RU2457245C1 - РЕАССОРТАНТ ReM8 - ВАКЦИННЫЙ ШТАММ ВИРУСА ГРИППА А ПОДТИПА Н1N1 - Google Patents
РЕАССОРТАНТ ReM8 - ВАКЦИННЫЙ ШТАММ ВИРУСА ГРИППА А ПОДТИПА Н1N1 Download PDFInfo
- Publication number
- RU2457245C1 RU2457245C1 RU2011129286/10A RU2011129286A RU2457245C1 RU 2457245 C1 RU2457245 C1 RU 2457245C1 RU 2011129286/10 A RU2011129286/10 A RU 2011129286/10A RU 2011129286 A RU2011129286 A RU 2011129286A RU 2457245 C1 RU2457245 C1 RU 2457245C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- virus
- reassortant
- rem8
- strain
- influenza
- Prior art date
Links
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 17
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 title claims description 6
- 201000010740 swine influenza Diseases 0.000 title abstract description 6
- 206010069767 H1N1 influenza Diseases 0.000 title 1
- 241000197306 H1N1 subtype Species 0.000 claims abstract description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 claims description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 claims description 3
- 241001500351 Influenzavirus A Species 0.000 claims description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 67
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 abstract description 17
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 6
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 abstract description 5
- 208000037801 influenza A (H1N1) Diseases 0.000 abstract description 5
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 abstract description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 4
- 229940031626 subunit vaccine Drugs 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 13
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 13
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 13
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 13
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 11
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 9
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 7
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 7
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 6
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 6
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 230000007124 immune defense Effects 0.000 description 4
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 4
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 4
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 3
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 3
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 230000003067 hemagglutinative effect Effects 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical class O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000252870 H3N2 subtype Species 0.000 description 2
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 2
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 1
- 241001397616 Influenza A virus (H1N1) Species 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 238000011530 RNeasy Mini Kit Methods 0.000 description 1
- OZBDFBJXRJWNAV-UHFFFAOYSA-N Rimantadine hydrochloride Chemical compound Cl.C1C(C2)CC3CC2CC1(C(N)C)C3 OZBDFBJXRJWNAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 241000725681 Swine influenza virus Species 0.000 description 1
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000012268 genome sequencing Methods 0.000 description 1
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 208000037797 influenza A Diseases 0.000 description 1
- 229960003971 influenza vaccine Drugs 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- ZIUHHBKFKCYYJD-UHFFFAOYSA-N n,n'-methylenebisacrylamide Chemical compound C=CC(=O)NCNC(=O)C=C ZIUHHBKFKCYYJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VSZGPKBBMSAYNT-RRFJBIMHSA-N oseltamivir Chemical compound CCOC(=O)C1=C[C@@H](OC(CC)CC)[C@H](NC(C)=O)[C@@H](N)C1 VSZGPKBBMSAYNT-RRFJBIMHSA-N 0.000 description 1
- 229960003752 oseltamivir Drugs 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- RWVGQQGBQSJDQV-UHFFFAOYSA-M sodium;3-[[4-[(e)-[4-(4-ethoxyanilino)phenyl]-[4-[ethyl-[(3-sulfonatophenyl)methyl]azaniumylidene]-2-methylcyclohexa-2,5-dien-1-ylidene]methyl]-n-ethyl-3-methylanilino]methyl]benzenesulfonate Chemical compound [Na+].C1=CC(OCC)=CC=C1NC1=CC=C(C(=C2C(=CC(C=C2)=[N+](CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C)C=2C(=CC(=CC=2)N(CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C)C=C1 RWVGQQGBQSJDQV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- KCFYEAOKVJSACF-UHFFFAOYSA-N umifenovir Chemical compound CN1C2=CC(Br)=C(O)C(CN(C)C)=C2C(C(=O)OCC)=C1CSC1=CC=CC=C1 KCFYEAOKVJSACF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004626 umifenovir Drugs 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- 239000013585 weight reducing agent Substances 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области вирусологии. Предложен вакцинный штамм вируса A ReM8 (H1N1), депонированный в ГКВ под №2632. Высокая продуктивность полученного реассортанта ReM8, а также его иммуногенность, выявляемая в опытах иммунной защиты на мышах, позволяет рассматривать вирус-реассортант ReM8 как штамм-кандидат для производства инактивированных и субъединичных вакцин против пандемического вируса гриппа А (H1N1) 2009 года. 2 ил., 1 табл., 2 пр.
Description
Изобретение относится к области вирусологии и может быть использовано для производства инактивированных и субъединичных вакцин против вируса гриппа А (H1N1).
Эпидемия гриппа, охватившая в 2009 году почти все страны земного шара и получившая, по решению ВОЗ, статус пандемии, была вызвана новым вариантом вируса гриппа А подтипа H1N1 [6, 7], возникшим в результате скрещивания двух вирусов гриппа свиней [8, 14, 16, 18]. Он резко отличается по антигенным свойствам от циркулировавшего в предшествующие годы вируса подтипа H1N1. Поскольку новый вирус имеет значительные антигенные отличия от предшествующих вирусов подтипа H1N1, вакцины, содержащие антигены прежних штаммов, непригодны для профилактики заболеваний, вызванных пандемическим вирусом. Этим обусловлена необходимость создания новых вакцинных штаммов.
В последние годы для получения вакцинных штаммов с определенным набором генов все большее применение находит метод обратной (реверсной) генетики с плазмидной трансфекцией [9]. Этот подход был применен для получения вакцинных штаммов, содержащих гены гемагглютинина (НА) и нейраминидазы (NA) пандемического вируса 2009 года [20, 21]. Наряду с этим в производстве инактивированных или субъединичных противогриппозных вакцин находят применение и вакцинные штаммы, полученные классическим методом. Их традиционно получают путем скрещивания эпидемического вируса с высокопродуктивным штаммом A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) и последующего его клонирования. Именно посредством скрещивания пандемического вируса 2009 года с вирусом A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) был создан в Нью-йоркском медицинском колледже первый штамм для инактивированных и субъединичных вакцин против пандемического вируса 2009 года [22].
Даже небольшие различия в аминокислотной последовательности поверхностных белков вируса могут быть важными для продуктивности вакцинных штаммов при размножении в эмбрионах кур и в клеточных культурах [5, 10, 19], а также для других фенотипических свойств вируса и его иммуногенности. Поэтому представляется оправданным расширение круга штаммов пандемического вируса гриппа A (H1N1), используемых для получения реассортантных вакцинных штаммов.
Сущность настоящего изобретения - создать путем скрещивания вакцинный штамм, который должен содержать гены гемагглютинина и нейраминидазы пандемического вируса гриппа А (H1N1) 2009 года, а остальные 6 геномных сегментов его должны быть от высокопродуктивного вируса A/Puerto Rico/8/34 (H1N1). Задача состояла в том, чтобы получить и охарактеризовать вирус-реассортант, содержащий гены НА и NA штамма A/IIV-Moscow/01/2009 (H1N1)sw1 [2, 3], который был изолирован на территории России и депонирован в Государственную коллекцию вирусов (ГКВ) под номером 2452, и 6 генов высокопродуктивного вируса A/Puerto Rico/8/34 (H1N1). Предлагаемый вакцинный штамм, названный ReM8, обладает всеми признаками и характеристиками вируса гриппа А подтипа H1N1, депонирован в ГКВ на базе Федерального государственного бюджетного учреждения «Научно-исследовательского института вирусологии им. Д.И.Ивановского» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ФГУ «НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского» Минздравсоцразвития России) за №2632.
Сложность работы заключалась в том, что оба вируса-родителя содержат гемагглютинин подтипа H1, что затрудняло селекцию реассортантов с использованием антител против НА подтипа H1, применяемую обычно при скрещивании штамма A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) с вирусами других подтипов. Поэтому в качестве вируса-донора генов штамма A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) мы предложили использовать реассортантный штамм Х-31, который был получен скрещиванием вируса A/Aichi/2/68 (H3N2) и вируса A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) [13].
Штамм Х-31 содержит гены НА и NA вируса A/Aichi/2/68 подтипа H3N2, а остальные 6 генов внутренних и неструктурных белков от вируса A/Puerto Rico/8/34 (H1N1). Такое сочетание генов обеспечивает его высокую продуктивность.
Получение штамма
Вирус A/IIV-Moscow/01/2009 (H1N1)sw1 в концентрации 107 ЭИД50/мл в виде осветленной центрифугированием на малой скорости и разведенной раствором Хэнкса аллантоисной жидкости подвергали УФ-облучению в дозе, необходимой для снижения инфекционного титра на 5 lg. Облученный вирус смешивали с равным количеством необлученного вируса Х-31 (H3N2), и смесь использовали без разведения для заражения куриных эмбрионов. После 14 часов инкубации при 37°С и охлаждения эмбрионов в течение 18 часов при 4°С вирус собирали, обрабатывали иммунной сывороткой против вируса Х-31 (H3N2) и использовали для заражения куриных эмбрионов (по 12 эмбрионов на каждое 10-кратное разведение вируса). Вирус собирали раздельно из каждого эмбриона в предельном разведении и клонировали посредством 6-кратного пассирования в предельных разведениях. Вируссодержащую аллантоисную жидкость хранили при 4°С или замораживали и хранили при -80°С.
Присутствие в составе вируса Х-31 НА подтипа Н3 и NA подтипа N2 облегчает получение реассортанта, содержащего гены поверхностных белков пандемического вируса, поскольку позволяет использовать поликлональную иммунную сыворотку против вируса подтипа H3N2 для отбора клонов при селекции реассортантов. Использование штамма A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) в качестве вируса-родителя потребовало бы тонкой дифференциации антигенов НА и NA пандемического вируса и вируса-донора высокопродуктивности, принадлежащих к одному и тому же подтипу H1N1, для чего было бы необходимо получение специальной панели моноклональных антител.
Секвенирование генома. Вирусную РНК выделяли из вируссодержащей аллантоисной жидкости с помощью набора RNeasy Mini kit (Qiagen). Обратно-транскриптазную реакцию и ПЦР проводили с праймерами, специфическими для генов вируса гриппа А. Продукты полимеразной цепной реакции очищали, используя набор QIAquick PCR purification kit (Qiagen). ДНК секвенировали с использованием секвенатора DNA ABI Prism 3130 (Applied Biosystems) и BigDye Terminator v3.1 kit. Нуклеотидные последовательности обрабатывали с помощью программы DNASTAR sequence analysis software package (DNASTAR Inc.). Полученный штамм-реассортант ReM8 генотипирован посредством частичного секвенирования геномных РНК-сегментов. Секвенирование подтвердило наличие у предлагаемого вакцинного штамма генов НА и NA от вируса A/IIV-Moscow/01/2009 (H1N1)sw1 и остальных 6 генов от штамма A/Puerto Rico/8/34 (H1N1).
Биологические свойства. Вакцинный штамм-реассортант ReM8 размножается в десятидневных куриных эмбрионах при заражении в аллантоисную полость, инкубация 48 часов при температуре 37°С, до титра 108 ЭИД50 и гемагглютинирующего титра 256 гемагглютинирующих единиц (ГАЕ). Агглютинирует эритроциты кур и человека 0(1) группы. Штамм чувствителен к озельтамивиру и арбидолу, резистентен к ремантадину.
Серологические свойства. Вакцинный штамм-реассортант ReM8 реагирует до гомологичного титра в РТГА с моноклональными антителами к НА вируса A/IIV-Moscow/01/2009 (H1N1)sw1 [2].
Инфекционный титр штамма в аллантоисной жидкости - 108 ЭИД50 и гемагглютинирующий титр в аллантоисной жидкости - 256 ГАЕ.
Вакцинные штаммы, полученные скрещиванием дрейфовых вариантов вируса гриппа А человека и вируса A/Puerto Rico/8/34 (H1N1), обычно обладают высокой продуктивностью, близкой к продуктивности вируса-родителя A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) [13]. Однако для некоторых вирусов гриппа А при получении высокопродуктивных реассортантов могут возникнуть трудности, обусловленные неполным функциональным соответствием генов вирусов-родителей. Реассортанты, содержащие гены НА и NA вирусов гриппа птиц, обычно имеют более низкую продуктивность, чем вирус-родитель A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) [1, 10, 15, 17].
Пример 1. Определение уровня репродукции реассортанта ReM8 и вирусов-родителей. Уровень репродукции определяли по данным реакции гемагглютинации (РГА) и титрования инфекционности на куриных эмбрионах, а также посредством концентрации вирусов из определенного объема аллантоисной жидкости и последующим электрофорезом и анализом результатов сканирования. (Фиг.1).
Вируссодержащую аллантоисную жидкость после осветления центрифугированием на малой скорости наслаивали на 4 мл 20% сахарозы в буферном растворе (0,15 М NaCl, 0,01 М Tris-HCl pH 7,6) и осаждали центрифугированием в роторе SW-27 при 23000 об/мин в течение 90 мин. Бляшки ресуспендировали в малом объеме буферного раствора (0,15 М NaCl, 0,01 М Tris-HCl pH 7,6). Анализ вирусных белков проводили посредством электрофореза в полиакриламидном геле (ПААГ) с бис-акриламидной сшивкой при концентрации акриламида 13% без β-меркаптоэтанола с окрашиванием Кумасси синим G-250 и сканированием пластины геля. Обработку результатов сканирования проводили с использованием компьютерной программы TotalLab TL120. Расчет количества вирусного белка в пробе проводили по соотношению вирусных белков и бычьего сывороточного альбумина.
Приведенные в таблице 1 (фиг.1) данные показывают, что гены внутренних и неструктурных белков высокопродуктивного вируса-родителя резко повышают продуктивность реассортанта ReM8 по сравнению с пандемическим вирусом-родителем A/IIV-Moscow/01/2009 (H1N1)sw1. Однако они не обеспечивают реассортанту продуктивности вируса-родителя Х-31 (H3N2), которая близка к продуктивности вируса A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) [13]. Увеличение продуктивности реассортанта ReM8 по сравнению с вирусом-родителем A/IIV-Moscow/01/2009 (H1N1)sw1 имело место во всех опытах, причем продуктивность реассортанта была в 3-4 раза выше, чем продуктивность вируса A/IIV-Moscow/01/2009 (H1N1)sw1 (Фиг.1).
Пример 2. Определение иммуногенности в опыте иммунной защиты
Известно, что белые мыши различных линий обладают разной чувствительностью к пандемическому вирусу гриппа А (H1N1) 2009 года [4, 12]. У мышей линии BALB/c вирус 2009 года вызывает гибель только после адаптации [11].
Иммуногенность вируса-реассортанта ReM8 была определена в опытах на мышах BALB/c. В предварительных опытах установили, что реассортант ReM8 вызывает гибель беспородных белых мышей, но у мышей линии BALB/c даже при заражении очень высокими дозами вируса (106 ЭИД50 на мышь) наблюдается лишь временное снижение веса, но не гибель животных.
В опытах иммунной защиты мышей линии BALB/c иммунизировали вирусом ReM8 очищенным и инактивированным глютаральдегидом в концентрации 0,1% в течение 7 дней при 4°С. Мышам линии BALB/c весом 10,0 г вводили внутримышечно по 20,0 мкг инактивированного вируса. Контрольные группы мышей получали дозу глютаральдегида, соответствующую дозе, полученной мышами опытных групп при иммунизации. Иммунизацию повторяли через 3 недели. Через 3 недели после второй иммунизации мышей заражали интраназально вирусом для определения уровня иммунной защиты. Мышей наблюдали в течение 13 дней, регистрируя вес тела и гибель животных. После двукратной иммунизации как иммунизированных мышей, так и мышей, получивших плацебо, заражали интраназально вирусом ReM8. Мыши, получавшие плацебо, реагировали на инфекцию значительным снижением веса, тогда как у иммунизированных мышей снижение веса было выражено очень слабо (Фиг.2).
Таким образом, высокая продуктивность полученного реассортанта ReM8, а также его иммуногенность, выявляемая в опытах иммунной защиты на мышах, позволяет рассматривать вирус-реассортант ReM8 как штамм-кандидат для производства инактивированных и субъединичных вакцин против пандемического вируса гриппа A (H1N1) 2009 года. Штамм ReM8 (H1N1) (семейство Ortomyxoviridae, род Influenzavirus А) получен путем скрещивания пандемического штамма A/IIV-Moscow/01/2009 (H1N1)sw1, выделенного от человека и депонированного в ГКВ под номером 2452, с высокоурожайным штаммом Х-31 (H3N2). Гены гемагглютинина и нейраминидазы получены реассортантом от пандемического штамма, а гены внутренних и неструктурных белков от донора высокопродуктивного штамма Х-31 (H3N2). Использованный прием скрещивания с реассортантным донором высокопродуктивности может быть использован в будущем для получения вакцинных штаммов против дрейфовых вариантов, если они возникнут в ходе дальнейшей циркуляции вируса H1N1.
Claims (1)
- Вакцинный штамм вируса гриппа А подтипа H1N1 семейства Ortomyxoviridae рода Influenzavirus А, депонированный в ФГБУ НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского Минздравсоцразвития России под №2632 - реассортант ReM8.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011129286/10A RU2457245C1 (ru) | 2011-07-14 | 2011-07-14 | РЕАССОРТАНТ ReM8 - ВАКЦИННЫЙ ШТАММ ВИРУСА ГРИППА А ПОДТИПА Н1N1 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011129286/10A RU2457245C1 (ru) | 2011-07-14 | 2011-07-14 | РЕАССОРТАНТ ReM8 - ВАКЦИННЫЙ ШТАММ ВИРУСА ГРИППА А ПОДТИПА Н1N1 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2457245C1 true RU2457245C1 (ru) | 2012-07-27 |
Family
ID=46850701
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2011129286/10A RU2457245C1 (ru) | 2011-07-14 | 2011-07-14 | РЕАССОРТАНТ ReM8 - ВАКЦИННЫЙ ШТАММ ВИРУСА ГРИППА А ПОДТИПА Н1N1 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2457245C1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109312310A (zh) * | 2016-07-15 | 2019-02-05 | 般财团法人阪大微生物病研究会 | 重配流感病毒的制备方法 |
| EP3677672A4 (en) * | 2017-08-28 | 2021-06-09 | The Research Foundation for Microbial Diseases of Osaka University | METHOD OF GRADUAL CONSTRUCTION OF REASSORTING INFLUENZA VIRUS |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2185437C1 (ru) * | 2000-12-08 | 2002-07-20 | Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины РАМН | Штамм вируса гриппа a/47/новая каледония/99/156(h1n1) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для детей |
| RU2413765C1 (ru) * | 2009-09-16 | 2011-03-10 | Учреждение Российской Академии Медицинских Наук Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины Северо-западного отделения РАМН (НИИЭМ СЗО РАМН) | Вакцинный штамм вируса гриппа а/17/калифорния/2009/38 (h1n1) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей |
-
2011
- 2011-07-14 RU RU2011129286/10A patent/RU2457245C1/ru active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2185437C1 (ru) * | 2000-12-08 | 2002-07-20 | Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины РАМН | Штамм вируса гриппа a/47/новая каледония/99/156(h1n1) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для детей |
| RU2413765C1 (ru) * | 2009-09-16 | 2011-03-10 | Учреждение Российской Академии Медицинских Наук Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины Северо-западного отделения РАМН (НИИЭМ СЗО РАМН) | Вакцинный штамм вируса гриппа а/17/калифорния/2009/38 (h1n1) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109312310A (zh) * | 2016-07-15 | 2019-02-05 | 般财团法人阪大微生物病研究会 | 重配流感病毒的制备方法 |
| KR20190026663A (ko) * | 2016-07-15 | 2019-03-13 | 잇판사이단호진한다이비세이부쯔뵤우겐큐우카이 | 리소턴트 인플루엔자 바이러스 작출 방법 |
| EP3486316A4 (en) * | 2016-07-15 | 2019-12-04 | The Research Foundation for Microbial Diseases of Osaka University | METHOD FOR PRODUCING A REASSEMBLED INFLUENZA VIRUS |
| KR102477492B1 (ko) | 2016-07-15 | 2022-12-13 | 잇판사이단호진한다이비세이부쯔뵤우겐큐우카이 | 리소턴트 인플루엔자 바이러스 작출 방법 |
| US11633469B2 (en) | 2016-07-15 | 2023-04-25 | The Research Foundation For Microbial Diseases Of Osaka University | Reassortant influenza virus production method |
| EP3677672A4 (en) * | 2017-08-28 | 2021-06-09 | The Research Foundation for Microbial Diseases of Osaka University | METHOD OF GRADUAL CONSTRUCTION OF REASSORTING INFLUENZA VIRUS |
| AU2018326931B2 (en) * | 2017-08-28 | 2024-07-25 | The Research Foundation For Microbial Diseases Of Osaka University | Method for gradual construction of reassortant influenza virus |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US12239699B2 (en) | Immunogen for broad-spectrum influenza vaccine and application thereof | |
| US10793834B2 (en) | Live-attenuated virus and methods of production and use | |
| Kilany et al. | Protective efficacy of H5 inactivated vaccines in meat turkey poults after challenge with Egyptian variant highly pathogenic avian influenza H5N1 virus | |
| US9505806B2 (en) | DNA vaccine, method of inducing the immune response, method of immunisation, antibodies specifically recognising the H5 haemagglutinin of an influenza virus and use of the DNA vaccine | |
| JP2024161055A (ja) | 安定化されたｎａを有する組換えインフルエンザウイルス | |
| US20200188506A1 (en) | Vectors for eliciting immune responses to non-dominant epitopes in the hemagglutinin (ha) protein | |
| Adel et al. | Molecular and antigenic traits on hemagglutinin gene of avian influenza H9N2 viruses: Evidence of a new escape mutant in Egypt adapted in quails | |
| Zou et al. | Efficient strategy for constructing duck enteritis virus-based live attenuated vaccine against homologous and heterologous H5N1 avian influenza virus and duck enteritis virus infection | |
| EP2650362A2 (en) | Novel vaccines against the a/h1n1 pandemic flu virus | |
| Bahgat et al. | Characterization of an avian influenza virus H5N1 Egyptian isolate | |
| Sączyńska et al. | A novel hemagglutinin protein produced in bacteria protects chickens against H5N1 highly pathogenic avian influenza viruses by inducing H5 subtype-specific neutralizing antibodies | |
| Khalenkov et al. | Modulation of the severity of highly pathogenic H5N1 influenza in chickens previously inoculated with Israeli H9N2 influenza viruses | |
| RU2457245C1 (ru) | РЕАССОРТАНТ ReM8 - ВАКЦИННЫЙ ШТАММ ВИРУСА ГРИППА А ПОДТИПА Н1N1 | |
| TWI620819B (zh) | 抗大流行性感冒病毒ａ／ｈ１ｎ１之新穎疫苗 | |
| Yin et al. | Synergistic effects of adjuvants interferon-γ and levamisole on DNA vaccination against infection with Newcastle disease virus | |
| SG173642A1 (en) | Influenza hemagglutinin and neuraminidase variants | |
| Stepanova et al. | Amino acid substitutions N123D and N149D in hemagglutinin molecule enhance immunigenicity of live attenuated influenza H7N9 vaccine strain in experiment | |
| CN104804099B (zh) | 一种重组h9n2亚型禽流感加强型多表位疫苗 | |
| Lu et al. | Immunopotentiators improve the efficacy of oil-emulsion-inactivated avian influenza vaccine in chickens, ducks and geese | |
| RU2464312C1 (ru) | Реассортантный штамм вируса гриппа rn2/57-human a(h7n2) для определения антител к нейраминидазе при гриппозной инфекции и вакцинации | |
| RU2428476C1 (ru) | Реассортантный штамм вируса гриппа rn 1/09-swine a(h7n1) для определения антител к нейраминидазе при гриппозной инфекции и вакцинации | |
| Röhrs et al. | A model for early onset of protection against lethal challenge with highly pathogenic H5N1 influenza virus | |
| Kuruppuarachchi et al. | Evaluation of efficacy of oil adjuvanted H5N6 inactivated vaccine against highly pathogenic H5N6 and H5N1 influenza viruses infected chickens | |
| Kaverin et al. | Cross-protection and reassortment studies with avian H2 influenza viruses | |
| CN102234637B (zh) | 重组甲型h1n1流感病毒灭活疫苗株(sc/pr8)的制备及应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20150415 |