RU2648156C1 - Metabiotic immunomodulatory agent containing cellular walls of symbiotic corinebacteria, for strengthening congenital immunity and method of its preparation - Google Patents
Metabiotic immunomodulatory agent containing cellular walls of symbiotic corinebacteria, for strengthening congenital immunity and method of its preparation Download PDFInfo
- Publication number
- RU2648156C1 RU2648156C1 RU2017111991A RU2017111991A RU2648156C1 RU 2648156 C1 RU2648156 C1 RU 2648156C1 RU 2017111991 A RU2017111991 A RU 2017111991A RU 2017111991 A RU2017111991 A RU 2017111991A RU 2648156 C1 RU2648156 C1 RU 2648156C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- metabiotic
- cell
- preparation
- nutrient medium
- washed
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 9
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 title claims 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 10
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 title abstract description 6
- 230000036039 immunity Effects 0.000 title description 3
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 title 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 title 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 claims abstract description 16
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 claims abstract description 7
- 241000186227 Corynebacterium diphtheriae Species 0.000 claims abstract description 6
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims abstract description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 23
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 claims description 16
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 claims description 16
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 13
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 12
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 9
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 8
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims description 8
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 7
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 5
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 4
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 claims description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 3
- 239000005018 casein Substances 0.000 claims description 3
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 32
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 17
- 239000013049 sediment Substances 0.000 abstract description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract 3
- 238000001085 differential centrifugation Methods 0.000 abstract 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 38
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 36
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 11
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 10
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 10
- 230000002584 immunomodulator Effects 0.000 description 8
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 7
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 6
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 6
- 102000004008 5'-Nucleotidase Human genes 0.000 description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 5
- 108010043671 prostatic acid phosphatase Proteins 0.000 description 5
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 4
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000186226 Corynebacterium glutamicum Species 0.000 description 3
- 206010054979 Secondary immunodeficiency Diseases 0.000 description 3
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 3
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 3
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 3
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 2-Amino-2-Deoxy-Hexose Chemical compound NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 2
- 241000588748 Klebsiella Species 0.000 description 2
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 2
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 2
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 2
- 208000031951 Primary immunodeficiency Diseases 0.000 description 2
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 2
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 2
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 2
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 2
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 1
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical compound CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010059378 Endopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000005593 Endopeptidases Human genes 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 102000004366 Glucosidases Human genes 0.000 description 1
- 108010056771 Glucosidases Proteins 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 241000736262 Microbiota Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000004721 adaptive immunity Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 229940064004 antiseptic throat preparations Drugs 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 1
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 1
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000000403 immunocorrecting effect Effects 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004144 purine metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000011012 sanitization Methods 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000012130 whole-cell lysate Substances 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/05—Actinobacteria, e.g. Actinomyces, Streptomyces, Nocardia, Bifidobacterium, Gardnerella, Corynebacterium; Propionibacterium
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/15—Corynebacterium
- C12R2001/16—Corynebacterium diphtheriae
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к производству бактериальных препаратов - метабиотиков из симбионтных бактерий, которое может быть использовано в медицине и ветеринарии для стимуляции и коррекции иммунного статуса при первичных и вторичных иммунодефицитных состояниях, связанных с инфекционными, аллергическими, онкологическими, соматическими заболеваниями, путем оптимизации иммунного гомеостаза и микробиоты макроорганизма.The invention relates to biotechnology, in particular to the production of bacterial preparations - metabiotics from symbiont bacteria, which can be used in medicine and veterinary medicine to stimulate and correct the immune status in primary and secondary immunodeficiency states associated with infectious, allergic, oncological, somatic diseases, by optimization of immune homeostasis and microbiota of a macroorganism.
Симбионтные микроорганизмы являются неотъемлемой частью многочисленных микробиоценозов человека и животных, которые вместе с макроорганизмом составляют единую экологическую систему, находящуюся в состоянии биологического равновесия. Бондаренко В.М. Метаболитные пробиотики: механизмы терапевтического эффекта при микроэкологических нарушениях. Consilium medicum, 2005, т. 7, №6, с. 437-443.Symbiotic microorganisms are an integral part of numerous microbiocenoses of humans and animals, which, together with a macroorganism, form a single ecological system in a state of biological equilibrium. Bondarenko V.M. Metabolic probiotics: mechanisms of the therapeutic effect in microecological disorders. Consilium medicum, 2005, v. 7, No. 6, p. 437-443.
Коринебактерии входят в состав микробиоценозов всех открытых полостей: т.е кожи, дыхательных путей, ротоглотки, гениталий и т.д., и их метаболиты оказывают влияние на макроорганизм, поддерживая его иммунный гомеостаз, тем самым влияя на сохранение здоровья.Corynebacteria are part of the microbiocenoses of all open cavities: i.e., the skin, respiratory tract, oropharynx, genitals, etc., and their metabolites affect the macroorganism, supporting its immune homeostasis, thereby affecting the preservation of health.
Профилактическая и терапевтическая активность бактериальных метаболитов-иммуномодуляторов подтверждается их действием на распознающие рецепторы клеток врожденного иммунитета.The prophylactic and therapeutic activity of bacterial immunomodulator metabolites is confirmed by their effect on the recognition receptors of innate immunity cells.
Современные исследования и открытия в области иммунологии позволяют оценить активность микробных метаболитов и их роль в стимуляции или коррекции иммунного статуса при первичных или вторичных иммунодефицитных состояниях, сопряженных прежде всего с инфекционными заболеваниями бактериальной и вирусной природы.Modern studies and discoveries in the field of immunology make it possible to evaluate the activity of microbial metabolites and their role in stimulating or correcting the immune status in primary or secondary immunodeficiency states, associated primarily with infectious diseases of a bacterial and viral nature.
Роль врожденного иммунитета, естественной и приобретенной невосприимчивости к инфекциям открывают возможность более целенаправленного управления инфекционным процессом. Так, отпадает прессинг на иммунную систему специфической вакцинацией или массированным использованием антибиотиков, приводящий к появлению еще более устойчивых видов патогенов и дисбиотическим микроэкологическим нарушениям.The role of innate immunity, natural and acquired immunity to infections open up the possibility of more targeted management of the infectious process. So, pressure on the immune system by specific vaccination or the massive use of antibiotics disappears, leading to the appearance of even more resistant types of pathogens and dysbiotic microecological disorders.
Известен иммуномодулятор, подавляющий активность продукции антител класса IgE, выделенный из продукта разложения клеточной стенки Corynebacteriae, полученного путем растворения клеточных стенок Corynebacterium glutamicum с одним из ферментов глюкозидазой и эндопептидазой. Степень распада определяется по растворению гексозамина или глюкозамина в надосадочной жидкости. В частном случае реализации изобретения штамм Corynebacterium glutamicum АТСС 15354 инокулируют в питательном бульоне и инкубируют со встряхиванием при температуре 30°C в течение 18 ч. Клетки собирают центрифугированием, чтобы получить приблизительно 3 г осадка. Влажные клетки отмывают центрифугированием один раз физиологическим раствором. Затем 500 мл физиологического раствора добавляют к осадку, суспендируют клетки и добавляют при перемешивании 4 мг лизоцима яичного белка. После перемешивания при температуре 37°C в течение 2 ч добавляют 4 мг сератиопептидазы и дополнительно инкубируют при температуре 37°C в течение 2 ч при перемешивании, чтобы получить материал разложения по настоящему изобретению. Полученную смесь нагревают при температуре 80°C в течение 30 мин и подвергают сублимационной сушке с получением 3 г сухого материала. US 5506388 В1, опубл. 14.01.2003.An immunomodulator is known that suppresses the activity of producing IgE class antibodies isolated from the decomposition product of the cell wall of Corynebacteriae obtained by dissolving the cell walls of Corynebacterium glutamicum with one of the enzymes glucosidase and endopeptidase. The degree of decomposition is determined by dissolving hexosamine or glucosamine in the supernatant. In the particular case of the invention, the strain Corynebacterium glutamicum ATCC 15354 is inoculated in a nutrient broth and incubated with shaking at a temperature of 30 ° C for 18 hours. Cells are collected by centrifugation to obtain approximately 3 g of sediment. Wet cells are washed by centrifugation once with saline. Then, 500 ml of physiological saline is added to the precipitate, the cells are suspended and 4 mg of egg white lysozyme is added with stirring. After stirring at 37 ° C for 2 hours, 4 mg of seratiopeptidase is added and further incubated at 37 ° C for 2 hours with stirring to obtain the decomposition material of the present invention. The resulting mixture was heated at a temperature of 80 ° C for 30 min and subjected to freeze-drying to obtain 3 g of dry material. US 5506388 B1, publ. 01/14/2003.
Способ получения препарата из целых клеток Corynebacterium glutamicum представляет собой процесс приготовления с помощью ферментов лизата целых клеток (лизоцим) и лизата клеточных стенок (сератиопептидаза). Введение такого лизата (сублимационно высушенного) приводит к снижению показателей гуморального иммунитета, т.е. антител изотипа IgE, отражающих наличие аллергического статуса организма.A method for preparing a preparation from whole cells of Corynebacterium glutamicum is a process of preparing whole cell lysate (lysozyme) and cell wall lysate (seratiopeptidase) using enzymes. The introduction of such a lysate (freeze-dried) leads to a decrease in humoral immunity, i.e. IgE isotype antibodies, reflecting the presence of an allergic status of the body.
Наиболее близким по технической сущности к заявленному является симбионтный штамм Corynebacteriae diphtheriae tox- №108 - депонированный в Государственной коллекции микроорганизмов нормальной микрофлоры (ГКНМ) ФБУН «МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора», используемый для приготовления иммуномодулятора, создающего неспецифическую резистентность против инфекционных заболеваний бактериальной и вирусной природы у сельскохозяйственных животных. Для получения иммуномодулятора штамм выращивают в течение 16 ч на плотной питательной среде на основе рыбного гидролизата с добавлением сыворотки крупного рогатого скота при температуре 37°C. Затем культуру смывают жидкой питательной средой на основе гидролизата казеина и после 5 ч культивирования вносят в емкости с той же питательной средой большего объема. Проводят выращивание биомассы при постоянном перемешивании при температуре 37°C в течение 16 ч. Микробные клетки осаждают центрифугированием при 5000 g в течение 20 мин и трижды промывают физиологическим раствором при центрифугировании в режиме 5000 g в течение 20 мин. Влажный осадок взвешивают, суспендируют в забуференном физиологическом растворе с pH 7,2 до концентрации клеток 5%. Затем целые клетки дезинтегрируют на ультразвуковой установке в течение 20 мин при частоте 20 кГц, амплитуде 14 мкм и охлаждением (льдом или водой) до температуры 30°C. Полученную после ультразвуковой обработки гомогенную суспензию дезинтеграта центрифугируют при 5000 g в течение 20 мин с целью отделения неразрушенных клеток и их фрагментов от клеточных стенок. Осадок удаляют, надосадочную жидкость центрифугируют при 14000 g в течение 20 мин. Осадок, представляющий собой препарат клеточных стенок, ресуспендируют в физиологическом растворе и снова центрифугируют при 14000 g в течение 20 мин. Отмывание клеточных стенок от примеси цитоплазмы повторяют 3 раза. Отмытые клеточные стенки ресуспендируют в дистиллированной воде, полученный маточный раствор стерилизуют при температуре 100°C, и подвергают лиофильному высушиванию. Полученный сухой препарат - порошок беловатого цвета, после разведения в физиологическом растворе образует суспензию. RU 2477751 С1, опубл. 20.03.2013.The closest in technical essence to the claimed is a symbiont strain of Corynebacteriae diphtheriae tox - No. 108 - deposited in the State collection of microorganisms of normal microflora (SCNM) FBSI “MNIIEM them. G.N. Gabrichevsky Rospotrebnadzor "used for the preparation of an immunomodulator that creates non-specific resistance against infectious diseases of bacterial and viral nature in farm animals. To obtain an immunomodulator, the strain is grown for 16 hours in a dense nutrient medium based on fish hydrolyzate with the addition of cattle serum at a temperature of 37 ° C. Then the culture is washed off with a liquid nutrient medium based on casein hydrolyzate and after 5 hours of cultivation, it is introduced into containers with a larger volume of the same nutrient medium. Biomass is grown with constant stirring at a temperature of 37 ° C for 16 hours. Microbial cells are precipitated by centrifugation at 5000 g for 20 minutes and washed three times with physiological saline by centrifugation at 5000 g for 20 minutes. The wet cake is weighed, suspended in buffered saline with a pH of 7.2 to a cell concentration of 5%. Then the whole cells are disintegrated on an ultrasonic unit for 20 minutes at a frequency of 20 kHz, an amplitude of 14 μm and cooling (ice or water) to a temperature of 30 ° C. Obtained after ultrasonic treatment, a homogeneous suspension of the disintegrate is centrifuged at 5000 g for 20 min in order to separate the undamaged cells and their fragments from the cell walls. The precipitate was removed, the supernatant was centrifuged at 14,000 g for 20 minutes. The precipitate, which is a cell wall preparation, is resuspended in physiological saline and centrifuged again at 14,000 g for 20 minutes. Washing of the cell walls from cytoplasmic impurities is repeated 3 times. The washed cell walls are resuspended in distilled water, the resulting mother liquor is sterilized at a temperature of 100 ° C, and subjected to freeze drying. The resulting dry preparation is a whitish powder, after dilution in physiological saline forms a suspension. RU 2477751 C1, publ. 03/20/2013.
Полученный таким способом препарат из симбионтного штамма C.diphtheriae tox- №108 (Государственная коллекция микроорганизмов нормальной микрофлоры ФБУН «МНИИЭМ» им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора) предлагается использовать в качестве иммуномодулятора для создания неспецифической резистентности у сельскохозяйственных животных.The preparation obtained in this way from the symbiont strain C.diphtheriae tox - No. 108 (State collection of microorganisms of normal microflora of the Federal State Budget Scientific Research Institute named after G. N. Gabrichevsky Rospotrebnadzor) is proposed to be used as an immunomodulator to create non-specific resistance in farm animals.
Технической задачей является разработка способа получения метабиотического препарата-иммуномодулятора для укрепления врожденного иммунитета у человека и животных, использующего клеточные стенки симбионтного штамма Corynebacteriae tox- №2 ГИСК им. Л.А. Тарасевича.The technical task is to develop a method for producing a metabiotic preparation-immunomodulator to strengthen innate immunity in humans and animals, using the cell walls of the symbiont strain Corynebacteriae tox - No. 2 GISK them. L.A. Tarasevich.
Технический результат от реализации заявленной группы изобретений заключается в получении безопасного и эффективного метабиотического препарата-иммуномодулятора для укрепления врожденного иммунитета у человека и животных, обеспечивающего поддержание иммунного гомеостаза, что так же способствует и коррекции микроэкологического статуса того или иного биотопа.The technical result from the implementation of the claimed group of inventions is to obtain a safe and effective metabiotic preparation-immunomodulator to strengthen innate immunity in humans and animals, ensuring the maintenance of immune homeostasis, which also contributes to the correction of the microecological status of a biotope.
Технический результат достигается тем, что симбионтный штамм Corynebacterium diphtheriae tox- №2 ГИСК им. Л.А. Тарасевича выращивают на плотной питательной среде, содержащей рыбный гидролизат с добавлением сыворотки крупного рогатого скота в соотношении 3:1 в течение 60-70 ч, затем культуру смывают жидкой питательной средой на основе гидролизата казеина и после 5 ч культивирования проводят наращивание биомассы в той же жидкой питательной среде при постоянном перемешивании в течение 16 ч, микробные клетки осаждают центрифугированием при 5000 g в течение 20 мин и трижды промывают раствором хлорида натрия при центрифугировании при 5000 g в течение 20 мин, полученный влажный осадок суспендируют в забуференном растворе хлорида натрия до концентрации клеток 5-6 мас.% и дезинтегрируют в течение 20 мин при частоте 20 кГц, амплитуде 14 мкм, при температуре не выше 30°C, полученный дезинтеграт клеток центрифугируют при 5000 g в течение 20 мин, осадок удаляют, надосадочную жидкость центрифугируют при 14000 g в течение 20 мин, полученный осадок ресуспендируют в растворе хлорида натрия и центрифугируют при 14000 g в течение 20 мин, отмывают клеточные стенки от примеси цитоплазмы и питательной среды 3 раза, полученный осадок клеточных стенок ресуспендируют в растворе стабилизатора - глицина в концентрации 15 мг/мл и стерилизуют.The technical result is achieved by the fact that the symbiotic strain of Corynebacterium diphtheriae tox - No. 2 GISK them. L.A. Tarasevich is grown in a dense nutrient medium containing fish hydrolyzate with the addition of cattle serum in a ratio of 3: 1 for 60-70 hours, then the culture is washed off with a liquid nutrient medium based on casein hydrolyzate and after 5 hours of cultivation, biomass is grown in the same liquid nutrient medium with constant stirring for 16 h, microbial cells are precipitated by centrifugation at 5000 g for 20 min and washed three times with a solution of sodium chloride by centrifugation at 5000 g for 20 min, half The resulting wet cake is suspended in a buffered sodium chloride solution to a cell concentration of 5-6 wt.% and disintegrated for 20 min at a frequency of 20 kHz, amplitude of 14 μm, at a temperature not exceeding 30 ° C, the resulting cell disintegrate is centrifuged at 5000 g for 20 min, the precipitate was removed, the supernatant was centrifuged at 14000 g for 20 min, the resulting precipitate was resuspended in sodium chloride solution and centrifuged at 14000 g for 20 min, the cell walls were washed from the impurities of the cytoplasm and
Полученный метабиотический препарат-иммуномодулятор для укрепления врожденного иммунитета у человека и животных содержит клеточные стенки симбионтного штамма Corynebacteriae tox- №2 ГИСК им. Л.А. Тарасевича.The resulting metabiotic immunomodulator drug for strengthening innate immunity in humans and animals contains the cell walls of the symbiont strain Corynebacteriae tox - No. 2 GISK them. L.A. Tarasevich.
Приготавливают препарат в форме спрея или высушивают методом лиофилизации. Препарат пригоден для использования в различных лекарственных формах - капсулах, порошках, инъекционных растворах, мазях, аэрозолях, свечах, каплях и др.The preparation is prepared in the form of a spray or dried by lyophilization. The drug is suitable for use in various dosage forms - capsules, powders, injection solutions, ointments, aerosols, suppositories, drops, etc.
Изобретение поясняется примером его осуществления.The invention is illustrated by an example of its implementation.
Пример 1.Example 1
Штамм Corynebacteriae tox- №2 ГИСК им. Л.А. Тарасевича выращивают на плотной питательной среде известного состава - рыбный гидролизат с добавлением сыворотки крупного рогатого скота в соотношении 3:1 при температуре 37°C в течение 65 ч. Затем культуру смывают жидкой питательной средой, содержащей, г/л: гидролизат казеина - 2,0, пептон - 10,0, глюкоза - 10,0, дрожжевой экстракт - 2,0, натрия хлорид - 6,0, вода - остальное. После 5 ч культивирования при температуре 37°C вносят в рабочие емкости с той же жидкой питательной средой и проводят наращивание биомассы при постоянном перемешивании при температуре 37°C в течение 16 ч. Микробные клетки осаждают центрифугированием при 5000 g в течение 20 мин и трижды промывают раствором хлорида натрия при центрифугировании в режиме не менее 5000 g в течение 20 мин. Полученный влажный осадок взвешивают, суспендируют в забуференном растворе хлорида натрия с pH 7,2 до концентрации клеток 5 мас.%. Затем суспензию целых клеток дезинтегрируют на ультразвуковой установке в течение 20 мин при частоте 20 кГц, амплитуде 14 мкм, при температуре не выше 30°C. Полученный дезинтеграт клеток центрифугируют при 5000 g в течение 20 мин с целью отделения неразрушенных клеток и их фрагментов от клеточных стенок. Осадок удаляют, надосадочную жидкость центрифугируют при 14000 g в течение 20 мин, отмывают клеточные стенки от примеси цитоплазмы и питательной среды 3 раза, полученный осадок клеточных стенок ресуспендируют в растворе стабилизатора - глицина в концентрации 15 мг/мл и стерилизуют.Strain Corynebacteriae tox - No. 2 GISK them. L.A. Tarasevich is grown on a dense nutrient medium of known composition - a fish hydrolyzate with the addition of cattle serum in a ratio of 3: 1 at a temperature of 37 ° C for 65 hours. Then the culture is washed off with a liquid nutrient medium containing, g / l: casein hydrolyzate - 2, 0, peptone - 10.0, glucose - 10.0, yeast extract - 2.0, sodium chloride - 6.0, water - the rest. After 5 hours of cultivation at 37 ° C, they are introduced into working containers with the same liquid nutrient medium and biomass is grown with constant stirring at 37 ° C for 16 hours. Microbial cells are pelleted by centrifugation at 5000 g for 20 minutes and washed three times. a solution of sodium chloride during centrifugation in the mode of not less than 5000 g for 20 minutes The resulting wet cake was weighed, suspended in a buffered sodium chloride solution with a pH of 7.2 to a cell concentration of 5 wt.%. Then, the whole cell suspension is disintegrated on an ultrasonic unit for 20 min at a frequency of 20 kHz, an amplitude of 14 μm, and at a temperature not exceeding 30 ° C. The resulting cell disintegrate is centrifuged at 5000 g for 20 minutes in order to separate the undamaged cells and their fragments from the cell walls. The precipitate is removed, the supernatant is centrifuged at 14000 g for 20 minutes, the cell walls are washed from the impurities of the cytoplasm and the
Оценка влияния препарата на систему врожденного иммунитета.Assessing the effect of the drug on the innate immunity system.
При оценке препаратов-модуляторов ориентируются не только на конечный результат невосприимчивости к инфекциям, но и на отдельные наиболее информативные показатели состояния иммунной системы. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств, ч. 2, глава 11, доклинические исследования иммуномодуляторов микробного происхождения. М., 2013. С. 284.When evaluating modulator drugs, they focus not only on the end result of immunity to infections, but also on some of the most informative indicators of the state of the immune system. Guidelines for preclinical studies of drugs,
Пример 2.Example 2
Влияние препарата на устойчивость к Klebsiella, pneumonia.The effect of the drug on resistance to Klebsiella, pneumonia.
Важной характеристикой неспецифической активности иммуномодуляторов является их способность стимулировать естественную резистентность организма к различным микробным инфекциям.An important characteristic of the non-specific activity of immunomodulators is their ability to stimulate the body's natural resistance to various microbial infections.
Изучение защитной роли препарата при заражении Klebsiella, pneumonia проводили на беспородных мышах. На фиг. 1 показано влияние препарата на устойчивость беспородных мышей к заражению Klebs. pneumonia. По оси ординат представлено количество погибших животных в %, по оси абсцисс - заражающие дозы Klebs. Pneumonia, * - достоверные различия между выживаемостью опытных и контрольных животных. За 1 сутки до заражения мышам подкожно ввели препарат в разных дозах. Как видно, гибель животных, получивших препарат в дозах 200 мкг и 400 мкг, ниже, чем у контрольных животных. Введение препарата в дозе 100 мкг повышает выживаемость мышей только при заражающих дозах 10-3; 10-5 микробных клеток.The study of the protective role of the drug in infection with Klebsiella, pneumonia was carried out on outbred mice. In FIG. 1 shows the effect of the drug on the resistance of outbred mice to Klebs infection. pneumonia. The ordinate represents the number of dead animals in%, the abscissa represents the infecting dose of Klebs. Pneumonia, * - significant differences between the survival of experimental and control animals. 1 day before infection, the mice were subcutaneously injected with the drug in different doses. As can be seen, the death of animals that received the drug in doses of 200 μg and 400 μg is lower than in control animals. The introduction of the drug in a dose of 100 μg increases the survival of mice only with infectious doses of 10 -3 ; 10 -5 microbial cells.
Пример 3.Example 3
Влияние препарата на устойчивость к St. aureus представлено в таблице 1.The effect of the drug on resistance to St. aureus is presented in table 1.
* - в скобках отмечено количество выживших животных.* - the number of surviving animals is indicated in parentheses.
Как видно из данных таблицы, защитное действие препарата проявляется в обеих группах животных, но у мышей F1(CBA×C57B1/6) оно выражается сильнее. У них выше выживаемость, а локальный очаг воспаления у большинства выживших отсутствует (т.е. все зажило). Наибольший защитный эффект отмечен при вакцинирующей дозе 100 мкг как у беспородных мышей, так и у гибридов.As can be seen from the table, the protective effect of the drug is manifested in both groups of animals, but in mice F 1 (CBA × C57B1 / 6) it is more pronounced. They have higher survival rates, and the local focus of inflammation in most survivors is absent (i.e., everything has healed). The greatest protective effect was noted with a vaccination dose of 100 μg in both outbred mice and hybrids.
Пример 4.Example 4
Влияние препарата на активность мембранного фермента макрофагов перитонеального экссудата (МПЭ) 5'-нуклеотидазы лабораторных животных.The effect of the drug on the activity of the membrane enzyme of macrophages of peritoneal exudate (MPE) 5'-nucleotidase laboratory animals.
В реализации биологической активности иммуномодуляторов важнейшую роль играют мембранные структуры. Большое значение для понимания механизма действия модуляторов и оценки их активности имеет изучение экзоферментов цитоплазматической мембраны макрофагов, в частности 5'-нуклеотидазы. 5'-нуклеотидаза (5'-н) - это один из основных ферментов пуринового обмена, который является ключевым звеном, опосредующим влияние различных факторов на жизнедеятельность клеток, в том числе клеток иммунной системы.In the implementation of the biological activity of immunomodulators, the most important role is played by membrane structures. Of great importance for understanding the mechanism of action of modulators and assessing their activity is the study of exoenzymes of the cytoplasmic membrane of macrophages, in particular 5'-nucleotidase. 5'-nucleotidase (5'-n) is one of the main enzymes of purine metabolism, which is a key link mediating the influence of various factors on the vital activity of cells, including cells of the immune system.
Снижение активности 5'-н - маркера цитоплазматической мембраны МПЭ является одним из характерных признаков активации этих клеток.A decrease in the activity of the 5'-n - marker of the cytoplasmic membrane of MPE is one of the characteristic signs of activation of these cells.
Препараты, обладающие иммуностимулирующим действием, вызывают снижение активности 5'-н в МПЭ беспородных мышей, а иммуносупрессивным, наоборот - повышение ферментативной активности. Препараты, не обладающие иммуномодулирующим эффектом, не изменяют уровня активности 5'-нуклеотидазы в МПЭ.Drugs that have an immunostimulating effect cause a decrease in 5'-n activity in MPE of outbred mice, and immunosuppressive ones, on the contrary, increase enzymatic activity. Drugs that do not have an immunomodulatory effect do not change the level of 5'-nucleotidase activity in MPE.
Активность 5'-нуклеотидазы в МПЭ мышей гибридов F1(CBA×C57B1/6) в течение 30 суток после подкожного введения разных доз препарата показана на фиг.2. По оси абсцисс представлено время в сутках, по оси ординат - активность 5'-н у вакцинированных животных по отношению к контрольным, * - достоверные различия между уровнем активности 5'-н у вакцинированных и контрольных мышей.The activity of 5'-nucleotidase in the MPE of mice of hybrids F 1 (CBA × C57B1 / 6) for 30 days after subcutaneous administration of different doses of the drug is shown in figure 2. The abscissa axis represents time in days, the ordinate axis shows 5'-n activity in vaccinated animals relative to the control, * * significant differences between the 5'-n level in vaccinated and control mice.
Видно, что при применении препарата в дозах 100 мкг и 200 мкг наблюдается стабильное снижение активности фермента относительно контрольных значений в течение всего срока исследования. Препарат в дозе 400 мкг вызывает повышение активности фермента к 23 суткам, а к 31 - эта активность падает.It can be seen that when using the drug in doses of 100 μg and 200 μg, a stable decrease in the enzyme activity relative to control values is observed throughout the study period. The drug at a dose of 400 μg causes an increase in enzyme activity by 23 days, and by 31 this activity decreases.
Полученные данные свидетельствуют о наличии у препарата длительного иммуностимулирующего эффекта. Глубина этого эффекта зависит от вводимой животным дозы и срока наблюдения.The data obtained indicate the presence of a long-term immunostimulating effect in the drug. The depth of this effect depends on the dose administered to the animal and the duration of observation.
Пример 5.Example 5
Влияние препарата на продукцию ИЛ-2 представлено в таблице 2.The effect of the drug on the production of IL-2 is presented in table 2.
Под воздействием иммуномодулятора микробного происхождения возрастает продукция противовоспалительных цитокинов, необходимых для инициации клеточного и гуморального иммунитета.Under the influence of an immunomodulator of microbial origin, the production of anti-inflammatory cytokines necessary for the initiation of cellular and humoral immunity increases.
Определение продукции ИЛ-2 под влиянием препарата-иммуномодулятора в дозах 10 мг/кг при 2-кратном введении мышам линии F1(CBA×B6) приведены в таблице 2. Видно, что введение препарата стимулирует продукцию ИЛ-2 спленоцитами, активированными конкавалином А, что выражается в усилении пролиферации клеток на 50-70% (индекс стимуляции 1,0). Препарат в дозах 1, 0,1 мг/кг стимулирует ИЛ-2 меньшим процентом клеток, что и отражает индекс стимуляции (2,1±0,25 и 1,2±0,3).The determination of the production of IL-2 under the influence of the immunomodulator at doses of 10 mg / kg with 2-fold administration of the F 1 line (CBA × B6) to mice is shown in Table 2. It can be seen that the introduction of the drug stimulates the production of IL-2 with splenocytes activated with concavalin A , which is expressed in enhancing cell proliferation by 50-70% (stimulation index 1.0). The drug in doses of 1, 0.1 mg / kg stimulates IL-2 with a lower percentage of cells, which reflects the stimulation index (2.1 ± 0.25 and 1.2 ± 0.3).
Стимулирующий эффект препарата на продукцию ИЛ-2 по сравнению со стимулирующим эффектом некоторых известных иммуномодуляторов (например, полисахаридами), то последние существенно уступают препарату из коринебактерий.The stimulating effect of the drug on the production of IL-2 compared with the stimulating effect of some known immunomodulators (for example, polysaccharides), the latter are significantly inferior to the drug from corynebacteria.
Выявленное усиление синтеза ИЛ-2 у животных, иммунизированных препаратом, усиливает общую экспрессию иммунокомпетентных клеток, что повышает уровень неспецифической резистентности в ответ на контакт с бактериальными и вирусными антигенами.The revealed increase in IL-2 synthesis in animals immunized with the drug enhances the general expression of immunocompetent cells, which increases the level of non-specific resistance in response to contact with bacterial and viral antigens.
Пример 6.Example 6
Влияние препарата на образование Т-киллеров in vivo у животных, иммунизированных препаратом, в ответ на введение аллогенных опухолевых клеток.The effect of the drug on the formation of T-killers in vivo in animals immunized with the drug in response to the introduction of allogeneic tumor cells.
* - Указаны средние трех независимых опытов; соотношение киллер:мишень - 30: 1.* - Indicates the average of three independent experiments; ratio killer: target - 30: 1.
Видно, что у животных, иммунизированных препаратом, выявлена высокая неспецифическая активность киллеров в отношении аллогенных опухолевых клеток. Более высокая активность выявлена при иммунизации животных дозой 10 мг/кг.It can be seen that in animals immunized with the drug, a high nonspecific activity of killers against allogeneic tumor cells was revealed. Higher activity was detected during immunization of animals with a dose of 10 mg / kg.
Пример 7.Example 7
Влияние препарата на количественное содержание лимфоцитов в крови у 40 взрослых лиц - носителей возбудителя дифтерии.The effect of the drug on the quantitative content of lymphocytes in the blood of 40 adults - carriers of the causative agent of diphtheria.
Проблема носительства возбудителя дифтерии C. diphtheriae tox+ и заболевания привитых остается актуальной. Санация антибиотиками и антисептиками не предотвращает длительного и рецидивирующего носительства возбудителя, которое преимущественно наблюдается у привитых лиц с хронической патологией ЛОР-органов, отягощенных аллергическим статусом и вторичным иммунодефицитным состоянием.The problem of carriage of the diphtheria causative agent C. diphtheriae tox + and vaccine diseases remains relevant. Sanitation with antibiotics and antiseptics does not prevent prolonged and recurrent carriage of the pathogen, which is mainly observed in vaccinated individuals with chronic pathology of ENT organs, weighed down by allergic status and secondary immunodeficiency.
В таблице 4 представлены клинические показатели содержания лимфоцитов в крови длительных носителей C.diphtheriae tox+ до и после введения препарата.Table 4 presents the clinical indicators of the content of lymphocytes in the blood of long-term carriers of C. diphtheriae tox + before and after administration of the drug.
Примечание:Note:
n - число обследованных,n is the number of examined
отличие от нормы значимо при р*<0,05; **<0,01; ***<0,001.the difference from the norm is significant at p * <0.05; ** <0.01; *** <0.001.
До введения препарата регистрировались индивидуальные отклонения в содержании лимфоцитов по сравнению с их содержанием в крови здоровых лиц. Поэтому все обследованные в зависимости от исходных показателей были разделены на три группы. В первую группу вошли носители с низким исходным содержанием лимфоцитов, во вторую - с высоким, и в третью - с показателями, соответствовавшими норме.Before the drug was administered, individual deviations in the content of lymphocytes were recorded in comparison with their content in the blood of healthy individuals. Therefore, all examined, depending on the initial indicators, were divided into three groups. The first group included carriers with a low initial content of lymphocytes, the second with high, and the third with normal rates.
У всех лиц первой группы показатели содержания лимфоцитов достоверно ниже, чем в контрольной группе. После введения препарата содержание лимфоцитов в первой группе увеличилось, приближаясь к показателям нормы.In all individuals of the first group, the lymphocyte counts are significantly lower than in the control group. After the introduction of the drug, the lymphocyte content in the first group increased, approaching the norm.
В группе №2 носителей с высоким содержанием лимфоцитов в крови после введения препарата их показатели содержания лимфоцитов снизились, приближаясь к показателям контрольной группы.In group No. 2 carriers with a high content of lymphocytes in the blood after administration of the drug, their lymphocyte counts decreased, approaching that of the control group.
У носителей третьей группы, в крови которых исходное содержание лимфоцитов соответствовало норме, после введения препарата количество лимфоцитов в крови осталось прежним, т.е. оно колебалось в пределах верхней и нижней границы нормы.In carriers of the third group, in the blood of which the initial content of lymphocytes corresponded to the norm, after the administration of the drug, the number of lymphocytes in the blood remained the same, i.e. it fluctuated within the upper and lower limits of the norm.
Представленные данные свидетельствуют об избирательном воздействии препарата на иммунную систему человека. Так, при низкой исходной концентрации после введения препарата происходит стимуляция их содержания, при высокой - снижение, при концентрации, соответствующей норме, их содержание не меняется. Следовательно, метабиотический препарат-иммуномодулятор из симбионтных коринебактерий обладает иммуномодулирующей активностью, безвредностью и иммунокорегирующими свойствами. Изменение количественного состава лимфоцитов в крови длительных носителей в сторону физиологического оптимума сопровождалось положительным санирующим эффектом.The data presented indicate the selective effect of the drug on the human immune system. So, at a low initial concentration after administration of the drug, their content is stimulated, at high - a decrease, at a concentration corresponding to the norm, their content does not change. Consequently, a metabiotic preparation-immunomodulator from symbiont corynebacteria has immunomodulating activity, harmlessness and immunocorrecting properties. A change in the quantitative composition of lymphocytes in the blood of long-term carriers towards a physiological optimum was accompanied by a positive sanitizing effect.
Итак, представленные характеристики иммуностимулирующих свойств препарата свидетельствуют о его неспецифической активности.So, the presented characteristics of the immunostimulating properties of the drug indicate its non-specific activity.
Выраженная способность макроорганизма под воздействием препарата-метабиотика стимулировать резистентность к инфекционным возбудителям повышает активность системы макрофагов, ИЛ-2, активность Т-киллеров, что позволяет говорить о возможности использования метабиотического препарата-иммуномодулятора из симбионтных коринебактерий для повышения неспецифической резистентности (адаптивного иммунитета) макроорганизма.The expressed ability of a macroorganism to stimulate resistance to infectious pathogens under the influence of a metabiotic preparation increases the activity of the macrophage system, IL-2, the activity of T-killers, which suggests the possibility of using a metabiotic immunomodulator from symbiotic corynebacteria to increase the non-specific resistance (adaptive immunity) of the macroorganism.
Claims (3)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017111991A RU2648156C1 (en) | 2017-04-10 | 2017-04-10 | Metabiotic immunomodulatory agent containing cellular walls of symbiotic corinebacteria, for strengthening congenital immunity and method of its preparation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017111991A RU2648156C1 (en) | 2017-04-10 | 2017-04-10 | Metabiotic immunomodulatory agent containing cellular walls of symbiotic corinebacteria, for strengthening congenital immunity and method of its preparation |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2648156C1 true RU2648156C1 (en) | 2018-03-22 |
Family
ID=61707979
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017111991A RU2648156C1 (en) | 2017-04-10 | 2017-04-10 | Metabiotic immunomodulatory agent containing cellular walls of symbiotic corinebacteria, for strengthening congenital immunity and method of its preparation |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2648156C1 (en) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2019181C1 (en) * | 1992-05-25 | 1994-09-15 | Елена Александровна Шмелева | Method of nonspecific resistance organism increase, and a method of preparation preparing for increase of nonspecific organism resistance |
| RU2127119C1 (en) * | 1997-12-08 | 1999-03-10 | Андреева Зоя Михайловна | Method of preparing nonspecific inactivated liquid immunomodulating agent ("modcor") from corynebacterium |
| US20030091596A1 (en) * | 1998-11-20 | 2003-05-15 | Asama Chemical Co., Ltd. | Immunomodulator, immunomodulator food |
-
2017
- 2017-04-10 RU RU2017111991A patent/RU2648156C1/en active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2019181C1 (en) * | 1992-05-25 | 1994-09-15 | Елена Александровна Шмелева | Method of nonspecific resistance organism increase, and a method of preparation preparing for increase of nonspecific organism resistance |
| RU2127119C1 (en) * | 1997-12-08 | 1999-03-10 | Андреева Зоя Михайловна | Method of preparing nonspecific inactivated liquid immunomodulating agent ("modcor") from corynebacterium |
| US20030091596A1 (en) * | 1998-11-20 | 2003-05-15 | Asama Chemical Co., Ltd. | Immunomodulator, immunomodulator food |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5603537B2 (en) | Lipopolysaccharide and method for producing lipopolysaccharide | |
| US20040047881A1 (en) | Delivery of disease control in aquaculture and agriculture using microbes containing bioactive proteins | |
| JP5511112B2 (en) | Disrupted microbial cell and its blend | |
| CN101144062B (en) | Lactobacillus casei strain and application for products thereof in bird immunity | |
| JPWO2005030938A1 (en) | Fermentation and culture method, plant fermented extract, plant fermented extract powder and blended plant fermented extract | |
| KR101533602B1 (en) | Compositions for inducing an immune response of silkworm and silkworm having anitmicrobial induced an immune response by using the same | |
| CN106413724A (en) | Lactobacillus rhamnosus RHT-3201 conjugated to polysaccharide polymer binder, and use thereof for prevention or treatment of atopic diseases | |
| AU691797B2 (en) | Immunotherapeutic composition | |
| CN108079023A (en) | Application of Lactobacillus equine ZW3 in the preparation of drugs and food for preventing or improving stress-induced mental problems | |
| RU2648156C1 (en) | Metabiotic immunomodulatory agent containing cellular walls of symbiotic corinebacteria, for strengthening congenital immunity and method of its preparation | |
| Steiro et al. | Optimising of culture conditions and stimulation of head kidney macrophages from Atlantic cod, Gadus morhua L. | |
| Karuvelan et al. | Immunomodulatory and growth-enhancing postbiotic effects in poultry | |
| JP4479162B2 (en) | Immune function regulator and immune function-modulating food | |
| RU2414227C1 (en) | Immunomodulator for broiler culture and method for applying thereof | |
| RU2697828C1 (en) | Method of producing a preparation for preventing and treating radiation damage of animals and a method for preventing and treating radiation damage of animals | |
| CN104120093A (en) | Bifidobacterium longum and application thereof, and functional food composition and preparation method thereof | |
| RU2101020C1 (en) | Preparation showing immunostimulating effect | |
| CN105412155A (en) | Application of trichoderma pseudokoningii exopolysaccharide in preventing and treating colon cancer and application of chemotherapeutic drug combined with trichoderma pseudokoningii exopolysaccharide in treating colon cancer | |
| KR20200130174A (en) | Nucleic acids derived from microorganism and use thereof | |
| CN111053789A (en) | Methods and compositions for modulating the immune system | |
| RU2019181C1 (en) | Method of nonspecific resistance organism increase, and a method of preparation preparing for increase of nonspecific organism resistance | |
| RU2086246C1 (en) | Method of preparing enzymotherapeutic, antiviral and immunomodulating preparation and enzymotherapeutic, antiviral and immunomodulating preparation | |
| CN118634253B (en) | Application of streptococcus thermophilus STN26 microbial inoculum in preparation of product for preventing or/and improving constipation accompanied by parkinsonism | |
| RU2475254C1 (en) | PREPARATION 'ToksiBioVit' FOR PREVENTING AND TREATING GASTROINTESTINAL DISEASES | |
| RU2709809C1 (en) | Method for cellular laboratory immunity of laboratory animals |