RU2429225C2

RU2429225C2 - N-замещенные амиды 2-гидрокси-4-оксо-4-(41-хлорфенил)2-бутеновой кислоты, проявляющие противомикробную активность

Info

Publication number: RU2429225C2
Application number: RU2009138209/04A
Authority: RU
Inventors: Наталья Александровна Мельникова (RU); Наталья Александровна Мельникова; Татьяна Федоровна Одегова (RU); Татьяна Федоровна Одегова; Антон Юрьевич Бородин (RU); Антон Юрьевич Бородин; Назим Мусабекович Игидов (RU); Назим Мусабекович Игидов; Светлана Викторовна Чащина (RU); Светлана Викторовна Чащина; Татьяна Викторовна Бородина (RU); Татьяна Викторовна Бородина; Римма Валентиновна Кириллова (RU); Римма Валентиновна Кириллова
Priority date: 2009-10-15
Filing date: 2009-10-15
Publication date: 2011-09-20
Also published as: RU2009138209A

Abstract

Изобретение относится к области органической химии, а именно к новому биологически активному веществу - N-замещенному амиду 2-гидрокси-4-оксо-4-(4¹-хлорфенил)2-бутеновой кислоты формулы (I), где R=2,6-(СН₃)₂С₆Н₃ (Iа); 2,4,6-(СН₃)₃С₆Н₂ (Iб), которое проявляет выраженную противомикробную активность и при этом обладает низкой токсичностью. 1 табл.

Description

Изобретение относится к области органической химии, к производным ацилпировиноградных кислот, а именно к новым биологически активным веществам - N-замещенным амидам 2-гидрокси-4-оксо-4-(4¹-хлорфенил)2-бутеновой кислоты формулы (I):

R=2,6-(СН₃)₂С₆Н₃ (Ià); 2,4,6-(СН₃)₃С₆Н₂ (Iá);

которые могут найти применение в медицине в качестве лекарственных противомикробных средств.

Ближайшим структурным аналогом заявляемым соединениям является N-4-метилфениламид 2-гидpoкcи-4-oкco-4-(4¹-xлopфeнил)2-бутеновой кислоты, обладающий противомикробной активностью. Известный структурный аналог заявляемых соединений получен взаимодействием 5-(4¹-xлopфeнил)-2,3-дигидpo-2,3-фypaндиoнa с 4-метиланилином [Беляев А.О. Аминопроизводные 4-арил-4-оксо-2-бутеновых кислот: синтез, строение, свойства и биологическая активность. Автореф. дисс. канд. хим. наук. / Курск. 2004. - 20 с.].

В качестве эталона сравнения нами взят противомикробный препарат - диоксидин [Машковский М.Д. Лекарственные средства. М.: Новая волна, Т.2], широко применяемый в лечебной практике.

Цель данного изобретения - синтез неописанных ранее N-замещенных амидов 2-гидpoкcи-4-oкco-4-(4¹-xлopфeнил)2-бутеновой кислоты, обладающих противомикробным действием.

Поставленная цель достигается получением по известной методике [Андрейчиков Ю.С., Милютин А.В., Крылова И.В., Сараева Р.Ф., Дормидонтова Е.В., Дровосекова Л.П., Назметдинов Ф.Я., Колла В.Э. Синтез и биологическая активность гетериламидов ароилпировиноградных кислот и 5-арилпиразол-3-карбоновых кислот// Хим.-фарм.-журн. - 1990. - Т.24. - №7. - С.33-35] N-замещенных амидов 2-гидрокси-4-оксо-4-(4¹-хлорфенил)2-бутеновой кислоты реакцией 5-(4-хлорфенил)-2,3-дигидро-2,3-фурандиона [Игидов Н.М., Козьминых Е.Н., Софьина О.А., Широнина Т.М., Козьминых В.О. Синтез 1,6-диарил-3,4-дигидрокси-2,4-гексадиен-1,6-дионов из производных 2,3-фурандионов. // Химия гетероцикл. соедин. 1999. №11. С.1466-1475] с 2,6-диметил - или 2,4,6-триметиланилинами в среде толуола:

R=2,6-(СН₃)₂С₆Н₃ (Ià); 2,4,6-(СН₃)₃С₆Н₂ (Iá).

Пример получения заявляемого соединения Iа

К раствору 2.09 г (0,01 моль) 5-(4¹-хлорфенил)-2,3-дигидро-2,3-фурандиона в 10 мл толуола добавляли 1.21 г (0.01 моль) 2,6-диметиланилина и кипятили в течение 5-7 мин. Выпавший после охлаждения осадок отфильтровывали, промывали гексаном, перекристаллизовывали из ацетонитрила. Получают 1,90 г (58%) кристаллического соединения (I) с Т_пл. 143-145°С. Найдено: С 65,43; Н 4,76; Сl 10,83; N 4,19. C₁₈H₁₆ClNO₃. Вычислено: С 65,56; Н 4,89; Cl 10,75; N 4,25. ИК спектр, v, см^-1 (кристаллы): 3344(CONH), 1696 (CONH), 1592 (С=С, СО хел.). Спектр ПМР, δ, м.д., ДМСО-d₆: 2,14 с (6Н, 2 СН₃); 4,57 с (2Н, CH₂); 7,04-8,05 м (8Н, СН С₆Н₄, С₆Н₃), 10,12 уш. с (1Н, NH)

Пример получения заявляемого соединения Iб

К раствору 2.09 г.(0,01 моль) 5-(4¹-xлopфeнил)-2,3-дигидpo-2,3-фурандиона в 10 мл толуола добавляют 1.35 г (0.01 моль) 2,4,6-триметиланилина и кипятят в течение 5-7 мин. Выпавший после охлаждения осадок отфильтровывают, промывают гексаном, перекристаллизовывают из ацетонитрила. Получают 1,89 г (55%) кристаллического соединения (I) с Т_пл. 168-171°С. С₁₉Н₁₈СlNО₃. Найдено: С 66,38; Н 5,28; Cl 10,31; N 4,07. Вычислено: С 66,26; Н 5,19; Cl 10,22; N 4,00. ИК спектр, v, см^-1 (кристаллы): 3288 (CONH), 1680 (CONH), 1596 (С =С, СО хел.). Спектр ПМР, δ, м.д., ДМСО-d₆: 2,05 с (6Н, 2 СН₃), 2,22 с (3Н, СН₃), 4,55 с (2Н, СН₂), 6,83 с (2Н, С₆Н₂), 7,08 с (1Н, СН), 7,56, 7,94 два д (4Н, С₆Н₄,), 10,02 уш. с (1Н, NH).

Полученные соединения (I а, б) представляет собой желтые кристаллические вещества, растворимые в диметисульфоксиде, диметиформамиде, труднорастворимые в ацетонитриле, ацетоне, нерастворимые в гексане и воде.

Исследование биологической активности

Острую токсичность при внутрибрюшинном введении определяют на белых нелинейных мышах-самцах массой 18-24 г. Исследуемое вещество и препарат сравнения вводят в брюшную полость в виде раствора в 1%-ной крахмальной слизи из расчета 0,1 мл на 10 г массы животного в возрастающих дозах. Результаты обрабатывают по Прозоровскому с вычислением средней смертельной дозы (ЛД₅₀) при Р<0,05 [Прозоровский В.В., Прозоровская М.П., Демченко В.М. Фармакол. токсикол. Т41, №4, с.497-502 (1978)].

Определение бактериостатической активности проводят методом двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде [Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М., 2000., с.264-273]. Для всех исследуемых соединений определяют МПК в отношении штаммов: S. aureus ATCC 6538-Р, E.coli ATCC 25922, В. subtilis ATCC 6633, Ps. aeroginosa ATCC 9027, С. albicans NCTC 885-653. Посевы производят в мясопептонный бульон, рН 7,0 с различной концентрацией испытуемых соединений. Культуры выращивают в пробирках на скошенной агаризированной среде (мясопептонный агар, плотная среда Сабуро). Для определения противомикробной активности используют 18, 20, 48-часовые чистые культуры микроорганизмов. Для приготовления рабочей взвеси микробов производят смывы выросших чистых культур изотоническим раствором натрия хлорида и устанавливают плотность микробной взвеси по стандарту мутности 5 единиц. Далее из полученной микробной взвеси (500 млн м.т./мл) готовят рабочий раствор бактерий с концентрацией 5 млн м.т./мл. Данную взвесь микробов вносят в количестве 0,1 мл в пробирки с серийными разведениями изучаемых препаратов. Таким образом, микробная нагрузка составяет 250 000 м. т./мл. Изучаемое соединение в количестве 0,05 г растворяют в 5 мл диметилсульфоксида, 1 мл полученного разведения 1:100 соединяют с 4 мл мясопептонного бульона или жидкой среды Сабуро (1:500). Далее готовят ряд серийных разведений с двукратно уменьшающей концентрацией.

Учет результатов производят через 18-20 часов выдержки контрольных и опытных пробирок в термостате при температуре 37°С для бактерий и через 48 часов при 22°С - для грибов. Минимальную подавляющую концентрацию (МПК) устанавливают по отсутствию признаков роста на питательной среде: последняя пробирка с задержкой роста (прозрачный бульон) соответствует МПК препарата в отношении данного штамма. Противомикробный эффект сравнивают хлоргексидином биглюконатом (ХГБ) [Падейская Е.Н. Инф. и антимикроб. терап., 2001, №5, с.105-155]. Результаты исследований представлены в таблице 1.

Таблица 1
Противомикробная активность (мкг/мл) и острая токсичность соединений
Соединение	В.subtilis	Ps.aerogin.	S.aureus	E.coli	C.albic.	LD_50, мг/кг
1а	64-128	500-1000	0,25-0,5	1-2	500-1000	2820,0 (2300,0÷3400,0)
1б	128-250	500-1000	3,9-7,8	7,8-15,6	125-500	1410,0 (1100,0÷1700,0)
ХГБ	1-3	10-500	1-2	1-5	7-15	4000

Соединения (Ia, б) обладают противомикробной активностью по отношению к грамположительным и грамотрицательным микроорганизмам (МПК 0,25-1000 мкг/мл).

Согласно классификации токсичности препаратов [Измеров И.Ф., Сапоцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов // М., с.197 (1977)] соединения Iа, б относятся к классу практически нетоксичных препаратов.

Таким образом, N-замещенные амиды 2-гидpoкcи-4-oкco-4-(4¹-xлopфeнил) 2-бутеновой кислоты (Iа, б) проявляют выраженную противомикробную активность и являются практически нетоксичным. Следовательно, заявляемые соединения (Iа, б) могут найти применение в медицине в качестве противомикробных лекарственных средств.

Claims

N-замещенные амиды 2-гидpoкcи-4-oкco-4-(4¹-xлopфeнил)2-бутеновой кислоты формулы

проявляющие противомикробную активность.