RU2517054C1 - Method for prediction of clinical course of lipidemia - Google Patents
Method for prediction of clinical course of lipidemia Download PDFInfo
- Publication number
- RU2517054C1 RU2517054C1 RU2013105994/15A RU2013105994A RU2517054C1 RU 2517054 C1 RU2517054 C1 RU 2517054C1 RU 2013105994/15 A RU2013105994/15 A RU 2013105994/15A RU 2013105994 A RU2013105994 A RU 2013105994A RU 2517054 C1 RU2517054 C1 RU 2517054C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lipidemia
- lipoprotein
- apolipoprotein
- cholesterol
- course
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 55
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims abstract description 76
- 108010033266 Lipoprotein(a) Proteins 0.000 claims abstract description 48
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims abstract description 34
- 101710095342 Apolipoprotein B Proteins 0.000 claims abstract description 32
- 102100040202 Apolipoprotein B-100 Human genes 0.000 claims abstract description 32
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 27
- DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N tristearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 23
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims abstract description 8
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims abstract description 7
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000010257 thawing Methods 0.000 claims abstract description 7
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 102000057248 Lipoprotein(a) Human genes 0.000 claims abstract 4
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 claims description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 102100040214 Apolipoprotein(a) Human genes 0.000 description 48
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 41
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 41
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 22
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 22
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 19
- 230000000923 atherogenic effect Effects 0.000 description 13
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 12
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 9
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 9
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 8
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 7
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 6
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 6
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 5
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 5
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000008214 LDL Cholesterol Methods 0.000 description 4
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 4
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 4
- 101710115418 Apolipoprotein(a) Proteins 0.000 description 3
- 102000018616 Apolipoproteins B Human genes 0.000 description 3
- 108010027006 Apolipoproteins B Proteins 0.000 description 3
- 102000006410 Apoproteins Human genes 0.000 description 3
- 108010083590 Apoproteins Proteins 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 238000009499 grossing Methods 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 108010071619 Apolipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000007592 Apolipoproteins Human genes 0.000 description 2
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 2
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 2
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 2
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 2
- 108010069201 VLDL Cholesterol Proteins 0.000 description 2
- 108010062497 VLDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- RXKJFZQQPQGTFL-UHFFFAOYSA-N dihydroxyacetone Chemical compound OCC(=O)CO RXKJFZQQPQGTFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- PCZOHLXUXFIOCF-BXMDZJJMSA-N lovastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 PCZOHLXUXFIOCF-BXMDZJJMSA-N 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N sn-glycerol 3-phosphate Chemical compound OC[C@@H](O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 2
- RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 4-aminoantipyrine Chemical compound CN1C(C)=C(N)C(=O)N1C1=CC=CC=C1 RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150102415 Apob gene Proteins 0.000 description 1
- 102000005666 Apolipoprotein A-I Human genes 0.000 description 1
- 108010059886 Apolipoprotein A-I Proteins 0.000 description 1
- 108010012927 Apoprotein(a) Proteins 0.000 description 1
- 101100177544 Arabidopsis thaliana FC2 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010003211 Arteriosclerosis coronary artery Diseases 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 108010089254 Cholesterol oxidase Proteins 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 1
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 1
- 208000034826 Genetic Predisposition to Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000032382 Ischaemic stroke Diseases 0.000 description 1
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 102000000853 LDL receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010001831 LDL receptors Proteins 0.000 description 1
- 208000017170 Lipid metabolism disease Diseases 0.000 description 1
- PCZOHLXUXFIOCF-UHFFFAOYSA-N Monacolin X Natural products C12C(OC(=O)C(C)CC)CC(C)C=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 PCZOHLXUXFIOCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SNIOPGDIGTZGOP-UHFFFAOYSA-N Nitroglycerin Chemical compound [O-][N+](=O)OCC(O[N+]([O-])=O)CO[N+]([O-])=O SNIOPGDIGTZGOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000006 Nitroglycerin Substances 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 description 1
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 description 1
- 206010048215 Xanthomatosis Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000013103 analytical ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000010100 anticoagulation Effects 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 230000036523 atherogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- GGCLNOIGPMGLDB-GYKMGIIDSA-N cholest-5-en-3-one Chemical compound C1C=C2CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 GGCLNOIGPMGLDB-GYKMGIIDSA-N 0.000 description 1
- NYOXRYYXRWJDKP-UHFFFAOYSA-N cholestenone Natural products C1CC2=CC(=O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCCC(C)C)C1(C)CC2 NYOXRYYXRWJDKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 230000008094 contradictory effect Effects 0.000 description 1
- 208000026758 coronary atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 229940120503 dihydroxyacetone Drugs 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000005684 electric field Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 229960003711 glyceryl trinitrate Drugs 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 208000020346 hyperlipoproteinemia Diseases 0.000 description 1
- 230000000871 hypocholesterolemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000003771 laboratory diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 229960004844 lovastatin Drugs 0.000 description 1
- QLJODMDSTUBWDW-UHFFFAOYSA-N lovastatin hydroxy acid Natural products C1=CC(C)C(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C2C(OC(=O)C(C)CC)CC(C)C=C21 QLJODMDSTUBWDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000004089 microcirculation Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 150000004060 quinone imines Chemical class 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 206010039083 rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 208000013220 shortness of breath Diseases 0.000 description 1
- 125000005629 sialic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 210000001562 sternum Anatomy 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 230000003966 vascular damage Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине и может быть использовано в кардиологии и терапии.The invention relates to medicine and can be used in cardiology and therapy.
Известны способы разделения на фракции липопротеинов крови методом аналитического ультрацентрифугирования (А.Н.Климов, Н.Г.Никульчева. Липиды, липопротеины и атеросклероз. - Питер, пресс, с.98-102).Known methods of separation into fractions of blood lipoproteins by the method of analytical ultracentrifugation (A.N. Klimov, N.G. Nikulcheva. Lipids, lipoproteins and atherosclerosis. - Peter, press, p.98-102).
Известны способы разделения на фракции липопротеинов (ЛП) в полиакриламидном геле (Н.Н.Шацкая. Биохимические исследования в оценке состояния сердечно-сосудистой системы. В кн. «Методы исследований в профпатологии», М., 1988, с.95-97).Known methods of separation into fractions of lipoproteins (LP) in a polyacrylamide gel (NN Shatskaya. Biochemical studies in assessing the state of the cardiovascular system. In the book "Research Methods in Occupational Pathology", M., 1988, p. 95-97) .
Известны также способы разделения на фракции ЛП путем электрофореза в геле агарозе (Лаб. методы исследования / под редакцией В.В.Меньшикова. М.: Медицина. 1987, с.248 -249), SU 1720015 A, 15.03.1992. RU 2063040 C1, 27.06.1996. RU 2115121 C1, 10.07.1998. RU 2097038 C1, 27.11.1997. RU 2060034 C1, 20.05.1996. ЕР 0074610 A, 23.03.1983.There are also known methods of separation into LP fractions by agarose gel electrophoresis (Lab. Research methods / edited by V.V. Menshikov. M: Medicine. 1987, p.248 -249), SU 1720015 A, 03/15/1992. RU 2063040 C1, 06/27/1996. RU 2115121 C1, 07/10/1998. RU 2097038 C1, 11.27.1997. RU 2060034 C1, 05.20.1996. EP 0074610 A, 03.23.1983.
Недостатком данных способов является то, что они не позволяют выявить все фракции апопротеинов, а именно аполипопротеинов B и липопротеинов(а). Под липопротеином(а) понимают аполипопротеин(а), т.е. апо-белок липопротеина(а) (ЛП(а)). Термин используется в каталогах к реагентам биохимического анализатора Konelab (Финляндия) для определения апо-белка ЛП(а). Поэтому в описании способа в связи с применяемым методом анализа используется термин липопротеин(а) вместо аполипротеина(а).The disadvantage of these methods is that they do not allow to identify all fractions of apoproteins, namely apolipoproteins B and lipoproteins (a). Lipoprotein (a) means apolipoprotein (a), i.e. apo-protein of lipoprotein (a) (LP (a)). The term is used in the catalogs for reagents of the Konelab biochemical analyzer (Finland) for the determination of the apo protein of LP (a). Therefore, in the description of the method in connection with the method of analysis used, the term lipoprotein (a) is used instead of apoliprotein (a).
Известен способ прогнозирования течения ишемической болезни сердца. RU 2439582 C1, 10.01.2012. Данный способ является наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату и выбран в качестве прототипа.
Недостатком данного способа является то, что он не позволяет выявить аполипротеин B и липопротеин(а). Это связано с тем, что липопротеин(а), с одной стороны. является наиболее атерогенным, а, с другой, в норме выявляется в очень низкой концентрации и увеличивается в крови при липидемии атерогенного генеза. Следовательно, для ранней диагностики заболевания и оценки прогнозирования течения липидемии особенно важно выявление липопротеина(а) наряду с максимально полным определением аполипопротеина B, соотношения аполипротеина B к липопротеину(а), определения общего холестерола, триацилглицерола крови до и после лечения.The disadvantage of this method is that it does not allow to detect apoliprotein B and lipoprotein (a). This is due to the fact that lipoprotein (a), on the one hand. is the most atherogenic, and, on the other hand, it is normally detected in a very low concentration and increases in the blood with lipidemia of atherogenic origin. Therefore, for the early diagnosis of the disease and assessment of the prognosis of the course of lipidemia, the identification of lipoprotein (a) is especially important along with the most complete determination of apolipoprotein B, the ratio of apoliprotein B to lipoprotein (a), determination of total cholesterol, blood triacylglycerol before and after treatment.
Целью предлагаемого изобретения является повышение точности и эффективности способа.The aim of the invention is to increase the accuracy and efficiency of the method.
Указанная цель достигается тем, что сыворотку крови до и после лечения перед исследованием обрабатывают трехкратным замораживанием и оттаиванием по 20 минут и 10 минут соответственно с последующей дезинтеграцией, а затем определяют аполипопротеин В, липопротеин (а), их соотношение, общий холестерол, триацилглицерол, и при увеличении отношения аполипопротеина В к липопротеину (а) на 40% и более по сравнению с исходным уровнем и снижении общего холестерола на 25% и более и триацилглицерола на 20% и более по сравнению с исходным уровнем оценивают прогноз течения липидемии как благоприятный.This goal is achieved by the fact that the serum before and after treatment before the study is treated with three freezing and thawing for 20 minutes and 10 minutes, respectively, followed by disintegration, and then determine apolipoprotein B, lipoprotein (a), their ratio, total cholesterol, triacylglycerol, and with an increase in the ratio of apolipoprotein B to lipoprotein (a) by 40% or more compared with the initial level and a decrease in total cholesterol by 25% or more and triacylglycerol by 20% or more compared with the initial level, n coryza of the course of lipidemia as favorable.
Новым в данном способе является предварительная обработка сыворотки крови трехкратным замораживанием и оттаиванием по 20 минут и 10 минут соответственно с последующей дезинтеграцией, что позволяет определить максимальную концентрацию аполипопортеина В и липопротеина (а), их соотношения, общий холестерол, триацилглицерол для оценки поргнозирования течения липидемии.New in this method is the pretreatment of blood serum by freezing and thawing three times for 20 minutes and 10 minutes, respectively, followed by disintegration, which allows to determine the maximum concentration of apolipoportein B and lipoprotein (a), their ratio, total cholesterol, triacylglycerol to assess the progression of lipidemia.
Следовательно, только комплексная модернизация способа-прототипа позволяет получить желаемый результат.Therefore, only a comprehensive modernization of the prototype method allows to obtain the desired result.
Каждый вновь введенный в формулу изобретения признак выполняет функцию повышения точности и эффективности способа. Трехкратное замораживание 0,5 мл сыворотки крови с последующим трехкратным оттаиванием в течение 20 минут и 10 минут соответственно с последующей дезинтеграцией позволяет максимально выявить содержание аполипопортеина В и липопротеина (а), общего холестерола, триацилглицерола до и после лечения для прогнозирования течения липидемии.Each feature newly introduced into the claims performs the function of increasing the accuracy and efficiency of the method. Threefold freezing of 0.5 ml of blood serum followed by thawing thrice for 20 minutes and 10 minutes, respectively, followed by disintegration, maximally reveals the content of apolipoportein B and lipoprotein (a), total cholesterol, triacylglycerol before and after treatment to predict the course of lipidemia.
Исследование аполипопротеинов и липопротеинов разных классов при диагностике липидемии и ишемической болезни сердца (ИБС) рекомендовано Всероссийским научным обществом кардиологов согласно положению рекомендаций Европейского общества по изучению атеросклероза - «Диагностика и коррекция нарушения липидного обмена с целью профилактики и лечения атеросклероза» (г.Москва, 2005 г., Клиническая лабораторная диагностика, 10, 2008 г., с.21-32).The study of apolipoproteins and lipoproteins of different classes in the diagnosis of lipidemia and coronary heart disease (IHD) is recommended by the All-Russian Scientific Society of Cardiology according to the provisions of the European Society for the Study of Atherosclerosis - “Diagnosis and correction of lipid metabolism disorders for the prevention and treatment of atherosclerosis” (Moscow, 2005 , Clinical Laboratory Diagnostics, 10, 2008, p.21-32).
В настоящее время перспективными являются методы исследования липидов и липопротеинов. В лабораторной практике все больше используются прямые методы определения липопротеинов (ЛП) и их аполипротеинов, а именно методы иммунопреципитации.Currently, promising are methods for the study of lipids and lipoproteins. In laboratory practice, more and more direct methods are used to determine lipoproteins (LPs) and their apoliproteins, namely immunoprecipitation methods.
Увеличение концентрации ЛП abnormal или ЛП(а) и его аполипротеина(а) в крови считают независимым фактором риска атеросклероза. При содержании в крови ЛП(а) более 300 мкг/мл при норме 0-300 мкг/мл риск возникновения коронарного атеросклероза увеличивается вдвое, а при одновременном повышении уровня ЛП(а), холестерола (ХС) и ХС ЛПНП - в пять раз (J.A. М.А. - 2001. - Vol.285. - P.2486-2497, Eur. Heart. J. - 2003. - Vol.24. - P.1601-1610).An increase in the concentration of abnormal LP or LP (a) and its apoliprotein (a) in the blood is considered an independent risk factor for atherosclerosis. With a blood content of LD (a) of more than 300 μg / ml at a rate of 0-300 μg / ml, the risk of coronary atherosclerosis is doubled, and with a simultaneous increase in the level of LP (a), cholesterol (cholesterol) and LDL cholesterol - five times ( JA, M.A. - 2001. - Vol.285. - P.2486-2497, Eur. Heart. J. - 2003. - Vol.24. - P.1601-1610).
Липопротеин(а) является предиктором атеросклероза, свидетельствует о генетической предрасположенности к сердечно-сосудистым заболеваниям, фатальному и нефатальному инфаркту миокарда и ишемическому инсульту.Lipoprotein (a) is a predictor of atherosclerosis, indicating a genetic predisposition to cardiovascular disease, fatal and non-fatal myocardial infarction and ischemic stroke.
В настоящее время особое внимание уделяется исследованию фракции липопротеина(а), в связи с чем разрабатываются способы лабораторной диагностики, позволяющие в максимальной концентрации исследовать этот липопротеин крови. Он относится к апо-В-содержащим липопротеинам, богатым холестеролом (ХС). ЛП(а) идентичен «тонущим» пре- -ЛП (sinking pre- -Lp), имеющим при электрофорезе подвижность пре- -ЛП. ЛП (а) содержат 27% белка, 8% углеводов и 65% липидов, из которых ЭХС составляют 59%, НЭХС 14%, ФЛ 14%.Currently, special attention is paid to the study of the lipoprotein fraction (a), in connection with which laboratory diagnostic methods are being developed that allow to study this blood lipoprotein in the maximum concentration. It refers to apo-B-containing lipoproteins rich in cholesterol (cholesterol). PL (a) is identical to “sinking” pre-β-LP (sinking pre-β-Lp), which, during electrophoresis, has the mobility of pre-β-LP. PL (a) contains 27% protein, 8% carbohydrates and 65% lipids, of which ECS make up 59%, NEHS 14%, and PL 14%.
Белковым компонентом ЛП (а) является высокогликозилированный полипептид - апо(а), имеющий близкое структурное сродство к плазминогену - одному из факторов системы свертывания - противосвертывания крови. При росте концентрации как ЛП (а), так и его модифицированных форм в крови нарушаются процессы микроциркуляции в кровеносных артериях с возможным образованием микротромбов.The protein component of LP (a) is a highly glycosylated polypeptide - apo (a), which has a close structural affinity for plasminogen - one of the factors of the coagulation system - anticoagulation of blood. With an increase in the concentration of both LP (a) and its modified forms in the blood, the microcirculation processes in the blood arteries are disrupted with the possible formation of microthrombi.
Благодаря наличию в структуре апо(а) сиаловых кислот ЛП(а) более отрицательно заряжен по сравнению с - ЛП в электрическом поле, лучше растворим в воде, может взаимодействовать с ионами металлов (кальция). Этот липопротеин и его модифицированные формы гетерогенны. Все это свидетельствует об особой роли ЛП(а) и модифицированных ЛП(а) в атерогенезе.Due to the presence of sialic acids in the structure of apo (a), PL (a) is more negatively charged compared to - PL in an electric field, it is better soluble in water, and can interact with metal ions (calcium). This lipoprotein and its modified forms are heterogeneous. All this indicates the special role of LP (a) and modified LP (a) in atherogenesis.
ЛП(а) может взаимодействовать с ЛПНП-рецепторами, оказывая слабое влияние на активность ГМК-КоА редуктазы, на этерификацию ХС. Период полураспада ЛП(а) длиннее, чем у ЛПНП и составляет 3,3 суток. Содержание ЛП(а) в крови в норме не превышает 30 мг/л. При высокой концентрации в крови ЛП(а) выявляется в местах поражения сосудов в области скопления фибриногена. Повышенная концентрация ЛП(а) часто сочетается с IIа, IIб типами гиперлипопротеинемий, при которых часто выявляются модифицированные ЛП. Поэтому в клинической практике крайне важно определение ЛП(а) одновременно с определением белков острой фазы воспаления. Установлено, что большинство гиполипидемических препаратов не влияет на повышенный уровень ЛП(а).LP (a) can interact with LDL receptors, exerting a weak effect on the activity of GMK-CoA reductase, on the esterification of cholesterol. The half-life of the drug (a) is longer than that of LDL and is 3.3 days. The content of LP (a) in the blood normally does not exceed 30 mg / L. At a high concentration in the blood, PL (a) is detected at the sites of vascular damage in the area of accumulation of fibrinogen. An increased concentration of LP (a) is often combined with IIa, IIb types of hyperlipoproteinemia, in which modified LPs are often detected. Therefore, in clinical practice it is extremely important to determine the LP (a) simultaneously with the determination of proteins of the acute phase of inflammation. It was found that most lipid-lowering drugs do not affect elevated levels of LP (a).
Фракция ЛП(а) гетерогенна. Установлено, что при электрофорезе ЛП(а) находятся в области - глобулинов, но до 5% ЛП(а) при этом могут выявляться в области - глобулинов. По причине такой выраженной гетерогенности достаточно сложно оценить при электрофорезе всю фракцию ЛП(а), а тем более ее минорные фракции, которые могут оставаться на линии старта, если размер их частиц достаточно велик. Поэтому использование иммуноприципетации при исследовании липопротеина(а) и аполипротеина В позволяет наиболее точно определить уровень этих липопротеинов в крови.The LP (a) fraction is heterogeneous. It was established that during electrophoresis, drugs (a) are in the region of globulins, but up to 5% of drugs (a) can be detected in the region of globulins. Due to such pronounced heterogeneity, it is quite difficult to evaluate the whole LP fraction (a) during electrophoresis, and even less its minor fractions, which can remain on the start line if their particle size is large enough. Therefore, the use of immunoprecipitation in the study of lipoprotein (a) and apoliprotein B allows you to most accurately determine the level of these lipoproteins in the blood.
Обработка 0,5 мл сыворотки крови методом трехкратного замораживания и оттаивания с последующей дезинтеграцией позволяет определить максимальную концентрацию аполипротеинов, общего холестерола и триацилглицерола в крови пациента.Processing 0.5 ml of blood serum by three times freezing and thawing followed by disintegration allows to determine the maximum concentration of apoliproteins, total cholesterol and triacylglycerol in the patient's blood.
Усовершенствование способа касается трехкратного замораживания и оттаивания по 20 минут и 10 минут соответственно с последующей дезинтеграцией крови пациента до и после лечения с определением аполипопротеина B, липопротеина(а), их соотношения и оценки общего холестерола и триацилглицерола.The improvement of the method relates to three freezing and thawing for 20 minutes and 10 minutes, respectively, followed by disintegration of the patient’s blood before and after treatment with determination of apolipoprotein B, lipoprotein (a), their ratio and assessment of total cholesterol and triacylglycerol.
Указанное выше время обработки сыворотки пробы является оптимальным. Проведение этой процедуры менее 20 минут и 10 минут или более 20 минут и 10 минут соответственно не улучшает результатов исследования аполипопротеинов. Улучшает результат исследования дезинтеграция сыворотки крови.The above processing time of the serum sample is optimal. Carrying out this procedure for less than 20 minutes and 10 minutes or more than 20 minutes and 10 minutes, respectively, does not improve the results of the study of apolipoproteins. Serum disintegration improves the test result.
Поскольку липопротеин(а) наиболее атерогенен, очень важно на ранних стадиях заболевания выявлять максимальное содержание в крови липопротеина(а). Это позволяет диагностировать липидемию при ишемической болезни сердца еще до стадии значительных изменений других клинико-лабораторных показателей, повышает точность диагностики заболевания. В свою очередь таким пациентам рано назначается патогенетически обоснованная терапия. Не менее важно выявление липопротеина(а) для оценки эффективности терапии заболевания и прогнозирования течения липидемии при ишемической болезни сердца.Since lipoprotein (a) is the most atherogenic, it is very important in the early stages of the disease to detect the maximum content of lipoprotein (a) in the blood. This allows you to diagnose lipidemia in coronary heart disease even before the stage of significant changes in other clinical and laboratory parameters, improves the accuracy of the diagnosis of the disease. In turn, pathogenetically substantiated therapy is prescribed to such patients early. The identification of lipoprotein (a) is equally important for assessing the effectiveness of the treatment of the disease and predicting the course of lipidemia in coronary heart disease.
Все сказанное свидетельствует о крайней важности разработки способов оценки эффективности лечения липидемии и способов прогнозирования течения липидемии, позволяющих наиболее полно выявлять липопротеин(а), а также аполипопротеин В, уровень общего холестерола и триацилглицерола крови.All of the above indicates the extreme importance of developing methods for assessing the effectiveness of lipidemia treatment and methods for predicting the course of lipidemia, which allow the most complete detection of lipoprotein (a), as well as apolipoprotein B, the level of total cholesterol and blood triacylglycerol.
Существенные признаки, характеризующие изобретение, проявили в заявляемой совокупности новые свойства, явным образом не вытекающие из уровня техники в данной области и неочевидные для специалиста.The essential features characterizing the invention, showed in the claimed combination of new properties that are not explicitly derived from the prior art in this field and are not obvious to a specialist.
Идентичной совокупности признаков не обнаружено при изучении патентной и научно-медицинской литературы.An identical set of features was not found in the study of patent and medical literature.
Данное изобретение может быть использовано в практическом здравоохранении для повышения точности оценки эффективности лечения липидемии у больных ИБС и прогнозирования течения липидемии при ИБС.This invention can be used in medical practice to improve the accuracy of evaluating the effectiveness of the treatment of lipidemia in patients with coronary artery disease and to predict the course of lipidemia in coronary artery disease.
Таким образом, следует считать данное техническое решение соответствующим условиям патентоспособности: «Новизна», «Изобретательский уровень», «Промышленная применимость».Thus, this technical solution should be considered relevant to the conditions of patentability: “Novelty”, “Inventive step”, “Industrial applicability”.
Способ осуществляется следующим образом поэтапно.The method is as follows in stages.
1. 0,5 мл сыворотки крови трехкратно замораживают и оттаивают по 20 минут и 10 минут соответственно.1. 0.5 ml of blood serum is frozen three times and thawed for 20 minutes and 10 minutes, respectively.
2. Далее 0,5 мл сыворотки крови обрабатывают дезинтегратором «Microsonic ТМ» для полной дезинтеграции липопротеинов крови и максимально точного определения концентрации общего холестерола и триацилглицерола крови. Дезинтеграцию липопротеинов осуществляют Ultrasonic cell Disruptor производства Heat systems, JWC, 1938, New Jork 11735, Model Xh 2005, serial NO, работающий с характеристикой электрического тока 50 вольт, 1 ампер, мощностью 50 ватт, частотой тока 20 килогерц.2. Next, 0.5 ml of blood serum is treated with a Microsonic TM disintegrator to completely disintegrate blood lipoproteins and determine the concentration of total cholesterol and triacylglycerol in the blood as accurately as possible. Lipoprotein disintegration is carried out by Ultrasonic cell Disruptor manufactured by Heat systems, JWC, 1938, New Jork 11735, Model Xh 2005, serial NO, operating with an electric current characteristic of 50 volts, 1 ampere, 50 watts, and a current frequency of 20 kilohertz.
3. В сыворотке крови пациента определяют липопротеин(а) с помощью набора для Konelab.3. Lipoprotein (a) is determined in the patient's blood serum using a Konelab kit.
Методика определения основана на измерении иммунопреципитации, усиленной полиэтиленгликолем (ПЭГ), при длине волны 340 нм. В анализатор Konelab устанавливается исследуемый образец сыворотки крови пациента либо образец сыворотки крови, разведенный разбавителем для образца в 2 раза в случае высокой концентрации липопротеина(а) в крови. Затем устанавливается реактив с буферным раствором, содержащий избыток специфической антисыворотки. В анализаторе автоматически проводится исследование пробы сыворотки крови пациента. Регистрируется увеличение поглощения света, вызванное иммунопреципитацией. Изменение светопоглощения пропорционально концентрации липопротеина(а), содержащегося в сыворотке крови пациента. Анализатор Konelab автоматически готовит серию из стандартного калибратора липопротеина(а) (код 981916) в соответствии с установленными параметрами. Калибровочная кривая строится исходя из значений, полученных при измерении отклика калибраторов с применением сплайнового сглаживания. Результат исследования пробы сыворотки крови пациента после ее реакции с антисывороткой к липопротеину(а) появляется на калибровочной кривой в виде точки. По горизонтали на графике указывается концентрация липопротеина(а) в мг/л, а по вертикали абсорбция (A). Следовательно, определяется значение абсорбции пробы, которая в автоматическом режиме обозначается результирующей концентрацией липопротеина(а), выраженной в мг/л. Выполнение анализа возможно вплоть до концентрации 8100 мг/л (8,1 г/л) липопротеина(а) и минимальном значении 30 мг/л.The determination procedure is based on measuring immunoprecipitation enhanced with polyethylene glycol (PEG) at a wavelength of 340 nm. The Konelab analyzer installs the patient’s test blood serum sample or a blood serum sample diluted 2 times with the sample diluent in case of a high concentration of lipoprotein (a) in the blood. Then a reagent with a buffer solution containing an excess of specific antiserum is installed. The analyzer automatically examines a patient's blood serum sample. An increase in light absorption caused by immunoprecipitation is recorded. The change in light absorption is proportional to the concentration of lipoprotein (a) contained in the patient's blood serum. The Konelab analyzer automatically prepares a series of the standard lipoprotein calibrator (a) (code 981916) in accordance with the set parameters. The calibration curve is constructed based on the values obtained when measuring the response of calibrators using spline smoothing. The result of the study of the patient’s blood serum sample after its reaction with the antiserum to lipoprotein (a) appears on the calibration curve as a dot. The horizontal concentration indicates the concentration of lipoprotein (a) in mg / l, and the vertical absorption (A). Therefore, the absorption value of the sample is determined, which is automatically indicated by the resulting concentration of lipoprotein (a), expressed in mg / L. The analysis is possible up to a concentration of 8100 mg / l (8.1 g / l) of lipoprotein (a) and a minimum value of 30 mg / l.
Установленное значение нормы липопротеина(а) 31-150 мг/л. При липидемии атерогенного генеза уровень липопротеина (а) увеличивается в диапазоне 310-4200 мг/л (0,3-4,2 г/л).The established norm value of lipoprotein (a) is 31-150 mg / l. With lipidemia of atherogenic origin, the level of lipoprotein (a) increases in the range of 310-4200 mg / l (0.3-4.2 g / l).
Сравнительное исследование проводилось в соответствии с NCCLS документом EP-9А с использованием коммерческой нефелометрической методики, которая служила в качестве эталона с концентрацией липопротеина(а) в образцах 69-1622 мг/л.A comparative study was conducted in accordance with NCCLS document EP-9A using a commercial nephelometric technique, which served as a reference with a concentration of lipoprotein (a) in samples 69-1622 mg / L.
4. В сыворотке крови пациента определяют аполипопротеин В с помощью набора для Konelab.4. Apolipoprotein B is determined in the patient's blood serum using a Konelab kit.
Методика определения основана на измерении иммунопреципитации, усиленной полиэтиленгликолем (ПЭГ), при длине волны 340 нм. В анализатор Konelab устанавливается исследуемый образец сыворотки крови пациента либо образец сыворотки крови, разведенный разбавителем для образца в 2 раза в случае высокой концентрации аполипопротеина B в крови. Затем устанавливается реактив с буферным раствором, содержащий избыток специфической антисыворотки. B анализаторе автоматически проводится исследование пробы сыворотки крови пациента. Регистрируется увеличение поглощения света, вызванное иммунопреципитацией. Изменение светопоглощения пропорционально концентрации аполипопротеина B, содержащегося в сыворотке крови пациента. Анализатор Konelab автоматически готовит серию из стандартного калибратора апо А-1/В: лиофилизированного, на основе человеческого материала (концентрация аполипопротеина B в восстановленном калибраторе указана на этикетке флакона). Калибровочная кривая строится исходя из значений, полученных при измерении отклика калибраторов с применением сплайнового сглаживания. Результат исследования пробы сыворотки крови пациента после ее реакции с антисывороткой к аполипопротеину В появляется на калибровочной кривой в виде точки. По горизонтали на графике указывается концентрация аполипопротеина B в г/л, а по вертикали абсорбция (A). Следовательно определяется значение абсорбции пробы, которая в автоматическом режиме обозначается результирующей концентрацией аполипопротеина В, выраженной в г/л. Выполнение анализа возможно вплоть до концентрации аполипопротеина В, равной 13,1 г/л при минимальном значении 0,05 г/л.The determination procedure is based on measuring immunoprecipitation enhanced with polyethylene glycol (PEG) at a wavelength of 340 nm. The Konelab analyzer installs a test patient's blood serum sample or a blood serum sample diluted 2 times with a sample diluent in case of a high concentration of apolipoprotein B in the blood. Then a reagent with a buffer solution containing an excess of specific antiserum is installed. The analyzer automatically examines a patient's blood serum sample. An increase in light absorption caused by immunoprecipitation is recorded. The change in light absorption is proportional to the concentration of apolipoprotein B contained in the patient's blood serum. The Konelab analyzer automatically prepares a series of the standard apo A-1 / B calibrator: lyophilized, based on human material (the concentration of apolipoprotein B in the recovered calibrator is indicated on the label of the bottle). The calibration curve is constructed based on the values obtained when measuring the response of calibrators using spline smoothing. The result of the study of the patient’s blood serum sample after its reaction with the antiserum to apolipoprotein B appears on the calibration curve as a dot. Horizontally, the graph shows the concentration of apolipoprotein B in g / l, and the vertical absorption (A). Therefore, the absorption value of the sample is determined, which is automatically indicated by the resulting concentration of apolipoprotein B, expressed in g / l. The analysis is possible up to a concentration of apolipoprotein B equal to 13.1 g / l with a minimum value of 0.05 g / l.
Установленное значение нормы для м. 0,63-1,88 г/л, для ж. 0,56-1,82 г/л. При липидемии атерогенного генеза уровень аполипопротеина В увеличивается в диапазоне 1,9-13,1 г/л.The established value of the norm for m. 0.63-1.88 g / l, for w. 0.56-1.82 g / l. With atherogenic lipidemia, the level of apolipoprotein B increases in the range of 1.9-13.1 g / l.
Сравнительное исследование проводится в соответствии с инструкцией к анализатору NCCLS документом EP-9А с использованием коммерческой нефелометрической методики, которая служила в качестве эталона с концентрацией аполипопротеина B в образцах 0,4-2,21 г/л.A comparative study is carried out in accordance with the instruction to the NCCLS analyzer document EP-9A using a commercial nephelometric technique, which served as a reference with a concentration of apolipoprotein B in samples of 0.4-2.21 g / l.
Для более точной характеристики ранней стадии липидемии впервые было определено отношение аполипопротеина В к липопротеину (а) как наиболее атерогенной фракции липопротеинов.To more accurately characterize the early stage of lipidemia, the ratio of apolipoprotein B to lipoprotein (a) was first determined as the most atherogenic fraction of lipoproteins.
Установлено нормально значение отношения аполипропротеина B к липопротеину(а), превышающее 20,6. Значение этого соотношения снижается при липидемии и становится меньше 20,5.The ratio of apoliproprotein B to lipoprotein (a) was found to be normal, exceeding 20.6. The value of this ratio decreases with lipidemia and becomes less than 20.5.
5. Холестерол определяли набором ThermoFisher для Konelab. Холестерол определяли энзиматическим методом. Холестерол окисляется холестеролоксидазой до холестенона и перекиси водорода. В результате реакции пероксида водорода с несколькими реагентами образуется хромофор, оцениваемый количественно при 550 нм. Результат вычисляется автоматически с использованием калибровочной кривой.5. Cholesterol was determined with a ThermoFisher kit for Konelab. Cholesterol was determined by enzymatic method. Cholesterol is oxidized by cholesterol oxidase to cholestenone and hydrogen peroxide. As a result of the reaction of hydrogen peroxide with several reagents, a chromophore is formed, quantified at 550 nm. The result is calculated automatically using the calibration curve.
6. Тригицерол определяли набором ThermoFisher для Konelab энзиматическим методом.6. Trigicerol was determined by the enzyme kit ThermoFisher for Konelab.
Принцип метода:Principle of the method:
триацилглицерол ЛПЛ→глицерол+жирная кислотаtriacylglycerol LPL → glycerol + fatty acid
глицерол+АТФ ГК→глицерол-3 фосфат+АДФglycerol + ATP GK → glycerol-3 phosphate + ADP
глицерол-3 фосфат+O2→дигидроксиацетон+Н2O2 glycerol-3 phosphate + O 2 → dihydroxyacetone + H 2 O 2
ДГБС+2Н2O2+4-ААП ПОД→Хинонимин+4Н2ODGBS + 2H 2 O 2 + 4-AAP + AML → quinoneimine 4H 2 O
Интенсивность окраски реакционной смеси прямо пропорциональна концентрации триацилглицеролов в пробе. Нормальные величины в сыворотке крови - до 1,71 ммоль/л.The color intensity of the reaction mixture is directly proportional to the concentration of triacylglycerols in the sample. Normal values in blood serum are up to 1.71 mmol / l.
В анализатор Konelab устанавливается исследуемый образец сыворотки крови пациента. Затем устанавливается рабочий реагент. Автоматически производится исследование пробы. Регистрируется оптическая плотность раствора, пропорциональная полученной окраске раствора. Калибровочная кривая строится исходя из значений, полученных при измерении отклика калибраторов с применением сплайнового сглаживания.The Konelab analyzer installs a test sample of the patient's blood serum. Then the working reagent is installed. Automatically examines the sample. The optical density of the solution is proportional to the resulting color of the solution. The calibration curve is constructed based on the values obtained when measuring the response of calibrators using spline smoothing.
Описываем возможные осложнения при выполнении исследования и способы их устранения.We describe possible complications during the study and how to eliminate them.
Предотвращение возможных ложноположительных и ложноотрицательных результатов связано с предельно точным выполнением методов исследования. Ложноположительный результат возможен крайне редко и может быть обусловлен только нарушением техники разведения сыворотки крови при высокой концентрации в ней липидов. Перед установкой реагентов на борт анализатора Konelab необходимо удостовериться в отсутствии пузырьков во флаконах и на поверхности реагентов.Prevention of possible false positive and false negative results is associated with extremely accurate implementation of research methods. A false positive result is extremely rare and can only be caused by a violation of the technique for diluting blood serum with a high concentration of lipids in it. Before installing reagents on board the Konelab analyzer, make sure that there are no bubbles in the vials and on the surface of the reagents.
Для подтверждения работоспособности предлагаемого способа и достижения технического результата были обследованы группа контроля (n=10) и группа больных ишемической болезнью сердца (ИБС), т.к. в основе патогенеза ИБС лежит липидемия атерогенного генеза (n=30). Обе группы обследованы с помощью предлагаемого способа и способа-прототипа. В группе контроля в случае использования способа-прототипа и предлагаемого способа липопротеины(а) не выявлены, либо выявлены в минимальной концентрации до лечения и после лечения кардиостатином (ловастатином), код C10АА02 одновременно с симптоматической терапией.To confirm the operability of the proposed method and achieve a technical result, the control group (n = 10) and the group of patients with coronary heart disease (CHD) were examined, because the pathogenesis of IHD is based on lipidemia of atherogenic origin (n = 30). Both groups were examined using the proposed method and the prototype method. In the control group, in the case of using the prototype method and the proposed method, lipoproteins (a) were not detected, or were detected in a minimum concentration before treatment and after treatment with cardiostatin (lovastatin), code C10AA02 simultaneously with symptomatic therapy.
В группе больных ИБС выявлены липопротеины низкой и очень низкой плотности, липопротеины(а), оценен уровень общего холестерола, триацилглицерола, но аполипротеины не определяются. Липидемия атерогенного генеза до лечения выявлена в 73% случаев, т.е. у 22 пациентов из 30 больных ИБС, а после лечения в 40% случаев, т.е. 12 пациентов. Таким образом, эффективность лечения липидемии составила 33%.In the group of patients with coronary artery disease, low and very low density lipoproteins, lipoproteins (a) were detected, the level of total cholesterol, triacylglycerol was estimated, but apoliproteins were not determined. Lipidemia of atherogenic genesis before treatment was detected in 73% of cases, i.e. 22 patients out of 30 patients with coronary heart disease, and after treatment in 40% of cases, i.e. 12 patients. Thus, the effectiveness of the treatment of lipidemia was 33%.
В группе больных ИБС, обследованных по предлагаемому способу, определены аполипопротеины B, липопротеины(а) с расчетом их соотношения, значительно сниженного по сравнению с нормой, т.е. значительно ниже 20,5, уровень общего холестерола и триацилглицерола до лечения. Липидемия выявлена у 26 из 30 обследованных пациентов на самых ранних стадиях заболеваниях, т.е. в 86% случаев.In the group of IHD patients examined by the proposed method, apolipoproteins B, lipoproteins (a) were determined with the calculation of their ratio significantly reduced compared to the norm, i.e. significantly lower than 20.5, the level of total cholesterol and triacylglycerol before treatment. Lipidemia was detected in 26 of the 30 examined patients at the earliest stages of the disease, i.e. in 86% of cases.
Далее в течение 4 недель этим пациентам назначалась гипохолестеринемическая диета, которая не привела к нормализации указанных показателей. Холестерол составил у них 6,8±0,4 ммоль/л, триацилглицерол 1,6±0,2 ммоль/л, а отношение аполипопротеина В к липопротеину(а) 6,0±0,5. Следующим этапом лечения было назначение кардиостатина в дозе 10 мг/сут с исследованием уровня липидов через 4 недели. После проведенной терапии уровень холестерола крови составил 5,1±0,5 ммоль/л, триацилглицерол 1,2±0,1 ммоль/л, аполипопротеин B снизился с 1,8±0,2 до 1,1±0,1 г/л, липопротеин(а) составил после лечения 0,06±0,006 г/л, отношение аполипоротеина B к липопротеину(а) было равно 19,1±1,4, что свидетельствовало о высокой эффективности лечения липидемии. Липидемия у больных ИБС после лечения выявлена в 10% случаев. Следовательно, эффективность лечения липидемии при ИБС составила 76%, так как вместо 86% до лечения была выявлена после лечения в 10% случаев. При этом клинические данные свидетельствовали об отсутствии ксантоматоза, а течение стенокардии стало стабильным и характеризовалось снижением функционального класса заболевания с III до II, т.е. отмечалось улучшение клинического состояния пациентов.Further, for 4 weeks, a hypocholesterolemic diet was prescribed to these patients, which did not lead to the normalization of these indicators. Their cholesterol was 6.8 ± 0.4 mmol / L, triacylglycerol 1.6 ± 0.2 mmol / L, and the ratio of apolipoprotein B to lipoprotein (a) was 6.0 ± 0.5. The next stage of treatment was the appointment of cardiostatin at a dose of 10 mg / day with the study of lipid levels after 4 weeks. After the therapy, the level of blood cholesterol was 5.1 ± 0.5 mmol / L, triacylglycerol 1.2 ± 0.1 mmol / L, apolipoprotein B decreased from 1.8 ± 0.2 to 1.1 ± 0.1 g / l, lipoprotein (a) was 0.06 ± 0.006 g / l after treatment, the ratio of apoliporotein B to lipoprotein (a) was 19.1 ± 1.4, which indicated a high efficiency in the treatment of lipidemia. Lipidemia in patients with coronary heart disease after treatment was detected in 10% of cases. Consequently, the effectiveness of the treatment of lipidemia in coronary heart disease was 76%, since instead of 86% before treatment, it was detected after treatment in 10% of cases. Moreover, clinical data indicated the absence of xanthomatosis, and the course of angina pectoris became stable and was characterized by a decrease in the functional class of the disease from III to II, i.e. there was an improvement in the clinical condition of patients.
Прогноз течения липидемии оценивался через 1 месяц при повторном обследовании пациентов амбулаторно для повторного назначения по клиническим показаниям кардиостатина. Обследовано 26 больных ИБС с диагнозом: стенокардия напряжения, ФК II-III. В течение месяца больным назначалась гипохолестеринемическая диета. В результате клинико-лабораторного обследования у них установлен уровень холестерола 5,0±0,3 ммоль/л, триацилглицерол 1,3±0,1 ммоль/л, аполипопротеин B 1,2±0,1 г/л, липопротеин(а) 0,058±0,006 г/л, отношение апоВ/апо(а) 21,1±2,0, что свидетельствовало о высокой эффективности прогнозирования течения липидемии. Течение стенокардии у всех обследованных больных ИБС было стабильным. Функциональный класс заболевания не превышал II. Следовательно, использованный способ является надежным критерием прогнозирования течения липидемии.The prognosis of the course of lipidemia was assessed after 1 month when the patients were re-examined on an outpatient basis for re-appointment according to the clinical indications of cardiostatin. 26 patients with ischemic heart disease were examined with a diagnosis of angina pectoris, FC II-III. Within a month, patients were prescribed a cholesterol-lowering diet. As a result of clinical and laboratory examination, they established a cholesterol level of 5.0 ± 0.3 mmol / l, triacylglycerol 1.3 ± 0.1 mmol / l, apolipoprotein B 1.2 ± 0.1 g / l, lipoprotein (a ) 0.058 ± 0.006 g / l, the ratio of apoB / apo (a) 21.1 ± 2.0, which testified to the high efficiency of predicting the course of lipidemia. The course of angina in all examined patients with coronary artery disease was stable. The functional class of the disease did not exceed II. Therefore, the method used is a reliable criterion for predicting the course of lipidemia.
Таким образом, предлагаемый способ прогнозирования течения липидемии после медикаментозной коррекции уровня липидов кардиостатином оказался наиболее точным, а также наиболее информативным по сравнению со способом-прототипом, поскольку новый способ в большинстве случаев позволяет выявлять уровень липопротеина(а) кроме остальных фракций липопротеинов и липидов при липидемии, соотношение аполипопротеина В к липопротеину(а), уровень общего холестерола, триацилглицерола, что позволило провести эффективное лечение липидемии и оценить прогноз течения липидемии.Thus, the proposed method for predicting the course of lipidemia after drug correction of lipid levels with cardiostatin turned out to be the most accurate and also the most informative in comparison with the prototype method, since the new method in most cases allows detecting the level of lipoprotein (a) in addition to other lipoprotein and lipid fractions in case of lipidemia , the ratio of apolipoprotein B to lipoprotein (a), the level of total cholesterol, triacylglycerol, which allowed an effective treatment of lipidemia and to evaluate ognoz flow hyperlipidemia.
Способ прогнозирования течения липидемии позволил выявить начальные стадии липидемии атерогенного генеза, провести патогенетически обоснованную терапию малыми дозами кардиостатина, оценить динамику течения липидемии и получить положительный результат. Это стало возможным благодаря усовершенствованию обработки сыворотки крови перед исследованием, использованию нового коэффициента (отношение аполипопротеина В к липопротеину (а)), характеризующего ранние стадии липидемии атерогенного генеза и одновременному определению концентрации холестерола и триацилглицерола в крови.A method for predicting the course of lipidemia made it possible to identify the initial stages of lipidemia of atherogenic origin, to conduct pathogenetically substantiated therapy with small doses of cardiostatin, to evaluate the dynamics of the course of lipidemia and to obtain a positive result. This was made possible thanks to the improvement of the treatment of blood serum before the study, the use of a new coefficient (the ratio of apolipoprotein B to lipoprotein (a)) characterizing the early stages of lipidemia of atherogenic origin and the simultaneous determination of the concentration of cholesterol and triacylglycerol in the blood.
Для лечения больных липидемией при ИБС впервые были предложены расширенные показания к назначению кардиостатина, не только не противоречащие установленным МЗ Соцразвития РФ рекомендациям по применению кардиостатина, но и входящие согласно инструкции по применению кардиостатина в область официнально рекомендуемых показаний уровня холестерола для назначения препарата. Используемая нами верхняя граница популяционной нормы значения холестерола оказалась несколько ниже общепринятой и составила 6,5 ммоль/л. Это позволило разработать новый способ оценки эффективности лечения липидемии с применением кардиостатина и оценить прогноз течения липидемии после лечения кардиостатином.For the treatment of patients with lipidemia with coronary heart disease, for the first time, extended indications for the appointment of cardiostatin were proposed, not only not contradicting the recommendations established by the Ministry of Health of the Social Development of the Russian Federation for the use of cardiostatin, but also included according to the instructions for the use of cardiostatin in the field of officially recommended cholesterol levels for prescribing the drug. The upper limit of the population norm of the cholesterol value used by us turned out to be slightly lower than the generally accepted one and amounted to 6.5 mmol / L. This made it possible to develop a new method for evaluating the effectiveness of lipidemia treatment using cardiostatin and to evaluate the prognosis of the course of lipidemia after treatment with cardiostatin.
При оценке действия кардиостатина было установлено не только снижение уровня ХС, ТАГ, аполипопротеина B, но и уровня липопротеина (а), что было установлено впервые. Впервые с помощью комплекса указанных выше показателей оценен прогноз течения липидемии при ИБС.When assessing the action of cardiostatin, it was found not only a decrease in the level of cholesterol, TAG, apolipoprotein B, but also the level of lipoprotein (a), which was found for the first time. For the first time using the complex of the above indicators, the prognosis of the course of lipidemia in IHD was estimated.
Итак, новый способ прогнозирования течения липидемии позволил расширить диапазон исцользования кардиостатина для лечения ранних стадий липидемии атерогенного генеза и профилактики липидемии, не протеворечащих узаконенным рекомендациям по назначению кардиостатина, изложенным в инструкции по применению препарата.So, a new method for predicting the course of lipidemia made it possible to expand the range of use of cardiostatin for the treatment of the early stages of lipidemia of atherogenic genesis and the prevention of lipidemia, which do not contradict the legal recommendations for the appointment of cardiostatin set forth in the instructions for use of the drug.
Наиболее диагностически значимым критерием является выявление самых низких значений уровня липопротеина(а), что по нашим результатам важно как для лечения, так и для прогноза течения липидемии при лечении больных в липидной клинике.The most diagnostically significant criterion is the identification of the lowest lipoprotein levels (a), which according to our results is important both for treatment and for predicting the course of lipidemia in the treatment of patients in a lipid clinic.
Новый анализ полученных результатов позволяет выявлять липидемию на ранних стадиях заболевания и проводить своевременную гиполипидемическую терапию кардиостатином и прогнозировать течение липидемии, что повышает точность и специфичность способа. Поэтому критерии по интерпретации результатов уточняют наличие ранних стадий липидемии атерогенного генеза и позволяют прогнозировать течение липидемии при атеросклерозе.A new analysis of the results allows us to detect lipidemia in the early stages of the disease and conduct timely lipid-lowering therapy with cardiostatin and predict the course of lipidemia, which increases the accuracy and specificity of the method. Therefore, the criteria for interpreting the results clarify the presence of early stages of lipidemia of atherogenic genesis and make it possible to predict the course of lipidemia in atherosclerosis.
Клинический пример: пациент Д., 55 лет. Жалобы при поступлении на боли за грудиной и в области сердца, возникающие при физической нагрузке. Боли купируются нитроглицерином. Больного беспокоит одышка при физической нагрузке. АД 170/90 мм рт.ст., пульс в покое 66 ударов в минуту.Clinical example: patient D., 55 years old. Complaints on admission to pain behind the sternum and in the region of the heart that occur during physical exertion. Pain is stopped by nitroglycerin. The patient is concerned about shortness of breath during physical exertion. HELL 170/90 mm Hg, pulse at rest 66 beats per minute.
Результаты лабораторных исследований: ХС общий 7,1 ммоль/л, триацилглицерол 1,8 ммоль/л, ХС ЛПВП 1,0 ммоль/л, ХС ЛПНП 6,2 ммоль/л, ХС ЛПОНП 0,64 ммоль/л, аполипопротеин В 2,2 г/л, липопротеин (а) 0,33 г/л, отношение аполипопротеина В к липопротеину (а) 6,9.Laboratory results: total cholesterol 7.1 mmol / l, triacylglycerol 1.8 mmol / l, HDL cholesterol 1.0 mmol / l, LDL cholesterol 6.2 mmol / l, VLDL cholesterol 0.64 mmol / l, apolipoprotein B 2.2 g / l, lipoprotein (a) 0.33 g / l, the ratio of apolipoprotein B to lipoprotein (a) 6.9.
Диагноз: ишемическая болезнь сердца, стенокардия напряжения, ФК III-IV, гиперхолестеролемия.Diagnosis: coronary heart disease, angina pectoris, FC III-IV, hypercholesterolemia.
В течение 4 недель проводилось лечение кардиостатином в дозе 10 мг/сут.Cardiostatin was administered for 4 weeks at a dose of 10 mg / day.
Результаты повторного обследования: ХС общий 5,2 ммоль/л, триацилглицерол 1,4 ммоль/л, ХС ЛПВП 1,2 ммоль/л, ХС ЛПНП 3,4 ммоль/л, ХС ЛПОНП 0,61 ммоль/л, аполипопротеин В 1,7 г/л, липопротеин (а) 0,088 г/л, отношение аполипопротеина В к липопротеину (а) 20,0.The re-examination results: total cholesterol 5.2 mmol / l, triacylglycerol 1.4 mmol / l, HDL cholesterol 1.2 mmol / l, LDL cholesterol 3.4 mmol / l, cholesterol VLDL 0.61 mmol / l, apolipoprotein B 1.7 g / l, lipoprotein (a) 0.088 g / l, the ratio of apolipoprotein B to lipoprotein (a) 20.0.
Диагноз после курсового лечения кардиостатином: ишемическая болезнь сердца, стенокардия напряжения ФК II (липидемия отсутствует).Diagnosis after course treatment with cardiostatin: coronary heart disease, FC II angina (no lipidemia).
При повторном обследовании через месяц уровень ХС общий составил 5,3 ммоль/л, триацилглицерол 1,5 ммоль/л, ХС ЛПВП 1,1 ммоль/л, ХС ЛПНП 3,55 ммоль/л, ХС ЛПОНП 0,65 ммоль/л, аполипопротеин В 1,85 г/л, липопротеин (а) 0,09 г/л, отношение аполипопротеина В к липопротеину (а) 20,4. Следовательно прогноз течения липидемии оценен как благоприятный. Состояние больного стабилизировалось. Прогрессирование липидемии атерогенного характера не наблюдается.Upon repeated examination after a month, the total cholesterol level was 5.3 mmol / L, triacylglycerol 1.5 mmol / L, HDL cholesterol 1.1 mmol / L, LDL cholesterol 3.55 mmol / L, VLDL cholesterol 0.65 mmol / L apolipoprotein B 1.85 g / l, lipoprotein (a) 0.09 g / l, the ratio of apolipoprotein B to lipoprotein (a) 20.4. Therefore, the prognosis of the course of lipidemia is assessed as favorable. The patient's condition has stabilized. Atherogenic lipid progression is not observed.
Таким образом, эффективность нового способа связана с выявлением ранних стадий липидемии для медикаментозной коррекции заболевания кардиостатином, оценки прогноза течения липидемии и заключается в возможности более точной лабораторной диагностики ранних стадий липидемии, ее коррекции при стенокардии и возможности длительного наблюдения за течением заболевания. Точность медицинской технологии связана с высокой воспроизводимостью.Thus, the effectiveness of the new method is associated with the identification of the early stages of lipidemia for the medical correction of cardiostatin disease, assessment of the prognosis of the course of lipidemia, and lies in the possibility of more accurate laboratory diagnosis of the early stages of lipidemia, its correction in case of angina pectoris and the possibility of long-term monitoring of the course of the disease. The accuracy of medical technology is associated with high reproducibility.
Экономическая эффективность нового способа заключается в повышении точности выявления ранних стадий липидемии при ишемической болезни сердца (ИБС) для медикаментозной коррекции заболевания кардиостатином и оценки прогнозирования течения липидемии, что уменьшает продолжительность лечения заболевания кардиостатином, значительно снижает стоимость профилактики обострений заболевания. При этом преимуществом предлагаемого способа является низкая трудоемкость, затратность, невысокая стоимость применяемого препарата и невысокая стоимость повторного обследования для прогнозирования течения липидемии. Метод не требует для исполнения дополнительных дорогостоящих реактивов и оборудования. Исключаются методические ошибки в анализе, что делает предлагаемый способ экономически целесообразным.The economic efficiency of the new method consists in increasing the accuracy of detecting the early stages of lipidemia in coronary heart disease (CHD) for the medical correction of cardiostatin disease and assessing the prognosis of lipidemia, which reduces the duration of treatment with cardiostatin and significantly reduces the cost of preventing exacerbations of the disease. The advantage of the proposed method is the low complexity, cost, low cost of the drug used and the low cost of re-examination to predict the course of lipidemia. The method does not require the execution of additional expensive reagents and equipment. Methodological errors in the analysis are excluded, which makes the proposed method economically feasible.
Использование предлагаемого способа повышает точность оценки прогнозирования течения липидемии. При этом предлагаемый способ прост в использовании и интерпретации полученных результатов.Using the proposed method improves the accuracy of predicting the course of lipidemia. Moreover, the proposed method is easy to use and interpretation of the results.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013105994/15A RU2517054C1 (en) | 2013-02-12 | 2013-02-12 | Method for prediction of clinical course of lipidemia |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013105994/15A RU2517054C1 (en) | 2013-02-12 | 2013-02-12 | Method for prediction of clinical course of lipidemia |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2517054C1 true RU2517054C1 (en) | 2014-05-27 |
Family
ID=50779363
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013105994/15A RU2517054C1 (en) | 2013-02-12 | 2013-02-12 | Method for prediction of clinical course of lipidemia |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2517054C1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2694534C1 (en) * | 2019-02-19 | 2019-07-16 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Method for assessing the effectiveness of the treatment of lipidemia |
| RU2694538C1 (en) * | 2019-02-18 | 2019-07-16 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Diagnostic technique for early and late stages of lipidemia |
| RU2714689C1 (en) * | 2019-06-10 | 2020-02-19 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Method for prediction of clinical course of lipidemia |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2439582C1 (en) * | 2010-06-11 | 2012-01-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Национальный исследовательский Томский политехнический университет" | Method of predicting ischemic heart disease course |
| RU2462718C1 (en) * | 2011-08-09 | 2012-09-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Национальный исследовательский Томский политехнический университет" | Method for evaluating clinical effectiveness in lipidemia |
-
2013
- 2013-02-12 RU RU2013105994/15A patent/RU2517054C1/en active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2439582C1 (en) * | 2010-06-11 | 2012-01-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Национальный исследовательский Томский политехнический университет" | Method of predicting ischemic heart disease course |
| RU2462718C1 (en) * | 2011-08-09 | 2012-09-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Национальный исследовательский Томский политехнический университет" | Method for evaluating clinical effectiveness in lipidemia |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| NIELSEN T.R. et al. Changes in lipidemia during chronic care treatment of childhood obesity. Child Obes. 2012 Dec; 8(6): 533-41. Найдено в PubMed, PMID: 23181919. WUERMLI L. et al. Hypertriglyceridemia as a possible risk factor for prostate cancer. Prostate Cancer Prostatic Dis. 2005;8(4):316-20. Найдено в PubMed, PMID: 16158078 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2694538C1 (en) * | 2019-02-18 | 2019-07-16 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Diagnostic technique for early and late stages of lipidemia |
| RU2694534C1 (en) * | 2019-02-19 | 2019-07-16 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Method for assessing the effectiveness of the treatment of lipidemia |
| RU2714689C1 (en) * | 2019-06-10 | 2020-02-19 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Method for prediction of clinical course of lipidemia |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5270684B2 (en) | Biomarker for fatty liver disease and method of use thereof | |
| JP6388284B2 (en) | A lipidomic biomarker for predicting cardiovascular outcome in patients with coronary artery disease receiving statin therapy | |
| JP6388283B2 (en) | A lipidomic biomarker to predict cardiovascular outcomes in patients with coronary artery disease who have not received statin therapy | |
| Vorkas et al. | Metabolic phenotypes of carotid atherosclerotic plaques relate to stroke risk: an exploratory study | |
| Nauck et al. | Homogeneous assay for direct determination of high-density lipoprotein cholesterol evaluated | |
| RU2462718C1 (en) | Method for evaluating clinical effectiveness in lipidemia | |
| RU2517054C1 (en) | Method for prediction of clinical course of lipidemia | |
| Trentini et al. | Sex difference: an important issue to consider in epidemiological and clinical studies dealing with serum paraoxonase-1 | |
| Gruppen et al. | Higher circulating GlycA, a pro-inflammatory glycoprotein biomarker, relates to lipoprotein-associated phospholipase A2 mass in nondiabetic subjects but not in diabetic or metabolic syndrome subjects | |
| Orringer | Non-HDL cholesterol, ApoB and LDL particle concentration in coronary heart disease risk prediction and treatment | |
| EP3714273A1 (en) | Methods for prediction and early detection of diabetes | |
| RU2521322C1 (en) | Method for assessing progression of atherogenicity in ischemic heart disease | |
| RU2398239C1 (en) | Method of predicting course of coronary heart disease | |
| WO2017040983A1 (en) | Systems and methods for characterization of hypertriglyceridemia | |
| RU2476888C1 (en) | Diagnostic technique for lipidemia | |
| RU2400759C1 (en) | Method of estimating efficiency of coronary heart disease treatment | |
| EP4264272B1 (en) | Method for determining whether a subject is at risk of developing a musculoskeletal and/or connective tissue disease | |
| RU2694538C1 (en) | Diagnostic technique for early and late stages of lipidemia | |
| RU2439582C1 (en) | Method of predicting ischemic heart disease course | |
| RU2543356C1 (en) | Method for prediction of early post-infarction angina in patients with acute st-elevation myocardial infarction across staying in hospital | |
| RU2694531C1 (en) | Method for diagnosing lipidemia | |
| RU2439576C1 (en) | Method of predicting ischemic heart disease course | |
| RU2402016C1 (en) | Method of predicting course of coronary heart disease | |
| RU2714689C1 (en) | Method for prediction of clinical course of lipidemia | |
| RU2476883C1 (en) | Method for estimating clinical effectiveness of ischemic heart disease |