RU2185630C1 - Noninvasive method for setting diagnosis of sensibilization to chemical compounds - Google Patents
Noninvasive method for setting diagnosis of sensibilization to chemical compounds Download PDFInfo
- Publication number
- RU2185630C1 RU2185630C1 RU2001113556/14A RU2001113556A RU2185630C1 RU 2185630 C1 RU2185630 C1 RU 2185630C1 RU 2001113556/14 A RU2001113556/14 A RU 2001113556/14A RU 2001113556 A RU2001113556 A RU 2001113556A RU 2185630 C1 RU2185630 C1 RU 2185630C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- control
- experimental
- allergen
- ige
- histamine
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины, медицинской экологии, и предназначено для выявления сенсибилизации, обусловленной воздействием низкомолекулярных химических соединений и возникновением аллергического заболевания. The invention relates to medicine, medical ecology, and is intended to detect sensitization due to exposure to low molecular weight chemical compounds and the occurrence of an allergic disease.
В настоящее время более широкое распространение получили инвазивные методы диагностики сенсибилизации, т.е. с исследованием проб сыворотки крови. Однако указанные способы можно использовать лишь в условиях крупных учреждений практического здравоохранения, где есть в наличии необходимая лабораторная база. Currently, invasive methods for diagnosing sensitization, i.e. with the study of serum samples. However, these methods can only be used in large institutions of practical health care, where the necessary laboratory facilities are available.
Неинвазивная же диагностика несравнимо проще, дешевле, менее травматична, более безопасна для пациента и может быть использована медицинскими учреждениями и в экспедиционных условиях. Non-invasive diagnostics is incomparably simpler, cheaper, less traumatic, safer for the patient and can be used by medical institutions and in expeditionary conditions.
Известен способ неинвазивной диагностики бактериальной аллергии, согласно которому с использованием лейкоцитов слюны пациентов проводят реакцию лейкоцитолиза и диагностируют наличие сенсибилизации организма к специфическому антигену при наличии индекса лейкоцитолиза 0,1 и выше, при этом в качестве специфического антигена используют бруциллезный антиген (1). There is a method for non-invasive diagnosis of bacterial allergy, according to which, using the leukocytes of patients' saliva, they perform a leukocytolysis reaction and diagnose the presence of sensitization of the body to a specific antigen in the presence of a leukocytolysis index of 0.1 or higher, while brucillosis antigen is used as a specific antigen (1).
Однако данный способ является неприемлемым для определения сенсибилизации к химическим соединениям, т.к. предусматривает проведение специфических реакций лишь в отношении особого вида антигена. However, this method is unacceptable for determining sensitization to chemical compounds, because provides for specific reactions only in relation to a special type of antigen.
Наиболее близким к предлагаемому изобретению по назначению и совокупности признаков является способ неинвазивной диагностики сенсибилизации к сульфитам, включающий обработку полости рта сульфитом натрия, установление в исследуемом материале - смыве из полости рта с помощью инструментальных методов содержания лейкотриенов - липидных медиаторов аллергии, анализ полученного показателя по отношению к контролю (смыв из полости рта без обработки сульфитом натрия) и диагностирование сенсибилизации по увеличению уровня лейкотриенов в опытной пробе относительно контроля (2). Closest to the proposed invention in terms of purpose and combination of features is a method of non-invasive diagnosis of sensitization to sulfites, including treatment of the oral cavity with sodium sulfite, the establishment in the test material - rinse from the oral cavity using instrumental methods for the content of leukotrienes - lipid allergy mediators, analysis of the obtained ratio to control (flushing from the oral cavity without treatment with sodium sulfite) and diagnosing sensitization by increasing the level of leukotrienes in the experiment sample with respect to control (2).
Недостатком указанного известного способа является его узкая направленность, позволяющая диагностировать лишь сенсибилизацию к сульфитам. The disadvantage of this known method is its narrow focus, which allows to diagnose only sensitization to sulfites.
Кроме того, известный способ является недостаточно точным и достоверным, т. к. при смыве из полости рта невозможно абсолютно бесперекрестное одновременное получение опытного и контрольного образцов смывов, а разнесение их по времени будет искажать результат, поскольку каждый последующий смыв будет механически изменен за счет предыдущего. In addition, the known method is not sufficiently accurate and reliable, since when washing from the oral cavity, it is impossible to absolutely simultaneously obtain experimental and control samples of flushes, and spacing them in time will distort the result, since each subsequent flush will be mechanically changed due to the previous .
Кроме того, известный способ является некомфортным для пациентов, особенно детей, т.к. введение сульфитов в ротовую полость может вызвать рвотный рефлекс. In addition, the known method is uncomfortable for patients, especially children, because The introduction of sulfites into the oral cavity can cause a gag reflex.
Техническая задача, решаемая предлагаемым способом, состоит в обеспечении универсальности способа, позволяющего диагностировать сенсибилизацию к различным химическим веществам и у разновозрастных пациентов, а также в повышении точности и достоверности. The technical problem solved by the proposed method is to ensure the versatility of the method, allowing to diagnose sensitization to various chemicals and patients of different ages, as well as to increase accuracy and reliability.
Поставленная техническая задача достигается тем, что в качестве исследуемого материала используют секрет слизистой носа, при этом предварительно слизистую носа обрабатывают хемотаксином, после чего на слизистую одной половины носовой полости накладывают опытную нитроцеллюлозную подложку с адсорбированным на ней аллергеном, а на слизистую второй половины носовой полости - контрольную нитроцеллюлозную подложку без аллергена, после выдержки каждую нитроцеллюлозную подложку помещают в физиологический раствор, инкубируют, удаляют подложки из опытного и контрольного растворов, методом иммуноферментного анализа определяют в последних содержание гистамина и/или иммуноглобулина Е (Ig E) и по повышению уровня гистамина в опытном образце по отношению к контрольному и (или) по повышению содержания IgE в контрольном образце по отношению к опытному с кратностью 1,5 и выше диагностируют сенсибилизацию организма к данному аллергену. The stated technical problem is achieved by using the secretion of the nasal mucosa as the test material, while the nasal mucosa is preliminarily treated with chemotaxin, after which an experimental nitrocellulose substrate with an allergen adsorbed on it is applied to the mucosa of the nasal cavity, and the mucous membrane of the second half of the nasal cavity is applied control nitrocellulose substrate without allergen, after exposure, each nitrocellulose substrate is placed in physiological saline, incubated, remove burns from the experimental and control solutions, by enzyme-linked immunosorbent assay, determine the content of histamine and / or immunoglobulin E (Ig E) in the latter and by increasing the histamine level in the test sample relative to the control and (or) by increasing the IgE content in the control sample in relation to Experienced with a multiplicity of 1.5 and above are diagnosed with sensitization of the body to this allergen.
Достижение поставленного технического результата можно объяснить следующим. The achievement of the technical result can be explained as follows.
Сенсибилизация приводит к продукции иммуноглобулинов или эффекторных Т-клеток, которые способны вступать в специфическую реакцию с антигеном. Иммунный ответ долгое время считался только защитным механизмом, пока не выяснилось, что он может быть причиной ряда патологий. Сама сенсибилизация заболевания не вызывает - лишь повторный контакт с тем же антигеном может привести к нежелательному эффекту (реакция антиген-антитело). Из выделенных четырех типов аллергических реакций наибольший интерес представляют реакции первого типа, или, как их еще называют, реакции немедленного типа, анафилактические реакции, IgE-опосредованные реакции. В анафилактической реакции различают три фазы:
-в первой (специфической) протекает непосредственно сама реакция антиген-антитело;
-во второй (неспецифической) выделяются медиаторы анафилактической реакции (вазоактивные амины, например гистамин);
-в третьей проявляются функциональные или морфологические изменения.Sensitization leads to the production of immunoglobulins or effector T cells, which are capable of entering into a specific reaction with an antigen. The immune response has long been considered only a protective mechanism, until it turned out that it can be the cause of a number of pathologies. The sensitization of the disease itself does not cause - only repeated contact with the same antigen can lead to an undesirable effect (antigen-antibody reaction). Of the four types of allergic reactions identified, the most interesting are the reactions of the first type, or, as they are also called, immediate-type reactions, anaphylactic reactions, IgE-mediated reactions. In anaphylactic reaction, three phases are distinguished:
- in the first (specific) antigen-antibody reaction itself proceeds directly;
-in the second (non-specific) mediators of anaphylactic reaction (vasoactive amines, for example histamine) are distinguished;
- in the third, functional or morphological changes occur.
Антитела, вызывающие анафилактическую реакцию, относятся к определенным классам иммуноглобулинов - IgE (реагины) и IgG и связываются только с определенным типом клеток. Рецепторы для IgE чаще всего несут базофилы и тучные клетки. Тучные клетки содержатся в тканях (90% в слизистых оболочках), обладают высокоаффинными Fc-рецепторами к IgE, содержат базофильные гранулы с ферментами острой фазы и большим количеством гистамина. В результате реакции антиген-антитело происходит деформация молекулы иммуноглобулина, которая вызывает цепную реакцию с дегрануляцией тучных клеток и базофилов с выделением гистамина, вызывающего повышенную проницаемость сосудов и отек тканей. Antibodies that cause an anaphylactic reaction belong to certain classes of immunoglobulins - IgE (reagins) and IgG and bind only to a specific type of cell. IgE receptors are most often carried by basophils and mast cells. Mast cells are contained in tissues (90% in the mucous membranes), have high affinity IgE Fc receptors, and contain basophilic granules with acute phase enzymes and a large amount of histamine. As a result of the antigen-antibody reaction, a deformation of the immunoglobulin molecule occurs, which causes a chain reaction with the degranulation of mast cells and basophils with the release of histamine, which causes increased vascular permeability and tissue edema.
Благодаря нанесению хемотаксина, например IgG, в предлагаемом способе инициируется движение клеток, в том числе с базофильной зернитостью, по направлению к созданному градиенту плотности, что обеспечивает максимальное попадание гистаминсодержащих клеток в составе секрета слизистой на нитроцеллюлозную подложку. Due to the application of chemotaxin, for example IgG, in the proposed method, the movement of cells, including with basophilic granularity, is initiated in the direction of the created density gradient, which ensures maximum penetration of histamine-containing cells in the mucous secretion onto the nitrocellulose substrate.
Благодаря инкубации нитроцеллюлозной подложки в физрастворе в предлагаемом способе обеспечивается максимальный контакт химического вещества - антигена с вариабельными доменами IgE, являющихся рецепторами клеток с базофильными гранулами, и в случае наличия гомологичных специфических участков и связывания антигенов с двумя активными центрами антитела, характеризующегося авидностью, происходит запуск цепной реакции и выброс гистамина из связанных с IgE Fac-фрагментом клеток с базофильной зернистостью. При наличии аллерген-специфичных IqE содержание гистамина в исследуемой пробе увеличивается в отличие от контрольной пробы. Due to the incubation of the nitrocellulose substrate in saline, the proposed method provides maximum contact of the chemical substance - antigen with the variable domains of IgE, which are receptors of cells with basophilic granules, and in the presence of homologous specific sites and binding of antigens to two active centers of the avidity antibody, the chain starts reactions and release of histamine from basophilic granularity associated with IgE Fac-fragment. In the presence of allergen-specific IqE, the histamine content in the test sample increases, in contrast to the control sample.
Благодаря тому, что в качестве исследуемого материала используют секрет слизистой носа, обеспечивается доступность и простота обследования разновозрастных пациентов, в том числе и детей. Due to the fact that the secretion of the nasal mucosa is used as the test material, the availability and simplicity of examining patients of different ages, including children, is ensured.
Кроме того, благодаря совокупности последовательных особых оригинальных приемов (смазывание слизистой носа хемотаксином, наложение подложки с аллергеном, последующая инкубация этой подложки в физрастворе) обеспечивается in vitro точное моделирование условий осуществления реакции антиген-антитело in vivo, что повышает точность и достоверность определения. In addition, due to the combination of successive special original techniques (lubrication of the nasal mucosa with chemotaxin, application of a substrate with an allergen, subsequent incubation of this substrate in physiological saline), in vitro accurate modeling of the antigen-antibody reaction in vivo is performed, which increases the accuracy and reliability of the determination.
А благодаря использованию контрольной подложки без сорбированного на ней аллергена достигается чистота эксперимента и повышается точность, т.к. исключается неспецифическое влияние самого секрета слизистой. And thanks to the use of the control substrate without the allergen adsorbed on it, the purity of the experiment is achieved and the accuracy increases, because the nonspecific effect of the secretion of the mucosa is excluded.
При реализации предлагаемого способа осуществляют следующие операции в нижеуказанной последовательности:
-обрабатывают обе половины носовой полости пациента хемотаксином, например 1,5%-ным водным раствором человеческого IgG;
-через 40-60 мин на обработанную слизистую одной половины носовой полости накладывают опытную нитроцеллюлозную подложку, например, в форме диска с адсорбированным на ней аллергеном, например формальдегидом, фталиевым ангидридом и т.п., а на слизистую второй половины носовой полости накладывают контрольную нитроцеллюлозную подложку без аллергена;
-затем после непродолжительного промежутка времени (до полной пропитки нитроцеллюлозной подложки секретом) каждую подложку помещают в лунки планшета для иммуноферментного анализа, заполненные на 50 мкл физиологическим раствором;
-лунки с подложками герметично закрывают и инкубируют при 37oС в течение 90 минут при постоянном шейкировании;
-по окончании инкубации подложки удаляют из лунок, берут по 25 мкл опытной и контрольной пробы и изучают их на содержание гистамина и/или IgE методом иммуноферментного анализа;
-оценку результатов производят по увеличению содержания гистамина в опытной пробе в 1,5 раза и более по сравнению с контрольной и/или по превышению содержания IgE в контрольной пробе по сравнению с опытной в 1,5 раза и более, что свидетельствует о наличии сенсибилизации организма к данному аллергену.When implementing the proposed method, the following operations are carried out in the following sequence:
- treat both halves of the patient's nasal cavity with chemotaxin, for example, a 1.5% aqueous solution of human IgG;
- after 40-60 minutes an experimental nitrocellulose substrate is applied to the treated mucosa of one half of the nasal cavity, for example, in the form of a disk with an allergen adsorbed on it, for example formaldehyde, phthalic anhydride, etc., and a control nitrocellulose is applied to the mucosa of the second half of the nasal cavity a substrate without allergen;
- then, after a short period of time (until the nitrocellulose substrate is completely impregnated with a secret), each substrate is placed in the wells of an enzyme-linked immunosorbent assay, filled with 50 μl of physiological saline;
-wells with substrates are hermetically sealed and incubated at 37 o C for 90 minutes with constant shaking;
- at the end of the incubation, the substrates are removed from the wells, 25 μl of the experimental and control samples are taken and examined for histamine and / or IgE content by enzyme-linked immunosorbent assay;
-valuation of the results is carried out by increasing the histamine content in the experimental sample by 1.5 times or more compared to the control and / or by exceeding the IgE content in the control sample compared to the experimental one by 1.5 times or more, which indicates the presence of sensitization of the body to this allergen.
Пример конкретного осуществления. An example of a specific implementation.
В процессе испытаний было обследовано 10 детей, в возрасте от 3 до 12 лет, проживающих в г. Перми. Перед проведением исследований готовили нитроцеллюлозные подложки следующим образом. During the tests, 10 children, aged 3 to 12 years old, living in Perm were examined. Prior to research, nitrocellulose substrates were prepared as follows.
Специальным перфоратором нарезали диски диаметром 5,5 мм из фильтра обеззоленного "белая лента" (ТУ 6-09-1678-86), затем их помещали в водный раствор 0,25%-ной концентрации тестируемого аллергена - формальдегида. Причем было установлено, что именно такая концентрация является щадящей, то есть не оказывающей повреждающего действия на волокна диска. Диски инкубировали в этом растворе 120 мин при постоянном перемешивании, в результате чего получили бумажные диски с прикрепленным к нему тестируемым аллергеном в максимальном сорбционном количестве. В качестве контрольной подложки использовали такой же диск без аллергена. Disks with a diameter of 5.5 mm were cut with a special puncher from an anesthetized white tape filter (TU 6-09-1678-86), then they were placed in an aqueous solution of a 0.25% concentration of the tested allergen - formaldehyde. Moreover, it was found that just such a concentration is gentle, that is, does not have a damaging effect on the fibers of the disk. Disks were incubated in this solution for 120 minutes with constant stirring, resulting in paper disks with the test allergen attached to it in the maximum sorption amount. As a control substrate used the same disk without allergen.
Слизистую обеих половин носовой полости пациентов смазывали хемотаксином - 1,5%-ным раствором IgG и выдерживали 40 мин. Затем на слизистую одной половины носовой полости накладывали до полной пропитки секретом слизистой опытный диск с аллергеном, а на слизистую второй половины носовой полости - диск без аллергена. Перед наложением оба диска подвергали однократной промывке фосфатным буфером (0,02 М раствором КH2РO4 и Na2HPO4).The mucosa of both halves of the patients nasal cavity was smeared with chemotaxin, a 1.5% solution of IgG, and kept for 40 minutes. Then, an experimental disk with an allergen was applied to the mucous membrane of one half of the nasal cavity until the mucous membrane was completely impregnated with a mucous membrane, and an allergen-free disk was applied to the mucosa of the second half of the nasal cavity. Before application, both discs were washed once with phosphate buffer (0.02 M solution of KH 2 PO 4 and Na 2 HPO 4 ).
Затем диски извлекали из носа и помещали в лунки стандартной планшеты для иммуноферментного анализа, куда предварительно было помещено по 50 мкл физраствора. После инкубирования при +37oС и постоянного встряхивания диски извлекались из лунок, а в оставшихся в пробах (по 25 мкл) проводили определение содержания гистамина и/или IgE известным методом иммуноферментного анализа, описанным в инструкциях к тест-системам по определению гистамина ("Biomerica", США) и определению IgE ("Вектор-Бест", Новосибирск, Россия).Then the discs were removed from the nose and placed in the wells of a standard plate for enzyme-linked immunosorbent assay, which was previously placed in 50 μl of saline. After incubation at +37 o C and constant shaking, the discs were removed from the wells, and in the remaining samples (25 μl each), the content of histamine and / or IgE was determined by the known enzyme-linked immunosorbent assay described in the instructions for histamine test systems (" Biomerica ", USA) and IgE determination (" Vector-Best ", Novosibirsk, Russia).
Устанавливали разность в содержании гистамина и/или IgE в опытной и контрольной пробах и по увеличению этих показателей в 1,5 раза и более в опытной пробе относительно контроля для гистамина и в контрольной над опытной для IgE диагностировали сенсибилизацию организма к формальдегиду. A difference was found in the histamine and / or IgE content in the experimental and control samples, and 1.5 times or more increase in these indicators in the experimental sample relative to the control for histamine and in the control over the experimental one for IgE were diagnosed with sensitization of the body to formaldehyde.
Данные, полученные в ходе испытаний, приведены в таблице. The data obtained during the tests are shown in the table.
При наличии специфической сенсибилизации к химическому соединению содержание IgE в опытной пробе будет ниже, так как после удаления подложки вместе с ней из пробы будут изыматься специфические IgE к данному соединению, образовавшие комплекс "антиген-антитело" с адсорбированным па подложке изучаемым веществом. С другой стороны, имеющиеся в супернатанте клетки с базофильной зернистостью за счет специфической реакции "антиген-антитело" будут дегранулированы, что отразится на повышении содержания гистамина в опытной пробе по сравнению с контрольной. Таким образом, положительная реакция па специфическую сенсибилизацию должна проявляться повышенным уровнем гистамина в опытном образце по отношению к контрольному и/или повышенным содержанием IgE в контрольном образце по отношению к опытному с кратностью 1,5 и выше. In the presence of specific sensitization to a chemical compound, the IgE content in the test sample will be lower, since after removal of the substrate together with it, specific IgE for this compound will be removed from the sample, forming an antigen-antibody complex with the studied substance adsorbed on the substrate. On the other hand, the cells with basophilic granularity present in the supernatant will be degranulated due to the specific antigen-antibody reaction, which will affect the increase in histamine content in the experimental sample compared to the control one. Thus, a positive reaction to specific sensitization should be manifested by an increased level of histamine in the experimental sample in relation to the control and / or increased IgE content in the control sample in relation to the experimental sample with a multiplicity of 1.5 and higher.
Данные, приведенные в таблице, показывают, что сенсибилизация к формальдегиду у пациентов 2,5,6,8,10 наблюдается как по критерию гистамина, так и по критерию IgE. Диагностически значимые уровни изучаемых критериев совпадают с повышенным содержанием формальдегида в крови обследуемых детей. Таким образом, для установления факта сенсибилизации предложенным способом достаточно идентифицировать превышение заданного диагностического уровня по одному из предложенных критериев. The data in the table show that sensitization to formaldehyde in patients 2,5,6,8,10 is observed both by the histamine criterion and by the IgE criterion. Diagnostically significant levels of the studied criteria coincide with an increased formaldehyde content in the blood of the examined children. Thus, to establish the fact of sensitization by the proposed method, it is sufficient to identify the excess of a given diagnostic level according to one of the proposed criteria.
Источники информации
1. Патент РФ 2157537, кл. G 01 N 33/536, от 1998 г.Sources of information
1. RF patent 2157537, cl. G 01 N 33/536, 1998
2. Патент РФ 2155963, кл. G 01 N 33/84, от 1995 г. (прототип). 2. RF patent 2155963, cl. G 01 N 33/84, from 1995 (prototype).
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2001113556/14A RU2185630C1 (en) | 2001-05-16 | 2001-05-16 | Noninvasive method for setting diagnosis of sensibilization to chemical compounds |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2001113556/14A RU2185630C1 (en) | 2001-05-16 | 2001-05-16 | Noninvasive method for setting diagnosis of sensibilization to chemical compounds |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2185630C1 true RU2185630C1 (en) | 2002-07-20 |
Family
ID=20249746
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2001113556/14A RU2185630C1 (en) | 2001-05-16 | 2001-05-16 | Noninvasive method for setting diagnosis of sensibilization to chemical compounds |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2185630C1 (en) |
-
2001
- 2001-05-16 RU RU2001113556/14A patent/RU2185630C1/en not_active IP Right Cessation
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5630936B2 (en) | A method for detecting diseases at high speed by identifying targets in human body fluids | |
| US4054646A (en) | Method and apparatus for detection of antibodies and antigens | |
| US5339829A (en) | Oral collection device | |
| EP0395642A1 (en) | Device and method for the determination of incisional wound healing ability. | |
| JP4778804B2 (en) | Immunochromatographic measurement method and apparatus for biopyrine detection | |
| JP2008516201A (en) | In vitro diagnostics for saliva volume measurement | |
| EP0292810B1 (en) | One-step immunoassay for the determination of antigen-specific antibodies from one of the immunoglobulin classes a,m,d or e and reagent therefor | |
| JP3422491B2 (en) | Methods and assays | |
| DE2952478A1 (en) | METHOD AND MEANS FOR THE IMMUNOLOGICAL DETERMINATION OF ENZYMES | |
| US5532139A (en) | Micro lysis-analysis process to measure cell characteristics and diagnose diseases | |
| JP5455220B2 (en) | Biopsy device for concentrating tissue, cells or specimens | |
| JP2002513149A (en) | How to collect samples | |
| RU2185630C1 (en) | Noninvasive method for setting diagnosis of sensibilization to chemical compounds | |
| JPH11201969A (en) | Simple method for measuring free hemoglobin and kit for measurement | |
| Thalhimer et al. | A slide test modification of the hemagglutination test for antibodies against tubercle bacilli | |
| CH645726A5 (en) | PREPARATION FOR DETERMINING HUMAN IMMUNOGLOBULIN G, METHOD FOR THE PRODUCTION THEREOF AND ITS USE. | |
| JP7081861B1 (en) | A kit for testing urothelial cancer that identifies Neu5Gc in urine modified with UMOD based on LIP, and a method for producing the same. | |
| JP2008224543A (en) | Method for measuring saliva buffer capacity | |
| Toomey et al. | Clinical trial of a new disposable bleeding-time device | |
| LU86654A1 (en) | METHOD AND DEVICE FOR DETECTING CELL AESIONS | |
| DE2638250A1 (en) | Detecting antibodies by complex formation with antigens - supported on a metallised substrate, then examining for the double layer (NL010377) | |
| JPH09178752A (en) | Method for detecting microorganism and inspection set for detection | |
| Muir | Contributions to the Physiology and Pathology of the Blood: Part I | |
| BRPI0617500B1 (en) | Loxosceles recluse venom detection immunoassay kit | |
| RU2170431C1 (en) | Method of diagnosis of leprous process activity |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20030517 |