RU2670054C1 - BIFIDOBACTERIUM BIFIDUM ICIS-310 BACTERIUM STRAIN - PRODUCER OF INHIBITOR OF PRO-INFLAMMATORY CYTOKINE INF-γ - Google Patents
BIFIDOBACTERIUM BIFIDUM ICIS-310 BACTERIUM STRAIN - PRODUCER OF INHIBITOR OF PRO-INFLAMMATORY CYTOKINE INF-γ Download PDFInfo
- Publication number
- RU2670054C1 RU2670054C1 RU2018115331A RU2018115331A RU2670054C1 RU 2670054 C1 RU2670054 C1 RU 2670054C1 RU 2018115331 A RU2018115331 A RU 2018115331A RU 2018115331 A RU2018115331 A RU 2018115331A RU 2670054 C1 RU2670054 C1 RU 2670054C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- icis
- bifidobacterium bifidum
- inhibitor
- pro
- inf
- Prior art date
Links
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 title claims abstract description 31
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 title claims abstract description 31
- 241000186016 Bifidobacterium bifidum Species 0.000 title claims abstract description 26
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title claims abstract description 19
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 title claims abstract description 17
- 229940002008 bifidobacterium bifidum Drugs 0.000 title claims description 20
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 title description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 7
- 244000005706 microflora Species 0.000 claims abstract description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 17
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 6
- 230000003092 anti-cytokine Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 238000009631 Broth culture Methods 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- -1 mannotol Chemical compound 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000007259 schaedler broth Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010055851 Acetylglucosaminidase Proteins 0.000 description 1
- PLXMOAALOJOTIY-FPTXNFDTSA-N Aesculin Natural products OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1Oc2cc3C=CC(=O)Oc3cc2O PLXMOAALOJOTIY-FPTXNFDTSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- WNBCMONIPIJTSB-BGNCJLHMSA-N Cichoriin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1)c1c(O)cc2c(OC(=O)C=C2)c1 WNBCMONIPIJTSB-BGNCJLHMSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- QWIZNVHXZXRPDR-UHFFFAOYSA-N D-melezitose Natural products O1C(CO)C(O)C(O)C(O)C1OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O QWIZNVHXZXRPDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N L-cystine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CSSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- 239000004158 L-cystine Substances 0.000 description 1
- 235000019393 L-cystine Nutrition 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100030122 Protein O-GlcNAcase Human genes 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N Salicin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1)c1c(CO)cccc1 NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N alpha-salicin Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 102000006995 beta-Glucosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010047754 beta-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 210000004921 distal colon Anatomy 0.000 description 1
- XHCADAYNFIFUHF-TVKJYDDYSA-N esculin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC(C(=C1)O)=CC2=C1OC(=O)C=C2 XHCADAYNFIFUHF-TVKJYDDYSA-N 0.000 description 1
- 229940093496 esculin Drugs 0.000 description 1
- AWRMZKLXZLNBBK-UHFFFAOYSA-N esculin Natural products OC1OC(COc2cc3C=CC(=O)Oc3cc2O)C(O)C(O)C1O AWRMZKLXZLNBBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- BTIJJDXEELBZFS-QDUVMHSLSA-K hemin Chemical compound CC1=C(CCC(O)=O)C(C=C2C(CCC(O)=O)=C(C)\C(N2[Fe](Cl)N23)=C\4)=N\C1=C/C2=C(C)C(C=C)=C3\C=C/1C(C)=C(C=C)C/4=N\1 BTIJJDXEELBZFS-QDUVMHSLSA-K 0.000 description 1
- 229940025294 hemin Drugs 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- QWIZNVHXZXRPDR-WSCXOGSTSA-N melezitose Chemical compound O([C@@]1(O[C@@H]([C@H]([C@@H]1O[C@@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O)CO)CO)[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O QWIZNVHXZXRPDR-WSCXOGSTSA-N 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N salicin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N 0.000 description 1
- 229940120668 salicin Drugs 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 230000031068 symbiosis, encompassing mutualism through parasitism Effects 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/745—Bifidobacteria
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к микробиологии. Штамм бактерий Bifidobacterium bifidum ICIS-310 может быть использован для получения ингибитора провоспалительного цитокина INF-γ.The invention relates to microbiology. The bacterial strain Bifidobacterium bifidum ICIS-310 can be used to obtain a pro-inflammatory cytokine inhibitor INF-γ.
Аналогов изобретения в патентной и научно-технической литературе не обнаружено.Analogues of the invention in the patent and scientific literature are not found.
Технический результат, на достижение которого направлено изобретение, заключается в получении средства для продуцирования ингибитора провоспалительного цитокина INF-γ.The technical result to which the invention is directed is to provide a means for producing a pro-inflammatory cytokine inhibitor INF-γ.
Указанный технический результат достигнут получением нового штамма бактерий Bifidobacterium bifidum ICIS-310.The specified technical result was achieved by obtaining a new strain of bacteria Bifidobacterium bifidum ICIS-310.
Штамм бактерий Bifidobacterium bifidum ICIS-310 выделен из испражнений пациента с эубиозом кишечника при обследовании микробиоценоза дистального отдела толстого кишечника в 2013 году в лаборатории биомониторинга и молекулярно-генетических исследований ФГБУН Института клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения Российской академии наук г. Оренбурга.The bacterial strain Bifidobacterium bifidum ICIS-310 was isolated from the bowel movements of a patient with intestinal eubiosis by examining the microbiocenosis of the distal colon in 2013 at the Biomonitoring and Molecular Genetic Research Laboratory of the Institute of Cellular and Intracellular Symbiosis of the Ural Branch of the Russian Academy of Sciences of Orenburg.
Полученный штамм Bifidobacterium bifidum ICIS-310 депонирован в Государственной коллекции микроорганизмов нормальной микрофлоры (ГКНМ) ФБУН «МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора» и имеет регистрационный номер 1258.The obtained strain of Bifidobacterium bifidum ICIS-310 was deposited in the State collection of microorganisms of normal microflora (GKNM) FBUN "MIIII them. G.N. Gabrichevsky Rospotrebnadzor "and has registration number 1258.
Штамм Bifidobacterium bifidum ICIS-310 характеризуется следующими культурально-морфологическими и физиолого-биохимическими признаками.The strain Bifidobacterium bifidum ICIS-310 is characterized by the following cultural-morphological and physiological-biochemical characteristics.
Культурально-морфологические признаки.Cultural and morphological characters.
Клетки представляют собой грамположительные, неподвижные палочки, длиной от 0,4 до 5,0 мкм с бифуркацией или утолщением на одном или двух концах, располагающиеся в виде отдельных клеток или скоплений.Cells are gram-positive, fixed rods, from 0.4 to 5.0 microns in length with bifurcation or thickening at one or two ends, located in the form of separate cells or clusters.
В анаэробных условиях на поверхности Schaedler-агара и МРС-5 (38±1°С, 48 часов) образуют круглые мелкие белые колонии.Under anaerobic conditions, round small white colonies form on the surface of Schaedler agar and MPC-5 (38 ± 1 ° C, 48 hours).
В полужидких средах (печеночная среда Блаурокка, казеиново-дрожжевой (КД-5), гидролизатно-молочный (ГМ) при 38±1°С, 48 часов бактерии вырастают в виде рыхлой массы, оставляя прозрачной верхнюю часть среды (зона аэробиоза). Отдельные колонии бифидобактерий при росте на печеночной среде Блаурокка имеют форму мелких «гвоздей» белого цвета, образующих при встряхивании крошковатую массу.In semi-liquid media (hepatic Blaurock, casein-yeast (KD-5), hydrolyzate-milk (GM) at 38 ± 1 ° С, for 48 hours the bacteria grow in the form of a loose mass, leaving the upper part of the medium (aerobiosis zone) transparent. colonies of bifidobacteria with growth on the liver medium of Blaurock are in the form of small "nails" of white color, which form a tiny mass when shaken.
Физиолого-биохимические признаки.Physiological and biochemical characteristics.
Строгий анаэроб.Strict anaerobic.
Температурный диапазон роста 38±1°С, фаза максимального накопления микробных клеток заканчивается к 24-48 ч. Оптимум рН 7,2-7,6.The temperature range of growth is 38 ± 1 ° C, the phase of maximum accumulation of microbial cells ends at 24-48 hours. The optimum pH is 7.2-7.6.
Не ферментируют индол, мальтозу, уреазу, нитраты, N-ацетил-β-D-глюкозаминидазу, β-глюкозидазу, раффинозу и ксилозу. Ферментируют глюкозу, фруктозу, галактозу, лактозу, мелезитозу, сукрозу, салицин, трегалозу, маннотол, рамнозу, эскулин, маннозу, целлобиозуарабинозу, сорбитол.Indole, maltose, urease, nitrates, N-acetyl-β-D-glucosaminidase, β-glucosidase, raffinose and xylose are not fermented. Glucose, fructose, galactose, lactose, melezitose, sucrose, salicin, trehalose, mannotol, rhamnose, esculin, mannose, cellobiozuarabinose, sorbitol are fermented.
Условия хранения лиофильно высушенной культуры: в герметичной упаковке при температуре 4±2°С в защищенном от прямых солнечных лучей месте при относительной влажности воздуха не более 70%. При соблюдении всех норм, срок хранения 1 год.Storage conditions for freeze-dried culture: in sealed packaging at a temperature of 4 ± 2 ° C in a place protected from direct sunlight with a relative humidity of not more than 70%. Subject to all norms, the shelf life is 1 year.
Условия и состав сред для размножения:Conditions and composition of propagation media:
- плотные среды: МРС-5, Schaedler-агар (48 часов, 38±1°С, анаэробные условия);- Dense media: MPC-5, Schaedler-agar (48 hours, 38 ± 1 ° C, anaerobic conditions);
- полужидкие среды: печеночная среда Блаурокка, казеиново-дрожжевая (КД-5), гидролизатно-молочная (ГМ) (48 часов, 38±1°С, анаэробные условия);- semi-fluid mediums: hepatic medium Blaurock, casein-yeast (KD-5), hydrolyzate-milk (GM) (48 hours, 38 ± 1 ° С, anaerobic conditions);
- Schaedler-бульон (24-48 часов, 38±1°С, анаэробные условия).- Schaedler broth (24-48 hours, 38 ± 1 ° C, anaerobic conditions).
При проведении полногеномного секвенирования, включая 16rRNA-типирование штамм Bifidobacterium bifidum ICIS-310 идентифицирован как штамм вида Bifidobacterium bifidum.During genome-wide sequencing, including 16rRNA typing, the strain Bifidobacterium bifidum ICIS-310 was identified as a strain of the species Bifidobacterium bifidum.
Уровень активности продуцируемого Bifidobacterium bifidum ICIS-310 ингибитора провоспалительного цитокина INF-γ определяли согласно известному способу определения антицитокиновой активности микроорганизмов (Бухарин О.В. и др. Антицитокиновая активность микроорганизмов // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии, 2011 - №4, С. 56-61).The activity level of the pro-inflammatory cytokine inhibitor INF-γ produced by Bifidobacterium bifidum ICIS-310 was determined according to the known method for determining the anticytokine activity of microorganisms (Bukharin O.V. et al. Anticytokine activity of microorganisms // Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology, 2011 - No. 4, C. 56-61).
Уровень активности ингибитора провоспалительного цитокина INF-γ, продуцируемого штаммом бактерий Bifidobacterium bifidum ICIS-310 выражают в процентах (%) инактивации цитокинов в опыте по сравнению с контролем.The activity level of the pro-inflammatory cytokine inhibitor INF-γ produced by the bacterial strain Bifidobacterium bifidum ICIS-310 is expressed as a percentage (%) of cytokine inactivation in the experiment compared to the control.
Примеры осуществления изобретения.Examples of carrying out the invention.
Пример 1Example 1
Бульонную культуру Bifidobacterium bifidum ICIS-310 получают выращиванием данного штамма в пробирках в жидкой питательной среде следующего состава: гидролизат казеина - 5,67 г.; протеозопептон - 5,00 г.; папаиновый перевар соевой муки - 1,00 г.; дрожжевой экстракт - 5,00 г.; глюкоза - 5,83 г.; NaCl - 1,67 г.; калия гидрофосфат - 0,83 г.; трис - 3,00 г.; L-цистин - 0,40 г.; гемин - 0,01 г. рН = 7,6±0,2. Температура 38±1°С, время инкубации 24-48 часа в анаэробных условиях. Полученную бульонную культуру Bifidobacterium bifidum ICIS-310 центрифугируют при 3000 оборотах в минуту в течение 20 минут.Bifidobacterium bifidum ICIS-310 broth culture is obtained by growing this strain in test tubes in a liquid nutrient medium of the following composition: casein hydrolyzate - 5.67 g; proteozopeptone - 5.00 g; papain digest of soy flour - 1.00 g; yeast extract - 5.00 g; glucose - 5.83 g; NaCl - 1.67 g; potassium hydrogen phosphate - 0.83 g; Tris - 3.00 g; L-cystine - 0.40 g; hemin - 0.01 g. pH = 7.6 ± 0.2. Temperature 38 ± 1 ° С, incubation time 24-48 hours under anaerobic conditions. The resulting Bifidobacterium bifidum ICIS-310 broth culture was centrifuged at 3,000 rpm for 20 minutes.
Культуральную жидкость отделяют от бактериальных клеток стеклянной стерильной пипеткой в отдельную емкость. Данная культуральная жидкость представляет собой неочищенный препарат ингибитора провоспалительного цитокина INF-γ.The culture fluid is separated from the bacterial cells with a sterile glass pipette into a separate container. This culture fluid is a crude preparation of the pro-inflammatory cytokine INF-γ inhibitor.
Наличие и уровень активности полученного неочищенного препарата ингибитора провоспалительного цитокина INF-γ определяют следующим образом: супернатант Bifidobacterium bifidum ICIS-310 соинкубируют с раствором рекомбинантного цитокина («Sigma», INF-γ) в соотношении 1:1 (опытные пробы).The presence and activity level of the obtained crude preparation of the pro-inflammatory cytokine inhibitor INF-γ is determined as follows: the supernatant of Bifidobacterium bifidum ICIS-310 is co-incubated with a solution of recombinant cytokine ("Sigma", INF-γ) in a 1: 1 ratio (experimental samples).
В качестве контроля используют раствор цитокинов, внесенный в Schaedler-бульон (BBL, США).As a control, a solution of cytokines introduced into Schaedler broth (BBL, USA) is used.
Конечная концентрация цитокинов в опытных и контрольных пробах составляла для INF-γ-20, 80, 160, 240, 320 пг/мл.The final concentration of cytokines in the experimental and control samples was for INF-γ-20, 80, 160, 240, 320 pg / ml.
Опытные и контрольные пробы инкубируют в течение 2 часов (37°С), реакцию останавливают на холоду, центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 мин (+4°С) и отбирают супернатант.The experimental and control samples were incubated for 2 hours (37 ° C), the reaction was stopped in the cold, centrifuged at 3000 rpm for 15 min (+ 4 ° C) and the supernatant was taken.
Определение концентрации цитокинов в опытных и контрольных пробах проводят общепринятым иммуноферментным анализом с использованием реагентов «Цитокин» (СП-б, Россия).Determination of the concentration of cytokines in experimental and control samples is carried out by conventional enzyme-linked immunosorbent assay using reagents "Cytokine" (SP-b, Russia).
Учет результатов проводят на фотометре Multiskan Labsystems (Финляндия) при длине волны 492 нм.The results are taken into account on a Multiskan Labsystems photometer (Finland) at a wavelength of 492 nm.
О наличии продуцируемого штаммом Bifidobacterium bifidum ICIS-310 ингибитора провоспалительного цитокина INF-γ судили по способности его супернатанта снижать концентрацию рекомбинантного цитокина в опыте по сравнению с контролем.The presence of the inhibitor of the proinflammatory cytokine INF-γ produced by the Bifidobacterium bifidum ICIS-310 strain was judged by the ability of its supernatant to reduce the concentration of recombinant cytokine in the experiment compared with the control.
Уровень активности продуцируемого Bifidobacterium bifidum ICIS-310 ингибитора провоспалительного цитокина INF-γ определяли согласно известному способу определения антицитокиновой активности микроорганизмов (Бухарин О.В. и др. Антицитокиновая активность микроорганизмов // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии, 2011 - №4, С. 56-61).The activity level of the pro-inflammatory cytokine inhibitor INF-γ produced by Bifidobacterium bifidum ICIS-310 was determined according to the known method for determining the anticytokine activity of microorganisms (Bukharin O.V. et al. Anticytokine activity of microorganisms // Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology, 2011 - No. 4, C. 56-61).
Уровень активности ингибитора INF-y, продуцируемого штаммом Bifidobacterium bifidum ICIS-310 составил при концентрации цитокина в среде от 20 до 160 пг/мл - 100%, при 240 пг/мл - 80% и 320 пг/мл - 55%.The activity level of the INF-y inhibitor produced by the Bifidobacterium bifidum strain ICIS-310 was 100% at a cytokine concentration in the medium of 20 to 160 pg / ml, 80% at 240 pg / ml and 55% at 320 pg / ml.
Пример 2Example 2
Аналогично примеру 1 проводили эксперименты по определению наличия и уровня активности ингибитора провоспалительного цитокина INF-γ, продуцируемого штаммом Bifidobacterium bifidum ICIS-310 и клиническими изолятами Bifidobacterium spp.(В. bifidum 1-11), выделенных из кишечного биотопа.Analogously to example 1, experiments were carried out to determine the presence and activity level of the pro-inflammatory cytokine inhibitor INF-γ produced by the Bifidobacterium bifidum ICIS-310 strain and clinical isolates of Bifidobacterium spp. (B. bifidum 1-11) isolated from the intestinal biotope.
Результаты исследований приведены в таблице.The research results are shown in the table.
Как видно из таблицы штамм бактерий Bifidobacterium bifidum ICIS-310 имеет 100% уровень активности ингибитора провоспалительного цитокина INF-γ при концентрации цитокина в среде от 20 до 160 пг/мл, а у клинических изолятов бифидобактерий (В. bifidum 1-11) уровень активности ингибитора цитокина INF-γ в среднем составлял при концентрации цитокина в среде 20 пг/мл - 66,8±5,6%, при 80 пг/мл - 53±5,6%, при 160 пг/мл - 29,3±5,6%. При создании концентрации цитокина в среде 240 пг/мл среди клинических изолятов бифидобактерий три штамма ингибировали 19,7±2,1% цитокина, при 320 пг/мл активность отсутствовала у всех клинических культур.As can be seen from the table, the bacterial strain Bifidobacterium bifidum ICIS-310 has a 100% level of activity of the proinflammatory cytokine inhibitor INF-γ at a concentration of cytokine in the medium from 20 to 160 pg / ml, and in clinical isolates of bifidobacteria (B. bifidum 1-11) the level of activity when the cytokine inhibitor INF-γ averaged 66.8 ± 5.6% at a concentration of cytokine in the medium of 20 pg / ml, 53 ± 5.6% at 80 pg / ml and 29.3 ± at 160 pg / ml 5.6%. When creating a cytokine concentration in the medium of 240 pg / ml among the clinical isolates of bifidobacteria, three strains inhibited 19.7 ± 2.1% of the cytokine; at 320 pg / ml, activity was absent in all clinical cultures.
Уровень активности ингибитора провоспалительного цитокина INF-γ у штамма Bifidobacterium bifidum ICIS-310 сохранялся и при более высокой концентрации цитокинов: при 240 пг/мл его активность составляла 80%, а при 320 пг/мл уровень активности был равен 55%, что свидетельствует о большей продуктивности ингибитора провоспалительного цитокина INF-γ штаммом Bifidobacterium bifidum ICIS-310 по сравнению с клиническими изолятами Bifidobacterium spp.The activity level of the inhibitor of the pro-inflammatory cytokine INF-γ in the Bifidobacterium bifidum ICIS-310 strain was maintained even at a higher concentration of cytokines: at 240 pg / ml, its activity was 80%, and at 320 pg / ml the activity level was 55%, which indicates greater productivity of the pro-inflammatory cytokine inhibitor INF-γ strain of Bifidobacterium bifidum ICIS-310 compared with clinical isolates of Bifidobacterium spp.
Таким образом, заявляемый штамм бактерий Bifidobacterium bifidum ICIS-310 может быть использован в качестве продуцента ингибитора провоспалительного цитокина INF-γ.Thus, the inventive bacterial strain Bifidobacterium bifidum ICIS-310 can be used as a producer of the pro-inflammatory cytokine INF-γ inhibitor.
В. bifidum 1…11 - клинические изоляты Bifidobacterium spp.,B. bifidum 1 ... 11 - clinical isolates of Bifidobacterium spp.,
в (№) указан лабораторный номер.in (No.) the laboratory number is indicated.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018115331A RU2670054C1 (en) | 2018-04-24 | 2018-04-24 | BIFIDOBACTERIUM BIFIDUM ICIS-310 BACTERIUM STRAIN - PRODUCER OF INHIBITOR OF PRO-INFLAMMATORY CYTOKINE INF-γ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018115331A RU2670054C1 (en) | 2018-04-24 | 2018-04-24 | BIFIDOBACTERIUM BIFIDUM ICIS-310 BACTERIUM STRAIN - PRODUCER OF INHIBITOR OF PRO-INFLAMMATORY CYTOKINE INF-γ |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2670054C1 true RU2670054C1 (en) | 2018-10-17 |
Family
ID=63862429
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018115331A RU2670054C1 (en) | 2018-04-24 | 2018-04-24 | BIFIDOBACTERIUM BIFIDUM ICIS-310 BACTERIUM STRAIN - PRODUCER OF INHIBITOR OF PRO-INFLAMMATORY CYTOKINE INF-γ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2670054C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2805505C2 (en) * | 2023-03-10 | 2023-10-18 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Оренбургский федеральный исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук | Consortium of strains of bifidobacteria used for preparation of bifid-containing products |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000042168A2 (en) * | 1999-01-15 | 2000-07-20 | Enterprise Ireland (Trading As Bioresearch Ireland) | Bifidobacterium in the treatment of inflammatory disease |
| RU2473681C2 (en) * | 2007-03-28 | 2013-01-27 | Элиментари Хелт Лимитед | PROBIOTIC STRAIN OF Bifidobacterium longum, COMPOSITION CONTAINING SUCH STRAIN AND USE THEREOF |
-
2018
- 2018-04-24 RU RU2018115331A patent/RU2670054C1/en active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000042168A2 (en) * | 1999-01-15 | 2000-07-20 | Enterprise Ireland (Trading As Bioresearch Ireland) | Bifidobacterium in the treatment of inflammatory disease |
| RU2473681C2 (en) * | 2007-03-28 | 2013-01-27 | Элиментари Хелт Лимитед | PROBIOTIC STRAIN OF Bifidobacterium longum, COMPOSITION CONTAINING SUCH STRAIN AND USE THEREOF |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ПЕРУНОВА Н.Б. "Биорегуляция микросимбионтов в микросимбиоценозе кишечника человека".// Авто дисс., д.м.н., 01.12.2011, Оренбург. * |
| ПЕРУНОВА Н.Б. "Биорегуляция микросимбионтов в микросимбиоценозе кишечника человека".// Автореферат дисс., д.м.н., 01.12.2011, Оренбург. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2805505C2 (en) * | 2023-03-10 | 2023-10-18 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Оренбургский федеральный исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук | Consortium of strains of bifidobacteria used for preparation of bifid-containing products |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110452845B (en) | Escherichia coli for producing sucrose phosphorylase | |
| Muhammad et al. | ANTIBIOTIC PRODUCTION BY THERMOPHILIC BACILLUS SPECIE SAT-4. | |
| CN103509816B (en) | Produce the construction process of Coenzyme Q10 99.0 engineering bacteria, engineering bacteria and application thereof | |
| CZ285149B6 (en) | Alpha-l-rhamnosidase, process for preparing thereof and its use | |
| RU2288263C2 (en) | Strain bacillus coagulants sim-7 dsm 14043 for preparing l-(+)-lactate and method for preparing l-(+)-lactate | |
| JPS60244295A (en) | Production of (+)- trans-cyclopropane carboxylic acid | |
| RU2670054C1 (en) | BIFIDOBACTERIUM BIFIDUM ICIS-310 BACTERIUM STRAIN - PRODUCER OF INHIBITOR OF PRO-INFLAMMATORY CYTOKINE INF-γ | |
| Jansson | Isolation of fastidious mycoplasma from human sources | |
| RU2726653C2 (en) | Bacterial strain lactobacillus salivarius - producer of interleukin-6 and interleukin-17 cytokine inhibitor | |
| CN106676023A (en) | Bacillus amyloliquefaciens highly yielding neutral protease and application thereof | |
| CN113956994B (en) | Two strains that can break the carbon glycoside bond of flavonoid carbon glycoside compounds and their applications | |
| US3663373A (en) | Process for the preparation of iodinin | |
| Buzoleva et al. | Adaptation variability of Yersinia pseudotuberculosis during long-term persistence in soil | |
| RU2059716C1 (en) | Strain of streptococcus lactis - a producer of bacteriocin nisine | |
| RU2085584C1 (en) | Method of preparing recombinant tularemia microorganisms - producers of virulence factors, recombinant strain of francisella tularensis subspecies, holarctica r5s - producer of virulence factor francisella tularensis nearctica shu, recombinant strain of francisella tularensis holarctica rn4 - a producer of virulence factor pseudomonas tularensis subspecies holarctica r1a - a producer of virulence factor francisella tularensis nearctica b 399 a cole | |
| Nuyanzina-Boldareva et al. | Characterization of a new strain of a purple nonsulfur bacterium from a thermal spring | |
| RU2575799C2 (en) | USE OF STRAIN OF BACTERIA BACILLUS CEREUS GISK №279 AS PRODUCER OF INHIBITOR CYTOKINE FNO - α | |
| RU2105060C1 (en) | Yeast strain candida sp k1 producing ethyl alcohol on whey-containing medium | |
| SU1025725A1 (en) | Strain of bacteria marcescens 24 producer of endonuclease | |
| RU2821907C1 (en) | Strain streptomyces species yvz012 - producer of surugamide a | |
| RU2257412C1 (en) | Strain haemophilus influenzae b mech 1 as producer of capsule polysaccharide - polyribosyl ribitol phosphate | |
| SU1705347A1 (en) | Strain of bacteria escherichia coli for @@@-deoxyadenosine preparation | |
| SU823423A1 (en) | Leuconostoc mesenteroides 122 strain as antagonist of cheese foreign microflora | |
| RU2087535C1 (en) | Strain of actinomyces streptomyces avermitilis - a producer of avermectines | |
| KR100260837B1 (en) | Optical activating carbon acid and method for preparing isomer ester |