RU2659095C1 - “ik-4” strain of the virus of infectious anemia of chickens - Google Patents
“ik-4” strain of the virus of infectious anemia of chickens Download PDFInfo
- Publication number
- RU2659095C1 RU2659095C1 RU2017120888A RU2017120888A RU2659095C1 RU 2659095 C1 RU2659095 C1 RU 2659095C1 RU 2017120888 A RU2017120888 A RU 2017120888A RU 2017120888 A RU2017120888 A RU 2017120888A RU 2659095 C1 RU2659095 C1 RU 2659095C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- virus
- strain
- chickens
- iac
- anemia
- Prior art date
Links
- 241000700605 Viruses Species 0.000 title claims abstract description 33
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 title claims abstract description 10
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 title claims abstract description 9
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 title claims abstract description 8
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 title claims abstract description 7
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 title claims abstract description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 7
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 241001533399 Circoviridae Species 0.000 claims abstract description 4
- 241000316868 Gyrovirus Species 0.000 claims abstract description 4
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 abstract description 13
- 241000271566 Aves Species 0.000 abstract description 8
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 abstract description 8
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 2
- 210000004738 parenchymal cell Anatomy 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 101100024330 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) MSB1 gene Proteins 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 5
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 101150085390 RPM1 gene Proteins 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 3
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- IXQPRUQVJIJUEB-UHFFFAOYSA-N 7-(diethylamino)-n-[2-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)ethyl]-2-oxochromene-3-carboxamide Chemical compound O=C1OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=C1C(=O)NCCN1C(=O)C=CC1=O IXQPRUQVJIJUEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000725585 Chicken anemia virus Species 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N ciprofloxacin Chemical compound C12=CC(N3CCNCC3)=C(F)C=C2C(=O)C(C(=O)O)=CN1C1CC1 MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000144992 flock Species 0.000 description 2
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 2
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 2
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 2
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 2
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 101710197658 Capsid protein VP1 Proteins 0.000 description 1
- 235000014676 Phragmites communis Nutrition 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 101710106388 Structural protein VP1 Proteins 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229960003405 ciprofloxacin Drugs 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 208000037824 growth disorder Diseases 0.000 description 1
- 230000003118 histopathologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005571 horizontal transmission Effects 0.000 description 1
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000003307 slaughter Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000036435 stunted growth Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000002992 thymic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и биотехнологии и может быть использовано при производстве вакцины против инфекционной анемии цыплят.The invention relates to veterinary virology and biotechnology and can be used in the manufacture of a vaccine against infectious anemia of chickens.
Вирус инфекционной анемии цыплят (ИАЦ), единственный представитель рода Gyrovirus семейства Circoviridae [1], который широко распространен во всем мире. В организме больной птицы возбудитель активно реплицируется в гемоцитобластах костного мозга и предшественниках Т-лимфоцитов и, как следствие, проявляется атрофия тимуса [2, 3]. Развитие инфекционного процесса характеризуется снижением количества лимфоцитов, особенно CD8 + Т-клеток, нарушением продукции цитокинов, иммуносупрессией и повышенной чувствительностью к различным инфекциям вирусной и бактериальной этиологии [4, 5, 6].Chicken Infectious Anemia Virus (IAC), the only representative of the genus Gyrovirus of the family Circoviridae [1], which is widespread throughout the world. In the sick bird, the pathogen actively replicates in the bone marrow hemocytoblasts and T-lymphocyte precursors and, as a result, thymic atrophy is manifested [2, 3]. The development of the infectious process is characterized by a decrease in the number of lymphocytes, especially CD8 + T cells, impaired cytokine production, immunosuppression and increased sensitivity to various infections of viral and bacterial etiology [4, 5, 6].
Клиническое проявление болезни установлено у молодняка (2-3 недель) птицы без материнских антител с признаками депрессии, анемией, задержкой роста и увеличением смертности [7]. У птицы более старшего возраста с формированием иммунной системы развивается возрастная устойчивость к вирусу ИАЦ, хотя они могут быть инфицированы и стать источником горизонтальной передачи вируса [8, 9]. Единственным и надежным способом зашиты цыплят от вируса ИАЦ является применение вакцины за месяц до начала яйцекладки.The clinical manifestation of the disease was established in young (2-3 weeks) birds without maternal antibodies with signs of depression, anemia, stunted growth and increased mortality [7]. Older birds with the formation of the immune system develop age-related resistance to the IAC virus, although they can be infected and become a source of horizontal transmission of the virus [8, 9]. The only and reliable way to protect chickens from the IAC virus is to use the vaccine one month before the laying of eggs.
Сведения о выделении и характеристике изолятов вируса ИАЦ в России фрагментарны. По этой причине отечественные средства диагностики и профилактики болезни до настоящего времени не разработаны.Information on the isolation and characterization of IAC virus isolates in Russia is fragmented. For this reason, domestic means of diagnosing and preventing disease have not yet been developed.
В зарубежной литературе описан ряд штаммов вируса ИАЦ, используемых для производства вакцин. Известен штамм «CUX-1» вируса ИАЦ, который репродуцируется только в 5-6-суточных эмбрионах СПФ-кур [10] и данная биологическая модель довольно дорогая и крайне недоступная. Так, до настоящего время отечественная биологическая промышленность не располагает стадом птицы, соответствующим СПФ статусу, так как создание и содержание таких стад требует наличие специальной технологии выращивания птицы и значительных материальных средств. Недостатком данного штамма также является и низкая антигенная и иммуногенная активность.Foreign literature describes a number of IAC virus strains used for vaccine production. The known strain "CUX-1" of the IAC virus, which is reproduced only in 5-6-day-old embryos of SPF-hens [10] and this biological model is quite expensive and extremely inaccessible. So, up to now, the domestic biological industry does not have a flock of poultry corresponding to SPF status, since the creation and maintenance of such flocks requires the presence of special technology for growing poultry and significant material resources. The disadvantage of this strain is also low antigenic and immunogenic activity.
Известен ГКВ штамм «2722» для производства диагностикумов [11]. Штамм культивируется и поддерживается на СПФ-цыплятах суточного возраста. Недостатком данного штамма является его вирулентность и непригодность для производства вакцины из-за отсутствия эффективной биологической модели для промышленного культивирования.Known STBs strain "2722" for the production of diagnosticums [11]. The strain is cultivated and maintained on day old SPF chickens. The disadvantage of this strain is its virulence and unsuitability for vaccine production due to the lack of an effective biological model for industrial cultivation.
Наиболее близким предлагаемому изобретению по совокупности существенных признаков является штамм «26Р4» вируса ИАЦ, адаптированный к культуре клеток MDCC-MSB1 [12].The closest to the invention according to the set of essential features is the strain 26P4 of the IAC virus, adapted to the cell culture MDCC-MSB1 [12].
Однако штамм-прототип имеет недостаток, состоящий в том, что он обладает остаточной вирулентностью и индуцирует поражения в тимусе и костном мозге, сопровождающиеся иммунодепрессией. Недостаток штамма «26Р4» состоит также в том, что по своим антигенным и иммунобиологическим характеристикам он отличается от аналогичных характеристик эпизоотических изолятов вируса ИАЦ, выделенных на территории России.However, the prototype strain has the disadvantage that it has residual virulence and induces lesions in the thymus and bone marrow, accompanied by immunosuppression. The disadvantage of the 26P4 strain also lies in the fact that in its antigenic and immunobiological characteristics it differs from similar characteristics of epizootic isolates of the IAC virus isolated in Russia.
В задачу создания настоящего изобретения входило получение нового штамма вируса ИАЦ, обладающего высокой биологической и антигенной активностью и безвредного для ремонтного молодняка птицы.The task of creating the present invention was to obtain a new strain of the IAC virus, which has high biological and antigenic activity and is harmless to repair young birds.
Технический результат от использования предлагаемого изобретения заключается в повышении биологической и специфической антигенной активности для производства ареактогенных средств специфической профилактики болезни.The technical result from the use of the invention is to increase the biological and specific antigenic activity for the production of areactogenic agents for specific prophylaxis of the disease.
Штамм "ИК-4" получен и поддерживается путем серийных последовательных пассажей исходного изолята вируса ИАЦ в клеточной культуре MDCC MSBI.Strain "IR-4" obtained and maintained by serial sequential passages of the original isolate of the IAC virus in cell culture MDCC MSBI.
Штамм "ИК-4" относится к семейству Circoviridae, роду Gyrovirus, обладает морфологическими признаками, характерными для возбудителя ИАЦ: форма вириона икосаэдрическая, размер - 22-25 нм, относится к ДНК-содержащим вирусам, устойчив к воздействию температуры до +56°С в течение 30 мин, эфира и хлороформа. Капсид вирионов состоит из 32 капсомеров, оболочка отсутствует и имеет один главный структурный белок VP1. Штамм "ИК-4" активно репродуцируется в клеточной культуре МДСС - MSB1, вызывая ЦПД, стабилен в течение 20 последовательных пассажей. Штамм "ИК-4" депонирован в государственной коллекции вирусов НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского 26 апреля 2017 г., регистрационный номер 2844.The strain "IK-4" belongs to the family of Circoviridae, the genus Gyrovirus, has morphological characteristics characteristic of the causative agent of the IAC: the form of the virion is icosahedral, size - 22-25 nm, refers to DNA-containing viruses, resistant to temperatures up to + 56 ° C for 30 minutes, ether and chloroform. The virion capsid consists of 32 capsomeres, the membrane is absent and has one main structural protein VP1. The strain "IR-4" is actively reproduced in the cell culture MDSS - MSB1, causing CPD, is stable for 20 consecutive passages. The strain "IK-4" was deposited in the state virus collection of the Research Institute of Virology. DI. Ivanovsky on April 26, 2017, registration number 2844.
Для пояснения сущности предлагаемого изобретения приведены примеры его исполнения, которые не ограничивают объем изобретения.To clarify the essence of the invention, examples of its execution are given, which do not limit the scope of the invention.
Пример 1. Культивирование штамма "ИК-4" вируса ИАЦ в суспензионной линии клеток MDCC MSBI.Example 1. The cultivation of the strain "IR-4" of the IAC virus in the suspension cell line MDCC MSBI.
К клеточной культуре МДСС - MSB1 в посевной дозе 2,0-2,5×105 кл/см3 объемом 0,5 см3 добавляли равное количество стерильного 20%-ного гомогената внутренних органов цыплят больных анемией и инкубировали при температуре 37°С в течение 30 мин. Затем смесь клеточной культуры и гомогената переносили в пластиковый флакон объемом 25 см3 с питательной средой RPM1 - 1640, производство «Биолот» (г. Санкт-Петербург), с добавлением 1 см3 ципрофлоксацина (2 мг/см3) на 100 см3 среды и 10% фетальной бычьей сыворотки. Флаконы с зараженной культурой клеток и в контроле инкубировали в CO2 инкубаторе при 39,5°С в атмосфере 5% углекислого газа в течение 2-3 сут. Затем зараженную культуру клеток трижды замораживали и размораживали, центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 мин. Полученный супернатант использовали для проведения очередного пассажа методом «слепых» пассажей путем разбавления вируссодержащего материала предыдущего пассажа свежей подогретой питательной средой RPM1 - 1640 с 10% сыворотки и антибиотиками в соотношении 1:10 до проявления четких морфологических изменений в зараженных клетках. ЦПД вируса в культуре клеток характеризовалось увеличением размеров клеток с последующей их деформацией, дегенерацией и лизисом в связи с гибелью клеток и повышением рН среды. Специфичность ЦПД вируса ИАЦ подтверждается в реакции нейтрализации с гипериммунной сывороткой к вирусу ИАЦ.An equal amount of a sterile 20% homogenate of the internal organs of anemia chickens was added to a cell culture of MDSS - MSB1 in a seeding dose of 2.0-2.5 × 10 5 cells / cm 3 with a volume of 0.5 cm 3 and incubated at 37 ° C within 30 minutes Then the mixture of cell culture and homogenate was transferred into a plastic bottle with a volume of 25 cm 3 with nutrient medium RPM1 - 1640, manufactured by Biolot (St. Petersburg), with the addition of 1 cm 3 of ciprofloxacin (2 mg / cm 3 ) per 100 cm 3 medium and 10% fetal bovine serum. Vials with infected cell culture and in the control were incubated in a CO 2 incubator at 39.5 ° C in an atmosphere of 5% carbon dioxide for 2-3 days. Then, the infected cell culture was frozen and thawed three times, centrifuged at 3000 rpm for 15 minutes. The obtained supernatant was used for the next passage using the blind blind passage method by diluting the virus-containing material of the previous passage with fresh heated nutrient medium RPM1 - 1640 with 10% serum and antibiotics in a ratio of 1:10 until clear morphological changes in the infected cells appeared. The viral CPD in the cell culture was characterized by an increase in cell size with subsequent deformation, degeneration and lysis in connection with cell death and an increase in the pH of the medium. The specificity of the CPI of the IAC virus is confirmed in the neutralization reaction with hyperimmune serum to the IAC virus.
Пример 2. Определение инфекционной активности "ИК-4" вируса ИАЦ.Example 2. Determination of the infectious activity of "IR-4" of the IAC virus.
Предварительно готовили серию 10-кратных разведений штамма "ИК-4" вируса ИАЦ на питательной среде RPM1 - 1640 от 10-1 до 10-7, которыми заражали культуру клеток МДСС - MSB1. Каждое разведение супернатанта в объеме 100 мкл вносили в 4 лунки 24-луночноого планшета, затем - 900 мкл клеточной культуры в питательной среде с плотностью 5×104 кл/см3 и инкубировали в СО2 инкубаторе при 39,5°С. Контролем служили флаконы с незараженной культурой МДСС - MSB1. Пересевы вирусных суспензий проводили через каждые 48 ч из расчета 200 мкл зараженной культуры в 800 мкл свежей подогретой питательной среды. Процедуру повторяли не менее 8 раз до проявления ЦПД в конечных разведениях и изменения цвета среды (красный) в связи с прекращением роста клеток. За титр вируса принимали максимальное (предельное) его разведение, вызывающее цитопатогенное действие в 50% лунок и выражали в lg ТЦД50/см 3. Расчет активности вируса проводят по методу Рида и Менча. Титр вируса составил 5,5-6,0 lg ТЦД50/см 3.A series of 10-fold dilutions of the IAC-4 strain of the IAC virus was prepared on a nutrient medium RPM1 - 1640 from 10 -1 to 10 -7 , which infected the MDSS - MSB1 cell culture. Each dilution of the supernatant in a volume of 100 μl was added to 4 wells of a 24-well plate, then 900 μl of the cell culture in a nutrient medium with a density of 5 × 10 4 cells / cm 3 and incubated in a CO 2 incubator at 39.5 ° C. The control was vials with uninfected culture MDSS - MSB1. Reseeding of viral suspensions was carried out every 48 hours at the rate of 200 μl of the infected culture in 800 μl of fresh, heated nutrient medium. The procedure was repeated at least 8 times until the CPD appeared in the final dilutions and the color of the medium (red) changed due to the cessation of cell growth. The maximum (limiting) dilution of the virus was taken as the titer of the virus, causing a cytopathogenic effect in 50% of the wells and expressed in lg TCD 50 / cm 3 . The calculation of the activity of the virus is carried out according to the method of Reed and Mench. The virus titer was 5.5-6.0 lg TCD 50 / cm 3 .
Пример 3. Оценка стабильности биологической и антигенной активности штамма "ИК-4" на уровне разных пассажей.Example 3. Assessment of the stability of the biological and antigenic activity of the strain "IR-4" at the level of different passages.
Предварительно пробы вируса 5-; 10-; 15- и 20-го пассажа титровали в клеточной культуре МДСС MSB1 так, как описано в примере 2. Антигенную активность вируса на разных уровнях пассажей определяли на птице путем его введения внутримышечно по 0,2 см3 каждой птице. Результаты опыта представлены в таблице 1.Preliminary virus samples 5-; 10-; The 15th and 20th passages were titrated in the MDSS MSB1 cell culture as described in Example 2. The antigenic activity of the virus at different levels of passages was determined on the bird by intramuscular injection of 0.2 cm 3 for each bird. The results of the experiment are presented in table 1.
Из данных таблицы 1 следует, что штамм "ИК-4", выращенный в клеточной культуре МДСС MSB1 в течение 20 пассажей, сохраняет биологические и антигенные свойства, что свидетельствует о его стабильности по указанным признакам.From the data of table 1 it follows that the strain "IR-4" grown in a cell culture MDSS MSB1 for 20 passages, retains biological and antigenic properties, which indicates its stability according to these characteristics.
Пример 4. Определение безвредности штамма "ИК-4".Example 4. Determination of the harmlessness of the strain "IR-4".
Вирус в дозе 5,0 lg ТЦД50/см 3 вводили внутримышечно ремонтному молодняку 8-9-недельного возраста в количестве 15 голов, свободному от антител к вирусу ИАЦ. Контролем служили 15 голов птицы аналогичного возраста, которым вводили физиологический раствор без вакцины. На 14, 21 и 28-е сутки опыта по 5 голов в каждой группе птицы подвергали диагностическому убою и соответственно отбирали трубчатую кость и тимус для выявления морфологических изменений. За период проведения опыта клинических признаков болезни у птицы не наблюдали. Патматериал фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина и исследовали по общепринятой методике проведения гистологических исследований. Результаты патологоморфологических исследований костного мозга и тимуса цыплят в разные сроки после введения вируса показали сохранность морфологической структуры на всех этапах опыта. Таким образом, результаты испытаний показали, что штамм "ИК-4" вируса ИАЦ является безвредным в отношении ремонтного молодняка птицы.The virus at a dose of 5.0 lg TCD 50 / cm 3 was administered intramuscularly to repair young animals of 8–9 weeks of age in the amount of 15 animals, free of antibodies to the IAC virus. The control was 15 birds of a similar age, which were injected with saline without a vaccine. On the 14th, 21st and 28th days of the experiment, 5 animals in each group of birds were subjected to diagnostic slaughter and, accordingly, a tubular bone and thymus were selected to detect morphological changes. During the experiment, no clinical signs of the disease were observed in the bird. The material was fixed in a 10% solution of neutral formalin and examined according to the generally accepted methodology for histological studies. The results of pathological and morphological studies of bone marrow and thymus of chickens at different times after the introduction of the virus showed the preservation of the morphological structure at all stages of the experiment. Thus, the test results showed that the strain "IR-4" of the IAC virus is harmless in relation to the repair of young birds.
Источники информацииInformation sources
1. Pringle С.R. Virus Taxonomy at the XIth International Congress of Virology, Sydney, Australia. Archives of Virology, 1999, 144, 2065-2070.1. Pringle C.R. Virus Taxonomy at the XIth International Congress of Virology, Sydney, Australia. Archives of Virology, 1999, 144, 2065-2070.
2. Gorio M., T. Suwa, T. Umemura, C. Utakura S. Yamashiro, 1989. Histopathology of chicks inoculated with chicken anaemia agent (MSB1-TK5803 strain). Avian Pathology, 18, 73-89.2. Gorio M., T. Suwa, T. Umemura, C. Utakura S. Yamashiro, 1989. Histopathology of chicks inoculated with chicken anaemia agent (MSB1-TK5803 strain). Avian Pathology, 18, 73-89.
3. Smyth J., D. Moffett, M. McNulty, D. Todd D. Mackie, Aequential histopathologic and immunocytochemical study of chicken anemia virus infection at one day of age. 1993. Avian Diseases, 37, 324-338.3. Smyth J., D. Moffett, M. McNulty, D. Todd D. Mackie, Aequential histopathologic and immunocytochemical study of chicken anemia virus infection at one day of age. 1993. Avian Diseases, 37, 324-338.
4. Adair В.M. Immunopathogenesis of chicken anemia virus infection. Developmental and Comparative Immunology, 2000. 24, 247-255.4. Adair B.M. Immunopathogenesis of chicken anemia virus infection. Developmental and Comparative Immunology, 2000.24, 247-255.
5. Todd D. Circoviruses: Immunosuppressive threat to avian species; a review. Avian Pathology, 2000. 29, 373-394.5. Todd D. Circoviruses: Immunosuppressive threat to avian species; a review. Avian Pathology, 2000.29, 373-394.
6. Ragland W.L., R. Novak, J. El-Attrache, 
7. Schat K.A. Chicken infectious anemia.In: Diseases of Poultry. 11th edn, eds Saif, Y.M., H.J. Barnes, J.R. Glisson, A.M. Fadly, L.R. McDougald & D.E. Swayne, Iowa State University, Ames, 2003, pp 182-202.7. Schat K.A. Chicken infectious anemia. In: Diseases of Poultry. 11th edn, eds Saif, Y.M., H.J. Barnes, J.R. Glisson, A.M. Fadly, L.R. McDougald & D.E. Swayne, Iowa State University, Ames, 2003, pp 182-202.
8. Rosenberger J.K. & S.S. Cloud, The effects of age, route of exposure, and coinfection with infectious bursal disease virus on the pathogenicity and transmissibility of chicken anemia agent (CAA). Avian Diseases, 1989, 33, 753-759.8. Rosenberger J.K. & S.S. Cloud, The effects of age, route of exposure, and coinfection with infectious bursal disease virus on the pathogenicity and transmissibility of chicken anemia agent (CAA). Avian Diseases, 1989, 33, 753-759.
9. Toro H., A.M. Ramirez, J. Larenas. Pathogenicity of chicken anaemia virus (isolate 10343) for young and older chickens. Avian Pathology, 1997. 26, 485-499.9. Toro H., A.M. Ramirez, J. Larenas. Pathogenicity of chicken anaemia virus (isolate 10343) for young and older chickens. Avian Pathology, 1997.26, 485-499.
10. Vielitz E., Bulow V. von, Landgraf H., Conrad C. Anemia in broilers: development of a vaccine for parent stock. - Journal of Veterinary Medicine, 1987, Vol. 34, P. 553-557.10. Vielitz E., Bulow V. von, Landgraf H., Conrad C. Anemia in broilers: development of a vaccine for parent stock. - Journal of Veterinary Medicine, 1987, Vol. 34, P. 553-557.
11. Пат. США 5686077, 453-454.11.1997.11. Pat. U.S. 5686077, 453-454.11.1997.
12. Пат. РФ №2489487, C12N 7/00; 10.08.2013.12. Pat. RF No. 2489487, C12N 7/00; 08/10/2013.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017120888A RU2659095C1 (en) | 2017-06-14 | 2017-06-14 | “ik-4” strain of the virus of infectious anemia of chickens |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017120888A RU2659095C1 (en) | 2017-06-14 | 2017-06-14 | “ik-4” strain of the virus of infectious anemia of chickens |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2659095C1 true RU2659095C1 (en) | 2018-06-28 |
Family
ID=62816008
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017120888A RU2659095C1 (en) | 2017-06-14 | 2017-06-14 | “ik-4” strain of the virus of infectious anemia of chickens |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2659095C1 (en) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1132466B1 (en) * | 2000-02-29 | 2005-11-16 | Akzo Nobel N.V. | Chicken anaemia viruses of low pathogenicity |
| RU2489487C1 (en) * | 2012-05-04 | 2013-08-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины" (ФГБОУ ВПО СПГАВМ) | Strain of virus of infectious anaemia of chickens no2722 in state virus collection for production of diagnosticums |
-
2017
- 2017-06-14 RU RU2017120888A patent/RU2659095C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1132466B1 (en) * | 2000-02-29 | 2005-11-16 | Akzo Nobel N.V. | Chicken anaemia viruses of low pathogenicity |
| RU2489487C1 (en) * | 2012-05-04 | 2013-08-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины" (ФГБОУ ВПО СПГАВМ) | Strain of virus of infectious anaemia of chickens no2722 in state virus collection for production of diagnosticums |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Li YP et al., Pathogenicity and genomic sequence comparison of a chicken infectious anemia virus field isolate, Wei Sheng Wu Xue Bao. 2007 Oct., Vol.47, No.5 abstr. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ingrao et al. | Infectious Bursal Disease: A complex host–pathogen interaction | |
| Eterradossi et al. | Infectious bursal disease | |
| CN102066407A (en) | Novel avian astrovirus | |
| Allan et al. | Rapid diagnosis of infectious bursal disease infection by immunofluorescence on clinical material | |
| CN114395536B (en) | Avian adenovirus type 4, 8 and 11 trivalent vaccine and preparation method and application thereof | |
| CN105802920B (en) | A11 plants of infectious bursal disease virus and its application | |
| CN113755454B (en) | 8a type avian adenovirus strain, inactivated vaccine, preparation method and application thereof | |
| Sentíes-Cué et al. | Avian encephalomyelitis in layer pullets associated with vaccination | |
| Kamdi et al. | Chicken infectious anemia: An emerging immunosuppressive viral threat to the poultry industry | |
| RU2659095C1 (en) | “ik-4” strain of the virus of infectious anemia of chickens | |
| CN103721253B (en) | Live avian encephalomylitis and henpox combined vaccine | |
| CN109207437B (en) | Group I8 avian adenovirus strain and application thereof | |
| CN102965344A (en) | Production of infectious bronchitis virus and vaccine from cell line | |
| Carmichael et al. | A Fatal Septicemic Disease of Infant Puppies Caused by Gytopathogenic Organisms with Characteristics of Mycoplasma | |
| Lin et al. | Assessing the efficacy of a live vaccine against avian encephalomyelitis virus | |
| Nagy et al. | Seroprevelance of avian Metapneumovirus in Egyptian chicken and duck flocks with a reference on economic impact | |
| Jackwood | Infectious bursal disease in poultry | |
| CN100384988C (en) | Chicken astrovirus type 2 | |
| Awandkar et al. | Comparative investigations of infectious runting and stunting syndrome in vaccinated breeder chicks by inactivated reovirus and chicks from non-vaccinated breeders | |
| N Wambura | Detection of antibody to Newcastle disease virus in semidomesticated free-range birds (Numida meleagris and Columba livia domestica) and the risk of transmission of Newcastle disease to village chickens-short communication | |
| Hassan et al. | Growth of different infectious bursal disease virus strains in cell lines from origin of lymphoid leukosis tumors | |
| CN106754744B (en) | Group I avian adenovirus strain of serum type 4 and application thereof | |
| Alkateb et al. | Chicken infectious anaemia virus: A Mini-Review | |
| Anjum et al. | Adaptation of infectious bursal disease virus by cultivation in embryonated chicken eggs and evaluation as potential candidate for local live attenuated vaccine | |
| Andrabi et al. | Popular Article Chicken Infectious Anaemia: An Emerging Threat to Poultry Industry |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200615 |