют большинство киназ и считаются важной исследовательской мишенью. Протеинкиназы регулируют, вместе с фосфатазой, белки и ферменты, а также клеточную сигнальную транедукцию. Хотя клеточные белки регулируются многочисленными ковалентными связями, немногие из этих связей являются обратимыми. Соответственно, можно сказать, что фосфорилирование белков имеет регуляторную функцию. Протеинкиназы часто могут иметь множество субстратов, и иногда конкретный белок может действовать в качестве субстрата по меньшей мере для одной киназы. По этой причине протеинкиназы называют, используя факторы, которые регулируют их активность. Например, кальмодулин-зависимая протеинкиназа регулируется кал ьмо дул ином. В некоторых случаях киназы могут быть классифицированы по подгруппам. Например, циклические АМР-зависимые протеинкиназы типа I и типа II включают идентичные ферментные субъединицы, но их регуляторные субъединицы, связывающиеся с циклической AMP, отличаются друг от друга.

Протеинкиназа представляет собой фермент, который катализирует фосфорилирование гидроксигруппы, находящейся в тирозиновых, сериновых и треониновых остатках белков, и играет важную роль в передаче сигналов факторов роста, которые индуцируют рост, дифференцировку и пролиферацию клеток (Melnikova, I. et al., Nature Reviews Drug Discovery, 3 (2004), 993), и сообщается, что аномальная экспрессия или мутация конкретной киназы часто имеет место в раковых клетках.

В качестве одного из путей, которыми клетки распознают внешние стимулы, может быть использовано распознавание через тирозинкиназу, которая является рецептором в клеточной мембране. Рецепторная тирозинкиназа (RTK) состоит из внеклеточной части, обращенной наружу от клетки, внутриклеточной части, обращенной во внутриклеточную цитоплазму, и трансмембранной части, проходящей через плазматическую мембрану, между внеклеточной частью и внутриклеточной частью. Внеклеточная часть рецептора представляет собой часть, с которой связывается конкретный лиганд, а внутриклеточная часть функционирует, передавая сигнал активации рецептора, активированного лигандом, в клетку. RTK имеет обладающий тирозинкиназной активностью домен в С-концевой области, обращенной внутрь клетки, и когда конкретный лиганд присоединяется к внеклеточной части, киназный фермент С-концевого тирозинкиназного домена, обращенного в цитоплазматический участок рецепторного белка, активируется, и две RTK перекрестно фосфорилируют тирозины на С-концах соседних RTK. Этот процесс фосфорилирования тирозина является важным процессом в передаче сигналов, соответствующих внеклеточной стимуляции, в клетки. Существует много известных рецепторов, которые обладают тирозинкиназной активностью для передачи внеклеточных стимулов в клетки на основе этого механизма. Примерами таких рецепторов являются FLT3, VEGFR и SYK.

Среди них FMS-подобная тирозинкиназа 3 (FLT3), которая является рецепторной тирозинкиназой, обычно экспрессируется в гематопоэтических клетках-предшественниках гематопоэтическими бластными клетками и играет важную роль в экспрессии нормальных стволовых клеток и иммунной системе. Аномальная сверхэкспрессия и мутации FLT3 часто обнаруживаются у пациентов с лейкозом. В частности, различные мутации FLT3, такие как D835V, D835Y и внутренняя тандемная дупликация (ITD), обнаружены при остром миелогенном лейкозе (AML). AML представляет собой расстройство гематопоэтических стволовых клеток, характеризующееся аномальной пролиферацией и дифференцировкой бластных клеток в миелоиде и периферической крови. FLT3 в последнее время рассматривается как одна из самых важных мишеней в терапевтических аспектах AML.

Имеются сообщения о том, что мутации генов RAS и р53 при AML взрослых составляют примерно 20% и 5% при AML взрослых соответственно, тогда как мутации гена FLT3 обнаруживаются примерно в 30% случаев AML взрослых. Самой типичной проблемой, связанной с AML, является то, что мутации FLT3, которые являются причиной плохого прогноза, активируются. Мутации FLT3 классифицируются по двум типам: один представляет собой внутренние тандемные дупликации (ITD) в юкстамембранном домене, а другой представляет собой точковые мутации в тирозинкиназной домене (TKD). Примерно 23% пациентов с ранним AML испытывают активацию FLT3-ITD, чаще всего обнаруживаемой мутации. Пациенты с ITD мутацией имеют плохой прогноз и высокую частоту рецидивов. Другой основной мутацией FLT3 является мутация FLT3 TKD, на долю которой приходится примерно 7% начальных случаев AML. Точковые мутации в остатках аспартата 835 (D835), которые заменены различными аминокислотами, являются одними из наиболее часто встречающихся мутаций, хотя они встречаются реже, чем ITD мутации. Кроме того, другой основной способ активации FLT3 при AML представляет собой сверхэкспрессию белка FLT3 дикого типа.

Активация ITD мутаций в FLT3 встречается у примерно 20% пациентов с острым миелогенным лейкозом, и она ассоциируется с плохим прогнозом. Исследования показали, что FLT3-ITD является драйверным поражением, которое вызывает патогенез злокачественности, и может быть эффективной терапевтической мишенью у человека с AML (непатентный документ 1). Мутации в гене FLT3 часто возникают при AML и обычно сопровождаются ITD мутациями в области, кодирующей юкстамембранный домен, или точковыми мутациями в тирозинкиназном домене (TKD). FLT3-ITD мутации и FLT3-TKD мутации вызывают лиганд-независимую пролиферацию вследствие димеризации компонентов и активации рецептора FLT3. Высокая степень FLT3-ITD мутации применительно к аллелю дикого типа связана с плохим прогнозом у взрослых и детей (непатентный документ 2). Другие типы лейкоза, такие как хронический миеломоноцитарный лейкоз (CMML), также могут иметь активационную мутацию FLT3. Таким образом, FLT3 с активированными мутациями является важной мишенью для нескольких типов рака (непатентный документ 3 и непатентный документ 4).

Известно, что рецептор фактора роста эндотелия сосудов (VEGFR) является киназой, которая вовлечена в регуляцию процесса ангиогенеза. Солидные опухоли требуют больше питательных веществ и кислорода, чем нормальные ткани. Следовательно, возникает недостаточность кровоснабжения по сравнению с нормальными состояниями, и сверхэкспрессия или активация VEGFR вызывает неоваскуляризацию, вовлеченную в ангиогенез, необходимый для роста и пролиферации опухолевых клеток (непатентный документ 5). Поэтому проводились различные клинические исследования с целью лечения опухолей путем ингибирования ангиогенеза, и было получено несколько многообещающих результатов. Кроме того, VEGF играет важную роль в раке крови и сверхэкспрессируется в различных злокачественных солидных опухолях. Известно, что сверхэкспрессия VEGF имеет высокую корреляцию с болезненным прогрессированием злокачественных опухолей. VEGFR классифицируются в соответствии с подтипами, включающими VEGFR-1, VEGFR-2 и VEGFR-3. VEGFR-2 (KDR) является типичной мишенью при опухолевых заболеваниях, имеющих экспрессию VEGFR. Репрезентативными заболеваниями, обусловленными сверхэкспрессией VEGFR-2, являются рак легкого, рак молочной железы, неходжкинская лимфома, карцинома яичника, рак поджелудочной железы и т.д. VEGF, который является лигандом к VEGFR, может иметь ангиогенную активность и может промотировать рост опухоли посредством прямого эффекта провыживания в опухолевых клетках (непатентный документ).

Селезеночная тирозинкиназа (SYK) экспрессируется в основном в клетках крови и играет важную роль в путях передачи сигналов других иммунорецепторов, таких как В-клеточные рецепторы и тучные клетки. SYK экспрессируется в негематопоэтических клетках, таких как нервные клетки и сосудистые эндотелиальные клетки. Недавние исследования показывают, что SYK задействована в окислении стимулов различных клеток, включающих IL-1, TNF-α и ITGB1. Известно, что SYK является хорошей потенциальной мишенью при многих гематологических злокачественных опухолевых, аутоиммунных заболеваниях и других воспалительных ответах (непатентный документ 7 и непатентный документ 8).

Документы предшествующего уровня техники

(Непатентный документ 1) Catherine et al., Nature, 2012, 485: 260-263

(Непатентный документ 2) A S Moore et al., Leukemia, 2012, 26: 1462-1470

(Непатентный документ 3) Cancer Cell, (2007), 12: 367-380

(Непатентный документ 4) Current Pharmaceutical Design (2005), 11: 3449-3457

(Непатентный документ 5) Kliche, S. et al., J., Life, 52, (2002), 61

(Непатентный документ 6) Simons, M. et al., Nature Reviews Drug Discovery, 17, (2016), 611

(Непатентный документ 7) Liu et al., Journal of Hematology & Oncology (2017) 10:145

(Непатентный документ 8) Yamada T et al., J. Immunol., (2001) 167, 283-288

Описание изобретения

Техническая задача

Предложены новые соединения пиримидина, обладающие активностью ингибирования киназ.

Предложены способы получения соединений пиримидина.

Предложены фармацевтические применения соединений пиримидина.

Решение задачи

Дополнительные аспекты будут изложены частично в описании, которое следует далее, и, в частности, будут очевидны из описания, или могут быть изучены при практическом осуществлении представленных воплощений.

Согласно аспекту воплощения предложено соединение, выбранное из соединения, представленного формулой 1, и его стереоизомер, таутомер, сольват или фармацевтически приемлемая соль:

Формула 1

где в формуле 1

R¹ представляет собой водород, галоген, гидроксигруппу, С₁-С₄алкоксигруппу или -NR_aR_b,

где каждый из R_a и R_b независимо представляет собой водород или С₁-С₄алкильную группу;

R² представляет собой водород, галоген, цианогруппу, нитрогруппу, аминогруппу, карбоксамидную группу, формильную группу, галоген-С₁-С₄алкильную группу или C₁-С₄алкильную группу;

R представляет собой водород, галоген, гидроксигруппу, галоген-С₁-С₄алкильную группу, С₁-С₄алкильную группу, С₂-С₄алкенильную группу или С₂-С₄алкинильную группу;

каждый R⁴ независимо представляет собой водород, галоген, гидроксигруппу, цианогруппу, нитрогруппу, аминогруппу, -S(=O)_l-R_c, галоген-С₁-С₄алкильную группу, C₁-С₄алкоксигруппу, гидрокси-С₁-С₄алкильную группу, С₁-С₄алкильную группу, С₂-С₄алкенильную группу, С₂-С₄алкинильную группу, -NR_dR_e, -CO₂R_e или -CO-NR_dR_e,

где R_c представляет собой С₁-С₄алкильную группу или -NR_dR_e,

каждый из R_d и R_e независимо представляет собой водород или С₁-С₄алкильную группу,

l равно целому числу от 0 до 2, и

k равно целому числу от 0 до 4;

каждый из R⁵ и R⁶ независимо представляет собой водород, галоген, гидроксигруппу, нитрогруппу, аминогруппу, С₁-С₄алкоксигруппу или С₁-С₄алкильную группу;

R⁷ представляет собой гидрокси-С₁-С₄алкильную группу, C₁-С4алкильную группу, С₂-С₄алкенильную группу, С₂-С₄алкинильную группу, С₃-С₇циклоалкильную группу или С₃-С₉гетероциклоалкильную группу,

где С₃-C₇циклоалкильная группа или С₃-С₉гетероциклоалкильная группа не замещена или замещена галогеном, С₁-С₄алкильной группой или галоген-С₁-С₄алкильной группой;и

X представляет собой Н или ОН;

где, когда X представляет собой ОН, тогда соединение, представленное формулой 1, включает в себя таутомерную структуру, представленную формулой 2,

Формула 2

R³, R⁴ и k в формуле 2 такие же, как описано применительно к формуле 1;

Y представляет собой -(СН₂)_m-, -(СН₂)_m-O-(СН₂)_n-, -(СН₂)_m-СО-(СН₂)_n-, -(СН₂)_m-NR⁸-(CH₂)_n- или -(CH₂)_m-SO₂(CH₂)_n-,

где R⁸ представляет собой водород или С₁-С₄алкильную группу,

каждый из m и n независимо равен целому числу от 0 до 2; и

Z представлен формулой 3,

Формула 3

где в формуле 3

представляет собой С₃-С₁₀циклоалкильную группу или С₂-С₁₁гетероциклоалкильную группу;

R⁹ представляет собой галоген, гидроксигруппу, цианогруппу, нитрогруппу, аминогруппу, тиольную группу, формильную группу, галоген-С₁-С₄алкильную группу, С_1-С₄алкоксигруппу, линейную или разветвленную гидрокси-С₁-С₄алкильную группу, линейную или разветвленную С₁-С₄алкильную группу, С₂-С₄алкенильную группу, С₂-С₄алкинильную группу, С₃-С₁₀циклоалкильную группу,

С₂-С₉гетероциклоалкильную группу, гидрокси-С₂-С₉гетероциклоалкильную группу, линейную или разветвленную гидрокси-С₁-С₄алкилкарбонильную группу, -NR¹⁰R¹¹, -COR¹², -COOR¹² или -SO₂R¹³,

q равно целому числу от 0 до 5,

где, когда представляет собой пиперазин или пиперидин, тогда q не равно 0, и

где два или более R⁹ связаны или конденсированы с с образованием 7-12-членной бициклоалкильной группы, гетеробициклоалкильной группы, спироциклоалкильной группы или спирогетероциклоалкильной группы;

каждый из R¹⁰ и R¹¹ независимо представляет собой водород, гидрокси-C₁-С₄алкильную группу, галоген-С₁-С₄алкильную группу, С₁-С₄алкильную группу, С₂-С₄алкенильную группу или С₂-С₄алкинильную группу;

R¹² представляет собой водород, гидроксигруппу, гидрокси-С₁-С₄алкильную группу, галоген-С₁-С₄алкильную группу, С₁-С₄алкильную группу, С₂-С₄алкенильную группу, С₂-С₄алкинильную группу, С₃-С₁₀циклоалкильную группу или С₂-С₉гетероциклоалкильную группу;

R¹³ представляет собой гидрокси, галогенС₁-С₄алкильную группу, С₁-С₄алкильную группу, С₂-С₄алкенильную группу, С₂-С₄алкинильную группу, С₃-С₁₀циклоалкильную группу, С₂-С₉гетероциклоалкильную группу, арильную группу или -NR_fR_g, и

каждый из R_f и R_g независимо представляет собой водород или С₁-С₄алкильную группу.

Согласно аспекту другого воплощения предложены способы получения этих соединений.

Согласно аспекту другого воплощения фармацевтические композиции для предупреждения или лечения рака содержат эти соединения или их фармацевтически приемлемые соли в качестве активного ингредиента.

Согласно аспекту другого воплощения фармацевтические композиции для предупреждения или лечения заболевания, опосредованного FLT3, содержат эти соединения или их фармацевтически приемлемые соли в качестве активного ингредиента.

Согласно аспекту другого воплощения фармацевтические композиции для ингибирования активности киназы FLT3 содержат эти соединения или их фармацевтически приемлемые соли и фармацевтически приемлемый эксципиент.

Согласно аспекту другого воплощения предложены способы снижения активности FLT3 у нуждающегося субъекта путем использования этих соединений.

Согласно аспекту другого воплощения предложены способы лечения заболевания, опосредованного FLT3, путем использования этих соединений.

Преимущественные эффекты изобретения

Соединение согласно одному аспекту настоящего изобретения обладает превосходной FLT3-ингибирующей активностью и поэтому подходит для эффективного использования для предупреждения или лечения клеточных пролиферативных заболеваний, вызванных аномальной активностью FLT3, таких как рак, например лейкоз.

Принцип изобретения

Настоящее изобретение далее будет описано более подробно.

Если не дано иного определения, все термины (в том числе технические и научные термины), использованные в данном документе, имеют общепринятые значения, понятные специалисту в области, к которой относится это изобретение. Хотя в данном описании перечислены иллюстративные способы или вещества, другие подобные или эквивалентные способы или вещества также входят в объем настоящего изобретения. Также, числовые значения, изложенные в данном описании, считаются включающими значение "примерно", если прямо не указано иное. Все публикации, раскрытые в виде ссылок, включены во всей их полноте в данное описание посредством ссылки.

Согласно аспекту настоящего изобретения предложено соединение, выбранное из соединения, представленного формулой 1, и его стереоизомер, таутомер, сольват или фармацевтически приемлемая соль.

Остатки, указанные как R¹-R¹⁷, X, Y, Z, Z', А, В, Q, L или E^a-E^d, можно понимать таким же образом, как их понимает специалист в данной области.

Термин "галоген" включает в себя фтор, хлор, бром или йод, если не указано иное, и может означать, например, фтор или хлор, но без ограничения ими.

Термин "алкил" относится к насыщенному одновалентному углеводородному радикалу. Термин "алкенил", использованный в данном документе, относится к одновалентному углеводородному радикалу, содержащему по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь, где каждая двойная связь может иметь Е-или Z-стерическую конфигурацию. Термин "алкинил", использованный в данном документе, относится к одновалентному углеводородному радикалу, содержащему по меньшей мере одну углерод-углеродную тройную связь. Такие алкильная группа, алкенильная группа и алкинильная группа могут быть линейными, то есть прямоцепочечными, или могут иметь боковые цепи. Как определено выше, количество атомов углерода в алкильной группе может быть равно 1, 2, 3, 4, 5 или 6; или 1, 2, 3 или 4. Примеры алкила включают метил, этил, пропил, в том числе н-пропил и изопропил, н-бутил, втор-бутил, бутил, в том числе изобутил и трет-бутил, пентил, в том числе н-пентил, 1-метилбутил, изопентил, неопентил и трет-пентил, гексил, в том числе н-гексил, 3,3-диметилбутил и изогексил. Двойная связь алкенильной группы и тройная связь алкинильной группы, каждая, могут находиться в любом положении. Примерами алкенила и алкинила являются этенил, проп-1-енил, проп-2-енил (=аллил), бут-2-енил, 2-метилпроп-2-енил, 3-метилбут-2-енил, гекс-3-енил, гекс-4-енил, проп-2-енил (=пропаргил), бут-2-енил, бут-3-енил, гекс-4-енил и гекс-5-енил. В том случае, когда каждое из соединений является достаточно стабильным и подходящим для желаемого применения в качестве, например, фармацевтического вещества, замещенная алкильная группа, замещенная алкенильная группа и замещенная алкинильная группа могут быть замещены по любому положению.

Термин "циклоалкил", если не указано иное, относится к замещенной или незамещенной циклической алкильной группе, и примером одно- или многоциклической группы является моно- или бициклоалифатическая группа. Примеры циклоалкильной группы включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогексенил, циклогептил, циклогептенил, циклооктил, циклооктенил, 2,5-циклогексадиенил, бицикло[2.2.2]октил, адамант-1-ил, декагидронафтильную группу, оксоциклогексил, диоксоциклогексил, тиоциклогексил, 2-оксо-бицикло[2.2.1]гепт-1-ил или их любой подходящий изомер, но без ограничения ими.

Термин "бицикло алкильная группа", использованный в данном документе, относится, если не указано иное, к насыщенному карбоциклу, содержащему два кольца, и включает в себя конденсированный карбоцикл, в котором два кольца имеют два общих соседних атома как часть этих колец, и мостиковый карбоцикл, в котором два кольца имеют два общих атома, не являющихся соседними, как часть этих колец. Например, 7-12-членный бициклоалкил относится к конденсированному карбоциклу или мостиковому карбоциклу, каждый из которых имеет в сумме два кольца, состоящие из 7-12 атомов.

Термин "гетероциклоалкил", использованный в данном документе, относится, если не указано иное, к замещенному или незамещенному моноциклическому или многоциклическому алкилу, содержащему по меньшей мере один гетероатом, выбранный из О, N и S, например от 1 до 4 гетероатомов. Примерами моногетероциклоалкильной группы являются пиперазинил, пиперидинил, пиперазинил-1-оксид, морфолинил, тиаморфолинил, пирролидинил, имидазолидинил, тетрагидрофуранил, диазабициклогептанил, диазабициклооктан и диазаспирооктан и группы, подобные им, но без ограничения.

Термин "гетеробициклоалкил" использованный в данном документе, относится, если не указано иное, к бициклоалкилу, содержащему один или более гетероатомов, выбранных из О, N, и S, и включает в себя конденсированную гетеробициклоалкильную группу и мостиковую гетеробициклоалкильную группу. Термин "мостиковая", использованный в данном документе, относится к валентной связи, одному атому или неразветвленной цепи атомов, которые соединяют две разных части внутри молекулы. Также, пара третичных или более атомов углерода, связанных мостиками, называется "головками мостика". Другими словами, атомы углерода, которые одновременно являются частью двух или более колец, называются головками мостика, и связи, соединенные с этими головками мостика, называются мостиками. Термин "мостиковое соединение", использованный в данном документе, относится к соединению, в котором два или более колец имеют одну или более общих пар атомов углерода.

Примеры конденсированной гетеробициклоалкильной группы включают индол, хинолин, тиазоло[4,5-b]-пиридин, хинолин и т.п., но без ограничения ими. Примеры мостикового гетеробициклоалкила включают 7-12-членные гетеробициклоалкилы, такие как диазабицикло[2.2.1]гептан или диазабицикло[3.2.1]октан, но без ограничения ими.

Термин "спиро", использованный в данном документе, относится, если не дано иного определения, к двум кольцам, которые имеют один общий атом, при этом два кольца не соединены друг с другом мостиками. Термин "спироциклоалкил", использованный в данном документе, относится, если не дано иного определения, к насыщенному карбоциклу, состоящему из двух колец, которые имеют только один общий атом углерода в качестве части колец. Примеры спироциклоалкила включают 7-12-членную спироциклоалкильную группу, такую как диазаспиро[2.5]октан, но без ограничения им. Термин "гетероспироциклоалкил" относится, если не дано иного определения, к спироциклоалкилу, содержащему по меньшей мере один гетероатом, выбранный из О, N и S. Выражение "спиросоединение", использованное в данном документе, относится к линкеру, имеющему один общий атом, если не дано иного определения.

Термин "арил", использованный в данном документе, относится, если не указано иное, к ароматической группе, которая может быть замещенной или незамещенной, такой как фенил, бифенил, нафтил, толуил, нафталинил, антрценил или любой их изомер, но без ограничения ими.

Термин "гетероарил", использованный в данном документе, относится, если не указано иное, к моноциклической или бициклической или высшей ароматической группе, содержащей по меньшей мере один гетероатом, выбранный из О, N и S, например от 1 до 4 гетероатомов. Примерами моноциклического гетероарила являются тиазолил, оксазолил, тиофенил, фуранил, пирролил, имидазолил, изоксазолил, пиразолил, триазолил, тиадиазолил, тетразолил, оксадиазолил, пиридинил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил и т.п., но без ограничения этими примерами. Примерами бициклического гетероарила являются индолил, бензотиофенил, бензофуранил, бензимидазолил, бензоксазолил, бензизоксазолил, бензтиазолил, бензтиадиазолил, бензтриазолил, хинолинил, изохинолинил, пуринил, фуропиридинил и т.п., но без ограничения ими.

Термин "алкиленовый мостик" относится, если не дано иного определения, к линейному или разветвленному двухвалентному углеводородному мостику, который связывает два разных атома углерода, имеющих идентичную структуру кольца, может состоять из атомов углерода и водорода, не является ненасыщенным и может иметь, например, 3-6 атомов углерода, и его примерами являются пропилен, н-бутилен и т.п.Алкиленовый мостик может связывать любые два атома углерода в кольцевой структуре. По меньшей мере один метилен в алкиленовом мостике может быть замещен по меньшей мере одним, выбранным из -О-, -S-, -S(O)-, -S(O)₂ и -N(R')-, где R' может представлять собой водород, C₁-С₆алкильную группу, С₃-C₇циклоалкильную группу или ар ил. В настоящем описании изобретения числовой диапазон, указанный с использованием термина "до", относится к диапазону, включающему в себя числовые значения, указанные до и после этого термина, как нижний предел и верхний предел соответственно.

В иллюстративном воплощении аспекта настоящего изобретения R¹ в соединении формулы 1 может представлять собой водород, С₁-С₄алкоксигруппу или гидроксигруппу.

В воплощении R¹ в соединении формулы 1 может представлять собой водород, галоген, гидроксигруппу или С₁-С₄алкоксильную группу.

В воплощении R² в соединении формулы 1 может представлять собой водород, галоген, С₁-С₄алкильную группу или галоген-С_1-4алкильную группу.

В воплощении R³ в соединении формулы 1 может представлять собой водород, гидроксигруппу или С₁-С₄алкильную группу. В воплощении R³ может представлять собой водород.

В воплощении R⁴ в соединении формулы 1 может представлять собой водород, галоген, гидроксигруппу, цианогруппу, нитрогруппу, аминогруппу, галоген-C₁-₄алкильную группу, С₁-С₄алкоксигруппу, гидрокси-С₁-С₄алкильную группу, С₁-С₄алкильную группу, С₂-С₄алкенильную группу или С₂-С₄алкинильную группу. В воплощении R⁴ может представлять собой водород, галоген, гидроксигруппу, С₁-С₄алкоксигруппу, гидрокси-С₁-С₄алкильную группу или С₁-С₄алкильную группу.

В воплощении каждый из R⁵ и R⁶ в соединении формулы 1 независимо может представлять собой водород, галоген, гидроксигруппу, цианогруппу или С₁-С₄алкильную группу. В воплощении каждый из R⁵ и R⁶ независимо может представлять собой водород или гидрокси.

В воплощении R⁷ в соединении формулы 1 может представлять собой С₃-С₇циклоалкильную группу. В воплощении R⁷ может представлять собой циклопропил.

В воплощении Y в соединении формулы 1 может представлять собой -(СН₂)_m-, -(СН₂)_m-O-(СН₂)_n- или -(СН₂)_m-СО-(СН₂)_n-, где каждый из т и п независимо может быть равен целому числу от 0 до 2. В воплощении Y может представлять собой -(СН₂)_m-, где т может быть равно целому числу, выбранному из 1 и 2.

В воплощении Z в соединении формулы 1 может представлять собой соединение, представленное формулой 3:

Формула 3

где в формуле 3

может представлять собой С₃-С₁₀циклоалкильную группу или С₂-С₁₁гетероциклоалкильную группу;

R⁹ может представлять собой галоген, гидроксигруппу, цианогруппу, нитрогруппу, аминогруппу, тиоловую группу, формильную группу, галоген-С₁-С₄алкильную группу, С₁-С₄алкоксигруппу, линейную или разветвленную гидрокси-С₁-С₄алкильную группу, линейную или разветвленную С₁-С₄алкильную группу, С₂-С₄алкенильную группу, С₂-С₄алкинильную группу, С₃-С₁₀циклоалкильную группу, С₂-С₉гетероциклоалкильную группу, гидрокси-С₂-С₉гетероциклоалкильную группу, линейную или разветвленную гидрокси-С_1-4алкилкарбонильную группу, -COR¹², -COOR¹² или -SO₂R¹³,

q независимо может быть равно целому числу от 0 до 5,

где, когда представляет собой пиперазин или пиперидин, тогда q не может быть равно 0, и

2 или более R⁹ могут быть связаны друг с другом или конденсированы с с образованием 7-12-членной бициклоалкильной группы;

каждый из R¹⁰ и R¹¹ независимо может представлять собой водород, гидрокси-C₁-С₄алкильную группу, галоген-С₁-С₄алкильную группу, С₁-С₄алкильную группу, С₂-С₄алкенильную группу или С₂-С₄алкинильную группу;

R¹² представляет собой водород, гидроксигруппу, гидрокси-С_1-4алкильную группу, галоген-С₁-С₄алкильную группу, С₁-С₄алкильную группу, С₂-С₄алкенильную группу, С₂-С₄алкинильную группу, С₃-С₁₀циклоалкильную группу или С₂-С₉гетероциклоалкильную группу;

В примере формулы 3

может представлять собой С_з-С₆гетероциклоалкил, содержащий один или два гетероатома, выбранные из О, N и S;

R⁹ независимо может представлять собой водород, гидроксигруппу, линейную или разветвленную гидрокси-С₁-С₄алкильную группу, линейную или разветвленную C₁-С₄алкильную группу, С₃-С₁₀циклоалкильную группу, С₂-С₉гетероциклоалкильную группу, гидрокси-С₂-С₉гетероциклоалкильную группу, -NR¹⁰R¹¹ или -COR¹²,

каждый из R¹⁰ и R¹¹ независимо может представлять собой водород, гидрокси-C₁-С₄алкильную группу или С₁-С₄алкильную группу; и

R¹² может представлять собой водород, гидроксигруппу, гидрокси-С₁-С₄алкильную группу, галоген-С₁-С₄алкильную группу или С₁-С₄алкильную группу.

В иллюстративном воплощении в соединении формулы 1

X представляет собой Н или ОН,

где, когда X представляет собой ОН, тогда соединение, представленное формулой 1, может включать в себя таутомерную структуру, представленную формулой 2:

Формула 2

R³, R⁴ и k в формуле 2 такие же, как описано применительно к формуле 1.

X представляет собой Н или ОН,

где, когда X представляет собой ОН, тогда соединение, представленное формулой 1, может включать в себя таутомерную структуру, представленную формулой 2;

R¹ может представлять собой водород, гидрокси, С₁-С₄алкоксигруппу или С₁-С₄алкильную группу;

R² может представлять собой водород, галоген, С₁-С₄алкильную группу или галоген-С₁-С₄алкильную группу;

R³ может представлять собой водород;

R⁴ может представлять собой водород, галоген, гидроксигруппу, С₁-С₄алкоксигруппу, гидрокси-С₁-С₄алкильную группу или С₁-С₄алкильную группу;

k может быть равно целому числу от 0 до 2;

каждый из R⁵ и R⁶ независимо может представлять собой водород или гидроксигруппу;

R⁷ может представлять собой циклопропил;

Y может представлять собой -(СН₂)_m-, -(СН₂)_m-O-(СН₂)_n- или -(СН₂)_m-СО-(СН₂)_n-;

каждый из m и n независимо равен целому числу от 0 до 2; и Z может представлять собой формулу 3:

Формула 3

где в формуле 3

может представлять собой С₃-С₆гетероциклоалкил, содержащий один или два гетероатома, выбранные из О, N и S;

R⁹ независимо может представлять собой гидрокси, гидрокси-С₁-С₄алкильную группу, С₁-С₄алкильную группу, С₃-С₁₀циклоалкильную группу, С₂-С₉гетероциклоалкильную группу, гидрокси-С₂-С₉гетероциклоалкильную группу, -NR¹⁰R¹¹ или -COR¹²,

каждый из R¹⁰ и R¹¹ независимо может представлять собой водород, гидрокси-C₁-С₄алкильную группу или С₁-С₄алкильную группу;

R¹² может представлять собой водород, гидрокси-С₁-С₄алкильную группу, галоген-С₁-С₄алкильную группу или С₁-С₄алкильную группу, и

q независимо может быть равно целому числу от 0 до 3.

В примере соединения, представленного формулой 1, когда представляет собой пиперазинил или пиперидинил, тогда q не может быть равно 0.

В примере соединения, представленного формулой 1, Z может представлять собой любое одно, выбранное из формул 11-13.

Формула 11

Формула 12

Формула 13

где в формуле 11-13

каждый из V и W независимо может представлять собой N или СН при условии, что каждый из V и W не представляет собой СН одновременно,

R¹⁴ может представлять собой водород, галоген, линейную или разветвленную C₁-С₄алкильную группу, линейный или разветвленный гидрокси-С₁-С₄алкил, гидроксигруппу, -NR¹⁶R¹⁷, линейную или разветвленную гидрокси-С₁-С₄алкилкарбонильную группу, С₂-С₉гетероциклоалкильную группу, гидрокси-С₂-С₉гетероциклоалкильную группу, линейную или разветвленную галоген-С₁-С₄алкильную группу и линейную или разветвленную C₁-C₄ алкоксигруппу,

R¹⁵ независимо может представлять собой линейную или разветвленную С₁-С₄алкильную группу, линейную или разветвленную гидрокси-С₁-С₄алкильную группу или галоген,

R¹⁴ и R¹⁵ могут быть связаны друг с другом, или R¹⁴ или R¹⁵ конденсированы с циклическим соединением, представленным одной из формул 11-13, с образованием 7-12-членной бициклоалкильной группы, гетеробициклоалкильной группы, спироциклоалкильной группы или спирогетероциклоалкильной группы,

каждый из R¹⁶ и R¹⁷ независимо может представлять собой водород, линейную или разветвленную С₁-С₄алкильную группу или линейную или разветвленную гидрокси-C₁-С₄алкильную группу,

р может быть равно целому числу от 0 до 4, и

каждый из s и t независимо может быть равен целому числу от 0 до 5, когда R¹⁴представляет собой водород, и целому числу от 0 до 4, когда R¹⁴ не представляет собой водород.

Примерами 7-12-членного бициклоалкила, образованного посредством связывания R¹⁴ и R¹⁵ друг с другом или конденсирования R¹⁴ или R¹⁵ с циклическим соединением, представленным любой из формул 11-13, являются диазабициклогептанил и диазабициклооктанил. В воплощении 7-12-членный бициклоалкил может представлять собой 2,5-диазабицикло[2.2.1]гептанил или 3,8-диазабицикло[3.2.1]октанил. Примером 7-12-членного спироциклоалкила, образованного посредством связывания R¹⁴ и R¹⁵ друг с другом или конденсирования R¹⁴ или R¹⁵ с циклическим соединением, представленным любой из формул 11-13, может быть диазаспирооктанильная группа, например диазаспиро[2.5]октанил.

В примере соединения, представленного формулой 1, R⁷ может представлять собой С₃-С₇циклоалкил, и Z может представлять собой замещенную или незамещенную С₂-С₁₁гетероциклоалкильную группу. С₃-C₇циклоалкил может представлять собой, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил или циклогептил, но без ограничения ими. Z может представлять собой, например, С₃-C₇циклоалкил, не замещенный или замещенный галогеном, гидрокси, циано, нитро, амино, галоген-C₁-С₄алкилом, С₁-С₄алкокси, гидрокси-С₁-С₄алкилом или С₁-С₄алкилом, но без ограничения ими. С₃-C₇циклоалкил может представлять собой пиперазинил, пиперидинил, морфолинил, тиоморфолинил, пирролидинил, имидазолидинил или тетрагидрофуранил и не ограничивается ими.

В соединении согласно воплощению R⁷ может представлять собой циклопропил, и Z может представлять собой пиперазинил, замещенный С₁-С₄алкильной группой, например, диметилпиперазинил. Соединение согласно воплощению может иметь улучшенный фармакокинетический профиль и улучшенную метаболическую стабильность, такую как микросомальная стабильность.

В воплощении соединение формулы 1 может быть выбрано из соединения, представленного формулой 14, и его стереоизомера, таутомера, сольвата или фармацевтически приемлемой соли:

Формула 14

где в формуле 14

Е^а может представлять собой водород, гидроксигруппу или С₁-С₄алкоксигруппу;

E^b может представлять собой водород, галоген, С₁-С₄алкильную группу или С₁-С₄фторалкильную группу;

каждый из E^c и E^d независимо может представлять собой водород или гидро кс игруппу;

X' может представлять собой водород или гидроксигруппу; к может быть равно целому числу от 0 до 4;

Q независимо может представлять собой гидрокси, галоген, С₁-С₄алкильную группу, гидроксиС₁-С₄алкильную группу или С₁-С₄алкоксигруппу; и

Z' может представлять собой одновалентную функциональную группу, представленную формулой 15:

Формула 15

где n в формуле 15 может быть равно целому числу от 1 до 8;

А независимо может представлять собой функциональную группу, выбранную из гидрокси, С₁-С₄алкильной группы и гидрокси-С₁-С₄алкильной группы, где, когда п равно двум или более, тогда два А могут быть связаны друг с другом с образованием алкиленового мостика с образованием Z', представляющего собой 7-12-членное мостиковое гетеробициклоалкильное кольцо, или два А могут быть спиро-связаны с образованием 7-12-членного спирогетероциклоалкильного кольца;

L может представлять собой водород, С₁-С₄алкил, гидроксигруппу или гидрокси-С₁-С₄алкильную группу.

Соединение, выбранное из соединения формулы 14 и его стереоизомера, таутомера, сольвата или фармацевтически приемлемой соли, может иметь улучшенные свойства по сравнению с другими соединениями, имеющими сходную химическую структуру, в аспектах фармакокинетического профиля, который является подходящим для перорального введения, и метаболической стабильности, такой как микросмальная стабильность.

Термин "фармакокинетический профиль", использованный в данном документе, относится к всасыванию, распределению, изменениям in vivo и профилю экскреции лекарственного средства, исходя из которых могут быть идентифицированы физиологические и биохимические действия лекарственного средства на живой организм и механизм их действия, то есть ответная реакция организма на лекарственные средства.

Термин "метаболическая стабильность", такая как микросомальная стабильность, использованный в данном документе, относится к степени стабильности метаболических органов после введения лекарственного средства, и может влиять на фармакокинетические параметры лекарственного средства, такие как клиренс и пероральная биодоступность. В качестве эксперимента для прогнозирования степени метаболизма лекарственного средства основными органами in vitro, метаболически активная система, такая как микросома или гепатоцит печени, может быть использована для измерения метаболической стабильности.

В воплощении E^b может представлять собой галоген, п может быть равно целому числу от 2 до 4, и может представлять собой алкильную группу, например метил, этил или пропил.

В воплощении E^b может представлять собой галоген, п может представлять собой 2, и может представлять собой метил.

В воплощении Z' может представлять собой 3,5-диметилпиперазин-1-ил.

В воплощении E^b может представлять собой хлор.

Соединение, выбранное из соединения формулы 14 и его стереоизомера, таутомера, сольвата или фармацевтически приемлемой соли, может эффективно контролировать одну или более киназ, вовлеченных во внутриклеточную сигнальную транедукцию и внутриклеточные сложные биомеханизмы. Например, выбранное соединение может действовать на рецепторную тирозинкиназу (RTK) для эффективного контролирования доставки внеклеточных стимулов внутрь клетки. В воплощении выбранное соединение может эффективно контролировать fms-подобную тирозинкиназу 3 (FLT3), которая часто аномально экспрессируется или подвергается мутации у пациентов с лейкозом, и селезеночную тирозинкиназу (SYK), которая действует на пути передачи сигналов рецептора эпителиального фактора роста (VEGFR), который вовлечен в контролирование процесса ангиогенеза, и другие иммунорецепторы, такие как В-клеточные рецепторы и тучные клетки. Соединение согласно воплощению эффективно подавляет мутацию или сверхэкспрессию FLT3 и одновременно сверхэкспрессию или сверхактивацию VEGFR, тем самым блокируя поступление питательных веществ и кислорода в опухоль и подавляя SYK. Соответственно, соединение может быть полезным для лечения острого миелогенного лейкоза (AML), который демонстрирует устойчивость к ингибиторам FLT3. Термин "общая выживаемость (OV)", использованный в данном документе, относится к периоду времени от случайного распределения до смертельного исхода в клинических испытаниях. FLT3-ITD-положительный острый миелоидный лейкоз (AML) представляет собой заболевание с очень низкой OV. SYK сверхэкспрессируется и активируется в гематологической злокачественной опухоли, и в высокой степени активированная SYK обычно встречается при FLT3-ITD-положительном остром миелоидном лейкозе (AML), который имеет очень низкую OV. Следовательно, в качестве мишени для лечения заболевания AML необходимо рассматривать SYK как важный фактор вместе с FLT3.

Соединение согласно воплощению демонстрирует эффективную селективную ингибирующую активность против SYK, а также FLT3, тем самым значительно улучшая эффективность лечения острого миелоидного лейкоза (AML) и улучшая время OV.

В воплощении L представляет собой водород, С₁-С₄алкил, гидроксигруппу или гидрокси-С₁-С₄алкильную группу;

E^b представляет собой галоген, например хлор, n равно 2, и А представляет собой метил.

Соединение, выбранное из соединения формулы 14 и его стереоизомера, таутомера, сольвата или фармацевтически приемлемой соли, где Z' представляет собой 3,5-диметилпиперазин-1-ил, демонстрирует превосходную ингибирующую активность против FLT3 и может эффективно подавлять сверхэкспрессию или сверхактивацию VEGFR и SYK. Кроме того, соединение может быть эффективно использовано для предупреждения или лечения клеточных пролиферативных заболеваний, вызванных аномальной активностью FLT3, VEGFR и SYK, для повышения эффективности лечения опухоли. Следовательно, соединение может быть полезным для лечения рака или лейкоза, имеющего устойчивость к ингибиторам FLT3 предшествующего уровня техники, например AML.

В воплощении соединение формулы 1 может представлять собой соединение, выбранное из соединений, перечисленных в Таблице 1:

Термин "изомер", использованный в данном документе, относится к соединению, имеющему такую же молекулярную формулу и другую структуру. Соединения формулы 1 согласно аспекту настоящего изобретения могут существовать в виде различных соединений, имеющих соотношение изомеров в трехмерном аспекте, и эти изомеры и смеси входят в объем настоящего изобретения. В одном или более воплощениях соединения формулы 1 согласно аспекту настоящего изобретения могут существовать в виде стереоизомера или структурного изомера, например таутомера.

Термин "стереоизомер", использованный в данном документе, относится к соединению, которое имеет такую же молекулярную формулу и такой же порядок связывания атомов и является другим в стереоскопическом или оптическом аспектах. То есть, стереоизомер относится к соединению, имеющему такой же химический состав, но отличается аспектом трехмерного расположения, а именно: отличается расположением атомов или групп. Стереоизомер включает геометрические изомеры, энантиомерные изомеры и частичные стереоизомеры.

Термин "геометрический изомер", использованный в данном документе, относится к типу стереоизомера, зависящему от направления расположения функциональной группы в молекуле, и может называться цис- или транс-изомером. Обычно эти изомеры содержат неспособные к вращению двойные связи, и заместители соединения, содержащего двойные связи, могут находиться в Е-форме или Z-форме. Например, когда соединение содержит 2-замещенную циклоалкильную группу, тогда это соединение может иметь цистит транс-форму. Когда соединение формулы 1 содержит мостиковое кольцо, тогда соединение может существовать в виде экзо- или эндо-изомера.

Термин "хиральный", использованный в данном документе, относится к молекуле, у которой имеется ненакладывающийся энантиомерный партнер, и термин "ахиральный", использованный в данном документе, относится к молекуле, у которой имеется накладывающийся энантиомерный партнер. Термин "энантиомер", использованный в данном документе, относится к случаю, когда две молекулы, имеющие оптическую активность, являются зеркально симметричными. То есть, энантиомер означает изомер, который не накладывается на исходную молекулу и не имеет никаких элементов симметрии, включающих плоскость симметрии и центр симметрии, и имеет стереоскопический центр (хиральный центр). Термин "диастереомер", использованный в данном документе, относится к случаю, когда молекулы, имеющие два или более хиральных центров, являются не энантиомерами, а стереоизомерами. Поскольку соединения формулы 1 согласно аспекту настоящего изобретения могут иметь хиральные центры или асимметрические углеродные центры (отсутствующие углероды), соединения могут существовать в виде энантиомера (R или S изомера), рацемата, диастереоизомеров или их смеси, и все эти изомеры и смеси входят в объем настоящего изобретения. Оптически активные (R)- и (S)-изомеры могут быть разделены с использованием методов предшествующего уровня техники, или хирального синтона, или хиральных реагентов.

Термин "структурные изомеры", использованный в данном документе, относится к изомерам, имеющим одинаковую молекулярную формулу, но другой порядок связывания атомов, и могут включать таутомер. Термин "таутомеры", использованный в данном документе, относится к структурным изомерам, имеющим структуры разной энергии, которые взаимозаменяются через низкоэнергетические барьеры. Например, фотонный таутомер (также протонный таутомер) включает в себя взаимопревращение посредством переноса фотонов, такое как кето-енольная и имин-енаминная изомеризация. Валентные таутомеры включают в себя взаимопревращения посредством перегруппировки некоторых электронов в связанных электронах. Соединение формулы 1 согласно аспекту и его стереоизомер или таутомер могут существовать в форме сольвата. Термин "сольват" может включать в себя молекулярный комплекс, содержащий соединение и по меньшей мере одну молекулу фармацевтически приемлемого растворителя, например этанола или воды. Комплекс, в котором молекулой растворителя является молекула воды, также называется "гидратом".

Соединение формулы 1 согласно аспекту и его стереоизомер, таутомер и сольват могут существовать в форме фармацевтически приемлемой соли. Термин "фармацевтически приемлемая соль", использованный в данном документе, относится к соли, которая имеет низкую токсичность по отношению к людям и не воздействует неблагоприятно на биологическую активность и физико-химические свойства родительского соединения. Фармацевтически приемлемые соли соединения, представленного формулой 1, включают фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты и фармацевтически приемлемые соли присоединения основания, которые понятны специалистам в данной области техники.

Фармацевтически приемлемые соли могут быть получены стандартным способом. Например, соединение формулы 1 может быть растворено в растворителе, который способен смешиваться с водой, например в метаноле, этаноле, ацетоне, 1,4-диоксане, и затем к нему может быть добавлена свободная кислота или свободное основание для кристаллизации с получением фармацевтически приемлемой соли.

В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ получения соединений.

В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения предложен способ получения соединения формулы 1, включающий взаимодействие соединения формулы 6 с соединением формулы 7:

Формула 6

Формула 7

где R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, X, Y, Z и к в формулах 6 и 7 могут быть такими, как описано применительно к формулам 1 и 2, и V может представлять собой галоген.

Органическое основание, например триэтиламин, диизопропилэтиламин, пиридин и т.п.; неорганическое основание, например карбонат натрия, карбонат калия, гидрид натрия и т.п.; органическая кислота, например трифторуксусная кислота, толуолсульфоновая кислота и т.п.; или неорганическая кислота, например соляная кислота, серная кислота, фосфорная кислота и т.п., могут быть добавлены или не добавлены в реакционный раствор при осуществлении реакции. Растворитель, используемый в реакции, может представлять собой любой растворитель, который не тормозит реакцию, например полярный апротонный растворитель, такой как диметилсульфоксид, N,N-диметилформамид, ацетонитрил или тетрагидрофуран (THF); полярный протонный растворитель, такой как метанол, этанол, 2-пропанол или 2-бутанол; или неполярный апротонный растворитель, такой как толуол или 1,4-диоксан. Реакционная температура может находиться в диапазоне от 0°С до 150°С, например от комнатной температуры до примерно 100°С.

В примере воплощения соединение формулы 1 может быть получено, как показано на Реакционной схеме 1:

Реакционная схема 1

Соединения формул 4 и 5 могут быть получены с использованием обычных знаний в области органической химии.

На Реакционной схеме 1 R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, X, Y, Z и к могут быть, соответственно, такими же, как в формулах 1 и 2, и каждый из V¹ и V² независимо может представлять собой галоген.

Для получения соединения формулы 6 путем проведения реакции соединения формулы 4 с соединением формулы 5 реакция может быть осуществлена путем добавления металлоорганического соединения. Например, металлоорганическое соединение может представлять собой алкилмагниевое соединение или алкиллитиевое соединение.

Растворитель, используемый в реакции, может представлять собой любой растворитель, который не тормозит реакцию, например полярный апротонный растворитель, такой как диметилсульфоксид, N,N-диметилформамид, ацетонитрил или THF; полярный протонный растворитель, такой как метанол, этанол, 2-пропанол или 2-бутанол; или неполярный апротонный растворитель, такой как толуол или 1,4-диоксан. Реакционная температура может находиться в диапазоне от 0°С до 150°С, например от 0°С до 60°С.

Для получения соединения формулы 7,

когда Y представляет собой -(СН₂)_m-, тогда m может быть равно целому числу от 1 до 2,

когда Y представляет собой -(CH₂)_m-O-(CH₂)_n-, тогда m может быть равно 0, и n независимо может быть равно целому числу от 0 до 2,

когда Y представляет собой -(CH₂)_m-CO-(CH₂)_n-, тогда каждый из m и n может быть равен 0, и

соединение получают, основываясь на знаниях в соответствующей области органической химии, как объяснено применительно к Схемам получения 1-3.

Схема получения 1 в случае, когда Y представляет собой -(СН₂)_m-:

m=0,

На Схеме получения 1 R⁵, R⁶, R⁷, R⁹, и q такие же, как описано применительно к формулам 1 и 3, и V³ может представлять собой галоген, и L может представлять собой Cl, Br, I, OMs, OTs или т.п.

Схема получения 2

в случае, когда Y представляет собой -(СН₂)_m-O-(СН₂)_n-:

n=0,

На Схеме получения 2 R⁵, R⁶, R⁷, R⁹, - и q такие же, как описано применительно к формулам 1 и 3, и L может представлять собой Cl, Br, I, OMs, OTs или т.п.

Схема получения 3

в случае если Y представляет собой -(CH₂)_m-CO-(CH₂)_n-:

На Схеме получения 3 R⁵, R⁶, R⁷, R⁹, и q такие же, как описано применительно к формулам 1 и 3.

В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ получения соединения, представленного формулой 1а, включающий взаимодействие соединения, представленного формулой 10, и соединения, представленного формулой 3:

Формула 10

Формула 3

Формула 1a

R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁹, , X, k и q в формулах 10, 3 и 1a такие же, как описано применительно к формулам 1, 2 и 3.

Реакция может быть проведена путем добавления или не добавления в реакционный раствор восстановителя, такого как боргидрид натрия, цианоборгидрид натрия, триацетоксиборгидрид натрия и т.п.; органического основания, такого как триэтиламин, диизопропилэтиламин и пиридин; неорганического основания, такого как карбонат натрия, карбонат калия и гидрид натрия; органической кислоты, такой как трифторуксусная кислота, толуолсульфоновая кислота и т.п.; или неорганической кислоты, такой как соляная кислота, серная кислота и фосфорная кислота. Растворитель, используемый в реакции, может представлять собой любой растворитель, который не тормозит реакцию, и примерами растворителя являются полярный апротонный растворитель, такой как диметилсульфоксид, N,N-диметилформамид, ацетонитрил или тетрагидрофуран; полярный протонный растворитель, такой как метанол, этанол, 2-пропанол или 2-бутанол; или неполярный апротонный растворитель, такой как толуол или 1,4-диоксан. Реакционная температура может находиться в диапазоне от 0°С до 150°С, например комнатная температура.

Соединение формулы 10 может быть получено с использованием обычных знаний в области органической химии.

В воплощении соединение, представленное формулой 1а, может быть получено с использованием способа, проиллюстрированного на Реакционной схеме 2.

Реакционная схема 2

На Реакционной схеме 2 R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, , X, k и q такие же, как описано применительно к формулам 1, 2 и 3, и V² представляет собой галоген.

Для получения соединения формулы 10 из соединения формулы 9 соединение формулы 9 окисляют, используя окислитель, такой как MnO₂, и затем промывают органическим растворителем, таким как метиленхлорид, с последующим концентрированием и очисткой полученного органического слоя.

Для получения соединения формулы 9 путем проведения реакции соединения формулы 8 с соединением формулы 6 растворитель, используемый в реакции, может представлять собой любой растворитель, который не тормозит реакцию. Например, реакция может быть проведена путем добавления или не добавления в реакционный раствор органического основания, такого как триэтиламин, диизопропилэтиламин и пиридин; неорганического основания, такого как карбонат натрия, карбонат калия и гидрид натрия; органической кислоты, такой как трифторуксусная кислота, толуолсульфоновая кислота и т.п.; или неорганических кислот, таких как соляная кислота, серная кислота и фосфорная кислота; и эквивалент основания или кислоты может составлять от 0,1 до 5 эквивалентов в расчете на один эквивалент Соединения 1 формулы В. Растворитель, используемый в реакции, может представлять собой любой растворитель, который не тормозит реакцию, и примерами растворителя являются полярный апротонный растворитель, такой как диметилсульфоксид, N,N-диметилформамид, ацетонитрил или тетрагидрофуран; полярный протонный растворитель, такой как метанол, этанол, 2-пропанол или 2-бутанол; или неполярный апротонный растворитель, такой как толуол или 1,4-диоксан. Реакционная температура может находиться в диапазоне от 0°С до 150°С, например от 50°С до примерно 100°С.

Хотя способ получения соединения формулы 1 описан путем приведения конкретных примеров, конкретные реакционные условия, такие как количество реакционного растворителя, основания и реагента, которые используют, не ограничены теми, которые описаны в настоящем описании изобретения и не должны рассматриваться как ограничивающие объем настоящего изобретения.

В другом аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция для предупреждения или лечения рака, содержащая соединение или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента.

Рак может включать лейкоз, такой как острый миелогенный лейкоз (AML), хронический миелогенный лейкоз (CML), острый лимфоцитарный лейкоз (ALL), хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL), острый промиелоцитарный лейкоз (APL), волосистоклеточный лейкоз, хронический нейтрофильный лейкоз (CNL) или т.п.

В одном воплощении рак может представлять собой лейкоз.

В воплощении лейкоз может включать AML, ALL или CML.

В другом аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция для предупреждения или лечения ШГ3-опосредованного заболевания, содержащая соединение или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента.

В другом аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция для ингибирования активности киназы FLT3, содержащая соединение согласно аспекту или его фармацевтически приемлемую соль и фармакологически приемлемый эксципиент.

В примере воплощения фармацевтическая композиция может содержать фармацевтически приемлемый(ую) эксципиент или добавку. Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может быть приготовлена стандартным способом и может быть приготовлена в различных пероральных лекарственных формах, таких как таблетка, пилюля, порошок, капсула, сироп, эмульсия и микроэмульсия; или в парентеральных лекарственных формах, таких как формы для внутримышечного, внутривенного или подкожного введения.

Когда фармацевтическая композиция по настоящему изобретению приготовлена в форме пероральной композиции, примеры носителя или добавки, пригодного(ой) для использования, включают разбавитель, разрыхлитель, связующее, смазывающее вещество, поверхностно-активное вещество, суспендирующее вещество и эмульгатор. Когда фармацевтическая композиция по настоящему изобретению приготовлена в форме для инъекций, примеры носителя или добавки могут включать воду, физиологический раствор, водный раствор глюкозы, псевдосахаридный раствор, спирт, гликоль, эфир (например, полиэтиленгликоль 400), масло, жирную кислоту, сложный эфир жирной кислоты, глицерид, поверхностно-активное вещество, суспендирующее вещество и эмульгатор. Такие способы приготовления общеизвестны специалистам в фармацевтической области.

В воплощении соединение формулы 1 в качестве активного ингредиента, включенного в фармацевтическую композицию, можно вводить субъекту или пациенту в эффективном количестве для лечения или предупреждения. Соединение формулы 1 можно вводить перорально или парентерально согласно назначению. При пероральном введении соединения активный ингредиент можно вводить в количестве в диапазоне от 0,01 миллиграмм (мг) до 1000 мг, например от 0,01 мг до 500 мг, например от 0,1 мг до 300 мг, например от 0,1 до 100 мг на килограмм (кг) массы тела в сутки. При парентеральном введении соединения активный ингредиент можно вводить от одного до нескольких раз в количестве в диапазоне от 0,01 мг до 100 мг, например от 0,1 мг до 50 мг на кг массы тела в сутки. Композицию можно вводить однократно или несколькими разделенными дозами. Дозу для субъекта или пациента следует определять с учетом массы тела, возраста, пола, состояния здоровья пациента, диеты, времени введения, способа введения, тяжести заболевания и т.д. Следует иметь в виду, что практикующий врач может надлежащим образом корректировать дозу. Доза не предназначена для ограничения объема изобретения в каких-либо аспектах.

В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ предупреждения или лечения рака путем использования соединения согласно аспекту. В воплощении способ может включать в себя введение субъекту соединения, выбранного из соединения формулы 1 согласно аспекту и его стереоизомера, таутомера, сольвата или фармацевтически приемлемой соли. Субъектом может быть пациент. В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ ингибирования активности FLT3 у целевого субъекта путем использования соединения согласно аспекту.

В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения FLT3-опосредованного заболевания путем использования соединения согласно аспекту.

Подробности способа предупреждения или лечения могут быть такими же, как описано выше со ссылкой на фармацевтическую композицию согласно аспекту настоящего изобретения.

В воплощении дозировка, количество введений или способ введения соединения, используемого для лечения, могут варьироваться в зависимости от субъекта, которого лечат, тяжести заболевания или состояния, скорости введения и суждения лечащего врача. Дозировка для человека с массой тела 70 кг может находиться в диапазоне от 0,1 до 2000 мг в сутки, например от 1 до 1000 мг или от 10 до 2000 мг. Количество введений может составлять от однократного введения до введения несколько раз, например от 1 до 4 раз или согласно схемам лечение/перерыв, и способ введения может представлять собой пероральный или парентеральный путь. В одном или более воплощениях дозировка может быть меньше, чем диапазон, описанный выше. В одном или более воплощениях дозировка может представлять собой дозировку больше, чем в диапазоне, описанном выше, не вызывающую пагубных побочных эффектов. В последнем случае дозировка может быть разделена на несколько небольших порций, вводимых на протяжении суток. Врачи обычной квалификации в релевантной области могут определить и прописать дозировку соединения согласно назначению. Например, врачи могут применять дозировку соединения согласно воплощению настоящего изобретения на уровне, который ниже необходимого для достижения целевого терапевтического эффекта, и затем постепенно увеличивать дозировку до достижения целевого эффекта.

В одном воплощении согласно способу соединение согласно одному аспекту настоящего изобретения в качестве активного ингредиента можно применять само по себе или в комбинации с одним или более другими фармацевтическим лекарственными средствами, известными для лечения рака, опухоли или лейкоза, или фармацевтическими носителями. В одном воплощении соединение, выбранное из соединения, представленного формулой 1, и его стереоизомера, таутомера, сольвата или фармацевтически приемлемой соли, можно вводить вместе с другими ингибиторами активности киназы FLT3 или другими агентами различных механизмов, которые увеличивают эффективность ингибирования активности киназы FLT3, или усиливают синергетическое действие по снижению активности FLT3, или усиливают терапевтический эффект в отношении FLT3-опосредованного заболевания.

Термин "лечение" использованный в данном документе, включает в себя лечение, улучшение, ослабление или управление течением заболевания. Термин "осуществление лечения" или "лечение", использованный в данном документе, относится к подавлению заболевания, например подавлению заболевания, состояния или расстройства, предупреждению дальнейшего развития патологии и/или симптомов, улучшению состояния при заболевании или реверсированию патологии и/или симптомов, например снижению тяжести заболевания, у субъекта, который испытывает или демонстрирует патологию или симптом заболевания, состояния или расстройства.

Термин "осуществление предупреждения" или "предупреждение", использованный в данном документе, относится к предупреждению заболевания, например предупреждению заболевания, состояния или расстройства у субъекта, который может быть предрасположен к этому заболеванию, состоянию или расстройству, но еще не испытывает или не проявляет патологию или симптом заболевания.

Термин "субъект" или "пациент", использованный в данном документе, относится к любому животному, включая млекопитающих, например мышей, крыс, других грызунов, кроликов, собак, кошек, свиней, коров, овец, лошадей или приматов и людей.

Термины "имеющий", "может иметь", "включающий" или "может включать" могут относиться к наличию признака (например, компонента, такого как количество, компонент и т.д.) и не исключают наличия дополнительных признаков.

Далее настоящее изобретение будет описано более подробно со ссылкой на нижеследующие Примеры и Экспериментальные Примеры. Однако эти Примеры и Экспериментальные Примеры призваны помочь понять настоящее изобретение, и объем настоящего изобретения не ограничивается ими в каком-либо смысле.

Пример 1: 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-4-(6-фтор-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин

Технологическая операция 1. Получение 3-бром-5-нитробензойной кислоты

500 г (2991,86 ммоль) 3-нитробензойной кислоты растворяли в 1,4 л концентрированной (конц.) серной кислоты (H₂SO₄), и температуру поднимали до 60°С. 652 г (3590,23 ммоль) N-бромсукцинимида добавляли в этот раствор три раза в течение 1 часа, и полученную смесь перемешивали при температуре 60°С в течение 2 часов. Сразу после завершения реакции в реакционную смесь добавляли лед. Полученное твердое вещество фильтровали и сушили в сушильном шкафу при температуре 40°С в течение 16 часов с получением 730 г целевого соединения с выходом 99,2%.

¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 8.59 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.38 (s, 1H).

Технологическая операция 2. Получение (3-бром-5-нитрофенил)метанола

200 г (812,94 ммоль) 3-бром-5-нитробензойной кислоты, полученной в результате Технологической операции 1, растворяли в 1,25 л тетрагидрофурана (THF), и температуру снижали до 0°С.Медленно по каплям добавляли 1,6 л (3251,76 ммоль) борандиметилсульфида (2,0 М в THF) в течение 1,5 часов. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов и затем перемешивали при нагревании с обратным холодильником при температуре 80°С в течение 1 часа. Сразу после завершения реакции полученную реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и в нее добавляли по каплям насыщенный гидрокарбонат натрия. Процесс экстракции осуществляли три раза, используя этилацетат, и органический слой промывали соленой водой, сушили с использованием безводного сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (хлорметилен:метанол = 10:1 (об./об.)), и полученный раствор концентрировали при пониженном давлении и затем подвергали кристаллизации, используя гексан, с получением 180 г целевого соединения с выходом 95,4%.

¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 8.23 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 4.63 (s, 2H).

Технологическая операция 3. Получение (3-циклопропил-5-нитрофенил)метанола

100 г (431,00 ммоль) (3-бром-5-нитрофенил)метанола, полученного в результате Технологической операции 2, и 111 г (1293,00 ммоль) циклопропилбората, 9,7 г (43,10 ммоль) Pd(OAc)₂, 274,5 г (1293,00 ммоль) фосфата калия и 33,92 г (129,30 ммоль) трифенилфосфина растворяли в смешанном растворителе из толуола и H₂O (2:1, 1,35 л) и затем продували азотом в течение 5 минут. Реакционную смесь герметично закрывали, и температуру поднимали до 100°С, затем перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 20 часов. Сразу после завершения реакции смешанный раствор охлаждали до комнатной температуры, и смешанный раствор фильтровали, используя фильтр из целита. Слой целита промывали этилацетатом. Органический слой экстрагировали три раза из смешанного раствора, подвергнутого фильтрации, и органический слой промывали соленой водой, сушили с использованием безводного сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат : гексан = 1:5 (об./об.)), и полученный раствор концентрировали при пониженном давлении с получением 62 г целевого соединения с выходом 74,5%.

¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 8.07 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 4.70 (s, 2Н), 1.90 (m, 1H), 1.01 (m, 2H), 0.71 (m, 2H).

Технологическая операция 4. Получение (3R,5S)-1-(3-циклопропил-5-нитробензил)-3,5-диметилпиперазина

2 г (10,35 ммоль) (3-циклопропил-5-нитрофенил)метанола, полученного в результате Технологической операции 3, растворяли в смешанном растворителе, содержащем тетрагидрофуран и воду (1:1, 66 мл), и температуру снижали до 0°С. Добавляли гидроксид натрия (NaOH; 829 мг, 20,70 ммоль) и 3,95 г (20,70 ммоль) пара-толуолсульфонилхлорида. После перемешивания в течение 1 часа при температуре 0°С добавляли по каплям воду при комнатной температуре. Процесс экстракции осуществляли три раза, используя этилацетат, и органический слой промывали соленой водой, сушили с использованием безводного сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в 11 мл N,N-диметилформамида и добавляли 796 мг (5,76 ммоль) карбоната калия (K₂CO₃) и 394 мг (3,45 ммоль) (2R,6S)-2,6-диметилпиперазина, и полученную смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником при температуре 100°С в течение 1 часа. Сразу после завершения реакции смешанный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли по каплям этилацетат и воду. Органический слой экстрагировали, и органический слой промывали соленой водой, сушили с использованием безводного сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали методом ЖХСД (жидкостная хроматография среднего давления) (хлороформ:метанол = 10:1 (об./об.)), и полученный раствор концентрировали при пониженном давлении с получением 645 мг целевого соединения с выходом 77%.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ 7.95 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 3.53 (m, 2Н), 3.44 (t, 4Н), 2.39 (t, 4Н), 1.45 (m, 9Н), 1.04 (m, 2Н), 0.76 (m, 2Н).

Технологическая операция 5. Получение 3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3.5-диметилпиперазин-1-ил)метил)анилина

11 мл 50%-ного этанола добавляли к 622 мг (11,14 ммоль) Fe порошка и медленно добавляли по каплям 0,1 мл (0,89 ммоль) концентрированной соляной кислоты (конц. HCl), и полученную смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником при температуре 110°С в течение 1,5 часов. В активированную Fe смесь добавляли (3R,5S)-1-(3-циклопропил-5-нитробензил)-3,5-диметилпиперазин (645 мг, 2,23 ммоль), полученный согласно Технологической операции 4, и полученную смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником при температуре 110°С в течение 1 часа. Сразу после завершения реакции проводили фильтрование, используя фильтр из целита. Смешанный раствор хлороформа и метанола и насыщенного раствора гидрокарбоната натрия добавляли по каплям в фильтрат. Органический слой выделяли из смешанного раствора, промывали соленой водой, сушили с использованием безводного сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением 518 мг целевого соединения с выходом 90%.

Технологическая операция 6. Получение 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-4-(6-фтор-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амина

46 мг (0,17 ммоль) 3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)анилина, полученного в результате Технологической операции 5, и 50 мг (0,17 ммоль) 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола, способ получения которого раскрыт в WO 2013014448, растворяли в 2 мл 2-бутанола, и в этот раствор добавляли 34 мг (0,17 ммоль) пара-толуолсульфоновой кислоты (p-TsOH). Эту реакционную смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником при температуре 120°С в течение 21 часов. Сразу после завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры, и в нее по каплям добавляли насыщенный раствор гидрокарбоната натрия, затем осуществляли экстракцию, используя хлороформ, дважды. Экстрагированный органический слой промывали соленой водой, сушили с использованием безводного сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (хлороформ:метанол = 9:1 (об./об.)), и полученный раствор концентрировали при пониженном давлении с получением 11 мг целевого соединения с выходом 12%.

МС (ИЭР⁺, m/z): 505 [М+Н]⁺

¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.94 (bs, 1H), 9.50 (s, 1H), 8.60 (m, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.36 (s, 1Н), 7.29 (m, 1H), 6.96 (m, 1Н), 6.63 (s, 1H), 2.70 (m, 4Н), 1.85 (m, 1Н), 1.44 (m, 2), 0.92 (m, 8Н), 0.60 (m, 2Н).

Пример 2: 5-хлор-4-(6-хлор-1H-индол-3-ил)-N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)пиримидин-2-амин

97 мг целевого соединения было получено с выходом 69% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 89 мг (0,30 ммоль) 6-хлор-3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-1Н-индола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1Н-индола в Технологической операции 6 Примера 1.

МС (ИЭР⁺, m/z): 521 [М+Н]⁺

¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 12.01 (s, 1H), 9.54 (s, 1H), 8.58 (d, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.55 (m, 1H), 7.46 (m, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.11 (m, 1H), 6.65 (s, 1H), 3.37 (s, 2H), 2.85 (m, 2H), 2.71 (d, 2H), 1.84 (m, 1H), 1.60 (m, 2H), 0.95 (d, 7H), 0.89 (m, 2H), 0.61 (m, 2H).

Пример 3: 2-((2R,6S)-4-(3-((5-хлор-4-(6-фтор-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)амино)-5-циклопропилбензил)-2,6-диметилпиперазин-1-ил)этан-1-ол

38 мг целевого соединения было получено с выходом 63% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 32 мг (0,11 ммоль) 2-((2R,6S)-4-(3-амино-5-циклопропилбензил)-2,6-диметилпиперазин-1-ил)этан-1-ола использовали вместо 3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)-анилина.

МС (ИЭР⁺, m/z): 549 [M+H]⁺

¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.94 (bs, 1Н), 9.51 (s, 1H), 8.59 (m, 1H), 8.54 (m, 1H), 8.49 (s, 1H), 7.42 (s, 3H), 7.36 (s, 1H), 7.27 (d, 1H), 6.96 (t, 1H), 6.62 (s, 1H), 4.35 (m, 1H), 3.39 (m, 4H), 3.27 (m, 2H), 2.48 (m, 4H), 1.82 (m, 1H), 1.59 (m, 2H), 0.89 (m, 8H), 0.57 (m, 2H).

Пример 4: 2-((2R,6S)-4-(3-((5-хлор-4-(1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)-амино)-5-циклопропилбензил)-2,6-диметилпиперазин-1-ил)этан-1-ол

18 мг целевого соединения было получено с выходом 31% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 32 мг (0,11 ммоль) 2-((2R,6S)-4-(3-амино-5-циклопропилбензил)-2,6-диметилпиперазин-1-ил)этан-1-ола использовали вместо 3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)-анилина, и 31 мг (0,11 ммоль) 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-1H-индола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

МС (ИЭР+, m/z): 531 [М+Н]⁺

¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.90 (bs, 1H), 9.48 (s, 1H), 8.57 (d, 1H), 8.54 (m, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.49 (m, 3Н), 7.23 (m, 1H), 7.18 (m, 1H), 6.61 (s, 1H), 4.35 (m, 1H), 3.39 (m, 4Н), 3.27 (m, 2Н), 2.48 (m, 4Н), 1.82 (m, 1H), 1.59 (m, 2Н), 0.89 (m, 8Н), 0.59 (m, 2Н).

Пример 5: 2-((2R,6S)-4-(3-((5-хлор-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)амино)-5-циклопропилбензил)-2,6-диметилпиперазин-1-ил)этан-1-ол

28 мг целевого соединения было получено с выходом 47% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 32 мг (0,11 ммоль) 2-((2R,6S)-4-(3-амино-5-циклопропилбензил)-2,6-диметилпиперазин-1-ил)этан-1-ола использовали вместо 3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)-анилина, и 31 мг (0,11 ммоль) 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-метил-1H-индола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

МС (ИЭР+, m/z): 545 [М+Н]⁺

¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.76 (bs, 1H), 9.45 (s, 1H), 8.45 (m, 3Н), 7.43 (d, 1H), 7.25 (s, 1H), 6.94 (d, 1H), 6.61 (s, 1H), 4.35 (m, 1H), 3.39 (m, 4Н), 3.27 (m, 2Н), 2.48 (m, 4Н), 2.40 (s, 3Н), 1.82 (m, 1H), 1.59 (m, 2Н), 0.89 (m, 8Н), 0.59 (m, 2Н).

Пример 6: (R)-5-хлор-N-(3-циклопропил-5-((3-метилпиперазин-1-ил)метил)-фенил)-4-(1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин

32 мг целевого соединения было получено с выходом 17% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 100 мг (0,41 ммоль) (R)-3-циклопропил-5-((3-метилпиперазин-1-ил)метил)анилина использовали вместо 3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)анилина, и 108 мг (0,41 ммоль) 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-1H-индола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

МС (ИЭР+, m/z): 473 [М+Н]⁺

¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.93 (s, 1H), 9.52 (s, 1H), 8.58 (d, 1H), 8.50 (d, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.54 (m, 3H), 7.22 (t, 1H), 7.15 (m, 1H), 6.65 (s, 1H), 3.77 (m, 1H), 3.45 (m, 2H), 3.21 (m, 2H), 2.95 (m, 1H), 2.82 (m, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.20 (m, 1H), 2.01 (m, 1H), 1.84 (m, 1H), 0.93 (m, 2H), 0.63 (m, 2H).

Пример 7: (R)-5-хлор-N-(3-циклопропил-5-((3-метилпиперазин-1-ил)метил)-фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин

39 мг целевого соединения было получено с выходом 38% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 53 мг (0,21 ммоль) (R)-3-циклопропил-5-((3-метилпиперазин-1-ил)метил)анилина использовали вместо 3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)анилина, и 66 мг (0,24 ммоль) 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-метил-1H-индола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

МС (ИЭР+, m/z): 487 [М+Н]⁺

¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.77 (bs, 1H), 9.47 (s, 1H), 8.47 (m, 3Н), 7.50 (s, 1H), 7.39 (s, 1Н), 7.28 (s, 1H), 6.93 (d, 1H), 6.64 (s, 1H), 3.39 (s, 2H), 2.94 (m, 1H), 2.77 (m, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.00 (m, 5H), 1.04 (m, 4H), 0.92 (m, 2H), 0.62 (m, 2H).

Пример 8: 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин

30 мг целевого соединения было получено с выходом 7% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 222 мг (0,80 ммоль) 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-метил-1H-индола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола в Технологической операции 6 Примера 1.

МС (ИЭР+, m/z): 501 [М+Н]⁺

¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.76 (bs, 1H), 9.45 (s, 1H), 8.47 (m, 3Н), 7.46 (s, 1H), 7.39 (s, 1Н), 7.27 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 6.63 (s, 1H), 2.69 (m, 2Н), 2.60 (m, 2Н), 2.42 (s, 3Н), 1.84 (m, 1H), 1.45 (t, 2Н), 0.91 (m, 8Н), 0.62 (m, 2Н).

Пример 9: 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-(((3S,5R)-3-этил-5-метилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин

30 мг целевого соединения было получено с выходом 29% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 55 мг (0,20 ммоль) 3-циклопропил-5-(((3S,5R)-3-этил-5-метилпиперазин-1-ил)метил)анилина использовали вместо 3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)анилина, и 61 мг (0.22 ммоль) 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-метил-1H-индола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

МС (ИЭР+, m/z): 515 [М+Н]⁺

¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.77 (bs, 1H), 9.45 (s, 1H), 8.47 (m, 3Н), 7.46 (s, 1Н), 7.39 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 6.63 (s, 1H), 3.36 (m, 2H), 2.70 (m, 4H), 2.42 (s, 3H), 1.85 (m, 1H), 1.50 (m, 2H), 0.93 (m, 11H), 0.61 (m, 2H).

Пример 10: 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-((3,5-диметилпиперазин-1-ил)-метил)фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин

100 мг целевого соединения было получено с выходом 52% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 100 мг (0,36 ммоль) 3-циклопропил-5-((3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)анилина использовали вместо 3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)-анилина, и 150 мг (0,54 ммоль) 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-метил-1H-индола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

МС (ИЭР+, m/z): 501 [М+Н]⁺

¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.77 (s, 1H), 9.46 (s, 1Н), 8.45 (m, 3Н), 7.43 (d, 2H), 7.30 (s, 1H), 6.75 (d, 1H), 6.64 (s, 1H), 2.82 (m, 2H), 2.72 (d, 2H), 2.42 (s, 3Н), 1.83 (m, 1H), 1.47 (t, 1H), 0.88 (s, 8H), 0.64 (m, 2H).

Пример 11: N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)-метил)фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин

409 мг целевого соединения было получено с выходом 31% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 700 мг (2,80 ммоль) 3-(2-хлорпиримидин-4-ил)-6-метил-1H-индола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

МС (ИЭР+, m/z): 467 [М+Н]⁺

¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.63 (bs, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.44 (d, 1H), 8.28 (d, 1H), 8.19 (m, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.22 (m, 2Н), 6.96 (d, 1H), 6.59 (s, 1H), 4.20 (m, 1H), 3.15 (s, 3Н), 2.71 (m, 2Н), 2.65 (m, 3Н), 2.40 (s, 3Н), 1.85 (m, 1H), 1.48 (m, 2Н), 0.93 (m, 2Н), 0.90 (m, 6Н), 0.62 (m, 2Н).

Пример 12: N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)-метил)фенил)-5-фтор-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин

101 мг целевого соединения было получено с выходом 77% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 78 мг (0,30 ммоль) 3-(2-хлор-5-фторпиримидин-4-ил)-6-метил-1H-индола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

МС (ИЭР⁺, m/z): 485 [М+Н]⁺

¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.83 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 8.60 (d, 1H), 8.40 (d, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.00 (d, 1H), 6.62 (s, 1H), 3.42 (s, 2H), 2.98 (m, 2H), 2.79 (d, 2H), 2.43 (s, 3H), 1.87 (m, 1H), 1.70 (m, 2H), 1.08 (d, 7H), 0.96 (m, 2H), 0.67 (m, 2H).

Пример 13: N-(3-циклопро1 гил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)-метил)фенил)-4-(1H-индол-3-ил)-5-метилпиримидин-2-амин

99 мг целевого соединения было получено с выходом 79% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 73 мг (0,30 ммоль) 3-(2-хлор-5-метилпиримидин-4-ил)-1H-индола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

МС (ИЭР+, m/z): 467 [М+Н]⁺

¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.74 (s, 1H), 9.15 (s, 1H), 8.58 (d, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.55 (m, 3Н), 7.20 (t, 1H), 7.12 (m, 1H), 6.56 (s, 1H), 3.37 (s, 2Н), 2.86 (m, 2Н), 2.70 (d, 2Н), 2.37 (s, 3Н), 1.75 (m, 1H), 1.57 (m, 2Н), 0.95 (d, 7Н), 0.91 (m, 2Н), 0.60 (m, 2Н).

Пример 14: N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)-метил)фенил)-5-метил-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин

135 мг целевого соединения было получено с выходом 73% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 150 мг (0,58 ммоль) 3-(2-хлор-5-метилпиримидин-4-ил)-6-метил-1H-индола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.64 (s, 1H), 9.15 (s, 1H), 8.44 (d, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.93 (d, 1H), 6.58 (s, 1H), 3.46 (s, 2Н), 2.83 (d, 2Н), 2.43 (s, 3Н), 2.36 (s, 3Н), 1.94 (t, 2Н), 1.91 (m, 1Н), 1.05 (t, 1Н), 0.89 (m, 2Н), 0.61 (t, 2Н).

Пример 15: N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)-метил)фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)-5-(трифторметил)пиримидин-2-амин

289 мг целевого соединения было получено с выходом 28% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 600 мг (1,92 ммоль) 3-(2-хлор-5-(трифторметил)пиримидин-4-ил)-6-метил-1H-индола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

МС (ИЭР+, m/z): 535 [М+Н]⁺

¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.63 (bs, 1H), 9.87 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.28 (m, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.49 (s, 1Н), 7.39 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.93 (d, 1H), 6.66 (s, 1H), 4.20 (m, 1H), 3.15 (s, 3H), 2.58 (m, 3H), 2.55 (m, 3H), 2.40 (s, 3H), 1.85 (m, 1H), 1.40 (m, 2H), 0.89 (m, 8H), 0.57 (m, 2H).

Пример 16: (3-(5-хлор-2-((3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)-1H-индол-6-ил)метанол

Технологическая операция 1. Получение (3-(5-хлор-2-((3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)-1-тозил-1H-индол-6-ил)метанола

30 мг целевого соединения было получено с выходом 46% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 51 мг (0,11 ммоль) (3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-1-тозил-1H-индол-6-ил)метанола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 9.70 (s, 1Н), 8.62 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.29-8.03 (m, 2H), 7.53-7.09 (m, 4H), 6.33 (s, 1H), 5.39 (brs, 1H), 4.65 (s, 2H), 2.73 (m, 2H), 2.61 (d, 2H), 2.33 (s, 3H), 1.80 (m, 1H), 1.49 (t, 1H), 0.88 (m, 10H), 0.55 (m, 2H).

Технологическая операция 2. Получение (3-(5-хлор-2-((3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3.5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)-1H-индол-6-ил)метанола

18 мг (0,03 ммоль) (3-(5-хлор-2-((3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)-1-тозил-1H-индол-6-ил)метанола, полученного в результате Технологической операции 1 Примера 16, растворяли в смешанном растворителе, содержащем метанол и тетрагидрофуран (1 мл, 1:1), и затем температуру увеличивали до 60°С. Туда же добавляли 18 мг (0,06 ммоль) карбоната цезия, и полученную смесь перемешивали при 60°С в течение 2 часов. Сразу после завершения реакции температуру снижали до комнатной температуры и добавляли водный раствор хлорида аммония. Процесс экстракции осуществляли три раза, используя хлороформ. Полученное вещество сушили с использованием безводного сульфата натрия и затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали жидкостной хроматографией среднего давления (ЖХСД) (хлороформ:метанол = 100:5 (об./об.)), и полученный раствор концентрировали при пониженном давлении с получением 10 мг целевого соединения с выходом 72%.

МС (ИЭР+, m/z): 517 [М+Н]⁺

¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.90 (s, 1H), 9.49 (s, 1H), 8.51 (m, 3Н), 7.48 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.07 (d, 1H), 6.65 (s, 1H), 5.19 (m, 1H), 4.62 (s, 2H), 4.14 (m, 1H), 3.46 (s, 2H), 3.16 (m, 2H), 2.83 (d, 2H), 1.945 (m, 4H), 1.11 (d, 2H), 0.93 (m, 4H), 0.64 (m, 2H).

Пример 17: 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-4-(5-метокси-6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин

11 мг целевого соединения было получено с выходом 13% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 50 мг (0,16 ммоль) 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-5-метокси-6-метил-1H-индола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

МС (ИЭР+, m/z): 531 [М+Н]⁺

¹H-ЯМР (300 МГц, DUSO-d₆): δ 11.64 (s, 1H), 9.45 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.38 (m, 2H), 7.22 (s, 1H), 6.61 (s, 1H), 3.50 (s, 3H), 2.72 (m, 2H), 2.65 (m, 2H), 2.27 (m, 4H), 1.65 (m, 1H), 1.59 (m, 2H), 1.21 (m, 2H), 1.07 (m, 6H), 0.82 (m, 2H), 0.51 (m, 2H).

Пример 18: 3-(5-хлор-2-((3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)-6-метил-1H-индол-5-ол

10 мг целевого соединения было получено с выходом 15% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 39 мг (0,13 ммоль) 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-метил-1H-индол-5-ола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

МС (ИЭР+, m/z): 517 [М+Н]⁺

¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.50 (s, 1Н), 9.31 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.58 (s, 1H), 3.17-2.56 (m, 4H), 2.26 (m, 3H), 1.89 (m, 1H), 1.22 (m, 2H), 0.86 (m, 8H), 0.57 (m, 2H).

Пример 19: 3-(5-хлор-2-((3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)-6-метилиндолин-2-он

5 мг целевого соединения было получено с выходом 3% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 70 мг (0,24 ммоль) 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-метилиндол-2-она использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

МС (ИЭР+, m/z): 517 [М+Н]⁺

¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 10.65 (s, 1H), 9.68 (s, 1H), 8.57 (s, 1Н), 7.21 (m, 2H), 7.09 (m, 1H), 6.96 (m, 2H), 6.56 (s, 1H), 5.12 (s, 1H), 2.82 (m, 2H), 2.72 (m, 2H), 2.27 (s, 3Н), 1.73 (m, 3Н), 1.17 (m, 3Н), 1.08 (m, 6H), 0.90 (m, 2H), 0.52 (m, 2H).

Пример 20: 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-4-метокси-6-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин

17 мг целевого соединения было получено с выходом 17% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 60 мг (0,19 ммоль) 3-(2,5-дихлор-6-метоксипиримидин-4-ил)-6-метил-1H-индола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

МС (ИЭР+, m/z): 531 [М+Н]⁺

¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.66 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 8.44 (d, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 6.67 (s, 1H), 4.04 (s, 3Н), 3.43 (s, 2Н), 2.98 (m, 2Н), 2.83 (m, 2Н), 2.45 (s, 3Н), 1.83 (m, 3Н), 1.08 (m, 6Н), 0.93 (m, 2Н), 0.64 (m, 2Н).

Пример 21: 5-хлор-2-((3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)амино)-6-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-4-ол

19 мг (0,04 ммоль) 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-4-метокси-6-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амина, полученного согласно Примеру 20, растворяли в 1 мл этанола, и затем в этот раствор добавляли 0,2 мл соляной кислоты, после чего его перемешивали при температуре 80°С в течение 16 часов. Сразу после завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры и затем добавляли в нее этилацетат и насыщенный гидрокарбонат натрия. Органический слой отделяли, и его затем сушили с использованием безводного сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (хлороформ: метанол = 5:1 (об./об.)), и полученный раствор концентрировали при пониженном давлении с получением 1,4 мг целевого соединения с выходом 7%.

МС (ИЭР+, m/z): 517 [М+Н]⁺

¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.56 (s, 1H), 8.17 (m, 1H), 8.06 (d, 1H), 7.41 (s, 1Н), 7.32 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 6.82 (d, 1H), 6.70 (s, 1H), 2.72 (m, 2H), 2.50 (m, 2H), 2.00 (s, 3H), 1.83 (m, 3H), 1.23 (m, 6H), 0.93 (m, 2H), 0.64 (m, 2H).

Пример 22: 3-(5-хлор-2-((3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)-6-метил-1H-индол-7-ол

25 мг целевого соединения было получено с выходом 41% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 50 мг (0,17 ммоль) 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-метил-1H-индол-7-ола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

МС (ИЭР+, m/z): 517 [М+Н]⁺

¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.50 (bs, 1Н), 9.45 (s, 1H), 8.95 (bs, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 6.85 (d, 1H), 6.62 (s, 1H), 3.34 (s, 2H), 2.73 (m, 2H), 2.63 (m, 2H), 2.28 (s, 3H), 1.83 (m, 1H), 1.44 (t, 2H), 0.92 (m, 9H), 0.61 (m, 2H).

Пример 23: 2-((5-хлор-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)амино)-4-циклопропил-6-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенол

5 мг целевого соединения было получено с выходом 5% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 56 мг (0,20 ммоль) 2-амино-4-циклопропил-6-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенола использовали вместо 3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)-анилина, и 85 мг (0,31 ммоль) 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-метил-1H-индола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

МС (ИЭР+, m/z): 517 [М+Н]⁺

¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.72 (s, 1H), 8.38 (m, 2Н), 8.15 (d, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.82 (d, 1H), 6.50 (s, 1H), 3.60 (s, 2Н), 2.70 (d, 4Н), 2.46 (s, 3Н), 1.74 (m, 1H), 1.63 (t, 2Н), 0.84 (d, 6Н), 0.79 (m, 2Н), 0.50 (m, 2Н).

Пример 24: 4-((5-хлор-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)го1римидин-2-ил)амино)-2-циклопропил-6-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенол

200 мг целевого соединения было получено с выходом 53% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 200 мг (0,73 ммоль) 4-амино-2-циклопропил-6-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенола использовали вместо 3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)-анилина, и 303 мг (1,09 ммоль) 3-(2-хлор-5-метилпиримидин-4-ил)-6-метил-1H-индола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

МС (ИЭР+, m/z): 517 [М+Н]⁺

¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.72 (s, 1H), 11.05 (s, 1Н), 9.09 (s, 1H), 8.40-8.32 (m, 4H), 7.26 (s, 2H), 6.84 (m, 2H), 3.59 (m, 2H), 2.77 (d, 4H), 2.41 (s, 3H), 2.11 (m, 1H), 1.60 (t, 2H), 0.92 (d, 6H), 0.87 (m, 2H), 0.58 (m, 2H).

Пример 25: (R)-5-хлор-N-(3-циклопропил-5-((3,3,5-триметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин

Технологическая операция 1. (3-Амино-5-циклопропилфенил)метанол

5,8 г целевого соединения было получено с выходом 95% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 5 Примера 1, за исключением того, что 7,2 г (37,27 ммоль) (3-циклопропил-5-нитрофенил)метанола использовали вместо (3R,5S)-1-(3-циклопропил-5-нитробензил)-3,5-диметилпиперазина.

¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 6.31 (s, 1H), 6.18 (s, 1H), 6.13 (s, 1H), 4.94 (m, 3Н), 4.28 (d, 2Н), 1.73 (m, 1H), 0.87 (m, 2Н), 0.56 (m, 2Н).

Технологическая операция 2. (3-((5-Хлор-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)амино)-5-циклопропилфенил)метанол

3,5 г целевого соединения было получено с выходом 49% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 6 Примера 1, за исключением того, что 2,9 г (17,77 ммоль) (3-амино-5-циклопропилфенил)метанола использовали вместо 3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)анилина, и 7,4 г (26,65 ммоль) 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-метил-1H-индола использовали вместо 3-(2,5-дихлорпиримидин-4-ил)-6-фтор-1H-индола.

¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.78 (s, 1H), 9.48 (s, 1H), 8.50 (m, 3Н), 7.53 (s, 1Н), 7.38 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 6.67 (s, 1H), 5.10 (t, 1H), 4.42 (d, 1H), 2.43 (s, 3H), 1.84 (m, 1H), 0.93 (m, 2H), 0.65 (m, 2H).

Технологическая операция 3. 3-((5-Хлор-4-(б-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)амино)-5-циклопропилбензальдегид

5,67 г (14,00 ммоль) (3-((5-хлор-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)амино)-5-циклопропилфенил)метанола, полученного в результате Технологической операции 2 Примера 25, растворяли в 200 мл метиленхлорида, и затем в этот раствор добавляли 14,3 г (140,00 ммоль) диоксид марганца. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. После завершения реакции полученную смесь фильтровали через фильтр, заполненный целитом, и промывали метиленхлоридом. Полученный органический слой концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали методом ЖХСД (этилацетат : гексан = 1:4 (об./об.)), и полученный раствор концентрировали при пониженном давлении с получением 2,1 г целевого соединения с выходом 37%.

¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.81 (s, 1H), 9.90 (s, 1H), 9.78 (s, 1H), 8.50 (m, 3Н), 8.15 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.25 (d, 2H), 6.94 (d, 2H), 2.42 (s, 3Н), 1.97 (m, 1H), 1.02 (m, 2H), 0.75 (m, 2H).

Технологическая операция 4. Получение (R)-5-хлор-N-(3-циклопропил-5-((3,3.5-триметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амина

140 мг (0,35 ммоль) 3-((5-хлор-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)амино)-5-циклопропилбензальдегида, полученного в результате Технологической операции 3 Примера 25, и 140 мг (0,70 ммоль) (R)-2,2,6-триметилпиперазина гидрохлорида растворяли в 2 мл 1,2-дихлорэтана, и в этот раствор добавляли 200 мг (0,75 ммоль) триацетоксиборгидрида натрия и 0,3 мл (1,74 ммоль) диизопропиламина. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После завершения реакции добавляли по каплям метиленхлорид и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Органический слой экстрагировали, и органический слой промывали соленой водой, сушили с использованием безводного сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали методом ЖХСД (метиленхлорид : метанол = 25:1 (об./об.)), и полученный раствор концентрировали при пониженном давлении с получением 140 мг целевого соединения с выходом 78%.

МС (ИЭР+, m/z): 515 [М+Н]⁺

¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.77 (s, 1H), 9.47 (s, 1H), 8.48 (m, 3Н), 7.57 (s, 1Н), 7.35 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.94 (d, 1H), 6.64 (s, 1H), 3.38 (q, 2H), 2.95 (m, 1H), 2.70 (d, 1H), 2.43 (s, 3H), 1.84 (m, 1H), 1.59 (m, 2H), 1.23 (d, 1H), 1.12 (s, 3H), 0.94 (m, 2H), 0.63 (m, 2H).

Пример 26: ((2R,6R)-4-(3-((5-хлор-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)амино)-5-циклопропилбензил)-6-метилпиперазин-2-ил)метанол

22 мг целевого соединения было получено с выходом 24% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 4 Примера 25, за исключением того, что 55 мг (0,27 ммоль) ((2i?, 67?)-6-метилпиперазин-2-ил)метанола гидрохлорида использовали вместо (R)-2,2,6-триметилпиперазина гидрохлорида.

МС (ИЭР+, m/z): 517 [М+Н]⁺

¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.80 (s, 1H), 9.49 (s, 1H), 8.48 (m, 3Н), 7.50 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 6.65 (s, 1H), 4.99 (m, 1H), 4.10 (m, 1H), 3.42 (s, 2Н), 3.16 (d, 2Н), 2.97 (m, 2Н), 2.80 (m, 2Н), 2.43 (s, 3Н), 1.85 (m, 3Н), 1.23 (m, 2Н), 1.04 (d, 3Н), 0.94 (m, 2Н), 0.65 (m, 2Н).

Пример 27: (R)-5-хлор-N-(3-цшслопропил-5-((5-метил-4,7-диазаспиро[2.5]октан-7-ил)метил)фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин

150 мг целевого соединения было получено с выходом 60% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 4 Примера 25, за исключением того, что 188 мг (1,49 ммоль) (7?)-5-метил-4,7-диазаспиро[2.5]октана гидрохлорида использовали вместо (R)-2,2,6-триметилпиперазина гидрохлорида.

¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.77 (s, 1H), 9.46 (s, 1H), 8.47 (m, 3Н), 7.47 (s, 1Н), 7.40 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 6.64 (s, 1H), 2.71 (d, 2H), 2.62 (d, 2H), 2.42 (s, 3H), 1.87 (m, 1H), 1.50 (q, 2H), 1.23 (q, 2H), 0.92 (m, 8H), 0.62 (m, 2H).

Пример 28: 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-(((3R,5R)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин

17 мг целевого соединения было получено с выходом 9% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 4 Примера 25, за исключением того, что 149 мг (0,80 ммоль) (2R,6R)-2,6-диметилпиперазина гидрохлорида использовали вместо (R)-2,2,6-триметилпиперазина гидрохлорида.

МС (ИЭР+, m/z): 501 [М+Н]⁺

¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.80 (s, 1H), 9.15 (s, 1H), 8.46 (m, 3Н), 7.66 (s, 1Н), 7.35 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 6.63 (s, 1H), 3.51 (d, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.25 (m, 2H), 1.85 (m, 1H), 1.23 (s, 2H), 0.91 (m, 4H), 0.62 (m, 2H).

Пример 29: 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-(((3S,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин

25 мг целевого соединения было получено с выходом 15% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 4 Примера 25, за исключением того, что 75 мг (0,66 ммоль) (2S,6S)-2,6-диметилпиперазина гидрохлорида использовали вместо (R)-2,2,6-триметилпиперазина гидрохлорида.

МС (ИЭР+, m/z): 501 [М+Н]⁺

¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.76 (s, 1H), 9.46 (s, 1H), 8.46 (m, 3Н), 7.55 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.27 (s, 1Н), 6.94 (d, 1H), 6.63 (s, 1H), 3.59 (t, 2Н), 3.05 (m, 2Н), 2.32 (d, 2Н), 1.89 (m, 2Н), 1.75 (m, 1H), 1.01 (d, 6Н), 0.91 (m, 2Н), 0.62 (m, 2Н).

Пример 30: 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,4,5-триметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин

70 мг целевого соединения было получено с выходом 79% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 4 Примера 25, за исключением того, что 168 мг (0,70 ммоль) (2R,6S)-1,2,6-триметилпиперазина трифторацетата использовали вместо (R)-2,2,6-триметилпиперазина гидрохлорида.

МС (ИЭР+, m/z): 515 [М+Н]⁺

¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.76 (s, 1H), 9.46 (s, 1H), 8.46 (m, 3Н), 7.48 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 6.64 (s, 1H), 4.34 (m, 1H), 3.47 (m, 1H), 2.63 (m, 2Н), 2.43 (s, 3Н), 2.15 (m, 2Н), 1.82 (m, 2Н), 1.08 (m, 8Н), 0.62 (m, 2Н).

Пример 31: (2R,6S)-4-(3-((5-хлор-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)амино)-5-циклопропилбензил)-2,6-диметилпиперазин-1-ол

60 мг целевого соединения было получено с выходом 94% по существу таким же образом, как и в Технологической операции 4 Примера 25, за исключением того, что 62 мг (0,37 ммоль) (2R,6S)-2,6-диметилпиперазин-1-ола гидрохлорида использовали вместо (R)-2,2,6-триметилпиперазина гидрохлорида.

МС (ИЭР+, m/z): 517 [М+Н]⁺

¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.77 (s, 1H), 9.48 (s, 1H), 8.47 (m, 3Н), 7.67 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 6.63 (s, 1H), 3.31 (s, 2Н), 2.69 (d, 2Н), 2.43 (s, 3Н), 1.81 (m, 3Н), 1.05 (t, 2Н), 0.95 (m, 8Н), 0.62 (m, 2Н).

Пример 32: (2R,6S)-4-(3-циклопропил-5-((4-(6-метил-1H-индол-3-ил)-пиримидин-2-ил)амино)бензил)-2,6-диметилпиперазин-1-ол

1,5 г целевого соединения было получено с выходом 51% по существу таким же образом, как в Примере 25, за исключением того, что в Технологической операции 4 Примера 25 2,5 г (12,16 ммоль) (2R,6S)-2,6-диметилпиперазин-1-ола гидрохлорида использовали вместо (R)-2,2,6-триметилпиперазина гидрохлорида, и 2,24 г (6,08 ммоль) 3-циклопропил-5-((4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)амино)бензальдегида использовали вместо 3-((5-хлор-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)амино)-5-циклопропилбенз альдегида.

МС (ИЭР⁺, m/z): 483 [М+Н]⁺

¹Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ 11.63 (bs, 1Н), 9.23 (s, 1H), 8.45 (d, 1H), 8.29 (m, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.51 (d, 2H), 7.22 (m, 2H), 6.96 (d, 1H), 6.58 (s, 1H), 2.73 (m, 2H), 2.55 (m, 4H), 1.88 (m, 1H), 1.82 (m, 2H), 0.96 (m, 8H), 0.64 (m, 2H).

Экспериментальные Примеры

Оценивали киназа-ингибирующую активность и рост клеток-ингибирующую активность приведенных выше соединений, полученных в Примерах. Результаты следующие.

Экспериментальный Пример 1: Оценка киназа-ингибирующей активности

Измеряли ингибирующую активность некоторых соединений, описанных выше, против FLT3-ITD, FLT3 дикого типа (WT), VEGFR2 (KDR) и SYK киназы.

Ингибирующую активность соединений против мутантных белков, таких как FLT3 WT и ITD, оценивали на основе технологии LanthaScreen, разработанной Thermo Fisher Scientific Inc. Этот анализ основан на связывании Alexa Fluor® 647-меченого, АТР-конкурентного ингибитора киназы (киназная метка-236) с киназой, и измеряли сигналы резонансного переноса энергии флуоресценции (FRET) в присутствии европий-конъюгированного антитела. Этот эксперимент проводили в 384-луночном планшете в условиях, включающих 50 мМ HEPES рН 7,5, 0,01% BRIJ-35, 10 мМ MgCl₂, 1 мМ EGTA и 1% DMSO. После измерения фонового сигнала в отсутствии белков, таких как FLT3 или FLT3-ITD, и измерения сигнала неингибирования путем добавления только растворителя (1% DMSO) для оценки соединения использовали ряд концентраций (например, от 50 нМ до 0,05 нМ, разведение 1:10) для вычисления киназа-ингибирующей активности оцениваемого соединения в виде IC₅₀. Результаты представлены в Таблице 2 ниже.

Как показано в Таблице 2, соединение по настоящему изобретению продемонстрировало превосходную киназа-ингибирующую активность против FLT3 ITD и WT.

SYK-ингибирующую активность соединений оценивали на основе технологии z-LYTE, разработанной Thermo Fisher Scientific Inc. Согласно этому методу оценки измеряли сигналы флуоресценции FRET-пептидов, причем измеряли флуоресценцию FRET-пептида, который фосфорилируется в результате связывания соединения с мишенью, и измеряли сигналы флуоресценции нефосфорилированного пептида для идентификации активности в отношении киназы. Этот эксперимент проводили в 384-луночном планшете в условиях, включающих 50 мМ HEPES рН 7,5, 0,01% BRIJ-35, 10 мМ MgCl₂, 1 мМ EGTA и 1% DMSO. Фоновый сигнал измеряли в отсутствии белков; неингибирующий сигнал измеряли, когда был добавлен только растворитель (1% DMSO); и оцениваемое соединение использовали в концентрации 100 нМ для вычисления SYK-ингибирующей активности оцениваемого соединения процентах (%). Набор для анализов киназ z-lyte (Life Technologies, PV 3190) использовали для VEGFR, и тесты были выполнены Life Technologies Inc. В Таблице 3 представлена ингибирующая активность соединения против соответствующей киназы в процентах (%), когда концентрация составляла 100 нМ.

Как показано в Таблице 3, соединения по настоящему изобретению обладают превосходной ингибирующей активностью в отношении VEGFR2 и SYK киназы.

Экспериментальный Пример 2: Оценка рост клеток-ингибирующей активности

Линию клеток острого миелогенного лейкоза (ALL) человека MOLM-13 (DSMZ no. АСС 554) инкубировали в среде RPMI1640, дополненной 20% активированной нагреванием FBS (фетальная бычья сыворотка) при температуре 37°С. Инкубированную линию клеток подготавливали в количестве 2,0 × 10⁴ клеток/100 мкл и затем высевали в 96-луночный планшет. Среду RPMI1640 последовательно разбавляли тестируемыми соединениями в концентрации в диапазоне от 1 мкМ до 0,01 нМ при соотношении 1:10. После этого осуществляли инкубирование в течение трех суток. Что касается линии клеток острого миелогенного лейкоза человека MV-4-11 (АТСС® CRL-9591®), клетки инкубировали при температуре 37°С в среде IMDM (среда Искова (Iscove's), модифицированная по Дульбекко), дополненной 10% FBS. Инкубированную линию клеток подготавливали в количестве 2,0 × 10⁴ клеток/100 мкл и затем высевали в 96-луночный планшет. Среду IMDM обрабатывали последовательным разведением трех тестируемых соединений в концентрации в диапазоне от 1 мкМ до 0,01 нМ при соотношении 1/10. После этого осуществляли инкубирование в течение трех суток. MTS-тест выполняли для измерения жизнеспособности клеток, и значение (GI₅₀) ингибирования роста линии клеток вычисляли, используя программное обеспечение GraphPad Prism. Результаты для каждой линии клеток представлены в Таблице 4 ниже.

Как показано в Таблице 4, обнаружено, что соединение по настоящему изобретению обладает превосходной рост клеток-ингибирующей активностью на линии клеток острого миелогенного лейкоза (ALL).

Экспериментальный Пример 3: Оценка фармакокинетического профиля

После приготовления тестируемых веществ с использованием выбранных растворителей их вводили перорально (п.о.) и внутривенно (в.в.), каждого однократно, некоторое количество крови брали через предопределенное время, плазму выделяли из крови, и анализ концентраций осуществляли методом ЖХ-МС/МС (жидкостная хроматография и тандемная масс-спектрометрия). AUC (концентрацию лекарственного средства и площадь под кривой) вычисляли по формуле линейно-логарифмического суммирования трапеций с использованием некомпартментного анализа в программе WinNonlin по кривым зависимости концентрации в плазме от времени. Биодоступность (ВА) вычисляли, применяя вычисленное значение AUC, по следующей формуле: ВА (%) = (AUC n.o./AUC в.в.) × (доза в.в./доза п.о.) × 100.

Как показано в Таблице 5 и Таблице 6, соединение согласно воплощению настоящего изобретения продемонстрировало лучшие характеристики всасывания, подходящие для перорального введения, такие как биодоступность и площадь под кривой, чем контрольные соединения, имеющие химические структуры, подобные структуре этого соединения.

Экспериментальный Пример 4: Метод измерения микросомальной стабильности

Для подтверждения способности тестируемых веществ вступать в реакцию с внутрипеченочными ферментами CYP450 5 мкМ тестируемого вещества и 1 мг/мл микросом печени человека инкубировали в течение 1 часа при температуре 37°С в присутствии системы регенерации NADPH. Через 1 час для прекращения реакции добавляли ацетонитрил, и надосадочную жидкость после центрифугирования анализировали методом ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография). % остаточного количества вычисляли по нижеследующему уравнению, используя значение прореагировавшего образца за 1 час относительно значения в 0 минут в качестве максимального значения, полученного в результате анализа. (Максимальное значение образца, прореагировавшего за 1 час/максимальное значение образца в 0 минут) × 100=% остаточного количества.

Как показано в Таблице 7, соединение согласно воплощению настоящего изобретения имеет улучшенную микросомальную стабильность по сравнению с контрольным соединением, имеющим сходную химическую структуру.

Из иллюстративных данных можно видеть, что соединения согласно воплощению настоящего изобретения, как обнаружено, имеют лучшие фармакокинетические свойства, чем контрольные соединения, имеющие сходные заместители и сравнимые уровни стерического затруднения.

Соединение согласно одному аспекту настоящего изобретения обладает превосходной FLTS-ингибирующей активностью и поэтому подходит для эффективного использования для предупреждения или лечения клеточных пролиферативных заболеваний, вызванных аномальной активностью FLT3, таких как рак, например лейкоз.

Хотя данное изобретение конкретно показано и описано со ссылкой на примеры его воплощения, специалистам в данной области будет понятно, что различные изменения формы и частностей могут быть сделаны, не отклоняясь от замысла и объема изобретения, который определен прилагаемой формулой изобретения. Пример воплощения следует рассматривать только в дескриптивном смысле, а не в целях ограничения. Следовательно, объем изобретения определен не подробным описанием, а прилагаемой формулой изобретения, и все отличия в рамках этого объема будут истолкованы как охваченные настоящим изобретением.

Claims

1. Соединение формулы 14 или его стереоизомер либо таутомер ,

где в формуле 14

Е^а представляет собой водород, гидрокси или С₁-С₄алкоксигруппу;

E^b представляет собой водород, галоген, С₁-С₄алкильную группу или С₁-С₄фторалкильную группу;

каждый из Е^с и E^d независимо представляет собой водород или гидроксигруппу;

X' представляет собой водород или гидроксигруппу;

k равно целому числу от 0 до 4;

каждый Q независимо представляет собой гидрокси, галоген, С₁-С₄алкильную группу, гидрокси-С₁-С₄алкильную группу или С₁-С₄алкоксигруппу; и

Z' представляет собой одновалентную функциональную группу, представленную формулой 15:

,

где в формуле 15 n равно целому числу от 1 до 5;

каждый А независимо представляет собой функциональную группу, выбранную из гидрокси, С₁-С₄алкильной группы и гидрокси-С₁-С₄алкильной группы, где, когда n равно двум или более, тогда два А могут быть спиро-связаны с образованием 4,7-диазаспиро[2.5]октана; и

L представляет собой водород, С₁-С₄алкил, гидроксигруппу или гидрокси-C₁-С₄алкильную группу.

2. Соединение по п. 1, где E^b представляет собой галоген, n равно 2, и А представляет собой метил.

3. Соединение по п. 1, где Z' представляет собой 3,5-диметилпиперазин-1-ил.

4. Соединение по п. 1, где E^b представляет собой хлор или фтор.

5. Соединение по п. 1, где соединение формулы 1 выбрано из соединений, указанных ниже:

1) 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)-фенил)-4-(6-фтор-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин;

2) 5-хлор-4-(6-хлор-1H-индол-3-ил)-N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)пиримидин-2-амин;

3) 2-((2R,6S)-4-(3-((5-хлор-4-(6-фтор-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)амино)-5-циклопропилбензил)-2,6-диметилпиперазин-1-ил)этан-1-ол;

4) 2-((2R,6S)-4-(3-((5-хлор-4-(1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)амино)-5-циклопропилбензил)-2,6-диметилпиперазин-1-ил)этан-1-ол;

5) 2-((2R,6S)-4-(3-((5-хлор-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)амино)-5-циклопропилбензил)-2,6-диметилпиперазин-1-ил)этан-1-ол;

6) (R)-5-хлор-N-(3-циклопропил-5-((3-метилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-4-(1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин;

7) (R)-5-хлор-N-(3-циклопропил-5-((3-метилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин;

8) 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)-фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин;

9) 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-(((3S,5R)-3-этил-5-метилпиперазин-1-ил)метил)-фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин;

10) 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-((3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин;

11) N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин;

12) N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-5-фтор-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин;

13) N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-4-(1H-индол-3-ил)-5-метилпиримидин-2-амин;

14) N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-5-метил-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин;

15) N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)-5-(трифторметил)пиримидин-2-амин;

16) (3-(5-хлор-2-((3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)-метил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)-1H-индол-6-ил)метанол;

17) 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)-фенил)-4-(5-метокси-6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин;

18) 3-(5-хлор-2-((3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)-фенил)амино)пиримидин-4-ил)-6-метил-1H-индол-5-ол;

19) 3-(5-хлор-2-((3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)-фенил)амино)пиримидин-4-ил)-6-метилиндолин-2-он;

20) 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)-фенил)-4-метокси-6-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин;

21) 5-хлор-2-((3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)-фенил)амино)-6-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-4-ол;

22) 3-(5-хлор-2-((3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)-фенил)амино)пиримидин-4-ил)-6-метил-1H-индол-7-ол;

23) 2-((5-хлор-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)амино)-4-циклопропил-6-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенол;

24) 4-((5-хлор-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)амино)-2-циклопропил-6-(((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)фенол;

25) (R)-5-хлор-N-(3-циклопропил-5-((3,3,5-триметилпиперазин-1-ил)метил)-фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин;

26) ((2R,6R)-4-(3-((5-хлор-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)амино)-5-циклопропилбензил)-6-метилпиперазин-2-ил)метанол;

27) (R)-5-хлор-N-(3-циклопропил-5-((5-метил-4,7-диазаспиро[2.5]октан-7-ил)-метил)фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин;

28) 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-(((3R,5R)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)-фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин;

29) 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-(((3S,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)метил)-фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин;

30) 5-хлор-N-(3-циклопропил-5-(((3R,5S)-3,4,5-триметилпиперазин-1-ил)метил)-фенил)-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-амин;

31) (2R,6S)-4-(3-((5-хлор-4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)амино)-5-циклопропилбензил)-2,6-диметилпиперазин-1-ол; и

32) (2R,6S)-4-(3-циклопропил-5-((4-(6-метил-1H-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)-амино)бензил)-2,6-диметилпиперазин-1-ол.

6. Соединение

.

7. Соединение

.

8. Соединение

.

9. Соединение

.

10. Соединение

.

11. Способ лечения FLT3 (FMS-подобная тирозинкиназа 3)-опосредованного заболевания у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение указанному субъекту соединения по любому из пп. 1-10, где указанное FLT3-опосредованное заболевание представляет собой рак.

12. Способ по п. 11, где рак характеризуется аномальной сверхэкспрессией и/или мутациями FLT3.

13. Способ по п. 11, где рак представляет собой лейкоз.

14. Способ по п. 13, где лейкоз представляет собой острый миелогенный лейкоз, острый лимфоцитарный лейкоз или хронический миелогенный лейкоз.

15. Способ ингибирования активности киназы FLT3 у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение указанному субъекту соединения по любому из пп. 1-10.

16. Способ по п. 11, где рак ассоциирован с мутантным FLT3.

17. Способ по п. 16, где мутантный FLT3 имеет мутацию, представляющую собой внутреннюю тандемную дупликацию (ITD).

18. Способ по п. 16, где мутантный FLT3 содержит по меньшей мере одну точечную мутацию в тирозинкиназном домене (TKD) FLT3.

19. Способ по п. 16, где мутация FLT3 представляет собой D835V или D835Y.