RU2182529C1 - Consortium of strains of microorganisms-destructors: bacillus species, aeromonas species, alcaligenes eutrophus, alcaligenes denitrificans used to purify soils, grounds, waters against petroleum contamination - Google Patents
Consortium of strains of microorganisms-destructors: bacillus species, aeromonas species, alcaligenes eutrophus, alcaligenes denitrificans used to purify soils, grounds, waters against petroleum contamination Download PDFInfo
- Publication number
- RU2182529C1 RU2182529C1 RU2000121810A RU2000121810A RU2182529C1 RU 2182529 C1 RU2182529 C1 RU 2182529C1 RU 2000121810 A RU2000121810 A RU 2000121810A RU 2000121810 A RU2000121810 A RU 2000121810A RU 2182529 C1 RU2182529 C1 RU 2182529C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- consortium
- species
- soils
- alcaligenes
- microorganisms
- Prior art date
Links
- 239000002689 soil Substances 0.000 title claims abstract description 26
- 241000252867 Cupriavidus metallidurans Species 0.000 title claims description 10
- 241000607534 Aeromonas Species 0.000 title claims description 9
- 241001453369 Achromobacter denitrificans Species 0.000 title claims description 7
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 title claims description 6
- 239000003643 water by type Substances 0.000 title abstract 2
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 title description 6
- -1 grounds Substances 0.000 title description 4
- 238000011109 contamination Methods 0.000 title description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 17
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 2
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 abstract description 13
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 abstract description 5
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 abstract description 5
- 239000003209 petroleum derivative Substances 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 abstract description 2
- 241000902900 cellular organisms Species 0.000 abstract 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 abstract 1
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000894007 species Species 0.000 description 6
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 5
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 5
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 5
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 5
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 5
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 5
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 5
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 5
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 5
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 5
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 5
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 5
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 5
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 5
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 5
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 5
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 5
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N L-(-)-Sorbose Chemical compound OCC1(O)OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N 0.000 description 4
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 4
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 4
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 4
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 4
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 4
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 3
- 239000006096 absorbing agent Substances 0.000 description 3
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 241000588986 Alcaligenes Species 0.000 description 2
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 241000206672 Gelidium Species 0.000 description 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 2
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 2
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 2
- MVYYDFCVPLFOKV-UHFFFAOYSA-M barium monohydroxide Chemical compound [Ba]O MVYYDFCVPLFOKV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000186063 Arthrobacter Species 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000589776 Pseudomonas putida Species 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000026058 directional locomotion Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000012543 microbiological analysis Methods 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Processing Of Solid Wastes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при биологической очистке нефтяного загрязнения почв, почвогрунтов и вод на территориях нефтебаз, нефтепромыслов, промышленных предприятий и других объектах. The invention relates to biotechnology and can be used in the biological treatment of oil pollution of soils, soil and water in the territories of oil depots, oil fields, industrial enterprises and other facilities.
Известен консорциум штаммов микроорганизмов-деструкторов: Alcaligenes denitrificans, Bacillus species, Pseudomonas putida, Aeromonas species, предназначенный для очистки почв, почвогрунтов, вод от нефти, нефтепродуктов и остаточной замазученности и выделенный из почв, загрязненных нефтепродуктами, прибрежной зоны юга Дальнего Востока. Окислительная способность консорциума составляет 1981 мг СО2 за 30 сут (патент РФ 2115629, кл. С 02 F 3/34, публ. 1998).A known consortium of strains of microorganisms-destructors: Alcaligenes denitrificans, Bacillus species, Pseudomonas putida, Aeromonas species, designed to clean soils, soil, water from oil, oil products and residual contamination and isolated from soils contaminated with oil products, the coastal zone of the south of the Far East. The oxidizing ability of the consortium is 1981 mg of CO 2 for 30 days (RF patent 2115629, class C 02 F 3/34, publ. 1998).
Недостатком консорциума является низкая окислительная способность. The disadvantage of the consortium is its low oxidative ability.
Известен консорциум штаммов микроорганизмов-деструкторов: Aeromonas species, Alcaligenes denitrificans, Arthrobacter species, предназначенный для очистки почв, почвогрунтов, вод от нефти, нефтепродуктов и остаточной замазученности и выделенный из почв, загрязненных нефтепродуктами, прибрежной зоны юга Дальнего Востока. Окислительная способность консорциума составляет 2041 мг СО2 за 30 сут (патент РФ 2127310, кл. С 12 N 1/20, публ. 1999).A known consortium of strains of microorganisms-destructors: Aeromonas species, Alcaligenes denitrificans, Arthrobacter species, designed to clean soils, soil, water from oil, oil products and residual contamination and isolated from soils contaminated with oil products, the coastal zone of the south of the Far East. The oxidizing ability of the consortium is 2041 mg of CO 2 for 30 days (RF patent 2127310, class C 12 N 1/20, publ. 1999).
Недостатком консорциума является низкая окислительная способность. The disadvantage of the consortium is its low oxidative ability.
Задача изобретения - получение консорциума штаммов микроорганизмов-деструкторов для очистки почв, почвогрунтов и вод от нефтяных загрязнений. The objective of the invention is to obtain a consortium of strains of microorganisms-destructors for cleaning soils, soil and water from oil pollution.
Для решения поставленной задачи из почв, хронически загрязненных нефтепродуктами, прибрежной экосистемы юга Дальнего Востока (морской порт г. Владивостока), выделен консорциум микроорганизмов-деструкторов: Bacillus species КММ НФ 8-3 (КММ НФ - коллекция морских нефтеокисляющих микроорганизмов), Aeromonas species КММ НФ 8-18, Alcaligenes eutrophus КММ НФ 8-8, Alcaligenes eutrophus КММ НФ 8-10, Alcaligenes denitrificans КММ НФ 8-12. To solve this problem, a consortium of destructive microorganisms: Bacillus species KMM NF 8-3 (KMM NF - collection of marine oil-oxidizing microorganisms), Aeromonas species KMM, has been allocated from soils chronically contaminated with oil products, the coastal ecosystem of the south of the Far East (seaport of Vladivostok) NF 8-18, Alcaligenes eutrophus KMM NF 8-8, Alcaligenes eutrophus KMM NF 8-10, Alcaligenes denitrificans KMM NF 8-12.
Это природные ассоциации нефтеокисляющих микроорганизмов, которые сформировались в почве в результате длительного воздействия на нее нефтепродуктов. These are natural associations of oil-oxidizing microorganisms that have formed in the soil as a result of prolonged exposure to oil products.
Выделенные штаммы микроорганизмов депонированы во Всероссийской коллекции микроорганизмов Института биохимии и физиологии микроорганизмов РАН, где им присвоены номера ВКМ В-2078 Д, ВКМ В-2079 Д, ВКМ В-2075 Д, ВКМ В-2076, ВКМ В-2077 Д соответственно. The isolated microorganism strains were deposited in the All-Russian collection of microorganisms of the Institute of Biochemistry and Physiology of Microorganisms of the Russian Academy of Sciences, where they were assigned the numbers VKM V-2078 D, VKM V-2079 D, VKM V-2075 D, VKM V-2076, VKM V-2077 D, respectively.
Для характеристики структуры консорциума применяли два критерия широко используемых в эколого-микробиологическом анализе: частота встречаемости и оценка доминантности различных видов микроорганизмов. To characterize the structure of the consortium, two criteria were widely used in environmental-microbiological analysis: the frequency of occurrence and the assessment of the dominance of various types of microorganisms.
В данном сообществе микроорганизмы рода Alcaligenes - доминантные виды и относятся к типично часто встречаемым видам (48%). Виды Bacillus species и Aeromonas species относятся к содоминантным культурам (по 26%). In this community, microorganisms of the genus Alcaligenes are dominant species and belong to typical frequently encountered species (48%). The species Bacillus species and Aeromonas species belong to co-dominant cultures (26% each).
Таким образом, штаммы микроорганизмов в консорциуме представлены в следующих количествах, %:
Bacillus species КММ НФ 8-3 - 26
Aeromonas species КММ НФ 8-18 - 26
Крахмал, агар-агар, желатин не гидролизуют. Твин-80 гидролизуют. Арабинозу, рибозу, сорбозу, лактозу, меллибиозу, трегалозу не утилизируют. Способны окислять углеводороды нефти. Температура роста 4-35oС, рН 7,0-7,5. Не патогенен.Thus, the strains of microorganisms in the consortium are presented in the following amounts,%:
Bacillus species KMM NF 8-3 - 26
Aeromonas species KMM NF 8-18 - 26
Starch, agar-agar, gelatin do not hydrolyze. Tween-80 is hydrolyzed. Arabinose, ribose, sorbose, lactose, mellibiosis, trehalose are not disposed of. Capable of oxidizing petroleum hydrocarbons. The growth temperature is 4-35 o C, pH 7.0-7.5. Not pathogenic.
Характеристика штамма Alcaligenes eutrophus КММ НФ 8-10. Characterization of the strain Alcaligenes eutrophus KMM NF 8-10.
Морфолого-культуральные признаки. Одиночные палочки размером 1,0х2,0 мкм, подвижные, перетрихи, грамотрицательные. На агаризованных средах образуют растекающиеся, полупрозрачные слизистые колонии беловатого цвета. Сапрофит. Morphological and cultural characteristics. Single sticks with a size of 1.0x2.0 microns, movable, grinding, gram-negative. On agarized media, whitish, spreading, translucent mucous colonies are formed. Saprophyte.
Физиолого-биохимические свойства. Хемоорганотрофы. Метаболизм дыхательный. Оксидазо- и каталазоположительные. Уреазу не образуют. Крахмал, агар-агар, желатин не гидролизуют. Твин-80 гидролизуют. Арабинозу, рибозу, сорбозу, лактозу, меллибиозу, трегалозу не утилизируют. Способны окислять углеводороды нефти. Температура роста 4-35oС, рН 7,0-7,5. Не патогенен.Physiological and biochemical properties. Chemorganotrophs. Metabolism is respiratory. Oxidase and catalase positive. Urease does not form. Starch, agar-agar, gelatin do not hydrolyze. Tween-80 is hydrolyzed. Arabinose, ribose, sorbose, lactose, mellibiosis, trehalose are not disposed of. Capable of oxidizing petroleum hydrocarbons. The growth temperature is 4-35 o C, pH 7.0-7.5. Not pathogenic.
Характеристика штамма Alkaligenes denitrificans КММ НФ 8-12. Characterization of the strain Alkaligenes denitrificans KMM NF 8-12.
Морфолого-культуральные признаки. Одиночные прямые палочки размером 0,8х1,8 мкм, перетрихи, грамотрицательные. На агаризованных средах образуют круглые, гладкие полупрозрачные слизистые колонии желтоватого оттенка. Сапрофит. Morphological and cultural characteristics. Single straight sticks 0.8x1.8 microns in size, rubbing, gram-negative. On agarized media form round, smooth translucent mucous colonies of a yellowish tint. Saprophyte.
Физиолого-биохимические свойства. Хемоорганотрофы со строго дыхательным типом метаболизма. Оксидазо- и каталазоположительные. Уреазу не образуют. Крахмал, твин-80, желатин не гидролизуют. Сорбозу, раффинозу, лактозу, меллибиозу, трегалозу не утилизируют. Способность окислять углеводороды нефти высокая. Температура роста 4-35oС, рН 7,0-7,5. Не патогенен.Physiological and biochemical properties. Chemorganotrophs with a strictly respiratory type of metabolism. Oxidase and catalase positive. Urease does not form. Starch, tween-80, gelatin is not hydrolyzed. Sorbose, raffinose, lactose, mellibiosis, trehalose are not disposed of. The ability to oxidize oil hydrocarbons is high. The growth temperature is 4-35 o C, pH 7.0-7.5. Not pathogenic.
Предлагаемый консорциум микроорганизмов хорошо растет на жидкой среде Ворошиловой - Диановой следующего состава, г/л: NH4NO3 - 1,0, К2НРO4 - 1,0, КН2РO4, - 1,0, MgSO4 - 0,2, CaCl2, - 0,02, FeCl - 2 капли концентрированного раствора, вода дистиллированная - 1000 мл.Proposed microbial consortium grows well on liquid medium Voroshilova - Dianova following composition, g / l: NH 4 NO 3 - 1.0, K 2 HPO 4 - 1.0, KH 2 PO 4, - 1,0, MgSO 4 - 0 , 2, CaCl 2 , - 0.02, FeCl - 2 drops of a concentrated solution, distilled water - 1000 ml.
Alcaligenes eutrophus KMM НФ 8-8 - 16%
Alcaligenes eutrophus KMM НФ 8-10 - 16%
Alcaligenes denitrificans KMM НФ 8-12 - 16%
Характеристика штамма Bacillus species КММ НФ 8-3.Alcaligenes eutrophus KMM NF 8-8 - 16%
Alcaligenes eutrophus KMM NF 8-10 - 16%
Alcaligenes denitrificans KMM NF 8-12 - 16%
Characterization of the strain of Bacillus species KMM NF 8-3.
Морфолого-культуральные признаки. Morphological and cultural characteristics.
Клетки представлены крупными неподвижными палочками размером 1,2х2,6 мкм. Споры элипсовидные, по одной в каждой клетке. Окраска по Грамму вариабельная. На агаризованных средах образуют округлые, беловатые, слизистые колонии. Сапрофит. Cells are represented by large fixed sticks measuring 1.2 x 2.6 microns. The spores are ellipsoidal, one in each cell. Gram stain is variable. On agarized media form round, whitish, mucous colonies. Saprophyte.
Физиолого-биохимические свойства. Physiological and biochemical properties.
Хемоорганотрофы. Метаболизм и дыхательный, и бродильный. Оксидазоотрицательные, каталазоположительные. Крахмал, твин-80, желатин гидролизуют. Способны окислять углеводороды нефти. Температура роста 4-35oС, рН 7,0-7,5. Не патогенен.Chemorganotrophs. Metabolism is both respiratory and fermentative. Oxidase-negative, catalase-positive. Starch, tween-80, gelatin hydrolyzed. Capable of oxidizing petroleum hydrocarbons. The growth temperature is 4-35 o C, pH 7.0-7.5. Not pathogenic.
Характеристика штамма Aeromonas species КММ НФ 8-18. Characterization of the strain Aeromonas species KMM NF 8-18.
Морфолого-культуральные признаки. Палочки с закругленными концами, почти овоидные, размером 1,0х1,8 мкм. Движение направленное. Грамотрицательные. Сапрофит. Morphological and cultural characteristics. Sticks with rounded ends, almost ovoid, 1.0x1.8 microns in size. Directional movement. Gram-negative. Saprophyte.
Физиолого-биохимические свойства. Хемоорганотрофы. Метаболизм и дыхательный, и бродильный. Оксидазо- и каталазоположительные. Глюкозу, фруктозу, мальтозу, трегалозу утилизируют. Гидролизуют казеин, желатин, крахмал. Сорбозу, ксилозу не сбраживают. Способны окислять углеводороды нефти. Температура роста 4-30oС, рН 7,0-7,5, не патогенен.Physiological and biochemical properties. Chemorganotrophs. Metabolism is both respiratory and fermentative. Oxidase and catalase positive. Glucose, fructose, maltose, trehalose are disposed of. Casein, gelatin, starch are hydrolyzed. Sorbose, xylose are not fermented. Capable of oxidizing petroleum hydrocarbons. The growth temperature is 4-30 o C, pH 7.0-7.5, not pathogenic.
Характеристика штамма Alcaligenes eutrophus КММ НФ 8-8. Characterization of the strain Alcaligenes eutrophus KMM NF 8-8.
Морфолого-культуральные признаки. Одиночные палочки размером 1,0x2,0 мкм, подвижные, перетрихи, грамотрицательные. На агаризованных средах образуют растекающиеся, полупрозрачные слизистые колонии беловатого цвета. Сапрофит. Morphological and cultural characteristics. Single sticks with a size of 1.0x2.0 microns, movable, grinding, gram-negative. On agarized media, whitish, spreading, translucent mucous colonies are formed. Saprophyte.
Физиолого-биохимические свойства. Хемоорганотрофы. Метаболизм дыхательный. Оксидазо- и каталазоположительные. Уреазу не образуют. Physiological and biochemical properties. Chemorganotrophs. Metabolism is respiratory. Oxidase and catalase positive. Urease does not form.
В качестве единственного источника углерода добавляют 10 мл нефтепродукта. Оптимальная температура роста 25-30oС, рН 7,0-7,2.As a single carbon source, 10 ml of oil is added. The optimum growth temperature is 25-30 o C, pH 7.0-7.2.
Интенсивный рост консорциума наблюдается при использовании среды следующего состава, г/л: К2НРO4 - 10,0, КН2РO4 - 1,0, NH4NO3 - 2,0, вода дистиллированная - 1000 мл, нефтепродукт - 10 мл.Intensive consortium growth observed when using medium of the following composition, g / l: K 2 HPO 4 - 10.0, KH 2 PO 4 - 1,0, NH 4 NO 3 - 2.0 Distilled water - 1000 ml petroleum - 10 ml
Активному нарастанию биомассы консорциума способствует среда, состоящая из 0,3% водного раствора нитроаммофоски, где азот, фосфор и калий сбалансированы по 17%. An active increase in the biomass of the consortium is facilitated by a medium consisting of a 0.3% aqueous solution of nitroammophos, where nitrogen, phosphorus and potassium are balanced at 17%.
Заявленный консорциум был выделен из почв, хронически загрязненных нефтепродуктами, путем высева почвенного образца на агаризованную и жидкую питательные среды. Чтобы повысить активность выделенных нефтеокисляющих микроорганизмов к повышенным концентрациям нефтепродуктов, проводят их адаптацию путем частых пересевов на свежую питательную среду. Это позволяет выделить наиболее устойчивые, физиологически активные особи нефтеокисляющих микроорганизмов и получить активный консорциум штаммов микроорганизмов. Математически устанавливают, что в данном консорциуме микроорганизмы рода Alcaligenes являются доминантными и относятся к типично часто встречаемым (48%). The claimed consortium was isolated from soils chronically contaminated with oil products by plating a soil sample on agarized and liquid nutrient media. To increase the activity of the selected oil-oxidizing microorganisms to increased concentrations of oil products, they are adapted by frequent reseeding on a fresh nutrient medium. This allows you to select the most stable, physiologically active individuals of oil-oxidizing microorganisms and get an active consortium of strains of microorganisms. It is mathematically established that in this consortium, microorganisms of the genus Alcaligenes are dominant and are typically encountered (48%).
Из них на Alcaligenes eutrophus приходится 32% от всех изолятов в ассоциации, Alcaligenes denitrificans составляет 16% и относится к типично редким видам. Виды Bacillus species и Aeromonas species относятся к содоминантным видам (по 26%). Of these, Alcaligenes eutrophus accounts for 32% of all isolates in the association, Alcaligenes denitrificans accounts for 16% and is a typical rare species. Species Bacillus species and Aeromonas species belong to co-dominant species (26% each).
Окислительную активность консорциума определяют по конечному продукту окисления, т.е. по выделению СО2.The oxidative activity of the consortium is determined by the final oxidation product, i.e. for the allocation of CO 2 .
В колбы емкостью 500 мл, соединенные последовательно герметично, вносят поглотитель углекислоты ВаОН. В колбу, где находится инокулянт, вносят 250 мл среды Ворошиловой-Диановой, 2,5 мл нефтепродукта и 5 мл трехсуточной культуры консорциума с содержанием 1,0•105 клеток/мл. С помощью дозатора, со скоростью 34 мл/мин подают атмосферный воздух. Чтобы в колбу с инокулянтом не поступал СО2, воздух пропускают через 2 колбы с поглотителем СО2 и аэрация инокулянта проходит без углекислоты. После окисления нефтепродуктов в колбе с инокулянтом, аэрируемый воздух дополнительно проходит через две колбы с поглотителем СО2, затем ВаОН оттитровывают НСl и определяют окислительную способность культуры консорциума по количеству выделенного углекислого газа.In flasks with a capacity of 500 ml, connected in series tightly, a carbon dioxide absorber BaOH is introduced. 250 ml of Voroshilova-Dianova medium, 2.5 ml of oil product and 5 ml of a three-day culture of the consortium containing 1.0 • 10 5 cells / ml are introduced into the flask where the inoculant is located. Using a dispenser, at a speed of 34 ml / min serves atmospheric air. To prevent CO 2 from entering the flask with the inoculant, air is passed through 2 flasks with a CO 2 absorber and the inoculant is aerated without carbon dioxide. After oxidation of oil products in a flask with an inoculant, the aerated air additionally passes through two flasks with a CO 2 absorber, then BaOH is titrated with HCl and the oxidizing ability of the consortium culture is determined by the amount of carbon dioxide released.
Для установления чистоты опыта одновременно ставят при таких же условиях еще 2 контроля. Один - с реактивами без консорциума и нефтепродуктов, другой - с реактивами, нефтепродуктами, но без консорциума. В контроле содержание СО2 не обнаружено. Длительность опыта 30 суток. Окислительная способность консорциума составляет 2091 мг СО2.To establish the purity of the experiment, two more controls are simultaneously set under the same conditions. One with reagents without a consortium and petroleum products, the other with reagents, petroleum products, but without a consortium. In the control, the content of CO 2 was not found. The duration of the experiment is 30 days. The oxidizing ability of the consortium is 2091 mg of CO 2 .
Применение консорциума. Для очистки нефтяного пятна на почве размером 20x5,0 м, глубиной загрязнения 0,1-0,2 м с содержанием нефтепродуктов 23% берут 0,7 кг минерального удобрения нитроаммофоски, в котором азот, фосфор и калий сбалансированы по 17%, растворяют в 200 л воды и поливают участок из расчета 1 л на 1 м2 за 2 дня до вспашки. После вспашки, через 2 дня вновь вносят раствор на участок из расчета 1 л/м2. Это необходимо для активизации как сапрофитной, так и аборигенной нефтеокисляющей микрофлоры. Через неделю после внесения минеральных удобрений вносят инокулянт консорциума (водный раствор). Титр 1,0•1012 клеток в 1 мл. Норма полива 1 л/м2. Через месяц содержание нефтепродукта в почве составляет 10%, через 2 месяца - 5%, через 3 месяца нефтепродуктов в почве не обнаружено.Consortium application. To clean an oil slick on soil with a size of 20x5.0 m, a depth of pollution of 0.1-0.2 m with an oil content of 23%, 0.7 kg of mineral fertilizer nitroammofoski, in which nitrogen, phosphorus and potassium are balanced in 17%, are dissolved in 200 liters of water and water the plot at the rate of 1 liter per 1 m 2 2 days before plowing. After plowing, after 2 days, the solution is again added to the plot at the rate of 1 l / m 2 . This is necessary to activate both saprophytic and indigenous oil-oxidizing microflora. A week after the application of mineral fertilizers, a consortium inoculant (aqueous solution) is introduced. The titer is 1.0 • 10 12 cells in 1 ml. Watering rate 1 l / m 2 . After a month, the oil content in the soil is 10%, after 2 months - 5%, after 3 months, no oil was found in the soil.
Таким образом, предлагаемый консорциум штаммов микроорганизмов обладает большой скоростью окисления нефтепродуктов и обеспечивает высокую степень очистки от нефтяных загрязнений. Thus, the proposed consortium of strains of microorganisms has a high oxidation rate of oil products and provides a high degree of purification from oil pollution.
Преимуществом предлагаемого консорциума штаммов микроорганизмов является способность расти на обедненной питательной среде, а также высокая скорость окисления нефти и нефтепродуктов, что позволяет эффективно использовать его при биологической очистке почв, почвогрунтов и вод, загрязненных нефтепродуктами. The advantage of the proposed consortium of microorganism strains is the ability to grow on a depleted nutrient medium, as well as the high rate of oxidation of oil and oil products, which allows its effective use in the biological treatment of soils, soil and water contaminated with oil products.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000121810A RU2182529C1 (en) | 2000-08-15 | 2000-08-15 | Consortium of strains of microorganisms-destructors: bacillus species, aeromonas species, alcaligenes eutrophus, alcaligenes denitrificans used to purify soils, grounds, waters against petroleum contamination |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000121810A RU2182529C1 (en) | 2000-08-15 | 2000-08-15 | Consortium of strains of microorganisms-destructors: bacillus species, aeromonas species, alcaligenes eutrophus, alcaligenes denitrificans used to purify soils, grounds, waters against petroleum contamination |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2182529C1 true RU2182529C1 (en) | 2002-05-20 |
Family
ID=20239257
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2000121810A RU2182529C1 (en) | 2000-08-15 | 2000-08-15 | Consortium of strains of microorganisms-destructors: bacillus species, aeromonas species, alcaligenes eutrophus, alcaligenes denitrificans used to purify soils, grounds, waters against petroleum contamination |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2182529C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2446621C2 (en) * | 2006-12-28 | 2012-03-27 | Панасоник Корпорэйшн | Base station device, terminal device and closed-loop control method |
-
2000
- 2000-08-15 RU RU2000121810A patent/RU2182529C1/en not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2446621C2 (en) * | 2006-12-28 | 2012-03-27 | Панасоник Корпорэйшн | Base station device, terminal device and closed-loop control method |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3406926B2 (en) | Method for biodegrading trichlorethylene and method for biodegrading organic chlorine compounds using microorganisms | |
| RU2565549C2 (en) | Biopreparation for bioremediation of oil-contaminated soils for climatic conditions of far north | |
| CN111518715B (en) | Sulfonamide antibiotic synergistic degradation bacteria and application thereof | |
| CN109576187A (en) | One plant of cyanide degradation bacterial strain and the method for utilizing the strains for degrading cyanide | |
| CN113215033B (en) | Sulfonamide antibiotic degrading bacteria and application thereof | |
| Shradha et al. | Isolation and characterization of phenol degrading bacteria from oil contaminated soil | |
| CN112625942A (en) | Aerobic denitrifying bacterium and application thereof | |
| CN105199981B (en) | Eat alkali Gordonia bronchialis YC-RL2 and its application | |
| RU2509150C2 (en) | Association of strains of bacteria-oil decomposers, and remediation method of oil-contaminated objects | |
| JP2023544961A (en) | Kosakonia oryzae HN05 and its use | |
| JP4707251B2 (en) | Activated sludge and wastewater treatment method | |
| RU2107722C1 (en) | Acinetobacter calcoaceticus, pseudomonas fluorescens, alcaligenes faecalis bacteria strains consorcium for destroying oil and petroleum products | |
| RU2182529C1 (en) | Consortium of strains of microorganisms-destructors: bacillus species, aeromonas species, alcaligenes eutrophus, alcaligenes denitrificans used to purify soils, grounds, waters against petroleum contamination | |
| Chistyakova et al. | A novel EDTA-degrading Pseudomonas sp. | |
| RU2257409C1 (en) | Strain rhodococcus erythropolis for decomposition of petroleum and petroleum products | |
| RU2115629C1 (en) | Consortium of strains of microorganism-destructors: alcaligenes denitrificans, bacillus species, pseudomonas putida, aeromonas species for treatment of soil, soil-ground, water from oil, petroleum product and residual mazut amount excess | |
| KR100459852B1 (en) | The microbial seeds for the sewage/wastewater treatment and the method for it's development | |
| RU2083667C1 (en) | Consortium of strains as microorganism-destructors: alcaligenes denitrificans, pseudomonas maltophila, pseudomonas putida, pseudomonas species, bacillus species used for treatment of soil, ground and water from oil, petroleum products and residual mazut | |
| RU2127310C1 (en) | Consortium of strains of microorganism-destructors: aeromonas species, alcaligenes denitrificans, arthrobacter species used for treatment of soil, ground, water from petroleum, petroleum products and mazut residues | |
| RU2142996C1 (en) | Strain arthrobacter sp for degradation of crude oil and petroleum products | |
| RU2292392C2 (en) | BACTERIUM Pseudomonas alcaligence STRAIN USEFUL IN PURIFICATION OF SOILS, GROUND WATER AND SURFACE WATER FROM TRINITROTOLUENE | |
| RU2160719C1 (en) | Consortium of strains of microorganisms- desctructors including alcaligenes denitrificans, alcaligenes eutrophus, pseudomonas maltophila used for purification of soils, ground-soils and water from oil, oil products and residual fuel oil contaminations | |
| RU2300561C1 (en) | Strain rhodococcus globerulus h-42 for decomposition of petroleum and petroleum products | |
| RU2257410C1 (en) | Strain rhodococcus erythropolis for decomposition of petroleum and petroleum products | |
| RU2181701C2 (en) | Biological preparation "avalon" for cleaning environmental objects to remove petroleum and petroleum derivatives, and method of preparation thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170816 |