RU2382789C2 - ПРОИЗВОДНЫЕ 1,10b-ДИГИДРО-2-(АМИНОКАРБОНИЛФЕНИЛ)-5Н-ПИРАЗОЛО[1,5-c][1,3]БЕНЗОКСАЗИН-5-ИЛ)ФЕНИЛМЕТАНОНА В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ РЕПЛИКАЦИИ ВИЧ ВИРУСА - Google Patents

Abstract

Описываются производные 5Н-пиразоло[1,5-с][1,3]бензоксазин-5-ил)фенилметанона формулы (I), обладающие способностью ингибировать репликацию ВИЧ, где значения заместителей R¹, R², R³ указаны в формуле изобретения. Описывается также фармацевтический препарат и применение соединения для получения лекарственного препарата, применяемого для лечения состояний, ассоциированных с ВИЧ инфекцией. Соединения по настоящему изобретению применимы для предотвращения или лечения инфекции, вызываемой ВИЧ, и для лечения СПИДа. 4 н. и 10 з.п. ф-лы, 3 табл.

Description

Настоящее изобретение относится к производным 5Н-пиразоло[1,5-c][1,3]бензоксазин-5-ил)фенилметанона как ингибиторам вирусной репликации ВИЧ вируса, способам их получения, а также к фармацевтическим композициям, использованию их в качестве лекарственных средств и диагностическим наборам, их содержащим. Настоящее изобретение также касается комбинаций настоящих ВИЧ ингибиторов с другими антиретровирусными средствами. Оно, кроме того, относится к использованию их в тестах в качестве соединений сравнения или реагентов. Соединения по настоящему изобретению применимы для предотвращения или лечения инфекции, вызываемой ВИЧ, и для лечения СПИДа.

Количество людей, живущих с ВИЧ /СПИДом, насчитывало в декабре 2001 г. приблизительно 40 миллионов человек, в число которых входило более 37 миллионов взрослых и приблизительно 2,7 миллионов детей до 15 лет. Количество людей, инфицированных ВИЧ, только в 2001 г., доходило до 5 миллионов человек, в то время как количество смертей от СПИДа в 2001 г. составляло 3 миллиона. В современной химиотерапии при лечении людей, инфицированных ВИЧ/СПИДом, используют ингибиторы слияния вируса, а также ферментов обратной транскриптазы (RT) и протеазы. В свете возникновения штаммов ВИЧ, резистентных к ингибиторам потока генерации слияния, RT и протеазы, существует возрастающая потребность в разработке новых антивирусных средств с новыми механизмами воздействия.

Настоящее изобретение относится к соединениям, имеющим формулу (I),

и их N-оксидам, стереоизомерным формам и солям,

где

«а» принимает значения 0, 1, 2, 3, 4 или 5;

R¹ представляет собой водород, С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил, С_2-10алкинил, С_3-12 циклоалкил, Het, арил или С_1-10 алкил, замещенный заместителем, выбранным из группы, состоящей из Het, арила, С_3-12 циклоалкила, амино и моно- или дизамещенного амино, где заместители аминогруппы, каждый индивидуально, выбраны из С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила, С_3-12 циклоалкила, Het и арила;

R² представляет собой водород, С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил, С_2-10алкинил, С_3-12 циклоалкил, Het, арил или С_1-10 алкил, замещенный заместителем, выбранным из группы, состоящей из Het, арила, С_3-12 циклоалкила, амино и моно- или дизамещенного амино, где заместители аминогруппы, каждый индивидуально, выбирают из С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила, С_3-12 циклоалкила, Het и арила; или

R¹ и R² вместе с атомом азота, к которому они присоединены образуют (5-12)-членный насыщенный или частично насыщенный гетероцикл; этот гетероцикл может быть необязательно замещен С_1-10 алкилом, С_2-10 алкенилом, С_2-10 алкинилом, С_3-12 циклоалкилом, С_1-6 алкилоксикарбонилом, Het, арилом или С_1-10 алкилом, замещенным заместителем, выбранным из группы, состоящей из Het, арила, С_3-12 циклоалкила, амино и моно- или дизамещенного амино, где заместители аминогруппы, каждый индивидуально, выбраны из С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила, С_3-12 циклоалкила, Het и арила;

R³ представляет собой карбоксил, галоген, нитро, С_1-10 алкил, С_3-12циклоалкил, полигалоС_1-10алкил, циано, амино, моно- или дизамещенный амино, аминокарбонил, моно- или дизамещенный аминокарбонил, С_1-10 алкилокси, С_1-10 алкилтио, С_1-10 алкилсульфонил, пирролидинил, пиперидинил, гомопиперидинил, морфолинил, тиоморфолинил или пиперазинил, необязательно замещенный С_1-10 алкилом, где заместители любой из аминогрупп, каждый индивидуально, выбирают из С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила, С_3-12 циклоалкила, Het и арила;

арил представляет собой фенил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из С_1-10 алкила, полигалоС_1-10алкила, С_1-10 алкилокси, С_1-10 алкилтио, С_1-10 алкилсульфонила, нитро, циано, гало, С_3-7 циклоалкила, С_1-10 алкилкарбонила, карбоксила, С_1-10 алкилоксикарбонила, амино, моно- или дизамещенного амино, аминокарбонила, моно- или дизамещенного аминокарбонила, где заместители любой из аминогрупп, каждый индивидуально, выбирают из фенила, С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила, С_3-7 циклоалкила, пирролидинила, пиперидинила, гомопиперидинила или пиперазинила, необязательно замещенного С_1-10 алкилом;

Het представляет собой 5- или 6-членный ароматический, насыщенный или частично насыщенный, моноциклический или бициклический гетероцикл с одним или несколькими гетероатомами, из которых, каждый индивидуально, выбирают из азота, кислорода или серы; и каждый гетероцикл может быть необязательно замещен одним, или, где возможно, несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из С_1-10 алкила, полигалоС_1-10алкила, С_1-10 алкилокси, С_1-10 алкилтио, С_1-10 алкилсульфонила, нитро, циано, гало, С_3-7циклоалкила, С_1-10 алкилкарбонила, карбоксила, С_1-10 алкилоксикарбонила, амино, моно-или дизамещенного амино, аминокарбонила, моно- или дизамещенного аминокарбонила, где заместители любой из аминогрупп, каждый индивидуально, выбирают из фенила, С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила, С_3-7 циклоалкила, пирролидинила, пиперидинила, гомопиперидинила или пиперазинила, необязательно замещенного С_1-10 алкилом.

В настоящем документе термин ”гало” или ”галоген” использован для обозначения группы или части группы, вводимой как фтор, хлор, бром или йод. Термин “полигало” применен как префикс, который обозначает замещение одним или несколькими атомами галогена. Примеры, в которых использован префикс «полигало», включают в себя, например, полигалоС_1-10алкил, полигалоС_1-6алкил, полигалоС_1-4алкил и тому подобное. Особенно интересными являются такие полигалоалкилы, как дифторметил и трифторметил.

Термин «С_1-4 алкил», относящийся к группе или части группы, обозначает насыщенные одновалентные углеводородные радикалы с неразветвленной и разветвленной цепью, содержащие от 1 до 4 атомов углерода. Примеры таких С_1-4 алкильных радикалов включают в себя метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил и тому подобное.

Термин «С_1-6 алкил», относящийся к группе или части группы, обозначает насыщенные одновалентные углеводородные радикалы с неразветвленной и разветвленной цепью, содержащие от 1 до 6 атомов углерода. Примеры таких С_1-6 алкильных радикалов включают в себя метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, 2-метилбутил, пентил, изоамил, гексил, 3-метилпентил и тому подобное.

Термин «С_1-10 алкил», относящийся к группе или части группы, обозначает насыщенные одновалентные углеводородные радикалы с неразветвленной и разветвленной цепью, содержащие от 1 до 10 атомов углерода. Примеры таких С_1-10 алкильных радикалов включают в себя примеры С_1-6 алкильных радикалов и гептил, октил, нонил, децил, 3-этилгептил и тому подобное.

Термин «С_2-6алкенил», относящийся к группе или части группы, обозначает одновалентные углеводородные радикалы с неразветвленной и разветвленной цепью, имеющие, по крайней мере, одну двойную связь и содержащие от 2 до 6 атомов углерода. Примеры таких С_2-6 алкенильных радикалов включают в себя этенил, пропенил, 1-бутенил, 2-бутенил, изобутенил, 2-метил-1-бутенил, 1-пентенил, 2-пентенил, 1-гексенил, 2-гексенил, 3-гексенил, 3-метил-2-пентенил и тому подобное.

Термин «С_2-10алкенил», относящийся к группе или части группы, обозначает одновалентные углеводородные радикалы с неразветвленной и разветвленной цепью, имеющие, по крайней мере, одну двойную связь и содержащие от 2 до 10 атомов углерода. Примеры таких С_2-10 алкенильных радикалов включают в себя

примеры С_2-6 алкенила и 2-гептенил, 3-гептенил, 3-октенил, 4-октенил, 4-ноненил, 4-деценил и тому подобное.

Термин «С_2-6 алкинил», относящийся к группе или части группы, обозначает одновалентные углеводородные радикалы с неразветвленной и разветвленной цепью, имеющие, по крайней мере, одну тройную связь и содержащие от 2 до 6 атомов углерода. Примеры таких С_2-6 алкинильных радикалов включают в себя этинил, пропинил, 1-бутинил, 2-бутинил, изобутинил, 2-метил-1-бутинил, 1-пентинил, 2-пентинил, 1-гексинил, 2-гексинил, 3-гексинил, 3-метил-2-пентинил и тому подобное.

Термин «С_2-10 алкинил», относящийся к группе или части группы, обозначает одновалентные углеводородные радикалы с неразветвленной и разветвленной цепью, имеющие, по крайней мере, одну тройную связь и содержащие от 2 до 10 атомов углерода. Примеры таких С_2-10 алкинильных радикалов включают в себя

примеры С_2-6 алкинила и 2-гептинил, 3-гептинил, 3-октинил, 4-октинил, 4-нонинил, 4-децинил и тому подобное.

Термин «С_3-7 циклоалкил», относящийся к группе или части группы, обозначает карбоциклические или спирокарбоциклические одновалентные углеводородные радикалы, имеющие от 3 до 7 атомов углерода в основной цепи карбоцикла или спирокарбоцикла. Примеры таких С_3-7 циклоалкильных радикалов включают в себя циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, спиро[2,4]гептанил, циклогептил и тому подобное.

Термин «С_3-12 циклоалкил», относящийся к группе или части группы, обозначает карбоциклические или спирокарбоциклические одновалентные углеводородные радикалы, имеющие от 3 до 12 атомов углерода в основной цепи карбоцикла или спирокарбоцикла. Примеры таких С_3-12 циклоалкильных радикалов включают в себя примеры С_3-7 циклоалкила и циклооктил, циклононил, спиро[4,4]нонил, спиро[4,5]децил, спиро[5,5]ундецил, циклододецил, спиро[5,6]додецил и тому подобное.

Примеры 5- или 6-членных гетероциклов, обозначаемых как Het, включают в себя, кроме прочих, пиридин, пиримидин, пиридазин, пиразин, триазин, имидазол, тиазол, оксазол, оксадиазол, тиадиазол, изотиазол, изоксазол, пиразол, фуран, тиофен, пирол, хинолин, изохинолин, бензоксазол, изобензоксазол, бензотиазол, изобензотиазол, бензимидазол, бензотриазол, тетрагидрохинолин, тетрагидроизохинолин, пиперидин, пиперазин, морфолин, тиоморфолин, пирролидин, гомопиперидин, гомопиперазин, тетрагидрофуран и тетрагидротиенил.

При использовании в настоящем документе, термин «C(=O)» обозначает карбонильную часть, а термин «S(=O)₂» определяет сульфонильную часть. Термин «гидрокси», используемый в настоящем документе означает -OH, термин «нитро» означает -NO₂, термин «циано» означает -CN, а термин «тио» означает -S, термин «оксо» означает =O.

При любом использовании терминов “один или несколько заместителей” или “замещенный”, при определении соединений формулы (I), подразумевают, что при атоме, указанном в выражениях, использующих оборот «один или несколько заместителей» или «замещенный», один или несколько атомов водорода замещены выбранными из указанной группы заместителями; при условии, что не превышена главная валентность указанного атома, и что замещение приводит к химически устойчивому соединению, то есть к соединению, которое достаточно устойчиво, чтобы быть выделенным из реакционной смеси с необходимой степенью чистоты и быть преобразованным в терапевтическое средство.

Для терапевтического использования применяют такие соли соединений по настоящему изобретению, в которых противоион является фармацевтически или физиологически приемлемым. Однако соли, имеющие фармацевтически неприемлемый противоион, могут также найти применение, например, при получении или очистке фармацевтически приемлемого соединения по настоящему изобретению. Все соли, вне зависимости от того, являются они приемлемыми фармацевтически или нет, включены в объем настоящего изобретения.

Фармацевтически приемлемые или физиологически переносимые формы кислотно-аддитивных солей, которые способны образовывать соединения по настоящему изобретению, могут быть легко получены при использовании таких соответствующих кислот, как, например, такие неорганические кислоты, как галоидоводородные кислоты, например соляная или бромистоводородная кислоты, серная, азотная, фосфорная и аналогичные кислоты; или органические кислоты, такие как, например, уксусная, пропановая, гликолевая, молочная, пировиноградная, щавелевая, малоновая, янтарная, малеиновая, фумаровая, яблочная, винная, лимонная, метансульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая, п-толуолсульфоновая, цикламовая, салициловая, п-аминосалициловая, памовая и аналогичные кислоты.

Указанные формы кислотно-аддитивных солей при обработке соответствующим основанием могут быть превращены обратно в форму свободного основания.

Соединения по настоящему изобретению, содержащие кислый протон, также могут быть превращены в нетоксическую форму аддитивной соли металла или амина посредством обработки соответствующими органическими и неорганическими основаниями. Соответствующие формы основных солей включают в себя, например, соли аммония, четвертичные соли аммония, соли щелочных и щелочноземельных металлов, например соли лития, натрия, калия, магния, кальция и тому подобное, соли с органическими основанииями, например соли бензатина, N-метила, -D-глюкамина, гидрабамина и соли с аминокислотами, такими как, например, аргинин, лизин и тому подобное.

Указанные формы основно-аддитивных солей при обработке соответствующей кислотой могут быть обратно превращены в форму свободной кислоты.

Термин “соли” также включает гидраты и формы аддитивных солей растворителя, которые способны образовывать соединения по настоящему изобретению. Примерами таких форм являются, например, гидраты, алкоголяты и тому подобное. Термин “соли” также включает в себя кватернизацию атомов азота настоящих соединений. Основный атом азота может быть кватернизован с помощью любого агента, известного специалистам среднего звена в данной области, включая, например, низшие алкилгалогениды, диалкилсульфаты, галогениды с длинной цепью и арилалкилгалогениды.

N-оксидные формы настоящих соединений включают в себя соединения, в которых один или несколько атомов азота окислены до так называемого N-оксида.

Настоящие соединения могут также существовать в таутомерных формах. Такие формы, хотя они явно не указаны в приведенной выше формуле, полагают включенными в объем настоящего изобретения.

При любом употреблении в настоящей заявке на патент, термины “настоящие соединения”, “соединения по настоящему изобретению”, “соединения формулы (I)” или аналогичные термины включают в себя соединения формулы (I), их N-оксиды, их стереоизомерные формы, их соли или любые их подгруппы.

Интересными соединениями формулы (I) являются такие соединения или любая их подгруппа, где «a» принимает значение ноль, 1 или 2;, более интересными, в частности, оказываются такие соединения, где «a» принимает значение ноль или 1.

Интересными соединениями являются такие соединения формулы (1), в которых R¹ представляет собой водород, С_1-6 алкил, С_2-6 алкенил, С_2-6 алкинил, С_3-7 циклоалкил, Het, арил или C_1-6 алкил, замещенный заместителем, выбранным из группы, состоящей из Het, арила, С_3-7 циклоалкила, амино и моно- или дизамещенного амино, где заместители аминогруппы, каждый индивидуально, выбирают из С_1-6 алкила или С_3-7 циклоалкила;

где R¹, в частности, представляет собой C_1-6 алкил, С_3-7 циклоалкил, Het, арил или

C_1-6 алкил, замещенный заместителем, выбранным из группы, состоящей из Het, арила, С_3-7 циклоалкила, и моно- или дизамещенного амино, где заместители аминогруппы, каждый индивидуально, выбирают из С_1-6 алкила.

Интересными соединениями являются такие соединения формулы (I) или любой их подгруппы, в которых R² представляет собой водород, C_1-10 алкил, C_2-10 алкенил, C_2-10 алкинил, С_3-12 циклоалкил, или C_1-10 алкил, замещенный заместителем, выбранным из группы, состоящей из Het, арила, С_3-7 циклоалкила, амино и моно- или дизамещенного амино, где заместители аминогруппы, каждый индивидуально, выбирают из С_1-6 алкила;

где R², в частности, представляет собой водород, C_1-6 алкил, C_2-6 алкенил, или C_1-6 алкил, замещенный заместителем, выбранным из группы, состоящей из арила.

Интересными соединениями являются такие соединения формулы (I) или любой их подгруппы, в которых R¹ и R² вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют (5-12)-членный насыщенный или частично насыщенный гетероцикл; этот гетероцикл может быть необязательно замещенным C_1-6 алкилом, C_2-6 алкенилом,

C_2-6 алкинилом, С_3-7 циклоалкилом, C_1-6 алкилоксикарбонилом, Het, арилом или C_1-6 алкилом, замещенным заместителем, выбранным из группы, состоящей из Het, арила, С_3-7 циклоалкила, амино и моно- или дизамещенного амино, где заместители аминогруппы, каждый индивидуально, выбирают из C_1-6 алкила, C_2-6 алкенила, C_2-6 алкенила, С_3-7 циклоалкила, Het и арила;

где, в частности, R¹ и R² вместе с атомом азота, к которому присоединены, образуют (5-12)-членный насыщенный или частично насыщенный гетероцикл; этот гетероцикл может быть необязательно замещенным C_1-6 алкилом, C_1-6 алкилоксикарбонилом или C_1-6 алкилом, замещенным арилом;

более детально, соединения, в которых R¹ и R² вместе с атомом азота, к которому присоединены, образуют гетероцикл, выбранный из группы, состоящей из пиперазинила, гомопиперазинила, пиперидинила, гомопиперидинила, морфолинила, тиоморфолинила, пирролидинила, индолинила, 1,2,3,4-тетрагидрохинолинила, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолинила; этот гетероцикл может быть необязательно замещенным C_1-6 алкилом, C_2-6 алкенилом, C_2-6 алкинилом, С_3-7циклоалкилом, C_1-6 алкилоксикарбонилом, Het, арилом, или C_1-6 алкилом, замещенным заместителем, выбранным из группы, состоящей из Het, арила, С_3-7 циклоалкила, амино и моно- или дизамещенного амино, где заместители аминогруппы, каждый индивидуально, выбирают из C_1-6 алкила, C_2-6 алкенила, С_3-7 циклоалкила, Het и арила.

И даже более детально, соединения, в которых R¹ и R² вместе с атомом азота, к которому присоединены, образуют гетероцикл, выбранный из группы, состоящей из пиперазинила, гомопиперазинила, пиперидинила, гомопиперидинила, морфолинила, тиоморфолинила, пирролидинила, индолинила, 1,2,3,4-тетрагидрохинолинила, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолинила; этот гетероцикл может быть необязательно замещен C_1-6 алкилом, C_1-6 алкилоксикарбонилом или C_1-6 алкилом, замещенным арилом.

Интересными соединениями являются такие соединения формулы (I) или любая их подгруппа, в которых R³ является карбоксилом, галогеном, нитро, C_1-6 алкилом, С_3-7 циклоалкилом, полигалоС_1-4 алкилом, циано, амино, моно- или дизамещенным амино, аминокарбонилом, моно- или дизамещенным аминокарбонилом, C_1-6 алкилокси, C_1-6 алкилтио, C_1-6 алкилсульфонилом, пирролидинилом, пиперидинилом, гомопиперидинилом, морфолинилом, тиоморфолинилом или пиперазинилом, необязательно замещенным C_1-6 алкилом, где заместители любой из аминогрупп выбирают, каждый индивидуально, из C_1-6 алкила, C_2-6 алкенила, С_3-7 циклоалкила, Het и арила;

где R³, в частности, представляет собой галоген, нитро, C_1-6 алкил, С_3-7циклоалкил, полигалоС_1-4алкил, циано, C_1-6алкилокси, C_1-6 алкилтио, C_1-6 алкилсульфонил, пиперидинил, морфолинил.

Интересными соединениями являются такие соединения формулы (I) или любая их подгруппа, в которых арил является фенилом, необязательно замещеннымм одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из C_1-6 алкила, полигалоС_1-6 алкила, C_1-6 алкилокси, C_1-6алкилтио, C_1-6алкилсульфонила, нитро, циано, гало, С_3-7циклоалкила, C_1-6 алкилкарбонила, карбоксила, C_1-6 алкилоксикарбонила, амино, моно- или дизамещенного амино, аминокарбонила, моно- или дизамещенного аминокарбонила, где заместители любой из аминогрупп, каждый индивидуально, выбирают из фенила, из C_1-6 алкила, C_2-6 алкенила, С_3-7 циклоалкила, пирролидинила, пиперидинила, гомопиперидинила или пиперазинила, необязательно замещенного C_1-6 алкилом;

где, в частности, арил является фенилом, необязательно замещенным одним, двумя или тремя заместителями, выбранными из группы, состоящей из C_1-6 алкила, C_1-6 алкилокси, нитро, циано, гало, амино, моно- или дизамещенного амино, где заместители любой из аминогрупп, каждый индивидуально, выбирают из C_1-6 алкила.

Интересными соединениями являются такие соединения формулы (I) или любая их подгруппа, в которых Het представляет собой 5- или 6-членный ароматический, насыщенный или частично насыщенный, моноциклический или бициклический гетероцикл с одним или несколькими гетероатомами, где каждый индивидуально выбирают из азота, кислорода или серы; и этот гетероцикл может быть необязательно замещен одним, или, там где возможно, несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из C_1-6 алкила, полигалоС_1-6алкила, C_1-6 алкилокси, C_1-6 алкилтио, C_1-6 алкилсульфонила, нитро, циано, гало, С_3-7циклоалкила, C_1-6 алкилкарбонила, карбоксила, C_1-6 алкилоксикарбонила, амино, моно- или дизамещенного амино, аминокарбонила, моно- или дизамещенного аминокарбонила, где заместители любой из аминогрупп, каждый индивидуально, выбирают из фенила, C_1-6 алкила, C_2-6 алкенила, С_3-7 циклоалкила, пирролидинила, пиперидинила, гомопиперидинила или пиперазинила, необязательно замещенного C_1-6 алкилом;

где, в частности, Het представляет собой 5- или 6-членный ароматический, насыщенный или частично насыщенный, моноциклический или бициклический гетероцикл с одним или несколькими гетероатомами, где, каждый индивидуально, выбирают из азота, кислорода или серы; и этот гетероцикл может быть необязательно замещен C_1-6 алкилом.

Более детально, когда Het представляет собой гетероцикл, выбранный из группы, состоящей из пиридинила, пиримидинила, пиразинила, пиридазинила, триазинила, пиранила, пирролила, фуранила, тиенила, оксазолила, изоксазолила, тиазолила, изотиазолила, имидазолила, тетрагидрофуранила, тетрагидротиенила, имидазолинила, диоксоланила, пирролидинила, пиперидинила, гомопиперидинила, пиперазинила, гомопиперазинила, диоксанила, морфолинила, тиоморфолинила; этот гетероцикл может быть необязательно замещен одним, или, где возможно, несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из C_1-6 алкила, полигалоС_1-6алкила, C_1-6 алкилокси, C_1-6 алкилтио, C_1-6 алкилсульфонила, нитро, циано, гало, С_3-7 циклоалкила, C_1-6 алкилкарбонила, карбоксила, C_1-6 алкилоксикарбонила, амино, моно- или дизамещенного амино, аминокарбонила, моно- или дизамещенного аминокарбонила, где заместители любой из аминогрупп, каждый индивидуально, выбирают из фенила, C_1-6 алкила, C_2-6 алкенила, С_3-7 циклоалкила, пирролидинила, пиперидинила, гомопиперидинила или пиперазинила, необязательно замещенного C_1-6 алкилом;

даже более детально, где Het представляет собой гетероцикл, выбранный из группы, состоящей из пиридинила, пиримидинила, пиразинила, пиридазинила, триазинила, пиранила, пирролила, фуранила, тиенила, оксазолила, изоксазолила, тиазолила, изотиазолила, имидазолила, тетрагидрофуранила, тетрагидротиенила, имидазолинила, диоксоланила, пирролидинила, пиперидинила, гомопиперидинила, пиперазинила, гомопиперазинила, диоксанила, морфолинила, тиоморфолинила; этот гетероцикл может быть необязательно замещен C_1-6 алкилом.

Еще интересными соединениями являются такие соединения формулы (I) или любой их подгруппы, в которых Het представляет собой гетероцикл, выбранный из группы, состоящей из пиридинила, фуранила, тиенила, тетрагидрофуранила, пирролидинила, пиперидинила; этот гетероцикл может быть необязательно замещенным одним, или, там где возможно, несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из C_1-6 алкила, полигалоС_1-6алкила, C_1-6 алкилокси, C_1-6 алкилтио, C_1-6 алкилсульфонила, нитро, циано, гало, С_3-7циклоалкила, C_1-6 алкилкарбонила, карбоксила, C_1-6 алкилоксикарбонила, амино, моно- или дизамещенного амино, аминокарбонила, моно- или дизамещенного аминокарбонила, где заместители любой из аминогрупп, каждый индивидуально, выбирают из фенила, C_1-6 алкила, C_2-6 алкенила, С_3-7 циклоалкила, пирролидинила, пиперидинила, гомопиперидинила или пиперазинила, необязательно замещенного C_1-6 алкилом;

где, в частности, Het представляет собой гетероцикл, выбранный из группы, состоящей из пиридинила, фуранила, тиенила, тетрагидрофуранила, пирролидинила, пиперидинила; этот гетероцикл может быть необязательно замещен C_1-6 алкилом.

Интересной группой соединений являются такие соединения формулы (I), где используют одно или несколько нижеследующих ограничений:

1. «a» принимает значения ноль или l;

2. R¹ представляет собой C_1-10 алкил, С_3-12 циклоалкил, Het, арил или C_1-10 алкил, замещенный заместителем, выбранным из группы, состоящей из Het, арила, С_3-12 циклоалкила и моно- или дизамещенного амино, в котором заместители аминогруппы, каждый индивидуально, выбирают из C_1-10 алкила;

3. R² представляет собой водород, C_1-10 алкил, C_2-10 алкенил или C_1-10 алкил, замещенный арилом;

4. R¹ и R² вместе с атомом азота, к которому присоединены, образуют (5-12)-членный насыщенный или частично насыщенный гетероцикл; этот гетероцикл может быть необязательно замещен C_1-10 алкилом, C_1-6 алкилоксикарбонилом или C_1-10 алкилом, замещенным арилом;

5. R³ представляет собой галоген, нитро, C_1-10 алкил, С_3-12 циклоалкил, полигалоС_1-10алкил, циано, C_1-10 алкилокси, C_1-10 алкилтио, C_1-10 алкилсульфонил, пиперидинил, морфолинил;

6. Арил представляет собой фенил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из C_1-10 алкилокси, гало, моно- или дизамещенного амино, в котором заместитель любой из аминогрупп, каждый индивидуально, выбирают из C_1-10 алкила;

7. Het представляет собой 5- или 6-членный ароматический, насыщенный или частично насыщенный, моноциклический или бициклический гетероцикл с одним или несколькими гетероатомами, где каждый индивидуально выбирают из азота, кислорода или серы; и этот гетероцикл может быть необязательно замещен C_1-10 алкилом.

Конкретными соединениями являются соединения формулы (I) или любой их подгруппы, такими как интересные соединения, определенные выше, в которых -C(=O)-NR¹R² часть находится в пара- положении в фенильном кольце, соединенном с позицией 2 каркаса 1,9b-дигидро-5-окса-3,3a-диазациклопента[a]нафталина (также называемого каркасом 1,10b-дигидро-5H-пиразоло[1,5-c][1,3]бензоксазина), как можно видеть в соединении формулы (Ia), показанного на фигуре, изображенной ниже.

Конкретные соединения представляют собой соединения формулы (I) или любой их подгруппы, такие как интересные соединения обозначенные выше, в которых «a» принимает значения ноль или 1, а R³ является галогеном, нитро, C_1-10 алкилом, С_3-12 циклоалкилом, полигалоС_1-10алкилом, циано, C_1-10 алкилокси, C_1-10 алкилтио, C_1-10 алкилсульфонилом, пиперидинилом, морфолинилом.

Конкретные соединения представляют собой соединения формулы (I) или (Iа) или любой их подгруппы, такие как интересные соединения, обозначенные выше, в которых R¹ является C_1-10 алкилом, С_3-12 циклоалкилом, Het, арилом или C_1-10 алкилом, замещенным заместителем, выбранным из группы, состоящей из Het, арила, С_3-12 циклоалкила и моно- или дизамещенного амино, в котором заместители аминогруппы, каждый индивидуально, выбирают из C_1-10 алкила; R² представляет собой водород, C_1-10 алкил, C_2-10 алкенил или C_1-10 алкил, замещенный арилом;

или R¹ и R² вместе с атомом азота, к которому присоединены, образуют (5-12)-членный насыщенный или частично насыщенный гетероцикл; этот гетероцикл может быть необязательно замещен C_1-10 алкилом, C_1-6 алкилоксикарбонилом или C_1-10 алкилом, замещенным арилом.

Предпочтительными соединениями являются соединения формулы (I) или (Ia) или любой их подгруппы, такие как интересные и конкретные соединения, определенные выше, в которых

«a» принимает значение ноль или 1;

R¹ является C_1-10 алкилом, С_3-12 циклоалкилом, Het, арилом или C_1-10 алкилом, замещенным заместителем, выбранным из группы, состоящей из Het, арила, С_3-12 циклоалкила и моно- или дизамещенного амино, в котором заместители аминогруппы, каждый индивидуально, выбирают из C_1-10 алкила;

R² представляет собой водород, C_1-10 алкил, C_2-10 алкенил или C_1-10 алкил, замещенный арилом; или

R¹ и R² вместе с атомом азота, к которому присоединены, образуют (5-12)-членный насыщенный или частично насыщенный гетероцикл; этот гетероцикл может быть необязательно замещен C_1-10 алкилом, C_1-6 алкилоксикарбонилом или C_1-10 алкилом, замещенным арилом;

R³ представляет собой галоген, нитро, C_1-10 алкил, С_3-12 циклоалкил, полигалоС_1-10алкил, циано, C_1-10 алкилокси, C_1-10 алкилтио, C_1-10 алкилсульфонил, пиперидинил, морфолинил.

Предпочтительными соединениями являются соединения формулы (I) или (Ia) или любой их подгруппы, такие как интересные и конкретные соединения, определенные выше, в которых

«a» принимает значения ноль или 1;

R¹ является C_1-10 алкилом, С_3-12 циклоалкилом, Het, арилом или C_1-10 алкилом, замещенным заместителем, выбранным из группы, состоящей из Het, арила, С_3-12 циклоалкила и моно- или дизамещенного амино, в котором заместители аминогруппы, каждый индивидуально, выбирают из C_1-10 алкила;

R² представляет собой водород, C_1-10 алкил, C_2-10 алкенил или C_1-10 алкил, замещенный арилом; или

R¹ и R² вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют (5-12)- членный насыщенный или частично насыщенный гетероцикл; этот гетероцикл может быть необязательно замещен C_1-10 алкилом, C_1-6 алкилоксикарбонилом или C_1-10 алкилом, замещенным арилом;

R³ представляет собой галоген, нитро, C_1-10 алкил, С_3-12 циклоалкил, полигалоС_1-10алкил, циано, C_1-10 алкилокси, C_1-10 алкилтио, C_1-10 алкилсульфонил, пиперидинил, морфолинил;

арил представляет собой фенил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из C_1-10 алкилокси, гало, моно- или дизамещенного амино, где заместители любой из аминогрупп, каждый индивидуально, выбирают из C_1-10 алкила;

Het представляет собой 5- или 6-членный ароматический, насыщенный или частично насыщенный, моноциклический или бициклический гетероцикл с одним или несколькими гетероатомами, где, каждый индивидуально, выбирают из азота, кислорода или серы; и этот гетероцикл может быть необязательно замещен C_1-10 алкилом.

Более предпочтительными соединениями являются соединения формулы (I) или (Ia) или любой их подгруппы, такие как интересные и конкретные соединения, определенные выше, в которых

«а» принимает значения ноль или 1;

R¹ является C_1-6 алкилом, С_3-7 циклоалкилом, Het, арилом или C_1-6 алкилом, замещенным заместителем, выбранным из группы, состоящей из Het, арила, С_3-7 циклоалкила и моно- или дизамещенного амино, в котором заместители аминогруппы, каждый индивидуально, выбирают из C_1-6 алкила;

R² представляет собой водород, C_1-6 алкил, C_2-6 алкенил или C_1-6 алкил, замещенный заместителем, выбранным из группы, состоящей из арила; или

R¹ и R² вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гетероцикл выбранный из группы, состоящей из пиперазинила, гомопиперазинила, пиперидинила, гомопиперидинила, морфолинила, тиоморфолинила, пирролидинила, индолинила, 1,2,3,4-тетрагидрохинолинила, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолинила; этот гетероцикл может быть необязательно замещен C_1-6алкилом, C_1-6 алкилоксикарбонилом или C_1-6алкилом, замещенный арилом;

R³ представляет собой галоген, нитро, C_1-6 алкил, С_3-7 циклоалкил, полигалоС_1-4алкил, циано, C_1-6 алкилокси, C_1-6 алкилтио, C_1-6 алкилсульфонил, пиперидинил, морфолинил;

арил представляет собой фенил, необязательно замещенный одним, двумя или тремя заместителями, выбранным из группы, состоящей из C_1-6 алкила, C_1-6 алкилокси, нитро, циано, гало, амино, моно- или дизамещенного амино, в котором заместители любой из аминогрупп, каждый индивидуально, выбирают из C_1-6 алкила;

Het представляет собой гетероцикл, выбранный из группы, состоящей из пиридинила, фуранила, тиенила, тетрагидрофуранила, пирролидинила, пиперидинила; этот гетероцикл может быть необязательно замещен C_1-6 алкилом.

Другими более предпочтительными соединениями являются соединения формулы (I) или (Ia) или любой их подгруппы, такие как интересные, конкретные и предпочтительные соединения, определенные выше, в которых R¹ является циклопентилом, а R² является водородом.

Другими более предпочтительными соединениями являются соединения формулы (I) или (Ia) или любой их подгруппы, такие как интересные, конкретные и предпочтительные соединения, определенные выше, в которых «a» имеет значение 1, а R³ является галогеном, циано, C_1-4 алкилом, C_1-4 алкилтио; морфолинилом, C_1-4 алкилокси, нитро, C_1-4 алкилсульфонилом, трифторметилом.

Наиболее предпочтительными соединениями являются

4-[5-(4-фторбензоил)-1,10b-дигидро-5H-пиразоло[1,5-c][1,3]бензоксазин-2-ил]-N-[(4-метоксифенил)метил]-N-метилбензамид;

4-[5-(4-цианобензоил)-1,10b-дигидро-5H-пиразоло[1,5-c][1,3]бензоксазин-2-ил]-N-циклопентилбензамид;

4-[5-(4-пропилбензоил)-1,10b-дигидро-5H-пиразоло[1,5-c][1,3]бензоксазин-2-ил]-N-циклопентилбензамид;

4-[5-(4-метилсульфанилбензоил)-1,10b-дигидро-5H-пиразоло[1,5-c] [1,3]бензоксазин-2-ил]-N-циклопентилбензамид;

4-[5-(4-этибензоил)-1,10b-дигидро-5H-пиразоло[1,5-c][1,3]бензоксазин-2-ил]-N-циклопентилбензамид;

4-[5-(4-трет-бутилбензоил)-1,10b-дигидро-5H-пиразоло[1,5-c][1,3] бензоксазин -2-ил]-N-циклопентилбензамид;

4-[5-(4-нитрбензоил)-1,10b-дигидро-5H-пиразоло[1,5-c][1,3]бензоксазин-2-ил]-N-циклопентилбензамид;

4-[5-(4-метансульфонилбензоил)-1,10b-дигидро-5H-пиразоло[1,5-c] [1,3]бензоксазин-2-ил] -N-циклопентилбензамид;

4-[5-(4-трифторметилбензоил)-1,10b-дигидро-5Н-пиразоло[1,5-c][1,3]бензоксазин-2-ил]-N-циклопентилбензамид

или их N-оксиды, стереоизомерные формы или соли.

Благодаря тому что соединения формулы (I) являются ингибиторами репликации ВИЧ, соединения формулы (I) являются пригодными для лечения теплокровных животных, в частности людей, инфицированных ВИЧ. Состояния, связанные с ВИЧ, которые можно предотвратить или излечить с помощью соединений по настоящему изобретению включают СПИД, СПИД-ассоциированный комплекс (ARS), прогрессирующую генерализованную лимфаденопатию (PGL), также как такие хронические болезни ЦНС, вызываемые, ретровирусами, как, например, ВИЧ опосредованные слабоумие и рассеянный склероз.

Поэтому соединения по настоящему изобретению могут быть использованы в качестве лекарственных средств, противодействующих упомянутым выше состояниям, или в способе их лечения. Указанное использование в качестве лекарственного средства или как метода лечения включает в себя системное введение эффективного терапевтического количества соединения формулы (I) ВИЧ-инфицированным теплокровным животным, в частности ВИЧ-инфицированным людям. Следовательно, соединения по настоящему изобретению могут быть использованы при получении лекарственного препарата, применимого при лечении состояний, ассоциированных с ВИЧ инфекцией.

В одном варианте осуществления изобретение относится к использованию соединения по настоящему изобретению для получения лекарственного препарата для предотвращения передачи ВИЧ или ВИЧ инфекции, или заболевания, ассоциированного с ВИЧ инфекцией теплокровных животных, в частности людей, и, в частности, передачи инфекции или через половые сношения, или близкий интимный контакт между партнерами. Таким образом, изобретение также относится к способу предотвращения передачи ВИЧ или ВИЧ инфекции, или заболевания, связанного с ВИЧ инфекцией, в частности, передачи инфекции половым путем, или близкий интимный контакт между партнерами, включающему в себя введение теплокровному животному, в частности человеку, эффективного профилактического количества соединения формулы (I).

Термин «стереохимически изомерные формы соединений по настоящему изобретению», используемый ранее в настоящем документе, определяет все возможные соединения, составленные из одних и тех же атомов, связанных одинаковой последовательностью связей, но имеющих разные трехмерные структуры, которые не являются взаимозаменяемыми и которыми могут обладать соединения по настоящему изобретению.

Если не упомянуто или указано иначе, химическое обозначение соединения включает в себя смесь всех его возможных стереохимических изомерных форм. Указанная смесь может содержать все диастереомеры и/или энантиомеры основной молекулярной структуры указанного соединения. Все стереохимически изомерные формы соединений по настоящему изобретению, как в чистой форме, так и в виде смеси друг с другом, включены в объем настоящего изобретения.

Чистые стереоизомерные формы соединений и интермедиатов, упомянутых в настоящем документе, определяют как изомеры, по существу, не содержащие иных энантиомерных или диастереомерных форм одной и той же базовой молекулярной структуры указанных соединений или интермедиатов. В частности, термин «стереоизомерно чистый» относится к соединениям или интермедиатам, имеющим избыток стереоизомера, составляющий, по крайней мере, от 80% (то есть минимальное количество одного изомера составляет 80%, а максимальное количество других возможных изомеров составляет 20%) до 100% избыточного количества стереоизомера (то есть 100% одного изомера, при отсутствии других изомеров); более детально, к соединениям или интермедиатам, имеющим избыток стереоизомера, составляющий от 90% до 100%, даже более детально, имеющим избыток стереоизомера, составляющий от 94% до 100% и, наиболее детально, имеющим избыток стереоизомера, составляющий от 97% до 100%. Термины «энантиомерно чистый» и «диастереомерно чистый» следует понимать аналогичным образом, но, соответственно, учитывая избыток энантиомера и избыток диастереомера в рассматриваемой смеси.

Чистые стереоизомерные формы соединений и интермедиатов по этому изобретению могут быть получены применением методик, известных в данной области. Например, энантиомеры могут быть отделены друг от друга селективной кристаллизацией их диастереомерных солей, используя оптически активные кислоты. Альтернативно, энантиомеры могут быть разделены с помощью хроматографических методов, использующих хиральные неподвижные фазы. Указанные стереохимически чистые изомерные формы могут также быть получены из соответствующих стереохимически чистых изомерных форм соответствующих исходных веществ, при условии, что реакция протекает как стереоспецифичная. Если требуется определенный стереоизомер, то предпочтительно, когда указанное соединение будут синтезировать стереоспецифичными способами получения. В этих способах будут преимущественно использованы энантиомерно чистые исходные вещества.

Диастереомерные рацемические смеси соединений по настоящему изобретению могут быть получены отдельно с помощью общепринятых способов. Соответствующие способы физического разделения, которые преимущественно могут быть использованы, представляют собой, например, селективную кристаллизацию и хроматографию, например, колоночную хроматографию.

Соединения могут содержать один или несколько асимметричных центров и, таким образом, могут существовать в виде различных стереоизомерных форм. Абсолютную конфигурацию каждого асимметричного центра, который может присутствовать в соединениях, могут обозначать с помощью стереохимических дескрипторов R и S; такое R- и S-обозначение соответствует правилам, описанным в Pure Appl. Chem. 1976, 45, 11-30.

Настоящее изобретение также предполагает включение всех изотопов атомов, присутствующих в настоящих соединениях. Изотопы включают в себя атомы, имеющие одинаковый порядковый номер, но различные массовые числа. Как универсальный пример, в отсутствие ограничений, изотопы водорода включают в себя тритий и дейтерий. Изотопы углерода включают в себя ¹³C и ¹⁴C.

Полезные свойства настоящих соединений, относящиеся к их способности ингибировать репликацию ВИЧ вируса, могут быть иллюстрированы, используя тест антивирусной репликации, в котором непосредственно измеряют происходящую репликацию ВИЧ вируса дикого типа в клетках MT4 специфическим взаимодействием ВИЧ-tat с LTR последовательностью, соединенной с GFP (MT4-LTR-EGFP клетки). Используя тест антивирусной репликации, приведенный выше, обнаружили, что настоящие соединения подавляют репликацию вирусов, резистентных к соединениям, ингибирующим обратную транскриптазу, соединениям, ингибирующим протеазу, или соединениям, ингибирующим и то, и другое (так называемые вирусы с множественной лекарственной устойчивостью).

Что касается механизма действия, по которому настоящие соединения ингибируют вирусную репликацию, то в эксперименте по определению времени добавления было показано, что настоящие соединения ингибируют начальную стадию процесса вирусной репликации. Эксперименты по определению времени добавления позволяют понять, в какой момент времени тестируемое соединение ингибирует вирусную репликацию в клеточной среде. В частности, тестируемые соединения по настоящему изобретению добавляли с разными временными интервалами к MT4 клеткам, инфицированным ВИЧ-1, экспрессирующим репортерный ген ВИЧ-1-LTR-люциферазы (MT4-LTR-Luc) или MT4 клеткам, экспрессирующим HTV-1-LTR-EGFP репортерный ген (MT4-LTR-EGFP). Первое добавление тестируемого соединения (первая временная точка) наступало через 30 минут после синхронизации вируса.

Более того, было обнаружено, что настоящие соединения обладают незначительной активностью или вообще не обнаруживают активности в репортерном тесте на внедрение вируса (ERA), где измеряют ингибирование слияния клеток между линией клеток, устойчиво экспрессирующих ВИЧ (эффекторная линия клеток), и линией клеток, экспрессирующих CD4 и CXCR4 (линия клеток - мишени), содержащих LTR-EGFP, используя в качестве считывающего устройства лазерный анализатор клеток (FACS).

Тест на токсичность, в котором сниженная экспрессия GFP репортерного белка (MT4-CMV-EGFP клетки) служит в качестве маркера токсичности клеток тестируемого соединения, может быть использован для оценки токсичности настоящих соединений.

Вообще говоря, соединения по настоящему изобретению могут быть получены посредством последовательности реакций синтеза, изображенной на схеме 1.

Схема 1

На схеме 1, интермедиат формулы 1.2 может быть получен сочетанием амина формулы NH(R¹)(R²) и бензойной кислоты формулы 1.1. Эту реакцию можно осуществлять в таком соответствующем инертном для данной реакции растворителе, как ацетонитрил, дихлорметан, тетрагидрофуран или любом другом растворителе, который растворяет реагенты, в присутствии связующего вещества, такого как EDCI (этилдиметиламинопропилкарбодиимид) и HOBt (гидроксибензтриазол) или их функционального эквивалента. Интермедиаты формулы 1.2 затем могут быть подвергнуты конденсации с салициловым альдегидом формулы 1.3, в присутствии соответствующего основания, такого как неорганическое основание, например гидроксид калия или гидроксид натрия в соответствующей системе растворителей, такой как, например, смесь спирта и воды, например смесь этанола и воды. Или же может быть использовано такое органическое основание, как пирролидин в таком соответствующем растворителе, как тетрагидрофуран или дихлорметан. Изменяемое “PG” в интермедиате 1.3 означает защитную группу для гидроксигруппы, такую, например, как метоксиметил, трет-бутоксиметил, тетрагидропиранил или метоксиэтоксиметил (MEM). Лучшие выходы наблюдали при использовании защищенных салициловых альдегидов формулы 1.3. Особенно подходящей защитной группой является, например, MEM. Схема 2 показывает реакционную процедуру получения интермедиата формулы 1.3, где защитной группой является MEM. Интермедиат, полученный по приведенной выше реакции конденсации, представляет собой халкон формулы 1.4 (описанный также в J. Med. Chem, 2000, 43, 4868-4876). Защитная группа может быть удалена с защищенного халкона формулы 1.4 в кислой среде, например, используя хлористоводородную кислоту в соответствующем растворителе, таком как, например, тетрагидрофуран, дихлорметан или спирт, таким образом получают интермедиат формулы 1.5. Затем интермедиат 1.5 могут подвергнуть взаимодействию с гидразином в соответствующем смешивающемся с водой растворителе, таком, например, как диоксан, толуол или спирт, подобный этанолу, для получения дигидропиразола формулы 1.6 (J. Ind. Chem. Soc, 1989, 66, 893-896). Соединение формулы (1) могут затем получить посредством сочетания дигидропиразола формулы 1.6 с соответствующим глиоксалем формулы 1.7 в соответствующем растворителе, таком как толуол или диоксан, в присутствии каталитического количества кислоты, такой как пара-толуолсульфокислота.

Схема 2

Препарат интермедиата формулы 1.3 с MEM в качестве защитной группы могут получить взаимодействием салицилового альдегида 2.1, который является коммерчески доступным, с хлорметоксиметоксиэтаном, в присутствии основания, такого как гидрид натрия или гидрид калия, в присутствии подходящего растворителя, такого как N,N-диметилформамид или тетрагидрофуран.

Схема 3

Получение глиоксаля формулы 1.7 можно осуществить, исходя из интермедиата формулы 3.1, по способу или аналогично способу, описанному в J. Het. Chem. 1987, 24, 441-451. Более детально, ацетил формулы 3.1 может быть окислен до глиоксаля формулы 1.7 в таком растворителе, как диоксан, используя в качестве окисляющего агента окись селена.

Соединения формулы (I) также могут быть получены посредством последовательности реакций синтеза, изображенных на схеме 4.

Схема 4

Согласно схеме 4, интермедиат формулы 4.1 можно подвергнуть конденсации с салициловым альдегидом формулы 4.2, в присутствии такого подходящего основания, как неорганическое основание, подобное гидроксиду калия или гидроксиду натрия, в такой соответствующей системе растворителей, например, как спирт или смесь спирта и воды, например смесь этанола и воды. Такая конденсация приводит к выходу халкона формулы 4.3. Этот халкон формулы 4.3 затем могут подвергнуть взаимодействию с гидразином в таком подходящем смешивающимся с водой растворителе, например, как диоксан, толуол или спирт, подобный этанолу, чтобы получить дигидропиразол формулы 4.4. Интермедиаты формулы 4.5 могут быть получены сочетанием дигидропиразола формулы 4.4 с соответствующим глиоксалем 1.7 в подходящем растворителе, таком как толуол, N,N-диметилформамид или диоксан, в присутствии каталитического количества такой кислоты, как пара-толуолсульфокислота. Затем бензойную кислоту формулы 4.5 могут подвергнуть реакции сочетания с амином формулы NH(R¹)(R²) в соответствующем инертном для данной реакции растворителе, таком как ацетонитрил, дихлорметан, тетрагидрофуран или любой другой растворитель, который растворяет реагенты, в присутствии такого связующего вещества, например, как EDCI и HOBt или их функционального эквивалента, для получения соединения формулы (I).

В способах получения, представленных выше, продукты реакции могут быть выделены из реакционной среды и затем, если необходимо, дополнительно очищены согласно способам, широко известным в данной области, таким, например, как экстракция, кристаллизация, дистилляция, растирание в порошок и хроматография.

Соединения формулы (I), полученные способами, описанными выше в настоящем описании, могут быть синтезированы в виде смеси стереоизомерных форм, в частности, в виде рацемических смесей энантиомеров, которые могут быть отделены один от другого, следуя известным в данной области методикам разделения. Рацемические соединения формулы (I) могут быть превращены в соответствующие формы диастереомерных солей по реакции с соответствующей хиральной кислотой. Указанные формы диастереомерных солей затем разделяют, например, селективной или дробной кристаллизацией, и энантиомеры отделяют с помощью щелочи. Альтернативный способ отделения энантиомерных форм соединений формулы (I) включает в себя жидкую хроматографию, использующую хиральную неподвижную фазу. Указанные стереохимически чистые изомерные формы также могут быть получены из соответствующих стереохимически чистых изомерных форм соответствующих исходных веществ при условии, что протекающая реакция стереоспецифична. Если требуется определенный стереоизомер, то предпочтительно, чтобы указанное соединение было синтезировано стереоспецифичными способами получения. Эти способы преимущественно будут использовать энантиомерно чистые исходные вещества.

Таким образом, соединения по настоящему изобретению могут быть использованы для животных, предпочтительно млекопитающих, и, в частности, для людей в качестве фармацевтических средств, сами по себе, в смесях друг с другом или в виде фармацевтических препаратов.

Более того, настоящее изобретение относится к фармацевтическим препаратам, которые содержат в качестве активных составных частей эффективную дозу, по крайне мере, одного из соединений формулы (I), в дополнение к общепринятым фармацевтически безвредным наполнителям и вспомогательным средствам. Обычно, фармацевтические препараты содержат от 0,1 до 90% мас. данного соединения. Фармацевтические препараты могут быть получены способом, который сам по себе известен профессионалам в данной области. Для этой цели, по крайне мере, одно соединение по настоящему изобретению, вместе с одним или несколькими твердыми или жидкими фармацевтическими наполнителями и/или вспомогательными средствами, и, если необходимо, в комбинации с другими фармацевтически активными соединениями, переводят в пригодную для введения форму или лекарственную форму, которую затем могут использовать в качестве фармацевтического средства в медицине человека или ветеринарии.

Фармацевтические препараты, которые содержат соединение по изобретению, могут быть введены перорально, парентерально, например, внутривенно, ректально, посредством ингаляции, или местно; предпочтительный путь введения зависит от индивидуального случая заболевания, например, конкретного течения нарушения, подлежащего лечению. Оральное введение является предпочтительным.

На базе своих специальных знаний, профессионал в данной области знает вспомогательные средства, которые пригодны для требуемого фармацевтического препарата. Кроме растворителей, гелеобразующих агентов, основы для суппозиториев, таблетированных вспомогательных средств и других активных носителей соединений, применяют также антиоксиданты, диспергирующие вещества, эмульгаторы, противовспенивающие вещества, корригенты, консерванты, солюбилизаторы, агенты для достижения депо-эффекта, буферные вещества или красители.

Соединения по настоящему изобретению могут также найти применение при ингибировании образцов, ex vivo, содержащих ВИЧ или которые, как полагают, будут подвержены воздействию ВИЧ. Следовательно, настоящие соединения могут быть использованы для ингибирования ВИЧ, присутствующего в образце жидкостей организма, который содержит или полагают, что содержит ВИЧ, или подвержен воздействию ВИЧ.

В качестве лекарственного средства также может быть использована комбинация антиретровирусного соединения и соединения по настоящему изобретению. Таким образом, настоящее изобретение относится также к продукту, содержащему (a) соединение по настоящему изобретению и (b) еще одно антиретровирусное соединение, в форме комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения при лечении ретровирусных инфекций. Таким образом, для того чтобы лечить или бороться с ВИЧ инфекциями, или инфекцией и заболеванием, ассоциированным с ВИЧ инфекциями, такими как синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД) или СПИД-ассоциированным комплексом (ARC), соединения по данному изобретению могут быть совместно введены в комбинации, например, с такими ингибиторами связывания, как, например, декстрансульфат, сурамин, полианионы, растворимый CD4, агентом, связывающим gpl20, таким как BMS378806, анти CD4 Ab соединения, такие как PRO-542 или TNX-355; ингибиторами слияния, такими как, например, T20, T1249, ингибиторами, связывающими ко-рецепторы, такими как, например, AK-602, SCH-C, SCH-D, AMD 3100 (бицикламы), AMD-070, ТАК 779, ТАК 220, UK-427-857, PRO-140; RT ингибиторами (ингибиторами обратной транскриптазы), такими как, например, фоскарнет и пролекарства; нуклеозидом RTIs, таким как, например, AZT, 3TC, DDC, DDI, D4T, абакавир, FTC, Эмтрицитабин, DAPD, dOTC; нуклеотидом RTIs, таким как, например, PMEA, PMPA, тенофовир; NNRTIs, такими как, например, невирапин, делавирдин, эфавиренз, тивирапин, ловирид, этравирин, дапивирин, R278474, MKC-442, UC 781, каправирин (Capravirine), DPC 961, DPC963, DPC082, DPC083, каланолид А, SJ-3366, TSAO, 4”-деаминированный TSAO; ингибиторами H РНКазы, такие как, например, SP1093V, PD126338; TAT ингибиторами, такими как, например, RO-5-3335, K12, K37; ингибиторами интегразы, такими как, например, L 708906, L 731988; ингибиторами протеазы, такими как, например, дарунавир, ампренавир ритонавир, нелфинавир, сахинавир, индинавир, лопинавир, лазинавир, атазанавир, BMS 186316, DPC 681, DPC 684, типранавир, AG1776, DMP 450, L 756425, PD178390, PNU 140135; ингибиторами гликозилирования, такими как, например, кастаноспермин, дезоксиноииримицин.

Особый интерес представляют продукты, содержащие (i) соединение формулы (I) и (ii) дарунавир, и (iii) ритонавир в виде комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения при лечении ретровирусных инфекций.

Особый интерес представляют продукты, содержащие (i) соединение формулы (I) и (ii) этравирин, в виде комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения при лечении ретровирусных инфекций.

Особый интерес представляют продукты, содержащие (i) соединение формулы (I) и (ii) дапивирин, в виде комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения при лечении ретровирусных инфекций.

Особый интерес представляют продукты, содержащие (i) соединение формулы (I) и R278474 в виде комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения при лечении ретровирусных инфекций.

Для уменьшения интенсивности симптомов заболевания, борьбы с ВИЧ инфекцией или удаления инфекции и ее симптомов соединения по настоящему изобретению также могут быть введены в комбинации с иммуномодуляторами (например, бропиримином, антителами к человеческому альфа-интерферону, IL-2, метионинэнкефалином, интерфероном альфа, и налтрексоном) или с антибиотиками (например, пентамидинизотиоратом).

Для формы орального введения соединения по настоящему изобретению смешивают с соответствующими добавками, такими как наполнители, стабилизаторы или инертные разбавители, и с помощью общепринятых способов приводят в такие формы, пригодные для введения, как таблетки, таблетки с покрытием, твердые капсулы, водный, спиртовой или масляный растворы. Примерами пригодных инертных носителей являются аравийская камедь, оксид магния, карбонат магния, фосфат калия, лактоза, глюкоза или крахмал, в частности кукурузный крахмал. В этом случае препарат может быть выполнен в виде как сухих, так и влажных гранул. Пригодными масляными наполнителями или растворителями являются растительный или животный жир, такой как подсолнечное масло или рыбий жир. Пригодными растворителями для водных или спиртовых растворов являются вода, этанол, сахарные растворы, или их смеси. Для других форм введения в качестве дополнительных вспомогательных средств применимы также полиэтиленгликоли и полипропиленгликоли.

Для подкожного или внутривенного введения активные соединения переводят в раствор, суспензию, или эмульсию, при желании, вместе с такими общепринятыми веществами, как солюбилизаторы, эмульгаторы или с другими вспомогательными средствами. Соединения могут быть подвергнуты лиофилизации, и полученные лиофилизаты используют, например, для получения препаратов для инъекций и инфузии. Пригодными растворителями являются, например, вода, физиологический раствор или спирты, например, этанол, пропанол, глицерин и, кроме того, сахарные растворы, такие как растворы глюкозы или маннита, или же различные смеси указанных растворителей.

Пригодными фармацевтическими препаратами для введения в форме аэрозолей или спреев являются, например, растворы, суспензии или эмульсии данных соединений или их физиологически допустимые соли в фармацевтически приемлемом растворителе, таком как этанол или вода, или смесь этих растворителей. При необходимости, препарат может также дополнительно содержать другие фармацевтические вспомогательные средства, такие как поверхностно-активные вещества, эмульгаторы и стабилизаторы, также как пропеллент. Такой препарат обычно содержит активное соединение в концентрации от приблизительно 0,1 до 50%, в частности от приблизительно 0,3 до 3% мас.

Для того чтобы увеличить растворимость и/или устойчивость соединений в фармацевтических композициях, может оказаться полезным использование α-, β- или γ-циклодекстринов или их производных. Также такие co-растворители, как спирты могут улучшить растворимость и/или устойчивость соединений в фармацевтических композициях. При получении водных композиций аддитивные соли рассматриваемых соединений, вследствие их лучшей растворимости в воде, очевидно, являются более пригодными.

Подходящими циклодекстринами являются α-, β- или γ-циклодекстрины (CDs) или их простые эфиры или их смешанные простые эфиры, в которых одна или несколько гидроксигрупп структурных единиц глюкозных остатков циклодекстрина замещены алкилом, в частности, метилом, этилом или изопропилом, например, произвольно метилированный β-CD; гидроксиалкилом, в частности, гидроксиэтилом, гидроксипропилом или гидроксибутилом; карбоксиалкилом, в частности, карбоксиметилом или карбоксиэтилом; алкилкарбонилом, в частности, ацетилом; алкилоксикарбонилалкилом или карбоксиалкилоксиалкилом, в частности, карбоксиметоксипропилом или карбоксиэтоксипропилом; алкилкарбонилоксиалкилом, в частности, 2-ацетилоксипропилом. Особенно заслуживают внимания как комплексообразователи и/или солюбилизаторы β-CD, произвольно метилированный β-CD, 2,6-диметил-β-CD, 2-гидроксиэтил-β-CD, 2-гидроксиэтил-γ-CD, 2-гидроксипропил-γ-CD и (2-карбоксиметокси)-пропил-β-CD, и, в частности, 2-гидроксипропил-β-CD (2-HP-β-CD).

Термин «смешанный простой эфир» обозначает производные циклодекстрина, в которых, по крайне мере, две гидроксигруппы циклодекстрина этерифицированы различными группами, такими как, например, гидроксипропилом и гидроксиэтилом.

Интересный способ формирования комбинации настоящего соединения с циклодекстрином или его производным был описан в EP-A-721331. Хотя описанные там препараты содержат активные противогрибковые ингредиенты, они являются одинаково интересными для разработки соединений по настоящему изобретению. Препараты, описанные там, в частности, пригодны для орального введения и содержат активный противогрибковый ингредиент, достаточное количество циклодекстрина или его производного в качестве солюбилизатора, водную кислую среду в качестве объемного жидкого носителя и спиртовой co-растворитель, сильно облегчающий получение композиции. Кроме того, указанные препараты при добавлении подсластителей и/или корригентов, фармацевтически приемлемых, могут быть превращены в более приятные.

Другие удобные способы увеличения растворимости соединений по настоящему изобретению в фармацевтических композициях описаны в WO94/05263, PCT заявке No. PCT/EP98/01773, EP-A-499299 и WO 97/44014, которые все введены в настоящий документ в виде ссылки.

Более детально, настоящие соединения могут быть сформированы в фармацевтическую композицию, содержащую терапевтически эффективное количество частиц, состоящих из твердой дисперсии, содержащей (a) соединение по настоящему изобретению и (b) один или несколько фармацевтически приемлемых водорастворимых полимеров.

Термин “твердая дисперсия” определяет систему, находящуюся в твердом состоянии (в противоположность жидкому или газообразному состояниям), содержащую, по крайне мере, два компонента, где один компонент диспергирован более или менее равномерно по другому компоненту или компонентам. Когда указанная дисперсия компонентов является такой, что система на всем протяжении является химически и физически однородной или гомогенной или состоит из одной фазы, как ее определяют в термодинамике, то такую твердую дисперсию определяют как «твердый раствор». Твердые растворы являются предпочтительными физическими системами, потому что их компоненты обычно бывают легко биодоступными для организмов, в которые они введены.

Термин “твердая дисперсия” также включает в себя дисперсии, которые на всем протяжении менее гомогенны, чем твердые растворы. Такие дисперсии не являются на всем протяжении химически и физически однородными и содержат более чем одну фазу.

Удобно, когда водорастворимый полимер в виде частиц является полимером, который имеет кажущуюся вязкость от 1 до 100 мПа·с при растворении в 2% водном растворе при температуре растворения, составляющей 20°C.

Предпочтительными водорастворимыми полимерами являются гидроксипропилметилцеллюлозы или HPMC. HPMC, обладающая степенью метоксизамещения, составляющей от, приблизительно, 0,8 до, приблизительно, 2,5 и молярным показателем замещения гидроксипропилом, составляющим от, приблизительно, 0,05 до, приблизительно, 3,0, обычно растворима в воде. Термин «степень метоксизамещения» обозначает среднее число групп простого метилового эфира, приходящееся на один глюкозный остаток молекулы целлюлозы. Термин «молярный показатель замещения гидроксипропилом» обозначает среднее число молей пропиленоксида, которое взаимодействует с каждым глюкозным остатком молекулы целлюлозы.

Частицы, определенные выше в настоящем описании, могут быть получены сначала в виде твердой дисперсии компонентов, и затем необязательного измельчения или дробления этой дисперсии. Существуют разные методики получения твердых дисперсий, включая экструзию из расплава, распылительную сушку и выпаривание из раствора.

Дополнительно может оказаться удобным формировать настоящее соединение в виде наночастиц, на поверхности которых адсорбирован модификатор поверхности в количестве, достаточном для сохранения эффективного среднего размера частицы, составляющего менее чем 1000 нм. Как полагают, приемлемые модификаторы поверхности включают в себя такие модификаторы, которые физически прилипая к поверхности антиретровирусного агента, не связываются с антиретровирусным агентом химически.

Приемлемые модификаторы поверхности, предпочтительно, могут быть выбраны из известных органических и неорганических фармацевтических наполнителей. Такие наполнители включают в себя различные полимеры, олигомеры низкой молекулярной массы, природные соединения и поверхностно-активные вещества. Предпочтительные модификаторы поверхности включают в себя неионогенное и анионогенное поверхностно-активные вещества.

Однако еще один интересный способ формирования настоящих соединений включает в себя фармацевтическую композицию, с помощью которой соединения по данному изобретению вводят в гидрофильные полимеры, и такую смесь наносят в качестве покрывающей пленки на множество маленьких шариков, таким образом получая композицию, обладающую хорошей биодоступностью, которая может быть легко получена и которая пригодна для получения фармацевтической лекарственной формы для перорального введения.

Указанные шарики содержат (a) расположенную в центре, закругленную или сферическую сердцевину, (b) покрывающую пленку гидрофильного полимера и антиретровирусный агент и (c) плотно покрывающий полимерный слой.

Вещества, пригодные для использования в качестве сердцевины шариков, многообразны, при условии, что указанные вещества являются фармацевтически приемлемыми и обладают соответствующими размерами и прочностью. Примерами таких веществ являются полимеры, неорганические вещества, органические вещества и сахариды и их производные.

Еще одна сторона настоящего изобретения относится к набору или контейнеру, содержащему соединение по настоящему изобретению в количестве, эффективном для использования в качестве эталона или реагента в тесте или пробе для определения способности потенциального фармацевтического препарата ингибировать внедрение ВИЧ вируса, развитие ВИЧ или и то, и другое. Эта сторона изобретения может найти применение в исследовательских фармацевтических программах.

Доза настоящих соединений или физиологически допустимой их соли(ей), которую вводят, зависит от индивидуального случая заболевания, и, как обычно, она должна быть адаптирована, для получения оптимального эффекта, к состояниям при индивидуальном случае заболевания. Таким образом, она, конечно, зависит от частоты введения и от эффективности и продолжительности действия соединений, используемых в каждом отдельном случае для терапии или профилактики; но также она зависит от природы и тяжести инфекции и симптомов заболевания, от пола, возраста, массы и индивидуальной восприимчивости человека или животного, подлежащего лечению, а также от того, является ли терапия неотложной или профилактической. Обычно, дневная доза соединения по настоящему изобретению при введении пациенту с массой тела, приблизительно, составляющей 75 кг, находится в интервале между 1 мг и 5 г, предпочтительно, между 10 мг и 2 г, более предпочтительно, между 20 мг и 1 г. Доза может быть введена в виде разовой дозы или быть разделенной на несколько, например две, три, четыре и даже более, отдельных доз.

Экспериментальная часть

ПРИМЕР 1. Синтез 4-[5-(4-цианобензоил)-1,10b-дигидро-5H-пиразоло[1,5-c] [1,3]бензоксазин-2-ил]-N-циклопентилбензамида, в соответствии со схемой 1 (соединение 44)

Синтез 4-ацетил-N-циклопентилбензамида 1.2.a

Смесь 4-ацетилбензойнойной кислоты 1.1.a (10 ммоль), циклопентиламина (11 ммоль), EDCI (11 ммоль) и HOBt (2 ммоль) в CH₂Cl₂ (100 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 20 часов. К полученной реакционной смеси добавляли воду, и органический слой отделяли. Водный слой три раза экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические слои сушили над MgSO₄, фильтровали, и растворитель выпаривали досуха. Остаток очищали колоночной хроматографией над силикагелем (элюент: CH₂Cl₂/метанол: 95/5). Чистые фракции собирали, и растворитель выпаривали, получая 90% продукта 1.2.a.

Синтез 2-(2-метоксиэтоксиметокси)бензальдегида 1.3.a

Интермедиат 2.1 (20 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (150 мл). Полученную смесь охлаждали до 0°C. Добавляли гидрид натрия (30 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, и добавляли хлорметоксиметоксиэтан (20 моль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Добавляли воду (200 мл), и смесь экстрагировали дихлорметаном. Органический слой отделяли, сушили (над MgSO₄), фильтровали, и растворитель выпаривали досуха. Остаток очищали на силикагеле, используя дихлорметан в качестве элюента. Растворитель удаляли, чтобы получить соединение 1.3.a с выходом 95%.

Синтез N-циклопентил-4-{3-[2-(2-метоксиэтоксиметокси) фенил]акрилоил}бензамида 1.4.a

Интермедиат 1.2.a (5 ммоль) растворяли в этаноле (100 мл) и затем добавляли интермедиат 1.3.a (5 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре и по каплям добавляли раствор гидроксида калия (10 ммоль) в воде (50 мл). Смесь нагревали до 80°C в течение 12 часов. После охлаждения до комнатной температуры добавляли раствор хлорида аммония (50 мл), и этанол удаляли и заменяли этилацетатом. Смесь экстрагировали этилацетатом и сушили сульфатом магния. Удаление растворителя и очистка на силикагеле при использовании CH₂Cl₂ и метанола, используемого в качестве элюента, привели к получению продукта 1.4.a (70%) в виде масла.

Синтез N-Циклопентил-4-[3-(2-гидроксифенил)акрилоил] бензамида 1.5.a

Интермедиат 1.4.a (5 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (100 мл) и по каплям добавляли раствор соляной кислоты (2 молярный). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли воду (100 мл), и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным раствором соли, сушили сульфатом магния, и растворитель выпаривали досуха, получая интермедиат 1.5.a (80 %) в виде порошка.

Синтез N-циклопентил-4-[5-(2-гидроксифенил)-4,5-дигидро-1H-пиразол-3-ил]бензамида 1.6.a

Интермедиат 1.5.a (4 ммоль) растворяли в этаноле (100 мл). К реакционной смеси по каплям добавляли гидразин (4,4 ммоль). Смесь затем перемешивали при 70°C в течение 4 часов. После охлаждения до комнатной температуры смесь фильтровали, получая интермедиат 1.6.a в виде порошка белого цвета (90%).

Синтез 4-(2-оксоацетил)бензонитрила 1.7.a

К смеси диоксана (75 мл) и воды (7,5 мл), добавляли окись селена (100 ммоль). Смесь перемешивали при 50°C до растворения окиси селена. Затем добавляли пара-цианоацетофенон (100 ммоль). Смесь перемешивали при 90°C в течение 12 часов. Теплый раствор фильтровали и растворитель удаляли. Полученный остаток растворяли в дихлорметане и добавляли воду. Органический слой отделяли, сушили над сульфатом магния, и растворитель удаляли, получая интермедиат 1.7.a в виде твердого вещества (85%).

Синтез соединения 44

Интермедиат 1.6.a (4 ммоль) растворяли в толуоле (50 мл), затем добавляли интермедиат 1.7.a (4,4 ммоль) и пара-толуолсульфокислоту (5%). Реакционную смесь кипятили в колбе с обратным холодильником в течение 8 часов. После охлаждения до комнатной температуры добавляли воду, и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным раствором соли, сушили сульфатом магния, фильтровали, и растворитель выпаривали досуха. Остаток очищали колоночной хроматографией над силикагелем (элюент: CH₂Cl₂/метанол: 95/5). Фракции продукта собирали, и растворитель выпаривали, получая 85% соединения 44.

ПРИМЕР 2. Синтез 4-[5-(4-цианобензоил)-1,10b-дигидро-5H-пиразоло[1,5-c] [1,3]бензоксазин-2-ил]-N-циклопентилбензамида, в соответствии со схемой 4 (соединение 44)

Синтез 4-[3-(2-гидроксифенил)акрилоил]бензойной кислоты 4.3.a

Способ A. 4-ацетилбензойную кислоту 4.1.a (10 ммоль) растворяли в этаноле (100 мл) и затем добавляли салициловый альдегид (10 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре и по каплям добавляли раствор гидроксида калия (50 ммоль) в воде (30 мл). Смесь нагревали до 80°C в течение 12 часов. После охлаждения до комнатной температуры добавляли воду (100 мл), и этанол удаляли и заменяли этилацетатом. Смесь подкисляли до pH 4, добавляя водный раствор соляной кислоты. Реакционную смесь затем экстрагировали этилацетатом, и органический слой сушили сульфатом магния. Растворитель выпаривали, и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: CH₂Cl₂/метанол: 80/20), получая интермедиат 4.3.a в виде порошка белого цвета (20%).

Способ В. 4-ацетилбензойную кислоту 4.1.a (10 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (100 мл) и затем добавляли салициловый альдегид 4.2 (10 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре, и по каплям добавляли пирролидин (20 ммоль). Смесь нагревали до 80°C в течение 12 часов. После охлаждения до комнатной температуры добавляли воду (100 мл) и этилацетат (100 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом и сушили сульфатом магния. Растворитель выпаривали, и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: CH₂Cl₂/МеОН: 80/20), получая интермедиат 4.3.a в виде порошка белого цвета (35%).

Синтез 4-[5-(2-гидроксифенил)-4,5-дигидро-1H-пиразол-3-ил]бензойной кислоты 4.4.a

Интермедиат 4.3.a (33 ммоль) растворяли в этаноле (150 мл) и по каплям добавляли гидразин (134 ммоль). Смесь перемешивали при 70°C в течение 4 часов. После охлаждения до комнатной температуры смесь фильтровали, получая интермедиат 4.4.a в виде порошка белого цвета (90%).

Синтез 4-[5-(4-цианобензоил)1,10b-дигидро-5H-пиразоло[1,5-c][1,3] бензоксазин-2-ил]бензойной кислоты 4.5.a

Интермедиат 4.4.a (5 ммоль) растворяли в толуоле (50 мл), затем добавляли интермедиат 1.7.a (6 ммоль) и пара-толуолсульфокислоту (5%). Смесь кипятили в колбе с обратным холодильником в течение 8 часов. После охлаждения до комнатной температуры добавляли воду, и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили сульфатом магния, фильтровали и растворитель удаляли. Остаток очищали на силикагеле, используя CH₂Cl₂ и метанол в качестве элюента, получая интермедиат 4.5.a в виде порошка (81%).

Синтез соединения 44

Карбоновую кислоту 4.5.a (2,4 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (20 мл). Затем добавляли EDCI (2,64 ммоль) и HOBT (10%). Смесь перемешивали 10 минут при комнатной температуре и добавляли циклопентиламин (2,64 ммоль). Затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли воду, и смесь экстрагировали этилацетатом, сушили сульфатом магния, и растворитель удаляли. Сырой остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, используя дихлорметан и метанол в качестве элюента, получая соединение 44 в виде порошка (82%).

Соединения, перечисленные в нижеследующих таблицах, были получены аналогично способам, описанным в примерах 1 или 2.

Таблица 1

Таблица 2

ПРИМЕР 3. Вирусологические свойства соединений по настоящему изобретению

Антивирусную активность соединений определяли, используя клеточный тест на MT4-LTR-EGFP клетках. Тест показал, что эти соединения обнаруживают сильную анти-ВИЧ активность против лабораторного штамма ВИЧ дикого типа (ВИЧ-1 штамм LAI) и ВИЧ-1 вируса (ВИЧ-1-MDR), обладающего множественной лекарственной устойчивостью. Клеточный тест осуществляли в соответствии с нижеследующей методикой.

ВИЧ-инфицированные или ложно-инфицированные MT4-LTR-EGFP клетки инкубировали в течение трех дней в присутствии разных концентраций ингибитора. При инфицировании GFP репортер активируется вирусным tat белком. В конце инкубационного периода оценивали уровень GFP. В образцах вирусного контроля (в отсутствие любого ингибитора) получали максимальный уровень флюоресценции. Ингибирующую активность соединения наблюдали в инфицированных вирусом клетках и выражали как EC₅₀ и EC₉₀. Эти величины представляют собой количество соединения, необходимое для защиты от вирусной инфекции, соответственно 50% и 90% клеток. Токсичность соединения измеряли на ложно-инфицированных клетках и выражали как CC₅₀, что представляет собой концентрацию соединения, необходимую для ингибирования роста клеток на 50%. Индекс селективности (SI) (отношение CC₅₀/EC₅₀) является индикатором селективности анти-ВИЧ активности ингибитора.

Таблица 3
Соединения, имеющие величину pEC50 (которую определяют как отрицательный логарифм выражения EC50), превышающую 6, принадлежат к классу активности A. Соединения, имеющие величину pEC50, превышающую или равную 5, но меньшую или равную 6, принадлежат к классу активности B. Соединения, имеющие величину pEC50, меньшую, чем 5, принадлежат к классу активности С. Для некоторых соединений, по настоящему изобретению, проводили несколько тестов. В этом случае для определения класса активности использовали среднее значение EC50. Пустая клетка в таблице 3 означает, что данные отсутствуют
Номер соединения	Класс активности при тестировании на HTV-1-LAI	Класс активности при тестировании на HTV-1-MDR
1	В	С
2	С	С
3	С	С
4	В
5	А	С
6	А	С
7	В	С
8		С
9	А	С
10	С	С
11	С	С
12	В	С
13	В	С
14	С	С
15	С	С
16	С	С
17	А	С
18	А
19	В	С
20	В	В
21	С	С
22	А	С
23	С	С
24	В	В
25	В	В
26	В	В
27	А	А
28	А	А
29	В	А
30	С	С
31	В	В
32	С	В
33	А	А
34	В	С
35	А	С
36	А
37	В	С
38	А	В
39*	А	В
40	В	С
41	В	С
42	В	С
43	В	С
44	А	А
45	А	А
46	А	А
47	А	А
48	В	В
49	С
50	А	А
51		А
52	А	А
53	А	А
54	В	В
55	А	А
58	А	А

ПРИМЕР 4. Эксперимент по определению времени добавления

MT4-LTR-EGFP или MT4-LTR-Luc клетки инфицировали множественной инфекцией (MOI) центрифугированием в течение 10 минут при 1200g. Свободный вирус удаляли с помощью двухстадийного промывания при 4°C, чтобы синхронизировать инфекцию. Через 30 минут после инфицирования тестируемое соединение добавляли в разное время в параллельные культуры в микротитровочных планшетах. В случае MT4-LTR-EGFP клеток, флуоресценцию в культурах оценивали под микроскопом через 24 часа после инфицирования и собирали надосадочную жидкость (супернатант). ВИЧ репликацию оценивали количественно в образцах надосадочной жидкости, измеряя концентрацию вирусного антигена p24, при использовании покупного набора, в соответствии с протоколом по его применению (NEN). Из-за высокой MOI, используемой в этом типе экспериментов, концентрации ингибиторов были, не менее чем в 100 раз выше, чем их величина EC₅₀ в антивирусном клеточном тесте. В случае MT4-LTR-Luc клеток, ВИЧ ингибиторы с концентрацией, отвечающей

EC₉₀, добавляли в различные временные интервалы к ВИЧ-1 инфицированным MT4 клеткам, экспрессирующим ВИЧ-1-LTR-люциферазы репортерный ген. ВИЧ-1 инфекцию обнаруживают, определяя люциферазу. Через 24 часа после инкубации, добавляли субстрат люциферазы и измеряли уровень хемилюминесценции. В тех временных точках, где соединения обнаруживали активность, уровень люциферазы был снижен.

Соединения по настоящему изобретению, которые тестировали, ингибировали вирусную репликацию ранее, чем через три часа после синхронизации.

Пример 5. Фармацевтические композиции

Капсулы

Активный ингредиент, in casu, соединение формулы (I), растворяют в органическом растворителе, таком как этанол, метанол или метиленхлорид, предпочтительно смесь этанола и метиленхлорида. Такие полимеры, как сополимер поливинилпирролидона с винилацетатом (PVP-VA) или гидроксипропилметилцеллюлоза (HPMC), обычно 5 мПа·с, растворяют в таких органических растворителях, как этанол, метанол, метиленхлорид. Приемлемо, когда полимер растворяют в этаноле. Растворы полимера и соединения смешивают и затем высушивают распылительной сушкой. Соотношение соединение/полимер выбирают в интервале от 1/1 до 1/6. Для интермедиата этот интервал составляет от 1/1,5 до 1/3. Пригодным соотношением является соотношение 1/6. Высушенным распылительной сушкой порошком, твердой дисперсией затем заполняют капсулы, предназначенные для введения в организм. Загрузка лекарственным средством одной капсулы составляет, в зависимости от размера используемой капсулы, от 50 до 100 мг.

Таблетки, покрытые пленкой

ПОЛУЧЕНИЕ ЦЕНТРАЛЬНОЙ ЧАСТИ ТАБЛЕТКИ

Смесь 100 г активного ингредиента, in casu, соединения формулы (I), 570 г лактозы и 200 г крахмала хорошо смешивают и после этого увлажняют раствором 5 г додецилсульфата натрия и 10 г поливинилпирролидона в, приблизительно, 200 мл воды. Влажную порошковую смесь просеивали, сушили и снова просеивали. Затем добавляли 100 г микрокристаллической целлюлозы и 15 г гидрированного растительного масла. Все хорошо перемешивали и прессовали в таблетки, получая 10000 таблеток, где каждая таблетка содержала 10 мг активного ингредиента.

ОБОЛОЧКА

К раствору 10 г метилцеллюлозы в 75 мл денатурированного этанола добавляют раствор 5 г этилцеллюлозы в 150 мл дихлорметана. Затем добавляют 75 мл дихлорметана и 2,5 мл 1,2,3-пропантриола. 10 г полиэтиленгликоля расплавляют и растворяют в 75 мл дихлорметана. Последний раствор добавляют к предшествующему и затем добавляют 2,5 г октадеканоата магния, 5 г поливинилпирролидона и 30 мл концентрированной суспензии красителя, и все в целом гомогенизируют. Центральные части таблеток покрывают смесью, полученной таким образом, в специальной аппаратуре для покрытия.

Claims (14)

1. Производные 1,10b-дигидро-2-(аминокарбонилфенил)-5Н-пиразоло[1,5-c][1,3]бензоксазин-5-ил)фенилметанона, имеющие формулу

его или их соль
где «а» принимает значения ноль, 1;
R¹ представляет собой водород, С_1-10алкил, С_2-10алкенил или С_1-10алкил, замещенный заместителем, выбранным из группы, состоящей из амино и моно-или дизамещенного амино, где заместители аминогруппы, каждый индивидуально, выбирают из С_1-10алкила;
R² представляет собой С_1-10алкил, С_3-12циклоалкил, пиридинил, пиперидинил, фенил, замещенный заместителем, выбранным из С_1-10алкилокси, дизамещенной аминогруппы, С_1-10алкил, замещенный заместителем, выбранным из пиридинила, тетрагидрофуранила, тиенила, фуранила, пирролила, С_3-12циклоалкила, фенила, замещенного заместителем выбранным из С_1-10алкилокси, галогена;
R¹ и R² вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гомопиперидин, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин, пиперазинил, замещенный С_1-10алкилом, С_1-10алкилоксикарбонилом;
R³ представляет собой галоген, нитро, С_1-10алкил, С_3-12циклоалкил, полигалоС_1-10алкил, циано, амино, моно- или дизамещенный С_1-10алкилокси, С_1-10алкилтио, С_1-10алкилсульфонил, пиперидинил, морфолинил.

2. Соединение по п.1, в котором R¹ представляет собой С_1-10алкил, С_2-10алкенил или С_1-10алкил, замещенный заместителем, выбранным из группы, состоящей из амино и моно- или дизамещенного амино, где заместители аминогруппы, каждый индивидуально, выбирают из С_1-10алкила;
R² представляет собой С_1-10алкил, С_3-12циклоалкил, пиридинил, пиперидинил, фенил, замещенный заместителем, выбранным из С_1-10алкилокси, дизамещенной аминогруппы, С_1-10алкил, замещенный заместителем, выбранным из пиридинила, тетрагидрофуранила, тиенила, фуранила, пирролила, С_3-12циклоалкила, фенила, замещенного заместителем выбранным из С_1-10алкилокси, галогена;
R¹ и R² вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гомопиперидин, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин, пиперазинил, замещенный С_1-10алкилом, С_1-10алкилоксикарбонилом.

3. Соединение по п.1, в котором R³ представляет собой галоген, нитро, С_1-10алкил, С_3-12циклоалкил, полигалоС_1-10алкил, циано, С_1-10алкилтио, С_1-10алкилсульфонил, пиперидинил, морфолинил.

4. Соединение по п.1, где соединение имеет формулу

5. Соединение по п.4, где «а» принимает значения ноль или 1;
R¹ представляет собой водород, С_1-10алкил, С_2-10алкенил или С_1-10алкил, замещенный заместителем, выбранным из группы, состоящей из амино и моно- или дизамещенного амино, где заместители аминогруппы, каждый индивидуально, выбирают из С_1-10алкила;
R² представляет собой С_1-10алкил, С_3-12циклоалкил, пиридинил, пиперидинил, фенил, замещенный заместителем, выбранным из С_1-10алкилокси, дизамещенной аминогруппы, С_1-10алкил, замещенный заместителем, выбранным из пиридинила, тетрагидрофуранила, тиенила, фуранила, пирролила, С_3-12циклоалкила, фенила, замещенного заместителем выбранным из С_1-10алкилокси, галогена;
R¹ и R² вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гомопиперидин, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин, пиперазинил, замещенный С_1-10алкилом, С_1-10алкилоксикарбонилом;
R³ представляет собой галоген, нитро, С_1-10алкил, С_3-12циклоалкил, полигалоС_1-10алкил, циано, амино, моно- или дизамещенный С_1-10алкилокси, С_1-10алкилтио, С_1-10алкилсульфонил, пиперидинил, морфолинил.

6. Соединение по пп.4 и 5, в котором «а» принимает значения ноль или 1;
R¹ представляет собой водород, С_1-10алкил, С_2-10алкенил или С_1-10алкил, замещенный заместителем, выбранным из группы, состоящей из амино и моно- или дизамещенного амино, где заместители аминогруппы, каждый индивидуально, выбирают из С_1-10алкила;
R² представляет собой С_1-10алкил; или
R¹ и R² вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гомопиперидин, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин, пиперазинил, замещенный С_1-10алкилом, С_1-10алкилоксикарбонилом;
R³ представляет собой галоген, нитро, С_1-10алкил, С_3-12циклоалкил, полигалоС_1-10алкил, циано, амино, моно- или дизамещенный С_1-10алкилокси, С_1-10алкилтио, C_1-10алкилсульфонил, пиперидинил, морфолинил.

7. Соединение по пп.1 или 5, в котором
«а» принимает значение 1;
R¹ представляет собой водород, С_1-10алкил, С_2-10алкенил или С_1-10алкил, замещенный заместителем, выбранным из группы, состоящей из амино и моно- или дизамещенного амино, где заместители аминогруппы, каждый индивидуально, выбирают из С_1-10алкила;
R² представляет собой С_1-10алкил; или
R¹ и R² вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гомопиперидин, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин, пиперазинил, замещенный С_1-10алкилом, С_1-10алкилоксикарбонилом;
R³ представляет собой галоген, нитро, С_1-10алкил, С_3-12циклоалкил, полигалоС_1-10алкил, циано, амино, моно- или дизамещенный С_1-10алкилокси, С_1-10алкилтио, С_1-10алкилсульфонил, пиперидинил, морфолинил.

8. Соединение по пп.1, 4 или 5 в котором «а» имеет значение 1, a R³ представляет собой галоген, циано, амино, моно- или дизамещенный С_1-10алкилокси, С_1-10алкилтио, С_1-10алкилсульфонил, пиперидинил, морфолинил.

9. Соединение по п.1, имеющее структуру:
4-[5-(4-фторбензоил)-1,10b-дигидро-5Н-пиразоло-[1,5-с][1,3]бензоксазин-2-ил]-N-[(4-метоксифенил)метил]-М-метилбензамид;
4-[5-(4-цианобензоил)-1,10b-дигидро-5Н-пиразоло-[1,5-с][1,3]бензоксазин-2-ил]-N-циклопентилбензамид;
4-[5-(4-пропилбензоил)-1,10b-дигидро-5Н-пиразоло-[1,5-с][1,3]бензоксазин-2-ил]-N-циклопентилбензамид;
4-[5-(4-метилсульфанилбензоил)-1,10b-дигидро-5Н-пиразоло[1,5-с][1,3] бензоксазин-2-ил]-N-циклопентилбензамид;
4-[5-(4-этилбензоил)-1,10b-дигидро-5Н-пиразоло[1,5-с][1,3]бензоксазин-2-ил]-Н-циклопентилбензамид;
4-[5-(4-трет-бутилбензоил)-1,10b-дигидро-5Н-пиразоло[1,5-с][1,3]бензоксазин-2-ил]-Н-циклопентилбензамид;
4-[5-(4-нитробензоил)-1,10b-дигидро-5Н-пиразоло[1,5-с][1,3]бензоксазин-2-ил]-N-циклопентилбензамид;
4-[5-(4-метансульфонилбензоил)-1,10b-дигидро-5Н-пиразоло[1,5-с][1,3]бензоксазин-2-ил]-N-циклопентилбензамид;
4-[5-(4-трифторметилбензоил)-1,10b-дигидро-5Н-пиразоло[1,5-с][1,3]бензоксазин-2-ил]-N-циклопентилбензамид.

10. Соединение по любому из пп.1-9 в качестве лекарственного средства, обладающего способностью ингибировать репликацию ВИЧ.

11. Применение соединения по любому из пп.1-9 для получения лекарственного препарата, применяемого для лечения состояний, ассоциированных с ВИЧ инфекцией.

12. Применение соединения по любому из пп.1-9 при получении лекарственного препарата, пригодного для предотвращения передачи ВИЧ, или предотвращения ВИЧ инфицирования, или предотвращения заболевания, ассоциированного с ВИЧ инфекцией.

13. Фармацевтический препарат, обладающий способностью ингибировать репликацию ВИЧ, который содержит в качестве активных составляющих эффективную дозу соединения по любому из пп.1-9 в дополнение к общепринятым фармацевтически безвредным наполнителям и вспомогательным средствам.

14. Соединение по любому одному из пп.1, 2, 10, в котором R³ представляет собой галоген, нитро, С_1-10алкил, C_3-12циклоалкил, полигалоС_1-10алкил, циано, С_1-10алкилтио, пиперидинил, морфолинил.