RU2545909C2 - Method of immunochromatographic determination of specific antibodies - Google Patents
Method of immunochromatographic determination of specific antibodies Download PDFInfo
- Publication number
- RU2545909C2 RU2545909C2 RU2013111990/15A RU2013111990A RU2545909C2 RU 2545909 C2 RU2545909 C2 RU 2545909C2 RU 2013111990/15 A RU2013111990/15 A RU 2013111990/15A RU 2013111990 A RU2013111990 A RU 2013111990A RU 2545909 C2 RU2545909 C2 RU 2545909C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- test
- antibodies
- antigen
- strip
- membrane
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 30
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 19
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 19
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 19
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 16
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 15
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 13
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 claims description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 4
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 claims description 3
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 claims description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 abstract description 25
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 7
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 abstract description 3
- 239000010931 gold Substances 0.000 abstract description 3
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 abstract description 3
- 238000003317 immunochromatography Methods 0.000 abstract description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract description 3
- 239000011148 porous material Substances 0.000 abstract description 2
- 238000012505 colouration Methods 0.000 abstract 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 9
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 4
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 3
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- -1 PhoS Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 1
- 101710123661 Venom allergen 5 Proteins 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000009589 serological test Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к иммунологии и медицинской диагностике и представляет собой метод иммунохроматографического определения специфических антител. Наличие в сыворотке крови антител, специфичных к возбудителю определенного заболевания, является эффективным критерием, позволяющим с высокой достоверностью диагностировать соответствующее инфекционное заболевание (Rose N.R. (ed.). Manual of Clinical Laboratory Immunology (4th ed.). Washington, D.C.: American Society for Microbiology, 1992.). В случае диагностики инфекционных заболеваний преимуществами данного подхода по сравнению с непосредственным выявлением и идентификацией возбудителя является определенность при выборе тестируемой пробы (сыворотка крови, тогда как возбудитель может на данной стадии инфекции преимущественно локализоваться в самых разных органах и тканях), а также возможность быстрой детекции достаточно высокого уровня антител, индуцированного контактом с антигеном, в то время как для выявления антигена могут потребоваться довольно продолжительные стадии доращивания до достижения им регистрируемой концентрации. Хотя в настоящее время активно используются как микробиологические, так и иммунологические способы диагностики инфекционных заболеваний, для проведения массового первичного скрининга оптимально иммунологическое определение наличия в сыворотке крови специфических антител (серодиагностика), которое может быть реализовано с высокой экспрессностью и производительностью. Особенный интерес вызывают серодиагностические подходы в тех случаях, когда в силу особенностей роста микроорганизмов получение результатов микробиологического тестирования может потребовать значительного времени.The invention relates to immunology and medical diagnostics and is a method of immunochromatographic determination of specific antibodies. The presence in the blood serum of antibodies specific for the causative agent of a particular disease is an effective criterion for diagnosing the corresponding infectious disease with high confidence (Rose NR (ed.). Manual of Clinical Laboratory Immunology (4th ed.). Washington, DC: American Society for Microbiology, 1992.). In the case of the diagnosis of infectious diseases, the advantages of this approach compared to the direct identification and identification of the pathogen are certainty when choosing a test sample (blood serum, while the pathogen can be mainly localized in various organs and tissues at this stage of infection), as well as the possibility of quick detection is sufficient high levels of antibodies induced by contact with the antigen, while quite long tadii of growing until they reach a registered concentration. Although both microbiological and immunological methods for diagnosing infectious diseases are currently actively used, for the primary primary screening, the immunological determination of the presence of specific antibodies in the blood serum (serodiagnosis) is optimal, which can be implemented with high expressivity and productivity. Of particular interest are serodiagnostic approaches in those cases where, due to the characteristics of the growth of microorganisms, obtaining the results of microbiological testing may require considerable time.
Благодаря высокой чувствительности и специфичности серологические тесты незаменимы при массовых обследованиях. Кроме того, гуморальный иммунный ответ отражает активный инфекционный процесс, и поэтому результаты иммунохимического тестирования достоверно отражают именно случаи заболевания, дискриминируя их от бактерионосительства.Due to its high sensitivity and specificity, serological tests are indispensable for mass examinations. In addition, the humoral immune response reflects an active infectious process, and therefore the results of immunochemical testing reliably reflect precisely the cases of the disease, discriminating them against bacterial carriage.
Иммунохимический анализ может быть реализован в различных форматах. Однако, поскольку для массовых обследований первоочередное значение имеют скорость и производительность тестирования, в данной ситуации несомненными преимуществами обладает иммунохроматографический анализ, для которого все необходимые реагенты предварительно нанесены на мембранные компоненты тест-полоски, и ее контакт с тестируемой пробой непосредственно инициирует движение фронта жидкости по мембранам, протекание специфических реакций и формирование иммунных комплексов, которые благодаря включению в их состав окрашенного маркера могут детектироваться визуально или с помощью оптического детектора (Рис.1).Immunochemical analysis can be implemented in various formats. However, since the testing speed and performance are of primary importance for mass examinations, in this situation immunochromatographic analysis has undoubted advantages, for which all the necessary reagents are preliminarily applied to the membrane components of the test strip, and its contact with the test sample directly initiates the movement of the liquid front across the membranes , the occurrence of specific reactions and the formation of immune complexes, which, due to the inclusion of a colored mark pa can be detected visually or by an optical detector (Fig.1).
Применительно к серодиагностике (определению антител, специфичных к определенному антигену или группе антигенов) общая схема иммунохроматографии заключается в следующем.In relation to serodiagnosis (determination of antibodies specific to a particular antigen or group of antigens), the general scheme of immunochromatography is as follows.
Проба, потенциально содержащая специфические антитела, под действием капиллярных сил перемещается вдоль тест-полоски. При этом она вначале взаимодействует с окрашенными частицами (коллоидное золото или иной маркер), на поверхности которых адсорбирован компонент, предназначенный для связывания с антителами. Обычно в качестве такового компонента выбирают антивидовые антитела (иммуноглобулины, выделенные из сыворотки животного, иммунизированного препаратом иммуноглобулинов человека или другого организма, для которого проводится серодиагностика), белок А из Staphylococcus aureus или белок G из Streptococcus spp. Затем фронт жидкости преодолевает аналитическую (тестовую) зону, которая представляет собой участок мембраны с иммобилизованным антигеном (нативным или специально модифицированным для эффективной сорбции). Степень связывания маркера с иммобилизованным антигеном и, соответственно, интенсивность окрашивания мембраны определяются концентрацией специфических антител в пробе. Для проверки качества реагентов и сохранения функциональности тест-системы используется расположенная далее контрольная зона, в которой компонент, сорбированный на окрашенной частице, связывается с соответствующим иммобилизованным на мембране реагентом.The sample, potentially containing specific antibodies, moves along the test strip under the action of capillary forces. At the same time, it first interacts with colored particles (colloidal gold or another marker), on the surface of which a component designed to bind to antibodies is adsorbed. Typically, anti-species antibodies (immunoglobulins isolated from the serum of an animal immunized with a human immunoglobulin preparation or another organism for which serodiagnosis is performed) are selected as such component, protein A from Staphylococcus aureus or protein G from Streptococcus spp. Then the front of the liquid overcomes the analytical (test) zone, which is a portion of the membrane with immobilized antigen (native or specially modified for effective sorption). The degree of marker binding to the immobilized antigen and, accordingly, the intensity of membrane staining are determined by the concentration of specific antibodies in the sample. To check the quality of the reagents and maintain the functionality of the test system, the control zone located below is used, in which the component adsorbed on the colored particle is bound to the corresponding reagent immobilized on the membrane.
Ниже представлена информация о методике, реализуемой в тест-системе «TB-Check-I» фирмы «Vedalab» (Франция) - см. http://www.sanitamedikal.com/Assets/MD_220002_m3_TB_1408_c.pdf. Данная методика определения антител к возбудителю туберкулеза рассматривается в настоящей заявке в качестве прототипной.Below is information about the methodology implemented in the TB-Check-I test system of Vedalab (France) - see http://www.sanitamedikal.com/Assets/MD_220002_m3_TB_1408_c.pdf. This method of determining antibodies to the causative agent of tuberculosis is considered in this application as a prototype.
Метод основан на комбинации антител к иммуноглобулинам человека, конъюгированных с хромогеном, и высокоочищенного БЦЖ-белка… При прохождении исследуемого образца через адсорбционную зону тестового устройства конъюгат, содержащий меченые антитела, связывается с IgG, образуя комплекс «антиген-антитело». Этот комплекс взаимодействует с высокоочищенным БЦЖ-белком в тестовой зоне устройства, и если концентрация специфического IgG к возбудителю туберкулеза превышает 350 Е/мл, образует окрашенную полосу. При низкой концентрации антител окрашенная полоса в тестовой зоне не образуется. Несвязавшийся конъюгат взаимодействует с реагентом в контрольной зоне тестового устройства, образуя окрашенную полосу, что указывает на правильное проведение теста… Процедура исследования: …заполнить одноразовую пипетку сывороткой или плазмой и внести 1 каплю в окно для пробы тестового устройства. Добавить в окно для пробы 5-6 полных капель разбавляющего раствора (дилюента). Через 10-15 мин произвести учет результатов.The method is based on a combination of antibodies to human immunoglobulins conjugated to a chromogen and a highly purified BCG protein ... When a test sample passes through the adsorption zone of a test device, the conjugate containing labeled antibodies binds to IgG to form an antigen-antibody complex. This complex interacts with a highly purified BCG protein in the test zone of the device, and if the concentration of specific IgG to the tuberculosis pathogen exceeds 350 U / ml, it forms a colored band. At a low concentration of antibodies, a colored band does not form in the test area. An unbound conjugate interacts with the reagent in the control zone of the test device, forming a colored strip, which indicates the proper conduct of the test ... Test procedure: ... fill the disposable pipette with serum or plasma and add 1 drop to the test device sample window. Add 5-6 full drops of dilution solution (diluent) to the sample window. After 10-15 minutes, record the results.
Одной из наиболее важных задач в иммунохроматографии является повышение чувствительности анализа. Для увеличения чувствительности анализа следует использовать как можно более высокие концентрации конъюгата и рецептора в аналитической зоне. Однако увеличение концентрации коллоидного конъюгата лимитировано тем фактом, что конъюгат должен полностью продиффундировать через иммунохроматографические мембраны за время проведения анализа (~10 мин), поэтому использование конъюгатов с оптической плотностью выше 10 проблематично. Увеличение концентрации центров связывания на поверхности коллоида лимитировано низкой сорбционной емкостью наночастиц золота - обычно концентрация белка около 10 мкг/мл является насыщающей (GHITESCU, L. and M. BENDAYAN. Immunolabeling efficiency of protein A-gold complexes. J. Histochem. Cytochem., 38, 1523-1530, 1990). Сорбционная емкость рабочей мембраны иммунохроматографического теста на несколько порядков выше, чем коллоидного золота - до 15 мг/мл (http://www.millipore.com/publications.nsf/a73664f9i981af8c852569b9005b4eee/348ee7096d9 3729b85256bf40066a40d/$FILE/tb500en00.pdf), но повышение концентрации рецептора в аналитической зоне в стандартном методе иммунохроматографического анализа для серодиагностики нецелесообразно по экономическим причинам, так как рецептором обычно являются самые дорогие компоненты тест-системы: рекомбинантные белки бактерий или вирусов. Поэтому нами был предложен способ иммунохроматографического анализа, в котором молекулы антигена или антигенов сорбируются на поверхности коллоидного золота (при этом расход антигена значительно снижается: с 300-600 нг до 100 нг на тест), а в аналитической зоне тест-полоски иммобилизуется компонент для связывания антител: антивидовые антитела, белок А из Staphylococcus uureus или белок G из Streptococcus spp. Перечисленные реагенты для связывания антител широко используются в иммунохимии (в иммуноанализе, для выделения очистки антител и т.д.), поэтому существует налаженное массовое производство данных реагентов и их стоимость более чем на порядок ниже стоимости рекомбинантных антигенов, поэтому 10-кратное повышение концентрации данных реагентов не приводит к существенному повышению стоимости теста и при этом позволяет значительно повысить чувствительность анализа.One of the most important tasks in immunochromatography is to increase the sensitivity of the analysis. To increase the sensitivity of the assay, the highest possible concentrations of the conjugate and receptor in the assay area should be used. However, an increase in the concentration of the colloidal conjugate is limited by the fact that the conjugate must completely diffuse through the immunochromatographic membranes during the analysis (~ 10 min); therefore, the use of conjugates with an optical density above 10 is problematic. The increase in the concentration of binding sites on the colloid surface is limited by the low sorption capacity of gold nanoparticles - usually a protein concentration of about 10 μg / ml is saturating (GHITESCU, L. and M. BENDAYAN. Immunolabeling efficiency of protein A-gold complexes. J. Histochem. Cytochem., 38, 1523-1530, 1990). The sorption capacity of the working membrane of the immunochromatographic test is several orders of magnitude higher than colloidal gold - up to 15 mg / ml (http://www.millipore.com/publications.nsf/a73664f9i981af8c852569b9005b4eee/348ee7096d9 3729b85256bf40066a40d500 / 00 FILE / $ FILE / FILE concentration of the receptor in the analytical zone in the standard method of immunochromatographic analysis for serodiagnostics is impractical for economic reasons, since the receptor is usually the most expensive components of the test system: recombinant proteins of bacteria or viruses. Therefore, we proposed a method for immunochromatographic analysis in which antigen or antigen molecules are adsorbed on the surface of colloidal gold (in this case, the antigen consumption is significantly reduced: from 300-600 ng to 100 ng per test), and the binding component is immobilized in the analytical zone of the test strip antibodies: anti-species antibodies, protein A from Staphylococcus uureus or protein G from Streptococcus spp. The listed reagents for binding antibodies are widely used in immunochemistry (in immunoassay, to highlight the purification of antibodies, etc.), therefore, there is a well-established mass production of these reagents and their cost is more than an order of magnitude lower than the cost of recombinant antigens, therefore a 10-fold increase in data concentration reagents does not lead to a significant increase in the cost of the test and at the same time can significantly increase the sensitivity of the analysis.
Предложенный подход был реализован заявителями для серодиагностики туберкулеза с использованием антигена 38 кДа (Ag78, antigen 5, PhoS, Rv0934) M. tuberculosis. Ниже представлено описание способа получения тест-полосок и проведения иммунохроматографического анализа, а также полученные результаты.The proposed approach was implemented by applicants for serodiagnosis of tuberculosis using the 38 kDa antigen (Ag78,
ПримерExample
Для формирования тест-системы использовали набор мембран «mdi Easypack» фирмы «Advanced Microdevices» (Индия), включающий рабочую мембрану CNPC-SN12 L2-P25 (размер пор 15 мкм), мембрану под конъюгат PT-R5, мембрану для нанесения образца GFB-R4, адсорбирующую мембрану АР 045, для нанесения БСА использовалась мембрана PT-R5.For the formation of the test system, a set of mdi Easypack membranes from Advanced Microdevices (India) was used, including a CNPC-SN12 L2-P25 working membrane (pore size 15 μm), a PT-R5 conjugate membrane, and a GFB-applied sample membrane. R4, AP 045 adsorbing membrane; PT-R5 membrane was used for BSA deposition.
На мембраны были нанесены следующие реагенты:The following reagents were applied to the membranes:
1. Белок А из Staphylococcus aureus, производства ООО «Имтек» (Россия).1. Protein A from Staphylococcus aureus, manufactured by Imtek LLC (Russia).
2. Конъюгат коллоидного золота со средним диаметром частиц 30 нм и рекомбинантного антигена 38 кДа М. tuberculosis (Rv0934), фирмы «Arista Biologicals Inc.» (США), кат. № AGMTB-0220.2. The conjugate of colloidal gold with an average particle diameter of 30 nm and a recombinant antigen of 38 kDa M. tuberculosis (Rv0934), the company "Arista Biologicals Inc." (USA), cat. No. AGMTB-0220.
3. Моноклональные антитела НТМ81 против рекомбинантного антигена 38 кДа M. tuberculosis. Центр молекулярной диагностики и терапии, Москва (Россия).3. Monoclonal antibodies NTM81 against the 38 kD recombinant antigen M. tuberculosis. Center for Molecular Diagnostics and Therapy, Moscow (Russia).
Для формирования аналитической зоны использовали белок А, контрольной зоны - моноклональные антитела НТМ81 против рекомбинантного антигена 38 кДа M. tuberculosis. На 1 см полосы наносили 2 мкл раствора белка А (10,0 мг/мл в 50 мМ фосфатном буфере, pН 7,4) и 2 мкл раствора антител (0,5 мг/мл в том же буфере). Конъюгат коллоидного золота с антигеном наносили в разведении, соответствующем D520=6,5, в объеме 10 мкл на 1 см полосы. Для нанесения реагентов использовали диспенсер «IsoFlow» фирмы «Imagene Technology» (США). После нанесения реагентов мембраны высушивали не менее 24 ч в помещении с контролируемыми температурой и влажностью. Листы мембран с нанесенными иммунореагентами нарезали на индивидуальные тест-полоски шириной 3,5 мм.Protein A was used to form the analytical zone, and the NTM81 monoclonal antibodies against the 38 kD recombinant antigen M. tuberculosis were used as the control zone. 2 μl of Protein A solution (10.0 mg / ml in 50 mM phosphate buffer, pH 7.4) and 2 μl of antibody solution (0.5 mg / ml in the same buffer) were applied to 1 cm of the strip. The conjugate of colloidal gold with antigen was applied in a dilution corresponding to D 520 = 6.5, in a volume of 10 μl per 1 cm of the strip. For the application of reagents, an IsoFlow dispenser from Imagene Technology (USA) was used. After applying the reagents, the membranes were dried for at least 24 hours in a room with controlled temperature and humidity. Membrane sheets coated with immunoreagents were cut into individual test strips 3.5 mm wide.
Для сравнения изготавливали тест-полоски по стандартной схеме с использованием тех же реагентов и мембран, но с коллоидным золотом. Конъюгировали белок А (10 мкг/мл, конъюгат наносили на мембрану из оптической плотности 7), а в аналитической зоне иммобилизовали рекомбинантный белок 38 кДа М. tuberculosis.For comparison, test strips were prepared according to the standard scheme using the same reagents and membranes, but with colloidal gold. Protein A was conjugated (10 μg / ml, the conjugate was applied to the membrane from an optical density of 7), and a recombinant 38 kDa M. tuberculosis protein was immobilized in the assay zone.
Иммунохроматографический анализ проводили при комнатной температуре. Тест-полоску погружали в пробу на 1 мин в вертикальном положении, а затем извлекали и помещали на горизонтальную поверхность. Детекцию связывания коллоидного золота осуществляли через 10 мин визуально (Рис.2).Immunochromatographic analysis was performed at room temperature. The test strip was immersed in the sample for 1 min in a vertical position, and then removed and placed on a horizontal surface. Colloidal gold binding was detected visually after 10 min (Fig. 2).
Достигнутая при использовании предложенного способа анализа чувствительность на порядок превышает чувствительность, достигнутую при использовании стандартного способа анализа.The sensitivity achieved using the proposed analysis method is an order of magnitude higher than the sensitivity achieved using the standard analysis method.
Рис.1. Принцип иммунохроматографического анализа для серодиагностики. 1 - мембрана, адсорбирующая образец; 2 - частицы коллоидного золота; 3 - реагент для связывания антител: антивидовые антитела, белок А, белок G или др.; 4 - пластиковая основа; 5 - рабочая мембрана; 6 - конечная адсорбирующая мембрана; 7 - антиген, иммобилизованный в аналитической зоне; 8 - антивидовые антитела, иммобилизованные в контрольной зоне.Fig. 1. The principle of immunochromatographic analysis for serodiagnosis. 1 - membrane adsorbing the sample; 2 - particles of colloidal gold; 3 - reagent for binding antibodies: anti-species antibodies, protein A, protein G or others; 4 - a plastic base; 5 - working membrane; 6 - final adsorbing membrane; 7 - antigen immobilized in the analytical zone; 8 - anti-species antibodies immobilized in the control zone.
Рис.2. Тестирование сывороток крови больных туберкулезом (3 пробы): А - стандартным методом и Б - альтернативным методом, предложенным заявителями (стрелкой указано положение аналитической зоны).Fig. 2. Testing of blood serum of patients with tuberculosis (3 samples): A - the standard method and B - the alternative method proposed by the applicants (the arrow indicates the position of the analytical zone).
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013111990/15A RU2545909C2 (en) | 2013-03-19 | 2013-03-19 | Method of immunochromatographic determination of specific antibodies |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013111990/15A RU2545909C2 (en) | 2013-03-19 | 2013-03-19 | Method of immunochromatographic determination of specific antibodies |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2013111990A RU2013111990A (en) | 2014-09-27 |
| RU2545909C2 true RU2545909C2 (en) | 2015-04-10 |
Family
ID=51656205
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013111990/15A RU2545909C2 (en) | 2013-03-19 | 2013-03-19 | Method of immunochromatographic determination of specific antibodies |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2545909C2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2741199C1 (en) * | 2020-09-25 | 2021-01-22 | Федеральное государственное учреждение"Федеральный исследовательский центр "Фундаментальные основы биотехнологии" Российской академии наук" (ФИЦ Биотехнологии РАН) | Method of immunochromatographic serodiagnogy with sequential addition of reagents |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006065166A1 (en) * | 2005-07-26 | 2006-06-22 | Obschestvo S Ogranichennoi Otvetstvennostyu 'rusgen' | Protein l1 and protein e7 peptide-based composition for treating and preventing a human papillomaviral infection |
| RU2395092C2 (en) * | 2008-09-17 | 2010-07-20 | Институт биохимии имени А.Н. Баха Российской академии наук | Method of determining antibodies to tuberculosis germ |
| WO2012015327A1 (en) * | 2010-07-29 | 2012-02-02 | Veliev Sabir Nasirovich | Test system for determining a heart-type fatty acid-binding protein and troponin i (variants) |
-
2013
- 2013-03-19 RU RU2013111990/15A patent/RU2545909C2/en active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006065166A1 (en) * | 2005-07-26 | 2006-06-22 | Obschestvo S Ogranichennoi Otvetstvennostyu 'rusgen' | Protein l1 and protein e7 peptide-based composition for treating and preventing a human papillomaviral infection |
| RU2395092C2 (en) * | 2008-09-17 | 2010-07-20 | Институт биохимии имени А.Н. Баха Российской академии наук | Method of determining antibodies to tuberculosis germ |
| WO2012015327A1 (en) * | 2010-07-29 | 2012-02-02 | Veliev Sabir Nasirovich | Test system for determining a heart-type fatty acid-binding protein and troponin i (variants) |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Tong Lin ET AL., Development of a serotype colloidal gold strip using monoclonal antibody for rapid detection type Asia1 foot-and-mouth disease. Virology Journal 2011, 8: 418. PP. 1-6 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2741199C1 (en) * | 2020-09-25 | 2021-01-22 | Федеральное государственное учреждение"Федеральный исследовательский центр "Фундаментальные основы биотехнологии" Российской академии наук" (ФИЦ Биотехнологии РАН) | Method of immunochromatographic serodiagnogy with sequential addition of reagents |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2013111990A (en) | 2014-09-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2020233741B2 (en) | Method and device for combined detection of viral and bacterial infections | |
| AU2018204793B2 (en) | Signal amplification in lateral flow and related immunoassays | |
| US10379121B2 (en) | Method and device for combined detection of viral and bacterial infections | |
| US8962260B2 (en) | Method and device for combined detection of viral and bacterial infections | |
| JP2013072663A (en) | Immunochromatography test device and kit for mycoplasma pneumoniae detection | |
| WO2007138964A9 (en) | Latex composition for immunoassay | |
| JP5541748B2 (en) | Immunochromatographic test device using avidin-biotin linked labeling reagent and use thereof | |
| US20210072235A1 (en) | Method for diagnosing tuberculosis | |
| RU2395092C2 (en) | Method of determining antibodies to tuberculosis germ | |
| RU2532352C2 (en) | Method of carrying out immunochromatographic analysis for serodiagnostics | |
| RU2545909C2 (en) | Method of immunochromatographic determination of specific antibodies | |
| RU2530560C2 (en) | Method of obtaining intermolecular conjugate for immunochromatographic determination of specific antibodies | |
| RU2741199C1 (en) | Method of immunochromatographic serodiagnogy with sequential addition of reagents | |
| Byzova et al. | Manufacturing lateral flow tests for tuberculosis diagnosis: choosing a reactants completion and sensing regime | |
| HK40019586A (en) | Method and device for combined detection of viral and bacterial infections | |
| HK40006500A (en) | Signal amplification in lateral flow and related immunoassays | |
| HK40006500B (en) | Signal amplification in lateral flow and related immunoassays | |
| NA et al. | Design of Immunochromatographic System for Express Detection of Mycobacterium tuberculosis Cells | |
| BR112017021686B1 (en) | METHOD FOR DETECTING ONE OR SEVERAL OXA CARBAPENEMASES, DEVICE FOR IMMUNOCHROMATOGRAPHIC DETECTION AND USE OF THE DEVICE FOR IMMUNOCHROMATOGRAPHIC DETECTION | |
| HK1214308B (en) | Method and device for combined detection of viral and bacterial infections | |
| JP2007300817A (en) | Bacteria detection method, detection reagent and detection kit. |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner |